Source: http://docplayer.es/24448731-Hplc-a-uplc-como-conseguir-una-buena-transferencia-de-metodos-iv-reunion-de-usuarios-de-sistemas-uplc-24-enero-2012-madrid.html
Timestamp: 2018-11-20 16:55:50+00:00

Document:
HPLC a UPLC Como conseguir una buena transferencia de métodos? IV Reunión de Usuarios de Sistemas UPLC 24 Enero 2012, Madrid. - PDF
HPLC a UPLC Como conseguir una buena transferencia de métodos? IV Reunión de Usuarios de Sistemas UPLC 24 Enero 2012, Madrid.
Download "HPLC a UPLC Como conseguir una buena transferencia de métodos? IV Reunión de Usuarios de Sistemas UPLC 24 Enero 2012, Madrid."
María Carmen Parra Villalba
1 HPLC a UPLC Como conseguir una buena transferencia de métodos? IV Reunión de Usuarios de Sistemas UPLC 24 Enero 2012, Madrid Waters Corporation 1
2 Como conseguir una buena transferencia de métodos? Escalado Geométrico Escalado Químico Herramientas disponibles para facilitar la transferencia Columns Selectivity Chart Acquity Columns Calculator 2012 Waters Corporation 2
3 Parámetros a Modificar Dimensiones de columna Acquity UPLC Mantener capacidad de separación entre columna HPLC y columna UPLC Capacidad de Separación: Relación entre Longitud y tamaño de partícula Columna habitual HPLC 4,6 x 150 mm, 5 µm Longitud de columna (L) = 150 mm = µm Tamaño de partícula (d p )= 5 µm L = = d p 5 Elegir columna UPLC con la misma relación L/dp que columna HPLC 2012 Waters Corporation 3
4 Escalado de HPLC a UPLC - L/dp constante 5 µm 150 mm Inyección = 5,0 µl Caudal = 0,2 ml/min Rs (2,3) = 2,28 HPLC 3,5 µm 100 mm Inyección = 3,3 µl Caudal = 0,3 ml/min Rs (2,3) = 2,32 2,5 µm 75 mm Inyección = 2,5 µl Caudal = 0,5 ml/min Rs (2,3) = 2,34 UPLC 1,7 µm 50 mm Inyección = 1,7 µl Caudal = 0,6 ml/min Rs (2,3) = 2, Waters Corporation 4
5 Escalado Geométrico Método inicial Temperatura: 30 C Caudal: 1.50 ml/min Analitos: Cafeina (100 µg/ml) Hidroquinidina (33 µg/ml) 3-Aminobenzofenona (39 µg/ml) Pesos moleculares: Menores de 500 Diluyente de muestra: DMSO Volumen de inyección: 10 µl Detección: Fase móvil: 254 nm A: 0.05% TFA en agua B: 0.05% TFA en acetonitrilo 2012 Waters Corporation 5
6 Ejemplo Características de la Columna inicial Fase estacionaria: XTerra MS C 18 Tamaño de partícula (dp):5 µm Diámetro interno (id): 4,6 mm Longitud (L): 150 mm Cálculo: L dp 150,000 µm = = 30,000 5 µm Calculamos la relación L/dp como medida de resolución Con este dato, seleccionamos las dimensiones adecuadas de la columna de UPLC 2012 Waters Corporation 6
7 Ejemplo Resultado Inicial Absorbance 254 nm Columna: 4,6 x 150 mm, 5 µm L/dp = Resolución (1,2) = 12 Resolución (2,3) = Minutos 2012 Waters Corporation 7
8 Ejemplo Gradiente inicial Etapa Tiempo Caudal %A %B Curva (min) (ml/min) Inicial 0 1, * , , , lineal 1 Regeneración 1 Re-equilibrado 2012 Waters Corporation 8
9 Ejemplo Características del Instrumento inicial Waters Alliance 2695 Solvent Manager Una única bomba Gradiente con mezcla en baja presión Waters Alliance 2695 Sample Manager Waters 2487 TUV a 254 nm 2012 Waters Corporation 9
10 Cálculo del volumen de inyección Cálculo del volumen de inyección Volumen de inyección inicial X Volumen de columna UPLC Volumen de columna HPLC Escalamos el volumen de inyección de 10 µl en una columna de 4,6 x 150 mm a una columna de 2,1 x 50 mm 10 µl x 3,14 x (0,105 cm)2 x 5 cm 3,14 x (0,23 cm) 2 x 15 cm = 10 µl x 0,17 2,49 = = 0,7 µl 10 µl x 0, Waters Corporation 10
11 Escalado del volumen de inyección El volumen de inyección debe ser menos del 5% del volumen de la columna. Intentar por debajo del 1% y determinar experimentalmente si se puede aumentar según condiciones cromatográficas. 4,6 x 150 mm 2,49 ml 20 µl inyección/2,49 ml = 0,8% 2,1 x 50 mm 0,17 ml 20 µl inyección/0,17 ml = 12% Si se inyecta demasiado, puede generare una mala forma de pico debido a sobrecarga 2012 Waters Corporation 11
12 Escalado geométrico del flujo Caudal = Caudal inicial x π x r2 col UPLC π x r 2 col HPLC Esta ecuación se reduce a: Caudal = Caudal inicial x d 2 Col. UPLC d 2 Col HPLC Escalamos el caudal de 1,5 ml/min en una columna de 4,6 x 150 mm a una columna de 2,1 x 50 mm 1,5 ml/min X 2,1 2 4,6 2 = 0,31 ml/min 2012 Waters Corporation 12
13 Escalado del gradiente inicial Etapa Tiempo (minutos) Caudal %A % B Curva Duración (min) Duración del gradiente (cv) Inicial 0 1, * , , , Lineal 1 Regeneración 1 Reequilibrado Waters Corporation 13
14 Duración del gradiente Expresado en función del volumen de columna Etapa 2: Tiempo de gradiente de 15 min a 1,5 ml/min en una columna de 4,6 x 150 mm Volumen de gradiente = Caudal x Tiempo = 1,5 ml/min x 15 min = 22.5 ml Volumen de columna = π x r 2 x L = 3,14 x 0,23 2 x 15 = 2,49 ml Duración del gradiente (cv) = Volumen de gradiente Volumen de columna Duración del gradiente = 22,5 ml 2,49 ml = 9,03 cv Nota: etapa 3 : 5 min = 3,01 cv y etapa 4 : 10 min = 6,02 cv 2012 Waters Corporation 14
15 Escalado del gradiente inicial Etapa Tiempo (min) Caudal %A %B Curva Tiempo de gradiente (min) Duración del gradiente (cv) Inicial 0 1, * , , , Waters Corporation 15
16 Escalado del gradiente inicial Manteniendo constante la duración del gradiente (cv) Etapa 2 en HPLC: 15 1,5 ml/min con una duración en volúmenes de columna de 9.03 cv Cálculo de etapa 2 en UPLC: Se mantiene constante la duración del gradiente en volúmenes de columna 9.03 cv Volumen de columna UPLC = π x r 2 x L = 3,14 x 0,105 2 x 5,0 = 0,17 ml Volumen de gradiente UPLC = duración del gradiente (cv) x Volumen de columna = 9,03 cv x 0,17 ml = 1,54 ml Tiempo de gradiente (min) = Volumen de gradiente / Caudal = 1,54 ml / 0,31 ml/min = 5 min 2012 Waters Corporation 16
17 Escalado del gradiente inicial Columna de 2,1 x 50 mm Ajustamos el tiempo manteniendo constante la duración del gradiente en volúmenes de columna Etapa Tiempo (min) Caudal* % A %B Curva Tiempo gradiente (min) Tiempo de gradiente (cv) Initial 0 0, * , ,0 9,03 3 6,67 0, ,67 3, , ,33 6,02 Ajustamos el flujo para una columna de 2,1 x 50 mm manteniendo constante la velocidad lineal (*Escalado geometrico del flujo) 2012 Waters Corporation 17
18 Curvas de van Deemter (PM<500) HETP (µm) µm SunFire C µm SunFire C µm ACQUITY UPLC HSS T3 1.7 µm ACQUITY UPLC BEH C Linear Velocity [mm/s] Diámetro Caudal de trabajo (ml/min) 4.6 mm mm mm Waters Corporation 18
19 Gradiente optimizado Seleccionamos el flujo en UPLC y ajustamos el tiempo manteniendo constante el número de volúmenes de columna Etapa Tiempo (min) Caudal % A % B Curva Tiempo de gradiente (min) Tiempo de gradiente (cv) Inicial 0 0, * ,61 0, ,61 9,03 3 3,48 0, ,87 3,01 4 5,22 0, ,74 6, Waters Corporation 19
20 Escalado Químico Que condiciona la selectividad de una columna? Fase enlazada Partícula Unión de la fase enlazada Endcapping 2012 Waters Corporation 20
21 Fase Enlazada Diferentes tipos: C18 - C8 CN Amide PFP... Diferentes enlaces: Trifuncional Monofuncional Embeeded Group Diferentes densidades 2012 Waters Corporation 21
22 Evolución del tamaño de partícula 70 s (inicio) recubrimiento pelicular no-poroso de 40µm psi platos/metro Columnas de 1m 10 min 70 s (finales) Partículas Irregulares micro-porosas de 10µm psi platos/metro Columnas de 3,9 x 300 mm 10 min 80 s hasta hoy Partículas esféricas micro-porosas de µm psi platos/metro Columnas de 3,9 x mm 10 min 2012 Waters Corporation 22
23 Fases Híbridas 2012 Waters Corporation 23
24 Evolución de las partículas 2012 Waters Corporation 24
25 End Capping Cl CH 3 Si CH 3 CH 3 Es un proceso que implica una segunda derivatización con trimetilclorosilano ( C1), que bloquea los grupos hidroxilo libres, haciéndolos inaccesibles a nuestros analitos CH 3 Si CH 3 CH 3 Primera Derivatización C18 Quedan ~ 50% OH Segunda Derivatización C1 Quedan ~ 40% OH Waters Corporation 25
26 Waters Selectivity Chart 2012 Waters Corporation 26
27 2012 Waters Corporation 27
28 2012 Waters Corporation 28
29 2012 Waters Corporation 29
30 Rellenos columnas BEH UPLC BEH C18 Relleno C18 trifuncional Primera elección en columna UPLC Máxima eficacia y óptima simetría de picos BEH C8 Relleno C8 trifuncional Nuevo proceso de endcapping El mayor rango de ph BEH Shield RP18 Relleno monofuncional Grupo polar embebido Selectividad alternativa BEH Phenyl Relleno Fenilo trifuncional Combinación única de partícula y ligando Amplio rango ph BEH HILIC Partícula BEH sin funcionalizar Relleno para bases muy polares BEH Amide Relleno trifuncional con grupo amida Modo Hilic para ácidos muy polares y azúcares Tipo Ligando Densidad Ligando Carga Carbono Endcapping 2012 Waters Corporation 30 Rango ph Trifuncional C µmol/m 2 18% Proprietary 1-12 Trifuncional C µmol/m 2 13% Proprietary 1-12 Monofuncional Grupo Polar Embebido 3.3 µmol/m 2 17% TMS 2-11 Trifuncional C 6 Fenil 3.0 µmol/m 2 15% Proprietary 1-12 Sin ligando Trifuncional Amide 7.5 µmol/m 2 12% None 2-11
31 Rellenos columnas HSS UPLC HSS T3 Tecnología T3 de enlazado y endcapping Mayor retención para compuestos polares HSS C 18 Alta cobertura, relleno C18 trifuncional Universal, relleno C18 de altas prestaciones Proceso de endcapping patentado para picos óptimos HSS C 18 SB SB: Selectividad para Bases Sin encapping: selectividades silanólicas alternativas Diseñada para desarrollo de métodos Tipo Ligando Densidad Ligando Carga Carbono Endcapping Rango ph HSS PFP Selectividad excepcional para isómeros posicionales, compuestos halogenados y compuestos polares HSS CN Estable, compatible con RP & NP, química CN reproducible Baja hidrofobicidad y selectividad única comparada con ligando C18 Trifuncional C µmol/m 2 11% Proprietary 2-8 Trifuncional C µmol/m 2 15% Proprietary 1-8 Trifuncional C µmol/m 2 8% None 2-8 Trifuncional Propilfluorofenil Monofuncional Diisopropil Ciano 3.3 µmol/m 2 7.5% None µmol/m 2 5.5% None Waters Corporation 31
32 Rellenos columnas CSH UPLC CSH C18 Media/alta cobertura trifuncional C 18 Superior forma pico para productos básicos en fases móviles de baja fuerza iónica Menor retención para bases (vs. BEH C 18 ) CSH PFP Fluorofenil Forma pico excepcional y baja retención para bases con grandes diferencias en selectividad Elevada reproducbilidad CSH Fenil Hexil Excepcional forma de pico para compuestos básicos Selectividad complementaria para compuestos aromáticos Tipo Ligando Densidad Ligando Carga Carbono Endcapping Rango ph Trifuncional C µmol/m 2 15% Proprietary 1-11 Trifuncional Propilfluorofenil 2.3 µmol/m 2 10% None 1-8 Trifuncional C 6 Fenil 2.3 µmol/m 2 14% Proprietary Waters Corporation 32
33 UPLC Columns calculator 2012 Waters Corporation 33
34 Condiciones Cromatográficas HPLC Condiciones Cromatográficas HPLC : Columna: XTerra MS C 18 4,6 x 150 mm, 5 µm Fase Móvil A: 0,1% TFA en agua Fase Móvil B: 0,08% TFA en acetonitrilo Caudal: 1,0 ml/min Perfil Gradiente: Tiempo Perfil (min) %A %B curva 0, , , , , , Vol. inyección: 10 µl Conc. muestra: 100 µg/ml Temperatura: 40 o C Detección: 330 nm Velocidad adquisición datos: 5 pts/sec Constante Tiempo: 1,0 Instrumento: Módulo Separación Alliance 2695 con 2996 PDA 2012 Waters Corporation 34
35 Método HPLC original: Derivados de ácido cafeico en Echinacea Purpurea P c = AU Minutos Nombre Tiempo Retención Resolución USP 1. Acido caftárico 5,71 2. Acido clorogénico 7,07 4,20 3. Cinarina 13,96 21,19 4. Equinacosida 16,54 10,16 5. Acido cicoico 20,32 17, Waters Corporation 35
36 Opción 1: Escalado geométrico del gradiente a la misma velocidad lineal de HPLC AU HPLC P c = 94 Retention Time USP Resolution Name caftaric acid 5.71 chlorogenic acid cynarin echinacoside cichoic acid AU Minutes UPLC P c = Minutos Retention Time USP Resolution Name caftaric acid 1.99 chlorogenic acid cynarin echinacoside cichoric acid Waters Corporation 36
37 Opción 2: Escalado geométrico del gradiente a velocidad lineal de UPLC AU HPLC P c = 94 Retention Time USP Resolution Name caftaric acid 5.71 chlorogenic acid cynarin echinacoside cichoic acid Minutos AU UPLC P c = Minutos 2012 Waters Corporation Retention Time USP Resolution Name caftaric acid 0.71 chlorogenic acid cynarin echinacoside cichoric acid
Columnas Acquity UPLC & Nuevos Rellenos LC Bàrbara Bagó Facultad Química - Universidad de Sevilla 3 de Noviembre 2011
Columnas Acquity UPLC & Nuevos Rellenos LC Bàrbara Bagó Facultad Química - Universidad de Sevilla 3 de Noviembre 2011 2010 Waters Corporation Agenda Columnas Acquity UPLC HILIC Nuevos Rellenos en Fase
Descubra la Cromatografía de Convergencia UltraPerformance : UPC² Waters UPC² Workshop Mayo 2012 Cerdanyola del Vallès
Descubra la Cromatografía de Convergencia UltraPerformance : UPC² Waters UPC² Workshop 30-31 Mayo 2012 Cerdanyola del Vallès 2012 Waters Corporation 1 Agenda 09:15 Bienvenida 09:45 Introducción a la Cromatografía
[ COLUMNAS HPLC ] Continúa el legado de las columnas HPLC
[ CLUMNAS HPLC ] Continúa el legado de las columnas HPLC Columnas HPLC Creación de una cromatografía excepcional La reputación de Waters se basa en la cromatografía, pero nosotros no creamos cromatografía:
Cromatografía de alta presión: esquema
Cromatografía de alta presión: esquema Registrador Bomba Inyector Medidor de presión Reservorio de solventes Sistema de datos o integrador Columna Detector Desecho HPLC 2 10/96 1 PROPIEDADES DE LA FASE
Requisitos de las muestras y condiciones de análisis
Requisitos de las muestras y condiciones de análisis Página 1 INTRODUCCION A continuación se indican los requisitos generales que han de cumplir las muestras para poder ser analizadas en el Servicio de
Columnas de HPLC XBridge
[ ] Columnas de HPLC XBridge Versatilidad y rendimiento inigualables La familia de columnas de HPLC XBridge está diseñada para obtener la máxima flexibilidad en el desarrollo de métodos de HPLC. Se pueden
HPLC. High Performance Liquid Chromatography Cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) Diseño instrumental de HPLC ANÁLISIS FUNCIONAL ORGÁNICO
ANÁLISIS FUNCIONAL ORGÁNICO 1º cuatrimestre 2013 HPLC High Performance Liquid Chromatography Cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) Diseño instrumental de HPLC Muestra Inyector Mezclador Bombas
Protocolo de Prendido y Estabilización del Equipo HPLC
21-09-2015 ID Nº: P-HPLC-01 Versión: 00 Páginas: 1 de 16 Protocolo de Prendido y Estabilización del Equipo HPLC Si es la primera vez que usa el sistema o no está seguro de su funcionamiento, se necesita
2012 Instrumentación en UPLC & UPLC /MS. 2012 Waters Corporation 1
2012 Instrumentación en UPLC & UPLC /MS 2012 Waters Corporation 1 UPLC Retos tecnológicos iniciales Desarrollo focalizado tras años: En Waters (headquarters) En colaboración con científicos tanto académicos
IV REUNIÓN DE USUARIOS DE SISTEMAS UPLC
IV REUNIÓN DE USUARIOS DE SISTEMAS UPLC Procedimientos de diagnóstico y mantenimiento de sistemas UPLC Madrid, 24 de Enero 2012 2012 Waters Corporation IV REUNIÓN DE USUARIOS DE SISTEMAS ACQUITY UPLC 1
Ácidos orgánicos: TRANSGENOMIC
Ácidos orgánicos TEKNOKROMA Fax gratuito para pedidos 900 12 19 05 Ácidos orgánicos: TRANSGENOMIC En este capítulo se incluyen una serie de columnas constituidas todas ellas por partículas poliméricas
Memorias in extenso XVIII Congreso Nacional de Química Analítica. Editadas por la UAM-I. Área de Química Analítica. México, ISBN
Separación de ácidos húmicos por Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (HPLC). Silvia Nieto Velázquez, Fidel Pérez Moreno, Ma de Lourdes Pacheco Hernández* Centro de Investigaciones Químicas, Universidad
Mediante HPLC podemos analizar un rango más amplio de compuestos en comparación con GC.
CURSO TEÓRICO-PRÁCTICO DE ESPECTROMETRÍA DE MASAS Dra. Pilar Blasco Dr. Pablo Candela CURSO FORMACIÓN ESPECÍFICA PAS - 2012 HPLC/MS Por qué acoplar un HPLC y un MS? Mediante HPLC podemos analizar un rango
Tecnología Core-Shell. 11 mitos sobre HPLC. Develados. y por qué necesita tener columnas de HPLC Kinetex core-shell 2.6. www.phenomenex.
Tecnología Core-Shell 11 mitos sobre HPLC Develados y por qué necesita tener columnas de HPLC Kinetex core-shell 2.6 www.phenomenex.com/kinetex Hay mitos sobre HPLC que circulan desde principios del siglo
Soluciones actuales de purificación por HPLC. José Juan Rivero Especialista de producto Madrid 24 de Marzo 2011
Soluciones actuales de purificación por HPLC José Juan Rivero Especialista de producto Madrid 24 de Marzo 2011 Soluciones de Purificación LC de Agilent 2 CROMATOGRAFÍA FLASH VS PREPARATIVA Preparativa
Guía de selección de columnas Agilent ZORBAX para HPLC
Analice eficientemente sus compuestos más desafiantes. Entregue rápidamente resultados de alta calidad. Guía de selección de columnas Agilent ZORBAX para HPLC Aquí está un único punto de información para
LEWATIT MonoPlus MP 500
La Lewatit MonoPlus MP 500 es un intercambiador de aniones fuertemente básico de tipo I, macroporoso, con bolas de tamaño uniforme (monodispersas) a base de un copolímero de estireno divinilbenceno. Diseñado
[ QuEChERS Simplified ]
[ QuEChERS Simplified ] QuEChERS simplificado El método QuEChERS (acrónimo inglés de Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged y Safe [rápido, fácil, económico, eficaz, sólido y seguro]) seguido de una extracción
b. No debe reaccionar con ninguno de los componentes de la mezcla.
ANÁLISIS CUALITATIVO Una vez obtenido un cromatograma satisfactorio se procede a realizar la identificación de los componentes de la muestra empleando alguna de las siguientes técnicas. 1. Técnica cualitativa
Guía de selección de columnas Agilent J&W para GC Confie en una reproducibilidad, eficiencia e inercia sin igual. Ahorre tiempo en la selección de columnas. Our measure is your success. Tabla de Contenidos
Soluciones para análisis de alimentos. Columnas y reactivos
Soluciones para análisis de alimentos Columnas y reactivos [ 1 ] [Trabajando por una alimentación segura] Los consumidores de todo el mundo son cada vez más conscientes de la importancia de controlar la
TEMA 4. CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN
TEMA 4. CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN 4.0. CARACTERÍSTICAS Y EQUIPOS DISPONIBLES 4.0.1. Características más importantes 4.0.2. Equipos disponibles en el departamento de Ingeniería Química
CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA EFICACIA (HPLC)
Curso de Análisis Instrumental Instituto de Ingeniería Química Facultad de Ingeniería - 2007 CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA EFICACIA (HPLC) CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA EFICACIA (HPLC) Ampliamente
OBTENCIÓN DE XILITOL MEDIANTE HIDROGENACIÓN DE XILOSA DE OLOTE DE MAÍZ. Alternativas energéticas y mecanismos de desarrollo limpio
OBTENCIÓN DE XILITOL MEDIANTE HIDROGENACIÓN DE XILOSA DE OLOTE DE MAÍZ Alternativas energéticas y mecanismos de desarrollo limpio Departamento de Madera Celulosa y Papel, Centro Universitario de Ciencias
VERTEX Technics 93 223 33 33 www.vertex.es Thermo Scientific-DIONEX: Cromatografía Iónica Dpto. de Analítica Cromatografía Capilar: amplía las capacidades de la Cromatografía Iónica con columnas de 0,4
Cromatografía de exclusión por tamaño para insulina biosimilar y original
Cromatografía de exclusión por tamaño para insulina biosimilar y original mediante la columna Agilent AdvanceBio SEC Nota de aplicación Industria biofarmacéutica Autores M. Sundaram Palaniswamy y Andrew
MÉTODO DE ANÁLISIS DETERMINACIÓN DE LA DIFERENCIA ENTRE EL CONTENIDO REAL Y EL CONTENIDO TEÓRICO EN TRIGLICÉRIDOS CON ECN 42
CONSEJO OLEICOLA INTERNACIONAL COI/ T.0/ Doc. nº 0/Rev. 008 ESPAÑOL Original: INGLES Príncipe de Vergara, 154 800 Madrid España Telef.: +34 915 903 638 Fax: +34 915 631 63 - e-mail: iooc@internationaloliveoil.org
CG - HPLC HPLC CROMATOGRAFÍA DE GASES
CG - HPLC Muestra volátil Posibilidad análisis de gases Necesidad de estabilidad térmica Peso molecular
Filtros jeringa con prefiltro de microfibra de vidrio
Filtros jeringa con prefiltro de microfibra de vidrio Un filtro jeringa que incorpora un prefiltro de microfibra de vidrio con una retención de partículas de 0.7 µm. Estos filtros son muy útiles en la
Consulta 2.2 En el Articulo 7.1 Documentos que deben aportarse, favor aclarar estos planos que mencionan a que se refieren?
CONSULTA LICITACIÓN PÚBLICA INTERNACIONAL ADQUISICIÓN DE EQUIPOS PARA LOS LABORATORIOS DE INSPECCIÓN QUÍMICA DE LOS PAÍSES MIEMBROS DE LA CAN (EUROPAID/133018/DSUP/MULTI) POSTOR 1 Consulta 1.1 Nos gustaría

References: resolución 
 Resolución 
 Resolución 
 Resolución 
 resolución 
 resolución 
 Resolución 
 RESOLUCIÓN

 RESOLUCIÓN