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Timestamp: 2019-05-26 01:39:03+00:00

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RAI | Servicios | Microscopía
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Servicios de la Unidad de Microscopía del Instituto Nacional de Cancerología
Descripción de los equipos y aplicaciones
Descripción: Microscopio vertical equipado con lámpara para epifluorescencia X-Cite y cámara digital monocromática AxioCam HRm.
Técnicas y aplicaciones: Inmunofluorescencia, inmunohistoquímica (campo claro), contraste de fases, marcaje fluorescente mediante transfección de proteínas quiméricas fluorescentes o FISH.
Descripción: Microscopio vertical con movimiento motorizado en Z.
Técnicas y aplicaciones: Inmunofluorescencia, inmunohistoquímica (campo claro), contraste de fases, campo obscuro, marcaje fluorescente mediante transfección de proteínas quiméricas fluorescentes o FISH.
Descripción: Microscopio invertido con platina motorizada, revolver de filtros y de objetivos motorizados. El microscopio está equipado con lámpara para epifluorescencia X-Cite y cámara digital a color AxioCam MRc5. Cuenta además con sistema de incubación de células vivas: atmósfera controlada de CO2, regulador de temperatura y humedad controladas.
Técnicas y aplicaciones: Inmunofluorescencia, inmunohistoquímica (campo claro), contraste de fases, marcaje fluorescente mediante transfección de proteínas fluorescentes o FISH. Microscopía de células vivas sin marcaje, usando contraste de fase, o bien marcadas con fluorescencia mediante de transfección de proteínas quiméricas fluorescentes.
Descripción: Microscopio vertical AxioImager. Z2, con platina motorizada y revolver de objetivos y filtros motorizados. Equipado con lámpara X-Cite para epifluorescencia y cámara digital CoolCube1 (Metasystems). Cuenta además con un brazo robótico para el montaje de hasta 32 soportes con 5 laminillas cada uno.
Técnicas y aplicaciones: Sistema automatizado de detección y captura de imagen de células en mitosis y de cromosomas mitóticos que han sufrido translocaciones específicas. Las muestras se pueden preparar por fijación y tinción con eosina y azul de metileno. Las translocaciones se detectan por epifluorescencia, mediante técnica de FISH, actualmente se está detectando la T (9/22) en leucemia mieloide crónica.
Descripción: Microscopio estereoscópico, equipado con revolver de objetivos Plan S 1.0X FWD 81mm, PlanApo S 1.5X FWD 30 mm y Plan Apo S 0.63X FWD 81 mm.
Técnicas y aplicaciones: Para analizar y capturar las muestras en tres dimensiones. Las aplicaciones están en biología celular y del desarrollo y cirugía. Diferentes especímenes biológicos pueden usarse como ratones para cirugía o huevos de pollo para estudios de angiogénesis.
Descripción: Microscopio invertido AxioOberver. Z1 con platina motorizada, equipado con lámpara X-Cite para epifluorescencia y cámara digital AxioCam Mrm. Sistema de microdisección láser PALM Microbeam y pinzas ópticas PALM MicroTweezers, brazo robótico para cáptura de muestras microdisectadas e impulsadas contra la gravedad.
Técnicas y aplicaciones: A partir de preparaciones de inmunohistoquímica en cortes histológicos se puede seleccionar una región celular de interés mediante disección láser para su posterior análisis. En líneas celulares podemos también aislar cromosomas individuales para su análisis por PCR, que han sido previamente marcados con alguna técnica citogenética. Por epifluorescencia también podemos seleccionar células vivas individuales que han sido marcadas previamente con alguna proteína fluorescente.
Descripción: Microscopio invertido AxioObserver. Z1 con platina motorizada y revolver de filtros y objetivos motorizados. Sistema equipado con lámpara para epifluorescencia X-Cite, sistema confocal LSM710 y sistema confocal 5LIVE; siete líneas de láser con longitudes de onda específicas y un láser multifotónico con longitudes de onda sintonizables. El equipo cuenta además con un sistema de incubación de células vivas: atmósfera controlada de CO2, regulador de temperatura y humedad controladas.
Técnicas y aplicaciones: Inmunofluorescencia en líneas celulares o cortes histológicos de hasta 2 mm de espesor, marcaje fluorescente mediante transfección de múltiples proteínas fluorescentes o FISH. Microscopía de células vivas sin marcaje, usando campo claro, o bien marcadas con fluorescencia mediante de transfección de proteínas quiméricas fluorescentes.
Descripción: Microscopio invertido AxioObserver. Z1 con platina motorizada y revolver de filtros y objetivos motorizados. Sistema equipado con lámpara para epifluorescencia X-Cite, sistema de iluminación estructurada (SIM) para alta resolución (hasta 100 nm) y de localización específica de una sola molécula mediante fotoactivación y reconstrucción estocástica óptica (PALM, STORM) para alta resolución (hasta 20 nm).
Técnicas y aplicaciones: Inmunofluorescencia en líneas celulares o, marcaje fluorescente mediante transfección de proteínas fluorescentes o FISH. Para las técnicas de localización de una sola molécula (PALM y STORM) se usan marcajes con proteínas fluorescentes fotoactivables o anticuerpos de 15 nm marcados con cianinas, o bien fluorocromos sintéticos para alta resolución.
Descripción: Microscopio vertical AxioImager equipado con carrusel de filtros y objetivos de alta resolución, motorizados, dos cámaras digitales de alta resolución y una fuente de iluminación basada en leds para fluorescencia (Colibrí.2).
Técnicas y aplicaciones: Herramienta de microscopía diseñada para trabajo de alto volumen. Escaneo automatizado de hasta 100 laminillas completas, tanto en campo claro (preparaciones de inmunohistoquímica en cortés histológicos), como en fluorescencia.
Descripción: Cuenta con un cañón FIB que permite seccionar la muestra y observarla en su interior lo que facilita posteriormente hacer una reconstrucción 3D de forma digital. El uso de cámara IR (Infrarrojas) permite ver en tiempo real lo que sucede dentro de la cámara de muestra del SEM, por lo que tener 2 cámaras en el AURIGA deja observar la posición de la muestra en la platina del microscopio desde dos ángulos diferentes y tener una mejor precisión al colocarla por debajo de la lente objetiva del SEM o FIB. La neutralización de electrones es muy importante en el manejo de muestras biológicas cuando se quieren observar directamente, ya que el trabajar una muestra al alto vacío provocaría una contracción en la misma, y saturación de electrones en su superficie evitando poder ver la muestra, al hacer una neutralización por medio una ionización, se evita que la muestra se deteriore y que la superficie quede libre de electrones. La ventaja de hacerlo con compensación de cargas en lugar de presión variable consiste en que directamente se ioniza la superficie de la muestra sin variar la presión en toda la cámara, evitando sacar del alto vacío el microscopio y manteniendo así la alta resolución al observar la muestra con electrones secundarios.
El AURIGA cuenta con un detector EsB, para separación espectral con el cual se pueden determinar las diferentes líneas espectrales de la muestra y hacer una distinción analítica de la misma, lo que nos permite la observación más fina topográfica de la muestra logrando una alta resolución trabajando con voltajes muy bajos (normalmente en muestras biológicas). También tiene un detector STEM, para la observación de cortes muy finos y análisis de muestras por transmisión con posibilidad de resolución de hasta 0.6 nm.
Descripción: Microscopio con carrusel de filtros y objetivos de alta resolución, motorizados, dos cámaras digitales de alta resolución y una fuente de iluminación basada en 4 líneas de láser.
Técnicas y aplicaciones: Microscopio diseñado para la observación temporal y en alta velocidad de muestras de alto volumen, como embriones completos y cultivos tridimensionales con múltiples marcajes fluorescentes.
Para mayor detalle de los servicios ingrese a la Unidad de Microscopía del INCAN

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