CELEX: 51991PC0137
Language: es
Date: 1991-04-26
Title: PROPUESTA DE REGLAMENTO ( CEE ) DEL CONSEJO POR EL QUE SE ESTABLECEN MEDIDAS COMUNITARIAS PARA LA LUCHA CONTRA LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE

N ° C 146/12                          Diario Oficial de las Comunidades Europeas                                   5. 6. 91
                                                              II
                                               (Actos jurídicos preparatorios)
                                                  COMISIÓN
               Propuesta de Reglamento (CEE) del Consejo por el que se establecen medidas comunitarias
                                    para la lucha contra la enfermedad de Newcastle
                                                       (91/C 146/14)
                                                    COM(91) 137 final
                                   (Presentada por la Comisión el 16 de mayo de 1991)
EL CONSEJO DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS,                           Considerando que el diagnóstico de la enfermedad debe
                                                                  efectuarse bajo los auspicios de los laboratorios respon-
Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Econó-              sables, que deberán estar coordinados por un laboratorio
mica Europea y, en particular, su artículo 43,                    de referencia designado por la Comunidad;
Vista la propuesta de la Comisión,
Visto el dictamen del Parlamento Europeo,
                                                                  Considerando que es necesario prever que los Estados
                                                                  miembros que recurran a la vacunación elaboren planes
Visto el dictamen del Comité Económico y Social,
                                                                  de vacunación y los comuniquen a la Comisión y a los
                                                                 demás Estados miembros;
Considerando que el sector de las aves de corral figura
en el Anexo II del Tratado y que su comercialización
constituye una importante fuente de ingresos para los
productores agrarios;
                                                                 Considerando que es conveniente conferir a la Comisión
Considerando que es necesario establecer medidas de              la función de adoptar las normas de desarrollo necesa-
control a escala comunitaria para que sean adoptadas en          rias,
caso de presentarse brotes de la enfermedad de New-
castle a fin de asegurar el desarrollo del sector de las
aves de corral y contribuir a la protección de la salud
animal en la Comunidad;
                                                                 HA ADOPTADO EL PRESENTE REGLAMENTO:
Considerando que los brotes de la enfermedad de New-
castle pueden adquirir rápidamente un carácter epizoó-
tico y provocar una mortalidad y unas perturbaciones ta-
les que comprometan seriamente la rentabilidad de las
explotaciones de aves de corral;
                                                                                          Artículo 1
Considerando que es necesario tomar medidas en cuanto             1.    El presente Reglamento define las medidas comuni-
existan indicios de esta enfermedad de manera que, si se         tarias de lucha contra la enfermedad de Newcastle apli-
confirma, sea posible adoptar inmediatamente medidas             cables en caso de aparición de esta enfermedad en explo-
eficaces para luchar contra ella; que las autoridades            taciones de aves de corral que no sean palomas mensaje-
competentes de cada país deberán adaptar esas medidas            ras, sin perjuicio de las disposiciones comunitarias que
teniendo en cuenta si un país está aplicando o no un pro-        regulan el comercio intracomunitario.
grama de vacunación preventiva en todo su territorio o
en parte de él;
Considerando que, tan pronto como se declare un brote
de esta enfermedad, es necesario evitar su propagación           2.     El presente Reglamento no se aplicará en caso de
controlando de modo estricto los movimientos de anima-           que se detecte la enfermedad de Newcastle en otras aves.
les y la utilización de productos que puedan estar conta-        Sin embargo, los Estados miembros deberán informar a
minados, recurriendo, en su caso, a la vacunación;               la Comisión de las medidas que hayan adoptado.
 ---pagebreak--- 5.6.91                                  Diario Oficial de las Comunidades Europeas                             N ° C 146/13
                          Artículo 2                             2.    En cuanto se le notifique la sospecha de infección,
                                                                 la autoridad competente pondrá la explotación bajo vigi-
1.    A los efectos del presente Reglamento, se utilizarán       lancia oficial y ordenará, en particular:
cuando proceda las definiciones del artículo 2 de la Di-
rectiva 90/539/CEE del Consejo (»).
                                                                 a) la realización de un censo de todas las aves de corral
                                                                    de la explotación en el que se precise, por categorías,
2.    Además, se entenderá por:                                     el número de aves de corral muertas, cuántas presen-
                                                                    tan síntomas clínicos y cuántas no. Este censo deberá
                                                                     actualizarse y presentarse cuando se solicite y podrá
a) «Ave de corral infectada»:                                       controlarse en cada visita;
    — toda ave de corral en la que un examen de labora-
        torio haya permitido comprobar oficialmente la           b) la reclusión de todas las aves de corral de la explota-
        enfermedad de Newcastle,                                    ción dentro de sus locales habituales o de cualquier
                                                                    otro lugar en el que queden aisladas, sin ningún con-
    — tratándose de un segundo brote o de brotes subsi-
                                                                    tacto con otras aves;
        guientes, toda ave de corral en la que se hayan
        encontrado síntomas clínicos o lesiones post mor-
         tem propios de la enfermedad de Newcastle;              c) la prohibición tanto de la entrada de aves de corral en
                                                                    la explotación como la salida de las que se encuentren
                                                                    en ésta;
b) «Ave de corral sospechosa de estar infectada»: toda
    ave de corral con síntomas clínicos o lesiones post
                                                                 d) la prohibición, salvo autorización del veterinario ofi-
    mortem tales que se pueda sospechar legítimamente la
    presencia de la enfermedad de Newcastle;                        cial:
                                                                    — de todo movimiento de personas, animales o vehí-
c) «Ave de corral sospechosa de estar contaminada»:                      culos cuyo destino u origen sea la explotación;
    toda ave de corral que haya podido estar, directa o             — de toda salida de la explotación de carne o cana-
    indirectamente, en contacto con el virus de la enfer-                les de aves de corral, piensos, material, desechos,
    medad de Newcastle;                                                  cama de paja o cualquier otro elemento suscepti-
                                                                         ble de transmitir la enfermedad de Newcastle a
d) «Aguas grasas»: los desperdicios procedentes de coci-                 partir de la explotación;
    nas, restaurantes o, en su caso, industrias cárnicas;
                                                                 e) la prohibición de la salida de la explotación de huevos
e) «Autoridad competente»: la autoridad veterinaria de-             que no estén destinados al consumo y que no hayan
    signada al efecto por la administración nacional del            sido desinfectados a satisfacción del veterinario ofi-
    país de que se trate, responsable directamente ante             cial;
    ésta en el marco del presente Reglamento y encar-
    gada de informar a través de la administración nacio-        f) la instalación de medios de desinfección apropiados
    nal;                                                            en las entradas y salidas de la explotación y de los
                                                                    edificios que alberguen las aves de corral;
f) «Veterinario oficial»: el veterinario designado por la
    autoridad competente de un Estado miembro.                   g) una investigación epizootiológica con arreglo a lo dis-
                                                                    puesto en el artículo 7.
                          Articulo 3                             3.    Hasta que entren en vigor las medidas oficiales
Toda sospecha de enfermedad de Newcastle deberá ser              contempladas en el apartado 2, el propietario o avicultor
notificada inmediatamente a la autoridad competente.             de toda explotación en la que se sospeche la presencia de
                                                                 la enfermedad adoptará todas las medidas razonables
                                                                 que conduzcan al cumplimiento de las disposiciones con-
                                                                 templadas en las letras b) a e) del apartado 2.
                          Artículo 4
1.     Cuando se sospeche que aves de corral están infec-
                                                                 4.    La autoridad competente podrá hacer extensivas las
tadas o contaminadas con la enfermedad de Newcastle,
                                                                 medidas previstas en el apartado 2 a otras explotaciones
el veterinario oficial deberá realizar inmediatamente una
                                                                 cuando su ubicación, configuración o los contactos con
investigación para confirmar o rechazar la presencia de
                                                                 la explotación en que se sospeche la existencia de la en-
esta enfermedad; en particular, deberá tomar o procurar
                                                                 fermedad permitan sospechar una posible contaminación.
que se tomen muestras adecuadas para analizarlas en el
laboratorio.
                                                                 5.    Las medidas contempladas en los apartados 2, 3 y 4
                                                                 no serán retiradas hasta que la sospecha de la enferme-
                                                                 dad de Newcastle haya sido desmentida por el veterina-
(') DO n° L 303 de 31. 10. 1990, p. 6.                           rio oficial.
 ---pagebreak--- N ° C 146/14                             Diario Oficial de las Comunidades Europeas                                    5. 6.91
                          Artículo 5                              2.    De conformidad con el artículo 24, la Comisión fi-
                                                                  jará los criterios aplicables a la concesión de la excepción
1.     En cuanto se confirme oficialmente la presencia en         prevista en el apartado 1.
una explotación de la enfermedad de Newcastle, la auto-
ridad competente, además de las medidas enumeradas en
el apartado 2 del artículo 4, ordenará que se lleven a                                      Artículo 7
cabo inmediatamente las siguientes operaciones:
                                                                  1.    La investigación epizootiológica estudiará los si-
a) el sacrificio in situ de todas las aves de corral que se       guientes aspectos:
    encuentren en la explotación y la destrucción de las
    aves de corral muertas o sacrificadas y de los huevos         — período de la posible presencia de la enfermedad de
    que se hallen en la explotación. Estas operaciones se             Newcastle en la explotación;
    efectuarán de manera que se reduzca al mínimo el
                                                                  — posible origen de la enfermedad de Newcastle por lo
    riesgo de propagación de la enfermedad;
                                                                      que se refiere a la explotación e identificación de las
b) la destrucción o el tratamiento de todas las materias o            demás explotaciones en las que se encuentren aves de
    desechos, como piensos, camas y estiércol que pudie-              corral que hayan podido infectarse o contaminarse a
    ren estar contaminados. El tratamiento deberá reali-              partir del mismo foco;
    zarse ateniéndose a las instrucciones del veterinario
    oficial y deberá garantizar la destrucción total del vi-      — los movimientos de personas, aves de corral u otros
    rus de la enfermedad de Newcastle;                                animales, vehículos, huevos, carne, canales, y cual-
                                                                      quier utensilio o material que haya podido transmitir
c) en lo posible, la búsqueda y destrucción de la carne               el virus de la enfermedad de Newcastle a la explota-
    de las aves de corral que hayan sido sacrificadas du-             ción afectada o propagarlo a partir de ella.
    rante el período presunto de incubación de la enfer-
    medad;                                                        2.    Se creará una unidad de crisis para coordinar todas
                                                                  las medidas necesarias para erradicar la enfermedad de
d) en lo posible, la búsqueda y destrucción de los huevos
                                                                  Newcastle lo más rápidamente posible y realizar la inves-
    que, producidos durante el período presunto de incu-
                                                                  tigación epizootiológica.
    bación, hayan salido de la explotación; las aves de co-
    rral que hayan nacido de esos huevos estarán someti-          Se aplicarán las normas generales relativas a las unidades
    das a vigilancia oficial;                                     de crisis nacionales y a la unidad de crisis comunitaria
e) después de haberse llevado a cabo las operaciones in-          que figuran en el Reglamento (CEE) n° . . ./ .. del Con-
    dicadas en la letra a), la limpieza y desinfección, con       sejo.
    arreglo al artículo 11, de los edificios en que vivan las
    aves de corral y de sus alrededores, de los vehículos                                   Artículo 8
    de transporte y de todo el material que pudiere estar
    contaminado;                                                  1.    Cuando el veterinario oficial tenga motivos para
                                                                  sospechar que las aves de corral de una explotación pue-
f) después de realizar las operaciones indicadas en la            dan estar contaminadas debido a movimientos de perso-
    letra e), transcurrirá un mínimo de 21 días antes de          nas, animales y vehículos o a cualquier otro medio, las
    volver a introducir aves de corral en la explotación;         explotaciones afectadas se someterán a control oficial
                                                                  con arreglo a lo dispuesto en el apartado 2.
g) realización de una investigación epizootiológica con
    arreglo a lo dispuesto en el artículo 7.
                                                                  2.    El control oficial tendrá como finalidad detectar in-
2.     La autoridad competente podrá aplicar las medidas          mediatamente cualquier indicio de la enfermedad de
previstas en el apartado 1 a otras explotaciones cuando           Newcastle, llevar a cabo el censo de las aves de corral,
su ubicación, configuración o los contactos con la explo-         controlar sus movimientos y, en su caso, aplicar las me-
tación en la que se haya confirmado la enfermedad per-            didas previstas en el apartado 3.
mitan sospechar una posible contaminación.
                                                                  3.    Cuando una explotación esté sometida al control
                                                                  oficial de conformidad con las disposiciones del apartado
                          Artículo 6
                                                                  2, la autoridad competente prohibirá la salida de las aves
 1.    Cuando las explotaciones estén formadas por dos o          de corral de la explotación cuando no sea para su trans-
más manadas independientes, la autoridad competente               porte directo a un matadero bajo control oficial para su
podrá exceptuar de la aplicación de las medidas enuncia-          sacrificio inmediato. Antes de que pueda autorizarse tal
das en la letra a) del apartado 1 del artículo 5 las mana-        salida, el veterinario oficial deberá haber efectuado un
das sanas de una explotación infectada, siempre que el            examen clínico de todas las aves de corral que demuestre
veterinario oficial haya confirmado que la estructura de          que la explotación está indemne de la enfermedad de
las unidades, su tamaño y las operaciones que en ella se          Newcastle. Las restricciones de movimientos antes men-
realicen reúnen unas características tales que las hacen          cionadas se aplicarán durante un período mínimo de 21
completamente independientes, tanto desde el punto de             días a partir de la última fecha en que pudiera haberse
vista del alojamiento, mantenimiento y alimentación de            producido la contaminación; si durante ese período de
las manadas como del de la inmunidad por vacunación,              21 días se detectara una posible contaminación, el perío-
de modo que no haya peligro de propagación del virus.             do de estas restricciones durará al menos 7 días.
 ---pagebreak--- 5.6.91                                    Diario Oficial de las Comunidades Europeas                             N ° C 146/15
4.     Cuando considere que las condiciones lo permiten,               ii) de pollitos de un día de edad o de pollas que es-
la autoridad competente podrá limitar la aplicación de                     tén a punto de poner a una explotación situada
las medidas establecidas en el presente artículo a una                     dentro de la zona infectada y que no tenga otras
parte de la explotación y a las aves de corral que se ha-                  aves de corral. Esta explotación estará sometida al
llen en ésta, siempre que hayan sido alojadas, mantenidas                  control oficial previsto en el apartado 2 del ar-
y alimentadas de forma totalmente separada y por dife-                     tículo 8;
rente personal.
                                                                      iii) de huevos para incubar bien a una incubadora si-
                                                                           tuada dentro de la zona infectada o a una incuba-
                           Artículo 9                                      dora situada fuera de ella, designada por la auto-
                                                                           ridad competente; los huevos y sus envases debe-
 1.     Cuando el diagnóstico de la enfermedad de New-                     rán desinfectarse antes de ser enviados.
castle se haya confirmado oficialmente, la autoridad
competente delimitará una zona infectada alrededor de                 Los movimientos indicados en los incisos i), ii) y iii)
la explotación infectada. Esta zona estará compuesta por              deberán ser realizados directamente bajo control ofi-
una zona de protección de un radio mínimo de 3 km y                   cial y únicamente se autorizarán después de que el
una zona de vigilancia de un radio mínimo de 10 km.                   veterinario oficial haya efectuado una inspección sa-
Para la delimitación de estas zonas deberán tenerse en                nitaria de la explotación. Los medios de transporte
cuenta las barreras naturales y las características epizoó-           empleados deberán limpiarse y desinfectarse antes y
ticas del brote de la enfermedad.                                     después de su utilización;
                                                                   g) prohibición de retirar o esparcir sin autorización el
2.      En la zona de protección se aplicarán las siguientes          estiércol de las aves de corral o sus camas de paja;
medidas:
                                                                   h) prohibición de celebrar ferias, mercados, exposiciones
a) localización de todas las explotaciones de la zona en              y demás concentraciones de aves de corral o de cual-
    las que se encuentren aves de corral;                             quier otro tipo de aves.
b) visitas periódicas a todas las explotaciones en que se          3.     Las medidas aplicadas en la zona de protección se
    encuentren aves de corral, con exámenes clínicos de            mantendrán al menos durante 21 días después de que se
    éstas y, en su caso, toma de muestras para su examen           hayan efectuado en la explotación infectada las opera-
    de laboratorio; se llevará un registro de visitas y re-        ciones preliminares de limpieza y desinfección con arre-
    sultados de los exámenes;                                      glo a lo dispuesto en el artículo 11. A partir de ese mo-
                                                                   mento, la zona de protección pasará a formar parte de la
                                                                   zona de vigilancia.
c) mantenimiento de las aves de corral en su alojamiento
    habitual o en cualquier otro lugar que permita aislar-
    las;                                                           4.     Las medidas aplicadas en la zona de vigilancia in-
                                                                   cluirán :
d) utilización de sistemas de desinfección apropiados en
                                                                   a) la localización de todas las explotaciones de la zona
    las entradas y salidas de las explotaciones;
                                                                      con aves de corral;
e) control de los movimientos de entrada y salida de las           b) el control de los movimientos de las aves de corral y
    explotaciones de las personas que manipulen aves de               de los huevos para incubar dentro de la zona;
    corral vivas o muertas y huevos y de los vehículos que
    transporten tales productos; en general, se prohibirá          c) la prohibición de sacar aves de corral fuera de la zona
    el transporte de las aves, exceptuando el tránsito por            durante los 15 primeros días, excepto para enviarlas
    las carreteras y líneas férreas más importantes;                  directamente a un matadero situado fuera de la zona
                                                                      infectada y designado por la autoridad competente,
f) prohibición de sacar aves de corral y huevos para in-              en cuyo caso la carne de estas aves deberá llevar la
    cubar de la explotación en que se encuentren, salvo               marca sanitaria especial establecida en el artículo 6
    que la autoridad competente autorice el transporte:               del Reglamento n° . . ./. ./CEE [sobre las condiciones
                                                                      de policía sanitaria a las que deben ajustarse los inter-
      i) de las aves para su sacrificio inmediato, preferen-          cambios intracomunitarios y las importaciones de car-
         temente en un matadero situado en la zona infec-             nes frescas de aves de corral y de aves de caza de cría
         tada, o, si no fuera posible, en uno situado fuera           procedentes de terceros países];
         de ésta y designado por la autoridad competente.
         La carne de esas aves deberá llevar la marca sani-        d) la prohibición de sacar huevos para incubar fuera de
         taria especial establecida en el apartado 1 del ar-          la zona infectada, salvo que se envíen a un local de-
         tículo 6 del Reglamento . . ./ . ./CEE del Consejo,          signado por la autoridad competente. Antes de ser en-
         [sobre las condiciones de policía sanitaria a las            viados, los huevos y sus envases deberán ser desinfec-
         que deben ajustarse los intercambios intracomuni-            tados;
         tarios y las importaciones de carnes frescas de
         aves de corral y de aves de caza de cría, proce-          e) la prohibición del transporte de estiércol de aves de
         dentes de terceros países];                                  corral o sus camas de paja fuera de la zona;
 ---pagebreak--- N ° C 146/16                            Diario Oficial de las Comunidades Europeas                                    5.6.91
f) la prohibición de celebrar ferias, mercados, exposicio-       c) uno o varios institutos o laboratorios nacionales en-
    nes y demás concentraciones de aves de corral o de                cargados de controlar la eficacia, potencia y pureza
    cualquier otro tipo de aves;                                      de las vacunas utilizadas con carácter preventivo en
                                                                      su país o almacenadas para una intervención de ur-
g) sin perjuicio de las disposiciones contempladas en las             gencia.
    letras b) y c), la prohibición de transportar aves de
    corral, exceptuando el tránsito por carretera y líneas       2.      Los laboratorios nacionales enumerados en el
    férreas más importantes.                                     Anexo II se encargarán de la coordinación de las normas
                                                                 y los métodos de diagnóstico, el uso de reactivos y el
5.      Las medidas aplicadas en la zona de vigilancia se        control de vacunas.
mantendrán al menos durante 30 días después de haberse
realizado en la explotación infectada las operaciones pre-       3.      Los laboratorios nacionales a que hace referencia el
liminares de limpieza y desinfección con arreglo a lo dis-       apartado 2 se encargarán de la coordinación de las nor-
puesto en el artículo 11.                                        mas y los métodos de diagnóstico establecidos en cada
                                                                 laboratorio de diagnóstico de la enfermedad de New-
                          Artículo 10                            castle en el Estado miembro. A tal fin:
 1.     La autoridad competente determinará las modalida-        a) podrán proporcionar a los laboratorios regionales
 des de control de los movimientos de huevos y de aves                reactivos para el diagnóstico;
de corral.
                                                                 b) controlarán la calidad de todos los reactivos para
2.      A petición de la autoridad competente, el propieta-           diagnóstico utilizados en ese Estado miembro;
 rio de aves de corral o el avicultor deberá facilitarle los
datos sobre las entradas y salidas de su explotación de          c) organizarán periódicamente pruebas comparativas;
 aves y huevos.
                                                                 d) mantendrán aislados virus de la enfermedad de New-
 3.     Toda persona que se dedique al transporte o al co-            castle provenientes de casos confirmados en ese Es-
 mercio de aves de corral y de huevos deberá poder infor-             tado miembro;
 mar a la autoridad competente sobre los movimientos de
 aves que haya transportado o comercializado y aportar           e) confirmarán los resultados positivos obtenidos en los
 una documentación detallada al respecto.                             laboratorios de diagnóstico regionales.
                                                                 4.      Los laboratorios nacionales enumerados en el
                          Artículo 11
                                                                 Anexo II mantendrán contactos con el laboratorio comu-
 1.     Los desinfectantes que se vayan a utilizar así como      nitario de referencia mencionado en el artículo 14.
 su concentración deberán estar autorizados por la autori-
 dad competente.
                                                                                           Artículo 14
 2.     Las operaciones de limpieza y desinfección deberán       En el Anexo III se menciona el laboratorio comunitario
 efectuarse bajo la supervisión oficial y con arreglo a las      de referencia para el diagnóstico de la enfermedad de
 instrucciones del veterinario oficial.                          Newcastle. Las funciones y obligaciones de dicho labora-
                                                                 torio se determinarán de acuerdo con el procedimiento
                                                                 establecido en el artículo 24, siempre y cuando no estén
                          Artículo 12
                                                                 cubiertas por el artículo 28 de la Decisión 90/424/CEE
 Las tomas de muestras y los análisis de laboratorio que         del Consejo (*).
 se efectúen para detectar el virus de la enfermedad de
 Newcastle deberán realizarse con arreglo a las disposi-
                                                                                           Artículo 15
 ciones del Anexo I.
                                                                  1.     La vacunación contra la enfermedad de Newcastle
                          Artículo 13                            con vacunas autorizadas por la autoridad competente
                                                                 podrá realizarse con carácter preventivo o bien como
 1.     Los Estados miembros designarán:                         complemento de las medidas de control que se adopten
                                                                 cuando se declare la enfermedad.
 a) uno o varios laboratorios nacionales que dispongan
     de instalaciones y de personal especializado para rea-
                                                                 2.      Únicamente se autorizarán las vacunas que satisfa-
     lizar permanentemente la tipificación completa de las
                                                                 gan las siguientes condiciones:
     características antigénicas y biológicas del virus de la
     enfermedad de Newcastle y confirmar los resultados           a) deberán cumplir los requisitos de la farmacopea euro-
     obtenidos por los laboratorios de diagnóstico regiona-           pea y haber sido producidas, controladas y distribui-
     les;                                                              das bajo vigilancia oficial,
 b) uno o varios laboratorios nacionales encargados de
     controlar los reactivos utilizados por los laboratorios
     regionales;                                                  (') DO n° L 224 de 18. 8. 1990, p. 19.
 ---pagebreak--- 5.6.91                                  Diario Oficial de las Comunidades Europeas                             N ° C 146/17
b) cuando se trate de vacunas importadas de terceros             c) durante la vacunación contemplada en el apartado 1,
    países, deberán cumplir los requisitos indicados en la          toda ave de corral de las especies designadas deberá
    letra a).                                                       permanecer en la zona de vacunación, excepto
                                                                    cuando se trate de:
3.     Por otra parte, con arreglo a lo dispuesto en el ar-
tículo 24, podrán fijarse otros criterios relativos a la utili-     — pollitos de un día de edad destinados a una explo-
zación de vacunas contra la enfermedad de Newcastle.                    tación de la zona de vacunación donde serán va-
                                                                        cunados;
                         Artículo 16                                — aves trasladadas directamente a un matadero de la
1.     Los Estados miembros en los que se practique la                  zona de vacunación para su sacrificio inmediato.
vacunación preventiva, facultativa u obligatoria, contra la             Cuando el matadero esté situado fuera de la zona
enfermedad de Newcastle informarán de ello a la Comi-                   de vacunación, únicamente se permitirán movi-
sión y a los demás Estados miembros.                                    mientos de aves de corral después de que el veteri-
                                                                        nario oficial haya efectuado una inspección sanita-
                                                                        ria de la explotación;
2.     En la información transmitida con arreglo al apar-
tado 1, deberán precisarse:
                                                                 d) al término de las operaciones de vacunación previstas
                                                                    en la letra a), podrá autorizarse la salida de la zona
— las características y composición de cada tipo de va-
                                                                    de vacunación de:
     cuna utilizado;
— las modalidades de supervisión, distribución, almace-             — pollitos de un día destinados a la producción cár-
     namiento y utilización de las vacunas;                             nica de una explotación, siempre y cuando se va-
                                                                        cunen en ella; la explotación deberá mantenerse
— las especies y categorías de aves de corral que vayan                 bajo vigilancia hasta que las aves que se trasladan
     a ser vacunadas o que puedan serlo;                                hayan sido sacrificadas;
— las zonas en que pueda o deba efectuarse la vacuna-               — aves de corral vacunadas más de 21 días antes,
     ción.                                                              siempre que vayan a ser sacrificadas inmediata-
                                                                        mente;
                         Artículo 17                                — huevos para incubar procedentes de una manada
                                                                        productora vacunada al menos 21 días antes,
 1.    Cuando se haya comprobado un brote de enferme-                   siempre que se desinfecten antes de su salida los
dad de Newcastle, la autoridad competente, con el fin de                huevos y envases.
completar las otras medidas de control previstas en el
presente Reglamento, podrá delimitar un territorio y un
período en los que, bajo control oficial, se realizará la        4.    Las medidas previstas en las letras b) y d) del apar-
vacunación rápida y sistemática (vacunación de urgencia)         tado 3 se aplicarán durante un período de tres meses,
de las especies designadas de aves de corral. Los Estados        renovable por períodos sucesivos de tres meses, al tér-
miembros que apliquen la vacunación de urgencia infor-           mino de las operaciones de vacunación establecidas en el
marán a la Comisión y a los demás Estados miembros a             apartado 1.
través del Comité veterinario permanente, creado me-
diante la Decisión 68/361/CEE del Consejo ('), sobre el          5.    No obstante lo dispuesto en las letras a) y b) del
estado de la enfermedad de Newcastle y el programa de            apartado 3, la autoridad competente podrá decidir que
vacunación de emergencia.                                        no se sometan a vacunación sistemática a determinadas
                                                                 manadas de aves de corral de especial valor científico,
2.     En el caso contemplado en el apartado 1 estará            siempre y cuando la autoridad competente adopte todas
prohibido vacunar o revacunar aves de corral en las ex-          las disposiciones necesarias para proteger su salud y las
                                                                 sometan a controles serológicos periódicos.
plotaciones a que se refiere el artículo 4.
                                                                 6.    La Comisión seguirá de cerca la evolución de la si-
3.     En el caso contemplado en el apartado 1:
                                                                 tuación de la enfermedad y, si fuere necesario, recurrirá
                                                                 al procedimiento establecido en el artículo 24 para tomar
a) deberán vacunarse lo antes posible las especies de aves
                                                                 una decisión, especialmente en cuanto al control de mo-
    de corral designadas;
                                                                 vimientos y al vacunación.
b) toda ave de corral de las especies designadas nacida o
    introducida en una explotación de la zona de vacuna-                                 Artículo 18
    ción deberá ser o estar vacunada;                            1.    Cuando en una determinada región una epizootia
                                                                 de la enfermedad de Newcastle presente un carácter ex-
                                                                 cepcionalmente grave y una tendencia a propagarse, el
(') DO n° L 255 de 18. 10. 1968, p. 23.                          Estado miembro afectado deberá:
 ---pagebreak---  N ° C 146/18                           Diario Oficial de las Comunidades Europeas                                  5.6.91
— declarar «zona de alto riesgo sanitario» una zona de-          2.    Los criterios que deberán aplicarse en la elabora-
     limitada territorialmente que abarque como mínimo           ción del plan de intervención serán los establecidos en la
     todas las zonas de protección y vigilancia que se en-       Decisión 91/42/CEE de la Comisión ('), que se aplicará
     cuentren dentro de la zona en cuestión;                      mutatis mutandis.
— aplicar las medidas previstas en el apartado 3 del ar-         De conformidad con lo dispuesto en el artículo 24, la
     tículo 9 en la «zona de alto riesgo sanitario»;             Comisión podrá modificar o completar los criterios en
                                                                 función de las características específicas de la enferme-
— prohibir la salida de toda ave de corral viva y todo           dad de Newcastle.
     huevo para incubar de la «zona de alto riesgo sanita-
     rio»;                                                       3.    Los planes elaborados con arreglo a los criterios a
                                                                 los que se refiere el apartado 2 serán sometidos a la Co-
— informar a la Comisión y a los demás Estados miem-             misión, a más tardar, doce meses después de la entrada
     bros a través del Comité veterinario permanente so-         en vigor del presente Reglamento.
     bre la situación de la enfermedad y las medidas de
     control aplicadas.                                          4.    La Comisión examinará los planes para determinar
                                                                 si permiten alcanzar el objetivo perseguido y sugerirá a
2.     Los límites de la «zona de alto riesgo sanitario» po-     los Estados miembros cualquier modificación que sea ne-
drán modificarse eliminando progresivamente las zonas            cesario introducir para hacer sus planes compatibles con
de vigilancia. Las disposiciones del apartado 1 dejarán de       los de los demás Estados miembros.
aplicarse cuando se haya suprimido la última zona de vi-
gilancia.                                                        La Comisión aprobará los planes, eventualmente modifi-
                                                                 cados, con arreglo al procedimiento establecido en el ar-
                                                                 tículo 24.
3.     En caso de que persista la situación excepcional-
mente grave, las medidas que deba adoptar el Estado              Con arreglo al mismo procedimiento, los planes podrán
miembro afectado, en particular la determinación de la           ser posteriormente modificados o completados para tener
«zona de alto riesgo sanitario» y la aplicación de las dis-      en cuenta la evolución de la situación.
posiciones del artículo 17, deberán decidirse con arreglo
al procedimiento establecido en el artículo 24.
                                                                                         Artículo 21
                          Artículo 19                            Los veterinarios especializados de la Comisión podrán,
                                                                en la medida en que sea necesario para garantizar la
 1.    Queda prohibido utilizar en la alimentación de las        aplicación uniforme del presente Reglamento, realizar
aves de corral las aguas grasas procedentes de medios de         inspecciones in situ en colaboración con las autoridades
transporte internacionales, tales como buques, vehículos        del Estado miembro de que se trate. La Comisión infor-
terrestres y aeronaves. Estas aguas grasas deberán ser re-      mará a los Estados miembros acerca de los resultados de
cogidas y destruidas bajo supervisión oficial.                  la investigación.
2.     La utilización de aguas grasas distintas de las indi-    Los Estados miembros en cuyo territorio se esté reali-
cadas en el apañado 1 o de restos de aves de corral en la       zando una inspección prestarán a los expertos la necesa-
alimentación de las aves de corral únicamente podrá au-         ria asistencia para el desempeño de sus funciones.
torizarse tras haberlos sometido a un tratamiento térmico
                                                                Las normas generales de desarrollo del presente artículo
que garantice la destrucción del virus de la enfermedad
                                                                serán determinadas con arreglo al procedimiento estable-
de Newcastle.
                                                                cido en el artículo 24.
3.     En caso necesario, la Comisión establecerá las nor-
mas de desarrollo del apartado 2, con arreglo al procedi-                                Artículo 22
miento contemplado en el artículo 24.                           En la Decisión 90/424/CEE se fijan las normas que re-
                                                                gulan la participación financiera de la Comunidad en las
                                                                acciones resultantes de la aplicación del presente Regla-
                         Artículo 20
                                                                mento.
1.     Cada Estado miembro elaborará un plan de inter-
vención en el que se especificarán las medidas que debe-
                                                                                         Artículo 23
rán aplicarse a escala nacional en caso de que se regis-
tren brotes de la enfermedad de Newcastle.                      Los Anexos del presente Reglamento podrán ser modifi-
                                                                cados por la Comisión, con arreglo al procedimiento es-
Este plan deberá permitir el acceso a las instalaciones,        tablecido en el artículo 24, en particular a fin de adap-
equipos, personal y cualquier otro material adecuado ne-        tarlo a la evolución de los procedimientos de diagnós-
cesario para la rápida y eficaz erradicación del brote.         tico.
Deberá contener una indicación precisa de las vacunas
que cada Estado miembro interesado considera necesa-
rias para una vacunación de urgencia.                           O DO n° L 33 de 29. 1. 1991, p. 29.
 ---pagebreak--- 5. 6. 91                                   Diario Oficial de las Comunidades Europeas                                     N° C 146/19
                          Artículo 24                                    El dictamen se incluirá en el acta; además, cada Estado
                                                                         miembro tendrá derecho a solicitar que su posición
1.    La Comisión estará asistida por el Comité veterina-                conste en acta.
rio permanente, en adelante denominado «el Comité».
                                                                         La Comisión tendrá en cuenta, en la mayor medida posi-
                                                                         ble, el dictamen emitido por el Comité. Informará al Co-
2.    En caso de que se haga referencia al procedimiento                 mité de la manera en que ha tenido en cuenta dicho dic-
establecido en el presente artículo, se aplicarán las dispo-             tamen.
siciones siguientes:
                                                                                                  Artículo 25
                                                                         El presente Reglamento entrará en vigor el 1 de julio de
El representante de la Comisión someterá al Comité un                    1991.
proyecto de las medidas que deban adoptarse. El Comité
emitirá su dictamen sobre dicho proyecto en un plazo                     El presente Reglamento será obligatorio en todos sus
que el presidente podrá fijar en función de la urgencia                 elementos y directamente aplicable en cada Estado
del asunto, procediendo, en su caso, a una votación.                    miembro.
                                                               ANEXO I
             PROCEDIMIENTOS PARA LA CONFIRMACIÓN Y DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DE LA
                                                   ENFERMEDAD DE NEWCASTLE
             Los siguientes procedimientos de aislamiento y caracterización de los virus de la enfermedad de Newcastle
             han de considerarse como directrices y constituyen los requisitos mínimos que deben aplicarse en el
             diagnóstico de dicha enfermedad.
             El virus responsable de la enfermedad de Newcastle es la especie tipo de la familia Paramyxoviridae. Hasta
             ahora, existen nueve grupos serológicamente diferenciables de paramixovirus aviarios, que se han denomi-
             nado PMV-1 a PMV-9. Todos los virus de la enfermedad de Newcastle se sitúan en el grupo PMV-1. A
             los efectos de los procedimientos de diagnóstico para la confirmación y el diagnóstico diferencial de la
             enfermedad de Newcastle, se empleará la siguiente definición:
             Por enfermedad de Newcastle se entiende una infección de las aves de corral producida por cualquier cepa
             aviaria del paramixovirus 1, con un índice de patogenicidad intracerebral (IPIC) superior a 0,7 en pollitos
             de un día de edad.
                                                              CAPÍTULO 1
                                             Toma de muestras y tratamiento de las mismas
             1. Muestras
                Hisopos de cloaca (o materias fecales) e hisopos traqueales de aves enfermas; materias fecales o conte-
                nido intestinal, tejido cerebral, tráquea, pulmones, hígado, bazo y otros órganos manifiestamente afecta-
                dos procedentes de aves recién fallecidas.
             2. Tratamiento de las muestras
                Aunque los órganos y los tejidos arriba mencionados pueden mezclarse, las materias fecales deberán
                tratarse por separado. Se sumergirán completamente los hisopos en una cantidad suficiente de medio
                con antibióticos. A su vez, las muestras de materias fecales y de órganos deberán homogeneizarse (en un
                mezclador cerrado o utilizando un mortero y arena esterilizada) en un medio con antibióticos para
                convertirlas en suspensiones en ese medio al 10-20 % p/v. Posteriormente, esas suspensiones se dejarán
                a temperatura ambiente durante dos horas aproximadamente (o durante más tiempo a una temperatura
                de 4 °C) y se clarificarán por centrifugación (por ejemplo, de 800 a 1 000 x gramo durante 10 minu-
                tos).
 ---pagebreak--- N° C 146/20                               Diario Oficial de las Comunidades Europeas                                       5. 6. 91
           3. Medio con antibióticos
              Diferentes laboratorios han utilizado distintos medios con antibióticos con buenos resultados. En cada
              país, los laboratorios enumerados en el Anexo II podrán asesorar al respecto. Para las muestras de
              materias fecales es necesaria una fuerte concentración de antibióticos; así, una mezcla típica es la si-
              guiente: 10 000 unidades/ml de penicilina, 10 mg/ml de estreptomicina, 0,25 mg/ml de gentamicina y
              5 000 unidades/ml de micostatina en una solución salina amortiguadora de fosfato. Estos niveles pueden
              reducirse hasta cinco veces cuando se trabaje con tejidos e hisopos traqueales. Para evitar el crecimiento
              de Chlamydia, pueden añadirse 50 mg/ml de oxitetraciclina. Al elaborar el medio, es imprescindible
              comprobar el pH después de añadir los antibióticos y corregirlo hasta que fluctúe entre 7,0 y 7,4.
                                                             CAPITULO 2
                                                         Aislamiento del virus
           Aislamiento del virus en huevos embrionados de aves de corral
           Deberán inocularse dosis de 0,1 a 0,2 mi del líquido sobrenadante clarificado dentro de la cavidad alantoi-
           dea de al menos cuatro huevos embrionados que hayan sido incubados de ocho a diez días. Es preferible
           que los huevos procedan de una manada exenta de patógenos específicos, aunque, si ello no fuera posible,
           podrán utilizarse huevos de una manada exenta de anticuerpos del virus de la enfermedad de Newcastle.
           Los huevos inoculados deberán mantenerse a 37 °C y se examinarán al trasluz diariamente. Los huevos que
           contengan embriones muertos o moribundos serán refrigerados a 4 °C a medida que se vayan compro-
           bando. Los demás lo serán a la misma temperatura 6 días después de la inoculación. Los fluidos alantoideos
           o amnióticos se someterán además a la prueba de hemaglutinación. Si la prueba de hemaglutinación resul-
           tase negativa, deberá repetirse el procedimiento anterior utilizando fluido alantoideo o amniótico como
           inoculo.
           Cuando la hemaglutinación sea positiva, deberá descartarse la posible presencia de bacterias mediante la
           realización de un cultivo. Si se confirma la presencia de bacterias, podrán filtrarse los fluidos con un filtro
           de membrana de 450 nm, añadirse más antibióticos e inocularse en huevos embrionados como ya se explicó
           anteriormente.
                                                             CAPÍTULO 3
                                                        Diagnóstico diferencial
           1. Diferenciación preliminar
              Todos los virus hemaglutinantes deberán enviarse al laboratorio nacional enumerado en el Anexo II
              para que sean objeto de pruebas de identificación, caracterización y patogenicidad más completas. No
              obstante, como es fundamental que se adopten mientras tanto medidas para limitar la extensión de la
              enfermedad de Newcastle lo antes posible, los laboratorios regionales deberán ser capaces de detectar el
              virus de dicha enfermedad. Por ello, los fluidos hemaglutinantes deberán someterse a las pruebas de
              inhibición de la hemaglutinación descritas en los capítulos 5 y 6. Una inhibición positiva, es decir de 2' o
              más, con antisuero policlonal específico para el virus de la enfermedad de Newcastle (con un título
              conocido de al menos 2') se considerará una identificación preliminar suficiente para imponer medidas
              provisionales para la lucha contra la enfermedad.
           2. Identificación confirmatoria
              El laboratorio nacional deberá efectuar un diagnóstico diferencial completo de todos los agentes hema-
              glutinantes. La presencia del virus de la enfermedad de Newcasde volverá a confirmarse por inhibición
              realizando pruebas de inhibición de la hemaglutinación con antisueros de gallina monoespecíficos. Todo
              el material positivo deberá someterse a la prueba del índice de patogenicidad intracerebral con arreglo a
              las directrices del capítulo 7. Los índices de patogenicidad superiores a 0,7 indicarán que la presencia del
              virus exige la aplicación de todas las medidas de lucha contra la enfermedad.
              Gracias a los últimos progresos realizados en materia de tipificación de los virus de la enfermedad de
              Newcastle, especialmente las técnicas de anticuerpos monoclonales, ha sido posible agrupar las cepas y
              microorganismos aislados. Concretamente, se dispone de algunos anticuerpos monoclonales específicos
              para las cepas utilizadas en las vacunas de la Comunidad Europea. Estos anticuerpos pueden emplearse
              en pruebas sencillas de inhibición de la hemaglutinación. Dado que a partir de las aves de corral utiliza-
              das como muestra a menudo pueden aislarse vivas las cepas utilizadas en las vacunas, resulta obvia la
              ventaja de que los laboratorios nacionales que figuran en el Anexo II puedan identificarlas con rapidez.
              El laboratorio comunitario de referencia contemplado en el artículo 14 obtendrá esos anticuerpos mo-
              noclonales y se los facilitará a los laboratorios nacionales para que puedan confirmar el aislamiento de
              los virus utilizados en las vacunas.
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          Los laboratorios nacionales deberán enviar todos los agentes hemaglutinantes al laboratorio comunitario
          de referencia.
       3. Tipificación y caracterización adicional de los virus aislados
          Los laboratorios nacionales enviarán al laboratorio comunitario de referencia todos los virus hemagluti-
          nantes y éste, en consonancia con las funciones y cometidos que le han sido asignados, someterá esos
          virus a estudios antigénicos y genéticos adicionales para llegar a un mejor conocimiento de la epizootio-
          logía de la enfermedad o enfermedades en la Comunidad Europea.
                                                         CAPÍTULO 4
               Pruebas rápidas para la detección del virus y los anticuerpos de la enfermedad de Newcastle
       A continuación se enumeran las pruebas rápidas para la detección del virus de la enfermedad de Newcastle
                             en aves vacunadas y la detección de anticuerpos en aves no vacunadas
       1. Detección del virus de la enfermedad de Newcastle
          Se vienen empleando varias pruebas rápidas para detectar directamente los antigenos de la enfermedad
          de Newcastle en el diagnóstico de infecciones de aves vacunadas; las más extendidas por el momento
          son la prueba con anticuerpos fluorescentes en secciones longitudinales de la tráquea y la prueba con
          anticuerpos de la peroxidasa en el cerebro. No hay motivos para creer que no se pueden aplicar a las
          infecciones por el virus de la enfermedad de Newcastle otras pruebas de detección directa de antígenos,
          pero estas pruebas tienen el inconveniente de que no resulta factible examinar todos los posibles puntos
          de replicación del virus de la enfermedad de Newcastle en las aves vacunadas. Así, la ausencia de
          indicios del virus en la tráquea, por ejemplo, no excluye que éste se replique en el intestino. No se
          recomienda ningún método determinado de detección directa para su uso rutinario, si bien en determi-
          nadas circunstancias pueden ser de utilidad.
       2. Detección de anticuerpos en aves no vacunadas
          La mayoría de los laboratorios que efectúan diagnósticos de la enfermedad de Newcastle conocen bien
          la prueba de inhibición de la hemaglutinación. Las recomendaciones que vienen a continuación se refie-
          ren a esta prueba para la medición de anticuerpos del virus. N o obstante, la prueba de inmunosorción
          con enzimas (ELISA) puede dar buenos resultados cuando se usa para detectar los anticuerpos del virus.
          Se aconseja que, cuando los laboratorios regionales deseen servirse de la prueba ELISA, ésta sea super-
          visada por el laboratorio nacional enumerado en el Anexo II.
          a) M u e s t r a s
              Deberán tomarse muestras de sangre de todas las aves cuando la manada esté compuesta de menos
              de 20 animales y muestras de 20 aves cuando la manada sea mayor. (De este modo, la probabilidad
              de detectar al menos un suero positivo será > 99 % si el 25 % o más de la manada es positivo,
              independientemente del tamaño de ésta). Deberá dejarse que la sangre se coagule y se extraerá el
              suero para la prueba.
          b) E x a m e n de los a n t i c u e r p o s
              Se probará la capacidad de las muestras individuales de suero para inhibir el antígeno hemagluti-
              nante del virus de la enfermedad de Newcastle en pruebas estándar de inhibición de la hemaglutina-
              ción efectuadas de acuerdo con el capítulo 6.
              Como las opiniones difieren en cuanto a la utilización de 4 u 8 unidades de hemaglutinina en la
              prueba de inhibición de la hemaglutinación, y al parecer ambas dosis son válidas, la elección se deja
              al arbitrio de los laboratorios nacionales.
              Téngase en cuenta, sin embargo, que del antígeno utilizado dependerá el nivel en el que un suero
              sea considerado positivo: con 4 unidades de hemaglutinina un suero se considerará positivo cuando
              presente un título superior o igual a 2*; mientras que con 8 unidades el título deberá ser igual o
              superior a 25.
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                                                           CAPÍTULO 5
                                                  Prueba de hemaglutinación (HA)
            1. Reactivos
               a) Solución salina isotónica amortiguadora de fosfato (0,05M) de pH 7,0 a 7,4.
               b) Hematíes extraídos de un mínimo de tres gallinas exentas de patógenos específicos (a falta de éstas,
                  podrá utilizarse sangre de aves que hayan estado bajo control regular y que estén exentas de anti-
                  cuerpos del virus de la enfermedad de Newcastle), reunidos y mezclados a partes iguales con solu-
                  ción de Alsever. Antes de utilizarlos, los hematíes deberán lavarse tres veces en la solución salina
                  isotónica amortiguadora de fosfato (SSIAF). Para la prueba, se recomienda una suspensión en SSIAF
                  al 1 % (hematíes empaquetados v/v).
               c) Se recomienda la utilización como antígeno estándar de la cepa de virus de la enfermedad de New-
                  castle Ulster 2C.
            2. Procedimiento
               a) Distribuir 0,025 mi de SSIAF en cada uno de los pocilios de una placa de microtitulación (utilizar
                  pocilios con fondo en V).
               b) Introducir 0,025 mi de suspensión de virus (es decir, fluido alantoideo) en el primer pocilio.
               c) Utilícese una micropipeta para hacer diluciones del virus a la mitad (de 1:2 a 1:4096) en toda la
                  placa.
               d) Distribuir otros 0,025 mi de SSIAF en cada pocilio.
               e) Añadir 0,025 mi de una suspensión al 1 % de hematíes a cada pocilio.
               f) Homogeneizar golpeando ligeramente la placa y refrigerarla a 4 °C.
               g) Leer las placas después de 30 o 40 minutos cuando se hayan sedimentado los controles. La lectura se
                  efectuará inclinando la placa y observando la presencia o ausencia de un movimiento de los hematíes
                  en forma de lágrima. Los pocilios en los que no se haya producido la hemaglutinación deberán
                  presentar un movimiento similar al de los pocilios de control que no contengan virus.
               h) El título de hemaglutinación será la mayor dilución que produzca la aglutinación de los hematíes.
                  Puede considerarse que tal dilución contiene una unidad de hemaglutinación. Otro método más
                  preciso para determinar el título de hemaglutinación consiste en realizar pruebas de hemaglutinación
                  con virus en una gama de diluciones iniciales muy cercanas entre sí, por ejemplo, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6,
                  etc. Este método se recomienda para preparar con gran precisión antígenos para las pruebas de
                  inhibición de la hemaglutinación (capítulo 6).
                                                           CAPÍTULO 6
                                          Prueba de inhibición de la hemaglutinación (IH)
            1. Reactivos (veáse capítulo 5)
               a) SSIAF.
               b) Fluido alantoideo que contenga el virus, diluido con SSIAF hasta que contenga 4 u 8 unidades de
                  hemaglutinación por cada 0,025 mi.
               c) Suspensión de hematíes de gallina al 1 %.
               d) Suero de gallina de control negativo.
               e) Suero de control positivo.
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         2. Procedimiento
            a) Distribuir 0,025 mi de SSIAF en cada uno de los pocilios de una placa de microtitulación de plástico
               (utilizar pocilios con fondo en V).
            b) Introducir 0,025 mi de suero en el primer pocilio de la placa.
            c) Utilizar una micropipeta para hacer diluciones a la mitad del suero en toda la placa.
            d) Añadir 0,025 mi de fluido alantoideo diluido que contenga 4 u 8 unidades de hemaglutinación.
            e) Homogeneizar golpeando ligeramente la placa y refrigerarla a 4 °C al menos durante 60 minutos o
               dejarla a temperatura ambiente durante 30 minutos como mínimo.
            f) Añadir 0,025 mi de suspensión de hematíes al 1 % a todos los pocilios.
            g) Homogeneizar golpeando ligeramente las placas y refrigerarlas a 4 °C.
            h) Leer las placas después de 30 a 40 minutos cuando se hayan sedimentado los hematíes de control. La
               lectura se efectuará inclinando las placas y observando la presencia o ausencia de un movimento en
               forma de lágrima similar al de los pocilios de control que contengan hematíes (0,025 mi) y SSIAF
               (0,05 mi) solamente.
            i) El título de inhibición de la hemaglutinación será la mayor dilución del antisuero que produzca una
               inhibición completa de 4 u 8 unidades de virus (en todas las pruebas deberá incluirse una titulación
               de hemaglutinación para confirmar la presencia de las unidades de hemaglutinación necesarias).
            j) La validez de los resultados dependerá de la obtención de un título de menos de V para 4 unidades
               de hemaglutinación o de 22 para 8 unidades de hemaglutinación con el suero de control negativo y
               de un título que esté entre el doble y la mitad (un orden de dilución) del título conocido del suero de
               control positivo.
                                                         CAPÍTULO 7
                                        Prueba del índice de patogenicidad intracerebral
         1. Diluir a 1:10 fluido alantoideo recién recogido e infeccioso (el título de hemaglutinación deberá ser
            superior a 24) en una solución salina isotónica esterilizada (no podrán utilizarse antibióticos).
         2. Inyectar en el cerebro de cada uno de 10 pollitos de un día de edad (es decir, >24 horas y <40 horas
            después de salir del huevo) 0,05 mi de virus diluido. Los pollitos deberán haber nacido de huevos proce-
            dentes de una manada exenta de patógenos específicos.
         3. Examinar las aves cada 24 horas durante 8 días.
         4. Puntuar todas las aves en cada examen: 0 = normal, 1 = enferma y 2 = muerta.
         5. Calcular el índice del siguiente modo:
                                                                  Días después de la inoculación
                   Signos clínicos
                                                                         número de aves
                                          1    2     3   4      5     6     7    8          Total           Puntuación
            normal                       10   4      0   0      0     0     0    0         14 @ 0             -     0
            enferma                       0   6     10   4      0     0     0    0        20 @ 1              -   20
            muerta                        0   0      0   6     10    10    10   10        46 @ 2              -   92
                                                                                             TOTAL            = 112
            El índice será la puntuación media por ave y por observación = 112/80 = 1,4.
 ---pagebreak--- ^
  N ° C 146/24                               Diario Oficial de las Comunidades Europeas                                         5.6.91
                                                                 CAPÍTULO 8
                                             Evaluación de la capacidad de formación de placas
               1. Normalmente, lo más conveniente es utilizar una serie de diluciones del virus a fin de obtener un nú-
                  mero adecuado de placas en el cultivo. Bastará con diluciones decimales hasta llegar a una concentra-
                  ción de 10" 7 enSSIAF.
              2. Preparar capas monocelulares confluentes de células de embrión de gallina o una línea celular apropiada
                  (por ejemplo, la línea de riñon de bovino de Madin—Darby) en placas de Petri de 5 cm de diámetro.
              3. Introducir 0,2 mi de cada dilución de virus en dos placas de Petri y esperar 30 minutos para que el virus
                  se adsorba.
              4. Tras lavar tres veces con SSIAF las células infectadas, se cubrirán con un medio apropiado que contenga
                  agar al 1 % p/v (también puede añadirse 0,01 mg/ml de tripsina). Es importante no añadir suero al
                  medio de recubrimiento.
              5. Tras 72 horas de incubación a 37 °C las placas habrán alcanzado un tamaño adecuado. Para observar-
                  las, conviene retirar la capa de agar y teñir la capa monocelular con violeta cristal (0,5 % p/v) en etanol
                  al 25 % (v/v).
              6. Todos los virus incubados con tripsina en el medio producirán placas claras. Por el contrario, a falta de
                  tripsina, sólo producirán placas los virus que resulten virulentos para las gallinas.
                                                                  ANEXO     II
              LISTA DE LABORATORIOS NACIONALES PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD
                                                             DE NEWCASTLE
              BÉLGICA                                       Instituí national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99,
                                                            B-1180 Bruxelles
              DINAMARCA                                     National Veterinary Laboratory, Poultry Disease           División,
                                                            Hang0vej 2, DK-8200 Árhus N
              REPÚBLICA FEDERAL DE                          Institut für Kleintierzucht der Bundesforschungsanstak für
              ALEMANIA                                      Landwirtschaft, Braunschweig-Volkenrode, Postfach 2 80,
                                                            D-W-3100 Celle
              FRANCIA                                       Centre national d'études vétérinaires et alimentation — Labora-
                                                            toire central de recherches agricoles et porcine, boíte póstale 53,
                                                            F-22440 Ploufragan
              GRECIA                                        Institut de maladies infectieuses et parasitaires d'Athénes, 25 rué
                                                            Napoleos, 153 10, Agia Baraskevi, Attiki
              IRLANDA                                       Veterinary Research Laboratory, Abbotstown,            Castleknock,
                                                            IRL-Dublin 15
              ITALIA                                        Istituto zooprofilattico sperimentale di Padova, via G. Orus n.
                                                            2, 1-35100 Padova
              LUXEMBURGO                                    Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99,
                                                            B-1180 Bruxelles
              PAÍSES BAJOS                                  Centraal Diergeneeskundig Instituut,         Vestiging   Virologie,
                                                            Hourtibweg 39, NL-8221 RA Lelystad
 ---pagebreak--- 5. 6. 91                  Diario Oficial de las Comunidades Europeas                               N° C 146/25
         PORTUGAL                      Laboratorio Nacional de Investigacao Veterinaria (LNIV), Es-
                                       trada de Benfica, 701, P-1500 Lisboa
         ESPAÑA                        Laboratorio de Sanidad y Producción Animal, Zona Franca,
                                       Circunvalación — Tramo 6, Esquina Calle 3, E-08004 Barce-
                                       lona
         REINO UNIDO                   Central Veterinary Laboratory, New Haw, Weybridge,
                                       UK-Surrey KT15 3NB
                                            ANEXO III
         NOMBRE DEL LABORATORIO COMUNITARIO DE REFERENCIA PARA LA DETECCIÓN DE
                              LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE
                                  Central Veterinary Laboratory
                                  New Haw
                                  Weybridge
                                  UK-Surrey KT15 3NB