Source: https://www.neogen.com/de/solutions/allergens/veratox-gliadin-r5/
Timestamp: 2020-07-10 19:47:55+00:00

Document:
Veratox für Gliadin R5/ Gluten
Quantifizierungsbereich 2,50 ppm Gliadin - 40,00 ppm Gliadin
Rot markierte Mikrotiterstreifen mit 48 Vertiefungen zum Transferieren der Proben und Kontrollen
6 gelb etikettierte Flaschen mit 0, 2,5, 5, 10, 20 und 40 ppm Gliadin-Kontrollen (0, 5, 10, 20, 40 und 80 ng/mL Gliadin)
1 Folienbeutel mit 10 mM PBS- Extraktionssolventspulver; jeder Beutel enthält eine ausreichende Menge Pulver zur Herstellung von 1 L Verdünnungspuffer
50 g Extraktionsadditiv in 2 Probenbechern
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Fotometer mit 650 nm Filter (Neogen® Art. 9303)
Messzylinder für 10-20 mL (Neogen Art. 9447)
Messzylinder für 250 mL (Neogen Art. 9368)
1-L-Flasche (Neogen Art. 9472)
12-Kanal-Pipette, 50-200 µL (Neogen Art. 9273)
Reagenz-Reservoire, 3er-Set (Neogen Art. 9435)
7-mL-Röhrchen bzw. Vial (Neogen Art. 9468)
Pipettenpumpe für serologische Röhrchen (Neogen Art. 9277)
Pipetten, steril, serologisch, 10 mL (100 Stk) (Neogen Art. 9415)
Ethanol in Laborqualität (95 %)
Papiertuch o.Ä.
Methode für nicht-wärmebehandelte Proben (Extraktion A oder B)
Röhrchen, 50 mL (Neogen Art. 9381) oder Flasche, 125 mL (Neogen Art. 9398)
Waage ± 0,1 g (Neogen Art. 9427, 9395)
Orbitalrotator (Neogen Art. 9396) bzw. Orbitalschüttler für 50-mL-Röhrchen
Cocktailmethode für wärmebehandelte Proben (Extraktion C)
Gliadin Renaturierungs-Cocktaillösung für wärmebehandelte Proben (Neogen Art. 8515, 8515B, 8515S)
Orbitalrotator (Neogen Art. 9396)
Waage ± 0,01g (Neogen Art. 9395)
Wasserbad bzw. Ofen bei 50°C
Quantifizierungsbereich: 2,5 – 40 ppm
Enthaltene Kontrollen:
0, 2,5, 5, 10, 20 und 40 ppm Gliadin
0, 5, 10, 20, 40 und 80 ppm Gluten
Tests pro Kit: Bis zu 36
Validierung: AOAC-RI 061201
Veratox® für Gliadin R5, Englisch – USA Veratox® für Gliadin R5, Englisch – Großbritannien Veratox® für Gliadin R5, Deutsch Veratox® für Gliadin R5, Französisch Veratox® für Gliadin R5, Schwedisch – Schweden Veratox® für Gliadin R5, Ungarisch – Ungarn Veratox® für Gliadin R5, Dänisch – Dänemark Veratox® für Gliadin R5, Spanisch – Mexiko/Mittelamerika
Veratox für Gliadin R5 ist ein Sandwich-Enzyme-linked Immunosorbent Assay (S-ELISA). Gliadin wird aus den Proben mit einer 60%igen Ethanollösung durch Schütteln in einem Schüttler oder Rotator extrahiert. Der Extrakt wird in phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) verdünnt und die verdünnten Proben werden in die mit R5-Antikörper beschichteten Vertiefungen (Fängerantikörper) gegeben, wo Gliadin während eines Inkubationsschrittes an den Antikörper bindet. Ungebundenes Gliadin wird durch Waschen entfernt und ein zweiter, enzymmarkierter R5-Antikörper (Detektionsantikörper) wird hinzugefügt. Der Detektionsantikörper bindet während eines weiteren Inkubationsschrittes an das Gliadin. Ungebundener enzymmarkierter Antikörper wird durch Waschen entfernt und ein Einschritt-Substrat wird hinzugefügt. Durch die Präsenz des gebundenen markierten Antikörpers entwickelt sich eine Färbung. Ein Stopp-Reagenz wird hinzugefügt und die Farbentwicklung der resultierenden Lösung beobachtet. Eine blaue Färbung zeigt an, dass eine hohe Gliadin-Konzentration in der Probe vorhanden ist, während violette oder rote Proben wenig oder gar kein Gliadin enthalten. Die optischen Dichten der Kontrollen bilden eine Standardkurve und die optischen Dichten der Probe werden gegen die Kurve aufgetragen, um die genaue Gliadin-Konzentration in Parts per Million (ppm) zu berechnen.

References: Art. 9303
 Art. 9447
 Art. 9368
 Art. 9472
 Art. 9273
 Art. 9435
 Art. 9468
 Art. 9277
 Art. 9415
 Art. 9381
 Art. 9398
 Art. 9427
 Art. 9396
 Art. 8515
 Art. 9396
 Art. 9395