CELEX: 32002R2091
Language: mt
Date: 2002-11-26 00:00:00
Title: Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KE) Nru. 2091/2002 tas-26 ta' Novembru 2002 li jemenda r-Regolament (KE) Nru. 2870/2000 li jistabbilixxi metodi ta' referenza tal-Komunità għall-analiżi ta' xorb alkoħoliku

Avviż Legali Importanti

|

32002R2091

Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KE) Nru. 2091/2002 tas-26 ta' Novembru 2002 li jemenda r-Regolament (KE) Nru. 2870/2000 li jistabbilixxi metodi ta' referenza tal-Komunità għall-analiżi ta' xorb alkoħoliku  

Official Journal L 322 , 27/11/2002 P. 0011 - 0027 CS.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 ET.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 HU.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 LT.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 LV.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 MT.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 PL.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 SK.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411 SL.ES Chapter 3 Volume 37 P. 395  - 411

		Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KE) Nru. 2091/2002tas-26 ta' Novembru 2002li jemenda r-Regolament (KE) Nru. 2870/2000 li jistabbilixxi metodi ta' referenza tal-Komunità għall-analiżi ta' xorb alkoħolikuIL-KUMMISSJONI TAL-KOMUNITAJIET EWROPEJ,Wara li kkunsidrat it-Trattat li jistabbilixxi l-Komunità Ewropea,Wara li kkunsidrat ir-Regolament tal-Kunsill (KEE) Nru. 1576/89 tad-29 ta' Mejju 1989 li jistabbilixxi regoli ġenerali dwar id-definizzjoni, id-deskrizzjoni u l-preżentazzjoni ta' xorb alkoħoliku [1], kif ġie emendat bl-Att ta' Adeżjoni ta' l-Awstrija, il-Finlandja u l-Isvezja, u b'mod partikolari bl-Artiklu 4 (8) fih imsemmi,Billi:(1) Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KE) Nru. 2870/2000 tad-19 ta' Diċembru 2000 li jistabbilixxi metodi ta' referenza tal-Komunità għall-analiżi ta' xorb alkoħoliku [2] jiddeskrivi dawn il-metodi f'L-Anness.(2) Erba' metodi ta' analiżi għad-determinazzjoni ta' trans-anethole f'xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi, ta' glycyrrhizic acid u ta' chalcones fil-pastis u ta' l-isfar tal-bajda f'likuri tal-bajd u likuri bil-bajd jitqiesu validi skond proċeduri rikonoxxuti internazzjonalment bħala parti minn proġett ta' riċerka sostnut mill-Kummissjoni.(3) Dawn l-erba' metodi jistgħu jkunu rikonoxxuti bħala metodi ta' referenza tal-Komunità u jridu jiżdiedu fl-Anness tar-Regolament (KE) Nru. 2870/2000.(4) Il-miżuri provduti f'dan ir-Regolament jaqblu ma' l-opinjoni tal-Kumitat ta' l-Implimentazzjoni għax-Xorb Alkoħoliku,ADOTTAT DAN IR-REGOLAMENT:Artikolu 1L-Anness tar-Regolament (KE) Nru. 2870/2000 huwa b'dan emendat kif ġej:1. Fit-taqsira ta' l-Anness, it-terminu '(p.m.)' f'punti V, VI, VII u IX se jitħassar.2. Kapitli V, VI, VII u IX fl-Anness ta' dan ir-Regolament se jiżdiedu wara Kapitlu III.Artikolu 2Dan ir-Regolament se jidħol fis-seħħ fis-seba' ġurnata wara l-pubblikazzjoni tiegħu fil-Ġurnal Uffiċjali tal-Komunitajiet Ewropej.Dan ir-Regolament se jkun jorbot fl-intier tiegħu u japplika direttament f'Istati Membri kollha.Magħmul fi Brussel, fis-26 ta' Novembru 2002.Għall-KummissjoniFranz FischlerMembru tal-Kummissjoni[1] ĠU L 160, tat-12.6.1989, p. 1.[2] ĠU L 333, tad-29.12.2000, p. 20.--------------------------------------------------L-ANNESSV. DETERMINAZZJONI KROMATOGRAFIKA B'ANETHOLE GAS TA' TRANS-ANETHOLE F'XORB ALKOĦOLIKU1. GħanDan il-metodu huwa addattat għad-determinazzjoni ta' trans-anethole f'xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi bl-użu tal-kromatografija b'gass kapillari.2. Referenzi normattiviISO 3696: 1987 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.3. PrinċipjuIl-konċentrazzjoni ta' trans-anethole fl-ispirtu hija ddeterminata bil-kromatografija tal-gass (GC). L-istess kwantità ta' internal standard, per eżempju 4-allylanisole (estragole) meta l-estragole m'huwiex preżenti b'mod naturali fil-kampjun, hija miżjuda mal-kampjun tat-test u ma' soluzzjoni ta' trans-anethole ta' konċentrazzjoni magħrufa wżata bħala referenza. It-tnejn li huma huma mbagħad dilwiti ma' soluzzjoni ta' 45 % ethanol u injettati direttament fis-sistema GC. Hemm bżonn li ssir estrazzjoni qabel il-preparazzjoni u l-analiżi ta' kampjun għal-likuri li fihom kwantitajiet kbar ta' zokkor.4. Reaġenti u materjaliWaqt l-analiżi, uża biss reaġenti ta' purità ta' mill-inqas 98 %. Għandu jintuża ilma ta' mill-inqas grad 3 kif definit mill-ISO 3696.Kimiċi ta' referenza għandhom jinħażnu kesħin (f'temperatura ta' 4 °C), fid-dlam, f'kontenituri ta' l-aluminju jew fi fliexken tar-reaġenti magħmula mill-ħġieġ kulurit (ambra). It-tappijiet għandhom ikunu preferibbilment imdaħħla fil-post b'siġill ta' l-aluminju. It-trans-anethole ikollu bżonn jitniżżel mill-istat kristallin tiegħu qabel jintuża, imma f'dan il-każ it-temperatura tiegħu m'għandha qatt taqbeż il-35 °C.4.1. Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5)4.2. 1-methoxy-4-(1-propenyl) benzene; (trans-anethole) (CAS 4180-23-8)4.3. 4-allylanisole, (estragole) (CAS 140-67-0), internal standard suġġerit (IS)4.4. Ethanol 45 % vol.Żid 560 g ta' ilma distillat ma' 378 g ta' ethanol 96 % vol.4.5. Preparazzjoni ta' soluzzjonijiet standardIs-soluzzjonijiet standard kollha għandhom jinħażnu f'temperatura ambjentali (15 sa 35!!! error character !!! Β!!! error character !!! ΊC) fid-dlam f'kontenituri ta' l-aluminju jew fi fliexken tar-reaġenti magħmula mill-ħġieġ kulurit (ambra). It-tapp għandu jkun preferibbilment imdaħħal fil-post b'siġill ta' l-aluminju.It-trans-anethole u l-4-allylanisole huma prattikament insolubbli fl-ilma, u għalhekk hemm bżonn li t-trans-anethole u l-4-allylanisole jiddewbu fi ftit 96 % ethanol (4.1) qabel iż-żieda ta' 45 % ethanol (4.4).Is-soluzzjonijiet għall-użu għandhom ikunu preparati kull ġimgħa.4.5.1. Soluzzjoni Standard ASoluzzjoni għall-użu ta' trans-anethole (konċentrazzjoni: 2 g/l)Iżen 40 mg ta' trans-anethole (4.2) f'volumetric flask ta' 20 ml (jew 400 mg f'200 ml, eċċ.). Żid ftit 96 % ethanol (4.1) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.4.5.2 Soluzzjoni internal standard BSoluzzjoni għall-użu ta' internal standard, per eżempju estragole (konċentrazzjoni: 2 g/l)Iżen 40 mg ta' estragole (4.3) f'volumetric flask ta' 20 ml (400 mg f'200 ml, eċċ.). Żid ftit 96 % vol. ethanol (4.1) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.4.5.3 Soluzzjonijiet użati biex tiċċekkja l-linearity response tal-flame ionisation detector (FID)Il-linearity response tal-FID trid tkun iċċekkjata għall-analiżi waqt li tqis firxa ta' konċentrazzjonijiet ta' trans-anethole fi spirti minn 0 g/l sa 2.5 g/l. Fil-proċedura ta' l-analiżi, il-kampjuni mhux magħrufa li se jkunu analizzati huma dilwiti 10 darbiet (8.3). Għall-kondizzjonijiet ta' l-analiżi deskritti fil-metodu, soluzzjonijiet għall-użu li jikkorrispondu għal konċentrazzjonijiet ta' 0, 0,05, 0,1, 0,15, 0,2, u 0,25 g/l ta' trans-anethole fil-kampjun li se jkun analizzat huma preparati kif ġej: ħu 0,5, 1, 1,5, 2, u 2,5 ml ta' soluzzjoni għall-użu A (4.5.1) u ttrasferixxi bil-pipetta f'volumetric flasks separati ta' l-20 ml; ittrasferixxi bil-pipetta f'kull flask 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.Il-blank solutions (8.4) hija wżata bħala soluzzjoni ta' 0 g/l.4.5.4 Soluzzjoni standard CĦu 2 ml ta' soluzzjoni standard A (4.5.1) u ttrasferixxi bil-pipetta f'volumetric flask ta' l-20 ml, imbagħad żid 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.5. Apparat5.1. Kromatografu b'gass kapillari li fih flame ionisation detector (FID) u integrator jew xi sistema oħra ta' data handling li kapaċi tkejjel il-peak heights jew areas, u b'automatic sampler jew l-apparat meħtieġ għall-injezzjoni manwali tal-kampjun.5.2. Split/splitless injector5.3. Kolonna kapillari, per eżempju:Tul: 50 mDiametru ta' ġewwa: 0,32 mmĦxuna tal-film: 0,2 μmFażi stazzjonarja: FFAP – modified TPA polyethylene glycol cross-linked porous polymer.5.4. Apparat komuni tal-laboratorji: A grade volumetric glassware, analytical balance (preċiżjoni: ±0,1 mg).6. Kondizzjonijiet tal-kromatografijaIt-tip ta' kolonna u d-dimensjonijiet, u l-kondizzjonijiet tal-GC, għandhom ikunu dawk li l-anethole u l-internal standard ikunu separati minn xulxin u minn kull sustanza oħra li tista' tinterferixxi. Kondizzjonijiet tipiċi għall-kolonna mogħtija bħala eżempju f'5.3 huma:6.1. Carrier gas: analytical helium6.2. Rata tal-fluss: 2 ml/min6.3. Injector temperature: 250 °C6.4. Detector temperature:: 250 °C6.5. Kondizzjonijiet tat-temperatura tal-forn: isothermal, 180°C, run time 10 minuti6.6. Injection volume: 1 μl, split 1:40.7. KampjuniIl-kampjuni għandhom jinħażnu f'temperatura ambjentali, f'post mudlam u mhux kiesaħ.8. Proċedura8.1 Screening tal-kampjun għall-estragoleBiex tassigura li m'hemm l-ebda estragole preżenti b'mod naturali fil-kampjun, għandha ssir analiżi blank mingħajr iż-żieda ta' ebda internal standard. Jekk l-estragole huwa preżenti b'mod naturali jrid jintgħażel internal standard ieħor (per eżempju menthol).Ittrasferixxi bil-pipetta 2 ml tal-kampjun f'volumetric flask ta' l-20 ml u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.8.2 Preparazzjoni ta' kampjuni mhux magħrufaIttrasferixxi bil-pipetta kampjun ta' 2 ml f'volumetric flask ta' l-20 ml imbagħad żid 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.8.3 BlankIttrasferixxi bil-pipetta 2 ml ta' soluzzjoni internal standard B (4.5.2) f'volumetric flask ta' l-20 ml u kompli l-volum b'45 % vol. ethanol (4.4), ħallat sew.8.4 Test ta' linearitàQabel tinbeda l-analiżi, il-linearità tar-response tal-FID għandha tkun iċċekkjata billi jiġu analizzati b'mod suċċessiv tliet kopji preċiżi ta' kull waħda mil-linearity standard solutions (4.5.3).Miż-żoni peak jew il-peak heights ta' l-integrator għal kull injezzjoni ipplottja graph tal-konċentrazzjoni tal-mother solution tagħhom fi g/l versus ir-ratio R għal kull wieħed.R = il-peak height jew żona tat-trans-anethole diviża bil-peak height jew żona ta' l-estragole.Għandu jingħata linear plot.8.5 DeterminazzjoniInjetta l-blank solution (8.3), segwita mis-soluzzjoni standard C (4.5.4), segwita minn wieħed mil-linearity standards (4.5.3) li se jaħdem bħala kampjun tal-kontroll tal-kwalità (dan jista' jintgħażel b'referenza għall-konċentrazzjoni probabbli ta' trans-anethole f'dak li mhux magħruf) segwit minn ħamsa mhux magħrufa (8.2); daħħal kampjun ta' linearità (għall-kontroll tal-kwalità) wara kull ħames kampjuni mhux magħrufa, biex tassigura stabbilità analitika.9. Kalkolu tar-response factorKejjel iż-żoni peak (billi tuża integrator jew xi data system oħra) jew il-peak heights (manual integration) għat-trans-anethole u l-peaks ta' l-internal standard.9.1 Kalkolu tar-response factor (RFi)Ir-response factor huwa kkalkulat kif ġej:Rfi= (Ci/area or heighti)*(area or heightis/Cis)Fejn:Ci  hija l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole fis-soluzzjoni standard A (4.5.1)Cis  hija l-konċentrazzjoni ta' internal standard fis-soluzzjoni standard B (4.5.2)areai  hija ż-żona (jew il-height) tal-peak tat-trans-anetholeareais  hija ż-żona (jew il-height) tal-peak ta' l-internal standardRFi huwa kkalkulat mill-ħames kampjuni ta' soluzzjoni C (4.5.4).9.2 Analiżi tas-soluzzjonijiet tal-linearity response test.Injetta s-soluzzjonijiet tal-linearity response test. (4.5.3).9.3 Analiżi tal-kampjunInjetta s-soluzzjoni mhux magħrufa tal-kampjun (8.2).10. Kalkolu tar-riżultatiIl-formola għall-kalkolu tal-konċentrazzjoni ta' trans-anethole hi din li ġejja:ci = Cis * (żona jew heighti/żona jew heightis)*RFiFejn:ci  hija l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole mhux magħrufaCis  hija l-konċentrazzjoni ta' internal standard fis-soluzzjoni mhux magħrufa (4.5.2)Area jew heighti  hija ż-żona jew il-height tal-peak tat-trans-anetholeArea jew heightis  hija ż-żona jew il-height tal-peak ta' l-internal standardRFi  huwa r-response coefficient (ikkalkulat bħal dak f'9.1)Il-konċentrazzjoni ta' trans-anethole hija espressa fi grammi f'kull litru, sa punt deċimali wieħed.11. Assigurazzjoni u kontroll tal-kwalitàIl-chromatograms iridu jkunu dawk li l-anethole u l-internal standard ikunu separati minn xulxin u minn kull sustanza oħra li tista' tinterferixxi. Il-valur tar-RFi huwa kkalkulat mir-riżultati għall-ħames injezzjonijiet ta' soluzzjoni C (4.5.4). Jekk il-coefficient of variation (CV % = (standard deviation/mean)*100) huwa sa plus jew minus 1 %, il-valur medju tar-RFi huwa aċċettabbli.Il-kalkolu ta' hawn fuq għandu jintuża biex tkun kalkulata l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole fil-kampjun magħżul għall-kontroll tal-kwalità mis-soluzzjonijiet tal-linearity control (4.5.3).Jekk ir-riżultati medji kkalkulati mill-analiżi tal-linearity solution magħżula bħala kampjun għall-internal quality control (IQC) huma sa plus jew minus 2,5 % tal-valur teoretiku tagħhom, allura r-riżultati għall-kampjuni mhux magħrufa jistgħu jkunu aċċettati.12. Trattament tal-kampjun tax-xorb alkoħoliku li fih ammont kbir ta' zokkor u tal-kampjun tal-likuri qabel l-analiżi bil-GCEstrazzjoni ta' alkoħol mix-xorb alkoħoliku li fih ammont kbir ta' zokkor, sabiex tkun tista' tiġi ddeterminata l-konċentrazzjoni ta' trans-anethole bl-użu tal-kromatografija b'gass kapillari.12.1. PrinċipjuParti milll-kampjun tal-likuri tittieħed u ma' din jinżied l-internal standard, f'konċentrazzjoni simili għal dik ta' l-analyte (trans-anethole) fil-likur. Ma' dan jinżiedu sodium phosphate dodecahydrate u anhydrous ammonium sulphate. It-taħlita li tirriżulta titħawwad sew u titkessaħ, żewġ saffi jiżviluppaw, u s-saff ta' alkoħol fil-wiċċ jitneħħa. Parti minn dan is-saff ta' alkoħol tittieħed u tiġi dilwita ma' soluzzjoni ta' 45 % ethanol (4.4) (Nota: l-ebda internal standard ma jiżdied f'din il-fażi, għax diġa żdied). Is-soluzzjoni li tirriżulta tiġi analizzata fil-kromatografija tal-gass.12.2. Reaġenti u materjaliWaqt l-estrazzjoni uża biss reaġenti ta' purità ikbar muinn 99 %.12.2.1. Ammonium sulphate, anhydrous, (CAS 7783-20-2).12.2.2. Sodium phosphate, dibasic, dodecahydrate, (CAS 10039-32-4).12.3. ApparatConical flasks, separating flasks, friġġ.12.4. Proċedura12.4.1. Screening tal-kampju għall-estragoleBiex tassigura li m'hemm l-ebda estragole preżenti b'mod naturali fil-kampjun, għandhom isiru blank extraction (12.6.2) u analiżi mingħajr iż-żieda ta' ebda internal standard. Jekk l-estragole huwa preżenti b'mod naturali jrid jintgħażel internal standard ieħor.12.4.2. EstrazzjoniIttrasferixxi bil-pipetta 5 ml ta' 96 % ethanol (4.1) f'conical flask, iżen f'dan il-flask 50 mg ta' internal standard (4.3), u żid 50 ml tal-kampjun. Żid 12 g ta' ammonium sulphate, anhydrous (12.2.1), 8.6 g ta' dibasic sodium phosphate, dodecahydrate (12.2.2). Agħlaq il-conical flask b'tapp.Ħawwad il-flask għal mill-inqas 30 minuta. Jista' jintuża apparat mekkaniku għat-taħwid, imma mhux Teflon coated magnetic stirring bar, minħabba li t-Teflon jassorbi ftit mill-analyte. Ara li l-imluħa miżjuda ma jdubux kompletament.Poġġi l-flask magħluq bit-tapp fi friġġ (T < 5 C) għal mill-inqas sagħtejn.Wara dan il-ħin, suppost li jkun hemm żewġ saffi distinti ta' likwidi u residwu solidu. Is-saff ta' alkoħol għandu jkun ċar, jekk le, erġa' poġġi fil-friġġ sakemm ikun hemm separazzjoni ċara.Meta s-saff ta' l-akoħol ikun ċar, ħu bil-galbu parti minnu (per eżempju 10 ml), mingħajr ma ċċaqlaq is-saff ta' l-ilma, poġġi f'tubu tal-ħġieġ kulur ambra u għalaq sew.12.4.3. Preparazzjoni tal-kampjun estratt li se jkun analizzatĦalli l-estratt (12.4.2) jilħaq temperatura ambjentali.Ħu 2 ml tas-saff ta' l-akoħol tal-kampjun estratt u ttrasferixxi bil-pipetta f'volumetric flask ta' l-20 ml, kompli l-volum b'45 % ethanol (4.4), ħallat sew.12.5. DeterminazzjoniSegwi l-proċedura kif indikat f'8.5.12.6. Kalkolu tar-riżultatiUża l-formola li ġejja biex tikkalkula r-riżultati:Ci = (mis/V)* (areai/areais)*RFifejn:mis  hija l-piż ta' internal standard (4.3) meħud (12.4.2) (f'milligrammi)V  hija l-volum ta' kampjun mhux magħruf (50 ml)RFi  hija r-response factor (9.1)areai  hija ż-żona tal-peak tat-trans-anetholeareais  hija ż-żona tal-peak ta' internal standardIr-riżultati huma espressi fi grammi f'kull litru, sa punt deċimali wieħed.12.7 Kontroll u assigurazzjoni tal-kwalitàSegwi l-proċedura kif indikat fi 11 hawn fuq.13. Karatteristiċi ta' method performance (preċiżjoni)Riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju:It-tabelli li ġejjin jagħtu l-valuri għall-anethole.L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftehma internazzjonalment.Sena ta' test interlaboratorju | 1998 |Numru ta' laboratorji | 16 |Numru ta' kampjuni | 10 |Analyte | anethole |Pastis:Kampjuni | A | B | C | D | E | F |Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna | 15 | 15 | 15 | 13 | 16 | 16 |Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) | 1 | 1 | 1 | 3 | — | — |Numru ta' riżultati aċċettati | 30 | 30 | 30 | 26 | 16 | 16 |Valur medju g/l | 1,477 | 1,955 | 1,940 | 1,833 | 1,741 | 1,754 |Repeatability standard deviation (Sr) g/l | 0,022 | 0,033 | 0,034 | 0,017 | — | — |Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) | 1,5 | 1,7 | 1,8 | 0,9 | — | — |Repeatability limit (r) g/l | 0,062 | 0,093 | 0,096 | 0,047 | — | — |Reproducibility standard deviation (SR) g/l | 0,034 | 0,045 | 0,063 | 0,037 | 0,058 | 0,042 |Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) | 2,3 | 2,3 | 3,2 | 2,0 | 3,3 | 2,4 |Reproducibility limit (R) g/l | 0,094 | 0,125 | 0,176 | 0,103 | 0,163 | 0,119 |Tipi ta' kampjuni:A  pastis, blind duplicatesB  pastis, blind duplicatesC  pastis, blind duplicatesD  pastis, blind duplicatesE  pastis, single duplicatesF  pastis, single duplicatesXorb alkoħoliku ieħor b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi:Kampjuni | G | H | I | J |Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna | 16 | 14 | 14 | 14 |Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) | - | 2 | 1 | 1 |Numru ta' riżultati aċċettati | 32 | 28 | 28 | 28 |Valur medju g/l | 0,7780,530 (*) | 1,742 | 0,351 | 0,599 |Repeatability standard deviation (Sr) g/l | 0,020 | 0,012 | 0,013 | 0,014 |Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) | 3,1 | 0,7 | 3,8 | 2,3 |Repeatability limit (r) g/l | 0,056 | 0,033 | 0,038 | 0,038 |Reproducibility standard deviation (SR) g/l | 0,031 | 0,029 | 0,021 | 0,030 |Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) | 4,8 | 1,6 | 5,9 | 5,0 |Reproducibility limit (R) g/l | 0,088 | 0,080 | 0,058 | 0,084 |Tipi ta' kampjuni:G  ouzo, split levels (*)H  anisi, blind duplicatesI  likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi, duplicatesJ  likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi, duplicates.VI. GLYCYRRHIZIC ACID. DETERMINAZZJONI TA' GLYCYRRHIZIC ACID BL-UŻU TAL-KROMATOGRAFIJA HIGH-PERFORMANCE TAL-LIKWIDU1. GħanDan il-metodu huwa addattat għad-determinazzjoni ta' glycyrrhizic acid f'xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi bl-użu tal-kromatografija tal-likwidu high performance (HPLC). Ir-Regolament (KEE) Nru. 1576/89 jispeċifika li kull xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi msejjaħ "pastis" irid ikun fih bejn 0,05 u 0,5 g ta' glycyrrhizic acid f'kull litru.2. Referenzi normattiviISO 3696: 1987 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.3. PrinċipjuIl-konċentrazzjoni ta' glycyrrhizic acid hija ddeterminata bl-użu tal-kromatografija tal-likwidu high performance (HPLC) bil-UV detection. Soluzzjoni standard u l-kampjun tat-test huma ffiltrati u huma injettati separatament direttament fis-sistema HPLC.4. Reaġenti u materjaliWaqt l-analiżi, uża biss reaġenti ta' grad HPLC, absolute ethanol u ilma ta' grad 3 kif definit mill-ISO 3696.4.1. Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5).4.2. Ammonium glycyrrhizinate, C42H62O16NH3 (Glycyrrhizic acid ammonium salt)(Mol. Wt.: 839,98) (CAS 53956-04-0): purità mill-anqas 90 %(Mol. Wt.: glycyrrhizic acid 822,94).4.3. Glacial acetic acid, CH3COOH, (CAS 64-19-7).4.4. Methanol, CH3OH (CAS 67-56-1).4.5 Ethanol 50 % vol.Għal 1000 ml f'temperatura ta' 20°C:- 96 % vol. ethanol (4.1): 521 ml- Ilma (2.0): 511 ml.4.6 Preparazzjoni ta' l-HPLC elution solutions4.6.1. Elution solvent A (eżempju)80 parti (skond il-volum) ta' ilma (2.0)20 parti (skond il-volum) ta' acetic acid (4.3).Neħħi l-gass mill-elution solvent għal ħames minuti.Nota:Jekk l-ilma wżat ma ġiex mikrofiltrat, aħjar tiffiltra l-elution solvent preparat fuq filter għall-organic solvents b'pore size inqas minn jew fid-daqs ta' 0,45μm.4.6.2. Elution solvent BMethanol (4.4).4.7 Preparazzjonijiet ta' soluzzjonijiet standardIs-soluzzjonijiet standard kollha jridu jkunu preparati mill-ġdid wara xahrejn.4.7.1. Soluzzjoni ta' referenza CIżen għall-eqreb 0,1 mg, 25 mg ta' ammonium glycyrrhizinate (4.2) f'volumetric flask tal-100 ml. Żid ftit 50 % vol. ethanol (4.5) u dewweb l-ammonium glycyrrhizinate. Meta jkun dab kompli sal-marka b'50 % vol. ethanol (4.5).Iffiltra minn filter għall-organic solvent.4.7.2. Soluzzjonijiet standard użati biex tiċċekkja l-linearità tar-response ta' l-istrumentazzjoniSoluzzjoni għall-użu ta' 1,0 g/l hija preparata billi tiżen, bl-iktar mod preċiż possibbli 0,1 mg, 100 mg ta' ammonium glycyrrhizinatef'volumetric flask tal-100 ml. Żid ftit 50 % vol. ethanol (4.5) u dewweb l-ammonium glycyrrhizinate. Meta jkun dab kompli sal-marka b'50 % vol. ethanol (4.5).Mill-inqas erba' soluzzjonijiet oħra li jikkorrispondu għal 0,05, 0,1, 0,25 u 0,5 g/l ta' ammonium glycyrrhizinate huma preparati billi jiġu trasferiti bil-pipetta rispettivament 5 ml, 10 ml, 25 ml u 50 ml tas-soluzzjoni għall-użu ta' 1,0 g/l f'volumetric flasks separati tal-100 ml. Imbagħad kompli sal-marka b'50 % vol. ethanol (4.5) u ħallat sew.Iffiltra s-soluzzjonijiet kollha minn filter għall-organic solvents5. Apparat5.1. Sistema ta' separazzjoni5.1.1 Kromatografu high-performance tal-likwidu.5.1.2. Sistema ta' ppumpjar li tippermettilek li tilħaq u żżomm rata ta' fluss kostanti jew ipprogrammata bi preċiżjoni kbira.5.1.3. UV spectrophotometric detection system: għandu jkun issettjat fuq 254 nm.5.1.4. Solvent degassing system.5.2. Computational integrator jew recorder, li l-performance tiegħu hija kompatibbli mal-bqija tas-sistema.5.3. Kolonna (eżempju):Materjal: stainless steel jew ħġieġDiametru ta' ġewwa: 4 sa 5 mmTul: 100 sa 250 mmFażi stazzjonarja: cross-linked silica ma' octadecyl functional group (C18) (preferibbilment sferiku), particle size massimu: 5 μm.5.4. Apparat tal-laboratorju5.4.1. Analytical balance bi preċiżjoni ta' 0,1 mg5.4.2. A-grade volumetric glassware5.4.3. Micromembrane filtration arrangement għal volumi żgħar.6. Kondizzjonijiet tal-kromatografija6.1. Karatteristiċi ta' l-elution: (eżempju)- rata tal-fluss: 1 ml/minuta,- solvent A = 30 %,- solvent B = 70 %.6.2. Detection:- UV = 254 nm7. Proċedura7.1. Preparazzjoni tal-kampjun tax-xorb alkoħolikuIffiltra, jekk ikun hemm bżonn, minn filter għall-organic solvents (pore diameter: 0,45 μm).7.2. DeterminazzjoniMeta l-kondizzjonijiet tal-kromatografija jkunu stabbilew ruħhom,- injetta 20 μl tas-soluzzjoni ta' referenza C (4.7.1),- injetta 20 μl tas-soluzzjoni tal-kampjun,- qabbel iż-żewġ chromatograms. Identifika l-peaks ta' glycyrrhizic acid mir-retention times tagħhom. Kejjel iż-żoni (jew il-heights) tagħhom u kkalkula l-konċentrazzjoni fi g/l sa żewġ numri deċimali billi tuża l-ekwazzjoni li ġejja:c =c ×h × P × 823H × 100 × 840fejn:c  hija l-konċentrazzjoni fi grammi f'kull litru ta' glycyrrhizic acid fix-xorb alkoħoliku li jkun qed jiġi analizzatC  hija l-konċentrazzjoni fi grammi f'kull litru ta' ammonium glycyrrhizinate fis-soluzzjoni ta' referenzah  hija ż-żona (jew il-height) tal-peak ta' glycyrrhizic acid tax-xorb alkoħoliku li jkun qed jiġi analizzatH  hija ż-żona (jew il-height) tal-peak ta' glycyrrhizic acid tas-soluzzjoni ta' referenzaP  hija l-purità tar-referenza ammonium glycyrrhizinate (f' %)823  hija l-massa ta' mole wieħed ta' glycyrrhizic acid840  hija l-massa ta' mole wieħed ta' ammonium glycyrrhizinate.8. Karatteristiċi ta' method performance (preċiżjoni)Riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju:It-tabella li ġejja tagħti l-valuri għall-glycyrrhizic acid.L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftiehma internazzjonalment.Sena ta' test interlaboratorju | 1998 |Numru ta' laboratorji | 16 |Numru ta' kampjuni | 5 |Analyte | glycyrrhizic acid |Kampjuni | A | B | C | D | E |Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna | 13 | 14 | 15 | 16 | 16 |Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) | 3 | 2 | 1 | - | - |Numru ta' riżultati aċċettati | 26 | 28 | 30 | 32 | 32 |Valur medju g/l | 0,046 | 0,092(*) 0,099 | 0,089 | 0,249 | 0,493 |Repeatability standard deviation (Sr) g/l | 0,001 | 0,001 | 0,001 | 0,002 | 0,003 |Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) | 1,5 | 1,3 | 0,7 | 1,0 | 0,6 |Repeatability limit (r) g/l | 0,002 | 0,004 | 0,002 | 0,007 | 0,009 |Reproducibility standard deviation (SR) g/l | 0,004 | 0,007 | 0,004 | 0,006 | 0,013 |Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) | 8,6 | 7,2 | 4,0 | 2,5 | 2,7 |Reproducibility limit (R) g/l | 0,011 | 0,019 | 0,010 | 0,018 | 0,037 |Tipi ta' kampjuni:A  pastis, blind duplicatesB  pastis, split levels (*)C  pastis, blind duplicatesD  pastis, blind duplicatesE  pastis, blind duplicatesVII. CHALCONES, METODU TAL-KROMATOGRAFIJA TAL-LIKWIDU HIGH-PERFORMANCE BIEX TIVVERIFIKA L-PREŻENZA TA' CHALCONES FIL-PASTIS1. GħanDan il-metodu huwa addattat biex tiddetermina jekk iċ-chalcones humiex preżenti fix-xorb alkoħoliku b'togħma ta' l-anisi jew le. Chalcones huma koloranti naturali tal-familja flavanoid li huma preżenti fl-għeruq tal-likurizja (Glycyrrhiza glabra).Biex xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi jissejjaħ "pastis", irid ikun fih iċ-chalcones (Regolament (KEE) Nru. 1576/89).2. Referenzi normattiviISO 3696: 1987 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.3. PrinċipjuSoluzzjoni ta' referenza ta' estratt tal-likurizja hija preparata. Il-preżenza jew l-assenza ta' chalcones hija ddeterminata bl-użu tal-kromatografija high-performance tal-likwidu (HPLC) bil-UV detection.4. Reaġenti u materjaliWaqt l-analiżi, uża biss reaġenti ta' grad HPLC. L-ethanol għandu jkun 96 % vol. Għandu jintuża ilma ta' grad 3 biss kif definit mill-ISO 3696.4.1. Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5)4.2. Acetonitrile, CH3CN, (CAS 75-05-8)4.3. Sustanza ta' referenza: Glycyrrhiza glabra: likurizja, "sweet root"Għeruq tal-likurizja mitħunin mhux fini (Glycyrrhiza glabra). Dimensjonijiet medji tal-biċċiet tawwalin: tul: 10 sa 15 mm, ħxuna: 1 sa 3 mm.4.4. Sodium acetate, CH3COONa, (CAS 127-09-3)4.5. Glacial acetic acid, CH3COOH, (CAS 64-19-7)4.6. Preparazzjoni tas-soluzzjonijiet4.6.1. Ethanol 50 % volumeGħal 1000 ml f'temperatura ta' 20 °C:- 96 % vol. ethanol (4.1): 521 ml,- Ilma (2.0): 511 ml.4.6.2. Solvent A: acetonitrileAcetonitrile (4.2) ta' purità għall-analiżi HPLC.Neħħi l-gass4.6.3. Solvent B: 0,1 M sodium acetate buffer solution, pH 4,66.Iżen 8,203 g ta' sodium acetate (4.4), żid 6,005 g ta' glacial acetic acid (4.5) u kompli għal 1000 ml bl-ilma (2) f'volumetric flask.5. Preparazzjoni ta' l-estratt ta' referenza mill-Glycyrrhiza glabra (4.3)5.1. Iżen 10 g ta' għeruq tal-likurizja (Glycyrrhiza glabra) (4.3) u poġġiha f'distillation flask bil-qiegħ tond.- żid 100 ml ta' 50 % vol. ethanol (4.6.1),- għalli taħt reflux għal siegħa,- iffiltra,- poġġi l-likwidu filtrat għalih biex tużah iktar tard5.2. Ħu l-estratt tal-likurizja mill-filter- poġġih f'distillation flask bil-qiegħ tond,- żid 100 ml ta' 50 % vol. ethanol (4.6.1),- għalli taħt reflux għal siegħa,- iffiltra. Poġġi l-likwidu filtrat għalih biex tużah iktar tard.5.3. L-estrazzjoni tal-likurizja trid issir tliet darbiet wara xulxin.5.4. Ħallat it-tliet likwidi filtrati.5.5. Evapora s-solvent phase (ta' 5.4.) fuq rotary evaporator.5.6. Ħu l-estratt residwu (ta' 5.5) ma' 100 ml 50 % vol. ethanol (4.6.1).6. Apparat6.1. Sistema ta' separazzjoni.6.1.1. Kromatografija tal-likwidu high-performance.6.1.2. Sistema ta' ppumpjar li kapaċi tilħaq u żżomm rata ta' fluss kostanti jew programmata bi pressjoni għolja.6.1.3. UV/visible spectrophotometric detection system li tista' tkun issettjata fuq 254 u 370 nm.6.1.4. Solvent degassing system:6.1.5. Column oven li jista' jkun issettjat għal temperatura ta' 40 ± 0,1 °C.6.2. Computational integrator jew recorder, li l-performance tiegħu hija kompatibbli mal-bqija tas-sistema ta' separazzjoni.6.3. KolonnaMaterjal: stainless steel jew ħġieġDiametru ta' ġewwa: 4 sa 5 mmFażi stazzjonarja: cross-linked silica ma' octadecyl derived functional group (C18), particle size: 5 μm l-iktar (fażi cross-linked).6.4. Apparat komuni tal-laboratorju, inkluż:6.4.1. analytical balance (preċiżjoni: ± 0,1 mg);6.4.2. Apparat tad-distillar b'reflux condenser, li jinkludi, per eżempju:- flask bil-qiegħ tond tal-250 ml bi standardised ground-glass joint,- reflux condenser twil 30 ċm, u- sors ta' sħana (kull reazzjoni piroġenika li tinvolvi l-materja estrattiva trid tkun evitata billi tuża arranġament addattat).6.4.3. Apparat tar-rotary evaporation.6.4.4. Apparat għall-filtrazzjoni (i.e. Buchner funnel).6.5. Kondizzjonijiet tal-kromatografija (eżempju).6.5.1. Karatteristiċi ta' elution ta' solvents A (4.6.2) u B (4.6.3):- bidla minn 20/80 (v/v) għal 50/50 (v/v) gradient fi 15-il minuta,- bidla minn 50/50 (v/v) għal 75/25 (v/v) gradient f'ħames minuti,- saħħa ugwali ta' 75/25 (v/v) għal ħames minuti,- stabbilizzazzjoni tal-kolonna bejn l-injezzjonijiet,- saħħa ugwali ta' 20/80 (v/v) għal ħames minuti.6.5.2. Rata tal-fluss: 1 ml/minuta.6.5.3. Issettjar tal-UV detector:id-detector irid ikun issettjat fuq 370 nm biex tinstab il-preżenza ta' chalcones u mbagħad fuq 254 nm biex jinstab il-glycyrrhizic acid.Nota:il-bidla ta' wavelength (minn 370 nm għal 254 nm) trid issir 30 sekonda qabel il-bidu tal-peak ta' elution tal-glycyrrhizic acid.7. Proċedura7.1. Preparazzjoni tal-kampjun tax-xorb alkoħolikuIffiltra minn filter għall-organic solvents (pore diameter: 0,45 μm).7.2. Preparazzjoni ta' l-estratt ta' likurizja residwu (5.6)Għamel dilution wieħed f'għaxra b'50 % vol. ethanol (4.6.1) qabel l-analiżi.7.3. Determinazzjoni7.3.1. Injetta 20 μl ta' l-estratt ta' likurizja preparat (7.2). Għamel l-analiżi billi tuża l-kondizzjonijiet tal-kromatografija deskritti hawn fuq (6.5).7.3.2. Injetta 20 μl tal-kampjun (7.1) (kampjun tax-xorb alkoħoliku b'togħma taż-żerriegħa ta' l-aniżi). Għamel l-analiżi billi tuża l-kondizzjonijiet tal-kromatografija deskritti hawn fuq (6.5).7.3.3. Qabbel iż-żewġ chromatograms. Għandu jkun hemm xebh kbir bejn iż-żewġ chromatograms fil-chalcone exit zone (waqt id-detection ta' 370 nm taħt il-kondizzjonijiet ta' l-analiżi deskritti hawn fuq) (ara Tabella 1).8. Chromatogram karatteristiku għal pastis+++++ TIFF +++++9. Karatteristiċi ta' method performance (preċiżjoni)Riżultati tat-test interlaboratorju:It-tabella li ġejja tagħti l-performance għal rikonoxximent ta' preżenza jew assenza ta' chalcones fil-pastis u f'xorb alkoħoliku bit-togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi.L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftiehma internazzjonalment.Sena ta' test interlaboratorju | 1998 |Numru ta' laboratorji | 14 |Numru ta' kampjuni | 11 |Analyte | chalcones |Kampjuni | A | B | C | D | E | F |Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna | 14 | 14 | 14 | 14 | 14 | 13 |Numru ta' dawk li varjaw ħafna minn oħrajn (laboratorji) | — | — | — | — | — | 1 [1] |Numru ta' riżultati aċċettati | 28 | 14 | 14 | 28 | 28 | 26 |Numru ta' riżultati għall-preżenza ta' chalcones | 28 | 14 | 14 | 0 | 28 | 0 |Numru ta' riżultati għall-assenza ta' chalcones | 0 | 0 | 0 | 28 | 0 | 26 |Persentaġġ ta' riżultati tajbin (%) | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |Kampjuni | G | H | I | J | K |Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna | 14 | 14 | 14 | 14 | 14 |Numru ta' dawk li varjaw ħafna (laboratorji) | — | — | — | — | — |Numru ta' riżultati aċċettati | 28 | 14 | 14 | 28 | 28 |Numru ta' riżultati għall-preżenza ta' chalcones | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |Numru ta' riżultati għall-assenza ta' chalcones | 28 | 14 | 14 | 28 | 28 |Persentaġġ ta' riżultati tajbin (%) | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |Tipi ta' kampjuni:A  pastis, blind duplicatesB  pastis, single sampleC  pastis, single sampleD  "pastis" (li ma fihx chalcones), blind duplicatesE  pastis (li ma fihx chalcones), blind duplicatesF  likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi (li ma fihx chalcones), blind duplicatesG  likur b'togħma taż-żerriegħa ta' l-anisi (li ma fihx chalcones), blind duplicatesH  ouzo (li ma fihx chalcones), single sampleI  ouzo (li ma fihx chalcones), single sampleJ  anisi (li ma fihx chalcones), blind duplicatesK  "pastis" (li ma fihx chalcones), blind duplicates.IX. ISFAR TAL-BAJD. DETERMINAZZJONI TAL-KONĊENTRAZZJONI TA' ISFAR TAL-BAJD FIX-XORB ALKOĦOLIKU – METODU FOTOMETRIKU1. GħanDan il-metodu huwa addattat għad-determinazzjoni tal-konċentrazzjoni ta' isfar tal-bajd minn 40 sa 250 g/l fil-likuri tal-bajd u l-likuri bil-bajd.2. Referenzi normattiviISO 3696: 1897 Ilma għall-użu ta' l-analiżi fil-laboratorji – Speċifikazzjonijiet u metodi ta' l-ittestjar.3. PrinċipjuL-ethanol-soluble phosphorus compounds li jinsabu fl-isfar tal-bajd huma estratti u l-konċentrazzjoni tagħhom hija determinata bil-fotometrija bħala phosphorus molybdate complex.4. Reaġenti u materjali4.1. Ilma double-distilled4.2. Diatomaceous earth4.3. Ethanol 96 % vol. (CAS 64-17-5)4.4. Soluzzjoni 15 % magnesium acetate (CAS 16674-78-5)4.5. 10 % sulphuric acid (CAS 7664-93-9)4.6. 1 N sulphuric acid.4.7. 0,16 g/l potasssium dihydrogen phosphate (CAS 778-77-0), soluzzjoni KH2PO44.8. Reaġent għad-determinazzjoni tal-fosfat:dewweb 20 g ta' ammonium molybdate (CAS 12054-85-2), (NH4)6Mo7O24.4H2O f'400 ml ilma f'temperatura ta' 50°C;dewweb, f'kontenitur ieħor, gramma ta' ammonium vanadate (CAS 7803-55-6), NH4VO3, f'300 ml ilma jaħraq, ħallih jibred, imbagħad żid 140 ml ta' nitric acid konċentrat (CAS 7697-37-2). Ħallat is-soluzzjonijiet imberrda f'volumetric flask ta' l-1000 ml u kompli sal-marka ta' l-1000 ml.5. Apparat5.1. Conical flask tal-100 ml5.2. Ultrasonic bath (jew magnetic stirrer)5.3. Volumetric flask tal-100 ml5.4. Banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C5.5. Filter (Whatman No 4 jew ekwivalenti)5.6. Crucible tal-porċellana (jew tal-platinum)5.7. Banju bl-ilma jagħli5.8. Hot plate5.9. Muffle furnace5.10. Volumetric flask tal-50 ml5.11. Volumetric flask ta' l-20 ml5.12. Spectrophotometer issettjat fuq 420 nm5.13. Cuvette ta' ċentimetru.6. KampjuniIl-kampjuni huma maħżuna f'temperatura ambjentali qabel l-analiżi.7. Proċedura7.1. Preparazzjoni tal-kampjun7.1.1. Iżen 10 g tal-kampjun f'conical flask tal-100 ml (5.1).7.1.2. Żid gradwalment 70 ml ta' ethanol (4.3) f'porzjonijiet żgħar, ħawwad ma' kull żieda, u poġġi f'banju ultrasoniku (5.2) għal 15-il minuta (jew ħawwad it-taħlita b'magnetic stirrer (5.2) għal 10 minuti f'temperatura ambjentali).7.1.3. Ittrasferixxi l-kontenut tal-flask f'volumetric flask tal-100 ml (5.3) b'washings ta' ethanol (4.3). Aġġusta sal-calibration mark b'ethanol (4.3) u poġġi l-flasks f'water bath f'temperatura ta' 20 °C (5.4). Aġġusta sal-calibration mark f'temperatura ta' 20 °C.7.1.4. Żid ammont żgħir ta' diatomaceous earth (4.2) u ffiltra (5.5), u armi l-ewwel 20ml.7.1.5. Ittrasferixxi 25 ml tal-likwidu filtrat f'crucible tal-porċellana (jew tal-platinum) (5.6). Il-likwidu filtrat irid imbagħad jiġi konċentrat b'gentle evaporation f'boiling water bath (5.7), biż-żieda ta' 5ml ta' soluzzjoni 15 % magnesium acetate (4.4).7.1.6. Poġġi l-crucibles fuq hot plate (5.8) u saħħan sakemm jixxuttaw.7.1.7. Ġib ir-residwu rmied billi ssaħħan sa l-inkandexxenza f'temperatura ta' 600 °C f'muffle furnace(5.9) sakemm l-irmied isir abjad, minimu ta' siegħa u nofs imma jista' jitħalla matul il-lejl.7.1.8. Ħu l-irmied ma' 10 ml ta' 10 % sulphuric acid (4.5) u ttrasferieh b'washings ta' ilma distillat (4.1) f'volumetric flask ta' 50 ml (5.10), u imla sal-marka f'temperatura ambjentali b'ilma distillat (4.1).Parti ta' 5 ml ta' din is-soluzzjoni ta' rmied għandha tintuża biex tkun ippreparatas-soluzzjoni tal-kampjun tad-determinazzjoni tal-konċentrazzjoni tal-fosfat bil-fotometrija.7.2. Determinazzjoni tal-konċentrazzjoni tal-fosfat bil-fotometrija7.2.1. Soluzzjoni komparattiva7.2.1.1. Poġġi 10 ml ta' 10 % sulphuric acid (4.5) f'volumetric flask tal-50 ml (5.10) u imla sal-marka b'ilma distillat (4.1).7.2.1.2. Żid ma' parti ta' 5 ml ta' din is-soluzzjoni (7.2.1.1.), li qiegħda f'volumetric flask ta' l-20 ml (5.11), millilitru ta' l N sulphuric acid (4.6) u 2 ml tar-reaġent tal-fosfat (4.8) u kompli sa 20 ml b'ilma distillat (4.1).7.2.1.3. Għalaq b'tapp mhux issikat, ħawwad u saħħan f'banju bl-ilma jagħli (5.7) għal 10 minuti, imbagħad berred f'banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C (5.4) għal 20 minuta.7.2.1.4. Imla cuvette ta' ċentimetru (5.13) b'din is-soluzzjoni komparattiva.7.2.2. Soluzzjoni tal-kampjun7.2.2.1. Żid ma' parti ta' 5 ml tas-soluzzjoni ta' l-irmied (7.1.8), li qiegħda f'volumetric flask ta' l-20 ml (5.11), millilitru ta' 1 N sulphuric acid (4.6) u 2 ml tar-reaġent tal-fosfat (4.8) u kompli sa 20 ml b'ilma distillat (4.1).7.2.2.2. Għalaq b'tapp mhux issikat, ħawwad u saħħan f'banju bl-ilma jagħli (5.7) għal 10 minuti, imbagħad berred f'banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C (5.4) għal 20 minuta.7.2.2.3. Is-soluzzjoni safra li tiżviluppa hija analizzata mmedjatament bl-ispectrophotometry (5.12) f'cuvette ta' ċentimetru (5.13) b'420 nm kontra s-soluzzjoni komparattiva (7.2.1.4.).7.2.3. Calibration curve7.2.3.1. Biex tibni l-calibration curve, żid partijiet ta' 2 ml tar-reaġent tal-fosfat (4.8) f'volumetric flasks ta' l-20 ml (5.11) u li kull wieħed fih 1 N sulphuric acid (4.6) u 0, 2, 4, 6, 8 u 10 ml tas-soluzzjonita' potassium dihydrogen phosphate (4.7) rispettivament, u kompli sal-marka ta' 20 ml b'ilma distillat (4.1).7.2.3.2. Għalaq b'tapp mhux issikat, ħawwad u saħħan f'banju bl-ilma jagħli(5.7) għal 10 minuti, imbagħad berred f'banju bl-ilma f'temperatura ta' 20 °C (5.4) għal 20 minuta u analizza bl-ispectrophotometry (5.12) f'cuvette ta' ċentimetru(5.13) b'420 nm kontra s-soluzzjoni komparattiva (7.2.1.4).7.2.3.3. Binja tal-calibration curve:soluzzjoni ta' dihydrogen phosphate(ml) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |P2O5 (mg) | 0 | 0,167 | 0,334 | 0,501 | 0,668 | 0,835 |8. Espressjoni tar-riżultatiIl-kontenut ta' isfar tal-bajd fi g/l huwa kkalkulat mill-formola li ġejja:G/l ta' isfar tal-bajd = mg PO×110 × densityE/40Fejn:110  conversion factor għal total P2O5 fi g f'100 g ta' isfar tal-bajdmg P2O5  valur stabbilit mill-calibration curvedensity  massa per unit volume (g/ml) tal-likur ibbażat fuq il-bajd f'temperatura ta' 20 °CE  piż tal-likur ibbażat fuq il-bajd fi g40  dilution factor għal parti ta' 5 ml ta' soluzzjoni ta' rmied.9. Karatteristiċi ta' (preċiżjoni)Riżultati statistiċi tat-test interlaboratorju:It-tabella li ġejja tagħti l-valuri għall-isfar tal-bajd.L-informazzjoni li ġejja ttieħdet minn studju internazzjonali ta' method performance magħmul skond proċeduri miftiehma internazzjonalment.Sena ta' test interlaboratorju | 1998 |Numru ta' laboratorji | 24 |Numru ta' kampjuni | 5 |Analyte | isfar tal-bajd |Kampjuni | A | B | C | D | E |Numru ta' laboratorji miżmuma wara li ġew eliminati dawk li varjaw ħafna | 19 | 20 | 22 | 20 | 22 |Numru ta' dawk li varjaw ħafna minn oħrajn (laboratorji) | 3 | 4 | 2 | 4 | 2 |Numru ta' riżultati aċċettati | 38 | 40 | 44 | 40 | 44 |Valur medju g/l | 147,3 | 241,1 | 227,4 | 51,9 (*)72,8 (*) | 191,1 |Repeatability standard deviation (Sr) g/l | 2,44 | 4,24 | 3,93 | 1,83 | 3,25 |Repeatability relative standard deviaton (RSDr) (%) | 1,7 | 1,8 | 1,8 | 2,9 | 1,7 |Repeatability limit (r) g/l | 6,8 | 1,9 | 11,0 | 5,1 | 9,1 |Reproducibility standard deviation (SR) g/l | 5,01 | 6,06 | 6,66 | 3,42 | 6,87 |Reproducibility relative standard deviation (RSDR) (%) | 3,4 | 2,5 | 2,9 | 5,5 | 3,6 |Reproducibility limit (R) g/l | 14,0 | 17,0 | 18,7 | 9,6 | 19,2 |Tipi ta' kampjuniA  Advocaat, blind duplicatesB  Advocaat, blind duplicatesC  Advocaat, blind duplicatesD  Advocaat (diluted), split levels (*)E  Advocaat, blind duplicates[1] Riżultati inkonsistenti bejn iż-żewġ duplicates attribwiti għal żball ta' sampling--------------------------------------------------