CELEX: 32013R1348
Language: fi
Date: 2013-12-16 00:00:00
Title: Komission täytäntöönpanoasetus (EU) N:o 1348/2013, annettu 16 päivänä joulukuuta 2013 , oliiviöljyn ja uutetun oliiviöljyn ominaisuuksista sekä niiden määritysmenetelmistä annetun asetuksen (ETY) N:o 2568/91 muuttamisesta

17.12.2013   
               
               
                  FI
               
               
                  Euroopan unionin virallinen lehti
               
               
                  L 338/31
               
            
         KOMISSION TÄYTÄNTÖÖNPANOASETUS (EU) N:o 1348/2013,
         annettu 16 päivänä joulukuuta 2013,
         oliiviöljyn ja uutetun oliiviöljyn ominaisuuksista sekä niiden määritysmenetelmistä annetun asetuksen (ETY) N:o 2568/91 muuttamisesta
         EUROOPAN KOMISSIO, joka
         ottaa huomioon Euroopan unionin toiminnasta tehdyn sopimuksen,
         ottaa huomioon maatalouden yhteisestä markkinajärjestelystä ja tiettyjä maataloustuotteita koskevista erityissäännöksistä (yhteisiä markkinajärjestelyjä koskeva asetus) 22 päivänä lokakuuta 2007 annetun neuvoston asetuksen (EY) N:o 1234/2007 (1) ja erityisesti sen 113 artiklan 1 kohdan a alakohdan ja 121 artiklan ensimmäisen kohdan a ja h alakohdan yhdessä sen 4 artiklan kanssa,
         sekä katsoo seuraavaa:
         
                     (1)
                  
                  
                     Komission asetuksessa (ETY) N:o 2568/91 (2) määritellään oliiviöljyn ja oliivin puristemassaöljyn kemialliset ja aistinvaraiset ominaisuudet sekä kyseisten ominaisuuksien määritysmenetelmät. Kyseiset menetelmät ja öljyjen ominaisuuksiin liittyvät raja-arvot olisi saatettava ajan tasalle ottaen huomioon asiantuntijakemistien lausunto ja kansainvälisen oliivineuvoston (IOC) puitteissa tehty työ.
                  
               
                     (2)
                  
                  
                     Eräitä asetuksessa (ETY) N:o 2568/91 säädettyjä analyysimenetelmiä ja oliiviöljyjen ominaisuuksien raja-arvoja olisi päivitettävä IOC:n vahvistamien tuoreimpien kansainvälisten standardien täytäntöönpanon varmistamiseksi unionin tasolla.
                  
               
                     (3)
                  
                  
                     Sen vuoksi stigmastadieenien, vahojen, myristiinihapon ja rasvahappoalkyyliestereiden raja-arvoja olisi muutettava, kuten myös eräitä päätöksentekokaavioita, joita käytetään sen todentamiseksi, onko oliiviöljynäyte ilmoitetun luokan mukainen. Kuluttajansuojan vuoksi olisi kaupan helpottamiseksi ja oliiviöljyn aitouden takaamiseksi otettava käyttöön kampesterolia ja delta-7-stigmasterolia koskevat päätöksentekokaaviot, joihin liittyy rajoittavampia parametreja. Menetelmät sterolien koostumuksen ja pitoisuuden määrittämiseksi sekä erytrodiolin ja uvaolin määrittämiseksi olisi korvattava luotettavammilla menetelmillä, jotka koskevat myös triterpeenidialkoholeja. On myös asianmukaista tarkastella uudelleen oliiviöljyn aistinvaraista arviointia ja ottaa käyttöön menetelmä oliiviöljyissä esiintyvien vieraiden kasviöljyjen havaitsemiseksi.
                  
               
                     (4)
                  
                  
                     Oliiviöljyn ja oliivin puristemassaöljyn näytteenottomenetelmiä olisi mukautettava öljyjen vaatimustenmukaisuustarkastuksiin liittyvien menetelmien kehittymisen perusteella.
                  
               
                     (5)
                  
                  
                     Sen vuoksi asetusta (ETY) N:o 2568/91 olisi muutettava.
                  
               
                     (6)
                  
                  
                     Tällä asetuksella tehtyjä muutoksia olisi sovellettava vasta 1 päivästä maaliskuuta 2014, jotta aikaa jäisi uusiin sääntöihin sopeutumiselle ja niiden soveltamisen vaatimien välineiden käyttöönotolle ja jottei kaupankäynnille aiheutettaisi häiriöitä. Samoista syistä olisi säädettävä, että ennen kyseistä päivämäärää unionissa lainmukaisesti valmistettuja ja merkittyjä tai unioniin lainmukaisesti tuotuja, vapaaseen liikkeeseen laskettuja oliiviöljyjä ja oliivin puristemassaöljyjä voidaan pitää kaupan varastojen loppumiseen asti.
                  
               
                     (7)
                  
                  
                     Tässä asetuksessa säädetyt toimenpiteet ovat maatalouden yhteisen markkinajärjestelyn hallintokomitean lausunnon mukaiset,
                  
               ON HYVÄKSYNYT TÄMÄN ASETUKSEN:
         
            1 artikla
            Muutetaan asetus (ETY) N:o 2568/91 seuraavasti:
            
                        1)
                     
                     
                        Korvataan 2 artikla seuraavasti:
                        
                           "2 artikla
                           
                              1.   Liitteessä I säädettyjen öljyjen ominaisuudet määritetään seuraavilla määritysmenetelmillä:
                              
                                          a)
                                       
                                       
                                          oleiinihappoprosentteina ilmaistavat vapaat rasvahapot määritetään liitteessä II esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          b)
                                       
                                       
                                          peroksidiluku määritetään liitteessä III esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          c)
                                       
                                       
                                          vahapitoisuus määritetään liitteessä IV esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          d)
                                       
                                       
                                          sterolien ja triterpeenidialkoholien koostumus ja pitoisuus määritetään kapillaarikaasukromatografialla liitteessä V esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          e)
                                       
                                       
                                          2-glyseryylimonopalmitaatin prosenttiosuus määritetään liitteessä VII esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          f)
                                       
                                       
                                          spektrofotometrinen määritys tehdään liitteessä IX esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          g)
                                       
                                       
                                          rasvahappokoostumus määritetään liitteissä X A ja X B esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          h)
                                       
                                       
                                          haihtuvat halogeeniliuottimet määritetään liitteessä XI esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          i)
                                       
                                       
                                          neitsytoliiviöljyn aistinvaraiset ominaisuudet arvioidaan liitteessä XII esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          j)
                                       
                                       
                                          stigmastadieenit määritetään liitteessä XVII esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          k)
                                       
                                       
                                          C42:ta sisältävien triglyseridien koostumus määritetään liitteessä XVIII esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          l)
                                       
                                       
                                          alifaattisten alkoholien pitoisuus määritetään liitteessä XIX esitetyllä menetelmällä;
                                       
                                    
                                          m)
                                       
                                       
                                          vahojen, rasvahappojen metyyliestereiden ja rasvahappojen etyyliestereiden pitoisuudet määritetään liitteessä XX esitetyllä menetelmällä.
                                       
                                    Oliiviöljyissä esiintyvien vieraiden kasviöljyjen havaitsemiseksi sovelletaan liitteessä XX a esitettyä määritysmenetelmää.
                           
                           
                              2.   Kansallisilta viranomaisilta tai näiden edustajilta edellytettävistä neitsytoliiviöljyjen aistinvaraisten ominaisuuksien tarkistuksesta vastaavat jäsenvaltioiden hyväksymät maistajaraadit.
                              Ensimmäisessä kohdassa tarkoitetun oliiviöljyn aistinvaraisten ominaisuuksien katsotaan olevan yhdenmukaisia ilmoitetun oliiviöljyluokan kanssa, jos asianomaisen jäsenvaltion hyväksymä raati vahvistaa kyseisen luokituksen.
                              Jos raati ei vahvista ilmoitusta ilmoitetun oliiviöljyluokan aistinvaraisten ominaisuuksien osalta, kansalliset viranomaiset tai niiden edustajat teettävät asianomaisen pyynnöstä viipymättä muilla hyväksytyillä raadeilla kaksi seurantamääritystä, joista ainakin toisen tekee asianomaisen tuottajajäsenvaltion hyväksymä raati. Kyseisten ominaisuuksien katsotaan olevan yhdenmukaisia ilmoitettujen ominaisuuksien kanssa, jos ilmoitettu luokitus vahvistetaan molemmissa seurantamäärityksissä. Päinvastaisessa tapauksessa seurantamäärityksen kustannuksista vastaa asianomainen.
                           
                           
                              3.   Kun on kyse kansallisten viranomaisten tai niiden edustajien tekemästä 1 kohdan mukaisesta öljyn ominaisuuksien toteamisesta, näytteenotto tehdään koenäytteen valmistelua ja näytteenottoa koskevia kansainvälisiä standardeja EN ISO 661 ja EN ISO 5555 noudattaen. Poiketen siitä, mitä standardissa EN ISO 5555 olevassa 6.8 kohdassa määrätään, silloin kun kyseessä ovat tällaiset pakkaukseen suorassa kosketuksessa olevat öljyt, näytteenotto tehdään kuitenkin tämän asetuksen liitteen I a mukaisesti. Kun kyseessä on pakkaamaton öljy, josta ei voida ottaa näytettä standardin EN ISO 5555 mukaisesti, näytteenotto tehdään jäsenvaltion toimivaltaisen viranomaisten ohjeiden mukaisesti.
                              Rajoittamatta standardin EN ISO 5555 ja standardissa EN ISO 661 olevan 6 luvun määräysten soveltamista näytteet on sijoitettava viipymättä valolta ja lämmöltä suojattuun paikkaan ja lähetettävä laboratorioon määritettäviksi viimeistään näytteenottoa seuraavana viidentenä työpäivänä; muussa tapauksessa näytteet on säilytettävä niin, että ne eivät heikenny tai vahingoitu kuljetuksen tai varastoinnin aikana ennen laboratorioon lähettämistä.
                           
                           
                              4.   Edellä 3 kohdassa tarkoitettua todentamista varten liitteissä II, III, IX, XII ja XX tarkoitetut määritykset ja tapauksen mukaan kansallisessa lainsäädännössä säädetyt vastamääritykset on tehtävä ennen vähimmäissäilymisajan päättymistä, kun kyseessä ovat pakatut tuotteet. Kun kyseessä ovat pakkaamattomat öljyt, määritykset on tehtävä kuuden kuukauden kuluessa näytteenottokuukaudesta.
                              Muihin tässä asetuksessa säädettyihin määrityksiin ei sovelleta määräaikoja.
                              Jos määritysten tulokset eivät vastaa oliiviöljyn tai oliivin puristemassaöljyn ilmoitetun luokan ominaisuuksia, asianomaisen on ilmoitettava asiasta kuukauden kuluessa ensimmäisessä alakohdassa tarkoitetun määräajan päättymisestä, paitsi jos näyte on otettu vähimmäissäilymisajan päättymistä edeltävien kahden kuukauden kuluessa.
                           
                           
                              5.   Määritystuloksia verrataan suoraan tässä asetuksessa säädettyihin rajoihin oliiviöljyjen ominaisuuksien määrittelemiseksi 1 kohdan ensimmäisessä alakohdassa säädettyjä menetelmiä noudattaen."
                           
                        
                     
                  
                        2)
                     
                     
                        Korvataan liite I tämän asetuksen liitteessä I olevalla tekstillä.
                     
                  
                        3)
                     
                     
                        Korvataan liite I a tämän asetuksen liitteessä II olevalla tekstillä.
                     
                  
                        4)
                     
                     
                        Korvataan liite I b tämän asetuksen liitteessä III olevalla tekstillä.
                     
                  
                        5)
                     
                     
                        Korvataan liite V tämän asetuksen liitteessä IV olevalla tekstillä.
                     
                  
                        6)
                     
                     
                        Poistetaan liite VI.
                     
                  
                        7)
                     
                     
                        Korvataan liite XII tämän asetuksen liitteellä V.
                     
                  
                        8)
                     
                     
                        Lisätään liitteen XX jälkeen liite XX a tämän asetuksen liitteen VI mukaisesti.
                     
                  
         
            2 artikla
            Ennen 1 päivää maaliskuuta 2014 unionissa lainmukaisesti valmistettuja ja merkittyjä tai unioniin lainmukaisesti tuotuja, vapaaseen liikkeeseen laskettuja tuotteita voidaan pitää kaupan varastojen loppumiseen asti.
         
         
            3 artikla
            Tämä asetus tulee voimaan seitsemäntenä päivänä sen jälkeen, kun se on julkaistu Euroopan unionin virallisessa lehdessä.
            Sitä sovelletaan 1 päivästä maaliskuuta 2014.
         
         
            Tämä asetus on kaikilta osiltaan velvoittava, ja sitä sovelletaan sellaisenaan kaikissa jäsenvaltioissa.
            Tehty Brysselissä 16 päivänä joulukuuta 2013.
            
               
                  Komission puolesta
               
               
                  Puheenjohtaja
               
               José Manuel BARROSO
            
         
         
            (1)  EUVL L 299, 16.11.2007, s. 1.
         
            (2)  Komission asetus (ETY) N:o 2568/91, annettu 11 päivänä heinäkuuta 1991, oliiviöljyn ja uutetun oliiviöljyn ominaisuuksista sekä niiden määritysmenetelmistä (EYVL L 248, 5.9.1991, s. 1).
      
      
         
            LIITE I
            
               
                  
                     ”LIITE 1
                     
                        OLIIVIÖLJYJEN OMINAISUUDET
                     
                     
                                 Luokka
                              
                              
                                 Rasvahappojen etyyliesterit (FAEE) mg/kg (*)
                              
                              
                                 Happopitoisuus (%) (*)
                              
                              
                                 Peroksidiluku mEq O2/kg (*)
                              
                              
                                 Vahat mg/kg (**)
                              
                              
                                 2-glyseryylimonopalmitaatti (%)
                              
                              
                                 Stigmastadieeni mg/kg (1)
                                 
                              
                              
                                 HPLC:llä määritetyn ja teoreettisesti lasketun ECN42:n (2)
                                 
                                 välinen ero
                              
                              
                                 K232 (*)
                              
                              
                                 K268 tai K270 (*)
                              
                              
                                 δ-K (*)
                              
                              
                                 Aistinvarainen arvio
                                 Virheen mediaani (Md) (*)
                              
                              
                                 Aistinvarainen arvio
                                 Hedelmäisyyden mediaani (Mf) (*)
                              
                           
                                 
                                             1.
                                          
                                          
                                             Ekstra-neitsytoliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 FAEE ≤ 40 (2013–2014 satovuosi) (3)
                                 
                                 FAEE ≤ 35 (2014–2015 satovuosi)
                                 FAEE ≤ 30 satovuodet 2015:stä eteenpäin)
                              
                              
                                 ≤ 0,8
                              
                              
                                 ≤ 20
                              
                              
                                 
                                    
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % ≤ 14 %
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ |0,2|
                              
                              
                                 ≤ 2,50
                              
                              
                                 ≤ 0,22
                              
                              
                                 ≤ 0,01
                              
                              
                                 Md = 0
                              
                              
                                 Mf > 0
                              
                           
                                 ≤ 1,0 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % > 14 %
                              
                           
                                 
                                             2.
                                          
                                          
                                             Neitsytoliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 2,0
                              
                              
                                 ≤ 20
                              
                              
                                 
                                    
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % ≤ 14 %
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ |0,2|
                              
                              
                                 ≤ 2,60
                              
                              
                                 ≤ 0,25
                              
                              
                                 ≤ 0,01
                              
                              
                                 Md ≤ 3,5
                              
                              
                                 Mf > 0
                              
                           
                                 ≤ 1,0 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % > 14 %
                              
                           
                                 
                                             3.
                                          
                                          
                                             Lamppuoliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 —
                              
                              
                                 > 2,0
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 
                                    
                                  (4)
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % ≤ 14 %
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ |0,3|
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 Md > 3,5 (5)
                                 
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 ≤ 1,1 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % > 14 %
                              
                           
                                 
                                             4.
                                          
                                          
                                             Jalostettu oliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 0,3
                              
                              
                                 ≤ 5
                              
                              
                                 
                                    
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % ≤ 14 %
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ |0,3|
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 1,10
                              
                              
                                 ≤ 0,16
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 ≤ 1,1 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % > 14 %
                              
                           
                                 
                                             5.
                                          
                                          
                                             Jalostetusta oliiviöljystä ja neitsytoliiviöljystä valmistettu oliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 1,0
                              
                              
                                 ≤ 15
                              
                              
                                 
                                    
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % ≤ 14 %
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ |0,3|
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 0,90
                              
                              
                                 ≤ 0,15
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 ≤ 1,0 jos palmitiinihapon kokonaisprosenttiosuus % > 14 %
                              
                           
                                 
                                             6.
                                          
                                          
                                             Raaka oliivin puristemassaöljy
                                          
                                       
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 
                                    
                                  (6)
                              
                              
                                 ≤ 1,4
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ |0,6|
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 
                                             7.
                                          
                                          
                                             Jalostettu oliivin puristemassaöljy
                                          
                                       
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 0,3
                              
                              
                                 ≤ 5
                              
                              
                                 
                                    
                              
                              
                                 ≤ 1,4
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ |0,5|
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 2,00
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 
                                             8.
                                          
                                          
                                             Oliivin puristemassaöljy
                                          
                                       
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 1,0
                              
                              
                                 ≤ 15
                              
                              
                                 
                                    
                              
                              
                                 ≤ 1,2
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ |0,5|
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 1,70
                              
                              
                                 ≤ 0,18
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                        
                     
                                 Luokka
                              
                              
                                 Rasvahappokoostumus (7)
                                 
                              
                              
                                 Trans- oleiini-isomeerien summa
                                 (%)
                              
                              
                                 Trans-linoli-isomeerien ja trans-linoleeni-isomeerien summa
                                 (%)
                              
                              
                                 Sterolikoostumus
                              
                              
                                 Kokonaissterolit
                                 (mg/kg)
                              
                              
                                 Erytrodioli ja uvaoli
                                 (%) (**)
                              
                           
                                 Myristiinihappo
                                 (%)
                              
                              
                                 Linoleenihappo
                                 (%)
                              
                              
                                 Arakidonihappo
                                 (%)
                              
                              
                                 Eikoseenihappo
                                 (%)
                              
                              
                                 Beheenihappo
                                 (%)
                              
                              
                                 Lignoseriinihappo
                                 (%)
                              
                              
                                 Kolesteroli
                                 (%)
                              
                              
                                 Brassikasteroli
                                 (%)
                              
                              
                                 Kampesteroli (8)
                                 
                                 (%)
                              
                              
                                 Stigmasteroli
                                 (%)
                              
                              
                                 Näenn. β-sitosterolipit.
                                 (%) (9)
                                 
                              
                              
                                 δ-7- stigmastenoli (8)
                                 
                                 (%)
                              
                           
                                 
                                             1.
                                          
                                          
                                             Ekstra-neitsytoliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 < kamp.
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                           
                                 
                                             2.
                                          
                                          
                                             Neitsytoliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 < kamp.
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                           
                                 
                                             3.
                                          
                                          
                                             Lamppuoliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,10
                              
                              
                                 ≤ 0,10
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≤ 4,5 (10)
                                 
                              
                           
                                 
                                             4.
                                          
                                          
                                             Jalostettu oliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 < kamp.
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                           
                                 
                                             5.
                                          
                                          
                                             Jalostetusta oliiviöljystä ja neitsytoliiviöljystä valmistettu oliiviöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 < kamp.
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                           
                                 
                                             6.
                                          
                                          
                                             Raaka oliivin puristemassaöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,10
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,2
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 2 500 
                              
                              
                                 > 4,5 (11)
                                 
                              
                           
                                 
                                             7.
                                          
                                          
                                             Jalostettu oliivin puristemassaöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,35
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,2
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 < kamp.
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 1 800 
                              
                              
                                 > 4,5
                              
                           
                                 
                                             8.
                                          
                                          
                                             Oliivin puristemassaöljy
                                          
                                       
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,35
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,2
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 < kamp.
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≥ 1 600 
                              
                              
                                 > 4,5
                              
                           
                        Huom.
                     
                     
                                 a)
                              
                              
                                 Analyysitulokset on ilmaistava yhtä monen desimaalin tarkkuudella kuin kunkin ominaisuuden osalta esitetään. Viimeinen luku on pyöristettävä yhdellä yksiköllä ylöspäin, jos sitä seuraava luku on suurempi kuin 4.
                              
                           
                                 b)
                              
                              
                                 Jos öljyn yksikin ominaisuus poikkeaa annetuista arvoista, sen luokka muutetaan tai todetaan, ettei se täytä tässä asetuksessa säädettyjä puhtausvaatimuksia.
                              
                           
                                 c)
                              
                              
                                 Öljyyn laatuun viittaavat tähdellä (*) merkityt ominaisuudet tarkoittavat seuraavaa: – lamppuoliiviöljyn ei tarvitse täyttää kaikkia raja-arvoja koskevia vaatimuksia samanaikaisesti, – jos neitsytoliiviöljy ei täytä jotain raja-arvoa koskevaa vaatimusta, öljyn luokka muutetaan, mutta se säilyy edelleen luokiteltuna johonkin neitsytoliiviöljyluokista.
                              
                           
                                 d)
                              
                              
                                 Kaksi tähteä (**) oliiviöljyn jonkin laatuominaisuuden kohdalla tarkoittaa, että oliivin puristemassaöljyjen ei tarvitse täyttää kaikkia raja-arvoja koskevia vaatimuksia samanaikaisesti.
                              
                           
               
               
                  
                     ”Lisäys
                     
                        Päätöksentekojärjestelmä
                     
                     
                        Kampesterolia koskeva päätöksentekokaavio neitsyt- ja ekstra-neitsytoliiviöljyä varten:
                     4,0 % < kampesteroli ≤ 4,5 %
                     Stigmasteroli ≤ 1,4 %
                     δ -7-stigmastenoli ≤ 0,3 %
                     Muiden parametrien on vastattava asetuksen mukaisia rajoja.
                     
                        δ-7- stigmastenolia koskeva päätöksentekojärjestelmä:
                     
                                 —
                              
                              
                                 ekstraneitsyt- ja neitsytoliiviöljyä varten
                                 0,5 % < δ-7-stigmastenoli ≤ 0,8 %
                                 Kampesteroli ≤ 3,3 %
                                 Näenn. β-sitosterolipit. / (kampest. + δ-7-stigm.) ≥ 25
                                 Stigmasteroli ≤ 1,4 %
                                 δ-ECN42 ≤ |0,1|
                              
                           Muiden parametrien on vastattava asetuksen mukaisia rajoja.
                     
                                 —
                              
                              
                                 oliivin puristemassaöljyä varten (raaka ja jalostettu)
                                 0,5 < δ-7-stigmastenoli ≤ 0,7
                                 δ-ECN42 ≤ |0,40|
                                 Stigmasteroli ≤ 1,4 %
                                 Muut parametrit rajaarvojen sisällä
                              
                           
               ”
            
               (1)  Isomeerien kokonaismäärä, joka voidaan (tai jota ei voida) erottaa kapillaarikolonnin avulla.
            
               (2)  Oliiviöljyn on oltava liitteessä XX a esitetyn menetelmän mukaista.
            
               (3)  Tätä rajaa sovelletaan 1 päivästä maaliskuuta 2014 alkaen tuotettuihin oliiviöljyihin.
            
               (4)  Kun öljyn vahapitoisuus on 300–350 mg/kg, sitä pidetään lamppuöljynä, jos alifaattisten alkoholien kokonaispitoisuus on enintään 350 mg/kg tai jos erytrodioli- ja uvaolipitoisuus on enintään 3,5 prosenttia
            
               (5)  Tai jos virheen mediaani on yli 3,5 tai jos virheen mediaani on enintään 3,5 ja hedelmäisyyden mediaani on 0.
            
               (6)  Kun öljyn vahapitoisuus on 300–350 mg/kg, sitä pidetään raakana oliivin puristemassaöljynä, jos alifaattisten alkoholien kokonaispitoisuus on yli 350 mg/kg ja jos erytrodioli- ja uvaolipitoisuus on yli 3,5 prosenttia.
            
               (7)  Muiden rasvahappojen pitoisuus (%): palmitiinihappo: 7,50–20,00; palmitoleiinihappo: 0,30–3,50; heptadekaanihappo: ≤ 0,30; heptadekeenihappo: ≤ 0,30; steariinihappo: 0,50–5,00; oleiinihappo: 55,00–83,00; linolihappo: 3,50–21,00.
            
               (8)  Ks. tämän liitteen lisäys.
            
               (9)  Näennäinen β-sitosterolipitoisuus: δ-5,23-stigmastadienoli + klerosteroli + β-sitosteroli + sitostanoli + δ-5-avenasteroli + δ-5,24-stigmastadienoli.
            
               (10)  Kun öljyn vahapitoisuus on 300–350 mg/kg, sitä pidetään lamppuöljynä, jos alifaattisten alkoholien kokonaispitoisuus on enintään 350 mg/kg tai jos erytrodioli- ja uvaolipitoisuus on enintään 3,5 prosenttia.
            
               (11)  Kun öljyn vahapitoisuus on 300–350 mg/kg, sitä pidetään raakana oliivin puristemassaöljynä, jos alifaattisten alkoholien kokonaispitoisuus on yli 350 mg/kg ja jos erytrodioli- ja uvaolipitoisuus on yli 3,5 prosenttia.
         
      
      
         
            LIITE II
            
               
                  
                     ”LIITE I a
                     
                        NÄYTTEENOTTO OLIIVIÖLJYISTÄ TAI OLIIVIN PURISTEMASSAÖLJYISTÄ, JOTKA TOIMITETAAN TUOTTEESEEN SUORASSA KOSKETUKSESSA OLEVISSA PAKKAUKSISSA
                     
                     Tätä näytteenottomenetelmää sovelletaan oliiviöljy- tai oliivin puristemassaöljyeriin, jotka toimitetaan suorassa kosketuksessa tuotteeseen olevissa pakkauksissa. Näytteenottomenetelmä vaihtelee sen mukaan, onko suorassa kosketuksessa tuotteeseen olevan pakkauksen vetoisuus yli viisi litraa vai ei.
                     Ilmaisulla ’erä’ tarkoitetaan kaikkia myyntiyksiköitä, jotka on tuotettu, valmistettu ja pakattu sellaisissa olosuhteissa, että kunkin tällaisen myyntiyksikön sisältämää öljyä pidetään yhdenmukaisena kaikkien analyyttisten ominaisuuksien osalta. Erä on yksilöitävä Euroopan parlamentin ja neuvoston direktiivin 2011/91/EU (1) mukaisesti.
                     ’Näyteyksiköllä’ tarkoitetaan tuotteeseen kosketuksessa olevaan pakkaukseen sisältyvää öljymäärää, joka otetaan erästä satunnaisotannalla.
                     1.   PERUSNÄYTTEEN SISÄLTÖ
                     1.1.   Tuotteeseen kosketuksessa olevat, vetoisuudeltaan enintään viiden litran pakkaukset
                     
                     Tuotteeseen kosketuksessa olevista, vetoisuudeltaan enintään viiden litran pakkauksista otetulla ’perusnäytteellä’ tarkoitetaan erästä taulukon 1 mukaisesti otettujen näyteyksiköiden lukumäärää.
                     
                        Taulukko 1
                     
                     
                        Perusnäytteen vähimmäiskoko muodostetaan seuraavasti
                     
                     
                                 Jos tuotteeseen kosketuksessa olevien pakkausten vetoisuus on
                              
                              
                                 Perusnäytteeksi valitaan
                              
                           
                                 
                                             a)
                                          
                                          
                                             vähintään 1 litra
                                          
                                       
                              
                                 
                                             a)
                                          
                                          
                                             yhden tuotteeseen kosketuksessa olevan pakkauksen öljy
                                          
                                       
                           
                                 
                                             b)
                                          
                                          
                                             alle 1 litra.
                                          
                                       
                              
                                 
                                             b)
                                          
                                          
                                             pienin mahdollinen määrä pakkauksia, joiden vetoisuus yhteensä on vähintään 1,0 litraa.
                                          
                                       
                           Jokainen jäsenvaltio voi lisätä perusnäytteen muodostavien taulukossa 1 tarkoitettujen pakkausten määrää omien tarpeidensa mukaan (esimerkiksi, jotta aistinvaraisen arvioinnin voi tehdä eri laboratorio kuin kemialliset analyysit, vastamäärityksiä varten jne.).
                     1.2.   Tuotteeseen kosketuksessa olevat, vetoisuudeltaan yli viiden litran pakkaukset
                     
                     Tuotteeseen kosketuksessa olevista, vetoisuudeltaan yli viiden litran pakkauksista otetulla ’perusnäytteellä’ tarkoitetaan edustavaa otosta kaikista näyteyksiköistä, jotka on saatu jakomenettelyn avulla ja taulukon 2 mukaisesti. Perusnäyte on muodostettava useista kappaleista.
                     Perusnäytteen ’kappaleella’ tarkoitetaan kutakin perusnäytteeseen kuuluvaa pakkausta.
                     
                        Taulukko 2
                     
                     
                        Valittavien näyteyksiköiden vähimmäismäärä
                     
                     
                                 Erään kuuluvien pakkausten lukumäärä
                              
                              
                                 Valittavien näyteyksiköiden vähimmäismäärä
                              
                           
                                 Enintään 10
                              
                              
                                 1 
                              
                           
                                 11–150
                              
                              
                                 2 
                              
                           
                                 151–500
                              
                              
                                 3 
                              
                           
                                 501–1 500 
                              
                              
                                 4 
                              
                           
                                 1 501 –2 500 
                              
                              
                                 5 
                              
                           
                                 > 2 500 , tuhatta pakkausta kohden
                              
                              
                                 1 ylimääräinen näyteyksikkö
                              
                           Jotta tuotteeseen kosketuksessa olevien pakkausten näytteenoton määrää voidaan pienentää, näyteyksiköiden sisältö homogenisoidaan perusnäytteen valmistamiseksi. Eri näyteyksiköiden annokset kaadetaan yhteen säiliöön ja homogenisoidaan sekoittamalla siten, että näyte suojataan ilmalta mahdollisimman hyvin.
                     Perusnäytteen sisältö kaadetaan useisiin, vetoisuudeltaan vähintään 1,0 litran pakkauksiin, joista jokainen muodostaa perusnäytteen kappaleen.
                     Jokainen jäsenvaltio voi lisätä perusnäytteiden lukumäärää omien tarpeidensa mukaan (esimerkiksi, jotta aistinvaraisen arvioinnin voi tehdä eri laboratorio kuin kemialliset analyysit, vastamäärityksiä varten jne.).
                     Jokainen pakkaus on täytettävä siten, että pintaan jäävä ilmakerros on mahdollisimman pieni, ja pakkaus on suljettava asianmukaisesti ja sinetöitävä sen varmistamiseksi, että tuotetta ei voida muuttaa.
                     Kappaleet on merkittävä siten, että ne voidaan tunnistaa virheettömästi.
                     2.   MÄÄRITYKSET JA TULOKSET
                     
                              
                                 2.1.
                              
                              
                                 Kukin perusnäyte jaetaan standardissa EN ISO 5555 olevan 2.5 kohdan mukaisesti laboratorionäytteiksi, ja perusnäytteet määritetään liitteessä I b annetun päätöksentekojärjestelmän mukaisessa järjestyksessä tai muussa satunnaisessa järjestyksessä.
                              
                           
                              
                                 2.2.
                              
                              
                                 Jos määritysten kaikki tulokset vastaavat ilmoitetun öljyluokan ominaisuuksia, koko kyseinen erä on todettava vaatimusten mukaiseksi.
                                 Jos määritysten yksikin tulos ei vastaa ilmoitetun öljyluokan ominaisuuksia, koko kyseinen erä on todettava vaatimusten vastaiseksi.
                              
                           3.   ERÄN LUOKAN TARKISTAMINEN
                     
                              
                                 3.1.
                              
                              
                                 Toimivaltainen viranomainen voi lisätä erän eri kohdista otettujen perusnäytteiden lukumäärää erän luokan tarkistamiseksi seuraavan taulukon mukaisesti:
                                 
                                    Taulukko 3
                                 
                                 
                                    Erän koon mukaan määritettävä perusnäytteiden lukumäärä
                                 
                                 
                                             Erän koko (litroina)
                                          
                                          
                                             Perusnäytteiden lukumäärä
                                          
                                       
                                             Alle 7 500 
                                          
                                          
                                             2 
                                          
                                       
                                             7 500 :sta alle 25 000 :een
                                          
                                          
                                             3 
                                          
                                       
                                             25 500 :sta alle 75 000 :een
                                          
                                          
                                             4 
                                          
                                       
                                             75 000 :sta alle 125 000 :een
                                          
                                          
                                             5 
                                          
                                       
                                             125 000  ja sitä enemmän
                                          
                                          
                                             6 + 1 kutakin 50 000 :ta litraa kohden
                                          
                                       Jokainen perusnäytteen muodostava näyteyksikkö on otettava samasta kohdasta erää; jokaisen perusnäytteen sijainti on merkittävä muistiin, ja siihen on laitettava selkeät tunnisteet.
                                 Jokainen perusnäyte muodostetaan 1.1 ja 1.2 kohdassa tarkoitettujen menettelyjen mukaisesti.
                                 Sen jälkeen jokaiselle perusnäytteelle tehdään 2 artiklan 1 kohdassa tarkoitetut määritykset.
                              
                           
                              
                                 3.2.
                              
                              
                                 Jos 2 artiklan 1 kohdassa tarkoitettujen määritysten tulokset eivät vähintään yhden perusnäytteen osalta vastaa ilmoitetun öljyluokan ominaisuuksia, koko kyseinen erä on todettava vaatimusten vastaiseksi.”
                              
                           
               
            
            
               (1)  Euroopan parlamentin ja neuvoston direktiivi 2011/91/EU, annettu 13 päivänä joulukuuta 2011, elintarvike-erän tunnistamismerkinnöistä (EUVL L 334, 16.12.2011, s. 1).
         
      
      
         
            LIITE III
            
               
                  
                     ”LIITE I b
                     
                        PÄÄTÖKSENTEKOJÄRJESTELMÄ SEN TODENTAMISEKSI, ONKO OLIIVIÖLJYNÄYTE ILMOITETUN LUOKAN MUKAINEN
                     
                     
                        Taulukko 1
                     
                     EKSTRA-NEITSYTOLIIVIÖLJY
                     (Laatuvaatimukset)
                     Happopitoisuus %
                     ≤ 0,8
                     > 0,8
                     Peroksidiluku mEqO2/kg
                     ≤ 20
                     > 20
                     Spektrofotometrinen määritys ultraviolettivalossa
                     K270 ≤ 0,22
                     K270 > 0,22
                     Spektrofotometrinen määritys ultraviolettivalossa
                     δ-K ≤ 0,01
                     δ-K > 0,01
                     Spektrofotometrinen määritys ultraviolettivalossa
                     K232 ≤ 2,50
                     K232 > 2,50
                     Aistinvarainen arviointi
                     Hedelm. med. > 0
                     ja
                     virheen med. = 0
                     Hedelm. med. = 0
                     Hedelm. med. > 0
                     ja
                     virheen med. > 0
                     Etyyliesterit*
                     Kyllä
                     Ei
                     Öljytyyppi on laatuvaatimusten osalta ilmoitetun öljyluokan mukainen.
                     Siirry taulukkoon 3 (Puhtausvaatimukset).
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista.
                     (a)
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista.
                     (b)
                     * ≤ 40 mg/kg v. 2013/2014
                     ≤ 35 mg/kg v. 2014/2015
                     ≤ 30 mg/kg satovuodesta 2015/2016
                     
                        Taulukko 2
                     
                     Neitsytoliiviöljyt
                     (Laatuvaatimukset)
                     Happopitoisuus %
                     ≤ 2,0
                     > 2,0
                     Peroksidiluku mEq O2/kg
                     ≤ 20
                     > 20
                     Spektrofotometrinen määritys UV-valossa
                     K270 ≤ 0,25
                     K270 > 0,25
                     Spektrofotometrinen määritys UV-valossa
                     δ-KK ≤ 0,01
                     δ-KK > 0,01
                     Spektrofotometrinen määritys UV-valossa
                     K232 ≤ 2,60
                     K232 > 2,60
                     Aistinvarainen arviointi
                     Hedelm. mediaani > 0
                     ja
                     virheen mediaani ≤ 3,5
                     Hedelm. mediaani = 0
                     tai
                     hedelm. mediaani > 0
                     virheen mediaani > 3,5
                     Täyttävätkö edellä annettujen parametrien arvot ekstra- neitsytoliiviöljylle asetetut laatuvaatimukset?
                     (Taulukko 1)
                     EI
                     KYLLÄ
                     Öljytyyppi on laatuvaatimusten osalta ilmoitetun öljyluokan mukainen.
                     Siirry taulukkoon 3 (Puhtausvaatimukset).
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista.
                     (a)
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista
                     (b)
                     
                        Taulukko 3
                     
                     Ekstra-neitsyt- ja neitsytoliiviöljyt
                     (Puhtausvaatimukset)
                     Laatuvaatimukset (Taulukot 1 ja 2)
                     KYLLÄ
                     EI
                     3,5-stigmastadieeni mg/kg
                     ≤ 0,05
                     > 0,05
                     Trans-isomeerit % rasvahapoista
                     tC18:1 ≤ 0,05
                     t(C18:2 + C18:3) ≤ 0,05
                     tC18:1 > 0,05
                     t(C18:2 + C18:3) > 0,05
                     Rasvahappopitoisuus
                     KYLLÄ
                     EI
                     δ-ECN42
                     ≤ |0,2|
                     > |0,2|
                     Sterolipitoisuus ja kokonaissterolit
                     KYLLÄ
                     EI
                     Erytrodioli + uvaoli %
                     ≤ 2,0
                     2,0 > E + U ≤ 4,5
                     > 4,5
                     Vahat1 mg/kg
                     ≤ 150
                     > 150
                     Öljytyyppi on ilmoitetun luokan mukainen.
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista.
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista.
                     (a)
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista.
                     Öljy ei ole ilmoitetun luokan mukaista.
                     (b)
                     
                        1C42+C44+C46
                  
               
               
                  
                     ”Lisäys 1
                     
                        Tämän asetuksen liitteiden ja päätöksentekokaaviossa tarkoitettujen määritysten väliset vastaavuudet
                     
                     
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Happopitoisuus
                                          
                                       
                              
                                 Liite II
                              
                              
                                 Vapaiden rasvahappojen määrittäminen kylmämenetelmällä
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Peroksidiluku
                                          
                                       
                              
                                 Liite III
                              
                              
                                 Peroksidiluvun määrittäminen
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Spektrofotometrinen määritys ultraviolettivalossa
                                          
                                       
                              
                                 Liite IX
                              
                              
                                 Spektrofotometrinen määritys
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Aistinvarainen arviointi
                                          
                                       
                              
                                 Liite XII
                              
                              
                                 Neitsytoliiviöljyn aistinvarainen arviointi
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Etyyliesterit
                                          
                                       
                              
                                 Liite XX
                              
                              
                                 Vahojen, rasvahappojen metyyliestereiden ja rasvahappojen etyyliestereiden pitoisuuksien määrittäminen kapillaarikaasukromatografisella menetelmällä
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Stigmasta-3,5-dieeni
                                          
                                       
                              
                                 Liite XVII
                              
                              
                                 Menetelmä stigmastadieenien määrittämiseksi kasviöljyistä
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Rasvahappojen trans-isomeerit
                                          
                                       
                              
                                 Liite X a
                                 ja
                              
                              
                                 Rasvahappojen metyyliestereiden määrittäminen kaasukromatografisella menetelmällä
                              
                           
                                 Liite X b
                              
                              
                                 Rasvahappojen metyyliestereiden valmistaminen
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Rasvahappojen koostumus
                                          
                                       
                              
                                 Liite X a
                                 ja
                              
                              
                                 Rasvahappojen metyyliestereiden määrittäminen kaasukromatografisella menetelmällä
                              
                           
                                 Liite X b
                              
                              
                                 Rasvahappojen metyyliestereiden valmistaminen
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             δ-ECN42
                                          
                                       
                              
                                 Liite XVIII
                              
                              
                                 ECN42:ta sisältävien triglyseridien koostutuksen määrittäminen (teoreettisen koostumuksen ja todellisen koostumuksen välinen ero)
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Sterolien koostumus ja kokonaissterolit
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             Erytrodioli ja uvaoli
                                          
                                       
                              
                                 Liite V
                              
                              
                                 Sterolien ja triterpeenidialkoholien rakenteen ja pitoisuuden määrittäminen kapillaarikaasukromatografisella menetelmällä
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Vahat
                                          
                                       
                              
                                 Liite IV
                              
                              
                                 Vahapitoisuuden määrittäminen kapillaarikaasukromatografisella menetelmällä
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             Alifaattiset alkoholit
                                          
                                       
                              
                                 Liite XIX
                              
                              
                                 Alifaattisten alkoholien pitoisuuden määrittäminen kapillaarikaasukromatografisella menetelmällä
                              
                           
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             2-asemassa olevat tyydyttyneet rasvahapot
                                          
                                       
                              
                                 Liite VII
                              
                              
                                 2-glyseryylimonopalmitaatin prosenttiosuuden määrittäminen
                              
                           
               ”
         
      
      
         
            LIITE IV
            
               
                  
                     ”LIITE V
                     
                        STEROLIEN JA TRITERPEENIDIALKOHOLIEN RAKENTEEN JA PITOISUUDEN MÄÄRITTÄMINEN KAPILLAARIKAASUKROMATOGRAFISELLA MENETELMÄLLÄ
                     
                     1.   TARKOITUS
                     Tällä menetelmällä voidaan määrittää yksittäisten sterolien ja triterpeenidialkoholien määrät ja niiden kokonaismäärä oliiviöljyissä ja oliivin puristemassaöljyissä.
                     2.   PERIAATE
                     Öljy, johon on lisätty α-kolestanoli sisäiseksi standardiksi, saippuoidaan kaliumhydroksidin etanoliliuoksella ja saippuoitumaton aines uutetaan etyylieetterillä.
                     Steroli- ja triterpeenidialkoholifraktio erotetaan saippuoitumattomasta aineksesta ohutkerroskromatografialla käyttämällä emäksistä silikageelilevyä. Silikageelistä saadut fraktiot muutetaan trimetyylisilyylieettereiksi ja määritetään sen jälkeen kapillaarikaasukromatografialla.
                     3.   VÄLINEISTÖ
                     Tavalliset laboratoriovälineet, erityisesti seuraavat:
                     
                                 3.1.
                              
                              
                                 Pullo, 250 ml, jossa on hiokset ja palautusjäähdytin.
                              
                           
                                 3.2.
                              
                              
                                 Erotussuppilo, 500 ml.
                              
                           
                                 3.3.
                              
                              
                                 Pulloja, 250 ml.
                              
                           
                                 3.4.
                              
                              
                                 Ohutkerroskromatografialaitteisto (TLC), jonka levyjen koko on 20 × 20 cm.
                              
                           
                                 3.5.
                              
                              
                                 Ultraviolettivalo, jonka aallonpituus on 254 tai 366 nm.
                              
                           
                                 3.6.
                              
                              
                                 Mikroruiskuja, 100 μl ja 500 μl.
                              
                           
                                 3.7.
                              
                              
                                 Lasisintterisuodatinsuppilo, jonka huokoskoko on G 3 (15–40 μm), halkaisija noin 2 cm ja korkeus 5 cm ja jossa on liitäntä tyhjiösuodatusta varten sekä koirashios.
                              
                           
                                 3.8.
                              
                              
                                 Tyhjiöimupullo, 50 ml, jossa on suodatinsuppiloon (3.7 kohta) sopiva naarashios.
                              
                           
                                 3.9.
                              
                              
                                 Koeputki, 10 ml, jossa on kartiomainen pohja ja ilmatiivis lasitulppa.
                              
                           
                                 3.10.
                              
                              
                                 Kaasukromatografi, jota käytetään kapillaarikolonnin ja jakoinjektiojärjestelmän kanssa ja jonka osat ovat
                                 
                                             3.10.1.
                                          
                                          
                                             termostaattisäätöinen kolonniuuni, joka säilyttää halutun lämpötilan noin ± 1 °C:n tarkkuudella,
                                          
                                       
                                             3.10.2.
                                          
                                          
                                             injektoriyksikkö, jonka lämpötilaa voi säätää, jonka höyrystämisosa on persilanoitua lasia ja jossa on virtauksenjakojärjestelmä,
                                          
                                       
                                             3.10.3.
                                          
                                          
                                             liekki-ionisaatiodetektori (FID),
                                          
                                       
                                             3.10.4.
                                          
                                          
                                             tiedonkeruujärjestelmä, joka sopii käytettäväksi FID-detektorin kanssa (3.10.3 alakohta) ja jonka voi integroida manuaalisesti.
                                          
                                       
                           
                                 3.11.
                              
                              
                                 Kvartsilasinen kapillaarikolonni, jonka pituus on 20–30 m ja sisähalkaisija 0,25–0,32 mm ja jonka sisäpinta on päällystetty yhdisteellä, jossa on 5 prosenttia bifenyyliä ja 95 prosenttia dimetyylipolysiloksaania (SE-52 tai SE-54 stationäärifaasi tai vastaava) siten, että päällysteen paksuus on kauttaaltaan 0,10–0,30 μm.
                              
                           
                                 3.12.
                              
                              
                                 Jakoinjektioon sopiva kiinteäneulallinen mikroruisku, 10 μl, kaasukromatografiaa varten.
                              
                           
                                 3.13.
                              
                              
                                 Kalsiumkloridia sisältävä eksikkaattori.
                              
                           4.   REAGENSSIT
                     
                              
                                 4.1.
                              
                              
                                 Vähintään 85-prosenttinen kaliumhydroksidi.
                              
                           
                              
                                 4.2.
                              
                              
                                 Kaliumhydroksidin noin 2 N etanoliliuos.
                                 130 g kaliumhydroksidia (4.1 kohta) liuotetaan 200 ml:aan tislattua vettä samalla jäähdyttäen ja lisätään etanolia (4.10 kohta) niin, että liuosta on yksi litra. Liuosta säilytetään tiiviisti suljetuissa, tummasta lasista valmistetuissa pulloissa enintään kahden päivän ajan.
                              
                           
                              
                                 4.3.
                              
                              
                                 Etyylieetteri, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 4.4.
                              
                              
                                 Kaliumhydroksidin noin 0,2 N etanoliliuos.
                                 13 g kaliumhydroksidia (4.1 kohta) liuotetaan 20 ml:aan tislattua vettä ja lisätään etanolia (4.10 kohta) niin, että liuosta on yksi litra.
                              
                           
                              
                                 4.5.
                              
                              
                                 Vedetön natriumsulfaatti, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 4.6.
                              
                              
                                 Silikageelillä päällystetyt lasilevyt (20 x 20 cm), paksuudeltaan 0,25 mm, ilman fluoresenssi-indikaattoria (voidaan ostaa käyttövalmiina).
                              
                           
                              
                                 4.7.
                              
                              
                                 Tolueeni, kromatografialaatua.
                              
                           
                              
                                 4.8.
                              
                              
                                 Asetoni, kromatografialaatua.
                              
                           
                              
                                 4.9.
                              
                              
                                 
                                    n-Heksaani, kromatografialaatua.
                              
                           
                              
                                 4.10.
                              
                              
                                 Etyylieetteri, kromatografialaatua.
                              
                           
                              
                                 4.11.
                              
                              
                                 Etanoli, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 4.12.
                              
                              
                                 Etyyliasetaatti, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 4.13.
                              
                              
                                 Ohutkerroskromatografian vertailuliuos: kolesterolin tai fytosterolin ja erytrodiolin viisiprosenttinen etyyliasetaattiliuos (4.11 kohta).
                              
                           
                              
                                 4.14.
                              
                              
                                 2,7-dikloorifluoreseiini, 0,2-prosenttinen etanoliliuos. Liuos tehdään lievästi emäksiseksi lisäämällä muutama tippa kaliumhydroksidin 2 N alkoholiliuosta (4.2 kohta).
                              
                           
                              
                                 4.15.
                              
                              
                                 Vedetön pyridiini, kromatografialaatua (ks. huomautus 5).
                              
                           
                              
                                 4.16.
                              
                              
                                 Heksametyylidisilatsaani, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 4.17.
                              
                              
                                 Trimetyylikloorisilaani, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 4.18.
                              
                              
                                 Sterolien trimetyylisilyylieettereiden (TMSE) näyteliuokset.
                                 Ne valmistetaan vasta käyttöhetkellä steroleista ja erytrodiolista, jotka saadaan niitä sisältävistä öljyistä.
                              
                           
                              
                                 4.19.
                              
                              
                                 α-Kolesteroli, puhtausaste yli 99 prosenttia (puhtausaste on tarkastettava kaasukromatografisella määrityksellä).
                              
                           
                              
                                 4.20.
                              
                              
                                 α-Kolestanoli, sisäisen standardin mukainen liuos, 0,2-prosenttisena (m/v) etyyliasetaattiluoksena (4.11 kohta).
                              
                           
                              
                                 4.21.
                              
                              
                                 Fenoliftaleiini, 10 g liuotettuna litraan etanolia (4.10 kohta).
                              
                           
                              
                                 4.22.
                              
                              
                                 Kantajakaasut: vety tai helium, kaasukromatografista laatua.
                              
                           
                              
                                 4.23.
                              
                              
                                 Apukaasut: vety, helium, typpi ja ilma, kaasukromatografista laatua.
                              
                           
                              
                                 4.24.
                              
                              
                                 
                                    n-Heksaanin (4.9 kohta) ja etyylieetterin (4.10 kohta) seos 65:35 (v/v).
                              
                           
                              
                                 4.25.
                              
                              
                                 Silylointireagenssi, jossa on pyridiiniä, heksametyylidisilatsaania ja trimetyylikloorisilaania tilavuussuhteessa 9:3:1.
                              
                           5.   MENETTELY
                     5.1.   Saippuoitumattomien aineiden esikäsittely
                     5.1.1.   250 ml:n pulloon (3.1 kohta) lisätään 500 μl:n mikroruiskulla (3.6 kohta) sellainen tilavuusmäärä α-kolestanolin sisäisen standardin mukaista liuosta (4.20 kohta) jonka sisältämä kolestanolin määrä on noin 10 prosenttia sterolin määrästä näytteessä. Esimerkiksi 5 gramman oliiviöljynäytteeseen lisätään 500 μl α-kolestanoliliuosta (4.20 kohta), ja jos näytteenä on oliivin puristemassaöljyä, lisätään 1 500 μl α-kolestanoliliuosta. Haihdutetaan kuiviin kevyessä typpivirrassa lämpimässä vesihauteessa ja pullon jäähdyttyä punnitaan 5 ± 0,01 g kuivattua, suodatettua näytettä samaan pulloon.
                     
                                 
                                    Huom. 1:
                              
                              
                                 Eläin- ja kasviperäiset rasvat ja öljyt, jotka sisältävät paljon kolesterolia, voivat tuottaa piikin, jonka retentioaika on lähes sama kuin kolestanolin. Jos käy näin, sterolifraktio on määritettävä kahdesti niin, että toisella kertaa käytetään sisäistä standardia ja toisella ei.
                              
                           5.1.2.   Lisätään 50 ml kaliumhydroksidin 2 N etanoliliuosta (4.2 kohta) ja hohkakiveä, käynnistetään palautusjäähdytin ja kuumennetaan vesihauteessa hiljalleen kiehuvaksi koko ajan voimakkaasti sekoittaen, kunnes saippuoituminen on tapahtunut (liuos kirkastuu). Kuumentamista jatketaan vielä 20 minuuttia, sitten lisätään 50 ml tislattua vettä jäähdyttimen yläpäästä, irrotetaan jäähdytin ja jäähdytetään pullo noin 30 °C:n lämpötilaan.
                     5.1.3.   Pullon sisältämä seos siirretään kvantitatiivisesti 500 ml:n erotussuppiloon (3.2 kohta) käyttämällä useita annoksia tislattua vettä (50 ml). Lisätään noin 80 ml etyylieetteriä (4.10 kohta), ravistetaan voimakkaasti noin 60 sekunnin ajan siten, että paine poistetaan ajoittain kääntämällä erotussuppilo ylösalaisin ja avaamalla tulppa. Annetaan seistä, kunnes kaksi faasia ovat täysin erottuneet (huomautus 2).
                     Sen jälkeen saippualiuos otetaan mahdollisimman tarkoin toiseen erotussuppiloon. Vesi-alkoholifaasi uutetaan vielä kaksi kertaa samalla tavoin käyttämällä 60–70 ml etyylieetteriä (4.10 kohta).
                     
                        Huom. 2: Mahdollinen emulsio voidaan hajottaa lisäämällä pieni määrä etanolia (4.11 kohta).
                     5.1.4.   Yhdistetään kolme eetteriuutetta yhteen erotussuppiloon, joka sisältää 50 ml vettä. Pestään vedellä (50 ml kerralla), kunnes pesuvesi ei enää saa vaaleanpunaista väriä, kun siihen lisätään tippa fenoliftaleiiniliuosta (4.21 kohta).
                     Kun pesuvesi on poistettu, suodatetaan vedettömän natriumsulfaatin (4.5 kohta) läpi etukäteen punnittuun 250 ml:n pulloon ja pestään suppilo ja suodatin pienillä määrillä etyylieetteriä (4.10 kohta).
                     5.1.5.   Liuotin haihdutetaan haihduttimessa 30 °C lämpötilassa tyhjiössä. Lisätään 5 ml asetonia, ja haihtuva liuotin poistetaan kokonaan kevyessä ilmavirrassa. Jäännöstä kuivatetaan lämpökaapissa 103 ± 2 °C:n lämpötilassa 15 minuutin ajan. Jäähdytetään eksikkaattoreissa ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella.
                     5.2.   Steroli- ja triterpeenidialkoholifraktion (erytrodioli + uvaoli) erottaminen
                     5.2.1.   Emäksisten levyjen valmistelu ohutkerroskromatografiaa varten: silikageelilevyt (4.6 kohta) upotetaan kaliumhydroksidin 0,2 N etanoliliuokseen (4.5 kohta) noin neljän senttimetrin syvyyteen kymmeneksi sekunniksi, minkä jälkeen niiden annetaan kuivua kaksi tuntia vetokaapissa ja lopuksi yksi tunti 100 °C:ssa lämpökaapissa.
                     Kun levyt on otettu lämpökaapista, niitä säilytetään kalsiumkloridia sisältävässä eksikkaattorissa (3.13 kohta) käyttöhetkeen saakka (näin käsitellyt levyt on käytettävä 15 päivän kuluessa).
                     
                                 
                                    Huom. 3:
                              
                              
                                 Kun sterolifraktion erottamiseen käytetään emäksisiä silikageelilevyjä, ei ole tarpeen käsitellä saippuoitumattomia aineita alumiinioksidilla. Näin kaikki happamat aineet (rasvahapot ja muut hapot) jäävät lähtöviivalle. Sterolivyöhyke erottuu selvästi alifaattisten ja triterpeenisten alkoholien vyöhykkeestä.
                              
                           5.2.2.   Heksaani-etyylieetteriseosta (4.24 kohta) (huomautus 4) kaadetaan kehitysastiaan niin, että sitä on noin 1 cm. Kehitysastia suljetaan sopivalla kannella ja annetaan seistä avaamatta vähintään puoli tuntia, jotta syntyy neste-höyrytasapaino. Astian sisäseinille voidaan kiinnittää suodatinpaperisuikaleita, jotka ulottuvat eluointiaineeseen. Tämä lyhentää kehitysaikaa lähes kolmanneksella ja aineosat eluoituvat tasaisemmin.
                     
                                 
                                    Huom. 4:
                              
                              
                                 Kehitysliuos on vaihdettava uuteen ennen jokaista koetta, jotta eluointiolosuhteet olisivat täysin toistettavissa. Vaihtoehtoisena liuottimena voidaan käyttää n-heksaani-etyylieetteriseosta (50:50, v/v).
                              
                           5.2.3.   Saippuoitumattomista aineista (5.1.5 alakohta) valmistetaan noin 5-prosenttinen etyyliasetaattiliuos (4.12 kohta), jota levitetään 0,3 ml ohuena ja tasaisena nauhana 100 μl:n mikroruiskulla kromatografialevyn (5.2.1 alakohta) alareunaan (2 cm). Asetetaan 2–3 μl aineiden vertailuliuosta (4.13 kohta) lähtöviivan tasalle niin, että steroli ja triterpeenidialkoholit voidaan tunnistaa kehityksen jälkeen.
                     5.2.4.   Levy asetetaan kehitysastiaan, joka on valmisteltu 5.2.2 alakohdan ohjeiden mukaan. Ympäristön lämpötilan on oltava 15–20 °C (huomautus 5). Astian kansi suljetaan heti ja annetaan levyn eluoitua, kunnes liuotinrintama on siirtynyt noin 1 cm:n päähän levyn yläreunasta. Levy otetaan kehitysastiasta ja liuotin haihdutetaan kuumassa ilmavirrassa tai panemalla levy joksikin aikaa vetokaappiin.
                     
                        Huom. 5: Korkeampi lämpötila voi haitata erottelua.
                     5.2.5.   Levylle suihkutetaan ohuelti ja tasaisesti 2,7-dikloorifluoreseiiniliuosta (4.14 kohta), ja se jätetään kuivumaan. Sterolin ja triterpeenidialkoholien vyöhykkeet voidaan tunnistaa ultraviolettivalossa kohdistamalla ne vertailuliuoksesta (4.13 kohta) syntyneisiin pisteisiin. Vyöhykkeiden ääriviivat merkitään mustalla kynällä fluoresenssin rajoja seuraten (ks. kuva 3, TLC-levy).
                     5.2.6.   Silikageelikerros raaputetaan merkityltä alueelta metallilastalla. Saatu aines hienonnetaan, siirretään suodatinsuppiloon (3.7 kohta), lisätään 10 ml kuumaa etyyliasetaattia (4.12 kohta), sekoitetaan huolellisesti metallilastalla ja suodatetaan tyhjiössä. Suodos kerätään suodatinsuppiloon liitettyyn erlenmeyerpulloon (3.8 kohta).
                     Pulloon jäänyt aines pestään kolme kertaa noin 10 ml:lla etyylieetteriä (4.3 kohta), ja suodos kerätään samaan, suodatinsuppiloon liitettyyn pulloon. Suodosta haihdutetaan, kunnes sen tilavuus on noin 4–5 ml, ja jäännösliuos kaadetaan etukäteen punnittuun 10 ml:n koeputkeen (3.9 kohta). Liuosta kuivataan alhaisella lämmöllä kevyessä typpivirrassa; jäännös liuotetaan muutamaan tippaan asetonia (4.8 kohta) ja kuivataan jälleen.
                     Koeputkessa olevan jäännöksen on sisällettävä steroli- ja triterpeenidialkoholifraktio.
                     5.3.   Trimetyylisilyylieettereiden valmistus
                     5.3.1.   Koeputkessa olevaan steroli- ja triterpeenifraktioon lisätään 50 μl silylointireagenssia (4.25 kohta) (huomautus 6) jokaista koeputkessa olevaa sterolien ja triterpeenidialkoholien milligrammaa kohti niin, että kosteutta ei pääse mukaan (huomautus 7).
                     
                                 
                                    Huom. 6:
                              
                              
                                 Käyttövalmiita liuoksia on kaupan. Saatavana on myös muita silylointireagensseja, kuten esim. bistrimetyylisilyylitrifluoriasetamidi + 1 % trimetyylikloorisilaania; reagenssi laimennetaan samalla määrällä vedetöntä pyridiiniä.
                              
                           Pyridiini voidaan korvata samalla määrällä asetonitriiliä.
                     5.3.2.   Koeputki suljetaan tulpalla, ravistetaan varovasti (ei ylösalaisin), kunnes yhdisteet ovat täysin liuenneet. Annetaan seistä vähintään 15 minuuttia huoneenlämmössä ja sentrifugoidaan sitten muutaman minuutin ajan; kirkas liuos on nyt valmis kaasukromatografista määritystä varten.
                     
                                 
                                    Huom. 7:
                              
                              
                                 Lievä sameus on tavallista eikä ole haitaksi. Valkoiset hiutaleet tai vaaleanpunaiseksi värjäytyminen ovat merkkejä kosteudesta tai reagenssien muuttumisesta. Jos näitä ilmenee, koe on uusittava (ainoastaan käytettäessä heksametyylidisilatsaania tai trimetyylikloorisilaania).
                              
                           5.4.   Kaasukromatografinen määritys
                     5.4.1.   Esivalmistelut ja kapillaarikolonnin valmistelu
                     
                              
                                 5.4.1.1.
                              
                              
                                 Kolonni (3.11 kohta) asennetaan kaasukromatografialaitteistoon kiinnittämällä kolonnin alkupää jakoinjektoriin ja kolonnin loppupää detektoriin.
                                 Tarkistetaan kaasukromatografisten laitteiden toiminta (kaasuliitännän tiiviys, detektorin, virtauksenjakojärjestelmän ja piirturin toimivuus, jne.)
                              
                           
                              
                                 5.4.1.2.
                              
                              
                                 Jos kapillaarikolonnia ei ole aikaisemmin käytetty, se on ensin valmisteltava käyttöön. Pieni määrä kaasua johdetaan kolonnin läpi, käynnistetään kaasukromatografi ja aloitetaan asteittainen lämmittäminen, jota jatketaan, kunnes lämpötila on kohonnut vähintään 20 °C korkeammaksi kuin käyttölämpötila (huomautus 8). Korkeaa lämpötilaa pidetään yllä vähintään kaksi tuntia, minkä jälkeen kromatografialaitteisto saatetaan käyttövalmiiksi (kaasuvirran ja erotuksen säätö, liekinsytytys, tietojärjestelmän kytkeminen, kolonnin, detektorin ja injektorin säätö jne.) ja signaalia rekisteröidään herkkyydellä, joka on vähintään kaksi kertaa niin suuri kuin määrityksessä käytettävä. Saadun perusviivan on oltava suora, eikä siinä saa olla minkäänlaisia piikkejä eikä siirtymää mihinkään suuntaan.
                                 Jos ilmenee negatiivista suoraviivaista siirtymää, se on merkki kolonnin liitäntöjen vuodosta, ja jos ilmenee positiivista siirtymää, se johtuu kolonnin riittämättömästä valmistelusta.
                                 
                                             
                                                Huom. 8:
                                          
                                          
                                             Esivalmistelulämpötilan on aina oltava vähintään 20 °C alempi kuin käytetyn stationäärifaasin korkein lämpötila.
                                          
                                       
                           5.4.2.   Toimintaolosuhteiden valinta
                     
                              
                                 5.4.2.1.
                              
                              
                                 Käyttöolosuhteiden ohjearvot ovat seuraavat:
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             kolonnin lämpötila: 260 ± 5 °C,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             injektorin lämpötila: 280–300 °C,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             detektorin lämpötila: 280–300 °C,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             kantajakaasun lineaarinopeus: heliumille 20–35 cm/s ja vedylle 30–50 cm/s,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             jakosuhde: 1:50–1:100,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             laitteiston herkkyys: 4–16 kertaa vähimmäisvaimennus,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             rekisteröintiherkkyys: 1–2 mV täydestä asteikosta,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             injektoidun aineen määrä: 0,5–1 μl TMSE-liuosta.
                                          
                                       Näitä olosuhteita voidaan muuttaa kolonnin ja kaasukromatografin ominaisuuksien mukaan niin, että saadaan seuraavat vaatimukset täyttävä kromatogrammi:
                                 
                                             —
                                          
                                          
                                             β-sitosterolipiikin retentioaika on 20 ± 5 minuuttia,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             kampesterolipiikki: oliiviöljylle (pitoisuus keskimäärin 3 %) 20 ± 5 % täydestä asteikosta, soijaöljylle (pitoisuus keskimäärin 20 %) 80 ± 10 % täydestä asteikosta,
                                          
                                       
                                             —
                                          
                                          
                                             kaikki mukana olevat sterolit on voitava erottaa toisistaan. Lisäksi kunkin piikin jälkeen piirturin tulee palata perusviivalle ennen uuden piikin alkua. Tämä ei ole kuitenkaan tarpeen, jos suhteellisen retentioajan (RRT) 1,02 piikki (sitostanoli) pystytään mittaamaan kohtisuoraan.
                                          
                                       
                           5.4.3.   Määritys
                     
                              
                                 5.4.3.1.
                              
                              
                                 Imetään 10 μl:n mikroruiskuun 1 μl heksaania, sitten 0,5 μl ilmaa ja tämän jälkeen 0,5–1 μl näyteliuosta; lopuksi männällä vedetään vielä neula tyhjäksi. Neula työnnetään septumin läpi injektoriin ja 1–2 sekunnin kuluttua seos injektoidaan nopeasti, odotetaan noin viisi sekuntia, jonka jälkeen neula vedetään pois hitaasti.
                                 Myös automaattista injektoria voidaan käyttää.
                              
                           
                              
                                 5.4.3.2.
                              
                              
                                 Rekisteröintiä jatketaan, kunnes näytteessä olevien triterpeenidialkoholien TMSE on kokonaan eluoitunut. Perusviivan on koko ajan oltava 5.4.1.2 alakohdan vaatimusten mukainen.
                              
                           5.4.4.   Piikkien tunnistaminen
                     Yksittäiset piikit tunnistetaan niiden retentioajan perusteella sekä vertaamalla sterolien ja triterpeenidialkoholien TMSE-seokseen, joka on määritetty samoissa olosuhteissa (ks. lisäys).
                     Sterolit ja triterpeenidialkoholit eluoituvat seuraavassa järjestyksessä: kolesteroli, brassikasteroli, ergosteroli, 24-metyleenikolesteroli, kampesteroli, kampestanoli, stigmasteroli, δ-7-kampesteroli, δ-5,23-stigmastadienoli, klerosteroli, β-sitosteroli, sitostanoli, δ-5-avenasteroli, δ-5,24-stigmastadienoli, δ-7-sigmastenoli, δ-7-avenasteroli, erytrodioli ja uvaoli.
                     ß-Sitosterolin retentioajat SE-52- ja SE-54-kolonneille on esitetty taulukossa 1.
                     Kuvat 1 ja 2 esittävät eräiden öljyjen tyypillisiä kromatogrammeja.
                     5.4.5.   Kvantitatiivinen arviointi
                     
                              
                                 5.4.5.1.
                              
                              
                                 Lasketaan α-kolestanolin sekä sterolien ja triterpeenidialkoholien piikkien pinta-alat tietojärjestelmän avulla. Sellaisten aineiden piikit jätetään huomiotta, jotka eivät esiinny taulukossa 1 (ergosterolin piikkiä ei lasketa). α-Kolestanolin vastekerroin on 1.
                              
                           
                              
                                 5.4.5.2.
                              
                              
                                 Lasketaan yksittäisten sterolien pitoisuus mg/kg:ssa rasvaa tai öljyä seuraavasta kaavasta:
                                 
                                    
                                 jossa:
                                 
                                             Ax
                                             
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             x-sterolin piikin pinta-ala, tietojärjestelmällä laskettuna;
                                          
                                       
                                             As
                                             
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             α-kolestanolin piikin pinta-ala, tietojärjestelmällä laskettuna;
                                          
                                       
                                             ms
                                             
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             lisätyn α-kolestanolin massa milligrammoina;
                                          
                                       
                                             m
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             määritykseen käytetyn näytteen massa grammoina.
                                          
                                       
                           6.   TULOSTEN ESITTÄMINEN
                     
                              
                                 6.1.
                              
                              
                                 Ilmoitetaan yksittäisten sterolien pitoisuus mg/kg:ssa rasvaa tai öljyä ja niiden pitoisuuksien yhteismäärä, ”kokonaissterolimäärä”.
                                 Yksittäisten sterolien sekä erytrodiolin ja uvaolin pitoisuudet ilmaistaan yhden desimaalin tarkkuudella.
                                 Kokonaisterolimäärä on ilmaistava kokonaislukuna.
                              
                           
                              
                                 6.2.
                              
                              
                                 Lasketaan yksittäisen sterolin prosenttiosuus sitä vastaavan piikin suhteellisena osuutena kaikkien sterolipiikkien sekä erytrodioli- ja uvaolipiikkien yhteenlasketusta pinta-alasta.
                                 
                                    
                                 jossa:
                                 
                                             Ax
                                             
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             x:n piikin pinta-ala;
                                          
                                       
                                             ΣA
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             kaikkien sterolien piikkien yhteenlaskettu pinta-ala.
                                          
                                       
                           
                              
                                 6.3.
                              
                              
                                 Näennäinen β-sitosterolipitoisuus: δ-5-23-stigmastadienoli + klerosteroli + β-sitosteroli + sitostanoli + δ-5-avenasteroli + δ-5-24-stigmastadienoli.
                              
                           
                              
                                 6.4.
                              
                              
                                 Lasketaan erytrodiolin ja uvaolin prosentuaalinen osuus:
                                 
                                    
                                 jossa
                                 
                                             ΣA
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             sterolin kokonaispinta-ala, tietojärjestelmällä laskettuna;
                                          
                                       
                                             Er
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             erytrodiolin pinta-ala tietojärjestelmällä laskettuna;
                                          
                                       
                                             Uv
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             uvaolin pinta-ala tietojärjestelmällä laskettuna.
                                          
                                       
                           
               
               
                  
                     ”Lisäys
                     
                        Kaasun lineaarinopeuden määrittäminen
                     
                     Kaasukromatografialaitteisto säädetään tavallisia käyttöolosuhteita vastaavaksi, injektoidaan 1–3 μl metaania (tai propaania) ja mitataan aika, jonka kuluessa kaasu kulkee kolonnin läpi, injektointihetkestä piikin muodostumiseen (tM).
                     Lineaarinopeus cm/s saadaan kaavasta L/tM, jossa L on kolonnin pituus senttimetreinä ja tM on mitattu aika sekunteina.
                     
                        Taulukko 1
                     
                     
                        Sterolien suhteelliset retentioajat
                     
                     
                                 Piikki
                              
                              
                                 Nimi
                              
                              
                                 Suhteellinen retentioaika
                              
                           
                                 Kolonni SE 54
                              
                              
                                 Kolonni SE 52
                              
                           
                                 1
                              
                              
                                 kolesteroli
                              
                              
                                 Δ-5-kolesteeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,67 
                              
                              
                                 0,63 
                              
                           
                                 2
                              
                              
                                 kolestanoli
                              
                              
                                 5-α-kolestaani-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,68 
                              
                              
                                 0,64 
                              
                           
                                 3
                              
                              
                                 brassicasteroli
                              
                              
                                 [24S]-24-metyyli-Δ-5,22-kolestadieeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,73 
                              
                              
                                 0,71 
                              
                           
                                 *
                              
                              
                                 ergosteroli
                              
                              
                                 [24S]-24-metyyli-Δ-5-7-22-kolestatrieeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,78 
                              
                              
                                 0,76 
                              
                           
                                 4
                              
                              
                                 24-metyleenikolesteroli
                              
                              
                                 24-metyleeni-Δ-5,24-kolestadieeni-3-ß-o1i
                              
                              
                                 0,82 
                              
                              
                                 0,80 
                              
                           
                                 5
                              
                              
                                 kampesteroli
                              
                              
                                 (24R)-24-metyyli-Δ-5-kolesteeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,83 
                              
                              
                                 0,81 
                              
                           
                                 6
                              
                              
                                 kampestanoli
                              
                              
                                 (24R)-24-metyyli-kolestaani-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,85 
                              
                              
                                 0,82 
                              
                           
                                 7
                              
                              
                                 stigmasteroli
                              
                              
                                 (24S)-24-etyyli-Δ-5,22-kolestadieeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,88 
                              
                              
                                 0,87 
                              
                           
                                 8
                              
                              
                                 δ-7-kampesteroli
                              
                              
                                 (24R)-24-metyyli-Δ-7-kolesteeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,93 
                              
                              
                                 0,92 
                              
                           
                                 9
                              
                              
                                 δ-5,23-stigmastadienoli
                              
                              
                                 (24R,S)-24-etyyli-Δ-5,23-koIestadieeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,95 
                              
                              
                                 0,95 
                              
                           
                                 10
                              
                              
                                 klerosteroli
                              
                              
                                 (24S)-24-etyyli-Δ-5,25-kolestadieeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 0,96 
                              
                              
                                 0,96 
                              
                           
                                 11
                              
                              
                                 ß-sitosteroli
                              
                              
                                 (24R)-24-etyyli-Δ-5-kolesteeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 1,00 
                              
                              
                                 1,00 
                              
                           
                                 12
                              
                              
                                 sitostanoli
                              
                              
                                 24-etyyli-kolestaani-3-ß-oli
                              
                              
                                 1,02 
                              
                              
                                 1,02 
                              
                           
                                 13
                              
                              
                                 Δ-5-avenasteroli
                              
                              
                                 (24Z)-24-etyylideeni-Δ-kolesteeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 1,03 
                              
                              
                                 1,03 
                              
                           
                                 14
                              
                              
                                 Δ-5-24-stigmastadienoli
                              
                              
                                 (24R,S)-24-etyyli-Δ-5,24-kolestadieeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 1,08 
                              
                              
                                 1,08 
                              
                           
                                 15
                              
                              
                                 Δ-7-stigmastenoli
                              
                              
                                 (24R,S)-24-etyyli-Δ-7-kolesteeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 1,12 
                              
                              
                                 1,12 
                              
                           
                                 16
                              
                              
                                 Δ-7-avenasteroli
                              
                              
                                 (24Z)-24-etyylideeni-Δ-7-kolesteeni-3-ß-oli
                              
                              
                                 1,16 
                              
                              
                                 1,16 
                              
                           
                                 17
                              
                              
                                 erytrodioli
                              
                              
                                 5-α-oleaani-12-eeni-3-ß-28-dioli
                              
                              
                                 1,41 
                              
                              
                                 1,41 
                              
                           
                                 18
                              
                              
                                 uvaoli
                              
                              
                                 Δ-12-urseeni-3-ß-28-dioli
                              
                              
                                 1,52 
                              
                              
                                 1,52 
                              
                           
                        Kuva 1
                     
                     
                        Lamppuoliiviöljyn steroli- ja triterpeenidialkoholifraktion kaasukromatogrammi (jossa näkyy sisäisen standardin huippu)
                     
                     
                        Kuva 2
                     
                     
                        Puhdistetun oliiviöljyn steroli- ja triterpeenidialkoholifraktion kaasukromatogrammi (jossa näkyy sisäisen standardin huippu)
                     
                     
                        Kuva 3
                     
                     
                        Oliivin puristemassaöljyn TLC-levyn vyöhyke, joka on raaputettava sterolien ja triterpeenialkoholien määrittämiseksi.
                     
                     
                                 1 –
                              
                              
                                 Skvaleeni
                              
                           
                                 2 –
                              
                              
                                 Triterpeeniset ja alifaattiset alkoholit
                              
                           
                                 3 –
                              
                              
                                 Sterolit ja triterpeenidialkoholit
                              
                           
                                 4 –
                              
                              
                                 Alku; vapaat rasvahapot
                              
                           
               ”
         
      
      
         
            LIITE V
            
               
                  
                     ”LIITE XII
                     
                        KANSAINVÄLISEN OLIIVINEUVOSTON MENETELMÄ NEITSYTOLIIVIÖLJYJEN AISTINVARAISTA ARVIOINTIA VARTEN
                     
                     1.   TARKOITUS JA SOVELTAMISALA
                     Tämän kansainvälisen menetelmän tarkoituksena on määrittää asetuksen (EY) N:o 1234/2007 liitteessä XVI olevassa 1 kohdassa tarkoitettujen neitsytoliiviöljyjen aistinvaraisten ominaisuuksien arvioinnissa käytettävä menettely ja vahvistaa menetelmä niiden luokittelemiseksi kyseisten ominaisuuksien perusteella. Menetelmässä annetaan myös valinnaisia pakkausmerkintöjä koskevia ohjeita.
                     Kuvattua menetelmää sovelletaan ainoastaan neitsytoliiviöljyihin ja niiden luokitteluun tai niiden pakkausmerkintöihin raadissa havaittujen virheiden ja hedelmäisyyden voimakkuuden perusteella. Raadin muodostaa ryhmä valikoituja, koulutettuja ja valvottuja maistajia.
                     Menetelmässä annetaan myös valinnaisia pakkausmerkintöjä koskevia ohjeita.
                     Tässä liitteessä mainituista kansainvälisen oliivineuvoston standardeista käytetään niiden viimeisintä saatavilla olevaa versiota.
                     2.   YLEINEN PERUSSANASTO AISTINVARAISTA ARVIOINTIA VARTEN
                     Viitataan standardiin IOC/T.20 / Asiak. nro 4 Sensory Analysis: General Basic Vocabulary (Aistinvarainen arviointi: yleinen perussanasto).
                     3.   ERITYISSANASTO
                     3.1.   Negatiiviset ominaisuudet
                     
                     
                                 
                                    Tunkkainen, sakkainen Maku on ominainen öljylle, joka on saatu kasoina tai muutoin sellaisissa olosuhteissa varastoiduista oliiveista, että anaerobinen käyminen on päässyt pitkälle, tai öljylle, joka on ollut kosketuksissa niin ikään anaerobiseen käymisprosessiin joutuneen tynnyrien ja sammioiden pohjasakan kanssa.
                              
                           
                                 
                                    Homeinen, kostea, maa Maku on ominainen sellaisista oliiveista saadulle öljylle, joita on säilytetty useita päiviä kosteissa olosuhteissa siten, että niihin on päässyt kasvamaan sienirihmastoa ja hometta, tai pesemättömistä maahan pudonneista tai mutaisista oliiveista saadulle öljylle.
                              
                           
                                 
                                    Viinimäinen, etikkainen, happoinen, hapan Öljylle ominainen viiniä tai etikkaa muistuttava maku johtuu pääasiassa oliivien tai huonosti pestyissä puristusmatoissa olevien oliivimassajäännösten aerobisesta käymisestä, joka johtaa etikkahapon, etyyliasetaatin ja etanolin muodostumiseen.
                              
                           
                                 
                                    Eltaantunut Maku on ominainen vahvasti hapettuneelle öljylle.
                              
                           
                                 
                                    Jäätyneet oliivit (puumainen, kostea) Maku on ominainen puussa jäätyneistä oliiveista saadulle öljylle.
                              
                           3.2.   Muut negatiiviset ominaisuudet
                     
                     
                                 
                                    Paistunut tai palanut Maku on ominainen öljylle, jota on kuumennettu valmistuksen aikana liikaa ja/tai liian pitkään, varsinkin kun tahnaa sekoitetaan ja kuumennetaan samanaikaisesti ja se tehdään sopimattomissa lämpöolosuhteissa.
                              
                           
                                 
                                    Heinämäinen, puumainen Maku on ominainen kuivuneista oliiveista tuotetulle öljylle.
                              
                           
                                 
                                    Karkea Toisinaan vanha öljy aiheuttaa paksun, tahmean suutuntuman.
                              
                           
                                 
                                    Rasvainen Öljyn maku muistuttaa petrolia, rasvaa tai mineraaliöljyä.
                              
                           
                                 
                                    Kasvisvesi Maku syntyy, kun öljy on ollut kauan kosketuksissa käymisprosessiin joutuneen kasvisveden kanssa.
                              
                           
                                 
                                    Suolavesi Maku johtuu siitä, että öljy on saatu suolaliemessä säilötyistä oliiveista.
                              
                           
                                 
                                    Metallinen Metallia muistuttava maku on ominainen öljylle, joka on ollut pitkäaikaisessa kosketuksessa metallipintojen kanssa murskauksen, sekoituksen, puristuksen tai varastoinnin aikana.
                              
                           
                                 
                                    Espartoheinä Maku on ominainen öljylle, joka on puristettu uusien espartomattojen läpi. Se voi olla erilainen sen mukaan, oliko mattojen esparto vihreää vai kuivaa.
                              
                           
                                 
                                    Toukkainen Maku on ominainen öljylle, joka on saatu oliivikärpäsen (Bactrocera oleae) toukkien pilaamista oliiveista.
                              
                           
                                 
                                    Kurkku Maku syntyy, kun öljyä on säilytetty ilmatiiviissä peltiastioissa liian kauan, ja se johtuu 2,6-nonadienaalin muodostumisesta.
                              
                           3.3.   Positiiviset ominaisuudet
                     
                     
                                 
                                    Hedelmäinen Oliivien lajikkeesta riippuvat hajuaistimukset ovat ominaisia hyvänlaatuisista ja tuoreista, raaoista tai kypsistä oliiveista saadulle öljylle. Ne havaitaan suoraan ja/tai nenän takaosan kautta.
                              
                           
                                 
                                    Karvas Maku on raaoista tai vielä kypsyvistä oliiveista saadun öljyn perusominaismaku, joka havaitaan kielen takaosan V:n muodostavilla vallinystyillä.
                              
                           
                                 
                                    Pistävä Pistelevä suutuntuma on ominainen satokauden alussa pääasiassa vielä raaoista oliiveista tuotetuille öljyille, ja se voidaan havaita koko suuontelossa, erityisesti kurkussa.
                              
                           3.4.   Valinnaiset termit pakkausmerkintöjä varten
                     
                     Raadin puheenjohtaja voi pyynnöstä todistaa, että arvioidut öljyt ovat ominaisuuksien voimakkuuden ja havaitsemisen osalta seuraavia ilmauksia ja adjektiiveja vastaavien määritelmien ja vertailuvälien mukaisia:
                     
                                 
                                    Positiiviset ominaisuudet (hedelmäinen, karvas ja pistävä): Aistimuksen voimakkuuden mukaan:
                                 
                                             ”voimakas”, jos asianomaisen ominaisuuden mediaani on yli 6,
                                          
                                       
                                             ”keskivoimakas”, jos asianomaisen ominaisuuden mediaani on 3–6,
                                          
                                       
                                             ”mieto”, jos asianomaisen ominaisuuden mediaani on alle 3.
                                          
                                       
                           
                                 
                                    Hedelmäinen Oliivien lajikkeesta riippuvat hajuaistimukset ovat ominaisia hyvänlaatuisista ja tuoreista oliiveista saadulle öljylle, jossa raakoja ja kypsiä oliiveja on samassa suhteessa. Ne havaitaan suoraan ja/tai nenän takaosan kautta.
                              
                           
                                 
                                    Vihreän hedelmäinen Oliivien lajikkeesta riippuvat hajuaistimukset tuovat mieleen vihreät hedelmät. Ne ovat ominaisia raaoista, hyvänlaatuisista ja tuoreista oliiveista saadulle öljylle. Ne havaitaan suoraan ja/tai nenän takaosan kautta.
                              
                           
                                 
                                    Kypsän hedelmäinen Oliivien lajikkeesta riippuvat hajuaistimukset tuovat mieleen kypsät hedelmät. Ne ovat ominaisia hyvänlaatuisista ja tuoreista oliiveista saadulle öljylle. Ne havaitaan suoraan ja/tai nenän takaosan kautta.
                              
                           
                                 
                                    Tasapainoinen Öljy ei ole epätasapainossa; epätasapainolla tarkoitetaan sellaisen öljyn haju- ja makuaistimusta sekä suutuntumaa, jossa karvauden ja/tai pistävyyden mediaani on yli kaksi yksikköä korkeampi kuin hedelmäisyyden mediaani.
                              
                           
                                 
                                    Mieto öljy Karvauden mediaani ja pistävyyden mediaani ovat öljyssä 2 tai vähemmän.
                              
                           4.   LASI ÖLJYN MAISTAMISTA VARTEN
                     Viitataan standardiin IOC/T.20 / Asiak. nro 5, Glass for Oil Tasting (Öljynmaistamislasi).
                     5.   MAISTAMISHUONE
                     Viitataan standardiin IOC/T.20 / Asiak. nro 6, Guide for the Installation of a Test Room (Maistamishuoneen suunnittelu).
                     6.   TARVIKKEET
                     Seuraavien tarvikkeiden, joita maistaja tarvitsee voidakseen suoriutua tehtävästään, on oltava jokaisessa arvostelukopissa käden ulottuvilla:
                     
                                 —
                              
                              
                                 laseja (standardoituja), joissa tunnuksella merkityt näytteet peitetään kellolasilla ja säilytetään 28 °C ± 2 °C:n lämpötilassa,
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 profiililomake (ks. kuva 1) paperitulosteena tai tiedostona edellyttäen, että profiililomakkeen käyttöä koskevat ehdot täyttyvät; tarvittaessa lomakkeen käyttöohjeet,
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 kuulakärkikynä tai pysyvä muste,
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 tarjottimia, joilla omenalohkoja ja/tai vettä, hiilihapotettua vettä ja/tai korppuja,
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 lasillinen huoneenlämpöistä vettä,
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 8.4 ja 9.11 kohdassa luetellut yleiset säännöt,
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 sylkykuppeja.
                              
                           7.   RAADIN PUHEENJOHTAJA JA MAISTAJAT
                     7.1.   Raadin puheenjohtaja
                     
                     Raadin puheenjohtajalla on oltava asianmukainen koulutus ja asiantuntemusta niistä öljyistä, joita työn kuluessa tulee käsiteltäväksi. Puheenjohtaja on raadin avainhenkilö ja vastaa sen organisaatiosta ja toiminnasta.
                     Raadin puheenjohtajan työ edellyttää peruskoulutusta aistinvaraisen arvioinnin välineisiin, aistinvaraisia taitoja, huolellisuutta kokeiden valmistelussa, järjestämisessä ja toteuttamisessa sekä taitoa ja kärsivällisyyttä suunnitella ja toteuttaa kokeet tieteellisellä tavalla.
                     Puheenjohtaja on yksin vastuussa maistajien valinnasta, koulutuksesta ja valvonnasta, jotta näiden soveltuvuus tehtäväänsä säilyy riittävän hyvänä. Puheenjohtaja vastaa siten myös maistajien arvioinnista, jonka on aina oltava objektiivista ja jota varten puheenjohtajien on kehitettävä erityiset kokeisiin perustuvat menettelyt ja hyvin perustellut hyväksyntä- ja hylkäämisperusteet. Viitataan standardiin IOC/T.20 / Asiak. nro 14, Guide for the selection, training and monitoring of skilled virgin olive oil tasters (Neitsytoliiviöljyn pätevien maistajien valinta-, koulutus- ja valvontaopas).
                     Raadin puheenjohtaja on vastuussa raadin toiminnasta ja siten sen suorittamasta arvioinnista, josta puheenjohtajan on esitettävä luotettavaa ja objektiivista näyttöä. Puheenjohtajan on kaikissa tapauksissa aina voitava osoittaa, että menetelmä ja maistajat ovat hänen hallinnassaan. Suositellaan, että raati kalibroidaan määräajoin (IOC/T.20 / Asiak. nro 14, 5 §).
                     Puheenjohtaja on viime kädessä vastuussa raadin asiakirjojen säilyttämisestä. Asiakirjojen on aina oltava jäljitettävissä. Hänen on noudatettava aistinvaraisen arvioinnin varmistamista ja laatua koskevien kansainvälisten standardien vaatimuksia ja varmistettava aina näytteiden nimettömyys.
                     Puheenjohtaja vastaa välineistön ja tarvittavien laitteiden inventoinnista ja siitä, että ne ovat tämän menetelmän edellyttämien eritelmien mukaisia sekä asianmukaisesti puhdistettuja ja huollettuja. Hänen on varmistettava, että siitä säilytetään kirjalliset todisteet, samoin kuin koeolosuhteiden vaatimustenmukaisuudesta.
                     Puheenjohtaja vastaa näytteiden vastaanotosta ja säilyttämisestä sen jälkeen, kun ne saapuvat laboratorioon, samoin kuin niiden varastoinnista kokeiden jälkeen. Puheenjohtajan on edellä mainituissa toimissa aina varmistettava, että näytteet pysyvät nimettöminä ja että niitä säilytetään asianmukaisesti. Hänen on laadittava sitä varten kirjalliset menettelyt, joilla varmistetaan koko prosessin jäljitettävyys ja takeet vaatimustenmukaisuudesta.
                     Lisäksi puheenjohtaja vastaa näytteiden valmistelusta, merkinnästä ja esittelystä maistajille noudattamalla ennalta vahvistettujen protokollien mukaista asiaankuuluvaa koesuunnitelmaa sekä maistajilta saatavien tietojen kokoamisesta ja tilastollisesta käsittelystä.
                     Puheenjohtaja vastaa myös kaikkien muiden sellaisten menettelyjen kehittelystä ja laatimisesta, joita saatetaan tarvita täydentämään tätä standardia ja varmistamaan, että raati toimii asianmukaisesti.
                     Hänen on pohdittava keinoja, joilla raadin tuloksia voidaan verrata muiden neitsytoliiviöljyä arvioivien raatien tuloksiin sen varmistamiseksi, että raati toimii asianmukaisesti.
                     Raadin puheenjohtajan velvollisuus on motivoida raadin jäseniä luomalla heidän keskuudessaan innostunut, utelias ja kilpaileva henki. Tätä varten suositellaan voimakkaasti, että sujuva vuorovaikutus raadin jäsenten kanssa varmistetaan pitämällä jäsenet ajan tasalla kaikista tehtävistä, joita he suorittavat, sekä saaduista tuloksista. Lisäksi puheenjohtajan on varmistettava, että hänen oma mielipiteensä ei ole tiedossa, jotta hän ei siirrä omia perusteitaan muille maistajille.
                     Puheenjohtaja kutsuu maistajat koolle riittävän ajoissa ja vastaa mahdollisiin kysymyksiin kokeiden suorittamisesta, mutta hän ei saa esittää näytettä koskevia näkemyksiä.
                     7.2.   Maistajat
                     
                     Oliiviöljyjä koskevissa aistinvaraisissa kokeissa maistajina toimivien henkilöiden on oltava vapaaehtoisia ja ymmärrettävä tällaisen vapaaehtoistoiminnan seuraukset velvoitteiden osalta sekä rahallisen korvauksen puuttuminen. Tästä syystä on suositeltavaa, että ehdokkaat tekevät kirjallisen hakemuksen. Raadin puheenjohtaja valitsee ja kouluttaa maistajaehdokkaat ja valvoo heidän taitoaan erottaa samanlaisia näytteitä. On muistettava, että koulutus lisää maistajien tarkkuutta.
                     Maistajan on toimittava todellisen aistinvaraisen havainnoitsijan tavoin, jätettävä syrjään oma henkilökohtainen makunsa ja raportoitava pelkästään havaitsemistaan aistimuksista. Tätä varten työ on aina tehtävä hiljaisuudessa, rennosti ja kiirehtimättä, jotta aistit voidaan kokonaan suunnata maistettavaan näytteeseen.
                     Jokaiseen kokeeseen tarvitaan 8–12 maistajaa, vaikka on aina hyvä pitää varalla muutama ylimääräinen maistaja, jotta mahdollisesti poisjääneet voidaan korvata.
                     8.   KOEOLOSUHTEET
                     8.1.   Näytteen esittely
                     
                     Arvioitava öljynäyte esitellään standardin IOC/T.20 / Asiak. nro 5, Glass for Oil Tasting mukaisessa maistamislasissa.
                     Lasissa on 14–16 ml öljyä tai 12,8–14,6 g, jos näytteet punnitaan. Ne on peitetty kellolasilla.
                     Jokainen lasi on merkitty tunnuksella, joka koostuu kahdesta satunnaisesta numerosta tai numeroista ja kirjaimista. Merkinnät on tehtävä hajuttomalla tavalla.
                     8.2.   Kokeen ja näytteen lämpötila
                     
                     Maistettavaksi tarkoitetut öljynäytteet on koko kokeen ajan säilytettävä laseissa 28 ± 2 °C:n lämpötilassa. Tämä lämpötila on valittu siksi, että siinä on helpompi havaita aistinvaraisia eroja kuin huonelämpötilassa. Toinen syy tämän lämpötilan valintaan on, että kylmemmässä öljyn aromaattiset aineet tuskin pääsevät haihtumaan ja korkeammassa lämpötilassa haihtuu aineita, jotka ovat ominaisia kuumennetulle öljylle. Näytteen lämmittämiseen lasissa käytettävä menetelmä on esitetty standardissa IOC/T.20 / Asiak. nro 5, Glass for Oil Tasting.
                     Maistamishuoneen lämpötilan on oltava 20–25 °C (ks. IOC/T.20 / Asiak. nro 6).
                     8.3.   Kokeen ajankohta
                     
                     Aamupäivä on parasta aikaa maistaa öljyjä: on todettu, että päivän aikana on jaksoja, jolloin maku- ja hajuaistimukset havaitaan parhaiten. Maku- ja hajuherkkyys kohoavat ennen aterioita ja vähenevät aterioiden jälkeen.
                     Tätä seikkaa ei saa kuitenkaan korostaa liikaa niin, että maistajat kärsivät nälän tunteesta, joka häiritsee heitä ja vaikuttaa erottelukykyyn. Siitä syystä maistamistilaisuudet suositellaan järjestettäviksi klo 10–12 aamupäivällä.
                     8.4.   Maistajat: yleiset käyttäytymissäännöt
                     
                     Maistajien työskentelyyn sovelletaan seuraavia käyttäytymissuosituksia.
                     Kun raadin puheenjohtaja kutsuu osallistumaan aistinvaraiseen arviointiin, maistajan olisi voitava osallistua etukäteen sovittuna ajankohtana ja noudattaa seuraavia ohjeita:
                     
                                 —
                              
                              
                                 Ennen kokeen alkamista maistaja ei tupakoi eikä juo kahvia ainakaan 30 minuuttiin.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Maistaja ei saa käyttää hajusteita, kosmetiikkaa tai saippuaa, jonka tuoksu voi säilyä koeajankohtaan asti. Kädet pestään tuoksuttomalla saippualla, ja kädet huuhdellaan ja kuivataan pesun jälkeen niin monta kertaa kuin on tarpeen mahdollisen tuoksun poistamiseksi.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Ennen maistamista ollaan syömättä ainakin yhden tunnin ajan.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Jos maistaja tuntee olonsa fyysisesti sairaaksi ja varsinkin jos tämä vaikuttaa haju- tai makuaistiin tai jos maistajaan kohdistuva psyykkinen paine estää häntä keskittymästä työhönsä, maistaja pidättyy maistamisesta ja ilmoittaa asiasta raadin puheenjohtajalle.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Noudatettuaan edellä annettuja ohjeita maistaja asettuu hänelle osoitettuun maistamiskoppiin hillitysti ja rauhallisesti.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Maistaja tutustuu huolellisesti profiililomakkeessa annettuihin ohjeisiin. Hän ei ala tutkia näytettä, ennen kuin on täysin valmistautunut tehtävään (rento ja kiireetön). Jos maistajalla on jotain kysymyksiä, hän kysyy yksityisesti neuvoa raadin puheenjohtajalta.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Tehtävä suoritetaan hiljaisuudessa.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Matkapuhelin kytketään aina pois päältä, jotta kollegojen keskittyminen ja työskentely ei häiriydy.
                              
                           9.   AISTINVARAINEN ARVIOINTIMENETTELY JA NEITSYTOLIIVIÖLJYN LUOKITTELU
                     9.1.   Maistamistekniikka
                     
                     
                              
                                 9.1.1.
                              
                              
                                 Maistaja ottaa lasin käteensä, kun kansi on vielä paikoillaan, ja kallistaa ja kiertää sitä niin, että öljy kastelee lasin sisäpintaa mahdollisimman paljon. Tämän vaiheen jälkeen hän ottaa kannen pois ja haistaa näytettä vetämällä henkeä tasaisesti, syvään ja hitaasti öljyn arvioimiseksi. Haistaminen ei saa kestää yli 30:tä sekuntia. Ellei maistaja ole tässä ajassa ehtinyt päätyä mihinkään tulokseen, hänen on odotettava hetki ennen kuin yrittää uudestaan.
                                 Kun haistamiskoe on suoritettu, voidaan siirtyä maun arviointiin (sisältää haju-, maku- ja tuntoaistimuksen). Tätä varten maistaja ottaa suuhunsa noin 3 ml öljyä. On tärkeätä, että öljy leviää kaikkialle suuhun, suun etuosasta ja kielen kärjestä sivuja pitkin suun takaosaan ja kitapurjeeseen, sillä makuaistin ja suutuntuman herkkyys vaihtelevat tunnetusti kitalaen ja kielen eri osissa.
                                 On hyvin tärkeää antaa riittävän määrän öljyä levitä hyvin hitaasti kielen yli kitapurjeeseen ja nieluun saakka, samalla kun maistaja keskittyy siihen, missä järjestyksessä karvas ja pistävä aistimus tuntuvat. Jos näin ei tehdä, molemmat aistimukset saattavat jäädä huomaamatta joissakin öljyissä ja toisaalta karvas maku saattaa jäädä pistävän maun peittämäksi.
                                 Lyhyiden, peräkkäisten, suun kautta tapahtuvien sisäänhenkäisyjen avulla maistaja saa näytteen leviämään kaikkialle suuhun ja pakottaa haihtuvat, aromaattiset yhdisteet nenän takaosaan aistittaviksi.
                                 Myös pistävä suutuntuma otetaan huomioon. Tätä tarkoitusta varten öljy on suositeltavaa niellä.
                              
                           
                              
                                 9.1.2.
                              
                              
                                 Kun neitsytoliiviöljyä arvioidaan aistinvaraisesti, yhdellä maistamiskerralla on suositeltavaa arvioida enintään NELJÄÄ NÄYTETTÄ siten, että päivässä järjestetään enintään kolme maistamistilaisuutta, sillä muiden näytteiden välitön arviointi saattaisi aiheuttaa kontrastivaikutuksen.
                                 Koska peräkkäiset maistamiset aiheuttavat väsymistä ja aistiherkkyys vähenee, on tärkeää käyttää jotakin tuotetta, joka poistaa öljyn suusta ennen seuraavaa maistamista.
                                 On suositeltavaa käyttää pientä omenapalaa, jota pureskellaan ja joka syljetään sitten sylkykuppiin. Sen jälkeen suu huuhdellaan pienellä määrällä huoneenlämpöistä vettä. Maistamisten välillä pidetään vähintään 15 minuutin tauko.
                              
                           9.2.   Miten maistaja käyttää profiililomaketta
                     
                     Maistajan käyttämä profiililomake on esitetty yksityiskohtaisesti tämän liitteen kuvassa 1.
                     Jokainen raatiin kuuluva maistaja haistaa ja maistaa (1) tarkasteltavaa öljyä. Sen jälkeen hänen on merkittävä profiililomakkeessa oleviin 10 cm:n asteikkoihin kunkin havaitsemansa negatiivisen ja positiivisen ominaisuuden voimakkuus.
                     Jos maistaja havaitsee negatiivisia ominaisuuksia, joita ei ole lueteltu 4 kohdassa, ne merkitään kohtaan ”muut” käyttämällä ilmauksia, jotka täsmällisimmin kuvaavat kyseisiä ominaisuuksia.
                     9.3.   Miten raadin puheenjohtaja käyttää tietoja
                     
                     Raadin puheenjohtaja kerää kunkin maistajan täyttämät profiililomakkeet ja tarkastaa eri ominaisuuksille osoitetut voimakkuusasteet. Jos havaitaan poikkeavuuksia, puheenjohtaja pyytää maistajaa tarkistamaan profiililomakkeensa ja tarvittaessa toistamaan kokeen.
                     Raadin puheenjohtaja vie raadin jäsenten arviointitiedot (standardin IOC/T.20 / Asiak. nro 15 mukaiseen) tietokonesovellukseen, jotta arvioinnin tulokset voidaan laskea tilastollisesti niiden mediaanin perusteella. Ks. tämän liitteen 9.4 kohta ja lisäys. Tiettyä näytettä koskevat tiedot kirjataan yhdeksän saraketta käsittävän matriisin avulla. Sarakkeet edustavat yhdeksää aistimusominaisuutta. Matriisissa on n riviä, jotka edustavat käytettyjen raadin jäsenten lukumäärää n.
                     Jos vähintään 50 prosenttia raadin jäsenistä on merkinnyt havaitsemansa virheen kohtaan ”muut”, kyseisen virheen mediaani lasketaan ja öljy luokitellaan vastaavasti.
                     Robusti variaatiokerroin (voimakkuudeltaan voimakkain virhe ja hedelmäinen ominaisuus), joka määrittää luokituksen, saa olla enintään 20 prosenttia.
                     Jos näin ei ole, raadin puheenjohtajan on toistettava kyseisen näytteen arviointi toisessa maistamistilaisuudessa.
                     Jos tällainen tilanne toistuu usein, raadin puheenjohtajan on suositeltavaa antaa maistajille erityistä lisäkoulutusta (IOC/T.20 / Asiak. nro 14, 5 §) ja käyttää toistettavuusindeksiä ja poikkeamaindeksiä raadin suorituksen tarkastamiseen (IOC/T.20 / Asiak. nro 14, 6 §).
                     9.4.   Öljyn luokittelu
                     
                     Öljy luokitellaan jäljempänä esitettyihin luokkiin virheen mediaanin ja hedelmäisyyden ominaisuuden mediaanin mukaan. Virheen mediaanilla tarkoitetaan voimakkaimmin havaitun virheen mediaania. Virheen mediaani ja hedelmäisyyden mediaani ilmaistaan yhden desimaalin tarkkuudella.
                     Öljy luokitellaan vertaamalla virheen mediaanin ja hedelmäisyyden mediaanin arvoa jäljempänä esitettyihin vertailuväleihin. Koska vertailuvälien rajoja määriteltäessä on otettu huomioon menetelmän virhe, niitä on pidettävä absoluuttisina. Luokittelu voidaan esittää tietokonesovelluksien avulla visuaalisesti tilastotiedoista koottuna taulukkona tai kaaviona.
                     
                                 a)
                              
                              
                                 Ekstra-neitsytoliiviöljy: virheen mediaani on 0 ja hedelmäisyyden mediaani yli 0.
                              
                           
                                 b)
                              
                              
                                 Neitsytoliiviöljy: virheen mediaani on yli 0 mutta enintään 3,5 ja hedelmäisyyden mediaani on yli 0.
                              
                           
                                 c)
                              
                              
                                 Lamppuoliiviöljy: virheen mediaani on yli 3,5 tai virheen mediaani on enintään 3,5 ja hedelmäisyyden mediaani on 0.
                              
                           
                        Huom. 1:
                     
                     Jos karvaan ja/tai pistävän ominaisuuden mediaani on yli 5,0, raadin puheenjohtaja tekee siitä merkinnän öljyn arviointitodistukseen.
                     
                        Kuva 1
                     
                     
                        NEITSYTOLIIVIÖLJYN PROFIILILOMAKE
                     
                     
                                 
                                    Havaittujen virheiden voimakkuus
                                 
                              
                           
                                 Tunkkainen/sakkainen (*1)
                                 
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Homeinen/kostea/maa (*1)
                                 
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Viinimäinen/etikkainen/
                                 happoinen/hapan (*1)
                                 
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Jäätyneet oliivit
                                 (puumainen, kostea)
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Eltaantunut
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Muut negatiiviset ominaisuudet:
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Laatusana:
                              
                              
                                 metallinen  heinämäinen  toukkainen  karkea 
                                 suolavesi  paistunut tai palanut  kasvisneste 
                                 esparto  kurkku  rasvainen 
                              
                           
                           
                                 
                                    Havaittujen positiivisten ominaisuuksien voimakkuus
                                 
                              
                           
                                 Hedelmäinen
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                  
                              
                              
                                 vihreä 
                              
                              
                                 kypsä 
                              
                           
                                 Karvas
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Pistävä
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                  
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Maistajan nimi:
                              
                              
                                  
                              
                              
                                 Maistajan tunnus:
                              
                           
                                 Näytteen tunnus:
                              
                              
                                 Allekirjoitus:
                              
                           
               
               
                  
                     ”Lisäys
                     
                        Mediaanin ja luottamusvälin laskutapa
                     
                     
                        Mediaani
                     
                     
                        
                     Mediaanilla tarkoitetaan reaalilukua Xm, joka osoittaa, että todennäköisyys (p) siihen, että jakauman arvot (X) ovat pienempiä kuin Xm, on enintään 0,5 ja että samanaikaisesti todennäköisyys (p) siihen, että jakauman arvot (X) ovat enintään Xm, on vähintään 0,5. Käytännönläheisemmän määritelmän mukaan mediaani on 50. prosenttipiste suuruusjärjestykseen asetetuista luvuista. Yksinkertaisemmin sanottuna mediaani on keskimmäinen suuruusjärjestykseen asetetuista luvuista, jos niitä on pariton määrä, tai kahden keskimmäisen luvun keskiarvo, jos suuruusjärjestykseen asetettuja lukuja on parillinen määrä.
                     
                        Robusti keskihajonta
                     
                     Jotta mediaanin variaatiosta saataisiin luotettava arvio, on käytettävä Stuartin ja Kendallin (4) arviointimenetelmää robustin keskihajonnan määrittämiseksi. Seuraavalla kaavalla saadaan asymptoottinen keskihajonta eli kyseessä olevien tietojen variaation robusti arvio, jossa N on havaintojen lukumäärä ja IQR kvartiilivälin pituus, joka sisältää täsmälleen 50 prosenttia tietyn todennäköisyysjakauman havainnoista.
                     
                        
                     Kvartiiliväli lasketaan laskemalla 75. ja 25. prosenttipisteen ero.
                     
                        
                     Prosenttipiste on arvo Xpc, joka osoittaa, että todennäköisyys (p) siihen, että jakauman arvot ovat pienempiä kuin Xpc, on enintään tietty prosentti, ja että samanaikaisesti todennäköisyys (p) siihen, että jakauman arvot ovat enintään Xpc, on vähintään kyseinen prosentti. Prosentti ilmoittaa tietyn jakauman fraktiilin. Kun kyseessä on mediaani, se on 50/100.
                     
                        
                     Käytännössä prosenttipiste on jakauman arvo, joka vastaa tiettyä jakauman tai tiheyden kaarelta rajattua aluetta. Esimerkiksi 25. prosenttipiste edustaa jakauman arvoa, joka vastaa aluetta 0,25 tai 25/100.
                     Tässä menetelmässä prosenttipisteet lasketaan tietomatriisissa olevien todellisten arvojen perusteella (prosenttipisteiden laskentamenettely).
                     
                        Robusti variaatiokerroin (%)
                     
                     Robusti variaatiokerroin CVr% on puhdas luku, joka osoittaa analysoitavan lukujoukon variaation prosenttiosuuden. Tämän vuoksi se on erittäin hyödyllinen raadin jäsenten luotettavuuden tarkistamiseksi.
                     
                        
                     
                        95 prosentin luottamusväli suhteessa mediaaniin
                     
                     95 prosentin luottamusväli (ensimmäisen lajin virheen arvo on 0,05 tai 5 prosenttia) kuvaa väliä, jolla mediaanin arvo voi vaihdella, jos koe olisi mahdollista toistaa lukemattomia kertoja. Käytännössä luottamusväli osoittaa kokeen vaihteluväliä valituissa toimintaolosuhteissa, jos oletetaan, että koe voitaisiin toistaa useita kertoja. Luottamusvälin kuten robustin variaatiokertoimenkin avulla voidaan arvioida kokeen luotettavuus.
                     
                        
                     
                        
                     jossa c = 1,96, kun luottamusväli on 95 prosentin tasolla.
                     Standardin IOC/T 20 / Asiak. nro 15 liitteessä I on esitetty esimerkkilaskelma.
                     
                        Kirjallisuus
                     
                     
                                 (1)
                              
                              
                                 Wilkinson, L. (1990). Systat: The system for statistics. SYSTAT Inc., Evanston, IL.
                              
                           
                                 (2)
                              
                              
                                 Cicchitelli, G. (1984). Probabilità e Statistica. Maggioli Editore, Rimini.
                              
                           
                                 (3)
                              
                              
                                 Massart, D. L., Vandeginste, B. G. M., Deming, Y., Michotte, L. (1988). Chemometrics. A textbook. Elsevier, Amsterdam.
                              
                           
                                 (4)
                              
                              
                                 Kendall, M. G., Stuart, A. (1967). The advanced theory of statistics. Vol. 1. Hafner Publishing Co., New York.
                              
                           
                                 (5)
                              
                              
                                 McGill, R., Tukey, J. W., Larsen, W. A. (1978). Variation of Box Plots. The American Statistician, 32: 2, 12–16.
                              
                           
                                 (6)
                              
                              
                                 IOC/T.28 / Asiakirja nro 1 (syyskuu 2007), Guidelines for the accreditation of sensory testing laboratories with particular reference to virgin olive oil according to standard ISO/IEC 17025:2005.
                                 
                              
                           
                                 (7)
                              
                              
                                 IOC/T.20 / Asiakirja nro 14.
                              
                           
                                 (8)
                              
                              
                                 IOC/T.20 / Asiakirja nro 15.
                              
                           
                                 (9)
                              
                              
                                 ISO/IEC 17025:05.
                              
                           
               ”
            
               (1)  1 Maistaja voi kieltäytyä maistamasta öljyä, jos hän havaitsee suoraan hajuaistimuksen perusteella jonkin äärimmäisen voimakkaan negatiivisen ominaisuuden. Hänen on merkittävä tällainen poikkeuksellinen TILANNE profiililomakkeeseen.
            
               (*1)  Poista tarpeeton.
         
      
      
         
            LIITE VI
            
               
                  
                     ”LIITE XX a
                     
                        MENETELMÄ VIERAIDEN ÖLJYJEN HAVAITSEMISEKSI OLIIVIÖLJYISSÄ
                     
                     1.   TARKOITUS
                     Menetelmää käytetään vieraiden kasviöljyjen havaitsemiseksi oliiviöljyissä. Oliiviöljyissä saattaa olla runsaasti linolihappoja sisältäviä kasviöljyjä (soija-, rapsi- ja auringonkukkaöljyä jne.) ja joitakin runsaasti öljyhappoja sisältäviä kasviöljyjä – kuten pähkinäöljyä, runsaasti öljyhappoa sisältävä auringonkukkaöljyä ja oliivin puristemassaöljyä. Havaittu taso riippuu vieraan öljyn tyypistä ja oliivilajikkeesta. Pähkinäöljyn tavanomainen havaintotaso on 5–15 prosenttia. Menetelmällä ei voida tunnistaa havaitun vieraan öljyn tyyppiä; sillä osoitetaan vain, onko oliiviöljy aitoa.
                     2.   PERIAATE
                     Öljy puhdistetaan kiinteäfaasiekstraktiolla (SPE) piihappopatruunoissa. Triasyyliglyseridikoostumus (TAG) määritetään korkean erotuskyvyn käänteisfaasinestekromatografian (HPLC) avulla käyttämällä refraktioindeksidetektoria ja liikkuvana faasina propionitriilia. Rasvahappometyyliestereitä (FAME) valmistetaan puhdistetusta öljystä metyloimalla kylmällä kaliumhydroksidin metanoliliuoksella (Liite X b), minkä jälkeen esterit määritetään kapillaarikaasukromatografiamenetelmällä käyttämällä polaarisuudeltaan suurta kolonnia (Liite X a). Teoreettinen triasyyliglyseridikoostumus lasketaan rasvahappokoostumuksesta tietokonesovelluksen avulla olettamalla, että rasvahapoilla on triasyyliglyseridissä satunnaisjakauma 1,3- tai 2-asemassa, kuitenkin rajoituksin tyydyttyneiden rasvahappojen osalta 2-asemassa. Laskentamenetelmä on muunnos liitteessä XVIII kuvatusta menetelmästä. Teoreettisesta ja kokeellisesta (HPLC) triasyyliglyseridikoostumuksesta lasketaan useita matemaattisia algoritmeja, ja tuloksena saatuja arvoja verrataan aidoista oliiviöljyistä saatuun tietokantaan sisältyviin arvoihin.
                     3.   AINEET JA REAGENSSIT
                     3.1.   Öljyn puhdistaminen
                     
                     
                              
                                 3.1.1.
                              
                              
                                 Erlenmeyerpulloja, 25 ml.
                              
                           
                              
                                 3.1.2.
                              
                              
                                 Kierrekorkkisia koeputkia (tilavuus 5 ml), joiden korkissa PTFE-liitos.
                              
                           
                              
                                 3.1.3.
                              
                              
                                 Piihappopatruunoita, 1 g (6 ml), kiinteäfaasiuuttoa varten (esimerkiksi Waters, Massachusetts, USA).
                              
                           
                              
                                 3.1.4.
                              
                              
                                 
                                    n-Heksaani, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 3.1.5.
                              
                              
                                 Heksaanin ja dietyylieetterin liuotinseos (87:13, v/v).
                              
                           
                              
                                 3.1.6.
                              
                              
                                 
                                    n-Heptaani, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 3.1.7.
                              
                              
                                 Asetoni, analyysilaatua.
                              
                           3.2.   Triasyyliglyseridien HPLC-määritys
                     
                     
                              
                                 3.2.1.
                              
                              
                                 Mikroruiskuja (50 μl) ja neuloja HPLC-injektiota varten.
                              
                           
                              
                                 3.2.2.
                              
                              
                                 Propionitriili, erittäin puhdasta tai HPLC-laatua (esimerkiksi ROMIL, Cambridge, Yhdistynyt kuningaskunta), käytetään liikkuvana faasina.
                              
                           
                              
                                 3.2.3.
                              
                              
                                 HPLC-kolonni (25 cm x sisähalkaisija 4 mm), johon pakattu RP-18-faasi (partikkelikoko 4 μm).
                              
                           3.3.   Rasvahappometyyliesterien valmistaminen
                     
                     (ks. Liite X b)
                     
                              
                                 3.3.1.
                              
                              
                                 Metanoli, jossa enintään 0,5 % vettä.
                              
                           
                              
                                 3.3.2.
                              
                              
                                 Heptaani, analyysilaatua.
                              
                           
                              
                                 3.3.3.
                              
                              
                                 Kaliumhydroksidin noin 2 N metanoliliuos, joka saadaan liuottamalla 1,1 grammaa kaliumhydroksidia 10 ml:aan metanolia.
                              
                           
                              
                                 3.3.4.
                              
                              
                                 Kierrekorkkisia koeputkia (tilavuus 5 ml), joiden korkissa PTFE-liitos.
                              
                           3.4.   Rasvahappometyyliesterien kaasukromatografinen määritys (GC)
                     
                     (Liitteessä X a on esitetty menetelmä tyydyttymättömien trans-rasvahappojen määrittämiseksi kapillaarikaasukromatografialla.)
                     
                              
                                 3.4.1
                              
                              
                                 Mikroruiskuja (5 μl) ja neuloja kaasukromatografin injektiota varten.
                              
                           
                              
                                 3.4.2
                              
                              
                                 Kantajakaasut: vety tai helium.
                              
                           
                              
                                 3.4.3
                              
                              
                                 Vetyä ja happea liekki-ionisaatiodetektoria (FID) varten.
                              
                           
                              
                                 3.4.4
                              
                              
                                 Apukaasut: typpi tai helium.
                              
                           
                              
                                 3.4.5.
                              
                              
                                 Kvartsilasikapillaarikolonni (50–60 m x sisähalkaisija 0,25–0,30 mm), joka on pinnoitettu syaanipropyylipolysiloksaani- tai syanopropyylifenyylisiloksaanifaasilla (SP-2380 tai vastaava), kerrospaksuus 0,20–0,25 μm.
                              
                           4.   VÄLINEISTÖ
                     
                              
                                 4.1.
                              
                              
                                 Tyhjiölaitteisto kiinteäfaasiuuttoa varten.
                              
                           
                              
                                 4.2.
                              
                              
                                 Pyöröhaihdutin.
                              
                           
                              
                                 4.3.
                              
                              
                                 Korkean erotuskyvyn nestekromatografi (HPLC), johon kuuluvat seuraavat osat:
                                 
                                             4.3.1.
                                          
                                          
                                             kaasunpoistolaite liikkuvaa faasia varten,
                                          
                                       
                                             4.3.2.
                                          
                                          
                                             Rheodyne-injektoriventtiili, jonka näytesilmukka on 10 μl,
                                          
                                       
                                             4.3.3.
                                          
                                          
                                             suurpainepumppuyksikkö,
                                          
                                       
                                             4.3.4.
                                          
                                          
                                             HPLC-kolonnia varten termostaattisäätöinen lämpökaappi, jossa voidaan pitää yllä huonelämpötilaa alhaisempia lämpötiloja (15–20 °C) (esimerkiksi Peltier-tyyppinen),
                                          
                                       
                                             4.3.5.
                                          
                                          
                                             refraktioindeksidetektori,
                                          
                                       
                                             4.3.6.
                                          
                                          
                                             tietokonepohjainen tiedonkeruujärjestelmä, jossa on integrointisovellus.
                                          
                                       
                           
                              
                                 4.4
                              
                              
                                 Liitteessä X a kuvattu kapillaarikaasukromatografialaitteisto, jossa on
                                 
                                             4.4.1.
                                          
                                          
                                             jakoinjektori,
                                          
                                       
                                             4.4.2.
                                          
                                          
                                             liekki-ionisaatiodetektori (FID),
                                          
                                       
                                             4.4.3.
                                          
                                          
                                             lämpötilaltaan ohjelmoitava lämpökaappi,
                                          
                                       
                                             4.4.4.
                                          
                                          
                                             tietokonepohjainen tiedonkeruujärjestelmä, jossa on integrointisovellus.
                                          
                                       
                           
                              
                                 4.5.
                              
                              
                                 Tietokone, jossa on Microsoft EXCEL -ohjelma.
                              
                           5.   MÄÄRITYS
                     5.1.   Öljyn puhdistaminen
                     
                     SPE-piihappopatruuna asetetaan tyhjiöeluutiolaitteeseen ja pestään tyhjiössä 6 ml:lla heksaania. Tyhjiöinti lopetetaan, jottei kolonni kuivu, ja patruunan alle laitetaan erlenmeyerpullo. Kolonniin laitetaan öljyliuos (noin 0,12 g) 0,5 ml:ssa heksaania. Tyhjiöidään, jotta liuos imeytyy piihappoon ja sen jälkeen eluoidaan tyhjiössä 10 ml:lla heksaanin ja dietyylietterin liuotinseosta (87:13 v/v) (3.1.5 kohta). Eluutioliuotin homogenoidaan, ja noin puolet määrästä kaadetaan toiseen erlenmeyerpulloon. Molemmat liuokset haihdutetaan erikseen kuiviin alipaineessa pyöröhaihduttimessa huoneenlämmössä. Triasyyliglyseridimääritystä varten toinen jäännös liuotetaan 1 ml:aan asetonia (ks. 5.2 kohdan ensimmäinen alakohta) ja kaadetaan kierrekorkilla varustettuun 5 ml:n koeputkeen. Toinen jäännös liotetaan 1 ml:aan n-heptaania ja kaadetaan toiseen kierrekorkilla varustettuun 5 ml:n koeputkeen rasvahappometyyliestereiden valmistamista varten.
                     
                        Huom.: Öljy voidaan puhdistaa piihappogeelikolonnissa IUPAC 2.507 -menetelmässä kuvatulla tavalla.
                     5.2.   Triasyyliglyseridien HPLC-määritys
                     
                     HPLC-järjestelmä valmistellaan käyttöön. Kolonnin lämpötila pidetään 20 °C:ssa, ja propionitriilia käytetään liikkuvana faasina siten, että virtaaman nopeus on 0,6 ml minuutissa. Kun perusviiva on vakaa, injektoidaan liuotin; jos perusviivassa on häiriöitä 12–25 minuutin alueella, näytteen liuottamiseen käytetään toisen tyyppistä asetonia tai propionitriilin ja asetonin seosta (25:75).
                     
                        Huom.: Eräät asetonit aiheuttavat perusviivaan häiriöitä edellä mainitulla alueella.
                     Puhdistetun öljyn 5-prosenttista asetoniliuosta injektoidaan 10 μl. Vaihe kestää noin 60 minuuttia. Lämpökaapin lämpötilaa ja/tai virtaamanopeutta on mukautettava, jotta päästään kuvassa 1 esitetyn kaltaiseen kromatogrammiin, jossa trilinoleiini (piikki 1) eluoituu 15,5 minuutin kohdalla ja jossa erotuskyky parien LLL/OLLn (piikit 1 ja 2) sekä OLL/OOLn (piikit 4 ja 5) välillä on hyvä.
                     Piikin 2 (OLLn+PoLL) huippu on saavutettava vähintään kolmella prosentilla koko asteikosta.
                     5.3.   Rasvahappometyyliestereiden valmistaminen
                     
                     Lisätään 0,1 ml kaliumhydroksidin 2 N metanoliliuosta liuokseen, jossa on puhdistettua öljyä 1 ml:ssa n-heptaania. Koeputken kierrekorkki suljetaan tiiviisti. Putkea ravistetaan voimakkaasti 15 sekuntia, minkä jälkeen sen annetaan seistä, kunnes liuoksen pintakerros kirkastuu (viisi minuuttia). n-Heptaaniliuos voidaan injektoida kaasukromatografiin. Liuos voidaan jättää huoneen lämpöön enintään 12 tunniksi.
                     5.4.   Rasvahappometyyliestereiden kaasukromatografimääritys (GC)
                     
                     On käytettävä tyydyttymättömien trans-rasvahappoja varten laaditussa menetelmässä (ks. Liite X a) kuvattua menettelyä.
                     GC-järjestelmä valmistellaan käyttöön; lämpökaapin lämpötilaksi valitaan 165 °C. Suositeltava lämpökaapin vakiolämpötila on 165 °C kymmenen minuutin ajan, minkä jälkeen lämpötilaa nostetaan 1,5 °C minuutissa 200 °C:een. Injektorin lämpötilaksi suositellaan 220–250 °C, jotta trans-rasvahappoja muodostuisi mahdollisimman vähän (ks. Liite X a). Detektorin lämpötilaksi asetetaan 250 °C. Vetyä tai heliumia on käytettävä kantajakaasuna, ja kolonnin pään paine on noin 130 kPa. Injektiomäärä on jakoinjektiossa 1 μl.
                     On saatava samanlainen GC-profiili kuin kuvassa 2. Erotuskykyyn on kiinnitettävä erityistä huomiota välillä C18:3 ja C20:1 (piikin C18:3 on tultava näkyviin ennen kuin C20:1). Näiden olosuhteiden saavuttamiseksi alkulämpötila ja/tai kolonnin pään paine on optimoitava. Mukauta injektorin olosuhteita (lämpötilaa, jakosuhdetta ja injektiomäärää), jotta palmitiinihapon ja palmito-oleiinihapon erottelu olisi mahdollisimman vähäistä.
                     Piikin C20:0 huipun on oltava noin 20 prosenttia koko asteikosta, jotta trans-isomeerien määrä voidaan määrittää. Jos piikki C18:0 vaikuttaa vääristyneeltä, näytemäärää vähennetään.
                     6.   KROMATOGRAMMIN PIIKKIEN INTEGROINTI
                     6.1.   HPLC-kromatogrammi
                     
                     Kuvassa 1 esitetään tyypillinen HPLC-kromatogrammi puhdistetun oliiviöljyn triasyyliglyserideistä. Piikkien integrointia varten on piirrettävä kolme perusviivaa: ensimmäinen perusviiva piikin 1 alun ja piikin 3 lopun välille; toinen perusviiva piikin 4 alun ja piikkiä 8 edeltävän laakson välille; kolmas perusviiva piikkiä 8 edeltävän laakson ja piikin 18 lopun välille.
                     Kokonaispinta-ala on kaikkien piikkien (sekä tunnistettujen että tunnistamattomien) yhteenlaskettu pinta-ala piikistä 1 piikkiin 18. Kunkin piikin prosentuaalinen osuus lasketaan seuraavasti:
                     
                        
                     Prosenttiosuudet ilmaistaan kahden desimaalin tarkkuudella.
                     6.2.   GC-kromatogrammi
                     
                     Kuvassa 2 esitetään puhdistetusta oliiviöljystä saatujen rasvahappoalkyyliestereiden GC-kromatogrammi. Seuraavien rasvahappojen prosentuaaliset osuudet on laskettava:
                     
                                 palmitiinihappo;
                              
                              
                                 P (C16:0)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 metyyliesteri + etyyliesteri
                              
                           
                                 steariinihappo;
                              
                              
                                 S (C18:0)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 metyyliesteri
                              
                           
                                 palmito-oleiinihappo:
                              
                              
                                 Po (C16:1)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 kahden cis-isomeerin metyyliesterien yhteismäärä
                              
                           
                                 oleiinihappo;
                              
                              
                                 O (C18:1)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 kahden cis-isomeerin metyyliesterien + etyyliesterin + trans-isomeerien yhteismäärä
                              
                           
                                 linolihappo;
                              
                              
                                 L (C18:2)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 metyyliesteri + etyyliesteri + trans-isomeerit
                              
                           
                                 linoleenihappo;
                              
                              
                                 Ln (C18:3)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 metyyliesteri + trans-isomeerit
                              
                           
                                 arakidonihappo;
                              
                              
                                 A (C20:0)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 metyyliesteri
                              
                           
                                 eikoseenihappo;
                              
                              
                                 G (C20:1)
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 metyyliesteri
                              
                           Etyyli- ja trans-isomeeriestereitä ei välttämättä näy kaasukromatogrammissa.
                     Kokonaispinta-ala (AT) on kaikkien kromatogrammissa esiintyvien piikkien yhteenlaskettu pinta-ala C14:0–C24:0, lukuun ottamatta piikkiä, joka vastaa skvaleenia. Kunkin piikin prosentuaalinen osuus lasketaan seuraavasti:
                     
                        
                     Tulokset on ilmaistava kahden desimaalin tarkkuudella.
                     Tietokonesovellusten laskelmia varten sataan normalisointi ei ole välttämätöntä, koska se tehdään automaattisesti.
                     
                        Kuva 1
                     
                     
                        ”Chamlali”-neitsytoliiviöljyn triasyyliglyseridien HPLC-kromatogrammi. Kromatogrammin piikkien pääkomponentit
                     
                     (1) LLL; (2) OLLn+PoLL; (3) PLLn; (4) OLL; (5) OOLn+PoOL;
                     (6) PLL+PoPoO; (7) POLn+PPoPo+PPoL; (8) OOL+LnPP; (9) PoOO;
                     (10) SLL+PLO; (11) PoOP+SPoL+SOLn+SPoPo; (12) PLP;
                     (13) OOO+PoPP; (14) SOL; (15) POO; (16) POP; (17) SOO;
                     (18) POS+SLS.
                     
                        Taulukko 1
                     
                     
                        Toistettavuustiedot neitsytoliiviöljyn triasyyliglyseridien määrittämiseksi HLPC:llä; kolonnin lämpötila on 20 °C ja liikkuva faasi on propionitriili
                     
                     
                                 ECN
                              
                              
                                 HPLC- piikit
                              
                              
                                 TAG
                              
                              
                                 Näyte 1
                              
                              
                                 Näyte 2
                              
                              
                                 Näyte 3
                              
                              
                                 Näyte 4
                              
                              
                                 Näyte 5
                              
                           
                                 Keski-arvo (%)
                              
                              
                                 RSDr (%)
                              
                              
                                 Keskiarvo (%)
                              
                              
                                 RSDr (%)
                              
                              
                                 Keskiarvo (%)
                              
                              
                                 RSDr (%)
                              
                              
                                 Keskiarvo (%)
                              
                              
                                 RSDr (%)
                              
                              
                                 Keskiarvo (%)
                              
                              
                                 RSDr (%)
                              
                           
                                 
                                    42
                                 
                              
                              
                                 
                                    1
                                 
                              
                              
                                 LLL
                              
                              
                                 0,020 
                              
                              
                                 7,23 
                              
                              
                                 0,066 
                              
                              
                                 5,18 
                              
                              
                                 0,095 
                              
                              
                                 4,10 
                              
                              
                                 0,113 
                              
                              
                                 0,95 
                              
                              
                                 0,34 
                              
                              
                                 1,05 
                              
                           
                                 
                                    2
                                 
                              
                              
                                 OLLn+ PoLL
                              
                              
                                 0,085 
                              
                              
                                 7,44 
                              
                              
                                 0,24 
                              
                              
                                 1,78 
                              
                              
                                 0,26 
                              
                              
                                 2,25 
                              
                              
                                 0,35 
                              
                              
                                 2,02 
                              
                              
                                 0,50 
                              
                              
                                 2,83 
                              
                           
                                 
                                    3
                                 
                              
                              
                                 PLLn
                              
                              
                                 0,023 
                              
                              
                                 15,74 
                              
                              
                                 0,039 
                              
                              
                                 5,51 
                              
                              
                                 0,057 
                              
                              
                                 5,62 
                              
                              
                                 0,082 
                              
                              
                                 4,35 
                              
                              
                                 0,12 
                              
                              
                                 6,15 
                              
                           
                                 
                                    44
                                 
                              
                              
                                 
                                    4
                                 
                              
                              
                                 OLL
                              
                              
                                 0,47 
                              
                              
                                 1,52 
                              
                              
                                 1,53 
                              
                              
                                 0,42 
                              
                              
                                 2,62 
                              
                              
                                 0,98 
                              
                              
                                 3,35 
                              
                              
                                 1,05 
                              
                              
                                 4,37 
                              
                              
                                 1,13 
                              
                           
                                 
                                    5
                                 
                              
                              
                                 OOLn+ PoOL
                              
                              
                                 1,07 
                              
                              
                                 2,01 
                              
                              
                                 1,54 
                              
                              
                                 0,46 
                              
                              
                                 1,61 
                              
                              
                                 0,71 
                              
                              
                                 1,72 
                              
                              
                                 1,07 
                              
                              
                                 1,77 
                              
                              
                                 2,40 
                              
                           
                                 
                                    6
                                 
                              
                              
                                 PLL+ PoPoO
                              
                              
                                 0,11 
                              
                              
                                 12,86 
                              
                              
                                 0,24 
                              
                              
                                 4,37 
                              
                              
                                 0,65 
                              
                              
                                 1,32 
                              
                              
                                 1,35 
                              
                              
                                 0,73 
                              
                              
                                 2,28 
                              
                              
                                 1,24 
                              
                           
                                 
                                    7
                                 
                              
                              
                                 POLn+ PpoPo+ PpoL
                              
                              
                                 0,42 
                              
                              
                                 5,11 
                              
                              
                                 0,49 
                              
                              
                                 2,89 
                              
                              
                                 0,55 
                              
                              
                                 2,01 
                              
                              
                                 0,85 
                              
                              
                                 1,83 
                              
                              
                                 1,09 
                              
                              
                                 1,96 
                              
                           
                                 
                                    46
                                 
                              
                              
                                 
                                    8
                                 
                              
                              
                                 OOL+ LnPP
                              
                              
                                 6,72 
                              
                              
                                 0,63 
                              
                              
                                 8,79 
                              
                              
                                 0,31 
                              
                              
                                 11,21 
                              
                              
                                 0,42 
                              
                              
                                 13,25 
                              
                              
                                 0,33 
                              
                              
                                 15,24 
                              
                              
                                 0,23 
                              
                           
                                 
                                    9
                                 
                              
                              
                                 PoOO
                              
                              
                                 1,24 
                              
                              
                                 2,86 
                              
                              
                                 1,49 
                              
                              
                                 0,95 
                              
                              
                                 1,63 
                              
                              
                                 0,85 
                              
                              
                                 2,12 
                              
                              
                                 0,45 
                              
                              
                                 2,52 
                              
                              
                                 0,56 
                              
                           
                                 
                                    10
                                 
                              
                              
                                 SLL+ PLO
                              
                              
                                 2,70 
                              
                              
                                 0,65 
                              
                              
                                 4,05 
                              
                              
                                 0,70 
                              
                              
                                 6,02 
                              
                              
                                 0,65 
                              
                              
                                 9,86 
                              
                              
                                 0,53 
                              
                              
                                 11,53 
                              
                              
                                 0,31 
                              
                           
                                 
                                    11
                                 
                              
                              
                                 PoOP+ SpoL+ SOLn+ SpoPo
                              
                              
                                 0,64 
                              
                              
                                 4,42 
                              
                              
                                 0,69 
                              
                              
                                 3,02 
                              
                              
                                 0,79 
                              
                              
                                 1,23 
                              
                              
                                 1,53 
                              
                              
                                 0,89 
                              
                              
                                 1,70 
                              
                              
                                 1,66 
                              
                           
                                 
                                    48
                                 
                              
                              
                                 
                                    12+13
                                 
                              
                              
                                 OOO+ PLP+ PoPP
                              
                              
                                 49,60 
                              
                              
                                 0,07 
                              
                              
                                 48,15 
                              
                              
                                 0,06 
                              
                              
                                 42,93 
                              
                              
                                 0,06 
                              
                              
                                 33,25 
                              
                              
                                 0,10 
                              
                              
                                 24,16 
                              
                              
                                 0,06 
                              
                           
                                 
                                    14
                                 
                              
                              
                                 SOL
                              
                              
                                 0,82 
                              
                              
                                 1,72 
                              
                              
                                 0,92 
                              
                              
                                 1,56 
                              
                              
                                 1,05 
                              
                              
                                 1,32 
                              
                              
                                 1,25 
                              
                              
                                 1,05 
                              
                              
                                 1,60 
                              
                              
                                 1,77 
                              
                           
                                 
                                    15
                                 
                              
                              
                                 POO
                              
                              
                                 22,75 
                              
                              
                                 0,25 
                              
                              
                                 21,80 
                              
                              
                                 0,20 
                              
                              
                                 21,05 
                              
                              
                                 0,30 
                              
                              
                                 20,36 
                              
                              
                                 0,35 
                              
                              
                                 20,17 
                              
                              
                                 0,14 
                              
                           
                                 
                                    50
                                 
                              
                              
                                 
                                    16
                                 
                              
                              
                                 POP
                              
                              
                                 3,05 
                              
                              
                                 0,46 
                              
                              
                                 4,56 
                              
                              
                                 0,42 
                              
                              
                                 4,98 
                              
                              
                                 0,52 
                              
                              
                                 5,26 
                              
                              
                                 0,41 
                              
                              
                                 5,57 
                              
                              
                                 0,38 
                              
                           
                                 
                                    17
                                 
                              
                              
                                 SOO
                              
                              
                                 6,87 
                              
                              
                                 0,21 
                              
                              
                                 5,56 
                              
                              
                                 0,33 
                              
                              
                                 4,86 
                              
                              
                                 0,43 
                              
                              
                                 4,12 
                              
                              
                                 0,72 
                              
                              
                                 3,09 
                              
                              
                                 0,69 
                              
                           
                                 
                                    18
                                 
                              
                              
                                 POS+ SLS
                              
                              
                                 1,73 
                              
                              
                                 1,23 
                              
                              
                                 1,65 
                              
                              
                                 1,10 
                              
                              
                                 1,54 
                              
                              
                                 0,99 
                              
                              
                                 1,49 
                              
                              
                                 1,10 
                              
                              
                                 1,41 
                              
                              
                                 1,00 
                              
                           
                                 
                                             n
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             3 toistoa
                                          
                                       
                                             RSDr
                                             
                                          
                                          
                                             =
                                          
                                          
                                             toistettavuuden suhteellinen keskipoikkeama
                                          
                                       
                           
                        Kuva 2
                     
                     
                        Oliivin puristemassaöljystä kylmällä kaliumhydroksidin metanoliliuoksella transesteröimällä saatujen rasvahappoalkyyliesterien kaasukromatogrammi
                     
                     7.   VIERAIDEN ÖLJYJEN HAVAITSEMINEN OLIIVIÖLJYISSÄ
                     Laskentamenetelmä, jota käytetään vieraiden öljyjen havaitsemiseksi oliiviöljyissä vertailemalla matemaattisia algoritmeja aidoista oliiviöljyistä laadittuun tietokantaan, on esitetty standardin IOC/T.20 / Asiakirja nro 25 liitteessä I.”