CELEX: 32015R1833
Language: et
Date: 2015-10-12 00:00:00
Title: Komisjoni rakendusmäärus (EL) 2015/1833, 12. oktoober 2015, millega muudetakse määrust (EMÜ) nr 2568/91 oliiviõlide ja pressimisjääkide omaduste ja asjakohaste analüüsimeetodite kohta

13.10.2015   
            
            
               ET
            
            
               Euroopa Liidu Teataja
            
            
               L 266/29
            
         KOMISJONI RAKENDUSMÄÄRUS (EL) 2015/1833,
   12. oktoober 2015,
   millega muudetakse määrust (EMÜ) nr 2568/91 oliiviõlide ja pressimisjääkide omaduste ja asjakohaste analüüsimeetodite kohta
   EUROOPA KOMISJON,
   võttes arvesse Euroopa Liidu toimimise lepingut,
   võttes arvesse Euroopa Parlamendi ja nõukogu 17. detsembri 2013. aasta määrust (EL) nr 1308/2013, millega kehtestatakse põllumajandustoodete ühine turukorraldus ning millega tunnistatakse kehtetuks nõukogu määrused (EMÜ) nr 922/72, (EMÜ) nr 234/79, (EÜ) nr 1037/2001 ja (EÜ) nr 1234/2007, (1) eriti selle artikli 91 esimese lõigu punkti d ja teist lõiku,
   ning arvestades järgmist:
   
               (1)
            
            
               Komisjoni määruses (EMÜ) nr 2568/91 (2) on määratletud oliiviõli ja oliivijääkõli füüsikalis-keemilised ja organoleptilised omadused ning nende hindamise meetodid. Osutatud meetodeid ajakohastatakse korrapäraselt, toetudes keemiaekspertide arvamustele ja arvestades tööd, mida tehakse rahvusvahelises oliivinõukogus.
            
         
               (2)
            
            
               Rahvusvahelise oliivinõukogu kehtestatud uusimate rahvusvaheliste standardite rakendamise tagamiseks liidu tasandil tuleks määruses (EMÜ) nr 2568/91 sätestatud teatavaid analüüsimeetodeid ajakohastada.
            
         
               (3)
            
            
               Kogemus on näidanud, et oliiviõlis kõrvaliste taimsete õlide avastamise meetod võib põhjustada valepositiivseid tulemusi. Seepärast tuleks viited osutatud meetodile välja jätta.
            
         
               (4)
            
            
               Seetõttu tuleks määrust (EMÜ) nr 2568/91 vastavalt muuta.
            
         
               (5)
            
            
               Käesoleva määrusega ette nähtud meetmed on kooskõlas põllumajandusturgude ühise korralduse komitee arvamusega,
            
         ON VASTU VÕTNUD KÄESOLEVA MÄÄRUSE:
   Artikkel 1
   Määrust (EMÜ) nr 2568/91 muudetakse järgmiselt:
   
               1)
            
            
               artikli 2 lõiget 1 muudetakse järgmiselt:
               
                           a)
                        
                        
                           esimest lõiku muudetakse järgmiselt:
                           
                                       i)
                                    
                                    
                                       punkt g asendatakse järgmisega:
                                       
                                                   „g)
                                                
                                                
                                                   rasvhapete koostis määratakse X lisas sätestatud meetodiga;”;
                                                
                                             
                                 
                                       ii)
                                    
                                    
                                       punkt l asendatakse järgmisega:
                                       
                                                   „l)
                                                
                                                
                                                   alifaatsete alkoholide ja triterpeenalkoholide sisaldus määratakse XIX lisas sätestatud meetodiga;”;
                                                
                                             
                                 
                     
                           b)
                        
                        
                           teine lõik jäetakse välja;
                        
                     
         
               2)
            
            
               lisa kokkuvõtet muudetakse järgmiselt:
               
                           a)
                        
                        
                           viited X A lisale ja X B lisale, sealhulgas nende lisade pealkirjad, asendatakse järgmise viitega:
                           „X lisa. Metüülestrite rasvhapete gaasikromatograafiline määramine”;
                        
                     
                           b)
                        
                        
                           XIX lisa pealkiri asendatakse viites järgmisega:
                           „Alifaatsete alkoholide ja triterpeenalkoholide sisalduse kapillaarkolonnkromatograafiline määramine”;
                        
                     
                           c)
                        
                        
                           viide XXa lisale jäetakse välja;
                        
                     
         
               3)
            
            
               Ib lisa 1. liidet muudetakse vastavalt käesoleva määruse I lisale;
            
         
               4)
            
            
               V lisa muudetakse vastavalt käesoleva määruse II lisale;
            
         
               5)
            
            
               IX lisa asendatakse käesoleva määruse III lisas esitatud tekstiga;
            
         
               6)
            
            
               X A ja X B lisa asendatakse käesoleva määruse IV lisaga;
            
         
               7)
            
            
               XII lisa muudetakse vastavalt käesoleva määruse V lisale;
            
         
               8)
            
            
               XIX lisa muudetakse vastavalt käesoleva määruse VI lisale;
            
         
               9)
            
            
               XXa lisa jäetakse välja.
            
         Artikkel 2
   Käesolev määrus jõustub kolmandal päeval pärast selle avaldamist Euroopa Liidu Teatajas.
   
      Käesolev määrus on tervikuna siduv ja vahetult kohaldatav kõikides liikmesriikides.
      Brüssel, 12. oktoober 2015
      
         
            Komisjoni nimel
         
         
            president
         
         Jean-Claude JUNCKER
      
   
   
      (1)  ELT L 347, 20.12.2013, lk 671.
   
      (2)  Komisjoni määrus (EMÜ) nr 2568/91, 11. juuli 1991, oliiviõlide ja pressimisjääkide omaduste ja asjakohaste analüüsimeetodite kohta (EÜT L 248, 5.9.1991, lk 1).
   
      I LISA
      Määruse (EMÜ) nr 2568/91 Ib lisa 1. liites esitatud vastavustabelit muudetakse järgmiselt.
      
                  1.
               
               
                  Rasvhapete trans-isomeere ja rasvhapete sisaldust käsitlevad read asendatakse järgmisega:
                  
                              
                                          „—
                                       
                                       
                                          Rasvhapete trans-isomeerid
                                       
                                    
                           
                              X lisa
                           
                           
                              Rasvhapete metüülestrite gaasikromatograafiline määramine
                           
                        
                              
                                          —
                                       
                                       
                                          Rasvhapete sisaldus
                                       
                                    
                           
                              X lisa
                           
                           
                              Rasvhapete metüülestrite gaasikromatograafiline määramine”
                           
                        
            
                  2.
               
               
                  Alifaatseid alkohole käsitlev rida asendatakse järgmisega:
                  
                              
                                          „—
                                       
                                       
                                          Alifaatsed alkoholid ja triterpeenalkoholid
                                       
                                    
                           
                              XIX lisa
                           
                           
                              Alifaatsete alkoholide ja triterpeenalkoholide sisalduse kapillaarkolonnkromatograafiline määramine”
                           
                        
            
   
      II LISA
      Määruse (EMÜ) nr 2568/91 V lisa punkt 6.2 asendatakse järgmisega:
      
         
                     „6.2.
                  
                  
                     Iga sterooli protsent arvutatakse vastava piigi pindala ja steroolide piikide kogupindala suhtena:
                     
                        
                     kus:
                     
                                 Ax
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 x'i piigi pindala;
                              
                           
                                 ΣA
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 steroolide piikide kogupindala.”
                              
                           
               
   
   
      III LISA
      
         
            „IX LISA
            
               SPEKTROFOTOMEETRILINE ANALÜÜS ULTRAVIOLETTPIIRKONNAS
            
            EESSÕNA
            Spektrofotomeetriline analüüs ultraviolettpiirkonnas võib anda teavet rasva kvaliteedi, säilivusseisundi ja tehnoloogilistest protsessidest tulenenud muutuste kohta. Käesolevas meetodis osutatud lainepikkustel esinev neeldumine on tingitud konjugeeritud dieen- ja trieensüsteemide olemasolust olenevalt oksüdeerumisprotsessist ja/või rafineerimisviisist. Valguse neeldumine väljendatakse eriekstinktsioonina (1-protsendilise (w/v) rasvalahuse ekstinktsioon teatavas lahustis 10 mm läbimõõduga küvetis), mida tavaliselt tähistatakse K-ga ja nimetatakse ka ekstinktsioonikoefitsiendiks.
            1.   KOHALDAMISALA
            Käesolevas lisas kirjeldatakse oliiviõli spektrofotomeetrilist analüüsi ultraviolettpiirkonnas.
            2.   MEETODI PÕHIMÕTE
            Proov lahustatakse ettenähtud lahustis ja lahuse neeldumist mõõdetakse teatavatel lainepikkustel, kasutades võrdluslahusena puhast lahustit.
            Arvutatakse eriekstinktsioon 232 nm ja 268 nm juures isooktaanis või 232 nm ja 270 nm juures tsükloheksaanis kontsentratsioonil 1 % (mass/maht) küvetis läbimõõduga 10 mm.
            3.   SEADMED
            3.1.   Spektrofotomeeter, mis sobib mõõtmiseks ultraviolettkiirguse lainepikkustel (220–360 nm) ja mis võimaldab tulemusi lugeda ühe nanomeetri täpsusega. Neeldumise ja lainepikkuse skaala täpsust ja korratavust ning hajuvat valgust soovitatakse korrapäraselt kontrollida.
            3.1.1.   Lainepikkuse skaala. Selle kontrollimiseks võib kasutada võrdlusmaterjali, milleks on optilisest klaasist filter, mis sisaldab holmiumoksiidi, või holmiumoksiidi lahus (kinnijoodetud ampullis või lahtiselt), millel on selged neeldumisribad. Võrdlusmaterjal on ette nähtud selliste nähtava ja ultraviolettvalguse spektrofotomeetrite lainepikkuse skaala kontrollimiseks ja kaliibrimiseks, mille spektririba nimilaius on 5 nm või väiksem. Vastavalt viitematerjalides lisatud juhenditele tehakse mõõtmised lainepikkuse vahemikus 640–240 nm, kasutades võrdluseks õhku. Tehakse nulljoone parandi leidmise katse iga pilulaiuse juures; selleks jäetakse valguskiire tee tühjaks. Standardlainepikkused on loetletud võrdlusmaterjali sertifikaadis.
            3.1.2.   Neelduvuse skaala. Kontrollimiseks võib kasutada müügilolevat kinnijoodetud ampullis võrdlusmaterjali, milleks on kaaliumdikromaadi lahused (neli kaaliumdikromaadi lahust perkloorhappes, mis on pandud nelja UV-piirkonnas töötamiseks ettenähtud kvartsküvetti; küvetid on suletud ja nendega mõõdetakse UV-piirkonnas skaala lineaarsust ja määramise fotomeetrilist täpsust), mis on teataval kontsentratsiooniastmel ja sertifikaadile vastava neeldumisväärtusega selle maksimaalsel lainepikkusel (λmax). Mõõdetakse kaaliumdikromaadi lahuseid, võrreldes tühikatsega (tühikatseks on kasutatav happelahus), ja võetakse arvesse nulljoone parandit, nagu on kirjeldatud juhendites, mis on lisatud võrdlusmaterjalile. Neelduvuse väärtused on loetletud võrdlusmaterjali sertifikaadis.
            Muud võimalused fotoelemendi ja fotokordisti tulemuste kontrollimiseks on järgmised: 1 000 ml mõõtekolbi kaalutakse 0,2000 g puhast kaaliumkromaati, see lahustatakse 0,05 N kaaliumhüdroksiidi lahuses ning täidetakse kuni 1 000 ml märgini. Seejärel võetakse 25 ml saadud lahust, kantakse 500 ml mõõtekolbi ning täidetakse sama kaaliumhüdroksiidi lahusega märgini.
            Saadud lahuse ekstinktsioon mõõdetakse 275 nm juures, kasutades võrdluslahusena kaaliumhüdroksiidi lahust. 1 cm küvetiga mõõtmisel peaks ekstinktsioon olema 0,200 ± 0,005.
            3.2.   10 mm optilise teepikkusega risttahukakujulised korgiga kvartsküvetid, mis sobivad mõõtmiseks ultraviolettkiirguse lainepikkusel (220–360 nm). Vee või mõne muu sobiva lahustiga täidetuna ei tohiks küvettide tulemuste erinevus olla suurem kui 0,01 ekstinktsiooniühikut.
            3.3.   Sama kaubamärgi alla kuuluvad A-klassi mõõtekolvid mahuga 25 ml.
            3.4.   Analüütiline kaal, millelt saab andmeid lugeda täpsusega 0,0001 g.
            4.   REAGENDID
            Kui ei ole öeldud teisiti, kasutatakse analüüsi käigus ainult tunnustatud analüütiliselt puhtaid reagente ja demineraliseeritud või destilleeritud või samaväärse puhtusastmega vett.
            Lahusti: isooktaan (2,2,4-trimetüülpentaan) mõõtmiseks 232 nm ja 268 nm juures või tsükloheksaan mõõtmiseks 232 nm ja 270 nm juures, mille neelduvus 10 mm küvetis 232 nm juures on väiksem kui 0,12 ja neelduvus 270 nm juures destilleeritud vee puhul mõõtmisel on väiksem kui 0,05.
            5.   TÖÖ KÄIK
            5.1.   Proov peab olema täiesti homogeenne ja hõljuvate lisanditeta. Kui see nii ei ole, tuleb proov filtreerida läbi paberi temperatuuril ligikaudu 30 °C.
            5.2.   25 ml mõõtekolbi kaalutakse ligikaudu 0,25 g (täpsusega 1 mg) eespool kirjeldatud viisil ettevalmistatud proovi, täidetakse ettenähtud lahustiga kuni märgini ning homogeenitakse. Tekkiv lahus peab olema täiesti selge. Opalestsentsi või hägususe korral tuleb proov kiiresti läbi paberi filtreerida.
            
               MÄRKUS: üldiselt on kaal 0,25–0,30 g piisav neitsioliiviõli ja ekstra-neitsioliiviõli neelduvuse mõõtmiseks 268 nm ja 270 nm juures. Mõõtmiseks 232 nm juures on proovi nõutav kaal üldiselt 0,05 g, seega valmistatakse tavaliselt ette kaks eri lahust. Oliivijääkõli, rafineeritud oliiviõli ja võltsitud oliiviõli neelduvuse mõõtmiseks on nende suurema neeldumise tõttu vaja üldjuhul väiksemat proovi (kaaluga 0,1 g).
            5.3.   Vajaduse korral korrigeeritakse nulljoont (220–290 nm) lahustiga mõlemas kvartsküvetis (proov ja võrdlusmaterjal), seejärel täidetakse proovi kvartsküvett testlahusega ja mõõdetakse ekstinktsioonid vahemikus 232, 268 või 270 nm, võttes võrdluseks kasutatud lahusti.
            Registreeritud ekstinktsiooniväärtused peavad jääma vahemikku 0,1–0,8 või spektrofotomeetri lineaarsusvahemikku, mida tuleks kontrollida. Vastasel korral tuleb mõõtmisi korrata ja kasutada vajaduse korral vähem või rohkem lahjendatud lahuseid.
            5.4.   Pärast neelduvuse mõõtmist lainepikkusel 268 või 270 nm mõõdetakse neelduvus λmax, λmax + 4 ja λmax – 4. Neelduvuse väärtusi kasutatakse selleks, et määrata kindlaks eriekstinktsiooni variatsioon (ΔΚ).
            
               MÄRKUS: lahustina kasutatava isooktaani neelduvus (λmax) peab olema 268 nm ja tsükloheksaani neelduvus 270 nm.
            6.   TULEMUSTE VÄLJENDAMINE
            6.1.   Registreeritakse eriekstinktsioonid (ekstinktsioonikoefitsiendid) eri lainepikkustel, mis arvutatakse järgmise võrrandi alusel:
            
               
            kus:
            
                         
                     
                     
                        Kλ on eriekstinktsioon lainepikkusel λ;
                     
                  
                         
                     
                     
                        Eλ on ekstinktsioon lainepikkusel λ;
                     
                  
                         
                     
                     
                        c on lahuse kontsentratsioon g/100 ml;
                     
                  
                         
                     
                     
                        s on kvartsküveti teepikkus sentimeetrites;
                     
                  väljendatud kahe kümnendkoha täpsusega.
            6.2.   Eriekstinktsiooni (ΔΚ) variatsioon
            Ekstinktsiooni (ΔΚ) absoluutväärtuse variatsioon on esitatud olukorras,
            
               
            kus Km on eriekstinktsioon maksimaalse neeldumise lainepikkusel 270 nm ja 268 nm, sõltuvalt kasutatud lahustist,
            väljendatud kahe kümnendkoha täpsusega.”
         
      
   
   
      IV LISA
      „
            X LISA
            
               RASVHAPETE METÜÜLESTRITE GAASIKROMATOGRAAFILINE MÄÄRAMINE
            
            1.   KOHALDAMISALA
            Käesolevas lisas antakse juhised, kuidas määrata gaasikromatograafiliselt vabu ja seotud rasvhappeid taimses rasvas ja õlis pärast nende teisendamist rasvhapete metüülestriteks (FAME).
            Triatsüülglütseroolide (TAG) seotud rasvhapped ning sõltuvalt esterdusmeetodist vabad rasvhapped (FFA) teisendatakse rasvhapete metüülestriteks, mis määratakse kapillaarkolonnkromatograafiaga.
            Käesolevas lisas kirjeldatud meetod võimaldab määrata rasvhapete metüülestreid vahemikus C12–C24, sealhulgas küllastunud, cis- ja trans-monoküllastumata ning cis- ja trans-polüküllastumata rasvhapete metüülestrid.
            2.   PÕHIMÕTE
            Gaasikromatograafiat kasutatakse rasvhapete metüülestrite kvantitatiivseks analüüsiks. Rasvhapete metüülestrid valmistatakse vastavalt A osale. Seejärel süstitakse need gaasikromatograafi ja aurustatakse injektoris. Rasvhapete metüülestrid eraldatakse konkreetse polaarsuse ja pikkusega analüüsikolonnide abil. Rasvhapete metüülestrite kindlaksmääramiseks kasutatakse leekionisatsioonidetektorit. Analüüsi tingimused on esitatud B osas.
            Rasvhapete metüülestrite kindlaksmääramisel leekionisatsioonidetektoris kasutatav kandegaas (liikuv faas) võib olla vesinik või heelium. Vesinik kiirendab eraldamist ja annab teravamad piigid. Statsionaarne faas on mikroskoopiliselt õhuke kiht tihedat vedelikku kvartsklaasist inertsel tahkel pinnal.
            Kapillaarkolonni läbimisel analüüsitakse lenduvate ühendite ja kolonni sisepinda katva statsionaarse faasi omavahelist suhet. Eri ühendite erineva koosmõju tõttu on nende elueerumisaeg erinev ning seda nimetatakse ühendi peetumisajaks konkreetsetel analüüsiparameetritel. Eri ühendid identifitseeritakse peetumisaegade võrdlemise teel.
            A OSA
            
               RASVHAPETE METÜÜLESTRITE VALMISTAMINE OLIIVIÕLIST JA OLIIVIJÄÄKÕLIST
            
            1.   RAKENDUSALA
            Käesolevas osas esitatakse üksikasjalikult rasvhapete metüülestrite valmistamisviis. Osa sisaldab meetodeid rasvhapete metüülestrite valmistamiseks oliiviõlist ja oliivijääkõlist.
            2.   KOHALDAMISALA
            Rasvhapete metüülestrite valmistamiseks oliiviõlist ja oliivijääkõlist ümberesterdatakse kaaliumhüdroksiid metanoolilahusega toatemperatuuril. Vajadus proovi enne ümberesterdamist puhastada sõltub proovi vabade rasvhapete sisaldusest ja kindlaksmääratavatest analüütilistest parameetritest, vajaduse üle võib otsustada vastavalt järgmisele tabelile:
            
                        Õli kategooria
                     
                     
                        Meetod
                     
                  
                        Neitsioliiviõli happesusega ≤ 2,0 %
                     
                     
                        
                                    1.
                                 
                                 
                                    Rasvhapped
                                 
                              
                                    2.
                                 
                                 
                                    
                                       Trans-rasvhapped
                                 
                              
                                    3.
                                 
                                 
                                    ΔECN42 (pärast puhastamist tahkefaasekstraktsiooni meetodil SPE silikageeliga)
                                 
                              
                  
                        Rafineeritud oliiviõli
                     
                  
                        Rafineeritud õlist ja neitsioliiviõlist koosnev oliiviõli
                     
                  
                        Rafineeritud oliivijääkõli
                     
                  
                        Oliivijääkõli
                     
                  
                        Neitsioliiviõli happesusega > 2,0 %
                        Töötlemata oliivijääkõli
                     
                     
                        
                                    1.
                                 
                                 
                                    Rasvhapped (pärast puhastamist SPE silikageeliga)
                                 
                              
                                    2.
                                 
                                 
                                    Rasvhapped (pärast puhastamist SPE silikageeliga)
                                 
                              
                                    3.
                                 
                                 
                                    ΔECN42 (pärast puhastamist SPE silikageeliga)
                                 
                              
                  3.   METOODIKA
            3.1.   Ümberesterdus kaaliumhüdroksiidi metanoolilahusega toatemperatuuril
            
            3.1.1.   Põhimõte
            
            Metüülestrid tekivad ümberesterdusel kaaliumhüdroksiidi lahusega metanoolis, estrite teke on vaheetapp enne seebistumist.
            3.1.2.   Reagendid
            
            3.1.2.1.   Metanool, mille veesisaldus on kuni 0,5 massiprotsenti.
            3.1.2.2.   Heksaan, kromatograafias kasutamiseks.
            3.1.2.3.   Heptaan, kromatograafias kasutamiseks.
            3.1.2.4.   Dietüüleeter, analüüsiks stabiliseeritud.
            3.1.2.5.   Atsetoon, kromatograafias kasutamiseks.
            3.1.2.6.   Elueerimislahusti õli puhastamiseks kolonnkromatograafia/SPE-kromatograafia abil: heksaani ja etüüleetri segu komponentide suhtega 87/13 (v/v).
            3.1.2.7.   Kaaliumhüdroksiid, ligikaudu 2M metanoolilahus: 100 ml metanoolis lahustatakse 11,2 g kaaliumhüdroksiidi.
            3.1.2.8.   Silikageelpadrunid, 1 g (6 ml), tahkefaasekstraktsiooni jaoks.
            3.1.3.   Seadmed
            
            3.1.3.1.   Keeratava korgiga 5 ml katseklaasid, mille korgid on varustatud teflontihendiga.
            3.1.3.2.   Mõõtpipetid või automaatpipetid, 2 ml ja 0,2 ml.
            3.1.4.   Õliproovide puhastamine
            
            Vajaduse korral puhastatakse proove õli juhtimisega läbi tahkefaasiekstraktsiooni silikageeli padruni. Silikageeli padrun (3.1.2.8) pannakse vaakumvoolutusseadmesse ja pestakse 6 ml heksaaniga (3.1.2.2); pesemine toimub ilma vaakumita. Seejärel kantakse õlilahus (ligikaudu 0,12 g) 0,5 ml heksaanis (3.1.2.2) kolonnile. Lahus imetakse kolonni sisse ja eludeeritakse siis vaakumit kasutades 10 ml heksaani-dietüüleetri seguga vahekorras 87:13 mahuosa (3.1.2.6). Ühendatud eluaadid homogeniseeritakse ja jagatakse võrdselt kaheks. Üks alikvoot aurutatakse rotaatoril vaakumis toatemperatuuril kuivaks. Jääk lahustatakse 1 ml heptaanis ja saadakse valmis lahus rasvhapete määramiseks gaasikromatograafia meetodil. Teine alikvoot aurutatakse kuivaks ja jääk lahustatakse 1 ml atsetoonis triglütseriidide määramiseks HPLC abil, kui see on vajalik.
            3.1.5.   Töö käik
            
            5 ml keeratava korgiga katseklaasis (3.1.3.1) kaalutakse umbes 0,1 g õliproovi. Lisatakse 2 ml heptaani (3.1.2.2) ja loksutatakse. Lisatakse 0,2 ml kaaliumhüdroksiidi lahust metanoolis (3.1.2.7), suletakse teflontihendiga varustatud keeratava korgiga, keeratakse kork tugevasti kinni ja loksutatakse tugevalt 30 sekundit. Jäetakse kihistuma, kuni ülemine lahus muutub selgeks. Ülemine, metüülestreid sisaldav kiht kallatakse pealt ära. Heptaanilahus on valmis gaasikromatograafi süstimiseks. Kuni gaasikromatograafilise analüüsi tegemiseni soovitatakse lahust hoida külmkapis. Lahust ei ole soovitatav hoida kauem kui 12 tundi.
            B OSA
            
               RASVHAPETE METÜÜLESTRITE GAASIKROMATOGRAAFILINE ANALÜÜS
            
            1.   RAKENDUSALA
            Käesolevas osas antakse üldjuhised kapillaarkolonnkromatograafia kohaldamiseks A osas kehtestatud meetodil saadud rasvhapete metüülestrite segu kvalitatiivse ja kvantitatiivse koostise kindlakstegemisel.
            Käesolevat osa ei kohaldata polümeriseeritud rasvhapete suhtes.
            2.   REAGENDID
            2.1.   Kandegaas
            
            Inertgaas (heelium või vesinik), põhjalikult kuivatatud ja hapnikusisaldusega kuni 10 mg/kg.
            
                        
                           Märkus 1:
                        
                     
                     
                        vesinik võib analüüsi kiirust kahekordistada, kuid on ohtlik. Saadaval on ohutusseadmed.
                     
                  2.2.   Abigaasid
            
            2.2.1.   Vesinik (puhtus ≥ 99,9 %), orgaaniliste lisanditeta.
            2.2.2.   Õhk või hapnik, orgaaniliste lisanditeta.
            2.2.3.   Lämmastik (puhtus > 99 %).
            2.3.   Võrdlusstandard
            
            Puhaste rasvhapete metüülestrite segu või teadaoleva, eelistatult analüüsitava rasvainega samaväärse koostisega rasva metüülestrid. Oktadekeenhappe, oktadekadieenhappe ja oktadekatrieenhappe metüülestrite cis- ja trans-isomeerid aitavad kindlaks teha küllastumata hapete trans-isomeere.
            Tuleks tagada, et polüküllastumata rasvhapped ei oksüdeeruks.
            3.   SEADMED
            Käesolevad juhendid hõlmavad tavapäraseid gaasikromatograafia seadmeid, kus kasutatakse kapillaarkolonne ja leekionisatsioonidetektorit.
            3.1.   Gaasikromatograaf
            
            Gaasikromatograaf koosneb järgmistest osadest.
            3.1.1.   Injektorseade
            
            Kasutada tuleb kapillaarkolonnidega injektorseadet, mis peab olema spetsiaalselt ette nähtud selliste kolonnide kasutamiseks. See võib olla jaotatud või jaotamata vooluga injektor.
            3.1.2.   Ahi
            
            Kapillaarkolonni peab olema võimalik ahjus kuumutada vähemalt temperatuurini 260 °C ning ahi peab soovitud temperatuuri hoidma 0,1 °C täpsusega. Viimane nõue on eriti oluline juhul, kui kasutatakse kvartsklaasist kolonni.
            Temperatuuriregulaatoriga kuumutamine on kõikidel juhtudel soovitav, eelkõige rasvhapete puhul, millel on vähem kui 16 süsinikuaatomit.
            3.1.3.   Kapillaarkolonn
            
            3.1.3.1.   Katseklaas, mis on valmistatud analüüsitava ainega inertsest materjalist (tavaliselt klaas või kvartsklaas). Sisediameeter on 0,20–0,32 mm. Sisekülge tuleb enne statsionaarse faasi kihiga katmist nõuetekohaselt töödelda (nt pinna ettevalmistamine, inaktiveerimine). Pikkus 60 m on rasvhapete ja rasvhapete trans-isomeeride jaoks piisav.
            3.1.3.2.   Statsionaarne faas, sobivad polaar-polüsiloksaani (tsüanopropüülsilikoon) seotud (võrkstruktuuriga) kolonnid.
            
                        
                           Märkus 2:
                        
                     
                     
                        polaar-polüsiloksaanid võivad raskendada linoleenhappe ja C20 hapete identifitseerimist ja eraldamist.
                     
                  Kiht peab olema õhuke, st 0,1–0,2 μm.
            3.1.3.3.   Kolonni monteerimine ja tasakaalustamine
            Järgitakse kapillaarkolonnide tavapäraseid ettevaatusabinõusid: kolonni asetus ahjus (tugirajatised), liitekohtade valik ja paigaldus (lekkekindlus), kolonni otste asetus injektoris ja detektoris (võimalikult vähe tühja ruumi). Läbi kolonni juhitakse kandegaas (nt 0,3 baari (30 kPa) läbi 25 m pikkuse ja 0,3 mm sisediameetriga kolonni).
            Kolonn tasakaalustatakse ahju reguleerides selliselt, et temperatuur tõuseb ümbritseva õhu temperatuurilt 3 °C minutis, saavutades sellise temperatuuri, mis on 10 °C madalam kui statsionaarse faasi hajumistemperatuur. Ahju hoitakse sellisel temperatuuril tund aega, kuni nulljoon stabiliseerub. Temperatuuri alandatakse taas tagasi 180 °C-le ja katset jätkatakse isotermilistel tingimustel.
            
                        
                           Märkus 3:
                        
                     
                     
                        nõuetekohaselt tasakaalustatud kolonnid on kaubandusvõrgus müügil.
                     
                  3.1.4.   Leekionisatsioondetektor ja muundurvõimendi
            
            3.2.   Süstal
            
            Süstla ülemine mõõtepiir on 10 μl ning mõõtskaala on jagatud 0,1-mikroliitristeks ühikuteks.
            3.3.   Andmekogumissüsteem
            
            Andmekogumissüsteem on internetipõhiselt ühendatud detektoritega ja seda kasutatakse piikide integreerimiseks ja normaliseerimiseks sobiva tarkvaraprogrammiga.
            4.   TÖÖ KÄIK
            Punktides 4.1–4.3 kirjeldatud toimingud eeldavad leekionisatsioonidetektori kasutamist.
            4.1.   Katsetingimused
            
            4.1.1.   Kapillaarkolonni jaoks vajalike optimaalsete töötingimuste valik
            
            Kapillaarkolonni tõhusus- ja täituvusomadused tingivad selle, et koostisosade eraldamine ja analüüsi kestus sõltuvad suuresti kandegaasi voolukiirusest kolonnis. Seetõttu on vaja töötingimusi optimeerida, muutes seda parameetrit (ehk lihtsalt kolonnipead vähendades) sõltuvalt sellest, kas soovitakse tõhustada eraldamist või kiirendada analüüsi.
            Rasvhapete metüülestrite (C4–C26) eraldamiseks on osutunud sobivaks järgmised tingimused. Kromatogrammide näidised on esitatud B liites.
            
                        Injektori temperatuur:
                     
                     
                        250 °C
                     
                  
                        Detektori temperatuur:
                     
                     
                        250 °C
                     
                  
                        Ahju temperatuur:
                     
                     
                        165 °C (8 min) kuni 210 °C temperatuuri tõusuga 2 °C/min
                     
                  
                        Kandegaas vesinik:
                     
                     
                        kolonnipea rõhk: 179 kPa
                     
                  
                        Koguvool:
                     
                     
                        154,0 ml/min;
                     
                  
                        Jaotatud voolu suhe:
                     
                     
                        1:100
                     
                  
                        Sissesüstitav ruumala:
                     
                     
                        1 μl
                     
                  4.1.2.   Resolutsiooni määramine (vt A liide)
            
            Kahe külgneva piigi (I ja II) resolutsioon (R) arvutatakse järgmise valemi abil:
            
               R = 2 × ((dr
               
               (
               
                  II
               
               ) – d
               r(I))/(ω(I) + ω(II))) või R = 2 × ((tr
               
               (
               
                  II
               
               ) – t
               r(I))/(ω(I) + ω(II))) (USP) (USA farmakopöa)
            või
            
               R = 1,18 × ((tr
               
               (
               
                  II
               
               ) – tr(I))/(ω0,5(I) + ω0,5(II))) (EP, BP, JP, DAB), (JP (Jaapani farmakopöa), EP (Euroopa farmakopöa), BP (Briti farmakopöa))
            kus:
            
                        
                           d
                           r(I)
                        
                     
                     
                        I piigi peetumisdistants;
                     
                  
                        
                           d
                           r(II)
                        
                     
                     
                        II piigi peetumisdistants;
                     
                  
                        
                           t
                           r(I)
                        
                     
                     
                        I piigi peetumisaeg;
                     
                  
                        
                           t
                           r(II)
                        
                     
                     
                        II piigi peetumisaeg;
                     
                  
                        ω(I)
                        
                     
                     
                        I piigi laius nulljoonel;
                     
                  
                        ω(II)
                        
                     
                     
                        II piigi laius nulljoonel;
                     
                  
                        ω0,5
                        
                     
                     
                        konkreetse ühendi piigi laius, piigi poolel kõrgusel;
                     
                  kui ω(I) ≈ ω(II), arvutatakse R järgmiste valemite abil:
            
               R = (dr
               
               (
               
                  II
               
               ) – d
               r(I))/ω = (dr
               
               (
               
                  II
               
               ) – d
               r(I))/4σ
            kus:
            σ on standardhälve (vt A liide joonis 1).
            Kui kahe piigi vaheline distants d
               r(II) – d
               r(I) võrdub 4σ, siis resolutsioonfaktor R = 1.
            Kui kaks piiki ei ole täiesti eraldi, lõikuvad kahe piigi käänupunkti tõmmatud puutujad punktis C. Selleks et kahte piiki täielikult eraldada, peab kahe piigi vaheline kaugus olema järgmine:
            
               d
               r(II) – d
               r(I) = 6 σ millest R = 1,5 (vt A liide joonis 3).
            5.   TULEMUSTE VÄLJENDAMINE
            5.1.   Kvalitatiivne analüüs
            
            B liite joonise 1 kohase kromatogrammiga saadud proovi metüülestripiigid määratakse vajaduse korral interpolatsiooni abil või nende võrdlemise teel punktis 2.3 osutatud metüülestrite võrdlussegude piikidega.
            5.2.   Kvantitatiivne analüüs
            
            5.2.1.   Koostise määramine
            
            Arvutada järgmisel viisil üksikute rasvhapete metüülestrite massiosa wi väljendatuna metüülestrite massiprotsendina.
            5.2.2.   Arvutusmeetod
            
            5.2.2.1.   Üldiselt
            Teatava komponendi i sisaldus väljendatuna metüülestrite massiprotsendina arvutatakse selliselt, et määratakse piigipindala suhteline osa kõikide piikide pindalast järgmise valemi alusel.
            wi = (Ai/ΣA) × 100
            kus:
            
                         
                     
                     
                        Ai on üksikute rasvhapete metüülestrite i piigipindala;
                     
                  
                         
                     
                     
                        ΣA on kõikide üksikute rasvhapete metüülestrite piigipindalade summa.
                     
                  Tulemused väljendatakse kahe kümnendkoha täpsusega.
            
                        
                           Märkus 4:
                        
                     
                     
                        rasvade ja õlide puhul võrdub rasvhapete metüülestrite massiosa triatsüülglütseroolide massiosaga grammides 100 g kohta. Kui seda üldistust ei saa kohaldada, vt punkti 5.2.2.2.
                     
                  5.2.2.2.   Parandustegurite kasutamine
            Teatavatel juhtudel, näiteks kui rasvhapetes on vähem kui kaheksa süsinikuaatomit või kui happes on sekundaarsed rühmad, tuleks piigipindalad korrigeerida kindla parandusteguriga (Fci). Parandustegur tuleb iga üksikjuhu puhul kindlaks määrata. Selleks tuleks kasutada sobivaid võrdlusmaterjale, mille vastavate vahemike rasvhapete koostis on sertifitseeritud.
            
                        
                           Märkus 5:
                        
                     
                     
                        need parandustegurid ei ole samad mis teoreetilised leekionisatsioonidetektori parandustegurid, mis on esitatud A liites, vaid hõlmavad ka injektorseadme toimimist jne. Suuremate erinevuste esinemisel tuleb siiski kontrollida kogu süsteemi toimimist.
                     
                  Selle võrdlussegu puhul määratakse rasvhapete metüülestrite massiprotsent i järgmise valemiga:
            
               wi
                = (mi
                /Σm) × 100
            kus:
            
                         
                     
                     
                        m
                              i
                            on rasvhapete metüülestrite mass i võrdlussegus;
                     
                  
                         
                     
                     
                        Σm on erinevate komponentide üldmass kui rasvhapete metüülestrite võrdlussegu.
                     
                  Võrdlussegu kromatogrammi alusel arvutatakse rasvhapete metüülestrite pindala protsent i järgmiselt:
            wi = (Ai/ΣA) × 100
            kus:
            
                         
                     
                     
                        Ai on rasvhapete metüülestrite pindala i võrdlussegus;
                     
                  
                         
                     
                     
                        ΣA on kõikide rasvhapete metüülestrite pindalade summa võrdlussegus.
                     
                  Parandustegur Fc on seega
            Fc = (mi × ΣA)/(Ai/Σm)
            Proovi iga rasvhappe metüülestri massiprotsent i on:
            wi = (Fi × Ai)/Σ (Fi × Ai)
            Tulemused väljendatakse kahe kümnendkoha täpsusega.
            
                        
                           Märkus 6:
                        
                     
                     
                        arvutatud väärtus vastab iga üksiku rasvhappe massiprotsendile, mis on arvutatud kui triatsüülglütseroolid 100 grammi rasva kohta.
                     
                  5.2.2.3.   Sisestandardi kasutamine
            Teatavate analüüside puhul (nt kui kõikide rasvhapete määr ei ole teada, juhul kui nelja ja kuue süsinikuaatomiga hapete kõrval esinevad ka 16 ja 18 süsinikuaatomiga happed, või kui on vaja määrata proovis olevate rasvhapete absoluutsumma) on vaja kasutada sisestandardit. Sageli kasutatakse 5, 15 või 17 süsinikuaatomiga rasvhappeid. Tuleks kindlaks määrata sisestandardi parandustegur (juhul kui see on vajalik).
            Komponendi i massiprotsent väljendatuna metüülestritena arvutatakse valemiga:
            
               wi
                = (mIS × Fi × Ai)/(m × FIS × AIS)
            kus:
            
                         
                     
                     
                        A
                              i
                            on rasvhapete metüülestrite pindala i;
                     
                  
                         
                     
                     
                        A
                              IS
                            on sisestandardi pindala;
                     
                  
                         
                     
                     
                        F
                              i
                            on rasvhapete parandustegur i, väljendatud rasvhapete metüülestritena;
                     
                  
                         
                     
                     
                        F
                              IS
                            on sisestandardi parandustegur;
                     
                  
                         
                     
                     
                        m on katsekoguse mass milligrammides;
                     
                  
                         
                     
                     
                        m
                              IS
                            sisestandardi mass milligrammides.
                     
                  Tulemused väljendatakse kahe kümnendkoha täpsusega.
            6.   KATSEARUANNE
            Katsearuandesse märgitakse metüülestrite valmistamisel ja gaasikromatograafilisel analüüsimisel kasutatud meetodid. Selles märgitakse samuti kõik üksikasjad, mida ei ole nimetatud käesolevas standardmeetodis või mis on valikulised, samuti üksikasjad tulemust mõjutada võinud asjaolude kohta.
            Katsearuandes peavad olema kõik proovi täielikuks tuvastamiseks vajalikud andmeid.
            7.   TÄPSUS
            7.1.   Laboritevahelise katse tulemused
            
            Üksikasjad laboritevahelise katse meetodi täpsuse kohta on esitatud standardi IOC/T.20/Doc. nr 33 C lisas. Laboritevahelise katse põhjal saadud näitajaid tohib kohaldada üksnes esitatud kontsentratsioonivahemike ja põhiainete suhtes.
            7.2.   Korduvus
            
            Absoluutne erinevus kahe sõltumatu üksikkatse (teostatud lühikese ajavahemiku jooksul samal meetodil, identse katsematerjaliga, samas laboris, sama teostaja poolt, samu katseseadmeid kasutades) tulemuste vahel võib üksnes 5 % juhtudest olla suurem kui r, mis on esitatud standardi IOC/T.20/Doc. nr 33 C lisa tabelites 1–14.
            7.3.   Korratavus
            
            Absoluutne erinevus kahe üksikkatse (teostatud samal meetodil, identse katsematerjaliga, eri laborites, eri teostaja poolt, eri katseseadmeid kasutades) tulemuste vahe võib üksnes 5 % juhtudest olla suurem kui R, mis on esitatud standardi IOC/T.20/Doc. nr 33 C lisa tabelites 1–14.
            
               A liide
               
                  Joonis 1
               
               
                  
               ω0,5 on laius kolmnurga (ABC) poolel kõrgusel ja b laius kolmnurga (NPM) poolel kõrgusel.
               
                           
                              Joonis 2
                           
                        
                        
                           
                              Joonis 3
                           
                        
                     
                           
                              
                        
                        
                           
                              
                        
                     
            
               B liide
               
                  Joonis 1
               
               
                  Oliivijääkõli koostise gaasikromatograafiline määramine külmmetüleerimise meetodi abil
               
               Kromatograafilised piigid vastavad metüül- ja etüülestritele, kui ei ole öeldud teisiti.
            
         ”
   
   
      V LISA
      Määruse (EMÜ) nr 2568/91 XII lisa muudetakse järgmiselt.
      
                  1)
               
               
                  Punkt 1 asendatakse järgmisega:
                  „1.   EESMÄRK JA KOHALDAMISALA
                  Käesolevas lisas kirjeldatud rahvusvahelise meetodi eesmärk on kehtestada kord, kuidas hinnata neitsioliiviõlide organoleptilisi omadusi Euroopa Parlamendi ja nõukogu määruse (EL) nr 1308/2013 (1) VII lisa VIII osa punkti 1 tähenduses ning määrata kindlaks metoodika, mille järgi oliiviõlisid klassifitseeritakse osutatud omaduste põhjal. Metoodika hõlmab ühtlasi juhiseid valikuliseks märgistamiseks.
                  Kirjeldatud meetodit kohaldatakse ainult neitsioliiviõlide puhul, nende klassifitseerimisel või märgistamisel, võttes arvesse täheldatud puuduste intensiivsust, samuti puuviljalisust, mille on kindlaks määranud valitud, koolitatud ja testitud degustaatorite rühm (hindamiskomisjon).
                  Käesolevas lisas nimetatud rahvusvahelise oliivinõukogu standardite puhul kasutatakse nende viimast versiooni.
                  
                     (1)  Euroopa Parlamendi ja nõukogu määrus (EL) nr 1308/2013, 17. detsember 2013, millega kehtestatakse põllumajandustoodete ühine turukorraldus ning millega tunnistatakse kehtetuks nõukogu määrused (EMÜ) nr 922/72, (EMÜ) nr 234/79, (EÜ) nr 1037/2001 ja (EÜ) nr 1234/2007 (ELT L 347, 20.12.2013, lk 671).”"
						
               
            
                  2)
               
               
                  Punktid 3.2, 3.3 ja 3.4 asendatakse järgmisega:
                  „3.1.1.   Muud negatiivsed tunnused
                  
                  
                              
                                 Kuumutatud või kõrbenud
                              
                           
                           
                              Iseloomulik maitse ja lõhn, mille põhjuseks on ülemäärane ja/või pikaajaline kuumutamine tootmise ajal, eelkõige pasta kuumsegamine ebasobival temperatuuril.
                           
                        
                              
                                 Heinane-puune
                              
                           
                           
                              Iseloomulik maitse ja lõhn kuivatatud oliividest toodetud õlide puhul.
                           
                        
                              
                                 Tihke
                              
                           
                           
                              Teatavate vanade õlide puhul suus tekkiv paks, pastat meenutav puuteaisting.
                           
                        
                              
                                 Määrdeainene
                              
                           
                           
                              Diislikütust, määret või mineraalõli meenutav maitse ja lõhn.
                           
                        
                              
                                 Taim mahlane
                              
                           
                           
                              Iseloomulik maitse õlide puhul, mis on olnud kaua kokkupuutes viljadest pressimisel eraldunud käärinud taimemahlaga.
                           
                        
                              
                                 Soolveene
                              
                           
                           
                              Soolvees säilitatud oliividest toodetud õlide maitse ja lõhn.
                           
                        
                              
                                 Metalline
                              
                           
                           
                              Maitse, mis meenutab metalli. See on iseloomulik õlidele, mis on olnud purustamise, segamise, pressimise või säilitamise ajal kaua kokkupuutes metallpindadega.
                           
                        
                              
                                 Espartone
                              
                           
                           
                              Iseloomulik maitse õli puhul, mis on saadud uutes espartomattides pressitud oliividest. Maitse võib erineda sõltuvalt sellest, kas matid on valmistatud haljast või kuivatatud espartost.
                           
                        
                              
                                 Tõugumaitse
                              
                           
                           
                              Iseloomulik maitse õli puhul, mis on saadud oliivikärbse (Bactrocera oleae) tõukude poolt kõvasti kahjustatud oliividest.
                           
                        
                              
                                 Kurgimaitse
                              
                           
                           
                              Maitse, mis tekib siis, kui õli on liiga kaua olnud hermeetiliselt pakendatud, eelkõige plekkpurkides, seda maitset seostatakse 2,6-nonadienaali tekkimisega.
                           
                        3.2.   Positiivsed tunnused
                  
                  
                              
                                 Puuviljaline
                              
                           
                           
                              Õlile iseloomulik haistmisaistingute kogum, mis sõltub õli sordist ja tekib, kui oliivid on olnud veatud ja värsked, kas küpsed või toored. Seda tuntakse otse ja/või retronasaalselt.
                           
                        
                              
                                 Mõru
                              
                           
                           
                              Iseloomulik esmane maitse õlide puhul, mis on valmistatud rohelistest oliividest või parajasti värvi muutvatest oliividest. Seda tuntakse keele V-piirkonnas asuvate keelenäsade kaudu.
                           
                        
                              
                                 Terav
                              
                           
                           
                              Torkavusaisting, mis on iseloomulik viljelusaasta alguses peamiselt veel rohelistest oliividest toodetud õlidele. Seda võib tunda kogu suus ja eriti kurgus.
                           
                        3.3.   Märgistamiseks vajalik valikuline terminoloogia
                  
                  Nõudmise korral võib hindamiskomisjoni esimees tõendada, et hinnatud õlid vastavad mõistetele ja väljendites esitatud vahemikele ning tunnuste intensiivsuste ja nende tajumist märkivatele omadussõnadele.
                  Positiivsed tunnused (puuviljaline, mõru ja terav): vastavalt tajumise intensiivsusele:
                  
                              —
                           
                           
                              
                                 intensiivne, kui tunnuse mediaan on suurem kui 6;
                           
                        
                              —
                           
                           
                              
                                 keskmine, kui tunnuse mediaan on 3–6;
                           
                        
                              —
                           
                           
                              
                                 kerge, kui tunnuse mediaan on väiksem kui 3.
                           
                        
                              
                                 Puuviljaline
                              
                           
                           
                              Õlile iseloomulik haistmisaistingute kogum, mis sõltub oliivisordist ja tekib, kui oliivid on olnud veatud ja värsked, ja milles ei domineeri ei roheline ega küps puuviljalisus. Seda tuntakse otse ja/või retronasaalselt.
                           
                        
                              
                                 Rohekas puuviljaline
                              
                           
                           
                              Õlile iseloomulik haistmisaistingute kogum, meenutab rohelisi puuvilju, sõltub oliivisordist ja tekib, kui oliivid on olnud rohelised, veatud ja värsked. Seda tuntakse otse ja/või retronasaalselt.
                           
                        
                              
                                 Küps puuviljaline
                              
                           
                           
                              Õlile iseloomulik haistmisaistingute kogum, meenutab küpseid puuvilju, sõltub oliivisordist ja tekib, kui oliivid on olnud veatud ja värsked. Seda tuntakse otse ja/või retronasaalselt.
                           
                        
                              
                                 Hästi tasakaalus
                              
                           
                           
                              Õli, mis ei ole tasakaalust väljas; selle all mõistetakse haistmis-, maitse- ja puuteaistingut, mille puhul mõru ja/või terava tunnuse mediaan on kahe punkti võrra kõrgem kui puuviljalisuse mediaan.
                           
                        
                              
                                 Mahe õli
                              
                           
                           
                              Õli, mille puhul mõru ja terava tunnuse mediaan on kuni 2.”
                           
                        
            
                  3)
               
               
                  Punktis 7 lisatakse alapunkti 7.1 järele järgmine alapunkt:
                  „7.1.1.   Hindamiskomisjoni juhataja asetäitja
                  
                  Hindamiskomisjoni juhatajat võib põhjendatud juhtudel asendada hindamiskomisjoni juhataja asetäitja, kes võib täita katsete tegemisega seotud kohustusi. Asetäitjal peavad olema kõik vajalikud oskused, mis on nõutavad hindamiskomisjoni juhataja puhul.”
               
            
                  4)
               
               
                  Punkt 7.2 asendatakse järgmisega:
                  „7.2.   Degusteerijad
                  
                  Oliiviõli organoleptilises analüüsis osalevad degusteerijad peavad tegema seda vabatahtlikult. Seepärast on soovitatav, et kandidaadid esitaksid kirjaliku avalduse. Hindamiskomisjoni juhataja valib kandidaadid, koolitab neid ja jälgib nende oskust eristada sarnaseid proove; tuleb arvestada, et eristamise täpsus suureneb koolitamisega.
                  Degusteerijad peavad tegutsema nagu tõelised organoleptilised vaatlejad, jätma kõrvale isiklikud maitse-eelistused ja teatama üksnes, milliseid aistinguid nad tajuvad. Selleks peavad nad alati töötama vaikuses, pingevabas õhkkonnas, kiirustamata, suunates kogu oma tähelepanu proovile, mida nad degusteerivad.
                  Katse tegemiseks on vaja 8–12 degusteerijat, kuid võimalike puudumiste puhuks oleks hea, kui on ka paar varudegusteerijat.”
               
            
                  5)
               
               
                  9.3 asendatakse järgmisega:
                  „9.3.   Andmete kasutamine hindamiskomisjoni juhataja poolt
                  
                  Hindamiskomisjoni juhataja kogub kokku kõigi degusteerijate täidetud profiililehed ja kontrollib eri tunnustele omistatud intensiivsusastmeid. Kui ta leiab midagi ebanormaalset, palub ta degusteerijal oma profiilileht üle vaadata ja hindamist korrata, kui see on vajalik.
                  Hindamiskomisjoni juhataja sisestab iga komisjoniliikme hindamisandmed arvutiprogrammi, mis vastab ettenähtud standardile IOC/t.20/Doc. nr 15, et tulemusi statistiliselt töödelda, mille aluseks on tulemuste mediaani arvutamine. Vt punkt 9.4 ja käesoleva lisa liide. Proovi andmed kantakse maatriksisse, millel on üheksa veergu, mis vastavad üheksale organoleptilisele tunnusele, ja n rida, mis vastavad komisjoni liikmete arvule n.
                  Kui on märgatud puudust ja vähemalt 50 % komisjoniliikmetest on kandnud selle pealkirja „Muud” alla, arvutab hindamiskomisjoni juhataja puuduse mediaani ja leiab selle alusel klassifikatsiooni.
                  Robustse variatsioonikordaja väärtus, mille alusel määratakse klassifikatsioon (suurima intensiivsusega puudus ja puuviljalisuse tunnus), ei tohi olla üle 20 %.
                  Vastupidisel juhul peab hindamiskomisjoni juhataja kordama konkreetsete proovide hindamist muul degusteerimissessioonil.
                  Kui selline olukord tekib sageli, soovitatakse hindamiskomisjoni juhatajal korraldada degusteerijatele täiendav koolitus selle kohta (IOC/T.20/Doc. nr 14, § 5) ning hinnata komisjoni tööd korratavusnäitaja ja kõrvalekaldenäitaja alusel (IOC/T.20/Doc. nr 14, § 6).”
               
            
                  6)
               
               
                  Punkt 9.4 asendatakse järgmisega:
                  „9.4.   Õli klassifitseerimine
                  
                  Õli klassifitseeritakse puuduste mediaani ja puuviljalisuse mediaani põhjal järgnevalt esitatud kategooriatesse. Puuduste mediaani käsitatakse suurima intensiivsusega tajutud puuduse mediaanina. Puuduste mediaan ja puuviljalisuse mediaan väljendatakse ühe kümnendkoha täpsusega.
                  Õli klassifitseerimisel võrreldakse puuduste mediaani ja puuviljalisuse mediaani väärtust järgmiste osutatud etalonvahemike suhtes. Kõnealuste vahemike piirid on kindlaks määratud meetodi viga arvesse võttes ning neid loetakse seepärast absoluutseteks. Arvutitarkvara võimaldab klassifikatsiooni esitada statistikaandmete tabelina või graafiliselt.
                  
                              a)
                           
                           
                              Ekstra-neitsioliiviõli: puuduste mediaan on 0 ja puuviljalisuse mediaan on suurem kui 0.
                           
                        
                              b)
                           
                           
                              Neitsioliiviõli: puuduste mediaan on suurem kui 0, kuid mitte üle 3,5, ja puuviljalisuse mediaan on suurem kui 0.
                           
                        
                              c)
                           
                           
                              Lambiõli: puuduste mediaan on üle 3,5 või puuduste mediaan on kuni 3,5 ning puuviljalisuse mediaan on 0.
                           
                        
                              
                                 Märkus 1:
                              
                           
                           
                              kui mõruduse ja/või teravuse mediaan on suurem kui 5,0, märgib hindamiskomisjoni juhataja seda degusteerimise kohta antavas sertifikaadis.
                           
                        Vastavuse kontrollimiseks tehtud hindamiste puhul tehakse proov. Vasturääkivustega hindamiste puhul korraldab hindamiskomisjoni juhataja õli organoleptilise hindamise kaks korda erinevate seansside jooksul. Tunnuste mediaani arvutamisel võetakse aluseks mõlema katse profiililehe andmed.”
               
            
                  7)
               
               
                  Joonis 1 asendatakse järgmisega:
                  
                     „Joonis 1
                  
                  
                     NEITSIOLIIVIÕLI PROFIILILEHT
                  
                  
                              
                                 Puuduste tajumise intensiivsus
                              
                           
                        
                              Kopitanud/settene
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Hallitanud/niiske/mullane
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Veinine/äädikane
                              Hapu/kibehapu
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Külmavõetud oliivid
                              (niiske puu)
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Räästunud
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Muud negatiivsed tunnused:
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Märksõna
                           
                           
                              Metalline ☐ Heinane ☐ Tõugumaitse ☐ Tihke ☐
                              Soolveene ☐ Kuumutatud või kõrbenud ☐ Taimemahlane ☐
                              Espartone ☐ Kurgimaitseline ☐ Määrdeainene ☐
                           
                        
                              
                                 Positiivsete omaduste tajumise intensiivsus
                              
                           
                        
                              Puuviljaline
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                               
                           
                           
                              Roheline ☐
                           
                           
                              Küps ☐
                           
                        
                              Mõru
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Terav
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                               
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Degusteerija nimi:
                           
                           
                               
                           
                           
                              Degusteerija kood:
                           
                        
                              Proovi kood:
                           
                           
                              Allkiri:
                           
                        
                              Kuupäev:
                           
                        
                              Märkused:”
                           
                        
            
   
      VI LISA
      Määruse (EMÜ) nr 2568/91 XIX lisa muudetakse järgmiselt:
      
                  1)
               
               
                  Pealkiri asendatakse järgmisega:
                  
                     „Alifaatsete alkoholide ja triterpeenalkoholide sisalduse kapillaarkolonnkromatograafiline määramine”
                  
               
            
                  2)
               
               
                  Punkt 1 asendatakse järgmisega:
                  „1.   SISU
                  Käesolevas lisas kirjeldatakse alifaatsete alkoholide ja triterpeenalkoholide sisalduse määramist õlides ja rasvades.”
               
            
                  3)
               
               
                  Punkt 4.11 asendatakse järgmisega:
                  
                              „4.11.
                           
                           
                              Võrdluslahus õhukese kihi kromatograafia jaoks: C20–C28 alkoholid 0,5 % kloroformis, või alkoholide fraktsioon, mis on saadud punkti 5.2 kohaselt oliivijääkõli seebistumatust ainest.”
                           
                        
            
                  4)
               
               
                  Punktid 5.2.5 ja 5.2.6 asendatakse järgmisega:
                  
                              „5.2.5.
                           
                           
                              Plaadile pihustatakse ettevaatlikult ja ühtlaselt 2′,7′-diklorofluorestseiini lahust, kui plaati vaadeldakse ultraviolettlambi all. Alifaatsete alkoholide vööndid võib määrata vastavalt nende asendile, mida võrreldakse võrdluslahuse lahutamisel tekkinud vöönditega: vööndite piirjooned joonistatakse üle musta pliiatsiga, kusjuures alifaatsete alkoholide vöönd ja otse selle kohal asuv terpeenalkoholide vöönd arvestatakse üheks vööndiks (märkus 4).
                              
                                          
                                             Märkus 4:
                                          
                                       
                                       
                                          alifaatsete alkoholide vöönd ja terpeenalkoholide vöönd tuleb arvestada kokku, kuna mõned alifaatsed alkoholid võivad olla migreerunud triterpeenalkoholide vööndisse. Õhukese kihi kromatograafia abil eraldamise näide on esitatud liite joonises 1.
                                       
                                    
                        
                              5.2.6.
                           
                           
                              Metallspaatliga kraabitakse märgistatud alalt maha silikageel. Kraapimisega saadud peenestatud materjal pannakse filterlehtrisse (3.7). Lisatakse 10 ml kuuma kloroformi, segatakse hoolikalt metallist spaatliga ning filtritakse vaakumiga; filtraat kogutakse filterlehtriga ühendatud koonilisse kolbi (3.8).
                              Silikageeli pestakse klaasfilterlehtris kolm korda dietüüleetriga (iga kord umbes 10 ml) ning filtraat kogutakse sama lehtriga ühendatud kolbi. Filtraat aurustatakse kokku mahuni 4–5 ml ning jääklahus valatakse eelnevalt kaalutud 10 ml katseklaasi (3.9), seejärel aurustatakse nõrga lämmastikuvoo läbijuhtimisel ettevaatlikult kuumutades kuivaks, lahustatakse uuesti paari tilga atsetooniga, aurustatakse taas kuivaks ning asetatakse umbes kümneks minutiks kuivatuskappi temperatuurile 105 °C, lastakse eksikaatoris jahtuda ja kaalutakse.
                              Katseklaasis olev jääk koosneb alkoholifraktsioonist.”
                           
                        
            
                  5)
               
               
                  Punkt 5.4.4 asendatakse järgmisega:
                  „5.4.4.   Piigi määramine
                  
                  Üksikpiigid määratakse peetumisaja alusel, võrreldes neid samadel tingimustel analüüsitud alifaatsete alkoholide trimetüülsilüüleetrite segu kromatogrammiga.
                  Rafineeritud oliiviõli alkoholifraktsiooni kromatogrammi näited on esitatud liite joonistel 2 ja 3.”
               
            
                  6)
               
               
                  Liide asendatakse järgmisega:
                  
                     „Liide
                     
                        Õhukese kihi kromatograafia abil eraldamise näide ja kromatogrammi näited
                     
                     
                        Joonis 1
                     
                     
                        Heksaani/etüüleetriga (65/35) eludeeritud oliiviõli seebistamatu fraktsiooni õhukese kihi kromatograafia plaat
                     
                     
                        Joonis 2
                     
                     
                        Rafineeritud oliiviõli alkoholifraktsiooni kromatogramm
                     
                     
                        Joonis 3
                     
                     
                        Rafineeritud oliiviõli ja teistkordselt tsentrifuugitud oliiviõli alifaatsed alkoholid ja triterpeenalkoholid