Datasets:

presencesw

/

pubmed_envi_stage_2

like 0

(--)-alpha-Bisabolol has a primary antipeptic action depending on dosage, which is not caused by an alteration of the pH-value. The proteolytic activity of pepsin is reduced by 50 percent through addition of bisabolol in the ratio of 1/0.5. The antipeptic action of bisabolol only occurs in case of direct contact. In case of a previous contact with the substrate, the inhibiting effect is lost.

(--) - Alpha-Bisabolol có tác dụng chống viêm loét dạ dày tá tràng nguyên phát tùy thuộc vào liều dùng, không phải do sự thay đổi giá trị pH. Hoạt tính phân giải protein của pepsin giảm 50% khi bổ sung bisabolol theo tỷ lệ 1/0,5. Tác dụng chống viêm loét của bisabolol chỉ xảy ra khi tiếp xúc trực tiếp. Trong trường hợp tiếp xúc trước đó với chất nền thì tác dụng ức chế bị mất.

RMI 61 140, RMI 61 144 and RMI 61 280 are newly synthetized N-[8-R-dibenzo(b,f)oxepin-10-yl]-N'-methyl-piperazine-maleates which show interesting psychopharmacologic effects. This work contains the results of a study performed with these three compounds, in order to demonstrate their neuropsycholeptic activity in comparison with chloropromazine (CPZ) and chlordiazepoxide (CPD). The inhibition of motility observed in mice shows that the compounds reduce the normal spontaneous motility as well as the muscle tone. The central-depressant activity is evidenced by increased barbiturate-induced sleep and a remarkable eyelid ptosis can also be observed. Our compounds do not show any activity on electroshock just as do CPZ and CPD. As to the antipsychotic outline, our compounds show strong reduction of lethality due to amphetamine in grouped mice and a strong antiapomorphine activity. They show also an antiaggressive effect and an inhibitory activity on avoidance behaviour much stronger than CPZ. We have also found extrapyramidal effects, as catalepsy, common to many tranquillizers of the kind of the standards used by us. As for vegetative phenomena, the compounds show hypotensive dose related action ranging from moderate to strong, probably due to an a-receptor inhibition. Adrenolytic activity against lethal doses of adrenaline, antiserotonin and antihistaminic effects, as well as other actions (hypothermia, analgesia, etc.) confirm that RMI 61 140, RMI 61 144 and RMI 61 280 are endowed with pharmacologic properties similar and more potent than those of CPZ. Studies on the metabolism of brain catecholamines show that they are similar to CPZ, although with less effect on dopamine level.

Các hợp chất RMI 61 140, RMI 61 144 và RMI 61 280 là các hợp chất mới được tổng hợp từ các hợp chất N-( 8-R-dibenzo (b, f) oxepin-10-yl]-N '-methyl-piperazine-maleate, cho thấy tác dụng thú vị về tâm sinh lý. Nghiên cứu này bao gồm kết quả của một nghiên cứu được thực hiện với ba hợp chất này, nhằm chứng minh hoạt tính thần kinh tâm thần của chúng so với chloropromazine (CPZ) và chlordiazepoxide (CPD ). Hoạt tính ức chế vận động quan sát được ở chuột cho thấy các hợp chất này làm giảm nhu động tự phát bình thường cũng như trương lực cơ. Hoạt tính giảm trung tâm của các hợp chất được chứng minh bằng cách tăng giấc ngủ do barbiturat gây ra và làm tẹo mí mắt đáng kể. Các hợp chất của chúng tôi không cho thấy bất kỳ hoạt tính nào trên sốc điện như CPZ và CPD. Về tác dụng chống loạn thần, các hợp chất của chúng tôi cho thấy tác dụng giảm huyết áp mạnh do chất amphetamine ở chuột và có hoạt tính chống apomorphine mạnh. Chúng cũng cho thấy tác dụng chống tiến triển và ức chế hành vi tránh thuốc mạnh hơn nhiều so với CPZ. Chúng tôi cũng đã tìm thấy các tác dụng ngoại tháp, như catalepsy, phổ biến đối với nhiều loại thuốc an thần thuộc loại mà chúng tôi sử dụng. Đối với hiện tượng sinh dưỡng, các hợp chất cho thấy tác dụng liên quan đến liều hạ huyết áp từ trung bình đến mạnh, có lẽ là do ức chế thụ thể a. Hoạt tính adrenolytic chống lại liều gây chết người của adrenaline, antiserotonin và thuốc kháng histamin, cũng như các tác dụng khác (hạ thân nhiệt, giảm đau, v. v.) xác nhận rằng RMI 61 140, RMI 61 144 và RMI 61 280 có đặc tính dược lý tương tự và mạnh hơn so với CPZ. Các nghiên cứu về chuyển hóa catecholamine trong não cho thấy chúng tương tự như CPZ, mặc dù ít ảnh hưởng đến mức độ dopamine.

A double-blind study with intra-individual comparisons was carried out to investigate the effects of 15 mg of (8r)-3alpha-hydroxy-8-isopropyl-1alphaH-tropanium bromide(+/-)-tropate (Sch 1000), 15 mg Sch 1000 + 10 mg oxazepam, 10 mg oxazepam and placebo with oral administration in randomized sequence on gastric juice volume, amount of acid, concentration and pH values in 12 healthy volunteers. The secretion parameters were measured during a 1-h basal period and a 2-h stimulation period. The gastric juice was obtained in 15 min portions via stomach tube. Stimulation was effected by 1 mug/kg/h pentagastrin via drip infusion. The Friedman test was used for the comparative statistical evaluation, and individual comparisons were carried out by means of the Wilcoxon test (pair-differences rank). The results show that Sch 1000 and Sch 1000 + oxazepam were equal in effect on basal and stimulated secretion volume. As compared with placebo, it was not possible to establish an effect on secretion volume for oxazepam alone. Sch 1000 and Sch 1000 + oxazepam were found to be equipotent in reducing the amount of basal acid, while oxazepam reduced this quantity only during the first 30 min of basal secretion. None of the three active preparations was capable of inhibiting the stimulated acid, although both Sch 1000 preparations produced a clear trend towards lowered mean values. During the basal secretion period, all three test preparations had an inhibiting action on acid concentration, but none of them had a significant effect during the stimulation period. The pH value was savely increased only by Sch 1000 and Sch 1000 + oxazepam, and this even only during the basal period. The results are discussed.

Nghiên cứu mù đôi có so sánh từng cá nhân được thực hiện để khảo sát tác dụng của 15mg (8r) - 3alpha-hydroxy-8-isopropyl-1alphaH-tropani bromide (+/-)-tropat (Sch 1000); 15mg Sch 1000 + 10mg oxazepam; 10mg oxazepam và giả dược, uống theo trình tự ngẫu nhiên trên thể tích dịch, lượng acid, nồng độ và pH dịch tiết ở 12 người khỏe mạnh. Kích thích được thực hiện bằng cách uống 1 cốc/kg/h pentagastrin. Kích thích được thực hiện bằng cách truyền dịch 15 phút. Nghiệm pháp Friedman được sử dụng để đánh giá thống kê so sánh, và so sánh từng cá nhân được thực hiện bằng nghiệm pháp Wilcoxon (chênh lệch mức độ).

Seven distinct glycosidases (EC 3.2) have been characterized in guinea-pig epidermis. Their properties indicate them to be of lysosomal origin. The 'profile' of the epidermal glycosidases is significantly different from that reported for whole skin, the activities of beta-galactosidase and beta-acetylglucosaminidase being very high and those of the remaining enzymes relatively low in epidermis.

Bảy glycosidase riêng biệt (EC 3.2) đã được đặc trưng ở lớp biểu bì của lợn lang. Đặc điểm của chúng cho thấy chúng có nguồn gốc lysosome. " Cấu trúc " của các glycosidase biểu bì khác biệt đáng kể so với báo cáo cho toàn bộ da, hoạt động của beta-galactosidase và beta-acetylglucosaminidase rất cao và các enzyme còn lại tương đối thấp ở lớp biểu bì.

Five distinct ester hydrolases (EC 3-1) have been characterized in guinea-pig epidermis. These are carboxylic esterase, acid phosphatase, pyrophosphatase, and arylsulphatase A and B. Their properties are consistent with those of lysosomal enzymes.

Năm enzyme hydrolase ester (EC 3-1) khác biệt đã được đặc trưng ở lớp biểu bì của lợn lang. Đó là các enzyme carboxylic, phosphatase acid, pyrophosphatase và arylsulphatase A và B. Các đặc tính của chúng phù hợp với các enzyme lysosome.

A serum agglutinin reactive with red cells in the presence of polycarboxyl groups is reported. It is likely that this represents an additional example of the type of agglutinin previously described as agglutinating red cells in the absence of ionized calcium. Experimental evidence is presented indicating that it is free polycarboxyl groups that potentiate agglutination and that any metal ion, such as calcium, capable of chelating with these groups will prove to be inhibitory.

Báo cáo cho thấy phản ứng ngưng kết hồng cầu trong huyết thanh với các nhóm polycarboxyl. Có khả năng đây là một ví dụ bổ sung của loại ngưng kết hồng cầu được mô tả trước đây như ngưng kết hồng cầu trong trường hợp không có canxi ion hóa. Bằng chứng thực nghiệm được trình bày cho thấy nhóm polycarboxyl tự do có khả năng gây ngưng kết và bất kỳ ion kim loại nào, chẳng hạn canxi, có khả năng chelating với các nhóm này sẽ bị ức chế.

The effect of the major metabolite of aspirin, namely salicylic acid, upon the pentose phosphate pathway (PPP) of normal and G6PD-deficient red cells has been studied. Salicylic acid was shown to inhibit this pathway in proportion to the amount present. At any concentration of this substance there was greater inhibition of the PPP in G6PD-deficient than in normal red cells.

Chất chuyển hóa chính của aspirin là acid salicylic có tác dụng ức chế con đường phát triển của tế bào hồng cầu bình thường và thiếu hụt G6PD. Axit salicylic đã được chứng minh là có tác dụng ức chế con đường này tương ứng với số lượng tế bào hiện có. Ở nồng độ nào của chất này, sự ức chế PPP ở tế bào thiếu hụt G6PD cao hơn so với tế bào bình thường.

1. In one experiment the effect on rumen pH of feeding with restricted amounts of whole or pelleted barley was studied. With whole barley there was little variation in rumen pH associated with feeding time, but with pelleted barley the pH decreased from about 7-0 before feeding to about 5-3, 2--3 h after feeding. 2. The rate of disappearance of dried grass during incubation in the rumens of sheep receiving either whole or pelleted barley was studied in a second experiment. After 24 h incubation only 423 mg/g incubated had disappeared in the rumen of sheep receiving pelleted barley while 625 mg/g incubated had disappeared when it was incubated in the rumen of sheep receiving whole barley. 3. The voluntary intake of dried grass of lambs was studied in a third experiment when they received supplements of either 25 or 50 g whole or pelleted barley/kg live weight 0-75. At the high level, pelleted barley reduced intake of dried grass by 534 g/kg but whole barley reduced it by only 352 g/kg. The digestibility of acid-detergent fibre was reduced more by pelleted barley than by whole barley but there was a tendency for a small increase in digestibility of the barley due to processing. 4. The implications of these findings on supplementation of roughages with cereals are discussed.

1. Trong một thí nghiệm, ảnh hưởng của việc cho ăn lúa mạch nguyên cám hoặc lúa mạch cắt nhỏ lên độ pH của dạ cỏ. Độ pH của lúa mạch nguyên cám ít thay đổi so với thời gian cho ăn, nhưng với lúa mạch cắt nhỏ độ pH giảm từ 7-0 trước khi cho ăn xuống còn 5-3 giờ, 2-3 giờ sau khi cho ăn. 2. Tỷ lệ cỏ khô biến mất trong quá trình ấp ở cừu nhận lúa mạch nguyên cám hoặc lúa mạch cắt nhỏ được nghiên cứu ở thí nghiệm thứ hai. Sau 24 giờ ấp chỉ có 423 mg/g cỏ khô biến mất ở cừu nhận lúa mạch cắt nhỏ, trong khi 625 mg/g cỏ khô biến mất ở cừu nhận lúa mạch nguyên cám. 3. Việc tự nguyện ăn cỏ khô của cừu được nghiên cứu ở thí nghiệm thứ ba khi chúng nhận bổ sung 25-50 g lúa mạch nguyên cám hoặc lúa mạch cắt nhỏ/kg thể trọng 0-75. Ở mức cao, lúa mạch cắt nhỏ giảm lượng cỏ khô xuống 534 g/kg nhưng lúa mạch nguyên cám chỉ giảm 352 g/kg. Khả năng tiêu hóa của các loại xơ có tính axit-chất tẩy rửa được giảm bởi lúa mạch cắt nhỏ hơn lúa mạch nguyên cám nhưng có xu hướng tăng nhẹ khả năng tiêu hóa của lúa mạch do quá trình chế biến. 4. Những hệ quả của phát hiện này đối với việc bổ sung lúa mạch thô với ngũ cốc được thảo luận.

The reaction of glutamate dehydrogenase and glutamate (gl) with NAD+ and NADP+ has been studied with stopped-flow techniques. The enzyme was in all experiments present in excess of the coenzyme. The results indicate that the ternary complex (E-NAD(P)H-kg) is present as an intermediate in the formation of the stable complex (E-NAD(P)H-gl). The identification of the complexes is based on their absorption spectra. The binding of the coenzyme to (E-gl) is the rate-limiting step in the formation of (E-NAD(P)H-kg) while the dissociation of alpha-ketoglutarate (kg) from this complex is the rate-limiting step in the formation of (E-NAD(P)H-gl). The Km for glutamate was 20-25 mM in the first reaction and 3 mM in the formation of the stable complex. The Km values were independent of the coenzyme. The reaction rates with NAD+ were approximately 50% greater than those with NADP+. Furthermore, high glutamate concentration inhibited the formation of (E-NADH-kg) while no substrate inhibition was found with NADP+ as coenzyme. ADP enhanced while GTP reduced the rate of (E-NAD(P)H-gl) formation. The rate of formation of (E-NAD(P)H-kg) was inhibited by ADP, while it increased at high glutamate concentration when small amounts of GTP were added. The results show that the higher activity found with NAD+ compared to NADP+ under steady-state assay conditions do not necessarily involve binding of NAD+ to the ADP activating site of the enzyme. Moreover, the substrate inhibition found at high glutamate concentration under steady-state assay condition is not due to the formation of (E-NAD(P)H-gl) as this complex is formed with Km of 3 mM glutamate, and the substrate inhibition is only significant at 20-30 times this concentration.

Phản ứng của glutamate dehydrogenase và glutamate (gl) với NAD+ và NADP+ đã được nghiên cứu bằng kỹ thuật dòng dừng. Trong tất cả các thí nghiệm, enzyme đều có mặt trong lượng lớn coenzyme. Kết quả chỉ ra rằng phức hợp bậc ba (E-NAD (P) H-kg) hiện diện như một chất trung gian trong quá trình hình thành phức hợp bền vững (E-NAD (P) H-gl ). Việc xác định các phức hợp dựa trên phổ hấp thụ của chúng. Sự gắn kết của coenzyme với (E-gl) là bước giới hạn tốc độ hình thành (E-NAD (P) H-kg) trong khi sự phân ly của alpha-ketoglutarate (kg) từ phức hợp này là bước giới hạn tốc độ hình thành (E-NAD (P) H-gl ). Giá trị Km độc lập với coenzyme. Tốc độ phản ứng với NAD+ lớn hơn khoảng 50% so với tốc độ phản ứng với NADP+. Hơn nữa, nồng độ glutamate cao đã ức chế sự hình thành (E-NADH-kg) trong khi không có sự ức chế cơ chất nào được tìm thấy với NADP+ khi có thêm một lượng nhỏ GTP. Kết quả cho thấy, hoạt tính cao hơn được tìm thấy với NAD+ so với NADP+ trong điều kiện ổn định không nhất thiết liên quan đến sự hình thành (E-NAD (P) H-gl) vì phức hợp này được hình thành với Km của glutamate 3 mM và sự ức chế cơ chất chỉ có ý nghĩa ở nồng độ gấp 20-30 lần nồng độ này.

Primary amines react with 2,4-pentanedione at pH 6-9 to form enamines, N-alkyl-4-amino-3-penten-2-ones. The latter compounds readily regenerate the primary amine at low pH or on treatment with hydroxylamine. Guanidine and substituted guanidines react with 2,4-pentanedione to form N-substituted 2-amino-4,6-dimethylpyrimidines at a rate which is lower by at least a factor of 20 than the rate of reaction of 2,4-pentanedione with primary amines. Selective modification of lysine and arginine side chains in proteins can readily be achieved with 2,4-pentanedione. Modification of lysine is favored by reaction at pH 7 or for short reaction times at pH 9. Selective modification of arginine is achieved by reaction with 2,4-pentanedione for long times at pH 9, followed by treatment of the protein with hydroxylamine. The extent of modification of lysine and arginine side chains can readily be measured spectrophotometrically. Modification of lysozyme with 2,4-pentanedione at pH 7 results in modification of 3.8 lysine residues and less than 0.4 arginine residue in 24 hr. Modification of lysozyme with 2,4-pentanedione at pH 9 results in modification of 4 lysine residues and 4.5 arginine residues in 100 hr. Treatment of this modified protein with hydroxylamine regenerated the modified lysine residues but caused no change in the modified arginine residues. One arginine residue seems to be essential for the catalytic activity of the enzyme.

Các amin bậc 1 phản ứng với 2,4-pentanedione ở pH 6-9 để tạo thành enamin, N-alkyl-4-amino-3-penten-2-ones. Các hợp chất sau dễ dàng tái tạo amin bậc 1 ở pH thấp hoặc khi xử lý bằng hydroxylamin. Guanidine và guanidine thay thế phản ứng với 2,4-pentanedione để tạo thành N-amino-4,6-dimethylpyrimidine thay thế với tốc độ thấp hơn ít nhất 20 lần so với tốc độ phản ứng của 2,4-pentanedione với amin bậc 1. Điều chỉnh có chọn lọc chuỗi bên lysine và arginine trong protein có thể dễ dàng đạt được với 2,4-pentanedione. Việc điều chỉnh lysine được ưa chuộng bởi phản ứng ở pH 7 hoặc cho thời gian phản ứng ngắn ở pH 9. Điều chỉnh có chọn lọc arginine đạt được bằng phản ứng với 2,4-pentanedione trong thời gian dài ở pH 9, sau đó xử lý protein bằng hydroxylamin. Mức độ điều chỉnh chuỗi bên lysine và arginine có thể dễ dàng đo bằng quang phổ. Điều chỉnh lysozyme với 2,4-pentanedione ở pH 7 dẫn đến điều chỉnh dư lượng lysine 3,8 và dư lượng arginine dưới 0,4 trong 24 giờ. Điều chỉnh lysozyme với 2,4-pentanedione ở pH 9 dẫn đến điều chỉnh dư lượng 4 lysine và dư lượng arginine trong 100 giờ. Điều trị protein đã được điều chỉnh này bằng hydroxylamin đã tái tạo dư lượng lysine đã được điều chỉnh nhưng không gây ra sự thay đổi dư lượng arginine đã được điều chỉnh. Dư lượng arginine có vẻ rất cần thiết cho hoạt động xúc tác của enzyme.

A purification procedure is reported for obtaining bovine liver dihydrofolate reductase in high yield and amounts of 100-200 mg. A key step in the procedure is the use of an affinity gel prepared by coupling pteroyl-L-lysine to Sepharose. The purified reductase has a specific activity of about 100 units/mg and is homogeneous as judged by analytical ultracentrifugation, polyacrylamide gel electrophoresis, and titration with methotrexate. The products of the first step of Edman degradation indicated a minimum purity of 79%. The reductase has a molecular weight of about 21500 on the basis of amino acid composition and 22100 +/- 300 from equilibrium sedimentation. It is not inhibited by antiserum to the Streptococcus faecium reductase (isoenzyme 2). Unlike the reductase of many other vertebrate tissues, the bovine enzyme is inhibited by mercurials rather than activated and it has a single pH optimum at both low and high ionic strength. However, the position of the pH optimum is shifted and the activity increased by increasing ionic strength. Automatic Edman degradation has been used to determine 34 of the amino-terminal 37 amino acid residues. Considerable homology exists between this region and the corresponding regions of the reductase from S. faecium and from Escherichia coli. This strengthens the idea that this region contributes to the structure of the binding site for dihydrofolate.

Đã có một quy trình tinh sạch để thu được dihydrofolate reductase ở gan bò với năng suất cao và hàm lượng 100-200 mg. Bước quan trọng trong quy trình này là sử dụng gel có ái lực được điều chế bằng cách kết hợp pteroyl-L-lysine với Sepharose. Reductase tinh sạch có hoạt tính đặc hiệu khoảng 100 đơn vị/mg và đồng nhất được đánh giá bằng phương pháp siêu ly tâm, điện di gel polyacrylamide và chuẩn độ bằng methotrexate. Sản phẩm của bước đầu tiên của quá trình phân hủy Edman cho thấy độ tinh khiết tối thiểu là 79 %. Reductase có trọng lượng phân tử khoảng 21.500 trên cơ sở thành phần axit amin và 22.100 +/- 300 từ quá trình lắng cân bằng. Nó không bị ức chế bởi kháng huyết thanh với Streptococcus faecium reductase (isoenzyme 2 ). Không giống như reductase của nhiều mô động vật có xương sống khác, enzyme bò bị ức chế bởi thủy ngân hơn là hoạt hóa và có độ pH tối ưu ở cả độ mạnh ion thấp và cao. Tuy nhiên, vị trí của pH tối ưu bị thay đổi và hoạt tính tăng lên khi tăng cường độ ion. Quá trình phân hủy Edman tự động đã được sử dụng để xác định 34 trong số 37 dư lượng axit amin cuối amino. Đáng kể có sự tương đồng giữa vùng này với các vùng tương ứng của reductase từ S.faecium và từ Escherichia coli. Điều này củng cố ý tưởng cho rằng vùng này góp phần vào cấu trúc của vị trí gắn dihydrofolate.

Dihydrofolate reductase has been purified 40-fold to apparent homogeneity from a trimethoprim-resistant strain of Escherichia coli (RT 500) using a procedure that includes methotrexate affinity column chromatography. Determinations of the molecular weight of the enzyme based on its amino acid composition, sedimentation velocity, and sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis gave values of 17680, 17470 and 18300, respectively. An aggregated form of the enzyme with a low specific activity can be separated from the monomer by gel filtration; treatment of the aggregate with mercaptoethanol or dithiothreitol results in an increase in enzymic activity and a regeneration of the monomer. Also, multiple molecular forms of the monomer have been detected by polyacrylamide gel electrophoresis. The unresolved enzyme exhibits two pH optima (pH 4.5 and pH 7.0) with dihydrofolate as a substrate. Highest activities are observed in buffers containing large organic cations. In 100 mM imidazolium chloride (pH 7), the specific activity is 47 mumol of dihydrofolate reduced per min per mg at 30 degrees. Folic acid also serves as a substrate with a single pH optimum of pH 4.5. At this pH the Km for folate is 16 muM, and the Vmax is 1/1000 of the rate observed with dihydrofolate as the substrate. Monovalent cations (Na+, K+, Rb+, and Cs+) inhibit dihydrofolate reductase; at a given ionic strength the degree of inhibition is a function of the ionic radius of the cation. Divalent cations are more potent inhibitors; the I50 of BaCl2 is 250 muM, as compared to 125 mM for KCl. Anions neither inhibit nor activate the enzyme.

Dihydrofolate reductase đã được tinh sạch 40 lần đến mức đồng nhất rõ ràng từ chủng Escherichia coli kháng trimethoprim (RT 500) bằng phương pháp sắc ký cột ái lực methotrexate. Các kết quả xác định trọng lượng phân tử của enzyme dựa trên thành phần acid amin, vận tốc lắng và điện di gel natri dodecyl sulfate cho giá trị lần lượt là 17680, 17470 và 18300. Có thể tách dạng tổng hợp của enzyme có hoạt tính đặc hiệu thấp ra khỏi monome bằng cách lọc gel; xử lý tổng hợp bằng mercaptoethanol hoặc dithiothreitol làm tăng hoạt tính của enzyme và tái sinh monome. Ngoài ra, điện di gel polyacrylamide cũng phát hiện nhiều dạng phân tử của monome. Enzym chưa được giải phóng có hai pH tối ưu (pH 4,5 và pH 7,0) với dihydrofolate làm chất nền. Hoạt tính cao nhất được quan sát thấy trong các chất đệm chứa cation hữu cơ lớn. Trong 100 mM imidazolium clorua (pH 7) thì hoạt tính đặc hiệu là 47 mumol dihydrofolate giảm mỗi phút một mg ở 30 độ C. Axit folic cũng đóng vai trò là chất nền với pH tối ưu là 4,5. Ở pH này, Km đối với folate là 16 muM, và Vmax là 1/1000 của tỷ lệ quan sát được với dihydrofolate làm chất nền. Các cation đơn trị (Na+, K+, Rb+ và Cs+) ức chế dihydrofolate reductase; ở một cường độ ion nhất định, mức độ ức chế là một chức năng của bán kính ion của cation. Các cation hóa trị hai là chất ức chế mạnh hơn; I50 của BaCl2 là 250 muM, so với 125 mM đối với KCl. Anion không ức chế cũng như không kích hoạt enzyme.

Ionization effects on the binding of the potential transition state analogues 2-phosphoglycolate and 2-phosphoglycolohydroxamate appear to be attributable to the changing state of ionization of the ligands themselves, therefore it is unnecessary to postulate the additional involvement of an ionizing residue at the active site of triosephosphate isomerase to explain the influence of changing pH on Ki in the neutral range. The binding of the competitive inhibitor inorganic sulfate is insensitive to changing pH in the neutral range. 3-Chloroacetol sulfate, synthesized as an active-site-specific reagent for triosephosphate isomerase, is used to provide an indication of the pKa of the essential carboxyl group of this enzyme. Previously described active-site-specific reagents for the isomerase were phosphate esters, and their changing state of ionization (accompanied by possible changes in their affinity for the active site) may have complicated earlier attempts to determine the pKa of the essential carboxyl group from the pH dependence of the rate of inactivation. Being a strong monoprotic acid, chloroacetol sulfate is better suited to the determination of the pKa of the carboxyl group. Chloroacetol sulfate inactivates triosephosphate isomerase by the selective esterification of the same carboxyl group as that which is esterified by the phosphate esters described earlier. From the pH dependence of the rate of inactivation of yeast triosephosphate isomerase, the apparent pKa of the active-site carboxyl group is estimated as 3.9 +/- 0.1.

Tác động của ion hóa lên sự gắn kết của các chất tương tự trạng thái chuyển tiếp 2-phosphoglycolate và 2-phosphoglycolohydroxamate dường như là do sự thay đổi trạng thái ion hóa của chính các phối tử, do đó không cần thiết phải đưa ra sự liên quan bổ sung của dư lượng ion hóa tại vị trí hoạt động của triosephosphate isomerase để giải thích ảnh hưởng của sự thay đổi pH lên K i trong khoảng trung tính. Sự gắn kết của chất ức chế cạnh tranh sulfat vô cơ không nhạy cảm với sự thay đổi pH trong khoảng trung tính. 3-Cloroacetol sulfate, được tổng hợp như một chất phản ứng đặc hiệu tại chỗ hoạt động cho isomerase triosephosphate, được sử dụng để chỉ ra pKa của nhóm carboxyl thiết yếu của enzyme này. Các chất phản ứng đặc hiệu tại chỗ hoạt động được mô tả trước đây cho nhóm isomerase là các este phosphate, và sự thay đổi pH (đi kèm với những thay đổi có thể có trong ái lực của chúng đối với vị trí hoạt động) có thể đã có những nỗ lực phức tạp trước đó để xác định pKa của nhóm carboxyl thiết yếu từ sự phụ thuộc của pH vào tốc độ bất hoạt của nhóm này. Là một axit monoprotic mạnh, chloroacetol sulfate phù hợp hơn để xác định pKa của nhóm carboxyl. Chloroacetol sulfate làm bất hoạt triosephosphate isomerase bằng cách este hóa chọn lọc của cùng nhóm carboxyl như đã được este hóa bởi các este phosphate được mô tả trước đó. Từ sự phụ thuộc pH của tốc độ bất hoạt của triosephosphate isomerase của nấm men, pKa biểu kiến của nhóm carboxyl hoạt động được ước tính là 3,9 +/- 0,1.

Bovine erythrocyte superoxide dismutase was slowly and irreversibly inactivated by hydrogen peroxide. The rate of this inactivation was directly dependent upon the concentrations of both H2O2 and of enzyme, and its second-order rate constant at pH 10.0 and 25 degrees was 6.7 M-1 sec-1. Inactivation was preceded by a bleaching due to rapid reduction of Cu2+ on the enzyme, and following this there was a gradual reappearance of a new absorption in the visible region, which was coincident with the loss of catalytic activity. Inactivation of the enzyme was pH-dependent and indicated an essential ionization whose pKa was approximately 10.2. Replacement of H2O by D2O raised this pKa but did not diminish the catalytic activity of superoxide dismutase, measured at pH 10.0. Several compounds, including xanthine, urate, formate, and azide, protected the enzyme against inactivation by H2O2. Alcohols and benzoate, which scavenge hydroxyl radical, did not protect. Compounds with special affinity for singlet oxygen were similarly ineffective. The data were interpreted in terms of the reduction of the enzyme-bound Cu2+ to Cu+, by H2O2, followed by a Fenton's type reaction of the Cu+ with additional H2O2. This would generate Cu2+-OH- or its ionized equivalent, Cu2+-O--, which could then oxidatively attack an adjacent histidine and thus inactivate the enzyme. Compounds which protected the enzyme could have done so by reacting with the bound oxidant, in competition with the adjacent histidine.

Hồng cầu bò bị bất hoạt từ từ và không thể phục hồi bởi chất hydro peroxid. Tốc độ bất hoạt phụ thuộc trực tiếp vào nồng độ của cả H2O2 và enzyme, và hằng số tốc độ bậc hai của nó ở pH 10,0 và 25 độ là 6,7 M-1 sec-1. Trước đó enzyme bị bất hoạt bằng cách tẩy trắng do sự khử Cu2+ nhanh chóng trên enzyme, và sau đó xuất hiện sự hấp thụ mới từ từ ở vùng nhìn thấy được, trùng với sự mất hoạt tính xúc tác. Sự bất hoạt của enzyme phụ thuộc vào pH và biểu hiện sự ion hóa thiết yếu có pKa xấp xỉ 10,2. Thay thế H2O bằng D2O làm tăng pKa này nhưng không làm giảm hoạt tính xúc tác của superoxide dismutase, đo ở pH 10,0. Một số hợp chất, bao gồm xanthine, urat, formate và azide, đã bảo vệ enzyme chống lại sự bất hoạt của H2O2. Rượu và benzoat, vốn làm sạch gốc hydroxyl, không bảo vệ được enzyme. Các hợp chất có ái lực đặc biệt với oxy nhóm đơn cũng không hiệu quả tương tự. Các dữ liệu được giải thích theo cách khử Cu2+ liên kết với Cu+ bằng H2O2, tiếp theo là phản ứng kiểu Fenton của Cu+ với H2O2 bổ sung. Điều này sẽ tạo ra Cu2+-OH-hoặc tương đương ion hóa của nó, Cu2+-O--, sau đó có thể tấn công oxy hóa histidine lân cận và do đó làm bất hoạt enzyme. Các hợp chất bảo vệ enzyme có thể làm như vậy bằng cách phản ứng với chất oxy hóa liên kết, cạnh tranh với histidine lân cận.

The near-ultraviolet circular dichroism (CD) of three homogeneous anti-type III pneumococcal antibodies in the absence and the presence of the specific hexasaccharide ligand was studied. In addition recombinations and hybridizations of H and L chains derived from two of these antibodies were carried out and the CD spectra of bound and free reconstituted IgG molecules were measured. The results indicate that the CD spectra of the native antibodies in the 260-310-nm range are very similar in shape and sign and exhibit a positive band at 285 nm. The homologous reconstituted antibody molecules exhibited CD spectra very similar in shape and sign to those of the native antibody molecules although recombinant molecules are no longer stabilized by interchain disulfide bonds. Upon addition of the hexasaccharide ligand, a significant decrease in amplitude of the CD spectra (18-21%) occurred in all three native antibodies and their Fab fragments as well as in the homologous recombinant molecules. No CD spectral changes could be detected upon interaction of the hapten ligand with the heterologous recombinants. All homogeneous antibodies studied exhibited fluorescence quenching upon oligosaccharide binding and a blue shift of the emission maximum. This property allowed the determination of the binding constant of one selected antibody to be made. Taken together, CD and fluorescence spectroscopic data suggest that oligosaccharide ligands induced detectable conformational changes in the Fab fragment of the antibody.

Nghiên cứu đã xác định được sự đồng nhất của 3 loại kháng thể kháng viêm phổi loại III không có và có sự hiện diện của các phối tử hexasaccharide. Bên cạnh đó, chúng tôi cũng tái tổ hợp và lai các chuỗi H và L từ 2 trong số các kháng thể này và đo phổ CD của các phân tử IgG tái tổ hợp tự do và liên kết. Kết quả cho thấy phổ CD của các kháng thể tự nhiên trong khoảng bước sóng 260-310 nm rất giống nhau về hình dạng và dấu hiệu và thể hiện dải dương ở bước sóng 285 nm. Các phân tử kháng thể tái tổ hợp tương đồng thể hiện phổ CD rất giống nhau về hình dạng và dấu hiệu so với các phân tử kháng thể tự nhiên mặc dù các phân tử tái tổ hợp không còn ổn định bởi liên kết disulfide interchain. Khi bổ sung phối tử hexasaccharide, biên độ phổ CD giảm đáng kể (18-21% ) xảy ra ở cả ba kháng thể tự nhiên và các mảnh Fab của chúng cũng như ở các phân tử tái tổ hợp tương đồng. Không phát hiện được sự thay đổi phổ CD khi có sự tương tác của phối tử hapten với các kháng thể dị hợp tử. Tất cả các kháng thể đồng nhất nghiên cứu đều thể hiện sự làm nguội huỳnh quang khi có liên kết oligosaccharide và sự dịch chuyển cực đại phát xạ. Đặc tính này cho phép xác định hằng số liên kết của một kháng thể được chọn. Kết hợp với nhau, các dữ liệu phổ CD và huỳnh quang cho thấy các phối tử oligosaccharide tạo ra những thay đổi về hình dạng có thể phát hiện được ở mảnh Fab của kháng thể.

The spontaneous inactivation of yeast glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase was found to fit a simple two-state model at pH 8.5 and 25 degrees. The first step is a relatively rapid dissociation of the tetramer to dimers with the equilibrium largely in favor of the tetramer. In the absence of NAD+ the dimer inactivates irreversibly. The apoenzyme is quite stable with a half-life for complete activity loss proportional to the square root of the enzyme concentration. Perturbances of the protein structure (by pH, ionic strength, and specific salts), which have no effect on the tetrameric state of the molecule, result in an alteration of the cooperativity of NAD+ binding, the reactivity of the active-site sulfhydryl group, and the catalytic activity of the enzyme. Covalent modification of two of the four active-site sulfhydryl groups has profound effects on the enzymic activity which are mediated by changes in the subunit interactions. Sedimentation analysis and hybridization studies indicate that the interaction between subunits remains strong after covalent modification. Under normal physiological and equilibrium dialysis conditions the protein is a tetramer. Equilibrium dialysis studies of NAD+ binding to the enzyme at pH 8.5 and 25 degrees reveal a mixed cooperativity pattern. A model consistent with these observations and the observed half-of-the-sites reactivity is that of ligand induced sequential conformational changes which are transferred across strongly interacting subunit domains. Methods for distinguishing negatively cooperative binding patterns from mixtures of denatured enzyme and multiple species are discussed.

Sự bất hoạt tự phát của enzyme glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase đã được tìm thấy phù hợp với mô hình hai trạng thái đơn giản ở pH 8,5 và 25 độ. Bước đầu tiên là sự phân ly tương đối nhanh của tetramer với các dime với trạng thái cân bằng chủ yếu thuận lợi cho tetramer. Khi không có NAD+, dimer bất hoạt không thể phục hồi. Apoenzyme khá ổn định với chu kỳ bán rã để mất hoạt động hoàn toàn tỷ lệ thuận với căn bậc hai nồng độ enzyme. Sự nhiễu loạn của cấu trúc protein (theo pH, cường độ ion và muối đặc hiệu) không ảnh hưởng đến trạng thái tetrameric của phân tử dẫn đến sự thay đổi tính hợp tác của liên kết NAD+, phản ứng của nhóm sulfhydryl tại chỗ hoạt động và hoạt động xúc tác của enzyme. Sự điều chỉnh cộng hóa trị của hai trong số bốn nhóm sulfhydryl tại chỗ hoạt động có ảnh hưởng sâu sắc đến hoạt động của enzyme được trung gian bởi những thay đổi trong tương tác của các tiểu đơn vị. Phân tích lắng và nghiên cứu lai tạo chỉ ra rằng sự tương tác giữa các tiểu đơn vị vẫn còn mạnh sau khi điều chỉnh cộng hóa trị. Trong điều kiện lọc máu sinh lý và cân bằng bình thường, protein là một tetramer. Các nghiên cứu lọc máu cân bằng đối với liên kết NAD+ với enzyme ở pH 8,5 và 25 độ cho thấy một mô hình hợp tác hỗn hợp. Một mô hình phù hợp với những quan sát này và phản ứng nửa nguyên tử quan sát được là sự thay đổi liên tiếp về hình dạng do phối tử gây ra được chuyển qua các tiểu đơn vị tương tác mạnh. Các phương pháp phân biệt mô hình liên kết hợp tác âm với hỗn hợp các enzyme bị biến tính và nhiều loài được thảo luận.

The kinetics of the pH-induced dissociation of the 3 X 10(6) mol wt hemoglobin from Lumbricus terrestris (the earthworm) have been studied in a light-scattering stopped-flow apparatus. The ligand dependent dissociation data were fit well by a simple sequential model. The data for CO and oxyhemoglobin are consistent with Hb12 leads to 2Hb6 leads to 12Hb. Methemoglobin at pH 7 appears to be hexameric and the dissociation is consistent with the model: Hb6 leads to 6Hb. In a sequential decay scheme for which light-scattering changes are monitored, the relative amounts of rapid and slow phase are determined by the rate constants as well as the molecular weights of intermediate species. Assignment of the hexameric intermediate is supported by an investigation of the sensitivity of the theoretical kinetic curves to the molecular weights of the intermediates. This assignment is further supported by the following: (1) the same model will fit the data for oxy- and CO-hemoglobin at all three temperatures (a 24-29-fold variation in rate constants), (2) evidence from electron microscopy shows hexameric forms, and (3) methemoglobin is apparently stable as a hexamer at pH 7. When CO replaces O2 as the ligand, the dissociation rate increases by a factor of four. The met is about 20 times faster than the initial oxyhemoglobin dissociation rate, but perhaps more relevant for comparing dissociation of the hexamer, the met rate was respectively 100 times and 500 times faster than that for the assumed hexameric forms of CO- and oxy-hemoglobin. The activation energies for the dodecamer to hexamer dissociation and for the dissociation of the hexamer to smaller forms were about 30 kcal/mol for oxy-, CO-, and methemoglobin.

Động lực học của sự phân ly do pH của 3 X 10 (6) mol hemoglobin từ giun đất đã được nghiên cứu trong một thiết bị ngừng dòng chảy tán xạ ánh sáng. Các số liệu phân ly phụ thuộc phối tử phù hợp với một mô hình tuần tự đơn giản. Số liệu cho CO và oxyhemoglobin phù hợp với Hb12 dẫn đến 2Hb6 dẫn đến 12Hb. Methemoglobin ở pH 7 có vẻ là dạng hexameric và sự phân ly phù hợp với mô hình: Hb6 dẫn đến 6Hb. Trong một sơ đồ phân rã liên tiếp theo dõi sự thay đổi của ánh sáng, các pha tương đối nhanh và chậm được xác định bởi các hằng số tốc độ cũng như trọng lượng phân tử của các loài trung gian. Việc gán cho các chất trung gian hexameric được hỗ trợ bởi một nghiên cứu về độ nhạy của các đường cong động học lý thuyết đối với trọng lượng phân tử của các chất trung gian. Việc gán này được hỗ trợ thêm bởi: ( 1) cùng một mô hình sẽ phù hợp với số liệu cho oxy-và CO-hemoglobin ở cả ba nhiệt độ (biến đổi 24-29 lần hằng số tốc độ); (2) bằng chứng từ kính hiển vi điện tử cho thấy các dạng nhanh và (3) methemoglobin có vẻ ổn định như một hexamer ở pH 7. Khi CO thay thế O2 làm phối tử, tốc độ phân ly tăng gấp 4 lần. Tốc độ met nhanh hơn khoảng 20 lần so với tốc độ phân ly oxyhemoglobin ban đầu, nhưng có lẽ phù hợp hơn khi so sánh sự phân ly của hexamer, tốc độ met lần lượt nhanh hơn 100 lần và 500 lần so với các dạng hexameric giả định của CO-và oxy-hemoglobin. Năng lượng hoạt hóa cho dodecamer để phân ly hexamer và cho sự phân ly hexamer thành dạng nhỏ hơn khoảng 30 kcal/mol đối với oxy-, CO-và methemoglobin.

1. A new procedure is described for selecting nitrogenase-derepressed mutants based on the method of Brenchley et al. (Brenchley, J.E., Prival, M.J. and Magasanik, B. (1973) J. Biol. Chem. 248, 6122-6128) for isolating histidase-constitutive mutants of a non-N2-fixing bacterium. 2. Nitrogenase levels of the new mutants in the presence of NH4+ were as high as 100% of the nitrogenase activity detected in the absence of NH4+. 3. Biochemical characterization of these nitrogen fixation (nif) derepressed mutants reveals that they fall into three classes. Three mutants (strains SK-24, 28 and 29), requiring glutamate for growth, synthesize nitrogenase and glutamine synthetase constitutively (in the presence of NH4+). A second class of mutants (strains SK-27 and 37) requiring glutamine for growth produces derepressed levels of nitrogenase activity and synthesized catalytically inactive glutamine synthetase protein, as determined immunologically. A third class of glutamine-requiring, nitrogenase-derepressed mutants (strain SK-25 and 26) synthesizes neither a catalytically active glutamine synthetase enzyme nor an immunologically cross-reactive glutamine synthetase protein. 4. F-prime complementation analysis reveals that the mutant strains SK-25, 26, 27, 37 map in a segment of the Klebsiella chromosome corresponding to the region coding for glutamine synthetase. Since the mutant strains SK-27 and SK-37 produce inactive glutamine synthetase protein, it is concluded that these mutations map within the glutamine synthetase structural gene.

1. Nghiên cứu này thực hiện một quy trình chọn lọc đột biến kháng nguyên nitơase dựa trên phương pháp chọn lọc của Brenchley và cộng sự (Brenchley, J.E., Priv, M.J.và Magasanik, B. (1973) J. Biol. Chem. 248, 6122-6128) để phân lập các đột biến cấu thành histidase của vi khuẩn không cố định N2.

1. The superoxide anion radical (O2-) reacts with ferricytochrome c to form ferrocytochrome c. No intermediate complexes are observable. No reaction could be detected between O2- and ferrocytochrome c. 2. At 20 degrees C the rate constant for the reaction at pH 4.7 to 6.7 is 1.4-10(6) M-1. S -1 and as the pH increases above 6.7 the rate constant steadily decreases. The dependence on pH is the same for tuna heart and horse heart cytochrome c. No reaction could be demonstrated between O2- and the form of cytochrome c which exists above pH approximately 9.2. The dependence of the rate constant on pH can be explained if cytochrome c has pKs of 7.45 and 9.2, and O2- reacts with the form present below pH 7.45 with k = 1.4-10(6) M-1 - S-1, the form above pH 7.45 with k = 3.0- 10(5) M-1 - S-1, and the form present above pH 9.2 with k = 0. 3. The reaction has an activation energy of 20 kJ mol-1 and an enthalpy of activation at 25 degrees C of 18 kJ mol-1 both above and below pH 7.45. It is suggested that O2- may reduce cytochrome c through a track composed of aromatic amino acids, and that little protein rearrangement is required for the formation of the activated complex. 4. No reduction of ferricytochrome c by HO2 radicals could be demonstrated at pH 1.2-6.2 but at pH 5.3, HO2 radicals oxidize ferrocytochrome c with a rate constant of about 5-10(5)-5-10(6) M-1 - S-1.

1. Gốc anion superoxit (O2-) phản ứng với ferricytochrome c tạo thành ferrocytochrome c. Không quan sát thấy bất kỳ phức chất trung gian nào. Không phát hiện được phản ứng giữa O2-và ferrocytochrome c. 2. Ở 20 độ C, hằng số tốc độ phản ứng ở pH 4,7 đến 6,7 là 1,4-10 (6) M-1. S-1 và khi pH tăng trên 6,7 hằng số tốc độ giảm dần. Sự phụ thuộc vào pH cũng tương tự ở tim cá ngừ và tim ngựa đối với cytochrome c. Không thể chứng minh được phản ứng giữa O2-và dạng cytochrome c, tồn tại ở pH xấp xỉ 9,2. Sự phụ thuộc của hằng số tốc độ vào pH có thể được giải thích nếu cytochrome c có pK 7,45 và 9,2, và O2-phản ứng ở dạng dưới pH 7,45 với k = 1,4-10 (6) M-1 - S-1, dạng trên pH 7,45 với k = 3,0-10 (5) M-1 - S-1, và dạng trên pH 9,2 với k = 0,3. Phản ứng có năng lượng hoạt hoá 20 kJ mol-1 và entanpy hoạt hoá ở 25 độ C là 18 kJ mol-1 ở cả pH trên và dưới pH 7,45. Có ý kiến cho rằng O2-có thể khử cytochrome c thông qua một đường bao gồm các amino acid thơm, và cần ít sự sắp xếp lại protein để tạo thành phức chất hoạt hoá. 4. Không thể chứng minh sự khử của ferricytochrome c bởi các gốc HO2 ở pH 1,2-6,2 nhưng ở pH 5,3, các gốc HO2 oxy hoá ferrocytochrome c với hằng số tốc độ khoảng 5-10 (5) - 5-10 (6) M-1 - S-1.

Properties of the phenobarbital induced cytoplasmic aldehyde dehydrogenase (EC 1.2.1.3) have been studied in rat liver. 7-12-Fold higher levels were seen in the cytoplasmic activities after phenobarbital treatment in reactor compared to non-reactor animals with high concentrations of acetaldehyde (18 mM) and propionaldehyde (9 mM). No difference was found with 0.12 mM acetaldehyde, 2 mM glycolaldehyde, 6 mM formaldehyde or 0.5 mM betaine aldehyde. The reactor group also had slightly higher activity in the mitochondrial fraction with the high acetaldehyde and propionaldehyde concentrations. In the microsomal fraction, the activities showed no differences at any substrate concentration. An induced aldehyde dehydrogenase was purified 70-fold by chromatographic techniques. It had different molecular and enzymic properties than the main high-Km enzyme normally present in rat liver cytoplasm. The pI of the induced enzyme was about 7.0 as measured by isoelectric focusing. It was active with several aliphatic and aromatic aldehydes but not with formaldehyde, glycolaldehyde or D-glyceraldehyde. The Km-values for propionaldehyde and acetaldehyde were in the millimolar range. Millimolar concentrations of aromatic aldehydes caused a strong substrate inhibition. The enzyme was inhibited by submicromolar concentrations of disulfiram. Estrone, deoxycorticosterone, progesterone and diethylstilbestrol also affected the enzyme activity.

Các đặc tính của aldehyde dehydrogenase (EC 1.2.1.3) gây ức chế tế bào chất đã được nghiên cứu trên gan chuột. Hoạt tính tế bào chất của enzyme phenobarbital sau khi được xử lý phenobarbital trong lò phản ứng có nồng độ acetaldehyde (18 mM) và propionaldehyde (9 mM) cao hơn 7-12 lần so với động vật không lò phản ứng. Không có sự khác biệt với 0,12 mM acetaldehyde, 2 mM glycolaldehyde, 6 mM formaldehyde và 0,5 mM betaine aldehyde. Hoạt tính của enzyme gây ức chế tế bào chất ở phân đoạn ty thể cao hơn một chút so với phân đoạn vi thể. Hoạt tính của enzyme gây ức chế tế bào chất không có sự khác biệt ở bất kỳ nồng độ nào. Một aldehyde dehydrogenase gây ức chế tế bào chất được tinh sạch 70 lần bằng kỹ thuật sắc ký. Enzyme có các đặc tính phân tử và enzyme khác nhau so với enzyme chính có nồng độ cao Km thường có trong tế bào chất của gan chuột. PI của enzyme gây ức chế tế bào chất là 7,0 được đo bằng phương pháp tập trung đẳng điện. Enzyme hoạt động với một số aldehyd dạng aliphatic và aromatic nhưng không hoạt động với formaldehyde, glycolaldehyde hoặc D-glyceraldehyde. Giá trị Km của propionaldehyde và acetaldehyde nằm trong khoảng milimol. Nồng độ aldehyd dạng millimol gây ức chế cơ chất mạnh. Enzyme bị ức chế bởi nồng độ disulfiram dưới nồng độ micromol. Estrone, deoxycorticosterone, progesterone và diethylstilbestrol cũng ảnh hưởng đến hoạt tính của enzyme.

Enzymes capable of hydrolyzing esters of thiocholine have been assayed in extracts of Solanum melongena L. (eggplant) and Zea Mays L. (corn). The enzymes from both species are inhibited by the anti-cholinesterases neostigmine, physostigmine, and 284c51 and by AMO-1618, a plant growth retardant and they both have pH optima near pH 8.0. The enzyme from eggplant is maximally active at a substrate concentration of 0.15 mM acetylthiocholine and is inhibited at higher substrate concentrations. On the basis of this last property, the magnitude of inhibition by the various inhibitors, and the substrate specificity, we conclude that the enzyme from eggplant, but not that from corn, is a cholinesterase.

Enzyme có khả năng thủy phân este thiocholine đã được khảo sát trong dịch chiết từ cây cà tím (Solanum melongena L.) và cây ngô (Zea Mays L.).

A strain of Bacillus sp (Bacillus R-4) produces a protease and a carbohydrolase both of which have the ability to lyse Rhizopus cell walls. Of the enzymes, the carbohydrolase has been purified to an ultracentrifugally and electrophoretically homogeneous state, and identified as a chitosanase. The enzyme was active on glycol chitosan as well as chitosan. Molecular weight of the purified enzyme was estimated as 31 000 and isoelectric point as pH 8.30. The enzyme was most active at pH 5.6 and at 40 degrees C with either Rhizopus cell wall or glycol chitosan as substrate, and was stable over a range of pH 4.5 to 7.5 at 40 degrees C for 3 h. The activity was lost by sulfhydryl reagents and restored by either reduced glutathione of L-cysteine. An abrupt decrease in viscosity of the reaction mixture suggested an endowise cleavage of chitosan by this enzyme.

Một chủng Bacillus sp (Bacillus R-4) tạo ra một protease và một carbohydrolase, cả hai đều có khả năng ly giải thành tế bào Rhizopus. Trong số các enzyme, carbohydrolase đã được tinh sạch đến trạng thái đồng nhất về mặt điện và siêu li tâm và được xác định là chitosanase. Enzym hoạt động trên chitosan glycol cũng như chitosan. Trọng lượng phân tử của enzyme tinh sạch được ước tính là 31 000 và điểm đẳng điện là pH 8,30. Enzym hoạt động mạnh nhất ở pH 5,6 và 40 độ C với thành tế bào Rhizopus hoặc chitosan glycol làm cơ chất và ổn định trong khoảng pH 4,5 đến 7,5 ở 40 độ C trong 3 giờ. Hoạt tính bị mất bởi thuốc thử sulfhydryl và được phục hồi bằng cách giảm glutathione của L-cysteine. Sự giảm đột ngột về độ nhớt của hỗn hợp phản ứng cho thấy enzyme này đã tạo ra sự phân cắt chitosan.

The characterization and localization of a Ca(2+)-ATPase (ATP phosphohydrolase, EC 3.6.1.3) in the tooth germ of the porcine fetus are reported. This enzyme, a microsome fraction, is preferentially activated by Ca(2+). In the presence of 0.5 mM ATP, maximal enzyme activity is obtained at 0.5--1.0 mM CaCl2. The maximal rate of ATP hydrolysis is approx. 20 mumol per h per mg of protein as the enzyme preparation is used here. At optimal Ca(2+) concentration, the Mg(2+) has an inhibitory effect. The enzyme does not require Na+ or/and K+ for activation by Ca(2+). Other nucleotide triphosphates may serve as the substrate, but V for ATP is the highest. The Km for ATP is 8.85 - 10(-5) M. The optimal pH for Ca(2+) activation of the enzyme lies around 9.2. Well known inhibitors of (Na+ + K+)-ATPase, mitochondria ATPase and Ca(2+)-ATPase in the erthrocyte do not inhibit the enzyme. In the subcellular order the enzyme may be assumed to be localized in the smooth endoplasmic reticulum fraction containing cell and Golgi body membrane fragments and in the tissue order in the enamel organ containing an ameloblast layer, stratum intermedium and stellate reticulum.

Đặc điểm và sự nội địa hóa của Ca (2+) - ATPase (ATP phosphohydrolase, EC 3.6.1.3) trong mầm răng của bào thai lợn được báo cáo. Enzyme này, một phần vi mô, được ưu tiên hoạt hóa bởi Ca (2+).

1. Based on incorporation of radioactively labeled N-ethylmaleimide, the readily reactive thiol groups of isolated myosin (EC 3.6.1.3) from fast, slow and cardiac muscles could be classified into 3 types. All 3 myosins contain 2 thiol-1, 2 thiol-2 and a variable number of thiol-3 groups per molecule. Both thiol-1 and thiol-2 groups which are essential for functioning of the K+-stimulated ATPase, are located in the heavy chains in all 3 myosin types. 2. The variation in the incorporation pattern of N-ethylmaleimide over the 3 thiol group classes under steady-state conditions of Mg(2+) - ATP hydrolysis allowed different conformations of some reaction intermediates to be characterized. In all 3 types of myosin the hydrolytic cycle of Mg(2+) - ATP was found to be controlled by the same step at 25 degrees C. In all three cases, this rate-limiting step is changed in the same way by lowereing temperature. 3. Using the chemically determined molecular weights for myosin light chains, their stoichiometry was found on the basis of sodium dodecyl sulfate electrophoresis to be 1.2 : 2.1 : 0.8 for light chain-1: light chain-2:light chain-3 per molecule of fast myosin, 2.0 : 1.9 for light chain-1:light chain-2 per molecule of slow myosin and 1.9 : 1.9 for light chain-1:light chain-2 per molecule of cardiac myosin. This qualitative difference in light subunit composition between the fast and the two types of slow myosin is not reflected in the small variations of the characteristics exhibited by the isolated myosins, but rather seems to be connected with their respective myofibrillar ATPase activities.

1. Trên cơ sở kết hợp với N-ethylmaleimide được dán nhãn phóng xạ, nhóm thiol dễ phản ứng của myosin phân lập (EC 3.6.1.3) từ cơ nhanh, cơ chậm và cơ tim có thể được phân thành 3 loại. Cả 3 loại myosin đều chứa 2 thiol-1,2 thiol-2 và số lượng thay đổi của các nhóm thiol-3 trên mỗi phân tử. Cả hai nhóm thiol-1 và thiol-2 đều cần thiết cho hoạt động của ATPase kích thích K+, nằm trong các chuỗi nặng ở cả 3 loại myosin. 2. Sự thay đổi mô hình kết hợp của N-ethylmaleimide so với 3 nhóm thiol trong điều kiện thủy phân Mg (2+) - ATP ở trạng thái ổn định cho phép đặc trưng sự phù hợp khác nhau của một số chất trung gian phản ứng. Trong cả 3 loại myosin, chu trình thủy phân của Mg (2+) - ATP được kiểm soát bởi cùng một bước ở 25 độ C. Trong cả 3 trường hợp, bước giới hạn tỷ lệ này được thay đổi theo cùng một cách do nhiệt độ thấp. 3. Sử dụng khối lượng phân tử đã xác định đối với chuỗi ánh sáng myosin, cân bằng hàm lượng của chúng được tìm thấy trên cơ sở điện di natri dodecyl sulfat là 1,2: 2,1: 0,8 đối với chuỗi ánh sáng-1: chuỗi ánh sáng-2: chuỗi ánh sáng-3 trên mỗi phân tử myosin nhanh và 1,9: 1,9 đối với chuỗi ánh sáng-1: chuỗi ánh sáng-2 trên mỗi phân tử myosin tim. Sự khác biệt về thành phần tiểu đơn vị ánh sáng giữa nhóm nhanh và hai loại myosin chậm không phản ánh ở sự thay đổi nhỏ về các đặc điểm của các myosin phân lập mà có vẻ liên quan đến hoạt động của myofibrillar ATPase tương ứng.

1. The pH dependencies of the apparent Michaelis constant for oxidized glutathione and the apparent turnover number of yeast glutathione reductase (EC 1.6.4.2) have been determined at a fixed concentration of 0.1 mM NADPH in the range pH 4.5--8.0. Between pH 5.5 and 7.6, both of these parameters are relatively constant. The principal effect of low pH on the kinetics of the enzyme-catalyzed reaction is the observation of a pH-dependent substrate inhibition by oxidized glutathione at pH less than or equal 7, which is shown to correlate with the binding of oxidized glutathione to the oxidized form of the enzyme. 2. The catalytic activity of yeast glutathione reductase at pH 5.5 is affected by the sodium acetate buffer concentration. The stability of the oxidized and reduced forms of the enzyme at pH 5.5 and 25 degrees C in the absence of bovine serum albumin was studied as a function of sodium acetate concentration. The results show that activation of the catalytic activity of the enzyme at low sodium acetate concentration correlates with an effect of sodium acetate on a reduced form of the enzyme. In contrast, inhibition of the catalytic activity of the enzyme at high sodium acetate concentration correlates with an effect of sodium acetate on the oxidized form of the enzyme.

1. Độ pH phụ thuộc của hằng số Michaelis biểu kiến đối với glutathion oxy hóa và số vòng quay biểu kiến của men glutathion reductase (EC 1.6.4.2) đã được xác định ở nồng độ cố định 0,1 mM NADPH trong khoảng pH 4,5-8,0. Trong khoảng pH 5,5 và 7,6, cả hai thông số này đều tương đối ổn định. Ảnh hưởng chính của pH thấp đến động học của phản ứng xúc tác enzyme là quan sát sự ức chế chất nền phụ thuộc pH của glutathion oxy hóa ở pH nhỏ hơn hoặc bằng 7, cho thấy có tương quan với sự gắn kết của glutathion oxy hóa với dạng oxy hóa của enzyme. 2. Hoạt tính xúc tác của men glutathion reductase bị ảnh hưởng bởi nồng độ đệm natri axetat. Sự ổn định của dạng oxy hóa và dạng khử của enzyme ở pH 5,5 và 25 độ C khi không có albumin huyết thanh bò được nghiên cứu như là một chức năng của nồng độ natri axetat. Kết quả cho thấy, hoạt tính xúc tác của enzyme ở nồng độ natri axetat thấp tương quan với tác dụng của natri axetat lên dạng oxy hóa của enzyme. Ngược lại, hoạt tính xúc tác của enzyme ở nồng độ natri axetat cao tương quan với tác dụng của natri axetat lên dạng oxy hóa của enzyme.

The phosphorylated form of liver glycogen phosphorylase (alpha-1,4-glucan : orthophosphate alpha-glucosyl-transferase, EC 2.4.1.1) (phosphorylase a) is active and easily measured while the dephosphorylated form (phosphorylase b), in contrast to the muscle enzyme, has been reported to be essentially inactive even in the presence of AMP. We have purified both forms of phosphorylase from rat liver and studied the characteristics of each. Phosphorylase b activity can be measured with our assay conditions. The phosphorylase b we obtained was stimulated by high concentrations of sulfate, and was a substrate for muscle phosphorylase kinase whereas phosphorylase a was inhibited by sulfate, and was a substrate for liver phosphorylase phosphatase. Substrate binding to phosphorylase b was poor (KM glycogen = 2.5 mM, glucose-1-P = 250 mM) compared to phosphorylase a (KM glycogen = 1.8 mM, KM glucose-1-P = 0.7 mM). Liver phosphorylase b was active in the absence of AMP. However, AMP lowered the KM for glucose-1-P to 80 mM for purified phosphorylase b and to 60 mM for the enzyme in crude extract (Ka = 0.5 mM). Using appropriate substrate, buffer and AMP concentrations, assay conditions have been developed which allow determination of phosphorylase a and 90% of the phosphorylase b activity in liver extracts. Interconversion of the two forms can be demonstrated in vivo (under acute stimulation) and in vitro with little change in total activity. A decrease in total phosphorylase activity has been observed after prolonged starvation and in diabetes.

Phosphatase gan (phosphorylase a) dạng phosphoryl hóa (alpha-1,4-glucan: orthophosphate alpha-glucosyl-transferase, EC 2.4.1.1) hoạt động và đo được dễ dàng, còn dạng khử phosphatlase (phosphorylase b) thì ngược lại, hoạt tính của enzyme cơ, được ghi nhận là không hoạt động ngay cả khi có mặt enzyme AMP. Chúng tôi đã tinh sạch cả hai dạng phosphorylase từ gan chuột và nghiên cứu đặc điểm của từng dạng. Hoạt tính của phosphorylase có thể đo được bằng điều kiện thí nghiệm. Phosporylase b thu được có nồng độ sulfate cao, là chất nền cho enzyme cơ phosphorylase kinase, còn phosphorylase a thì bị sulfate ức chế, là chất nền cho enzyme phosphorylase phosphatase. Chất nền gắn với phosphorylase b kém (KM glycogen = 2,5 mM, glucose-1-P = 250 mM) so với phosphorylase a (KM glycogen = 1,8 mM, KM glucose-1-P = 0,7 mM ). Trong điều kiện không có AMP, phosphorylase b hoạt động trong gan. Tuy nhiên, AMP đã hạ nồng độ KM của glucose-1-P xuống còn 80 mM và của phosphorylase b tinh sạch còn 60 mM (Ka = 0,5 mM ). Sử dụng chất nền, chất đệm thích hợp và nồng độ AMP, điều kiện thí nghiệm đã cho phép xác định hoạt tính phosphorylase a và 90% của phosphorylase b trong dịch chiết gan. Sự chuyển hóa giữa hai dạng có thể được chứng minh trên thực nghiệm (trong điều kiện kích thích cấp tính) và in vitro với ít thay đổi về tổng hoạt tính. Sau khi bị đói kéo dài và bệnh đái tháo đường, hoạt tính phosphorylase giảm.

Two rabbit erythrocyte casein kinases, GTP:casein kinase I and GTP:casein kinase II, have been purified 29 000- and 47 000-fold, respectively. Studies employing sucrose density gradient centrifugation indicate that kinase I has a molecular weight of about 9.5 - 10(5) (25 S) and kinase II about 1.4 - 10(6) (32 S). These enzymes can utilize either ATP or GTP as the phosphoryl donor. Among various protein substrates examined, these kinases catalyze the phosphorylation of casein greater than 50% dephosphorylated phosvitin congruent to 50% dephosphorylated casein greater than phosvitin. Histones, protamine and bovine serum albumin are poor phosphoryl acceptors. Kinetic data indicate that both enzymes are inhibited by high casein substrate concentrations which may be partially relieved by NaCl. Both phosphotransferases require Mg(2+) for activity and are optimally active at pH 9.0. The enzymes have apparent Km values of 2.5 - 10(-5) M for GTP, 2 - 10(-5) M for ATP, and 0.4--0.6 mg/ml for casein. The incorporation of the terminal phosphate of GTP into casein as catalyzed by these enzymes is inhibited to varying degrees by ATP, ITP, ADP, and GDP but not by UTP, CTP, GMP, adenosine 3':5'-cyclic monophosphate, and guanosine 3':5'-cyclic monophosphate. In addition, NaF and 2,3-diphosphoglyceric acid are also found to inhibit the activity of both kinases. The effect of 2,3-diphosphoglycerate is interesting and suggests that this metabolite may regulate the activity of the casein kinases in the red blood cells.

Hai enzyme erythrocyte casein kinase (GTP: casein kinase I và GTP: casein kinase II) đã được tinh sạch lần lượt 29 000 và 47 000 lần. Các nghiên cứu sử dụng ly tâm gradient mật độ sucrose cho thấy kinase I có trọng lượng phân tử khoảng 9,5-10 (5) (25 S) và kinase II khoảng 1,4-10 (6) (32 S). Các enzyme này có thể sử dụng ATP hoặc GTP như chất cho phosphoryl. Trong số các chất nền protein khác nhau được khảo sát, các kinase này xúc tác quá trình phosphoryl hóa casein lớn hơn 50% khử phosvitin và lớn hơn 50% khử phosphoryl hóa phosvitin. Histone, protamine và albumin huyết thanh bò là các chất nhận phosphoryl kém. Các dữ liệu động học cho thấy cả hai enzyme đều bị ức chế bởi nồng độ casein cao và có thể được giảm bớt một phần bởi NaCl. Cả hai phosphotransferase đều đòi hỏi Mg (2+) cho hoạt động và hoạt động tối ưu ở pH 9,0. Sự kết hợp của phosphate cuối của GTP vào casein do các enzyme này xúc tác bị ức chế ở các mức độ khác nhau bởi ATP, ITP, ADP và GDP nhưng không phải bởi UTP, CTP, GMP, adenosine 3 ': 5' - monophosphate và guanosine 3 ': 5' - monophosphate. Ngoài ra, NaF và axit 2,3-diphosphoglyceric cũng được tìm thấy có tác dụng ức chế hoạt động của cả hai kinase. Tác dụng của 2,3-diphosphoglycerate rất thú vị và cho thấy chất chuyển hóa này có thể điều chỉnh hoạt động của casein kinase trong hồng cầu.

A technique has been developed to separate and measure kallikrein in a heterogeneous population of rat renal cortical cells in suspension. After rat kidneys were perfused in situ in anaesthetized rats, viable, counted cortical cell suspensions were obtained. Cells were suspended in a sucrose/Tris buffer containing 0.5% deoxycholate, homogenized, centrifuged, dialyzed, and gel filtered on Sephadex G-25. Column chromatography on DEAE-cellulose resulted in a single peak of esterase activity between 0.20 to 0.25 M NaCl/sodium phosphate buffer. Subsequent elution yielded an alkaline esterase which was identical to kallikrein isolated from rat urine, insofar as pH optimum, effects of inhibitors, bioassay activity and immunological properties were concerned. Calculated yields were about 70% of the total esterase activity present in the parent cell homogenates. Recoveries of a purified rat urinary kallikrein added to the cell homogenates, the DEAE-cellulose columns, or the eluates from the columns ranged from 83-108% (mean 96%). Using this technique, it was found that the amount of kallikrein activity present in non-incubated renal cortical cells ranged from 0.6-10(-2) to 4.6 - 10(-2) alpha-N-tosyl-L-arginine methyl ester (Tos-Arg-OMe) esterase units per 10(8) cells. However, cells incubated in a nutrient medium at 37 degrees C for 3-8 h contained no measurable kallikrein activity, whereas the surrounding medium had kallikrein activity which could be significantly increased by aldosterone and decreased by spironolactone.

Đã xây dựng được kỹ thuật tách và đo hoạt độ kallikrein trong huyền phù vỏ thận ở chuột cống trắng. Sau khi truyền tại chỗ thận ở chuột cống trắng trên mô hình gây mê, thu được thể tích trung bình, tính được hoạt độ của huyền phù tế bào vỏ. Tế bào được thả lơ lửng trong dung dịch sucrose/Tris chứa 0,5% deoxycholate, đồng nhất hóa, ly tâm, quay số và gel lọc trên Sephadex G-25. Sắc ký cột DEAE-cellulose cho kết quả hoạt độ đỉnh của esterase trong khoảng 0,20 đến 0,25 M NaCl/natri phosphate. Sau đó, các kết quả phân tích cho thấy có hoạt độ esterase kiềm giống với kallikrein phân lập từ tế bào mẹ. Hoạt độ kallikrein nước tiểu tinh khiết được bổ sung vào các tế bào đồng nhất, các cột DEAE-cellulose hoặc các eluate từ các cột có hoạt độ từ 83-108% ( trung bình 96% ). Sử dụng kỹ thuật này, các tế bào nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng 37 độ C trong 3-8 giờ không có hoạt độ kallikrein đo được, trong khi môi trường xung quanh có hoạt độ kallikrein tăng lên đáng kể nhờ aldosterone và giảm đi nhờ spironolactone.

1. Holo-superoxide dismutase from bovine erythrocytes has been shown to undergo a reversible structural modification in the pH 3-5 range. 2. The spectral alterations observed on changing from neutrality to pH 2 were: a slight attenuation of the 680 nm absorbance; the loss of the 450 nm shoulder, apparent in the optical spectrum of the native protein; and a new band appeared at 330 nm. The circular dichroism at 600 nm was essentially lost while a weak negative band appeared at approx. 380 nm and a positive band at 310 nm. 3. The EPR spectrum was also modified on changing from the native to the low pH form: A parallel increased from approximately 130 to approximately 150 G, g parallel remained unchanged at approximately 2.27, and gm decreased from approximately 2.09 to approximately 2.08. The apparent linewidth remained essentially constant. 4. High resolution (220 MHz) PMR spectra of holo- and apoproteins revealed that the metals influence the three-dimensional structure of the protein. 5. PMR studies indicated that at pH 3 the apoprotein existed almost entirely in a random coil form and that it assumed a compact well-ordered structure on returning to neutral pH. The holoprotein maintained a compact, apparently dimeric, structure even at pH 3.

1. Holo-superoxide dismutase từ hồng cầu bò đã được chứng minh là có thể đảo ngược được trong phạm vi pH 3-5. 2. Các thay đổi phổ quan sát được khi thay đổi từ pH trung tính sang pH 2 là: độ hấp thụ 680 nm giảm nhẹ; vai 450 nm mất đi, rõ ràng trong phổ quang học của protein tự nhiên; và một dải mới xuất hiện ở 330 nm. Sự hình thành dicroism vòng ở 600 nm về cơ bản bị mất đi trong khi một dải âm yếu xuất hiện ở khoảng 380 nm và một dải dương ở 310 nm. 3. Phổ EPR cũng được sửa đổi khi thay đổi từ dạng tự nhiên sang dạng pH thấp: một dải song song tăng từ khoảng 130 lên khoảng 150 G, g song song không thay đổi ở khoảng 2,27 và gm giảm từ khoảng 2,09 xuống khoảng 2,08. Độ rộng đường truyền rõ ràng về cơ bản vẫn không đổi. 4. Phổ PMR có độ phân giải cao (220 MHz) của các protein nổi và protein ngầm cho thấy các kim loại có ảnh hưởng đến cấu trúc ba chiều của protein. 5. Các nghiên cứu PMR chỉ ra rằng ở pH 3, apoprotein tồn tại gần như hoàn toàn ở dạng cuộn ngẫu nhiên và nó giả định cấu trúc nhỏ gọn, có vẻ mờ nhạt khi trở về pH trung tính. Các holoprotein duy trì cấu trúc nhỏ gọn, có vẻ mờ nhạt ngay cả ở pH 3.

The erythrocruorin of the leech Haemopis grandis possessed an S20,w of 57 S at neutral pH, its isoelectric point at pH 6.0 and exhibited a slightly sigmoid oxygenation curve with n approximately 2.1 and P50 = 11.2 mm at pH 7.4. A minimum molecular weight of 24000 +/- 1500 per heme group was determined from the iron and heme contents, 0.22 +/- 0.01 and 2.73 +/- 0.14 weight %, respectively. The subunit composition of the erythrocruorin was investigated using gel filtration in sodium dodecyl sulfate and polyacrylamide gel electrophoresis in sodium dodecyl sulfate at neutral pH. Haemopis erythrocruorin dissociated in the presence of sodium dodecyl sulfate into four subunits (1 through 4) possessing molecular weights of about 27000, 23000, 21000 and 13500, respectively. When the erythrocruorin was reduced with mercaptoethanol prior to sodium dodecyl sulfate electrophoresis, three subunits were observed, possessing molecular weights of about 13000 (I), 16500 (II) and 28000 (III). Sodium dodecyl sulfate electrophoresis of the isolated subunits 1 through 4 showed that subunit I was provided by subunits 1 and 4, subunit II was provided by subunit 1 and subunit III was provided by both subunit 2 and subunit 3. Haemopis erythrocruorin thus appeared to consist of at least five different polypeptide chains. It is likely that not all of the constituent polypeptide chains were associated each with a heme group. The shape of the Haemopis erythrocruorin observed by electron microscopy appeared to be consistent with the two-tiered hexagonal array characteristic of annelid erythrocruorins and chlorocruorins.

erythrocruorin của loài đỉa Haemopis grandis có S20,w là 57 S ở pH trung tính, điểm đẳng điện của nó ở pH 6.0 và biểu hiện đường cong oxy hóa hơi xích ma với n khoảng 2.1 và P50 = 11.2 mm ở pH 7.4. Trọng lượng phân tử tối thiểu 24000 +/- 1500 trong mỗi nhóm heme được xác định từ hàm lượng sắt và heme, 0,22 +/- 0,01 và 2,73 +/- 0,14 %. Thành phần tiểu đơn vị erythrocruorin được khảo sát bằng phương pháp lọc gel trong điện di gel natri dodecyl sulfat và polyacrylamide trong natri dodecyl sulfat ở pH trung tính. Hemopis erythrocruorin phân ly khi có mặt natri dodecyl sulfat, có khối lượng phân tử lần lượt khoảng 27000, 23000, 21000 và 13500. Khi phân lập erythrocruorin bằng phương pháp khử bằng mercaptoethanol trước khi phân lập bằng điện di natri dodecyl sulfat, ba tiểu đơn vị đã được khảo sát có khối lượng phân tử khoảng 13000 (I ), 16500 (II) và 28000 (III ). Điện di natri dodecyl sulfat của các tiểu đơn vị phân lập từ 1 đến 4 cho thấy tiểu đơn vị I được phân lập bởi tiểu đơn vị 1 và 4, tiểu đơn vị II được phân lập bởi tiểu đơn vị 1 và tiểu đơn vị III được phân lập bởi cả tiểu đơn vị 2 và tiểu đơn vị 3. Như vậy, hemopis erythrocruorin có ít nhất năm chuỗi polypeptide khác nhau. Có khả năng không phải tất cả các chuỗi polypeptide cấu thành đều liên kết với một nhóm heme. Hình dạng của hemopis erythrocruorin quan sát bằng kính hiển vi điện tử phù hợp với đặc điểm hình lục giác hai lớp của erythrocruorin annelid và chlorocruorin.

The contractile proteins from arterial smooth muscle are highly soluble, and can be extracted at I = 0.05. However, they can be precipitated by a prolonged dialysis at pH 6 to give an actomyosin with a high, although variable, actin:myosin ratio. The sedimentation behavior of this actomyosin at high ionic strength was examined as a function of pH, protein concentration and composition by preparative ultracentrifugation. Comparisons with synthetic skeletal muscle actomyosins of similar composition demonstrated significant differences in the behaviors of these two systems. It was found that much smooth muscle actomyosin is not dissociated by normally relaxing conditions, and that it sediments at a slower rate than F-actin. The solubility of the supernatant protein (a myosin-enriched actomyosin) in 0.2 M K Cl (pH 7) depended on the pH during centrifugation. A lower solubility was associated only with a higher actin concentration in the supernatant, suggesting a dependence on actin repolymerization. Pure myosin was selectively precipitated from the supernatant by polyethylene glycol-6000, but only when the protein was soluble at low ionic strength. The solubility of purified myosin was similar to that of myosin from striated muscles. A relationship between the presence of depolymerized actin and the high solubility of smooth muscle contractile proteins is suggested.

Các protein co bóp từ cơ trơn động mạch có độ hòa tan cao, có thể được chiết xuất ở pH 6. Tuy nhiên, chúng có thể được kết tủa bằng phương pháp thẩm tách kéo dài ở pH 6 để tạo ra một actomyosin có tỷ lệ actin: myosin cao, mặc dù có thể thay đổi. Hoạt tính lắng đọng của actomyosin này ở cường độ ion cao được kiểm tra về pH, nồng độ protein và thành phần bằng phương pháp siêu ly tâm chuẩn bị trước. So sánh với các actomyosin cơ xương tổng hợp có thành phần tương tự đã chứng minh sự khác biệt đáng kể về hoạt động của hai hệ thống này. Người ta thấy rằng phần lớn actomyosin cơ trơn không bị phân ly bởi điều kiện thư giãn thông thường và nó lắng đọng với tốc độ chậm hơn F-actin. Độ hòa tan của protein nổi (actomyosin giàu myosin) trong 0,2 M K Cl (pH 7) phụ thuộc vào pH trong quá trình ly tâm. Độ hòa tan thấp hơn chỉ liên quan đến nồng độ actin cao hơn trong phần nổi, cho thấy sự phụ thuộc vào quá trình tái polyme hóa actin. Myosin tinh khiết được kết tủa có chọn lọc từ phần nổi bằng polyethylene glycol-6000 nhưng chỉ khi protein được hòa tan ở cường độ ion thấp. Độ hòa tan của myosin tinh khiết tương tự như myosin từ cơ vân. Mối liên quan giữa sự hiện diện của actin bị khử polyme và độ hòa tan cao của các protein co bóp cơ trơn được đề xuất.

Hb-Manitoba was discovered in 1970 [1] in a Canadian family of British origin. Recently we observed the same variant in a second family, and found that the oxy-derivative of Hb-Manitoba is slightly unstable at 65 degrees C, dissociates less readily at alkaline pH than does Hb-A, and forms asymmetric hybrids with other hemoglobins which are readily detectable by electrophoresis.

Hb-Manitoba được phát hiện vào năm 1970 trong một gia đình người Canada gốc Anh. Gần đây chúng tôi đã quan sát thấy biến thể tương tự trong một gia đình thứ hai, và thấy rằng dẫn xuất oxy của Hb-Manitoba hơi không ổn định ở 65 độ C, phân ly ít dễ dàng hơn ở pH kiềm so với Hb-A, và tạo thành các giống lai không đối xứng với các hemoglobin khác dễ dàng phát hiện bằng điện di.

1. Fragments of isolated rat liver plasma membrane possess a ribonuclease activity which at pH 7.8 in the presence of 10 mM EDTA can digest polyuridylic acid (poly(U)) and polycytidylic acid (poly(C)) but not polyadenylic acid (poly(A)) and polyguanylic acid (poly(G)). Under these conditions, the membrane preparation does not degrade native or denatured DNA. 2. The products of the reaction with poly(U) (10 mM EDTA present) can be separated on DEAE-Sephadex into oligonucleotides of increasing chain length. Most of the products are di- to hexa-nucleotides which contain terminal 3'-phosphate groups. 3. When EDTA is not present (pH 7.8 or 8.8) the plasma membrane preparation degrades both poly(A) and poly(U). With poly(A) the product is all nucleoside while with poly(U) as substrate most of the product is nucleoside, but also some oligonucleotides are produced. 4. The ribonuclease releases acid soluble products very slowly from high concentrations of poly(U) (mg/ml). 5. Uridine trinucleotide with and without a terminal 3'-phosphate group is degraded by rat liver plasma membrane. The trinucleotide diphosphate is rapidly hydrolyzed to nucleoside while the trinucleotide itself is slowly digested and yields intermediate products, including nucleoside.

1. Mảnh vỡ màng sinh chất gan chuột bị cô lập có hoạt tính ribonuclease ở pH 7,8 với sự có mặt của 10 mM EDTA có thể tiêu hóa được acid polyuridylic (poly (U) ) và acid polycytidylic (poly (C) ) nhưng không thể tiêu hóa được acid polyadenylic (poly (A) ) và acid polyguanylic (poly (G) ). Trong điều kiện này, việc chế tạo màng không làm suy giảm DNA tự nhiên hoặc biến tính. 2.

A preparation of ATPase from the membranes of Micrococcus lysodeikticus, solubilized and more than 95% pure, showed two main bands in analytical polyacrylamide gel electrophoresis. They did not correspond to isoenzymes because one band could be converted into the other by exposure to a mildly alkaline pH value. The conversion was paralleled by changes in molecular weight, circular dichroism and catalytic properties. Denaturation by pH at 25 degrees C was followed by means of circular dichroism, ultracentrifugation and polyacrylamide gel electrophoresis. A large conformational transition took place in the acid range with midpoints at about pH = 3.6 (I = 10(-4) M), 4.3 (I = 0.03 M) and 5.3 (I = 0.1 M). The transition was irreversible. Strong aggregation of the protein occurred in this range of pH. The final product was largely random coil, but even at pH 1.5 dissociation into individual subunits was not complete. However, partial dissociation took place at pH 5 (I = 0.028 M). At this pH value the enzyme was inactive, but 20-30% of the activity could be recovered when the pH was returned to 7.5. In the alkaline region the midpoint of the transition occurred near pH = 11 (I = 0.028 M). The pK of most of the tyrosine residues of the protein was about 10.9. The unfolding was irreversible and the protein was soon converted into peptide species with molecular weights lower than those determined for the subunits by gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulphate. Conventional proteolysis did not account for the transformation.

Kết quả phân tích cho thấy, trong điện di gel polyacrylamide phân tích từ màng của vi khuẩn Micrococcus lysodeikticus, hai dải chính không tương ứng với các isoenzyme do một dải có thể được chuyển đổi thành dải còn lại khi tiếp xúc với pH kiềm nhẹ. Sự chuyển đổi diễn ra song song với sự thay đổi về trọng lượng phân tử, sự phân cực tròn và các đặc tính xúc tác. Sự biến tính theo pH ở 25 độ C được tiếp nối bằng sự phân cực tròn, siêu li tâm và điện di gel polyacrylamide. Sự chuyển đổi hình dạng diễn ra ở pH acid với các điểm trung bình ở pH khoảng 3,6 (I = 10 (- 4) M) và 4,3 (I = 0,03 M) và 5,3 (I = 0,1 M) với sự chuyển đổi không thuận nghịch. Sự kết tập protein mạnh xảy ra ở pH này. Sản phẩm cuối cùng là cuộn dây ngẫu nhiên, nhưng ngay cả ở pH 1,5 sự phân ly thành các tiểu đơn vị riêng lẻ cũng không hoàn tất. Tuy nhiên, sự phân ly từng phần diễn ra ở pH 5 (I = 0,028 M ). Ở pH này, enzyme không hoạt động, nhưng có thể phục hồi 20-30% hoạt tính khi pH trở lại 7,5. Ở vùng kiềm, điểm trung bình của quá trình chuyển đổi diễn ra ở pH gần 11 (I = 0,028 M ). PK của hầu hết các dư lượng tyrosine của protein là khoảng 10,9. Sự mở ra là không thuận nghịch và protein nhanh chóng được chuyển đổi thành các peptide có trọng lượng phân tử thấp hơn so với các tiểu đơn vị được xác định bằng điện di gel với sự có mặt của natri dodecyl sulphate. Sự phân giải protein thông thường không phải là nguyên nhân của sự chuyển đổi này.

Experiments were conducted on male rats. A study was made of the content of nicotinamide coenzymes in the liver and myocardium 24 hours after the administration of 0.5 ml of dichloroethane into the stomach. In parallel with disturbance of the morphological structure of the liver and of the myocardium, increase in the activity of alanine and aspargic aminotranspherases in the blood serum, dichloroethane reduced the content of nicotinamide coenzymes and deranged the ratio of their oxidized and reduced forms in these organs.

Chuột cống đực được tiến hành thí nghiệm. Nghiên cứu được tiến hành trên chuột cống đực về hàm lượng các coenzyme nicotinamide trong gan và cơ tim sau 24 giờ uống 0,5 ml dichloroethane vào dạ dày. Song song với sự rối loạn cấu trúc hình thái của gan và cơ tim, sự gia tăng hoạt động của alanine và aspargic aminotranspherase trong huyết thanh, dichloroethane làm giảm hàm lượng các coenzyme nicotinamide và làm rối loạn tỷ lệ các dạng oxy hóa và giảm của chúng trong các cơ quan này.

Chronic experiments were conducted on rats and rabbits; a study was made of the effect of carbidine on the conditioned defence reflexes in stimulation of the mesencephalic part of the reticular formation. Carbidine prevented the depression of the conditioned defence reflexes caused by stimulation of the mesencephalic portion of the reticular formation. This pointed to its depressive influence on the mentioned structures, and was confirmed by experiments on rabbits in recording changes in biocurrents under conditions of stimulation of the mesencephalic reticular formation.

Các thí nghiệm mạn tính trên chuột cống và thỏ; nghiên cứu tác dụng của carbidine đối với phản xạ phòng vệ có điều kiện trong kích thích phần trung não hình thành lưới. Carbidine ngăn chặn sự suy giảm phản xạ phòng vệ có điều kiện gây ra bởi kích thích phần trung não hình thành lưới. Điều này cho thấy ảnh hưởng trầm cảm của nó lên các cấu trúc nói trên, và được xác nhận bằng các thí nghiệm trên thỏ trong ghi nhận những thay đổi trong các đợt tái diễn sinh học trong điều kiện kích thích hình thành lưới trung não.

This study has investigated the relationship between duodenogastric reflux, gastritis and certain symptoms 6-12 months after three operations for uncomplicated duodenal ulcer. The operations studied were proximal gastric vagotomy (PGV, 20 cases), truncal vagotomy and pyloroplasty (TV+P, 22 cases) and truncal vagotomy and antrectomy (TV+A, 21 cases). Duodenogastric reflux was assessed both by a radiological technique and by measuring the concentration of bilirubin in the gastric aspirate before and after operation. Incidence and severity of postoperative gastritis were determined by endoscopic biopsy. Symptoms were assessed by symptomatic score and Visick grading. There was a significant correlation between duodenal reflux and histological evidence of both severe superficial gastritis and glandular atrophy (P less than 0-01). There was also a close association between the degree of reflux and the presence of severe heartburn, epigastric pain and bile vomiting after operation. The amount of reflux did not differ before operation. There was significantly less reflux following PGV than after either TV+P (P less than 0-025) or TV+A (P less than 0-001). The results indicate that an operation which preserves an innervated and intact antrum and pylorus will protect against postoperative duodenogastric reflux, gastritis and symptoms.

Nghiên cứu này khảo sát mối liên quan giữa trào ngược, viêm dạ dày tá tràng và một số triệu chứng sau phẫu thuật 3 tháng ở bệnh nhân loét tá tràng không biến chứng. Các phẫu thuật được thực hiện gồm cắt thần kinh lang thang (PGV, 20 ca); cắt thần kinh lang thang và tạo hình vòm (TV+P, 22 ca); cắt thần kinh lang thang và tạo hình chống trực tràng (TV+A, 21 ca ). Sự tăng sinh dịch tá tràng được đánh giá bằng kỹ thuật X quang và đo nồng độ bilirubin trong dịch hút dạ dày trước và sau mổ. Tỷ lệ và mức độ nặng của viêm dạ dày được xác định bằng sinh thiết nội soi. Triệu chứng được đánh giá bằng điểm số triệu chứng và phân độ Visick. Có mối tương quan có ý nghĩa thống kê giữa trào ngược dịch tá tràng với bằng chứng mô học của viêm dạ dày nông nặng và teo tuyến (P < 0-01 ). Có mối tương quan chặt chẽ giữa mức độ trào ngược với sự hiện diện của ợ nóng, đau thượng vị và nôn mật sau mổ. Lượng trào ngược không khác biệt trước mổ. Sau phẫu thuật PGV, mức độ trào ngược ít hơn đáng kể so với sau phẫu thuật TV+P (P < 0-025) hoặc TV+A (P < 0-001 ). Kết quả cho thấy phẫu thuật bảo tồn ổ bụng, niêm mạc và phình sẽ bảo vệ chống lại trào ngược, viêm dạ dày và các triệu chứng sau phẫu thuật.

The actions of glycine, GABA, alpha-alanine, beta-alanine and taurine were studied by intracellular recordings from lumbar motoneurons of the isolated spinal cord of the frog. All amino acids tested produced a reduction in the amplitude of postsynaptic potentials, a blockade of the antidromic action potential and an increase of membrane conductance. Furthermore, membrane polarizations occurred, which were always in the same direction as the IPSP. All these effects indicate a postsynaptic inhibitory action of these amino acids. When the relative strength of different amino acids was compared, taurine had the strongest inhibitory potency, followed by beta-alanine, alpha-alanine, GABA and glycine. Topically applied strychnine and picrotoxin induced different changes of post-synaptic potentials, indicating that distinct inhibitory systems might be influenced by these two convulsants. Interactions with amino acids showed that picrotoxin seletively diminished the postsymaptic actions of GABA, while strychnine reduced the effects of taurine, glycine, alpha- and beta-alanine. But differences in the susceptibility of these amino acid actions to strychnine could be detected: the action of taurine was more sensitively blocked by strychnine compared with glycine, alpha- and beta-alanine. With regard to these results the importance of taurine and GABA as transmitters of postsynaptic inhibition on motoneurons in the spinal cord of the frog is discussed.

Tác dụng của glycine, GABA, alpha-alanine, beta-alanine và taurine được nghiên cứu bằng cách ghi nhận nội bào từ các tế bào thần kinh vận động thắt lưng của tủy sống ếch. Các axit amin được thử nghiệm làm giảm biên độ điện thế hoạt động sau synap, phong tỏa điện thế hoạt động chống sắc tố và tăng độ dẫn truyền màng tế bào. Hơn nữa, hiện tượng phân cực màng tế bào luôn xảy ra theo cùng một hướng với IPSP. Tất cả các tác dụng này đều chỉ ra tác dụng ức chế sau synap của các axit amin này. Khi so sánh độ mạnh tương đối của các axit amin khác nhau, taurine có hiệu lực ức chế mạnh nhất, tiếp theo là beta-alanine, alpha-alanine, GABA và glycine. Strychnine và picrotoxin bôi tại chỗ gây ra những thay đổi khác nhau về điện thế hoạt động sau synap, cho thấy các hệ thống ức chế khác nhau có thể bị ảnh hưởng bởi hai chất gây co giật này. Tương tác với các axit amin cho thấy picrotoxin làm giảm tác dụng sau synap của GABA, trong khi strychnine làm giảm tác dụng của taurine, glycine, alpha-và beta-alanine. Nhưng có thể phát hiện sự khác biệt về tính nhạy cảm của các axit amin này đối với strychnine: hoạt động của taurine bị chặn bởi strychnine nhiều hơn so với glycine, alpha-và beta-alanine. Đối với những kết quả này, tầm quan trọng của taurine và GABA trong vai trò chất truyền ức chế sau synap lên các tế bào thần kinh vận động ở tủy sống ếch được đề cập.

The effects of acid-base changes on cardiac output during diethyl ether anaesthesia were studied in 25 mongrel dogs prepared by surgically implanting a plastic encased non-ferrous core electromagnetic probe on the ascending aorta. The findings are: (1) Metabolic acidaemia produced only slight decrease in cardiac output but a more marked fall became evident with decreasing pH(2) Respiratory acidaemia led to a slight rise in cardiac output. (3) Respiratory alkalaemia decreased cardiac output. (4) Metabolic alkalaemia also produced a decline in cardiac output.

Nghiên cứu ảnh hưởng của thay đổi acid-base lên cung lượng tim trong gây mê DDEET trên 25 chó lai được phẫu thuật cấy ghép đầu dò điện từ lõi không màu bọc nhựa lên động mạch chủ lên. Kết quả cho thấy: ( 1) Acidaemia chuyển hóa chỉ làm giảm cung lượng tim nhẹ nhưng giảm rõ rệt hơn khi pH giảm (2) Acidaemia hô hấp làm tăng cung lượng tim nhẹ. (3) Alkalaemia hô hấp làm giảm cung lượng tim. (4) Alkalaemia chuyển hóa cũng làm giảm cung lượng tim.

Axenic, washed conidia of Fusarium solani f. sp. phaseoli, Aspergillus flavus, and Verticillium albo-atrum were placed on washed Difco purified agar discs along with an inorganic salt solution containing various levels of carbon and nitrogen substrates. These discs were exposed to volatiles from six soils (pH 5.1-8.6). Fusarium solani macroconidial germination was inhibited mostly by volatiles from soils of pH 5.1, 6.1, 7.0, and 7.5, but high levels of glucose and NH4Cl reversed this inhibition, raising germination to that of no-soil, no-carbon or nitrogen controls. Conidial germination of A. flavus was inhibited mainly by volatiles from high pH (7.0, 7.8, and 8.6) soils, and increased levels of glucose plus an amino acid mixture nullified this inhibition. Volatiles from soils of pH 5.1, 6.1, and 7.5 stimulated A. flavus conidial germination. Assays after the removal of CO2 from the air above soil of pH 5.1 demonstrated that volatiles inhibitory to A. flavus were produced by this soil. Assays indicated that a KOH-soluble compound was a fungistatic soil volatile to F. solani macroconidial germination. The nullification by carbon and nitrogen substrates of F. solani and A. flavus inhibition caused by soil volatiles parallels that for soil fungistasis. Conidial germination of V. albo-atrum was markedly stimulated by volatiles in all soils tested, and was not affected by removal of CO2. Inhibitory soil volatiles may increase the nutritional requirements for spore germination of certain fungi.

Các hợp chất Axenic, conidia rửa của Fusarium solani f. sp. phaseoli, Aspergillus flavus và Verticillium albo-atrum được đặt trên đĩa thạch tinh khiết Difco cùng với dung dịch muối vô cơ chứa nhiều loại cacbon và nitơ. Các đĩa này tiếp xúc với chất bay hơi từ 6 loại đất (pH 5,1-8,6 ). Sự nảy mầm của Fusarium solani vĩ mô bị ức chế chủ yếu bởi các chất bay hơi từ các loại đất có pH 5,1,6,1,7,0 và 7,5, nhưng hàm lượng glucose và NH4Cl cao đã đảo ngược sự ức chế này, làm tăng khả năng nảy mầm thành loại không đất, không cacbon hoặc nitơ. Sự nảy mầm của A. flavus bị ức chế chủ yếu bởi các chất bay hơi từ các loại đất có pH cao (7,0,7,8 và 8,6 ), đồng thời hàm lượng glucose và hỗn hợp acid amin tăng lên đã làm mất tác dụng của sự ức chế này. Các chất bay hơi từ đất có pH 5,1,6,1 và 7,5 đã kích thích sự nảy mầm của A. flavus. Các thí nghiệm sau khi loại bỏ CO2 khỏi không khí ở trên đất có pH 5,1 đã chứng minh rằng đất có khả năng ức chế sự nảy mầm của A. flavus là do đất có tính bay hơi. Sự mất tác dụng của các chất bay hơi và các chất nitơ của F. solani và A. flavus cũng tương tự như đối với sự phát triển của nấm trong đất. Sự nảy mầm của V. albo-atrum được kích thích rõ rệt bởi các chất bay hơi ở tất cả các loại đất được khảo sát, và không bị ảnh hưởng bởi sự loại bỏ CO2. Các chất bay hơi trong đất có thể làm tăng nhu cầu dinh dưỡng cho sự nảy mầm bào tử của một số loại nấm.

A glucose-containing mineral medium supplemented with 0.01% yeast extract is described upon which all the species of thermophilic and thermotolerant fungi tested will grow. Thirteen of the 21 species do not require the yeast extract supplement for growth. Using this solid, supplemented mineral medium, the pH and temperature optima for growth of all strains were measured. No correlation was found between temperature optimum and pH optimum among members of the group tested.

Mô tả môi trường khoáng chất chứa glucose có bổ sung cao chiết nấm men 0,01% trên đó tất cả các loài nấm ưa nhiệt và chịu nhiệt được khảo sát sẽ phát triển. 13/21 loài nấm không cần bổ sung cao chiết nấm men để phát triển. Sử dụng môi trường khoáng chất bổ sung rắn này, đo được pH và nhiệt độ tối ưu cho sự phát triển của tất cả các chủng nấm. Không tìm thấy mối tương quan giữa nhiệt độ tối ưu và pH tối ưu giữa các thành viên trong nhóm khảo sát.

Within 2 km of a zinc (Zn) smelter in Palmerton, Pennsylvania, near the Lehigh Water Gap, up to 13.5% Zn by weight has been measured in the O2 horizon of the soil, and up to 8% Zn in the A1 horizon. The total numbers of bacteria, actinomycetes, and fungi (measured by dilution plate counts) were greatly reduced in the most severely Zn-contaminated soils compared with control soils. The reduction of microbial populations may be a partial cause of the decreased rate of litter decomposition at Lehigh Gap. Growth of most bacteria from control sites was reduced by 100 to 200 muM Zn, most actinomycetes by 100 muM Zn, and most fungi by 100 to 1000 muM Zn in thin-Pablum extract agar (TPab). All the tested actinomycetes and non-spore-forming bacteria isolated from Zn-contaminated Lehigh Gap soils were Zn-tolerant, growing normally in media containing 600-2000 muM Zn. Most fungi, regardless of source, were capable of at least 50% of normal growth at 700 muM Zn. Zinc-tolerant bacteria, actinomycetes, and fungi were readily isolated from low-Zn soils, suggesting that selection for Zn tolerance may proceed rapidly. Acidophilic Mortierella species have been selectively eliminated near the smelter, apparently because of elevated soil pH. Peryronellaea glomerata (Corda) Goidanich and Coniothyrium spp. were found only in the high-Zn soils.

Trong phạm vi 2 km của một lò luyện kẽm (Zn) ở Palmerton, Pennsylvania, gần khe nước Lehigh, đã đo được tổng lượng Zn lên tới 13,5% theo trọng lượng ở chân trời O2 của đất, và lên tới 8% theo chân trời A1. Tổng số vi khuẩn, actinomycetes và nấm (được đo bằng số lượng mảng pha loãng) đã giảm đáng kể ở các loại đất bị nhiễm Zn nặng nhất so với đất đối chứng. Sự giảm số lượng vi sinh vật có thể là một phần nguyên nhân làm giảm tỷ lệ phân hủy rác ở khe Lehigh. Sự phát triển của hầu hết vi khuẩn từ các vị trí đối chứng đã giảm 100 đến 200 muM Zn, hầu hết các actinomycetes giảm 100 muM Zn và hầu hết các loại nấm giảm 100 đến 1000 muM Zn trong thạch chiết mỏng Pablum (TPab ). Tất cả các vi khuẩn actinomycetes và vi khuẩn không hình thành bào tử phân lập từ đất khe Lehigh bị nhiễm Zn đều có khả năng chịu Zn, phát triển bình thường ở môi trường chứa 600-2000 muM Zn. Hầu hết các loại nấm, bất kể từ nguồn nào, đều có khả năng sinh trưởng bình thường ở 700 muM Zn. Các vi khuẩn chịu kẽm, actinomycetes và nấm dễ dàng phân lập từ đất có độ pH thấp Zn, cho thấy việc lựa chọn để chịu Zn có thể tiến hành nhanh chóng. Các loài Mortierella ưa acid đã được loại bỏ có chọn lọc ở gần lò luyện kẽm, rõ ràng là do pH đất tăng cao. Peryronellaea glomerata (Corda) Goidanich và Coniothyrium spp. chỉ được tìm thấy ở các vùng đất có độ pH cao.

alpha-Naphthoflavone activates the aryl hydroxymethyl synthetase of both the microsomal membrane-bound and soluble enzymes of rat liver and rat lung. The enzyme catalyzes the hydroxymethylation of benzo(alpha)pyrene to the 6-hydroxymethyl derivative.

alpha-Naphthoflavon kích hoạt aryl hydroxymethyl synthetase của cả enzyme liên kết màng microsome và enzyme hòa tan của gan chuột cống và phổi chuột cống. Enzyme này xúc tác cho quá trình hydroxymethyl hóa benzo (alpha) pyrene thành dẫn xuất 6-hydroxymethyl.

(1) Subcutaneous or intra-abdominal injections of 8 mg of HgCl2/100 g body weight markedly depressed hepatic fatty acid synthetase activity of chicks at 1 h post-injection. The depression occurred despite the fact that the chicks continued to eat up until the time they were killed. Under these same conditions, the hepatic activity of acetyl-CoA carboxylase (EC 6.4.1.2) was not affected by HgCl2, while the activity of the mitochondrial system of fatty acid elongation was stimulated. (2) When 2-mercaptoethanol was included in the incubation medium for a highly purified preparation of fatty acid synthetase, 500 muM HgCl2 was required to show definite inhibition of the enzyme. When 2-mercaptoethanol was omitted, 50 muM HgCl2 was inhibitory and 100 muM HgCl2 abolished enzyme activity. (3) 2 mM dithiothreitol completely protected the purified fatty acid synthetase preparation from inhibition by 100 muM HgCl2. When dithiothreitol was added after the addition of enzyme to the mercury-containing medium, protection of the enzyme was not complete. (4) Dialysis of cytosol fractions from chicks injected with HgCl2 against 500 vol. of 0.2 M potassium phosphate buffer (pH 7.0) containing 1 mM EDTA and 10 mM dithiothreitol for 4 h at 4 degrees stimulated the fatty acid synthetase activity of the fractions. Dialysis of cytosol fractions from noninjected chicks under the same conditions was without effect on fatty acid synthetase activity. (5) These data support the hypothesis that the inhibitory effect of HgCl2 administered in vivo on hepatic fatty acid synthetase activity in chicks is mediated through the interaction of mercury with the sulfhydryl groups of the enzyme.

( 1) Tiêm dưới da hoặc trong ổ bụng liều 8 mg HgCl2/100 g thể trọng đã làm suy giảm rõ rệt hoạt tính tổng hợp acid béo ở gan gà con sau 1 giờ tiêm. Mặc dù gà con tiếp tục ăn cho đến khi bị giết chết nhưng hoạt tính của enzyme vẫn bị suy giảm rõ rệt. Trong điều kiện tương tự, hoạt tính của acetyl-CoA carboxylase (EC 6.4.1.2) ở gan không bị ảnh hưởng bởi HgCl2, trong khi đó hoạt tính của hệ thống ty thể của acid béo được kích thích. (2) Khi đưa 2-mercaptoethanol vào môi trường nuôi cấy để chế biến acid béo synthetase tinh khiết cao, cần phải có 500 muM HgCl2 để ức chế enzyme. Khi bỏ 2-mercaptoethanol, 50 muM HgCl2 bị ức chế và 100 muM HgCl2 bị loại bỏ hoạt tính. (3) 2 mM dithiothreitol bảo vệ hoàn toàn chế phẩm acid béo synthetase tinh khiết bằng 100 muM HgCl2. Khi bổ sung dithiothreitol sau khi bổ sung vào môi trường chứa thủy ngân, hoạt tính của enzyme vẫn chưa hoàn toàn được bảo vệ. (4) Lọc phân đoạn cytosol của gà con tiêm HgCl2 với dung dịch đệm potassium phosphate 0,2 M (pH 7,0) chứa 1 mM EDTA và 10 mM dithiothreitol trong 4 giờ ở 4 độ trong điều kiện tương tự không làm ảnh hưởng đến hoạt tính tổng hợp acid béo của các phân đoạn. (5) Những số liệu này đã củng cố giả thuyết cho rằng tác dụng ức chế của HgCl2 tiêm in vivo đối với hoạt tính tổng hợp acid béo ở gan gà con được trung gian thông qua tương tác của thủy ngân với các nhóm sulfhydryl của enzyme.

It is confirmed that N. nigricollis venom contains several phospholipases one of these is a basic phospholipase A. This enzyme is toxic for mice when injected intravenously. In vitro it reacts on egg yolk lecithin producing lysolecithin and prevents the phenomenon of blood clotting. An immunological identity has been established between this basic phospholipase and two acidic phospholipases present in the same venom.

N.nigricollis được xác nhận là có chứa nhiều phospholipase, một trong số đó là phospholipase A cơ bản. Enzyme này gây độc cho chuột khi tiêm tĩnh mạch. Trong ống nghiệm, enzyme phản ứng với lecithin lòng đỏ trứng tạo ra lysolecithin và ngăn ngừa hiện tượng đông máu. Một nhận dạng miễn dịch đã được thiết lập giữa phospholipase cơ bản này và hai phospholipase có tính axit có trong cùng một nọc độc.

We have observed a high and significant mortality in spontaneously hypertensive rats compared to normotensive and hypotensive controls, in the fifth generation. The hypertensive rats exhibited a high frequency of cerebral haemorrhage and periarteritis nodosa.

Tỉ lệ tử vong ở chuột tự phát tăng huyết áp cao và có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng tăng huyết áp và hạ huyết áp, ở thế hệ thứ năm. Chuột tăng huyết áp có tần suất xuất huyết não và viêm quanh điểm sinh dục cao.

The interaction of chemoreflex and pulmonary inflation reflex control of the coronary circulation was examined in conscious dogs by comparing the responses to chemoreflex stimulation (intracarotid injection of nicotine) when ventilation was allowed to increase with those when ventilation was controlled. The responses were also compared with those elicited by both forced mechanical and spontaneous hyperinflation. When the heart rate was constant, intracarotidly administered nicotine induced an increase in the depth of respiration followed closely by an increase in late diastolic coronary flow from 48 +/- 2 to 106 +/- 8 ml/min and a reduction in late diastolic coronary resistance from 1.62 +/- 0.08 to 0.78 +/- 0.06 mm Hg/ml min-1. After beta-receptor and cholinergic blockade, a similar coronary dilation in response to nicotine occurred only when ventilation was allowed to increase. However, when ventilation was controlled, intracarotidly administered nicotine increased coronary resistance after combined beta-receptor and cholinergic blockade. The reflex coronary dilation was not observed after carotid sinus nerve section or after alpha-receptor blockade. Thus, nicotine stimulation of the carotid chemoreflex results in a striking coronary dilation that has two components. The minor component involves a chemoreflex with its efferent pathway in tthe vagi. The major component of coronary dilation follows an increase in the depth of respiration, and its efferent component appears to involve withdrawal of alpha-adrenergic constrictor tone. An almost identical period of reflex coronary dilation followed either forced mechanical or spontaneous hyperinflation in the conscious dog.

Nghiên cứu tương tác của thuốc chống tăng nhãn áp và kiểm soát tăng áp phổi của tuần hoàn vành được thực hiện trên chó có ý thức bằng cách so sánh phản ứng kích thích chemoreflex (tiêm ni-cô-tin vào khoang động mạch cảnh) khi được phép thở tăng với phản ứng kích thích khi kiểm soát thông khí. Phản ứng cũng được so sánh với phản ứng kích thích bởi cả tăng áp lực cơ và tăng áp lực tự phát. Khi nhịp tim không đổi, dùng ni-cô-tin trong động mạch cảnh làm tăng độ sâu hô hấp, sau đó tăng lưu lượng cuối tâm trương từ 48 +/- 2 đến 106 +/- 8 ml/phút và giảm sức cản cuối tâm trương từ 1,62 +/- 0,08 đến 0,78 +/- 0,06 mm Hg/ml min-1. Sau khi ức chế thụ thể beta và cholinergic, sự giãn nở mạch vành tương tự để đáp ứng với nicotine chỉ xảy ra khi cho phép tăng thông khí. Tuy nhiên, khi kiểm soát thông khí, dùng ni-cô-tin trong động mạch cảnh làm tăng sức cản mạch vành sau khi bị phong tỏa kết hợp giữa thụ thể beta và cholinergic. Sự giãn nở mạch vành phản xạ không được quan sát thấy sau khi cắt đoạn thần kinh xoang động mạch cảnh hoặc sau khi bị phong tỏa thụ thể alpha. Do đó, kích thích bằng ni-cô-tin của chemoreflex gây ra sự giãn nở mạch vành nổi bật có hai thành phần. Thành phần thứ nhất liên quan đến chemoreflex với đường đi của nó trong phế vị. Thành phần chính của sự giãn nở mạch vành sau khi tăng độ sâu hô hấp, và thành phần đi ra của nó dường như liên quan đến sự rút lại trương lực co thắt alpha-adrenergic. Thời gian giãn mạch vành phản xạ gần như giống nhau theo sau tăng áp lực cơ hoặc tự phát ở chó có ý thức.

The rate of coronary blood flow was varied in isolated working rat heart preparations to determine its influence on the rate of glocose utilization, tissue high-energy phosphates, and intracellular pH. A 60% reduction in coronary blood flow resulted in a 30% reduction in oxygen consumption, an accelerated rate of glusoe utilization, lower tissue levels of high-energy phosphate, and higher tissue levels of lactate and H+. Ventricular performance deteriorated as reflected by a decrease in heart rate and peak systolic pressure. Further reductions in coronary blood flow resulted in inhibition of glycolysis, a greater decrease in tissue levels of high-energy phosphates, and higher tissue levels of both lactate and H+. These changes in glycolytic flux, tissue metabolites, and ventricular performance were proportional to the degree of restriction in coronary blood flow. The importance of coronary blood flow and washout of the interstitial space in the maintenance of accelerated glycolytic flux in oxygen-deficient hearts is emphasized. It is concluded that acceleration of ATP production from glycolysis can occur only in the marginally ischemic tissue in the peripheral area of tissue supplied by an occluded artery. The central area of tissue which receives a low rate of coronary blood flow will have a reduced rate of ATP production due to both a lack of oxygen and an inhibition of glycolysis.

Tỷ lệ lưu lượng máu mạch vành thay đổi trong chế phẩm tim chuột cống trắng đơn độc nhằm xác định ảnh hưởng của nó lên tỷ lệ sử dụng glocose, phosphat năng lượng cao và pH nội bào. Giảm 60% lưu lượng máu mạch vành làm giảm 30% lượng oxy tiêu thụ, tăng tốc độ sử dụng glusoe, giảm nồng độ mô phosphat năng lượng cao, nồng độ mô lactate và H+ cao hơn. Hiệu suất thất giảm do giảm nhịp tim và huyết áp tâm thu. Giảm lưu lượng máu mạch vành hơn nữa dẫn đến ức chế đường phân, giảm nồng độ mô phosphat năng lượng cao và nồng độ mô lactate và H+ cao hơn. Những thay đổi này trong dòng glycolytic, chất chuyển hóa mô và hiệu suất thất tỷ lệ thuận với mức độ hạn chế lưu lượng máu mạch vành. Vai trò của dòng máu mạch vành và rửa khoang kẽ trong việc duy trì dòng glycolytic tăng tốc ở tim thiếu oxy được nhấn mạnh. Kết luận rằng việc tăng tốc độ sản xuất ATP từ đường phân chỉ có thể xảy ra ở vùng thiếu máu cục bộ ở vùng ngoại vi của mô do động mạch bị tắc cung cấp. Vùng trung tâm của mô nhận được lưu lượng máu mạch vành thấp sẽ làm giảm tỷ lệ sản xuất ATP do thiếu oxy và ức chế đường phân.

The mechanisms of glycolytic inhibition in ischemic myocardium were investigated in the isolated, perfused rat heart. Glycolysis was inhibited at the level of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. The major factors that accounted for the glycolytic inhibition in the ischemic heart compared with the anoxic heart appeared to be higher tissue levels of lactate and H+ in the ischemic tissue. Increased extracellular pH inhibited glycolysis in anoxic and hypoxic hearts much more readily than it did in aerobic hearts. However, maintenance of both extracellular and intracellular pH caused only a modest acceleration of glycolysis in ischemic hearts. Accumulation of tissue lactate and inhibition of glycolysis were directly proportional to the reduction in coronary bloow flow in both anoxic and ischemic hearts. At intracellular lactate concentrations between 15 and 20 mM, glycolysis was inhibited under both conditions. Addition of either 10, 20, or 40 mM lactate to the perfusate inhibited glycolysis in aerobic, anoxic, and ischemic hearts. The effect of lactate did not appear to be mediated through changes in intracellular pH. It is concluded that accumulation of lactate represents a major factor in the inhibition of glycolysis that develops in ischemic hearts.

Nghiên cứu cơ chế ức chế đường phân ở bệnh nhân tim thiếu máu cục bộ được thực hiện trên bệnh nhân tim chuột được truyền dịch. Đường phân bị ức chế ở nồng độ glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Yếu tố chính gây ức chế đường phân ở tim thiếu máu cục bộ so với tim thiếu máu cục bộ là nồng độ lactate và H+ trong mô thiếu máu cục bộ cao hơn. pH ngoại bào tăng ức chế đường phân ở tim thiếu máu cục bộ và thiếu máu cục bộ dễ dàng hơn nhiều so với tim hiếu khí. Tuy nhiên, việc duy trì pH ngoại bào và nội bào chỉ làm tăng tốc độ đường phân ở tim thiếu máu cục bộ. Tích lũy lactate mô và ức chế đường phân tỷ lệ thuận với việc giảm lưu lượng dòng chảy của phù mạch ở cả tim thiếu máu cục bộ và tim thiếu máu cục bộ. Ở nồng độ lactate nội bào từ 15 đến 20 mM, đường phân bị ức chế trong cả hai điều kiện. Việc bổ sung 10,20 hoặc 40 mM lactate vào perfusate đã ức chế đường phân ở tim hiếu khí, thiếu máu cục bộ và thiếu máu cục bộ. Tác dụng của lactate dường như không được trung gian thông qua những thay đổi pH nội bào. Kết luận rằng tích lũy lactate thể hiện một yếu tố chính trong việc ức chế đường phân phát triển ở tim thiếu máu cục bộ.

This study compared the contractile performance of a canine right atrial trabecula with that of a macroscopically indistinguishable trabecula isolated from the right ventricular apex. The heart was removed from nine mongrel puppies weighing 6-8 kg and placed in Krebs-Ringer's bicarbonate solution. The bathing solution contained only 1.25 mmoles of Ca2+ and was bubbled with a 95% O2-5% CO2 gas mixture. Each atrial trabecula was specially selected from the right atrial appendage. Histologically, these trabeculae showed a remarkable longitudinal orientation of the fibers. At Lmax (the length of the muscle at which developed tension was maximum) under identical conditions of temperature, rate of stimulation, ionic milieu, pH, and O2 and CO2 supply, right atrial trabeculae achieved the same developed and total tensions but in a much shorter time than did ventricular trabeculae. In both muscle groups the maximum developed tension averaged about 2.5 g/mm2. Since Lo (expressed as a fraction of Lmax) was less in atrial muscle than it was in ventribular muscle, we concluded that atrial muscle can be stretched considerably more than can ventricular muscle before optimum length is reached. At any given initial muscle length, the maximum of tension rise for atrial trabeculae amounted to at least twice that for ventricular trabeculae. At any given load up to 1.5 g/mm2, the maximum velocity of shortening of an atrial trabecula was about three to four times that of a ventricular trabecula. These results collectively indicate that the contractile performance of the right atrial muscle is in many respects superior to that of the right ventricle, at least under the conditions of these experiments.

Nghiên cứu so sánh sự co bóp của cơ tam nhĩ phải với sự co bóp của cơ tam nhĩ phải phân lập từ đỉnh thất phải dưới kính hiển vi. Tim được lấy ra từ 9 con chó lai nặng 6-8 kg và đặt trong dung dịch bicacbonat Krebs-Ringer. Dung dịch tắm chỉ chứa 1,25 mmol Ca2+ và được pha với hỗn hợp khí O2-5% CO2. Mỗi cơ tam nhĩ phải được chọn lọc đặc biệt từ phần phụ nhĩ phải. Về mặt mô học, các cơ tam nhĩ phải được chọn lọc theo chiều dọc. Tại Lmax (chiều dài cơ phát triển căng nhất) trong điều kiện nhiệt độ, tốc độ kích thích, môi trường ion, pH, O2 và CO2 giống nhau, cơ tam nhĩ phải có cùng sự phát triển và tổng căng nhưng trong thời gian ngắn hơn nhiều so với cơ thất. Trong cả hai nhóm cơ, sự căng tối đa phát triển trung bình khoảng 2,5 g/mm2. Do Lo (được biểu thị bằng phần của Lmax) ít hơn ở cơ nhĩ so với cơ thất, chúng tôi kết luận rằng cơ nhĩ có thể căng nhiều hơn đáng kể so với cơ thất trước khi đạt được chiều dài tối ưu. Tại bất kỳ chiều dài cơ nào ban đầu, sự căng tăng tối đa đối với cơ tam nhĩ ít nhất gấp đôi so với cơ tam thất. Tại bất kỳ tải trọng nào lên tới 1,5 g/mm2, tốc độ rút ngắn tối đa của cơ tam nhĩ phải gấp khoảng ba đến bốn lần so với cơ tam thất. Kết quả này cho thấy sự co bóp của cơ tam nhĩ phải trên nhiều khía cạnh vượt trội so với cơ thất phải, ít nhất là trong điều kiện của các thí nghiệm này.

High-voltage paper electrophoresis of small samples of serum and urine at pH 6.0 resolves basic and acidic amino acids and separates them from the neutral amino acids. For separation and identification of the neutral amino acids, the appropriate area of the electrophoretogram is cut out, sewn onto a second sheet of paper, and rerun at pH 1.9. By this method, amino acids are rapidly resolved. It is suited for use with special procedures such as oxidation of biological fluid with performic acid and specific staining for confirmation of amino acid identification.

Điện di trên giấy cao áp trên mẫu nhỏ huyết thanh và nước tiểu ở pH 6,0 giải quyết acid amin cơ bản và acidic và tách chúng ra khỏi acid amin trung tính. Để tách và nhận diện acid amin trung tính, điện di được cắt ra, khâu vào tờ giấy thứ hai và chạy lại ở pH 1,9. Bằng phương pháp này, acid amin được giải quyết nhanh chóng. Phương pháp này phù hợp để sử dụng với các quy trình đặc biệt như oxy hóa dịch sinh học với acid performic và nhuộm đặc hiệu để xác nhận nhận diện acid amin.

A simple, highly sensitive and reproducible method for the assay of gamma-glutamyl transpeptidase (EC 2.3.2-) activity is introduced, using gamma-glutamyl-p-nitroanilide as a substrate and glycylglycine as an acceptor in 50 g/l of polyoxyethylene nonylphenol. Serum transpeptidase activity was assayed in 1080 healthy adults, the normal mean value being 14.8 mU/ml. The diagnostic evaluation of the enzyme in various hepatobiliary diseases is also discussed.

Nghiên cứu hoạt tính của enzyme transpeptidase (EC 2.3.2-) bằng phương pháp đơn giản, có độ nhạy cao và có thể tái sản xuất được, sử dụng chất nền là gamma-glutamyl-p-nitroanilide và chất nhận là glycylglycine trong 50 g/l polyoxyethylene nonylphenol. Hoạt tính của enzyme transpeptidase huyết thanh được khảo sát trên 1080 người trưởng thành khỏe mạnh, giá trị trung bình bình thường là 14,8 mU/ml.

A patient with aortitis syndrome had a pleural effusion which subsided but reappeared with an exacerbation of aortitis symptoms while under antituberculosis treatment. The character of the fluid was that of an exudate, and the glucose concentration was normal. Clinical and laboratory features of the case suggest that the effusion was part of the aortitis syndrome per se.

Bệnh nhân hội chứng viêm động mạch chủ có tràn dịch màng phổi giảm nhưng tái phát với triệu chứng viêm động mạch chủ nặng trong khi điều trị chống lao. Dịch có đặc điểm là dịch tiết, nồng độ glucose bình thường. Đặc điểm lâm sàng và cận lâm sàng của trường hợp này cho thấy tràn dịch là một phần của hội chứng viêm động mạch chủ.

At the Department of Plastic Surgery and Burns, Berufsgenossenschaftliche Unfalklinik Ludwigshafen-Oggersheim, a skinbank with typed skin has been established. The storage system consists of deep-freezing at -196 degrees C in liquid nitrogen. The transplantation of HL-A typed skin was evaluated from the clinical and histological point of view. Due to the effort necessary for such an undertaking this method is critically reviewed.

Tại khoa Phẫu thuật tạo hình và Bỏng, Berufsgenossenschaftliche Unfalklinik Ludwigshafen-Oggersheim, một ngân hàng da với da dạng đã được thiết lập. Hệ thống bảo quản bao gồm đông lạnh sâu ở -196 độ C trong nitơ lỏng. Việc ghép da dạng HL-A được đánh giá từ góc độ lâm sàng và mô học. Do những nỗ lực cần thiết cho việc thực hiện phương pháp này, phương pháp này được xem xét một cách nghiêm túc.

The feasibility of using isoelectric focusing for the separation of primate pituitary growth hormone from prolactin and for the characterization of polymorphic forms of these hormones was explored. In a pH 3--10 gradient, extracts of both human and cynomolgus monkey pituitaries were each resolved into 4 growth hormone components and at least 3 prolactin components, as shown by radioimmunoassay. In narrower gradients (of 2--3 pH units) greater resolution was achieved; the principal growth hormone components were well separated from the principal prolactin components but there was overlapping of some minor components. A partially purified human prolactin preparation was found to contain 4 prolactin components, one of which had a prolactin/growth hormone ratio of 760. Clinical grade human growth hormone was also resolved into at least 5 prolactin and 5 growth hormone components, many of which had higher pI values than those found in pituitary extract. Under the conditions used, both growth hormone and prolactin were found to be polymorphic with respect to isoelectric point. Some of the human prolactin components were found to contain less than 0.2% growth hormone by radioimmunoassay. Monkey growth hormone containing 0.01% prolactin was isolated. These findings demonstrate that isoelectric focusing is useful for the preparation of both growth hormone and prolactin which are essentially free of one another. Furthermore, the polymorphic forms were repeatedly found in preparations obtained by several methods and from 2 different species, suggesting that these forms are not artifacts.

Tính khả thi của phương pháp lấy nét đẳng điện trong tách hormone tăng trưởng tuyến yên từ prolactin và đặc điểm đa hình của các dạng hormone này đã được khảo sát. Trong độ pH 3-10, dịch chiết từ tuyến yên của cả người và cynomolgus mỗi loại phân giải thành 4 thành phần hormone tăng trưởng và ít nhất 3 thành phần prolactin như được thể hiện trong xét nghiệm miễn dịch phóng xạ. Trong độ pH hẹp hơn (2-3 đơn vị pH) đã cho độ phân giải cao hơn; các thành phần hormone tăng trưởng chính được tách riêng tốt khỏi các thành phần prolactin chính nhưng có sự chồng chéo của một số thành phần nhỏ. Chế phẩm prolactin tinh khiết một phần của người cũng được phân giải thành ít nhất 5 thành phần prolactin và 5 thành phần hormone tăng trưởng, trong đó có một số thành phần có pI cao hơn so với chế phẩm chiết từ tuyến yên. Trong điều kiện sử dụng, cả hormone tăng trưởng và prolactin đều được tìm thấy có tính đa hình về điểm đẳng điện. Một số thành phần prolactin của người được phân lập có chứa ít hơn 0,2% hormone tăng trưởng. Hormon tăng trưởng của khỉ chứa 0,01% prolactin đã được phân lập. Những phát hiện này cho thấy việc lấy nét đẳng điện rất hữu ích trong việc chế tạo cả hormone tăng trưởng và prolactin vốn về cơ bản không có lẫn nhau. Hơn nữa, các dạng đa hình này được tìm thấy nhiều lần trong các chế phẩm thu được bằng nhiều phương pháp và từ 2 loài khác nhau, cho thấy các dạng này không phải là tạo tác.

The mechanism responsible for the changes in serum and liver gamma-glutamyl transpeptidase (gamma-GT) activity was studied in a model of experimental hexachlorobenzene porphyria in rabbits. Porphyria followed the administration of hexachlorobenzene in doses of 280 mumol - kg-1 body weight, which were given daily through a gastric tube over a 20-day period. Serum gamma-GT activity and the activities of the lysosomal enzymes beta-N-acetylglucosaminidase and alpha-mannosidase were increased, whereas L-aspartate: 2-oxoglutarate aminotransferase and L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase and L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase remained unaltered. There was a considerable increase in liver microsomal protein, gamma-GT, cytochrome P-450, anilinehydroxylase, aminopyrine-demethylase and delta-aminolevulinic acid synthase. In the liver gamma-GT was detected in the microsomes as well as in the cytoplasm where enzymatic activity was higher. The high correlation coefficient between liver gamma-GT, cytochrome P-450 and delta-aminolevulinic acid synthase witnesses a hexachlorobenzene-induced gamma-GT formation in the liver. A statistically significant correlation between serum and liver gamma-GT activity was also found. These data strongly suggest that the increase in serum gamma-GT activity may result from the induction of the enzyme in the liver.

Cơ chế gây ra sự thay đổi hoạt độ gamma-glutamyl transpeptidase (gamma-GT) trong máu và gan được nghiên cứu trên mô hình thực nghiệm porphyria hexachlorobenzene (HTA) trên thỏ. Sau đó, cho thỏ uống hexachlorobenzene với liều 280 mumol-kg-1, truyền qua dạ dày trong thời gian 20 ngày. Hoạt độ gamma-GT trong máu và hoạt độ các enzyme lysosome beta-N-acetylglucosaminidase và alpha-mannosidase tăng lên, trong khi L-aspartate: 2-oxoglutarate aminotransferase và L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase và L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase không thay đổi. Ở gan, gamma-GT được phát hiện ở microsome cũng như trong tế bào chất nơi hoạt độ enzyme cao hơn. Hệ số tương quan cao giữa gamma-GT, cytochrome P-450 và delta-aminolevulinic acid synthase chứng tỏ sự gia tăng hoạt độ gamma-GT ở gan. Các dữ liệu này gợi ý mạnh mẽ rằng sự gia tăng hoạt độ gamma-GT trong máu có thể là kết quả của sự khởi phát enzyme ở gan.

Membranes of the bacterial form and the stable and unstable L-forms of Proteus mirabilis contain LD and DD-carboxypeptidase. The DD-carboxypeptidase is inhibited non-competitively by penicillin G. The enzyme of the bacterial form is highly penicillin-sensitive (Ki - 4 X 10(-9) M penicillin G). Inhibition is only partly reversible by treatment with penicillinase or by dialysis against buffer. In contrast, the DD-carboxypeptidase of the unstable L-form, grown in the presence of penicillin, is 175-fold less penicillin-sensitive (Ki = 7 X 10(7) M penicillin G). Inhibition is completely reversed by penicillinase or dialysis. After inhibition by penicillin and subsequent reactivation the penicillin sensitivity of the bacterial DD-carboxtpeptidase is similar to the sensitivity of the enzyme of the unstable L-form. The hypothesis is proposed that P. mirabilis contains two DD-carboxypeptidases of different penicillin sensitivity and with different mechanisms of penicillin binding. Peptidoglycan synthesis in the cell walls of the unstable L-form is probably carried out with the help of only one DD-carboxypeptidase, viz. the completely reactivatable enzyme with the lower penicillin sensitivity.

Màng của vi khuẩn và dạng L ổn định và không ổn định của Proteus mirabilis chứa LD và DD-carboxypeptidase. DD-carboxypeptidase bị ức chế không cạnh tranh bởi penicillin G. Enzyme của dạng vi khuẩn nhạy cảm với penicillin cao (Ki-4 X 10 (- 9) M penicillin G).

21 patients with cirrhosis of the liver and 24 control patients were studied before and after a protein load (120 g protein per day during one week). An EEG was recorded and a visual assessment of frequency pattern was performed. Venous admixture was estimated during hyperoxia. According to the EEG frequency pattern the patient group with cirrhosis was subdivided into those with EEG slowing after the protein load (n = 7) and those without (n = 14). The following results were obtained: 1) Resting arterial blood gases did not change in either group. 2) There was a significant increase of the AaD02 (difference between alveolar p02 and peripheral arterial p02) in cirrhotics and controls. 3) The increase in AaD02 was significantly larger in those cirrhotics showing EEG slowing compared to those without EEG - slowing or to the controls. 4) Fractional venous admisture increased significantly in those cirrhotics showing EEG slowing. There was no significant change in those patients who did not show EEG changes or in the controls.

21 bệnh nhân xơ gan và 24 bệnh nhân không xơ gan được nghiên cứu trước và sau khi nạp protein (120 g protein/ngày trong 1 tuần ). Điện não đồ được ghi nhận và đánh giá tần số bằng thị giác. Đánh giá sự pha trộn tĩnh mạch gan trong quá trình tăng oxy máu. Theo tần số điện não đồ, nhóm bệnh nhân xơ gan được chia thành nhóm có điện não đồ chậm sau nạp protein (n = 7) và nhóm không có điện não đồ chậm (n = 14).

Some derivatives of isoindoline were prepared in order to test their cardiovascular activity. Pharmacological tests showed that some of the compounds had moderate alpha-blocking and coronarodilatory activity whereas others had some local anesthetic activity.

Một số dẫn xuất của isoindoline đã được điều chế để kiểm tra hoạt động tim mạch của chúng. Các thử nghiệm dược lý cho thấy một số hợp chất có hoạt tính chặn alpha và giãn nở trung bình trong khi một số hợp chất khác có hoạt tính gây tê cục bộ.

A patient is reported with mast cell infiltration of the small intestine in the absence of the skin involvement characteristic of mast cell disease. She also had subtotal villous atrophy responsive to a gluten-free diet. Criteria for diagnosing mast cell disease of the small intestine are proposed. The literature of small intestinal mast cell disease is reviewed and the relationship to coeliac disease is discussed.

Bệnh nhân được ghi nhận có sự xâm nhập của tế bào mast vào ruột non trong trường hợp không có sự liên quan đến da đặc trưng của bệnh tế bào mast. Cô cũng bị teo lông nhung dưới mức đáp ứng với chế độ ăn không có gluten. Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh tế bào mast của ruột non được đề xuất. Tài liệu về bệnh tế bào mast ruột non được xem xét và mối liên quan với bệnh celiac được thảo luận.

The microflora and pH of gastric contents were determined in breast-fed and in bottle-fed normal infants, in well nourished infants with acute diarrhoea and in infants with chronic diarrhoea and protein-calorie malnutrition. The last group of infants was reevaluated after recovery from diarrhoea and protein-calorie malnutrition. A bactericidal pH effect below 2-5 was observed. Bottle-fed controls had low pH values and low bacterial concentrations, whereas infants with chronic diarrhoea and protein-calorie malnutrition had high pH values and bacterial overgrowth, essentially of Gram-negative bacilli. After recovery, the only remaining alteration was the frequent isolation of yeast-like fungi in low concentrations. Infants with acute diarrhoea, except for the isolation more frequently of yeast-like fungi, presented no alterations; this seems to indicate that pH alterations and Gram-negative bacilli overgrowth occurred during the evolution of the disease to a chronic state. Breast-fed normal infants had hydrogen-ion concentrations similar to those of the chronic diarrhoea group, but without Gram-negative bacilli overgrowth, suggesting that other factors, besides pH, regulate bacterial growth in the gastric contents of these groups of infants.

Hệ vi sinh vật và pH của dịch vị được xác định ở trẻ bú mẹ và bú bình, ở trẻ bị tiêu chảy cấp và ở trẻ bị tiêu chảy mạn và suy dinh dưỡng protein. Nhóm trẻ cuối cùng được đánh giá lại sau khi phục hồi sau tiêu chảy và suy dinh dưỡng protein. Hiệu quả pH diệt khuẩn dưới 2-5 được ghi nhận. Nhóm bú bình có pH và nồng độ vi khuẩn thấp, trong khi nhóm tiêu chảy mạn và suy dinh dưỡng protein có pH và sự phát triển quá mức của vi khuẩn, chủ yếu là trực khuẩn Gram âm. Sau khi phục hồi, sự thay đổi duy nhất còn lại là sự phân lập thường xuyên của các loại nấm giống men ở nồng độ thấp. Trẻ bị tiêu chảy cấp, ngoại trừ sự phân lập thường xuyên hơn của các loại nấm giống men, không có sự thay đổi nào; điều này dường như chỉ ra rằng sự thay đổi pH và sự phát triển quá mức của trực khuẩn Gram âm xảy ra trong quá trình tiến hóa của bệnh đến trạng thái mãn tính. Trẻ bình thường bú sữa mẹ có nồng độ hydro-ion tương tự như nhóm tiêu chảy mạn, nhưng không có sự phát triển quá mức của trực khuẩn Gram âm, cho thấy các yếu tố khác, ngoài pH, điều chỉnh sự phát triển của vi khuẩn trong dịch vị của các nhóm trẻ này.

Enzymic properties of monoamine oxidase (MAO) in dog serum were studied and the following results were obtained. Some of enzymic properties of MAO in dog serum differed from that of mitochondrial MAO. When dog serum was fractionated by ammonium sulfate, proteins were concentrated in two fractions, such as 25 approximately 33% and 67 approximately 80% of saturated ammonium sulfate fraction, while MAO activity was concentrated in 40 approximately 50% of saturated ammonium sulfate fraction. The reaction rate of MAO in dog serum was found to be proportional to enzyme concentration. The optimum pH of MAO in dog serum was 7.0 which differed from that of MAO in rabbit serum (pH 8.0). Tris-HCl buffer strongly inhibited MAO activity in dog serum. When benzylamine was used as substrate, the highest activity was obtained compared with the other substrate used. The activities with butylamine, amylamine, beta-phenylethylamine and tyramine showed about 30% while tryptamine and serotonin showed 3 approximately 10% compared to that with benzymlamine as substrate. The value of pI50 of catron was about 3 X 10(-6) M and that of harmaline was about 3 X 10(-5) M, but pargyline did not inhibit MAO activity in dog serum at the concentration of 1 X 10(-4) M.

Các đặc tính enzyme của enzyme monoamin oxidase (MAO) trong huyết thanh chó được nghiên cứu và thu được kết quả như sau. Các đặc tính enzyme của MAO trong huyết thanh chó khác với MAO ty thể. Khi phân đoạn bằng amoni sunfat, protein được tập trung ở hai phân đoạn, như 25 (khoảng 33% ) và 67 (khoảng 80% ) amoni sunfat bão hòa, trong khi hoạt tính của MAO tập trung ở 40 (khoảng 50% ) amoni sunfat bão hòa. Tốc độ phản ứng của MAO trong huyết thanh chó tỷ lệ thuận với nồng độ enzyme. Độ pH tối ưu của MAO trong huyết thanh chó là 7,0 (khác với MAO trong huyết thanh thỏ (pH 8,0 ). Tris-HCl đệm ức chế mạnh hoạt tính MAO trong huyết thanh chó. Khi sử dụng chất nền benzylamine, hoạt tính đạt được cao nhất so với các chất nền khác được sử dụng. Hoạt tính với butylamine, amylamine, beta-phenylethylamine và tyramine cho thấy khoảng 30% trong khi tryptamine và serotonin cho thấy khoảng 10% so với với benzymlamine làm chất nền. Giá trị pI50 của catron là khoảng 3 X 10 (-6) M và của harmaline là khoảng 3 X 10 (-5) M, nhưng pargyline không ức chế hoạt tính MAO trong huyết thanh chó ở nồng độ 1 X 10 (-4) M.

A combination of two or more drugs may exert a drug-drug interaction, in which case the effect can be potentiated or antagonized. Such synergistic effects are well known in the case of pyrabital (barbital + aminopyrine) or irgapyrine (phenylbutazone + aminopyrine). Bucolome (BCP), a non-steroidal anti-inflammatory agent, has the chemical structure of a barbiturate and also resembles the formula of pheylbutazone. Thus the influence of BCP combination on the pharmacological activities of various pyrazolone derivatives was examined. BCP potentiated the analgesic and antipyretic effects of 4-aminoantipyrine (4A), methylaminoantipyrine (MA), aminopyrine (AM) and isopropylaminoantipyrine (IPA), which were substituted by the alkylamino group at 4-position of the pyrazolone ring. This potentiation occurred when the dose of BCP exceeded that of the pyrazolones, and was especially marked when combination ratio of BCP exceeded that of the pyrazolones, and was especially marked when combination ratio of BCP and pyrazolone was 2:1 mola. The analgesic effects of antipyrine (AN), isopropylantipyrine (IP) and aminopropylone (AP), which were substituted by alkyl group or aminoacylamino group at 4-position, were not potentiated by BCP in any combination ratio. Most pyrazolones showed additive acute toxicity in their combination with BCP, but acute toxicities of 4A and AM, which were potentiated in analgesic effects, were decreased and antagonized when combined with BCP. The plasma concentration of AM was increased and prolonged by BCP, while that of IP remained much the same. These results suggest that the pharmacological activities are associated with certain molecular interactions between BCP and pyrazolones, which are substituted by the alkylamino group at 4-position of the pyrazolone ring.

Sự kết hợp của hai hay nhiều thuốc có thể tạo ra tương tác thuốc, trong trường hợp này tác dụng có thể tăng lên hoặc đối kháng với thuốc. Tác dụng hiệp đồng này đã được biết đến trong trường hợp thuốc Pyrabital (barbital + aminopyrine) hoặc thuốc Irgaccorrine (phenylbutazone + aminopyrine ). Bucolome (BCP) là một chất kháng viêm không steroid, có cấu trúc hóa học của một barbiturat và cũng giống với công thức của pheylbutazone. Do đó, ảnh hưởng của sự kết hợp BCP đến hoạt tính dược lý của các dẫn xuất pyrazolone đã được khảo sát. BCP đã làm tăng tác dụng giảm đau và hạ sốt của 4-aminoantipyrine (4A); methylaminoantipyrine (MA); aminopyrine (AM); isopropylaminoantipyrine (IPA); được thay thế bằng nhóm alkylamino tại vị trí 4 của vòng pyrazolone. Sự tăng tác dụng này xảy ra khi liều BCP vượt quá liều của nhóm pyrazolone và đặc biệt rõ rệt khi tỷ lệ kết hợp của BCP và pyrazolone là 2: 1 mola. Tác dụng giảm đau của antipyrine (AN); isopropylantipyrine (IP); aminopropylone (AP) được thay thế bằng nhóm alkyl hoặc nhóm aminoacylamino tại vị trí 4 không được BCP tăng lên theo bất kỳ tỷ lệ kết hợp nào. Đa số các thuốc nhóm pyrazolone đều có độc tính cấp khi kết hợp với BCP, nhưng độc tính cấp của nhóm 4A và nhóm AM, vốn đã tăng lên tác dụng giảm đau, lại giảm đi và đối kháng với BCP khi kết hợp với BCP. Nồng độ AM tăng lên và kéo dài hơn khi kết hợp với BCP, trong khi đó nồng độ IP vẫn giữ nguyên. Kết quả này gợi ý rằng hoạt tính dược lý có liên quan đến một số tương tác phân tử giữa BCP và pyrazolone, được thay thế bằng nhóm alkylamino tại vị trí 4 của vòng pyrazolone.

This report concerns the feasibility of low volume priming extracorporeal circulation. Through this study, the bubble oxygenator with Zuhdi's heat exchange was used. Moderate hypothermia with surface cooling and hemodilution perfusion with 5 per cent D/W was evaluated in 32 mongrel dogs and 16 clinical open heart cases. The results obtained here were as follow: 1) Body temperature reduction by surface cooling before bypass provided more even cooling than did core cooling by low flow partial bypass alone. 2) In regard to cardiac loading on returning the whole perfusate of the circuit to patient, approximately 20 ml/kg of 5 per cent D/W was feasible as a priming solution. 3) To reduce the blood visicosity, hemodilution technique with 5 per cent D/W was superior, and hemodilution effect during postoperative periods was temporaly. 4) The excess lactate volume postulated by Huckabee was a available index to evaluate metabolic acidosis during the extracorporeal circulation. 5) With aid of surface cooling, the acid-base balance during perfusion was kept to lesser extent than that of core cooling only. 6) This study indicated that the low priming perfusion in conjunction with surface cooling hypothermia was a reliable technique for the open heart operation and may be applied in more prolonged perfusion.

Nghiên cứu này đánh giá tính khả thi của phương pháp điều trị ngoại bào bằng phương pháp khởi động thể tích thấp. Sử dụng máy tạo ô xy bong bóng trao đổi nhiệt Zuhdi. Đánh giá giảm thân nhiệt vừa bằng phương pháp làm lạnh bề mặt và tưới máu pha loãng 5% D/W trên 32 bệnh nhân chó lai và 16 bệnh nhân tim hở. Kết quả như sau: 1) Giảm thân nhiệt bằng phương pháp làm lạnh bề mặt trước phẫu thuật làm lạnh bề mặt trước phẫu thuật giúp giảm thân nhiệt đều hơn so với phương pháp làm lạnh trung tâm đơn thuần bằng dòng chảy thấp. 2) Đối với tải trọng tim khi trả lại toàn bộ màng nhầy của mạch cho bệnh nhân, phương pháp khởi động khả thi với liều lượng khoảng 20 ml/kg thể tích 5% D/W. 3) Để giảm thể tích bề mặt máu, phương pháp pha loãng với 5% D/W là ưu việt, hiệu quả pha loãng trong thời gian sau phẫu thuật là tạm thời. 4) Thể tích lactate dư thừa theo Huckabee là một chỉ số sẵn có để đánh giá nhiễm toan chuyển hóa trong quá trình tuần hoàn ngoài cơ thể. 5) Với sự hỗ trợ của phương pháp làm lạnh bề mặt, cân bằng acid-base trong quá trình tưới máu được giữ ở mức thấp hơn so với chỉ làm lạnh trung tâm. 6) Nghiên cứu này chỉ ra rằng việc tưới máu pha loãng kết hợp với hạ thân nhiệt thể tích thấp là một kỹ thuật đáng tin cậy cho phẫu thuật tim hở và có thể áp dụng kéo dài hơn.

Resistance to pneumococcal infection was tested in T-lymphocyte-deficient, nude (nu/nu) mice. Pneumococcal serum opsonizing activity, in vivo phagocytosis of the pneumococcus, and the mean lethal dose for the pneumococcus were all found to be the same in nude mice as in control (+/+) mice. T-lymphocytes do not appear to play a significant role in the host's defense against the pneumococcus.

Nghiên cứu được tiến hành trên chuột nhắt trắng (chuột/chuột) thiếu T-lymphocyte, sống khỏa thân (nu/nu ). Hoạt tính phóng xạ huyết thanh phế cầu khuẩn, thực bào in vivo của phế cầu khuẩn và liều trung bình gây chết tế bào phế cầu khuẩn ở chuột trần đều giống nhau. T-lymphocyte dường như không đóng vai trò quan trọng trong việc bảo vệ vật chủ chống lại phế cầu khuẩn.

Extensively degraded RNA was isolated from virions of influenza virus which had been oxidized with sodium m-periodate. Similarly, although to a lesser extent, RNA isolated from periodate-treated ribonucleoprotein of influenza virus was also degraded. In contrast, influenza virus RNA, if first freed from other virion components, was not degraded by periodate oxidation.

Phân lập rộng rãi RNA phân hủy phân lập từ các virion của vi rút cúm đã bị oxy hóa bằng natri m-periodate. Tương tự, mặc dù ở mức độ thấp hơn, RNA phân lập từ ribonucleoprotein của vi rút cúm đã được xử lý định kỳ cũng bị phân hủy. Ngược lại, RNA của vi rút cúm, nếu lần đầu tiên được giải phóng khỏi các thành phần virion khác, thì không bị phân hủy bởi quá trình oxy hóa định kỳ.

Rubella virus failed to replicate in mosquitoes (Aedes albopictus and Culex fatigans) following parenteral inoculation. The virus demonstrated in mosquitoes tested immediately after inoculation but was not detected in insects sampled 7, 14 and 21 days postinoculation. This experiment provides further evidence that rubella is not an arbovirus, but does not invalidate its classification as a togavirus.

Vi rút Rubella không nhân lên được trên muỗi (Aedes albopictus và Culex fatigans) sau tiêm chủng. Vi rút được phát hiện trên muỗi được xét nghiệm ngay sau tiêm chủng nhưng không được phát hiện trên các côn trùng được lấy mẫu sau 7,14 và 21 ngày. Thí nghiệm này cung cấp thêm bằng chứng cho thấy Rubella không phải là một loại arbovirus nhưng không làm mất hiệu lực phân loại là togavirus.

The secretion of alpha-amylase and electrolytes by the parotid gland is now well understood and similarities exist in this respect between man and animals. Many modern drugs influence parotid secretion and morphology, and these are discussed.

Hiện nay, sự tiết alpha-amylase và điện giải của tuyến mang tai đã được hiểu rõ và có sự tương đồng về mặt này giữa người và động vật. Nhiều loại thuốc hiện đại có ảnh hưởng đến sự tiết parotid và hình thái, và những điều này sẽ được thảo luận sau.

Acute renal failure is a life-threatening situation for which satisfactory treatment is currently available. Death is usually related to concomitant infection rather than uremia. Prompt recognition and treatment of underlying factors that predispose to renal insufficiency can frequently prevent the development of intrinsic acute renal failure.

Suy thận cấp là tình trạng nguy hiểm đến tính mạng, hiện nay điều trị ổn định. Tử vong thường liên quan đến nhiễm trùng đồng thời chứ không phải là nhiễm niệu. Việc phát hiện và điều trị kịp thời các yếu tố nguy cơ dẫn đến suy thận có thể thường xuyên ngăn chặn sự phát triển của suy thận cấp.

A previously unrecognized enzyme, citrate lyase deacetylase, has been purified about 140-fold from cell extracts of Rhodopseudomonas gelatinosa. It catalyzed the conversion of enzymatically active acetyl-S-citrate lyase into the inactive HS-form and acetate. The enzyme exhibited an optimal rate of inactivation at pH 8.1. Because of the instability of acetyl-S-citrate lyase at acidic and alkaline pH values, all assays were carried out at pH 7.2, where the spontaneous hydrolysis of the acetyl-S-citrate lyase was negligible and deacetylase showed 70% of the activity at pH 8.1. The apparent Km value for citrate lyase was 10(-7) M at pH 7.2 and 30 C. The activity of the deacetylase was restricted to the citrate lyase from R. gelatinosa. The corresponding lyases from Enterobacter aerogenes (formerly Klebsiella aerogenes) and Streptococcus diacetilactis were not deacetylated; likewise, thioesters such as acetyl-S coenzyme A, acetoacetyl-S coenzyme A, and N-acetyl-S-acetyl-cysteamine were also not hydrolyzed. Citrate lyase deacetylase was present in very small amounts in cells of R. gelatinosa grown with acetate or succinate; it was induced by citrate along with the citrate lyase. L-(+)-Glutamate strongly inhibited the deacetylase. Fifty percent inhibition was obtained at a concentration of 1.4 X 10(-4) L-(+)-glutamate. D-(-)-Glutamate, alpha-ketoglutarate, L-alpha-hydroxyglutarate, L-(-)-proline, and other metabolites were less effective.

Một enzyme chưa được công nhận trước đây, citrate lyase deacetylase, đã được tinh sạch khoảng 140 lần từ dịch chiết tế bào của Rhodopseudomonas gelatinosa. Enzyme này xúc tác cho sự chuyển hóa acetyl-S-citrate lyase hoạt động enzyme thành dạng HS-và acetate không hoạt động. Tốc độ bất hoạt enzyme tối ưu ở pH 8.1. Do sự không ổn định của acetyl-S-citrate lyase ở pH axit và kiềm, tất cả các thử nghiệm đều được thực hiện ở pH 7.2, trong đó hoạt tính tự thủy phân của acetyl-S-citrate lyase là không đáng kể và hoạt tính khử là 70% ở pH 8.1. Giá trị Km rõ ràng của citrate lyase là 10 (- 7) M ở pH 7.2 và 30 C. Hoạt tính của deacetylase thu được ở nồng độ 1,4 X 10 (- 4) L-( +) - glucutamate. D-(-) - Glucase, alpha-ketoglutarate, L-alpha-hydroxyglutarate, L-(-) - proline và các chất chuyển hóa khác đều kém hiệu quả. Enzyme citrate lyase được citrate lyase thu được với hàm lượng rất nhỏ trong tế bào R. gelatinosa được nuôi cấy với acetate hoặc succinate; hoạt tính được citrate tạo ra cùng với citrate lyase. L-( +) - Glucase ức chế mạnh deacetylase. Ở nồng độ 1,4 X 10 (- 4) L-( +) - glucutamate, D-(-) - Glucase, alpha-glutamate, L-alpha-hydroxyglutarate, L-(-) - proline và các chất chuyển hóa khác đều kém hiệu quả.

An alcohol dehydrogenase linked to nicotinamide adenine dinucleotide and requiring glutathione has been isolated and partially purified from two methanol-assimilating yeasts. It differs from previously described methanol-oxidizing enzymes in pH optima, electron acceptor specificity, substrate specificity, inhibition pattern, and stability.

Một hợp chất alcohol dehydrogenase liên kết với nicotinamide adenine dinucleotide đòi hỏi glutathione đã được phân lập và tinh chế một phần từ hai men đồng hóa với methanol. Hợp chất này khác với các enzyme oxy hóa methanol đã được mô tả trước đây về pH optima, tính đặc hiệu của chất nhận electron, tính đặc hiệu của chất nền, mô hình ức chế và tính ổn định.

In merodiploid strains of Klebsiella aerogenes with chromosomal hut genes of K. aerogenes and episomal hut genes of Salmonella typhimurium, the repressor of either species can regulate the hut operons of the other species. The repression exerted by the homologous repressor on the left-hand hut operon is, in both organisms, stronger than that exerted by the heterologous repressor.

Trong các chủng lưỡng bội của Klebsiella aerogenes với các gen túp lều nhiễm sắc thể của K. aerogenes và các gen túp lều biểu sinh của Salmonella typhimurium, chất ức chế của một trong hai loài có thể điều hòa operon túp lều của loài kia. Chất ức chế tương đồng trên operon túp lều bên trái ở cả hai loài đều mạnh hơn chất ức chế dị thể.

The cellular localization of enzymes in Diplococcus pneumoniae was examined by fractionation of spheroplasts. A deoxyribonuclease implicated in the entry of deoxyribonucleic acid (DNA) into the cell during genetic transformation was located in the cell membrane. This enzyme, the major endonuclease of the cell (endonuclease I), which is necessary for the conversion of donor DNA to single strands inside the cell and oligonucleotides outside, thus could act at the cell surface. Another enzyme, the cell wall lysin (autolysin), was also found in the membrane fraction. Other enzymes, including amylomaltase, two exonucleases, and adenosine triphosphate-dependent deoxyribonuclease, and a restriction type endonuclease, were located in the cytosol within the cell. None of the enzymes examined were predominantly periplasmic in location. Spheroplasts were obtained spontaneously on incubation of pneumococcal cells in concentrated sugar solutions. The autolytic enzyme appears to be involved in this process. Cells that were physiologically competent to take up DNA formed osmotically sensitive spheroplasts two to three times faster than cells that were not in the competent state. Although some genetically incompetent mutants also formed spheroplasts more slowly, other such mutants formed them at the faster rate.

Sự định vị của các enzyme trong vi khuẩn Diplococcus pneumoniae được kiểm tra bằng cách phân đoạn các spheroplasts. Enzyme deoxyribonuclease liên quan đến sự xâm nhập của acid deoxyribonucleic (DNA) vào tế bào trong quá trình biến nạp di truyền được đặt ở màng tế bào. Enzyme này, endonuclease chính của tế bào (endonuclease I) cần thiết cho sự chuyển đổi DNA của người cho thành các chuỗi đơn bên trong tế bào và các oligonucleotide bên ngoài, do đó có thể hoạt động ở bề mặt tế bào. Enzyme khác, thành tế bào lysin (autolysin) cũng được tìm thấy ở phân đoạn màng tế bào. Các enzyme khác, bao gồm amylomaltase, hai exonuclease và deoxyribonuclease phụ thuộc adenosine triphosphate và một endonuclease dạng giới hạn, nằm trong cytosol bên trong tế bào. Không có enzyme nào được kiểm tra chủ yếu là periplasmic ở vị trí. Các spheroplasts thu được một cách tự nhiên khi nuôi cấy tế bào phế cầu khuẩn trong dung dịch đường cô đặc. Enzyme tự phân giải dường như tham gia vào quá trình này. Các tế bào có khả năng sinh lý để tiếp nhận DNA hình thành các spheroplasts nhạy cảm thẩm thấu nhanh hơn hai đến ba lần so với các tế bào không ở trạng thái có khả năng. Mặc dù một số đột biến gen không có khả năng hình thành cũng hình thành spheroplasts chậm hơn, nhưng các đột biến khác hình thành chúng với tốc độ nhanh hơn.

Coenzyme A (CoA) transferase from Peptostreptococcus elsdenii has been purified and crystallized, and some of its properties have been established. The work was facilitated by a newly developed coupled and continuous spectrophotometric assay in which the disappearance of added acrylate could be followed at 245 nm. The rate-limiting conversion of acetyl- and beta-hydroxypropionyl CoA to acrylyl CoA by CoA transferase was followed by the non-rate-limiting conversion to beta-hydroxypropionyl CoA by excess crotonase. Thus, a small priming quantity of acetyl CoA served to generate acrylyl CoA, which, by hydration, generated beta-hydroxypropionyl CoA. This product then served to generate more acrylyl CoA in cyclic fashion. The net result was the CoA transferase-limited conversion of acrylate to beta-hydroxypropionate. The purified transferase has a molecular weight of 125,000 and is composed of two subunits of 63,000 each, as determined by disc gel electrophoresis. Short-chain-length monocarboxylic acids are substrates, whereas dicarboxylic or beta-ketocarboxylic acids are not. The reaction kinetics are typical of a ping-pong bi bi mechanism composed of two half reactions linked by a covalent enzyme intermediate. Incubation of the transferase with acetyl CoA in the absence of a fatty acid acceptor yielded a stable intermediate which, by absorption spectrophotometry, radioactivity measurements, reduction with borohydride, reactivity with hydroxylamine, and catalytic activity, was identified as an enzyme-CoA compound. Kinetic constants for CoA transferase are: final specific activity, 110 U/mg of protein corresponding to 1.38 X 10(4) mumol of acrylate activated per mumol of transferase; Km for acrylate, 1.2 X 10(-3) M; Km for acetyl CoA (beta-hydroxypropionyl CoA), 2.4 X 10(-5) M.

Coenzyme A (CoA) transferase từ vi khuẩn Peptostreptococcus elsdenii đã được tinh sạch và kết tinh, một số tính chất của nó đã được thiết lập. Nghiên cứu này được thực hiện bằng phương pháp quang phổ kế kết hợp và liên tục (CCP ), theo đó có thể theo dõi sự biến mất của acrylate ở bước sóng 245 nm. Việc chuyển hóa có giới hạn tốc độ của acetyl-và beta-hydroxypropionyl CoA thành acrylyl CoA bằng CoA transferase được tiếp nối bằng cách chuyển hóa không giới hạn tốc độ thành beta-hydroxypropionyl CoA bằng crotonase dư thừa. Như vậy, một lượng nhỏ acetyl CoA được dùng để tạo ra acrylyl CoA, sau đó, bằng cách hydrat hóa, các axit dicarboxylic hoặc beta-ketocarboxylic được dùng để tạo ra nhiều acrylyl CoA hơn theo chu kỳ. Kết quả cuối cùng là sự chuyển hóa có giới hạn CoA của acrylate thành beta-hydroxypropionate. Acrylate tinh sạch có trọng lượng phân tử 125.000 và gồm hai tiểu đơn vị 63.000 mỗi tiểu đơn vị, được xác định bằng điện di gel. Các axit đơn chuỗi có độ dài ngắn là các chất nền, trong khi các axit dicarboxylic hoặc beta-ketocarboxylic thì không. Động học của phản ứng là đặc trưng của cơ chế sinh học sinh học ping-pong gồm hai nửa phản ứng liên kết với nhau bởi một enzyme trung gian cộng hóa trị. Việc ủ của enzyme với acetyl CoA trong điều kiện không có chất nhận axit béo cho ra một chất trung gian ổn định, bằng phương pháp quang phổ hấp thụ, đo phóng xạ, khử bằng borohydrid, phản ứng với hydroxylamin và hoạt tính xúc tác được xác định là hợp chất enzyme-CoA. Hằng số động học của CoA transferase là: hoạt tính đặc hiệu cuối cùng, 110 U/mg protein tương ứng với 1,38 X 10 (4) mumol của acrylate được hoạt hóa trên mỗi mumol của enzyme transferase; K đối với acrylate là 1,2 X 10 (- 3) M;

Studies were made on the physical and chemical properties of polysaccharides synthesized by cell-free extracts of Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, and Streptococcus sp. and their susceptibilities to dextranases. Among the polysaccharides examined, insoluble glucans were rather resistant to available dextranase preparations, and the insoluble, sticky glucan produced by S. mutans OMZ 176, which could be important in formation of dental plaques, was the most resistant. By enrichment culture of soil specimens, using OMZ 176 glucans as the sole carbon source, an organism was isolated that produced colonies surrounded by a clear lytic zone on opaque agar plates containing the OMZ 176 glucan. The organism was identified as a strain of Flavobacterium and named the Ek-14 bacterium. EK-14 bacterium was grown in Trypticase soy broth, and an enzyme capable of hydrolyzing the OMZ 176 glucan was concentrated from the culture supernatant and purified by negative adsorption on a diethylaminoethyl-cellulose (DE-32) column and gradient elution chromatography with a carboxymethyl-cellulose (CM-32) column. The enzyme was a basic protein with an isoelectric point of pH 8.5 and molecular weight of 65,000. Its optimum pH was 6.3 and its optimal temperature was 42 C. The purified enzyme released 11% of the total glucose residues of the OMZ 176 glucan as reducing sugars and solubilized about half of the substrate glucan. The products were found to be isomaltose, nigerose, and nigerotriose, with some oligosaccharides. The purified enzyme split the alpha-1,3-glucan endolytically and was inactive toward glucans containing alpha-1,6, alpha-1,4, beta-1,3, beta-1,4, and/or beta-1,6 bonds as the main linkages.

Các nghiên cứu đã được thực hiện để tìm hiểu các đặc tính vật lý và hóa học của các polysaccharide được tổng hợp từ dịch chiết không có tế bào của Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, Streptococcus sp. và tính nhạy cảm của chúng với dextranases. Trong số các polysaccharide được khảo sát, glucan không hòa tan khá kháng với các chế phẩm dextranase sẵn có, và glucan dính, không hòa tan do S. mutans sản xuất OMZ 176 (có vai trò quan trọng trong việc hình thành mảng bám răng) là kháng mạnh nhất. Bằng cách nuôi cấy làm giàu mẫu đất, sử dụng nguồn cacbon duy nhất OMZ 176 glucan, một sinh vật được phân lập và tạo ra các khuẩn lạc bao quanh bởi vùng lytic trên đĩa thạch đục chứa OMZ 176 glucan. Sinh vật được xác định là một chủng vi khuẩn Flavobacterium và được đặt tên là Ek-14. Vi khuẩn EK-14 được nuôi cấy trong môi trường nước tương Trypticase, và enzyme thủy phân OMZ 176 glucan được cô đặc từ dịch nuôi cấy nổi và được tinh sạch bằng sự hấp phụ âm tính trên cột diethylaminoethyl cellulose (DE-32) và sắc ký pha loãng gradient với cột carboxymethyl cellulose (CM-32 ). Enzyme là protein cơ bản với điểm đẳng điện pH 8,5 và trọng lượng phân tử 65.000. Độ pH tối ưu của enzyme là 6,3 và nhiệt độ tối ưu là 42 C. Enzyme tinh sạch giải phóng 11% tổng lượng glucose còn lại của glucan dưới dạng đường khử và hòa tan khoảng một nửa glucan cơ chất. Các sản phẩm được tìm thấy là isomaltose, nigerose và nigerotriose, với một số oligosaccharide. Enzyme tinh sạch phân tách nội phân tử alpha-1,3-glucan và không hoạt động với các glucan chứa alpha-1,6, alpha-1,4, beta-1,3, beta-1,4 và/hoặc beta-1,6.

After mutagenesis, surviving yeast cells are grown on plates at 25 C and later exposed to 37 C. The plates are then overlaid with a soft agar containing p-nitrophenylphosphate at pH 9.7. Lysed cells liberate alkaline phosphatase which gives rise to a yellow color on and around colonies.

Sau khi gây đột biến, các tế bào nấm men sống sót được nuôi cấy trên đĩa ở 25 C và sau đó tiếp xúc với 37 C. Các đĩa sau đó được phủ một lớp thạch mềm có chứa p-nitrophenylphosphate ở pH 9,7. Các tế bào ly giải giải phóng phosphatase kiềm làm phát sinh màu vàng trên và xung quanh các khuẩn lạc.

A deoxyribonuclease, which requires nucleoside triphosphate for reaction, has been purified about 150-fold from extracts of Bacillus laterosporus. Potassium phosphate and ethylene glycol stabilize the purified enzyme. The enzyme degrades double-stranded DNA about 100 times faster than heat-denatured DNA in the presence of nucleoside triphosphate. Double-stranded DNA is not degraded to any measurable extent in the absence of ATP, but the enzyme exhibits activity toward denatured DNA in the absence of nucleoside triphosphate, and this activity seems to be an intrinsic property of this enzyme protein. The optimum pH is 8.5 and the maximum activity is obtained in the copresence of Mg2+ (8.0 X 10(-3)M) and Mn2+ (7.0 X 10(-5)M). ATP and dATP are most effective and nucleoside di- or monophosphates are ineffective. ATP is converted to ADP and inorganic phosphate during the reaction and the ratio of the amount of ATP cleaved to that of hydrolyzed phosphodiester bonds of DNA is about 3:1. An inhibitor of the enzyme was observed in bacterial extracts prepared by sonic disruption; the inhibitory substance is produced in the bacteria in the later stages of cell growth. Preliminary results show that the inhibitor emerged near the void volume of a Sephadex G-200 column, and was relatively heat-stable, RNase-resistant, and DNase-sensitive.

Một hợp chất deoxyribonuclease đòi hỏi phải có nucleoside triphosphate cho phản ứng, đã được tinh sạch khoảng 150 lần từ dịch chiết của Bacillus laterosporus. Kali phosphate và ethylene glycol làm ổn định enzyme đã tinh sạch. Khi có nucleoside triphosphate, enzyme phân giải DNA sợi kép nhanh gấp khoảng 100 lần so với DNA bị biến tính nhiệt. Khi không có ATP, DNA sợi kép không bị phân giải ở bất kỳ mức độ nào, nhưng enzyme thể hiện hoạt tính đối với DNA bị biến tính, và hoạt tính này dường như là một đặc tính nội tại của protein enzyme này. Độ pH tối ưu là 8,5 và hoạt tính tối đa đạt được khi có sự đồng phân của Mg2+ (8,0 X 10 (-3) M) và Mn2+ (7,0 X 10 (-5) M ). ATP và dATP có hiệu quả nhất và nucleoside di-hoặc monophosphat không hiệu quả. ATP được chuyển hóa thành ADP và phosphate vô cơ trong quá trình phản ứng và tỷ lệ ATP được cắt so với liên kết phosphodiester thủy phân của DNA là khoảng 3: 1. Chất ức chế enzyme đã được quan sát thấy trong dịch chiết vi khuẩn được điều chế bằng cách phá vỡ âm thanh; chất ức chế được tạo ra ở vi khuẩn ở giai đoạn sau của quá trình phát triển tế bào. Kết quả bước đầu cho thấy chất ức chế xuất hiện gần thể tích rỗng của cột Sephadex G-200, tương đối ổn định về nhiệt, kháng RNase và nhạy cảm với DNase.

A radioimmunoassay procedure for guanosine 3',5'-cyclic monophosphate (CGMP) is described. The procedure is based on competitive binding between [3H]CGMP and non-radioactive CGMP, with separation of bound and unbound CGMP by Millipore filtration. The binding reaction showed very high specificity to CGMP, had a broad pH optimum, and reached equilibrium within a short time. A simple procedure for the pruification of assay samples using Dowex AG 50W-X2 resin is also described. CGMP contents in urine samples were assayed without purification. Injection of glucagon into healthy human volunteers resulted in a small but significant reduction in urinary CGMP level, whereas CAMP excretion increased dramatically.

Mô tả quy trình miễn dịch phóng xạ đối với guanosine 3 ', 5' - monophosphate vòng (CGMP).

1. Tryptophan was administered to rats under various nutritional conditions: fasted for 24 hr, fasted and refed with glucose or corn-oil, fasted and administered glycerol intramuscularly, and nonfasted. 2. The changes in the contents of glycolytic intermediates in the livers indicated that the phosphoenolpyruvate carboxykinase [EC 4.1.1.32] reaction is inhibited by tryptophan administration in all groups of rats. The inversely related changes in the contents of malate and phosphoenolpyruvate were associated with the accumulation of quinolinate in the livers. The content of quinolinate which exhibited the half-maximal effect on the contents of both metabolites was 0.1-0.2 mumole per g liver. 3. The rate of incorporation of 3H from 3H2O into the total hepatic fatty acids was increased about 2-fold by the administration of this amino acid to the fasted rats. The enhancement of the rate was closely related to the increase in the citrate content. The hyperlipogenesis was also related to the decrease of acetyl-CoA and the increase of malonyl-CoA. The content of long-chain acyl-CoA was not affected. These effects of tryptophan administration on the hepatic fatty acid metabolism were found in all groups of rats. The liver content of glycerol 3-phosphate was decreased by tryptophan administration was markedly increased by glycerol injection. The injection of glycerol into the control and the tryptophan-treated rats produced a marked increase of glycerol 3-phosphate but did not affect the rate of fatty acid synthesis in the livers of either group. 4. It may be concluded that, in the livers of rats under various nutritional conditions, the short-term control of fatty acid synthesis by tryptophan administration is most likely due to the activation of acetyl-coenzyme A carboxylase [EC 6.4.1.2] by citrate.

1. Chuột cống trắng được cho uống tryptophan trong điều kiện dinh dưỡng khác nhau: nhịn ăn 24 giờ, cho ăn glucose hoặc dầu ngô, cho ăn bắp và không nhịn ăn glycerol. 2. Sự thay đổi hàm lượng glycolytic intermediates trong gan cho thấy phản ứng phosphoenolpyruvate carboxykinase (EC 4.1.1.32) bị ức chế khi cho uống tryptophan ở tất cả các lô chuột. Sự thay đổi ngược lại về hàm lượng của malate và phosphoenolpyruvate có liên quan với sự tích tụ quinolinate trong gan. Hàm lượng quinolinate thể hiện tác dụng nửa tối đa trên cả hai chất chuyển hóa là 0,1-0,2 mumole/g gan. 3. Tốc độ kết hợp 3H từ 3H2O vào acid béo toàn phần của gan tăng khoảng 2 lần khi cho chuột đang nhịn ăn uống. Sự tăng cường hàm lượng citrate có liên quan chặt chẽ với sự gia tăng hàm lượng citrate. Tăng lipid cũng liên quan với sự giảm acetyl-CoA và malonyl-CoA. Hàm lượng acyl-CoA chuỗi dài không bị ảnh hưởng. Những tác động này của tryptophan lên quá trình chuyển hóa acid béo của gan đã được tìm thấy ở tất cả các lô chuột. Hàm lượng gan của glycerol 3-phosphate bị giảm khi cho uống tryptophan và tăng rõ rệt khi tiêm glycerol. Việc tiêm glycerol vào lô đối chứng và chuột đã xử lý tryptophan đã làm tăng đáng kể hàm lượng glycerol 3-phosphate nhưng không ảnh hưởng đến tốc độ tổng hợp acid béo ở cả hai lô. 4. Có thể kết luận rằng, ở gan chuột trong điều kiện dinh dưỡng khác nhau, sự kiểm soát ngắn hạn quá trình tổng hợp acid béo bằng tryptophan rất có thể là do sự hoạt hóa acetyl-coenzyme A carboxylase (EC 6.4.1.2) bởi citrate.

Cytochrome P-450 from bovine adrenocortical mitochondria exists in three forms of molecular weight: 850,000 (protein 16), of one-half (protein 8), and of one-quarter of this value (protein 4). The forms of the enzyme are named according to the number of subunits and all appear to be active in converting cholesterol to 3beta-hydroxy-5-pregnen-20-one (side chain cleavage) (Shikita, M., and Hall, P.F. (1973) J. Biol. Chem. 248, 5606). To determine whether all three forms are active at their characteristic molecular weights, the three cytochromes were each layered onto separate sucrose density gradients and centrifuged at 49,000 rpm for 60 min; the gradients contained all the factors necessary for side chain cleavage including one of the following substrates: cholesterol, 20S-hydroxycholesterol, and 20S,22R-dihydroxycholesterol. Regardless of the form of P-450 layered onto the gradient and regardless of the substrate, enzyme activity (side chain cleavage) was observed only in fractions corresponding to a sedimentation coefficient of 20 to 22 S which is that for protein 16. No activity was observed at S values corresponding to either protein 8 or protein 4. These findings indicate that the active form of cytochrome P-450 from adrenocortical mitochondria is that containing 16 subunits, i.e. the form in which the cytochrome is normally isolated from adrenal mitochondria. Forms consisting of eight and four subunits which can be prepared from protein 16 become active only by forming protein 16, at least in an aqueous medium in vitro.

Cytochrome P-450 từ ty thể vỏ thượng thận bò tồn tại dưới 3 dạng có khối lượng phân tử: 850.000 (protein 16); 1/2 (protein 8) và 1/4 (protein 4).

Clostridium perfringens sialidase was purified by affinity chromatography. Kinetic properties of the enzyme were examined with sialyllactose and with mixed sialoglycolipids (gangliosides) as substrates. With the latter substrate in 0.01 M Tris-acete in the absence of strong electrolyte, the pH optimum for enzymatic activity was 6.8. Addition of strong electrolyte (0.01 to 0.10 M Nac1) to the reaction medium caused an acidic shift and a broadening of the pH optimum, Enzymatic activity at pH 5.8 rose approximately 2.5-fold; a concomitant loss of activity at pH 6.8 was also observed. The alteration of enzymatic activity caused by strong electrolyte were dependent upon changes in Vmax. Km remained nearly invariant. Thus, a reversible transition of the enzyme from a relatively inactive to a highly active form occurred as a function of strong electrolyte concentration. Determination of the pK values of the active functional groups of C. perfringens sialidase revealed that the effects of strong electrolyte were exerted upon the pKa group of the enzyme. Strong electrolyte appeared to shield unfavorable electrostatic interactions between polyanionic sialoglycolipid micelles and the enzyme molecule, thus protecting the pKa group from inactivation. In comparision with the effects of strong electrolyte upon enzymatic activity toward the sialoglycolipid substrate, those observed with the monovalent substrate, sialyllacthose, were minor. Collectively, these findings indicate that ionic environment may effectively control the activity and relative substrate specificity of C. perfringens sialidase at a given pH. Furthermore, they explain the low pH optima and skewed pH profiles previously reported for enzymatic activity toward high molecular weight substrates.

Chất nền của enzyme là sialyllactose và sialoglycolipid (gangliosides) đã được tinh sạch bằng sắc ký ái lực. Các đặc tính động học của enzyme được khảo sát bằng chất nền là sialyllactose và sialoglycolipid hỗn hợp. Khi không có chất điện li mạnh, pH tối ưu cho hoạt động enzyme là 6,8 M tris-acete. Việc bổ sung chất điện li mạnh (0,01-0,10 M Nac1) vào môi trường phản ứng đã làm thay đổi tính acid và mở rộng pH tối ưu. Hoạt tính của enzyme ở pH 5,8 tăng gần 2,5 lần; đồng thời mất hoạt tính ở pH 6,8. Sự thay đổi hoạt tính của enzyme do chất điện li mạnh phụ thuộc vào sự thay đổi nồng độ Vmax. Km gần như bất biến. Như vậy, sự chuyển tiếp có thể đảo ngược của enzyme từ dạng tương đối không hoạt động sang dạng hoạt động cao đã xảy ra do sự thay đổi nồng độ điện li mạnh. Việc xác định giá trị pK của các nhóm chức năng hoạt động của C. perfringens sialidase cho thấy tác động của chất điện li mạnh lên nhóm pKa của enzyme. Chất điện li mạnh có vẻ bảo vệ các tương tác tĩnh điện bất lợi giữa các mixen của polyanionic sialoglycolipid và phân tử enzyme, do đó bảo vệ nhóm pKa khỏi bị bất hoạt. So sánh với tác động của chất điện li mạnh lên hoạt tính của enzyme đối với chất nền của sialoglycolipid, các tác động của chất nền đơn trị, sialyllacthose, là không đáng kể. Nói chung, những phát hiện này cho thấy môi trường ion có thể kiểm soát hiệu quả hoạt động và độ đặc hiệu của chất nền tương đối của enzyme đối với chất nền có trọng lượng phân tử cao.

The apoprotein of hog kidney D-amino acid oxidase was reconstituted with 5-deazaflavin adenine dinucleotide (5-deazaFAD) to yield a protein which contains 1.5 mol of 5-deazaFAD/mol of enzyme. The deazaFAD-containing enzyme forms complexes with benzoate, 2-amino benzoate, and 4-aminobenzoate which are both qualitatively and quantitatively similar to those observed with native enzyme. The complex with 2-aminobenzoate exhibits a new long wavelength absorption band characteristic of a flavin charge-transfer complex. The reconstituted enzyme exhibits no activity when assayed by D-alanine oxidation. However, the bound chromophore can be reduced by alanine, phenylalanine, proline, methionine, and valine, but not by glutamate or aspartate, indicating the deazaFAD enzyme retains the substrate specificity of the native enzyme. Reduction of the enzyme by D-alanine exhibits a 1.6-fold deuterium isotope effect. Reoxidation of the reduced enzyme occurred in the presence of pyruvate plus ammonia, but not with pyruvate alone or ammonia alone. beta-Phenylpyruvate and alpha-ketobutyrate, but not alpha-ketoglutarate could replace pyruvate. Reduced enzyme isolated following reaction with [alpha-3H]alanine was found to contain 0.5 mol of tritium/mol of deazaFADH2. After denaturation of the tritium-labeled enzyme, the radioactivity was identified as deazaFADH2. Reaction of the reduced tritium-labeled enzyme with pyruvate plus ammonia prior to denaturation yields [alpha-3H]alanine and unlabeled deazaFAD. These results suggest that reduction and reoxidation of enzyme-bound deazaFAD involves the stereo-specific transfer of alpha-hydrogen from substrate to deazaFAD.

Các protein apoprotein của enzyme thận lợn được tái tổ hợp với 5-deazaflavin adenine dinucleotide (5-deazaFAD) để tạo thành một protein chứa 1,5 mol 5-deazaFAD/mol của enzyme. Các enzyme chứa deazaFAD tạo thành các phức hợp với benzoate, 2-amino benzoate và 4-aminobenzoate, cả về chất lượng và số lượng tương tự như các phức hợp enzyme bản địa. Phức hợp 2-aminobenzoate thể hiện một dải hấp thụ bước sóng dài đặc trưng của phức chất chuyển điện flavin. Enzyme tái tổ hợp không có hoạt tính khi thử nghiệm oxy hóa bằng D-alanine. Tuy nhiên, chất nhiễm sắc thể liên kết có thể bị khử bởi alanine, phenylalanine, proline, methionine và valine, nhưng không phải bởi glutamate hoặc aspartate, cho thấy enzyme deazaFAD vẫn giữ được tính đặc hiệu của cơ chất enzyme bản địa. Phản ứng khử enzyme bằng D-alanine thể hiện hiệu ứng đồng vị deuterium gấp 1,6 lần. Phản ứng tái oxy hóa enzyme giảm xảy ra khi có pyruvate cộng với amoniac, nhưng không phải với pyruvate hoặc amoniac. Beta-Phenylpyruvate và alpha-ketobutyrate, nhưng không phải alpha-ketoglutarate có thể thay thế pyruvate. Enzyme khử phân lập được sau phản ứng với deazaFADH2. Phản ứng của enzyme khử với pyruvate cộng với amoniac trước khi enzyme biến tính tạo thành deazaFADH2.

Phosphoenolpyruvate carboxykinase, which has been isolated from chicken liver mitochondria in essentially homogenous form, carries out the irreversible decarboxylation of oxalacetate to pyruvate in the presence of catalytic amounts of GDP or IDP, as well as the reversible decarboxylation of oxalacetate to phosphoenolpyruvate in the presence of substrate amounts of GTP or ITP. The pyruvate- and phosphoenolpyruvate-forming reactions are similar in their nucleoside specificity and appear to be carried out by the same protein. However, the two activities vary markedly in their response to added metal ions and sulfhydryl reagents. Phosphoenolpyruvate formation is completely dependent on the presence of a divalent metal ion, with Mn2+ the most effective species. This reaction is also stimulated by sulfhydryl reagents such as 2-mercaptoethanol. In contrast, the pyruvate-forming reaction is strongly inhibited by divalent metal ions, including Mn2+, and also by moderate concentrations of sulfhydryl reagents. These observations and the demonstration that pyruvate kinase-like activity is very low or absent make it unlikely that pyruvate formation proceeds via phosphoenolpyruvate as an intermediate. Although the pyruvate-forming reaction is inhibited by added metal ions, the reaction is also inhibited by metal-chelating agents such as 8-hydroxyquinoline and o-phenanthroline, suggesting that the reaction is dependent on the presence of a metal ion. It has not been possible, however, to demonstrate that the enzyme is a metalloprotein.

Phosphoenolpyruvate carboxykinase, một enzyme phân lập từ ty thể gan gà ở dạng đồng nhất về cơ bản, thực hiện quá trình khử carboxyl oxalacetate thành pyruvate không thể đảo ngược khi có mặt một lượng xúc tác GDP hoặc IDP, cũng như quá trình khử carboxyl oxalacetate thành phosphoenolpyruvate khi có mặt một lượng chất nền GTP hoặc ITP. Phản ứng tạo pyruvate và phosphoenolpyruvate hoàn toàn phụ thuộc vào sự có mặt của ion kim loại hóa trị II, trong đó Mn2+ là chất có hiệu quả nhất. Phản ứng này cũng được kích thích bởi các thuốc thử sulfhydryl như 2-mercaptoethanol. Ngược lại, phản ứng tạo pyruvate bị ức chế mạnh bởi các ion kim loại hóa trị II, bao gồm Mn2+, và cũng bởi nồng độ trung bình của các thuốc thử sulfhydryl. Những quan sát này và việc chứng minh rằng hoạt động giống như pyruvate kinase rất thấp hoặc không có, khiến cho phản ứng không thể diễn ra thông qua phosphoenolpyruvate như một chất trung gian. Mặc dù phản ứng tạo pyruvate bị ức chế bởi các ion kim loại bổ sung, nhưng phản ứng cũng bị ức chế bởi các chất xếp lớp kim loại như 8-hydroxyquinoline và o-phenanthroline, cho thấy phản ứng phụ thuộc vào sự có mặt của một ion kim loại. Tuy nhiên, không thể chứng minh rằng enzyme này là một metalloprotein.

We describe a method for measuring the release of fatty acids from endogenous substrates of human platelet homogenates and membranes. The method depends on the availability of lipids whose fatty acids are odd-chained and therefore suitable as internal reference compounds that, at the time of lipid extraction, can be added to an incubation to permit subsequent quantification of the content of free fatty acids or fatty acids esterified to specific lipids. We found four types of lipolytic activities in human platelets. In homogenates at pH 4.0 a triglyceride lipase operated as shown by the synchrony of triglyceride degradation and release of glycerol and those fatty acids that are the predominant constituents of triglycerides. However, enough arachidonic acid was released at this pH level to suggest some phospholipid breakdown, since triglycerides hold relatively small amounts of this acid. With membranous preparations, in the alkaline pH range there were two peaks of fatty acid release with accompanying degradation of phospholipids. At pH 8.5, where release of the saturated acids, palmitic and stearic, predominated, their sum was 3.5 times that of arachidonic acid. At pH 9.5 the release of palmitic and stearic acids was only slightly below their peak values; however, the release of arachidonic acid nearly equaled the sum of the saturated acids. Linoleic acid was not released in representative amounts by those reactions that released arachidonic acid, despite the overwhelming propensity of both to be esterified at the 2-position of phospholipids. Pertinently, the choline phospholipids are linoleic-rich and the non-choline phospholipids linoleic-poor, while both have a generous endowment of arachidonic acid. With this in mind, we raise the possibility that the phospholipase A2 of human platelets is an endoenzyme because of its tendency to act on those phospholipids that are thought to comprise the inner layer of the cell membrane.

Chúng tôi mô tả một phương pháp đo sự giải phóng các acid béo từ các cơ chất nội sinh của các tế bào đồng nhất và màng tiểu cầu ở người. Phương pháp này phụ thuộc vào sự sẵn có của các lipid mà các acid béo của chúng có liên kết kỳ lạ và do đó thích hợp làm các hợp chất tham chiếu bên trong mà tại thời điểm tách lipid có thể được thêm vào một lò ấp để có thể định lượng tiếp theo hàm lượng của các acid béo tự do hoặc các acid béo được ester hóa cho các lipid cụ thể. Chúng tôi đã tìm thấy bốn loại hoạt động phân giải lipid ở tiểu cầu người. Ở các tế bào đồng nhất ở pH 4.0, một lipase triglyceride hoạt động như thể hiện qua sự đồng bộ của sự phân hủy triglyceride và giải phóng glycerol cùng với các acid béo là thành phần chủ yếu của triglyceride. Tuy nhiên, ở pH này, acid arachidonic được giải phóng đủ để gợi ý một số sự phân hủy phospholipid, vì triglyceride chứa một lượng tương đối nhỏ của loại acid này. Với chế phẩm màng, trong phạm vi pH kiềm có hai đỉnh giải phóng acid béo đi kèm với sự phân hủy phospholipid. Ở pH 8.5, trong đó sự giải phóng các acid bão hòa, acid palmitic và stearic chiếm ưu thế, tổng lượng của chúng gấp 3,5 lần so với acid arachidonic. Ở pH 9,5, sự giải phóng acid palmitic và acid stearic chỉ thấp hơn một chút so với giá trị đỉnh của chúng; tuy nhiên, sự giải phóng acid arachidonic gần bằng tổng lượng acid bão hòa. Axit linoleic không được giải phóng đại diện bởi các phản ứng giải phóng acid arachidonic mặc dù cả hai đều được ester hóa ở vị trí 2 của phospholipid. Một cách hợp lý, các phospholipid choline giàu linoleic và phospholipid không cholesterol nghèo linoleic, trong khi cả hai đều có nguồn cung cấp acid arachidonic dồi dào. Với ý nghĩ này, chúng tôi nâng cao khả năng phospholipase A2 của tiểu cầu người là một endoenzyme vì nó có xu hướng hoạt động trên các phospholipid được cho là bao gồm lớp trong của màng tế bào.

A method is described for the extensive purification of acid deoxyribonuclease (acid DNase) and its specific inhibitor from beef liver, the existence of which had been only supported by indirect evidence. By the use of insolubilized acid deoxyribonuclease, eight other proteins interacting with the enzyme have been detected. One of them (molecular weight, 59,000) was identified as responsible for phosphodiesterase activity which is often a contaminant of DNase preparations. Acid DNase (free of phosphodiesterase) and its inhibitor have been obtained as homogeneous proteins, as determined by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight of acid DNase and its inhibitor are, respectively, 26,500 and 21,500; those of other proteins range from 17,000 to 112,000. The properties of beef liver acid DNase are similar to those described for the enzymes extracted from other sources. The same alteration of DNase kinetics by this inhibitor, as that previously demonstrated with an impure protein has been confirmed; the sigmoidal shape observed at pH 5 for the plot of initial rate versus substrate concentration progressively disappears with increasing pH. We have also demonstrated that RNA, which inhibits the acid DNase through a competitive binding to the catalytic site, is able, like the substrate, to reverse the binding of inhibitor to the enzyme.

Đã có một phương pháp tinh sạch rộng rãi enzyme deoxyribonuclease (ADNase) và chất ức chế đặc hiệu của nó từ gan bò, tuy nhiên chỉ có bằng chứng gián tiếp mới chứng minh sự tồn tại của phương pháp này. Bằng cách sử dụng acid deoxyribonuclease không hòa tan, tám protein khác tương tác với enzyme đã được phát hiện. Một trong số đó (trọng lượng phân tử 59.000) được xác định là chịu trách nhiệm cho hoạt động của phosphodiesterase, thường là chất gây ô nhiễm của chế phẩm DNase. Acid DNase (không chứa phosphodiesterase) và chất ức chế của nó đã thu được như là các protein đồng nhất, được xác định bằng điện di gel natri dodecyl sulfate-polyacrylamide. Trọng lượng phân tử của acid DNase và chất ức chế của nó lần lượt là 26.500 và 21.500; trong khi đó, trọng lượng phân tử của các protein khác dao động từ 17.000 đến 112.000. Các đặc tính của acid gan bò tương tự như các đặc tính của enzyme được chiết xuất từ các nguồn khác. Sự thay đổi động học của DNase do chất ức chế này gây ra như đã được chứng minh trước đây với một protein không tinh khiết đã được xác nhận; hình dạng sigmoidal quan sát được ở pH 5 cho biểu đồ tốc độ ban đầu so với nồng độ cơ chất đã dần dần biến mất khi pH tăng lên. Chúng tôi cũng đã chứng minh rằng RNA, chất ức chế ADNase thông qua một liên kết cạnh tranh với chất xúc tác, có khả năng đảo ngược liên kết của chất ức chế với enzyme.