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Timestamp: 2013-12-04 22:40:44+00:00

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Ciclo de Bioquímica, plan 1987.-
1) Concepto de Inmunidad. Respuesta inmune innata o inespecífica. Barreras naturales. Mecanismos de fagocitosis.
Respuesta inmune específica. Definición. Respuesta. Inmune activa y pasiva. Respuesta inmune humoral y celular. Propiedades de la respuesta inmune. Respuesta inmune primaria y secundaria. Etapas de la respuesta inmune, reconocimiento, activación, efectora.
Órganos linfoides primarios y secundarios. Células que participan de la respuesta inmune.
Linfocitos T y B. Células NK. Macrófagos. Células accesorias.
2) Antígenos .Determinantes o epitopes antigénicos. Haptenos. Especificidad. Inmunogenicidad. Factores que condicionan la antigenicidad. Desnaturalización de antígenos. Diferentes tipos de determinantes antegénicos
Composición química de los antígenos. Mosaicos antigénicos. Antigenos sintéticos.
Antígenos compartidos. Antígenos heterófilos.
Antígenos T-dependientes y T-independientes. Antígenos bacterianos, virales, hemáticos . Tóxinas.
Concepto de antígenos del complejo mayor de histocopatibiilidad. Adyuvantes. Diferentes tipos, mecanismo de acción. Función.
3) Diferenciación de células linfoides y mieloides. Citoquinas involucradas.
Ontogenia y diferenciación de linfocitos B. Expresión de marcadores de superficie en fucnión de las etapas de diferenciación celular. Receptores de reconocimiento antigénico.
Inmunoglobulinas de superficie. Células plasmáticas, secreción de anticuerpos . Células con memoria.
Ontogenia y diferenciación de linfocitos T. Maduración intratímica. Expresión de marcadores de superficie.
Células efectoras, células con memoria. Receptor de reconocimiento antigénico. Estructura . Asociación con el complejo CD3. Restricción por el complejo mayor de histocompatibilidad. Linfocitos T colaboradores , subtipos. Linfocitos T citotóxicos. Linfocitos T supresores. Células con memoria. Reconocimiento de Antígenos T- dependientes y T-independientes. Colaboración celular T-B. Aloreactividad.
Reconocimiento de lo propio y lo no propio. Mecanismo de selección positiva y negativa en el timo.
Modelo de ratones inmunodeficientes: nude, SCID. Su relación con patologías humanas.
4) Respuesta Inmune humoral. Anticuerpos. Su ubicación en las proteínas plasmáticas.
Diferentes isotipos de inmunoglobulinas. Respuesta inmune policlonal y monoclonal .
Estructura básica de las inmunoglobulinas. Concepto de isotipo, alotipo e idiotipo. Orígen y función de los anticuerpos. Valencia.
Cadenas livianas, cadenas pesadas, dominios. Fragmentos de digestión papaínica y pépsica. Clases y subclases de inmunoglobulinas. Propiedades estructurales y biológicas de IgG, IgM, IgA, IgD e IgE.
Proteínas de Bence Jones. Respuesta primaria y secundaria. Sitio de combinación . Diferentes regiones de hipervariabilidad ( CDR). Estructura primaria, secundaria y terciaria, Biosíntesis, glicosilación y ensanblado de inmunoglobulinas. Catabolismo. 5) Antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad. Estructura y función. Su relación con la presentacióny reconocimiento antigénico. Antígenos de clase I y II . Reconocimiento y presentación antigénica células presentadoras de antígenos.
Reconocimiento antigénico mediado por linfocitos B. Reconocimiento antigénico por parte de los linfocitos T Diferente procesamiento y vías de presentación antigénica en función de las características del antígeno. Moléculas accesorias que participan del reconocimiento antigénico.
6) Tráfico y recirculación linfocitaria. Moléculas de adhesión involucradas en el contacto célula-célula y en el tráfico y homing de los linfocitos
7) Maduración de linfocitos B y expresión de genes para las inmunoglobulinas. Organización de los genes que codifican para las cadenas livianas y pesadas de las inmunoglobulinas. Reordenamiento genéticos .
Mutaciones somáticas.Generación de la diversidad. Maduración de la afinidad. Co-expresión de IgM, e IgD.
Secreción de inmunoglobulinas. Cambio de isotipo de cadena pesada. Transducción de señales de activación.
8) Maduración de linfocitos T y organización de los genes para el receptor de reconocimiento antigénico. Reordenamiento genético y expresión del receptor Ta /b y del receptor T d /g . El complejo CD3. Transducción de señales que lleva a la activación celular.
9) Regulación de la respuesta inmune. Linfocitos T supresores. Red idiotipo-anti-idiotipo. Feed-back de anicuerpos vía receptor Fc. Efectos regulatorios de las citoquinas.
10) Citoquinas. Propiedades generales. Función. Citoquinas que participan de la inmunidad natural. Citoquinas que regulan la activación, crecimiento y diferenciación de linfocitos. Interluquinas. Citoquinas
que participan del proceso inflamatorio. Citoquina que estimula la hematopoiesis.
11) El sistema complemento, sus componentes. Cinética de la inmunohemólisis. Activación por la vía clásica y la vía alterna. El complejo de ataque a la membrana. Actividad enzimática de algunos de sus constituyentes. Regulación de la vía clásiva y la vía alterna. Funciones biologicas del complemento.Citolisis, opsonización y fagocitosis. Anafilotoxinas y respuesta inflamatoria. Eliminación de complejo inmunes. Patologías relacionadas con el sistema complemento.
12) Interacción antígeno-anticuerpo primaria y secundaria. Bases termodinámicas y cinéticas de la interacción. Conceptos de afinidad y avidez. Interacci ón en solución con ligandos monovalentes. Curvas de Scatchard. Heterogeneidad..Indices de heterogeneidad. Ecuación de Sips. Interacción con ligandos multivalentes. Métodos utilizados para medir la interacción ligando-anticuerpo.
13) Alergia e inflamación. Mecanismos de hipersensibilidad inmediata. Manifestaciones de hipersensibilidad mediados por anticuerpos fijos a células: anafilaxia, atopía. Manifestaciones mediadas por anticuerpos circulantes: Arthus. Diferentes tipos de alérgenos. Sensibilización de células vía receptor Fc e . Mecanismo.
Activación celular y traducción de señales. Mediadores químicos producidos por mastocitos y basófilos. Regulación de la liberación de mediadores por el sistema nervioso central. 14) Manifestaciones de hipersensibilidad retardada, diferentes tipos. Características del infiltrado celular. Producción de linfoquina. Función de los macrófagos activados en la hipersensibilidad retardada. Función de los linfocitos T citotóxicos. Mecanismo de acción.
15) Inmunidad de transplante y rechazo de injertos. Bases inmunológicas leyes del transplante. Antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad y aloreactividad. Su participación en los mecanismos de rechazo. Rechazo de injerto mediado por anticuerpos y linfocitos T. Sustancias inmunosupresoras utilizadas para controlar el rechazo. Transplantes de órganos y tejidos. Determinación de la histocompatibilidad. La reacción
injerto-huésped. Transplante de médula ósea.
16) Principios de la tolerancia y la autoinmunidad. Delección clonal. Alergia clonal. Tolerancia perisférica. Inducción de tolerancia. Mecanismos de escape de la tolerancia. Autoantégeno. Expresión aberrante de antígenos del complejo mayor de histocompatibilidad de clase II, agentes infecciosos, etc.
Diferentes causas de la enfermedad autoinmune enfermedades autoinmunes específicas de órgano y generalizada. Reacciones inmunológicas utilizadas para el dignóstico.
17) Metodologías utilizadas para la preparación de anticuerpos monoclonales .
18) Sueros y Vacunas. Su función en la prevención y control de las enfermedades. Vacunas virales, bacterianas, otras, Vacunas de administración por vía parenteral y oral . Principios inmunológicos
de la vacunación. Vacunas obtenidas por biología molecular y técnicas de ADN recombinantes.
19) Inmunodeficiencia. Desordenes genéticos a nivel de los linfocitos B o T . Inmunodeficiencia combinada
Inmunodefciencia humana asociada al virus HIV.
20) Inmunología tumoral. Características de los Ag. tumorales. Mecanismos de defensa contra el tumor. Mecanismos de escape tumoral. Inmunoterapias antitumoral.
21) Nociones generales sobre introducción a la inmunoquímica y sus posibles campos de acción.
PROGRAMA ANALITICO DE ENSEÑANZA DE INMUNOLOGIA
CICLO DE BIOQUIMICA
Duración del curso 14 semanas Horas semanales de clases obligatorias: 6 distribuidas en el desarrollo de seminarios, proyección y comentarios de videos relacionados y actividades prácticas. 1-: El sistema Inmune
Seminario de introducción a) Concepto de inmunidad: inmunidad innata y adaptativa. El sistema inmune: órganos centrales y periféricos. Células inmunocompetentes: linfocitos y células accesorias. Concepto de receptor antigénico. b) Antígenos: definición, concepto de determinante antigénico o epitope. Epitopes lineales y conformacionales. Haptenos. Inmunogenicidad y antigenicidad. Factores que condicionan ambas propiedades c) Anticuerpos: estructura. Concepto de isotipo, alotipo e idiotipo. Anticuerpos monoclonales y policlonales. Respuesta inmune primaria y secundaria. Cambio de isotipo. Respuesta inducida por antígenos timo dependientes e independientes. Obtención experimental de sueros inmunes: pautas generales para diseñar un plan de inmunización. Utilización de adyuvantes. Propiedades generales y particulares de los distintos tipos de adyuvantes que se utilizan corrientemente. Planes de vacunación en humanos. Proyección del video : "Anticuerpos monoclonales"
2- Reacciones Antígeno -Anticuerpo Seminario: Generalidades de la interacción entre antígenos y anticuerpos. Fuerzas de unión. Interacción primaria y secundaria, características de cada una y factores que la condicionan. Concepto de afinidad, avidez. Especificidad y sensibilidad de las reacciones antígeno-anticuerpo. 3-. Aplicación de las reacciones secundarias para la detección y evaluación de anticuerpos. Actividad práctica:
a) Reacciones con antígenos solubles. Precipitación en medio líquido. Técnicas cualitativas y cuantitativas. a) Precipitación en anillo, b) valoración de Acs en muestras biológicas por precipitación en zona de equivalencia. Reacción de inhibición de la precipitación.
b) Reacciones con antígenos particulados: aglutinación distintas estrategias interpretación de resultados y resolución de problemas. Proyección del video: "Estructura de los anticuerpos y el origen de su diversificación".
4-. Interacción Antígeno/anticuerpo en geles:
Seminario: Fundamento de la precipitación en medio gelosado. Leyes físicas que rigen la difusión de macromoléculas en geles. Analogías y diferencias con la precipitación en medio líquido, ventajas de la precipitación en medio gelosado.
a) Técnicas de difusión libre. Métodos cualitativos: doble difusión bidimensional. (técnica de Ouchterlony), bandas de identidad, identidad parcial, no identidad. Aplicaciones del método de Ouchterlony para la resolución de muestras simples y complejas.
Métodos cuantitativos: Inmunodifusión radial. Distintas metodologías. Técnicas de Fahey y Mancini. Sueros .monoespecíficos, su obtención en animales de experimentación.
c) Técnicas de electroinmunodifusión. Contrainmunoelectroforesis. Inmunoelectroforesis. Efecto electroendosmótico. Técnicas relacionadas. Rocket. Inmunoelectroforesis bidimensional. Utilidad de estas técnicas y criterios de elección Actividad Práctica: Técnica de Ouchterlony. Inmunoelectroforesis. Visualización de arcos de precipitación de sueros normales y patológicos. Otras aplicaciones Valoración de inmunoglobulinas por IDR. Resolución de problemas.
5-. Aglutinación pasiva, hemoaglutinación directa y pasiva
Seminario: a) Aglutinació pasiva Fundamento de la reacción Fenómeno de prozona. Métodos cualitativos y semicuantitativos. Reacciones en tubo, placa y microplaca. Elaboración de protocolos de reacción e interpretación de resultados. Aplicaciones
b) Hemoaglutinación directa. Principales grupos antigénicos de los globulos rojos humanos. Concepto de isoaglutininas. Sistema Rh. Propiedades de los anticuerpos incompletos. Distintos métodos para su detección. Reacción de Coombs directa e indirecta.
c) Hemoaglutinación pasiva: fundamento de la reacción. Técnicas utilizadas para la sensibilización y estabilización de glóbulos rojos. Tratamiento de los sueros a valorar. Elaboración de protocolos de reacción.
Actividad práctica. Detección y titulación de anticuerpos en muestras biológicas por hemoaglutinacion pasiva. Técnicas en placa y en tubo. Identificación de grupos sanguíneos. Detección de anticuerpos anti-Rh incompletos por reacción de Coombs.
6-. Interacción Primaria
Seminario: fuerzas que determinan la reacción antígeno/anticuerpo. Equilibrio dinámico de la reacción. Conceptos de afinidad. Constante de disociación y asociación. Constante de asociación intrínseca promedio (Ko). Métodos para su determinación. Técnicas para valorar antígenos y anticuerpos por interacción primaria: a)- Técnicas inmunoenzimáticas: fundamento del método. Análisis de las sucesivas etapas de la reacción. ELISA homogéneos y heterogéneos. Distintas estrategias para detectar y valorar anticuerpos y antígenos. Análisis de los protocolos de reacción. b)- Técnicas de Inmunofluorescencia: fundamento del método. Reacción directa (IFD) e indirecta (IFI). Elaboración de protocolos. Controles de reacción. Utilización del microscopio de fluorescencia. Citómetro de flujo: sus aplicaciones. Evaluación de resultados.
c) Técnicas Inmunoradiométricas: fundamento del método. Reacciones en fase líquida.
Actividad práctica: Valoración de anticuerpos en sueros inmunes por ELISA en fase sólida. Elaboración de protocolos Procesamiento de datos Cálculo de "cut-of". Resolución de problemas. 7-. Introducción a las técnicas inmunoquímicas
Seminario: Métodos preliminares de purificación. Cromatografías convencionales: Tamices moleculares; Resinas de Intercambio; Cromatografías de afinidad. HPLC y FPLC.
a) Electroforesis en geles de poliacrilamida: principios del método, su aplicación al estudio de anticuerpos y antígenos.
b) Inmunoblotting: Principio del método, características de las membranas y del sistema de transferencia, desarrollo del procedimiento. Sensibilidad y aplicaciones. Técnicas relacionadas Actividad práctica: a) Aplicación de la separación por SDS-PAGE al análisis de muestras purificada. b) Determinación de la especificidad de sueros inmunes por inmunotransferencia. Discusión sobre los criterios de elección para la resolución de muestras diversas.
8- Inmunidad celular: Seminario: Conceptos generales. Mecanismos involucrados.
a) Evaluación de la Inmunidad celular. Caracterización de LT y LB, métodos que se aplican para tal fin. Pruebas para medir la funcionalidad de LT y LB "in vitro" e "in vivo".
b) Antígenos de histocompatibilidad: Generalidades. Tipificación de los antígenos HLA clase I y clase II. Distintas métodos. Cultivo mixto linfocitario (CML) unidireccional y bidireccional. Fundamento e interpretación de cada una de ellas.
c) Citotoxicidad T alogenéica.
Proyección del video: "Mecanismos celulares de la respuesta inmune".
Actividad práctica: a) Evaluación de la proliferación linfocitaria in vitro inducida por mitógenos(ConA). b) Cultivo mixto linfocitario de célula de bazo de ratones alogeneicos.
9-. Mecanismos efectores del sistema inmune:
Seminario: Sistema del complemento. Nociones sobre sus componentes, propiedades y distintos vías activación. Titulación de C en muestras biológicas. Métodos funcionales e inmunoquímicos. Fundamento de la valoración de C por Inmunohemólisis. Sistema hemolítico: sus componentes y estandarización del sistema. Tratamiento de las muestras a valorar. Ecuación de van Krough. Expresión de los resultados.
Actividad práctica: Valoración de la actividad del sistema complemento en sueros humanos por inmunohemólisis. Elaboración del protocolo de reacción Interpretación de resultados. Aplicaciones al diagnóstico clínico. Resolución de problemas.
10-. Proyección del video "Enfermedades infecciosas"; Discusión grupal y elaboración de una monografía sobre el tema "El sistema inmune y su actividad en distintos procesos infecciosos.

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