CELEX: 31984L0319
Language: es
Date: 1984-06-07 00:00:00
Title: Directiva 84/319/CEE de la Comisión, de 7 de junio de 1984, por la que se modifican los Anexos de la Directiva 77/96/CEE relativa a la investigación de triquinas en el momento de las importaciones, procedentes de terceros países, de carnes frescas de animales domésticos de la especie porcina

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31984L0319

Directiva 84/319/CEE de la Comisión, de 7 de junio de 1984, por la que se modifican los Anexos de la Directiva 77/96/CEE relativa a la investigación de triquinas en el momento de las importaciones, procedentes de terceros países, de carnes frescas de animales domésticos de la especie porcina  

Diario Oficial n° L 167 de 27/06/1984 p. 0034 - 0043 Edición especial en finés : Capítulo 3 Tomo 17 p. 0185  Edición especial en español: Capítulo 03 Tomo 31 p. 0083  Edición especial sueca: Capítulo 3 Tomo 17 p. 0185  Edición especial en portugués: Capítulo 03 Tomo 31 p. 0083 

 DIRECTIVA DE LA COMISIÓN    de 7 de junio de 1984    por la que se modifican los Anexos de la   Directiva 77/96/CEE relativa a la investigación   de triquinas en el momento de las importaciones ,   procedentes de terceros países , de carnes   frescas de animales domésticos de la especie porcina     ( 84/319/CEE )    LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS ,    Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad   Económica Europea ,    Vista la Directiva 77/96/CEE del Consejo , de 21   de diciembre de 1976 , relativa a la investigación de   triquinas en el momento de las importaciones , procedentes   de terceros países , de carnes frescas de animales   domésticos de la especie porcina (1) , modificada en   último lugar por la Directiva 83/91/CEE (2) y ,   en particular , su artículo 8 ,    Considerando que los estudios recientemente   realizados han permitido el ajuste de determinados   métodos de investigación de triquinas en las carnes   de porcinos ; que dichos métodos ofrecen garantías   sanitarias equivalentes a las que ofrecen los   métodos existentes ; que conviene ,   por lo tanto , completar el Anexo I de la Directiva   77/96/CEE ;    Considerando que para facilitar la ejecución   de la investigación de triquinas , interesa que se   permita a los terceros países y a los Estados miembros ,   la opción entre los métodos de investigación   previstos ,    Considerando que se deben introducir determinadas   adaptaciones de orden técnico , en los métodos   de investigación de triquinas actualmente aplicados ,   así como en lo que se refiere a las condiciones que   deben cumplir los laboratorios de detección de   triquinas ,    Considerando que las medidas previstas en la presente   Directiva concuerdan con el Dictamen del Comité   veterinario permanente ,    HA ADOPTADO LA PRESENTE DIRECTIVA :    Artículo 1    La Directiva 77/96/CEE se modificará conforme al   Anexo .    Artículo 2    Los Estados miembros aplicarán las disposiciones   legales , reglamentarias y administrativas necesarias   para cumplir la presente Directiva , a más tardar ,   el 1 de enero de 1985 , e informarán de ello   a la Comisión .    Artículo 3    Los destinatarios de la presente Directiva   serán los Estados miembros .    Hecho en Bruselas , el 7 de junio de 1984    Por la Comisión    Poul DALSAGER    Miembro de la Comisión    (1) DO n º L 26 de 31 . 1 . 1977 , p. 67 .    (2) DO n º L 59 de 5 . 3 . 1983 , p. 34 .    ANEXO    A . El Anexo I se modificará de la siguiente   manera :    1 . En la letra a ) del punto II :     - el segundo guión se sustituirá por el   siguiente guión :     « - Estereomicroscopio ( aumento de   15 a 40 veces ) que disponga de una iluminación   adecuada » .     - el último guión se sustituirá por el   siguiente guión :     « - Líquido de digestión compuesto de   la siguiente manera : 10 g de pepsina [ 80 U/g   FIP ( Federación Internacional de Farmacia ) ] ,   5 ml de HCl ( 37 % , por lo menos ) , llevar a un   litro con agua corriente » .    2 . El texto del punto III se sustituirá   por el siguiente texto :     « III . MÉTODO DE LA DIGESTIÓN ARTIFICIAL   DE MUESTRAS COLECTIVAS    a ) Instrumental y reactivos     - Un cuchillo y pinzas para la toma de muestras .     - Una máquina de picar carne cuyos agujeros   deberán tener un diámetro comprendido entre   2 y 3 mm .     - Un matraz Erlenmeyer de 3 l provisto de un   tapón de goma o de guata .     - Un embudo cónico de separación de una   capacidad de 2 000 ml .     - Un soporte normal con el pie en forma de A ,   de 28 cm de longitud , provisto de una varilla de   80 cm .     - Un anillo de 10 a 11 cm que pueda fijarse   al soporte .     - Una pinza provista de una boca chata   ( 23/40 mm ) que pueda sujetarse al soporte mediante   un manguito doble .     - Un tamiz ( finura de la malla : 177 µ )   de un diámetro exterior de 11 cm , provisto de una   rejilla de latón o de acero inoxidable .     - Un embudo de un diámetro interior ,   mínimo , de 12 cm .     - Probetas graduadas de 100 ml .     - Un estereomicroscopio ( aumento de 15 a 40   veces ) , que disponga de una iluminación   adecuada , o un triquinoscopio provisto de una   tabla horizontal para el compresor , que disponga   de una iluminación adecuada .     - En caso de utilización del triquinoscopio :   una cubeta para el cómputo de larvas , que se podrá   describir de la siguiente manera :    una cubeta formada por placas acrílicas de un espesor   de 3 mm y que reúna las siguientes características :    i ) fondo de la cubeta : 180 × 40 mm , dividido   en cuadrados ;    ii ) placas laterales : 230 × 20 mm ;    iii ) placas frontales : 40 × 20 mm .    El fondo y las placas frontales deberán   estar fijos entre las placas laterales , de manera   que formen una cubeta provista de 2 pequeñas asas   en los dos extremos . La parte superior del fondo   deberá estar entre 7 y 9 mm más elevada   con relación a la base del cuadrado formado por las   placas laterales y frontales . Las placas deberán   fijarse mediante una cola adecuada al material .     - En caso de utilización del estereomicroscopio ,   una serie de placas de Petri de un diámetro de 9 cm ,   cuyo fondo esté dividido en cuadrados de examen   de 10 × 10 mm , mediante un instrumento puntiagudo .     - Varios cubos de 10 l que se utilizarán en el   momento de la descontaminación de los   instrumentos , mediante un tratamiento como el   formol , y para el jugo digestivo que quede , en caso   de resultado positivo .     - Acido clorhídrico concentrado ( 37 % ) .     - Concentración de pepsina : 1 : 10 000 NF ( US   National Formulary ) ,    correspondiente a 1 : 12 500 BP ( British   Pharmacopea ) , correspondiente a 2 000 FIP   ( Federación Internacional de Farmacia ) .     - Un número de bandejas que puedan contener 50   muestras , de aproximadamente , 2 g cada una .     - Una balanza de precisión de 0,1 g .    b ) Toma de muestras    1 . Cuando las canales están enteras ,   tomar una muestra , de aproximadamente 2 g ,   en uno de los pilares del diafragma , en la zona   de transición entre la parte muscular y la   parte tendinosa ; si no hubiere pilar del   diafragma , tomar la misma cantidad en la   parte del diafragma situada cerca de las costillas   o del esternón , o en la musculatura de la lengua ,   o en los músculos masticadores , o también   en la musculatura abdominal .    2 . Para los trozos de carne , tomar una   muestra , de aproximadamente 2 g , en los   músculos esqueléticos que contengan poca   grasa y en la medida que sea posible , cerca   de los huesos o de los tendones .    c ) Método    1 . i ) Grupos completos de muestras   ( 100 a la vez )    Se tomará una muestra , de aproximadamente 1 g ,   de cada una de las 100 muestras individuales procedentes   de los cerdos . La muestra colectiva se pasará   una vez por la máquina de picar carne .    La carne picada se colocará en el matraz   Erlenmeyer de 3 l , al mismo tiempo que 7 g   de pepsina y se cubrirá con 2 l de agua de grifo   calentada a una temperatura aproximada de 40 a   41 ° C , y con 25 ml de ácido clorhídrico   concentrado . Agitar la mezcla para disolver la pepsina .    El pH de la solución será , entoncer , de   aproximadamente 1,5 a 2 .     - Para la digestión , el matraz Erlenmeyer   se colocará en una estufa a 40-41 ° C durante   4 horas aproximadamente . Durante este tiempo , se   agitará regularmente como mínimo , dos veces   por hora .     - Digerida la solución , se filtrará ,   mediante un tamiz , a través del embudo   cónico de separación de 2 l y se dejará   en reposo sobre el soporte durante , por lo menos ,   una hora .     - Se trasegará a una probeta graduada , un   volumen total de aproximadamente 45 ml , y se   distribuirá en tres placas de Petri , cuyos fondos   estarán divididos en cuadrados de 15 ml por placa .     - Cada placa de Petri se examinará minuciosamente   en el estereomicroscopio , con el fin de descubrir   las larvas .     - En caso de utilización de cubetas para el   cómputo de larvas , los 45 ml se distribuirán   en dos cubetas y se examinarán en el triquinoscopio .    Las larvas aparecerán en el sedimento como   unos organismos identificables y si el agua   estuviera tibia , frecuentemente se podrán observar   los enrrollados y desenrrollados de la espiral .     - Los líquidos de digestión se deberán   examinar desde el momento en que estén dispuestos .   En ningún caso se podrá postergar el examen para   el día siguiente . Si los líquidos de digestión   no fueran lo suficientemente transparentes , o si no   se examinaran en el plazo de 30 minutos siguiente   a su preparación , se deberán clarificar   de la siguiente manera : verter la muestra final   de 45 ml en una probeta graduada y dejar   sedimentar durante 10 minutos . Después de dicho   tiempo , quitar , por aspiración , 30 ml del líquido   sobrenadante y agregar agua de grifo a los   15 ml restantes hasta obtener un volumen total de 45 ml .   Después de un nuevo período de reposo   de 10 minutos , quitar , por aspiración , 30 ml   del líquido sobrenadante , verter los 15 ml   restantes en una placa de Petri , o en una   cubeta para el cómputo de las larvas , con   vistas a su examen . Lavar la probeta graduada   con 10 ml de agua de grifo ; agregar el   líquido obtenido a la muestra en la placa de Petri ,   o en la cubeta para cómputo de larvas y examinar .    ii ) Grupos de menos de 100 muestras    Se podrá agregar un máximo de 15 muestras   individuales a un grupo completo de 100 muestras   para examinarlas al mismo tiempo que estas   últimas . Si el número de muestras que se   deban examinar es superior a 15 e inferior a 100 ,   el líquido de digestión se deberá reducir   proporcionalmente .    2 . En caso de resultado positivo o dudoso del   examen de una muestra colectiva , se deberá   tomar una muestra de 20 g , de cada cerdo , de acuerdo   con las indicaciones contempladas en la anterior   letra b ) . Las muestras de 20 g procedentes de   5 cerdos se deberán reunir y examinar de acuerdo   con el método arriba descrito . De esta forma se   examinarán las muestras de 20 grupos de 5 cerdos .   Si se descubrieran las triquinas en un grupo   de muestras de 5 cerdos , se deberán tomar las   muestras de 20 g de cada animal que pertenezca a   dicho grupo y se deberán examinar de acuerdo   con el método arriba descrito » .    3 . Se añadirán los siguientes puntos IV , V , VI :     « IV . MÉTODO DE LA DIGESTIÓN DE MUESTRAS   COLECTIVAS CON ASISTENCIA MECÁNICO/TÉCNICA   DE LA SEDIMENTACIÓN    a ) Instrumental y reactivos     - Un cuchillo o tijeras para cortar las muestras .     - Bandejas divididas en 50 cuadrados que puedan   contener , cada uno , las muestras de carne , de   aproximadamente 2 g .     - Un Stomacher Lab-blender 3 500 , Thermo model .     - Bolsas de plástico adaptadas al Stomacher   Lab-blender .     - Embudos de separación cónicos de una   capacidad de 2 l , preferentemente provistos de llaves   de seguridad de Teflon     - Soportes con anillos y fijaciones .     - Tamices , finura de malla 177 µ de un   diámetro exterior de 11 cm , provistos de una   rejilla de acero inoxidable .     - Embudos de un diámetro interior mínimo   de 12 cm , cuyo destino será recibir los tamices .     - Probetas graduadas de 100 ml .     - Un dosificador de 25 ml .     - Vasos de precipitados de una capacidad de 3 l .     - Una cuchara o una varilla de vidrio para   agitar el líquido de digestión en el vaso de   precipitados .     - Una jeringa de plástico y un tubo de   aspiración .     - Una cuchara graduada de 6 g .     - Un termómetro de una precisión de   ± 0,5 ° C con una graduación de 1 a 100 ° C .     - Un vibrador , por ejemplo , una afeitadora   eléctrica sin cabeza .     - Un relé que se encienda y apague   cada minuto .     - Un triquinoscopio provisto de una tabla   horizontal o un estereomicroscopio que disponga   de una iluminación adecuada .     - Una cubeta para el cómputo de larvas   ( en caso de utilización de un triquinoscopio ) .    La cubeta deberá estar formada por placas   acrílicas de un espesor de 3 mm y deberá   presentar las siguientes características :    i ) fondo de la cubeta : 180 × 40 mm , dividido   en cuadrados ;    ii ) placas laterales : 230 × 20 mm ;    iii ) placas frontales : 40 × 20 mm .    El fondo y las placas frontales deberán   estar fijos entre las placas laterales , de   manera que formen dos pequeñas asas en los   dos extremos . La parte superior del fondo deberá   estar entre 7 y 9 mm más elevada con relación   a la base del cuadrado formado por las placas   laterales y frontales . Fijar las placas mediante   una cola adecuada al material .     - En caso de utilización del estereomicroscopio ,   varias placas de Petri de un diámetro de 9 cm ,   cuyo fondo esté dividido en cuadrados de 10 × 10 mm ,   mediante un instrumento puntiagudo .     - Solución de ácido clorhídrico de 17,5 % .     - Concentración de pepsina : 1 : 10 000 NF   ( US National Formulary ) ,    correspondiente a 1 : 12 500 BP ( British   Pharmacopea ) , correspondiente a 2 000 FIP   ( Federación Internacional de Farmacia ) .     - Varios cubos de 10 l que se utilizarán   en el momento de la descontaminación del   instrumental , mediante un tratamiento como el   formol y para el jugo digestivo que quede , en caso   de resultado positivo .     - Una balanza de una precisión de 0,1 g .    b ) Toma de muestras    1 . Cuando las canales están enteras , tomar   una muestra , de aproximadamente 2 g , en uno   de los pilares del diafragma , en la zona de   transición entre la parte muscular y la parte   tendinosa ; si no hubiere pilar del diafragma ,   tomar la misma cantidad en la parte del diafragma   situada cerca de las costillas o del esternón ,   o en la musculatura de la lengua , o en los músculos   masticadores , o también en la musculatura abdominal .    2 . Para los trozos de carne , tomar una muestra , de   aproximadamente 2 g , en los músculos esqueléticos   que contengan poca grasa y en la medida que sea posible ,   cerca de los huesos o de los tendones .    c ) Método    1 . Procedimiento de digestión    i ) Grupos completos de muestras ( 100 a la vez )     - Proveer al Stomacher Lab-blender 3 500   de una pequeña bolsa doble de plástico y regular   la temperatura en 40-41 ° C .     - Verter un litro y medio de agua caliente   a 32-35 ° C en la pequeña bolsa interior y   llevarla a 40-41 ° C     - Trasladar a la pequeña bolsa 25 ml   de la solución de ácido clorhídrico de   17,5 % .     - Luego , agregar 100 muestras , de aproximadamente   1 g cada una ( a 25-30 ° C ) tomadas de cada   una de las muestras individuales , de acuerdo   con el procedimiento contemplado en la letra b ) .     - Por último , agregar 6 g de pepsina .   Respetar escrupulosamente el orden de las operaciones ,   para evitar la descomposición de la pepsina .     - Triturar en el Stomacher durante 25 minutos .     - Quitar la pequeña bolsa de plástico   del Stomacher , filtrar el líquido de digestión   a través de un tamiz y dejarlo pasar a un vaso   de precipitados de 3 l .     - Lavar la pequeña bolsa de plástico con 100 ml   de agua , aproximadamente , que luego se utilizará   para enjuagar el tamiz y se agregará al filtrado   que contenga el vaso de precipitados .    Se podrá agregar un máximo de 15 muestras   individuales a un grupo completo de 100 muestras   para examinarlas al mismo tiempo que estas últimas .    ii ) Grupos de menos de 100 muestras     - Proveer al Stomacher Lab-blender   3 500 de una pequeña bolsa doble de plástico   y regular la temperatura en 40-41 ° C .     - Preparar un líquido de digestión   mezclando , aproximadamente , un litro y medio   de agua y 25 ml de ácido clorhídrico de 17,5 % .   Agregar 6 g de pepsina y mezclar todo a una   temperatura de 40-41 ° C . Respetar escrupulosamente   el orden de las operaciones para evitar la   descomposición de la pepsina .     - Determinar un volumen de líquido de digestión   correspondiente a 15 ml por g de muestra ( así ,   para 30 muestras , habrá que extraer 30 × 15 ml =   450 ml ) y traspasarlo a la pequeña bolsa   de plástico interior , al mismo tiempo que las   muestras de carne de aproximadamente 1 g   ( a 25-30 ° C ) tomadas de cada una de las   muestras individuales , de acuerdo con el procedimiento   contemplado en la letra b ) .     - Verter el agua a aproximadamente 41 ° C ,   en la pequeña bolsa exterior hasta obtener un   volumen total de un litro y medio en las dos   pequeñas bolsas .     - Triturar en el Stomacher durante 25 minutos .     - Quitar la pequeña bolsa de plástico   del Stomacher , filtrar el líquido de digestión   a través de un tamiz y dejarlo pasar a un vaso   de precipitados de 3 l .     - Lavar la pequeña bolsa de plástico   con 100 ml de agua , aproximadamente , que luego   se utilizará para enjuagar el tamiz y   que se añadirá al filtrado que contenga el vaso   de precipitados .    2 . Aislamiento de las larvas por sedimentación     - Agregar al líquido de digestión 300-400 g   de hielo en laminillas , o de hielo triturado   para obtener un volumen de 2 l , aproximadamente .   Agitar hasta que el hielo se funda . En el caso   de grupos más pequeños [ ver letra ii ) ] , la   cantidad de hielo deberá reducirse proporcionalmente .     - Traspasar el líquido de digestión   enfriado a un embudo de separación de 2 l   provisto de un vibrador que se habrá fijado mediante   una pinza suplementaria .     - Para la sedimentación , dejar el líquido   en el embudo de separación durante 30 minutos ,   alternando un minuto de vibración y un minuto de   pausa .     - Después de los 30 minutos , introducir   rápidamente 60 ml de sedimento en una probeta   graduada de 100 ml . ( Después de su utilización ,   enjuagar el embudo con una solución detergente ) .     - Dejar reposar la muestra de , por   lo menos , 60 ml , quitar , por aspiración ,   el líquido sobrenadante hasta dejar en la   probeta un volumen de 15 ml que se examinará para   investigar la presencia de larvas .     - Para la aspiración , utilizar una jeringa   de plástico desechable , provista de un tubo   de plástico .    La longitud del tubo deberá permitir   que en la probeta graduada queden 15 ml del   líquido cuando el cuello de la jeringa se encuentre   al nivel del borde del cilindro .     - Introducir los 15 ml restantes en una cubeta   para el cómputo de larvas , o en dos placas   de Petri y examinarlas en el triquinoscopio o en   el estereomicroscopio .     - Los líquidos de digestión se deberán   examinar desde el momento en que estén   dispuestos . En ningún caso se podrá   postergar el examen para el día siguiente .   Si los líquidos de digestión no fueran lo   suficientemente transparentes , o si no   examinaran en el plazo de 30 minutos siguiente   a su preparación , se deberán clarificar de la   siguiente manera : verter la muestra final   de 60 ml en una probeta graduada y dejar   sedimentar durante 10 minutos . Después de   dicho tiempo , quitar , por aspiración , 45 ml   de líquido sobrenadante y agregar agua de   grifo a los 15 ml restantes hasta obtener un   volumen total de 45 ml . Después de un nuevo   período de reposo de 10 minutos , quitar , por   aspiración , 30 ml del líquido sobrenadante ,   verter los 15 ml restantes en una placa de   Petri , o en una cubeta para el cómputo de   las larvas , con vistas a su examen . Lavar la probeta   graduada con 10 ml de agua de grifo ; agregar el   líquido obtenido a la muestra en la placa de Petri , o en   la cubeta para el cómputo de larvas y examinar .    3 . En caso de resultado positivo o dudoso   del examen de una muestra colectiva , se deberá   tomar una muestra de 20 g , de cada cerdo , de   acuerdo con las indicaciones contempladas   en la anterior letra b ) . Las muestras de 20 g procedentes   de 5 cerdos se deberán reunir y examinar de acuerdo   con el método arriba descrito . De esta forma   se examinarán las muestras de 20 grupos   de 5 cerdos . Si se descubrieran las triquinas   en un grupo de muestras de 5 cerdos , se deberán   tomar las muestras de 20 g de cada animal que pertenezca   a dicho grupo y se deberán examinar de acuerdo   con el método arriba descrito .    V . MÉTODO DE LA DIGESTIÓN DE MUESTRAS   COLECTIVAS CON ASISTENCIA MECÁNICO/TÉCNICA DEL   AISLAMIENTO POR FILTRACIÓN    a ) Instrumental y reactivos    Los mismos que los de la letra a ) del   método IV , más :     - Un embudo Gelman de un litro con soporte   para filtro ( diámetro del soporte : 45 mm ) .     - Discos filtrantes compuestos de :    una rejilla redonda de acero inoxidable ,   finura de la malla de 35 µ , diámetro del disco :   45 mm ;    dos anillos de goma de 1 mm de espesor ; diámetro   exterior : 45 mm ; diámetro interior : 38 mm .    La rejilla se deberá colocar entre los   anillos y se fijará con una cola de los dos   componentes que se adapte a los dos materiales .     - Un matraz Erlenmeyer de 3 l provisto de un   tubo lateral para aspiración .     - Una bomba de filtración .     - Bolsas pequeñas de plástico de una capacidad   mínima de 80 ml .     - Un saco de sosa     - « Rennilase » 1 : 150 000 unidades Soxlet   por g    b ) Toma de muestras    Ver letra b ) del método IV .    c ) Método    1 . Procedimiento de digestión    i ) Grupos completos de muestras ( 100 a la vez )    Ver letra i ) del punto 1 de la letra c )   del título IV .    ii ) Grupos de menos de 100 muestras    Ver letra ii ) del punto 1 de la letra c )   del título IV .    2 . Aislamiento de las larvas por filtración     - Agregar al líquido de digestión 300-400 g   de hielo en laminillas o de hielo triturado   para obtener un volumen de , aproximadamente ,   2 l . En el caso de grupos más pequeños , la   cantidad de hielo deberá reducirse proporcionalmente .     - Agitar el líquido de digestión hasta   que el hielo se funda . Dejar reposar el líquido   de digestión enfriado durante 3 minutos por   lo menos , para que las larvas puedan enrrollarse .     - Colocar el embudo Gelman provisto de un   soporte para filtro , en el cual se encuentra un disco   filtrante , sobre un matraz Erlenmeyer conectado   a una bomba de filtración .     - Introducir el líquido de digestión   en el embudo Gelman y filtrar . Hacia el final , se   podrá acelerar el paso del líquido a través   del filtro procediendo a una aspiración   mediante la bomba de filtración . Terminar   la aspiración exactamente antes de que el   filtro se seque , es decir , cuando queden entre   2 y 5 ml de líquido en el embudo .     - Después de la filtración de todo el   líquido de digestión , quitar el disco filtrante y   colocarlo en una pequeña bolsa de plástico de 80 ml   agregando de 15 a 20 ml de solución de   « rennilase » . Para obtener la solución   de « rennilase » se introducirán 2 g   de « rennilase » en 100 ml de agua de grifo .     - Practicar una doble soldadura en la pequeña   bolsa de plástico y colocarla en el Stomacher entre   la pequeña bolsa interior y la pequeña bolsa   exterior .     - Triturar en el Stomacher durante 3 minutos ,   por ejemplo ; entretanto , el aparato se utilizará   para el análisis de un grupo completo o incompleto   de muestras .     - Después de 3 minutos , quitar del Stomacher   la pequeña bolsa de plástico que contiene   el disco filtrante y la solución de   « rennilase » y abrirla con la ayuda de tijeras .   Introducir el líquido en una cubeta para el   cómputo de las larvas , o en una placa de   Petri . Lavar la pequeña bolsa con 5 ó 10 ml   de agua , que luego se introducirá en la cubeta   para la triquinoscopia , o en una placa de Petri   para examen en el estereomicroscopio .     - Los líquidos de digestión deberán examinarse   desde el momento en que estén dispuestos .   En ningún caso se podrá postergar el examen   para el día siguiente .    Nota    No utilizar nunca discos filtrantes que no   estén perfectamente limpios . No secar nunca   discos filtrantes si no están limpios .    Para limpiar los discos , es preciso dejarlos   en una solución de « rennilase » durante la   noche . Antes de su utilización , se deberán   lavar en el Stomacher en una solución de   « rennilase » .    3 . En caso de resultado positivo o dudoso   del examen de una muestra colectiva , se   deberá tomar una muestra de 20 g de cada cerdo ,   de acuerdo con las indicaciones contempladas en   la anterior letra b ) . Se deberán reunir   las muestras de 20 g procedentes de 5 cerdos y   examinarlas de acuerdo con el método   anterior . De esta forma , se examinarán las   muestras de 20 grupos de 5 cerdos . Si se descubrieran   las triquinas en un grupo de muestras de 5 cerdos ,   se deberán tomar las muestras de 20 g de   cada animal que pertenezca a dicho grupo y se   examinarán de acuerdo con el método arriba descrito .    VI . MÉTODO DE LA DIGESTIÓN DE MUESTRAS   COLECTIVAS CON UTILIZACIÓN DE UN AGITADOR MAGNÉTICO .    a ) Instrumental y reactivos     - Un cuchillo y pinzas para la toma de muestras .     - Bandejas divididas en 50 cuadrados que   puedan contener , cada uno , muestras de carne   de 2 g , aproximadamente .     - Un molinillo .     - Un agitador magnético provisto de una   placa térmica de temperatura controlada y una   barra magnética ( recubierta de Teflón ) de 5 cm ,   aproximadamente .     - Embudos de separación cónicos de una   capacidad de 2 l .     - Soportes con anillos y fijaciones .     - Tamices , finura de la malla 177 µ , de un   diámetro exterior de 11 cm , provistos de una   rejilla de acero inoxidable .     - Embudos de un diámetro interior mínimo de 12 cm ,   destinados a recibir el tamiz .     - Un vaso de precipitados de 3 l .     - Probetas graduadas de una capacidad aproximada   de 50 ml , o tubos de centrifugación .     - Un triquinoscopio de una tabla horizontal ,   o un estereomicroscopio que disponga de una   iluminación adecuada .     - Una cubeta para el cómputo de larvas ( en caso   de utilización de un triquinoscopio ) .    La cubeta deberá estar formada por placas   acrílicas de un espesor de 3 mm y deberá   presentar las siguientes características :    i ) fondo de la cubeta : 180 × 40 mm , dividido   en cuadrados ,    ii ) placas laterales : 230 × 20 mm ,    iii ) placas frontales : 40 × 20 mm .    El fondo y las placas frontales deberán estar   fijos entre las placas laterales de manera   que formen dos pequeñas asas en los dos extremos .   La parte superior del fondo deberá estar entre   7 y 9 mm más elevada con relación a la base del   cuadrado formado por las placas laterales y frontales .    Fijar las placas con una cola adecuada al material .     - Varias placas de Petri , en caso de utilización   de un estereomicroscopio , cuyo fondo se ha   dividido en cuadrados de 10 × 10 mm , mediante   un instrumento puntiagudo .     - Una hoja de aluminio .     - Acido clorhídrico de 25 % .     - Concentración de pepsina : 1 : 10 000 NF   ( US National Formulary ) ;    correspondiente a 1 : 12 500 BP ( British   Pharmacopea ) ,    correspondiente a 2 000 FIP ( Federación   Internacional de Farmacia ) .     - Agua de grifo calentada a una temperatura de   46-48 ° C .     - Varios cubos de 10 l que se utilizarán en el   momento de la descontaminación del instrumental ,   mediante un tratamiento como el formol , y para   el jugo digestivo que quede en caso de resultado positivo .     - Una balanza de precisión de 0,1 g .    b ) Toma de muestras    1 . Cuando las canales están enteras , tomar   una muestra , de aproximadamente 2 g , en uno   de los pilares del diafragma , en la zona de   transición entre la parte muscular y la parte   tendinosa ; si no hubiere pilar del diafragma ,   tomar la misma cantidad en la parte del diafragma   situada cerca de las costillas o del esternón , o   en la musculatura de la lengua , o en los músculos   masticadores , o también en la musculatura   abdominal .    2 . Para los trozos de carne , tomar una muestra ,   de aproximadamente 2 g , en los músculos   esqueléticos que contengan poca grasa y en la   medida que sea posible , cerca de los huesos   o de los tendones .    c ) Método    1 . i ) Grupos completos de muestras ( 100 a la vez )     - Triturar en el molinillo 100 muestras , de   aproximadamente 1 g , tomadas de cada muestra   individual , de acuerdo con las indicaciones de la   letra b ) . Hacer funcionar el aparato tres o cuatro veces   durante un segundo .     - Llevar la carne picada a un vaso de   precipitados de 3 l y espolvorearla con 10 g de   pepsina . Introducir en el vaso de precipitados 2 l   de agua de grifo calentada a una temperatura de   46-48 ° C y agregar 16 ml de ácido clorhídrico .     - Introducir varias veces el dispositivo de   triturado del molinillo en el líquido de   digestión que se encuentre en el vaso de   precipitados para quitar de él las sustancias que   aún tenga adheridas .     - Colocar la barra magnética en el vaso de   precipitados y cubrirlo con una hoja de aluminio .     - Colocar el vaso de precipitados en la placa   precalentada del agitador magnético y comenzar   la agitación . Antes de empezar el proceso   de agitación , se deberá regular el agitador   magnético de tal forma , que durante el   funcionamiento pueda mantenerse una temperatura constante   de 44-47 ° C . Durante el proceso de agitación ,   el líquido de digestión deberá girar a una velocidad   lo suficientemente elevada que permita la formación   de un profundo remolino central sin provocar   salpicaduras .     - Agitar el líquido de digestión durante   30 minutos , parar el aparato ; filtrar el líquido   de digestión a través de un tamiz colocado en un   embudo y recoger el filtrado en un embudo de separación .     - Dejar el líquido de digestión en el embudo de   separación durante 30 minutos .     - Después de 30 minutos , traspasar rápidamente   una muestra de 40 ml del líquido de digestión   a la probeta graduada , o al tubo de centrifugación .     - Dejar reposar la muestra de 40 ml durante   10 minutos y luego aspirar 30 ml de líquido   sobrenadante dejando , así , un volumen de 10 ml .     - La muestra de 10 ml del sedimento restante   se verterá en una cubeta para el cómputo   de larvas , o en una placa de Petri .     - Enjuagar la probeta graduada o el tubo de   centrifugación con aproximadamente 10 ml de   agua de grifo que se agregará a la muestra en la   cubeta de cómputo de larvas o en la placa de   Petri . Luego , proceder a la observación en   el triquinoscopio , o al examen en el estereomicroscopio ,   según el caso .     - Los líquidos de digestión deberán   observarse desde el momento en que estén   dispuestos . En ningún caso se podrá   postergar el examen para el día siguiente . Si los   líquidos de digestión no se examinan en el   plazo de 30 minutos siguiente a su preparación ,   se deberán clarificar de la siguiente manera :   verter la muestra final , de aproximadamente 40 ml ,   en una probeta graduada y dejar sedimentar durante   10 minutos . Después de dicho tiempo , quitar 30 ml   del líquido sobrenadante con el fin de obtener   un volumen de 10 ml . Dicho volumen se llevará a   40 ml con agua de grifo . Después de un nuevo   período de reposo de 10 minutos , quitar , por   aspiración , 30 ml del líquido sobrenadante   para obtener un volumen de 10 ml que se examinará   en una placa de Petri , o en una cubeta para   cómputo de larvas . Lavar la probeta graduada con   10 ml de agua de grifo y agregar el líquido   obtenido a la muestra en la placa de Petri , o en   la cubeta para el cómputo de larvas , para su examen .    Si el examen revela que el sedimento no está   claro , se deberá verter la muestra en   una probeta graduada y con agua de grifo se deberá   llevar su volumen a 40 ml . Luego , se aplicará   el método arriba mencionado .    ii ) Grupos de menos de 100 muestras    Eventualmente , se podrán agregar 15 muestras ,   de 1 g cada una , a un grupo de 100 muestras y   se podrán examinar al mismo tiempo que estas   últimas , de acuerdo con el método descrito   en la letra c ) . Se deberán examinar más   de 15 muestras en calidad de grupo completo .   En el caso de grupos que lleguen hasta las 50 muestras ,   los líquidos de digestión se podrán reducir a 1 l .    2 . En caso de resultado positivo o dudoso del   examen de una muestra colectiva , se deberá   tomar una muestra de 20 g de cada cerdo , de acuerdo   con las indicaciones contempladas en la anterior   letra b ) . Las muestras de 20 g procedentes de   5 cerdos se deberán reunir y examinar de   acuerdo con el método arriba descrito . De esta   forma se examinarán las muestras de 20 grupos   de 5 cerdos . Si se detectan las triquinas en un grupo   de muestras de 5 cerdos , se deberán tomar las   muestras de 20 g de cada animal que pertenezca a   dicho grupo y se deberán examinar de acuerdo con el   método arriba descrito » .    B . El apartado 1 del Capítulo 1 del Anexo II   se modificará de la siguiente manera :    1 . La letra b ) se sustituirá por el siguiente   texto :     « b ) de un local de examen suficientemente   equipado , cerrado con llave , ocultable , en el caso   de utilización de un triquinoscopio » .    2 . Se suprimirá la letra f ) ; las letras g ) ,   h ) , i ) , j ) , k ) , l ) , m ) y n ) se   transformarán , respectivamente , en f ) , g ) ,   h ) , i ) , j ) , k ) , l ) y m ) .    3 . La nueva letra g ) se sustituirá por el   siguiente texto :     « g ) de un aseo para la limpieza y   desinfección del material de examen ( por   ejemplo , recipientes de muestras , compresores ,   cuchillos y tijeras ) provisto :     - de un revestimiento de suelo impermeable e   inalterable , fácil de limpiar y desinfectar ,     - de paredes lisas revocadas hasta una altura   mínima de 2 m , con un revestimiento o una pintura   lavable y clara .    Dicha disposición no será obligatoria en caso   de aplicación de los métodos contemplados en   los títulos II , III , IV , V , VI del Anexo I ,   siempre que los laboratorios dispongan de un gran   sumidero conectado con las canalizaciones » .