CELEX: 31992D0608
Language: da
Date: 1992-11-14 00:00:00
Title: 92/608/EØF: Rådets beslutning af 14. november 1992 om visse analyse- og kontrolmetoder for varmebehandlet mælk til direkte konsum

Avis juridique important

|

31992D0608

92/608/EØF: Rådets beslutning af 14. november 1992 om visse analyse- og kontrolmetoder for varmebehandlet mælk til direkte konsum  

EF-Tidende nr. L 407 af 31/12/1992 s. 0029 - 0046 den finske specialudgave: kapitel 3 bind 47 s. 0164  den svenske specialudgave: kapitel 3 bind 47 s. 0164 

RAADETS BESLUTNING af 14. november 1992 om  visse analyse- og kontrolmetoder for varmebehandlet maelk til direkte konsum (92/608/EOEF)  RAADET FOR DE EUROPAEISKE FAELLESSKABER HAR -under henvisning til Traktaten om Oprettelse af  Det Europaeiske OEkonomiske Faellesskab, under henvisning til Raadets direktiv 85/397/EOEF af 5. august 1985 om sundhedsmaessige og  veterinaerpolitimaessige problemer i forbindelse med handelen inden for Faellesskabet med  varmebehandlet maelk (1), saerlig artikel 11, stk. 6, under henvisning til forslag fra Kommissionen, ogud fra foelgende betragtninger: Ifoelge artikel 11, stk. 6, i direktiv 85/397/EOEF fastsaetter Raadet bestemmelserne for den i samme  artikels stk. 2 omhandlede kontrol; kontrollen, der skal foretages af virksomhederne under tilsyn  af den officielle myndighed og paa dennes ansvar samt regelmaessigt af den officielle myndighed,  tager sigte paa at sikre overholdelse af kravene i direktiv 85/397/EOEF og isaer kravene i artikel 3,  litra A, nr. 3; opstillingen af kontrolbestemmelser omfatter fastlaeggelse af de metoder, der er noedvendige, for at  kontrollen kan gennemfoeres; der boer for varmebehandlet maelk til direkte konsum fastlaegges metoder, der goer det muligt at  bestemme toerstof, fedtindhold, fedtfrit toerstof, totalkvaelstof, proteinindhold og massefylde; af tekniske grunde boer der foreloebig fastsaettes referencemetoder for analyse og kontrol for at  sikre overholdelse af normerne i artikel 3, litra A, nr. 3, i direktiv 85/397/EOEF; det er isaer  vigtigt at fortsaette med at undersoege betingelserne for at bruge rutinemaessige metoder i  forbindelse med analyse og kontrol; indtil resultatet af denne undersoegelse foreligger, paahviler  det myndighederne at drage omsorg for, at der bruges passende rutinemetoder med henblik paa at  sikre, at naevnte normer overholdes; bestemmelsen af naevnte metoder omfatter isaer bestemmelse af analysemetoder og fastsaettelse af  paalidelighedskriterier for at sikre en ensartet fortolkning af resultaterne -VEDTAGET FOELGENDE  BESLUTNING: Artikel 1Metoderne for analyse og kontrol af varmebehandlet maelk til direkte  konsum er foelgende: - bestemmelse af toerstof- bestemmelse af fedtindhold- bestemmelse af fedtfrit toerstof-  bestemmelse af totalkvaelstof- bestemmelse af proteinindhold- bestemmelse af massefylde. Nr. L 407/3031. 12. 92Artikel 2Ivaerksaettelsen af analyse- og kontrolmetoderne, fastsaettelsen  af paalidelighedskriterierne og indsamlingen af proever foretages efter bestemmelserne i bilag I. Artikel 3De i artikel 1 omhandlede metoder er beskrevet i bilag II. Artikel 4Denne beslutning er rettet til medlemsstaterne. Udfaerdiget i Bruxelles, den 14. november 1992. Paa Raadets vegneJ. GUMMERFormand(1) EFT nr. L 226 af 24. 8. 1985, s. 13,  senest aendret ved direktiv 89/662/EOEF (EFT nr. L 395 af 30. 12. 1989, s. 13).  BILAG I I. GENERELLE BESTEMMELSER 1. INDLEDNINGDe generelle bestemmelser vedroerer  reagenser, udstyr, angivelse af resultater, noejagtighed og proeverapport. Medlemsstaternes  kompetente myndigheder og de kontrollaboratorier, der staar for proeveudtagning og kontrol af maelk,  skal overholde de generelle bestemmelser. 2. REAGENSER2.1. Vand2.1.1. Vedhenvisning til vand med henblik paa oploesning, fortynding eller  skylning skal der, medmindre andet er angivet, benyttes destilleret vand, ionbyttet vand eller  demineraliseret vand af mindst tilsvarende renhed. 2.1.2. Ved »oploesning« eller »fortynding« (uden yderligere angivelse) forstaas »oploesning i vand«  eller »fortynding med vand«. 2.2. KemikalierAlle anvendte kemikalier skal, medmindre andet er angivet, vaere af anerkendt  analysekvalitet for reagenser. 3. UDSTYR3.1. Lister over udstyrListerne over udstyr i de forskellige referencemetoder indeholder  kun elementer med en saerlig anvendelse og elementer med bestemte specifikationer. 3.2. AnalysevaegtVed »analysevaegt« forstaas en vaegt, der kan veje med en praecision paa 0,1 mg. 4. ANGIVELSE AF RESULTATER4.1. ResultaterDet i analyserapporten (6.) angivne resultat skal,  medmindre andet er angivet, vaere den aritmetriske middelvaerdi af to proever, som opfylder det  angivne repeterbarhedskriterium (5.1.1) for den paagaeldende metode. Hvis repeterbarhedskriteriet  ikke opfyldes, skal den paagaeldende proeve gentages eller resultatet erklaeres ugyldigt. 4.2. ProcentberegningResultatet skal, medmindre andet er angivet, beregnes som en vaegtprocent af  proeven. 5. NOEJAGTIGHEDSKRITERIER: REPETERBARHED OG REPRODUCERBARHED5.1. Noejagtighedskriterierne for hver  metode defineres som foelger: 5.1.1. Repeterbarhed (r) er den vaerdi, der ligger under den absolutte forskel mellem to enkelte  proeveresultater, som er opnaaet ved samme metode paa identisk proevemateriale under samme betingelser  (samme operatoer, samme apparatur, samme laboratorium og med et kort tidsinterval). 5.1.2. Reproducerbarhed (R) er den vaerdi, der ligger under den absolutte forskel mellem to enkelte  proeveresultater, som er opnaaet ved samme metode paa identisk proevemateriale under forskellige  betingelser (forskellige operatoerer, forskelligt apparatur, forskellige laboratorier og/eller  forskelligt tidsinterval). 5.1.3. Vaerdierne for repeterbarheds- og reproducerbarhedskriterier anfoert i de relevante punkter  for hver metode udgoer de konfidensniveauintervaller paa 95  %, som er defineret i ISO 5725: 1986, 2.  udg. 5.1.4. De noedvendige sammenlignende proever og undersoegelser skal planlaegges og udfoeres i  overensstemmelse med de internationale retningslinjer. 6. PROEVERAPPORTProeverapporten skal specificere den anvendte analysemetode samt de opnaaede  resultater. Den skal desuden oplyse eventuelle enkeltheder om anvendt metodik, som ikke er  specificeret i analysemetoden, eller som ikke er obligatorisk, samt eventuelle andre  omstaendigheder, som kan have paavirket de opnaaede resultater. Proeverapporten skal indeholde alle  noedvendige oplysninger til fuldstaendig identifikation af proeven. Nr. L 407/3231. 12. 92II. PROEVEUDTAGNING AF VARMEBEHANDLET MAELK 1. OMFANG OG  ANVENDELSESOMRAADEDette er en beskrivelse af referencemetoden til udtagning, transport og  opbevaring af proever af varmebehandlet maelk. 2. GENERELTProeveudtagning af varmebehandlet maelk (i tanke) skal foretages af en faglaert  medarbejder, der er passende oplaert inden proeveudtagningen. Hvis det anses for noedvendigt, skal proeveudtagningspersonalet af de kompetente myndigheder eller  kontrollaboratoriet instrueres om proeveudtagningsteknik med henblik paa at sikre, at proeven er  repraesentativ for og i overensstemmelse med hele partiet. Hvis det anses for noedvendigt, skal proeveudtagningspersonalet af de kompetente myndigheder eller  kontrollaboratoriet instrueres om maerkning af proeven med henblik paa sikker identifikation af den. 3. PROEVEUDTAGNINGSUDSTYR3.1. GenereltProeveudtagningsudstyret skal vaere af rustfrit staal eller  andet egnet materiale af passende styrke og med en til formaalet (blanding, proeveudtagning mv.)  egnet konstruktion. Kaernestaenger og omroerere til blanding af vaesker i beholdere skal have et  tilstraekkeligt omfang til at blande produktet passende, uden at der udvikles en harsk smag. OEser  skal have et solidt haandtag, som er langt nok til at muliggoere proeveudtagning paa en hvilken som  helst dybde i beholderen. OEsens kapacitet skal vaere mindst 50 ml. Proevebeholdere og lukkeanordninger skal vaere af glas, egnet metal eller plastik. Proeveudtagningsudstyrets (herunder beholdere og lukkeanordninger) konstruktionsmateriale maa ikke  foraarsage aendringer i proeven, som kan indvirke paa resultatet af undersoegelserne. Alle overflader paa  proeveudtagningsudstyr og -beholdere skal vaere rene, toerre, glatte og fri for spraekker, og hjoerner  skal vaere afrundede. 4. PROEVEUDTAGNINGSTEKNIK4.1. GenereltUanset hvilken undersoegelse der skal udfoeres, skal maelken  enten manuelt eller mekanisk blandes grundigt foer proeveudtagningen. Proeven udtages umiddelbart efter blandingen, mens maelken stadig er i bevaegelse. Proevens volumen skal vaere i overensstemmelse med kravene. De anvendte proevebeholdere skal have en  saadan kapacitet, at de naesten fyldes helt af proeven, saaledes at indholdet kan blandes ordentligt  inden undersoegelsen, samtidig med at der undgaas kaerning under transporten. 4.2. Proeveudtagning4.2.1. Proeveudtagning af maelk, der er fordelt paa flere beholdereNaar der skal  udtages proeve af maelk, der er fordelt paa mere end én beholder, tages en repraesentativ maengde fra  hver beholder, og det noteres, hvor meget maelk de respektive proever er udtaget af. Medmindre  proeverne fra hver beholder skal undersoeges enkeltvis, blandes portioner af disse repraesentative  maengder i forhold til maengden i beholderen, hvorfra hver proeve er taget. Der udtages proeve(r) fra  disse samlede forholdsmaessige maengder efter blanding. 4.2.2. Proeveudtagning fra store beholdere - opbevarings-, jernbane- og lastvognstanke4.2.2.1.  Maelken blandes efter en egnet metode foer proeveudtagningenDet anbefales at omroere maelken mekanisk  for at blande indholdet i store beholdere eller opbevarings-, jernbane- eller lastvognstanke  (4.2.2.2)Blandingstidens laengde skal vaere afpasset efter, hvor laenge maelken har vaeret i ro. Den  blandingsmetode, der anvendes under givne omstaendigheder, skal paavises at vaere egnet til den  planlagte analyse. Kriteriet for blandingseffektiviteten har saerlig betydning for ligheden mellem  analyseresultater fra proever, der er udtaget fra enten forskellige dele af partiet eller med  mellemrum fra tankens aabning under udstroemningen. En metode til blanding af maelk anses for at vaere  effektiv, hvis forskellen i fedtindholdet mellem to proever, der er udtaget under disse betingelser,  er under 0,1  %. Nr. L 407/3331. 12. 92I en stor beholder med aabning i bunden kan der ved aabningsstudsen vaere en  lille maengde maelk, som ikke er repraesentativ for hele indholdet, selv efter blanding. Proever skal  derfor helst tages gennem et mandehul. Hvis der tages proever fra aabningen, skal der udledes en  tilstraekkelig maengde maelk til at sikre, at proeverne er repraesentative for helheden. 4.2.2.3. Blanding af indholdet i store beholdere eller opbevarings-, jernbane- eller lastvognstanke  kan udfoeres: - af en mekanisk omroerer, som er indbygget i tanken og drevet af en elektromotor- af en propel  eller omroerer drevet af en elektromotor og placeret paa mandehullet med omroereren nede i maelken- i  jernbane- eller lastvognstanke ved recirkulation af maelken gennem overfoerselsslangen, der er  fastgjort til laensepumperne og indfoert gennem mandehullet- af ren filtreret trykluft. I dette  tilfaelde skal der benyttes mindst muligt lufttryk for at forhindre udvikling af en harsk smag. 4.3. Proeveudtagning af varmebehandlet maelk til direkte konsum i forbrugerpakningerProever af  varmebehandlet maelk til direkte konsum i forbrugerpakninger skal udtages af komplette, ubrudte  pakninger. Hvis det er muligt, udtages proeverne fra paafyldningsmaskinen i  forarbejdningsvirksomheden saa hurtigt som muligt efter fremstillingen (for pasteuriseret maelk paa  fremstillingsdagen). Proeverne udtages fra hver type varmebehandlet maelk (pasteuriseret, UHT og steriliseret) i et antal,  som svarer til de undersoegelser, der skal foretages, og i overensstemmelse med kontrollaboratoriets  eller anden kompetent myndigheds anvisninger. 5. IDENTIFIKATION AF PROEVENProeven skal maerkes med en identifikationskode, saaledes at den nemt kan  identificeres ved hjaelp af kontrollaboratoriets eller den kompetente myndigheds anvisninger til  sikker identifikation af den. 6. KONSERVERING, TRANSPORT OG OPBEVARING AF PROEVERAnvisninger vedroerende konservering (kemisk,  varme), transport, opbevaring og tidsinterval mellem proeveudtagning og analyse af maelken udarbejdes  af kontrollaboratoriet alt efter maelketype og den analysemetode, der vil blive anvendt.  Anvisningerne fastlaegges i forstaaelse med den kompetente nationale myndighed. Anvisningen omfatter foelgende punkt: - under transport og opbevaring skal der traeffes sikkerhedsforanstaltninger for at hindre, at  maelken udsaettes for forurenende lugte og direkte sollys. Hvis der anvendes en gennemsigtig beholder  til proeverne, skal denne opbevares moerkt.  BILAG II I. BESTEMMELSE AF TOERSTOFINDHOLD1. OMFANG OG ANVENDELSESOMRAADEDette er en  beskrivelse af referencemetoden til bestemmelse af toerstofindholdet i maelk. 2. DEFINITIONToerstofindhold: Den resterende masse efter afslutning af den specificerede  toerreprocedure udtrykt som vaegtprocent. 3. PRINCIPFordampning af vandet fra en analyseproeve ved en temperatur paa 102 oC±2 oC i en  toerreovn. 4. APPARATUR OG GLASVARERSaedvanligt laboratorieudstyr og i saerdeleshed: 4.1. Analysevaegt4.2. Ekssikator udstyret med effektivt toerremiddel (f.eks. frisktoerret kiselgel  med vandindholdsindikator). 4.3. Toerreovn, ventileret, termostatstyret ved 102 oC±2 oC i hele arbejdsomraadet. 4.4. Fladbundede skaale, hoejde 20 til 25 mm, diameter 50 til 75 mm og af et passende materiale med  taetsluttende, letaftageligt laag. 4.5. Kogende vandbad4.6. Homogeniseringsapparat5. FREMSTILLING AF PROEVENMaelkeproeven opvarmes til  en temperatur paa 20 til 25 oC. Den blandes grundigt for at sikre homogen fordeling af fedtet i hele  proeven. Det skal undgaas at omroere saa kraftigt, at maelken skummer, eller fedtet kaernes. Hvis det er  svaert at dispergere floedelaget, opvarmes langsomt til 35 til 40 oC, og eventuel floede, som sidder  fast paa beholderen, blandes forsigtigt i. Proeven afkoeles hurtigt til 20 til 25 oC. Et homogeniseringsapparat kan eventuelt benyttes til dispergering af fedtet. Der kan ikke forventes korrekte resultater, hvis proeven indeholder separat, flydende fedt eller  synlige, separate, uregelmaessigt formede, hvide partikler, som sidder fast paa beholderens  inderside. 6. METODIK6.1. Fremstilling af skaalenEn skaal (4.4), hvis laag stilles ved siden af i ovnen (4.3.),  opvarmes ved en styret temperatur paa 102 oC±2 oC mindst 30 minutter. Laaget saettes paa skaalen, og den  overfoeres straks til ekssikkatoren (4.2.). Der afkoeles til stuetemperatur (dvs. i mindst 30  minutter) og vejes til naermeste 0,1 mg. 6.2. Analyseproeve3 til 5 g af den fremstillede proeve (5.) vejes straks til naermeste 0,1 mg i den  fremstillede skaal (6.1.). 6.3. Bestemmelse6.3.1. Skaalen fortoerres i 30 minutter ved opvarmning i det kogende vandbad (4.5). Nr. L 407/3531. 12. 926.3.2. Skaalen med laaget ved siden af i ovnen (4.3.) opvarmes ved en styret  temperatur paa 102 oC±2 oC i to timer. Laaget saettes paa skaalen, og den tages ud af ovnen. 6.3.3. Der afkoeles i ekssikkatoren (4.2.) til stuetemperatur (i mindst 30 minutter) og vejes til  naermeste 0,1 mg. 6.3.4. Skaalen opvarmes igen med laaget ved siden af i ovnen i en time. Laaget saettes paa skaalen, op  den tages ud af ovnen. Der afkoeles i ca. 30 minutter i ekssikkatoren og vejes til naermeste 0,1 mg. 6.3.5. Fremgangsmaaden som beskrevet under 6.3.4. gentages, indtil vaegtforskellen mellem to paa  hinanden foelgende vejninger ikke overstiger 0,5 mg. Den laveste vaegt registreres som vaegt. 7. ANGIVELSE AF RESULTATER7.1. Beregning og formelDet samlede toerstofindhold beregnes som en  vaegtprocent ved foelgende formel:  WT =m2     m0m1     m0 × 100hvorWT =   er det samlede toerstofindhold i gram pr. 100 g, m0=   er vaegten i gram for skaal og laag (6.1.), m1=   er vaegten i gram for skaal, laag og analyseproeve (6.2.), m2=   er vaegten i gram for skaal, laag og toerret analyseproeve (6.3.5.). Den opnaaede vaerdi afrundes til naermeste 0,01  % vaegtprocent. 7.2. Noejagtighed7.2.1. Repeterbarhed (r): 0,10 g af det samlede toerstofindhold pr. 100 g af produktet. 7.2.2. Reproducerbarhed (R): 0,20 g af det samlede toerstofindhold pr. 100 g af produktet. II. BESTEMMELSE AF FEDTINDHOLD 1. OMFANG OG ANVENDELSESOMRAADEDette er en beskrivelse af  referencemetoden til bestemmelse af fedtindholdet i raa maelk og soedmaelk, delvis skummet maelk og  skummetmaelk. 2. DEFINITIONFedtindhold i maelk: Alt materiale som bestemt ved denne metode. Resultatet angives i  vaegtprocent. 3. PRINCIPEn ammoniakethanoloploesning af en analyseproeve ekstraheres med dietylaeter og  petroleumsaeter. Oploesningsmidlerne fjernes ved destillation eller fordampning, og vaegten bestemmes  for det ekstraherede materiale, som er oploeseligt i petroleumsaeter. (Metoden kendes under navnet  Roese-Gottlieb metoden). 4. REAGENSERAlle reagenser skal vaere af anerkendt analysekvalitet og maa ikke efterlade synlige  spor i en blindtest. Reagensernes kvalitet afproeves ved en bestemmelse som angivet i 6.3. Til afvejning benyttes en tom  kolbe, et tomt baegerglas eller en tom metalskaal (5.8.), der er fremstillet som angivet i 6.4., som  tara (for at kunne korrigere for paavirkninger af vejeresultatet, der skyldes aendringer i de  atmosfaeriske forhold). Hvis sporene, korrigeret for den tydelige aendring af taraens vaegt,  overstiger 2,5 mg, bestemmes oploesningsmiddelsporene saerskilt ved fordampning af henholdsvis 100 ml  dietylaeter (4.4.) og 100 ml petroleumsaeter (4.5.). Overstiger sporene 2,5 mg, renses  oploesningsmidlet ved destillation eller erstattes. 4.1. Ammoniakoploesning, som indeholder ca. 25  % (m/m) NH3. Der kan ogsaa benyttes en mere  koncentreret ammoniakoploesning (6.5.1. og A.1.5.1.). Nr. L 407/3631. 12. 924.2. Ethanol, mindst 94  % (v/v). Ethanol denatureret med methanol kan  benyttes, forudsat at det er sikkert, at resultaterne af bestemmelsen ikke paavirkes deraf. 4.3. Kongoroedt- eller kresolroedt-oploesning1 g kongoroedt eller kresolroedt oploeses i vand og  fortyndes til 100 ml. NB: Anvendelse af denne oploesning, som bevirker, at beroeringsfladen mellem oploesningsmidlet og  vandlagene kan ses tydeligere, er ikke obligatorisk (6.5.2.). Der kan anvendes andre vandfarveoploesninger, forudsat at de ikke paavirker resultatet af  bestemmelsen. 4.4. Dietylaeter, fri for peroxider, der ikke indeholder over 2 mg/kg antioxidant, og som opfylder  kravene til blindtesten (6.3.). 4.5. Petroleumsaeter med et kogepunkt mellem 30 oC og 60 oC. 4.6. Blandet oploesningsmiddel fremstillet kort foer brugen ved blanding af lige store maengder  dietylaeter (4.4.) og petroleumsaeter (4.5.). 5. APPARATUR OG GLASVARERAdvarsel: Da bestemmelsen medfoerer brug af flygtige, brandbare  oploesningsmidler, skal anvendte elektriske apparater opfylde lovgivningen vedroerende brug af  saadanne oploesningsmidler. Saedvanligt laboratorieudstyr og i saerdeleshed: 5.1. Analysevaegt5.2. Centrifuge, hvori fedtekstraktionskolber eller -glas (5.6.) kan rotere med en  omdrejningsfrekvens paa 500 til 600 omdrejninger pr. minut, saaledes at der frembringes et tyngdefelt  paa 80 til 90 G i kolbens eller glassets yderende. NB: Anvendelse af en centrifuge er ikke obligatorisk (6.5.5.). 5.3. Destillations- eller fordampningsapparatur til destillation af oploesningsmidler og ethanol fra  kolberne eller til fordampning fra baegerglas og skaale (6.5.12. og 6.5.15.) ved en temperatur, som  ikke overstiger 100 oC. 5.4. Ovn, elektrisk opvarmet med ventilationsaabningerne helt aabne, som kan termostatstyres ved en  temperatur paa 102 oC±2 oC i hele arbejdsomraadet. Ovnen skal vaere udstyret med et egnet termometer. 5.5. Vandbad, som kan holdes paa en temperatur paa 35 til 40 oC. 5.6. Fedtekstraktionskolber af Mojonnier-typenNB: Det er ogsaa muligt at benytte  fedtekstraktionsglas med haevert eller vaskeflaskearmatur, men saa er metoden en anden (angivet i  tillaegget). Kolberne (eller glassene) skal vaere udstyret med en prop af matteret glas eller kork af god  kvalitet eller en anden type prop, som ikke paavirkes af de anvendte reagenser. Korkpropper skal  ekstraheres med dietylaeter (4.4.), opbevares i vand ved 60 oC eller derover i mindst 15 minutter og  derefter afkoeles i vand, saaledes at de er maettede ved brug. 5.7. Stativ til fedtekstraktionskolber (eller glas) (5.6.). 5.8. Vaskeflaske, egnet til brug sammen med blandet oploesningsmiddel (4.6.). Der maa ikke benyttes  en plastikvaskeflaske. 5.9. Fedtopsamlingsbeholder, f.eks. kogekolber (med flad bund) eller Erlenmeyer-kolber med en  kapacitet paa 125 til 250 ml eller metalskaale. Hvis der anvendes metalskaale, skal de helst vaere af  rustfrit staal med flad bund, fortrinsvis med tud og med en diameter paa 80 til 100 mm og en hoejde paa  ca. 50 mm. 5.10. Kogesten, fedtfri, af ikke-poroest porcelaen eller siliciumkarbid eller glasperler (ikke  obligatorisk til metalskaale). 5.11. Maalecylindere med en kapacitet paa 5 og 25 ml. 5.12. Pipetter, graduerede, med en kapacitet paa 10 ml. 5.13. Tang af metal, egnet til at holde kolber, baegerglas eller skaale. Nr. L 407/3731. 12. 926. METODIKNB: Den alternative metodik, hvortil der benyttes  fedtekstraktionsglas med haevert eller vaskeflaskearmatur (se NB under 5.6.), er beskrevet i  tillaegget. 6.1. Fremstilling af proevenLaboratorieproevens temperatur justeres til ca. 35 til 40 oC i 15  minutter, eventuelt ved hjaelp af vandbad. Proeven blandes grundigt, men forsigtigt, ved at bunden paa  proeveflasken vendes i vejret flere gange, uden at maelken skummer eller kaernes, og den afkoeles  hurtigt til ca. 20 oC. 6.2. AnalyseproevenProeven (6.1.) blandes, ved at bunden paa flasken vendes forsigtigt i vejret 3 til  4 gange, og 10 til 11 g af proeven vejes straks til naermeste 1 mg direkte eller ved difference over  i en af ekstraktionskolberne (5.6.). Analyseproeven skal tilfoeres saa fuldstaendig som muligt til den nederste (lille) beholder i  ekstraktionskolben. 6.3. BlindtestBlindtesten foretages samtidig med bestemmelsen ved samme metode og med samme  reagenser, men analyseproeven erstattes med 10 til 11 ml vand. AEndringen i fedtopsamlingsbeholderens synlige vaegt korrigeret for den synlige aendring i  kontrolbeholderens vaegt maa ikke overstige 2,5 mg. 6.4. Fremstilling af fedtopsamlingsbeholdereEn beholder (5.9.) - sammen med nogle faa kogesten  (5.10.) for at fremme jaevn kogning under den efterfoelgende fjernelse af oploesningsmiddel i ovnen  (5.4.) - toerres i en time. Beholderen afkoeles (ikke i en ekssikkator, men stoevbeskyttet) til  vejerummets temperatur (glasbeholdere mindst en time, metalskaale mindst en halv time). Navnlig for  at undgaa temperatursvingninger benyttes der en tang til at anbringe beholderen paa vaegten, og der  vejes til naermeste 0,1 mg. 6.5. Bestemmelse6.5.1. 2 ml af ammoniakoploesningen (4.1.) eller en tilsvarende maengde mere  koncentreret ammoniakoploesning tilsaettes og blandes grundigt med analyseproeven i kolbens lille  beholder. Bestemmelsen foretages straks efter tilsaetning af ammoniak. 6.5.2. 10 ml ethanol (4.2.) tilsaettes og blandes forsigtigt, men grundigt, ved at kolbens indhold  flyder frem og tilbage mellem de to beholdere. Det maa undgaas, at vaesken kommer for taet paa kolbens  hals. Eventuelt tilsaettes to draaber kongoroedt- eller kresolroedt-oploesning (4.3). 6.5.3. 25 ml dietylaeter (4.4.) tilsaettes, kolben lukkes med en korkprop, der er maettet med vand,  eller en anden prop, der er vaedet med vand (5.6.), og kolben rystes kraftigt, men ikke for voldsomt  (for at undgaa dannelse af persistente emulsioner), i et minut med kolben i vandret position og den  lille beholder opad. Med mellemrum skal vaesken i den store beholder loebe ind i den lille beholder.  Kolben afkoeles eventuelt under rindende vand, derefter fjernes proppen omhyggeligt og proppen samt  kolbens hals skylles med en smule af det blandede oploesningsmiddel (4.6.) ved brug af vaskeflasken  (5.8.), saaledes at skyllevandet loeber ned i kolben. 6.5.4. 25 ml petroleumsaeter (4.5.) tilsaettes, kolben lukkes med proppen, som er vaedet igen (den  vaedes ved dypning i vand), og kolben rystes let i 30 sekunder som beskrevet i 6.5.3. 6.5.5. De lukkede kolbe centrifugeres i 1 til 5 minutter med en omdrejningsfrekvens paa 500 til 600  omdrejninger pr. minut (5.2.). Hvis der ikke kan benyttes en centrifuge (se NB under 5.2.), skal  den lukkede kolbe henstaa i stativet (5.7.) i mindst 30 minutter, indtil supernatanten er klart og  tydeligt adskilt fra vandlaget. Kolben afkoeles eventuelt under rindende vand. 6.5.6. Proppen fjernes omhyggeligt, og proppen og den indvendige side af kolbens hals skylles med  en smule af det blandede oploesningsmiddel (4.6.), saaledes at skyllevandet loeber ned i kolben. Hvis graensefladen mellem vaeskerne ligger under kolbehalsens grundlinje, haeves den lidt over dette  niveau ved forsigtig tilsaetning af vand langs siden af kolben for at lette dekantering af  oploesningsmidlet. 6.5.7. Ekstraktionskolben holdes i den lille beholder, og der dekanteres omhyggeligt saa meget som  muligt af supernatanten over i den fremstillede fedtopsamlingsbeholder (6.4.), som for kolbernes  vedkommende indeholder nogle faa kogesten (5.10.) (ikke obligatorisk for metalskaale), idet  dekantering af det vandige lag undgaas. 6.5.8. Ydersiden af ekstraktionskolbens hals skylles med en smule af det blandede oploesningsmiddel  (4.6.), saa skyllevandet opsamles i fedtopsamlingsbeholderen. Det blandede oploesningsmiddel maa ikke  brede sig ud over ekstraktionskolbens yderside. Oploesningsmidlet eller en del af oploesningsmidlet kan eventuelt fjernes fra beholderen ved  destillation eller fordampning som beskrevet i 6.5.12. Nr. L 407/3831. 12. 926.5.9. 5 ml ethanol (4.2.) tilsaettes til ekstraktionskolbens indhold, idet  ethanolet benyttes til at skylle indersiden af kolbens hals, og der blandes som beskrevet i 6.5.2. 6.5.10. En anden ekstraktion foretages ved gentagelse af metoden i 6.5.3. til 6.5.8., men der  bruges kun 15 ml dietylaeter (4.4.) og 15 ml petroleumsaeter (4.5.). AEteren benyttes til skylning af  indersiden af ekstraktionskolbens hals. Eventuelt haeves graensefladen mellem vaeskerne til midten af  kolbens stilk, saa den endelige dekantering af oploesningsmidlet kan blive saa fuldstaendig som  muligt. 6.5.11. En tredje ekstraktion foretages ved endnu engang at gentage metoden i 6.5.3. til 6.5.8.,  men der bruges kun 15 ml dietylaeter (4.4.) o 15% ml petroleumsaeter (4.5.). AEteren benyttes til  skylning af indersiden af ekstraktionskolbens hals. Eventuelt haeves graensefladen mellem vaeskerne  til midten af kolbens hals, saa den endelige dekantering af oploesningsmidlet kan blive saa  fuldstaendig som muligt.Den tredje ekstraktion kan udelades for skummetmaelk6.5.12. Oploesningsmidlerne (herunder ethanol)  fjernes saa fuldstaendigt som muligt fra kolben ved destillation eller fra baegerglasset eller skaalen  ved fordampning (5.3.), idet indersiden af kolbens hals skylles med en smule af det blandede  oploesningsmiddel (4.6.), foer destillationen paabegyndes. 6.5.13. Fedtopsamlingsbeholderen (med kolben placeret paa siden, saa oploesningsdampene kan forsvinde)  opvarmes i en time i ovnen (5.4.). Fedtopsamlingsbeholderen tages ud af ovnen og afkoeles (ikke i en  ekssikkator, men stoevbeskyttet) til vejerummets temperatur (glasbeholdere mindst en time,  metalskaale mindst en halv time), og der vejes til naermeste 0,1 mg. Beholderen maa ikke aftoerres umiddelbart foer vejning. Navnlig for at undgaa temperatursvingninger  saettes beholderen paa vaegten med en tang. 6.5.14. Metoden i 6.5.13. gentages, indtil fedtopsamlingsbeholderens vaegt reduceres med 0,5 mg  eller derunder eller foroeges mellem to paa hinanden foelgende vejninger. Den iagttagne minimumsvaegt  registreres som fedtopsamlingsbeholderens og det ekstraherede stofs vaegt. 6.5.15. 25 ml petroleumsaeter tilsaettes til fedtopsamlingsbeholderen for at kontrollere, om det  ekstraherede stof er fuldstaendigt oploeseligt. Beholderen opvarmes forsigtigt, og oploesningen  skvulpes rundt, indtil alt fedtet er oploest. Hvis det ekstraherede stof er fuldstaendigt oploeseligt i petroleumsaeteren, beregnes fedtvaegten som  forskellen mellem slutvaegten for den beholder, der indeholder det ekstraherede stof (6.5.14.), og  den oprindelige vaegt (6.4.). 6.5.16. Hvis det ekstraherede stof ikke er fuldstaendigt oploeseligt i petroleumsaeteren - eller i  tvivlstilfaelde - ekstraheres fedtet fuldstaendigt fra beholderen ved gentagne gange at udvaske det  med varm petroleumsaeter. Ethvert spor af uoploeseligt materiale skal bundfaelde sig, og petroleumsaeteren dekanteres  omhyggeligt, uden at eventuelt uoploeseligt materiale fjernes. Denne metode gentages yderligere tre  gange, og petroleumsaeteren benyttes til skylning af indersiden af beholderens hals. Til sidst skylles ydersiden af den oeverste del af beholderen med blandet oploesningsmiddel, saaledes  at oploesningsmidlet ikke spredes ud over beholderens yderside. Dampe af petroleumsaeter fjernes fra  beholderen ved opvarmning af beholderen i en time i ovnen, og der afkoeles og vejes som beskrevet i  6.5.13 og 6.5.14. Fedtvaegten beregnes som forskellen mellem den vaegt, der er bestemt i 6.5.14., og slutvaegten. 7. ANGIVELSE AF RESULTATER7.1. Beregning og formelFedtindholdet beregnes som en vaegtprocent ved  foelgende formel:  F =(m1     m2)     (m3     m4)m0 × 100hvorF  =   fedtindholdm0=   er analyseproevens vaegt i  gram (6.2.)m1=   er fedtopsamlingsbeholderens og det ekstraherede stofs vaegt i gram som bestemt i  6.5.14. m2=   er vaegten i gram af den fremstillede fedtopsamlingsbeholder eller - i tilfaelde af uoploest  materiale - af fedtopsamlingsbeholderen og de uoploeselige rester som bestemt i 6.5.16. m3=   er vaegten i gram af den i blindtesten (6.3.) anvendte fedtopsamlingsbeholder og eventuelt  ekstraheret som bestemt i 6.5.14. m4=   er vaegten i gram af den fremstillede og i blindtesten (6.3.) anvendte fedtopsamlingsbeholder  (se 6.4.) eller - i tilfaelde af uoploest materiale - vaegten i gram af fedtopsamlingsbeholderen og de  uoploeselige rester som bestemt i 6.5.16. Resultatet angives i naermeste 0,01  %. Nr. L 407/3931. 12. 927.2. Noejagtighed7.2.1. Repeterbarhed (r)- for soedmaelk og delvis skummet maelk: 0,02 g fedt pr. 100 g af  produktet- for skummetmaelk: 0,01 g fedt pr. 100 g produktet.. 7.2.2. Reproducerbarhed (R)- for soedmaelk: 0,04 g fedt pr. 100 g af produktet- for delvis skummet  maelk: 0,03 g fedt pr. 100 g af produktet- for skummetmaelk: 0,025 g fedt pr. 100 g produktet. III. BESTEMMELSE AF FEDTFRIT TOERSTOF 1. OMFANG OG ANVENDELSESOMRAADEDette er en beskrivelse af  referencemetoden til bestemmelse af fedtfrit toerstof i varmebehandlet maelk. 2. DEFINITION OG BEREGNINGIndholdet af fedtfrit toerstof udtrykkes i vaegtprocent. Indholdet af fedtfrit toerstof er: Toerstofindholdet (afsnit I) minus fedtindholdet (afsnit II). IV. BESTEMMELSE AF KVAELSTOFINDHOLD 1. OMFANG OG ANVENDELSESOMRAADEDette er en beskrivelse af  referencemetoden til bestemmelse af det totale kvaelstofindhold i soedmaelk, delvis skummet maelk og  skummetmaelk. 2. DEFINITIONVed det totale kvaelstofindhold i maelk forstaas kvaelstofindholdet udtrykt som  vaegtprocent bestemt efter Kjeldahl-metoden. 3. PRINCIPEn afvejet maelkeproeve behandles med koncentreret svovlsyre og kaliumsulfat og  kobber(II)sulfat som katalysator for at omdanne kvaelstoffet i de organiske forbindelser til  ammoniumsulfat. Ammoniakken frigoeres ved tilsaetning af natriumhydroxidoploesning og destilleres og  absorberes derefter i en borsyreoploesning. Denne titreres med en syreoploesning. 4. REAGENSER4.1. Kaliumsulfat (K2SO4)4.2. Kobbersulfatoploesning. 5,0 g  kobber(II)sulfatpentahydrat (CuSO4   7  5  H2O) oploeses i vand og fortyndes til 100 ml (ved 20 oC)  i en maaleflaske. 4.3. Svovlsyre, mindst 98,0  % (m/m), (H2SO4). 4.4. Natriumhydroxidoploesning, 47  % (m/m) 704 g NaOH/1 (20 oC). NB: En mindre koncentreret natriumhydroxidoploesning kan anvendes, f.eks. 40  % (m/m) 572 g/l, 20  oC, eller 30  % (m/m), 399 g/l, 20 oC. 4.5. Borsyreoploesning. 40 g borsyre (H3BO3) oploeses i en liter varmt vand, afkoeles og opbevares i  en borsilikatglasflaske. 4.6. Indikatoroploesning. 0,01 g metylroedt, 0,02 g bromtymolblaat og 0,06 g bromkresolgroent oploeses i  100 ml ethanol. Oploesningen opbevares koeligt og moerkt i en lukket, brun flaske. 4.7. Indstillet syreoploesning, c (1/2 H2SO4) eller c (HCl) = 0,1 mol/l indstillet med en  noejagtighed paa 0,0001 mol/l. Nr. L 407/4031. 12. 924.8. Kvaelstoffri sakkarose4.9. Ammoniumsalt, rent, f.eks. ammoniumoxalat  (NH4)2C2O4   7  H2O eller ammoniumsulfat (NH4)2SO4. 4.10. Tryptofan (C11H12N2O2), fenacetin (C10H7CH2CONH2) eller lysin mono- eller  dihydroklorid(C6H14N2O2   7  HC1 eller C6H14N2O2   7  2HC1). NB: Reagensernes renhed i 4.9. og 4.10. boer vaere af hoejere kvalitet end »analysekvalitet«. Hvis det  er muligt, benyttes der i 4.9. en godkendt ammoniumsaltoploesning. 5. APPARATUR OG GLASVARERSaedvanligt laboratorieudtryr og i saerdeleshed: 5.1. Kjeldahl-kolber, med en kapacitet paa 500 ml. 5.2. Egnede kogesten, f.eks. glasperler med en diameter paa ca. 5 mm, Hengar granulat og pimpsten. 5.3 Burette eller automatisk pipette kalibreret til 1,0 ml. 5.4. Graduerede maalecylindre af glas med en kapacitet paa 50, 100 og 250 ml. 5.5. Digestionsapparatur i skraanende stilling (ca. 45o) med elektriske varmeelementer eller  gasbraendere, som ikke opvarmer kolberne over indholdsniveauet, med et dampekstraktionssystem. 5.6. Destillationsapparatur af borsilikatglas, hvortil der kan fastgoeres en Kjeldahl-kolbe (5.1.)  bestaaende af et effektivt draabefang forbundet med et effektivt svaleroer med et lige, indvendigt roer  og en aabningsstuds i den nederste ende. Forbindelsesroer og prop(per) skal vaere taetsluttende og  helst af neoprengummi. 5.7. Pipette eller automatisk pipette kalibreret til 0,10 ml. 5.8. Koniske kolber med en kapacitet paa 500 ml, gradueret ved 200 ml. 5.9. Burette med en kapacitet paa 50 ml, gradueret i 0,01 ml, noejagtighed ±0,05 ml. 5.10. Lup til aflaesning af burette (5.9.). 5.11. pH-meter. 5.12. Automatisk burette. 6. METODIK6.1. Til Kjeldahl-kolben (5.1.) tilsaettes kogesten (5.2.) (f.eks. 3 glasperler), 15 g  kaliumsulfat (4.1.), 1,0 ml kobbersulfatoploesning (4.2.), ca. 5 g maelkeproeve (vejet til naermeste  0,001 g) og 25 ml svovlsyre (4.3.). Syren benyttes til afskylning af eventuel  kobbersulfatoploesning, kaliumsulfat eller maelk paa kolbens hals; indholdet i kolben blandes  forsigtigt. NB: Da organisk stof forbruger svovlsyre under kogning, bruges 30 ml H2SO4 (4.3.) i stedet for 25  ml til digestion, hvis maelken indeholder over 5,0  % (m/m) fedt. Dette gaelder ogsaa i blindtesten. 6.2. Hver Kjeldahl-kolbe opvarmes paa apparaturet (5.5.), i begyndelsen meget forsigtigt, saaledes at  det sorte skum forbliver i beholderen. Naar det foerste skum har lagt sig, og der fremkommer store  maengder hvid damp, koges kraftigt (syredampen kondenseres halvvejs oppe i kolbens hals), indtil der  ikke er sorte partikler tilbage, og indtil indholdet har en klar lys blaagroen farve. Derefter koges  jaevnt i mindst 1,5 time. Foelgende krav maa bemaerkes: a) Det maa ikke tage indholdet mere end en time at blive klart, og den samlede digestionstid maa ikke  vaere under 2,5 timer. Hvis det er noedvendigt med mere end en time til klaring, skal den samlede  digestionstid oeges tilsvarende. b) Den tilsatte kaliumsulfat fremmer digestionen, da den haever blandingens kogepunkt. Hvis den  resterende maengde H2SO4 er mindre end ca. 15 ml ved afslutningen af digestionen, kan der vaere sket  et kvaelstofsvind paa grund af overophedning. Hvis der opvarmes med en gasflamme, opvarmes kolben paa  en plade af varmeisolerende materiale med en cirkelformet aabning, hvis diameter er saadan, at den  frie flamme kun beroerer den del af kolben, som er under vaeskeindholdets overflade (5.5.). Nr. L 407/4131. 12. 92c) Hvis der kommer sorte partikler ind i kolbens hals, og de ikke alle  skylles ned i beholderen af syren, som stroemmer tilbage i starten af den kraftige kogningsperiode  (dette kan fremskyndes ved, at man drejer kolben rundt), skal kolben afkoeles tilstraekkeligt og  vaskes omhyggeligt med saa lidt vand som muligt. Dernaest fortsaettes digestionen som beskrevet  ovenfor. 6.3. Naar Kjeldahl-kolberne er afkoelet, tilsaettes 300 ml vand (se NB) til hver, saaledes at indholdet  med forsigtighed skylles ned langs indersiden af kolbens hals, og det blandes grundigt, saa det  sikres, at udskilte krystaller oploeses. Kogesten (5.2.) tilsaettes for at sikre ensartet kogning.  Dernaest tilsaettes til hver kolbe 70 ml natriumhydroxidoploesning (4.4.) (se NB) ved forsigtig  nedhaeldning af oploesningen i kolbens skraanende hals, saa der dannes et bundlag i beholderen. Det maa  undgaas at vaede den oeverste del af halsen med natriumhydroxidoploesningen. NB: Den kombinerede maengde vand og natriumhydroxidoploesning skal i alt udgoere 370 ml, saa der kan  opsamles ca. 150 ml destillat, lige foer den uregelmaessige kogning (stoedkogning) begynder. Hvis der saaledes tilsaettes en stoerre aekvivalent maengde natriumhydroxidoploesning, som er mindre  koncentreret end 47  % (m/m), skal vandmaengden reduceres tilsvarende. Hvis der f.eks. skal  tilsaettes 85 ml 40  % (m/m) eller 125 ml 30  % (m/m) natriumhydroxidoploesning, skal vandmaengden  vaere henholdsvis 285 ml eller 245 ml. 6.4. Hver Kjeldahl-kolbe forbindes straks med et destillationsapparat (5.6.). Det kontrolleres, at  spidsen af svaleroerets udloebsstuds er nedsaenket i 50 ml borsyreoploesning (4.5.) tillige med 0,20 ml  (5 til 6 draaber) indikatoroploesning (4.6.), som altsammen er indeholdt i en konisk kolbe (5.8.).  Indholdet i Kjeldahl-kolberne rystes, saa det blandes grundigt, og det koges, i begyndelsen  forsigtigt for at undgaa for voldsom skumdannelse. Naar 100 til 125 ml destillat er opsamlet, saenkes  den koniske kolbe, indtil spidsen af svaleroerets aabningsstuds er ca. 40 mm over 200 ml maerket.  Destillationen fortsaettes, indtil den uregelmaessige kogning (stoedkogning) starter, saa stoppes  opvarmningen straks. Kjeldahl-kolberne tages af apparatet, og spidsen af svaleroerenes aabningsstuds  skylles med en smule vand, idet skyllevandet opsamles i den koniske kolbe. Foelgende krav maa  bemaerkes: a) destillationshastigheden skal sikre, at ca. 150 ml destillat er opsamlet, naar den uregelmaessige  kogning (stoedkogning) starter; indholdet i hver af de koniske kolber vil saa vaere ca. 200 mlb)  svaleroerene skal vaere saa effektive, at indholdets temperatur i de koniske kolber ikke overstiger 25  oC under destillationen. 6.5. Hvert destillat titreres med en standardoploesning (4.7.), indtil pH er 4,6±0,1, ved brug af et  pH-meter og eventuelt en automatisk burette. Det er lettere at kontrollere, om titreringen  forloeber, som den skal, hvis der tilsaettes en indikator. Buretterne aflaeses til naermeste 0,01 ml  ved hjaelp af luppen (5.10.). Parallaksefejl maa undgaas. Titreringen kan foretages med kun én indikator. Den titreres, indtil destillatets farve svarer til  farven paa en nylig foretaget blanding af 150 ml vand tilsat 50 ml borsyreoploesning og 0,20 ml  indikator i en Erlenmeyer-kolbe (5.8.). 6.6. En blindtest foretages ifoelge 6.1. til 6.5., idet der benyttes 5 ml destilleret vand sammen  med ca. 0,1 g sakkarose (4.8.) i stedet for maelkeproeven. NB: Titreringen af blinddestillatet kraever kun en meget lille maengde standardoploesning (4.7.). 6.7. Noejagtigheden kontrolleres regelmaessigt ved to genfindingsproever efter metoden i 6.1. til  6.5. 6.7.1. Det kontrolleres, at der ikke sker kvaelstofsvind som resultat af overophedning eller  mekanisk udsivning under destillationen ved brug af en analyseproeve paa 0,15 g ammoniumoxalat eller  -sulfat (4.9.) afvejet med en noejagtighed paa 0,001 g sammen med 0,1 g sakkarose (4.8.). Den genfundne kvaelstofprocent skal vaere 99,0 til 100,0  %. Lavere eller hoejere resultater indikerer fejl i fremgangsmaaden og/eller unoejagtig koncentration af  standardoploesningen (4.7.). 6.7.2. Det kontrolleres, at digestionen er tilstraekkelig til frigoerelse af alt proteinkvaelstof ved  en analyseproeve paa 0,20 g ren tryptofan, 0,35 g fenacetin eller 0,20 g lysinhydroklorid (4.10.).  Alle afvejninger foretages med en noejagtighed paa 0,001 g. Mindst 98 til 99  % af kvaelstoffet skal  genfindes. 7. SIKKERHEDSFORANSTALTNINGERUnder arbejde med koncentreret svovlsyre og natriumhydroxid samt  haandtering af Kjeldahl-kolber er brug af laboratoriekittel, beskyttelsesbriller og  beskyttelseshandsker obligatorisk. Nr. L 407/4231. 12. 92Kjeldahl-kolberne skal altid overvaages under destillationen. Paa grund af  den potentielle fare skal destillationen straks standses, hvis kolbeindholdet »stoedkoger« for  voldsomt. Hvis stroemmen afbrydes i mere end 2 til 3 minutter, saenkes opsamlingskolben, saaledes at  destillationsspidsen er haevet over vaesken. 8. ANGIVELSE AF RESULTATER8.1. Beregning og formel: Kvaelstofindholdet (WN) udtrykt i gram kvaelstof pr. 100 g af produktet beregnes ved formlen:  WN =1,40 (V     VO) cmhvor: WN =   er kvaelstofindholdetV=   er den i bestemmelsen anvendte maengde indstillet syreoploesning i  milliliterVO=   er den i blindtesten anvendte maengde indstillet syreoploesning i milliliterc=    er koncentrationen udtrykt i mol pr. liter indstillet syreoploesning (4.7.)m=   er analyseproevens  vaegt i gram. Resultatet afrundes til naermeste 0,001 g pr. 100 g. 8.2. Noejagtighed8.2.1. Repeterbarhed (r): 0,007 g pr. 100 g8.2.2. Reproducerbarhed (R): 0,015 g pr.  100 g9. AENDRET METODIK9.1. Der bruges et blokdigestionsapparat med cylindriske kolber i stedet  for digestionsapparatet og Kjeldahl-kolberne som beskrevet i 5.5. og 5.1. Eventuelle problemer  identificeres her ved at kontrollere hvert enkelt trin (6.7.). 9.2. Dampdestillation benyttes i stedet for direkte opvarmning af kolberne (6.4.). Naar der ikke kan  benyttes destilleret vand paa grund af apparatet, skal det kontrolleres, at vandet ikke indeholder  flygtige syrer eller flygtige alkaliske stoffer. 9.3. En analyseproeve paa 1 g maelk (semi-makro Kjeldahl) kan benyttes i stedet for 5 g (6.1.),  forudsat at: - maengderne af reagenser, som benyttes til mineraliseringen (6.1.): H2SO4, CuSO4, 5 H2O, K2SO4,  reduceres til samme forhold (1:5)- den samlede behandlingstid (6.2) reduceres til 75 minutter-  maengden af natriumhydroxidoploesning (6.3.) reduceres til samme forhold (1:5)- der benyttes en  indstillet syreoploesning (4.7), med en lavere koncentration (0,02 til 0,03 mol/1). NB: Anvendelse af en eller flere af disse valgmuligheder kan kun godtages, hvis  repeterbarhedsvaerdien (8.2.1.) og resultaterne af de to noejagtighedsproever (6.7.) er i  overensstemmelse med denne metodes krav. V. BESTEMMELSE AF PROTEININDHOLD 1. OMFANG OG ANVENDELSESOMRAADEDette er en beskrivelse af  referencemetoden til bestemmelse af proteinindholdet i varmebehandlet maelk (jf. artikel 3, litra A,  nr. 3, i direktiv 85/397/EOEF). 2. DEFINITIONProteinindhold: Den vaerdi, som opnaas ved at gange det samlede kvaelstofindhold udtrykt  som en vaegtprocent bestemt ved metoden beskrevet i afsnit IV (3.) med en passende faktor (2.). 3. BEREGNINGProteinindholdet i maelk i vaegtprocent = 6,38×  samlet kvaelstofindhold i maelk i %. Nr. L 407/4331. 12. 92VI. BESTEMMELSE AF MASSEFYLDE 1. OMFANG OG ANVENDELSESOMRAADEDette er en  beskrivelse af referencemetoden til bestemmelse af massefylden af raa maelk, soedmaelk, delvis skummet  maelk og skummetmaelk ved 20 oC. 2. DEFINITIONMaelks massefylde er forholdet mellem en bestemt maengde maelks vaegt ved 20 oC og den  samme maengde vands vaegt ved 20 oC. 3. PRINCIPMassefylden ved 20 oC bestemmes ved hjaelp af en flydevaegt. 4. APPARATUR OG GLASVARERSaedvanligt laboratorieudstyr og i saerdeleshed: 4.1. FlydevaegtFlydevaegten til maaling af massefylde er et instrument, som bestaar af en glassvoemmer,  som i den nederste ende er bred og tung. En cylinderformet glasstang er fastgjort til den oeverste  ende af svoemmeren og koaksialt orienteret. Den oeverste ende af stangen er lukket. Glassvoemmeren indeholder vaegten (bly, kviksoelv osv.), som skal justere flydevaegtens masse. Stangen  har en gradueret skala fra 1,025 til 1,035 g/ml. Flydevaegten skal kontrolleres efter den pyknometriske metode ved hjaelp af et pyknometer med en  kapacitet paa ca. 100 ml og udstyret med et praecisionstermometer. 4.2. Cylindre (glas eller rustfrit staal)med foelgende mindstemaal: - indvendig diameter ca. 35 mm, - indvendig hoejde ca. 225 mm. 4.3. Vandbad, reguleret ved 20 oC±0,1 oC. 4.4. Vandbad, reguleret ved 40 oC±2 oC. 4.5. Termometer, gradueret til 0,5 oC. 5. METODIK5.1. Proeven blandes, ved at bunden paa den vendes i vejret, saa fedtet fordeles. Den  anbringes i vandbadet (4.4.) og opvarmes til 40 oC og holdes ved denne temperatur i fem minutter.  Proeven blandes omhyggeligt, ved at bunden paa den vendes i vejret, saa fedtet fordeles jaevnt. Den  afkoeles til 20 oC i det andet vandbad (4.3). 5.2. Proeven blandes omhyggeligt, ved at bunden paa den forsigtigt vendes i vejret, saa der ikke  iblandes luftbobler. Maelken haeldes i cylinderen (4.2.), der holdes skraat, saa der ikke dannes skum  eller bobler. Maelkeproeven skal vaere saa stor, at cylinderen loeber over, naar flydevaegten (4.1.)  saenkes ned i den. Flydevaegten saenkes forsigtigt ned i maelken og skal flyde frit, naar den naar sit  balancepunkt. Cylinderen skal staa lodret. Flydevaegten skal befinde sig midt i vaeskesoejlen og maa  ikke roere cylinderens vaegge. 5.3. Naar flydevaegten er kommet i ligevaegt, aflaeses skalaen ud for den oeverste del af menisken. 5.4. Straks efter aflaesning af flydevaegten saettes termometeret (4.5.) ned i proeven, og temperaturen  aflaeses med en noejagtighed paa 0,5 oC. Temperaturen maa ikke afvige fra 20 oC med mere end ±2 oC. 6. TEMPERATURKORRIGERING6.1. Hvis maelkeproevens temperatur ikke er noejagtig 20 oC, naar dens  massefylde maales, skal det fundne resultat korrigeres ved tillaeg af 0,0002 til massefylden for hver  grad over 20 oC eller fradrag af 0,0002 for hver grad under 20 oC. Denne korrektion kan kun  benyttes, hvis maelkeproevens temperatur ikke afviger fra 20 oC med mere end 5 oC. Nr. L 407/4431. 12. 927. ANGIVELSE AF RESULTATERBeregningsmetoden og formlen for proevens  massefylde udtrykkes i g/ml skummetmaelk ved 20 oC efter foelgende formel:  1 000   7  mv   MG   7  mv=0,92 mv (1 000     MG)1 000 MG   7  mv0,92920     MG   7   mvhvor: mv  =   proevens massefylde maalt paa flydevaegten (5.4) i g/lMG = proevens fedtindhold i %0,92 =  fedtdensitet. 8. NOEJAGTIGHED8.1. Repeterbarhed (r): 0,0003 g/ml. 8.2. Reproducerbarhed (R): 0,0015 g/ml. Nr. L 407/4531. 12. 92Tillaeg (til bilag II)ALTERNATIV METODIK MED ANVENDELSE AF  FEDTEKSTRAKTIONSGLAS MED HAEVERT ELLER VASKEFLASKEARMATUR A.1. METODIKA.1.1. Fremstilling af proeveSe 6.1. A.1.2. AnalyseproeveFremgangsmaaden i 6.2 foelges, men der benyttes fedtekstraktionsglas (5.6). Analyseproeven skal overfoeres saa fuldtstaendigt som muligt til bunden af ekstraktionsglasset. A.1.3. BlindtestSe 6.3. A.1.4. Fremstilling af fedtopsamlingsbeholderSe 6.4. A.1.5. BestemmelseA.1.5.1. 2 ml ammoniakoploesning (4.1.) eller en tilsvarende maengde mere koncentreret ammoniakoploesning  tilsaettes og blandes grundigt med den forbehandlede analyseproeve i bunden af glasset. Efter  tilsaetning af ammoniakken foretages bestemmelsen omgaaende. A.1.5.2. 10 ml ethanol (4.2.) tilsaettes, og der blandes forsigtigt, men grundigt, i bunden af glasset.  Eventuelt tilsaettes to draaber kongoroedt- eller kresolroedt-oploesning (4.3.). A.1.5.3. 25 ml dietylaeter (4.4.) tilsaettes, glasset lukkes med en korkprop, der er maettet med vand, eller en  anden prop, der er vaedet med vand (5.6.), og glasset rystes kraftigt, men ikke for voldsomt (for at  undgaa dannelse af persistente emulsioner) og vendes flere gange i et minut. Om noedvendigt afkoeles  glasset under rindende vand, derefter fjernes proppen omhyggeligt, og proppen og glassets hals  skylles med en smule af det blandede oploesningsmiddel (4.6.) ved brug af vaskeflasken (5.8.),  saaledes at skyllevandet loeber ned i glasset. A.1.5.4. 25 ml petroleumsaeter (4.5.) tilsaettes, glasset lukkes med proppen, som er vaedet igen (den vaedes ved  dypning i vand), og glasset rystes let i 30 sekunder som beskrevet i A.1.5.3. A.1.5.5. Det lukkede glas centrifugeres i 1 til 5 minutter med en omdrejningsfrekvens paa 500 til 600  omdrejninger pr. minut (5.2.). Hvis der ikke kan benyttes en centrifuge (se NB under 5.2.), skal  det lukkede glas henstaa i stativet (5.7.) i mindst 30 minutter, indtil supernatanten er klart og  tydeligt adskilt fra vandlaget. Eventuelt afkoeles glasset under rindende vand. A.1.5.6. Proppen fjernes omhyggeligt, og proppen og glassets hals skylles med en smule af det blandede  oploesningsmiddel, saaledes at skyllevandet loeber ned i glasset. A.1.5.7. Et haevet armatur eller vaskeflaskearmatur indsaettes i glasset, og den lange indvendige del af  armaturet skubbes ned, indtil aabningen er ca. 3 mm over graensefladen mellem lagene. Den indvendige  del af armaturet skal vaere parallel med ekstraktionsglassets akse. Supernatanten overfoeres omhyggeligt fra glasset til den fremstillede fedtopsamlingsbeholder (6.4.),  som for kolbers vedkommende indeholder nogle faa kogesten (5.10.) (ikke obligatorisk for  metalskaale). Det maa undgaas at overfoere noget af det vandige lag. Armaturets aabning skylles med en  smule af det blandede oploesningsmiddel, idet skyllevandet opsamles i fedtopsamlingsbeholderen. A.1.5.8. Armaturet loesnes fra glassets hals og haeves en smule. Den nederste del af den lange indvendige del  skylles med en smule af det blandede oploesningsmiddel. Armaturet saenkes og isaettes igen, og  skyllevandet overfoeres til fedtopsamlingsbeholderen.Armaturets aabning skylles med en smule af det blandede oploesningsmiddel, idet skyllevandet opsamles  i beholderen. Oploesningsmidlet eller en del af det kan eventuelt fjernes fra beholderen ved  destillation eller fordampning som beskrevet i 6.5.12. Nr. L 407/4631. 12. 92A.1.5.9. Armaturet loesnes igen fra halsen og haeves let. 5 ml ethanol tilsaettes til glassets indhold, idet  ethanolen benyttes til at skylle den lange indvendige del af armaturet. Der blandes som beskrevet i  A.1.5.2. A.1.5.10. En anden ekstraktion foretages ved gentagelse af metoden som beskrevet i A.1.5.3. til A.1.5.8., men  der bruges kun 15 ml dietylaeter (4.4.) og 15 ml petroleumsaeter (4.5.). AEteren benyttes til skylning  af den lange indvendige del af armaturet under fjernelse af dette fra glasset efter den foregaaende  ekstraktion. A.1.5.11. En tredje ekstraktion foretages ved endnu en gang at gentage metoden som beskrevet i A.1.5.3. til  A.1.5.8. Der bruges 15 ml dietylaeter og 15 ml petroleumsaeter, og den lange indvendige del af  armaturet skylles som beskrevet i A.1.5.10. Den tredje ekstraktion kan udelades for skummetmaelk. A.1.5.12. Der fortsaettes som beskrevet i 6.5.12. til 6.5.16.