Source: https://issuu.com/liborioescobedo/docs/_01_histo___embrio_
Timestamp: 2017-02-25 21:43:58+00:00

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#01 Histología & Embriología by Liborio Escobedo - issuu
Histología & Embriología
Ordenando de menor a mayor organización tendríamos:
• NIVEL SUBATÓMICO: Incluye los
componentes de los átomos: protones,
neutrones, electrones estos forman ➡
• ÁTOMOS: Un conjunto de átomos
forma ➡
• MOLÉCULAS: Un conjunto de
moléculas forma ➡
• SUBCÉLULAS: Es un nivel algo cuestionado pero sería válido incluirlo ya que es
un paso entre las moléculas y las células. Es
aquí donde incluimos a las organelas y también a los virus. Un conjunto de organelas
• CÉLULAS: Las células son moléculas
unidas entre si con vida propia y capacidad
de autorreplicarse un conjunto de células
• TEJIDOS: Llegamos a
nuestro objetivo, y a
Histología vamos a visualizar a esta "agrupación
de células". Existen 4
tejidos básicos: epitelial,
conectivo,muscular y
nervioso. Estos 4 tejidos
se combinan de diferentes formas para formar ➡
• ÓRGANOS: un conjunto de órganos forman ➡
• APARATOS o SISTEMAS que llevan a
cabo una función específica en conjunto:
por ejemplo, Sistema
etc. Un conjunto de
aparatos y sistemas conforman un ➡
• ORGANISMO.
Histología es una de las materias que van a cursar durante su primer año dentro de la facultad
de medicina. En realidad, es la cuarta parte de un gran bloque determinado como: Histología,
Embriología, Biología Celular y Genética. Desde nuestro lugar, hemos decidido la redacción
del presente manual, a modo de complemento para la primera clase de Histología. Recuerden
que el mismo, no reemplaza a la bibliografía autorizada por la cátedra; la misma tiene un
valor invaluable. No usen este manual como consulta, no estudien de él, solo úsenlo de manera de guía, un complemento para poder arrancar a leer algo, y comprender, quizás la Histología desde otro punto de vista. Sepan además, que la aprobación de dicho bloque asegura
el pase a segundo año, junto con la regularización de Anatomía. Disfruten su cursada de Histología, tanto como lo hicimos nosotros en su momento al momento de cursarla, no desaprovechen ni un segundo.
¡Éxitos en este nuevo año que comienza!
I.Histología.
Pasemos a hablar de qué es la Histología y cómo se estudia.
Si desglosamos la palabra Histología, tenemos un primer término "Histo" y un segundo,
"logia". "Histo" es tejido, y "logia" es estudio de, por lo tanto, es lógico suponer que vamos a
estudiar los tejidos. Pero, ¿qué es un tejido? Vayamos desde el principio. Refrescando un poco
la memoria, seguramente te
sonará de Biología Celular del
CBC "organización de la
materia". Ésta, justamente,
"organiza" a la materia desde
su estado más micro (pequeño, invisible al ojo humano) hasta una organización
mucho más macro (grande y
visible). Es importante entender que cada uno de los
niveles de organización agrupa a los anteriores.
Para cerrar esta introducción,
decimos entonces que Histología no solo vamos a estudiar la conformación de los
tejidos sino que vamos a estudiar, además, como reconocer
Microscopía Óptico
en su estado "micro" (recordando que un órgano es una
combinación de dos o más de los 4 tejidos básicos). Es por
eso que a la Histología se la llama "Anatomía microscópica". Su estudio excede al tejido; también incluye el análisis
de cada célula conociendo su estructura y ultraestructura y
además, a través de diferentes técnicas empleadas para su
estudio, conocer su funcionamiento y rol dentro de ese tejido,
y por lo tanto, dentro de ese órgano.
II.Microscopía:
Durante la cursada de Histología, van a utilizar dos elementos muy importantes: uno es el microscopio, y otra la
muestra a analizar. Parece algo irrelevante, pero es muy
importante conocer las partes o componentes del microscopio y qué imágenes nos muestran, cómo interpretarlas,
Existen dos tipos de microscopio: óptico y electrónico.
Ustedes van a trabajar con el microscopio óptico, es con el
que cuentan todas las cátedras; y aunque no manejen el
electrónico van a tener que visualizar sus imágenes a través
¿Cómo utilizar correctamente el microscopio óptico?:
En su primer clase, van a conocer cómo
manejar el microscopio óptico. Es de suma
importancia saber hacerlo, ya que van a
trabajar con él prácticamente a lo largo de
toda su carrera, ya que se requiere para otras
Primero debemos saber qué tipo de luz
posee el microscopio: propia o a través de
un espejo. Si la luz es propia, nada mas tenemos que encender la luz, y si se trata de
uno con espejo, debemos colocar la parte
convexa mirando hacia arriba e intentar que
la luz rebote en el mismo y se dirija hacia la
Miramos por el ocular y si vemos la luz,
quiere decir que el paso previo fue realizado
con éxito. Paso siguiente, es mover el
revólver y colocar el objetivo en panorámico
para que luego, al colocar la muestra, intentemos no romperla; luego con el tornillo
macrométrico alejamos la platina del objetivo. El 3er paso, como ya se adelantó, es
tomar la muestra. Las muestras, o bien
"preparados" (vamos a verlo más adelante)
los van a recibir en unos rectángulos de
vidrio, llamado "portaobjeto" y, cubriendo
la muestra, un cubreobjetos (lámina rectangular). Con el portaobjeto en mano, nos
aseguramos de colocarlo en la platina con el
cubreobjetos mirando hacia arriba. Lo trabamos con los ganchitos que se encuentran
sobre la platina con cuidado y ya estamos
preparados para enfocar el preparado.
Con el tornillo macrométrico, y con cuidado, vamos acercando la muestra hacia el
objetivo, mientras observamos por el ocular.
Repetimos esto hasta ver a través del ocular
una imágen nítida y clara.
Un microscopio es un sistema de lentes dispuestos de tal forma que me permitan observar
una imagen ampliada, que a simple vista no podemos ver. El microscopio más simple (de una
sola lente) podría ser una lupa, y uno compuesto (más de 2 lentes) es el óptico. Éste último
permite visualizar la imagen a través del paso de un haz de luz que atraviesa el sistema de
lentes. Existen microscopios ópticos con luz propia o bien, con un espejo que hace rebotar la
luz del medio externo. La imagen puede ser ampliada de 100 a cientos de miles de veces su
tamaño original (microscópico).
Como es este el tipo de microscopio que van a utilizar durante su cursada, conozcamos sus
partes y cómo realizar un correcto funcionamiento del mismo, para así, poder visualizar bien
• OCULARES: Los microscopios ópticos pueden ser monoculares (un ocular) o binoculares
(dos oculares). A través de ellos visualizamos la muestra ampliada e iluminada por la fuente
• REVÓLVER: Importante para cambiar las diferentes lentes objetivos, y así, intercambiar
hacia diferentes aumentos.
• OBJETIVOS: dependerá del microscopio pero, por lo general, van a encontrar 3 objetivos.
Estos van de un menor a mayor aumento. El de menor aumento (5x o 4x) es llamado “objetivo panorámico", nos permite visualizar gran parte de la muestra; luego tenemos uno intermedio, el "objetivo seco débil" (10x) podemos observar bien el tejido e identificar un poco
mejor de qué tejido se trata y cómo están dispuestas las células; el último de los objetivos,
"seco fuerte" (40x), al ser el de mayor aumento nos permite visualizar aún mejor las células,
su tinción, entre otros.
• PLATINA: rectángulo en cuya superficie se apoya el portaobjetos (rectángulo de vidrio en
donde se coloca la muestra) para poder ser visualizado. En algunos microscopios es móvil,
acercando y alejándose de los objetivos.
• CONTROLADOR DEL MOVIMIENTO DEL PORTAOBJETOS: pequeño tornillo
que mueve al portaobjetos. Importante para recorrer todo el preparado y tener un mejor
• TORNILLO MACROMÉTRICO (MACRO) tornillo grande que permite enfocar la imágen.
• TORNILLO MICROMÉTRICO (MICRO): tornillo pequeño que da más definición a la
• DIAFRAGMA: disco que ajusta el paso de la luz, ya sea para que pase más o menos de la
misma, proporcionándole una iluminación adecuada a la muestra. Es movible.
• CONDENSADOR: encargado, justamente de "condensar" los rayos luminosos provenientes de la fuente luminosa. Dependiendo de su apertura los rayos se condensaran más o
• LUZ: como bien se dijo, el microscopio puede tener una fuente luminosa propia, o bien un
espejo que haga rebotar la luz del medio externo.
Esto nos indica que la muestra se encuentra
correctamente enfocada. Paso seguido,
movemos un poco el tornillo micrométrico
para darle algo de definición al preparado.
Ya enfocados podemos explorar el preparado con el objetivo panorámico, utilizando el
controlador de movimiento del portaobjetos. Si queremos aumentar la imágen, vamos a mover el revólver hacia un objetivo
de mayor aumento - seco débil y únicamente accionar el micrométrico para darle
nitidez a la imágen, nunca mover el
macrométrico ya que perderemos la imágen y será muy difícil volver a enfocarla si es
que no tenemos mucha experiencia con el
M.O. Esto es igual si se desea cambiar a un
objetivo de mayor aumento como lo es el
seco fuerte, nunca del macrométrico, siempre con el micrométrico.
a. Fundamentos de la microscopía
Como hemos visto hasta el momento, ya sabemos cómo accionar por primera
vez un microscopio óptico. Podemos decir que la parte práctica ya fue explicada. Pero, ¿cómo podemos hacer para sacarle el mejor provecho al
microscopio?, ¿por qué en la explicación anterior no se habló del diafragma por
ejemplo? Toda puesta en práctica se sostiene a través de una teoría, y esta nos
dirige hacia una fórmula:
¿Qué se entiende por límite de resolución? Se define como límite de resolución a la mínima distancia que debe haber entre dos estructuras para que un sistema de lentes lo visualice como separado. Entonces, al comparar dos sistemas de lentes en donde uno tiene un
menor limite de resolución que otro, podemos decir que vamos a poder visualizar con
más detalle una muestra en aquel microscopio que posea un límite de resolución
El límite de resolución del ojo humano es de 0,1 mm. O sea que podemos ver dos líneas
separadas, por ejemplo, hasta que estas dos no se encuentren a una distancia menor a 0,1
mm. Si las dos líneas se encontrasen a una distancia menor a 0,1mm, veríamos una sola
línea y no separadas. El LR de los microscopios ópticos es de 0,25 um (micrómetros).
Otro de los conceptos a tener en cuenta, es el de poder de resolución. Este se define como la
capacidad que tiene un sistema de lentes para visualizar dos objetos como separados. Su fórmula es igual a 1/LR.
Ahora bien, ¿de qué nos sirve esta fórmula? Pues bien, para aprovechar al máximo un microscopio óptico tendremos que aumentar o disminuir ciertos valores numéricos dentro de la
formula. Hasta ahora sabemos que a menor límite de resolución y a mayor poder de resolución mejor un microscopio es. Por lo tanto: si queremos que el LR disminuya debemos aumentar la apertura numérica (denominador) o bien, disminuir la longitud de onda (numerador). Con respecto a 0,61, no varía, claramente porque se trata de una constante. En el caso
de la fórmula de PR, sabemos que es 1/LR, entonces por un lado, si disminuimos el LR,
automáticamente aumenta el PR.
Otros tipos de microscopía óptica:
Microscopio de luz polarizada: a través de
un filtro de polarización, llamado "polarizador" que se coloca entre la fuente luminosa y la muestra, y otro aparte, el "analizador" entre el objetivo y ocular.
Microscopio de campo oscuro: posee un
condensador que ilumina la muestra con
una gran intensidad y de forma oblicua,
esto permite que el campo se vea oscuro y la
muestra bien brillante resaltando.
Microscopio de contraste de fase: convierte
la diferencia de fase en diferencia de intensidad. Utilizado para el estudio de células
vivas (estudios dinámicos, en movimiento)
Microscopio con focal: Solo observamos el
plano que está situado en el punto de foco
del sistema óptico eliminado a través de un
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Como bien dijimos, hay que aumentar la apertura numérica. La apertura numérica es el producto entre el índice de refracción del medio (se define como el medio en el que se encuentra
la lente, por lo general el medio es el aire cuyo índice de refracción corresponde a 1) y entre
la mitad del ángulo de aceptación máxima que puede entrar o salir de la lente. Si tenemos
una apertura numérica grande, las lentes podrán captar más luz y por lo tanto dar una imágen más brillante y de calidad.
Por otro lado, hay que mantener una longitud de onda preferentemente baja. La longitud de
onda, siendo algo breves, es la distancia que recorre una onda en un determinado intervalo
de tiempo. En la fórmula está representada por la letra griega lambda. El valor numérico de
esta longitud de onda, corresponderá a la de la luz blanca, ya que es la que utilizaremos en
clase. Si quisiéramos disminuir esta longitud de onda, existen filtros que se colocan para disminuirla y así obtener una mejor imágen. El mejor filtro es el azul.
2. Microscopía Electrónica
– Sangre, se observa la superficie externa de
Como se dijo anteriormente, durante la cursada no van a poder manipular microscopios
electrónicos, pero si es importante conocer qué imágenes nos permiten visualizar ya que las
encontraremos en muchos libros.
En principio debemos saber que un microscopio electrónico tiene un mayor poder de resolución, y por lo tanto un menor límite de resolución en comparación con el microscopio óptico. Esto nos indica que tendremos una mejor capacidad de ver dos puntos como separados.
Pero, ¿cómo lo hace? Esto es posible ya que los microscopios electrónicos no utilizan luz
como los ópticos, sino que utiliza un haz de electrones que pueden algunos o bien "barrer" u
otros "atravesar" la muestra.
Según lo que queramos ver y estudiar, existen dos tipos de M.E: de barrido (MEB) y de
transmisión (MET). La diferencia entre ambos se vale básicamente del modo en que los electrones atraviesan la muestra. Si el haz barre, será un MEB y si atraviesa la muestra, será un
Las imágenes que reproduce un microscopio electrónico son en blanco y negro, aunque por
computadora se puede manipular y colorear las muestras. Estas imágenes pueden mostrar el
relieve del tejido - MEB -, o bien mostrar la estructura interna de las células, incluso de sus
organelas - MET-.
La imágen se proyecta en una pantalla o bien, es capturada en una placa fotográfica. Las porciones de la muestra que fueron atravesadas por el haz de electrones aparecen más claras, y las
partes que absorbieron electrones debido a su gran densidad aparecerán oscuras.
III. Técnica Histológica
Para poder visualizar al microscopio óptico una muestra, previamente se siguen una serie de
pasos que permiten preparar esa muestra para su eventual estudio. Estos pasos comienzan
desde la toma de la misma hasta su montaje en el portaobjetos.
La siguiente seguidilla de pasos de preparación de la muestra a analizar, corresponde específicamente a la llamada "técnica de rutina” utilizada para microscopía óptica y para tinción con
hematoxilina y eosina. Paciencia, ya ahondaremos en eso.
1. Técnica histológica de rutina con hematoxilina y eosina.
(MET) – Una mitocondria, se exponen sus
Imagen manipulada, se le han agregado
colores digitalmente. MEB – Espermatozoides.
1)OBTENCION DE LA MUESTRA: la misma se puede tomar tanto de un organismo vivo
como uno no vivo. Si es vivo, al proceso de toma se lo llamará "biopsia", y si no es vivo, se lo
llamará "necropsia". Otros tipos de obtención de la muestra se da a través de raspajes (técnica utilizada en el Papanicolaou) y el extendido (para muestras de sangre).
2) FIJACIÓN: Mediante la utilización de fijadores químicos (glutaldheido, formaldehido formalina) o físicos (congelación o desecación), tiene como objetivo detener los procesos
celulares dinámicos mediante la insolubilización de los componentes estructurales de la célula
y la formación de enlaces cruzados entre moléculas proteicas. Además, la fijación inactiva
ciertas enzimas cuya función es la degradación de la célula muerta. Los contra de la fijación,
es que la formalina es un mal fijador de lípidos, por lo tanto las membranas celulares (compuesta principalmente de este componente) no serán fijadas.
3) DESHIDRATACIÓN: Este paso, y el siguiente, puede ser, como no, incluido en el paso de
"inclusión (en parafina)". El proceso de deshidratación se lleva a cabo pasando la muestra por
soluciones crecientes de alcohol, la cuales van del 60% al 100%. Esto se realiza, básicamente,
para quitarle el agua a la muestra. Las células contienen una gran cantidad de agua, que debe
ser removida. Decimos que el paso de deshidrataciónpodría ser incluido en el de inclusión
(de hecho, hay cátedras que aceptan esta denominación), ya que la causa de por qué hacemos
este paso y el siguiente, el de la aclaración, es para poder incluir correctamente en parafina la
4) ACLARACIÓN: Se realiza con xilol o tolueno. Este permite remover el alcohol y además
es importante aplicarlo ya que es soluble en parafina.
5) INCLUSIÓN (en parafina líquida): Se coloca la muestra en parafina líquida y se deja reposar hasta que la misma endurezca. El mismo proceso (pero al revés) lo vemos en la vida
cotidiana en las velas que están compuestas, justamente, por parafina y que por acción de la
llama, esta se derrite.
Volviendo a la inclusión, repetimos que este paso se vería impedido si la muestra previamente
no se deshidrata y aclara. Uno de los efectos adversos de realizar estos dos pasos previos, es la
pérdida de los lípidos de la muestra.
6) CORTE: una vez que la parafina endurece, obtenemos lo que se conoce como "taco". Este
mismo va a ser pasado por una máquina, llamada micrótomo, que va a cortar con una
cuchilla al taco en finas láminas de unos 5 a 15 um - micrómetros. Este aparato lo podemos
asemejar, si uno quiere, con una cortadora de fiambres.
7) MONTAJE: la muestra se coloca en un portaobjetos donde se le aplica un medio de montaje, como la albúmina, que sirve de adhesivo.
8) DESPARAFINIZACION: se vuelve a pasar la muestra por xilol o tolueno para remover la
9) COLORACIÓN O TINCIÓN: Luego de la desparafinización se debe rehidratar la muestra con soluciones decrecientes de alcohol, ya que si no, los colorantes serían en vano, ya que
Luego de estos dos pasos, se tiñe la muestra con hematoxilina, paso seguido se utiliza la eosina. A pesar de que este ultimo colorante también es hidrosoluble, resulta mucho más soluble
en alcohol, por lo tanto se deshidrata nuevamente la muestra antes de colorearla con eosina.
10) MONTAJE FINAL: se utiliza un cubreobjetos. Ente el portaobjetos y el cubreobjetos se
coloca una gota de bálsamos de Canadá o betún de Judea para que queden bien adheridos.
Algo que llama la atención del procedimiento anterior, es la no conservación de los lípidos.
¿Cómo hacer para conservarlos? Para ello se deben utilizar cortes por congelamiento del tejido, fijado en formalina y utilizar colorantes que se disuelvan en las grasas.
2. Técnica histológica para microscopía electrónica.
La preparación de una muestra para microscopía electrónica es igual al de la microscopía
óptica, con la diferencia de que ciertos pasos, son de alguna manera "reforzados" por la
necesidad de métodos más refinados. En el paso de "fijación" se debe utilizar el mejor fijador
que se pueda conseguir; primero se fija con glutaldheido (preserva las proteínas al establecer
enlaces cruzados entre ellas), seguida por un enjuague en buﬀer y la fijación con tetroxido de
osmio (preserva lípidos).El tetroxido de osmio es un metal pesado, lo cual mejora la formación ulterior de la imagen en el MET.
El paso de deshidratación es igual y luego el tejido se sumerge con una resina epoxi que luego
se polimeriza (plástico). Luego se corta con un micrótomo de cuchilla de diamante que permite cortes muchos más finos, a comparación de micrótomos comunes para microscopía
3. Tinción H&E
En microscopía óptica, es de suma importancia teñir las muestras con diversos colorantes. La
mayoría de las muestras que vas a utilizar durante toda tu cursada, básicamente, están teñidas
con hematoxilina y eosina, dos colorantes diferentes, y que funcionan de manera diferentes.
Antes de saber qué tiñen, tenemos que entender cómo lo hacen. Para eso vamos a repasar
conceptos básicos que se han visto en Química del CBC.
a. Concepto de ácidos y bases
Un ácido es una sustancia capaz de ceder protones (H+); y una base, es aquella sustancia
capaz de aceptar protones (H+). Entonces podemos decir que si el acido dona protones, tendría una carga neta negativa, y las bases tendría una positiva ya que aceptan ese par.
El valor de acidez o alcalinidad (basicidad) está determinado a través de una escala: la escala
de pH. El valor de pH es igual al logaritmo negativo de la concentración de ion hidronio y el
de pOH al de la concentración del ion hidroxilo en disolución acuosa.
Esta misma oscila entre 0, que será el más acido, y 14, el más básico.
Cuando se combinan un ácido y una base, tiene lugar una reacción de neutralización, en la
que se formarán agua y sal.
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Técnica Histológica Hematoxilina - Eosina
b. Fundamentos de la tinción con hematoxilina-eosina (H&E)
celulares basofilos
Componentes celulares acidófilos
Heterocromatina Filamentos citoplas– nucléolo (grupo
máticos (células musfosfato) – ergatoculares) – fibras.
La tinción con H&E tiene un fundamento químico basado en la atracción de cargas. Es por
ello que introducimos los conceptos de "ácidos y bases". Pasando en limpio, dijimos que una
base al aceptar protones poseerá una carga neta positiva (+), mientras que los compuestos
ácidos, al ceder esos protones, pasarían a tener una carga neta negativa (-).
Como dijimos al principio, la histología se encarga del estudio de los tejidos, los cuales se
encuentran conformados por células. Las células están formadas por organelas. Las organelas
son un conjunto de moléculas, y sabemos que las moléculas, sustancias, tienen cargas. Los
colorantes, como la hematoxilina y eosina (y otros) también poseen cargas.
*Existen colorantes ácidos, como la eosina, naranja G, y la fucsina ácida; que se unen, por
atracción de cargas, a compuestos con carga positiva. Recordemos que "los opuestos se
atraen" por lo tanto, positivo con negativo se atraerán. Como ya sabemos que los ácidos
poseen una carga neta negativa, se unirá, como bien dijimos a los compuestos positivos, o
bien, básicos. También, cabe aclarar que se une a los grupos amino (NH2) de las proteínas
(las proteínas son polímeros de aminoácidos, los cuales poseen un grupo amino y un ácido
carboxílico en sus extremos, es justamente con este grupo amino con el que reaccionan los
colorantes ácidos). ¿Que estructuras podemos encontrar en las células que sean básicas, o
bien sean proteínas? Mitocondrias (debido a sus proteínas a nivel de sus membranas y matriz), componentes del citoesqueleto, etc. Los componentes que se tiñen con colorantes ácido, son llamados "acidófilos" - "aman lo ácido". Entonces podemos decir que las mitocondrias son acidófilas.
La eosina como bien dijimos, es un colorante ácido de color rojo, que por lo general, en las
muestras lo veremos de un color más bien rosado. Seguramente, en la muestras, vas a ver que
las tonalidades de este rosa varían entre rosa claro a rosa algo más oscuro llegando casi al rojo.
Esto se debe a la concentración de un cierto componente dentro de la célula. Por ejemplo,
muchas células se ven intensamente acidófilas y esto es debido a la gran concentración de
mitocondrias dentro de ella. Como sabemos, las mitocondrias son la principal fuente de energía celular, y por lo tanto, esta intensa acidofilia nos hace razonar que la célula que observamos con esas características debe tener un alto requerimiento energético. De eso se trata la
histología, de saber interpretar, a través de la tinción y de sus diferentes tonalidades lo que
Los colorantes básicos, como la hematoxilina, azul de toluidina, azul de metileno, los azures
y el verde de metilo, se unen por atracción de cargas, a compuestos con carga negativa. Como
los opuestos se atraen, al tener las bases carga positiva, se unirán a la carga negativa de los
compuestos celulares ácidos con carga negativa justamente. ¿Qué estructuras podemos encontrar en las células que sean ácidas? Principalmente, el ADN y ARN. En el caso del ADN
veremos al núcleo celular, esférico, y muchas veces al nucléolo; con respecto al ARN podemos nombrar a los ribosomas que si recordamos un poco de biología celular tienen ARN
ribosomal (ARNr).
Los componentes que se tiñen con colorantes básicos, son llamados "basófilos" - "aman lo
básico". Entonces, podemos decir que los ribosomas son basófilos.
La hematoxilina es un colorante básico cuyo color es el azul, que por lo general, en las
muestras lo veremos de un color más bien violeta. Lo mismo que ocurre con la eosina, veremos en las muestras tonalidades diferentes de violeta y esto se fundamenta por las diferentes
concentraciones de compuesto.
Si vemos, por ejemplo un núcleo violeta claro (basófilo pálido) y observamos al nucléolo con
un violeta intenso (basofilia intensa), quiere decir que dentro del núcleo, el ADN se encuentra laxamente dispuesto, en su forma de eucromatina, y si es que así se encuentra sabemos
que el ADN se dispone así para poder permitir una correcta transcripción del mismo; y qué
es por eso que en la muestra se evidencia el nucléolo. Si en cambio, el núcleo se ve con una
basofilia medianamente intensa y bien esférico, sin poder ver el nucléolo, decimos que el
ADN está en su estado mas compactado, heterocromático.
4. Otros tipos de tinción
• PAS - ácido Peryodico reactivo de Shiﬀ: es una técnica que tiñe hidratos de carbono (glúcidos), por ejemplo: algunas membranas celulares. El ácido Peryodico oxida a los grupos
oxhidrilos (OH) y forma grupos aldehídos. Así el reactivo de Shiﬀ puede "unirse" a este
grupo aldehído y colorear la muestra. La coloración es roja fuerte.
• FEULGEN: técnica especial para ADN. Se basa en el reconocimiento de los grupos aldehído de la pentosa del ADN (azúcar). Primero se realiza una hidrólisis ácida para romper
los puentes de hidrogeno que une a los nucleótidos, utilizando ácido clorhídrico. Los grupos aldehído liberados por la hidrólisis son teñidos con el reactivo de Shiﬀ. Se teñirá de
rojo/fucsia.
• SUDÁN: técnica especial para teñir lípidos.
Se observan de color negro.
Otras técnicas a tener en cuenta…
• Orceína y fucsina resorcina: utilizado para material elástico
• Impregnación argentica: utilizado para fibras reticulares, membranas basales.
• Tricrómico de Mallory: usa 3 colorantes ácidos: azul de toluidina, fucsina ácida y
naranja G. Tiñen el colágeno, citoplasma y eritrocitos (glóbulos rojos/hematíes)
Existen ciertos colorantes que a simple vista poseen un color determinados, supongamos “A”.
Cuando teñimos una muestra con este colorante de color A, observamos que vira (cambia) su
color hacia uno B, totalmente diferente. A esta propiedad de ciertos colorantes de virar su
coloración se lo denomina metacromasia.
Pasando en limpio: es la propiedad de ciertos colorantes de virar su color frente a tejidos en
donde existan sectores de concentración de polianiones (exceso de cargas negativas). Ya
habíamos explicado anteriormente, que si existe una cantidad excesiva del producto que el
colorante va a teñir, esta tinción se intensificaría; algo parecido pasa con este tipo de colorantes.
IV. ¿Cómo observar las muestras?
Hasta el momento, hemos aprendido el correcto uso del microscopio, cómo se tiñen y
preparan las muestras y cómo identificar estructuras en los preparados. Ahora, tenemos que
saber qué estamos mirando, y por qué se ven ciertas estructuras de diferentes maneras.
Partiendo de una base, hemos dicho que durante los pasos de la técnica histológica, a grandes
rasgos: colocamos el pedazo de muestra tomado de un organismo vivo o no vivo, lo incluimos en parafina y formamos un taco solido que va a ser cortado. El micrótomo puede
cortar a este taco en diversas direcciones según cómo nosotros lo deseemos. Como bien dimos el ejemplo antes, podríamos asemejar al micrótomo con una cortadora de fiambres. Intentemos realizar el siguiente razonamiento, y luego apliquémoslo a la práctica histológica.
Supongamos que tenemos una naranja que va a ser deslizada por un micrótomo; dependiendo de cómo yo corte esa naranja, es lo que voy a ver de su estructura interior. Si hago un
corte longitudinal no vería lo mismo que si hago un corte transversal / horizontal. Probemos
con otra estructura: un rollo de cocina. Como sabemos, el rollo de cocina (tubo de cartón
envuelto por paños de papel) es un tubo, hueco; si lo cortamos longitudinalmente, veríamos
a los costados los paños (papeles) y en el centro el tubo exponiendo su parte cóncava. Si hiciéramos un corte transversal observaríamos un tubo hueco envuelto por estos paños.
Si es que ya se dieron cuenta, lo mismo sucede al cortar con
un micrótomo las muestras
tomadas de los organismos.
En el cuerpo humano, y en
todos los animales, existen
órganos huecos (como el
rollo de cocina) y macizos
(como la naranja). Por
nombrar algunos huecos
diríamos: intestino delgado,
esófago, arterias, etc. Y macizos: hígado, bazo, cerebro, etc. Si estamos observando un órgano repleto de “tubos” como
lo es el riñón, tenemos que tener en cuenta que a causa de la “incidencia de corte” nosotros
vamos a ver en partes del preparado zonas en donde observamos parte del tubo en corte
transversal (cilindros con un hueco dentro) y otras zonas con cortes longitudinales (dos láminas encerrando el hueco, como pasaba con el rollo de cocina).
Lo que tenemos que tener en cuenta es que, más allá de estructuras macizas y huecas, también sucede con las formas. A partir de ahora, y no solo en Histología, sino en Anatomía y
Embriología, te vas a empezar a familiarizar con los cortes. Para poder interpretar una imagen en 2D, vas a tener que conocer su forma en 3D. Igual que hicimos al principio con la
naranja y el rollo. Es importante entender esto, ya que muchas veces confundimos dos estructuras que son exactamente lo mismo, pero que tienen distinta incidencia de corte, como
dos estructuras diferentes. Paciencia, esto lleva práctica, pero te vas a ir familiarizando con
estas estructuras y con la práctica te darás cuenta que es muy sencillo.
Estructura tubular en corte transversal, se ve
el hueco dentro y el tejido envolviéndolo.
Estructura tubular en corte longitudinal, se
ve al hueco entre dos porciones de tejido
(que es el que envuelve el tejido).
Pag 18 Nuevo Espacio Ciencias Medicas
V. Tejidos
Como bien dijimos, un tejido es un conjunto de células organizadas para un propósito
común. Poseemos solo 4 tejidos básicos. Es importante que recuerden que son únicamente 4,
ya que dentro de cada uno, existe la posibilidad de que haya una subclasificación del mismo
y, con el tiempo, el estudiante suele confundirse y por lo tanto fallar con esta simple pregunta
el día del examen: Nombrar los tejidos básicos.
Durante la primer mitad de la cursada van a conocer a estos 4 tejidos para luego poder reconocer órganos.
Este tejido, reviste las superficies corporales, tapiza las cavidades (estructuras ahuecadas) y es
el responsable de la formación de las glándulas. Al microscopio óptico (MO) vamos a visualizarlo como una aglomeración de células, muy juntas entre sí, casi sin espacio entre ellas.
Las células se disponen una al lado de la otra (yuxtaposición) y pueden aglomerarse a través
de estratos: simples o estratificados.
Cada célula que compone a un epitelio toma diversas formas: plana, cilíndrica o cúbica. A
través de sus formas y la cantidad de estratos podemos reconocer a los epitelios y así, nombrarlos. Así tendremos epitelios simples planos/cilíndricos/cúbicos; y estratificados planos/
cilíndricos/cúbicos.
Este tipo de tejido, siempre lo vamos a ver libre: nunca encontraremos otro tejido por encima
de él. Por ejemplo la epidermis de la piel, es tejido epitelial. No hay nada por encima de la
piel más que tejido epitelial, por eso decimos que reviste superficies o tapiza cavidades.
Como vemos, su nombre “conectivo” nos está queriendo decir algo. Este tipo de tejido, justamente “conecta” dos tejidos básicos entre sí. Sustenta o bien subyace a los otros 3 tejidos básicos.
Lo vamos a encontrar por debajo de los epitelios proveyéndole sostén.
Al MO es totalmente opuesto al tejido epitelial. Aquí las células se hayan más distanciadas entre
si y no se encuentran unidas. Hay abundante matriz extracelular que “rellena” ese espacio extracelular.
Ya que la matriz extracelular (MEC) es lo que abunda en este tejido, a partir de ésta, se van a
denominar los diferentes tipos de tejidos conectivos (TC). Existen dos tipos de clasificación:
tejidos conectivos no especializados, y especializados
Los TC no especializados se diferencian según qué tipo de fibra abunda en la MEC. En este caso
tendremos TCNE colágenos, elásticos, reticular y mucoso.
Los TC especializados pueden ser cartilaginosos, óseos, sanguíneo, linfoide y adiposo.
Este tipo de tejido comprende todo lo que son los músculos y tienen una característica particular: su remarcada acidofilia. Las células musculares son células de alto requerimiento energético, esto se lo brindan las mitocondrias, y si recordamos unas páginas atrás, las mitocondrias contenían muchas proteínas en sus membranas, sitio de acople del colorante eosina.
Además, las células musculares contienen en su citoplasma cantidades de proteínas específicas
para que éstas puedan contraerse.
Al MO vamos a observar a las fibras musculares o bien, células unidas entre sí. Esto es debido
a la función que cumple los músculos: si las células actúan en conjunto y se intercomunican
entre sí, la contracción será un éxito.
Este tipo de tejido se denomina así ya que está compuesto por un solo tipo celular: las células
nerviosas (neuronas) y otras células de sostén (células de la glía) que aparecen únicamente en
este tipo de tejido.
I. Introducción a la Embriología.
En la especie humana, al igual que en muchas otras especies, encontramos dos
sexos, masculino y femenino. Los integrantes de la especie humana necesitan
de la union de miembros de ambos sexos para reproducirse y, de esa forma,
permitir la sobrevida y evolución de la especie. Cada uno de los sexos tiene
órganos, células y comportamientos característicos que permiten la reproducción.
En un cuadro comparativo, diferencie mitosis de meiosis
El ser humano está conformado por un gran numero de pequeñas unidades denominadas células. Estas células no son todas iguales, sino que conforman muchos tipos
celulares con funciones diferentes. En el organismo humano encontramos células de
dos clases distintas, la primera de ellas son las células somáticas, que conforman la
mayor parte del individuo. Algunas de estas células somáticas darán origen a la segunda clase de células, las células germinales, células especializadas cuya función es la
generación de un nuevo individuo que sobrevivirá al que le dio origen. Las células
germinales totalmente maduras son llamadas gametas, y son generadas por ambos
sexos. De la union de una gameta masculina con una gameta femenina, hecho conocido con el nombre de fecundación, se genera un nuevo individuo de la especie conformado, en un principio, solo por células somáticas. Nuevamente este nuevo individuo recién formado, crecerá y se desarrollara hasta poder generar nuevas gametas
para la generación de un nuevo individuo de la especie. De esta forma, se genera un
ciclo mediante el cual las células germinales se unen para crear un individuo conformado por células somáticas, que producirán, células germinales que nuevamente
generaran un nuevo individuo. Este ciclo a lo largo de las distintas generaciones
permite el desarrollo y sobrevida de una especie.
De lo dicho anteriormente se desprende que podemos estudiar tanto el desarrollo de una especie, a través del desarrollo de los individuos integrantes de la
misma, o simplemente el desarrollo de la vida de los individuos, desde su
nacimiento hasta la muerte. La rama de biología que se dedica al estudio del
desarrollo de un individuo, perteneciente a una especie dada, desde el inicio
de su desarrollo (fecundación) hasta la muerte recibe el nombre de Ontogenia, mientras que la filogenia se dedica al estudio de la evolución de las diferentes especies a partir de una común.
Embriología: Esta ciencia tiene un campo incluso mas limitado que las dos nombradas anteriormente, y es abarcada por las mismas, la embriología se dedica al estudio del desarrollo de
un individuo durante el lapso comprendido entre la fecundación y el nacimiento. Es así como
la embriología es parte de la ontogenia y a su vez las diferentes ontogenias conforman la filogenia.
Dentro del tiempo total de gestación, la embriología divide al desarrollo
prenatal en periodos, esta división no es aleatoria y se explica por características propias del desarrollo embrionario:
1. Periodo preembrionario: Se encuentra conformado por las dos
primeras semanas de vida. No todos concuerdan con el nombre dado a
estas dos primeras semanas de vida. El =embrion= en este periodo se encuentra constituido por células que conformaran el embrion propiamente dicho y otras que generaran estructuras anexas. Las células que
conformaran el embrion se encuentran muy poco diferenciadas, y tienen
la capacidad de generar todo el embrion y cada una de sus partes, desde
una hígado, bazo, corazón, es decir, son totipotenciales.
2. Periodo embrionario: Es el comprendido entre la semana 3 y la semana
8 del desarrollo. En este periodo, a partir de las células antes mencionadas,
se forma la estructura básica del embrion y se generan los esbozos de todos los órganos y sistemas del mismo, adquiriendo ya facciones humanas
muy características; por tal motivo, este periodo es considerado de
organogenesis y morfogenesis.
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3. Periodo fetal: Desde la novena semana hasta el momento del nacimiento.
Luego de concluir el periodo anterior, los órganos formados distan mucho de ser maduros. En este periodo tales órganos se diferencian y maduran para alcanzar a tener la arquitectura y funcionalidad necesaria para el
La fecundación consiste en la convergencia de dos vidas distinta y separadas, en la
formación de una vida nueva y única; es la fusión de dos gametas (células sexuales o
germinales), que obtiene como resultado la formación de un nuevo ser.
La Fecundación es una secuencia de eventos que terminan con la generación de un
nuevo individuo, a través de la fusión de la gameta femenina con la masculina. Las
gametas posen enormes diferencias, la masculina debe abandonar al organismo que
las produce y ser transportadas al cuerpo femenino, lugar donde se producirá la
fusión de las gametas. Las gametas masculinas, los espermatozoides, son producidas
constantemente y deben experimentar cambios que las prepara para la fecundación.
Las gametas femeninas son liberadas regularmente por mes; está regulada por un
mecanismo endocrino.
Se puede dividir en principio a la fecundación en dos grandes etapas: Capacitación
y Activación, y cada una de estas posee subdivisiones.
La fecundación finaliza con la ANFIMIXIS, cuando se produce la primera división
de SEGMENTACION de la Célula huevo, esta división como las restantes se realiza por otro mecanismo ya conocido por nosotros, Mitosis.
1. Organos Sexuales
Los órganos sexuales producen por medio de sus gonadas a las células sexuales llamadas gametas que son las que se unen en el momento de la fecundación.
Los órganos sexuales masculinos se encuentran conformados, en primera instancia,
por la gonada, llamada testículo, que se encuentra dentro del escroto, y es el órgano
encargado de la producción de los espermatozoides (gametas masculinas). Dentro
de los testículos encontramos unos conductos llamados tubulos o conductos seminiferos, que están conformados por las células de sertoli y los espermatozoides,
como así también por los estadios entre espermatogonia y espermatozoides.
También el testiculo cumple con la función de producir las hormonas masculinas,
los androgenos, de los cuales el mas importante es la testosterona. Estos androgenos
son producidos por las células de leydig, que se encuentran rodeando a los conductos seminiferos.
Por otro lado, tenemos al órgano copulador, el pene, que es el
encargado de depositar los espermatozoides dentro del tracto
genital femenino, en la vagina.
Entre los testiculo y el penen existe un sistema de conductos,
que transporta los espermatozoides hasta el pene, y glándulas
anexas que producen el liquido seminal. El sistema de conductos comienza con el epididimo, que recibe lo espermatozoides
del testiculo. El epididimo se comunica con los conductos
seminiferos a través de la llamada res de haller o rete testis y los
conductillos eferentes. El epididimo al salir del escroto se continua con el conducto deferente. Este último recibe las secreciones producidas de las vesículas seminales, y a partir de este
lugar toma el nombre de conducto eyaculador y se mete dentro
de la próstata. Una vez dentro de la próstata el conducto eyaculador desemboca en la uretra, que se encuentra dividida en
tres porciones, la porción donde desemboca el conducto eyaculador es la primera porción, la uretra prostatica. Luego la uretra
prostatica se continua con la uretra membranosa, que recibe las
secreciones de la glándula bulbouretral, y por ultimo continua
en la uretra peneana, y desde aquí al exterior.
En el sexo femenino la gonada es el ovario, y las gametas que producen son llamadas
comúnmente ovulos, aunque en realidad, como veremos mas adelante, en la especie
humana las gametas son los ovocitos II. en el ovario los ovocitos se encuentran
rodeados por células foliculares conformando estructuras llamadas folículos. Al igual
que el testiculo, el ovario también produce hormonas, en este caso femeninas, estas
son las progesterona y los estrogenos, de los cuales el mas importante de estos últimos es el estradiol. Estas hormonas son producidas por células endocrinas homologas
a las células de Leydig, que se encuentran entre los folículos.
Ciclo menstrual: comente las hormonas
implicadas y los cambios que ocurren a
nivel de ovario y endometrio.
En el sexo femenino el órgano copulador, encargado de recibir al pene y a los espermatozoides, es la vagina.
Entre los ovarios y la vagina también tenemos un sistema de conductos encargado de
transportar al ovocito II y a los espermatozoides en el momento de la fecundación.
Estos conductos comienzan con las trompas de falopio, que reciben al ovocito II
luego de la ovulación, aunque no existe comunicación directa entre las trompas y el
ovario. El ovocito II es liberado a la cavidad abdominal y, desde allí, es absorbido por
el extremo distal de la trompa de falopio; es aquí donde se encuentran ambas gametas.Las trompas están comunicadas con el utero, órgano encargado de transportar
a los espermatozoides, y posteriormente, albergar al embrion. El utero se comunica,
por el otro extremo, con la vagina. Por ultimo, tenemos los órganos sexuales externos, estos son el monte de venus, el clítoris, los labios menores y los labios
mayores, que formen la vulva.
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Compare los procesos de maduración y capacitación de espermatozoides:
Lugar dónde ocurre
¿qué sucede con..
moléculas de reconocimiento celular?
cargas eléctricas?
Consumo de O2: actividad del espermatozoide
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#01 Histología & Embriología

References: resolución 
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