Source: https://www.leica-microsystems.com/es/productos/microscopios-confocales/detalles/product/leica-tcs-sp8/
Timestamp: 2018-08-19 20:20:32+00:00

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Leica TCS SP8 - Producto: Leica Microsystems
Leica TCS SP8 Leica Leica Microsystems
Plataforma de confocal Leica TCS SP8 Leica TCS SP8
No importa lo que quiera visualizar, tenemos un SP8 que se adapta a sus necesidades.
Desde células vivas a cuantificación de imágenes, desde súper-sensibilidad a la súper-resolución, desde multifotón a “light sheet imaging” - con el Leica TCS SP8 siempre puede ampliar sus posibilidades. Nos basamos en un concepto modular: adapte su microscopio para sus necesidades actuales y mejore funcionalidades adicionales en cualquier momento
120 nm laterial resolution
by LIGHTNING Image Information Extraction
(Sample: courtesy of Anne Aubusson-Fleury, CNRS, Gif-sur-Yvette, France)
Paramecium. Comparison of results using LIGHTNING Image Information Extraction and confocal imaging.
Máxima resolución dinámica mediante contaje de fotones
Relación señal-ruido superior
El contaje de fotones proporciona una relación señal-ruido mucho más alta que el tradicional promedio de intensidades. El promedio de intensidades es el estándar de facto en todos confocales comerciales que utilizan “multialkaline o GaAsP PMT”.
El Leica HyD es el único fotodetector con una alta resolución temporal que permite la resolución de fotones individuales, incluso a altas tasas de conteo que se utilizan normalmente para la imagen. Con el Leica HyD obtendrá información de sus imágenes más fiable que con cualquier otro detector totalmente integrado en un microscopio confocal.
El Leica HyD cubre el rango de frecuencias en un detector desde el contaje de fotones a imágenes. La información completa está contenida en una imagen. Esto significa una gran flexibilidad para sus experimentos de confocal y menos artefactos de procesamiento de datos.
La frecuencia de muestreo en un sistema de contaje de fotones está fuertemente ligada a la relación señal-ruido. Un sistema de contaje de fotones convencional con baja tasa de muestreo, por ejemplo, 15 MHz, puede detectar sólo un pequeño número de fotones, que se asocia con un nivel relativamente alto de ruido. A mayores tasas de conteo, la señal se satura y ya no es cuantitativa. Sin embargo, los marcadores típicos en muestras biológicas emiten a tasas de entre 15 y 40 MHz.
Con su muestreo rápido, el Leica HyD detecta mayores tasas de fotones con bajo nivel de ruido que resulta en mejores imágenes que los PMT o APD. En el modo de contaje de fotones, el HyD es lineal hasta 60 MHz, y la linealidad en modo estándar está garantizada incluso hasta 300 MHz.
El contaje de fotones permite mayor cantidad de información, que se acumula según sea necesario para el análisis estadístico.
Resolver por debajo de 30 nanómetros
El Leica TCS SP8 STED 3X ofrece verdadera súper-resolución para resolver detalles por debajo de 30 nm. Está totalmente integrado en la plataforma confocal Leica TCS SP8 y da acceso rápido e intuitivo, y acceso puramente óptico a los detalles estructurales mucho más allá del límite de difracción - lo suficientemente rápido incluso para imágenes de células vivas.
STED pulsado a 775nm de 45 nm Origamis ADN
- 45 nm pico a pico
- FWHM de un único pico por debajo de los 30 nm
Detectar fluorescencia con mayor sensibilidad
Menos foto toxicidad y más viabilidad de los organismos en desarrollo.
Todos los componentes ópticos del Leica TCS SP8 se emparejan para preservar fotones para imágenes brillantes llenas de contraste.
Con las sinergias del detector espectral multibanda, divisor de haz (AOBS) acústico-óptico, y súper sensible Leica HyDs, se obtiene un microscopio confocal con la máxima eficiencia de fotones y detección espectral sin huecos. Esta sensibilidad superior se traduce directamente en una reducción de la potencia del láser para la viabilidad de la célula y la resolución.
Incluso mayor sensibilidad
La plataforma Leica TCS SP8 ofrece posibilidades avanzadas para la adquisición amable de imágenes de muestras sensibles.
Imágenes multifotónicas (MP): reduce la excitación fuera de foco y aumenta la viabilidad de sus muestras.
Imágenes “Light sheet”: con el Leica TCS SP8 DLS ofrece iluminación con baja intensidad y la adquisición de alta velocidad, lo que reduce los efectos de foto-toxicidad y permite seguir el desarrollo de organismos en el tiempo.
Imagen espectral de fluorocromos cercanos con una eficiencia mayor al 30%
En la microscopía confocal, la luz de excitación entra en la muestra en el mismo lado por el que se recoge la emisión. Un divisor de haz separa la luz de excitación y emisión.
El AOBS (Divisor de Haz Acústico Óptico) es un cristal activo de TeO2 completamente transparente, que ofrece la máxima eficiencia de fotones. Una onda acústica acoplada en el cristal cambia sus propiedades de transmisión. Se cambia en microsegundos, simplemente cambiando la frecuencia de radio de la onda. Esto hace de los AOBS un divisor de haz flexible, eficiente y rápido.
Las bandas de reflexión del AOBS tienen un corte abrupto y un ancho de banda estrecha que permite la recogida de hasta 30% más de luz de emisión.
El AOBS puede alojar hasta ocho bandas de reflexión. Puede utilizar líneas de excitación muy próximas entre sí para obtener imágenes simultáneas de combinaciones de colorantes únicos como GFP y YFP. Como resultado, la separación de colorantes se puede realizar fácilmente sin “Unmixing” y los artefactos relacionados.
Arriba: Todas las longitudes de onda son totalmente flexibles con el AOBS, permitiendo utilizar líneas de excitación muy próximas entre sí como para GFP y YFP, imposible en cualquier sistema con rueda de filtros.
Abajo: Los escarpados picos del AOBS incrementan la eficiencia de la transmisión hasta un 30%.
Detección súper sensible con Leica HyD
Especímenes vivos sensibles necesitan ser adquiridos en condiciones de poca luz en situaciones de alta ganancia.
El Leica HyD le ofrece una relación señal-ruido superior para ayudar con los más mínimos detalles de cualquier espécimen - incluso los más difíciles, tales como cortes de tejido con alta dispersión.
Al reducir el ruido oscuro, el Leica HyD mejora automáticamente el contraste de la imagen, y le proporciona de inmediato imágenes listas para publicar.
Haga clic aquí para leer más acerca de la tecnología de detección híbrida.
Eficiencia fotónica sin pausas
El sistema de detección espectral sin filtros está diseñado para ofrecer la detección simultánea de bandas ajustables de emisión sin espacios.
Este diseño patentado con el uso de un prisma representa el concepto de dispersión más eficiente. En contraste con diseños basados en rejilla, no hay desperdicio de fotones y por lo tanto no hay necesidad de bucles de reciclado.
Rango dinámico adaptable
A diferencia de los diseños de detección espectral basados en matrices, el detector del Leica SP permite un balance personalizado entre la sensibilidad más alta y el rango dinámico más alto. Detectores discretos permiten ajustes de ganancia individuales para cada detector, en lugar de estar obligados a utilizar la misma ganancia para todos los elementos de la matriz. Cada detector de punto se adapta individualmente al rango dinámico de diferentes marcadores sin pérdida de fotones. Esta es la base para separar los marcadores mediante “linear unmixing” sin restauración matemática.
Rango dinámico adaptivo del detector SP. El diseño de detección SP utilizando detectores puntuales individuales evita dos inconvenientes inherentes de matrices multiánodo: pérdida de la dinámica y las lagunas espectrales.
Seguimiento de dinámica en células vivas
Mayor viabilidad con detección sensible y alta velocidad.
Con un Leica TCS SP8, las imágenes de los especímenes vivos pueden tener muchas facetas. Le ofrece la libertad para realizar convenientemente cualquier método avanzado de formación de imágenes en vivo con resultados fiables. Usted puede contar con la más alta fidelidad y viabilidad de su muestra mediante la detección eficiente de la luz y el sistema de barrido de alta velocidad.
Más grande y profundo
Pensando más grande y más profundo el Leica TCS SP8 MP acomoda organismos vivos. En el extremo opuesto de la escala se pueden estudiar detalles nanoscópicos en células vivas utilizando súper-resolución STED. O seguir el desarrollo embrionario mediante una suave iluminación de “light sheet illumination” con el Leica TCS SP8 DLS. Pero no importa la forma que elija para observarlo - un Leica TCS SP8 siempre está optimizado para la velocidad.
Escáner tándem
Alta velocidad para muestras vivas
El escáner tándem une el escáner FOV con un sistema de escaneo resonante basado en espejos galvanométricos conmutables.
22 mm FOV – el mayor de cualquier sistema de barrido puntual
Barrido X2Y con tres espejos para iluminación homogénea
Combinación única de FOV y sistema de barrido resonante de 8 kHz o 12 kHz con espejos galvanométricos conmutables
Frecuencias de barrido hasta 12 kHz, resultando sobre 40 fps (512 x 512 px) o 428 fps (512 x 16 px)
Adquisición de series 4D hasta 50% más rápida que sistemas comparables, combinado con “SuperZ GalvoFlow”
No compromiso en resolución, sensibilidad o contraste, usando los objetivos con alta apertura numérica y los sensibles Leica HyD RLDs
Las células vivas sufren efectos fototóxicos inherentes como resultado de la formación de imágenes.
La alta sensibilidad de los Leica HyD permite directamente una reducción de la cantidad de la luz entregada a la muestra. Esto mejora la viabilidad de su espécimen.
Incluso organismos delicados, tales como levadura o gusanos, son accesibles con la detección híbrida con excelente resolución confocal.
Células de levadura en vivo con doble marcaje con EGFP, tanto en la envoltura nuclear como en el telómero.
Muestra más colores
Su libertad espectral
Obtener la libertad espectral que necesita para la imagen de cualquier tipo de combinación de marcadores. Explorar fácilmente la conectividad celular utilizando proteínas fluorescentes “Brainbow” con el Leica TCS SP8.
Con el sistema de detección espectral sin filtros del Leica TCS SP8 puede grabar simultáneamente hasta 5 emisiones de colorantes diferentes, procedentes de su muestra, sin ningún tipo de pérdida.
El AOBS le permite adquirir fluoróforos espectralmente adyacentes como GFP y YFP, simultáneamente - imposible en sistemas dicroicos. El láser de luz blanca ofrece la mayor flexibilidad para sus experimentos multicolor, ya que es una fuente de láser que cubre todo el espectro de la luz visible.
NIH3T3 células transducidas con cinco proteínas fluorescentes individuales
Vectores (FP). FPs: Cerulean, EGFP, Venus, tdTomato y mCherry. Cada FP era solo visible en las células transducidas con el correspondiente vector.
AOBS rápido barrido secuencial con cinco excitaciones y 5 bandas de emisión. No unmixing.
Cortesía de Daniela Malide, NIH Bethesda, MD USA
AOBS y WLL
Detección simultanea de bandas de emisión sin huecos
Para diferenciar entre diferentes emisiones de un espécimen, es crucial tener un sistema de detección espectral que permite la grabación de varios canales simultáneamente. El detector espectral de cada Leica TCS SP8 permite la detección simultánea de cinco canales diferentes a través de un elemento dispersivo a base de prisma y la disposición en cascada de espejos deslizantes ajustables.
Dispersión del prisma y detección espectral. La luz emitida pasa a través de un prisma (1) que descompone la luz en sus componentes espectrales. Una banda estrecha de longitudes de onda puede ser seleccionada por la inserción de una ranura mecánica (espejos) de deslizamiento (2). El resto del espectro es dirigido por los espejos altamente reflectantes a los detectores posteriores (3). Una cascada de ranuras mecánicas construidas a partir de espejos altamente reflectantes permite la adquisición de hasta cinco canales simultáneamente, sin pérdidas.
Prism Gráfico de dispersión y detección espectral
Confocal libremente sintonizable
El WLL (láser de luz blanca) utilizado en el TCS SP8 X cuenta con una fuente de luz blanca que cubre el rango espectral de 470 nm a 670 nm.
El AOBS es clave para la selección de cualquier longitud de onda del espectro blanco y maximiza las ventajas del WLL. Hasta ocho líneas pueden ser seleccionadas a partir del espectro. Cada línea se puede ajustar libremente en color y en intensidad, que se traduce en ¡8 = 40320 combinaciones!.
La iluminación continua sintonizable y el divisor de haz están perfectamente completados por la detección continua sintonizable del detector SP. Puede recoger las bandas de transmisión entre las líneas de excitación por las bandas espectrales sintonizables - con una eficiencia de transmisión máxima y en cinco canales verdaderos de emisión de forma simultánea, lo que permite aplicaciones multicolor reales.
Arriba: El láser de luz blanca permite detectar hasta 8 líneas del espectro, todas sintonizables libremente en longitud de onda e intensidad.
Abajo: Todas las longitudes de onda son totalmente flexibles con el AOBS que permite utilizar líneas de excitación muy próximas entre sí como GFP y YFP.
Buscar las profundidades de tejidos clareados
Revelar secretos inexplorados
Tejidos transparentes nos ayudan a identificar la topología y la conectividad de las células en los tejidos. Esto es particularmente útil para la identificación de los circuitos neuronales. Técnicas de clarificación proporcionan la máxima profundidad de imagen y resolución más alta cuando se combinan con las ópticas adecuadas.
Profundidad máxima, mayor resolución
Con los objetivos especiales diseñados específicamente por Leica Microsystems para muestras tratadas con CLARITY y BABB, usted puede revelar secretos inexplorados. Consiga imágenes de órganos enteros a la máxima profundidad y resolución de imagen y descubra CLARITY perfecto con excitación única o multifotónica.
Expandir su campo de visión
Desde organismos enteros hasta el máximo nivel de detalle.
Campo grande – organismos enteros. El Leica TCS SP8 ofrece el mayor campo de visión en el barrido puntual mediante el uso de una arquitectura espejo de exploración X2Y. Usted puede tomar imágenes de animales o plantas, a menudo en una sola toma.
La opción Mosaicos (stitching) está disponible para muestras más grandes que el campo de visión. Ahorre tiempo en el montaje, cubriendo la misma área con un menor número de imágenes. Debido a la iluminación homogénea sobre el campo de visión, sus imágenes están desprovistas de artefactos de montaje. Al mismo tiempo, cada detalle se conserva con alta resolución confocal.
La plataforma que está preparada para su investigación
Obtenga lo que necesita ahora y actualice cuando que sea necesario.
El Leica TCS SP8 está diseñado para todas sus necesidades futuras en términos de eficacia y eficiencia.
Obtenga el microscopio exacto que necesita
Nunca comprometa de nuevo en la velocidad, la resolución o la sensibilidad
Preserve cada precioso fotón
Actualice su sistema para satisfacer sus necesidades de crecimiento
Con el paquete de visualización LAS X 3D se incluye un monitor de 4K en cada Leica TCS SP8.
Nuestra plataforma de software Leica Application Suite X (LAS X) se puede personalizar a sus demandas y le ayuda en la planificación, ejecución y análisis de sus experimentos.
El diseño orientado del flujo de trabajo y los intuitivos asistentes le guían paso a paso a través de la adquisición, procesamiento y análisis de imágenes. Adapte LAS X a sus necesidades con paquetes de software adicionales, como la visualización y análisis en 3D, que le permiten comprender la topología de la imagen 3D y cuantificar diferentes aspectos de las estructuras intracelulares.
El examen y análisis de sus experimentos resultan extremadamente fáciles usando Leica TCS SP8 y LAS X.
Sin CAM (arriba): Los acontecimientos importantes pueden pasarse por alto. Con CAM (abajo): Resolución de tiempo se incrementa temporalmente como sea necesario. Los procesos se estudian con más detalle y con mejor rendimiento.
Empiece a pensar en grande
Los progresos en sus descubrimientos pueden suceder cuando usted está en el lugar correcto en el momento adecuado. Leica HCS A puede acelerar el proceso de los descubrimientos a través de “high content screening” y le permite estandarizar aplicaciones biológicas para resultados rápidos y reproducibles.
Computer Aided Microscopy (CAM) permite la detección de eventos raros que utilizan el software de análisis de imagen externo como ImageJ o Cell Profiler. Los datos se transmiten de forma continua a un almacenamiento externo y el análisis de imágenes se lleva a cabo en paralelo a la adquisición de datos. Leica HCS A puede responder a la retroalimentación del software de análisis, lo que simplifica los grandes los procesos de cribado.
Caracterización espectral de imágenes
Microscopio CARS: obtención de imágenes sin marcadores
Objetivos motCORR de Leica
Máximo rendimiento óptico en 3D
Automatización de cribado rico en contenido
Leica SR GSD 3D: Sistema de superresolución para microscopía de localización en 3D

References: resolución 
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