CELEX: 31985L0503
Language: es
Date: 1985-10-25 00:00:00
Title: Primera Directiva 85/503/CEE de la Comisión, de 25 de octubre de 1985, relativa a métodos de análisis de caseínas y caseinatos alimentarios

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31985L0503

Primera Directiva 85/503/CEE de la Comisión, de 25 de octubre de 1985, relativa a métodos de análisis de caseínas y caseinatos alimentarios  

Diario Oficial n° L 308 de 20/11/1985 p. 0012 - 0024 Edición especial en finés : Capítulo 13 Tomo 14 p. 0208  Edición especial en español: Capítulo 13 Tomo 19 p. 0020  Edición especial sueca: Capítulo 13 Tomo 14 p. 0208  Edición especial en portugués: Capítulo 13 Tomo 19 p. 0020 

 PRIMERA DIRECTIVA DE LA COMISIÓN    de 25 de octubre de 1985    relativa a métodos de análisis de caseínas   y caseinatos alimentarios     ( 85/503/CEE )    LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS ,    Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad   Económica Europea ,    Visto la Directiva 83/417/CEE del Consejo , de 25 de   julio de 1983 , relativa a la aproximación de legislaciones   de los Estados miembros sobre ciertas lactoproteínas   ( caseínas y caseinatos ) destinadas a la alimentación   humana (1) , y en particular la letra b ) de su   artículo 9 ,    Considerando que la letra b ) del artículo 9 de la   Directiva 83/417/CEE exige la determinación de métodos   de análisis comunitarios a fin de controlar la   composición de ciertas cafeínas y cafeinatos   alimentarios ;    Considerando que es posible adoptar una primera serie   de métodos para los que se han efectuado los   correspondientes estudios ;    Considerando que las medidas establecidas por la   presente Directiva concuerdan con el dictamen del Comité   permanente de géneros alimentarios ,    HA ADOPTADO LA PRESENTE DIRECTIVA :    Artículo 1    Los Estados miembros tomarán todas las medidas que se   precisen a fin de garantizar que los análisis necesarios   para la verificación de los criterios indicados en el   Anexo I se efectúen conforme a los métodos descritos en   el Anexo II .    Artículo 2    Los Estados miembros aplicarán las disposiciones   legales , reglamentarias y administrativas necesarias para   cumplir la presente Directiva a más tardar el 1 de mayo   de 1987 , e informarán de ello inmediatamente a la   Comisión .    Artículo 3    Los destinatarios de la presente Directiva serán los   Estados miembros .    Hecho en Bruselas , el 25 de octubre de 1985 .    Por la Comisión    COCKFIELD    Vicepresidente    (1) DO n º L 237 de 26 . 8 . 1983 , p. 25 .    ANEXO I    OBJETO DE LA PRESENTE DIRECTIVA COMUNITARIA SOBRE   MÉTODOS DE ANÁLISIS DE CASEÍNAS Y CASEINATOS   ALIMENTARIOS    I . Disposiciones generales    II . Determinación del contenido en humedad de :     - las caseínas ácidas , por el método 1 ,   Anexo II     - las caseínas - cuajos , por el método 1 ,   Anexo II     - los caseinatos , por el método 1 , Anexo II    III . Determinación del contenido en proteínas de :     - las caseínas ácidas , por el método 2 , Anexo II     - las caseínas - cuajos , por el método 2 , Anexo II     - los caseinatos , por el método 2 , Anexo II    IV . Determinación de la acidez valorable de :     - las caseínas ácidas , por el método 3 , Anexo II    V . Determinación de cenizas ( P2O5 ) incluido ) de :     - las caseínas ácidas , por el método 4 , Anexo II     - las caseínas - cuajos , por el método 5 , Anexo II    VI . Determinación del pH de :     - los caseinatos , por el método 6 , Anexo II    ANEXO II    MÉTODOS DE ANÁLISIS DE LA COMPOSICIÓN DE   CASEÍNAS Y CASEINATOS ALIMENTARIOS    DISPOSICIONES GENERALES    1 . PREPARACIÓN DE LA MUESTRA DE ANÁLISIS    1.1 . Observación general    La masa de la muestra presentada al laboratorio a   efectos de su análisis debe ser de 200 g como mínimo .    1.2 . Preparación de la muestra para el análisis   en laboratorio    1.2.1 . Homogeneizar cuidadosamente la muestra de   laboratorio , triturar los posibles grumos , sacudiendo   y girando con frecuencia el recipiente ( si es necesario ,   tras haber transferido toda la muestra a un recipiente   hermético al aire de capacidad doble del volumen de   la muestra a fin de poder efectuar esta operación ) .    1.2.2 . Verter en el tamiz 3.3 una parte lo más   representativa posible de la muestra cuidadosamente   homogeneizada ( alrededor de 50 g ) .    1.2.3 . Si la totalidad de los 50 g atraviesa completa   o casi completamente el tamiz ( un 95 % en peso , como   mínimo ) , utilizar para la determinación la   muestra preparada según 1.2.1 .    1.2.4 . Si no es así , moler los 50 g empleando   el dispositivo de moler ( 3.4 ) hasta que cumplan el   criterio de tamizado ( 1.2.3 ) . Pasar inmediatamente   toda la muestra tamizada a un recipiente hermético   al aire de capacidad doble del volumen de la muestra ,   y homogeneizar cuidadosamente agitando y girando   continuamente . Durante estas operaciones , tomar   precauciones para evitar toda modificación del contenido   en agua del producto .    1.2.5 . Tras preparar la muestra para la prueba ,   proceder todo lo rápidamente posible a la determinación .    1.3 . Recipientes    La muestra debe mantenerse siempre en un recipiente   hermético al aire y a la humedad .    2 . REACTIVOS    2.1 . Agua    2.1.1 . El agua utilizada para la preparación de   solución , de dilución o de solución de lavado   deberá ser agua destilada o agua desmineralizada   de pureza al menos equivalente .    2.1.2 . Cada vez que se haga referencia a una   « solución » o a una « dilución » sin   otra indicación , se tratará de una « solución   acuosa » o de una « dilución agua » .    2.2 . Sustancias químicas    Salvo cuando se indique lo contrario , todas las   sustancias químicas deberán ser de calidad analítica   reconocida .    3 . MATERIAL    3.1 . Lista de material    Las listas de material sólo comprenderán artículos   que tengan un empleo determinado y que respondan a   características particulares .    3.2 . Balanza analítica    Se entenderá por balanza analítica una balanza   con una precisión de pesada de al menos 0,1 mg .    3.3 . Tamiz    El tamiz deberá poseer un diámetro de 200 mm   e ir provisto de una tapa y un recipiente colector .   La tela metálica del tamiz ha de tener una abertura   nominal de 500 µm . Las tolerancias de abertura y   el diámetro del hilo metálico corresponderán a   los valores indicados en la norma ISO/3310/1 ( Tamiz   para pruebas - normas técnicas y comprobación -   primera parte : tela metálica ISO/3310/1 - 1975 , o   la última edición de esta norma ) .    3.4 . Dispositivo moledor    Permite , si es necesario , moler la muestra de   laboratorio sin provocar un calor excesivo y sin modificar   la humedad ( 1.2.4 ) . No deberá utilizarse un moledor   de martillo .    4 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    4.1 . Resultados    Si se cumplen las condiciones de reproducibilidad   aplicables a un método , se tomará como resultado   la media aritmética de dos determinaciones .    4.2 . Cálculo de porcentaje    Salvo cuando se indique lo contrario , deberán   calcularse los resultados como porcentaje en masa   de la muestra .    5 . ACTA DE LA PRUEBA    El acta de la prueba precisará el método analítico   empleado y los resultados obtenidos . Incluirá también   todos los detalles del procedimiento no previstos en   el método analítico o facultativos , así como   todas las circunstancias que hayan podido influenciar   los resultados obtenidos . El acta de la prueba dará   todas informaciones necesarias para la identificación   completa de la muestra .    MÉTODO 1    DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN HUMEDAD    1 . OBJETO Y ÁMBITO DE APLICACIÓN    El presente método permite determinar el contenido   en humedad de :     - las caseínas ácidas ,     - las caseínas - cuajos ,     - los caseinatos .    2 . DEFINICIÓN    Por contenido en humedad de caseínas y caseinatos   se entenderá la pérdida de masa que se obtiene   aplicando el método descrito a continuación .    3 . PRINCIPIO    Desecación a presión atmosférica , en una   estufa a 102 ° C ± 1 ° C , de una muestra de   prueba hasta obtener una masa constante . Se calcula   la pérdida de masa como porcentaje en masa de la muestra .    4 . EQUIPO    4.1 . Balanza analítica    4.2 . Cápsulas    De fondo plano y de material inalterable en las   condiciones de la prueba ( por ejemplo de níquel ,   aluminio , acero inoxidable o vidrio ) . Deben ir   provistos de tapas que ajusten perfectamente pero   que puedan retirarse rápidamente . Dimensiones   adecuadas : diámetro de 60 a 80 mm y profundidad   de unos 20 mm .    4.3 . Estufa a presión atmosférica    Bien ventilada y provista de un dispositivo de   termoregulación ( temperatura : 102 ° C ± 1 ° C ) .   La temperatura ha de ser uniforme en todo el interior   de la estufa .    4.4 . Desecador    Deberá contener gel de sílice activado   recientemente , provisto de un indicador hidrométrico ,   o un dispositivo de desecación equivalente .    4.5 . Instrumento para manipular las cápsulas    Por ejemplo , pinzas de laboratorio .    5 . PROCEDIMIENTO    5.1 . Preparación de la muestra para el ensayo    Véase el punto 1.2 de las « Disposiciones   generales » .    5.2 . Preparación de las cápsulas    5.2.1 . Colocar la cápsula destapada y su tapa   ( 4.2 ) en la estufa ( 4.3 ) , regulada a 102 ° C ±   1 ° C , durante al menos una hora .    5.2.2 . Colocar la tapa sobre la cápsula , introducir   la cápsula así tapada en el desecador ( 4.4 ) , dejar   enfriar a temperatura ambiente y pesar con precisión   de 0,1 mg ( m0 ) .    5.3 . Muestra de prueba    Introducir de 3 a 5 g de la muestra para pruebas   ( 5.1 ) en la cápsula , tapar ésta y pesar con   precisión de 0,1 mg ( m1 ) .    5.4 . Determinación    5.4.1 . Destapar la cápsula y colocarla junto con   la tapa en la estufa , regulada a 102 ° C ± 1 ° C ;   dejarla allí durante 4 horas .    5.4.2 . Colocar la tapa sobre la cápsula , introducirla   en el desecador , dejar enfriar a temperatura ambiente   y pesar con precisión de 0,1 mg .    5.4.3 . Destapar la cápsula y colocarla junto con   la tapa en la estufa durante una hora . Repetir a   continuación la operación descrita en 5.4.2 .    5.4.4 . Si la masa obtenida según 5.4.3 es inferior   en más de 1 mg a la obtenida según 5.4.2 , repetir   la operación descrita en 5.4.3 .    Si se obtiene un aumento de la masa , utilizar para   el cálculo la cifra más baja registrada ( 6.1 ) .    La duración total del secado no sobrepasa por   lo general 6 horas .    Designemos como m2 la masa final registrada ,   en gramos .    6 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    6.1 . Método de cálculo    La pérdida de masa de la muestra de prueba ,   expresada en porcentaje de masa , viene dado por la   fórmula siguiente :     ( m1 - m2 ) / ( m1 - m0 ) × 100    donde    m0 = masa en gramos de la cápsula y su tapa tras   la operación 5.2 ,    m1 = masa en gramos de la cápsula , su tapa y   la muestra de prueba antes del secado ( 5.3 ) ,    m2 = masa en gramos de la cápsula , su tapa y la   muestra de prueba tras el secado ( 5.4.3 . o 5.4.4 ) .    Expresar el resultado final con precisión de 0,01 % .    6.2 . Reproducibilidad    La diferencia entre los resultados de dos determinaciones   efectuadas simultáneamente con un breve intervalo   sobre la misma muestra , en las mismas condiciones y por   el mismo analista , no debe sobrepasar los 0,1 g de   humedad por 100 g de producto .    La probabilidad de no sobrepasar este valor es del   95 % de los casos .    MÉTODO 2    DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO EN PROTEÍNAS    1 . OBJETO Y ÁMBITO DE APLICACIÓN    El presente método permite determinar el contenido   en proteínas de :     - las caseínas ácidas ,     - las caseínas - cuajos ,     - los caseinatos ,    con excepción de los caseinatos que contengan amonio   u otros compuestos de amonio , o nitrógeno no proteico .    2 . DEFINICIÓN    Contenido en proteínas : contenido en   nitrógeno determinado por el método aquí   descrito , multiplicado por 6,38 y expresado como   porcentaje en masa .    3 . PRINCIPIO    Se ataca una muestra de prueba con una mezcla de   sulfato de potasio y de ácido sulfúrico en   presencia de sulfato de cobre ( II ) como   catalizador , a fin de transformar el nitrógeno   orgánico en nitrógeno amoniacal . Se destila   el amoniaco y se absorbe en una solución de   ácido bórico . Se valora mediante una   solución estándar de ácido clorhídrico . Se   obtiene el contenido en proteínas multiplicando   el contenido en nitrógeno por 6,38 .    4 . REACTIVOS    4.1 . Ácido sulfúrico concentrado , D20   1,84 g/ml    4.2 . Sulfato de potasio anhidro ( K2SO4 )    4.3 . Sulfato de cobre ( II ) pentahidratado   ( CuSO4-5H2O )    4.4 . Sacarosa ( C12H22O11 )    4.5 . Ácido bórico , solución de 40 g/l .    4.6 . Hidróxido sódico , solución   concentrada al 30 % en masa , exenta de carbonato .    4.7 . Ácido clorhídrico : solución estándar   a 0,1 mol/l .    4.8 . Indicador mixto : mezclar a volúmenes   iguales una solución de rojo de metilo   de 2 g/l en etanol de al menos 95 % ( en   volumen ) , y una solución de azul de   metileno de 1 g/l en etanol de al menos 95 %   ( en volumen ) .    5 . EQUIPO    5.1 . Balanza analítica    5.2 . Matraz de Kjeldahl , 500 ml    5.3 . Aparato de descomposición proteica    Debe permitir mantener inclinado el   matraz de Kjeldahl ( 5.2 ) e ir provisto de un   sistema de calentamiento que evite el calentamiento   de la parte del matraz situada por encima del   nivel del líquido .    5.4 . Condensador de tubo interior rectilíneo    5.5 . Tubo de salida    Con una ampolla de seguridad unída   al extremo inferior del condensador ( 5.4 )   por una conexión en vidrio esmerilado o un   tubo de goma . En este último caso , los   extremos de vidrio han de hallarse próximos entre   sí .    5.6 . Deflegmador    Unido al matraz de Kjeldahl ( 5.2 ) y al   condensador ( 5.4 ) mediante tapones de goma bien   ajustados .    5.7 . Matraz Erlenmeyer , 500 ml    5.8 . Probetas graduadas , 50 ml y 100 ml    5.9 . Bureta de 50 ml , graduaciones a 0,1 ml    5.10 . Reguladores de ebullición    5.10.1 . Para la descomposición proteica :   trozos pequeños de porcelana o bolas de vidrio .    5.10.2 . Para la destilación : gránulos   pequeños de piedra pómez .    6 . PROCEDIMIENTO    6.1 . Preparación de la muestra para la prueba    Véase el punto 1.2 de las « Disposiciones   generales » .    6.2 . Demostración del nitrógeno amoniacal    Si se supone la presencia de caseinato   de amonio o de otros compuestos amoniacales ,   efectuar la prueba siguiente : en un pequeño   matraz Erlenmeyer , añadir a 1 g de muestra 10 ml   de agua y 100 mg de óxido de magnesio . Enjuagar   el óxido adherido a la pared de vidrio , tapar   el matraz con un tapón de corcho , metiendo   entre el tapón y el cuello del matraz una tira   de papel tornasol humectada . Mezclar con   cuidado el contenido del matraz y calentar éste   en un baño a unos 60 ° C . Si el papel tornasol   vira a azul en los 15 minutos siguientes , esto   revela la presencia de amoniaco ; en este caso ,   el método no es aplicable ( véase el punto 1 ) .    6.3 . Prueba en blanco    Simultáneamente a la determinación del   contenido en nitrógeno de la prueba , efectuar   una prueba en blanco sustituyendo la muestra de prueba por   0,5 g de sacarosa ( 4.4 ) y utilizando el   mismo equipo , las mismas cantidades de reactivo   y el mismo procedimiento que los descritos   en el punto 6.5 . Si en la prueba en blanco   la valoración sobrepasa 0,5 ml de la solución   ácida de 0,1 mol/l , deberán verificarse   los reactivos y purificarse o sustituirse el   reactivo o los reactivos impuros .    6.4 . Muestra de prueba    Introducir en el matraz de Kjeldahl ( 5.2 )   de 0,3 a 0,4 g de la muestra ( 6.1 ) , pesados con   precisión de 0,1 mg .    6.5 . Determinación    6.5.1 . Introducir en el matraz algunos   trozos de porcelana o algunas bolas de   vidrio ( 5.10.1 ) , y aproximadamente 10 g   de sulfato de potasio anhidro ( 4.2 ) .    Añadir 0,2 g de sulfato de cobre ( II )   ( 4.3 ) y enjuagar el cuello del matraz con un   poco de agua . Añadir 20 ml de ácido   sulfúrico concentrado ( 4.1 ) y mezclar   el contenido del matraz .    Calentar suavemente sobre el aparato de   descomposición ( 5.3 ) hasta que desaparezca   la espuma . Hacer ebullir suavemente hasta   que la solución esté limpia y persista el   color verdiazul pálido . Agitar el matraz   de tiempo en tiempo durante el calentamiento .    Proseguir la ebullición regulando el   calentamiento , de forma que los vapores se condensen   en el centro del cuello del matraz . Continuar   calentando durante 90 minutos , evitando todo   sobrecalentamiento local .    Dejar enfriar a temperatura ambiente . Añadir   con precaución unos 200 ml de agua y algunos   granos de piedra pómez ( 5.10.2 ) . Mezclar   y dejar enfriar de nuevo .    6.5.2 . Introducir en el matraz Erlenmeyer   ( 5.7 ) 50 ml de la solución de ácido bórico   ( 4.5 ) y 4 gotas del indicador ( 4.8 ) . Mezclar .   Colocar el matraz Erlenmeyer bajo el condensador   ( 5.4 ) de manera que la extremidad del tubo   de salida ( 5.5 ) esté sumergida en la   solución de ácido bórico . Mediante   una probeta graduada ( 5.8 ) introducir en el   matraz de Kjeldahl 80 ml de la solución de hidróxido   sódico ( 4.6 ) . Durante esta operación debe   mantenerse el matraz inclinado de forma que la   solución de hidróxido de sodio fluya   a lo largo de la pared y forma una capa en la   parte inferior del matraz .    Volver a acoplar inmediatamente el matraz de   Kjeldahl al condensador por medio del   deflegmador ( 5.6 ) .    Mezclar el contenido del matraz de Kjedahl   haciéndolo girar suavemente . Hacer ebullir   suavemente al principio , evitando toda formación   de espuma . Continuar la destilación de forma   que se obtengan 150 ml de destilado en 30 minutos ,   aproximadamente .    El destilado debe poseer una temperatura   inferior a 25 ° C .    Unos dos minutos tras el término de   la destilación , bajar el matraz Erlenmeyer   de manera que el extremo del tubo de salida   no esté ya sumergido en la solución ácida ,   y enjuagar dicho extremo con un poco de   agua . Hacer cesar el calentamiento , levantar   el tubo de salida y enjuagar sus paredes interiores   y exteriores con un poco de agua , recogiendo el agua   de enjuagado en el matraz Erlenmeyer .    6.5.3 . Valorar el destilado del matraz   Erlenmeyer mediante la solución estándar   de ácido clorhídrico ( 4.7 ) .    7 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    7.1 . Modo de cálculo y fórmula    El contenido en proteínas de la muestra ,   expresado en porcentaje en masa , es igual a :     ( ( V1 - V2 ) × T × 14 × 100 × 6,38 ) /   ( m × 1 000 ) = 8,932 ( V1 - V2 ) × T ) /m    donde    V1 = volumen en ml de la solución estándar   de ácido clorhídrico ( 4.7 ) utilizado para   la determinación ( 6.5 ) ,    V2 = volumen en ml de la solución estándar   de ácido clorhídrico ( 4.7 ) utilizada   para el ensayo en blanco ,    T = concentración de la solución estándar   de ácido clorhídrico ( 4.7 ) en mol/l ,    m = masa , en g , de la muestra de prueba .    Expresar el contenido en proteínas con   precisión de 0,1 % .    7.2 . Reproducibilidad    La diferencia entre los resultados de dos   determinaciones efectuadas simultáneamente o con un   breve intervalo , en las mismas condiciones   y por el mismo analista , no debe sobrepasar los   0,5 g de proteínas por 100 g de producto .    Este valor tiene una probabilidad de no   sobrepasarse del 95 % de los casos , si el   método se lleva a cabo de forma correcta .    MÉTODO 3    DETERMINACIÓN DE LA ACIDEZ VALORABLE    1 . OBJETO Y ÁMBITO DE APLICACIÓN    El presente método permite determinar la   acidez valorable de las caseínas ácidas .    2 . DEFINICIÓN    Acidez valorable de las caseínas ácidas :   volumen , en mililitros de solución de   hidróxido sódico de 0,1 mol/l , necesario para   neutralizar un extracto acuoso de 1 g de producto .    3 . PRINCIPIO    Preparación y filtración de un extracto   acuoso de la muestra a 60 ° C . Valoración   del filtrado mediante una solución estándar   de hidróxido sódico , en presencia de fenolftaleína   como indicador .    4 . REACTIVOS    El agua utilizada para la aplicación del   método o la preparación de los reactivos   debe estar exenta de anhídrido carbónico ( a tal   fin , calentarla 10 minutos antes de usarla ) .    4.1 . Hidróxido sódico , solución a 0,1 mol/l .    4.2 . Fenolftaleína utilizada como indicador ,   solución de 1 g en 100 ml de etanol ( 95 %   en volumen ) , neutralizada con relación a un   indicador .    5 . EQUIPO    5.1 . Balanza analítica    5.2 . Matraz Erlenmeyer , 500 ml , con cuello   y tapón esmerilados .    5.3 . Pipeta graduada a 100 ml .    5.4 . Pipeta , adecuada para medir 0,5 ml   de la solución indicadora ( 4.2 ) .    5.5 . Matraz Erlenmeyer , 250 ml .    5.6 . Probeta graduada , 250 ml .    5.7 . Bureta con graduaciones de 0,1 ml .    5.8 . Baño de agua , regulable a una   temperatura de 60 ± 2 ° C .    5.9 . Filtro adecuado    6 . PROCEDIMIENTO    6.1 . Para la preparación de la muestra para   la prueba , véase el punto 1.2 de las   « Disposiciones generales » .    6.2 . Muestra de prueba    Pesar unos 10 g de la muestra con precisión   de 10 mg e introducirlos en el matraz Erlenmeyer   ( 5.2 ) .    6.3 . Determinación    Mediante la probeta de 250 ml ( 5.6 ) ,   añadir 200 ml de agua recientemente ebullida y enfriada ,   calentada previamente a 60 ° C . Cerrar   el matraz , mezclar por agitación de éste   y colocarlo en el baño a 60 ° C ( 5.8 )   durante 30 minutos . Agitar el matraz cada   10 minutos , aproximadamente .    Filtrar y dejar enfriar el filtrado a unos   20 ° C . El filtrado debe ser límpido .    Tomar con la pipeta ( 5.3 ) 100 ml del filtrado   enfriado e introducirlos en el matraz Erlenmeyer   ( 5.5 ) . Añadir 0,5 ml de la solución   indicadora de fenolftaleína ( 4.2 ) mediante   la pipeta ( 5.4 ) . Valorar mediante la solución   estándar de hidróxido sódico ( 4.1 ) hasta   que aparezca un color rosa pálido persistente   durante al menos 30 segundos . Anotar el volumen   utilizado con precisión de a 0,01 ml .    7 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    7.1 . Método y fórmula de cálculo    La acidez valorable de la caseína   viene dada por la fórmula :     ( 20 × V × T ) /m    donde    V = volumen en ml de la solución   estándar de hidróxido sódico   ( 4.1 ) utilizada ,    T = concentración , en mol/l , de la   solución estándar de hidróxido sódico ( 4.1 ) ,    m = masa , en g , de la muestra de prueba .    Expresar la acidez valorable con dos decimales .    7.2 . Reproducibilidad    La diferencia entre los resultados de dos   determinaciones efectuadas simultáneamente   o con un breve intervalo sobre la misma muestra ,   en las mismas condiciones y por el mismo analista   no debe sobrepasar 0,02 ml de solución de   hidróxido sódico para 1 g de producto .    Este valor tiene una probabilidad de no   ser sobrepasado del 95 % de los casos .    MÉTODO 4    DETERMINACIÓN DE CENIZAS ( P2O5 incluido )    1 . OBJETO Y ÁMBITO DE APLICACIÓN    El presente método permite determinar las   « cenizas » de : las caseínas ácidas   ( P2O5 incluido ) .    2 . DEFINICIÓN    Cenizas ( P2O5 incluido ) : sustancias determinadas   según el método descrito a continuación ,   expresadas como porcentaje en masa .    3 . PRINCIPIO    Incineración de una muestra de prueba a   825 ° C ± 25 ° C en presencia de   acetato de magnesio , destinado a fijar la   totalidad del fósforo de origen orgánico .   Se pesa el residuo y se sustrae la masa de cenizas   procedente del acetato de magnesio .    4 . REACTIVOS    4.1 . Acetato de magnesio tetrahidratado    Mg (CH3CO2)2 , 4H2O , solución de 120 g/l .   5 . EQUIPO    5.1 . Balanza analítica    5.2 . Pipeta graduada a 5 ml .    5.3 . Cápsulas de silicio o platino , de   unos 70 mm de diámetro y de 25 a 50 mm de   profundidad .    5.4 . Estufa de secado regulable a 102 ° C ± 1 ° C .    5.5 . Horno eléctrico de circulación de aire ,   regulable a 825 ° C ± 25 ° C .    5.6 . Baño de agua en ebullición    5.7 . Desecador con gel de sílice recientemente   activado , provisto de un indicador hidrométrico , o   un deshidratante equivalente .    6 . PROCEDIMIENTO    6.1 . Preparación de la muestra para la prueba    Véase el punto 1.2 de las « Disposiciones   generales » .    6.2 . Preparación de las cápsulas    Colocar 2 cápsulas ( 5.3 ) A y B en el horno   eléctrico ( 5.5 ) , regulado a 825 ° C ± 25 ° C ,   durante 30 minutos . Dejarlas enfriar un poco antes de   colocarlas en un desecador ( 5.7 ) hasta que se   enfríen a la temperatura ambiente , y pesarlas con   precisión de 0,1 mg .    6.3 . Muestra de prueba    Pesar con precisión de 0,1 mg unos 3 g de la   muestra ( 6.1 ) , directamente sobre una de las   cápsulas preparadas ( A ) .    6.4 . DETERMINACIÓN    Introducir en la cápsula A , mediante la pipeta   ( 5.2 ) , 5 ml exactos de la solución de acetato de   magnesio ( 4.1 ) , de manera que se humedezca toda   la muestra de prueba , y dejar reposar durante 20 minutos .    En la otra cápsula preparada ( B ) , introducir   con la pipeta ( 5.2 ) 5 ml exactos de la solución de   acetato de magnesio ( 4.1 ) .    Evaporar hasta la sequedad el contenido de ambas   cápsulas A y B , en el baño de agua en   ebullición ( 5.6 ) .    Colocar las dos cápsulas en la estufa ( 5.4 ) ,   regulada a 102 ° C ± 1 ° C , durante 30 minutos .    Colocar la cápsula A , con su contenido , sobre una   llama pequeña , una placa caliente o bajo una   lámpara de infrarojos , hasta que la muestra esté   completamente carbonizada y vigilando que ésta no   arda .    Colocar las dos cápsulas A y B en un horno eléctrico   ( 5.5 ) regulado a 825 ° C ± 25 ° C , y   dejarlas allí durante al menos 1 hora , hasta que las   partículas carbonosas de la cápsula A desaparezcan   completamente . Dejar enfriar un poco ambas cápsulas   y colocarlas en el desecador ( 5.7 ) hasta que alcancen   la temperatura ambiente , pesándolas luego con   precisión de 0,1 mg .    Repetir las operaciones de calentamiento durante   unos 30 minutos en el horno eléctrico , de enfriamiento   y de pesada hasta obtener una masa constante ( con   precisión de 1 mg ) , anotando la masa mínima .    7 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    7.1 . Método y fórmula de cálculo    Las cenizas ( P2O5 incluido ) de la muestra , expresadas   como porcentaje en masa , vienen dadas por la fórmula :     ( ( m1 - m2 ) - ( m3 - m4 ) ) /m0 × 100    donde    m0 = masa , en g , de la muestra de prueba ,    m1 = masa , en g , de la cápsula A con su contenido ,    m2 = masa , en g , de la cápsula A vacía ,    m3 = masa , en g , de la cápsula B con su contenido ,    m4 = masa , en g , de la cápsula B vacía .    Expresar el resultado final con precisión de 0,01 % .    7.2 . Reproducibilidad    La diferencia entre los resultados de dos determinaciones   efectuadas simultáneamente o con un breve   intervalo sobre la misma prueba , en las mismas condiciones   y por el mismo analista , no debe sobrepasar 0,1 g   por 100 g de producto .    Este valor tiene una probabilidad de no ser   sobrepasado del 95 % de los casos .    MÉTODO 5    DETERMINACIÓN DE CENIZAS ( P2O5 incluido )    1 . OBJETO Y ÁMBITO DE APLICACIÓN    El presente método permite determinar el contenido   en cenizas de las caseínas puras .    2 . DEFINICIÓN    Cenizas ( P2O5 incluido ) : sustancias determinadas   según el método descrito a continuación y   expresadas como porcentaje en masa .    3 . PRINCIPIO    Incineración de una muestra de prueba a 825 ° C ±   25 ° C hasta la obtención de una masa constante . Se   pesa el residuo obtenido .    4 . EQUIPO    4.1 . Balanza analítica    4.2 . Cápsulas de silicio o platino , de   aproximadamente 70 mm de diámetro y de 25 a 50 mm de   profundidad .    4.3 . Horno eléctrico    Horno de circulación de aire , regulable a   825 ° C ± 25 ° C .    4.4 . Desecador    Con gel de sílice activado recientemente , provisto   de un indicador hidrométrico , o cualquier deshidratante   equivalente .    5 . PROCEDIMIENTO    5.1 . Preparación de la muestra para la prueba    Véase el punto 1.2 de las « Disposiciones   generales » .    5.2 . Preparación de la cápsula    Colocar la cápsula ( 4.2 ) en el horno eléctrico   ( 4.3 ) , regulado a 825 ° C ± 25 ° C durante   30 minutos . Dejar enfriar la cápsula en el desecador   ( 4.4 ) hasta la temperatura ambiente . Pesar con   precisión de 0,1 mg .    5.3 . Muestra de prueba    Pesar directamente en la cápsula preparada , con   precisión de 0,1 mg , unos 3 g de la muestra ( 5.1 ) .    5.4 . Determinación    Calentar la cápsula , con su contenido , sobre una   llama pequeña , una placa caliente o bajo una   lámpara de infrarojos , hasta que la muestra esté   completamente carbonizada y vigilando que ésta no arda .    Colocar la cápsula en un horno eléctrico ( 4.3 )   regulado a 825 ° C ± 25 ° C , y dejarla allí   durante al menos 1 hora , hasta que las partículas   carbonosas de la cápsula desaparezcan completamente .   Dejar enfriar un poco la cápsula y colocarla en el   desecador ( 4.4 ) hasta que alcance la temperatura ambiente ,   pesándola luego con precisión de 0,1 mg .    Repetir las operaciones de calentamiento durante   unos 30 minutos en el horno eléctrico , de enfriamiento   y de pesada hasta obtener una masa constante ( con   precisión de 1 mg ) .    6 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    6.1 . Método y fórmulas de cálculo    Las cenizas ( P2O5 incluido ) de la muestra , expresadas   como porcentaje en masa , vienen dadas por la fórmula :     ( m1 - m2 ) /m0 × 100    donde    m0 = masa , en g , de la muestra de prueba ,    m1 = masa , en g , de la cápsula con su contenido ,    m2 = masa , en g , de la cápsula vacía .    Expresar el resultado final con precisión de 0,01 % .    6.2 . Reproducibilidad    La diferencia entre los resultados de dos determinaciones   efectuadas simultáneamente o con un breve   intervalo sobre la misma prueba , en las mismas   condiciones y por el mismo analista , no debe   sobrepasar 0,15 g de cenizas por 100 g de producto .    Este valor tiene una probabilidad de no ser   sobrepasado del 95 % de los casos .    MÉTODO 6    DETERMINACIÓN DEL pH    1 . OBJETO Y ÁMBITO DE APLICACIÓN    El presente método permite determinar el pH de   los caseinatos .    2 . DEFINICIÓN    pH de los caseinatos : el pH a 20 ° C de una solución   de caseinato , determinado según el método descrito   a continuación .    3 . PRINCIPIO    Determinación electrométrica del pH de una   solución de caseinato mediante un pHmetro .    4 . REACTIVOS    El agua utilizada para la preparación de reactivos   o para la realización del método ( 6 ) debe ser   agua recientemente destilada y protegida contra la   absorción de anhídrido carbónico .    4.1 . Soluciones tampón para la calibración del   pHmetro . Dos soluciones tampón patrones , de un pH   dado a 20 ° C con precisión de dos cifras decimales   y cuyo intervalo cubra el pH de la muestra ; por   ejemplo , una solución tampón de ftalato , de pH   próximo a 4 , y una solución tampón de bórax ,   de pH próximo a 9 .    5 . EQUIPO    5.1 . Balanza , sensibilidad de 0,1 g .    5.2 . pHmetro    Sensibilidad mínima : 0,05 pH , provisto de un   electrodo de vidrio adecuado y de un electrodo de   calomel u otro electrodo de referencia .    5.3 . Termómetro    Precisión : 0,5 ° C .    5.4 . Matraz Erlenmeyer    Capacidad de 100 ml , provisto de un tapón de   vidrio esmerilado .    5.5 . Vaso de vidrio de 50 ml    5.6 . Agitador    5.7 . Vaso para el agitador ( 5.6 ) , capacidad   mínima 250 ml .    6 . PROCEDIMIENTO    6.1 . Preparación de la muestra para la prueba    Véase el punto 1.2 de las « Disposiciones   generales » .    6.2 . Determinación    6.2.1 . Calibración del pHmetro    Establecer la temperatura de las soluciones tampón   ( 4.1 ) en 20 ° C y regular el pHmetro según   las instrucciones del fabricante .    Observaciones    1 . El calibrado debe efectuarse introduciendo el   electrodo durante 20 minutos en los matraces Erlenmeyer   en reposo ( 6.2.2 ) .    2 . Si se efectúa el análisis de una serie   de muestras , verificar el calibrado del pH al menos   cada 30 minutos , con una o varias soluciones tampón   patrones .    6.2.2 . Preparación de la solución de prueba    Introducir en el vaso de vidrio ( 5.6 ) 95 ml de   agua , añadir 5,0 g de la muestra de prueba ( 6.1 ) y   mezclar mediante el agitador ( 5.5 ) durante 30 segundos .    Dejar reposar durante 20 minutos a unos 20 ° C ,   con el vaso tapado con un vidrio de reloj .    6.2.3 . Medida del pH    6.2.3.1 . Verter unos 20 ml de la solución en el   vaso ( 5.5 ) y determinar inmediatamente el pH de este   líquido con el pHmetro ( 5.2 ) , tras haber   enjuagado cuidadosamente los electrodos con agua .    6.2.3.2 . Medir el pH    7 . EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS    7.1 . Lectura del pH    Anotar el valor leído sobre la escala del pHmetro   que corresponda al pH de la solución de caseinato ,   con dos cifras decimales como mínimo .    7.2 . Repetibilidad    La diferencia entre los resultados de dos determinaciones   efectuadas simultáneamente o con un breve intervalo   sobre la misma prueba , en las mismas condiciones   y por el mismo analista , no debe sobrepasar 0,05 unidades   de pH .    Este valor tiene una probabilidad de no ser   sobrepasado del 95 % de los casos .