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Timestamp: 2018-05-27 13:42:19+00:00

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Cuantificación de la permeabilidad glomerular de macromoléculas fluorescentes mediante microscopía 2-Photon en Munich Ratas Wistar
Cuantificación de la permeabilidad glomerular de macromoléculas fluorescentes mediante microscopía 2-Photon en Munich Ratas Wistar Ruben M. Sandoval1, Bruce A. Molitoris1 1Medicine/Nephrology, Indiana University School of Medicine Una técnica de la utilización de alta resolución intavital 2 fotones microscopía de visualizar directamente y cuantificar la filtración gloemrular en los glomérulos superficie. Este método permite la determinación directa de las características de permeabilidad de macromoléculas tanto en estados normales y enfermos.
Isquemia Induce Alteraciones En Los Filamentos De Actina En Las Células Del Músculo Liso Vascular Renal American Journal of Physiology. Renal Physiology. Jun, 2002 | Pubmed ID: 11997317	Aunque alterada renal reactividad vascular se sabe para ocurrir tras la isquemia, la base estructural explicando el fenómeno no se ha aclarado. Para evaluar daños estructurales en la vasculatura renal isquémica insuficiencia renal aguda (ARF), F-actina en la vasculatura renal de rata riñones y células del músculo liso vascular cultivadas fue examinada usando microscopia confocal de la fluorescencia. La arteria renal izquierda fue afianzado con abrazadera para 15 o 45 min en ratas Sprague-Dawley. En otros grupos experimentales, 45 min de sujeción arterial renal fue seguida por 1 o 3 h de la reperfusión. Riñones de control fueron procurados sin ningún procedimiento intervencionista anterior. F-actina fue marcado con fluoresceína o Faloidina conjugada roja de Texas. Serie de secciones ópticas se recolectaron mediante microscopía confocal y volúmenes de imagen fueron despojados de tres dimensiones. Se evaluó el grado de daño citoesqueleto en la vasculatura marcando semicuantitativa de la tinción de la F-actina. Desorganización/desorden de la F-actina, reflejado por la interrupción y aglutinación de los filamentos de actina, se observó en las arterias, arteriolas y el vasa rectae del riñón después de isquemia o isquemia reperfusión. Las células musculares lisas de las arterias y arteriolas demostraron daño significativo a la F-actina después de 15 o 45 minutos de isquemia en una forma dependiente de la duración. El citoesqueleto de actina tiende a recuperarse de los daños causados por 45 minutos de isquemia 1 y 3 h tras la reperfusión. El vasa rectae no demostró daño significativo a la F-actina después de 15 o 45 minutos de isquemia. Sin embargo, un daño considerable a la rectae vasa fue manifiesto 3 h después de la reperfusión después de 45 minutos de isquemia. En Resumen, desorganización/desorden de la F-actina en células musculares lisas vasculares del riñón se observó después de isquemia o isquemia reperfusión. Un hallazgo similar fue observado en células cultivadas del músculo liso vascular. Sugerimos que esta desorganización del citoesqueleto de actina puede desempeñar un papel contributario en la pérdida de autorregulación del flujo sanguíneo renal y la reactividad vascular aberrante en ARF postisquémica.
Disfunción En La Insuficiencia Renal Aguda Isquémica Y Lesión Endotelial Critical Care Medicine. May, 2002 | Pubmed ID: 12004242	Insuficiencia renal aguda isquémica es la más frecuente causa de insuficiencia renal aguda en pacientes hospitalizados y tiene una tasa de mortalidad promedio de 50%. Aunque las anormalidades celulares epiteliales y vasculares del músculo liso han sido delineó claramente en asociación con esta condición, el grado de lesión endotelial y disfunción ha sido difícil documento, sobre todo por razones anatómicas. Sin embargo, la separación de ensambladura apretada endotelial y separación de células endoteliales, blebbing y necrosis se han observado tras la isquemia en otros órganos. Además, estudios de agotamiento de trifosfato de adenosina en células endoteliales cultivadas han demostrado que múltiples basadas en actina alteraciones ocurren de manera reversible y dependiente de la duración. Después de un insulto isquémico, flujo de sangre renal total devuelve hacia normal, pero se producen alteraciones marcadas, regionales. Más afectados es el exterior medular o corticomedullary cruce región donde el flujo de sangre sigue siendo aproximadamente el 10% de lo normal. En esta área, se congestiona la microvascularización. Edema intersticial, captura de glóbulos rojos, la adherencia del leucocito y extravasación contribuyen a esta congestión. Aumento de la expresión de selectina P y E selectina se ha documentado en las células endoteliales renales después de lesión isquémica y tratamiento con anticuerpos contra cualquier adherencia intercelular molecule-1, P selectinas o selectinas E se ha demostrado para minimizar el daño renal. Durante la isquemia in vivo y agotamiento de trifosfato de adenosina en estudios en cultivos celulares, destrucción de la F-actina ocurre, con la polimerización hacia la acumulación de agregados de actina intracelular. Mediante microscopía multifotón, Voxx software y el ratón Tie-2 con la expresión de la proteína fluorescente de células endoteliales selectivo verde impulsada por el promotor de la Tie-2, hemos podido identificar macrovasculares y las células endoteliales microvasculares en cuatro dimensiones (tres dimensiones más tiempo) intravitally. Mediante el uso de dextranos marcados con rojo de gran peso molecular de Texas, podemos documentar flujo sanguíneo y disfunción vascular. Intravital estudios mediante técnicas de imagen multifotón pueden realizarse ahora para identificar y cuantificar la lesión de la célula endotelial y disfunción en órganos de funcionamiento.
Estudios Funcionales Del Riñón De Animales Vivos Mediante Microscopía De Dos Fotones Multicolor American Journal of Physiology. Cell Physiology. Sep, 2002 | Pubmed ID: 12176747	Microscopía óptica, cuando se aplica a animales vivos, proporciona un medio poderoso para estudiar la biología de la célula en el ajuste más fisiológicamente relevante. La capacidad de microscopia de dos fotones para recoger secciones ópticas profundamente en los tejidos biológicos ha abierto el campo de la microscopia intravital para estudios de alta resolución del cerebro, lente, piel y tumores. Aquí presentamos ejemplos de la manera en que la microscopia de dos fotones puede aplicarse a intravital estudios de fisiología renal. Porque el riñón es exteriorizado fácilmente sin comprometer su función, microscopia puede utilizarse para evaluar diversos aspectos de la función renal en vivo. Estos incluyen la vitalidad de la célula y apoptosis, transporte de fluidos, endocitosis mediada por receptor, flujo sanguíneo y trata de leucocitos. Excitación de dos fotones eficiente de fluoróforos múltiples permite la comparación de múltiples sondas y caracterización simultánea de varios parámetros y aporta información espectral que es crucial para la interpretación de imágenes que contienen autofluorescence desacostumbrado. Los estudios descritos aquí demostraron la manera en que la microscopia de dos fotones puede proporcionar un nivel de resolución hasta ahora inalcanzable en microscopia intravital, permitiendo análisis cinéticos y estudios fisiológicos de los órganos de animales vivos con resolución subcelular.
Lesión Endotelial Microvascular Y Disfunción En La Insuficiencia Renal Aguda Isquémica Kidney International. Nov, 2002 | Pubmed ID: 12371954	La fisiopatología de la insuficiencia renal aguda isquémica (IRA) parece implicar una interacción compleja entre la lesión tubular y hemodinámica renal y procesos inflamatorios. Mientras que el paradigma actual de la fisiopatología de la ARF isquémica invoca tanto subletales y lesión tubular letal como de vital importancia para disminuir la función renal, un creciente cuerpo de evidencia apoya la contribución de la función vascular renal alterada en potencialmente iniciar y posteriormente extendiendo la lesión tubular inicial. Proponemos que la "fase de extensión" del ARF isquémico implica alteraciones en la perfusión renal, hipoxia continua y los procesos inflamatorios que contribuyen a la lesión de la célula tubular continuo. Disfunción y lesión de la célula endotelial vascular juegan un papel vital en esta fase de extensión. En el Estado constitutivo el endotelio regula la migración de células inflamatorias en el tejido, tono vascular y la perfusión, vasopermeability y evita la coagulación. Sobre la lesión, la célula endotelial pierde su capacidad para regular estas funciones. Esta pérdida de función reguladora puede tener un impacto perjudicial posterior sobre la función renal. Congestión vascular, formación del edema, disminución del flujo sanguíneo, infiltración de células inflamatorias se han documentado en el cruce de corticomedullary del riñón, y vincular su génesis a la disfunción y lesión endotelial vascular ha sido difícil. Sin embargo, se han desarrollado nuevos enfoques de investigación, como el ratón Tie2-GFP, microscopía multifotón que aún más nuestra comprensión de la lesión endotelial de papeles y disfunción jugará en la patofisiología de ARF isquémica. Este conocimiento debe proporcionar nuevos métodos diagnósticos y terapéuticos a ARF isquémica.
Agotamiento De Nucleótido Aumenta Tráfico De Gentamicina En El Complejo De Golgi En Células LLC-PK1 American Journal of Physiology. Renal Physiology. Dec, 2002 | Pubmed ID: 12388419	Una vez demostrado tráfico rápido de aminoglucósidos al complejo de Golgi en cultivo celular, nos centramos en la interacción perjudicial que se produce cuando la administración de gentamicina es precedida por isquemia renal. Con gentamicina de marcado con rojo de Texas como un trazador, determinamos que 15 min de nucleótido celular agotamiento no aumentaron significativamente posterior absorción. Sin embargo, las células previamente agotadas de nucleótidos acumulan significativamente más gentamicina marcado con rojo de Texas dentro de un complejo de Golgi disperso. Usando Ricinus communis y Lens culinaris lectinas, etiqueta que compartimentos específicos del complejo de Golgi (red trans-Golgi/trans y medial/cis compartimentos, respectivamente), se determinó que el compartimento medial/cis dispersa después de 15 minutos de agotamiento de nucleótido pero el compartimiento de red/trans trans-Golgi seguía siendo inafectado. Un aumento en el número de células que interrumpió medial/cis-Golgi morfología después también se observó la repleción en medios fisiológicos que contiene gentamicina. En Resumen, el aumento de la nefrotoxicidad visto cuando isquemia precede captación de aminoglucósidos puede ser parte de un complejo mecanismo que inicialmente implica mayor acumulación de Golgi y prolongada dispersión de Golgi. El complejo de Golgi entonces deben soportar los efectos de la gentamicina acumulado en grandes cantidades en un estado fisiológico aberrante.
Enfermedades Cardiovasculares En Pacientes Con Enfermedad Renal Crónica Seminars in Nephrology. Nov, 2002 | Pubmed ID: 12430090	Enfermedades cardiovasculares (ECV) es la causa principal de morbilidad y mortalidad en pacientes con insuficiencia renal. Pacientes con enfermedad renal crónica tienen importante CVD y llevan una alta carga cardiovascular en el momento en que comienzan la terapia de reemplazo renal (TRR). La severidad de las enfermedades cardiovasculares que se ha observado en pacientes de diálisis plomo a un creciente cuerpo de investigación que examine la patogénesis y progresión de enfermedades cardiovasculares durante la progresión de la nefropatía crónica (NC) para la insuficiencia renal terminal (ERT) (es decir, fase de prediálisis). Múltiples factores intervienen en el desarrollo de enfermedades cardiovasculares en CKD. Lo que es más importante, factores críticos y claves parecen desarrollar temprano en el curso de CKD y como resultado puede prevenir empeoramiento de enfermedades cardiovasculares en esta población de pacientes. La anemia es común en pacientes con nefropatías crónicas y ha demostrado tener un papel independiente en la génesis de la hipertrofia ventricular izquierda (HVI) y posterior CVD. Por desgracia, es underdiagnosed y undertreated en pacientes con nefropatías crónicas. Intervención temprana y mejor corrección de la anemia, parece tener un gran impulso en la prevención y manejo de enfermedades cardiovasculares en CKD. La hipertensión es otro factor de riesgo que ha sido designada por la nacional riñón Fundación Task Force on CVD en enfermedad renal crónica. Este artículo repasa los diferentes factores implicados en la patogenia de la ECV en la ERC y la evidencia que apoya la intervención precoz y agresiva.
Transición a La Terapia En La Insuficiencia Renal Aguda Isquémica Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Jan, 2003 | Pubmed ID: 12506160
ADF/cofilin Media Alteraciones Citoesqueleto De Actina En Células PK LLC Durante El Agotamiento Del ATP American Journal of Physiology. Renal Physiology. Apr, 2003 | Pubmed ID: 12620926	Lesión isquémica induce agregación y alteración del citoesqueleto de actina, pero no quedan claros los mecanismos que afectan a estos cambios. Para determinar el papel del factor depolymerizing de actina (ADF) / cofilin participación en descomposición citoesqueleto de actina isquémica inducida, se utilizaron células de riñón porcino cultivado, LLC-PK(A4.8) y adenovirus con wild-type (wt), constitutivamente activa e inactivo Xenopus ADF/cofilin ligado a la proteína de la fluorescencia verde [XAC (wt)-GFP] en un modelo de agotamiento de ATP. Infectividad adenoviral alta (70%) en las células LLC-PK(A4.8) resultó en aumento linealmente XAC (wt) - GFP y fosforilada (p) XAC (wt) - expresión (inactivo) GFP. Agotamiento de ATP inducida rápidamente la desfosforilación y, por lo tanto, la activación, de pcofilin endógeno, así como pXAC (wt) - GFP junto con la formación de XAC fluorescente (wt) - GFP/actina agregados y barras. Ningunas alteraciones citoesqueleto de actina significativo ocurrieron con agotamiento de ATP a corto plazo de las células LLC-PK(A4.8) expresando GFP o el mutante constitutivamente inactivo XAC (S3E)-GFP, pero las células que expresan el mutante constitutivamente activo demostraron interrupción casi instantánea de la actina con la formación de agregados y varilla. Reconstrucciones tridimensionales volumen de imagen confocal de células LLC-PK(A4.8) normales y ATP-agotado demostradas que 25 min de agotamiento de ATP indujo un aumento rápido en XAC (wt)-señal apical y basal de la GFP además la formación agregada de XAC-GFP/actina. Estos datos demuestran XAC (wt)-GFP participa en alteraciones citoesqueleto de actina inducida por la isquemia y determina la velocidad y extensión de estas alteraciones celulares inducidas por el agotamiento del ATP.
Un Nuevo Método Para Determinar La Especificidad Y Sensibilidad De La Reacción De TUNEL En La Cuantificación De La Apoptosis American Journal of Physiology. Cell Physiology. May, 2003 | Pubmed ID: 12676658	La apoptosis es un modo importante de muerte celular bajo condiciones fisiológicas y fisiopatológicas. Existen numerosas técnicas para el estudio y cuantificación de la apoptosis en cultivos celulares, pero pocos son útiles cuando se aplica a los tejidos complejos. Entre estos, el ensayo dUTP mediada por la transferasa terminal nick etiquetado final (TUNEL) sigue siendo la técnica más ampliamente utilizada. Sin embargo, su especificidad y sensibilidad para la detección de apoptosis siguen siendo polémicas. Hemos desarrollado una técnica de tinción de células vivas y tejidos con Hoechst 33342 y el yoduro de propidio colorante vital (PI), seguida de la fijación y la reacción del TUNEL. Demostramos excelente retención de PI en células necróticas después de la fijación. También examinamos la distribución de TUNEL coloración entre necrótico y células apoptóticas en varios modelos de lesión de la célula in vitro e in vivo. Mostramos que la sensibilidad del TUNEL variaron entre 61 y 90% en los modelos examinados. La especificidad superó el 87 por ciento en todos los modelos, pero cayó hasta el 70% cuando una lesión necrótica predominante fue inducida. Esta novela y simple método permitirá la determinación de índices de sensibilidad y especificidad para el ensayo TUNEL en otros tejidos y condiciones experimentales.
Lesión De La Función Microvascular Endotelio Renal Altera La Barrera Después De La Isquemia American Journal of Physiology. Renal Physiology. Aug, 2003 | Pubmed ID: 12684225	El papel de la lesión renal microvascular de las células endoteliales en la fisiopatología de la isquemia insuficiencia renal aguda (IRA) sigue siendo en gran parte desconocido. No se observaron alteraciones morfológicas consistentes se han atribuido en el endotelio de la microvasculatura renal como consecuencia de la lesión por isquemia-reperfusión. Por lo tanto, el propósito de este estudio fue examinar los marcadores bioquímicos de lesión endotelial y los cambios morfológicos en el endotelio microvascular renal en un modelo murino de isquemia IRA. Circulación de factor von Willebrand (FVW) se midió como un marcador de lesión endotelial. Veinticuatro horas después de la isquemia, que circula vWF alcanzó un máximo de 124% sobre los valores basales (p = 0,001). El ratón FVB-TIE2/GFP se utilizó para localizar los cambios morfológicos en el endotelio microvascular renal. Inmediatamente después de la isquemia, se produjo un marcado incremento en los agregados F-actina en el aspecto basal y basolateral de las células renales endoteliales microvasculares en la unión corticomedular. Después de 24 h de reperfusión, el patrón de tinción F-actina era más similar a la observada en condiciones fisiológicas. Además, las alteraciones en la integridad de las uniones adherentes de la microvasculatura renal, como se demuestra por la pérdida de la localización en inmunotinción vascular cadherina endotelial, se observaron después de 24 h de reperfusión. Esta observación temporal relacionada con el mayor grado de defecto de la permeabilidad en la microvasculatura renal, identificados con dextranos fluorescentes y de dos fotones de imagen intravital. En conjunto, estos hallazgos indican que la lesión renal endotelial vascular isquémico se produce en la insuficiencia renal aguda y puede desempeñar un papel importante en la fisiopatología de la isquemia IRA.
Actina Urinaria, Interleucina-6 E Interleucina-8 Pueden Predecir ARF Sostenido Después De Lesión Isquémica En Allografts Renales American Journal of Kidney Diseases : the Official Journal of the National Kidney Foundation. May, 2003 | Pubmed ID: 12722043	Daño celular y la inflamación después de la isquemia contribuyen a sostenido insuficiencia renal aguda (IRA).
Proyección De Imagen Intravital Del Riñón Mediante Microscopía Multifotón Multiparámetro Nephron. Experimental Nephrology. 2003 | Pubmed ID: 12806182	Microscopía óptica intravital proporciona un medio poderoso para estudiar la biología de la célula en el ajuste más fisiológicamente relevante. La capacidad de microscopía multifotón para recoger secciones ópticas profundamente en los tejidos biológicos ha abierto el campo de la microscopia intravital a estudios de alta resolución de múltiples órganos. Presentados aquí es ejemplos de microscopia de dos fotones cómo pueden aplicarse a estudios intravital de fisiología renal y el estudio de procesos de la enfermedad. Estos incluyen estudios de vitalidad celular y apoptosis, transporte de fluidos, endocitosis mediada por receptor, flujo sanguíneo y trata de leucocitos. Eficiente excitación de dos fotones de fluoróforos múltiples permite la comparación de múltiples sondas y caracterización simultánea de múltiples parámetros. Microscopía de dos fotones ahora puede proporcionar un nivel de investigación hasta ahora inalcanzable en microscopia intravital, permitiendo análisis cinéticos y estudios fisiológicos de los órganos de animales vivos con resolución subcelular. Por lo tanto, la aplicación de esta tecnología proporcionará la visualización directa de las respuestas específicas de la célula y órgano a una variedad de estímulos y enfoques terapéuticos, mejorar nuestro entendimiento y tratamiento de procesos de la enfermedad.
Recientemente Se Desarrollaron Técnicas Para Estudiar Y Diagnosticar La Insuficiencia Renal Aguda Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Aug, 2003 | Pubmed ID: 12874475	Avances en el tratamiento humano insuficiencia renal aguda (ARF) son dependiente en el desarrollo de técnicas que permiten un diagnóstico rápido, cuantificación de lesiones, mayor comprensión de la patofisiología y los efectos del tratamiento. Por lo tanto, cuatro técnicas que faciliten este proceso se describe e ilustradas por cuatro equipos de investigación diferentes. Técnicas para medir los cambios rápidos en la tasa de filtración glomerular están disponibles para un diagnóstico rápido y cuantificación de ARF en seres humanos. Estado de la técnica resonancia magnética (MRI) permite actualmente resolución mejorada del flujo sanguíneo renal regional y evaluaciones funcionales en los pacientes. Además, nuevas sondas y técnicas para MRI que permiten la identificación y cuantificación de la inflamación, aplicable a ARF humana, están siendo desarrollados y probados en modelos animales. Por último, microscopia de dos fotones permitirá cuadridimensional estudios celulares y subcelulares en modelos animales de ARF proporciona rápidas penetraciones en la patofisiología y los efectos terapéuticos de una variedad de agentes prometedores. Desarrollo y utilización de estas técnicas, especialmente en concierto con genética, proteómica y aproximaciones moleculares, permitirá necesarios conocimientos sobre la Fisiopatología y la terapia en humano ARF.
Mecanismo De Polimerización De La Actina En Agotamiento De ATP Celular The Journal of Biological Chemistry. Feb, 2004 | Pubmed ID: 14623892	Agotamiento de ATP celular en tipos celulares diferentes da lugar a la conversión neta de G-actina monomérica polimérico F-actina y es un aspecto importante del daño celular en isquemia del tejido. Proponemos que esta conversión es resultado de alterar la proporción de ATP-G-actina y ADP-G-actina, causando una disminución neta en la concentración de complejos thymosinactin como consecuencia de la afinidad diferencial de timosina beta4 de ATP - y ADP-G-actina. Para probar esta hipótesis examinamos el efecto de depleción de ATP inducida por antimicina A y agotamiento del sustrato en la polimerización de la actina, el estado del nucleótido de la piscina de monómero y la Asociación de monómeros de actina con la timosina y perfilación en la línea de células epiteliales renales PK1 LLC. Agotamiento de ATP por 30 min incrementó el contenido de la F-actina a 145% de los niveles bajo condiciones fisiológicas, acompañados de una disminución correspondiente en el contenido de la G-actina. D Cytochalasin el tratamiento no redujo la formación de la F-actina durante el agotamiento de ATP, indicando que era predominante no debido a la adición de monómero de extremo de púa. Los niveles de ATP-G-actina disminuyeron rápidamente durante el agotamiento, pero no hubo cambios en la concentración de monómeros de ADP-G-actina. La disminución en los niveles de ATP-G-actina podría explicarse por la disociación del complejo binario timosina-G-actina, produce un aumento en la concentración de libre timosina beta4 de 4 a 11 microm. Mayor detección de complejos de View-actina durante el agotamiento indica que View puede participar en catalizar el intercambio de nucleótidos durante el agotamiento. Este mecanismo proporciona una base bioquímica para la acumulación de agregados de la F-actina en células isquémicas.
Gentamicina Trafica Retrógrada a Través De La Vía Secretora Y Se Libera En El Citosol Por El Retículo Endoplasmático American Journal of Physiology. Renal Physiology. Apr, 2004 | Pubmed ID: 14625200	Mecanismos anteriores, describiendo cómo aminoglucósidos ejercen su toxicidad celular, incluyendo la acumulación lisosomal, ruptura y soltar, no son responsables de la rapidez y magnitud de lo observado subcelular y efectos de órgano. Utilizando técnicas de immunoamplification y colocalización con epitopos del retículo endoplásmico (ER), divulgamos rápido transporte retrógrado de gentamicina al ER. Además, tiempos de exposición de 2 y 4 h en células LLC-PK1 producen liberación citosólica y Asociación nuclear. Internalización celular y el tráfico de análogos estructurales de aminoglucósidos, dextranos fluorescentes catiónicos que contienen amina de 3.000 peso molecular, corroboran estos hallazgos. Sin embargo, idénticas dextranos fluorescentes aniónicos o dextranos catiónicos más grandes, de 10.000 peso molecular, no atravesar de la ER en el citosol o localizar dentro del núcleo. Estos estudios sugieren que un camino existe eso aminoglucósidos transportes interiorizados y otros compuestos catiónicos de pequeño peso molecular, de una manera retrógrada a través del complejo de Golgi y el retículo endoplasmático. Desde allí, estos compuestos se mueven en el citosol para la entrega a lo largo de la célula. Para cuantificar los efectos tóxicos potenciales de liberación de aminoglucósidos citosólica, experimentos examinando posible en la permanencia de gentamicina extracelular de la membrana mitocondrial se llevaron a cabo y demostraron una reducción significativa después de 4 a 8 h. Estas observaciones proporcionan un mecanismo para las alteraciones celulares conocidas rápidamente inducidos, como fusión de la vesícula aberrante, generación radical libre toxicidad mitocondrial y síntesis disminuida de la proteína por transcripción reducida o traducción después de la exposición de aminoglucósidos.
Isquemia Renal Induce Microfilamentos Desestabilizadoras De Disociación De Las Microvellosidades De Tropomiosina American Journal of Physiology. Renal Physiology. May, 2004 | Pubmed ID: 15075195	Lesión celular inducida por la isquemia resultados en factor de rápida duración dependiente depolymerizing de actina (ADF) / cofilin-mediado interrupción de los núcleos de microfilamentos apical microvellosidades. Porque microfilamentos microvillar intestinales son limitados y estabilizados en la web terminal por la tropomiosina de proteína de unión a actina, nos preguntó si un efecto protector de la localización de la tropomiosina a la web terminal de los núcleos de microfilamentos del túbulo proximal se interrumpe durante la lesión isquémica. Con anticuerpos específicos a la tropomiosina, examinamos las secciones corticales de rata bajo condiciones fisiológicas y lesión isquémica siguiente mediante microscopía confocal. Además, se realizó análisis de Western blot de extractos corticales y de la orina. Nuestros estudios demostraron la presencia de isoformas de la tropomiosina en el web terminal microvillar del túbulo proximal bajo condiciones fisiológicas y su disociación en respuesta a 25 min de lesión isquémica. Esto se correlaciona con la excreción de vesículas de membrana plasmática que contienen tropomiosina en la orina de las ratas isquémicas. Además, observamos la tropomiosina mayor solubilidad de Triton X-100 tras la isquemia en los extractos de la corticales. Estos estudios sugieren la tropomiosina se une y estabiliza el núcleo microfilamento microvillar en la web terminal bajo condiciones fisiológicas. Con la aparición de lesión isquémica, proponemos que tropomiosina se disocia de la base de microfilamentos acceso a microfilamentos en la web terminal para la F-actina vinculante, cortar y depolymerizing acciones de ADF/cofilin proteínas.
Captación Y Tráfico De Conjugados Fluorescentes De ácido Fólico En Riñón Intacto Determinado Usando Microscopia Intravital De Dos Fotones American Journal of Physiology. Cell Physiology. Aug, 2004 | Pubmed ID: 15102609	Microscopia intravital de dos fotones fue utilizada para seguir el consumo y tráfico de conjugados fluorescentes de ácido fólico en el riñón de rata. Las moléculas de tinte intravenoso administrado de folato-ligado llenaron rápidamente el volumen de plasma pero componentes no celulares de la sangre. Filtración glomerular se produjo inmediatamente y Unión a células del túbulo proximal se vio dentro de segundos. Fluorescencia de un pH-insensible conjugado de ácido fólico, ácido fólico Texas rojo (FTR), fácilmente se observó en la superficie apical de los túbulos proximales y en varios compartimentos celulares, pero poco vinculante o captación se podía detectar en otras células de riñón. Fluorescencia de un conjugado de membrana de ácido fólico, fluoresceína de folato, fue vista solamente en la superficie apical de las células del túbulo proximal, sugiriendo que conjugados de folato internalizada se localizan en compartimientos de ácidos. La mayoría del conjugado FTR internalizado por los túbulos proximales acumulados dentro de un pool lisosomal, según lo determinado por estudios de colocalización. Sin embargo, porciones de FTR también fueron demostradas por microscopia electrónica a transcitosis de apical a dominios basales. Estudios adicionales con colchicina, que se sabe que despolimerizar los microtúbulos e interrumpir transcitosis, produjeron una reducción marcada en la endocitosis de FTR, con acumulación limitada a la región subapical de la célula. Se observó ninguna evidencia de liberación citosólica de cualquiera conjugado de ácido fólico, que puede representar una diferencia fundamental de la deposición citosólica en células neoplásicas. Juntos, estos datos apoyan el argumento conjuga eso folato (y, por extrapolación, folato fisiológico) se unen a la superficie apical de las células del túbulo proximal y se transportan en y a través de las células en compartimentos endocíticos.
Lesión Endotelial Y Disfunción: Papel En La Fase De Extensión De Insuficiencia Renal Aguda Kidney International. Aug, 2004 | Pubmed ID: 15253696	La fisiopatología de la insuficiencia renal aguda isquémica (IRA) consiste en una interacción compleja entre la hemodinámica renal, lesión de la célula tubular y endoteliales y procesos inflamatorios. Un creciente cuerpo de evidencia apoya la contribución de la función vascular renal alterada, especialmente a nivel microvascular, en iniciar y posteriormente extendiendo la lesión tubular inicial. La fase de extensión de ARF isquémica trata de continua disminución de perfusión renal, hipoxia continua y procesos inflamatorios que ocurren durante la reperfusión y contribuyan a la lesión de la célula tubular continuo. Disfunción y lesión de la célula endotelial vascular juegan un papel vital en esta fase de extensión. Con lesiones, la célula endotelial pierde su capacidad de regular el tono vascular, la perfusión, la permeabilidad y la inflamación/adhesión. Esta pérdida de función reguladora tiene un impacto negativo sobre la función renal. Congestión vascular, formación del edema, disminución del flujo sanguíneo y la infiltración de células inflamatorias se han documentado en el cruce de corticomedullary del riñón. Sin embargo, ha sido difícil vincular su génesis a la disfunción y lesión endotelial microvascular. Nuevos métodos diagnósticos y terapéuticos de ARF isquémica deben incorporar éstos que encuentran para idear estrategias de reconocimiento temprano y enfoques terapéuticos.
Citoesqueleto De Actina En La Insuficiencia Renal Aguda Isquémica Kidney International. Aug, 2004 | Pubmed ID: 15253754
Microscopía Multifotón Intravital De Procesos Dinámicos Renales American Journal of Physiology. Renal Physiology. Jun, 2005 | Pubmed ID: 15883167	Recientes avances en microscopia y óptica, Ciencias de la computación y los fluoróforos disponible solía moléculas de etiqueta de interés han facultado investigadores utilizar microscopia intravital de dos fotones para estudiar los eventos dinámicos dentro del funcionamiento del riñón. Esta técnica emergente permite a investigadores a seguir las alteraciones funcionales y estructurales con resolución subcelular dentro del mismo campo de visión en segundos a semanas. Este enfoque vigoriza la validez de los datos y facilita el análisis y la interpretación como tendencias más fácilmente se determinan cuando uno es más estrecha vigilancia indicativos parámetros fisiológicos. Por lo tanto, en este informe que destacamos cómo enfoques específicos permitirá estudios en la permeabilidad glomerular, túbulo proximal endocitosis y función microvascular en el riñón. Intentamos mostrar cómo pueden cuantificarse datos visuales, permitiendo mayor comprensión de los procesos bajo estudio. Por último, se presta atención a las posibles oportunidades futuras de esta tecnología y sus limitaciones actuales.
Micropunción Gene Entrega Y Visualización De Dos Fotones Intravital De Expresión De Proteínas En El Riñón De Rata American Journal of Physiology. Renal Physiology. Sep, 2005 | Pubmed ID: 15886277	Comprender los mecanismos moleculares de los procesos de la patofisiología y la enfermedad requiere el desarrollo de nuevos métodos para el estudio de proteínas en los tejidos animales y órganos. Aquí se describe un método para la transferencia de genes mediada por adenoviral en túbulo o células endoteliales del riñón de rata. El riñón izquierdo de una rata anestesiado fue expuesto y los lúmenes de túbulos proximales superficiales o puntos manan vasculares fueron microinfused, generalmente por 20 min. El adenovirus de solución contenida de microinfusion con un cDNA construir de cualquier 1) Xenopus laevis actina depolymerizing factor/cofilin [XAC; proteína wt-verde fluorescente (GFP)], 2) actina-GFP o GFP 3). Sudán negro castor oil, inyectada en túbulos cercanos, permitió localizar las estructuras microinfused para visualización posterior. Dos días más tarde, la rata fue anestesiada y los riñones se fijaron para tisular o el riñón izquierdo se observó en vivo usando microscopia de dos fotones. Expresión de proteínas GFP y quimérica GFP se vio claramente en las células epiteliales de los túbulos proximales inyectados y las proteínas expresadas fueron localizadas de manera similar a sus contrapartes endógeno expresados. Sólo una minoría de las células en las regiones expuestas de forma viral, sin embargo, expresó que estas proteínas. Las células endoteliales también expresan XAC-GFP después de inyección del cDNA virus construir en puntos manan vasculares. Una ventaja del túbulo proximal y enfoques de micropunción vascular es que solamente las diminutas cantidades de virus se requieren para alcanzar la expresión de la proteína in vivo. Este enfoque micropunción de transferencia de genes de la construcción de cDNA del virus y la microscopia intravital de dos fotones debe aplicarse para el estudio del comportamiento de cualquier proteína fluorescente etiquetado en la promesa de riñón y espectáculos en el estudio de la Fisiopatología y fisiología renal.
Microscopia Intravital Cuantitativa Mediante Un Concepto De Polaridad Generalizado Para Estudios De Riñón American Journal of Physiology. Cell Physiology. Nov, 2005 | Pubmed ID: 16033906	En este artículo, describimos una técnica de microscopia intravital de dos fotones radiométrica para el estudio de la permeabilidad glomerular y diferencias en la reabsorción de células del túbulo proximal. Este enfoque cuantitativo se basa en el concepto de polaridad generalizado (GP), en el que la diferencia de intensidad entre dos moléculas fluorescentes se normaliza la intensidad total producido por los dos tintes. Después de una inyección intravenosa inicial de una mezcla de 3, 40 y 70-kDa fluorescencia con la etiqueta dextranos en vivo ratas Wistar-Munich-Frömter (MWF), fuimos capaces de monitorear los cambios en los valores GP entre cualquier dos colorantes dentro de regiones locales del riñón, incluyendo el glomérulo, cápsula de Bowman del, lúmenes del túbulo proximal y células del túbulo proximal y los vasos capilares. Hemos sido capaces de cuantificar las acumulaciones de dextranos diferentes en el espacio de Bowman y tubulares lúmenes, así como reabsorción de células tubulares proximales en momentos diferentes en la misma rata. Se encontró que para las ratas de la MWF 6 a 8 semanas de edad que desarrollaron albuminuria espontánea, los dextranos de 40 y 70 kDa, con radios hidrodinámicas más grandes que la albúmina, se filtraron diferencialmente, pero ambos eran capaces de pasar la barrera de filtración glomerular y entrar en el espacio urinario de la cápsula de Bowman de en unos pocos segundos después de la infusión intravenosa. Usando el análisis de imágenes GP, encontramos que dextranos negativamente cargados de 40 y 70 kDa mejor fueron reabsorbidas por las células del túbulo proximal que el dextrano 40-kDa neutral cargada. Estos resultados demuestran el potencial del GP técnica para estudios cuantitativos de la filtración glomerular y reabsorción tubular de la proyección de imagen.
Flujo Sanguíneo Renal En La Sepsis: Un Tema Complejo Critical Care (London, England). Aug, 2005 | Pubmed ID: 16137373	La complejidad clínica de la sepsis y la variabilidad regional en el flujo sanguíneo renal presentan un desafío difícil para el médico o el investigador en la comprensión de la función y la importancia clínica de reducción del flujo sanguíneo en la fisiopatología de la insuficiencia renal aguda inducida por la sepsis. Entender el papel del flujo de la microvascularización regional y las interacciones entre el endotelio y glóbulos blancos en la administración local de oxígeno y sustratos es de vital importancia. Por lo tanto, medición del flujo sanguíneo renal total no podrá permitir un adecuado entendimiento del papel de la hemodinámica alterada en pacientes sépticos que desarrollan insuficiencia renal aguda.
Adenoviral Vectores Expresando Humano ENDOSTATINA-angiostatina Y Tie2 Soluble: Mejorada La Supresión De Los Efectos De Crecimiento Y Antiangiogénico De Tumor En Un Modelo De Tumor De La Próstata Molecular Therapy : the Journal of the American Society of Gene Therapy. Dec, 2005 | Pubmed ID: 16169279	La angiogénesis es esencial para el desarrollo de cáncer de próstata y metástasis. Terapia angiogénica dirigidos a tumor neovasculature, por lo tanto, representa un enfoque prometedor para el tratamiento de cáncer de próstata. Presumimos que entrega adenoviral mediada por una combinación de anti-angiogénico factores podrían tener una mayor respuesta antitumoral. Desarrollamos los vectores adenoviral Ad-hEndo-angio, expresión de una proteína de fusión angiostatina ENDOSTATINA humano único, quimérico y Ad-sTie2, expresando una forma soluble de endotelio específico receptor tirosina quinasa Tie2. Ensayos de angiogénesis Matrigel usando Ad-hEndo-angio revelaron una inhibición significativa de la formación de redes tubulares y brotes endoteliales compararon con Ad-sTie2. Estudios in vivo en un modelo de xenoinjerto de tumor de PC-3 bilateral tras intratumoral o la administración sistémica de Ad-hEndo-angio llevado a suprimir el crecimiento tumoral mayor comparado con Ad-sTie2. Un nuevo hallazgo es que un intratumoral, terapia de combinación que emplean la mitad de la dosis de Ad-hEndo-angio así como Ad-sTie2 condujo a una regresión completa de la inyección, así como el contralateral uninjected, tumor y prolonga la supervivencia libre de tumor en el 80% de los animales. Además, una modalidad de proyección de imagen de novela, en tiempo real, intravital fue utilizada para supervisar antiangiogénico respuestas después de la transferencia génica mediada por adenoviral. Estos resultados sugieren que un enfoque de terapia de gene antiangiogénico combinatoria Ad-hEndo-angio y Ad-sTie2 podría convertirse en una forma nueva de tratamiento para el cáncer localizado de próstata humano.
Cofilin Media Alteraciones De Actina ATP Celular Endotelial Inducida Por El Agotamiento American Journal of Physiology. Renal Physiology. Jun, 2006 | Pubmed ID: 16434575	Isquemia y sepsis conducen al daño de la célula endotelial, dando por resultado flujo microvascular comprometido en muchos órganos. Mucho queda por determinarse en relación con los acontecimientos estructurales intracelulares que conducen a la disfunción de las células endoteliales. Para investigar posibles mecanismos relacionados con el citoesqueleto de actina, agotamiento de ATP fue inducido en células endoteliales microvasculares (MS1) de páncreas de ratón. La proyección de imagen fluorescente y estudios bioquímicos demostraron un aumento rápido y progresivo en la F-actina junto con una disminución de G-actina en 60 min análisis de Microscopio Confocal demostrado agotamiento de ATP resultó en la destrucción de fibras de actina estrés y acumulación de agregados de la F-actina. Presumimos que estas alteraciones de actina fueron secundarios a la desfosforilación/activación del factor depolymerizing de actina (ADF) / cofilin proteínas. Cofilin, la isoforma predominante expresada en células MS1, fue rápidamente defosforilaciones/activado durante el agotamiento del ATP. Para investigar directamente el papel de la activación de cofilin en el citoesqueleto de actina durante la isquemia, MS1 células infectaron con adenovirus que contiene los cDNAs de tipo salvaje Xenopus laevis proteína fluorescente verde ADF/cofilin [XAC (wt)-GFP], GFP y las isoformas constitutivamente activas e inactivas XAC (S3A) - GFP y XAC (S3E) - GFP. El índice y el grado de destrucción cortical de la actina y la formación agregados de actina se incrementaron en ATP-agotado XAC (wt) - GFP - y XAC (S3A) - GFP - expresando las células, mientras que las fibras de actina creciente estrés fueron observadas en XAC (S3E) células que expresan - GFP-. Para investigar la vía de señalización aguas arriba de ADF/cofilin, LIM quinasa 1-GFP (LIMK1-GFP) se expresó en células MS1. Células que expresan la proteína GFP LIMK1 tenían niveles más altos de fosforilada ADF/cofilin, fibras de estrés y retrasar la destrucción del citoesqueleto de actina F durante el agotamiento del ATP. Estos resultados apoyan fuertemente la importancia de la regulación cofilin en alteraciones de citoesqueleto de actina celular endotelial inducida por la isquemia lleva a daño celular y disfunción microvascular.
Pérdida De La Fusión De Homotípicos Y Vacuola Proteína Clasificación O Vesícula De Golgi Proteína Retrógrada Tethering Complejos Se Traduce En Sensibilidad De La Gentamicina En La Levadura Saccharomyces Cerevisiae Antimicrobial Agents and Chemotherapy. Feb, 2006 | Pubmed ID: 16436714	Gentamicina sigue siendo un antibiótico principal contra infecciones por gramnegativos. Por desgracia, asociado nefro y ototoxicidad limitan su uso. Nuestros estudios mamíferos anteriores demostraron que gentamicina es traficada al retículo endoplasmático de una manera retrógrada y posteriormente liberada en el citosol. Para mejor diseccionar el mecanismo a través del cual gentamicina induce toxicidad, hemos decidido estudiar su toxicidad mediante la simple eucariotas Saccharomyces cerevisiae. Una pantalla reciente de la biblioteca de la canceladura de levadura identificado múltiples cepas sensibles a la gentamicina, muchos de los cuales participan en el tráfico intracelular. Nuestro enfoque fue evaluar la sensibilidad de la gentamicina en condiciones de crecimiento logarítmico. Mediante la cuantificación de inhibición del crecimiento en presencia de gentamicina, se determinó que varias de las cepas sensibles eran parte de la proteína retrógrada Golgi (GARP) y la proteína de fusión y vacuola de homotípicos clasificación complejos (saltos). La evaluación adicional de sus otros componentes demostró que la supresión de cualquier miembro GARP resultó en cepas gentamicina hipersensibles, mientras que la supresión de otros miembros de lúpulo resultó en menos sensibilidad de gentamicina. Otros genes cuya eliminación dio lugar a la hipersensibilidad de la gentamicina incluyen ZUO1, SAC1 y NHX1. Finalmente, utilizamos un conjugado de gentamicina de Texas Red para caracterizar la absorción de la gentamicina y localización en cepas sensibles a la gentamicina tanto - insensibles. Estos estudios eran constantes con nuestros estudios mamíferos, sugiriendo toxicidad de gentamicina en resultados de levadura de alteraciones a vías de tráfico intracelular. La identificación de genes cuya ausencia provoca gentamicina ayudarán a vías específicas y mecanismos que contribuyen a la gentamicina.
Incidencia Y Mortalidad De La Insuficiencia Renal Aguda En Los Beneficiarios De Medicare, De 1992 a 2001 Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Apr, 2006 | Pubmed ID: 16495381	Objetivo de este estudio fue determinar la incidencia y mortalidad de la insuficiencia renal aguda (IRA) en los beneficiarios de Medicare. Los datos fueron hospitalizados beneficiarios de Medicare (5.403.015 descargas) entre 1992 y 2001 de la muestra del 5% de reclamaciones de Medicare. De 1992 a 2001, la tasa de incidencia de ARF fue 23,8 casos por 1000 descargas, con tasas de aumento de aproximadamente el 11% por año. Edad avanzada, sexo masculino y raza negra fueron fuertemente asociados (P < 0.0001) con ira. La tasa de mortalidad general en el hospital fue 4,6% en las descargas sin ARF, 15,2% en descargas con ira codificado como el diagnóstico principal y 32.6% en descargas con ira como un diagnóstico secundario. Las tasas de mortalidad en el hospital fueron 32.9% en descargas con ira que requiere diálisis renal y del 27,5% en aquellos con ira que no requerían diálisis. Muerte dentro de 90 días después de hospitalización fue de 13,1% en las descargas sin ARF, 34,5% en descargas con ira codificado como principal diagnóstico y 48,6% en descargas con ira como un diagnóstico secundario. Descargas con ira eran más (P < 0.0001) probabilidad de tener cuidados intensivos y otra una disfunción orgánica aguda que sin ARF. Para descargas con y sin ARF, las tasas de muerte dentro de 90 días después de la admisión de hospital mostraron una tendencia descendente. En conclusión, ha aumentado la incidencia de ira en los beneficiarios de Medicare. Los de mayor edad, sexo masculino y raza negra son más propensos a tener ARF. Estos datos demuestran ARF que contribuye de manera importante a la morbilidad y mortalidad en pacientes hospitalizados.
Avances En La Proyección De Imagen Del Riñón Y Procesos Celulares Nephron. Experimental Nephrology. 2006 | Pubmed ID: 16543761
Un Congénere De Gentamicina No Nefrotóxico Que Conserva Eficacia Antimicrobiana Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Oct, 2006 | Pubmed ID: 16971659	Antibióticos aminoglucósidos, aunque de importancia clínica en el tratamiento de infecciones graves de Gram-negativos y un potencial agente terapéutico en la mejoría de las enfermedades que se caracterizan por mutaciones de parada prematuro, se asocian a una alta incidencia de insuficiencia renal aguda. Con el uso de técnicas HPLC, los cuatro componentes (congéneres) de gentamicina, el más comúnmente utilizado aminoglucósidos, fueron aislado y caracterizado. Se describe aquí es un congénere con citotoxicidad mínima en celda estudios en animales y cultura que conservan las propiedades bactericidas normales en forma multirresistente de Klebsiella pneumoniae y Bacillus subtilis. Además, en estudios con animales, este producto de la familia no inducir los cambios patológicos y funcionales que son característicos de nefrotoxicidad de gentamicina que es visto con el compuesto nativo. Finalmente, internalización de este componente no nefrotóxicos era inalterada, pero la distribución subcelular era diferente de gentamicina nativa o los otros tres congéneres citotóxicos. Estos estudios han identificado un componente de la mezcla de congéneres de gentamicina nativo que conserva sus propiedades bactericidas con mínima o ninguna aparente nefrotoxicidad.
Pharmacophotonics: Utilizando Los Microscopia Para Cuantificar La Entrega De La Droga Y El Tráfico Intracelular En El Riñón Advanced Drug Delivery Reviews. Sep, 2006 | Pubmed ID: 17064810	La reciente introducción de los microscopia juntada con avances en óptica, Ciencias de la computación y los fluoróforos disponible solía moléculas de etiqueta de interés han facultado a los investigadores a estudiar los eventos dinámicos dentro del riñón funcionando a nivel celular y subcelular. Esta técnica emergente, con mejor resolución espacial y temporal y sensibilidad, permite a los investigadores a seguir la captación específica de celular de moléculas grandes y pequeñas, determinar el modo de absorción celular, el tráfico intracelular y el metabolismo de la droga en órganos heterogéneos complejos tales como el riñón con el tiempo. Repetidas determinaciones sobre segundos a horas o días permiten múltiples observaciones dentro de los mismos animales, minimizando el uso de animales y variabilidad anteriores. Esto puede ser particularmente útil para los estudios preclínicos. Además, la posibilidad de obtener datos volumétricos (tridimensional) permite análisis cuantitativos 4D (tiempo). Finalmente, hasta tres fluoróforos se pueden visualizar al mismo tiempo teniendo en cuenta tres procesos diferentes o interactivos ser observado y resuelto.
Estudios En Tiempo Real De La Progresión De Infecciones Bacterianas Y Las Respuestas Inmediata Del Tejido En Animales Vivos Cellular Microbiology. Feb, 2007 | Pubmed ID: 16953802	Mediante la combinación de microscopia intravital de multifotón y genética bacteriana hemos desarrollado una técnica que permite la proyección de imagen en tiempo real de respuestas de tejido y proliferación bacterianas en un animal vivo. Control espacial y temporal del proceso de infección fue alcanzado por microinjecting GFP (+)-expresando uropatógenos Escherichia coli (UPEC) en los túbulos de los riñones exteriorizados en ratas vivos. GFP(+) se introdujo en la cepa clínica de la UPEC CFT073 como una fusión de genes cromosómicos solo copia. Dentro de las horas, colonización bacteriana fue acompañada por efectos marcados isquémico, perivascular fugas, pérdida de integridad tubular y reclutamiento localizada de células inmunes. La patofisiología fue alterada en respuesta a una cepa bacteriana isogénicas carecer la hemolisina exotoxina, revelando las funciones sutiles y temporales de los factores de virulencia bacteriana in vivo. Microdisección y extracción de RNA de la nefrona inyectada permitieron el análisis molecular de la expresión génica de procariotas y eucariotas. Las técnicas descritas aquí pueden aplicarse para estudiar la comunicación celular integrado por una variedad de patógenos bacterianos, asistir en el diseño de estrategias para combatir las infecciones bacterianas.
Determinación Rápida De La Función Renal De Filtración Utilizando Un óptico Radiométrica De Enfoque De La Imagen American Journal of Physiology. Renal Physiology. Jun, 2007 | Pubmed ID: 17311910	La tasa de filtración glomerular (GFR), que mide la cantidad de plasma que se filtra a través del riñón en un tiempo determinado, es un indicador esencial y clínicamente importante de la función renal. Presentamos una nueva técnica de medición radiométrica basada en microscopia intravital de fluorescencia que permite la evaluación rápida de la función renal en modelos de roedores. Mediante esta técnica, tasas de remoción de plasma de un marcador fluorescente de GFR pueden medirse en menos de 5 minutos después de una infusión de bolo de una mezcla de colorante fluorescente en el torrente sanguíneo. La cinética de la separación de plasma del marcador GFR mostraron valores consistentes cuando se mide en animales sanos en las localizaciones en el riñón y de la piel. Además, mediante el uso de esta técnica, hemos sido capaces de determinar rápidamente la función renal con modelos animales de insuficiencia renal aguda y con otros modelos animales donde se alteraron funciones de filtración del riñón. La cinética de la separación de plasma medido utilizando esta técnica correlacionados con cambios esperados en la función renal. Encontramos este enfoque radiométrica ofrece mayor precisión y velocidad para la cuantificación de la función renal en comparación con el enfoque utilizando sondas fluorescentes individuales, y la medición puede realizarse de forma no invasiva de la piel. Este enfoque también ofrece una alta sensibilidad para la determinación de la tasa de depuración del plasma de un compuesto fluorescente. Esta característica es importante cuantificar rápidamente pequeñas diferencias en la depuración plasmática al cambia la función del riñón.
Red De Lesión Renal Aguda: Informe De Una Iniciativa Para Mejorar Los Resultados En La Lesión Renal Aguda Critical Care (London, England). 2007 | Pubmed ID: 17331245	La lesión renal aguda (AKI) es un desorden complejo que actualmente hay una definición aceptada. Tener una norma uniforme para diagnosticar y clasificar AKI aumentaría nuestra capacidad para manejar a estos pacientes. Futura investigación clínica y traslacional en AKI requerirá redes de colaboración de investigadores de diversas disciplinas, difusión de información a través de publicaciones y conferencias conjuntas multidisciplinares y traducción mejorada de conocimiento de investigación pre-clínica. Describimos una iniciativa para desarrollar estándares uniformes para definir y clasificar AKI y establecer un foro para la interacción multidisciplinar mejorar la atención de pacientes con o en riesgo por AKI.
Proteína C Activada Mejora La Lesión Renal Aguda Inducida Por LPS Y Algo Renal INOS Y Angiotensina 2 American Journal of Physiology. Renal Physiology. Jul, 2007 | Pubmed ID: 17409278	La disfunción endotelial contribuye significativamente a la insuficiencia renal aguda (IRA) en enfermedades inflamatorias incluyendo shock séptico. Estudios anteriores han demostrado que la proteína activada C (APC) exhibe propiedades antiinflamatorias y modula la función endotelial. Por lo tanto, investigamos el efecto de APC en ARF en un modelo de rata de endotoxemia. Ratas sometidas a tratamiento de lipopolisacárido (LPS) exhibieron ARF según lo ilustrado por flujo capilar peritubular marcado reducida y concentraciones séricas mayores sangre urea nitrógeno (BUN). Usando microscopia intravital de dos fotones cuantitativa, observamos que en el tratamiento de la post-LPS de 3 h, rata APC (bolo de 0.1 mg/kg iv) mejoró significativamente flujo capilar peritubular [288 +/-15 microm/s (LPS) vs 734 + /-59 microm/s (LPS + APC), P = 0.0009, n = 6] y reduce la adherencia del leucocito (P = 0, 003) y balanceo (P = 0,01) en comparación con el grupo tratado con LPS. Experimentos adicionales demostraron que el tratamiento de la APC significativamente mejorado flujo sanguíneo renal y reduce los niveles BUN sérico comparado con tratamiento de post-LPS 24 h. El análisis bioquímico reveló niveles de mRNA APC o inducible del óxido nítrico sintasa (iNOS) y NO subproductos en el riñón. Además, APC modulado del sistema renina-angiotensina mediante la reducción de los niveles de expresión de mRNA de 1 de enzima convertidora de angiotensina (ACE1), angiotensinógeno y mayores niveles de mRNA de ACE2 en el riñón. Además, APC redujo significativamente los niveles de la ANG II en el riñón en comparación con el grupo tratado con LPS. Tomados en conjunto, estos datos sugieren que la APC puede suprimir ARF inducida por LPS modulando factores implicados en la inflamación vascular, incluyendo downregulation de iNOS renal y sistemas de ANG II. Además, los datos sugieren un papel terapéutico potencial de APC en el tratamiento de la ARF.
Cuantificación De Procesos Dinámicos De Riñón Utilizando Microscopía De Los Contributions to Nephrology. 2007 | Pubmed ID: 17464132	Los microscopia y avances en óptica, Ciencias de la computación y los fluoróforos etiquetado disponible ahora permiten que los investigadores a estudiar los acontecimientos dinámicos en el funcionamiento renal con resolución subcelular. Esta tecnología emergente, con mejor resolución espacial y temporal y sensibilidad, permite a los investigadores a seguir procesos heterogéneos complejos en órganos como el riñón. Determinaciones repetidas en el mismo animal están posibles minimizar la variabilidad de su uso y inter-animal. Además, la posibilidad de obtener datos volumétricos (3D) permite análisis cuantitativos de 4D (tiempo). Finalmente, el uso de fluoróforos hasta tres al mismo tiempo permite tres procesos diferentes o interactivos observar simultáneamente. Por lo tanto, este enfoque complementa técnicas moleculares, bioquímicas y farmacológicas existentes por el avance, análisis de datos e interpretación de los niveles subcelulares para moléculas sin el requisito para la fijación.
Mejorar Los Resultados De La Lesión Renal Aguda: Informe De Una Iniciativa American Journal of Kidney Diseases : the Official Journal of the National Kidney Foundation. Jul, 2007 | Pubmed ID: 17591518
Mejorar Los Resultados De La Lesión Renal Aguda Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Jul, 2007 | Pubmed ID: 17596636
Mejorar Los Resultados De La Lesión Renal Aguda: Informe De Una Iniciativa Nature Clinical Practice. Nephrology. Aug, 2007 | Pubmed ID: 17653122	La lesión renal aguda (AKI) es un desorden complejo que comprende varios factores etiológicos y que ocurre en múltiples escenarios. El trastorno tiene una variedad de manifestaciones clínicas que van desde la mínima elevación en el nivel de creatinina del suero a falta renal anuric. Describimos la formación de una red de colaboración multidisciplinar enfocada AKI. Esta red de lesión renal aguda tiene propuestos estándares uniformes para diagnosticar y clasificar AKI. Las propuestas de normas tendrá que ser validado en estudios futuros, un proceso que será facilitado por la red de lesiones renales agudos, que ofrece un foro que promueve la adquisición de conocimiento para mejorar los resultados del paciente.
Progresión De Infecciones Bacterianas Estudiadas En Tiempo Real--novela Perspectivas Proporcionados Por Microscopía Multifotón Cellular Microbiology. Oct, 2007 | Pubmed ID: 17662072	El Santo Grial de la biología de la infección es estudiar un patógeno dentro de su naturaleza infecciosa, el anfitrión de la vida. Avances en las técnicas de imagen in vivo han empezado a introducir la posibilidad de visualizar en tiempo real, la progresión de la infección dentro de un modelo de vida. En esta revisión detallan los avances actuales y conocimiento en microscopía multifotón y cómo puede relacionar el campo de las infecciones microbianas. Esta tecnología es una herramienta nueva y muy valiosa para la proyección de imagen in vivo, y con esta técnica es posible comenzar a estudiar varios microbios dentro de su naturaleza infecciosa - el anfitrión de la vida.
Mejorar Los Resultados De La Lesión Renal Aguda: Informe De Una Iniciativa Pediatric Nephrology (Berlin, Germany). Oct, 2007 | Pubmed ID: 17665221	La lesión renal aguda (AKI) es una entidad clínica caracterizada por una disminución aguda en la función renal, con manifestaciones que van desde la mínima elevación de la concentración de creatinina sérica, insuficiencia renal anuric. Teniendo en cuenta la adquisición de conocimiento e investigación en esta importante área requiere de la colaboración multidisciplinar, un grupo que representa a miembros de la iniciativa de calidad de diálisis aguda, Nefrología y sociedades de cuidados críticos ha establecido la red aguda de lesión renal (AKIN). La primera Conferencia de consenso de esta red se centró en definir los criterios de diagnósticos y estadificación por AKI. Cambios en los niveles de creatinina sérica y la salida de la orina se utilizan para definir y tres niveles de disfunción renal de la etapa. Estos criterios requieren evaluación y validación en estudios clínicos prospectivos y, quizás, modificaciones como marcadores más sensibles de la lesión renal se identifican. Otros temas que deben ser examinados son epidemiología global y resultado de AKI y desarrollo de estrategias para mejorar los resultados. Se reconoció el papel vital de conferencias multidisciplinarias para difundir el conocimiento y la aclaración de cuestiones en la práctica clínica.
Desarrollo De Un Programa De Investigación Clínica De La Lesión Renal Aguda Mediante Un Proceso De Delphi Modificado Internacional, Interdisciplinario, Three-step Clinical Journal of the American Society of Nephrology : CJASN. May, 2008 | Pubmed ID: 18216348	Aunque la lesión renal aguda es común y aumenta significativamente el riesgo para la unidad de cuidados intensivos y mortalidad hospitalaria, poco se sabe sobre su incidencia real o cómo puede prevenirse. Además, principales interrogantes quedan sobre el óptimo diagnóstico y tratamiento de pacientes con insuficiencia renal aguda. Se buscó una agenda de investigación internacional, basada en el consenso, priorizadas para guiar la investigación clínica y traslacional en la lesión renal aguda.
Penetración De La Tecnología: ¿desarrollo De Biomarcadores En La Lesión Renal Aguda--lo Que Podemos Anticipar? Nature Clinical Practice. Nephrology. Mar, 2008 | Pubmed ID: 18227821	Diagnóstico precoz ha sido el talón de Aquiles de la lesión renal aguda (AKI) que ha impedido la exitosa implementación de estrategias de tratamiento. Hasta la fecha, la intervención farmacológica ha sido en gran parte fracasado o ambiguos, y morbimortalidad asociada con AKI han permanecido inaceptablemente altas. A pesar de sus limitaciones bien conocidas, los biomarcadores más ampliamente utilizados para el diagnóstico precoz de AKI son creatinina del suero, nitrógeno ureico en sangre y orina de salida. Desarrollo de nuevos biomarcadores es imprescindible. Una variedad de métodos han sido empleados para descubrir nuevos biomarcadores de AKI, incluyendo anti-lípidos, matrices de gene, transcriptómica, proteómica y tecnologías de imagen. Los ensayos clínicos están realizando para establecer la validez de los biomarcadores descubiertos utilizando estas técnicas. Esta revisión resume la importancia de biomarcadores de AKI, desde su descubrimiento a la práctica clínica, desde la perspectiva actual y de qué esperar en el futuro. Se hacen grandes pasos adelante en derribar barreras importantes para la exitosa prevención y tratamiento de esta enfermedad devastadora.
Cuantificación De Endocitosis En Vivo Usando Microscopia Intravital De Dos Fotones Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2008 | Pubmed ID: 18369960	La reciente introducción de microscopía multifotón junto con los avances en la óptica, Ciencias de la computación, diseñador fluoróforos, etiquetado molecular y enfoques fisiológicos previamente desarrollados han habilitado los investigadores a estudiar cuantitativamente los eventos dinámicos de células específicas, como endocitosis, dentro de un órgano de funcionamiento con resolución subcelular. Este emergente campo de investigación, con resolución espacial y temporal superior y alta sensibilidad, permite a los investigadores rastrear moléculas y determinar su modo de absorción celular, el tráfico intracelular y el metabolismo de una manera específica de la célula en órganos heterogéneos complejos tales como el riñón con determinaciones repetidas posibles durante un periodo prolongado de tiempo. Este enfoque se ve reforzada por la capacidad de obtener y cuantificar datos volumétricos con un máximo de tres diferentes fluoróforos simultáneamente. Hemos utilizado este enfoque intravital para entender y cuantificar la captación celular de riñón túbulo proximal y distribución intracelular y el metabolismo de fluorescencia etiquetadas moléculas, incluyendo ácido fólico, gentamicina y el ácido ribonucleico interferente pequeño (siRNA). Limitaciones de esta técnica incluyen la penetración del tejido, que es el gran obstáculo para la utilización clínica exitosa de esta tecnología. Sin embargo, su uso en modelos preclínicos de animales ofrece nuevas perspectivas en los procesos fisiológicos y la fisiopatologia y tratamiento de procesos de la enfermedad.
Mediada Por La Infección Bacteriana De Señalización Mucosa Induce Isquemia Renal Local Como Una Defensa Contra La Sepsis Cellular Microbiology. Oct, 2008 | Pubmed ID: 18549455	Ascendente de infecciones del tracto urinario puede causar grandes daños en la estructura del riñón y la función. Hemos utilizado una serie de técnicas avanzadas incluyendo microscopía multifotón para investigar las primeras fases cruciales de uropatógenos Escherichia coli inducida por pielonefritis dentro de un animal vivo. Nuestros resultados revelan una respuesta vascular innata Sines infección mucosa, lo que permite el aislamiento y la erradicación del patógeno. La respuesta del huésped extremadamente rápida a la infección mucosa se destacó por la activación de una cascada de eventos dentro de 3-4 h. epitelial señalización producido un aumento en el consumo de O(2) celular y afectado flujo microvascular por coagulación, provocando isquemia localizada. Daño isquémico posterior afectado Fisiopatología con entrega en forma actina y descamación epitelial hacia paracelular movimiento bacteriano. Una membrana tubular denudada del sótano se muestra a obstaculizar la difusión inmediata de las bacterias, dando el tiempo de host para aislar la infección por coagulación. Supresión de coagulación por tratamiento con heparina había causado urosepsis fatal. Clínicamente, estos resultados pueden ser relevantes en la entrega de antibióticos en pacientes de pielonefritis y el uso de anticoagulantes en la sepsis.
Mejoras En El Diagnóstico De Insuficiencia Renal Aguda Saudi Journal of Kidney Diseases and Transplantation : an Official Publication of the Saudi Center for Organ Transplantation, Saudi Arabia. Jul, 2008 | Pubmed ID: 18580009	La lesión renal aguda (AKI) representa una amplia gama de condiciones clínicas heterogéneas con una tasa de mortalidad alta. A pesar de mejoras en nuestra comprensión de los procesos de enfermedad, mortalidad marginalmente ha mejorado y sigue siendo inaceptablemente alta. Una consecuencia adicional de AKI es la aceleración marcada de preexistente nefropatía crónica a insuficiencia renal. Una limitación importante en la mejora de los resultados de AKI ha sido la falta de normas comunes para el diagnóstico y la severidad de la estratificación. Creatinina sérica es un último marcador de disfunción del riñón y lesiones. En la actualidad, ninguna prueba comercial disponible ofrece diagnóstico, ni la capacidad para estratificar a los pacientes por la gravedad de la lesión, temprano en el curso de la enfermedad cuando la terapia puede ser beneficiosa. El grupo de iniciativa de calidad de diálisis aguda (ADQI) propuso un sistema de definición y clasificación estándar para el síndrome de insuficiencia renal aguda. Basado en datos que incluso pequeños cambios de resultado de creatinina del suero en el aumento de la mortalidad, la red aguda de lesión renal (AKIN) tiene criterios modificados recientemente propuestos. Ambos sistemas de puesta en escena destacan cambios en la producción de creatinina y orina de suero. Es también posible que un número de bio-marcadores en suero y orina desarrollado en estudios preclínicos y actualmente se está investigando y validado, permite el diagnóstico precoz de AKI.
¿Nefropatía De Contraste: Son Adecuados Para La Cuantificación Del Riesgo Renal a Largo Plazo De Las Medidas De Resultado a Corto Plazo? Nature Clinical Practice. Nephrology. Nov, 2008 | Pubmed ID: 18779854
Técnicas De Imagen En La Lesión Renal Aguda Nephron. Clinical Practice. 2008 | Pubmed ID: 18802368	Los microscopia, junto con avances en otras modalidades de imágenes, permite a los investigadores la oportunidad de estudiar eventos dinámicos dentro del funcionamiento del riñón. Estas tecnologías emergentes permiten a los investigadores a seguir procesos heterogéneos complejos en órganos como el riñón con mejor resolución espacial y temporal y sensibilidad. Además, la posibilidad de obtener datos volumétricos (tridimensional) permite análisis cuantitativos 4D (tiempo). Finalmente, uso de fluoróforos hasta tres al mismo tiempo de los microscopios permite tres procesos diferentes o interactivos observar simultáneamente. Por lo tanto, este enfoque complementa técnicas moleculares, bioquímicos, farmacológicos y radiológicas existentes por el avance, análisis de datos e interpretación de los niveles subcelulares para moléculas sin el requisito para la fijación. Su uso en la lesión renal aguda está en su infancia pero ofrece mucha promesa para resolver los complejos procesos interdependientes conocidos a insuficiencia orgánica y lesión de la célula. Además, los avances recientes en otras técnicas de imagen ofrecen potenciales herramientas de diagnóstico clínicas para el estudio de la lesión renal aguda en modelos animales y en pacientes.
Lesión Isquémica Al Riñón Induce Effacement Glomerular Podocito Y Disociación De Las Proteínas De Membrana De Hendidura Neph1 Y ZO-1 The Journal of Biological Chemistry. Dec, 2008 | Pubmed ID: 18922801	Lesión glomerular se caracteriza a menudo por el borrado de podocitos, pérdida de diafragmas de hendidura y proteinuria. Isquemia renal o la pérdida del flujo sanguíneo a los riñones ha sido asociada con lesión tubular y endotelial pero rara vez se ha demostrado para inducir Podocito daños e interrupción de la membrana de hendidura. En este estudio, hemos utilizado un modelo isquémico de rata in vivo para demostrar que la isquemia renal induce effacement Podocito con pérdida del diafragma de la raja y proteinuria. El análisis bioquímico de los glomérulos isquémicos muestra que la isquemia induce la pérdida rápida de la interacción entre la abertura diafragma junctional proteínas Neph1 y ZO-1. Para entender más el efecto de la isquemia en las interacciones moleculares entre proteínas del diafragma de hendidura, un modelo de cultura de célula fue empleado para estudiar el enlace entre Neph1 y ZO-1. En condiciones fisiológicas, Neph1 co-localized con ZO-1 en contactos célula-célula en podocitos humanos cultivados. Inducción de lesiones por agotamiento de ATP dio lugar a la pérdida rápida de Neph1 y ZO-1 y redistribución de Neph1 y ZO-1 proteínas de membrana de la célula al citoplasma. Recuperación resultó en mayor fosforilación de tirosina Neph1, restauración de Neph1 y ZO-1 y su localización en la membrana celular. Además, demostramos fosforilación de la tirosina de Neph1 mediada por resultados de Fyn en el enlace de Neph1 y ZO-1 aumentó significativamente, lo que sugiere un papel crítico para la fosforilación de la tirosina de Neph1 en reorganizar el complejo Neph1-ZO-1. Este estudio documenta que la isquemia renal induce cambios dinámicos en las interacciones moleculares entre proteínas del diafragma de la raja, proteinuria y daño del Podocito.
La Lesión Renal Aguda Aumenta Riesgo De ESRD Entre Ancianos Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Jan, 2009 | Pubmed ID: 19020007	Riesgo de ESRD entre pacientes ancianos con insuficiencia renal aguda (AKI) no ha sido estudiado en una muestra grande y representativa. Este estudio pretende determinar las tasas de incidencia y cocientes de riesgo para el desarrollo de ESRD en ancianos, con y sin enfermedad renal crónica (CKD), que tenía AKI. En el 2000 muestra aleatoria 5% de los beneficiarios de Medicare, condiciones clínicas fueron identificadas mediante reclamaciones de Medicare; Información de tratamiento de ESRD obtuvieron del registro ESRD durante 2 años de seguimiento. Nuestra cohorte de 233.803 pacientes fueron hospitalizados en el año 2000, fueron años > o = año 67 en la descarga, no tenía anterior ERT o AKI y fueron derecho a Medicare para > = 2 años antes del alta. En esta cohorte, 3,1% sobrevivió a la descarga con una diagnosis de AKI y 5,3 por 1000 había desarrollado ESRD. Entre los pacientes que recibieron tratamiento para ESRD, 25.2% tenía antecedentes de AKI. Después del ajuste por edad, género, raza, diabetes y la hipertensión, el cociente de riesgo para el desarrollo de ESRD era 41,2 (intervalo de confianza del 95% [IC] 34,6 a 49.1) para los pacientes con ERC en comparación con aquellos sin enfermedad del riñón, 13.0 y AKI (95% CI 10.6 a 16.0) para pacientes con AKI y sin anterior CKD y 8.4 (95% CI 7.4 a 9.6) para pacientes con nefropatías crónicas y sin AKI. Resumiendo, ancianos con AKI, particularmente aquellos con CKD previamente diagnosticado, corren un riesgo significativamente mayor de ESRD, sugiriendo que los episodios de AKI pueden acelerar la progresión de la enfermedad renal.
Absorción Tubular Deteriorada Explica Albuminuria En La Nefropatía Diabética Temprana Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Mar, 2009 | Pubmed ID: 19118149	Comprensión de la patogenesia de albuminuria en la nefropatía diabética es importante para mejorar los métodos de diagnóstico y tratamiento oportunos. En este estudio, nos había examinado si la albuminuria en diabetes resulta de filtración glomerular modificada o había alterado el proceso de albúmina filtrada por el túbulo proximal. Tipo 1 albuminuria diabética de ratas desarrolladas Wistar de Munich después de 12 semanas de la diabetes. Microscopia intravital de dos fotones reveló la permeabilidad glomerular similar en los animales diabéticos y control, evaluada mediante albúmina-Alexa568 y 69-kD FITC-dextrano; sin embargo, los animales diabéticos demostraron significativamente que menos filtrado fluorescente albúmina en células del túbulo proximal renal (PT) en comparación con los animales de control. También observamos aumento derivado de albúmina urinaria péptido excreción en animales diabéticos y había modulada de hiperglucemia esta peptideuria. En conclusión, en las primeras etapas de la nefropatía diabética, el PT desempeña un papel importante en el desarrollo de la albuminuria, que puede ser precedido por peptideuria.
Reorganización De F-actina Cytokine-inducida En Células Endoteliales Implica La Activación De RhoA American Journal of Physiology. Renal Physiology. Mar, 2009 | Pubmed ID: 19144696	La lesión renal isquémica aguda produce un aumento marcado en niveles de citoquinas locales y sistémicos. IL-1 alfa, IL-6 y TNF-alfa orquestaran varias reacciones inflamatorias que influyen en la permeabilidad endotelial alterando los accesorios de la célula a célula y célula a extracelulares de la matriz. Para explorar el papel de actina, proteínas reguladoras RhoA y cofilin en este proceso, las células endoteliales microvasculares (MS1) expusieron a citoquinas individuales o un cóctel de citoquinas. En cuestión de minutos, una redistribución marcada, time-dependent del citoesqueleto de actina se produjo con la formación de fibras de estrés basal de largas, F-actina. La concentración de la F-actina, normalizada a la coloración nuclear, aumentó significativamente en comparación con las células no tratadas (hasta un 20%, P < o = 0.05). Análisis de Western blot de lisados MS1 incubada con la citocina cóctel durante 4 horas mostraron un aumento de cofilin fosforilada/inactivo (hasta 25 +-15%, P < o = 0.05) y activación de RhoA (hasta 227 +/-aumento del 26%, P < o = 0. 05) en comparación con las células no tratadas. Disminuir los niveles de RhoA utilizando ARN interferente pequeño bloquea el efecto de citoquinas en la organización de fibra de estrés. Tratamiento con Y-27632, un inhibidor de la RhoA efectoras p160-roca, disminución de los niveles de cofilin fosforilada y reduce el estrés fibra fluorescencia en un 22%. En células tratadas con Y-27632 seguida por el tratamiento con la citocina cóctel, los niveles de estrés fibra eran similares a las células del control y fosforilación de cofilin fue 55% de los niveles de control. Tomados juntos, estos estudios muestran una estimulación de citoquinas de RhoA, que a su vez conduce a la fosforilación de cofilin y formación de fibras de estrés de actina basal numerosos. Estos resultados sugieren la señal de citoquinas a través de la vía de la Rho-ROCK, sino también a través de otra vía para afectar la dinámica de la actina.
Técnicas Para Estudiar La Función De La Nefrona: Microscopía E Imagen PflÃ¼gers Archiv : European Journal of Physiology. May, 2009 | Pubmed ID: 19145447	Recientes avances en óptica, Ciencias de la computación, fluoróforos y técnicas moleculares permiten a los investigadores la oportunidad de estudiar eventos dinámicos dentro del riñón funcione con resolución subcelular. Los investigadores ahora pueden usar microscopía de dos fotones seguir varios complejos procesos heterogéneos en órganos como el riñón con alta resolución espacial y temporal. Repetir las determinaciones con el tiempo dentro de los mismos animales son posibles y minimizar el uso de animales y la variabilidad interanimal. Además, la posibilidad de obtener datos volumétricos (3D) permite análisis cuantitativos de 4D (tiempo). Finalmente, uso de fluoróforos múltiples al mismo tiempo permite tres procesos diferentes o interactivos observar simultáneamente. Por lo tanto, este enfoque complementa técnicas moleculares, bioquímicas y farmacológicas existentes por el avance de datos in vivo análisis e interpretación de niveles subcelulares para moléculas sin el requisito para la fijación. Su uso en el riñón está en su infancia pero ofrece promete mucho para desentrañar los procesos fisiológicos y patofisiológicos interdependientes complejos conocidos a las enfermedades y la función de la célula.
Trombomodulina Soluble Protege Riñones Isquémicos Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Mar, 2009 | Pubmed ID: 19176699	Inflamación y alteración de la coagulación contribuyen a la patogenia de la lesión renal isquémica. Trombomodulina es un factor necesario en el camino de anticoagulantes proteína C y tiene propiedades anti-inflamatorias inherentes. Se estudió el efecto de trombomodulina soluble (sTM) en un modelo de hipoperfusión de la lesión renal isquémica. Para reducir marcadamente del flujo sanguíneo aorta infrarenal y presión arterial femoral, sujeta la aorta suprarenal de ratas, ellos ocluyendo el 90%, para 60 min lesión renal aguda Reversible (AKI) ocurrió a las 24 h en ratas sometidas a hipoperfusión. Análisis histológico a las 24 h reveló necrosis tubular aguda (NTA) y microscopia intravital de dos fotones mostró anormalidades del flujo en la microvasculatura y defectos de la permeabilidad endotelial. Tratamiento previo con rata sTM había reducido marcado-R-inducida de la disfunción renal y partituras de lesión tubular histológico. sTM también significativamente mejorado las tasas de flujo microvascular del eritrocito, redujo leucocitaria endotelial microvascular del balanceo y accesorio y minimiza la permeabilidad endotelial a dextranos fluorescencia infundido, evaluado por microscopia intravital de multifotón cuantitativa. Además, sTM había administrado 2 h después de la reperfusión protegidos frente a la disfunción renal inducida por la isquemia en 24 h y mejoría en la supervivencia. Mediante el uso de una variante de sTM, también determinamos que los efectos protectores de sTM eran independientes de su capacidad para generar activada de la proteína C. Estos datos sugieren que STM puede tener potencial terapéutico por AKI isquémica.
Allanar La Patogenia De La Insuficiencia Renal Aguda American Journal of Kidney Diseases : the Official Journal of the National Kidney Foundation. Apr, 2009 | Pubmed ID: 19324244
Iluminar La Función Mitocondrial Y Disfunción Tecnología Multifotón Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Jun, 2009 | Pubmed ID: 19470668
SiRNA Dirigido a P53 Atenúa La Lesión Renal Aguda Isquémica E Inducida Por Cisplatino Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Aug, 2009 | Pubmed ID: 19470675	Células del túbulo proximal (CCP), que son el sitio primario de la lesión renal asociada a isquemia o nefrotoxicidad, son el lugar de reabsorción del oligonucleótido dentro del riñón. Hemos explotado esta propiedad para probar la eficacia de siRNA dirigido a p53, una proteína clave en la vía apoptótica, para prevenir la lesión renal. Desnudo sintético siRNA a p53 había inyectado por vía intravenosa 4 h después de lesión isquémica máximo había protegido PTCs y función renal. PTCs fueron el sitio primario para la captación de siRNA en el riñón y el cuerpo. Después de la filtración glomerular, endocíticas absorción de Cy3 siRNA por PTCs fue rápida y extensa y redujo significativamente la isquemia inducida por p53 upregulation. La duración del efecto de siRNA en PTCs fue 24 a 48 h, determinado por los niveles de expresión de mRNA y proteína p53. Cy3 fluorescencia e hibridación in situ de siRNA corroboran un t(1/2) corto de siRNA. Disminuir el grado de renoprotection, en celulares p53 y atenuación de la apoptosis mediada por p53 por siRNA eran dependiente de la dosis y del tiempo. Análisis de la histología renal y apoptosis revelada mejoraron calificaciones de lesiones en ambas corticales y corticomedullary regiones. siRNA a p53 también fue eficaz en un modelo de la lesión renal inducida por cisplatino. Tomados en conjunto, estos datos indican que una entrega rápida de siRNA a células del túbulo proximal sigue la administración intravenosa. Targeting siRNA a p53 conduce a una atenuación de dose-dependent de Señalización apoptótica, sugiriendo posibles beneficios terapéuticos para isquémica y lesión del riñón nefrotóxicos.
Gestión De Conflictos De Intereses: El Camino Por Delante Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Sep, 2009 | Pubmed ID: 19713304
Política ASN En La Gestión De Conflictos De Intereses Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Sep, 2009 | Pubmed ID: 19713305
Activada De La Proteína C Y La Lesión Renal Aguda: Selective Targeting De PAR-1 Current Drug Targets. Dec, 2009 | Pubmed ID: 19715537	Proteína C es una proteasa de serina de plasma que cuando activada juega un papel central en la modulación de la función del endotelio vascular y su interfaz con el sistema inmune innato. Proteína activada C (APC) tiene un doble mecanismo de acción mediante la inhibición de la regeneración de generación de trombina y como un agonista del receptor 1 de proteasa activa (PAR-1). A través de interacciones de cofactor diferentes, este mecanismo dual de antitrombóticos y los resultados de la actividad citoprotectora en la capacidad de APC para modular la disfunción endotelial por bloqueo de señalización de citoquinas, expresión de adherencia de la célula funcional, permeabilidad vascular, apoptosis y migración de leucocitos y la adherencia de la modulación. Deficiencia de proteína C, que ocurre durante la activación inflamatoria sistémica, se asocia altamente a la disfunción del órgano. APC ha demostrado eficacia en una serie de modelos preclínicos de trombosis e isquemia, y el recombinante humano APC drotrecogin alfa (activado), reduce la mortalidad en pacientes con sepsis grave riesgo. La capacidad de APC para suprimir las vías proinflamatorias y mejorar la supervivencia celular sugiere que APC desempeña un papel clave en la respuesta adaptativa para proteger la pared del vaso de insulto y para realzar endotelial, celular y la supervivencia del órgano. El objetivo de esta revisión será resumir los datos emergentes, lo que sugiere el potencial beneficio terapéutico de APC y miembros relacionados de la vía en la prevención y el tratamiento de la lesión renal aguda.
Seguimiento Temprano De Necrosis Tubular Aguda En El Riñón De Rata Por 23Na-MRI American Journal of Physiology. Renal Physiology. Nov, 2009 | Pubmed ID: 19726545	Reabsorción de agua y otras moléculas depende del corticomedullary el gradiente de la concentración de sodio en el riñón. Durante el curso temprano de la necrosis tubular aguda (ATN), este gradiente se altera. Por lo tanto, 23Na resonancia magnética (MRI) fue utilizado para estudiar las alteraciones en la distribución de sodio renal en el riñón de la rata durante la isquemia y reperfusión (IR) lesiones, que induce la ATN. Isquemia en el imán fue inducida por 0 (testigo), 10, 20, 30 o 50 min en ratas Wistar. 23Na imágenes fueron recogidos cada 10 minutos durante la instantánea, isquemia y periodos de reperfusión 60min. T1 y T2 tiempos de relajación se midieron por 23Na MRI y -MRS en un grupo separado de animales durante la isquemia y reperfusión para la corrección de la concentración de sodio de relacionadas con la relajación del tejido (TSC). Se observó una disminución marcada en la médula y la corteza 23Na-MRI intensidad (SI) durante la evolución temprana de ATN causada por lesión de IR, con la función de la reabsorción de sodio del riñón irreversible daño después de 50 minutos de isquemia. Características de tiempo de relajación de sodio fueron similares en la médula y la corteza del riñón normal, pero disminuyeron significativamente con ir Los cambios en los tiempos de relajación en ambos compartimientos eran idénticos; así la relación de la médula a la corteza sodio SI representa la proporción TSC de ambos compartimientos. La magnitud del daño de IR con la examinación histológica correlacionados con los datos del 23Na-MRI. 23Na-MRI tiene un gran potencial para el diagnóstico no invasivo, clínica de ATN en evolución en la configuración de insuficiencia renal aguda y en ATN de diferenciar de otras causas de insuficiencia renal donde se mantiene la función tubular.
Multifotón Técnicas En La Lesión Renal Aguda De Imagen Contributions to Nephrology. 2010 | Pubmed ID: 20427955	Microscopía multifotón permite a los investigadores la oportunidad de estudiar eventos dinámicos durante la lesión renal aguda y en el funcionamiento renal. Esto permite a los investigadores a seguir procesos complejos multifactoriales en el riñón con mejor resolución espacial y temporal y sensibilidad. Además, la posibilidad de obtener datos volumétricos (tridimensional) permite análisis cuantitativos 4D (tiempo). Finalmente, uso de fluoróforos hasta tres al mismo tiempo en microscopía multifotón permite tres procesos diferentes o interactivos observar simultáneamente. Por lo tanto, este enfoque complementa técnicas moleculares, bioquímicos y farmacológicos existentes por lo que permite la visualización directa a nivel celular y subcelular de moléculas sin el requisito para la fijación. Su uso en la lesión renal aguda está en su infancia pero ofrece mucha promesa para resolver los complejos procesos interdependientes conocidos a insuficiencia orgánica y lesión de la célula.
Rápido Diagnóstico Y Cuantificación De La Lesión Renal Aguda Con Fluorescente Relación Métrica Determinación De La Tasa De Filtración Glomerular En La Rata American Journal of Physiology. Renal Physiology. Nov, 2010 | Pubmed ID: 20685826	El rápido diagnóstico y cuantificación de la severidad de lesión (AKI) renal aguda permanecen altas prioridades clínicas. Mediante la combinación de la proyección de imagen de dos fotones riñón intravital radiométrica fluorescente y el modelo de dos compartimientos farmacocinética, demostramos que la cuantificación rápida de la tasa de filtración glomerular (GFR) puede lograrse en fisiológica y modelos de riñón de rata AKI. Usando una infusión de bolo de una mezcla de FITC-inulina y un dextrano de Texas Red 500-kDa, una gama completa de valores de la tasa de filtración glomerular, que van desde 0.17 a 1.12 ml·min(-1) ·la g(-1), se obtuvo. Los valores de FG así determinan correlacionaron bien con los valores obtenidos por el método de separación de infusión estándar de 2 h de inulina con coeficiente de correlación de Pearson de 0,85. Además, deterioro postischemia se estudió mediante la medición de la TFG usando el acercamiento de dos fotones durante 24 h, siguiendo un modelo de abrazadera de isquemia bilateral de 45 minutos. La tasa de filtración glomerular se encontró a declinar drásticamente durante la 4 h inicial seguido por un nadir con cartelito de levantamiento durante el período de 24 horas posterior. Además, un marcado con FITC 5-kDa dextrano fue identificado como teniendo filtración casi idénticas características como FITC-inulina, pero había aumentado notablemente la intensidad fluorescente, minimizando la cantidad necesaria para los estudios individuales. La técnica informada permite determinaciones de GFR muy rápidas, dentro de 10-15 minutos, basado en la depuración plasmática de una sonda de fluorescencia libremente filtrada, en lugar de una separación de molécula de reportero prolongado espacio intersticial de un compartimiento empleada por otras tecnologías.
Evaluación De La Eficacia De La Protección Renal De SiRNA Para P53 En Modelos De Trasplante De Riñón De Rata Experimental En Microscopia Intravital De Dos Fotones Cell Transplantation. 2010 | Pubmed ID: 20719069	Isquemia-reperfusión renal (I / R) lesión, que es inevitable en el trasplante renal, con frecuencia influye tanto supervivencia de aloinjerto corto y largo plazo. A pesar de décadas de investigaciones clínicas y de laboratorio y el advenimiento de la terapia de reemplazo renal, la tasa de mortalidad debido a una lesión tubular aguda ha cambiado poco. / R-induced daños en el ADN da lugar a activación de p53 en células del túbulo proximal (PTC), llevando a su apoptosis. Por lo tanto, examinamos el efecto terapéutico de inhibición temporal de p53 en dos modelos de trasplante renal de rata en aspectos estructurales y funcionales de lesiones usando microscopia intravital de dos fotones. Nephrectomized Ratas Sprague-Dawley recibió trasplante de riñón izquierdo syngeneic después de 40 minutos de isquemia caliente intencional o después de 5 h combinada fría y 30 min isquemia caliente del injerto. SiRNA administrado por vía intravenosa para p53 (siP53) se ha demostrado previamente para ser filtrada y reabsorbida por células epiteliales tubulares proximales tras la lesión de isquemia/reperfusión caliente en un modelo de abrazadera renal. Aquí, demostramos que también fue adoptado por PTC tras 5 horas de isquemia fría. En comparación con los receptores tratados con solución salina, el tratamiento con siP53 dio lugar a la conservación de la función renal y suprimió significativamente el aumento / R-inducida en la creatinina sérica en ambos modelos de trasplante de riñón. Microscopia intravital de dos fotones reveló que sip53 significativamente mejorados daños estructurales y funcionales en el riñón por cuantificación de formación del molde tubular y el número de apoptótica y necróticas células tubulares y evaluación del flujo de sangre. En conclusión, la administración sistémica de siRNA para p53 es un prometedor nuevo enfoque para proteger los riñones de I / lesiones de la R en el trasplante renal.
Lecciones De Haití En La Relevación Del Desastre Clinical Journal of the American Society of Nephrology : CJASN. Nov, 2010 | Pubmed ID: 20947792
¿Sin Embargo Otro Avance En La Albuminuria De Comprensión? Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Dec, 2010 | Pubmed ID: 21051742
El Antibiótico Gentamicina Inhibe Funciones Tráfico Específico De La Proteína De La Familia De GTPasas De Arf1/2 Antimicrobial Agents and Chemotherapy. Jan, 2011 | Pubmed ID: 20956596	La gentamicina es un antibiótico altamente eficaz contra bacterias Gram-negativas. Sin embargo, su utilidad en el tratamiento de las infecciones se ve comprometida por su toxicidad renal mal entendida. También se observan efectos tóxicos en una variedad de otros organismos. Mientras que la levadura Saccharomyces cerevisiae es relativamente insensible a la gentamicina, las mutaciones en cualquiera de los genes ∼20 causan una dramática disminución en la resistencia. Muchos de estos genes codifican proteínas importantes para la terminación de la traducción o complejos específicos de tráfico de proteínas. Inspección posterior de las interacciones físicas y genéticas de los restantes mutantes sensibles a la gentamicina reveló una red centrada en la quitina sintasa y la Arf GTPases. El análisis adicional ha demostrado que algunos arf1 condicional y alelos gea1 hacen que las células hipersensibles a la gentamicina en condiciones permisivas. Estos resultados sugieren que una consecuencia de la exposición de la gentamicina es interrupción del tráfico de proteínas dependientes de la Arf.
Proliferación Endotelial Deteriorada Y Mesenquimal Transición Contribuyen a Vacuo Vascular Después De La Lesión Renal Aguda American Journal of Physiology. Renal Physiology. Mar, 2011 | Pubmed ID: 21123492	La lesión renal aguda induce la pérdida de los microvasos renales, pero el destino de las células endoteliales y el mecanismo del factor de crecimiento endotelial vascular potencial (VEGF)-protección mediada es desconocido. Proliferación celular acumulativo se analizó en el riñón de ratas Sprague-Dawley después de isquemia-reperfusión (I / R) lesiones repetitiva administración de BrdU (dos veces al día) y colocalización en células endoteliales con CD31 o cablin. Proliferación de células endoteliales eran imperceptibles hasta 2 días después me / R y representaron sólo ∼1% de células BrdU-positivas después de 7 días. VEGF-121 conservado vascular pérdida después de la I / R pero no afectan la proliferación de células endoteliales, de perivascular o células tubulares. Estados de transición mesenquimales endotelial se identificaron al localizar marcadores endoteliales (CD31, cablin o infundido la lectina de tomate) con el marcador de fibroblastos S100A4. Estas estructuras fueron prominentes dentro de las 6 h y sostenido durante al menos 7 días después me / r. Un empate-2-cre transgénico se cruzó con un amarillo proteína fluorescente (YFP) reportero ratón fue utilizado para rastrear el destino de las células endoteliales y demostrado interstititial expansión de células YFP-positivas colocalizing con actina S100A4 y del músculo liso, después me / r. La expansión intersticial de células YFP fue atenuada por VEGF-121. Proyección de imagen multifotón de ratones transgénicos reveló la alteración de las células vasculares YFP-positivos asociados con los vasos sanguíneos caracterizados por perfusión limitada in vivo. Tomados en conjunto, estos datos indican que abandono vascular post-AKI resulta de transición fenotípica endotelial combinado con una deteriorada capacidad regenerativa, que puede contribuir a la enfermedad renal crónica progresiva.
Lesión Renal Aguda En Adultos Mayores Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Jan, 2011 | Pubmed ID: 21209252	Envejecimiento riñones sufren cambios estructurales y funcionales que hay capacidad de disminuir y aumentan la susceptibilidad a la lesión aguda. La lesión renal aguda se asocia con la duración y el lugar de hospitalización, riesgo de mortalidad, la progresión a la enfermedad renal crónica y el estado funcional en la vida cotidiana. Definición y diagnóstico de la lesión renal aguda se basan en cambios en la creatinina, que es un marcador inadecuado y puede identificar a los pacientes cuando ya es demasiado tarde. Está aumentando la incidencia de insuficiencia renal aguda y aumenta con el avance de la edad, sin embargo, los estudios clínicos ha sido lento para abordar cuestiones geriátricas o la heterogeneidad en las etiologías, los resultados o pacientes preferencias entre los ancianos. Aquí examinamos algunos de la literatura actual, identificar las brechas de conocimiento y sugerir posibles preguntas de investigación con respecto a la lesión renal aguda en adultos mayores. Responder a estas preguntas, facilitará la integración de temas geriátricos en futuros estudios mecanísticos y clínicos que afectan la administración y cuidado de la lesión renal aguda.
Fisiopatología De La Insuficiencia Renal Aguda Isquémica Nature Reviews. Nephrology. Apr, 2011 | Pubmed ID: 21364518	La lesión renal aguda (AKI) como consecuencia de la isquemia es un acontecimiento clínico común hacia inaceptablemente alta morbilidad y mortalidad, desarrollo de la nefropatía crónica (NC) y transición de CKD preexistente a insuficiencia renal. Los datos indican una estrecha interacción entre los muchos tipos celulares implicados en la patofisiología de AKI isquémico, que tiene importantes implicaciones para el tratamiento de esta condición. Inflamación parece ser el factor común que une los distintos tipos de células involucrados en este proceso. En esta revisión se describen las interacciones entre estas células y su respuesta a la lesión después de isquemia. Estos eventos se relaciona con pacientes que tienen un alto riesgo de AKI y resaltar las características que podrían predisponer a estos pacientes a lesiones. También discutimos cómo terapia dirigida a tipos específicos de la célula puede minimizar la lesión inicial y posterior después de isquemia, limitando el alcance de los cambios agudos y, con suerte, a largo plazo alteraciones estructurales y funcionales del riñón.
Uropathogenic Escherichia Coli P Y Fimbrias Tipo 1 Actúan En Sinergia En Un Host De Vida Para Facilitar La Colonización Renal Lleva a La Obstrucción De La Nefrona PLoS Pathogens. Feb, 2011 | Pubmed ID: 21383970	La progresión de una infección bacteriana natural es un proceso dinámico, influenciado por las características fisiológicas de los órganos de destino. Novedades en proyección de imagen de animal vivo permiten el estudio de la interacción dinámica de hosts de microbio en tiempo real mientras que progresa la infección dentro de un órgano de un host directo. Aquí utilizamos multifotón basadas en microscopia animal vivo imaging, combinado con procedimientos quirúrgicos avanzados, para investigar el papel de uropatógenos Escherichia coli (UPEC) accesorio orgánulos P y fimbrias tipo 1 en infección bacteriana renal. GFP + expresando la variante de la cepa de la UPEC CFT073 y genéticamente definidos isogénicas mutantes fueron microinfused en el glomérulo de rata o túbulos proximales. Dentro de 2 h bacterias colonizadas por el epitelio escamoso plano de la cápsula de Bowman de a pesar de estar expuesto al filtrado primario. Cuando enfrenta el reto del flujo de filtrado en el túbulo proximal, las fimbrias P y tipo 1 parecen actuar en sinergia para promover la colonización. Las fimbrias P mejorado colonización temprana del epitelio tubular, mientras que las fimbrias tipo 1 mediada por colonización del centro del túbulo mediante un mecanismo que se cree que involucra el enlace inter-bacterial y formación de biopelículas. La heterogénea comunidad bacteriana dentro de los túbulos afectados posteriormente filtración renal lleva a la obstrucción total de la nefrona dentro de 8 h. Nuestros resultados revelan la importancia de factores fisiológicos como filtración en determinar los patrones de colonización bacteriana y demuestran que la resolución espacial de un nicho infecciosa puede ser tan pequeña como el centro o la periferia de un lumen del túbulo. Además, nuestros datos muestran lesiones fisiológicas como secundarias tales como obstrucción de contribuir a la fisiopatología completa de pielonefritis.
¿La Fuerza De Trabajo Futuro De Nefrología: Habrá Uno? Clinical Journal of the American Society of Nephrology : CJASN. Jun, 2011 | Pubmed ID: 21551020	El interés en nefrología como una carrera está disminuyendo y ha declinado durante casi una década. Entre 2002 y 2009, todos subespecialidades de medicina interna excepto Medicina geriátrica aumentaron el número de posiciones de becas disponibles. Sin embargo, sólo dos subespecialidades atrajeron menos graduados médicos de Estados Unidos (USMGs) en 2009 que en 2002: Medicina Geriátrica y Nefrología. Esta caída se produjo en un momento cuando está aumentando la demanda de nefrólogos y cuando la especialidad tiene un tiempo más difícil aprovechar la contribución substancial de graduados médicos internacionales (diplomados). USMGs de hoy poseen carrera fundamentalmente diferente y los objetivos personales de sus maestros y mentores. Informe de estudiantes de medicina reciben una exposición mínima a Nefrología en rotaciones clínicas, y perciben que la especialidad es demasiado complejo, sin interés y carece de oportunidad profesional. Mientras tanto, los datos demográficos de enfermedad renal en los Estados Unidos, así como novedades de política nacional de salud, indican una creciente necesidad de nefrólogos. Esfuerzos para mejorar la continuidad educativa en nefrología y tutoría son esenciales para restaurar interés en nefrología para USMGs, manteniendo su atractivo entre los diplomados y el desarrollo de una mano de obra suficiente para satisfacer la futura demanda de cuidado renal.
Implicaciones De Una Escasez De Mano De Obra De Nefrología Para El Cuidado De Pacientes De Diálisis Seminars in Dialysis. May-Jun, 2011 | Pubmed ID: 21682769	Disminución dramática reciente graduado médico de Estados Unidos y el interés internacional médico graduado en nefrología como una carrera sugieren que la prestación de la atención a la población vulnerable de los pacientes de diálisis en los Estados Unidos podría afectar negativamente en los próximos años. Los cambios demográficos y cambios en la política nacional de salud son también exacerbar problemas para proporcionar una adecuada atención a pacientes en diálisis o en riesgo de insuficiencia renal. Formación de un número adecuado de nefrólogos es imprescindible y requerirá tanto reconfiguración enfoques actuales de la formación y ciertos aspectos de la atención, así como destacar puntos brillantes de innovación dentro del campo de la nefrología.
Proyección De Imagen De Dos Fotones En El Tórax Murino Sin Artefacto De Movimiento Respiratorios Y Cardíacos The American Journal of Pathology. Jul, 2011 | Pubmed ID: 21703395	Microscopia intravital ha sido reconocida por su capacidad para realizar mediciones fisiológicas a nivel celular y subcelular manteniendo el microambiente natural complejo. Microscopía de dos fotones (TPM), con longitudes de onda más largas que la excitación de fotones individuales, ha ampliado intravital imágenes más profundo en los tejidos, con mínima fototoxicidad. Sin embargo, debido a una tasa de adquisición relativamente lento, TPM es especialmente sensible a artefacto de movimiento, que presenta un desafío cuando los tejidos sufrir movimientos respiratorios y cardíacos de la proyección de imagen. Órganos toracoabdominal que no exteriorizados o inmovilizados durante TPM generalmente han requerido el uso de preparaciones aisladas, bomba de perfusión. Sin embargo, este enfoque conlleva una alteración significativa de la fisiología normal, tales como la falta de insumos neuronales, aumentó la resistencia vascular y activación de leucocitos. Adaptamos las técnicas de microscopia intravital que permitió TPM de órganos que se mantienen dentro de la cavidad toracoabdominal de vivir, respirar las ratas o ratones. Se obtuvieron imágenes de TPM intravital extendida del pulmón intacto, podría decirse que el órgano más susceptible al movimiento respiratorio y cardíaco. TPM intravital detectado el desarrollo de activación endotelial microvascular del pulmón que se manifiesta como la extravasación de plasma y adhesión creciente del leucocito en respuesta a inductores de estrés oxidativo PMA o extracto soluble del humo del cigarrillo. La microvasculatura pulmonar y alvéolos en el animal intacto fueron fotografiadas con detalle comparable y fidelidad a los animales de bomba de perfusión, abriendo la posibilidad para TPM de otros órganos Toracoabdominales bajo condiciones fisiológicas y fisiopatológicas.
Circulación Micro RNAs En La Lesión Renal Aguda: Primeras Observaciones Clinical Journal of the American Society of Nephrology : CJASN. Jul, 2011 | Pubmed ID: 21734080
La Proyección De Imagen Específica De La Enfermedad Renal: Introducción Seminars in Nephrology. May, 2011 | Pubmed ID: 21784271
Disfunción Endotelial Del Riñón: Isquemia, Las Infecciones Localizadas Y Sepsis Contributions to Nephrology. 2011 | Pubmed ID: 21921615	Las células endoteliales juegan un papel clave en la iniciación y propagación de la respuesta inflamatoria en la isquemia, infecciones y sepsis. Situado en una posición clave entre las células epiteliales y glóbulos blancos (WBC), interactúan y responden a las señales de ambos tipos de células. Las células endoteliales microvasculares en el riñón median coagulación, accesorio de la WBC, migración de la WBC en el intersticio, las tasas de flujo microvascular y permeabilidad. Potencial bajo de la regeneración y transformación endotelial mesenquimal llevan a la fibrosis y posterior abandono microvascular. Este último evento es en gran parte responsable de una reducción crónica de perfusión regional, posterior mayor vulnerabilidad a la lesión renal aguda recurrente y la aceleración de la progresión de la enfermedad renal crónica a la enfermedad renal de la fase final. La disfunción endotelial glomerular puede llevar a preglomerular la derivación del flujo sanguíneo, permitiendo el flujo de sangre renal a permanecer cerca de normal mientras dando por resultado una reducción en la tasa de filtración glomerular.
Un Analizador De Fluorescencia Radiométrica De Fibra óptica Portátil Proporciona Rápida Determinación De Punto De Atención De La Tasa De Filtración Glomerular En Animales Grandes Kidney International. Jan, 2012 | Pubmed ID: 21881552	Medición de la tasa de filtración glomerular (GFR) es el estándar de oro para una evaluación precisa de la función renal. Una determinación rápida, point-of-care del GFR puede proporcionar ventajas en el ámbito clínico sobre ensayos disponibles en la actualidad. Aquí demostramos una prueba del principio para este enfoque en un cerdo y perros, dos especies que se aproximan a los accesos vasculares y los resultados de FG espera que en los seres humanos. En ambos modelos animales, una fibra óptica de submilimétricas que entrega la luz de excitación y recoge las emisiones fluorescentes fue insertada en una vena periférica (perro) o acceso venoso central (cerdo) por medio de catéteres intravenosos comerciales. Una mezcla de quimeras fluorescentes de un pequeño reportero libremente filtrable y marcador de volumen de plasma no filtrables grande fueron infundidas como un bolo, excitado por diodos emisores de luz, y las señales en vivo detectada y cuantificada por los tubos de fotomultiplicador en ambas especies en menos de 60 min concurrente estandarizado 6 h iohexol espacios de riñón de plasma validaron la exactitud de nuestros resultados para ambos fisiológica y un entorno de enfermedad renal crónica. Por lo tanto, nuestra técnica radiométrica permite tanto medición de volumen vascular del plasma y altamente precisas determinaciones de GFR en tiempo real, permitiendo la toma de decisión clínica en tiempo real.

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