CELEX: 51987EC4154
Language: fi
Date: 2007-02-16
Title: Luonnos Komission asetus (EY) n:o …/… annettu […] tietyistä maataloustuotteista valmistettuja tavaroita koskevan tuontijärjestelmän soveltamiseksi tarvittavista analyysimenetelmistä ja muista teknisistä säännöksistä (Kodifioitu toisinto)

FI

|[pic]                     |EUROOPAN YHTEISÖJEN KOMISSIO                                                                                     |

                                        Bryssel
                                        K(2007)

                                                                     Luonnos

                                                          KOMISSION ASETUS (EY) N:o …/…

                                                                   annettu […]

  tietyistä maataloustuotteista valmistettuja tavaroita koskevan tuontijärjestelmän soveltamiseksi tarvittavista analyysimenetelmistä ja muista
                                                             teknisistä säännöksistä

                                                              (Kodifioitu toisinto)

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

                                                                     Luonnos

                                                          KOMISSION ASETUS (EY) N:o …/…

                                                                   annettu […]

                                         tietyistä maataloustuotteista Ö valmistettuja tavaroita koskevan
                  tuonti Õ järjestelmän soveltamiseksi tarvittavista Ö määritys Õ menetelmistä ja muista teknisistä säännöksistä

EUROOPAN YHTEISÖJEN KOMISSIO, joka

ottaa huomioon Euroopan yhteisön perustamissopimuksen,

ottaa huomioon tariffi- ja tilastonimikkeistöstä ja yhteisestä tullitariffista 23 päivänä heinäkuuta 1987 annetun neuvoston asetuksen  (ETY)  N:o
2658/87[1] ja erityisesti sen 9 artiklan,

sekä katsoo seuraavaa:

                                            ê 

   1) Tietyistä  maataloustuotteista  valmistettuihin  tavaroihin  sovellettavasta  kauppajärjestelmästä  annetun  asetuksen  (ETY)  N:o  3033/80
      soveltamiseksi tarvittavista analyysimenetelmistä ja muista teknisistä säännöksistä 22 päivänä joulukuuta 1987 annettua komission  asetusta
      (ETY) N:o 4154/87[2] on muutettu huomattavilta osilta[3]. Sen vuoksi olisi selkeyden ja järkeistämisen takia kodifioitava mainittu asetus.

                                            ê 203/98 johdanto-osan 1 kappale ja 4154/87 johdanto-osan 3 kappale (mukautettu)

   2) Ö Tiettyihin maataloustuotteiden valmistuksessa tuotettuihin tavaroihin sovellettavasta  kauppajärjestelmästä  6  päivänä  joulukuuta  1993
      annetun neuvoston asetuksen Õ (EY) N:o 3448/93[4] Ö soveltamisalaan kuuluvien tavaroiden yhdenmukaisen kohtelun  varmistamiseksi  yhteisöön
      tuonnin yhteydessä olisi määriteltävä  määritysmenetelmät  ja  muut  teknisluonteiset  säännökset  ottaen  huomioon  tieteen  ja  tekniikan
      kehitys. Õ

                                            ê 4154/87 johdanto-osan 4 kappale (mukautettu)

   3) Tässä asetuksessa säädetyt toimenpiteet ovat Ö tullikoodeksikomitean tariffi- ja tilastonimikkeistöjaoston Õ lausunnon mukaiset,

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

ON ANTANUT TÄMÄN ASETUKSEN:

                                                                    1 artikla

Tässä asetuksessa määritellään asetuksen (EY) N:o Ö 3448/93 Õ (tuonnin osalta) ja Ö komission Õ asetuksen (EY) N:o Ö 1460/96[5] Õ  soveltamiseksi
tarvittavat Ö määritys Õ menetelmät tai Ö määritys Õ menetelmän puuttuessa noudatettavien Ö määritys Õ toimenpiteiden  luonne  tai  sovellettavan
menetelmän periaate.

                                                                    2 artikla

Asetuksen (EY) N:o Ö 1460/96 Õ liitteessä III esitettyjen  tärkkelys/glukoosipitoisuuteen,  ja  sakkaroosi/inverttisokeri/isoglukoosipitoisuuteen
liittyvien  määritelmien  mukaisesti  ja  mainitun  asetuksen  liitteiden   II   ja   III   soveltamiseksi   Ö tärkkelys/glukoosipitoisuuden   ja
sakkaroosi/inverttisokeri/isoglukoosipitoisuuden määrittämiseen Õ käytetään seuraavia kaavoja, menettelyjä ja menetelmiä:

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

1.    Tärkkelys/glukoosipitoisuus

      (sellaisenaan olevan tavaran 100 % tärkkelyspitoisuutena ilmaistuna)

       a)   (Z − F) × 0,9,

            kun glukoosipitoisuus on vähintään yhtä suuri kuin fruktoosipitoisuus, tai

       b)   (Z − G) × 0,9,

            kun glukoosipitoisuus on pienempi kuin fruktoosipitoisuus

      kun:

|Z     |=     |tämän asetuksen liitteessä I kuvatulla menetelmällä määritetty Ö glukoosipitoisuus Õ;                |
|F     |=     |HPLC:lla (suuren erotuskyvyn nestekromatorafia) Ö määritetty fruktoosipitoisuus Õ;                   |
|G     |=     |HPLC:lla määritetty Ö glukoosipitoisuus Õ.                                                           |

      Kun laktoosihydrolysaatin esiintyminen on a alakohdan mukaisesti ilmeinen ja/tai  havaitaan  galaktoosimääriä,  Ö (HPLC:lla  määritettyä) Õ
       galaktoosipitoisuutta vastaava Ö (HPLC:lla määritetty) Õ glukoosipitoisuus vähennetään glukoosin  kokonaispitoisuudesta  (Z)  ennen  muita
       laskutoimenpiteitä.

2.    Sakkaroosi/inverttisokeri/isoglukoosipitoisuus

      (sellaisenaan olevan tavaran sakkaroosipitoisuutena ilmaistuna)

       a)   S + (2F) × 0,95,

            kun glukoosipitoisuus on vähintään yhtä suuri kuin fruktoosipitoisuus;

       b)   S + (G + F) × 0,95,

            kun glukoosipitoisuus on pienempi kuin fruktoosipitoisuus

      kun:

|S     |=     |Ö HPLC:lla määritetty Õ sakkaroosipitoisuus;                              |
|F     |=     |Ö HPLC:lla määritetty Õ fruktoosipitoisuus ä;                             |
|G     |=     |Ö HPLC:lla määritetty Õ glukoosipitoisuus.                                |

      Kun laktoosihydrolysaatin esiintyminen on  ilmeinen  ja  /tai  havaitaan  laktoosi-  ja  galaktoosimääriä,  galaktoosipitoisuutta  vastaava
       glukoosipitoisuus (HPLC:lla määritettynä) vähennetään glukoosipitoisuudesta (G) ennen muita laskutoimenpiteitä.

                                            ê 203/98 1 art. (mukautettu)

3.    Maitorasvapitoisuus

       a)   Jollei Ö b Õ alakohdan säännöksistä muuta johdu, sellaisenaan olevan tavaran maitorasvapitoisuus on  määritettävä  vetykloridihapolla
           tapahtuvan hydrolyysin jälkeen tapahtuvalla uuttomenetelmällä.

       b)   Kun tavaran koostumuksesta ilmoitetaan myös muita rasvoja kuin maitorasvoja, sovelletaan seuraavaa menettelyä:

              – määritetään a alakohdan mukaisesti sellaisenaan olevan tavaran kokonaisrasvapitoisuus painoprosentteina,

              – maitorasvat  määritetään  käyttäen  petrolieetterillä  tapahtuvaa  uuttomenetelmää,  jota  edeltää  vetykloridihapolla  tapahtuva
                hydrolyysi ja jota edelleen seuraa rasvahappojen  metyyliestereiden  käyttö  kaasukromatografiaan.  Jos  maitorasvoja  havaitaan,
                niiden suhteellinen osuus lasketaan kertomalla  metyylibutyraatin  suhteellinen  osuus  25:llä,  ja  näin  saatu  arvo  kerrotaan
                sellaisenaan olevan tavaran kokonaisrasvapitoisuuden painoprosentilla ja jaetaan 100:lla.

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

4.    Maitovalkuaispitoisuus

       a)   Jollei b alakohdan säännöksistä muuta johdu, sellaisenaan olevan  tavaran  maitovalkuaispitoisuus  lasketaan  kertomalla  (Kjeldahlin
           menetelmällä määritetty) typpipitoisuus ) tekijällä 6,38.

       b)   Kun tavaran koostumuksesta ilmoitetaan myös muita kuin maitovalkuaista sisältäviä ainesosia:

              – kokonaistyppipitoisuus Ö painoprosentteina Õ määritetään Kjeldahlin menetelmällä,

              – maitovalkuaispitoisuus lasketaan a  alakohdan  mukaisesti  vähentämällä  kokonaistyppipitoisuudesta  muita  kuin  maitovalkuaista
                vastaava typpipitoisuus.

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

                                                                    3 artikla

Asetuksen (EY) N:o Ö 1460/96 Õ liitteen I Ö soveltamiseksi Õ käytetään seuraavia menetelmiä ja/tai menettelyjä:

1.     Ö CN-koodeihin Õ  0403 10 51-0403 10 59,  0403 10 91-0403 10 99,  0403 90 71-0403 90 79  ja  0403 90 91-0403 90 99  kuuluvien   tavaroiden
       luokitustarkoituksiin määritetään maitorasvapitoisuus tämän asetuksen 2 artiklan 3 kohdassa tarkoitetulla menetelmällä;

2.      Ö CN-koodeihin Õ   1704 10 11–1704 10 99   ja    1905 20 10–1905 20 90    kuuluvien    tavaroiden    luokitustarkoituksiin    määritetään
       sakkaroosipitoisuus,  sakkaroosina  ilmaistu  inverttisokeri  mukaanlukien,  HPLC-menetelmällä;  (sakkaroosina   ilmaistu   inverttisokeri
       tarkoittaa yhtä suurten glukoosi- ja fruktoosimäärien summaa kerrottuna luvulla 0,95);

3.     Ö CN-koodeihin Õ  1806 10 10–1806 10 90  kuuluvien  tavaroiden  luokitustarkoituksiin  määritetään  sakkaroosi/inverttisokeri/isoglukoosi-
       pitoisuus tämän asetuksen 2 artiklan 2 kohdassa annetun kaavan, menetelmän ja menettelyjen mukaisesti;

4.    Ö CN-koodeihin Õ  3505 20 10–3505 20 90  kuuluvien  tavaroiden  luokitustarkoituksiin  määritetään  tärkkelyksen,  dekstriinin  tai  muiden
       muunnettujen tärkkelysten pitoisuus tämän asetuksen liitteessä II annetulla menetelmällä;

5.     Ö CN-koodeihin Õ  3809 10 10–3809 10 90  kuuluvien  tavaroiden  luokitustarkoituksiin  määritetään  amylaasiset  aineet  tämän   asetuksen
       liitteessä II annetulla menetelmällä;

6.    Joko Ö CN-koodiin Õ 1901 90 11 tai  Ö CN-koodiin Õ  1901 90 19  kuuluvien  tavaroiden  luokitustarkoituksiin  tehdään  ero  kuiva-aineeseen
       perustuen määritettynä kuivauksella 103 ± 2 °C lämpötilassa vakiopainoon;

7.    Ö CN-koodeihin Õ 1902 19 10 ja 1902 19 90 kuuluvien tavaroiden luokitustarkoituksiin käytetään  tämän  asetuksen  liitteessä  III  annettua
       menetelmää makaronivalmisteissa esiintyvien tavallisesta vehnästä valmistettujen jauhojen ja suurimoiden esiintymisen testaamiseksi;

8.    Ö CN-koodeihin Õ 2905 44 11-2905 44 59 ja 3823 60 11-3823 60 99 kuuluvien tavaroiden sisältämän  mannitolin  ja  D-glusitolin  (sorbitolin)
       osuus määritetään HPLC:lla.

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

                                                                    4 artikla

1. Laaditaan Ö määritys Õ seloste.

2. Ö Määritys Õ selosteessa on oltava erityisesti:

     – kaikki näytteen tunnistamiseen liittyvät tiedot,

     – käytetty  yhteisön  menetelmä  ja  tarkka  viittaus  oikeudelliseen  asiakirjaan,  jossa  siitä  on  säädetty  tai  tarvittaessa  viittaus
       yksityiskohtaiseen menetelmään, jossa on eritelty tässä asetuksessa esitettyjen  noudatettavien  Ö määritys Õ  toimenpiteiden  luonne  tai
       sovellettavan menetelmän periaate,

     – tuloksiin mahdollisesti vaikuttaneet tekijät,

     – Ö määritys Õ tulokset ottaen huomioon käytetyssä menetelmässä  sovellettu  ilmaisumuoto  sekä  Ö määrittämistä Õ  pyytäneiden  tulli-  tai
       hallintoviranomaisten tarpeiden saneleman ilmaisumuoto.

                                                                    5 artikla

                                            ê 

Kumotaan asetus (ETY) N:o 4154/87.

Viittauksia kumottuun asetukseen pidetään viittauksina tähän asetukseen liitteessä V olevan vastaavuustaulukon mukaisesti.

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

                                                                    6 artikla

Tämä asetus tulee voimaan Ö kahdentenakymmenentenä päivänä sen jälkeen, kun se on julkaistu Euroopan unionin virallisessa lehdessä Õ.

Tämä asetus on kaikilta osiltaan velvoittava, ja sitä sovelletaan sellaisenaan kaikissa jäsenvaltioissa.

Tehty Brysselissä […]

      Komission puolesta
      […]
      Komission jäsen

                                            ê 4154/87 (mukautettu)

                                                                     LIITE I

                       TÄRKKELYSPITOISUUDEN JA Ö TÄRKKELYKSEN Õ HAJOAMISTUOTTEIDEN Ö , GLUKOOSI MUKAAN LUETTUNA, Õ MÄÄRITYS

1     Tarkoitus ja soveltamisala

       a)   Menetelmällä on mahdollista määrittää  tärkkelyspitoisuus  Ö sekä  sen  hajoamistuotteiden  pitoisuus,  glukoosi  mukaan  luettuna Õ,
           jäljempänä ”tärkkelys”.

       b)   Edellä a alakohdassa tarkoitettu ”tärkkelys” pitoisuus on yhtä suuri kuin arvo E laskettuna  tämän  liitteen  6  kohdan  a  alakohdan
           mukaisesti.

2     Periaate

       Näyte  hajotetaan  natriumhydroksidilla  ja  tärkkelys  jaetaan  glukoosiyksiköihin  amyloglukosidaasin   avulla.   Glukoosi   määritetään
       entsymaattisesti.

3     Reagenssit

      (Käytetään kahdesti tislattua vettä.)

3.1   0,5 N Natriumhydroksidiliuos (0,5 mol/l).

3.2   (vähintään) 96 % jääetikka.

3.3   Amyloglukosidaasiliuos:

      Välittömästi ennen käyttöä liuotetaan noin 10 mg amyloglukosidaasia (EC 3.2.1.3) (6 U/mg) 1 millilitraan vettä[6].

3.4   Trietanoliamiinipuskuriliuos:

       Liuotetaan 14,0 g trietanoliamiinihydrokloridia  [tris(2-hydroksietyyli)ammoniumkloridi]  ja  0,25 g   magnesiumsulfaattia   (MgSO4 7 H2O)
       80 ml:aan vettä, lisätään noin 5 ml 5 N natriumhydroksidiliuosta (5 mol/l) ja säädetään pH:ksi 7,6 1 N natriumhydroksidiliuosta  (1 mol/l)
       käyttäen.

      Täytetään 100 ml:ksi vedellä. Puskuriliuosta voidaan säilyttää vähintään 4 viikkoa 4 °C:ssa.

3.5   NADP (nikotinamidiadeniinidinukleotidifosfaatti, dinatriumsuola) -liuos:

      Liuotetaan 60 mg NADP 6 ml:aan vettä. Tätä liuosta voidaan säilyttää Ö vähintään Õ neljä viikkoa 4 °C:ssa.

3.6   ATP (adenosiini-5'-trifosfaatti, dinatriumsuola) -liuos:

      Liuotetaan 300 mg ATP, 3H2O ja 300 mg natriumvetykarbonaattia (NaHCO3) 6 ml:aan  vettä.  Liuosta  voidaan  säilyttää  vähintään  4  viikkoa
       4 °C:ssa.

3.7   HK/G6P-DH [Heksokinaasi (EC 2.7.1.1) ja glukoosi-6-fosfaatti-dehydrogenaasi (EC 1.1.1.49)]-suspensio:

      suspendoidaan 280 U HK ja 140 U G6P-DH 1 ml:ssa 3,2 M ammoniumsulfaattiliuosta. Suspensiota voidaan säilyttää vähintään vuosi 4 °C:ssa.

4     Välineistö

4.1   Magneettisekoittaja vesihauteessa 60 °C:ssa.

4.2   Magneettisauvoja.

4.3   UV-spektrofotometri 1 cm optisin kyvetein.

4.4   Pipettejä entsymaattista määritystä varten.

5     Menetelmä

5.1   Näyte pestään etanolilla, uutetaan lämmittäen natriumhydroksidilla ja ”tärkkelys” hydrolysoidaan entsymaattisesti:

5.1.1 Näytteen paino valitaan seuraavasti  oletetun  ”tärkkelys”pitoisuuden  (”tärkkelys”pitoisuus  saa  olla  enintään  0,4 g  näytettä  kohden)
       mukaisesti:

|Tuotteen oletettu              |Näytteen paino grammoina noin|Mittapullon tilavuus,         |Laimennoskerroin yhdeksi      |
|”tärkkelys”pitoisuus,          |(p)                          |ml                            |litraksi                      |
|g/100 g                        |                             |                              |(f)                           |
|> 70                           |0,35–0,4                     |500                           |2                             |
|20-70                          |enintään 0,5                 |500                           |2                             |
|5-20                           |enintään 1                   |250                           |4                             |
|< 5                            |enintään 2                   |200                           |5                             |

5.1.2 Punnitaan näytettä täsmälleen 0,1 mg.

5.1.3  Lisätään  50 ml  0,5 N  natriumhydroksidiliuosta  (3.1  kohta)  ja  sekoitetaan  jatkuvasti  30  minuuttia   vesihauteessa   (4.1   kohta)
       magneettisekoittajalla 60 °C:ssa.

5.1.4 Lisätään muutama ml väkevää etikkahappoa (3.2 kohta) ja saatetaan pH:ksi 4,6–4,8.

5.1.5 Asetetaan vesihauteeseen magneettisekoittajan kanssa (4.1 kohta) 60 °C:seen,  lisätään  1,0 ml  entsyymiliuosta  (3.3  kohta)  ja  annetaan
       reagoida samalla jatkuvasti sekoittaen 30 minuuttia.

5.1.6 Jäähdytyksen jälkeen siirretään kvantitatiivisesti mittapulloon (5.1.1 kohta) ja täytetään merkkiin vedellä.

5.1.7 Tarvittaessa suodatetaan laskostetun suodattimen läpi (ks. huomautus 1).

5.2.  Glukoosin kvantitatiivinen määritys:

5.2.1 Koeliuoksessa on oltava 100–1 000 mg glukoosia litraa kohden, mikä vastaa ΔE340 -arvoa 0,1–1,0.

      Koeliuoksen absorbanssi laimennoksena 1 + 30 veden kanssa ei saa olla suurempi  kuin  0,4  (mitattuna  suhteessa  ilmaan)  aallonpituudella
       340 nm.

5.2.2 Saatetaan puskuriliuos (3.4) huoneenlämpöiseksi (20 °C).

5.2.3 Reagenssien ja näytteen lämpötilan on oltava 20–25 °C.

5.2.4 Mitataan absorbanssi aallonpituudella 340 nm suhteessa ilmaan (eli vertailuvälissä ei optista kyvettiä).

5.2.5 Pipetoidaan seuraavan taulukon mukaisesti:

|Kaadetaan optisiin kyvetteihin:                  |Kontrolli                       |Koe                                      |
|                                                 |(ml)                            |(ml)                                     |
|Puskuriliuos (3.4 reagenssi)                     |1,00                            |1,00                                     |
|NADP (3.5 reagenssi)                             |0,10                            |0,10                                     |
|ATP (3.6 reagenssi)                              |0,10                            |0,10                                     |
|Koeliuos (5.1.6 tai 5.1.7)                       |-                               |0,10                                     |
|Kahdesti tislattu vesi                           |2,00                            |1,90                                     |
|Sekoitetaan ja noin 3 minuutin kuluttua mitataan liuosten absorbanssi (E1). Aloitetaan reaktio lisäämällä:                 |
|HK/G6P-DH (3.7 reagenssi)                        |0,02                            |0,02                                     |
|Sekoitetaan, annetaan reaktion edetä loppuun (noin 15 minuuttia) ja mitataan liuosten absorbanssi (E2). Ö Otetaan huomioon |
|mahdolliset jatkoreaktiot. Õ                                                                                               |
|Jos reaktio ei ole pysähtynyt 15 minuutin kuluttua, absorbanssit luetaan 5 minuutin välein, kunnes nousunopeus on vakio.   |
|Tämän jälkeen ekstrapoloidaan taaksepäin 3.7 kohdassa tarkoitetun suspension lisäämishetkeen (ks. huomautus 2).            |

5.2.6 Lasketaan absorbanssierot nollareagenssille ja näytteelle (E2−E1).

      Vähennetään nollareagenssin absorbanssiero (ΔEnollareagenssi) näytteen vastaavasta (ΔEnäyte):

                                                         ΔE = ΔEnäyte − ΔEnollareagenssi

      Tämä erotus antaa koeliuoksen glukoosipitoisuuden:

                                                   Koeliuoksen sisältämä glukoosipitoisuus, g/l

                                      Gl = ((3,22 × 180,16)/(6,3 × 1 × 0,1 × 1 000)) × ΔE340 = 0,921 × ΔE340

       (3,22: mitattavan liuoksen tilavuus; 1: kyvetin paksuus; 0,1: näyteliuoksen tilavuus; Glukoosin moolimassa on 180,16 (g/mol).

5.2.7 Jos mittausta ei jostakin syystä voida tehdä aallonpituudella 340 nm, se  voidaan  tehdä  aallonpituudella  365 nm  tai  334 nm,  luku  6,3
       edellisessä Gl:n kaavassa on sitten korvattava luvulla 3,5 tai vastaavasti luvulla 6,18.

6     Laskutapa ja tulosten ilmaiseminen

       a)   E = ”Tärkkelys”pitoisuus ilmaistuna g/100 g:

                                                             E = ((100 × 0,9 × Gl)/(p × f))

       b)   Z = ”Glukoosi” pitoisuus ilmaistuna g/100 g:

                                                                Z = ((100 × Gl)/(p × f))

       joissa

|Gl      |=       |glukoosi ilmaistuna g/l (5.2.6);                                                |
|f       |=       |laimennoskerroin (5.1.1);                                                       |
|p       |=       |näytteen paino grammoina;                                                       |
|0,9     |=       |glukoosin muunnoskerroin tärkkelykseksi.                                        |

Huomautukset:

1)    Jos koeliuosta ei voida suodattaa 5.1.7 kohdan mukaisesti, on tehtävä asianmukaiset toimenpiteet.

2)    Jos esiintyy entsyymien inhibitiota, suositellaan käytettäväksi menetelmää, jossa lisätään tunnettuja määriä puhdasta tärkkelystä.

                                                                  _____________

                                                                     LIITE II

  Ö CN-KOODEIHIN Õ 3505 20 10–3505 20 90 KUULUVIEN TAVAROIDEN TÄRKKELYSTEN TAI DEKSTRIINIEN TAI MUIDEN MUUNNETTUJEN TÄRKKELYSTEN PITOISUUDEN JA
                      Ö CN-KOODEIHIN Õ 3809 10 10–3809 10 90 KUULUVIEN TAVAROIDEN AMYLAASISTEN AINEIDEN PITOISUUDEN MÄÄRITYS

I     Periaate

      Tärkkelys muutetaan happohydrolyysilla pelkistäviksi sokereiksi, jotka määritetään tilavuuteen perustuen Fehlingin liuosta käyttäen.

II    Välineistö ja reagenssit

       1.   Ö Noin Õ 250 ml Ö :n Õ pullo;

       2.   200 ml mittapullo;

       3.   25 ml mittabyretti;

       4.   Vetykloridihappo, tiheys 1,19;

       5.   Kaliumhydroksidiliuos;

       6.   Väriä poistava puuhiili;

       7.   Fehlingin liuos;

       8.   Metyleenisininen liuos (1 %).

III   Menetelmä

      Noin 1 g tärkkelystä sisältävä näyte laitetaan 250 ml:n pulloon. Lisätään 100 ml  tislattua  vettä  ja  2 ml  vetykloridihappoa.  Saatetaan
       kiehuvaksi ja refluksoidaan 3 tuntia.

      Siirretään pullon sisältö ja huuhtelunesteet 200 ml:n mittapulloon. Jäähdytetään ja tehdään lähes neutraaliksi  kaliumhydroksidiliuoksella.
       Lisätään tislattua vettä 200 ml:ksi ja suodatetaan pienen määrän väriä poistavan puuhiilen läpi.

      Tämän jälkeen liuos kaadetaan mittabyrettiin ja pelkistetään 10 ml Fehlingin liuosta seuraavalla menetelmällä:

      Noin 250 ml:n tasapohjaiseen pulloon kaadetaan 10 ml Fehlingin liuosta (5 ml liuosta A ja 5 ml liuosta B).  Ravistetaan,  kunnes  liuos  on
       kirkas ja lisätään 40 ml tislattua vettä ja pieni määrä kvartsia tai hohkakiveä.

      Asetetaan pullo neliön muotoiselle asbestilevylle, jossa on halkaisijaltaan noin 6 cm pyöreä reikä keskellä,  asbestin  ollessa  puolestaan
       metallilankaverkkopalan päällä. Kuumennetaan pulloa sellaisella nopeudella, että neste alkaa kiehua noin 2 minuutin kuluttua.

      Byretistä lisätään kiehuvaan nesteeseen vähitellen sokeriliuosta, kunnes  Fehlingin  liuoksen  sininen  väri  tulee  tuskin  havaittavaksi;
       sitten lisätään 2 tai  3  pisaraa  metyleenisinistä  liuosta  indikaattoriksi  ja  titrataan  loppuun  lisäämällä  edelleen  sokeriliuosta
       tipoittain, kunnes indikaattorin sininen väri häviää.

      Suurempaa tarkkuutta varten toistetaan titraus samoissa olosuhteissa, mutta  lisäämällä  katkoitta  lähes  koko  määrä  Fehlingin  liuoksen
       pelkistämiseksi tarvittavasta sokeriliuoksesta. Tässä toisessa titrauksessa Fehlingin liuoksen olisi pelkistyttävä 3 minuutissa. Jatketaan
       kiehuttamista edelleen täsmälleen 2 minuuttia lisäten reagenssi minuutissa tipoittain kiehuvaan liuokseen, kunnes sininen väri katoaa.

      Näytteen sisältämän tärkkelyksen painoprosentti määritetään seuraavalla kaavalla:

                                                 % tärkkelystä = ((T × 200 × 100)/(n × p)) × 0,95

       jossa:

|T         |=     |on vedettömän dekstroosin määrä grammoina, joka vastaa 10 ml Fehlingin liuosta (5 ml liuosta A ja 5 ml     |
|          |      |liuosta B). Tämä tiitteri vastaa 0,04945 g vedetöntä dekstroosia, kun liuos A sisältää 17,636 g kuparia    |
|          |      |litraa kohden;                                                                                             |
|n         |=     |on titraukseen käytetyn sokeriliuoksen ml-määrä;                                                           |
|p         |=     |on näytemäärän paino;                                                                                      |
|0,95      |=     |on vedettömän dekstroosin muunnostekijä tärkkelykseksi.                                                    |

IV    Fehlingin liuosten valmistus

|Liuos A:         |Mittapullossa liuotetaan 69,278 g puhdasta kiteistä kuparisulfaattia - analyysilaatua (CuSO4 · 5 H2O) -    |
|                 |jossa ei ole rautaa, veteen ja täytetään tilavuudeksi 1 litra tislatulla vedellä. Tämän liuoksen           |
|                 |täsmällinen pitoisuus on tarkastettava kuparin kvantitatiivisella määrityksellä.                           |
|Liuos B:         |Mittapullossa liuotetaan 100 g natriumhydroksidia ja 346 g natriumkaliumtartraattia (Rochellen suolaa)     |
|                 |tislattuun veteen ja täytetään tilavuudeksi 1 litra tislatulla vedellä.                                    |

      Nämä kaksi liuosta A ja B sekoitetaan yhtä suurina määrinä välittömästi ennen käyttöä. 10 ml Fehlingin liuosta  (5 ml  liuosta  A  ja  5 ml
       liuosta B) pelkistetään täysin III kohdassa kuvatuissa olosuhteissa 0,04945 g:lla vedetöntä dekstroosia.

                                                                  _____________

                                                                    LIITE III

                   HIENOJEN TAI KARKEIDEN VEHNÄJAUHOJEN HAVAITSEMINEN MAKARONISSA, SPAGETISSA JA VASTAAVISSA TUOTTEISSA (PASTA)

                                 (Youngin ja Gillesin menetelmän mukaisesti, Bernaertsin ja Grunerin muuttamana)

I     Periaate

      Määritettävän pastanäytteen uute valmistetaan käyttäen polaaritonta liuotinta.

      Tämä uute kromatografoidaan silikageelin ohutkerroksesta jakeiden eri vyöhykkeissä esiintyvien sterolien erottamiseksi.

      Kirkkaanväristen vyöhykkeiden määrän mukaan on mahdollista määrittää,  onko  tutkittava  tuote  valmistettu  ainoastaan  durumvehnästä  vai
       hienosta vehnäjauhosta vai näiden kahden seoksesta. On myös mahdollista määrittää, onko lisätty munia.

II    Välineistö ja reagenssit

       1.   Homogenisaattori tai jauhin rouheen saamiseksi, joka läpäisee 0,200 mm silmäisen standardiseulan;

       2.   Standardiseula, jossa 0,200 mm silmäkoko;

       3.   Haihdutin vesihauteella alennetussa paineessa haihduttamiseksi;

       4.   Lasilevy, alumiinilevy tai muu soveltuva tausta kooltaan 20 cm × 20 cm, päällystettynä ohuella silikageelikerroksella. Jos ohutkerros
           on valmistettava, olisi käytettävä silikageeliä  sekoitettuna  noin  13 %  kipsilaastin  kanssa,  ja  se  olisi  levitettävä  0,25 mm
           kerroksena soveltuvan laitteen avulla valmistajan ohjeiden mukaisesti;

       5.   Mikropipetti 20 mikrolitran mittaamiseksi;

       6.   Kannellinen säiliö, joka soveltuu kromatogrammien kehittämiseen;

       7.   Sumutuskoje;

       8.   Petrolieetteriä, jonka kiehumispiste on välillä 40–60 °C, toistotislattuna ennen käyttöä;

       9.   Vedetöntä etyylieetteriä määritystä varten;

       10.  Hiilitetrakloridia kromatografiaa varten, toistotislattuna ennen käyttöä;

       11.  Fosfomolybdeenihappoa määritystä varten;

       12.  94 ° etyylialkoholia.

III   Menetelmä

      Jauhetaan noin 20 g määritettävää näytettä siten,  että  se  läpäisee  kokonaisuudessaan  seulan.  Laitetaan  näyte  Erlenmeyer-pulloon  ja
       peitetään 150 ml:lla petrolieetteriä. Jätetään normaaliin lämpötilaan seuraavaksi päiväksi. Ravistellaan silloin tällöin.

      Tämän jälkeen suodatetaan Buchner-suppilon läpi,  jossa  on  suodatuksen  apuainetta  tai  sintrattu  suodatin.  Näin  saatu  kirkas  liuos
       siirretään asteittain 100 ml:n kalibroituun  pulloon.  Haihdutetaan  liuotin  alennetussa  paineessa  kuumentamalla  pulloa  vesihauteessa
       40–50 °C:ssa. Kun liuotin on haihtunut, kuumennetaan alennetussa paineessa edelleen 10 minuuttia.

      Kun pullo on jäähtynyt, määritetään uutteen paino. Laimennetaan uute etyylieetterillä suhteessa 1 ml etyylieetteriä 60 mg uutetta kohden.

      Aktivoidaan ohutkerrokset nostamalla niiden lämpötila 130 °C:seen 3 tunniksi. Annetaan jäähtyä silikageeliä  sisältävässä  eksikaattorissa.
       Levyt, joita ei käytetä välittömästi voidaan säilyttää samassa eksikaattorissa.

      Lisätään tipoittain 20 mikrolitraa kirkasta  liuosta  vakioleveyksisen  vyöhykkeen  muodostamiseksi,  pituudeltaan  3 cm,  mieluiten  vasta
       aktivoidun kerroksen päälle. Annetaan liuottimen haihtua.

      Kehitetään  kromatogrammi  normaalissa  lämpötilassa  hiilitetrakloridilla  käyttäen  kromatogrammisäiliötä,  jonka  seinämät  on  peitetty
       liuottimessa liotetulla suodatinpaperilla. Noin tunnin kuluttua liuotin saavuttaa 18 cm korkeuden. Poistetaan  levy  ja  jätetään  liuotin
       haihtumaan avonaisesti. Vyöhykkeiden paremmin erottamiseksi kromatogrammi kehitetään toiseen kertaan. Annetaan liuottimen jälleen  haihtua
       avonaisesti.

      Sumutetaan ohut silikageelikerros etyylialkoholissa olevalla  20 %  fosfomolybdeenihappoliuoksella.  Kerroksen  värin  on  oltava  tasaisen
       keltainen. Kehitetään vyöhykkeet kuumentamalla sumutettua levyä 110 °C:ssa 5 minuuttia.

IV    Kromatogrammin tulkinta

      Jos kromatogrammissa esiintyy 1 pääasiallinen kirkasvärinen vyöhyke, jonka Rf on  noin  0,4-0,5,  kyseisen  pastan  valmistukseen  käytetty
       vehnä on durumvehnää. Toisaalta, jos esiintyy 2 pääasiallista kirkkaudeltaan yhtäläistä vyöhykettä, käytetty raaka-aine  on  ollut  hienoa
       vehnäjauhoa. Durumvehnän ja hienon vehnäjauhon seokset voidaan määrittää arvioimalla 2 vyöhykkeen suhteellista kirkkautta.

      Jos esiintyy 3 vyöhykettä (löydetään 2 vyöhykettä korkeudella, jossa hienon vehnäjauhon pääasialliset vyöhykkeet sijaitsevat, sekä  vyöhyke
       näiden välissä), pastaan on lisätty munia. Tällöin käytetty raaka-aine on durumvehnää, jos keskimmäinen vyöhyke on kirkkaampi kuin  ylempi
       vyöhyke. Toisaalta, jos ylempi vyöhyke on keskimmäistä vyöhykettä kirkkaampi, käytetty raaka-aine on ollut hienoa vehnäjauhoa.

                                                                  _____________

                                            é

                                                                     LIITE IV

                                                           Kumottu asetus ja sen muutos

|Komission asetus (ETY) N:o 4154/87                                            |(EYVL L 392, 31.12.1987, s. 19)                             |
|Komission asetus (EY) N:o 203/98                                           |(EYVL L 21, 28.1.1998, s. 6)                         |

                                                                  _____________

                                                                     LIITE V

                                                                Vastaavuustaulukko

|Asetus (ETY) N:o 4154/87                                             |Tämä asetus                                                          |
|1 – 4 artikla                                                        |1 – 4 artikla                                                        |
|5 artikla                                                            |-                                                                    |
|-                                                                    |5 artikla                                                            |
|6 artikla                                                            |6 artikla                                                            |
|Liitteet I, II ja III                                                |Liitteet I, II ja III                                                |
|-                                                                    |Liite IV                                                             |
|-                                                                    |Liite V                                                              |

                                                           _____________[pic][pic][pic]

                                                             -----------------------
[1]   EYVL L 256, 7.9.1987, s. 1, Ö asetus sellaisena kuin se on viimeksi muutettuna asetuksella (EY) N:o 486/2006  (EUVL  L  88,  25.3.2006,  s.
      1). Õ
[2]   EYVL L 392, 31.12.1987, s. 19, asetus sellaisena kuin se on muutettuna asetuksella (EY) N:o 203/98 (EYVL L 21, 28.1.1998, s. 6).
[3]   Katso liite IV.
[4]   EYVL L 318, 20.12.1993, s. 18, asetus sellaisena kuin se on viimeksi muutettuna asetuksella (EY) N:o 2580/2000 (EYVL L 298, 25.11.2000,  s.
      5).
[5]   EYVL L 187, 26.7.1996, s. 18.
[6]   U on entsyymiaktiivisuuden kansainvälinen yksikkö.