CELEX: 31983H0571
Language: es
Date: 1983-10-26 00:00:00
Title: 83/571/CEE: Recomendación del Consejo, de 26 de octubre de 1983, relativa a las pruebas para la comercialización de especialidades farmacéuticas

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31983H0571

83/571/CEE: Recomendación del Consejo, de 26 de octubre de 1983, relativa a las pruebas para la comercialización de especialidades farmacéuticas  

Diario Oficial n° L 332 de 28/11/1983 p. 0011 - 0032 Edición especial en español: Capítulo 13 Tomo 14 p. 0215  Edición especial en portugués: Capítulo 13 Tomo 14 p. 0215 

 RECOMENDACIÓN DEL CONSEJO    de 26 de octubre de 1983    relativa a las pruebas para la comercialización   de especialidades farmacéuticas     ( 83/571/CEE )    EL CONSEJO DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS ,    Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad   Económica Europea y , en particular , su   artículo 235 ,    Visto el dictamen del Parlamento Europeo (1) ,    Visto el dictamen del Comité Económico y   Social (2) ,    Considerando que la Directiva 65/65/CEE (3) ha   emprendido la aproximación de las disposiciones legales ,   reglamentarias y administrativas de los Estados miembros   sobre especialidades farmacéuticas y que las   Directivas 75/318/CEE (4) y 75/319/CEE (5) han   proseguido dicha aproximación y han desarrollado   los principios establecidos en la Directiva 65/65/CEE ;    Considerando en particular que la Directiva 75/318/CEE   define el marco general para la experimentación de   especialidades farmacéuticas , enumera los diversos   tipos de pruebas que deben efectuarse y establece los   principios que deben seguirse para la tramitación   de las solicitudes de autorización de comercialización   de tales especialidades ;    Considerando que la experiencia ha demostrado que la   realización y el contenido de dichas pruebas deben ser   objeto de una descripción más precisa que permita una   aplicación idéntica de las directivas comunitarias   en la realización de las pruebas y en el examen de las   solicitudes por las autoridades nacionales ;    Considerando que , en consecuencia , son necesarias notas   explicativas para prevenir divergencias de apreciación   en la aplicación de las normas y protocolos establecidos   en la Directiva 75/318/CEE ; que tales notas contribuirán   a favorecer la libre circulación de las especialidades   farmacéuticas ;    Considerando que las pruebas dirigidas a evaluar la   calidad , la seguridad y la eficacia de las especialidades   farmacéuticas deben ser constantemente adaptadas a la   evaluación de los conocimientos científicos y   técnicos sin que ello implique sin embargo un   despilfarro de los recursos ni una utilización   de los animales de laboratorio más allá de lo   estrictamente necesario ;    Considerando que es por tanto altamente deseable   revisar periídicamente , las notas explicativas para   tener en cuenta la evolución de la técnica y elaborar   de común acuerdo con las autoridades nacionales ,   nuevas notas explicativas en función de las   prioridades que se presenten ;    Considerando que tal progreso en la armonización ,   esencial en el plano comunitario , favorecerá igualmente   el reconocimiento , en el plano internacional , de las   pruebas de especialidades farmacéuticas efectuadas de   conformidad con dichas notas , evitando así la necesidad   de repetir las pruebas en productos destinados a la   exportación a terceros países ;    Considerando que el Comité farmacéutico y el Comité   de específicos farmacéuticos han sido consultados   sobre las medidas objeto de la presente Recomendación ,    RECOMIENDA A LOS ESTADOS MIEMBROS :    1 . velar por que los solicitantes de autorizaciones de   comercialización de especialidades farmacéuticas   respeten , en lo que se refiere a la realización de las   pruebas y a la presentación de los resultados , los   principios y la metodología de las notas explicativas   que figuran en los Anexos ;    2 . tramitar y evaluar , de conformidad con dichas   notas explicativas , las solicitudes de autorización   de comercialización .    Hecho en Luxemburgo , el 26 de octubre de 1983 .    Por el Consejo    El Presidente    G. MORAITIS    (1) DO n º C 287 de 9 . 11 . 1981 , p. 127 .    (2) DO n º C 189 de 30 . 7 . 1981 , p. 39 .    (3) DO n º 22 de 9 . 2 . 1965 , p. 369/65 .    (4) DO n º L 147 de 9 . 6 . 1975 , p. 1 .    (5) DO n º L 147 de 9 . 6 . 1975 , p. 13 .    ANEXO I    TOXICIDAD POR ADMINISTRACIÓN CONTINUADA    Nota explicativa relativa a la aplicación del   número 2 de la letra B de la Segunda Parte del   Capítulo 1 , del Anexo de la Directiva 75/318/CEE ,   para la concesión de la autorización de   comercialización de un nuevo medicamento    1 . INTRODUCCIÓN    Estas pruebas tendrán por objeto la obtención   de información sobre la toxicidad de un producto   previsiblemente destinado a ser administrado de forma   continuada , con objeto de permitir la evaluación   de los riesgos que resulten de su administración   terapéutica , teniendo en cuenta los productos de   biotransformación .    La duración de dichas pruebas estará en función   de la utilización preconizada en seres humanos o de la   duración prevista del período de administración .   Con objeto de poner en correlación la duración de los   estudios de toxicidad crónica con la duración   prevista del período de administración del   fármaco a seres humanos se proponen , a título   simplemente indicativo , los períodos siguientes :    Duración prevista del tratamiento * Duración   propuesta de los ensayos toxicidad por administración   reiterada *    Una o varias administraciones en un solo día *   dos semanas *    Administración continuada hasta siete días *   cuatro semanas *    Administración continuada hasta treinta días *   tres meses *    Administración continuada más de treinta días *   seis meses *    Cuando el período de administración de la   substancia a seres humanos se prevea más prolongado ,   por ejemplo , en los casos en que una administración   discontinua repetida frecuentemente se traduzca en un   período total de exposición al fármaco de un mes   o más en el curso de un período de un año , o   cuando la retención en el organismo de una dosis   única del medicamento fuese prolongada , la duración   de la prueba de toxicidad crónica será de seis meses .    Si resultase necesario efectuar pruebas de toxicidad   de una duración de tres o seis meses , convendrá   efectuar una prueba de toxicidad de subaguda de una   duración de dos o cuatro semanas con el fin de   establecer la gama de dosis apropiadas para el estudio   a largo plazo ( ver número 2.5 ) .    En efecto , la administración de una dosis   demasiado elevada dejaría muy pocos animales vivos al   final del estudio de tres meses o más , mientras que   la administración de una dosis demasiado débil   impediría la aparición de alteraciones tóxicas .    1.1 . Especificaciones generales referentes al   estudio de toxicidad por administración continuada    En la Segunda Parte del Anexo de la Directiva   75/318/CEE , referente a las pruebas toxicológicas y   farmacológicas , se precisa que dichos experimentos   deberán poner de manifiesto , entre otras cosas los   umbrales de toxicidad : « Las pruebas de toxicidad   por administración continuada tendrán por objeto   revelar las alteraciones funcionales y/o patológicas   subsiguientes a la administración repetida de la   substancia activa o de la asociación de substancias   activas , y establecer las condiciones de aparición de   dichas alteraciones en función de la posología .    De forma general , será conveniente realizar dos   pruebas : una a corto plazo , de una duración de dos   a cuatro semanas , y otra a largo plazo , cuya duración   dependerá de las condiciones de aplicación clínica .   Esta última prueba tendrá por objeto establecer   los límites de inocuidad experimental del producto   examinada y su duración habitual será de   3 a 6 meses . »    Como dichos límites sólo podrán ser determinados   una vez que hayan sido rebasados , el estudio de   toxicidad por administración continuada deberá   orientarse a poner de relieve los síntomas de   toxicidad . Ello significará que :    1.1.1 . Desde el punto de vista del metabolismo y de   la farmacocinética del medicamento , será deseable   que las especies vivas escogidas para los estudios   a largo plazo que deban realizarse antes de la   comercialización del producto sean tan próximas   al ser humano como sea posible , en la gama habitual   de animales de laboratorio normalmente utilizados para   las pruebas de toxicidad por administración continuada .   Si hubiera diferencias significativas en el metabolismo ,   deberán ser tenidas en cuenta para la evaluación de   los resultados .    1.1.2 . En la medida en que ello sea conocido y   realizable , será deseable que los órganos-objetivo   farmacológicos y los efectos farmacológicos del   producto en la especie utilizada sean los mismos que los   implicados en el efecto terapéutico previsto para el   hombre .    1.1.3 . Deberán escogerse la dosis , la vía y la   frecuencia de administración que favorezcan la   acumulación en el organismo animal de una cantidad   del producto y de sus metabolitos que baste para poner   en evidencia los efectos nocivos secundarios sobre   los órganos-objetivo . En la elaboración del protocolo   se tendrá en cuenta la farmacocinética del medicamento .    La administración continuada de un medicamento en   dosis suficientemente elevadas podrá dar lugar a   las siguientes fases principales :    a ) acumulación del fármaco en el organismo   hasta llegar a un nivel estacionario ;    b ) adaptación del organismo a la acumulación   del medicamento , en lo que concierne a los   órganos-objetivo farmacológicos , a las encimas   de biotransformación , o a los mecanismos de   excreción ;    c ) en determinados casos , activación de una vía   metabólica secundaria como consecuencia de una   sobrecarga de la vía metabólica primeria de   desintoxicación con la consiguiente posibilidad de   formación de un nuevo metabolito tóxico ;    d ) aparición de síntomas de toxicidad en el   órgano-objetivo , que podrán ir desde fallos en las   funciones fisiológicas hasta alteraciones patológicas .    La administración del producto en el marco de un   estudio de toxicidad por administración reiterada   deberá ser suficiente , desde el punto de vista de   la dosis y de la duración , para alcanzar la fase final   mencionada en la letra d ) , de forma que puedan   evaluarse el tipo de intoxicación engendrado por la   administración de una dosis excesiva , y el múltiplo   de la dosis terapéutica que produzca tal   intoxicación . En la práctica , no todos los   medicamentos podrán ser administrados en dosis que   puedan producir una intoxicación del órgano-objetivo .   En tales casos , deberá demostrarse que ha sido   administrada la máxima dosis posible y que el   medicamento ha sido absorbido sistemáticamente .    2 . ESPECIFICACIONES REFERENTES AL MEDICAMENTO Y A SU   ADMINISTRACIÓN    2.1 . Calidad del medicamento    En la medida de lo posible , el principio activo   deberá presentar el mismo espectro de impurezas que   el producto que se vaya a comercializar . Si , en su   forma de administración definitiva , el medicamento   presentara impurezas significativamente diferentes en   cantidad y en calidad de las del lote sometido a   prueba , deberán tomarse nuevas disposiciones para   verificar su posible toxicidad . Si el medicamento   debiera administrarse por vía oral , podrán ser   importantes algunas características físicas del   mismo , como por ejemplo , la dimensión de las   partículas , por consiguiente , en las pruebas de   toxicidad por administración continuada deberán   precisarse en cada caso las propiedades físicas y   la estabilidad de la substancia utilizada . Cada vez   que en una prueba de toxicidad por administración   continuada se utilice más de un lote de principio   activo , convendrá precisarlo e identificar cada   lote . El lote o lotes utilizados en los estudios   de toxicidad por administración continuada no   deberán tener un grado de pureza superior a la de los   lotes destinados al producto acabado . Cuando el   medicamento se administre mezclado con los alimentos   o con el agua de bebida que se dé a los animales   de experimentación deberá establecerse la   estabilidad del mismo en dichos medios .    Cuando se utilice por primera vez un nuevo excipiente   deberá ser estudiado con los mismos criterios que   si se tratase de una nueva substancia activa .    2.2 . Duración de la administración    La duración de estas pruebas estará en   función de la duración del uso terapéutico   propuesto en seres humanos ( número 1 ) .    2.3 . Vía de administración    Siempre que ello sea técnicamente realizable ,   el producto se administrará por la vía prevista   para el hombre y será deseable que dicha vía   permita demostrar su efecto farmacológico , a falta   de lo cual deberá considerarse la utilización de   otras vías ( la administración por inhalación se   tratará en el Apéndice ) . La cantidad de   medicamento absorbido a partir del lugar de   administración propuesto deberá ser conocida   tras estudios farmacocinéticos . Cuando el producto   se administre mezclado con los alimentos o con el agua   de bebida que se de a los animales de experimentación ,   el solicitante deberá demostrar que efectivamente   se absorbe una cantidad razonable y bien conocida del   medicamento ingerido . En estos casos , será necesario   además ajustar periodicamente la cantidad de medicamento   contenido en los alimentos o en el agua de bebida   para realizar las compensaciones necesarias en función   del crecimiento y de los cambios del consumo alimentario .    Además de la toxicidad general , la posibilidad   de una toxicidad local en el lugar mismo de la aplicación   deberá ser objeto de una gran atención , como por   ejemplo en los casos de aplicación cutánea , vaginal ,   endovenosa , intramuscular , rectal , subcutánea ,   intra-articular , endorraquídea , conjuntival ,   intranasal y auricular , o cuando el medicamento sea   administrado por inhalación .    2.4 . Frecuencia de administración    Con determinados productos la acumulación en el   organismo hasta llegar a un estado estacionario sólo   se produce cuando dichos productos son administrados   durante siete días a la semana . Normalmente , la   administración de medicamentos a los animales se   efectuará sobre esta base . Si esto no fuera posible ,   deberá darse la razón de ello . Cuando la velocidad   de eliminación sea lenta , podrá recurrirse a una   administración menos frecuente . Por el contrario ,   una velocidad de eliminación rápida o una   intolerancia gástrica podrán obligar a administrar   los productos más de una vez al día .    2.5 . Dosis    El tratamiento deberá incluir :    a ) una dosis fuerte , escogida para provocar la   toxicidad en el órgano-objetivo siempre que sea   posible o , en su defecto , para provocar una   toxicidad no específica o para alcanzar el límite   impuesto por el volumen de administración .    En caso de un estudio de toxicidad de una duración   de tres o seis meses será necesario determinar dicha   dosis a partir de una prueba de toxicidad subaguda   de una duración de dos o cuatro semanas , programada   y realizada con objeto de determinar la gama de las   dosis ;    b ) una dosis débil , que baste para provocar un   efecto farmacodinámico o el efecto terapéutico   deseado , o para producir niveles sanguíneos   comparables a los que , según las previsiones ,   deberían producir dichos efectos en el hombre ;    c ) una dosis intermedia , por ejemplo , la media   geométrica entre la dosis fuerte y la dosis débil ;    d ) uno o varios lotes testigos apropiados ; en   determinados casos podrá ser necesario un lote testigo   positivo .    Sin embargo , las anteriores observaciones no   serán aplicables cuando el propio efecto   farmacodinámico sea responsable de la toxicidad ; un   ejemplo de ello es la hipoglucemia provocada por la   administración de agentes antidiabéticos .    El experimentador deberá indicar las razones   que le hayan llevado a elegir dichos niveles de dosis .    2.6 . Promedicamentos    Cuando el producto administrado sea un promedicamento ,   su transformación en principio activo deberá   demostrarse en la especie utilizada en el estudio .    3 . ESPECIFICACIONES REFERENTES A LOS ANIMALES DE   EXPERIMENTACIÓN    3.1 . Especies animales : elección y caracterización    En la medida de lo posible , las especies animales   deberán elegirse sobre la base de su similitud con el   ser humano desde el punto de vista de la farmacocinética ,   incluida la biotransformación del producto   ( número 1.1.1 ) .    El efecto farmacodinámico del producto deberá   demostrarse , si fuera posible , en al menos una de   las especies , con objeto de proporcionar la información   necesaria respecto al margen que exista entre el efecto   terapéutico y el efecto tóxico . El investigador   deberá justificar la elección de la especie y de su   origen . La utilización de animales SPF deberá   aumentar normalmente el valor del estudio .    3.2 . Sexo    Normalmente deberá utilizarse un número igual de   animales machos y de animales hembras .    3.3 . Dimensiones de los grupos de experimentación    Al fijar la dimensión de los grupos de   experimentación , deberán tomarse en consideración   los elementos siguientes :    a ) La dimensión de dichos grupos deberá ser   suficiente para hacer aparecer todos los efectos   toxicológicos importantes debidos al tratamiento .    b ) La dimensión de los grupos deberá ser suficiente   para permitir el sacrificio de animales en intervalos   dados antes del final de la prueba sin que ello   interfiera el análisis estadístico final .    c ) La dimensión de los grupos deberá ser suficiente   para permitir la conservación de un determinado   número de animales al término del tratamiento , con   objeto de poder determinar la reversibilidad de las   alteraciones tóxicas .    d ) Para la determinación de la dimensión de los   grupos será asimismo importante el poseer unos   buenos conocimientos de base sobre las series de   variables que deban estudiarse en las especies y   razas utilizadas .    Sin embargo , la dimensión de los grupos de control   y de tratamiento estará siempre limitada por factores   prácticos y financieros , así como por consideraciones   humanitarias .    3.4 . Número de especies    El fin de los estudios de toxicidad por administración   continuada será la elaboración de un modelo animal   para la administración continuada de la substancia   en el hombre . El valor del modelo para su extrapolación   en el hombre dependerá en gran medida del parecido   cualitativo entre el modelo animal y el hombre ;   generalmente , dicho parecido constituye una incógnita .   Para reducir todo riesgo de error en la extrapolación   en relación con los efectos o la ausencia de efectos   propios de tal o tal especie , el investigador deberá   recurrir al menos a dos especies , una de ellas no   perteneciente al orden de los roedores . La elección   de las especies deberá ser justificada   ( ver número 1.1.1 ) .    4 . CONDICIONES DE ESTABULACION DE LOS ANIMALES    Las condiciones de estabulación de los animales   deberán ser de alta calidad y se controlarán las   condiciones ambientales ; su dieta deberá tener   una composición constante y perfectamente conocida a   lo largo de todo el tratamiento . Las medidas tomadas   para conseguir dichas condiciones deberán ser descritas   en el informe .    5 . OBSERVACIONES    5.1 . Datos de control y datos previos al tratamiento    Para los pequeños mamíferos será necesario disponer   de datos de control de la colonia relativos a todas   las variables morfológicas , bioquímicas y   fisiológicas . En el caso de los animales de mayor   tamaño , deberán obtenerse datos previos al tratamiento   de los animales utilizados para el estudio .    5.2 . Controles durante el estudio    5.2.1 . Control general    Se efectuará un control general a lo largo de todo   el estudio que deberá abarcar los puntos siguientes :   consumo de alimentos , peso del cuerpo , hematología ,   química clínica , análisis de orina ,   oftalmología , electrocardiograma y comportamiento   general . La selección de las técnicas empleadas   y la elección de otras pruebas deberán hacerse   en función del nivel de los conocimientos científicos   en el momento de las pruebas y de la especie animal   utilizada . En el caso de los roedores , si se   requirieran el electrocardiograma , el examen   oftalmológico u otros exámenes específicos ,   bastará que los mismos se efectúen sobre un   número limitado de animales a cada nivel de dosis .    5.2.2 . Frecuencias de los controles    La frecuencia de los controles , al margen de la   fase anterior al tratamiento y del control final , deberá   estar en función de las manifestaciones de toxicidad ,   así como de la farmacocinética del medicamento .    Las pruebas ( incluida la recogida de muestras   sanguíneas ) realizadas durante los controles deberán   afectar asimismo a los animales de control , pero no   a los animales de experimentación con objeto de que   la interpretación final de los resultados de la   prueba de toxicidad no pueda ser afectada por ello .    5.2.3 . Consumo de alimentos    Cuando los productos sean administrados en la comida   deberá dedicarse una atención particular al efecto   del producto en el consumo de alimentos . Convendrá   asimismo tener en cuenta los consiguientes efectos   en relación con la ingestión del medicamento .    5.3 . Control final    Las observaciones finales deberán ser todo lo   completas que sea posible . Se deberá practicar   una autopsia a todos los animales . Deberá efectuarse   la histopatología en todos los órganos y tejidos   enumerados en el Apéndice de los animales pertenecientes   al grupo de dosis alta y al grupo de control . En los   roedores , el examen de los grupos que hayan recibido   las dosis más débiles podrá limitarse a los   órganos y a los tejidos que presenten alteraciones   patológicas en la autopsia . Para las otras especies ,   cuando se utilicen pocos animales , la histopatología   de los tejidos enumerados deberá ser practicada en   todos los animales de todas las dosis .    Si los órganos no hubieran sido sometidos a un   examen microscópico , deberán prepararse inclusiones   de cera o cortes y conservares durante un período   de cinco años a partir de la fecha de comercialización ,   a efectos de un posible examen . Las particularidades   encontradas en la distribución del medicamento   podrán necesitar estudios histopatológicos   complementarios .    6 . INTERFERENCIA INMUNOLOGICA    El considerable desarrollo de la inmunología y el   reconocimiento de su importancia han obligado a prestar   atención a la interferencia de los medicamentos con   el sistema inmunológico , incluso si dicha interferencia   no depende de su actividad prevista . Tal interferencia   puede ocasionar efectos secundarios indeseables   ( interferencia con infecciones , carcinoma ) .   Por tanto , será particularmente importante , al   término del estudio de toxicidad , someter el bazo ,   el timo y determinados ganglios linfáticos a un   examen macroscópico y microscópico . Dichos   exámenes deberán poner en evidencia todos los efectos   de los medicamentos en el sistema inmunitario e indicar   por tanto si es necesario proceder a pruebas   complementarias .    Habida cuenta de los continuos progresos de los   conocimientos en esta materia , las pruebas realizadas   para verificar los efectos inmunológicos de un   medicamento deberán tener en cuenta el estado de   desarrollo de los conocimientos científicos en el   momento considerado .    7 . CONCLUSIONES    El investigador deberá presentar las oportunas   conclusiones de estos estudios .    Apéndice A    Lista de los tejidos que deberán ser sometidos   a un examen histológico en el marco de un estudio   de toxicidad por administración reiterada     - Lesiones macroscópicas     - Masas de tejidos o tumores ( incluidos los ganglios   regionales linfáticos )     - Frotis sanguíneo ( en caso de anemia , de   hipertrofia del timo , de linfadenopatía )     - Ganglios linfáticos     - Glándulas mamarias     - Glándulas salivares     - Esternón , fémur o vértebras   ( incluida la médula ósea )     - Hipófisis     - Timo     - Tráquea     - Pulmones     - Corazón     - Tiroides     - Esófago     - Estómago     - Intestino delgado ( método « swiss roll » )     - Colon     - Hígado     - Vesícula biliar     - Páncreas     - Bazo     - Riñones     - Suprarrenales     - Vejiga     - Próstata     - Testículos     - Ovarios     - Utero     - Encéfalo ( secciones horizontales a tres niveles )     - Ojos     - Médula espinal    Apéndice B    Realización de las pruebas de toxicidad por inhalación    1 . PREFACIO    Los medicamentos destinados a ser administrados a seres   humanos por inhalación podrán hallarse en aerosoles   que contengan la sustancia activa en   estado líquido o sólido , o bien podrán   ser vapores o gases . Estos últimos productos serán   utilizados en forma de anastésicos por inhalación ,   mientras que los aerosoles en general contendrán un   medicamento en forma de partículas suspendidas   en un gas propulsor que , en principio , deberá ser   biológicamente inactivo .    Las pruebas de toxicidad realizadas por inhalación   serán necesarias cuando :    a ) la farmacocinética de una sustancia administrada   por inhalación pueda diferir cualitativa o   cuantitativamente de aquella correspondiente a otras   vías de administración :    o bien    b ) cuando el medicamento y el gas propulsor puedan   interactuar en el organismo ,    o    c ) cuando el producto inhalado pueda ejercer un   efecto local en las vías respiratorias a corto plazo ,   ( efecto en la función ciliar u otros signos de   irritación local ) , o a largo plazo ( enfisema ,   bronquitis , afección maligna ) .    Los aerosoles se utilizarán para la administración   de medicamentos que tengan por objeto ( i ) conseguir un   efecto local en el sistema respiratorio , ( ii )   conseguir efectos sistemáticos utilizando la mucosa   de las vías respiratorias para la absorción del   compuesto activo , o ( iii ) evitar la alteración   de los medicamentos en el tracto gastro-intestinal .    En determinados casos , los estudios toxicológicos   del medicamento podrán haber sido realizados recurriendo   a otras vías de administración , de manera que   un estudio toxicológico muy completo que interese   a otras vías de administración podrá haber sido   realizado ya en el momento en que se emprendan los   estudios de inhalación . En otros casos , por ejemplo ,   cuando se trate de componentes que ejerzan una   acción local , como los agentes mucolíticos , el   estudio toxicológico que utilice otras vías de   administración podrá no tener objeto o tener una   utilidad muy relativa . Todo programa de estudio   toxicológico por inhalación deberá tener en   cuenta los datos toxicológicos o farmacológicos   ya existentes sobre el producto de que se trate .    2 . PROPIEDADES FISIOQUIMICAS    Los datos sobre las propiedades fisicoquímicas de la   substancia activa deberán proveerse del mismo modo   que para cualquier otro estudio toxicológico .   Otras informaciones que se deberán proporcionar   afectan a las características del aerosol , en particular   a la distribución de la dimensión de las partículas   o de las gotitas de la substancia activa y las   características fisicoquímicas de la substancia o de   las substancias utilizadas como gas propulsor .    El propulsor utilizado en dicho estudios deberá ser   el mismo que el que esté previsto para el producto   final . En caso de utilización de un nuevo propulsor ,   éste deberá estudiarse como si se tratase de una   nueva substancia activa .    3 . PROGRAMA DE ADMINISTRACION    3.1 . Administración    El método de administración dependerá de la   naturaleza de la substancia y de la utilización   prevista en el hombre . En el transcurso de los estudios   de toxicidad aguda , convendrá administrar la   substancia directamente en las vías respiratorias   por medio de un tubo nasotraqueal o por traqueotomía .   Así , la cantidad administrada podrá ser   determinada directamente .    En el caso de estudios con exposición de larga   duración , será necesario , por regla general ,   utilizar cámaras de exposición « sólo cabeza »   o « sólo nariz » , o máscaras de inhalación .   En caso de exposición del cuerpo entero , el depósito   de substancias en la piel , en partes vellosas o en las   vías respiratorias superiores , así como las   cantidades ingurgitadas , deberán ser tomadas en   consideración para fijar la dosis de substancia   que deba administrarse .    Convendrá demostrar que el método de administración   permite a la substancia alcanzar el lugar deseado .    3.2 . Nivel de administración    En los estudios de administración única y   continuada deberán utilizarse normalmente tres   niveles de dosis y uno o varios grupos de control ,   según el caso . Se podrán obtener niveles de   exposición diferentes modificando la concentración   de la substancia inhalada o variando la duración de   la exposición . Para la selección del nivel de dosis ,   deberán aplicarse , en la medida de lo posible , los   mismos principios que los que hayan sido utilizados   para los estudios de toxicidad por otras vías de   administración .    Deberán indicarse las razones que hayan presidido   la elección de los diferentes niveles de dosis .    3.3 . Duración del estudio    Para determinar la duración del estudio deberá   tenerse en cuenta , al menos en cierta medida ,   la exposición a la que deba ser sometido el ser humano .    4 . FARMACOCINETICA Y METABOLISMO    El cuadro metabólico del medicamento administrado   por inhalación podrá diferir del cuadro observado   cuando se hayan escogido otras vías de administración .   El investigador deberá determinar si existen diferencias   farmacocinéticas o metabólicas importantes para   la interpretación de los estudios toxicológicos   realizados por vía de inhalación .    Si se produjera una biotransformación en el   propio pulmón , deberá tomarse en consideración   la posibilidad de una inducción encimática   de este proceso .    5 . ANIMALES    Los animales de experimentación utilizados en   dichos estudios no deberán estar afectados por   infecciones pulmonares y presentar una baja incidencia   de otras enfermedades pulmonares .    El número de animales que deba utilizarse en cada   grupo deberá fijarse teniendo en cuenta las necesidades   del análisis estadístico , la duración del   experimento y el número de observaciones ,   mediciones y sacrificios que deban realizarse durante   los períodos de exposición . Entre las especies   que se utilicen para todos los estudios por administración   reiterada , se escogerá al menos una especie de   roedores y otra de no roedores .    6 . OBSERVACIONES    Los controles intermedios y los estudios finales   deberán realizarse de la manera indicada para los   otros estudios de toxicidad . Convendrá conceder   una especial atención a todos los efectos locales .   Si el medicamento debiera ser administrado de manera   continuada , podrán resultar necesarios estudios   especiales de la función ciliar y de la microflora .    Examen final    Al término del estudio , todos los animales serán   sometidos a una autopsia , y se realizará el examen   de sus tejidos como en los otros estudios toxicológicos .    En los estudios de administración por inhalación   deberán pesarse los pulmones de todos los animales ,   y deberán someterse a examen histopatológico   muestras de tejidos del aparato respiratorio y del   correspondiente tejido linfático , tomadas los   niveles de exposición .    7 . PRESENTACIÓN DE LOS RESULTADOS Y CONCLUSIONES    Los resultados deberán ser presentados de la misma   manera que en los otros estudios de toxicología y el   investigador deberá presentar las oportunas conclusiones   del estudio que haya efectuado .    ANEXO II    ESTUDIOS DE LA FUNCIÓN REPRODUCTORA    Nota explicativa relativa a la aplicación de   las letras C y D del Capítulo I de la Segunda Parte   del Anexo de la Directiva 75/318/CEE , para la concesión   de la autorización de comercialización de un   nuevo medicamento    GENERALIDADES    El estudio de los efectos sobre la función   reproductora se efectuará en todo nuevo medicamento   con objeto de poner de manifiesto posibles efectos sobre   el apareamiento o que pudieran entrañar la pérdida   de feto , anomalías fetales o alteraciones posteriores   de la progenia , como :    i ) modificación de la fertilidad o parto de   crías anormales debidos a alteraciones de los gametos   masculinos y/o femeninos ,    ii ) interferencia en el desarrollo del óvulo   fecundado , en las fases de preimplantación y de   implantación ,    iii ) efectos tóxicos en el embrión ,    iv ) efectos tóxicos en el feto ,    v ) modificaciones de la fisiología materna que   impliquen efectos secundarios en el embrión o el feto ,    vi ) efectos en el crecimiento uterino o placentario ,   o en el desarrollo ,    vii ) interferencia en el parto ,    viii ) efectos en el desarrollo postparto , en la   lactancia de la progenia y en la lactancia materna ,    ix ) efectos tardíos en la progenia .    RECOMENDACIONES ESPECIFICAS    En la interpretación de estas notas explicativas   conviene tener presente que no se trata de criterios   rígidos ni de principios de aplicación universal .   Su interpretación , por tanto , deberá ser flexible   y adaptada a la utilización propuesta del medicamento .   Será necesario justificar la elección de los estudios .    1 . ELECCION DE LAS ESPECIES    Los estudios de embriotoxicidad serán efectuados   normalmente en dos especies de mamíferos , una de   ellas no perteneciente al orden de los roedores .   Los estudios de fertilidad y perinatalidad serán   efectuados al menos en una especie . Si se supiera   que el metabolismo de un medicamento en una especie   determinada se parece a su metabolismo en el hombre ,   será deseable utilizar dicha especie . Será deseable   que una de las especies escogidas sea la misma que   la escogida para los estudios de toxicidad a largo plazo .   Podrán ser útiles estudios en una tercera especie   si los resultados obtenidos en las dos especies inicialmente   escogidas fuesen contradictorios . Convendrá precisar   las especies y las razas utilizadas en dichos estudios .    2 . ADMINISTRACION    El medicamento será administrado normalmente a   tres niveles posológicos . La dosis máxima deberá   permitir habitualmente poner de manifiesto una cierta   toxicidad en la madre , por ejemplo , una disminución   de peso . La dosis mínima deberá ser suficiente   para producir un efecto farmacodinámico parecido   al efecto terapéutico buscado o para asegurar niveles   sanguíneos comparables a los que sean necesarios para   producir el efecto ( esta recomendación no se aplicará   si el efecto farmacodinámico fuese en sí mismo   causa de toxicidad ) . La dosis intermedia será la   media geométrica de las dosis máxima y mínima .    La administración se hará por la vía o vías   previstas para la administración clínica .    Los programas de estudio de los efectos de los   medicamentos en la función reproductora implicarán   en principio :    a ) estudios de embriotoxicidad ; la administración   se hará en dos especies , una de ellas no perteneciente   al orden de los roedores , durante toda la duración   de la embriogénesis ( organogénesis ) ;    b ) un estudio de fertilidad ( al menos en una   especie ) ; se empezará con la administración a   animales machos y hembras con la suficiente antelación   al apareamiento para que todos los efectos del medicamento   en la gametogénesis puedan ser descubiertos . Los   animales tratados podrán ser apareados con parejas   tratadas , pero en caso de resultado positivo en lo que   concierne a un defecto de reproducción , el estudio   deberá comenzarse nuevamente con ayuda de animales   tratados apareados con parejas no tratadas . Tras el   apareamiento , las hembras tratadas continuarán siendo   tratadas durante toda la gestación .    La mitad de las hembras serán sacrificadas durante   la gestación preferentemente unos días antes de la   fecha prevista del parto , y los fetos serán extraídos   por cesárea y examinados . A las hembras restantes   se les dejará parir normalmente y criar a sus crías ;    c ) estudios perinatales , al menos en una especie ;   el tratamiento deberá cubrir todo el período de   gestación que se extiende desde el final de la   organogénesis hasta el parto y el período de lactancia   hasta el destete .    3 . NUMERO DE ANIMALES    Para cada nivel de dosis se utilizará un número   de animales suficiente para permitir una válida   interpretación de los resultados . Salvo para los   primates , los efectivos mínimos propuestos para cada   nivel de dosis serán los siguientes :    a ) estudios de embriotoxicidad : veinte hembras   preñadas para los roedores , doce hembras preñadas   para las otras especies ;    b ) estudios de fertilidad : veinticuatro hembras   y veinticuatro machos ;    c ) estudios perinatales : doce hembras preñadas .    En caso de utilización de una tercera especie ,   se propondrá que el número de animales tratados   y el número de animales testigos sean escogidos de   tal manera que del estudio se pueda sacar una conclusión   perfectamente clara .    4 . ESTABULACION Y REGIMEN ALIMENTICIO    Deberán especificarse todas las condiciones relativas   a la estabulación , enjaulado y régimen alimenticio   ( incluidos los aditivos ) de los animales .    5 . FARMACOCINETICA    En la realización de los estudios de reproducción   convendrá tener en cuenta la farmacocinética del   medicamento en la hembra embarazada . Deberá determinarse   el grado de exposición del feto al medicamento ,   en la medida en que ello sea técnicamente posible .    6 . EVALUACIONES    a ) Los fetos llevados por hembras tratadas durante   la embriogénesis serán examinadas tras el sacrificio   de las madres y la extracción de los fetos por   cesárea . Se tomará nota del número de cuerpos   amarillos , de puntos de implantación ( puntos de   implantación visibles y puntos de implantación   determinados por método específico , como por ejemplo ,   el método de Salewsky ) , de resorciones , así   como el peso y el sexo de cada feto . Se examinará   cada feto desde el punto de vista de las anomalías   externas y se efectuará asimismo un adecuado examen   del esqueleto y/o de las vísceras en todos los fetos .   Cada vez que se observen anomalías evidentes se   procederá a efectuar exámenes complementarios   apropiados . Los niveles de resorción anormalmente   elevados merecerán una particular atención , pues   podrían indicar la necesidad de estudios complementarios   en busca de efectos teratógenos en las fases precoces   de la gestación .    b ) En el estudio de fertilidad , los fetos de las   hembras sacrificadas durante la gestación , serán   extraídos por cesárea y se tomará nota del número   de cuerpos amarillos , de lugares de implantación , de   resorción , así como el peso y el sexo de cada   feto . En cada uno de los fetos se buscarán anomalías   del esqueleto y/o de las vísceras .    En las hembras tratadas durante el estudio de fertilidad   a las que se haya dejado parir y criar su camada hasta   el destete , se guardará un número suficiente de   crías con vistas a que puedan alcanzar la madurez ,   de manera que se pueda proceder a exámenes ulteriores .   Se evaluarán los efectos tardíos del medicamento   en la progenie en términos de anomalías de audición ,   de visión y de comportamiento . Se determinará la   capacidad de reproducción de la progenie permitiendo   al menos que un macho y una hembra de cada camada   de los animales tratados se reproduzcan y den origen   a una camada ( no está previsto el apareamiento entre   hermano y hermana ) .    c ) Las hembras tratadas durante los períodos   anterior y posterior al parto deberán parir   espontáneamente . La progenie será examinada en   el momento del destete .    Todos los animales sacrificados al final de la lactancia   serán sometidos a una autopsia completa . En   determinados casos , se mantendrá con vida a una   parte de la progenie hasta la madurez a fin de evaluar   su capacidad de reproducción y de determinar los   efectos tardíos del medicamento en términos de   anomalías del comportamiento , de la audición y   de la visión .    7 . CONCLUSIONES    El investigador deberá sacar conclusiones generales   del resultado de estos estudios indicando :    a ) que no hay evidencia de que el medicamento tenga   efectos nocivos en la función reproductora ,    o    b ) que hay evidencia de que el medicamento tiene   efectos nocivos en la función reproductora que deberán   ser especificados ,    o    c ) que los datos no permiten sacar conclusiones .    Si se hubieran omitido determinados estudios , el   investigador deberá justificar dicha omisión .    Apéndice    Duración de la gametogénesis    En los estudios sobre los roedores , el tratamiento   del macho deberá durar al menos sesenta días y el   de la hembra al menos catorce días , antes del   apareamiento . Al principio del tratamiento , los animales   deberán tener unos catorce días de edad . En el   estado actual de los conocimientos científicos , dichas   cifras son consideradas aceptables .    ANEXO III    PODER CANCERIGENO    Nota explicativa relativa a la aplicación de   la letra E de la Segunda Parte del Capítulo I del   Anexo de la Directiva 75/318/CEE , para la concesión   de la autorización de comercialización de un nuevo   medicamento    La prueba más evidente de que un compuesto químico   presenta un riesgo carcinógeno para el hombre es de   orden epidemiológico , aunque la mayor parte de los   productos reconocidos como carcinógenos en el hombre   lo sean también para los animales de laboratorio .   No está demostrado que todas las substancias carcinógenas   para el animal lo sean también para el hombre , pero   es difícil afirmar que un compuesto no es carcinógeno   para el hombre cuando su carcinogenidad haya sido   demostrada en pruebas con animales .    La extrapolación al hombre es un proceso difícil ,   a veces arbitrario ; lo ideal sería analizar los   mecanismos implicados en el aumento de la frecuencia   de los tumores experimentales y determinar si tales   mecanismos , implicando vías bioquímicas específicas   y conduciendo a la formación del verdadero carcinógeno ,   pudieran ser aplicados al hombre . Los criterios en los   que se basa la extrapolación pueden variar según el   agente considerado , el uso que se proyecte hacer de   él , la dosis y el modo de administración , por   una parte , y las especies , las localizaciones ,   la frecuencia de los tumores y la dosis experimental   requiera , por otra .    La probabilidad de un riesgo carcinógeno en el hombre   aumenta cuando hay una fuerte producción de tumores   malignos en un tejido determinado en el momento en que   se administra al animal de laboratorio la substancia   de que se trata por la vía que será utilizada en   el hombre y en una dosis igual o más débil que la   que determina la toxicidad mínima . Sin embargo ,   como no hay prueba convincente de la existencia de un   umbral , el aumento del número de tumores benignos o de   tumores malignos como consecuencia de dosis más fuertes o   la reducción del período de latencia , deberá   interpretarse como elementos de un posible riesgo para   el hombre . En tales circunstancias , el agente   carcinógeno será considerado generalmente menos   activo y el riesgo podrá ser más fácilmente   cotejado con las ventajas asociadas al empleo terapéutico   de dicho compuesto .    1 . NECESIDAD DE ESTUDIOS DE CARCINOGENICIDAD    Los estudios de carcinogenicidad serán necesarios   generalmente en los casos siguientes :    a ) cuando el medicamento sea susceptible de ser   administrado regularmente al paciente durante un   período substancial de su vida ( de forma continua   durante un mínimo de seis meses , o de modo frecuente   y discontinuo , de manera que la exposición total   sea la misma )    o    b ) cuando la estructura química de la substancia   haga sospechar un efecto carcinógeno potencial    o   c )cuando una substancia pueda provocar dudas en razón :    i ) de determinados aspectos particulares de su   actividad biológica ( por ejemplo , pertenencia a   una clase terapéutica de la que varios miembros hayan   producido resultados carcinógenos positivos ) ,    ii ) de las modalidades de su toxicidad o de su   acumulación a largo plazo ( del medicamento o de los   metabolítos ) puestas de manifiesto en estudios   anteriores ,    iii ) de los resultados de las pruebas de mutagenicidad   y/o de carcinogenicidad a corto plazo .    Las pruebas de carcinogenicidad no se considerarán   necesarias cuando la substancia de que se trate sea   utilizada sólo en enfermos cuya esperanza   de vida sea más breve que el tiempo necesario para que   la sustancia manifieste su carcinogenicidad en el hombre .   Si las circunstancias cambiaran y un medicamento de   esta última categoría fuese utilizado para tratar   afecciones menos graves , las pruebas de carcinogenicidad   resultarán necesarias . Las substancias insolubles   que no sean absorbidas podrán no necesitar estudios   formales de carcinogenicidad .    2 . ELECCION DE LAS ESPECIES Y DE LAS RAZAS    Los estudios de carcinogénesis , cuando   sean necesarios , deberán ser realizados   normalmente en dos especies . El comportamiento   metabólico del medicamente deberá ser conocido en las   especies utilizadas y , preferentemente , deberá   presentar parecidos con su metabolismo en el   hombre . Se tendrán en cuenta las reacciones   conocidas de las especies y de las razas a productos   químicos similares . Se evitará utilizar especies   y razas que presenten normalmente una alta   frecuencia de aparición de tumores espontáneos .   Los investigadores escogerán especies y razas   sensibles a uno o varios carcinógenos . No será   necesario efectuar sistemáticamente   controles positivos , pero se anotará la   frecuencia de tumores espontáneos de las   razas utilizadas .    3 . TRATAMIENTO    a ) Vía y frecuencia de administración    En la medida de lo posible , la administración   deberá hacerse por la vía prevista en   terapéutica humana . En caso de necesidad se   proporcionará la prueba de absorción del   producto . Normalmente , la frecuencia de administración   será diaria .    b ) Niveles de dosis    Normalmente , las pruebas de carcinogenicidad   deberán efectuarse a tres niveles posológicos .   La dosis máxima deberá provocar un efecto   tóxico mínimo , por ejemplo una pérdida   de peso del 10 % , o un defecto de crecimiento , o   un efecto tóxico mínimo en el órgano-objetivo .   El efecto tóxico en un órgano-objetivo será   demostrado por una perturbación de las funciones   psicológicas normales y finalmente por   alteraciones patológicas . La dosis mínima   deberá ser del orden de dos a tres veces   la dosis terapéutica humana máxima o la dosis   que produzca un efecto farmacológico en los   animales . La dosis intermedia será la media   geométrica entre la dosis máxima y la dosis   mínima .    Podrán darse excepciones a estos principios ,   por ejemplo , cuando la dosis tóxica del producto   sea muy superior a la dosis terapéutica ;   en dichos casos , y en la medida en que esto sea   técnicamente realizable , la dosis máxima   podrá fijarse en cien veces la dosis terapéutica   humana .    4 . ASPECTOS PRACTICOS    Los animales deberán gozar inicialmente   de buena salud y conservarse en dicho estado   a lo largo de todo el estudio . Será indispensable   para ello óptimos niveles de estabulación .   Se tomarán precauciones especiales cuando se   prueben carcinógenos inhalables o volátiles .    La calidad farmacéutica del lote o lotes   utilizados deberá ser claramente especificada .    a ) Edad de los animales al comienzo del estudio    Los estudios de carcinogenicidad deberán   empezar en cuanto sea posible tras el destete ,   es decir , en cuanto los animales estén   habituados a un régimen alimenticio y a su entorno .    b ) Duración de los estudios    Actualmente , se recomienda hacer estudios   durante veinticuatro meses en la rata y   dieciocho meses en el ratón y el hámster .   Cuando la tasa de supervivencia sea elevada   se estará en condiciones de prolongar   los estudios a treinta meses en la rata y a   veinticuatro meses en el ratón , e incluso   durante toda la vida de los animales , es decir ,   hasta una tasa de supervivencia del 20 % de los   animales testigos .    c ) Número de animales por grupo    Para las pruebas de rutina con el ratón , la rata   y el hámster se aconseja utilizar cincuenta   animales de cada sexo por grupo tratado , y dos   grupos de control de cincuenta animales de cada   sexo , a los que se administrará el excipiente   sólo por la misma vía ( en la mayor parte   de los casos , el medicamento se mezclará con   la comida ) .    d ) Régimen alimenticio    Los alimentos para animales que se encuentran   en el comercio son variables ; deberán tomarse   medidas para conseguir un régimen tan   uniforme como sea posible durante toda la   duración del estudio de carcinogenicidad .   Deberá facilitarse la composición   completa del régimen .    5 . CONTROLES COMPLEMENTARIOS    Los estudios de carcinogenicidad deberán   programarse con objeto de obtener un máximo   de informaciones de los animales de experimentación ,   sin que ninguna investigación efectuada con el   fin de recoger informaciones toxicológicas   suplementarias deba comprometer el objetivo   principal , que consiste en la evaluación   del potencial carcinógeno del medicamento .   Los datos sobre la absorción , la distribución y   el metabolismo del producto , así como la   cuestión de su posible acumulación o de su   efecto inductor encimático deberán obtenerse   en otros estudios de toxicidad .    6 . ESQUEMA ESTADISTICO DEL ESTUDIO    Será necesario escoger un plan experimental   apropiado y en particular :    i ) las jaulas que contengan a los animales   en tratamiento y a los de control deberán   ser repartidas en el animalario de tal forma   que se eviten alteraciones de los resultados   imputables a factores ambientales ;    ii ) los animales serán repartidos al azar   en las unidades experimentales ( por ejemplo ,   las jaulas ) y deberá describirse claramente   el método utilizado para efectuar dicha   distribución al azar ;    iii ) si por razones prácticas imputables a la   utilización de un número elevado de animales   se decidiera escalonar el comienzo del estudio ,   será deseable que todos los grupos estén   representados en cada comienzo de estudio por   igual número de animales ; cuando esto ocurra ,   deberá mencionarse el momento en que comience   el estudio de los diferentes grupos de animales .    7 . EXAMENES QUE DEBERAN PRACTICARSE AL TERMINO   DE LA PRUEBA    7.1 . Autopsia    Se deberá proceder a la autopsia completa de todos los   animales muertos en el curso del experimento o   sacrificados en razón de un mal estado general .    Al final de la prueba , todos los animales   supervivientes deberán ser sacrificados , y cada uno de   ellos deberá ser sometido a una autopsia completa .   Los efectos tóxicos comprobados en el curso   de pruebas anteriores podrán indicar aquellos   puntos que deberán ser objeto de investigaciones   particulares . Análisis hematológicos   y bioquímicos podrán facilitar la interpretación   de las lesiones observadas .    7.2 . Histopatología    7.2.1 . Detección de la carcinogenicidad    i ) Se procederá a efectuar un examen   microscópico de todos los tejidos y órganos   enumerados en la lista y tomados de todos   los animales tratados con dosis fuerte y de todos   los animales de control , así como    ii ) de los tejidos de cualquier animal ,   de cualquier grupo , en el que se hayan   descubierto en la autopsia lesiones macroscópicas ,   cualesquiera que éstas sean .    Si los resultados obtenidos en la letra i )   indicaran que se hubieran formado tumores en uno   o varios órganos o tejidos , convendrá   examinar ,    iii ) los tejidos y órganos tratados   con dosis media o débil , incluso si resultaran   normales desde el punto de vista macroscópico .    Todos los tejidos enumerados de todos los animales   muertos o sacrificados en el curso del estudio   deberán ser sometidos a un examen macroscópico .    7.2.2 . Detección de la toxicidad    Los efectos tóxicos descubiertos en el curso   de pruebas anteriores podrán revelar aspectos   particulares que deban estudiarse .    Para la interpretación de todas las lesiones   observadas podrán ser útiles análisis   hematológicos y bioquímicos . Se deberá   conceder una particular atención al lugar de   administración del medicamento , si fuera   administrado por una vía que no sea la oral .    8 . PRINCIPIOS QUE REGIRAN LA EXPOSICION DE LOS   RESULTADOS DE LOS ESTUDIOS DE CARCINOGENICIDAD    8.1 . Definiciones    Un neoplasma maligno es un neoplasma constituido   por una población de células anormales que invade   los tejidos cercanos , caracterizada por una   multiplicación anárquica y generalmente muy   rápida , así como por otros caracteres   morfológicos y funcionales peor definidos .    Un neoplasma maligno es un neoplasma que invade   los tejidos cercanos y desarrolla metástasis . De una   manera general , se considera que un tumor es benigno   o maligno sobre la base de sus características   histopatológicas y en la correlación establecida   por el pataólogo entre tales características   y el comportamiento biológico observado en   experiencias anteriores en tumores que   presentaban características comparables .    Para describir los tumores , se utilizará la   terminología histopatológica convencional   anteniéndose a clasificaciones bien definidas   ( Organización Mundial de la Salud , por ejemplo ) .    8.2 . Presentación de los resultados    Convendrá en primer lugar resumir por separado   los resultados obtenidos en cada uno de los grupos de   tratamiento y de los grupos testigo , distinguiendo   los sexos e indicando :    1 ) el número de animales examinados , así   como los resultados de los exámenes individuales   macro y microscópicos ;    2 ) el número ( y el porcentaje ) de animales   que presentan tumores precisando en cada caso el   tipo y el tejido atacado y , en la medida de lo   posible , distinguiendo entre tumores benignos y   tumores malignos ;    3 ) en el caso de animales que presenten uno o   varios tumores del mismo tipo , la frecuencia de   distribución del número total de tumores   descubiertos en el animal y del número total   de tumores malignos en el animal ; si los   tumores no pudieran ser contados , se utilizará   un método de evaluación de la multiplicidad   de los tumores ;    4 ) la fecha de la muerte de cada uno de los   animales ;    5 ) la fecha de formación de toda masa de   tejidos ( descubierta por palpación ) , su   desarrollo y , en su caso , su histopatología .    9 . ANALISIS DE LOS DATOS    El método de análisis y las pruebas de   importancias estadística utilizadas deberán   ser las apropiadas para el tipo de datos y para   el esquema experimental de base . Los métodos   estadísticos utilizados serán expuestos claramente .    Los resultados se expresarán de la siguiente   forma :    i ) número total de animales atacados por tumores ,    ii ) número total de tumores ,    iii ) número total de tumores que afecten   a un tejido determinado ,    iv ) número total de tumores considerados malignos ,    v ) período de latencia antes de la   aparición de tumores ( se utilizarán métodos   actuariales ) .    El análisis versará sobre :    a ) la evaluación de la existencia de un   efecto cualquiera de la substancia   estudiada , tal como resulte de la comparación   entre la respuesta de los tres grupos de tratamiento ,   considerados como un conjunto , y la de los grupos   de control , considerados igualmente en su conjunto ;    b ) la evaluación para cada efecto comprobado   de la existencia de una relación efecto-dosis   tal como pudiera aparecer en la comparación   de las respuestas de los grupos tratados con   dosis débil , media y fuerte .    Será aconsejable consultar a un especialista   en estadística para evaluar la influencia de otros   factores , tales como la muerte de los animales de   resultas de otras afecciones y el sacrificio   prematuro de los animales por la detección   clínica de tumores . Las pruebas especiales   de significación estadística que haya que   utilizar para establecer la prueba de un efecto   o la existencia de una relación efecto-dosis se   omiten intencionadamente . Los datos experimentales   podrán requerir un método de análisis   diferente de una experiencia a otra .    Se considerará que la substancia estudiada   puede aumentar el riesgo de transformación   neoplástica si una de las respuestas anteriores   fuera aumentada materialmente ( o si el tiempo de latencia   fuera substancialmente disminuido ) . Se   considerará que el compuesto actúa con mayor   eficacia en los animales si varias de las   respuestas citadas fueran modificadas y si hubiera   una prueba tanto de la presencia del efecto como   de una respuesta efecto-dosis . Un aumento de la   frecuencia de aparición de tumores en los   animales tratados en comparación con los   animales de control deberá ser tomado en   consideración cualquiera que fuera el mecanismo   supuesto o demostrado para el desarrollo de dichos   tumores , pero cualquier circunstancia particular   deberá ser identificada y anotada . Podrá   tratarse , por ejemplo , de mecanismos   característicos de una especie ( griseofulvina y   metabolismo de las profirinas en los ratones ) ,   de una fuerte estimulación de las glándulas   endocrinas ( particularmente en el perro ) o bien   incluso del desarrollo de caracteres particulares   en las especies objeto de las pruebas ( cálculos   vesicales en la rata ) .    Diferentes circunstancias pueden llevar a :    i ) un aumento de la frecuencia o una   reducción del plazo de aparición de los   tumores malignos ,    ii ) un aumento de la frecuencia de los tumores   benignos ,    iii ) la inducción de tumores localizada en el   lugar de inyección .    10 . UTILIZACIÓN DE LAS PRUEBAS DE CARCINOGENESIS   A CORTO PLAZO    Convendrá someter los nuevos productos a   pruebas de mutagenicidad . Sin embargo , las   técnicas disponibles para determinar el poder   mutágeno o cancerígeno de las substancias   químicas mediante pruebas a corto plazo no pueden   substituir a las pruebas clásicas de carcinogénesis   en animales para determinar el potencial carcinógeno   de un medicamento . Incluso la obtención de   resultados positivos en pruebas a corto plazo implicará   siempre la necesidad de efectuar estudios   convencionales de carcinogénesis si el desarrollo   del medicamento tuviera que ser proseguido .   Los estudios que den resultados negativos no   dispensarán de realizar los estudios clásicos cuando   estos últimos estén indicados por las razones   expuestas en el apartado 1 anterior .    11 . CONCLUSIONES    Corresponderá al experimentador el sacar   las conclusiones de dichos estudios .    Apéndice    Lista de los tejidos que deberán ser sometidos a examen   histológico en las pruebas de carcinogenicidad     - Lesiones macroscópicas     - Masas de tejidos o tumores ( incluidos los ganglios   regionales linfáticos )     - Frotis sanguíneo ( en caso de anemia , de   hipertrofia del timo , de linfadenopatía )     - Ganglios linfáticos     - Glándulas mamarias     - Glándulas salivares     - Esternón , fémur o vértebras ( incluida la   médula ósea )     - Hipófisis     - Timo     - Tráquea     - Pulmones     - Corazón     - Tiroides     - Esófago     - Estómago     - Intestino delgado ( método « swiss roll » )     - Colon     - Hígado     - Vesícula biliar     - Páncreas     - Bazo     - Riñones     - Suprarrenales     - Vejiga     - Próstata     - Testículos     - Ovarios     - Utero     - Encéfalo ( secciones horizontales a tres niveles )     - Ojos   - Médula espinal    ANEXO IV    ESTUDIO DE LA FARMACOCINETICA Y DEL METABOLISMO EN LOS   ANIMALES DESDE EL PUNTO DE VISTA DE LA SEGURIDAD    Nota explicativa relativa a la aplicación de las letras   F y G del Capítulo I de la Segunda Parte del Anexo de la   Directiva 75/318/CEE , para la concesión de la   autorización de comercialización de un nuevo   medicamento    1 . INTRODUCCION    La presente nota concierne a la evolución en el tiempo   de la absorción , de la distribución , de la   excreción y del metabolismo de nuevos medicamentos desde   el punto de vista de su seguridad . Dichos datos son   esenciales en numerosas fases de evaluación de un   medicamento , por ejemplo para :    a ) determinar los niveles del medicamento y de sus   metabolitos , así como su cinética en la sangre , en   los líquidos biológicos y en los órganos ;    b ) obtener informaciones sobre la relación entre la   toxicidad en el órgano-objetivo y la concentración   del medicamento en la sangre , en los líquidos   orgánicos y en los órganos ;    c ) evaluar la posibilidad de inducción encimática   y de acumulación del medicamento en caso de   administración repetida ;    d ) seleccionar , en la medida de lo posible , las   especies animales que deban utilizarse en el marco de los   estudios toxicológicos sobre la base de la semejanza   de su farmacocinética con la del hombre , y determinar   la aplicabilidad de los resultados de dichos estudios   toxicológicos al hombre .    2 . CARACTERISTICAS DEL MEDICAMENTO    Deberá proporcionarse información detallada sobre las   propiedades físicas y químicas del medicamento , así   como sobre la estabilidad del preparado .    En caso de utilización de un medicamento marcado ,   deberán indicarse la posición del marcaje en la   molécula y la actividad específica de la substancia .   Convendrá tener en cuenta , en la elección de la   posición del marcaje , su metabolismo probable .    3 . METODOS    Los datos referentes a los niveles del medicamento y de   sus metabolitos en la sangre , en los líquidos   biológicos , en los órganos y en las excreciones   podrán obtenerse por métodos físicos , químicos o   biológicos . El investigador deberá justificar   detalladamente los métodos empleados , su validez y su   reproductibilidad , incluida su especifidad , su   precisión y su exactitud ( el estudio de la evolución   en el tiempo de los efectos farmacodinámicos podrá   proporcionar útiles informaciones suplementarias ) .    En caso de utilización de medicamentos marcados ,   deberá tenerse presente que el trazador medido en los   líquidos biológicos puede no corresponder al del   medicamento no modificado , y que puede incluir metabolitos   o derivados de conjugación marcados . No deberá   ignorarse la posibilidad de un intercambio isotópico   con los compuestos endógenos .    4 . ESPECIES    Por regla general , las especies animales utilizadas en   dichos estudios serán las que se empleen corrientemente   en el laboratorio para los estudios farmacológicos y   toxicológicos . Si fueran seleccionadas otras especies ,   convendrá indicar la razón de dicha selección .    Un estudio preliminar de la cinética y del metabolismo   del medicamento en un pequeño número de pacientes   humanos podrá proporcionar información útil para   la elección de la especie animal que deba utilizarse   para los estudios de toxicidad por administración   continuada .    5 . ADMINISTRACION DEL MEDICAMENTO    En la medida de lo posible , las dosis y las vías de   administración deberán tener en cuenta el uso   clínico previsto para el medicamento . Una de las vías   de administración seleccionadas deberá garantizar la   absorción del medicamento , si ello correspondiera al   uso que se espera hacer de él en el hombre .    6 . PRESENTACION DE LOS RESULTADOS    Deberán proporcionarse informaciones sobre los puntos   siguientes :    i ) absorción ( fracción absorbida y velocidad ) ,    ii ) distribución en los principales órganos y   tejidos y evolución en el tiempo en los líquidos   biológicos ,    iii ) período de actividad en la sangre , en el plasma   y en el suero ,    iv ) fijación protéica en el plasma ,    v ) caracterización del perfil metabólico en los   excreta y , si ello fuera realizable , identificación   de los principales metabolitos ,    vi ) vía y evolución en el tiempo de la eliminación   del medicamento y de sus metabolitos ,    vii ) si la excreción biliar fuera la vía de   eliminación más importante , deberá investigarse la   posibilidad de un ciclo enterohepático ,    viii ) deberá intentarse un balance cualitativo de la   dosis administrada ,    ix ) deberá investigarse la posibilidad de una   inducción encimática . Si se descubriera que tal   inducción se produce , se examinará su importancia en   función de la utilización prevista del medicamento .    7 . CONCLUSIONES    De estas pruebas se sacarán las conclusiones   apropiadas , teniendo en cuenta los objetivos indicados   en el número 1 .    ANEXO V    ASOCIACIONES FIJAS DE MEDICAMENTOS    Nota explicativa relativa a la aplicación del   número 2 de la letra C de la Tercera Parte del   Capítulo II del Anexo de la Directiva 75/318/CEE , para   la concesión de la autorización de comercialización   de un nuevo medicamento    1 . JUSTIFICACION    Los solicitantes estarán obligados a justificar la   asociación particular de principios activos que sea   propuesta . Tales medicamentos sólo serán aceptados   si la asociación propuesta se funda en principios   terapéuticos válidos .    Convendrá evaluar las ventajas potenciales de cualquier   asociación fija en relación a sus inconvenientes en   el plano clínico , para determinar si cumple las   exigencias de las normas y protocolos en materia de   eficacia y seguridad .    Las ventajas potenciales de las asociaciones fijas   incluyen :    1 ) la mejora de la relación efectos   terapéuticos/tóxicos , por ejemplo , como consecuencia   del reforzamiento del efecto terapéutico ;    2 ) la simplificación de la terapia , que conduce a   una mejor aceptación por parte del paciente .    Los inconvenientes de las asociaciones medicamentosas   específicas incluyen :    1 ) el hecho de que , aún respondiendo a las   necesidades del paciente medio , la asociación es pocas   veces formulada de la manera que mejor corresponde a las   necesidades individuales ;    2 ) la acumulación de reacciones adversas .    En principio , las asociaciones podrán no ser   consideradas racionales si el período de actividad   biológica y/o la duración de su acción difieran de   forma significativa . Sin embargo , este principio no se   aplicará necesariamente cuando se pruebe que la   asociación es clínicamente válida a pesar de las   diferencias existentes en dicho ámbito ( por ejemplo ,   si un componente estuviera destinado a facilitar la   absorción del otro o si los distintos componentes   estuvieran destinados a producir sus efectos   sucesivamente ) .    La inclusión de una substancia para contrarrestar   el efecto adverso de uno de los otros componentes podrá   ser considerada justificada , a condición de que la   reacción adversa aparezca comúnmente .    La inclusión de un componente destinado a provocar   efectos secundarios desagradables , como medio de prevenir   los abusos , no es deseable .    Las substancias que tengan una gama posológica   crítica o un índice terapéutico débil no aptas   generalmente para su inclusión en asociaciones fijas   de medicamentos .    2 . INDICACIONES    Las indicaciones pretendidas para la asociación de   medicamentos deberán ser tales que la presencia de   cada componente esté justificada para cada una de las   indicaciones . La preparación deberá estar formulada   de forma que la cantidad y la proporción de cada uno   de sus componentes sean apropiadas a todos los usos   recomendados .    Es evidente que , una « indicación » deberá   corresponder a un estado patológico , a trastornos   funcionales , a un síndrome o a una entidad patológica   muy claros . Los diferentes componentes de una   asociación podrán tener por objeto la atenuación   simultánea de los diferentes síntomas del estado de   que se trate , pero cada síntoma individual no deberá   ser considerado una indicación en lo que concierne a la   asociación fija , dado que también pudiera estar   presente en el caso de otras afecciones y que para el   tratamiento de este único síntoma los otros   componentes pueden no tener utilidad alguna .    3 . SEGURIDAD Y EFICACIA    Es posible distinguir entre la extensión de los   estudios exigidos para las asociaciones específicas que   sean muy parecidas a asociaciones ya utilizadas   corrientemente , a condición de que estén sostenidas   por una documentación completa y fiable , y la aquellos   estudios exigidos para las asociaciones que sean   esencialmente nuevas ( porque los medicamentos de que se   trate no sean asociados habitualmente , porque la   composición cuantitativa sea inhabitual o porque uno   de los componentes sea enteramente nuevo ) .    Por regla general , los estudios de seguridad de las   asociaciones de medicamentos deberán hacerse en animales   ( con las mismas proporciones de principios activos que   en las asociaciones de que se trata ) . Dichos estudios no   serán exigidos cuando todos los componentes hayan sido   utilizados frecuentemente y de manera segura en el hombre ,   durante un período prolongado , en asociaciones   idénticas o muy similares , y cuando exista sobre estas   últimas una documentación válida .    La eficacia y la seguridad de una asociación   fija de medicamentos , deberán haber sido   estudiadas en el hombre . En los casos de asociaciones   conocidas , podrán aceptarse datos bibliográficos muy   fundados . Toda nueva asociación deberá ser sometida   a pruebas clínicas para definir el papel desempeñado   por cada uno de sus componentes en el conjunto .    4 . INTERACCIONES    La posibilidad de interacción entre los componentes   deberá ser prevista siempre . Cuando una interacción   farmacéutica , farmacocinética o farmacodinámica   parezca posible , el solicitante deberá proporcionar   datos que prueben que dicha interacción no se produce ,   o que está bien definida y es conocida .    5 . EFECTOS NEGATIVOS    Cuando haya motivos para creer que una asociación fija   de medicamentos pueda ser más nociva que útil o que   pueda producir efectos negativos más frecuentes que si   cada uno de sus componentes fuese administrado   individualmente , el solicitante deberá proporcionar   la prueba de que ello no ocurre en el uso terapéutico o   que las ventajas de la asociación ( por ejemplo , una   eficacia acrecentada ) , prevalecen sobre los   inconvenientes citados .    6 . POSOLOGIA    La asociación de medicamentos deberá ser segura y   eficaz en toda la gama de las dosis recomendadas .    7 . PREPARADOS FARMACEUTICOS PRESENTADOS CONJUNTAMENTE   EN UN MISMO ENVASE    Los principios aplicables a las asociaciones de   medicamentos lo son también a la evaluación de los   preparados que contengan diferentes productos medicinales   presentados conjuntamente en un mismo envase y destinados   a una administración simultánea o sucesiva .    8 . COMBINACIONES Y COMPLEJOS QUIMICOS    A los efectos de las presentes disposiciones las   substancias de este tipo que se disocien antes de la   absorción en dos o varios componentes activos , podrán   ser consideradas como asociaciones fijas de dichas   substancias más que como entidades químicas .