Source: https://fin.centerforhealthlawequity.com/amplisens-hcv-fl.html
Timestamp: 2020-07-10 00:30:54+00:00
Document Index: 23725390

Matched Legal Cases: ['kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'KKO ', 'kko ', 'kko ', 'kko ', 'kko ']

Amplisense hcv fl - Oireet 2020
Järvien, puistojen ja neliöiden, aktiivisten savien lämpökausiin. Tom, perebuivaychi on naturі, varto pourbuvatisya noin vlasnu bezpeku, abi.
testi AmniSure
Osta testi amnioottisen nesteen vuodon määrittämiseksi raskaana olevalle Amnishur-lääkkeelle voit myös apteekeissa Kiovassa:
1. Apteekit "Arnika".
FLOROTSENOZ
Uuden sukupolven monimutkainen koe diagnosoimaan kaikki kliinisesti merkitsevät urogenitaalisen infektiot lisääntymisikäisten naisilla..
OHJEET. "AmpliSens HCV-genotyyppi-FL" AmpliSens
1 KÄYTTÖOHJE käyttämiseksi reagensseja havaitsemiseksi ja erilaistumista genotyyppien hepatiitti C (HCV) kliinisistä näytteistä polymeraasiketjureaktiolla (PCR), jossa hybridisaatio-fluoresenssin havaitseminen "reaaliajassa" tila "AmpliSens HCV-genotyyppi-FL» AmpliSens liittovaltion budjetti toimielimen tiede "Keski tutkimuslaitos epidemiologian", Venäjä, Moskova, katu Novogireevskaya 3a talo
2 SISÄLLYSLUETTELO. 3 TARKOITUS. 3 MENETELMÄN PERIAATE. 3 FORMAT JA TUOTANTO reagenssipakkaus. 5 ANALYYTTISET OMINAISUUDET. 5 VAROTOIMENPITEET. 6 LISÄTARVIKKEET JA LAITTEET. 7 TAKE, kuljetus ja varastointi testimateriaalin. 9 koostumusnäkökohdassa FRT PCR-RNA-uutto tutkimusten malli JÄRJESTELY käänteistranskriptioreaktio valmistus A. putket käänteistranskriptioon B. suorittaminen käänteistranskriptioreaktio monistuksen havaitseminen "reaaliajassa", jonka valmistus A. putkien A1 vahvistusta varten. Valmistelu koeputkia monistus käyttäen joukko "PCR kit" reagenssit variantti FRT-G A2. Valmistelu koeputkia monistamiseen käyttäen reagensseja "PCR kit" variantti FRT-G B. Suoritetaan monistus havaitsemisen "reaaliajassa" analyysi ja tulkinta tulokset Kestoaika, kuljetus ja varastointiolosuhteet LIITE 1. RNA: n KÄYTTÖ reagenssipakkaus " ribo-sorbentin "LIITE 2. RNA: n uutto reagenssipakkauksen" ribo-prep "symboleja painotuotteen x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 2 32
3 LYHENTEET Seuraavia lyhenteitä ja symboleja, joita käytetään näissä ohjeet: DNA dezoksirubonukleinovaya happo cDNA komplementaarinen DNA-RNA ribonukleiinihappo käänteistranskriptioreaktiosta EKO sisäisen kontrollinäytteen OKO negatiivinen kontrolli PKO positiivisena kontrollina K + - positiiviset kontrolli-PCR-K - negatiivinen kontrolli-PCR-OK - negatiivinen PCR uuttamalla valvonta polymeraasiketjureaktion FBUN Central Research Institute of Epidemiology HCV-FRT TARKOITUS federaatiobudjetista vahvistettu ix Science "Central Research Institute for epidemiologia" ja Liittovaltion valvonta kuluttajansuojaneuvostoa ja ihmisten hyvinvointia että hepatiitti C -viruksen fluoresenssidetektoinnilla in "reaaliajassa" Reagenssit "AmpliSens HCV-genotyyppi-FL" on tarkoitettu havaitsemiseen ja erilaistumista viruksen genotyyppien hepatiitti C (HCV) kliinisistä näytteistä polymeraasiketjureaktiolla (PCR), jossa hybridisaatio-fluoresenssin havaitseminen "reaaliaikaisesti". Määritys HCV-genotyyppien 1 a, 1 b, 2, 3a, 4 kautta tapahtuvaa "PCR kit" variantti FRT-g1-4; määritetään genotyyppien HCV-1a, 1b, 2, 3a, 4, 5a, 6 kautta tapahtuvaa "PCR kit" variantti FRT-g1-6. Tämä reagenssipakkaus on suositeltavaa käyttää sen jälkeen, kun HCV-RNA: n näytteitä sarjat on suunniteltu sekä kvalitatiivista että kvantitatiivista määritystä HCV-RNA (esim., "AmpliSens HCV-FL», käyttäen gibridizatsionnofluorestsentnuyu havaitseminen, tai "AmpliSens HCV erh "elektoforeettisilla monistus- tuotteiden havaitsemiseksi (valmistaja FBUN Epidemiology CRI)). VAROITUS! PCR-analyysi Tulokset esitetään monimutkainen sairauden diagnoosin 1. Menetelmän periaate 1 mukaisesti EU-direktiivin 98/79 / EY. 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 3 32
4 perustuu periaatteeseen testauksen RNA: n uuttaminen verestä plasmasta yhdessä rekombinantti sisemmän kontrollinäyte (ASD), suorittamalla RNA käänteistranskriptioreaktio ja PCR-monistus cDNA gibridizatsionnofluorestsentnoy havaitseminen "reaaliaikaisesti". Jotta voidaan sulkea pois vääriä negatiivisia tuloksia tutkimuksessa tuli EKR, jonka avulla voit hallita kaikkia vaiheita analyysin ja arvioimaan PCR-estäjien tuloksista tutkimuksen. Genotyypin määrittäminen HCV yksittäinen näyte pidetään useita putkia, kunkin putken kaksi eriytetty HCV-genotyyppi, tai yhden genotyypin ja HCV EKO. Pakkaus on suunniteltu laitteille, joissa on kaksi tai useampia fluoresenssin havaitsemiskanavia. Taulukko osoittaa kanavat, jolla havaitaan HCV-genotyypit kunkin reaktioseokseen. Reaktioseoksen 1b / 3a 1a / 2 EKR / 4 5a / 6 genotyyppien 2 Kanava oleva HCV FAM / vihreä 1b 1a ASD 5a JOE / HEX / keltainen / Cy3 3a on osa "PCR kit" variantti FRT-g1-6. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 4/32
5 MUOTO ja pakokaasujen reagenssipakkaus Reagent Kit valmistettu yhtenä muoto: FRT Reagent Kit valmistettu 7 muodostaa set: Muoto 1 sisältää reagenssipakkauksista "ribo-sorbentin" variantti 50 "Reverte-L» vaihtoehto 50, "PCR kit" vaihtoehto FRT-g1-4. Lomake 2 sisältää reagenssipakkauksista "ribo-prep" variantti 50 "Reverte-L» vaihtoehto 50, "PCR kit" variantti FRT-g1-4. Lomake 3 käsittää reagenssipakkauksen "PCR kit" variantti FRT-g1-4. Lomake 4 sisältää sarjat reagenssien "ribo-sorbentin" variantti 50 "Reverte-L» vaihtoehto 50, "PCR kit" variantti FRT-g1-6. Lomake 5 sisältää sarjat reagenssien "ribo-prep" variantti 50 "Reverte-L» vaihtoehto 50, "PCR kit" variantti FRT-g1-6. Lomake 6 sisältää joukon reagensseja "PCR kit" -optio FRT-g1-6. Lomake 7 sisältää reagenssipakkauksista irtotavarana, pakattu yksityiskäyttöä reagenssien merkitty reagenssit niiden tukkupakkausten. Muoto kokoonpano 1, 2, 3 on suunniteltu määrittämään genotyyppien 1 a, 1 b, 2, 3a, 4 ° C: muodot HBV kokoonpano 4, 5, 6 on suunniteltu määrittämään genotyyppien 1 a, 1 b, 2, 3a, 4, 5a, 6 HCV C. muodostaa kokoonpano 1, 2, 4, 5 on suunniteltu suorittamaan kattavan PTsRissledovaniya mukaan lukien RNA: n eristäminen kliinisestä materiaalista, suorittamalla käänteistranskriptio RNA: n ja PCR-monistus cDNA gibridizatsionnofluorestsentnoy havaitseminen "reaaliaikaisesti". Muodostaa täydellinen 3 ja 6 käytetään PCR-monistaminen hybridisaatio-fluoresenssin havaitseminen "reaaliaikaisesti". Suorittaa täydellinen analyysi on tarpeen käyttää reagenssipakkauksista FBUN Tuotanto Research Institute of Epidemiology RNA-uuttamista (reagenssipakkauksista "ribo-sorbentin" tai "ribo-prep"), ja käänteistranskriptio reaktio (sarja reagenssi "Reverte-L»). Konfiguraatiomuoto 7 on suunniteltu tuotantoon myöhempää merkitsemistä varten asiakkaan kielellä ja sarjojen valmistuksessa. VAROITUS! Käyttäen 7 muodostaa täydellinen ainoastaan ​​sääntöjen mukaisesti hyväksytyn FBUN Keski tutkimuslaitos Epidemiology. ANALYYTTISET HARAKTISTIKI 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 5 32
6 Analyyttinen herkkyys uuttamalla vuosikerta, l kitti eristämällä RNA / DNA: n 100 "ribo-sorbentin" 100 "ribo-prep" kit monistamiseen ja havaitsemiseen "PCR kit" variantti FRT-g1-4, «PCR kit" suoritusmuodossa FRT- g1-6 «PCR kit" variantti FRT-g1-4, «PCR kit" variantti FRT-g1-6 analyyttisen herkkyyden, IU / ml 5x10 3 2,5x10 3 analyyttisen spesifisyyden arviointi analyyttinen reagenssipakkauksen spesifisyyden osoittanut risti-reaktio genotyypit 1 a, 1 b, 2, 3a, 4, 5a ja 6 C-hepatiittiviruksen käyttämällä erittäin rekombinaation covariant positiivisista kontrollinäytteistä ja veriplasman näytteissä, jotka vastaavat HCV-genotyyppejä. VAROTOIMET työ on suoritettava laboratoriossa suoritetaan molekulyarnobiologicheskie (PCR) tutkii kliinisten näytteiden läsnäolon infektoivien aineiden, mukaisesti terveys-epidemiologinen sääntöjen SP "Security työtä mikro-organismien III IV patogeenisyys ryhmät (vaara) ja aktivaattoreita loissairaudet", SanPin "Sanitary epidemiologinen vaatimuksia hallintaan lääketieteellisen jätteen "ja suuntaviivat MU" järjestäminen laboratorioiden menetelmät vahvistusta n kleinovyh happojen kanssa työskennellessä materiaali sisältää mikro-organismeja patogeenisyys ryhmien I IV". Toiminnassa aina täytettävä seuraavat vaatimukset: - On pidettävä testinäytteiden tarttuvan ja vaarallisen työn järjestämiseksi ja varastoinnin mukaisesti SP "turvallisuustyötä mikrobeja III IV patogeenisyys ryhmät (vaara) ja loistauti aineita." - Jotta puhdistaa ja desinfioida pullotettu näytteitä tai reagensseja käyttämällä desinfiointiaineiden mukaisesti SP "Security työtä mikro-organismien III IV patogeenisyys ryhmät (vaara) ja loistauti aineet." - Laboratorioprosessin on oltava yksisuuntainen. Analyysi suoritetaan 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 6 32
7 erillistä huonetta (vyöhykkeet). Työ pitäisi alkaa Zone Spin-Zone jatkaa monistus ja havaitseminen. Älä palauta näytteitä, laitteiden ja materiaalien vyöhykkeellä, jossa prosessi suoritettiin edellisessä vaiheessa. - Poista käyttämättömät reagenssit mukaisesti SanPiN "terveysvaatimukset hallintaan lääketieteellistä jätettä." VAROITUS! Jätettä poistettaessa monistuksen jälkeen (putkiin, jotka sisältävät PCR-tuotteet) tutkimatta avaamisen putkien ja sisällön roiskuminen, koska tämä voi johtaa saastumiseen PCR-tuotteiden laboratorion alueella, ja reagensseja. Käytä sarjaa tiukasti käyttötarkoituksen mukaan tämän käyttöohjeen mukaisesti. Anna vain valtuutetun henkilökunnan työskennellä pakkauksen kanssa. Älä käytä pakkausta viimeisen käyttöpäivämäärän jälkeen. Käytä kertakäyttökäsineitä lab takit, suojalaseja kun työskennellään näytteiden ja reagenssien. Pese kädet huolellisesti työn päätyttyä. Vältä kosketusta ihon, silmien ja limakalvojen kanssa. Jos joutuu kosketukseen, huuhtele välittömästi ihoalue vedellä ja hakeudu lääkärin hoitoon. Materiaalit Käyttöturvallisuustiedote (KTT käyttöturvallisuustiedote) ovat saatavilla pyynnöstä. MUUT MATERIAALIT JA LAITTEET ALUE 1. RNA: n eristäminen kliinisestä materiaalista 1. sarjaa reagenssien RNA / DNA "ribo-sorbentin" (N) "ribo- prep" (TU) tai muut suositeltavat FBUN CRI epidemiologia työskenneltäessä täydellinen muodot 3, Laminar-nyrkkeily. 3. Vortex. 4. Mikrosentrifugiputket tyyppi "Eppendorf" tuhatta 12 g. 5. Termostaatti putkien, kuten "Eppendorf" 25-100 C. 6. automaatit vaihtelevan tilavuuden (5-50 ui, 20 ui 200 ja 100-1000 l). 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 7, 32
7. Kertakäyttöiset polypropeeniruuvit tai tiukasti suljetut 1,5 ml: n putket. 8. Kertakäyttöiset kärjet, joissa on enintään 100 μl: n suodatin, enintään 200 μl ja enintään 1000 μl jalustoihin. 9. Vacuum lääketieteellinen imulaite, jossa on trap-trap supertaantin poistamiseksi. 10. Kertakäyttöiset vintturit, jotka ovat enintään 200 μl jalustassa. 11. Jalustat putkille, joiden tilavuus on 1,5 ml. 12. Jääkaappi 2-8 C. 13. Erilliset vaatekappaleet, hatut, kengät ja kertakäyttökäsineet MU: n mukaan. Kapasiteetti desinfiointiaineella. ALUE 2. suorittaminen käänteistranskriptioreaktio ja monistuksen "reaaliajassa" 1 sarja reagenssien suorittamiseksi käänteistranskriptioreaktio "Reverte-L» (W) toiminnan aikana muodostaa täydellisen 3, Nyrkkeily abakteerisen ilmakehä (PCR-laatikko). 3. Sentrifugi / vorteksi. 4. Automaattiset vaihtelevan tilavuuden annostelijat (5 - 50 μl ja 20 - 200 μl). 5. Kertakäyttöiset kärjet, joissa on enintään 100 μl: n ja enintään 200 μl: n suodatin jalustoihin. 6. Jalustat 0,5 ml: n tai 0,2 ml: n tai 0,1 ml: n putkille (käytettävän putken tyypin mukaan). 7. Lämmitys 2-8 C: ssa pakastimessa ei ole suurempi kuin miinus 16 C 8. Erillinen kaapu, korkit, kengät, kertakäyttöiset käsineet MU kyky nollata liittimiin. Suoritettaessa käänteistranskriptioreaktio käyttäen "Reverte-L»: 10. Kertakäyttöiset polypropyleeniputkiin 0,2 ml: n tai 0,5 ml (riippuen käytetystä mallista lämpösyklilaitteesta tai termostaatti, jolloin käänteistranskriptioreaktio suoritetaan). 11. Termostaatti putkien, kuten "Eppendorf" 25-100 C tai ohjelmoitavaa PCR-laitetta (esim., "Tertsik" ( "DNA Technology", Venäjä), gradienttiaika Palm Cycler (Corbett Research, Australia), GeneAmp PCR System 2700 (Applied Biosystems, USA). 12. asettamalla käänteistranskriptioreaktion vähemmän kuin 10 2 tutkimus (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 8 32
9 näytettä automaattisella vaihtelevalla tilavuusannostelijalla (0,5-10 μl). 13. asettamalla käänteistranskriptioreaktion vähemmän kuin 10 testinäytteet kertakäyttösuppiloa suodattimen kanssa 10 ui jalustaa. Kun työskennellään "PCR Kit": 14. ohjelmoitava lämpösyklilaitteessa pyörivät (esim., Rotor-Gene 3000 tai 6000 (Corbett Research, Australia), roottori-Gene Q (Qiagen, Saksa)), tai tabletin tyyppi lämpösyklilaite (esim., Icycler iq5 (Bio-Rad, USA)), tai monistettavissa SmartCycler II (Cepheidiltä, ​​USA), tai Mx3000P, Mx3005P (Stratagene, USA) ja suositellut FBUN tutkimuslaitoksen Epidemiology in käytön suuntaviivat tämän reagenssipakkauksen). 15. Kertakäyttöiset polypropyleeniputkiin PCR: a) ohutseinämäisen PCR-putkiin 0,2 ml, jossa on kupera kansi (nestripovannye tai stripovannye) käyttäen tabletti-tyyppinen laite; b) ohutseinäinen PCR-putkiin 0,2 ml, jossa on tasainen kansi (nestripovannye) tai stripovannye putkia 0,1 ml käyttäen pyörivää laitetta. c) PCR-putkiin tilavuus 0,025 ml (Cepheidiltä, ​​USA) käyttäen laitetta SmartCycler II (Cepheidiltä, ​​USA). 16. Merkitty jalusta (kun käytetään tasotyyppisiä instrumentteja). 17. Kertakäyttöiset polypropyleeniputkiin PCR (litteä korkki, nestripovannye) 0,5 ml: ssa 18. Sentrifugoidaan ja seistä putkien (Cepheidiltä, ​​USA) käyttäen SmartCycler II (Cepheidiltä, ​​USA). Näytteiden kerääminen, kuljetus ja varastointi testimateriaalin ennen työn olisi tunnettava suuntaviivoja 'ottaa, kuljetuksen, varastoinnin kliinisen materiaalin PTsRdiagnostiki "kehittämä FSIS CRIE Rospotrebnadzor, Moskova, 2008 PCR -tutkimukset ääreisveren plasmaa. Veren plasma kerättiin koeputkeen, jossa on 3% EDTA-liuosta nopeudella 20: 1 (20 osaa verta 1 osaan EDTA). Suljettu koeputki, jossa on verta, käännetään useita kertoja. 6 tunnin sisällä veren keräämisestä tulee ottaa plasmaa ja siirtää uusi putki. Tätä tarkoitusta varten koeputkeen verta sentrifugoidaan 20 minuutin ajan g, minkä jälkeen plasma kerätään ja siirretään erottaa kertakäyttöinen 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 9 32
10 koeputkea. Plasmaa voidaan säilyttää korkeintaan 3 vuorokautta lämpötilassa 2-8 ° C ja pitkään lämpötilassa, joka ei ole korkeampi kuin miinus 68 ° C. 2 x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 10/32
11 FORMAT FRT FORMAT FRT KOOSTUMUS Reagent Kit "ribo-sorbentin" vaihtoehto 50 reagenssipakkauksen RNA / DNA uutetaan kliinisestä materiaalista sisältää: Reagent kuvaus Volume, ml Max hajottavan liuos Liuos pesua varten eräs ratkaisu pesu 3 Liuos pesua varten 5 1 pullo pullo 50 1 injektiopullo 20 päivänä tammikuuta injektiopullo sorbentin suspensio valkoinen moppi 1,25 1 RNA: n 0,5 puskuria putkien 5 reagenssipakkauksen suunniteltu RNA: n eristys / DNA: n 50 näytteiden verrokit mukaan lukien. Sisältyvät muottikokoonpanoon 1 ja 4. Reagenssi kit "ribo-prep" vaihtoehto 50 reagenssipakkauksen RNA / DNA uutetaan kliinisestä materiaalista sisältää: Reagent kuvaus Volume, ml Max lyysi saostamiseksi liuokseen pestä ratkaisu 3 RNA-pesupuskurilla 4 Läpinäkyvä sininen pullo pullo päivänä tammikuuta 20 päivänä tammikuuta 25 1 pullo pullo 10 1,2 4 injektiopulloa reagenssipakkauksen suunniteltu RNA: n eristys / DNA: n 50 näytteiden verrokit mukaan lukien. Sisältyvät muottikokoonpanoon 2 ja 5. Reagenssi kit "Reverte-L» 50 suoritusmuodossa reagenssikitti kun säilytettiin 3 lyysiliuosta, lyysausliuoksessa ja puhdistus 1 lämpötilassa 2-8 C voi saostua kiteinä. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 11/32
12 FORMAT FRT-cDNA RNA Malli sisältää: RT-G-mix-1 käänteistranskriptaasi RT-seosta (MMLV) DNA puskurireagenssi kuvaus määrä, ml Max 0,01 0,125 5 putkien 5 0,03 putket 1 koeputkeen 1, päivänä helmikuuta 1 injektiopullo reagensseja suoritusmuodossa 50 on suunniteltu pitämään 60 käänteisen transkription reaktioita, mukaan luettuina. Reagenssipakkaus "PCR kit" variantti FRT-g1-4 reagenssipakkauksen PCR-monistaminen genotyyppien (1 a, 1 b, 2, 3a, 4) HCV kanssa gibridizatsionnofluorestsentnoy havaitsemisen "reaaliajassa" sisältää: PCR-seos-1- FRT HCV-genotyyppien 1 b / 3a PCR-seosta-1-FRT HCV-genotyyppien 1a / 2 PCR-seos-1-FRT HCV EKR / genotyyppi 4 reagenssin kuvaus tilavuus, ml lukumäärä RT-PCR-seos-2-FEP / FRT-polymeraasia (TaqF-) FFP cDNA HCV-genotyyppien 1 b / 3a FFP cDNA HCV genotyypit 1 a / 2 FFP HCV cDNA EKR / 4 genotyyppi TE-puskuria putken 0,6 1 0,6 0,6 1 1 putki putki putken 3 0,3 0,03 3 putkea 0,2 1 putki 0,2 1 putki 0,2 1 putki 0,5 1 putki K Reagenssipakkaus on suunniteltu 55 testille (165 monistusreaktiota), mukaan lukien kontrollit. Sisältyvät kokoonpano muodostaa 1, 2 ja 3. sarja reagenssien liitteenä uuttovaiheen vertailunäytteet :. 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 12 32
13 FORMAT FRT kuvaus Reagent määrä, ml Max OKO EKR STI-248-rec 0,5 0,5 1 putken 1 putki Reagent Kit "PCR kit" variantti FRT-g1-6 reagenssipakkauksen PCR-monistaminen genotyyppien ( 1 a, 1 b, 2, 3a, 4, 5a, 6) HCV kanssa gibridizatsionnofluorestsentnoy havaitsemisen "reaaliajassa" sisältää: reagenssin kuvaus tilavuus, ml Max PCR-seos-1-FRT HCV-genotyyppien 1 b / 3a PCR smes- 1-FRT HCV-genotyyppien 1a / 2 PCR-seosta-1-FRT HCV EKR / genotyyppien 4 PCR-seos-1-FRT HCV-genotyyppien 5a / 6 RT-PCR-seos-2-FEP / FRT-polymeraasia (TaqF-) FFP cDNA HCV genotyyppien 1 b / 3a FFP cDNA HCV genotyypit 1 a / 2 FFP HCV cDNA EKR / 4 genotyyppi FFP KDN HCV-genotyyppien 5a / 6 TE-puskuria putki 0,6 0,6 1 0,6 1 putken 1 putken 1 putki 0,6 0,3 0,03 4 4 koeputket 1 koeputkeen 0,2 0,2 ​​0 1 putki, päivänä helmikuuta 1 injektiopullo 0,2 0,5 1 putken 1 putki reagenssipakkauksen on suunniteltu pitämään 55 testi (220 monistusreaktioiden), verrokit mukaan lukien. Sisällytetty yksikkö muodostaa 4, 5 ja 6 sarja reagenssien liitteenä kontrollinäytteiden uuttovaihe: 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 13 32.
14 FORMAT FRT kuvaus Reagent määrä, ml Max OKO EKR STI-248-rec 0,5 0,5 1 putken 1 putki PCR TUTKIMUS JÄRJESTELY PCR Tutkimus koostuu seuraavista vaiheista: RNA: n kliinisistä näytteistä. Suoritetaan käänteistranskriptioreaktio. Monistus suoritetaan hybridisointi-fluoresoivalla havaitsemisella "reaaliajassa" -tilassa. Tulosten analysointi ja tulkinta. Menettelyn yksityiskohdat ja analyysi perustuu tyypin käytettävien laitteiden on esitetty "Guidelines for käyttöön reagenssipakkauksen määrittämiseksi ja erilaistumista viruksen genotyyppien hepatiitti C (HCV) kliinisistä näytteistä polymeraasiketjureaktiolla (PCR), jossa hybridisaatio-fluoresenssidetektoinnilla" AmpliSens HCV-genotyyppi-FL »» kehittämä Keski tutkimuslaitos Epidemiology FBUN. RNA-UUTTAMINEN VAADITTAVISTA NÄYTTEISTÄ! Työskenneltäessä RNA tarvitsee vain käyttää kertakäyttömuovisia kulutushyödykkeiden erityisellä merkinnällä «RNasefree», «DNaasivapaata». RNA: n uutto reagenssipakkauksista käytetty suositeltava FBUN CRI Epidemiology: käyttäen pakkausta "ribo-sorbentin" reaktanttien käyttömenetelmä, katso liite 1 "RNA: n käyttämällä reagenssia kit" ribo-sorbentin.". käyttämällä reagensseja "ribo-prep" menettely toimii cm. liitteessä 2 "RNA: n käyttämällä reagenssia kit" ribo-prep". VAROITUS! Syntyneet RNA-valmiste ei saa säilyttää, käänteinen reaktio on 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 14 32
15 FORMAT FRT-transkriptio olisi suoritettava välittömästi RNA-näytteen saamisen jälkeen. REAKTION REAKTIOJEN KÄYTTÄMINEN Reaktioseoksen kokonaistilavuus oli 20 ui, mukaan lukien RNA: n näytetilavuus 10 ul. VAROITUS! Kun työskentelet RNA: n kanssa, on käytettävä vain kertakäyttöisiä muovisia tarvikkeita, joissa on erityinen merkintä "RNasefree", "DNase-free". A. Putkien valmistus käänteistranskriptiolle Reagenssien ja RNA-näytteiden lisäämiseen putkiin käytetään kertakäyttöisiä kärkiä suodattimilla. VAROITUS! Reaktioseoksen komponentit tulee sekoittaa välittömästi ennen käänteistranskriptioreaktiota. 1. Ennen kuin työ alkaa sulaa, sekoita sekoittamalla perusteellisesti vortex RT-sekoitus ja RT-G-mix-1. Tyhjennä pudot testiputken korkista. 2. Valitse tarvittava määrä putkia, joiden tilavuus on 0,2 tai 0,5 ml (riippuen käytetystä termostaatista tai lämpösyklistä) käänteistranskriptioreaktion suorittamiseksi ottaen huomioon testiohjausten ja kontrollinäytteiden määrä (yksi uuttoohjaus (OK)). Merkitse testiputket. 3. Otettaessa näytteiden käänteistranskriptio: a) Valmista reaktioseos 12 reaktiota varten. Tätä varten lisää 5 μl RT-G-mix-1: ää koeputkeen RT-seoksella, sekoitetaan perusteellisesti pyörteeseen ja saostetaan pisarat putken korkista. b) Lisätään tulokseksi saatuun liuokseen 6 pl revertaaasia (MMlv), pipetoidaan 5 kertaa, sekoitetaan vortexin kanssa. Pujota putket putken korkista lyhyen sentrifugoinnin avulla. 4. Kun alle 10 näytteen käänteistranskriptio suoritetaan: Reaktioseoksen valmistamiseksi sekoitetaan reagenssit yhteen putkeen seuraavalla tavalla: 10 ui RT-seosta, 0,4 ui RT-G-seksi-1 ja 0, 5 pl revertaaasia (MMlv) (ks. Myös taulukko 1). Kun seokseen lisätään RT-G-mix-1 ja revertase (MMlv), jokainen reagenssi pipetoidaan vähintään 5 kertaa. Sekoitetaan seoksesta perusteellisesti pyörteisiin ja pudotetaan putken korkista. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 15/32
16 FRT FORMAT VAROITUS! Palautus (MMlv) on lämpöherkkä! Älä jätä sitä huoneenlämmössä pitkään! Puhdista jääkaappi pakastimessa välittömästi käytön jälkeen! Tilavuus reagenssia yhden reaktion (I) määrä kliinisistä näytteistä kaavion valmistamiseksi reaktioseos 10,00 0,4 0,5 RT-mix RT-G-mix-1 käänteistranskriptaasin (MMLV), huhtikuu 3, 8 3 2 4, 6 4,, 0 5,0 5. Lisää 10 μl valmistettua reaktioseosta valmistetuille putkille. Taulukko 1 6. Lisää 10 μl RNA-näytteitä, jotka on eristetty kliinisistä ja kontrollinäytteistä valmiisiin koeputkiin merkinnän mukaisesti. Sekoitetaan varovasti pyörteessä ja saostetaan pisarat putken korkista. VAROITUS! Kun lisätään RIBO-Sorb-reagenssipakkaukseen eristettyjä RNA-näytteitä, on vältettävä sorbentin saamista reaktioseokseen. B. Reverse transkriptioreaktion suorittaminen 1. Aseta putket termosykleriin (termostaatti) 37 ° C: ssa 30 minuuttia. VAROITUS! Kun käytetään asettamiseksi käänteistranskriptioreaktio cyclers kanssa havaitsemisjärjestelmä "reaaliajassa" on ohjelmoitava laite ohjelman suoritus (ks. Taulukko. 2 ja "suuntaviivat käyttäen reagensseja havaitsemiseksi ja erilaistumista viruksen genotyyppien hepatiitti C (HCV) kliinisistä näytteistä polymeraasiketjureaktiolla (PCR), jossa hybridisaatio-fluoresenssidetektoinnilla "AmpliSens HCV-genotyyppi-FL» », joiden FBUN Epidemiology CRI). Taulukko 2 4 Otettujen reagenssien volyymit annetaan ottaen huomioon tutkittavien näytteiden määrä (kliiniset näytteet ja 1 RNA-eristysvaiheen valvonta) ja 1 näytteen kanta. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 16/32
17 MUOTO FRT ohjelma käänteistranskriptio -lämpöreaktoreita havaitsemisjärjestelmä "reaaliajassa" reaktio 5 Vaihe Lämpötila, C Aika fluoresenssin mittaus määrä sykliä 1 min 2. Kun reaktio on mennyt loppuun putken lisätään 20 mikrolitraa DNA-puskuria, käyttäen uutta Kärki, jossa on suodatin jokaiselle näytteelle. Sekoita varovasti pyörteeseen ja saostuta putket putken korkista. Päinvastaisessa transkriptioreaktiossa kdnk saadut tulokset käytetään PCR-monistuksessa. Valmis lääke kdnk voidaan varastoida lämpötilassa, joka ei ole korkeampi kuin miinus 16 C yhden viikon ajan tai lämpötilassa, joka ei ole korkeampi kuin miinus 68 C vuoden aikana. Monistuksella havaitseminen "reaaliajassa" valmistus A. koeputkien monistamaan valinta putkien monistuksen riippuu lämpösyklilaitteella. Reagenssien lisäämiseksi käytetään näytteen kdnk- ja kontrollinäytteitä putkiin, kertakäyttöisiä kärkiä suodattimilla. Reaktioseoksen kokonaistilavuus oli 25 ui, mukaan lukien 10 dl näytteen tilavuus. VAROITUS! Reaktioseoksen komponentit tulee sekoittaa välittömästi ennen PCR-testin suorittamista. Reagenssien sekoittaminen vaaditun reaktiomäärän laskemisesta, mukaan lukien testi- ja kontrollinäytteiden testaus on tarpeen laskentataulukon mukaan (ks. Taulukko 3, 4). A1. Valmistelu putkien monistus käyttämällä kit "PCR kit" reagenssit variantti FRT-g1-4 esimerkiksi 5, Rotor-Gene 3000 tai 6000 (Corbett Research, Australia); Rotor-Gene Q (Qiagen, Saksa); iq5 (Bio-Rad, USA); Mx3000P (Stratagene, USA); "DT-96" ( "DNA-tekniikalla", Venäjä) ja suositteli FBUN CRI epidemiologia on ohjeet käyttää tätä reagenssipakkausta. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 17/32
18 MUOTO FRT 1. Ennen sulattamiseen, sekoita perusteellisesti vorteksoi kaikki reagensseja ja sedimentin putoaa putkeen korkit. 2. Valitse tarvittava määrä testiputkia monistamista varten ottamalla huomioon koe- ja kontrollinäytteiden lukumäärä (yksi RNA-uuton valvonta, kaksi vahvistuksen säätöä). Putkien tyyppi on valittava riippuen käytetystä laitteesta. VAROITUS! Jokainen näyte analysoidaan käyttäen kolmea reaktioseosta, joten jokaiselle näytteelle on valmistettava 3 koeputkea. Käytettäessä pyörivätyyppisiä instrumentteja merkitään putket "sample_1b / 3a", "sample_1a / 2" ja "sample_over / 4". Kun käytät tasomaisia ​​laitteita, käytä merkittyjä kolmijalka näitä tarkoituksia varten. 3. Valitse kolme 0,5 ml: n putkea reaktioseosten valmistukseen. Merkitse testiputket "1b / 3a", "1a / 2" ja "VKO / 4". 4. Kussakin kolmeen koeputkeen valmistukseen tarkoitettujen reaktioseosten tehdä reaktion nopeutta on 1: 5 l RT-PCR-seosta-2-FEP / FRT, 0,5 l-polymeraasia (TaqF-) ja 10 ui vastaavan PCR-mix -1-FRT HCV-genotyyppi (ks. myös taulukko. 3), PCR-mix-1-FRT HCV-genotyyppien 1b / 3a syötetään putken «1 b / 3a» jne. Tuloksena oleva reaktioseos vorteksoidaan ja saostetaan putken korkista. VAROITUS! Reaktioseokset on valmistettava 1 näytteen varalla (katso taulukko 3). 5. Lisää 15 μl valmistettua reaktioseosta monistamiseen tarkoitettuihin koeputkiin merkinnän mukaisesti, ts. reaktioseos "lb / 3a" lisätään putkiin, jotka on merkitty "näyte-1b / 3a" jne. 6. valmistetut putket Annostele reaktioseos mukaisesti merkinnän Lisää 10 ui cDNA saadut näytteet käänteiskopiointireaktion, kunkin näytteen, kuten uuttamalla negatiivinen kontrolli (C), tarvitaan 3 pulloihin, jotka sisälsivät reaktio Annostele seokset "1b / 3a", "1a / 2" ja "VKO / 4". 7. Aseta ohjaus reaktiot: a) PCR-negatiivinen kontrolli (K) lisätään putkiin, jotka sisältävät reaktioseokset Annostele «1 b / 3a», «1 a / 2" ja 'SAI / 4' 10 ul: aan TE-puskuria. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 18/32
19 FORMAT FRT b) positiivinen kontrolli PCR (K + 1 b / 3a) putkeen, joka sisälsi reaktioseoksen «1 b / 3a" lisätään 10 ui cDNA FFP HCV-genotyyppien 1 b / 3a; c) PCR-positiivinen kontrolli (C + 1 a / 2) koeputkeen, joka sisälsi reaktioseoksen «1 a / 2" lisätään 10 ui cDNA FFP HCV-genotyyppien 1 a / 2; d) PCR-positiivinen kontrolli (C + EKR / 4) putki, joka sisältää reaktioseoksen "SAI / 4" lisätään 10 ui FFP HCV cDNA EKR / genotyyppi 4. Kaavio valmistamiseksi reaktioseokset variantin FRT reagenssin määrä reaktiota kohden (l) No. kliininen testinäytteet pistettä 6 10,00 5,00 6 0,50 määrä kliinisten näytteiden + 1 kontrolli-RNA uuttovaiheeseen 2 PCR-+ ohjaus (N + 3, N useissa kliinisissä näytteissä). PCR-seos-1- FRT HCV-genotyyppi * RT-PCR-seos-2- FEP / FRT * Taulukko 3-polymeraasia (TaqF-) *,,,,,,,,, 0 * tilavuudet reagenssien käyttöön, marginaali antama 1 näyte. A2. Valmistelu koeputkia monistus käyttäen joukko "PCR kit" reagenssit variantti FRT-g Ennen sulattamiseen, sekoitetaan perusteellisesti vorteksoi kaikki reagensseja ja sedimentin putoaa putkeen korkit. 2. Valitse tarvittava määrä testiputkia monistamista varten ottamalla huomioon koe- ja kontrollinäytteiden lukumäärä (yksi RNA-uuton valvonta, kaksi vahvistuksen säätöä). Putkien tyyppi on valittava riippuen käytetystä laitteesta. VAROITUS! Jokainen näyte analysoidaan käyttäen neljää reaktioseosta, joten jokaiselle näytteelle on valmistettava 4 koeputkea. Kun käytetään 0,2 ml putkiin pyörivän putken merkin "obraztsa_1b / 3a» laitteet "obraztsa_1a / 2", "obraztsa_vko / 4" ja "obraztsa_5a / 6", vastaavasti. Kun käytät tasotyyppisiä laitteita tai käyttäessäsi nauhoitettua 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 19/32
20 FORMAT FRT-koeputkia roottorityyppisille instrumenteille käyttää merkittyjä kolmijalkaa näihin tarkoituksiin. 3. Valitse neljä 0,5 ml: n putkea reaktioseosten valmistukseen. Merkitse putket "1b / 3a", "1a / 2", "VKO / 4" ja "5a / 6". 4. Kussakin neljän putken valmistukseen tarkoitettujen reaktioseosten tehdä reaktion nopeutta on 1: 5 l RT-PCR-mix-2- FRT HCV-genotyyppi (katso myös taulukko 4..), kanssa PCR-1- FRT HCV-genotyypit lb / 3a lisätään putkeen "lb / 3a" jne. Tuloksena oleva reaktioseos vorteksoidaan ja saostetaan putken korkista. Järjestelmän valmistamiseksi reaktioseokset variantti FRT-reaktiota kohti tilavuus reagenssia (I) No. kliininen testi näytteiden pistettä 7 10,00 5,00 0,50 FEP / FRT, 0,5 l-polymeraasia (TaqF-) ja 10 ui vastaavan PCR-mix -1- PCR-seos-1- FRT HCV-genotyyppi * RT-PCR-seos-2- FEP / FRT * Taulukko 4-polymeraasia (TaqF-) *,,,,,,,,, 0 * mainitut määrät reaktantteja syötettiin marginaali 1 näytettä. 5. Lisää 15 μl valmistettua reaktioseosta monistamiseen tarkoitettuihin koeputkiin merkinnän mukaisesti, ts. reaktioseos "lb / 3a" lisätään putkiin, jotka on merkitty "näyte-1b / 3a" jne. Jos reaktion yhteydessä käytetään irrallisten putkien monistusta, reaktioseokset tulee ottaa käyttöön kuviossa 1 esitetyn järjestelmän mukaisesti. 7 lukumäärä kliinisten näytteiden + 1 kontrolli-RNA uuttovaiheeseen 2 PCR-+ ohjaus (N + 3, N useissa kliinisissä näytteissä). 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 20/32
21 FORMAT FRT 4 putkia käytetään asettamaan kliinisestä näytteestä seos «1 b / 3a» Seosta, jossa oli «1 a / 2" seos "SAI / 4" seos "5a / 6" Seosta, jossa oli«1 b / 3a»Seosta, jossa oli« 1 a / 2" seos " VKO / 4 »Seos« 5a / 6 »Kuvio 1. Järjestelmä reaktioseosten ja näytteiden tuomiseksi käytet- täessä irrallisia putkia PCR-tuotannolle. 6. valmistetut putket Annostele reaktioseos mukaisesti merkinnän Lisää 10 ui cDNA saadut näytteet käänteiskopiointireaktion, kunkin näytteen, kuten uuttamalla negatiivinen kontrolli (C), on tehtävä 4 putkiin, jotka sisältävät reaktion Annostele seokset "1b / 3a", "1a / 2", "EKO / 4" ja "5a / 6". 7. Aseta ohjaus reaktiot: a) PCR-negatiivinen kontrolli (K) lisätään putkiin, jotka sisältävät reaktioseokset Annostele «1 b / 3a», «1 a / 2", 'SAI / 4' ja '5 a / 6' 10 ul: aan TE-puskuria. b) positiivinen kontrolli PCR (K + 1 b / 3a) putkeen, joka sisälsi reaktioseoksen «1 b / 3a" lisätään 10 ui cDNA FFP HCV-genotyyppien 1 b / 3a; c) PCR-positiivinen kontrolli (C + 1 a / 2) koeputkeen, joka sisälsi reaktioseoksen «1 a / 2" lisätään 10 ui cDNA FFP HCV-genotyyppien 1 a / 2; d) PCR-positiivinen kontrolli (C + EKR / 4) putki, joka sisältää reaktioseoksen "SAI / 4" lisätään 10 ui FFP HCV cDNA EKR / 4 genotyyppi; d) PCR-positiivinen kontrolli (C + 5a / 6) putken kanssa reaktioseoksen «5a / 6" lisätään 10 ui cDNA FFP HCV-genotyyppien 5a / 6. B. Suoritetaan monistus havaitsemisen "reaaliajassa" laite 1. Ohjelman (cycler kanssa havaitsemisjärjestelmä "reaaliajassa") suorittamaan asianmukaisen monistamiseen ja havaitsemiseen fluoresoiva signaali ohjelma "AmpliSens-1" (ks. Taulukko. 5, 6 ). Taulukko 5 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 21/32
22 FORMAT FRT «AmpliSens-1 'ohjelma pyörivät laitteet 8 Lämpötilan kesto mittaus määrä vaiheessa C vaiheessa sykliä fluoresenssi pito / Hold min 1 Lämpötila-ry 95 5 Cycling / 5 pyöräily 95 5 Cycling 2 / FAM / vihreä 40 Cycling 2 JOE / keltainen taulukon 6 "AmpliSens-1" tabletti-tyyppisiä laitteita 9 ja laite Smart Cycler II (Cepheidiltä, ​​USA) Vaihe lämpötila kesto mittaus Numeron sykliä fluoresenssi min (900-10), jossa 95 s 5 s FAM: n, JOE / HEX / Cy: n kanssa 2. Asenna testiputket instrumentin reaktiomoduulin soluihin. 3. Aloita vahvistusohjelman suorittaminen fluoresoivalla signaalilla. 4. Aloita ohjelman analysointi ja tulkinta ohjelman suorittamisen jälkeen. Analyysi ja tulkinta TULOSTEN Analyysi aineen ohjelmiston kanssa, jota laite suorittamalla PCR havaitsemiseen c "reaaliaikaisesti". Analysoi fluoresoivan signaalin kerääntymiskäyrät kanavan yli fluorofori FAM: lle (tai vastaavalle) ja kanavalle JOE-fluoroforille (tai vastaavalle). Tulokset tulkitaan perusteella läsnä (tai poissa) esimerkin 8, roottori-Gene 3000 tai 6000 (Corbett Research, Australia), roottori-Gene Q (Qiagen, Saksa). Esimerkiksi icycler iq5 (Bio-Rad, USA); Mx3000P, Mx3005 (Stratagene, USA); "DT-96" ("DNA-Technology", Venäjä) ja jota FBUN CRI Epidemiologia Rospotrebnadzor suositteli tämän reagenssiryhmän käyttöohjeissa. 10 Smart Cycler II: lle (Cepheid, USA). 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 22/32
23 FORMAT FRT leikkauspiste käyrä fluoresenssin asennettu sopivalla tasolla kynnysviiva, että havaitsee (tai poissaolon) näytearvojen cDNA kynnyssyklinä Ct vastaavassa sarakkeessa tuloksen taulukossa. Tulos monistamisen kanavan katsotaan positiiviseksi, jos fluoresenssin käyrä on tyypillinen reaaliaikainen PCR S-muotoinen, kun leikkaa kynnysarvon rivillä merkittävä fluoresenssin kasvu, negatiivinen ilman käyrän tyypillisen muodon ja leikkaa kynnysarvon viiva (ei Ct tai Cp) ja kyseenalaista kaikissa muissa tapauksissa. Taulukko 7 esittää kanavat, joiden kautta HCV-genotyypit havaitaan jokaiselle reaktioseokselle. Taulukko 7 Reaktioseos «1 b / 3a» «1 a / 2" "SAI / 4" "5a / kesäkuu 11" Kanava jäljitettävä genotyypit HCV FAM / vihreä 1b 1a ASD 5a JOE / HEX / keltainen / Cy3-3a Accounting tuloksia kontrollinäytteiden Tulokset PCR-analyysi pidetään luotettavana, jos saadut tulokset kokeen näytteet mukaisesti arvioinnin tulosten taulukosta kontrollireaktioihin (ks. taulukko. 8). 11 Sisältyy FRT-g1-6: n PCR-sarjan versioon. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 23/32
24 FORMAT FRT reaktiivisen Nye seos ohjaimen OK-K K + 1 b / 3a Tulokset valvonnan eri vaiheissa analyysi FAM / Vihreät Ei Ct o Ct alle raja-arvon TAULUKKO 8 «1b / 3a» «1 a / 2" "SAI / 4 »« 5a / 6 '12 tulokset vahvistusta kanavan JOE / HEX / keltainen / Cy3 FAM / Vihreä JOE / HEX / keltainen / Cy3 FAM / Vihreä JOE / HEX / keltainen / Cy3 FAM / Vihreä JOE / HEX / keltainen / Cy3 Ei merkitystä ct o ct-arvo on alle raja-arvon K + 1 a / 2 * * Ei ct arvo ei ct arvo ei ct arvo ei ct-arvo on alle raja-arvon o ct arvo otsuts tvuet Ct o Ct-arvossa ei Ct-arvossa ei Ct-arvossa ei Ct-arvossa ei Ct-arvossa * * * * * * alle raja-arvon alle raja-arvon K + EKR / 4 * * * * * * * * alle raja-arvon raja-arvon alapuolelle K + 5a / 6 * * * * * * * Tätä reaktioseosta ei ole testattu. * * Raja-arvon alapuolella VARO! Ct: n raja-arvot on merkitty inserttiin PCR-pakkaukseen. Tulosten tulkinta tutkimuksessa kliinisten näytteiden alle raja-arvon 1. HCV-genotyyppi läsnä näytteessä vahvistetaan vertailemalla Monistamiseen kolmen tuloksen (haulle "PCR kit" variantti FRT-g1-4) tai neljä putkea (haulle "PCR kit" variantti FRT-g1-6) taulukon 1 mukaisesti. 7, jossa a) Jos taulukon tulokset näytteelle määritetään Ct, yksi vastaava genotyyppi HCV-RNA: ta, sitten palauttaa tuloksena "genotyyppi"; b) Jos taulukko tulokset kahdesta näytteestä tai useamman Ct-arvoja määritetään, sitten se annetaan kahden, kolmen, ja niin edelleen. d. genotyyppi. Poikkeuksena on seuraavissa tapauksissa: Jos määritetty näytteen Ct reaktioseokseen "SAI / 4" kanava JOE / HEX / keltainen / Cy3 (4 HCV-genotyyppi) ja «1 b / 3a» reaktioseos kanava FAM / vihreä (1 b-genotyyppi HCV), jossa Ct-arvo 4. genotyypin suurempi Ct-arvossa ensimmäisen genotyyppi 10 sykliä tai enemmän, antoi 12 on osa PCR -kittiä variantti FRT-g1-6. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 24/32
25 FORMAT FRT-tulos "Genotyyppi 4". Taulukossa 2. Jos tulokset Ct-arvo määritetään näytteen vain SAI (reaktioseos "SAI / 4», FAM / vihreä kanava) ja on alle asetetun raja-arvon liner, tulos annetaan «HCV-genotyyppi ei määritetty". Näin ollen, jos tiedetään, että pitoisuus HCV-RNA näytteessä on sisällä analyyttisen herkkyyden reagenssien, tulos annetaan «HCV-genotyyppi ei määritetty johtuen alhaisesta viruskuorman". 3. Jos taulukko näytteiden tuloksista ei Ct-arvoja kaikkien genotyyppien ja Ct-arvo EKR (FAM kanavan PCR-mix-1-FRT HCV EKR / genotyyppi 4) ei ole määritetty tai ylittää rajan (ilmoitettu insertti), sitten sen on toistettava tämän näytteen PCR-tutkimus, joka alkaa RNA-uuttovaiheesta. VAROITUS! 1. Jos Ct-arvo on vähintään yhdestä näytteestä positiivisen kontrollin PCR-vaiheessa (K + 1 b / 3a, K + 1 a / 2, K + EKR / 4 tai K + 5a / 6) ylittää raja-arvon on määritelty liner tai poissa, se on tarpeen toista PCR-testi kaikille näytteille alkaen uuttovaiheesta. 2. Jos negatiivisena kontrollina RNA: n uuttaminen (OK) ainakin yksi reaktioseosten «1 b / 3a», «1 a / 2», «5a / 6" Jonkin käytettyjen kanavien ja / tai "SAI / 4, reaktioseos "kanava havaitaan positiivinen JOE / HEX / keltainen / Cy3-signaali, toista PCR kaikki tutkittavat näytteet, joille tämä reaktioseos HCV-genotyyppi määritettiin vaiheesta RNA-eristystä. 3. Jos negatiivinen PCR-kontrolli (K) minkä tahansa reaktioseoksesta jokin kanavista havaitaan positiivinen signaali, toista PCR kaikki tutkittavat näytteet, joille tämä reaktioseos HCV-genotyyppi määritettiin vaiheesta RNA-eristystä. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 25/32
26 HENKILÖKOHDAT, KULJETUS- JA SÄILYTYSOLOSUHTEET Säilyvyysaika. 12 kuukautta Sellaisten reagenssien joukossa, joiden voimassaoloaika on päättynyt, ei sovelleta. Säilyvyyttä reagenssien vastaa avattiin mennessä merkitty etiketteihin ja avaamaton reagenssien, ellei opetusta. Liikkuminen. Reagenssipakkaus on kuljetettava 2-8 ° C: n lämpötilassa enintään 5 vuorokautta. Kun se on vastaanotettu, purkaa ohjeiden mukaiset säilytyslämpötilat. Varastointi. Sarjat reagenssien "ribo-sorbentin" ja "ribo-prep" säilytettiin 2-8 C sarjat reagenssit "Reverte-L» ja «PCR kit" paitsi OKO, TE-puskuria ja EKR STI-248-rec tallennetaan lämpötilassa, joka ei ole korkeampi kuin miinus 16 C OKO, TE-puskuria ja EKR STI-248-rec päässä "PCR kit" säilytettiin 2-8 C. PCR-seos oli-1-FRT HCV-genotyyppien 1b / 3a PCR-seosta-1-FRT HCV-genotyyppien 1a / 2, PCR-mix-1-FRT HCV EKR / 4 genotyyppi ja PCR-seos-1-FRT HCV-genotyyppien 5a / 6 säilytettiin pimeässä paikassa. Lupa-ajat. Hoito -, ehkäiseviä ja saniteettitiloja varten. Valitukset laadusta joukko "AmpliSens HCV-genotyyppi-FL» reagenssit suunnataan valmistajan FBUN Central Research Institute of Epidemiology (Ul. Novogireevskaya, d. 3a) Sanoma Newsin työn vaatimukset ja koulutusorganisaatioiden (puh. (495) fax (495), palautetta ja ehdotuksia tuotteesta "AmpliSens" voi jättää, täyttämällä lomakkeen internetsivuilla kuluttajan: 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 26 32.
27 LIITE 1. RNA: n uuttaminen RNA: ta käyttäen "ribo-sorbentin" reagenssipakkauksen Menettelytapa 1. hajottavan liuos ja pesuliuos 1 (jos niitä säilytettiin 2-8 C), lämmin 60 ° C, kunnes täydellinen liukeneminen kiteet. 2. Valitse kertakäyttöisten koeputkien haluttu määrä 1,5 ml: lla (mukaan lukien negatiivisen uuton säätö). Merkitse testiputket. 3. Anna jokaisen putken pohjalle 10 μl EKO STI-248-rec. 4. Lisää 450 ui lyysiliuosta testiputkiin. Merkitse testiputket. Huomaa Kun suuri näytteen tilavuus eristämisen helpottamiseksi menettely sekoittaa erillisessä pullossa lyysiliuosta ja EKR STI-248-rec (perustuu yhteen näytteeseen 450 ui: aan lysis-liuosta ja 10 l EKR STI-248-rec) ja sen jälkeen etäisyys 450 ui valmiiksi valmistettuihin 1,5 ml: n putkiin. 5. Lisää 100 μl näytettä koeputkiin lyysiliuoksella ja VKO käyttäen suodattimen kärkiä. Negatiivisessa kontrollissa (OK) uuton putkessa lisätään 100 μl OKO: ta. 6. Tiiviit näyte sekoitettiin perusteellisesti vortex-sekoituksella ja protsentrifugirovat 5 sekunnin ajan 5000 kierrosta / min mikrosentrifugissa poistaa tippaa sisäpinnasta putken kannen. 7. Suspendoi sorbentti voimakkaasti sekoittumalla pyörteeseen. Lisää 25 μl resuspendoitua sorbenttia kummallekin putkelle erillisellä kärjellä. 8. Sekoita pyörreputkien sisältö ja anna ne 10 minuutin ajan huoneenlämpötilassa sekoittaen huolellisesti joka toinen minuutti. 9. Sentrifugoi mikrosentrifugiputkiin 7 th g (esim., 10000 kierrosta / min minispin Sentrifugoidaan, Eppendorf) 1 minuutin ajan. 10. Ota kummastakin putkesta supernatantti erillisellä kärjellä käyttäen tyhjiöimulaatiota. 11. Lisää putkeen 400 ui pesuliuosta 1. Sekoita vorteksoimalla, kunnes täydellisen sekoittumisen sorbentin. Sentrifugoidaan putket mikrosentrifugissa nopeudella 7 000 g 1 min. Valitse supernatantti 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 27/32
28 RNA-ulostulo kustakin putkesta erillisellä kärjellä, käyttäen imuyksikköä. 12. Lisää 500 μl pesuliuosta putkiin. 3. Sekoita vorteksointiin kunnes sorbentin täydellinen suspensio on valmis. Sentrifugoidaan putket mikrosentrifugissa nopeudella 7 000 g 1 min. Valitse liuos pesemällä 3 kustakin putkesta erillisellä kärjellä käyttäen imuyksikköä. 13. Lisää 400 μl pesuliuosta putkiin 4. Sekoitetaan pyörteessä, kunnes sorbentti kokonaan suspendoidaan uudelleen. Sentrifugoidaan putket mikrosentrifugissa nopeudella 7 000 g 1 min. Poista täydellisesti pesuliuos 4 kustakin putkesta erillisellä kärjellä käyttämällä tyhjiöimulaatiota. 14. Kuivaa sorbentti asettamalla putket avoimilla kannilla termostaatissa 60 ° C: n lämpötilassa 15 minuutin ajan. 15. Resuspendoidaan sorbentti uudelleen 50 ui RNA-puskuria. Kuumenna uunissa lämpötilassa 60 ° C 2 min, sekoitettiin vorteksoimalla ja sentrifugoidaan saostamiseksi sorbentti on 12000 g (esim., Rev / min minispin Sentrifugoidaan, Eppendorf) 1 minuutin ajan. VAROITUS! Saatu RNA-valmiste ei altistu varastointia varten, käänteistranskriptioreaktio suoritetaan heti RNA-näytteen saamisen jälkeen. Ota RNA-liuos reaktioon hyvin varovasti absorboitumatta sorbenttia. Jos sorbentti häiriintyy, on välttämätöntä saostaa se sentrifugilla. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 28/32
29 LIITE 2 RNA: n RNA: n kittiä "ribo-prep" reagenssit Menettely 1. Lysis Solution (jos se säilytettiin 2-8 C), lämmin 65 C: ssa kunnes liukeneminen on täydellistä kiteitä. 2. Valitse kertakäyttöisten koeputkien haluttu määrä 1,5 ml: lla (mukaan lukien negatiiviset ja positiiviset uuttoohjaukset). 3. Anna jokaisen putken pohjalle 10 μl EKO STI-248-rec. 4. Lisää 300 ui lyysiliuosta testiputkiin. Merkitse testiputket. Huomaa Kun suuri näytteen tilavuus eristämisen helpottamiseksi menettely sekoittaa erillisessä injektiopullossa hajoamista ja EKR STI-248-rec (perustuu yhteen näytteeseen 300 ui lyysi ja 10 ui EKR STI-248-rec) ja sen jälkeen väli 300 ml seosta valmiiksi valmistettuihin 1,5 ml: n putkiin. 5. Putkiin, joissa on liuosta lyysiä ja VKO: ta varten, lisätään 100 μl näytettä käyttäen kärkiä suodattimella. Negatiivisessa kontrollissa (OK) uuton putkessa lisätään 100 μl OKO: ta. 6. Putkien sisältöä on syytä sekoittaa perusteellisesti, sentrifugoida 5 sekuntia mikrosentrifugissa pisaroiden poistamiseksi kannen sisäpinnasta ja lämmittää 5 minuuttia 65 ° C: ssa termostaatissa. 7. Lisää 400 μl saostusliuosta koeputkiin, sekoita voimakkaasti vortexin kanssa. 8. Sentrifugoidaan putket mikrosentrifugissa 12 000 g: ksi (esimerkiksi rpm MiniSpin-sentrifugille, Eppendorf) 5 minuutin ajan. 9. Poista supernatantti huolellisesti koskematta sedimenttiin käyttämällä tyhjiöhöyryä ja erillistä kärkiä kutakin näytettä kohti. 10. Lisää 500 μl pesuliuosta testiputkiin 3, sulje kansi tiukasti, pese pesu sedimentistä ja käännä koeputket 3-5 kertaa. Voit suorittaa toimenpiteen samanaikaisesti kaikille putkille. Tällöin sinun on peitettävä kolmion jalustat ylhäältä kansi tai muu jalusta, paina niitä ja käännä jalusta. 11. Sentrifugoidaan 12 000 g: n lämpötilassa 1 - 2 minuutin ajan mikrosentrifugissa. 12. varovasti, ilman syömällä sakka, supernatantti pois, 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / s. 29 32
30-RNA-UUTUUS käyttäen tyhjiöimulaitteistoa ja erillistä kärkiä kullekin näytteelle. 13. Lisää 200 μl pesuliuosta 4 testiputkeen, sulje kansi tiukasti ja pese pelletti varovasti kääntämällä putket 3-5 kertaa. Voit suorittaa toimenpiteen samanaikaisesti kaikille putkille. Tällöin sinun on peitettävä kolmion jalustat ylhäältä kansi tai muu jalusta, paina niitä ja käännä jalusta. 14. Sentrifugoidaan 12 000 g: n lämpötilassa 2 minuutin ajan mikrosentrifugissa. 15. Huolehdi huolellisesti sedimentin keräämisestä huolellisesti supernatantista käyttämällä imuyksikköä ja erillinen kärki jokaiselle näytteelle. 16. Aseta putket termostaattiin 65 ° C: n lämpötilassa 5 minuutin ajan lietteen kuivattamiseksi (putkikannet avautuvat). 17. Lisää 50 μl RNA-puskuria putkiin. Sekoita pyörre. Aseta termostaattiin 65 ° C: n lämpötilassa 5 minuutin ajan, minkä jälkeen se ravistetaan säännöllisesti pyörrepuhdistuksella. 18. Sentrifugoidaan putket 12 000 g: n lämpötilassa yhden minuutin ajan mikrosentrifugissa. Supernatantti sisältää puhdistettua RNA: ta. Näytteet ovat valmiita käänteistranskriptio- ja PCR-reaktion reaktioon. VAROITUS! Saatu RNA-valmiste ei altistu varastointia varten, käänteistranskriptioreaktio suoritetaan heti RNA-näytteen saamisen jälkeen. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 30/32
31 TULOSTETTUISTA TUOTTEISTA KÄYTETTÄVÄT SYMBOLIT Osanumero Eräkoodi Varoitus! Viittaavat oheisiin asiakirjat enimmäismäärä testattavan tuotteen on in vitro diagnostinen käyttö vaihtuu lämpötilan raja lämpötilan yläraja, katso käyttöopas Vältä auringonvalo päivämäärä valmistus Valmistaja 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p 31/32
32 Issue LA IVI paikka muuttuu Alatunnisteen Sheet ydin muutokset muutosten lisätty luettelonumero R-V1-G (1-4) - 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC), jolloin muodostuu täydellinen 3 Poista luettelo numerot formulaatiot 1 ja 4 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / sivu 32/32
Hepatiitti c vaiheita
Mpiviropackin hinta
Kaikki hepatiitti C: stä
Hoito, oireet, huumeet
Hepatiitti rcc-amplikonilla hcv fl
Hepatiittia kutsutaan akuutteiksi ja kroonisiksi maksan tulehduksellisiksi sairauksiksi, jotka eivät ole keskittyviä vaan yleisiä. Eri hepatiitissa infektiomenetelmät ovat erilaiset, mutta ne eroavat myös sairauden etenemisnopeudesta, kliinisistä ilmenemismuodoista, menetelmistä ja ennusteesta. Myös eri tyyppisten hepatiittien oireet ovat erilaiset. Ja jotkut oireet ovat muita vakavampia, mikä määräytyy hepatiitin tyypin mukaan.
Keltaisuustekijöillä. On usein löydetty oireita, ja se johtuu siitä, että bilirubiini tulee maksan vaurioituneen potilaan veressä. Veri, joka kiertää kehon läpi, kuljettaa sen elimiin ja kudoksiin värittämällä ne keltaisella.
Kivun ulkonäkö oikean hypokondriolin alueella. Se syntyy maksan koon kasvun takia, mikä aiheuttaa kipua, joka on tylppä ja pitkittynyt tai on paroksismaalinen.
Terveyden heikkeneminen, johon liittyy kuumetta, päänsärkyä, huimausta, ruoansulatuskanavan häiriöitä, uneliaisuutta ja letargiaa. Kaikki tämä on seurausta bilirubiinin vaikutuksesta kehoon.
Hepatiitti akuutti ja krooninen
Hepatiittipotilailla on akuutteja ja kroonisia muotoja. Akuutissa muodossa ne ilmenevät virusten maksavaurion tapauksessa samoin kuin jos myrkytys johtuu erilaisista myrkkyistä. Akuutissa sairauden muodoissa potilaiden tila huononee nopeasti, mikä osaltaan edistää oireiden nopeutettua kehittymistä.
Tämän sairauden muodon avulla suotuisat ennusteet ovat mahdollisia. Paitsi sen muuttaminen krooniseksi. Akuutissa muodossa tauti tunnistetaan helposti ja on helpompi hoitaa. Käsittelemätön akuutti hepatiitti kehittyy helposti krooniseen muotoon. Joskus vaikeassa myrkytyksessä (esim. Alkoholi), krooninen muoto esiintyy yksinään. Hepatiitin kroonisessa muodossa maksasolujen sidekudoksen korvaaminen tapahtuu. Se on heikosti ilmaistu, se on hidasta, ja siksi se joskus jää diagnosoimatta siihen asti, kunnes maksakirroosi alkaa. Kroonista hepatiittia hoidetaan huonommin, ja sen parannuskehitys on epäedullisempi. Akuutissa taudin tietenkin huomattavasti terveyden heikkenemisestä, keltaisuus kehittää, myrkytyksen näkyy, työfunktio pienenee maksan bilirubiini on lisääntynyt veren. Kun hepatiitti on tunnistettu ja tehokkaasti hoidettu akuutissa muodossa, potilas palaa eniten. Kun taudin kesto on yli kuusi kuukautta, hepatiitti kulkeutuu krooniseen muotoon. Krooninen muodossa tauti aiheuttaa vakavia häiriöitä elimistössä - lisääntynyt pernan ja maksan aineenvaihdunta häiriintyy, ongelmia syntyy, maksakirroosi ja syövän muodostumisen. Jos potilaalla on alhainen immuniteetti, hoitojärjestelmä on virheellinen tai alkoholiriippuvuus, hepatiitin siirtyminen krooniseen muotoon uhkaa potilaan elämää.
Hepatiitilla on useita tyyppiä: A, B, C, D, E, F, G, heitä kutsutaan myös virusperäiseksi hepatiitiksi, koska niiden esiintyminen on virus.
Tällaista hepatiittia kutsutaan myös Botkinin taudiksi. Se on inkubaatioaika, joka kestää 7 päivää - 2 kuukautta. Sen aiheuttaja - RNA-virus - voidaan siirtää sairastuneelta henkilöltä terveelle henkilölle heikkolaatuisten tuotteiden ja veden kautta, kosketuksiin potilaiden kanssa käytettävistä kotitaloustavaroista. Hepatiitti A on mahdollista kolmessa muodossa, ne jakautuvat taudin ilmentymisen voimakkuuden mukaan:
akuutissa muodossa keltaisuutta, maksan vaurioituu vakavasti,
kun subakuuti ilman keltaisuutta, voimme puhua taudin kevyemmästä versiosta,
subkliinisessä muodossa, et edes huomaa oireita, vaikka tartunta on viruksen lähde ja pystyy tarttumaan muihin.
Tätä tautia kutsutaan myös seerumin hepatiitiksi. Sen mukana seuraa maksan ja pernan lisääntyminen, kipujen esiintyminen nivelissä, oksentelu, lämpötila ja maksavaurio. Se virtaa joko akuuteissa tai kroonisissa muodoissa, mikä määräytyy sairastuneen henkilön immuniteetin perusteella. Tartuntataudit: terveydentilaa koskevien sääntöjen rikkomisen yhteydessä, sukupuoliyhteys, verensiirron aikana, huonosti desinfioituneiden lääkinnällisten välineiden käyttö. Inkubaation kesto on 50 ÷ 180 päivää. B-hepatiitin esiintyvyys heikkenee rokotuksen yhteydessä.
Tällainen tauti on yksi vakavimmista sairauksista, koska siihen liittyy usein kirroosi tai maksasyöpää, mikä johtaa kuolemaan. Tauti ei ole hoidettavissa, ja lisäksi, koska se on toistunut kerran hepatiitti C: n kanssa, henkilö voi toistuvasti saada tartunnan samalla taudilla. HCV-hoitoa ei ole helppoa: akuutin hepatiitti C: n jälkeen 20% ihmisistä toipuu ja 70% potilaista keho ei pysty parantamaan virusta ja tauti krooniseksi. Määritä syy siihen, miksi jotkut ovat parantuneet itsensä ja muut eivät ole, mutta se ei ollut mahdollista. Itse hepatiitti C: n krooninen muoto ei katoa, joten sitä on käsiteltävä. Akuuttien HCV-lääkkeiden diagnoosi ja hoito on tartuntatautilääkäri, joka on taudin krooninen muoto, joka on hepato- tai gastroenterologi. Voit tulehtua aikana verensiirrossa plasman tai veren tartunnan luovuttajan, käyttämällä hoidetaan huonosti MEDINSTRUMENT, seksuaalisesti, ja sairas äiti kulkee infektion lapselle. Hepatiitti C -virus (HCV) levittyy nopeasti ympäri maailmaa, potilaiden määrä on pitkään yli sata ja sata miljoonaa ihmistä. Aikaisemmin HCV ei suostunut hoitoon, mutta nyt tauti voidaan parantaa nykyaikaisilla suoralla vaikuttavilla antiviruksilla. Vain tämä hoito on melko kallista, mutta koska kaikilla ei ole varaa siihen.
Tämä hepatiitti D -tyyppi on mahdollista vain, jos hepatiitti B -viruksella on samanaikainen infektio (ko-infektio - tapaus, jossa yksi solu on erilaisten virusten kanssa). Hänen mukana on massiivinen maksavaurio ja akuutti taudin kulku. Tartuntataudit - sairastumisviruksen saattaminen terveelle henkilölle verestä virustartunnan tai sairaan henkilön verestä. Inkubaatioaika kestää 20 ÷ 50 päivää. Ulospäin, taudin kulku muistuttaa hepatiitti B: tä, mutta sen muoto on raskaampi. Voi tulla krooniseksi, kun hän menettelee kirroosiin. On mahdollista suorittaa vastaavanlainen rokotus kuin hepatiitti B: llä.
Se muistuttaa hieman hepatiitti A: ta kurssilla ja siirron mekanismilla, koska se on myös tarkasti lähetetty veren kautta. Sen erityispiirre on salamannopeiden muotojen syntyminen, mikä johtaa kuolemaan, enintään 10 päivän ajan. Muissa tapauksissa se voidaan tehokkaasti parantaa ja elpymisen ennuste on usein suotuisa. Poikkeus voi olla raskaus, koska lapsen menettämisriski on lähes 100%.
Tämän tyyppistä hepatiittia ei ole vielä tutkittu. Se on ainoa tunnettu siitä, että tauti on aiheuttanut kaksi eri virukset: yksi eristetty verenluovuttajien, toinen ulosteisiin saavilla potilailla hepatiitti jälkeen verensiirtoa. Oireet: keltaisuus, kuume, askites (nesteen kertyminen vatsaonteloon), suurentunut maksa ja perna, kasvu bilirubiinin ja maksan entsyymien esiintyminen muutokset virtsan ja ulosteet, sekä yleinen myrkytyksen. Tehokkaita hepatiitti F: n hoitomenetelmiä ei ole vielä kehitetty.
Tällainen hepatiitti on samanlainen kuin hepatiitti C, mutta ei niin vaarallinen, koska se ei edistä kirroosin ja maksasyövän esiintymistä. Kyroosi voi esiintyä vain hepatiitti G: n ja C-infektioiden tapauksessa.
Virustaudin hepatiitti on samankaltainen oireissansa toisiinsa, aivan kuten jotkin virusinfektiot. Tästä syystä on vaikea määrittää tarkasti potilaan diagnoosia. Siten hepatiitin tyypin ja oikean hoidon tarkoituksen selkeyttämiseksi tarvitaan laboratoriotutkimuksia, jotta voidaan tunnistaa kunkin viruksen tyypin omaavat markkeri-indikaattorit. Näiden merkkiaineiden ja niiden suhdeluvun havaitsemisen jälkeen on mahdollista määrittää taudin vaihe, sen toiminta ja mahdollinen lopputulos. Prosessin dynamiikan seuraamiseksi kysely toistetaan tietyn ajan kuluttua.
Miten hepatiitti C: tä hoidetaan?
Nykyinen hoito-ohjelmat kroonisen HCV alennetaan yhdistettyyn viruslääkitystä lukien antivirusniki suoraan vaikuttava tyyppi sofosbuviiri, velpatasvira, daklatasvira, ledipasvira eri yhdistelmiä. Joskus ribaviriinia ja interferoneja lisätään niiden tehon parantamiseksi. Tämä vaikuttavien aineiden yhdistelmä pysäyttää virusten replikaation, mikä säästää maksa tuhoisilta vaikutuksiltaan. Tällaisella hoidolla on useita haittoja:
Hepatiittiviruksen vastaisten lääkkeiden kustannukset ovat korkeat, eivätkä kaikki voi ostaa niitä.
Tiettyjen lääkkeiden ottamiseen liittyy epämiellyttäviä haittavaikutuksia, kuten kuume, pahoinvointi, ripuli.
Kroonisten hepatiittiformulaatioiden kesto kestää useista kuukausista vuoteen riippuen viruksen genotyypistä, kehon vaurioitumisesta ja käytetyistä lääkkeistä. Koska hepatiitti C vaikuttaa ensisijaisesti maksaan, potilaiden on noudatettava tiukkaa ruokavaliota.
HCV-genotyyppien ominaisuudet
Hepatiitti C on yksi vaarallisimmasta virusperäisestä hepatiitista. Tauti johtuu RNA: ta sisältävästä Flaviviridae-viruksesta. Hepatiitti C -virusta kutsutaan myös "lempeä tappaja". Tällainen epämiellyttävä epiteetti, jonka hän sai, koska alkuvaiheessa tauti ei ole lainkaan mukana oireina. Ei ole merkkejä klassisesta keltaisuudesta, ei ole kipua oikean hypokondrian alueella. Tunnista viruksen läsnäolo aikaisintaan pari kuukautta infektion jälkeen. Ennen sitä immuunijärjestelmän reaktio ei ole täysin toteutunut, eikä markkereita voida havaita veressä, joten genotyypitys ei ole mahdollista. HCV: n erityispiirteenä on myös se, että viruksen siirtyessä lisääntymisprosessiin virusta alkaa nopeasti muuntua. Tällaiset mutaatiot häiritsevät tartunnan immuunijärjestelmää sairauden säätämiseksi ja torjumiseksi. Tämän seurauksena tauti voi kestää useita vuosia ilman oireita, minkä jälkeen ilmenee melkein kirroosi tai pahanlaatuinen kasvain. Ja 85% tapauksista, akuutin muodon tauti tulee krooniseksi. Hepatiitti C -viruksella on tärkeä piirre - geneettisen rakenteen monimuotoisuus. Itse asiassa hepatiitti C on kokoelma viruksia, jotka on luokiteltu niiden rakennevaihtoehtojen mukaan ja jotka on jaettu genotyyppeihin ja alatyyppeihin. Genotyyppi on perinnöllisten ominaisuuksien koodaamien geenien summa. Lääketieteessä tiedetään 11 ​​hepatiitti C -viruksen genotyyppiä, joilla on omat alatyypit. Genotyyppi on merkitty lukuilla 1 - 11 (vaikka kliinisissä tutkimuksissa käytetään pääasiassa genotyyppiä 1 ÷ 6) ja alatyyppejä käyttäen latinalaisen aakkoston kirjaimia:
Eri maissa HCV: n genotyypit jakautuvat eri tavoin, esimerkiksi Venäjällä useimmiten löytyy ensimmäisestä kolmanteen. Taudin kulku riippuu genotyypin tyypistä, ne määrittävät hoidon suunnitelman, sen keston ja hoidon tuloksen.
Kun maailma leviää HCV-kantoja
Hepatiitti C-genotyypit jakautuvat heterogeenisesti eri puolilla maailmaa, ja genotyypit 1, 2 ja 3 esiintyvät useimmiten, ja joillakin alueilla se näyttää tältä:
Länsi-Euroopassa ja sen itäisillä alueilla genotyypit 1 ja 2 ovat yleisimpiä,
Yhdysvalloissa, alatyypit 1a ja 1b,
Pohjois-Afrikassa yleisin on genotyyppi 4.
Mahdollisen C-hepatiitin ovat ihmisiä, joilla veren sairaudet (kasvaimia verisoluista, hemofilia ja muut.), Sekä potilaita makaa kohtelua dialyysiyksiköissä. Yleisin maailmassa on genotyyppi 1 - sen osuus
50% tapausten kokonaismäärästä. Toiseksi esiintyvyydessä - genotyyppi 3, jossa on hieman yli 30%. HCV: n leviäminen Venäjälle on huomattavia eroja maailman tai Euroopan vaihtoehdoista:
genotyypin 1b osuus
50% tapauksista,
genotyyppi 3a
hepatiitti 1a tartutaan
10% potilaista,
löydettiin hepatiitti genotyypin 2 kanssa
Mutta ei vain genotyyppi riippuu HCV-hoidon vaikeudesta. Hoidon tehokkuuteen vaikuttavat myös seuraavat tekijät:
potilaiden ikä. Mahdollisuus parantaa nuoria on paljon suurempi,
naiset voidaan parantaa paremmin kuin miehet,
merkittävä maksan vajaatoiminta - lopputuloksen etu on suurempi ja vähemmän vahinkoa sille,
viruksen kuormituksen suuruus - vähemmän viruksia kehossa hoidon aikana, sitä tehokkaampi hoito,
potilaan paino: sitä korkeampi se on, sitä monimutkaisempi hoito tulee.
Siksi hoitohoito valitsee hoitava lääkäri, joka perustuu edellä mainittuihin tekijöihin, genotyyppien ja EASL: n (European Liver Tissue Association) suosituksiin. EASL suosittelee, että sen suositukset ovat ajantasaisia ​​ja uusia tehokkaita lääkkeitä hoidetaan suositelluilla hepatiitti C -toimenpiteillä.
Kuka on vaarassa HCV-infektiolle?
Kuten tiedetään, hepatiitti C -virus välitetään veren kautta, ja siksi todennäköisimmin tartuntaa ovat:
potilaat, jotka saavat verensiirtoja,
potilaat ja asiakkaat hammaslääkärissä ja lääketieteellisissä laitoksissa, joissa lääketieteellisiä välineitä,
koska ei-steriilejä työkaluja, voi olla vaarallista käydä manikyyri ja kauneushoitolat,
huonosti valmistetuista työkaluista voi myös kärsiä lävistyksiä ja tatuointeja,
infektioriski on suuri niillä, jotka käyttävät huumeita, koska toistuva käyttö ei-steriilejä neuloja,
sikiö voi infektoida hepatiitti C-infektoituneelta äidiltä,
seksuaalivarmennetta tai toimia infektio voi myös päästä terveydelle.
Mitä hepatiitti C: tä hoidetaan?
Hepatiitti C -virusta ei turhaan pidetty "herkkänä" viruksentorjuntana. Se ei vuosia voi ilmetä, minkä jälkeen se ilmestyy yhtäkkiä komplikaatioiden muodossa, joihin liittyy kirroosi tai maksasyöpä. Mutta HCV: n diagnosointi on aiheuttanut yli 177 miljoonaa ihmistä maailmassa. Hoito, jota käytettiin vuoteen 2013 asti, yhdistetyt interferonin ja ribaviriinin injektiot antoivat potilaille mahdollisuuden parantua, ei enempää kuin 40-50%. Lisäksi sen mukana oli vakavia ja tuskallisia sivuvaikutuksia. Tilanne on muuttunut kesällä 2013, oltuaan farmgigantom US Gilead Sciences patentoitu sofosbuviiri aine purkautuu muodossa lääkeaineen tuotemerkillä Sovaldi, joka koostuu 400 mg lääkeainetta. Se tuli ensimmäiseksi suoraan vaikuttavaksi viruslääkkeeksi (PDPD) HCV: n torjumiseksi. Kliinisten tutkimusten tulokset sofosbuviiri tyytyväinen lääketieteellinen tehokkuus, joka saavutetaan tämän genotyypin arvoon 85 Ö 95%, kun taas kesto hoidon kuluessa verrattuna interferonihoidon ja ribaviriinin, enemmän kuin puolittaa. Ja vaikka Sofosbuvir patentoi Gilead-lääkeyrityksen, se syntetisoitiin vuonna 2007 Michael Sophia, työntekijä Pharmasett, myöhemmin hankittu Gilead Sciences. Michaelin nimestä hänen syntetisoivansa aineistoa kutsuttiin sofosbuviriksi. Itse Michael Sofia yhdessä joukko tiedemiehiä, jotka ovat tehneet useita havaintoja, jotka paljastavat luonteen HCV luoden tehokas lääke käsitellä sitä, voitti Lasker-DeBakey kliininen Medical Research. Uuden tehokkaan välineen käyttöönotosta saatiin lähes kaikki hyöty Gileadille, joka asetti monopolihinnat Sovvaldissa. Lisäksi yhtiö puolusti kehitystään erityisillä patenttijulkaisuilla, joiden mukaan Gilead ja eräät sen yhteistyökumppaneista omistavat yksinoikeuden alkuperäisen PFDP: n valmistamiseen. Tämän seurauksena Gileadin voitot vain huumeiden käyttöönoton ensimmäisillä kahdella vuodella ovat toistuvasti estäneet kaikki kustannukset, jotka yritys joutui hankkimaan Pharmasettia, hankkimaan patentin ja myöhemmät kliiniset tutkimukset.
Mikä on Sofosbuvir?
Tämän lääkkeen vaikuttavuus HCV: n torjunnassa on ollut niin korkea, että nyt lähes täydellinen terapiaohjelma ei ole täydellinen ilman sen soveltamista. Sophosbuviriä ei suositella käytettäviksi monoterapiana, mutta monimutkaisessa käytössä se on poikkeuksellisen korkeita tuloksia. Aluksi, lääke on käytetty yhdessä ribaviriinin ja interferoni, joka teki mahdolliseksi saavuttaa yksinkertainen tapauksissa kovettumisen vain 29 viikko. Ja tämä huolimatta siitä, että vain interferoni- ja ribaviriinihoito oli puolet yhtä tehokkaasti ja sen kesto ylitti joskus 40 viikkoa. Vuoden 2013 jälkeen jokainen seuraava vuosi toi uutisia yhä useammasta uudesta lääkkeestä, jotka menestyksekkäästi vastustavat hepatiitti C -virusta:
vuonna 2014 ilmestyi daklatasvir,
2015 oli syntymävuosi ladypasvira,
2016 oli tyytyväinen velpatasviran luomiseen.
Daklataswirin vapautti Bristol-Myers Squibb Daklinzan valmisteeksi, joka sisälsi 60 mg aktiivista ainesosaa. Gileadin tutkijat tekivät kaksi seuraavaa ainetta, ja koska yksikään niistä ei ollut sopiva monoterapiaan, vain lääkkeitä käytettiin sofosbuvirin kanssa. Gilead-hoidon helpottamiseksi äskettäin luotu lääkitys on vapautettu välittömästi yhdessä sophosbuvirin kanssa. Niinpä valmistelut olivat:
Harvoni, yhdistämällä sophosbuvir 400 mg ja ladypasvir 90 mg,
Epclusa, joka sisälsi sofosbuvir 400 mg ja velpatasvir 100 mg.
Daklatasviraa käyttävällä hoidolla oli otettava kaksi erilaista Sowaldi- ja Daklinsu-valmistetta. Jokainen aktiivisten aineiden yhdistetyistä yhdistelmistä käytettiin tiettyjen HCV-genotyyppien hoitoon EASL: n suosittelemien hoitohoitojen mukaisesti. Ja vain sophosbuvira ja velpathasvir yhdistelmä osoittautui pangenotyyppiseksi (universaaliksi) korjaamiseksi. Eclusus paransi kaikkia hepatiitti C: n genotyyppejä käytännössä samalla suurella hyötysuhteella noin 97 ÷ 100%.
Geneeristen lääkkeiden esiintyminen
Kliiniset kokeet ovat vahvistaneet hoidon tehoa, mutta kaikki nämä erittäin huumeiden oli yksi haittapuoli - liian korkeat hinnat, jotka eivät salli niitä ostaa suurimman osan tapauksista. Monopolistisesti korkeita hintoja tuotteille asetettuihin Gilead, aiheutti paheksuntaa ja skandaali, joka sai patentin haltijoille tehdä tiettyjä myönnytyksiä, jolloin jotkut yritykset Intiasta, Pakistanista, Egyptistä ja lisenssit tuotantoon analogit (geneeriset valmisteet) on niin tehokas ja suosittu huumeita. Lisäksi kamppailu patenttien haltijoiden kanssa, joka tarjoaa huumeita puolueettomien hintojen hoitamiseksi, Intiaan johtajana, maassa, jossa miljoonat potilaat, joilla on krooninen hepatiitti C, elävät. Seurauksena tämän taistelun - Gilead on antanut 11 lisenssejä intialaisille yrityksille ja patentin kehittämistä itsensä vapautumista sofosbuviiri ensin, ja sitten hänen muita uusia lääkkeitä. Saatuaan lisenssin, intialaiset valmistajat nopeasti perustivat geneeristen lääkkeiden tuottamisen ja omaksivat tuotetut tuotteet omiin kauppansa. Niinpä ilmestyi ensin Soveneri jenerkiki, sitten Daklinza, Harvoni, Epclusa ja Intiasta maailman johtava tuotanto. Lisenssisopimuksen mukaiset intialaiset valmistajat maksavat 7 prosenttia ansaitusta varoista patentin haltijoiden hyväksi. Mutta näiden maksujen lisäksi Intiassa tuotettujen geneeristen lääkkeiden kustannukset olivat kymmeniä kertaa pienempiä kuin alkuperäiskappaleet.
Kuten edellä on jo todettu, HCV-hoidon uudet uutiset liittyvät PFDD: ään ja vaikuttavat suoraan virusin. Vaikka interferoni ribaviriinillä, jota aiemmin käytettiin hoitoon, vahvisti ihmisen immuunijärjestelmää ja auttoi elimistöä vastustamaan tautia. Kukin aine vaikuttaa virukseen omalla tavallaan:
Sofosbuvir estää RNA-polymeraasin estäen näin viruksen replikaation.
Daklatasvir, lepidaviiri ja velpathaswir ovat NS5A-estäjiä, jotka estävät virusten leviämisen ja niiden pääsyn terveisiin soluihin.
Tällainen suuntaava vaikutus mahdollistaa menestyksekkäästi taistelun HCV: llä, hakee hoitoa sophosbuvirille, joka on yhdistetty daklatasvirin, ledipasvirin, velpatasvirin kanssa. Joskus viruksen vaikutuksen tehostamiseksi kolmannelle komponentille lisätään pari, joka on useimmiten ribaviriini.
Intiasta peräisin olevien geneeristen valmisteiden tuottajat
Maan yritykset ovat käyttäneet niille myönnettyjä lisenssejä, ja nyt Intia valmistaa seuraavia geneerisiä aineita Sovaldi:
Hepcvir on Ciplan valmistaja,
Hepcinat - Natco Pharma Ltd.,
Cimivir - Biocon ltd. # 038, Hetero Drugs Ltd.,
MyHep on Mylan Pharmaceuticals Private Ltd: n valmistaja,
SoviHep - Zydus Heptiza Oy,
Sofovir on Hetero Drugs Ltd. -yhtiön valmistaja,
Resof - tuottaa yrityksen Dr Reddy # 8217, s Laboratories,
Virso - julkaisee Strides Arcolabia.
Daklinsa analogit tekevät myös Intiassa:
Natdac Natco Pharmasta,
Dacihep Zydus Heptizasta,
Daclahep Hetero Drugsilta,
Dactovin Strides Arcolabista,
Daclawin Bioconilta. # 038, Hetero Drugs Ltd.,
Mydacla valmistaja Mylan Pharmaceuticals.
Gileadin jälkeen intialaiset huumevalmistajat ovat myös hallitsineet Harvonin tuotantoa, mikä johtaa tällaisiin geneerisiin valmisteisiin:
Ledifos - julkaisut Hetero,
Hepcinat LP - Natco,
Myhep LVIR - Mylan,
Hepcvir L - Cipla Oy,
Cimivir L-Biocon ltd. # 038, Hetero Drugs Ltd.,
Ja jo vuonna 2017 aloitettiin seuraavien intialaisten geneeristen lääkkeiden tuotanto:
Velpanat on julkaissut lääkeyrityksen Natco Pharman,
release Velasof on oppinut Hetero Drugs,
SoviHep V aloitti Zydus Heptiza.
Kuten huomaat, intialaiset lääkeyhtiöt eivät ole jäljessä amerikkalaisista valmistajista, nopeasti hallitsemaan äskettäin kehitettyjä lääkkeitä samalla, kun noudatetaan kaikkia laadullisia, määrällisiä ja terapeuttisia ominaisuuksia. Lisäksi farmakokineettinen biologinen samanarvoisuus suhteessa alkuperäisiin.
Geneeristen lääkkeiden vaatimukset
Geneerinen nimeltään lääke, joka pystyy korvaamaan peruslääkkeitä patentilla oleville farmakologisille ominaisuuksille. Ne voidaan vapauttaa sekä läsnäolon että lisenssin puuttuessa, mutta sen saatavuus saa tuotetun analogin lisenssin. Jos lupa myönnettiin intialaisille lääkeyhtiöille, Gilead toimitti heille tuotantoteknologian ja antoi lisenssinhaltijoille oikeuden itsenäiseen hinnoittelupolitiikkaan. Jotta lääkeanalogia voitaisiin pitää geneerisenä, sen on vastattava useita parametreja:
On tärkeää tarkkailla valmisteen tärkeimpien farmaseuttisten komponenttien suhdetta laadullisten ja kvantitatiivisten standardien mukaisesti.
Noudata asiaa koskevia kansainvälisiä standardeja.
Asianmukainen tuotanto on pakollista.
Valmisteissa on pidettävä yllä vastaava ekvivalentti imusparametreista.
On syytä huomata, että WHO on sitoutunut suojelemaan lääkkeiden saatavuutta, joka budjetoidun geneeristen lääkkeiden avulla korvaa kalliiden merkkituotteiden lääkkeiden kanssa.
Egyptin yleinen sophosbuvira
Toisin kuin Intiassa, Egyptin lääkeyhtiöt eivät puhkineet maailman johtajia hepatiitti C: n genetiikan tuotannossa, vaikka he hallitsivat sofosbuvirin analogien tuotantoa. Totta, että suurin osa niiden tuottama analogi on luvaton:
MPI Viropack, tuottaa lääkkeen Marcyrl Pharmaceutical Industries # 8229, eräs Egyptin aikaisimmista geneerisistä lääkkeistä,
Pharmed Healthcare julkaisi Heterosofir. se on ainoa lisensoitu geneerinen Egyptissä. Hologrammin alla olevassa pakkauksessa on piilotettu koodi, jonka avulla voidaan tarkistaa tuotteen alkuperäisyys valmistajan verkkosivustolla, mikä sulkee pois sen väärentämisen,
Grateziano, valmistaja Pharco Pharmaceuticals,
Sofolanork, tuotettu Vimeo,
Sofocivir, valmistaja ZetaPhar.
Bangladeshin hepatiitin hallinnan generiset aineet
Toinen maa, joka tuottaa geneerisiä lääkkeitä suuria määriä HCV: tä vastaan, on Bangladesh. Lisäksi tämä maa ei edes tarvitse lisenssejä merkkituotteiden analogisten valmisteiden valmistamiseen, sillä vuoteen 2030 asti sen lääkeyhtiöt saavat tuottaa tällaisia ​​lääkkeitä ilman asianmukaisten lisensointiasiakirjojen saatavuutta. Tunnetuimpia ja uusinta tekniikkaa tarjoava lääke on Beacon Pharmaceuticals Ltd. Tuotantokapasiteettiprojekti on luonut eurooppalaiset asiantuntijat ja täyttää maailmanlaajuiset standardit. Beacon tuottaa seuraavat geneeriset lääkkeet hepatiitti C -viruksen hoitoon:
Soforal, sophosbuviran geneerinen valmiste sisältää 400 mg vaikuttavaa ainetta. Toisin kuin 28 kappaletta sisältävissä perinteisissä pakkauksissa, Sophoral tuottaa 8 tabletin läpipainopakkauksia yhdessä levyssä,
Daclavir on daklatasvira geneerinen, yksi tabletti sisältää 60 mg vaikuttavaa ainetta. Ne vapauttavat sen myös läpipainopakkausten muodossa, mutta kukin levy sisältää 10 tablettia,
Sofosvel on geneerinen Epclusa, joka sisältää sofosbuvir 400 mg ja velpatasvir 100 mg. Pangenotyyppinen (yleinen) lääke on tehokas HCV-genotyyppien 1 ÷ 6 hoidossa. Tässä tapauksessa ei ole tavanomaista pakkausta injektiopulloissa, pillerit on pakattu kuhunkin kuoppaan 6 kpl: n läpipainopakkauksiin.
Darvoni on monimutkainen valmiste, jossa yhdistetään somosbuvir 400 mg ja daklatasvir 60 mg. Jos tarpeen yhdistää sofosbuvirin ja daklatasvirin hoito muiden valmistajien valmisteiden kanssa, on tarpeen ottaa jokainen tabletti. Ja Beacon laittoi ne yhteen pilleriin. Darvoni on pakattu 6 tablettia läpipainopakkauksiin, jotka on lähetetty vain vientiin.
Kun ostat lääkkeitä Beaconilta hoidon kulun perusteella, on otettava huomioon pakkaustensa alkuperäisyys, jotta hoidosta tarvittava määrä voidaan ostaa. Tunnetuimmat intialaiset lääkeyhtiöt Kuten edellä mainittiin, kun maan lääkeyhtiöt saivat lisenssit geneeristen lääkkeiden tuottamiseksi HCV-hoitoon, Intiasta on tullut maailman johtava tuotanto. Mutta monien yritysten joukossa on syytä huomata muutamia, joiden tuotteista Venäjä on tunnetuin.
Natco Pharma Oy
Suosituin lääkeyhtiö Natco Pharma Oy, lääkkeet, jotka pelastaneet useita kymmeniä tuhansia kroonista muotoa hepatiitti C. hallitsee tuotantoa lähes koko linjan viruslääkkeiden suoran toiminnan, kuten sofosbuviiri kanssa daklatasvirom ja ledipasvir kanssa velpatasvirom. Natco Pharma on esiintynyt 1981 kaupungin Hyderabad alkupääoma 3,3 miljoonaa. Rupiaa, kun taas henkilöstön määrä oli 20 henkilöä. Nyt Intiassa viisi yritystä työllistää 3500 henkilöä, ja muissa maissa on myös sivuliikkeitä. Tuotantoyksiköiden lisäksi yhtiöllä on hyvin varustetut laboratoriot, jotka mahdollistavat nykyaikaisten lääkkeiden kehittämisen. Oman kehityksen ohella on syytä mainita huumeet syövän torjumiseksi. Yksi tunnetuimmista lääkkeitä tällä alalla pidetään Veenat, tuotettu vuodesta 2003 ja käytetään leukemian. Kyllä, ja geneeristen lääkkeiden vapauttaminen hepatiitti C -viruksen hoitamiseksi on Natcon ensisijainen alue.
Tämän yrityksen tavoitteena on tuottaa geneerisiä lääkkeitä, jotka ovat alistaneet tämän toiveensa omalle teollisuusverkostolleen, mukaan lukien tehtaat, joilla on konttoreita ja toimistoja laboratorioilla. Tuotantoverkosto Hetero on vangittuna lääkkeiden tuottamiseen yhtiön saamien lisenssien perusteella. Yksi toimintansa suuntaa ovat lääkkeet, jotka mahdollistavat taistelun vakavien virustaudin kanssa, joiden hoito monille potilaille on mahdotonta alkuperäisten lääkkeiden korkeiden kustannusten vuoksi. Ostettu lisenssi sallii Heteroille nopeasti aloittaa geneeristen lääkkeiden vapauttamisen potilaille edullisella hinnalla. Hetero-huumeiden luominen on peräisin vuodelta 1993. Viimeisten 24 vuoden aikana Intiassa on ilmestynyt tusinaa tehtaita ja kymmeniä tuotantoyksiköitä. Omien laboratorioiden läsnäolo antaa yritykselle mahdollisuuden kokeilla aineen synteesiä, mikä on osaltaan lisännyt tuotantopohjaa ja lääkkeiden aktiivista vientiä ulkomaille.
Zydus on intialainen yritys, joka on asettanut tavoitteekseen terveellisen yhteiskunnan, joka omistajiensa mukaan seuraa ihmisten elämänlaadun parantaminen. Tavoitteena on jalo, ja sen saavuttamiseksi yritys harjoittaa aktiivista koulutustoimintaa, joka vaikuttaa maan väestön köyhimpiin osiin. Mukaan lukien väestön vapaa rokottaminen hepatiitti B: tä vastaan. Zidus tuotannon kannalta Intian lääkemarkkinoilla on neljänneksi. Lisäksi sen 16 tuotetta sisällytettiin Intian lääketeollisuuden 300 tärkeän lääkkeen luetteloon. Zydus-tuotteita on kysytty paitsi kotimarkkinoilla, ja ne löytyvät 43 maapallon apteekista. Ja 7 yrityksessä tuotettujen lääkkeiden valikoima ylittää 850 valmisteita. Yksi sen tehokkaimmista tuotantolaitoksista on Gujaratin osavaltiossa ja kuuluu suurimpiin paitsi Intiassa myös Aasiassa.
Hepatiitti C: n hoito-ohjelmat jokaiselle potilaalle valitaan lääkäri erikseen. Jotta hoito olisi oikea, tehokas ja turvallinen, lääkärin on tiedettävä:
viruksen genotyyppi,
taudin kesto,
maksan vaurion aste,
samanaikainen infektio (esim. HIV tai muu hepatiitti), negatiivinen kokemus edellisestä hoidosta.
Saatuaan nämä tiedot analysointiryhmän suorittamisen jälkeen lääkärin suositusten perusteella EASL valitsee parhaan hoitomuunnoksen. EASL-suositukset korjataan vuosittain ja uusia lääkkeitä lisätään. Ennen kuin suositat uusia hoitoja, ne toimitetaan kongressille tai erityiskokoukselle harkittavaksi. Vuonna 2017 EASL: n erityiskokous piti suositusten päivittämistä Pariisissa. Päätettiin lopettaa kokonaan interferonihoito HCV: n hoidossa Euroopassa. Lisäksi ei ollut yhtä suositeltua järjestelmää, jossa käytettiin yhtä ainoaa suoran toiminnan huumetta. Seuraavassa on muutamia suositeltuja vaihtoehtoja hoito-ohjelmille. Kaikki ne annetaan vain viitteenä, eivätkä ne voi olla toiminnan opas, koska hoito voidaan antaa vain lääkäriltä, ​​jonka valvonnassa se kulkee myöhemmin.
EASL: n ehdottamat mahdolliset hoito-ohjelmat hepatiitti C: n moninfektioon tai samanaikaiseen HIV + HCV-infektioon potilailla, joilla ei ole kirroosia, eikä niitä ole aiemmin hoidettu:
hoitoon genotyypit 1a ja 1b voit käyttää:
# 8229, sofosbuvir + ledipasvir, ilman ribaviriinia, kesto 29 viikkoa, # 8229, sophosbuvir + daklatasvir, myös ilman ribaviriinia, hoitojakso on 29 viikkoa, # 8229, tai sofosbuvir + velpatasvir ilman ribaviriinia, kesto on 29 viikkoa.
hoidon kanssa genotyyppi 2 sovelletaan ilman ribaviriinia 29 viikon ajan:
# 8229, sofosbuvir + dklatasvir, # 8229, tai sophosbuvir + velpathaswir.
hoidossa genotyyppi 3 ilman ribaviriinin käyttöä 29 viikon käytön aikana:
# 8229, sophosbuvir + daklutasvir, # 8229, tai sofosbuvir + velpatasvir.
hoidon kanssa genotyyppi 4 on mahdollista soveltaa ilman ribaviriinia 29 viikon ajan:
# 8229, sofosbuvir + ledipasvir, # 8229, sophosbuvir + daklutasvir, # 8229, tai sofosbuvir + velpatasvir.
Suositellut EASL-hoito-ohjelmat hepatiitti C: n moninfektioon tai samanaikaiseen HIV / HCV-infektioon potilailla, joilla on korvattu kirroosi, joita ei ole aiemmin hoidettu:
# 8229, sofosbuviiri + ledipasvir ribaviriinilla, kesto 29 viikkoa, # 8229 tai 24 viikkoa ilman ribaviriinia, # 8229, ja toinen vaihtoehto - 24 viikkoa ribaviriinillä, jossa on epäsuotuisa ennuste vasteesta, # 8229, sophosbuvir + daklutasvir, jos ilman ribaviriinia, sitten 24 viikkoa, ja ribaviriinin kanssa 29 viikkoa kestäneen hoidon, # 8229, tai sofosbuviiri + velpatasvir ilman ribaviriinia, 29 viikkoa.
# 8229, sofosbuviiri + dklatasvir ilman ribaviriinia 29 viikon ajan ja ribaviriinin kanssa 24 viikon epäsuotuisassa ennusteessa, # 8229, tai sophosbuvir + velpathaswir ilman yhdistelmää ribaviriinin kanssa 29 viikon ajan.
# 8229, sophosbuvir + daklatasvir 24 viikon ajan ribaviriinin, # 8229 tai sofosbuvir + velpatasvir uudelleen ribaviriinilla, hoitojakso on 29 viikkoa, # 8229, koska muunnos on mahdollista софосбувир + велпатасвир 24 viikkoa, mutta jo ilman рибавирина.
hoidon kanssa genotyyppi 4 sovelletaan samoja järjestelmiä kuin genotyyppeihin 1a ja 1b.
Kuten näet, lääkkeen tulostaan ​​vaikuttavat määrätyt lääkkeet yhdessä potilaan tilan ja hänen ruumiinsa ominaisuuksien lisäksi. Lisäksi hoidon kesto riippuu lääkärin valitsemasta yhdistelmästä.
Hoito nykyaikaisilla lääkkeillä HCV: stä
Suoraan antiviraalista vaikutusta omaavien valmisteiden tabletit, joita lääkäri määrää suullisesti kerran päivässä. Niitä ei ole jaettu osiin, niitä ei pureskella, ne pestään tavallisella vedellä. On parasta tehdä tämä samanaikaisesti, joten ylläpidetään aktiivista ainetta sisältävän aineen jatkuva konsentraatio. Sitoutuminen ruoan saannin ajoitukseen ei ole välttämätöntä, tärkeintä - älä tee sitä tyhjänä vatsaan. Aloitettaessa lääkkeiden ottamista kiinnität huomiota terveystilanteeseen, sillä tämän ajanjakson aikana on helpointa havaita mahdollisia haittavaikutuksia. Heillä ei itse asiassa ole paljon PDPD: tä, mutta monimutkaisten lääkkeiden määrä on paljon pienempi. Useimmin haittavaikutukset ilmenevät seuraavasti:
oksentelu ja huimaus,
biokemiallisten veritasojen muutokset, hemoglobiinin alhainen taso, verihiutaleiden ja lymfosyyttien väheneminen.
Haittavaikutukset ovat mahdollisia pienessä määrin potilaita. Kaiken kaikkiaan kaikki ilmoitetut vaivat tulee ilmoittaa osallistuvalle lääkärille tarvittavien toimenpiteiden toteuttamisesta. Jotta sivuvaikutukset eivät lisääntyisi, alkoholin ja nikotiinin pitäisi olla poissuljettu, koska ne vaikuttavat haitallisesti maksaan.
Joissakin tapauksissa PDPD: n hyväksyminen suljetaan pois, se koskee:
potilaiden yksilöllinen yliherkkyys lääkkeiden joidenkin ainesosien osalta,
alle 18-vuotiaita potilaita, koska heillä ei ole tarkkoja tietoja niiden vaikutuksista elimistöön,
naiset, joilla on sikiö ja imettävät vauvat,
naisten tulee käyttää luotettavia ehkäisymenetelmiä, jotta vältytään käsityksiltä hoidon aikana. Tämä vaatimus koskee myös naisia, joiden kumppanit ovat myös PADA-hoidon alaisia.
Säilytä suoraan lääkkeitä, jotka eivät ole käyttökelpoisia lapsille ja suoran auringonvalon vaikutuksille. Varastointilämpötilan tulee olla 15 ÷ 30 ° C. Kun otat lääkkeitä, tarkista niiden valmistus- ja säilytysajat pakkauksessa. Myöhästyneet lääkkeet ovat kiellettyjä. Miten ostaa PPPD venäläisille kansalaisille Valitettavasti et löydä intialaista geneerisiä lääkkeitä venäläisiltä apteekeilta. Lääkeyhtiö Gilead, joka on myöntänyt lisenssejä valmisteiden valmistukseen, on varovaisesti kieltänyt vientinsä monissa maissa. Sisältää kaikki Euroopan maat. Ne, jotka haluavat ostaa budjettia Intian geneerisiä lääkkeitä hepatiitti C: n torjumiseksi, voivat hyödyntää useita tapoja:
tilaa ne venäläisten online-apteekkien kautta ja saada tavarat muutamassa tunnissa (tai päivinä) toimituspaikan mukaan. Ja useimmissa tapauksissa edes ennakkomaksua ei tarvita,
tilata ne intialaisten verkkokauppojen kautta kotiinkuljetuksen avulla. Se edellyttää ennakkomaksua valuutassa, ja odotusaika kestää kolme viikkoa kuukaudelta. Lisäksi lisäät tarve kommunikoida myyjän kanssa englanniksi,
mennä Intiaan ja tuoda lääkkeen itse. Tämä kestää myös aikaa sekä kieliesteen lisäksi apteekissa ostettujen tavaroiden alkuperäisyyden tarkistamisen monimutkaisuuden. Kaikkiin riippumattomaan vientiin liittyvä ongelma, joka vaatii termosäiliön, lääkärin päätelmät ja reseptiä englanniksi, sekä kopio tarkastuksesta, lisätään myös.
Ne, jotka ovat kiinnostuneita ostamaan lääkkeitä, päättävät itselleen mahdollisista toimitusvaihtoehdoista. Älä unohda, että HCV: n tapauksessa hoidon myönteinen tulos riippuu sen alkamisnopeudesta. Täällä kirjaimellisessa mielessä kuoleman viivästyminen on samanlainen, joten ei ole syytä viivästyttää menettelyn aloittamista.
Child Pughin maksakirroosin luokittelu
Sisäelinten tutkiminen
Essentiale tai Essential Fort - sitä parempi maksa on hoidettu?
Reseptit ruokia niille, joilla on sairas maksan
Rokotus hepatiitti B: tä vastaan, haittavaikutukset lapsilla ja aikuisilla
Latinalainen nimi: Essentiale forte NVaikuttava aine: Fosfolipidit (fosfolipidit)Valmistaja: A.Nattermann ja Cie., GmbH (Saksa)Päivitä kuvaus ja kuva: 17.5.2018Essentiale forte N - lääke, jolla on hepatiivinen vaikutus.