instruction
stringlengths 10
576
| output
stringlengths 1
626
| input
stringlengths 176
6.5k
|
---|---|---|
cosmosiin ๋ณด๋ค apigenin์ด ์ข๋ ํญ๊ท ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ฐํ์ก์ด? | NO | <h2>์ฝ์ค๋ชจ์ค์ซ Silica gel column chromatography ๋ถํ๋ฌผ์ ํญ๊ท ํ์ฑ ํจ๊ณผ</h2><p>\(3\)์ข
์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ด ๋ณด์ฌ์ค ํญ๊ท ํ์ฑ ์ค์์๋ EtOAc์ธต ๋ถํ๋ฌผ์ด S. aureus์ ๋ํด ๋ํ๋ธ ์ฐ์ํ ํญ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ข ๋ ์ดํด ๋ณด๊ธฐ ์ํด Silica gel column chromatography๋ฅผ ์ค์ํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํด ํฐ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ๊ณผ ๋ถํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต ๋ถํ๋ฌผ์ \(5\)๊ฐ๋ก ๋ถํํ์ฌ ๋ฌผ์ง์ ์ป์๊ณ ์์ฃผ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ถฉ ๋ถํ๋ฌผ์ \(3\)๊ฐ์ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ป์๋ค. ๋ฌผ์ง์ ๋ถ๋ฆฌ๋ TLC๋ฅผ ํตํด ํ์ธํ์๋ค.</p><p>์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ silica gel column chromatography ๋ถํ๋ฌผ(์ดํ, silica gel ๋ถํ๋ฌผ)๋ค์ ๋ํด \( 24 \mathrm{h} \)๋์ ํญ๊ท ํ์ฑ ์คํ์ ์งํํ ๊ฒฐ๊ณผ ๊ท ์ ์ฑ์ฅ์ด ๋ํ๋์ง ์๋ ์ต์์ ํด๋๋์ ๋ํ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ด ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>\(3\)์ข
์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต silica gel ๋ถํ๋ฌผ์์ ํฐ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ๊ณผ ์์ฃผ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ Fr. \(1\)์ ๊ฒฝ์ฐ์ ๊ด์ฐฐ ๋๋ ๋ชจ๋์์ ๊ท ์ ์ฑ์ฅ์ด ์ต์ ๋์์ผ๋ฉฐ ์ต์์ ํด๋๋๊ฐ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๋ถํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ Fr. \(2\)์ ๊ฒฝ์ฐ์ ๋ชจ๋ ๊ด์ฐฐ ๋๋์์ ๊ท ์ ์ฆ์์ด ๋ํ๋์ง ์์์ผ๋ฉฐ ์ต์์ ํด๋๋๋ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค. ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต silica gel๋ถํ๋ฌผ ์ค์์๋ ์์ ์ต์์ ํด๋๋๊ฐ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ธ ๋ถํ๋ฌผ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ \( 0.2,0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ ๊ด์ฐฐ ๋๋์์๋ ๊ท ์ด ์ฑ์ฅํ์ง ์์ ๋ถํ๋ฌผ์๋ ๊ท ์ ์ฆ์์ ์ต์ ํ๋๋ฐ ๊ด์ฌํ๋ ๋ฌผ์ง์ด ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋๋ค. Olufunmiso์ Ashafa์ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ๋ณด๋ฉด, ์ฝ์ค๋ชจ์ค์ ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฑ๋ถ์ ๋ถ์ํ์๋๋ฐ \(34\)๊ฐ์ง์ ์๋ ค์ง ์ฑ๋ถ์ด \( 97.89 \% \)์ด๊ณ ์๋ ค์ง์ง ์์ ์ฑ๋ถ์ด \( 1.94 \% \)์ด๋ผ๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ด ์ฑ๋ถ๋ค ๊ฐ์ ์ฐํฉ์ด ํญ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์๋๋ฐ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํญ๊ท ๋ฌผ์ง๋ก ํ์
ํ apigenin์ ์ ์ ์ฑ๋ถ ๋ด์๋ ๋ถ์๋์ง ์์๋ค. ์ด๋ ์ถ์ถ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ถ์ถ ์ฑ๋ถ์ ์ฐจ์ด์์ ๋น๋กฏ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋์๋ค.</p><h2>์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ ํจ์ ๋ ์ฒ์ฐ๋จ์ผ ๋ฌผ์ง์ ํญ๊ท ํ์ฑ ๋น๊ต</h2><p>\(3\)์ข
์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ EtOAc์ธต silica gel ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ด์ฐฐ ๋๋ ์ค์์ ์ต์์ ํด๋๋๊ฐ ๋ํ๋ ํฐ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ Fr. \(1, 2\)์ ๋ถํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ Fr. \(1, 2, 3\) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์์ฃผ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ Fr. \(1\)์ ํจ์ ๋์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ ์ถ๋๋ ๋ฌผ์ง์ ๋ํด ํญ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ดํด๋ณด์๋ค. ์ฐ์ , ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ ๋ํ ํจ๊ณผ ์คํ์์ ํ์ค๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉ๋๋ cosmosiin๊ณผ cosmosiin์ ๊ตฌ์กฐ์์ ๋น์ด ์ ๊ฑฐ๋ ํํ์ธ apigenin์ ํญ๊ท ํ์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ ์ถ๋ฌผ์ง๋ก ์ ์ ํ์๋ค. Apigenin์ ์ ์ ์ cosmosiin์ด ์ฝ์ค๋ชจ์ค๊ฝ์ ํจ์ ๋ ๋ฌผ์ง ์ค์ ๋์ ๋น์จ์ ์ฐจ์งํ๊ณ ์๋ค๋ Saito์ ์ฐ๊ตฌ์ apigenin์ด ์ถ์ถ๊ณผ ๋ถํ ๊ณผ์ ์์ cosmosiin์์ ๋น์ด ์ ๊ฑฐ๋ ๋ ๋ํ๋๋ ๊ตฌ์กฐ๋ผ๋ ์ ์์ ๊ทผ๊ฑฐํ์๋ค. ๋ํ, Silica gel ๋ถํ๋ฌผ ์ค์ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)๋ฅผ ์ต์ ์ ํด๋๋๋ก ๊ฐ์ง๋ ๋ถํ๋ฌผ๋ค์์ apigenin๊ณผ ์ ์ฌํ ๋ฐ์ ํฉ์์ ํ๊ด๋น์ด ๊ด์ฐฐ๋ ์ , Rf ๊ฐ์ด \( 0.88 \)๋ก ๋์ผํ ์ ์ ํตํด์ ์ ์ ํ์๋ค.</p><p>์ ์ ๋ cosmosiin๊ณผ apigenin์ด S. aureus์ ๋ํด์ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ณด์ด๋์ง ์คํ์ ์งํํ์๋ค.</p><p>์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด cosmosiin ๋ณด๋ค apigenin์ด ์ข๋ ํญ๊ท ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค. ๊ด์ฐฐ ๋๋ ์ค์์๋ \(100 \mu \mathrm{M} \)๊ฐ \( 50 \mu \mathrm{M} \)์ ๋นํด \( 24 \mathrm{h} \)๋์ ๊ท ์ ์ฆ์์ ์ข๋ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ์งํ์๋ค. cosmosiin์ ๊ด์ฐฐ \( 9 \sim 15 \mathrm{h} \)์์ ์ผ์์ ์ผ๋ก ํญ๊ท ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>์ด๊ฒ์ผ๋ก ๋ถํ๋ฌผ๋ค ์์ cosmosiin๊ณผ apigenin์ ํํ๊ฐ ์กด์ฌํ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์์ ๋ฟ ์๋๋ผ ์ด ์ค์ apigenin์ด ์ฐ์ํ์ง๋ ์์ง๋ง ํญ๊ท ํจ๊ณผ์ ๊ด๋ จ๋ ๋ฌผ์ง ์ค์ ํ๋์ผ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค.</p> |
Table 11 Effects of various enzyme treatments on the solubilization of defatted perilla seed residue ์์ Relative protein content๊ฐ \( 90.19 \pm 10.01 \)์ธ ๊ฒฝ์ Enzymes์ ๋ญ์ผ? | \( 121.93 \pm 16.45 ^ { 1) } \) | <h3>๋ฏธ์๋ฌผ ๋ฐฐ์</h3> <p>Lenconostoc mesenteroides \( 10-12 \) ๊ท ์ฃผ๋ฅผ Lactobacilli MRS broth์ \( 36 ^ {\circ } \mathrm { C } \)์์ 19์๊ฐ ๋์ ์ข
๋ฐฐ์ํ๊ณ ๋ฐฐ์์ก๋ฅผ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ \( \left (3000 \times \mathrm { g } , 10 \mathrm { ~min } , 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)ํ์ฌ ๊ท ์ฒด๋ฅผ ํ์ํ ๋ค์ ๋ฉธ๊ท ์์ผ์๋ก \(2 \)ํ ์ธ์ฒํ ํ ๊ท ์ฒด๋ฅผ ๋ฐฐ์์ก๊ณผ ๋์ผ ๋ถํผ์ ๋ฉธ๊ท ์์ผ์์์ ํํํ์๋ค. ๋ค๋ฅธ ์์์ฑ๋ถ์ ์ฒจ๊ฐ ํ์ง ์๊ณ ๋ฉธ๊ท ํ์ฌ ์ค๋นํ ๋ค๊นจ๋ฐ ํจ์๋ถํด๋ฌผ์ ๊ท ์ฃผ ํํ์ก์ \( 5 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \)๋ก ์ ์ข
ํ๊ณ \( 36 ^ {\circ } \mathrm { C } \)์์ \( 180 \mathrm { rpm } \) ์ผ๋ก \(15 \)์๊ฐ ๋์ ์งํ ๋ฐฐ์ํ๋ณ์ ๊ท ์ ์์ก, ์ ์ ์ฐ๋์ ๋ณํ๋ฅผ ๊ฒฝ์์ ์ผ๋ก ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฐฐ์์ก์ \( \mathrm { pH } \)๋ \( \mathrm { H } \) meter๋ก ์ง์ ์ธก์ ํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ ์ฐ๋๋ ํฌ์ํ ๋ฐฐ์์ก 10 \( \mathrm { nL } \) ๋ฅผ phenolphthalein์ ์ง์์ฝ์ผ๋ก \(0.01 \)N NaOH๋ก ์ ์ ํ์ฌ ์ ์ฐ ํจ๋์ผ๋ก ํ์ํ์๋ค. ๊ท ์ ์์ก ์ ๋๋ \( 610 \mathrm { ~nm } \) ์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ๋ชจ๋ํฐ๋งํ์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ์ผ๋ก๋ ๋ค๊นจ๋ฐ ๋ฏธ๋ถํด๋ฌผ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p> <h2>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h2> <h3>๋ค๊นจ๋ฐ ๋ถํดํจ์ ์ ๋ณ</h3> <p>ํ์ง ๋ค๊นจ๋ฐ์ ๊ฐ๊ฐ \( 30-40 \% \) ํจ์ ๋์ด ์๋ ํ์ํ๋ฌผ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ํจ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ก ๊ฐ์ฉํํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์์
์ฉ ํ์ํ๋ฌผ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ์ ๋ณํ์๋ค. \( 10 \%( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \) ๋ค๊นจ๋ฐ ํํ์ก์ ๋ค๊นจ๋ฐ ์ค๋์ \( 1 \% \)๋ก ํจ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐ์์ํจ ํ ํจ์ ์ฒ๋ฆฌ ์๋ฑ์ก์ ํ์ํ๋ฌผ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง ํจ๋์ ๋ถ์ํ์ฌ ํจ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์๊ณ ๋จ์ ์ถ์ถํ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์๋ค(Table \(1 \)). ํ์๋น์ ํจ๋์ Ceremix \( >\) Alcalase \( \geq \) Viscozyme \( >\) Protamex \( >\) Flavourzyme \( >\) Neutrase \( >\) Pectinase ์์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค \( 27.0-68.9 \% \), ๋จ๋ฐฑ์ง ํจ๋์ Alcalase \( >\) Protamex \( >\) Neutrase ์์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฐ ๋ณด๋ค \( 3.5 \sim 21.9 \% \) ์ฆ๊ฐํ์๋ค. Ceremix๋ \( \alpha \)-amylase, \( \beta \)-glucanase, cellulase, pentosanase ๋ฑ์ ํผํฉํจ์์ ์ ๋ก ํ์๋น ํจ๋์ ๋์กฐ๊ตฐ ๋๋น ์ฝ \( 70 \% \), Alcalase๋ ๋จ๋ฐฑ์ง ํจ๋์ ๋์กฐ๊ตฐ ๋๋น \( 20 \% \) ์ด์ ํญ์์ํค๋ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ค๊นจ๋ฐ์ ํ์ํ๋ฌผ ๋ถํด์๋ Ceremix, ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํด์๋ Alcalase๋ฅผ ์ฌ์ฉํ๋ ๊ฒ์ด ์ ์ ํ๋ค๊ณ ์ฌ๋ฃ๋๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ค๊นจ๋ฐ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๊ฐ์๋ถํด์์ Flavourzyme์ด Alclase๋ณด๋ค ๋์ ๊ฐ์๋ถํด๋๋ฅผ ๋ณด์ธ๋ค๋ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์์ดํ ๊ฒ์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถ๋ฆฌ์์ด ๋ค๊นจ๋ฐ์ ํจ์์ ๊ธฐ์ง๋ก ์ฌ์ฉํ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์ธ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๋ํ, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ ์ฒ๋ฆฌ๋ก ํ์๋น์ ํจ๋์ด ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ ๋ค๊นจ๋ฐ์ ์กด์ฌํ๋ ๋น๋จ๋ฐฑ์ง ๋ณตํฉ์ฒด์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถ๋ถ์ ๊ฐ์ ๋ถํดํ์ฌ ๋ค๋น๋ฅ์ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฉํด๋๋ฅผ ์ฆ๊ฐ์ํค๋๋ฐ ๊ธฐ์ธํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฝํญ์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ธ Alcalase, Flavourzyme ๋ฑ์ผ๋ก ํ์ผ๋ฐ์ด๋ ๋์ ๋ถํดํ์์ ๋ ๋์กฐ๊ตฐ ๋ณด๋ค ํ์๋น ํจ๋์ด ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ ๋งค์ฐ ์ ์ฌํ์๋ค.</p> <table border><caption>Table \(1 \) Effects of various enzyme treatments on the solubilization of defatted perilla seed residue</caption> <tbody><tr><td>Enzymes</td><td>Relative protein content (%)</td><td>Relative reducing sugar content (%)</td></tr><tr><td>Alcalase</td><td>\( 121.93 \pm 16.45 ^ { 1) } \)</td><td>\( 146.62 \pm 16.24 \)</td></tr><tr><td>Flavourzyme</td><td>\( 32.27 \pm 4.51 ^ { * } \)</td><td>\( 133.78 \pm 26.76 \)</td></tr><tr><td>Nutrase</td><td>\( 103.53 \pm 8.00 \)</td><td>\( 129.73 \pm 7.64 \)</td></tr><td>Protamex</td><td>\( 117.06 \pm 17.77 \)</td><td>\( 135.81 \pm 8.60 \)</td></tr><td>Ceremix</td><td>\( 90.19 \pm 10.01 \)</td><td>\( 168.92 \pm 0.61 ^ { * } \)</td></tr></tr><td>Pectinase</td><td>\( 59.11 \pm 7.56 ^ { * } \)</td><td>\( 127.03 \pm 7.64 \)</td></tr></tr><td>Viscozyme</td><td>\( 65.65 \pm 2.39 ^ { * } \)</td><td>\( 145.95 \pm 34.40 \)</td></tr></tr><td>Control</td><td>\( 100 \pm 15.63 \)</td><td>\( 100 \pm 11.45 \)</td></tr></tbody></table> |
lancemaside A๋ ๋๋ ์ฃผ์ฐ์๋ฅผ ๊ตฌ๋ณํ๊ธฐ ์ํ ์ ์ฌ์ ๋์ฌ์ฒด ๋ง์ปค์ธ๊ฐ์? | YES | <h1>์ด ๋ก</h1><p>๋๋(Codonopsis lanceolata)์ ์ฃผ๋ก ํ๊ตญ, ์ค๊ตญ ๋ฑ ๋์์์ ์ง์ญ์ ์ฌ๋ฐฐ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋๋์ ๋ฟ๋ฆฌ๋ ๊ธฐ์นจ, ๊ธฐ๊ด์ง์ผ, ์ฒ์, ๊ฒฐํต, ์ํ ๋ถ๋์ ์ฆ์์ ์น๋ฃํ๊ธฐ ์ํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ํ ๋ฐ ์ ํต ์ํ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋์ด์ ธ ์๋ค. ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ์ ์ํ๋ฉด phenylpropanoids, polyacetylenes, saponins, flavonoids์ ๊ฐ์ ๋ค์ํ ์๋ฌผ ์ฒ์ฐ๋ฌผ ์ฑ๋ถ๋ค์ด ํญ๋น๋ง, ํญ์ผ, ํญ์, ํญ์ฐํ, ํญ๋ฏธ์๋ฌผ ํ์ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ์ฝ๋ฆฌํ์ ์์ฉ์ ๊ด์ฌํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. MS๊ธฐ๋ฐ ๋์ฌ์ฒดํ ๋ถ์์ ์ด์ฉํ ์ฃผ์ฐ์ง์ ๋ง์ปค ์ฑ๋ถ์ ์ ์ ํ๋ ๊ฒ์ ๋ค๋ฅธ ์ง์ญ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋ ์ฝ์ฉ ์๋ฌผ์ ์์ ์ฑ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ํํ์ ์กฐ์ฑ๊ณผ ์๋ฌผํ์ ํจ๋ฅ์ ๋ณํ์๋ ๊ด๋ จ์ด ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋ถ์์ฉ ์์ด ๋๋์ ์ ์ตํ ํจ๊ณผ๋ง์ ๋ณด์ฅํ๋๋ฐ ์ค์ํ๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ตญ๋ด์ฐ ๋๋์ ์ฃผ์ฐ์ง ํน์ฑ์ ๊ตฌ๋ณํ๊ธฐ ์ํด UPLC-QTOF-MS๋ฅผ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก ํ๋ ๋์ฌ์ฒด ํ๋กํ์ผ๋ง๊ณผ ๋ค๋ณ๋ ํต๊ณ๋ถ์ ๊ธฐ๋ฒ์ธ PCA๋ถ์์ ์ํํ์ฌ ํ๋ณ๋ชจ๋ธ์ ํ๋ฆฝํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ์ธ์ (๊ฐ์๋), ํก์ฑ(๊ฐ์๋), ๋ฌด์ฃผ(์ ๋ผ๋ถ๋)์ 3๊ฐ ๊ทธ๋ฃน์ด PCA์ loading plot ๋ถ์๊ฒฐ๊ณผ tangshenoside I, lancemaside A, lancemaside G๋ ๋๋ ์ฃผ์ฐ์ง๋ฅผ ๊ตฌ๋ณํ๊ธฐ ์ํ ์ ์ฌ์ ๋์ฌ์ฒด ๋ง์ปค๋ค๋ก ์ ์ํ์๋ค.</p> |
uralensis, G. glabra ๋ฐ SW๋ ์ด๋ป๊ฒ ์๋ฃ๋ฅผ ์กฐ์ ํ๋ ๋จ๊ณ๋ฅผ ๊ฑฐ์นฉ๋๊น? | ๋์ด์งํฅ์ฒญ ๊ตญ๋ฆฝ์์ํน์๊ณผํ์ ์ธ์ผํน์๋ถ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์คํ์ฌ๋ฃ</h2><p>2016๋
์ฌ๋ฐฐ๋ G. uralensis, G. glabra ๋ฐ SW์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋์ด์งํฅ์ฒญ ๊ตญ๋ฆฝ์์ํน์๊ณผํ์ ์ธ์ผํน์๋ถ(Eumseong, Korea)์์ ์ ๊ณต๋ฐ์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, voucher specimen์ ํ๊ตญ์ฝ์ฉ์์ํ ๋ณธ๊ด์ ๋ณด๊ด๋์ด ์๋ค. ๊ฑด์กฐ์ํจ G. uralensis, G. glabra ๋ฐ SW์ \( 50 \% \) ethanol์ ์ด์ฉํ์ฌ ์์จ์์ 72์๊ฐ ๋์ ์นจ์ง ํ, ์ฌ๊ณผ ๋ฐ ๊ฐ์ ๋์ถํ์ฌ ์๋ฃ๋ฅผ ์กฐ์ ํ์๋ค. ๊ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ dimethyl sulfoxide (DMSO, Sigma Co., St Louis, USA)์ ๋
น์ฌ \( 4{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๋ณด๊ดํ๋ฉด์, ์คํ ์ ํฌ์ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์์ผ</h2><p>In vitro ํญ์ฐํ ํ์ฑ ์ธก์ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazy(DPPH), 2-deoxyribose๋ Sigma์ฌ์์, \( \mathrm{FeSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) ๋ Daejung Chemicals \( \& \) Metals Co. Ltd (Siheung, Korea)์์, EDTA disodium salt dehydrate ๋ฐ phosphoric acid๋ Samchun Pure Chemical Co. Ltd (Pyeongtaek, Korea)์์ ๊ตฌ๋งคํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Thiobarbituric acid (TBA), trichloroacetic acid (TCA)๋ ๊ฐ๊ฐ Acros Organics (Fair Lawn, New Jersey, USA), Kanto Chemical Co. Inc (Tokyo, Japan)์์ ๊ตฌ๋งคํ์์ผ๋ฉฐ, phenezine methosulfate (PMS), nicotinamide adenine dinucleotide (NADH) disodium salt, nitrotetrazolium blue chloride (NBT) ์์ฝ์ Bio Basic Co. (Toronto, Canada)์ฌ์์ ๊ตฌ๋งคํ์ฌ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. C6 glial cell์ ํ๊ตญ์ธํฌ์ฃผ์ํ(Korea Cell Line Bank, Seoul, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ธํฌ ๋ฐฐ์์ ์ํด ์ฌ์ฉ๋ Dulbecco's modified eagle medium (DMEM) ๋ฐฐ์ง, fetal bovine serum (FBS) ๊ณผ \( 100 \mathrm{units} / \mathrm{mL} \) penicillin streptomycin, trypsin EDTA ์ฉ์ก์ Welgene (Daegu, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ธํฌ์ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค๋ฅผ ์ ๋ํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉํ \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) ๋ Junsei (Tokyo, Japan)์ฌ์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , cell viability๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉํ 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) ๋ฐ ROS ์์ฑ๋ ์ธก์ ์ ์ํ 2'-7'-dichlorofluorescin diacetate (DCF-DA)๋ Sigma์ฌ์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazy (DPPH) radical ์๊ฑฐ๋ฅ</h2><p>๊ฐ ๋๋๋ณ ์ถ์ถ๋ฌผ \( (5,10,25,50,100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) ์ EtOH์ ๋
น์ธ ์๋ฃ \( 100 \mu \mathrm{L} \) ์ \( 60 \mu \mathrm{M} \) DPPH์ฉ์ก \( 100 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ 96-well plate์ ํผํฉํ์ฌ 30๋ถ๊ฐ ์ค์จ์์ ๋ฐ์์ํจ ํ, \( 540 \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์คํ๊ตฐ์ ๋น๊ตํ์ฌ DPPH radical ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ค์์ ๊ณ์ฐ์์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ฐฑ๋ถ์จ(\( \% \))๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>DPPH radical scavenging activity \((\%)=\left(\mathrm{Abs}_{\mathrm{c}}-\mathrm{Abs}_{\mathrm{s}}\right) / \mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \times 100 \\ \)( \(\mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \) : Absorbance of control, \(\mathrm{Abs}_{\mathrm{s}} \) : Absorbance of sample)</p><h2>Hydroxyl radical \( (\cdot \mathbf{O H}) \) ์๊ฑฐ๋ฅ</h2></p>\( \cdot \mathrm{OH} \) radical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ์ Fenton ๋ฐ์์ ๋ฐ๋์ผ๋ฉฐ, \( 0.2 \mathrm{M} \) phosphate buffer saline (PBS)์ ๋๋๋ณ ์๋ฃ ์ฉ์ก \( 1400 \mu \mathrm{L} \) ์ \( 10 \mathrm{~mM} \quad \mathrm{FeSO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)-EDTA \( 200 \mu \mathrm{L}, 10 \mathrm{~mM} \) 2-deoxyribose solution \( 200 \mu \mathrm{L}, 10 \mathrm{mM} ~ \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} ~ 200 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ๊ทธ ํ 4์๊ฐ ๋์ \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๋ฐฐ์ ํ ๋ค, \( 2.8 \% \) TCA \( 1 \mathrm{~mL} \) ์ \( 1.0 \% \) TBA solution \( 1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ 20๋ถ ๋์ \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ๊ฐ์ดํ๊ณ ์ค์จ์์ ๋๊ฐ์ํจ ๋ค \( 490 \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์คํ๊ตฐ์ ๋น๊ตํ์ฌ \( \cdot \mathrm{OH} \) radical ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ค์์ ๊ณ์ฐ์์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ฐฑ๋ถ์จ(\( \% \))๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>\( \cdot \mathrm{OH} \) radical scavenging activity \( (\%)=\left(\mathrm{Abs}_{\mathrm{c}}-\mathrm{Abs}_{\mathrm{s}}\right) / \mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \times 100 \\ \)(\( \mathrm{Abs}_{\mathrm{c}} \) : Absorbance of control, \( \mathrm{Abs}_{\mathrm{s}} \) : Absorbance of sample)</p> |
์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๋์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉ๋๋ ๋ถ๊ดํ์ ์ธ ๊ธฐ๊ธฐ๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | NMR, MS, UV | <h2>UPLC-QTof-MS ๋ฐ PDF ๋ถ์ ์กฐ์ </h2><p>๋๋ฆ
๋๋ฌด ์ ์งํ ๋ฌผ์ง์ ์ ์ฑ๋ถ์์ ์ํด UPLC-QTof-MS์PDA ๋ถ์์ BEH \(\mathrm{C}_{18}(2.1 \times 100 \mathrm{mm}, 1.7 \mu \mathrm{m})\) ์นผ๋ผ ๊ด๊ณผ PDA (photodiode array)์ mass๋ฅผ ์ฅ์ฐฉํ UPLC์ ์ ์ \( 0.4 \mathrm{mL} / \)\( \mathrm{min} \), ์ฉ๋งค๋ \( 0.1 \% \) formic acid๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฆ๋ฅ์(A)์ ACN(B)์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ํํ์๋ค. UPLC ์ด๋์์ ์ฉ๋งค ์กฐ์ฑ์ 0.0-1.0 \({~min} ~1 \% \) (B), 1.0-3.0 \({~min}~1-15 \%\) (B), 3.0-11.0 \({~min} ~15-40 \% \) (B), 11.0-13.0 \({~min} ~40\%\) (B), 13.1-15.0 \({~min} ~40-1\%\) (B) ์กฐ๊ฑด์ ์ด์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ์๋ฃ๋ \( 2 \mu \mathrm{L}(1 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ถ์์ ์ค์ํ์๋ค.</p><h2>๊ตฌ์กฐ๋ถ์</h2><p>์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๋์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ NMR, MS, UV ๋ฑ์ ๋ถ๊ดํ์ ์ธ ๊ธฐ๊ธฐ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋จผ์ , \( { }^{1} \mathrm{H}-,{ }^{13} \mathrm{C}-\mathrm{NMR} \)์์ ์์์ ํ์์ ๊ฐ์์ chemical shift ๊ฐ์ผ๋ก ๊ธฐ๋ณธ์ ์ธ ๊ณจ๊ฒฉ์ ์์ํ์๊ณ , 2D-NMR (COSY, HMQC, HMBC, DEPT)์์ ์์-ํ์์ ์ฐ๊ด๊ด๊ณ๋ฅผ ํตํด ์นํ๊ธฐ์ ์ ํํ ์์น์ ํ์ ์ฐจ์๋ฅผ ํ์ธํ์ฌ ๋ฌผ์ง์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ํ์ธํ์๊ณ ์ ํ๋ฌธํ์ ํํฉ๋ฌผ๊ณผ ๋น๊ตํ์ธํ์ฌ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ์๋ค.</p><h2>Chlorogenic acid (3-O-caffeoylquinic acid)</h2><p>\( { }^{1} \mathrm{H} \) NMR \( \left(500 \mathrm{MHz}\right. \), methanol-\( \left.d_{4}, \delta\right)\): 7.58(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 7.04(d, J=2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.94(dd, J=8.2,2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.78(d, J=8.2 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.30(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 5.36 (brd, 1H), 4.14(\(\mathrm{m}\), 1H), 3.65(\(\mathrm{m}\), 1H), 1.932 .22(\(\mathrm{m}\), 4H) \(\mathrm{ppm}\) \(;{ }^{13} \mathrm{C}\) NMR\((125 \mathrm{MHz} \), methanol-\( \left.d_{4}, \delta\right)\): 178.4, 168.9, 149.5, 147.1, 146.8, 127.8, 123.0, 116.5, 115.3, 115.2, 77.3, 73.9, 72.1, 71.9, 39.4, 38.3 \(\mathrm{ppm}\)</p><h2>Nochlorogenic acid (5-O-caffeoylquinic acid)</h2><p>\( { }^{1} \mathrm{H}\) NMR \(\left(500 \mathrm{MHz}\right.\), methanol-\(\left.d_{4}, \delta\right)\): 7.56(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 7.05(d, J=2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.95(dd, J=8.2,2.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.78(d, J=8.2 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 6.27(d, J=16.0 \(\mathrm{Hz}\), 1H), 5.35 (m, 1H), 4.18 (brd, 1H), 3.75(m, 1H), 2,042.25(m, 4H) \(\mathrm{ppm};{ }^{13} \mathrm{C}\) NMR\((125 \mathrm{MHz} \), DMSO-\( \left.d_{6}, \delta\right)\): 175.6, 167.3, 148.1, 145.7, 145.3, 126.4, 121.6, 115.1, 113.8, 113.8, 74.7, 72.1, 70.5, 69.9, 36.8, 37.4 \(\mathrm{ppm}\)</p><h2>์ ๋ ๋ถ์</h2><p>๋ถ์ ์๋ฃ์ ์ ์กฐ ํ์ค ๋ฌผ์ง์ธ 3-O-caffeoylquinic acid์ 5-O-caffeoylquinic acid์ ๊ฐ๊ฐ์ ๋๋๋ฅผ \( 1000 \mathrm{ppm} \) ๋ง๋ค์ด ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ํ ์๋ฑ์ก์ ์ทจํ์ฌ ๋ถ์์ฉ vial ์ ๋ด์ ์งํํ์๋ค. ์ ๋ ๊ฐ์ ์ธก์ ๊ฐ์ ํผํฌ๋ฉด์ ์ ๊ฒ๋์ \( (\mathrm{y}=\mathrm{ax}+\mathrm{b}) \) ์์ ๋์
ํ ํ ๊ณ์ฐ์์ ์ํด ์ฐ์ถํ์๋ค. ๊ฒ๋์ ์ \( \mathrm{x} \)์ถ์ ๋ฐ๋ณต ์ ๋ฐ ๋ถ์ ์์ ์, \( \mathrm{y} \)์ถ์ ํผํฌ๋ฉด์ ์ ์ ์ฉํ์ฌ ์ต์์์น๋ฒ์ผ๋ก ์ฐ์ถ ํ์๋ค. ํ๊ฐ ํญ๋ชฉ์ ํน์ด์ฑ, ์ง์ ์ฑ, ๊ฒ์ถ ํ๊ณ, ์ ๋ ํ๊ณ, ์๋ฃ ์๋ฅ์ 5 ๊ฐ์ง ํญ๋ชฉ์ผ๋ก ํ๊ฐํ์๋ค.</p> |
\( 30{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ํจ์ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์ด? | YES | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์ฌ์ฉ๊ท ์ฃผ, ๋ฐฐ์ง ๋ฐ ๋ฐฐ์</h2><p>๋ณธ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ Pseudoxanthomonas sp. WD12์ WD32๊ท ์ฃผ๋ ๋ถํจํ ๋๋ฌด์์ ๋ถ๋ฆฌํ ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , ๋ฐฐ์์ LB ๋ฐฐ์ง(sodium chloride \( 0.5 \% \), tryptone \( 1.0 \% \), yeast extract \( 0.5 \% \); Duchefa biochemie, Netherlands)์ \( 0.1 \% \) Difco skim milk (BD, Sparks, MD, USA)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ง๋ ๋ฐฐ์ง๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๊ท ์ฃผ๋ \( 37{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ์ต๊ณ ํ์ฑ์ ๋ณด์ธ ๋ฐฐ์์๊ฐ (WD 12๋ \(100\) ์๊ฐ, WD32๋ \(80\) ์๊ฐ) ๋์ ๋ฐฐ์ํ๊ณ ๊ท ์ ์ฑ์ฅ์ ํก๊ด๋ \( 600 \mathrm{~nm} \) ์์ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>ํจ์ํ์ฑ ์ธก์ </h2><p>๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ ํ์ฑ ์ธก์ ์ ๋ฐฐ์์ก์ \( 4{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( 8,000 \mathrm{rpm} \) (Micro \( 17 \)R, Hanil, Kimpo, Korea)์์ \( 5 \)๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ํ์ฌ ๊ท ์ฒด๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ ์๋ฑ์ก์ ์กฐํจ์์ก์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค. ํจ์์ ํ์ฑ ์ธก์ ์ ๊ธฐ์ง๋ก \( 0.5 \%(\mathrm{w} / \mathrm{v}) \) azocasein์ ์ฌ์ฉํ ์กฐ ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์๊ฑฐํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ ํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ ๊ฐ์ ๋ชจ๋ \( 3 \) ํ ๋ฐ๋ณต ์ธก์ ํ์ฌ ํ๊ท ๊ฐ๊ณผ ํ์คํธ์ฐจ๋ก ํ์ํ์๋ค.</p><h2>์ต์ \( \mathrm{pH} \), ์จ๋์กฐ๊ฑด ๋ฐ ๊ธ์์ด์จ</h2><p>์ต์ \( \mathrm{pH} \) ์ธก์ ์ ์ํด \( \mathrm{pH} 6.0 \) ์์ \( \mathrm{pH} 7.0 \) ๊น์ง๋ \( 0.5 \mathrm{M} \) phosphate ์์ถฉ์ฉ์ก, \( \mathrm{pH} 8.0 \) ์์ \( \mathrm{pH} 9.0\) ๊น์ง๋ \( 0.5 \mathrm{M} \) Tris-\( \mathrm{HCl} \) ์์ถฉ์ฉ์ก, \( \mathrm{pH} 10.0 \) ์์ \( \mathrm{pH} 11.0\) ๊น์ง๋ \( 2.0 \mathrm{M} \) glycine-\( \mathrm{NaOH} \) ์์ถฉ์ฉ์ก์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ํจ์ ๋ฐ์์จ๋๋ \( 10{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์๋ถํฐ \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์ด์ฉํ๋ฉฐ \( 5^{\circ} \mathrm{C} \) ๊ฐ๊ฒฉ์ผ๋ก ์กฐ์ ํ์ฌ ํจ์ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ธ์์ด์จ์ \( \mathrm{AgNO}_{3}\), \(\mathrm{KCl}\), \(\mathrm{NaCl}\), \(\mathrm{CaCl}_{2}\), \(\mathrm{CuSO}_{4}\), \(\mathrm{MgCl}_{2} \), \( \mathrm{MnSO}_{4}\), \(\mathrm{AlCl}_{3}\), \(\mathrm{FeCl}_{3} \) ์ ์ต์ข
๋๋๊ฐ \( 1 \mathrm{mM} \) ๋๋ \( 5 \mathrm{mM} \) ์ ๋๋๋ก ํจ์ ๋ฐ์์ก์ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค.</p> |
์ค๋์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก pH๋ ์ด๋ป๊ฒ ๋ณํ ๊น? | 24์๊ฐ | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์ด ํ๋ ๋ฐ ์ํ ์์๋ ํจ๋</h2><p>๋ฐํจ์ ๋ฅผ ์ ์กฐํ์ฌ 24์๊ฐ ์์ ํ ์ํจ ํ ๋ฐํจ์ ์ ์ด ํ๋๊ณผ ์ํ ์์๋ ํจ๋์ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ด ํ๋ ํจ๋์ MS๋ฅผ ๋ฃ์ง ์์ ๊ตฐ๋ค์์ ์๋น๋ ํจ์ ๋์ด ์์์ง๋ง MS๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์์ ๋ ๊ธ์ฆํ๋ ๊ฒ์ ๋ณผ ์ ์์๋ค. Bacteria์ ์ข
๋ฅ๋ ์ดํ๋ ํจ๋์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น์ง ์์์ ์ดํ๋ ํจ๋์ BA+MS, LP+MS ๊ตฐ๋ค์ด YF, LP, BA๊ตฐ๋ค๋ณด๋ค ํต๊ณ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ๊ฒ ๋์๋ค. ์ด ์ํ ์์๋ ํจ๋๋ ํ๋์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ ์์์ ๋์๋๋ฐ, YF, BA, LP๊ตฐ๋ค์์๋ ์ด ์ํ ์์๋ ํจ๋์ด ๋งค์ฐ ๋ฎ์์ผ๋ฉฐ MS๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ ๋ ๊ธ๊ฒฉํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ ์ด ํจ๋๋ bacteria์ ์ข
๋ฅ์ ์ํด์๋ ์ํฅ์ ๋ฐ์ง ์์๋ค. ์ค๋+์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฒจ๊ฐ๊ฐ ์ด ์ํ ์์๋๊ณผ ์ด ํ๋ ํจ๋์ ์ฆ๊ฐ์ํจ ๊ฒ์ ์ค๋์ ์ํ ์์๋์ด ๋ง์ด ํจ์ ๋์ด ์๋ ๊ฒ๊ณผ ๊ด๋ จ์ด ์๋ค. ์ํ ์์๋์ ์ด์ ๋ถ์์ ํ์ฌ \( 70{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์ด์์์ ์งง์ ์๊ฐ ๊ฐ๊ณตํ๋ ๋์์๋ ํ๊ดด๊ฐ ๋ง์ด ์ผ์ด๋๋๋ฐ, \( 37{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์์ 24์๊ฐ ๋์ ๊ณต๊ธฐ์ ์ ์ดํ๋ฉด์ ๋ฐํจํ๋๋ฐ๋ ์ํ ์์๋์ ํ๊ดด๊ฐ ์์ฃผ ๋์ง๋ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ ๊ณต๊ธฐ๋ณด๋ค๋ ์ด์ด ์ํ ์์๋ ํ๊ดด์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ๊ฒ์ ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p><h2>pH์ ์ฐ๋</h2><p>์ ์ฐ๊ท ์ ์ข
๋ฅ์ ์๊ฐ์ ๋ฐ๋ฅธ pH์ ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์ฐจ์ด๋ Table 3์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๊ฐ ๊ตฐ๋ง๋ค ์ด๊ธฐ์ ๋ฐํจ ์์ ์ pH ๊ฐ์ \( 6.65 \pm 0.05 \)๋ก ์ ์ฌํ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๊ณ ๋ฐํจ ์๋ฃ ์์ ์๋YF์ ์ค๋ + ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ BA + MS๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฐํจ๊ฐ ์งํ๋๋ ๋์ LP์ BA๊ตฐ์ ์ค๋ + ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ ๊ตฐ์ ๋นํ์ฌ ๊ฐ์ด ๋ฎ์์ง๋ ํญ์ด ์ ์๋ค. ๋ฐํจ ์ด๊ธฐ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ BA๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์์ง๋ง \( 0.14 \pm 0.02 \)๋ก ์ ์ฌํ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฐํจ ์๋ฃ ์์ ์ ์ค๋+์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฒจ๊ฐํ ๊ฒ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๊ณ , YF, LP, BA์์ผ๋ก ๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฐํจ๊ฐ ์งํ๋๋ ์๊ฐ์์๋ ๋ฐํจ ์๋ฃ ์์ ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ ์์์ ๋ณด์๋๋ฐ, ์ค๋+์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ ์ ๊ธฐ์ฐ ๊ฐ์ด ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>pH ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ์ ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋๋ฐ, pH ๊ฐ์ด ๋ฎ์์๋ก ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ๋์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ์ค๋ \(+\) ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ฒจ๊ฐ ๊ตฐ์ด ๋ค๋ฅธ ๊ตฐ๋ณด๋ค pH๋ ๋ฎ๊ณ , ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ๋์๋ค. ์ด๋ ์ ์ฐ๊ท ์ ์ ๊ธฐ์ฐ์ ๋ํด ์ค๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ๋ํด์ ธ pH๊ฐ์ด ๋ ๋ฎ๊ฒ, ์ ๊ธฐ์ฐ๋์ ๋ ๋๊ฒ ๋์จ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ธ๋ค. Yang ๋ฑ์ ์ค๋ ๋์ถ์ก ์ฒจ๊ฐ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ํ์ pH ๊ฒฐ๊ณผ, ์ค๋์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋ง์์ง๋ฉด ์ด๊ธฐ pH ๊ฐ์ด ๋ฎ์์ก๋ค. Celik์ Bakirci๋ ์ค๋ ์ฒญ์ ์ฒจ๊ฐํ ๋ฐํจ์ ์ pH์์ ์ค๋ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ด๊ธฐ๋ถํฐ ๋ฎ์ pH๊ฐ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ํ์ง๋ง ๋ฐํจ ํ๋ฐ๊ธฐ์๋ ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค ๋์ pH๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋๋ฐ, ์ด๋ ์ค๋์ฒจ๊ฐ๊ตฐ ๋ฐํจ์ ์ ์ฐ๋๊ฐ ๋์์ง๋ฉด์ pH๋ ๋ฎ์์ ธ ๋ฐํ
๋ฆฌ์์ ์ ์ฐ ํ์ฑ์ ๋ฐฉํดํ์ฌ, ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค pH๋ ๋๊ณ ์ฐ๋๋ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ์ด๋ค์ S. thermophilus, L. bulgaricus, B. longum ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๊ณ ๋ฎ์ pH์ ๋์ ์ฐ๋์์ ์ ์ฐ์ ํ์ฑ์ด ์ง์ฐ๋์ด ๋ฐํจ ํ๋ฐ๊ธฐ์ ๋ณํ๊ฐ ๋ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ณธ ์คํ์์๋ ๋ด์ฐ์ฑ์ด ๊ฐํ ์๋ฌผ์ฑ ์ ์ฐ๊ท ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ค๋ \(+\) ์คํฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ฒจ๊ฐ์๋ pH์ ์ฐ๋์์ ์ง์์ ์ผ๋ก ์ข์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ธ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p> |
๋์
๊ณผ ๊ฐ์ ์์ ํด์ถฉ๋ค์ ๋ฐ๋ฉธํ๊ณ ์ ํ ๋์๋ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋ ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ๋ฉด ์๋๋๊ฐ? | NO | <h1>์ ๋ก </h1><p>๋์ฝ(pesticide)์ ๋ณํด์ถฉ๊ณผ ์ก์ด ๋ฑ์ ์ ๊ฑฐํ์ฌ ์๋ ์์ฐ๋์ ์ฆ๋์ํค๊ธฐ ์ํด ํ์ ๋ถ๊ฐ๊ฒฐํ ๋์์ฌ์ด๋ค. ๋ค์ํ ๋์ฝ๋ค ์ค์์ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ ๋์
๊ณผ ๊ฐ์ ์์ ํด์ถฉ๋ค์ ๋ฐ๋ฉธํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉ๋๋ ๋ํ์ ์ธ ์ด์ถฉ์ ์ฑ๋ถ ์ค์ ํ๋๋ก์จ ๋์ ์๋ฅ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ์ ๊ธฐ์ผ์(organochlorine) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ ๋์ฒดํ๊ธฐ ์ํด์ ์ ๊ธฐ์ธ(organophosphorus) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ฐ ์นด๋ฐ๋ฉ์ดํธ(carbamate) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๋๋ถ์ด \(1970\) ๋
๋ ์ดํ๋ถํฐ ๋งค๋
์ฌ์ฉ๋์ด ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์๋ค. ๋น๋ก ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ด ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ ๊ธฐ์ธ(organophosphorus) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ ๋นํด์ ์ธ๊ฐ์ ๋ํ ์น๋ช
์ ์ธ ๋
์ฑ์ด ๋ฎ๋ค๊ณ ํ๋๋ผ๋, ๊ณ ๋๋์ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๋
ธ์ถ๋๊ฑฐ๋ ์ ๋๋์ ์ง์์ ์ผ๋ก ๋
ธ์ถ๋๋ค๋ฉด ๋ด๋ถ๋น ๊ต๋, ๋ฆผํ์ ๊ณผ ๋น์ฅ์ ์์ ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฐ์๊ณผ ๊ฐ์ ๋ค์ํ ์ฆ์์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ์๋ ์ฆ๊ฐ๋ก ์ธํ์ฌ ์ถ์ด ์ฌ์ ๋ก์์ง์ ๋ฐ๋ผ ๋ง์ ์๋น์๋ค์ ์๋ฅ ๋์ฝ์ผ๋ก๋ถํฐ ์์ ํ ๋จน๊ฑฐ๋ฆฌ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ๋์์ง๊ณ ์๋ค. ๊ตญ๋ด ๊ณต๊ณต๊ธฐ๊ด๋ค์ด ์กฐ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด \(2012\) ๋
๋ถ์ฐ์ง์ญ์์ ์ถํ/์ ํต๋๋ ๋์ฐ๋ฌผ \(3,996\)๊ฑด์ ์กฐ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ, ์๋ฅ ๋์ฝ์ด ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(57\) ํ๋ชฉ \(499\)๊ฑด์ผ๋ก ์ถํ/์ ํต ๋์ฐ๋ฌผ์ \( 12.5 \% \) ์ ๋ฌํ๋ฉฐ, ๊ทธ ์ค ์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค์ ์ด๊ณผํ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(32\)๊ฑด์ผ๋ก \( 0.8 \% \) ์ ์ด๋ฅด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์กฐ์ฌ๋์๋ค. ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๋์ฐ๋ฌผ ๊ฒ์ถ ํํฉ์ ๋ณด๋ฉด ๋นํํธ๋ฆฐ (bifenthrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(15\) ํ ๊ฒ์ถ ์ค \(2\) ๊ฑด์ด ๊ธฐ์ค์น๋ฅผ ์ด๊ณผํ ๊ฒ์ผ๋ก, ์ธ์ดํผ๋ฉํธ๋ฆฐ(cypermethrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \( 5 \) ํ ๊ฒ์ถ, ํํ๋กํํธ๋ฆฐ(fenpropathrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(3\)ํ ๊ฒ์ถ, ์ธ์ดํ ๋กํธ๋ฆฐ (cyhalothrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(1\)ํ ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. \(2012\)๋
๊ฒฝ๊ธฐ๋์์ ์ ํต๋ ์ด \(11,008\)๊ฑด์ ๋์ฐ๋ฌผ์ ์๋ฅ๋์ฝ์ ๋ถ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ, ์๋ฅ ๋์ฝ์ด ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(665\)๊ฑด์ผ๋ก ์ ์ฒด ์ ํต ๋์ฐ๋ฌผ์ \( 6.0 \% \) ๋ฅผ ์ฐจ์งํ๋ฉฐ ์ด๋ค ์ค ์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค์ ์ด๊ณผํ ๊ฒฝ์ฐ๋ \(160\) ๊ฑด์ผ๋ก \( 1.5 \% \) ๋ฅผ ์ฐจ์ง ํ์๋ค. ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋ (pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๊ฒ์ถ ํํฉ์ ๋ณด๋ฉด ๋นํํธ๋ฆฐ(bifenthrin) ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(28\) ํ ๊ฒ์ถ ์ค \(3\)๊ฑด์ด ๊ธฐ์ค์น๋ฅผ ์ด๊ณผ, ์ธ์ดํผ๋ฉํธ๋ฆฐ (cypermethrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(10\) ํ ๊ฒ์ถ ์ค \(2\)์ด ๊ธฐ์ค์น๋ฅผ ์ด๊ณผ, ํํ๋กํํธ๋ฆฐ(fenpropathrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(3\)ํ ๊ฒ์ถ, ์ธ์ดํ ๋กํธ๋ฆฐ (cyhalothrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(2\)ํ ๊ฒ์ถ, ํผ๋ฉํธ๋ฆฐ(permethrin)์ ๊ฒฝ์ฐ ์ด \(1\)ํ ๊ฒ์ถ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค.</p><p>์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ์ ๊ฒฝ์ฐ, ๊ด ์ฐํ(photooxidation), ํํ์ ์ฐํ(chemical oxidation)์ ์๋ฌผํ์ ๋ถํด(biodegradation)์ ๊ฐ์ ๋ฐฉ๋ฒ๋ค์ ์ํด์ ๋ถํด๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ํนํ ํ ์๊ณผ ํด์ ๋ฌผ ๋ฑ์์๋ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ด ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋ (pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ์ ๋ค์ ๋ถํดํ๋๋ฐ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ด์ ๊ด๋ จํ์ฌ Bacillus subtilis, Brevibacterium aureum, Pseudomonas aeruginosa, Sphingobium sp., Streptomyces aureus ๋ฑ์ ๋ฏธ์๋ถ๋ค์ ์ํด์ ๋ค์ํ ์ข
๋ฅ์ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ค์ถฉ์ ๋ค์ ์๋ฌผํ์ ๋ถํด์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ค์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ค์ํ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋(pyrethroid) ๊ณ์ด ์ด์ถฉ ์ฑ๋ถ๋ค ์ค์์ ์ฌ์ดํผ๋ฉํธ๋ฆฐ (cypermethrin)์ ์๋ฌผํ์ ๋ถํด๋ฅผ ์ํ ์๋ก์ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ยท ๋์ ํ๊ณ ๋ถํด ํน์ฑ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์ํํ์๋ค.</p> |
Melanin ์์ฑ์ ์ด๋ค ํจ์์ ์ํด ์กฐ์ ๋๋์? | ๊ณผ์์ ํผ๋ถ์นจ์ฐฉ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ค์ํ ๊ธฐ๋ฏธ, ์ฃผ๊ทผ๊นจ, ๊ฒ์ ๋ฐ์ ๋ฑ์ ํผ๋ถ์งํ์ ์์ธ | <h1>์ ๋ก </h1><p>Melanin์ ์์ธ์ ์ ๋น ์๋์ง๋ฅผ ํก์ํ์ฌ ์์ธ์ ์ ์ํ ์์์ผ๋ก๋ถํฐ ์งํผ ์ดํ์ ํผ๋ถ ๊ธฐ๊ด์ ๋ณดํธํ๋ ์ญํ ์ ํ๋ฉฐ, ํผ๋ถ ์์ฒด ๋ด์ ์๊ฒจ๋ ์ ํด์ฐ์ ๋ฐ free radical ๋ฑ์ ์ก์์ฃผ๋ ๋ฑ ์ธ๋ถ ์ ํด์ธ์๋ก๋ถํฐ ํผ๋ถ๋ฅผ ๋ณดํธํ๋ ์ ์ฉํ ์ญํ ์ ์ํํ๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๊ณผ๋ํ ์์ธ์ ๋
ธ์ถ๋ก ์ธํ ๋น์ ์์ ์ธ melanin์ ์์ฑ์ ๊ณผ์์ ํผ๋ถ์นจ์ฐฉ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ค์ํ ๊ธฐ๋ฏธ, ์ฃผ๊ทผ๊นจ, ๊ฒ์ ๋ฐ์ ๋ฑ์ ํผ๋ถ์งํ์ ์์ธ์ด ๋๋ฉฐ, ๋ ๋์๊ฐ์๋ ํผ๋ถ๋
ธํ ๋ฑ์ ์ผ๊ธฐ์์ผ ํผ๋ถ ๊ฑด๊ฐ์ ์ํํ๊ณ ์๋ค. Melanin ์์ฑ์ ์ฌ๋ฌ ๋จ๊ณ์ ํจ์์ , ํํ์ ์ธ ์ฐ์์ ์ธ ๋ฐ์์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง๋ฉฐ, tyrosinase, tyrosinase related protein-1 (TRP-1), TRP-2์ ๊ฐ์ ์ฃผ์ํ ํจ์์ ์ํด ์กฐ์ ๋๋ฉฐ tyrosinase๋ ๊ตฌ๋ฆฌ๋ฅผ ํฌํจํ rate-limiting ํจ์๋ก์ ๋ฉ๋ผ๋ ํ์ฑ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๊ณ ์๋ค. Tyrosinase๋ ๋ฉ๋ผ๋
ธ์ข(melanosome)๋ด์์ melanogenesis์ ์๋๊ฒฐ์ ๋จ๊ณ์ธ ์ด๊ธฐ๋ฐ์์ ์์ฉํ๋ ํจ์๋ก tyrosine์ ์ฐํ์์ผ 3,4-dihydrophenylalanine (DOPA)์ ์์ฑํ๋ tyrosine hydroxylase ํ์ฑ๊ณผ DOPA๋ฅผ ์ฐํ์์ผ DOPA quinone์ ๋ง๋๋ DOPA oxidase๋ก์ ์์ฉํ์ฌ ๋ฉ๋ผ๋ ์คํฉ์ฒด๋ฅผ ํฉ์ฑํ๋ ํต์ฌ ํจ์๋ก ์์ฉํ๋ค. ๊ธฐ์กด์ ๋ฏธ๋ฐฑ๋ฌผ์ง๋ก ์๋ ค์ง vitamin-c, kojic acid, arbutin์ ๋ฌผ์ง์ ๋ถ์์ ์ฑ, ์๋ ๋ฅด๊ธฐ ์ ๋ฐ, ํผ๋ถ์ ์๊ตฌ ํ์ํ, ๋ฐ์์ฑ ๋ฌผ์ง, ํผ๋ถํจ์์ ์ํ ๋ถํด ๋ฑ ๊ธฐ์กด์ ์๋ ค์ง ๋ฏธ๋ฐฑ์ ๋ค์ ๋ฌธ์ ์ ์ ํด๊ฒฐํ๊ณ ์ ๋ฉ๋ผ๋ ์ํฉ์ฑ์ ์ต์ ํ์ฌ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ ธ์ฌ ์ ์๋ ๋ฌด๋
์ฑ ์ฒ์ฐ์์ฌ ๊ฐ๋ฐ์ด ์๊ตฌ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์์์ ์ข
์์ถ์ถ๋ฌผ, ๋ฐฑ์ถ์ , ๊ฐ๊ตญ ์ถ์ถ๋ฌผ, ์ฒ๊ถ์ถ์ถ๋ฌผ, ์์ง์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฑ์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ๋ ์์ฌ๊ฐ ๊ฐ๋ณ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ์ ์ธ์ฆ๋ฐ์ ์ฌ์ฉ ์ค์ ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋, ๊ณ ๊ฐ ์์ฌ์ ํ๋์ ์ํ ์ ํ์ ์ธ ๊ณ ๊ฐ์ธต๋ง์ ํ๊น์ผ๋กํ๋ ์ ํ๋ค์ด ๊ฐ๋ฐ๋๋ ์ค์ ์ผ๋ก ์จ๋ฌด ๋ถ์ฐ๋ฌผ๊ณผ ๊ฐ์ด ๋์๋ฌผ์ ๋ถ์ฐ๋ฌผ ์์ฌํ๋ก ์ ๋ ดํ ๋น์ฉ์ ์์ฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ ๊ฐ ๊ธฐ๋ฅ์ฑํ์ฅํ ์์ฅ ํ๋๊ฐ ํ์ํ๋ค.</p><p>์จ๋ฌด(Coix lachryma-jobi var. ma-yuen Stapf)๋ ๋ฒผ๊ณผ(Gramineae)์ ํํด์ด์ด ์ด๋ณธ์ผ๋ก ์ผ์ฃผ(Coix lachryma-jobi L.)์ ๋ณ์ข
์ด๋ฉฐ, ์์ฐ์ง๋ ์ธ๋ ๋๋ ๋๋จ์์์๋ก ์ผ์ํ๊ณผ ์ฌ๋ฐฐํ์ผ๋ก ์ ์ธ๊ณ์ ์ด๋ ๋ฐ ์จ๋ ์ง์ญ์ ๋๋ฆฌ ๋ถํฌํ๋ค. ๊ตญ๋ด์์๋ ๊ฒฝ๊ธฐ๋ ์ฐ์ฒ๊ตฐ์ ๋ํ์ ์ธ ํน์ฐ๋ฌผ๋ก ๊ตญ๋ด ์ ์ฒด ์ฌ๋ฐฐ๋ฉด์ ์ ์ฝ 80\( \% \) ์ด์์ ์ฐจ์งํ๊ณ ์๋ค. ์จ๋ฌด์ ์ข
์๋ ์ํ๊ณผ ํ์ฝ์ฌ, ์ค๊ธฐ์ ์์ ๊ฐ์ถ์ ์ฌ๋ฃ๋ก ํ์ฉ๋๋๋ฐ, ํ๋ฐฉ์์๋ ์จ๋ฌด์ ์ข
ํผ๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ ์จ๋ฅผ ์์ด์ธ(่่กใพ)์ด๋ผ ํ์ฌ ๋ถ์ข
, ์ ๊ฒฝํต, ๋ฅ๋จธํฐ์ฆ, ๋ฐฉ๊ด๊ฒฐ์ ๋ฑ์ ์ฝ์ฌ๋ก ์ฐ๋ฉฐ, ๋ฟ๋ฆฌ๋ ํฉ๋ฌ๊ณผ ์ ๊ฒฝํต์ ์น๋ฃ์ ์ฌ์ฉํ๋ค. ์จ๋ฌด ์ข
์์ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ก๋ ํญ๋น๋ง, ํญ์ฐํ, ํญ์ผ์ฆ, ์ธ๊ฐ ์ ๋ฐฉ์ ์ธํฌ์ฃผ(human breast cancer cell lines)์ ๋ํ anti-proliferative ํ์ฑ, ์์ฅ๋ณดํธ ํจ๊ณผ ๋ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ผ๋ฉฐ, Chen ๋ฑ์ ์จ๋ฌด ์ข
์ ๊ป์ง์ acetone ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ฐ๋ ฅํ ํญ๋์ฐ๋ณ์ด ํ์ฑ์, Otsuka ๋ฑ์ ์จ๋ฌด ๋ฟ๋ฆฌ๋ก๋ถํฐ ๋ถ๋ฆฌํ benzoxazinod ๊ณ์ด ํํฉ๋ฌผ์ ํญ์ผ์ฆ ํ์ฑ์ ๋ณด๊ณ ํ ๋ฐ ์๋ค. ์จ๋ฌด์ ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ fatty acid, phenolic acids, lactams, polysaccharide, benzoxazinoid, lignan ๋ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ๊ธฐ์กด ์จ๋ฌด์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฐ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ข
์๋ฅผ ์ด์ฉํ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ๋๋ถ๋ถ์ผ๋ก, ์จ๋ฌด ์ข
์ ์ฑ์ทจ ํ ๋ฒ๋ ค์ง๋ ๋ถ์ฐ๋ฌผ(์, ์ค๊ธฐ, ๋ถ๋ฆฌ, ๋ฏธ๊ฐ ๋ฑ)์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋ฏธ๋นํ ์ค์ ์ด๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์จ๋ฌด ๋ถ์ฐ๋ฌผ์ ์์ฌํ๋ฅผ ์ํด ํ๋์ธ๋ค์ ๊ด์ฌ์ด ๋์ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ์ ๊ด๋ จ๋ tyrosinase ํ์ฑ์ ๊ฒํ ํ์์ผ๋ฉฐ, ํ์ฑ์ด ์ฐ์ํ ์จ๋ฌด ๋ถ๋ฆฌ๋ก๋ถํฐ ๋ฏธ๋ฐฑ ๋ฌผ์ง์ ๊ท๋ช
ํ๊ณ ์ ํ์๋ค</p> |
B1616F1010 ์ธํฌ์ ๋ฌด์์ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ melanin ์์ ์์ฑ์ ์ ๋ํ ์ ์์ด? | ์๋ถ์ ๊ณต๊ธ์ด ์ํ | <p>๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ณด์ต ํจ๊ณผ. ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ณด์ต ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด ํผ๋ถ์ธํฌ์ ๋ง์ด ๋ถํฌํ๊ณ ์๋ water channel์ธ aquaporin-\(3\) (AQP-\(3\))์ ๋ฐํ์์ ํ์ธํ์๋ค. AQP-\(3 \)์ ๋ฐํ์์ด ์ฆ๊ฐํจ์ ๋ฐ๋ผ ์๋ถ์ ๊ณต๊ธ์ด ์ํํด์ ธ ํผ๋ถ์ ๋ณด์ตํจ๊ณผ๊ฐ ๊ธฐ๋๋๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ HaCaT ์ธํฌ์ ์ฒ๋ฆฌํ ํ real time PCR๋ก AQP-\(3\) ๋ฐํ์์ ํ์ธํ์๋ค. ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ \( 1 \% \) ๋๋์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒ์ด ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด AQP-\(3 \) ๋ฐํ์์ \( 1.5 \)๋ฐฐ ์ ๋ ์ฆ๊ฐ์์ผฐ๊ณ \( 5 \% \) ๋๋์์๋ ๋ฐํ์์ \(2 \)๋ฐฐ๊น์ง ์ฆ๊ฐ์ํค๋ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ ์ ์์๋ค(Fig. \(4\)).</p><p>๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ. ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด melanin ํฉ์ฑ์ ์ค์ํ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๋ฐํ์์ ํ์ธํ์๋ค. Melanin์ ํผ๋ถ์ ์์ ๋ฌผ์ง๋ก ์์ธ์ ๊ฐ์ ์๊ทน์ ํผ๋ถ์ธํฌ๊ฐ ๋
ธ์ถ ๋์์ ๋ tyrosinase ๊ฐ์ ํจ์ ๋ฑ์ ์ํด melanin์ด ํ์ฑ๋๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ melanin์ ํ์ฑ์ด ์ต์ ๋๋ฉด ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ธฐ๋ํ ์ ์๊ฒ ๋๋ค. ๋ณธ ์คํ์์๋ B\( 16\)F\( 10\) ์ธํฌ์ \( \alpha \)-Melanocytestimulating hormone \( (\alpha\)-MSH๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ melanin ์์ ์์ฑ์ ์ ๋ํ ๋ค, ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ถ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํจ์ ๋ฐ๋ผ ๋ณํํ๋ melanin ์์ ์ ๋ํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ \( 5 \% \) ๋๋์ ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํ์ ๊ฒฝ์ฐ positive control๋ก ์ฌ์ฉํ \( 16 \mu \mathrm{M} \) ๋๋์ kojic aicd ๋ณด๋ค \( 10 \% \) ๋ ๋ฎ์ ์์ melanin์ด ๊ฒ์ถ๋์๋ค. ์ฆ, ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ต์ ์ฝ \( 60 \% \) ์ melanin์๋ง์ด ๊ฒ์ถ๋จ์ ๋ฐ๋ผ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. \(5\)).</p><p>์์ฝํ๋ฉด, ๊ทธ ๋์ ์ข์ ํ์ฑ์๋ ๋ถ๊ตฌํ๊ณ ์ฐ์
์ ์์ฉ์ด ๊ฑฐ์ ๋์ง ์์๋ ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํผ๋ถ์ธํฌ์ ์ฒ๋ฆฌํจ์ ๋ฐ๋ผ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์จ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ฒ๋ฆฌ์ \( 30 \% \) ์ ๋ COX-\(2\) ๋ฐํ์์ ์กฐ์ ํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ผ์ฆ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๊ณ , ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ๋ถํดํ๋ ํจ์์ธ MMP-\(1\)์ ๋ฐํ์ \( 40 \% \) ์ ๋ ์ ํดํ๊ณ ์๋ผ์คํด ๋ฐํ์์ \(3 \)๋ฐฐ ์ ๋ ์ฆ๊ฐ์ํด์ผ๋ก์จ ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ๋ํ ๋ณด์ต์ ์ฃผ์ํ ๋ง ๋จ๋ฐฑ์ง์ธ AQP-\(3 \) ๋ฐํ์์ \(2 \)๋ฐฐ ์ฆ๊ฐ์ํด์ผ๋ก์จ ๋ณด์ตํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๊ณ melanin ์์ \( 40 \% \) ์ ๋ ๊ฐ์์ํด์ ๋ฐ๋ผ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ฑ์ง๊ฝ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ํญ์ผ์ฆ, ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ , ๋ณด์ต ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์์ ๋ฐ๋ผ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์จ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค.</p> |
๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ๋ถ์ฐ๋ถ์์ผ๋ก ์ ์์ฑ์ ๋ถ์ํ ๋ ์ฌ์ฉํ ์ํํธ์จ์ด๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ์? | PVC ํฌ์ฅ์ง | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์คํ์ฌ๋ฃ</h2><p>๋ณธ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋ก๋ณต์ด ๋ก์ ์ ์กฐ๋ฅผ ์ํ์ฌ ๋ฏธ๋ถ(Nongshim Flour Mills Co., Asan, Korea)๊ณผ ์๊ธ(CJ Cheiljedang, Seoul, Korea)์ ์์ค์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ด์ฉํ์๋ค. ์ฌ๋ฃ๋ 4\(^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ์จ๋์์ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์ด์ฉํ์๋ค.</p><h2>LED ๊ด์ ๋ฐ ์กฐ์ฌ ์ฅ์น</h2><p>์์ถ๋ก์ ์ฒญ์๊ด์ ์กฐ์ฌํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ํ์ฅ 460 \(\mathrm{~nm} \), ํฌ๊ธฐ \( 3 \times 3 \mathrm{~mm} \)์ LED ๊ด์ LD-CQAR (Osram, Mรผnchen, Germany)์ ์ด์ฉํ์๋ค. LED ์กฐ์ฌ ์ฅ์น๋ ์ํ์ ์ ์ฅ, ์ ํต ๋ฐ ์ง์ด์ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์ค๊ณํ์์ผ๋ฉฐ, ์ด์ ๋ฐ๋ผ ์ธ์ฒด์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ด ์ ์ผ๋ฉด์ ๊ท ์ ์ต์ ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ์๋ 460 \(\mathrm{~nm} \) ํ์ฅ์ ๊ด์์ ์ ํํ์๋ค. LED ์ฅ์น๋ 9๊ฐ์ LED ๊ด์์ ๋ณด๋์ ๋ถ์ฐฉํ๊ณ ํ๋ฅ์ ์๊ณต๊ธ์ฅ์น (KPS305DF, Shenzhen Wanptek Electronic Technology Co., LTD, Shenzhen, China)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ 1.5 \( \mathrm{~A} \) ์ ์ง์์ ์ธ ์ ๋ฅ๋ฅผ ๊ณต๊ธํ์๊ณ LED ์ ์ํ ์จ๋ ์์น์ ๋ฐฉ์งํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋๊ฐํฌ์ ์ค์นํ์๋ค. LED ์ฅ์น์ ๊ด์ ํ๋ฉด๊ณผ ๋ก ํ๋ฉด ์ฌ์ด์ ๊ฑฐ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ light dependent resistor photocell (Luna Optoelectronics, Camarillo, CA, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ก์ ์ค์ฌ์์ lux ๋จ์๋ก ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>LED ๋ฐฐ์ด ๋ฐ ๊ดํ ์๋ฎฌ๋ ์ด์
</h2><p>LED ์ฅ์น์ ๋ถ์ฐฉ๋ 9๊ฐ์ LED ๋ชจ๋์ ๋ฐฐ์ด(array) ๋ฐ ๊ด์๊ณผ ์ํ์ ๊ฑฐ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ผ ๋ฌ๋ผ์ง๋ ๋น์ ์กฐ์ฌ ์ธ๊ธฐ์ ํจํด์ ์๋ฎฌ๋ ์ด์
ํ์๋ค. LED ๋ชจ๋์ ๋ฐฐ์ด์ Fig. 2์ ๊ฐ์ด ์ธ ๊ฐ์ง๋ก ์ค์ ํ์ฌ ๋น๊ตํ์์ผ๋ฉฐ, LED ๋ฐฐ์ด์ ๋ฐ๋ฅธ ๋น์ ์กฐ์ฌ ํจํด์ Zemax OpticStudio 16.5 (Zemax LLC, Kirkland, WA, USA) ์ํํธ์จ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์๋ฎฌ๋ ์ด์
ํ์๋ค. ์๋ฎฌ๋ ์ด์
์ non-sequential ๋ชจ๋๋ก ์ํํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ด์์ ๋ํ ์ ๋ณด๋ ๊ด์์ ์ ์กฐ์ฌ์ธ Osram์ฌ์์ ์ ๊ณตํ๋ ํ์ผ์ ์ด์ฉํ์๋ค. ๊ด์ ์ถ์ (ray tracing) ๊ธฐ๋ฅ์ ์ด์ฉํ์ฌ LED๋ก๋ถํฐ ๋์ค๋ ๊ด์ ์ด detector์ ๋ฉด์ ์์ ๋ํ๋ด๋ ๋น์ ์ธ๊ธฐ ํจํด์ ๋ถ์ํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ด์ ์ถ์ ๊ธฐ๋ฅ์ Monte-Carlo ray-tracing์ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก detector ์ ํน์ ๋ฉด์ ์ ๊ด์ ์ด ๋๋ฌํ๋ ์ ๋๋ฅผ ํ๋ฅ ์ ์ผ๋ก ๊ณ์ฐํ์ฌ ์ํํ์๋ค. ์๋ฎฌ๋ ์ด์
์ ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ Osram ์ฌ์์ ์ ๊ณตํ๋ radiant flux ๋ฐ power์ ์ฆ์ ์น๋ฅผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ๊ณ์ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ด์์ผ๋ก๋ถํฐ ์
์ฌ๋๋ ๋น์ ๊ธฐ๋ณธ์ ์ธ ๊ตด์ ์ ๋ํ ํน์ฑ์ Snell's law์ ์ํ์ฌ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ด ๊ณ์ฐํ์๋ค(Eq. (1)).</p><p>\( n_{1} \sin \theta_{1}=n_{2} \sin \theta_{2} \)<caption>(1)</caption></p><p>์์ ์์์ \( n_{1} \) ๊ณผ \( n_{2} \) ๋ ์๋ก ๋ค๋ฅธ ๋ ๋งค์ง์ ๊ตด์ ๋ฅ , \( \theta_{1} \) ๊ณผ \( \theta_{2} \)๋ ์
์ฌ๊ด ๋ฐ ๊ตด์ ๊ด์ ๊ฐ๋์ด๋ค.</p><p>Detector๋ ๋ก ์ํ๊ณผ ๋์ผํ ๋์ด์ ๋ฉด์ ์ผ๋ก ์ค์ ํ๊ณ \( 250 \) ๊ฐ์ ํฝ์
์์ ์ป์ด์ง ๋น์ ์ธ๊ธฐ ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ท ์ผ๋ (uniformity)๋ฅผ ๊ณ์ฐํ์๋ค. ๊ท ์ผ๋์ ์ฒ๋๋ก Petri factor๋ฅผ ๊ณ์ฐ ํ์์ผ๋ฉฐ, Eq. (2)๊ณผ ๊ฐ์ด ์กฐ์ฌ ๋ฉด์ ์์ ํ๊ท ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ฅผ ์ค์ฌ์ ๋น ์กฐ์ฌ ์ธ๊ธฐ์ ๋น์จ๋ก ๋๋์ด์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>Petri factor \( =\frac{\sum\left(I / I_{0}\right)}{n} \)<caption>(2)</caption></p><p>์์ ์์์ \( I \) ๋ ํน์ ์์น์์์ ๋น์ ์ธ๊ธฐ, \( I_{0} \) ๋ ๋ฉด์ ์ค์ฌ์์์ ๋น์ ์ธ๊ธฐ๋ฅผ ์๋ฏธํ๋ค.</p><h2>Bacillus cereus group์ ๋ถ๋ฆฌ</h2><p>๋ก๋ณถ์ด ๋ก์์์ LED ์ฒญ์๊ด์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ด์ ํญ์ฑ์ด ๋์ ๋ก์ ๋ํ์ ์ธ ์ํ ์ํด๊ท ์ธ Bacillus cereus (B. cereus) group์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ, ๋ก๋ณต์ด ๋ก์ ์ ์กฐํ ํ \( 2 \mathrm{~h} \) ๋์ \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๋๊ฐํ ํ ๋ก์ผ๋ก๋ถํฐ ๊ท ์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. B. cereus group์ ๋ถ๋ฆฌ๋ ์ํ ๊ณต์ (๊ณ ์ ์ 2011-20ํธ) ๋ฐ Kim ๋ฑ ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ํํ์๋ค. ๋ก์ ํฌ์ํ์ฌ ๋ถ์ํ ํํ์ก์ MYP (mannitol egg yolk polymyxin) agar (Difco, Detroit, Michigan, USA) ๋ฐฐ์ง์ ๋๋งํ์ฌ ๋ฐฐ์ํ ํ colony ์ค ํผํํ ๋ถํ์ ํ์ ํ์ฑํ๋ colony๋ฅผ ์ ๋ณํ์๋ค. ์ดํ ๋ฉธ๊ท ๋ ๋ฃจํ๋ก colony ๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ TSA (tryptic soy agar) (Difco) ๋ฐฐ์ง์ ํํ ํ์ ํ์ฌ ์ ์ข
ํ๊ณ 37\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 24 \( \mathrm{h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ ๋ณ๋ colony ๋ TSB (tryptic soy broth) (Difco) ์ก์ฒด๋ฐฐ์ง์์ \( 10^{8} \mathrm{CFU} / \) \( \mathrm{mL} \) ๊ฐ ๋๋๋ก \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( 24 \mathrm{h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์ฌ ์คํ์ ์ด์ฉํ์๋ค.</p><h2>๋ก๋ณถ์ด ๋ก ์ ์กฐ ๋ฐ ์ํ ์ค๋น</h2><p>๋ก๋ณต์ด ๋ก์ ์ ์กฐ๋ฅผ ์ํ์ฌ ๋ก ๋ฐ์ฃฝ์ ์๊ธ์ ํจ๋์ ๋ฏธ๋ถ ๋๋น 1 \(\%\) ๊ฐ ๋๋๋ก ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ๋ฏธ๋ถ๊ณผ ์ ์ ์์ ๋น์จ์ \( 2:1 \)๋ก ํํฉํ์๋ค. ์ดํ ์ด๋ฅผ ์ฆ์ํ๊ณ ์์ถํ์ฌ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก์ ์ ์กฐํ์๋ค. ์์ถํ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก์ ๋ก 3๊ฐ๋ฅผ ๊ฐ๋ก 45 \( \mathrm{~mm} \), ์ธ๋ก 50 \( \mathrm{~mm} \), ๋์ด 15 \( \mathrm{~mm} \) ๊ฐ ๋๋๋ก ๋ฐฐ์ดํ์ฌ ํด๋ฆฌ์ํธ๋ ํฌ์ฅ์ง ๋ด์ ํฌ์ฅํ ํ 90\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 40 \( \mathrm{~min} \) ๋์ ์ด์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ๋ํ์ฌ ์ด๊ท ํ์๋ค. ์ด๊ท ์ ์๋ฃํ ๋ก์ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก์ ๋ณด๊ด ๋ฐ ์ ํต์ ๊ฐ์ ํ์ฌ ๋์ฅ ์จ๋์ธ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ๋๊ฐํ์๋ค. ๋๊ฐํ ๋ก ์ํ์ LED๋ฅผ ์กฐ์ฌํ ํ๋ฉด์ B. cereus group ํํ์ก์ ๋ก ์ํ์ ์ด๊ธฐ ๊ท ์๊ฐ \( 10^{6} \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \) ์ด ๋๋๋ก ์ ์ข
ํ๊ณ \( 30 \mathrm{~min} \) ๋์ ๊ฑด์กฐ์์ปธ๋ค. ์ดํ ๋ก์ ๊ฑด์กฐ๋ฅผ ๋ฐฉ์งํ๊ณ ํฌ์ฅ ์๋๋ฅผ ๊ฐ์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋น์ด ํฌ๊ณผํ๋ PVC ํฌ์ฅ์ง๋ก ํฌ์ฅํ์ฌ LED ์กฐ์ฌ ์คํ์ ์ด์ฉํ์๋ค.</p><h2>LED ์กฐ์ฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ๋ฏธ์๋ฌผ ๋ถ์</h2><p>LED ์ฅ์น๊ฐ ๋ก ํ๋ฉด์์ B. cereus group์ ๊ท ์์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ 2,4,8,12,16,24 \( \mathrm{~h} \) ๋์ ๋น์ ์กฐ์ฌํ์์ผ๋ฉฐ, LED ์ฅ์น์ ์ํ์ฌ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก ํ๋ฉด ์จ๋๊ฐ 2 \( \mathrm{~h} \) ํ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 9\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์ฆ๊ฐํ๊ณ 24 \( \mathrm{~h} \) ๊น์ง 9\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ์ ์ง๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์จ๋ ์์น ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ ์ธํ LED ๋น์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํ์ฌ \( 9^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ์ธํ๋ฒ ์ดํฐ ๋ด์์ LED ์กฐ์ฌ ์คํ๊ตฐ๊ณผ ๋์ผ ์๊ฐ ๋์ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์ํ๋ง์ ์งํํ์๋ค. ๋ํ, LED์ ๋ก ํ๋ฉด ์ฌ์ด์ ๊ฑฐ๋ฆฌ์ ์ํ ๋น ์ธ๊ธฐ ๋ณํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ LED์ ๋ก ํ๋ฉด ์ฌ์ด์ ๊ฑฐ๋ฆฌ๊ฐ \( 22,32,42 \mathrm{~mm} \) ๊ฐ ๋๋๋ก ์ฅ์น์ ๋์ด๋ฅผ ์กฐ์ ํ์ฌ ์ธ ๊ฐ์ง ๋์ด์์ LED ์กฐ์ฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ๊ท ์ ๋ณํ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ๋ก์ ๊ท ์๋ ๋ก๋ณถ์ด ๋ก \( 10 \mathrm{~g} \) ์ \( 0.1 \% \) ๋ฉธ๊ท ํฉํค์๋ฅผ \( 90 \mathrm{~g} \) ํผํฉํ ํ homogenizer (Polytron PT 2100 , Kinematica AG, Luzern, Switzerland)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ท ์งํ ํ์๋ค. ์ดํ ์ํ ํํ์ก์ \( 0.1 \% \) ํฉํค์์ ๋จ๊ณ์ ์ผ๋ก ํฌ์ํ์ฌ MYP ๋ฐฐ์ง์ ํํ ๋๋งํ์๋ค. ๋ฐฐ์ง๋ \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( 24 \mathrm{~h} \) ๋์ ์ธํ๋ฒ ์ดํฐ์์ ๋ฐฐ์ํ ํ colony์ ์๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ ๋ถ์</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ํ๋ ๋ชจ๋ ์คํ์ 3ํ ์ด์ ๋ฐ๋ณต์ธก์ ์ ํ์์ผ๋ฉฐ, ๋ฐ์ดํฐ๋ SPSS (SPSS Statistics \( 21 \), IBM, Armonk, NY, USA) ์ํํธ์จ์ด๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ฐ๋ถ์(ANOVA)์ผ๋ก ์ ์์ฑ์ ๋ถ์ํ์๋ค \( (p<0.05) \).</p> |
์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค์์ flavonoid์ flavonoid ๋ฐฐ๋น์ฒด ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ณด๊ณ ๋์์ด? | ๊ฐ์ง | <h2>์ ๋ก </h2><p>์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด(Prumus davidiana)๋ ์ฅ๋ฏธ๊ณผ(Rosaceae)์ ๋์ฝ ํ์ฝ ์๊ต๋ชฉ์ด๋ค. ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ ์ ๊ตญ ์ฐ์ผ์ ๋ถํฌํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์ค๊ตญ์๋ ์์ํ๊ณ ์๋ค. ํค๋ \( 6 \mathrm{~m} \) ์ ๋๊น์ง ์๋ผ๋ฉฐ ์์ ํผ์นจํ์ด๋ค. ๊ฝ์์ \( 5 \)์ฅ์ด๋ฉฐ ๊ฝ์ ์ฐํ ๋ถํ์์ผ๋ก \( 4 \)์์ ํ๋ค.์ด๋งค๋ ํ์ํ์ด๋ฉฐ ํํผ์ ํธ์ด ๋ง๊ณ ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ์ด๋งค์ธ ๋ณต์ญ์ ๋ณด๋ค ์๊ณ ๋จ๋จํ๋ค. \(7\)-\(8\)์์ ๊ณผ์ผ์ด ์ต์ผ๋ฉฐ ์ด๋งค๊ฐ ๋๋งน์ด์ฒ๋ผ ์๊ณ ๋จ๋จํ๋ค๊ณ ํ์ฌ ๋๋ณต์ญ์ ๋ผ๊ณ ๋ถ๋ฅด๊ธฐ๋ ํ๊ณ ๊ฐ๋ณต์ญ์ ๋ผ๊ณ ๋ ๋ถ๋ฅด๋๋ฐ ๋ ์ด๋ฆ ๋ค ๋๋ฆฌ ํต์ฉ๋์ง๋ง ๊ณต์์ ์ธ ์ด๋ฆ์ ์๋๋ค. ์ด๋งค๋ ๋จ๋ฐฑ์ง, ์ง์ง, ๋น์ง, ์นผ์, ์ธ, ์ฒ ๋ถ, ๋ํธ๋ฅจ, ์นผ๋ฅจ, ๋นํ๋ฏผ \( \mathrm{A}, \mathrm{B}_{1}, \mathrm{~B}_{2} \) ๋ฑ์ ํจ์ ํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ง์ด ๋ฌ๊ณ ์ฑ์ง์ด ์ฐจ๋ฉฐ ํด๋
์์ฉ์ด ์์ด์ ๊ฐ์ข
์ผ์ฆ์ ์น๋ฃํ๋ฏ๋ก ์ ๊ฒฝํต์ด๋ ๊ด์ ์ผ ๋ฑ์ ์ข๋ค๊ณ ํ๋ค. ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ์๋ ค์ง ์๋ฆฌ ํ์ฑ์ผ๋ก๋ ๊ฐ์ง์์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ๊ณผ ์ง์ง ๊ณผ์ฐํ ์ต์ ๋ฅ ๋ฐ ํญ์ผ์ฆ ํจ๊ณผ, ํญ๊ณ ์งํ์ฆ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ์ด๋งค๋ ํญ์ฐํ ๋ฐ ๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๋ฅ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋งค์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ์ ์ฒ์ฑ ๊ณ ํ์ ํ์์ ํ์ฒญ ์ง์ง๊ฐ์ ๋ฐ ์ฌ์ฅ ์ํ๊ธฐ๊ณ ์งํ, ๊ณ ํ์์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ง๊ธ๊น์ง ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋ ์ฃผ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด์ ๊ฐ์ง์์ prunin, kaempferol ๋ฑ์ flavonoid ํํฉ๋ฌผ, steroid ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ฐ๋ณต์ฌ ๋๋ฌด์ ์์์๋ flavonoid์ flavonoid ๋ฐฐ๋น์ฒด ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ํ์ง๋ง ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค์ ๋ํ ์ฑ๋ถ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋ณด๊ณ ๋ ๊ฒ์ด ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ ์๋ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค๋ก๋ถํฐ ์ด์ฐจ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌํ๊ณ ๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ๋ํ ์ฑ๋ถ๋ถ์๊ณผ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ๊ด๋ จํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์งํํ์ฌ ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค์ ์์ฝํ ๋ฐ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ ๋ฐฉ์์ ๋ชจ์ํ๊ณ ์ ์คํ์ ์ํํ์๋ค. ์ฐ๋ณต์ฌ๋๋ฌด ์ด๋งค๋ฅผ \( 80 \% \) methanol \( (\mathrm{MeOH}) \)๋ก ์ถ์ถํ๊ณ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ํ์ฌ ethyl acetate \( (\mathrm{EtOAc}) \), \( n \)-butyl alcohol \( (n-\mathrm{BuOH}) \), ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฌผ๋ก ๊ณํต ๋ถํ ์ค์ํ์๋ค. ์ด ์ค \(\mathrm{EtOAc}\) ๋ถํ์ Thin Layer Chromatography (TLC) ์ ๊ฐํ์์ ๋ \(3\) ์ข
์ ํํฉ๋ฌผ์ด ๋๋ ทํ๊ฒ ๋ณด์ด๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์ฌ(data not shown) ์ด๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌํ๊ณ ์ silica gel \( \left(\mathrm{SiO}_{2}\right) \) ์ octadecyl \( \mathrm{SiO}_{2} \) (ODS) resin์ ์ด์ฉํ์ฌ column chromatography๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ค์ํ์๊ณ \(3\)์ข
์ triterpenoid ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ nuclear magnetic resonance (NMR), infrared (IR), mass spectrometry (MS) ๋ฑ์ ์คํํธ๋ผ ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ํด์ํ์ฌ ํํ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๋์ ํ์๋ค.</p> |
์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์ ํ ์ ๋ด ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋จ์ํ๋? | ํ ์ \( \mathrm{pH} \), ์ ๊ธฐ๋ฌผ ํจ๋, ์ ํ ํจ๋, ์ผ๋ ๋ฑ ๋ค์ํ ํ๊ฒฝ ์ธ์๋ค์ ์ํฅ | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํ ์ ์ค ์ค๊ธ์์ ์ํ๊ณ์ ์ธ๊ฐ์ ๊ฑด๊ฐ์ ๋ถ์ ์ ์ธ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ต๊ทผ ์ค์ํ ์ฐ๊ตฌ์ฃผ์ ๋ก ๋ค๋ฃจ์ด ์ง๊ณ ์๋ค. ์ค๊ธ์์ ํ ์์์ ๋ค์ํ ํํ๋ก ์กด์ฌํ๋๋ฐ ์ด ์ค ์๋ฌผ์ด ํก์ํ ์ ์๋ ํํ์ ์ค๊ธ์์ ์ค๊ธ์ ์ ํจํ๋ผ ํ๋ค. ์ค๊ธ์ ์ ํจํ ํจ๋์ ํ ์ \( \mathrm{pH} \), ์ ๊ธฐ๋ฌผ ํจ๋, ์ ํ ํจ๋, ์ผ๋ ๋ฑ ๋ค์ํ ํ๊ฒฝ ์ธ์๋ค์ ์ํฅ์ ๋ฐ๋๋ค. ํ ์ ์ค ์ ๊ธฐ์ฐ๋ ์ค๊ธ์ ์ ํจ๋์ ๋ฐ์ ํ ๊ด๋ จ์ด ์๋ค. ํ ์ ์ค ์ ๊ธฐ์ฐ์ ํ ์์ ์ ์
๋ ์ ๊ธฐ๋ฌผ์ด ๋ถํด๋๋ ๊ณผ์ ์์ ์์ฑ๋๋ฉฐ ๋งค์ฐ ์์ ๋ ์ ๋ถ์ ๋ฌผ์ง์ด๋ค. ๋ํ, ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์๋ฌผ๋ฟ๋ฆฌ์์ ๋์ค๋ ๋ถ๋น์ก์ ์ฑ๋ถ ๋ฌผ์ง ์ค ํ๋์ด๋ค. ์ํธ๋ฅด์ฐ, ์ฅ์ด์ฐ, ์์ธํธ์ฐ ๋ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ์ ๋ถ์์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์๋ฌผ๋ฟ๋ฆฌ์์ ๋ถ๋น๋๋ฉฐ, ์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์ ๋ง์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ค. ํ ์ ์ค ์ค๊ธ์์ ๋๋ถ๋ถ ์ฉํด๋์ง ์๋ ํํ๋ก ์กด์ฌํ๋ฉฐ[8] ์ด๋ฌํ ๋ถ์ฉ์ฑ ์ค๊ธ์์ ์๋ฌผ ์ ํจ๋๊ฐ ๋ฎ๋ค. ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์ผ๋ฐ์ ์ธ ํ ์์กฐ๊ฑด์์ ๋ณดํต ์์ผ๋ก ํ์ ๋์ด ์์ด ํ ์ ์
์์ ๋ถ์ฐฉ๋์ด ์๊ฑฐ๋ ํ ์ ์๋ถ ์ค์ ์กด์ฌํ๋ ์ค๊ธ์ ์์ด์จ๊ณผ ๊ฐํ ๊ฒฐํฉ ๋ฐ์์ ์ผ์ผํจ๋ค. ํ ์์
์๋ณด๋ค ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์ค๊ธ์๊ณผ ์น๋ฐ๋(affinity)๊ฐ ๋ ๋๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ํ ์์ ๋ถ์ฐฉ๋์ด ์๋ ์ค๊ธ์์ด ๋จ์ด์ ธ ๋์ ์ ๊ธฐ์ฐ๊ณผ ๊ฒฐํฉํ๋ ๊ฒ์ด๋ค. ํ ์์ ํก์ฐฉ๋ ์ค๊ธ์์ ๋ถ์ฉ์ฑ์ด์ง๋ง ์ ๊ธฐ์ฐ๊ณผ ๊ฒฐํฉํ ์ ๊ธฐ์ฐ-์ค๊ธ์ ๋ณตํฉ์ฒด๋ ์ฉํด๋๊ฐ ๋์์ ์ค๊ธ์ ์ ํจ๋์ ๋ณํ๋ฅผ ์ค๋ค.</p><p>์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์ค๊ธ์ ์ฉ์ก์ ์กด์ฌํ๋ฉด ์ค๊ธ์ ์ด์จ์ ๋๋ถ๋ถ ์ ๊ธฐ์ฐ๊ณผ ํฌ๋ ์ดํธ๋ฅผ ํ์ฑํ๋ค. ์ฌ๋ฌ ๋
ผ์์ด ์์ง๋ง ์๋ฌผ์ฒด๋ ์ค๊ธ์์ ํก์ํ ๋ ์์ ์ด์จ ํํ๋ง์ ํก์ํ๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๊ธฐ์กด ์ฐ๊ตฌ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด, ์ ๊ธฐ์ฐ-์ค๊ธ์ ๋ณตํฉ์ฒด๋ ํฌ๊ธฐ๊ฐ ๋๋ฌด ํฌ๊ณ ๊ทน์ฑ์ด ๊ฐํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋ณตํฉ์ฒด ํํ ๊ทธ๋๋ก ๋ฟ๋ฆฌ ์ธํฌ์ ์ํ์ง ๋ง์ ํต๊ณผํ๊ธฐ ์ด๋ ต๋ค. ๊ทธ๋์ ์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์์ ์ค๊ธ์์ ํํ์ข
, ํนํ ์์ ์ด์จ์ ์์ ์์ฃผ ์ค์ํ ์ธ์์ด๋ค. ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ํ ์ ์ค ์ค๊ธ์์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋ค์ํ๊ฒ ์ฐ๊ตฌ๋์ด ์์ผ๋ ํ ์ ์ค ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ์๋ฌผ์ ์ค๊ธ์ ํก์์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋งค์ฐ ๋ณต์กํ๋ฉฐ ์ค๊ธ์ ์ข
๋ฅ๋ณ, ์ ๊ธฐ์ฐ ์ข
๋ฅ๋ณ, ์๋ฌผ ์ข
๋ฅ๋ณ๋ก ๊ฐ๊ฐ ๋ค๋ฅด๊ฒ ๋ํ๋๋ค[16]. ์ ํ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ง๋ฆญ์ฐ๊ณผ ์์ธํธ์ฐ์ ์ฅ์์์ ์ฒ๋ฆฌํ์ ๋ ๋ง๋ฆญ์ฐ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ๋ณด๋ค ์์ธํธ์ฐ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์์ ์ฅ์์ ์ฒด๋ด ์นด๋๋ฎด์ด ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ํ, ์ํธ๋ฅด์ฐ์ Sedum alfredii์ ์นด๋๋ฎด ํก์, ์ฒด๋ด ์ด๋, ๋ด์ฑ์ ์ข
ํฉ์ ์ผ๋ก ๊ด๋ จ์ด ์์์ง๋ง ์ฃผ์์ฐ์ ๋ฟ๋ฆฌ ํก์์๋ง ์ํฅ์ด ์์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก ์ค๊ธ์๊ณผ ํ ์, ์๋ฌผ ๊ฐ ์ํธ์์ฉ๊ณผ ๊ฐ์ข
๊ธฐ์๋ค์ ์ดํดํ๋ ค๋ฉด ์ค๊ธ์์ ๋ํ ์ฌ๋ฌ ์ ๊ธฐ์ฐ์ ์ํฅ์ ์ฐ๊ตฌํ ํ์๊ฐ ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์๋น๋๊ณ ์๋ ์์ถ(Lactuca sativa L.)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ, ์ ๊ธฐ์ฐ์ผ๋ก ์์ก ์ค ๋ฉ๊ณผ ์นด๋๋ฎด์ ํํ์ข
๋น์จ์ ๋ค๋ฅด๊ฒ ์ฒ๋ฆฌํ์ ๋, ์์ถ ์๊ณผ ๋ฟ๋ฆฌ์ ์ด๋ค ์ค๊ธ์ ๋๋ ๋ณํ๋ฅผ ํตํด ์ ๊ธฐ์ฐ์ด ๋ฉ๊ณผ ์นด๋๋ฎด์ ํก์์ ์ด๋์ ์ด๋ค ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋์ง ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์ํ๋์๋ค.</p> |
ํ์ผ์ ์ฆ์ ์จ๋๋ ๋ช๋์ธ๊ฐ์? | Santa Cruz Biotechnology | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์คํ์ฌ๋ฃ</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉ๋ ํ์ผ์ ๊ฒฝ๊ธฐ๋ ์ฌ์ฃผ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋ \(6\)๋
๊ทผ ์์ผ์ \(2013\)๋
\(10\)์, ์ง์ ์๋งคํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์์ฝ</h2><p>ํ์ผ ๋ฐํจ๋ฅผ ์ํด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ฐฐ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์์ฝ์ ๋ชจ๋ Difco (Difco Laboratory, Detroit, MI, USA) ์ ํ์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ฒ๋ฆฌ์ ์ฌ์ฉ๋ ํจ์ํผํฉ์ก์ ํ๊ตญ ํํ ์ฐ๊ตฌ์ ์ตํฉ ํํ ์ฐ๊ตฌํ์์ ์ ๊ณตํ Cellulclast, HTec2, Amyloglucosidase ๋ฑ์ \(1:1:1\) ํผํฉ์ก์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋ฐํจ ๊ท ์ฃผ๋ F\(1\): Leuconostoc mesenteroides, F\(2\): Lactobacillus sp. MEI \(823\), F\(3\): Saccharomyces cerevisiae, F\(4\): Lactobacillus paracasei๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. \(1\),\(1\)-diphenyl\(2\)-picrylhydrazyl (DPPH)์ \(2\),\(2^{\prime}\)-azinobis-\(3\)-ethyl-benzothiazoline\(6\)-sulfonic acid (ABTS)๋ Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์๊ณ , nitrocellulose membranes๋ Amersham GE Healthcare (Little. Chalfont, UK)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF), superoxide dismutase \(1\) (SOD-\(1\)), catalase, glutathione peroxidase (GPx), nuclear factorkappa B (NF-\(\kappa\)B p\(65\)), nuclear factor-erythroid \(2\)-related factor \(2\) (Nrf\(2\)), heme oxygenase-\(1\) (HO-\(1\)), inducible nitric oxide synthase (iNOS), cyclooxygenase-\(2\) (COX-\(2\)), tumor necrosis factor alpha (TNF-\( \alpha \)), interleukin-\(6\) (IL-\(6\)), Histone, \( \beta \)-actin๊ณผ \(2\)์ฐจ ํญ์ฒด๋ Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์์ผ๋ฉฐ, protease inhibitor mixture, dimethyl sulfoxide, ethylenediaminetetraacetic acid๋ Wako Pure Chemical Industries, Ltd. (Osaka. Japan)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. cis-Diammineplatinum (โ
ก) dichloride๋ Sigma-Aldrich์์, blood urea nitrogen (BUN)๊ณผ creatinine assay kit๋ ์์ฐ์ ์ฝ์ฃผ์ํ์ฌ (Hwaseong, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. ๋ํ, \(2\),\(7\)-Dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA)๋ Molecular Probes (Eugene, OR, USA)์์ enhanced chemiluminescence (ECL) Western Blotting Detection Reagents๋ GE Healthcare (Piscataway, NJ, USA)๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋จ๋ฐฑ์ง ์ ๋์ ์ํ BCA protein assay kit๋ Thermo Scientific (Rockford, IL, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ฐฐ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์์ฝ์ ๋ชจ๋ Difco (Difco Laboratory, Detroit, MI, USA) ์ ํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์๋ฃ ์ ์กฐ</h2><p>์์ผ์ ์ธ์ฒํ ํ ์ธ์ผ(RG\(0\))์ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ ๊ฑด์กฐ ํ์๊ณ , ํ์ผ์ ์ฆ์ ์๊ฐ์ \( 2\), \(4\), \(6\), \(8 \)์๊ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ๋ถํ์ฌ ์ฆ์ํ ํ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ ๊ฑด์กฐํ์๋ค(Fig. \(1\); Table \(1\)). ๊ฑด์กฐ๋ ๋ฐํ ์ ์ต์ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ (ACE Machinery, Seoul, Korea)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์๋ถํจ๋ \( 15 \% \) ๋ฏธ๋ง์ผ๋ก ๊ฑด์กฐํ์๊ณ , ์ฆ์์ ๋ฌด์์ ์คํ์ฆ์๊ธฐ(ACE Machinery)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ฆ์์จ๋ \(90 \)์์ ์ฆ์ํ์๋ค. ํ์ผ์ ๋ฐํจ์ ์ฌ์ฉ๋ ๊ท ์ฃผ๋ ๊ตฌํ๊ธฐ ์ฌ์ฐ๋ฉฐ ์์ ์ฑ์ด ๋ณด์ฅ๋ ๋ํ์ ์ธ ๊ท ์ฃผ์ธ Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus sp. MEI \(823\), Saccharomyces cerevisiae, Lactobacillus paracasei๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ฐํจํ์๋ค(Table \(2\)). ํ์ผ๊ณผ ๋ฐํจํ์ผ๊ฐ์ ํญ์ฐํ ์งํ์ ์ ํจ ์ฑ๋ถ์ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด ์ก์๋ฐํจ๋ฅผ ํ์๋ค. ํ์ผ์ ๊ฐ๊ฐ \( 5 \mathrm{~g} \)์ฉ ์นญ๋ํ์ฌ ๋ฃ๊ณ , \( 45 \mathrm{~mL} \)์ ๋ฉธ๊ท ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ํํํ์๋ค( \( 10 \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \)). ์๋ฃ๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฉ๊ธฐ๋ง๋ค ๋ฏธ๋ฆฌ ํผํฉ๋ ๋ณตํฉ ํจ์์ก \( 0.5 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ํ๋ฃป๋ฐค ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ์๋ฃ์ ๋ฐ๋ผ ์ ํด์ง ๊ท ์ฃผ ํํ์ก์ \( 0.5 \mathrm{~mL} \)์ฉ ์ ์ข
ํ์ฌ ์ญ์จ \(35\) ์ธํ๋ฒ ์ดํฐ์์ ์ ์น ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ ์ข
์ ๊ท ์ฃผ์ ๋๋๋ ์์ก์ ๋ฐ๋ผ ๊ฐ๊ฐํ์ฌ \(107\)-\(108 \mathrm{~cells} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋ก ํ์๋ค. ์ํ์ ๋ฐ๋ผ ๊ฐํ์ ์ผ๋ก ํ๋ค์ด ์ฃผ์๊ณ , ๋งค์ผ ๊ฐ์ ์๊ฐ์ ๋ฐํจ์ํ(\( \mathrm{pH} \))๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ ๋ฐํจ์ ์ง์์ฌ๋ถ๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ์๋ค. ์ ์์ ์๋ฐฉ ํจ๋ฅ์ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด ์ค์ํ ๋๋ฌผ์คํ์ ํ์ํ ์๋ฃ๋ ๊ณ ํ๋ฐํจ๋ฅผ ํ์๋ค. ์ฌ๊ฐ ํฌ๋ช
๋ฐํ์ฉ๊ธฐ์ ๊ฐ๊ฐ ๋ผ๋ฒจ์ ๋ถ์ด๊ณ , ์๋ฃ๋ฅผ ์ํ ํ๋๋น \(2 \)๊ฐ์ฉ ๊ฐ๊ฐ \( 50 \mathrm{~g} \) ์ฉ(์ด \(100 \mathrm{g}\)) ์นญ๋ํ์ฌ ๋ฃ์๋ค. \( 250 \mathrm{~mL} \)์ ๋ฉธ๊ท ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ํํํ ๋ค์ (\( 20 \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \)), ์๋ฃ๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฉ๊ธฐ๋ง๋ค ๋ฏธ๋ฆฌ ํผํฉ๋ ๋ณตํฉ ํจ์์ก \( 2 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ํ๋ฃป๋ฐค ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ๊ทธ ํ, ์๋ฃ์ ๋ฐ๋ผ ํฐ์์ ์ ์น ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋ฐฐ์์ก์ \(107\)-\(108 \mathrm{~cells}/ \mathrm{mL} \)์ ๊ท ์ฃผ ๋๋์ ๋ง์ถ์ด ์ ์ข
ํ์๋ค. ์ํ์ ๋ฐ๋ผ ๊ฐํ์ ์ผ๋ก ํ๋ค์ด ์ฃผ์์์ผ๋ฉฐ, ๋งค์ผ ๊ฐ์ ์๊ฐ ๋ฐํจ์ํ(\( \mathrm{pH} \))๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ \( 35^{\circ} \mathrm{C}\), \(6 \)์ผ ๊ฐ ๋ฐํจํ์๋ค. ์์ ์๋ฃ๋ค์ ๋ถ์๊ธฐ๋ก ๋ถ์ ํ ๋ค์ ์๋ฃ \( 5 \mathrm{~g} \)์ Distilled water \( 50 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ฃ๊ณ , \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \(3\)์๊ฐ์ฉ \(2\)ํ ๋ฐ๋ณต ์ถ์ถํ์๋ค. Kimble-filtering flask์ funnel์ ์ฅ์ฐฉํ๊ณ ์ฌ๊ณผ์ง(Whatman No. \(2\), GE healthcare, Arlington Heights, IL, USA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฌ๊ณผํ ๋ค ์ฌ๊ณผ์ก์ ๋ฏธ๋ฆฌ ํญ๋๋ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ฃ์ด \(45\)-\(50^{\circ} \mathrm{C} \)์ ์์จ์์ rotary vacuum evaporator (JP/N-\(1000\)X\), EYELA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๊ฐ์๋์ถ ํ \( -30^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ, \( -15^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ, \( 0^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(240 \)๋ถ, \( 15^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ, \( 30^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(120 \)๋ถ์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐ ํ์๋ค.</p> |
๋ฏธ๊ตญ์ ๋ช ๋
๋์ ZFN ๊ธฐ์ ๋ก ์ก์ฑํ ์ฅ์์์ ๋ํด ๊ท์ ํ์ง ์๋๋ค๋ ๊ฒฐ์ ์ ๋ด๋ ธ๋๊ฐ? | ์ ์ ์๊ฐ ์ ๊ฑฐ๋๊ฑฐ๋ ๋ด์ฌ ์ ์ ์๊ฐ ๋ํด์ง๋ ๊ฒฝ์ฐ | <h1>๊ฐ ๊ตญ์ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ๊ท์ ์ ์ฑ
๋ํฅ</h1><p>์์์๋ ์ง์ ํ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ ๊ท์ ์ฒด๊ณ๋ ์์ง ํ๋ฆฝ๋์ง ๋ชปํ ์ค์ ์ด๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ฏธ๊ตญ ๋ฑ ์ผ๋ถ ๊ตญ๊ฐ์์๋ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ค ์ ์ ์๊ต์ ์ ๊ท์ ์ ๊ด๋ จ๋ ์ ์ฑ
์ ๊ฒฐ์ ํ์๊ฑฐ๋ ์ ์ฑ
๊ฒฐ์ ์ด ๊ฐ์ํ๋๊ณ ์๋ค. ์ด ์ฅ์์๋ ๊ฐ ๊ตญ์ ์ฌ๋ก๋ฅผ ํตํด ์ ์ ์๊ต์ ๊ท์ ์ ๊ด๋ จ๋ ํํฉ์ ๊ธฐ์ ํ์๋ค.</p><h2>๋ฏธ๊ตญ</h2><p>๋ฏธ๊ตญ์ ์ธ๊ณ ๊ฐ ๊ตญ ์ค ์ ์ ์ ๊ต์ ์ ๋ํ ์ ์ฑ
์ ์
์ฅ์ ๊ฐ์ฅ ๋ช
ํํ๊ฒ ๋ฐํ ๊ตญ๊ฐ์ด๋ค. \(2012\)๋
ZFN ๊ธฐ์ ๋ก ์ก์ฑํ ์ฅ์์์ ๋ํด ๊ท์ ํ์ง ์๋๋ค๋ ๊ฒฐ์ ์ ๋ด๋ฆฐ ํ, \(2015\)๋
๋ถํฐ \(2018\)๋
\(10\)์๊น์ง "\(7\) CFR part \(340\)"์ 'Am I regulated?' ์ปจ์คํ
ํ๋ก๊ทธ๋จ์ ๊ฑฐ์ณ ๊ท์ ๊ฐ ๋ฉด์ ๋ ์ผ์ด์ค๊ฐ \(26\)๊ฑด์ ์ด๋ฅด๋ฉฐ, \(2018\)๋
\(4\)์ ๋ฏธ๊ตญ ๋๋ฌด์ฑ์ ์ ์ ์๊ต์ ์ผ๋ก ์ก์ฑํ ์๋ฌผ์ ๋ ์ด์ ๊ท์ ํ์ง ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ฐํํ์๋ค. ๋ฐํ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด ์ ์ ์๊ฐ ์ ๊ฑฐ๋๊ฑฐ๋ ๋ด์ฌ ์ ์ ์๊ฐ ๋ํด์ง๋ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๊ท์ ๋์์ด ์๋๋ค.</p><h2>์บ๋๋ค</h2><p>์บ๋๋ค๋ ๋ํ์ ์ธ ์ฐ๋ฌผ ์ค์ฌ์ ๊ท์ ๊ตญ๊ฐ๋ก์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์๊ด ์์ด ์๋ก์ด ํ์ง์ ๋ณด์ด๋ ์๋ฌผ์ ๊ท์ ๋์์ผ๋ก ์ผ๋๋ค. ์ ์ ์๊ต์ ์ฐ๋ฌผ๋ ๊ธฐ์กด ์ ์ฑ
์ ๋ฐ๋ผ ์ ์ฉ ๊ธฐ์ ์ด ์๋๋ผ ์ฐ๋ฌผ์ ์ ๊ท ํ์ง ์ฌ๋ถ๊ฐ ๊ท์ ์ฌ๋ถ๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ๋ ์์ธ์ด๋ค.</p><h2>์๋ฅดํจํฐ๋์ ๋จ๋ฏธ</h2><p>๋๋ถ๋ถ์ ๋จ๋ฏธ๊ตญ๊ฐ๋ค์ ์นด๋ฅดํํค๋ ๋ฐ์ด์ค์์ ์ฑ ์์ ์์ ๋ฐ๋ผ ์๊ตญ์ ๊ท์ ์ฒด๊ณ๋ฅผ ํ๋ฆฝํ์๋ค. ์๋ฅดํจํฐ๋์ ๊ฒฝ์ฐ ๋ฐ์ด์ค์์ ์ฑ ์์ ์์ ๋น์ฌ๊ตญ์ ์๋์ง๋ง ์๊ตญ์ ๋ฒ(Resolution no.\(701\)/\(2011\))์์ GMO๋ฅผ ๋ฐ์ด์ค์์ ์ฑ ์์ ์์ ์ ์์ ๋์ผํ๊ฒ ๊ท์ ํ๋ค. ์ ์ ์๊ต์ ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์๋ฅดํจํฐ๋์ ์
์ฅ์ Resolution no.\(173\)/\(2015\)์ ์ ๋ํ๋ ์๋๋ฐ, GMO๋ก์์ ๊ท์ ์ฌ๋ถ๋ case-by-case ๋ถ์์ ํตํด ๊ฒฐ์ ํ๋ฉฐ transgene์ด ์์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๊ท์ ๋์์์ ์ ์ธํ๋ค. ์น ๋ ์ ๋ธ๋ผ์ง ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ฝ๋กฌ๋น์๋ ์๋ฅดํจํฐ๋์ ์ ์ฑ
์ ๊ฒฐ์ ์ ๋ฐ๋ผ๊ฐ๋ ์ถ์ธ๋ก ์น ๋ ๋ \(2017\)๋
, ๋ธ๋ผ์ง์ \(2018\)๋
\(1\)์์ transgene์ด ์์ผ๋ฉด ๊ท์ ํ์ง ์์ ๊ฒ์์ ๋ฐํํ๋ค. ์ต๊ทผ์๋ ์ฝ๋กฌ๋น์ ์ ๋ถ๊ฐ ์ ์ ์๊ต์ ์ผ๋ก ์ก์ฑํ ์นด์นด์ค๋ฅผ ๊ท์ ํ์ง ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ๋ฐํํ๋ค.</p><h2>์ ๋ฝ์ฐํฉ</h2><p>์ ์ ์๊ต์ ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ ๋ฝ์ฐํฉ์ ์ ์ฑ
๊ฒฐ์ ์ ์ผ์ ๋ถ๋ถ ํผ๋ ์ํ์ ๋น ์ง ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ธ๋ค. GMO ๊ท์ ๋ฅผ ์๊ฒฉํ๊ฒ ์ํํ๊ณ ์๋ ์ ๋ฝ์ฐํฉ์ \(2006\)๋
๋ค๋ธ๋๋ ์ ์ ์๋ณํ์์ํ(Commission on Genetic Modification), \(2011\)๋
์ ๋ฝ์ฐํฉ์งํ์์ํ ๊ณต๋ ์ฐ๊ตฌ์ผํฐ(European Commissions Joint Research Center), \(2017\)๋
EC ๊ณผํ์๋ฌธ๋จ(EC SAM; Science Advice Mechanism) ๋ฑ์์ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ ํน์ฑ์ ๊ฒํ ํ ํ transgene์ด ์๋ ์ ์ก์ข
๊ธฐ์ ์ฐ๋ฌผ์ ๊ท์ ๋์์์ ์ ์ธํ ๊ฒ์ ์ ์ํ๋ ๋ฑ ์ ํฅ์ ์ ์ฑ
๊ฒฐ์ ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ \(2018\)๋
\(7\)์\(25\)์ผ ์ ๋ฝ์ฌ ๋ฒ์ฌํ์์์ ๋น์์ฐ์ ์ผ๋ก ๋ฐ์ํ๋ ๋ชจ๋ ๋ณ์ด์ฒด๋ ๊ท์ ๋์์ด๋ฉฐ, ๋จ ๋ฐฉ์ฌ๋ฅ ๋ณ์ด์ ๊ฐ์ด ์ค๋ ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ์ต์ํ ๊ฒ์ ๊ท์ ์์ ์์ธ๋ฅผ ๋๋ค๊ณ ํ๊ฒฐํจ์ผ๋ก์จ ํฅํ ์ ๋ฝ์ฐํฉ ์งํ์์ ํ์์กฐ์น์ ๊ด์ฌ์ด ์ ๋ฆฌ๊ณ ์๋ค. ์์ผ๋ก ์์๋๋ ์ ๋ฝ์ฐํฉ ์งํ์์ ํ์์กฐ์น ์๋๋ฆฌ์ค๋ก๋ ์ฌ๋ฒ์ฌํ์์ ํ๊ฒฐ์ ์์ฉํ์ฌ ์ ์ ์๊ต์ ์ฐ๋ฌผ์ GMO์ ๋ฒ์ฃผ์์ ๊ท์ ํ๊ฑฐ๋ GMO ๊ท์ ๊ท์ (Directive \(2001\)/\(18\)/EC) ์ค ๊ท์ ์์ธ๋ฅผ ๊ธฐ์ ํ Annex \( 1 \)B๋ฅผ ๊ฐ์ ํ์ฌ ์ ์ ์๊ต์ ์ฐ๋ฌผ์ ์ผ๋ถ(์๋ฅผ ๋ค์ด SDN-\(1\), \(2\)๋ฅผ ๊ท์ ์์ธ ๋์์ผ๋ก ์ผ๊ฑฐ๋ GMO ๊ท์ ์ฒด๊ณ์ ์ ๋ฉด์ ๊ฐํธ์ ์์ํ ์ ์๋ค. ํํธ EU ์ฒด์ ์์ ๋ฒ์ด๋๋ ค๋ ์๊ตญ์ BREXIT๊ฐ ๋๋ ํ ์๊ตญ์ ์ ์ ์๊ต์ ๊ท์ ์ ๊ด๋ จ๋ ์
์ฅ์ ์ญ๋ด์ ๊ท์ ํ๋ฆ์ ํฐ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ด๋ฉฐ, ํ ์์ ์์๋ ์๊ตญ์ด BREXIT ํ ๊ท์ ์ ๋ํด ์ ์ฐํ ์
์ฅ์ ์ทจํ ๊ฒ์ผ๋ก ์์๋๋ค.</p> |
UV-B๋ ํผ๋ถ์ ์์์ ์ผ์ผํค๋ ์์ธ์ด ๋ง๋๊ฐ? | 6.25-100 | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>MTT assay์ ์ํ ์ธํฌ ๋
์ฑ</h2><p>ํ๋ฆฌ์ฐ ์ด์์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ํธ์์ธํ
์ดํธ ๋ถํ๋ฌผ(TW-EA)๋ก CCD-986sk cell๊ณผ HEM cell์์ ์ธํฌ ๋
์ฑ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์๋ฃ๋ฅผ 6.25, 12.5, 25, 50, 75, 100, 200 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๊ด์ฐฐํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ CCD-986sk cell์ 6.25-100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์๋ ์ธํฌ ๋
์ฑ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๊ณ , 200 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์์์ ๋
์ฑ์ด ๊ด์ฐฐ๋์๋ค. HEM cell์ ๊ฒฝ์ฐ 100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋ ์ด์์์ ์ธํฌ๋
์ฑ์ด ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig. 1).</p><h2>ํญ์ฐํ ํ์ฑ</h2><p>์๋ฃ์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฒ์ฆํ๊ธฐ ์ํด DPPH, ABTS radical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ , ROS-Glo \( ^{\mathrm{TM}} \) \( \mathrm{H_2O_2} \) assay kit๋ฅผ ์ด์ฉํ ROS ์์ฑ๋์ธก์ ์ ์ํํ์๋ค. DPPH๋ ๋ผ๋์นผ ์ ์์ ๋นํธ์ฌํ์ ์ํด ์์ ํ ๊ตฌ์กฐ์ ๋ผ๋์นผ๋ก ์กด์ฌํ๋ ํํฉ๋ฌผ ๋ด ์ง์ ์ค์ฌ์ ๋ผ๋์นผ์ด๋ค. 17 \( \mathrm{~nm} \)์์ ์ต๋ ํก์๋ฅผ ํ๋ฉฐ, ํ์๋๋ฉด 517\( \mathrm{~nm} \)์์ ํก์๊ฐ ์์ด์ง๋ฏ๋ก DPPH์ ํ์์ ๋๋ ํ์์ ์ ํ์๋ ฅ์ ๋ฌ๋ ค์๋ค๊ณ ํ ์ ์๋ค. ๊ธฐ์กด ๋ณด๊ณ ์์ ์ ์ฃผ ์์ ์กฐ๋ก๋๋ฌด ๋ถํ๋ฌผ์ DPPH ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ ์ํธ์์ธํ
์ดํธ ๋ถํ๋ฌผ(EA)์ด 100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ ์ฝ 50\(%\)์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๊ณ , ์ฌ๊ณผ๊ฝ์ 70\(\%\) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EA๋ 100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ ์ฝ 58\(%\)์ ์ ํดํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ํ๋ฆฌ์ฐ ์ด์์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฅ์ฐ(TW-H), ์ํธ์์ธํ
์ดํธ(TW-EA), ๋ถํ์ฌ(TW-B), ๋ฌผ(TW-W) ๋ถํ๋ฌผ์ 100, 1,000\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ ๊ฐ๊ฐ 19, 62, 43, 22\(%\)์ 33, 92, 90, 83\(%\)์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ํ๋ด์๊ณ , ๊ทธ ์ค TW-EA์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ์ฐ์ํ๋ค(Fig. 2A). TW-EA์ RC50 ๊ฐ์ 75.4\(\pm\)4.2\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ์ธก์ ๋์๋ค.</p><p>ABTS radical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ๋ฒ์ ํญ์ฐํ๋ฌผ์ง์ ์์ ์ด์จ ๊ณต์ฌ๋ฅ์ ์ธก์ ํ๋ ๋ถ์๋ฒ์ผ๋ก ๊ณผํฉ์ฐ์นผ๋ฅจ๊ณผ ๋ฐ์์ ์ํด ์์ฑ๋ ABTS+ ์์ ๋ผ๋์นผ์ด ์๋ฃ์์ ํญ์ฐํ ๋ฌผ์ง์ ์ํด ์ ๊ฑฐ๋์ด ๋ผ๋์นผ ํน์ ์ ์์ธ ์ฒญ๋ก์์ด ํ์๋๋ ๊ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ์ฐํํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ๋ค. ๊ตฌ์ ์ด ๊ฝ์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EA์์ ์ฝ 65\(%\) (100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \))๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๊ณ , ๋ฌด์ฒญ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EA๋ ์ฝ 43%์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ํ๋ด์๋ค. TW-H, TW-EA, TW-B,TW-W๋ 100๊ณผ 1,000 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ ์๊ฑฐํ์ฑ์ด ๊ฐ๊ฐ 12,93, 68, 60\(%\)์ 22, 97, 96, 86\(%\)๋ก ๋ํ๋์ ๋ ๋์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ํ์ธํ์๊ณ , ๋ถํ๋ฌผ ์ค์์๋ TW-EA์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. 2B). TW-EA์ RC50 ๊ฐ์ 40.8\(\pm\)3.7 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ์ธก์ ๋์๋ค.</p><p>UV-B์ ๋
ธ์ถ๋ ํผ๋ถ๋ ํ์ฑ์ฐ์์ข
(ROS)์ ์์ฑํ๋๋ฐ ์ด๊ฒ์ ์ธํฌ๋ด์ ์ํฅ์ ์ฃผ์ด ํผ๋ถ์์์ ์ฃผ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ด๊ฒ์ ์ ๊ฑฐ๋ฅ์ ๊ฒ์ฆํ๊ธฐ ์ํด, ROS๋ฅผ ์ ๋ํ ๋ค DPPH์ ABTS raical ์๊ฑฐ๋ฅ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ์์ ๊ฐ์ฅ ์ฐ์ํ ํจ๋ฅ์ ๋ํ๋ธ TW-EA๋ฅผ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ํญ์ฐํ๋ฅ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ๋๋์์กด์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๊ณ 100\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ 46.4\(%\)์ ์ ํดํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค(Fig. 2C).</p> |
๊ตญ๋ด์์ ์ํ๋๋ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 3.27~4.53๊ฐ ๋ง๋๊ฐ? | ๋น๋กํ์ฌ ๋ค์ ๋ฎ์์ก์ผ๋ฉฐ | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ</h2><p>์๊ตฌ๋ฅดํธ ์ ์กฐ์ ์ด์ฉ๋๋ starter ์ ์ฐ๊ท ์ ๋๋ถ๋ถ์ ์ ๋ถ ๋ถํดํจ์์ ํ์ฑ์ด ๊ฒฐ์ฌ๋์๊ฑฐ๋ ๋ฏธ๋ฏธํ๋ฏ๋ก ์ฐ์ ์ด์ธ์ ์ ๋ถ์ ํจ์ ํ ์๋ฃ๋ฅผ ๋ถ์๋ฃ๋ก ์๊ตฌ๋ฅดํธ ์ ์กฐ์ ์ฌ์ฉํ๋ ๊ฒฝ์ฐ, ํนํ ์ฐ์ ๋ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ผ๋ถ๋ฅผ ๋์ฒดํ๋ ๊ฒฝ์ฐ ๋ถ์๋ฃ์ ํจ์ ๋ ์ ๋ถ์ ์ ์ฐ๊ท ์ด ๋ฐํจ์ ์ด์ฉ๋ ์ ์๋ ์ ๋ถ์๋ก ๋ถํดํ๋ ๋นํ๊ฐ ํ์ํ๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ์ดํ์ํ๋ฌผ์ \( 79.40 \% \), ํ์๋น์ \( 3.20 \% \) ๋ก ํ์ํ๋ฌผ์ ๋๋ถ๋ถ์ด ์ ์ฐ๊ท ์ด ์ด์ฉํ๊ธฐ ์ด๋ ค์ด ๋น๋ฐํจ์ฑ ๋น๋ฅ์ด๋ฏ๋ก, ์ฃผ๋ฐ์ \( \alpha\)-amylase์ glucoamylase๋ฅผ ์์ฐจ์ ์ผ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ค๋นํ์๋ค. ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ํ์๋น ํจ๋์ ํจ์์ฒ๋ฆฌ ์ ์ฃผ๋ฐ์ 3.20์์\( 73.0 \% \)๋ก ํฌ๊ฒ ์ฆ๊ฐ๋์ด ์ฃผ๋ฐ์ ํจ์ ๋ ๋น๋ฐํจ์ฑ ๋น๋ฅ์ ๋๋ถ๋ถ์ด ์ ๋ถ์ ๋น๋ฅ๋ก ๋ถํด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค.</p><h2>\( \mathrm{pH} \)์ ์ ์ ์ฐ๋์ ๋ณํ</h2><p>ํ์ง๋ถ์ \( 10 \%(\mathrm{w}/\mathrm{w})\) ๋ฅผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ๋ก ํ์ง๋ถ์ ์ฌ์ฉ๋์ \(0\)(๋์กฐ๊ตฐ), \( 10,20,30,50 \% \) ๋ฅผ ๋์ฒดํ์ฌ ์ค๋นํ ํํ์ก์ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 18์๊ฐ ๋์ ๋ฐํจ์ํค๋ฉฐ \( \mathrm{pH} \)์ ์ ์ ์ฐ๋์ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฐํจ์ก์ \( \mathrm{pH} \)๋ณํ๋ ๋ชจ๋ ์คํ๊ตฐ์์ ๋์ผํ ๊ฒฝํฅ์ผ๋ก ๋ฐํจ 12์๊ฐ๊น์ง ๊ธ๊ฒฉํ๊ฒ ๊ฐ์ํ ํ ๊ทธ ์ดํ ๋ฐํจ 18์๊ฐ๊น์ง \( \mathrm{pH} \) ๋ณํ๋ ๋ฏธ๋ฏธํ์์ผ๋ฉฐ, ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ฌ์ฉํ์คํ๊ตฐ์ \( \mathrm{pH} \)๊ฐ ๋์กฐ๊ตฐ๋ณด๋ค ํญ์ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ณด์๋ค. ๋ฐํจ ์์์ ์์์ \( \mathrm{pH} \)๋ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ๋ค์ ๋ฎ์์ก์ผ๋ฉฐ [6.72 (๋์กฐ๊ตฐ), 6.68 (\(10\%\) ๋์ฒด), 6.66 (\(20\%\)๋์ฒด), 6.62 (\(30\%\)๋์ฒด), 6.53 (\(50\%\)๋์ฒด)], ์ด๋ ์ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋งค์ฐ ์ ์ฌํ์๋ค. ๋ฐฐ์ 12์๊ฐ ํ ๋์กฐ๊ตฐ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 4.30, ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 4.16(\(10\%\)๋์ฒด), 4.09 (\(20\%\)๋์ฒด), 4.12 (\(30\%\)๋์ฒด), 3.96 (\(50\%\)๋์ฒด)์ผ๋ก ์ฃผ๋ฐ ๋นํ๋ฌผ๋ก ํ์ง๋ถ์ ๋ฅผ ๋์ฒดํ ์กฐ๊ฑด์์ ๋ ๋ฎ์\( \mathrm{pH} \)๋ฅผ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{pH} \) ๊ฐ์๋ ์ฃผ๋ฐ ๋นํ๋ฌผ์ ์ฌ์ฉ๋์ ๋น๋กํ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๋ณํ๋ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ \(0.5\%\)~\(2.0\%\) ์ฒจ๊ฐํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ํ์ง๋ถ์ ์ \(10\%\)~\(50\%\)๋ฅผ ์์ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ํจ์ ๋ถํด๋ฌผ๋ก ๋์ฒดํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์์๋ ๋์ผํ ๊ฒฝํฅ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ฐฐ์18์๊ฐ ํ ๋ชจ๋ ์คํ๊ตฐ์์ \( \mathrm{pH} \)๋ 3.96~4.39๋ก ๊ตญ๋ด์์ ์ํ๋๋ ๋ฐํจ์ ์ \( \mathrm{pH} \) (3.46~4.15)์ ๋ํ ๋ฐํจ์ ์ \( \mathrm{pH} \) (4.17~4.56)์ ๊ดํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ \( \mathrm{pH} \)๋ 3.27~4.53์ด ์ ๋นํ๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ ์ ๋ถํฉ๋์๋ค. ๋ฐํจ ์ค ์ ์ ์ฐ๋๋ \( \mathrm{pH} \)์ ์ ์ฌํ๊ฒ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์คํ๊ตฐ์์ ๋ชจ๋ ๋ฐํจ 12์๊ฐ๊น์ง ๊ธ๊ฒฉํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๋ฐฐ์ 12์๊ฐ ํ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ \(0.93\%\), ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ 1.04 (\(10\%\) ๋์ฒด), 1.02 (\(20\%\)๋์ฒด), 0.86 (\(30\%\) ๋์ฒด), 0.84 (\(50\%\) ๋์ฒด)๋ก ํ์ง๋ถ์ ์ ๋์ฒด์จ์ด ๋ฎ์ ์กฐ๊ฑด(\(10\)~\(20\%\))์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ ๋ณด๋ค ์ฐ์ ์์ฑ์ด ์ฆ๊ฐ๋์์ง๋ง ํ์ง๋ถ์ ์ \(30\%\) ์ด์์ ์ฃผ๋ฐ ๋นํ๋ฌผ๋ก ๋์ฒดํ๋ฉด ์ฐ์ ์์ฑ์ด ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฝํฅ์ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฃผ๋ฐ ํน์ ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ ์ถ๊ฐ๋ก ์ฒจ๊ฐํ๋ฉด ์ฐ์ ์์ฑ์ด ๋น๋ก์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ๋ฉด ํ์ง๋ถ์ ์ ๋์ฒด์จ์ด ๋ฎ์ ์กฐ๊ฑด(\(10\)~\(20\%\) ๋์ฒด)์์๋ ์ฃผ๋ฐ์ ํจ์ ๋ ๋ฏธ๋์ ๋ฐํจ์ด์ง๋ฌผ์ง์ด, ๋์ฒด์จ์ด ๋์ ์กฐ๊ฑด(30~50\(\%\) ๋์ฒด)์์๋ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ ๊ฐ์๊ฐ ์์ธ์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๋ํ ์ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์์ ๋ง๊ฑธ๋ฆฌ ์ฌ์ฉ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ ์ ์ฐ๋๊ฐ ์ฆ๊ฐํ์๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ ์์ดํ ๊ฒ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ถ๊ฐ๋ก ์ฃผ๋ฐ ํน์ ์ฃผ๋ฐ ๋ถํด๋ฌผ์ ์ฒจ๊ฐํ ๊ฒ์ด ์๋๋ผ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฌ์ฉ๋์ ์ค์ด๊ณ ์ฃผ๋ฐ ๋ถํด๋ฌผ๋ก ๋์ฒดํ์ฌ ์๊ตฌ๋ฅดํธ ๋ฐํจ์ ์ฌ์ฉํ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ค. ์์ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ํจ์ ๋ถํด๋ฌผ๋ก ํ์ง๋ถ์ ๋ฅผ ๋์ฒดํ๋ ๊ฒฝ์ฐ ๋์ฒด ์ ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฐ์ ์์ฑ์ด ๊ฐ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋น๊ตํ๋ฉด ์์ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ํจ์ ๋ถํด๋ฌผ๋ณด๋ค ์ฃผ๋ฐ ํจ์ ๋นํ๋ฌผ์ด์ฐ์ ์์ฑ์ ๋์์ด ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ฐฐ์ 18์๊ฐ ํ ๋ชจ๋ ์คํ๊ตฐ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ 0.8~1.0 \(\%\)๋ก ๊ตญ๋ด์์ ์ํ๋๋ ๋ฐํจ์ ์ ์ ์ ์ฐ๋(0.45~0.94)์ ๋ํ ๋ฐํจ์ ์ ์ ์ ์ฐ๋(0.75~1.02)์ ๊ดํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ํ๊ตญ์ธ์๊ฒ ๊ธฐํธ๋๊ฐ ๋์ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ์ ์ ์ฐ๋๋ 0.85~.120\(\%\)๋ผ๋ ๋ณด๊ณ ์ ๋ถํฉํ์๋ค. |
์คํ๋๋ฌผ ์ฌ์ก ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ๋ฌผ๊ณผ ์์ด๋๋ฌด์ ํ์ผ๋ก ๊ณต๊ธ๋์์ง? | ๋งํฌ๋ก์ (Seoul, Korea) | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>๋๋ฌผ์คํ ๋์์ธ</h2><p>์คํ๋๋ฌผ์ \(5\)์ฃผ๋ น ๋ ์์ปท ICR ๋ง์ฐ์ค๋ฅผ (์ฃผ)์ค๋ฆฌ์ํธ๋ฐ์ด์ค(Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ, \(7\)์ผ๊ฐ์ ์ ์๊ธฐ๋ฅผ ๊ฑฐ์ณ ๋ณธ ์คํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ฌ์ก์ค ํ๊ฒฝ์ ์จ๋ (\( 22 \pm 2{ }^{\circ} \mathrm{C}\)), ์ต๋(\(20\)-\(55\%\)) ๋ฐ ๊ด์ฃผ๊ธฐ(๋ช
์ \(12\)์๊ฐ ๊ฐ๊ฒฉ)๊ฐ ์กฐ์ ๋๋ฉฐ, ๋ชจ๋ ์คํ๋๋ฌผ์ ์ฌ๋ฃ์ ๋ฌผ์ ์์ ๊ธ์ํ์๋ค. ์ผ์ฃผ์ผ๊ฐ์ ์ ์๊ธฐ ํ ์คํ๋๋ฌผ์ ๊ทธ๋ฃน๋น \(6\)๋ง๋ฆฌ์ฉ ์ด \(3\)๊ทธ๋ฃน์ผ๋ก ๊ตฌ๋ถํ์๋ค. ์ ์ ๋์กฐ๊ตฐ(CTL)์ ์ผ๋ฐ ์ฌ๋ฃ(\(5\)L\(79\), Lab Diet, St. Louis, USA)๋ฅผ ๊ธ์ฌํ์๊ณ , ๊ณ ์ง๋ฐฉ ์ฌ๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ (HFD)์ \( 45 \% \) ์ง๋ฐฉ์ด ํจ๋๋ ์ฌ๋ฃ (D\(12451\), Research Diets, New Brunswick, USA)๋ฅผ \(3\)์ฃผ๊ฐ ๊ณต๊ธํ์๋ค. ์ ์์ด์ฌ์ ์ฌ๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ(LFD)์ \( 0.1 \% \) ์์ด์ฌ์ ๊ฐ ํจ์ ๋๊ฒ ์ ์กฐํ์ฌ (DooYeol Biotech, Seoul, Korea)๋ฅผ \(3\)์ฃผ๊ฐ ๊ธ์ฌ ํ์์ผ๋ฉฐ ๊ฐ ์ฌ๋ฃ์ ์ผ๋ฐ์ฑ๋ถ์ Table \(1\)์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์คํ๋๋ฌผ ์ฌ์ก ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ๋ฌผ๊ณผ ์์ด๋ ์ ํ ์์ด ๊ณต๊ธํ์๋ค. ๋ณธ ์คํ์ ์ ์ฃผ๋ํ๊ต ์คํ๋๋ฌผ์ค๋ฆฌ์์ํ์ ์ฌ์ ์ฌ์๋ฅผ ๋ฐ์ ์งํํ์๋ค(ACUC-JNU: \(2016\)-\(0045\)).</p><h2>์ฒด์ค ๋ฐ ์์ด์์ ์ญ์ทจ๋ ์ธก์ </h2><p>์ฒด์ค ๋ฐ ์์ด์์ ์ญ์ทจ๋์ ์ ์คํ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ์ฃผ \(1\)ํ ์ธก์ ํ์๊ณ , ์คํ๋๋ฌผ์ ํ ๋ง๋ฆฌ์ฉ ์ผ์ด์ง์ ์์ฉํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ ์คํ๋๋ฌผ ๊ฐ์ฒด๋ณ๋ก ์ธก์ ๋ ์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฌผ์ ๊ธ์ฌํ \(24\)์๊ฐ ํ ์ญ์ทจ์๋์ ์ธก์ ํ์ฌ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><h2>๋ถ๋ณ ์ฑ์ทจ ๋ฐ ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ๋ถ์</h2><p>์คํ๋๋ฌผ์ ๋ถ๋ณ์ ์คํ๋๋ฌผ ๊ฐ์ฒด๋ณ๋ก ์์ฉ๋ ์ผ์ด์ง์ ์ ์๋ง์ ์ค์นํ์ฌ \(5\)์๊ฐ ์ด๋ด์ ๋ํ๋ ๋ถ๋ณ์ ์ฑ์ทจํ ๋ค, \( -80^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ๋ณด๊ดํ์๋ค. ๋ถ๋ณ ๋ฏธ์๋ฌผ DNA๋ PowerFecal DNA isolation kit (MOBIO Laboratories Inc., Germantown, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ๋ DNA๋ \( 16 \)S rRNA ์ ์ ์์ V\( 4 \) ๋ถ๋ถ์ ์ฆํญ์ํจ ํ \(2\)-step PCR์ ํตํด Illumina MiSeq ํ๋ซํผ์ ๋ง์ถฐlibrary๋ฅผ ์ ์ํ์๊ณ , ์ํ์ฑ(sequencing)์ ๋งํฌ๋ก์ (Seoul, Korea)์์ ์ํํ์๋ค. ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ๋ MOTHUR๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ ์ฒ๋ฆฌ ๋ฐ ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ๋ถ์</h2><p>ํต๊ณํ์ ๋ถ์์ ANOVA๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ ์์ฑ๊ฒ์ ์ ์ค์ํ์๊ณ , ์ ์์ฑ์ด ์์ ๋ ์ฌํ๊ฒ์ ์ผ๋ก Tukey's HSD test๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค(\( p<0.05 \)). ๊ทธ๋ฃน๊ฐ์ ๋น๊ต๋ Duncan's multiple range test๋ฅผ ์ค์ํ์์ผ๋ฉฐ, \( p<0.05 \)์ผ ๋ ์ ์์ฑ์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์๋ค. ๊ฐ ๊ทธ๋ฃน๊ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ํ๋น๊ต์์๋ AMOVA๋ก ์ ์์ ์ฐจ์ด๋ฅผ ํ๋จํ์๊ณ Non-metric multidimensional scaling (NMDS) plot์ผ๋ก ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, genus ์์ค์ abundance ์ฐจ์ด๋ METASTATS๋ก ๋น๊ตํ์๋ค. \( 16 \)S rRNA ์ ์ ์ ๊ธฐ๋ฐ metabolic pathway ์ถ์ ์ PICRUSt ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋น๊ตํ์๊ณ , STAMP v\(2.1.3\)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ heatmap์ผ๋ก ๋ํ๋ด์๋ค. ์ด๋ ANOVA๋ก ์ ์์ฑ ๊ฒ์ ์ ์ค์ํ์๊ณ , ์ ์์ฑ์ด ์์ ๋ Tukey's HSD test๋ก ์ฌํ๊ฒ์ ํ์๋ค(\(p<0.01\)). ๋ํ ์ด์ ๋ฐ๋ฅธ ๊ณํต์ ๋ถ์์ The Unweighted Pair Group Method with Arithmetic Mean ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ํ๋ด์๋ค.</p> |
์คํ์ ํตํด ์ป์ ์ต์ ํ๋ ์กฐ๊ฑด์ ์ด์ ์ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ชจ๋ ์กฐ๊ฑด๋ค๋ณด๋ค ๋ ๋์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ถ์ถํ ์ ์๋ ์กฐ๊ฑด์ผ๊น? | ์๋ฌผ์ฒด ๋ด๋ถ๋ก ์นจํฌ๊ฐ ์ฉ์ดํ์ฌ ํ๋์ฑ ๋ฌผ์ง์ ์ถ์ถ์ ์ ๋ฆฌํ ํน์ง์ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ค. | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ ์กฐ ๋ฐ ํ์ฑ๋น๊ต</h2><p>\( 80 \% \) ์ํ์ฌ์ ์ด์ฉํ์ฌ \(20 \)๊ฐ์ง์ ํ๋ธ ์๋ฌผ์ ์ถ์ถํ์๋ค. \( 80 \% \) ์ํ์ฌ์ ๊ทน์ฑ๊ณผ ๋น๊ทน์ฑ์ ์ฑ์ง์ ๋ชจ๋ ๊ฐ์ง ์์น๋งค์ฑ ์ฉ๋งค๋ก, ์ํ์ฌ ์์ฉ์ก์ ํํ๋ ์๋ฌผ์ฒด ๋ด๋ถ๋ก ์นจํฌ๊ฐ ์ฉ์ดํ์ฌ ํ๋์ฑ ๋ฌผ์ง์ ์ถ์ถ์ ์ ๋ฆฌํ ํน์ง์ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ค. ์ถ์ถ์ก์ ๊ฐ์๋์ถํ ํ ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐํ๊ณ DMSO์ \( 1 \mathrm{~mg} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋๊ฐ ๋๋๋ก ๋
น์ฌ ์ด ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ๋ฐ DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ฐ ํ๋ธ ์๋ฃ๋ก๋ถํฐ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ์ ๊ณ ํ๋ถ ์์จ์ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ์ด ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ํจ๋์ Table \(2 \)์ ํ์ํ์๋ค. Table \(2 \)์์ ๋ณด๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด ์ด ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋์ ํด๋ฌ๋ธ, ํ์, ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ, ๊ณํผ์ ์์ผ๋ก ๊ฐ๊ฐ \( 7.08\), \(6.90 \), \( 4.88\), \(3.35 \mathrm{~mg} \mathrm{~CAE} / 100 \mathrm{~g} \)์ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ํ์, ์ค๋ ๊ฐ๋
ธ, ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ, ํด๋ฌ๋ธ์ ์์ผ๋ก \( 1.71\), \(0.77\), \(0.80 \), \( 0.97 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)์ ๋ํ๋๋ค. ๋ํ, DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ ํ์, ์๊ณ์ ์, ์ธ์ด์ง, ํด๋ฌ๋ธ, ์ค๋ ๊ฐ๋
ธ, ๋ง์กฐ๋, ๋ฐ์ง, ๊ณํผ, ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ \( 90 \% \) ์ด์์ ๋์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ํ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ๊ฐ์ฅ ๋์์ผ๋ฉฐ, ์ด ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋ ๋ฐ DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ๋ ํ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ๋์ ์์ค์ ๋ณด์ฌ \(20\)๊ฐ์ง ํ๋ธ ์๋ฌผ ์ค ํ์์ ์ถ์ถ์๋ฃ๋ก, ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๋ฅผ ์ถ์ถ ํํฉ๋ฌผ๋ก ์ ํํ์๋ค. ์ํ๋๋ \(6 \)์ข
์ ํ๋ธ๋ฅ ์ค์์ ๋ก์ฆ๋ง๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋์ด ๋๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ \(11 \)์ข
์ ํ๋ธ ์ค ๋ฐฐ์ดํฅ, ํํผ๋ฏผํธ ๋ฑ์ DPPH radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ด ์ฐ์ํ๋ค๋ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์๋ค. ์ถ์ถ์ฉ๋งค(์ด์ ํน์ ๋ฉํ์ฌ)์ ์๋ฃ์ ์ฐจ์ด์ ์ํ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ๋๋ผ๋ ํด๋ฆฌํ๋์ด๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ๊ฐ์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง์ ํจ๋์ด ๋์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ๋์ ํญ์ฐํํ์ฑ์ ๋ณด์ธ ๊ฒ๊ณผ ์ ์ฌํ ๊ฒฝํฅ์ด์๋ค.</p><h2>ํ์์ ์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด ์ต์ ํ</h2><p>ํ์ ๋ถ๋ง๋ก๋ถํฐ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ์ถ์ถ์ ์ํ ์ ์ ํ ์ฉ๋งค ์ ์ ์ ์ํด ๋ฌผ๊ณผ ์๋ \( 99 \% \) ์ด์์ ์ฉ๋งค(์ํ์ฌ, ๋ฉํ์ฌ, \( n \)-ํฅ์ฐ)๋ก ๊ฐ๊ฐ ํ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ์ฌ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค. ํ์์ด ํจ์ ํ๊ณ ์๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๊ณ ๋ฌผ์ง์ ๊ทน์ฑ ๋ฐ ๋น๊ทน์ฑ๋๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ๊ทน์ฑ์ด ๋ค๋ฅธ ์ธ ์ฉ๋งค๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ถ์ถํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ Fig. \(1\)์์ ๋ณด๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด, ์ํ์ฌ, ๋ฉํ์ฌ ๋ฐ \( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ \( 2.86 \pm 0.64\), \(2.09 \pm 0.30 \) ๋ฐ \( 10.09 \pm 1.24 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)์ด์๊ณ , ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์์๋ ๊ฒ์ถ๋์ง ์์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ๋์ ์ฉ๋งค์ธ \( n \)-ํฅ์ฐ์ ์ถ์ถ์ฉ๋งค๋ก ์ ์ ํ์๋ค. ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ์ถ์ถ์ ๊ณ ์จ์ ๋ฌผ์ ์ฉ๋งค๋ก๋ ์ฌ์ฉํ๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋น๊ต์ ๋ฎ์ ์จ๋์ธ \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ์ถ์ถํ์ฌ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๊ฐ ๊ฒ์ถ๋์ง ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค.</p><p>ํ์ ๋ถ๋ง๋ก๋ถํฐ \( n \)-ํฅ์ฐ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๋ฅผ ์ถ์ถํ๊ธฐ ์ํ ์ต์ ์ ์กฐ๊ฑด์ ์ฐพ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋ฐ์ํ๋ฉด๋ถ์๋ฒ(RSM)์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋
๋ฆฝ๋ณ์๋ก์ ์ถ์ถ์จ๋ (\( \mathrm{X}_{1}\)), ์๋ฃ๋๋ (\( \mathrm{X}_{2} \)) ๋ฐ ์ถ์ถ์๊ฐ (\( \mathrm{X}_{3} \))์ ์ ์ ํ์๊ณ , ์ข
์๋ณ์๋ก์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋ (\( \mathrm{Y}_{1} \))์ ์ ์ ํ์๋ค. ๋
๋ฆฝ๋ณ์๋ฅผ \(3 \)๊ฐ์ง ๋ฒ์ \( (-1,0,1) \)์์ \(20 \)๊ฐ์ง ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ์ถ์ถ์คํ์ ์ค์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค. ๋
๋ฆฝ๋ณ์์ ์ต์๊ฐ๊ณผ ์ต๋๊ฐ์ ์๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์คํฌ๋ฆฌ๋ ์คํ ์กฐ๊ฑด ๋ฐ ์ฉ๋งค์ ๋๋์ ์ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ์ค์ ํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ Table \(3\)์์ ๋ณด๋ ๋ฐ์ ๊ฐ์ด, ๊ฐ ์คํ ์กฐ๊ฑด์์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ \(3.73\)-\(7.41 \mathrm{~mg}\) \(\mathrm{NE}/100 \mathrm{g}\) ๋ฒ์๋ก ๋ถ์๋์๋ค. ๋ค์ ์์ ๊ฐ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด์ ๋ฐ๋ฅธ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ํ ๋ฐ์ํ๋ฉด ํ๊ท์์ด๋ค. \( \mathrm{Y}_{1}=+69.95-2.42 \mathrm{X}_{1}+9,03 \mathrm{X}_{2}+4.34 \mathrm{X}_{3}-3.61 \mathrm{X1}^{2}-9.55 \mathrm{X2}^{2}-4.74 \mathrm{X3}^{2}- 1.42 \mathrm{X}_{1} \mathrm{X}_{2}-1.75 \mathrm{X}_{1} \mathrm{X}_{3}-0.27 \mathrm{X}_{2} \mathrm{X}_{3} \)</p><p>\( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ๋ํ ํ๊ท์์ ์๊ด๊ด๊ณ (\( \mathrm{R}^{2} \))๋ \( 0.9011 \)๋ก, \( 5 \% \) ์ด๋ด์ ์์ค์์ ์ ์์ฑ์ด ์ธ์ ๋์๋ค. ANOVA ๋ถ์ฐ๋ถ์์ผ๋ก ๋
๋ฆฝ๋ณ์์ ๋ํ ์ข
์๋ณ์์ ์ํธ๊ด๊ณ๋ฅผ ํ์ธํ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋
๋ฆฝ๋ณ์ ์ค์์ ์ถ์ถ์จ๋ (\( \mathrm{X}_{1} \))๋ฅผ ์ ์ธํ ์ถ์ถ๋๋ (\( \mathrm{X}_{2} \))์ ์ถ์ถ์๊ฐ (\( \mathrm{X}_{3} \))์ด ์ ์์ฑ์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค (\( 5 \% \) ์ ์ ์์์ค ์ด๋ด). ๋ฅ์ ๋ถ์ ๊ทธ๋ํ๋ฅผ ํตํด \(3\)๊ฐ์ง ์ธ์์ ์ํธ๊ด๊ณ๋ฅผ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ, ์ถ์ถ๋๋ (\( X_{2} \))๊ฐ \(0.50\)-\(1.63\%\)๋ก ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ์ ์์ฑ ์๊ฒ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค (\( p<0.0003 \)). ์ถ์ถ์๊ฐ (\( \mathrm{X}_{3} \))์ \(30\)-\(193\)๋ถ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค(\( p<0.0227 \)). ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ํ ์ถ์ถ์จ๋ (\( \mathrm{X}_{1} \))์ ์ํฅ์ ๋ฏธ๋ฏธํ์์ผ๋ ์ถ์ถ ๋๋ (\( \mathrm{X}_{2} \))๋ \( 1.63 \% \)๊น์ง ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋๋ ทํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค(Fig. \(2\)). ํ์์ ์ผ์ข
์ธ ์ฌ๋ฐฑ๋ฆฌํฅ์์ \( 75 \% \) ์ํ์ฌ์ ์ฉ๋งค๋ก microwave๋ฅผ ์ด์ฉํ ํญ์ฐํ ์ฑ๋ถ์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด ์ต์ ํ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๋์ผํ๊ฒ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ์ถ์ถ๋์ ์ถ์ถ์๊ฐ์ \( 5 \% \) ์ ์์์ค์์ ์ ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค.</p><h2>์ต์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด ์์ธก ๋ฐ ๊ฒ์ฆ</h2><p>ํ์์ผ๋ก๋ถํฐ ์จ๋, ๋๋, ์๊ฐ์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด์ ๋ฐ๋ฅธ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ฐ์ํ๋ฉด๋ถ์์์ ์์ธก๋ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ \( 7.05 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)์ด์๊ณ , ์ด ๋์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด์ ์ถ์ถ์จ๋ \( 35.87^{\circ} \mathrm{C} \), ์ถ์ถ๋๋ \( 1.63 \% \), ์ถ์ถ์๊ฐ \( 192.28 \)๋ถ์ด์๋ค. ์์ธก๋ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ์ \( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ ํ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ถ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ \( 6.79 \pm 0.46 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g} \)๋ก ์์ธก ๊ฐ์ \( 96.3 \% \)๋ฅผ ๋ํ๋ด์ด ์คํ๊ณํ๋ฒ์ ์ํ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด ์ต์ ํ์ ์ ๋ขฐ์ฑ์ด ๊ฒ์ฆ๋์๋ค.</p><p>์ด์์ ์ต์ ํ๋ ์กฐ๊ฑด์์ ์ป์ ํ์ \( n \)-ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ Kwon ๋ฑ์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ง์ดํฌ๋กํ ํฌ์
์กฐ๊ฑด์์ \( 75 \% \) ์ํ์ฌ๋ก ์ถ์ถํ ์ถ์ถ๋ฌผ์์์ ํจ๋(\(15.08 \mathrm{~mg} \mathrm{~NE} / 100 \mathrm{~g}) \)๋ณด๋ค๋ ๋ฎ์ ์์น์ด๋, ๋ง์ดํฌ๋กํ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ง ์์ ์ด์์ถ์ถ๋ฌผ(\(80\)-\(100^{\circ} \mathrm{C}\), \(3.5 \)์๊ฐ ์ถ์ถ)์ ๋์์ผ๋ก ํ ์ฐ๊ตฌ์ ๋นํ๋ฉด ํฌ๊ฒ ํฅ์๋ ๊ฒ์ด๋ค. ๋ํ ์ด ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋ฌผ๋ก ํญ์ฐํ ํ์ฑ ๋ชจ๋ ๋์ \( (+) \)์ ์๊ด๊ด๊ณ๋ฅผ ๋ํ๋ธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ์ด๋ค. ๊ฒฐ๋ก ์ ์ผ๋ก ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ต์ ํํ ์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด์ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ์์ฐ์ ์ํ ํ์์ ์ฉ๋งค์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก์ ํ์ฉํ ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ธฐ๋๋๋ค.</p> |
\( 50 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ DDPE์ ์ ํ๊ตฌ๊ฐ ์ฌ์ ๋ฐฐ์๋ ๊ฒฝ์ฐ์ tolaasin ์ฒจ๊ฐ ํ \( 10 \)๋ถ ์ด๋ด์ ์ฉํ์ด ์๊ฒฐ๋ผ? | YES | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>ํฌ๊ธฐ๊ฐ ๋ค๋ฅธ ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ ์ธ์ง์ง์ ํจ๊ณผ</h2><p>Tolaasin์ ์ํ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ์ธํฌ๋ง์์ pore๋ฅธ ํ์ฑํจ์ผ๋ก์จ ์ผ์ด๋๋ฉฐ, tolaasin์ pore ํ์ฑ์์ฉ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ค์ํ ์ธ์ง์ง์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ธ์ง์ง์ ํ์์ ๊ธธ์ด๊ฐ ๋ค๋ฅธ ํฌํ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ ๊ฒ์ ์ ํํ์์ผ๋ฉฐ, ์ธ์ง์ง DDPE๋ \( 2 \)๊ฐ์ decanoic acid \( (\mathrm{C} 10: 0) \)๋ฅผ, DMPE๋ myristic acid \( (\mathrm{C} 14: 0) \)๋ฅผ, DSPE๋ stearic acid \( (\mathrm{C} 18: 0) \)๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ํฌํจํ๋ phosphatidylethanolamine์ด๋ฉฐ, ๋ฐ์ ์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ tolaasin์ ์ฉํํ์ฑ ํน์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค(Fig. 1). DMPE์ DSPE๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์์ ๊ฒฝ์ฐ, tolaasin์ ํ์ฑ์ ์ธ์ง์ง์ ๋ฃ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋น๊ตํ์ฌ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์์ผ๋, DDPE๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ๊ฒฝ์ฐ์๋ \( 5 \)๋ถ ์ด๋ด์ ์ ํ๊ตฌ์ ์ฉํ์ด ๋ชจ๋ ์ผ์ด๋ tolaasin์ ์ธํฌ๋
์ฑ์ด ํฌ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์๋ค.</p><p>์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์ฅ์ ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ง์ ๊ตฌ์ฑํ๋ ์ธ์ง์ง์ด ํ์ \(18 \)๊ฐ๋ฅผ ์ค์ฌ์ผ๋ก \( 16\)-\(20 \)๊ฐ์ ํ์๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ์ง๋ฐฉ์ฐ๋ค๋ก ๊ตฌ์ฑ๋์ด ์๋ค๋ ์ฌ์ค์ ๊ณ ๋ คํ ๋, DMPE์ DSPE๋ ์ธํฌ๋ง์ ์ธ์ง์ง๋ค๊ณผ ํ์์ฌ์ฌ ๊ธธ์ด์ ํฐ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์ด tolaasin์ ํ์ฑ์ ํฐ ์ํฅ์ด ์์์ ๋ณด์ฌ์ค๋ค. ๋ฐ๋ฉด, DDPE๋ tolaasin์ ํ์ฑ์ ํฌ๊ฒ ์ฆ๊ฐ์์ผ, tolaasin์ ์ํ pore ํ์ฑ์ ์ด์งํ๊ฑฐ๋ ํ์ฑ๋ pore๋ฅผ ์์ ํ์ํด์ ๋์์ฃผ๋ ์ญํ ์ ํ๊ณ ์์์ ์๋ฏธํ๋ค. ์ด๋ tolaasin์ด ํ์ฑํ๋ pore์ ๊ธธ์ด๊ฐ ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ง์ ๋๊ป๋ณด๋ค ์งง์, ์ค๊ฐํฌ๊ธฐ์ ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ ์ธ์ง์ง์ด tolaasin pore์ ์ฃผ๋ณ์ ๊ฒฐํฉํ์ฌ pore ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ฃผ๋ณ ๋ง์ ์์ ์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํฌ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์์์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค.</p><h2>DDPE์ ์ฌ์ ์ฒ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ tolaasin์ ์ฉํํ์ฑ</h2><p>์ ํ๊ตฌ๋ฅผ ๋ค์ํ ๋๋์ DDPE์ \( 10 \)๋ถ๊ฐ ์ฌ์ ๋ฐฐ์ํ์ฌ ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ง์ DDPE๋ฅผ ๊ฒฐํฉ์ํจ ํ, tolaasin ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํ ์ฉํํ์ฑ์ ๋์กฐ์คํ์ ๋นํ์ฌ ๋น ๋ฅด๊ฒ ์ผ์ด๋ฌ๋ค. DDPE ์ฌ์ ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํ tolaasin์ ์ฉํํ์ฑ ์ฆ๊ฐ๋ DDPE์ ์ฒ๋ฆฌ๋๋์ ๋ฐ๋ผ ๋ค๋ฅด๋ \( 5 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ ๋๋์์ ์ฆ๊ฐํ๊ธฐ ์์ํ์ฌ \( 50 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ ๋๋์์ ์ต๋๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ํนํ \( 50 \mu \mathrm{M} \) ์ด์์ DDPE์ ์ ํ๊ตฌ๊ฐ ์ฌ์ ๋ฐฐ์๋ ๊ฒฝ์ฐ์๋ tolaasin ์ฒจ๊ฐ ํ \( 10 \)๋ถ ์ด๋ด์ ์ฉํ์ด ์๊ฒฐ๋์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์ค๊ฐํฌ๊ธฐ ์ฌ์ฌ์ ์ง๋ฐฉ์ฐ์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ์ธ์ง์ง์ด tolaasin ๋ถ์์ ๋น ๋ฅธ pore ํ์ฑ์ ์ด ์งํ์ฌ tolaasin pore์ ํ์ฑ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ์ ๋ฐํจ์ ์ ์ ์๋ค.</p> |
Hatching rates \((96\) h)์ ํ๊ท ๊ฐ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ ๋ Concentration \( \left(\mu \mathrm{g} \mathrm{L}^{-1}\right) \)์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | \( 86.7 \pm 8.79 \) | <p>์์ฆ๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถํ ๊ณํผ ์ ์ ์ ์ ์ ์ ๋ธ๋ผํผ์ฌ ๋ฐฐ์์ ๋ํ ๋ถํ์จ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ Table \(4\)์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋ถํ์จ์ด \( 86 . 7 \% \) ์์ผ๋ฉฐ ์ ์ ๋ฅผ ๋บ ์ ์ ์ ๋
ธ์ถ๋ ์ ๋ธ๋ผํผ์ฌ์ ๋ถํ์จ์ \( 93 . 6 \% \)์์ผ๋ฉฐ ๋ ์คํ๊ตฐ ๊ฐ์ ์ ์์ฑ์ ๋ฐ๊ฒฌ๋์ง ์์๋ค. ์์ฆ๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถํ ๊ณํผ ์ ์ ์ ์ ์ ์ฒ๋ฆฌ ๋๋๋ \( 500 \mathrm{mg} \mathrm{L}^{-1} \) ์์ผ๋ฉฐ ์ด ๋ ๋ถํ์จ์ \( 84 . 4 \% \) ๋ก์จ ๋๊ฐ์ง ๋ค๋ฅธ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ์ ๋น๊ต์์ ํต๊ณํ์ ์ผ๋ก ์ ์์ฑ์ด ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ด ์ฒ๋ฆฌ ๋๋ ๋ฒ์์์๋ ์์ฆ๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถํ ๊ณํผ ์ ์ ์ ์ ๋ ์ ๋ธ๋ผํผ์ฌ ๋ฐฐ์์ ๋ถํ์ ๋
์ฑ์ ๋ํ๋ด์ง ์์๋ค.</p> <table border><caption>Table \(4 \) Hatching rates of emulsifiable concentrates of cinnamonessential oils obtained using steam distillation to zebrafish embryos(Danio rerio)</caption> <tbody><tr><td>Sample</td><td>Concentration \( \left(\mu \mathrm{g} \mathrm{L}^{-1}\right) \)</td><td>Hatching rates \((96\) h)</td></tr><tr><td>Control (negative)</td><td>water</td><td>\( 86.7 \pm 8.79 \)</td></tr><tr><td>Control (positive )</td><td>without essential oil</td><td>\( 93.6 \pm 3.81 \)</td></tr><tr><td>Cinnamon</td><td>\(10\)</td><td>\( 94 . 7 \pm 2 . 48 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(50\)</td><td>\( 90.3 \pm 7.15 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(100\)</td><td>\( 88.9 \pm 6.97 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(250\)</td><td>\( 87.7 \pm 6.92 \)</td></tr><tr><td></td><td>\(500\)</td><td>\( 84.4 \pm 3.86 \)</td></tr></tbody></table> |
์ปคํผ ๋ก์คํ
์๊ฐ์ด ์ํฅ์ ๋ฏธ์ณ? | ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ถ์์ ์ํด | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>Coffee ์๋ฃ ๋ฐ ์ปคํผ ์ถ์ถ</h2><p>์ปคํผ ์๋ ์๋ฃ๋ ์ฝ๋กฌ๋น์์ฐ Coffea arabica var. tipica ํ์ข
์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. ์ปคํผ ๋ก์คํ
๊ฐ๊ณต์ medium๊ณผ dark์ ๋ ์์ค์ผ๋ก ์งํํ์๋ค. Medium์ ์ํด์ ๋ฐ์ดํ์ ๋ก์คํฐ(Taehwan, Bucheon, Korea)๋ก \( 210{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 10๋ถ, dark๋ฅผ ์ํด์ \( 210{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์์ 15๋ถ ๊ฐ roastingํ์๋ค. ์๋๋ฅผ ๋ถ์ํ๊ธฐ ์ํด ์ปคํผ๋ถ์๊ธฐ(Melitta, Tokyo, Japan)๋ก ๊ฐ์์ ๋ถ๋ง์ ๋ฐํ๋ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ฃ์ด ๊ฑด์กฐํ๊ณ ๊ณต๊ธฐ๊ฐ ์ ํตํ๋ (\( 20\)-\(25^{\circ} \mathrm{C} \)) ์์ค์ ์ ์ฅํ์๋ค.</p></p>์ผ์ ํ ์กฐ๊ฑด์์ ์ปคํผ์๋ฃ๋ฅผ ์ถ์ถํ๊ธฐ ์ํด์๋ ๋ถ์๋ \( 10 \mathrm{~g} \)์ ์ปคํผ๋ฅผ beaker์ ๋ฃ๊ณ \( 95{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์ฆ๋ฅ์ \( 50 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ 2 ๋ถ๊ฐ ๊ต๋ฐํ๋ฉด์ ์ปคํผ์ ์ฑ๋ถ์ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ์ด ๋๋๋ฉด ์ปคํผ ๊ณ ํ๋ถ์ ์ ๊ฑฐํ๊ธฐ ์ํด ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ์์ธต์ก์ ์ป์๋ค. ์์ธต์ก์ ์ก์ฒด ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ถ์์ ์ํด \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) membrane filter(Millipore, Merck, Darmstadt, Germany)๋ฅผ ํต๊ณผ์์ผ์ ๋ฏธ์ธ ๊ณ ํ๋ฌผ์ ์ ๊ฑฐํ์๋ค.</p><h2>์ง๋ฐฉ์ฐ์ ์ฐํ ๋ถ์</h2><p>์กฐ์ง๋ฐฉ์ ์ถ์ถ ๋ฐ ์ง๋ฐฉ์ ์ฐ๊ฐ, ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ ์ธก์ ์ ์ํ๊ณต์ ์ ๋ถ์๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ์ํํ์๋ค.</p><h2>์ง๋ฐฉ์ ๋ถ์</h2><p>๋ฏธ์ธํ๊ฒ ๊ฐ ์ปคํผ๋ถ๋ง \( 10 \mathrm{~g} \) ์ ์ ํํ ๋ฌ์ ๋ฌด๊ฒ๋ฅผ ์๋ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ด์ \(100\)-\( {105 }^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ 1 ์๊ฐ ๊ฑด์กฐํ ํ ๋ฐ์์ผ์ดํฐ์์ ์ํ๊ณ Soxhlet ์ถ์ถ์ฅ์น์ diethyl ether ๋ก \( 60{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 8์๊ฐ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ์ด ๋๋๋ฉด ether๋ฅผ \( 50{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ์ฆ๋ฐ์ํค๊ณ \( 100{ }^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ์ฝ 1 ์๊ฐ ๊ฑด์กฐ ํ ์ฉ๊ธฐ์ ๋ฌด๊ฒ๋ฅผ ๋ฌ์ ์ฉ๊ธฐ์ ๋จ์์๋ ์กฐ์ง๋ฐฉ์ ๋ฌด๊ฒ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><p>์กฐ์ง๋ฐฉ \( (\%)=( \) ์ถ์ถ๋ ์กฐ์ง๋ฐฉ ๋ฌด๊ฒ/์๋ฃ๋ฌด๊ฒ \( ) \times 100 \)</p><h2>์ง๋ฐฉ ์ฐ๊ฐ</h2><p>์ง์ง \( 1 \mathrm{~g} \) ์ ์คํํ๋๋ฐ ํ์ํ \( \mathrm{KOH} \) ์ \( \mathrm{mg} \) ์ ์ฆ ์๋ฃ ์ค์ ์ ๋ฆฌ์ง๋ฐฉ์ฐ์ ์์ ๊ตฌํ๊ธฐ ์ํด ์ปคํผ ๋ถ๋ง์์ hexane์ผ๋ก ์ค์จ์์ ์ถ์ถํ๊ณ ๊ฐ์์ฆ๋ฅ๊ธฐ์์ hexane์ ๋ถ๋ณ์ฆ๋ฅ๋ก ์ ๊ฑฐํ ํ ์ป์ ์ง๋ฐฉ์๋ฃ \( 1 \mathrm{~g} \) ์ ์ ๋ฐํ ๋ฌ์ ethanol:ether \( (1: 2) \) ํผ์ก \( 10\mathrm{mL} \) ๋ฅผ ๋ฃ์ด ๋
น์๋ค. ์ปคํผ ์ง๋ฐฉ์๋ฃ์ ์๊ฐ์ ๋๋ฌธ์ \( 1 \% \) ํฐ๋ชฐํํ๋ ์ธ/ethanol ์ฉ์ก์ ์ง์์ฝ์ผ๋ก ํ์ฌ ์ฒญ์์ด 30์ด ๊ฐ ์ง์ํ ๋๊น์ง \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{KOH} / \) ethanol ์ฉ์ก์ผ๋ก ์ ์ ํ๋ค. ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{KOH} / \mathrm{ethanol} \) ์ ๋ถํผ(a)์์ ๋ฐํ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.1 \mathrm{M} \) \( \mathrm{KOH} / \)ethanol์ ๋ถํผ(b)๋ฅผ ๋ค์์ ์์ ํตํด ์ฐ๊ฐ๋ฅผ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><p>์ฐ๊ฐ \( =5.611 \times(\mathrm{a}-\mathrm{b}) \)</p><h2>์ง๋ฐฉ ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ</h2><p>๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ, ์ฆ, ์ ์ง \( 1 \mathrm{~kg} \) ์ ์ํ์ฌ \( \mathrm{KI} \)์์ ์ ๋ฆฌ๋๋ I2์ ๋ฐ๋ฆฌ๋น๋์ \( (\mathrm{meq} / \mathrm{kg}) \) ๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ปคํผ์์ ์ถ์ถํ ์ง๋ฐฉ ๊ฒ์ฒด \( 1 \mathrm{~g} \) ์ ๋ฌ์ acetic acid:chloroform \( (3: 2)\) \(2.5 \mathrm{~mL} \) ์ ์ฝ๊ฐ ๊ฐ์จํ์ฌ ๋
น์ด๊ณ ํฌํ \( \mathrm{KI} \) ์ฉ์ก \( 0.1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐ๋ณ๊ฒ ํ๋ค์ด ์์ ๋ค์ ์ด๋์ด ๊ณณ์ 10 ๋ถ๊ฐ ๋ฐฉ์นํ๊ณ ๋ฌผ \( 3 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ ์ธ๊ฒ ํ๋ค์ด ์์ ๋ค์ ์ ๋ถ์์ก \( 0.1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ง์์ฝ์ผ๋ก ํ์ฌ \( 0.01 \mathrm{M} \) sodium thiosulfate ์ก์ผ๋ก ์ ์ ํ๋ค. ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.01 \mathrm{M} \) sodium thiosulfate์ก์ ๋ถํผ(a)์์ ๋ฐํ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ \( 0.01 \mathrm{M} \) sodium thiosulfate์ก์ ๋ถํผ(b)๋ก๋ถํฐ ๋ค์์ ์์ ํตํด ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ๋ฅผ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><p>๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๊ฐ \( (\mathrm{meq} / \mathrm{kg})=(\mathrm{a}-\mathrm{b}) \times 10 \)</p><h2>CGA์ ์ ๋</h2><p>์์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ๋ถ์๋ ์ปคํผ์๋์์ ๋ฌผ๋ก ์ถ์ถํ ์ปคํผ์ ์ถ์ถ๋ CGA์ ์กฐ์ฑ ๋ฐ CGA์ ํํ์ ๋ณํ์ ์ํด ํ์ฑ๋๋ ๋ค๋ฅธ ๋ค๋ฅธ ์ฑ๋ถ๋ค์ ๋ถ์ํ๊ธฐ ์ํด ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ์ํํ์๋ค. ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ์ํด์ ์ถ์ถ๋ ์ปคํผ์๋ฃ \( 1 \mathrm{~mL} \) ์ \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{HCl} \)/ methanol\( : \) chloroform (\( 1: 2)\) \( 2 \mathrm{~mL} \) ์ ๊ฐํ๊ณ ์ค์จ์์ 30 ๋ถ๊ฐ ํ๋ค์ด์ ์์ด์ฃผ์๋ค. Chloroform ์ธต์ ์ทจํ์ฌ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ์ง๊ณต๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ ๋ง๋ฆฌ๊ณ ์์ ํ ๊ฑด์กฐ๊ฐ ์ด๋ฃจ์ด์ง๊ธฐ ์ ์ ์๋ฃ๋ฅผ \( 0.1 \mathrm{M} \mathrm{HCl} / \) methanol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) ์ ๋
น์๋ค. ์ก์ฒดํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ถ์์ ์ํด \( \mathrm{C} 18 \) column \( (4.6 \times 150 \mathrm{~mm}\), \(5 \mu \mathrm{m}) \) ์ด ์ฐ๊ฒฐ๋ Agilent 1200LC (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)์ ์๋ฃ๋ฅผ 10\( \mu \mathrm{L} \) ์ฃผ์
ํ๊ณ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ฅผ ์ ์งํ๋ฉด์ ์ด๋์์ผ๋ก \( 10 \mathrm{mM} \mathrm{HCl} \) : methanol \( (9:1) \)๋ฅผ \( 1 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \) ์ ์ ์์์ ๋ถ๋ฆฌ๋๋ ๋ฌผ์ง๋ค์ \( 374 \mathrm{~nm} \) ์ ํ์ฅ์์์ ํก๊ด๋๋ก ์ธก์ ํ์๋ค. CGA์ ์ ๋๋ถ์์ ์ํด์ CGA ํ์คํ(Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)์ \( 10 \mathrm{mM} \mathrm{HCl} :\)methanol \( (9:1) \)์ ๋
น์ฌ์ ์ธก์ ํ์ฌ CGA ์ retention time๊ณผ ํ์ค๊ณก์ ์ ์ป์๋ค.</p><h2>ํญ์ฐํํ์ฑ์ ์ธก์ </h2><p>DPPH radical ์๊ฑฐ๋ฅ ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด Kang ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ Katsube ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์๋ฃ ํน์ฑ์ ๋ง์ถฐ ์ค์ํ์๋ค. ์ปคํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์ด์จ์๋ก ์ฐ์ ํฌ์ํ์ฌ ๊ฐ ํฌ์๋๋์์ \( 50 \mu \mathrm{L} \) ์ฉ์ ์ทจํ์ฌ 96-well plate์ ๋ฃ์๋ค. ์ฌ๊ธฐ์ 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) \( / 50 \% \) ์ํ์ฌ \( 200 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ๋ฃ๊ณ 30๋ถ๊ฐ ์ค์จ์์ ๋ฐ์ํ์๋ค. \( 550 \mathrm{~nm} \) ์์์ ํก๊ด๋ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ ํด Multilabel Counter (PerkinElmer, Inc., Wellesley, MA, USA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Radical ์๊ฑฐํ์ฑ์ ๊ณ์ฐํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ์ฉํ ์์ด๋ค. Radical ์๊ฑฐํ์ฑ \( (\%)=100 \times(\mathrm{A}-\mathrm{B}) / \mathrm{A} \), ์ฌ๊ธฐ์ \( \mathrm{A} \) ๋ control(์๋ฃ ์์ด ์ธก์ ํ DPPH radicals์ ํก๊ด๋) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ \( \mathrm{B} \) ๋ ์๋ฃ์ ๋ฐ์ํ ํ radicals์ ํก๊ด๋์ด๋ค. ๊ฐ ์๋ฃ์ ํญ์ฐํํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ๋ 3๋ฐ๋ณต ์คํ๊ฒฐ๊ณผ์ ํ๊ท \( \pm \mathrm{SD} \) ๋ก ํ์ํ์๋ค.</p><p>\( \mathrm{ABTS}^{+} \)radical ์๊ฑฐ๋ฅ ๋ถ์์ ์ํด ๋จผ์ 2,2-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) ์ฉ์ก์ ๋ง๋ค๊ธฐ ์ํด \( 5 \mathrm{~mL}\) \( 7 \mathrm{mM} \) ABTS / \(\mathrm{dH}_{2} \mathrm{O} \) ๊ณผ \( 80 \mu \mathrm{L}\) \( 2.45 \mathrm{mM} \) potassium persulfate๋ฅผ ํจ๊ป ๋ฃ๊ณ ๋น์ ์ฐจ๋จํ ์ํ๋ก ์ค์จ์์ 12์๊ฐ ๋ฐ์ํ์ฌ ABTS radical cation \( \left(\mathrm{ABTS}^{+}\right) \)์ ์ป์๋ค. ๋ฐ์ ํ ์ฉ์ก์ \( 734 \mathrm{~nm} \) ์์์ ํก๊ด๋๊ฐ \( 0.7 \) ์ด ๋๋๋ก ethanol๋ก ํฌ์ํ์๋ค. \( \mathrm{ABTS}^{+} 1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ \( 50 \mu \mathrm{L} \) ์ ์๋ฃ๊ฐ ๋ค์ด ์๋ ์ ๋ฆฌ ํ๋ธ์ ๋ฃ๊ณ 30์ด ๊ฐ vortex ํ์๋ค. 5๋ถ ๋ ๋ฐ์ ์ํจ ํ ํก๊ด๋๋ฅผ \( 734 \mathrm{~nm} \) ์์ ์ธก์ ํ์๋ค. Radical ์๊ฑฐ๋ฅ ํ์ฑ๋๋ ์๋ฃ๊ฐ ์๋ ์ํ์์ ์ธก์ ํ ๊ฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ๋ณํ๋ ํก๊ด๋์ ๋ฐฑ๋ถ์จ๋ก ๊ณ์ฐํ์๋ค. ๋ชจ๋ ์คํ์์ ๊ฐ ์๋ฃ๋ 3 ๋ฐ๋ณต์ ํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><p>Antioxidant Response Element (ARE) ํ์ฑ ๋ถ์์ ์ํด ์ฌ๋์ ๊ฐ์ธํฌ์ฃผ์ธ HepG2์ Antioxidant Response Element (ARE)-luciferase/pGL vector๋ก transfectionํ์ฌ ์ป์ HepG2-ARE cell์ ์ฌ์ฉํ์ฌ luciferase reporter ๋ถ์์ ์งํํ์๋ค. ๋ถ์์ ์ํ์ฌ ๋จผ์ 6-well plate์์ sub-confluentํ๊ฒ ๋ HepG2-ARE ์ธํฌ๋ฅผ \( 0.5 \% \) FBS ์กฐ๊ฑด์์ 12์๊ฐ ๋์ serum starvation์ ์ํจ ํ ์๋ฃ๋ฅผ 100 ๋ฐ \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋๋ก 12์๊ฐ ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. Luciferase activity๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด Promega์ฌ์ luciferase assay kit์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ ์คํ ๋ฐฉ๋ฒ์ kit์ ์ค๋ช
์๋ฅผ ๋ฐ๋๋ค. ์ฆ, ์ธํฌ๋ฅผ \( 3 \mathrm{~mL} \) ice cold PBS๋ก 2ํ ์ธ์ฒํ ํ lysis buffer๋ก ์ธํฌ๋ฅผ ๋
น์ฌ ์ธํฌ ์ถ์ถ์ก์ ์ป๊ณ ์ด ์ถ์ถ์ก \( 10 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ luciferase ๊ธฐ์ง์ฉ์ก๊ณผ ์์ ํ TD-20/20 luminometer(Turner Designs, Sunnyvale, CA, USA)๋ก ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ฐ ์ธก์ ๊ฐ๋ค์ bicinchoninic acid protein assay (Pierce Biotech., Waltham, MA, USA) ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ธก์ ๋ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋๋๋ฅผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ๋ณด์ ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ณด์ ๋ ๊ฐ๋ค์ ๋ค์ ์์ฑ๋์กฐ๊ตฌ๋ก ์ฌ์ฉ๋ vector control์์ ์ป์ ๊ฐ์ 1๋ก ํ์์ ๋ ๋ช ๋ฐฐ ์ฆ๊ฐํ์๋์ง ๋ฐฐ์๋ก ๊ณ์ฐํ์์ผ๋ฉฐ ์์ฑ ๋์กฐ๊ตฐ์ผ๋ก \( 5 \mu \mathrm{M} \) Sulforaphane (Sigma-Aldrich)์ luciferase ํ์ฑ๊ฐ์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ๋ค์ ๋ณด์ ํ์๋ค. ๊ฐ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์๋ฃ๋น 3ํ ๋ฐ๋ณตํ์ฌ ์ธก์ ํ ๊ฐ \( \pm \mathrm{SD} \)๋ก ํ์ํ์๋ค.</p><p>์ปคํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ ํจ๋(total polyphenolic content, TPC)์ธก์ ์ ์ํด ๊ฐ ์ปคํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋ํจ๋์ Folin-Ciocalteu ์์ฝ์ผ๋ก ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ถ์์ ์ํด \( 1: 10 \) ์ผ๋ก ํฌ์๋ ์๋ฃ \( 100 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ tube์ ๋ฃ๊ณ ์ฌ๊ธฐ์ ํ์ด์จ์์ 1:5๋ก ํฌ์ํ Folin-Ciocalteu ์์ฝ \( 15 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ๋ฃ๊ณ ์์ ํ ์ค์จ์์ 5๋ถ ๊ฐ ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ์ด์ด์ \( 50 \mu \mathrm{L} 10 \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \) sodium bicarbonate ์ฉ์ก๊ณผ ๋ฃ์ด์ฃผ๊ณ ์์ ํ ์ด๋์ด ์ค์จ์์ 5๋ถ ๊ฐ ๋ฐ์ ํ ๋ฐ์๋ฌผ์ 96-well ํํ์ผ๋ก ํก๊ด๋์ ๋ณํ๋ฅผ microplate reader๋ก \( 593 \mathrm{~nm} \) ์์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฐํ์ฉ์ก์ผ๋ก๋ ์๋ฃ๋ฅผ ์ ์ธํ๊ณ ์์ ๋ชจ๋ ์ฉ์ก์ด ๋ค์ด๊ฐ ๊ฒ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. TPC์ ์ ๋์ ์ํด gallic acid๋ฅผ ์ด์ฉํ ํ์ค๊ณก์ ์ ์ป์์ผ๋ฉฐ ์ด ๊ณก์ ์์ ์๋ฃ \( \mathrm{mL} \)๋น \( \mathrm{TPC} \) ์ ์์ \( \mu \mathrm{g} \) gallic acid์ ์์ผ๋ก ํ์ฐํ์๋ค.</p> |
\( 150 \mathrm{ppm} \)์ ์ฉ์ก์ ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ก ์ธก์ ํ๋ ๊ฒ์ด ๊ฐ์ฅ ์ข์ง? | NO | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํ ์์ ์ผ๋ฅ ์ง์ ์ ์์ ์ ์ธ ์๋ ์์ฐ์ ์ ํดํ๋ ๊ฐ์ฅ ํฐ ์์๋ค ์ค ํ๋์ด๋ฉฐ, ์ ์ธ๊ณ ๊ฒฝ์ ๊ฐ๋ฅํ ๋ฉด์ ์ 10\( \% \) ์ด์์ด ์ผ๋ฅ์ฑ(saline) ํน์ ๋ํธ๋ฅจ์ฑ(sodic) ํ ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฅ๋๋ค. ์ผํดํ ์์ ์ฃผ๋ก ๊ฑด์กฐ ํน์ ๋ฐ๊ฑด์กฐ๋์ ๋ถํฌํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋, ๋จ๊ทน์ ์ ์ธํ ๋ชจ๋ ๊ธฐํ๋์ 100๊ฐ ๊ตญ ์ด์์ ๊ฑธ์ณ ๋ฐ๊ฒฌ๋๋ค. ํ๊ตญ์์ ์ผํดํ ์์ ๊ณผ๋ค์๋น๋ ์์ค์ฌ๋ฐฐ์ง์ ๋ฐ๋ค๋ฅผ ๋งค๋ฆฝํด ์กฐ์ฑ๋ ๊ฐ์ฒ์ง๋ฅผ ์์ฃผ๋ก ๋ถํฌํ๊ณ ์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ผ๋ฅ์ง์ง์ง์ ์ผ๋ ๋ณํ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์ ๋น๊ต์ ์ธ๋ฐํ ์กฐ์ ๊ณผ์ ์ ๊ฑฐ์ณ ์ป์ด์ง๋ ํฌํ์นจ์ถ์ก(saturated paste extract)์ ๋ํด EC ๋ฐ ๊ตฌ์ฑ ์์ด์จ ํน์ ์์ด์จ๋ค์ ๋ถ์ํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ด ํ์ค์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋๋ค.\( \mathrm{Na}^{+} \)๊ฐ ์๋ฌผ์์ก ์ ํด์ ๊ฐ์ฅ ํฐ ์ํญ์ ๋ฏธ์น๋ ์์ด์จ์ด๋ผ๋ฉด, \( \mathrm{Cl}^{-1} \) ์ผํด์ง ์๋ฌผ๋
์ฑ์ ๊ฐ์ฅ ๋ฏผ์ ํ๊ฒ ๊ด๋ จ๋ ์์ด์จ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. \( \mathrm{Cl}^{-1} \)๋ ์๋ฌผ์ ๊ดํฉ์ฑ, ์ ํ ๊ท ํ ๋ฐ ์ผํฌ์ ์กฐ์ ์ ํ์์ด์ง๋ง, ์กฐ์ง ๋ด ๋์ \( \mathrm{Cl}^{-} \)๋๋๋ ์ฝ๋ก์ ํ๊ดด, ์ธํฌ๋ง ์์, ํจ์ ํ์ฑ ์ ํด ๋ฑ์ ๋
์ฑ์ ์ ๋ฐํ๋ค.<p>ํ ์ ์ถ์ถ์ก ์ค \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ์ ๋์ ์ด์จ ์ ํ์ฑ ์ ๊ทน ํน์ ์ง์์ฝ์ ์ด์ฉํ ์ ์ ๋ฒ, \( \mathrm{Hg}(\mathrm{SCN})_{2} \) ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ์ ๋ถ๊ด๋ฒ, ์ด์จ์ ํ์ฑ ์ ๊ทน์ ์ํ ์ง์ ์ธก์ , ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ ๋ฑ ๋ค์ํ ๋ฐฉ๋ฒ๋ค์ด ์ ์ฉ๋ ์ ์์ง๋ง, ๊ฐ๊ธฐ ์ ์ ์ข
๋ง์ ๊ฒฐ์ ์ ์ด๋ ค์, ์ ๋
์ฑ ๋ฌผ์ง์ ์ทจ๊ธ, ๋ฐฉํด ์ด์จ๋ค์ ๊ฐ์ญ, ์ ๊ตํ ์ฌ์ ๋ณด์ , ๊ณ ๊ฐ์ ๋ถ์์ฅ๋น ์๊ตฌ ๋ฑ์ ๋จ์ ๋ค์ด ๊ณ ๋ ค๋์ด์ผ ํ๋ค. ์์ธ๋ฌ, ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ ์๋์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ฅ ๋์ ๊ฐ๋์ ์ ๋ฐ๋๋ฅผ ์ ๊ณตํ์ง๋ง ๋น๊ต์ ์ข์ ๋๋ ๊ตฌ๊ฐ(์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก \( 100 \mathrm{ppm} \) ์ดํ)์์ ์ ์ฉ ๊ฐ๋ฅํ๋ค. ๋ฐ๋ผ์, \( \mathrm{Cl}^{-} \)๋๋๊ฐ ์์ฒ \( \mathrm{ppm} \)์ ์ํํ ์ ์๋ ์ผํดํ ์ ์ถ์ถ์ก์ ๊ฒฝ์ฐ, ๊ณผ๋ํ ํฌ์ ๋ฐ ์ํ์ฐฉ์ค๋ฅผ ํตํ ํฌ์๋น ๊ฒฐ์ ์ด ์ถ๊ฐ์ ์ผ๋ก ๋จ์ ์ด ๋๋ค. ํํธ, ์ต๊ทผ ์ ์๋ค์ ๊ธฐ์กด ๋ฐฉ๋ฒ๋ค๊ณผ ๋ฌ๋ฆฌ, ์ฉ์ก ์ค \( \mathrm{Cl}^{-} \)๊ฐ \( \mathrm{Ag}^{+} \)์ ๊ฒฐํฉํ์ฌ ์นจ์ ๋ ๋ ์๋ฐ๋๋ ์ ๊ธฐ์ ๋๋ ๋ณํ๋ฅผ \( \mathrm{EC} \) ์ ๊ทน์ผ๋ก ๊ฐ๋จํ ์ธก์ ํจ์ผ๋ก์จ \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ์ ๋์ด ๊ฐ๋ฅํจ์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ ๋ฐ ์๋ค. ์ด \( \mathrm{AgCl} \) ์นจ์ ์ ๊ธฐ์ ๋๋์ฐจ \( (\mathrm{Ag}-\mathrm{dEC}) \) ๋ฒ์ ์ ๋ฐํ ๊ธฐ๊ธฐ๋ถ์๋ฒ์ด๋ ์ ์์ฐจ ์ ์ ๋ฒ์ ๋นํด ์๋์ ์ผ๋ก ๋ฎ์ ๊ฐ๋์ ์ ๋ฐ๋๋ฅผ ๋ณด์ผ ์ ์์ผ๋, \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ๋๋๊ฐ ๋์ ์ผํด์ง์ ์ผ๋ ๋ถํฌ ๋ฐ ๋ณํ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์ ์ ํฉํ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ธฐ๋๋๋ค.<p>์ด์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ \( \mathrm{Ag}-\mathrm{dEC} \) ๋ฐฉ๋ฒ์ (1) ๊ฒ์ถํ๊ณ, ์ ๋ํ๊ณ, ์ ๋ฐ๋ ๋ฐ ๊ฐ๋๊ฐ ์ผํดํ ์์ \( \mathrm{Cl}^{-} \)์ ๋ ๋ชฉ์ ์ ๋ถํฉํ ์ ์๋์ง ์กฐ์ฌํ์์ผ๋ฉฐ, (2) ์ ๋จ ๊ณ ํฅ ๊ฐ์ฒ์ง์์ ์ฑ์ทจ๋ ํ ์์ ํฌํ์นจ์ถ์ก ๋ํด ์ด์จ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ก ๋ถ์๋ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋น๊ตํจ์ผ๋ก์จ, ์ด ์๋ก์ด ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ผํด์ง ์ผ๋ ๋ถํฌ ๋ฐ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์ ๋ํ ์ ์ฉ์ฑ์ ํ๊ฐํ๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> |
๋ฐ์ดํฐ ํต๊ณ์ ์ ์์์ค์ ๋ค๋ฃจ๋ ์ฌํ๋ถ์๋ฒ์ ๋ฌด์์ด๋ผ๊ณ ํ๋๊ฐ? | Tukey๋ฒ | <h2>2.4 ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ ๋ถ์</h2><p>์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ํฌํจ๋ ๋ฐํจ๊ฐ๋ฅํ ๋น(๊ธ๋ฃจ์ฝ์ค์ค, ์์ผ๋ก์ค)๊ณผ furfural, acetic acid, \( \mathrm{HMF} \), formic acid์ ๊ฐ์ ๋ฐํจ์ ํด๋ฌผ์ง์ ๋๋๋ Aminex \( 87 \mathrm{H} \) column \( (300 \times \) \( 7.8 \mathrm{~mm}, \mathrm{BIO}-\mathrm{RAD} \) )๊ณผ refractive index detector(Waters 2414 , USA)๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ HPLC(Waters e2695, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์๋ค. ์ด๋์์ \( 5 \mathrm{mM} \mathrm{H}_{2} \mathrm{SO}_{4} \) ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ๋ \( 0.6 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \) ์ผ๋ก 55 ๋ถ ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค. ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ํฌํจ๋ total phenolic compounds(TPC)์ ํจ๋์ Folin-Ciocalteu's reagent๋ก ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>2.5 ์ฌ๋ฆฌ๊ณ ๋จธ ๋ถ์</h2><p>์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ์กด์ฌํ๋ ๋ฐํจ๊ฐ๋ฅํ ๋น ์ด์ธ์ ์ฌ๋ฆฌ๊ณ ๋จธ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด National Renewable Energy Laboratory(NREL)์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ post-hydrolysis๋ฅผ ์ํํ์๋ค. ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ \( 1 \mathrm{~mL} \) ์ \( 4 \% \mathrm{H}_{2} \mathrm{SO}_{4} 9 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ \( 50 \mathrm{~mL} \) ์ผ๊ฐํ๋ผ์คํฌ์ ํฌ์
ํ์ฌ \( 121^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 60 ๋ถ๊ฐ ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. ๊ทธ ํ \( 0.22 \mu \mathrm{m} \) micro centrifuge filter๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ๋ฆฌ๋ ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ๋ฐํจ๊ฐ๋ฅํ ๋น ์ธก์ ์ ์ฌ์ฉ๋ ์กฐ๊ฑด์์ HPLC๋ก ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h2> 2.6 ํ๊ท ๋ถ์๋ ๋ฐ ๋ค๋ถ์ฐ๋ ์ธก์ </h2><p>์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ ๋ถ์๋ ๋ถํฌ๋ gel permeation chromatography(GPC)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. Waters Ultrahydrogel \(120\), \(500\), \(1000\) column \(3\)๊ฐ๋ฅผ ์ฐ๊ฒฐํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , refractive index detector๋ฅผ ํฌํจํ๋ Dionex HPLC Ultimate \(3000\)(USA, Thermo)์ผ๋ก ๋ถ์ํ์๋ค. ์ด๋์์ผ๋ก sodium azide \( 0.1 \mathrm{M} \) ์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ๋์ \( 1 \mathrm{mL} / \mathrm{min} \) ์ผ๋ก ๋ถ์ํ์๋ค. Pullulan(Mw: \(342~805000\))์ ํ์ค๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>2.7 Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) ๋ถ์</h2><p>GC-MS ๋ถ์์ ์ํด ethyl acetate์ ์ก์๊ฐ์๋ถํด์ฐ๋ฌผ์ \(3:1\)๋ก ํผํฉํ์ฌ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ ํ, anhydrous \( \mathrm{MgSO}_{4} \)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์๋ถ์ ์ ๊ฑฐํ๊ณ \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ๊ฐ์ ๋์ถํ์๋ค. ์ ๋์ฒดํ๋ฅผ ์ํด \( 50 \mu l \) ์ pyridine๊ณผ \( 100 \mu l \) ์ BSTFA(N, O-Bis(trimethylsilyl, TMS) trifluoroacetamide)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ \( 70^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \(60\)๋ถ ๋์ ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ๋ฐ์์ด ์๋ฃ๋ ์ํ์ \( 0.22 \mu \mathrm{m} \) micro centrifuge filter๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ๋ฆฌํ ํ ๋ถ์์ ์ํํ์๋ค. GC-MS(5975C, Agillent)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์์ผ๋ฉฐ, column์ \( \mathrm{HP}-5 \mathrm{MS}(30 \mathrm{~m} \times 0.25 \mathrm{~mm} \), \( 0.25 \mathrm{um}) \), ์ด๋์์ \( \mathrm{He}(\mathrm{gas}) \), split ratio๋ \(20:1\), mass range๋ \( 1.6 \sim 1050 \mathrm{~m} / \mathrm{z} \), ์๋ฃ ์ฃผ์
๋์ \( 1 \mu \ell \) ๋ก ํ์๋ค. ์ฃผ์
๊ตฌ ๋ฐ ๊ฒ์ถ๊ธฐ์ ์จ๋๋ ๊ฐ๊ฐ \( 250^{\circ} \mathrm{C} \) ์ \( 300^{\circ} \mathrm{C} \), ๊ฒ์ถ๊ธฐ๋ flame ionization detector(F\(I\)D)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ค๋ธ์จ๋๋ \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 5 ๋ถ๊ฐ ์ ์งํ ํ \( 5^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \) ์ ์น์จ์๋๋ก \( 250^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์์น์ํจ ํ \( 10^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \) ์ ์น์จ์๋๋ก \( 320^{\circ} \mathrm{C} \) ๊น์ง ์์น์์ผฐ๋ค.</p><h2>2.8 ํต๊ณ๋ถ์</h2><p>๋ฐ์ดํฐ์ ์ ์๋ฏธํ ์ฐจ์ด๋ ํต๊ณ ํ๋ก๊ทธ๋จ IBM SPSS Statistics version \(23\) ์ ์ด์ฉํ ์ผ์๋ฐฐ์น ๋ถ์ฐ๋ถ์(One-ay ANOVA)์ผ๋ก ํต๊ณ๋ถ์ ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ชจ๋ ํต๊ณ์น์ ์ ์์์ค์ ์ฌํ๋ถ์(Tukey๋ฒ)์ ํตํด ์ ์์์ค \( 0.05 \) ์์ ๊ฒ์ฆํ์๋ค.</p> |
์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ ์ฑ ํ๊ฐ๊ธฐ์ค์ ์ผ๋ฐ์ฆ์๊ด์ฐฐ๋ก๋ง ํ๊ฐํ๋๊ฐ? | \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์ | <h1>๊ณ ์ฐฐ</h1><p>๋ชฉ๋ จ๊ณผ ์๋ฌผ์ ๋ค์ํ ํ์ฑ์ ๋ง์ด ๋ณด๊ณ ๊ฐ ๋์์ผ๋, ๋ชฉ๋ จ๊ณผ ์๋ฌผ์ ๋ด์ค๋ฆฌ๋ก ์๋ ค์ง ์ ์ด๋ ์ค๋์ ๋ถํฐ ๋ค์ํ ์งํ์ ์น๋ฃ์ ์ฌ์ฉ์ด ๋์์ผ๋ ๋
์ฑ ๋ฐ ์์ ์ฑ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋น๊ต์ ์ฐพ์๋ณด๊ธฐ ์ด๋ ต๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์์ ํ ํฌ์ฌ ์ฉ๋ ๋ฒ์๋ฅผ ์ค์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌ ๋
์ฑ์ํ์ ์งํํ์๋ค. ๋
์ฑ์ํ์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ํฌํจํ์ฌ \(1,500\), ๋ฐ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ํฌ์ฌ๊ตฐ์ผ๋ก ์ค์ ํ์๋ค. ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌ ํ, ์ผ๋ฐ์ฆ์, ๋ฌด๊ฒ๋ณํ, ํ๊ตฌ๋ถ์, ํ์ก์ํํ๋ถ์ ๋ฐ ์ฅ๊ธฐ ๋ฌด๊ฒ ์ธก์ ์ ํ์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ์ ํฌํจํ ๋ชจ๋ ํฌ์ฌ ๊ตฐ์์ ์ต๊ณ ๋๋์ธ\( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)๊น์ง์ ๊ฒฝ๊ตฌํฌ์ฌ ์ ์คํ๊ธฐ๊ฐ ๋์ ์ฌ๋ง๋๋ฌผ์ด๋ ๋ฌผ์ง๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ด์์ฆ์์ ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์๋ค. ์ฒด์ค, ์ฌ๋ฃ์ญ์ทจ๋, ๋ถ๊ฒ ๋ฐ ์ฅ๊ธฐ์ค๋ ๋ฐ ํ์กํ์ ๊ฒ์ฌ์์ ์ญ์ ์ํ๋ฌผ์ง๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋
์ฑํ์ ์๊ฒฌ์ด ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์๋ค. ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ์ด๊ฐ ๋
์ฑํ์ ์ธก๋ฉด์์ ์์ ํ ๋ฌผ์ง์ธ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ์ผ๋ถ ํฌ์ฌ๊ตฐ์์ ํ๊ตฌ๋ถ์ ๋ฐ ํ์ก์ํํ๋ถ์์์ ์ผ๋ถ ํฌ์ฌ๊ตฐ์์ ์งํ์ ๋ณํ๊ฐ ๊ด์ฐฐ๋์์ง๋ง, ์ด๋ ์ ์๋ฒ์ ๋ด์์์ ๋ณํ๋ก ๊ฐ์ฃผ๋์ด ์ง๊ณ ๋ค๋ฅธ ์์ํ์ ๋ณํ์ ์ํฅ์ ์ฃผ์ง ์์์ผ๋ฏ๋ก ๋
์ฑํ์ ์๋ฏธ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์๋ค. ์ข
ํฉ์ ์ผ๋ก, ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ \(1,500\) ๋ฐ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)์ ์ฉ๋์ผ๋ก \(4\)์ฃผ๊ฐ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌ ์, ์ํ๋ฌผ์ง๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์น์ฌ์จ ๋ฐ ๋
์ฑํ์ ์ธ ๋ณํ๊ฐ ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์์ผ๋ฏ๋ก ๋ฌด๋
์ฑ๋์ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์์ด๋ฉฐ, ๋
์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ํ์ ์ฅ๊ธฐ๋ ์์์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์ดํ์ \(13\)์ฃผ ์ด์์ ์ฅ๊ธฐ ๋ฐ๋ณต ๊ฒฝ๊ตฌํฌ์ฌ ๋
์ฑ์ํ์ ์ต๊ณ ์ฉ๋์ ์ค์ ํ ๋ ์ฉ๋ ์ค์ ๊ธฐ์ค์ ์ฐธ๊ณ ์๋ฃ ๋ฐ ์ ์ด์ ๊ณผํ์ ์ธ ์์ ์ฑ ๊ธฐ์ด์๋ฃ๋ก ํ์ฉ๋ ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ง์ ์ฝ๋ฆฌํ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์
์ฆ๋๊ณ ์์ ํ๋ค๊ณ ์ธ์ ๋๋ ์์ฝ์ ๋ฅผ ํฌํจํ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์ค๋ซ๋์ ์ฌ์ฉ๋์ด ์๋ค. ๋ค๋ง ์์ฝ์ ๋ก ์ฌ์ฉ ๋๋ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์์ ์ฑ ๋ฑ ๋ถ์์ฉ์ ๋ช
ํํ๊ฒ ํ์ธ๋์ง ์์๋ค. ์ด๋ฒ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ ์ ํต์ฆ, ๋น์ผ, ํ๋ ด ์น๋ฃ์ ์ฌ์ฉ๋๋ ์ ์ด์ ์์ ์ฑ ํ๊ฐ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ SD ๋ซ๋ ๋๋ฌผ๋ชจ๋ธ์ ์ด์ฉํ์ฌ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ์ฉ๋ ๊ฒฐ์ ๋
์ฑ์ํ์ผ๋ก ์ ์ด์ ๋
์ฑํ๊ฐ๋ฅผ ์ํํ์๋ค. ์์ปท๊ณผ ์์ปท SD ๋ซ๋์ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ \(28\)์ผ ๋์ \(1,500\), \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)์ ๋๋๋ก ํ๋ฃจ \(1\)ํ ๊ฒฝ๊ตฌ ํฌ์ฌํ์๋ค. ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ ์ฑ ํ๊ฐ๋ ์ผ๋ฐ์ฆ์๊ด์ฐฐ, ์ฒด์ค ๋ฐ ์ฌ๋ฃ์ญ์ทจ๋ ์ธก์ , ํ๊ตฌ ๋ฐ ํ์ก์ํํ ๋ถ์, ๋ถ๊ฒ์๊ฒฌ ๊ด์ฐฐ ๋ฐ ์๋์ ์ฅ๊ธฐ๋ฌด๊ฒ ์ธก์ ์ผ๋ก ํ๋จํ์์ผ๋ฉฐ ์คํ๊ธฐ๊ฐ๋์ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ์ฌ๋ก ๋
์ฑ ๊ด๋ จ ์ ์๋ฏธํ ๋ณํ๋ ๋ํ๋์ง ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ด๋ฌํ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ \(4\)์ฃผ ๋ฐ๋ณต ์ฉ๋ ๊ฒฐ์ ๋
์ฑ์ํ์์ ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ด ๋
์ฑ ๋ฑ ๋ถ์์ฉ์ ๋ํ๋์ง ์์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ด์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋
์ฑ์ด ๋ํ๋์ง ์๋ ์ต๋๋ฌด๋
์ฑ๋์ \( 3,000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์์ผ๋ก ์ถ์ ๋์๋ค.</p> |
ํํฉ๋ฌผ 4(yellow needles)์ \( { }^{1} \mathrm{H}- \) NMR, (\( 400 \mathrm{MH} \mathrm{z} \),\( \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD} \), \( \left.\delta_{H}\right) \)์คํํธ๋ผ์ ์ ์์ฅ ์์ญ์์ \(4\)๊ฐ์ olefin methine proton signal๋ก ๋ถํฐ ์ด๋ค ๊ฒ์ด ํ๋ ์ด์ ์กด์ฌํจ์ ์ ์ ์๋ ๋ฌผ์ง์ธ๊ฐ์? | \( 10 \% \) ํฉ์ฐ | <p>ํํฉ๋ฌผ 3 (yellow powder)์ TLC์ ์ ๊ฐ์ํจ ํ, \( 10 \% \) ํฉ์ฐ์ ๋ถ๋ฌดํ๊ณ ๊ฐ์ดํ์ ๋ ๋
ธ๋์์ผ๋ก ๋ฐ์๋์๋ค. EI/MS์์ \( m / z 354[\mathrm{M}]^{+} \)์ ๋ถ์์ด์จ peak๊ฐ ๊ด์ธก๋์ด ๋ถ์๋์ \(354\)๋ก ๊ฒฐ์ ํ์๋ค. IR ์คํํธ๋ผ์ผ๋ก๋ถํฐ ์์ฐ๊ธฐ \( \left(3370 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ carboxyl๊ธฐ \( \left(1725 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), ๊ณต์ญ ester \( \left(1666 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), ์ด์ค๊ฒฐํฉ \( \left(1650 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ ํ์ธํ์๋ค. \( { }^{1} \mathrm{H}-\mathrm{NMR}\left(400 \mathrm{MHz}, \mathrm{D}_{2} \mathrm{O}\right) \) ๊ณผ \( { }^{13} \mathrm{C}-\mathrm{NMR}(100 \mathrm{MHz} \) \( \mathrm{D}_{2} \mathrm{O} \) ) ์คํํธ๋ผ์์ ํํฉ๋ฌผ \(2\)์ ๋งค์ฐ ๋น์ทํ ์์์ signal์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ์ฐ์๊ฐ ์นํ๋ ์์ญ์์ oxygenated methine proton signal \( \left(\delta_{\mathrm{H}} 4.79,1 \mathrm{H}, \mathrm{dd}, \quad J=8.8,3.2 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-4\right) \) ์ chemial shift ๊ฐ์ด esterification ํจ๊ณผ์ ์ํ์ฌ ์ ์์ฅ์ผ๋ก shift๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํํฉ๋ฌผ 3์ quinic acid์ \(4\)๋ฒ์์น์ caffeic acid๊ฐ ๊ฒฐํฉํ ํํฉ๋ฌผ \(2\) ๋ฒ์ ๊ตฌ์กฐ ์ด์ฑ์ง์ฒด์์ ํ์ธํ์๊ณ , ์ด๋ฅผ ํ ๋๋ก ๋ฌธํ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ cryptochlorogenic acid( \(3 \)) ๋ก ๊ตฌ์กฐ ๋์ ํ์๋ค.</p><p>ํํฉ๋ฌผ 4 (yellow needles)๋ TLC์ ์ ๊ฐ์ํจ ํ, \( 10 \% \) ํฉ์ฐ์ ๋ถ๋ฌดํ๊ณ ๊ฐ์ดํ์ ๋ ๋
ธ๋์์ผ๋ก ๋ฐ์๋์๋ค. \( \mathrm{EI} / \mathrm{MS} \) ์์ \( m / z 610[\mathrm{M}]^{+} \)์ ๋ถ์์ด์จ peak ๊ฐ ๊ด์ธก๋์ด ๋ถ์๋์ \(610\) ์ผ๋ก ๊ฒฐ์ ํ์๋ค. IR ์คํํธ๋ผ์ผ๋ก๋ถํฐ ์์ฐ๊ธฐ \( \left(3380 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ ๊ณต์ญ ketone๊ธฐ \( \left(1650 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), ์ด์ค๊ฒฐํฉ \( \left(1610 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) ์ ํ์ธํ์๋ค. \( { }^{1} \mathrm{H}- \) NMR, (\( 400 \mathrm{MH} \mathrm{z} \),\( \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD} \), \( \left.\delta_{H}\right) \) ์คํํธ๋ผ์ ์ ์์ฅ ์์ญ์์ \(4\)๊ฐ์ olefin methine proton signal๋ก๋ถํฐ para-์ด์นํ ๋ฒค์ ๋ง์ด ํ๋ ์กด์ฌํจ์ ์ ์ ์์๊ณ , \(2\) ๊ฐ์ olefin methine proton signal ์ด ๊ด์ธก๋์ด long range coupling \( \left(J^{4}\right) \) ํ๋ \( 1,2,3,5 \)-์ฌ์นํ ๋ฒค์ ๋ง์ด ํ๋ ์กด์ฌํจ์ ์ ์ ์์๋ค. ๋ํ ๋น๋ถ์์ ์ ๋ํ \(2\)๊ฐ์ hemiacetal proton ์ด ๊ด์ธก๋์์ผ๋ฉฐ, \(8\)๊ฐ์ oxygenated methine proton signal ๋ฐ \(2\) ๊ฐ์ oxygenated methylene proton signal ์ด ์ค์ฒฉ๋์ด ๊ด์ธก๋์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํด flavonol diglycoside์์ ์์ํ ์ ์์๋ค. \( { }^{13} \mathrm{C}-\mathrm{NMR} \) ๋ฐ DEPT์คํํธ๋ผ์์ ์ด \(27\) ๊ฐ์ carbon signal๊ณผ ๋ค์ค๋๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ํ์ธํ์ฌ flavonol ๊ณจ๊ฒฉ์ hexose ๋ ๋ถ์๊ฐ ๊ฒฐํฉํ ํํฉ๋ฌผ์์ ํ์ธํ์๋ค. ์ ์์ฅ ์์ญ์์ \(1\) ๊ฐ์ ๊ณต์ญ ketone carbon signal \(6 \) ๊ฐ์ oxygenated olefin quaternary carbon signal , \( 6 \)๊ฐ์ olefin methin carbon signal, \(2 \)๊ฐ์ olefin quaternary carbon signal, \(6 \) ๊ฐ์ olefin methin carbon signal ์ด ๊ด์ธก๋์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํ์ฌ aglycone์ด kaempferol์์ ํ์ธํ์๋ค. ๋น์ผ๋ก๋ถํฐ ์ ๋ํ \( 2 \)๊ฐ์ hemiacetal carbon signal , \( 8 \)๊ฐ์ oxygenated methine carbon signal \(2\)๊ฐ์ oxygenated methylene carbon signal ์ chemical shift ๊ฐ์ผ๋ก๋ถํฐ ๊ฒฐํฉ๋ ๋น์ด ๊ฐ๊ฐ \( \beta \)-galactopyranose์ \( \beta \)-glucopyranose๋ก ํ๋ช
๋์๋ค. \( \beta \)-Galactopyranose์ carbon signal์ด ์ ์์ฅ์ผ๋ก glycosidation shift๋์ด ๊ด์ธก๋จ์ ๋ฐ๋ผ ๋ง๋จ glucose ๊ฐ galactose์ \(2\) ๋ฒ ์์น์ ๊ฒฐํฉํ ๊ฒ์ผ๋ก ์์ํ์๋ค. gHMBC ์คํํธ๋ผ์์ ๋ง๋จ glucose์ hemiacetal proton signal ์ด galactose์ \( 2 \)๋ฒ oxygenated methine carbin signal ๊ณผ cross-peak๋ฅผ ๋ณด์ด๊ณ , galactose์ hemiacetal proton signal ์ด kaempferol์ \(3\)๋ฒ oxygenated olefin quaternary carbon signal ๊ณผ cross-peak๋ฅผ ๋ณด์ฌ ๊ฐ ๋น์ ๊ฒฐํฉ ์์น๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ํ ๋๋ก ๋ฌธํ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ panasenoside๋ก ๊ตฌ์กฐ ๋์ ํ์๋ค.</p><p>ํํฉ๋ฌผ \( 3 \) ๊ณผ \( 4 \) ๋ ๊ฐ์ง ์์์๋ ์ด๋ฒ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. ํํฉ๋ฌผ \( 1 \)์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 2 \)๋ ํญ์ฐํ, ํญ์ผ์ฆ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 3 \)์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 4 \)๋ ํญ์ฐํ์ ํญ๋น๋จ ํ์ฑ์ด, ํํฉ๋ฌผ \( 5 \) ์ ํญ์ข
์ ํ์ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด ๊ฐ์ง ์์ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ณ ๋ถ๊ฐ๊ฐ์น ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ ๋ถ์ฐ๋ฌผ ํ์ฉ ๋ฐ ๋๊ฐ์๋ ์ฆ๋์ ๊ธฐ์ฌ ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋ฉฐ, ์ถํ ์ด์ ํ์ฉ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์ถ์งํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p><h2>์ด ๋ก</h2><p>๊ฐ์ง ์์ผ๋ก๋ถํฐ \(3\)์ข
์ phenylpropanoid, \( 1 \)์ข
์ flavonoid glycoside, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ \( 1 \)์ข
์ norsesquiterpenoid glycoside ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋์ ํ์๋ค. ๊ฐ์ง ์์ \( 80 \% \mathrm{MeOH} \) ๋ก ์ถ์ถํ์์ผ๋ฉฐ, ์ป์ด์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( n \)-hexane, \( \mathrm{EtOAc} \), \( n-\mathrm{BuOH} \) ๋ฐ ๋ฌผ ์ธต์ผ๋ก ๊ณํต ๋ถํ์ ์ค์ํ์๋ค. ์ด ์ค \( n-\mathrm{BuOH} \) ๋ถํ์ ๋ํ์ฌ \( \mathrm{SiO}_{2}\), ODS ๋ฐ Sephadex LH-\( 20 \) column chromatography๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ค์ํ์ฌ \( 5 \)์ข
์ ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ, ์ ์ ํ์๋ค. Nuclear magnetic resonance, infrared spectroscopy ๋ฐ mass spectrometry์ spectroscopic data๋ฅผ ํด์ํ์ฌ ์ด ํํฉ๋ฌผ๋ค์ caffeic acid (\( 1 \)), chlorogenic acid (\( 2 \)), cryptochlorogenic acid (\( 3 \)), panasenoside (\( 4 \)), ๋ฐ (\( 6 \) R, \( 7 \) E, \( 9 \) R)-\( 4,7 \) -megastigmadien-\( 3 \)-one-\( 9 \)- \( \beta \)-D-glucopyranoside ๋ก ๊ฐ๊ฐ ๋์ ํ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํํฉ๋ฌผ \( 3 \) ๊ณผ \( 4 \) ๋ ๊ฐ์ง ์์์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌ, ๋์ ํ์๋ค.</p> |
ํํฉ๋ฌผ 4์ 5๋ ํ์ฌ๊น์ง ์ฒ์ฐ์์ ์ฝ๊ฒ ๊ตฌํ ์ ์๋๊ฐ? | ๊ทผ๊ฒฝ | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์ฒ๊ถ์ ๊ทผ๊ฒฝ์ EeOH์์ฉ์ก์ผ๋ก ์ถ์ถํ์์ผ๋ฉฐ, ์ป์ด์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฉ๋งค๊ณํต๋ถํ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ EtOAc ๋ถํ, \( n \)-BuOH ๋ถํ ๋ฐ ๋ฌผ ๋ถํ์ผ๋ก ๋๋์๋ค. EtOAc ๋ถํ๊ณผ \( n \)-BuOH ๋ถํ์ ๋ํ์ฌ silica gel, octadecyl silica gel ๋ฐ Sephadex LH-20์ ์ ์ง์์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์ฌ ์นผ๋ผํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ํํ ๊ฒฐ๊ณผ 5์ข
์ lipid๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. 5์ข
ํํฉ๋ฌผ์ IR, MS ๋ฐ NMR ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ํด์ํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ methyl linoleate (1), linoleic aicd (2) 6-linoleoyl- \( \alpha \)-D-glucopyranosyl \( \beta \)-D-fructofuranoside (3), 1-linolenoyl-3-( \( \alpha \)-D-galactopyranosyl (1 \(\rightarrow\)6)-\(\beta \)-D-galactopyranosyl) glycerol (4) ๋ฐ 1-linoleoyl-3-( \( \alpha \)-D-galactopyranosyl (1 \(\rightarrow\)6)- \( \beta \)-D-galactopyranosyl) glycerol (5)๋ก ๊ตฌ์กฐ๋์ ํ์๋ค, ํํฉ๋ฌผ 1๊ณผ 3-5๋ ์ฒ๊ถ์์๋ ์ด๋ฒ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฒ์ ๋ถ๋ฆฌ๋์๋ค. ๋ํ ํํฉ๋ฌผ 1๊ณผ 2์ ๊ฒฝ์ฐ NMR ๋ฐ์ดํฐ๊ฐ ์์ ํ์ง ์๊ฑฐ๋, ๋ฌธํ์ ๋ฐ๋ผ ์๋ก ๋ค๋ฅด๊ฒ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ผ๋, ์ด๋ฒ์ 2-D NMR ๋ฑ์ ์์ธํ ๊ฒํ ํ์ฌ ๋ชจ๋ ํ์ ๋ฐ ์์์ ๋ํ ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ํ์คํ๊ฒ ๋์ ํ์๋ค. Sucrose์ ์ง๋ฐฉ์ฐ ๋ณตํฉ์ฒด์ธ ํํฉ๋ฌผ 3๊ณผ digalactosyl monoglyceride์ธ ํํฉ๋ฌผ 4์ 5๋ ํ์ฌ๊น์ง ์ฒ์ฐ์์ ๋งค์ฐ ๋๋ฌผ๊ฒ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ๋ณด๊ณ ๋ ์ง์งํํฉ๋ฌผ๋ค์ ๋ฉด์ญ์ฆ๊ฐ, ํญ์ํ์ฑ ๋ฑ์ ํตํด, ์ฒ๊ถ ๊ทผ๊ฒฝ์ ๋ค์ํ ์ฝ๋ฆฌํ์ฑ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ธฐ๋ํ ์ ์๋ค.</p> |
์ ์ ํ ์๊ธ์น์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ ํ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ๊ฐ์ ๋ฐ ํ์ง๋ณํ๋ฅผ ํ์ธํ ๊ฒ์ ๋ฉฐ์น ์ ์ฅํ ํ์ธ๊ฐ? | (\( 40 \), \(50\), \(60^{\circ} \mathrm{C} \)) | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์๊ธ์น์ fumaric acid์ mild heat์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ํตํด ๋ณ์์ฑ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ์ดํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ท๋ช
ํ๊ณ ์ ์๊ธ์น์ E. coli O\(157\):H\( 7\), L. monocytogenes๋ฅผ ์ ์ข
ํ ํ ๊ฐ ๋จ์ผ์ฒ๋ฆฌ ํ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. Fumaric acid \( (0.1\), \(0.3\), \(0.5 \%) \)์ mild heat (\( 40 \), \(50\), \(60^{\circ} \mathrm{C} \))์ ๊ฐ ๋จ์ผ์ฒ๋ฆฌ ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก, ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ์ํ fumaric acid์ ์ต์ ๋๋๋ \( 0.5 \% \), mild heat ์ฒ๋ฆฌ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \( 5 \mathrm{~min} \)์ผ๋ก ์ ์ ํ์๊ณ , ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ ์ L. monocytogenes, E. coli O\(157\):H\( 7\)์ ์๋ ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋นํด ๊ฐ๊ฐ \( 2.53\), \(2.62 \mathrm{~log} \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \) ๊ฐ์ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ ์ ํ ์๊ธ์น์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ ํ \( 4^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(12 \)์ผ๊ฐ ์ ์ฅํ๋ฉด์ ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ๊ฐ์ ๋ฐ ํ์ง ๋ณํ๋ฅผ ์กฐ์ฌ ํ์๋ค. ์๊ธ์น์ ์ด๊ธฐ ๋ฏธ์๋ฌผ ์์ ์์ด์ ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋น๊ตํ์ฌ, ๋ณํฉ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์์ ์ด ํธ๊ธฐ์ฑ ๊ท ์ \( 2.77 \log \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \) ๊ฐ์์์ผฐ๋ค. ํนํ, ์ ์ฅ \(12 \)์ผ ํ ๋ณํฉ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์ ์ด ํธ๊ธฐ์ฑ ๊ท ์๋ \( 4.84 \log \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \)์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋น๊ตํ์ฌ \( 1.82 \log \mathrm{CFU} / \mathrm{g} \)์ ๊ฐ๊ท ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ก๋ค. ๋ํ ์๊ธ์น์ ์ ์ฅ ์ค Hunter ์๋ ๊ฐ ๋ฐ ๋นํ ๋ฏผ C ํจ๋์ ์์ด์ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ ๊ฐ์ ์ ์์ ์ธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ, fumaric acid์ mild heat์ ๋ณํฉ์ฒ๋ฆฌ๊ฐ ์๊ธ์น์ ๋ฏธ์๋ฌผํ์ ์์ ์ฑ ์ ์ง์ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ฒ๋ฆฌ๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค.</p> |
์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ์ ๊ณผ๋ ๋ฌด์์ผ๊น์? | ์ฐธ์ง๋๊ธฐ๊ณผ | <h1>์ ๋ก </h1><p>๊ณ ๋์ ์ฐ์
ํ๋ก ์ธํ์ฌ ์ฌํ๊ฐ ๋์ฑ ๋ฐ์ ํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ธ๋ฅ์ ์ถ์ ๋ํ ์ง์ ์์ค์ด ๋์์ง๊ณ ์์ผ๋, ๊ทธ๋ก ์ธํด ์ง๊ตฌ ์จ๋ํ๊ฐ ๊ฐ์ํ๋๋ฉด์ ๊ฐ์ข
ํด์ถฉ ๋ฐ ๋ณ์๊ท ์ด ์ ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ํ์ฐ๋๊ณ ์๋ ์ถ์ธ์ด๋ค. ์ด๋ค์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ํฉ์ฑ์ด์ถฉ์ ๋ฐ ์ด๊ท ์ ๊ฐ ๊ฐ๋ฐ๋์ด ์์ผ๋, ์ํ๊ณ์ ๋ํ ์๋ฅ์ฑ ๋ฐ ํด์ถฉ์ ๋ํ ์ ํญ์ฑ ๋ฐํ ๋ฑ ๋ถํ์ํ ๋ถ์์ฉ์ด ๋ณด๊ณ ๋๋ฉด์ ์ด๋ฅผ ๋์ฒดํ ๋ฐฉ์ ์ ๋ต์ผ๋ก์ ์๋ฌผ์ฒด ์ ๋ ํํฉ๋ฌผ์ ๋ํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ด ์ฃผ๋ชฉ ๋ฐ๊ณ ์๋ค. ์๋ฌผ์ ์ค๋ ์๊ฐ ์งํ๋ฅผ ๊ฑฐ๋ญํ๋ฉด์ ์ธ๋ถ ํ๊ฒฝ์ผ๋ก๋ถํฐ ์ค์ค๋ก๋ฅผ ๋ณดํธํ๊ธฐ ์ํ ๊ธฐ์์ผ๋ก ๋ค์ํ ์ด์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ์์ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ์๋ฌผ์ ๊ณ ์ ํ ์ฑ์ง๊ณผ ๋
ํนํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ์ง๋๊ฒ ๋์๋ค. ์ด๋ฌํ ์๋ฌผ์ฒด์ ์ด์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ ์ค์ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ฌผ์ง์ ๋๋ถ๋ถ ํ๋ฐ์ฑ์ด ๊ฐํ ํฐํ๋
ธ์ด๋ ๊ณ์ด ๋ฌผ์ง๋ก, ๋ค์ํ ํด์ถฉ์ ๋ํ์ฌ ์ ์ธ, ๊ธฐํผ, ์ญ์ ์ ํด, ํฅ๋ถ ๋ฐ ์ด์ถฉํจ๊ณผ ๋ฑ์ ์ผ์ผํค๋ฉฐ, ๋ํ ๊ฐ์ข
๋ณ์์ฑ ์ธ๊ท ๋ฐ ๊ท ๋ฅ์ ๋ํ์ฌ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ธ๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์๋ฌผ์์ ์ ๋ํ ์ด์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ๊ฐ์ข
์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฐ ์ด๋ค์ ์ด์ฉํ๋ ค๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ ์งํ ์ค์ด๋ค.</p><p>์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ(Haemaphysalis longicornis)๋ ์ฐธ์ง๋๊ธฐ๊ณผ(Ixodidae)์ ์ผ์ข
์ผ๋ก ์ฃผ๋ก ๋์์์์ ์ค์คํธ๋ ์ผ๋ฆฌ์์์ ๋ฐ๊ฒฌ๋๋ ํกํ์ฑ ์ง๋๊ธฐ์ด๋ค. ์ด๋ ๋ํ์ ์ธ ์ธ์๊ณตํต๊ฐ์ผ๋ณ ๋งค๊ฐ ์ง๋๊ธฐ๋ก์ ์ฏ์ฏ๊ฐ๋ฌด์์ฆ์ ์ ๋ฐํ๋ ๋ฆฌ์ผ์ฐจ ๋ฐ ์ค์ฆ์ด์ฑํ์ํ๊ฐ์์ฆํ๊ตฐ(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS) ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๋ฑ์ ์ธ๊ฐ์๊ฒ ์ ์ผ์์ผ ์น๋ช
์ ์ธ ํผํด๋ฅผ ์ผ์ผํจ๋ค. ํนํ SFTS๋ \( 2012 \) ๋
์ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์์ ์ฒซ ๊ฐ์ผ ์ฌ๋ก๊ฐ ๋ณด๊ณ ๋์์ผ๋ฉฐ, ์ฝ \( 30 \% \)์ ๋ฌํ๋ ์น์ฌ์จ์ ๋ณด์ด๊ณ ์์ด์ ํฐ ๋ฌธ์ ๊ฐ ๋๊ณ ์๋ค. ์ ์ฅ์ํ์ง๋๊ธฐ์ ์ผ์ข
์ธ ๊ธดํธ๊ฐ๋ฃจ์์ (Tyrophagus putrescentiae)๋ ์ ์ฅ์ค์ธ ๊ณก๋ฌผ์์ ์ฝ๊ฒ ๋ฐ์ํ๋ฉฐ, ์ต๋๊ฐ ๋ฎ์ ํ๊ฒฝ์์๋ ์ฝ๊ฒ ๊ฒฌ๋๊ณ ์ต์ ์์ก์จ๋์ ๋ฒ์๊ฐ ๋์ด ๋ฐฉ์ ์ ํฐ ์ด๋ ค์์ ๊ฒช๊ณ ์๋ ํด์ถฉ์ด๋ค. ์ด๋ค์ ๊ณก๋ฌผ์๋ง ํ์ ํ์ง ์๊ณ ๊ณ ์ง๋ฐฉ๊ณผ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ํจ์ ํ ํ, ์น์ฆ ๋ฐ ๊ฒฌ๊ณผ๋ฅ ๋ฑ์์๋ ๋ฐ์ํ๋ฉฐ, ์ ์ฅ์ํ ๊ด๋ จ ์ข
์ฌ์์ ๊ฐ์ข
์ง๋ณ์ ์ผ์ผํจ๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์ด๋ค์ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํ ํ์กดํ๋ ํฉ์ฑ ์ด๋น์ ๊ฐ ๋์ ์๋ฅ์ฑ์ผ๋ก ์ธํ์ฌ ๊ด๋ จ์
๊ณ ์ข
์ฌ์ ๋ฐ ์๋น์๋ค์ ์์ ์ฑ์ ๋ํ ๋ฌธ์ ๊ฐ ์ ๊ธฐ๋จ์ ๋ฐ๋ผ ์ด๋ฅผ ๋์ฒดํ ์์ ํ ๋ฐฉ์ ๋ฒ ๋ง๋ จ์ด ์๊ธํ ์ค์ ์ด๋ค.</p><p>์ํ์ ์ญ์ทจํ๋ ๊ณผ์ ์์ ๋ค์ํ ๋ณ์๊ท ์ด ์ฒด๋ด๋ก ์ ์
๋ ์ ์๋๋ฐ, Bacillus, Listeria, Salmonella ๋ฐ Staphylococcus์ ๊ฐ์ ๊ท ๋ค์ ์์ค๋
, ํจํ์ฆ ๋ฑ์ ์ง๋ณ์ ์ผ์ผํค๋ฉฐ, ๋๋ก๋ ์ฌ๋์ ์ฃฝ์์ ์ด๋ฅด๊ฒ ํ๋ค. ์์ค๋
๊ท ์ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ๊ฐ๊ณต์ก์์์ฐํ๋ ๊ณผ์ ์์ ์ค์ผ๋๋ฉฐ, ์์ฌ๋ฃ์ ์๋ชป๋ ๋ณด๊ด ๋ฐ ์ทจ๊ธ์ผ๋ก ์ธํด ๋ฐ์ํ๊ธฐ๋ ํ๋ค.</p><p>๊ธธ์ด๊ทผ(Valeriana officinalis)์ ์ค๊ตญ์์ ์ฝ์ฉ์๋ฌผ๋ก ์ฐ์ด๋๋งํ๋ฆฌ๊ณผ(Valeriaceae)์ ๋ค๋
์ ์๋ฌผ๋ก ์ฃผ๋ก ๋ฟ๋ฆฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ๋ค. ๊ธธ์ด๊ทผ์ ์ค์ถ์ ๊ฒฝ๊ณ๋ฅผ ์์ ์ํค๋ ๊ธฐ๋ฅ์ด ์์ด ์ ๊ฒฝ์์ ์ ๋ฐ ํญ๊ฒฝ๋ จ์ ๋ก ์ฐ์ด๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์๋ฉด์ ์ ๋ํ๋ ์๋ฆฌํ์ฑ๋ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์ด๋ฌํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ด ๋ฐํ์ ธ ์์์๋ ๋ถ๊ตฌํ๊ณ , ๊ธธ์ด๊ทผ์ ํด์ถฉ ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ํ ์ด์ถฉํ์ฑ ๋ฐ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํด์๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ถ์กฑํ ์ค์ ์ด๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ธธ์ด๊ทผ์ ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ ๋ฐ ๊ธดํธ๊ฐ๋ฃจ์์ ์ ๋ํ ์ด๋นํ์ฑ๊ณผ ์์ค๋
๊ท ์ ๋ํ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ์์๋ณด๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> |
๋น๋จ ์ฅ์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ์ฌํ๋ฉด ์ด ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋์ด ๊ฐ์ํ์ง? | YES | <h1>๊ฒฐ ๊ณผ</h1><h2>3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง๋ฐฉ์์ฑ๊ณผ ๋น ํก์ ์ฆ๊ฐํจ๊ณผ</h2><p>LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ด 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์ ์ธํฌ์ฑ์ฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๋
์ฑ์ \( 125 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋๊น์ง๋ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ธํฌ ์์กด์จ์ด ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์๋ ์ธํฌ๋
์ฑ์ด ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig.1A). LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ \( (100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \)์ ๋น ํก์ ์ฆ๊ฐํจ๊ณผ๋ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ๋น ์ญ์ทจ๋ฅ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ ์์ฑ ๋์กฐ๋ฌผ์ง troglitazone๊ณผ pinitol ์ฑ๋ถ์ ๋น ์ญ์ทจ ํจ๊ณผ๋ณด๋ค๋ ๋ฎ์ ์์ค์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. 1B). LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ(\(100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) ์ ์ง๋ฐฉ์ถ์ ์ ๋๋ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํ์ฌ ์ ์ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์๊ณ , ์์ฑ ๋์กฐ๋ฌผ์ง์ธ troglitazone๊ณผ pinitol ์ฑ๋ถ๋ณด๋ค๋ ์์นํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig. 1C, D).</p><h2>3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ ์ฌํจ๊ณผ</h2><p>LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ ์ฌํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ ๊ตฌ์ธํฌ๋ฅผ ์ง๋ฐฉ์ธํฌ๋ก ๋ถํ์ ๋ ํ๋ฉด์ ์ธ์๋ฆฐ์ ์ฒ๋ฆฌ ๋๋ ๋น์ฒ๋ฆฌ ์กฐ๊ฑด์์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ์ง๋ฐฉ์ธํฌ๋ก ๋ถํ์ ๋์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ฒ๋ฆฌ ์กฐ๊ฑด์ ์ธ์๋ฆฐ ๋น์ฒ๋ฆฌ ์กฐ๊ฑด์ ๋นํด ์ง๋ฐฉ์์ฑ ์ ๋๊ฐ ํ์ ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค(Fig. 2A, B). ๋ํ, ์ธ์๋ฆฐ ์ฒจ๊ฐ ๋๋ ๋น์ฒจ๊ฐ ์กฐ๊ฑด ๋ชจ๋์์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง๋ฐฉ์์ฑ ์ ๋๊ฐ ํต๊ณํ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ๊ฒ ์์นํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๋ค(Fig. 2A, B). ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ์ฒ๋ผ ์ ์ฌํ ์์ฉ๊ธฐ์ ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ง ์ฒ์ฐ์์ฌ์์ด ๋๋ ทํ๊ฒ ์ฆ๋ช
๋์๋ค.</p><h2>3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ PPAR \( \gamma \) ์์ฉ ๋ฐ ์ธ์๋ฆฐ ์ ํญ์ฑ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ</h2><p>LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธ์๋ฆฐ ์ ์ฌ์์ฉ์ ์ํ ์ธ์๋ฆฐ ๋ฏผ๊ฐ์ฑ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ์ด๋ค. LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ง ์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด PPAR \( \gamma\), IRS-1, GLUT4 ๋จ๋ฐฑ ๋ฐํ์ ์ ์ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐ์์ผฐ๋ค(Fig. 3A, B). ๊ทธ๋ฌ๋ ์์ฑ ๋์กฐ๋ฌผ์ง pinitol ์ฑ๋ถ์ IRS-1๊ณผ GLUT4 ๋จ๋ฐฑ ๋ฐํ๋ง์ ์ ์ํ๊ฒ ์ฆ๊ฐ์ํค๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. 3A, B). Pinitol ์ฑ๋ถ์ ์ฝฉ๋ฅ์ ํจ์ ๋ ์ฒ์ฐํ๋น์กฐ์ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก ์ธ์๋ฆฐ ์ ํญ์ฑ์ ๊ฐ์ ์ํค๋ ๋ฌผ์ง๋ก ์ ์๋ ค์ ธ ์๊ธฐ์ troglitazone ๊ฐ์ PPAR \( \gamma \) ์์ฉ์ ์ญํ ์ด ์๋ ์ธ์๋ฆฐ ์ ํธ์ ๋ฌ๊ณ์ ํ์ฑ์ ๊ธฐ์ธํ์ฌ ํ๋น์กฐ์ ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ฌ์ง๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ฏ๋ก 3T3-L1 ์ง๋ฐฉ์ธํฌ์์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋น ํก์ ์ฆ๊ฐํจ๊ณผ๋ PPAR \( \gamma \) ์์ฉ์ ๋๋ ์ธ์๋ฆฐ ์ ํธ์ ๋ฌ ๊ฒฝ๋ก์ ํ์ฑ๊ณผ ๋ฐ์ ํ๊ฒ ๊ด๋ จ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ฌ์ง๋ค.</p><h2>์ 2ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ \( d b / d b \)๋ง์ฐ์ค์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ด์ ๋ฌผ์ญ์ทจ๋ ๋ฐ ๊ณต๋ณตํ๋น ๋ณํ</h2><p>์ 2ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ์ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ์ 6์ฃผ๊ฐ ๊ฒฝ๊ตฌํฌ์ฌ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, ์ฒด์ค์ ๋ณํ๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ๋๋ ทํ ๋ณํ๊ฐ ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์๋ค(Fig. 4A). ์คํ๊ธฐ๊ฐ ๋์์ ๊ณต๋ณตํ๋น์ ๋ณํ๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ด๊ธฐ ๊ณต๋ณตํ๋น์ \( 7.8 \pm 22.7 \mathrm{mmol} / \mathrm{L} \) ์์ ํ๋น์ด ์ง์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์คํ ์ข
๋ฃ์์ ์์๋ \( 34.8 \pm 25.9 \mathrm{mmol} / \mathrm{L} \)๋ก ์ฌ๊ฐํ ๊ณ ํ๋น ์ํ๊ฐ ์ง์๋๋๋ฐ ๋ฐํด, LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ ๊ฒฝ์ฐ 1 ์ฃผ์งธ๋ถํฐ ๊ณต๋ณตํ๋น์ด ๊ฐ์ํ์ฌ ์คํ ์ข
๋ฃ์์ ์์๋ \( 27.0 \pm 13.7 \mathrm{mmol} / \mathrm{L} \) ๋ก ๋๋ ทํ๊ฒ ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 4B). ๋ฌผ๊ณผ ์์ด ์ญ์ทจ๋์ 2์ฃผ์งธ๋ถํฐ LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ด ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ๋๋ ทํ๊ฒ ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 4C, D).</p><h2>์ 2 ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์ฅ ์ค์ฑ์ง๋ฐฉ๊ณผ ์ด์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋ ๋ณํ</h2><p>ํ์ฅ ์ค์ฑ์ง๋ฐฉ์ ๋๋๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ \( 179.5 \pm 4.82 \mathrm{mg} / \mathrm{dL}, \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ \( 108.67 \pm 5.23 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ ์์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 5A). ํ์ฅ ์ด ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ๋๋์์๋ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ \( 222 \pm 12.48 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \), LMTN ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ \( 141.67 \) \( \pm 3.98 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ์ผ๋ก ๋ํ๋ \( \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํ์ฌ ์ด ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋๋ ์ ์์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 5B).</p><h2>์ 2 ํ ๋น๋จ๋ชจ๋ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์ ์ง๋ฐฉ๊ณผ ๊ทผ์ก์กฐ์ง์์์ ์ผ์์ธ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ PPAR \( \gamma \) ์ GLUT4 mRNA ๋ฐํ ํจ๊ณผ</h2><p>2ํ ๋น๋จ๋ณ๋ชจ๋ธ์ธ \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์ ์ง๋ฐฉ๊ณผ ๊ทผ์ก์กฐ์ง์์ ๋น ๋์ฌ์ ๊ด๋ จ๋ PPAR \( \gamma \) ์ GLUT4 mRNA ๋ฐํ ์ ๋๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, \( \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ PPAR \( \gamma \) ์ GLUT4 ์ ์ ์ ๋ฐํ์ด ๋น๋จ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค(Fig. 6A, B). ์ธ์๋ฆฐ ์ ํญ์ฑ์ ํน์ง์ ์ธ ์๊ฒฌ์ ๊ฐ์ง \( d b / d b \) ๋ง์ฐ์ค์์์ \( \mathrm{LMTN} \) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ๋๋น ํญ์์ฑ ์กฐ์ ํจ๊ณผ๋ ๊ทผ์ก๊ณผ ์ง๋ฐฉ์กฐ์ง์ \( \mathrm{PPAR} \gamma \) ํ์ฑ ๋ฐ ๋น ํก์ GLUT4 mRNA ๋ฐํ์ ์กฐ์ ๊ณผ ๋ฐ์ ํ๊ฒ ๊ด๋ จ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค.</p> |
๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ, ์ ๋ฐ์ด์์ ๋ฐ ๋ฐฐ์ถ์ข๋๋ฐฉ์ ๋ํ ์ด์ถฉํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฒ์ ํ๊ธฐ ์ํด ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ๋ฒ์ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ ์ด๋ค ๋ฌผ์ง์ ์ด์ฉํ์๋๊ฐ? | \(6.50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \) | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ๋ฒ์ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ ๊ณ ์ ๋ฐ ๊ณํผ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ํตํด ๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ, ์ ๋ฐ์ด์์ ๋ฐ ๋ฐฐ์ถ์ข๋๋ฐฉ์ ๋ํ ์ด์ถฉํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฒ์ ํ์๋ค. ๊ณ ์์ ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ด์ถฉ ๋ฐ ์ด๋นํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ, ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด \(30.59 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \) ๋ก ์ฐ์ํ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๊ณํผ์ ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ๋ฒ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ด์ถฉ ๋ฐ ์ด๋นํ์ฑ ๊ฒฐ๊ณผ, ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ ๋ฐ ํฅ์ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ๋ฐ์ด์์ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด ๊ฐ๊ฐ 5.96, \(4.64 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \)์ ์ฐ์ํ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ํ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ์์ ๋ณต์ญ์ํน์ง๋ง๋ฌผ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด \(6.50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{2} \)์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๊ณ ์์ ๊ณํผ์ ์์ฆ๊ธฐ ์ฆ๋ฅ, ํฅ์ฐ ๋ฐ ์ด์๊ณ ์ถ์ถ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ด์ฉํ ์นํ๊ฒฝ ๋ฐฉ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ค๋ค.</p> |
blue ๋ฐ green LED ํธ๋ฉ์ ์์
์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์ด์ฉ๋๋ BLB๋ณด๋ค ์ ์ธํ๋์ด ์ฐ์ํ๊ฐ? | green LED | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌํ์ ์ด์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ LED ํ์ฅ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ฃผ๊ด์ฑ ํ๋๋ฐ์์ ์กฐ์ฌํ๊ธฐ ์ํ์ฌ blue \( (470 \pm 10 \mathrm{~nm}) \), green \( (520+5 \mathrm{~nm}) \), yellow \( (590+5 \mathrm{~nm}) \), red \( (625 \pm 10 \mathrm{~nm}) \), UV \( (365 \mathrm{~nm}) \), IR \( (730 \mathrm{~nm}) \) LED๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ด์ฐฐํ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ blue LED์ ๊ฐ์ฅ ์ฐ์ํ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ green LED ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ด ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ฐํ์ผ๋ก ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด๋ถ์ ์ธ๋ถ์์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํด ์ ์๋ LED ํธ๋ฉ์ ๊ฐ ํด์ถฉ์ ์ ์ธํ์ฑ์ด ๋ํ๋ blue LED์ green LED ๋ฅผ ์ฅ์ฐฉํด ์คํํ์๋ค. ์ด๋ค์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด ์์ฑ ๋์กฐ๊ตฌ๋ก BLB๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด์์ ์ค์ฆ์คํ์ ์งํํ์๋ค. ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ blue LED ํธ๋ฉ์ผ๋ก \(4\)์ผ๋์ ์คํํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \( 145.8 \) ๋ง๋ฆฌ๊ฐ ํฌํ๋์๊ณ , ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \(248.4\)๋ง๋ฆฌ๊ฐ ํฌํ๋์์ผ๋ฉฐ ์ด๋ ์ธ๋ถ์์ ๋ด๋ถ๋ณด๋ค ์ฝ \( 1.7 \) ๋ฐฐ ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ๋ฐ๋ฉด, ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์๋ BLB์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ ๋ํ ์ ์ธ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \(105.1\)๋ง๋ฆฌ, ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \( 105.5 \) ๋ง๋ฆฌ๋ก blue LED๋ณด๋ค ๋ด๋ถ ์ฝ \( 1.8 \) ๋ฐฐ, ์ธ๋ถ ์ฝ \( 2.4 \) ๋ฐฐ์ ๋ฎ์ ๊ฐ์ฒด์๊ฐ ํฌํ๋์๋ค. ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด ์ฐฝ๊ณ ์์ green LED ํธ๋ฉ์ผ๋ก \(4\) ์ผ๋์ ์คํ์ ์งํํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \( 120.4 \) ๋ง๋ฆฌ, ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \( 199.1 \)๋ง๋ฆฌ๊ฐ ํฌํ๋์ด์ ์ธ๋ถ๊ฐ ๋ด๋ถ๋ณด๋ค ์ฝ \( 1.7 \) ๋ฐฐ ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์๋ค. ๋์กฐ๊ตฌ๋ก ์ฌ์ฉ๋ BLB๋ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ๋ด๋ถ์์ ํ๊ท \(65.3\)๋ง๋ฆฌ, ์ธ๋ถ์์ ํ๊ท \(94.1\)๋ง๋ฆฌ๋ก ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ๋ํด ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ green LED๋ณด๋ค ๋ด๋ถ ์ฝ \( 1.9 \) ๋ฐฐ, ์ธ๋ถ ์ฝ \( 2.1 \) ๋ฐฐ์ ๋ฎ์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>์ค๋ด๊ฒ์ ์ ์์ด์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ์ฃผ๊ด์ฑ ํ๋๋ฐ์์ ๊ฐ๊ฐ blue LED์ green LED์์ ์ฐ์ํ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ฌ์ผ๋ ์ค์ฆ์คํ์์๋ ๋ฎ์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ์ด๋ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ ์งํ๋ ์ค์ฆ์คํ์ด ์จ๋, ์ต๋, ๋น, ์๋ถ๊ณผ ๊ฐ์ ํ๊ฒฝ์ ์กฐ๊ฑด์ ์ํด ์ํฅ์ ๋ฐ์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๋ํ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์ธ๋ถ ์คํ์ด ๋ด๋ถ ์คํ๋ณด๋ค ์ ์ธํ์ฑ์ด ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ๋ชจ๋ ์ฝ \(1.7\)๋ฐฐ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ์ผ๋ฉฐ, ์ด ํ์์ ๋ด๋ถ ์คํ ์ค์ ๋จน์ด์ ๋ํ ์กฐ๊ฑด์ด ์ ๊ณกํด์ถฉ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์ณ LED ํธ๋ฉ์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๊ฐ์์ํค๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ์์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ blue LED, ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ green LED ํธ๋ฉ์ ๋ํด ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์์ผ๋ฉฐ, ๋จํ์ฅ LED์ ๋ฏผ๊ฐํ๊ฒ ๋ฐ์ํ๋ค๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ(Plodia interpunctella)๊ณผ ์ค์๋ฝ๋ช
๋๋ฐฉ (Cadra cautella)์ด ์ฐฝ๊ณ ์คํ์์ green light trap๊ณผ UV ์ ๋ํ ์ ์ธํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ๋ฉฐ, ์ด์ ๊ฐ์ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋จํ์ฅ LED์ ๋ ๋ฏผ๊ฐํ๊ฒ ๋ฐ์ํ๋ค๋ ๊ฒ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์คํ์ ํตํด blue LED ํธ๋ฉ์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ, green LED ํธ๋ฉ์ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ์ธํ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์์
์ ์ผ๋ก ๋๋ฆฌ ์ด์ฉ๋๋ BLB๋ณด๋ค ์ฐ์ํ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ ๊ณก๋ฌผ ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์ ์นํ๊ฒฝ ํด์ถฉ๋ฐฉ์ ์ ์ ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ธฐ๋ํ๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ๊ณผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํ LED ํธ๋ฉ์ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ ์ด์ฉ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ๊ฐํ๊ธฐ ์ํด ์์
์ ๋์กฐ๊ตฌ BLB ํธ๋ฉ๊ณผ ๋น๊ตํ ์ค์ฆ์คํ์ ํตํ์ฌ ์ ์ธํจ๊ณผ๋ฅผ ๋น๊ตํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ \(4\)์ผ ํ blue LED ํธ๋ฉ์ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ, green LED ํธ๋ฉ์ ํ๋๊ณก ๋๋ฐฉ์ ๋ํ์ฌ ๋์กฐ๊ตฌ BLB ํธ๋ฉ๋ณด๋ค ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์ธ๋ถ์์ ์งํํ ์คํ์ ๋ด๋ถ ์คํ๋ณด๋ค ์ฝ \(1.7\)๋ฐฐ ๋์ ์ ์ธํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ฐํ์ผ๋ก blue LED์ green LED ํธ๋ฉ์ด ๊ณก๋ฌผ๋ณด๊ด์ฐฝ๊ณ ์์ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ๊ณผ ๋ณด๋ฆฌ๋๋ฐฉ์ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํ ์นํ๊ฒฝ ์ ๊ณกํด์ถฉ ๋ฐฉ์ ๋ฒ์ผ๋ก ์ ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค.</p> |
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ชฉ์ ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | ์
๋ฃฐ๋ก์ค์ ํค๋ฏธ์
๋ฃฐ๋ก์ค ๋ถํ ํฉ์ฑ์ ์ ํด | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ํฌ์ํ(annual bluegrass, Poa anmua L.)์ Poa์ ์๋ฌผ์ ํฌํจ๋๋ ์ผ๋
์ ๋๋ ์๋
์ ํ๋ณธ๊ณผ ์ก์ด๋ก์ ์ผํฐํค๋ธ๋ฃจ๊ทธ๋์ค๋ ๋ฒคํธ๊ทธ๋์ค์ ๊ฐ์ด ํ์งํ์๋์ ํ๊ฒฝ์ ์ ํน์ฑ์ธ ๋ดํ์ฑ, ๋ด์ต์ฑ, ๋ด์์ฑ, ๋ด๋ด์์ฑ ๋ฐ ๋ด์์ทจ์ฑ ๋ฑ์ด ์ฐ์ํ์ฌ ํ์ด์จ์ด๋ ๋ฌํ์ ์๋๋ก์จ๋ ๋งค์ฐ ์ด์ฉ๊ฐ์น๊ฐ ๋๋ค(Vargas์ Turgeon 2004). ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ฎ์ ์์ฅ ๋์ด, ๋ค์ข
์์ฑ, ๋ฐ์ ์, ์ฒ๊ทผ์ฑ์ ํน์ง์ ๊ฐ์ง๊ณ ์์ด ์๋์ ์ ์ฉ์ฑ๊ณผ ๊ฒฝ๊ด๋ฏธ์ ์ํฅ์ ์ฃผ๊ณ , ์ถ์ ๋ฐ ๊ฐํ๊ธฐ์ ๋ฐฑ์์ ์ด์ญ์ ํ์ฑํ๊ฒ ๋๋ฉด ์๋์ ํฐ์์ด ๋ถ๊ฐ๋์ด ๊ฒฝ๊ด์ ์ข์ง ๋ชปํ๋ฉฐ, ๊ทธ๋ฆฐ์ ๊ฒฝ์ฐ ์๋๋ฐญ ํ๋ฉด์ ์์ฒ ์ ์์ฑ์์ผ ๋ณผ๊ตฌ๋ฆ ๋ฐฉํฅ์ ์
์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ฉฐ(Kane๊ณผ Miller 2003; McCullough ๋ฑ, 2005), ๊ณ ์จ๋ค์ตํ ์กฐ๊ฑด์ ์ทจ์ฝํ์ฌ ํ๊ณ ํ์์ ์ฝํ ๋ฑ์ ๋จ์ ์ด ์์ด ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์์๋ ์ก์ด๋ก ๊ฐ์ฃผํ์ฌ ๋ฐฉ์ ์ ๋์์ด๋ค(Park ๋ฑ, 2006; Park ๋ฑ 2007).</p><p>๊ณจํ๊ทธ๋ฆฐ์ค ์ํฌ์ํ๋ ์ ์ ํ ์ฌ๋ฐฐ๋ฒ๊ณผ paclobutrazol, fluprimidol ๋ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ์๋ฌผ์ฑ์ฅ์กฐ์ ์ ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ฐฉ์ ๊ด๋ฆฌํ ์ ์์ง๋ง, ์ด๋ฌํ ๊ด๋ฆฌ๋ฒ์ ์๋์ ์ํฌ์๋ฌผ์ ๊ฒฝ์๊ด๊ณ์์ ์๋์ ์ ๋ฆฌํ๊ฒ ์์ฉํ๊ฒ ํ์ฌ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ ๋ฐฑ์ฑ์ด ๋์ง ์์ ์ด๋ฌํ ๋ฐฉ์ ๋ฒ์ผ๋ก๋ ์์ ๋ฐฉ์ ๊ฐ ํ๋ค๋ค. ๋ํ, ์๋ฌผ์ ์ฅ์กฐ์ ์ ๋ ์ฌ๋ฌํ์ ๊ฑธ์น ๋ค์ค๋ฐฉ์ ๊ฐ ํ์ํ๊ณ ์ ์ด์ ์ฌ์ฉ์ ์ฝ์ ์ ์ํด ์๋๊น์ง ๊ณ ์ฌํ๋ ๋ฑ์ ์ฝํด ๋ฐ์์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ์ ์ด๋ ค์์ด ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์, ์ํฌ์ํ๋ก๋ถํฐ ๊ทธ๋ฆฐ์ ๋ณดํธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ ํ์ ์ธ ๋ฐฉ์ ๊ฐ ๊ฐ๋ฅํ ์ฝ์ ๊ฐ ํ์ํ๋ค(Park ๋ฑ 2007; Brosnan ๋ฑ, 2013a).</p><p>Methiozolin์ ๋ชฉ์ฐ์ฐ๊ตฌ์์์ ๊ฐ๋ฐํ isoxazoline๊ณ์ ์ ์ด์ ๋ก 2010๋
๊ตญ๋ด์์ ์ํฌ์ํ ๋ฐฉ์ ์ฉ์ผ๋ก ์๋์ ๋ฑ๋ก๋์๋ค. ์ด ๋์ฝ์ \( 125 \mathrm{~g} / \mathrm{ha} \)์ ๋๋๋ก ์ํฌ์ํด, crabgrass๋ฅผ ์๋, ์ผํฐํค ๋ธ๋ฃจ๊ทธ๋์ค, ๋ฒ๋ฎค๋ค ๊ทธ๋์ค์๋ ์ ๋ฐฑ์ ์ผ๋ก ๋ฐ์์ ๋ฐ ์์ก๊ธฐ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ํ ์ ์๋ค. ํนํ, ์ํฌ์ํ์ ๋ํด ํ์ํ ์ ํ์ ๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ธ๋ค(Brosnan ๋ฑ, 2013b; Koo ๋ฑ, 2014).</p><p>ํ์ฌ๊น์ง methiozolin์ ์์ฉ๊ธฐ์์ ์ ํํ ์๋ ค์ ธ ์์ง ์์ง๋ง ์๋ฌผ์ธํฌ๋ฒฝ์ ์ํฉ์ฑ์ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐ๋์๊ณ , ์ฅ์์ ๋ฟ๋ฆฌ์์ ์
๋ฃฐ๋ก์ค์ ํค๋ฏธ์
๋ฃฐ๋ก์ค ๋ถํ ํฉ์ฑ์ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ค๋ฅธ ์
๋ฃฐ๋ก์ค ํฉ์ฑ ์ ํด์ , ๋ฏธ์๊ด ์ ํด์ , very-long chain ์ง๋ฐฉ์ฐ ํฉ์ฑ์ ํด์ ํ๊ณ ๋ ๋ค๋ฅธ ์์ฉ๊ธฐ์์ ๋ณด์๋ค(Lee ๋ฑ, 2007). Grossman๋ฑ์ ์ดํํฉ๋ฌผ์ด ๊ฐ๊ตฌ๋ฆฌ๋ฐฅ(Lemna paucicostata L.)์์ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค๋ก๋ถํฐ ์ธํฌ๋ง ๋ณดํธ ์์ฉ์ ํ๋ plastoquinone๊ณผ tocopherol ํฉ์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ์๋ tyrosine aminotransferase ์ ํด์ ์ผ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ์ธํ์๋ค(Grossman ๋ฑ, 2012).</p><p>Methiozolin์ ์ ์ฌ๊ณํต์ ํํฉ๋ฌผ ์ค ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ์ต์ด ์์
ํ ์ฌ๋ก์ธ ๋
ํนํ ๋ฌผ์ง๋ก ํ๋ณธ๊ณผ ์ก์ด์ ๋ํ ๋์ ํ์ฑ๊ณผ ๊ฐ์ข
์๋ฌผ์ ์์ ์ฑ์ ๊ฐ์ง๋ฉฐ, \( \mathrm{LD}_{50} \)์ \( >2000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) b.w.๋ก ๋ฎ์ ๊ธ์ฑ ๊ฒฝ๊ตฌ๋
์ฑ๊ณผ \( 2000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) b.w. ์ด์์ NOAEL (No Observed- Adverse Effect Level) ๊ฐ์ผ๋ก ๋ฎ์ ๋ง์ฑ๋
์ฑ, ํ๊ฒฝ๋ํ ์ธก๋ฉด์์ ์ ๋์ฝ์ผ๋ก ๊ฐ์ถ์ด์ผ ํ ์ ๋งํ ํน์ฑ์ ๋๋ฃจ ๊ฐ์ถ ๋์ฝ์ด๋ค(Koo ๋ฑ, 2010).</p><p>๋์ฝ์ ๊ณจํ์ฅ์ ๋ณํด์ถฉ ๋ฐ ์ก์ด๋ฐฉ์ ๋ฅผ ํตํ ์๋๋ณดํธ์ ์ฃผ๋ณ ์๋ฆผ ๋ฐ ๊ฒฝ๊ด ์๋ฌผ์ ๋ณดํธ์ ํ์๋ถ๊ฐ๊ฒฐํ ์์ฌ๋ก์, ๊ณจํ์ฅ ์๋ ์ฌ์ฉ๋ฑ๋ก ๋์ฝํ๋ชฉ์ ๊ณ์ ์ฆ๊ฐํ์ฌ 2014๋
250ํ๋ชฉ์ผ๋ก์ 2001๋
90ํ๋ชฉ์ ๋นํด ์ฝ 3๋ฐฐ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๋ํ ์ ๊ตญ ๊ณจํ์ฅ์ 2014๋
๋ง ๊ธฐ์ค 503๊ฐ์๋ก 1998๋
120๊ฐ์๋ณด๋ค 419( \% \)์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ ์ด์ ๋ฐ๋ผ ์ ๊ตญ ๊ณจํ์ฅ๋ฉด์ ๋ 1๋ง3์ฒ \(\mathrm{ha}\) ('98๋
)์์ 2๋ง 46,400 \(\mathrm{ha}\) (2014๋
)๋ก \( 357 \% \) ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๊ณจํ์ฅ ๋์ฝ์ฌ์ฉ๋์ ํด๋ง๋ค ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์ ํจ์ฑ๋ถ๋ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก 2008๋
112.6ํค์์ 2014๋
\( 159.3 \)ํค์ผ๋ก \( 141 \% \) ์ฆ๊ฐํ์๋ค(http:/sgis.nier.go.kr).</p><p>๊ณจํ์ฅ์์ ์ก์ด๋ฐฉ์ ๋ฅผ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์ดํฌ๋ ์ ์ด์ ๋ ์๋ฌผ์ฒด์ ๊ฒฝ์ฝ๋ถ์๋ก ํ์๋์ด ์ฝํจ๋ฅผ ๋ํ๋ด๊ฑฐ๋, ์ผ๋ถ๋ ํ ์์ผ๋ก ์ ์
๋์ด ๋ฟ๋ฆฌ๋ฅผ ํตํด ์๋ฌผ์ฒด๋ด๋ก ํก์๋์ด ์ฝํจ๋ฅผ ๋ํ๋ด๊ธฐ๋ ํ์ง๋ง(Im ๋ฑ, 2011; Brosnan ๋ฑ, 2013b), ๊ณผ๋ค์ดํฌ๋๋ ๊ฒฝ์ฐ ์ฃผ๋ณ์ ํ ์๊ณผ ์๊ณํ๊ฒฝ์ ์ค์ผ์ํฌ ์ ์์ผ๋ฉฐ ์ฃผ์์ ๋นํ์ ์๋ฌผ์ฒด์ ์ํด๋ฅผ ๋ํ๋ผ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์๋ค.</p><p>๋ฐ๋ผ์ ํ๊ฒฝ๋ถ์์๋ '๊ณจํ์ฅ์ ๋์ฝ์ฌ์ฉ๋ ๋ฐ ๋์ฝ์๋ฅ๋ ๊ฒ์ฌ ๋ฑ์ ๊ดํ ๊ท์ '์ ๋ฐ๋ผ ๋งค๋
๋ฐ๊ธฐ๋ง๋ค ๊ณจํ์ฅ์ ๋งน-๊ณ ๋
์ฑ๋์ฝ์ ์ฌ์ฉ์ฌ๋ถ์ ๊ณจํ์ฅ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋์ฝ์ฌ์ฉ๋ ๋ฑ์ ์ฒด๊ณ์ ์ผ๋ก ์กฐ์ฌํ๊ณ ์๋ค. ๋ํ ํ ์, ์๋, ์ ์ถ์ ์๋ฃ์ ๋ํด ๋งค๋
2ํ ์ด์ ์ฑ์ทจํ์ฌ ๋งน๋
์ฑ ๋์ฝ 13์ข
, ๊ธฐ๋ณธํญ๋ชฉ 17์ข
, ์ ํํญ๋ชฉ 10์ข
๋ฑ ์ถฉ ๋์ฝ ์๋ฅ๋ ๊ฒ์ฌ๋ฅผ ์ค์ํ๊ณ ์์ง๋ง, ์๋์ ์ฌ์ฉ๋ฑ๋ก๋ ๋์ฝ์ ํญ๋ชฉ๊ณผ ์์ดํ ๋ฉด์ด ์๋ค(MOE 2011).</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์๋์ ์ฌ์ฉ๋ฑ๋ก ๋์ด์์ง๋ง ํ ์, ์๋, ์ ์ถ์์ ๋ํ ์๋ฅ ๋ถ์๋ฐฉ๋ฒ์ ์์ง ๋ณด๊ณ ๋์ด ์์ง ์์ methiozolin์ ๋์์ผ๋ก ์๋ฅ๋ถ์๋ฒ์ ๊ฐ๋ฐํ๊ณ ๊ณจํ์ฅ ๊ทธ๋ฆฐ์ ์ดํฌ๋ ์ฝ์ ์ ์๋, ํ ์ ์ค ์๋ฅ ์์คํน์ฑ์ ๊ตฌ๋ช
ํ๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> |
์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ค์ ๋ฏธ๋ฐฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ฑ๋ถ 4๊ฐ์ง๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP) 1, TRP2, microphthalmia associated transcription factor (MITF) | <h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ B16F10 ์ธํฌ์์์ ๋ฏธ๋ฐฑํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฒ์ฏ์ ๋์ tyrosinase ํ์ฑ ์ ํด๋ฅ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ 1,000\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋์์ 42\( \% \) ์ ์ ํด์จ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, B16F10 ์ธํฌ๋ด์ tyrosinase, ๋ฉ๋ผ๋ ์ํฉ์ฑ ์ ํด๋ฅ์ 5\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ 26, 25\( \% \) ์ ์ ํด๋ฅ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ฉ๋ผ๋ ์์ฑ ๊ด๋ จ ์ธ์ ์ค ์์ ๋จ๊ณ์ธ cAMP์ PKA์ ๋ฐํ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋๋ ์ ์กด์ ์ผ๋ก ๋ฐํ์์ด ์ค์ด๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ํ ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฏธ๋ฐฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ tyrosinase, tyrosinase related protein (TRP) 1, TRP2, microphthalmia associated transcription factor (MITF)์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐ ์ ์ ์ ๋ฐํ์์ด ๊ฐ์ํจ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ณธ ์คํ์ ํตํ์ฌ ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด cAMP๋ฅผ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ต์ ํจ์ผ๋ก์จ, PKA์ ํ์ฑ์ ์ ํด ์์ผฐ์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฅผ ํตํด tyrosinase ํ์ฑ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ TRP1, TRP2 ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ MITF ๋ฐํ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ ํด ํ๋ค๋ ์ฌ์ค์ ํ์ธํ์ฌ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฏธ๋ฐฑ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์ ์ํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> |
ํ๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(5์ข
)๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(8์ข
)์ ํจ๋์ ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด ์ด๋ค ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ฌ์ฉํ๋์? | \( \mathrm{MeOH} \) ์ ๋
น์ฌ stock solution์ ๋ง๋ ํ, \( 0-100 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ๋ฒ์ ๋ด์์ 8๊ฐ ๋๋๋ก ํฌ์ํ์ฌ | <h2>๋ถ์๋ฒ ์ ํจ์ฑ ๊ฒ์ฆ</h2><p>ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ \( \mathrm{MeOH} \) ์ ๋
น์ฌ stock solution์ ๋ง๋ ํ, \( 0-100 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ๋ฒ์ ๋ด์์ 8๊ฐ ๋๋๋ก ํฌ์ํ์ฌ ํ์ค์ฉ์ก์ ์ ์กฐํ์๋ค. ์คํ์ ์ค์ฐจ๋ฅผ ์ค์ด๊ณ , ๋ฐ๋ณต์ฑ(repeatability)๊ณผ ์ฌํ์ฑ(reproducibility), ์ ๋ฐ์ฑ(precision)์ ํ๋ณดํ๊ธฐ ์ํด ์ ์กฐํ ํ์ค์ฉ์ก์ UPLC-PDA๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ UV \( 230 \mathrm{~nm} \) ์์ ๊ฐ๊ฐ 3๋ฐ๋ณต ๋ถ์์ ์ค์ํ์๊ณ , ๋๋์ ๋ฐ๋ฅธ ํผํฌ์ ๋ฉด์ ์ ๋จ์ ์ ํํ๊ท๊ณก์ ์ ํํ๋ก ๊ตฌํ์ฌ ๊ฒ๋๊ณก์ ์ ์์ฑํ์๋ค. ์์ฑ๋ ๊ฒ๋๊ณก์ ์ ์ง์ ์ฑ(linearity)์ ๊ฒฐ์ ๊ณ์(coefficient of determination, \( \mathrm{R}^{2} \) ๋ฅผ ํตํ์ฌ ํ๋จํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ฒ์ถํ๊ณ(limit of detection, LOD)์ ์ ๋ํ๊ณ(limit of quantification, LOQ)๋ ๊ฒ๋๊ณก์ ์ ํ๊ท ๊ธฐ์ธ๊ธฐ์ ๊ฒ๋์ ์ ํธ์ ํ์คํธ์ฐจ์ ๊ทผ๊ฑฐํ์ฌ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><h2>ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ํ ์ ์กฐ</h2><p>๊ตญ๋ด ์ ํต์์ฅ์์ ํ๋ณดํ ํ๊ตญ์ฐ ๋ฐํ( 5 ์ข
)๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(8์ข
)์ ์๊ฑดํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ Tube mill (IKA, Staufen, DE)์ ์ด์ฉํ์ฌ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ฉ ์๊ฒ ๋ถ์ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ , \( 94 \% \) ethanol \( (94 \% \mathrm{EtOH} \), \( 100 \mathrm{~mL} \times 3 \) )์ ๊ฐํ ํ, ์ด์ํ ์ถ์ถ๋ฒ(ultrasonication extraction)์ ์ด์ฉํ์ฌ 3ํ ๋ฐ๋ณต ์ถ์ถ, ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ์ธ์ด์ง ์ฌ์ก์ ๊ฐ์ ๋์ถํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ป์ ํ, \( 94 \% \mathrm{EtOH} \) ์ ๋
น์ฌ 50 \( \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ์ ๊ท ์ผํ ๋๋๋ก ์ํ์ ์ ์กฐํ์๋ค.</p><h2>ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ UPLC-PDA ๋ถ์</h2><p>ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ์ \( 94 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ก๋ถํฐ ํ๊ฒ ํ๋ณํํฉ๋ฌผ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด \UPLC์ BEH \(\mathrm{C}_{18}\) (\(2.1 \times 100 \mathrm{~mm}\) , \( 1.7\mathrm{mm}) \) ์นผ๋ผ๊ด๊ณผ PDA ๊ฒ์ถ๊ธฐ๋ฅผ ์ฅ์ฐฉํ๊ณ ์นผ๋ผ์ค๋ธ์ ์จ๋๋ฅผ \(35 { }^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก ์ ์งํ์ฌ ๋ถ์์ ์งํํ์๋ค. A ์ฉ๋งค๋ \( 0.1 \% \) formic acid๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฆ๋ฅ์๋ก, B์ฉ๋งค๋ \( 0.1 \% \) formic acid๊ฐ ํฌํจ๋ ACN์ผ๋ก ์ค๋นํ์๋ค. UPLC ์ด๋์ ์กฐ๊ฑด์ 0-1 min \(10 \% \) B, 1-2 min \(50 \% \) B, 2-8 min \(100 \% \) B, 8-10 min \(100 \% \) B, 10- 10.5 min \(10 \% \) B, 10.5-13.0 min \(10 \% \) B๋ฅผ ์ ์ \( 0.4 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \)๋ก ํ๋ ธ์ผ๋ฉฐ, ์๋ฃ๋ \( 5 \mathrm{~mL}\) (\(50 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ฌด์์ 3 ๋ฐ๋ณต๋ถ์์ ์ค์ํ์๋ค.</p><h2>ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ ์ ๋ ๋ฐ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ ๋น๊ต๋ถ์</h2><p>ํ๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(5์ข
)๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ(8์ข
)์ ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ ์ ๋ํ๊ณ ๊ทธ ํจ๋์ ์๋ก ๋น๊ตํ๊ธฐ ์ํด, UPLC-PDA ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ(UV \( 230 \mathrm{~nm}) \) ์์ ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ ํด๋นํ๋ ํผํฌ ๋ฉด์ ์ ์ ๋ถ์ ํตํด ๊ตฌํ์๋ค. ํผํฌ ๋ฉด์ ๊ฐ์ ๊ฒ๋์์ ๋์
ํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ ์๋ฃ์ ๋ํ ํ๊ฒ ํ๋ณ ํํฉ๋ฌผ์ ํจ๋์ ์ฐ์ถํ์ฌ ์๋ก ๋น๊ตํ์๊ณ , ํ๊ตญ์ฐ๊ณผ ์ค๊ตญ์ฐ ๋ฐํ์ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ์ overlayํ์ฌ ๋น๊ต ๋ถ์ํ์๋ค.</p> |
saponarin ์ํฉ์ฑ์ ๊ด์ฌํ๋ ๊ด์ ์ฒญ์๊ด์ธ๊ฐ์? | \( 27 \% \) | <h2>๊ด ์จ๋ ๋ฐ ๋ณด๊ด ์ฒ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ Saponarin ํจ๋ ๋ถ์</h2><p>์ต์ ๊ด๋์ผ๋ก ํ์ธ๋ \( 220-320 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}{ }^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ ์กฐ๊ฑด์์ ์กฐ์ฌ ๊ด ์จ๋๋ฅผ \( 3000 \mathrm{~K} \) ์ \( 6500 \mathrm{~K} \) ๋ก ๊ตฌ๋ถํ๊ณ , ๊ฐ ๊ด ์จ๋์์ ๋ถ์กฑํ ํ์ฅ๋์ ๊ด์ ๋ณด๊ด ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์ฌ๋ฐฐ๋ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ saponarin ํจ๋์ ์กฐ์ฌํ์๋ค. Table 7์์ ์ ์ํ ๊ฒ๊ณผ ๊ฐ์ด, \( 3000 \mathrm{~K} \) ์์ \( 220 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ฒ๋ฆฌํ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ ๋์ผํ ๊ด๋์ผ๋ก \( 6500 \mathrm{~K} \) ๊ด์ ์ฒ๋ฆฌํ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์ ๋นํด saponarin ํจ๋์ด \( 27 \% \) ๊ฐ์ํ์๋ค. \( \mathrm{LED} \) ๊ด์ ์ ์กฐ์ฌ์์ ์ ๊ณตํ๋ \( 3000 \mathrm{~K} \) ๊ด ์คํํธ๋ผ์ \( 6500 \mathrm{~K} \) ์ ๋น๊ตํ์ฌ ๊ดํฉ์ฑ ์์ ํ์ฅ๋๋ก ์๋ ค์ง ์ ์๊ด ์์ญ 600-700 nm์ ๊ด ๋ถํฌ๋ ๋์ผ๋ ์ฒญ์๊ด ์์ญ์ธ \(400- 500 \mathrm{~nm} \) ๊ด ๋ถํฌ๋ ๋งค์ฐ ๋ฎ์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ฒญ์๊ด์ด saponarin ์ํฉ์ฑ์ ๊ด์ฌํจ์ ์ ์ถํ ์ ์๋ค. ์ด์ ๋ฐ๋ผ, ๊ฐ ์ฃผ์ ๊ด ์จ๋์กฐ๊ฑด์์ ๋ถ์กฑํ ํ์ฅ๋์ ๊ด์ ๋ณด๊ดํ์ฌ ์ด ๊ด๋์ \( 320 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}{ }^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ผ๋ก ์ ์งํ๋ฉฐ, \( 6500 \mathrm{~K} \) ์ ์๋์ ์ผ๋ก ๋ถ์กฑํ ์ ์๊ด์ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ๊ณ , \( 3000 \mathrm{~K} \) ์๋ ์ฒญ์๊ด์ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๋ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ saponarin ์์ฑ๋์ ๊ฐ๊ฐ ๋น๊ต ๋ถ์ํ์๋ค.</p><p>\( 220 \mu \mathrm{mol} \mathrm{m}{ }^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ \( 6500 \mathrm{~K} \) ๋ฅผ ์ฃผ ๊ด์์ผ๋ก \( 600-700 \mathrm{~nm} \) ๋ฅผ ์ฃผํ์ฅ๋๋ก ๊ฐ๋ ์ ์ LED๋ฅผ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๋, \( 6500 \mathrm{~K} \) LED ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ ๋๋น saponarin ํจ๋์ด \(28%\) ์ฆ๊ฐํจ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ฉด, \( 6500 \mathrm{~K} \) ์ LED ๊ด์ \( 400-500 \mathrm{~nm} \) ๋ฅผ ์ฃผ ํ์ฅ๋๋ก ํ๋ ์ฒญ์๊ด์ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ, saponarin ํ๋์ \( 6500 \mathrm{~K}\) LED ๊ด ๋จ๋ ์ฒ๋ฆฌ ๋ณด๊ด์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ, saponarin ํจ๋์ \( 6500 \mathrm{~K} \) LED ๊ด ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ ๊ตฌ์ ๋นํด \( 35 \% \) ๊ฐ๋ ๊ฐ์ํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ฑด๋ฌผ ์์ก๋๋ ์ ํ๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค(Table \(7\)). ๋ํ, \( 3000 \mathrm{~K} \) ๋ฅผ ์ฃผ ๊ด์์ผ๋ก ์ฒญ์๊ด์ ๋ณด๊ดํ ๊ฒฝ์ฐ \( 12 \% \) ๊ฐ๋ saponarin ํจ๋์ด ์ฆ๊ฐํ์ฌ, \( 6500 \mathrm{~K} \) ๋จ๋
๊ด์ ์ฒ๋ฆฌ์ saponarin ํจ๋์ด ์ ์ฌํจ์ ํ์ธํ์๋ค. ์ ์๊ด์ ์๋ฌผ์ phytochrome์ ์๊ทนํ์ฌ ๊ดํฉ์ฑ ๋ฅ๋ ฅ์ ํฅ์์ํค๊ณ ์ฒญ์๊ด์ chryptochrome์ ์๊ทนํ์ฌ ์ด์ฐจ๋์ฌ๋ฌผ์ง ํฉ์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น ์ ์๊ณ , ํนํ ์ฒญ์๊ด์ anthocyanin ํฉ์ฑ์ ์กฐ์ ํ๋ phenylpropanoid ์ํฉ์ฑ๊ฒฝ๋ก์์ Chalcone synthase(CHS)์ ๋ฐํ์ ์ด์งํ์ฌ anthocyanin ํจ๋์ ์ฆ์งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. Saponarin ์ํฉ์ฑ ๊ฒฝ๋ก ๋ํ CHS ์์ฉ์ ์๋ฐํด์ผ ํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ฒญ์๊ด์ ์ํด ์ ๋๋ ๋์ฌ ๊ฒฝ๋ก๋ฅผ ํตํ์ฌ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ saponarin ํจ๋ ์ฆ์ง์ ๊ธฐ์ฌํ์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ข
ํฉํ๋ฉด saponarin ์ํฉ์ฑ์ ์ฒญ์๊ด์ด ์ฃผ์ ์ธ์๋ก ์์ฉํจ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, saponarin ๊ณ ํจ์ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ ์ฌ๋ฐฐ์๋ \( 8 \mathrm{~h} \mathrm{day}{ }^{-1} \)์ ๊ด ์ฃผ๊ธฐ์์ \( 6500 \mathrm{~K} \) LED ์ ์ ์๋ณด๊ด์ ํตํ \( 220-320 \mu \mathrm{mol} \)\( \mathrm{m}^{-2} \mathrm{~s}^{-1} \) ์ ์ต์ข
๊ด๋์ด ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ธ๊ณต ๊ด ์กฐ์ฌ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ์ธ ๋์๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ์ธ๊ณต ๊ด ์ฌ๋ฐฐ ์์คํ
์ saponarin ๊ณ ํจ์ ๋ณด๋ฆฌ ์ด๋ฆฐ ์์ ์ฐ์ค ์์ฐ์ ๊ธฐ์ฌ ํ ์ ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค.</p> |
๋ฐฑ์ถ, ์ฐ์ฌ ์๋ฃ ๋ชจ๋ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ํ์์จ์ ๋ณด์์ด? | \( 108.8 \% \) | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>HPLC-MS/MS ๋ถ์๋ฒ ํ๋ฆฝ ๋ฐ ๊ฒ์ฆ</h2><p>์ง๋๋ถ์๊ธฐ ์ต์ ํ ์กฐ๊ฑด์ ํ๋ฆฝํ๊ธฐ ์ํด ํ์ค์ฉ์ก์ ์ฌ์ฉํ์ฌ Flow injection analysis๋ถ์์ ์ํํ์๋ค. ์ด์จํ ๋ฐฉ์์ electrospray์ ํ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ spray voltage \( 4,000 \)V์์ ์ด์จํ ํ์๊ณ positive ๋ชจ๋์์ ๋ถ์ํ์๋ค. ESI positive mode์์๋ ์์ฑํ๋ ๋ถ์์ด์จ \( \left[\mathrm{M}+\mathrm{H}^{+}\right. ]\)์ ์ถ๊ฐ ๋ถ๊ดด์์ผ ๊ฐ๋ ๋ฐ ์ ํ์ฑ์ด ์ฐ์ํ \( 2 \)์ข
์ daughter ion์ธ \( \mathrm{m} / \mathrm{z} 220.1 \) ์ ์ ๋์ด์จ์ผ๋ก \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) \( 192.1 \)์ ์ ์ฑ์ด์จ์ผ๋ก ์ ์ ํ์๋ค. ํด๋น ๋ถ์์กฐ๊ฑด์์ metalaxyl์ ๊ธฐ๊ธฐ์ ์ ๋ํ๊ณ ๋๋์ธ \( 0.001 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฅผ \( 7 \)๋ฒ ๋ฐ๋ณต ๋ถ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋จธ๋ฌด๋ฆ ์๊ฐ์ \( 10.6 \)๋ถ์ด์๊ณ ๋ณ์ด๊ณ์(Coefficient of variation, C.V.)๋ \( 1.3 \% \) ๋ก \( 10 \% \) ์ด๋ด๋ฅผ ๋ง์กฑํ์์ผ๋ฉฐ ๊ฒ๋์ ์ ๊ฒฐ์ ๊ณ์ \( \left(\mathrm{R}^{2}\right) \) ๋ ๋งค์ง๋ณ \( 0.999 \) ์ด์์ผ๋ก ์ฐ์ํ ์ง์ ์ฑ์ ๋ณด์๋ค.</p><h2>์ ์ ์กฐ๊ฑด ํ๋ฆฝ</h2><p>ํ์ค์ฉ์ก์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ณดํธ์ ์ผ๋ก ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋๋ \( 5 \)๊ฐ์ง์ d-SPE ๋ฅผ ๊ฒํ ํ์๋๋ฐ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ๋ PSA, C18, GCB์ ํก์ฐฉ์ ๊ฐ ๋ค์ด๊ฐ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 99.7-107.5\% \)์ ์ฐ์ํ ํ์์จ์ ๋ณด์์ง๋ง, Z-Sep์ด ๋ค์ด๊ฐ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 32.9 \% \) ์ ๋ฎ์ ํ์์จ์ ๋ณด์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก Z-Sep์ด ๋ค์ด๊ฐ d-SPE \( 5 \) ๋ฅผ ์ ์ธํ๊ณ ํ์์จ์ ํ๋ณดํ d-SPE๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ฐฑ์ถ, ์ฐ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ matrix effect๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. LC-MS์ ๊ฒฝ์ฐ matrix effect๋ ์ง๋๋ถ์๊ธฐ ๋ด์ ์ด์จํ ๊ณผ์ ์์ ๋ํ๋๋ฉฐ matrix์ ํด๋น ์ฑ๋ถ๊ณผ ํจ๊ป ์ง๋๋ถ์๊ธฐ์ ์ด์จํ ์์ค๋ก ์ฃผ์
๋์ด ion suppression ๋ฐ ion enhancement๋ฅผ ์ผ์ผ์ผ ์ ํํ ์ ๋๋ถ์์ ๋ฐฉํดํ๋ค. ๋๋ถ๋ถ์ ๋์ฝ์ LC-MS ESI positive mode์์ ๋ถ์์ด ์ฉ์ดํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ LC-MS์์ matrix effect๋ ๋ถ๊ฐํผํ๋ค. ๋ฐฑ์ถ์ ๊ฒฝ์ฐ d-SPE \( 1, 2, 3, 4 \)๋ก ์ ์ ํ์ ๋ matrix effect๊ฐ \( -69.8 \% \) ์์ ์ต๋ \( -71.4 \% \) ์ด์๊ณ ์ฐ์ฌ์ \( -85.6 \% \) ์์ ์ต๋ \( -87.0 \% \) ๋ก ์ฐ์ถ๋์๋ค. ๋ ๋งค์ง ๋ชจ๋ matrix์ ์ํฅ์ด ๊ธฐ์กด ๋ค๋ฅธ ์ฐ๊ตฌ์ ๋์ผํ๊ฒ \( \mathrm{d}-\mathrm{SPE} \) ๋ก ์ ์ ์ \( 60 \% \) ์ด์์ผ๋ก ํฌ๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ฐ๋ผ์, metalaxyl์ด ์ฝ์ฐ์ฑ ํํฉ๋ฌผ์ธ ์ ์ ์ฐฉ์ํ์ฌ ์ฝ์์ด์จ๊ตํํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ ํผ์ธ \( \mathrm{SPE}{-\mathrm{NH}_{2}} \) cartridge๋ฅผ ๊ฒํ ํ์๋ค. \( \mathrm{SPE}-\mathrm{NH}_{2} \) cartridge๋ก acetone/ \( n \)-hexane ํผํฉ์ฉ๋งค๋ฅผ ๊ฐ ๋น์จ๋ณ๋ก \( 5 \mathrm{~mL} \) ์ฉ ์ฉ์ถํ์ฌ ํ์ธํ์์ ๋, acetone \( / n \)-hexane \( (5 / 95, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ๋ ๋ฒ์งธ ๋ถํ์์ ์ฉ์ถ๋๊ธฐ ์์ํ์์ผ๋ฉฐ, acetone/ \( n \)-hexane \( (10 / 90, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ๋ ๋ฒ์งธ ๋ถํ๊น์ง ์ฉ์ถ๋์ด ์ด \( 85.6 \% \) ์ ํ์์จ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์๋ค.ํ์ง๋ง, ์์ฝ ์๋ฃ๋ฅผ ๋์
ํ์์ ๊ฒฝ์ฐ ํ์์จ์ด \( 36.2 \% \) ๋ก ๊ฐ์ํ์ฌ acetone์ ๋น์จ์ ๋์ฌ์ ํ๋ฆฝํ์๋ค. ์ต์ข
์ ์ผ๋ก ์นดํธ๋ฆฌ์ง์ acetone/ \( n \)-hexane \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) \( 5 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ ์ ์ถํ์ฌ ๋ฒ๋ฆฐ ํ acetone \( / n \)-hexane \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) \( 5 \mathrm{~mL} \) ์ ๋
น์ธ ์๋ฃ ์ฉ์ก์ ๊ฐํ์ฌ ์ ์ถ ์ ์ถฉ์ง์ ํ๋ฉด์ด ๋
ธ์ถ๋๊ธฐ ์ง์ acetone \( / n- \) hexane \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) \( 5 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ฉ์ถํ์ฌ ๋ฐ๋ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ๋ฆฝํ์๋ค. ํ๋ฆฝํ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ์ ์ฉํ์์ ๊ฒฝ์ฐ \( 108.8 \% \) ์ ์ฐ์ํ ํ์์จ์ ๋ณด์๋ค. ๋ํ, \( \mathrm{SPE}-\mathrm{NH}_{2} \) cartridge๋ก ์ ์ ํ์ ๊ฒฝ์ฐ SPE cartridge type์ matrix effect์ ์ํญ์ด ๋ฎ๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๊ฐ์ด ๋ฐฑ์ถ์์ \( -18.9 \% \), ์ฐ์ฌ์์ \( -17.9 \% \) ์ ๋ฎ์ ์์น๋ฅผ ๋ณด์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, \( \mathrm{SPE}-\mathrm{NH}_{2} \) cartridge ์ ์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ํ๋ฆฝํ์๋ค.</p><h2>๋ถ์์ ๋ํ๊ณ ๋ฐ ํ์์จ</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํ๋ฆฝํ ๋ถ์๋ฒ ๋ฐ ๊ธฐ๊ธฐ๋ถ์์กฐ๊ฑด ๊ณผ์ ์ ์์ฝ์๋ฃ ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ์ ์ ์ฉํ์ฌ ์ํํ์์ ๋ Table \( 2 \)์ ๊ฐ์ ํ์์จ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ์ป์๋ค. ๋ถ์๊ธฐ๊ธฐ์ ๊ธฐ๊ธฐ์์ ๋ํ๊ณ๋ \( 0.002 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์์ผ๋ฉฐ, ๋ถ์์ ๋ํ๊ณ๋ ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ ๋ชจ๋ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์์ค์ด์๋ค. ์ด์ ๋ฐ๋ฅธ ํ์์จ ์ํ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ฐฑ์ถ์๋ฃ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 100.3 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 2.0 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์๊ณ \( 0.1 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 109.1 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 5.8 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์๋ค. ์ฐ์ฌ์๋ฃ๋ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 88.6 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 3.6 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์๊ณ \( 0.1 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ฒ๋ฆฌ์์ค์์ \( 88.1 \% \) ์ ํ์์จ๊ณผ \( 6.2 \% \) ์ ๋ณ์ด๊ณ์๋ฅผ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ ๋ ๋งค์ง ๋ชจ๋ ์๋ฅ๋ถ์๊ธฐ์ค์ธ ํ์์จ \( 70-120\% \), ๋ณ์ด๊ณ์ \( 10 \% \) ์ด๋ด๋ฅผ ๋ง์กฑํ์๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>์์ฝ ์ค ์๋ฅ๋์ฝ์ ์์ ์ฑ์ ํ๋ณดํ๊ธฐ ์ํด metalaxyl์ ๋ํด ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ์ ์๋ฅ๋์ฝ ๋ถ์๋ฒ์ ๊ฒ๋ฐํ๊ณ ์ ํ์๋ค. LC-MS/MS๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ QuEChERS๋ฒ์ ๊ธฐ๋ฐ์ผ๋ก ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ฌ ์ค metalaxyl์ ๋ถ์ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋ฌผ๋ก ์ต์คํ ์์ผ acetonitirile๋ก ์ถ์ถํ์ฌ \( \mathrm{MgSO}_{4} \) ์ \( \mathrm{NaCl} \) ์ ์ฒจ๊ฐํด ์ธต ๋ถ๋ฆฌ ํ \( \mathrm{SPE}\)-\( \mathrm{NH}_{2} \) cartridge๋ก ์ ์ ํ์๋ค. ๋ณธ ๋ถ์๋ฒ์ ๊ธฐ๊ธฐ์ ๋ํ๊ณ์ ๋ถ์์ ๋ ํ๊ณ๋ \( 0.002 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๊ณผ \( 0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์ด์๊ณ ํ์ค๊ฒ๋์ ์ \( 0.001- \) \( 0.05 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) ๋ฒ์์์ ๊ฒฐ์ ๊ณ์ \( \left(\mathrm{R}^{2}\right) 0.999 \) ์ ์ง์ ์ฑ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐฑ์ถ๊ณผ ์ฐ์ ์ ๋ํ ํ์์จ์MLOQ ์์ค, MLOQ์ \( 10 \)๋ฐฐ ์์ค์์ \( 88.1-109.1 \% \)์ ์ฐ์ํ ํ์์จ์ ๋ณด์๊ณ , ๋ณ์ด๊ณ์๋ \( 2.0-6.2 \% \) ๋ก \( 10 \% \) ์ดํ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ํ๋ฆฝํ LC-MS/MS๋ฅผ ์ด์ฉํ ์๋ฅ๋ถ์๋ฒ์ ํ์์จ ๋ฐ ๋ถ์์ค์ฐจ๋ ๊ตญ์ ์ ์ธ ๊ธฐ์ค์ ๋ง์กฑํ๊ณ ์์ผ๋ฏ๋ก ์์ฝ ๋ฐฑ์ถ ๋ฐ ์ฐ์ฌ ์ค metalaxyl์ ์์ ์ฑ ๊ฒ์ฌ๋ฅผ ์ํ ๋ถ์๋ฒ์ผ๋ก ํ์ฉํ ์ ์์ ๊ฒ์ด๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ค.</p> |
\( \mathrm{V_{max}}\), \(\mathrm{K_{m}} \) ๊ฐ์ ๊ตฌํ ํ ๋ฌด์์ ๋ํด ํ๊ฐํ์ด? | Tukey HSD | <h2>ํ ์ urease ํ์ฑ์ ๋ฏธ์น๋ ๋ชฉ์ด์ก์ ์ํฅ</h2><p>ํ ์ urease ํ์ฑ ์ธก์ ์ ์๊ฑด ํ ์๋ถํจ๋์ \( 20 \%(\mathrm{W} / \mathrm{W})\)๋ก ๋ง์ถ๊ณ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ํ๋ฃจ ๋ฐฐ์ํ ํ ์ \( 2 \mathrm{~g} \)์ toluene \( 80 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐ ํ PEB (\( \mathrm{pH~} 7.0\)) \( 4 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ํ์ฌ ํจ์์ก์ ์ค๋นํ์๋ค. ์์๋๋์ ๋ฐฐ์์จ๋, ์ฒ๋ฆฌ์กฐ๊ฑด์ jack bean๊ณผ Bacillus urease ํ์ฑ ์ธก์ ๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ ๊ฐ๊ณ \(3\)์๊ฐ ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋ฐ์ ํ stop reagent๋ก \( \mathrm{Ag_{2}SO_{4}} \) (\(3 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \))๋ฅผ \( 2 \mathrm{~mL} \)์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐ์์ ์ข
๊ฒฐ์ํจ ํ \( 2 \mathrm{M} \) \( \mathrm{KCl} \)์ \( 20 \mathrm{~mL} \) ๋ฃ์ด \(30\)๋ถ๊ฐ ์งํ ํ No. \(2 \) ์ฌ๊ณผ์ง์ ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ์ฆ๋ฅ์ \( 400 \mu \mathrm{L} \)์ ์ฌ๊ณผํ ํ ์ ์ถ์ถ์ก \( 100 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ์ทจํด์ ๋ฃ๊ณ , EDTA \( 50 \mu \mathrm{L} \), phenol-nitroprusside \( 200 \mu \mathrm{L} \)์ \( \mathrm{NaOH} \)-hypochlorite \( 200 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ๋ฃ์ด \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)์์กฐ์์ \(30\)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ \( 630 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์๋ชจ๋์ ๋๋ ๋ฐ urease ํ์ฑ ์ ํด๋(\(\%\)) ๊ณ์ฐ์ jack bean๊ณผ Bacillus urease ํ์ฑ ๊ณ์ฐ๋ฐฉ๋ฒ๊ณผ ๋์ผํ๋ค.</p><h2>Jack bean urease ๋ฐ์์๋์ ๋ฏธ์น๋ ๋ชฉ์ด์ก์ ์ํฅ</h2><p>๋ชฉ์ด์ก์ ์์๋ถํด ์ ํด ๊ธฐ์์ ์๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋ชฉ์ด์ก \( 500\), \(5,000 \), \( 10,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)์ ์์๋๋๋ฅผ \( 20\), \(80\), \(160\), \(320\), \(500 \mathrm{mM} \)๋ก ๋ฌ๋ฆฌํ์ฌ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(3\)๋ถ ๋์ ๋ฐ์์ํจ ํ jack bean urease ๋ฐ์ ์๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์์๋๋๋ณ ๋ฐ์์๋๊ฐ์ ์์๋๋์ ๋ฐ์ ์๋์ ์ญ์๋ฅผ ์ทจํ์ฌ Lineweaver-Burk plot์ผ๋ก ํ์ฐํ์ฌ \( \mathrm{V_{max}}\), \(\mathrm{K_{m}} \) ๊ฐ์ ๊ตฌํ ํ inhibition์ ๋ฐ์๊ธฐ์์ ํ๊ฐํ์๋ค.</p><h2>ํ ์ ๋ด ์์ ๊ฐ์๋ถํด์ ๋ฏธ์น๋ ๋ชฉ์ด์ก์ ์ํฅ</h2><p>๋ชฉ์ด์ก์ด ํ ์ ๋ด ์์ ๊ฐ์๋ถํด์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๋ณด๊ธฐ ์ํ์ฌ ์์์ ๋ชฉ์ด์ก์ ํ ์์ ์ง์ ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์์ ๊ฐ์๋ถํด ์ ๋ฐ์ํ๋ ํ ์ ๋ด ์๋ชจ๋์๋ฅผ \( 2 \mathrm{M} \) \(\mathrm{ KCl} \) ์ถ์ถ-indophenol blue ๋ณ๋ฒ์ผ๋ก ์ธก์ ํ์ฌ ์์ ๊ฐ์๋ถํด ์ ๋๋ก ๋ํ๋ด์๋ค. ์๊ฑด ํ ํ ์์ ์๋ถํจ๋์ \( 30 \% \)๋ก ๋ง์ถ๊ณ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ํ๋ฃจ ๋ฐฐ์ํ ํ ์ \( 20 \mathrm{~g} \)์ urea \( 100 \mathrm{mg} \)๊ณผ ๋ชฉ์ด ํฌ์์ก์ ์ฆ๋ฅ์์ฌ๋ฌผ ๊ธฐ์ค ๋๋๋ณ (\(1,000\), \(5,000\), \(10,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L}\))๋ก \( 1 \mathrm{~mL} \)์ฉ ์ฒจ๊ฐํ ํ \( 35^{\circ} \mathrm{C} \) ํญ์จ ๋ฐฐ์๊ธฐ์์ \( 1\), \(2\), \(3\), \(5\), \(10 \)์ผ ๋์ ํญ์จ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ด๋ ํ ์์ ์๋ถํจ๋์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ต์ ์๋ถํจ๋์ธ water filled pore space \( 60 \% \)๋ก ๋ง์ถ์๋ค. ๋ฐฐ์ ํ \( 20 \mathrm{~g} \) ํ ์ ์ค \( 2 \mathrm{~g} \)์ ์ทจํด \( 2 \mathrm{M} \) \( \mathrm{KCl}\) \(20 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ฃ์ด \(30\)๋ถ๊ฐ ์งํ ํ No. \(2\) ์ฌ๊ณผ์ง์ ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ์ฆ๋ฅ์ \( 400 \mu \mathrm{L} \)์ ์ฌ๊ณผํ ํ ์ ์ถ์ถ์ก \( 100 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ์ทจํด์ ๋ฃ๊ณ , EDTA \( 50 \mu \mathrm{L} \), phenol-nitroprusside \( 200 \mu \mathrm{L} \)์ \( \mathrm{NaOH} \)-hypochlorite \( 200 \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ๋ฃ์ด \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) ์์กฐ์์ \(30\)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ \( 630 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. Control์ ๋ชฉ์ด์ก ๋์ \( \mathrm{MeOH} \)๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์๋ค.</p><h2>๋ถ์ ๋ฐ์ดํฐ์ ํต๊ณ์ ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>๋ชจ๋ ์คํ์ \(3\)๋ฐ๋ณต์ผ๋ก ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ถ์ํ ๋ฐ์ดํฐ๋ ํ๊ท ๊ณผ ํ์คํธ์ฐจ๋ก ํ์ํ์๋ค. ๋ชฉ์ด์ก ์ฒ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ฅธ urease ํ์ฑ ์ ํด๋ R \( 3.3.3 \) ํ๋ก๊ทธ๋จ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ผ์๋ถ์ฐ๋ถ์์ผ๋ก ์ฐจ์ด๋ฅผ ๊ฒ์ ํ์๋ค. ์ฌํ๊ฒ์ ์ผ๋ก Tukey HSD๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ ์ฒ๋ฆฌ ์ง๋จ์ ์ฐจ์ด๊ฐ ์๋ ๊ฒฝ์ฐ(\( p<0.05\)) ๊ฐ์ ์๋ฌธ์๋ก ๊ทธ๋ํ ์์ ํ์ํ์๋ค.</p> |
์ต๊ทผ ์ฒ์ฐ ์์ฌ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ค์ด๋ค์ด, ํฉ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์๋๊ฐ? | ๋ฏธ์๋ฌผ ํจ์ ๋ฐ์์ ํตํด ์๋กญ๊ฒ ์ ๋ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ผ์ฆ์ ๋ฌผ๋ฆฌ์ ํํ์ ์๊ทน์ ์ํ ์ธ์์ด๋ ์กฐ์ง ์์์ผ๋ก๋ถํฐ ์ ์ฒด๋ฅผ ๋ฐฉ์ดํ๊ธฐ ์ํ ์์ฒด ์กฐ์ง์ ๋ฉด์ญ ๋ฐ์์ผ๋ก, ๋ค์ํ ๋ฉด์ญ์ธํฌ์ ์ํด ์งํ๋๋ ์ผ๋ จ์ ์๋ฌผํ์ ๊ณผ์ ์ด๋ค. ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ผ์ฆ๋ฐ์์ ์์๋ ์กฐ์ง์์ ์ฌ๋ฌ ๋ฉด์ญ ๊ด๋ จ ์ธํฌ๋ค์ด ๋ถ๋นํ๋ nitric oxide (\( \mathrm{NO} \)), prostaglandin (PG) ๋ฐ tumor necrosis factor- \( \alpha \) (TNF- \( \alpha \) ), interleukin-\( 6 \) (IL-\( 6 \)), interleukin-\( 1 \) \( \beta \)(IL-\( 1 \)\( \beta \))์ ๊ฐ์ ์ ์ผ์ฆ์ฑ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ(Pro-inflammatory cytokines)์ ํฌํจํ ๋ค์ํ ์ผ์ฆ ์ด์ง์ฑ ๋งค๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ์ํด ์ ๋๋๋๋ฐ, ์ด๋ค์ ํต์ฆ, ๋ถ์ข
, ์ด ๋ฑ์ ์ผ์ฆ์ฑ ์ฆ์์ ๋ฐํํ์ฌ ๋ค์ํ ์ง๋ณ์ ๋งค๊ฐ์ฒด๋ก์จ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ค. ์ฒด๋ด์ ์ฃผ์ ์ผ์ฆ์ธํฌ๋ก ์๋ ค์ง ๋์์ธํฌ (Macrophage)๋ ์ธํฌ ํ๋ฉด์ ๋ฐํํ๋ toll-like receptor์ ํตํด gram negative bacteria์ ์ธ๋ถ ์ธํฌ๋ง ๋
์ ๋ฌผ์ง์ธ lipopolysaccharide (LPS)๋ฅผ ์ธ์ํ์ฌ ์ธํฌ ๋ด ์ ์ฌ์ธ์ nuclear factor- \(\kappa \)B NF \(\kappa \)B์ ์ ํธ ์ ๋ฌ ๊ฒฝ๋ก๋ฅผ ํ์ฑํ ํ๋๋ฐ, ๋์์ธํฌ์ ํต ์์ผ๋ก ์ด๋ํ NF \(\kappa \)B๋ ์ผ์ฆ ๊ด๋ จ ์ ์ ์์ธ inducible nitric oxide synthase (iNOS) ๋ฐ cyclooxygenase-2(COX-\( 2 \))์ ๋ฐํ์ ์ ๋ํจ์ผ๋ก์จ \( \mathrm{NO} \) ๋ฐ prostaglandin E\( 2 \) \( \left(\mathrm{PGE}_{2}\right) \)์ ๊ฐ์ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ์์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํจ๋ค. ๊ทธ์ค \( \mathrm{NO} \)๋ ๊ณ ๋ฐ์์ฑ radical์ ์ผ์ข
์ผ๋ก, ๋ฎ์ ๋๋์์๋ ์ ํธ ์ ๋ฌ ๋ฐ ๋ฐํ
๋ฆฌ์์ ์ฌ๋ฉธ์ ํตํ ๋ฉด์ญ ์์ฉ ๋ฑ์ ์ธ์ฒด์ ์ค์ํ ์๋ฆฌ์ ์ญํ ์ ์ํํ์ง๋ง, ๊ณผ๋ํ ๋ฐํ์ ์ฒด๋ด์ ์ ์ ํ์ง ์์ ์ผ์ฆ์ ์ ๋ฐํ์ฌ ์ ์ ์์ ๋ณ์ด, ์กฐ์ง๊ณผ ์ ๊ฒฝ์ ์์์ ์ด๋ํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์๋ค. ๋ํ COX-\( 2 \)์ ์ด๋งค์ ํ์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํค๊ณ , signaling cascade๋ฅผ ์ด๋ฐํ๋ ๋ฑ COX-\( 2 \)์ ๊ธ์ฑ์ ์ธ ๋ฐํ์ ์ ๋ํ์ฌ \( \mathrm{PGE}_{2} \)์ ์์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํด์ผ๋ก์จ ์ฌ๋ฌ ๋์น์ฑ ์งํ์ ์ ๋ฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก๋ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ผ์ฆ์ฑ ์งํ์ ์์ธ์ด ๋๋ ๊ณผ๋ํ \( \mathrm{NO} \)์ \( \mathrm{PGE}_{2} \)์ ์์ฑ์ด ์ ๋ํ iNOS ๋ฐ COX-\( 2 \)์ ์ํ ๊ฒ์์ ๊ณ ๋ คํ ๋, iNOS์ COX-\( 2 \) ์ ์ ์ ๋ฐํ์ ์ต์ ํ๋ ๋ฌผ์ง์ด ์ผ์ฆ๋ฐ์ ์กฐ์ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ๋๋ค๊ณ ๋ณผ ์ ์๋ค. ์ต๊ทผ ๋ค์ํ ์ง๋ณ์ ์ผ์ฆ์ฑ ๊ทผ๊ฑฐ๊ฐ ๋ช
ํํด์ง์ ๋ฐ๋ผ ์ผ์ฆ์ฑ ์งํ์ ์๋ฐฉ ๋ฐ ์น๋ฃ๋ฅผ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ํ iNOS, COX-\( 2 \) ๋ฐ ์ฌ๋ฌ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ ๋ฌผ์ง์ ํ์ฑ ์ต์ ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ๋์์ง๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ณด๋ค ์์ ํ ํญ์ผ์ฆ ์์ฌ์ ๋ฐ๊ตด์ ์ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ ์งํ๋๊ณ ์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์กฐ๋ก๋๋ฌด๋ ์กฐ๋ก๋๋ฌด๊ณผ์ ์๋ก ๊ต๋ชฉ์ผ๋ก ์ ์ฃผ๋ ๋ฐ ๋จํด์ ์ฌ ๋ฑ์ ์์ํ๋ฉฐ, ์ผ๋ณธ ํผ์ ์ด๋จ, ์ค๊ตญ ๋๋จ๋ถ, ํ์ด์ ๋ฑ์ ๋ถํฌํ๋ค. ๋ํ, ํญ์ผ์ฆ ํจ๋ฅ์ด ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋ syringin๊ณผ catechin, quercetin, quercitrin ๋ฅ๊ณผ ๊ฐ์ ์๋ฆฌํ์ฑ์ฑ๋ถ์ ํจ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ์์ผ๋ฉฐ, DPPH ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ํตํ ํญ์ฐํ ํจ๋ฅ๊ณผ tyrosinase ๋ฐ elastase์ ์ต์ ํจ๋ฅ์ด ์ฐ๊ตฌ๋์๋ค. Kim ๋ฑ์ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ํ๋ฉด ์กฐ๋ก๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{NO} \) ์์ฑ ์ต์ ํจ๋ฅ์ ๋ฏธ๋ฏธํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์์ผ๋ ๋ค์ํ ์ผ์ฆ ์ธ์์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋ณด๊ณ ๋์ง ์์๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ์ฐ์
๋ฐ์ ๊ณผ ํจ๊ป ํผ๋ถ ๋ฏธ์ฉ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐํ์ฌ ํ๋ฐํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์งํ๋๊ณ ์์ผ๋, ์ ํด ์ฑ๋ถ ๋ฐ ํฉ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ๋ถ์์ฉ์ผ๋ก ์ธํ์ฌ ํํ ๋ฌผ์ง์ ๋ํ ๊ณตํฌ์ฆ์ ๊ฐ์ง ์ผ๋ฏธ์ปฌํฌ๋น์ (Chemical Phobia) ๋ฑ์ ์ ์ข
๋ฌธํ๊ฐ ํ์ฐ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋ถ์์ฉ์ด ์ ๊ฑฐ๋ ์ฒ์ฐ ์์ฌ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐ๋๊ณ ์๋ค. ๋ํ, ๋
์ฑ์ด ์๊ฑฐ๋ ํ์ฑ์ด ๋ฏธ๋ฏธํ์ฌ ๊ฐ์น๊ฐ ๋ฎ์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ๋์์ผ๋ก ์๋ฆฌํ์ฑ์ ์ฆ์ง์ํค๊ธฐ ์ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ๊ฒ ์ด๋ฃจ์ด์ง๊ณ ์๋ ๊ฐ์ด๋ฐ, ๋ฏธ์๋ฌผ ํจ์ ๋ฐ์์ ํตํด ์๋กญ๊ฒ ์ ๋ํจ์ผ๋ก์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ํ์ฑ์ ์ฆ์ง์ํค๋ biorenovation์ ํ ๋ ๋ฐ ์ ์ฑ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฑ ๋ค์ํ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์ ์ฉ๋์ด ๊ทธ ์ ์ฉ์ฑ์ ์
์ฆ ํ ๋ฐ์๋ค. ์ด์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ LPS๋ก ์๊ทน๋ RAW\( 264.7 \) ์ผ์ฆ๋ชจ๋ธ์์ ์กฐ๋ก๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ (DL)์ biorenovation์ ์ ์ฉํ ์ถ์ถ๋ฌผ (DLB)์ \( \mathrm{NO} \), iNOS, COX-2 ๋ฐ ์ ์ผ์ฆ์ฑ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์กฐ์ฌํจ์ผ๋ก์ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ฒ์ฐ ํญ์ผ์ฆ์ ๋ก์์ ํ์ฉ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ฒํ ํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> |
syncytium ํ์ฑ์ฌ๋ถ์ cytopathic ํจ๋ฅ (CPE), cytopathic units (CPU) ์ ๋์ ๋ญ๋ก ๊ด์ฐฐํด? | ํจ์ ํ์ฑ ์ต์ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์ธํฌ์ฃผ, ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๋ฐ ์์ฝ</h2><p>BHK ์ธํฌ์ฃผ(์ผ๋ณธ ์ดํํ์ฐ๊ตฌ์ ๋ถ์)๋ \( 37^{\circ} \mathrm{C} \), humidified \( \mathrm{CO}_{2} \) incubator (\( 5 \% \mathrm{CO}_{2}-95 \% \) air)๋ด์์ \( 10 \% \) calf serum (BD)์ด ํฌํจ๋ Eagle's minimum essential medium (BD, Carlsbad, CA, USA)์์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. NDV; Miyadera strain๋ ๊ตญ๋ฆฝ๋ณด๊ฑด์ฐ๊ตฌ์(National Institute of Health, Seoul, Korea)์์ ๋ถ์๋ฐ์ BHK ์ธํฌ์์ ์ฆ์ํ์๋ค. ์ฆ์๋ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค stock๋ค์ monolayer BHK ์ธํฌ์ฃผ์ plaque forming units์ assay๋ฅผ ํต ํ์ฌ ์ ์ ํ์๋ค. ๋ชจ๋ ์ํ์ ์ฌ์ฉ๋ ์์ฝ๋ค์ Sigma-Aldrich(St. Louis, MO, USA) ์ฌ๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์๋ฃ ์ถ์ถ</h2><p>์ค๋ฐฐ์ ์๋ฃ๋ ๋๊ตฌ์๋ด์ ์์นํ ํ์ฝ๋ฐฉ์ผ๋ก๋ถํฐ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ค๋ฐฐ์ ์๋ฃ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ ๊ฐ๊ฐ ๋ฉํ์ฌ (\( 100 \mathrm{~mL} \))๋ก ์์จ์์ 24์๊ฐ๋์ ์ถ์ถํ์ฌ Whatman filter paper์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ฌ๊ณผํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฉํ์ฌ์ ์ ๊ฑฐํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์ฌ๊ณผ์ก์ ๊ฐ์๋์ถ(\(40 { }^{\circ} \mathrm{C} \) )ํ์ฌ ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐ ํ ํ \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ๋ณด๊ดํ์ฌ ํ์ฑ ์ํ์ ์ฌ๋ฃ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>ํจ์ ํ์ฑ ๊ฒ์ </h2><p>์ค๋ฐฐ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ํํ๋ ๋ค์ํ glucosidase์ ๋ํ์ฌ ํจ์ ํ์ฑ ์ต์ ๋ฅผ ๋ณด์๋ค. glycosidase์ assay๋ Lee ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ์ํํ์๋ค. \( \alpha \)-glucosidase์ ๋ค๋ฅธ glucosidase์ ํ์ฑ ๋ถ์์ ์ํ์ฌ ๊ธฐ์ง๋ก p-nitrophenol (PNP) glycosides (\(1 \mathrm{mM}\))๋ฅผ ํฌํจํ๋ \( 50 \mathrm{mM} \) phosphate ์์ถฉ์ฉ์ก \(\mathrm{pH}6.7 \)์ ์กฐ์ ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์์ถฉ์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ \( 37^{\circ} \mathrm{C}\), 5 ๋ถ ํจ์ ๋ฐ์ ๊ฐ์ ํ ๊ธฐ์ง์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ \( 37^{\circ} \mathrm{C}, 10 \) ๋ถ ๊ฐ ํจ์ ๋ฐ์์ ์ํํ์๋ค. ํจ์๋ฐ์ ์ข
๋ฃ๋ 3 ๋ฐฐ vol.์ \( 1 \mathrm{M}\) \(\mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐ์์ ์ข
ํ ํ \( \mathrm{OD}_{405} \) ๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ํก๊ด๋ ๋ณํ๋ก๋ถํฐ ํจ์์ ํดํ์ฑ์ ๊ณ์ฐํ์๋ค. ํ์ฑ๋จ์์ธ 1 unit๋ ํ์ฑ์ธก์ ์กฐ๊ฑด์์, 1๋ถ ๋์ PNP \( 1.0 \mu \mathrm{mol} \) ์ ์์ฑํ๋๋ฐ ์ฌ์ฉ๋ ํจ์ ์์ผ๋ก ์ ํ์๋ค. ์ต์ ์จ ๊ณ์ฐ์ ์๋์ ๊ฐ์ด ํ์๋ค.</p>\(\text{Inhibition} (\%)=\frac{\text { Activity control }-\text { Activity sample }}{\text { Activity control } \times 100} \)<h2>Syncytium ํ์ฑ ๋ฐ cytopathic ํจ๊ณผ</h2><p>BHK cell์ ํ์ ์ธํฌ ๋จ์ผ์ธต(monolayer)์ 96 well microtiter plate์ 5 multiplicity of infection ๋๋์ NDV๋ฅผ ๊ฐ์ผ์ํจ ํํ์๋ ๋๋์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฐ ํ NDV ๊ฐ์ผ ์ธํฌ์ฃผ์์ syncytium ํ์ฑ์ฌ๋ถ์ cytopathic ํจ๋ฅ (CPE), cytopathic units (CPU) ์ ๋์ ๊ดํํ๋ฏธ๊ฒฝ์ผ๋ก ๊ด์ฐฐํ์๋ค.96 well microtiter plate์ ๋ฐฐ์๋ BHK ์ธํฌ์ฃผ์ 2๋ฐฐ ํฌ์ ๋๋๊ฐ ๋๊ฒ ํ์ฌ VSV๋ฅผ ๊ฐ์ฌ์ํจ ํ CPU ์ ๋์ ํ์๋ค. CPU๋ ์ธํฌ๋ณ๋ณํจ๊ณผ๊ฐ ์ผ์ด๋๋ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋๋ ์ด์ ์ ์ต๋ ํฌ์ ๋ฐฐ์จ๋ก ์ ํ๋ฉฐ, ์ธํฌ๋ณ๋ณํจ๊ณผ์ ๋ด์ฑ์ ๊ฐ๋ ๋ฌผ์ง์ ์ต๋ ํฌ์๋๋๋ฅผ ์๋ฏธํ๋ค.</p><h2>Cell growth</h2>96 well plates์ BHK ์ธํฌ๋ฅผ ๋ถ์ฃผํ ํ 2 ๋ฐฐ ๋๋๋ก ํฌ์๋ ์ค๋ฐฐ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ \( 37^{\circ} \mathrm{C}\), \(\mathrm{CO}_{2} \) incubator์์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. BHK ์ธํฌ ์ฑ์ฅ์ 2-(4-iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium monosodium salt (SigmaAldrich)๋ฅผ ์ด์ฉํ colorimetric ๋ฐฉ๋ฒ์ ์คํ์ฌ ๊ฒฐ์ ํ์๋ค.<h2>์ ํ๊ตฌ์์ง(Hemagglutination) ๋ฐ ํ๊ตฌํก์ฐฉ(hemadsorption)</h2><p>๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๋น๋จ๋ฐฑ์ง NDV-hemagglutinin-neuramidase (NDV-HN) ์ํฉ์ฑ์ NDV ๊ฐ์ผ ์ธํฌ์ฃผ์ ์ฉํด๋ฌผ์ ํ๊ตฌ์์ง๋จ์(hemagglutination units, HAU๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ์ฌ ์ ๋ํ์๋ค. ์ธํฌ ํ๋ฉด์์ NDV-HN ๋ฐํ์ ๋ฌด๋ ํ๊ตฌํก์ฐฉ(hemadsorption, HAD)์ ์ ๋์ผ ๋ก ๊ฒฐ์ ํ์๋ค.</p><p>6-well plates (Falcon; BD, Detroits, MI, USA)์ \(1 \mathrm{HAU}/ \mathrm{mL} \) ๋๋์ NDV๋ฅผ \( 2 \mathrm{~mL} \) ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๊ฐ์ผ์ํจ ํ 14์๊ฐ, \(37 { }^{\circ} \mathrm{C} \), humidified \(5\%\) \( \mathrm{CO}_{2}-95 \% \) air incubator์์ BHK ์ธํฌ์ Confluent ๋ฐฐ์์ ์ํํ์๋ค. ๋ฐฐ์ํ ๋ฐฐ์ง๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ ํ ๋๊ฐ๋ ์์ผ์(chilled saline)์ ์๋ \( 1 \%(\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ๋ญ ์ ํ๊ตฌ (chicken red blood) ์ธํฌ \( 2 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ์ well์ ๋ถ์ฃผ ํ ํ \( 4{ }^{\circ} \mathrm{C}\), 30๋ถ๊ฐ ์ ์นํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ฐ๋์ฉ ๊ฐ๊ฒน๊ฒ ํ๋ค์ด ์ฃผ์๋ค. ํก์ฐฉ๋์ง ์์ ํ๊ตฌ์ธํฌ๋ฅผ ์ ๊ฑฐ ํ ํ, cell layer๋ฅผ ๋๊ฐํ ์์ผ์ \( 2 \mathrm{~mL} \)๋ก 3ํ ์ป์ด์ฃผ์๋ค. ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ๋ \( 1 \% \) ์๋ชจ๋์๊ฐ ํฌํจ๋ ๋ฉธ๊ท ์๋ก swollen ํ \( \mathrm{OD}_{550} \) ๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ์ ๋ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ๋ถ์</h2><p>๋ชจ๋ ์คํ์ 3ํ ์ด์ ๋ฐ๋ณตํ์ฌ ์ค์ํ์์ผ๋ฉฐ, ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ SAS (Statistical Analysis System, SAS Inc., Cary, NC, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ one-way ANOVA ๋ถ์์ ์ค์ํ์์ผ๋ฉฐ, Duncan์ ๋ค๋ฒ์ ๊ฒ์ (Ducan's multiple range test)์ ํตํ์ฌ \( 5 \% \) ์์ค์์ ์๋ฃ๊ฐ์ ์ ์์ ์ธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๊ฒ์ฆํ์๋ค.</p> |
์ฌ๋๋ค์ ์์๋น๊ทผ์ด ์ผ๋ง๋ ์ฒจ๊ฐ๋ ํธ๋ฉ์ ์ข์ํ ๊น? | 7.5\( \% \) | <h2>๋ฌผ์ฑ ์ธก์ </h2><p>์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ ๋ฌผ์ฑ ์ธก์ ๊ฐ์ Table 4์ ๋ํ๋ด์๊ณ ๊ฒฝ๋, ๊ฒ์ฑ, ์นํ์ฑ์ Fig. 7์ ๋ํ๋ด์๋ค. 7์ผ๊ฐ ๊ฒฝ๋๋ฅผ ๋ณด์์ ๋ ๋์กฐ๊ตฐ, ์คํ๊ตฐ ๋ชจ๋ 91~118๊ฐ ์ฌ์ด๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๊ณ ๋ณ๋ค๋ฅธ ์ฐจ์ด๋ ๋ณด์ด์ง ์์์ผ๋ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐํ ๊ตฐ์ ๊ฒฝ๋๊ฐ ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ ์ฐฉ์ฑ์์๋ ์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก์ด ๋ง์ด ์ฒจ๊ฐํ ์๋ก ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ณด์๊ณ , ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ์ธํ๊ณ ์๊ฐ์ด ์ง๋จ์ ๋ฐ๋ผ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ํ์ฑ๊ณผ ๊ฒฐํฉ์ฑ์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ์คํ๊ตฐ ๋ชจ๋ ๋ณ๋ค๋ฅธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๊ณ ๊ฒ์ฑ์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ์ธํ ์คํ๊ตฐ์์ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๋ค. ์นํ์ฑ์ ์์๋น๊ทผ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๊ณ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ 3.7\( \% \) ์คํ๊ตฐ์ ๋ณ๋ค๋ฅธ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๋ค. ์คํ๊ฒฐ๊ณผ ์๊ฐ์ ๋ฐ๋ฅธ ์์๋น๊ทผ ํธ๋ฉ์ ํ์ง์ ๋ณํ๋ ์์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค. Yu ๋ฑ์ ๋ณต๋ถ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ ํ์ง์ ํน์ฑ์ ์ฐ๊ตฌํ์๋๋ฐ, ํธ๋ฉ์ ๋ฌผ์ฑ ์ธก์ ์์ ์ ค๋ผํด๊ณผ ์คํ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ ์๋ ์ ํ์ ๊ฒฝ๋, ๊ฒ์ฑ, ์นํ์ฑ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ๋ฎ๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๊ณ , ๊ด๋ฅํ๊ฐ๋ฅผ ํตํ์ฌ ๊ฒฝ๋, ๊ฒ์ฑ, ์นํ์ฑ์ด ๋ฎ์๋ ์ ํ์ด ์ ์ฒด์ ์ธ ๊ธฐํธ๋์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ๊ฐ์ ๋ํ๋๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค.</p><h2>ํธ๋ฉ ๊ด๋ฅ ํ๊ฐ</h2><p>์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๊ฐ๊ฐ 10, 20, 30\( \mathrm{~mL} \) ๋ก ๋ฌ๋ฆฌํ ํธ๋ฉ์ ๋ํด ์, ํ๋ฏธ, ๋ง, ์กฐ์ง๊ฐ, ์ ์ฒด์ ์ ํธ๋์ ๋ํ ๊ด๋ฅ์ ํน์ฑ์ 5์ ์ฒ๋๋ก ๊ธฐํธ๋ ์กฐ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Table 5 ์ ๊ฐ๋ค. ์(Color)์ ๋์กฐ๊ตฐ 3.75 ์ , ์์๋น๊ทผ 7.5 \( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ด 3.75์ ์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๊ฐ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋๊ณ ์์๋น๊ทผ 11.4\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ 3.65์ ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ํฅ(Flavor)์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ 3.35์ , ์์๋น๊ทผ 7.5\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ 3.4 ์ , ์์๋น๊ทผ 11.4\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ 3.4 ์ ์ ๋ฐ์๋ค. ์์๋น๊ทผ 3.7\( \% \) ์ฒจ๊ฐ ํธ๋ฉ์ ์๊ณผ ํฅ์์ ๋ฎ์ ์ ํธ๋๋ฅผ ๋ณด์๋ค.</p><p>๋ง(Taste)์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ด 2.95 ์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ์ ์๋ฅผ ๋ํ๋๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก ๋ง์ ๋ํ ์ ์๊ฐ 3.35์ , 3.55์ , 3.6์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๊ณ , ์กฐ์ง๊ฐ(Texture)์ ๋์กฐ๊ตฐ์ 3.35์ ์ด๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก 3.6์ , 3.55์ , 3.45์ ์ผ๋ก ๋ฎ์์ง๋ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋์๋ค.</p><p>๋ง(Taste)์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ด 2.95 ์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ฅ ๋ฎ์ ์ ์๋ฅผ ๋ํ๋๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก ๋ง์ ๋ํ ์ ์๊ฐ 3.35์ , 3.55์ , 3.6์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์๊ณ , ์กฐ์ง๊ฐ(Texture)์ ๋์กฐ๊ตฐ์ 3.35์ ์ด๊ณ ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ๋์์ง์๋ก 3.6์ , 3.55์ , 3.45์ ์ผ๋ก ๋ฎ์์ง๋ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๋์๋ค. ์ ์ฒด์ ์ธ ์ ํธ๋(overall preference)๋ฅผ ์ดํด๋ณด๋ฉด ์์๋น๊ทผ 7.5 \( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ 3.5 ์ ์ ๋ฐ์์ผ๋ฉฐ ์์๋น๊ทผ 11.4\( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ, ๋์กฐ๊ตฐ, ์์๋น๊ทผ 3.7\( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ ์์ผ๋ก 3.35์ , 3.25์ , 2.85์ ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๊ฒฝ๋ ๊ฐ์ด ๋ฎ๊ณ ๊ฒ์ฑ๊ณผ ์นํ์ฑ์ด ๋ฎ์๋ ์์๋น๊ทผ ๋์ถ์ก7.5 \( \% \) ํธ๋ฉ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ ๊ธฐํธ๋ ๊ฐ์ ๋ณด์๋ค. Park ๋ฑ์ ๋ณต์ญ์ ๊ณผ์ฆ์ ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ ํ์ง ํน์ฑ์ ์ฐ๊ตฌํ์๋๋ฐ, ๋ณต์ญ์์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ํธ๋ฉ์ \( \mathrm{pH} \) ๊ฐ ๋ฎ์์ ธ ํธ๋ฉ์ ๊ฒฝ๋์ ํ์ฑ์ด ๊ฐ์ํ๊ณ ์ ์ฐฉ์ฑ๊ณผ ์นํ์ฑ, ์์ง์ฑ์ ์ฆ๊ฐํ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๊ณ , ๋ณต์ญ์ ๊ณผ์ฆ์ด ๊ฐ์ฅ ๋ง์ด ๋ค์ด๊ฐ ํธ๋ฉ์์ ๊ธฐํธ๋ ๊ฐ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ์์๋น๊ทผ์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๋ฌ๋ฆฌํ ํธ๋ฉ๋ง๋ค ์ ํธ๋ ์ ์๊ฐ ํฐ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์ด์ง๋ ์์ง๋ง ์์๋น๊ทผ์ 7.5\( \% \) ์ฒจ๊ฐํ ํธ๋ฉ์ด ์๋น์๋ค์๊ฒ ๋์ ์ ํธ๋๋ฅผ ๋ํ๋ผ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p> |
์ง์ค ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๋
ธ๋์ด๋ฆฐ์ฐ๊ฝ ์ค ๋ฎ์ ๋๋์์ ๋ ๋์ MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ์? | ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ cell viability์ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋๋ ๋ฒ์ ๊ฒฐ์ ์ ์ํด | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>CCD-986sk๋ด์์์ ์ธํฌ์์กด์จ ํ๊ฐ</h2><p>๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ cell viability์ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ ๋๋ ๋ฒ์ ๊ฒฐ์ ์ ์ํด MTT assay๋ฅผ ์ํํ์๋ค. CCD-\(986\)sk ์ธํฌ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ \( 5,10,25,50,75 \), \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฐ๊ณผ, \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ดํ์ ๋๋์์ ์ธํฌ์์กด์จ์ด \( 90 \% \)์ด์์ผ๋ก ๋ํ๋ด์ด CCD-986sk ์ธํฌ์ ์์กด์จ์ ํฐ ์ํฅ์ ๋ํ๋ด์ง ์์์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 1).</p><h2>ํ์ฑ์ฐ์์ข
(ROS) ์ต์ ํจ๊ณผ</h2><p>ํผ๋ถ์ UVB์ ๋
ธ์ถ์ ํ์ฑ์ฐ์์ข
(ROS) ์์ฑ์ ์ผ๊ธฐ์ํค๋ฉฐ(Fisher ๋ฑ, 1997; Yoon ๋ฑ, 2003; Han ๋ฑ, 2013), ์ด๋ ์์ฑ๋๋ ROS๋ ํผ๋ถ์ธํฌ ๋ด์์์ ์ฌ๋ฌ ์ ํธ ์ ๋ฌ ์ฒด๊ณ๋ฅผ ํตํด ํผ๋ถ ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ ์ฌ์ธ์๋ค์ ํ์ฑํ ์ํจ๋ค(Lee ๋ฑ, 2012). ์ด๋ ๊ด๋
ธํ๋ฅผ ๋ฐฉ์ดํ๊ณ ์์ธ์ ์ผ๋ก๋ถํฐ ๋ณดํธ์ ๋ฅผ ๊ฐ๋ฐํ๋๋ฐ ์์ด์ ROS์ ์ญํ ์ด ์ค์ํจ์ ์์ฌํ์ฌ ์ค๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ROS ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ์ฌ CCD-986sk ์ธํฌ์์์ UVB ์กฐ์ฌ์ ๋ฐ๋ฅธ ROS ์์ฑ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, UVB ๋ก ์ ๋๋ ๊ทธ๋ฃน์์๋ ์ ์๊ตฐ์ ๋นํด ROS ์์ฑ๋ฅ ์ด ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ROS ์์ฑ์ ๊ฐ์์ํค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๊ทธ ์ค ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ถํ๋ฌผ์ด \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \( 50 \% \) ์ด์์ ROS ๋ฐํ์ ์ต์ ์์ผฐ์ผ๋ฉฐ Park ๋ฑ (2014)์ ๋ง์ฑ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์ ROS ์์ฑ์ ์ต์ ์ํค๋ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ธ ๊ฒ์ ๋นํด ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ถํ๋ฌผ์ด ๋ ์ฐ์ํ ํจ๋ฅ์ ๋ํ๋์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 2).</p><h2>CCD-986sk ์ธํฌ๋ด pro-collagen ํฉ์ฑ ๋ฐ MMP-1 ๋ฐํ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ</h2><p>ํผ๋ถ ๋
ธํ์ ์ค์ํ ์์์ฆ์์ธ ์ฃผ๋ฆ, ํผ๋ถํ๋ ฅ๊ฐ์์ ์์ธ์ผ๋ก๋ ์งํผ ๋ด ์ธํฌ ์ธ ๊ธฐ์ง ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๊ฐ์๋ฅผ ๋ค ์ ์๋ค. ์์ธ์ ์ ์๊ทน์ ๋ฐ์ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์๋ collagenase, elastase, gelatinase๋ฑ์ MMPs์ ์ํ์ฌ ๋ถํด๋์ด ์ฝ๋ผ๊ฒ ์ฌ์ ์ ๊ธธ์ด์ ๋ถํฌ์ ์์์ ์ด๋ํ๊ฒ ๋๋ฉฐ ํผ๋ถ ์ธํฌ์ ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ์ฝ๋ผ๊ฒ๋ค์ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์ ํ๋ก์ฝ๋ผ๊ฒ์ด๋ผ๋ ์ ๊ตฌ๋ฌผ์ง์ ํํ๋ก ํฉ์ฑ๋๋ค(Chung 2003; Kim ๋ฑ, 2015). ์์ธ์ ์ ์ํด ์ด๋ฌํ ํ๋ก์ฝ๋ผ๊ฒ์ ์์ด ๊ฐ์ํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ฝ๋ผ๊ฒ ์์ด ๊ฐ์ํ๊ฒ ๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํ๋กํฉํ์ด๋์ MMP-1์ ์์ ์ธก์ ํจ์ผ๋ก์จ ์ธํฌ๋ด์์์ ์ฝ๋ผ๊ฒ ํฉ์ฑ ์ ๋๋ฅผ ํ์
ํ ์ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํ๋ก์ฝ๋ผ๊ฒ์ ํฉ์ฑ์ ์ด์ง ๋ฐ MMP-1์ ๋ฐํ์ ์ต์ ์ํฌ ์ ์๋ ์์ฌ๋ ํ๋ ฅ ์๋ ํผ๋ถ๋ฅผ ๋ง๋ค์ด ์ฃผ๋ ํ์ฅํ ์๋ฃ๋ก์ ์ฌ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ๋๋ค๊ณ ์๊ฐ๋๋ฉฐ ์ด์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ pro-collagen ํฉ์ฑ ๋ฐ MMP-1 ๋ฐํ ์คํ์ ์ํํ์ ๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 5,10,25 \) \( \mu \mathrm{g} /\mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \( 6,16,28 \% \)์ pro-collagen ํฉ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, EA ๋ฐ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ \( 5 \mu \mathrm{g}/\mathrm{mL} \) ๋๋์์๋ ๋ฎ์ ํฉ์ฑ์จ์ ๋ํ๋ด์์ง๋ง \( 10,25 \mu \mathrm{g} /\mathrm{mL} \) ๋๋์์๋ ๋์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ํนํ EA ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ต๊ณ ๋๋์ธ \( 25 \mu \mathrm{g} /\mathrm{mL} \)์ ๋๋์์๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด \( 40 \% \) ์ด์์ ๋์ ์์ฑ์จ์ ๋ํ๋ด์ด, Hwang ๋ฑ (2015)์ ๋ณด๊ณ ์์ ์์ฃผ๋ฌ๊ฐ๋น ๋ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ 25 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \( 28 \% \) pro-collagen์ ํฉ์ฑ๋ฅ์ ๋ํ๋ธ ๊ฒ๊ณผ ๋น๊ตํ์์ ๋ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ pro-collagen์ ํ์ฑ์ด ์ฐ์ํจ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 3). ๋ํ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ MMP-1 ํ์ฑ ์ ํด๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, UVB๋ก ๋ฐํ๋ MMP-1์ ๋ชจ๋ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ ํด๋ฅผ ์์ผฐ์ง๋ง, EA ๋ถํ๋ฌผ์ด \( 5,10,25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 10,28,46 \% \)์ ์ ํด์จ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \( \mathrm{EA} \) ๋ถํ๋ฌผ๊ณผ ๊ฐ์ ๋๋๊ตฌ๊ฐ์์ ๊ฐ๊ฐ \( 7,15,32 \%\)๋ก ๋ฐํ์ ์ ํด ํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ Lee์ Lee (2013)์ ๋ณด๊ณ ๋ ์ฒญ๋ฏธ๋๋ฉ๊ตด ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์์ \( 25.1 \% \)์ ์ ํด ํ์ฑ๋ณด๋ค๋ ๋ฐ์ด๋ ํ์ฑ์์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Fig. 4). ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก ๋ณด์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์์ UV-B๋ก ์ธํ procollagen ๊ฐ์๋ฅผ ์ฆ๊ฐ ์์ผ์ฃผ๋ฉฐ, ์ฆ๊ฐ๋ MMP-1 ๋ฐํ์์ ์ ํด์์ผ ์ค์ผ๋ก์จ ์ฃผ๋ฆ ์์ฑ์ ์๋ฐฉํ ์ ์๋ ์์ฌ์์ ํ์ธํ์๋ค.</p><h2>CCD-986sk ์ธํฌ๋ด pro-collagen, MMP-1์ protein ๋ฐ mRNA ๋ฐํ ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ</h2><p>ELISA๋ฅผ ํตํด pro-collagen์ ํฉ์ฑ๋ฅ๊ณผ MMP-1์ ๋ฐํ ์ ํด๋ฅผ ์ ๋์ ์ผ๋ก ํ์ธ ํ์์ผ๋ฉฐ, CCD-986sk ์ธํฌ์์ ๋จ๋ฐฑ์ง๊ณผ RNA์ ์ถ์ถํ์ฌ protein ๋ฐ mRNA level์์์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ์ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ westem blot๊ณผ RT-PCR์ ์ด์ฉํ์ฌ ํ์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. UVB๋ฅผ ์กฐ์ฌํ ๊ทธ๋ฃน์์๋ pro-collagen ๋ฐํ์ด UVB๋ฅผ ์กฐ์ฌํ์ง ์์ ๊ทธ๋ฃน์ ๋นํด \( 40 \% \) ์ด์ ๋ฐํ์ด ์ ํด ๋์์ผ๋ฉฐ, MMP-1์ ๋ฐํ์ UVB ์กฐ์ฌํ ๊ทธ๋ฃน์ด ์กฐ์ฌ ํ์ง ์์ ๊ทธ๋ฃน์ ๋นํด 4๋ฐฐ ์ด์ ๋ฐํ๋ฅ ์ด ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ์ฌ๊ธฐ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ์ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฐ๊ณผ pro-collagen protein ๋ฐํ ์ฆ๊ฐ์์๋ ๋ฎ์ ํ์ฑ์ด ํ์ธ ๋์์ง๋ง, MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋ ๋ถํ๋ฌผ ๋ชจ๋ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ ํด์ํค๋ ๊ฒ์ด ํ์ธ ๋์๋ค. EA ๋ถํ๋ฌผ์ \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}\)์ ๋๋์์ \(38 \% \)์ ์ ํด์จ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ๊ฐ์ ๋๋์ธ \(25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 35\% \)์ ์ ํด์จ์ด ๋ํ๋์ ํ์ธ ํ์๋ค(Fig. 4). mRNA ๋ฐํ์์๋ EA์ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก pro-collagen ๋ฐํ์ด ์ฆ๊ฐ ํ์์ผ๋ฉฐ, EA ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ต๊ณ ๋๋์ธ \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 33 \% \)์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๊ณ ,\( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \(53\% \)์ ์ฐ์ํ procollagen ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. MMP-1์ ์ ํด ํ์ฑ ๋ํ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์์ ์ฐ์ํ ์ ํด ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์ \(40\% \) ์ด์ MMP-1 ๋ฐํ์ ๊ฐ์์ํค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค(Fig.5). Lee ๋ฑ (2013)์ ์๋ฌผ์ ํ ์ง์ค ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \(50\% \) MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ด ๋ํ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ์๋๋ฐ, ๋
ธ๋์ด๋ฆฐ์ฐ๊ฝ์ \(10\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ \(40 \% \)์ด์์ MMP-1 ์ ํด ํ์ฑ์ ํ์ธํ์ฌ ์ ๋๋์์๋ ๋์ ํ์ฑ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ฐ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ CCD-986sk ์ธํฌ๋ด์์ ROS์ ๊ฐ์ ๋
ธํ ์ธ์์ ์์ฑ ์ต์ ์ ๋์์ ํผ๋ถ์ ์ฃผ์ ๊ตฌ์ฑ์ฑ๋ถ์ธ ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๋ถํด ์ต์ ํจ๋ฅ์ ํตํด ํญ๋
ธํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ๊ฐ์น๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ฉฐ, ์์ผ๋ก ์์ ์์ค์์ ์์ ์ฑ ๋ฐ ํจ๋ฅ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์งํ ํ ์์ ์ด๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์๋ก์ด ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ํ์ฅํ ์์ฌ ๊ฐ๋ฐ์ ์ํด ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฌ์ ์์ธํฌ๋ด์์์ ํญ๋
ธํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธ ํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ CCD-986sk ์ธํฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ๋
ธํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, EA๋ถํ๋ฌผ์ด UVB์ ์ํด ์ฆ๊ฐ๋ ROS ๋ฐํ์ \( 50 \% \) ์ด์ ์ต์ ํ์์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ pro-collagen mRNA ๋ฐํ์ \(25\mu\mathrm{g} / \mathrm{mL}\)์์ \(50 \% \) ์ด์ ๋ฐํ์ ์ฆ๊ฐ์์ผฐ๋ค. EA ๋ถํ๋ฌผ๊ณผ \(\mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ ๋ชจ๋ MMP-1 protein๊ณผ mRNA๋ฐํ์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ ํด์์ผฐ์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \(10 \mu\mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์์ \( 40 \% \) ์ด์์ MMP-1 mRNA ๋ฐํ ์ต์ ์จ์ ํ์ธํ์๋ค. ์ด๋ ๋
ธํ ์ธ์์ธ ํ์ฑ์ฐ์์ข
์ ์์ฑ ์ต์ ์ ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ๋ฐ์ ํ ๊ด๋ จ์ด ์๋ ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๋ถํด์ต์ ๋ฅผ ํตํด ํญ์ฐํ ๋ฐ ์ฃผ๋ฆ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋์์ผ๋ฉฐ ํนํ EA์ \( \mathrm{BuOH}\) ๋ถํ๋ฌผ์ ๋์ ํจ๋ฅ์ด ํ์ธ๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋
ธ๋์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ EA ๋ฐ \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ํ์ฅํ ๋ถ์ผ์์ ํญ๋
ธํ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ๊ฐ์น๊ฐ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p> |
mulberrofuran E๋ฅผ ๋ฌด์์์ ์ถ์ถํ๋๊ฐ? | ์ค๋ | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์ค๋(Morus alba L.)๋ฅผ ์ค์จ์์ \( 80 \% \) \(\mathrm{MeOH} \) ์์ฉ์ก์ผ๋ก ์ถ์ถํ๊ณ ์ด ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(\mathrm{EtOAc} \) , \( n \)-butyl alcohol, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๋ฌผ ๋ถํ์ผ๋ก ๋๋์๋ค. \(\mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ์ ๋ํ์ฌ \( \mathrm{SiO}_{2} \) ๋ฐ ODS column chromatography๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ค์ํ์ฌ 2์ข
์ Diels-Alder ๋ถ๊ฐํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ, ์ ์ ํ์๋ค. NMR, IR ๋ฐ ESI/MS data๋ฅผ ํด์ํ์ฌ, ํํฉ๋ฌผ 1๊ณผ 2๋ฅผ mulberrofuran E์ chalcomoracin ์ผ๋ก ๊ฐ๊ฐ ๊ตฌ์กฐ๋์ ํ์๋ค. ๋ ํํฉ๋ฌผ ๋ชจ๋ ์ค๋๋ก๋ถํฐ๋ ์ด๋ฒ ์คํ์์ ์ฒ์์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌ๋์๋ค.</p> |
์ ํ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ๊ณผ ๋์์์ ๋ช ์ข
์ด์์ ํํฉ๋ฌผ๋ค์ ๋ถ๋ฆฌํ๋์? | 1950๋
๋ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ฒ์ฐ๋ฌผํํ ์ฐ๊ตฌ๋ถ์ผ์์ ํ์ฑ์ ๋๋ถํ๋ฒ(bioassay-guided fractionation)๊ณผ ์ค์ผ์ผ ์
๋ถ์ทจ๋ฐฉ๋ฒ์ ํจ์จ์ ์ธ ๊ธฐ์ ์ด๋ฉฐ, 20์ธ๊ธฐ ์ด๋ฐ ๋ถ์ ์ฐ๊ตฌ์, ์ฝ๋ฆฌํ์ ๋ฐ ๋
์ฑ ์ฐ๊ตฌ ํ์๋ค์ด ๋๋ฆฌ ์ฌ์ฉํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ด์ง๋ง ์ค์ ๋ก 1950๋
๋๋ถํฐ ๊ณต์์ ์ผ๋ก ๊ฐ๋
ํ ๋์ด ํ์ฌ ์ ๋ถ ๋ฐ ์ฐ๊ตฌ ๊ธฐ๊ด์ ๋น๋กฏํ ํ๊ณ์ ์ ์ธ๊ณ ์คํ์ค์์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์์ฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์น๋ฃ์ ๋ฅผ ๋ฐ๊ฒฌํ๋๋ฐ ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์๋ค. ๋ํ ์ต๊ทผ์๋ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์์ฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ ์ฝ๊ฐ๋ฐ์์ ์๋ฃ์์ฌ(BRM, Botanical Raw Material)์ ์๋ฃ์์ฝํ(DS, Drug Substance) ํ์คํ(CMC, Chemistry, Manufacturing, Control)์ ์ฒ์๋ถํฐ ์ต์ข
๋จ๊ณ๊น์ง ํ์ฉ๋๋ ์ฐ๊ตฌ๋ฐฉ๋ฒ๋ค ์ค ํ๋์ด๋ค. ์ฒ์ฐ๋ฌผ์์ฌ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ํ์ฑ์ ์คํฌ๋ฆฌ๋ ํ๊ธฐ ์ํ ๋ถ์๋ฒ์์ ์ํ๋๋ ๋ค์์ 5 ๋จ๊ณ ์ํฌํ๋ก์ฐ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋๋ค. 1) ์ฉ๋งค๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ถ์์๋ฃ๋ก๋ถํฐ ๋์ฌ ๋ฌผ์ง์ ์ถ์ถํ๊ณ , 2) ์ถ์ถ๋ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋ํผ๋ฒ์ ์ํ ๋ถํํ, 3) ๊ฐ ๋ถํ๋ฌผ๋ค์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๊ฒ์ ์คํฌ๋ฆฌ๋, 4) ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ถํ์ผ๋ก๋ถํฐ ์ ์ ๋ ๋์ฌ์ฒด์ ๋ถ๋ฆฌ, 5) ๋ถ๋ฆฌ๋ ์์ ๋จ์ผ์ฑ๋ถ๋ค์ ๊ตฌ์กฐ๋ถ์ ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ํจ๋ฅ ํ๊ฐ์ ๋ฉ์ปค๋์ฆ ๊ท๋ช
์ผ๋ก ์งํํ๋ค. ๋๋๋ก ํ์ฑ์ ๋๋ถํ๋ฒ๊ณผ ์ค์ผ์ผ ์
์ ์ด์ฉํ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง๋ค์ ๋ถ๋ฆฌํ๋ ๋์ ๋ช ๊ฐ์ง ์คํจ์ ํจ์ ์ด ์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ด์ ๋ ์๋ฆฌํ์ฑ ํํฉ๋ฌผ์ด ๋ฐ๋ณต์ ์ธ ์นผ๋ผ์ ํตํด ๋ถ๋ฆฌ ์ค์ ๋ถํด๋๊ฑฐ๋ ์๋ฆฌํ์ฑ ํํฉ๋ฌผ์ด ๋งค์ฐ ๋ฎ์ ๋๋๋ก ์กด์ฌํ์ฌ ํจ์จ์ ์ผ๋ก ๋ถ๋ฆฌ ํ ์ ์๊ณ , ๋ค์ํ ํํฉ๋ฌผ๋ค๊ณผ ์๋ฆฌํ์ฑ ์ฌ์ด์์ ๋ณตํฉ์ ์ธ ์๋์ง ํจ๊ณผ(MCMT, multi-component multi-target)์ ์ํด ์ผ์ด๋ ์ ์๋ค. ๋ถ๋ฆฌ ํ ์ ์๊ณ , ๋ค์ํ ํํฉ๋ฌผ๋ค๊ณผ ์๋ฆฌํ์ฑ ์ฌ์ด์์ ๋ณตํฉ์ ์ธ ์๋์ง ํจ๊ณผ(MCMT, multi-component multi-target)์ ์ํด ์ผ์ด๋ ์ ์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์ฝ์ฌ์ธ ์ ์ฉ์ ํ์ ๋ฟ๋ฆฌ์ธ ํฉ๊ธ (Scutellaria baicalensis Georgi)์ ์ฃผ๋ก ๋์์์ ์ผ๋์ ์์ํ๊ณ ํ๋ฐฉ์์ ๋ํ ๋ฑ์ ์ฝ์ผ๋ก ์ฐ๋ฉฐ ํด์ด, ์ด๋จ, ํญ๊ท , ํญ์ง๊ท , ํ์๊ฐํ, ํ๋น์์น ํจ๋ฅ ๋ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋ ์ค์ํ ์ฝ์ฌ์ด๋ค. ํจ๋ฅ์ ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ผ๋ก flavone ๊ณ์ด์ baicalin, wogonoside์ ๊ทธ๋ค์ aglycone์ธ baicalein wogonin๊ฐ ์ฃผ์ฑ๋ถ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๊ณ ๊ณผํ์ ์ธ ํจ๋ฅ ๊ท๋ช
์ฐ๊ตฌ๋ก anti-cancer, hepatoprotection, antibacterial, antivirall, antioxidant, anticonvulsant, neuroprotective ๊ฒฐ๊ณผ๋ค์ด ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ์ ํ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ๊ณผ ๋์(๊ณจ๋ฌด๊ฝ์, Scutellaria genus)์์ 200์ข
์ด์์ ๋ง์ ํํฉ๋ฌผ๋ค์ ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก ํฉ๊ธ์ ํ์ฑ ์ ๋ ๋ถํ ๋ฌผ๋ก๋ถํฐ ์์ญ๋ฐ๋ฆฌ๊ทธ๋จ ์์ค์ ๋ฏธ๋์ฑ๋ถ๋ค์ ์์๋ถ๋ฆฌํ๊ธฐ ์ํด ๋ถ์๋ถํฐ ๋ถ์ทจ๊น์ง ๋ฐฉ๋ฒ์ ํ์ค์ ์ฐจ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ํ๋ฆฝํ๊ณ ๋ถ์์ ํตํด ์งํ์ฑ๋ถ๋ค์ ์ถ์ ํ๊ณ ๋์๊ฐ ๋ถ๋ฆฌ ๋ฐ ๊ตฌ์กฐ ๋์ ์ ์๋ฃํ์๋ค. ๋ํ, ๊ฐ๊ฐ ์ ์กฐ๋ ํ์ค ์ ํจ๋ถํ๋ฌผ๋ค์ ๋ํด ์งํ์ฑ๋ถ 8์ข
์ ๋ถ๊ดํ์ ์ ๋ณด๋ฅผ ํตํด ์ค์ผ์ผ ์
์์ฐ ๋ฐฐ์น๋ณ ๋๋ฑ์ฑ์ ์
์ฆํ์ฌ ์ ์กฐ๋ฒ์ ๋ํ ์ ํจ์ฑ์ ๊ฒ์ฆํ์๋ค.</p> |
์ด์ฐจํญ์ฒด์ ๋ฐ์์ํค๊ณ ์ธ์ฒ ํ ์ด๋ค ์ฉ์ก์ ์ด์ฉํ์ฌ ํ๋ฆ์ ๊ฐ๊ดํ์ฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ ์ ์๋์? | 48์๊ฐ | <p>๋จ๋ฐฑ์ง ์ถ์ถ์ ๋ง์ฐฌ๊ฐ์ง๋ก ํ์ง์ ํ 48์๊ฐ ๊ฒฝ๊ณผ ํ RiPA buffer (50\( \mathrm{mM} \) Tris-HCl of \( \mathrm{pH} \) 8.1, 150\( \mathrm{mM} \mathrm{NaCl} \), 1\( \% \mathrm{v} / \mathrm{v} \) NP-40, 0.5\( \% \) \(\mathrm{w} / \mathrm{v} \) sodium deoxycholate, 0.1\( \% \mathrm{w} / \mathrm{v} \) sodium dodecyl sulphate and protease inhibitor)๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 30 ๋ถ๊ฐ ๋ฐฉ์นํ ํ scraper๋ก ์ธํฌ๋ฅผ ๊ฑท์๋ค. ์ฉํด๋ ์ธํฌ๋ฅผ ์ด์ํ ๋ถํดํ ํ ์์ฌ ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. Bicinchoninic acid assay๋ฅผ ํตํด ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ ๋ํ๊ณ SDS-polyacrylamide gels ์์ ํฌ๊ธฐ ๋ณ๋ก ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ polyvinylidene difluoride membrane ์ ์ฎ๊ธด ๋ค์ ์ผ์ฐจ ํญ์ฒด๋ฅผ 4\( ^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( \mathrm{O} / \mathrm{N} \) (overnight)์ผ๋ก ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. TBS-Tween ์ฉ์ก์ผ๋ก ์ธ์ฒ ํ ์ด์ฐจํญ์ฒด์ ์์จ์์ 1์๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ ์๊ณผ ๋์ผํ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก 1์๊ฐ ๋์ ์ธ์ฒํ์๋ค. ECL detection kit (Biosesang, Seongnam, Korea) ์ฉ์ก๊ณผ ๋ฐ์์์ผ ํ๋ฆ์ ๊ฐ๊ดํ์ฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค.</p><p>HBx ๋ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค ๊ฐ์ผ ์ด๊ธฐ ๋จ๊ณ์์ ์ ์ ์ ๋ณต์ ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ ๋ถ๋ง ์๋๋ผ B ํ ๊ฐ์ผ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค์ ๊ด๋ จ๋ ์ง๋ณ๊ณผ hepatocellular carcinoma ๋ฐ๋ณ์ ํต์ฌ์ ์ธ ์ญํ ์ ํ๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ B ํ ๊ฐ์ผ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค์์ ๋ฐํ๋๋ HBx ๋จ๋ฐฑ์ง์ด ๊ฐ์ฌ์ ํ ๋ฐ๋ณ์ ์ด๋ค ์ญํ ์ ํ๋์ง ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ์ฌ HBx ๋ฅผ ๋ฐํํ์กฐ๋ก ์ธํฌ๋ฅผ ํ์ง ์ ํํ์ฌ ์คํ์ ์ํํ์๋ค. ๋จผ์ vector 10\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฅผ ํ์ง ์งํํ ๋์กฐ๊ตฐ(vector) ๊ณผ HBx 10\( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฅผ ํ์ง ์ ํํ ์คํ๊ตฐ HBx ์์ RNA ๋ฅผ ์ถ์ถํ์ฌ RT-PCR์ ํตํด HBx mRNA ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค. ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ ๋์กฐ๊ตฐ์์๋ HBx mRNA๊ฐ ๋ฐํ๋์ง ์์๊ณ ์คํ๊ตฐ์์ ๋ฐํ๋ ๊ฒ์ ํตํด ํ์ง์งํ์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ก์์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. 1A). Bํ ๊ฐ์ผ ๋ฐ์ด๋ฌ์ค์ ๊ฐ์ผ๋์ด ๊ฐ์ฌ์ ํ๊ฐ ์งํ๋ ํ์์๊ฒ์ fibrotic marker์ธ vimentin๊ณผ fibronectin์ด ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์๋ค. ์ด ํ์์ด HBV์ HBx ์ ์ํ ๊ฒ์ธ์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด HBx ๋ฅผ ํ์ง์งํ์ํจ ํ vimentin๊ณผ fibronectin์ mRNA ๋ฐ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค (Fig. 1B, C). Vimentin์ type intermediate filament ๋จ๋ฐฑ์ง๋ก ์ธํฌ์ด๋(cell migration), ๋ถ์ฐฉ(adhesion) ๋ฑ์ ์ ๋ํ๋ฉฐ ๊ฐ์ฌ์ ํ์์ HSC ๊ฐ ํ์ฑํ๊ฐ ๋์ด ์๋ ๋์ ๋ฐํ๋๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. Fibronectin์ ๊ฐ์ฌ์ ํ ๊ณผ์ ์์ ์ค์ํ ์ธํฌ์ธ๊ธฐ์ง ์ค ํ๋์ด๋ค. ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ, HBx ๋ฅผ ํ์ง์ ํ์ํจ ์คํ๊ตฐ์์ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ vimentin์ mRNA์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ชจ๋ ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์์ผ๋ฉฐ, fibronectin ๋ํ ์ฆ๊ฐ๋ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์๋ค. ์ด ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํด HBx ๊ฐ ํ์ง์ ํ๋ Huh7 ์ธํฌ์์ ๊ฐ์ฌ์ ํ๊ฐ ์งํ๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค.</p><p>HBx ์ ์ํ ์ฌ์ ํ๊ฐ ์ด๋ ํ ๊ณผ์ ์ ๊ฑฐ์ณ ์ด๋ฃจ์ด์ง๋์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ ์คํ์ ์ํํ์๋ค. ์ํผ-๊ฐ์ฝ์ ํ(Epithelial-to-mesenchymal transition, EMT)์ ์ํผ ์ธํฌ(epithelial cell)๊ฐ ์นจ์ค๋ฅ๋ ฅ๊ณผ ์ ์ด๋ฅ๋ ฅ์ ๊ฐ์ง๋ ์ธํฌ๋ก ๋ฐ๋๋ ๊ณผ์ ์ด๋ค. EMT ๊ฐ ๊ฐ์กฐ์ง์์ ๋ฐ์์ด ๋ ๋๋ ๊ฐ์ ์์์ด๋ ์ผ์ฆ์ด ๋ฐ์ํ์์ ๊ฒฝ์ฐ์ด๋ค. ๊ฐ์ธํฌ๊ฐ EMT๋ฅผ ๋ํด ๊ฐ์ฝ์ธํฌ๋ก ๋ถํ๋ ํ ๋ค์ ๊ฐ์ฝ์ํผ ์งํ์ ๊ฑฐ์น๋ฉด์ ์ฌ์์ด ์ผ์ด๋ ์์์ด ํ๋ณต๋๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๊ทธ ์์์ด๋ ์ผ์ฆ์ด ๊ณผ๋ํ ๊ฒฝ์ฐ ๊ธฐ์ง ์ฌํ์ฑ์ด ์ ๋ฐ๋์ด ๊ฐ์ฌ์ ํ๊ฐ ๋ฐ์ํ๊ฒ ๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๊ฐ์ฌ์ ํ์ ์์ธ์ด ๋๋ EMT์ ํต์ฌ์กฐ์ ์์ธ ์ง์ฌ์ธ์ snail (snai1)๊ณผ slug (snai2)์ mRNA์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. 2). ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ slug๋ mRNA์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ชจ๋ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ ๊ฒ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์์ผ๋ฉฐ snail์ mRNA ์์ค์์๋ ์คํ๊ตฐ์์ ์ ์์ ์ฐจ์ด๊ฐ ์๊ฒ ์ฆ๊ฐํ์์ง๋ง ๋จ๋ฐฑ์ง ์์ค์์๋ ์ ์์ ์ฐจ์ด ์์ด ๋ฏธ์ธํ ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ๋ณด์๋ค. Slug์ ์ํ vimentin ์ ์กฐ์ ์ ์ฌ๋ฌ ๋
ผ๋ฌธ ์ํด ๋ณด๊ณ ๋์ด์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ HBx ์ ์ํ vimentin์ ์ฆ๊ฐ๋ snail๋ณด๋ค๋ slug๋ฅผ ํตํด ์กฐ์ ๋ ๊ฒ์ด๋ผ ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ๋ค์ด ROS๊ฐ ์ธํฌ ์ฆ์, ๋ถํ, ์ด๋๊ณผ ๊ฐ์ ๋ค์ํ ์ธํฌ ๊ณผ์ ์ ๊ด์ฌํ๋ค๋ ๋ด์ฉ์ ๋
ผ๋ฌธ์ด ๋ง์ด ๋ฐํ๋๊ณ ์๋ค. ROS ๊ฐ ์ฌ์ ํ์ ์์์์ ์ด๋ ํ ์ญํ ์ ํ๋์ง๋ ์ ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, EMT์ ๊ด๋ จ์ด ์๋ค๋ ์ฌ์ค ๋ํ ๊ณ์ํด์ ๋ฐํ์ง๊ณ ์๋ค. NOX๋ ๋ค์ํ ์๊ทน์ ์ํด ROS๋ฅผ ๋ฐ์ํ๋ ํจ์๋ก, ๊ฐ ๋ด์์ NOX system์ ์ํด ๋ฐ์๋๋ ์ฐํ์คํธ๋ ์ค๋ ์ฌ๋ฌ ๊ฐ์ง ๊ฐ์งํ๊ณผ ๊ฐ์ฌ์ ํ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. NOX4๋ ROS ๋ฅผ ์์ฑํ๊ณ ๊ทผ์ฌ์ ์์ธํฌ(myofibroblast)์ ํ์ฑํ๋ฅผ ์กฐ์ ํ์ฌ ํ์ ์ ์ฅ์ ์ฌ์ ํ์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ค. ์ด์ snail๊ณผ slug์ ์ฆ๊ฐ๊ฐ ROS์ ๊ด๋ จ๋์ด ์๋์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด NAPDH oxidase์ ๋ฐํ์ ํ์ธํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ HBx ๊ฐ ํ์ง์ ํ๋ ์คํ๊ตฐ์์ NOX4 ๊ฐ mRNA ์ ๋จ๋ฐฑ์ง ์์ค ๋ชจ๋์์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋นํด ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๊ณ ๋ ๋ค๋ฅธ NADPH oxidase์ธ NOX2 ๋ NOX4 ์๋ ๋ฌ๋ฆฌ HBx ์ ์ํ ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ๋ณด์ด์ง ์์๋ค(Fig. 3).</p> |
๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง์ง๊ณผ์ฐํ ์ต์ ํ์ฑ์ linoleic acid์ ์ฐํ์ ์ํด ์์ฑ๋๋ ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ์ ์ธก์ ๋ฒ์ผ๋ก ํ์ธํ์๋์? | ๊ทธ๋ฆฐ๋ด์ธ๋ด | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์คํ ์ฌ๋ฃ</h2><p>๋์ถฉ์ ๋ถ๋ง์ ๊ทธ๋ฆฐ๋ด์ธ๋ด(Jindo, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Folin-Ciocalteu reagent, gallic acid, \(2\),\(2\)-diphenyl-\(1\)-picryl-hydrazyl (DPPH), ferric ferricyanide, \( \alpha \)-tocopherol ๋ฐ indole-\(3\)-carbinol์ Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) ์ ํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ธ์ฒด ๋น์์ธํฌํ์์ธํฌ(human non-small cell lung cancer cell, A549), ๊ฒฐ์ฅ์์ธํฌ(human colon cancer cell, SNU-C4), ์๊ถ๊ฒฝ๋ถ์์ธํฌ(human cervical cancer cell, HeLa) ๋ฐ ์ธ์ฒด ๋ฐฐ์ ํ ์ํผ์ธํฌ(human embryonic lung epithelial cell, L132)๋ American Type Culture Collection (Manassa, VA, USA)์ ์ธํฌ์ฃผ๋ฅผ ๋ฐฐ์ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. RPMI-1640, fetal bovine serum (FBS), penicillin-streptomycin ๋ฐ trypsin-EDTA๋ HyClone (Logan, UT, USA)์ ์ ํ์, Cell Counting Kit-8 (CCK-8)์ Dojindo (Kumamoto, Japan)์ ์ ํ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ ์ ์กฐ</h2><p>๋์ถฉ์ ๋ถ๋ง์ \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(4\)์๊ฐ ๊ฑด์กฐํ ํ ์ฌ๋ถ์ํ์ฌ \(100\)-\(300\)\( \mu \mathrm{m} \) ํฌ๊ธฐ์ ์
์๋ง์ ์๋ฃ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋์ถฉ์ ๋ถ๋ง์ \(10\)๋ฐฐ \( (\mathrm{w} / \mathrm{w}) \)์ ์์ธํค์ ๋ฃ๊ณ ํญ์จ์งํ์กฐ(Jeio Tech, Daejeon, Korea)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์์จ์์ \(2\)์๊ฐ ๋์ ์ถ์ถํ์๋ค. ์์จ์์ ์์ฌ ๋ถ๋ฆฌ \( (2,000 \times g,~ 5 \) ๋ถ \( ) \)ํ์ฌ ์์ง์ก์ ์ป๊ณ \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ์์ธํค์ ์ฆ๋ฐ์์ผ ๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ์๋ค.</p><h2>์ด ํ๋์ฑ ํํฉ๋ฌผ ํจ๋</h2><p>๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด ํ๋์ฑ ํํฉ๋ฌผ ํจ๋์ Folin-Ciocalteu reagent๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ Folin-Ciocalteu ์์ฝ์ ๋ถ๊ฐํ์ฌ ์์จ์์ \(3\)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์์ํค๊ณ , \( 10 \% ~\mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} \) ์ฉ์ก์ ๋ฃ๊ณ ์์จ์์ \(1\)์๊ฐ ์ ์น์ํจ ํ \( 725 \mathrm{~nm} \)์์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ด ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋์ \( \mathrm{mg} \) gallic acid equivalent (GAE)/\(\mathrm{g}\)-์ถ์ถ๋ฌผ๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><h2>In vitro ํญ์ ํ์ฑ</h2><p>๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ธํฌ ์ฆ์์ต์ ํ์ฑ์ CCK-8์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ํ์ฌ์ ์ฉํดํ ๋ค ๋ฐฐ์ง์ ํฌ์ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , ์ด๋ ์ํ์ฌ์ ์ต์ข
๋๋๊ฐ \( 0.1 \% \)\( (\mathrm{v} / \mathrm{v}) \)์ด ์ด๊ณผ๋์ง ์๋๋ก ํ์๋ค. ์์ธํฌ(A549, SNU-C4, HeLa) ์ ์ ์์ธํฌ(L132)๋ \( 5 \% \) FBS์ penicillin-streptomycin์ด ํฌํจ๋ RPMI- 1640 ๋ฐฐ์ง์์ \( 5 \%\ ~\mathrm{CO}_{2}, ~37^{\circ} \mathrm{C} \)์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก \(24\)์๊ฐ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ดํ ๋ฐฐ์์ก์ ์ ์ ํ ๋ฐฐ์ง๋ก ๊ต์ฒดํ ๋ค ํฌ์ํ ๋ ์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ๊ณ ๋์ผ ์กฐ๊ฑด์์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์์ฑ๋์กฐ๊ตฐ์ธ indol-3-carbinol์ ๋๋๋ณ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ์์ธํฌ ์ฆ์์ต์ ํ์ฑ์ ๋น๊ตํ์๋ค. \(24\)์๊ฐ ํ ์คํ๊ตฐ๊ณผ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋ฐฐ์์ก์ ์ ๊ฑฐํ ํ ๊ฐ๊ฐ CCK-8 ์ฉ์ก๊ณผ serum-free RPMI-1640์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ microplate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, \( \mathrm{CA}, \mathrm{USA}) \)๋ก \( 450 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์์ธํฌ ์ฆ์์ต์ ํ์ฑ(\(\%\))์ (๋์กฐ๊ตฐ์ ํก๊ด๋-์คํ๊ตฐ์ ํก๊ด๋)/๋์กฐ๊ตฐ์ ํก๊ด๋ \( \times 100 \)์ผ๋ก ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>In vitro ํญ์ฐํ ํ์ฑ</h2><p>๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ๋ฆฌ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ DPPH๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋๋๋ณ๋ก ํฌ์ํ ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 0.15 \) \( \mathrm{mM}\) DPPH ์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ์์จ์์ \(30\)๋ถ ๋ฐ์์ํจ ํ \(525\)\( \mathrm{nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ ๋ฆฌ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ\( (\%) \)์ \( ( \) ๋ฌด์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ ํก๊ด๋ - ์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ ํก๊ด๋ \( ) \)/๋ฌด์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ ํก๊ด๋ \( \times 100 \)์ผ๋ก ๊ณ์ฐํ์๊ณ , ์์ฑ๋์กฐ๊ตฐ์ผ๋ก \( \alpha \)-tocopherol์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><p>๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ์ ferric ferricyanide๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋๋๋ณ๋ก ํฌ์ํ ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 1 \% \) \( \mathrm{K}_{3} \mathrm{Fe}(\mathrm{CN})_{6} \)๊ณผ \( 0.2 \mathrm{M} \) ์ธ์ฐ ์์ถฉ์ฉ์ก \( \left(\mathrm{pH}\right. \) 6.6)์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(20\) ๋ถ๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ \( 10 \% \) trichloroacetic acid ์ฉ์ก์ ๊ฐํ๊ณ \( 2,000 \times \mathrm{g} \)์์ \(5\)๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. ์์ง์ก์ ์ป์ด \( 0.1 \% \) \( \mathrm{FeCl}_{3} \) ์ฉ์ก์ ๊ฐํ ํ \( 700 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ํ์๋ ฅ์ ํก๊ด๋ ๊ฐ์ผ๋ก ๋ํ๋ด์๊ณ , ์์ฑ๋์กฐ๊ตฐ์ผ๋ก \( \alpha \)-tocopherol์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><p>๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง์ง๊ณผ์ฐํ ์ต์ ํ์ฑ์ linoleic acid์ ์ฐํ์ ์ํด ์์ฑ๋๋ ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ์ ์ธก์ ๋ฒ์ผ๋ก ํ์ธํ์๋ค. ๋๋๋ณ๋ก ํฌ์ํ ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 2.52 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) linoleic acid์ \( 50 \mathrm{mM} \) ์ธ์ฐ ์์ถฉ์ก\( (\mathrm{pH} 7.0) 4.0 \mathrm{~mL} \)์ ํผํฉํ์ฌ \( 45^{\circ} \mathrm{C} \)์์ 48์๊ฐ ๋์ ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์ฑ์ทจํ์ฌ \( 30 \% \) ammonium thiocyanate์ ํจ๊ป \( 75 \% \) ethanol ์ฉ์ก์ ํผํฉํ ํ ์ค์จ์์ 5๋ถ๊ฐ ์ ์น์ํค๊ณ \( 20 \mathrm{mM} \) ferrous chloride๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ \( 500\mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ง์ง๊ณผ์ฐํ ์ ๋๋ ํก๊ด๋ ๊ฐ์ผ๋ก ๋ํ๋ด์๊ณ , ์์ฑ๋์กฐ๊ตฐ์ผ๋ก \( \alpha \)-tocopherol์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>๋์ถฉ์ ์์ธํค ์ถ๋ฃฐ๋ฌผ์ ์ฒ๋ฆฌํ ์๋ฃ์ ๋ํด t-test๋ฅผ ์ค์ํ์ฌ ์ ์์ฑ์ ๊ฒ์ฆํ์๋ค. ์ธ ๋ฒ์ ๋ฐ๋ณต์คํ์ ํตํด ์ป์ด์ง ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ๊ท \( \pm \)ํ์คํธ์ฐจ๋ก ๋ํ๋ด์๊ณ , \( p<0.05 \)์ธ ๊ฒฝ์ฐ ํต๊ณ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ ํ์๋ค.</p> |
์ํดํ๊ฐ์์ ํ์ฉ๋๊ณ ์๋ ๊ฒ์ ์๋ฅ๋์ฝ ๋ชจ๋ํฐ๋ง ์๋ฃ์ ์ด๋ค ์๋ฃ์ผ? | Azoxystrobin, chlorpyrifos, imazalil ๋ฐ thiabendazole ๋ฑ | <p>๊ฐ ๊ฒ์ฌ๊ตญ๋ณ๋ก ๋ฐ๋๋์์ ๊ฒ์ถ๋ ๋์ฝ์ ์ข
๋ฅ๋ Table 2์ ๊ฐ๋ค. EU์์ ๊ฐ์ฅ ๋ง์ 85์ข
๋์ฝ์ด ๊ฒ์ถ๋์๊ณ , ์ผ๋ณธ, ๋ฏธ๊ตญ, ์๊ตญ ๋ฐ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ๋ ๊ฐ๊ฐ 57,23,18 ๋ฐ 8์ข
๋์ฝ์ด ๊ฒ์ถ๋์๋ค. Azoxystrobin, bifenthrin ๋ฐ chlorpyrifos๋ ๋ชจ๋ ๊ตญ๊ฐ์ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์์ ๊ฒ์ถ๋์๋ค. Boscalid, buprofezin, fenpropimorph, imazalil, iprodione, myclobutanil ๋ฐ thiabendazole ๋์ฝ์ ๊ฐ๊ตญ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์์ ๋น๋ฒํ ๊ฒ์ถ๋๋ ์ฑ๋ถ์ด์๋ค. ์ด๋ ๋ฐ ์์ด๋ ๊ธฐํ ์ง์ญ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋๋ ๋ฐ๋๋๋ ๊ฐ๊ตญ์์ ์ฃผ๋ก ์์
์ ํตํด ์ ํต๋๋ ๋์ฐ๋ฌผ์ด๋ฏ๋ก ์ ์ฅ ๋ฐ ์ ํต๊ณผ์ ์ค ๋ณํด์ถฉ์ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํด post-harvest ๋์ฝ์ ์ฒ๋ฆฌํ๊ฒ ๋๋ค. Azoxystrobin, chlorpyrifos, imazalil ๋ฐ thiabendazole ๋ฑ์ด post-harvest ๋์ฝ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์์ผ๋ฏ๋ก, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์์ ๊ฒ์ถ ๋น๋๊ฐ ๋์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋์๋ค. ์ ๋ฑ์ ์์ฆ ์๋ฃ ์ค๋ ์ง ๋ฐ ๊ฐ๊ทค์์ post-harvest ๋์ฝ์ธ imazalil ๋ฐ chlorpyrifos์ ๊ฒ์ถ์ ํ์ธํ์๋ค. ํฉ ๋ฑ๋ ์์
๊ณผ์ผ์ ์ดํฌ๋ ์ํ ํ ์ฒ๋ฆฌ ๋์ฝ์ ๊ฒฝ์์ ๋ณํ์์ chlorpyrifos๋ ์ฒ๋ฆฌ ์งํ ๊ณผ์ผ ์ ์ฒด์์ \( 0.4 \)-\( 2.2 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \), ๊ณผ์ก์์ \(\mathrm{ND}- 0.32 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)์ผ๋ก ์กฐ์ฌ ๋์๊ณ , 4์ฃผ ํ์๋ ๊ณผ์ผ ์ ์ฒด์์ \( 0.3 \)-\( 0.9 \mathrm{mg}/ \mathrm{kg} \), ๊ณผ์ก์์ \(\mathrm{ND}- 0.02 \mathrm{mg}/ \mathrm{kg} \)์ผ๋ก ์กฐ์ฌ ๋์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค.</p><p>์๋ฅ๋์ฝ ๋ชจ๋ํฐ๋ง ์๋ฃ๋ ์ผ์ผ์ถ์ ์ญ์ทจ๋(Estimated Daily Intake, EDI) ํ๊ฐ์ ํ์ฉ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ์ํดํ๊ฐ ์ ๊ป์ง์งธ ๋์ฝ์ด ๊ฒ์ถ๋ ์๋ฃ๋ฅผ ํ์ฉํ๊ณ ์๋ค. ํ๊ตญ์ 2015๋
๋ชจ๋ํฐ๋ง์์ ๋ฐ๋๋ ๊ป์ง์ ๋ฏธํฌํจํ ์๋ฅ๋์ฝ ๊ฒ์ฌ๋ฅผ ์ค์ ํ์๊ณ ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ, ๊ป์ง์ ์ ๊ฑฐํ ํ ๋์ฝ ๊ฒ์ถ๋ฅ ์ \( 23.8 \% \)๋ก ๊ป์ง์งธ ๋ถ์ํ ๊ฒ์ถ๋ฅ \( 57.1 \% \)๋ณด๋ค ๊ฐ์ ๋์๋ค. ์ ๋ฑ๋ ๊ณผํผ ์ ๊ฑฐ ์ ํ์ ๋ฐ๋ฅธ ๊ฐ๊ทค๋ฅ์ ๋ํ์ฌ ํ๊ท \( 91.6 \% \)์ ์๋ฅ๋์ฝ ์ ๊ฑฐ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๋ํ, ์กฐ ๋ฑ์ ์ํด ๊ฐ์๋ถ ๋ฐ ๋น๊ฐ์๋ถ์ ๋ํ ๋ถ๋ฆฌ ์คํ์ด ์ค์ ๋์๊ณ , ์๋ฅ๋ ๋๋ถ๋ถ์ด ๊ณผํผ์ ์์กดํจ์ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๋ฐ๋๋๋ ๊ป์ง์ ์ ๊ฑฐํ ํ ์ญ์ทจํ๊ฒ๋๋ฏ๋ก ์ํดํ๊ฐ์์ ๊ป์ง ์ ๊ฑฐ ๊ณ์(Peeling Factor)๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ ํ์๋ ์๋ค๊ณ ํ๋จ๋๋ค.</p><p>๊ฐ๊ตญ์ ์๋ฅ๋์ฝ ๋ชจ๋ํฐ๋ง ๊ฒฐ๊ณผ์์ ๊ฒ์ถ๋ ๋์ฝ์ ์ฐ๋๋ณ๋ก ๊ฒ์ฌ ๊ฑด์์ ๋ํ ๊ฒ์ถ ๊ฑด์๋ก ๋ช
์ํ์ฌ Table 3์ ๋ํ๋ด์๋ค. 2007 ๋
๋ถํฐ 2018๋
๊น์ง ๋ฐ๋๋์ ๋ํ ๋์ฝ์ ๊ฒ์ถ๋ฅ ์ \( 3.36 \)-\( 7.58 \% \) ๋ฒ์์์ผ๋ฉฐ, ์ด 12๋
๊ฐ ๊ฒ์ถ๋ฅ ํ๊ท ์ \( 4.58 \% \)์๋ค. 2016-2018๋
์ ๊ฒ์ถ๋ฅ ์ \( 6.33 \)-\( 7.58 \% \)๋ก 12๋
๊ฐ ํ๊ท ๊ฒ์ถ๋ฅ ๋ณด๋ค ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋๋ฐ, ์ด ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ถ์ ํฉ ์๋ฃ ๋ฐ ๋ชจ๋ํฐ๋ง ๋ณด๊ณ ์๋ฅผ ๋ฐํํ ์ผ๋ถ ๊ตญ๊ฐ์ ๊ฒ์ถ ์๋ฃ๋ง์ด ์์ง๋์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๊ฐ๊ตญ์์ ์ค์ํ ๋ฐ๋๋์ ์๋ฅ๋์ฝ ๋ชจ๋ํฐ๋ง์์ ๊ฒ์ถ๋ ์ด 109์ข
๋์ฝ ์ค 2007-2018๋
๋์ ๋
๋๋ณ ๊ฒ์ถ๋ ๋์ฝ ์๋ 9-55์ข
์ด์๋ค. 9๊ฐ ๋
๋ ์ด์ ๊ฒ์ถ๋ ๋์ฝ์ azoxystrobin, bifenthrin, buprofezin, carbendazim, chlorfenapyr, chlorpyrifos, clothianidin, cypermethrin, deltamethrin, fenpropimorph, imazalil, imidacloprid, iprodione, myclobutanil, thiabendazole ๋ฐ thiamethoxam 16์ข
์ด์๋ค. ์ด ์ค azoxystrobin ๋ฐ bifenthrin์ ๋งค๋
๊ฒ์ถ๋์๋ค.</p><p>Azoxystrobin์ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์ ์ ์ ์ ๋ฌ ์ฒด๊ณ ์ค ๋ณตํฉ์ฒด โ
ข์ ํด๋
ผ์ ๊ฒฐํฉํ์ฌ ์ ์ ์ ๋ฌ์ ์ ํดํ์ฌ ATP ์์ฑ์ ๋ฐฉํดํ๋ ๊ธฐ์์ ๊ฐ์ง ์ฌ์ฉ ์คํํธ๋ผ์ด ๋์ ์ด๊ท ์ ์ด๋ค. ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์์๋ ๋ฒผ์ ๋์ด๋ณ, ๋ฉธ๊ตฌ, ํฐ์๋ง๋ฆ๋ณ ๋ฐ ์ดํ๋ณ๋๋ฐฉ ๋ฑ์ ๋ค์ํ ๋ณํด์ถฉ ๋ฐฉ์ ์ ์ฌ์ฉํ๋๋ก ๋ฑ๋ก๋์ด ์์ผ๋ฉฐ, ๊ณ ์ถ, ์์ถ ๋ฐ ์๋ฐ ๋ฑ์ ํฐ๊ฐ๋ฃจ๋ณ, ์ธ์ผ์ ์ ๋ฌด๋ฌ๋ณ๊ณผ ํ์ ๋ณ ์๋ฐฉ ๋ฐ ์น๋ฃ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋์์ ๋ณด์ธ๋ค. ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์๋ ๊ฐ์ง, ๊ฐ๊ทค ๋ฐ ๋ฐ๋๋ ๋ฑ 99์ข
์ ์ํ์ ์ด ๋์ฝ์ ๋ํ ์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค์ด ์ค์ ๋์๋ค.</p><p>Bifenthrin์ ์ ์ด ๋ฐ ์๋
์ผ๋ก ๋ํธ๋ฅจ ์ฑ๋์ ๊ฐ์ญํ์ฌ ์ ๊ฒฝ๊ณ์ ์ํญ์ ์ฃผ๋ ํผ๋ ์ค๋ก์ด๋๊ณ ์ด์ถฉ์ ๋ก \( \mathrm{K_{ow}} \)๊ฐ์ 6.0 ์ด์์ผ๋ก ๋ฌผ์ ์ ๋
น์ง ์๋๋ค. ์ง๋ง๋ฌผ, ์์ , ๋
ธ๋ฆฐ์ฌ, ํ๋ฐค๋๋ฐฉ, ๋ชฉํ๋ฐ๋๋ช
๋๋ฐฉ, ๋ฐฐ์ถ์ข๋๋ฐฉ ๋ฐ ์๋ง์ด๋๋ฐฉ ๋ฑ์ ๋ฐฉ์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ์๋ฐ, ์ฌ๊ณผ, ์์, ์๊ธ์น, ์ค์ด, ์ ์ฑ ๋ฐ ์ฐธ๊นจ ๋ฑ์ ์ฌ์ฉํ๋๋ก bifenthrin์ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์ ๋ฑ๋ก๋์ด ์๋ค.</p><p>ํฌ๋ฃจํฌ๊ฐ์ฐ ๋ฐ๋๋์์ ๊ฒ์ถ๋ endosulfan์ 2015๋
EU ๋ชจ๋ํฐ๋ง์์๋ง ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ํ ์์ ์๋ฅ๋ endosulfan์ด ์๋ฌผ๋ก ํก์์ดํ ๋์ด ๋ํ๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. Endosulfan์ ๊ณผ๊ฑฐ ๋ฎ์ ๋๋์์๋ ํ์ํ ์ด์ถฉ๋ ฅ์ ๋ํ๋ด์ด ์์ ์ ๋ด๋ฐฐ๋๋ฐฉ ๋ฐฉ์ ์ ํํ ์ฌ์ฉ๋์๋ ์ ๊ธฐ์ผ์๊ณ ์ด์ถฉ์ ์์ผ๋ ๋์ ์๋ฌผ๋์ถ์ฑ๊ณผ ๋
์ฑ, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์ฅ๊ฑฐ๋ฆฌ ์ด๋์ฑ์ผ๋ก ์ธํด ์๋ฅ์ฑ์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ฌผ์ง (Persistent Organic Pollutants, POPs)๋ก ๊ท์ ๋์ด ๊ตญ์ ์ ์ผ๋ก ์์ฐ ๋ฐ ์ฌ์ฉ์ด ๊ธ์ง๋์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์ธ๋, ์ค๊ตญ ๋ฐ ์ฌ๋ฌ ๊ฐ๋ฐ๋์๊ตญ์์ ์ฌ์ ํ ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ํ ์, ํด์ ์ธต, ๋ฏผ๋ฌผ, ํด์, ๋๊ธฐ ๋ฑ ๋ค์ํ ํ๊ฒฝ์์ ์ต๊ทผ๊น์ง ๊ฒ์ถ๋๊ณ ์๋ค. ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ๋ 2011๋
์ endosulfan์ ๋์ฝ ๋ฑ๋ก์ ์ทจ์ํ์๊ณ , 2015๋
์ POPs์ผ๋ก ๋ฑ๋กํ์ฌ endosulfan์ ๋ํ ๊ด๋ฆฌ๋ฅผ ๊ฐํํ์๋ค.</p> |
Bacillus ๊ฐ ์ฌ๋ฌ ์ฐ์
์ ์ฌ์ฉ๋๋ ์ด์ ๋? | ์์ฅ์๋๊ฐ ๊ต์ฅํ ๋น ๋ฅด๊ณ , ๋ฐฐ์์ด ์ฝ๊ณ , ์ ์ ์ ์กฐ์์ด ๊ฐ๋ฅํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ | <h1>์๋ก </h1><p>์ฒ์ ๋ค์ํ ์๋ฌผ๋ค์ด ์์ํ๋ ๊ณต๊ฐ์ผ๋ก ๋ณต์กํ ์ํ๊ณ๋ฅผ ์ด๋ฃจ๊ณ ์๋ค. ์ฒ์ด ๊ฑด์ ํ๊ฒ ์ ์ง๋๊ธฐ ์ํด์๋ ์ฐ๋ฆผ์ํ๊ณ ๋ด๋ก ์์ง์ ์์์์ด ์ง์์ ์ผ๋ก ๊ณต๊ธ ๋์ด์ผ ํ๋ค(Waldrop ๋ฑ, 2004; Ayres ๋ฑ, 2009; Yang ๋ฑ, 2014). ์ฒ์ ์ ์
๋๋ ๋๋ถ๋ถ์ ์์์์ ๊ดํฉ์ฑ์ ์ํ์ฌ ์์ฑ๋๋ ๋์ฝ, ๋์ง ๋๋ ๊ณ ์ฌํ ์๋ฌผ๊ณผ ๊ฐ์ ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค์ด๋ค(Potter๊ณผ Kloster 1997). ์ด๋ฌํ ์ ๊ธฐ๋ฌผ์ ๋๋ถ๋ถ์ \( \beta\)-1,4-glucan์ ๋ถ์ฉ์ฑ ์ฌ์ ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ์
๋ฃฐ๋ก์ค์ค์ xylan, mannans, glucans์ ํฌํจํ๋ ๋น์
๋ฃฐ๋ก์ค์ค ๋ค๋น๋ฅ์ธ ํค๋ฏธ์
๋ฃฐ๋ก์ค์ค๊ฐ ๋ฆฌ๊ทธ๋๊ณผ ๊ฐ๋ ฅํ ๋ณตํฉ์ฒด๋ฅผ ํ์ฑํ๊ณ ์๋ค(Urbanovรก ๋ฑ, 2015). ํผ์์๋ฌผ(angiosperm) ๋ชฉ์ง๋ถ์ ๊ฒฝ์ฐ \(42-50\%\)์ ์
๋ฃฐ๋ก์ค์ค, \(25-30\%\)์ ํค๋ฏธ์
๋ฃฐ๋ก์ค์ค, \(20-35 \% \) ์ ๋ฆฌ๊ทธ๋๊ณผ ์ฝ \( 25-30 \% \) ์ ์์ฉ์ก์ผ๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ ธ ์๋ค (Whistler๊ณผ Richards 1970; Kumar ๋ฑ, 2008). ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค๋ ์ฒ ํ ์์ ํน์ฑ๊ณผ ๋น์ฅ๋ ๊ฐ๋๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ฒ ์ํ๊ณ์ ๊ท ํ์ ์กฐ์ ํ๊ธฐ ์ํ ์ค์ํ ํ์์์ผ๋ก ์ ๊ณต๋๋ค(Potter๊ณผ Klooster 1997; Waldrop ๋ฑ, 2004; Ayres ๋ฑ, 2009). ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค๊ฐ ์ฒ ์ํ๊ณ๋ฅผ ์ด๋ฃจ๊ณ ์๋ ์๋ฌผ์ ์์์์ผ๋ก ์ด์ฉ๋๊ธฐ ์ํด์๋ ๋ค๋น๋ฅํํ์ ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค๊ฐ ๋จ๋น๋ฅ๋ก ํํ๋ก ์ ํ์ด ๋์ด์ผ ํ๋ค. ๋ค์ํ ์ข
๋ฅ์ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ํด ์ฒด์ธ๋ก ๋ถ๋น๋๋ ํด๋ฆฌํ๋ ์ฐํํจ์, cellulase, xylanase, \( \beta \)-glucosidase์ ๊ฐ์ ๋ค์ํ ์ข
๋ฅ์ ํ์ํ๋ฌผ ๋ถํดํจ์ ๋ฑ์ ์ํด์ ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค๋ D-glucose, D-galactose, D-mannose, L-arabinose, D-ribose, D-xylose์ ๊ฐ์ ๋จ๋น๋ฅ์ ํ๋๋ฆญ ํํฉ๋ฌผ๋ก ๊ฐ์๋ถํด ๋๋ค(Kumar ๋ฑ, 2008; Urbanovรก ๋ฑ, 2015).</p><p>๊ทธ๋ ์์ฑ๊ท ์ธ Clostridium์, Cellulomonas์, Thermomonospora์๊ณผ ์ง๊ท ๋ฅ์ธ Trichderma์, Aspergillus์์ด ์์ฐํ๋ ํ์ํ๋ฌผ ๋ถํดํจ์๋ค์ ์ค๋๋ ํํ์ฐ์
, ์ํ์ฐ์
, ๋๋ฌผ์ฌ๋ฃ๊ฐ๊ณต ๋ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ถ์ผ์ ์ด์ฉ๋๋ค(Kuhad ๋ฑ, 1999; Min ๋ฑ, 2002; Sun๊ณผ Cheong, 2002; Sukumaran ๋ฑ, 2005; Kuhad ๋ฑ, 2011). ์ต๊ทผ ๋ค์ด DNA๋ถ์๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ฌ์ ํตํ์ฌ ๋ง์ ์ข
๋ฅ์ ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค ๋ถํด ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ง์ด ์งํ๋๊ณ ์๋ค. ์ฐ๋ฆผํ ์์ ๋์์ผ๋ก \( 16 \mathrm{S} \) rRNA ์ ์ ์ ์ผ๊ธฐ์์ด๋ถ์๋ฒ์ผ๋ก ์ข
์ ๋์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ Bacillus์๊ณผ Paenibacillus์์ ๊ด๋ จ๋ ๊ท ์ฃผ๊ฐ ๋ง์ ๋ถ๋ถ์ ์ฐจ์งํ๊ณ ์์๋ค(Wilson 2011; Yang ๋ฑ, 2014). ํนํ Bacillus์ ๊ท ์ฃผ๋ ์ฐ๋ฆผํ ์์ ์ ์
๋๋ ์ ๊ธฐ๋ฌผ์ ๋ถํด์ ๊ด์ฌ ํ์ฌ ์ฒ์ ๊ฑด๊ฐํ ์ํํ๊ฒฝ ์ ์ง์ ํฐ ์ญํ ์ ๋ด๋นํ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ํ์์ํ์ ์์ด ๋งค์ฐ ์ค์ํ ๋ถ๋ถ์ ๋ด๋นํ๊ณ ์๋ค (Demain ๋ฑ, 2005; Yang ๋ฑ, 2014).</p><p>์ฐ๋ฆผ์ ์์ํ๋ ๋๋ถ๋ถ์ ์๋ช
์ฒด๋ค์ ๋ค์ํ ์ข
๋ฅ์ ๋ชฉ์ฌ ๋ถํ๊ท ๋ฐ ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ํธ์์ฉ์ ์ํด ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค๋ก๋ถํฐ ๊ณต๊ธ๋๋ ์์๋ถ์ผ๋ก ์ด์๊ฐ๋ค. ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค ๋ถํด์ ์ค์ํ ์ญํ๋ ํ๋ ๋ฏธ์๋ฌผ๋ค์ ๋ํ ์ข
์ด์ฐ์
, ์ํ ์ฐ์
, ๋ฐ์ด์ค์ํ์ฌ ์์ฐ ๋ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ๊ฐ์ข
์ฐ์
์ ์ด์ฉ ๊ฐ๋ฅํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ฒ์ ์ฐ์ํ ์ฌ์ ์ ๋ถํด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ์ป๊ธฐ ์ํ ์ข์ ์์ ์ค์ ํ๋์ด๋ค. ํนํ, Bacillus ์ข
์ ๋ค์ํ ์ข
๋ฅ์ ๋ชฉ์ง๋ฐ์ด์ค๋งค์ค ๋ถํด ํจ์๋ค์ ์์ฐํ๊ณ ๊ณฐํก์ด๋ ํจ๋ชจ์ ๋นํด์ ์์ฅ์๋๊ฐ ๊ต์ฅํ ๋น ๋ฅด๊ณ , ๋ฐฐ์์ด ์ฝ๊ณ , ์ ์ ์ ์กฐ์์ด ๊ฐ๋ฅํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ฐ์
์ ์ผ๋ก ๋ง์ด ์ฌ์ฉ๋๋ค(Tjalsma ๋ฑ, 2004; Khandeparker ๋ฑ, 2011; Zang๊ณผ Zhang 2011). ํ์ฌ ์์
์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์๋ ์ฌ์ ์ ๋ถํด ํจ์์ ์ฝ \( 50 \% \) ์ด์์ Bacillus ์ข
์ผ๋ก๋ถํฐ ๊ธฐ์ํ๋ค (Schallmey ๋ฑ, 2004).</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฐ๋ฆผํ ์์ผ๋ก๋ถํฐ ์ฐ ๋ด์ฑ xylanase ๋ฐํ
๋ฆฌ์ Bacillus sp. GJY๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌ ยท ๋์ ํ๊ณ , Bacillus sp. GJY๊ฐ ์์ฐํ๋ CMCase์ xylanase์ ํ์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ํน์ฑ๋ค์ ๊ตฌ๋ช
ํ์๋ค.</p> |
elicitation ๊ธฐ๋ฒ์ ์ ๋ชฉํ์ฌ ์ป์ ์ ์๋ ํจ๊ณผ๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ์? | ์ฃผ๋ฆ ์์ฑ, ํผ์ง์์ฑ ๊ฐ์๋ก ์ธํ ๊ฑด์ฑ ํผ๋ถํ, ๊ฒฝํผ ์๋ถ ์์ค ์ฆ๊ฐ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ๋ฉ๋ผ๋ ์์ฑ์ ์ํ ์ผ๊ตด์ ๋ช
๋๊ฐ ๋ฎ์์ง๊ณ ๊ธฐ๋ฏธ์ ๊ฒ๋ฒ์ฏ ๋ฑ์ด ์์ฑ๋๋ ๋ฑ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ธ๊ฐ์ ํผ๋ถ๋ ๋
ธํ๋์ด๊ฐ์ ๋ฐ๋ผ ๊ธฐ๋ฅ์ , ๊ตฌ์กฐ์ ์ผ๋ก ๋ณํ๋์ด ์๊ฐ์ ์ผ๋ก ๋ํ๋๊ฒ ๋๋๋ฐ, ํธ๋ฅด๋ชฌ์ ๋ถ๋น๊ฐ ๊ฐ์ํ๊ณ , ๋ฉด์ญ์ธํฌ์ ๊ธฐ๋ฅ์ด ์ ํ๋์ด ํผ๋ถ๊ฐ ์์์ ธ ํผ๋ถํ๋ ฅ ๊ฐ์๋ก ์ธํ ์ฃผ๋ฆ ์์ฑ, ํผ์ง์์ฑ ๊ฐ์๋ก ์ธํ ๊ฑด์ฑ ํผ๋ถํ, ๊ฒฝํผ ์๋ถ ์์ค ์ฆ๊ฐ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ๋ฉ๋ผ๋ ์์ฑ์ ์ํ ์ผ๊ตด์ ๋ช
๋๊ฐ ๋ฎ์์ง๊ณ ๊ธฐ๋ฏธ์ ๊ฒ๋ฒ์ฏ ๋ฑ์ด ์์ฑ๋๋ ๋ฑ ์ฌ๋ฌ ๊ฐ์ง ํ์์ด ๋ํ๋๊ฒ ๋๋ค. ๋ํ ํผ๋ถ๋ ํญ์ ์ฐ์์ ์ ์ดํ๊ณ ์๊ณ ์์ธ์ ์ ์ฝ๊ฒ ๋
ธ์ถ๋์ด ํ์ฑ ์ฐ์ ๋ฑ์ ์ํ ํผ๋ถ์ ๊ด์ฐํ์ ์์๊ณผ ๊ด๋
ธํ๊ฐ ๋ฐ์ํ ์ํ์ด ํญ์ ์กด์ฌํ๋ค. ํผ๋ถ๊ฐ ์์ธ์ ์ ๋ฐ๊ฒ ๋๋ฉด ํผ๋ถํ๋ฉด์ ์กด์ฌํ๋ ์ง์ง์ด ๋
ธ์ถ๋ ํผ๋ถํ๋ฉด์์ ์ง์ง๊ณผ์ฐํ๋ฌผ๋ก ๋ณํํ์ฌ ์ฐํํ๊ฒ ๋๋ค. ํผ๋ถ์ ์ง์ง์ ์ํผ์ธํฌ ์ฆ์ ์กฐ์ , ์ธํฌ ๊ฐ ์์ง, ํํผ์ธํฌ์ ํ๋ฝ์ ๊ด์ฌํ๋ฉฐ, ์์ธ์ ๋
ธ์ถ์ ํผ๋ถ์ ๋ง์ง๋ง barrier์ธ ๊ฐ์ง์ธต์ ์ง์ง์ ์ฐํ์์ผ ํผ๋ถ์ฅ๋ฒฝ์ ์์์ ์ด๋ํจ์ผ๋ก์จ ํผ๋ถ์ ์๋ถ์ ์ง์ ์ธ๋ถ์๋ถ์ ์ ์
์ ๋ง๋ ๊ธฐ๋ฅ์ ์ ํ ์ํจ๋ค.</p><p>ํ์ฌ ์ธ๋ฅ์ ๋น๋ฉด๊ณผ์ ์ธ ๋
ธํ ์ต์ ๋ฅผ ์ํ ์ฐ๊ตฌ์ ์ผํ์ผ๋ก ํผ๋ถ๋
ธํ ์ต์ ๋ฐ ๊ฐ์ ์ ์ํด ๋ง์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์งํ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ๋
ธํ์ต์ ๋ฅผ ์ํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฌผ์ง๋ค์ ๊ฐ๋ฐ์ด ์งํ๋๊ณ ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฌผ์ง์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ธ์ฒด์ ๋ถ์์ฉ์ด ์์ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ผ๋ก ์ง์ค๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๋์์ํ์์ ์ค๋ ๊ธฐ๊ฐ ์น๋ฃ์ ์๋ฐฉ์ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋์ด์จ ํ์ฝ์ฌ์ ์ฝ์ฉ์๋ฌผ๋ค๊ณผ ์๋ฌผ์ 2์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ด ๊ฐ์ง๋ ์์ฒด์ ๋ํ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง ๋ฑ ์ธ์ฒด์ ๋ํ ์์ ์ฑ์ด ๋น๊ต์ ๊ฒ์ฆ๋ ๊ฒ์ ์ด์ฉํ๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์๋๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํผ๋ถ ๊ตฌ์ฑ๋ฌผ์ง์ ์ฆ๊ฐ์ํค๊ฑฐ๋, ๋ฉ๋ผ๋ ์ํฉ์ฑ์ ์ต์ ํ๋ ๋ฌผ์ง ๋ฑ์ ์ ์ฉ์ํค๋ ๊ฒ์ ๋
ธํ๋ก ์ธํด ๋ฐ์ํ๊ฒ ๋๋ ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ , ํ๋ ฅ๋ณต์ ๋ฐ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ ๋ฑ์ ํผ๋ถ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณผ ์ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค.</p><p>์ผ๋ฐฑ์ด(Saururus chinensis)๋ ์๋ก๋ถํฐ ๋ค์ํ ํผ๋ถ์งํ์ ์์ ๋ฌ์ฌ ๋ง์๊ฑฐ๋ ์ฆ์ ๋ด์ด ๋ง์๊ฑฐ๋ ๋ณ๋ณ์ ๋ํฌํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ํผ๋ถ์งํ ๋ฐ ๋ด๊ณผ์ ์งํ์ ์ ํต์ ์ธ ๋ฏผ๊ฐ์๋ฒ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ ๋์ด ์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ๊ธฐ์กด์ ๋์ง์์ ์ฌ๋ฐฐ๋๊ณ ์๋ ์ฝ์ฉ ์๋ฌผ์ elicitation ๊ธฐ๋ฒ์ ์ ๋ชฉํ์ฌ ์ผ๋ฐฑ์ด์ ์ด์ฐจ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ์์ฐ์ฑ์ ์ฆ๋์ํค๊ณ ํ์ฅํ๊ธฐ๋ฅ์ฑ์ ์ฆ๋์ํค๋ ๊ฒ์ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก์จ, ์ผ๋ฐฑ์ด์ ์ ์ฉ์ฑ๋ถ ์์ฐ์ฑ์ ๋์ด๊ธฐ ์ํ elicitation ๊ธฐ๋ฒ์ ๋
ธ์ง์ฌ๋ฐฐ์ ์ ์ฉํ๊ธฐ ์ํ ์ ์ ํ elicitation system์ ํ๋ฆฝํ๋ ์์คํ
์ ๊ฐ์ถ๋ ๊ฒ์ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ํ์๋ค.</p> |
๋ค๊นป์ ์ค ๋์ฝ 6์ข
์ ์๋ฌผํ์ ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ๋ฅผ ์ฐ์ถํ๊ธฐ ์ํด ์ด๋ค ๋ชจ๋ธ์ ์ ์ฉํ์๋์? | first-order kinetics model | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>๋์ฝ ๋ฐ ์์ฝ</h2><p>์ํ์ ์ฌ์ฉ๋ triazole๊ณ ์ด๊ท ์ \( 6 \)์ข
fluqinconazole, hexaconazole, metconazole, myclobutanil, tebuconazole ๋ฐ tetraconazole ํ์คํ์ ์๋๋ \( 98.7-99.0\% \)๋ก Dr. Ehrenstorfer GmbH (Augsbug, Germeny)์ฌ์ ๊ฒ์ ๊ตฌ๋งคํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ํฌ์ฅ์ํ ์ค ๋ค๊นป์์ ์ดํฌํ ๋์ฝ ์ ํ์ ํ๋ฆฌ์ฌ๋(Fluquinconazole \( 10 \% \) SC, Bayer Crop Science, Seoul, Korea), ํ๋น(Hexaconazole \( 5\% \), SC, ๊ฒฝ๋, Seoul, Korea), ์ด๋ฆผ๊พผ(Metconazole \( 20 \% \) SC, ๋๋ฐฉ์๊ทธ๋ก, Seoul, Korea), ์์คํ
(Myclobutanil \( 6\% \) WP, ๊ฒฝ๋, Seoul, Korea), ํธ๋ฆฌ์ฟ ์ด(Tebuconazole \( 25\% \) EC, ํํ๋, Seoul, Korea), ๋ฐ ์๋จธ๋ํธ(Tetraconazole \( 12.5 \% \) EW, Bayer Crop Science, Seoul, Korea)์ด์๋ค. ๋์ฝ ์๋ฅ๋ถ์์ ์ฌ์ฉ๋ ์ฉ๋งค acetone, acetonitrile, dichloromethane, n-hexane ๋ฐ water๋ Burdick & Jackson(Muskegon, MI, USA)์ฌ์ ์ ํ์ด์๋ค. ์๋ฃ์ ์ ์ ์ ์ฌ์ฉ๋ ํก์ฐฉ์ florisil์ Sigma-Aldrich Chemical Co. (MI, USA)์ฌ์ \( 60-100 \)mesh ์ ํ์ \( 120^{\circ} \mathrm{C} \)์ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ์์ \( 8 \)์๊ฐ ์ด์ ํ์ฑํ ์ํจ ํ ์์ฉํ์๋ค.</p><h2>์ํ ํฌ์ฅ ๋ฐ ์ฝ์ ์ดํฌ</h2><p>๋ค๊นป์์ ์ํ ํฌ์ฅ์ ๊ฒฝ์๋จ์กฐ ๋ฐ์์ ์๋จ๋ฉด์ ์์นํ ๋น๋ ํ์ฐ์ค ์ฌ๋ฐฐ ํฌ์ฅ์ ์๋ํ์ฌ ์คํ ํ์์ผ๋ฉฐ, ํ์ข
์ ๋จ์ฒ์ด์๋ค. ๊ตฌํ ๋ฐ ๋ฐฐ์น๋ \( 1.4 \mathrm{~m} \times 7.2 \mathrm{~m} \) ํฌ๊ธฐ๋ก ๊ตฌํํ์ฌ \( 1 \mathrm{~m} \)์ ์์ถฉ๊ตฌ๋ฅผ ๋๊ณ \( 3 \)๋ฐ๋ณต์ผ๋ก ๋ฐฐ์นํ์์ผ๋ฉฐ ์ฌ์ ๋ฐ๋๋ \( 7 \mathrm{~cm} \times 13 \mathrm{~cm} \) ๋ก ํ์ข
ํ์ฌ ์ฌ๋ฐฐํ์๋ค. ์ํ๊ธฐ๊ฐ์ \( 2015 \)๋
\( 4\)์๋ถํฐ \( 2018 \)๋
\( 4 \)์๊น์ง \( 4 \)๋
์ ๊ฑธ์ฒ ์ํํ์์ผ๋ฉฐ, hexaconazole, metconazole, myclobutanil ๋ฐ fluquinconazole (\( 2016 \)๋
), tetraconazole (\( 2017 \)๋
), tebuconazole (\( 2018 \)๋
)์ ๊ฒฝ์ฝ์ดํฌ ํ์๋ค. ์ฝ์ ์ดํฌ๋ fluqinconazole \( 1,000 \)๋ฐฐ, hexaconazole \( 5,000 \)๋ฐฐ, metconazole \( 3,000 \)๋ฐฐ, myclobutanil \( 1,500 \)๋ฐฐ, tebuconazole \( 2,000 \)๋ฐฐ ๋ฐ tetraconazole \( 1,000 \)๋ฐฐ๋ก ๊ฐ๊ฐ ํฌ์ํ์ฌ \( 200 \mathrm{~L} / 10 \mathrm{a} \) ์ ์ดํฌ๋์ผ๋ก ๋ฐฐ๋ถ์ ๋ถ๋ฌด๊ธฐ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ดํฌํ์๋ค. ์ดํฌ ์๊ธฐ ๋ฐ ํ์๋ \( 7 \)์ผ ๊ฐ๊ฒฉ์ผ๋ก \( 3 \)ํ ์ฒ๋ฆฌํ์์ผ๋ฉฐ, ์ํ ์๊ธฐ๋ ์ต์ข
์ฝ์ ์ฐํฌ \( 2 \)์๊ฐ ํ ์ํํ \( 0 \)์ผ์ฐจ ์๋ฃ๋ฅผ ํฌํจํ์ฌ, \( 1,3,5 \) ๋ฐ \(7\)์ผ์ฐจ๋ก ์ฐ์ ์ํํ์๋ค.</p><h2>๋ค๊นป์ ์ค ์๋ฅ๋์ฝ๋ถ์๋ฒ</h2><p>๋ค๊นป์ ์ค \( 6 \)์ข
๋์ฝ์ ์๋ฅ๋์ฝ๋ถ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ํ๊ณต์ ์๋ฅ๋์ฝ ๋ถ์๋ฒ์ ์ฐธ์กฐ ๋ฐ ๋ณํํ์ฌ ์ ์ฉ ํ์๋ค. ๋ค๊นป์ ์๋ฃ \( 10 \mathrm{~g} \)์ \( 80 \mathrm{~mL} \) acetone ๋ฐ acetonitrile์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ homogenizer์์ \( 3 \)๋ถ๊ฐ \( 12,000 \mathrm{rpm} \) ์ผ๋ก ๊ณ ์๋ง์ ์ถ์ถํ์์ผ๋ฉฐ, ์ถ์ถ์ก์ Celite \(545\)๋ก ํก์ธ์ฌ๊ณผํ ํ dichloromethane์ผ๋ก \( 2 \)ํ ์ก์ก๋ถ๋ฐฐํ์๋ค. ์ก์ก๋ถ๋ฐฐ๋ ์ถ์ถ์ก์ ๊ฐ์๋์ถํ ํ hexane์ผ๋ก ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ์ ์ ๊ณผ์ ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><p>\(6\)์ข
์ ๋์ฝ ์ค \( 5 \)์ข
(tebuconazole, fluquinconazole, metconazole, hexaconazole ๋ฐ myclobutanil)์ ์ ์ ๊ณผ์ ์ glass column (\( 16 \mathrm{mm} \), I.D.)์ ํ์ฑํ ์ํจ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ florisil๊ณผ sodium sulfate anhydrous \( (1 \mathrm{~cm} \) ๋์ด)๋ฅผ hexane์ผ๋ก ์ต์ ์ถฉ์ ํ ๊ฒ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Tebuconazole, fluquinconazole ๋ฐ metconazole์ ๊ฒฝ์ฐ \( 100 \mathrm{~mL} \) hexane/acetone \( (90 / 10, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ผ๋ก \( 1 \)์ฐจ ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ํ๋ ค๋ฒ๋ฆฐ ํ, \( 70 \mathrm{~mL} \) hexane/acetone \( (80 / 20, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)์ผ๋ก \( 2 \)์ฐจ ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ๋ถ์ทจํ์ฌ ๊ฐ์๋์ถํ์์ผ๋ฉฐ, hexaconazole ์๋ฃ์ ์ ์ ๋ \( 90 \mathrm{~mL} \) hexane/ethyl acetate \( (70 / 30, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ผ๋ก \( 1 \)์ฐจ ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ํ๋ ค๋ฒ๋ฆฐ ํ, \( 80 \mathrm{~mL} \) hexane/ethyl acetate \( (50 / 50, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ผ๋ก \( 2 \)์ฐจ ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ๋ถ์ทจํ์ฌ ๋์ถํ์๋ค. Myclobutanil ์๋ฃ์ ์ ์ ๋ \( 70 \mathrm{~mL} \) hexane/acetone \( (90 / 10, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ผ๋ก \( 1 \)์ฐจ ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ํ๋ ค๋ฒ๋ฆฐ ํ, \( 70 \mathrm{mL} \) hexane/acetone \( (70 / 30, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)์ผ๋ก \( 2 \)์ฐจ ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ๋ถ์ทจํ์ฌ ๋์ถํ์๋ค. ์๊ธฐ์ \( 5 \)์ข
๋์ฝ ์ค fluquinconazole, metconazole ๋ฐ tebuconazole์ ๋์ถ ์งํ ์์ฌ๋ฅผ acetonitrile \( 2 \) ๋ฐ \( 4 \mathrm{~mL} \) ์ ์ฌ์ฉํดํ ๋ค \( 20.0 \mu \mathrm{L} \) ์ฉ HPLC-UVD์ ์ฃผ์
ํ์ฌ Table \( 2 \)์ ๊ฐ์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ๋ถ์ํ์๋ค. ํด๋น ๋ถ์ ์กฐ๊ฑด์ผ๋ก ๋ํ๋ chromatogram์์ peak area๋ฅผ ํ์ค๊ฒ๋์ ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ์๋ฅ๋์ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><h2>์๋ฌผํ์ ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ ์ฐ์ถ ๋ฐ ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>๋ค๊นป์ ์ค ๋์ฝ \( 6 \)์ข
์ ์๋ฌผํ์ ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ \( (T) \) ๋ first-order kinetics model์ ์ ์ฉํ์ฌ ์๋์ ์์ ๋ฐ๋ผ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><p>\( C_{t}=C_{0} e^{-k t} \)</p><p>\( \frac{1}{2} C_{0}=C_{0} e^{-k t} \)</p><p>\( T=\frac{\ln (2)}{k} \)</p><p>์ ์์์ \( C_{0} \)๋ ๋์ฝ์ ์ด๊ธฐ ์๋ฅ๋ \( (\mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \), \( t \)๋ ๊ฒฝ๊ณผ์ผ์, \( k \)๋ ๊ฐ์์์๋ฅผ ๋ํ๋ด๋ฉฐ \( C_{i} \) ๋ \( t \)์๊ฐ ๊ฒฝ๊ณผ ํ ๋์ฝ์ ์๋ฅ๋ \( (\mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \)์ ๋ํ๋ธ๋ค.</p><p>์๊ธฐ์ ์์ผ๋ก ์ฐ์ถ๋ ๋ค๊นป์ ์ค ๋์ฝ์ ์๋ฌผํ์ ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ์ ๊ฐ ๋์ฝ์ ๋ฌผ๋ฆฌํํ์ ํน์ฑ๊ณผ์ ๊ด๊ณ๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ ์ ํต๊ณ๋ถ์์ ํ์๋ค. ํต๊ณ๋ถ์์ SPSS \( 18.0 \) ver (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) ํต๊ณํ๋ก๊ทธ๋จ์ ์ด์ฉํ์ฌ, ์ฃผ์ฑ๋ถ ๋ถ์ ๋ฐ ์ด๋ณ๋ ์๊ด๊ณ์๋ก ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ ํ์๋ค. ์ด \( 8 \)๊ฐ์ ๋ณ์๋ฅผ ์ค์ ํ์ฌ ํ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ ์ค ์ข
์๋ณ์๋ ์ด๊ธฐ์๋ฅ๋(initial concentration, IC) ๋ฐ ๋์ฝ์ ์๋ฌผํ์ ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ(half of residue level, \( \mathrm{RL}_{50} \) ), ๋
๋ฆฝ๋ณ์๋ \( 5 \)ํญ๋ชฉ์ ๋ฌผ๋ฆฌํํ์ ํน์ฑ ๋ฐ ๋์ฝ ์ดํฌ์ก์ ์ฝ๋(active ingredient, Al์ผ๋ก ์ด \( 7 \)๊ฐ์ ๋ณ์๋ฅผ ์ค์ ํ์๋ค. \( 5 \)ํญ๋ชฉ์ ๋ฌผ๋ฆฌ ํํ์ ํน์ฑ์ ๋ถ์๋(molecular weight, MW), Log P, ๋ฌผ์ ๋ํ ์ฉํด๋(solubility in water, \( \mathrm{S}_{\mathrm{W}} \) ), ์ฆ๊ธฐ์(vapor pressure, \( \mathrm{Pv} \) ), ๋ฐ ์ฐํด๋ฆฌ์์ ์ง์(dissociation constant, \( \mathrm{pKa} \) )๋ก ์ค์ ํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ ๊ฐ์ University of Hertfordshire์ pesticide properties database (PPDB)์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ธ์ฉํ์ฌ Table \( 1 \)๊ณผ ๊ฐ์ด ํ์ธ ๋์๋ค.</p> |
HDL ์ฝ๋ ์คํ
๋กค์ ๊ฒฝ์ฐ BBR๊ตฐ๊ณผ HFD๊ตฐ ๋ชจ๋ ํต๊ณ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ ์ฆ๊ฐ์จ์ ๋ณด์ด๋๊ฐ? | NO | <h2>ํ์ค ์ง์ง ๋ถ์</h2><p>๊ณ ์งํ์ฆ์ ํ์ก ๋ด์ ์ง์ง ๋์ฌ์ ์ด์์ด ๋ฐ์ํ์ฌ ์ง์ง ํจ๋์ด ๋น์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ ์ํ๋ก ๋์ ๋๋์ ์ง์ง์ด ํ์ค์ ์กด์ฌํจ์ผ๋ก์จ ํ๊ด๋ฒฝ์ ๋์ ๋๊ฑฐ๋ ์๊ณ ๋์ด ํ๊ด์ ๋ง๊ฑฐ๋ ํ์ก์ ์ํํ ์ํต์ ๋ฐฉํดํ์ฌ ๋๋งฅ๊ฒฝํ์ฆ ๋ฑ์ ์ฌํ๊ด๊ณ ์งํ์ ์ผ๊ธฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ํนํ, ์ด ์ฝ๋ ์คํ
๋กค (T-CHO), ์ค์ฑ์ง๋ฐฉ(TG) ๋ฐ HDL ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ๋ฑ์ ์ง์ง ๋์ฌ์ฒด ํจ๋์ ์ด๋ฌํ ์ฌํ๊ด๊ณ ์งํ์ ์กฐ์ ํ๊ณ ์น๋ฃํ๋๋ฐ ์ค์ํ ์งํ๊ฐ ๋๊ณ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๊ณ ์ง๋ฐฉ์์ด๋ก ์ ๋ํ ๋น๋ง ๋ง์ฐ์ค ๋ชจ๋ธ์ BBR ๊ณผ SBN ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ BBR-SBN ๋ณตํฉ๋ฌผ์ ๊ณ ์ง๋ฐฉ์์ด์ ํจ๊ป ์ ๊ณตํ ํ, ํ์ค T-CHO, TG, HDL ์ฝ๋ ์คํ
๋กค์ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ์ด์์ง์ง๋์ฌ์ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ์ ๋ํด ๋ถ์ํ์๋ค(Fig. 3)).</p><p>T-CHO์ ๊ฒฝ์ฐ ์ ์์์ด๋ฅผ ๊ณต๊ธํ ๋์กฐ๊ตฐ์ธ NC๊ตฐ์ด \( 129.1 \pm \)\( 6.1 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ์ธ ๊ฒ์ ๋นํด HFD ๊ตฐ์ \( 182.3 \pm 11.4 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ ๊ณ ์ง๋ฐฉ์์ด๋ก ์ธํด ํ์ค T-CHO ํจ๋์ด NC๊ตฐ์ ๋นํด ์ฝ \( 1.4 \) ๋ฐฐ ์ ๋ ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํจ์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. 3A). ๊ทธ๋ฌ๋, PC๊ตฐ, BBR๊ตฐ, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ SBN๊ตฐ์์์ ํ์ค T-CHO ํจ๋์ ๊ฐ๊ฐ \( 158.8 \pm 3.7 \), \( 157.7 \pm 8.9 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ \( 157.5 \pm 13.0 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ HFD ๊ตฐ์ ๋นํด ๊ฐ๊ฐ ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์์ผ๋ ํต๊ณ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ์ง ์์๋ค. ๋ฐ๋ฉด์, BBR-SBN๋ณตํฉํฌ์ฌ๊ตฐ์ T-CHOํจ๋์ด \( 142.1 \pm 7.4 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ HFD๊ตฐ์ ์์น์ ๋นํด ์ฝ \( 22 \% \) ์ ๋์ ์ ์ํ ๊ฐ์ํจ๊ณผ๊ฐ ์์๋ค(Fig. 3A). ํนํ ๊ฐ ์คํ๊ตฐ(BBR๊ตฐ, SBN๊ตฐ, BBR-SBN๊ตฐ ๋ฐ PC๊ตฐ)๊ณผ NC๊ตฐ ์ฌ์ด์๋ ํต๊ณ์ ์ ์์ฑ์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ ํฌ์ฌํ ์ฝ๋ฌผ๋ค์ด ํ์ค T-CHOํจ๋์ ๋ฎ์ถ์ด ์ผ๋ฐ์์ด๋ฅผ ๊ณต๊ธํ NC๊ตฐ ์์ค์ผ๋ก ์ ์ง์ํฌ ์ ์๋ ํ์ฑ์ด ์์์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. TG ์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ HFD ๊ตฐ์ \( 84.1 \pm 4.4 \)\( \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ NC๊ตฐ \( (60.7 \pm 4.2 \mathrm{mg} / \mathrm{dL}) \) ์ ๋นํด ์ฝ \( 39 \% \) ์ ๋ ์ฆ๊ฐํ์์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. 3B). ๊ทธ๋ฌ๋, BBR๊ตฐ, SBN๊ตฐ ๋ฐ BBR-SBN๊ตฐ์ ํ์ค TG ํจ๋์ ๊ฐ๊ฐ \( 63.1 \pm 3.8\), \(67.9 \pm 0.8 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ \( 61.5 \pm 2.5 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ HFD ๊ตฐ์ ๋นํด ๊ฐ๊ฐ ์ฝ \( 25,19 \% \) ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ \( 27 \% \) ์ ๋์ ํต๊ณ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์๊ณ ๋ํ PC๊ตฐ \( (60.9 \pm 1.7 \mathrm{mg} / \mathrm{dL}) \) ๋ HFD ๊ตฐ์ ๋นํด ์ฝ \( 27 \% \) ์ ๋ ๊ฐ์ํ์๋ค(Fig. 3B). ๋ฐ๋ผ์ ๊ฐ ์ฝ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์์ ์ ๋ฐ์ ์ผ๋ก TG ํจ๋์ด ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒฝํฅ์ด ์์ผ๋ฉฐ ํนํ BBR ๊ณผ SBN์ ๋ณตํฉํฌ์ฌํ์ ๋ ์ค์ฑ์ง๋ฐฉ ํจ๋์ ์ผ๋ฐ์์ด๊ตฐ์ธ NC๊ตฐ์ TG ํจ๋ ์์ค์ผ๋ก ํ๋ณต๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ๊ณ ์งํ์ฆ ํ์์ ์น๋ฃ์ ์ฌ์ฉํ๋ simvastatin ์ ์ค์ฑ์ง๋ฐฉ ๊ฐ๊ฒฝ ํจ๊ณผ์ ๋น๊ตํด๋ ๊ฑฐ์ ๊ฐ์ ์์ค์ ํ์ฑ์ด ๋ํ๋๊ณ ์์์ ํ์ธํ์๋ค. HDL ์ฝ๋ ์คํ
๋กค์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ NC๊ตฐ์ \( 85.3 \pm 3.3 \mathrm{mg} / \mathrm{dL}\) HFD๊ตฐ์ \( 89.5 \pm 3.0 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ ๋ ๊ตฐ์ ์ฐจ์ด๋ ๊ฑฐ์ ์์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ BBR ๊ตฐ๊ณผ BBR-SBN๊ตฐ์ ๊ฐ๊ฐ \( 118.7 \pm 9.9\), \(122.8 \pm 5.0 \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ HFD๊ตฐ์ ๋นํด ์ฝ \(1.3-1.4\)๋ฐฐ ์ ๋์ ํต๊ณ์ ์ผ๋ก ์ ์ํ ์ฆ๊ฐ ๋ฐ ๊ฐ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ ํ์ธํ์๋ค(Fig. 3C). PC๊ตฐ๊ณผ SBN๊ตฐ๋ ๊ฐ๊ฐ \( 103.8 \pm 4.6\), \(118.7 \pm 9.9 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{dL} \) ๋ก์ HFD ๊ตฐ์ ๋นํด HDL ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋์ด ์ฆ๊ฐํ์ผ๋ ์ ์์ ์ด์ง ์์๋ค.</p><p>์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ค์ BBR ๊ณผ SBN ๋ณตํฉํฌ์ฌ๊ฐ ๊ณ ์ง๋ฐฉ์์ด์ ์ํด ์ฆ๊ฐ๋ T-CHO์ TG ์ ํจ๋์ ๋ฎ์ถ๊ฒ ํ๊ณ , HDL ์ฝ๋ ์คํ
๋กค์ ํจ๋์ ์ฆ๊ฐ์ํค๋ ๋ฑ ์ด์์ง์ง๋์ฌ์ ๋ํ ์กฐ์ ๋ฐ ๊ฐ์ ๊ธฐ๋ฅ์ด ์์์ ์๋ฏธํ๋ค. ๋์กธ์ค, ๊ณ ํ์, ๋๋งฅ๊ฒฝํ์ฆ๊ณผ ๊ฐ์ ์ฌํ๊ด๊ณ ์งํ์ ์ผ์ผํค๋ ์์ธ ์ค ํ๋์ธ ๊ณ ์งํ์ฆ์ ์ฒด๋ด์ ํ์ ์ด์ ๋ง์ ์ง๋ฐฉ์ฑ๋ถ์ด ํ๊ด๋ฒฝ์ ์์ฌ ์ผ์ฆ๊ณผ ์งํ์ ์ผ์ผํค๋๋ฐ, ๋ณธ ์คํ๊ฒฐ๊ณผ๋ก ๋ฏธ๋ฃจ์ด๋ณผ ๋ ๊ณ ์งํ์ฆ ํ์๋ค์ ํ์ค ์ง์งํจ๋๊ณผ ๊ทธ๋ก ์ธํด ์ด๋๋๋ ๋๋งฅ๊ฒฝํ ๋ฐ ์ฌํ๊ด ์งํ ๋ฑ์ ์๋ฐฉ๊ณผ ์น๋ฃ์ ๊ธ์ ์ ์ธ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ค ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค.</p> |
๋ฐฐ์์ก์ Type \(16\) rotor๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ช\(\mathrm{rpm}\)์์ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ๋ฐฐ์์์ง์ก์ ์ป์๋๊ฐ? | ์งํ๋ฐฐ์ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>ํจ๋ผ์ ์ ์์๋ถ๋ฆฌ</h2><p>\( 25{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์ Pseudomonas agar F (Bacto-tryptone \( 10 \mathrm{~g} \), Bacto-peptone \( 10 \mathrm{~g},~ \mathrm{MgSO}_{4}~ 1.5 \mathrm{~g}, \mathrm{~K}_{2} \mathrm{HPO}_{4}~ 1.5 \mathrm{~g} \), Glycerol \( 10 \mathrm{~mL} \), Agar \( 15 \mathrm{~g} / 1 \mathrm{~L} \) ์ฆ๋ฅ์) ์ก์ฒด ๋ฐฐ์ง์ P. tolaasii ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ ์ข
ํ ํ, ์ ์ฒด๊ธฐ์ ๋๋ฌํ๋๋ก \(18\)์๊ฐ ์ด์ ์งํ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋ฐฐ์์ก์ Type \(16\) rotor (Beckman Instruments, Inc., Palo Alto, CA, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ \( 8,000 \mathrm{rpm} \)์์ \(30\)๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ๊ท ์ฒด๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ ๋ฐฐ์์์ง์ก์ ์ป์๋ค(Cho ๋ฑ, \(2000\)). ํจ๋ผ์ ์ ํฌํจํ ๋ฐฐ์์์ง์ก์ ์ฉํํ์ฑ ์ธก์ ์ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ํ์์ ๋ฐ๋ผ ํจ๋ผ์ ๋ถ์๋ฅผ ์์๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ํน์ฑ์ ์กฐ์ฌํ์๋ค. ์์๋ถ๋ฆฌ๊ณผ์ ์ ๊ฐ๋ตํ ๋ฐฐ์์์ง์ก์ ammonium sulfate๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์ด๊ณ ์์์ฌ๋ถ๋ฆฌ๊ธฐ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ํจ๋ผ์ ์ ์นจ์ ์ ์ป์๋ค. ์นจ์ ์ ์ฉํดํ์ฌ Gel permeation chromatography๊ณผ์ ์ผ๋ก ์์๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ๋ถ์ก์ ๋ง๋ค์ด ์ด์ ์จ๋๋๊ณ \( \left(-70{ }^{\circ} \mathrm{C}\right) \)์ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>ํจ๋ผ์ ์ ์ํ ์ฉํํ์ฑ ์ธก์ </h2><p>ํจ๋ผ์ ์ ์ฉํํ์ฑ ์ธก์ ์ Cho ๋ฑ \( (2000) \)์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ์ฅ์ ์ ํ๊ตฌ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ํํ์๋ค. ์ฉํํ์ฑ์ ์ธก์ ํ๋๋ฐ ์ฌ์ฉํ ์ ํ๊ตฌ๋ ์ฌ์ฉํ๊ธฐ ๋ฐ๋ก ์ง์ ์ HBS ์์ถฉ์ก์ผ๋ก \(10\)๋ฐฐ ํฌ์ํ ํ ์ต์ข
๋ฐ์์ฉ์ก์ \( 10 \% \)๊ฐ ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. ํจ๋ผ์ ์ 1 HU์ฒ๋ฆฌํ์ฌ \(30\)๋ถ๊ฐ ๋ฐฐ์ํ๋ฉด์ UV/Vis ๋ถ๊ด๊ด๋๊ณ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ \( 600 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋ ๊ฐ์๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ ์ ํ๊ตฌ ์ธํฌ์ ํ๊ดด ํ์ฑ์ ํ๊ฐํ์๋ค.</p><h2>TIF์ ํจ๊ณผ ๋ฐ ์์ ์ฑ ์ธก์ </h2><p>TIF๋ Sakamoto Yakuhin Kogyo (Osaka, Japan)์ Mitsubishi-Kagaku Foods Corporation (Tokyo, Japan)์ ์ ํ์ ๋จ์์์ฌ๋ฅผ ํตํด ๊ณต๊ธ๋ฐ์๋ค. TIF \(10\)๊ณผ TIF \(16\)์ polyglycerol fatty acid ester์ด๋ฉฐ, TIF \(12\)๋ sucrose fatty acid ester ํํฉ๋ฌผ์ด๋ค (Yun ๋ฑ, \(2017\)). TIF์ ํ์ฑ ๋ณํ๋ ๊ฐ TIF๋ฅผ HBS ์์ถฉ์ก \( (\mathrm{pH} \) \(7.4\))์ ํฌ์ํ ํ, ์ ํ๊ตฌ์ ํจ๋ผ์ ์ ํฌํจํ๋ ์ต์ข
๋ฐ์์ฉ์ก์ \( 10 \% \)๊ฐ ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ํจ๋ผ์ ์ ํ์ฑ ์ ํด๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์คํ ์์์ผ์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ํ์ฌ ' 0 day'๋ก ์ค์ ํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ฐ TIF๊ฐ ๊ณตํต์ ์ผ๋ก ํจ๋ผ์ ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ธ \( 10 \mu \mathrm{M} \)์ ๋๋์์ TIF์ ๊ฒฝ์์ ํ์ฑ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. TIF์ ์์ ์ฑ ์ฆ๋๋ฅผ ์ํด TIF ์ฉ์ก์ ํญ์ฐํ์ ์ธ Ascorbic acid \( 0.1 \mathrm{mM} \), Dithiothreitol \( 0.1 \mathrm{mM} \)์ ๋๋๋ก ์ฒจ๊ฐํ ํ, 2์ฃผ๊ฐ ์์จ์ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ 2์ผ๋ง๋ค TIF์ ํ์ฑ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p> |
๋๋ญ์์ ์์ ํจ๋ ๋ถ์ ์คํ์ ์งํํ ํ ์ด๋ค ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ฌํ๋ถ์์ ์งํํ์๋๊ฐ? | \( 1 \) ๋ \( 3 \) | <h2>PM ํฌ๊ธฐ๋ณ ๊ธ์ ์์ ๋ถ์</h2><p>PM์ ํฌ๊ธฐ์ ๋ฐ๋ผ ์กด์ฌํ๋ ๊ธ์ ์์๋ฅผ ๋ถ์ํ๊ธฐ ์ํด, ํฌ๊ธฐ๊ฐ ๋ค๋ฅธ PM์ ํฌํจํ ๊ฑด์กฐ๋ ํํฐ๋ฅผ ํ
ํ๋ก ๋ถํด์ฉ๊ธฐ์ ๋ฃ๊ณ ์งํ ์ง์ฐ๊ณผ ์งํ ์ผ์ฐ์ \( 1 \) ๋ \( 3 \) ์ ๋น์จ๋ก ํผํฉํ ์์๋ก ๋ถํดํ์๋ค. PM์ ํฌํจํ๊ณ ์๋ ํํฐ๋ฅผ ๋ถํด์ฉ๊ธฐ์ ๋ฃ๊ณ ์์ \( 8 \mathrm{mL} \) ๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ์์ผ๋ฉฐ ํฌ์ง๊ด์๋ \( 0.5 \mathrm{M} \) ์ง์ฐ \( 5 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๋ฃ๊ณ heating block (OD lab, Gwangmyeong, Korea)์์ \( 130^{\circ} \mathrm{C} \) ๋ก \( 2 \) ์๊ฐ ๊ฐ์ดํ ํ ๋ถํดํ ์ฉ์ก์ ์ด์์๋ก \( 30 \mathrm{~mL} \) ๋ก ํฌ์ํ์๋ค. PM์ ํฌํจํ์ง ์์ ํํฐ๋ฅผ ์์๋ก ์๋ฃ์ ๊ฐ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ๋ถํดํ์ฌ ๊ณต์๋ฃ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋ถํดํ ์ฉ์ก์ \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) ์ฃผ์ฌ๊ธฐ ํํฐ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฌ๊ณผํ ํ United States Environmental Protection Agency \( 200.8 \) ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ inductively coupled plasma-mass spectroscopy (\( 7800 \) ICP-MS, Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๊ธ์ ์์ ํจ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h2>๋๋ญ์์ ์์ ํจ๋ ๋ถ์</h2><p>์์ ์ถ์ ๋ PM์ด ๊ธฐ๊ณต์ ํตํด ์ ๋ด๋ถ์ ํก์๋ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ํ๊ฐํ๊ธฐ ์ํด PM ์ธ์ฒ ํ ์์ ๊ธ์ ์์ ํจ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค. PM ์ถ์ถ ํ ๋จ์ ์์ \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) ์ค๋ธ์์ ๊ฑด์กฐํ๊ณ ์์ ํฌ๊ธฐ๋ก ๋ถ์ํ์๋ค. ๋ถ์ํ ๋๋ญ์ \( 0.5 \mathrm{~g} \)์ \( 100 \mathrm{~mL} \) ์ผ๊ฐํ๋ผ์คํฌ์ ๋ฃ๊ณ \( 5 \mathrm{~mL} \)์ ์งํ ์ง์ฐ์ ๋ฃ์ด \( 24 \)์๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ \( 140^{\circ} \mathrm{C} \)์ heating block์์ ๋ถํด์ก์ด ์ฝ \( 1 \mathrm{~mL} \) ๋จ์ ๋๊น์ง ๊ฐ์ดํ์ฌ ๋ถํดํ์๋ค. ๋ถํดํ ์ฉ์ก์ ์๋ฃ๋ด ๊ธ์ ํจ๋์ด ๋ฎ์ผ๋ฏ๋ก ํฌ์์ ์ต์ํํ๊ธฐ ์ํด ์ด์์๋ก conical tube์ \( 14 \mathrm{~mL} \)๋ก ํฌ์ํ์๋ค. ๋ถํด์ก์ \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) ์ฃผ์ฌ๊ธฐ ํํฐ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฌ๊ณผํ ํ ICP-MS๋ก ๋ถํด์ก์ ๊ธ์์์ ํจ๋์ ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>์๋ฃ์ ์ ํ๋๋ \( 5 \text{-} 10\) ๊ฐ์ ๋ถ์ ์๋ฃ ๋น \( 1 \)๊ฐ์ ํ์ค์ก์ ์ฝ์
ํ์ฌ ๋ถ์ํจ์ผ๋ก์จ ํ๊ฐํ์๊ณ \( 90 \% \) ์ด์ ๋์ง ์์ ๊ฒฝ์ฐ ์ฌ๋ถ์ํ์๋ค. ์ ๋ฐ๋๋ \( 3 \)๊ฐ์ ๋ฐ๋ณต ์๋ฃ๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฐ์ผ๋ก ํ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ ํ์คํธ์ฐจ๋ก ํ์ํ์๋ค. ๊ฒ์ถํ๊ณ๋ ๊ณต์๋ฃ๋ฅผ ๋ฐ๋ณต ์ธก์ ํ์ฌ ํ์คํธ์ฐจ์ \( 3 \)๋ฐฐ๋ก ๊ณ์ฐํ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ๋ SPSS Statistics software \( 25 \) (Ineternational Business Machines Co., USA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Pearson ์๊ด๋ถ์์ผ๋ก PM์ ์์ ๊ฐ ์๊ด๊ด๊ณ ๋ฐ ์๊ณผ PM์ ์๊ด๊ด๊ณ๋ฅผ ๋ถ์ํ์๋ค. ์ ์ ์์ค์ \( 99 \% \) ์ \( 95 \% \left({ }^{* *} p<0.01,{ }^{*} p<0.05\right) \)์์ ์ ์์ฑ์ด ์์์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์๋ฃ์ ๋ฐ๋ฅธ ๋ถ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ฐจ์ด๋ ์ผ์๋ฐฐ์น ๋ถ์ฐ๋ถ์(one-way ANOVA)์ ์ด์ฉํ์ฌ ํ๊ฐํ์๊ณ ์ฌํ๋ถ์์ผ๋ก Duncan์ ๋ค์ค ๋น๊ต๋ฒ์ ์ค์ํ์๋ค.</p> |
NO ์์ฑ๋์ ์ธก์ ํ๋ฉด์, ์คํ๋๋ฌผ์ ์กฐ์ง์ ์์ธต์ก๊ณผ ์ฆ๋ฅ์์ ํผํฉํ ๋ค, griess reagent๋ฅผ ๋๋์ผ๋ก ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋น์ ์ฐจ๋จํ ํ ์ค์จ์์ ๋ช ๋ถ ๋ฐฉ์นํ์๋๊ฐ? | boiling | <h2>T-๋ฏธ๋ก ์คํ</h2><p>๊ฒ์ ์ ์ํฌ๋ฆด๋ก ์ ์๋ Tํ ๋ฏธ๋ก๋ ์ถ๋ฐ ์์, ์ผ์ชฝ ํต๋ก, ์ค๋ฅธ์ชฝ ํต๋ก๋ก ๊ตฌ์ฑ๋์ด์์ผ๋ฉฐ, ์ค๋ฅธ์ชฝ ํต๋ก์๋ ๋ถ๋ฆฌํ ์ ์๋ ์ฐจ๋จ ๋ฌธ์ ์ค์นํ์๋ค. ์คํ ํ๋ฃจ ์ ๋ ์ฐจ๋จ ๋ฌธ์ผ๋ก T-๋ฏธ๋ก์ ์ค๋ฅธ์ชฝ ํต๋ก๋ฅผ ๋ง๊ณ , ์ผ์ชฝ ํต๋ก๋ ๊ฐ๋ฐฉํ ์ํ๋ก ์คํ๋๋ฌผ์ ์ถ๋ฐ์์ ์์ ์ถ๋ฐ์์ผ 10๋ถ๊ฐ ์์ ๋กญ๊ฒ ํ์ํ๋๋ก ํ์๋ค. 24์๊ฐ ๋ค, ์ฐจ๋จ ๋ฌธ์ ์ ๊ฑฐํ์ฌ ์ผ์ชฝ ํต๋ก์ ์ค๋ฅธ์ชฝ ํต๋ก๋ฅผ ๊ฐ๋ฐฉํ๊ณ ์คํ๋๋ฌผ์ ์ถ๋ฐ์์ ์์ ์ถ๋ฐ์์ผ 10๋ถ ๋์ ์ผ์ชฝ ํต๋ก(old route)์ ์ค๋ฅธ์ชฝ ํต๋ก(new route)์ ๋ค์ด๊ฐ ํ์๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ๊ธฐ๋กํ์๋ค. ๋งค ์คํ์ด ๋๋ ๋๋ง๋ค \( 70 \% \) ethanol๋ก Tํ ๋ฏธ๋ก๋ฅผ ์๋
ํ๋ฉด์ ์คํ์ ์งํํ์๋ค.</p><h2>๋ฌผ์ฒด์ธ์ง์คํ</h2><p>์คํ ํ๋ฃจ ์ ๋ ๊ฒ์์ ์ํฌ๋ฆด๋ก ๋ง๋ ๋ฐ์ค ๋ด์ ํฌ๊ธฐ์ ๋ชจ์์ด ๋๊ฐ์ ๋ฌผ์ฒด(A1๊ณผ A2)๋ฅผ ๋ฐฐ์นํ ๋ค, ์คํ๋๋ฌผ์ ๋ฐฐ์น์์ผ 10๋ถ๊ฐ ๋ ๋ฌผ์ฒด๋ฅผ ์์ ๋กญ๊ฒ ํ์ํ๋๋ก ํ์๋ค. 24์๊ฐ ๋ค ๋ ๋ฌผ์ฒด ์ค ํ๋์ ๋ฌผ์ฒด๋ฅผ ๋ชจ์๊ณผ ํฌ๊ธฐ๊ฐ ๋ค๋ฅธ ์๋ก์ด ๋ฌผ์ฒด๋ก ๋ฐ๊พธ๊ณ (A1๊ณผ B), ์คํ๋๋ฌผ์ 10๋ถ๊ฐ ๊ธฐ์กด ๋ฌผ์ฒด(old object, A1)์ ์๋ก์ด ๋ฌผ์ฒด(new object, B)๋ฅผ ์์ ๋กญ๊ฒ ํ์ํ๋๋ก ํ๊ณ ๊ฐ๊ฐ์ ํ์ ํ์๋ฅผ ๊ธฐ๋กํ์๋ค. ๋งค ์คํ์ด ๋๋ ๋๋ง๋ค \( 70 \% \) ethanol๋ก ๋ฌผ์ฒด์ธ์ง์คํ ๋ฐ์ค๋ฅผ ์๋
ํ๋ฉด์ ์คํ์ ์งํํ์๋ค.</p><h2>์์กฐ๋ฏธ๋ก์คํ</h2><p>์์กฐ(์ง๋ฆ \( 150 \mathrm{~cm} \), ๋์ด \( 30 \mathrm{~cm}) \)๋ฅผ ๊ท ๋ฑํ๊ฒ ์ฌ๋ฑ๋ถํ๊ณ , ๋ฒฝ๋ฉด์๋ ๊ณต๊ฐ๋จ์(visual cue)๋ก ์๋ก ๋ค๋ฅธ ํ์์ ๋ถ์ฐฉ์์ผฐ๋ค. ํ ๊ตฌ์ญ์ ์ค์์ ๋ฌผ์ ์๋ฉด์ผ๋ก๋ถํฐ \( 1 \mathrm{~cm} \) ์๋์ ์ํ ๋ํผ๋(์ง๋ฆ \( 9 \mathrm{~cm}) \)๋ฅผ ์์น์ํค๊ณ , \( 22 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \)์ ๋ฌผ์ ์ฑ์ด ๋ค ์คํ๋๋ฌผ์ด ์ง์ ๋ํผ๋๋ฅผ ์ฐพ์ ์ ์๋๋ก ํฐ์ ๋ฌผ๊ฐ(Poster color, ShinHan) ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ์คํ๋๋ฌผ์ ๊ฐ ์ฌ๋ถ๋ฉด์ ์ค์์์ ์ถ๋ฐ์ํจ ๋ค, 60์ด๊ฐ ์์ ๋กญ๊ฒ ์์กฐ๋ฅผ ํ์ํ๋๋ก ํ์๋ค. ๋ง์ผ 60์ด๊ฐ ๊ฒฝ๊ณผํ์ฌ๋ ์คํ๋๋ฌผ์ด ๋ํผ๋๋ฅผ ์ฐพ์ง ๋ชปํ๋ฉด ์คํ์๊ฐ ์คํ๋๋ฌผ์ ๋ํผ๋๋ก ์ ๋ํ์ฌ 15์ด๊ฐ ๋ํผ๋ ์์น์ ๊ณต๊ฐ๋จ์๋ฅผ ์ธ์์์ผฐ๋ค. ์ด๋ ํ๋ฃจ์ 4์๊ฐ ๊ฐ๊ฒฉ์ผ๋ก 3๋ฒ์ฉ 3์ผ ๋์ ๋ํผ๋์ ์์น๋ฅผ ์ธ์ํ ์ ์๋๋ก ํ์ต์์ผฐ๋ค. 4์ผ์งธ์๋ ์คํ๋๋ฌผ์ ์ธ์ง๋ฅ๋ ฅ์ ํ์ธํ ์ ์๋ ์ธ๊ฐ์ง ์คํ์ ์ค์ํ์๋ค. ์ฒซ ๋ฒ์งธ ์คํ์ ํฐ์ ๋ฌผ๊ฐ์ ํ ์์กฐ์ ๋ํผ๋(hiddenplatform)๋ฅผ ์์น์ํค๊ณ 60์ด ๊ฐ ์คํ๋๋ฌผ์ด ๋ํผ๋์ ์ฐพ์๊ฐ๋ ์๊ฐ์ ๊ฐ๊ฐ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ ๋ฒ์งธ ์คํ์ ํฐ์ ๋ฌผ๊ฐ์ ํ ์์กฐ์์ ๋ํผ๋๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ๊ณ , 60์ด ๋ด์ ์คํ๋๋ฌผ์ด ๋ํผ๋๊ฐ ์์๋ ์ฌ๋ถ๋ฉด์ ๋จธ๋ฌธ ์๊ฐ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ธ ๋ฒ์งธ ์คํ์ ํฐ์ ๋ฌผ๊ฐ์ ํ์ง ์์ ์์กฐ์ ๋ํผ๋(exposed platform)๋ฅผ ์์น์ํค๊ณ 60์ด ์ด๋ด์ ๋ง์ฐ์ค๊ฐ ๋ํผ๋์ ์ฐพ์๊ฐ๋ ์๊ฐ์ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>์ง์ง๊ณผ์ฐํ ํจ๋ ์ธก์ </h2><p>์คํ๋๋ฌผ์ ๋, ๊ฐ, ์ ์ฅ ์กฐ์ง์ homogenizer๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์๋ฆฌ์์ผ์๋ก ๊ท ์งํ ์ํจ ๋ค, \( 3,000 \mathrm{rpm} \)์์ 10๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ์์ผ ์กฐ์ง ์์ธต์ก์ ์ป์๋ค. ๊ฐ ์กฐ์ง ์์ธต์ก์ \( 1 \% \) phosphoric acid์ \( 0.67 \% \) TBA์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ ๋ค, 45๋ถ๊ฐ boiling ์์ผฐ๋ค. ๊ฐ ๋ฐ์๋ฌผ์ 1-butanol์ ์ฒจ๊ฐํ ๋ค, \( 3,000 \mathrm{rpm} \)์์ 10๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ์ํจ ๋ค ์ป์ ์์ธต์ก์ \( 535 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ง์ง๊ณผ์ฐํ๋ฌผ ์์ฑ๋์ MDA ํ์ค๊ณก์ ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><h2>\( \mathrm{NO} \) ์์ฑ๋ ์ธก์ </h2><p>์คํ๋๋ฌผ์ ๋, ๊ฐ, ์ ์ฅ ์กฐ์ง์ ์๋ฆฌ์์ผ์๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ท ์งํ์ํจ ์์ธต์ก \( 150 \mu \mathrm{L} \)์ ์ฆ๋ฅ์ \( 130 \mu \mathrm{L} \)์ ํผํฉํ ๋ค, griess reagent๋ฅผ ๋๋์ผ๋ก ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๋น์ ์ฐจ๋จํ ํ ์ค์จ์์ ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. 30๋ถ ๋ค, ๊ฐ ๋ฐ์๋ฌผ์ \( 540 \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. \( \mathrm{NO} \) ์์ฑ๋์ \( \mathrm{NaNO}_{2} \) ํ์ค๊ณก์ ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ๋ถ์</h2><p>๋ชจ๋ ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ํ๊ท \( \pm \)ํ์คํธ์ฐจ๋ก ๋ํ๋ด์๊ณ , ๊ฐ ์คํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก๋ถํฐ ANOVA (analysis of variance)๋ฅผ ๊ตฌํ ํ Duncan's multiple test \( (p<0.05) \)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ฐ ๊ตฐ์ ํ๊ท ๊ฐ์ ์ ์์ฑ์ ๊ฒ์ ํ์๋ค. ๊ฐ ๊ตฐ๋ด ๋ ์งํ์ ๋น๊ต๋ Student's t-test \( (p \) \(<0.05) \)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์๋ค.</p> |
๋ฌด์์ด ์ง์ง์ถ์ ์ต์ ํ์ฑ๊ณผ ์ผ์นํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์ด๊ณ ์๋๊ฐ? | chlorogenic acid, caffeic acid, rutin | <h2>ํฉ์น ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฃผ์ flavonoid ๋ถ์</h2><p>ํฉ์น ๋๋ฌด์๋ chlorogenic acid, caffeic acid, rutin๋ฑ ํด๋ฆฌํ๋ ์ฑ๋ถ์ด ํจ์ ๋์ด ์๋ค. Ecklonia cava์์ ๋ถ๋ฆฌํ ํด๋ฆฌํ๋ ์ถ์ถ๋ฌผ์ธ Seapolynol \( ^{\mathrm{TM}} \) ๊ณผ Dieckol์ด ์ ์์ ์ผ๋ก HMGCR ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ํ ํด๋ฆฌํ๋ ์ฑ๋ถ ์ค caffeic acid, ellagic acid, gallic acid, ferulic acid์ด HMGCR ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ์ HMGCR ์ต์ ์ ๋ก ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ง์ธ ํด๋ฆฌํ๋ ์ฑ๋ถ์ด ํจ๊ณผ์ ์ด๋ผ๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ฐํ๋์๋ค. Sechium edule shoots์ ํด๋ฆฌํ๋๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ HMGCR ์ ์ต์ ํ๊ณ ์ฝ๋ ์คํ
๋กค ํจ๋์ ๊ฐ์์์ผฐ๋ค. ํฉ์น ๋๋ฌด์ HMGCR ์ต์ ๋ฅ๋ ํฉ์น ๋๋ฌด ์์ ๋ค๋ ํจ์ ๋ ํด๋ฆฌํ๋ ์ฑ๋ถ์ ํจ๊ณผ์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋๋ค. ๋ค๋ง ์ง์ง์ถ์ ์ต์ ๊ธฐ๋ฅ์ ๋น๊ตํ ๊ฒฐ๊ณผ ํฉ์น ๋๋ฌด์ ์ฐ์์ ๋ฐ๋ฅธ ์ฐจ์ด๋ ํฌ์ง ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์ฌ ํฉ์น ๋๋ฌด ์์ ํจ์ ๋์ด ์๋ ์ฃผ์ flavonoid ํจ๋์ 10๋
์ ํฉ์น ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด ๋ฐ ์ฑ์ทจ์๊ธฐ์ ๋ฐ๋ฅธ flavonoid ํจ๋์ ํ์ธํ์๋ค. Figure 5์ Table 1์์ ๋ณด์ฌ์ง๋ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๊ฐ์ด ํฉ์น ๋๋ฌด ์์ ์ด์์ ์ฃผ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์์๋ rutin๊ณผ chlorogenic acid๊ฐ ํ์ธ๋์์ผ๋ฉฐ rutin์ ํจ๋์ด chlorogenic acid์ ๋นํด ์ฝ 5๋ฐฐ ์ด์ ๋ง์ด ํจ์ ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ์ด๋ค ์ฑ๋ถ์ ํจ๋์ ์ถ์ถ์ฉ๋งค์ ์ฃผ์ ์ ๋น์จ์ด ๋์์๋ก ๋ง์ด ํจ์ ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋๋ค. ๋ํ 8์์ด๋ 11์์ ์ฑ์ทจํ ์๋ณด๋ค๋ 5์์ ์ฑ์ทจํ ์์ rutin๊ณผ chlorogenic acid ์ฑ๋ถ์ด ๋ง์ด ํจ์ ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก ๋ดค์ ๋, ์ฃผ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ํฉ์น ์ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ์ฑ๋ถ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ถ์ถํ ์ ์๋ ์ฉ๋งค๋ผ๊ณ ํ๋จ๋๋ฉฐ ์ด๋ ์ง์ง์ถ์ ์ต์ ํ์ฑ๊ณผ ์ผ์นํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์ด๊ณ ์๋ค. Rutin๊ณผ chlorogenic acid ์ฑ๋ถ๋ค ์ด์ธ์ ํฉ์น ๋๋ฌด ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ ํจ์ ๋์ด ์๋ ๋ค๋ฅธ ์ฑ๋ถ๋ค์ ์ฐจ์ด์ ํ์ฑ์ ์ฃผ์ํ๊ฒ ๊ธฐ์ฌํ๋ ์ฑ๋ถ์ ๋ํด์๋ ์ถ๊ฐ์ ์ผ๋ก ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์งํ๋์ด์ผ ํ ๊ฒ์ด๋ค.</p> |
๋์
์ํ๊ณ์ ํด์ถฉ ๋ฐ๋๊ฐ ์ฆ๊ฐํ๋ ์ด์ ๋ ๋ญ์ผ? | ๊ตญ์ ๊ต์ญ์ ์ฆ๊ฐ ๋ฐ ๊ธฐํ๋ณํ๊ฐ ์ง์๋จ | <h1>์ ๋ก </h1><p>๊ตญ์ ๊ต์ญ์ ์ฆ๊ฐ ๋ฐ ๊ธฐํ๋ณํ๊ฐ ์ง์๋จ์ ๋ฐ๋ผ ๋์
์ํ๊ณ์ ํด์ถฉ ๋ฐ๋๊ฐ ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ๋ฏธ๊ตญ์ ๋
๋ฒ๋ (Metcalfa pruinosa) ๊ฐ์๋ ๊ฐ๋งค๋ฏธ์ถฉ(Ricania shantungensis), ๊ฝ๋งค๋ฏธ(Lycorma delicatula)๋ฑ ์๋ก์ด ์ธ๋๋๋ฐ ํด์ถฉ์ด ๊ตญ๋ด์ ์นจ์
ํ์๊ณ ๋ฐ์ ๋ฐ ํผํด๋ฉด์ ์ด ๋์ด๋๊ณ ์๋ ์ํฉ์ด๋ค. ์ด์ค ๋ฏธ๊ตญ์ ๋
๋ฒ๋ ๋ 2009๋
๊ตญ๋ด์ ์ฒ์ ๋ฐ์์ด ๋์์ผ๋ฉฐ ๊ฒฝ๋จ ๊นํด์ ๋จ๊ฐ ๊ณผ์์์ ์๋ฌผ์ ๋ํ ํผํด๋ ๊ฐ์ด ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ์ด๋ ๋ถ๋ฅํ์ ์ผ๋ก ๋
ธ๋ฆฐ์ฌ๋ชฉ(Hemiptera) ์ ๋
๋ฒ๋ ๊ณผ(Flatidae)์ ์ํ๋ ํด์ถฉ์ผ๋ก ๋ถ์๋ฉ๋ฆฌ์นด๊ฐ ์์ฐ์ง์ด๋ค. ์์ฐ์ง์ธ ๋ฏธ๊ตญ์์๋ 50๊ฐ๊ณผ 102์ข
์ ์ด๋ฅด๋ ์๋ฌผ์ด ๊ธฐ์ฃผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์์ด ๊ด๋ฒ์ํ ๊ธฐ์ฃผ๋ฒ์๋ฅผ ๋ํ๋ธ๋ค. ๊ตญ๋ด์ ๊ฒฝ์ฐ 62๊ณผ 145์ข
์ด ๊ธฐ์ฃผ์๋ฌผ๋ก ์กฐ์ฌ๋์ด ๋ฏธ๊ตญ๋ณด๋ค ๊ธฐ์ฃผ์๋ฌผ์ ์๊ฐ ๋ง์ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ฏธ๊ตญ์ ๋
๋ฒ๋ ๋ ์ฐ1์ธ๋ ๋ฐ์ํ๋ฉฐ, ์ฑ์ถฉ ์์ปท์ด ๊ฐ์์ ๊ธฐ์ฃผ์๋ฌผ์ ์ฐ๋์ ํ๊ณ ๊ธฐ์ฃผ์๋ฌผ์์ ์๋ํ ์์ด ์ด๋ฌํด 5์ ์คํ์ ๊ฒฝ์ ์์์ ๋ถํํ์ฌ 5ํ์ ํํผ๋ฅผ ๊ฑฐ์ณ ์ฑ์ถฉ์ด ๋๋ค. ์ฝ์ถฉ๊ณผ ์ฑ์ถฉ์ ๊ธฐ์ฃผ์๋ฌผ์ ์ค๊ธฐ๋ฅผ ํก์ฆํ๊ณ ๊ฐ๋ก๋ฅผ ๋ฐฐ์คํ์ฌ ๊ทธ์์๋ณ์ ์ ๋ฐํ๋ค.ํนํ ๊ณผ์๋ ์ด๋ก ์ธํ ํ์ง์ ํ๊ฐ ๋ฐ์ํ๋ ๋ฑ ํผํด๊ฐ ๋ฐ์ํ๊ณ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํจ๊ณผ์ ์ธ ๋ฐฉ์ ๋ฒ์ด ํ์ํ ์ํฉ์ธ๋ฐ ํ์ฌ ์ด๋ฃจ์ด์ง๊ณ ์๋ ๋ฐฉ์ ๋ ๋๋ถ๋ถ ํํ๋์ฝ์ ์์กดํ๊ณ ์๋ค. ์ด๋ ์์ง ๊ดํ์ฌ๋ฐฐ๊ฐ ์ฃผ๋ฅผ ์ด๋ฃจ๊ณ ์๋ ๊ตญ๋ด์ ์ํฉ๊ณผ ์ด๋ฅผ ๋์ฒดํ ์ ์๋ ํจ๊ณผ์ ์ธ ๋ฐฉ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ด ๋ง์ด ๋ถ์กฑํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ค.ํ์ฌ ๋ฏธ๊ตญ์ ๋
๋ฒ๋ ์ ๋ํ ์นํ๊ฒฝ ๋ฐฉ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ก๋ ์ ์ผํ๊ฒ ๊ณํผ, ์ํธ๋ก๋ฌ๋ผ, ํ๋๋ก์ ๋ฐ ์ค๋ ๊ฐ๋
ธ ๋ฑ ์ํ์ค์ธ 124์ข
์ ์๋ฌผ์ ์ ๋ฅผ ํ์ฉํ ์ด์ถฉ ์คํฌ๋ฆฌ๋์ ์ํํ์ฌ 12์ข
์ ์ ์ ๋ฅผ ์ ๋ฐํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์๋ค. ๊ตญ์ธ์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ์๋ฌผ ์ ์ ๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ด์ถฉํ์ฑ ๊ด๋ จ ์ฐ๊ตฌ๋ ๋ง์ผ๋ ๋ฏธ๊ตญ์ ๋
๋ฒ๋ ๋ฅผ ๋์์ผ๋ก ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์์ง ์๋ ์ค์ ์ด๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์นํ๊ฒฝ ๋์ฐ๋ฌผ ์์ฐ๋๊ฐ์์๋ ํํ๋์ฝ์ ์ฌ์ฉ์ด ์ ํ๋๋ฏ๋ก ํํ๋์ฝ์ ์ ๊ฒ ์ฌ์ฉํ๊ฑฐ๋ ์ด๋ฅผ ๋์ฒดํ ์ ์๋ ๋ค์ํ ๋ฐฉ์ ๋งค๋ด์ผ ๊ฐ๋ฐ๊ณผ ์๋ก์ด ๋ฐฉ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๊ฐ๋ฐ๋ณด๊ธ์ ์ต์ฐ์ ์ฌํญ์ผ๋ก ์๊ตฌํ๊ณ ์๋ค. ๊ดํ ๋ฐฉ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋์ฒดํ ์ ์๋ ์๋จ ์ค ํ๋๋ก ์๋ฌผ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์ฉํ ๋ฐฉ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ค ์ ์๋ค. ์๋ฌผ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง์ ์ ์ผ๋ก ํด์ถฉ์ ์ฌ๋ฉธ์ํค๋ ์ด์ถฉ์์ฉ๊ณผ ํด์ถฉ์ด ์ ๊ทผํ์ง ์๋ ๊ธฐํผํจ๊ณผ๋ ์ฐ์ํ์ฌ ์ด์ ์ ํ์ฉํ ์๋ก์ด ๋ฐฉ์ ์ ๋ก์ ์ฐ๊ตฌ ๊ฐ๋ฐ์ด ์ด๋ฃจ์ด์ก๋ค. ๋ํ ์๋ฌผ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฌ๋ฌ ์ฑ๋ถ์ ํจ์ ๋ ํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ์ข
๋ฅ๊ฐ ๋ค์ํ์ฌ, ๋์ฝ์ ์ ํญ์ฑ์ด ์๊ฒจ ๋ฐฉ์ ๊ฐ ์ ๋์ง ์๋ ํด์ถฉ์๋ ์ฐ์ํ ๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ธ๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์๋ฌผ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ๋์ฝ์ ๋์ฒด ๋๋ ๋ณด์์ ์ธ ๋ฐฉ์ ์ ๋ก์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด์๋ค๊ณ ํ๋จ๋๋ฉฐ ๊ตญ์ธ์์๋ ๋ค์ํ ์๋ฌผ์ ์ ๋ฅผ ์ด์ฉํ ๋ฐฉ์ ์ ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ๊ณผ๊ฑฐ๋ถํฐ ์ง์์ ์ผ๋ก ์ํ๋์๋ค.</p><p>์๊ฐ(Alpinia galangal)๋ ์๊ฐ๋ชฉ(Zingiberales), ์๊ฐ๊ณผ(Zingi-beraceae), ๊ฝ์ํ์(Alpinia)์ ์ํ๋ ์๋ฌผ๋ก์, ์๊ฐ์ด๋ผ ๋ถ๋ฆฌ๋ 4์ข
๋ฅ์ ์๋ฌผ ์ค ํ๋์ด๋ฉฐ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก Greater galangal์ด๋ผ ๋ถ๋ฆฐ๋ค. ์๊ฐ์ ์ํ๋ถ๋, ๋ณตํต ๋ฑ์ ํจ๋ฅ์ด ์์ด ์ฝ์ฉ์ผ๋ก ์ด์ฉ๋์์ง๋ง ์๊ฐ๊ณผ ๊ฐ์ ์์ฉ์ผ๋ก๋ ์ด์ฉ๋์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์๊ฐ๊ทผ ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๊ทธ ์ฃผ์ฑ๋ถ์ธ Methylcinnamate๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ ํํ ์ ์ ๋ฅผ ๋ฏธ๊ตญ์ ๋
๋ฒ๋ ์ ์ ์ฉํ์ฌ ์ด์ถฉ ๋ฐ ๊ธฐํผ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ดํด๋ณด์ ๋ฏธ๊ตญ์ ๋
๋ฒ๋ ์ ๋ํ ์๊ฐ๊ทผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด์ถฉ ํ์ฑ์ ๊ฒํ ํ์๋ค.</p> |
ํญ์ฐํ ํจ์์ ์ํด \( \mathrm{O}_{2}^{-} \)๋ ์ด๋ค ๋ถ์๋ค๋ก ์ ํ๋๋๊ฐ? | \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ๋ฌผ | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><p>์ฐ์ฐ๊ณ ๋ก์ \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ค๋ฌผ๊ณผ 4๊ฐ์ง ์ ๊ธฐ์ฉ๋งค ์ถ์ถ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค์ ๋ํ ํญ์ฐํ ๋ฐ ์ ๊ฒฝ์ธํฌ ๋ณดํธ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํด ๋ณด์๋ค. DPPH๋ ๋น๊ต์ ์์ ํ radical์ ๊ฐ์ง๋ ๋ฌผ์ง๋ก ํญ์ฐํ๋ฅ์ด ์๋ ๋ฌผ์ง์๊ฒ ์ ์๋ฅผ ๋ด์ด์ฃผ๋ฉด์ ๊ณ ์ ์ ์์์ด ํ์๋๋ ์๋ฆฌ๋ก, ์ด ์คํ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋น๊ต์ ์์ ์ ์ด๊ณ ๊ฐํธํ๋ฉฐ ์ ๋ขฐ์ฑ์ด ๋์ ์ฅ์ ์ ๊ฐ์ง๊ณ ์์ด ํญ์ฐํ๋ฅ ์ธก์ ์ ๋๋ฆฌ ์ด์ฉ๋๊ณ ์๋ค. ์ฐ์ฐ๊ณ ๋ก์ \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ \(4 \)๊ฐ์ง ์ ๊ธฐ์ฉ๋งค ์ถ์ถ ๋ถํ๋ฌผ์ ๊ฐ ๋๋ ๋ณ DPPH ์๊ฑฐ๋ฅ์ ์ดํด๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ, \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ 4๊ฐ์ง ์ ๊ธฐ์ฉ๋งค ์ถ์ถ ๋ถํ๋ฌผ์ ์ฐ์ํ DPPH ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ \( \mathrm{Hx} \) ๋ถํ๋ฌผ์ ์ ์ธํ ๋๋จธ์ง \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๋ถํ๋ฌผ์ 50 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์์ 80 \( \% \) ์ด์์ DPPH radical ์๊ฑฐ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ฌ ์ฐ์ฐ๊ณ ๋ก์ ์ DPPH ์๊ฑฐ๋ฅ์ด ๋งค์ฐ ์ฐ์ํ ๊ฒ์ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค(Table 1). ํนํ EtOAc ๋ถํ๋ฌผ์ 5 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์์๋ 80 \( \% \) ์ด์์ ๋์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ 4.47 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ \( \mathrm{EC} _{50} \) ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์ด ๊ฐ์ฅ ์ฐ์ํ DPPH ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๊ฐ์ง๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>ํญ์ฐํ ํจ์์ธ peroxidase์ catalase์ ์ํด ๋ถํด๋๋ \( \mathrm{O}_{2}^{-} \)๋ ๋ฌดํดํ ๋ฌผ ๋ถ์์ ์ฐ์ ๋ถ์๋ก ์ ํ๋๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์ธ๋ถ์ ์๊ทน์ ์ํด ์ฒด๋ด ํญ์ฐํ ๋ฐฉ์ด์ฒด๊ณ์ ๊ท ํ์ด ๊นจ์ง๊ฒ ๋๋ฉด \( \mathrm{O}_{2} \) ๋ ๊ณผ๋ํ๊ฒ ์์ฑ๋๋ฉด์ ์์ฒด ๋ด ์ธํฌ์ ์ ํดํ ์์ฉ์ ํ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์กฐ์ง์ ์ฐํ ๋ฐ ๋
ธํ๋ฅผ ์ด์ง์ํค๊ฒ ๋๋ค. ๋ณธ ์คํ์์ \( \mathrm{O}_{2} \) ์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋ชจ๋ \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ 4๊ฐ์ง ์ ๊ธฐ์ฉ๋งค ์ถ์ถ ๋ถํ๋ฌผ์์ \( \mathrm{O}_{2}^{-} \)์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ, ํนํ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ๋ฌผ์ 100 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์ \( 80 \% \) ์ด์์ ์๊ฑฐ๋ฅ์ ๋ํ๋ด์ด ์ฐ์ฐ๊ณ ๋ก์ \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ 4๊ฐ์ง ์ ๊ธฐ์ฉ๋งค ์ถ์ถ ๋ถํ๋ฌผ ์ค ๊ฐ์ฅ ๋์ \( \mathrm{O}_{2}^{-} \)์๊ฑฐ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ง๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธํ์๋ค(Table 2).</p><p>์์ฐ๊ณ์ ๋๋ฆฌ ๋ถํฌํ๊ณ ์๋ ๋ํ์ ์ธ ํญ์ฐํ ์ฑ๋ถ์ธ ํ๋์ phenolic hydroxyl๊ธฐ๋ฅผ ๊ฐ์ง๋ 2์ฐจ ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ๋ก ๋ค์ํ ๊ตฌ์กฐ ๋ฐ ๋ถ์๋์ ๊ฐ์ง๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ํญ์, ํญ์ผ์ฆ ๋ฐ ํญ์๋ ๋ฅด๊ธฐ ์์ฉ ๋ฟ ์๋๋ผ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ ๋ฐ์ด๋ free radical์ ์ํด ์ ๋ฐ๋๋ ๋ค์ํ ์ง๋ณ์ ์๋ฐฉ ๋ฐ ์น๋ฃ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ์ง๋ฉฐ ํนํ ์๋ฌผ์ ํจ์ ๋ ํ๋์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ด ๋ฐ์ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ด ํ๋ ํจ๋์ tannic acid๋ฅผ ํ์ค๋ฌผ์ง๋ก ํ์ฌ ์คํ์ ์งํํ์๋ค. Tannic acid equivalent ํ๋ ํจ๋์ ์ดํด๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ, \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ์ 192.10 \( \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) extract, \( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ๋ฌผ์ 182.12 \( \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) extract, \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ๋ฌผ์ 532.63 \( \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) extract, MC ๋ถํ๋ฌผ์ 96.22 \( \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) extract, \( \mathrm{Hx} \) ๋ถํ๋ฌธ์11.68 \( \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) extract์ผ๋ก ๋ํ๋ ์ฐ์ฐ๊ณ ๋ก์ \( \mathrm{MeOH} \) ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๋ถํ๋ฌผ ์ค \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ๋ฌผ์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ ํ๋ ํจ๋์ ๊ฐ์ง๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. 1).</p> |
๋ณธ๋ฌธ์์ bradford๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๋ฌด์์ ์ธก์ ํ์์ต๋๊น? | -\(70\)\( ^{\circ} \mathrm{C} \) | <h2>๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์ ์ถ์ถ</h2><p>์๋ฆดํฌ๋ฉ์ดํธ ํ์ฆ ์ฒ๋ฆฌ ํ ์ฝ์ถฉ์ -\(70\)\( ^{\circ} \mathrm{C} \)์ ๋ณด๊ดํ๊ณ ์ด๋ฅผ ํจ์ ํฌ์ ์ฉ์ก \(250\)\(\mathrm{mM} \) sucrose, \(10\)\(\mathrm{mM} \) Tris-HCl, \(\mathrm{pH} \) 7.4) 200\( \mu \mathrm{L} \) ์ ๋ฃ๊ณ ์ผ์์ ์ ์งํ ์ฑ๋ก ๊ท ์งํ ํ์๋ค. ๊ท ์งํํ ์ฉ์ก์ \(4\)\(^ {\circ} \mathrm{ C } \), 600 \(\mathrm{G}\), \(10\)๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ํ์๋ค. ๋ถ๋ฆฌํ ์๋ฑ์ก์ \(4\)\( { }^{\circ} \mathrm{C}\), 10,000 \(\mathrm{G}\), \(15\)๋ถ๊ฐ ๋ค์ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ๊ณ ์๋ฑ์ก์ ์ ๊ฑฐํ์๋ค. ์นจ์ ๋ฌผ์ ํจ์ ํฌ์ ์ฉ์ก \(20\)\( \mu \mathrm{L} \) ์ ๋
น์ฌ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์ ์์ก์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋จ๋ฐฑ์ง ์ ๋์ bradford๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ์ํํ์์ผ๋ฉฐ, ํ์ค ๋จ๋ฐฑ์ง๋ก BSA์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ํ์ค๊ณก์ ์ ์ป์๋ค. \(96\)well plate์ ์ผ์์์ฝ \(250\)\( \mu \mathrm{L} \) ์ ์๋ฃ \(5\)\( \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ํผํฉํ๊ณ \(5\)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์ ์ํจ ๋ค \(595\)\( \mathrm{~nm} \)์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h2>Cytochrome c oxidase (cox) ํ์ฑ ์ธก์ </h2><p>๊ธฐ์ง๋ก ํ์ํ Cytochrome c๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๊ณ Cytochrome c (\(2.7\)\( \mathrm{mg} \) )๋ฅผ ์นญ๋ํ์ฌ ์ฆ๋ฅ์ \(1\)\( \mathrm{~mL} \) ์ ์ฉํดํ์๋ค. ์ด ์ฉ์ก์ \(0.1\)\( \mathrm{M} \)Dithiothreitol 5\( \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ๋ฃ๊ณ ์์จ์์ \(30\)๋ถ๊ฐ ๊ฐ์์์ ๋ถํ์์ผ๋ก ๋ณํ ๋๊น์ง ๋ฐ์์ํค๊ณ \(30\)์ด ๊ฐ๊ฒฉ \(10\)๋ถ๊ฐ \(550\)\( \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋ ๋ณํ์ ์ ๋ฌด๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ์์ ํ ํ์๋ cytochrome c ์ฉ์ก์ Tris-buffer ์ฉ์ก (\(120\)\( \mathrm{ mM } \) KCl, 10\( \mathrm{ mM } \) Tris-HCl, \( \mathrm{ pH } \) 7.4)๋ก \(10\)๋ฐฐ ํฌ์ํ์ฌ ํจ์ ํ์ฑ ๋ฐ์์ก์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ถ์ถํ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์ ์์ก์ ์ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์ ์ถ์ถ ์ ์ฌ์ฉํ ํจ์ ํฌ์ ์ฉ์ก์ผ๋ก ์ฌํฌ์ ํ์์ผ๋ฉฐ \(20\)\( \mu \mathrm{L} \)๋ฅผ ํจ์ ํ์ฑ ๋ฐ์์ก \(180\) \( \mu \mathrm{L} \) ๊ณผ ํํฉํ์ฌ \(30\)์ด ๊ฐ๊ฒฉ \(60\)๋ถ ๋์ \(550\)\( \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. COX ํ์ฑ์ \( \mathrm{ Unit/mg } \) ๋จ์๋ก ํํํ์์ผ๋ฉฐ, \(1\)\( \mathrm{ Unit } \)์ \(1\)\( \mu \mathrm{mole} \) ์ ํ์๋ cytochrome c๊ฐ \(1\)๋ถ๋น ์ฐํ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ ์ํ์์ผ๋ฉฐ ์ด๋ ์กฐ๊ฑด์ ์์จ, \( \mathrm{pH} \) \(7.4\)์๋ค. ๊ฒฐ๊ณผ๋ SPSS ํต๊ณ ํ๋ก๊ทธ๋จ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ One-way ANOVA ๋ฐ Tukey test ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ ํ์๋ค.</p> |
๋ณธ๋ฌธ์ ์ฐ๊ตฌ์์ 10 \( \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{mL} \) glutathione์ ๊ฒฌ์ค ๋งํ ํญ์ฐํ ๋ฅ๋ ฅ์ ๋ณด์ฌ์ค ๊ฒ์ ์ด๋ค ์ธต์ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด์์ด? | glutathione | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์ธํฌ ์์กด์จ</h2><p>๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ด HaCaT cell๊ณผ B16F10 cell์ ๋ํด ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ์ ๋ฉ๋ผ๋ ํฉ์ฑ ์ ํด ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋์ง๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ ์คํ์ ํ๊ธฐ ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ ์ธํฌ๋ค์ ๋ํ ๋
์ฑ ์ฌ๋ถ๋ฅผ ์์ ๋ณด์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ \( \mathrm{CHCl_{3}} \)์ธต๊ณผ EtOAc์ธต, DW์ธต์ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ HaCaT cell์ ์์กด์ ์ํฅ์ ์ฃผ์ง ์์๊ณ B16F10 cell๋ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ ์ฒ๋ฆฌํ์์ ๋, ๋์กฐ๊ตฐ \( (100 \%) \)์ ๋นํด ์์กด์จ์ด ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด์ HaCaT cell๊ณผ B16F10 cell์ ์์กด์จ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋์๋ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ ๋๋์ ๋์ผํ ๋๋์ธ \( 10,20,40 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋๋ก ํญ์ฐํ์ ๋ฉ๋ผ๋ ํฉ์ฑ ์ ํด ํจ๊ณผ ์คํ์ ์งํํ์๋ค(Fig. 1).</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Kang๊ณผ Jung์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์กฐ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ์ธํฌ๋
์ฑ์ ๋ณด์ด์ง ์์๋ค๋ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ์นํ์๊ณ ์ด๋ฅผ ํตํด์ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ๊ฐ ์์ ํ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ผ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋์๋ค.</p><h2>ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ</h2><p>๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ด ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋์ง๋ฅผ ์์๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ, ๊ฐ์งํ์ฑ์ธํฌ์ธ HaCaT cell์ ๋ํด ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ด ๋๋์์กด์ ์ผ๋ก ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์๋ค(Fig. 2). ํนํ, EtOAc์ธต ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ด ์ฐํ์คํธ๋ ์ค์ ์ฐ์ํ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋๋ฐ \( \mathrm{H_{2}O_{2}} \) ๋์กฐ๊ตฐ(\( 100\% \))์ ๋นํด ์ฐํ์คํธ๋ ์ค๊ฐ \( 53 \)-\( 55 \% \) ๊ฐ์๋์๋ค. DW์ธต๊ณผ \( \mathrm{CHCl_{3}} \)์ธต ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค๋ ์ฐํ์คํธ๋ ์ค๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ \( 36\)-\( 54 \%, 36\)-\( 47 \% \) ๊ฐ์์์ผฐ๋ค. ๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด์ ํ๋จํ ๋, ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ค์ด ์์ฑ๋์กฐ๊ตฐ์ธ glutathione \( (58 \%) \)๊ณผ ํญ์ฐํ ๋ฅ๋ ฅ์ด ์ ์ฌํ ์ ๋๋ก ์ฐ์ํ ํญ์ฐํ ๋ฌผ์ง์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋๋ค.</p><p>ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ์ ๋ํ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ ์ค์ Jung์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ \( 99 \% \) ์ํ์ฌ ์กฐ์ถ์ถ๋ฌผ \( 50,100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์์ ๋๋์์กด์ ์ผ๋ก ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋ฌ๋ค๊ณ ํ๋ค. ์ด๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ถํํ 3๊ฐ์ง ์ธต์ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ๋ชจ๋ ๋๋์์ ์ฐ์ํ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋ ๊ฒ๊ณผ ์ผ์นํ ๊ฒฐ๊ณผ์ด๋ค. ๋ง๋ถ์ฌ, ๋ถํํ ๊ฒฝ์ฐ ๋ฎ์ ๋๋์์๋ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋๋ ๊ฒ์ ์ ์ ์์๋ค. ์ด๋ 3๊ฐ์ง ์ฉ๋งค๋ฅผ ํตํด์ ๋ถํ๋๋ฉด์ ํ์ฑ๋ฌผ์ง๋ค์ด ๋ถ๋ฆฌ, ๋์ถ๋์๊ธฐ์ ๋ฎ์ ๋๋์์๋ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋๋ค. ๋ํ, Chung์ ์ฐ๊ตฌ์์๋ \( 60 \% \) ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ์๋ก๋์, ๋ธ๋์ปค๋ฐํธ์ ๋นํด DPPH ๋ฐ ABTS radical ์๊ฑฐ๋ฅ, FRAP, ํ์๋ ฅ์์ ์ ์์ ์ผ๋ก ํ์ฑ์ด ๋์๊ณ ์์ฑ ๋์กฐ๊ตฐ์ธ ascorbic acid์ ๋นํด์๋ ์ฐ์ํ๋ค๊ณ ํ์๋ค. ์ด๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ EtOAc์ธต ์ถ์ถ๋ฌผ์ด glutathione (10 \( \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{mL} \) )์ ๋น๊ฒฌํ ๋งํ ํญ์ฐํ ๋ฅ๋ ฅ์ ๋ณด์ธ ๊ฒ๊ณผ ์ผ์นํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํด์ ๋งํค๋ฒ ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฒ์ฐ ํญ์ฐํ์ ๋ก ํ์ฉํ ์ ์๋ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์๋ ์๋ฃ๋ก ์๊ฐ๋๋ค.</p> |
๊ฒฝ๊ณผ์ผ๋ณ ํ ์ ์ค tricyclazole ์๋ฅ ๊ฐ์๊ฐ ์ ์ฉ๋ ์์ ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ๋ ์ผ๋ง์ธ๊ฐ? | 1์๊ฐ | <h2>ํ ์ ์ค Tricyclazole์ ๋ถ์</h2><p>ํ ์ \( 20 \mathrm{~g} \)์ ์ทจํ์ฌ ์ฆ๋ฅ์ \( 30 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๊ฐํ๊ณ 1์๊ฐ ์ ์นํ ํ \( 100 \mathrm{~mL} \) acetone์ ๊ฐํ์ฌ ์งํ๊ธฐ๋ก 30๋ถ๊ฐ \( 200 \mathrm{~rpm} \)์ผ๋ก ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ์ก์ Bรผchner funnel๋ก ํก์ธ์ฌ๊ณผํ๊ณ \( 30 \mathrm{~mL} \) acetone์ผ๋ก ์์ฌ ๋ฐ ์ฉ๊ธฐ๋ฅผ ์ป์ด ์์ ์ฌ์ก๊ณผ ํฉํ์๋ค. ์ฌ์ก์ \( 500 \mathrm{~mL} \) ๋ถ์ก์ฌ๋์ ์ฎ๊ธฐ๊ณ \( 20 \mathrm{~mL} \) ํฌํ์์ผ์์ \( 80 \mathrm{~mL} \) ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฐจ๋ก๋ก ๊ฐํ ํ dichloromethane \( 70 \mathrm{~mL} \)๋ก 2ํ ๋ถ๋ฐฐ ์ถ์ถํ์๋ค. Dichloromethane ์ถ์ถ์ก์ \( 20 \mathrm{~g} \)์ anhydrous sodium sulfate์ ํต๊ณผํ์ฌ ํ์ํ๊ณ \( 40~^{\circ} \mathrm{C} \) ์์์์์ ๊ฐ์๋์ถ ํ ํ dichloromethane \( 2 \mathrm{~mL} \)์ ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ์ ์ ๊ณผ์ ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. dichloromethane \( 5 \mathrm{~mL} \)๋ก ํ์ฑํ ์ํจ SPE-\(\mathrm{NH}_{2}(1 \mathrm{~g}) \) catridge์ ์ฌ์ฉํด๋ ๋ถ์์๋ฃ๋ฅผ ๊ฐํ๊ณ , \( 8 \mathrm{~mL} \) methanoldichloromethane \( (5 / 95,~ \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)์ผ๋ก ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ์ง์๊ฑด๊ณ ํ์๋ค. ๊ฑด๊ณ ํ acetonitrile \( 4 \mathrm{~mL} \)๋ก ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ \( 5 ~\mu \mathrm{L} \)์ฉ HPLC-VWD์ ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ํ๋ chromatogram์์ peak area๋ฅผ ํ์ค๊ฒ๋์ง์ ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ์๋ฅ๋์ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>์๊ฐ์ด ๋ฐฐ์ถ ์ค Tricyclazole์ ๋ถ์</h2><p>๋ง์๋ ์๊ฐ์ด ๋ฐฐ์ถ์๋ฃ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ทจํ์ฌ ์ฆ๋ฅ์ \( 30 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๊ฐํ๊ณ 1์๊ฐ ์ ์นํ ํ \( 100 \mathrm{~mL} \) acetone์ ๊ฐํ์ฌ ์งํ๊ธฐ๋ก 30๋ถ๊ฐ \( 200 \mathrm{~rpm} \)์ผ๋ก ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ์ก์ Bรผchner funnel๋ก ํก์ธ์ฌ๊ณผ ํ๊ณ \( 30 \mathrm{~mL} \) acetone์ผ๋ก ์์ฌ ๋ฐ ์ฉ๊ธฐ๋ฅผ ์ป์ด ์์ ์ฌ์ก๊ณผ ํฉํ์๋ค. ์ฌ์ก์ \( 500 \mathrm{~mL} \) ๋ถ์ก์ฌ๋์ ์ฎ๊ธฐ๊ณ \( 20 \mathrm{~mL} \) ํฌํ์์ผ์์ \( 80 \mathrm{~mL} \) ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฐจ๋ก๋ก ๊ฐํ ํ dichloromethane \( 70 \mathrm{~mL} \)๋ก 2ํ ๋ถ๋ฐฐ ์ถ์ถํ์๋ค. Dichloromethane ์ถ์ถ์ก์ \( 20 \mathrm{~g} \)์ anhydrous sodium sulfate์ ํต๊ณผํ์ฌ ํ์ํ๊ณ \( 40^{~\circ} \mathrm{C} \) ์์์์์ ๊ฐ์๋์ถ ํ ํ dichloromethane \( 2 \mathrm{~mL} \)์ ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ์ ์ ๊ณผ์ ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. dichloromethane \( 5 \mathrm{~mL} \)๋ก ํ์ฑํ ์ํจ SPE-\( \mathrm{NH}_{2}(1 \mathrm{~g}) \) catridge์ ์ฌ์ฉํด๋ ๋ถ์์๋ฃ๋ฅผ ๊ฐํ๊ณ , \( 8 \mathrm{~mL} \) methanol/dichloromethane \( (5 / 95,~ \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)์ผ๋ก ์ฉ์ถ์์ผ ๊ทธ ์ฉ์ถ์ก์ ์ง์๊ฑด๊ณ ํ์๋ค. ๊ฑด๊ณ ํ acetonitrile \( 2 \mathrm{~mL} \)๋ก ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ \( 5~ \mu \mathrm{L} \)์ฉ HPLC-VWD์ ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ํ๋ chromatogram์์ peak area๋ฅผ ํ์ค๊ฒ๋์ง์ ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ์๋ฅ๋์ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>ํ ์ ๋ฐ ์๊ฐ์ด ๋ฐฐ์ถ ์ค Tricyclazole์ ํ์์จ ํ์ธ</h2><p>Tricyclazole ํ์ค์ฉ์ก \( 10.0 \mathrm{~mg} / \mathrm{L} \)์ ๋ฌด์ฒ๋ฆฌ ํ ์์๋ฃ \( 20 \mathrm{~g} \)์ ๊ฐ๊ฐ \( 0.4 \) ๋ฐ \( 2.0 \mathrm{~mL} \), ๋ฌด์ฒ๋ฆฌ ๋ฐฐ์ถ \( 10 \mathrm{~g} \)์ ๊ฐ๊ฐ \( 0.2,~1.0 \mathrm{~mL} \) ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ ์๋ฅ๋์ด \( 0.2 \) ๋ฐ \( 1.0 \mathrm{~mg} / \mathrm{kg} \)์ด ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์์ ์๋ฅ๋ถ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถ, ์ ์ ํ ํ HPLC-VWD๋ก ๋ถ์ํ์ฌ ํ์์จ์ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>๋ฐ๊ฐ๊ธฐ</h2><p>๊ฒฝ๊ณผ์ผ๋ณ ํ ์ ์ค tricyclazole ์๋ฅ ๊ฐ์๋ Sigma Plot ํ๋ก๊ทธ๋จ(Simasoft, ์์ธ, ๋ํ๋ฏผ๊ตญ)์ ์ด์ฉํ์ฌ ์๋์ ์์ ์ ์ฉํ์๋ค.</p><p>\( \begin{aligned} \mathrm{C}_{\mathrm{t}} &=\mathrm{C}_{0} \cdot \mathrm{e}^{-\mathrm{kt}} \\ \ln \mathrm{C}_{\mathrm{t}} &=\ln \mathrm{C}_{0}-\mathrm{\kappa t} \end{aligned} \)</p><p>\( \left(\mathrm{C}_{\mathrm{t}}\right. \) : ์๋ฅ๋, \( \mathrm{C}_{0} \) : ์ด๊ธฐ์๋ฅ๋, \( \kappa \) : ๊ฐ์์์, \( \mathrm{t} \) : ์๊ฐ \( ) \)</p><p>๋ฐ๊ฐ๊ธฐ๋ \( \ln 2 / \mathrm{k} \)์ ๊ฐ์ผ๋ก ํํ๋๋ฉฐ \( 0.693 / \mathrm{k} \)์ ๊ฐ๋ค.</p> |
์ ๊ตญ์ ์ธ ๋จ์์ ์ ์ฃผ ใ
๋ฌด๊ธฐ๋น์ ํจ๋์ ๋ํ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ๋ง์ด ์ด๋ฃจ์ด์ก์ด? | ๋น์์ค์ผ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์์ ์ ์ธ๊ณ ์ธ๊ตฌ์ \( 50 \% \) ๊ฐ๋์ด ์ฃผ์์ผ๋ก ์ด์ฉํ๊ณ ์๋ค. ๋ํ, ๋ฐฉ๊ธ๋ผ๋ฐ์, ์ธ๋, ๋ฒ ํธ๋จ ๋ฑ ๋ง์ ์์์ ๊ตญ๊ฐ์ ์์ด์ ์์ ๋น์์ค์ผ์ ๋์
์์ ๊ฐ์ฅ ์ฌ๊ฐํ ๋ฌธ์ฒด ์ค ํ๋๋ก ์ธ์๋๊ณ ์๋ค. ํนํ ๊ด๊ฐ์ฉ์๋ฅผ ๋ง์ด ํ์๋ก ํ๋ ๋ฒผ๋์ฌ์ ๊ฒฝ์ฐ, ๋น์๋ก ์ค์ผ๋ ๊ด๊ฐ์ฉ์๋ฅผ ์ฌ์ฉํ ์ ์ค ๋น์ํจ๋์ด ๋๋ค๋ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์ง์๋๊ณ ์๋ค. ์ต๊ทผ, ์ธ๊ณ์๋๊ธฐ๊ตฌ(Food an Agricultural Organization, FAO)์ ์ธ๊ณ๋ณด๊ฑด๊ธฐ๊ตฌ(World Health Organization, WHO)๊ฐ ๊ณต๋ ์ฃผ๊ดํ๋ ์ํ๊ธฐ์ค ๊ท๊ฒฉ์์ํ ์ค์ผ๋ฌผ์ง๋ถ๊ณผ์์ํ(Codex Committee on Contaminants in Foods; CCCF)๋ ๋ฐฑ๋ฏธ์ ํ๋ฏธ์ ๋ฌด๊ธฐ๋น์ ๊ธฐ์ค์ ๊ฐ๊ฐ \(0.2\)๊ณผ, \( 0.35 \mathrm{mg} \mathrm{kg}^{-1} \) ์ผ๋ก ์ค์ ํ๊ณ ํ์๊ตญ์ ๊ถ์ฅ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ ์ํ์๋ค. ๊ทธ๋์, ์ ์ค ๋ฌด๊ธฐ๋น์ ๊ธฐ์ค์ค์ ์ ๊ดํ ๋
ผ์์์๋ ์ ์ค ๋ฌด๊ธฐ๋น์ ํจ๋์ ๊ดํ ์ค๊ตญ, ์ผ๋ณธ, ๋ฏธ๊ตญ, EU ๋ฑ 10์ฌ๊ฐ๊ตญ ์๋ฃ๋ฅผ ๊ฒํ ํ์์ผ๋ ๊ตญ๋ด์ ์๋ฃ๋ ํ์ฉ๋์ง ์์๋ค. ์ ์ค ๋น์์ ๊ดํ ๊ตญ๋ด ๋ชจ๋ํฐ๋ง ๊ฒฐ๊ณผ๋ ์ฃผ๋ก ๋ฐฑ๋ฏธ์ ํ๋ฏธ์ ์ด๋น์ ํจ๋์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๊ณ , ๋ฌด๊ธฐ๋น์์ ๋ณด๊ณ ๋ ์ต๊ทผ์ ํ๋ฐ์ด ์งํ๋๊ณ ์๋ค. Paik ๋ฑ ์ \( 1 \% \) ์ง์ฐ์ ํจ์ ํ methanol-water (1:1) ํผํฉ์ก์ผ๋ก ์ถ์ถํ์ฌ high performance liquid chromatography coupled with nductively coupled plasma-mass spectrometry (HPLC-ICP-MS)๋ก ๋ถ์ํ ๋ฐฑ๋ฏธ ์ค ๋ฌด๊ธฐ๋น์ ํจ๋์ด \(8.6\)-\(37.2 \mu \mathrm{g} \mathrm{kg}^{-1} \) ์ผ๋ก ์ด ๋น์์ \(35.4\)-\( 73.3 \% \)๋ฅผ ์ฐจ์งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. Kim ๋ฑ ์ \( 1 \% \) ์ง์ฐ์ผ๋ก ์ถ์ถํ 30์ ์ ๋ฐฑ๋ฏธ ์๋ฃ์์ ๋ฌด๊ธฐ๋น์ ํจ๋์ด ํ๊ท \( 0.085 \mathrm{mg} \mathrm{kg}^{-1} \) ์ ์ด๋น์์ ๋ํ ๋ฌด๊ธฐ๋น์์ ๋น์จ์ด \( 54.5\)-\(87.86 \% \) ๋ก ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๋ํ Kim ๋ฑ์ ํ๊ด์ฐ ์ธ๊ทผ์์ ์ฑ์ทจํ ํ๋ฏธ์ ๋ฐฑ๋ฏธ ์ค ๋ฌด๊ธฐ๋น์ ํจ๋์ด ๊ฐ๊ฐ \( 0.09 \mathrm{mg} \mathrm{kg}^{-1} \) (\( 0.02\)-\(0.31 \mathrm{~m} \mathrm{~kg}^{-1}\)), \(0.05 \mathrm{mg} \mathrm{kg}^{-1}\) (\(0.01\)-\(0.11 \mathrm{mg} \mathrm{kg}^{-1}\)) ์ผ๋ก ์กฐ์ฌ๋์๊ณ ์ด์ ๋ํ ์ํด์ฑ ํ๊ฐ๋ก ์ธ์ฒด์ ๋ฏธ์น๋ ์ํด์ฑ์ด ๋ฏธ๋ฏธํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋, ์ ๊ตญ์ ์ธ ๋จ์์ ์ ์ค ๋ฌด๊ธฐ๋น์ ํจ๋์ ๊ดํ ๋ณด๊ณ ๋ ๊ทนํ ์ ํ์ ์ด๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ ์ค๊ธ์ ๋น์ค์ผ ์ ์ฃผ์ฐ๋จ์ง ๋
ผํ ์์์ ์์ฐ๋ ํ๋ฏธ์ ๋ฐฑ๋ฏธ ์ค ๋น์ ํํ์ข
ํจ๋์ ๋ํ ํํฉ์ ํ์
ํ๊ณ ์ ์ค ๋น์ ๊ธฐ์ค์ค์ ๋ฐ ์์ ๋น์์ค์ผ์ ๋ํ ์์ ๊ด๋ฆฌ์ ๊ธฐ์ด ์๋ฃ๋ฅผ ์ ๊ณตํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> |
์ค๋ฏธ์ ์ข
์์ ํจ์ ๋ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๋ถ์ํ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ณด๊ณ ์ค ์ด๋ค ๋ฐฉ์์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ์กฐํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ํ์ฌ ํญ์ผ์ฆ ํจ๊ณผ์๋ ํ์ํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋์ฑ ์ฆ๊ฐํ๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์์ด? | 9-10์์ ๊ณผ์ค์ด ์ด๋ฆฌ๊ณ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ค๋ฏธ์๋ ์ค๋ฏธ์ ๋๋ฌด๊ณผ(Schisandraceae)์ ์ํ๋ ๋์ฝ์ฑ ๋ชฉ๋ณธ์ ๋ฉ๊ตด์ฑ ์๋ฌผ๋ก ๋ฅ๊ทผ ํํ์ ๋ถ์์ ๊ณผ์ค์ด๋ค(Jung ๋ฑ, 2000; Mok 2005). ์ค๋ฏธ์๋ 6-8์์ ๊ฐํํ์ฌ 9-10์์ ๊ณผ์ค์ด ์ด๋ฆฌ๊ณ ์๋ฆฌ๊ฐ ๋ด๋ฆฐ ํ, ์ฑ์ทจํ์ฌ ์ฌ์ฉํ๋ฉฐ, ์ค๋ฏธ์ ๊ณผ์ก์ ๋ฌ๊ณ ๋ ์ ๋ง์ ๋ํ๋ด๋ฉฐ, ํต์ค์ ๋งต๊ณ ๋ ๋ซ์ผ๋ฉฐ ๋ํ ์ด๋ง์ด ํฉํด์ ธ์ ๋ค์ฏ ๊ฐ์ง์ ๋ง์ด๋ผ๊ณ ํ์ฌ ๊ทธ ๋ช
์นญ์ด ์ ๋๋์๋ค(Moon ๋ฑ, 2003; Jeong ๋ฑ 2006). ์ค๋ฏธ์์ ์ฃผ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ ๋ฆฌ๊ทธ๋ ํํฉ๋ฌผ์ด ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, schizandrin, gomisin N ๋ฐ gomisin A ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋ง์ด ํจ์ ๋์ด ์์ผ๋ฉฐ(Yukinobu ๋ฑ, 1979; Sohn and Bock 1989; Kim ๋ฑ, 2002), ์ค๋ฏธ์์ ๋ถ์์์ \( 80 \% \) ์ด์์ด anthocyanin ์ ํจ์ ๋ก ์ธํ ๊ฒ์ด๋ฉฐ, ์ด๋ฌํ anthocyanin์ peonidin 3-glucoside์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์๋ค(Song 1982). ์ด์ ๊ฐ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ์ด ํจ์ ๋ ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ค์ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์งํ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ํนํ, ์์ฝ์ฌ ํด๋
์์ฉ ๋ฐ ๊ฐ ๋ณดํธ ํจ๊ณผ(Lee์ Lee 1990; Kim ๋ฑ, 2000), ๊ฐ์์ธํฌ์ ๋ํ ํญ์ํจ๊ณผ(Rho ๋ฑ, 2002), ๋์ฅ์์ธํฌ ์ฆ์์ต์ ํจ๊ณผ(Ryu์ Chung 2011), ๊ณ ์งํ์ฆ ์ํ(Ock 1995), ํ๋น ๋ฐ ํ์๊ฐํ ๋ฑ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์๋ ค์ ธ ์๋ค(Whang 2002; Ko ๋ฑ, 2004; Kim ๋ฑ, 2009).</p><p>๋ํ, ์ด๋ฌํ ์ค๋ฏธ์์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ์ ์ต๊ทผ ์ฒ์ฐ ํญ์ฐํ์ ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ ์ด๋ฃจ์ด์ง๋ฉด์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๊ฐ๊ณ ์๋ ์ฒ์ฐ ์ฌ๋ฃ๋ก ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์๋ค. ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์ฒ์ฐ ์ฌ๋ฃ์์์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด์๋ ๋ค์ํ ์ฉ๋งค๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฒ์ฐ ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ถ์ถํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋๋ถ๋ถ์ด๋ค. ์ด์ ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ์ด์ \( \left(\mathrm{H}_{2} \mathrm{O}\right) \) ๋ฐ ์ํ์ฌ (EtOH) ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ถ์ถํ ์ค๋ฏธ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์์๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์๋ค. ์ฆ, ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ์ด์ ๋ฐ ์ํ์ฌ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ถ์ถํ ๋ค์ ์ถ์ถ๋ฌผ ๊ฐ๊ฐ์ ๋ํ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์์๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ ์ด์ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ณด๋ค ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ์ผ๋ฉฐ, ์์จ์ผ ๋ ๋ณด๋ค ๊ฐ์จ์ ํ ๊ฒฝ์ฐ ๋ ๋์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์๋ค(Kwon๊ณผ Park 2006; Kim ๋ฑ, 2009; Kim๊ณผ Park 2010). ๋ํ, ์ค๋ฏธ์์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๊ณผ์ก๋ณด๋ค๋ ์ข
์์ ๋ง์ด ํจ์ ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค(Choi ๋ฑ, 2011; Kim ๋ฑ, 2013). ๋ํ, ์ค๋ฏธ์ ์ข
์์ ํจ์ ๋ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๋ถ์ํ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ณด๊ณ ์ค ์ค๋ฏธ์ ์ข
์์ ๋ถ์ ํ ์ฉ๋งค์ถ์ถ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ์กฐํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ํ์ฌ ํญ์ผ์ฆ ํจ๊ณผ์๋ ํ์ํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋์ฑ ์ฆ๊ฐํ๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์๋ค(Kwon ๋ฑ, 2001; Choi ๋ฑ, 2013).</p><p>์ด์ ๊ฐ์ด ์ค๋ฏธ์์ ๊ดํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ ์งํ๋๋ฉด์ ์ฃผ๋ก ์ฝ์ฉ์๋ฌผ๋ก ์ฌ์ฉ๋์ด ์๋ ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ํ์ฉํ์ฌ ๋ค์ํ ์๋ฃ์ ๋ํ ์์์ ๊ณต๊ธ์ด ์ฆ๊ฐํ๊ฒ ๋๊ณ , ์ค๋ฏธ์์ ์ฌ๋ฐฐ, ์์ฐ ํ๋์ ๋๋ถ์ด ๋์ฐ์
์ ๊ณ ๋ถ๊ฐ๊ฐ์น ์๋ฌผ๋ก ์๋ฆฌ๋งค๊น ํ๊ณ ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ์ค๋ฏธ์ ์ ํต ์ \( 80 \% \) ์ด์์ด ์๊ณผ ํํ๋ก ํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, \( 20 \% \) ์ ๋๋ง ๊ฑด์กฐ ๋๋ ์ก์ฆ ํํ๋ก ๊ฐ๊ณตํ์ฌ ํ๋งคํ๊ณ ์๋ค(Kim ๋ฅ, 2012). ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์์ค์์ ์ฝ๊ฒ ์ ํ ์ ์๋ ์ค๋ฏธ์๋ ์ ์ฅ์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํจ ๊ฑด์กฐ๋ ์ค๋ฏธ์์ด๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ ์ค๋ฏธ์์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ณด๋ค๋ ๋๋ถ๋ถ์ด ๊ฑด ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ฐ๊ตฌ ๋ณด๊ณ ์ด๋ค. ๋ํ, ์ ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฐ๊ตฌํ ๋ณด๊ณ ์์๋ ๋๋ถ๋ถ ์ฐฉ์ฆ ๊ณต์ ์ ๊ฑฐ์ณ ์์ฐ๋ ๊ฐ๊ณตํ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ ์๋ฃ์ผ ๋ฟ ์ ์ค๋ฏธ์์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ง์ด ๋ถ์กฑํ ์ค์ ์ด๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ์ฐฉ์ฆํ๊ณ ๋จ์ ์ฐฉ์ฆ๋ฐ์ ๋ํ ํญ์ฐํ์ ํน์ฑ ๋ฐ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ ์ค ํ๋์ธ schizandrin ํจ๋์ ์ธก์ ํ์ฌ ์ ์ค๋ฏธ์์ ํน์ฑ์ ์์๋ณด๊ณ ์ ํ๋ค. ์ฆ, ์ ์ค๋ฏธ์์ ์ฐฉ์ฆ ํ ๋ฒ๋ ค์ง๋ ๋ง์ ์์ ์ฐฉ์ฆ๋ฐ์ ๊ฐ๊ณต์ํ์ ์๋ฃ๋ก ์ด์ฉํ ์ ์๋์ง์ ๋ํ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์์๋ด์ผ๋ก์จ ์ ์ค๋ฏธ์ ์ฐฉ์ฆ๋ฐ์ ๋ํ ํ์ฉ๋๋ฅผ ์ฆ๊ฐ์ํฌ ์ ์์ผ๋ฉฐ, ์ค๋ฏธ์๋ฅผ ์์ฐํ๋ ๋๊ฐ์ ๋ํ ๊ฒฝ์ ์ ์ฑ์ฅ์ ๋์์ ์ฃผ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> |
๊ฐ์ฅ ์ด์ถฉํจ๊ณผ๊ฐ ์ ์ ๊ฒ์? | ํ์์์ ์ถ์ถํ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ๋ํด์๋ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ ์ ์ถฉ | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌํ์ ์ด์ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์๋ฌผ์ฒด์์ ์ถ์ถํ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ๊ณผ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ์ ์ด์ถฉํ์ฑ์ ์กฐ์ฌํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ์ ์นผ๋ฆฝํฌ์ค ํํผ๋ฏผํธ๋ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ ์ถฉ์ ๋ํด ํ์ฆ๋ฒ์์ \( 175.41 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{3} \)๊ณผ ์ ์ด๋ฒ์์ \( 177.68 \mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{3} \)์ \( \mathrm{LC}_{50} \) ๊ฐ์ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด์๋ ํ์ฆ๋ฒ์์ \( 1.07\mu \mathrm{g} / \mathrm{cm}^{3} \) ์ \( \mathrm{LC}_{50} \) ๊ฐ์ ๋ํ๋๋. ํ์ ์ ์ ๋ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ ์ ์ถฉ์ ๋ํด ํ์ฆ๋ฒ์์ \( 0.117 \mathrm{mg} / \mathrm{cm}^{3} \), ์ ์ด๋ฒ์์ \( 0.158 \mathrm{mg} / \mathrm{cm}^{3} \) ์ \( \mathrm{LD}_{50} \) ๊ฐ์ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ ์ฑ์ถฉ์ ๋ํด ํ์ฆ๋ฒ์์ \( 0.141 \mathrm{mg} / \mathrm{cm}^{3} \) ๊ณผ ์ ์ด๋ฒ์์ \( 0.236 \)\( \mathrm{mg} / \mathrm{cm}^{3} \) ์ \( \mathrm{LD}_{50} \) ๊ฐ์ ๋ํ๋๋ค. ์ด๋ฌํ ์ด์ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ๋ฐํ์ผ๋ก ์๊ณก์ฐฝ๊ณ ์์ ์ ์นผ๋ฆฝํฌ์ค ํํผ๋ฏผํธ์ ํ์ ์ ์ ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ๊ณผ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ์ ๋ํ ์ด์ถฉ ์ค์ฆ์คํ์ ์งํํ์๋ค. ์ ์นผ๋ฆฝํฌ์ค ํํผ๋ฏผํธ ์ ์ ์ ๋ํด ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ ์ถฉ์ 72์๊ฐ ๋์ 35,86 ๋ฐ \( 100 \% \) ์ ์ฌ์ถฉ์จ์ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ, ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ฑ์ถฉ์ 3์๊ฐ ๋์ 22,72 ๋ฐ \( 100 \% \)์ ์ฌ์ถฉ์จ์ ๋ณด์๋ค. ํ์์์ ์ถ์ถํ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ๋ํด์๋ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ ์ ์ถฉ์ 120์๊ฐ ๋์ ์คํํ ๊ฒฐ๊ณผ 24, 38, 71, 82 ๋ฐ \( 100 \% \)์ ์ฌ์ถฉ์จ์ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ, ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ ์ฑ์ถฉ์ 120์๊ฐ ๋์ 57, 69, 82, 92 ๋ฐ \(100 \% \) ์ ์ฌ์ถฉ์จ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ๊ณผ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ์ ๋ํด ์ ์นผ๋ฆฝํฌ์ค ํํผ๋ฏผํธ์ ํ์ ์ ์ ๋ฅผ ๋ถ์ฌํ์ง ์์ ์๊ณก์ฐฝ๊ณ ์์๋ \( 0 \% \)์ ์ฌ์ถฉ์จ๋ก ์ ๋ถ์๊ณก์ฐฝ๊ณ ์ ํ๊ฒฝ์ ์ฌ์ถฉ์จ์ ์ํฅ์ ๋ผ์น์ง ์์๋ค. ์ ์นผ๋ฆฝํฌ์ค ํํผ๋ฏผํธ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ํด ์ด์ถฉํ์ฑ์ด ๋ํ๋๋๋ฐ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ ์ถฉ์ 72์๊ฐ๊ณผ ์ฑ์ถฉ 3์๊ฐ์ผ๋ก ๋ฐฉ์ ์๊ฐ์ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ, Chen ๋ฑ์ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ์์ ์์๊ณ ์ถ๋์ด(Armoracia rusticana)์ ๋ํด ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ์ ์ถฉ์ \( 17.171 \mu \mathrm{L} / \mathrm{L} \), ์ฑ์ถฉ์ \( 4.543 \mu \mathrm{L} / \mathrm{L} \) ์ \( \mathrm{LC}_{50} \) ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋ฐ๋ผ ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ ์ฑ์ถฉ์ ์ ์ถฉ๋ณด๋ค ๊ฐ์์ฑ์ด ๋๊ฒ ๋ํ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ฌ์ง๋ค. ๋ฐ๋ฉด์ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ ์ ์ถฉ๊ณผ ์ฑ์ถฉ์ ํ์ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์ํด 120์๊ฐ๋ด \( 100 \% \)์ ์ด์ถฉํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ ๋ถ์๊ณก์ฐฝ๊ณ ์์ ์ด์ถฉ ์ค์ฆ์คํ์ ์งํํ์ฌ ์ ์นผ๋ฆฝํฌ์ค ํํผ๋ฏผํธ์ ํ์ ์ ์ ๋ก ํ๋๊ณก๋๋ฐฉ๊ณผ ๊ฑฐ์ง์๋๋๊ฑฐ์ ๋ฆฌ์ ๋ํด ๋์ ์ด์ถฉํ์ฑ์ ๋ํ๋์ผ๋ฏ๋ก ์์ค์ ํ๋งค๋๊ณ ์๋ ์์
์ ๋ฐฉ์ ์ ๋ฅผ ๋์ฒดํ์ฌ ์ถํ ์ ๋ถ์๊ณก์ฐฝ๊ณ ๋ด์์ ์ ๊ณกํด์ถฉ์ ๋ฐฉ์ ํ ์ ์๋ ์ฒ์ฐ ๋ฐ์ด์ค ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์์ฌ๋ก์ ๊ฐ๋ฐ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์ถฉ๋ถํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p> |
Urease ์ ํด์ ๋ก ์ ์๋ ค์ง NBPT์ ์ฒ๋ฆฌ๋ ์๋ฌผ ์์ก์ ์
์ํฅ์ ๋ฏธ์น ์ ์๋๊ฐ? | ๊ณผ๋ํ ์์๊ฐ ์์ ์ถ์ ๋์๊ธฐ ๋๋ฌธ | <h2>๋ฐฐ์ถ(Brassica campestris var. Pekinensis) ํฌ์ฅ ์ฌ๋ฐฐ</h2><p>ํฌ์ฅ์ฌ๋ฐฐ์์ ๊ฐ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์ ํฌ๊ธฐ๋ \( 2.4 \times 0.8 \mathrm{~m} \) ์์ผ๋ฉฐ ๊ฐ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ๋ ์ํํฌ์ฅ ๋ด์ \(3\)๋ฐ๋ณต์ผ๋ก ๋๋ค์ผ๋ก ๋ฐฐ์นํ์๋ค. ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ ์ฌ์ด์๋ ๋ถ์์ ํฌํจ์ํค์ง ์๋ ๋ฐฐ์ถ๋ฅผ ์ฌ์ด ์ธ์ ํ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์ ์ํฅ์ ๋ฐ์ง ์๋๋ก ํ์์ผ๋ฉฐ ๊ฐ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ ๋น \(10\)๊ฐ์ ๋ฐฐ์ถ ๋ชจ์ข
์ ์ฌ์๋ค. ํฌ์ฅ ์ฌ๋ฐฐ์ ๊ฒฝ์ฐ ์จ์ค์์์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ฐํ์ผ๋ก ๋์กฐ๊ตฌ๋ก ๊ดํ๊ณผ ๊ฐ์ด ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒ(Conventional treatment), ์ง์ ํ์ค์๋น๋์ \( 50 \% \) ์ ๋ชฉ์ด์ก์ ๊ธฐ๋น๋ก ์ค ๊ฒ(PA), ์ง์ ํ์ค์๋น๋์ \( 50 \% \) ์ ๋ชฉ์ด์ก์ chloroform ๋ถํ์ ๊ธฐ๋น๋ก ์ค ๊ฒ(AI), ์ง์ ํ์ค์๋น๋์ \( 50 \% \) ๋ง ๊ธฐ๋น๋ก ์ค ๊ฒ(Urea)์ผ๋ก ์ด \(4\)๊ฐ์ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ๋ฅผ \(3\) ๋ฐ๋ณต์ผ๋ก ํ์์ผ๋ฉฐ ์ฒ๋ฆฌ ๋ด์ฉ์ Table \(3\)๊ณผ ๊ฐ์๋ค. P, K๋ ํ์ค์๋น๋์ ๋ง์ถฐ ์ฉ๊ณผ๋ฆฐ๊ณผ ์ผํ์นผ๋ฅจ์ผ๋ก ์๋นํ์๋ค. ์ง์๋น๋ฃ๋ ๋ฐฐ์ถ ๋ชจ์ข
์ ์ฌ์ ์ง \(2\)์ฃผ๊ฐ ์ง๋ฌ์ ๋๋ถํฐ \(10\) ์ผ ๊ฐ๊ฒฉ์ผ๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. ๋ฐฐ์ถ๋ ๋ง์ง๋ง ๋น๋ฃ๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ๊ณ \(16\) ์ผ ํ์ ์ํํ์์ผ๋ฉฐ, ์ํ ํ ๋ฐฐ์ถ์ ์์ฒด์ค์ ์ ์ธ๋ก ์ธก์ ํ์๊ณ , ๋ฐฐ์ถ ํฌ๊ธฐ์ ์ด์ฅ๊ณผ ํญ์ ๋์์ ์ธก์ ํ ์ ์๋๋ก ์๋ฅผ ๋ถ์ฌ ์ ์ํ ์ฅ์น๋ก ์ด์ฅ๊ณผ ํญ์ ์ธก์ ํ์์ผ๋ฉฐ ๋ฐฐ์ถ์ ๊ฒ์์ ๋ฐ๊ณ ๊ฒฐ๊ตฌ๋ง์ ์ด์ฅ๊ณผ ํญ๋ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋ฐฐ์ถ ์์ ์ด์ง์ ํจ๋์ ํฉ์ฐ์ผ๋ก ๋ถํดํ ํ ์ผ๋ฌ ๋ถ์์ฅ์น๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>๋ชฉ์ด์ก์ chloroform ๋ถํ์ด ํ ์์ ์๋ชจ๋์ํ ์์ฉ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ</h2><p>๋ชฉ์ด์ก์ ์กด์ฌํ๋ urease ์ ํด ๋ฌผ์ง์ chloroform์ผ๋ก ๋ถํ์ด ๊ฐ๋ฅํ๊ณ , ๋ถํํ ๊ฒ์ urease ์ ํด ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ชฉ์ด์ก์ chloroform์ผ๋ก ๋ถํํ๊ณ ์์ฉ์ธต์ chloroform๊ณผ ๋ฉํ์ฌ ํผํฉ์ก์ผ๋ก ๋ค์ ๋ถํํ๊ณ ๋จ์ ์์ฉ์ธต๊ณผ ๋น๊ตํ ๊ฒฐ๊ณผ chloroform์ธต์ Bacillus pasteurii urease ํ์ฑ ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ์ข์๋ค. ๋ชฉ์ด์ก์ ์ ๊ธฐ์ฉ๋งค ์ถ์ถ์ก์ phenolic compound์ ํจ๋์ด ๋์ nitric oxide ์ ํด ํ์ฑ, ํญ์ฐํ, ํญ์ผ ํ์ฑ์ด๋๋ค. Chloroform ๋ถํ์ ํ ์์ ์ฒ๋ฆฌ(with \( \mathrm{AI}) \) ํ ํ \(1\)์ผ ๊ฒฝ๊ณผํ ํ๋ถํฐ ์์๋ง ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์(without \( \mathrm{AI}) \) ์ ๋นํด ์๋ชจ๋ํ ์ง์ ํจ๋์ด ๋ฎ์์ผ๋ฉฐ \(14\)์ผ๊ฐ ๋ฐฐ์ํ์ ๋ ์์๋ง ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒ๋ณด๋ค ๋ชฉ์ด์ก์ chloroform ๋ถํ์ ๊ฐ์ด ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ ์๋ชจ๋ํ ์ง์ ํจ๋์ด \( 79.7 \% \) ๋ฎ๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค(Fig. \(1\)). ์ด์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ถํ ์ ์ ๋ชฉ์ด์ก์ ํ ์์ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ํ ์์์ ์๋ชจ๋ํ ์ง์๊ฐ ๋ฐ์ํ๋ ์ ๋๋ฅผ ํ๊ฐํ ๊ฒฐ๊ณผ ์์ ์ฒ๋ฆฌ \(3\)์ผ ํ ๋ชฉ์ด์ก์ ์ฒ๋ฆฌํ์ง ์์ ๊ฒ๊ณผ ๋น๊ตํด ์๋ชจ๋ํ ์ง์๊ฐ ๊ฐ์ํ์๊ณ \(7\)์ผ์งธ์๋ ์ฒ๋ฆฌํ์ง ์์ ๊ฒ๊ณผ ๋น๊ตํด ์๋ชจ๋ํ ์ง์๊ฐ \( 96 \% \) ๊ฐ์ํ์๋ค.</p><p>Urease ์ ํด์ ๋ก ๋ง์ด ์ฐ์ด๋ \( N \)-(n-butyl)thiophosphoric triamide (NBPT)๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒ๊ณผ ์ฒ๋ฆฌํ์ง ์์ ๊ฒ์ ๋น๊ตํ๋ฉด, NBPT ๊ฐ ๋ฐฐ์ ์ด๋ฐ์๋ urease ํ์ฑ์ ํ์ ํ ๊ฐ์์์ผฐ์ผ๋ \(10\)์ผ์ด ์ง๋ฌ์ ๋ ์ ํด ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๊ทธ์ ๋ฐํด ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ urease ์ ํด์ ๋ก ์ฌ์ฉํ ๋ชฉ์ด์ก์ chloroform ๋ถํ์ \(14\)์ผ ํ์๋ ํ ์์ urease ํ์ฑ์ ์ ํดํ์๋ค(Fig. \(1\)).</p><p>Urease ์ ํด์ ๋ก ์ ์๋ ค์ง NBPT์ ์ฒ๋ฆฌ๋ ์๋ฌผ ์์ก์ ์
์ํฅ์ ๋ฏธ์น ์ ์์ผ๋ฉฐ, urease ์ ํด์ ๋ก ์ฐ์ด๋ NBPT์ phenylphosphorodiamidate (PPD)๋ฅผ ์์์ ํจ๊ป ์ฒ๋ฆฌํ์์ ๋ ๋ฐ๊ณผ ์์๋๋ฌด์ ์ ๋ ๊ดด์ฌ๊ฐ ์ผ์ด๋๋ฉด์ ์์ ์์ ํจ๋์ ์ฆ๊ฐ์์ผฐ๋ค. PPD๋ณด๋ค๋ NBPT๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ ๋ ์ ๋ ๊ดด์ฌ๊ฐ ๋ ๋ง์ด ์ ๋ฐ๋์๋๋ฐ ์ด๋ ๊ณผ๋ํ ์์๊ฐ ์์ ์ถ์ ๋์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ชฉ์ด์ก ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํ ์๋ฌผ ์์ก์ ์
์ํฅ์ด ๊ด์ฐฐ๋์ง ์์์ผ๋ฉฐ ์ด๊ธฐ ์๋ฌผ ์์ก์ด ๋ค๋ฅธ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ์ ๋นํด ๋ ์ข์๋ค.</p> |
acetonitrile๋ก ๋จ๊ณ์ ์ผ๋ก ํฌ์ํ์ฌ ํ์ฅฐ์ฉ์ก์ ์ ์กฐํ ํ ๋ถ์๊ธฐ๊ธฐ์ ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋์จ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ผ์ฐจ์์ ๊ฒ๋์ ์ ์์ฑํ๋๋ฐ ์ด ๊ธฐ์ค์ด ๋ญ์ผ? | \( 1,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) | <h2>์๋ฅ๋ถ์ HPLC ๊ธฐ๊ธฐ ์กฐ๊ฑด</h2><p>์๋ฃ ์ค ์๋ฅ azoxystrobin์ Photo-Diode Array Detector (DAD)๊ฐ ์ฅ์ฐฉ๋ Agilent \(1100\) series HPLC (Agilent, Santa Clara, CA, \( \mathrm{USA}) \) ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์๊ณ , ๊ธฐ๊ธฐ ์กฐ๊ฑด์ Table \(3\) ์ ๊ฐ๋ค.</p><h2>ํ์ค๊ฒ๋์ ์์ฑ</h2><p>Azoxystrobin ํ์คํ \( 100.60 \mathrm{mg} \) ์ ์นญ๋ํ์ฌ \( 100 \mathrm{~mL} \) ์ ์ฉํ๋ผ์คํฌ์ ๋ฃ๊ณ acetonitrile๋ก ์ ์ฉํ์ฌ \( 1,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) ๋๋ ํ์ค์ฉ์ก์ ์กฐ์ ํ์๋ค. ์ด๋ฅผ acetonitrile๋ก ๋จ๊ณ์ ์ผ๋ก ํฌ์ํ์ฌ \( 0.1,0.5 \), \( 1.0,5.0 \) ๋ฐ \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) ์ ํ์ค์ฉ์ก์ ์ ์กฐํ ํ ๊ฐ๊ฐ ์ผ์ ๋ \( (10 \) \( \mu \mathrm{L}) \) ์ ๋ถ์๊ธฐ๊ธฐ์ ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ํ๋ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ์ ๋ฉด์ ์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ผ์ฐจ์์ ๊ฒ๋์ ์ ์์ฑํ์๋ค.</p><h2>์๋ฃ ์ค azoxystrobin์ ์๋ฅ๋ถ์์ ์ํ ์ ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>ํ ์ ์๋ฃ \( 20 \mathrm{~g} \) ์ ์ทจํ์ฌ ์ฆ๋ฅ์ \( 30 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๊ฐํ๊ณ \(1\) ์๊ฐ ์ ์นํ ํ(์์ถ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ ์ทจํ์ฌ ๋ฐ๋ก ์ถ์ถ) \( 100 \mathrm{~mL} \) ์ acetone์ ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ์งํ๊ธฐ๋ก \( 200 \mathrm{rpm} \) ์ผ๋ก 30๋ถ๊ฐ ์ถ์ถํ์๋ค. ์ถ์ถ๋ฌผ์ Bรผchner funnel๋ก ํก์ธ์ฌ๊ณผํ๊ณ \( 30 \mathrm{~mL} \) acetone์ผ๋ก ์์ฌ ๋ฐ ์ฉ๊ธฐ๋ฅผ ์ป์ด๋ด๋ ค ์์ ์ฌ์ก๊ณผ ํฉํ์๋ค. ์ฌ์ก์ \( 500 \mathrm{~mL} \) ๋ถ์ก์ฌ๋์ ์ฎ๊ธฐ๊ณ \( 20 \mathrm{~mL} \) ์ ํฌํ์์ผ์์ \( 80 \mathrm{~mL} \) ์ ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฐจ๋ก๋ก ๊ฐํ ํ dichloromethane \( 70 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ด 2ํ ๋ถ๋ฐฐ ์ถ์ถํ์๋ค. Dichloromethane ๋ถ๋ฐฐ ์ถ์ถ์ก์ \( 20 \mathrm{~g} \) ์ anhydrous sodium sulfate์ ํต๊ณผ์์ผ ์๋ถ์ ์ ๊ฑฐํ๊ณ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ์์์์์ ๊ฐ์๋์ถ, ๊ฑด๊ณ ํ ํ \( 5 \% \) acetone/hexane \( (5 / 95, \mathrm{v} / \mathrm{v}) 2 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ์ ์ ๊ณผ์ ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. \( \mathrm{n} \)-Hexane \( 5 \mathrm{~mL} \) ๋ก ํ์ฑํ ์ํจ SPE-FL\((1 \mathrm{~g}) \) ์ ์ฌ์ฉํด๋ ์๋ฃ ์ฉ์ก๋ฅผ ์ ํํ๊ณ , \( 10 \mathrm{~mL} \) ์ \( 5 \% \) acetone/hexane \( (5 / 95, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ผ๋ก ๋ถ์๋ฌผ์ ์ป๊ฒจ ํ๋ ค์ฃผ๊ณ , \(10\) \( \mathrm{mL} \) ์ \( 30 \% \) acetone/hexane \( (30 / 70, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ผ๋ก azoxystrobin์ ์ฉ์ถ์์ผ ๋ชจ์ ์ฉ์ถ์ก์ ์ง์๊ฑด๊ณ ํ์๋ค. ๊ฑด๊ณ ํ ์์ฌ๋ฅผ acetonitrile \( 4 \mathrm{~mL} \) (์์ถ์ ๊ฒฝ์ฐ, \( 2 \mathrm{~mL} \) )๋ก ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ \( 10.0 \) \( \mu \mathrm{L} \) ์ฉ HPLC-DAD์ ์ฃผ์
ํ์ฌ ๋ํ๋ ํฌ๋ก๋งํ ๊ทธ๋จ์์ ํผํฌ๋ฉด์ ์ ํ์ค๊ฒ๋์ ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ ์๋ฅ๋์ ์ฐ์ถํ์๋ค(Fig. \(1\)).</p><h2>ํ ์ ๋ฐ ์์ถ ์ค azoxystrobin์ ํ์์จ ์ํ</h2><p>Azoxystrobin ํ์ค์ฉ์ก \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) ์ ๊ฐ๊ฐ ๋ฌด์ฒ๋ฆฌ ํ ์์๋ฃ \(20\) \( \mathrm{g} \) ์ \( 0.4 \) ๋ฐ \( 2.0 \mathrm{~mL} \), ๋ฌด์ฒ๋ฆฌ ์์ถ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ \( 0.2,1.0 \mathrm{~mL} \) ์ฒจ๊ฐํ์ฌ ๊ฐ๊ฐ์ \( 0.2 \) ๋ฐ \( 1.0 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) ์์ค์ด ๋๊ฒ ์ฒ๋ฆฌํ ํ ์์ ์๋ฅ๋ถ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ์ถ์ถ, ์ ์ ํ ํ HPLC-DAD๋ก ๋ถ์ํ์ฌ ํ์์จ์ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>ํ ์ ์ค ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ ์ฐ์ถ</h2><p>์ผ์ฐจ๋ณ ํ ์ ์๋ฃ ์ค ๋์ฝ์๋ฅ๋์ ํ๊ท ์น๋ก ๊ฒฝ๊ณผ์ผ์์ ๋ฐ๋ฅธ ์๋ฅ๋์ \( \mathrm{C}_{\mathrm{t}}=\mathrm{C}_{0} \mathrm{e}^{-\mathrm{kt}}\left(\mathrm{C}_{\mathrm{t}}\right. \) : ์๋ฅ๋, \( \mathrm{C}_{0} \) : ์ด๊ธฐ๋๋, \( \mathrm{k} \) : ๊ฐ์์์, \( \mathrm{t} \) : ์๊ฐ)์ผ๋ก ํ๊ท์์ ๊ณ์ฐํ๊ณ \( \mathrm{k} \) ๊ฐ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์๋ฌผํ์ ๋ฐ๊ฐ๊ธฐ \( \left(\mathrm{t}_{1 / 2}\right) \) ๋ฅผ \( 0.693 / \mathrm{k} \) ์์ผ๋ก ์ฐ์ถํ์๋ค.</p> |
LPS์ ๊ฐ์ ์ธ๋ถ์๊ทน์ผ๋ก ์ธํด ํ์ฑํ ๋ ํ ๋น ๋ฅด๊ฒ ์ธํฌ์ ํต ์์ผ๋ก ๊ฐ์ ์ผ์ฆ๋งค์ฒด๋ฅผ ๋ง๋ค์ด๋ด๋ ์ ์ฌ์ธ์๋ ๋ฌด์์ผ๊น? | \( 19.3,73.6 \% \) | <h2>ALM\( 16 \)์ด iNOS ๋ฐ COX-\( 2 \) ํจ์ ๋ฐํ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ</h2><p>iNOS ๋ interferon-gamma, TNF-\( \alpha \), LPS ์๊ทน ๋ฑ์ ์ํด ํ์ฑํ๋์ด L-arginine์ผ๋ก๋ถํฐ \( \mathrm{NO} \)๋ฅผ ์์ฑํ๋ฉฐ, NF-\( \kappa\)B์ ์ํด ๋ฐํ์ด ์กฐ์ ๋๋ค. COX-\(2 \)๋ arachidonic acid๋ก๋ถํฐ prostaglandins(PGs)์ ํฉ์ฑํ๋ฉฐ pro-inflammatory cytokine์ ์์ฑ์ ์ฆ๊ฐ์ํค๋ ์์ธ ์ค ํ๋๋ก NF- \( \kappa \)B์ ํ์ฑํ์ ์ํด ๋ฐํ์ด ์ฆ๊ฐ๋๋ค . ๊ธฐ์กด ํญ์ผ์ฆ ์ฝ๋ฌผ๋ค์ ์ฃผ์ ์์ฉ๊ธฐ์ ์ ์ ํ์ ์ธ COX-\( 2 \)์ ๋ฐํ ๋ฐ ํ์ฑ ์ ํด์ ์ํ PGs ํฉ์ฑ์ ์ต์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๋ณธ ์คํ์์๋ LPS ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํด ์ผ์ฆ๋งค๊ฐ๋ฌผ์ง์ ์์ฑ๋ ์ฆ๊ฐ์ ๋ฐ๋ฅธ ๊ด๋ จ ํจ์์ธ iNOS์ COX-\( 2 \)์ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ๋์ ํ์ธํ์๋ค. ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ LPS ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํด ์ฆ๊ฐ๋ iNOS ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ๋์ ALM \( 16 \) \(50,100,200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํด ๊ฐ๊ฐ \( 23.9,32.8,37.3 \% \) ์ ์์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. COX-\( 2 \)์ ๊ฒฝ์ฐ, LPS ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ์ ๋นํด ALM16 \( 100,200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ ๊ฐ๊ฐ \( 19.3,73.6 \% \) ์ ์์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ์๋ค. Yang ๋ฑ์ LPS๋ก ์๊ทน๋ RAW264.7 ์ธํฌ์์ ์๋๊ทน ์ถ์ถ๋ฌผ ์ฒ๋ฆฌ์ ๋ฐ๋ผ \( \mathrm {NO}\)์ \(\mathrm{PGE}_{2} \)์ ์์ฑ์ด ๊ฐ์๋์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ iNOS์ COX-\( 2 \) ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ์กฐ์ ์ ์ํ ๊ฒ์์ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ALM \( 16 \)์ด \( \mathrm{NO} \), \( \mathrm{PGE}_{2} \)์ ๊ฐ์ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ์ฒด ์์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ ์๋ ํจ์์ ๋ฐํ์ ์กฐ์ ํ์ฌ ์ผ์ฆ๋ฐ์์ ์ต์ ํ ์ ์์์ ํ์ธํ์๋ค.</p><h2>ALM\( 16 \)์ด NF-\( \kappa \)B ํ์ฑ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ</h2><p>์ต๊ทผ ์ฐ๊ตฌ๋ค์์ ๋๊ฐ์ ์๋ธ์ ๋์ผ๋ก ๊ตฌ์ฑ๋ NF-\( \kappa \)B๋ pro-inflammatory cytokines๊ณผ iNOS, COX-\( 2 \)์ ๋ฐํ์ ์กฐ์ ํ๋ ์ ์ฌ์ธ์๋ก ๋ณด๊ณ ๋์์ผ๋ฉฐ, LPS์ ๊ฐ์ ์ธ๋ถ์๊ทน์ ์ํด ํ์ฑํ๋์ด ์ ์ํ ์ธํฌ์ ํต ์์ผ๋ก ์ด๋(nuclear translocation)ํ์ฌ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ์ฒด๋ฅผ ๋ฐํ์ํจ๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ผ์ฆ ์กฐ์ ์ฐ๊ตฌ์ ์์ด์ NF-\( \kappa \)B์ ํ์ฑํ ๋ฐ ํต ์์ผ๋ก ์ด๋์ ๋ํ ์กฐ์ ์ ๊ฐ์ฅ ์ค์ํ ์์์ด๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ALM\( 16 \)์ด ๋์์ธํฌ์์ LPS์์ํ NF-\( \kappa \)B์ ํ์ฑ ๋ฐ ํต ์์ผ๋ก์ ์ด๋์ ์ต์ ํ ์ ์๋์ง ํ์ธํ์๋ค. Fig. \(5 \) A์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด๋ฉด, LPS ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํด ์ธํฌ์ ํต์ผ๋ก ์ด๋ํ NF-\( \kappa \)B์ ๋จ๋ฐฑ์ง ์์ด ์๋ฌด๊ฒ๋ ์ฒ๋ฆฌํ์ง ์์ ์ธํฌ์ ๋๋นํ์ฌ ์ฝ \( 6.1 \)๋ฐฐ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ํ์ง๋ง ALM\( 16 \) \( 50, 100, 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ฒ๋ฆฌ์ ํต์ผ๋ก ์ด๋ํ NF-\( \kappa \)B์ ๋จ๋ฐฑ์ง ์์ด LPS ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ ๋๋น ๊ฐ๊ฐ \( 34.3,47.6,50.1 \% \) ์ ์์ ์ผ๋ก ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ํ, NF-\( \kappa \)B์ ํ์ฑํ๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด DNA-binding activity๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, LPS ์ฒ๋ฆฌ๋ ๋์์ธํฌ ์ NF-\( \kappa \)B DNA-binding activity๋ ์๋ฌด๊ฒ๋ ์ฒ๋ฆฌํ์ง ์์ ์ธํฌ์ ๋น๊ตํ์ฌ ์ฝ \( 2.7 \)๋ฐฐ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ์ด์๋ ๋์กฐ์ ์ผ๋ก ALM\( 16 \) \( 100,200 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ LPS ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์ฌ NF-\( \kappa \)B์ DNA-binding activity๊ฐ ๊ฐ๊ฐ \( 30.8,40.8 \% \) ๊ฐ์ํ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ALM\( 16 \)์ LPS์ ๊ฐ์ ์ธ๋ถ์๊ทน์์ํ ์ผ์ฆ๋ฐ์์ ์กฐ์ ํ๋ ์ฃผ์ ์ธ์์ธ NF-\( \kappa \)B์ ํ์ฑ์ ๋ํ ์กฐ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ ์์ฌํ๋ค.</p><h2>ALM\( 16 \)์ด MAPK (JNK, ERK, p\( 38 \)) pathway ํ์ฑํ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ</h2><p>๋์์ธํฌ์์ LPS ๋ฑ์ ์ธ๋ถ์๊ทน์ ์ํด MAPK ์ ํธ์ ๋ฌ๊ฒฝ๋ก์ ํ์ฑํ๊ฐ ์งํ๋๋ค. MAPK๋ JNK, ERK, p\( 38 \)๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, NF-\( \kappa \)B๋ฅผ ํฌํจํ ์ ์ฌ์ธ์๋ค์ ํ์ฑํ์ ๊ด์ฌํ์ฌ ์ผ์ฆ๋ฐ์ ํ์ฑํ์ ์ค์ํ ์ญํ์ ํ๋ค. ERK ๋ฐ p \(38 \)์ ํ์ฑํ๋ pro-inflammatory cytokine์ ์์ฑ ๋ฐ ๋ฐฉ์ถ์ ๊ด์ฌํ๋ฉฐ, JNK์ ํ์ฑํ๋ iNOS ๋ฐ COX-\( 2 \)๋ฐํ์ ๊ด์ฌํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ALM \( 16 \)์ด LPS ์๊ทน์ ์ํ ๋์์ธํฌ์์ MAPK์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ์์๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ, LPS ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํด ์ธ์ฐํ๋ JNK, ERK, p \(38 \)์ ์๋ฌด๊ฒ๋ ์ฒ๋ฆฌํ์ง ์์ ์ธํฌ ๋๋น ๊ฐ๊ฐ \( 2.5,20.8,16.1 \)๋ฐฐ ์ฆ๊ฐํ์๊ณ , MAPK ์ ํธ์ ๋ฌ๊ฒฝ๋ก๊ฐ ํ์ฑํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ALM\( 16 \)์ \( 50,100,200 \mu \mathrm{g} \mathrm{mL} \) ์ฒ๋ฆฌํ์ ๊ฒฝ์ฐ JNK์ ์ธ์ฐํ๊ฐ LPS ๋จ๋
์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ ๋๋น ๊ฐ๊ฐ \( 29.3,39.5,43.0 \% \) ์ ์ํ๊ฒ ๊ฐ์ํ์๋ค. LPS์ฒ๋ฆฌ์ ์ํด ์ฆ๊ฐ๋ ์ธ์ฐํ๋ ERK๋ ALM \( 16 \) \( 100,200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ฒ๋ฆฌํ์์๋ ๊ฐ๊ฐ \( 19.0,28.3 \% \) ์ ์์ ์ธ ๊ฐ์๋ฅผ ๋ณด์๋ค. ํ์ง๋ง p \( 38 \) ์ธ์ฐํ์ ๋ํด์๋ ์ ์์ ์ธ ๋ณํ๋ฅผ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด ALM \(16 \)์ด ์ธ์ฐํ๋ JNK, ERK ํน์ด์ ์ธ MAPK ์ ํธ์ ๋ฌ ๊ฒฝ๋ก๋ฅผ ์ต์ ํจ์ ํ์ธํ์๋ค. Lee ๋ฑ์ ์น์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ํน์ด์ ์ผ๋ก JNK ํ์ฑ๊ณผ NF-NF-\( \kappa \)B ํ์ฑ ์ต์ ๋ฅผ ํตํ ํญ์ผ์ฆ ํ์ฑ์ ๋ณด๊ณ ํ์๊ณ , Choi ๋ฑ์ rebaudioside A๊ฐ MAPK ์ค ํน์ด์ ์ผ๋ก ERK์ ์ธ์ฐํ๋ฅผ ๊ฐ์์์ผ NF-\( \kappa \)B ์กฐ์ ๊ธฐ์์ ๊ด์ฌํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ค์ ์ข
ํฉํด๋ณด๋ฉด, ALM\( 16 \)์ JNK, ERK ํน์ด์ ์ธ MAPK ์ ํธ์ ๋ฌ ๊ฒฝ๋ก์ NF-\( \kappa \)B์ ํ์ฑ ์ต์ ๋ฅผ ํตํด iNOS ๋ฐ COX-2์ ๋ฐํ์ ์ต์ ํ์ฌ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ์ฒด์ pro-inflammatory cytokine์ ์์ฑ์ ๊ฐ์์์ผ ํญ์ผ์ฆ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ ๋๋ก ALM \( 16 \)์ ์ผ์ฆ ์กฐ์ ํจ๋ฅ์ ํตํด ๋ง์ฑ ์ผ์ฆ์ฑ ์งํ์ ์๋ฐฉ๊ณผ ์น๋ฃ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ ์ ์๋ ์ ์ฉํ ์์ฌ์์ ํ์ธํ์๋ค.</p> |
ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํจ๋ฅ์ ๋ฌด์์ด์ผ? | ๊ตญํ๊ณผ | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ(Coreopsis lanceolata L)์ ๊ตญํ๊ณผ(Asteraceae)์ ์ํ๋ ์ฌ๋ฌํด์ด์ด ํ๋ก, ๋ฏธ๊ตญ, ์บ๋๋ค, ์ค์์๋ฉ๋ฆฌ์นด, ๋จ์๋ฉ๋ฆฌ์นด, ๋จ์ํ๋ฆฌ์นด, ๋์์์ ๋ฑ์ง์ ์ฃผ๋ก ๋ถํฌํ๊ณ ์๋ค. ๊ธธ๊ฐ๋ ๋๋ก๋ณ์์ ํํ ๋ฐ๊ฒฌํ ์ ์์ผ๋ฉฐ, ๊ด์์ฉ ์๋ฌผ๋ก๋ ๋๋ฆฌ ์ฌ๋ฐฐ๋๋ค. ๋์ด๋ \( 30-100 \mathrm{cm} \)๊น์ง ๋ญ์ฒ์ ๋๋ฐ๋ก ์ ์ํ๋ก ์๋ผ๋๋ค. ์์ ์ด๋ก์์ผ๋ก ์ฐฝ๋๋ชจ์์ผ๋ก ๋ง์ฃผ๋๋ฉฐ, ๊ฝ์ ์ง๋ฆ์ด \( 4-6 \mathrm{cm} \)์ด๊ณ , ๊ฝ์์ ๊ฑฐ๊ฟ๋ฌ๊ฑํ์ด๋ฉฐ, ๋
ธ๋์์ ๋๋ค. 7์์์ 8์๊ฒฝ์ ํ ์ฌ๋ฆ์ ๊ฐํํ๋ค.</p><p>๊ธ๊ณ๊ตญ์(Coreopsis) ์๋ฌผ์๋ ์ฝ 7์ข
์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋๋ฐ, ๊ทธ ์ค์์ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ๊ณผ ๊ทผ์ฐ์๋ฌผ์ธ ๊ธฐ์์ด(Coreopsis tinctoria)๋ 'Kunlun snow chrysanthemum'์ด๋ผํ์ฌ ํ๊ตญ, ์ค๊ตญ ๋ฑ์ง์์ ์์ฉ๊ฝ์ผ๋ก์ ์ฌ์ฉํ๊ณ ์๋ค. ๋ํ quercetin (flavonol), luteolin (flavone), butin (flavanone) ๊ฐ์ ๋ค์ํ flavonoid ๋ค์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ๊ณผ ๊ธฐ์์ด๋ ์์ฐ์ง๊ฐ ๋ถ์๋ฉ๋ฆฌ์นด๋ก ๊ฐ๊ณ , ๊ฝ์ ์์ด ๋
ธ๋์์ด๋ฉฐ, ๊ฝ์ ๋ชจ์ ์ญ์ ๊ฑฐ์ ๋น์ทํ๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ ์ฌํ ์ด์ฐจ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ํฌํจํ ๊ฒ์ด๋ผ ์์ํ ์ ์๋ค. ๋ํ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ์ ์ฌ๋ฌํด์ด์ด ํ์ด๊ณ , ๊ฝ์ ์ง๋ฆ์ด \( 4-6 \mathrm{~cm} \)๊น์ง ์๋ผ๋๋ ๋ฐ๋ฉด์ ๊ธฐ์์ด๋ ํ๋ํด์ด์ด ํ์ด๋ฉฐ, ๊ฝ์ ์ง๋ฆ์ด \( 2.5 \mathrm{~cm} \)์ ๋ ๋ฐ์ ์๋ผ๋์ง ์์ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ์ด ๊ธฐ์์ด์ ๋นํด ๋ ํฐ ๊ฒฝ์ ์ ํจ์จ์ฑ์ ์ง๋๋ค๊ณ ๋ณผ ์ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๊ธฐ์์ด์ ๊ฐ์ ํ์ฉ์ฑ์ ๊ธฐ๋ํ ์ ์์ผ๋ฉด์, ๊ฒฝ์ ์ ์ธ ํจ์จ์ฑ์ ๋ ํ๋ณดํ ์ ์๋ค๋ ์ธก๋ฉด์์ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ์ํจ์ ์ ์ ์๋ค. ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ ๊ฝ์์ \(8\)์ข
์ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ ๋ํ ๋ถ๋ฆฌ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์ ํ๋ ๋ฐ ์์ผ๋ฉฐ, ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ ๊ฝ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํญ์ฐํ, ์ด์ ์ถฉ, ํญ์๋ฌ์ง, ํญ๊ท ๋ฑ์ ํจ๋ฅ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ํ์ง๋ง ์ฌ์ ํ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ ๊ฝ์ ์ฑ๋ถ์ฐ๊ตฌ์ ๋ํ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ๊ฑฐ์ ์ด๋ฃจ์ด์ง ๋ฐ ์๋ค.</p><p>ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ์ ํ๊ตญ์ ๋ค์ด์จ ํ์ถ์ธ๋์ข
์ผ๋ก, ๊ฐํ ์๋ช
๋ ฅ ๋๋ฌธ์ ์ผ๋ณธ์์๋ ์ํ ๊ต๋์ข
์ผ๋ก ์ง์ ๋ ๊ฝ์ด๋ค. ํ๊ตญ์์๋ ์ ๊ฑฐํ์๋ ์ด๋์ด ์ ์ ์ผ์ด๋๊ณ ์๋ ์ถ์ธ์ด๋, ์ ๊ตญ์ ์ผ๋ก ๋ง์ด ํด์ ธ์์ด ๊ทธ ์ฒ๋ฆฌ ๋ํ ๊ณค๋ํ ์ค์ ์ด๋ค. ์ด๋ฌํ ์ํฉ์์ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ์ ๋ํ ์ฑ๋ถ๊ณผ ํจ๋ฅ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ํตํด ๋จ์ํ ์ ๊ฑฐ๊ฐ ์๋ ํ์ฉ์ฑ์ ๋์ถํ๊ฒ ๋๋ค๋ฉด, ๋์ฑ ํจ์จ์ ์ธ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ ๊ฝ์ ์ฌ์ฉ์ด ๊ฐ๋ฅํ ๊ฒ์ด๋ค. ์ด์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ ๊ฝ์ ์ด์ฐจ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋ฐ ๋์ ํ๊ณ ์ด์ ๋ํ ํ์ฑ์ ๊ฒ์ฆํด ๋ค์ํ ์์ฌ๋ก์ ๊ฐ๋ฐ์ ์ํ ๋ชฉ์ ์ผ๋ก ์คํ์ ์งํํ์๋ค. ํ์ฌ๊น์ง ์ ์ ๋ฑ์ ํฐ๊ธ๊ณ๊ตญ ๊ฝ์ผ๋ก๋ถํฐ 12์ข
์ chalcone ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋์ ํ ๋ฐ ์๋ค. ์ด๋ฒ ์คํ์์๋ 1์ข
์ flavonol ํํฉ๋ฌผ๊ณผ 1์ข
์ benzoyl ํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋์ ํ์๊ธฐ์ ์ด์ ๋ํ์ฌ ๋ณด๊ณ ํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> |
์ด ์ฐ๊ตฌ์์ ์ดํด๋ณธ ํผํฌ๋ ์ฌ๊ณผ์ ํจ๋ฅ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | \( 2018 \)๋์
์ ๋ง | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ต๊ทผ \(1\) ์ธ๊ฐ๊ตฌ์ ์ฆ๊ฐ๋ก ์์ ๋จ์๋ก ํฌ์ฅ๋ ์ ํ๋ค์ด ์ธ๊ธฐ๋ฅผ ๋๋ ๊ฒ๊ณผ ๊ฐ์ด ์ฌ๊ณผ ๋ํ ์์ ํ์ข
์ด ์ธ๊ธฐ๋ฅผ ์ป๊ณ ์๋ ์ถ์ธ์ด๋ค. ์ต๊ทผ ๋ฐํ๋ '\( 2018 \)๋์
์ ๋ง'์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด ๊ฐ์ ์ฉ ์ฌ๊ณผ์ ๊ฒฝ์ฐ ์๊ณผ \( (213 \mathrm{~g} \) ์ดํ)๋ฅผ ์ ํธํ๋ ๋น์จ์ด \(2014\)๋
\(8.7 \% \)์์ \(2017\)๋
\( 16.6 \% \)๋ก ๋๋ฐฐ ๊ฐ๊น์ด ์ฆ๊ฐ ํ ๋ฐ๋ฉด, ๋๊ณผ \( (300 \mathrm{~g} \) ์ด์)๋ \( 9.4 \% \) ์์ \( 3.9 \% \)๋ก ๋ ๋ฐฐ ์ด์ ๊ฐ์ํ๋ค. ์ ๋ฌผ์ฉ๋ ์ค๊ณผ ์ ํธ๋น์ค์ ์์นํ ๋ฐ๋ฉด ๋๊ณผ๋ ๊ฐ์ํ๋ ์ถ์ธ๋ฅผ ๋ณด์์ผ๋ฉฐ, ๋์ด๊ฒฝ์ ์ฐ๊ตฌ์์ ๋ฐํ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด ์ค,์๊ณผ ์ฌ๊ณผ๊ฐ๊ฒฉ์ด ๋๊ณผ์ ๋นํด \(9\)-\(22 \% \)๊น์ง ์์นํ๋ค๊ณ ํ๋ค.</p><p>์ฌ๊ณผ๋๋ฌด๋ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์์ ์ ์ฒด ๊ณผ์ ์ฌ๋ฐฐ ๋ฉด์ ์ \( 40 \% \)๋ฅผ ์ฐจ์งํ๋ฉฐ ์ฅ๋ฏธ๊ณผ(Rosaceae)์ ์ํ๋ ๋ถ๋ถ ์จ๋๊ณผ์์ด๋ค. ์๋ฌผ ํํ์ฐ๊ตฌ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด ์ฌ๊ณผ๋ ๋ค๋น๋ฅ, ์๋ฌผ์ฑ ์คํ
๋กค, ํ๋, ๋จ๋ฐฑ์ง, ๋นํ๋ฏผ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ธ๊ฐ์ด ํ์๋ก ํ๋ ํ์ ๋ฏธ๋์์๋ค์ ํฌํจํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ํนํ ์ฌ๊ณผ๊ป์ง์ ๊ณผ์ก์ ๋นํด \(2\)-\(9\)๋ฐฐ๋ก ๋์ ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋์ ๋ํ๋ธ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ํด๋ฆฌํ๋์ ์ฌ๊ณผ์ ์ฃผ์ํ ํญ์ฐํ ๋ฌผ์ง์ด๋ฉฐ, ํญ์ผ์ฆํจ๊ณผ, ํญ์ข
์ํจ๊ณผ ๋ฑ์ ๋ํ๋ด์ด ์ธ๊ฐ์ ๊ฑด๊ฐ์ ์ ์ตํ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ด ์
์ฆ๋ ๋ฌผ์ง์ด๋ค.</p><p>ํผํฌ๋(Malus pumila Mill) ์ฌ๊ณผ ํ์ข
์ ์ผ์ธ๋ก ์ํ ๊ฐ ๋ ๋จน๊ธฐ ์ข์ ์ฌ๊ณผ๋ผ ํด์ 'ํผํฌ๋'์ด๋ผ ์ด๋ฆ์ด ๋ถ์ฌ์ก์ผ๋ฉฐ ํ์ง์ ์ฐ์ฌ ํ์ข
์ ๊ต๋ฐฐํด ๋ง๋ ์ ํ์ข
์ผ๋ก ํ
๋์ค ๊ณต ํฌ๊ธฐ์ด๋ฉฐ, ๋ฌด๊ฒ๊ฐ ์ฝ \( 220 \mathrm{~g} \) ์ ๋์ ๋นจ๊ฐ์ ์ค, ์๊ณผ ์ฌ๊ณผ๋ก ๋ณดํต \(9\)์ ์ค์์์ \(10\) ์ ์ด์ ์ํ๋๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ฒฝ๋ถ ๊ตฐ์์ ์ฌ๊ณผ์ฐ๊ตฌ์์์ ํ์ข
์ด ๊ฐ๋ฐ๋์ด ๊ฒฝ๋ถ์์ฒ ์ง๋ฐฉ์์ ์ง์ญํนํํ์ข
์ผ๋ก ํ์ง์ ์ธ์ ๋ฐ๊ณ ์๋ ํผํฌ๋ ์ฌ๊ณผ์ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ์ ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ ํจ๊ณผ, ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ ๋ฑ ๋ค์ํ ๋ฏธ์ฉ์๋ฆฌํ์ฑ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ดํด๋ณด๊ณ ์ด ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ํตํด ํญ์ฐํ ๋ฐ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฐ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ฒํ ํ์๋ค.</p> |
๋ค์ ์ค ์๋ฌผ์ ์์ฅ์ ๋์์ ์ฃผ๋ ์์ฑ๊ท ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | IAA์ ACC deaminase ์์ฑ๋ฅ | <h2>์ง์ ๊ณ ์ ๋ฅ๊ณผ siderophore ์์ฑ๋ฅ</h2><p>์ง์ ๊ณ ์ ๋ฅ๊ณผ siderophore ์์ฑ๋ฅ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, \(5\)๊ท ์ฃผ์์ ๋ชจ๋ ์ง์ ๊ณ ์ ๋ฅ๊ณผ siderophore ์์ฑ๋ฅ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ๊ทธ ์ค์์๋ DDP\(346\)์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ์ง์ ๊ณ ์ ๋ฅ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ง์ ๋น๋ฃ๋ ์ฌ์ฉํ ๋น๋ฃ์ \( 50 \% \) ์ดํ๋ง ์๋ฌผ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ํก์๋๊ณ ๋๋จธ์ง๋ ํ๋ฐ์ฑ ๋ถํด๋ก ์ธํ์ฌ ์์ค๋๋ค๋ ๋จ์ ์ด ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ \(5\)๊ท ์ฃผ ๋ชจ๋ ์ง์ ๊ณ ์ ๋ฅ๊ณผ siderophore ์์ฑ๋ฅ์ ๊ฐ์ง์ผ๋ก์จ ์ง์์ ์ฒ ์ด์ฉ๋ฅ ์ ๋์ฌ ์๋ฌผ ์์ฅ์ ๋์์ ์ค ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ถ์ ๋๋ฉฐ, ์ง์์ฑ์ด ๋ฎ์ ํํ ๋น๋ฃ์ ๋์ฒด์ ๋ก ํ์ฉ์ด ๊ฐ๋ฅํ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค. ๋ํ siderophore์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ์๋ฌผ ๋ณ์์ฑ ๊ณฐํก์ด์์ ์ฒ ๊ฒฝ์์ ํตํด ๋ณ์์ฒด์ ์์ฅ๊ณผ ๋ณํด์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฅผ ํตํด DDP\(346\)์ ์ํด ์์ฑ๋ siderophore๊ฐ \(7\)์ข
์ ์๋ฌผ ๋ณ์์ฑ ๊ณฐํก์ด์ ๋ํ ํญ์ง๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ๋ฐ์ ์ผ๋ถ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น ๊ฒ์ผ๋ก ์ถ์ ๋๋ค.</p><h2>IAA ์์ฑ๋ฅ, ACC deaminase ์์ฑ๋ฅ ์กฐ์ฌ</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ํ๊ฒฝ์คํธ๋ ์ค์์ ์ฐ๊ด์ฑ์ ์กฐ์ฌํ๊ธฐ ์ํด์ IAA์ ACC deaminase ์์ฑ๋ฅ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋จผ์ , ์๋ฌผ ์์ฅ ํธ๋ฅด๋ชฌ์ผ๋ก ์๋ ค์ง IAA ์ธก์ ๊ฒฐ๊ณผ, \(5.80-64.15 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ IAA ์์ฑ๋ฅ์ ํ์ธํ ์ ์์์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ ์ค์์๋ DDP\(346\), DDP\(398\) ๋ฐ DDP\(406\) ๊ท ์ฃผ์์ ๋น๊ต์ ๋์ IAA ์์ฑ๋ฅ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ACC deaminase ์์ฑ๋ฅ์ \(5\)๊ท ์ฃผ์์ ๋น์ทํ ์์ค์ผ๋ก ๋ํ๋ด์๋ค. Danish ๋ฑ์ ๊ฑด์กฐ ์คํธ๋ ์ค ์กฐ๊ฑดํ์์ ACC deaminase ํ์ฑ์ ๊ฐ์ง ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ ์ข
ํ์ฌ ์ฅ์์๋ฅผ ์ฌ๋ฐฐํ ๊ฒฐ๊ณผ, shoot length์ shoot dry weight๊ฐ ๊ฐ๊ฐ ์ต๋ \( 1.5 \)๋ฐฐ์ \( 1.4 \)๋ฐฐ๊น์ง ์ฆ๊ฐํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. ๋ํ, ์ผ ์คํธ๋ ์ค ์กฐ๊ฑด์์ ์๋ฌผ์ PGPR ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ์ ๋, ์๋ฌผ ๋ด์ \( \mathrm{Na}^{+} \)์ด์จ ๊ณต๊ธ์ ์ค์ฌ \( \mathrm{Na}^{+} / \mathrm{K}^{+} \)์ ๋น์จ์ ์กฐ์ ํจ์ผ๋ก์จ ์ผ ์คํธ๋ ์ค๋ฅผ ์ํ์์ผ ์ฃผ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ IAA์ ACC deaminase ์์ฑ๋ฅ์ ๊ฐ์ง ๊ท ์ฃผ๊ฐ ์ธ๋ถ ํ๊ฒฝ ์คํธ๋ ์ค๋ก๋ถํฐ ์ด์จ์ ํญ์์ฑ์ ์ ์งํด ์ค์ผ๋ก์จ ์๋ฌผ์ ์์ฅ์ ๋์์ ์ค ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์ถ์ ๋๋ฉฐ, ํฅํ ํ๊ฒฝ ์คํธ๋ ์ค ์กฐ๊ฑด์์ ์๋ฌผ์ ์์ฅ๊ณผ ๋ฐ๋ฌ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํด์ ์๋ฌผ ์ฌ๋ฐฐ๋ฅผ ํตํ ํ์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค.</p><h2>๋ฏธ์๋ฌผ ๋์ </h2><p>๋ฏธ๋ค๋ ๊ฐ์ฉํ๋ฅ, ์๋ฌผ ์์ฅ ์ด์ง ํ์ฑ ๋ฐ ํญ์ง๊ท ํ์ฑ์ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ์ต์ข
์ ์ผ๋ก ๋ค๋ชฉ์ ๊ธฐ๋ฅ์ ๊ฐ์ง ๋ฏธ์๋ฌผ ์ ์ ๋ก์จ ๊ฐ์ฅ ์ ํฉํ DDP\(346\) ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ ์ ํ์๋ค. DDP\(346\)์ ๋์ ํ๊ธฐ ์ํด์ \( 16\)S rRNA ์ ์ ์ ์ผ๊ธฐ์์ด์ ๋ถ์ํ์ฌ NCBI Blast์์ ๋น๊ตํ ๊ฒฐ๊ณผ, Acinetobacter pittii DSM \(21653\) (NR_\(117621.1\))๊ณผ \( 99.9 \% \)๋ก ๋์ ์๋์ฑ์ ๋ณด์๋ค. \(16\)S rRNA ์ผ๊ธฐ์์ด์ ๋ฐํ์ผ๋ก ๊ณํต๋๋ฅผ ๋ถ์ํ ๊ฒฐ๊ณผ, Acinetobacter pittii์ ๋์ ์ ์ฐ๊ด๊ณ๋ฅผ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์์ผ๋ฉฐ, Bootstrap ๊ฐ๋ \( 77 \% \)๋ก ๋์ ์์น๋ฅผ ๋ณด์ฌ Acinetobacter sp.์ ์ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ถ์ ๋๋ค.</p> |
2'-Methoxyacetophenone๋ C. perfringens ๋ฐ E coli์ ๋ํด \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \) ์์ inhibition zone์ผ๋ก ์ ๋์ฒด์ค์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ํญ๊ท ํ์ฑ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ํ๋ ๊ฒ์ด๋ค? | 20๋ถ | <h2>์ด๋นํ์ฑ ๊ฒ์ </h2><p>์ฐํด๋ฐ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ ์ ์ถฉ ๋ฐ ์ฝ์ถฉ ๋ํ ์ด๋น ํ์ฑ ๊ฒ์ ์ Stone๊ณผ Haydock ์ packet test๋ก ๊ฒ์ ํ์๋ค. ์ฐํด๋ฐ ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ethanol๊ณผ Triton X๊ฐ ํฌํจ๋ ์ฆ๋ฅ์์ ํฌ์์์ผ ์ ์กฐ๋ ๋ค์ํ ๋๋(1,3 ๋ฐ \( 5 \%) \) ์ ์๋ฃ๋ฅผ \( 250 \mu \mathrm{L} \) ์ทจํ ํ, \(\text{๊ฐ๋ก}5 \mathrm{~cm} \times \text{์ธ๋ก} 10 \mathrm{~cm} \) ํฌ๊ธฐ๋ก ์๋ฅธ filter paper (chmlab group, \( 90 \mathrm{~mm} \) diameter, Barcelona, Spain)์ ๋ถ์ฃผํ์๋ค. ์๋ฃ๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ filter paper๋ fume hood์์ 20๋ถ๊ฐ ๊ฑด์กฐํ ํ, filter paper๋ฅผ ๋ฐ์ผ๋ก ์ ์ด ์์ชฝ์ ์ง๊ฒ(bulldog clip)๋ก ๋ง๊ณ ์ด๋ฆฐ ํ ์ชฝ ์
๊ตฌ๋ฅผ ํตํด ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ ์ ์ถฉ ๋ฐ ์ฝ์ถฉ์ ๊ฐ๊ฐ20 ๋ง๋ฆฌ์ฉ ๋ฃ์ด ๋ดํ์๋ค. ์์กฐ๊ฑด์ incubator์ ์จ๋ \( 27 \pm 1^{\circ} \mathrm{C} \), ์๋์ต๋ \( 70 \pm 10 \% \) ์์ 24 ์๊ฐ ๊ฒฝ๊ณผ ํ ์์ง์ด์ง ์๋ ๊ฐ์ฒด๋ฅผ ์ฃฝ์ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ฐ์ฃผํ์ฌ ์ด๋น์จ์ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>๊ฐ ์ํ์ 3๋ฐ๋ณต์ผ๋ก ์ํํ์์ผ๋ฉฐ, ๋ณธ ์ํ์ ํตํด ์ป์ด์ง ๊ฒฐ๊ณผ๋ SPSS ํต๊ณํ๋ก๊ทธ๋จ(Version 12.0, Chicago, IL, USA)์ ํํด ๊ฐ๊ฐ์ ํ๊ท ๊ณผ ํ์ค์ค์ฐจ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><p>์์ฆ๊ธฐ ์ ์ ์ถ์ถ๋ฒ์ ํตํ์ฌ ์ป์ด์ง ์ฐํด๋ฐ ๋ฟ๋ฆฌ ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ 5์ข
์ ๋ํ ํญ๊ท ํ์ฑ ๋ฐ ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ์ ๋ํ ์ด๋นํ์ฑ์ Table 1์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ฐํด๋ฐ ์ ์ ๋ ์ฅ๋ด ์ ํด๊ท C. perfringens ๋ฐ E coli์ ๋ํด inhibition zone์ด \( 20.0 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \) ์์ ๊ฐ๊ฐ 11.3 ๋ฐ \( 13.1 \mathrm{~mm} \)๋ก ๋ํ๋ฌ์ผ๋ฉฐ, ์ ์ต๊ท 3์ข
(B. bifidum, B. longum ๋ฐ L. casei)์ ๋ํด์๋ ํญ๊ท ํ์ฑ์ด ๋ํ๋์ง ์์๋ค. ํํธ, ์ฐํด๋ฐ ์ ์ ์ฑ๋ถ์ ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ์ ๋ํ ์ด๋นํ์ฑ ๊ฒ์ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์คํํ ๋๋์ธ 1.0, 3.0 ๋ฐ \( 5.0 \% \) ์์ ์ ์ถฉ๊ณผ ์ฝ์ถฉ์ ์ด๋นํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์ง ์์๋ค.</p><p>GC-MS ๋ถ์์ ํตํด ๊ฒ์ถ๋ ์ ์ ๊ตฌ์ฑ๋ฌผ์ง 4'-hydroxyaceto-phenone, 2',5'-hydroxyacetophenone, 2'-hydroxy-5'-methoxyacetophenone, 4'-hydroxy-3'-methoxyacetophenone, myristic acid ๋ฐ palmitic acid์ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ 5์ข
์ ๋ํ ํญ๊ท ํ์ฑ์ Table 2 ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ์ฐํด๋ฐ ์ ์ ์ ๊ตฌ์ฑ์ฑ๋ถ ์ค์ 2'-hydroxy-5'-methoxyacetophenone ๋ํ ์ ์ต๊ท 3์ข
์ ์ ์ธํ C. perfringens ๋ฐ E. coli์ ๋ํด \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \) ์์ ๊ฐ๊ฐ 12.1 ๋ฐ \( 12.0 \mathrm{~mm} \)์ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ 4'-hydroxyacetophenone, 4'-hydroxy-3'-methoxyaceto-phenone, myristic acid ๋ฐ palmitic acid๋ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ 5์ข
์ ๋ํ์ฌ ์ด๋ ํ ํญ๊ท ํ์ฑ๋ ๋ํ๋์ง ์์๋ค. ์ด์ ์ ์ฐ๊ตฌ์ ๋ฐ๋ฅด๋ฉด ์ฐํด๋ฐ ์ ์ ๋ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ํ ํญ๊ท ํ์ฑ ์ด์ธ์๋ ์ด๋นํ์ฑ, ํญ์ผ์์ฉ ๋ฐ ํญ๋น๋จ ํ์ฑ ๋ฑ๊ณผ ๊ฐ์ ์๋ฆฌํ์ฑ์ด ๋ฐํ์ ธ ์๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ฝ์ฉ์๋ฌผ๋ก๋ถํฐ ์ ๋ํ ๋ง์ ์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง๋ค์ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ํด ์๋ฆฌํ์ฑ ์๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ ์์ผ๋ฉฐ, Yang ๋ฑ์ ๋ฐฑ๋ฆฌํฅ์์ Thymus tosevii ๋ฐ ๊ตฌ์ฑ์ฑ๋ถ์ธ myrtenol์ด ์ฅ๋ด ์ ํด๊ท C. difficile, C. perfringens ๋ฐ E. coli์ ๋ํด ํญ๊ท ํ์ฑ์ด ๋ํ๋ฌ๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค.</p><p>์ฐํด๋ฐ ์ ์ ์์ ์ ๋๋ ๊ตฌ์ฑ์ฑ๋ถ ์ค์ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ 2'-hydroxy-5'-methoxyacetophenone์ ๋ํ์ฌ ์ ๋์ฒด 10์ข
(acetophenone, 2'-hydroxyacetophenone, 4'-hydroxyacetophenone, 2'-methoxyacetophenone, 4'-methoxyacetophenone, 2',4'-dihydroxy- acetophenone 2',5'-dihydroxyacetophenone, 2',4'-dimethoxy- acetophenone, 2',5'-dimethoxyacetophenone ๋ฐ 2'-hydroxy-4'-methoxyacetophenone)์ ์ ๋ฐํ์ฌ ๊ตฌ์กฐ์ ๋ฐ๋ฅธ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ 5์ข
์ ๋ํ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฐ ๊ตฌ์กฐ์ ์ฐจ์ด๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค(Table 3). 2'-Methoxyacetophenone๋ C. perfringens ๋ฐ E coli์ ๋ํด \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \) ์์ ๊ฐ๊ฐ 17.3 ๋ฐ \( 14.3 \mathrm{~mm} \) ์ inhibition zone์ผ๋ก ์ ๋์ฒด ์ค์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. 4'Methoxyacetophenone์ C. perfringens ๋ฐ E. coli์ ๋ํด ๊ฐ ๊ฐ 16.1 ๋ฐ \( 13.6 \mathrm{~mm} \)์ inhibition zone์ด ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, ์ฅ๋ด ์ ์ต๊ท B. bifidum (\( 11.5 \mathrm{~mm} \)) ์ ๋ํด์๋ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋๋ค. 2',4'-Dimethoxyacetophenone์ ์ฒ๋ฆฌํ์์ ๋์๋ C. perfringens ์ ๋ํด์๋ง \( 11.0 \mathrm{~mm} \) ๋ก inhibition zone ๊ฐ์ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, 2',5'dimethoxyacetophenone์ C. perfringens ๋ฐ E. coli์ ๋ํด์ ๊ฐ๊ฐ 14.0 ๋ฐ \( 11.0 \mathrm{~mm} \) ์ inhibition zone์ด ๋ํ๋๋ค. 2'-Hydroxy4'-methoxyacetophenone์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ E. coli์ ๋ํด์๋ง \( 11.0 \mathrm{mm} \) ์ inhibition zone์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ acetophenone, 2'hydroxyacetophenone, 4'-hydroxyacetophenone, 2',4'-hydroxyacetophenone, 2',5'-hydroxyacetophenone์ 5์ข
์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ํด ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์ง ์์๋ค. 2'-Hydroxy-5'-methoxyacetophenone ๋ฐ ์ ๋์ฒด 10 ์ข
์ค์ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ณด์ธ 6๊ฐ ํํฉ๋ฌผ์ acetophenone์ ๊ตฌ์กฐ์์ ์์ฉ๊ธฐ(functional group)์ ๊ด๋ จ์ฑ์ ๋ํ๋๋ค. Acetophenone ๊ตฌ์กฐ์ methyl group์ด ์กด์ฌํ๋ ๊ฒฝ์ฐ, ์ ํ์ ์ผ๋ก ์ฅ๋ด ์ ํด๊ท ์ ๋ํด ํญ๊ท ํ์ฑ์ด ๋ํ๋ฌ์ผ๋, hydroxy group์ด ์กด์ฌํ๋ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ 5์ข
์ ๋ํด ์๋ฌด๋ฐ ์์ก์ต์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์ง ์์๋ค.</p><p>๊ฐ๊ฐ์ ์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ ๊ท ์ฃผ์ ๋ํ 2'-hydroxy-5'-methoxyaceto-phenone ๋ฐ ๊ทธ์ ์ ๋์ฒด 10์ข
์ ์ต์์ ํด๋๋(MIC)๋ Table 4์ ๋ํ๋ด์๋ค. 2'-Methoxyacetophenone๊ณผ 2'-hydroxy-5'-methoxy-acetophenone์ C. perfringens ๋ฐ E. coli์ ๋ํด MIC๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋ชจ๋ ๊ท ์ฃผ์ ๋ํ์ฌ \( 5.0 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ ๋ํ๋ธ์ผ๋ฉฐ, 4'- methoxyacetophenone ๋ฐ 2',5'-dimethoxyacetophenone ์ C. perfringens ๋ฐ E. coli์ ๋ํด ๊ฐ๊ฐ 5.0 ๋ฐ \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ MIC ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ํ 4'-methoxyacetophenone์ ์ฅ๋ด ์ ์ต๊ท B. bifidum (\( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) ์ ๋ํด์๋ MIC ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. 2',4'-Dimethoxyacetophenone์ C. perfringens์ ๋ํด์๋ง \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ์ MIC ๊ฐ์ ๋ํ๋์ผ๋ฉฐ, 2'-hydroxy-4'-methoxy- acetophenone์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ E. coli์ ๋ํด์๋ง \( 10.0 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)์ MIC ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ acetophenone, 2'-hydroxyaceto-phenone, 4'-hydroxyacetophenone, 2',4'-hydroxyacetophenone ๋ฐ 2',5'-hydroxyacetophenone์ 5์ข
์ฅ๋ด ๋ฏธ์๋ฌผ์ ๋ํด \( 10.0 \mathrm{mg} / \) \( \mathrm{mL} \) ๋๋์์์ ํผํ๋์ ๋์กฐ๊ตฌ์ ํผํ๋๊ฐ ํฐ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์ด์ MIC๋ ๊ทธ ์ด์์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํด ํญ๊ท ํ์ฑ ๊ฒ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์์ํ๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, ๋ค๋ฅธ ์ด์ ์ ์ฐ๊ตฌ์์ ํํฉ๋ฌผ์ ๊ตฌ์กฐ์ ํน์ฑ์ด ํญ๊ท ํจ๊ณผ์ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๊ฒฐ์ ํ๋ค๊ณ ๋ฐํ๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ํตํด ์ฐํด๋ฐ ์ ์ ์์ ์ ๋๋ 2'-hydroxy-5'-methoxy-acetophenone ๋ฐ ๊ทธ ์ ๋์ฒด๋ ์์์ํผ์ฐธ์ง๋๊ธฐ์ ๋ํด ์ด๋นํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์ง ์์์ผ๋, ์ฅ๋ด ์ ์ต๊ท ์๋ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น์ง ์๊ณ ์ฅ๋ด ์ ํด๊ท ์ ๋ํด ์ ํ์ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ ํ์ธํจ์ผ๋ก์จ ์ ์ฅ์์ฉ ํจ๊ณผ ๋ฐ ์ ํ์ ํญ๊ท ์ ๊ฐ๋ฐ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์๋ค.</p> |
์ฌ๊ณจ ์ถ์ถ๋ฏ์ ์นผ์๊ณผ ์ธ์ ์ฉ์ถ๋์ ์ด๋ป๊ฒ ๋ํ๋ด์๋๊ฐ? | ์ ์ฑ TNF (์ถฉ๋จ ํญ์ฑ) | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ์ฌ๊ณจ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ ์กฐ</h2><p>์ฌ๊ณจ์ ํธ์ฃผ์ฐ์ผ๋ก ์ ์ฑ TNF (์ถฉ๋จ ํญ์ฑ)๋ก๋ถํฐ ์ ๊ณต๋ฐ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ฌ๊ณจ ์ถ์ถ๋ฌผ์ Kim ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ฐ์์ถ์ถ๋ก ์ ์กฐํ์๋ค. \( 3 \sim 5 \mathrm{~cm} \) ํฌ๊ธฐ๋ก ์ ๋จํ๊ณ ํ๋ฅด๋ ๋ฌผ์ \( 3 \)์๊ฐ ๋์ ํ๋ฌผ์ ์ ๊ฑฐํ ์ฌ๊ณจ \( 250-300 \mathrm{~g} \)์ ์นญ๋ํ๊ณ \( 3 \)๋ฐฐ์์ ์ถ์ถ์ก๋ฅผ ๊ฐํ ๋ค์ autoclave๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ \( 121^{\circ} \mathrm{C} \)์์ 5์๊ฐ ์ถ์ถํ ํ \( 4 \)๊ฒน์ cheese cloth๋ก ์ฌ๊ณผํ์ฌ ์ฌ๊ณจ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐํ์๋ค.</p><h2>์นผ์๊ณผ ์ธ ํจ๋ ๋ถ์</h2><p>์ฌ๊ณจ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 10 \% \) trichloroacetic acid๋ฅผ ๊ฐํ๊ณ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ๋ก ์นจ์ ๋ฌผ์ ์ ๊ฑฐํ ๋ค์ ์๋ฑ์ก์ ์นผ์ ํจ๋์ arsenazo โ
ข๋ฅผ ์ด์ฉํ ๋ฐ์๋ฒ์ผ๋ก, ์ธ ํจ๋์ ๋ชฐ๋ฆฌ๋ธ๋ด ๋ฐ์๋ฒ์ผ๋ก ๊ฐ๊ฐ ๋ถ์ํ์๋ค. ์นผ์๊ณผ ์ธ์ ํจ๋์ ๊ฐ๊ฐ ๋ผ\( 100 \mathrm{~g} \)๋น ์ฉ์ถ๋์ผ๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><h2>๊ด๋ฅํ๊ฐ</h2><p>์ฌ๊ณจ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ด๋ฅ์ ์ธ ํน์ฑ์ Kim ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ณํํ์ฌ ์กฐ์ฌํ์๋ค. ์ฌ๊ณจ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 4 \mathrm{brix}\)๋ก ํฌ์ํ ํ ์คํ์ผ๋ก \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)๊น์ง ๊ฐ์ดํ์ฌ ์๋ฃ๋ฅผ ์ค๋นํ ๋ค์, ์ฒญ์ด๋ํ๊ต ์ํ์์ํ๊ณผ ๋ํ์ \( 12 \) ๋ช
์ ๋์์ผ๋ก ์, ํฅ, ๋ง, ์ ์ฒด์ ์ธ ๊ธฐํธ๋์ ๋ํ์ฌ \( 5 \) ์ ์ฒ๋๋ฒ์ผ๋ก 1ํ ํ๊ฐํ์๋ค. ๋ถ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Statistical Package for Social Science (SPSS Inc., Chicago, IL, USA, version \( 11.5 \))๋ก ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ ํ์์ผ๋ฉฐ ANOVA๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ Duncan's multiple range test๋ก \( 5 \% \) ์์ค์์ ๊ฐ ์๋ฃ๊ฐ์ ์ ์์ฑ์ ๊ฒ์ฆํ์๋ค(์ ์์์ค \( p<0.05 \) ).</p> |
์ด ์ค ์์ง์ฐ์ผ์ ๊ฐ์ฅ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์๊ฑฐํ๋ ๊ฒ์? | ํ์ฐจ๋ฐ์ \( 30 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ | <h2>๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ</h2><p>๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ABTS ์์ด์จ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ๋๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ABTS ์์ด์จ๋ผ๋์นผ์ \( 50 \% \) ์๊ฑฐํ๋ ๋๋์ธ EC\(_{50}\)๊ฐ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 560.6 \pm 17.65 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์๊ณ , ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 1,357.4 \pm 8.45 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ๋ํ๋ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ด์จ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ด ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋นํด \(2\)๋ฐฐ ์ ๋ ์ฐ์ํ์๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ด์จ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ๋์กฐ๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉ๋ L-ascorbic acid์ EC\(_{50}\)๊ฐ์ธ \(77.8 \pm 1.76 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋นํด \(7.2\)๋ฐฐ ๋์์ผ๋, ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ตฌ์ฑ์ด ๋จ์ผ ์ฑ๋ถ์ด ์๋ ๋ค์ํ ์ฑ๋ถ๋ค์ ํผํฉ๋ฌผ์ธ ๊ฒ์ ๊ณ ๋ คํ๋ฉด ๋์ถฉ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ABTS ์์ด์จ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ์ฐ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ABTS ์๊ฑฐ์ ๋ํ EC\(_{50}\)๊ฐ์ ๋ฐฑ์ฐ์ ์์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 667.2 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ณด๋ค๋ ๋ฎ์์ผ๋, Napier grass์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ 350.0 ฮผg/mL, ํ์ฐจ๋ฐ \( 30 \% \) ์ํ์ฌ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 141.8 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฌผ์๊ฒ
ํด ์๊ณผ ์ฌ๊ณ ์ฌ๋ฆฌ ์์ \( 70 \% \) ๋ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(40.7\) ๋ฐ \( 92.6 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ณด๋ค๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ DPPH ์ ๋ฆฌ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ๋ ๋๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. DPPH ์ ๋ฆฌ๋ผ๋์นผ์ \( 50 \% \) ์๊ฑฐํ๋ ๋๋์ธ EC\(_{50}\)๊ฐ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ฒฝ์ฐ \( 574.2 \pm 14.70 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ก ABTS ์์ด์จ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ๊ณผ ๋น์ทํ ์์ค์ด์์ผ๋, ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 2,103.1 \pm 108.59 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ๋ํ๋ ์์ด์จ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ๋นํด์๋ ํ์ฑ์ด ๋ฎ์๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ DPPH ์๊ฑฐ์ ๋ํ EC\(_{50}\)๊ฐ์ ๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง์ ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EC\(_{50}\)๊ฐ์ธ \(274.0\) ๋ฐ \( 955.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋นํด ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ํ ๋์ถฉ๋๋ฌด ์์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ EC\(_{50}\)๊ฐ์ ๋์ถฉ๋๋ฌด ์์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 2,077.8 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฐ Napier grass์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 1,930.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ณด๋ค๋ ํฌ๊ฒ ๋ฎ์์ผ๋, ๋ฐฑ์ฐ์ ์์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 133.5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) , ํ์ฐจ๋ฐ์ \( 30 \% \) ์ํ์ฌ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 108.1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \), ๋
น์ฐจ์ ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 25.2 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \), ๊ณ ๋ ค์๊ฒ
ํด ์์ ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 111.2 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฐ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ์์ \( 80 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 109.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ณด๋ค๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><h2>๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ</h2><p>๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{Fe}^{3+} \) ์ด์จ์ ๋ํ ํ์๋ ฅ ์ญ์ ๋๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ํ์๋ ฅ์ ํก๊ด๋๊ฐ \( 0.5 \) ์ ๋๋ฌํ๋๋ฐ ํ์ํ ๋๋์ธ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 319.9 \pm 13.42 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์๊ณ , ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 705.9 \pm 26.08 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ๋ํ๋ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ์ด ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋นํด \(2\)๋ฐฐ ์ด์ ์ฐ์ํ์๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ์ ๋์กฐ๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉ๋ L-ascorbic acid์ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ธ \( 39.2 \pm 1.84 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋นํด \(8.2\)๋ฐฐ ๋์์ผ๋, ๊ทธ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ์ฌ๋ฌ ๋ค์ํ ์ฑ๋ถ๋ค์ ํผํฉ๋ฌผ์ธ ๊ฒ์ ๊ณ ๋ คํ๋ฉด ๋์ถฉ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ์ ์ฐ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ(EC\(_{50}\)๊ฐ)์ ๋์ถฉ๋๋ฌด ์์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 275.8 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \), ๋ฐฑ์ฐ์ ์์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ถ์ \( 250.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฐ ์์ ๊ณ ๊ตฌ๋ง ๋ฟ๋ฆฌ์ \( 70 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ถ์ \( 236.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋น์ทํ ์์ค์ด์๊ณ , Napier grass์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 840.0 \mu \mathrm{g} / \)\( \mathrm{mL} \), ๋ณต๋ถ์์ ์ค๋ ์ด๋งค์ ์์ธํค ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 871.0 \) ๋ฐ \( 746.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ณด๋ค๋ ๋ฎ์ ๊ฐ์ ๋ํ๋ด์ด ๋์ถฉ๋๋ฌด ์์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ์ ์ฐ์ํ ์์ค์ผ๋ก ๋ณผ ์ ์๋ค.</p><h2>๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ง์ฐ์ผ ์๊ฑฐํ์ฑ</h2><p>๋์ถฉ๋๋ฌด ์๊ณผ ๊ป์ง์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ง์ฐ์ผ ์๊ฑฐํ์ฑ๋ ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ ๋ฐ ํ์๋ ฅ๊ณผ ๋์ผํ๊ฒ ๋๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ์์ง์ฐ์ผ์ ์์ฐ์ ์ฐ์ฑ ์กฐ๊ฑด์์ ์๋ฏผ๋ฅ์ ๋ฐ์ํ์ฌ ๋ฐ์์ฑ์ ๊ฐ์ง nitrosamine์ ์์ฑํ๋๋ฐ ํญ์ฐํ ๋ฌผ์ง์ ์ด๋ฌํ ์์ง์ฐ์ผ์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์๊ฑฐํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ์๋ค. ์์ง์ฐ์ผ์ \( 50 \% \) ์๊ฑฐํ๋ ๋๋์ธ \(\mathrm{EC}_{\mathrm{50}} \) ๊ฐ์ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 2,329.2 \pm 35.11 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์๊ณ , ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 5,467.6 \pm 243.92 \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{mL} \) ๋ก ๋ํ๋ ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ง์ฐ์ผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ด ๊ป์ง ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋นํด \(2.3\)๋ฐฐ ์ฐ์ํ์๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ง์ฐ์ผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ๋์กฐ๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉ๋ L-ascorbic acid์ \( \mathrm{EC}_{\mathrm {50 }} \)๊ฐ์ธ \( 349.2 \pm 11.77 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋นํด \(6.7\)๋ฐฐ ๋์์ผ๋, ์ญ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ์ฌ๋ฌ ๋ค์ํ ์ฑ๋ถ๋ค์ ํผํฉ๋ฌผ์ธ ๊ฒ์ ๊ณ ๋ คํ๋ฉด ๋์ถฉ๋๋ฌด ์ ์ถ์ถ๋ถ์ ์์ง์ฐ์ผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ์ฐ์ํ๋ค๊ณ ๋ณผ ์ ์๋ค. ๋์ถฉ๋๋ฌด ์์ \(50\%\) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{EC}_{\mathrm {50 }} \)๊ฐ์ ๋ฐฑ์ฐ์ ์์ \(50\%\) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 2,582.9 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๊ณผ๋ ๋น์ทํ ์์ค์ด์๊ณ , Napier grass์ \( 50 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 1,470.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฐ ํ์ฐจ๋ฐ์ \( 30 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 397.2 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ณด๋ค๋ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋ํ ์ฅ์ \( 70 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 1.0 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋์์ ์์ง์ฐ์ผ์ \( 41 \% \) ์๊ฑฐํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ ์๋ค.</p> |
Sensory evaluation results of yogurt added with Korean rice wine lees powder after fermentation at 40 oC for 12 h ํ์์ Korean rice wine lees ๊ฐ 2.0% ์ผ ๋ Overall acceptability ๊ฐ์ ๋ญ์ผ? | 3.85ยฑ0.93 | <h2>์ด ๋ก</h2> <p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ๋ฐํจ์ํ์ ์ด์ฉํ๊ณ ์ ์์
์ฉLactobacillus acidophilus , Bifidobacterium longum, Streptococcusthermophilus ํผํฉ ๊ท ์ฃผ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง๋ก ์๊ตฌ๋ฅดํธ๋ฅผ ์ ์กฐํ๊ณ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๋ฐ๋ฅธ ์๊ตฌ๋ฅดํธ์ ๋ฐํจํน์ฑ์ ์กฐ์ฌํ์๋ค. ํ์ง๋ถ์ ์ ์ฃผ๋ฐ์ 0.5-2.0 \% ์ฒจ๊ฐํ ๊ฒฐ๊ณผ ์ ์ ์ฐ๋๋ ์ฃผ๋ฐ์ ์ฌ์ฉ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ, 12 ์๊ฐ ํ ๋์กฐ๊ตฌ 1.07 %์์ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง ์ฒจ๊ฐ ์๊ตฌ๋ฅดํธ๋ \(1.19~1.29 %๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค. \( \mathrm { pH } ์ ๋นํ๋ ์ ์ ์ฐ๋์ ๋ฒํ์ ์ผ์นํ๋ ๊ฒฝํญ์ด์๋ค. ์ฐ๊ท ์๊ท ์๋ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๋น๋กํ์ฌ ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์ฐ๊ท ์๊ฐ ์ต๋๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ์๊ฐ๋ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ์ฒจ๊ฐ๋์ด ์ฆ๊ฐํ ์๋ก ๋จ์ถ๋์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ์ 15์๊ฐ ํ 8.77log CFU/g๋ก, 2.0 % ์ฒจ๊ฐ๊ตฐ์ 9์๊ฐ ํ 8.96 log CFU/g๊น์ง์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๋ํ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ์ฒจ๊ฐ๋์ ๋ฐ๋ผ ์ ์ฒญ ๋น์จ์ ๊ฐ์ํ์ฌ ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ด ์ ์ฒญ ๋ถ๋ฆฌ๋ฅผ ์ต์ ํ์ฌ ์ปค๋์ ์์ ์ฑ์ ๊ธฐ์ฌํ์๋ค. ์ฃผ๋ฐ ๋ถ๋ง์ ์ฒจ๊ฐํ ์๊ตฌ๋ฅดํธ๋ ๋์กฐ๊ตฐ๊ณผ ๊ด๋ฅ์ ์ผ๋ก ์ฐจ์ด๊ฐ ์์๋ค.</p> <table border><caption>Sensory evaluation results of yogurt added with Korean rice wine lees powder after fermentation at 40 oC for 12 h</caption> <tbody><tr><td>Korean rice wine lees (%)</td><td>Taste</td><td>Flavor</td><td>Color</td><td>Viscosity</td><td>Overall acceptability</td></tr><tr><td>0</td><td>3.85ยฑ0.93</td><td>3.70ยฑ0.80</td><td>3.85ยฑ0.75</td><td>3.40ยฑ1.00</td><td>3.90ยฑ0.72</td></tr><tr><td>0.5</td><td>3.35ยฑ0.67</td><td>3.40ยฑ0.88</td><td>3.80ยฑ0.62</td><td>3.15ยฑ0.75</td><td>3.65ยฑ0.67</td></tr><tr><td>1.0</td><td>3.55ยฑ0.95</td><td>3.65ยฑ0.88</td><td>3.85ยฑ0.67</td><td>3.40ยฑ0.75</td><td>3.80ยฑ0.83</td></tr><tr><td>2.0</td><td>3.40ยฑ0.88</td><td>3.50ยฑ0.95</td><td>3.85ยฑ0.81</td><td>3.35ยฑ0.81</td><td>3.65ยฑ0.93</td></tr></tbody></table> |
์ฅ ๊ณํต ์๋ฌผ์ด ๊ฐ์ง jaceosidin ๋ฌผ์ง์ ์ด๋ค ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด๋๊ฐ? | ํ์ฅ ํญ์๊ณ ๋ฐ ํญํ์ํ ํจ๊ณผ | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><p>๊ฐํ ์ฌ์๋ฐ์ฝ์ฅ์ \(50\%\)\((\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์จ์ \(20.6 \pm \) \( 1.2 \% \) ์๊ณ , ์ด ํด๋ฆฌํ๋ ๋ฐ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ์ถ์ถ๋ฌผ \( \mathrm{g} \) ๋น ๊ฐ๊ฐ \( 106.9 \pm 3.3 \mathrm{mg} \) gallic acid equivalents (GAE) ๋ฐ \( 34.1 \pm 0.4 \) \( \mathrm{mg} \) quercetin equivalents (QE)๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค(Table 1). ์๋ฌผ์ ์ฃผ๋ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง์ธ ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ ์ฐ์ํ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ ๊ฐ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํด๋ฆฌํ๋ ํจ๋์ ๋
น์ฐจ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(85.6 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)๊ณผ ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(64.1 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) ๋ณด๋ค ๋์๊ณ , ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(24.0 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) ๊ณผ ๋ฌผ์๊ฒ
ํด์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(13.3 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)๋ณด๋ค ๋๊ฒ ๋ํ๋ ์ฐ์ํ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ ๊ธฐ๋ํ ์ ์์๋ค.</p><p>์ฌ์๋ฐ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ABTS ์์ด์จ๋ผ๋์นผ๊ณผ DPPH ์ ๋ฆฌ๋ผ๋์นผ์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์๊ฑฐํ์๋ค(Fig. 1A). ๋ผ๋์นผ์ \(50\%\) ์๊ฑฐํ๋ ๋๋์ธ ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ ABTS ๋ผ๋์นผ์ ๋ํด์๋ \(226.1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์๊ณ , DPPH๋ผ๋์นผ์ ๋ํด์๋ \(297.1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์๋ค. ์์ฑ๋์กฐ๊ตฐ์ธ L-ascorbic acid์ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ ABTS๋ผ๋์นผ์ ๋ํด์๋ \( 63.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ธ ๊ฒ๊ณผ DPPH ๋ผ๋์นผ์ ๋ํด์๋ \(38.4 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ธ ๊ฒ์ ๋นํด ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ด ๋์์ผ๋ ๋จ์ผ ์ฑ๋ถ์ด ์๋ ํผํฉ๋ฌผ์ธ ๊ฒ์ ๊ณ ๋ คํ๋ฉด ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ผ๋์นผ์๊ฑฐํ์ฑ์ ์ฐ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ์ง๋ค. ์ด๋ ๊ธฐ์กด ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์๋ฐ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ DPPH ์ ๋ฆฌ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐ์ ๋ํ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ด ์ฝ \(200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ก ๋ณด๊ณ ๋ ๊ฒ๊ณผ ์ ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค.</p><p>๋ํ ์ฝ์ฉ์๋ฌผ๋ก ๋๋ฆฌ ์๋ ค์ง ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ABTS ๋ฐ DPPH ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐ์ ๋ํ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ด ๊ฐ๊ฐ 560.6 ๋ฐ \(574.2 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ธ ๊ฒ์ ๋นํด ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ ์๋นํ ๋ฎ์ ์์ค์ผ๋ก ๋ํ๋ ์ฐ์ํ ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ์ฌ์๋ฐ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋๋์ ๋น๋กํ์ฌ ํ์๋ ฅ๋ ์ฆ๊ฐํ์๋ค(Fig. 1B). ํ์๋ ฅ์์ ํก๊ด๋๊ฐ 0.5์ ๋๋๋ฐ ํ์ํ ๋๋์ธ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ \(178.6 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์๊ณ , L-ascorbic acid์์๋ \(35.5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋์ธต์ ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๋ณต๋ถ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์๋ ฅ์ ๋ํ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ด ๊ฐ๊ฐ \(319.9 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๊ณผ \( 871.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ธ ๊ฒ์ ๋นํด ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ ์๋นํ ๋ฎ์ ์์ค์ผ๋ก ๋ํ๋ ์ญ์ ํ์๋ ฅ๋ ๋ฐ์ด๋จ์ ์ ์ ์์๋ค.</p><p>์ฌ์๋ฐ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฐ์๋ฌผ์ง์ธ nitrosamine ์์ฑ์ ๊ทผ์์ด ๋๋ ์์ง์ฐ์ผ์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์๊ฑฐํ์๋ค(Fig. 2A). ์์ง์ฐ์ผ์ 50% ์๊ฑฐํ๋ ๋๋์ธ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ \(976.1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ด์๊ณ , L-ascorbic acid์์๋ \(505.0 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ง์ฐ์ผ ์๊ฑฐ์ ๋ํ \( \mathrm{EC}_{50} \) ๊ฐ์ \(2,329.2 \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{mL} \) ๋ก ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ ์์ด ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์์ง์ฐ์ผ ์๊ฑฐํ์ฑ์ ์ฐ์ํ๋ค๊ณ ์ฌ๊ฒจ์ง๋ค. ๋ํ ์ฌ์๋ฐ ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง์ง ์ฐํ์ ์ฐ๋ฌผ์ธ ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ์ ์์ฑ์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ต์ ํ์๋ค(Fig. 2B)๋ถํฌํ ์ง๋ฐฉ์ฐ์ด 72 ์๊ฐ ์ฐํ๋๋ ๋์ ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(56.5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋์์ ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ์ ์์ฑ์ \(67.9 \%\) ์ต์ ํ์๋ค. ๋์ถฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(74.8 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋์์ ๊ณผ์ฐํ๋ฌผ์ ์์ฑ์ \(70.0\%\) ์ต์ ํ๋ค๋ ๋ณด๊ณ ์ ๋น๊ตํด์๋ ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง์ง๊ณผ์ฐํ ์ต์ ํ์ฑ์ ๋์ ์์ค์ด์๋ค. ๊ฐํ์ฌ์๋ฐ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ผ๋์นผ๊ณผ ์์ง์ฐ์ผ์ ๋ํ ์ฐ์ํ ์๊ฑฐํ์ฑ, ๋์ ํ์๋ ฅ ๋ฐ ์ง์ง๊ณผ์ฐํ ์ต์ ํ์ฑ์ ๊ทธ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ค๋ ํจ์ ๋์ด ์๋ ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ ๊ธฐ์ธํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๋ฃ๋๋ค.</p><p>์ฌ์๋ฐ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ํ์ก์๊ณ ์ ๊ณตํต๊ฒฝ๋ก๋ฅผ ์ ํดํ๋ ํ์ฅ ํญ์๊ณ ํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค(Fig. 3). ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ด์ธ์ฑ ๊ฒฝ๋ก์ธ aPTT์ ์ธ์ธ์ฑ ๊ฒฝ๋ก์ธ PT์์ ํ์ฅ ์๊ณ ๋ฅผ ์ง์ฐ์ํค๋ ํจ๊ณผ๊ฐ ํฌ๊ฒ ๋ํ๋์ง ์์์ผ๋, ๊ณตํต๊ฒฝ๋ก์ธ TT์์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋๋ ์ฆ๊ฐ์ ๋ฐ๋ผ ํ์ฅ์๊ณ ์๊ฐ์ ํ์ ํ ์ง์ฐ์ํด์ ์ ์ ์์๋ค. ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(1.61 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋์์ TT ๋ฅผ \(157.5\%\) ์ง์ฐ์์ผฐ๊ณ , \(3.22 \mathrm{mg} \mathrm{mL} \) ์ ๋๋์์ \(182.0\%\) ์ง์ฐ์์ผฐ๋ค. ํ์ก์๊ณ ๋ ๋ด์ธ์ฑ ๊ฒฝ๋ก์ ์ธ์ธ์ฑ ๊ฒฝ๋ก๋ฅผ ๊ฑฐ์น๋ฉด์ ํ์ฑํ๋ ์๊ณ ์ธ์ \( \mathrm{Xa} \) ๊ฐ๊ณตํต๊ฒฝ๋ก์์ ์ฐ์ ์์ฉ์ผ๋ก prothrombin์ thrombin์ผ๋ก ํ์ฑํ์ํค๊ณ ์ด์ ์ํด fibrin ์คํฉ์ฒด์ธ ํ์ ์ด ์์ฑ๋๋ ๊ณผ์ ์ ๊ฑฐ์น๋ค. ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ํ TT์์์ ๋์ ์ง์ฐํจ๊ณผ๋ ๊ทธ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด thrombin์ ์ํด ๋งค๊ฐ๋๋ fibrin ์๊ณ ๊ดด์ ํ์ฑ์ ํ์ ํ ์ ํดํจ์ผ๋ก์จ ํ์ฅ ํญ์๊ณ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ธ๋ค๊ณ ์ฌ๊ฒจ์ง๋ค. ์ฅ ๊ณํต์ ์๋ฌผ์ ๋ค์ด์๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ธ eupatilin๊ณผ jaceosidin์ด ํ์ฅ ํญ์๊ณ ๋ฐ ํญํ์ํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด๊ณ , ํด๋ฆฌํ๋ ํํฉ๋ฌผ์ด ํ์ฅ ํญ์๊ณ ํ์ฑ์ ๊ฐ์ง๋ค๋ ๋ณด๊ณ ๋ก ๋ณด์ ์ฝ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์ฅ ํญ์๊ณ ํ์ฑ์ ํด๋ฆฌํ๋ ๋ฐ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ ๊ธฐ์ธํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด์ธ๋ค.</p><p>์ด์์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก๋ถํฐ ๊ฐํ ์ฌ์๋ฐ์ฝ์ฅ์ \(50\%\) ์ํ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํด๋ฆฌํ๋๊ณผ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ ๋ค๋ ํจ์ ํ๊ณ ์์๊ณ , ์ฐ์ํ ํญ์ฐํ ๋ฐ ํ์ฅ ํญ์๊ณ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ํฅํ ์ฌ์๋ฐ์ฝ ์ฅ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ์๋ฆฌํ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ํ์ธํ๊ณ , ํญ์ฐํ ๋ฐ ํ์ฅ ํญ์๊ณ ํ์ฑ์ ๋ฉ์ปค๋์ฆ ๊ท๋ช
์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ฌ๊ฒจ ์ง๋ค.</p> |
๋ถ์์ ๋ํ๊ณ ๋ฐ ํ์์จ ํ์ธ์์ ์ฐ์ ์ ๊ณ๋์ ๊ฒฝ์ฐ ์์ฌ ๊ณ ํ๋ฌผ์ ์ฌ์ฉํด ํ ํ ์ฌ์ฉํด์ก ๋ช\( \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ถํด์ฉ vial์ ์ฎ๊ฒผ๋๊ฐ? | Method limit of quantitation | <h2>Aminopropyl SPE ์ ์ ์กฐ๊ฑด ์ค์ </h2><p>2,4,6 -TCP ๋ถํด ๋ฐ ๋ถ๋ฐฐ์ก์ ์์กดํ ๋ถ์ ๋ฐฉํด๋ฌผ์ง ์ ๊ฑฐ๋ฅผ ์ํด \( \mathrm{NH}_{2} \mathrm{SPE} \) (solid phase extraction) cartridge์ ํ์ฉํ ์ถ๊ฐ ์ ์ ์กฐ๊ฑด์ ๊ฒํ ํ์์ผ๋ฉฐ, ๊ณ ๊ธฐ๋ฅ์ ํํด ์กฐ๊ฑด์ ํ๋ฆฝํ์๋ค. \( \mathrm{NH}_{2} \mathrm{SPE} \) cartridge \( (1 \mathrm{~g}\) , \(6 \mathrm{cc}) \) ๋ dichloromethane \( 10 \mathrm{~mL} \) ๋ก ํ์ฑํ์ํจ ํ 2,4,6 -TCP ํ์ค์ฉ์ก \( 1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}\), \(1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ง์ ๊ฑด๊ณ ํ ๋ค์ dichloromethane \( 5 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ฌ์ฉํดํ ์ฉ์ก์ ์นดํธ๋ฆฌ์ง์ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ์ต์ ์ ์ฉ์ถ์กฐ๊ฑด์ ํ๋ฆฝํ๊ธฐ ์ํด methanol/ dichloromethane ํผํฉ์ก, acetone, methanol, n-hexane ๋ฐ \( 1 \% \) formic acid๋ฅผ ํจ์ ํ methanol์ผ๋ก ์ฉ์ถ์์ผ ํ์์จ์ ํ์ธํ์๋ค.</p><h2>๋ถ์์ ๋ํ๊ณ ๋ฐ ํ์์จ ํ์ธ</h2><p>Prochloraz ๋ถ์์ ์ํ ๊ฐ ์ธ๋ถ ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ฒ์ ํ์ ํ ํ ILOQ, ์๋ฃ์ฑ์ทจ๋, ์ํ์ฉ์ก ๋ถํผ, ๋ถ์์กฐ์์ ๋ฐ๋ฅธ ํฌ์ ๋๋ ๋์ถ๋ฐฐ์๋ฅผ ๊ณ ๋ คํ์ฌ ์ ์ฒด ๋ถ์๋ฒ์ ๋ถ์์ ๋ํ๊ณ(Method limit of quantitation, MLOQ๋ฅผ ์ฐ์ถํ์๋ค. ํ์ ๋ ์ ์ฒ๋ฆฌ ๋ฐฉ๋ฒ ๋ฐ ๊ธฐ๊ธฐ๋ถ์๋ฒ์ ๋ฐ๋ฅธ prochloraz ์๋ฅ๋ถ์์ ์ ํ์ฑ๊ณผ ์ ๋ฐ์ฑ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด ํ์์จ ์คํ์ ์ค์ํ์๋ค. ํ์ค์ฉ์ก ์ฒจ๊ฐ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ ์ฒ๋ฆฌ์์์ด MLOQ ๋ฐ MLOQ์ 10๋ฐฐ๊ฐ ๋๋๋ก prochloraz ํ์ค์ฉ์ก์ ์๊ณ ๊ธฐ, ๋ผ์ง๊ณ ๊ธฐ, ๋ญ๊ณ ๊ธฐ, ์ฐ์ ๋ฐ ๊ณ๋ \( 10 \mathrm{~g} \) ์ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ๊ณ ๊ธฐ๋ฅ์ ๊ฒฝ์ฐ acetone \( 100 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐ ํ \( 200 \mathrm{rpm} \) ์์ 30 ๋ถ๊ฐ ์งํ ์ถ์ถํ ํ filter paper๊ฐ ๊น๋ ค์๋ ๋ทฐํ๋ ๊น๋๊ธฐ๋ก ๊ฐ์์ฌ๊ณผํ ๋ค์ ์์ฌ๋ฅผ acetone \( 50 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ธ์ฒํ์๋ค. ์ถ์ถ์ก์ \( 2 \% \) diethylene glycol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) ์ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ ๊ฐ์ ๋์ถํ ํ acetonitrile์ ํฌํ๋ \( n \)-hexane \( 50 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ฌ ์ฉํดํ์ฌ \( n \) -hexane์ ํฌํ์ํจ \( 1 \% \) formic acid ํจ์ ๋ acetonitrile \( 50 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ด์ฉํด 2๋ฒ ๋ถ๋ฐฐ ํ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ์์์์์ ๊ฐ์ ๋์ถํ์๋ค. ์ฐ์ ๋ฐ ๊ณ๋์ ๊ฒฝ์ฐ ์ถ์ถ์ฉ๋งค acetone \( 20 \mathrm{~mL} \) ์ฒจ๊ฐ ํ \( 200 \mathrm{rpm} \) ์์ 30 ๋ถ๊ฐ ์งํ ์ถ์ถํ๊ณ , \( 3500 \mathrm{rpm} \) ์์ 5 ๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ ํ ์๋ฑ์ก์ ๋ถ์ก์ฌ๋๋ก ์ฎ๊ฒจ ์ฆ๋ฅ์ \( 250 \mathrm{~mL} \) ์ ํฌํ์์ผ์ 50 \( \mathrm{mL} \) ๋ฅผ ๋ฃ๊ณ dichloromethane \( 50 \mathrm{~mL} \) ๋ก ๋ ๋ฒ ๋ถ๋ฐฐํ์๋ค. ๋ถ๋ฐฐ์ก์ sodium sulfate, anhydrous์ ํต๊ณผ์์ผ ํ์ํ ํ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ์์์์์ ๊ฐ์ ๋์ถํ์๋ค. ๊ฐ์๋์ถ ํ ์์ฌ ๊ณ ํ๋ฌผ์ dichloromethane \( 10 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ฌ์ฉํดํ ํ ๊ทธ ์ค \( 1 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ๋ถํด์ฉ vial์ ์ฎ๊ธฐ๊ณ \( 2 \% \) diethylene glycol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) ์ฒจ๊ฐํ ํ ์ง์ ๋์ถํ์๋ค. ๋ถํด์ฉ vial์ pyridine hydrochloride \( 5 \mathrm{~g} \) ์ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ \( 220^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ 1 ์๊ฐ ๋ถํด ํ ์์จ์์ ๋ฐฉ์นํ ๋ค์ \( 0.2 \mathrm{M} \) \( \mathrm{HCl} \) ์์ฉ์ก \( 20 \mathrm{~mL} \) ์ฌ ์ฉํดํ๊ณ ๋ถ์ก์ฌ๋๋ก ์ฎ๊ฒผ๋ค. ์ฆ๋ฅ์ \(100\) \( \mathrm{mL} \) ์ ํฌํ์์ผ์ \( 50 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ๊ณ dichloromethane \( 50 \mathrm{~mL} \) ์ผ๋ก \(2\) ๋ฒ ๋ถ๋ฐฐํ ํ sodium sulfate, anhydrous์ ํต๊ณผ์์ผ ํ์ํ๊ณ \( 2 \% \) diethylene glycol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ๋ค์ \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) ์์์์์ ๊ฐ์ ๋์ถํ๊ณ ethyl acetate \( 2 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์์ฌ ๊ณ ํ๋ถ์ ์ฌ ์ฉํดํ์ฌ ๊ธฐ๊ธฐ ๋ถ์ํ์๋ค. ๋ญ๊ณ ๊ธฐ์ ๊ฒฝ์ฐ ์ถ๊ฐ์ ์ ๊ฐ ํ์ํ์ฌ ์์ ์์ฌ๋ฅผ dichloromethane \( 5 \mathrm{~mL} \) ์ ์ฌ์ฉํดํ์ฌ dichloromethane \( 10 \mathrm{~mL} \) ๋ก ํ์ฑํ์ํจ \( \mathrm{NH}_{2} \) cartridge \( (1 \mathrm{~g}\) ,\( 6 \mathrm{cc}) \) ์ loadingํ์๋ค. Methanol \( 10 \mathrm{~mL} \) ๋ฅผ ํ๋ ค ์ธ์ฒํ์ฌ ๋ฒ๋ฆฐ ํ \( 1 \% \) formic acid๋ฅผ ํจ์ ํ methanol์ \( 10 \mathrm{~mL} \) ์ฉ์ถํ์ฌ ๋ฐ์ ์ง์ ๋์ถํ์ฌ ethyl acetate \( 2 \mathrm{~mL} \) ๋ก ์ฌ์ฉํดํ์ฌ ๊ธฐ๊ธฐ ๋ถ์ํ์๋ค. ์ด ๊ณผ์ ์ 3๋ฒ ๋ฐ๋ณต ์คํํ์ฌ ์ถ์ฐ๋ฌผ๋ณ ์ฒ๋ฆฌ์์ค๋ณ ํ์์จ์ ์ฐ์ถํ์๋ค.</p> |
์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ์ธ์๋ก \( \mathrm{PGE}_{2} \)์ ๋ฐํ์ ์ฆ๊ฐ์ํค๋ ๊ฑด ๋ญ์ผ? | UVB์ IFN-ฮณ/TNF-ฮฑ | <h1>์ด ๋ก</h1><p>HaCaT ์ธํฌ์์ UVB์ IFN-ฮณ/TNF-ฮฑ์ ์ํ ์ผ์ฆ ๊ด๋ จ ์ธ์์ ํ๋์ ๋ณต๋ถ์ ์จ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํญ์ผ์ฆ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์์๋ณด๊ณ ์ ํ์๋ค. ๋ณต๋ถ์ ์จ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ HaCaT ์ธํฌ์์ UVB์ IFN-\(\gamma\)/TNF-\(\alpha\)์ ์ํ ROS ์ ๋ ํ์ฑ๊ณผ interleukin-1\(\beta\), interleukin-6, interleukin-8์ ๋ฐํ์ ์ต์ ํ์๋ค. ๋ํ ์ผ์ฆ ๋งค๊ฐ์ธ์์ธ cyclooxygenase-2 (COX-2)์ ๋ฐํ ๋ํ ์ต์ ์์ผฐ์ผ๋ฉฐ, COX-2์ ์ํด ์ฆ๊ฐ๋์ด ์ง๋ \( \mathrm{PGE}_{2} \)์ ๋ฐํ ๋ํ ์ต์ ์ํค๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ ๋์๋ค. ๋ง์ง๋ง์ผ๋ก ๋ณต๋ถ์ ์จ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํผ๋ถ์ฅ๋ฒฝ์ ์ฃผ์ ์ธ์์ธ filaggrin์ ๋ฐํ์ ์ธก์ ํด ๋ณธ ๊ฒฐ๊ณผ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์์๋ filaggrin์ ๋ฐํ์ ์ฆ๊ฐ ์ํค๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ์ด๋ฅผ ํตํ์ฌ ๋ณต๋ถ์ ์จ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ํํผ ์ธต์ ์์์ ํ๋ณตํจ์ผ๋ก์จ ์ผ์ฆ์ ๋ณดํธํ๋ ํจ๋ฅ์ด ์์์ ํ์ธ ํ ์์์๋ค. ์ด์์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ก ๋ถํฐ ๋ณต๋ถ์ ์จ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ UVB๋ก๋ถํฐ ๋ฐ์๋์ด์ง๋ ์ผ์ฆ์ ๊ฐ์ ์ํด์ผ๋ก์จ ํญ์ผ์ฆ์ ํจ๋ฅ์ด ์๋ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ํ์ธ ์ ์์๋ค.</p> |
flavonoid์ ๊ฐ์ polyphenol๊ณ ๋ฌผ์ง์
๋๊น? | ์๋ฌผํธ๋ฅด๋ชฌ์ธ ethylene์ ๊ฐํ๊ธฐ ์ง์ ์ ์ฒ๋ฆฌ | <h1>์ ๋ก </h1><p>Ethephon์ ethylene ์ ๊ตฌ์ฒด๋ก \(1965\)๋
์ฒ์ ๊ฐ๋ฐ๋์ด ์ง๊ธ๋ ๋๋ฆฌ ์ฌ์ฉ๋๋ ๋์ฝ์ด๋ฉฐ, ๊ตญ๋ด์๋ ๋จ๊ฐ, ๊ทค, ๋ ๋ชฌ, ๋ฉด ์ข
์, ๋ฐ, ๋ฐฐ, ๋ณด๋ฆฌ, ์ฌ๊ณผ, ์ค์ด, ์ปคํผ์๋, ํ ๋งํ , ํ์ธ์ ํ, ํฌ๋, ํผ์นธ, ํธ๋, ํธ๋ฐ์ ์ฌ์ฉ๋ ์ ์๋๋ก ํ๊ฐ๋์ด ์๋ค. ์ด๋ค์ ๋ํ ์ต๋์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค(MRL)์ \( 0.05\)-\(5.0 \mathrm{~mg}~ \mathrm{kg}^{-1} \)์ผ๋ก ์ค์ ๋์ด ์์ง๋ง, ์ฝฉ ์ ๋ฑ ๋ค์์ ์๋ฌผ์ ๋ํ ethephon ์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค์ด ์ค์ ๋์ด ์์ง ์์ ethephon์ ๋์ํ์ ์ฌ์ฉํ๋ ์์
ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์์ ์ฑ์ ๋ํ ๊ฒ์ฆ์ด ์ฐ์ ๋์ด์ผ ํ๋ค.</p><p>๊ณผ๊ฑฐ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฌผ์ง ํ์ ์ฐ๊ตฌ๋ ์๋ฌผ ์์ฌ๋ก๋ถํฐ ์๋ก์ด ๋ฌผ์ง์ ํ์ํ๋ ์ฐ๊ตฌ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ฒ์ฆํ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ก ๋๋์ด ์ง๋ ์์ญ๋
๊ฐ ์ง์๋์ด ์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฌํ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ํตํด flavonoid, xanthone, anthocyanin, terpene, saponin ๋ฑ ๋ค์ํ ์ฒ์ฐ ๋ฌผ์ง์ ๊ตฌ์กฐ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฑ์ด ๊ฒ์ฆ๋์ด ์๋ค. ํนํ, flavonoid์ ๊ฐ์ polyphenol๊ณ ๋ฌผ์ง์ ๋์ ํญ์ฐํ๋ ฅ์ ๋ฐํ์ผ๋ก ํญ์, ํญ๊ท , ํญ๋ฐ์ด๋ฌ์ค, ํญ์ผ ๋ฑ ๋ค์ํ ์ง๋ณ ์๋ฐฉ ๋ฐ ์น๋ฃ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์์ฉํ๋ฅผ ์ํ ๋๋ ์์ฐ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ผ๋ถ ์งํ๋๊ณ ์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ flavonoid ์ค isoflavone ๊ณ์ด์ genistein, daidzein ๋ฑ์ estrogen ์ ์ฌ๋ฌผ์ง๋ก ํญ์, ๋ผ ๊ฑด๊ฐ, ํญ์ผ์ฆ ๋ฑ์ ํจ๋ฅ์ด ๋ณด๊ณ ๋์๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ์ฒ์ฐ ์์ฌ๋ก๋ถํฐ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฌผ์ง์ ๋๋ ์์ฐํ๊ณ ์ ํ๋ ์ฐ๊ตฌ์๋ค์ ethylene๊ณผ ๊ฐ์ ์๋ฌผ ํธ๋ฅด๋ชฌ์ ํ์ฉํ๋ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์งํํ๊ณ ์๊ณ , ์ด๋ค ์ค ์๋ฌผ ์ฒ๋ฆฌ๊ฐ ์์ฌ์ด ethephon์ ํ์ฉํ polyphenol ์์ฐ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ค์ํ๊ฒ ์งํ๋๊ณ ์๋ค.</p><p>์ต๊ทผ Yuk ๋ฑ์ ๋๋ ์ฝฉ ์์ผ๋ก๋ถํฐ isoflavone์ ๋๋ ์์ฐํ๋๋ฐ ์ฑ๊ณตํ์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฅผ ์ํด ์๋ฌผํธ๋ฅด๋ชฌ์ธ ethylene์ ๊ฐํ๊ธฐ ์ง์ ์ ์ฒ๋ฆฌํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ด ์ฐ๊ตฌ์์ Yuk ๋ฑ์ ์คํ์ค์ด ์๋ ํฌ์ฅ์ํ์์์ ethylene ์ฒ๋ฆฌ๋ ethephon์ ๊ฒฝ์ฝ์ดํฌํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ํ์ง๋ง, ethephon์ ์ฝฉ ์์์ ์๋ฅํ์ฉ๊ธฐ์ค์ด ์ค์ ๋์ด ์์ง ์๊ณ , ์ฝฉ ์ ์ฌ๋ฐฐ ์ค ethephon ์๋ฅ ๊ฐ์์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์ ํ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ๊ฐ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ฝฉ ์ ์์ฐ๊ณผ์ ์ค ethephon์ ๊ฒฝ์ฝ์ดํฌ ํน์ ๊ด์ฃผ ์ฒ๋ฆฌ์ ์ฝฉ ์ ์ค ์๋ฅ ๊ฐ์ ๋ณํ๋ฅผ ์กฐ์ฌํ๊ณ , ์ํ ํ ๊ฑด์กฐ๋ ์ฝฉ ์ ์๋ฃ์์ ethephon ์๋ฅ ์์ ์ฑ์ ํ๊ฐํ์ฌ, ๊ธฐ๋ฅ์ฑ polyphenol ์์ฐ์ ์ํด ์ฒ๋ฆฌํ ethephon์ ์์ ์ฑ์ ํ์ธํ๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> |
์ด ํ๋ํจ๋๊ณผ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์์ ์ธก์ ์ ์ํด ์ฌ์ฉํ ๋์กฐํํฉ๋ฌผ์ ์ข
๋ฅ๋ ์๋ก ๊ฐ์๊ฐ? | ์ ์ ์ฑ๋ถ | <p>๊ฝ์ ์์ ๋งค๊ฐ์ถฉ์ ์ ์ธํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ํฅ๊ธฐ๋ฌผ์ง์ธ ์ ์ ์ฑ๋ถ๊ณผ, ์๊ณผ UV๋ฅผ ๋ํ๋ด๋ ์ํ ์์๋์ด๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์ ๊ฐ์ ํ๋์ฑํํฉ๋ฌผ์ ํจ์ ํ๊ณ ์๋ค. ๊ทธ ์ธ์๋ ํญ์๋ฌ์ง, ํญ๊ท ์ฑ์ ๊ฐ์ง๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ ๋ฐ ๋ค์ํ ์ด์ฐจ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ์ ํจ์ ํ๊ณ ์๋ค. ํนํ ํ๋์ฑ ํํฉ๋ฌผ์ ํญ์ฐํํ์ฑ, ํญ์ผ์ฆํ์ฑ ๋ฐ ๋ค์ํ ์ฝ๋ฆฌํ์ฑ๊ณผ ํ์ฅํ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ด๋ฒ์ ์์งํ ๊ฝ์ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ฐ ๋ถํ๋ฌผ์ ๋ํ์ฌ ์ด ํ๋ ๋ฐ ์ด ํ๋ผ๋ณธ์ด๋ ํจ๋์ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><p>์ด ํ๋ํจ๋์ ์ธก์ ์ Folin-Cioaclteu's phenol ์์ฝ์ ์ด์ฉํ ๋ฐ์๋ฒ์ ๋ณํํ์ฌ ์ด์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, ๋์กฐํํฉ๋ฌผ๋ก๋ gallic acid ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Gallic acid๋ฅผ ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋๋๋ณ๋ก ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ \( \mathrm{y}=0.5516 \mathrm{x}-3.3448\left(\mathrm{r}^{2}=\right. 0.9996\))์ ๊ฒ๋์ ์ ์ป์๋ค. Fig. \( 1 \)์ ๋ณด๋ฉด ์ ์ ์๋ฏ์ด \( \mathrm{EtOAc} \) ์ \( n \)-\( \mathrm{BuOH} \) ๋ถํ์ด ๋ฌผ ๋ถํ๊ณผ \( n \)-hexane ๋ถํ์ ๋นํ์ฌ ๋ง์ ์์ phenol์ ํจ์ ํจ์ ์ ์ ์์์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ ์ค์์๋ ํนํ ์ฅ๋ถ์์ด์ \( n \)-hexane ๋ฐ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ, ํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค์ \( n \) -hexane ๋ถํ, ๋ถํ ์ฝ์ค๋ชจ์ค์ \( n \)-hexane ๋ฐ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ์ ์ด ํ๋ ํจ๋์ด ๋์์ ์ ์ ์์๋ค. ๊ฐ ๋ถํ๋ค์ \( 35.33\), \( 29.38\), \( 67.07\), \( 36.58\), \( 26.40 \mathrm{mg} \mathrm{GAE} / \mathrm{g} \mathrm{DW} \) ํจ์ ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๊ทธ๋ํ์์ ์ ์ ์๋ฏ์ด ํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค์ \( n \) -hexane ๋ถํ์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ํจ๋์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋์์ ์ธก์ ์ diethylene glycol์ ์ด์ฉํ ๋ฐ์๋ฒ์ ๋ณํํ์ฌ ์คํํ์์ผ๋ฉฐ, ๋์กฐํํฉ๋ฌผ๋ก๋ naringin์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Naringin์ ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ๋๋๋ณ๋ก ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ \( \mathrm{y}=1323.8 \mathrm{x}-397.3\left(\mathrm{r}^{2}=0.9947\right) \)์ ๊ฒ๋์ ์ ์ป์๋ค. Fig. \( 2 \)๋ฅผ ๋ณด๋ฉด ์ ์ ์๋ฏ์ด \( \mathrm{EtOAc} \) ์ \( \mathrm{n-BuOH} \) ๋ถํ์ด ๋ฌผ ๋ถํ๊ณผ \( n \)-hexane ๋ถํ์ ๋นํ์ฌ ๋ง์ ์์ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋๋ฅผ ํจ์ ํจ์ ์ ์ ์์๋ค. ๊ทธ ์ค์์๋ ์ฅ๋ถ์์ด์ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ, ํ์ ์ฝ์ค๋ชจ์ค์ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ, ๋นจ๊ฐ ์ฝ์ค๋ชจ์ค์ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ, ๊ตญํ ํ๋ก๊ธฐ์ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ๊ตญํ ํ์ด๋ง์ผ์ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ์ ์ด ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ๋์์ ์ ์ ์์๋ค. ๊ฐ ๋ถํ๋ค์ \( 133.48\), \(54.38 \), \( 54.28 \), \( 70.75 \), \( 34.29\) \(\mathrm{mg} \mathrm{NAE} / \mathrm{g} \mathrm{DW}\)๊ฐ ํจ์ ๋์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ฅ๋ถ์์ด์ \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ์์ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋์ด ๋ค๋ฅธ ์๋ฌผ์ ๋ถํ์ ๋นํด ์๋ฑํ ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค.</p> |
ํํฉ๋ฌผ 2์ IC50 ๊ฐ์ SK-MEL-5๋ณด๋ค HepG2์์ ๋๋ค. | YES | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์ธ์ผ(Panax. ginseng) ์ด๋งค๋ฅผ 80\( \% \) \( \mathrm{MeOH} \) ์์ฉ์ก์ผ๋ก 3ํ ๋ฐ๋ณต ์ถ์ถํ ๋ค, ๊ฐ์ ๋์ถํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{EtOAc} \), \( n-\mathrm{BuOH}^{-} \)๊ณผ \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) ์ธต์ผ๋ก ๊ณํต ๋ถํ์ ์ค์ํ์๋ค. \( \mathrm{EtOAc} \) ๋ถํ์ ๋ํ์ฌ \( \mathrm{SiO}_{2} \) ๋ฐ ODS column chromatography๋ฅผ ๋ฐ๋ณต์ค์ํ์ฌ 5์ข
์ ginsenosideํํฉ๋ฌผ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋ฐ ์ ์ ํ์๋ค. NMR, IR, FAB/MS ๋ฐ์ดํฐ๋ฅผ ํด์ํ์ฌ, ๊ฐ๊ฐ ginsenoside F1 ( 1), ginsenoside F2 (2),ginsenpside F3 ( 3), ginsenoside Ia (4) ๋ฐ notoginsenoside Fe(5)๋ก ๊ตฌ์กฐ ๋์ ํ์๋ค. ํํฉ๋ฌผ 2-5๋ ์ธ์ผ์ด๋งค์์๋ ์ด๋ฒ์ ์ฒ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ถ๋ฆฌํ 5์ข
์ ํํฉ๋ฌผ์ ์ธ์ฒด ์์ธํฌ์ฃผ(HCT-116, SK-OV-3, HeLa, HepG2, SK-MEL-5)์ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ด ์ค ํํฉ๋ฌผ 2, 4, ๋ฐ 5๊ฐ ์ธ์ฒด ์์ธํฌ์ฃผ์ ๋ํด ์ธํฌ๋
์ฑ์ ์ ํด์ํค๋ ๊ฒ์ ์ ์ ์์๋ค. ํํฉ๋ฌผ 2๋ SK-MEL-5, HepG2, HeLa์ธํฌ์์ \( \mathrm{IC}_{50} \) ๊ฐ์ด 82.8, 86.8, 78.3 \( \mu \mathrm{M} \)๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ํํฉ๋ฌผ 4๋ HCT-116, SK-MEL-5, SK-OV-3, HepG2, HeLa ์ธํฌ์์ \( \mathrm{IC}_{50} \) ๊ฐ์ด 24.5, 25.4,26.3, 22.0, 24.9 \( \mu \mathrm{M} \)๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ํํฉ๋ฌผ 5๋ SK-MEL-5 ์ธํฌ์์ \( \mathrm{IC}_{50} \) ๊ฐ์ด 81.7 \( \mu \mathrm{M} \)๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ์ธ์ผ ์ด๋งค์์ ๋ถ๋ฆฌํ ํํฉ๋ฌผ2, 4, ๋ฐ 5๊ฐ ์์ธํฌ์ฃผ์ ๋ํด ๊ฐํ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ, ์ด ํํฉ๋ฌผ๋ค์ ๊ณตํต์ ์ผ๋ก 3๋ฒ ์์ฐ๊ธฐ์ glucopyranose๋ฅผ ๊ฐ์ง๊ณ ์์์ ํ์ธํ์๋ค.</p> |
Type I BVMO ๋ฐ type O BVMO์ ๋ณด์กฐ์ธ์๋ก ์ฌ์ฉ๋๋ ๊ฒ์ NADH์ ๋นํด ๋ช๋ฐฐ ์ด์ ๋น์ผ๊ฐ? | Type O BVMO์์๋ ์ด๋ฏธ ์์ ์ธ๊ธํ type I BVMO์์ ๋ฐ๊ฒฌ๋ motif๊ฐ ์ ํ ๋ฐ๊ฒฌ๋์ง ์์ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ | <h2>Type O BVMO</h2><p>Type O BVMO๋ ์์ ์ธ๊ธํ type I BVMO ๋ฐ type II BVMO ์ ๋ค์ ๋๋จ์ด์ง ํน์ง์ ๋ณด์ฌ์ฃผ๊ณ ์๋ค. Type O BVMO์์๋ ์ด๋ฏธ ์์ ์ธ๊ธํ type I BVMO์์ ๋ฐ๊ฒฌ๋ motif๊ฐ ์ ํ ๋ฐ๊ฒฌ๋์ง ์์ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ, type I BVMO ๋ฐ type II BVMO์ ๋น๊ต์์ ๊ตฌ์กฐ์ ์ ์ฌ์ฑ ๋ํ ๋ฐ๊ฒฌ๋์ง ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ํ์ ์ธ type O BVMO๋ Streptomyces argillaceus ATCC 12956์ MtmOIV์ด๋ค. Type O BVMO์ธ MtmOIV๋ ํญ์์ ๋ก ์ฌ์ฉ๋๋ polyketide์ธ mithramycin ์ํฉ์ฑ ๊ณผ์ ์์ ์ฐํ๋ฐ์์ ์ด๋งคํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. Type O BVMO์ธ MtmOIV๋ FAD๋ฅผ ๋ณด๊ฒฐ๋ถ์๋จ์ผ๋ก, NADPH๋ฅผ ๋ณด์กฐ์ธ์๋ก ์ฌ์ฉํ๋ฉฐ, ์ด ํจ์๋ class A flavoprotein monooxygenase์ ์ํ๋ค.</p><p>Type O BVMO์ ํน์ด์ ์ MtmOIV์ ๊ฒฝ์ฐ์ ๊ฐ์ด ๋จ์ผ BV ๋ฐ์์ ์ด๋งค ํ ์ ์์ง๋ง, ๋๋ถ๋ถ BV oxidation ์ธ์ ๋ค๋ฅธ ๋ฐ์๋ค์ ์ด๋งคํ๋ ๋ค๊ธฐ๋ฅ ํจ์๋ผ๋ ์ ์ด๋ค. ์๋ฅผ ๋ค์๋ฉด, ์ด๋ ํ BVMO๋ ์ฐ์ ์ฝ์
, ๊ฐ์๋ถํด, ํ์นด๋ณต์คํ ์ธ ๋จ๊ณ์ cascade ๋ฐ์์ ๋งค๊ฐํ๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋น์ทํ ๊ธฐ๋ฅ์ ํ๋ type O BVMO๋ณ๋ก ์์ด์ ์ ์ฌ์ฑ์ด ๋์ ๋ฟ MtmOIV ์ ๋ค๋ฅธ type O BVMO๋ค๊ณผ๋ ์ ์ฌํ ์์ด์ด ์กด์ฌํ์ง ์์ ์ ์๋ค.</p><h2>ํจ์๊ณตํ์ ์ด์ฉํ BVMO์ ๊ฐ๋</h2><p>BVMO ๋ ์ต๊ทผ PE ๋ถํด ๊ณผ์ ์ ํ์ํ ํจ์๋ก์จ ์ฃผ๋ชฉ ๋ฐ๊ณ ์์ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ด๋ฏธ ์ฐ์
์ ์ผ๋ก๋ ๊ธ์ ์ด๋งค ํํํฉ์ฑ์์ ์กฐ์ ํ๊ธฐ ์ด๋ ค์ด ๋ฐ์์ ๋์ฒดํ๊ธฐ ์ํ ์์ด๋งค๋ก์จ ์ฃผ๋ชฉ ๋ฐ๊ณ ์๋ค. ๊ทธ๋ผ์๋ ๋ถ๊ตฌํ๊ณ , ์์ฐ๊ณ์ ์กด์ฌํ๋ ์ผ์ํ BVMO๋ฅผ ์์ ๊ฐ์ ๊ณต์ ์ ์ ์ฉํ๊ธฐ ์ํด์๋ ๊ฐ์ ์ด ํ์ํ ์ ๋ ์กด์ฌํ๋ค. ์ฐ์
์ฉ ํจ์๋ก ํ์ฉํ๊ธฐ ์ํด ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ์๊ตฌ๋๋ ํจ์์ ์์ ์ฑ ํญ์์ ์ ์ธํ๊ณ ๋ BVMO์ ๋ณด์กฐ์ธ์ ์๊ตฌ์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๊ฐ์ ์ด ํ์ํ๋ค๋ ์ ์์๋ ์ด๊ฒฌ์ด ์๋ค. Type I BVMO ๋ฐ type O BVMO์ ๋ณด์กฐ์ธ์๋ก ์ฌ์ฉ๋๋NADPH๋ NADH์ ๋นํด \(10\)๋ฐฐ ์ด์ ๋น์ผ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, \( \mathrm{NADP}^{+} \)์ ์ฌ์์ฑ (์ฌํ์์ฑ) ๋ํ \( \mathrm{NAD}^{+} \)์ ๋นํด ๋ฎ์ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ด๋ก ์ธํ์ฌ ์ผ์ํ์ type I BVMO ๋ฐ type O BVMO๋ฅผ ์ด์ฉํ ๊ณต์ ์ ๊ฒฝ์ ์ฑ์ด ๋งค์ฐ ๋จ์ด์ ธ ์ค์ ๊ณต์ ์์ ์ฌ์ฉํ๊ธฐ์๋ ์ด๋ ค์์ด ์๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ์ด์ ๋ค ๋๋ฌธ์ BVMO์ ๋ณด์กฐ์ธ์์ธ NADPH์ ์์กด์ฑ์ ๋ฎ์ถ๊ธฐ ์ํ ์ฐ๊ตฌ๋ค์ด ์ํ๋ ๋ฐ ์๋ค.</p><p>์๋ฅผ ๋ค๋ฉด, ํจ์๊ณตํ์ ํตํ์ฌ NADPH ์์กดํ BVMO๋ฅผ NADH ์์กดํ์ผ๋ก ๊ฐ๋ํ ๊ฒ์ด ๋ํ์ ์ธ ์ฌ๋ก์ด๋ค. ์ด๋ฅผ ์ํด Acinetobacter sp. NCIMB 9871์ cyclohexanone monooxy-genase๊ฐ ์ด์ฉ๋์์ผ๋ฉฐ, ์ด ์ผ์ํ ํจ์๋ NADPH๋ฅผ ๋ณด์กฐ์ธ์๋ก ์๊ตฌํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ด๋ค ์ฐ๊ตฌ์์๋ ํจ์์ \(3\)์ฐจ์ ๊ตฌ์กฐ์ ๊ธฐ๋ฐํ์ฌ ๋ณด์กฐ์ธ์์ธ NADPH ์ ๊ทผ์ ํ๊ฒ ์ํธ์์ฉํ๋ ์๋ฏธ๋
ธ์ฐ ์๊ธฐ๋ค์ ๋ฉด๋ฐํ ๊ฒํ ํ์ฌ NADPH์ ์ธ์ฐ์ผ๊ณผ ์ํธ์์ฉํ๋ ์๊ธฐ๋ค์ ์ฐพ์ ๋์ฐ๋ณ์ด๋ฅผ ์ ๋ํ์ฌ NADPH ์์กด๋๊ฐ ๋ฎ์ ๋์ฐ๋ณ์ด๋ฅผ ์คํฌ๋ฆฌ๋ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. NADPH์ ์ธ์ฐ์ผ ๊ฒฐํฉ ๋ถ์์ ์๊ธฐ๋ค์ ๋์ฐ๋ณ์ด S\(208\)D, S\(208\)E, Q\(210\)N, Q\(210\)S, K\(326\)H, K\(326\)N, K\(349\)R์ NADH์ ๋ํ ํ์ฑ์ด ์ฆ๊ฐ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ๋ ๋์๊ฐ ์ด ๋์ฐ๋ณ์ด๋ค์ ์กฐํฉํ์ฌ ์ผ์ํ ๋๋น NADH์ ๋ํ ํ์ฑ์ \(2,600\)๋ฐฐ ์ด์ ๊ฐ์ ์ํจ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ๊ณ ์๋ค. ๋ํ ๋ณด์กฐ์ธ์ ๋ถ์์ ์ง๊ฐ์ ์ ์ผ๋ก ์ํธ์์ฉํ๋ ์๊ธฐ๋ค์ ๋์ฐ๋ณ์ด๋ฅผ ์ถ๊ฐ๋ก ์ ๋ฐํ์ฌ L\(55\)R, S\(186\)P, T\(187\)L, V\(253\)Y, F\(284\)Q, D\(341\)C, W\(490 \)Y์ ๋ณ์ด๊ฐ NADH์ ๋ํ ํ์ฑ์ ํฅ์์ํจ ๊ฒ์ผ๋ก๋ ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ํ, ์ด๋ค์ ์กฐํฉํ์ฌ ๋ง๋ ๋ณ์ด์ฒด ์ค S186P/S208E/K326H์ S186P/S208E/K326H์ ๊ฐ๊ฐ NADH์ ๋ํ ํ์ฑ์ด ์ผ์ํ ํจ์ ๋๋น 1,920๋ฐฐ ๋ฐ 4,170๋ฐฐ ํญ์ ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ํ๊ณ ์๋ค. ์ด๋ค ์ฐ๊ตฌ๋ ํน์ ์๊ธฐ์ ๋์ฐ๋ณ์ด๋ฅผ ํตํด NADH์ ์์ฉ๋น์จ์ ๋์ด๊ธด ํ์ง๋ง BVMO์ ๋ณด์กฐ์ธ์ ํน์ด์ฑ์ ์์ ํ ์ ํํ ๊ฒ์ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค.</p><h2>BVMO ํจ์์ ์ ๋ง</h2><p>BVMO๋ ์ฐ์
์ฉ BV ์ฐํ ๋ฐ์์ ์ํ ์ฃผ์ ํจ์๋ก์จ, PE ๋ถํด ๊ณผ์ ์์ ์ฃผ์ํ ํจ์๋ก์จ ๊ทธ ์ญํ ์ด ํฌ๊ฒ ๊ธฐ๋๋๊ณ ์๋ค. ํนํ, PE ๋ถํด์ ์์ด์ ๋ค์ํ ์ฐํ/ํ์ ํจ์๋ค์ ์์ฉ์ผ๋ก PE ๊ตฌ์กฐ์ carbonyl group์ด ํ์ฑ๋ ๋ค, ์ด๋ค์ ์ถ๊ฐ ๋ถํด์ ๋ฐ๋์ BVMO์ ์ํ BV ์ฐํ ๊ณผ์ ์ด ํ์ํ ์ค์ ์ด๋ค. ํ์ง๋ง, ์ด์ ๊ฐ์ BVMO์ ๋ฐ์์๋ ์์ ์ธ๊ธ๋ NADPH ๋ฐ NADH ๋ณด์กฐ์ธ์๊ฐ ์ ๊ณต๋์ด์ผ ํ๋ค. PE์ ๊ฐ์ ๊ณ ๋ถ์ ๋ถํด์ ์์ด์๋ BVMO ํจ์๊ฐ ์ธํฌ ๋ฐ์ผ๋ก ๋ถ๋น๋๊ฑฐ๋ ์ธํฌ ํ๋ฉด์์ ์ธ๋ถ ํ๊ฒฝ์ผ๋ก ๋
ธ์ถ๋์ด์ผ ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์ ๋ง๋๊ณ ์๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ํ๊ฒฝ์์ ๋ณด์กฐ์ธ์์ ์ฌ์ํ์ด ์ฉ์ดํ์ง ์์ ๊ฒฝ์ฐ, BVMO์ ์ง์์ ์ธ ํ์ฑ์ ๊ธฐ๋ํ๊ธฐ๋ ์ด๋ ค์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ์์๋๋ค. BVMO๋ฅผ ์ด์ฉํ ํํ๊ณต์ ์์๋ ์ด์ ๊ฐ์ ๋ฌธ์ ๋ ๊ณตํต๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์ผ๋ถ ๋ณด์กฐ์ธ์์ ์ฌ์ํ์ ์ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์๋๋ ๋ฐ ์๋ค. ์ฆ, BVMO ๋ฐ์์์ ์ฐํ๋ ๋ณด์กฐ์ธ์๋ฅผ ๋ค๋ฅธ ํจ์๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ํ์์ํค๋ ์ ๋ต์ด๋ค. ์ด๋ \( \mathrm{NADP}^{+} \) ์์กดํ alcohol dehydrogenase๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ธฐ์ง๋ก์จ endo-bicycloheptane-\(2\)-ol์ ์ฐํ์ํค๋ ๊ณผ์ ์์ \( \mathrm{NADP}^{+}\)(BVMO ๋ฐ์์์ ๋ก ์ฐํ๋ ๋ณด์กฐ์ธ์)๋ฅผ ๋ค์ ํ์ ์ํจ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ด์ ๊ฐ์ ์ ๋ต์ด ๋ณด์กฐ์ธ์์ ์์ ํ ์ฐํ/ํ์ ์กฐ์ ์ ์ฑ๊ณตํ ๊ฒ์ ์๋์ง๋ง ์์ผ๋ก BVMO์ ์ฐ์
์ ์ด์ฉ์ ์์ด์ ๋ ๋์ ๋ณด์กฐ์ธ์ ์ฐํ/ํ์ ์์คํ
์ ๊ฐ์ถ๋ ๊ฒ ๋ํ BVMO ํจ์์ ์์ ์ฑ๊ณผ ํ์ฑ์ ๋์ด๋ ค๋ ๋
ธ๋ ฅ๊ณผ ํจ๊ป ์ค์ํ๊ฒ ๊ณ ๋ ค๋์ด์ผ ํจ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ๊ณ ์๋ค.</p> |
ํ๊ธฐ๋ฌผ์ด๋ ๊ฐ๊ณต๋ถ์ฐ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ์ฉ๋ฌผ์ง์ ๋ถ๋ฆฌ,ํ์ฉํ๋ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๊ฒฝ์ ์ ๊ด์ , ๊ด๋ จ ๋ฒ์ ๊ท์ ํด๊ฒฐ ๋ฐ ํ๊ฒฝ์ค์ผ ๋ฌธ์ ๋ฑ์ ํด๊ฒฐํ ์ ์๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ๊ฐ๊ด๋ฐ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ๋ฆฐ๋ด๋ ์ ์ฑ
๊ณผ๋ ๋ถํฉ๋๋ ์ ๋งํ R&D ๋ถ์ผ๋ก ์ทจ๊ธ๋ฐ๋ ์ด์ ๊ฐ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ๋ ์ํ์ฐ์
์ ๋์ฒด์ ์ผ๋ก ์ ์กฐ ๋ฐ ๊ฐ๊ณต ์ค ๋ง์ ์์ ํ๊ธฐ๋ฌผ ๋ฐ ๊ฐ๊ณต๋ถ์ฐ๋ฌผ์ ์์ฑํ๋๋ฐ ์ด๋ค์ ์ฒ๋ฆฌ ๊ณผ์ ์ ๊ธ์ ์ ์ธ ์์ค์ ๋ฐ์์ํฌ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ๋ฒ์ ์ธ ๊ท์ ๊ฐ ๋ฐ๋ฅด๋ฉฐ, ํ๊ธฐ๋ฌผ์ ์์ด ์ฆ๊ฐํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ ์ฌ์ ํ๊ฒฝ์ค์ผ์ ์ ๋ฐ์ํค๋ ์์ธ์ด ๋๊ธฐ๋ ํ๋ค | <h1>์ ๋ก </h1><p>์๋ก์ ๋ฒ ๋ผ(Aloe vera, Aloe Barbadensis Mill.)๋ ์ด๋ ์ง๋ฐฉ์ด ์ฃผ ์ฌ๋ฐฐ์ง๋ก ๋ฐฑํฉ๊ณผ (Liliaceae๊ณ)์ ์๋ก์ ์(Aloineae)์ ์ํ๋ ๋ค๋
์ ์ด๋ณธ์ผ๋ก, ์ ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ์ฝ \(400 \)์ข
์ด์์ด ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ ํ์ฌ \(6 \sim 7\)์ข
๋ง์ด ์์ฉ ๋ฐ ์ฝ์ฉ์ผ๋ก ์ด์ฉ๋๊ณ ์๋ค. ๊ตญ๋ด์์๋ ์๋ก์ ๋ฒ ๋ผ์ ์๋ณด๋ ์ผ์ค๊ฐ ์ฌ๋ฐฐ๋๊ณ ์๋ค. ์๋ก์ ๋ฒ ๋ผ ์์ ์ธ๋ถ์ ๋
น์๋ถ๋ถ์ธ ๊ป์ง๊ณผ ๋ด๋ถ์ ๊ณผ์ก๋ถ๋ถ์ธ ๊ฒ๋ก ๋๋ ์ ์์ผ๋ฉฐ ์ฃผ์ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ ์๋ถ์ด \( 90 \% \) ์ด์์ด๋ฉฐ, ๋ค๋น์ฒด, ๋นํ๋ฏผ๋ฅ, ์ง๋ฐฉ์ฐ, ์๋ฏธ๋
ธ์ฐ, ์
๋ ๋, ์นผ์, ์ํธ๋ผํด๋
ผ (anthraquinone)๋ฅ ๋ฑ ์ฝ \(300 \)์ฌ ํฌํจํ๊ณ ์๋ ์๋ฌผ๋ก ์๋ก๋ถํฐ ์๊ณ์, ๋น๋ฐ, ํ์์น๋ฃ, ํญ์, ๋ฉด์ญํ์ฑ, ๋ฐ ํผ๋ถ์งํ ์น๋ฃ ๋ฑ ๋ค์ํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ง๋๊ณ ์์ด์ ์ค๋ซ๋์ ์ฌ์ฉ๋์ด์ ธ ์๋ค. ๋ํ ์ต๊ทผ๊น์ง ์๋ก์๋ฅผ ์ด์ฉํ ๋ฉด์ญ์ํ ๋ฐ ๋ค๋น๋ฅ, ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋, ์ํธ๋ผํด๋
ผ, ์ง๋ฒ ๋ ๋ฆฐ, ๋ฒ ํ ์ํ ์คํ
๋กค ๋ฑ ์ฌ๋ฌ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ๋ฌผ์ง์ ํฌํจํ๋ ๊ฑด๊ฐ ๋ณด์กฐ์ํ๊ณผ ๊ฐ์ ์ฌ๋ฌ ํํ์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ํ๋ค์ด ์๊ฐ๋๊ณ ์๋ค.</p><p>์๋ก์๋ฅผ ๋น๋กฏํ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ๋ ์ํ์ฐ์
์ ๋์ฒด์ ์ผ๋ก ์ ์กฐ ๋ฐ ๊ฐ๊ณต ์ค ๋ง์ ์์ ํ๊ธฐ๋ฌผ ๋ฐ ๊ฐ๊ณต๋ถ์ฐ๋ฌผ์ ์์ฑํ๋๋ฐ ์ด๋ค์ ์ฒ๋ฆฌ ๊ณผ์ ์ ๊ธ์ ์ ์ธ ์์ค์ ๋ฐ์์ํฌ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ๋ฒ์ ์ธ ๊ท์ ๊ฐ ๋ฐ๋ฅด๋ฉฐ, ํ๊ธฐ๋ฌผ์ ์์ด ์ฆ๊ฐํจ์ ๋ฐ๋ผ ์ ์ฌ์ ํ๊ฒฝ์ค์ผ์ ์ ๋ฐ์ํค๋ ์์ธ์ด ๋๊ธฐ๋ ํ๋ค. ์ด๋ฌํ ํ๊ธฐ๋ฌผ์ด๋ ๊ฐ๊ณต๋ถ์ฐ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ์ฉ๋ฌผ์ง์ ๋ถ๋ฆฌ, ํ์ฉํจ์ผ๋ก์จ ๊ฒฝ์ ์ ๊ด์ , ๊ด๋ จ ๋ฒ์ ๊ท์ ํด๊ฒฐ ๋ฐ ํ๊ฒฝ์ค์ผ ๋ฌธ์ ๋ฑ์ ํด๊ฒฐํ ์ ์๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ๋งค๋
๊พธ์คํ ์ฐ๊ตฌ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ๊ทธ๋ฆฐ๋ด๋ ์ ์ฑ
๊ณผ๋ ๋ถํฉ๋๋ ์ ๋งํ R&D ๋ถ์ผ๋ก ๋ณผ ์ ์๋ค. ํ์ฌ๊น์ง ์๋ก์์ ๋ค์ํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ํจ๊ณผ์ ๊ดํ ๋ณด๊ณ ๋ ์ฃผ๋ก ์๋ก์ ๊ฒ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ์ฐํ, ํญ์, ํญ๋น๋จ, ๋ฉด์ญ์ฆ๊ฐ ๋ฐ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ ๋ฑ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋๋ถ๋ถ์ด๊ณ ์๋ก์ ๊ฐ๊ณต ๋ถ์ฐ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ์ฌ๋ฌ ํจ๊ณผ์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๋ ๊ฑฐ์ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ๊ฐ ์๋ค. Baek๊ณผ Lee์ ์ฐ๊ตฌ์์ ์๋ก์ ๋ฒ ๋ผ์ ๊ฐ๊ณต ๋ถ์ฐ๋ฌผ์ธ ์ฌ์ ์ง์ ํน์ฑ์ ์กฐ์ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ, ์ํ \( \alpha \)-cellulose ์์ด ์ฌ์ ๋ณด๋ค ํฝ์ค๋ ฅ, ๋ณด์๋ ฅ ๋ฐ ์ ํ๋ฅ์์ ์ฐ์ํ ํน์ง์ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ ๋ณด๊ณ ํ ๋ฐ๊ฐ ์๋ค. Han ๋ฑ์ ์๋ฅ๊ณผํผ, ๋ฐ๊ธฐ์ธ๋ฑ \(8 \)์ข
๋ฅ์ ์ํ ๊ฐ๊ณต ๋ถ์ฐ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ ์กฐ์ฌํ์ฌ ์ฒ์ฐ๋ณด์กด์ ํ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด๊ณ ํ์๊ณ , Ren ๋ฑ์ ์ฅ๋ฏธ์ฐจ ๋ฐ ๋ฒ๋ ค์ง๋ ๋๋ผ์ดํ๋ผ์๋ฅผ ์ด์ฉํ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ ๋์ ํญ๊ท , ํญ์ฐํ ๋ฐ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด๋ ๊ฒ์ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค. Choi ๋ฑ์ ๋๋ ๋ถ์ฐ๋ฌผ์์ ์ง๋ฐฉ์ธํฌ ๋ถํ ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ ๋ณด๊ณ ํ์์ผ๋ฉฐ, Maisuthisakul๊ณผ Gordon์ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋จน๊ณ ๋ฒ๋ ค์ง๋ ๋ง๊ณ ์ข
์์์ ํญ์ฐํ ๋ฐ Tyrosinase์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์์์ ๋ณด๊ณ ํ์๋ค.</p><p>์ด์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์๋ก์ ๋ฒ ๋ผ์ ๊ฐ๊ณต ๋ถ์ฐ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฒด์ง๋ฐฉ ๊ฐ์, ๋ณด์ต, ๋ฏธ๋ฐฑ, ํญ๊ท ํ์ฑ ๋ฐ ํญ์ฐํ์ ์ด๋ ํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด๋์ง๋ฅผ ์กฐ์ฌํ์๊ณ , ์ด๋ฅผ ํตํด ํ๊ธฐ ์ฒ๋ถ๋๋ ์๋ก์ ๊ฐ๊ณต ๋ถ์ฐ๋ฌผ์ ์ด์ฉํ ์๋ฃ ๋ฐ ๋ง์คํฌํฉ ์ ์กฐ ๋ฑ์ ์ฒจ๊ฐํ ์ ์๋ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์๋ฌผ ์์ฌ๋ก์ ํ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ์กฐ์ฌํ๊ธฐ ์ํด์ ์ํํ์๋ค.</p> |
์ด ๋
ผ๋ฌธ์์๋ ์คํ์ ํ ๋ฒ๋ง ์งํํ์๋๊ฐ? | NO | <h2>์ธํฌ ์์กด์จ</h2><p>์ธํฌ ์์กด์จ ์คํ์ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ๋ค. \( \mathrm{HaCaT} \) cell๊ณผ \( \mathrm{B} 16 \mathrm{~F} 10 \) cell์ ๊ฐ๊ฐ \(96\) well plate์ \( 1.5 \times 10^{4} \) cells/well๋ก ๋ถ์ฃผํ๊ณ incubator \( \left(37^{\circ} \mathrm{C}, 5 \% \mathrm{CO}_{2}\right) \) ์์ \( 24 \mathrm{~h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋ถํ๋ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( \mathrm{DMSO} \) ์ ์ฉํดํ๊ณ ์ด๋ฅผ \( 10,20,40 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋๋ก ์ธํฌ์ ์ฒ๋ฆฌํ ํ incubator์์ \( 24 \mathrm{~h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋ฐฐ์ง๊ฐ ์๋ ์ํ๋ก MTS์์ฝ์ \( 20 \mu \mathrm{L} \) ์ฉ ์ฒจ๊ฐํ ํ \( 3 \mathrm{~h} \) ๋์ incubator์ ๋ณด๊ดํ์๋ค. formazan์ ์ํ๋ฅผ ๊ด์ฐฐํ ๋ค์ microplate reader์ ํก๊ด๋ \( 495 \mathrm{~nm} \) ๋ชจ๋์์ ๊ฐ์ ๊ตฌํ์๋ค. Cell viability ๊ฐ์ ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋ํ ์๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ๋ค์ ํก๊ด๋ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ฐฑ๋ถ์จ๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>Cell viability \( (\%)=(\mathrm{A} / \mathrm{B}) \times 100 \) \( \mathrm{A} \) : ์๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ์ ํก๊ด๋ \( \mathrm{B} \) : ์๋ฃ ๋ฌด์ฒ๋ฆฌ๋ \( \mathrm{DMSO} \) ์ฉ๋งค ๋์กฐ๊ตฐ ํก๊ด๋</p><h2>ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ</h2><p>์ธํฌ ์คํ ์ค ํญ์ฐํ ํจ๋ฅ ์คํ์ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ ๋ฐฉ์์ผ๋ก ์ํํ์๋ค. \( \mathrm{HaCaT} \) cell์ \( 96 \) well plate์ \( 1.5 \times 10^{4} \) cells/well๋ก ๋ถ์ฃผํ๊ณ incubator์์ \( 24 \mathrm{~h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ธํฌ ๋ฐฐ์ well ๋ง๋ค PBS๋ก \( 2 \)ํ ์ธ์ฒํ์ฌ phenol red๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ์๋ค. ๊ฐ๊ฐ์ well ์ \( 20 \mu \mathrm{M} \) ์ DCFDA๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ ๋ค์ \( 45 \mathrm{~min} \) ๋์ incubator์์ ๋ณด๊ดํ์๋ค. ์ดํ PBS๋ก ๋ค์ ์ธ์ฒํ๊ณ ๋์กฐ๊ตฐ์ ์ ์ธํ well ๋ง๋ค \( 500 \mu \mathrm{M} \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) (hydrogen peroxide)์ \( 10,20,40 \) \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋์ ์๋ฃ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ํ ๋ค์ \( 45 \mathrm{~min} \) ๋์ ๋ค์ incubator์์ ๋ณด๊ดํ์๋ค. Microplate reader์ \( 485 / 528 \mathrm{~nm} \) ์์ ํ๊ด๊ฐ์ ์ป์ด ๋์กฐ๊ตฐ์ ๋ํ ์๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ๋ค์ ๊ฐ์ ๊ณ์ฐํ ํ ์ด๋ฅผ ๋ฐฑ๋ถ์จ๋ก ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>Relative activity \( (\%)=(\mathrm{A} / \mathrm{B}) \times 100 \) \( \mathrm{A} \) : ์๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ์ ํ๊ด๊ฐ \( \mathrm{B} \) : ์๋ฃ ๋ฌด์ฒ๋ฆฌ๋ \( \mathrm{DMSO} \) ์ฉ๋งค ๋์กฐ๊ตฐ ํ๊ด๊ฐ</p><h2>๋ฏธ๋ฐฑ ํจ๊ณผ</h2><p>๋ฏธ๋ฐฑ ์คํ์ ์งํ์ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ๋ค. \( \mathrm{B}16\mathrm{F}10\) cell์ 6 well์ \( 1 \times 10^{5} \mathrm{cells} / \mathrm{well} \) ๋ก ๋ถ์ฃผํ์ฌ incubator์์ \( 24 \mathrm{~h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ๋์กฐ๊ตฐ ์ธ์ ์๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ๋ค์ \( \alpha-\mathrm{MSH}(100 \mathrm{nM}) \) ๋ฅผ ์ฉํดํ DMEM (serum free)์ \( 30 \mathrm{~min} \) ๊ฐ ์ ์ฉํ์๋ค. ๋ฐฐ์ง๋ฅผ ๊ต์ฒด์์ด ์๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ๋ค์ ์๋ฃ๋ฅผ \( 2 \) ๋ฐฐ๋ก ์ฒจ๊ฐํ ํ incubator์์ \( 48 \mathrm{~h} \) ๋์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ดํ ๊ฐ well์PBS๋ก ์ธ์ฒํ ๋ค์ ์ธํฌ๋ฅผ ์๊ฑฐํ์ฌ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ \( \left(4{ }^{\circ} \mathrm{C}, 12,000 \mathrm{rpm}, 3 \mathrm{~min}\right) \) ํ์๋ค. ์์ธต์ก์ ์ ๊ฑฐํ๊ณ ์ธํฌ pellet์ RIPA lysis buffer (Tris-Cl ( \( \mathrm{pH} 7.5\)) \(50\) \( \mathrm{mM}, \mathrm{NP}-401 \%, \mathrm{NaCl} 50 \mathrm{mM} \), SDS \( 0.1 \% \), sodium deoxycholate \( 0.5 \% \), protease inhibitor cocktail (Roche, Switzerland))๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ ๋ค์ ice box์์ \( 30 \mathrm{~min} \) ๋์ ๋ณด๊ดํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ๋ค์ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ \( \left(4{ }^{\circ} \mathrm{C}, 14,000 \mathrm{rpm}, 10 \mathrm{~min}\right) \) ํ๊ณ ์์ธต์ก์ ์ ๊ฑฐํ์ฌ pellet๋ง ๋จ๊ธด ๋ค์ \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) oven์์ ๊ฑด์กฐํ์๋ค. ๊ฑด์กฐ๋ pellet์ \( 2 \mathrm{~N} \) \( \mathrm{NaOH} 200 \mu \mathrm{L} \) ์ \( 20 \% \mathrm{DMSO} \) ๋ฅผ ์ฒจ๊ฐ, ํผํฉํ ํ \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) oven ์์ ์ฉํดํ์๋ค. \(96\) well์ ์ฉํด๋ฌผ์ \( 100 \mu \mathrm{L} \) ์ฉ ๋ด๊ณ microplate reader์ \( 405 \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><p>Relative activity \( (\%)=(\mathrm{A} / \mathrm{B}) \times 100 \) \( \mathrm{A} \) : ์๋ฃ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฐ์ ํก๊ด๋ \( \mathrm{B} \) : ์๋ฃ ๋ฌด์ฒ๋ฆฌ๋ \( \mathrm{DMSO} \) ์ฉ๋งค ๋์กฐ๊ตฐ ํก๊ด๋</p><h2>ํต๊ณ ๋ถ์</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ ์คํ์ \(3\) ํ ์ด์ ๋ฐ๋ณตํ์ฌ ์ํํ ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋์ถํ์๋ค. ๊ทธ๋ํ์ ๊ฒฐ๊ณผ๊ฐ์ ์ํํ ์คํ ํ์๋ค์ ํ๊ท (mean, M) ๊ณผ ํ์คํธ์ฐจ(standard deviation, SD)๋ก ๋ํ๋๋ค.</p> |
azoxystrobin๊ณผ prochloraz๋ฅผ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์๋ฐฉํ๋ ์ด ๋ณ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ | ๋
ธ๋๋ ฅ ์ ๊ฐํจ๊ณผ | <h1>์ ๋ก </h1><p>๋ธ๊ธฐ๋ ์ฅ๋ฏธ๊ณผ์ ์ํ๋ ๋ค๋
์ด ์๋ฌผ๋ก์ ๋ฌด๊ธฐ์ง, ๋นํ๋ฏผ C๊ฐ ํ๋ถํ๊ณ ํญ์ฐํ๋ฌผ์ง์ด ๋ค๋ ํจ์ ๋์ด ์ฌํ๊ด์งํ์ ์๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ์ ์ธ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ ๊ณผ์ฑ๋ฅ๋ก์ ๋ง๊ณผ ํฅ์ด ์ข์์ ์ ์ธ๊ณ์ ์ผ๋ก ์ธ๊ธฐ ์๋ ๋์ฐ๋ฌผ๋ก ์๋ฆฌ๋งค๊น ํ๊ณ ์๋ค. ๋ธ๊ธฐ๋ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์ ์ฃผ์ ์์ถ์๋ชฉ์ผ๋ก \(2017\)๋
์ฝ \(4,000\)๋ง ๋ฌ๋ฌ ์ด์์ ์์ถ์ก์ ๊ธฐ๋กํ๊ณ ์๋ค. ์ต๊ทผ์๋ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ ๋ธ๊ธฐ ์ฌ๋ฐฐํํ๊ฐ ์ ์ ๊ด์๋ฅผ ์ด์ฉํ ์์ก์ฌ๋ฐฐ๋ก ๋น ๋ฅด๊ฒ ์ ํ๋๊ณ ์๊ณ , ์์ก์ฌ๋ฐฐ ๋น์จ์ ('\(08\)) \( 84.1~ \mathrm{ha}\)์์ ('\(14\)) \(663.7\)๋ก ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ์์ก์ฌ๋ฐฐ๋ ์ ์ ๊ด์๋ฅผ ํตํด ์ํ ์ ์๋ถ๊ณผ ์๋ถ์ ๊ณต๊ธํ์ฌ ์๋ฌผ์ด ๋ฟ๋ฆฌ๋ฅผ ํตํด ์ด๋ฅผ ํก์ํ๊ฒ ํ๋ ์๋ํํ์ด๋ค. ์ด๋ฌํ ์๋ํํ๋ ์จ์ค ๋ฐ ํ์ฐ์ค์์ ์ด๋ฃจ์ด์ ธ ์ฌ๋ฐฐํ๊ฒฝ์ด ์จ๋ ๋ค์ตํ์ฌ ๋ณ\(\cdot\)ํด์ถฉ ํผํด๊ฐ ๋ง์ด ๋ฐ์ํ์ฌ, ์ ์ ์ํ๋ ์์ฐ์ ์ํด์๋ ์ ์ ํ ๋์ฝ ์ฌ์ฉ์ด ๊ฐ์ฅ ํฉ๋ฆฌ์ ์ธ ๋ฐฉ๋ฒ์ด๋ค. ์์ก์ฌ๋ฐฐ ๋๊ฐ์์๋ ๋์ฝ์ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ํตํด์ ๋ณ\(\cdot\)ํด์ถฉ ๋ฐฉ์ ์ ๋ง์ ๊ด์ฌ์ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ค. ๋์ฝ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ๋ ๋
ธ๋๋ ฅ ์ ๊ฐํจ๊ณผ๊ฐ ์๊ณ , ๋ฟ๋ฆฌ์ ํผํด๋ฅผ ์ฃผ๋ ์์๋ฟ๋ฆฌํ๋ฆฌ ๋ฐ ํ์ ๋ณ ๋ฑ ๋ณ\(\cdot\)ํด์ถฉ ๋ฐฉ์ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๊ณ , ๊ฒฝ์ฝ์ฒ๋ฆฌ์ ๋นํด์ ์๋ฅ๋์ด ๋ฎ๊ฒ ๋ํ๋๋ค๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ค์ด ์์ด ๋๋ฏผ๋ค์ ๊ด์ฌ์ ๋ฐ๊ณ ์๋ค. ์ด๋ฌํ ์ฅ์ ๋ค์ด ์์์๋ ๋ช ๊ฐ์ง ๋ฌธ์ ๋๋ฌธ์ ์ ๋๋ก ์ด์ฉ๋์ง ๋ชปํ๊ณ ์๋ค.</p><p>์ฒซ์งธ, ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ์ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ๋ก ๋ฑ๋ก๋ ๋์ฝ์ \( 5 \% \) ์์ค์ด๋ค. ๋๊ฐ ํ์ฅ์์๋ ๊ณ์์ ์ผ๋ก ๋ณํ๋ ์๋ํํ์ ํธ์์ฑ ๋๋ฌธ์ ๋์ฝ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ๋ ๊ณ์์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์ง๋ง ํฉ๋ฒ์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ ์ ์๋ ๋์ฝ์ ๋ถ์กฑํ๋ค. ํ์ฅ์์ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ๋ก ๋ง์ด ์ฌ์ฉ๋๋ ์ฝ์ ๋ก๋ azoxystrobin๊ณผ prochloraz๋ก ๊ทผ๋ถํ์ ๋ณ ์๋ฐฉ์ ์ํด์ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์ง๋ง, ๋์ฝ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ๋ก ๋ฑ๋ก๋์ง ์์๋ค. ๊ทผ๋ถํ์ ๋ณ์ ์ก๋ฌ๊ธฐ๋ถํฐ ๋ฐ์ํ๊ธฐ ์์ํ๊ณ , ๋ฐ๋ณ์ด ๋๋ฉด ์์กฐ ํ์์ ๋ณด์ด๋ค๊ฐ ๊ณ ์ฌํ๊ฒ ๋๋ ๋ณ์ผ๋ก, ๋ธ๊ธฐ์์ ๋ง์ด ๋ฐ์ํ๋ ๋ณ์ด๋ค. ๋งค๋
ํ์ฅ์์ ํ์ฉํ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋ฑ๋ก์ด ํ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๋ค.</p><p>๋์งธ, ์์ถ ๋์๊ตญ์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก๋ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ๋ก ๋ฑ๋ก๋ ๋์ฝ๋น์จ์ \(4\)-\(7\%\)๋ก ๋งค์ฐ ๋ถ์กฑํ๋ฐ, ์๋๊ตญ Maximum Residue Level (MRL)์ด ๋ฎ์ ์ ๋๋ก ์ฌ์ฉ๋์ง ๋ชปํ๊ณ ์๋ ๋์ฝ๋ค์ด ์๋ค. Thiamethoxam์ ๊ทธ ์ค ๋ํ์ ์ธ ๋์ฝ์ผ๋ก ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ MRL (\( 1.0 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \))๋ณด๋ค ํ์ฝฉ MRL (\(0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)) ๋ฎ๊ฒ ์ค์ ๋์ด์๋ค. ํ์ฝฉ์ ์ฐ๋ฆฌ๋๋ผ ๋ธ๊ธฐ์ ์ต๋ ์์ถ๊ตญ์ผ๋ก, ๋ง์ ๋๊ฐ์์ ํ์ฝฉ ์์ถ์ ๋์์ผ๋ก ๋ธ๊ธฐ๋ฅผ ์์ฐํ๊ณ ์๋ค. ๋ํ Thiamethoxam์ ์์๋ฟ๋ฆฌํ๋ฆฌ ์๋ฐฉ ์ฝ์ ๋ก์, ์์๋ฟ๋ฆฌํ๋ฆฌ๋ ์์ค์ก๋ฌ์ฅ์์ ์ฐ์ค ๋ฐ์ํ์ฌ ํผํด๋ฅผ ์ฃผ๊ณ , ํนํ ๋ ์จ๊ฐ ๋ฐ๋ปํด์ง ๋ ํผํด๊ฐ ์ฌํ ํด์ถฉ์ผ๋ก, ์์๋ฟ๋ฆฌํ๋ฆฌ ๋ฐฉ์ ๋ฅผ ์ํด thiamethoxam์ ์ฌ์ฉ์ ํ์ํ ์ค์ ์ด๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋, ์๋ MRL์ด ๋ฎ์ ๊ฒฝ์ฐ ๊ทธ ๊ธฐ์ค์ ๋ง๋ ๋์ฝ์์ ์ฌ์ฉ๊ธฐ์ค์ด ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์, ์์ถ ๋๊ฐ์์๋ ๋ถ์ ํฉ ๋ฌธ์ ๋ก ์ฌ์ฉ์ ์ง์ํ๊ณ ์๋ค. ๋์ฐ๋ฌผ ์์ถ์ \( 1 \% \)์ ์์ ์ฑ ์ฌ๊ณ ๋ ๋์ฐ๋ฌผ ์์ถ์์ ์ํ ์ ์๊ฒ์ฌ ๋ฐ ์์ถ๊ธ์ง ์กฐ์น๋ก ์ธํด ํฐ ๊ฒฝ์ ์ ์์ค์ ๋ฐ์ํ ์ ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ค. ๊ทธ๋ ๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์์ถ ๋๊ฐ์์ ์์ถํ๋๋ฅผ ์ํด์๋ ์๋๊ตญ ๊ธฐ์ค์ ๋ง๋ ๋์ฝ์์ ์ฌ์ฉ๊ธฐ์ค ์ค์ ์ด ํ์ํ๋ค.</p><p>์ด๋ฒ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ ๊ฐ์ง ํ์ฅ ๋ฌธ์ ํด๊ฒฐ์ ์ํด์, ๋ฑ๋ก์ด ๋์ง ์์์ง๋ง ๊ดํ์ ์ผ๋ก ๋ง์ด ์ฌ์ฉํ๊ณ ์๋ ๋์ฝ azoxystrobin๊ณผ prochloraz์ ์๋ฅ์์ ์ฑ ๊ตฌ๋ช
๊ณผ thiamethoxam์ ๋ค์ํ ๊ด์ฃผ์ฒ๋ฆฌ ์กฐ๊ฑด์ ํตํ ์์ถ ์๋๊ตญ(ํ์ฝฉ) MRL์ ๋ง๋ ๋์ฝ์์ ์ฌ์ฉ๊ธฐ์ค์ ์ ์ํ๊ณ ์ ํ๋ค.</p> |
xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ ์ ํดํ๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ ๋ญ๋? | xanthine oxidase | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>์ฝ์ฉ์๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase ํ์ฑ ์ ํด ํจ๊ณผ</h2><p>์์ฝ์ ๋ก ๋๋ฆฌ ์ฌ์ฉ๋๋ ์ฝ์ฉ์๋ฌผ \( 67 \)์ข
์ ์ฝ๋ฆฌ ํ์ฑ ๋ถ์๋ฅผ ์ผ์์์ ์์ฉํ๋ ์กฐ๊ฑด์ธ ๋จ๊ฑฐ์ด ๋ฌผ๋ก ์ถ์ถํ์ฌ ํญํตํ xanthine oxidase ํ์ฑ ์ ํด ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. Table \( 1 \)์์ ๋ณด๋ฏ์ด ์์ฐฝํฌ ๋ฟ๋ฆฌ์ค๊ธฐ, ์๋ ๋ฟ๋ฆฌ, ๋ฌ๋ ๋ฟ๋ฆฌ, ๋ฐฑ์์ค ๋ฟ๋ฆฌ, ํฉ์น ๋๋ฌด ์, ๋ง ๋ฟ๋ฆฌ, ๊ฐ์ด ๋ฟ๋ฆฌ, ๊ตฌ๊ธฐ์๋๋ฌด ๊ป์ง(์ง๊ณจํผ), ํฉ์ ๋ฟ๋ฆฌ, ๋๋ฆ
๋๋ฌด ๊ป์ง(์ ๊ทผํผ) ๋ฐ ์๊ฐ ๋ฟ๋ฆฌ์ค๊ธฐ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ ์ ํ ์ ํดํ์ง ๋ชปํ์๋ค. ๊ฐ์ด ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 1.68 \% \) ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ์๋ค. ์ฐฝ์ถ ๋ฟ๋ฆฌ, ์ฒ๋ง ๋ฟ๋ฆฌ, ์๋๋ฌด ๊ป์ง(ํด๋ํผ), ์ธ๊ธ ๋ฟ๋ฆฌ, ์ฃฝ์ฌ ์๊ป์ง, ๊ฐํฉ ๋ฟ๋ฆฌ,ํฉ๊ธฐ ๋ฟ๋ฆฌ, ๋ง๋ ๋ฟ๋ฆฌ, ์ฐ์์ก, ์ฌ์์ ๋ฐ ๋ชฉํฅ ๋ฟ๋ฆฌ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ ์ ํด ํจ๊ณผ๊ฐ \( 5 \% \) ์ด๋ด๋ก ํญํตํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ฏธ๋ฏธํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ฃฝ์ฌ์ ์ฐฝ์ถ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ ๊ฐ๊ฐ \( 5.75 \) ๋ฐ \( 5.85 \% \) ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์คํ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ์์ผ๋, ํด๋ํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ํจ์ ํ์ฑ์ \( 14.47 \% \) ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋นํด xanthine oxidase ์ ํด ํจ๊ณผ๊ฐ ๋์๋ค. ์ฝ๋ฆฌ ํจ๊ณผ๊ฐ ํ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ง ์ธ์ผ์ ๊ฐ๊ณตํ์ธ ๋ฐฑ์ผ, ํ๊ทน์ผ, ํ์ผ ๋ฐ ํ์ผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase ํ์ฑ์ \( 3.7 \)-\( 9.1 \% \) ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ ์ญ์ ๊ทธ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ฎ์๋ค.</p><p>์ฝ์ฃผ(๋ฐฑ์ถ) ๋ฟ๋ฆฌ์ค๊ธฐ, ์ค๊ฐํผ ๊ป์ง, ์ฒ๊ถ ๋ฟ๋ฆฌ์ค๊ธฐ, ์ง๊ตฌ์(ํ๊ฐ๋๋ฌด ์ด๋งค), ๋์ถ ์ด๋งค, ๊ตฌ๊ธฐ์ ์ด๋งค, ๋ชจ์ฏ๋(์ ๋) ๋ฟ๋ฆฌ, ํผ๋ง์ ์, ์ค๋ฏธ์ ์ด๋งค ๋ฐ ์ฉ์์ก ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase ํ์ฑ์ \( 5 \) ์ด์ \( 10 \% \) ์ด๋ด์์ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ์ฝ์ฃผ(๋ฐฑ์ถ) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 3.96 \% \) ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์คํ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ์๋ค.</p><p>์ก๊ณ ๊ป์ง(๊ณํผ), ํ๋ฐ ๋ฟ๋ฆฌ๊ป์ง, ํ๋ จ์ด ์, ๊ฐ์ค์์ผ ์ด๋งค(ํ ์ฌ์), ์๋จ ๋ฟ๋ฆฌ, ์์ง ๋ฟ๋ฆฌ, ํฅ์ ์, ์ฐ์์ ์ด๋งค, ๊ฐํฉ, ๊ทค๊ป์ง(์งํผ), ์ฐ์ฌ์, ์์์ฝ ์ ๋ฐ ๊ตฌ๋ฆฟ๋(๋ฐฑ์ง) ๋ฟ๋ฆฌ ์ค๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase ํ์ฑ์ \( 10 \) ์ด์ \( 20 \% \) ์ด๋ด์์ ์ ํดํ๋๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ ๊ทธ ํจ๊ณผ๊ฐ ํฌ์ง ์์๋ค. ๊ตฌ๋ฆฟ๋(๋ฐฑ์ง) ์ถ๋ฃฐ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 19.12 \% \) ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์คํ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ์นํ์์ผ๋, ๊ทค ๊ป์ง(์งํผ) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ ํจ์ ํ์ฑ์ \( 6.89 \% \) ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋นํด xanthine oxidase ์ ํด ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ค์ ๋ฎ๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค.</p><p>๋น๊ท ๋ฟ๋ฆฌ, ํํ ๊ฝ, ๊ฐ๋๋ฆฌ(์ฐ๊ต) ์ด๋งค, ๊ตฌ์ ์ด ์, ๋ฝ๋๋ฌด ๊ป์ง(์๋ฐฑํผ), ์ธ๋์ด(๊ธ์ํ) ๊ฝ๋ง์ธ, ๋ฐํ ์, ์ฐ์ ๋ฟ๋ฆฌ, ์ฐ์ด ์ด๋งค ๋ฐ ์์งํฉ ๋ถ๋ฆฌ์ค๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase ํ์ฑ์ \( 20 \) ์ด์ \( 40 \% \) ์ด๋ด์์ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ ํญํตํ ์ฒ์ฐ ์์ฌ๋ก์์ ํ์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ์ธ๋์ด(๊ธ์ํ) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 27.81 \% \) ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์คํ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ์นํ์์ผ๋, ๊ฐ๋๋ฆฌ(์ฐ๊ต)์ ํํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ ํจ์ ํ์ฑ์ \( 10 \% \) ์ด๋ด์์ ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ฐจ์ด๊ฐ ์์๋ค.</p><p>์ง์ค(ํฑ์๋๋ฌด์ ๋ฏธ์ฑ์ ๊ณผ์ผ), ๋
น์ฐจ ์, ๋ณต๋ถ์ ์ด๋งค, ๊ฐ๊ทผ(์นก) ๋ฟ๋ฆฌ, ํ์์ค ๋ฟ๋ฆฌ, ์ง๊ฐ(๊ด๊ทค ์ด๋งค) ๋ฐ ํฉ๊ธ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 40 \% \) ์ด์ ๊ฐ๋ ฅํ๊ฒ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ ํญํตํ ์ฒ์ฐ ์์ฌ๋ก์ ํ์ฉ ๊ฐ์น๊ฐ ๋๋ค๊ณ ํ ์ ์๋ค. ํนํ ํฉ๊ธ ๋ฐ ์ง๊ฐ(๊ด๊ทค ์ด๋งค) ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 80 \% \) ์ด์ ์ ํดํ ์ ๋๋ก ๊ทธ ํจ๊ณผ๊ฐ ํ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ํฉ๊ธ ์ฝ์นจ์ก์ด xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ ๊ฐ๋ ฅํ๊ฒ ์ ํดํ์๊ณ , ํฉ๊ธ์ ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 87.75 \% \) ์ต์ ํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ ์์ด ๋ณธ ์คํ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ผ์นํ์๋ค. ํฉ๊ธ์ ๋ฉํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์์ xanthine oxidase ์ ํด ๋ฌผ์ง์ธ \( 3,5,7 \)-trihydroxy-\( 2' \)-methoxyflavone์ด ๋ถ๋ฆฌ๋์ ๋์๊ณ , ํนํ ํฉ๊ธ์ baicalein ์ฑ๋ถ์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ ๊ฐ๋ ฅํ๊ฒ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ง์ค(ํฑ์ ์ด๋งค) ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ธฐ์กด์ ์ฐ๊ตฌ์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 25.7 \% \) ์ต์ ํ์ฌ ๋ณธ ์คํ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ์ ์ฌํ ์์์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ํนํ ํนํ ์ง์ค ๊ป์ง์ ๋ฌผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 37.14 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 50 \% \) ์ ํดํ๋ค๋ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์๋ฏ์ด ์ด๋ฏธ ํญํตํ ์์ฌ๋ก์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์ํ๋๊ณ ์๋ค. ์ง๊ฐ(๊ด๊ทค ์ด๋งค)์ ethyl acetate ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ฐ๋ ฅํ xanthine oxidase ์ ํด ํ์ฑ์ ๋ณด์ ํ๊ณ ์๊ณ , ํนํ ์ง๊ฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํจ์ ๋์ด ์๋ ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํํฉ๋ฌผ์ธ naringenin, hesperitin ๋ฐ nobiletin์ด xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ ์ ํดํ๋ ์ฃผ๋ ๋ฌผ์ง์์ด ๋ฐํ์ง ๋ฐ ์๋ค. ๋ํ ๋
น์ฐจ, ์ฐ๋กฑ์ฐจ ๋ฐ ํ์ฐจ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฐ์ํ xanthine oxidase ์ ํด ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๊ณ , ์ฐจ์ ํจ์ ๋์ด ์๋ ์นดํ
ํจ๋ฅ ์ค์ gallate๊ธฐ๊ฐ ๊ฒฐํฉ๋์ด ์๋ (-)-epigallocatechin gallate ๋ฐ (-)-epicatechin gallate๊ฐ ์ฃผ๋ ์ ํด ๋ฌผ์ง์์ด ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ ์๋ค. ๊ฐ๊ทผ(์นก) ๋ฟ๋ฆฌ์ \( 70 \% \) ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๋๋์์ xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 52 \% \) ์ ํดํ๋ค๋ ๋ณด๊ณ ๋์๋ฏ์ด ์ด๋ฏธ ํญํตํ ์์ฌ๋ก์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์ํ๋์๊ณ , ๊ฐ๊ทผ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ก๋ถํฐ puerarin๋ฑ์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ๊ฒ ํํฉ๋ฌผ์ด ์ ํด ๋ฌผ์ง๋ก ๋ถ๋ฆฌ ๋์ ๋์๋ค. ๋ณต๋ถ์์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ ๊ทธ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ ์ต์ ํ์ฌ ์์ฐ ๊ฒฐ์ ์ ์์ฑ์ ์ต์ ํ๋ค๊ณ ๋ฐํ๋ ๋ฐ ์๋ค. ํ์์ค ์, ์ค๊ธฐ ๋ฐ ๋ฟ๋ฆฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๊ฐ๋ ฅํ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ ๊ฐ์ง๊ณ ์๊ณ emodin ํํฉ๋ฌผ๊ณผ quercetin์ด ํญ์ฐํ ๋ฌผ์ง๋ก์์ ์ญํ ์ ํ๋ค๊ณ ์๋ ค์ ธ ์๊ณ , ํ์์ค ์๊ณผ ์ค๊ธฐ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด xanthine oxidase์ ํ์ฑ์ \( 15.81 \% \) ์ ํดํ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋ ๋ฐ ์์ผ๋ ์์ง๊น์ง ํ์์ค ๋ฟ๋ฆฌ์ xanthine oxidase ์ ํด ํจ๊ณผ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ด๋ฃจ์ด์ง์ง ์์๋ค.</p> |
ํ ๋งํ ๋ ๊ฐ์ง์ ๋ฌธ์ด ๊ฐ์? | YES | <h1>๊ฒฐ๊ณผ ๋ฐ ๊ณ ์ฐฐ</h1><h2>Fibroblast cell line MTT ์ธก์ </h2><p>GBE์ CCD986sk cell์ ๋ํ ๋
์ฑ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด MTTassay๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ์ธํฌ ์์กด์จ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ Fig. 1์์์ ๊ฐ๋ค. GBE๋ฅผ ๋๋๋ณ (\( 100\),\(200\),\(300\),\(400\),\(500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \)๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์์ ๋ ๋๋๊ฐ ์ฆ๊ฐํ์ฌ๋ ์ธํฌ ์์กด์จ์ด \(98.09\)-\( 95.70\% \)๋ก \( 95 \% \)์ด์์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ์ผ๋ฉฐ, \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๊ณ ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์์๋ ์ธํฌ ์์กด์จ์ด \( 95 \% \) ์ด์์ผ๋ก ํ์ธ๋์ด ๊ณ ๋๋์ GBE ์ฒ๋ฆฌ ์ ์ธํฌ ์์กด์จ์ ํฌ๊ฒ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น์ง ์๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์์์๋ค.</p><p>์์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋ฐ๋ผ GBE๊ฐ CCD986sk cell์ ๋ํ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ๊ฐ์ง์ง ์์์ ํ์ธํ์ฌ \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ์ต๊ณ ๋๋๋ก ์ค์ ํ์ฌ ์ถํ western blot ๋ฐ real-time PCR ์ธก์ ์คํ์ ์งํํ์๋ค.</p><h2>Western blot์ ์ด์ฉํ COL1A2 protein ๋ฐํ๋ ์ธก์ </h2><p>์ธ์ฒด ํผ๋ถ์ ๊ธฐ๋ฅ์ ์ธ ํน์ฑ์ ํผ๋ถ์์ ๊ฐ์ฅ ํ๋ถํ๊ฒ ์กด์ฌํ๋ ๊ตฌ์กฐ ๋จ๋ฐฑ์ง์ธ collagen์ ์ํ์ ๊ด๋ จ์ด ๊น์ผ๋ฉฐ, collagen์ ํผ๋ถ์ ๊ฐ๋์ ์ฅ๋ ฅ์ ๋ถ์ฌํ์ฌ ์ธ๋ถ์ ์๊ทน ๋ฑ์ผ๋ก๋ถํฐ ํผ๋ถ๋ฅผ ๋ณดํธํ๋ ์ญํ ์ ํ๋ค. Collagen์ ๊ฐ์๋ ํผ๋ถ์ ๋
ธํ ๋ฐ ์ฃผ๋ฆ์์ฑ์ ๋ฐ์ ํ๊ฒ ๊ด์ฌํ๋ ์ฑ๋ถ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ํ ์ธ์ฒด ๋ด์ collagen์ ํฉ์ฑ ๋ฐ ๋ถํด๊ณผ์ ์ ์ ์ ํ๊ฒ ์กฐ์ ๋๋ฉฐ, ๋
ธํ๊ฐ ์งํ๋๋ฉด์ collagen์ ์์ด ๊ฐ์ํ๊ณ ํผ๋ถ๊ฐ ์์ธ์ ์ ๋
ธ์ถ๋๋ฉด ๊ธฐ์ง ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ถํดํจ์์ธ MMPs์ ๋ฐํ์ด ์ด์ง๋๋ค. ์ง๊ธ๊น์ง ์ฝ 20์ข
์ MMPs๊ฐ ๋ฐ๊ฒฌ๋์๋๋ฐ MMP๋ ๊ธฐ์ ๋ง๊ณผ ์ธํฌ์ธ๊ธฐ์ง์ ๋ถํด์ ๊ด์ฌํ๋ ์์ฐ์ ํฌํจํ๋ ๋จ๋ฐฑ์ง๋ถํด ํจ์๋ก์ ๊ตฌ์กฐ ๋ฐ ๊ธฐ๋ฅ์ ํน์ฑ์ ๋ฐ๋ผ collagenase, gelatinase,stromelysin, matrilysin ๋ฐ membrane type-MMP ๋ฑ์ผ๋ก ๊ตฌ๋ถ๋๋ค. ํผ๋ถ์์์ collagen ํฉ์ฑ์ ๊ณ ๋ นํ์ ๋ฐ๋ฅธ ๋ด์ธ์ฑ ๋
ธํ ๋ฐ ์์ธ์ ๋
ธ์ถ์ ์ํ ๊ด๋
ธํ์ ๊ด๋ จ์ด ์๋ค. GBE์ COL1A2 protein ๋ฐํ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด UVB์ ์ํด ์๊ทน๋ CCD986sk cell์ GBE๋ฅผ ๋๋๋ณ(\(100\), \(300\), \(500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \))๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๋ฐํ๋์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ Fig. 2์์์ ๊ฐ์ด \(55.87\),\(65.40\),\(100.00 \% \))์ COL1A2 ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์ด 500 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๊ณ ๋๋์์ \( 100.00 \% \)๋ก UVB ์๊ทน์ ์ฃผ์ง ์์ normal(Nor)๊ตฐ์ ์ํ์ ๊ฐ์ COL1A2 ํฉ์ฑ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค.</p><h2>Western blot์ ์ด์ฉํ MMP-1, MMP-9, TIMP-1 protein ๋ฐํ๋ ์ธก์ </h2><p>ํผ๋ถ์ ๋
ธํ๊ฐ ์งํ๋จ์ ๋ฐ๋ผ ํผ๋ถ ๋ด์ MMP-1์ ํ์ฑ์ด ์ฆ๊ฐํ๊ฒ ๋๊ณ , ํผ๋ถ์ collagen ํฉ์ฑ์ด ๊ฐ์ํ์ฌ ํผ๋ถ ํ๋ ฅ ๊ฐ์์ ์ฃผ๋ฆ์ ์ ๋ฐํ๋ค. MMP-9์ ๊ธฐ์ ๋ง์ ํ์ฑํ๋ ์ 4ํ ์๊ต์ง์ฌ์ ๋ฅผ ๋ถํดํ๋ ํจ์๋ก ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฌํ ์ฉํด์ฑ MMPs๋ ๋นํ์ฑํ์ผ๋ก ๋ถ๋น๋์ด N-๋ง๋จ ์ ๊ตฌ์์ญ์ด ๋ถ๋ฆฌ๋ ๋ค์ ํ์ฑํ๋๋๋ฐ ์ฌ๋ฌ ๋จ๋ฐฑ๋ถํดํจ์๋ค์ด ์ด ์ ๊ตฌํจ์์ ํ์ฑํ์ ๊ด์ฌํ๋ค. ํ์ฑํ MMPs๋ ์ฃผ๋ก TIMPs์ ์ํด ์ต์ ๋๋ค. TIMPs๋ ์ง๊ธ๊น์ง ์ฃผ๋ก 4๊ตฐ์ด ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, TIMP-1์ MMP-9, TIMP-2๋ MMP-2๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ๋ํญํจ์ผ๋ก์จ ํผ๋ถ ์ธํฌ ๋ด์์ ์ผ์ฆ์ด๋ ์ฃผ๋ฆ ์ํ ์ธ์๋ค๊ณผ ์ฐ๊ด์ฑ์ ๋ณด์๋ค๋ ๋ณด๊ณ ๊ฐ ์๋ค.</p><p>GBE์ MMP-1, MMP-9, TIMP-1 protein ๋ฐํ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด UVB์ ์ํด ์๊ทน๋ CCD986sk cell์ GBE๋ฅผ ๋๋๋ณ(\( 100\),\(300\),\(500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \))๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๋ฐํ๋์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ MMP-1์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig.\( 3 \mathrm{A} \)์์์ ๊ฐ์ด \( 99.08\), \(75.69\), \(73.36 \% \)์ ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๊ณ ๋๋์์ \( 26.64 \% \)์ ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๊ณ , MMP-9์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig. 3B์์์ ๊ฐ์ด \( 60.77\), \(46.27\), \(32.98 \% \)์ ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๊ณ ๋๋์์ \( 67.02 \% \)์ ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค. TIMP-1์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig. 3 C์์์ ๊ฐ์ด \(64.16\), \(60.80\), \(84.08 \% \)์ TIMP-1 ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์๊ณ , \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๊ณ ๋๋์์ \( 84.08 \% \) ๋ก UVB ์๊ทน๋ง ์ฒ๋ฆฌํ control (Con)๊ตฐ์ \( 40.59 \% \) ์๋นํด ์ฐ์ํ TIMP-1 ์์ฑ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. UVB์ ์ํด ์๊ทน๋ MMP-1, MMP-9 protein ๋ชจ๋ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ๋ฐํ๋์ด ๊ฐ์ํ์์ผ๋ฉฐ, COL1A2, TIMP-1 protein์ ๊ฒฝ์ฐ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ๋ฐํ๋์ด ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค.</p><p>์์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋ฐ๋ผ GBE๊ฐ MMP-1 protein์ ์ต์ ํ์์ผ๋ฉฐ,MMP-1์ ํ์ฑ์ต์ ์ ์ํด COL1A2์ ํฉ์ฑ๋์ด ์ฆ๊ฐ๋๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ GBE๊ฐ type โ
collagenase group์MMP-1 ์ต์ ์ ์ด์ ๊ด๋ จ๋ COL1A2 ํฉ์ฑ์ ๋ชจ๋ ๊ด์ฌํ๋ค๊ณ ํ๋จ๋์๋ค. ๋ํ gelatin ๋ถํด์ type โ
ฅ collagenase๋ก ์๋ ค์ง MMP-9์ ์ต์ , MMPs์ tissue inhibitor๋ก ์๋ ค์ง glycoprotein์ธ TIMP-1์ ์์ฑ์๋ ๊ด์ฌํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ, ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ ๋ ๋ค๋ฅธ ์ ์ ์์๋ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น ๊ฒ์ผ๋ก ์์๋์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ GBE์ ๊ฒฝ์ฐ์ ๊ฐ์ด collagen ๋์ฌ๋ฅผ ์กฐ์ ํ๋ ์์ฌ์ ํ์์ ์์ธ์ ์ผ๋ก๋ถํฐ ์ ๋๋๋ ํผ๋ถ ๋
ธํ๋ฅผ ์๋ฐฉํ๊ณ ์น๋ฃํ๋๋ฐ ํจ๊ณผ์ ์ธ ์ ๊ทผ ๋ฐฉ๋ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋๊ณ ์๋ค.</p><h2>Real-time PCR์ ์ด์ฉํ photoaging-related factors (COL1A2, MMP-1, MMP-9, HAS2, TGF- \( \beta \), TIMP-1) ๋ฐํ๋ ์ธก์ </h2><p>๋
ธํ๊ฐ ์งํ๋ ์๋ก ํผ๋ถ๋ฅผ ๊ตฌ์ฑํ๋ ๋ฌผ์ง์ธ collagen, elastin,hyaluronic acid ๋ฑ ๊ตฌ์กฐ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์์ฑํ๋ ๋ฅ๋ ฅ์ด ๊ฐ์ํ๋ค. ํผ๋ถ์ ์์ด collagen์ ์ ์ฒด ๊ณณ๊ณณ์ ์กด์ฌํ๋ ๋ํ์ ์ธ ์ฌ์ ์ ๋จ๋ฐฑ์ง๋ก์ 14๊ฐ์ type์ด ์กด์ฌํ๋ฉฐ ์ด ์ค ํผ๋ถ์๋ type I collagen์ด ์ฃผ๋ก ์กด์ฌํ๋ค. Type I collagen์ ํผ๋ถ์ ์งํผ, ํ์ค, ๋ผ, ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ์น์ ๋ฑ์ ์กด์ฌํ๋ฉฐ ์กฐ์ง์ ํ๋ ฅ์ ์ ์งํ๋๋ฐ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ค. Collagen์ ๋ ๊ฐ์ \( \alpha \)1 ์ฌ์ฌ๊ณผ ํ ๊ฐ์ \( \alpha \)2 ์ฌ์ฌ์ด 3์ค ๋์ ํํ๋ก ๊ผฌ์ฌ์ ์์ฑ๋๋ฉฐ ์ด์ฌ์ฌ๋ค์ ๊ฐ๊ฐ COL1A1, COL1A2 ์ ์ ์๋ก๋ถํฐ ๋ฐํ๋๋ค. ํผ๋ถ ๋
ธํ๋ ์งํผ์ฌ์ ์์ธํฌ์ ์์ฉ์ด ํน์ ์์ธ์ ์ํด ์ด์์ด ์๊ธฐ๋ ๊ฒ์ผ๋ก, ์งํผ์ฌ์ ์์ธํฌ์ ๊ธฐ๋ฅ ์ด์์ collagen์ ์์ฑ ์ ํด์ collagen ๋ถํด ํจ์์ธ MMPs์ ํ์ฑ ์ฆ๊ฐ๋ก ์ด์ด์ง๊ฒ ๋๋ค. MMPs๋ ์งํผ์ธต์ผ๋ก ๋ถ๋น๋์ด collagen์ ๋ถํด๋ฅผ ์ด์งํ์ฌ ์ฃผ๋ฆ ์์ฑ๊ณผ ํ๋ ฅ์ ๊ฐ์๋ฅผ ์ ๋ํ๋ค. ์ฌ์ ์์ธํฌ์์ ์์ฑ๋๋ MMP-1, MMP-9์ type โ
, โ
ก, โ
ข collagen์ ๋ถํดํ๋ ์์ฉ์ ํ๋ค. MMPs์ ํ์ฑ์ ์กฐ์ ํ๋ ์ธ์๋ก ์๋ ค์ง TIMPs๋ MMPs์ ๋น ๊ณต์ ์ ์ธ ๊ฒฐํฉ์ ํ์ฌ MMPs์ ๊ธฐ๋ฅ์ ์ต์ ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๊ณ , TIMP-1์ MMP-9๊ณผ,TIMP-2๋ MMP-2์ ๊ฐ๊ฐ ๊ฒฐํฉํ์ฌ ์ธํฌ ๊ฐ ๊ธฐ์ง์ ํ๊ดด์ ์ฌํ์ฑ ๊ฐ์ ๊ท ํ์ ์กฐ์ ํ๋ ์ญํ ์ ํ๋ค. ์ธํฌ์์กด, ์ธํฌ๋ถํ, ์ธํฌ์ธ๊ธฐ์ง ํฉ์ฑ ๋ฑ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ ๊ธฐ์ ์ ๊ด์ฌํ๋ ๋ํ์ ์ธ ๋ค๊ธฐ๋ฅ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ์ธ TGF-\( \beta \)๋ UVB์ ์ํ์ฌ ์ฆ๊ฐ๋ ROS์ ์ํด ์ ํด๋๋ฉฐ, TGF-\( \beta \)์ ํ์ฑํ๋ MMPs์ type Ipro-collagen ๋ฐํ์ ๊ด์ฌํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค.</p><p>GBE์ photoaging-related factors (COL1A2, MMP-1, MMP-9, HAS2, TGF-\( \beta \), TIMP-1) ๋ฐํ๋์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด UVB์ ์ํด ์๊ทน๋ CCD986sk cell์ GBE๋ฅผ ๋๋๋ณ(\(100\), \(300\), \(500\) \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \))๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ ๋ฐํ๋์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ Fig. 4A์์์ ๊ฐ์ด \(0.48\), \(0.62\), \(0.68\)์ COL1A2 ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์ด (\(100\)-\(500\) \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \))์ ๋ชจ๋ ๋๋์์ UVB ์๊ทน๋ง ์ฒ๋ฆฌํ Con๊ตฐ์ 0.34์ ๋นํด๋์ COL1A2 ์์ฑ๋์ ๋ํ๋ด์๋ค. MMP-1์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig. 4B์์์ ๊ฐ์ด 0.84, 0.61, 0.59์ ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์ด \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ๊ณ ๋๋์์ Con๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์์ ๋ MMP-1์ ํจ๊ณผ์ ์ธ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ ์ ์์์ผ๋ฉฐ, MMP-9์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig. 4C์์์ ๊ฐ์ด 0.98, 0.94, 0.83์ ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์ด \(500\) ฮผg/mL์ ๊ณ ๋๋์์ Con๊ตฐ๊ณผ ๋น๊ตํ์์ ๋ MMP-9์ ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผํ์ธํ์๋ค. HAS2์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig. 4D์์์ ๊ฐ์ด 0.30, 0.37, 0.56์ ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์ด ๋๋์์กด์ ์ผ๋ก ์ ์์ ์ผ๋ก ์์นํ๋๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค. TGF-\( \beta \)์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig. 4E์์์ ๊ฐ์ด 0.44, 0.48, 0.63์ ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์ด TGF-\( \beta \)๊ฐ ๋๋์์กด์ ์ผ๋ก ๋ฐํ๋์ด ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค. TIMP-1์ ๊ฒฝ์ฐ์๋ Fig. 4F์์์ ๊ฐ์ด 0.34, 0.47, 0.53์ ๋ฐํ๋์ ๋ํ๋ด์ด ์ฐ์ํ MMPs ์กฐ์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค. ์์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋ฐ๋ผ UVB์ ์ํด ์๊ทน๋ photoaging-related factors ๋ชจ๋ ์ ์์ ์ผ๋ก ๋ฐํ๋์ด ๊ฐ์ํ๊ฑฐ๋ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ, UVB ์๊ทน๋ง ์ฒ๋ฆฌํ Con๊ตฐ์ ๋ฐํ๋๊ณผ ๋น๊ตํ์์ ๋ ์ ์์ ์ผ๋ก ๋ ์ฐ์ํ ํจ๊ณผ๋ฅผ๋ํ๋ด์๋ค. ๋ํ GBE๊ฐ MMP-1, MMP-9์ ํจ๊ณผ์ ์ผ๋ก ์ต์ ํ์์ผ๋ฉฐ, MMPs ์ type I pro-collagen ๋ฐํ์ ๊ด์ฌํ๋ ์กฐ์ ์ธ์์ธ TIMP-1๊ณผ TGF-\( \beta \)์ ๋ฐํ๋์ด ์ฆ๊ฐํจ์ ๋ฐ๋ผ COL1A2์ ์์ฑ๋์ด ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ ํผ๋ถ๋ฅผ ๊ตฌ์ฑํ๋ ๊ตฌ์กฐ ๋จ๋ฐฑ์ง ์ค ํ๋์ธ hyaluronic acid ์์ฑ์ ๊ด์ฌํ๋ HAS2์ ๋ฐํ๋ ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ GBE๊ฐ ์ฃผ๋ฆ์์ฑ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ์ธ์์ ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ ์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ ์ธ์ ๋ชจ๋์ ๊ด์ฌํ๋ค๊ณ ํ๋จ๋์๋ค.</p> |
๊ณ ๋ ๊ทธ๋ฆฌ์ค์ธ์ Thymus quinquecostatus๋ฅผ ์ฝ์ฉ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋์? | YES | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํผ๋ถ ๋
ธํ๋ ๋ค์๊ณผ ๊ฐ์ด ํฌ๊ฒ ๋ ์ข
๋ฅ๋ก ๋๋ ์ ์๋ค. ๋จผ์ , ๋ด์ธ์ฑ ๋
ธํ (intrinsic aging)๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ ์์ฐ ๋
ธํ ํ์์ ํผ๋ถ์ธํฌ ๋
ธํ์ ๋ฐ๋ฅธ ํ์์ ๋งํ๋ค. ๊ฐํ ์ฃผ๊ธฐ์ ๋ฐ๋ผ ์ค๋๋ ํผ๋ถ ์ธํฌ๋ ๊ฐ์ง ์ธต์ผ๋ก ๋ถํ ํ์ฌ ๋ ์ด์ ์ญํ ์ ๋ด๋นํ์ง ๋ชปํ๊ฒ ๋๊ณ ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ์งํผ ๋ฐ ํผํ ์ธต์ด ์์ถ ๋์ด ํํผ ์กฐ์ง ์ฃผ๋ณ์ ์กด์ฌ ํ๋ collagen ๋ฐ fibronectin๊ณผ ๊ฐ์ extracellular matrix ๊ฐ ๊ธฐ๋ฅ์ ํ์ง ๋ชปํ๊ฒ ๋๋ ๊ฒ์ ์๋ฏธ ํ๋ค. ๋ ๋ฒ์งธ๋ ๊ด๋
ธํ (photoaging)๋ก์ ์ค๋ซ๋์ ํ๋น์ ๋
ธ์ถ๋ ์ผ๊ตด, ์๋ฑ, ๋ชฉ๋ค ๋ฑ์ ํผ๋ถ์ ์ ๊ด์ฐฐ๋๋ ๋
ธํํ์์ ๋งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์์ธ์ (ultraviolet)์ ๊ด๋
ธํ๋ฅผ ์ ๋ฐ ํ๋ ์ฃผ์ ์์ธ์ด๋ค. ์์ธ์ ์คํํธ๋ผ์ UV-A (\(320\)-\(400 \mathrm{nm}\))์ UV-B (\( 290\)-\(320 \mathrm{~nm} \))๋ก ๊ตฌ๋ถ ๋๋๋ฐ ํนํ, UV-B์ ๊ฒฝ์ฐ ์ธ๊ฐ์ ํผ๋ถ์ ์ฐํ ์คํธ๋ ์ค๋ฅผ ์ ๋ฐ ํ์ฌ ์ผ์์ ์ด๊ณ ์ง์์ ์ธ ์ ์ ์ ์์, ํ์ฑํ ์ธ์์ ์ฆ๊ฐ ๋ฐ matrix metallopretenase (MMP)์ ๊ฐ์ ๋
ธํ ์ธ์์ ๋ฐํ ์ฆ๊ฐ๋ฅผ ๊ฐ์ ธ ์ฌ ์ ์๋ค. ๊ด ๋
ธํ๋ ๋ฏธ์ธํ๊ณ ๊ฑฐ์น ์ฃผ๋ฆ, ์์ ์นจ์ฐฉ ๋ฐ ์์ฃผ๋ฆ, ํผ๋ถ๊ฑด์กฐ์ฆ, ํ๋ ฅ ๊ฐ์ ๋ฑ์ ๋ค ์ ์๋ค. UVB์ ๋
ธ์ถ๋๋ฉด ํผ๋ถ๋
ธํ๋ฅผ ์ด์ง ์ํค๋ ์ฝ๋ผ๊ฒ๋ค์ด์ฆ (Collagenase)์ ์ผ์ข
์ธ MMP ๋จ๋ฐฑ์ง์ ๋ฐํ์ด ์ฆ๊ฐํ๋ฉฐ, MMP ๋ฐํ ์ฆ๊ฐ๋ก ์ธํ ํผ๋ถ ์งํผ๋ฅผ ๊ตฌ์ฑํ๋ ์ฃผ์ ๋จ๋ฐฑ์ง์ธ ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ๋ถํดํ๊ฑฐ๋ ์์ฑ์ ๊ฐ์ ์ํจ๋ค. MMP ๋ฐํ์ ์ต์ ๋ ์ฝ๋ผ๊ฒ ๋์ฌ์ ์กฐ์ ๊ณผ ์ฝ๋ผ๊ฒ ์์ฑ์ ๋ง์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ค. MMP๋ MMP-\(1\), MMP-\(3\) ๋ฐ MMP-\(9\)๋ฅผ ํฌํจํ๊ณ ํนํ Interstitial collagenase ๋ผ๊ณ ๋ ์๋ ค์ง MMP-\(1\)์ ์ฃผ๋ก ์งํผ์์ ๊ฐ์ฅ ํ๋ถํ ๊ตฌ์กฐ ๋จ๋ฐฑ์ง์ธ ํผ๋ถ type \(1\) collagen์ ๋ถํด๋ฅผ ๋ด๋นํ๋ค. ํนํ, MMP-\(1\)์ ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ํน์ ๋ถ์์ ์์ฉํ์ฌ ์ฝ๋ผ๊ฒ์ ๋ ์กฐ๊ฐ์ผ๋ก ์๋ฅด๊ฒ ๋๋๋ฐ, MMP-\(1\)์ ์ฝ๋ผ๊ฒ ๋ถํด ํจ์๋ผ ๋ถ๋ฅด๋ฉฐ, ์ฝ๋ผ๊ฒ ๋ถํด ํจ์๋ ์์ธ์ ์๊ทน์ ๋ฐ๋ผ MEK/MAPK ์ธ์ฐํ ๊ธฐ์ ์ ํตํ์ฌ MMP-\(1\)๊ณผ ๊ฐ์ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ ์ฌ๊ฐ ์ผ์ด๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. UVB ์๊ทน์ ERK\(1\)/\(2\), JNK ๋ฐ p\(38 \) kinase์ ์ธ์ฐํ๋ฅผ ํ์ฑํ์ํค๊ณ , ์ด๋ค ํ์ฑํ ๋ MAP kinase๋ NF-\(\kappa\)B ์ ์ฌ ์ธ์์ ์ค์ํ subunit์ธ p\(65\) ๋ฐ p\(50\) ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ธ์ฐํ๋ฅผ ์ด์ง ํ์ฌ ํต๋ด๋ก translocation ๋๋ ์ ์ฌ ์ธ์์ ์์ ์ฆ๊ฐ์ํจ๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ํ์ฑํ ๋์ด ํต๋ด๋ก translocation ๋ NF-\(\kappa\)B๋ MMP-\(1 \)๊ณผ ๊ฐ์ ๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ ์ฌ๋ฅผ ์ด์งํ์ฌ collagen ๋ถํด๋ฅผ ์ผ๊ธฐ ํ๋ค.</p><p>Thymus quinquecostatus๋ ๊ณ ๋ ๊ทธ๋ฆฌ์ค์ธ๊ณผ ๋ก๋ง์ธ์ด ์ฝ์ฉ ์ด์ธ์ ์์ฝ์ฌ๊ณผ ์น์ฆ๋ฅผ ๋ง๋ณด๊ณ ํผ๋ถ๋ฅผ ์ ํํ๋ฉฐ ์ ๊ฒฝ์ ์ง์ ์ํค๋ ๋ฐ ์ฌ์ฉ๋๋ ์ด๊ท ์ฑ ์์ผ์
์ค์ผ์ ํฌํจํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ, ์์ Thymus quinquecostatus์ ๊ฒฝ์ฐ ํญ๊ท ํ์ฑ์ ๋ํ๋ธ๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ํ, Thymus uinquecostatus์์ ์ถ์ถํ Thymol์ chang cell์์ ์ ๋๋๋ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค ๊ฐ์ ํ์ฌ ์ธํฌ์ ์ฌ๋ฉธ์ ๋ง๋ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ ์ฃผ์ ์ฒ์ฐ ์์ฌ์ธ Thymus quinquecostatus์ ์ถ์ถ๋ฌผ(TQE)์ ์ด์ฉํ์ฌ ๊ฐ์ง์ธํฌ์์ UVB์ ์ํ MMP-\(1\)์ ๋ฐํ์ ์ต์ ํ๊ณ , ์ฝ๋ผ๊ฒ ์์ฑ ํจ๋ฅ์ ๋ณํ๋ฅผ ํ์ธํ๊ณ ์ ํ์๋ค. ์ด๋ฅผ ์ํด ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ธํฌ ๋
์ฑ๊ณผ ์ฃผ๋ฆ๊ฐ์ ํจ๋ฅ๊ณผ ๋ค์ํ ํผ๋ถ ์งํ์ ๊ด์ฌํ๋ MAPKs์ ์ธ์ฐํ ์ ํธ์ ๋ฌ์ฒด๊ณ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ํ์ธํ๊ณ ์ฒ์ฐ๋ฌผ ์์ฌ์ ์ํ ์์ฌ ๊ฐ๋ฐ์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ๊ณผ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์๋ฃ๋ฅผ ์ํ ๊ธฐ์ด ์๋ฃ๋ก ํ์ฉํ๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> |
์ฅ์ ๋ถ๋ฆฌ๋ ๋ฉฐ์น ์งธ์ ํฌ์์์ผ ์งํ๋ผ์์ด? | \( 8 \) ์ผ | <h2>๊ถค์์ฑ ๋์ฅ์ผ ํ๊ฐ</h2><p>์ ์๊ตฐ, ๋์กฐ๊ท , sulfasalazine ํฌ์ฌ๊ตฐ, SCB๋ณตํฉ๋ฌผ ํฌ์ฌ๊ตฐ์ \( 8 \) ์ผ์งธ์ ํฌ์ํ์ฌ ๋งน์ฅ์์๋ถํฐ ๋์ฅ์ ๋ง๋จ๊น์ง ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. ๋ถ๋ฆฌํ ๋์ฅ์ ๊ดํ ๋์งํธ ์นด๋ฉ๋ผ(DSC-HX\( 50 \)V, Sony, Tokyo, Japan)๋ฅธ ์ด์ฉํ์ฌ ์ดฌ์ํ ๋ค ๋ฌด๊ฒ์ ๊ธธ์ด๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ์ ์ ์ฑ ์ผ์ฆ๋ฐ์์์ ๋ํ๋๋ ๋น์ฅ๋น๋์ ๋ํ ์ฝํจ๋ฅผ ํ๊ฐํ๊ธฐ ์ํ์ฌ ๋น์ฅ ๋ํ ์ ์ถํ์ฌ ๋ฌด๊ฒ๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค. ๋น์ฅ์ ๋ฌด๊ฒ๋ ๋ง์ฐ์ค์ ์ฒด์ค์ผ๋ก ๋๋์ด ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>ํ์ฒญ์ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค ๋ฐ์ด์ค๋ง์ปค ์ธก์ </h2><p>์คํ๋๋ฌผ์ ํฌ์์ํค๊ธฐ ์ \( 24 \) ์๊ฐ ๋์ ์ ์์ํจ ํ ์ฌ์ฅ์์ ์ฑํ์ ํ์๋ค. ์ฑํํ ํ์ก์ \( 4,000 \mathrm{rpm} \) ๋ก \( 10 \) ๋ถ๊ฐ ์์ฌ ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ํ์ฒญ์ ์ป์๊ณ ํ์ฒญ์ \( -80^{\circ} \mathrm{C} \) ์ ๋ณด๊ดํ ํ ๋ถ์์ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ํ์ฒญ ๋ด์ Reactive oxygen species (ROS)๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ \( 25 \mathrm{mM} \mathrm{DCFH}-\mathrm{DA} \) ๋ฅผ ํผํฉํ ํ, ํ๊ด ๊ด๋๊ณ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ \( 0 \) ๋ถ๋ถํฐ ๋งค \( 5 \) ๋ถ์ฉ emission wavelength of \( 530 \mathrm{~nm} \) ์ excitation wavelength of \( 485 \mathrm{~nm} \) ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ \( 30 \) ๋ถ๊ฐ ์ธก์ ํ ์ฐ์ถ๊ฐ์ ๊ณ์ฐํ์๋ค. ๋ํ \( \mathrm{ONOO}^{-} \)๋ฅผ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํ์ฌ, Kooy๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ํํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. ๊ฐ ์ํ์ \( \mathrm{pH} \mathrm{7.4} \) ์ rodamine buffer์ \( 5 \mathrm{mM} \) DHR\( 123 \)๊ณผ ์์ ํ \( 5 \)๋ถ๊ฐ \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ ํ๋ค์ด ์ค ํ \( 5 \) ๋ถ์ฉ \( 30 \) ๋ถ๊ฐ emission ํ์ฅ \( 535 \mathrm{~nm} \) ์ excitation ํ์ฅ \( 480 \mathrm{~nm} \) ๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ \( 30 \) ๋ถ๊ฐ ์ธก์ ํ ์ฐ์ถ ๊ฐ์ ๊ณ์ฐํ์๋ค.</p><h2>Western Blot Analysis</h2><p>๋์ฅ์ ์ธํฌ์ง๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ป๊ธฐ ์ํด \( 100 \mathrm{mM} \) Tris-HCl \( (\mathrm{pH} \) 7.4), \( 5 \mathrm{mM} \) Tris-HCl \( (\mathrm{pH} 7.5)\), \(2 \mathrm{mM} \mathrm{MgCl} 2\) ,\(15 \mathrm{mM} \mathrm{CaCl} \) ์ \( 1.5 \)M sucrose, \( 0.1 \mathrm{M} \) DTT protease inhibitor cocktail์ ์ฒจ๊ฐํ buffer A๋ฅผ ๋ฃ๊ณ tissue grinder๋ก ๋ถ์ํ ํ \( 10 \% \) NP-\( 40 \) ์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ์์ด์ค ์์์ \( 30 \) ๋ถ๊ฐ ์ ์น์ํจ ํ \( 12,000 \mathrm{rm} \)์ผ๋ก \( 2 \)๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌ ํ์ฌ ์ธํฌ์ง๋จ๋ฐฑ์ง์ ํฌํจํ๊ณ ์๋ ์์ธต์ก์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. ํต๋จ๋ฐฑ์ง์ ์ป๊ธฐ ์ํด \( 10 \% \mathrm{NP}-40 \)๊ฐ ๋ํด์ง buffer \( \mathrm{A} \) ์ ๋ ๋ฒ ํ๊ตฌ๊ณ \( 150 \mathrm{~mL} \) ์ buffer C (50 mM HEPES,) (\( 50 \mathrm{mM} \mathrm{KCl}\), \(0.3 \mathrm{mM} \mathrm{NaCl}\),\( 0.1 \mathrm{mM} \) EDTA, \( 1 \mathrm{mM} \) DTT, \( 0.1\mathrm{mM} \) PMSF and \( 10 \% \) glycerol)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํด ์ฌ๋ถ์ ์ํจ ๋ค \( 10 \)๋ถ๋ง๋ค vortex๋ฅผ \( 3 \)๋ฒ ํ์๋ค. \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ \( 12,000 \mathrm{rpm} \) ์ผ๋ก \( 10 \) ๋ถ๊ฐ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ ํ ํต๋จ๋ฐฑ์ง์ ํฌํจํ๊ณ ์๋ ์์ธต์ก์ ์ป์ด \( -80^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ๊ฐ๊ฐ ๋๋ ๋ณด๊ดํ์๋ค. ๊ฐ ์กฐ์ง์ ์ธํฌ์ง๋จ๋ฐฑ์ง์ \( \mathrm{TNF}-\alpha \), IL-\( 6 \), IL-\( 1 \beta\) , MCP-\( 1 \), Bax, Cytochrome C, Caspase\( 3 \), \( \beta \)-actin์ ๋ฐํ์ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด \( 9 \mathrm{mg} \)์ ๋จ๋ฐฑ์ง์ \( 8-15\%\) SDS- polyacrylamide gel์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ๊ธฐ์๋ ํ, acrylamide gel์ nitrocellulose membrane์ผ๋ก ์ด๋์์ผฐ๋ค. ์ค๋น๋ membrane์ ๊ฐ๊ฐ์ \( 1 \)์ฐจ antibody๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) ์์ overnight ์ํจ ๋ค์ PBST๋ก \( 6 \)๋ถ๋ง๋ค \( 8 \)ํ ์ธ์ฒํ๊ณ , ๊ฐ๊ฐ ์ฒ๋ฆฌ๋ \( 1 \)์ฐจ ํญ์ฒด์ ์ฌ์ฉ๋๋ \( 2 \)์ฐจ ํญ์ฒด(PBST๋ก \( 1:3000 \)๋ก ํฌ์ํด์ ์ฌ์ฉ)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์์จ์์ \( 1 \)์๊ฐ ๋ฐ์์ํจ ํ, PBST๋ก \( 6 \)๋ถ๋ง๋ค\( 5 \)ํ ์ธ์ฒํ์๋ค. ๊ทธ๋ฆฌ๊ณ enhanced chemiluminescence (ECL, GE Healthcare, Arlington Heights, IL, USA) ์ฉ์ก์ ๋ถ์ด์ค ๋ค, Sensi-Q\( 2000 \)Chemidoc (Lugen Sci Co., Ltd., Seoul, Korea)์ ๊ฐ๊ด์์ผ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ํ์ธํ ํ, ํด๋น band๋ฅผ ATTO Densitograph Software (ATTO Corporation, Tokyo, Japan)ํ๋ก๊ทธ๋จ์ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ ๋ํ์๋ค.</p><h2>ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ</h2><p>๋ชจ๋ ์์น๋ ํ๊ท \( \pm \) ํ์ค์ค์ฐจ(Mean \( \pm \mathrm{SEM}) \) ๋ก ํ์ํ์์ผ๋ฉฐ, SPSS (22.0 for Windows program)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ one-way analysis of variance (ANOVA)๋ก ์ ์์์ค \( p \)-value \(<0.05 \) ์์ ๊ฒ์ ํ์๋ค.</p> |
๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋ฌด์์ด ์ผ๋ฐ์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๊ณ ์ง๋ฐฉ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์ ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๊ดํ์ฌ ์กฐ์ฌํ์๋๊ฐ? | ์ ์ | <h1>์ด๋ก</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ์ ์์ด ์ผ๋ฐ์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๊ณ ์ง๋ฐฉ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์ ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ๊ดํ์ฌ ์กฐ์ฌํ์๋ค. ์ผ๋ฐ์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๊ณ ์ง๋ฐฉ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ๋ง์ฐ์ค์ \(16\)์ฃผ ๋์ ๋ฌดํ๊ธ์ด ํํ๋ก ์ญ์ทจํ๊ฒ ํ์ฌ ์คํ์ข
๋ฃ ์ง์ ์ \(1\)์ผ(\(24\)์๊ฐ) ๊ฐ ์ ์์์ผฐ์ผ๋ฉฐ, ์ ์ ์ ํ์ ๋ถ๋ณ ์ํ์ ์ฑ์งํ๊ณ MiSeq ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ ๋ถ์์ ์งํํ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๊ณ ์ง๋ฐฉ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์์๋ ์ ์ ์ ํ ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ ๋ด์ ์ข
ํ๋ถ์ฑ๊ณผ ๊ท ๋ฑ์ฑ์ด ๊ฐ์ํ ๋ฐ๋ฉด, ์ผ๋ฐ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์์๋ ์ฐจ์ด๋ฅผ ๋ํ๋ด์ง ์์๋ค. ๋ํ, ๊ณ ์ง๋ฐฉ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์ ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ์์๋ ์ ์ ํ ๋ณํํ๋ ๊ฒ์ ํ์ธํ์์ผ๋ฉฐ, ์ผ๋ฐ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์ ์ ์ ์ ํ ๋ณํ๊ฐ ์์๋ค. Difference abundance analysis๋ ์ผ๋ฐ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์์ ์ ์ ์ดํ S\(24-7\)๋ก ๋ถ๋ฅ๋๋ OTU๋ ์ฆ๊ฐํ๊ณ , Ruminococcaceae๋ก ๋ถ๋ฅ๋๋ OTU๊ฐ ๊ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๋ฐ๋ฉด, ๊ณ ์ง๋ฐฉ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์์๋ ์ ์ ์ดํ \( 10 \)OTUs ๊ฐ ๊ฐ์ํ๊ณ , \(3\)OTUs๊ฐ ์ฆ๊ฐํ์๋๋ฐ, ๋๋ถ๋ถ Ruminococcaceae๋ก ๋ถ๋ฅ๋๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ง์ฐ์ค์์์ ์ ์์ด ์ฅ๋ด๋ฏธ์๋ฌผ์ํ ์ค Ruminococcaceae์ abundance์ ์ํฅ์ ๋ฏธ์น๋ฉฐ, ์ผ๋ฐ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์ ๋นํด ๊ณ ์ง๋ฐฉ์ฌ๋ฃ๋ฅผ ์ญ์ทจํ ๋ง์ฐ์ค์์ ์ ์์ ๋ํ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ ๋ช
ํํ๊ฒ ๋ํ๋๋ค๋ ๊ฒ์ ์์ฌํ๋ค.</p> |
์ธ์ผ์ ์์๋ ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋๊ฐ ํจ๋๋์ด ์์ด ์ธ์ผ์ ๋๋ถ๋ถ ์๊น์ง ์ญ์ทจํ์ง? | ์ค๋งํธ ํ ํน์ ์๋ฌผ๊ณต์ฅ | <h1>์ ๋ก </h1><p>์ต๊ทผ ๋์
์ ๋์
์ธ๊ตฌ์ ๊ณ ๋ นํ์ ๊ธ๊ฒฉํ ๊ธฐํ ๋ณํ ๋ฑ์ ์ํด ๋์
ํ๊ฒฝ์ด ๊ธ๋ณ ์ค์ด๋ฉฐ, ์ด์ ๋์ํ๊ธฐ ์ํด ์ฌ๋ฐฐ ์ ๋ฐ์ ์๋ฌผ ์์ก ์ ๋ณด, ์์ก ํ๊ฒฝ ๋ฑ์ ์์ฝ๊ฒ ๊ธฐ๋ก, ์ ์ฅํ์ฌ ์์
์ ์์ฐ์ฑ ๋ฐ ํจ์จ์ฑ์ ๋์ด๋ ์ค๋งํธ ํ ํน์ ์๋ฌผ๊ณต์ฅ์ ๋ํ ๊ด์ฌ์ด ์ฆ๊ฐํ๊ณ ์๋ค. ์ค๋งํธ ํ ํน์ ์๋ฌผ๊ณต์ฅ์ ๊ธฐ์กด ๋์
๊ธฐ์ ์ ์๋ํ์ ICT ์ ๋ณดํ ๋ฑ์ ๊ธฐ์ ์ ์ ๋ชฉํ์ฌ ์๋ฌผ์ ์์ฐ์์ ์ ํต ๋ฐ ์๋น๊น์ง์ ์ ๊ณผ์ ์ ๊ฑธ์ณ ์์ฐ์ฑ๊ณผ ํจ์จ์ฑ์ ์ฆ์ง์ํค๊ณ ํ์ง ํฅ์ ๋ฑ์ผ๋ก ๊ณ ๋ถ๊ฐ๊ฐ์น ์ฐฝ์ถ์ด ๊ฐ๋ฅํ ๋์
๊ธฐ์ ์ด๋ค.</p><p>์ธ์ผ(Panax ginseng)์ ์ค๊ฐํผ๋๋ฌด๊ณผ์ ๋ค๋
์ ์ด๋ณธ์ผ๋ก ์์ฃผ ์ค๋์ ๋ถํฐ ํ์์ฝ ํน์ ๊ฑด๊ฐ๊ธฐ๋ฅ์ํ ์์ฌ๋ก ๋๋ฆฌ ์ฌ์ฉ๋์ด ์๋ค. ์ธ์ผ์ ์ฃผ๋ก ๋ฟ๋ฆฌ๋ฅผ ์ฝ์ฉ์ด๋ ์์ฉ์ผ๋ก ์ฌ์ฉํ๋ฉฐ, ์ ์์ ์ผ๋ก ์ฌ๋ฐฐ๋ ์ธ์ผ์ ์ด๋ง์ด ๊ฐํ๊ณ ์์ ๊ฒฝํ๋๊ฐ ๋์ ์ด์ฉํ๊ธฐ์ ๋ถ์ ์ ํ๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋, ์์น์ธ์ผ์ 1๋
ํน์ 2๋
๊ทผ ์ด๋ด์ ๋ฌ์ผ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ฝ 20-60์ผ ์ ๋ ์ฌ๋ฐฐํด ์, ์ค๊ธฐ ๋ฐ ๋ฟ๋ฆฌ๋ฅผ ๋ชจ๋ ์ญ์ทจํ ์ ์๋๋ก ์ฌ๋ฐฐ๋๊ณ ์๋ค. ์์น์ธ์ผ์ ์ฌ๋ฐฐ๊ธฐ๊ฐ์ด ์งง๊ณ ์ค๋งํธ ํ ํน์ ์๋ฌผ๊ณต์ฅ๊ณผ ๊ฐ์ ์์ค์์๋ ์ฌ๋ฐฐ๊ฐ ๊ฐ๋ฅํ์ฌ ๊ณ์ ์ ์ํฅ์ ๋ฐ์ง ์์ผ๋ฉฐ ๋์ฝ์ ์ฌ์ฉํ์ง ์๊ณ ๋ถ๋ฆฌ, ์ค๊ธฐ ๋ฐ ์ ๋ชจ๋๋ฅผ ์ญ์ทจํ ์ ์๋ ํน์ง์ด ์๋ค. ์ต๊ทผ์ ์์น์ธ์ผ์ ํจ์๊ฐ์๋ถํด์ ํญ์ฐํ ํ์ฑ, ์์น์ธ์ผ๊ณผ ์ฐจํ์ ๋ณตํฉ ์ถ์ถ๋ฌผ ํผ๋ถ ํญ์ฐํ ๋ฐ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๊ณผ ๋ฑ์ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ๋ํ ์นด์คํ
๋ผ ๋ฐ ์ค๊ธฐ๋ก๊ณผ ๊ฐ์ ๊ฐ๊ณต์ํ์ผ๋ก ํ์ฉ๋์ด์ง๊ณ ์๋ค.</p><p>์ธ์ผ์ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง๋ก๋ ๋ํ์ ์ธ ์ผ ์ฌํฌ๋์ธ ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋์ ๋น๋กฏํ์ฌ ์ธ์ผ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐ polyphenol์ฑ ํํฉ๋ฌผ, ์ฐ์ฑ ๋ค๋น์ฒด ๋ฑ์ด ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋๋ triterpenoid์ dammarane๊ณ์ ์ธ์ผ ์์ ์๋ฌผ์๋ง ์กด์ฌํ๋ ํน์ ํ ์ฌํฌ๋์ด๋ค. ๊ธฐ๋ณธ ๊ณจ๊ฒฉ์ ํ์ 3, 6, ๋ฐ 20๋ฒ์ ์์น์ glucose, xylose ๋ฐ rhamnose ๋ฑ์ ๋น์ ๊ฒฐํฉํ๋ ํํ์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๊ฐ์ง๋ฉฐ ์ด๋ค์ protopanaxadiol (PPD) ๋ฐ protopanaxatriol (PPT), oleanolic acid, octillol ํํ๋ก ๊ตฌ๋ถ๋๋ฉฐ, ์ฝ์ฑ์ด ๋งค์ฐ ์จํํ๊ณ ๊ณผ๋ ํฌ์ฌ์ ์ํ ๋
์ฑ์ด ์์ผ๋ฉฐ ์ฉํ ์์ฉ์ด ๊ฑฐ์ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ก๋ค. PPD ํํ์ ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋๋ Rb1 ๋ฐ Rb2. Rb3, Rc, Rd, Rg1 ๋ฑ ๋ฐ PPT ๊ณ์ด์ ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋๋ Re ๋ฐ Rf, Rg 1, Rg 2 ๋ฑ์ด ์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ฌํ ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋๋ค์ ์ฌ๋ฌ ํจ๋ฅ๋ค์ด ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ํ์ ์ผ๋ก ํญ์, ํญ๋น๋จ ์์ฉ ๋ฐ ๋ฉด์ญ๊ธฐ๋ฅ ์กฐ์ ์์ฉ ๋ฑ์ ํจ๋ฅ์ด ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ์ธ์ผ์ ์ฃผ๋ก ๋ฟ๋ฆฌ๋ง ์์ฉ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ์ด๋ ์ฌ๋ฐฐ ๋
์๊ฐ ์ง๋ ์๋ก ์์ ๊ฒฝ์งํ ๋ฑ์ ์ํด ์์ฉ์ด ์ด๋ ต๊ธฐ ๋๋ฌธ์ด๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋, ๊ดํฉ์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ์ด ์๋ ์ธ์ผ์ ์์๋ ์ ์ง ์์ ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋๊ฐ ํจ์ ๋์ด ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋์๋ค.</p><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๋์
ํ๊ฒฝ ๋ณํ์ ๋ฐ๋ฅธ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์์ฌ๋ก์ ์์น์ธ์ผ์ ์์ฐ์ ์ํ์ฌ ๋ฌ์ผ ํฌ๊ธฐ์ ๋ฐ๋ผ ์๋ฌผ๊ณต์ฅ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋ ์์น์ธ์ผ์ ์ง์ธ๋
ธ์ฌ์ด๋ ํจ๋ ๋ฐ ํญ์ฐํ ํ์ฑ์ ๋ถ์ํ์ฌ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์์ฌ๋ก ์์ฐ์ ์ํ ์ต์ ์ ์์น์ธ์ผ ํฌ๊ธฐ ์ ์ ์ ๊ธฐ์ด์๋ฃ๋ก ํ์ฉํ๊ณ ์ ํ์๋ค.</p> |
ํฅํ ์ฃผ๋ฆ ๊ฐ์ ์ฉ ํ์ฅํ ์๋ฃ๋ก ์์ก \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ์ฉ์ด ๊ฐ๋ฅํ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋์์ด? | ์ฐ๋ น ๋ฐ ์์ธ์ ์กฐ์ฌ์ ์ํ ๊ด๋
ธํ | <h2>์์ก ์ถ์ถ๋ฌผ์ tyrosinase ์ต์ ํจ๊ณผ</h2><p>Tyrosinase๋ ๊ตฌ๋ฆฌ๋ฅผ ํจ์ ํ ํจ์๋ก์ melanin ํฉ์ฑ์ ์ด๊ธฐ๋จ๊ณ ์ธ L-tyrosine์์ L-DOPA๋ก ์ ํ์ํค๋ hydroxylase๋ก์์ ํ์ฑ๊ณผ L-DOPA์์ L-dopaquinone์ผ๋ก ์ ํ์ํค๋ dopaoxidase ๋ก์์ ํ์ฑ์ ๋ชจ๋ ๊ฐ์ง๊ณ ์์ด ๋ ๊ฐ์ง ๋จ๊ณ์ ๋ฐ์์ ์ด์ง์ํค๋ melanin ํฉ์ฑ์ key enzyme์ผ๋ก ์์ฉํ๋ฉฐ, ์ต์ข
์ ์ผ๋ก melanin์ ํ์ฑํ๋๋ฐ ์ด๋ ๊ฒ ์์ฑ๋ melanin์ ํผ๋ถ ํํ์ ํผ๋ถ ์งํ์ ์์ธ์ด ๋๋ค. ๋ฐ๋ผ์ melanin ์ํฉ์ฑ ๊ณผ์ ์์ ์ค์ํ ์ญํ ์ ํ๋ tyrosinase๋ฅผ ์ต์ ํ๊ฒ ๋๋ฉด ํผ๋ถ์ melanin ์์ ์์ฑ์ ์กฐ์ ํ์ฌ ๋ฏธ๋ฐฑํจ๋ฅ์ ๋ํ๋ด๋ ๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉํ ์ ์์ด tyrosinase ์ต์ ์ ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ๋ฐํ ์งํ๋๊ณ ์๋ค. ์์ก ์ถ์ถ๋ฌผ์ tyrosinase ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Fig. 5์ ๊ฐ์ด ์์ก ์ด์ ์ถ์ถ๋ฌผ์์๋ tyrosinase ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋งค์ฐ ๋ฎ๊ฒ ์ธก์ ๋ ์์ผ๋, \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) phenolic ๋๋์์๋ \( 64.59 \% \) ๋ก ๋ํ๋ ์๋์ ์ผ๋ก ๋์ tyrosinase ์ต์ ํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธ ํ ์ ์์๋ค. ํ์ฝ์ฌ ๋ณตํฉ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 1,000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ ๋ \( 34.0 \%, 5,000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์์ ๋ \( 65.0 \% \) ์ด์์ tyrosinase ์ ํดํ์ฑ์ด ๋ํ๋๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ Kim ๋ฑ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋น๊ตํ์์ ๋, ์์ก \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ต์ ํจ๋ฅ์ด ๋ ์ฐ์ํจ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ์์ก ์ถ์ถ๋ฌผ์ tyrosinase ์ต์ ํจ๊ณผ๋ phenol์ฑ ๋ฌผ์ง ํจ๋์ ๋๋ ์์กด์ ์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์์ผ ๋ฉฐ, ์ด๋ ์ ์์ ์ผ๋ก ๋ํ๋๋ ๊ฒ์ ๊ด์ฐฐํ ์ ์์์ผ๋ฉฐ, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด mushroom tyrosinase์ ์ง์ ์ ์ธ ์ ํดํ์ฑ์ด ๋ค์ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋์๋ค. ๋ํ ๋์กฐ๊ตฌ์ธ kojic acid๋ณด๋ค ์์ก \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ํดํจ๋ฅ์ด ๋ ์ฐ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ํ๋, ์์ก \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ํฅํ melanin ์ฑ์ฑ์ ์ต์ ์ํค๋ ๋ฏธ๋ฐฑ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ํ์ฅํ ์๋ฃ๋ก ์ด์ฉ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ด ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ธฐ๋๋์๋ค.</p><h2>์์ก ์ถ์ถ๋ฌผ์ collagenase, elastase ์ ํดํจ๊ณผ</h2><p>์ธํฌ ์ธ ๊ธฐ์ง(extracellular matrix)์ ์ฃผ์ ๊ตฌ์ฑ ์ฑ๋ถ์ธ collagen ์ ํผ๋ถ์ ์ฌ์ ์์ธํฌ์์ ์์ฑ๋๋ ์ฃผ์ ๊ธฐ์ง ๋จ๋ฐฑ์ง๋ก ์์ฒด ๋จ๋ฐฑ์ง ์ด ์ค๋์ ์ฝ \( 30 \% \) ๋ฅผ ์ฐจ์งํ๋ฉฐ ๊ฒฌ๊ณ ํ 3 ์ค ๋์ ๊ตฌ์กฐ๋ฅผ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ค. Collagen์ ์ฃผ๋ ๊ธฐ๋ฅ์ผ๋ก๋ ํผ๋ถ์ ๊ธฐ๊ณ์ ๊ฒฌ๊ณ ์ฑ, ๊ฒฐํฉ์กฐ์ง์ ์ ํญ๋ ฅ๊ณผ ์กฐ์ง์ ๊ฒฐํฉ๋ ฅ, ์ธํฌ ์ ์ฐฉ์ ์งํฑ, ์ธํฌ ๋ถํ ๊ณผ ๋ถํ์ ์ ๋ ๋ฑ์ด ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ์ด๋ฌํ collagen์ ์ฐ๋ น ๋ฐ ์์ธ์ ์กฐ์ฌ์ ์ํ ๊ด๋
ธํ์ ์ํด ๊ฐ์ํ๊ณ , ์ด๋ ํผ๋ถ์ ์ฃผ๋ฆ ํ์ฑ๊ณผ ๋ฐ์ ํ ์ฐ๊ด์ด ์๋ค๊ณ ์๋ ค ์ ธ ์๋ค. ์์ก ์ด์ ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ \(50-200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) phenolic ๋๋๋ก ์กฐ์ ํ์ฌ collagenase ์ ํดํ์ฑ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Fig. 6A์ ๊ฐ์ด ์์ก ์ด์ ์ถ์ถ๋ฌผ์์๋ \(38.89-61.69\%\)์ collagenase ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ํ์ธ๋์๊ณ , \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์์๋ \( 75.95-85.02 \% \) ์ ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ํ์ธ๋์ด, \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ์ด์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋นํด collagenase ์ ๋ํ ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋ ์ฐ์ํจ์ ํ์ธํ ์ ์์๋ค. ์ด๋ฌํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด ์์ก ์ถ์ถ๋ฌผ์ด ํผ๋ถ ๋ด์์ collagenase์ ํ์ฑ์ ์ต์ ํจ์ผ๋ก์ collagen์ ๋ถํด๋ฅผ ๋ง์ ์ฃผ๋ฆ ๊ฐ์ ์ ์ํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก ํ์ฉ์ด ๊ฐ๋ฅํ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จ๋์๋ค. Lee ๋ฑ์ ์ ๋ฐฑํผ ์ถ์ถ๋ฌผ์ collagenase ์ ํดํ์ฑ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ์์ ์ ๋ฐฑํผ \( 100 \mathrm{ppm} \) ์ด \( 27.6 \% \) ๋ฅผ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, Barrantes์ Guinea์ ์๋ก์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ collagenase ์ ํดํ์ฑ์ ํ์ธํ ๊ฒฐ๊ณผ์์๋ \( 37.1 \% \) ๋ฅผ ๋ํ๋ด์๋ค๋ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋น๊ตํ๋ฉด, ์์ก \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ collagenase ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ๋งค์ฐ ์ฐ์ํ ๊ฒ์ผ๋ก ํ์ธ๋์๋ค.</p><p>Elastase๋ ์งํผ ๋ด ํผ๋ถํ๋ ฅ์ ์ ์งํ๋๋ฐ ์ค์ํ ๊ธฐ์ง ๋จ๋ฐฑ ์ง์ธ elastin์ ๋ถํดํ๋ ํจ์๋ก, ๋ค๋ฅธ ์ค์ํ ๊ธฐ์ง ๋จ๋ฐฑ์ง์ธ collagen์ ๋ถํดํ ์ ์๋ ๋นํน์ด์ ๊ฐ์๋ถํด ํจ์์ด๋ค. Elastase ์ ํด์ ๋ ์ฃผ๋ก ํผ๋ถ ์ฃผ๋ฆ์ ๊ฐ์ ํ๋ ์์ฉ์ ๋ํ๋ด๋ฉฐ ursolic acid, vitamin C ๋ฑ์ด ๋ํ์ ์ธ elstase ์ ํด์ ๋ก ์ด์ฉ๋ ๊ณ ์๋ค. ๋ํ elstase๋ ์ฒด๋ด์ elastin์ ๋ถํดํ๋ ๋ฐฑํ๊ตฌ ๊ณผ๋ฆฝ ํจ์ ์ค์ ํ๋๋ก, ์ด์์กฐ์ง์์๋ ๊ทธ ํจ์์ ํ์ฑ์ด ๊ทนํ ๋์ ์กฐ์ง ํ๊ดด์ ์ง์ ์ ์ธ ์์ธ์ด ๋๋ฉฐ ํผ๋ถ ์ฃผ๋ฆ๊ณผ ํ๋ ฅ์ฑ ์์ค์ ์ ๋ฐํ๋ค. ์ด๋ฌํ ์ฃผ๋ฆ ์์ฑ๊ณผ ๊ด๋ จ๋ elastase ์ ํดํ์ฑ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Fig. 6B์ ๊ฐ์ด ์ด์ ์ถ์ถ๋ฌผ๋ณด๋ค \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์์ elastase ์ต์ ํจ๊ณผ๊ฐ ํจ์ฌ ๋ ์ฐ์ํ์์ผ๋ฉฐ, \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) phenolic ๋๋์์ \( 63.65 \% \) ์ elastase ์ ํด ํจ๊ณผ๊ฐ ํ์ธ๋์๋ค. ๋ํ ๋์กฐ๊ตฌ๋ก ์ฌ์ฉํ epigallocatechin-gallate \( 50-200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์์ \(22.11-51.16\%\)์ ์ต์ ํจ๊ณผ์ ๋น๊ตํ๋ฉด ์์ก \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ elastase ์ต์ ํจ๋ฅ์ด ๋ ๋ฐ์ด๋จ์ ์ ์ ์์๋ค. ์ด์์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํตํด ์์ก \( 50 \% \) ethanol ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ฐ์ํ collagenase์ elastase ์ ํดํจ๋ฅ์ ๊ฐ์ง๊ณ ์์ด ํฅํ ์ฃผ๋ฆ ๊ฐ์ ์ฉ ํ์ฅํ ์๋ฃ๋ก ํ์ฉ์ด ๊ฐ๋ฅํ ๊ฒ์ด๋ผ ํ๋จ๋์๋ค.</p><p> |
ํ๊ณ ๋ฒ์ฏ์ ์ ๋ฐฐํ๋ ๋์์, ํฉํฐ๋ ๋
์๋ฅผ ํจ์ ํ ์ธ๊ท ๋ฐฐ์์ก์์ ์ธ๊ท ์ ์ ๊ฑฐํ ๋ฐฐ์์์ก์ ํฑ๋ฐฅ๋ฐฐ์ง ํ๋ฉด์ ์๋ ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด ๊ท ์ฌ์ ๋ถ๋ฌดํ์ด? | ํฉํฐ๋ ๋
์ | <h1>์ด ๋ก</h1><p>์๋ชฉ๊ณผ ํฑ๋ฐฅ๋ฐฐ์ง์์ ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด์ ์ค์ผ๊ณผ ์ฑ์ฅ์ ํ๊ณ ๋ฒ์ฏ์ ์ฑ์ฅ์ ์ฌํ๊ฒ ์ ํดํ ์ ์๋ค. ํ๊ณ ๋ฒ์ฏ ์ฌ๋ฐฐ์์ ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด๋ณ์ ๋ฐฉ์ ๋ฅผ ์ํ์ฌ ๋์ฝ๊ณผ ํญ์
์ ์ ๊ฐ์ ํํ ์ฝํ์ ์ฌ์ฉ์ ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ํ์ฉ๋์ง ์๋๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด๋ณ์ ๋ฐฉ์ ๋ฅผ ์ํ์ฌ ๋ํ๋ฆฌ๋ฒ์ฏ์์ ๊ฐ๋ฐ๋ณ์ ์ผ์ผํค๋ ์ธ๊ท ์ฑ ๋ณ์๊ท ์ ๋ถ๋ฆฌํ๊ณ ์ด๋ค์ ํฉํฐ๋ ๋
์๋ฅผ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค. Pseudomonas tolaasii ๊ท ์ฃผ๋ค์ ํญ์ง๊ท ํ์ฑ์ ๊ฐ๋ ํจ๋ผ์ ๋ฐ ์ด์ ๊ตฌ์กฐ์ ์ ์ฌ์ฒด์ธ ๋ค์ํ ํฉํฐ๋ ๋
์๋ฅผ ๋ถ๋นํ๋ค. ์ด๋ฌํ ํฉํฐ๋๋ค์ ํ๊ณ ๋ฒ์ฏ์ ์ฑ์ฅ์๋ ์ํฅ์ ์ฃผ์ง ์๋๋ค๋ ๊ฒ์ด ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ํฉํฐ๋ ๋
์๋ค์ Trichoderma harziamum H1 ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด์ ์ฒ๋ฆฌํ์์ ๋, ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด์ ์ฑ์ฅ์ ์ ํดํ์๋ค. ํฉํฐ๋๋ฅผ ๋ถ๋นํ๋ 20 ์ข
์ P. tolaasii ๊ท ์ฃผ ์ค์์ ๊ฐ, ์ค, ์ฝ์ ํญ์ง๊ท ํ์ฑ์ ๊ฐ์ง ๊ท ์ฃผ์ ์๋ ๊ฐ๊ฐ 8, 5, 7 ์ข
์ผ๋ก ๋ํ๋ฌ๋ค. ํ๊ณ ๋ฒ์ฏ์ ์ ๋ฐฐํ๋ ๋์์, ํฉํฐ๋ ๋
์๋ฅผ ํจ์ ํ ์ธ๊ท ๋ฐฐ์์ก์์ ์ธ๊ท ์ ์ ๊ฑฐํ ๋ฐฐ์์์ก์ ํฑ๋ฐฅ๋ฐฐ์ง ํ๋ฉด์ ์๋ ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด ๊ท ์ฌ์ ๋ถ๋ฌดํ์๋ค. ๋ฐฐ์์์ก์ ํธ๋ฅธ๊ณฐํก์ด์ ์ฑ์ฅ์ ์ต์ ํ ์ ์๋ ๋ฐ๋ฉด, ํ๊ณ ๋ฒ์ฏ ์ฑ์ฅ๊ณผ ์์ฐ์๋ ์ํญ์ ์ฃผ์ง ์์๋ค. ํฉํฐ๋ ๋
์๋ฅผ ํจ์ ํ ๋ฐฐ์์์ก์ ๊ณฐํก์ด์ ํฐ์ ๊ท ์ฌ์ฒด๋ฅผ ๋
ธ๋์์ ๋ง๋ฅธ ๋ฑ์ง๋ก ๋ณํ์์ผฐ๊ณ , ์ด๊ฒ์ ํฉํฐ๋ ๋
์๊ฐ ๊ฐ๋ ฅํ ํญ์ง๊ท ํ์ฑ๊ณผ ์ด๊ท ํ์ฑ์ ๊ฐ๊ณ ์์์ ๋ณด์ฌ์ค๋ค.</p> |
FreSHtracer๋ผ๋ ๊ฐ์ญ์ฑ ํ๋ก๋ธ์์ GSH์์ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ๋ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | \( \mathrm{F} 510 / \mathrm{F} 580 \)์ ์๋์ ์ธ ๋น์จ์ ๊ตฌํจ์ผ๋ก์จ | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํ ๋งํ (Lycopersicon esculentum)๋ ๊ฐ์ง๊ณผ์ ํํด์ด์ดํ๋ก, ํค๋ \( 1\) - \(1.5 \mathrm{~m} \) ์ ๋์ด๋ฉฐ ๊ฐ์ง๋ฅผ ๋ง์ด ๋ด๊ณ ๋ถ๋๋ฌ์ด ํ ํธ์ด ๋๋ค. ์์ ์์ \( 9 \)-\( 19 \)๊ฐ ์ ๋๋ก ๋ฌ๊ฑ ๋ชจ์์ด๋ ๊ธด ํ์ ๋ชจ์์ด๋ฉฐ ๋์ด ๋พฐ์กฑํ๊ณ ๊น์ด ํจ์ด ๋ค์ด๊ฐ ํฑ๋๊ฐ ์๋ค. ๊ฝ์ \( 5 \)-\( 8 \)์์ ๋
ธ๋์์ผ๋ก ํผ๊ณ ์ด๋งค๋ \( 6 \)์๋ถํฐ ๋ถ๊ฒ ์ฝ๋๋ค. ํ๋ณ์ ๋ฐ์ ๋นจ๊ฐ๊ฒ ์ต๋ ๋
ธ์ง ์ฌ๋ฐฐ ํ ๋งํ ๋ vitamin C, \( \beta \)-carotene, vitamin B๊ตฐ, vitamin E๋ฑ์ ํญ์ฐํ ๋นํ๋ฏผ์ด ํ๋ถํ๋ค. ๋ถ์์ ์์ ์ฑ๋ถ์ธ lycopene ์ carotenoid ์ ์ผ์ข
์ผ๋ก, \( \beta \)-carotene ์ด์์ ํญ์ฐ๋ ฅ์ด ์์ด์ ์์ด๋ ๋๋งฅ๊ฒฝํ ๋ฑ์ ์๋ฐฉํ๋ ํจ๊ณผ๊ฐ ์๋๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, \( 10 \)๋ ์ฅ์์ํ ์ค ํ๋๋ก ๊ผฝํ๋ค. ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ adenine, trigonelline, choline ๋ฐ ์๋์ tomatine์ด ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ์ต๊ทผ ์๋ฌผ์์ ์ป์ด์ง๋ ๋ค์ํ ์ ์ฉ์ฑ๋ถ๋ค์ anticancer, antimicrobial, antivirus, anti-aging ๋ฑ์ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ์ ์ง๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ์์ฝํ, ์ํ, ํ์ฅํ ์ธ์ ๋ค์ํ ๋ถ์ผ์ ์ด์ฉ๋๊ณ ์๋ค. ํ ๋งํ ๋ ์ฌ๋ฌ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง๋ค์ ํจ์ ํ๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ๊ทธ ๊ฒฐ๊ณผ ๋ค์ํ ์ง๋ณ์ ์๋ฐฉ์ ๊ฐ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋์๋ค. ํ์ง๋ง ํ์ฌ๊น์ง antioxidant ๋ฐ anti-aging ํจ๊ณผ๋ฅผ ํตํ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ณด๊ณ ๋๋ฐ๊ฐ ์๋ค.</p><p>๊ธ๋ฃจํ์น์จ(glutathione, GSH)์ ์ธํฌ ์์์ ์ผ๊ธฐํ๋ reactive oxygen species (ROS)์ ๋ํ ์ธํฌ ๋ฐฉ์ด ๊ธฐ์ ์์ ์ค์ฌ์ ์ธ ์ญํ ์ ํ๋ค.GSH๋ ๊ธ๋ฃจํ์น์จ ๊ณผ์ฐํํจ์(glutathione peroxidase)์ ์ํด ROS์ ์ ์๋ฅผ ์ ๋ฌํ๊ณ , GSH๋ ์ฐํ ํํ์ธ glutathione disulphide (GSSG)์ ํ์ฑํ๋ค. ๋ํ, GSSG glutathione reductase ์ ์ํด NADPH๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ GSH๋ก ๋ค์ ํ์๋๋ฉด์ ํ์ฑ์ฐ์๋ก๋ถํฐ ์ธํฌ๋ฅผ ๋ณดํธํ๋ค. GSH๋ ์ธํฌ์ง์์ ์์ฐ๋์ด GSH ์ฐํํ์์ด ํ์ํ ๋ฏธํ ์ฝ๋๋ฆฌ์ ๋๋ ํต๊ณผ ๊ฐ์ ์ธํฌ ๋ด ์๊ธฐ๊ด์ผ๋ก ์ ๋ฌ๋๋ฉฐ, GSH๋๋ ์ ์ง๋ ์ธํฌ์์ ์ฐํํ์ ๋ฅ๋ ฅ๊ณผ ์ ํธ ์ ๋ฌ ์ฒด๊ณ์ ์ค์ํ ์งํ๊ฐ ๋๋ค. ์ธํฌ ๋ด GSH ๋๋๊ฐ ๋์์๋ก ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค๋ก๋ถํฐ ์ธํฌ๋ฅผ ๋ณดํธํ ์ ์๊ณ , ๋
ธํ์ฑ ์ง๋ณ์ ๋ฐฉ์งํ ์ ์๋ค.</p><p>์ต๊ทผ ์ด์์๋ ์ธํฌ ๋ด GSH ๋๋๋ฅผ ์ธก์ ํ ์ ์๋ FreSHtracer๋ผ๋ ๊ฐ์ญ์ฑ ํ๋ก๋ธ๋ฅผ ๊ฐ๋ฐํ๋ค. ์ด์์๋ ์ธํฌ์์์ ํญ์ฐํ๋ฅ์ ์ธก์ ํ ์ ์๋ ํ๋ก๋ธ๋ ํ์ฌ๊น์ง ๊ฐ๋ฐ๋ ์ ์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก, ๊ธฐ์กด์ ํํ์ ๊ธฐ๋ฒ์ธ ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐ๋ฅ ํ๊ฐ ์คํ๊ณผ ๋ฌ๋ฆฌ FreSHtracer๊ฐ ์ธํฌ๋ง์ ํต๊ณผํ์ฌ ์ธํฌ ๋ด GSH์ thiol๊ณผ ๋ฐ์ํ ์ ์๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ์ค์๊ฐ์ผ๋ก ์ธํฌ ๋ด GSH ๋๋์ ํ๋ณต๋ฅ์ ํ์ธํ ์ ์๋ค. FreSHtracer๋ \( 580 \mathrm{~nm} \)์์ ํ๊ด ๋ฐฉ์ถ ์คํํธ๋ผ์ ๊ฐ์ง๊ณ \(( \mathrm{F} 580\)), GSH์ thiol๊ณผ ๋ฐ์ํ์ฌ \( 510 \mathrm{nm} \) ์ ํ๊ด์ผ๋ก ๋ณํ๊ฒ ๋๋ค (\( \mathrm{F} 510\)). ์ด ๋ \( \mathrm{F} 510 / \mathrm{F} 580 \)์ ์๋์ ์ธ ๋น์จ์ ๊ตฌํจ์ผ๋ก์จ GSH์์ ๋ณํ๋ฅผ ์ธก์ ํ๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ \( \mathrm{F} 510 / \mathrm{F} 580 \) ๋น์จ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ธํฌ ๋ด GSH์ ํ๊ท ๊ฐ (Glutathione mean, GM)๊ณผ ์ธํฌ๊ฐ GSH์ ๋ถํฌ์์(Glutathione heterogeneity, GH)์ ์ธก์ ํ ์ ์๋ ๋ถ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๊ฐ๋ฐํ๋ค. GM์ \( \mathrm{F} 510 / \mathrm{F} 580 \) ๋น์จ์ ํ๊ท ๊ฐ์ ๊ณ์ฐํ์ฌ ์ธก์ ํ ์ ์์ผ๋ฉฐ, GH๋ \( \mathrm{F} 510 / \mathrm{F} 580 \) ๋น์จ๊ฐ์ ํ์คํธ์ฐจ๋ฅผ ํ๊ท ์ ๋ํ ๋ฐฑ๋ถ์จ๋ก ๊ณ์ฐํ์ฌ ์ป์ ์ ์๋ค. ์ผ๋ฐ์ ์ผ๋ก ๋
ธํ๊ฐ ์งํ๋์๊ฑฐ๋ ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค๊ฐ ์ถ์ ๋์ด ๊ธฐ๋ฅ์ด ์ ํ๋ ์ธํฌ๋ ์ธํฌ ๋ด GM ๊ฐ์ด ๋ฎ์์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, ์ธํฌ๊ฐ GSH์ ๋ถํฌ๊ฐ ๋งค์ฐ ๋ค์ํด์ ธ GH๊ฐ์ด ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์ธ๋ค. ์ด๊ฒ์ผ๋ก ์ธํฌ์ ํญ์ฐํ๋ฅ์ ๊ฐ๊ดํํ ์ ์์ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ธํฌ์ ํ์ง์ ์ธก์ ํ ์ ์๋ค. ๋ํ, ์ด ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ์ฐํ ๊ธฐ๋ฅ์ ๊ฐ์ง๋ ๋ฌผ์ง์ ํจ๋ฅ ํ๊ฐ์๋ ํ์ฉํ ์ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ํญ์ฐํ ๊ธฐ๋ฅ์ ๊ฐ์ง๋ค๊ณ ์ ์๋ ค์ง ํ ๋งํ ์์ ์ป์ด์ง ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๋ถํ๋ฌผ์ ๋ํด GSH ํญ์ฐํํจ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๊ณ , ๊ทธ ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋์ ํ์๋ค.</p> |
์ฝฉ์๊ณผ ๊ฐ์ ์ฝ์ฑ๋ฅ๋ ์ cold-chain ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ํตํ๋งค๊ฐ ์ด๋ฃจ์ด์ง๋์? | ๋จ๋ฐฑ์ง, ์์ด์ฌ์ ๊ทธ ๋ฐ์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ, ์ฌํฌ๋, ๋ ์ํด ๋ฑ | <h1>์๋ก </h1><p>์ฝฉ(Glycine max. Merr L)์ ์์ฉ์๋ฌผ๋ก์ ๋๋ฆฌ ์ฌ๋ฐฐ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ๋์์์ ๋ง๋ก ํ๊ณ \(1,000\)์ฌ ๊ฐ์ง์ ์ฉ๋๋ก ์ด์ฉ๋๊ณ ์๋ ์ธ๊ณ์ ์ธ ์ํ์ผ๋ก ์ฝฉ์ ๋ํ ๋ค์ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์งํ๋์๋ค. ์ฝฉ์๋ ๋จ๋ฐฑ์ง, ์์ด์ฌ์ ๊ทธ ๋ฐ์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ, ์ฌํฌ๋, ๋ ์ํด ๋ฑ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ฌผ์ง๋ค์ด ์กด์ฌํ๋ฉฐ ๊ทธ ์ค genistein ๋ฐ daidzein๊ณผ ๊ฐ์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ์ ์ฒด๋ด์์ ๋์ฌ๋๋ ๊ณผ์ ์์ ์์ฑ๋๋ equol๊ณผ ๊ฐ์ ๋์ฌ์์ฑ๋ฌผ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ํ๋ฐํ ์งํ๋๊ณ ์๋ค. ์ฝฉ์ ๋ถ์ฐ๋ฌผ์ธ ์ฝฉ์์ ๊ฒฝ์๋, ์ ์ฃผ๋ ์ง์ญ์์ ํ์ ์ ์ผ๋ก ์ฌ์ฉ๋๋ ์์ฌ๋ฃ๋ก์จ ๋๋ฆฌ ์๋ ค์ง ์ฌ๋ฃ๋ ์๋๋ค. ์ด๊ธฐ ์ฝฉ์์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ์๋ ์ฝฉ์ ๋ฌผ๊น์น ์์ฑ ์ค ์ดํํ์ ํน์ฑ ๋ณํ, ์๊ธ ๋๋๊ฐ ์ฝฉ์ ๊น์น์ ์์ฑ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ, ํคํ ์ฐ ์ฒจ๊ฐ ์ฝฉ์ ๊น์น์ ์ ์ฅ์ฑ ํฅ์์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ ๋ฑ ์ฝฉ์์ ์ด์ฉํ ์ํ์ ํ์ง์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ์ฃผ๋ฅผ ์ด๋ฃจ์๋ค. ์ต๊ทผ์๋ ์ฝฉ์ ๋ฐ ์ฝฉ์ ์๋ฆฌ์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ๋ ๋ฐ ํญ์ฐํ ๊ด๋ จ ์ฑ๋ถ ๋น๊ต, ๊ณ ์ง๋ฐฉ์์ด ๋ง์ฐ์ค์์ ์ฝฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ง๋ฐฉ๊ฐ ์ต์ ํจ๊ณผ, ์ํ ํ ์ํธ๋ ๋ฐ ๊ด ์ฒ๋ฆฌ์ ์ํ ์ฝฉ์ ์ค ํ๋ผ๋ณด๋
ธ์ด๋ ํจ๋ ๋ณํ, ์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด์ ๋ฐ๋ฅธ ์ฝฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ๋ ๋ฐ ์ดํํ์ ํน์ฑ, ์ ์ฐ๊ท ๋ฐํจ๋ฅผ ํตํ ์ฝฉ์ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋น๋ฐฐ๋น์ฒด ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ๋ ์ฆ๋์ ๊ดํ ์ฐ๊ตฌ ๋ฑ ํญ์ฐํ ํ์ฑ ๋ฐ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์๋ค. ์ด์ํ๋ผ๋ณธ๋ฅ, ํ๋ผ๋ณธ๋ฅ, ํ๋ผ๋ณด๋๋ฅ, ํ๋์ฑ ํํฉ๋ฌผ ๋ฑ ์ด \(16\)์ข
์ ํญ์ฐํ ๋ฌผ์ง์ด ์ฝฉ์์ ํจ์ ๋์ด ์๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์์ผ๋ฉฐ ๊ทธ ๋ฐ์๋ ํด๋ก๋กํ, ์นด๋กํฐ๋
ธ์ด๋, ๋นํ๋ฏผ C๋ฑ์ ํจ๋์ด ๋์ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์๋ค.</p><p>์ํธ๋ (ethylene), ์ง๋ฒ ๋ ๋ฆฐ(gibberellin) ๋ฑ์ ์๋ฌผ์์ฅ์กฐ์ ์ (Plant growth regulation)๋ ์ฒ์ฐ๋ฌผ์ง ๋๋ ํฉ์ฑ๋ฌผ์ง๋ก ์๋ฌผ์ ์ฑ์ฅ๊ณผ ๋ฐ๋ฌ์ ์ธ์์ ์ผ๋ก ์กฐ์ ํ๋ค. ์ด์ค ์ํธ๋ ํธ๋ฅด๋ชฌ์ ์๋ฌผ์์ ๋ค์ํ ์๋ฆฌํ์ฑ ๋ํ๋ด๋ฉฐ, ์๋ฌผ์ ์์ฅ์ ์กฐ์ ํ๋ ๋ฌผ์ง๋ก ์๋ฌผ ๋์ฌ์ฒด ํฉ์ฑ์ ๊ด์ฌํ์ฌ ์ด์ฐจ๋์ฌ์ฐ๋ฌผ ํฉ์ฑ์ ์ด์งํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌํ์ ์ ํ์ฐ๊ตฌ์์ ์ํธ๋ ์ ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ ์ฝฉ์์์ isoflavone ํจ๋์ด ๊ธ๊ฒฉํ ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฐ๊ณผ๋ฅผ ํ์ธํ์๋ค. Daidzin, genistin, malonyldaidzin ๋ฐ malonylgenistin์ ํจ๋์ด ๋ชจ๋ ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์ด ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ๋์ \( 0.2 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) ๋ฏธ๋ง์์ ์ํธ๋ ์ ๊ตฌ์ฒด์ธ ์ํ
ํฐ(ethephon) ์ฒ๋ฆฌ ํ \(24\)์๊ฐ๋ง์ \( 7 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) ์ด์์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ์ฒ๋ฆฌ ํ \(96\)์๊ฐ์ ์ฝ \( 15 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) ์ด์์ผ๋ก ์ฆ๊ฐํ์ฌ ์ผ๋ฐ ์ฝฉ์ ๋นํด \(5\)๋ฐฐ ์ด์์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ๋์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><p>Saio ๋ฑ ๋ฐ Sio์ Arisaka๋ ๊ณ ์จ ๊ณ ์ต์์ \(1\)๊ฐ์ ๋์ ์ฝฉ์ ์ ์ฅ ์ค ํ์ง๋ณํ์ ๋ํด ์ฐ๊ตฌํ์๊ณ , Sul ๋ฑ์ ์ ์ฅ ์จ๋๊ฐ ์ฝฉ์ ์ง์์ฉํด๋ ๋ณํ, ์ฐ๊ฐ, ์ ๊ธฐ์ฐ ๋ณํ, ์ง๋ฐฉ์ฐ ๋ฐ ์๋ฏธ๋
ธ์ฐ ๋ฑ์ ๋ณํ์ ๋ฏธ์น๋ ์ํฅ์ ์ฐ๊ตฌํ๋ ๋ฑ ์ฝฉ์ ์ ์ฅ์ฑ์ ๋ํ ์กฐ์ฌ๋ ๋ช๋ช ์ด๋ฃจ์ด์ ธ ์์ผ๋ ์ฝฉ์์ ์ ์ฅ์ฑ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๋ ์ํ๋์ง ์์๋ค. ์ฝฉ์๊ณผ ๊ฐ์ ์ฝ์ฑ๋ฅ๋ ์ ์ฅ์ฑ์ด ๋จ์ด์ง๊ธฐ ๋๋ฌธ์ ๋๋, ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐ ๋ฐ ์ต๊ทผ์๋ cold-chain ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ ์ ํตํ๋งค๊ฐ ํ๋ฐํ ์ด๋ฃจ์ด์ง๊ณ ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉ๋ ๊ณ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ์ ์ฝฉ์์ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ๋ ๋ณํ๋ฅผ ์ต์ํํ๊ธฐ ์ํด ์ํ ํ ์ฆ์ ์ธ์ฒ ๋ฐ ๊ฑด์กฐํ์ฌ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์ด๋ฌํ ํน์ฑ์ผ๋ก ๊ณ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ์ ์ฝฉ์์ ์๋น์๋ค์ ์ํ์์ ์๋น๊ฐ ์ด๋ ค์ฐ๋ฉฐ ๋๋ถ๋ถ ๊ฑด์กฐํํ๋ก ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ํ์์ ๋ฐ๋ผ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์์ฌ๋ก ์ด์ฉ๋๋ค.</p><p>๋ฐ๋ผ์ ๊ณ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ์ ์ฝฉ์์ ์ํ ํ ๊ฑด์กฐ ๋ณด๊ดํ๋ ๊ณผ์ ์์ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์ฑ๋ถ์ธ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ๊ณผ ๊ธฐํ ์ฑ๋ถ์ ๋ํ ๋ณํ๋ฅผ ์ต์ํํ ์ ์๋ ์ ์ฅ ์กฐ๊ฑด์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ๊ฐ ํ์ํ๋ค. ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ณ ์ด์ํ๋ผ๋ณธ ํจ์ ์ฝฉ์์ ์ํ ํ ๊ฑด์กฐ ๋ฐ ๋ถ์ํ์ฌ ์ ์ฅ ์จ๋ ๋ฐ ๊ธฐ๊ฐ์ ๋ฐ๋ผ ์ง๋ฐฉ์ฐ, ์๋ฏธ๋
ธ์ฐ, ๋ฌด๊ธฐ์ง, ์ด์ํ๋ผ๋ณธ, ์ด phenolics, ์ด flavonoids ๋ฐ ๋ผ๋์นผ ์๊ฑฐํ์ฑ ๋ณํ๋ฅผ ๋ถ์ํ์๋ค.</p> |
์ฐ๋ฆฌ๋ ๊ถ๊ทน์ ์ผ๋ก ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ์ด( ) ์ธ์ฐํ ์ต์ ๋ฅผ ํตํด CCL20 ๋ฐํ์ ํํฅ ์กฐ์ ํ๋ฉฐ, ๊ฑด์ ์ ๋ฐ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ๋ค์ ๋ฐํ ๋ํ ์ต์ ํจ์ ์ ์ ์์๋ค.๋ผ๋ ๋ฌธ์ฅ์์ ๊ดํธ์์ ๋ค์ด๊ฐ ์๋ง์ ๋จ์ด๋ ๋ฌด์์ธ๊ฐ? | C-C motif chemokine ligand (CCL) 20 | <h1>์ด ๋ก</h1><p>๊ฑด์ (Psoriasis)์ IL-6, CXCL8, TNF- \( \alpha \) ๋ฐ IFN-\(\gamma \) ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ Th17 ์ธํฌ์์ ๋ถ๋น๋๋ IL-17A ๋ฑ ๋ค์ํ ์ผ์ฆ์ฑ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ์ ์ํด ํํผ์ ๊ณผ์ฆ์(hyperkeratosis) ๋ฐ ๋ง์ฑ์ ์ผ์ฆ(inflammation)์ด ์ ๋ฐ๋๋ ๋์น์ฑ ํผ๋ถ ์งํ์ด๋ค. ์๋ชฉ(Caesalpinia sappan L.)์ ์ ํจ์ฑ๋ถ์ผ๋ก ์๋ ค์ง ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ(brazilin)์ ํญ์ฐํ, ํญ์ผ์ฆ ๋ฐ ํผ๋ถ ์ฅ๋ฒฝ ๊ฐ์ ๋ฑ์ ํจ๋ฅ์ด ์๋ ค์ก๋ค. ํนํ, tumor necrosis factor (TNF)-\( \alpha \) ์๊ทน HaCaT ๊ฐ์งํ์ฑ์ธํฌ ๋ชจ๋ธ์์ ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ์ ๊ฑด์ ์น๋ฃ ์์ฌ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ๊ทธ๋ฌ๋, ์ง์ ์ ์ธ ๊ฑด์ ์ ๋ฐ ์ธ์์ธ C-C motif chemokine ligand (CCL) 20์ ์กฐ์ ์ ์ ํ ๋ณด๊ณ ๋์ง ์์๋ค. ๋ฐ๋ผ์, ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ฑด์ ์ ์ฌ ๋ชจ๋ธ์ ํ์ฉํด CCL20 ๋ฐํ ์กฐ์ ์ฌ๋ถ ๋ฐ ๊ทธ ๊ธฐ์์ ๋ํด ๊ท๋ช
ํ๊ณ ์ ํ์๋ค. IL-17A๋ก ์๊ทน๋ HaCaT ์ธํฌ์์ ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ์ CCL20, CXCL8 ๋ฐํ ๋ฐ signal transducer and transcription (STAT)3 ์ธ์ฐํ๋ฅผ ์ ์ํ๊ฒ ์ต์ ํ์๋ค. ๋ํ, ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ์ TNF-\( \alpha \)/IL-17A/IFN-\(\gamma \) 3์ข
์ฌ์ดํ ์นด์ธ์ผ๋ก ์ฒ๋ฆฌ๋ ์กฐ๊ฑด์์๋ STAT3 ์ธ์ฐํ๋ฅผ ์ต์ ํ๋ฉฐ ์ผ์ฆ์ฑ ๋ถ์(CXCL8, CCL20, IL-1, IL-6,๋ฐ TNF-\(\alpha \))์ ๋ฐํ์ ํํฅ ์กฐ์ ํ์๋ค. ๋ง์ง๋ง์ผ๋ก ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ์ TNF-\(\alpha\)/IL-17A/IFN-\(\gamma\)๋ก ์๊ทน๋ ๊ฑด์ ์ ์ฌ ํ๊ฒฝ์์ ํผ๋ถ ์ฅ๋ฒฝ ๊ฐ์ ์๋ ์ ์์ ์ธ ์ํฅ์ ๋ฏธ์ณค๋ค. ์ ๊ฒฐ๊ณผ๋ค์ ํตํด ์ฐ๋ฆฌ๋ ๊ถ๊ทน์ ์ผ๋ก ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ์ด STAT3 ์ธ์ฐํ ์ต์ ๋ฅผ ํตํด CCL20 ๋ฐํ์ ํํฅ ์กฐ์ ํ๋ฉฐ, ๊ฑด์ ์ ๋ฐ ์ฌ์ดํ ์นด์ธ๋ค์ ๋ฐํ ๋ํ ์ต์ ํจ์ ์ ์ ์์๋ค. ํฅํ, ๊ฑด์ ๋๋ฌผ๋ชจ๋ธ ๋ฐ ์์์ํ์ ํตํด ๋ธ๋ผ์ง๋ฆฐ์ ๊ฑด์ ๊ฐ์ ์ ๋ํ ํจ๋ฅ์ด ๊ฒ์ฆ๋๋ค๋ฉด, ๊ฑด์ ํ์์๊ฒ ์ ์ฌ์ ์ธ ์น๋ฃ ๋ฌผ์ง๋ก ์ฌ์ฉ๋ ์ ์์ ๊ฒ์ผ๋ก ๊ธฐ๋๋๋ค.</p> |
์ด๋น ํจ๋์ด ๊ฐ์ฅ ๋์ ์๋ฃ๋ ๋ญ์ผ? | ์์ธํฌ์ ์ด๋์ฑ | <h2>Wound healing assay</h2><p>์์ ์ ์ด๋ ์์ธํฌ์ ํน์ง์ผ๋ก ์ ์ด์์ ๊ฐ์ฅ ์ค์ํ ์์๋ก์ ์์ธํฌ์ ์ด๋์ฑ์ ๋ค ์ ์๋ค. ์ธํฌ์ ์ด๋์ฑ์ ์ธํฌ์ ํํ๊ฐ ๋ฐ๋๋ฉด์ ์ผ์ ํ ๋ฐฉํฅ์ฑ๊ณผ ํจ๊ป ๊ด์ฐฐํ ์ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ์ํฉ๋ฒ์ฏ ์ถ์ถ๋ฌผ์ B16F10๊ณผ SK-MEL-5์ ๋ํ ์์ธํฌ ์ฆ์ ์ต์ ํ์ฑ์ ์์๋ณด๊ธฐ ์ํ์ฌ wound healing assay๋ฅผ ์ค์ํ ๊ฒฐ๊ณผ๋ Fig. 5, 6๊ณผ ๊ฐ๋ค. SK-MEL-5 cell์ wound๋ฅผ ํ์ฑํ ํ \( 3 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ EBE๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ๋ฅผ ์ ์ธํ ๋ชจ๋ ๊ฒฝ์ฐ์์ ์์ฑ ๋์กฐ๊ตฌ์ ๋นํด ์์ธํฌ ์ฆ์ ์ต์ ํ์ฑ์ด ๋๊ฒ ๋ํ๋ฌ๋ค. ๋์กฐ๊ตฌ์ ํจ์ ์ ์ฒ๋ฆฌ๊ตฌ ๋ชจ๋ ์ ์ ๊ณผ์ ์ ๊ฑฐ์น NEB, EB๊ฐ NEBE, EBE ๋ณด๋ค ๋์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. B16F10 ๊ณผ SK-MEL-5 ๋ชจ๋์์ 12 ์๊ฐ ๊ฒฝ๊ณผ์ EB \(30 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ - ๊ฐ์ฅ ๋์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์์ผ๋ฉฐ, ํนํ ์์ฑ ๋์กฐ๊ตฌ(resveratrol \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)) ์ ๋นํ์ฌ ๋์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค. ํฝ์ด๋ฒ์ฏ ์ถ์ถ๋ฌผ \( 1000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ฒ๋ฆฌ์ ์ฝ \( 70 \% \)์ ์ต์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋๋ค๊ณ ๋ณด๊ณ ํ Lee ๋ฑ์ ๊ฒฐ๊ณผ์ ๋น๊ต ํ ๋, EB \(30 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)์ ์ฒ๋ฆฌ์ ์ฝ \( 70 \% \)์ ์ต์ ํ์ฑ์ ๋ณด์ฌ ๋ ๋ฎ์ ๋๋์์ ์ ์ฌํ ์ต์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์๋ ๊ตญ๋ด์ฐ ์ํฉ๋ฒ์ฏ์ ํจ์ ๊ฐ์๋ถํด ์ ์ฒ๋ฆฌ๋ฅผ ํตํ \( \beta \)-glucan์ ์ต์ ์ถ์ถ์กฐ๊ฑด์ ํ๋ฆฝํ๊ณ ๊ทธ์ ๋ฐ๋ฅธ ํ์ฑ์ ์์๋ณด๊ณ ์ ์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด์ ๋ฐ๋ฅธ ์์ดํํ์ ํ์ฑ์ ์ฆ์ ํ์๋ค. ํจ์ ๊ฐ์๋ถํด ์กฐ๊ฑด์ ์ต์ ํํ๊ธฐ ์ํด ์ค์ํ ๋ฐ์ํ๋ฉด๋ถ์๋ฒ์ ๊ฒฐ๊ณผ \( 0.66 \%(\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) ์ viscozyme ๋๋์์ \( 6.08 \) ์๊ฐ ๋ฐ์ํ๋ ๊ฒ์ด ์ต์ ์ด๋ผ ์์ธก๋์์ผ๋ฉฐ (\( \mathrm{R}^{2}=0.9245 \)), ์ด์ ๋ฐ๋ผ ์ต์ ์ถ์ถ ์กฐ๊ฑด์์ ์ถ์ถํ ์๋ฃ์ \( \beta \)-glucan ํจ๋์ \( 1.9594 \mathrm{~g} / 100 \mathrm{~g} \) ์ผ๋ก ์ธก์ ๋์๋ค. ์ถ์ถ ์์จ (\( 0.76-16.40 \% \)) ์ EBE๊ฐ NEBE์ ๋นํด ์ฝ 3๋ฐฐ ๋์๋ค. \( \beta \)-glucan ์๋ (\(11.15-59.05\%\))๋ก ๊ฐ์ฅ ๋์์ผ๋ฉฐ, \( \beta- \) glucan ํจ๋ ๋ํ \( 0.26-3.38 \mathrm{~g} / 100 \mathrm{~g} \) ์ผ๋ก EB (\(3.38 \mathrm{~g} / 100 \mathrm{~g} \)) ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋์๋ค. ์ด๋น ํจ๋ (\( 0.61-1.17 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)) ์ NEB, EB ๊ฐ NEBE, EBE ๋ณด๋ค ๋์์ผ๋ฉฐ, EB ๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋์๋ค. ๊ตฌ์ฑ๋น ๋ถ์ ๊ฒฐ๊ณผ, ๋ชจ๋ ์ถ์ค๋ฌผ์์ glucose์ ํจ๋์ด ๊ฐ์ฅ ๋์์ผ๋ฉฐ, ๋์กฐ๊ตฌ์ ํจ์ ์ ์น๋ฆฌ๊ตฌ ๋ชจ๋ ์ ์ ํ๋ฉด์ ๊ทธ ๋น์จ์ด ์ฆ๊ฐํ์๋ค. ๋จ๋ฐฑ์ง ํจ๋ (\( 0.44-11.73 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \)) ์ NEBE, EBE๊ฐ NEB, EB๋ณด๋ค ๋์์ผ๋ฉฐ, EBE๊ฐ ๊ฐ์ฅ ๋์๋ค. FT-IR ๋ถ์ ๊ฒฐ๊ณผ \( 890 \mathrm{~cm}^{-1} \) ๋ถ๊ทผ์์ peak ๊ฐ ํ์ธ๋์๊ธฐ์ \( \beta \)-glycosidic linkage๋ฅผ ๊ฐ์ง๊ณ ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ํ๋จํ์๋ค. MTT assay๋ฅผ ํตํด B6F10๊ณผ SK-MEL-5์ธํฌ ๋
์ฑ์ ์ธก์ ํ ๊ฒฐ๊ณผ B6F10์ ๊ฒฝ์ฐ ๋์กฐ๊ตฌ์ ์ธํฌ ์์กด์จ์ \( 100 \% \) ๋ก ํ์์ ๋ ์ธํฌ ์์กด์จ์ด \( 80 \% \) ์ด์์ผ๋ก ๋ํ๋ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ๋ณด์ด์ง ์์์ผ๋, SK-MEL-5์์๋ EBE๋ฅผ \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ์ ๋๋๋ก ์น๋ฆฌํ์์ ๋ ์ธํฌ ์์กด์จ์ด \( 75 \% \) ๋ก ๋ํ๋ ์ฝ๊ฐ์ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ๋ณด์๋ค. Wound healing assay๋ฅผ ํตํด ์์ธํฌ ์ฆ์ ์ต์ ํ์ฑ ์ธก์ ๊ฑธ๊ณผ, ์ ์ ํ NEB, EB๊ฐ NEBE, EBE ๋ณด๋ค ํ์ฑ์ด ๋์์ผ๋ฉฐ, ํนํ 12 ์๊ฐ์ผ ๋ EB \(30 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ ๊ฒฝ์ฐ B6F10 ๊ณผ SK-MEL-5 ๋ชจ๋์์ ๊ฐ์ฅ ๋์ ํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p> |
lycopene๋ณด๋ค \( \beta \)-carotene์ด ํญ์ฐํ๋ฅ์ด ๋ ๋์ง? | NO | <h1>์ ๋ก </h1><p>ํ ๋งํ (Lycopersicon esculentum)๋ ๊ฐ์ง๊ณผ์ ํํด์ด์ดํ๋ก, ๋์ด๋ \( 1.5 \mathrm{~m} \) ์ ๋์ด๋ฉฐ ๊ฐ์ง๋ฅผ ๋ง์ด ๋ด๊ณ ํฐ ํธ์ด ๋๋ค. ์ข
์์ ๋ฐ๋ผ ํฌ๊ฒ ๋์ด ๋พฐ์กฑํ ํํ์, ์๋ฐํ์ ๋ ์ข
๋ฅ๊ฐ ์๋ค. ํ ๋งํ ๋ ascorbic acid, \( \beta \)-carotene, vitamin B๊ตฐ, tocopherol๋ฑ์ vitamin์ด ํ๋ถํ ๊ฒ์ผ๋ก ๋ณด๊ณ ๋๊ณ ์๊ณ , ๋ํ ํ ๋งํ ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ผ๋ก๋ adenine, trigonelline, choline ๋ฐ tomatine์ด ๋ถ๋ฆฌ ๋ณด๊ณ ๋์ด ์๋ค. ํนํ lycopene ์ \( \beta \)-carotene ์ด์์ ํญ์ฐํ๋ฅ์ด ์์ด, ํญ์ ๋ฑ ๋ค์์ ์ฝ๋ฆฌํ์ฑ์ด ์๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๋ ค์ ธ ์๋ค. ํ์ง๋ง ํ์ฌ๊น์ง antioxidant ๋ฐ anti-aging ํจ๊ณผ๋ฅผ ํตํ ํ์ฅํ ์์ฌ๋ก์์ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๋ํ ์ฐ๊ตฌ ๊ฒฐ๊ณผ๋ ๋ฏธ๋ฏธํ ์์ค์ด๋ค.</p><p>Glutathione (GSH)์ glutamate, cysteine, glycine ๋ฑ์ amino acid๋ก ์ด๋ฃจ์ด์ง ๊ฒฐ์ ์ฑ peptide์ด์, Reactive oxygen species์ ๋ํ ์ธํฌ ๋ฐฉ์ด ๊ธฐ์ ์์ ์ค์ฌ์ ์ธ ์ญํ ์ ํ๋ค. GSH๋ ์ธํฌ์ง์์ ์์ฐ๋์ด GSH ์ฐํ-ํ์์ด ํ์ํ mitochondria์ ๊ฐ์ ์ธํฌ ๋ด ์๊ธฐ๊ด์ผ๋ก ์ ๋ฌ๋๋ฉฐ, GSH ๋๋ ์ ์ง๋ ์ธํฌ์์ ์ฐํ, ํ์ ๋ฅ๋ ฅ๊ณผ ์ ํธ ์ ๋ฌ ์ฒด๊ณ์ ์ค์ํ ์งํ๊ฐ ๋๋ค. ์ธํฌ ๋ด GSH ๋๋๊ฐ ๋์์๋ก ์ฐํ์ ์คํธ๋ ์ค๋ก๋ถํฐ ์ธํฌ๋ฅผ ๋ณดํธํ ์ ์๊ณ , ๋
ธํ์ฑ ์ง๋ณ์ ๋ฐฉ์งํ ์ ์๋ค. ์ต๊ทผ ์ด์ ์๋ ์ธํฌ ๋ด์ GSH ๋๋๋ฅผ ์ธก์ ํ ์ ์๋ FreSHtracer๋ผ๋ ๊ฐ์ญ์ฑ probe๊ฐ ๊ฐ๋ฐ๋์ด, ์ธํฌ ๋ด GSH ๋๋์ ํ๋ณต๋ฅ์ ์ค์๊ฐ์ผ๋ก ํ์ธํ ์ ์๋ค. ๋
ธํ๊ฐ ์งํ๋์๊ฑฐ๋ oxidative stress๊ฐ ์ถ์ ๋์ด ๊ธฐ๋ฅ์ด ์ ํ๋ ์ธํฌ๋ ์ธํฌ ๋ด GSH์ ํ๊ท ๊ฐ์ด ๋ฎ์์ ธ ์์ผ๋ฉฐ, ์ธํฌ๊ฐ GSH์ ๋ถํฌ๊ฐ ๋งค์ฐ ๋ค์ํด์ ธ ์ธํฌ๊ฐ GSH์ ๋ถํฌ์์์ด ์ฆ๊ฐํ๋ ๊ฒฝํฅ์ ๋ณด์ธ๋ค. ์ด๊ฒ์ผ๋ก ์ธํฌ์ ํญ์ฐํ๋ฅ์ ๊ฐ๊ดํํ ์ ์์ ๋ฟ๋ง ์๋๋ผ ์ธํฌ์ ํ์ง์ ์ธก์ ํ ์ ์๋ค. ๋ํ, ์ด ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ด์ฉํ์ฌ ํญ์ฐํ ๊ธฐ๋ฅ์ ๊ฐ์ง๋ ๋ฌผ์ง์ ํจ๋ฅ ํ๊ฐ์๋ ํ์ฉํ ์ ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๋ค์ํ ์ฝ๋ฆฌํ์ฑ๊ณผ ์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ์ง๋ ์ํ์ธ ํ ๋งํ ์ GSH ํ๋ณต๋ฅ์ ํตํ ํญ์ฐํ ํจ๊ณผ๋ฅผ ์ป์ด์ง ์ถ์ถ๋ฌผ๊ณผ ๋ถํ๋ฌผ์ ํตํด ํ์ธํ์๊ณ , ๋์ ํญ์ฐํ๋ฅ์ ๋ณด์ธ ๋ถํ์ ์ฃผ์์ฑ๋ถ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋์ ํ์ฌ ํ ๋งํ ํญ์ฐํํจ๋ฅ์ ์งํ์ฑ๋ถ์ผ๋ก ํ์ฉํ๊ณ ์ ๋ณธ ์ฐ๊ตฌ๋ฅผ ์งํํ์๋ค.</p> |
๊ธ์ํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ด๋ค ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ์ต์ ํ๋์? | ์ฐํ๋ฐฉ์ง ํ์ฑ, tyrosinase ํ์ฑ์ ํด ๋ฐ ๋ฉ๋ผ๋ ํจ๋ ์ ํ | <h1>์ด ๋ก</h1><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ๊ธ์ํ(Calendula arvensis)์ ๋ํ ๋ค์ํ ์๋ฆฌ,ํํ์ ํ์ฑ์ ์ํํ์ฌ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ์์ฌ ๊ฐ๋ฅ์ฑ์ ๊ฒํ ํ์๋ค. ๊ธ์ํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ฎ์ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ๋ํ๋๋ค. ์ธํฌ๋
์ฑ์ด ๊ฑฐ์ ์๋ ๋๋์์ ๊ธ์ํ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ฒ๋ฆฌ ์, ์ฐํ๋ฐฉ์ง ํ์ฑ, tyrosinase ํ์ฑ์ ํด ๋ฐ ๋ฉ๋ผ๋ ํจ๋ ์ ํ๋ฅผ ๋ณด์ฌ์ฃผ์๋ค. ๊ธ์ํ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋๋์ ๋ฐ๋ผ tyrosinase ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ด ์ต์ ๋์์ผ๋ฉฐ, ์ด๋ ๊ธ์ํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ด tyrosinase์ ํ์ฑ ๋ฐ ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ์ ์ต์ ์ํค๊ฑฐ๋ ํน์ ๋ฉ๋ผ๋
ธ์ข ์์ก ์ ํด ๋ฑ ๋ค๋ฅธ ์์ธ์ ์ํด ๋ฉ๋ผ๋ ํฉ์ฑ์ ์ ํดํ๋ ๊ฒ์ผ๋ก ์๊ฐ๋๋ค. ๋ํ, ๊ธ์ํ ์ถ์ถ๋ฌผ ์ฒ๋ฆฌ ์, ํญ๊ท ํ์ฑ์ด ๋ํ๋จ์ ํ์ธํ์๋ค. ๋ฐ๋ผ์ ๊ธ์ํ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํฅํ ๊ธฐ๋ฅ์ฑ ์์ฌ์ ํ์ฉํ ์ ์๋ ํจ๊ณผ์ ์ธ ๋ฌผ์ง์ด ๋ ์ ์๋ค๊ณ ํ๋จ ๋๋ค.</p> |
์ฐ์์ผ ์ ์ด๋ 4์์ ์ํํ ๊ฒ์ ๊ตฌ์
ํ์ง? | ์ผ๋ถํ๋ถ์ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์ธ์ผ, ์ฐ์์ผ ๋ฐ ์ฐ์์ผ ์ ์ด ์๋ฃ</h2><p>CG๋ ์ถฉ๋ถ ๊ธ์ฐ๊ตฐ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋ \(5 \)๋
๊ทผ์ ๊ตฌ์
ํ์๊ณ MCG์ ์ฐ์์ผ ์ ์ด(WPMCG: whole plant of MCG)๋ ๊ฒฝ๋จ ํจ์๊ตฐ์์ ์ฌ๋ฐฐ๋ \(5 \)๋
๊ทผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ฐ์์ผ ๋ฟ๋ฆฌ๋ \(4\)์์ ์ํํ ๊ฒ์ ์ฐ์์ผ ์ ์ด๋ \(6\)์์ ์ํํ ๊ฒ์ ๋์
ํ์ฌ๋ฒ์ธ ์ง์๋ฐ์ด์ค(Hamyanggun, Gyeongsnagnam-do, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๊ตฌ์
ํ ์๋ฃ๋ ํ๋ฅด๋ ๋ฌผ์ ์ธ์ฒ ํ ํ๋ฉด์ ๋ฌผ๊ธฐ๊ฐ ์ ๊ฑฐ๋๋๋ก ์ค์จ์์ \(2\)-\(3\)์๊ฐ ์๊ฑดํ ๋ค์ ์ํ ๊ฑด์กฐ๊ธฐ(SI-\(70\)S\(2\), Sinil, Daegu, Korea)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ \( 55 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \) ์จ๋๋ก \(2\)-\(3\)์ผ๊ฐ ๊ฑด์กฐํ์๋ค. ๊ฑด์กฐ ํ ๋ถ์๊ธฐ(HGB\(2\)WTS\(3\), Waring, Torrington, CT, USA)๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์ฌ ๋ถ๋ง์ \( -40^{\circ} \mathrm{C} \)์์ ๋๊ฒฐ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์๋ฃ๋ก ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์์ฝ</h2><p>Folin-ciocalteu reagent, diethylen glycol, \(2\),\(2\)-diphenyl-\(1\)picrydrazyl (DPPH), \(2\),\(2\)'-azino-bis (\(3\)-ethylbenzothiazoline-\(6\)-sulfonic acid) (ABTS), trichloroacetic acid (TCA), thiobarbituric acid (TBA) ์ \(2\),\(4\),\(5\)-tri(\(2\)-pyridyl)-\(1\),\(3\),\(5\)-triazine (TPTZ) ๋ฑ์ Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. Ginsenoside ํ์คํ \(21\)์ข
(Rg\(1\), Re, Ro, Rf, F\(5 \), F\(3\), Rg\(2\), Rh\(1\), Rb\(1\), Rc, F\(1\), Rb\(2\), Rb\(3\), Rd, Rd\(2\), F\(2\), Rg\(3\), PPT, compound K, Rh\(2\) ๋ฐ PPD)๋ KOC biotech (Daejeon, Korea)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋ถ์ ๋ฑ์ ์ฌ์ฉํ high performance liquid chromatography (HPLC) ๋ฑ๊ธ์ ์ ๊ธฐ์ฉ๋งค๋ J.T.Baker (Philipsbug, NJ, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๊ณ , ๊ทธ ์ธ์ ์ฌ์ฉ๋ ๊ธฐํ ์์ฝ์ ํน๊ธ ๋ฐ HPLC ๋ฑ๊ธ์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>์ง๋ฐฉ์ฐ ๋ถ์</h2><p>์ง๋ฐฉ์ฐ ๋ถ์์ Lee ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ๋ฐ๋ผ gas chromatography (GC, Agilent \(7890\)A system, Agilent Technologies Inc., Wilmington, DE, USA)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์๋ค. ๋ถ์ํ๊ธฐ์ ์์ ์๋ฃ \( 1 \mathrm{~g} \)์ ๋ฉํ์ฌ์ ๋
น์ธ \( 0.5 \mathrm{~N}\) \(\mathrm{~NaOH}\) \(3 \mathrm{mL} \)์ ํผํฉํ์ฌ \( 100{ }^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(10 \)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์ํ์ฌ ์ง๋ฐฉ์ฐ๊ณผ ๊ธ๋ฆฌ์ธ๋กค์ ๊ฐ์๋ถํดํ์๋ค. ์ดํ ๋ฐ์๋ฌผ์ ์ผ๋ถํ๋ถ์(\(\mathrm{BF}_{3}\)) \(2 \mathrm{~mL} \)์ ๊ฐํ์ฌ ํผํฉ ํ \(30 \)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์์ ํตํด ๋ฉํธ์์คํ
๋ฅดํ๋ฅผ ์งํํ์๋ค. ์ด์ด ์ด์์ฅํ \( 1 \mathrm{~mL} \)์ ๊ฐํ์ฌ ํผํฉ ํ ์์ฌ๋ถ๋ฆฌํ์ฌ ์์ธต์ธ ์ด์์ฅํ์ธต์ ํ์ํ์ฌ ๋ฌด์์ํฉ์ฐ๋ํธ๋ฅจ๊ณผ ํจ๊ป ํ์ํ ๋ค \( 0.45 ~\mu \mathrm{m} \) membrane filter (Dismic-\(25\)CS, Toyoroshikaisha Ltd, Tokyo, Japan)๋ก ์ฌ๊ณผํ์ฌ ๋ถ์ํ์๋ค. GC๋ ์์ ๋ฐ ์ง์ ๊ฐ์ค์ flame ion detector (FID) ๋ฐ SP-\(2560\) capillary column \( (100 \mathrm{~m} \times 0.25 \mathrm{~mm} \) i.d., \( 0.25\)-\(\mu \mathrm{m} \) film thickness, Sigma-Aldrich Co.)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋ถ์์กฐ๊ฑด์ ์ค๋ธ ์จ๋๋ \( 140^{\circ} \mathrm{C} \)์์ \(5 \)๋ถ๊ฐ ์ ์ง ํ, \( 180^{\circ} \mathrm{C} \)๊น์ง \(1 \)๋ถ๋น \( 20^{\circ} \mathrm{C} \)๋งํผ ์์น์์ผ \(2 \)๋ถ๊ฐ ์ ์งํ๊ณ ์ต์ข
\( 230^{\circ} \mathrm{C} \)๊น์ง ๋ถ๋น \( 5^{\circ} \mathrm{C} \)๋งํผ ์์น์์ผ \( 10 ~\mu \mathrm{L} \)์ ์๋ฃ๋ฅผ ์ฃผ์
ํ์ฌ \(35 \)๋ถ๊ฐ FID์์์ ์ง๋ฐฉ์ฐ ํจ๋์ ๊ฒ์ถํ์๋ค. Injector์ ์จ๋์ FID detector ์ ์จ๋๋ ๊ฐ๊ฐ \( 220^{\circ} \mathrm{C} \)์ \( 240^{\circ} \mathrm{C} \)๋ก ์งํํ์๋ค.</p> |
4์๊ฐ ๋์ ๋ฐ์์ํจ \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ๋๋์ ์์ฝ์ ๋ช ์๊ฐ ํ์ demethyl sulfoxide \( 500 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ๋ฃ์ด์ ๋
น์ฌ์ฃผ์๋๊ฐ? | ๊ตญ๋ฆฝ์๋ฌผ์์๊ด ์๋ฌผ์์์ฐ๊ตฌ๋ถ ์๋ฌผ์์๊ณผ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์ถ์ถ ๋ฐ ๋ถ๋ฆฌ</h2><p>๋ณธ ์ฐ๊ตฌ์์ ์ฌ์ฉํ ์๋ฃ์ธ ์ด๋ฆฌ์ฐ๊ฝ์ ๋์
ํ์ฌ๋ฒ์ธ (์ฃผ)๋กํฐ์ค๊ทธ๋ฆฐ์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ๋ํ, ์ด ์๋ฃ๋ ์๋ฌผ ์ข
ํ๋ณ ์์คํ
์ ์ํด ํ์ฆํ๋ณธ(NIBRVP000012545)์ผ๋ก ํ์ธ๋์์ผ๋ฉฐ, ํ์ธ์ ๊ตญ๋ฆฝ์๋ฌผ์์๊ด ์๋ฌผ์์์ฐ๊ตฌ๋ถ ์๋ฌผ์์๊ณผ๋ฅผ ํตํด ์งํ๋์๋ค. ์ถ์ถ์ ๊ฑด์กฐ๋ ์๋ฃ๋ฅผ \( 100 \% \) methyl alcohol์ ์นจ์ง์์ผ \(72\)์๊ฐ ๋์ ๋์์ผ๋ฉฐ ์ด ๊ณผ์ ์ \(3\)ํ ๋ฐ๋ณตํ์ฌ ๋์ถ ๋ฐ ๋๊ฒฐ๊ฑด์กฐํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ํ๋ณดํ์๋ค. ์ถ๋ฌผ์ ์ฉ๋งค์ ๊ทน์ฑ์ ๋ฐ๋ผ ์์ฐจ์ ์ผ๋ก ๋ถํํ์์ผ๋ฉฐ, ethyl acetate ๋ถํ๋ฌผ์ medium pressure liquid chromatography (Isocratic, Water: \( \mathrm{ACN}=80: 20 \), \( \mathrm{v} / \mathrm{v}, 40 \mathrm{~min}) \) ์ ์ํํ์ฌ ํํฉ๋ฌผ \( (55.3 \mathrm{mg}) \) ์ ๋ถ๋ฆฌํ์๋ค.</p><h2>์๋ฃ ๋ฐ ๊ธฐ๊ธฐ</h2><p>์ ํจ์ฑ๋ถ์ ๋ถ๋ฆฌ ๋ฐ ์ ์ ๋ preparative-liquid chromatography (LC-Forte/R, YMC, Kyoto, KP, Japan)๋ก ํ์๊ณ , ํํฉ๋ฌผ์ ๊ตฌ์กฐ ๋์ ์ Bruker Ascend \(400\) (Bruker, Karlsruhe, BW, Germany)์ ์ฌ์ฉํ์ฌ NMR ์ธก์ ์ ์ค์ํ์๋ค. ํจ๋ฅ ์ธก์ ์ ์ํ elastase์ ๊ฒฝ์ฐ porcine pancreas elastase๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์์ผ๋ฉฐ, n-succinyl-(L-Ala) \( )_{3} \)-p-nitroanilide์ ํจ๊ป Sigma chemical Co. (St. Louis, MO, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ธํฌ ๋ฐฐ์ ๋ฐฐ์ง์ ์๋ฃ์ธ dulbecco's modified eagle medium (DMEM), fetal bovine serum, penicillin/streptomycin์ gibco BRL Co. (Grand Island, NY, USA)์์, ์ธํฌ๋
์ฑ ์ธก์ ์์ฝ 3-[4,5- dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT)์ Sigma-Aldrich (St Louis, MO, USA)์์ ๊ตฌ์
ํ์๋ค. ํญ๋
ธํ ํ์ฑ ์ธก์ ์ ROS-Glo \( \mathrm{iM}_{2} \mathrm{O}_{2} \) assay kit (Promega, Madison, WI, USA), MMP-1 ELISA kit (Abcam, Cambridge, MA, USA), procollagen type I C-peptide kit (Takara Shuzo, Kyoto, \( \mathrm{KP} \), Japan)์ pro-COL1A1, MMP-1, \( \beta \)-actin ํญ์ฒด(Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA)๋ฅผ ๊ฐ๊ฐ ๊ตฌ์
ํ์ฌ ์ฌ์ฉํ์๋ค.</p><h2>Elastase ์ ํดํ์ฑ ์ธก์ </h2><p>Isoquercitrin (IQC)์ \( 5\),\(10\),\(50\),\(100\) \(\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ก ํฌ์ํ์ฌ \( 40 \mu \mathrm{L} \) ์ฉ \(96\) well plate์ ๋ฃ์ ๋ค \( 2.5 \mathrm{U} / \mathrm{mL} \) porcine pancreas elastase ์ \( \mathrm{n} \)-succinyl-(L-Ala \( )_{3} \)-pnitroanilide \( (0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}) \) ๋ฅผ \( 50 \mathrm{mM} \) tris-\( \mathrm{HCl} \) buffer \( (\mathrm{pH} \) 8.6)์ ๋
น์ฌ์ well์ ๋ฃ๊ณ \( 30 \mathrm{~min} \) ๋ฐ์ ํ \( 445 \mathrm{~nm} \) ์์ ์ธก์ ํ์๋ค. ์๋ฃ์ฉ์ก์ ์ฒจ๊ฐ๊ตฌ์ ๋ฌด์ฒจ๊ฐ๊ตฌ์ ํก๊ด๋ ๊ฐ์์จ(\%)๋ก elastase ์ ํดํ์ฑ์ ๋ํ๋ด์๋ค.</p><h3>MTT assay์ ์ํ ์ธํฌ ๋
์ฑ ์ธก์ </h3><p>๋ณธ ์คํ์ ์ฌ์ฉ๋ \( \mathrm{IQC} \) ์ ์ธํฌ๋
์ฑ์ ํ์ธํ๊ธฐ ์ํด CCD-986sk cell์ \(48\) well plate์ ๊ฐ๊ฐ \( 5 \times 10^{3} \) cells/well๋ก ๋ถ์ฃผํ๊ณ \(24\)์๊ฐ ์์ ํํ์๋ค. ๊ทธ ํ \( \mathrm{IQC} \) ๋ฅผ \( 0.5,1,5,10,20 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋ก ํฌ์ํ์ฌ ์ฒ๋ฆฌํ ํ \(48\) ์๊ฐ ๋์ \( 37^{\circ} \mathrm{C}, 5 \% \mathrm{CO}_{2} \) incubator์์ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. \(48\) ์๊ฐ ํ \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) ๋๋์ ์์ฝ์ \(4\) ์๊ฐ ๋ฐ์์ํค๊ณ demethyl sulfoxide \( 500 \mu \mathrm{L} \) ๋ฅผ ๋ฃ์ด์ ๋
น์ฌ์ฃผ์๋ค. ๊ทธ ํ microplate reader๋ฅผ ์ด์ฉํ์ฌ \( 540 \mathrm{~nm} \) ์์ ํก๊ด๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h3>\( \operatorname{ROS} \) ์์ฑ๋ ์ธก์ </h3><p>ROS ์์ฑ๋์ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด CCD-986sk cell์ 48 well plate์ ๊ฐ๊ฐ \( 5 \times 10^{3} \mathrm{cells} / \mathrm{well} \) ๋ก ๋ถ์ฃผํ๊ณ \(24\) ์๊ฐ ์์ ํํ์๋ค. ์ดํ, ๋ฐฐ์ง๋ฅผ ์ ๊ฑฐํ๊ณ PBS๋ฅผ ๋ฃ์ด UVB \( \left(20 \mathrm{~mJ} / \mathrm{cm}^{2}\right) \) ๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. ๋ค์ DMEM ๋ฐฐ์ง๋ฅผ ๋ฃ๊ณ \( \mathrm{IQC} \) ๋ฅผ \( 0.5,1,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ์ฌ \(48\)์๊ฐ ๋ฐฐ์ ํ, ROS ๋ฐ์์์ ROS-Glo \( { }^{\mathrm{TM}} \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) assay kit๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h3>Procollagen ๋ฐ MMP-1 ๋ถ๋น๋ ์ธก์ </h3><p>Procollagen๊ณผ MMP-1์ ๋ฐํ์์ procollagen type I C-peptide kit์ MMP-1 ELISA kit๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ธก์ ํ์๋ค. CCD-986sk cell์ 48 well plate์ ๊ฐ๊ฐ \( 5 \times 10^{3} \) cells/well๋ก ๋ถ์ฃผํ ํ \(24\) ์๊ฐ ๋ฐฐ์ํ๊ณ UVB \( \left(20 \mathrm{~mJ} / \mathrm{cm}^{2}\right) \) ๋ฅผ ์กฐ์ฌํ ๋ค DMEM ๋ฐฐ์ง๋ก ๊ตํํ์ฌ ์๋ฃ๋ฅผ 48์๊ฐ ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. ๊ทธ ํ ์๋ฑ์ก์ ์ทจํด ๊ฐ๊ฐ์ kit๋ก ์ธก์ ํ์๋ค.</p><h3>์ธํฌ๋ด Procollagen ๋ฐ MMP-1 ๋จ๋ฐฑ์ง ๋ฐํ๋ ์ธก์ </h3><p>CCD-986sk cell์ \(6\) well plate์ \( 1 \times 10^{5} \) cells/well๋ก ๋ถ์ฃผํ์ฌ \(24\)์๊ฐ ๋ฐฐ์ํ๊ณ UVB \( \left(20 \mathrm{~mJ} / \mathrm{cm}^{2}\right) \) ๋ฅผ ์ฒ๋ฆฌํ์๋ค. ๊ทธ ํ IQC ๋ฅผ \( 0.5,1,5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) ๋๋๋ก ์ฒ๋ฆฌํ๊ณ \(48\) ์๊ฐ ๋ฐฐ์ํ์๋ค. ์ค๋น๋ cell์ RIPA buffer (Pierce, Appleton, WI, USA)๋ก ๋จ๋ฐฑ์ง ์ถ์ถํ ํ BCA protein assay (Pierce)์ ์ด์ฉํด ์ ๋ํ์๋ค. ๋๋์ ๋จ๋ฐฑ์ง sample๋ค์ \( 10 \% \) SDS-PAGE๋ก ์ ๊ธฐ์๋ํ๊ณ PVDF membrane์ผ๋ก transfer์์ผ \(1\), \(2\)์ฐจ ํญ์ฒด ๋ฐ์์ ํธ๊ณ , ๊ฒฐ๊ณผ๋ ImageQuant LAS-4000 (GE life sciences, Taipei, Taiwan)๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ๋ถ์ํ์๋ค.</p><h3>ํต๊ณ์ฒ๋ฆฌ</h3><p>๋ณธ ์คํ์ SPSS \(10.0\)์ผ๋ก ๋ถ์ฐ๋ถ์(ANOVA: analysis of variance)์ ์ค์ํ์์ผ๋ฉฐ, ์ ์์์ค \( p<0.05 \) ์์ ์ ์์ฐจ ๊ฒ์ ์ ํ์๋ค.</p> |
์ด์, ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ ๋ช์๊ฐ ์ด์ ๊ต๋ฐ์ถ์ถํด? | ๋
ธ์ง์์ ์ฃผ๋ฆ์กฐ๊ฐํ์ ์ด๋ฆฐ์์ด ์๋ผ๊ธฐ ์์ํ๋ \(4\)์ ํ์๊ฒฝ๋ถํฐ ์์ด ๋ค์๋ผ๋ \(6\)-\(7\)์ ํ์๊ฒฝ๊น์ง \(1\)ํ\( \left(3.3 \mathrm{~m}^{2}\right) \)์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ฑ์ฅ๋จ๊ณ ๋ฐ ํ๋น ์ฃผ๋ฆ์กฐ๊ฐํ์ ๋ถํฌ๋๋ฅผ ์ธก์ | <h1>์ฌ๋ฃ ๋ฐ ๋ฐฉ๋ฒ</h1><h2>์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ๋์ (elicitor)์ ์ ์กฐ ๋ฐ ์ ์ฉ</h2><p>Elicitor์ ์ ์กฐ๋ Cho ๋ฑ์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์ํ์ฌ ์๋ฆฌํ์ฑ๋ฌผ์ง์ ๋์ (elicitor) ๋ถ๋ง์ ์ ์กฐํ์๋ค. Elicitor์ ์ ์ฉ์ ๋
ธ์ง์์ ์ฃผ๋ฆ์กฐ๊ฐํ์ ์ด๋ฆฐ์์ด ์๋ผ๊ธฐ ์์ํ๋ \(4\)์ ํ์๊ฒฝ๋ถํฐ ์์ด ๋ค์๋ผ๋ \(6\)-\(7\)์ ํ์๊ฒฝ๊น์ง \(1\)ํ\( \left(3.3 \mathrm{~m}^{2}\right) \)์ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ์ฑ์ฅ๋จ๊ณ ๋ฐ ํ๋น ์ฃผ๋ฆ์กฐ๊ฐํ์ ๋ถํฌ๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ \(1\)ํ๋น elicitor ์ฒ๋ฆฌ ์ดํฌ๋์ ๊ฒฐ์ ํ์๋ค. Elicitor ์ดํฌ๋์ ์ฒ๋ฆฌ๊ทธ๋ฃน๋ณ \( 1 \mathrm{~mg} / \mathrm{mL} \) (group A), \( 3 \mathrm{~mg} / \mathrm{mL} \) (group B), ๋ฐ \( 5 \mathrm{~mg} / \mathrm{mL} \) (group C)์ ๋๋๋ก ์ค์ ํ์ฌ \(1\)ํ๋น \( 1 \mathrm{~L}(1,3,5 \mathrm{~g} / \mathrm{L}) \)๋ฅผ ๊ธฐ์ค์ผ๋ก ๊ณ์ฐํ์๋ค. ์ฃผ๋ฆ์กฐ๊ฐํ์ ํ๋น ๋ถํฌ๋๋ \(1\)์ฐจ, \(2\)์ฐจ, \(3\)์ฐจ ์ฒ๋ฆฌ ์๊ธฐ๋ณ๋ก \(1 \)ํ๋น ๋ถํฌ๋๋ฅผ ์ธก์ ํ์ฌ \( 60,80,100 \% \)๋ก ์ค์ ํ ํ elicitor๋ฅผ ์ ์กฐํ์์ผ๋ฉฐ, ์ผ์ ๊ธฐ๊ฐ์ ๋ฐ๋ผ ์ด \(3\)ํ์ ๊ฑธ์ณ elicitor ์ฉ์ก์ ์ ์กฐํ ํ ๋ถ๋ฌด๊ธฐ๋ฅผ ์ฌ์ฉํ์ฌ ์ง์ ์์ ๋ถ๋ฌดํ์๋ค.</p><h2>์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐ</h2><p>Elicitor ์ฒ๋ฆฌํ ์ฃผ๋ฆ์กฐ๊ฐํ ์์ ์ํํ์ฌ ์ด๋ฌผ์ง์ ์ ๊ฑฐํ ํ, \( 45^{\circ} \mathrm{C} \) dry oven์์ ๊ฑด์กฐํ์๋ค. ๊ฑด์กฐํ ์๋ฃ๋ ๋ถ์๊ธฐ๋ฅผ ์ด์ฉ ํ์ฌ \(40 \mathrm{~mesh}\)๋ก ๋ถ์ํ์ฌ ๋ฐ๋ดํ์ฌ ๋ณด๊ดํ๋ฉฐ ์ฌ์ฉํ์๋ค. ์ด์์ถ์ถ๋ฌผ์ ์ ์กฐ๋ ์๋ฃ \( 1 \mathrm{~g} \)์ ์ฆ๋ฅ์ \( 200 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๋ฃ๊ณ ๊ฐ์ดํ์ฌ ์ก์ด \( 100 \mathrm{~mL} \)์ด ๋์์ ๋ ๋๊ฐํ์์ผ๋ฉฐ, ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ์ \( 1 \mathrm{~g} \)์ ์๋ฃ์ \( 70 \% \) ์ํ์ฌ \( 100 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ๊ฐํ์ฌ homogeniger๋ก \( 20,000 \mathrm{rpm} \)์์ \(1\)๋ถ๊ฐ ๊ท ์งํํ์๋ค. ์ด์, ์ํ์ฌ ์ถ์ถ๋ฌผ ๋ชจ๋ \(12\)์๊ฐ ์ด์ ๊ต๋ฐ ์ถ์ถํ๊ณ ์ถ์ถ์ก์ whatman No. \(1\) filter paper๋ก ์ฌ๊ณผํ์๋ค.</p><h2>Total phenolic ์ ๋</h2><p>์ถ์ถ๋ฌผ์ ํจ์ ๋ total phenolic compounds์ ํจ๋์ ์ธก์ ํ๊ธฐ ์ํด Folin๊ณผ Denis์ ๋ฐฉ๋ฒ์ ์คํ์ฌ ์ฃผ๋ฆ์กฐ๊ฐํ ์ถ์ถ๋ฌผ \( 1 \mathrm{~mL} \), ๋๋์ \( 95 \% \) ์ํ์ฌ \( 1 \mathrm{~mL} \)์ \( 5 \mathrm{~mL} \)์ ์ฆ๋ฅ์๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ ํ \( 2 \mathrm{~N} \) ๋๋์ Folin-ciocalteu reagent๋ฅผ \(2 \)๋ฐฐ ํฌ์ํ์ฌ \( 0.5 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ์ฒจ๊ฐํ์๋ค. ์ด ํ vortexํ์ฌ ์ค์จ์ \(5 \)๋ถ๊ฐ ๋ฐ์
์ํจ ํ ๋ฐ์์์ฝ์ธ \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} 1 \mathrm{~mL} \)๋ฅผ ์์ด์ฃผ๊ณ ์์ค์์ \(1 \)์๊ฐ ๋ฐ์์์ผฐ๋ค. ์ธก์ ์ \( 725 \mathrm{~nm} \)์ ํ์ฅ์์ ํก๊ด๋(Optical density, OD)๋ฅผ ์ธก์ ํ์์ผ๋ฉฐ, total phenolic compounds ํจ๋์ gallic acid๋ฅผ ์ด์ฉํ ํ์ค๊ณก์ ์ ์ด์ฉํ์ฌ ์ ๋ํ์๋ค.</p> |