Source: https://es.scribd.com/doc/56495814/Uso-Basico-Del-Microscopio
Timestamp: 2016-08-25 19:32:49+00:00

Document:
BrowseUploadSign inJoinBooksAudiobooksComicsSheet MusicWelcome to Scribd! Start your free trial and access books, documents and more.Find out moreIntroducción a la Biología Facultad de Cs.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
NORMAS BÁSICAS PARA EL CUIDADO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO Al ser el microscopio un aparato de precisión y de precio elevado, es muy conveniente asegurarle un buen rendimiento y una larga duración mediante toda una serie de normas y cuidados: • • NO ENCHUFAR EL MICROSCOPIO A LA LÍNEA TRIFÁSICA. Para transportar el microscopio se recomienda utilizar siempre las dos manos, sujetándolo por el brazo con una mano y sosteniéndolo del pie con la palma de la otra mano. Se debe desplazar en posición vertical para evitar la caída del ocular y/o del espejo o fuente de luz. En la mayoría de los microscopios el brazo debe quedar hacia el observador. Debe apoyarse correctamente el aparato hacia el centro de la mesada. Seleccionar al inicio de la observación, el objetivo de menor aumento. Cambiar en forma gradual los objetivos. Finalizada la observación, volver a ubicar el objetivo de menor aumento. Al efectuar el primer enfoque, el objetivo debe estar bien cerca de la preparación sin llegar a tocarla. Se coloca en esta posición mirando lateralmente el microscopio. El desplazamiento del tubo óptico para enfocar, se efectuará de abajo hacia arriba. Se evitará siempre tocar la preparación con la lente frontal de los objetivos. En algunos microscopios el desplazamiento del condensador tiene un tope, mientras que en otros no, por lo que al ascenderlo hay que cuidar de no tocar el portaobjetos. Cuando se utiliza un microscopio monocular es recomendable mantener los dos ojos abiertos para evitar el cansancio visual. Mover siempre suave y lentamente cualquier pieza del microscopio Utilice papel de seda fino especial o gamuza para lentes. Evite tocar las lentes con los dedos. La parte inferior del portaobjetos debe estar siempre seca al situarlo sobre la platina.
Un rayo paralelo al eje. con la puerta cerrada.
Q P P F F’ Q’
La mayor parte de los sistemas ópticos comprenden más de una superficie reflectante o refractante. CARACTERÍSTICAS Y FUNCIONAMIENTO DEL MICROSCOPIO
¿CÓMO SE FORMA LA IMAGEN? Algunos principios físicos.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
Después de utilizar el microscopio debe guardarse aislado del polvo y la humedad con una funda de plástico o en su caja correspondiente. después de atravesar la lente. La imagen formada por la primer superficie sirve de objeto a la segunda y así sucesivamente. puede hallarse por un método gráfico sencillo... pasa por el segundo foco de una lente convergente. (llamados rayos principales). La posición y tamaño de la imagen de un objeto formada por una lente delgada.Introducción a la Biología Facultad de Cs. Un rayo que pasa por el centro de curvatura de la lente no es desviado apreciablemente (si la lente es delgada). como el punto Q de la siguiente figura . después de la refracción por la lente. que divergen desde un punto determinado del objeto que no esta sobre el eje. Este método consiste en determinar el punto de intersección. Un rayo que pasa (o se dirige hacia) el primer foco emerge paralelo al eje.
. de unos cuantos rayos.
Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
Imagen de un objeto situado a una distancia mayor al foco. (f = R / 2.Introducción a la Biología Facultad de Cs. Cuando un objeto se sitúa más allá del foco de su lente.
Ahora volvemos a lo que nos interesa.
. El objetivo del microscopio actúa como una cámara fotográfica.. se produce una imagen ampliada. real e invertida.. R es el radio de curvatura de la lente)
Foco 2 objeto Foco 1
Imagen de un objeto situado a una distancia menor al foco.
como por ejemplo el aceite de cedro. Esto significa que una estructura que mide un micrón puede observarse como si tuvieran 1 o 1. de manera muy simplificada. 40 y 45 X. Los objetivos más comúnmente utilizados son de 4. Así.5). ¿Cuál es la otra propiedad importante para lograr una buena imagen?
En el microscopio distinguimos un sistema óptico destinado a la iluminación y obtención de una imagen muy aumentada del objeto examinado. o por la manera de utilizarse: • Objetivos a seco:
En éstos.Introducción a la Biología Facultad de Cs. pero invertida con relación al objeto examinado. cuya finalidad es la de sustentar convenientemente los elementos ópticos y los preparados que se examinan.5 milímetros. Por lo tanto.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
El ocular actúa como una lupa que observa la imagen que ha formado el objetivo. y la superior. producida por el objetivo. y por el aparato de iluminación. virtual y derecha con relación a aquella. o lente ocular. En consecuencia. 2. ♦ El ocular recibe la imagen dada por el objetivo. es tomada por el ocular (como si fuera un objeto) y es magnificada nuevamente. ¿por qué existe una limitación en la amplificación que puede brindar un sistema de lentes? El principal problema radica en que la capacidad de aumentar una imagen no es la única propiedad a tener en cuenta para una buena observación. los mayores aumentos que pueden conseguirse con el microscopio óptico son de 1000-1500 x. La parte óptica fundamental del microscopio está formada por dos sistemas centrados de lentes de aumento o convergentes: el objetivo y el ocular. La distancia al preparado utilizando estos objetivos es muy pequeña y suelen tener un muelle protector para evitar roturas. y otra (ocular) que actúa como una lupa que observa la imagen formada por la primera. 10. la imagen definitiva (que es invertida respecto de la original) resulta el producto entre el aumento del objetivo por el aumento del ocular.
. • Objetivos a inmersión:
Se distinguen de los anteriores porque entre la lente y el preparado se debe interponer un medio transparente con un índice de refracción (n) superior al del aire (n=1). y semejante al del vidrio (n=1. la imagen del microscopio compuesto resulta de la combinación de las provocadas por una lente (objetivo) que actúa como una cámara fotográfica. El medio utilizado es un aceite de inmersión. construyendo una nueva imagen mucho más ampliada. En las figuras anteriores pudimos observar. ♦ El objetivo está compuesto por un sistema centrado de lentes convergentes. que facilita y mejora la observación microscópica. que se diferencian por las características de su composición. Está compuesta por dos lentes: la inferior o colectora. el aire se interpone entre su lente y el preparado. que permite aprovechar un mayor número de rayos refractados por el preparado para la formación de la imagen. Existen distintos tipos de objetivos. Sin embargo. que la imagen aumentada. y un sistema mecánico (o montura).
Introducción a la Biología Facultad de Cs. es decir. Profundidad de campo o de foco o poder de penetración: Es el espesor del preparado que se observa con nitidez. • Condensador :está constituido por un sistema de lentes convergentes que proyecta sobre el preparado en forma de un amplio cono el haz de luz que lo atraviesa. está formado por:
• Espejo: cuando existe. Con aumentos medianos o grandes. la profundidad de campo es muy escasa (menor que 1 µm). • Filtros de luz: son placas de vidrio coloreadas que dejan pasar las radiaciones de longitud de onda más convenientes para la más adecuada observación (κ=400-500 nm). situado debajo de la platina. Es inversamente proporcional al aumento. Concentra los rayos luminosos procedentes de la fuente de luz sobre la preparación.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
El aparato de iluminación. podemos observar sólo pequeños espesores con nitidez. Con inmersión en aceite. que a medida que se utilizan objetivos de mayor aumento disminuye la distancia frontal y por lo tanto aumenta el riesgo de romper el preparado. Los microscopios con luz incorporada generalmente no poseen espejo. absorbiendo las restantes. • Diafragma: dispuesto debajo del condensador. La profundidad de foco guarda relación inversa con el aumento: es tanto menor cuanto mayor es el aumento de la lente.
. El aumento total puede calcularse como el producto del aumento del ocular por el del objetivo. Distancia frontal: Es la distancia ente el objeto observado y la lente del objetivo cuando el preparado se encuentra enfocado correctamente. es decir. ALGUNOS CONCEPTOS IMPORTANTES EN MICROSCOPÍA Aumento: Es la proporción entre el tamaño de la imagen observada al microscopio y el tamaño real del objeto. dirigiéndolos hacia arriba del eje óptico. sirve para graduar la cantidad de rayos luminosos que llegan al objeto. profundidad de planos que están en foco en un momento dado. al mover el tornillo micrométrico. mientras que por encima y por debajo de esta zona la imagen se desvanece. posee una cara plana y otra cóncava destinadas a proyectar el haz de rayos que iluminará el objeto.
el diafragma y el condensador en la iluminación?
. debido a que determina el tamaño del haz de luz que es captado por el objetivo luego de haber pasado a través del objeto. menor es la distancia que separa dos puntos entre sí sin que estos se confundan. 6. inferior a 0. el límite de resolución no es. Observando los distintos elementos del microscopio ubique los que corresponden a la parte óptica. Apertura numérica: Es una medida de la capacidad del microscopio de agrupar las refracciones de la luz producidas por los finos detalles del objeto. El tamaño del campo observado es inversamente proporcional al aumento total del microscopio. en vez de verlos como uno solo. es por esto que forma parte de las inscripciones grabadas en los objetivos. más finos serán los detalles de la preparación que puedan distinguirse.2 µm. observaremos una imagen más aumentada pero que incluirá sólo una parte de lo que observábamos con el objetivo menor. ¿De qué partes del microscopio depende la correcta iluminación de la preparación ? ¿A qué partes del microscopio debe dirigirse la luz de la lámpara? ¿Por qué? ¿Qué se puede colocar en el portafiltros y qué utilidad tiene? ¿Cómo varía la iluminación al abrir o cerrar el diafragma? ¿Qué función tienen el espejo. Se representa por el diámetro de la parte de la preparación que se está observando (área del campo). 3. Poder de resolución: Es la capacidad de las lentes de distinguir o resolver (mostrar separados) con nitidez dos puntos situados muy próximos entre sí. 5. 8. 7.Introducción a la Biología Facultad de Cs. y por esta razón las lentes de pequeño aumento son útiles para rastrear la preparación. Se expresa como la distancia mínima que permite dar una imagen bien definida de dos puntos. Es una característica propia de cada objetivo. Cuanto mayor es el poder de resolución (PR). en general. En los microscopios ópticos. Reconozca los objetivos secos y de inmersión. Límite de resolución: Es la distancia mínima que debe existir ente dos puntos del objeto para que puedan visualizarse separados. cuanto mayor sea el poder resolutivo del objetivo. Si cambiamos de un objetivo a otro de mayor aumento. En consecuencia. 4. el filtro.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
Campo observado: Es la porción del preparado incluida en la imagen.
ESTE OBJETIVO REQUIERE DE ACEITE DE INMERSION PARA SU UTILIZACION. Corte una pequeña letra de diario y ubíquela encima de la gota de agua. Dibuje lo observado y coloque referencias. 11. En función a lo observado.
¿CÓMO SE PREPARA EL MATERIAL PARA SU OBSERVACIÓN BAJO EL MICROSCOPIO? Existen diversas técnicas de preparación del material para su observación bajo el instrumental óptico. Observe a menor aumento. que se han efectuado para observar un preparado correctamente. Preste especial atención al objetivo de INMERSION. Esta preparación se conoce como MONTAJE HÚMEDO.
Observación de una preparación: resuma global. ¿Cuál le parece el instrumento más eficiente? Fundamente su respuesta. se requiere que los portas y cubreobjetos se encuentren perfectamente limpios. ¿en qué sentido se mueve la imagen? ¿Qué combinaciones de aumentos (del ocular. éstos deben ser sumamente delgados como para permitir el
14. del objetivo y total) pueden hacerse con el microscopio del que se dispone? ¿Por qué es conveniente centrar en el campo de observación el objeto que nos interesa ver de la preparación si queremos observarlo a gran aumento? Analice las 4 imágenes que aparecen a continuación. Coloque el portaobjetos sobre la platina. ordenada y brevemente todos los pasos.Introducción a la Biología Facultad de Cs. Escriba e interprete las inscripciones que llevan cada grupo de lentes. Coloque una gota de agua en el centro del portaobjetos. ¿Cuáles son las características que tiene la imagen final del microscopio compuesto? Al desplazar el portaobjetos. Mueva lentamente el tornillo micrométrico y observe las modificaciones en la imagen. En caso de realizar cortes. desde el principio hasta el final. Cubra el preparado con un cubreobjetos. cuidando que el objetivo no toque el preparado.
10. preferentemente enjuagados con alcohol fino y secos. La preparación del material se debe realizar sobre una superficie limpia y plana. podrá responder a las siguientes preguntas: 9. Fundamentalmente. Indique las características de las distintas imágenes.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
Tome un portaobjetos limpio y seco por sus bordes. NO INTENTE OBSERVAR MATERIAL SIN TOMAR LOS RECAUDOS NECESARIOS. 12. Ellas responden a un mismo objeto visualizado mediante cuatro instrumentos diferentes.
Se debe operar con precaución pero con firmeza para evitar la rotura del material. Para ello se utiliza otro portaobjetos de borde muy parejo que se desliza sobre el primero desde un extremo al opuesto. Para realizarlo se siguen los siguientes pasos: • • • • Se disgrega el material con la ayuda de pinzas y alfileres o agujas. Se coloca sobre el cubreobjetos un papel secante o un papel de filtro doblado y se aplasta con el dedo pulgar sin deslizar ni rotar el cubreobjetos. rápido y uniforme. Cuando la gota se extienda por capilaridad a todo el ancho del portaobjetos.Introducción a la Biología Facultad de Cs. SQUASH : consiste en la disgregación de la muestra mediante el aplastamiento del material entre el porta y cubreobjetos.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
paso de la luz a través del material. Si se requiere. Se apoya el portaobjetos sobre una superficie dura y completamente plana.
FROTIS : consiste en esparcir el material generalmente líquido o semilíquido de modo que quede distribuido uniformemente en una delgada capa.
. se lo somete a coloración durante el tiempo necesario. Se cubre el material con un cubreobjetos. se desliza hacia el otro extremo con un movimiento suave. Además del montaje húmedo existen dos técnicas especiales para realizar el montaje del material: SQUASH o aplastado y FROTIS o extendido. Se procede del siguiente modo: • • Se coloca una gota de material sobre un extremo del portaobjetos limpio y seco Se apoya sobre la gota un borde del otro portaobjetos formando un ángulo agudo.
mitocondrias. vacuolas. pared celular. cilias. cloroplastos.
NO PUEDEN OBSERVARSE CON EL MICROSCOPIO ÓPTICO:
Las bacterias más pequeñas La estructura interna de las células procariontes La estructura de las organelas eucariontes La membrana plasmática Los conjuntos membranosos como los retículos endoplásmicos y el aparato de Golgi. aunque su ubicación en la célula puede ser revelada mediante ciertas técnicas
. cromosomas. centriolos.Introducción a la Biología Facultad de Cs. flagelos. nucleólos.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
Realice un frotis y un squash con el material brindado en el trabajo práctico. Estas estructuras se identifican con claridad utilizando alguna técnica accesoria con preparación de la muestra.
¿Cuáles son las ventajas y qué limitaciones presenta el microscopio óptico en la observación de estructuras biológicas?
CON EL MICROSCOPIO ÓPTICO SE PUEDEN OBSERVAR:
La forma general de la mayoría de las células procariontes La forma general de las células eucariontes Algunas organelas eucariontes: núcleo.
Puede apreciarse que la lupa posee un par de oculares.Introducción a la Biología Facultad de Cs. ya que en éstos la imagen formada en un único objetivo es desdoblada en dos imágenes idénticas por un prisma situado entre el objetivo y los dos oculares. por lo que vemos una imagen de tres dimensiones. No debe confundirse este aparato óptico con los microscopios binoculares.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
ESTEREOMICROSCOPIO O LUPA BINOCULAR
El estereomicroscopio consta realmente de dos microscopios completos. cada uno de los cuales se
. al no coincidir sus ejes ópticos. cada uno con su objetivo y ocular en los que. las imágenes formadas en los oculares son distintas (lo mismo que ocurre con la visión ocular).
¿Cómo es la distancia de trabajo en relación con la del microscopio óptico? 2. con el fin de proveer una imagen nítida para ambos ojos. limpieza y transporte.
. El tornillo de sujeción debe estar suficientemente apretado para evitar la caída del brazo de la lupa CARACTERÍSTICAS Y FUNCIONAMIENTO DE LA LUPA BINOCULAR 1. de manera de obtener una imagen en tres dimensiones. Además se tendrán presentes las siguientes normas: • • • • Moviendo los tubos oculares se busca la distancia interpupilar adecuada para cada observador. Debe colocarse en la platina una placa de contraste.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
enfoca independientemente del otro. recomendadas para el microscopio compuesto deben tenerse también en cuenta al utilizar la lupa binocular. en qué sentido se mueve la imagen final? 4. ¿Cuáles son las características de la imagen final? 5. ¿Al desplazar un objeto observado. ¿Por qué no existe tornillo micrométrico? ¿Cómo es la profundidad del campo? 3. Observe bajo lupa el material brindado.Introducción a la Biología Facultad de Cs. NORMAS BÁSICAS PARA EL CUIDADO Y MANEJO DE LA LUPA BINOCULAR La mayoría de las normas de cuidado. Enfoque primeramente con el ocular fijo y luego ajuste el foco de la imagen tridimensional con el ocular de foco ajustable. ¿Qué finalidad tiene el ocular ajustable? 6. Nótese que éste es un instrumento de baja magnificación. Esquematice lo observado y coloque referencias e indique el aumento obtenido. de un color tal que realce la observación.
produciendo en consecuencia diferencias de intensidad luminosa. En el microscopio de contraste de fase existen dispositivos especiales que transforman estas diferencias de fase en diferencias de amplitud. La velocidad con que la luz atraviesa un cuerpo transparente depende de la cantidad de material presente y determina el índice de refracción de este cuerpo. ya que sus componentes. para las cuales la retina es sensible. Dado que las diversas estructuras celulares tienen un índice de refracción diferente. son incoloros y transparentes. o también material fijado. dando origen a diferencias de fase entre las zonas luminosas emergentes.
. y también para el examen de células recientemente removidas de animales vivos.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES El estudio de estructuras in vivo es normalmente muy difícil. pero esas diferencias no son visibles.Introducción a la Biología Facultad de Cs. pero sin colorear. causas diversos atrasos en las ondas luminosas que las atraviesan. El microscopio de contraste de fase permite el estudio de muchas estructuras celulares in vivo. con raras excepciones. Generalmente se utiliza en combinación con las técnicas de cultivo de células y tejidos.
Aunque su poder de resolución aumentó a través del tiempo. permite conocer la ordenación interna de las sustancias birrefringentes. Tal capacidad se debe a que esas sustancias poseen una ordenación interna y periódica de sus átomos. De un único rayo luminoso resultan dos rayos refractados. resultan dos rayos llamados polarizados. encima de ella. Cuando se coloca en la platina un cuerpo amorfo. para distinguir las sustancias monorrefringentes de las birrefringentes. Creo que los instrumentos que nos asistirán algún día no tendrán nada en común. su orientación a escala submicroscópica.
. Sea o no aparente esta ordenación. su factor limitante fue la longitud de onda de la luz. también llamados isótropos o monorrefringentes.Introducción a la Biología Facultad de Cs. la luz brilla con mayor o menor intensidad. entonces.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
MICROSCOPIO DE POLARIZACIÓN Cuando la luz atraviesa ciertas sustancias o estructuras. las sustancias que no pertenecen a este grupo se llaman amorfas. Polarizador y analizador están colocados de tal manera que sus secciones principales están cruzadas. la dirección de la vibración de la luz pasa a seguir una dirección determinada. En los cuerpos cristalinos. eliminando otros rayos por reflexión total. tan lejano para los investigadores de aquellos tiempos. El microscopio de polarización sirve. se cortan perpendicularmente. La velocidad a la que se propaga la luz en estos cuerpos amorfos. independientemente de la dirección que siga dentro de ellos. El microscopio de polarización emplea un prisma que deja pasar solamente la luz polarizada rectilíneamente. el cuerpo tienen un único índice de refracción. sufre una división de tal orden que de un solo rayo luminoso a la entrada. junto al ocular analizador). se dice que tales cuerpos tienen estado cristalino. Así. o anisótropos o birrefringentes.
BREVE RESEÑA HISTÓRICA DE LA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA Desde el año 1660 a la actualidad el microscopio óptico ha sido pilar fundamental en el conocimiento de lo invisible. En 1873. Por el contrario. lo que da lugar al fenómeno conocido con el nombre de doble refracción. Además. Entonces. es siempre igual. con la mejora de la calidad de las lentes. que son polarizados rectilíneamente. esto es. la velocidad de la luz varía según la dirección de propagación. a la que se le añaden dos polarizadores: uno ubicado debajo de la platina (polarizador) y el otro. Ernst Abbe había predicho :"Quizá en el futuro se conozca alguna fuerza que permita a través de diferentes caminos sobrepasar los límites que ahora nos parecen insalvables. Lo contrario ocurre cuando observamos un cuerpo cristalino o birrefringente. esta situación no se altera porque la luz no sufre modificación. o sea. Realmente su predicción se cumplió ya que los equipos actuales permiten acceder al mundo molecular y atómico. En estas condiciones el observador no ve ninguna luz en el ocular. salvo sus nombres". y según la orientación de ese cuerpo en la platina. Este instrumento óptico está compuesto de una platina rotatoria.
El ánodo es un disco abierto en la base del cilindro de Wehnelt conectado a tierra (con potencial cero). los saca fuera evitando la acumulación en el filamento. Por lo tanto la gran diferencia radica en reemplazar el haz de luz fotónica por un haz de electrones que se genera en el cañón electrónico.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
Fue gracias al descubrimiento de los principios físicos que llegaron a ser la base teórica de la microscopía electrónica. La resolución en un ME depende de la condición del potencial acelerador.
. El filamento constituye el cátodo y está rodeado por un cilindro abierto (cilindro de Wehnelt) que contribuye a producir un haz más pequeño pero de igual intensidad. los cuales deben ser lo suficientemente finos (60 nm). Se logran haces de electrones con una longitud de onda de 0.Introducción a la Biología Facultad de Cs. Ambos. por lo general en alto vacío y que se comunica con la columna al levantarse la pantalla y abrirse un shunt.2 nm mientras que la longitud de onda de la luz visible oscila alrededor de 500 nm y su poder de resolución es de 0. La columna tiene un lugar donde introducir el especimen en una precámara. La segunda demostración de Busch (1926) que un campo electrostático adecuado podría ser usado como verdadera lente para un rayo electrónico y así producir una imagen agrandada. Un hecho destacable con el desarrollo del ME fue que mientras el microscopio de luz u óptico (MO) alcanzó su perfección de más de 2 siglos de desarrollo. El haz de electrones se genera en una columna con un alto vacío a fin de evitar la dispersión de los electrones al chocar con las partículas de la atmósfera. Una enorme expansión de nuestro conocimiento de la ultraestructura de la materia ha tenido lugar gracias al ME. EL MICROSCOPIO ELECTRÓNICO Vamos a referirnos a las características del ME que lo diferencian de la microscopía de luz y que permite mejorar el límite de resolución de este último. donde un filamento de tungsteno en forma de V y con propiedades de termoemisión.2 µm. lo que ha permitido la respuesta a muchos problemas fundamentales de significado biológico y médico. Los electrones generados son acelerados por un voltaje de aceleración negativo entre el cátodo y el ánodo de 1000 KV (fuente de alta tensión). instrumento y técnicas se han vuelto casi de rutina. cuyo poder de resolución es de 0. donde se recogen los cortes del material biológico. el ánodo atrae los electrones.05 nm. Primero la teoría de De Broglie (1924) que indica que a un electrón en movimiento puede asignarse una longitud de onda muy corta. Dos desarrollos esenciales condujeron a la construcción del microscopio electrónico (ME). El alto vacío se logra en general mediante una bomba difusora apoyada por una bomba mecánica. el ME alcanzó un nivel comparable en el espacio corto de 2 décadas. genera una fuente puntual de electrones y además es enfocante. Una cámara fotográfica se ubica debajo de la pantalla. al calentárselo con un voltaje de calentamiento del cátodo produce el haz de electrones. la misma se pre-vacía antes de ser comunicada con la columna para introducir el especimen que consiste en una grilla de unos 4 mm de diámetro de cobre o níquel de 200 o 300 mesh. que se avanzó a pasos agigantados en el conocimiento de lo muy pequeño.
A tal fin el material biológico debe estar incluido en resinas especiales para vacío y con una rigidez suficiente para poder seccionarlo tan finamente en un ultramicrótomo con cuchillas de
. Existen escalas de grises. Esto se logra variando la distancia focal de la proyectora. la porción de electrones absorbido por el material biológico es infinitésima. La lente objetivo forma la primera imagen aumentada de la porción iluminada del especimen en un plano que luego se puede volver a aumentar por las lentes proyectoras. en la que no son los electrones transmitidos los que dan la imagen sino los electrones secundarios que son refractados en la superficie del material biológico. 2) En el ME no es necesario cambiar la lente de Objetivo o las proyectoras cuando se desean distintas magnificaciones. usando aperturas angulares tan pequeñas que la aberraciones son escasas. En el MO se forma por absorción diferente de la luz. En el ME en cambio.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
El sistema óptico del ME consiste en bobinas electromagnéticas. las lentes condensadoras concentran el haz sobre el especimen y permiten también regular la intensidad de luz. La lente objetivo es la más crítica porque de ella depende el poder de resolución.
Podemos resumir las diferencias entre el MO y el ME : 1) Las lentes magnéticas no tienen distancias focales fijas como las lentes ópticas. En la microscopía electrónica de transmisión (MET). La distancia focal es dependiente de la intensidad de campo.Introducción a la Biología Facultad de Cs. Resulta claro por qué es necesario cortes muy finos. a diferencia de la microscopía de scanning (o barrido) (MES o MEB). cambiando la corriente que pasa a través de la bobina. los electrones que atraviesan la muestra son los que van a impactar en la pantalla para dar la imagen. en tanto que en el ME la pérdida de electrones por dispersión en puntos individuales del espécimen resulta en variaciones de la intensidad de la imagen (contraste). 3) El modo de formar la imagen es diferente en los 2 microscopios. el blanco corresponde a los electrones que no fueron desviados y atraviesan el espécimen y constituyen el background. en tanto que la magnificación del objetivo es siempre fija. Las lentes objetivas y proyectoras juntas magnifican la imagen sobre una pantalla fluorescente o cuando ésta se levanta sobre una placa fotográfica. Pero la diferencia con la MO es que en ésta la imagen se forma porque el material absorbe la luz. Las lentes intermedias y proyectoras se usan en condiciones tales que los errores de la lente no interfieren seriamente con la imagen. La formación de la imagen no se basa en la absorción de electrones sino que se basa en la pérdida de electrones del haz por el scattering (o dispersión) en distintos puntos del preparado. lo que resulta en diferencias visibles en diversas partes de la imagen. proceso intensificado por las tinciones del especimen. La imagen se forma en blanco y negro correspondiendo el negro a las zonas con alta densidad de material capaz de dispersar electrones.
tinciones o contrastados.
. Dichas resinas son hidrofóbicas y requieren una deshidratación previa con solventes como acetona. Tratamientos tan drásticos hacen indispensables una adecuada fijación del material biológico que asegure la correcta preservación de la ultraestructura. deshidrataciones. Para ello el material debe ser procesado de manera específica y rigurosa. Este procesamiento incluye fijaciones. inclusiones.Introducción a la Biología Facultad de Cs. cortes ultradelgados.Exactas y Naturales Universidad Nacional de Mar del Plata
vidrio o de diamante.
APENDICE 6 NUMEROS CUANTICOS Y ORBITALES ATÓMICOSAPENDICE 1 CONSTANTES DE IONIZACIÓN DE ÁCIDOS00059838Aplicación del Micro chip Avid
Uso Basico Del Microscopio by lucy_medrano_32,4K viewsEmbedDownloadRead on Scribd mobile: iPhone, iPad and Android.Copyright: Attribution Non-Commercial (BY-NC)List price: $0.00Download as PDF, TXT or read online from ScribdFlag for inappropriate contentMore informationShow less
RelatedManejo y Uso Del Microscopioby yukarisanPractica 1 Uso y Cuidado Del Microscopioby tsukinogaara2.- Manejo y Cuidado Del Microscopioby .:("*"BLacK BuLLeT"*"):.Aberración Cromáticaby yellow_gold_33equipor e instrumentacion de laboratorioby Caro TpObtención Del Dioxido de Carbono y Propiedades de Los Carbonatosby BerioskaRosasCartolínRecristalizacion y Sublimacion Del Acido Benzoicoby Sebaas LinaresINFORME Estudio y Manejo Del Microscopioby ponceca20Similar to Uso Basico Del MicroscopioManejo y Uso Del MicroscopioPractica 1 Uso y Cuidado Del Microscopio2.- Manejo y Cuidado Del MicroscopioAberración Cromáticaequipor e instrumentacion de laboratorioObtención Del Dioxido de Carbono y Propiedades de Los CarbonatosRecristalizacion y Sublimacion Del Acido BenzoicoINFORME Estudio y Manejo Del MicroscopioManejo y uso del microscopioMedicina Hebrea

References: resolución 
 resolución 
 resolución 
 resolución 
 resolución 
 resolución 
 resolución