output
stringlengths 1
626
| input
stringlengths 176
6.5k
| instruction
stringlengths 10
576
|
---|---|---|
NO | <h2>์ฝ์ค๋ชจ์ค์ซ Silica gel column chromatography ๋ถํ๋ฌผ์ ํญ๊ท ํ์ฑ ํจ๊ณผ</h2><p>\(3\)์ข
์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ด ๋ณด์ฌ์ค ํญ๊ท ํ์ฑ ์ค์์๋ EtOAc์ธต ๋ถํ๋ฌผ์ด S. aureus์ ๋ํด ๋ํ๋ธ ์ฐ์ํ ํญ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ข ๋ ์ดํด ๋ณด๊ธฐ ์ํด Silica gel column chromatography๋ฅผ ์ค์ํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํด ํฐ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ๊ณผ ๋ถํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต ๋ถํ๋ฌผ์ \(5\)๊ฐ๋ก ๋ถํํ์ฌ ๋ฌผ์ง์ ์ป์๊ณ ์์ฃผ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ถฉ ๋ถํ๋ฌผ์ \(3\)๊ฐ์ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ป์๋ค. ๋ฌผ์ง์ ๋ถ๋ฆฌ๋ TLC๋ฅผ ํตํด ํ์ธํ์๋ค.</p><p>์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ silica gel column chromatography ๋ถํ๋ฌผ(์ดํ, silica gel ๋ถํ๋ฌผ)๋ค์ ๋ํด \( 24 \mathrm{h} \)๋์ ํญ๊ท ํ์ฑ ์คํ์ ์งํํ ๊ฒฐ๊ณผ ๊ท ์ ์ฑ์ฅ์ด ๋ํ๋์ง ์๋ ์ต์์ ํด๋๋์ ๋ํ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ด ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>\(3\)์ข
์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต silica gel ๋ถํ๋ฌผ์์ ํฐ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ๊ณผ ์์ฃผ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ Fr. \(1\)์ ๊ฒฝ์ฐ์ ๊ด์ฐฐ ๋๋ ๋ชจ๋์์ ๊ท ์ ์ฑ์ฅ์ด ์ต์ ๋์์ผ๋ฉฐ ์ต์์ ํด๋๋๊ฐ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๋ถํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ Fr. \(2\)์ ๊ฒฝ์ฐ์ ๋ชจ๋ ๊ด์ฐฐ ๋๋์์ ๊ท ์ ์ฆ์์ด ๋ํ๋์ง ์์์ผ๋ฉฐ ์ต์์ ํด๋๋๋ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค. ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต silica gel๋ถํ๋ฌผ ์ค์์๋ ์์ ์ต์์ ํด๋๋๊ฐ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ธ ๋ถํ๋ฌผ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ \( 0.2,0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ ๊ด์ฐฐ ๋๋์์๋ ๊ท ์ด ์ฑ์ฅํ์ง ์์ ๋ถํ๋ฌผ์๋ ๊ท ์ ์ฆ์์ ์ต์ ํ๋๋ฐ ๊ด์ฌํ๋ ๋ฌผ์ง์ด ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋๋ค. Olufunmiso์ Ashafa์ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ๋ณด๋ฉด, ์ฝ์ค๋ชจ์ค์ ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฑ๋ถ์ ๋ถ์ํ์๋๋ฐ \(34\)๊ฐ์ง์ ์๋ ค์ง ์ฑ๋ถ์ด \( 97.89 \% \)์ด๊ณ ์๋ ค์ง์ง ์์ ์ฑ๋ถ์ด \( 1.94 \% \)์ด๋ผ๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ด ์ฑ๋ถ๋ค ๊ฐ์ ์ฐํฉ์ด ํญ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์๋๋ฐ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํญ๊ท ๋ฌผ์ง๋ก ํ์
ํ apigenin์ ์ ์ ์ฑ๋ถ ๋ด์๋ ๋ถ์๋์ง ์์๋ค. ์ด๋ ์ถ์ถ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ถ์ถ ์ฑ๋ถ์ ์ฐจ์ด์์ ๋น๋กฏ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋์๋ค.</p><h2>์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ ํจ์ ๋ ์ฒ์ฐ๋จ์ผ ๋ฌผ์ง์ ํญ๊ท ํ์ฑ ๋น๊ต</h2><p>\(3\)์ข
์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต silica gel ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ด์ฐฐ ๋๋ ์ค์์ ์ต์์ ํด๋๋๊ฐ ๋ํ๋ ํฐ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ Fr. \(1, 2\)์ ๋ถํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ Fr. \(1, 2, 3\) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์์ฃผ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ Fr. \(1\)์ ํจ์ ๋์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ ์ถ๋๋ ๋ฌผ์ง์ ๋ํด ํญ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ดํด๋ณด์๋ค. ์ฐ์ , ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ ๋ํ ํจ๊ณผ ์คํ์์ ํ์ค๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉ๋๋ cosmosiin๊ณผ cosmosiin์ ๊ตฌ์กฐ์์ ๋น์ด ์ ๊ฑฐ๋ ํํ์ธ apigenin์ ํญ๊ท ํ์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ ์ถ๋ฌผ์ง๋ก ์ ์ ํ์๋ค. Apigenin์ ์ ์ ์ cosmosiin์ด ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ ํจ์ ๋ ๋ฌผ์ง ์ค์ ๋์ ๋น์จ์ ์ฐจ์งํ๊ณ ์๋ค๋ Saito์ ์ฐ๊ตฌ์ apigenin์ด ์ถ์ถ๊ณผ ๋ถํ ๊ณผ์ ์์ cosmosiin์์ ๋น์ด ์ ๊ฑฐ๋ ๋ ๋ํ๋๋ ๊ตฌ์กฐ๋ผ๋ ์ ์์ ๊ทผ๊ฑฐํ์๋ค. ๋ํ, Silica gel ๋ถํ๋ฌผ ์ค์ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)๋ฅผ ์ต์ ์ ํด๋๋๋ก ๊ฐ์ง๋ ๋ถํ๋ฌผ๋ค์์ apigenin๊ณผ ์ ์ฌํ ๋ฐ์ ํฉ์์ ํ๊ด๋น์ด ๊ด์ฐฐ๋ ์ , Rf ๊ฐ์ด \( 0.88 \)๋ก ๋์ผํ ์ ์ ํตํด์ ์ ์ ํ์๋ค.</p><p>์ ์ ๋ cosmosiin๊ณผ apigenin์ด S. aureus์ ๋ํด์ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ณด์ด๋์ง ์คํ์ ์งํํ์๋ค.</p><p>์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด cosmosiin ๋ณด๋ค apigenin์ด ์ข๋ ํญ๊ท ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค. ๊ด์ฐฐ ๋๋ ์ค์์๋ \(100 \mu \mathrm{M} \)๊ฐ \( 50 \mu \mathrm{M} \)์ ๋นํด \( 24 \mathrm{h} \)๋์ ๊ท ์ ์ฆ์์ ์ข๋ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ์งํ์๋ค. cosmosiin์ ๊ด์ฐฐ \( 9 \sim 15 \mathrm{h} \)์์ ์ผ์์ ์ผ๋ก ํญ๊ท ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>์ด๊ฒ์ผ๋ก ๋ถํ๋ฌผ๋ค ์์ cosmosiin๊ณผ apigenin์ ํํ๊ฐ ์กด์ฌํ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์์ ๋ฟ ์๋๋ผ ์ด ์ค์ apigenin์ด ์ฐ์ํ์ง๋ ์์ง๋ง ํญ๊ท ํจ๊ณผ์ ๊ด๋ จ๋ ๋ฌผ์ง ์ค์ ํ๋์ผ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค.</p> | cosmosiin ๋ณด๋ค apigenin์ด ์ข๋ ํญ๊ท ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ฐํ์ก์ด? |
\( 121.93 \pm 16.45 ^ { 1) } \) | <h3>๋ฏธ์๋ฌผ ๋ฐฐ์</h3> <p>Lenconostoc mesenteroides \( 10-12 \) ๊ท ์ฃผ๋ฅผ Lactobacilli MRS broth์ \( 36 ^ {\circ } \mathrm { C } \)์์ 19์๊ฐ ๋์ ์ข
๋ฐฐ์ํ๊ณ ๋ฐฐ์์ก๋ฅผ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ \( \left (3000 \times \mathrm { g } , 10 \mathrm { ~min } , 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)ํ์ฌ ๊ท ์ฒด๋ฅผ ํ์ํ ๋ค์ ๋ฉธ๊ท ์์ผ์๋ก \(2 \)ํ ์ธ์ฒํ ํ ๊ท ์ฒด๋ฅผ ๋ฐฐ์์ก๊ณผ ๋์ผ ๋ถํผ์ ๋ฉธ๊ท ์์ผ์์์ ํํํ์๋ค. ๋ค๋ฅธ ์์์ฑ๋ถ์ ์ฒจ๊ฐ ํ์ง ์๊ณ ๋ฉธ๊ท ํ์ฌ ์ค๋นํ ๋ค๊นจ๋ฐ ํจ์๋ถํด๋ฌผ์ ๊ท ์ฃผ ํํ์ก์ \( 5 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \)๋ก ์ ์ข
ํ๊ณ \( 36 ^ {\circ } \mathrm { C } \)์์ \( 180 \mathrm { rpm } \) ์ผ๋ก \(15 \)์๊ฐ ๋์ ์งํ ๋ฐฐ์ํ๋ณ์ ๊ท ์ ์์ก, ์ ์ ์ฐ๋์ ๋ณํ๋ฅผ ๊ฒฝ์์ ์ผ๋ก ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฐฐ์์ก์ \( \mathrm { pH } \)๋ \( \mathrm { H } \) meter๋ก ์ง์ ์ธก์ ํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ ์ฐ๋๋ ํฌ์ํ ๋ฐฐ์์ก 10 \( \mathrm { nL } \) ๋ฅผ phenolphthalein์ ์ง์์ฝ์ผ๋ก \(0.01 \)N NaOH๋ก ์ ์ ํ์ฌ ์ ์ฐ ํจ๋์ผ๋ก ํ์ํ์๋ค. ๊ท ์ ์์ก ์ ๋๋ \( 610 \mathrm { ~nm } \) ์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ๋ชจ๋ํฐ๋งํ์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ์ผ๋ก๋ ๋ค๊นจ๋ฐ ๋ฏธ๋ถํด๋ฌผ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p> <h2>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h2> <h3>๋ค๊นจ๋ฐ ๋ถํดํจ์ ์ ๋ณ</h3> <p>ํ์ง ๋ค๊นจ๋ฐ์ ๊ฐ๊ฐ \( 30-40 \% \) ํจ์ ๋์ด ์๋ ํ์ํ๋ฌผ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ํจ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ก ๊ฐ์ฉํํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์์
์ฉ ํ์ํ๋ฌผ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ์ ๋ณํ์๋ค. \( 10 \%( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \) ๋ค๊นจ๋ฐ ํํ์ก์ ๋ค๊นจ๋ฐ ์ค๋์ \( 1 \% \)๋ก ํจ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐ์์ํจ ํ ํจ์ ์ฒ๋ฆฌ ์๋ฑ์ก์ ํ์ํ๋ฌผ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง ํจ๋์ ๋ถ์ํ์ฌ ํจ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์๊ณ ๋จ์ ์ถ์ถํ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์๋ค(Table \(1 \)). ํ์๋น์ ํจ๋์ Ceremix \( >\) Alcalase \( \geq \) Viscozyme \( >\) Protamex \( >\) Flavourzyme \( >\) Neutrase \( >\) Pectinase ์์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค \( 27.0-68.9 \% \), ๋จ๋ฐฑ์ง ํจ๋์ Alcalase \( >\) Protamex \( >\) Neutrase ์์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฐ ๋ณด๋ค \( 3.5 \sim 21.9 \% \) ์ฆ๊ฐํ์๋ค. Ceremix๋ \( \alpha \)-amylase, \( \beta \)-glucanase, cellulase, pentosanase ๋ฑ์ ํผํฉํจ์์ ์ ๋ก ํ์๋น ํจ๋์ ๋์กฐ๊ตฐ ๋๋น ์ฝ \( 70 \% \), Alcalase๋ ๋จ๋ฐฑ์ง ํจ๋์ ๋์กฐ๊ตฐ ๋๋น \( 20 \% \) ์ด์ ํญ์์ํค๋ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ค๊นจ๋ฐ์ ํ์ํ๋ฌผ ๋ถํด์๋ Ceremix, ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํด์๋ Alcalase๋ฅผ ์ฌ์ฉํ๋ ๊ฒ์ด ์ ์ ํ๋ค๊ณ ์ฌ๋ฃ๋๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ค๊นจ๋ฐ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๊ฐ์๋ถํด์์ Flavourzyme์ด Alclase๋ณด๋ค ๋์ ๊ฐ์๋ถํด๋๋ฅผ ๋ณด์ธ๋ค๋ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์์ดํ ๊ฒ์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถ๋ฆฌ์์ด ๋ค๊นจ๋ฐ์ ํจ์์ ๊ธฐ์ง๋ก ์ฌ์ฉํ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์ธ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๋ํ, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ ์ฒ๋ฆฌ๋ก ํ์๋น์ ํจ๋์ด ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ ๋ค๊นจ๋ฐ์ ์กด์ฌํ๋ ๋น๋จ๋ฐฑ์ง ๋ณตํฉ์ฒด์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถ๋ถ์ ๊ฐ์ ๋ถํดํ์ฌ ๋ค๋น๋ฅ์ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฉํด๋๋ฅผ ์ฆ๊ฐ์ํค๋๋ฐ ๊ธฐ์ธํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฝํญ์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ธ Alcalase, Flavourzyme ๋ฑ์ผ๋ก ํ์ผ๋ฐ์ด๋ ๋์ ๋ถํดํ์์ ๋ ๋์กฐ๊ตฐ ๋ณด๋ค ํ์๋น ํจ๋์ด ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ ๋งค์ฐ ์ ์ฌํ์๋ค.</p> <table border><caption>Table \(1 \) Effects of various enzyme treatments on the solubilization of defatted perilla seed residue</caption> <tbody><tr><td>Enzymes</td><td>Relative protein content (%)</td><td>Relative reducing sugar content (%)</td></tr><tr><td>Alcalase</td><td>\( 121.93 \pm 16.45 ^ { 1) } \)</td><td>\( 146.62 \pm 16.24 \)</td></tr><tr><td>Flavourzyme</td><td>\( 32.27 \pm 4.51 ^ { * } \)</td><td>\( 133.78 \pm 26.76 \)</td></tr><tr><td>Nutrase</td><td>\( 103.53 \pm 8.00 \)</td><td>\( 129.73 \pm 7.64 \)</td></tr><td>Protamex</td><td>\( 117.06 \pm 17.77 \)</td><td>\( 135.81 \pm 8.60 \)</td></tr><td>Ceremix</td><td>\( 90.19 \pm 10.01 \)</td><td>\( 168.92 \pm 0.61 ^ { * } \)</td></tr></tr><td>Pectinase</td><td>\( 59.11 \pm 7.56 ^ { * } \)</td><td>\( 127.03 \pm 7.64 \)</td></tr></tr><td>Viscozyme</td><td>\( 65.65 \pm 2.39 ^ { * } \)</td><td>\( 145.95 \pm 34.40 \)</td></tr></tr><td>Control</td><td>\( 100 \pm 15.63 \)</td><td>\( 100 \pm 11.45 \)</td></tr></tbody></table> | Table 11 Effects of various enzyme treatments on the solubilization of defatted perilla seed residue ์์ Relative protein content๊ฐ \( 90.19 \pm 10.01 \)์ธ ๊ฒฝ์ Enzymes์ ๋ญ์ผ? |
YES | <h1>์ด ๋ก</h1><p>๋๋(Codonopsis lanceolata)์ ์ฃผ๋ก ํ๊ตญ, ์ค๊ตญ ๋ฑ ๋์์์ ์ง์ญ์ ์ฌ๋ฐฐ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋๋์ ๋ฟ๋ฆฌ๋ ๊ธฐ์นจ, ๊ธฐ๊ด์ง์ผ, ์ฒ์, ๊ฒฐํต, ์ํ ๋ถ๋์ ์ฆ์์ ์น๋ฃํ๊ธฐ ์ํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ํ ๋ฐ ์ ํต ์ํ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋์ด์ ธ ์๋ค. ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ์ ์ํ๋ฉด phenylpropanoids, polyacetylenes, saponins, flavonoids์ ๊ฐ์ ๋ค์ํ ์๋ฌผ ์ฒ์ฐ๋ฌผ ์ฑ๋ถ๋ค์ด ํญ๋น๋ง, ํญ์ผ, ํญ์, ํญ์ฐํ, ํญ๋ฏธ์๋ฌผ ํ์ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ์ฝ๋ฆฌํ์ ์์ฉ์ ๊ด์ฌํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. MS๊ธฐ๋ฐ ๋์ฌ์ฒดํ ๋ถ์์ ์ด์ฉํ ์ฃผ์ฐ์ง์ ๋ง์ปค ์ฑ๋ถ์ ์ ์ ํ๋ ๊ฒ์ ๋ค๋ฅธ ์ง์ญ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋ ์ฝ์ฉ ์๋ฌผ์ ์์ ์ฑ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ํํ์ ์กฐ์ฑ๊ณผ ์๋ฌผํ์ ํจ๋ฅ์ ๋ณํ์๋ ๊ด๋ จ์ด ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋ถ์์ฉ ์์ด ๋๋์ ์ ์ตํ ํจ๊ณผ๋ง์ ๋ณด์ฅํ๋๋ฐ ์ค์ํ๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ตญ๋ด์ฐ ๋๋์ ์ฃผ์ฐ์ง ํน์ฑ์ ๊ตฌ๋ณํ๊ธฐ ์ํด UPLC-QTOF-MS๋ฅผ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก ํ๋ ๋์ฌ์ฒด ํ๋กํ์ผ๋ง๊ณผ ๋ค๋ณ๋ ํต๊ณ๋ถ์ ๊ธฐ๋ฒ์ธ PCA๋ถ์์ ์ํํ์ฌ ํ๋ณ๋ชจ๋ธ์ ํ๋ฆฝํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ์ธ์ (๊ฐ์๋), ํก์ฑ(๊ฐ์๋), ๋ฌด์ฃผ(์ ๋ผ๋ถ๋)์ 3๊ฐ ๊ทธ๋ฃน์ด PCA์ loading plot ๋ถ์๊ฒฐ๊ณผ tangshenoside I, lancemaside A, lancemaside G๋ ๋๋ ์ฃผ์ฐ์ง๋ฅผ ๊ตฌ๋ณํ๊ธฐ ์ํ ์ ์ฌ์ ๋์ฌ์ฒด ๋ง์ปค๋ค๋ก ์ ์ํ์๋ค.</p> | lancemaside A๋ ๋๋ ์ฃผ์ฐ์๋ฅผ ๊ตฌ๋ณํ๊ธฐ ์ํ ์ ์ฌ์ ๋์ฌ์ฒด ๋ง์ปค์ธ๊ฐ์? |
๋์ด์งํฅ์ฒญ ๊ตญ๋ฆฝ์์ํน์๊ณผํ์ ์ธ์ผํน์๋ถ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์คํ์ฌ๋ฃ</h2><p>2016๋
์ฌ๋ฐฐ๋ G. uralensis, G. glabra ๋ฐ SW์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋์ด์งํฅ์ฒญ ๊ตญ๋ฆฝ์์ํน์๊ณผํ์ ์ธ์ผํน์๋ถ(Eumseong, Korea)์์ ์ ๊ณต๋ฐ์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, voucher specimen์ ํ๊ตญ์ฝ์ฉ์์ํ ๋ณธ๊ด์ ๋ณด๊ด๋์ด ์๋ค. ๊ฑด์กฐ์ํจ G. uralensis, G. glabra ๋ฐ SW์ \( 50 \% \) ethanol์ ์ด์ฉํ์ฌ ์์จ์์ 72์๊ฐ ๋์ ์นจ์ง ํ, ์ฌ๊ณผ ๋ฐ ๊ฐ์ ๋์ถํ์ฌ ์๋ฃ๋ฅผ ์กฐ์ ํ์๋ค. ๊ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ dimethyl sulfoxide (DMSO, Sigma Co., St Louis, USA)์ ๋
น์ฌ \( 4{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๋ณด๊ดํ๋ฉด์, ์คํ ์ ํฌ์ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์์ผ</h2><p>In vitro ํญ์ฐํ ํ์ฑ ์ธก์ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazy(DPPH), 2-deoxyribose๋ Sigma์ฌ์์, \( \mathrm{FeSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) ๋ Daejung Chemicals \( \& \) Metals Co. Ltd (Siheung, Korea)์์, EDTA disodium salt dehydrate ๋ฐ phosphoric acid๋ Samchun Pure Chemical Co. Ltd (Pyeongtaek, Korea)์์ ๊ตฌ๋งคํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Thiobarbituric acid (TBA), trichloroacetic acid (TCA)๋ ๊ฐ๊ฐ Acros Organics (Fair Lawn, New Jersey, USA), Kanto Chemical Co. Inc (Tokyo, Japan)์์ ๊ตฌ๋งคํ์์ผ๋ฉฐ, phenezine methosulfate (PMS), nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) disodium salt, nitrotetrazolium blue chloride (NBT) ์์ฝ์ Bio Basic Co. (Toronto, Canada)์ฌ์์ ๊ตฌ๋งคํ์ฌ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. C6 glial cell์ ํ๊ตญ์ธํฌ์ฃผ์ํ(Korea Cell Line Bank, Seoul, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ธํฌ ๋ฐฐ์์ ์ํด ์ฌ์ฉ๋ Dulbecco's modified eagle medium (DMEM) ๋ฐฐ์ง, fetal bovine serum (FBS) ๊ณผ \( 100 \mathrm{units} / \mathrm{mL} \) penicillin streptomycin, trypsin EDTA ์ฉ์ก์ Welgene (Daegu, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ธํฌ์ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค๋ฅผ ์ ๋ํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉํ \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) ๋ Junsei (Tokyo, Japan)์ฌ์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , cell viability๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉํ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) ๋ฐ ROS ์์ฑ๋ ์ธก์ ์ ์ํ 2'-7'-dichlorofluorescin diacetate (DCF-DA)๋ Sigma์ฌ์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazy (DPPH) radical ์๊ฑฐ๋ฅ</h2><p>๊ฐ ๋๋๋ณ ์ถ์ถ๋ฌผ \( (5,10,25,50,100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) ์ EtOH์ ๋
น์ธ ์๋ฃ \( 100 \mu \mathrm{L} \) ์ \( 60 \mu \mathrm{M} \) DPPH์ฉ์ก \( 100 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ 96-well plate์ ํผํฉํ์ฌ 30๋ถ๊ฐ ์ค์จ์์ ๋ฐ์์ํจ ํ, \( 540 \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์คํ๊ตฐ์ ๋น๊ตํ์ฌ DPPH radical ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ค์์ ๊ณ์ฐ์์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ฐฑ๋ถ์จ(\( \% \))๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>DPPH radical scavenging activity \((\%)=\left(\mathrm{Abs}_{\mathrm{c}}-\mathrm{Abs}_{\mathrm{s}}\right) / \mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \times 100 \\ \)( \(\mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \) : Absorbance of control, \(\mathrm{Abs}_{\mathrm{s}} \) : Absorbance of sample)</p><h2>Hydroxyl radical \( (\cdot \mathbf{O H}) \) ์๊ฑฐ๋ฅ</h2></p>\( \cdot \mathrm{OH} \) radical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ์ Fenton ๋ฐ์์ ๋ฐ๋์ผ๋ฉฐ, \( 0.2 \mathrm{M} \) phosphate buffer saline (PBS)์ ๋๋๋ณ ์๋ฃ ์ฉ์ก \( 1400 \mu \mathrm{L} \) ์ \( 10 \mathrm{~mM} \quad \mathrm{FeSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)-EDTA \( 200 \mu \mathrm{L}, 10 \mathrm{~mM} \) 2-deoxyribose solution \( 200 \mu \mathrm{L}, 10 \mathrm{mM} ~ \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} ~ 200 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ๊ทธ ํ 4์๊ฐ ๋์ \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๋ฐฐ์ ํ ๋ค, \( 2.8 \% \) TCA \( 1 \mathrm{~mL} \) ์ \( 1.0 \% \) TBA solution \( 1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ 20๋ถ ๋์ \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ๊ฐ์ดํ๊ณ ์ค์จ์์ ๋๊ฐ์ํจ ๋ค \( 490 \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์คํ๊ตฐ์ ๋น๊ตํ์ฌ \( \cdot \mathrm{OH} \) radical ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ค์์ ๊ณ์ฐ์์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ฐฑ๋ถ์จ(\( \% \))๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>\( \cdot \mathrm{OH} \) radical scavenging activity \( (\%)=\left(\mathrm{Abs}_{\mathrm{c}}-\mathrm{Abs}_{\mathrm{s}}\right) / \mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \times 100 \\ \)(\( \mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \) : Absorbance of control, \( \mathrm{Abs}_{\mathrm{s}} \) : Absorbance of sample)</p> | uralensis, G. glabra ๋ฐ SW๋ ์ด๋ป๊ฒ ์๋ฃ๋ฅผ ์กฐ์ ํ๋ ๋จ๊ณ๋ฅผ ๊ฑฐ์นฉ๋๊น? |
NMR, MS, UV | <h2>UPLC-QTof-MS ๋ฐ PDF ๋ถ์ ์กฐ์ </h2><p>๋๋ฆ
๋๋ฌด ์ ์งํ ๋ฌผ์ง์ ์ ์ฑ๋ถ์์ ์ํด UPLC-QTof-MS์PDA ๋ถ์์ BEH \(\mathrm{C}_{18}(2.1 \times 100 \mathrm{mm}, 1.7 \mu \mathrm{m})\) ์นผ๋ผ ๊ด๊ณผ PDA (photodiode array)์ mass๋ฅผ ์ฅ์ฐฉํ UPLC์ ์ ์ \( 0.4 \mathrm{mL} / \)\( \mathrm{min} \), ์ฉ๋งค๋ \( 0.1 \% \) formic acid๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฆ๋ฅ์(A)์ ACN(B)์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ํํ์๋ค. UPLC ์ด๋์์ ์ฉ๋งค ์กฐ์ฑ์ 0.0-1.0 \({~min} ~1 \% \) (B), 1.0-3.0 \({~min}~1-15 \%\) (B), 3.0-11.0 \({~min} ~15-40 \% \) (B), 11.0-13.0 \({~min} ~40\%\) (B), 13.1-15.0 \({~min} ~40-1\%\) (B) ์กฐ๊ฑด์ ์ด์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ์๋ฃ๋ \( 2 \mu \mathrm{L}(1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ถ์์ ์ค์ํ์๋ค.</p><h2>๊ตฌ์กฐ๋ถ์</h2><p>์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๋์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ NMR, MS, UV ๋ฑ์ ๋ถ๊ดํ์ ์ธ ๊ธฐ๊ธฐ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋จผ์ , \( { }^{1} \mathrm{H}-,{ }^{13} \mathrm{C}-\mathrm{NMR} \)์์ ์์์ ํ์์ ๊ฐ์์ chemical shift ๊ฐ์ผ๋ก ๊ธฐ๋ณธ์ ์ธ ๊ณจ๊ฒฉ์ ์์ํ์๊ณ , 2D-NMR (COSY, HMQC, HMBC, DEPT)์์ ์์-ํ์์ ์ฐ๊ด๊ด๊ณ๋ฅผ ํตํด ์นํ๊ธฐ์ ์ ํํ ์์น์ ํ์ ์ฐจ์๋ฅผ ํ์ธํ์ฌ ๋ฌผ์ง์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ํ์ธํ์๊ณ ์ ํ๋ฌธํ์ ํํฉ๋ฌผ๊ณผ ๋น๊ตํ์ธํ์ฌ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ์๋ค.</p><h2>Chlorogenic acid (3-O-caffeoylquinic acid)</h2><p>\( { }^{1} \mathrm{H} \) NMR \( \left(500 \mathrm{MHz}\right. \), methanol-\( \left.d_{4}, \delta\right)\): 7.58(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 7.04(d, J=2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.94(dd, J=8.2,2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.78(d, J=8.2 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.30(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 5.36 (brd, 1H), 4.14(\(\mathrm{m}\), 1H), 3.65(\(\mathrm{m}\), 1H), 1.932 .22(\(\mathrm{m}\), 4H) \(\mathrm{ppm}\) \(;{ }^{13} \mathrm{C}\) NMR\((125 \mathrm{MHz} \), methanol-\( \left.d_{4}, \delta\right)\): 178.4, 168.9, 149.5, 147.1, 146.8, 127.8, 123.0, 116.5, 115.3, 115.2, 77.3, 73.9, 72.1, 71.9, 39.4, 38.3 \(\mathrm{ppm}\)</p><h2>Nochlorogenic acid (5-O-caffeoylquinic acid)</h2><p>\( { }^{1} \mathrm{H}\) NMR \(\left(500 \mathrm{MHz}\right.\), methanol-\(\left.d_{4}, \delta\right)\): 7.56(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 7.05(d, J=2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.95(dd, J=8.2,2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.78(d, J=8.2 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.27(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 5.35 (m, 1H), 4.18 (brd, 1H), 3.75(m, 1H), 2,042.25(m, 4H) \(\mathrm{ppm};{ }^{13} \mathrm{C}\) NMR\((125 \mathrm{MHz} \), DMSO-\( \left.d_{6}, \delta\right)\): 175.6, 167.3, 148.1, 145.7, 145.3, 126.4, 121.6, 115.1, 113.8, 113.8, 74.7, 72.1, 70.5, 69.9, 36.8, 37.4 \(\mathrm{ppm}\)</p><h2>์ ๋ ๋ถ์</h2><p>๋ถ์ ์๋ฃ์ ์ ์กฐ ํ์ค ๋ฌผ์ง์ธ 3-O-caffeoylquinic acid์ 5-O-caffeoylquinic acid์ ๊ฐ๊ฐ์ ๋๋๋ฅผ \( 1000 \mathrm{ppm} \) ๋ง๋ค์ด ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ํ ์๋ฑ์ก์ ์ทจํ์ฌ ๋ถ์์ฉ vial ์ ๋ด์ ์งํํ์๋ค. ์ ๋ ๊ฐ์ ์ธก์ ๊ฐ์ ํผํฌ๋ฉด์ ์ ๊ฒ๋์ \( (\mathrm{y}=\mathrm{ax}+\mathrm{b}) \) ์์ ๋์
ํ ํ ๊ณ์ฐ์์ ์ํด ์ฐ์ถํ์๋ค. ๊ฒ๋์ ์ \( \mathrm{x} \)์ถ์ ๋ฐ๋ณต ์ ๋ฐ ๋ถ์ ์์ ์, \( \mathrm{y} \)์ถ์ ํผํฌ๋ฉด์ ์ ์ ์ฉํ์ฌ ์ต์์์น๋ฒ์ผ๋ก ์ฐ์ถ ํ์๋ค. ํ๊ฐ ํญ๋ชฉ์ ํน์ด์ฑ, ์ง์ ์ฑ, ๊ฒ์ถ ํ๊ณ, ์ ๋ ํ๊ณ, ์๋ฃ ์๋ฅ์ 5 ๊ฐ์ง ํญ๋ชฉ์ผ๋ก ํ๊ฐํ์๋ค.</p> | ์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๋์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉ๋๋ ๋ถ๊ดํ์ ์ธ ๊ธฐ๊ธฐ๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? |
YES | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์ฌ์ฉ๊ท ์ฃผ, ๋ฐฐ์ง ๋ฐ ๋ฐฐ์</h2><p>๋ณธ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ Pseudoxanthomonas sp. WD12์ WD32๊ท ์ฃผ๋ ๋ถํจํ ๋๋ฌด์์ ๋ถ๋ฆฌํ ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , ๋ฐฐ์์ LB ๋ฐฐ์ง(sodium chloride \( 0.5 \% \), tryptone \( 1.0 \% \), yeast extract \( 0.5 \% \); Duchefa biochemie, Netherlands)์ \( 0.1 \% \) Difco skim milk (BD, Sparks, MD, USA)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ง๋ ๋ฐฐ์ง๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๊ท ์ฃผ๋ \( 37{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ์ต๊ณ ํ์ฑ์ ๋ณด์ธ ๋ฐฐ์์๊ฐ (WD 12๋ \(100\) ์๊ฐ, WD32๋ \(80\) ์๊ฐ) ๋์ ๋ฐฐ์ํ๊ณ ๊ท ์ ์ฑ์ฅ์ ํก๊ด๋ \( 600 \mathrm{~nm} \) ์์ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>ํจ์ํ์ฑ ์ธก์ </h2><p>๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ ํ์ฑ ์ธก์ ์ ๋ฐฐ์์ก์ \( 4{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( 8,000 \mathrm{rpm} \) (Micro \( 17 \)R, Hanil, Kimpo, Korea)์์ \( 5 \)๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ํ์ฌ ๊ท ์ฒด๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ ์๋ฑ์ก์ ์กฐํจ์์ก์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค. ํจ์์ ํ์ฑ ์ธก์ ์ ๊ธฐ์ง๋ก \( 0.5 \%(\mathrm{w} / \mathrm{v}) \) azocasein์ ์ฌ์ฉํ ์กฐ ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์๊ฑฐํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ ํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ ๊ฐ์ ๋ชจ๋ \( 3 \) ํ ๋ฐ๋ณต ์ธก์ ํ์ฌ ํ๊ท ๊ฐ๊ณผ ํ์คํธ์ฐจ๋ก ํ์ํ์๋ค.</p><h2>์ต์ \( \mathrm{pH} \), ์จ๋์กฐ๊ฑด ๋ฐ ๊ธ์์ด์จ</h2><p>์ต์ \( \mathrm{pH} \) ์ธก์ ์ ์ํด \( \mathrm{pH} 6.0 \) ์์ \( \mathrm{pH} 7.0 \) ๊น์ง๋ \( 0.5 \mathrm{M} \) phosphate ์์ถฉ์ฉ์ก, \( \mathrm{pH} 8.0 \) ์์ \( \mathrm{pH} 9.0\) ๊น์ง๋ \( 0.5 \mathrm{M} \) Tris-\( \mathrm{HCl} \) ์์ถฉ์ฉ์ก, \( \mathrm{pH} 10.0 \) ์์ \( \mathrm{pH} 11.0\) ๊น์ง๋ \( 2.0 \mathrm{M} \) glycine-\( \mathrm{NaOH} \) ์์ถฉ์ฉ์ก์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ํจ์ ๋ฐ์์จ๋๋ \( 10{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์๋ถํฐ \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์ด์ฉํ๋ฉฐ \( 5^{\circ} \mathrm{C} \) ๊ฐ๊ฒฉ์ผ๋ก ์กฐ์ ํ์ฌ ํจ์ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ธ์์ด์จ์ \( \mathrm{AgNO}_{3}\), \(\mathrm{KCl}\), \(\mathrm{NaCl}\), \(\mathrm{CaCl}_{2}\), \(\mathrm{CuSO}_{4}\), \(\mathrm{MgCl}_{2} \), \( \mathrm{MnSO}_{4}\), \(\mathrm{AlCl}_{3}\), \(\mathrm{FeCl}_{3} \) ์ ์ต์ข
๋๋๊ฐ \( 1 \mathrm{mM} \) ๋๋ \( 5 \mathrm{mM} \) ์ ๋๋๋ก ํจ์ ๋ฐ์์ก์ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค.</p> | \( 30{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ํจ์ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์ด? |
24์๊ฐ | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์ด ํ๋ ๋ฐ ์ํ ์์๋ ํจ๋</h2><p>๋ฐํจ์ ๋ฅผ ์ ์กฐํ์ฌ 24์๊ฐ ์์ ํ ์ํจ ํ ๋ฐํจ์ ์ ์ด ํ๋๊ณผ ์ํ ์์๋ ํจ๋์ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ด ํ๋ ํจ๋์ MS๋ฅผ ๋ฃ์ง ์์ ๊ตฐ๋ค์์ ์๋น๋ ํจ์ ๋์ด ์์์ง๋ง MS๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์์ ๋ ๊ธ์ฆํ๋ ๊ฒ์ ๋ณผ ์ ์์๋ค. Bacteria์ ์ข
๋ฅ๋ ์ดํ๋ ํจ๋์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น์ง ์์์ ์ดํ๋ ํจ๋์ BA+MS, LP+MS ๊ตฐ๋ค์ด YF, LP, BA๊ตฐ๋ค๋ณด๋ค ํต๊ณ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ๊ฒ ๋์๋ค. ์ด ์ํ ์์๋ ํจ๋๋ ํ๋์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ ์์์ ๋์๋๋ฐ, YF, BA, LP๊ตฐ๋ค์์๋ ์ด ์ํ ์์๋ ํจ๋์ด ๋งค์ฐ ๋ฎ์์ผ๋ฉฐ MS๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ ๋ ๊ธ๊ฒฉํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ ์ด ํจ๋๋ bacteria์ ์ข
๋ฅ์ ์ํด์๋ ์ํฅ์ ๋ฐ์ง ์์๋ค. ์ค๋+์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฒจ๊ฐ๊ฐ ์ด ์ํ ์์๋๊ณผ ์ด ํ๋ ํจ๋์ ์ฆ๊ฐ์ํจ ๊ฒ์ ์ค๋์ ์ํ ์์๋์ด ๋ง์ด ํจ์ ๋์ด ์๋ ๊ฒ๊ณผ ๊ด๋ จ์ด ์๋ค. ์ํ ์์๋์ ์ด์ ๋ถ์์ ํ์ฌ \( 70{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์ด์์์ ์งง์ ์๊ฐ ๊ฐ๊ณตํ๋ ๋์์๋ ํ๊ดด๊ฐ ๋ง์ด ์ผ์ด๋๋๋ฐ, \( 37{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์์ 24์๊ฐ ๋์ ๊ณต๊ธฐ์ ์ ์ดํ๋ฉด์ ๋ฐํจํ๋๋ฐ๋ ์ํ ์์๋์ ํ๊ดด๊ฐ ์์ฃผ ๋์ง๋ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ ๊ณต๊ธฐ๋ณด๋ค๋ ์ด์ด ์ํ ์์๋ ํ๊ดด์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ๊ฒ์ ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p><h2>pH์ ์ฐ๋</h2><p>์ ์ฐ๊ท ์ ์ข
๋ฅ์ ์๊ฐ์ ๋ฐ๋ฅธ pH์ ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์ฐจ์ด๋ Table 3์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๊ฐ ๊ตฐ๋ง๋ค ์ด๊ธฐ์ ๋ฐํจ ์์ ์ pH ๊ฐ์ \( 6.65 \pm 0.05 \)๋ก ์ ์ฌํ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๊ณ ๋ฐํจ ์๋ฃ ์์ ์๋YF์ ์ค๋ + ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ BA + MS๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฐํจ๊ฐ ์งํ๋๋ ๋์ LP์ BA๊ตฐ์ ์ค๋ + ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ ๊ตฐ์ ๋นํ์ฌ ๊ฐ์ด ๋ฎ์์ง๋ ํญ์ด ์ ์๋ค. ๋ฐํจ ์ด๊ธฐ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ BA๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์์ง๋ง \( 0.14 \pm 0.02 \)๋ก ์ ์ฌํ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฐํจ ์๋ฃ ์์ ์ ์ค๋+์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฒจ๊ฐํ ๊ฒ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๊ณ , YF, LP, BA์์ผ๋ก ๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฐํจ๊ฐ ์งํ๋๋ ์๊ฐ์์๋ ๋ฐํจ ์๋ฃ ์์ ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ ์์์ ๋ณด์๋๋ฐ, ์ค๋+์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ด ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>pH ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ์ ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋๋ฐ, pH ๊ฐ์ด ๋ฎ์์๋ก ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ๋์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ์ค๋ \(+\) ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ ๊ตฐ์ด ๋ค๋ฅธ ๊ตฐ๋ณด๋ค pH๋ ๋ฎ๊ณ , ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ๋์๋ค. ์ด๋ ์ ์ฐ๊ท ์ ์ ๊ธฐ์ฐ์ ๋ํด ์ค๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ๋ํด์ ธ pH๊ฐ์ด ๋ ๋ฎ๊ฒ, ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ๋ ๋๊ฒ ๋์จ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ธ๋ค. Yang ๋ฑ์ ์ค๋ ๋์ถ์ก ์ฒจ๊ฐ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ํ์ pH ๊ฒฐ๊ณผ, ์ค๋์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋ง์์ง๋ฉด ์ด๊ธฐ pH ๊ฐ์ด ๋ฎ์์ก๋ค. Celik์ Bakirci๋ ์ค๋ ์ฒญ์ ์ฒจ๊ฐํ ๋ฐํจ์ ์ pH์์ ์ค๋ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ด๊ธฐ๋ถํฐ ๋ฎ์ pH๊ฐ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ํ์ง๋ง ๋ฐํจ ํ๋ฐ๊ธฐ์๋ ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค ๋์ pH๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋๋ฐ, ์ด๋ ์ค๋์ฒจ๊ฐ๊ตฐ ๋ฐํจ์ ์ ์ฐ๋๊ฐ ๋์์ง๋ฉด์ pH๋ ๋ฎ์์ ธ ๋ฐํ
๋ฆฌ์์ ์ ์ฐ ํ์ฑ์ ๋ฐฉํดํ์ฌ, ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค pH๋ ๋๊ณ ์ฐ๋๋ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ์ด๋ค์ S. thermophilus, L. bulgaricus, B. longum ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๊ณ ๋ฎ์ pH์ ๋์ ์ฐ๋์์ ์ ์ฐ์ ํ์ฑ์ด ์ง์ฐ๋์ด ๋ฐํจ ํ๋ฐ๊ธฐ์ ๋ณํ๊ฐ ๋ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ณธ ์คํ์์๋ ๋ด์ฐ์ฑ์ด ๊ฐํ ์๋ฌผ์ฑ ์ ์ฐ๊ท ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ค๋ \(+\) ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฒจ๊ฐ์๋ pH์ ์ฐ๋์์ ์ง์์ ์ผ๋ก ์ข์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ธ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p> | ์ค๋์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก pH๋ ์ด๋ป๊ฒ ๋ณํ ๊น? |
NO | <h1>์ ๋ก </h1><p>๋์ฝ(pesticide)์ ๋ณํด์ถฉ๊ณผ ์ก์ด ๋ฑ์ ์ ๊ฑฐํ์ฌ ์๋ ์์ฐ๋์ ์ฆ๋์ํค๊ธฐ ์ํด ํ์ ๋ถ๊ฐ๊ฒฐํ ๋์์ฌ์ด๋ค. ๋ค์ํ ๋์ฝ๋ค ์ค์์ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ ๋์
๊ณผ ๊ฐ์ ์์ ํด์ถฉ๋ค์ ๋ฐ๋ฉธํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉ๋๋ ๋ํ์ ์ธ ์ด์ถฉ์ ์ฑ๋ถ ์ค์ ํ๋๋ก์จ ๋์ ์๋ฅ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ์ ๊ธฐ์ผ์(organochlorine) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ ๋์ฒดํ๊ธฐ ์ํด์ ์ ๊ธฐ์ธ(organophosphorus) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ฐ ์นด๋ฐ๋ฉ์ดํธ(carbamate) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๋๋ถ์ด \(1970\) ๋
๋ ์ดํ๋ถํฐ ๋งค๋
์ฌ์ฉ๋์ด ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์๋ค. ๋น๋ก ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ด ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ ๊ธฐ์ธ(organophosphorus) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ ๋นํด์ ์ธ๊ฐ์ ๋ํ ์น๋ช
์ ์ธ ๋
์ฑ์ด ๋ฎ๋ค๊ณ ํ๋๋ผ๋, ๊ณ ๋๋์ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๋
ธ์ถ๋๊ฑฐ๋ ์ ๋๋์ ์ง์์ ์ผ๋ก ๋
ธ์ถ๋๋ค๋ฉด ๋ด๋ถ๋น ๊ต๋, ๋ฆผํ์ ๊ณผ ๋น์ฅ์ ์์ ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฐ์๊ณผ ๊ฐ์ ๋ค์ํ ์ฆ์์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ์๋ ์ฆ๊ฐ๋ก ์ธํ์ฌ ์ถ์ด ์ฌ์ ๋ก์์ง์ ๋ฐ๋ผ ๋ง์ ์๋น์๋ค์ ์๋ฅ ๋์ฝ์ผ๋ก๋ถํฐ ์์ ํ ๋จน๊ฑฐ๋ฆฌ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ๋์์ง๊ณ ์๋ค. ๊ตญ๋ด ๊ณต๊ณต๊ธฐ๊ด๋ค์ด ์กฐ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด \(2012\) ๋
๋ถ์ฐ์ง์ญ์์ ์ถํ/์ ํต๋๋ ๋์ฐ๋ฌผ \(3,996\)๊ฑด์ ์กฐ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ, ์๋ฅ ๋์ฝ์ด ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(57\) ํ๋ชฉ \(499\)๊ฑด์ผ๋ก ์ถํ/์ ํต ๋์ฐ๋ฌผ์ \( 12.5 \% \) ์ ๋ฌํ๋ฉฐ, ๊ทธ ์ค ์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค์ ์ด๊ณผํ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(32\)๊ฑด์ผ๋ก \( 0.8 \% \) ์ ์ด๋ฅด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์กฐ์ฌ๋์๋ค. ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๋์ฐ๋ฌผ ๊ฒ์ถ ํํฉ์ ๋ณด๋ฉด ๋นํํธ๋ฆฐ (bifenthrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(15\) ํ ๊ฒ์ถ ์ค \(2\) ๊ฑด์ด ๊ธฐ์ค์น๋ฅผ ์ด๊ณผํ ๊ฒ์ผ๋ก, ์ธ์ดํผ๋ฉํธ๋ฆฐ(cypermethrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \( 5 \) ํ ๊ฒ์ถ, ํํ๋กํํธ๋ฆฐ(fenpropathrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(3\)ํ ๊ฒ์ถ, ์ธ์ดํ ๋กํธ๋ฆฐ (cyhalothrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(1\)ํ ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. \(2012\)๋
๊ฒฝ๊ธฐ๋์์ ์ ํต๋ ์ด \(11,008\)๊ฑด์ ๋์ฐ๋ฌผ์ ์๋ฅ๋์ฝ์ ๋ถ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ, ์๋ฅ ๋์ฝ์ด ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(665\)๊ฑด์ผ๋ก ์ ์ฒด ์ ํต ๋์ฐ๋ฌผ์ \( 6.0 \% \) ๋ฅผ ์ฐจ์งํ๋ฉฐ ์ด๋ค ์ค ์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค์ ์ด๊ณผํ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(160\) ๊ฑด์ผ๋ก \( 1.5 \% \) ๋ฅผ ์ฐจ์ง ํ์๋ค. ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋ (pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๊ฒ์ถ ํํฉ์ ๋ณด๋ฉด ๋นํํธ๋ฆฐ(bifenthrin) ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(28\) ํ ๊ฒ์ถ ์ค \(3\)๊ฑด์ด ๊ธฐ์ค์น๋ฅผ ์ด๊ณผ, ์ธ์ดํผ๋ฉํธ๋ฆฐ (cypermethrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(10\) ํ ๊ฒ์ถ ์ค \(2\)์ด ๊ธฐ์ค์น๋ฅผ ์ด๊ณผ, ํํ๋กํํธ๋ฆฐ(fenpropathrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(3\)ํ ๊ฒ์ถ, ์ธ์ดํ ๋กํธ๋ฆฐ (cyhalothrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(2\)ํ ๊ฒ์ถ, ํผ๋ฉํธ๋ฆฐ(permethrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(1\)ํ ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค.</p><p>์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๊ฒฝ์ฐ, ๊ด ์ฐํ(photooxidation), ํํ์ ์ฐํ(chemical oxidation)์ ์๋ฌผํ์ ๋ถํด(biodegradation)์ ๊ฐ์ ๋ฐฉ๋ฒ๋ค์ ์ํด์ ๋ถํด๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ํนํ ํ ์๊ณผ ํด์ ๋ฌผ ๋ฑ์์๋ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋ (pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ ๋ถํดํ๋๋ฐ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ด์ ๊ด๋ จํ์ฌ Bacillus subtilis, Brevibacterium aureum, Pseudomonas aeruginosa, Sphingobium sp., Streptomyces aureus ๋ฑ์ ๋ฏธ์๋ถ๋ค์ ์ํด์ ๋ค์ํ ์ข
๋ฅ์ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ค์ถฉ์ ๋ค์ ์๋ฌผํ์ ๋ถํด์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ค์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ค์ํ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ ์ฑ๋ถ๋ค ์ค์์ ์ฌ์ดํผ๋ฉํธ๋ฆฐ (cypermethrin)์ ์๋ฌผํ์ ๋ถํด๋ฅผ ์ํ ์๋ก์ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ยท ๋์ ํ๊ณ ๋ถํด ํน์ฑ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์ํํ์๋ค.</p> | ๋์
๊ณผ ๊ฐ์ ์์ ํด์ถฉ๋ค์ ๋ฐ๋ฉธํ๊ณ ์ ํ ๋์๋ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋ ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ๋ฉด ์๋๋๊ฐ? |
๊ณผ์์ ํผ๋ถ์นจ์ฐฉ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ค์ํ ๊ธฐ๋ฏธ, ์ฃผ๊ทผ๊นจ, ๊ฒ์ ๋ฐ์ ๋ฑ์ ํผ๋ถ์งํ์ ์์ธ | <h1>์ ๋ก </h1><p>Melanin์ ์์ธ์ ์ ๋น ์๋์ง๋ฅผ ํก์ํ์ฌ ์์ธ์ ์ ์ํ ์์์ผ๋ก๋ถํฐ ์งํผ ์ดํ์ ํผ๋ถ ๊ธฐ๊ด์ ๋ณดํธํ๋ ์ญํ ์ ํ๋ฉฐ, ํผ๋ถ ์์ฒด ๋ด์ ์๊ฒจ๋ ์ ํด์ฐ์ ๋ฐ free radical ๋ฑ์ ์ก์์ฃผ๋ ๋ฑ ์ธ๋ถ ์ ํด์ธ์๋ก๋ถํฐ ํผ๋ถ๋ฅผ ๋ณดํธํ๋ ์ ์ฉํ ์ญํ ์ ์ํํ๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๊ณผ๋ํ ์์ธ์ ๋
ธ์ถ๋ก ์ธํ ๋น์ ์์ ์ธ melanin์ ์์ฑ์ ๊ณผ์์ ํผ๋ถ์นจ์ฐฉ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ค์ํ ๊ธฐ๋ฏธ, ์ฃผ๊ทผ๊นจ, ๊ฒ์ ๋ฐ์ ๋ฑ์ ํผ๋ถ์งํ์ ์์ธ์ด ๋๋ฉฐ, ๋ ๋์๊ฐ์๋ ํผ๋ถ๋
ธํ ๋ฑ์ ์ผ๊ธฐ์์ผ ํผ๋ถ ๊ฑด๊ฐ์ ์ํํ๊ณ ์๋ค. Melanin ์์ฑ์ ์ฌ๋ฌ ๋จ๊ณ์ ํจ์์ , ํํ์ ์ธ ์ฐ์์ ์ธ ๋ฐ์์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง๋ฉฐ, tyrosinase, tyrosinase related protein-1 (TRP-1), TRP-2์ ๊ฐ์ ์ฃผ์ํ ํจ์์ ์ํด ์กฐ์ ๋๋ฉฐ tyrosinase๋ ๊ตฌ๋ฆฌ๋ฅผ ํฌํจํ rate-limiting ํจ์๋ก์ ๋ฉ๋ผ๋ ํ์ฑ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๊ณ ์๋ค. Tyrosinase๋ ๋ฉ๋ผ๋
ธ์ข(melanosome)๋ด์์ melanogenesis์ ์๋๊ฒฐ์ ๋จ๊ณ์ธ ์ด๊ธฐ๋ฐ์์ ์์ฉํ๋ ํจ์๋ก tyrosine์ ์ฐํ์์ผ 3,4-dihydrophenylalanine (DOPA)์ ์์ฑํ๋ tyrosine hydroxylase ํ์ฑ๊ณผ DOPA๋ฅผ ์ฐํ์์ผ DOPA quinone์ ๋ง๋๋ DOPA oxidase๋ก์ ์์ฉํ์ฌ ๋ฉ๋ผ๋ ์คํฉ์ฒด๋ฅผ ํฉ์ฑํ๋ ํต์ฌ ํจ์๋ก ์์ฉํ๋ค. ๊ธฐ์กด์ ๋ฏธ๋ฐฑ๋ฌผ์ง๋ก ์๋ ค์ง vitamin-c, kojic acid, arbutin์ ๋ฌผ์ง์ ๋ถ์์ ์ฑ, ์๋ ๋ฅด๊ธฐ ์ ๋ฐ, ํผ๋ถ์ ์๊ตฌ ํ์ํ, ๋ฐ์์ฑ ๋ฌผ์ง, ํผ๋ถํจ์์ ์ํ ๋ถํด ๋ฑ ๊ธฐ์กด์ ์๋ ค์ง ๋ฏธ๋ฐฑ์ ๋ค์ ๋ฌธ์ ์ ์ ํด๊ฒฐํ๊ณ ์ ๋ฉ๋ผ๋ ์ํฉ์ฑ์ ์ต์ ํ์ฌ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ ธ์ฌ ์ ์๋ ๋ฌด๋
์ฑ ์ฒ์ฐ์์ฌ ๊ฐ๋ฐ์ด ์๊ตฌ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์์์ ์ข
์์ถ์ถ๋ฌผ, ๋ฐฑ์ถ์ , ๊ฐ๊ตญ ์ถ์ถ๋ฌผ, ์ฒ๊ถ์ถ์ถ๋ฌผ, ์์ง์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฑ์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ๋ ์์ฌ๊ฐ ๊ฐ๋ณ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ์ ์ธ์ฆ๋ฐ์ ์ฌ์ฉ ์ค์ ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋, ๊ณ ๊ฐ ์์ฌ์ ํ๋์ ์ํ ์ ํ์ ์ธ ๊ณ ๊ฐ์ธต๋ง์ ํ๊น์ผ๋กํ๋ ์ ํ๋ค์ด ๊ฐ๋ฐ๋๋ ์ค์ ์ผ๋ก ์จ๋ฌด ๋ถ์ฐ๋ฌผ๊ณผ ๊ฐ์ด ๋์๋ฌผ์ ๋ถ์ฐ๋ฌผ ์์ฌํ๋ก ์ ๋ ดํ ๋น์ฉ์ ์์ฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ ๊ฐ ๊ธฐ๋ฅ์ฑํ์ฅํ ์์ฅ ํ๋๊ฐ ํ์ํ๋ค.</p><p>์จ๋ฌด(Coix lachryma-jobi var. ma-yuen Stapf)๋ ๋ฒผ๊ณผ(Gramineae)์ ํํด์ด์ด ์ด๋ณธ์ผ๋ก ์ผ์ฃผ(Coix lachryma-jobi L.)์ ๋ณ์ข
์ด๋ฉฐ, ์์ฐ์ง๋ ์ธ๋ ๋๋ ๋๋จ์์์๋ก ์ผ์ํ๊ณผ ์ฌ๋ฐฐํ์ผ๋ก ์ ์ธ๊ณ์ ์ด๋ ๋ฐ ์จ๋ ์ง์ญ์ ๋๋ฆฌ ๋ถํฌํ๋ค. ๊ตญ๋ด์์๋ ๊ฒฝ๊ธฐ๋ ์ฐ์ฒ๊ตฐ์ ๋ํ์ ์ธ ํน์ฐ๋ฌผ๋ก ๊ตญ๋ด ์ ์ฒด ์ฌ๋ฐฐ๋ฉด์ ์ ์ฝ 80\( \% \) ์ด์์ ์ฐจ์งํ๊ณ ์๋ค. ์จ๋ฌด์ ์ข
์๋ ์ํ๊ณผ ํ์ฝ์ฌ, ์ค๊ธฐ์ ์์ ๊ฐ์ถ์ ์ฌ๋ฃ๋ก ํ์ฉ๋๋๋ฐ, ํ๋ฐฉ์์๋ ์จ๋ฌด์ ์ข
ํผ๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ ์จ๋ฅผ ์์ด์ธ(่่กใพ)์ด๋ผ ํ์ฌ ๋ถ์ข
, ์ ๊ฒฝํต, ๋ฅ๋จธํฐ์ฆ, ๋ฐฉ๊ด๊ฒฐ์ ๋ฑ์ ์ฝ์ฌ๋ก ์ฐ๋ฉฐ, ๋ฟ๋ฆฌ๋ ํฉ๋ฌ๊ณผ ์ ๊ฒฝํต์ ์น๋ฃ์ ์ฌ์ฉํ๋ค. ์จ๋ฌด ์ข
์์ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ก๋ ํญ๋น๋ง, ํญ์ฐํ, ํญ์ผ์ฆ, ์ธ๊ฐ ์ ๋ฐฉ์ ์ธํฌ์ฃผ(human breast cancer cell lines)์ ๋ํ anti-proliferative ํ์ฑ, ์์ฅ๋ณดํธ ํจ๊ณผ ๋ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ผ๋ฉฐ, Chen ๋ฑ์ ์จ๋ฌด ์ข
์ ๊ป์ง์ acetone ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ฐ๋ ฅํ ํญ๋์ฐ๋ณ์ด ํ์ฑ์, Otsuka ๋ฑ์ ์จ๋ฌด ๋ฟ๋ฆฌ๋ก๋ถํฐ ๋ถ๋ฆฌํ benzoxazinod ๊ณ์ด ํํฉ๋ฌผ์ ํญ์ผ์ฆ ํ์ฑ์ ๋ณด๊ณ ํ ๋ฐ ์๋ค. ์จ๋ฌด์ ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ fatty acid, phenolic acids, lactams, polysaccharide, benzoxazinoid, lignan ๋ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ๊ธฐ์กด ์จ๋ฌด์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฐ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ข
์๋ฅผ ์ด์ฉํ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ๋๋ถ๋ถ์ผ๋ก, ์จ๋ฌด ์ข
์ ์ฑ์ทจ ํ ๋ฒ๋ ค์ง๋ ๋ถ์ฐ๋ฌผ(์, ์ค๊ธฐ, ๋ถ๋ฆฌ, ๋ฏธ๊ฐ ๋ฑ)์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋ฏธ๋นํ ์ค์ ์ด๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์จ๋ฌด ๋ถ์ฐ๋ฌผ์ ์์ฌํ๋ฅผ ์ํด ํ๋์ธ๋ค์ ๊ด์ฌ์ด ๋์ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ์ ๊ด๋ จ๋ tyrosinase ํ์ฑ์ ๊ฒํ ํ์์ผ๋ฉฐ, ํ์ฑ์ด ์ฐ์ํ ์จ๋ฌด ๋ถ๋ฆฌ๋ก๋ถํฐ ๋ฏธ๋ฐฑ ๋ฌผ์ง์ ๊ท๋ช
ํ๊ณ ์ ํ์๋ค</p> | Melanin ์์ฑ์ ์ด๋ค ํจ์์ ์ํด ์กฐ์ ๋๋์? |
์๋ถ์ ๊ณต๊ธ์ด ์ํ | <p>๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ณด์ต ํจ๊ณผ. ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ณด์ต ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด ํผ๋ถ์ธํฌ์ ๋ง์ด ๋ถํฌํ๊ณ ์๋ water channel์ธ aquaporin-\(3\) (AQP-\(3\))์ ๋ฐํ์์ ํ์ธํ์๋ค. AQP-\(3 \)์ ๋ฐํ์์ด ์ฆ๊ฐํจ์ ๋ฐ๋ผ ์๋ถ์ ๊ณต๊ธ์ด ์ํํด์ ธ ํผ๋ถ์ ๋ณด์ตํจ๊ณผ๊ฐ ๊ธฐ๋๋๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ HaCaT ์ธํฌ์ ์ฒ๋ฆฌํ ํ real time PCR๋ก AQP-\(3\) ๋ฐํ์์ ํ์ธํ์๋ค. ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ \( 1 \% \) ๋๋์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒ์ด ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด AQP-\(3 \) ๋ฐํ์์ \( 1.5 \)๋ฐฐ ์ ๋ ์ฆ๊ฐ์์ผฐ๊ณ \( 5 \% \) ๋๋์์๋ ๋ฐํ์์ \(2 \)๋ฐฐ๊น์ง ์ฆ๊ฐ์ํค๋ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ ์ ์์๋ค(Fig. \(4\)).</p><p>๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ. ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด melanin ํฉ์ฑ์ ์ค์ํ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๋ฐํ์์ ํ์ธํ์๋ค. Melanin์ ํผ๋ถ์ ์์ ๋ฌผ์ง๋ก ์์ธ์ ๊ฐ์ ์๊ทน์ ํผ๋ถ์ธํฌ๊ฐ ๋
ธ์ถ ๋์์ ๋ tyrosinase ๊ฐ์ ํจ์ ๋ฑ์ ์ํด melanin์ด ํ์ฑ๋๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ melanin์ ํ์ฑ์ด ์ต์ ๋๋ฉด ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ธฐ๋ํ ์ ์๊ฒ ๋๋ค. ๋ณธ ์คํ์์๋ B\( 16\)F\( 10\) ์ธํฌ์ \( \alpha \)-Melanocytestimulating hormone \( (\alpha\)-MSH๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ melanin ์์ ์์ฑ์ ์ ๋ํ ๋ค, ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ถ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํจ์ ๋ฐ๋ผ ๋ณํํ๋ melanin ์์ ์ ๋ํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ \( 5 \% \) ๋๋์ ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํ์ ๊ฒฝ์ฐ positive control๋ก ์ฌ์ฉํ \( 16 \mu \mathrm{M} \) ๋๋์ kojic aicd ๋ณด๋ค \( 10 \% \) ๋ ๋ฎ์ ์์ melanin์ด ๊ฒ์ถ๋์๋ค. ์ฆ, ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ต์ ์ฝ \( 60 \% \) ์ melanin์๋ง์ด ๊ฒ์ถ๋จ์ ๋ฐ๋ผ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. \(5\)).</p><p>์์ฝํ๋ฉด, ๊ทธ ๋์ ์ข์ ํ์ฑ์๋ ๋ถ๊ตฌํ๊ณ ์ฐ์
์ ์์ฉ์ด ๊ฑฐ์ ๋์ง ์์๋ ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํผ๋ถ์ธํฌ์ ์ฒ๋ฆฌํจ์ ๋ฐ๋ผ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์จ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ฒ๋ฆฌ์ \( 30 \% \) ์ ๋ COX-\(2\) ๋ฐํ์์ ์กฐ์ ํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ผ์ฆ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๊ณ , ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ๋ถํดํ๋ ํจ์์ธ MMP-\(1\)์ ๋ฐํ์ \( 40 \% \) ์ ๋ ์ ํดํ๊ณ ์๋ผ์คํด ๋ฐํ์์ \(3 \)๋ฐฐ ์ ๋ ์ฆ๊ฐ์ํด์ผ๋ก์จ ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ๋ํ ๋ณด์ต์ ์ฃผ์ํ ๋ง ๋จ๋ฐฑ์ง์ธ AQP-\(3 \) ๋ฐํ์์ \(2 \)๋ฐฐ ์ฆ๊ฐ์ํด์ผ๋ก์จ ๋ณด์ตํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๊ณ melanin ์์ \( 40 \% \) ์ ๋ ๊ฐ์์ํด์ ๋ฐ๋ผ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ํญ์ผ์ฆ, ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ , ๋ณด์ต ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์์ ๋ฐ๋ผ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์จ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค.</p> | B1616F1010 ์ธํฌ์ ๋ฌด์์ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ melanin ์์ ์์ฑ์ ์ ๋ํ ์ ์์ด? |
PVC ํฌ์ฅ์ง | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์คํ์ฌ๋ฃ</h2><p>๋ณธ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋ก๋ณต์ด ๋ก์ ์ ์กฐ๋ฅผ ์ํ์ฌ ๋ฏธ๋ถ(Nongshim Flour Mills Co., Asan, Korea)๊ณผ ์๊ธ(CJ Cheiljedang, Seoul, Korea)์ ์์ค์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ด์ฉํ์๋ค. ์ฌ๋ฃ๋ 4\(^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ์จ๋์์ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์ด์ฉํ์๋ค.</p><h2>LED ๊ด์ ๋ฐ ์กฐ์ฌ ์ฅ์น</h2><p>์์ถ๋ก์ ์ฒญ์๊ด์ ์กฐ์ฌํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ํ์ฅ 460 \(\mathrm{~nm} \), ํฌ๊ธฐ \( 3 \times 3 \mathrm{~mm} \)์ LED ๊ด์ LD-CQAR (Osram, Mรผnchen, Germany)์ ์ด์ฉํ์๋ค. LED ์กฐ์ฌ ์ฅ์น๋ ์ํ์ ์ ์ฅ, ์ ํต ๋ฐ ์ง์ด์ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์ค๊ณํ์์ผ๋ฉฐ, ์ด์ ๋ฐ๋ผ ์ธ์ฒด์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ด ์ ์ผ๋ฉด์ ๊ท ์ ์ต์ ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ์๋ 460 \(\mathrm{~nm} \) ํ์ฅ์ ๊ด์์ ์ ํํ์๋ค. LED ์ฅ์น๋ 9๊ฐ์ LED ๊ด์์ ๋ณด๋์ ๋ถ์ฐฉํ๊ณ ํ๋ฅ์ ์๊ณต๊ธ์ฅ์น (KPS305DF, Shenzhen Wanptek Electronic Technology Co., LTD, Shenzhen, China)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ 1.5 \( \mathrm{~A} \) ์ ์ง์์ ์ธ ์ ๋ฅ๋ฅผ ๊ณต๊ธํ์๊ณ LED ์ ์ํ ์จ๋ ์์น์ ๋ฐฉ์งํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋๊ฐํฌ์ ์ค์นํ์๋ค. LED ์ฅ์น์ ๊ด์ ํ๋ฉด๊ณผ ๋ก ํ๋ฉด ์ฌ์ด์ ๊ฑฐ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ light dependent resistor photocell (Luna Optoelectronics, Camarillo, CA, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ก์ ์ค์ฌ์์ lux ๋จ์๋ก ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>LED ๋ฐฐ์ด ๋ฐ ๊ดํ ์๋ฎฌ๋ ์ด์
</h2><p>LED ์ฅ์น์ ๋ถ์ฐฉ๋ 9๊ฐ์ LED ๋ชจ๋์ ๋ฐฐ์ด(array) ๋ฐ ๊ด์๊ณผ ์ํ์ ๊ฑฐ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ผ ๋ฌ๋ผ์ง๋ ๋น์ ์กฐ์ฌ ์ธ๊ธฐ์ ํจํด์ ์๋ฎฌ๋ ์ด์
ํ์๋ค. LED ๋ชจ๋์ ๋ฐฐ์ด์ Fig. 2์ ๊ฐ์ด ์ธ ๊ฐ์ง๋ก ์ค์ ํ์ฌ ๋น๊ตํ์์ผ๋ฉฐ, LED ๋ฐฐ์ด์ ๋ฐ๋ฅธ ๋น์ ์กฐ์ฌ ํจํด์ Zemax OpticStudio 16.5 (Zemax LLC, Kirkland, WA, USA) ์ํํธ์จ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์๋ฎฌ๋ ์ด์
ํ์๋ค. ์๋ฎฌ๋ ์ด์
์ non-sequential ๋ชจ๋๋ก ์ํํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ด์์ ๋ํ ์ ๋ณด๋ ๊ด์์ ์ ์กฐ์ฌ์ธ Osram์ฌ์์ ์ ๊ณตํ๋ ํ์ผ์ ์ด์ฉํ์๋ค. ๊ด์ ์ถ์ (ray tracing) ๊ธฐ๋ฅ์ ์ด์ฉํ์ฌ LED๋ก๋ถํฐ ๋์ค๋ ๊ด์ ์ด detector์ ๋ฉด์ ์์ ๋ํ๋ด๋ ๋น์ ์ธ๊ธฐ ํจํด์ ๋ถ์ํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ด์ ์ถ์ ๊ธฐ๋ฅ์ Monte-Carlo ray-tracing์ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก detector ์ ํน์ ๋ฉด์ ์ ๊ด์ ์ด ๋๋ฌํ๋ ์ ๋๋ฅผ ํ๋ฅ ์ ์ผ๋ก ๊ณ์ฐํ์ฌ ์ํํ์๋ค. ์๋ฎฌ๋ ์ด์
์ ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ Osram ์ฌ์์ ์ ๊ณตํ๋ radiant flux ๋ฐ power์ ์ฆ์ ์น๋ฅผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ๊ณ์ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ด์์ผ๋ก๋ถํฐ ์
์ฌ๋๋ ๋น์ ๊ธฐ๋ณธ์ ์ธ ๊ตด์ ์ ๋ํ ํน์ฑ์ Snell's law์ ์ํ์ฌ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ด ๊ณ์ฐํ์๋ค(Eq. (1)).</p><p>\( n_{1} \sin \theta_{1}=n_{2} \sin \theta_{2} \)<caption>(1)</caption></p><p>์์ ์์์ \( n_{1} \) ๊ณผ \( n_{2} \) ๋ ์๋ก ๋ค๋ฅธ ๋ ๋งค์ง์ ๊ตด์ ๋ฅ , \( \theta_{1} \) ๊ณผ \( \theta_{2} \)๋ ์
์ฌ๊ด ๋ฐ ๊ตด์ ๊ด์ ๊ฐ๋์ด๋ค.</p><p>Detector๋ ๋ก ์ํ๊ณผ ๋์ผํ ๋์ด์ ๋ฉด์ ์ผ๋ก ์ค์ ํ๊ณ \( 250 \) ๊ฐ์ ํฝ์
์์ ์ป์ด์ง ๋น์ ์ธ๊ธฐ ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ท ์ผ๋ (uniformity)๋ฅผ ๊ณ์ฐํ์๋ค. ๊ท ์ผ๋์ ์ฒ๋๋ก Petri factor๋ฅผ ๊ณ์ฐ ํ์์ผ๋ฉฐ, Eq. (2)๊ณผ ๊ฐ์ด ์กฐ์ฌ ๋ฉด์ ์์ ํ๊ท ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ฅผ ์ค์ฌ์ ๋น ์กฐ์ฌ ์ธ๊ธฐ์ ๋น์จ๋ก ๋๋์ด์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>Petri factor \( =\frac{\sum\left(I / I_{0}\right)}{n} \)<caption>(2)</caption></p><p>์์ ์์์ \( I \) ๋ ํน์ ์์น์์์ ๋น์ ์ธ๊ธฐ, \( I_{0} \) ๋ ๋ฉด์ ์ค์ฌ์์์ ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ฅผ ์๋ฏธํ๋ค.</p><h2>Bacillus cereus group์ ๋ถ๋ฆฌ</h2><p>๋ก๋ณถ์ด ๋ก์์์ LED ์ฒญ์๊ด์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ด์ ํญ์ฑ์ด ๋์ ๋ก์ ๋ํ์ ์ธ ์ํ ์ํด๊ท ์ธ Bacillus cereus (B. cereus) group์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ, ๋ก๋ณต์ด ๋ก์ ์ ์กฐํ ํ \( 2 \mathrm{~h} \) ๋์ \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๋๊ฐํ ํ ๋ก์ผ๋ก๋ถํฐ ๊ท ์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. B. cereus group์ ๋ถ๋ฆฌ๋ ์ํ ๊ณต์ (๊ณ ์ ์ 2011-20ํธ) ๋ฐ Kim ๋ฑ ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ํํ์๋ค. ๋ก์ ํฌ์ํ์ฌ ๋ถ์ํ ํํ์ก์ MYP (mannitol egg yolk polymyxin) agar (Difco, Detroit, Michigan, USA) ๋ฐฐ์ง์ ๋๋งํ์ฌ ๋ฐฐ์ํ ํ colony ์ค ํผํํ ๋ถํ์ ํ์ ํ์ฑํ๋ colony๋ฅผ ์ ๋ณํ์๋ค. ์ดํ ๋ฉธ๊ท ๋ ๋ฃจํ๋ก colony ๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ TSA (tryptic soy agar) (Difco) ๋ฐฐ์ง์ ํํ ํ์ ํ์ฌ ์ ์ข
ํ๊ณ 37\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 24 \( \mathrm{h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ ๋ณ๋ colony ๋ TSB (tryptic soy broth) (Difco) ์ก์ฒด๋ฐฐ์ง์์ \( 10^{8} \mathrm{CFU} / \) \( \mathrm{mL} \) ๊ฐ ๋๋๋ก \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( 24 \mathrm{h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์ฌ ์คํ์ ์ด์ฉํ์๋ค.</p><h2>๋ก๋ณถ์ด ๋ก ์ ์กฐ ๋ฐ ์ํ ์ค๋น</h2><p>๋ก๋ณต์ด ๋ก์ ์ ์กฐ๋ฅผ ์ํ์ฌ ๋ก ๋ฐ์ฃฝ์ ์๊ธ์ ํจ๋์ ๋ฏธ๋ถ ๋๋น 1 \(\%\) ๊ฐ ๋๋๋ก ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ๋ฏธ๋ถ๊ณผ ์ ์ ์์ ๋น์จ์ \( 2:1 \)๋ก ํํฉํ์๋ค. ์ดํ ์ด๋ฅผ ์ฆ์ํ๊ณ ์์ถํ์ฌ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก์ ์ ์กฐํ์๋ค. ์์ถํ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก์ ๋ก 3๊ฐ๋ฅผ ๊ฐ๋ก 45 \( \mathrm{~mm} \), ์ธ๋ก 50 \( \mathrm{~mm} \), ๋์ด 15 \( \mathrm{~mm} \) ๊ฐ ๋๋๋ก ๋ฐฐ์ดํ์ฌ ํด๋ฆฌ์ํธ๋ ํฌ์ฅ์ง ๋ด์ ํฌ์ฅํ ํ 90\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 40 \( \mathrm{~min} \) ๋์ ์ด์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ๋ํ์ฌ ์ด๊ท ํ์๋ค. ์ด๊ท ์ ์๋ฃํ ๋ก์ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก์ ๋ณด๊ด ๋ฐ ์ ํต์ ๊ฐ์ ํ์ฌ ๋์ฅ ์จ๋์ธ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ๋๊ฐํ์๋ค. ๋๊ฐํ ๋ก ์ํ์ LED๋ฅผ ์กฐ์ฌํ ํ๋ฉด์ B. cereus group ํํ์ก์ ๋ก ์ํ์ ์ด๊ธฐ ๊ท ์๊ฐ \( 10^{6} \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \) ์ด ๋๋๋ก ์ ์ข
ํ๊ณ \( 30 \mathrm{~min} \) ๋์ ๊ฑด์กฐ์์ปธ๋ค. ์ดํ ๋ก์ ๊ฑด์กฐ๋ฅผ ๋ฐฉ์งํ๊ณ ํฌ์ฅ ์๋๋ฅผ ๊ฐ์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋น์ด ํฌ๊ณผํ๋ PVC ํฌ์ฅ์ง๋ก ํฌ์ฅํ์ฌ LED ์กฐ์ฌ ์คํ์ ์ด์ฉํ์๋ค.</p><h2>LED ์กฐ์ฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ๋ฏธ์๋ฌผ ๋ถ์</h2><p>LED ์ฅ์น๊ฐ ๋ก ํ๋ฉด์์ B. cereus group์ ๊ท ์์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ 2,4,8,12,16,24 \( \mathrm{~h} \) ๋์ ๋น์ ์กฐ์ฌํ์์ผ๋ฉฐ, LED ์ฅ์น์ ์ํ์ฌ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก ํ๋ฉด ์จ๋๊ฐ 2 \( \mathrm{~h} \) ํ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 9\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์ฆ๊ฐํ๊ณ 24 \( \mathrm{~h} \) ๊น์ง 9\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ์ ์ง๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์จ๋ ์์น ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ ์ธํ LED ๋น์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํ์ฌ \( 9^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ์ธํ๋ฒ ์ดํฐ ๋ด์์ LED ์กฐ์ฌ ์คํ๊ตฐ๊ณผ ๋์ผ ์๊ฐ ๋์ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์ํ๋ง์ ์งํํ์๋ค. ๋ํ, LED์ ๋ก ํ๋ฉด ์ฌ์ด์ ๊ฑฐ๋ฆฌ์ ์ํ ๋น ์ธ๊ธฐ ๋ณํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ LED์ ๋ก ํ๋ฉด ์ฌ์ด์ ๊ฑฐ๋ฆฌ๊ฐ \( 22,32,42 \mathrm{~mm} \) ๊ฐ ๋๋๋ก ์ฅ์น์ ๋์ด๋ฅผ ์กฐ์ ํ์ฌ ์ธ ๊ฐ์ง ๋์ด์์ LED ์กฐ์ฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ๊ท ์ ๋ณํ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ๋ก์ ๊ท ์๋ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก \( 10 \mathrm{~g} \) ์ \( 0.1 \% \) ๋ฉธ๊ท ํฉํค์๋ฅผ \( 90 \mathrm{~g} \) ํผํฉํ ํ homogenizer (Polytron PT 2100 , Kinematica AG, Luzern, Switzerland)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ท ์งํ ํ์๋ค. ์ดํ ์ํ ํํ์ก์ \( 0.1 \% \) ํฉํค์์ ๋จ๊ณ์ ์ผ๋ก ํฌ์ํ์ฌ MYP ๋ฐฐ์ง์ ํํ ๋๋งํ์๋ค. ๋ฐฐ์ง๋ \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( 24 \mathrm{~h} \) ๋์ ์ธํ๋ฒ ์ดํฐ์์ ๋ฐฐ์ํ ํ colony์ ์๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ ๋ถ์</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ํ๋ ๋ชจ๋ ์คํ์ 3ํ ์ด์ ๋ฐ๋ณต์ธก์ ์ ํ์์ผ๋ฉฐ, ๋ฐ์ดํฐ๋ SPSS (SPSS Statistics \( 21 \), IBM, Armonk, NY, USA) ์ํํธ์จ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ฐ๋ถ์(ANOVA)์ผ๋ก ์ ์์ฑ์ ๋ถ์ํ์๋ค \( (p<0.05) \).</p> | ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ๋ถ์ฐ๋ถ์์ผ๋ก ์ ์์ฑ์ ๋ถ์ํ ๋ ์ฌ์ฉํ ์ํํธ์จ์ด๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ์? |
๊ฐ์ง | <h2>์ ๋ก </h2><p>์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด(Prumus davidiana)๋ ์ฅ๋ฏธ๊ณผ(Rosaceae)์ ๋์ฝ ํ์ฝ ์๊ต๋ชฉ์ด๋ค. ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ ์ ๊ตญ ์ฐ์ผ์ ๋ถํฌํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์ค๊ตญ์๋ ์์ํ๊ณ ์๋ค. ํค๋ \( 6 \mathrm{~m} \) ์ ๋๊น์ง ์๋ผ๋ฉฐ ์์ ํผ์นจํ์ด๋ค. ๊ฝ์์ \( 5 \)์ฅ์ด๋ฉฐ ๊ฝ์ ์ฐํ ๋ถํ์์ผ๋ก \( 4 \)์์ ํ๋ค.์ด๋งค๋ ํ์ํ์ด๋ฉฐ ํํผ์ ํธ์ด ๋ง๊ณ ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ์ด๋งค์ธ ๋ณต์ญ์ ๋ณด๋ค ์๊ณ ๋จ๋จํ๋ค. \(7\)-\(8\)์์ ๊ณผ์ผ์ด ์ต์ผ๋ฉฐ ์ด๋งค๊ฐ ๋๋งน์ด์ฒ๋ผ ์๊ณ ๋จ๋จํ๋ค๊ณ ํ์ฌ ๋๋ณต์ญ์ ๋ผ๊ณ ๋ถ๋ฅด๊ธฐ๋ ํ๊ณ ๊ฐ๋ณต์ญ์ ๋ผ๊ณ ๋ ๋ถ๋ฅด๋๋ฐ ๋ ์ด๋ฆ ๋ค ๋๋ฆฌ ํต์ฉ๋์ง๋ง ๊ณต์์ ์ธ ์ด๋ฆ์ ์๋๋ค. ์ด๋งค๋ ๋จ๋ฐฑ์ง, ์ง์ง, ๋น์ง, ์นผ์, ์ธ, ์ฒ ๋ถ, ๋ํธ๋ฅจ, ์นผ๋ฅจ, ๋นํ๋ฏผ \( \mathrm{A}, \mathrm{B}_{1}, \mathrm{~B}_{2} \) ๋ฑ์ ํจ์ ํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ง์ด ๋ฌ๊ณ ์ฑ์ง์ด ์ฐจ๋ฉฐ ํด๋
์์ฉ์ด ์์ด์ ๊ฐ์ข
์ผ์ฆ์ ์น๋ฃํ๋ฏ๋ก ์ ๊ฒฝํต์ด๋ ๊ด์ ์ผ ๋ฑ์ ์ข๋ค๊ณ ํ๋ค. ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ์๋ ค์ง ์๋ฆฌ ํ์ฑ์ผ๋ก๋ ๊ฐ์ง์์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ๊ณผ ์ง์ง ๊ณผ์ฐํ ์ต์ ๋ฅ ๋ฐ ํญ์ผ์ฆ ํจ๊ณผ, ํญ๊ณ ์งํ์ฆ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ์ด๋งค๋ ํญ์ฐํ ๋ฐ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๋ฅ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋งค์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ์ ์ฒ์ฑ ๊ณ ํ์ ํ์์ ํ์ฒญ ์ง์ง๊ฐ์ ๋ฐ ์ฌ์ฅ ์ํ๊ธฐ๊ณ ์งํ, ๊ณ ํ์์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ง๊ธ๊น์ง ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋ ์ฃผ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ๊ฐ์ง์์ prunin, kaempferol ๋ฑ์ flavonoid ํํฉ๋ฌผ, steroid ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ฐ๋ณต์ฌ ๋๋ฌด์ ์์์๋ flavonoid์ flavonoid ๋ฐฐ๋น์ฒด ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ํ์ง๋ง ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค์ ๋ํ ์ฑ๋ถ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋ณด๊ณ ๋ ๊ฒ์ด ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ ์๋ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค๋ก๋ถํฐ ์ด์ฐจ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌํ๊ณ ๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ๋ํ ์ฑ๋ถ๋ถ์๊ณผ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ๊ด๋ จํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์งํํ์ฌ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค์ ์์ฝํ ๋ฐ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ ๋ฐฉ์์ ๋ชจ์ํ๊ณ ์ ์คํ์ ์ํํ์๋ค. ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค๋ฅผ \( 80 \% \) methanol \( (\mathrm{MeOH}) \)๋ก ์ถ์ถํ๊ณ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ํ์ฌ ethyl acetate \( (\mathrm{EtOAc}) \), \( n \)-butyl alcohol \( (n-\mathrm{BuOH}) \), ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฌผ๋ก ๊ณํต ๋ถํ ์ค์ํ์๋ค. ์ด ์ค \(\mathrm{EtOAc}\) ๋ถํ์ Thin Layer Chromatography (TLC) ์ ๊ฐํ์์ ๋ \(3\) ์ข
์ ํํฉ๋ฌผ์ด ๋๋ ทํ๊ฒ ๋ณด์ด๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์ฌ(data not shown) ์ด๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌํ๊ณ ์ silica gel \( \left(\mathrm{SiO}_{2}\right) \) ์ octadecyl \( \mathrm{SiO}_{2} \) (ODS) resin์ ์ด์ฉํ์ฌ column chromatography๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ค์ํ์๊ณ \(3\)์ข
์ triterpenoid ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ nuclear magnetic resonance (NMR), infrared (IR), mass spectrometry (MS) ๋ฑ์ ์คํํธ๋ผ ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ํด์ํ์ฌ ํํ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๋์ ํ์๋ค.</p> | ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค์์ flavonoid์ flavonoid ๋ฐฐ๋น์ฒด ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ณด๊ณ ๋์์ด? |
ํ ์ \( \mathrm{pH} \), ์ ๊ธฐ๋ฌผ ํจ๋, ์ ํ ํจ๋, ์ผ๋ ๋ฑ ๋ค์ํ ํ๊ฒฝ ์ธ์๋ค์ ์ํฅ | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํ ์ ์ค ์ค๊ธ์์ ์ํ๊ณ์ ์ธ๊ฐ์ ๊ฑด๊ฐ์ ๋ถ์ ์ ์ธ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ต๊ทผ ์ค์ํ ์ฐ๊ตฌ์ฃผ์ ๋ก ๋ค๋ฃจ์ด ์ง๊ณ ์๋ค. ์ค๊ธ์์ ํ ์์์ ๋ค์ํ ํํ๋ก ์กด์ฌํ๋๋ฐ ์ด ์ค ์๋ฌผ์ด ํก์ํ ์ ์๋ ํํ์ ์ค๊ธ์์ ์ค๊ธ์ ์ ํจํ๋ผ ํ๋ค. ์ค๊ธ์ ์ ํจํ ํจ๋์ ํ ์ \( \mathrm{pH} \), ์ ๊ธฐ๋ฌผ ํจ๋, ์ ํ ํจ๋, ์ผ๋ ๋ฑ ๋ค์ํ ํ๊ฒฝ ์ธ์๋ค์ ์ํฅ์ ๋ฐ๋๋ค. ํ ์ ์ค ์ ๊ธฐ์ฐ๋ ์ค๊ธ์ ์ ํจ๋์ ๋ฐ์ ํ ๊ด๋ จ์ด ์๋ค. ํ ์ ์ค ์ ๊ธฐ์ฐ์ ํ ์์ ์ ์
๋ ์ ๊ธฐ๋ฌผ์ด ๋ถํด๋๋ ๊ณผ์ ์์ ์์ฑ๋๋ฉฐ ๋งค์ฐ ์์ ๋ ์ ๋ถ์ ๋ฌผ์ง์ด๋ค. ๋ํ, ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์๋ฌผ๋ฟ๋ฆฌ์์ ๋์ค๋ ๋ถ๋น์ก์ ์ฑ๋ถ ๋ฌผ์ง ์ค ํ๋์ด๋ค. ์ํธ๋ฅด์ฐ, ์ฅ์ด์ฐ, ์์ธํธ์ฐ ๋ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ์ ๋ถ์์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์๋ฌผ๋ฟ๋ฆฌ์์ ๋ถ๋น๋๋ฉฐ, ์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์ ๋ง์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ค. ํ ์ ์ค ์ค๊ธ์์ ๋๋ถ๋ถ ์ฉํด๋์ง ์๋ ํํ๋ก ์กด์ฌํ๋ฉฐ[8] ์ด๋ฌํ ๋ถ์ฉ์ฑ ์ค๊ธ์์ ์๋ฌผ ์ ํจ๋๊ฐ ๋ฎ๋ค. ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์ผ๋ฐ์ ์ธ ํ ์์กฐ๊ฑด์์ ๋ณดํต ์์ผ๋ก ํ์ ๋์ด ์์ด ํ ์ ์
์์ ๋ถ์ฐฉ๋์ด ์๊ฑฐ๋ ํ ์ ์๋ถ ์ค์ ์กด์ฌํ๋ ์ค๊ธ์ ์์ด์จ๊ณผ ๊ฐํ ๊ฒฐํฉ ๋ฐ์์ ์ผ์ผํจ๋ค. ํ ์์
์๋ณด๋ค ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์ค๊ธ์๊ณผ ์น๋ฐ๋(affinity)๊ฐ ๋ ๋๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ํ ์์ ๋ถ์ฐฉ๋์ด ์๋ ์ค๊ธ์์ด ๋จ์ด์ ธ ๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ๊ณผ ๊ฒฐํฉํ๋ ๊ฒ์ด๋ค. ํ ์์ ํก์ฐฉ๋ ์ค๊ธ์์ ๋ถ์ฉ์ฑ์ด์ง๋ง ์ ๊ธฐ์ฐ๊ณผ ๊ฒฐํฉํ ์ ๊ธฐ์ฐ-์ค๊ธ์ ๋ณตํฉ์ฒด๋ ์ฉํด๋๊ฐ ๋์์ ์ค๊ธ์ ์ ํจ๋์ ๋ณํ๋ฅผ ์ค๋ค.</p><p>์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์ค๊ธ์ ์ฉ์ก์ ์กด์ฌํ๋ฉด ์ค๊ธ์ ์ด์จ์ ๋๋ถ๋ถ ์ ๊ธฐ์ฐ๊ณผ ํฌ๋ ์ดํธ๋ฅผ ํ์ฑํ๋ค. ์ฌ๋ฌ ๋
ผ์์ด ์์ง๋ง ์๋ฌผ์ฒด๋ ์ค๊ธ์์ ํก์ํ ๋ ์์ ์ด์จ ํํ๋ง์ ํก์ํ๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๊ธฐ์กด ์ฐ๊ตฌ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด, ์ ๊ธฐ์ฐ-์ค๊ธ์ ๋ณตํฉ์ฒด๋ ํฌ๊ธฐ๊ฐ ๋๋ฌด ํฌ๊ณ ๊ทน์ฑ์ด ๊ฐํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋ณตํฉ์ฒด ํํ ๊ทธ๋๋ก ๋ฟ๋ฆฌ ์ธํฌ์ ์ํ์ง ๋ง์ ํต๊ณผํ๊ธฐ ์ด๋ ต๋ค. ๊ทธ๋์ ์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์์ ์ค๊ธ์์ ํํ์ข
, ํนํ ์์ ์ด์จ์ ์์ ์์ฃผ ์ค์ํ ์ธ์์ด๋ค. ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ํ ์ ์ค ์ค๊ธ์์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋ค์ํ๊ฒ ์ฐ๊ตฌ๋์ด ์์ผ๋ ํ ์ ์ค ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋งค์ฐ ๋ณต์กํ๋ฉฐ ์ค๊ธ์ ์ข
๋ฅ๋ณ, ์ ๊ธฐ์ฐ ์ข
๋ฅ๋ณ, ์๋ฌผ ์ข
๋ฅ๋ณ๋ก ๊ฐ๊ฐ ๋ค๋ฅด๊ฒ ๋ํ๋๋ค[16]. ์ ํ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ง๋ฆญ์ฐ๊ณผ ์์ธํธ์ฐ์ ์ฅ์์์ ์ฒ๋ฆฌํ์ ๋ ๋ง๋ฆญ์ฐ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ๋ณด๋ค ์์ธํธ์ฐ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์์ ์ฅ์์ ์ฒด๋ด ์นด๋๋ฎด์ด ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ํ, ์ํธ๋ฅด์ฐ์ Sedum alfredii์ ์นด๋๋ฎด ํก์, ์ฒด๋ด ์ด๋, ๋ด์ฑ์ ์ข
ํฉ์ ์ผ๋ก ๊ด๋ จ์ด ์์์ง๋ง ์ฃผ์์ฐ์ ๋ฟ๋ฆฌ ํก์์๋ง ์ํฅ์ด ์์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก ์ค๊ธ์๊ณผ ํ ์, ์๋ฌผ ๊ฐ ์ํธ์์ฉ๊ณผ ๊ฐ์ข
๊ธฐ์๋ค์ ์ดํดํ๋ ค๋ฉด ์ค๊ธ์์ ๋ํ ์ฌ๋ฌ ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์ํฅ์ ์ฐ๊ตฌํ ํ์๊ฐ ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์๋น๋๊ณ ์๋ ์์ถ(Lactuca sativa L.)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ, ์ ๊ธฐ์ฐ์ผ๋ก ์์ก ์ค ๋ฉ๊ณผ ์นด๋๋ฎด์ ํํ์ข
๋น์จ์ ๋ค๋ฅด๊ฒ ์ฒ๋ฆฌํ์ ๋, ์์ถ ์๊ณผ ๋ฟ๋ฆฌ์ ์ด๋ค ์ค๊ธ์ ๋๋ ๋ณํ๋ฅผ ํตํด ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ๋ฉ๊ณผ ์นด๋๋ฎด์ ํก์์ ์ด๋์ ์ด๋ค ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋์ง ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์ํ๋์๋ค.</p> | ์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์ ํ ์ ๋ด ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋จ์ํ๋? |
Santa Cruz Biotechnology | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์คํ์ฌ๋ฃ</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉ๋ ํ์ผ์ ๊ฒฝ๊ธฐ๋ ์ฌ์ฃผ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋ \(6\)๋
๊ทผ ์์ผ์ \(2013\)๋
\(10\)์, ์ง์ ์๋งคํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์์ฝ</h2><p>ํ์ผ ๋ฐํจ๋ฅผ ์ํด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ฐฐ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์์ฝ์ ๋ชจ๋ Difco (Difco Laboratory, Detroit, MI, USA) ์ ํ์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ฒ๋ฆฌ์ ์ฌ์ฉ๋ ํจ์ํผํฉ์ก์ ํ๊ตญ ํํ ์ฐ๊ตฌ์ ์ตํฉ ํํ ์ฐ๊ตฌํ์์ ์ ๊ณตํ Cellulclast, HTec2, Amyloglucosidase ๋ฑ์ \(1:1:1\) ํผํฉ์ก์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋ฐํจ ๊ท ์ฃผ๋ F\(1\): Leuconostoc mesenteroides, F\(2\): Lactobacillus sp. MEI \(823\), F\(3\): Saccharomyces cerevisiae, F\(4\): Lactobacillus paracasei๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. \(1\),\(1\)-diphenyl\(2\)-picrylhydrazyl (DPPH)์ \(2\),\(2^{\prime}\)-azinobis-\(3\)-ethyl-benzothiazoline\(6\)-sulfonic acid (ABTS)๋ Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์๊ณ , nitrocellulose membranes๋ Amersham GE Healthcare (Little. Chalfont, UK)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), superoxide dismutase \(1\) (SOD-\(1\)), catalase, glutathione peroxidase (GPx), nuclear factorkappa B (NF-\(\kappa\)B p\(65\)), nuclear factor-erythroid \(2\)-related factor \(2\) (Nrf\(2\)), heme oxygenase-\(1\) (HO-\(1\)), inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-\(2\) (COX-\(2\)), tumor necrosis factor alpha (TNF-\( \alpha \)), interleukin-\(6\) (IL-\(6\)), Histone, \( \beta \)-actin๊ณผ \(2\)์ฐจ ํญ์ฒด๋ Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์์ผ๋ฉฐ, protease inhibitor mixture, dimethyl sulfoxide, ethylenediaminetetraacetic acid๋ Wako Pure Chemical Industries, Ltd. (Osaka. Japan)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. cis-Diammineplatinum (โ
ก) dichloride๋ Sigma-Aldrich์์, blood urea nitrogen (BUN)๊ณผ creatinine assay kit๋ ์์ฐ์ ์ฝ์ฃผ์ํ์ฌ (Hwaseong, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. ๋ํ, \(2\),\(7\)-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA)๋ Molecular Probes (Eugene, OR, USA)์์ enhanced chemiluminescence (ECL) Western Blotting Detection Reagents๋ GE Healthcare (Piscataway, NJ, USA)๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋จ๋ฐฑ์ง ์ ๋์ ์ํ BCA protein assay kit๋ Thermo Scientific (Rockford, IL, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ฐฐ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์์ฝ์ ๋ชจ๋ Difco (Difco Laboratory, Detroit, MI, USA) ์ ํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์๋ฃ ์ ์กฐ</h2><p>์์ผ์ ์ธ์ฒํ ํ ์ธ์ผ(RG\(0\))์ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ ๊ฑด์กฐ ํ์๊ณ , ํ์ผ์ ์ฆ์ ์๊ฐ์ \( 2\), \(4\), \(6\), \(8 \)์๊ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ๋ถํ์ฌ ์ฆ์ํ ํ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ ๊ฑด์กฐํ์๋ค(Fig. \(1\); Table \(1\)). ๊ฑด์กฐ๋ ๋ฐํ ์ ์ต์ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ (ACE Machinery, Seoul, Korea)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์๋ถํจ๋ \( 15 \% \) ๋ฏธ๋ง์ผ๋ก ๊ฑด์กฐํ์๊ณ , ์ฆ์์ ๋ฌด์์ ์คํ์ฆ์๊ธฐ(ACE Machinery)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ฆ์์จ๋ \(90 \)์์ ์ฆ์ํ์๋ค. ํ์ผ์ ๋ฐํจ์ ์ฌ์ฉ๋ ๊ท ์ฃผ๋ ๊ตฌํ๊ธฐ ์ฌ์ฐ๋ฉฐ ์์ ์ฑ์ด ๋ณด์ฅ๋ ๋ํ์ ์ธ ๊ท ์ฃผ์ธ Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus sp. MEI \(823\), Saccharomyces cerevisiae, Lactobacillus paracasei๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ฐํจํ์๋ค(Table \(2\)). ํ์ผ๊ณผ ๋ฐํจํ์ผ๊ฐ์ ํญ์ฐํ ์งํ์ ์ ํจ ์ฑ๋ถ์ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด ์ก์๋ฐํจ๋ฅผ ํ์๋ค. ํ์ผ์ ๊ฐ๊ฐ \( 5 \mathrm{~g} \)์ฉ ์นญ๋ํ์ฌ ๋ฃ๊ณ , \( 45 \mathrm{~mL} \)์ ๋ฉธ๊ท ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ํํํ์๋ค( \( 10 \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \)). ์๋ฃ๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฉ๊ธฐ๋ง๋ค ๋ฏธ๋ฆฌ ํผํฉ๋ ๋ณตํฉ ํจ์์ก \( 0.5 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ํ๋ฃป๋ฐค ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ์๋ฃ์ ๋ฐ๋ผ ์ ํด์ง ๊ท ์ฃผ ํํ์ก์ \( 0.5 \mathrm{~mL} \)์ฉ ์ ์ข
ํ์ฌ ์ญ์จ \(35\) ์ธํ๋ฒ ์ดํฐ์์ ์ ์น ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ ์ข
์ ๊ท ์ฃผ์ ๋๋๋ ์์ก์ ๋ฐ๋ผ ๊ฐ๊ฐํ์ฌ \(107\)-\(108 \mathrm{~cells} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋ก ํ์๋ค. ์ํ์ ๋ฐ๋ผ ๊ฐํ์ ์ผ๋ก ํ๋ค์ด ์ฃผ์๊ณ , ๋งค์ผ ๊ฐ์ ์๊ฐ์ ๋ฐํจ์ํ(\( \mathrm{pH} \))๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ ๋ฐํจ์ ์ง์์ฌ๋ถ๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ์๋ค. ์ ์์ ์๋ฐฉ ํจ๋ฅ์ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด ์ค์ํ ๋๋ฌผ์คํ์ ํ์ํ ์๋ฃ๋ ๊ณ ํ๋ฐํจ๋ฅผ ํ์๋ค. ์ฌ๊ฐ ํฌ๋ช
๋ฐํ์ฉ๊ธฐ์ ๊ฐ๊ฐ ๋ผ๋ฒจ์ ๋ถ์ด๊ณ , ์๋ฃ๋ฅผ ์ํ ํ๋๋น \(2 \)๊ฐ์ฉ ๊ฐ๊ฐ \( 50 \mathrm{~g} \) ์ฉ(์ด \(100 \mathrm{g}\)) ์นญ๋ํ์ฌ ๋ฃ์๋ค. \( 250 \mathrm{~mL} \)์ ๋ฉธ๊ท ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ํํํ ๋ค์ (\( 20 \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \)), ์๋ฃ๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฉ๊ธฐ๋ง๋ค ๋ฏธ๋ฆฌ ํผํฉ๋ ๋ณตํฉ ํจ์์ก \( 2 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ํ๋ฃป๋ฐค ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ๊ทธ ํ, ์๋ฃ์ ๋ฐ๋ผ ํฐ์์ ์ ์น ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋ฐฐ์์ก์ \(107\)-\(108 \mathrm{~cells}/ \mathrm{mL} \)์ ๊ท ์ฃผ ๋๋์ ๋ง์ถ์ด ์ ์ข
ํ์๋ค. ์ํ์ ๋ฐ๋ผ ๊ฐํ์ ์ผ๋ก ํ๋ค์ด ์ฃผ์์์ผ๋ฉฐ, ๋งค์ผ ๊ฐ์ ์๊ฐ ๋ฐํจ์ํ(\( \mathrm{pH} \))๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ \( 35^{\circ} \mathrm{C}\), \(6 \)์ผ ๊ฐ ๋ฐํจํ์๋ค. ์์ ์๋ฃ๋ค์ ๋ถ์๊ธฐ๋ก ๋ถ์ ํ ๋ค์ ์๋ฃ \( 5 \mathrm{~g} \)์ Distilled water \( 50 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ฃ๊ณ , \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \(3\)์๊ฐ์ฉ \(2\)ํ ๋ฐ๋ณต ์ถ์ถํ์๋ค. Kimble-filtering flask์ funnel์ ์ฅ์ฐฉํ๊ณ ์ฌ๊ณผ์ง(Whatman No. \(2\), GE healthcare, Arlington Heights, IL, USA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฌ๊ณผํ ๋ค ์ฌ๊ณผ์ก์ ๋ฏธ๋ฆฌ ํญ๋๋ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ฃ์ด \(45\)-\(50^{\circ} \mathrm{C} \)์ ์์จ์์ rotary vacuum evaporator (JP/N-\(1000\)X\), EYELA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๊ฐ์๋์ถ ํ \( -30^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ, \( -15^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ, \( 0^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(240 \)๋ถ, \( 15^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ, \( 30^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐ ํ์๋ค.</p> | ํ์ผ์ ์ฆ์ ์จ๋๋ ๋ช๋์ธ๊ฐ์? |
์ ์ ์๊ฐ ์ ๊ฑฐ๋๊ฑฐ๋ ๋ด์ฌ ์ ์ ์๊ฐ ๋ํด์ง๋ ๊ฒฝ์ฐ | <h1>๊ฐ ๊ตญ์ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ๊ท์ ์ ์ฑ
๋ํฅ</h1><p>์์์๋ ์ง์ ํ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ ๊ท์ ์ฒด๊ณ๋ ์์ง ํ๋ฆฝ๋์ง ๋ชปํ ์ค์ ์ด๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ฏธ๊ตญ ๋ฑ ์ผ๋ถ ๊ตญ๊ฐ์์๋ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ค ์ ์ ์๊ต์ ์ ๊ท์ ์ ๊ด๋ จ๋ ์ ์ฑ
์ ๊ฒฐ์ ํ์๊ฑฐ๋ ์ ์ฑ
๊ฒฐ์ ์ด ๊ฐ์ํ๋๊ณ ์๋ค. ์ด ์ฅ์์๋ ๊ฐ ๊ตญ์ ์ฌ๋ก๋ฅผ ํตํด ์ ์ ์๊ต์ ๊ท์ ์ ๊ด๋ จ๋ ํํฉ์ ๊ธฐ์ ํ์๋ค.</p><h2>๋ฏธ๊ตญ</h2><p>๋ฏธ๊ตญ์ ์ธ๊ณ ๊ฐ ๊ตญ ์ค ์ ์ ์ ๊ต์ ์ ๋ํ ์ ์ฑ
์ ์
์ฅ์ ๊ฐ์ฅ ๋ช
ํํ๊ฒ ๋ฐํ ๊ตญ๊ฐ์ด๋ค. \(2012\)๋
ZFN ๊ธฐ์ ๋ก ์ก์ฑํ ์ฅ์์์ ๋ํด ๊ท์ ํ์ง ์๋๋ค๋ ๊ฒฐ์ ์ ๋ด๋ฆฐ ํ, \(2015\)๋
๋ถํฐ \(2018\)๋
\(10\)์๊น์ง "\(7\) CFR part \(340\)"์ 'Am I regulated?' ์ปจ์คํ
ํ๋ก๊ทธ๋จ์ ๊ฑฐ์ณ ๊ท์ ๊ฐ ๋ฉด์ ๋ ์ผ์ด์ค๊ฐ \(26\)๊ฑด์ ์ด๋ฅด๋ฉฐ, \(2018\)๋
\(4\)์ ๋ฏธ๊ตญ ๋๋ฌด์ฑ์ ์ ์ ์๊ต์ ์ผ๋ก ์ก์ฑํ ์๋ฌผ์ ๋ ์ด์ ๊ท์ ํ์ง ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ฐํํ์๋ค. ๋ฐํ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด ์ ์ ์๊ฐ ์ ๊ฑฐ๋๊ฑฐ๋ ๋ด์ฌ ์ ์ ์๊ฐ ๋ํด์ง๋ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๊ท์ ๋์์ด ์๋๋ค.</p><h2>์บ๋๋ค</h2><p>์บ๋๋ค๋ ๋ํ์ ์ธ ์ฐ๋ฌผ ์ค์ฌ์ ๊ท์ ๊ตญ๊ฐ๋ก์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์๊ด ์์ด ์๋ก์ด ํ์ง์ ๋ณด์ด๋ ์๋ฌผ์ ๊ท์ ๋์์ผ๋ก ์ผ๋๋ค. ์ ์ ์๊ต์ ์ฐ๋ฌผ๋ ๊ธฐ์กด ์ ์ฑ
์ ๋ฐ๋ผ ์ ์ฉ ๊ธฐ์ ์ด ์๋๋ผ ์ฐ๋ฌผ์ ์ ๊ท ํ์ง ์ฌ๋ถ๊ฐ ๊ท์ ์ฌ๋ถ๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ๋ ์์ธ์ด๋ค.</p><h2>์๋ฅดํจํฐ๋์ ๋จ๋ฏธ</h2><p>๋๋ถ๋ถ์ ๋จ๋ฏธ๊ตญ๊ฐ๋ค์ ์นด๋ฅดํํค๋ ๋ฐ์ด์ค์์ ์ฑ ์์ ์์ ๋ฐ๋ผ ์๊ตญ์ ๊ท์ ์ฒด๊ณ๋ฅผ ํ๋ฆฝํ์๋ค. ์๋ฅดํจํฐ๋์ ๊ฒฝ์ฐ ๋ฐ์ด์ค์์ ์ฑ ์์ ์์ ๋น์ฌ๊ตญ์ ์๋์ง๋ง ์๊ตญ์ ๋ฒ(Resolution no.\(701\)/\(2011\))์์ GMO๋ฅผ ๋ฐ์ด์ค์์ ์ฑ ์์ ์์ ์ ์์ ๋์ผํ๊ฒ ๊ท์ ํ๋ค. ์ ์ ์๊ต์ ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์๋ฅดํจํฐ๋์ ์
์ฅ์ Resolution no.\(173\)/\(2015\)์ ์ ๋ํ๋ ์๋๋ฐ, GMO๋ก์์ ๊ท์ ์ฌ๋ถ๋ case-by-case ๋ถ์์ ํตํด ๊ฒฐ์ ํ๋ฉฐ transgene์ด ์์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๊ท์ ๋์์์ ์ ์ธํ๋ค. ์น ๋ ์ ๋ธ๋ผ์ง ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ฝ๋กฌ๋น์๋ ์๋ฅดํจํฐ๋์ ์ ์ฑ
์ ๊ฒฐ์ ์ ๋ฐ๋ผ๊ฐ๋ ์ถ์ธ๋ก ์น ๋ ๋ \(2017\)๋
, ๋ธ๋ผ์ง์ \(2018\)๋
\(1\)์์ transgene์ด ์์ผ๋ฉด ๊ท์ ํ์ง ์์ ๊ฒ์์ ๋ฐํํ๋ค. ์ต๊ทผ์๋ ์ฝ๋กฌ๋น์ ์ ๋ถ๊ฐ ์ ์ ์๊ต์ ์ผ๋ก ์ก์ฑํ ์นด์นด์ค๋ฅผ ๊ท์ ํ์ง ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ฐํํ๋ค.</p><h2>์ ๋ฝ์ฐํฉ</h2><p>์ ์ ์๊ต์ ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ ๋ฝ์ฐํฉ์ ์ ์ฑ
๊ฒฐ์ ์ ์ผ์ ๋ถ๋ถ ํผ๋ ์ํ์ ๋น ์ง ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ธ๋ค. GMO ๊ท์ ๋ฅผ ์๊ฒฉํ๊ฒ ์ํํ๊ณ ์๋ ์ ๋ฝ์ฐํฉ์ \(2006\)๋
๋ค๋ธ๋๋ ์ ์ ์๋ณํ์์ํ(Commission on Genetic Modification), \(2011\)๋
์ ๋ฝ์ฐํฉ์งํ์์ํ ๊ณต๋ ์ฐ๊ตฌ์ผํฐ(European Commissions Joint Research Center), \(2017\)๋
EC ๊ณผํ์๋ฌธ๋จ(EC SAM; Science Advice Mechanism) ๋ฑ์์ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ ํน์ฑ์ ๊ฒํ ํ ํ transgene์ด ์๋ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ฐ๋ฌผ์ ๊ท์ ๋์์์ ์ ์ธํ ๊ฒ์ ์ ์ํ๋ ๋ฑ ์ ํฅ์ ์ ์ฑ
๊ฒฐ์ ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ \(2018\)๋
\(7\)์\(25\)์ผ ์ ๋ฝ์ฌ ๋ฒ์ฌํ์์์ ๋น์์ฐ์ ์ผ๋ก ๋ฐ์ํ๋ ๋ชจ๋ ๋ณ์ด์ฒด๋ ๊ท์ ๋์์ด๋ฉฐ, ๋จ ๋ฐฉ์ฌ๋ฅ ๋ณ์ด์ ๊ฐ์ด ์ค๋ ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ์ต์ํ ๊ฒ์ ๊ท์ ์์ ์์ธ๋ฅผ ๋๋ค๊ณ ํ๊ฒฐํจ์ผ๋ก์จ ํฅํ ์ ๋ฝ์ฐํฉ ์งํ์์ ํ์์กฐ์น์ ๊ด์ฌ์ด ์ ๋ฆฌ๊ณ ์๋ค. ์์ผ๋ก ์์๋๋ ์ ๋ฝ์ฐํฉ ์งํ์์ ํ์์กฐ์น ์๋๋ฆฌ์ค๋ก๋ ์ฌ๋ฒ์ฌํ์์ ํ๊ฒฐ์ ์์ฉํ์ฌ ์ ์ ์๊ต์ ์ฐ๋ฌผ์ GMO์ ๋ฒ์ฃผ์์ ๊ท์ ํ๊ฑฐ๋ GMO ๊ท์ ๊ท์ (Directive \(2001\)/\(18\)/EC) ์ค ๊ท์ ์์ธ๋ฅผ ๊ธฐ์ ํ Annex \( 1 \)B๋ฅผ ๊ฐ์ ํ์ฌ ์ ์ ์๊ต์ ์ฐ๋ฌผ์ ์ผ๋ถ(์๋ฅผ ๋ค์ด SDN-\(1\), \(2\)๋ฅผ ๊ท์ ์์ธ ๋์์ผ๋ก ์ผ๊ฑฐ๋ GMO ๊ท์ ์ฒด๊ณ์ ์ ๋ฉด์ ๊ฐํธ์ ์์ํ ์ ์๋ค. ํํธ EU ์ฒด์ ์์ ๋ฒ์ด๋๋ ค๋ ์๊ตญ์ BREXIT๊ฐ ๋๋ ํ ์๊ตญ์ ์ ์ ์๊ต์ ๊ท์ ์ ๊ด๋ จ๋ ์
์ฅ์ ์ญ๋ด์ ๊ท์ ํ๋ฆ์ ํฐ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ด๋ฉฐ, ํ ์์ ์์๋ ์๊ตญ์ด BREXIT ํ ๊ท์ ์ ๋ํด ์ ์ฐํ ์
์ฅ์ ์ทจํ ๊ฒ์ผ๋ก ์์๋๋ค.</p> | ๋ฏธ๊ตญ์ ๋ช ๋
๋์ ZFN ๊ธฐ์ ๋ก ์ก์ฑํ ์ฅ์์์ ๋ํด ๊ท์ ํ์ง ์๋๋ค๋ ๊ฒฐ์ ์ ๋ด๋ ธ๋๊ฐ? |
6.25-100 | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>MTT assay์ ์ํ ์ธํฌ ๋
์ฑ</h2><p>ํ๋ฆฌ์ฐ ์ด์์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ํธ์์ธํ
์ดํธ ๋ถํ๋ฌผ(TW-EA)๋ก CCD-986sk cell๊ณผ HEM cell์์ ์ธํฌ ๋
์ฑ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์๋ฃ๋ฅผ 6.25, 12.5, 25, 50, 75, 100, 200 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๊ด์ฐฐํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ CCD-986sk cell์ 6.25-100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์๋ ์ธํฌ ๋
์ฑ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๊ณ , 200 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์์์ ๋
์ฑ์ด ๊ด์ฐฐ๋์๋ค. HEM cell์ ๊ฒฝ์ฐ 100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋ ์ด์์์ ์ธํฌ๋
์ฑ์ด ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig. 1).</p><h2>ํญ์ฐํ ํ์ฑ</h2><p>์๋ฃ์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฒ์ฆํ๊ธฐ ์ํด DPPH, ABTS radical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ , ROS-Glo \( ^{\mathrm{TM}} \) \( \mathrm{H_2O_2} \) assay kit๋ฅผ ์ด์ฉํ ROS ์์ฑ๋์ธก์ ์ ์ํํ์๋ค. DPPH๋ ๋ผ๋์นผ ์ ์์ ๋นํธ์ฌํ์ ์ํด ์์ ํ ๊ตฌ์กฐ์ ๋ผ๋์นผ๋ก ์กด์ฌํ๋ ํํฉ๋ฌผ ๋ด ์ง์ ์ค์ฌ์ ๋ผ๋์นผ์ด๋ค. 17 \( \mathrm{~nm} \)์์ ์ต๋ ํก์๋ฅผ ํ๋ฉฐ, ํ์๋๋ฉด 517\( \mathrm{~nm} \)์์ ํก์๊ฐ ์์ด์ง๋ฏ๋ก DPPH์ ํ์์ ๋๋ ํ์์ ์ ํ์๋ ฅ์ ๋ฌ๋ ค์๋ค๊ณ ํ ์ ์๋ค. ๊ธฐ์กด ๋ณด๊ณ ์์ ์ ์ฃผ ์์ ์กฐ๋ก๋๋ฌด ๋ถํ๋ฌผ์ DPPH ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ ์ํธ์์ธํ
์ดํธ ๋ถํ๋ฌผ(EA)์ด 100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ ์ฝ 50\(%\)์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๊ณ , ์ฌ๊ณผ๊ฝ์ 70\(\%\) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EA๋ 100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ ์ฝ 58\(%\)์ ์ ํดํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ํ๋ฆฌ์ฐ ์ด์์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฅ์ฐ(TW-H), ์ํธ์์ธํ
์ดํธ(TW-EA), ๋ถํ์ฌ(TW-B), ๋ฌผ(TW-W) ๋ถํ๋ฌผ์ 100, 1,000\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ ๊ฐ๊ฐ 19, 62, 43, 22\(%\)์ 33, 92, 90, 83\(%\)์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ํ๋ด์๊ณ , ๊ทธ ์ค TW-EA์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ์ฐ์ํ๋ค(Fig. 2A). TW-EA์ RC50 ๊ฐ์ 75.4\(\pm\)4.2\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ์ธก์ ๋์๋ค.</p><p>ABTS radical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ๋ฒ์ ํญ์ฐํ๋ฌผ์ง์ ์์ ์ด์จ ๊ณต์ฌ๋ฅ์ ์ธก์ ํ๋ ๋ถ์๋ฒ์ผ๋ก ๊ณผํฉ์ฐ์นผ๋ฅจ๊ณผ ๋ฐ์์ ์ํด ์์ฑ๋ ABTS+ ์์ ๋ผ๋์นผ์ด ์๋ฃ์์ ํญ์ฐํ ๋ฌผ์ง์ ์ํด ์ ๊ฑฐ๋์ด ๋ผ๋์นผ ํน์ ์ ์์ธ ์ฒญ๋ก์์ด ํ์๋๋ ๊ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ์ฐํํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ๋ค. ๊ตฌ์ ์ด ๊ฝ์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EA์์ ์ฝ 65\(%\) (100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \))๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๊ณ , ๋ฌด์ฒญ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EA๋ ์ฝ 43%์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ํ๋ด์๋ค. TW-H, TW-EA, TW-B,TW-W๋ 100๊ณผ 1,000 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ ์๊ฑฐํ์ฑ์ด ๊ฐ๊ฐ 12,93, 68, 60\(%\)์ 22, 97, 96, 86\(%\)๋ก ๋ํ๋์ ๋ ๋์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ํ์ธํ์๊ณ , ๋ถํ๋ฌผ ์ค์์๋ TW-EA์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. 2B). TW-EA์ RC50 ๊ฐ์ 40.8\(\pm\)3.7 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ์ธก์ ๋์๋ค.</p><p>UV-B์ ๋
ธ์ถ๋ ํผ๋ถ๋ ํ์ฑ์ฐ์์ข
(ROS)์ ์์ฑํ๋๋ฐ ์ด๊ฒ์ ์ธํฌ๋ด์ ์ํฅ์ ์ฃผ์ด ํผ๋ถ์์์ ์ฃผ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ด๊ฒ์ ์ ๊ฑฐ๋ฅ์ ๊ฒ์ฆํ๊ธฐ ์ํด, ROS๋ฅผ ์ ๋ํ ๋ค DPPH์ ABTS raical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ์์ ๊ฐ์ฅ ์ฐ์ํ ํจ๋ฅ์ ๋ํ๋ธ TW-EA๋ฅผ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ํญ์ฐํ๋ฅ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ๋๋์์กด์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๊ณ 100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ 46.4\(%\)์ ์ ํดํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค(Fig. 2C).</p> | UV-B๋ ํผ๋ถ์ ์์์ ์ผ์ผํค๋ ์์ธ์ด ๋ง๋๊ฐ? |
๋น๋กํ์ฌ ๋ค์ ๋ฎ์์ก์ผ๋ฉฐ | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ</h2><p>์๊ตฌ๋ฅดํธ ์ ์กฐ์ ์ด์ฉ๋๋ starter ์ ์ฐ๊ท ์ ๋๋ถ๋ถ์ ์ ๋ถ ๋ถํดํจ์์ ํ์ฑ์ด ๊ฒฐ์ฌ๋์๊ฑฐ๋ ๋ฏธ๋ฏธํ๋ฏ๋ก ์ฐ์ ์ด์ธ์ ์ ๋ถ์ ํจ์ ํ ์๋ฃ๋ฅผ ๋ถ์๋ฃ๋ก ์๊ตฌ๋ฅดํธ ์ ์กฐ์ ์ฌ์ฉํ๋ ๊ฒฝ์ฐ, ํนํ ์ฐ์ ๋ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ผ๋ถ๋ฅผ ๋์ฒดํ๋ ๊ฒฝ์ฐ ๋ถ์๋ฃ์ ํจ์ ๋ ์ ๋ถ์ ์ ์ฐ๊ท ์ด ๋ฐํจ์ ์ด์ฉ๋ ์ ์๋ ์ ๋ถ์๋ก ๋ถํดํ๋ ๋นํ๊ฐ ํ์ํ๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ์ดํ์ํ๋ฌผ์ \( 79.40 \% \), ํ์๋น์ \( 3.20 \% \) ๋ก ํ์ํ๋ฌผ์ ๋๋ถ๋ถ์ด ์ ์ฐ๊ท ์ด ์ด์ฉํ๊ธฐ ์ด๋ ค์ด ๋น๋ฐํจ์ฑ ๋น๋ฅ์ด๋ฏ๋ก, ์ฃผ๋ฐ์ \( \alpha\)-amylase์ glucoamylase๋ฅผ ์์ฐจ์ ์ผ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ค๋นํ์๋ค. ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ํ์๋น ํจ๋์ ํจ์์ฒ๋ฆฌ ์ ์ฃผ๋ฐ์ 3.20์์\( 73.0 \% \)๋ก ํฌ๊ฒ ์ฆ๊ฐ๋์ด ์ฃผ๋ฐ์ ํจ์ ๋ ๋น๋ฐํจ์ฑ ๋น๋ฅ์ ๋๋ถ๋ถ์ด ์ ๋ถ์ ๋น๋ฅ๋ก ๋ถํด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค.</p><h2>\( \mathrm{pH} \)์ ์ ์ ์ฐ๋์ ๋ณํ</h2><p>ํ์ง๋ถ์ \( 10 \%(\mathrm{w}/\mathrm{w})\) ๋ฅผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ๋ก ํ์ง๋ถ์ ์ฌ์ฉ๋์ \(0\)(๋์กฐ๊ตฐ), \( 10,20,30,50 \% \) ๋ฅผ ๋์ฒดํ์ฌ ์ค๋นํ ํํ์ก์ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 18์๊ฐ ๋์ ๋ฐํจ์ํค๋ฉฐ \( \mathrm{pH} \)์ ์ ์ ์ฐ๋์ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฐํจ์ก์ \( \mathrm{pH} \)๋ณํ๋ ๋ชจ๋ ์คํ๊ตฐ์์ ๋์ผํ ๊ฒฝํฅ์ผ๋ก ๋ฐํจ 12์๊ฐ๊น์ง ๊ธ๊ฒฉํ๊ฒ ๊ฐ์ํ ํ ๊ทธ ์ดํ ๋ฐํจ 18์๊ฐ๊น์ง \( \mathrm{pH} \) ๋ณํ๋ ๋ฏธ๋ฏธํ์์ผ๋ฉฐ, ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ฌ์ฉํ์คํ๊ตฐ์ \( \mathrm{pH} \)๊ฐ ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค ํญ์ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ณด์๋ค. ๋ฐํจ ์์์ ์์์ \( \mathrm{pH} \)๋ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ๋ค์ ๋ฎ์์ก์ผ๋ฉฐ [6.72 (๋์กฐ๊ตฐ), 6.68 (\(10\%\) ๋์ฒด), 6.66 (\(20\%\)๋์ฒด), 6.62 (\(30\%\)๋์ฒด), 6.53 (\(50\%\)๋์ฒด)], ์ด๋ ์ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋งค์ฐ ์ ์ฌํ์๋ค. ๋ฐฐ์ 12์๊ฐ ํ ๋์กฐ๊ตฐ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 4.30, ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 4.16(\(10\%\)๋์ฒด), 4.09 (\(20\%\)๋์ฒด), 4.12 (\(30\%\)๋์ฒด), 3.96 (\(50\%\)๋์ฒด)์ผ๋ก ์ฃผ๋ฐ ๋นํ๋ฌผ๋ก ํ์ง๋ถ์ ๋ฅผ ๋์ฒดํ ์กฐ๊ฑด์์ ๋ ๋ฎ์\( \mathrm{pH} \)๋ฅผ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{pH} \) ๊ฐ์๋ ์ฃผ๋ฐ ๋นํ๋ฌผ์ ์ฌ์ฉ๋์ ๋น๋กํ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๋ณํ๋ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ \(0.5\%\)~\(2.0\%\) ์ฒจ๊ฐํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ํ์ง๋ถ์ ์ \(10\%\)~\(50\%\)๋ฅผ ์์ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ํจ์ ๋ถํด๋ฌผ๋ก ๋์ฒดํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์์๋ ๋์ผํ ๊ฒฝํฅ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ฐฐ์18์๊ฐ ํ ๋ชจ๋ ์คํ๊ตฐ์์ \( \mathrm{pH} \)๋ 3.96~4.39๋ก ๊ตญ๋ด์์ ์ํ๋๋ ๋ฐํจ์ ์ \( \mathrm{pH} \) (3.46~4.15)์ ๋ํ ๋ฐํจ์ ์ \( \mathrm{pH} \) (4.17~4.56)์ ๊ดํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 3.27~4.53์ด ์ ๋นํ๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ ์ ๋ถํฉ๋์๋ค. ๋ฐํจ ์ค ์ ์ ์ฐ๋๋ \( \mathrm{pH} \)์ ์ ์ฌํ๊ฒ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์คํ๊ตฐ์์ ๋ชจ๋ ๋ฐํจ 12์๊ฐ๊น์ง ๊ธ๊ฒฉํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๋ฐฐ์ 12์๊ฐ ํ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ \(0.93\%\), ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ 1.04 (\(10\%\) ๋์ฒด), 1.02 (\(20\%\)๋์ฒด), 0.86 (\(30\%\) ๋์ฒด), 0.84 (\(50\%\) ๋์ฒด)๋ก ํ์ง๋ถ์ ์ ๋์ฒด์จ์ด ๋ฎ์ ์กฐ๊ฑด(\(10\)~\(20\%\))์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ ๋ณด๋ค ์ฐ์ ์์ฑ์ด ์ฆ๊ฐ๋์์ง๋ง ํ์ง๋ถ์ ์ \(30\%\) ์ด์์ ์ฃผ๋ฐ ๋นํ๋ฌผ๋ก ๋์ฒดํ๋ฉด ์ฐ์ ์์ฑ์ด ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฝํฅ์ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฃผ๋ฐ ํน์ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ถ๊ฐ๋ก ์ฒจ๊ฐํ๋ฉด ์ฐ์ ์์ฑ์ด ๋น๋ก์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ๋ฉด ํ์ง๋ถ์ ์ ๋์ฒด์จ์ด ๋ฎ์ ์กฐ๊ฑด(\(10\)~\(20\%\) ๋์ฒด)์์๋ ์ฃผ๋ฐ์ ํจ์ ๋ ๋ฏธ๋์ ๋ฐํจ์ด์ง๋ฌผ์ง์ด, ๋์ฒด์จ์ด ๋์ ์กฐ๊ฑด(30~50\(\%\) ๋์ฒด)์์๋ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ ๊ฐ์๊ฐ ์์ธ์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๋ํ ์ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์์ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ ์ฌ์ฉ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ ์ ์ฐ๋๊ฐ ์ฆ๊ฐํ์๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ ์์ดํ ๊ฒ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ถ๊ฐ๋ก ์ฃผ๋ฐ ํน์ ์ฃผ๋ฐ ๋ถํด๋ฌผ์ ์ฒจ๊ฐํ ๊ฒ์ด ์๋๋ผ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฌ์ฉ๋์ ์ค์ด๊ณ ์ฃผ๋ฐ ๋ถํด๋ฌผ๋ก ๋์ฒดํ์ฌ ์๊ตฌ๋ฅดํธ ๋ฐํจ์ ์ฌ์ฉํ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ค. ์์ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ํจ์ ๋ถํด๋ฌผ๋ก ํ์ง๋ถ์ ๋ฅผ ๋์ฒดํ๋ ๊ฒฝ์ฐ ๋์ฒด ์ ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฐ์ ์์ฑ์ด ๊ฐ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋น๊ตํ๋ฉด ์์ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ํจ์ ๋ถํด๋ฌผ๋ณด๋ค ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ด์ฐ์ ์์ฑ์ ๋์์ด ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ฐฐ์ 18์๊ฐ ํ ๋ชจ๋ ์คํ๊ตฐ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ 0.8~1.0 \(\%\)๋ก ๊ตญ๋ด์์ ์ํ๋๋ ๋ฐํจ์ ์ ์ ์ ์ฐ๋(0.45~0.94)์ ๋ํ ๋ฐํจ์ ์ ์ ์ ์ฐ๋(0.75~1.02)์ ๊ดํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ํ๊ตญ์ธ์๊ฒ ๊ธฐํธ๋๊ฐ ๋์ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ 0.85~.120\(\%\)๋ผ๋ ๋ณด๊ณ ์ ๋ถํฉํ์๋ค. | ๊ตญ๋ด์์ ์ํ๋๋ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 3.27~4.53๊ฐ ๋ง๋๊ฐ? |
๋งํฌ๋ก์ (Seoul, Korea) | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>๋๋ฌผ์คํ ๋์์ธ</h2><p>์คํ๋๋ฌผ์ \(5\)์ฃผ๋ น ๋ ์์ปท ICR ๋ง์ฐ์ค๋ฅผ (์ฃผ)์ค๋ฆฌ์ํธ๋ฐ์ด์ค(Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ, \(7\)์ผ๊ฐ์ ์ ์๊ธฐ๋ฅผ ๊ฑฐ์ณ ๋ณธ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ฌ์ก์ค ํ๊ฒฝ์ ์จ๋ (\( 22 \pm 2{ }^{\circ} \mathrm{C}\)), ์ต๋(\(20\)-\(55\%\)) ๋ฐ ๊ด์ฃผ๊ธฐ(๋ช
์ \(12\)์๊ฐ ๊ฐ๊ฒฉ)๊ฐ ์กฐ์ ๋๋ฉฐ, ๋ชจ๋ ์คํ๋๋ฌผ์ ์ฌ๋ฃ์ ๋ฌผ์ ์์ ๊ธ์ํ์๋ค. ์ผ์ฃผ์ผ๊ฐ์ ์ ์๊ธฐ ํ ์คํ๋๋ฌผ์ ๊ทธ๋ฃน๋น \(6\)๋ง๋ฆฌ์ฉ ์ด \(3\)๊ทธ๋ฃน์ผ๋ก ๊ตฌ๋ถํ์๋ค. ์ ์ ๋์กฐ๊ตฐ(CTL)์ ์ผ๋ฐ ์ฌ๋ฃ(\(5\)L\(79\), Lab Diet, St. Louis, USA)๋ฅผ ๊ธ์ฌํ์๊ณ , ๊ณ ์ง๋ฐฉ ์ฌ๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ (HFD)์ \( 45 \% \) ์ง๋ฐฉ์ด ํจ๋๋ ์ฌ๋ฃ (D\(12451\), Research Diets, New Brunswick, USA)๋ฅผ \(3\)์ฃผ๊ฐ ๊ณต๊ธํ์๋ค. ์ ์์ด์ฌ์ ์ฌ๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ(LFD)์ \( 0.1 \% \) ์์ด์ฌ์ ๊ฐ ํจ์ ๋๊ฒ ์ ์กฐํ์ฌ (DooYeol Biotech, Seoul, Korea)๋ฅผ \(3\)์ฃผ๊ฐ ๊ธ์ฌ ํ์์ผ๋ฉฐ ๊ฐ ์ฌ๋ฃ์ ์ผ๋ฐ์ฑ๋ถ์ Table \(1\)์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์คํ๋๋ฌผ ์ฌ์ก ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ๋ฌผ๊ณผ ์์ด๋ ์ ํ ์์ด ๊ณต๊ธํ์๋ค. ๋ณธ ์คํ์ ์ ์ฃผ๋ํ๊ต ์คํ๋๋ฌผ์ค๋ฆฌ์์ํ์ ์ฌ์ ์ฌ์๋ฅผ ๋ฐ์ ์งํํ์๋ค(ACUC-JNU: \(2016\)-\(0045\)).</p><h2>์ฒด์ค ๋ฐ ์์ด์์ ์ญ์ทจ๋ ์ธก์ </h2><p>์ฒด์ค ๋ฐ ์์ด์์ ์ญ์ทจ๋์ ์ ์คํ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ์ฃผ \(1\)ํ ์ธก์ ํ์๊ณ , ์คํ๋๋ฌผ์ ํ ๋ง๋ฆฌ์ฉ ์ผ์ด์ง์ ์์ฉํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ ์คํ๋๋ฌผ ๊ฐ์ฒด๋ณ๋ก ์ธก์ ๋ ์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฌผ์ ๊ธ์ฌํ \(24\)์๊ฐ ํ ์ญ์ทจ์๋์ ์ธก์ ํ์ฌ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><h2>๋ถ๋ณ ์ฑ์ทจ ๋ฐ ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ๋ถ์</h2><p>์คํ๋๋ฌผ์ ๋ถ๋ณ์ ์คํ๋๋ฌผ ๊ฐ์ฒด๋ณ๋ก ์์ฉ๋ ์ผ์ด์ง์ ์ ์๋ง์ ์ค์นํ์ฌ \(5\)์๊ฐ ์ด๋ด์ ๋ํ๋ ๋ถ๋ณ์ ์ฑ์ทจํ ๋ค, \( -80^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ๋ณด๊ดํ์๋ค. ๋ถ๋ณ ๋ฏธ์๋ฌผ DNA๋ PowerFecal DNA isolation kit (MOBIO Laboratories Inc., Germantown, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ๋ DNA๋ \( 16 \)S rRNA ์ ์ ์์ V\( 4 \) ๋ถ๋ถ์ ์ฆํญ์ํจ ํ \(2\)-step PCR์ ํตํด Illumina MiSeq ํ๋ซํผ์ ๋ง์ถฐlibrary๋ฅผ ์ ์ํ์๊ณ , ์ํ์ฑ(sequencing)์ ๋งํฌ๋ก์ (Seoul, Korea)์์ ์ํํ์๋ค. ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ๋ MOTHUR๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ ์ฒ๋ฆฌ ๋ฐ ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ๋ถ์</h2><p>ํต๊ณํ์ ๋ถ์์ ANOVA๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ ์์ฑ๊ฒ์ ์ ์ค์ํ์๊ณ , ์ ์์ฑ์ด ์์ ๋ ์ฌํ๊ฒ์ ์ผ๋ก Tukey's HSD test๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค(\( p<0.05 \)). ๊ทธ๋ฃน๊ฐ์ ๋น๊ต๋ Duncan's multiple range test๋ฅผ ์ค์ํ์์ผ๋ฉฐ, \( p<0.05 \)์ผ ๋ ์ ์์ฑ์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์๋ค. ๊ฐ ๊ทธ๋ฃน๊ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ํ๋น๊ต์์๋ AMOVA๋ก ์ ์์ ์ฐจ์ด๋ฅผ ํ๋จํ์๊ณ Non-metric multidimensional scaling (NMDS) plot์ผ๋ก ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, genus ์์ค์ abundance ์ฐจ์ด๋ METASTATS๋ก ๋น๊ตํ์๋ค. \( 16 \)S rRNA ์ ์ ์ ๊ธฐ๋ฐ metabolic pathway ์ถ์ ์ PICRUSt ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋น๊ตํ์๊ณ , STAMP v\(2.1.3\)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ heatmap์ผ๋ก ๋ํ๋ด์๋ค. ์ด๋ ANOVA๋ก ์ ์์ฑ ๊ฒ์ ์ ์ค์ํ์๊ณ , ์ ์์ฑ์ด ์์ ๋ Tukey's HSD test๋ก ์ฌํ๊ฒ์ ํ์๋ค(\(p<0.01\)). ๋ํ ์ด์ ๋ฐ๋ฅธ ๊ณํต์ ๋ถ์์ The Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ํ๋ด์๋ค.</p> | ์คํ๋๋ฌผ ์ฌ์ก ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ๋ฌผ๊ณผ ์์ด๋๋ฌด์ ํ์ผ๋ก ๊ณต๊ธ๋์์ง? |
์๋ฌผ์ฒด ๋ด๋ถ๋ก ์นจํฌ๊ฐ ์ฉ์ดํ์ฌ ํ๋์ฑ ๋ฌผ์ง์ ์ถ์ถ์ ์ ๋ฆฌํ ํน์ง์ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ค. | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ ์กฐ ๋ฐ ํ์ฑ๋น๊ต</h2><p>\( 80 \% \) ์ํ์ฌ์ ์ด์ฉํ์ฌ \(20 \)๊ฐ์ง์ ํ๋ธ ์๋ฌผ์ ์ถ์ถํ์๋ค. \( 80 \% \) ์ํ์ฌ์ ๊ทน์ฑ๊ณผ ๋น๊ทน์ฑ์ ์ฑ์ง์ ๋ชจ๋ ๊ฐ์ง ์์น๋งค์ฑ ์ฉ๋งค๋ก, ์ํ์ฌ ์์ฉ์ก์ ํํ๋ ์๋ฌผ์ฒด ๋ด๋ถ๋ก ์นจํฌ๊ฐ ์ฉ์ดํ์ฌ ํ๋์ฑ ๋ฌผ์ง์ ์ถ์ถ์ ์ ๋ฆฌํ ํน์ง์ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ค. ์ถ์ถ์ก์ ๊ฐ์๋์ถํ ํ ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐํ๊ณ DMSO์ \( 1 \mathrm{~mg} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋๊ฐ ๋๋๋ก ๋
น์ฌ ์ด ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ๋ฐ DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ฐ ํ๋ธ ์๋ฃ๋ก๋ถํฐ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ์ ๊ณ ํ๋ถ ์์จ์ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ์ด ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ํจ๋์ Table \(2 \)์ ํ์ํ์๋ค. Table \(2 \)์์ ๋ณด๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ์ด ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋์ ํด๋ฌ๋ธ, ํ์, ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ, ๊ณํผ์ ์์ผ๋ก ๊ฐ๊ฐ \( 7.08\), \(6.90 \), \( 4.88\), \(3.35 \mathrm{~mg} \mathrm{~CAE} / 100 \mathrm{~g} \)์ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ํ์, ์ค๋ ๊ฐ๋
ธ, ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ, ํด๋ฌ๋ธ์ ์์ผ๋ก \( 1.71\), \(0.77\), \(0.80 \), \( 0.97 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)์ ๋ํ๋๋ค. ๋ํ, DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ ํ์, ์๊ณ์ ์, ์ธ์ด์ง, ํด๋ฌ๋ธ, ์ค๋ ๊ฐ๋
ธ, ๋ง์กฐ๋, ๋ฐ์ง, ๊ณํผ, ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ \( 90 \% \) ์ด์์ ๋์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ํ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ๊ฐ์ฅ ๋์์ผ๋ฉฐ, ์ด ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋ ๋ฐ DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ๋ ํ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ๋์ ์์ค์ ๋ณด์ฌ \(20\)๊ฐ์ง ํ๋ธ ์๋ฌผ ์ค ํ์์ ์ถ์ถ์๋ฃ๋ก, ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๋ฅผ ์ถ์ถ ํํฉ๋ฌผ๋ก ์ ํํ์๋ค. ์ํ๋๋ \(6 \)์ข
์ ํ๋ธ๋ฅ ์ค์์ ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋์ด ๋๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ \(11 \)์ข
์ ํ๋ธ ์ค ๋ฐฐ์ดํฅ, ํํผ๋ฏผํธ ๋ฑ์ DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ด ์ฐ์ํ๋ค๋ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์๋ค. ์ถ์ถ์ฉ๋งค(์ด์ ํน์ ๋ฉํ์ฌ)์ ์๋ฃ์ ์ฐจ์ด์ ์ํ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ๋๋ผ๋ ํด๋ฆฌํ๋์ด๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ๊ฐ์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง์ ํจ๋์ด ๋์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ๋์ ํญ์ฐํํ์ฑ์ ๋ณด์ธ ๊ฒ๊ณผ ์ ์ฌํ ๊ฒฝํฅ์ด์๋ค.</p><h2>ํ์์ ์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด ์ต์ ํ</h2><p>ํ์ ๋ถ๋ง๋ก๋ถํฐ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ์ถ์ถ์ ์ํ ์ ์ ํ ์ฉ๋งค ์ ์ ์ ์ํด ๋ฌผ๊ณผ ์๋ \( 99 \% \) ์ด์์ ์ฉ๋งค(์ํ์ฌ, ๋ฉํ์ฌ, \( n \)-ํฅ์ฐ)๋ก ๊ฐ๊ฐ ํ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ์ฌ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค. ํ์์ด ํจ์ ํ๊ณ ์๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๊ณ ๋ฌผ์ง์ ๊ทน์ฑ ๋ฐ ๋น๊ทน์ฑ๋๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ๊ทน์ฑ์ด ๋ค๋ฅธ ์ธ ์ฉ๋งค๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ถ์ถํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ Fig. \(1\)์์ ๋ณด๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด, ์ํ์ฌ, ๋ฉํ์ฌ ๋ฐ \( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ \( 2.86 \pm 0.64\), \(2.09 \pm 0.30 \) ๋ฐ \( 10.09 \pm 1.24 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)์ด์๊ณ , ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์์๋ ๊ฒ์ถ๋์ง ์์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ๋์ ์ฉ๋งค์ธ \( n \)-ํฅ์ฐ์ ์ถ์ถ์ฉ๋งค๋ก ์ ์ ํ์๋ค. ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ์ถ์ถ์ ๊ณ ์จ์ ๋ฌผ์ ์ฉ๋งค๋ก๋ ์ฌ์ฉํ๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋น๊ต์ ๋ฎ์ ์จ๋์ธ \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ์ถ์ถํ์ฌ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๊ฐ ๊ฒ์ถ๋์ง ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค.</p><p>ํ์ ๋ถ๋ง๋ก๋ถํฐ \( n \)-ํฅ์ฐ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๋ฅผ ์ถ์ถํ๊ธฐ ์ํ ์ต์ ์ ์กฐ๊ฑด์ ์ฐพ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋ฐ์ํ๋ฉด๋ถ์๋ฒ(RSM)์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋
๋ฆฝ๋ณ์๋ก์ ์ถ์ถ์จ๋ (\( \mathrm{X}_{1}\)), ์๋ฃ๋๋ (\( \mathrm{X}_{2} \)) ๋ฐ ์ถ์ถ์๊ฐ (\( \mathrm{X}_{3} \))์ ์ ์ ํ์๊ณ , ์ข
์๋ณ์๋ก์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋ (\( \mathrm{Y}_{1} \))์ ์ ์ ํ์๋ค. ๋
๋ฆฝ๋ณ์๋ฅผ \(3 \)๊ฐ์ง ๋ฒ์ \( (-1,0,1) \)์์ \(20 \)๊ฐ์ง ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ์ถ์ถ์คํ์ ์ค์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค. ๋
๋ฆฝ๋ณ์์ ์ต์๊ฐ๊ณผ ์ต๋๊ฐ์ ์๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์คํฌ๋ฆฌ๋ ์คํ ์กฐ๊ฑด ๋ฐ ์ฉ๋งค์ ๋๋์ ์ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ์ค์ ํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ Table \(3\)์์ ๋ณด๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด, ๊ฐ ์คํ ์กฐ๊ฑด์์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ \(3.73\)-\(7.41 \mathrm{~mg}\) \(\mathrm{NE}/100 \mathrm{g}\) ๋ฒ์๋ก ๋ถ์๋์๋ค. ๋ค์ ์์ ๊ฐ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด์ ๋ฐ๋ฅธ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ํ ๋ฐ์ํ๋ฉด ํ๊ท์์ด๋ค. \( \mathrm{Y}_{1}=+69.95-2.42 \mathrm{X}_{1}+9,03 \mathrm{X}_{2}+4.34 \mathrm{X}_{3}-3.61 \mathrm{X1}^{2}-9.55 \mathrm{X2}^{2}-4.74 \mathrm{X3}^{2}- 1.42 \mathrm{X}_{1} \mathrm{X}_{2}-1.75 \mathrm{X}_{1} \mathrm{X}_{3}-0.27 \mathrm{X}_{2} \mathrm{X}_{3} \)</p><p>\( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ๋ํ ํ๊ท์์ ์๊ด๊ด๊ณ (\( \mathrm{R}^{2} \))๋ \( 0.9011 \)๋ก, \( 5 \% \) ์ด๋ด์ ์์ค์์ ์ ์์ฑ์ด ์ธ์ ๋์๋ค. ANOVA ๋ถ์ฐ๋ถ์์ผ๋ก ๋
๋ฆฝ๋ณ์์ ๋ํ ์ข
์๋ณ์์ ์ํธ๊ด๊ณ๋ฅผ ํ์ธํ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋
๋ฆฝ๋ณ์ ์ค์์ ์ถ์ถ์จ๋ (\( \mathrm{X}_{1} \))๋ฅผ ์ ์ธํ ์ถ์ถ๋๋ (\( \mathrm{X}_{2} \))์ ์ถ์ถ์๊ฐ (\( \mathrm{X}_{3} \))์ด ์ ์์ฑ์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค (\( 5 \% \) ์ ์ ์์์ค ์ด๋ด). ๋ฅ์ ๋ถ์ ๊ทธ๋ํ๋ฅผ ํตํด \(3\)๊ฐ์ง ์ธ์์ ์ํธ๊ด๊ณ๋ฅผ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ, ์ถ์ถ๋๋ (\( X_{2} \))๊ฐ \(0.50\)-\(1.63\%\)๋ก ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ์ ์์ฑ ์๊ฒ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค (\( p<0.0003 \)). ์ถ์ถ์๊ฐ (\( \mathrm{X}_{3} \))์ \(30\)-\(193\)๋ถ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค(\( p<0.0227 \)). ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ํ ์ถ์ถ์จ๋ (\( \mathrm{X}_{1} \))์ ์ํฅ์ ๋ฏธ๋ฏธํ์์ผ๋ ์ถ์ถ ๋๋ (\( \mathrm{X}_{2} \))๋ \( 1.63 \% \)๊น์ง ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋๋ ทํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค(Fig. \(2\)). ํ์์ ์ผ์ข
์ธ ์ฌ๋ฐฑ๋ฆฌํฅ์์ \( 75 \% \) ์ํ์ฌ์ ์ฉ๋งค๋ก microwave๋ฅผ ์ด์ฉํ ํญ์ฐํ ์ฑ๋ถ์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด ์ต์ ํ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๋์ผํ๊ฒ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ์ถ์ถ๋์ ์ถ์ถ์๊ฐ์ \( 5 \% \) ์ ์์์ค์์ ์ ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค.</p><h2>์ต์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด ์์ธก ๋ฐ ๊ฒ์ฆ</h2><p>ํ์์ผ๋ก๋ถํฐ ์จ๋, ๋๋, ์๊ฐ์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด์ ๋ฐ๋ฅธ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ฐ์ํ๋ฉด๋ถ์์์ ์์ธก๋ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ \( 7.05 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)์ด์๊ณ , ์ด ๋์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด์ ์ถ์ถ์จ๋ \( 35.87^{\circ} \mathrm{C} \), ์ถ์ถ๋๋ \( 1.63 \% \), ์ถ์ถ์๊ฐ \( 192.28 \)๋ถ์ด์๋ค. ์์ธก๋ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ์ \( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ ํ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ถ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ \( 6.79 \pm 0.46 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)๋ก ์์ธก ๊ฐ์ \( 96.3 \% \)๋ฅผ ๋ํ๋ด์ด ์คํ๊ณํ๋ฒ์ ์ํ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด ์ต์ ํ์ ์ ๋ขฐ์ฑ์ด ๊ฒ์ฆ๋์๋ค.</p><p>์ด์์ ์ต์ ํ๋ ์กฐ๊ฑด์์ ์ป์ ํ์ \( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ Kwon ๋ฑ์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ง์ดํฌ๋กํ ํฌ์
์กฐ๊ฑด์์ \( 75 \% \) ์ํ์ฌ๋ก ์ถ์ถํ ์ถ์ถ๋ฌผ์์์ ํจ๋(\(15.08 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g}) \)๋ณด๋ค๋ ๋ฎ์ ์์น์ด๋, ๋ง์ดํฌ๋กํ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ง ์์ ์ด์์ถ์ถ๋ฌผ(\(80\)-\(100^{\circ} \mathrm{C}\), \(3.5 \)์๊ฐ ์ถ์ถ)์ ๋์์ผ๋ก ํ ์ฐ๊ตฌ์ ๋นํ๋ฉด ํฌ๊ฒ ํฅ์๋ ๊ฒ์ด๋ค. ๋ํ ์ด ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ฌผ๋ก ํญ์ฐํ ํ์ฑ ๋ชจ๋ ๋์ \( (+) \)์ ์๊ด๊ด๊ณ๋ฅผ ๋ํ๋ธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ์ด๋ค. ๊ฒฐ๋ก ์ ์ผ๋ก ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ต์ ํํ ์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด์ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ์์ฐ์ ์ํ ํ์์ ์ฉ๋งค์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก์ ํ์ฉํ ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ธฐ๋๋๋ค.</p> | ์คํ์ ํตํด ์ป์ ์ต์ ํ๋ ์กฐ๊ฑด์ ์ด์ ์ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ชจ๋ ์กฐ๊ฑด๋ค๋ณด๋ค ๋ ๋์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ถ์ถํ ์ ์๋ ์กฐ๊ฑด์ผ๊น? |
YES | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>ํฌ๊ธฐ๊ฐ ๋ค๋ฅธ ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ ์ธ์ง์ง์ ํจ๊ณผ</h2><p>Tolaasin์ ์ํ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ์ธํฌ๋ง์์ pore๋ฅธ ํ์ฑํจ์ผ๋ก์จ ์ผ์ด๋๋ฉฐ, tolaasin์ pore ํ์ฑ์์ฉ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ค์ํ ์ธ์ง์ง์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ธ์ง์ง์ ํ์์ ๊ธธ์ด๊ฐ ๋ค๋ฅธ ํฌํ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ ๊ฒ์ ์ ํํ์์ผ๋ฉฐ, ์ธ์ง์ง DDPE๋ \( 2 \)๊ฐ์ decanoic acid \( (\mathrm{C} 10: 0) \)๋ฅผ, DMPE๋ myristic acid \( (\mathrm{C} 14: 0) \)๋ฅผ, DSPE๋ stearic acid \( (\mathrm{C} 18: 0) \)๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ํฌํจํ๋ phosphatidylethanolamine์ด๋ฉฐ, ๋ฐ์ ์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ tolaasin์ ์ฉํํ์ฑ ํน์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค(Fig. 1). DMPE์ DSPE๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์์ ๊ฒฝ์ฐ, tolaasin์ ํ์ฑ์ ์ธ์ง์ง์ ๋ฃ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋น๊ตํ์ฌ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์์ผ๋, DDPE๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ๊ฒฝ์ฐ์๋ \( 5 \)๋ถ ์ด๋ด์ ์ ํ๊ตฌ์ ์ฉํ์ด ๋ชจ๋ ์ผ์ด๋ tolaasin์ ์ธํฌ๋
์ฑ์ด ํฌ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์๋ค.</p><p>์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์ฅ์ ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ง์ ๊ตฌ์ฑํ๋ ์ธ์ง์ง์ด ํ์ \(18 \)๊ฐ๋ฅผ ์ค์ฌ์ผ๋ก \( 16\)-\(20 \)๊ฐ์ ํ์๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ์ง๋ฐฉ์ฐ๋ค๋ก ๊ตฌ์ฑ๋์ด ์๋ค๋ ์ฌ์ค์ ๊ณ ๋ คํ ๋, DMPE์ DSPE๋ ์ธํฌ๋ง์ ์ธ์ง์ง๋ค๊ณผ ํ์์ฌ์ฌ ๊ธธ์ด์ ํฐ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์ด tolaasin์ ํ์ฑ์ ํฐ ์ํฅ์ด ์์์ ๋ณด์ฌ์ค๋ค. ๋ฐ๋ฉด, DDPE๋ tolaasin์ ํ์ฑ์ ํฌ๊ฒ ์ฆ๊ฐ์์ผ, tolaasin์ ์ํ pore ํ์ฑ์ ์ด์งํ๊ฑฐ๋ ํ์ฑ๋ pore๋ฅผ ์์ ํ์ํด์ ๋์์ฃผ๋ ์ญํ ์ ํ๊ณ ์์์ ์๋ฏธํ๋ค. ์ด๋ tolaasin์ด ํ์ฑํ๋ pore์ ๊ธธ์ด๊ฐ ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ง์ ๋๊ป๋ณด๋ค ์งง์, ์ค๊ฐํฌ๊ธฐ์ ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ ์ธ์ง์ง์ด tolaasin pore์ ์ฃผ๋ณ์ ๊ฒฐํฉํ์ฌ pore ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ฃผ๋ณ ๋ง์ ์์ ์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํฌ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์์์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค.</p><h2>DDPE์ ์ฌ์ ์ฒ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ tolaasin์ ์ฉํํ์ฑ</h2><p>์ ํ๊ตฌ๋ฅผ ๋ค์ํ ๋๋์ DDPE์ \( 10 \)๋ถ๊ฐ ์ฌ์ ๋ฐฐ์ํ์ฌ ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ง์ DDPE๋ฅผ ๊ฒฐํฉ์ํจ ํ, tolaasin ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํ ์ฉํํ์ฑ์ ๋์กฐ์คํ์ ๋นํ์ฌ ๋น ๋ฅด๊ฒ ์ผ์ด๋ฌ๋ค. DDPE ์ฌ์ ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํ tolaasin์ ์ฉํํ์ฑ ์ฆ๊ฐ๋ DDPE์ ์ฒ๋ฆฌ๋๋์ ๋ฐ๋ผ ๋ค๋ฅด๋ \( 5 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ ๋๋์์ ์ฆ๊ฐํ๊ธฐ ์์ํ์ฌ \( 50 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ ๋๋์์ ์ต๋๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ํนํ \( 50 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ DDPE์ ์ ํ๊ตฌ๊ฐ ์ฌ์ ๋ฐฐ์๋ ๊ฒฝ์ฐ์๋ tolaasin ์ฒจ๊ฐ ํ \( 10 \)๋ถ ์ด๋ด์ ์ฉํ์ด ์๊ฒฐ๋์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์ค๊ฐํฌ๊ธฐ ์ฌ์ฌ์ ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ์ธ์ง์ง์ด tolaasin ๋ถ์์ ๋น ๋ฅธ pore ํ์ฑ์ ์ด ์งํ์ฌ tolaasin pore์ ํ์ฑ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ์ ๋ฐํจ์ ์ ์ ์๋ค.</p> | \( 50 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ DDPE์ ์ ํ๊ตฌ๊ฐ ์ฌ์ ๋ฐฐ์๋ ๊ฒฝ์ฐ์ tolaasin ์ฒจ๊ฐ ํ \( 10 \)๋ถ ์ด๋ด์ ์ฉํ์ด ์๊ฒฐ๋ผ? |
\( 86.7 \pm 8.79 \) | <p>์์ฆ๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถํ ๊ณํผ ์ ์ ์ ์ ์ ์ ๋ธ๋ผํผ์ฌ ๋ฐฐ์์ ๋ํ ๋ถํ์จ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ Table \(4\)์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋ถํ์จ์ด \( 86 . 7 \% \) ์์ผ๋ฉฐ ์ ์ ๋ฅผ ๋บ ์ ์ ์ ๋
ธ์ถ๋ ์ ๋ธ๋ผํผ์ฌ์ ๋ถํ์จ์ \( 93 . 6 \% \)์์ผ๋ฉฐ ๋ ์คํ๊ตฐ ๊ฐ์ ์ ์์ฑ์ ๋ฐ๊ฒฌ๋์ง ์์๋ค. ์์ฆ๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถํ ๊ณํผ ์ ์ ์ ์ ์ ์ฒ๋ฆฌ ๋๋๋ \( 500 \mathrm{mg} \mathrm{L}^{-1} \) ์์ผ๋ฉฐ ์ด ๋ ๋ถํ์จ์ \( 84 . 4 \% \) ๋ก์จ ๋๊ฐ์ง ๋ค๋ฅธ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ์ ๋น๊ต์์ ํต๊ณํ์ ์ผ๋ก ์ ์์ฑ์ด ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ด ์ฒ๋ฆฌ ๋๋ ๋ฒ์์์๋ ์์ฆ๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถํ ๊ณํผ ์ ์ ์ ์ ๋ ์ ๋ธ๋ผํผ์ฌ ๋ฐฐ์์ ๋ถํ์ ๋
์ฑ์ ๋ํ๋ด์ง ์์๋ค.</p> <table border><caption>Table \(4 \) Hatching rates of emulsifiable concentrates of cinnamonessential oils obtained using steam distillation to zebrafish embryos(Danio rerio)</caption> <tbody><tr><td>Sample</td><td>Concentration \( \left(\mu \mathrm{g} \mathrm{L}^{-1}\right) \)</td><td>Hatching rates \((96\) h)</td></tr><tr><td>Control (negative)</td><td>water</td><td>\( 86.7 \pm 8.79 \)</td></tr><tr><td>Control (positive )</td><td>without essential oil</td><td>\( 93.6 \pm 3.81 \)</td></tr><tr><td>Cinnamon</td><td>\(10\)</td><td>\( 94 . 7 \pm 2 . 48 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(50\)</td><td>\( 90.3 \pm 7.15 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(100\)</td><td>\( 88.9 \pm 6.97 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(250\)</td><td>\( 87.7 \pm 6.92 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(500\)</td><td>\( 84.4 \pm 3.86 \)</td></tr></tbody></table> | Hatching rates \((96\) h)์ ํ๊ท ๊ฐ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ ๋ Concentration \( \left(\mu \mathrm{g} \mathrm{L}^{-1}\right) \)์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? |
ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ถ์์ ์ํด | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>Coffee ์๋ฃ ๋ฐ ์ปคํผ ์ถ์ถ</h2><p>์ปคํผ ์๋ ์๋ฃ๋ ์ฝ๋กฌ๋น์์ฐ Coffea arabica var. tipica ํ์ข
์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. ์ปคํผ ๋ก์คํ
๊ฐ๊ณต์ medium๊ณผ dark์ ๋ ์์ค์ผ๋ก ์งํํ์๋ค. Medium์ ์ํด์ ๋ฐ์ดํ์ ๋ก์คํฐ(Taehwan, Bucheon, Korea)๋ก \( 210{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 10๋ถ, dark๋ฅผ ์ํด์ \( 210{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์์ 15๋ถ ๊ฐ roastingํ์๋ค. ์๋๋ฅผ ๋ถ์ํ๊ธฐ ์ํด ์ปคํผ๋ถ์๊ธฐ(Melitta, Tokyo, Japan)๋ก ๊ฐ์์ ๋ถ๋ง์ ๋ฐํ๋ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ฃ์ด ๊ฑด์กฐํ๊ณ ๊ณต๊ธฐ๊ฐ ์ ํตํ๋ (\( 20\)-\(25^{\circ} \mathrm{C} \)) ์์ค์ ์ ์ฅํ์๋ค.</p></p>์ผ์ ํ ์กฐ๊ฑด์์ ์ปคํผ์๋ฃ๋ฅผ ์ถ์ถํ๊ธฐ ์ํด์๋ ๋ถ์๋ \( 10 \mathrm{~g} \)์ ์ปคํผ๋ฅผ beaker์ ๋ฃ๊ณ \( 95{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์ฆ๋ฅ์ \( 50 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ 2 ๋ถ๊ฐ ๊ต๋ฐํ๋ฉด์ ์ปคํผ์ ์ฑ๋ถ์ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ์ด ๋๋๋ฉด ์ปคํผ ๊ณ ํ๋ถ์ ์ ๊ฑฐํ๊ธฐ ์ํด ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ์์ธต์ก์ ์ป์๋ค. ์์ธต์ก์ ์ก์ฒด ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ถ์์ ์ํด \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) membrane filter(Millipore, Merck, Darmstadt, Germany)๋ฅผ ํต๊ณผ์์ผ์ ๋ฏธ์ธ ๊ณ ํ๋ฌผ์ ์ ๊ฑฐํ์๋ค.</p><h2>์ง๋ฐฉ์ฐ์ ์ฐํ ๋ถ์</h2><p>์กฐ์ง๋ฐฉ์ ์ถ์ถ ๋ฐ ์ง๋ฐฉ์ ์ฐ๊ฐ, ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ ์ธก์ ์ ์ํ๊ณต์ ์ ๋ถ์๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ์ํํ์๋ค.</p><h2>์ง๋ฐฉ์ ๋ถ์</h2><p>๋ฏธ์ธํ๊ฒ ๊ฐ ์ปคํผ๋ถ๋ง \( 10 \mathrm{~g} \) ์ ์ ํํ ๋ฌ์ ๋ฌด๊ฒ๋ฅผ ์๋ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ด์ \(100\)-\( {105 }^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ 1 ์๊ฐ ๊ฑด์กฐํ ํ ๋ฐ์์ผ์ดํฐ์์ ์ํ๊ณ Soxhlet ์ถ์ถ์ฅ์น์ diethyl ether ๋ก \( 60{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 8์๊ฐ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ์ด ๋๋๋ฉด ether๋ฅผ \( 50{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ์ฆ๋ฐ์ํค๊ณ \( 100{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ์ฝ 1 ์๊ฐ ๊ฑด์กฐ ํ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ฌด๊ฒ๋ฅผ ๋ฌ์ ์ฉ๊ธฐ์ ๋จ์์๋ ์กฐ์ง๋ฐฉ์ ๋ฌด๊ฒ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><p>์กฐ์ง๋ฐฉ \( (\%)=( \) ์ถ์ถ๋ ์กฐ์ง๋ฐฉ ๋ฌด๊ฒ/์๋ฃ๋ฌด๊ฒ \( ) \times 100 \)</p><h2>์ง๋ฐฉ ์ฐ๊ฐ</h2><p>์ง์ง \( 1 \mathrm{~g} \) ์ ์คํํ๋๋ฐ ํ์ํ \( \mathrm{KOH} \) ์ \( \mathrm{mg} \) ์ ์ฆ ์๋ฃ ์ค์ ์ ๋ฆฌ์ง๋ฐฉ์ฐ์ ์์ ๊ตฌํ๊ธฐ ์ํด ์ปคํผ ๋ถ๋ง์์ hexane์ผ๋ก ์ค์จ์์ ์ถ์ถํ๊ณ ๊ฐ์์ฆ๋ฅ๊ธฐ์์ hexane์ ๋ถ๋ณ์ฆ๋ฅ๋ก ์ ๊ฑฐํ ํ ์ป์ ์ง๋ฐฉ์๋ฃ \( 1 \mathrm{~g} \) ์ ์ ๋ฐํ ๋ฌ์ ethanol:ether \( (1: 2) \) ํผ์ก \( 10\mathrm{mL} \) ๋ฅผ ๋ฃ์ด ๋
น์๋ค. ์ปคํผ ์ง๋ฐฉ์๋ฃ์ ์๊ฐ์ ๋๋ฌธ์ \( 1 \% \) ํฐ๋ชฐํํ๋ ์ธ/ethanol ์ฉ์ก์ ์ง์์ฝ์ผ๋ก ํ์ฌ ์ฒญ์์ด 30์ด ๊ฐ ์ง์ํ ๋๊น์ง \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{KOH} / \) ethanol ์ฉ์ก์ผ๋ก ์ ์ ํ๋ค. ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{KOH} / \mathrm{ethanol} \) ์ ๋ถํผ(a)์์ ๋ฐํ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.1 \mathrm{M} \) \( \mathrm{KOH} / \)ethanol์ ๋ถํผ(b)๋ฅผ ๋ค์์ ์์ ํตํด ์ฐ๊ฐ๋ฅผ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><p>์ฐ๊ฐ \( =5.611 \times(\mathrm{a}-\mathrm{b}) \)</p><h2>์ง๋ฐฉ ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ</h2><p>๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ, ์ฆ, ์ ์ง \( 1 \mathrm{~kg} \) ์ ์ํ์ฌ \( \mathrm{KI} \)์์ ์ ๋ฆฌ๋๋ I2์ ๋ฐ๋ฆฌ๋น๋์ \( (\mathrm{meq} / \mathrm{kg}) \) ๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ปคํผ์์ ์ถ์ถํ ์ง๋ฐฉ ๊ฒ์ฒด \( 1 \mathrm{~g} \) ์ ๋ฌ์ acetic acid:chloroform \( (3: 2)\) \(2.5 \mathrm{~mL} \) ์ ์ฝ๊ฐ ๊ฐ์จํ์ฌ ๋
น์ด๊ณ ํฌํ \( \mathrm{KI} \) ์ฉ์ก \( 0.1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐ๋ณ๊ฒ ํ๋ค์ด ์์ ๋ค์ ์ด๋์ด ๊ณณ์ 10 ๋ถ๊ฐ ๋ฐฉ์นํ๊ณ ๋ฌผ \( 3 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ ์ธ๊ฒ ํ๋ค์ด ์์ ๋ค์ ์ ๋ถ์์ก \( 0.1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ง์์ฝ์ผ๋ก ํ์ฌ \( 0.01 \mathrm{M} \) sodium thiosulfate ์ก์ผ๋ก ์ ์ ํ๋ค. ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.01 \mathrm{M} \) sodium thiosulfate์ก์ ๋ถํผ(a)์์ ๋ฐํ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.01 \mathrm{M} \) sodium thiosulfate์ก์ ๋ถํผ(b)๋ก๋ถํฐ ๋ค์์ ์์ ํตํด ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ๋ฅผ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><p>๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ \( (\mathrm{meq} / \mathrm{kg})=(\mathrm{a}-\mathrm{b}) \times 10 \)</p><h2>CGA์ ์ ๋</h2><p>์์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ๋ถ์๋ ์ปคํผ์๋์์ ๋ฌผ๋ก ์ถ์ถํ ์ปคํผ์ ์ถ์ถ๋ CGA์ ์กฐ์ฑ ๋ฐ CGA์ ํํ์ ๋ณํ์ ์ํด ํ์ฑ๋๋ ๋ค๋ฅธ ๋ค๋ฅธ ์ฑ๋ถ๋ค์ ๋ถ์ํ๊ธฐ ์ํด ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ์ํํ์๋ค. ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ์ํด์ ์ถ์ถ๋ ์ปคํผ์๋ฃ \( 1 \mathrm{~mL} \) ์ \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{HCl} \)/ methanol\( : \) chloroform (\( 1: 2)\) \( 2 \mathrm{~mL} \) ์ ๊ฐํ๊ณ ์ค์จ์์ 30 ๋ถ๊ฐ ํ๋ค์ด์ ์์ด์ฃผ์๋ค. Chloroform ์ธต์ ์ทจํ์ฌ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ์ง๊ณต๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ ๋ง๋ฆฌ๊ณ ์์ ํ ๊ฑด์กฐ๊ฐ ์ด๋ฃจ์ด์ง๊ธฐ ์ ์ ์๋ฃ๋ฅผ \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{HCl} / \) methanol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) ์ ๋
น์๋ค. ์ก์ฒดํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ถ์์ ์ํด \( \mathrm{C} 18 \) column \( (4.6 \times 150 \mathrm{~mm}\), \(5 \mu \mathrm{m}) \) ์ด ์ฐ๊ฒฐ๋ Agilent 1200LC (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)์ ์๋ฃ๋ฅผ 10\( \mu \mathrm{L} \) ์ฃผ์
ํ๊ณ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ฅผ ์ ์งํ๋ฉด์ ์ด๋์์ผ๋ก \( 10 \mathrm{mM} \mathrm{HCl} \) : methanol \( (9:1) \)๋ฅผ \( 1 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \) ์ ์ ์์์ ๋ถ๋ฆฌ๋๋ ๋ฌผ์ง๋ค์ \( 374 \mathrm{~nm} \) ์ ํ์ฅ์์์ ํก๊ด๋๋ก ์ธก์ ํ์๋ค. CGA์ ์ ๋๋ถ์์ ์ํด์ CGA ํ์คํ(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)์ \( 10 \mathrm{mM} \mathrm{HCl} :\)methanol \( (9:1) \)์ ๋
น์ฌ์ ์ธก์ ํ์ฌ CGA ์ retention time๊ณผ ํ์ค๊ณก์ ์ ์ป์๋ค.</p><h2>ํญ์ฐํํ์ฑ์ ์ธก์ </h2><p>DPPH radical ์๊ฑฐ๋ฅ ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด Kang ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ Katsube ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์๋ฃ ํน์ฑ์ ๋ง์ถฐ ์ค์ํ์๋ค. ์ปคํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์ด์จ์๋ก ์ฐ์ ํฌ์ํ์ฌ ๊ฐ ํฌ์๋๋์์ \( 50 \mu \mathrm{L} \) ์ฉ์ ์ทจํ์ฌ 96-well plate์ ๋ฃ์๋ค. ์ฌ๊ธฐ์ 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) \( / 50 \% \) ์ํ์ฌ \( 200 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ๋ฃ๊ณ 30๋ถ๊ฐ ์ค์จ์์ ๋ฐ์ํ์๋ค. \( 550 \mathrm{~nm} \) ์์์ ํก๊ด๋ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ ํด Multilabel Counter (PerkinElmer, Inc., Wellesley, MA, USA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ ๊ณ์ฐํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉํ ์์ด๋ค. Radical ์๊ฑฐํ์ฑ \( (\%)=100 \times(\mathrm{A}-\mathrm{B}) / \mathrm{A} \), ์ฌ๊ธฐ์ \( \mathrm{A} \) ๋ control(์๋ฃ ์์ด ์ธก์ ํ DPPH radicals์ ํก๊ด๋) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ \( \mathrm{B} \) ๋ ์๋ฃ์ ๋ฐ์ํ ํ radicals์ ํก๊ด๋์ด๋ค. ๊ฐ ์๋ฃ์ ํญ์ฐํํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ๋ 3๋ฐ๋ณต ์คํ๊ฒฐ๊ณผ์ ํ๊ท \( \pm \mathrm{SD} \) ๋ก ํ์ํ์๋ค.</p><p>\( \mathrm{ABTS}^{+} \)radical ์๊ฑฐ๋ฅ ๋ถ์์ ์ํด ๋จผ์ 2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) ์ฉ์ก์ ๋ง๋ค๊ธฐ ์ํด \( 5 \mathrm{~mL}\) \( 7 \mathrm{mM} \) ABTS / \(\mathrm{dH}_{2} \mathrm{O} \) ๊ณผ \( 80 \mu \mathrm{L}\) \( 2.45 \mathrm{mM} \) potassium persulfate๋ฅผ ํจ๊ป ๋ฃ๊ณ ๋น์ ์ฐจ๋จํ ์ํ๋ก ์ค์จ์์ 12์๊ฐ ๋ฐ์ํ์ฌ ABTS radical cation \( \left(\mathrm{ABTS}^{+}\right) \)์ ์ป์๋ค. ๋ฐ์ ํ ์ฉ์ก์ \( 734 \mathrm{~nm} \) ์์์ ํก๊ด๋๊ฐ \( 0.7 \) ์ด ๋๋๋ก ethanol๋ก ํฌ์ํ์๋ค. \( \mathrm{ABTS}^{+} 1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ \( 50 \mu \mathrm{L} \) ์ ์๋ฃ๊ฐ ๋ค์ด ์๋ ์ ๋ฆฌ ํ๋ธ์ ๋ฃ๊ณ 30์ด ๊ฐ vortex ํ์๋ค. 5๋ถ ๋ ๋ฐ์ ์ํจ ํ ํก๊ด๋๋ฅผ \( 734 \mathrm{~nm} \) ์์ ์ธก์ ํ์๋ค. Radical ์๊ฑฐ๋ฅ ํ์ฑ๋๋ ์๋ฃ๊ฐ ์๋ ์ํ์์ ์ธก์ ํ ๊ฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ๋ณํ๋ ํก๊ด๋์ ๋ฐฑ๋ถ์จ๋ก ๊ณ์ฐํ์๋ค. ๋ชจ๋ ์คํ์์ ๊ฐ ์๋ฃ๋ 3 ๋ฐ๋ณต์ ํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><p>Antioxidant Response Element (ARE) ํ์ฑ ๋ถ์์ ์ํด ์ฌ๋์ ๊ฐ์ธํฌ์ฃผ์ธ HepG2์ Antioxidant Response Element (ARE)-luciferase/pGL vector๋ก transfectionํ์ฌ ์ป์ HepG2-ARE cell์ ์ฌ์ฉํ์ฌ luciferase reporter ๋ถ์์ ์งํํ์๋ค. ๋ถ์์ ์ํ์ฌ ๋จผ์ 6-well plate์์ sub-confluentํ๊ฒ ๋ HepG2-ARE ์ธํฌ๋ฅผ \( 0.5 \% \) FBS ์กฐ๊ฑด์์ 12์๊ฐ ๋์ serum starvation์ ์ํจ ํ ์๋ฃ๋ฅผ 100 ๋ฐ \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋๋ก 12์๊ฐ ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. Luciferase activity๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด Promega์ฌ์ luciferase assay kit์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ ์คํ ๋ฐฉ๋ฒ์ kit์ ์ค๋ช
์๋ฅผ ๋ฐ๋๋ค. ์ฆ, ์ธํฌ๋ฅผ \( 3 \mathrm{~mL} \) ice cold PBS๋ก 2ํ ์ธ์ฒํ ํ lysis buffer๋ก ์ธํฌ๋ฅผ ๋
น์ฌ ์ธํฌ ์ถ์ถ์ก์ ์ป๊ณ ์ด ์ถ์ถ์ก \( 10 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ luciferase ๊ธฐ์ง์ฉ์ก๊ณผ ์์ ํ TD-20/20 luminometer(Turner Designs, Sunnyvale, CA, USA)๋ก ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ฐ ์ธก์ ๊ฐ๋ค์ bicinchoninic acid protein assay (Pierce Biotech., Waltham, MA, USA) ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ธก์ ๋ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋๋๋ฅผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ๋ณด์ ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ณด์ ๋ ๊ฐ๋ค์ ๋ค์ ์์ฑ๋์กฐ๊ตฌ๋ก ์ฌ์ฉ๋ vector control์์ ์ป์ ๊ฐ์ 1๋ก ํ์์ ๋ ๋ช ๋ฐฐ ์ฆ๊ฐํ์๋์ง ๋ฐฐ์๋ก ๊ณ์ฐํ์์ผ๋ฉฐ ์์ฑ ๋์กฐ๊ตฐ์ผ๋ก \( 5 \mu \mathrm{M} \) Sulforaphane (Sigma-Aldrich)์ luciferase ํ์ฑ๊ฐ์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ๋ค์ ๋ณด์ ํ์๋ค. ๊ฐ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์๋ฃ๋น 3ํ ๋ฐ๋ณตํ์ฌ ์ธก์ ํ ๊ฐ \( \pm \mathrm{SD} \)๋ก ํ์ํ์๋ค.</p><p>์ปคํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ ํจ๋(total polyphenolic content, TPC)์ธก์ ์ ์ํด ๊ฐ ์ปคํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ํจ๋์ Folin-Ciocalteu ์์ฝ์ผ๋ก ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ถ์์ ์ํด \( 1: 10 \) ์ผ๋ก ํฌ์๋ ์๋ฃ \( 100 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ tube์ ๋ฃ๊ณ ์ฌ๊ธฐ์ ํ์ด์จ์์ 1:5๋ก ํฌ์ํ Folin-Ciocalteu ์์ฝ \( 15 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ๋ฃ๊ณ ์์ ํ ์ค์จ์์ 5๋ถ ๊ฐ ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ์ด์ด์ \( 50 \mu \mathrm{L} 10 \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \) sodium bicarbonate ์ฉ์ก๊ณผ ๋ฃ์ด์ฃผ๊ณ ์์ ํ ์ด๋์ด ์ค์จ์์ 5๋ถ ๊ฐ ๋ฐ์ ํ ๋ฐ์๋ฌผ์ 96-well ํํ์ผ๋ก ํก๊ด๋์ ๋ณํ๋ฅผ microplate reader๋ก \( 593 \mathrm{~nm} \) ์์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฐํ์ฉ์ก์ผ๋ก๋ ์๋ฃ๋ฅผ ์ ์ธํ๊ณ ์์ ๋ชจ๋ ์ฉ์ก์ด ๋ค์ด๊ฐ ๊ฒ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. TPC์ ์ ๋์ ์ํด gallic acid๋ฅผ ์ด์ฉํ ํ์ค๊ณก์ ์ ์ป์์ผ๋ฉฐ ์ด ๊ณก์ ์์ ์๋ฃ \( \mathrm{mL} \)๋น \( \mathrm{TPC} \) ์ ์์ \( \mu \mathrm{g} \) gallic acid์ ์์ผ๋ก ํ์ฐํ์๋ค.</p> | ์ปคํผ ๋ก์คํ
์๊ฐ์ด ์ํฅ์ ๋ฏธ์ณ? |
NO | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํ ์์ ์ผ๋ฅ ์ง์ ์ ์์ ์ ์ธ ์๋ ์์ฐ์ ์ ํดํ๋ ๊ฐ์ฅ ํฐ ์์๋ค ์ค ํ๋์ด๋ฉฐ, ์ ์ธ๊ณ ๊ฒฝ์ ๊ฐ๋ฅํ ๋ฉด์ ์ 10\( \% \) ์ด์์ด ์ผ๋ฅ์ฑ(saline) ํน์ ๋ํธ๋ฅจ์ฑ(sodic) ํ ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฅ๋๋ค. ์ผํดํ ์์ ์ฃผ๋ก ๊ฑด์กฐ ํน์ ๋ฐ๊ฑด์กฐ๋์ ๋ถํฌํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋, ๋จ๊ทน์ ์ ์ธํ ๋ชจ๋ ๊ธฐํ๋์ 100๊ฐ ๊ตญ ์ด์์ ๊ฑธ์ณ ๋ฐ๊ฒฌ๋๋ค. ํ๊ตญ์์ ์ผํดํ ์์ ๊ณผ๋ค์๋น๋ ์์ค์ฌ๋ฐฐ์ง์ ๋ฐ๋ค๋ฅผ ๋งค๋ฆฝํด ์กฐ์ฑ๋ ๊ฐ์ฒ์ง๋ฅผ ์์ฃผ๋ก ๋ถํฌํ๊ณ ์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ผ๋ฅ์ง์ง์ง์ ์ผ๋ ๋ณํ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์ ๋น๊ต์ ์ธ๋ฐํ ์กฐ์ ๊ณผ์ ์ ๊ฑฐ์ณ ์ป์ด์ง๋ ํฌํ์นจ์ถ์ก(saturated paste extract)์ ๋ํด EC ๋ฐ ๊ตฌ์ฑ ์์ด์จ ํน์ ์์ด์จ๋ค์ ๋ถ์ํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ด ํ์ค์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋๋ค.\( \mathrm{Na}^{+} \)๊ฐ ์๋ฌผ์์ก ์ ํด์ ๊ฐ์ฅ ํฐ ์ํญ์ ๋ฏธ์น๋ ์์ด์จ์ด๋ผ๋ฉด, \( \mathrm{Cl}^{-1} \) ์ผํด์ง ์๋ฌผ๋
์ฑ์ ๊ฐ์ฅ ๋ฏผ์ ํ๊ฒ ๊ด๋ จ๋ ์์ด์จ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. \( \mathrm{Cl}^{-1} \)๋ ์๋ฌผ์ ๊ดํฉ์ฑ, ์ ํ ๊ท ํ ๋ฐ ์ผํฌ์ ์กฐ์ ์ ํ์์ด์ง๋ง, ์กฐ์ง ๋ด ๋์ \( \mathrm{Cl}^{-} \)๋๋๋ ์ฝ๋ก์ ํ๊ดด, ์ธํฌ๋ง ์์, ํจ์ ํ์ฑ ์ ํด ๋ฑ์ ๋
์ฑ์ ์ ๋ฐํ๋ค.<p>ํ ์ ์ถ์ถ์ก ์ค \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ์ ๋์ ์ด์จ ์ ํ์ฑ ์ ๊ทน ํน์ ์ง์์ฝ์ ์ด์ฉํ ์ ์ ๋ฒ, \( \mathrm{Hg}(\mathrm{SCN})_{2} \) ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ์ ๋ถ๊ด๋ฒ, ์ด์จ์ ํ์ฑ ์ ๊ทน์ ์ํ ์ง์ ์ธก์ , ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ฑ ๋ค์ํ ๋ฐฉ๋ฒ๋ค์ด ์ ์ฉ๋ ์ ์์ง๋ง, ๊ฐ๊ธฐ ์ ์ ์ข
๋ง์ ๊ฒฐ์ ์ ์ด๋ ค์, ์ ๋
์ฑ ๋ฌผ์ง์ ์ทจ๊ธ, ๋ฐฉํด ์ด์จ๋ค์ ๊ฐ์ญ, ์ ๊ตํ ์ฌ์ ๋ณด์ , ๊ณ ๊ฐ์ ๋ถ์์ฅ๋น ์๊ตฌ ๋ฑ์ ๋จ์ ๋ค์ด ๊ณ ๋ ค๋์ด์ผ ํ๋ค. ์์ธ๋ฌ, ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ ์๋์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ฅ ๋์ ๊ฐ๋์ ์ ๋ฐ๋๋ฅผ ์ ๊ณตํ์ง๋ง ๋น๊ต์ ์ข์ ๋๋ ๊ตฌ๊ฐ(์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก \( 100 \mathrm{ppm} \) ์ดํ)์์ ์ ์ฉ ๊ฐ๋ฅํ๋ค. ๋ฐ๋ผ์, \( \mathrm{Cl}^{-} \)๋๋๊ฐ ์์ฒ \( \mathrm{ppm} \)์ ์ํํ ์ ์๋ ์ผํดํ ์ ์ถ์ถ์ก์ ๊ฒฝ์ฐ, ๊ณผ๋ํ ํฌ์ ๋ฐ ์ํ์ฐฉ์ค๋ฅผ ํตํ ํฌ์๋น ๊ฒฐ์ ์ด ์ถ๊ฐ์ ์ผ๋ก ๋จ์ ์ด ๋๋ค. ํํธ, ์ต๊ทผ ์ ์๋ค์ ๊ธฐ์กด ๋ฐฉ๋ฒ๋ค๊ณผ ๋ฌ๋ฆฌ, ์ฉ์ก ์ค \( \mathrm{Cl}^{-} \)๊ฐ \( \mathrm{Ag}^{+} \)์ ๊ฒฐํฉํ์ฌ ์นจ์ ๋ ๋ ์๋ฐ๋๋ ์ ๊ธฐ์ ๋๋ ๋ณํ๋ฅผ \( \mathrm{EC} \) ์ ๊ทน์ผ๋ก ๊ฐ๋จํ ์ธก์ ํจ์ผ๋ก์จ \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ์ ๋์ด ๊ฐ๋ฅํจ์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ ๋ฐ ์๋ค. ์ด \( \mathrm{AgCl} \) ์นจ์ ์ ๊ธฐ์ ๋๋์ฐจ \( (\mathrm{Ag}-\mathrm{dEC}) \) ๋ฒ์ ์ ๋ฐํ ๊ธฐ๊ธฐ๋ถ์๋ฒ์ด๋ ์ ์์ฐจ ์ ์ ๋ฒ์ ๋นํด ์๋์ ์ผ๋ก ๋ฎ์ ๊ฐ๋์ ์ ๋ฐ๋๋ฅผ ๋ณด์ผ ์ ์์ผ๋, \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ๋๋๊ฐ ๋์ ์ผํด์ง์ ์ผ๋ ๋ถํฌ ๋ฐ ๋ณํ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์ ์ ํฉํ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ธฐ๋๋๋ค.<p>์ด์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ \( \mathrm{Ag}-\mathrm{dEC} \) ๋ฐฉ๋ฒ์ (1) ๊ฒ์ถํ๊ณ, ์ ๋ํ๊ณ, ์ ๋ฐ๋ ๋ฐ ๊ฐ๋๊ฐ ์ผํดํ ์์ \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ๋ ๋ชฉ์ ์ ๋ถํฉํ ์ ์๋์ง ์กฐ์ฌํ์์ผ๋ฉฐ, (2) ์ ๋จ ๊ณ ํฅ ๊ฐ์ฒ์ง์์ ์ฑ์ทจ๋ ํ ์์ ํฌํ์นจ์ถ์ก ๋ํด ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ก ๋ถ์๋ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋น๊ตํจ์ผ๋ก์จ, ์ด ์๋ก์ด ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ผํด์ง ์ผ๋ ๋ถํฌ ๋ฐ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์ ๋ํ ์ ์ฉ์ฑ์ ํ๊ฐํ๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> | \( 150 \mathrm{ppm} \)์ ์ฉ์ก์ ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ก ์ธก์ ํ๋ ๊ฒ์ด ๊ฐ์ฅ ์ข์ง? |
Tukey๋ฒ | <h2>2.4 ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ ๋ถ์</h2><p>์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ํฌํจ๋ ๋ฐํจ๊ฐ๋ฅํ ๋น(๊ธ๋ฃจ์ฝ์ค์ค, ์์ผ๋ก์ค)๊ณผ furfural, acetic acid, \( \mathrm{HMF} \), formic acid์ ๊ฐ์ ๋ฐํจ์ ํด๋ฌผ์ง์ ๋๋๋ Aminex \( 87 \mathrm{H} \) column \( (300 \times \) \( 7.8 \mathrm{~mm}, \mathrm{BIO}-\mathrm{RAD} \) )๊ณผ refractive index detector(Waters 2414 , USA)๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ HPLC(Waters e2695, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์๋ค. ์ด๋์์ \( 5 \mathrm{mM} \mathrm{H}_{2} \mathrm{SO}_{4} \) ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ๋ \( 0.6 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \) ์ผ๋ก 55 ๋ถ ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค. ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ํฌํจ๋ total phenolic compounds(TPC)์ ํจ๋์ Folin-Ciocalteu's reagent๋ก ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>2.5 ์ฌ๋ฆฌ๊ณ ๋จธ ๋ถ์</h2><p>์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ์กด์ฌํ๋ ๋ฐํจ๊ฐ๋ฅํ ๋น ์ด์ธ์ ์ฌ๋ฆฌ๊ณ ๋จธ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด National Renewable Energy Laboratory(NREL)์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ post-hydrolysis๋ฅผ ์ํํ์๋ค. ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ \( 1 \mathrm{~mL} \) ์ \( 4 \% \mathrm{H}_{2} \mathrm{SO}_{4} 9 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ \( 50 \mathrm{~mL} \) ์ผ๊ฐํ๋ผ์คํฌ์ ํฌ์
ํ์ฌ \( 121^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 60 ๋ถ๊ฐ ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. ๊ทธ ํ \( 0.22 \mu \mathrm{m} \) micro centrifuge filter๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ๋ฆฌ๋ ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ๋ฐํจ๊ฐ๋ฅํ ๋น ์ธก์ ์ ์ฌ์ฉ๋ ์กฐ๊ฑด์์ HPLC๋ก ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h2> 2.6 ํ๊ท ๋ถ์๋ ๋ฐ ๋ค๋ถ์ฐ๋ ์ธก์ </h2><p>์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ๋ถ์๋ ๋ถํฌ๋ gel permeation chromatography(GPC)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. Waters Ultrahydrogel \(120\), \(500\), \(1000\) column \(3\)๊ฐ๋ฅผ ์ฐ๊ฒฐํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , refractive index detector๋ฅผ ํฌํจํ๋ Dionex HPLC Ultimate \(3000\)(USA, Thermo)์ผ๋ก ๋ถ์ํ์๋ค. ์ด๋์์ผ๋ก sodium azide \( 0.1 \mathrm{M} \) ์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ๋์ \( 1 \mathrm{mL} / \mathrm{min} \) ์ผ๋ก ๋ถ์ํ์๋ค. Pullulan(Mw: \(342~805000\))์ ํ์ค๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>2.7 Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) ๋ถ์</h2><p>GC-MS ๋ถ์์ ์ํด ethyl acetate์ ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ \(3:1\)๋ก ํผํฉํ์ฌ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ ํ, anhydrous \( \mathrm{MgSO}_{4} \)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์๋ถ์ ์ ๊ฑฐํ๊ณ \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๊ฐ์ ๋์ถํ์๋ค. ์ ๋์ฒดํ๋ฅผ ์ํด \( 50 \mu l \) ์ pyridine๊ณผ \( 100 \mu l \) ์ BSTFA(N, O-Bis(trimethylsilyl, TMS) trifluoroacetamide)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ \( 70^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \(60\)๋ถ ๋์ ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ๋ฐ์์ด ์๋ฃ๋ ์ํ์ \( 0.22 \mu \mathrm{m} \) micro centrifuge filter๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ๋ฆฌํ ํ ๋ถ์์ ์ํํ์๋ค. GC-MS(5975C, Agillent)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์์ผ๋ฉฐ, column์ \( \mathrm{HP}-5 \mathrm{MS}(30 \mathrm{~m} \times 0.25 \mathrm{~mm} \), \( 0.25 \mathrm{um}) \), ์ด๋์์ \( \mathrm{He}(\mathrm{gas}) \), split ratio๋ \(20:1\), mass range๋ \( 1.6 \sim 1050 \mathrm{~m} / \mathrm{z} \), ์๋ฃ ์ฃผ์
๋์ \( 1 \mu \ell \) ๋ก ํ์๋ค. ์ฃผ์
๊ตฌ ๋ฐ ๊ฒ์ถ๊ธฐ์ ์จ๋๋ ๊ฐ๊ฐ \( 250^{\circ} \mathrm{C} \) ์ \( 300^{\circ} \mathrm{C} \), ๊ฒ์ถ๊ธฐ๋ flame ionization detector(F\(I\)D)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ค๋ธ์จ๋๋ \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 5 ๋ถ๊ฐ ์ ์งํ ํ \( 5^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \) ์ ์น์จ์๋๋ก \( 250^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์์น์ํจ ํ \( 10^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \) ์ ์น์จ์๋๋ก \( 320^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์์น์์ผฐ๋ค.</p><h2>2.8 ํต๊ณ๋ถ์</h2><p>๋ฐ์ดํฐ์ ์ ์๋ฏธํ ์ฐจ์ด๋ ํต๊ณ ํ๋ก๊ทธ๋จ IBM SPSS Statistics version \(23\) ์ ์ด์ฉํ ์ผ์๋ฐฐ์น ๋ถ์ฐ๋ถ์(One-ay ANOVA)์ผ๋ก ํต๊ณ๋ถ์ ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ชจ๋ ํต๊ณ์น์ ์ ์์์ค์ ์ฌํ๋ถ์(Tukey๋ฒ)์ ํตํด ์ ์์์ค \( 0.05 \) ์์ ๊ฒ์ฆํ์๋ค.</p> | ๋ฐ์ดํฐ ํต๊ณ์ ์ ์์์ค์ ๋ค๋ฃจ๋ ์ฌํ๋ถ์๋ฒ์ ๋ฌด์์ด๋ผ๊ณ ํ๋๊ฐ? |
\( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์ | <h1>๊ณ ์ฐฐ</h1><p>๋ชฉ๋ จ๊ณผ ์๋ฌผ์ ๋ค์ํ ํ์ฑ์ ๋ง์ด ๋ณด๊ณ ๊ฐ ๋์์ผ๋, ๋ชฉ๋ จ๊ณผ ์๋ฌผ์ ๋ด์ค๋ฆฌ๋ก ์๋ ค์ง ์ ์ด๋ ์ค๋์ ๋ถํฐ ๋ค์ํ ์งํ์ ์น๋ฃ์ ์ฌ์ฉ์ด ๋์์ผ๋ ๋
์ฑ ๋ฐ ์์ ์ฑ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋น๊ต์ ์ฐพ์๋ณด๊ธฐ ์ด๋ ต๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์์ ํ ํฌ์ฌ ์ฉ๋ ๋ฒ์๋ฅผ ์ค์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌ ๋
์ฑ์ํ์ ์งํํ์๋ค. ๋
์ฑ์ํ์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ํฌํจํ์ฌ \(1,500\), ๋ฐ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ํฌ์ฌ๊ตฐ์ผ๋ก ์ค์ ํ์๋ค. ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌ ํ, ์ผ๋ฐ์ฆ์, ๋ฌด๊ฒ๋ณํ, ํ๊ตฌ๋ถ์, ํ์ก์ํํ๋ถ์ ๋ฐ ์ฅ๊ธฐ ๋ฌด๊ฒ ์ธก์ ์ ํ์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ์ ํฌํจํ ๋ชจ๋ ํฌ์ฌ ๊ตฐ์์ ์ต๊ณ ๋๋์ธ\( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)๊น์ง์ ๊ฒฝ๊ตฌํฌ์ฌ ์ ์คํ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ์ฌ๋ง๋๋ฌผ์ด๋ ๋ฌผ์ง๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ด์์ฆ์์ ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์๋ค. ์ฒด์ค, ์ฌ๋ฃ์ญ์ทจ๋, ๋ถ๊ฒ ๋ฐ ์ฅ๊ธฐ์ค๋ ๋ฐ ํ์กํ์ ๊ฒ์ฌ์์ ์ญ์ ์ํ๋ฌผ์ง๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋
์ฑํ์ ์๊ฒฌ์ด ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์๋ค. ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ์ด๊ฐ ๋
์ฑํ์ ์ธก๋ฉด์์ ์์ ํ ๋ฌผ์ง์ธ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ์ผ๋ถ ํฌ์ฌ๊ตฐ์์ ํ๊ตฌ๋ถ์ ๋ฐ ํ์ก์ํํ๋ถ์์์ ์ผ๋ถ ํฌ์ฌ๊ตฐ์์ ์งํ์ ๋ณํ๊ฐ ๊ด์ฐฐ๋์์ง๋ง, ์ด๋ ์ ์๋ฒ์ ๋ด์์์ ๋ณํ๋ก ๊ฐ์ฃผ๋์ด ์ง๊ณ ๋ค๋ฅธ ์์ํ์ ๋ณํ์ ์ํฅ์ ์ฃผ์ง ์์์ผ๋ฏ๋ก ๋
์ฑํ์ ์๋ฏธ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์๋ค. ์ข
ํฉ์ ์ผ๋ก, ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ \(1,500\) ๋ฐ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)์ ์ฉ๋์ผ๋ก \(4\)์ฃผ๊ฐ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌ ์, ์ํ๋ฌผ์ง๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์น์ฌ์จ ๋ฐ ๋
์ฑํ์ ์ธ ๋ณํ๊ฐ ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์์ผ๋ฏ๋ก ๋ฌด๋
์ฑ๋์ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์์ด๋ฉฐ, ๋
์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ํ์ ์ฅ๊ธฐ๋ ์์์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์ดํ์ \(13\)์ฃผ ์ด์์ ์ฅ๊ธฐ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌํฌ์ฌ ๋
์ฑ์ํ์ ์ต๊ณ ์ฉ๋์ ์ค์ ํ ๋ ์ฉ๋ ์ค์ ๊ธฐ์ค์ ์ฐธ๊ณ ์๋ฃ ๋ฐ ์ ์ด์ ๊ณผํ์ ์ธ ์์ ์ฑ ๊ธฐ์ด์๋ฃ๋ก ํ์ฉ๋ ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ง์ ์ฝ๋ฆฌํ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์
์ฆ๋๊ณ ์์ ํ๋ค๊ณ ์ธ์ ๋๋ ์์ฝ์ ๋ฅผ ํฌํจํ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์ค๋ซ๋์ ์ฌ์ฉ๋์ด ์๋ค. ๋ค๋ง ์์ฝ์ ๋ก ์ฌ์ฉ ๋๋ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์์ ์ฑ ๋ฑ ๋ถ์์ฉ์ ๋ช
ํํ๊ฒ ํ์ธ๋์ง ์์๋ค. ์ด๋ฒ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ ์ ํต์ฆ, ๋น์ผ, ํ๋ ด ์น๋ฃ์ ์ฌ์ฉ๋๋ ์ ์ด์ ์์ ์ฑ ํ๊ฐ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ SD ๋ซ๋ ๋๋ฌผ๋ชจ๋ธ์ ์ด์ฉํ์ฌ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ์ฉ๋ ๊ฒฐ์ ๋
์ฑ์ํ์ผ๋ก ์ ์ด์ ๋
์ฑํ๊ฐ๋ฅผ ์ํํ์๋ค. ์์ปท๊ณผ ์์ปท SD ๋ซ๋์ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ \(28\)์ผ ๋์ \(1,500\), \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)์ ๋๋๋ก ํ๋ฃจ \(1\)ํ ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌํ์๋ค. ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ ์ฑ ํ๊ฐ๋ ์ผ๋ฐ์ฆ์๊ด์ฐฐ, ์ฒด์ค ๋ฐ ์ฌ๋ฃ์ญ์ทจ๋ ์ธก์ , ํ๊ตฌ ๋ฐ ํ์ก์ํํ ๋ถ์, ๋ถ๊ฒ์๊ฒฌ ๊ด์ฐฐ ๋ฐ ์๋์ ์ฅ๊ธฐ๋ฌด๊ฒ ์ธก์ ์ผ๋ก ํ๋จํ์์ผ๋ฉฐ ์คํ๊ธฐ๊ฐ๋์ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ์ฌ๋ก ๋
์ฑ ๊ด๋ จ ์ ์๋ฏธํ ๋ณํ๋ ๋ํ๋์ง ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ด๋ฌํ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ์ฉ๋ ๊ฒฐ์ ๋
์ฑ์ํ์์ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ด ๋
์ฑ ๋ฑ ๋ถ์์ฉ์ ๋ํ๋์ง ์์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋
์ฑ์ด ๋ํ๋์ง ์๋ ์ต๋๋ฌด๋
์ฑ๋์ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์์ผ๋ก ์ถ์ ๋์๋ค.</p> | ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ ์ฑ ํ๊ฐ๊ธฐ์ค์ ์ผ๋ฐ์ฆ์๊ด์ฐฐ๋ก๋ง ํ๊ฐํ๋๊ฐ? |
\( 10 \% \) ํฉ์ฐ | <p>ํํฉ๋ฌผ 3 (yellow powder)์ TLC์ ์ ๊ฐ์ํจ ํ, \( 10 \% \) ํฉ์ฐ์ ๋ถ๋ฌดํ๊ณ ๊ฐ์ดํ์ ๋ ๋
ธ๋์์ผ๋ก ๋ฐ์๋์๋ค. EI/MS์์ \( m / z 354[\mathrm{M}]^{+} \)์ ๋ถ์์ด์จ peak๊ฐ ๊ด์ธก๋์ด ๋ถ์๋์ \(354\)๋ก ๊ฒฐ์ ํ์๋ค. IR ์คํํธ๋ผ์ผ๋ก๋ถํฐ ์์ฐ๊ธฐ \( \left(3370 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ carboxyl๊ธฐ \( \left(1725 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), ๊ณต์ญ ester \( \left(1666 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), ์ด์ค๊ฒฐํฉ \( \left(1650 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ ํ์ธํ์๋ค. \( { }^{1} \mathrm{H}-\mathrm{NMR}\left(400 \mathrm{MHz}, \mathrm{D}_{2} \mathrm{O}\right) \) ๊ณผ \( { }^{13} \mathrm{C}-\mathrm{NMR}(100 \mathrm{MHz} \) \( \mathrm{D}_{2} \mathrm{O} \) ) ์คํํธ๋ผ์์ ํํฉ๋ฌผ \(2\)์ ๋งค์ฐ ๋น์ทํ ์์์ signal์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ์ฐ์๊ฐ ์นํ๋ ์์ญ์์ oxygenated methine proton signal \( \left(\delta_{\mathrm{H}} 4.79,1 \mathrm{H}, \mathrm{dd}, \quad J=8.8,3.2 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-4\right) \) ์ chemial shift ๊ฐ์ด esterification ํจ๊ณผ์ ์ํ์ฌ ์ ์์ฅ์ผ๋ก shift๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํํฉ๋ฌผ 3์ quinic acid์ \(4\)๋ฒ์์น์ caffeic acid๊ฐ ๊ฒฐํฉํ ํํฉ๋ฌผ \(2\) ๋ฒ์ ๊ตฌ์กฐ ์ด์ฑ์ง์ฒด์์ ํ์ธํ์๊ณ , ์ด๋ฅผ ํ ๋๋ก ๋ฌธํ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ cryptochlorogenic acid( \(3 \)) ๋ก ๊ตฌ์กฐ ๋์ ํ์๋ค.</p><p>ํํฉ๋ฌผ 4 (yellow needles)๋ TLC์ ์ ๊ฐ์ํจ ํ, \( 10 \% \) ํฉ์ฐ์ ๋ถ๋ฌดํ๊ณ ๊ฐ์ดํ์ ๋ ๋
ธ๋์์ผ๋ก ๋ฐ์๋์๋ค. \( \mathrm{EI} / \mathrm{MS} \) ์์ \( m / z 610[\mathrm{M}]^{+} \)์ ๋ถ์์ด์จ peak ๊ฐ ๊ด์ธก๋์ด ๋ถ์๋์ \(610\) ์ผ๋ก ๊ฒฐ์ ํ์๋ค. IR ์คํํธ๋ผ์ผ๋ก๋ถํฐ ์์ฐ๊ธฐ \( \left(3380 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ ๊ณต์ญ ketone๊ธฐ \( \left(1650 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), ์ด์ค๊ฒฐํฉ \( \left(1610 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ ํ์ธํ์๋ค. \( { }^{1} \mathrm{H}- \) NMR, (\( 400 \mathrm{MH} \mathrm{z} \),\( \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD} \), \( \left.\delta_{H}\right) \) ์คํํธ๋ผ์ ์ ์์ฅ ์์ญ์์ \(4\)๊ฐ์ olefin methine proton signal๋ก๋ถํฐ para-์ด์นํ ๋ฒค์ ๋ง์ด ํ๋ ์กด์ฌํจ์ ์ ์ ์์๊ณ , \(2\) ๊ฐ์ olefin methine proton signal ์ด ๊ด์ธก๋์ด long range coupling \( \left(J^{4}\right) \) ํ๋ \( 1,2,3,5 \)-์ฌ์นํ ๋ฒค์ ๋ง์ด ํ๋ ์กด์ฌํจ์ ์ ์ ์์๋ค. ๋ํ ๋น๋ถ์์ ์ ๋ํ \(2\)๊ฐ์ hemiacetal proton ์ด ๊ด์ธก๋์์ผ๋ฉฐ, \(8\)๊ฐ์ oxygenated methine proton signal ๋ฐ \(2\) ๊ฐ์ oxygenated methylene proton signal ์ด ์ค์ฒฉ๋์ด ๊ด์ธก๋์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํด flavonol diglycoside์์ ์์ํ ์ ์์๋ค. \( { }^{13} \mathrm{C}-\mathrm{NMR} \) ๋ฐ DEPT์คํํธ๋ผ์์ ์ด \(27\) ๊ฐ์ carbon signal๊ณผ ๋ค์ค๋๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ํ์ธํ์ฌ flavonol ๊ณจ๊ฒฉ์ hexose ๋ ๋ถ์๊ฐ ๊ฒฐํฉํ ํํฉ๋ฌผ์์ ํ์ธํ์๋ค. ์ ์์ฅ ์์ญ์์ \(1\) ๊ฐ์ ๊ณต์ญ ketone carbon signal \(6 \) ๊ฐ์ oxygenated olefin quaternary carbon signal , \( 6 \)๊ฐ์ olefin methin carbon signal, \(2 \)๊ฐ์ olefin quaternary carbon signal, \(6 \) ๊ฐ์ olefin methin carbon signal ์ด ๊ด์ธก๋์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํ์ฌ aglycone์ด kaempferol์์ ํ์ธํ์๋ค. ๋น์ผ๋ก๋ถํฐ ์ ๋ํ \( 2 \)๊ฐ์ hemiacetal carbon signal , \( 8 \)๊ฐ์ oxygenated methine carbon signal \(2\)๊ฐ์ oxygenated methylene carbon signal ์ chemical shift ๊ฐ์ผ๋ก๋ถํฐ ๊ฒฐํฉ๋ ๋น์ด ๊ฐ๊ฐ \( \beta \)-galactopyranose์ \( \beta \)-glucopyranose๋ก ํ๋ช
๋์๋ค. \( \beta \)-Galactopyranose์ carbon signal์ด ์ ์์ฅ์ผ๋ก glycosidation shift๋์ด ๊ด์ธก๋จ์ ๋ฐ๋ผ ๋ง๋จ glucose ๊ฐ galactose์ \(2\) ๋ฒ ์์น์ ๊ฒฐํฉํ ๊ฒ์ผ๋ก ์์ํ์๋ค. gHMBC ์คํํธ๋ผ์์ ๋ง๋จ glucose์ hemiacetal proton signal ์ด galactose์ \( 2 \)๋ฒ oxygenated methine carbin signal ๊ณผ cross-peak๋ฅผ ๋ณด์ด๊ณ , galactose์ hemiacetal proton signal ์ด kaempferol์ \(3\)๋ฒ oxygenated olefin quaternary carbon signal ๊ณผ cross-peak๋ฅผ ๋ณด์ฌ ๊ฐ ๋น์ ๊ฒฐํฉ ์์น๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ํ ๋๋ก ๋ฌธํ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ panasenoside๋ก ๊ตฌ์กฐ ๋์ ํ์๋ค.</p><p>ํํฉ๋ฌผ \( 3 \) ๊ณผ \( 4 \) ๋ ๊ฐ์ง ์์์๋ ์ด๋ฒ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. ํํฉ๋ฌผ \( 1 \)์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 2 \)๋ ํญ์ฐํ, ํญ์ผ์ฆ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 3 \)์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 4 \)๋ ํญ์ฐํ์ ํญ๋น๋จ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 5 \) ์ ํญ์ข
์ ํ์ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด ๊ฐ์ง ์์ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ณ ๋ถ๊ฐ๊ฐ์น ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ ๋ถ์ฐ๋ฌผ ํ์ฉ ๋ฐ ๋๊ฐ์๋ ์ฆ๋์ ๊ธฐ์ฌ ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋ฉฐ, ์ถํ ์ด์ ํ์ฉ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์ถ์งํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p><h2>์ด ๋ก</h2><p>๊ฐ์ง ์์ผ๋ก๋ถํฐ \(3\)์ข
์ phenylpropanoid, \( 1 \)์ข
์ flavonoid glycoside, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ \( 1 \)์ข
์ norsesquiterpenoid glycoside ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋์ ํ์๋ค. ๊ฐ์ง ์์ \( 80 \% \mathrm{MeOH} \) ๋ก ์ถ์ถํ์์ผ๋ฉฐ, ์ป์ด์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( n \)-hexane, \( \mathrm{EtOAc} \), \( n-\mathrm{BuOH} \) ๋ฐ ๋ฌผ ์ธต์ผ๋ก ๊ณํต ๋ถํ์ ์ค์ํ์๋ค. ์ด ์ค \( n-\mathrm{BuOH} \) ๋ถํ์ ๋ํ์ฌ \( \mathrm{SiO}_{2}\), ODS ๋ฐ Sephadex LH-\( 20 \) column chromatography๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ค์ํ์ฌ \( 5 \)์ข
์ ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ, ์ ์ ํ์๋ค. Nuclear magnetic resonance, infrared spectroscopy ๋ฐ mass spectrometry์ spectroscopic data๋ฅผ ํด์ํ์ฌ ์ด ํํฉ๋ฌผ๋ค์ caffeic acid (\( 1 \)), chlorogenic acid (\( 2 \)), cryptochlorogenic acid (\( 3 \)), panasenoside (\( 4 \)), ๋ฐ (\( 6 \) R, \( 7 \) E, \( 9 \) R)-\( 4,7 \) -megastigmadien-\( 3 \)-one-\( 9 \)- \( \beta \)-D-glucopyranoside ๋ก ๊ฐ๊ฐ ๋์ ํ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํํฉ๋ฌผ \( 3 \) ๊ณผ \( 4 \) ๋ ๊ฐ์ง ์์์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌ, ๋์ ํ์๋ค.</p> | ํํฉ๋ฌผ 4(yellow needles)์ \( { }^{1} \mathrm{H}- \) NMR, (\( 400 \mathrm{MH} \mathrm{z} \),\( \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD} \), \( \left.\delta_{H}\right) \)์คํํธ๋ผ์ ์ ์์ฅ ์์ญ์์ \(4\)๊ฐ์ olefin methine proton signal๋ก ๋ถํฐ ์ด๋ค ๊ฒ์ด ํ๋ ์ด์ ์กด์ฌํจ์ ์ ์ ์๋ ๋ฌผ์ง์ธ๊ฐ์? |
๊ทผ๊ฒฝ | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์ฒ๊ถ์ ๊ทผ๊ฒฝ์ EeOH์์ฉ์ก์ผ๋ก ์ถ์ถํ์์ผ๋ฉฐ, ์ป์ด์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฉ๋งค๊ณํต๋ถํ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ EtOAc ๋ถํ, \( n \)-BuOH ๋ถํ ๋ฐ ๋ฌผ ๋ถํ์ผ๋ก ๋๋์๋ค. EtOAc ๋ถํ๊ณผ \( n \)-BuOH ๋ถํ์ ๋ํ์ฌ silica gel, octadecyl silica gel ๋ฐ Sephadex LH-20์ ์ ์ง์์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์ฌ ์นผ๋ผํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ํํ ๊ฒฐ๊ณผ 5์ข
์ lipid๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. 5์ข
ํํฉ๋ฌผ์ IR, MS ๋ฐ NMR ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ํด์ํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ methyl linoleate (1), linoleic aicd (2) 6-linoleoyl- \( \alpha \)-D-glucopyranosyl \( \beta \)-D-fructofuranoside (3), 1-linolenoyl-3-( \( \alpha \)-D-galactopyranosyl (1 \(\rightarrow\)6)-\(\beta \)-D-galactopyranosyl) glycerol (4) ๋ฐ 1-linoleoyl-3-( \( \alpha \)-D-galactopyranosyl (1 \(\rightarrow\)6)- \( \beta \)-D-galactopyranosyl) glycerol (5)๋ก ๊ตฌ์กฐ๋์ ํ์๋ค, ํํฉ๋ฌผ 1๊ณผ 3-5๋ ์ฒ๊ถ์์๋ ์ด๋ฒ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฒ์ ๋ถ๋ฆฌ๋์๋ค. ๋ํ ํํฉ๋ฌผ 1๊ณผ 2์ ๊ฒฝ์ฐ NMR ๋ฐ์ดํฐ๊ฐ ์์ ํ์ง ์๊ฑฐ๋, ๋ฌธํ์ ๋ฐ๋ผ ์๋ก ๋ค๋ฅด๊ฒ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ผ๋, ์ด๋ฒ์ 2-D NMR ๋ฑ์ ์์ธํ ๊ฒํ ํ์ฌ ๋ชจ๋ ํ์ ๋ฐ ์์์ ๋ํ ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ํ์คํ๊ฒ ๋์ ํ์๋ค. Sucrose์ ์ง๋ฐฉ์ฐ ๋ณตํฉ์ฒด์ธ ํํฉ๋ฌผ 3๊ณผ digalactosyl monoglyceride์ธ ํํฉ๋ฌผ 4์ 5๋ ํ์ฌ๊น์ง ์ฒ์ฐ์์ ๋งค์ฐ ๋๋ฌผ๊ฒ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ๋ณด๊ณ ๋ ์ง์งํํฉ๋ฌผ๋ค์ ๋ฉด์ญ์ฆ๊ฐ, ํญ์ํ์ฑ ๋ฑ์ ํตํด, ์ฒ๊ถ ๊ทผ๊ฒฝ์ ๋ค์ํ ์ฝ๋ฆฌํ์ฑ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ธฐ๋ํ ์ ์๋ค.</p> | ํํฉ๋ฌผ 4์ 5๋ ํ์ฌ๊น์ง ์ฒ์ฐ์์ ์ฝ๊ฒ ๊ตฌํ ์ ์๋๊ฐ? |
(\( 40 \), \(50\), \(60^{\circ} \mathrm{C} \)) | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์๊ธ์น์ fumaric acid์ mild heat์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ํตํด ๋ณ์์ฑ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ์ดํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ท๋ช
ํ๊ณ ์ ์๊ธ์น์ E. coli O\(157\):H\( 7\), L. monocytogenes๋ฅผ ์ ์ข
ํ ํ ๊ฐ ๋จ์ผ์ฒ๋ฆฌ ํ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. Fumaric acid \( (0.1\), \(0.3\), \(0.5 \%) \)์ mild heat (\( 40 \), \(50\), \(60^{\circ} \mathrm{C} \))์ ๊ฐ ๋จ์ผ์ฒ๋ฆฌ ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก, ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ์ํ fumaric acid์ ์ต์ ๋๋๋ \( 0.5 \% \), mild heat ์ฒ๋ฆฌ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \( 5 \mathrm{~min} \)์ผ๋ก ์ ์ ํ์๊ณ , ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ ์ L. monocytogenes, E. coli O\(157\):H\( 7\)์ ์๋ ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋นํด ๊ฐ๊ฐ \( 2.53\), \(2.62 \mathrm{~log} \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \) ๊ฐ์ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ ์ ํ ์๊ธ์น์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ ํ \( 4^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(12 \)์ผ๊ฐ ์ ์ฅํ๋ฉด์ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ๊ฐ์ ๋ฐ ํ์ง ๋ณํ๋ฅผ ์กฐ์ฌ ํ์๋ค. ์๊ธ์น์ ์ด๊ธฐ ๋ฏธ์๋ฌผ ์์ ์์ด์ ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋น๊ตํ์ฌ, ๋ณํฉ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์์ ์ด ํธ๊ธฐ์ฑ ๊ท ์ \( 2.77 \log \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \) ๊ฐ์์์ผฐ๋ค. ํนํ, ์ ์ฅ \(12 \)์ผ ํ ๋ณํฉ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์ ์ด ํธ๊ธฐ์ฑ ๊ท ์๋ \( 4.84 \log \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \)์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋น๊ตํ์ฌ \( 1.82 \log \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \)์ ๊ฐ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ก๋ค. ๋ํ ์๊ธ์น์ ์ ์ฅ ์ค Hunter ์๋ ๊ฐ ๋ฐ ๋นํ ๋ฏผ C ํจ๋์ ์์ด์ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ ๊ฐ์ ์ ์์ ์ธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ, fumaric acid์ mild heat์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ๊ฐ ์๊ธ์น์ ๋ฏธ์๋ฌผํ์ ์์ ์ฑ ์ ์ง์ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ฒ๋ฆฌ๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค.</p> | ์ ์ ํ ์๊ธ์น์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ ํ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ๊ฐ์ ๋ฐ ํ์ง๋ณํ๋ฅผ ํ์ธํ ๊ฒ์ ๋ฉฐ์น ์ ์ฅํ ํ์ธ๊ฐ? |
์ฐธ์ง๋๊ธฐ๊ณผ | <h1>์ ๋ก </h1><p>๊ณ ๋์ ์ฐ์
ํ๋ก ์ธํ์ฌ ์ฌํ๊ฐ ๋์ฑ ๋ฐ์ ํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ธ๋ฅ์ ์ถ์ ๋ํ ์ง์ ์์ค์ด ๋์์ง๊ณ ์์ผ๋, ๊ทธ๋ก ์ธํด ์ง๊ตฌ ์จ๋ํ๊ฐ ๊ฐ์ํ๋๋ฉด์ ๊ฐ์ข
ํด์ถฉ ๋ฐ ๋ณ์๊ท ์ด ์ ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ํ์ฐ๋๊ณ ์๋ ์ถ์ธ์ด๋ค. ์ด๋ค์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ํฉ์ฑ์ด์ถฉ์ ๋ฐ ์ด๊ท ์ ๊ฐ ๊ฐ๋ฐ๋์ด ์์ผ๋, ์ํ๊ณ์ ๋ํ ์๋ฅ์ฑ ๋ฐ ํด์ถฉ์ ๋ํ ์ ํญ์ฑ ๋ฐํ ๋ฑ ๋ถํ์ํ ๋ถ์์ฉ์ด ๋ณด๊ณ ๋๋ฉด์ ์ด๋ฅผ ๋์ฒดํ ๋ฐฉ์ ์ ๋ต์ผ๋ก์ ์๋ฌผ์ฒด ์ ๋ ํํฉ๋ฌผ์ ๋ํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ด ์ฃผ๋ชฉ ๋ฐ๊ณ ์๋ค. ์๋ฌผ์ ์ค๋ ์๊ฐ ์งํ๋ฅผ ๊ฑฐ๋ญํ๋ฉด์ ์ธ๋ถ ํ๊ฒฝ์ผ๋ก๋ถํฐ ์ค์ค๋ก๋ฅผ ๋ณดํธํ๊ธฐ ์ํ ๊ธฐ์์ผ๋ก ๋ค์ํ ์ด์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ์์ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ์๋ฌผ์ ๊ณ ์ ํ ์ฑ์ง๊ณผ ๋
ํนํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ์ง๋๊ฒ ๋์๋ค. ์ด๋ฌํ ์๋ฌผ์ฒด์ ์ด์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ ์ค์ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ฌผ์ง์ ๋๋ถ๋ถ ํ๋ฐ์ฑ์ด ๊ฐํ ํฐํ๋
ธ์ด๋ ๊ณ์ด ๋ฌผ์ง๋ก, ๋ค์ํ ํด์ถฉ์ ๋ํ์ฌ ์ ์ธ, ๊ธฐํผ, ์ญ์ ์ ํด, ํฅ๋ถ ๋ฐ ์ด์ถฉํจ๊ณผ ๋ฑ์ ์ผ์ผํค๋ฉฐ, ๋ํ ๊ฐ์ข
๋ณ์์ฑ ์ธ๊ท ๋ฐ ๊ท ๋ฅ์ ๋ํ์ฌ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ธ๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์๋ฌผ์์ ์ ๋ํ ์ด์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ๊ฐ์ข
์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฐ ์ด๋ค์ ์ด์ฉํ๋ ค๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ ์งํ ์ค์ด๋ค.</p><p>์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ(Haemaphysalis longicornis)๋ ์ฐธ์ง๋๊ธฐ๊ณผ(Ixodidae)์ ์ผ์ข
์ผ๋ก ์ฃผ๋ก ๋์์์์ ์ค์คํธ๋ ์ผ๋ฆฌ์์์ ๋ฐ๊ฒฌ๋๋ ํกํ์ฑ ์ง๋๊ธฐ์ด๋ค. ์ด๋ ๋ํ์ ์ธ ์ธ์๊ณตํต๊ฐ์ผ๋ณ ๋งค๊ฐ ์ง๋๊ธฐ๋ก์ ์ฏ์ฏ๊ฐ๋ฌด์์ฆ์ ์ ๋ฐํ๋ ๋ฆฌ์ผ์ฐจ ๋ฐ ์ค์ฆ์ด์ฑํ์ํ๊ฐ์์ฆํ๊ตฐ(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS) ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๋ฑ์ ์ธ๊ฐ์๊ฒ ์ ์ผ์์ผ ์น๋ช
์ ์ธ ํผํด๋ฅผ ์ผ์ผํจ๋ค. ํนํ SFTS๋ \( 2012 \) ๋
์ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์์ ์ฒซ ๊ฐ์ผ ์ฌ๋ก๊ฐ ๋ณด๊ณ ๋์์ผ๋ฉฐ, ์ฝ \( 30 \% \)์ ๋ฌํ๋ ์น์ฌ์จ์ ๋ณด์ด๊ณ ์์ด์ ํฐ ๋ฌธ์ ๊ฐ ๋๊ณ ์๋ค. ์ ์ฅ์ํ์ง๋๊ธฐ์ ์ผ์ข
์ธ ๊ธดํธ๊ฐ๋ฃจ์์ (Tyrophagus putrescentiae)๋ ์ ์ฅ์ค์ธ ๊ณก๋ฌผ์์ ์ฝ๊ฒ ๋ฐ์ํ๋ฉฐ, ์ต๋๊ฐ ๋ฎ์ ํ๊ฒฝ์์๋ ์ฝ๊ฒ ๊ฒฌ๋๊ณ ์ต์ ์์ก์จ๋์ ๋ฒ์๊ฐ ๋์ด ๋ฐฉ์ ์ ํฐ ์ด๋ ค์์ ๊ฒช๊ณ ์๋ ํด์ถฉ์ด๋ค. ์ด๋ค์ ๊ณก๋ฌผ์๋ง ํ์ ํ์ง ์๊ณ ๊ณ ์ง๋ฐฉ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ํจ์ ํ ํ, ์น์ฆ ๋ฐ ๊ฒฌ๊ณผ๋ฅ ๋ฑ์์๋ ๋ฐ์ํ๋ฉฐ, ์ ์ฅ์ํ ๊ด๋ จ ์ข
์ฌ์์ ๊ฐ์ข
์ง๋ณ์ ์ผ์ผํจ๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์ด๋ค์ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํ ํ์กดํ๋ ํฉ์ฑ ์ด๋น์ ๊ฐ ๋์ ์๋ฅ์ฑ์ผ๋ก ์ธํ์ฌ ๊ด๋ จ์
๊ณ ์ข
์ฌ์ ๋ฐ ์๋น์๋ค์ ์์ ์ฑ์ ๋ํ ๋ฌธ์ ๊ฐ ์ ๊ธฐ๋จ์ ๋ฐ๋ผ ์ด๋ฅผ ๋์ฒดํ ์์ ํ ๋ฐฉ์ ๋ฒ ๋ง๋ จ์ด ์๊ธํ ์ค์ ์ด๋ค.</p><p>์ํ์ ์ญ์ทจํ๋ ๊ณผ์ ์์ ๋ค์ํ ๋ณ์๊ท ์ด ์ฒด๋ด๋ก ์ ์
๋ ์ ์๋๋ฐ, Bacillus, Listeria, Salmonella ๋ฐ Staphylococcus์ ๊ฐ์ ๊ท ๋ค์ ์์ค๋
, ํจํ์ฆ ๋ฑ์ ์ง๋ณ์ ์ผ์ผํค๋ฉฐ, ๋๋ก๋ ์ฌ๋์ ์ฃฝ์์ ์ด๋ฅด๊ฒ ํ๋ค. ์์ค๋
๊ท ์ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ๊ฐ๊ณต์ก์์์ฐํ๋ ๊ณผ์ ์์ ์ค์ผ๋๋ฉฐ, ์์ฌ๋ฃ์ ์๋ชป๋ ๋ณด๊ด ๋ฐ ์ทจ๊ธ์ผ๋ก ์ธํด ๋ฐ์ํ๊ธฐ๋ ํ๋ค.</p><p>๊ธธ์ด๊ทผ(Valeriana officinalis)์ ์ค๊ตญ์์ ์ฝ์ฉ์๋ฌผ๋ก ์ฐ์ด๋๋งํ๋ฆฌ๊ณผ(Valeriaceae)์ ๋ค๋
์ ์๋ฌผ๋ก ์ฃผ๋ก ๋ฟ๋ฆฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ๋ค. ๊ธธ์ด๊ทผ์ ์ค์ถ์ ๊ฒฝ๊ณ๋ฅผ ์์ ์ํค๋ ๊ธฐ๋ฅ์ด ์์ด ์ ๊ฒฝ์์ ์ ๋ฐ ํญ๊ฒฝ๋ จ์ ๋ก ์ฐ์ด๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์๋ฉด์ ์ ๋ํ๋ ์๋ฆฌํ์ฑ๋ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์ด๋ฌํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ด ๋ฐํ์ ธ ์์์๋ ๋ถ๊ตฌํ๊ณ , ๊ธธ์ด๊ทผ์ ํด์ถฉ ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ํ ์ด์ถฉํ์ฑ ๋ฐ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํด์๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ถ์กฑํ ์ค์ ์ด๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ธธ์ด๊ทผ์ ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ ๋ฐ ๊ธดํธ๊ฐ๋ฃจ์์ ์ ๋ํ ์ด๋นํ์ฑ๊ณผ ์์ค๋
๊ท ์ ๋ํ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ์์๋ณด๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> | ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ์ ๊ณผ๋ ๋ฌด์์ผ๊น์? |
YES | <h1>๊ฒฐ ๊ณผ</h1><h2>3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง๋ฐฉ์์ฑ๊ณผ ๋น ํก์ ์ฆ๊ฐํจ๊ณผ</h2><p>LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ด 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์ ์ธํฌ์ฑ์ฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๋
์ฑ์ \( 125 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋๊น์ง๋ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ธํฌ ์์กด์จ์ด ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์๋ ์ธํฌ๋
์ฑ์ด ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig.1A). LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ \( (100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \)์ ๋น ํก์ ์ฆ๊ฐํจ๊ณผ๋ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ๋น ์ญ์ทจ๋ฅ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ ์์ฑ ๋์กฐ๋ฌผ์ง troglitazone๊ณผ pinitol ์ฑ๋ถ์ ๋น ์ญ์ทจ ํจ๊ณผ๋ณด๋ค๋ ๋ฎ์ ์์ค์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. 1B). LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ(\(100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) ์ ์ง๋ฐฉ์ถ์ ์ ๋๋ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํ์ฌ ์ ์ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์๊ณ , ์์ฑ ๋์กฐ๋ฌผ์ง์ธ troglitazone๊ณผ pinitol ์ฑ๋ถ๋ณด๋ค๋ ์์นํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig. 1C, D).</p><h2>3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ ์ฌํจ๊ณผ</h2><p>LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ ์ฌํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ ๊ตฌ์ธํฌ๋ฅผ ์ง๋ฐฉ์ธํฌ๋ก ๋ถํ์ ๋ ํ๋ฉด์ ์ธ์๋ฆฐ์ ์ฒ๋ฆฌ ๋๋ ๋น์ฒ๋ฆฌ ์กฐ๊ฑด์์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ์ง๋ฐฉ์ธํฌ๋ก ๋ถํ์ ๋์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ฒ๋ฆฌ ์กฐ๊ฑด์ ์ธ์๋ฆฐ ๋น์ฒ๋ฆฌ ์กฐ๊ฑด์ ๋นํด ์ง๋ฐฉ์์ฑ ์ ๋๊ฐ ํ์ ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค(Fig. 2A, B). ๋ํ, ์ธ์๋ฆฐ ์ฒจ๊ฐ ๋๋ ๋น์ฒจ๊ฐ ์กฐ๊ฑด ๋ชจ๋์์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง๋ฐฉ์์ฑ ์ ๋๊ฐ ํต๊ณํ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ๊ฒ ์์นํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig. 2A, B). ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ์ฒ๋ผ ์ ์ฌํ ์์ฉ๊ธฐ์ ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ง ์ฒ์ฐ์์ฌ์์ด ๋๋ ทํ๊ฒ ์ฆ๋ช
๋์๋ค.</p><h2>3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ PPAR \( \gamma \) ์์ฉ ๋ฐ ์ธ์๋ฆฐ ์ ํญ์ฑ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ</h2><p>LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ ์ฌ์์ฉ์ ์ํ ์ธ์๋ฆฐ ๋ฏผ๊ฐ์ฑ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ์ด๋ค. LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด PPAR \( \gamma\), IRS-1, GLUT4 ๋จ๋ฐฑ ๋ฐํ์ ์ ์ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐ์์ผฐ๋ค(Fig. 3A, B). ๊ทธ๋ฌ๋ ์์ฑ ๋์กฐ๋ฌผ์ง pinitol ์ฑ๋ถ์ IRS-1๊ณผ GLUT4 ๋จ๋ฐฑ ๋ฐํ๋ง์ ์ ์ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐ์ํค๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. 3A, B). Pinitol ์ฑ๋ถ์ ์ฝฉ๋ฅ์ ํจ์ ๋ ์ฒ์ฐํ๋น์กฐ์ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก ์ธ์๋ฆฐ ์ ํญ์ฑ์ ๊ฐ์ ์ํค๋ ๋ฌผ์ง๋ก ์ ์๋ ค์ ธ ์๊ธฐ์ troglitazone ๊ฐ์ PPAR \( \gamma \) ์์ฉ์ ์ญํ ์ด ์๋ ์ธ์๋ฆฐ ์ ํธ์ ๋ฌ๊ณ์ ํ์ฑ์ ๊ธฐ์ธํ์ฌ ํ๋น์กฐ์ ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ฌ์ง๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋น ํก์ ์ฆ๊ฐํจ๊ณผ๋ PPAR \( \gamma \) ์์ฉ์ ๋๋ ์ธ์๋ฆฐ ์ ํธ์ ๋ฌ ๊ฒฝ๋ก์ ํ์ฑ๊ณผ ๋ฐ์ ํ๊ฒ ๊ด๋ จ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ฌ์ง๋ค.</p><h2>์ 2ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ \( d b / d b \)๋ง์ฐ์ค์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ด์ ๋ฌผ์ญ์ทจ๋ ๋ฐ ๊ณต๋ณตํ๋น ๋ณํ</h2><p>์ 2ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ์ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ 6์ฃผ๊ฐ ๊ฒฝ๊ตฌํฌ์ฌ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, ์ฒด์ค์ ๋ณํ๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ๋๋ ทํ ๋ณํ๊ฐ ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์๋ค(Fig. 4A). ์คํ๊ธฐ๊ฐ ๋์์ ๊ณต๋ณตํ๋น์ ๋ณํ๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ด๊ธฐ ๊ณต๋ณตํ๋น์ \( 7.8 \pm 22.7 \mathrm{mmol} / \mathrm{L} \) ์์ ํ๋น์ด ์ง์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์คํ ์ข
๋ฃ์์ ์์๋ \( 34.8 \pm 25.9 \mathrm{mmol} / \mathrm{L} \)๋ก ์ฌ๊ฐํ ๊ณ ํ๋น ์ํ๊ฐ ์ง์๋๋๋ฐ ๋ฐํด, LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ ๊ฒฝ์ฐ 1 ์ฃผ์งธ๋ถํฐ ๊ณต๋ณตํ๋น์ด ๊ฐ์ํ์ฌ ์คํ ์ข
๋ฃ์์ ์์๋ \( 27.0 \pm 13.7 \mathrm{mmol} / \mathrm{L} \) ๋ก ๋๋ ทํ๊ฒ ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 4B). ๋ฌผ๊ณผ ์์ด ์ญ์ทจ๋์ 2์ฃผ์งธ๋ถํฐ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ด ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ๋๋ ทํ๊ฒ ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 4C, D).</p><h2>์ 2 ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์ฅ ์ค์ฑ์ง๋ฐฉ๊ณผ ์ด์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋ ๋ณํ</h2><p>ํ์ฅ ์ค์ฑ์ง๋ฐฉ์ ๋๋๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ \( 179.5 \pm 4.82 \mathrm{mg} / \mathrm{dL}, \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ \( 108.67 \pm 5.23 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ ์์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 5A). ํ์ฅ ์ด ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ๋๋์์๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ \( 222 \pm 12.48 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \), LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ \( 141.67 \) \( \pm 3.98 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ์ผ๋ก ๋ํ๋ \( \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํ์ฌ ์ด ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋๋ ์ ์์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 5B).</p><h2>์ 2 ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์ ์ง๋ฐฉ๊ณผ ๊ทผ์ก์กฐ์ง์์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ PPAR \( \gamma \) ์ GLUT4 mRNA ๋ฐํ ํจ๊ณผ</h2><p>2ํ ๋น๋จ๋ณ๋ชจ๋ธ์ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์ ์ง๋ฐฉ๊ณผ ๊ทผ์ก์กฐ์ง์์ ๋น ๋์ฌ์ ๊ด๋ จ๋ PPAR \( \gamma \) ์ GLUT4 mRNA ๋ฐํ ์ ๋๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, \( \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ PPAR \( \gamma \) ์ GLUT4 ์ ์ ์ ๋ฐํ์ด ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค(Fig. 6A, B). ์ธ์๋ฆฐ ์ ํญ์ฑ์ ํน์ง์ ์ธ ์๊ฒฌ์ ๊ฐ์ง \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์์์ \( \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ๋๋น ํญ์์ฑ ์กฐ์ ํจ๊ณผ๋ ๊ทผ์ก๊ณผ ์ง๋ฐฉ์กฐ์ง์ \( \mathrm{PPAR} \gamma \) ํ์ฑ ๋ฐ ๋น ํก์ GLUT4 mRNA ๋ฐํ์ ์กฐ์ ๊ณผ ๋ฐ์ ํ๊ฒ ๊ด๋ จ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค.</p> | ๋น๋จ ์ฅ์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ์ฌํ๋ฉด ์ด ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋์ด ๊ฐ์ํ์ง? |
\(6.50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \) | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ๋ฒ์ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ ๊ณ ์ ๋ฐ ๊ณํผ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ํตํด ๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ, ์ ๋ฐ์ด์์ ๋ฐ ๋ฐฐ์ถ์ข๋๋ฐฉ์ ๋ํ ์ด์ถฉํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฒ์ ํ์๋ค. ๊ณ ์์ ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ด์ถฉ ๋ฐ ์ด๋นํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ, ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด \(30.59 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \) ๋ก ์ฐ์ํ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๊ณํผ์ ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ๋ฒ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ด์ถฉ ๋ฐ ์ด๋นํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ, ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ ๋ฐ ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ๋ฐ์ด์์ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด ๊ฐ๊ฐ 5.96, \(4.64 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \)์ ์ฐ์ํ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ํ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ์์ ๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด \(6.50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \)์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๊ณ ์์ ๊ณํผ์ ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ด์ฉํ ์นํ๊ฒฝ ๋ฐฉ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ค๋ค.</p> | ๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ, ์ ๋ฐ์ด์์ ๋ฐ ๋ฐฐ์ถ์ข๋๋ฐฉ์ ๋ํ ์ด์ถฉํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฒ์ ํ๊ธฐ ์ํด ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ๋ฒ์ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ ์ด๋ค ๋ฌผ์ง์ ์ด์ฉํ์๋๊ฐ? |
green LED | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌํ์ ์ด์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ LED ํ์ฅ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ฃผ๊ด์ฑ ํ๋๋ฐ์์ ์กฐ์ฌํ๊ธฐ ์ํ์ฌ blue \( (470 \pm 10 \mathrm{~nm}) \), green \( (520+5 \mathrm{~nm}) \), yellow \( (590+5 \mathrm{~nm}) \), red \( (625 \pm 10 \mathrm{~nm}) \), UV \( (365 \mathrm{~nm}) \), IR \( (730 \mathrm{~nm}) \) LED๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ด์ฐฐํ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ blue LED์ ๊ฐ์ฅ ์ฐ์ํ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ green LED ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ด ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ฐํ์ผ๋ก ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด๋ถ์ ์ธ๋ถ์์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ ์๋ LED ํธ๋ฉ์ ๊ฐ ํด์ถฉ์ ์ ์ธํ์ฑ์ด ๋ํ๋ blue LED์ green LED ๋ฅผ ์ฅ์ฐฉํด ์คํํ์๋ค. ์ด๋ค์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด ์์ฑ ๋์กฐ๊ตฌ๋ก BLB๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด์์ ์ค์ฆ์คํ์ ์งํํ์๋ค. ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ blue LED ํธ๋ฉ์ผ๋ก \(4\)์ผ๋์ ์คํํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \( 145.8 \) ๋ง๋ฆฌ๊ฐ ํฌํ๋์๊ณ , ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \(248.4\)๋ง๋ฆฌ๊ฐ ํฌํ๋์์ผ๋ฉฐ ์ด๋ ์ธ๋ถ์์ ๋ด๋ถ๋ณด๋ค ์ฝ \( 1.7 \) ๋ฐฐ ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ๋ฐ๋ฉด, ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์๋ BLB์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ ๋ํ ์ ์ธ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \(105.1\)๋ง๋ฆฌ, ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \( 105.5 \) ๋ง๋ฆฌ๋ก blue LED๋ณด๋ค ๋ด๋ถ ์ฝ \( 1.8 \) ๋ฐฐ, ์ธ๋ถ ์ฝ \( 2.4 \) ๋ฐฐ์ ๋ฎ์ ๊ฐ์ฒด์๊ฐ ํฌํ๋์๋ค. ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด ์ฐฝ๊ณ ์์ green LED ํธ๋ฉ์ผ๋ก \(4\) ์ผ๋์ ์คํ์ ์งํํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \( 120.4 \) ๋ง๋ฆฌ, ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \( 199.1 \)๋ง๋ฆฌ๊ฐ ํฌํ๋์ด์ ์ธ๋ถ๊ฐ ๋ด๋ถ๋ณด๋ค ์ฝ \( 1.7 \) ๋ฐฐ ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ๋์กฐ๊ตฌ๋ก ์ฌ์ฉ๋ BLB๋ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \(65.3\)๋ง๋ฆฌ, ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \(94.1\)๋ง๋ฆฌ๋ก ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ๋ํด ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ green LED๋ณด๋ค ๋ด๋ถ ์ฝ \( 1.9 \) ๋ฐฐ, ์ธ๋ถ ์ฝ \( 2.1 \) ๋ฐฐ์ ๋ฎ์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>์ค๋ด๊ฒ์ ์ ์์ด์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ์ฃผ๊ด์ฑ ํ๋๋ฐ์์ ๊ฐ๊ฐ blue LED์ green LED์์ ์ฐ์ํ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ฌ์ผ๋ ์ค์ฆ์คํ์์๋ ๋ฎ์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ์ด๋ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ ์งํ๋ ์ค์ฆ์คํ์ด ์จ๋, ์ต๋, ๋น, ์๋ถ๊ณผ ๊ฐ์ ํ๊ฒฝ์ ์กฐ๊ฑด์ ์ํด ์ํฅ์ ๋ฐ์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๋ํ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์ธ๋ถ ์คํ์ด ๋ด๋ถ ์คํ๋ณด๋ค ์ ์ธํ์ฑ์ด ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ๋ชจ๋ ์ฝ \(1.7\)๋ฐฐ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ์ผ๋ฉฐ, ์ด ํ์์ ๋ด๋ถ ์คํ ์ค์ ๋จน์ด์ ๋ํ ์กฐ๊ฑด์ด ์ ๊ณกํด์ถฉ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์ณ LED ํธ๋ฉ์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๊ฐ์์ํค๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ์์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ blue LED, ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ green LED ํธ๋ฉ์ ๋ํด ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์์ผ๋ฉฐ, ๋จํ์ฅ LED์ ๋ฏผ๊ฐํ๊ฒ ๋ฐ์ํ๋ค๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ(Plodia interpunctella)๊ณผ ์ค์๋ฝ๋ช
๋๋ฐฉ (Cadra cautella)์ด ์ฐฝ๊ณ ์คํ์์ green light trap๊ณผ UV ์ ๋ํ ์ ์ธํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ๋ฉฐ, ์ด์ ๊ฐ์ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋จํ์ฅ LED์ ๋ ๋ฏผ๊ฐํ๊ฒ ๋ฐ์ํ๋ค๋ ๊ฒ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์คํ์ ํตํด blue LED ํธ๋ฉ์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ, green LED ํธ๋ฉ์ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ์ธํ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์์
์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์ด์ฉ๋๋ BLB๋ณด๋ค ์ฐ์ํ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ ๊ณก๋ฌผ ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์ ์นํ๊ฒฝ ํด์ถฉ๋ฐฉ์ ์ ์ ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ธฐ๋ํ๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํ LED ํธ๋ฉ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ ์ด์ฉ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ๊ฐํ๊ธฐ ์ํด ์์
์ ๋์กฐ๊ตฌ BLB ํธ๋ฉ๊ณผ ๋น๊ตํ ์ค์ฆ์คํ์ ํตํ์ฌ ์ ์ธํจ๊ณผ๋ฅผ ๋น๊ตํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ \(4\)์ผ ํ blue LED ํธ๋ฉ์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ, green LED ํธ๋ฉ์ ํ๋๊ณก ๋๋ฐฉ์ ๋ํ์ฌ ๋์กฐ๊ตฌ BLB ํธ๋ฉ๋ณด๋ค ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์ธ๋ถ์์ ์งํํ ์คํ์ ๋ด๋ถ ์คํ๋ณด๋ค ์ฝ \(1.7\)๋ฐฐ ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ฐํ์ผ๋ก blue LED์ green LED ํธ๋ฉ์ด ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ๊ณผ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํ ์นํ๊ฒฝ ์ ๊ณกํด์ถฉ ๋ฐฉ์ ๋ฒ์ผ๋ก ์ ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค.</p> | blue ๋ฐ green LED ํธ๋ฉ์ ์์
์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์ด์ฉ๋๋ BLB๋ณด๋ค ์ ์ธํ๋์ด ์ฐ์ํ๊ฐ? |
์
๋ฃฐ๋ก์ค์ ํค๋ฏธ์
๋ฃฐ๋ก์ค ๋ถํ ํฉ์ฑ์ ์ ํด | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ํฌ์ํ(annual bluegrass, Poa anmua L.)์ Poa์ ์๋ฌผ์ ํฌํจ๋๋ ์ผ๋
์ ๋๋ ์๋
์ ํ๋ณธ๊ณผ ์ก์ด๋ก์ ์ผํฐํค๋ธ๋ฃจ๊ทธ๋์ค๋ ๋ฒคํธ๊ทธ๋์ค์ ๊ฐ์ด ํ์งํ์๋์ ํ๊ฒฝ์ ์ ํน์ฑ์ธ ๋ดํ์ฑ, ๋ด์ต์ฑ, ๋ด์์ฑ, ๋ด๋ด์์ฑ ๋ฐ ๋ด์์ทจ์ฑ ๋ฑ์ด ์ฐ์ํ์ฌ ํ์ด์จ์ด๋ ๋ฌํ์ ์๋๋ก์จ๋ ๋งค์ฐ ์ด์ฉ๊ฐ์น๊ฐ ๋๋ค(Vargas์ Turgeon 2004). ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ฎ์ ์์ฅ ๋์ด, ๋ค์ข
์์ฑ, ๋ฐ์ ์, ์ฒ๊ทผ์ฑ์ ํน์ง์ ๊ฐ์ง๊ณ ์์ด ์๋์ ์ ์ฉ์ฑ๊ณผ ๊ฒฝ๊ด๋ฏธ์ ์ํฅ์ ์ฃผ๊ณ , ์ถ์ ๋ฐ ๊ฐํ๊ธฐ์ ๋ฐฑ์์ ์ด์ญ์ ํ์ฑํ๊ฒ ๋๋ฉด ์๋์ ํฐ์์ด ๋ถ๊ฐ๋์ด ๊ฒฝ๊ด์ ์ข์ง ๋ชปํ๋ฉฐ, ๊ทธ๋ฆฐ์ ๊ฒฝ์ฐ ์๋๋ฐญ ํ๋ฉด์ ์์ฒ ์ ์์ฑ์์ผ ๋ณผ๊ตฌ๋ฆ ๋ฐฉํฅ์ ์
์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ฉฐ(Kane๊ณผ Miller 2003; McCullough ๋ฑ, 2005), ๊ณ ์จ๋ค์ตํ ์กฐ๊ฑด์ ์ทจ์ฝํ์ฌ ํ๊ณ ํ์์ ์ฝํ ๋ฑ์ ๋จ์ ์ด ์์ด ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์์๋ ์ก์ด๋ก ๊ฐ์ฃผํ์ฌ ๋ฐฉ์ ์ ๋์์ด๋ค(Park ๋ฑ, 2006; Park ๋ฑ 2007).</p><p>๊ณจํ๊ทธ๋ฆฐ์ค ์ํฌ์ํ๋ ์ ์ ํ ์ฌ๋ฐฐ๋ฒ๊ณผ paclobutrazol, fluprimidol ๋ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ์๋ฌผ์ฑ์ฅ์กฐ์ ์ ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ฐฉ์ ๊ด๋ฆฌํ ์ ์์ง๋ง, ์ด๋ฌํ ๊ด๋ฆฌ๋ฒ์ ์๋์ ์ํฌ์๋ฌผ์ ๊ฒฝ์๊ด๊ณ์์ ์๋์ ์ ๋ฆฌํ๊ฒ ์์ฉํ๊ฒ ํ์ฌ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ ๋ฐฑ์ฑ์ด ๋์ง ์์ ์ด๋ฌํ ๋ฐฉ์ ๋ฒ์ผ๋ก๋ ์์ ๋ฐฉ์ ๊ฐ ํ๋ค๋ค. ๋ํ, ์๋ฌผ์ ์ฅ์กฐ์ ์ ๋ ์ฌ๋ฌํ์ ๊ฑธ์น ๋ค์ค๋ฐฉ์ ๊ฐ ํ์ํ๊ณ ์ ์ด์ ์ฌ์ฉ์ ์ฝ์ ์ ์ํด ์๋๊น์ง ๊ณ ์ฌํ๋ ๋ฑ์ ์ฝํด ๋ฐ์์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ์ ์ด๋ ค์์ด ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์, ์ํฌ์ํ๋ก๋ถํฐ ๊ทธ๋ฆฐ์ ๋ณดํธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ ํ์ ์ธ ๋ฐฉ์ ๊ฐ ๊ฐ๋ฅํ ์ฝ์ ๊ฐ ํ์ํ๋ค(Park ๋ฑ 2007; Brosnan ๋ฑ, 2013a).</p><p>Methiozolin์ ๋ชฉ์ฐ์ฐ๊ตฌ์์์ ๊ฐ๋ฐํ isoxazoline๊ณ์ ์ ์ด์ ๋ก 2010๋
๊ตญ๋ด์์ ์ํฌ์ํ ๋ฐฉ์ ์ฉ์ผ๋ก ์๋์ ๋ฑ๋ก๋์๋ค. ์ด ๋์ฝ์ \( 125 \mathrm{~g} / \mathrm{ha} \)์ ๋๋๋ก ์ํฌ์ํด, crabgrass๋ฅผ ์๋, ์ผํฐํค ๋ธ๋ฃจ๊ทธ๋์ค, ๋ฒ๋ฎค๋ค ๊ทธ๋์ค์๋ ์ ๋ฐฑ์ ์ผ๋ก ๋ฐ์์ ๋ฐ ์์ก๊ธฐ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ํ ์ ์๋ค. ํนํ, ์ํฌ์ํ์ ๋ํด ํ์ํ ์ ํ์ ๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ธ๋ค(Brosnan ๋ฑ, 2013b; Koo ๋ฑ, 2014).</p><p>ํ์ฌ๊น์ง methiozolin์ ์์ฉ๊ธฐ์์ ์ ํํ ์๋ ค์ ธ ์์ง ์์ง๋ง ์๋ฌผ์ธํฌ๋ฒฝ์ ์ํฉ์ฑ์ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๊ณ , ์ฅ์์ ๋ฟ๋ฆฌ์์ ์
๋ฃฐ๋ก์ค์ ํค๋ฏธ์
๋ฃฐ๋ก์ค ๋ถํ ํฉ์ฑ์ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ค๋ฅธ ์
๋ฃฐ๋ก์ค ํฉ์ฑ ์ ํด์ , ๋ฏธ์๊ด ์ ํด์ , very-long chain ์ง๋ฐฉ์ฐ ํฉ์ฑ์ ํด์ ํ๊ณ ๋ ๋ค๋ฅธ ์์ฉ๊ธฐ์์ ๋ณด์๋ค(Lee ๋ฑ, 2007). Grossman๋ฑ์ ์ดํํฉ๋ฌผ์ด ๊ฐ๊ตฌ๋ฆฌ๋ฐฅ(Lemna paucicostata L.)์์ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค๋ก๋ถํฐ ์ธํฌ๋ง ๋ณดํธ ์์ฉ์ ํ๋ plastoquinone๊ณผ tocopherol ํฉ์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ์๋ tyrosine aminotransferase ์ ํด์ ์ผ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ์๋ค(Grossman ๋ฑ, 2012).</p><p>Methiozolin์ ์ ์ฌ๊ณํต์ ํํฉ๋ฌผ ์ค ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ์ต์ด ์์
ํ ์ฌ๋ก์ธ ๋
ํนํ ๋ฌผ์ง๋ก ํ๋ณธ๊ณผ ์ก์ด์ ๋ํ ๋์ ํ์ฑ๊ณผ ๊ฐ์ข
์๋ฌผ์ ์์ ์ฑ์ ๊ฐ์ง๋ฉฐ, \( \mathrm{LD}_{50} \)์ \( >2000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) b.w.๋ก ๋ฎ์ ๊ธ์ฑ ๊ฒฝ๊ตฌ๋
์ฑ๊ณผ \( 2000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) b.w. ์ด์์ NOAEL (No Observed- Adverse Effect Level) ๊ฐ์ผ๋ก ๋ฎ์ ๋ง์ฑ๋
์ฑ, ํ๊ฒฝ๋ํ ์ธก๋ฉด์์ ์ ๋์ฝ์ผ๋ก ๊ฐ์ถ์ด์ผ ํ ์ ๋งํ ํน์ฑ์ ๋๋ฃจ ๊ฐ์ถ ๋์ฝ์ด๋ค(Koo ๋ฑ, 2010).</p><p>๋์ฝ์ ๊ณจํ์ฅ์ ๋ณํด์ถฉ ๋ฐ ์ก์ด๋ฐฉ์ ๋ฅผ ํตํ ์๋๋ณดํธ์ ์ฃผ๋ณ ์๋ฆผ ๋ฐ ๊ฒฝ๊ด ์๋ฌผ์ ๋ณดํธ์ ํ์๋ถ๊ฐ๊ฒฐํ ์์ฌ๋ก์, ๊ณจํ์ฅ ์๋ ์ฌ์ฉ๋ฑ๋ก ๋์ฝํ๋ชฉ์ ๊ณ์ ์ฆ๊ฐํ์ฌ 2014๋
250ํ๋ชฉ์ผ๋ก์ 2001๋
90ํ๋ชฉ์ ๋นํด ์ฝ 3๋ฐฐ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๋ํ ์ ๊ตญ ๊ณจํ์ฅ์ 2014๋
๋ง ๊ธฐ์ค 503๊ฐ์๋ก 1998๋
120๊ฐ์๋ณด๋ค 419( \% \)์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ ์ด์ ๋ฐ๋ผ ์ ๊ตญ ๊ณจํ์ฅ๋ฉด์ ๋ 1๋ง3์ฒ \(\mathrm{ha}\) ('98๋
)์์ 2๋ง 46,400 \(\mathrm{ha}\) (2014๋
)๋ก \( 357 \% \) ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๊ณจํ์ฅ ๋์ฝ์ฌ์ฉ๋์ ํด๋ง๋ค ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์ ํจ์ฑ๋ถ๋ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก 2008๋
112.6ํค์์ 2014๋
\( 159.3 \)ํค์ผ๋ก \( 141 \% \) ์ฆ๊ฐํ์๋ค(http:/sgis.nier.go.kr).</p><p>๊ณจํ์ฅ์์ ์ก์ด๋ฐฉ์ ๋ฅผ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์ดํฌ๋ ์ ์ด์ ๋ ์๋ฌผ์ฒด์ ๊ฒฝ์ฝ๋ถ์๋ก ํ์๋์ด ์ฝํจ๋ฅผ ๋ํ๋ด๊ฑฐ๋, ์ผ๋ถ๋ ํ ์์ผ๋ก ์ ์
๋์ด ๋ฟ๋ฆฌ๋ฅผ ํตํด ์๋ฌผ์ฒด๋ด๋ก ํก์๋์ด ์ฝํจ๋ฅผ ๋ํ๋ด๊ธฐ๋ ํ์ง๋ง(Im ๋ฑ, 2011; Brosnan ๋ฑ, 2013b), ๊ณผ๋ค์ดํฌ๋๋ ๊ฒฝ์ฐ ์ฃผ๋ณ์ ํ ์๊ณผ ์๊ณํ๊ฒฝ์ ์ค์ผ์ํฌ ์ ์์ผ๋ฉฐ ์ฃผ์์ ๋นํ์ ์๋ฌผ์ฒด์ ์ํด๋ฅผ ๋ํ๋ผ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์๋ค.</p><p>๋ฐ๋ผ์ ํ๊ฒฝ๋ถ์์๋ '๊ณจํ์ฅ์ ๋์ฝ์ฌ์ฉ๋ ๋ฐ ๋์ฝ์๋ฅ๋ ๊ฒ์ฌ ๋ฑ์ ๊ดํ ๊ท์ '์ ๋ฐ๋ผ ๋งค๋
๋ฐ๊ธฐ๋ง๋ค ๊ณจํ์ฅ์ ๋งน-๊ณ ๋
์ฑ๋์ฝ์ ์ฌ์ฉ์ฌ๋ถ์ ๊ณจํ์ฅ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋์ฝ์ฌ์ฉ๋ ๋ฑ์ ์ฒด๊ณ์ ์ผ๋ก ์กฐ์ฌํ๊ณ ์๋ค. ๋ํ ํ ์, ์๋, ์ ์ถ์ ์๋ฃ์ ๋ํด ๋งค๋
2ํ ์ด์ ์ฑ์ทจํ์ฌ ๋งน๋
์ฑ ๋์ฝ 13์ข
, ๊ธฐ๋ณธํญ๋ชฉ 17์ข
, ์ ํํญ๋ชฉ 10์ข
๋ฑ ์ถฉ ๋์ฝ ์๋ฅ๋ ๊ฒ์ฌ๋ฅผ ์ค์ํ๊ณ ์์ง๋ง, ์๋์ ์ฌ์ฉ๋ฑ๋ก๋ ๋์ฝ์ ํญ๋ชฉ๊ณผ ์์ดํ ๋ฉด์ด ์๋ค(MOE 2011).</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์๋์ ์ฌ์ฉ๋ฑ๋ก ๋์ด์์ง๋ง ํ ์, ์๋, ์ ์ถ์์ ๋ํ ์๋ฅ ๋ถ์๋ฐฉ๋ฒ์ ์์ง ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ง ์์ methiozolin์ ๋์์ผ๋ก ์๋ฅ๋ถ์๋ฒ์ ๊ฐ๋ฐํ๊ณ ๊ณจํ์ฅ ๊ทธ๋ฆฐ์ ์ดํฌ๋ ์ฝ์ ์ ์๋, ํ ์ ์ค ์๋ฅ ์์คํน์ฑ์ ๊ตฌ๋ช
ํ๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> | ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? |
tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP) 1, TRP2, microphthalmia associated transcription factor (MITF) | <h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ B16F10 ์ธํฌ์์์ ๋ฏธ๋ฐฑํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฒ์ฏ์ ๋์ tyrosinase ํ์ฑ ์ ํด๋ฅ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ 1,000\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋์์ 42\( \% \) ์ ์ ํด์จ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, B16F10 ์ธํฌ๋ด์ tyrosinase, ๋ฉ๋ผ๋ ์ํฉ์ฑ ์ ํด๋ฅ์ 5\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ 26, 25\( \% \) ์ ์ ํด๋ฅ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฉ๋ผ๋ ์์ฑ ๊ด๋ จ ์ธ์ ์ค ์์ ๋จ๊ณ์ธ cAMP์ PKA์ ๋ฐํ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋๋ ์ ์กด์ ์ผ๋ก ๋ฐํ์์ด ์ค์ด๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ํ ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฏธ๋ฐฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP) 1, TRP2, microphthalmia associated transcription factor (MITF)์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐ ์ ์ ์ ๋ฐํ์์ด ๊ฐ์ํจ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ณธ ์คํ์ ํตํ์ฌ ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด cAMP๋ฅผ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ต์ ํจ์ผ๋ก์จ, PKA์ ํ์ฑ์ ์ ํด ์์ผฐ์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฅผ ํตํด tyrosinase ํ์ฑ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ TRP1, TRP2 ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ MITF ๋ฐํ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ํด ํ๋ค๋ ์ฌ์ค์ ํ์ธํ์ฌ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฏธ๋ฐฑ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์ ์ํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> | ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ค์ ๋ฏธ๋ฐฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ฑ๋ถ 4๊ฐ์ง๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? |
\( \mathrm{MeOH} \) ์ ๋
น์ฌ stock solution์ ๋ง๋ ํ, \( 0-100 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ๋ฒ์ ๋ด์์ 8๊ฐ ๋๋๋ก ํฌ์ํ์ฌ | <h2>๋ถ์๋ฒ ์ ํจ์ฑ ๊ฒ์ฆ</h2><p>ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ \( \mathrm{MeOH} \) ์ ๋
น์ฌ stock solution์ ๋ง๋ ํ, \( 0-100 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ๋ฒ์ ๋ด์์ 8๊ฐ ๋๋๋ก ํฌ์ํ์ฌ ํ์ค์ฉ์ก์ ์ ์กฐํ์๋ค. ์คํ์ ์ค์ฐจ๋ฅผ ์ค์ด๊ณ , ๋ฐ๋ณต์ฑ(repeatability)๊ณผ ์ฌํ์ฑ(reproducibility), ์ ๋ฐ์ฑ(precision)์ ํ๋ณดํ๊ธฐ ์ํด ์ ์กฐํ ํ์ค์ฉ์ก์ UPLC-PDA๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ UV \( 230 \mathrm{~nm} \) ์์ ๊ฐ๊ฐ 3๋ฐ๋ณต ๋ถ์์ ์ค์ํ์๊ณ , ๋๋์ ๋ฐ๋ฅธ ํผํฌ์ ๋ฉด์ ์ ๋จ์ ์ ํํ๊ท๊ณก์ ์ ํํ๋ก ๊ตฌํ์ฌ ๊ฒ๋๊ณก์ ์ ์์ฑํ์๋ค. ์์ฑ๋ ๊ฒ๋๊ณก์ ์ ์ง์ ์ฑ(linearity)์ ๊ฒฐ์ ๊ณ์(coefficient of determination, \( \mathrm{R}^{2} \) ๋ฅผ ํตํ์ฌ ํ๋จํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ฒ์ถํ๊ณ(limit of detection, LOD)์ ์ ๋ํ๊ณ(limit of quantification, LOQ)๋ ๊ฒ๋๊ณก์ ์ ํ๊ท ๊ธฐ์ธ๊ธฐ์ ๊ฒ๋์ ์ ํธ์ ํ์คํธ์ฐจ์ ๊ทผ๊ฑฐํ์ฌ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><h2>ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ํ ์ ์กฐ</h2><p>๊ตญ๋ด ์ ํต์์ฅ์์ ํ๋ณดํ ํ๊ตญ์ฐ ๋ฐํ( 5 ์ข
)๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(8์ข
)์ ์๊ฑดํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ Tube mill (IKA, Staufen, DE)์ ์ด์ฉํ์ฌ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ฉ ์๊ฒ ๋ถ์ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ , \( 94 \% \) ethanol \( (94 \% \mathrm{EtOH} \), \( 100 \mathrm{~mL} \times 3 \) )์ ๊ฐํ ํ, ์ด์ํ ์ถ์ถ๋ฒ(ultrasonication extraction)์ ์ด์ฉํ์ฌ 3ํ ๋ฐ๋ณต ์ถ์ถ, ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ์ธ์ด์ง ์ฌ์ก์ ๊ฐ์ ๋์ถํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ป์ ํ, \( 94 \% \mathrm{EtOH} \) ์ ๋
น์ฌ 50 \( \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ์ ๊ท ์ผํ ๋๋๋ก ์ํ์ ์ ์กฐํ์๋ค.</p><h2>ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ UPLC-PDA ๋ถ์</h2><p>ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ์ \( 94 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ก๋ถํฐ ํ๊ฒ ํ๋ณํํฉ๋ฌผ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด \UPLC์ BEH \(\mathrm{C}_{18}\) (\(2.1 \times 100 \mathrm{~mm}\) , \( 1.7\mathrm{mm}) \) ์นผ๋ผ๊ด๊ณผ PDA ๊ฒ์ถ๊ธฐ๋ฅผ ์ฅ์ฐฉํ๊ณ ์นผ๋ผ์ค๋ธ์ ์จ๋๋ฅผ \(35 { }^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ์ ์งํ์ฌ ๋ถ์์ ์งํํ์๋ค. A ์ฉ๋งค๋ \( 0.1 \% \) formic acid๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฆ๋ฅ์๋ก, B์ฉ๋งค๋ \( 0.1 \% \) formic acid๊ฐ ํฌํจ๋ ACN์ผ๋ก ์ค๋นํ์๋ค. UPLC ์ด๋์ ์กฐ๊ฑด์ 0-1 min \(10 \% \) B, 1-2 min \(50 \% \) B, 2-8 min \(100 \% \) B, 8-10 min \(100 \% \) B, 10- 10.5 min \(10 \% \) B, 10.5-13.0 min \(10 \% \) B๋ฅผ ์ ์ \( 0.4 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \)๋ก ํ๋ ธ์ผ๋ฉฐ, ์๋ฃ๋ \( 5 \mathrm{~mL}\) (\(50 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ฌด์์ 3 ๋ฐ๋ณต๋ถ์์ ์ค์ํ์๋ค.</p><h2>ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ ์ ๋ ๋ฐ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ ๋น๊ต๋ถ์</h2><p>ํ๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(5์ข
)๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(8์ข
)์ ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ ์ ๋ํ๊ณ ๊ทธ ํจ๋์ ์๋ก ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด, UPLC-PDA ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ(UV \( 230 \mathrm{~nm}) \) ์์ ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ ํด๋นํ๋ ํผํฌ ๋ฉด์ ์ ์ ๋ถ์ ํตํด ๊ตฌํ์๋ค. ํผํฌ ๋ฉด์ ๊ฐ์ ๊ฒ๋์์ ๋์
ํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ ์๋ฃ์ ๋ํ ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ ํจ๋์ ์ฐ์ถํ์ฌ ์๋ก ๋น๊ตํ์๊ณ , ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ์ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ์ overlayํ์ฌ ๋น๊ต ๋ถ์ํ์๋ค.</p> | ํ๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(5์ข
)๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(8์ข
)์ ํจ๋์ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด ์ด๋ค ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ฌ์ฉํ๋์? |
\( 27 \% \) | <h2>๊ด ์จ๋ ๋ฐ ๋ณด๊ด ์ฒ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ Saponarin ํจ๋ ๋ถ์</h2><p>์ต์ ๊ด๋์ผ๋ก ํ์ธ๋ \( 220-320 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}{ }^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ ์กฐ๊ฑด์์ ์กฐ์ฌ ๊ด ์จ๋๋ฅผ \( 3000 \mathrm{~K} \) ์ \( 6500 \mathrm{~K} \) ๋ก ๊ตฌ๋ถํ๊ณ , ๊ฐ ๊ด ์จ๋์์ ๋ถ์กฑํ ํ์ฅ๋์ ๊ด์ ๋ณด๊ด ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์ฌ๋ฐฐ๋ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ saponarin ํจ๋์ ์กฐ์ฌํ์๋ค. Table 7์์ ์ ์ํ ๊ฒ๊ณผ ๊ฐ์ด, \( 3000 \mathrm{~K} \) ์์ \( 220 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ฒ๋ฆฌํ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ ๋์ผํ ๊ด๋์ผ๋ก \( 6500 \mathrm{~K} \) ๊ด์ ์ฒ๋ฆฌํ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์ ๋นํด saponarin ํจ๋์ด \( 27 \% \) ๊ฐ์ํ์๋ค. \( \mathrm{LED} \) ๊ด์ ์ ์กฐ์ฌ์์ ์ ๊ณตํ๋ \( 3000 \mathrm{~K} \) ๊ด ์คํํธ๋ผ์ \( 6500 \mathrm{~K} \) ์ ๋น๊ตํ์ฌ ๊ดํฉ์ฑ ์์ ํ์ฅ๋๋ก ์๋ ค์ง ์ ์๊ด ์์ญ 600-700 nm์ ๊ด ๋ถํฌ๋ ๋์ผ๋ ์ฒญ์๊ด ์์ญ์ธ \(400- 500 \mathrm{~nm} \) ๊ด ๋ถํฌ๋ ๋งค์ฐ ๋ฎ์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ฒญ์๊ด์ด saponarin ์ํฉ์ฑ์ ๊ด์ฌํจ์ ์ ์ถํ ์ ์๋ค. ์ด์ ๋ฐ๋ผ, ๊ฐ ์ฃผ์ ๊ด ์จ๋์กฐ๊ฑด์์ ๋ถ์กฑํ ํ์ฅ๋์ ๊ด์ ๋ณด๊ดํ์ฌ ์ด ๊ด๋์ \( 320 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}{ }^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ผ๋ก ์ ์งํ๋ฉฐ, \( 6500 \mathrm{~K} \) ์ ์๋์ ์ผ๋ก ๋ถ์กฑํ ์ ์๊ด์ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ๊ณ , \( 3000 \mathrm{~K} \) ์๋ ์ฒญ์๊ด์ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๋ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ saponarin ์์ฑ๋์ ๊ฐ๊ฐ ๋น๊ต ๋ถ์ํ์๋ค.</p><p>\( 220 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}{ }^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ \( 6500 \mathrm{~K} \) ๋ฅผ ์ฃผ ๊ด์์ผ๋ก \( 600-700 \mathrm{~nm} \) ๋ฅผ ์ฃผํ์ฅ๋๋ก ๊ฐ๋ ์ ์ LED๋ฅผ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๋, \( 6500 \mathrm{~K} \) LED ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ ๋๋น saponarin ํจ๋์ด \(28%\) ์ฆ๊ฐํจ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ฉด, \( 6500 \mathrm{~K} \) ์ LED ๊ด์ \( 400-500 \mathrm{~nm} \) ๋ฅผ ์ฃผ ํ์ฅ๋๋ก ํ๋ ์ฒญ์๊ด์ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ, saponarin ํ๋์ \( 6500 \mathrm{~K}\) LED ๊ด ๋จ๋ ์ฒ๋ฆฌ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ, saponarin ํจ๋์ \( 6500 \mathrm{~K} \) LED ๊ด ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ ๊ตฌ์ ๋นํด \( 35 \% \) ๊ฐ๋ ๊ฐ์ํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ฑด๋ฌผ ์์ก๋๋ ์ ํ๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค(Table \(7\)). ๋ํ, \( 3000 \mathrm{~K} \) ๋ฅผ ์ฃผ ๊ด์์ผ๋ก ์ฒญ์๊ด์ ๋ณด๊ดํ ๊ฒฝ์ฐ \( 12 \% \) ๊ฐ๋ saponarin ํจ๋์ด ์ฆ๊ฐํ์ฌ, \( 6500 \mathrm{~K} \) ๋จ๋
๊ด์ ์ฒ๋ฆฌ์ saponarin ํจ๋์ด ์ ์ฌํจ์ ํ์ธํ์๋ค. ์ ์๊ด์ ์๋ฌผ์ phytochrome์ ์๊ทนํ์ฌ ๊ดํฉ์ฑ ๋ฅ๋ ฅ์ ํฅ์์ํค๊ณ ์ฒญ์๊ด์ chryptochrome์ ์๊ทนํ์ฌ ์ด์ฐจ๋์ฌ๋ฌผ์ง ํฉ์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น ์ ์๊ณ , ํนํ ์ฒญ์๊ด์ anthocyanin ํฉ์ฑ์ ์กฐ์ ํ๋ phenylpropanoid ์ํฉ์ฑ๊ฒฝ๋ก์์ Chalcone synthase(CHS)์ ๋ฐํ์ ์ด์งํ์ฌ anthocyanin ํจ๋์ ์ฆ์งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. Saponarin ์ํฉ์ฑ ๊ฒฝ๋ก ๋ํ CHS ์์ฉ์ ์๋ฐํด์ผ ํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ฒญ์๊ด์ ์ํด ์ ๋๋ ๋์ฌ ๊ฒฝ๋ก๋ฅผ ํตํ์ฌ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ saponarin ํจ๋ ์ฆ์ง์ ๊ธฐ์ฌํ์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ข
ํฉํ๋ฉด saponarin ์ํฉ์ฑ์ ์ฒญ์๊ด์ด ์ฃผ์ ์ธ์๋ก ์์ฉํจ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, saponarin ๊ณ ํจ์ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ ์ฌ๋ฐฐ์๋ \( 8 \mathrm{~h} \mathrm{day}{ }^{-1} \)์ ๊ด ์ฃผ๊ธฐ์์ \( 6500 \mathrm{~K} \) LED ์ ์ ์๋ณด๊ด์ ํตํ \( 220-320 \mu \mathrm{mol} \)\( \mathrm{m}^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ ์ต์ข
๊ด๋์ด ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ธ๊ณต ๊ด ์กฐ์ฌ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ์ธ ๋์๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ์ธ๊ณต ๊ด ์ฌ๋ฐฐ ์์คํ
์ saponarin ๊ณ ํจ์ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ ์ฐ์ค ์์ฐ์ ๊ธฐ์ฌ ํ ์ ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค.</p> | saponarin ์ํฉ์ฑ์ ๊ด์ฌํ๋ ๊ด์ ์ฒญ์๊ด์ธ๊ฐ์? |
\( 108.8 \% \) | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>HPLC-MS/MS ๋ถ์๋ฒ ํ๋ฆฝ ๋ฐ ๊ฒ์ฆ</h2><p>์ง๋๋ถ์๊ธฐ ์ต์ ํ ์กฐ๊ฑด์ ํ๋ฆฝํ๊ธฐ ์ํด ํ์ค์ฉ์ก์ ์ฌ์ฉํ์ฌ Flow injection analysis๋ถ์์ ์ํํ์๋ค. ์ด์จํ ๋ฐฉ์์ electrospray์ ํ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ spray voltage \( 4,000 \)V์์ ์ด์จํ ํ์๊ณ positive ๋ชจ๋์์ ๋ถ์ํ์๋ค. ESI positive mode์์๋ ์์ฑํ๋ ๋ถ์์ด์จ \( \left[\mathrm{M}+\mathrm{H}^{+}\right. ]\)์ ์ถ๊ฐ ๋ถ๊ดด์์ผ ๊ฐ๋ ๋ฐ ์ ํ์ฑ์ด ์ฐ์ํ \( 2 \)์ข
์ daughter ion์ธ \( \mathrm{m} / \mathrm{z} 220.1 \) ์ ์ ๋์ด์จ์ผ๋ก \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) \( 192.1 \)์ ์ ์ฑ์ด์จ์ผ๋ก ์ ์ ํ์๋ค. ํด๋น ๋ถ์์กฐ๊ฑด์์ metalaxyl์ ๊ธฐ๊ธฐ์ ์ ๋ํ๊ณ ๋๋์ธ \( 0.001 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฅผ \( 7 \)๋ฒ ๋ฐ๋ณต ๋ถ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋จธ๋ฌด๋ฆ ์๊ฐ์ \( 10.6 \)๋ถ์ด์๊ณ ๋ณ์ด๊ณ์(Coefficient of variation, C.V.)๋ \( 1.3 \% \) ๋ก \( 10 \% \) ์ด๋ด๋ฅผ ๋ง์กฑํ์์ผ๋ฉฐ ๊ฒ๋์ ์ ๊ฒฐ์ ๊ณ์ \( \left(\mathrm{R}^{2}\right) \) ๋ ๋งค์ง๋ณ \( 0.999 \) ์ด์์ผ๋ก ์ฐ์ํ ์ง์ ์ฑ์ ๋ณด์๋ค.</p><h2>์ ์ ์กฐ๊ฑด ํ๋ฆฝ</h2><p>ํ์ค์ฉ์ก์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ณดํธ์ ์ผ๋ก ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋๋ \( 5 \)๊ฐ์ง์ d-SPE ๋ฅผ ๊ฒํ ํ์๋๋ฐ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ๋ PSA, C18, GCB์ ํก์ฐฉ์ ๊ฐ ๋ค์ด๊ฐ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 99.7-107.5\% \)์ ์ฐ์ํ ํ์์จ์ ๋ณด์์ง๋ง, Z-Sep์ด ๋ค์ด๊ฐ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 32.9 \% \) ์ ๋ฎ์ ํ์์จ์ ๋ณด์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก Z-Sep์ด ๋ค์ด๊ฐ d-SPE \( 5 \) ๋ฅผ ์ ์ธํ๊ณ ํ์์จ์ ํ๋ณดํ d-SPE๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ฐฑ์ถ, ์ฐ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ matrix effect๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. LC-MS์ ๊ฒฝ์ฐ matrix effect๋ ์ง๋๋ถ์๊ธฐ ๋ด์ ์ด์จํ ๊ณผ์ ์์ ๋ํ๋๋ฉฐ matrix์ ํด๋น ์ฑ๋ถ๊ณผ ํจ๊ป ์ง๋๋ถ์๊ธฐ์ ์ด์จํ ์์ค๋ก ์ฃผ์
๋์ด ion suppression ๋ฐ ion enhancement๋ฅผ ์ผ์ผ์ผ ์ ํํ ์ ๋๋ถ์์ ๋ฐฉํดํ๋ค. ๋๋ถ๋ถ์ ๋์ฝ์ LC-MS ESI positive mode์์ ๋ถ์์ด ์ฉ์ดํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ LC-MS์์ matrix effect๋ ๋ถ๊ฐํผํ๋ค. ๋ฐฑ์ถ์ ๊ฒฝ์ฐ d-SPE \( 1, 2, 3, 4 \)๋ก ์ ์ ํ์ ๋ matrix effect๊ฐ \( -69.8 \% \) ์์ ์ต๋ \( -71.4 \% \) ์ด์๊ณ ์ฐ์ฌ์ \( -85.6 \% \) ์์ ์ต๋ \( -87.0 \% \) ๋ก ์ฐ์ถ๋์๋ค. ๋ ๋งค์ง ๋ชจ๋ matrix์ ์ํฅ์ด ๊ธฐ์กด ๋ค๋ฅธ ์ฐ๊ตฌ์ ๋์ผํ๊ฒ \( \mathrm{d}-\mathrm{SPE} \) ๋ก ์ ์ ์ \( 60 \% \) ์ด์์ผ๋ก ํฌ๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ฐ๋ผ์, metalaxyl์ด ์ฝ์ฐ์ฑ ํํฉ๋ฌผ์ธ ์ ์ ์ฐฉ์ํ์ฌ ์ฝ์์ด์จ๊ตํํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ ํผ์ธ \( \mathrm{SPE}{-\mathrm{NH}_{2}} \) cartridge๋ฅผ ๊ฒํ ํ์๋ค. \( \mathrm{SPE}-\mathrm{NH}_{2} \) cartridge๋ก acetone/ \( n \)-hexane ํผํฉ์ฉ๋งค๋ฅผ ๊ฐ ๋น์จ๋ณ๋ก \( 5 \mathrm{~mL} \) ์ฉ ์ฉ์ถํ์ฌ ํ์ธํ์์ ๋, acetone \( / n \)-hexane \( (5 / 95, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ๋ ๋ฒ์งธ ๋ถํ์์ ์ฉ์ถ๋๊ธฐ ์์ํ์์ผ๋ฉฐ, acetone/ \( n \)-hexane \( (10 / 90, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ๋ ๋ฒ์งธ ๋ถํ๊น์ง ์ฉ์ถ๋์ด ์ด \( 85.6 \% \) ์ ํ์์จ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์๋ค.ํ์ง๋ง, ์์ฝ ์๋ฃ๋ฅผ ๋์
ํ์์ ๊ฒฝ์ฐ ํ์์จ์ด \( 36.2 \% \) ๋ก ๊ฐ์ํ์ฌ acetone์ ๋น์จ์ ๋์ฌ์ ํ๋ฆฝํ์๋ค. ์ต์ข
์ ์ผ๋ก ์นดํธ๋ฆฌ์ง์ acetone/ \( n \)-hexane \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) \( 5 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ ์ ์ถํ์ฌ ๋ฒ๋ฆฐ ํ acetone \( / n \)-hexane \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) \( 5 \mathrm{~mL} \) ์ ๋
น์ธ ์๋ฃ ์ฉ์ก์ ๊ฐํ์ฌ ์ ์ถ ์ ์ถฉ์ง์ ํ๋ฉด์ด ๋
ธ์ถ๋๊ธฐ ์ง์ acetone \( / n- \) hexane \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) \( 5 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ฉ์ถํ์ฌ ๋ฐ๋ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ๋ฆฝํ์๋ค. ํ๋ฆฝํ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ์ ์ฉํ์์ ๊ฒฝ์ฐ \( 108.8 \% \) ์ ์ฐ์ํ ํ์์จ์ ๋ณด์๋ค. ๋ํ, \( \mathrm{SPE}-\mathrm{NH}_{2} \) cartridge๋ก ์ ์ ํ์ ๊ฒฝ์ฐ SPE cartridge type์ matrix effect์ ์ํญ์ด ๋ฎ๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๊ฐ์ด ๋ฐฑ์ถ์์ \( -18.9 \% \), ์ฐ์ฌ์์ \( -17.9 \% \) ์ ๋ฎ์ ์์น๋ฅผ ๋ณด์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, \( \mathrm{SPE}-\mathrm{NH}_{2} \) cartridge ์ ์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ๋ฆฝํ์๋ค.</p><h2>๋ถ์์ ๋ํ๊ณ ๋ฐ ํ์์จ</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํ๋ฆฝํ ๋ถ์๋ฒ ๋ฐ ๊ธฐ๊ธฐ๋ถ์์กฐ๊ฑด ๊ณผ์ ์ ์์ฝ์๋ฃ ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ์ ์ ์ฉํ์ฌ ์ํํ์์ ๋ Table \( 2 \)์ ๊ฐ์ ํ์์จ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์๋ค. ๋ถ์๊ธฐ๊ธฐ์ ๊ธฐ๊ธฐ์์ ๋ํ๊ณ๋ \( 0.002 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์์ผ๋ฉฐ, ๋ถ์์ ๋ํ๊ณ๋ ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ ๋ชจ๋ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์์ค์ด์๋ค. ์ด์ ๋ฐ๋ฅธ ํ์์จ ์ํ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ฐฑ์ถ์๋ฃ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 100.3 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 2.0 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์๊ณ \( 0.1 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 109.1 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 5.8 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์๋ค. ์ฐ์ฌ์๋ฃ๋ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 88.6 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 3.6 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์๊ณ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 88.1 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 6.2 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ ๋ ๋งค์ง ๋ชจ๋ ์๋ฅ๋ถ์๊ธฐ์ค์ธ ํ์์จ \( 70-120\% \), ๋ณ์ด๊ณ์ \( 10 \% \) ์ด๋ด๋ฅผ ๋ง์กฑํ์๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>์์ฝ ์ค ์๋ฅ๋์ฝ์ ์์ ์ฑ์ ํ๋ณดํ๊ธฐ ์ํด metalaxyl์ ๋ํด ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ์ ์๋ฅ๋์ฝ ๋ถ์๋ฒ์ ๊ฒ๋ฐํ๊ณ ์ ํ์๋ค. LC-MS/MS๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ QuEChERS๋ฒ์ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ ์ค metalaxyl์ ๋ถ์ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋ฌผ๋ก ์ต์คํ ์์ผ acetonitirile๋ก ์ถ์ถํ์ฌ \( \mathrm{MgSO}_{4} \) ์ \( \mathrm{NaCl} \) ์ ์ฒจ๊ฐํด ์ธต ๋ถ๋ฆฌ ํ \( \mathrm{SPE}\)-\( \mathrm{NH}_{2} \) cartridge๋ก ์ ์ ํ์๋ค. ๋ณธ ๋ถ์๋ฒ์ ๊ธฐ๊ธฐ์ ๋ํ๊ณ์ ๋ถ์์ ๋ ํ๊ณ๋ \( 0.002 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๊ณผ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์๊ณ ํ์ค๊ฒ๋์ ์ \( 0.001- \) \( 0.05 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) ๋ฒ์์์ ๊ฒฐ์ ๊ณ์ \( \left(\mathrm{R}^{2}\right) 0.999 \) ์ ์ง์ ์ฑ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ ์ ๋ํ ํ์์จ์MLOQ ์์ค, MLOQ์ \( 10 \)๋ฐฐ ์์ค์์ \( 88.1-109.1 \% \)์ ์ฐ์ํ ํ์์จ์ ๋ณด์๊ณ , ๋ณ์ด๊ณ์๋ \( 2.0-6.2 \% \) ๋ก \( 10 \% \) ์ดํ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํ๋ฆฝํ LC-MS/MS๋ฅผ ์ด์ฉํ ์๋ฅ๋ถ์๋ฒ์ ํ์์จ ๋ฐ ๋ถ์์ค์ฐจ๋ ๊ตญ์ ์ ์ธ ๊ธฐ์ค์ ๋ง์กฑํ๊ณ ์์ผ๋ฏ๋ก ์์ฝ ๋ฐฑ์ถ ๋ฐ ์ฐ์ฌ ์ค metalaxyl์ ์์ ์ฑ ๊ฒ์ฌ๋ฅผ ์ํ ๋ถ์๋ฒ์ผ๋ก ํ์ฉํ ์ ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค.</p> | ๋ฐฑ์ถ, ์ฐ์ฌ ์๋ฃ ๋ชจ๋ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ํ์์จ์ ๋ณด์์ด? |
Tukey HSD | <h2>ํ ์ urease ํ์ฑ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ชฉ์ด์ก์ ์ํฅ</h2><p>ํ ์ urease ํ์ฑ ์ธก์ ์ ์๊ฑด ํ ์๋ถํจ๋์ \( 20 \%(\mathrm{W} / \mathrm{W})\)๋ก ๋ง์ถ๊ณ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ํ๋ฃจ ๋ฐฐ์ํ ํ ์ \( 2 \mathrm{~g} \)์ toluene \( 80 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐ ํ PEB (\( \mathrm{pH~} 7.0\)) \( 4 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ํ์ฌ ํจ์์ก์ ์ค๋นํ์๋ค. ์์๋๋์ ๋ฐฐ์์จ๋, ์ฒ๋ฆฌ์กฐ๊ฑด์ jack bean๊ณผ Bacillus urease ํ์ฑ ์ธก์ ๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ ๊ฐ๊ณ \(3\)์๊ฐ ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋ฐ์ ํ stop reagent๋ก \( \mathrm{Ag_{2}SO_{4}} \) (\(3 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \))๋ฅผ \( 2 \mathrm{~mL} \)์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐ์์ ์ข
๊ฒฐ์ํจ ํ \( 2 \mathrm{M} \) \( \mathrm{KCl} \)์ \( 20 \mathrm{~mL} \) ๋ฃ์ด \(30\)๋ถ๊ฐ ์งํ ํ No. \(2 \) ์ฌ๊ณผ์ง์ ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ์ฆ๋ฅ์ \( 400 \mu \mathrm{L} \)์ ์ฌ๊ณผํ ํ ์ ์ถ์ถ์ก \( 100 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ์ทจํด์ ๋ฃ๊ณ , EDTA \( 50 \mu \mathrm{L} \), phenol-nitroprusside \( 200 \mu \mathrm{L} \)์ \( \mathrm{NaOH} \)-hypochlorite \( 200 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ๋ฃ์ด \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)์์กฐ์์ \(30\)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ \( 630 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์๋ชจ๋์ ๋๋ ๋ฐ urease ํ์ฑ ์ ํด๋(\(\%\)) ๊ณ์ฐ์ jack bean๊ณผ Bacillus urease ํ์ฑ ๊ณ์ฐ๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ ๋์ผํ๋ค.</p><h2>Jack bean urease ๋ฐ์์๋์ ๋ฏธ์น๋ ๋ชฉ์ด์ก์ ์ํฅ</h2><p>๋ชฉ์ด์ก์ ์์๋ถํด ์ ํด ๊ธฐ์์ ์๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋ชฉ์ด์ก \( 500\), \(5,000 \), \( 10,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)์ ์์๋๋๋ฅผ \( 20\), \(80\), \(160\), \(320\), \(500 \mathrm{mM} \)๋ก ๋ฌ๋ฆฌํ์ฌ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(3\)๋ถ ๋์ ๋ฐ์์ํจ ํ jack bean urease ๋ฐ์ ์๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์์๋๋๋ณ ๋ฐ์์๋๊ฐ์ ์์๋๋์ ๋ฐ์ ์๋์ ์ญ์๋ฅผ ์ทจํ์ฌ Lineweaver-Burk plot์ผ๋ก ํ์ฐํ์ฌ \( \mathrm{V_{max}}\), \(\mathrm{K_{m}} \) ๊ฐ์ ๊ตฌํ ํ inhibition์ ๋ฐ์๊ธฐ์์ ํ๊ฐํ์๋ค.</p><h2>ํ ์ ๋ด ์์ ๊ฐ์๋ถํด์ ๋ฏธ์น๋ ๋ชฉ์ด์ก์ ์ํฅ</h2><p>๋ชฉ์ด์ก์ด ํ ์ ๋ด ์์ ๊ฐ์๋ถํด์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋ณด๊ธฐ ์ํ์ฌ ์์์ ๋ชฉ์ด์ก์ ํ ์์ ์ง์ ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์์ ๊ฐ์๋ถํด ์ ๋ฐ์ํ๋ ํ ์ ๋ด ์๋ชจ๋์๋ฅผ \( 2 \mathrm{M} \) \(\mathrm{ KCl} \) ์ถ์ถ-indophenol blue ๋ณ๋ฒ์ผ๋ก ์ธก์ ํ์ฌ ์์ ๊ฐ์๋ถํด ์ ๋๋ก ๋ํ๋ด์๋ค. ์๊ฑด ํ ํ ์์ ์๋ถํจ๋์ \( 30 \% \)๋ก ๋ง์ถ๊ณ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ํ๋ฃจ ๋ฐฐ์ํ ํ ์ \( 20 \mathrm{~g} \)์ urea \( 100 \mathrm{mg} \)๊ณผ ๋ชฉ์ด ํฌ์์ก์ ์ฆ๋ฅ์์ฌ๋ฌผ ๊ธฐ์ค ๋๋๋ณ (\(1,000\), \(5,000\), \(10,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L}\))๋ก \( 1 \mathrm{~mL} \)์ฉ ์ฒจ๊ฐํ ํ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \) ํญ์จ ๋ฐฐ์๊ธฐ์์ \( 1\), \(2\), \(3\), \(5\), \(10 \)์ผ ๋์ ํญ์จ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ด๋ ํ ์์ ์๋ถํจ๋์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ต์ ์๋ถํจ๋์ธ water filled pore space \( 60 \% \)๋ก ๋ง์ถ์๋ค. ๋ฐฐ์ ํ \( 20 \mathrm{~g} \) ํ ์ ์ค \( 2 \mathrm{~g} \)์ ์ทจํด \( 2 \mathrm{M} \) \( \mathrm{KCl}\) \(20 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ฃ์ด \(30\)๋ถ๊ฐ ์งํ ํ No. \(2\) ์ฌ๊ณผ์ง์ ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ์ฆ๋ฅ์ \( 400 \mu \mathrm{L} \)์ ์ฌ๊ณผํ ํ ์ ์ถ์ถ์ก \( 100 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ์ทจํด์ ๋ฃ๊ณ , EDTA \( 50 \mu \mathrm{L} \), phenol-nitroprusside \( 200 \mu \mathrm{L} \)์ \( \mathrm{NaOH} \)-hypochlorite \( 200 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ๋ฃ์ด \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) ์์กฐ์์ \(30\)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ \( 630 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. Control์ ๋ชฉ์ด์ก ๋์ \( \mathrm{MeOH} \)๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์๋ค.</p><h2>๋ถ์ ๋ฐ์ดํฐ์ ํต๊ณ์ ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>๋ชจ๋ ์คํ์ \(3\)๋ฐ๋ณต์ผ๋ก ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ถ์ํ ๋ฐ์ดํฐ๋ ํ๊ท ๊ณผ ํ์คํธ์ฐจ๋ก ํ์ํ์๋ค. ๋ชฉ์ด์ก ์ฒ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ urease ํ์ฑ ์ ํด๋ R \( 3.3.3 \) ํ๋ก๊ทธ๋จ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ผ์๋ถ์ฐ๋ถ์์ผ๋ก ์ฐจ์ด๋ฅผ ๊ฒ์ ํ์๋ค. ์ฌํ๊ฒ์ ์ผ๋ก Tukey HSD๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ ์ฒ๋ฆฌ ์ง๋จ์ ์ฐจ์ด๊ฐ ์๋ ๊ฒฝ์ฐ(\( p<0.05\)) ๊ฐ์ ์๋ฌธ์๋ก ๊ทธ๋ํ ์์ ํ์ํ์๋ค.</p> | \( \mathrm{V_{max}}\), \(\mathrm{K_{m}} \) ๊ฐ์ ๊ตฌํ ํ ๋ฌด์์ ๋ํด ํ๊ฐํ์ด? |
๋ฏธ์๋ฌผ ํจ์ ๋ฐ์์ ํตํด ์๋กญ๊ฒ ์ ๋ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ผ์ฆ์ ๋ฌผ๋ฆฌ์ ํํ์ ์๊ทน์ ์ํ ์ธ์์ด๋ ์กฐ์ง ์์์ผ๋ก๋ถํฐ ์ ์ฒด๋ฅผ ๋ฐฉ์ดํ๊ธฐ ์ํ ์์ฒด ์กฐ์ง์ ๋ฉด์ญ ๋ฐ์์ผ๋ก, ๋ค์ํ ๋ฉด์ญ์ธํฌ์ ์ํด ์งํ๋๋ ์ผ๋ จ์ ์๋ฌผํ์ ๊ณผ์ ์ด๋ค. ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ผ์ฆ๋ฐ์์ ์์๋ ์กฐ์ง์์ ์ฌ๋ฌ ๋ฉด์ญ ๊ด๋ จ ์ธํฌ๋ค์ด ๋ถ๋นํ๋ nitric oxide (\( \mathrm{NO} \)), prostaglandin (PG) ๋ฐ tumor necrosis factor- \( \alpha \) (TNF- \( \alpha \) ), interleukin-\( 6 \) (IL-\( 6 \)), interleukin-\( 1 \) \( \beta \)(IL-\( 1 \)\( \beta \))์ ๊ฐ์ ์ ์ผ์ฆ์ฑ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ(Pro-inflammatory cytokines)์ ํฌํจํ ๋ค์ํ ์ผ์ฆ ์ด์ง์ฑ ๋งค๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ์ํด ์ ๋๋๋๋ฐ, ์ด๋ค์ ํต์ฆ, ๋ถ์ข
, ์ด ๋ฑ์ ์ผ์ฆ์ฑ ์ฆ์์ ๋ฐํํ์ฌ ๋ค์ํ ์ง๋ณ์ ๋งค๊ฐ์ฒด๋ก์จ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ค. ์ฒด๋ด์ ์ฃผ์ ์ผ์ฆ์ธํฌ๋ก ์๋ ค์ง ๋์์ธํฌ (Macrophage)๋ ์ธํฌ ํ๋ฉด์ ๋ฐํํ๋ toll-like receptor์ ํตํด gram negative bacteria์ ์ธ๋ถ ์ธํฌ๋ง ๋
์ ๋ฌผ์ง์ธ lipopolysaccharide (LPS)๋ฅผ ์ธ์ํ์ฌ ์ธํฌ ๋ด ์ ์ฌ์ธ์ nuclear factor- \(\kappa \)B NF \(\kappa \)B์ ์ ํธ ์ ๋ฌ ๊ฒฝ๋ก๋ฅผ ํ์ฑํ ํ๋๋ฐ, ๋์์ธํฌ์ ํต ์์ผ๋ก ์ด๋ํ NF \(\kappa \)B๋ ์ผ์ฆ ๊ด๋ จ ์ ์ ์์ธ inducible nitric oxide synthase (iNOS) ๋ฐ cyclooxygenase-2(COX-\( 2 \))์ ๋ฐํ์ ์ ๋ํจ์ผ๋ก์จ \( \mathrm{NO} \) ๋ฐ prostaglandin E\( 2 \) \( \left(\mathrm{PGE}_{2}\right) \)์ ๊ฐ์ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ์์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํจ๋ค. ๊ทธ์ค \( \mathrm{NO} \)๋ ๊ณ ๋ฐ์์ฑ radical์ ์ผ์ข
์ผ๋ก, ๋ฎ์ ๋๋์์๋ ์ ํธ ์ ๋ฌ ๋ฐ ๋ฐํ
๋ฆฌ์์ ์ฌ๋ฉธ์ ํตํ ๋ฉด์ญ ์์ฉ ๋ฑ์ ์ธ์ฒด์ ์ค์ํ ์๋ฆฌ์ ์ญํ ์ ์ํํ์ง๋ง, ๊ณผ๋ํ ๋ฐํ์ ์ฒด๋ด์ ์ ์ ํ์ง ์์ ์ผ์ฆ์ ์ ๋ฐํ์ฌ ์ ์ ์์ ๋ณ์ด, ์กฐ์ง๊ณผ ์ ๊ฒฝ์ ์์์ ์ด๋ํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์๋ค. ๋ํ COX-\( 2 \)์ ์ด๋งค์ ํ์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํค๊ณ , signaling cascade๋ฅผ ์ด๋ฐํ๋ ๋ฑ COX-\( 2 \)์ ๊ธ์ฑ์ ์ธ ๋ฐํ์ ์ ๋ํ์ฌ \( \mathrm{PGE}_{2} \)์ ์์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํด์ผ๋ก์จ ์ฌ๋ฌ ๋์น์ฑ ์งํ์ ์ ๋ฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก๋ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ผ์ฆ์ฑ ์งํ์ ์์ธ์ด ๋๋ ๊ณผ๋ํ \( \mathrm{NO} \)์ \( \mathrm{PGE}_{2} \)์ ์์ฑ์ด ์ ๋ํ iNOS ๋ฐ COX-\( 2 \)์ ์ํ ๊ฒ์์ ๊ณ ๋ คํ ๋, iNOS์ COX-\( 2 \) ์ ์ ์ ๋ฐํ์ ์ต์ ํ๋ ๋ฌผ์ง์ด ์ผ์ฆ๋ฐ์ ์กฐ์ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ๋๋ค๊ณ ๋ณผ ์ ์๋ค. ์ต๊ทผ ๋ค์ํ ์ง๋ณ์ ์ผ์ฆ์ฑ ๊ทผ๊ฑฐ๊ฐ ๋ช
ํํด์ง์ ๋ฐ๋ผ ์ผ์ฆ์ฑ ์งํ์ ์๋ฐฉ ๋ฐ ์น๋ฃ๋ฅผ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ํ iNOS, COX-\( 2 \) ๋ฐ ์ฌ๋ฌ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ํ์ฑ ์ต์ ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ๋์์ง๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ณด๋ค ์์ ํ ํญ์ผ์ฆ ์์ฌ์ ๋ฐ๊ตด์ ์ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ ์งํ๋๊ณ ์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์กฐ๋ก๋๋ฌด๋ ์กฐ๋ก๋๋ฌด๊ณผ์ ์๋ก ๊ต๋ชฉ์ผ๋ก ์ ์ฃผ๋ ๋ฐ ๋จํด์ ์ฌ ๋ฑ์ ์์ํ๋ฉฐ, ์ผ๋ณธ ํผ์ ์ด๋จ, ์ค๊ตญ ๋๋จ๋ถ, ํ์ด์ ๋ฑ์ ๋ถํฌํ๋ค. ๋ํ, ํญ์ผ์ฆ ํจ๋ฅ์ด ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋ syringin๊ณผ catechin, quercetin, quercitrin ๋ฅ๊ณผ ๊ฐ์ ์๋ฆฌํ์ฑ์ฑ๋ถ์ ํจ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ์์ผ๋ฉฐ, DPPH ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ํตํ ํญ์ฐํ ํจ๋ฅ๊ณผ tyrosinase ๋ฐ elastase์ ์ต์ ํจ๋ฅ์ด ์ฐ๊ตฌ๋์๋ค. Kim ๋ฑ์ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ํ๋ฉด ์กฐ๋ก๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{NO} \) ์์ฑ ์ต์ ํจ๋ฅ์ ๋ฏธ๋ฏธํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์์ผ๋ ๋ค์ํ ์ผ์ฆ ์ธ์์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋ณด๊ณ ๋์ง ์์๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ์ฐ์
๋ฐ์ ๊ณผ ํจ๊ป ํผ๋ถ ๋ฏธ์ฉ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐํ์ฌ ํ๋ฐํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์งํ๋๊ณ ์์ผ๋, ์ ํด ์ฑ๋ถ ๋ฐ ํฉ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ๋ถ์์ฉ์ผ๋ก ์ธํ์ฌ ํํ ๋ฌผ์ง์ ๋ํ ๊ณตํฌ์ฆ์ ๊ฐ์ง ์ผ๋ฏธ์ปฌํฌ๋น์ (Chemical Phobia) ๋ฑ์ ์ ์ข
๋ฌธํ๊ฐ ํ์ฐ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ถ์์ฉ์ด ์ ๊ฑฐ๋ ์ฒ์ฐ ์์ฌ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐ๋๊ณ ์๋ค. ๋ํ, ๋
์ฑ์ด ์๊ฑฐ๋ ํ์ฑ์ด ๋ฏธ๋ฏธํ์ฌ ๊ฐ์น๊ฐ ๋ฎ์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ๋์์ผ๋ก ์๋ฆฌํ์ฑ์ ์ฆ์ง์ํค๊ธฐ ์ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ๊ฒ ์ด๋ฃจ์ด์ง๊ณ ์๋ ๊ฐ์ด๋ฐ, ๋ฏธ์๋ฌผ ํจ์ ๋ฐ์์ ํตํด ์๋กญ๊ฒ ์ ๋ํจ์ผ๋ก์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ํ์ฑ์ ์ฆ์ง์ํค๋ biorenovation์ ํ ๋ ๋ฐ ์ ์ฑ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฑ ๋ค์ํ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์ ์ฉ๋์ด ๊ทธ ์ ์ฉ์ฑ์ ์
์ฆ ํ ๋ฐ์๋ค. ์ด์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ LPS๋ก ์๊ทน๋ RAW\( 264.7 \) ์ผ์ฆ๋ชจ๋ธ์์ ์กฐ๋ก๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ (DL)์ biorenovation์ ์ ์ฉํ ์ถ์ถ๋ฌผ (DLB)์ \( \mathrm{NO} \), iNOS, COX-2 ๋ฐ ์ ์ผ์ฆ์ฑ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์กฐ์ฌํจ์ผ๋ก์ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ฒ์ฐ ํญ์ผ์ฆ์ ๋ก์์ ํ์ฉ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ฒํ ํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> | ์ต๊ทผ ์ฒ์ฐ ์์ฌ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ค์ด๋ค์ด, ํฉ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์๋๊ฐ? |
ํจ์ ํ์ฑ ์ต์ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์ธํฌ์ฃผ, ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๋ฐ ์์ฝ</h2><p>BHK ์ธํฌ์ฃผ(์ผ๋ณธ ์ดํํ์ฐ๊ตฌ์ ๋ถ์)๋ \( 37^{\circ} \mathrm{C} \), humidified \( \mathrm{CO}_{2} \) incubator (\( 5 \% \mathrm{CO}_{2}-95 \% \) air)๋ด์์ \( 10 \% \) calf serum (BD)์ด ํฌํจ๋ Eagle's minimum essential medium (BD, Carlsbad, CA, USA)์์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. NDV; Miyadera strain๋ ๊ตญ๋ฆฝ๋ณด๊ฑด์ฐ๊ตฌ์(National Institute of Health, Seoul, Korea)์์ ๋ถ์๋ฐ์ BHK ์ธํฌ์์ ์ฆ์ํ์๋ค. ์ฆ์๋ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค stock๋ค์ monolayer BHK ์ธํฌ์ฃผ์ plaque forming units์ assay๋ฅผ ํต ํ์ฌ ์ ์ ํ์๋ค. ๋ชจ๋ ์ํ์ ์ฌ์ฉ๋ ์์ฝ๋ค์ Sigma-Aldrich(St. Louis, MO, USA) ์ฌ๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์๋ฃ ์ถ์ถ</h2><p>์ค๋ฐฐ์ ์๋ฃ๋ ๋๊ตฌ์๋ด์ ์์นํ ํ์ฝ๋ฐฉ์ผ๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ค๋ฐฐ์ ์๋ฃ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ ๊ฐ๊ฐ ๋ฉํ์ฌ (\( 100 \mathrm{~mL} \))๋ก ์์จ์์ 24์๊ฐ๋์ ์ถ์ถํ์ฌ Whatman filter paper์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฉํ์ฌ์ ์ ๊ฑฐํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ฌ๊ณผ์ก์ ๊ฐ์๋์ถ(\(40 { }^{\circ} \mathrm{C} \) )ํ์ฌ ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐ ํ ํ \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ๋ณด๊ดํ์ฌ ํ์ฑ ์ํ์ ์ฌ๋ฃ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>ํจ์ ํ์ฑ ๊ฒ์ </h2><p>์ค๋ฐฐ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ํํ๋ ๋ค์ํ glucosidase์ ๋ํ์ฌ ํจ์ ํ์ฑ ์ต์ ๋ฅผ ๋ณด์๋ค. glycosidase์ assay๋ Lee ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ์ํํ์๋ค. \( \alpha \)-glucosidase์ ๋ค๋ฅธ glucosidase์ ํ์ฑ ๋ถ์์ ์ํ์ฌ ๊ธฐ์ง๋ก p-nitrophenol (PNP) glycosides (\(1 \mathrm{mM}\))๋ฅผ ํฌํจํ๋ \( 50 \mathrm{mM} \) phosphate ์์ถฉ์ฉ์ก \(\mathrm{pH}6.7 \)์ ์กฐ์ ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์์ถฉ์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ \( 37^{\circ} \mathrm{C}\), 5 ๋ถ ํจ์ ๋ฐ์ ๊ฐ์ ํ ๊ธฐ์ง์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ \( 37^{\circ} \mathrm{C}, 10 \) ๋ถ ๊ฐ ํจ์ ๋ฐ์์ ์ํํ์๋ค. ํจ์๋ฐ์ ์ข
๋ฃ๋ 3 ๋ฐฐ vol.์ \( 1 \mathrm{M}\) \(\mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐ์์ ์ข
ํ ํ \( \mathrm{OD}_{405} \) ๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ํก๊ด๋ ๋ณํ๋ก๋ถํฐ ํจ์์ ํดํ์ฑ์ ๊ณ์ฐํ์๋ค. ํ์ฑ๋จ์์ธ 1 unit๋ ํ์ฑ์ธก์ ์กฐ๊ฑด์์, 1๋ถ ๋์ PNP \( 1.0 \mu \mathrm{mol} \) ์ ์์ฑํ๋๋ฐ ์ฌ์ฉ๋ ํจ์ ์์ผ๋ก ์ ํ์๋ค. ์ต์ ์จ ๊ณ์ฐ์ ์๋์ ๊ฐ์ด ํ์๋ค.</p>\(\text{Inhibition} (\%)=\frac{\text { Activity control }-\text { Activity sample }}{\text { Activity control } \times 100} \)<h2>Syncytium ํ์ฑ ๋ฐ cytopathic ํจ๊ณผ</h2><p>BHK cell์ ํ์ ์ธํฌ ๋จ์ผ์ธต(monolayer)์ 96 well microtiter plate์ 5 multiplicity of infection ๋๋์ NDV๋ฅผ ๊ฐ์ผ์ํจ ํํ์๋ ๋๋์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฐ ํ NDV ๊ฐ์ผ ์ธํฌ์ฃผ์์ syncytium ํ์ฑ์ฌ๋ถ์ cytopathic ํจ๋ฅ (CPE), cytopathic units (CPU) ์ ๋์ ๊ดํํ๋ฏธ๊ฒฝ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐํ์๋ค.96 well microtiter plate์ ๋ฐฐ์๋ BHK ์ธํฌ์ฃผ์ 2๋ฐฐ ํฌ์ ๋๋๊ฐ ๋๊ฒ ํ์ฌ VSV๋ฅผ ๊ฐ์ฌ์ํจ ํ CPU ์ ๋์ ํ์๋ค. CPU๋ ์ธํฌ๋ณ๋ณํจ๊ณผ๊ฐ ์ผ์ด๋๋ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋๋ ์ด์ ์ ์ต๋ ํฌ์ ๋ฐฐ์จ๋ก ์ ํ๋ฉฐ, ์ธํฌ๋ณ๋ณํจ๊ณผ์ ๋ด์ฑ์ ๊ฐ๋ ๋ฌผ์ง์ ์ต๋ ํฌ์๋๋๋ฅผ ์๋ฏธํ๋ค.</p><h2>Cell growth</h2>96 well plates์ BHK ์ธํฌ๋ฅผ ๋ถ์ฃผํ ํ 2 ๋ฐฐ ๋๋๋ก ํฌ์๋ ์ค๋ฐฐ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ \( 37^{\circ} \mathrm{C}\), \(\mathrm{CO}_{2} \) incubator์์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. BHK ์ธํฌ ์ฑ์ฅ์ 2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium monosodium salt (SigmaAldrich)๋ฅผ ์ด์ฉํ colorimetric ๋ฐฉ๋ฒ์ ์คํ์ฌ ๊ฒฐ์ ํ์๋ค.<h2>์ ํ๊ตฌ์์ง(Hemagglutination) ๋ฐ ํ๊ตฌํก์ฐฉ(hemadsorption)</h2><p>๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๋น๋จ๋ฐฑ์ง NDV-hemagglutinin-neuramidase (NDV-HN) ์ํฉ์ฑ์ NDV ๊ฐ์ผ ์ธํฌ์ฃผ์ ์ฉํด๋ฌผ์ ํ๊ตฌ์์ง๋จ์(hemagglutination units, HAU๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ์ฌ ์ ๋ํ์๋ค. ์ธํฌ ํ๋ฉด์์ NDV-HN ๋ฐํ์ ๋ฌด๋ ํ๊ตฌํก์ฐฉ(hemadsorption, HAD)์ ์ ๋์ผ ๋ก ๊ฒฐ์ ํ์๋ค.</p><p>6-well plates (Falcon; BD, Detroits, MI, USA)์ \(1 \mathrm{HAU}/ \mathrm{mL} \) ๋๋์ NDV๋ฅผ \( 2 \mathrm{~mL} \) ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๊ฐ์ผ์ํจ ํ 14์๊ฐ, \(37 { }^{\circ} \mathrm{C} \), humidified \(5\%\) \( \mathrm{CO}_{2}-95 \% \) air incubator์์ BHK ์ธํฌ์ Confluent ๋ฐฐ์์ ์ํํ์๋ค. ๋ฐฐ์ํ ๋ฐฐ์ง๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ ํ ๋๊ฐ๋ ์์ผ์(chilled saline)์ ์๋ \( 1 \%(\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ๋ญ ์ ํ๊ตฌ (chicken red blood) ์ธํฌ \( 2 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ์ well์ ๋ถ์ฃผ ํ ํ \( 4{ }^{\circ} \mathrm{C}\), 30๋ถ๊ฐ ์ ์นํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ฐ๋์ฉ ๊ฐ๊ฒน๊ฒ ํ๋ค์ด ์ฃผ์๋ค. ํก์ฐฉ๋์ง ์์ ํ๊ตฌ์ธํฌ๋ฅผ ์ ๊ฑฐ ํ ํ, cell layer๋ฅผ ๋๊ฐํ ์์ผ์ \( 2 \mathrm{~mL} \)๋ก 3ํ ์ป์ด์ฃผ์๋ค. ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ \( 1 \% \) ์๋ชจ๋์๊ฐ ํฌํจ๋ ๋ฉธ๊ท ์๋ก swollen ํ \( \mathrm{OD}_{550} \) ๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ์ ๋ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ๋ถ์</h2><p>๋ชจ๋ ์คํ์ 3ํ ์ด์ ๋ฐ๋ณตํ์ฌ ์ค์ํ์์ผ๋ฉฐ, ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ SAS (Statistical Analysis System, SAS Inc., Cary, NC, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ one-way ANOVA ๋ถ์์ ์ค์ํ์์ผ๋ฉฐ, Duncan์ ๋ค๋ฒ์ ๊ฒ์ (Ducan's multiple range test)์ ํตํ์ฌ \( 5 \% \) ์์ค์์ ์๋ฃ๊ฐ์ ์ ์์ ์ธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๊ฒ์ฆํ์๋ค.</p> | syncytium ํ์ฑ์ฌ๋ถ์ cytopathic ํจ๋ฅ (CPE), cytopathic units (CPU) ์ ๋์ ๋ญ๋ก ๊ด์ฐฐํด? |
7.5\( \% \) | <h2>๋ฌผ์ฑ ์ธก์ </h2><p>์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ ๋ฌผ์ฑ ์ธก์ ๊ฐ์ Table 4์ ๋ํ๋ด์๊ณ ๊ฒฝ๋, ๊ฒ์ฑ, ์นํ์ฑ์ Fig. 7์ ๋ํ๋ด์๋ค. 7์ผ๊ฐ ๊ฒฝ๋๋ฅผ ๋ณด์์ ๋ ๋์กฐ๊ตฐ, ์คํ๊ตฐ ๋ชจ๋ 91~118๊ฐ ์ฌ์ด๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๊ณ ๋ณ๋ค๋ฅธ ์ฐจ์ด๋ ๋ณด์ด์ง ์์์ผ๋ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐํ ๊ตฐ์ ๊ฒฝ๋๊ฐ ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ ์ฐฉ์ฑ์์๋ ์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก์ด ๋ง์ด ์ฒจ๊ฐํ ์๋ก ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ณด์๊ณ , ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ์ธํ๊ณ ์๊ฐ์ด ์ง๋จ์ ๋ฐ๋ผ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ํ์ฑ๊ณผ ๊ฒฐํฉ์ฑ์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์คํ๊ตฐ ๋ชจ๋ ๋ณ๋ค๋ฅธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๊ณ ๊ฒ์ฑ์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ์ธํ ์คํ๊ตฐ์์ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ์นํ์ฑ์ ์์๋น๊ทผ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๊ณ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ 3.7\( \% \) ์คํ๊ตฐ์ ๋ณ๋ค๋ฅธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๋ค. ์คํ๊ฒฐ๊ณผ ์๊ฐ์ ๋ฐ๋ฅธ ์์๋น๊ทผ ํธ๋ฉ์ ํ์ง์ ๋ณํ๋ ์์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค. Yu ๋ฑ์ ๋ณต๋ถ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ ํ์ง์ ํน์ฑ์ ์ฐ๊ตฌํ์๋๋ฐ, ํธ๋ฉ์ ๋ฌผ์ฑ ์ธก์ ์์ ์ ค๋ผํด๊ณผ ์คํ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ ์๋ ์ ํ์ ๊ฒฝ๋, ๊ฒ์ฑ, ์นํ์ฑ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ๋ฎ๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๊ณ , ๊ด๋ฅํ๊ฐ๋ฅผ ํตํ์ฌ ๊ฒฝ๋, ๊ฒ์ฑ, ์นํ์ฑ์ด ๋ฎ์๋ ์ ํ์ด ์ ์ฒด์ ์ธ ๊ธฐํธ๋์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ๊ฐ์ ๋ํ๋๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค.</p><h2>ํธ๋ฉ ๊ด๋ฅ ํ๊ฐ</h2><p>์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๊ฐ๊ฐ 10, 20, 30\( \mathrm{~mL} \) ๋ก ๋ฌ๋ฆฌํ ํธ๋ฉ์ ๋ํด ์, ํ๋ฏธ, ๋ง, ์กฐ์ง๊ฐ, ์ ์ฒด์ ์ ํธ๋์ ๋ํ ๊ด๋ฅ์ ํน์ฑ์ 5์ ์ฒ๋๋ก ๊ธฐํธ๋ ์กฐ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Table 5 ์ ๊ฐ๋ค. ์(Color)์ ๋์กฐ๊ตฐ 3.75 ์ , ์์๋น๊ทผ 7.5 \( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ด 3.75์ ์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๊ฐ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋๊ณ ์์๋น๊ทผ 11.4\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ 3.65์ ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ํฅ(Flavor)์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ 3.35์ , ์์๋น๊ทผ 7.5\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ 3.4 ์ , ์์๋น๊ทผ 11.4\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ 3.4 ์ ์ ๋ฐ์๋ค. ์์๋น๊ทผ 3.7\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ ์๊ณผ ํฅ์์ ๋ฎ์ ์ ํธ๋๋ฅผ ๋ณด์๋ค.</p><p>๋ง(Taste)์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ด 2.95 ์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ์ ์๋ฅผ ๋ํ๋๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก ๋ง์ ๋ํ ์ ์๊ฐ 3.35์ , 3.55์ , 3.6์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๊ณ , ์กฐ์ง๊ฐ(Texture)์ ๋์กฐ๊ตฐ์ 3.35์ ์ด๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก 3.6์ , 3.55์ , 3.45์ ์ผ๋ก ๋ฎ์์ง๋ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋์๋ค.</p><p>๋ง(Taste)์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ด 2.95 ์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ์ ์๋ฅผ ๋ํ๋๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก ๋ง์ ๋ํ ์ ์๊ฐ 3.35์ , 3.55์ , 3.6์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๊ณ , ์กฐ์ง๊ฐ(Texture)์ ๋์กฐ๊ตฐ์ 3.35์ ์ด๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก 3.6์ , 3.55์ , 3.45์ ์ผ๋ก ๋ฎ์์ง๋ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋์๋ค. ์ ์ฒด์ ์ธ ์ ํธ๋(overall preference)๋ฅผ ์ดํด๋ณด๋ฉด ์์๋น๊ทผ 7.5 \( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ 3.5 ์ ์ ๋ฐ์์ผ๋ฉฐ ์์๋น๊ทผ 11.4\( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ, ๋์กฐ๊ตฐ, ์์๋น๊ทผ 3.7\( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ ์์ผ๋ก 3.35์ , 3.25์ , 2.85์ ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๊ฒฝ๋ ๊ฐ์ด ๋ฎ๊ณ ๊ฒ์ฑ๊ณผ ์นํ์ฑ์ด ๋ฎ์๋ ์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก7.5 \( \% \) ํธ๋ฉ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ ๊ธฐํธ๋ ๊ฐ์ ๋ณด์๋ค. Park ๋ฑ์ ๋ณต์ญ์ ๊ณผ์ฆ์ ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ ํ์ง ํน์ฑ์ ์ฐ๊ตฌํ์๋๋ฐ, ๋ณต์ญ์์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ํธ๋ฉ์ \( \mathrm{pH} \) ๊ฐ ๋ฎ์์ ธ ํธ๋ฉ์ ๊ฒฝ๋์ ํ์ฑ์ด ๊ฐ์ํ๊ณ ์ ์ฐฉ์ฑ๊ณผ ์นํ์ฑ, ์์ง์ฑ์ ์ฆ๊ฐํ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๊ณ , ๋ณต์ญ์ ๊ณผ์ฆ์ด ๊ฐ์ฅ ๋ง์ด ๋ค์ด๊ฐ ํธ๋ฉ์์ ๊ธฐํธ๋ ๊ฐ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๋ฌ๋ฆฌํ ํธ๋ฉ๋ง๋ค ์ ํธ๋ ์ ์๊ฐ ํฐ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง๋ ์์ง๋ง ์์๋น๊ทผ์ 7.5\( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ด ์๋น์๋ค์๊ฒ ๋์ ์ ํธ๋๋ฅผ ๋ํ๋ผ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p> | ์ฌ๋๋ค์ ์์๋น๊ทผ์ด ์ผ๋ง๋ ์ฒจ๊ฐ๋ ํธ๋ฉ์ ์ข์ํ ๊น? |
๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ cell viability์ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋๋ ๋ฒ์ ๊ฒฐ์ ์ ์ํด | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>CCD-986sk๋ด์์์ ์ธํฌ์์กด์จ ํ๊ฐ</h2><p>๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ cell viability์ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋๋ ๋ฒ์ ๊ฒฐ์ ์ ์ํด MTT assay๋ฅผ ์ํํ์๋ค. CCD-\(986\)sk ์ธํฌ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ \( 5,10,25,50,75 \), \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฐ๊ณผ, \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ดํ์ ๋๋์์ ์ธํฌ์์กด์จ์ด \( 90 \% \)์ด์์ผ๋ก ๋ํ๋ด์ด CCD-986sk ์ธํฌ์ ์์กด์จ์ ํฐ ์ํฅ์ ๋ํ๋ด์ง ์์์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 1).</p><h2>ํ์ฑ์ฐ์์ข
(ROS) ์ต์ ํจ๊ณผ</h2><p>ํผ๋ถ์ UVB์ ๋
ธ์ถ์ ํ์ฑ์ฐ์์ข
(ROS) ์์ฑ์ ์ผ๊ธฐ์ํค๋ฉฐ(Fisher ๋ฑ, 1997; Yoon ๋ฑ, 2003; Han ๋ฑ, 2013), ์ด๋ ์์ฑ๋๋ ROS๋ ํผ๋ถ์ธํฌ ๋ด์์์ ์ฌ๋ฌ ์ ํธ ์ ๋ฌ ์ฒด๊ณ๋ฅผ ํตํด ํผ๋ถ ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ ์ฌ์ธ์๋ค์ ํ์ฑํ ์ํจ๋ค(Lee ๋ฑ, 2012). ์ด๋ ๊ด๋
ธํ๋ฅผ ๋ฐฉ์ดํ๊ณ ์์ธ์ ์ผ๋ก๋ถํฐ ๋ณดํธ์ ๋ฅผ ๊ฐ๋ฐํ๋๋ฐ ์์ด์ ROS์ ์ญํ ์ด ์ค์ํจ์ ์์ฌํ์ฌ ์ค๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ROS ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ์ฌ CCD-986sk ์ธํฌ์์์ UVB ์กฐ์ฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ROS ์์ฑ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, UVB ๋ก ์ ๋๋ ๊ทธ๋ฃน์์๋ ์ ์๊ตฐ์ ๋นํด ROS ์์ฑ๋ฅ ์ด ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ROS ์์ฑ์ ๊ฐ์์ํค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๊ทธ ์ค ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ถํ๋ฌผ์ด \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \( 50 \% \) ์ด์์ ROS ๋ฐํ์ ์ต์ ์์ผฐ์ผ๋ฉฐ Park ๋ฑ (2014)์ ๋ง์ฑ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์ ROS ์์ฑ์ ์ต์ ์ํค๋ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ธ ๊ฒ์ ๋นํด ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ถํ๋ฌผ์ด ๋ ์ฐ์ํ ํจ๋ฅ์ ๋ํ๋์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 2).</p><h2>CCD-986sk ์ธํฌ๋ด pro-collagen ํฉ์ฑ ๋ฐ MMP-1 ๋ฐํ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ</h2><p>ํผ๋ถ ๋
ธํ์ ์ค์ํ ์์์ฆ์์ธ ์ฃผ๋ฆ, ํผ๋ถํ๋ ฅ๊ฐ์์ ์์ธ์ผ๋ก๋ ์งํผ ๋ด ์ธํฌ ์ธ ๊ธฐ์ง ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๊ฐ์๋ฅผ ๋ค ์ ์๋ค. ์์ธ์ ์ ์๊ทน์ ๋ฐ์ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์๋ collagenase, elastase, gelatinase๋ฑ์ MMPs์ ์ํ์ฌ ๋ถํด๋์ด ์ฝ๋ผ๊ฒ ์ฌ์ ์ ๊ธธ์ด์ ๋ถํฌ์ ์์์ ์ด๋ํ๊ฒ ๋๋ฉฐ ํผ๋ถ ์ธํฌ์ ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ฝ๋ผ๊ฒ๋ค์ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์ ํ๋ก์ฝ๋ผ๊ฒ์ด๋ผ๋ ์ ๊ตฌ๋ฌผ์ง์ ํํ๋ก ํฉ์ฑ๋๋ค(Chung 2003; Kim ๋ฑ, 2015). ์์ธ์ ์ ์ํด ์ด๋ฌํ ํ๋ก์ฝ๋ผ๊ฒ์ ์์ด ๊ฐ์ํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ฝ๋ผ๊ฒ ์์ด ๊ฐ์ํ๊ฒ ๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํ๋กํฉํ์ด๋์ MMP-1์ ์์ ์ธก์ ํจ์ผ๋ก์จ ์ธํฌ๋ด์์์ ์ฝ๋ผ๊ฒ ํฉ์ฑ ์ ๋๋ฅผ ํ์
ํ ์ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํ๋ก์ฝ๋ผ๊ฒ์ ํฉ์ฑ์ ์ด์ง ๋ฐ MMP-1์ ๋ฐํ์ ์ต์ ์ํฌ ์ ์๋ ์์ฌ๋ ํ๋ ฅ ์๋ ํผ๋ถ๋ฅผ ๋ง๋ค์ด ์ฃผ๋ ํ์ฅํ ์๋ฃ๋ก์ ์ฌ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ๋๋ค๊ณ ์๊ฐ๋๋ฉฐ ์ด์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ pro-collagen ํฉ์ฑ ๋ฐ MMP-1 ๋ฐํ ์คํ์ ์ํํ์ ๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 5,10,25 \) \( \mu \mathrm{g} /\mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \( 6,16,28 \% \)์ pro-collagen ํฉ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, EA ๋ฐ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ \( 5 \mu \mathrm{g}/\mathrm{mL} \) ๋๋์์๋ ๋ฎ์ ํฉ์ฑ์จ์ ๋ํ๋ด์์ง๋ง \( 10,25 \mu \mathrm{g} /\mathrm{mL} \) ๋๋์์๋ ๋์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ํนํ EA ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ต๊ณ ๋๋์ธ \( 25 \mu \mathrm{g} /\mathrm{mL} \)์ ๋๋์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด \( 40 \% \) ์ด์์ ๋์ ์์ฑ์จ์ ๋ํ๋ด์ด, Hwang ๋ฑ (2015)์ ๋ณด๊ณ ์์ ์์ฃผ๋ฌ๊ฐ๋น ๋ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ 25 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \( 28 \% \) pro-collagen์ ํฉ์ฑ๋ฅ์ ๋ํ๋ธ ๊ฒ๊ณผ ๋น๊ตํ์์ ๋ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ pro-collagen์ ํ์ฑ์ด ์ฐ์ํจ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 3). ๋ํ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ MMP-1 ํ์ฑ ์ ํด๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, UVB๋ก ๋ฐํ๋ MMP-1์ ๋ชจ๋ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ ํด๋ฅผ ์์ผฐ์ง๋ง, EA ๋ถํ๋ฌผ์ด \( 5,10,25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 10,28,46 \% \)์ ์ ํด์จ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \( \mathrm{EA} \) ๋ถํ๋ฌผ๊ณผ ๊ฐ์ ๋๋๊ตฌ๊ฐ์์ ๊ฐ๊ฐ \( 7,15,32 \%\)๋ก ๋ฐํ์ ์ ํด ํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ Lee์ Lee (2013)์ ๋ณด๊ณ ๋ ์ฒญ๋ฏธ๋๋ฉ๊ตด ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์์ \( 25.1 \% \)์ ์ ํด ํ์ฑ๋ณด๋ค๋ ๋ฐ์ด๋ ํ์ฑ์์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 4). ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก ๋ณด์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์์ UV-B๋ก ์ธํ procollagen ๊ฐ์๋ฅผ ์ฆ๊ฐ ์์ผ์ฃผ๋ฉฐ, ์ฆ๊ฐ๋ MMP-1 ๋ฐํ์์ ์ ํด์์ผ ์ค์ผ๋ก์จ ์ฃผ๋ฆ ์์ฑ์ ์๋ฐฉํ ์ ์๋ ์์ฌ์์ ํ์ธํ์๋ค.</p><h2>CCD-986sk ์ธํฌ๋ด pro-collagen, MMP-1์ protein ๋ฐ mRNA ๋ฐํ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ</h2><p>ELISA๋ฅผ ํตํด pro-collagen์ ํฉ์ฑ๋ฅ๊ณผ MMP-1์ ๋ฐํ ์ ํด๋ฅผ ์ ๋์ ์ผ๋ก ํ์ธ ํ์์ผ๋ฉฐ, CCD-986sk ์ธํฌ์์ ๋จ๋ฐฑ์ง๊ณผ RNA์ ์ถ์ถํ์ฌ protein ๋ฐ mRNA level์์์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ์ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ westem blot๊ณผ RT-PCR์ ์ด์ฉํ์ฌ ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. UVB๋ฅผ ์กฐ์ฌํ ๊ทธ๋ฃน์์๋ pro-collagen ๋ฐํ์ด UVB๋ฅผ ์กฐ์ฌํ์ง ์์ ๊ทธ๋ฃน์ ๋นํด \( 40 \% \) ์ด์ ๋ฐํ์ด ์ ํด ๋์์ผ๋ฉฐ, MMP-1์ ๋ฐํ์ UVB ์กฐ์ฌํ ๊ทธ๋ฃน์ด ์กฐ์ฌ ํ์ง ์์ ๊ทธ๋ฃน์ ๋นํด 4๋ฐฐ ์ด์ ๋ฐํ๋ฅ ์ด ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ์ฌ๊ธฐ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ์ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฐ๊ณผ pro-collagen protein ๋ฐํ ์ฆ๊ฐ์์๋ ๋ฎ์ ํ์ฑ์ด ํ์ธ ๋์์ง๋ง, MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋ ๋ถํ๋ฌผ ๋ชจ๋ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ ํด์ํค๋ ๊ฒ์ด ํ์ธ ๋์๋ค. EA ๋ถํ๋ฌผ์ \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}\)์ ๋๋์์ \(38 \% \)์ ์ ํด์จ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ๊ฐ์ ๋๋์ธ \(25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 35\% \)์ ์ ํด์จ์ด ๋ํ๋์ ํ์ธ ํ์๋ค(Fig. 4). mRNA ๋ฐํ์์๋ EA์ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก pro-collagen ๋ฐํ์ด ์ฆ๊ฐ ํ์์ผ๋ฉฐ, EA ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ต๊ณ ๋๋์ธ \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 33 \% \)์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๊ณ ,\( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \(53\% \)์ ์ฐ์ํ procollagen ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. MMP-1์ ์ ํด ํ์ฑ ๋ํ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์์ ์ฐ์ํ ์ ํด ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์ \(40\% \) ์ด์ MMP-1 ๋ฐํ์ ๊ฐ์์ํค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค(Fig.5). Lee ๋ฑ (2013)์ ์๋ฌผ์ ํ ์ง์ค ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \(50\% \) MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ด ๋ํ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ์๋๋ฐ, ๋
ธ๋์ด๋ฆฐ์ฐ๊ฝ์ \(10\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \(40 \% \)์ด์์ MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ ํ์ธํ์ฌ ์ ๋๋์์๋ ๋์ ํ์ฑ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ฐ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ CCD-986sk ์ธํฌ๋ด์์ ROS์ ๊ฐ์ ๋
ธํ ์ธ์์ ์์ฑ ์ต์ ์ ๋์์ ํผ๋ถ์ ์ฃผ์ ๊ตฌ์ฑ์ฑ๋ถ์ธ ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๋ถํด ์ต์ ํจ๋ฅ์ ํตํด ํญ๋
ธํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ๊ฐ์น๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ฉฐ, ์์ผ๋ก ์์ ์์ค์์ ์์ ์ฑ ๋ฐ ํจ๋ฅ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์งํ ํ ์์ ์ด๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์๋ก์ด ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ํ์ฅํ ์์ฌ ๊ฐ๋ฐ์ ์ํด ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์์ ํญ๋
ธํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธ ํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ CCD-986sk ์ธํฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ๋
ธํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, EA๋ถํ๋ฌผ์ด UVB์ ์ํด ์ฆ๊ฐ๋ ROS ๋ฐํ์ \( 50 \% \) ์ด์ ์ต์ ํ์์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ pro-collagen mRNA ๋ฐํ์ \(25\mu\mathrm{g} / \mathrm{mL}\)์์ \(50 \% \) ์ด์ ๋ฐํ์ ์ฆ๊ฐ์์ผฐ๋ค. EA ๋ถํ๋ฌผ๊ณผ \(\mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ ๋ชจ๋ MMP-1 protein๊ณผ mRNA๋ฐํ์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ ํด์์ผฐ์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \(10 \mu\mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 40 \% \) ์ด์์ MMP-1 mRNA ๋ฐํ ์ต์ ์จ์ ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ ๋
ธํ ์ธ์์ธ ํ์ฑ์ฐ์์ข
์ ์์ฑ ์ต์ ์ ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ๋ฐ์ ํ ๊ด๋ จ์ด ์๋ ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๋ถํด์ต์ ๋ฅผ ํตํด ํญ์ฐํ ๋ฐ ์ฃผ๋ฆ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋์์ผ๋ฉฐ ํนํ EA์ \( \mathrm{BuOH}\) ๋ถํ๋ฌผ์ ๋์ ํจ๋ฅ์ด ํ์ธ๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ฐ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ํ์ฅํ ๋ถ์ผ์์ ํญ๋
ธํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ๊ฐ์น๊ฐ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p> | ์ง์ค ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๋
ธ๋์ด๋ฆฐ์ฐ๊ฝ ์ค ๋ฎ์ ๋๋์์ ๋ ๋์ MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ์? |
์ค๋ | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์ค๋(Morus alba L.)๋ฅผ ์ค์จ์์ \( 80 \% \) \(\mathrm{MeOH} \) ์์ฉ์ก์ผ๋ก ์ถ์ถํ๊ณ ์ด ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(\mathrm{EtOAc} \) , \( n \)-butyl alcohol, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฌผ ๋ถํ์ผ๋ก ๋๋์๋ค. \(\mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ์ ๋ํ์ฌ \( \mathrm{SiO}_{2} \) ๋ฐ ODS column chromatography๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ค์ํ์ฌ 2์ข
์ Diels-Alder ๋ถ๊ฐํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ, ์ ์ ํ์๋ค. NMR, IR ๋ฐ ESI/MS data๋ฅผ ํด์ํ์ฌ, ํํฉ๋ฌผ 1๊ณผ 2๋ฅผ mulberrofuran E์ chalcomoracin ์ผ๋ก ๊ฐ๊ฐ ๊ตฌ์กฐ๋์ ํ์๋ค. ๋ ํํฉ๋ฌผ ๋ชจ๋ ์ค๋๋ก๋ถํฐ๋ ์ด๋ฒ ์คํ์์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌ๋์๋ค.</p> | mulberrofuran E๋ฅผ ๋ฌด์์์ ์ถ์ถํ๋๊ฐ? |
1950๋
๋ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ฒ์ฐ๋ฌผํํ ์ฐ๊ตฌ๋ถ์ผ์์ ํ์ฑ์ ๋๋ถํ๋ฒ(bioassay-guided fractionation)๊ณผ ์ค์ผ์ผ ์
๋ถ์ทจ๋ฐฉ๋ฒ์ ํจ์จ์ ์ธ ๊ธฐ์ ์ด๋ฉฐ, 20์ธ๊ธฐ ์ด๋ฐ ๋ถ์ ์ฐ๊ตฌ์, ์ฝ๋ฆฌํ์ ๋ฐ ๋
์ฑ ์ฐ๊ตฌ ํ์๋ค์ด ๋๋ฆฌ ์ฌ์ฉํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ด์ง๋ง ์ค์ ๋ก 1950๋
๋๋ถํฐ ๊ณต์์ ์ผ๋ก ๊ฐ๋
ํ ๋์ด ํ์ฌ ์ ๋ถ ๋ฐ ์ฐ๊ตฌ ๊ธฐ๊ด์ ๋น๋กฏํ ํ๊ณ์ ์ ์ธ๊ณ ์คํ์ค์์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์์ฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์น๋ฃ์ ๋ฅผ ๋ฐ๊ฒฌํ๋๋ฐ ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์๋ค. ๋ํ ์ต๊ทผ์๋ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์์ฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ ์ฝ๊ฐ๋ฐ์์ ์๋ฃ์์ฌ(BRM, Botanical Raw Material)์ ์๋ฃ์์ฝํ(DS, Drug Substance) ํ์คํ(CMC, Chemistry, Manufacturing, Control)์ ์ฒ์๋ถํฐ ์ต์ข
๋จ๊ณ๊น์ง ํ์ฉ๋๋ ์ฐ๊ตฌ๋ฐฉ๋ฒ๋ค ์ค ํ๋์ด๋ค. ์ฒ์ฐ๋ฌผ์์ฌ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ํ์ฑ์ ์คํฌ๋ฆฌ๋ ํ๊ธฐ ์ํ ๋ถ์๋ฒ์์ ์ํ๋๋ ๋ค์์ 5 ๋จ๊ณ ์ํฌํ๋ก์ฐ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋๋ค. 1) ์ฉ๋งค๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ถ์์๋ฃ๋ก๋ถํฐ ๋์ฌ ๋ฌผ์ง์ ์ถ์ถํ๊ณ , 2) ์ถ์ถ๋ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ฒ์ ์ํ ๋ถํํ, 3) ๊ฐ ๋ถํ๋ฌผ๋ค์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๊ฒ์ ์คํฌ๋ฆฌ๋, 4) ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ถํ์ผ๋ก๋ถํฐ ์ ์ ๋ ๋์ฌ์ฒด์ ๋ถ๋ฆฌ, 5) ๋ถ๋ฆฌ๋ ์์ ๋จ์ผ์ฑ๋ถ๋ค์ ๊ตฌ์กฐ๋ถ์ ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ํจ๋ฅ ํ๊ฐ์ ๋ฉ์ปค๋์ฆ ๊ท๋ช
์ผ๋ก ์งํํ๋ค. ๋๋๋ก ํ์ฑ์ ๋๋ถํ๋ฒ๊ณผ ์ค์ผ์ผ ์
์ ์ด์ฉํ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง๋ค์ ๋ถ๋ฆฌํ๋ ๋์ ๋ช ๊ฐ์ง ์คํจ์ ํจ์ ์ด ์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ด์ ๋ ์๋ฆฌํ์ฑ ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ฐ๋ณต์ ์ธ ์นผ๋ผ์ ํตํด ๋ถ๋ฆฌ ์ค์ ๋ถํด๋๊ฑฐ๋ ์๋ฆฌํ์ฑ ํํฉ๋ฌผ์ด ๋งค์ฐ ๋ฎ์ ๋๋๋ก ์กด์ฌํ์ฌ ํจ์จ์ ์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌ ํ ์ ์๊ณ , ๋ค์ํ ํํฉ๋ฌผ๋ค๊ณผ ์๋ฆฌํ์ฑ ์ฌ์ด์์ ๋ณตํฉ์ ์ธ ์๋์ง ํจ๊ณผ(MCMT, multi-component multi-target)์ ์ํด ์ผ์ด๋ ์ ์๋ค. ๋ถ๋ฆฌ ํ ์ ์๊ณ , ๋ค์ํ ํํฉ๋ฌผ๋ค๊ณผ ์๋ฆฌํ์ฑ ์ฌ์ด์์ ๋ณตํฉ์ ์ธ ์๋์ง ํจ๊ณผ(MCMT, multi-component multi-target)์ ์ํด ์ผ์ด๋ ์ ์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์ฝ์ฌ์ธ ์ ์ฉ์ ํ์ ๋ฟ๋ฆฌ์ธ ํฉ๊ธ (Scutellaria baicalensis Georgi)์ ์ฃผ๋ก ๋์์์ ์ผ๋์ ์์ํ๊ณ ํ๋ฐฉ์์ ๋ํ ๋ฑ์ ์ฝ์ผ๋ก ์ฐ๋ฉฐ ํด์ด, ์ด๋จ, ํญ๊ท , ํญ์ง๊ท , ํ์๊ฐํ, ํ๋น์์น ํจ๋ฅ ๋ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋ ์ค์ํ ์ฝ์ฌ์ด๋ค. ํจ๋ฅ์ ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ผ๋ก flavone ๊ณ์ด์ baicalin, wogonoside์ ๊ทธ๋ค์ aglycone์ธ baicalein wogonin๊ฐ ์ฃผ์ฑ๋ถ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๊ณ ๊ณผํ์ ์ธ ํจ๋ฅ ๊ท๋ช
์ฐ๊ตฌ๋ก anti-cancer, hepatoprotection, antibacterial, antivirall, antioxidant, anticonvulsant, neuroprotective ๊ฒฐ๊ณผ๋ค์ด ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ์ ํ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ๊ณผ ๋์(๊ณจ๋ฌด๊ฝ์, Scutellaria genus)์์ 200์ข
์ด์์ ๋ง์ ํํฉ๋ฌผ๋ค์ ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก ํฉ๊ธ์ ํ์ฑ ์ ๋ ๋ถํ ๋ฌผ๋ก๋ถํฐ ์์ญ๋ฐ๋ฆฌ๊ทธ๋จ ์์ค์ ๋ฏธ๋์ฑ๋ถ๋ค์ ์์๋ถ๋ฆฌํ๊ธฐ ์ํด ๋ถ์๋ถํฐ ๋ถ์ทจ๊น์ง ๋ฐฉ๋ฒ์ ํ์ค์ ์ฐจ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ํ๋ฆฝํ๊ณ ๋ถ์์ ํตํด ์งํ์ฑ๋ถ๋ค์ ์ถ์ ํ๊ณ ๋์๊ฐ ๋ถ๋ฆฌ ๋ฐ ๊ตฌ์กฐ ๋์ ์ ์๋ฃํ์๋ค. ๋ํ, ๊ฐ๊ฐ ์ ์กฐ๋ ํ์ค ์ ํจ๋ถํ๋ฌผ๋ค์ ๋ํด ์งํ์ฑ๋ถ 8์ข
์ ๋ถ๊ดํ์ ์ ๋ณด๋ฅผ ํตํด ์ค์ผ์ผ ์
์์ฐ ๋ฐฐ์น๋ณ ๋๋ฑ์ฑ์ ์
์ฆํ์ฌ ์ ์กฐ๋ฒ์ ๋ํ ์ ํจ์ฑ์ ๊ฒ์ฆํ์๋ค.</p> | ์ ํ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ๊ณผ ๋์์์ ๋ช ์ข
์ด์์ ํํฉ๋ฌผ๋ค์ ๋ถ๋ฆฌํ๋์? |
48์๊ฐ | <p>๋จ๋ฐฑ์ง ์ถ์ถ์ ๋ง์ฐฌ๊ฐ์ง๋ก ํ์ง์ ํ 48์๊ฐ ๊ฒฝ๊ณผ ํ RiPA buffer (50\( \mathrm{mM} \) Tris-HCl of \( \mathrm{pH} \) 8.1, 150\( \mathrm{mM} \mathrm{NaCl} \), 1\( \% \mathrm{v} / \mathrm{v} \) NP-40, 0.5\( \% \) \(\mathrm{w} / \mathrm{v} \) sodium deoxycholate, 0.1\( \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \) sodium dodecyl sulphate and protease inhibitor)๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 30 ๋ถ๊ฐ ๋ฐฉ์นํ ํ scraper๋ก ์ธํฌ๋ฅผ ๊ฑท์๋ค. ์ฉํด๋ ์ธํฌ๋ฅผ ์ด์ํ ๋ถํดํ ํ ์์ฌ ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. Bicinchoninic acid assay๋ฅผ ํตํด ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ ๋ํ๊ณ SDS-polyacrylamide gels ์์ ํฌ๊ธฐ ๋ณ๋ก ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ polyvinylidene difluoride membrane ์ ์ฎ๊ธด ๋ค์ ์ผ์ฐจ ํญ์ฒด๋ฅผ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( \mathrm{O} / \mathrm{N} \) (overnight)์ผ๋ก ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. TBS-Tween ์ฉ์ก์ผ๋ก ์ธ์ฒ ํ ์ด์ฐจํญ์ฒด์ ์์จ์์ 1์๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ ์๊ณผ ๋์ผํ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก 1์๊ฐ ๋์ ์ธ์ฒํ์๋ค. ECL detection kit (Biosesang, Seongnam, Korea) ์ฉ์ก๊ณผ ๋ฐ์์์ผ ํ๋ฆ์ ๊ฐ๊ดํ์ฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค.</p><p>HBx ๋ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๊ฐ์ผ ์ด๊ธฐ ๋จ๊ณ์์ ์ ์ ์ ๋ณต์ ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ ๋ถ๋ง ์๋๋ผ B ํ ๊ฐ์ผ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค์ ๊ด๋ จ๋ ์ง๋ณ๊ณผ hepatocellular carcinoma ๋ฐ๋ณ์ ํต์ฌ์ ์ธ ์ญํ ์ ํ๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ B ํ ๊ฐ์ผ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค์์ ๋ฐํ๋๋ HBx ๋จ๋ฐฑ์ง์ด ๊ฐ์ฌ์ ํ ๋ฐ๋ณ์ ์ด๋ค ์ญํ ์ ํ๋์ง ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ์ฌ HBx ๋ฅผ ๋ฐํํ์กฐ๋ก ์ธํฌ๋ฅผ ํ์ง ์ ํํ์ฌ ์คํ์ ์ํํ์๋ค. ๋จผ์ vector 10\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฅผ ํ์ง ์งํํ ๋์กฐ๊ตฐ(vector) ๊ณผ HBx 10\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฅผ ํ์ง ์ ํํ ์คํ๊ตฐ HBx ์์ RNA ๋ฅผ ์ถ์ถํ์ฌ RT-PCR์ ํตํด HBx mRNA ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค. ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋์กฐ๊ตฐ์์๋ HBx mRNA๊ฐ ๋ฐํ๋์ง ์์๊ณ ์คํ๊ตฐ์์ ๋ฐํ๋ ๊ฒ์ ํตํด ํ์ง์งํ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ก์์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. 1A). Bํ ๊ฐ์ผ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค์ ๊ฐ์ผ๋์ด ๊ฐ์ฌ์ ํ๊ฐ ์งํ๋ ํ์์๊ฒ์ fibrotic marker์ธ vimentin๊ณผ fibronectin์ด ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์๋ค. ์ด ํ์์ด HBV์ HBx ์ ์ํ ๊ฒ์ธ์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด HBx ๋ฅผ ํ์ง์งํ์ํจ ํ vimentin๊ณผ fibronectin์ mRNA ๋ฐ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค (Fig. 1B, C). Vimentin์ type intermediate filament ๋จ๋ฐฑ์ง๋ก ์ธํฌ์ด๋(cell migration), ๋ถ์ฐฉ(adhesion) ๋ฑ์ ์ ๋ํ๋ฉฐ ๊ฐ์ฌ์ ํ์์ HSC ๊ฐ ํ์ฑํ๊ฐ ๋์ด ์๋ ๋์ ๋ฐํ๋๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. Fibronectin์ ๊ฐ์ฌ์ ํ ๊ณผ์ ์์ ์ค์ํ ์ธํฌ์ธ๊ธฐ์ง ์ค ํ๋์ด๋ค. ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ, HBx ๋ฅผ ํ์ง์ ํ์ํจ ์คํ๊ตฐ์์ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ vimentin์ mRNA์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ชจ๋ ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์์ผ๋ฉฐ, fibronectin ๋ํ ์ฆ๊ฐ๋ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์๋ค. ์ด ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํด HBx ๊ฐ ํ์ง์ ํ๋ Huh7 ์ธํฌ์์ ๊ฐ์ฌ์ ํ๊ฐ ์งํ๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค.</p><p>HBx ์ ์ํ ์ฌ์ ํ๊ฐ ์ด๋ ํ ๊ณผ์ ์ ๊ฑฐ์ณ ์ด๋ฃจ์ด์ง๋์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ ์คํ์ ์ํํ์๋ค. ์ํผ-๊ฐ์ฝ์ ํ(Epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)์ ์ํผ ์ธํฌ(epithelial cell)๊ฐ ์นจ์ค๋ฅ๋ ฅ๊ณผ ์ ์ด๋ฅ๋ ฅ์ ๊ฐ์ง๋ ์ธํฌ๋ก ๋ฐ๋๋ ๊ณผ์ ์ด๋ค. EMT ๊ฐ ๊ฐ์กฐ์ง์์ ๋ฐ์์ด ๋ ๋๋ ๊ฐ์ ์์์ด๋ ์ผ์ฆ์ด ๋ฐ์ํ์์ ๊ฒฝ์ฐ์ด๋ค. ๊ฐ์ธํฌ๊ฐ EMT๋ฅผ ๋ํด ๊ฐ์ฝ์ธํฌ๋ก ๋ถํ๋ ํ ๋ค์ ๊ฐ์ฝ์ํผ ์งํ์ ๊ฑฐ์น๋ฉด์ ์ฌ์์ด ์ผ์ด๋ ์์์ด ํ๋ณต๋๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๊ทธ ์์์ด๋ ์ผ์ฆ์ด ๊ณผ๋ํ ๊ฒฝ์ฐ ๊ธฐ์ง ์ฌํ์ฑ์ด ์ ๋ฐ๋์ด ๊ฐ์ฌ์ ํ๊ฐ ๋ฐ์ํ๊ฒ ๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๊ฐ์ฌ์ ํ์ ์์ธ์ด ๋๋ EMT์ ํต์ฌ์กฐ์ ์์ธ ์ง์ฌ์ธ์ snail (snai1)๊ณผ slug (snai2)์ mRNA์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. 2). ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ slug๋ mRNA์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ชจ๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ ๊ฒ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์์ผ๋ฉฐ snail์ mRNA ์์ค์์๋ ์คํ๊ตฐ์์ ์ ์์ ์ฐจ์ด๊ฐ ์๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์์ง๋ง ๋จ๋ฐฑ์ง ์์ค์์๋ ์ ์์ ์ฐจ์ด ์์ด ๋ฏธ์ธํ ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ๋ณด์๋ค. Slug์ ์ํ vimentin ์ ์กฐ์ ์ ์ฌ๋ฌ ๋
ผ๋ฌธ ์ํด ๋ณด๊ณ ๋์ด์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ HBx ์ ์ํ vimentin์ ์ฆ๊ฐ๋ snail๋ณด๋ค๋ slug๋ฅผ ํตํด ์กฐ์ ๋ ๊ฒ์ด๋ผ ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ๋ค์ด ROS๊ฐ ์ธํฌ ์ฆ์, ๋ถํ, ์ด๋๊ณผ ๊ฐ์ ๋ค์ํ ์ธํฌ ๊ณผ์ ์ ๊ด์ฌํ๋ค๋ ๋ด์ฉ์ ๋
ผ๋ฌธ์ด ๋ง์ด ๋ฐํ๋๊ณ ์๋ค. ROS ๊ฐ ์ฌ์ ํ์ ์์์์ ์ด๋ ํ ์ญํ ์ ํ๋์ง๋ ์ ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, EMT์ ๊ด๋ จ์ด ์๋ค๋ ์ฌ์ค ๋ํ ๊ณ์ํด์ ๋ฐํ์ง๊ณ ์๋ค. NOX๋ ๋ค์ํ ์๊ทน์ ์ํด ROS๋ฅผ ๋ฐ์ํ๋ ํจ์๋ก, ๊ฐ ๋ด์์ NOX system์ ์ํด ๋ฐ์๋๋ ์ฐํ์คํธ๋ ์ค๋ ์ฌ๋ฌ ๊ฐ์ง ๊ฐ์งํ๊ณผ ๊ฐ์ฌ์ ํ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. NOX4๋ ROS ๋ฅผ ์์ฑํ๊ณ ๊ทผ์ฌ์ ์์ธํฌ(myofibroblast)์ ํ์ฑํ๋ฅผ ์กฐ์ ํ์ฌ ํ์ ์ ์ฅ์ ์ฌ์ ํ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ค. ์ด์ snail๊ณผ slug์ ์ฆ๊ฐ๊ฐ ROS์ ๊ด๋ จ๋์ด ์๋์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด NAPDH oxidase์ ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ HBx ๊ฐ ํ์ง์ ํ๋ ์คํ๊ตฐ์์ NOX4 ๊ฐ mRNA ์ ๋จ๋ฐฑ์ง ์์ค ๋ชจ๋์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๊ณ ๋ ๋ค๋ฅธ NADPH oxidase์ธ NOX2 ๋ NOX4 ์๋ ๋ฌ๋ฆฌ HBx ์ ์ํ ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๋ค(Fig. 3).</p> | ์ด์ฐจํญ์ฒด์ ๋ฐ์์ํค๊ณ ์ธ์ฒ ํ ์ด๋ค ์ฉ์ก์ ์ด์ฉํ์ฌ ํ๋ฆ์ ๊ฐ๊ดํ์ฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ ์ ์๋์? |
End of preview. Expand
in Dataset Viewer.
README.md exists but content is empty.
Use the Edit dataset card button to edit it.
- Downloads last month
- 0