CELEX: 32007R0702
Language: mt
Date: 2007-06-21 00:00:00
Title: Regolament tal-Kummissjoni (KE) Nru 702/2007 tal- 21 ta’ Ġunju 2007 li jemenda r-Regolament (KEE) Nru 2568/91 dwar il-karatteristiċi taż-żejt taż-żebbuġa u ż-żejt tal-fdal taż-żebbuġa u dwar il-metodi ta’ analiżi rilevanti

22.6.2007   
               
               
                  MT
               
               
                  Il-Ġurnal Uffiċjali ta’ l-Unjoni Ewropea
               
               
                  L 161/11
               
            REGOLAMENT TAL-KUMMISSJONI (KE) Nru 702/2007
      tal-21 ta’ Ġunju 2007
      li jemenda r-Regolament (KEE) Nru 2568/91 dwar il-karatteristiċi taż-żejt taż-żebbuġa u ż-żejt tal-fdal taż-żebbuġa u dwar il-metodi ta’ analiżi rilevanti
      IL-KUMMISSJONI TAL-KOMUNITAJIET EWROPEJ,
      Wara li kkunsidrat it-Trattat li jistabbilixxi l-Komunità Ewropea,
      Wara li kkunsidrat ir-Regolament tal-Kunsill (KE) Nru 865/2004 tad-29 ta’ April 2004 dwar l-organizzazzjoni komuni tas-suq taż-żejt taż-żebbuġa u żebbuġ tal-mejda u li jemenda r-Regolament (KEE) Nru 827/68 (1), u b’mod partikulari l-Artikolu 5(3) tiegħu,
      Billi:
      
                  (1)
               
               
                  Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KEE) Nru 2568/91 (2) jiddefinixxi l-karatteristiċi fiżiċi u kimiċi taż-żejt taż-żebbuġa u taż-żejt tal-fdal taż-żebbuġa, u l-metodi ta’ evalwazzjoni ta’ dawn il-karatteristiċi. Dawn il-metodi, kif ukoll il-limiti tal-valuri relattivi għall-karatteristiċi taż-żejt, għandhom ikunu aġġornati b’qies għall-fehma ta’ l-esperti tal-kimika, u b’mod konsistenti mal-ħidmiet li saru fil-qafas tal-Kunsill Internazzjonali taż-Żejt taż-Żebbuġa.
               
            
                  (2)
               
               
                  L-esperti tal-kimika qalu partikularment li, għad-detezzjoni taż-żjut esterifikati, il-kwantifikazzjoni tal-perċentwal ta’ 2-glyceryl monopalmitate hija aktar preċiża. It-tnaqqis fil-limitu tal-valur għas-stigmastadeina fiż-żjut taż-żebbuġa verġni jippermetti wkoll tifrid aħjar taż-żjut taż-żebbuġa verġni u raffinati.
               
            
                  (3)
               
               
                  Sabiex ikun hemm perjodu ta’ żmien għall-aġġustament għall-istandards il-ġodda u għall-implimentazzjoni tal-mezzi meħtieġa biex ikunu jistgħu jiġu applikati, u sabiex ma jkunx hemm tfixkil għat-tranżazzjonijiet kummerċjali, jaqbel li sa l-1 ta’ Jannar 2008 dan ir-Regolament ma japplikax. Għall-istess raġunijiet, jeħtieġ li jkun żgurat li ż-żjut taż-żebbuġa u mir-residwi taż-żebbuġ, prodotti u ttikkettati legalment fil-Komunità jew importati legalment fil-Komunità, u li jkunu ġew irrilaxxati għaċ-ċirkolazzjoni ħielsa qabel id-data msemmija, jistgħu jitqiegħdu għall-bejgħ sakemm il-ħażniet kollha jkunu spiċċaw.
               
            
                  (4)
               
               
                  Il-miżuri provvduti f’dan ir-Regolament huma bi qbil ma’ l-opinjoni tal-Kumitat għall-Ġestjoni taż-Żejt taż-Żebbuġa u taż-Żebbuġ ta’ l-Ikel,
               
            ADOTTAT DAN IR-REGOLAMENT:
      Artikolu 1
      Ir-Regolament (KEE) Nru 2568/91 huwa emendat kif ġej:
      
                  (1)
               
               
                  Is-sitt inċiż ta’ l-Artikolu 2(1) huwa mibdul b’li ġej:
                  
                              “—
                           
                           
                              għad-determinazzjoni tal-perċentwal ta’ 2-glyceril monopalmitate, il-metodu msemmi fl-Anness VII”
                           
                        
            
                  (2)
               
               
                  L-Annessi huma emendati skond l-Anness ta’ dan ir-Regolament.
               
            Artikolu 2
      Dan ir-Regolament jidħol fis-seħħ fit-tielet jum wara dak tal-pubblikazzjoni tiegħu fil-Ġurnal Uffiċjali ta’ l-Unjoni Ewropea.
      Dan ir-Regolament għandu japplika mill-1 ta’ Jannar 2008.
      Madankollu, il-prodotti li jkunu ġew prodotti u ttikkettati legalment fil-Komunità, jew li jkunu ġew importati legalment fil-Komunità, u li jkunu ġew irrilaxxati għaċ-ċirkolazzjoni ħielsa qabel l-1 ta’ Jannar 2008, jistgħu jitqiegħdu għall-bejgħ sakemm il-ħażniet kollha jkunu spiċċaw.
      
         Dan ir-Regolament għandu jorbot fl-intier tiegħu u japplika direttament fl-Istati Membri kollha.
         Magħmul fi Brussell, 21 ta’ Ġunju 2007.
         
            
               Għall-Kummissjoni
            
            Mariann FISCHER BOEL
            
               Membru tal-Kummissjoni
            
         
      
      
         (1)  ĠU L 161, 30.4.2004, p. 97.
      
         (2)  ĠU L 248, 5.9.1991, p. 1. Ir-Regolament kif emendat l-aħħar bir-Regolament (KE) Nru 1989/2003 (ĠU L 295, 13.11.2003, p. 57).
      
         ANNESS
         L-Annessi tar-Regolament (KEE) Nru 2568/91 huma emendati kif ġej:
         
                     1.
                  
                  
                     Is-sommarju huwa emendat kif ġej:
                     
                                 (a)
                              
                              
                                 It-titlu ta’ l-Anness II jiġi mibdul b’li ġej:
                                 “Determinazzjoni ta’ l-aċidi grassi liberi, metodu fil-kiesaħ”
                              
                           
                                 (b)
                              
                              
                                 It-titlu ta’ l-Anness VII jiġi mibdul b’li ġej:
                                 “Determinazzjoni tal-perċentwal ta’ 2-glyceryl monopalmitate”;
                              
                           
               
                     2.
                  
                  
                     L-Anness I huwa mibdul b’li ġej:
                     
                        “L-ANNESS I
                        KARATTERISTIĊI TAŻ-ŻEJT TAŻ-ŻEBBUĠA
                        Noti:
                        
                                    a)
                                 
                                 
                                    Ir-riżultati ta' l-analiżi għandhom ikunu espressi bl-istess għadd ta' deċimali bħal dawk previsti għal kull karatteristika.
                                    L-aħħar ċifra għandha tiżdied b'unità jekk iċ-ċifra ta' wara hija akbar minn 4.
                                 
                              
                                    b)
                                 
                                 
                                    Karatteristika waħda biss mhix konformi mal-valuri indikati hija biżżejjed biex iż-żejt jibdel minn tip għal ieħor jew jiġi ddikjarat mhux konformi mal-purità.
                                 
                              
                                    c)
                                 
                                 
                                    Il-karatteristiċi indikati bi stilla (*), b'referenza għall-kwalità taż-żejt, jimplikaw li:
                                    
                                                —
                                             
                                             
                                                għaż-żejt taż-żebbuġa lampanti, il-limiti relattivi jistgħu ma jikkonkorrux;
                                             
                                          
                                                —
                                             
                                             
                                                għaż-żejt taż-żebbuġa verġni, in-nuqqas ta' osservanza ta' talanqas wieħed minn dawn il-limiti jwassal għal bidla fit-tip, iżda dejjem jibqa' kklassifikat f'wieħed mit-tipi
                                             
                                          
                              
                                    d)
                                 
                                 
                                    Il-karatteristiċi indikati b'żewġ stilel (**), b'referenza għall-kwalità taż-żejt, jimplikaw li għaż-żjut kollha tal-fdal taż-żebbuġa, il-limiti relattivi jistgħu ma jikkonkorrux.”
                                 
                              
                                    TIp
                                 
                                 
                                    Aċidità
                                    (%) (*)
                                 
                                 
                                    Valur ta' perossidu
                                    mEq O2/kg (*)
                                 
                                 
                                    Xama'
                                    mg/kg (**)
                                 
                                 
                                    2 glyceryl monopalmitate
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Stigmastadeina
                                    mg/kg (1)
                                    
                                 
                                 
                                    Differenza ECN42 HPLC - et ECN42
                                    Kalkolu teoretiku
                                 
                                 
                                    K232 (*)
                                 
                                 
                                    K270 (*)
                                 
                                 
                                    Delta-K (*)
                                 
                                 
                                    Evalwazzjoni organoleptika -
                                    Medjan tad-difett (*)
                                 
                                 
                                    Evalwzzjoni organoleptika -
                                    Medjan tat-togħma tal-frott (Mf) (*)
                                 
                              
                                    
                                                1.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa extra verġni
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,8
                                 
                                 
                                    ≤ 20
                                 
                                 
                                    ≤ 250
                                 
                                 
                                    ≤ 0,9 jekk % Aċidu palmitiku totali ≤ 14 %
                                    ≤ 1,0 jekk % Aċidu palmitiku totali > 14 %
                                 
                                 
                                    ≤ 0,10
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 2,50
                                 
                                 
                                    ≤ 0,22
                                 
                                 
                                    ≤ 0,01
                                 
                                 
                                    Md = 0
                                 
                                 
                                    Mf > 0
                                 
                              
                                    
                                                2.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa verġni
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 2,0
                                 
                                 
                                    ≤ 20
                                 
                                 
                                    ≤ 250
                                 
                                 
                                    ≤ 0,9 jekk % Aċidu palmitiku totali ≤ 14 %
                                    ≤ 1,0 jekk % Aċidu palmitiku totali > 14 %
                                 
                                 
                                    ≤ 0,10
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 2,60
                                 
                                 
                                    ≤ 0,25
                                 
                                 
                                    ≤ 0,01
                                 
                                 
                                    Md ≤ 2,5
                                 
                                 
                                    Mf > 0
                                 
                              
                                    
                                                3.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa lampanti
                                             
                                          
                                 
                                    > 2,0
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 300 (3)
                                    
                                 
                                 
                                    ≤ 0,9 jekk % Aċidu palmitiku totali ≤ 14 %
                                    ≤ 1,1 jekk % Aċidu palmitiku totali > 14 %
                                 
                                 
                                    ≤ 0,50
                                 
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    Md > 2,5 (2)
                                    
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    
                                                4.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa raffinat
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    ≤ 5
                                 
                                 
                                    ≤ 350
                                 
                                 
                                    ≤ 0,9 jekk % Aċidu palmitiku totali ≤ 14 %
                                    ≤ 1,1 jekk % Aċidu palmitiku totali > 14 %
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 1,10
                                 
                                 
                                    ≤ 0,16
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    
                                                5.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa magħmul minn żjut taż-żebbuġa raffinati u verġni
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 15
                                 
                                 
                                    ≤ 350
                                 
                                 
                                    ≤ 0,9 jekk % Aċidu palmitiku totali ≤ 14 %
                                    ≤ 1,0 jekk % Aċidu palmitiku totali > 14 %
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 0,90
                                 
                                 
                                    ≤ 0,15
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    
                                                6.
                                             
                                             
                                                Żejt tal-fdal taż-żebbuġa mhux raffinat
                                             
                                          
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    > 350 (4)
                                    
                                 
                                 
                                    ≤ 1,4
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    
                                                7.
                                             
                                             
                                                Żejt tal-fdal taż-żebbuġa raffinat
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    ≤ 5
                                 
                                 
                                    > 350
                                 
                                 
                                    ≤ 1,4
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 2,00
                                 
                                 
                                    ≤ 0,20
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    
                                                8.
                                             
                                             
                                                Żejt tal-fdal taż-żebbuġa
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 15
                                 
                                 
                                    > 350
                                 
                                 
                                    ≤ 1,2
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≤ 1,70
                                 
                                 
                                    ≤ 0,18
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                           
                        
                                    TIp
                                 
                                 
                                    Kontenut ta' aċidu (5)
                                    
                                 
                                 
                                    Total ta' l-iżomeri tranżoleiċi
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Total ta' l-iżomeri tranżlinoleiċi + tranżlinoleniċi
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Il-komposizzjoni ta' l-Isteroli
                                 
                                 
                                    Steroli totali
                                    (mg/kg)
                                 
                                 
                                    Erythrodiol u uvaol
                                    (%) (**)
                                 
                              
                                    Miristiku
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Linoleniku
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Arakidiku
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Ejkosenojku
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Beheniku
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Linjoċeriku
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Kolesterol
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Brassikasterol
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Kampesterol
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Stigmasterol
                                    (%)
                                 
                                 
                                    Betasitosterol
                                    (%) (6)
                                    
                                 
                                 
                                    Delta-7-Stigmastenol
                                    (%)
                                 
                              
                                    
                                                1.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa extra verġni
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,1
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    < Camp.
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 1 000 
                                 
                                 
                                    ≤ 4,5
                                 
                              
                                    
                                                2.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa verġni
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,1
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    < Camp.
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 1 000 
                                 
                                 
                                    ≤ 4,5
                                 
                              
                                    
                                                3.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa lampanti
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,10
                                 
                                 
                                    ≤ 0,10
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,1
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 1 000 
                                 
                                 
                                    ≤ 4,5 (7)
                                    
                                 
                              
                                    
                                                4.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa raffinata
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,20
                                 
                                 
                                    ≤ 0,30
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,1
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    < Camp.
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 1 000 
                                 
                                 
                                    ≤ 4,5
                                 
                              
                                    
                                                5.
                                             
                                             
                                                Żejt taż-żebbuġa magħmul minn żjut taż-żebbuġa raffinati u verġni
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,20
                                 
                                 
                                    ≤ 0,30
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,1
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    < Camp.
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 1 000 
                                 
                                 
                                    ≤ 4,5
                                 
                              
                                    
                                                6.
                                             
                                             
                                                Żejt tal-fdal taż-żebbuġa mhux raffinat
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,20
                                 
                                 
                                    ≤ 0,10
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    —
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 2 500 
                                 
                                 
                                    > 4,5 (8)
                                    
                                 
                              
                                    
                                                7.
                                             
                                             
                                                Żejt tal-fdal taż-żebbuġa raffinat
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,40
                                 
                                 
                                    ≤ 0,35
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    < Camp.
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 1 800 
                                 
                                 
                                    > 4,5
                                 
                              
                                    
                                                8.
                                             
                                             
                                                Żejt tal-fdal taż-żebbuġa
                                             
                                          
                                 
                                    ≤ 0,05
                                 
                                 
                                    ≤ 1,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,6
                                 
                                 
                                    ≤ 0,4
                                 
                                 
                                    ≤ 0,3
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 0,40
                                 
                                 
                                    ≤ 0,35
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≤ 0,2
                                 
                                 
                                    ≤ 4,0
                                 
                                 
                                    < Camp.
                                 
                                 
                                    ≥ 93,0
                                 
                                 
                                    ≤ 0,5
                                 
                                 
                                    ≥ 1 600 
                                 
                                 
                                    > 4,5
                                 
                              
                  
               
                     3.
                  
                  
                     L-Appendiċi 1 hija emendata kif ġej:
                     
                                 (a)
                              
                              
                                 l-ewwel inċiż jinbidel b’li ġej:
                                 
                                             
                                                         “—
                                                      
                                                      
                                                         Aċidità
                                                      
                                                   
                                          
                                             Anness II
                                          
                                          
                                             Determinazzjoni ta’ l-aċidi grassi liberi, metodu fil-kiesaħ”
                                          
                                       
                           
                                 (b)
                              
                              
                                 it-13-il inċiż jinbidel b’li ġej:
                                 
                                             
                                                         “—
                                                      
                                                      
                                                         Aċidi grassi ssaturati fil-pożizzjoni 2
                                                      
                                                   
                                          
                                             Anness VII
                                          
                                          
                                             Determinazzjoni tal-perċentwal ta’ 2-glyceryl monopalmitate”;
                                          
                                       
                           
               
                     4.
                  
                  
                     Fl-Anness II, it-titlu jiġi mibdul b’li ġej:
                      
                     “DETERMINAZZJONI TA’ L-AĊIDI GRASSI LIBERI, METODU FIL-KIESAĦ”;
                  
               
                     5.
                  
                  
                     L-Anness IV jinbidel b’li ġej:“
                        ANNESS IV
                        DETERMINAZZJONI TAL-KONTENUT TAX-XAMA’ PERMEZZ TAL-KROMATOGRAFIJA TAL-GASS B’KOLLONA KAPILLARI
                        1.   SKOP
                        Dan il-metodu jiddeskrivi proċedura għad-determinazzjoni tal-kontenut ta’ xama’ fiż-żjut taż-żebbuġa. Ix-xama’ jinfired skond l-għadd ta’ atomi tal-karbonju. Dan il-metodu jista’ jintuża partikularment biex issir distinzjoni bejn iż-żejt taż-żebbuġ miksub permezz tat-tagħsir u bejn dak miksub permezz ta’ l-estrazzjoni (żejt tal-fdal).
                        2.   PRINĊIPJU
                        Il-materja grassa, miżjuda b’livell standard intern xieraq, tiġi frazzjonata bil-kromatografija fuq kolonna ta’ ġell idratat tas-silika; l-ewwel frazzjoni miksuba fil-kondizzjonijiet ta’ prova (bil-polarità tiegħu tkun inqas minn dik tat-triglycerides) jiġi rkuprat, imbagħad jiġi analizzat direttament bil-kromatografija tal-gass fuq kolonna kapillari.
                        3.   APPARAT
                        3.1.   Flask Erlenmeyer ta’ 25 ml.
                        3.2.   Kolonna tal-ħġieġ għall-kromatografija tal-gass, ta’ diametru intern ta’ 15,0 mm, twila bejn 30 u 40 cm, u mgħammra b’vit.
                        3.3.   Apparat ta’ kromatografija tal-gass addattat għall-funzjonament bil-kolonna kapillari, mgħammar b’sistema għall-intoduzzjoni diretta fil-kolonna, u magħmul minn:
                        3.3.1.   Kompartiment termostatiku għall-kolonni, mgħammar bi programmatur tat-temperatura.
                        3.3.2.   Injettur kiesaħ għall-introduzzjoni diretta fil-kolonna.
                        3.3.3.   Indikatur tal-jonizzazzjoni tal-fjamma u konvertitur-amplifikatur.
                        3.3.4.   Reġistratur-integratur adattat għall-konvertitur-amplifikatur (3.3.3.), b’rata ta’ rispons ta’ mhux aktar minn sekonda, u b’velocità tal-karta varjabbli. (Wieħed jista’ juża wkoll sistemi informatiċi li jippermettu l-ġbir tad-dejta tal-kromatografija bil-gass permezz ta’ kompjuter.)
                        3.3.5.   Kolonna kapillari tal-ħġieġ jew tas-silika mdewba, twila bejn 8 u 12 m, ta’ diametru intern ta’ bejn 0,25 u 0,32 mm, miksija minn ġewwa b’likwidu, u bi ħxuna uniformi ta’ bejn 0,10 u 0,30 μm. (Likwidi għat-tifrix adattati għall-użu, tat-tipi SE52 jew SE54 fis-suq.)
                        3.4.   Mikrosiringa għall-introduzzjoni diretta fil-kolonna ta’ 10 μl, mgħammra b’labra iebsa.
                        3.5.   Vibratur ta’ l-elettriku.
                        3.6.   Evaporatur ċirkolari.
                        3.7.   Muffle furnace.
                        3.8.   Miżien analitiku li jiggarantixxi preċiżjoni ta’ + 0,1 mg.
                        3.9.   L-apparat tal-ħġieġ normali tal-laboratorju.
                        4.   REAĠENTI
                        4.1.   Ġell tas-silika tad-daqs ta’ fraka ta’ bejn 60 u 200 μm.
                        Poġġi l-ġell fil-forn f’temperatura ta’ 500 °C għal talanqas erba’ sigħat. Kessħu mill-ġdid, imbagħad żidlu l-ilma fi kwantità ta’ 2 % tal-ġell tas-silika mtella’. Ħawwad sew it-taħlita omoġenizzata. Ħalli fid-dlam għal talanqas 12-il siegħa qabel l-użu.
                        4.2.   n-hexane, għall-kromatografija.
                        4.3.   Eter etiliku, għall-kromatografija
                        4.4.   n-Heptane, għall-kromatografija.
                        4.5.   Soluzzjoni standard ta’ lauryl arachidate, f’0,1 % (m/V) fil-hexane (skond il-livell standard intern). (Wieħed jista’ juża wkoll palmitate tal-palmitil jew inkella methyl stearate)
                        4.5.1.   Soudan 1 (1-phenyl-azo-2-naphthol)
                        
                        4.6.   Gass portatur: idroġenu jew elju pur għall-kromatografija tal-gass.
                        4.7.   Gassijiet awżiljari:
                        
                                    —
                                 
                                 
                                    idroġenu pur għall-kromatografija tal-gass;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    arja safja, għall-kromatografija tal-gass.
                                 
                              5.   PROĊEDURA
                        5.1.   Tħejjija tal-kolonna kromatografika
                        Dendel 15 g ta’ ġell tas-silika (4.1) fl-n-hexane (4.2) u daħħlu fil-kolonna (3.2). Ħallih joqgħod spontanjament, u kompli t-tqegħid bl-għajnuna ta’ shaker elettroniku (3.5) biex is-saff kromatografiku jsir aktar omoġenju. Saffi 30 ml ta’ n-hexane biex tneħħi l-impuritajiet li jista’ jkun hemm. Iżen eżatt 500 mg mill-kampjun bl-għajnuna tal-miżien (3.8.) fl-Erlenmeyer ta’ 25 ml (3.1.), u żid il-kwantità meħtieġa ta’ standard intern (4.5.) skond il-kontenut previst ta’ xama’. Per eżempju, żid 0,1 mg ta’ lauryl arachidat fil-każ taż-żejt taż-żebbuġa, u minn 0,25 sa 0,5 mg fil-każ taż-żejt tal-fdal taż-żebbuġa. Ittrasferixxi l-kampjun hekk ippreparat għall-kolonna kromatografika bl-għajnuna ta’ żewġ porzjonijiet ta’ 2 ml ta’ n-hexane (4.2.).
                        Ħalli s-solvent inixxi sa 1 mm ’il fuq mill-ogħla livell ta’ l-assorbent, imbagħad saffi 70 ml addizzjonali ta’ n-hexane sabiex tneħħi l-n-alcanes li jkunu preżenti naturalment. Imbagħad ibda l-eluzzjoni kromatografika billi tiġbor 180 ml tat-taħlita n-hexane/eter etiliku, b’proporzjon 99:1, filwaqt li tinżamm rata ta’ madwar 15-il taqtira kull 10 sekondi. L-eluzzjoni tal-kampjun għandha ssir f’temperatura ta’ l-ambjent ta’ 22 °C + 4.
                        Noti:
                        
                                    —
                                 
                                 
                                    It-taħlita n-hexane/eter etiliku (99:1) għandha titħejja kuljum.
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    Biex tikkontrolla viżwalment l-eluzzjoni korretta tax-xama’, tista’ żżid mal-kampjun fis-soluzzjoni 100 μl ta’ 1 % Sudan fit-taħlita ta’ l-eluzzjoni. Peress li l-kolorant għandu retenzjoni intermedjarja bejn ix-xama’ u t-triglycerides, malli l-kulur jilħaq il-fond tal-kolonna kromatografika, jeħtieġ li l-eluzzjoni tkun sospiża għax ix-xama’ kollu jkunu ġew eluti.
                                 
                              Nixxef il-frazzjoni hekk miksuba fl-evaporatur ċirkolari (3.6.) sakemm is-solvent prattikament ikun tneħħa għalkollox. Neħħi l-aħħar 2 ml tas-solvent bl-għajnuna ta’ kurrent dgħajjef ta’ nitroġenu; imbagħad żid 2-4 ml ta’ n-heptane.
                        5.2.   Analiżi bil-kromatografija tal-gass
                        5.2.1.   Proċeduri preliminari
                        Waħħal il-kolonna mal-kromatografu tal-gass (3.3.) billi tqabbad it-terminal ta’ dħul fis-sistema on-column u t-terminal ta’ ħruġ ma’ l-indikatur. Agħmel verifika ġenerali ta’ l-apparat ta’ kromatografija bil-gass (l-operazzjoni taċ-ċirkwiti tal-gass, l-effiċjenza ta’ l-indikatur u tas-sistema ta’ reġistrazzjoni, eċċ.).
                        Jekk il-kolonna tkun qiegħda tintuża għall-ewwel darba, l-ewwel għandu jsir il-kondizzjonament tagħha. Għaddi nixxija rqiqa ta’ gass fil-kolonna, imbagħad ixgħel l-apparat tal-kromatografija tal-gass. Saħħanha bil-mod sakemm wara xi 4 sigħat tilħaq temperatura ta’ 350 °C. Żomm din it-temperatura għal talanqas sagħtejn, imbagħad għaddi għall-aġġustament ta’ l-apparat biex ikun jista’ jitħaddem (l-aġġustar tar-rata ta’ ċirkolazzjoni tal-gassijiet, it-tqabbid tal-fjamma, it-tqabbid mar-reġistratur elettroniku (3.3.4.), l-aġġustar tat-temperatura ta’ l-ambjent għall-kolonna, għall-indikatur, eċċ.) u rreġistra s-sinjal għal sensibbiltà talanqas darbtejn ikbar minn dik prevista għat-twettiq ta’ l-analiżi. Il-linja bażilari għandha tkun lineari, mingħajr l-ebda tip ta’ quċċata, u ma jista’ jkollha l-ebda sinjal ta’ devjazzjoni.
                        Devjazzjoni rettilineari negattiva tindika li l-konnessjonijiet tal-kolonna mhumiex sew; devjazzjoni pożittiva tindika li l-kolonna ma ġietx ikkondizzjonata kif suppost.
                        5.2.2.   Għażla tal-kondizzjonijiet tat-tħaddim
                        B’mod ġenerali, il-kundizzjonijiet tat-tħaddim li għandhom ikunu osservati huma dawn li ġejjin:
                        
                                    —
                                 
                                 
                                    it-temperatura tal-kolonna:
                                    
                                                 
                                             
                                             
                                                20 °C/minuta
                                             
                                             
                                                 
                                             
                                             
                                                5 °C/minuta
                                             
                                             
                                                 
                                             
                                             
                                                20 °C/minuta
                                             
                                             
                                                 
                                             
                                          
                                                fil-bidu 80 °C
                                                (1′)
                                             
                                             
                                                →
                                             
                                             
                                                240  °C
                                             
                                             
                                                →
                                             
                                             
                                                325  °C
                                                (6′)
                                             
                                             
                                                →
                                             
                                             
                                                340  °C
                                                (10′)
                                             
                                          
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    it-temperatura ta’ l-indikatur: 350 °C;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    il-kwantità tal-materjal injettat: 1 μl tas-soluzzjoni (2-4 ml) ta’ n-heptane;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    gass portatur: elju jew idroġenu bil-veloċità lineari l-aktar xierqa għall-gass magħżul (ara l-Appendiċi);
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    sensittività ta’ l-istrument: livell xieraq skond il-kundizzjonijiet ta’ hawn isfel:
                                 
                              Dawn il-kundizzjonijiet jistgħu jkunu mmodifikati skond il-karatteristiċi tal-kolonna u ta’ l-apparat ta’ kromatografija tal-gass, bil-għan li jinfired ix-xama’ kollu u li jkun hemm riżoluzzjoni sodisfaċenti tal-qċaċet (ara l-figura); il-periodu ta’ retenzjoni ta’ l-standard intern C32 għandu jkun ta’ 18-il minuta + 3. L-aktar quċċata tax-xama’ rappreżentattiva għandha tidher f’talanqas 60 % ta’ l-iskala.
                        Il-parametri ta’ l-integrazzjoni tal-qċaċet għandhom jiġu ddeterminati b’tali mod li tinkiseb evalwazzjoni korretta tas-superfiċji tal-qċaċet ikkunsidrati.
                        
                           Nota: Minħabba t-temperatura finali għolja, hija permessa devjazzjoni pożittiva ta’ mhux aktar minn 10 % ta’ l-iskala sħiħa.
                        5.3.   Eżekuzzjoni ta’ l-analiżi
                        Tella’ 1 μl mis-soluzzjoni bl-għajnuna tal-mikrosiringa ta’ 10 μl; neħħi l-plunger tas-siringa sabiex il-labra tibqa’ vojta. Daħħal il-labra fl-injettur, u wara sekonda jew tnejn, injetta malajr; wara madwar 5 sekondi, oħroġ il-labra bil-mod.
                        Agħmel ir-reġistrazzjoni sa l-eluzzjoni totali tax-xama’.
                        Il-linja bażilari għandha dejjem tissodisfa l-kundizzjonijiet stipulati.
                        5.4.   Identifikazzjoni tal-qċaċet
                        L-identifikazzjoni tal-qċaċet differenti għandha ssir abbażi tal-ħin ta’ retenzjoni, skond tqabbil ma’ taħlitiet ta’ xama’ b’ħinijiet ta’ retenzjoni magħrufin, analizzati fl-istess kundizzjonijiet.
                        Il-Figura turi kromatogramma tax-xama’ ta’ żejt taż-żebbuġa verġni.
                        5.5.   Evalwazzjoni kwantitattiva
                        Ikkalkola s-superfiċji tal-qċaċet ta’ l-istandard intern, kif ukoll ta’ l-esters alifatiċi minn C40 sa C46, bl-għajnuna ta’ l-integratur.
                        Ikkalkola l-kontenut tax-xama’ ta’ kull wieħed mill-esters, f’mg/kg ta’ xaħam, skond il-formula:
                        
                           
                        Fejn:
                        
                                    Ax
                                    
                                 
                                 
                                    =
                                 
                                 
                                    is-superfiċje tal-quċċata ta’ kull ester, f’millimetri kwadri;
                                 
                              
                                    As
                                    
                                 
                                 
                                    =
                                 
                                 
                                    is-superfiċje tal-quċċata ta’ l-istandard intern, f’millimetri kwadri;
                                 
                              
                                    ms
                                    
                                 
                                 
                                    =
                                 
                                 
                                    il-massa ta’ l-istandard intern miżjud, f’milligrammi;
                                 
                              
                                    m
                                 
                                 
                                    =
                                 
                                 
                                    il-massa tal-kampjun meħud għall-analiżi, fi grammi.
                                 
                              6.   ESPRESSJONI TAR-RIŻULTATI
                        Indika t-total tal-kontenut tat-tipi differenti ta’ xama’ minn C40 sa C46, fi mg/kg ta’ materja grassa (ppm).
                        
                           Nota: Il-komponenti li għandhom jiġu kkwantifikati jirreferu għall-qċaċet b’numru biż-żewġ tal-karbonju, bejn l-estri C40 u C46, skond l-eżempju tal-kromatogramma tax-xama’ taż-żejt taż-żebbuġa indikat fil-figura li ġejja. Jekk l-ester C46 jidher darbtejn, biex jiġi identifikat, jaqbel li ssir analiżi tal-frazzjoni tax-xama’ f’żejt tal-fdal taż-żebbuġa fejn il-quċċata C46 huwa faċilment identifikabbli għax għandha maġġoranza ċara.
                        Ir-riżultati għandhom ikunu espressi sa punt deċimali wieħed.
                        
                           FIGURA
                        
                        Kromatogramma tax-xama’ f’żejt taż-żebbuġa (*)
                        
                        
                     
                        Appendiċi
                        Determinazzjoni tal-veloċità lineari tal-gass
                        Injetta minn 1 sa 3 μl metanu (jew propan) fl-apparat kromatografiku tal-gass, wara l-aġġustament tiegħu għall-kundizzjonijiet normali ta’ l-operazzjoni. Żomm kont tal-ħin li l-gass jieħu biex jgħaddi mill-kolonna, mill-mument li jiġi injettat sakemm tintlaħaq il-quċċata (tM).
                        Il-veloċità lineari f’ċm/sek. hija mogħtija bil-formula L/tM, fejn L huwa t-tul tal-kolonna f’ċm, u tM huwa l-ħin imkejjel f’sekondi.
                     ”;
               
                     (6)
                  
                  
                     L-Anness VII jinbidel b’li ġej:
                     
                        “ANNESS VII
                        DETERMINAZZJONI TAL-PERĊENTWAL TA’ 2-GLYCERYL MONOPALMITATE
                        1.   SKOP U QASAM TA’ APPLIKAZZJONI
                        Dan il-metodu jiddeskrivi l-proċedura analitika biex jiġi ddeterminat il-perċentwal ta’ l-aċidu palmitiku fit-2 pożizzjoni tat-triglycerides permezz ta’ l-evalwazzjoni tat-2-glyceryl monopalmitate.
                        Dan il-metodu huwa applikabbli għaż-żjut veġetali likwidi fit-temperatura ta’ l-ambjent (20 °C).
                        2.   PRINĊIPJU
                        Wara t-tħejjija, il-kampjun ta’ żejt huwa sottomess għall-azzjoni tal-lipażi pankreatiku: idroliżi parzjali u speċifiku fil-pożizzjonijiet 1 u 3 tal-molekula ta’ triglyceride ġġib magħha id-dehra tal-monoglycerides fil-pożizzjoni 2. Il-preċentwal ta’ 2-glyceril monopalmitate fil-frazzjoni ta’ monoglyceride jiġi ddeterminat, wara silylation, permezz ta’ kromatografija tal-gass fuq kolonna kapillari.
                        3.   APPARAT U TAGĦMIR
                        3.1.   Flask Erlenmeyer ta’ 25 ml.
                        3.2.   Bikers ta’ 100, 250 u 300 ml.
                        3.3.   Kolonna tal-ħġieġ għall-kromatografija, b’dijametru intern ta’ 21-23 mm, twila 400 mm, mgħammra bi pjanċa tal-ħġieġ sinterizzat u vit.
                        3.4.   Provetti ta’ 10, 50, 100 u 200 ml.
                        3.5.   Flaskijiet ta’ 100 u 250 ml.
                        3.6.   Evaporatur ċirkolari.
                        3.7.   Tubi għaċ-ċentrifuga bil-qiegħ koniku ta’ 10 ml, b’tapp immolat.
                        3.8.   Ċentrifuga għat-tubi ta’ 10 u 100 ml.
                        3.9.   Termostat biex it-temperatura tinżamm f’ 40 ± 0,5 °C
                        3.10.   Pipetti ggradwati ta’ 1 u 2 ml.
                        3.11.   Siringa ipodermika ta’ 1 ml.
                        3.12.   Mikrosiringa ta’ 100 μl.
                        3.13.   Lenbut ta’ 1 000 ml
                        3.14.   Kromatografu tal-gass għal kolonni kapillari, mgħammar b’injettur on column fil-kiesaħ għall-introduzzjoni diretta tal-kampjun fil-kolonna, u b’forn biex tinżamm temperatura ta’ madwar 1 °C.
                        3.15.   Injettur on column fil-kiesaħ għall-introduzzjoni diretta tal-kampjun fil-kolonna.
                        3.16.   Rilevatur tal-jonizzazzjoni tal-fjamma u elettrometru.
                        3.17.   Reġistratur-integratur adattat għall-elettrometru b’veloċità ta’ risposta ta’ mhux aktar minn sekonda, u b’veloċità tal-karta varjabbli.
                        3.18.   Kolonna kapillari tal-ħġieġ jew tas-silika mdewba ta’ bejn 8 u 12-il metru, b’dijametru intern ta’ bejn 0,25 u 0,32 mm, miksija b’methylpolysiloxane jew b’phenyl methylpolysiloxane 5 %, bi ħxuna ta’ bejn 0,10 u 0,30 μm, li tista’ tintuża f’temperatura ta’ 370 °C.
                        3.19.   Mikrosiringa ta’ 10 μl mgħammra b’labra iebsa, twila talanqas 7.5 cm, għall-injezzjoni diretta fuq il-kolonna.
                        4.   REAĠENTI
                        4.1.   Ġell tas-silika tad-daqs ta’ fraka ta’ bejn 0 063 u 0 200 mm (70/280 mesh), imħejji kif ġej: qiegħed il-ġell tas-silika ġewwa kapsula tal-porċellana, nixxef fil-forn f’temperatura ta’ 160 °C għal 4 sigħat, imbagħad kessaħ f’temperatura ta’ l-ambjent f’dessikatur. Żid volum ta’ ilma ewkivalent għal 5 % tal-piż tal-ġell tas-silika, kif ġej: ġewwa flask Erlenmeyer ta’ 500 ml, iżen 152 g ġell tas-silika u żidlu 8 g ta’ ilma distillat, sodd it-tubu u ħawwad bil-mod sabiex l-ilma jinfirex b’mod uniformi. Ħalli joqgħod għal talanqas 12-il siegħa qabel l-użu.
                        4.2.   n-hexane (għall-kromatografija).
                        4.3.   Isopropanol.
                        4.4.   Isopropanol, soluzzjoni milwiema 1/1 (V/V).
                        4.5.   Lipażi pankreatika. Il-lipażi li tintuża għandu jkollha attività ta’ bejn 2 u 10 unitajiet ta’ lipażi għal kull mg (fis-suq jeżistu lipażi pankreatiċi b’attività ta’ bejn 2 u 10 unitajiet għal kull mg ta’ enżima).
                        4.6.   Soluzzjoni stabbilizzanti ta’ trishydroxymethylaminomethane: soluzzjoni milwiema 1 M miġjuba sa pH 8 (kontroll potenzjometriku) permezz ta’ HCI kkonċentrat (1/1 V/V).
                        4.7.   Sodju kolat, ta’ kwalità enżimatika, soluzzjoni milwiema 0,1 % (din is-soluzzjoni għandha tintuża sa 15-il jum wara l-preparazzjoni tagħha).
                        4.8.   Klorur tal-kalċju, soluzzjoni milwiema 22 %.
                        4.9.   Eter djetiliku għall-kromatografija.
                        4.10.   Solvent ta l-iżvilupp: taħlita n-hexane/eter djetiliku (87/13) (V/V).
                        4.11.   Idrossidu tas-sodju, soluzzjoni ta’ 12 % fil-piż.
                        4.12.   Phenolphthalein, soluzzjoni ta’ 1 % fl-etanol.
                        4.13.   Gass portatur: idroġenu jew elju, għall-kromatorgrafija tal-gass.
                        4.14.   Gassijiet awżiljari: – idroġenu, b’purità minima ta’ 99 %, mingħajr umidità jew sustanzi organiċi – u arja, għall-kromatografija tal-gass, bl-istess livell ta’ purità.
                        4.15.   Reaġent ta’ silanizzazzjoni: taħlita pyridine/hexamethyldisilazane, trimethylchlorosilane 9/3/1 (V/V/V) (Fis-suq jeżistu soluzzjonijiet lesti għall-użu). Jistgħu jintużaw reaġenti oħrajn ta’ silylation, partikolarment bit-trimethylsilyl trifluoracetamide + 1 % trimethylchlorosilane, dilwiti ma’ l-istess volum ta’ anhydrous pyridine).
                        4.16.   Kampjuni ta’ referenza: monoglycerides puri jew taħlitiet ta’ monoglycerides b’kompożizzjoni magħrufa tal-perċentwal, simili għal dik tal-kampjun.
                        5.   PROĊEDURA
                        5.1.   Tħejjija tal-kampjun
                        5.1.1.   Iż-żjut b’aċidità ħielsa ta’ inqas minn 3 % ma jeħtiġux jiġu newtralizzati qabel il-kromatografija tal-kolonna bil-ġell tas-silika. Iż-żjut b’aċidità ħielsa ta’ aktar minn 3 % għandhom ikunu sottomessi għan-newtralizzazzjoni skond il-punt 5.1.1.1.
                        5.1.1.1.   Ferra’ 50 g żejt u 200 ml n-hexane fil-lenbut ta’ 1 000 ml (3.13). Żid 100 ml isopropanol u kwantità tas-soluzzjoni ta’ idrossidu tas-sodju 12 % (4.11) ekwivalenti għall-aċidità ħielsa taż-żejt, miżjuda b’5 %. Ħawwad sewwa għal minuta. Żid 100 ml ilma distillat, erġa’ ħawwad u ħalli joqgħod.
                        Ferra’, imbagħad neħħi l-aħħar saff li fih is-sapun. Neħħi s-safef intermedji li jista’ jkun hemm (muċilaġni u sustanzi li ma jdubux). Aħsel is-soluzzjoni hexane taż-żejt newtralizzat b’porzjonijiet suċċessivi ta’ bejn 50 u 60 ml tas-soluzzjoni isopropanol/ilma 1/1 (V/V) (4.4) sakemm ma jibqax jidher il-kulur roża tal-phenolphthalein.
                        Neħħi l-biċċa l-kbira mill-hexane permezz tad-distillazzjoni fil-vakwu (per eżempju, jista’ jintuża evaporatur ċirkolari) uttrasferixxi ż-żejt għal ġo flask ta’ 100 ml (3.5). Nixxef iż-żejt fil-vakwu sakemm is-solvent ikun tneħħa għal kollox.
                        Fi tmiem din il-proċedura, l-aċidità taż-żejt għandha tkun inqas minn 0,5 %.
                        5.1.2.   Ferra’ 1 g ta’ żejt ippreparat kif deskritt hawn fuq, ġewwa flask Erlenmeyer ta’ 25 ml (3.1) u dewweb f’10 ml mit-taħlita ta’ l-iżvilupp (4.10). Ħalli s-soluzzjoni toqgħod għal talanqas kwarta qabel ma ssir il-kromatrografija fuq kolonna bil-ġell tas-silika.
                        Jekk is-soluzzjoni tkun imċajpra, għaddiha miċ-ċentrifuga biex tiżgura l-aqwa kundizzjonijiet għall-kromatografija. (Jistgħu jintużaw skrataċ ta’ ġell tas-silika SPE ta’ 500 mg lesti għall-użu).
                        5.1.3.   Tħejjija tal-kolonna kromatografika
                        Ferra’ fil-kolonna (3.3) madwar 30 ml mis-solvent ta’ l-iżvilupp (4.10), daħħal biċċa qoton fil-parti ta’ isfel tal-kolonna bl-għajnuna ta’ virga tal-ħġieġ; agħfas biex tneħħi l-arja.
                        Ġo biker, ipprepara suspensjoni ta’ 25 g ġell tas-silika (4.1) f’madwar 80 ml mis-solvent ta’ l-iżvilupp, u ferragħ fil-kolonna bl-għajnuna ta’ lenbut.
                        Iċċekkja li l-ġell kollu tas-silika jkun daħal fil-kolonna; aħsel bis-solvent ta’ l-iżvilupp (4.10), iftaħ il-vit u ħalli l-livell tal-likwidu jilħaq madwar 2 mm ‘il fuq mil-livell superjuri tal-ġell tas-silika.
                        5.1.4.   Kromatografija fuq kolonna
                        Ġo flask Erlenmeyer ta’ 25 ml (3.1), iżen eżatt 1 g tal-kampjun imħejji skond il-punt 5.1.
                        Dewweb il-kampjun f’10 ml mis-solvent ta’ l-iżvilupp (4.10). Ferragħ is-soluzzjoni fil-kolonna kromatografika mħejjija skond il-punt 5.1.3. Kemm jista’ jkun, tħarrikx is-superfiċje tal-kolonna.
                        Iftaħ il-vit u ħalli s-soluzzjoni tal-kampjun tnixxi sakemm tilħaq il-livell tal-ġell tas-silika. Żviluppa b’150 ml mis-solvent ta’ l-iżvilupp. Aġġusta r-rata sa 2 ml/min (sabiex 150 ml inixxu fil-kolonna f’madwar 60-70 minuta).
                        Irkupra l-eluzzjoni ġo flask ta’ 250 ml li jkun ġie mwieżen minn qabel. Evapora s-solvent fil-vakwu u neħħi l-aħħar traċċi tiegħu taħt kurrent ta’ nitroġenu.
                        Iżen il-flask u ikkalkula l-estratt irkuprat.
                        (Fil-każ li jkunu qed jintużaw skrataċ SPE tas-silika lesti għall-użu, ipproċedi kif ġej: Daħħal 1 ml mis-soluzzjoni (5.1.2.) ġo l-iskrataċ, imħejjija minn qabel b’3 ml ta’ n-hexane.
                        Saffi s-soluzzjoni, u żviluppa b’4 ml ta’ n-hexane/eter djetiliku 1/1 (V/V).
                        Irkupra s-soluzzjoni f’tubu ta’ 10 ml, u evapora taħt kurrent ta’ nitroġenu sakemm tkun nixfet.
                        Esponi l-fdal niexef għal-lipażi pankreatika (5.2.). Huwa fondamentali li tivverifika l-kompożizzjoni ta’ aċidi grassi qabel u wara li jiġi mgħoddi mill-iskartoċċ SPE).
                        5.2.   Idroliżi bil-lipażi pankreatika
                        5.2.1.   Fit-tubu għaċ-ċentrifuga, iżen 0,1 g taż-żejt imħejji skond il-punt 5.1. Żid 2 ml mis-soluzzjoni stabbilizzanti (4.6.), 0,5 ml mis-soluzzjoni ta’ sodju kolat (4.7), u 0,2 ml mis-soluzzjoni ta’ klorur tal-kalċju, filwaqt li tħawwad sewwa wara kull żieda. Agħlaq it-tubu b’tapp li jissiġilla mħejji għal dan il-għan u qiegħdu fit-termostat f’temperatura ta’.
                        5.2.2.   Żid 20 mg lipażi, ħawwad bil-galbu (filwaqt li tevita li jixxarrab it-tapp), u qiegħed it-tubu fit-termostat għal eżatt 2 minuti, imbagħad aqilgħu, ħawdu sewwa għal eżatt minuta, u ħallih jiksaħ.
                        5.2.3.   Żid 1 ml ta’ eter djetiliku, agħlaq bit-tapp u ħawwad sew, imbagħad għaddi miċ-ċentrifuga, u ittrasferixxi s-soluzzjoni ta’ eter ġo tubu nadif u niexef, bl-għajnuna ta’ mikrosiringa.
                        5.3.   Tħejjija tad-derivattivi silanizzati u tal-kromatografija tal-gass
                        5.3.1.   Bl-għajnuna ta’ mikrosiringa, daħħal 100 μl mis-soluzzjoni (5.2.3.) ġo tubu bil-qiegħ koniku ta’ 10 ml.
                        5.3.2.   Neħħi s-solvent taħt kurrent dgħajjef ta’ nitroġenu, żid 200 μl ta’ reaġent ta’ silanizzazzjoni (4.15.), agħlaq bit-tapp u ħalli joqgħod għal 20 minuta.
                        5.3.3.   Wara 20 minuta, żid bejn 1 u 5 ml n-hexane (skond il-kundizzjonijiet kromatografiċi): is-soluzzjoni li tirriżulta hija lesta għall-kromatografija tal-gass.
                        5.4.   Kromatografija tal-gass
                        Il-kundizzjonijiet ta’ tħaddim huma dawn li ġejjin:
                        
                                    —
                                 
                                 
                                    Temperatura ta’ l-injettur (on column) inqas mit-temperatura tat-tgħollija tas-solvent (68 °C);
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    Temperatura tar-rivelatur: 350 °C;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    Temperatura tal-kolonna: programmar tat-temperatura tal-forn: 60 °C għal minuta, b’żieda ta’ 15 °C kull minuta sa 180 °C, imbagħad ta’ 5 °C kull minuta sa 340 °C, imbagħad 340 °C matul 13-il minuta;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    Gass portatur: idroġenu jew elju, aġġustat għall-veloċità lineari xierqa sabiex tinkiseb r-riżoluzzjoni riflessa fil-Figura 1. Il-ħin tar-retenzjoni tat-triglyceride C54 għandu jkun ta’ 40 + 5 minuti (ara l-Figura 2); (Il-kundizzjonijiet ta’ tħaddim indikati hawn fuq jingħataw bħala proposta indikattiva. Kull operatur ikollu jaddattahom kif xieraq biex jilħqu r-reżoluzzjoni mixtieqa. It-tul tal-quċċata li tikkorrispondi għat-2-glyceryl monopalmitate għandu jkun ugwali għal talanqas 10 % mill-iskala tar-reġistratur).
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    L-ammont ta’ sostanza injettata: 0,5-1 μl mis-soluzzjoni (5 ml) ta’ n-hexane (5.3.3.).
                                 
                              5.4.1.   Identifikazzjoni tal-qċaċet
                        Il-monoglycerides individwali jiġu identifikati skond il-ħinijiet ta’ retenzjoni miksuba, u b’relazzjoni ma’ dawk miksuba bit-taħlitiet standard ta’ monoglycerides analizzati fl-istess kundizzjonijiet.
                        5.4.2.   Evalwazzjoni kwantitattiva
                        Is-superfiċje ta’ kull quċċata tiġi kkalkulata permezz ta’ integratur elettroniku.
                        6.   ESPRESSJONI TAR-RIŻULTATI:
                        Il-perċentwal ta’ glyceryl monopalmitate jiġi kkalkulat abbażi tar-relazzjoni bejn is-superfiċje tal-quċċata u t-total tas-superfiċji tal-qċaċet tal-monoglycerides kollha (ara l-Figura 2), skond il-formula:
                        Glyceril monopalmitate (%): 
                        Fejn:
                        
                                    Ax
                                    
                                 
                                 
                                    =
                                 
                                 
                                    is-superfiċje tal-quċċata li tikkorrispondi għall-glyceryl monopalmitate
                                 
                              
                                    ΣA
                                 
                                 
                                    =
                                 
                                 
                                    it-total tas-superfiċji tal-qċaċet kollha tal-monoglycerides
                                 
                              Ir-riżultat għandu jingħata b’ punt deċimali wieħed.
                        7.   RAPPORT TA’ L-ANALIŻI
                        Ir-rapport ta’ l-analiżi għandu jispeċifika:
                        
                                    —
                                 
                                 
                                    ir-referenza għal dan il-metodu;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    it-tagħrif kollu meħtieġ għall-identifikazzjoni kompleta tal-kampjun;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    ir-riżultat ta’ l-analiżi;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    kull devjazzjoni minn dan il-metodu, sew minħabba deċiżjoni tal-partijiet ikkonċernati sew minħabba raġuni oħra;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    id-dettalji ta’ l-identifikazzjoni tal-laboratorju, id-data ta’ l-analiżi u l-firma tal-persuni responsabbli għaliha.
                                 
                              
                           Figura 1
                        
                        Kromatogramma tal-prodotti tar-reazzjoni tas-silanizzazzjoni miksubin bl-azzjoni tal-lipażi fuq żejt taż-żebbuġa raffinat miżjud b’20 % ta’ żejt esterifikat (100 %).
                        
                           Figura 2
                        
                        
                           Kromatogramma ta’:
                        
                        A)   Żejt taż-żebbuġa mhux esterifikat, wara l-lipażi; wara s-silanizzazzjoni; f’dawn il-kundizzjonijiet (kolonna kapillari 8-12 m), il-frazzjoni ta’ xama’ tiġi elwita fl-istess ħin bħall-frazzjoni ta’ diglyceride, jew ftit wara.
                        
                        
                           Wara l-lipażi, il-kontenut ta’ triglycerides ma għandux jaqbeż 15 %.
                        
                        
                           Kromatogramma ta’:
                        
                        B)   żejt esterifikat wara l-lipażi; wara s-silanizzazzjoni; f’dawn il-kundizzjonijiet (kolonna kapillari 8-12 m), il-frazzjoni ta’ xama’ tiġi elwita fl-istess ħin bħall-frazzjoni ta’ diglyceride, jew ftit wara.
                        
                        
                           Wara l-lipażi, il-kontenut ta’ triglycerides ma għandux jaqbeż 15 %.
                        
                        8.   NOTI
                        
                           Nota 1   TĦEJJIJA TAL-LIPAŻI
                        Lipażi b’attività sodisfaċenti huma disponibbli fis-suq. Wieħed jista’ jippreparahom ukoll fil-laboratorju, kif ġej:
                        Kessaħ 5 kg ta’ frixa friska tal-majjal sa 0 °C. Neħħi x-xaħam solidu u t-tessut konnettiv ta’ madwarha, u itħan ġo blender sakemm issir pasta likwida. Ħawwad din il-pasta għal bejn 4 u 6 sigħat ma’ 2,5 litru ta’ anhydrous acetone, imbagħad għaddi miċ-ċentrifuga. Oħroġ il-fdal tliet darbiet oħra bl-istess volum ta’ anhydrous acetone, imbagħad darbtejn b’taħlita acetone/eter djetiliku (1/1) (V/V), u darbtejn bl-eter djetiliku.
                        Nixxef il-fdal matul 48 siegħa fil-vakwu biex jinkiseb trab stabbli li jżomm għal żmien twil fil-friġġ u protett mill-umdità.
                        
                           Nota 2.   KONTROLLAR TA’ L-ATTIVITA’ LIPAŻIKA
                        Ħejji emulsjoni ta’ żejt taż-żebbuġa kif ġej:
                        Ġo mikser, ħawwad għal 10 minuti taħlita magħmula minn 165 ml soluzzjoni ta’ gomma arabika f’100 g/l, 15 g silġ mitħun u 20 ml żejt taż-żebbuġa newtralizzat minn qabel.
                        Imbagħad daħħal 10 ml minn din l-emulsjoni f’biker ta’ 50 ml, imbagħad 0,3 ml minn soluzzjoni ta’ sodju kolat f’0,2 g/ml u 20 ml ilma distillat.
                        Qiegħed il-biker ġo termostat regolat għal 37 °C; daħħal l-elettrodi tal-miter tal-pH u l-aġitatur bl-iskrun.
                        Bl-għajnuna ta’ buretta, qattar soluzzjoni ta’ idrossidu tas-sodju 0,1 N sakemm jintlaħaq livell pH ta’ 8,3.
                        Żid kwantità ta’ sospensjoni ta’ trab tal-lipażi fl-ilma (0,1 g/ml ta’ lipażi). Malli l-miter tal-pH jindika livell pH ta’ 8.3, qabbad il-kronometru u żid is-soluzzjoni ta’ idrossidu tas-sodju billi tqattarha bir-ritmu meħtieġ biex il-livell pH jinżamm f’8.3. Innota kull minuta l-volum tas-soluzzjoni li jkun ġie kkunsmat.
                        Irreġistra din l-informazzjoni fi grafika x/y, bil-ħin fuq l-assi x, u l-millilitri ta’ soluzzjoni ta’ alkali 0,1 N ikkunsmati biex jinżamm livell kostanti tal-pH fuq l-assi y. B’hekk għandha tinkiseb grafika lineari.
                        L-attività tal-lipażi, imkejla f’unitajiet ta’ lipażi għal kull mg, tiġi kkalkolata bil-formula li ġejja:
                        
                           
                        Fejn:
                        
                                    A
                                 
                                 
                                    hija l-attività f’unitajiet ta’ lipażi/mg;
                                 
                              
                                    V
                                 
                                 
                                    hija l-għadd ta’ millilitri ta’ soluzzjoni ta’ idrossidu tas-sodju 0,1 N kull minuta (ikkalkulat abbażi tal-grafika);
                                 
                              
                                    N
                                 
                                 
                                    hija n-normalità tas-soluzzjoni ta’ idrossidu tas-sodju;
                                 
                              
                                    m
                                 
                                 
                                    hija l-massa tal-lipażi tat-test f’mg.
                                 
                              L-unità ta’ lipażi hija ddefinita bħala l-kwantità ta’ enżimi li jeħilsu 10 mikro-ekwivalenti ta’ aċidu kull minuta.”;
                     
                  
               
                     7.
                  
                  
                     Fl-Anness X “A”, il-punt 6.2 huwa mibdul b’li ġej:
                     
                                 “6.2.
                              
                              
                                 L-esters tal-metill jitħejjew skond il-metodu B deskritt fl-Anness X “B”. Is-sustanzi grassi b’aċidità libera ta’ aktar minn 3 % għandhom jiġu newtralizzati minn qabel, skond il-punt 5.1.1. ta’ l-Anness VII”.
                              
                           
               
            (1)  Total ta' l-iżomeri li jistgħu jinfirdu (jew le) b'kolonna kapillari.
         
            (2)  Jew meta l-medjan tad-difetti huwa daqs jew inqas minn 2,5, u l-medjan tat-togħma tal-frott huwa 0.
         
            (3)  Iż-żjut b'kontenut ta' xama' ta' bejn 300 mg/kg u 350 mg/kg jitqiesu bħala żejt taż-żebbuġa lampanti jekk it-total ta' alkoħol alifatiku huwa daqs jew inqas minn 350 mg/kg jew jekk il-perċentwal ta' erytrodiol u uvaol huwa daqs jew inqas minn 3,5.
         
            (4)  Iż-żjut b'kontenut ta' xama' ta' bejn 300 mg/kg u 350 mg/kg jitqiesu bħala żejt tal-fdal taż-żebbuġa mhux raffinat jekk it-total ta' alkoħol alifatiku huwa aktar minn 350 mg/kg u jekk il-perċentwal ta' erytrodiol u uvaol huwa aktar minn 3,5.
         
            (5)  Kontenut ta' aċidi grassi oħra (%): palmitiku: 7,5 - 20,0; palmitoleiku: 0,3 - 3,5; heptadekanoiku: ≤ 0,3; heptadekenoiku: ≤ 0,3; esteariku: 0,5 - 5,0; oleiku: 55,0 - 83,0; linoleiku: 3,5 - 21,0
         
            (6)  Total ta' : Delta-5-23-Stigmastadienol+Klerosterol+Beta-Sitosterol+Sitostanol+Delta-5-Avenasterol+Delta-5-24-Stigmastadienol.
         
            (7)  Iż-żjut b'kontenut ta' xama' ta' bejn 300 mg/kg u 350 mg/kg jitqiesu bħala żejt taż-żebbuġa lampanti jekk it-total ta' alkoħol alifatiku huwa inqas jew daqs 350 mg/kg jew jekk il-perċentwal ta' erytrodiol u uvaol huwa daqs jew inqas minn 3,5.
         
            (8)  Iż-żjut b'kontenut ta' xama' ta' bejn 300 mg/kg u 350 mg/kg jitqiesu bħala żejt tal-fdal taż-żebbuġa mhux raffinat jekk it-total ta' alkoħol alifatiku huwa aktar minn 350 mg/kg u jekk il-perċentwal ta' erytrodiol u uvaol huwa aktar minn 3,5.
         
            (*)  Wara l-eluzzjoni ta’ l-isterol esters, il-linja kromatografika ma għandhiex ikollha qċaċet sinifikattivi (triglycerides)