CELEX: 31977L0312
Language: da
Date: 1977-03-29 00:00:00
Title: Rådets direktiv 77/312/EØF af 29. marts 1977 om biologisk overvågning af befolkningen med hensyn til risikoen for blyforgiftning

Avis juridique important

|

31977L0312

Rådets direktiv 77/312/EØF af 29. marts 1977 om biologisk overvågning af befolkningen med hensyn til risikoen for blyforgiftning  

EF-Tidende nr. L 105 af 28/04/1977 s. 0010 - 0017 den finske specialudgave: kapitel 15 bind 2 s. 0063  den græske specialudgave: Kapitel 05 bind 2 s. 0174  den svenske specialudgave: kapitel 15 bind 2 s. 0063  den spanske specialudgave: Kapitel 05 bind 2 s. 0125  den portugisiske specialudgave: Kapitel 05 bind 2 s. 0125 

++++  RAADETS DIREKTIV  af 29 . marts 1977  om biologisk overvaagning af befolkningen med hensyn til risikoen for blyforgiftning   ( 77/312/EOEF )  RAADET FOR DE EUROPAEISKE FAELLESSKABER HAR -  under henvisning til traktaten om oprettelse af Det europaeiske oekonomiske Faellesskab , saerlig artikel 235 ,  under henvisning til forslag fra Kommissionen ,  under henvisning til udtalelse fra Europa-Parlamentet ( 1 ) ,  under henvisning til udtalelse fra Det oekonomiske og sociale Udvalg ( 2 ) , og  ud fra foelgende betragtninger :  En af de vaesentlige opgaver for Det europaeiske oekonomiske Faellesskab er at fremme en harmonisk udvikling af den oekonomiske virksomhed i Faellesskabet som helhed og en varig og afbalanceret ekspansion , hvilket ikke vil kunne ske uden saavel en bekaempelse af forureningen og de deraf foelgende gener , som en forbedring af livskvaliteten og beskyttelse af miljoeet ;  de forskellige former for anvendelse af bly medfoerer for tiden , at der finder blyforurening sted i talrige dele af miljoeet ;  det store antal blyforureningskilder i miljoeet goer det vanskeligt at afgoere , i hvor hoej grad det enkelte individ samlet er udsat for denne forureningsfaktor , og beskyttelsen af menneskets sundhed kraever derfor , at der foretages en saa noeje overvaagning af det enkelte menneskes samlede blyoptagelse som muligt ;  der boer gennemfoeres en biologisk overvaagning af befolkningen med hensyn til risikoen for blyforgiftning , og resultaterne af denne overvaagning boer vurderes med henblik paa eventuel udarbejdelse af nye forslag ;  der boer fastlaegges tekniske retningslinjer og biologiske referenceniveauer for denne overvaagning ;  bestemmelse af blodets blyindhold er den bedste metode for oejeblikket til vurdering af stoerrelsen af den blymaengde , et individ nyligt har optaget efter at have vaeret udsat for bly i miljoeet , og delta-aminolaevulinsyredehydrataseaktiviteten  ( ALA-D-aktiviteten ) i blodet kan tjene som vejledende eller supplerende maalemetode ved bestemmelse af blypaavirkningen ;  De europaeiske Faellesskabers handlingsprogram paa miljoeomraadet ( 3 ) fastsaetter , at de nationale programmer skal koordineres med henblik paa en forbedring af livskvaliteten , samt at en indsats mod blyforureningen skal prioriteres hoejt -  UDSTEDT FOELGENDE DIREKTIV :  Artikel 1  Medlemsstaterne traeffer de noedvendige foranstaltninger til anvendelse af en faelles fremgangsmaade for biologisk overvaagning med henblik paa at vurdere , i hvor hoej grad befolkningen er udsat for risiko for blyforgiftning uden for arbejdspladsen .  Artikel 2  Denne faelles fremgangsmaade , der skal finde anvendelse i fire , aar , bygger paa maaling af blodets blyindhold .  Som vejledende eller supplerende undersoegelse kan der ligeledes foretages maaling af ALA-D efter de i bilag I og II fastlagte fremgangsmaader .  Artikel 3  1 . Med henblik paa denne biologiske overvaagning fastlaegges :   - de naermere bestemmelser for proeveudtagning og analyse ,   - proeveudtagningens hyppighed .  2 . De anvendte blodproever udtages paa personer , der frivilligt deltager i undersoegelsen .  Artikel 4  Proeveudtagningen foretages paa :   - grupper paa mindst 100 personer i bymaessige omraader med over 0,5 millioner indbyggere ;   - grupper paa mindst 100 personer , for saa vidt dette tal kan naas , udvalgt blandt de befolkningsgrupper , der er udsat for paavirkning fra betydelige blyforureningskilder ;   - risikogrupper , udvalgt efter de kompetente nationale myndigheders anvisning .  I hver medlemsstat og i hver undersoegelsesraekke skal der foretages mindst 50 analyser/1 million indbyggere .  Artikel 5  Proeveudtagningen blandt de i artikel 4 omhandlede grupper skal foretages over mindst to undersoegelsesraekker i hvert af de paagaeldende omraader inden for programmets loebetid med et interval paa mindst 24 maaneder . Anden undersoegelsesraekke skal ikke noedvendigvis foretages paa samme personer som dem , der var omfattet af foerste undersoegelsesraekke .  Artikel 6  Til vurdering af resultaterne af den biologiske overvaagning med henblik paa de i artikel 8 omhandlede aktioner , skal foelgende tal for blodets blyindhold , som tager hensyn til det i bilag I anfoerte forhold mellem dosis og virkning , i forening anvendes som referenceniveauer :   - hoejst 20 mg Pb/100 ml blod for 50 % af den undersoegte befolkningsgruppe ;   - hoejst 30 mg Pb/100 ml blod for 90 % af den undersoegte befolkningsgruppe ;   - hoejst 35 mg Pb/100 ml blod for 98 % af den undersoegte befolkningsgruppe .  Artikel 7  Med henblik paa bestemmelse af blodets blyindhold :   - giver medlemsstaterne Kommissionen oplysning om navnene paa de laboratorier , der deltager i det biologiske overvaagningsprogram , og om de anvendte analysemetoder ;   - tilrettelaegger Kommissionen i samarbejde med medlemsstaterne de interkalibreringsprogrammer , som de ovennaevnte laboratorier deltager i ;   - gennemgaar Kommissionen i samarbejde med medlemsstaterne resultaterne af disse programmer med henblik paa at forbedre analysemetodernes sammenlignelighed .  Artikel 8  Hvis resultatet af analyserne viser , at de i artikel 6 anfoerte referenceniveauer i et eller flere tilfaelde er overskredet , skal medlemsstaterne :   - efterproeve resultaternes paalidelighed ;   - soege a * finde frem til de forureningskilder , som kan vaere aarsagen til disse overskridelser ; dette gaelder ligeledes for alle individer med et blyindhold i blodet paa mere end 35 mg/100 ml ;   - traeffe passende foranstaltninger efter deres kompetente nationale myndigheders skoen .  Artikel 9  1 . Inden seks maaneder efter meddelelsen af dette direktiv udpeger medlemsstaterne den kompetente nationale myndighed , som meddeler Kommissionen :   - resultaterne af den biologiske overvaagning af de i artikel 4 naevnte befolkningsgrupper med oplysninger om analysemetoderne , de undersoegte befolkningsgrupper og om de omraader , hvor proeverne er blevet udtaget ; disse resultater skal udformes saaledes , at de undersoegte personers anonymitet sikres paa enhver maade ; de naermere bestemmelser vedroerende fremsendelsen af disse resultater og den form , hvorunder fremsendelsen skal finde sted , fastlaegges efter faelles aftale mellem Kommissionen og medlemsstaterne ;   - oplysningerne om de formodede aarsager til overskridelsen af de i artikel 6 naevnte referenceniveauer .  2 . Den kompetente nationale myndighed underretter desuden Kommissionen om de i medfoer af artikel 8 , tredje led , trufne foranstaltninger .  Artikel 10  Kommissionen sammenkalder mindst to gange aarligt repraesentanterne for medlemsstaternes regeringer , navnlig med henblik paa :   - at sikre harmoniseret gennemfoerelse af den biologiske overvaagning , og isaer af bestemmelserne i artikel 4 og 5 ;   - at drage omsorg for , at de foretagne analyser er sammenlignelige ;   - at gennemgaa oplysningerne og lette udvekslingen af oplysninger mellem medlemsstaterne om resultaterne af den biologiske overvaagning , samt om de i medfoer af artikel 8 trufne foranstaltninger .  Artikel 11  Paa grundlag af de i medfoer af artikel 9 indhentede oplysninger udarbejder Kommissionen i samarbejde med de kompetente nationale myndigheder :   - en aarlig sammenfattende rapport om programmets gennemfoerelse , som fremsendes til medlemsstaterne , Raadet og Europa-Parlamentet ;   - ved programmets afslutning en generel rapport som skal danne grundlag for eventuel forberedelse af nye forslag , hvori der tillige tages hensyn til de fremskridt , der er gjort inden for videnskabelig og teknisk viden .  Artikel 12  Medlemsstaterne traeffer de noedvendige foranstaltninger , for at efterkomme dette direktiv inden 12 maaneder efter dets meddelelse og underretter straks Kommissionen herom .  Artikel 13  Dette direktiv er rettet til medlemsstaterne .  Udfaerdiget i Bruxelles , den 29 . marts 1977 .  Paa Raadets vegne  T . BENN  Formand  ( 1 ) EFT nr . C 28 af 9 . 2 . 1976 , s . 31 .  ( 2 ) EFT nr . C 50 af 4 . 3 . 1976 , s . 9 .  ( 3 ) Jf . EFT nr . C 112 af 20 . 12 . 1973 , s . 3 .  BILAG I  FORHOLDET DOSIS - VIRKNING  De niveauer for blyindhold i blodet , der vaelges med henblik paa bedoemmelse af resultaterne af den biologiske overvaagning , hidroerer fra en vurdering af de videnskabelige data vedroerende de forskellige giftvirkninger af bly . Denne vurdering , der tager hensyn til de normale variationer i de biologiske vaerdier hos befolkningen , goer det muligt at opst * le et kvasi-kvantitativt forhold mellem dosis og virkning . Foelgende forhold mellem dosis og virkning anvendes som referencegrundlag ved ivaerksaettelsen af dette direktiv :  Der kan hos befolkningen accepteres en vis nedgang i ALA-D-aktiviteten i de roede blodlegemer efter udsaettelse for blypaavirkning , for saa vidt den ikke bevirker en forstyrrelse i dannelsen af roede blodlegemer . Ved et blyindhold i blodet paa under 15 - 20 mg/100 ml mener man paa naervaerende tidspunkt ikke , at nedsaettelsen af ALA-D-aktiviteten bringer forstyrrelse i dannelsen af roede blodlegemer .  En foroegelse af protoporfhyrinerne i de roede blodlegemer ( PPE ) tyder paa interferens med udnyttelsen af jern , hvorved haemoglobinsyntesen haemmes . En foroegelse af PPE indtraeder ved blyindhold i blodet paa over 20 - 30 mg/100 ml . En foroegelse af PPE kan imidlertid skyldes andre aarsager .  Interferencen med glutathion-syntesen kan kun accepteres hos en lille broekdel af befolkningen og kun , saafremt den er lidet udtalt og ikke fremkalder andre subkliniske symptomer . En saadan uacceptabel interferens med glutathion-syntesen opstaar ikke , dersom blodets blyindhold er lavere end 30 mg/100 ml .  Den betydeligt foroegede udskillelse af delta-aminolaevulinsyre ( ALA-U ) i urinen er et tegn paa en alvorlig forstyrrelse af porfhyrinstofskiftet og er saaledes tegn paa svigtende helbred . Den statistisk betydelige foroegelse af ALA-U optraeder foerst ved blyindhold i blodet paa over 35 mg/100 ml .  BILAG II  FORHOLDET MELLEM BLYINDHOLDET I BLODET OG ENZYMAKTIVITETEN  I henhold til artikel 2 i dette direktiv er forholdet mellem blyindholdet i blodet og ALA-D-aktiviteten , maalt efter europaeisk standardmetode ( bilag 3 ) , som foelger :  Blyindhold i blodet ( mg/100 ml blod ) * ALA-D  ( enheder/liter ) *  35 * 20 *  30 * 25 *  20 * 35 *  Saa laenge de maalte ALA-D-vaerdier klart ligger over ovennaevnte graensevaerdier for de forskellige dele af befolkningen , er bekraeftende maalinger af blodets blyindhold overfloedige .  BILAG III  TEKNISKE FORSKRIFTER FOR BESTEMMELSE AF ALA-D AKTIVITETEN  Europaeisk standardmetode til bestemmelse af delta-aminolaevulinsyredehydrataseaktiviteten  Princippet i den metode , som er valgt til bestemmelse af delta-aminolaevulinsyredehydrataseaktiviteten , er velkendt . Det er baseret paa enzyminkubation med et overskud af delta-aminolaevulinsyresubstrat . Det i loebet af en bestemt tid dannede porphobilinogen blandes med modificeret Ehrlich-reagens , og den opnaaede farve maales ved hjaelp af et fotometer mod blindproeve . Maengden af det dannede porphobilinogen et er maal for ALA-D-aktiviteten .  METODE  Lysets indvirkning  Nyligt foretagne forsoeg har vist , at navnlig PBG er meget foelsomt over for lys . Hele analysen boer foretages under udelukkelse af alt direkte sollys i laboratoriet ( og ikke blot paa det sted , hvor analysen foretages ) .  Foerste fase - Udtagning og opbevaring af blodproever inden analysen .   - Der udtages en proeve paa 2 ml venoest blod ved hjaelp af en engangssproejte af plastmateriale  ( uden blytilsaetning ) under tilstedevaerelse af toerret heparin ( < 5 mg ) .   - Heraf udtages straks 4 portioner à 0,2 ml fordelt i plastikroer ( uden blytilsaetning ) , og der nedkoeles til 4 * C . Opsugningen foretages med maalepipetter af Marbourg-typen .   - Hvis analysen foretages inden for 3 timer , er nedkoeling af proeverne ikke noedvendig .   - Proeverne maa hoejest opbevares 24 timer ved 4 * C .   - Lige foer analysen skal alle proeverne anbringes i et isafkoelet vandbad i 10 minutter .  Anmaerkning : Af plastmaterialer kan eksempelvis vaelges polyethylen , polystyren og polypropylen . Opbevaringstiden paa 24 timer ved 4 * C er fastsat efter et forsigtigt skoen . Dette tidsrum er tilstraekkeligt til at transportere blodproeven fra proeveudtagningsstedet til et centrallaboratorium for analyse . Af de 4 udtagne portioner blod skal 3 benyttes til bestemmelse af ALA-D og 1 til kontrolproeven .  Anden fase - Bestemmelse af haematokrit  Denne bestemmelse skal foretages :   - samtidig med udtagningen af blodproeven ,   - efter en kapillarmetode med anvendelse af to proever .  Centrifugering efter lukning af den ene ende ved en hastighed paa mindst 30 000 omdr./min . ( i mindst 5 minutter ) .  Anmaerkning : Denne bestemmelse skal helst foretages paa stedet , men ikke over 24 timer efter udtagningen af blodproeven . Om muligt anvendes en mikrohaematokritcentrifuge .  Tredje fase - Haemolyse   - Tre forud " optoede " blodproever haemolyseres med 1,3 ml destilleret vand ( som i forvejen er opvarmet til 37 * C ) i 10 minutter ved 37 * C mere eller mindre 0,2 * C .   - Der tilsaettes vand , helst ved hjaelp af en 2 ml maalepipette , hvorefter der blandes grundigt .   - Proeverne maa derefter ikke rystes mere paa dette stadium .  Anmaerkning : Det er besluttet at anvende vand og ikke Triton X 100 til haemolysen . Ved haemolyseforsoeg med Triton X 100 sker der en betydelig nedsaettelse af ALA-D aktiviteten , som man endnu ikke har fundet nogen forklaring paa , men som kunne tyde paa en artefakt .  Fjerde fase - Tilsaetning af ALA-oploesningen til haemolysatet .   - ALA-oploesningen tilberedes .   - Den maa ikke vaere tilberedt mere end 5 timer i forvejen .   - Oploesningen bringes op paa 37 * i mindst 10 minutter inden tilsaetningen .   - 1 ml af denne oploesning tilsaettes haemolysatet , helst ved hjaelp af en 1 ml fuldpipette , hvorefter der blandes .  Anmaerkning : der er valgt en pH paa 6,4 , idet erfaringen har vist , at denne pH-vaerdi giver stoerst overensstemmelse mellem vaerdierne for ALA-D-aktiviteten og blyindholdet i blodet hos befolkningen under normale forhold . Det drejer sig ikke om at opnaa maksimal virkning ( hvilket er muligt ved at haeve pH ) , da den virkning , der skal bestemmes , er tilstraekkelig stor .  Femte fase - Tilberedning af kontrolproeven   - 0,2 ml blod , behandlet som ved bestemmelsen af ALA-D indtil det punkt , hvor ALA-oploesningen tilsaettes ; i stedet for denne tilfoejes 1 ml HgCl2 - TCA-oploesning , og derefter tilsaettes 1 ml ALA-oploesning , hvorefter fremgangsmaaden er som ved bestemmelsen af ALA-D ( se nedenfor ) .   - Ved ovennaevnte tilsaetning benyttes pipette .  Anmaerkning : kun én kontrolproeve sammenlignes med en serie paa 3 forsoeg for hver blodproeve . Hvis den for kontrolproeven opnaaede O.D . er meget hoej , gentages proeven .  Sjette fase - Inkubation   - 60 minutters vandbad ved 37 * C mere eller mindre 0,2 * C .   - Inkubationstiden beregnes fra tilsaetningen af ALA-oploesningen .  Anmaerkning : Inkubationstiden paa 60 minutter er valgt for paa naturlig maade at foroege ALA-D-aktiviteten , da ingen anden fase bevirker kunstig foroegelse af aktiviteten . Erfaringen har vist , at forholdet inkubationstid/aktivitet er lineaert ved tidsrum laengere end to timer .  Inkubationstemperaturen holdes paa 37 * af praktiske grunde .  Syvende fase - Standsning af PBG-reaktionen .   - Der tilsaettes 1 ml HgCl2 - TCA-oploesning til inkubationsblandingen , helst med 1 ml fuldpipette .  Ottende fase - Centrifugering og filtrering .   - 30 000 omdr . minutter .   - Filtrering med Whatman-papir nr . 54 eller tilsvarende ( syrebestandigt ) .  Anmaerkning : Centrifugeringen skal vare ca . 10 minutter .  Filtreringsfasen er indfoert for at undgaa , at smaa partikler ved pipetteopsugning overfoeres paa vaeskeoverfladen . Disse partikler synes at fremkalde en farvereaktion med Ehrlich-reagensen . Flere forsoeg har vist , at indfoerelsen af filtreringsfasen forbedrer reproducerbarheden . Filtreringsfasen kan om fornoedent erstattes af en yderligere centrifugering .  Niende fase - Reaktion med Ehrlich-reagensen .   - 1 ml af det oeverste vaeskelag blandes med 1 ml modificeret Ehrlich-reagens ved hjaelp af en fuldpipette .   - Der blandes ved hjaelp af en blandingspipette af Vortex-typen for at opnaa homogenitet .   - Proeven henstilles til reaktion i 5 minutter , foer extinktionen maales .  Anmaerkning : Det er meget vigtigt , at det oeverste , filtrerede vaeskelag blandes godt med Ehrlichreagensen for at sikre homogenitet .  Tiende fase - Maaling af extinktionen .   - Spektrofotometret indstilles ved hjaelp af en phenolphtaleinoploesning i en basisk puffer .   - Maaling af proevens extinktion i forhold til kontrolproeven ved 555 nm i en kuvette paa 1 cm  ( eller 2 cm , hvis der er meget ringe absorption ) .  Ellevte fase - Beregning af enzymaktiviteten .   - Denne aktivitet beregnes efter foelgende ligning :  OD korr . gange 35 gange 2 gange 100 gange K /  ( Hct . % gange 60 gange 62 ) = nmoles ALA/nm/ml RBC = U/ml  OD = maalt extinktion .  60 = inkubationstid .  35 = fortyndingsfaktor .  62 = molaer extinktionskoefficient i cm2/nmol .  K = spektrofotometrisk korrektionskoefficient .  Anmaerkning : De foreslaaede enheder er i overensstemmelse med Den internationale union for Biokemi's rekommandationer vedroerende enzymnomenklatur .  REAGENSER  1 . Tilberedning af en ALA-oploesning  Oploesning A :  1,78 g Na2HPO4 * 2 H2O oploest i 100 ml destilleret vand ( helst foretaget ved ionbytning ) .  Oploesning B :  1,38 g NaH2PO4 * 1 H2O oploest i 100 ml destilleret vand .  29 ml oploesning A + 71 ml oploesning B giver en puffer paa 0,1-molaer Na-phosphat med pH 6,4 .  Det er noedvendigt , at pufferen har denne ionkoncentration for at forhindre enhver pH-aendring i reagens-oploesningen .  167,6 mg ALA-HCl oploeses i oploesning B ( denne skal stadig vaere sur ) ; pH reguleres til 6,4 ved hjaelp af oploesning A . Rumfanget bringes derefter op paa 100 ml med pufferoploesningen 0,1-molaer Na-phosphat med pH 6,4 . Dette praeparat giver en 0,01-molaer ALA-oploesning .  2 . HgCl2 - TCA-oploesning  1,35 g HgCl2 oploeses i 100 ml 10 % trichloreddikesyre .  3 . Ehrlich-reagens-oploesningen  Reagenser :  2,5 g dimethylaminobenzaldehyd ( pDMAE )  0,25 g HgCl2 oploest i 10 ml iseddikesyre  perchlorsyre S.G . 1,7  iseddikesyre  Tilberedning :  pDMAB oploeses i 50 ml eddikesyre ; der tilsaettes 24,5 ml perchlorsyre og 4 ml HgCl2-oploesning . Dette blandes og afkoeles , og rumfanget foroeges til 100 ml ved tilsaetning af iseddikesyre i en maalekolbe ( 1 ) . Opbevares i en moerkfarvet flaske .  Kalibrering  Der skal paa faellesskabsplan finde en aarlig kalibrering sted hos et laboratorium , som udpeges af medlemsstaterne i forening .  ( 1 ) Skulle der paa dette stadium vise sig en brunfarvning , skal reagensen kasseres .