Source: http://docplayer.pl/3610895-Ospa-prawdziwa-patrz-c-wstecz-do-edwarda-jennera-a-nawet-troche-dalej.html
Timestamp: 2017-05-30 13:56:04
Legal References Found: art. 19
 art.4
 art.20
 art. 49
 art. 49
 art. 5
 art. 31
 art. 1
 art. 2
 art. 11
 Art. 9
 Art.1
 Art. 176
 art. 19
 art. 7
 art. 10

Document Content:
OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ - PDF
OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ
Download "OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ"
1 H I S T O R I A M I K R O B I O L O G I I POST. MIKROBIOL., 2009, 48, 4, OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ Marek Niemia³towski*, Lidia Szulc**, Anna Boratyñska**, Lech Martyniszyn**, Justyna Struzik**, Justyna Karandys** Zak³ad Immunologii, Katedra Nauk Przedklinicznych, Wydzia³ Medycyny Weterynaryjnej SGGW, ul. Ciszewskiego 8, Warszawa Wp³ynê³o w listopadzie 2009 r. 1. Wstêp. 2. Ortopokswirusy oraz historia wariolacji i wakcynacji jako przyk³ad roli intuicji i spostrzegawczoœci w badaniach naukowych. 3. Indukcja wrodzonej i nabytej odpornoœci przeciwzakaÿnej przez wirusowe zaka enia oœrodkowego uk³adu nerwowego. 4. Ortopokswirus ospy myszy wartoœciowym modelem badawczym nad immunobiologi¹ wirusa ospy ludzkiej. 5. Podsumowanie Smallpox: looking back to Edward Jenner and even a little further Abstract: The World Health Organization (WHO) announced on May that smallpox was the first human infectious disease eradicated from the environment. It was possible thanks to the spectacular success of the Intensified Smallpox Eradication Program initiated in 1967 by WHO. In this article, we summarize the fascinating history of smallpox variolation and vaccination. We also acknowledge Edward Jenner ( ), the father of immunology and one of the world s greatest scientific visionaries, who was many years ahead of his times. Since the studies on variola virus (VARV) are not accepted by the civilized countries, public opinion and scientific community, the progress in the immunobiology of VARV and the production of modern vaccines against smallpox will be not possible without model studies both in vivo and in vitro. Also, the lack of research would hinder the understanding of virus nature and the cellular and molecular mechanisms of the disease. For this reason, in our laboratory we are conducting studies on immunobiology of ectromelia virus (ECTV) and on mousepox pathogenesis as a substitute for VARV and smallpox. 1. Orthopoxviruses and history of variolation and vaccination as an example of intuition and quickness of perception in scientific research. 2. Induction of innate and acquired anti-infectious immunity by viral infections of central nervous system. 3. Mousepox orthopoxvirus as a valuable scientific model to study the immunobiology of variola virus. 4. Summary S³owa kluczowe: wirus ektromelii, wirus ospy prawdziwej Key words: ectromelia virus, variola virus 1. Wstêp Multi multa sciunt, nemo omnia Wielu wie du o, nikt wszystkiego Pomimo wielkiego postêpu nauki, w tym biomedycyny, ludzkoœæ jest ci¹gle zagro ona ró nymi chorobami zakaÿnymi, a czynniki je indukuj¹ce mog¹ wywo³ywaæ groÿne zachorowania na wiêksz¹ (pandemie, epidemie) lub mniejsz¹ skalê (ogniska endemiczne). Mog¹ te byæ u yte jako œrodki bojowe lub terrorystyczne. Opisuj¹c wspó³czesn¹ wiedzê na temat ró - nych czynników zakaÿnych i chorób, które wywo³uj¹, warto odwo³aæ siê do ich historii fascynuj¹cej nie tylko pod wzglêdem naukowym, ale i cywilizacyjnym, spo- ³ecznym, gospodarczym i militarnym. Do takich, wartych opisania, czynników zakaÿnych nale y z pewnoœci¹ wirus ospy prawdziwej (variola virus, VARV) i choroba, któr¹ wywo³uje tj. ospa ludzka (zwana te prawdziw¹ lub czarn¹). Przedstawiony opis objawów klinicznych ospy ludzkiej oddaje wiernie jej obraz: cyt. Nieszczêœliwi chorzy umierali w strasznych mêczarniach. Ca³e cia³o, nie wy³¹czaj¹c g³owy, pokryte by³o ropiej¹cymi pêcherzami. G³owa by³a tak obrzêk³a, e nie mo na by³o jej wprost rozpoznaæ. Oczy zamkniête, powieki obrzêk³e, oddech w najwy szym stopniu utrudniony... Po krótkich mêczarniach œmieræ przynosi³a dopiero ukojenie. Ci zaœ szczêœliwcy, Objaœnienia skrótów: CPXV wirus ospy krowiej; ECTV wirus ospy myszy (ektromelii); HSV-1/HHV-1 wirus opryszczki; MPXV wirus ospy ma³p; OUN oœrodkowy uk³ad nerwowy; VACV wirus krowianki; VARV wirus ospy ludzkiej (prawdziwej). * Autor korespondencyjny: Zak³ad Immunologii, Katedra Nauk Przedklinicznych, Wydzia³ Medycyny Weterynaryjnej SGGW, ul. Ciszewskiego 8, Warszawa; tel./fax. (22) ; ** Doktoranci z dziennego studium doktoranckiego Ksenobiotyki oraz biologia czynników zakaÿnych i inwazyjnych przy Wydziale Medycyny Weterynaryjnej SGGW (kierownik studium i promotor: prof.dr hab. Marek Niemia³towski)2 290 MAREK NIEMIA TOWSKI I WSP. którzy uchodzili ca³o z tej strasznej choroby, cierpieli pe³nych dwanaœcie dni: potem dopiero pêcherze przysycha³y i zwolna zaczyna³y siê goiæ, by wreszcie odpaœæ pozostawiaj¹c po sobie odra aj¹ce blizny... Œmieræ k³ad³a pokotem setki tysiêcy osób, zw³aszcza dzieci. Reszta wraca³a do zdrowia. Pozostawa³a im na resztê ycia odpornoœæ przeciw powtórnemu zachorowaniu i blizny na ca³ym ciele [10]. Ospa ludzka (w terminologii angielskiej nazywana smallpox ) jest pierwsz¹ w historii naszego gatunku chorob¹ zakaÿn¹ ludzi, która zosta³a ca³kowicie zwalczona dziêki zakoñczonej sukcesem w 1980 r. 10-letniej ogólnoœwiatowej kampanii szczepieñ (Intensified Smallpox Eradication Program) przeprowadzonej w latach XX wieku na masow¹ skalê przez Œwiatow¹ Organizacjê Zdrowia (World Health Organization, WHO). Przed rozpoczêciem kampanii w 1967 r. na œwiecie wystêpowa³o milionów zachorowañ rocznie, z czego 2 miliony chorych umiera³o. Wa n¹ cech¹ ró nych szczepów wirusa ospy ludzkiej, szczególnie dla produkcji skutecznych szczepionek, jest stabilnoœæ antygenowa wirusa, a brak jego rezerwuaru wœród zwierz¹t znacznie u³atwi³ zwalczenie choroby. Ospa ludzka towarzyszy³a naszemu gatunkowi od tysiêcy lat, a na wirus j¹ wywo³uj¹cy nie wp³ywa³y ani czynniki klimatyczne ani adne inne ograniczaj¹ce skutecznie rozprzestrzenianie siê ró nych chorób zakaÿnych. Warto przypomnieæ, e nie tylko sama choroba by³a zabójcza na masow¹ skalê ale i, bardzo czêsto, szczepienia pe³ni¹ce z za³o enia rolê ochronn¹ na 100 szczepionych mog³o umrzeæ 10 i wiêcej osób! Zmarli po szczepieniach powinni byæ kremowani, zgodnie z procedur¹ obowi¹zuj¹c¹ w takich przypadkach, choæ nie zawsze mia³o to miejsce [12]. Na dobr¹ sprawê nie mamy ca³kowitej pewnoœci, czy doœwiadczenia z u yciem VARV wykonywane by³y po 1980 r. i czy prowadzone s¹ obecnie, szczególnie w laboratoriach wojskowych, gdyby tak by³o to wymaga³oby to zapewnienia: (i) szczególnie skutecznych warunków technicznych w laboratoriach o wyj¹tkowo wysokim poziomie zabezpieczenia (BL-4) oraz (ii) personelu naukowego zaszczepionego i wysoce wyspecjalizowanego w pracy z materia³em biologicznym szczególnie niebezpiecznym. 2. Ortopokswirusy oraz historia wariolacji i wakcynacji jako przyk³ad roli intuicji i spostrzegawczoœci w badaniach naukowych Wirus ospy ludzkiej rozprzestrzenia siê, bez wzglêdu na wiek, p³eæ i rasê, g³ównie na drodze zaka enia kropelkowego lub przez kontakt bezpoœredni osób nie zaka onych z zaka onymi, jak równie przez rzeczy osób chorych, tj. ubrania, poœciel i inne przyk³adowo, w wojnach tocz¹cych siê w Ameryce pó³nocnej w latach o³nierze angielscy, nic przecie nie wiedz¹c o wirusie, u ywali koce zaka one VARV w celu wywo³ania epidemii ospy wœród Indian, co im siê skutecznie uda³o. Ciekaw¹ zale noœæ zaobserwowano porównuj¹c œmiertelnoœæ z powodu ospy czarnej u szczepionych i nie szczepionych kobiet w ci¹ y. Stwierdzono, e 27% przypadków œmiertelnych wystêpuje u zaszczepionych kobiet w ci¹ y w stosunku do 61% u kobiet nie szczepionych. Natomiast u kobiet szczepionych nie bêd¹cych w ci¹ y stwierdzono tylko 6% przypadków œmiertelnych w przeciwieñstwie do 35% u kobiet nie szczepionych. Wirusy ospy ludzkiej nale ¹ do rodziny Poxviridae grupuj¹cej du e wirusy o wielkoœci nm nm. Maj¹ one skomplikowan¹ strukturê dsdna-wirusów ( kb; G+C 35 40%). Dziel¹ siê na dwie podrodziny: Entomopoxvirinae (pokswirusy owadów z 3 rodzajami: Entomopoxvirus: A, B, C) i Chordopoxvirinae (pokswirusy krêgowców) do tej ostatniej zaliczamy osiem rodzajów wirusów: Orthopoxvirus, Avipoxvirus, Capripoxvirus, Leporipoxvirus, Molluscipoxvirus, Parapoxvirus, Suipoxvirus, Yatapoxvirus [8, 21, 28]. Bia³ka ortopokswirusów uczestnicz¹ w mechanizmach ucieczki immunologicznej wirusa przed mechanizmami obronnymi zaka onego organizmu do bia³ek tych nale ¹, miêdzy innymi, produkty genów, które hamuj¹ mechanizmy efektorowe uk³adu odpornoœciowego (np. inhibitory IFN i niektórych innych cytokin /L-1, TNF/ oraz szlaku aktywacji dope³niacza) lub te produkty genów indukuj¹cych replikacjê pokswirusów w zaka onych komórkach (np. kinaza tymidynowa /tk/ czy te homolog EGF /epidermal growth factor/) [27]. VARV mo e przetrwaæ 3 tygodnie w 35 C przy wilgotnoœci wzglêdnej powietrza 65%, natomiast 8 tygodni w 26 C przy tej samej wilgotnoœci powietrza i 12 tygodni przy wilgotnoœci poni ej 10% parametry te wp³ywaj¹ na d³ugoœæ bytowania wirusa w œrodowisku [12]. Ospa ludzka wyklu³a siê w Azji, gdzie od co najmniej kilku tysiêcy lat, jako choroba g³ównie endemiczna, dziesi¹tkowa³a ludnoœæ Chin i Indii (w tych ostatnich czczono dwie boginie tej choroby Mariatale i Patragali). Dopiero w nastêpnej kolejnoœci przeniesiona zosta³a w d³ugim i skomplikowanym ³añcuchu zdarzeñ (zwi¹zanym np. z migracj¹ ludnoœci, wyprawami wojennymi i handlowymi) do zachodniej Azji, Afryki i do Europy, w której ju powszechnie zbiera³a œmiertelne niwo w XVI w. [7, 9]. W apogeum zachorowañ w Europie pod koniec XVIII w. umiera³o rocznie oko³o ludzi (a wiêc œrednio 2192 osoby dziennie), a w Anglii zaczêto prowadziæ ewidencjê zachorowañ ludzi na tê chorobê w tzw. The London Bills of Mortality, co pozwoli³o stwierdziæ, e na3 OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ 291 prze³omie XVII i XVIII w. tylko w Londynie 10% wszystkich przypadków œmiertelnych zachodzi³o ka - dego roku w wyniku zachorowania ludzi na ospê czarn¹, a choroba ta zbiera³a znacznie wiêcej ofiar w latach epidemicznych. Na naszym kontynencie na chorobê tê zmarli, miêdzy innymi, królowa Anglii, Szkocji i Irlandii Maria II Stuart ( ), cesarz rzymsko-niemiecki Józef I ( ), król Francji Ludwik XV ( ) oraz car Rosji Piotr II ( ). Ospa trafi³a dziêki wyprawom konkwistadorów, kolonistów i misjonarzy oraz innym tego typu misjom cywilizacyjnym do obu Ameryk, w tym w 1520 r. do Meksyku i, nastêpnie, Peru, Brazylii oraz innych krajów regionu. Indianie nazywali ospê ludzk¹, w t³umaczeniu na jêzyk angielski, the great leprosy dlatego, e ofiary by³y pokryte krostami przypominaj¹cymi zmiany kliniczne u trêdowatych. Jako ciekawostkê mo na podaæ, e w 1775 r. George Washington opóÿni³ atak na Boston z powodu ospy w tym mieœcie, a kiedy wojska brytyjskie opuœci³y miasto rozkaza³, eby wkroczy³o do niego tysi¹c o³nierzy którzy przechorowali ospê ludzk¹ doskonale bowiem wiedziano z wieloletnich obserwacji, e przechorowanie ospy prawdziwej zabezpiecza skutecznie przed ponownym zachorowaniem na tê chorobê. Wyprawy dalekomorskie z Europy i Ameryki rozprzestrzeni³y chorobê do Afryki (np. Portugalczycy do Angoli) a Anglicy do Australii (ospa czarna przyczyni³a siê do masowego wymierania Aborygenów) i Nowej Zelandii [7]. Do rodzaju Orthopoxvirus nale ¹ te wirusy ospy byd³a (cowpox virus, CPXV), wirusy krowianki (VACV, vaccinia virus), wirusy ospy ma³p (monkeypox virus, MPXV wywo³uj¹cy u ma³p smallpox-like disease wirusy te by³y uwa ane za wirusy rodzicielskie dla VARV, podobnie, jak SIV dla HIV), wirusy ektromelii (ECTV, wirus ospy myszy), wirusy ospy œwiñ (swinepox virus, SWPV; œwinie mog¹ wykazywaæ objawy choroby równie po zaka eniu VACV), wirusy ospy wielb³¹dów (camelpox virus, CMLV), wirusy ospy koni (contagious pustular dermatitis of horses virus/contagious pustular stomatitis of horses virus) i inne ortopokswirusy [7, 8, 21]. Pierwszego opisu objawów klinicznych ospy ludzkiej dokona³ Galen (Claudius Galenos, A.D.; autor, miêdzy innymi, Techne iatrikë / Sztuka lekarska /, s³ynny lekarz Marka Aureliusza i jego nastêpców), a od dawien dawna wiedziano, e przechorowanie ospy chroni na ca³e ycie przed powtórnym zachorowaniem, dlatego te do powszechnych nale a³a praktyka kontaktu osób jeszcze zdrowych, w tym szczególnie dzieci, z osobami, które przechorowa³y lub rzeczami, z którymi siê stykali, szczególnie wtedy, kiedy szczyt zachorowañ min¹³. I chocia metoda ta by³a wyj¹tkowo ryzykowna to, mimo wszystko, empirycznie potwierdza³a coœ, o czym faktycznie dowiedzieliœmy siê dopiero na prze³omie XIX/XX w. oraz w XX w., to jest istnienia antygenowej swoistoœci reakcji immunologicznej oraz pamiêci immunologicznej bêd¹cych podstaw¹ szczepieñ przeciwzakaÿnych. Do imponuj¹cego rozwoju szczepieñ w XIX i XX w. przyczyni³ siê Edward J enner ( ), dobroczyñca ludzkoœci, cz³onek Królewskiego Kolegium w Londynie (przyjêty w poczet cz³onków za pracê o kuku³kach!) [7]. Edward Jenner urodzi³ siê w Berkeley, w harbstwie Gloucestershire w zachodniej Anglii w rodzinie pastora. I chocia od dawna wiedziano, e osoby stykaj¹ce siê z krowami chorymi na ospê nie zapadaj¹ na ospê ludzk¹ to dopiero E. Jenner u y³ po raz pierwszy w dniu 14 maja 1796 r. prost¹, ale skuteczn¹, szczepionkê przeciwko ospie ludzkiej w sk³ad szczepionki ( the vaccine od ³aciñskiego s³owa vacca krowa) wchodzi³ CPXV uzyskany ze zmian ospowych (szarych pêcherzyków) obecnych na rêkach dojarki Sarah Nelmes. Poddanym szczepieniu by³ syn ogrodnika E. Jennera 8-letni James Phipps, który po roku od zaszczepienia CPXV prze y³ kontakt z VARV podanym mu przez E. Jennera, czym dobitnie potwierdzi³ przewidywania co do skutecznoœci uodpornienia ludzi CPXV [7]. E. Jenner, znany uczony i lekarz, by³ zatem przy okazji twórc¹ immunologii i dokona³ tego na 100 lat przed odkryciem nie tylko wirusów, ale i podstawowych praw rz¹dz¹cych immunologi¹ wyprzedzaj¹c swoim geniuszem i intuicj¹ epokê, w której y³ (Fortes fortuna ádiuvat!*). By³ wielokrotnie uhonorowany przez wspó³czesnych, w tym, miêdzy innymi, specjalnym medalem przez Napoleona (w 1804 r.) oraz przez Indian pó³nocno-amerykañskich, którzy równie byli, jak ju wspomniano, ofiarami ospy prawdziwej podczas prowadzonego podstêpnie i planowo ludobójstwa. Ma³o znanym faktem jest, e w 1774 r., a wiêc na 22 lata przed E. Jennerem, inny Anglik, Benjamin J e s t y, inokulowa³ CPXV swoje dzieci, ale nie odniós³ takiego sukcesu, jaki osi¹gn¹³ Jenner tak wiêc od staro ytnoœci, krok po kroku, ludzkoœæ walczy³a z osp¹ a do prze³omowego 1796 r., który sta³ siê kamieniem milowym dla osi¹gniêcia koñcowego sukcesu w 1980 r. Przez wiele lat skuteczna szczepionka anty-varv oparta by³a na CPXV zaadaptowanym ewolucyjnie do byd³a wirus ten skutecznie zapewni³ ochronê przeciwko VARV u tych osób (w tym dzieci), które zosta³y nim zaszczepione. Przyk³adowo w Szwecji, w której rozpoczêto szczepienia przeciwko ospie prawdziwej na prze- ³omie XVIII/XIX w. ma³o doskona³ym wówczas preparatem zawieraj¹cym CPXV, liczba œmiertelnych ofiar zosta³a obni ona z oko³o 7200 na 1 milion ludnoœci w 1800 r. do tylko oko³o 200 przypadków œmiertelnych w 1820 r. [7, 14] (Rys. 1). By³ to sukces o wymiarze * Œmia³ym los sprzyja!4 292 MAREK NIEMIA TOWSKI I WSP. Rys. 1. Ochronny wp³yw szczepienia CPXV (w latach ) ludnoœci Szwecji przeciwko ospie prawdziwej (opracowanie w³asne wg 7) liczba zgonów uleg³a obni eniu z oko³o 4000 w 1780 r. do oko³o 400 w latach historycznym, a szczepionkê u ywano do zabezpieczenia ludzi w wielu krajach œwiata (np. w USA). Wydane w³asnym sumptem niskonak³adowe 75-stronicowe dzie³o E. Jennera Zbadanie przyczyn i skutków u ycia szczepionki przeciwospowej: choroby odkrytej w niektórych hrabstwach Zachodniej Anglii, szczególnie Gloucestershire, znanej pod nazw¹ ospy krowiej (1798) 1 st ed. Law Murray & Highly, London, England cyt. za T s charke i wsp. [34] przet³umaczono na wiele jêzyków europejskich, jak równie przez wiele lat tworzono instytuty szczepieñ antyospowych (nota bene, nowoczesny instytut im. Edwarda Jennera /The Edward Jenner Institute for Vaccine Research/ powsta³ w latach 90-tych XX w. i jest zlokalizowany tu obok Institute for Animal Health w Compton, Berkshire, Anglia wpisuj¹c siê w piêkn¹ tradycjê tych zapomnianych ju XIX-wiecznych Jennerowskich instytutów medycznych). Jak dalece E. Jenner wyprzedzi³ swój czas œwiadczy równie to, e dopiero w 1880 r. Ludwik P a s t e u r wykona³ kolejn¹ immunizacjê innym, ni CPXV, przedstawicielem œwiata wirusów, to jest przygotowanym laboratoryjnie wirusem wœcieklizny ( fixed rabies virus), który uodparnia³ osoby szczepione, ale nie wywo³ywa³ œmiertelnej choroby. Trzeci¹ próbê szczepienia przeciwko jeszcze innemu wirusowi ( ó³tej febry; 17D yellow fever vaccine) podjêto dopiero w 1930 r. [21]. Jak wspomniano wczeœniej, dynamiczny rozwój biomedycyny, w tym wirusologii, doprowadzi³ w II-po³owie XX w. (1967 r.) do uruchomienia przez Œwiatow¹ Organizacjê Zdrowia miêdzynarodowego programu zwalczenia ospy ludzkiej poprzez zastosowanie udoskonalonych szczepionek i masowych szczepieñ, w tym przede wszystkim w krajach azjatyckich, afrykañskich i po³udniowoamerykañskich, w których wystêpowa³y endemiczne ogniska ospy prawdziwej [7, 12, 15, 19]. W utworzonej The Global Commission for the Certification of Smallpox Eradication uczestniczyli znakomici wirusolodzy i epidemiolodzy z wielu krajów, w tym z Polski, a szczególnie donios³¹ rolê odegrali australijczyk dr Frank Fenner, uczeñ i wspó³pracownik innego s³ynnego wirusologa australijskiego, laureata nagrody Nobla (w 1960 r.) Sir Franka MacFarlane Burneta, jak równie amerykanin dr Donald A. H enderson [12]. Istniej¹ w¹tpliwoœci co do pochodzenia i naturalnych rezerwuarów wirusów ospy u ywanych do szczepieñ (wczeœniej CPXV, a nastêpnie VACV), które znacznie ró ni¹ siê od siebie wieloma cechami, w tym map¹ genetyczn¹. Zarówno pochodzenie VACV, jak i okreœlenie naturalnego gospodarza dla tych wirusów pozostaj¹ w sferze domniemañ i spekulacji. Wed³ug Fennera i wsp. [7] VACV móg³ powstaæ wskutek: (i) zaadaptowania siê VARV do krów, w których podlega³ kolejnym pasa om, (ii) wielokrotnych pasa y VARV w skórze zaka onych ludzi pod koniec XVIII w. i we wczesnych latach XIX w., co mog³o doprowadziæ do zmian genotypu i, w nastêpstwie, fenotypu dzikiego VARV w kierunku charakterystycznym dla VACV, (iii) wytworzenia siê hybryd CPXV i VARV we wczesnych latach XIX w., kiedy to CPXV by³ u ywany do wakcynacji pacjentów w szpitalach, w których podejmowano próby udzielania pomocy zaka onym ludziom. Byæ mo e VACV jest wyizolowan¹ ze zwierz¹t dzikich lub domowych wirusow¹ skamienia³oœci¹ ewolucyjn¹ i jest mo liwy do utrzymania tylko w specyficznych warunkach laboratoryjnych. Móg³ te powstaæ na skutek mutacji w genomie CPXV, do których dosz³o po wielokrotnych pasa ach wirusa w skórze ludzi oraz byd³a, owiec lub innych gatunków zwierz¹t warto wspomnieæ, e CPXV ma najwiêkszy genom ze wszystkich ortopokswirusów, a mutacje zachodz¹ w nim z du ¹ czêstotliwoœci¹ [7, 8, 21]. Do wytwarzania szczepionki przeciwospowej u ywano w XX w. g³ównie cielêta, które zaka ano VACV, mniej inne gatunki zwierz¹t, jak, na przyk³ad, owce. Wirusy szczepionkowe (przede wszystkim szczepy VACV Lister oraz VACV New York City Board of Health) namna ano te we wra liwych hodowlach komórek in vitro lub na b³onie kosmówkowo-omoczniowej (CAM, chorion allantois membrane) zalê onych jaj kurzych. Po ocenie ryzyka zwi¹zanego z u ywaniem do szczepieñ ró nych szczepów VACV wielu producentów zaczê³o stosowaæ jako wirus szczepionkowy tylko szczep Listera, który powodowa³ mniej groÿnych powik³añ u zaszczepionych osób. Nale y zaznaczyæ, e ka de szczepienie, szczególnie przy u yciu wirusa atenuowanego ( ywego, ale pozbawionego w laboratorium zdolnoœci wywo³ywania choroby), a nie inaktywowanego (zabitego), jest obarczone mniej-5 OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ 293 szym lub wiêkszym ryzykiem wywo³ania choroby zakaÿnej wskutek zawsze mo liwej rewersji wirusa atenuowanego do fenotypu cechuj¹cego w pe³ni zjadliwy szczep dziki. W przypadku atenuowanej szczepionki przeciwko VARV wystêpowa³y dwa rodzaje bardzo niebezpiecznych komplikacji: (i) uszkodzenia oœrodkowego uk³adu nerwowego (OUN) wskutek indukcji stanów zapalnych w mózgu [ neurovaccinia ] oraz (ii) powstawania zmian skórnych [ dermal vaccinia ] u osób zaszczepionych [7, 15]. Niebezpieczeñstwo to by³o szczególnie istotne u pacjentów, u których wystêpowa³a dysfunkcja mechanizmów odpornoœciowych, jak równie u chorych pobieraj¹cych leki immunosupresyjne. Sir Graham W i l s o n [7] stwierdzi³, e szczepionka przeciwko ospie ludzkiej, choæ w skali masowej spe³ni³a znakomicie swoj¹ rolê ochronn¹, by³a jednak przyczyn¹ wiêkszej liczby przypadków œmiertelnych ni jakakolwiek inna szczepionka. Ta opinia odnosi siê do zapaleñ mózgu oraz zapaleñ mózgu i rdzenia krêgowego wywo³ywanych przez atenuowane (lub tylko czêœciowo /!/ atenuowane) wirusy szczepionkowe szczególnie u zaszczepionych dzieci i osób starszych. Równie VARV powodowa³ podobne objawy u osób zaka onych wirus ten wystêpuj¹cy na obszarze Azji nazwano variola major virus (VARV major ; powodowa³ od 20 40% przypadków œmiertelnych), a we Wschodniej Afryce i Ameryce Po³udniowej variola minor virus (VARV minor lub alastrim ; powodowa³ oko³o 1% œmiertelnych przypadków). Porównuj¹c liczbê przypadków zapaleñ mózgu indukowanych przez VARV i ywe, szczepionkowe wirusy ospy (VACV) stwierdzono, e przeciêtnie w I po³owie XX w. VARV major by³ przyczyn¹ oko³o 2000 przypadków zapaleñ mózgu na milion zachorowañ, a VARV minor 500 [7, 14, 15]. Po szczepieniach wykonanych w Holandii w latach wykazano wyst¹pienie 258 przypadków zapaleñ mózgu. Na podstawie danych epidemiologicznych z wielu krajów stwierdzono, e VARV major powoduje zapalenia mózgu u oko³o 0,2% chorych, a VARV minor u 0,05%. Tak wiêc zarówno VARV dziki, jak i wirusy szczepionkowe mog³y powodowaæ du ¹ liczbê zgonów, co czyni³o ca³y program szczepieñ bardzo ryzykownym (z tego powodu mo liwoœæ u ycia VACV, czy te innych wirusów, jako wektorów ró nych genów innych czynników zakaÿnych niesie ze sob¹ du e ryzyko ciê kich zachorowañ mog¹cych zakoñczyæ siê œmierci¹ pacjentów, do których wprowadzono wektory szczepionkowe stosuj¹c jako noœnik VACV w wielu przypadkach ogranicza to lub ca³kowicie uniemo liwia ich stosowanie do celów profilaktycznych). Nale y przypomnieæ, e w 1967 r., a wiêc roku rozpoczêcia masowych szczepieñ, ospa prawdziwa wystêpowa³a endemicznie w 31 krajach ze stwierdzonym eksportem wirusa do innych 15 krajów. Mimo ró nych zagro eñ i ró nych czasowych pora ek Intensified Smallpox Eradication Program ( ) zakoñczy³ siê jednak olbrzymim, spektakularnym sukcesem ostatnie ogniska ospy ludzkiej zarejestrowano w 1976 r. w Etiopii, a w 1977 r. w Mogadishu, stolicy Somalii. Natomiast ostatnimi indywidualnymi zgonami w wyniku zaka enia naturalnego VARV by³o zejœcie œmiertelne kucharza w szpitalu równie w Somalii w mieœcie Merka, a w wyniku zaka enia laboratoryjnego œmieræ cz³onka zespo³u badawczego w Birmingham w Anglii w 1978 r. W dniu 8 maja 1980 r., Œwiatowa Organizacja Zdrowia og³osi³a, e œwiat jest wolny od VARV, a zatem ospa ludzka zosta³a skutecznie zwalczona jako jedyna do tej pory z wielkich, historycznych plag zwi¹zanych z naszym gatunkiem [7, 12, 15]. Nie powinniœmy byæ jednak tym uspokojeni, gdy szczepy VARV w dalszym ci¹gu istniej¹, a obecna sytuacja mo e byæ cisz¹ przed burz¹. W wyniku porozumienia spo³ecznoœci miêdzynarodowej w latach 1994 i 1999 szczepy VARV bêd¹ce w posiadaniu ró nych krajów zosta³y, przynajmniej oficjalnie, zniszczone z wyj¹tkiem zachowania ich w laboratoriach referencyjnych dwóch krajów wspó³pracuj¹cych œciœle z WHO, to jest w: (i) Rosji w Institute of Virus Preparations w Moskwie i State Research Center of Virology and Biotechnology (VECTOR) w Koltsovo w regionie nowosybirskim oraz (ii) USA w US Center for Disease Control and Prevention w Atlancie, GA [12, 31]; szczepionkowy referencyjny szczep VACV (szczep Listera Elstree) jest przechowywany w WHO Collaborating Centre for Smallpox Vaccine w Bilthoven, Holandia. Wielu ekspertów uwa a, e szczepy VARV mog¹ znajdowaæ siê równie w innych krajach, nie mówi¹c ju o laboratoriach wojskowych, w których prowadzi siê badania nad zaawansowan¹ genetycznie i biotechnologicznie broni¹ biologiczn¹ i jej produkcj¹. Pomimo trwaj¹cej od wiêcej ni dekady gor¹cej dyskusji nad ca³kowitym zniszczeniem istniej¹cych szczepów VARV, do tej pory nie podjêto takiej decyzji, a wrêcz przeciwnie, zmieniaj¹c obowi¹zuj¹c¹ do tej pory rozs¹dn¹ strategiê Œwiatowa Organizacja Zdrowia dopuszcza ostatnio prowadzenie œciœle okreœlonych badañ na tych szczepach w wyznaczonych do tego celu instytucjach naukowych, jak we wspomnianym wczeœniej US Center for Disease Control and Prevention w Atlancie. Nale y podkreœliæ, e bardzo du a czêœæ ludzkoœci nie jest od ponad 30 lat szczepiona przeciwko ospie prawdziwej, dlatego te w przypadku ponownego, celowego lub przypadkowego, wprowadzenia VARV do œrodowiska mog³aby nast¹piæ katastrofa na masow¹ skalê, szczególnie wœród m³odszej czêœci populacji œwiatowej, a olbrzymia mobilnoœæ komunikacyjna milionów ludzi i ³atwo przewidywalna panika tylko zwiêkszy³yby stopieñ œmiertelnego zagro enia w tym6 294 MAREK NIEMIA TOWSKI I WSP. kontekœcie polecam P.T. czytelnikom interesuj¹cy artyku³ Ve s p i gnaniego [35]. I chocia badania D e m k o w i c z a i wsp. [4] wykaza³y, e aktywne VACV-swoiste CD8 + i CD4 + CTL (cytotoksyczne limfocyty T pamiêci) mo na stwierdziæ nawet po 50 latach u osób, które w wieku dzieciêcym zosta³y zaszczepione VACV, to warto zauwa yæ, e status immunologiczny osób zaszczepionych przeciwko ospie ludzkiej kilkadziesi¹t lat wczeœniej nie jest klarowny i w chwili obecnej trudno odpowiedzialnie stwierdziæ, na ile skuteczne okaza³yby siê teraz szczepienia wykonane przed 1980 r. Dlatego te prowadzenie badañ nad patogenez¹ zaka eñ ortopokswirusami i innymi groÿnymi patogenami powinno stanowiæ jeden z priorytetów naukowych w czo³owych oœrodkach œwiata zajmuj¹cych siê immunobiologi¹ zaka eñ wirusowych, a poznanie strategii walki z VARV oraz opracowanie nowych, skuteczniejszych ni dotychczas stosowane, biopreparatów antyospowych powinno byæ nadrzêdnym celem jednocz¹cym, w dobie coraz groÿniejszego bioterroryzmu pañstwowego i indywidualnego, odpowiedzialn¹ czêœæ spo³ecznoœci œwiatowej [1, 5, 11, 12]. Rozwój wspó³czesnych szczepionek anty-varv jest zwi¹zany z badaniami modelowymi nad szczepionkami DNA, które mog¹ chroniæ ma³py (g³ównie cynomolgus i rhesus) przed œmiertelnymi dawkami wirusa ospy ma³p (MPXV, monkeypox virus) [6, 7, 12]. Prowadzone prace badawcze zmierzaj¹ do uzyskania bezpiecznych szczepionek, które zast¹pi¹ stare, jeszcze z okresu trwania ogólnoœwiatowego programu szczepieñ w II po³owie XX w. W okresie przejœciowym, miêdzy tym co by³o ( stare szczepy VACV), a tym co bêdzie (nowoczesne szczepionki DNA i inne), bardzo efektywne stare, ale daj¹ce groÿne efekty uboczne, szczepy VACV s¹ zastêpowane bezpieczniejszymi szczepami VACV, jak: (i) zmodyfikowany, ywy szczep Ankara (MVA, modified vaccinia Ankara; pasa owany 574 razy w fibroblastach zarodków kury) lub (ii) szczep DryVax u ywany do szczepienia ludzi w USA u pewnej liczby osób zaszczepionych DryVax stwierdzono jednak wyst¹pienie efektu ubocznego w postaci stanów zapalnych serca. Oba te szczepy s¹ produkowane przez firmy: (i) Acambis, Cambridge, MA, USA oraz (ii) Danish-German biotech Bavarian- Nordic). W U.S. Army Medical Research Institute of Infectious Diseases w Fort Detrick, MD, prowadzone s¹ intensywne prace nad szczepionk¹ zawieraj¹c¹ geny dla tych bia³ek VACV, które odgrywaj¹ g³ówn¹ rolê w indukcji odpornoœci anty-varv. Natomiast US Food and Drug Administration (FDA) dopuszcza mo liwoœæ wykonywania szczepieñ anty-varv tylko u œciœle okreœlonych grup zawodowych podwy szonego ryzyka ze wzglêdu na mo liwoœæ wyst¹pienia powik³añ poszczepiennych (zapalenie mózgu, ciê kie postêpuj¹ce zaka enie VACV /krowianka zgorzelinowa, vaccinia gangrenosa/, wyprysk poszczepienny /eczema vaccinatum/, uogólnione zaka enie skóry/ krowianka uogólniona/ i inne) [7, 12]. Spo³ecznoœæ miêdzynarodowa jest w praktyce bezbronna w obliczu ci¹gle istniej¹cego zagro enia osp¹ prawdziw¹, chocia Œwiatowa Organizacja Zdrowia dysponuje w Genewie nadzwyczajn¹ rezerw¹ szczepionki anty-varv. Prowadzone s¹ równie intensywne badania nad ró nymi chemioterapeutykami (np. cidofovirem inhibitorem wirusowej polimerazy DNA), które mog¹ byæ u yte do walki z VARV. 3. Indukcja wrodzonej i nabytej odpornoœci przeciwzakaÿnej przez wirusowe zaka enia oœrodkowego uk³adu nerwowego Wspó³praca wirusologów, immunologów, neurobiologów, patologów, cytobiologów i przedstawicieli innych dyscyplin biomedycyny nad wyjaœnieniem komórkowych i molekularnych mechanizmów patogenezy wirusowej zachodz¹cej w oœrodkowym uk³adzie nerwowym (OUN) oraz odpowiedzi immunologicznej zaka onego organizmu doprowadzi³a do ukszta³towania siê tak fascynuj¹cych nauk, jak neurowirusologia oraz neuroimmunologia. Zdolnoœæ zaka ania komórek OUN u cz³owieka i replikowania siê w nich posiada wiele wirusów nale ¹cych do ró nych rodzin, w tym wirusy opryszczki (HSV-1, herpes simplex virus 1/HHV-1, human herpesvirus 1), wirusy polio i inne [7, 20]. Niektóre wirusy, jak, na przyk³ad, HHV-1 mog¹ powodowaæ utajone lub przetrwa³e zaka enia wra liwych komórek, w których kwas nukleinowy wirusa jest wbudowany w genom komórki nie wywo³uj¹c widocznych objawów klinicznych a do chwili jego reaktywacji klasycznym przyk³adem jest wspomniany HHV-1, którego DNA znajduje siê w zwojach nerwu trójdzielnego mózgu u wiêkszoœci ludzi i, po reaktywacji wirusa, mo e powodowaæ w okreœlonych sytuacjach (np. wskutek stresu, zmiany klimatu, zaka enia innymi, ni HHV-1, czynnikami zakaÿnymi) popularn¹ opryszczkê wargow¹ (herpesvirus labialis) [8, 23]. Równie VARV i VACV mog¹, mimo istnienia silnej bariery krew-mózg, zaka aæ OUN, co mo e prowadziæ do zapalenia mózgu i œmierci organizmu zaka onego na drodze naturalnej lub wskutek przeprowadzonych szczepieñ [15]. Tak wiêc, uwzglêdniaj¹c historiê neurowirusologii, nawet w okresie, w którym nie by³a ona jeszcze zdefiniowana jako nauka, komplikacje neurologiczne wynikaj¹ce nie tylko z zaka enia VARV, ale i szczepieñ ochronnych VACV przeciwko ospie prawdziwej by³y jednymi z najwczeœniej rozpoznanych. Innymi wirusami wywo³uj¹cymi neuropatie poszczepionkowe s¹, przyk³adowo, wirusy u ywane jako szczepionki: (i) ywe (atenuowane): wspomniany VACV,7 OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ 295 nastêpnie wirusy polio (Enterovirus), œwinki (Rubulavirus), odry (Morbillivirus), ró yczki (Rubivirus) i HHV-3 (human herpesvirus 3; Varicellovirus) i inne, (ii) zabite (inaktywowane): wirus wœcieklizny (Lyssavirus), wirusy influenzy A i B (Orthomyxoviridae), ponownie wspomniany ju wirus polio oraz wirus zapalenia w¹troby A (Hepatovirus) i inne, jak równie (iii) szczepionki rekombinowane z u yciem, na przyk³ad, bia³ek wirusa zapalenia w¹troby B [8, 14]. Oprócz wywo³ywania zaburzeñ w OUN atenuowane wirusy szczepionkowe mog¹ wywieraæ dzia³anie teratogenne, co ma szczególnie dramatyczne konsekwencje zarówno u ludzi, jak i u zwierz¹t. Znane s¹ doskonale z przesz³oœci sytuacje, w których do szczepieñ u ywano wirusy z obecnymi w szczepionce wirusami pasa erskimi, jak to mia³o miejsce w USA na prze³omie lat 40/50 XX w. w przypadku szczepionkowego wirusa polio (synonimy: Heine-Medine disease virus; infantile paralysis virus; Enterovirus) zanieczyszczonego, czego nigdy nie potwierdzono doœwiadczalnie, pasa erskim SV40 (simian virus 40; Polyomavirus) lub SIV (simian immunodeficiency virus; Lentivirus). W zwi¹zku z namna aniem in vitro w laboratoriach szczepionkowego wirusa polio w pierwotnych hodowlach komórek nerek ma³p zaka onych SV40 i/lub SIV, a nastêpnie podawaniem doustnym szczepionym dzieciom jako szczepionki nie tylko ywych, atenuowanych wiruów polio, ale i dodatkowo pasa erskich SIV, które wielokrotnie pasa uj¹c siê u cz³owieka mog³y ulegaæ mutacjom prze³amuj¹c nastêpnie barierê gatunkow¹ i objawiaj¹c siê jako HIV przyczyna AIDS. To tylko kilka z realnych mo liwoœci obrazuj¹cych komplikacje bêd¹ce pochodnymi szczepieñ genialnego pomys³u E. Jennera. Do tej pory brak jest szczegó³owych informacji, które komórki OUN s¹ zaka ane przez VARV (w zaka eniu naturalnym) i VACV (po szczepieniu), co ma istotne znaczenie dla poznania mechanizmów patogenezy ortopokswirusowej, równie w kontekœcie opracowywania skutecznej terapii anty-varv. Wiadomo, e VARV by³ jednym z g³ównych sprawców utraty wzroku na przyk³ad w XVIII-wiecznej Europie oko³o 30% wszystkich przypadków zaniewidzenia by³o spowodowane przez VARV. Ortopokswirusy mog¹ równie wywo³ywaæ zaka enia spojówek, w których replikuj¹ siê doprowadzaj¹c do stanu zapalnego [7, 17, 18, 25]. Warto wspomnieæ, e do g³ównych wirusowych patogenów oczu nale ¹ adenowirusy i HHV-1 te ostatnie mog¹ wywo³ywaæ opryszczkowe zapalenie rogówki (herpetic stromal keratitis, HSK) i w wyniku tego zaburzenia widzenia i/lub ca³kowite zaniewidzenie wskutek immunopatologicznej reakcji w zaka onym oku zwi¹zanej z migracj¹ do rogówki z replikuj¹cym siê wirusem komórek uk³adu odpornoœciowego (na przyk³ad CTL CD8 + i/lub pomocniczych limfocytów T CD4 + Th1) z uszkodzonymi mechanizmami efektorowymi (aktywnoœcia cytotoksyczn¹ i zmian¹ w profilu wytwarzania jednych z wa nych bia³ek regulatorowych cytokin), które nawet gdyby by³y sprawne, to tym bardziej wp³ynê³yby destrukcyjnie na rogówkê uszkadzaj¹c j¹ bezpowrotnie wskutek, chocia by, uruchomienia silnej antygenowo-swoistej aktywnoœci cytotoksycznej w tej czêœci oka, w której nie powinno jej nigdy byæ [17, 18, 23, 24, 28]. 4. Ortopokswirus ospy myszy wartoœciowym modelem badawczym nad immunobiologi¹ wirusa ospy ludzkiej Skoro nie powinno siê, ze zrozumia³ych i wspomnianych ju w tym artykule, wzglêdów bezpieczeñstwa, prowadziæ badañ przy u yciu VARV, to w celu lepszego poznania w odniesieniu do prac zmierzaj¹cych do opracowania nowych generacji leków i bezpiecznych szczepionek anty-varv mechanizmów patogenezy ospy prawdziwej wirus ospy myszy (ECTV) zosta³ zaakceptowany przez wirusologów i immunologów jako wirus modelowy. Wirus ten, opisany po raz pierwszy przez J. M a r c h a l a w 1930 r. [20], Sir F. MacFarlane Burnet dopiero w 1945 r. zaklasyfikowa³ do rodzaju Orthopoxvirus (Tab. I). ECTV u genetycznie wra liwych na zaka enie myszy o haplotypie H-2 a (np. A, A/J) i H-2 d (np. BALB/c) wywo³uje ektromeliê ospê myszy [2, 7, 16, 22, 25, 26, 27, 30] nazywan¹ obrazowo smallpox of mice. Dlatego te od wielu lat prowadzone s¹ w naszym laboratorium badania z u yciem myszy BALB/c (H-2 d ), w których po dostopowym zaka eniu wysoce zjadliwym, referencyjnym szczepem Moscow ECTV (ECTV-MOS; wirus wyizolowany przez profesora V.D. S o l o v i e v a w Moskwie w po³owie lat 40-tych XX w.) dochodzi do uogólnionego zaka enia czêsto koñcz¹cego siê œmierci¹ zaka onych zwierz¹t [6]. Ortopokswirusy mog¹ bowiem powodowaæ zaka enia miejscowe (CPXV) lub uogólnione (ECTV), a VARV jest przyk³adem wirusa mog¹cego wywo³ywaæ zaka- enie miejscowe i uogólnione. W zaka eniu miejscowym wirus replikuje siê w komórkach skóry, natomiast w zaka eniu uogólnionym we wrotach zaka enia, Tabela I Historia izolacji szczepów wirusa ospy myszy (ECTV) Nazwa szczepu Kraj Rok izolacji Hampstead Anglia 1930 Moscow Rosja 1947 Ishibashi I III Japonia 1966 Münich 1 Niemcy 1976 NIH-79 USA 1979 St. Louis 79 USA 19798 296 MAREK NIEMIA TOWSKI I WSP. Rys. 2. Zmiany kliniczne u myszy BALB/c (H-2 d ) w 14 dniu po dostopowym zaka eniu szczepem Moscow wirusa ektromelii (ECTV-MOS; ATCC 1374). Strza³ka bia³a wskazuje zmiany skórne na ma³ owinie usznej, a strza³ka czarna stan zapalny (conjunctivitis) w spojówce ww. myszy Rys. 3. Rozetka utworzona z komórki prezentuj¹cej antygeny (APC) szczepu Moscow wirusa ektromelii (ECTV-MOS) i komórek efektorowych (EC, effector cells; limfocyty T CD4 + / CD8 +, limfocyty B, komórki NK i/lub neutrofile) w œledzionie myszy BALB/c (H-2 d ) w 7 dni po zaka eniu dostopowym badania w³asne. IS pokazuje mikroprzestrzeñ synapsy immunologicznej miêdzy APC a EC. Mikroskop SEM FEI Quanta 200; Centrum Analityczne SGGW a nastêpnie przedostaje siê do krwi (wiremia pierwotna) z któr¹ przenosi siê do narz¹dów mi¹ szowych (œledziony, w¹troby), w których zachodzi ponownie proces jego replikacji zwi¹zany z tworzeniem siê nowych cz¹steczek zakaÿnych wirusa, a nastêpnie ponowne uwalnianie wirusa do krwi (wiremia wtórna). W ospie myszy (Rys. 2) mo e dojœæ do charakterystycznych zmian ospowych na skórze, nekrozy oraz amputacji ogona i/lub ³apek zaka onych zwierz¹t, jak równie zapalenia spojówek i zaka enia OUN zarówno w przypadku ektromelii, jak i ospy prawdziwej u ludzi czas wylêgania choroby wynosi oko³o dni, a po 2 tygodniach mo e nast¹piæ okres zdrowienia zarówno u ocala³ych myszy, jak i ludzi. Dramatyczne skutki zaka enia VARV uwidaczniaj¹ siê w typowych ciê kich objawach ogólnych z dolegliw¹ wysypk¹ (krosty) na skórze i b³onach œluzowych, a podobieñstwo objawów klinicznych ospy myszy do ospy prawdziwej jest uderzaj¹ce. Badania wykonane w naszym zespole wykaza³y zmienn¹ w czasie intensywn¹ replikacjê ECTV-MOS w mózgu i wielu innych narz¹dach (np. skórze, spojówkach, wêz³ach ch³onnych, œledzionie, w¹trobie, p³ucach i uk³adzie rozrodczym) zaka onych myszy BALB/c (H-2 d ), co wskazuje na wytworzenie siê sieci replikuj¹cego siê wirusa, która kontroluje w ró nych komórkach i narz¹dach/tkankach efektorowe mechanizmy odpornoœciowe zachodz¹ce w zaka onym organizmie [3, 17, 18, 31]. Dlatego te poznanie mechanizmów komórkowych i molekularnych zwi¹zanych z patogenez¹, w tym neuropatogenez¹, wirusowego zaka enia spojówek i mózgów myszy BALB/c w zaka eniu uogólnionym, po dostopowym wprowadzeniu ECTV-MOS, mo e znaleÿæ praktyczne zastosowanie przy opracowywaniu nowych (bio)preparatów antywirusowych. Tak wiêc chocia istniej¹ istotne ró nice pomiêdzy VARV i ECTV (np. wynikaj¹ce z faktu odmiennoœci antygenowej tych wirusów oraz procesu przetwarzania i prezentacji ich antygenów efektorowym mechanizmom zaka onego gospodarza, w tym zró nicowanemu repertuarowi receptorów limfocytów T [TcR] i limfocytów B [BcR]), to jednak podstawowe procesy obronne s¹ zbli one u ludzi (VARV) i myszy (ECTV), a lepsze ich zrozumienie jest pochodn¹ badañ prowadzonych przy u yciu modelowego uk³adu doœwiadczalnego: myszy okreœlonego haplotypu (np. H-2 d ) jako genetycznie wra liwy gospodarz ECTV. Jako przyk³ad takich badañ na rys. 3 przedstawiono rozetkê komórek powsta³¹ wskutek prezentacji komórkom efektorowym (effector cells, EC, np. CTL CD8 +, limfocyty T CD4 +, limfocyty B, komórki NK i neutrofile) w œledzionie myszy BALB/c antygenów ECTV-MOS przez komórki prezentuj¹ce antygen (APC; komórki dendrytyczne lub makrofagi), a na rys. 4 ogonki aktynowe utworzone w komórkach HeLa zaka onych ECTV-MOS. Ludzkoœæ, poprzez reprezentuj¹cych ja naukowców i lekarzy, odnios³a sukces zakoñczony opanowaniem ospy prawdziwej. Jednak e zagro enie t¹ chorob¹ istnieje nadal, czego dowodem s¹ narastaj¹ce obawy przed rozwojem nowych generacji broni biologicznej i to niezale nie od tego, kto j¹ wytwarza i jakiej reto-9 OSPA PRAWDZIWA: PATRZ C WSTECZ DO EDWARDA JENNERA, A NAWET TROCHÊ DALEJ 297 Rys. 4. [A] Komórki HeLa (ATCC CCL-2) 19 godzin po zaka eniu ECTV-MOS. Kolor zielony wskazuje na lokalizacjê wirusa w zaka onej komórce (barwienie króliczymi anty-ectv-mos pab/fitc), kolor czerwony na F-aktynê (barwienie Alexa Fluor 633-Falloidyna) i kolor niebieski na DNA (barwienie DAPI). Strza³kami ó³tymi oznaczono ogonki aktynowe unosz¹ce na swoim zakoñczeniu wiriony ECTV-MOS. [B] Ogonek aktynowy z ECTV-MOS w powiêkszeniu. Z badañ w³asnych; zdjêcie wykonano w mikroskopie Olympus BX60 wyposa onym w Color View III cooled CCD camera ryki u ywa w celu wyt³umaczenia tego faktu. Kontrolê zagro eñ epidemiologicznych prowadzi skutecznie Œwiatowa Organizacja Zdrowia. Warto przypomnieæ znan¹ sentencjê: Indigne vivit, per quem non vivit alter * z pewnoœci¹ nie mo na tych s³ów odnieœæ do Edwarda Jennera, którego pasja i intuicja wielkiego badacza spowodowa³a, e od ponad 200 ju lat, pomimo wielu dramatycznych niepowodzeñ zwi¹zanych z powik³aniami po u yciu szczepionek anty-varv i zgonów osób chorych na ospê poszczepienn¹, da³ szansê godnego ycia tym innym, milionom ludzi, potencjalnym ofiarom ospy czarnej. 4. Podsumowanie * Niegodnie yje, kto nie daje yæ innemu W artykule odniesiono siê do problemu ospy prawdziwej, jednej z najgroÿniejszych na przestrzeni wieków chorób zakaÿnych. Przypomniano nazwisko Edwarda Jennera jako twórcy pierwszej (1796 r.) skutecznej szczepionki przeciwko ospie ludzkiej oraz sukces Œwiatowej Organizacji Zdrowia w ca³kowitym zwalczeniu tej choroby, co nast¹pi³o w 1980 r. Opisano wp³yw zaka enia ortopokswirusowego na mechanizmy efektorowe wrodzonej i nabytej odpornoœci przeciwzakaÿnej, jak równie podkreœlono u ytecznoœæ wirusa ospy myszy (ektromelii) jako modelu badawczego dla wirusa ospy ludzkiej. Piœmiennictwo 1. Breman J.G., Henderson D.A.: Poxvirus dilemmas: monkeypox, smallpox and biological terrorism. N. Engl. J. Med. 339, (1998) 2. Buller R.M.L., Fenner F., Mousepox (w) The Mouse in Biomedical Research. History, Wild Mice, and Genetics, vol. II Diseases, red. J.G. Fox, S.W. Barthold, M.T. Davisson, C.E. Newcomer, F.W. Quimby, A.L. Smith, Associated Press and Elsevier, Inc., Amsterdam, Boston, Heidelberg, London, New York, Oxford, Paris, San Diego, San Francisco, Singapore, Sydney, Tokyo, 2007, s Cymerys J., Krzy owska M., Spohr I., Winnicka A., Niemia³towski M.: Hsp-27, hsp-70 and hsp-90 expression and10 298 MAREK NIEMIA TOWSKI I WSP. apoptosis in macrophages during ectromelia (mousepox) virus infection. Centr. Eur. J. Immunol. 34, (2009) 4. Demkowicz W.E. Jr., Littaua R.A., Wang J., Ennis F.A.: Human cytotoxic T-cell memory: long-lived responses to vaccinia virus. J. Virol. 70, (1996) 5. Enserink M.: How devastating would a smallpox attact really be Science, 296, (2002) 6. Enserink M.: Smallpox vaccines: looking beyond the next generation. Science, 304, 809 (2004) 7. Fenner F., Wittek R., Dumbell K.R., The Othopoxviruses. Academic Press, Inc. San Diego, New York, Berkeley, Boston, London, Sydney, Tokyo, Toronto, 1989, s Fields B.N., Knipe D.M., Howley P.M., Fundamental virology. Lippincott-Raven Publ., Philadelphia, New York, 1996, s Gorbach S.L., Bartlett J.G., Blacklow N.R., Infectious Diseases. 3 rd Ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, Baltimore, New York, London, Buenos Aires, Hong Kong, Sydney, Tokyo, 2004, s Gross L., Siewcy chorób i œmierci. Biblioteka Wiedzy, tom 49. Trzaska, Evert i Michalski. Warszawa, 1948, s Halloran M.E., Longini I.M. Jr.: Smallpox bioterror response. Science, 300, (2003) 12. Henderson D.A., Inglesby T.V., Bartlett J.G., Ascher M.S., Eitzen E., Jahrling P.B., Hauer J., Layton M., McDade J., Osterholm M.T., O Toole T., Parker G., Perl T., Russel P.K., Tonat K.: Smallpox as a biological weapon. JAMA, 22, (1999) 13. Huq F.: Effect of temperature and relative humidity on variola virus in crusts. Bull. World Health Organ. 54, (1976) 14. Johnson R.T., Viral infections of the nervous system. Lippincott-Raven Publ., Philadelphia-New York. 2 nd edition. 1998, s Kempe C.H.: Studies on smallpox and complications of smallpox vaccination. Pediatrics, 26, (1960) 16. Krzy owska M., Niemia³towski M.: Supresja apoptozy w zaka eniach chordopokswirusami. Post. Biol. Kom. 30, (2003) 17. Krzy owska M., Polañczyk M., Baœ M., Cymerys J., Schollenberger A., Chiodi F., Niemia³towski M.: Mousepox conjunctivitis: the role of Fas/FasL mediated apoptosis of epithelial cells in virus dissemination. J. Gen. Virol. 86, (2005) 18. Krzy owska M., Schollenberger A., Skierski J., Niemia³towski M.: Apoptosis during ectromelia orthopoxvirus infection is DEVDase dependent: in vitro and in vivo studies. Microb. Infect. 4, (2002) 19. Mack T.: A different view of smallpox and vaccination. New Engl. J. Med. 348, (2003) 20. Marchal J.: Infectious ectromelia. A hitherto undescribed virus disease of mice. J. Pathol. Bacteriol. 33, (1930) 21. Mahy B.W.J., A dictionary of virology. Academic Press. San Diego, London, New York, Boston, Sydney, Tokyo, Toronto, 2001, s Navarini A.A., Krzy owska M., Lang K.S., Horvath E., Hengartner H., Niemia³towski M.G., Zinkernagel R.M.: Long lasting immunity by early infection of maternal-antibody protected infants. Eur. J. Immunol. 39, (2009) 23. Niemia³towski M.G.: Aktywnoœæ cytotoksyczna efektorowych limfocytów T w ostrych i persystentnych/latentnych zaka eniach herpeswirusowych i HIV: testament zaka onej komórki. Post. Mikrobiol. 38, (1999) 24. Niemia³towski M.G., Rouse B.T.: Phenotypic and functional studies on ocular T cells during herpetic stromal infections of the eye. J. Immunol. 148, (1992) 25. Niemia³towski M.D., Spohr de Faundez I., Gieryñska M., Malicka E., Toka F.N., Schollenberger A., Popis A.: The inflammatory and immune response to mousepox (infectious ectromelia) virus. Acta Virol. 38: (1994) 26. Niemia³towski M.G., Toka F.N., Malicka E., Gieryñska M., Spohr de Faundez I., Schollenberger A.: Controlling Orthopoxvirus infections 200 years after Jenner s revolutionary immunization. Arch. Immunol. Ther. Exp. 44, (1996) 27. Niemia³towski M.G., Toka F.N., Malicka E., Spohr de Faundez I., Gieryñska M., Schollenberger A.: Orthopoxviruses and their immune escape. Rev. Med. Virol. 7, (1997) 28. Niemia³towski G., Gieryñska M., Toka F.N., Spohr Cespedes I., Schollenberger A., Popis A.: Herpetic stromal keratitis and mousepox conjunctivitis: CD4 + Th1 cell aggression in infected ocular tissues. Centr. Eur. J. Immunol. 24, (1999) 29. Seet B.T., Johnston J.B., Brunetti C.R., Barrett J.W., Everett H., Cameron C., Sypula J., Nazarian S.H., Lucas A., McFadden G.: Poxviruses and immune evasion. Annu. Rev. Immunol. 21, (2003) 30. Spohr de Faundez I., Gieryñska M., Niemia³towski M.G., Malicka E., Popis A., Ectromelia virus estabilishes a persistent infection in spleen dendritic cells and macrophages of BALB/c mice following the acute disease (w) Dendritic Cells in Fundamental and Clinical Immunology, red. J. Banchereau, D. Schmitt, Plenum Press, New York, 1991, s Spohr Cespedes I., Toka F.N., Schollenberger A., Gieryñska M., Niemia³towski M.: Pathogenesis of mousepox in H-2 d mice: evidence for MHC class I-restricted CD8 + and MHC class II-restricted CD4 + CTL antiviral activity in the lymph nodes, spleen and skin, but not in the conjunctivae. Microb. Infect. 3, (2001) 32. Stone R.: WHO puts off destruction of U.S., Russian caches. Science, 295, (2002) 33. Szulc L., Niemia³towski M.G.: Synapsy immunologiczne i ich rola w mechanizmach efektorowych uk³adu odpornoœciowego. Post. Biol. Kom. 34, (2007) 34. Tscharke D.C. Karupiah G., Zhou J., Palmore T., Irvine K.R., Haeryfar S.M.M., Williams S., Sidney J., Sette A., Bennik J.R., Yewdell J.W.: Identification of poxvirus CD8 + T cell determinants to enable rational design and characterization of smallpox vaccines. J. Exp. Med. 201, (2005) 35. Vespignani A.: Predicting the behavior of techno-social systems. Science, 325, (2009) Grant no 2 PO5A (dla MN) z Ministerstwa Nauki i Szkolnictwa Wy szego w Warszawie Podobne dokumenty
Dziennik Ustaw Nr 241 15978 Poz. 2097 2097 ROZPORZÑDZENIE MINISTRA ZDROWIA 1) z dnia 23 grudnia 2002 r. w sprawie niepo àdanych odczynów poszczepiennych. Na podstawie art. 19 ust. 3 ustawy z dnia 6 wrzeênia Bardziej szczegółowo DOPALACZE. - nowa kategoria substancji psychoaktywnych
DOPALACZE - nowa kategoria substancji psychoaktywnych CZYM SĄ DOPALACZE? Dopalacze stosowana w Polsce, potoczna nazwa różnego rodzaju produktów zawierających substancje psychoaktywne, które nie znajdują Bardziej szczegółowo PROCEDURA OCENY RYZYKA ZAWODOWEGO. w Urzędzie Gminy Mściwojów
Temat: Czy świetlówki energooszczędne są oszczędne i sprzyjają ochronie środowiska? Karta pracy III.. Imię i nazwisko klasa Celem nauki jest stawianie hipotez, a następnie ich weryfikacja, która w efekcie Bardziej szczegółowo Prezentacja dotycząca sytuacji kobiet w regionie Kalabria (Włochy)
TEST dla stanowisk robotniczych sprawdzający wiedzę z zakresu bhp 1. Informacja o pracownikach wyznaczonych do udzielania pierwszej pomocy oraz o pracownikach wyznaczonych do wykonywania działań w zakresie Bardziej szczegółowo 3.2 Warunki meteorologiczne
Fundacja ARMAAG Raport 1999 3.2 Warunki meteorologiczne Pomiary podstawowych elementów meteorologicznych prowadzono we wszystkich stacjach lokalnych sieci ARMAAG, równolegle z pomiarami stê eñ substancji Bardziej szczegółowo 1.1. Przedmiotem zamówienia jest odbiór i unieszkodliwienie odpadów medycznych z grupy 18 01.
Białystok, dn. 24.04.2015 r. Uniwersytecki Szpital Kliniczny Białymstoku ul. M. Skłodowskiej Curie 24 A 15-276 Białystok do kontaktu : ul. Żurawia 14 15-540 Białystok tel. centr. 85-7409401 fax 7409600 Bardziej szczegółowo DE-WZP.261.11.2015.JJ.3 Warszawa, 2015-06-15
CENTRUM BADANIA OPINII SPOŁECZNEJ SEKRETARIAT OŚRODEK INFORMACJI 629-35 - 69, 628-37 - 04 693-46 - 92, 625-76 - 23 UL. ŻURAWIA 4A, SKR. PT.24 00-503 W A R S Z A W A TELEFAX 629-40 - 89 INTERNET http://www.cbos.pl Bardziej szczegółowo ROZPORZĄDZENIE MINISTRA ZDROWIA 1)
ZASADY WYPEŁNIANIA ANKIETY 1. ZMIANA GRUPY PRACOWNIKÓW LUB AWANS W przypadku zatrudnienia w danej grupie pracowników (naukowo-dydaktyczni, dydaktyczni, naukowi) przez okres poniżej 1 roku nie dokonuje Bardziej szczegółowo SCENARIUSZ LEKCJI WYCHOWAWCZEJ: AGRESJA I STRES. JAK SOBIE RADZIĆ ZE STRESEM?
SCENARIUSZ LEKCJI WYCHOWAWCZEJ: AGRESJA I STRES. JAK SOBIE RADZIĆ ZE STRESEM? Cele: - rozpoznawanie oznak stresu, - rozwijanie umiejętności radzenia sobie ze stresem, - dostarczenie wiedzy na temat sposobów Bardziej szczegółowo I. POSTANOWIENIE OGÓLNE
Załącznik do Zarządzenia Nr 26/2015 Rektora UKSW z dnia 1 lipca 2015 r. REGULAMIN ZWIĘKSZENIA STYPENDIUM DOKTORANCKIEGO Z DOTACJI PODMIOTOWEJ NA DOFINANSOWANIE ZADAŃ PROJAKOŚCIOWYCH NA UNIWERSYTETCIE KARDYNAŁA Bardziej szczegółowo Dziennik Ustaw Nr 234 14858 Poz. 1974 ROZPORZÑDZENIE MINISTRA PRACY I POLITYKI SPO ECZNEJ 1) z dnia 18 grudnia 2002 r.
KOMISJA WSPÓLNOT EUROPEJSKICH Bruksela, dnia 13.12.2006 KOM(2006) 796 wersja ostateczna Wniosek DECYZJA RADY w sprawie przedłużenia okresu stosowania decyzji 2000/91/WE upoważniającej Królestwo Danii i Bardziej szczegółowo Efektywna strategia sprzedaży
Sygn. akt II UK 27/15 WYROK W IMIENIU RZECZYPOSPOLITEJ POLSKIEJ Sąd Najwyższy w składzie: Dnia 3 lutego 2016 r. SSN Bogusław Cudowski (przewodniczący) SSN Jolanta Frańczak (sprawozdawca) SSN Krzysztof Bardziej szczegółowo Koszty obciążenia społeczeństwa. Ewa Oćwieja Marta Ryczko Koło Naukowe Ekonomiki Zdrowia IZP UJ CM 2012
Koszty obciążenia społeczeństwa chorobami układu krążenia. Ewa Oćwieja Marta Ryczko Koło Naukowe Ekonomiki Zdrowia IZP UJ CM 2012 Badania kosztów chorób (COI Costof illnessstudies) Ekonomiczny ciężar choroby; Bardziej szczegółowo Dz.U. 1999 Nr 47 poz. 480 ROZPORZĄDZENIE MINISTRA ZDROWIA I OPIEKI SPOŁECZNEJ
Kancelaria Sejmu s. 1/1 Dz.U. 1999 Nr 47 poz. 480 ROZPORZĄDZENIE MINISTRA ZDROWIA I OPIEKI SPOŁECZNEJ z dnia 11 maja 1999 r. w sprawie szczegółowych zasad powoływania i finansowania oraz trybu działania Bardziej szczegółowo ZAKRES OBOWIĄZKÓW I UPRAWNIEŃ PRACODAWCY, PRACOWNIKÓW ORAZ POSZCZEGÓLNYCH JEDNOSTEK ORGANIZACYJNYCH ZAKŁADU PRACY
BEZPIECZE STWO PRACY Z LASERAMI Szkodliwe dzia anie promieniowania laserowego dotyczy oczu oraz skóry cz owieka, przy czym najbardziej zagro one s oczy. Ze wzgl du na kierunkowo wi zki zagro enie promieniowaniem Bardziej szczegółowo Na podstawie art.4 ust.1 i art.20 lit. l) Statutu Walne Zebranie Stowarzyszenia uchwala niniejszy Regulamin Zarządu.
Polish Co zrobić, jeśli uważasz, że decyzja w sprawie zasiłku mieszkaniowego lub zasiłku na podatek lokalny jest niewłaściwa (What to do if you think the decision about your Housing Benefit or Council Bardziej szczegółowo Urząd Miasta Bielsko-Biała - um.bielsko.pl Wygenerowano: 2016-06-17/10:16:18
Europejski Dzień Prostaty obchodzony jest od 2006 roku z inicjatywy Europejskiego Towarzystwa Urologicznego. Jego celem jest zwiększenie społecznej świadomości na temat chorób gruczołu krokowego. Gruczoł Bardziej szczegółowo Ekonomia rozwoju. dr Piotr Białowolski Katedra Ekonomii I
Ekonomia rozwoju wykład 1 dr Piotr Białowolski Katedra Ekonomii I Plan wykładu Ustalenie celu naszych spotkań w semestrze Ustalenie technikaliów Literatura, zaliczenie Przedstawienie punktu startowego Bardziej szczegółowo Stanowisko Rzecznika Finansowego i Prezesa Urzędu Ochrony Konkurencji i Konsumentów w sprawie interpretacji art. 49 ustawy o kredycie konsumenckim
Prezes Urzędu Ochrony Konkurencji i Konsumentów Warszawa, 16 maja 2016 r. Stanowisko Rzecznika Finansowego i Prezesa Urzędu Ochrony Konkurencji i Konsumentów w sprawie interpretacji art. 49 ustawy o kredycie Bardziej szczegółowo Bezpieczna dzielnica - bezpieczny mieszkaniec
Bezpieczna dzielnica - bezpieczny mieszkaniec Program realizowany w ramach Miejskiego Programu Zapobiegania Przestępczości oraz Ochrony Bezpieczeństwa Obywateli i Porządku Publicznego. Miejski Program Bardziej szczegółowo USTAWA. z dnia 26 czerwca 1974 r. Kodeks pracy. 1) (tekst jednolity)
Dz.U.98.21.94 1998.09.01 zm. Dz.U.98.113.717 art. 5 1999.01.01 zm. Dz.U.98.106.668 art. 31 2000.01.01 zm. Dz.U.99.99.1152 art. 1 2000.04.06 zm. Dz.U.00.19.239 art. 2 2001.01.01 zm. Dz.U.00.43.489 art. Bardziej szczegółowo Badanie Kobiety na kierowniczych stanowiskach Polska i świat wyniki
Badanie Kobiety na kierowniczych stanowiskach i świat wyniki Badanie Manpower Kobiety na kierowniczych stanowiskach zostało przeprowadzone w lipcu 2008 r. w celu poznania opinii dotyczących kobiet pełniących Bardziej szczegółowo Konsultacje projektu programu opieki nad zwierzętami bezdomnymi oraz zapobiegania bezdomności zwierząt na terenie Gminy Narew w 2014 roku
Konsultacje projektu programu opieki nad zwierzętami bezdomnymi oraz zapobiegania bezdomności zwierząt na terenie Gminy Narew w 2014 roku Na podstawie art. 11a ust. 7 pkt 2 ustawy z dnia 21 sierpnia 1997 Bardziej szczegółowo Automatyczne przetwarzanie recenzji konsumenckich dla oceny użyteczności produktów i usług
Uniwersytet Ekonomiczny w Poznaniu Wydział Informatyki i Gospodarki Elektronicznej Katedra Informatyki Ekonomicznej Streszczenie rozprawy doktorskiej Automatyczne przetwarzanie recenzji konsumenckich dla Bardziej szczegółowo Warto wiedzieæ - nietypowe uzale nienia NIETYPOWE UZALE NIENIA - uzale nienie od facebooka narkotyków czy leków. Czêœæ odciêtych od niego osób wykazuje objawy zespo³u abstynenckiego. Czuj¹ niepokój, gorzej Bardziej szczegółowo za pośrednictwem 00-898 Warszawa Al. Solidarności 127 (art. 398 2 kpc) ul. Góralska 5 01-112 Warszawa
(WZÓR) Warszawa, dn. 2012 r. SĄD APELACYJNY SĄD PRACY I UBEZPIECZEŃ SPOŁECZNYCH w Warszawie za pośrednictwem Sądu Okręgowego XIV Wydział Ubezpieczeń Społecznych w Warszawa 00-898 Warszawa Al. Solidarności Bardziej szczegółowo DANE MAKROEKONOMICZNE (TraderTeam.pl: Rafa Jaworski, Marek Matuszek) Lekcja XXIII
DANE MAKROEKONOMICZNE (TraderTeam.pl: Rafa Jaworski, Marek Matuszek) Lekcja XXIII Systemy transakcyjne cz.1 Wszelkie prawa zastrze one. Kopiowanie i rozpowszechnianie ca ci lub fragmentu niniejszej publikacji Bardziej szczegółowo PROJEKT FOLDERU. 2. Folder powinien zawierać logo: a) Miasta Słupska 1. b) Pozytywnie Otwarci
Załącznik nr 1 do Umowy Nr../ZiSS/2014 z dnia... PROJEKT FOLDERU 1. Folder powinien zawierać informacje o finansowaniu folderu ze środków pozyskanych przez Miasto Słupsk w ramach konkursu Pozytywnie Otwarci. Bardziej szczegółowo Obowi¹zki pracodawcy w razie wypadku przy pracy (1)
Obowi¹zki pracodawcy w razie wypadku przy pracy (1) Rozdz. 7 Kodeksu pracy; ustawa z dnia 30 października 2002 r. o ubezpieczeniu zawodowych (Dz. U. Nr 199, poz. 1673 z późn. zm.); rozporządzenie RM z Bardziej szczegółowo Profilaktyka w zakresie udzielania pierwszej pomocy i ratownictwa
Profilaktyka w zakresie udzielania pierwszej pomocy i ratownictwa dla Miasta Duszniki Zdrój na lata 2009 2014 Opracowała: Anna Podhalicz 1 Duszniki Zdrój 2008 SPIS TREŚCI 1. Wstęp... 3 2. Podstawa prawna...... Bardziej szczegółowo UCHWAŁA NR XVII/245/2016 RADY MIEJSKIEJ W MIECHOWIE. z dnia 4 kwietnia 2016 r.
UCHWAŁA NR XVII/245/2016 RADY MIEJSKIEJ W MIECHOWIE z dnia 4 kwietnia 2016 r. w sprawie przyjęcia Programu opieki nad zwierzętami bezdomnymi oraz zapobiegania bezdomności zwierząt na terenie Gminy Miechów Bardziej szczegółowo UCHWAŁA NR LV/552/2014 RADY GMINY SZEMUD. z dnia 29 maja 2014 r.
UCHWAŁA NR LV/552/2014 RADY GMINY SZEMUD z dnia 29 maja 2014 r. w sprawie określenia rodzajów świadczeń oraz warunków i sposobu ich przyznawania w ramach pomocy zdrowotnej dla nauczycieli, nauczycieli Bardziej szczegółowo Urząd Miasta Bielsko-Biała - um.bielsko.pl Wygenerowano: 2016-06-30/02:29:36. Wpływ promieni słonecznych na zdrowie człowieka
Wpływ promieni słonecznych na zdrowie człowieka Światło słoneczne jest niezbędne do trwania życia na Ziemi. Dostarcza energii do fotosyntezy roślinom co pomaga w wytwarzaniu tlenu niezbędnego do życia. Bardziej szczegółowo Program opieki nad zwierzętami bezdomnymi oraz zapobiegania bezdomności zwierząt na rok 2016
Załącznik do uchwały nr XX/132/16 Rady Gminy Gorzyce z dnia 9 marca 2016 r. Program opieki nad zwierzętami bezdomnymi oraz zapobiegania bezdomności zwierząt na rok 2016 I. Zapewnienie bezdomnym zwierzętom Bardziej szczegółowo Metody wyceny zasobów, źródła informacji o kosztach jednostkowych
Metody wyceny zasobów, źródła informacji o kosztach jednostkowych by Antoni Jeżowski, 2013 W celu kalkulacji kosztów realizacji zadania (poszczególnych działań i czynności) konieczne jest przeprowadzenie Bardziej szczegółowo USTAWA. z dnia 26 stycznia 1982 r. Karta Nauczyciela. (tekst jednolity) Rozdział 3a. Awans zawodowy nauczycieli
USTAWA z dnia 26 stycznia 1982 r. Karta Nauczyciela (tekst jednolity) Rozdział 3a Awans zawodowy nauczycieli Art. 9a. 1. Ustala się stopnie awansu zawodowego nauczycieli: 1) nauczyciel stażysta; 2) nauczyciel Bardziej szczegółowo Czy ofiary wypadków mogą liczyć na pomoc ZUS
Czy ofiary wypadków mogą liczyć na pomoc ZUS Autor: Bożena Wiktorowska Ze względu na to, że podwładny uległ wypadkowi przy pracy, za okres niezdolności do pracy spowodowanej tym wypadkiem nie zachowuje Bardziej szczegółowo USTAWA. z dnia 29 sierpnia 1997 r. Ordynacja podatkowa. Dz. U. z 2015 r. poz. 613 1
USTAWA z dnia 29 sierpnia 1997 r. Ordynacja podatkowa Dz. U. z 2015 r. poz. 613 1 (wybrane artykuły regulujące przepisy o cenach transferowych) Dział IIa Porozumienia w sprawach ustalenia cen transakcyjnych Bardziej szczegółowo Zarządzenie Nr 4851/2014 Prezydenta Miasta Radomia z dnia 18 marca 2014 r.
Załącznik nr 1 do Uchwały Okręgowej Rady Pielęgniarek i Położnych w Opolu Nr 786/VI/2014 z dnia 29.09.2014 r. REGULAMIN WSPARCIA FINANSOWEGO CZŁONKÓW OIPiP BĘDĄCYCH PRZEDSTAWICIELAMI USTAWOWYMI DZIECKA Bardziej szczegółowo POSTANOWIENIA DODATKOWE DO OGÓLNYCH WARUNKÓW GRUPOWEGO UBEZPIECZENIA NA ŻYCIE KREDYTOBIORCÓW Kod warunków: KBGP30 Kod zmiany: DPM0004 Wprowadza się następujące zmiany w ogólnych warunkach grupowego ubezpieczenia Bardziej szczegółowo Historia i przyszłość szczepień
IV Europejski Tydzień Szczepień 20-26 kwietnia 2009 Historia i przyszłość szczepień Prof. dr hab. Andrzej Zieliński Zakład Epidemiologii Narodowego Instytutu Zdrowia Publicznego Błonica Zapadalność i umieralność Bardziej szczegółowo Procedura nadawania uprawnień do potwierdzania, przedłuŝania waŝności i uniewaŝniania profili zaufanych epuap. Załącznik nr 1
Załącznik nr 1 do zarządzenia Nr 204/2014 Burmistrza Miasta Kudowa-Zdrój z dnia 5 sierpnia 2014 r. Procedura nadawania uprawnień do potwierdzania, przedłuŝania waŝności i uniewaŝniania profili zaufanych Bardziej szczegółowo REGULAMIN ZESPOŁU INTERDYSCYPLINARNEGO W KROTOSZYNIE
REGULAMIN ZESPOŁU INTERDYSCYPLINARNEGO W KROTOSZYNIE 1 Postanowienia ogólne Podstawą prawną działania Zespołu Interdyscyplinarnego, zwanego dalej Zespołem, jest: 1) Ustawa z dnia 12 marca 2004 roku o pomocy Bardziej szczegółowo Poziom wiedzy młodzieży gimnazjalnej na temat dopalaczy na podstawie badań w wybranych gimnazjach Powiatu Ostródzkiego
Poziom wiedzy młodzieży gimnazjalnej na temat dopalaczy na podstawie badań w wybranych gimnazjach Powiatu Ostródzkiego Badaniu ankietowemu zostało poddanych 850 uczniów gimnazjów z powiatu ostródzkiego. Bardziej szczegółowo GŁÓWNY URZĄD STATYSTYCZNY Notatka informacyjna Warszawa 5.10.2015 r.
GŁÓWNY URZĄD STATYSTYCZNY Notatka informacyjna Warszawa 5.10.2015 r. Informacja o rozmiarach i kierunkach czasowej emigracji z Polski w latach 2004 2014 Wprowadzenie Prezentowane dane dotyczą szacunkowej Bardziej szczegółowo Rozdział 1 Postanowienia ogólne
Załącznik do zarządzenia Rektora nr 59 z dnia 20 lipca 2015 r. REGULAMIN PRZYZNAWANIA ZWIĘKSZENIA STYPENDIUM DOKTORANCKIEGO Z DOTACJI PROJAKOŚCIOWEJ ORAZ ZASADY PRZYZNAWANIA STYPENDIUM DOKTORANCKIEGO W Bardziej szczegółowo Jakie są te obowiązki wg MSR 41 i MSR 1, a jakie są w tym względzie wymagania ustawy o rachunkowości?
Regulamin Zarządu Pogórzańskiego Stowarzyszenia Rozwoju Art.1. 1. Zarząd Pogórzańskiego Stowarzyszenia Rozwoju, zwanego dalej Stowarzyszeniem, składa się z Prezesa, dwóch Wiceprezesów, Skarbnika, Sekretarza Bardziej szczegółowo www.naszanatura2000.pl
1 Biuro Projektu Stowarzyszenie Tilia ul. Przysiecka 13, 87-100 Toruń Tel./fax: 6 67 60 8 e-mail: tilia@tilia.org.pl www.tilia.org.pl Szkoła Leśna na Barbarce www.szkola-lesna.torun.pl www.naszanatura2000.pl Bardziej szczegółowo Regulamin Projektów Ogólnopolskich i Komitetów Stowarzyszenia ESN Polska
Regulamin Projektów Ogólnopolskich i Komitetów Stowarzyszenia ESN Polska 1 Projekt Ogólnopolski: 1.1. Projekt Ogólnopolski (dalej Projekt ) to przedsięwzięcie Stowarzyszenia podjęte w celu realizacji celów Bardziej szczegółowo Programy badań przesiewowych Wzrok u diabetyków
Programy badań przesiewowych Wzrok u diabetyków Dokładniejsze badania i leczenie retinopatii cukrzycowej Closer monitoring and treatment for diabetic retinopathy Ważne informacje o ochronie zdrowia Important Bardziej szczegółowo SPRAWOZDANIE Z DZIAŁALNOŚCI RADY NADZORCZEJ SPÓŁKI PATENTUS S.A. ZA OKRES 01.01.2010 31.12.2010.
SPRAWOZDANIE Z DZIAŁALNOŚCI RADY NADZORCZEJ SPÓŁKI PATENTUS S.A. ZA OKRES 01.01.2010 31.12.2010. 1. Informacja dotycząca kadencji Rady Nadzorczej w roku 2010, skład osobowy Rady, pełnione funkcje w Radzie, Bardziej szczegółowo Strategia rozwoju kariery zawodowej - Twój scenariusz (program nagrania).
Strategia rozwoju kariery zawodowej - Twój scenariusz (program nagrania). W momencie gdy jesteś studentem lub świeżym absolwentem to znajdujesz się w dobrym momencie, aby rozpocząć planowanie swojej ścieżki Bardziej szczegółowo PRZYJĘCIE NA LECZENIE DO SZPITALA
PRZYJĘCIE NA LECZENIE DO SZPITALA (Część 3 Ustawy o zdrowiu psychicznym z 1983 roku [Mental Health Act 1983]) 1. Imię i nazwisko pacjenta 2. Imię i nazwisko osoby sprawującej opiekę nad pacjentem ( lekarz Bardziej szczegółowo Dokumentacja obejmuje następujące części:
Załącznik nr 6 WYMAGANIA, JAKIM POWINNA ODPOWIADAĆ DOKUMENTACJA NIEZBĘDNA DO OCENY SUBSTANCJI CZYNNEJ JAKĄ SĄ MIKROORGANIZMY, W TYM TAKŻE WIRUSY I GRZYBY, ZAWARTE W PRODUKCIE BIOBÓJCZYM Wymagania ogólne. Bardziej szczegółowo Opracowała: Karolina Król-Komarnicka, kierownik działu kadr i płac w państwowej instytucji
OPUBLIKOWANO: 1 SIERPNIA 2013 ZAKTUALIZOWANO: 12 KWIETNIA 2016 Urlop rodzicielski aktualizacja Opracowała: Karolina Król-Komarnicka, kierownik działu kadr i płac w państwowej instytucji Ustawa z dnia 26 Bardziej szczegółowo DZIAŁ ÓSMY. Uprawnienia pracowników związane z rodzicielstwem
DZIAŁ ÓSMY Uprawnienia pracowników związane z rodzicielstwem Art. 176. Nie wolno zatrudniać kobiet przy pracach szczególnie uciążliwych lub szkodliwych dla zdrowia. Rada Ministrów określi, w drodze rozporządzenia, Bardziej szczegółowo WYROK. Zespołu Arbitrów z dnia 24 kwietnia 2007 r.
Sygn. akt UZP/ZO/0-452/07 WYROK Zespołu Arbitrów z dnia 24 kwietnia 2007 r. Zespół Arbitrów w składzie: Przewodniczący Zespołu Arbitrów Wojciech Balcerzak arbitrzy: Artur Maruszczak Zbigniew Marcin Nycz Bardziej szczegółowo Zarządzenie Nr W.0050.23.2015 Wójta Gminy Siedlce z dnia 1 kwietnia 2015 roku. w sprawie powołania Gminnego Zespołu Zarządzania Kryzysowego.
Zarządzenie Nr W.0050.23.2015 w sprawie powołania Gminnego Zespołu Zarządzania Kryzysowego. Na podstawie art. 19 ust. 4 ustawy z dnia 26 kwietnia 2007 roku o zarządzaniu kryzysowym (tekst jednolity: Dz. Bardziej szczegółowo Zapytanie ofertowe. (do niniejszego trybu nie stosuje się przepisów Ustawy Prawo Zamówień Publicznych)
Kraków, dn. 15 września 2015 r. Zapytanie ofertowe (do niniejszego trybu nie stosuje się przepisów Ustawy Prawo Zamówień Publicznych) W związku z realizacją przez Wyższą Szkołę Europejską im. ks. Józefa Bardziej szczegółowo zywania Problemów Alkoholowych
Państwowa Agencja Rozwiązywania zywania Problemów Alkoholowych Konferencja Koszty przemocy wobec kobiet w Polsce 2013 Warszawa, 27 maja 2013 r. www.parpa.pl 1 Podstawy prawne Ustawa o wychowaniu w trzeźwości Bardziej szczegółowo Producent P.P.F. HASCO-LEK S.A nie prowadził badań klinicznych mających na celu określenie skuteczności produktów leczniczych z ambroksolem.
VI.2 Podsumowanie danych o bezpieczeństwie stosowania produktów leczniczych z ambroksolem VI.2.1 Omówienie rozpowszechnienia choroby Wskazania do stosowania: Ostre i przewlekłe choroby płuc i oskrzeli Bardziej szczegółowo Załącznik nr 4 UMOWA O REALIZACJI PRAKTYKI STUDENCKIEJ
Załącznik nr 4 UMOWA O REALIZACJI PRAKTYKI STUDENCKIEJ W dniu 200.. roku, w Płocku pomiędzy: 1. Szkołą Wyższą im. Pawła Włodkowica w Płocku Filia w Wyszkowie, z siedzibą w Wyszkowie przy ul. Geodetów 45a, Bardziej szczegółowo Zarządzenie Nr 1469/2012
Zarządzenie Nr 1469/2012 Prezydenta Miasta Płocka z dnia 01 marca 2012 w sprawie przyjęcia Regulaminu Płockiej Karty Familijnej 3+ w ramach Programu Płocka Karta Familijna 3+ Na podstawie art. 7 ust 1 Bardziej szczegółowo REGULAMIN GMINNEGO ZESPOŁU INTERDYSCYPLINARNEGO d.s. PRZECIWDZIAŁANIA PRZEMOCY W RODZINIE. 1 Postanowienia ogólne
Załącznik do Uchwały Nr 42/VI/2011 Rady Miejskiej w Myślenicach z dnia 31 marca 2011r. REGULAMIN GMINNEGO ZESPOŁU INTERDYSCYPLINARNEGO d.s. PRZECIWDZIAŁANIA PRZEMOCY W RODZINIE 1 Postanowienia ogólne 1. Bardziej szczegółowo KONKURS NA NAJLEPSZE LOGO
KONKURS NA NAJLEPSZE LOGO Stowarzyszenie Unia Nadwarciańska ogłasza konkurs na logo. Regulamin konkursu: I. POSTANOWIENIA WSTĘPNE 1. Regulamin określa: cele konkursu, warunki uczestnictwa w konkursie, Bardziej szczegółowo tróżka Źródło: www.fotolia.pl
Ogród na tarasie Wiele bylin przeżywa właśnie pełnię swego rozkwitu, ale nie jest jeszcze za późno, aby dosadzić nowe efektowne rośliny i wzbogacić swój taras niezwykłymi aranżacjami. tróżka Źródło: www.fotolia.pl Bardziej szczegółowo ROZPORZĄDZENIE MINISTRA ROLNICTWA I ROZWOJU WSI 1) z dnia..2008 r.
ROZPORZĄDZENIE MINISTRA ROLNICTWA I ROZWOJU WSI 1) z dnia..2008 r. PROJEKT w sprawie sposobu prowadzenia dokumentacji obrotu detalicznego produktami leczniczymi weterynaryjnymi i wzoru tej dokumentacji Bardziej szczegółowo Regulamin Obrad Walnego Zebrania Członków Stowarzyszenia Lokalna Grupa Działania Ziemia Bielska
Załącznik nr 1 do Lokalnej Strategii Rozwoju na lata 2008-2015 Regulamin Obrad Walnego Zebrania Członków Stowarzyszenia Lokalna Grupa Działania Ziemia Bielska Przepisy ogólne 1 1. Walne Zebranie Członków Bardziej szczegółowo INSTYTUCJE WYMIARU SPRAWIEDLIWOŚCI WARSZAWA, LIPIEC 2000
CBOS CENTRUM BADANIA OPINII SPOŁECZNEJ SEKRETARIAT OŚRODEK INFORMACJI 629-35 - 69, 628-37 - 04 693-58 - 95, 625-76 - 23 UL. ŻURAWIA 4A, SKR. PT.24 00-503 W A R S Z A W A TELEFAX 629-40 - 89 INTERNET http://www.cbos.pl Bardziej szczegółowo ZATRUCIA POKARMOWE KAŻDE ZATRUCIE POKARMOWE MOŻE BYĆ GROŹNE, SZCZEGÓLNIE DLA NIEMOWLĄT I DZIECI DO LAT 3, LUDZI OSŁABIONYCH I STARSZYCH.
ZATRUCIA POKARMOWE Zatrucia pokarmowe to ostre i gwałtowne dolegliwości żołądkowo-jelitowe objawiające się zwykle biegunką i wymiotami. Występują w stosunkowo krótkim czasie po spożyciu żywności skażonej Bardziej szczegółowo TABELA ZGODNOŚCI. W aktualnym stanie prawnym pracodawca, który przez okres 36 miesięcy zatrudni osoby. l. Pornoc na rekompensatę dodatkowych
Białystok, dnia 30.03.2007 r. OPINIA PRAWNA sporządzona na zlecenie Stowarzyszenia Forum Recyklingu Samochodów w Warszawie I. Pytania: 1. Czy zakaz ponownego użycia przedmiotów wyposażenia i części, ujętych Bardziej szczegółowo ZMIANA SPECYFIKACJI ISTOTNYCH WARUNKÓW ZAMÓWIENIA I OGŁOSZENIA O ZAMÓWIENIU
Katowice, dnia 02.12.2015 r. Do wszystkich wykonawców Dotyczy: Postępowania o udzielenie zamówienia publicznego, prowadzonego w trybie przetargu nieograniczonego na Usługę składu i druku materiałów promocyjnych. Bardziej szczegółowo Regulamin. Rady Nadzorczej Spółdzielni Mieszkaniowej "Doły -Marysińska" w Łodzi
Regulamin Rady Nadzorczej Spółdzielni Mieszkaniowej "Doły -Marysińska" w Łodzi I. PODSTAWY I ZAKRES DZIAŁANIA 1 Rada Nadzorcza działa na podstawie: 1/ ustawy z dnia 16.09.1982r. Prawo spółdzielcze (tekst Bardziej szczegółowo DLA ZAMAWIAJĄCEGO: OFERTA. Ja/-my, niżej podpisany/-ni... działając w imieniu i na rzecz... Adres Wykonawcy:...
załącznik nr 1 do SIWZ. (pieczęć Wykonawcy) DLA ZAMAWIAJĄCEGO: Centrum Pomocy Społecznej Dzielnicy Śródmieście im. prof. Andrzeja Tymowskiego 00-217 Warszawa, ul. Konwiktorska 3/5 OFERTA Ja/-my, niżej Bardziej szczegółowo U Z A S A D N I E N I E
U Z A S A D N I E N I E Projektowana nowelizacja Kodeksu pracy ma dwa cele. Po pierwsze, zmianę w przepisach Kodeksu pracy, zmierzającą do zapewnienia pracownikom ojcom adopcyjnym dziecka możliwości skorzystania Bardziej szczegółowo ROLA SZKOŁY W PROFILAKTYCE OTYŁOŚCI DZIECI I MŁODZIEŻY Barbara Woynarowska Kierownik Zakładu Biomedycznych i Psychologicznych Podstaw Edukacji, Wydział Pedagogiczny UW Przewodnicząca Rady Programowej ds. Bardziej szczegółowo INSTRUKCJA DLA INSPEKTORÓW DS. REJESTRACJI
Katowice, dnia 13 sierpnia 2008r. INSTRUKCJA DLA INSPEKTORÓW DS. REJESTRACJI Wskazane dokumenty w kaŝdym punkcie uwzględniają pełnomocnictwo udzielone przez upowaŝnione osoby. NaleŜy zaznaczyć, Ŝe będzie Bardziej szczegółowo 2. Podjęcie uchwał w sprawie powołania członków Rady Nadzorczej 1[ ], 2[ ], 3[ ]
Warszawa, dnia 9 czerwca 2015 roku OD: Family Fund Sp. z o.o. S.K.A ul. Batorego 25 (II piętro) 31-135 Kraków DO: Zarząd Starhedge S.A. ul. Plac Defilad 1 (XVII piętro) 00-901 Warszawa biuro@starhedge.pl Bardziej szczegółowo UCHWAŁA Nr VI/17/2015 Rady Gminy w Jedlińsku z dnia 27 marca 2015 roku
UCHWAŁA Nr VI/17/2015 Rady Gminy w Jedlińsku z dnia 27 marca 2015 roku w sprawie przyjęcia Gminnego Programu Przeciwdziałaniu Narkomanii na lata 2015-2018 Na podstawie art. 10 ust 2 i 3 ustawy z dnia 29 Bardziej szczegółowo WYROK. Zespołu Arbitrów z dnia 22 czerwca 2005 r. Arbitrzy: Krzysztof Błachut. Elżbieta Zasadzińska. Protokolant Katarzyna Kawulska
Sygn. akt UZP/ZO/0-1432/05 WYROK Zespołu Arbitrów z dnia 22 czerwca 2005 r. Zespół Arbitrów w składzie: Przewodniczący Zespołu Arbitrów Urszula Borowska - Zaręba Arbitrzy: Krzysztof Błachut Elżbieta Zasadzińska Bardziej szczegółowo STATUT FUNDACJI CHCEMY POMAGAĆ Postanowienia ogólne
STATUT FUNDACJI CHCEMY POMAGAĆ Postanowienia ogólne 1 1. Fundacja pod nazwą Chcemy Pomagać, zwana dalej Fundacją, ustanowiona przez: Piotra Sołtysa zwanego dalej fundatorem, aktem notarialnym sporządzonym Bardziej szczegółowo Program działania. Zespołu Samokształceniowego nauczycieli bibliotekarzy
Program działania Zespołu Samokształceniowego nauczycieli bibliotekarzy pracujących w dzielnicy Warszawa Praga Południe na rok szkolny: 2006/2007, 2007/2008, 2008/2009 oprac. Bożena Dawidowska-Langer Pedagogiczna Bardziej szczegółowo Badania wieloośrodkowe w pielęgniarstwie Registered Nurse Forcasting Prognozowanie pielęgniarstwa. Planowanie zasobów ludzkich w pielęgniarstwie
Badania wieloośrodkowe w pielęgniarstwie Registered Nurse Forcasting Prognozowanie pielęgniarstwa. Planowanie zasobów ludzkich w pielęgniarstwie Maria Kózka Zakład Pielęgniarstwa Klinicznego Wydział Nauk Bardziej szczegółowo Aneks III. Zmiany w odpowiednich punktach Charakterystyk Produktów Leczniczych i Ulotek dla Pacjentów
Aneks III Zmiany w odpowiednich punktach Charakterystyk Produktów Leczniczych i Ulotek dla Pacjentów 43 Zmiany, które będą zawarte w odpowiednich punktach Charakterystyki Produktu Leczniczego dla monowalentnych Bardziej szczegółowo FORMULARZ POZWALAJĄCY NA WYKONYWANIE PRAWA GŁOSU PRZEZ PEŁNOMOCNIKA NA NADZWYCZAJNYM WALNYM ZGROMADZENIU CODEMEDIA S.A
FORMULARZ POZWALAJĄCY NA WYKONYWANIE PRAWA GŁOSU PRZEZ PEŁNOMOCNIKA NA NADZWYCZAJNYM WALNYM ZGROMADZENIU Z SIEDZIBĄ W WARSZAWIE ZWOŁANYM NA DZIEŃ 2 SIERPNIA 2013 ROKU Niniejszy formularz przygotowany został Bardziej szczegółowo 2017 © DocPlayer.pl Polityka prywatności | Warunki świadczenia usług | Zwrotny adres