CELEX: 51987EC4154
Language: et
Date: 2007-02-16
Title: Eelnõu Komisjoni määrus (EÜ) nr …/..., […], millega nähakse ette põllumajandustoodete töötlemisel saadud teatavate kaupade suhtes impordikorra rakendamiseks vajalikud analüüsimeetodid ja muud tehnilised sätted (kodifitseeritud versioon)

ET

|[pic]                     |EUROOPA ÜHENDUSTE KOMISJON                                                                                       |

                                        Brüssel,
                                        K(2007)

                                                                      Eelnõu

                                                         KOMISJONI MÄÄRUS (EÜ) nr …/...,

                                                                       […],

  millega nähakse ette põllumajandustoodete töötlemisel saadud teatavate kaupade suhtes impordikorra rakendamiseks vajalikud analüüsimeetodid ja
                                                              muud tehnilised sätted

                                                            (kodifitseeritud versioon)

                                            ê 4154/87 (kohandatud)

                                                                      Eelnõu

                                                         KOMISJONI MÄÄRUS (EÜ) nr …/...,

                                                                       […],

 millega nähakse ette põllumajandustoodete töötlemisel saadud teatavate kaupade suhtes Ö impordikorra Õ rakendamiseks vajalikud analüüsimeetodid
                                                            ja muud tehnilised sätted

EUROOPA ÜHENDUSTE KOMISJON,

võttes arvesse Euroopa Ühenduse asutamislepingut,

võttes arvesse nõukogu 23. juuli 1987. aasta määrust (EMÜ) nr 2658/87 tariifi- ja statistikanomenklatuuri ning ühise tollitariifistiku  kohta[1],
eriti selle artiklit 9,

ning arvestades järgmist:

                                            ê 

   1) Komisjoni 22. detsembri 1987. aasta määrust (EMÜ) nr 4154/87 millega nähakse ette põllumajandustoodete töötlemisel saadud teatavate kaupade
      suhtes kohaldatavat kauplemise korda käsitleva määruse (EMÜ)  nr  3033/80  rakendamiseks  vajalikud  analüüsimeetodid  ja  muud  tehnilised
      sätted[2] on oluliselt muudetud[3]. Selguse ja otstarbekuse huvides tuleks kõnealune määrus kodifitseerida.

                                            ê 203/98 põhjendus 1 ja 4154/87 põhjendus 3 (kohandatud)

   2) Ö 6. detsembri 1993. aasta Õ nõukogu määrusega (EÜ) nr 3448/93 Ö millega nähakse ette põllumajandussaaduste  töötlemisel  saadud  teatavate
      kaupadega  kauplemise  kord[4] Õ  hõlmatud  toodete  ühetaolise  kohtlemise  tagamiseks  ühendussse  importimisel  Ö tuleks  võtta  arvesse
      analüüsimeetodite teaduslikku ja tehnilist arengut. Õ

                                            ê 4154/87 põhjendus 4 (kohandatud)

   3) Käesoleva määrusega ettenähtud meetmed on kooskõlas Ö tolliseadustiku komitee tariifi- ja statistikanomeklatuuri osakonna Õ arvamusega,

                                            ê 4154/87 (kohandatud)

ON VASTU VÕTNUD KÄESOLEVA MÄÄRUSE:

                                                                    Artikkel 1

Käesoleva määrusega nähakse ette määruse (EÜ) nr Ö 3448/93 Õ  impordi  puhul  ja  Ö komisjoni  määruse Õ  (EÜ)  nr  Ö 1460/96[5] Õ  rakendamiseks
vajalikud analüüsimeetodid või nende puudumise korral tehtavate analüüside olemus või kohaldatava meetodi põhimõte.

                                                                    Artikkel 2

Kooskõlas määruse (EÜ) nr Ö 1460/96 Õ III lisas sätestatud järgmiste mõistetega:

     – tärklise-/glükoosisisaldus ja

     – sahharoosi-/invertsuhkru-/isoglükoosisisaldus

ning kõnealuse määruse II ja III lisa kohaldamisel kasutatakse järgmisi valemeid, menetlusi ning meetodeid:

                                            ê 4154/87

1.    Tärklise-/glükoosisisaldus:

       (väljendatuna esitatud kujul olevate kaupade 100 % veevaba tärklisesisaldusena)

       a)   (Z–F) × 0,9,

           kui glükoosisisaldus on vähemalt sama suur kui fruktoosisisaldus, või

       b)   (Z–G) × 0,9,

           kui glükoosisisaldus on väiksem kui fruktoosisisaldus,

       kus:

       Z    käesoleva määruse I lisas esitatud meetodi kohaselt määratud glükoosisisaldus;

       F    kõrgsurvevedelikkromatograafiliselt (HPLCga) määratud fruktoosisisaldus;

       G    HPLCga määratud glükoosisisaldus.

       Kui punkti a põhjal teatatakse laktoosi hüdrolüsaadi esinemisest ja/või täheldatakse laktoosi ning galaktoosi koguseid,  lahutatakse  enne
       muude arvutuste tegemist glükoosisisaldusest Z galaktoosisisaldusele (määratakse HPLCga) vastav glükoosisisaldus.

2.    Sahharoosi-/invertsuhkru-/isoglükoosisisaldus:

       (väljendatuna esitatud kujul olevate kaupade sahharoosisisaldusena)

       a)   S + (2F) × 0,95,

           kui glükoosisisaldus on vähemalt sama suur kui fruktoosisisaldus;

       b)   S + (G + F) × 0,95,

           kui glükoosisisaldus on väiksem kui fruktoosisisaldus,

       kus:

       S    HPLCga määratud sahharoosisisaldus;

       F    HPLCga määratud fruktoosisisaldus;

       G    HPLCga määratud glükoosisisaldus.

       Kui teatatakse laktoosi hüdrolüsaadi esinemisest ja/või täheldatakse laktoosi ning galaktoosi koguseid, lahutatakse enne  muude  arvutuste
       tegemist glükoosisisaldusest G galaktoosisisaldusele (määratakse HPLCga) vastav glükoosisisaldus.

                                            ê 203/98 art 1

3.    Piimarasvasisaldus:

       a)   Kui punktis b ei  sätestata  teisiti,  määratakse  kauba  piimarasvasisaldus  kindlaks  petrooleetriga  ekstraheerimise  teel  pärast
           soolhappega toimuvat hüdrolüüsi.

       b)   Kui kauba koostises esineb peale piimarasvade ka muid rasvu, toimitakse järgmiselt:

              – kaupade üldine rasvasisaldus massiprotsentides määratakse kindlaks vastavalt punktile a,

              – piimarasvasisaldus määratakse  kindlaks  meetodil,  mis  põhineb  petrooleetriga  ekstraheerimisel  pärast  soolhappega  toimuvat
                hüdrolüüsi,  millele  järgneb  rasvhapete  metüülestrite  gaasikromatograafia.  Piimarasvade   täheldamisel   arvutatakse   nende
                massiprotsent nii, et metüülbutüraadi sisaldus massiprotsentides korrutatakse 25ga, saadud tulemus korrutatakse  kõnealuse  kauba
                üldise rasvasisaldusega massiprotsentides ning jagatakse 100ga.

                                            ê 4154/87

4.    Piimavalgusisaldus:

       a)   Kui punktis b ei sätestata  teisiti,  korrutatakse  kauba  piimavalgusisalduse  saamiseks  lämmastikusisaldus  (määratakse  Kjeldahli
           meetodiga) 6,38ga.

       b)   Kui kauba koostises esineb aineid, mis peale piimavalkude sisaldavad ka muid valke:

              – määratakse üldine lämmastikusisaldus kindlaks Kjeldahli meetodiga;

              – arvutatakse  piimavalgusisaldus  vastavalt  punktile  a,  lahutades  üldisest  lämmastikusisaldusest  mittepiimavalkudele  vastav
                lämmastikusisaldus.

                                            ê 4154/87 (kohandatud)

                                                                    Artikkel 3

Määruse (EÜ) nr Ö 1460/96 Õ I lisa rakendamisel kasutatakse järgmisi meetodeid ja/või menetlusi:

1.    Ö CN-koodide Õ 0403 10 51–0403 10 59, 0403 10 91–0403 10 99, 0403 90 71–0403 90 79  ja  0403 90 91–0403 90 99  Ö alla Õ  kuuluvate  kaupade
       klassifitseerimisel määratakse piimarasvasisaldus kindlaks käesoleva määruse artikli 2 punktis 3 osutatud meetodil.

2.      Ö CN-koodide Õ   1704 10 11–1704 10 99   ning   1905 20 10–1905 20 90   Ö alla Õ   kuuluvate   kaupade   klassifitseerimisel   määratakse
       sahharoosisisaldus, sh sahharoosina väljendatud invertsuhkru sisaldus, kindlaks HPLCga; (sahharoosina  väljendatud  invertsuhkur  tähendab
       glükoosi ja fruktoosi võrdsetes kogustes summat korrutatuna 0,95ga).

3.     Kaupade  Ö CN-koodide Õ  1806 10 10–1806 10 90  Ö alla Õ  kuuluvate  kaupade  klassifitseerimisel   määratakse   sahharoosi-/invertsuhkru-
       /isoglükoosisisaldus kindlaks vastavalt käesoleva määruse artikli 2 punktis 2 esitatud valemitele, meetodile ja menetlustele.

4.    Kaupade Ö CN-koodide Õ 3505 20 10–3505 20 90 Ö alla Õ kuuluvate kaupade  klassifitseerimisel  määratakse  tärklise-,  dekstriini-  või  muu
       modifitseeritud tärklise sisaldus kindlaks käesoleva määruse II lisas nimetatud meetodil.

5.    Kaupade Ö CN-koodide Õ 3809 10 10–3809 10 90 Ö alla Õ kuuluvate kaupade  klassifitseerimisel  määratakse  tärklisained  kindlaks  käesoleva
       määruse II lisas esitatud meetodil.

6.    Kaupade Ö CN-koodide Õ 1901 90 11 või 1901 90 19 Ö alla Õ kuuluvate kaupade klassifitseerimisel tehakse vahet kuivekstrakti põhjal, mis  on
       määratud kindlaks kuivamisega temperatuuril 103 ± 2 °C kuni püsimassi saamiseni.

7.    Kaupade Ö CN-koodide Õ 1902 19 10 ja 1902 19 90 Ö alla Õ kuuluvate kaupade klassifitseerimisel  kasutatakse  käesoleva  määruse  III  lisas
       esitatud meetodit makarontoodetes sisalduva pehmest nisust valmistatud jahu ning manna kontrollimiseks

8.     Kaupade  Ö CN-koodide Õ  2905 44 11–2905 44 99  ning  3823 60 11–3823 60 99  Ö alla Õ  kuuluvate  kaupade  mannitooli   ja   D-glütsitooli
       (sorbitooli) sisaldus määratakse kindlaks HPLC põhjal.

                                            ê 4154/87

                                                                    Artikkel 4

1. Koostatakse analüüsiprotokoll.

2. Analüüsiprotokoll sisaldab järgmisi andmeid:

     – kõik andmed, mis on vajalikud proovi identifitseerimiseks,

     – kasutatud meetod ja täpne viide õigusaktile, kus see  on  sätestatud,  või  vajaduse  korral  üksikasjalik  viide  meetodile,  täpsustades
       käesoleva määruse kohaselt tehtavate analüüside olemust või kohaldatava meetodi põhimõtet,

     – kõik tulemusi mõjutada võivad tegurid,

     – analüüsitulemused vormis, mis on ette nähtud kasutatud meetodi kirjelduses või mida näevad ette analüüsi nõudnud tolli- või  haldusasutuse
       vajadused.

                                                                    Artikkel 5

                                            ê 

Määrus (EMÜ) nr 4154/87 tunnistatakse kehtetuks.

Viiteid kehtetuks tunnistatud määrusele käsitatakse viidetena käesolevale määrusele kooskõlas V lisas esitatud vastavustabeliga.

                                            ê 4154/87 (kohandatud)

                                                                    Artikkel 6

Käesolev määrus jõustub Ö kahekümnendal päeval pärast selle avaldamist Euroopa Liidu Teatajas Õ.

Käesolev määrus on tervikuna siduv ja vahetult kohaldatav kõikides liikmesriikides.

Brüssel, [...]

      Komisjoni nimel
      [...]
      komisjoni liige

                                            ê 4154/87 (kohandatud)

                                                                      I LISA

                              TÄRKLISESISALDUSE JA SELLE GLÜKOOSI SISALDAVATE LAGUNEMISPRODUKTIDE KINDLAKSMÄÄRAMINE

1.    Eesmärk ja rakendusala

       a)   Meetodi abil saab kindlaks määrata tärklisesisalduse ja selle glükoosi sisaldavad lagunemisproduktid, edaspidi „tärklis”.

       b)   Punktis a osutatud tärklise sisaldus on võrdne käesoleva lisa punkti 6 alapunkti a kohaselt arvutatud väärtusega E.

2.    Põhimõte

       Proov lagundatakse naatriumhüdroksiidiga ja tärklis jagatakse amüloglükoosidaasiga glükoosiühikuteks. Glükoos määratakse ensüümselt.

3.    Reaktiivid

       (Kasutatakse bidestilleeritud vett).

3.1.  0,5 N naatriumhüdroksiidi lahus (0,5 mol/l).

3.2.  (vähemalt) 96 %line jää-äädikhappes.

3.3.  Amüloglükoosidaasi lahus:

       Vahetult enne kasutamist lahustatakse umbes 10 mg amüloglükoosidaasi (EC 3.2.1.3) (6 U/mg) 1 ml vees[6].

3.4.  Trietanoolamiini puhverlahus:

       Lahustatakse 14,0 g trietanoolamiinhüdrokloriidi [tris(2-hüdroksüetüül)ammooniumkloriid]  ja  0,  25 g  magneesiumsulfaati  (MgSO4 · 7H2O)
       80 ml vees, lisatakse umbes 5 ml 5 N naatriumhüdroksiidi lahust (5 mol/l) ning viiakse pH tase 1 N natriumhüdroksiidi lahusega 7,6-le.

       Täiendatakse veega kuni 100 ml lahuse saamiseni. Puhverlahus säilib vähemalt neli nädalat temperatuuril 4 °C.

       3.5. NADP(nikotiinamiidadeniindinukleotiidfosfaat, dinaatriumsool)lahus:

       Lahustatakse 60 mg NADP-lahust 6 ml vees. Lahus säilib vähemalt neli nädalat temperatuuril 4 °C.

3.6.  ATP(adenosiin-5-trifosfaat, dinaatriumsool)lahus:

       Lahustatakse 300 mg ATP · 3H2O ja 300 mg naatriumvesinikkarbonaati (NaHCO3) 6 ml vees. Lahus säilib vähemalt neli nädalat temperatuuril  4
       °C.

3.7.  HK/G6P-DH [Heksokinaas (EC 2.7.1.1) ja glükoos-6-fosfaat-dehüdrogenaas (EC 1.1.1.49)]-suspensioon:

       heljundatakse 280 U HK ja 140 U G6P-DH 1 ml-s 3,2 M ammooniumsulfaadi lahuses. Suspensioon säilib vähemalt üks aasta temperatuuril 4 °C.

4.    Seadmed

4.1.  Magnetsegur-veevann temperatuuril 60 °C.

4.2.  Magnetvardad.

4.3.  1 cm optilise küvetiga UV-spektrofotomeeter.

4.4.  Ensüümianalüüsi pipetid.

5.    Meetod

5.1.  Proovi pesemine etanooliga, lagundamine naatriumhüdroksiidiga ja tärklise ensüümihüdrolüüs:

5.1.1.      Valitakse proovi mass vastavalt eeldatavale tärklisesisaldusele (tärklisesisaldus ei tohi olla üle 0,4 g proovi kohta) järgmiselt:

|Toote eeldatav                |Proovi ligikaudne mass        |Mõõtekolvi maht ml            |Lahjendusaste 1 liitrini      |
|tärklisesisaldus g/100 g      |grammides                     |                              |(f)                           |
|                              |(p)                           |                              |                              |
|> 70                          |0,35–0,4                      |500                           |2                             |
|20–70                         |kuni 0,5                      |500                           |2                             |
|5–20                          |kuni 1                        |250                           |4                             |
|< 5                           |kuni 2                        |200                           |5                             |

5.1.2.      Kaalutakse proovi täpsusega 0,1 mg.

5.1.3.      Lisatakse 50 ml 0,5 N naatriumhüdroksiidi lahust (punkt 3.1) ja segatakse pidevalt 30 minutit veevannis  (punkt  4.1)  magnetseguriga
       temperatuuril 60 °C.

5.1.4.      Lisatakse mõni ml kontsentreeritud äädikhapet (punkt 3.2) ning viiakse pH tase vahemikku 4,6–4,8.

5.1.5.      Asetatakse magnetseguriga veevanni (punkt  4.1)  temperatuuril  60  °C,  lisatakse  1,0 ml  ensüümilahust  (punkt  3.3)  ja  lastakse
       reageerida 30 minutit, samal ajal pidevalt segades.

5.1.6.      Pärast jahutamist mõõdetakse kogus mõõtekolbi (punkt 5.1.1) ning täidetakse veega märgini.

5.1.7.      Vajaduse korral filtreeritakse läbi kurdfiltri (vt märkus 1).

5.2.  Glükoosi koguse määramine:

5.2.1.      Katselahuses peab olema 100–1 000 mg glükoosi liitri kohta, mis vastab ΔE340 väärtusele 0,1–1,0.

       Neelduvus katselahuses, mida on lahjendatud veega (suhtes 1: 30), ei tohi olla üle 0,4 lainepikkusel (mõõdetuna õhu suhtes) 340 nm.

5.2.2.      Kuumutatakse puhverlahust (punkt 3.4) toatemperatuurini (20 °C).

5.2.3.      Reaktiivide ja proovi temperatuur peab olema 20–25 °C.

5.2.4.      Mõõdetakse neelduvust lainepikkusel 340 nm õhu suhtes (s.o võrdlusmeetodi puhul ilma optilise küvetita).

5.2.5.      Pipetitakse vastavalt järgmisele tabelile:

|Kallatakse optilisse küvetti                         |Kontroll (ml)                     |Katse (ml)                        |
|Puhver (reaktiiv 3.4)                                |1,00                              |1,00                              |
|NADP (reaktiiv 3.5)                                  |0,10                              |0,10                              |
|ATP (reaktiiv 3.6)                                   |0,10                              |0,10                              |
|Katselahus (5.1.6 või 5.1.7)                         |–                                 |0,10                              |
|Bidestilleeritud vesi                                |2,00                              |1,90                              |
|Segatakse ja umbes kolme minuti pärast mõõdetakse neelduvust lahustes (E1). Reaktsiooni alustamiseks lisatakse:            |
|HK/G6P.DH (reaktiiv 3.7)                             |0,02                              |0,02                              |
|Segatakse, lastakse reageerida lõpuni (umbes 15 minutit) ja mõõdetakse neelduvust lahustes (E2).                           |
|Kui reaktsioon ei ole 15 minuti pärast lõppenud, jätkatakse neelduvuse lugemist viieminutiliste vaheaegade järel, kuni     |
|reaktsiooni kiirus on konstantne. Siis ekstrapoleeritakse tagasi suspensiooni vastavalt punktile 3.7 lisamise hetkeni      |
|(vt märkus 2).                                                                                                             |

5.2.6.      Arvutatakse neelduvuste erinevus (E2-E1) nullreaktiivis ja proovis.

       Lahutatakse proovi neelduvusest (ΔE proov) nullreaktiivi neelduvus (ΔE nullreaktiiv):

                                                         ΔΕ = ΔΕ proov − ΔΕ nullreaktiiv

       Saadud vahe annab katselahuse glükoosisisalduse.

                                                        Katselahuse glükoosisisaldus, g/l

                                      Gl = ((3,22 × 180,16)/(6,3 × 1 × 0,1 × 1 000)) × ΔΕ340 = 0,921 × ΔΕ340

       (3,22: mõõdetava lahuse maht; 1: küveti paksus; 0,1: proovilahuse maht; glükoosi molekulmass on 180,16 (g/mol).

5.2.7.      Kui mingil põhjusel ei ole võimalik mõõta lainepikkusel 340 nm, võib seda teha lainepikkusel 365 nm või  334 nm,  kusjuures  arv  6,3
       eespool esitatud glükoosivalemis tuleb asendada vastavalt arvuga 3,5 või 6,18.

6.    Arvutuskäik ja tulemuste esitamine

       a)   E = tärklisesisaldus väljendatuna g/100 g:

                                                          E = ((100 × 0,9 × Gl)/(p × f))

       b)   Z = glükoosisisaldus väljendatuna g/100 g:

                                                             Z = ((100 × Gl)/(p × f))

       kus:

       Gl   =     glükoos väljendatuna g/l (5.2.6);

       f    =     lahjendusaste (5.1.1);

       p    =     proovi mass grammides;

       0,9  =     glükoosi ümberarvestustegur tärkliseks.

Märkused:

1)    Kui katselahust ei ole võimalik filtreerida punkti 5.1.7 kohaselt, tuleb selge lahuse saamiseks võtta vajalikke meetmeid.

2)    Kui esineb ensüümiinhibeerimine, soovitatakse kohaldada meetodit, mille käigus lisatakse kindlates kogustes puhast tärklist.

                                                                   ___________

                                                                     II LISA

  KAUPADE Ö CN-KOODIDE Õ 3505 20 10–3505 20 90 Ö ALLA Õ KUULUVATE KAUPADE TÄRKLISE-, DEKSTRIINI- VÕI MUU MODIFITSEERITUD TÄRKLISE SISALDUSE NING
                        Ö CN-KOODIDE Õ 3809 10 10–3809 10 90 Ö ALLA Õ KUULUVATE KAUPADE TÄRKLISAINETE SISALDUSE MÄÄRAMINE

I.    Põhimõte

       Happelise hüdrolüüsi teel muundatakse tärklis redutseerivateks suhkruteks, mis määratakse mahu põhjal Fehlingi lahuse abil.

II.   Seadmed ja reaktiivid

       1.   250 ml kolb

       2.   200 ml mõõtekolb

       3.   25 ml mõõtebürett

       4.   Soolhape tihedusega 1,19

       5.   Kaaliumhüdroksiidi lahus

       6.   Aktiivsüsi; värvitustamiseks

       7.   Fehlingi lahus

       8.   1 %line metüleensinise lahus.

III.  Meetod

       Umbes 1 g tärklist sisaldav proov pannakse 250 ml kolbi. Lisatakse 100 ml destilleeritud vett ja 2 ml soolhapet. Segu  lastakse  keema  ja
       keedetakse kolm tundi.

       Kolvi sisu ning loputusvesi kallatakse 200 ml mõõtekolbi. Jahutatakse  ning  tehakse  peaaegu  neutraalseks  kaaliumhüdroksiidi  lahusega.
       Täiendatakse destilleeritud veega 200 ml-ni ja filtreeritakse läbi vähese koguse aktiivsöe.

       Seejärel valatakse lahus mõõtebüretti ja redutseeritakse 10 ml Fehlingi lahust järgmisel meetodil:

       Umbes 250 ml lameda põhjaga kolbi kallatakse 10 ml Fehlingi lahust (5 ml lahust A ja 5 ml lahust B). Loksutatakse, kuni lahus on selge, ja
       lisatakse 40 ml destilleeritud vett ning väike kogus kvartsi või pimsskivi.

       Kolb asetatakse neljakandilisele asbestalusele, mille keskel on umbes 6 cm läbimõõduga ümmargune auk, mis  omakorda  on  traatvõrgu  peal.
       Kolbi kuumutatakse nii, et vedelik hakkaks umbes kahe minuti pärast keema.

       Büretist lisatakse keevale vedelikule vähehaaval suhkrulahust, kuni Fehlingi lahuse sinine värv  on  vaevu  märgatav;  seejärel  lisatakse
       indikaatoriks 2–3 tilka metüleensinise lahust ja tiitritakse lõpuni, lisades tilkhaaval edasi suhkrulahust, kuni indikaatori  sinine  värv
       on kadunud.

       Suurema täpsuse saamiseks korratakse tiitrimist samades tingimustes, kuid  peaaegu  kogu  suhkrulahus,  mis  on  vajalik  Fehlingi  lahuse
       redutseerimiseks, lisatakse korraga. Teist korda tiitrides peab Fehlingi lahus redutseeruma kolme minuti jooksul. Keedetakse veel  täpselt
       kaks minutit, lisades keevale lahusele ühe minuti jooksul tilkhaaval reaktiivi, kuni sinine värv on kadunud.

       Tärklise massiprotsent proovis määratakse järgmise valemiga:

                                               tärklise massi % = ((T × 200 × 100)/(n × p)) × 0,95

       kus:

       T    10 ml Fehlingi lahusele (5 ml lahust A ja 5 ml lahust  B)  vastava  veevaba  dekstroosi  kogus  grammides.  Kõnealune  tiiter  vastab
           0,04945 g veevabale dekstroosile, kui lahus A sisaldab 17,636 g vaske liitri kohta;

       n    tiitrimisel kasutatud suhkrulahuse kogus ml-tes;

       p    proovi mass;

       0,95 veevaba dekstroosi ümberarvestustegur tärkliseks.

IV.   Fehlingi lahuste valmistamine

       Lahus A:   Mõõtekolvis lahustatakse 69,278 g puhast rauavaba  kristallilist  vasksulfaati  –  analüütilist  reaktiivi  (CuSO4  ·  5H2O)  –
                destilleeritud vees ja  täidetakse  kolb  destilleeritud  veega  1 l-ni.  Lahuse  täpset  tiitrit  tuleb  kontrollida  vasekoguse
                määramisega.

       Lahus B:   Mõõtekolvis lahustatakse destilleeritud vees 100 g naatriumhüdroksiidi ja 346 g kaaliumnaatriumtartraati (Seignette'i sool)  ja
                täidetakse kolb destilleeritud veega 1 l-ni.

       Lahused A ja B tuleb segada võrdsetes kogustes vahetult  enne  kasutamist.  0,04945 g  veevaba  dekstroosi  redutseerib  täielikult  10 ml
       Fehlingi lahust (5 ml lahust A ja 5 ml lahust B) III punktis nimetatud tingimustel.

                                                                 ________________

                                                                     III LISA

          PEHMEST NISUST VALMISTATUD PÜÜLI- JA LIHTJAHU KINDLAKSMÄÄRAMINE MAKARONIDES, SPAGETIS JA MUUDES SAMALAADSETES MAKARONTOODETES

                                 (Youngi ja Gilles’i meetodi kohaselt, mida on täiendanud Bernaerts ning Gruner)

I.    Põhimõte

       Mittepolaarse lahusti abil valmistatakse analüüsitava makarontoote proovist ekstrakt.

       Kõnealust ekstrakti analüüsitakse kromatograafiliselt õhukesel silikageelikihil,  et  eraldada  erinevates  ribakujulistes  fraktsioonides
       leiduvad steroolid.

       Vastavalt eredavärviliste ribade arvule on võimalik kindlaks määrata, kas uuritav toode on valmistatud ainult kõvast  või  pehmest  nisust
       või nende kahe segust. Samuti on võimalik kindlaks määrata, kas on lisatud mune.

II.   Seadmed ja reaktiivid

       1.   Homogenisaator või veski jahvatise saamiseks, mis läbib 0,200 mm avadega standardsõela;

       2.   0,200 mm avadega standardsõel;

       3.   Veevanniga aurusti vähendatud rõhu all aurustamiseks;

       4.   Klaas-, alumiinium- või mõni muu õhukese silikageelikihiga kaetud alus  mõõtmetega  20  ×  20 cm.  Kui  kõnealune  õhuke  kiht  tuleb
           valmistada, peab kasutama umbes 13 %lise kipskrohviga segatud silikageeli, mis kantakse peale  selleks  ettenähtud  seadmega  0,25 mm
           paksuse kihina vastavalt tootja kasutusõpetusele;

       5.   Mikropipett 20 mikroliitri mõõtmiseks;

       6.   Kromatogrammi saamiseks sobiv kaanega anum;

       7.   Pihusti;

       8.   Petrooleeter keemispunktiga 40–60 °C, enne kasutamist redestilleeritud;

       9.   Analüüsiks vajalik veevaba etüüleeter;

       10.  Kromatograafiliseks analüüsiks vajalik süsiniktetrakloriid, enne kasutamist redestilleeritud;

       11.  Analüüsiks vajalik fosfomolübdeenhape;

       12.  94 %line etüülalkohol.

III.  Meetod

       Jahvatatakse umbes 20 g proovi nii peeneks, et  see  läbiks  sõela  täielikult.  Proov  pannakse  Erlenmeyeri  kolbi  ja  kaetakse  150 ml
       petrooleetriga. Jäetakse toatemperatuuril seisma kuni järgmise päevani. Loksutatakse aeg-ajalt.

       Seejärel filtreeritakse läbi filtrikihiga varustatud Büchneri lehtri või paagutatud filtri. Sel viisil saadud selge lahus valatakse  järk-
       järgult 100 ml mõõtekolbi. Lahustit aurutatakse vähendatud rõhu all, kuumutades kolbi veevannis temperatuuril  40-50 °C.  Kui  lahusti  on
       aurustunud, kuumutatakse vähendatud rõhu all veel 10 minutit.

       Kui kolb on jahtunud, määratakse ekstrakti mass. Lahjendatakse ekstrakti etüüleetriga vahekorras 1 ml etüüleetrit 60 mg ekstrakti kohta.

       Aktiveeritakse õhukesed kihid, tõstes nende temperatuuri 130 °C-ni kolmeks tunniks. Lastakse jahtuda silikageeli sisaldavas  eksikaatoris.
       Aluseid, mida kohe ei kasutata, võib hoida ka samas eksikaatoris.

       Lisatakse tilkhaaval 20 mikroliitrit selget lahust, et soovitavalt uuesti aktiveeritud alusel moodustuks püsiva laiusega ja  3 cm  pikkune
       riba. Lastakse lahustil auruda.

       Voolutatakse  süsiniktetrakloriidiga  kromatograafiliselt  toatemperatuuril  anumas,  mille   seinad   on   kaetud   lahustis   niisutatud
       filterpaberiga. Umbes tunni aja pärast tõuseb lahusti 18 cm kõrgusele. Alus eemaldatakse ja lastakse  lahustil  lahtiselt  auruda.  Ribade
       paremaks eraldamiseks voolutatakse kromatogrammi teist korda. Lahustil lastakse uuesti lahtiselt auruda.

       Pihustatakse õhuke kiht silikageeli koos etüülalkoholis oleva 20 %lise fosfomolübdeenhappe lahusega. Kiht peab  olema  ühtlaselt  kollane.
       Alust viis minutit temperatuuril 110 °C kuumutades moodustuvad ribad.

IV.   Kromatogrammi tõlgendamine

       Kui kromatogrammil on näha üks eredavärvilist põhiriba, mille Rf on ligikaudu 0,4-0,5, on  vastava  makarontoote  valmistamisel  kasutatud
       kõva nisu. Kui aga ilmub kaks võrdse eredusega riba, on toormaterjalina kasutatud pehmet nisu. Kõva ja  pehme  nisu  segusid  on  võimalik
       hinnata kahe riba suhtelise ereduse järgi.

       Kui on näha kolm riba (kaks riba sellel kõrgusel, kus pehme nisu puhul esinevad põhiribad, ning üks riba nende keskel), on  makarontootele
       lisatud mune. Kui keskmine riba on ülemisest eredam, on toorainena kasutatud kõva nisu. Kui ülemine riba  on  aga  keskmisest  eredam,  on
       toorainena kasutatud pehmet nisu.

                                                                  _____________

                                            é

                                                                     LISA IV

                                                  Kehtetuks tunnistatud määrus koos muudatusega

|Komisjoni määrus (EMÜ) nr 4154/87                                              |(EÜT L 392, 31.12.1987, lk 19)                            |
|Komisjoni määrus (EÜ) nr 203/98                                                  |(EÜT L 21, 28.1.1998, lk 6)                      |

                                                                  _____________

                                                                      LISA V

                                                                  Vastavustabel

|Määrus (EMÜ) nr 4154/87                                              |Käesolev määrus                                                      |
|Artiklid 1 kuni 4                                                    |Artiklid 1 kuni 4                                                    |
|Artikkel 5                                                           |__                                                                   |
|__                                                                   |Artikkel 5                                                           |
|Artikkel 6                                                           |Artikkel 6                                                           |
|Lisad I, II ja III                                                   |Lisad I, II ja III                                                   |
|_                                                                    |Lisa IV                                                              |
|_                                                                    |Lisa V                                                               |

                                                                  _____________

                                                             -----------------------
[1]   EÜT L 256, 7.9.1987, lk 1. Ö Määrust on viimati muudetud määrusega (EÜ) nr 486/2006 (ELT L 88, 25.3.2006, lk 1). Õ
[2][3]01µÂ  "    #     +     ,    .     /    0     1     9    F     G     n    q     r    É     Ê     Ò    Ó     Õ     Ö    ×      Ø     æ      ç
      ï     ð     ò    ó     ô     õ    ö     8…ô

      .
      G
      I
      J
      R
      S
      U
      V
      W
      X
      Y
      d
      x
      ùòçòãòÜòùÑùÈùÑ¿ÑùÜùò¸òù­Ü¤Ü­¿­Ü­Ü¤Ü­¿­Üùòù “ ùòÜ­Ü¤Ü­¿­ÜòÜjhÌ.      EÜT L 392, 31.12.1987, lk 19. Määrust on  muudetud  määrusega  (EÜ)  nr
      203/98 (EÜT L 21, 28.1.1998, lk 6).
[4]   Vt lisa IV.
[5]   EÜT L 318, 20.12.1993, lk 18. Määrust on viimati muudetud määrusega (EÜ) nr 2580/2000 (EÜT L 298, 25.11.2000, lk 5).
[6]   EÜT L 187, 26.7.1996, lk 18.
[7]   U on ensüümi aktiivsuse rahvusvaheline ühik.