CELEX: 21987A0207(02)
Language: bg
Date: 1958-12-15 00:00:00
Title: Протокол към Европейското споразумение относно обмена на терапевтични субстанции от човешки произход

02/ 03
            
            
               BG
            
            
               Официален вестник на Европейския съюз
            
            
               135
            
         21987A0207(02)
   
               L 037/4
            
            
               ОФИЦИАЛЕН ВЕСТНИК НА ЕВРОПЕЙСКИЯ СЪЮЗ
            
            
               
            
         
      ПРОТОКОЛ КЪМ ЕВРОПЕЙСКОТО СПОРАЗУМЕНИЕ
   
   относно обмена на терапевтични субстанции от човешки произход
   ЧАСТ I
   ОБЩИ РАЗПОРЕДБИ
   А.   ОБОЗНАЧАВАНЕ
   Към всеки съд или епруветка се прикрепва етикет на английски и френски език, съставен по подходящия модел, поместен в приложения от 2 до 10 към протокола.
   Б.   ОПАКОВАНЕ И ЕКСПЕДИРАНЕ
   Цяла човешка кръв се превозва в съд при температура от 4 °С до 6 °С, поддържана през целия период на транспортиране.
   Настоящото изискване не важи за производните, упоменати в протокола.
   В.   ПРОДУКТИ И АПАРАТИ
   Продуктите и апаратите, упоменати в част II от настоящия протокол, са стерилни, неапирогенни и нетоксични.
   Препоръчително е епруветката, както и разтворителите, необходими за сухите продукти, да се изпращат с всяка пратка.
   Г.   НЕТОКСИЧНОСТ НА ПЛАСТМАСОВО СЪОРЪЖЕНИЕ ЗА КРЪВОПРЕЛИВАНЕ
   Съоръжението е съобразено с разпоредбите, съдържащи се в приложение 11 към настоящия протокол.
   ЧАСТ II
   СПЕЦИАЛНИ РАЗПОРЕДБИ
   1.   ЦЯЛА ЧОВЕШКА КРЪВ
   Цяла човешка кръв е кръв, която е смесена с подходящ антикоагулант, след вземане от човешки индивид в нормално здраве.
   Не се взема кръв от човешки индивид:
   
               а)
            
            
               за който е известно, че боледува от или е боледувал от сифилис;
            
         
               б)
            
            
               чиято кръв не е изследвана с отрицателни резултати за наличие на сифилитична инфекция; или
            
         
               в)
            
            
               който не страда, доколкото може да се удостовери след медицински преглед и изследване на произхода му, от болести, предавани чрез кръвопреливане.
            
         Кръвта се изтегля асептично чрез затворена система от стерилни тръбички в стерилен съд, в който разтвор с антикоагулантен ефект е поставен преди стерилизацията на съда. Използваното съоръжение трябва да не съдържа апироген. Когато изтеглянето е завършено, съдът незабавно се запечатва и охлажда до температура от 4 °С до 6 °С, след което не се отваря до момента непосредствено преди използването на кръвта.
   Кръвта се събира в цитратен разтвор на киселинна реакция, съдържаща декстроза. Не се добавя антисептична или бактериостатична субстанция. Количеството разтвор с антикоагулантен ефект не трябва да надвишава 220 ml за всеки l цяла човешка кръв и концентрацията на хемоглобин не трябва да е по-ниска от 97 g на l.
   Кръвна група
   Кръвната група по системата АВ0 се определя чрез изследване както на кръвните телца, така и на кръвния серум по системата Rh чрез изследване на кръвните телца, като се използва отделна проба от кръвта на донора. При съществуващ национален стандарт или национално препоръчителна техника за определяне на кръвната група се използва тази техника.
   Терминът Rh отрицателна единица да се използва само в случаите, когато специални изследвания са показали отсъствието на антигени C, D, Du и E. Всяка останала кръв се обозначава с Rh положителна единица.
   Обмен на кръв по настоящото споразумение следва да се използва единствено за реципиенти със съответстващата АВ0 група.
   Съхранение
   Цяла човешка кръв се съхранява до момента на употребата ѝ в стерилен съд, запечатан така че да предотврати проникването на микроорганизми, при температура от 4 °С до 6 °С, с изключение на времето, необходимо за изследване и транспортиране при по-висока температура, като такъв период от време не надвишава 30 минути, след което кръвта незабавно се охлажда отново до температура от 4 °С до 6 °С.
   Обозначаване
   Етикетът върху съда дава цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 2). Групата Rh се изписва „положителна“ или „отрицателна“ или в съкратена форма „ПОЛ“ или „ОТР“.
   1а.   КОНЦЕНТРАТ НА ЧОВЕШКИ ЧЕРВЕНИ КЛЕТКИ
   Концентрат на човешки червени клетки е единица цяла човешка кръв, от която по-голяма част от плазмата е отстранена.
   Концентратът съдържа повечето червени клетки от единицата, от който е приготвен; други съставни части на клетката могат да присъстват или могат да бъдат частично отстранени.
   Течното съдържание на концентрата се състои или от остатъчна плазма, или от подходящ изотоничен изкуствен воден разтвор, добавен след отстраняване на плазмата. Обемът на червени клетки трябва да е между 65 % и 75 % от общия обем на продукта, но в случай, че е приложена по-голяма концентрация на червени клетки, приблизителния процент на еритроцитен обем (хематокрит) се обозначава на етикета.
   Всички необходими за приготвянето операции се извършват в асептични условия: преливането се извършва, като се използва стерилна затворена система и само чрез сгъстяване. Не се добавят антисептични или бактериостатични субстанции.
   Кръвна група и съхранение
   Както при цялата човешка кръв.
   Обозначаване
   Етикетът върху съда дава цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 2а). Групата Rh се изписва „положителна“ или „отрицателна“ или в съкратена форма „ПОЛ“ или „ОТР“. В случай, че е добавен изкуствен воден разтвор, етикетът посочва също така обема и състава му.
   2.   СУШЕНА ЧОВЕШКА ПЛАЗМА
   Сушена човешка плазма се приготвя чрез изсушаване на плаващи на повърхността флуиди, отделени чрез центрофугиране или чрез утаяване от количества цяла човешка кръв.
   При приготвянето не се добавят антисептични или бактериостатични или други субстанции. Сушена човешка плазма се получава чрез лиофилизация или посредством всеки друг метод, при който се избягва денатурацията на протеини. Изсушеният препарат е лесно разтворим в количество вода, равно на обема течност, от който е приготвена субстанцията. Концентрацията на протеин в така получения разтвор не трябва да е по-малка от 45 g на l и не трябва да показва видими следи от продуктите на хемолиза. Съдържанието на хемаглутинин в разтвора не трябва да е по-голямо от 1:32.
   Сушена човешка плазма, приготвена от едно или две кръводарявания
   Дарена кръв, която е показала съдържание на опасни количества изохемолизини (определени чрез използването на проба пресен серум) или всякакви имунни хемаглутинини, се изключва. Стерилността на всяка единица се проверява чрез възпроизвеждане на не повече от 10 ml, освен ако плазмата не е изтеглена и замразена до 48 часа от вземането на кръв.
   Сушена човешка плазма, приготвена от повече от две кръводарявания
   Взета кръв, показала съдържание на опасни нива имунни хемаглутинини или изохемолизини, се изключва. За избягване на неблагоприятни ефекти вследствие на бактериално израснали продукти в кръвта, не се използва индивидуално дарена кръв, която е показала наличие на бактериално заразяване, а стерилността на всяка взета кръв се проверява чрез култивиране на не повече от 10 ml. С цел минимизиране на риска от пренасяне на серумен хепатит, плазма се приготвя от количества от не повече от 12 вземания на кръв или посредством всеки друг метод, който е показал намаляване на риска по сходен начин.
   Разтворимост във вода
   Добавете количество вода, равно на обема течност, от която е приготвена пробата; субстанцията се разтваря напълно до 10 минути при температура от 15 °С до 20 °С.
   Идентифициране
   Разтворете известно количество от продукта в обем вода, равен на течния обем, от който е приготвен; разтворът преминава през следните реакции:
   
               i)
            
            
               при реакция на преципитация със специфични антисеруми трябва да покаже съдържание единствено на протеини на човешка плазма;
            
         
               ii)
            
            
               към 1 ml добавете подходящо количество тромбин или калциев хлорид; последва съсирване, което може да се ускори чрез инкубация при 37 °С.
            
         Загуба на тегло при изсушаване
   При изсушаване чрез фосфорен пентоксид при налягане, непревишаващо 0,02 mm живачен стълб за 24 часа, сушената човешка плазма не трябва да губи повече от 0,5 % от теглото си.
   Стерилност
   След повторно свързване крайният продукт е стерилен при проверка чрез подходящ бактериологичен метод.
   Съхранение
   Сушената човешка плазма се съхранява в азотна атмосфера или във вакуум в стерилен съд, запечатан така че да се изключи проникването на микроорганизми и, доколкото е възможно, на влага. Съдът е защитен от светлина и се съхранява при температура под 20 °С.
   Обозначаване
   Етикетът върху съда дава цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 3).
   3.   ЧОВЕШКИ АЛБУМИН И ПРОТЕИНОВА ФРАКЦИЯ НА ЧОВЕШКА ПЛАЗМА
   Човешкият албумин и протеиновата фракция на човешка плазма се приготвят от тази съставна част на протеина, която съставлява около 60 % от общата протеинова маса в плазмата на цялата човешка кръв.
   Използва се такъв метод на приготвяне, при който полученият материал отговаря на описаните тук изисквания. Независимо дали крайният продукт е течен или сух, след добавянето на подходящия стабилизиращ реактив или реактиви при приготвянето, крайният продукт се загрява в течно сътояние в крайния съд при температура 60 °С ± 0,5 °С в продължение на 10 часа, за да се дезактивира реактивът, причиняващ серумен хепатит. По време на приготвянето се добавя антисептично или бактериостатично субстанция.
   При приготвянето на човешки албумин не по-малко от 95 % от теглото на наличните протеини е албумин. При приготвянето на протеинови фракции от човешка плазма, не по-малко от 85 % от теглото на протеин е албумин.
   И при двата процеса на приготвяне наличието на имуноглобулин G е повече от 10 mg за всеки грам продукт.
   При приготвянето на протеинови фракции човешка плазма като разтвор той има обща концентрация на протеин между 45 и 50 g на l.
   При приготвянето на човешки албумин като разтвор той има обща концентрация на протеин, не по-малка от 45 g на l.
   Разтворимост на сухия продукт
   Добавете вода към препоръчителния обем; сухият препарат трябва напълно да се разтвори.
   Устойчивост
   При сравняване на разтворите преди и след загряване не се отчитат данни на съществена денатурация на протеините в разтвор, установени чрез измервания на лепкавост и помътняване, ултрацентрофугиране и електрофореза. Разтворът е изключително свободен от видими частици след загряване до 57 °С и след разбъркване в механично разбъркване в продължение на 6 часа при същата температура.
   Идентификация
   
               i)
            
            
               При тестове за утаяване със специфични антисеруми и двете проби трябва да покажат съдържание единствено на протеини на човешка плазма.
            
         
               ii)
            
            
               При електролиза, чрез използване на техниката на подвижната граница при приемливи и подходящи условия, показанията трябва да сочат, че протеиновата фракция с подвижността на съдържанието на албумин в нормална човешка плазма е не по-малка от 95 % от протеиновата маса при проби от човешки албумин и не по-малка от 85 % от протеиновата маса при проби от протеинова фракция на човешка плазма.
            
         Съдържание на натрий и концентрация на натрий
   Съдържанието на натрий в беден на сол човешки албумин не трябва да превишава 0,61 mmol на всеки g албумин. За други продукти на човешки албумин и в протеинова фракция на човешка плазма концентрацията на натрий не трябва да превишава 0,15 mol на всеки l разтвор или повторно свързан сух продукт.
   Концентрация на калий
   Концентрацията на калий в протеинова фракция на човешка плазма не трябва да превишава 2 mmol на всеки l разтвор или повторно свързан сух продукт.
   Киселинност
   Нивото на pH във всеки продукт е 6,8 ± 0,2, измерено при температура от 15 °С до 25 °С в разтвор, разреден до протеинова концентрация 10 g на l чрез разтвор, съдържащ 0,15 mol натриев хлорид на l.
   Загуба на маса при изсушаване
   Сухи продукти, когато са изсушени чрез фосфорен пентоксид при налягане, непревишаващо 0,02 mm живачен стълб за 24 часа, не трябва да изгубят повече от 0,5 % от теглото си.
   Стерилност
   Крайният продукт е стерилен при изследване с подходящ бактериологичен метод.
   Съхранение
   Сухият човешки албумин се съхранява в азотна среда или вакуум в стерилен съд, запечатан така че да изключи проникването на микроорганизми и, доколкото е възможно, на влага, защитен от светлина и съхраняван при температура под 20 °С.
   Разтвори на човешки албумин и протеинова фракция на човешка плазма трябва да се съхраняват в стерилни съдове, запечатани така че да изключат проникването на микроорганизми, защитени от светлина и съхранявани при температура от 4 °С до 6 °С.
   Обозначаване
   Етикетът върху съда съдържа цялата информация, както е показано на съответния етикет образец (приложение 4). За разтвори датата на приготвяне е датата на обработване чрез загряване в крайния съд.
   4.   ОБИКНОВЕН ЧОВЕШКИ ИМУНОГЛОБУЛИН
   Обикновеният човешки имуноглобулин се приготвя от протеинова плазма, получена от цяла човешка кръв, съдържаща антителата на нормални възрастни хора. Той се получава от изтеглена течна човешка плазма от не по-малко от 1 000 донори.
   Използваният метод на приготвяне е такъв, при който продуктът отговаря на посочените тук изисквания, и при който се избягва предаването на серумен хепатит чрез крайния продукт. В допълнение при използвания метод за приготвяне антителата, съдържащи се в изходящия материал, са концентрирани в подходящо количество в крайния продукт. Процедурата в това отношение се счита за задоволителна за всеки краен продукт при титрация на изходящия материал и на крайния продукт с антитела на поне един вирус и един бактериален токсин. Избраните антитела са такива, за които съществуват признати методи на титрация.
   По време на приготвянето не се добавят антисептични или бактериологични субстанции; в крайния продукт могат да се добавят подходящ консервант или стабилизиращ реактив за поддържане на бактериалната стерилност и устойчивост на крайния продукт.
   Крайният продукт се изписва като разтвор, в който концентрацията на имуноглобулин е между 100 и 170 g на l.
   Идентификация
   
               i)
            
            
               При тестове за утаяване със специфични антисеруми пробите трябва да покажат съдържание единствено на протеини на човешка плазма.
            
         
               ii)
            
            
               При електролиза, чрез използване техниката на подвижната граница при приемливи и подходящи условия, показанията трябва да сочат, че не по-малко от 90 % от протеиновата маса има подвижността на съставната част на гамаглобулините на нормална човешка плазма.
            
         Устойчивост
   Преди и след загряване на крайния разтвор при температура 37 °С в продължение на седем дни не трябва да има видими следи от утаяване или размътване. Препоръчително е също така да се извършат тестове чрез метода на ултрацентрофугиране за определяне степента на разпадане на продукта на съставни части с по-малко молекулярно тегло. Използваният метод трябва да е одобрен от националните контролни органи.
   Киселинност
   Нивото на pH в крайния продукт е 6,8 ± 0,4 измерено при температура от 15 °С до 25 °С в разтвор, разреден до протеинова концентрация 10 g на l чрез разтвор, съдържащ 0,15 граммолекули натриев хлорид на l.
   Стерилност
   Крайният продукт е стерилен при изследване с подходящ бактериологичен метод.
   Съхранение
   Разтворът на човешки имуноглобулин се съхранява в стерилен съд, запечатан така че да изключи проникването на микроорганизми, защитен от светлина и съхраняван при температура от 4 °С до 6 °С.
   Обозначаване
   Етикетът върху съда предоставя цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 5). Датата на приготвяне е датата на напълване на последния съд.
   5.   СПЕЦИФИЧНИ ЧОВЕШКИ ИМУНОГЛОБУЛИНИ
   Специфичните човешки имуноглобулини съдържат антитела срещу указани вирусни или бактериални агенти. Следователно, те могат да се приготвят от ограничен брой взети проби.
   В настоящите изисквания са включени следните специални човешки имуноглобулини:
   
               —
            
            
               Човешки имуноглобулин антитетанус
            
         
               —
            
            
               Човешки имуноглобулин противоваксина.
            
         Могат да се разработят и други специални имуноглобулини. Ако съществува съответен международен стандарт, имуноглобулините следва да се изпробват спрямо този стандарт, а тяхната ефикасност да се изрази в международни единици.
   Човешкият имуноглобулин противоваксина съдържа не по-малко от 500 IU на милилитър антитела на ваксина, определени чрез тест за неутрализиране върху хлороалантоични мембрани или в тъканна култура. Човешкият имуноглобулин антитетанус съдържа не по-малко от 50 IU на милилитър тетанус антиоксин, определен чрез тест за неутрализиране върху животни.
   Специфичните човешки имуноглобулини трябва освен това да отговарят на изискванията, посочени в раздел 4 „Обикновен човешки имуноглобулин“.
   В зависимост от съдържанието на антитела концентарцията на имуноглобулин в крайния разтвор може да варира между 100 и 170 g на l.
   Обозначаване
   Етикетът върху съда предоставя цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 5). Етикетът също така посочва ефикасността в международни единици съгласно съответния международен стандарт или международен референтен препарат.
   6.   ИЗСУШЕН ЧОВЕШКИ ФИБРИНОГЕН
   Изсушеният човешки фибриноген е сух продукт, който съдържа разтворима съставка на течна човешка плазма, която при добавяне на тромбин се превръща във фибрин. Използва се такъв метод на приготвяне, при който се произвежда материал, отговарящ на описаните тук изисквания, и който минимизира риска от пренасяне на серумен хепатит. Плазмата, използвана за приготвяне на фибриноген, трябва да съдържа възможно най-малко дарявания.
   По време на приготвянето не се добавят антисептични или бактериостатични субстанции. Крайният продукт е лиофилизиран.
   Разтворимост
   Добавете вода към препоръчителния обем; сухият продукт трябва да се разтвори напълно. До 60 минути от свързването не възниква утаяване.
   Обозначаване
   
               i)
            
            
               При тестове за утаяване със специфични антисеруми пробите трябва да покажат съдържание единствено на протеини на човешка плазма.
            
         
               ii)
            
            
               Прясно свързаният продукт има свойството на съсирване при добавяне на тромбин. При добавяне на тромбин към разтвор на човешки фибриноген със същата концентрация като тази на прясна обикновена плазма, съсирването възниква за време не по-голямо от два пъти времето, необходимо за възникване на съсирването на прясна обикновена плазма при добавянето на тромбин.
            
         
               iii)
            
            
               Коагулиращ протеин. Не по-малко от 50 % от общия протеин коагулира чрез тромбин.
            
         Загуба на маса при изсушаване
   Продукти, изсушени чрез фосфорен пентоксид при налягане непревишаващо 0,02 mm живачен стълб за 24 часа, не трябва да изгубят повече от 0,3 % от теглото си.
   Стерилност
   След повторно свързване при изследване чрез подходящ бактериологичен метод крайният продукт е стерилен.
   Съхранение
   Човешки фибриноген се съхранява в азотна среда или във вакуум в стерилен съд, запечатан така че да предотврати проникването на микроорганизми и доколкото е възможно влага, защитен от светлина и съхраняван при препоръчителна температура.
   Обозначаване
   Етикетът върху съда предоставя цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 6). Датата на приготвяне е датата на поставяне в последния разтвор преди лиофилизацията.
   7.   ИЗСУШЕН ИЛИ ЗАМРАЗЕН ЧОВЕШКИ КРЪВОСЪСИРВАЩ ФАКТОР VIII
   I.   Изисквания към донорите
   Донорите трябва да са в добро здраве, и по-специално да не са заразно болни, съгласно приетите критерии за суха човешка плазма.
   II.   Изисквания по отношение на приготвянето
   Стерилност и атоксичност
   Крайният продукт трябва да е стерилен и апирогенен. При утаяване при ниски температури в найлонови торбички продуктът не трябва да съдържа органичен разтворител или други чужди вещества, налични в смес за замразяване. Проникването на такива продукти през стените на найлоновата торбичка може да се предотврати, като торбичката се постави във втора непромокаема торбичка за цялото време на имерсия. Рискът от скъсване на найлоновата торбичка при съхранение в замразено състояние може да се намали, като всяка торбичка се постави в защитна кутия.
   Еритроцити, левкоцити и тромбоцити
   Центрофугирането трябва да е такова, че да елиминира съставните елементи на кръвта възможно най-бързо и пълно след вземането на кръвта.
   Разтворимост
   При добавяне на обозначеното количество подходящ разтворител следва пълно разтваряне на сухия продукт за по-малко от 30 минути при температура 37 °С. Малки и лесно отделими фибриногенни съединения могат да се задържат.
   Устойчивост
   Продуктът, консервиран при 20 °С, не трябва да показва никакви признаци на утаяване в продължение на три часа след разтваряне.
   Действие
   Повторно свързаният продукт трябва да съдържа обозначеното минимално количество фактор VIII, като една единица съответства на действието на 1 ml средна обикновена прясна плазма, като действието се определя чрез метод, одобрен от компетентните национални органи.
   Отсъствие на ненормални антитела и, ако продуктът е предназначен за пациенти от някоя AB0 група, титър на анти-А и анти-В антитела, непревишаващ 32.
   Идентификация
   При тестове за утаяване със специфични антисеруми пробите трябва да покажат съдържание единствено на протеини на човешка плазма.
   Загуба на маса при изсушаване
   Продукти, лиофилизирани, при изсушаване чрез фосфорен пентоксид при налягане, непревишаващо 0,02 mm живачен стълб за 24 часа, губят не повече от 1,5 % от теглото си.
   Съхранение
   Изсушеният препарат се съхранява в азотна среда или вакуум, в стерилен флакон, запушен така че да предотврати проникването на микроорганизми и доколкото е възможно — на влага. Съхранението в замразено състояние не превишава шест месеца, в сухо състояние — една година, освен когато продуктът е повторно изследван за минимално изискваната ефикасност.
   III.   Обозначаване
   Етикетът върху продукта дава цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 7).
   8.   ИЗСУШЕН ЧОВЕШКИ КРЪВОСЪСИРВАЩ ФАКТОР IX
   I.   Изисквания към донорите
   Донорите трябва да са в добро здраве, и по-специално да не са заразно болни, съгласно приетите критерии за суха човешка плазма.
   II.   Изисквания към приготвянето
   Стерилност и атоксичност
   Крайният продукт, тестван с подходящи методи, трябва да е стерилен, апирогенен и без нежелателни съдонразширяващи или респираторни ефекти. Тестването за отсъствие на съдонразширяващи ефекти следва да се извърши върху куче или котка.
   Разтворимост
   При добавяне на обозначеното количество разтворител трябва да настъпи пълно разтваряне до 10 минути при температура 37 °С.
   Тромбокиназа и липса на свободен тромбин
   Времето на рекалцификация на обикновена плазма, измерено при температура 37°С при наличието на същото количество различни разредители в повторно свързания продукт, не трябва да е по-малко от 40 секунди. Повторно свързаният продукт, към който е добавено същото количество фибриноген (3 g/l), трябва да се съсири до шест часа при температура 37 °С.
   Действие
   Повторно свързаният продукт трябва да съдържа обозначеното минимално количество фактор IX, като една единица съответства на действието на 1 ml средна обикновена прясна плазма, като действието се определя посредством одобрен от компетентните национални органи метод.
   Податливост и устойчивост in vivo
   
   Методът на приготвяне трябва да е такъв, че инжектирането на доза от 50 единици на kg телесна маса, бързо приложена интравенозно, като се използват няколко партиди материал, дадени на няколко пациенти, причинява до 15 минути, при отсъствието на специфичен задържащ фактор и в базови условия средно увеличение, не по-малко от 300 единици на l плазма, а при продължаване след 24 часа, средно увеличение от не по-малко от 60 единици на l плазма.
   Идентификация
   При тестове за утаяване със специфични антисеруми, пробите трябва да покажат съдържание единствено на протеини на човешка плазма.
   Загуба на маса при изсушаване
   При изсушаване чрез фосфорен пентоксид при налягане, непревишаващо 0,02 mm живачен стълб за 24 часа, продуктът губи не повече от 1,5 % от теглото си.
   Съхранение
   Препаратите се съхраняват сухи при температура под 5 °С. Периодът на съхранение не превишава две години, освен ако не са извършени повторни тестове за действието на препарата.
   III.   Обозначаване
   Етикетът върху препарата съдържа цялата информация, посочена в етикета образец (приложение 8).
   ПРИЛОЖЕНИЕ 1 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
      СЕРТИФИКАТ
   
   
      (Член 4)
   
   ДА НЕ СЕ ОТДЕЛЯ ОТ ПРАТКАТА
   
               …
               (място)
            
            
               …19…
               (дата)
            
         
      
   
               Брой пакети
            
            
               Долуподписаният удостоверявам, че пратката в полето
            
         
               …
            
            
               …
            
         
               …
            
            
               …
            
         
               Отбелязани
            
            
               изготвена под отговорността на…
            
         
               …
            
            
               …
            
         
               …
            
            
               …
            
         
               Партида №
            
            
               един от органите, посочени в член 6 от споразумението, е в съответствие с изискванията на протокола към споразумението и може да бъде доставена незабавно на адресата
            
         
               (име и място)…
            
         
               …
            
         
               
                           …
                           (печат)
                        
                        
                           …
                           (подпис)
                        
                        
                           …
                           (звание)
                        
                     
         ПРИЛОЖЕНИЕ 2 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя:…
            
         
               2.
            
            
               Цяла човешка кръв…
            
         
               3.
            
            
               Референтен номер:…
            
         
               4.
            
            
               Кръвна група:…
            
         
               5.
            
            
               Група Rh:…
            
         
               6.
            
            
               
                           …ml
                        
                        
                           разтвор с антикоагулантен ефект
                        
                     
                           …g
                        
                        
                           (глюкоза/l)
                        
                     
                           …mol
                        
                        
                           динатриев цитрат/l
                        
                     
                           …ml
                        
                        
                           кръв
                        
                     
         
               7.
            
            
               
                           Титър на изохемолизин
                        
                        
                           (указва се)
                        
                     
                           (не се указва)
                        
                     
         
               8.
            
            
               Дата на вземане:…
               Дата на изтичане срока на годност:…
            
         
               
                  9.
               
            
            
               
                  Съхранявайте при температура от 4 °С до 6 °С.
               
            
         
               
                  10.
               
            
            
               
                  Да не се използва при видими следи от разваляне.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 2а КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               Концентрат на човешки червени клетки…
            
         
               3.
            
            
               Референтен номер: …
            
         
               4.
            
            
               Кръвна група: …
            
         
               5.
            
            
               Група Rh: …
            
         
               6.
            
            
               … ml приготвени от.… ml кръв.
            
         
               7.
            
            
               Обем и състав на използвания антикоагулант: …
            
         
               8.
            
            
               Дата на вземане: …
               Дата на приготвяне: …
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               9.
            
            
               Да се съхранява при температура от 2 °С до 6 °С.
            
         
               10.
            
            
               
                           Добавен изкуствен воден разтвор
                        
                        
                           обем състав: .…
                        
                     
         ПРИЛОЖЕНИЕ 3 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               Сушена човешка плазма:…
            
         
               3.
            
            
               Референтен номер: …
            
         
               4.
            
            
               За повторно свързване добавете … ml стерилна, свободна от апирогени дистилирана вода.
            
         
               5.
            
            
               Повторно свързаната плазма съдържа:
               
                           … g
                        
                        
                           глюкоза/l
                        
                     
                           … mol
                        
                        
                           динатриев цитрат/l
                        
                     
                           … g/l
                        
                        
                           концентрация на протеин (най-малко)
                        
                     
         
               6.
            
            
               Брой индивидуални кръводарявания в извадката: …
            
         
               7.
            
            
               Дата на приготвяне: …
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               
                  8.
               
            
            
               
                  Да се съхранява защитена от светлина при температура под 20 °С.
               
            
         
               
                  9.
               
            
            
               
                  Да се използва незабавно след повторното свързване.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 4 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               Сух човешки албумин…
            
         
               3.
            
            
               Номер на партидата: …
            
         
               4.
            
            
               
                           Албумин:
                        
                        
                           … g
                        
                     
                           Стабилизатор:
                        
                        
                           естество … g/l
                        
                        
                           (в повторно свързания разтвор)
                        
                     
                  
               
                           натрий …
                        
                        
                           mmol/g (албумин)
                        
                     
         
               5.
            
            
               Дата на приготвяне: …
               Дата на изтичане на срока на годност: …
            
         
               6.
            
            
               Да се свърже повторно с … ml стерилна, апирогенна дестилирана вода.
            
         
               
                  7.
               
            
            
               
                  Да се съхранява защитен от светлина при температура под 20 °С.
               
            
         
               
                  8.
               
            
            
               
                  Да се използва незабавно след повторно свързване.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 4 (продължение 1)
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕН АНА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               
                           Разтвор на човешки албумин
                        
                        
                           … ml
                        
                     
         
               3.
            
            
               Номер на партидата: …
            
         
               4.
            
            
               
                           Албумин:
                        
                        
                           … g/l
                        
                     
                           Стабилизатор:
                        
                        
                           … естество … g/l
                        
                     
                  
               
                           Натрий: … mmol/g
                        
                        
                           (албумин)
                        
                     
         
               5.
            
            
               Дата на приготвяне: …
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               
                  6.
               
            
            
               
                  Да се съхранява, защитен от светлина, при температура от 4 °С до 6 °С.
               
            
         
               
                  7.
               
            
            
               
                  Да не се използва, ако не е чист и без утайки.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 4 (продължение 2)
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               
                           Протеинова фракция на човешка плазма
                        
                        
                           … ml
                        
                     
         
               3.
            
            
               Номер на партидата: …
            
         
               4.
            
            
               
                           Албумин:
                        
                        
                           …g/l
                        
                     
                           Стабилизатор:
                        
                        
                           естество …g/l
                        
                     
                  
               
                           Натрий … mmol/l
                        
                        
                            
                        
                     
         
               5.
            
            
               Дата на приготвяне: …
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               
                  6.
               
            
            
               
                  Да се съхранява защитен от светлина при температура от 4 °С до 6 °С.
               
            
         
               
                  7.
               
            
            
               
                  Да не се използва, ако не е чист и без утайки.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 5 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               Обикновен човешки имуноглобулин…
            
         
               2.
            
            
               Номер на партидата: …
            
         
               4.
            
            
               
                           Общо протеин:
                        
                        
                           … g/l
                        
                     
                           Добавен друг материал:
                        
                        
                           естество: …, … g/l
                        
                     
                  
               
                           Общ обем
                        
                        
                           … ml
                        
                     
         
               5.
            
            
               Дата на приготвяне: …
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               
                  6.
               
            
            
               
                  Да се съхранява, защитен от светлина, при температура от 4 °С до 6 °С.
               
            
         
               
                  12.
               
            
            
               
                  Да не се инжектира интравенозно.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 6 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               Сух човешки фибриноген
            
         
               3.
            
            
               Номер на партидата: …
            
         
               4.
            
            
               
                           Коагулиращ протеин:
                        
                        
                           …g
                        
                     
                           Добавен друг материал:
                        
                        
                           естество: … g/l
                        
                        
                           повторно свързан разтвор
                        
                     
         
               5.
            
            
               Дата на приготвяне: …
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               6.
            
            
               Свържете повторно с … ml стерилна, апирогенна дестилирана вода.
            
         
               7.
            
            
               
                           Брой индивидуални дарявания в извадката:
                        
                        
                           …
                        
                     
         
               
                  8.
               
            
            
               
                  Да се съхранява, защитен от светлина, при температура под 20 °С.
               
            
         
               
                  9.
               
            
            
               
                  Да се използва незабавно след повторно свързване.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 7 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               
                           Замразен човешки кръвосъсирващ фактор VIII,
                        
                        
                           или
                        
                     
                           Сух човешки кръвосъсирващ фактор VIII,
                        
                        
                            
                        
                     Метод на приготвяне: …
            
         
               3.
            
            
               Номер на партидата: …
            
         
               4.
            
            
               Минимално количество фактор VIII, общо количество протеини, естество и количество на всяка добавена субстанция: …
            
         
               5.
            
            
               Естество и обем на разтворителя: …
            
         
               6.
            
            
               Брой донори за партида: …
            
         
               
                  7.
               
            
            
               
                  Титър хемаглутинин, не по-висок от 1:32 или AB0 кръвна група
               
            
         
               8.
            
            
               Дата на приготвяне: …
            
         
               9.
            
            
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               
                  10.
               
            
            
               
                  Да се съхранява, защитен от светлина и замразен при температура под минус 30 °С или в сухо състояние при температура под 5 °C.
               
            
         
               
                  11.
               
            
            
               
                  Инжектирайте интравенозно незабавно след повторно свързване на продукта или най-късно три часа след съхранение при температура 20 °С.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 8 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
               …
            
         
               2.
            
            
               Сух човешки кръвосъсирващ фактор IX: …
               Налични други кръвосъсирващи фактори: …
               Метод на приготвяне: …
            
         
               3.
            
            
               Номер на партидата: …
            
         
               4.
            
            
               Минимално количество фактор IX, общо количество протеини, естество и количество на всяка добавена субстанция: …
            
         
               5.
            
            
               Естество и обем на разтворителя: …
            
         
               6.
            
            
               Брой донори за партида: …
            
         
               7.
            
            
               Дата на приготвяне: …
            
         
               8.
            
            
               Дата на изтичане срока на годност: …
            
         
               
                  9.
               
            
            
               
                  Да се съхранява, защитен от светлина при температура под 5 °С.
               
            
         
               
                  10.
               
            
            
               
                  Инжектирайте интравенозно незабавно след повторно свързване на продукта.
               
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 9 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               Стерилна, неапирогенна дестилирана вода
               
                           За повторно свързване на
                        
                        
                           суха човешка плазма
                           сух човешки албумин
                           сух човешки фибриноген
                           или сухи човешки коагулиращи фактори VIII и IX
                        
                     
         
               3.
            
            
               
                           Количество: …
                        
                        
                           ml
                        
                     
         ПРИЛОЖЕНИЕ 10 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   
               1.
            
            
               Име и адрес на производителя: …
            
         
               2.
            
            
               Епруветка
               Епруветка за работа с цяла човешка кръв, повторно свързана суха човешка плазма, човешки албумин, протеинова фракция на човешка плазма,човешки фибриноген или сух или замразен човешки кръвосъсирващ фактор VIII или сух човешки кръвосъсирващ фактор IX.
            
         ПРИЛОЖЕНИЕ 11 КЪМ ПРОТОКОЛА
   СЪВЕТ НА ЕВРОПА
   ЕВРОПЕЙСКО СПОРАЗУМЕНИЕ ОТНОСНО ОБМЕНА НА ТЕРАПЕВТИЧНИ СУБСТАНЦИИ ОТ ЧОВЕШКИ ПРОИЗХОД
   НЕТОКСИЧНОСТ НА ПЛАСТМАСОВИТЕ СЪОРЪЖЕНИЯ ЗА КРЪВОПРЕЛИВАНЕ
   I.   ХИМИЧНИ ТЕСТОВЕ
   Тестовете са предназначени за прилагане върху пластмасови съоръжения за кръвопреливане. Тези съоръжения биват две основни категории:
   
               1.
            
            
               пластмасови съдове за събиране, отделяне и съхранение на кръв и кръвни продукти;
            
         
               2.
            
            
               пластмасови комплекти за вземане и даване на кръв.
            
         Тестовете се извършват върху материалите, след като са стерилизирани чрез метода, който се използва при крайната стерилизация на съоръженията. Настоящите материали включват:
   
               1.
            
            
               пластмасата, използвана за направата на съдовете;
            
         
               2.
            
            
               тръбичките, използвани в съдовете; и
            
         
               3.
            
            
               комплектите за вземане и даване на кръв.
            
         Тестовете върху съдовете се извършват, преди съдовете да са напълнени с разтвор с антикоагулантен ефект. Ако обаче тестовете се извършват върху съдове, които вече са напълнени с разтвор с антикоагулантен ефект, лимит тестовете от част III, предназначени за самия разтвор с антикоагулантен ефект се вземат предвид при оценяване на резултатите от тестовете върху съдовете.
   Производителят на съоръжения за кръвопреливане трябва да предостави на съответните здравни органи информация за подробните формули на пластмасовия материал или материали, използвани за направата на съоръжението, източника на съставните части на материала или материалите и методите на производство (или съответно референтните номера на съставните части), информация за производството на съоръжението, естеството на всеки от добавените материали и лепила при направата, както и метода на стерилизация. Не се разрешава промяна в гореизброените без предизвестие до съответните здравни органи и одобрение от тяхна страна.
   Всяка партида суров материал, който се използва в производството на съоръженията, се идентифицира с номер на партидата, който се записва от производителя на съоръжението заедно с идентификационните номера на всички партиди съоръжения за кръвопреливане, направени от този материал, и резултатите от съответните за тези партиди тестове.
   На всеки етап от производствения процес се вземат всички практически осъществими предпазни мерки за намаляване на риска от случайно заразяване.
   А.   Приготвяне на екстракт и заготовка
   
               а)
            
            
               Пълен тест като описания тук изисква 1 250 cm2 пластмаса (обща повърхнина от двете страни на пластмасовата мостра (лист) с повърхнина на всяка страна 625 cm2). Мострата — без надписи или печати по нея — се реже на парчета от не повече от 10 cm2 всяко.
               За тръбички дължината (L) в cm се изчислява по следната формула:
               където:
               D1= вътрешен диаметър в cm,
               D2= външен диаметър в cm.
               Тръбичката трябва да се среже по дължина на части с размери приблизително 10 cm. За екстракцията се използва 10 ml вода на 50 cm2 повърхнина.
            
         
               б)
            
            
               Парченцата пластмасов филм или тръбичка се поставят в съд от боросиликатно стъкло с 250 ml апирогенна дестилирана вода, получена от продуктивни повърхности и тръбички, все още съдържащи стъклена кондензация (1). Отворът на съда е покрит с обърната стъкленица, съдът се загрява на наситена пара при температура 110 °С в продължение на 30 минути (автоклав), след което бързо се охлажда до стайна температура, като обемът се коригира до 250 ml с апирогенна дестилирана вода. Не е от значение ако пластмасовите частици леко се залепват една за друга.
               Топлочувствителен пластмасов материал, вместо да се загрява на автоклав, може да се загрее при температура от 70 °С в продължение на 72 часа.
               Приготвянето на заготовка се извършва по сходен начин, като се изключи пластмасата.
            
         Б.   Тестове върху екстракта
   1.   Окисляемост
   Към 20 ml от екстракта в ерленмайерова колба от боросиликатно стъкло добавете 20 ml 2 mmol на l разтвор на калиев перманганат и 1,0 ml на 1 mmol на l разтвор на сярна киселина и оставете сместа да ври в продължение на три минути. Бързо охладете разтвора и добавете 0,1 g калиев йодид и пет капки разтвор на скорбяла. Титрувайте с разтвор, съдържащ 10 mmol на l натриев тиосулфат. Едновременно с това извършете титрация на заготовка. Разликата в обема на използвания тиосулфат в двете титрации не превишава 2,00 ml разтвор, съдържащ 10 mmol на l натриев тиосулфат.
   2.   Хлорид
   Екстрактът изпълнява подходящ лимит тест за хлорид, еквивалентен на не повече от 11,2 μmol на l хлорид.
   3.   Амоняк
   Екстрактът изпълнява подходящ тест за амоняк, еквивалентен на не повече от 120 μmol NH3 на l.
   4.   Фосфорна киселина — фосфат
   Екстрактът изпълнява лимит теста за фосфат.
   Лимит тест за фосфат
   Изпарете 25 ml от екстракта почти до сухо състояние в колба за определяне на азота, охладете остатъка, добавете две капки сярна киселина и 1 ml азотна киселина, загрейте сместа до появяването на бели пари, охладете. Добавете една капка хлорна киселина и внимателно загрявайте в продължение на половин час. Охладете остатъка и добавете вода до 25 ml. Прехвърлете 10 ml от разтвора в 25-милилитрова келдалова колба, добавете 8 ml амониев разтвор на молибдат-сярна киселина и 2 ml прясно приготвен разтвор на аскорбинова киселина с концентрация 100 g/l. Загрейте на водна баня до 50 °С в продължение на 30 минути, охладете и разредете сместа до 25 ml. Зеленият или син цвят на разтвора не е по-наситен от този, получен при третиране на 25 ml от разтвора на заготовката по същия начин.
   5.   Киселинност или алкалност
   При добавяне на две капки разтвор фенолфталин към 10 ml екстракт той не се оцветява в червено. За получаване на червен цвят са необходими не повече от 0,4 ml разтвор съдържащ 10 mmol натриев хидроксид на l. След премахване на оцветяването чрез добавяне на 0,08 ml разтвор, съдържащ 10 mmol солна киселина на l, добавянето на пет капки метилов червен разтвор предизвиква появата на червен или оранжевочервен цвят.
   6.   Остатък при изпаряване
   Изпарете 100 ml от екстракта до сухо състояние на водна баня и изсушете при температура 105 °С до постоянно тегло. Остатъкът тежи не повече от 5,0 mg.
   7.   Бистрота и цвят
   Гледан през дебелина от 5 cm, екстрактът е бистър и безцветен при сравнение със заготовката.
   8.   Вкус и мирис
   Сравнен със заготовката, екстрактът е без мирис и вкус.
   9.   Специфични елементи
   Екстрактът изпълнява подходящи тестове за:
   
               i)
            
            
               всеки от следните елементи: арсен, хром, мед, олово, силиций, сребро и калай, еквивалентен на 1μg/g;
            
         
               ii)
            
            
               кадмий, еквивалентен на 0,1 μg/g.
            
         10.   Остатък при запалване
   1,0 g от пластмасовия материал, възпламенен до постоянно тегло, оставя не повече от 1 mg остатък.
   11.   Тежки метали
   Разтворете остатъка от запалването в минималното количество разтвор 2 mol на l солна киселина, загрейте при необходимост. Извършете подходящ лимит тест за тежки метали. Пластмасовият материал покрива лимит, непревишаващ 5 μg на g, изчислено като Pb.
   II.   БИОЛОГИЧНИ ТЕСТОВЕ
   
               1.
            
            
               Извършва се тест за прекомерна токсичност при първоначалната оценка на формули на пластмаса, предназначени за направата на съдове и комплекти за вземане и даване на кръв, като се използва екстракт А, а за всяка нова партида материали от одобрените формули, като се използва екстракт B, по процедурата, посочена в националната фармакопея или друг метод, одобрен от националните контролни органи. (Екстракти А и Б са описани в бележката по-долу.)
            
         
               2.
            
            
               Извършва се тест за апирогенност при първоначалната оценка на формули на пластмаса, предназначени за производство на съдове и комплекти за вземане и даване на кръв, като се използва екстракт А, а за всяка нова партида материали от одобрените формули, като се използва екстракт В по процедура, посочена в националната фармакопея или друг метод, одобрен от националните контролни органи.
               Обсегът на тестването за апироген, като се използва екстракт С, се определя от националните контролни органи. (Екстракти А и Б са определени в бележката по-долу.)
            
         
               3.
            
            
               Провежда се тест за хемолитични ефекти в буферни системи при първоначалното оценяване на формули на пластмаса, предназначени за производство на съдове и комплекти за вземане и даване на кръв и за всяка нова партида материали от одобрените формули, като се използва екстрактът, описан в точка I.А по-горе. (За метода и допустимия лимит, виж допълнението към настоящото приложение).
            
         
               4.
            
            
               Провежда се тест за издръжливостта на червени клетки in vivo при първоначалното оценяване на формули на пластмаса, предназначени за производство на съдове за кръв. При промяна в съгласуваните формули тестът се повтаря. (За предложения за методи и допустим лимит виж в допълнението към настоящото приложение.)
            
         Бележка:
   Екстракт А
   се получава, като към описания в точка I.А по-горе екстракт се добави апирогенен натриев хлорид до получаване на крайна концентрация 9 g на l.
   Екстракт B
   Съд за кръвопреливане. Напълнете съда за кръвопреливане догоре със стерилен апирогенен разтвор, съдържащ 9 g натриев хлорид на l, затегнете здраво скобите и потопете пълния съд изцяло във вода в продължение на един час, като поддържате температура от 85 °С.
   Пластмасов съд. Ако съдът е пълен с разтвор с антикоагулантен ефект, трябва да се изпразни и изплакне два пъти с количества от 250 ml стерилна апирогенна дестилирана вода при температура от 20 °С. Напълнете съда със 100 ml стерилен неприогенен разтвор, съдържащ 9 gа натрием хлорид на l, затворете плътно и потопете за един час в хоризонтално положение във вода, като поддържате температура от 85 °С. Съберете съдържанието на съда.
   Екстракт В
   Съд за кръвопреливане. Прокарайте 40-милилитрови количества стерилен апирогенен разтвор на натриев хлорид с концентрация 9 g на l при стайна температура през не повече от 10 съда за кръвопреливане при сила на струята приблизително 10 ml на минута и изтеглете отточното съдържание. Тествайте получения разтвор.
   Пластмасов съд. Изпразнете. Прокарайте 100-милилитрови количества стерилен апирогенен разтвор, съдържащ 9,0 g натриев хлорид на l, при стайна температура през тръбичките на не повече от четири пластмасови съда, оставете да престои в съдовете за 10 минути и изтеглете отточното съдържание, като го отстранявате през тръбичките. Тествайте получения разтвор.
   Пластмасов съд с антикоагулант (виж точка III).
   III.   ИЗИСКВАНИЯ ЗА РАЗТВОР С АНТИКОАГУЛАНТЕН ЕФЕКТ В ПЛАСТМАСОВИ СЪДОВЕ
   Всеки съд съдържа количеството и формулата разтвор с антикоагулантен ефект, посочени на етикета за обема на кръвта, която ще се вземе.
   Разтворът с антикоагулантен ефект и/или съставките, използвани при неговото приготвяне, отговарят на изискванията на националната фармакопея на съответната страна.
   Разтворът с антикоагулантен ефект отговаря на изискванията на националната фармакопия на съответната страна по отношение лимитите на тежки метали, отсъствието на определени вещества, нетоксичност и апирогенност.
   
      (1)  В случай че пластмасата е била в контакт с разтвор антикоагулантен ефект, парченцата първо се поставят в подобен съд със студена дестилирана вода (100 ml) и се разклащат няколко пъти. Това се повтаря още веднъж.
   Допълнение
   
      БИОЛОГИЧЕН ТЕСТ: ЛИМИТИ И МЕТОДИ
      А.   Тест за прекомерна токсичност
      (Виж точка II, 1 от приложението по-горе): лимит, както е посочен в националната фармакопея.
      Б.   Тест за апирогенност
      (Виж точка II, 2 от приложението по-горе): лимит, както е посочен в националната фармакопея.
      В.   Тест за хемолитични ефекти в буферни системи
      (Виж точка II, 3 от приложението по-горе):
      
                  а)
               
               
                  
                     Лимит:
                  Солен разтвор, еквивалентен на разтвор съдържащ 5,0 g NaCl на l, по отношение на електролитно осмотично действие, не произвежда хемолитична стойност, по-висока от 10 %, а солен разтвор от 4,0 g на l не се различава с повече от 10 % в хемолитичната си стойност от тази на съответстващия контролен разтвор.
               
            
                  б)
               
               
                  
                     Метод:
                  От първоначалния буферен изходящ разтвор за хемолиза се приготвят три разтвора: 30 ml буферен изходящ разтвор и 10 ml вода (разтвор aо), 30 ml буферен изходящ разтвор и 20 ml вода (разтвор bо), и 15 ml буферен изходящ разтвор и 85 ml вода (разтвор cо).
                  Към всяка от трите центрофугиращи тръбички (1, 2 и 3) се добавя 1,40 ml екстракт. Към тръбичка 1 се добавя 0,10 ml aо, към тръбичка 2 — 0,10 ml bо, а към тръбичка 3 — 0,10 ml cо, като по този начин се получават разтвори на сол, еквивалентни на разтвори, съдържащи 5,0 (тръбичка 1), 4,0 (тръбичка 2) и 1,0 g NaCl на l (тръбичка 3) по отношение на електролитното осмотично действие. Към всяка тръбичка се добавя 20 μl хепаринизирана човешка кръв. Тръбичките се оставят на водна баня при температура 30 °С (±1 °С) за 40 минути. След това се приготвят трите разтвора, съдържащи 3,0 ml aо и 12,0 ml вода (разтвор α1), 4,0 ml bо и 11,0 ml вода (разтвор β1) и 4,75 ml bо и 10,25 ml вода (разтвор γ1).
                  Към първата тръбичка се добавя 1,50 ml от а1, към втората — 1,50 ml от b1, а към третата 1,50 ml от c1. Тръбичките се центрофугират за пет минути при 2 000 до 2 500 оборота в минута. Едновременно с това за всяка от концентрациите се приготвя контролен разтвор, в който екстрактът е заменен с вода. Наблюдава се изчезване на течния слой при 540 nm. Буферен изходящ разтвор за хемолиза се използва като заготовка. Стойността на хемолиза в процентно съдържание се изчислява по следната формула:
                  където:
                  E 100 %= изчезване на разтвора, еквивалентен на 1,0 g сол на l
                  и
                  E exp= изчезване на разтворите, еквивалентни съответно на 4,0 и 5,0 g сол на l
               
            Буферен изходящ разтвор за хемолиза
      90,0 g натриев хлорид, 13,7 g безводен двунатриев фосфат и 1,90 g безводен натриев фосфат се разтварят в дестилирана вода до 1 000,0 ml.
      Г.   Тест за издръжливост in vivo на червени клетки
      (Виж точка II, 4 от приложението по-горе):
      
                  а)
               
               
                  
                     Лимит:
                  От еритроцитите на цяла човешка кръв с ACD антикоагулант, съхранявана в продължение на 21 дни при температура от 4 °С до 6 °С, поне 70 % се запазват 24 часа след кръвопреливане. Това се определя съгласно един от методите, предложени в буква б) по-долу.
               
            
                  б)
               
               
                  
                     Предложения за методи
                  
                  
                              1.
                           
                           
                              Метод от ISO/TC/76/WGD/3, App. E.
                           
                        
                              2.
                           
                           
                              Техника на Ашби — У. Ашби. Определяне продължителността на живот на кръвни телца в прелята кръв при човека.
                              J. Exp. Med. 29: 267—82. 1919.
                              Йънг. Л.А., Платцер. Р.Ф. и Рафърти, Дж.А. Диференциална аглутинация на човешки еритроцити.
                              J. Lab. Clin. Med. 32: 489—501, 1947.
                           
                        
                              3.
                           
                           
                              Метод на Гибсън-Шейтлин — Дж. Г. Гибсън и В.А. Шейтлин. Метод, използващ радиоактивен хром за установяване жизнеността на човешки еритроцити, върнати в кръвообращение след замразено съхранение.
                              J. Lab. Clin. Med. 46: 679—88, 1955.
                           
                        
                              4.
                           
                           
                              Методът на Струмиа — М.М. Струмиа, Л. Тейлър, А.Б. Семпъл, Л.С. Колуел и А. Дъгън. приложения и ограничения на изследванията за издръжливост на еритроцитите съединени с Cr 51.
                              Blood 10: 429—40, 1995.
                           
                        
                              5.
                           
                           
                              Техника Cr51 — I125 — Л.Н. Бътън, Дж.Г. Гибсън, К.У. Уолтър. Едновременно определяне на обема на червени клетки и плазма за изследване издръжливостта на съхранявана кръв.
                              Transfusion 5: 143—48, 1965.
                           
                        
                              6.
                           
                           
                              Препоръчителен метод за радиоизотопни изследвания на издръжливостта на червени клетки Брит Джей Хаймат. 21: 241, 1971.
                           
                        
            
         Съставено в Страсбург на 19 април 1982 година.
         
            Franz ARASEK
            
            
               Генерален секретар
            
         
         
            Заверено копие на единствения оригинален документ на английски и френски език, депозиран в архивите на Съвета на Европа.
            Erik HARREMOES
            
            
               Директор „Правни въпроси“ на Съвета на Европа