CELEX: 32019R1604
Language: mt
Date: 2019-09-27 00:00:00
Title: Regolament ta' Implimentazzjoni tal-Kummissjoni (UE) 2019/1604 tas-27 ta' Settembru 2019 li jemenda r-Regolament (KEE) Nru 2568/91 dwar il-karatteristiċi taż-żejt taż-żebbuġa u l-fdal taż-żejt taż-żebbuġa u dwar il-metodi ta' analiżi rilevanti

30.9.2019   
               
               
                  MT
               
               
                  Il-Ġurnal Uffiċjali tal-Unjoni Ewropea
               
               
                  L 250/14
               
            
         REGOLAMENT TA' IMPLIMENTAZZJONI TAL-KUMMISSJONI (UE) 2019/1604
         tas-27 ta' Settembru 2019
         li jemenda r-Regolament (KEE) Nru 2568/91 dwar il-karatteristiċi taż-żejt taż-żebbuġa u l-fdal taż-żejt taż-żebbuġa u dwar il-metodi ta' analiżi rilevanti
         IL-KUMMISSJONI EWROPEA,
         Wara li kkunsidrat it-Trattat dwar il-Funzjonament tal-Unjoni Ewropea,
         Wara li kkunsidrat ir-Regolament (UE) Nru 1308/2013 tal-Parlament Ewropew u tal-Kunsill tas-17 ta' Diċembru 2013 li jistabbilixxi organizzazzjoni komuni tas-swieq fi prodotti agrikoli u li jħassar ir-Regolamenti tal-Kunsill (KEE) Nru 922/72, (KEE) Nru 234/79, (KE) Nru 1037/2001 u (KE) Nru 1234/2007 (1), u b'mod partikolari l-punt (d) tal-ewwel paragrafu tal-Artikolu 91 tiegħu,
         Billi:
         
                     (1)
                  
                  
                     Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KEE) Nru 2568/91 (2) jiddefinixxi l-karatteristiċi fiżikokimiċi u organolettiċi taż-żejt taż-żebbuġa u taż-żejt mir-residwi taż-żebbuġ u jistabbilixxi l-metodi għall-valutazzjoni ta' dawk il-karatteristiċi.
                  
               
                     (2)
                  
                  
                     Il-metodi u l-valuri ta' limitu għall-karatteristiki taż-żjut għandhom jiġu aġġornati abbażi tal-opinjoni tal-esperti kimiċi u skont il-ħidma mwettqa fi ħdan il-Kunsill Internazzjonali taż-Żebbuġ (l-IOC).
                  
               
                     (3)
                  
                  
                     Sabiex tiġi żgurata l-implimentazzjoni fil-livell tal-Unjoni tal-aktar standards internazzjonali riċenti li ġew stabbiliti mill-IOC, ċerti metodi ta' analiżi stabbiliti fir-Regolament (KEE) Nru 2568/91 għandhom jiġu aġġornati.
                  
               
                     (4)
                  
                  
                     L-istandard tal-Kummerċ tal-IOC ġie emendat fir-rigward tal-espressjoni tal-limitu tal-aċidità libera, tal-valur tal-perossidu, tal-evalwazzjoni organolettika (il-medjan tad-difett u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma tal-frott) u tad-differenza bejn ECN42 (HPLC) u ECN42 (kalkolu teoretiku) għall-konsistenza mal-valuri ta' preċiżjoni tal-metodu analitiku.
                  
               
                     (5)
                  
                  
                     F'konformità mal-Artikolu 2a(5) tar-Regolament (KEE) Nru 2568/91, l-Istati Membri għandhom jivverifikaw jekk kampjun taż-żejt taż-żebbuġa jkunx konsistenti mal-kategorija ddikjarata billi jiġu vverifikati l-karatteristiċi stabbiliti fl-Anness I ta' dak ir-Regolament jew f'kull ordni jew skont l-ordni stabbilita f'dijagramma tad-deċiżjonijiet stabbilita fl-Anness Ib tiegħu.
                  
               
                     (6)
                  
                  
                     Fid-dawl tal-iżviluppi riċenti, huwa xieraq li jiġu aġġornati t-tabelli fl-Anness Ib tar-Regolament (KEE) Nru 2568/91 u l-appendiċi tiegħu kif xieraq. Jidher ukoll li t-terminu “dijagramma sekwenzjali” huwa aktar xieraq mit-terminu “dijagramma tad-deċiżjonijiet” fid-dawl tal-kontenut ta' dak l-Anness Ib.
                  
               
                     (7)
                  
                  
                     Il-punt 9.4 tal-Anness XII tar-Regolament (KEE) Nru 2568/91 jiddefinixxi l-medjan tad-difetti bħala l-medjan tad-difett innutat bl-akbar intensità. Fil-kuntest ta' kontrovalutazzjonijiet u minħabba li bordijiet differenti jridu jivvalutaw il-konformità taż-żejt, għandu jiġi ċċarat li d-deċiżjoni dwar il-konformità tal-karatteristiċi ta' żejt tal-kategorija ddikjarata hija relatata biss mal-valur medjan tad-difett ewlieni, irrispettivament min-natura tiegħu.
                  
               
                     (8)
                  
                  
                     Ir-Regolament (KEE) Nru 2568/91 għandu għaldaqstant jiġi emendat skont dan.
                  
               
                     (9)
                  
                  
                     Il-miżuri previsti f'dan ir-Regolament huma skont l-opinjoni tal-Kumitat għall-Organizzazzjoni Komuni tas-Swieq Agrikoli,
                  
               ADOTTAT DAN IR-REGOLAMENT:
         
            Artikolu 1
            Ir-Regolament (KEE) Nru 2568/91 huwa emendat kif ġej:
            
                        (1)
                     
                     
                        L-Artikolu 2 huwa emendat kif ġej:
                        
                                    (a)
                                 
                                 
                                    il-punt (l) tal-paragrafu (1) huwa sostitwit b'dan li ġej:
                                    
                                                “(l)
                                             
                                             
                                                biex jiġu ddeterminati l-kompożizzjoni u l-kontenut tal-isteroli, u biex jiġu ddeterminati l-komposti alkoħoliċi, permezz tal-kromatografija b'fażi gassuża f'kolonna kapillari, il-metodu spjegat fl-Anness XIX”;
                                             
                                          
                              
                                    (b)
                                 
                                 
                                    it-tielet subparagrafu tal-paragrafu 2 huwa sostitwit b'dan li ġej:
                                    “Jekk il-bord ma jikkonfermax il-kategorija ddikjarata fir-rigward tal-karatteristiċi organolettiċi, fuq talba tal-parti interessata, l-awtoritajiet nazzjonali jew ir-rappreżentanti tagħhom għandhom iwettqu żewġ kontrovalutazzjonijiet permezz ta' bordijiet approvati oħrajn mingħajr dewmien. Mill-inqas wieħed mill-bordijiet għandu jkun bord approvat mill-Istat Membru produttur konċernat. Il-karatteristiċi kkonċernati għandhom jitqiesu konformi mal-karatteristiċi ddikjarati jekk iż-żewġ kontrovalutazzjonijiet jikkonfermaw il-grad iddikjarat. Jekk dan ma jkunx il-każ, irrispettivament mit-tip ta' difetti determinati matul il-kontrovalutazzjonijiet, il-klassifikazzjoni għandha tiġi ddikjarata bħala inkonsistenti mal-karatteristiċi u l-parti interessata għandha tkun responsabbli għall-ispejjeż tal-kontrovalutazzjonijiet.”;
                                 
                              
                  
                        (2)
                     
                     
                        il-punt (b) tal-Artikolu 2a(5) huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        
                                    “(b)
                                 
                                 
                                    wara l-ordni stabbilita fl-Anness Ib fuq id-dijagramma sekwenzjali, sakemm tintlaħaq waħda mid-deċiżjonijiet li jidhru fid-dijagramma sekwenzjali.”;
                                 
                              
                  
                        (3)
                     
                     
                        it-tabella “Sommarju tal-ANNESSI” hija sostitwita bit-tabella tal-Anness I ta' dan ir-Regolament;
                     
                  
                        (4)
                     
                     
                        l-Anness I jinbidel bit-test tal-Anness II ta' dan ir-Regolament;
                     
                  
                        (5)
                     
                     
                        il-Punt 2.1 tal-Anness Ia huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        
                                    “2.1.
                                 
                                 
                                    Kull kampjun primarju għandu jinqasam mill-ġdid f'kampjuni tal-laboratorju, skont il-punt 2.5 tal-istandard EN ISO 5555, u jiġi analizzat fl-ordni mogħtija fid-dijagramma sekwenzjali stipulata fl-Anness Ib jew f'xi ordni aleatorja oħra.”;
                                 
                              
                  
                        (6)
                     
                     
                        l-Anness Ib jinbidel bit-test tal-Anness III ta' dan ir-Regolament;
                     
                  
                        (7)
                     
                     
                        l-Anness V jitħassar;
                     
                  
                        (8)
                     
                     
                        il-punt 4.2 tal-Anness VII huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        
                                    “4.2.
                                 
                                 
                                    n-hexane (grad ta' kromatografija). L-eżan jista' jiġi sostitwit bl-iso-ottan (2,2,4-trimetil pentan fi grad tal-kromatografija), dejjem jekk jinkisbu valuri ta' preċiżjoni komparabbli.”;
                                 
                              
                  
                        (9)
                     
                     
                        l-Anness XII hu emendat skont l-Anness IV ta' dan ir-Regolament;
                     
                  
                        (10)
                     
                     
                        l-Anness XVII huwa emendat f'konformità mal-Anness V ta' dan ir-Regolament;
                     
                  
                        (11)
                     
                     
                        l-Anness XVIII hu emendat f'konformità mal-Anness VI ta' dan ir-Regolament;
                     
                  
                        (12)
                     
                     
                        l-Anness XIX huwa sostitwit bit-test tal-Anness VII ta' dan ir-Regolament;
                     
                  
                        (13)
                     
                     
                        il-punt 4.2 tal-Anness XX huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        
                                    “4.2.
                                 
                                 
                                    n-essan, grad ta' kromatografija jew grad tal-fdal. L-eżan jista' jiġi sostitwit bl-iso-ottan (2,2,4-trimetil pentan fi grad tal-kromatografija), dejjem jekk jinkisbu valuri ta' preċiżjoni komparabbli. Solventi b'punt tat-togħlija ogħla minn n-eżan jieħdu aktar żmien biex jevaporaw. Madankollu, huma preferuti minħabba t-tossiċità tal-eżan. Il-purità trid tiġi vverifikata; pereżempju, jista' jiġi kkontrollat ir-residwu li jibqa' mill-evaporazzjoni ta' 100 ml tas-solvent.
                                    TWISSIJA – Il-fwar jista' jieħu n-nar. Żomm 'il bogħod minn sorsi ta' sħana, xrarat jew fjammi mikxufa. Kun ċert li l-fliexken dejjem jingħalqu tajjeb. Matul l-użu, ara li jkun hemm ventilazzjoni tajba. Evita li jinġemal-fwar u neħħi kull periklu possibbli ta' nar, bħal heaters jew tagħmir elettriku mhux manifatturat minn materjal li ma jiħux nar. Jekk jittieħed man-nifs huwa perikuluż, għax jista' jikkawża ħsara fiċ-ċelloli tan-nervituri. Evita li tibla' l-fwar. Uża apparat respiratorju adattat jekk hemm bżonn. Evita l-kuntatt mal-għajnejn jew mal-ġilda.
                                    L-iso-ottan huwa likwidu li jieħu n-nar, u jaf jikkaġuna n-nirien. Il-limiti ta' splużjoni fl-arja huma bejn 1,1 % u 6,0 % (frazzjoni tal-volum). Huwa tossiku meta jinbela' u meta jidħol mill-imnifsejn. Uża hood ventilat f'kundizzjoni operattiva tajba biex taħdem b'dan is-solvent.”.
                                 
                              
                  
         
            Artikolu 2
            Dan ir-Regolament għandu jidħol fis-seħħ fl-għoxrin jum wara dak tal-pubblikazzjoni tiegħu f'Il-Ġurnal Uffiċjali tal-Unjoni Ewropea.
         
         
            Dan ir-Regolament għandu jorbot fl-intier tiegħu u japplika direttament fl-Istati Membri kollha.
            Magħmul fi Brussell, is-27 ta' Settembru 2019.
            
               
                  Għall-Kummissjoni
               
               
                  Il-President
               
               Jean-Claude JUNCKER
            
         
         
            (1)  ĠU L 347, 20.12.2013, p. 671.
         
            (2)  Ir-Regolament tal-Kummissjoni (KEE) Nru 2568/91 tal-11 ta' Lulju 1991 dwar il-karatteristiċi taż-żejt taż-żebbuġa u l-fdal taż-żejt taż-żebbuġa u dwar il-metodi ta' analiżi rilevanti (ĠU L 248, 5.9.1991, p. 1).
      
      
         
            ANNESS I
            
               
                  
                     “ANNESSI
                     
                        SOMMARJU
                     
                     
                                 Anness I
                              
                              
                                 Karatteristiki taż-żejt taż-żebbuġa
                              
                           
                                 Anness Ia
                              
                              
                                 It-teħid ta' kampjuni taż-żejt taż-żebbuġa jew taż-żejt mir-residwi taż-żebbuġ mogħtija f'pakketti għall- konsum
                              
                           
                                 Anness Ib
                              
                              
                                 Dijagramma sekwenzjali biex jiġi vverifikat jekk kampjun taż-żejt taż-żebbuġa huwiex konsistenti mal-kategorija ddikjarata jew le
                              
                           
                                 Anness II
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-aċidi grassi liberi, metodu fil-kiesaħ
                              
                           
                                 Anness III
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-valur tal-perossidu
                              
                           
                                 Anness IV
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-kontenut tax-xama' permezz tal-kromatografija b'fażi gassuża f'kolonna kapillari
                              
                           
                                 Anness VII
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-perċentwal ta' 2-gliceril monopalmitat
                              
                           
                                 Anness IX
                              
                              
                                 Investigazzjoni spettrofotometrika fl-ultravjola
                              
                           
                                 Anness X
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-esteri metiliċi tal-aċidi xaħmin permezz tal-kromatografija b'fażi gassuża
                              
                           
                                 Anness XI
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-kontenut ta' solventi volatili aloġinati fiż-żejt taż-żebbuġa
                              
                           
                                 Anness XII
                              
                              
                                 Il-metodu tal-kunsill internazzjonali taż-żebbuġ għall-valutazzjoni organolettika taż-żejt taż-żebbuġa verġni
                              
                           
                                 Anness XV
                              
                              
                                 Kontenut ta' żejt tal-fdal taż-żebbuġ
                              
                           
                                 Anness XVI
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-valur tal-jodju
                              
                           
                                 Anness XVII
                              
                              
                                 Metodu għad-determinazzjoni tas-stigmastadienes fiż-żjut tal-ħaxix
                              
                           
                                 Anness XVIII
                              
                              
                                 Determinazzjoni tad-differenza bejn il-kontenut attwali u teoretiku tat-triaċiligliċeroli mal-ECN 42
                              
                           
                                 Anness XIX
                              
                              
                                 Determinazzjoni tal-kompożizzjoni u tal-kontenut tal-isteroli u tal-komposti alkoħoliċi permezz ta' kromatografija b'fażi gassuża f'kolonna kapillari
                              
                           
                                 Anness XX
                              
                              
                                 Metodu biex jiġi determinat il-kontenut ta' xema', esteri metiliċi tal-aċidi xaħmin, u esteri etiliċi tal-aċidi xaħmin permezz ta' kromatografija b'fażi gassuża f'kolonna kapillari
                              
                           
                                 Anness XXI
                              
                              
                                 Riżultati tal-verifiki tal-konformità mwettqa fuq iż-żjut taż-żebbuġa msemmija fl-Artikolu 8(2)
                              
                           
               ”
         
      
      
         
            ANNESS II
            
               
                  
                     “ANNESS I
                     
                        KARATTERISTIKI TAŻ-ŻEJT TAŻ-ŻEBBUĠA
                     
                     
                        Karatteristiki tal-kwalità
                     
                     
                                 Esteri etiliċi tal-aċidi xaħmin
                                 (mg/kg)
                              
                              
                                 ≤ 35
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 Evalwazzjoni organolettika
                              
                              
                                 Valur medjan tat-togħma ta' frott (Mf)
                              
                              
                                 Mf > 0,0
                              
                              
                                 Mf > 0,0
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 Valur medjan tad-difett (Md) (*)
                              
                              
                                 Md = 0,0
                              
                              
                                 Md ≤ 3,5
                              
                              
                                 Md> 3,5 (1)
                                 
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                              
                                  
                              
                           
                                 Delta-K
                              
                              
                                 ≤ 0,01
                              
                              
                                 ≤ 0,01
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 0,16
                              
                              
                                 ≤ 0,15
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,18
                              
                           
                                 K268 jew K270
                                 
                              
                              
                                 ≤ 0,22
                              
                              
                                 ≤ 0,25
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 1,25
                              
                              
                                 ≤ 1,15
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 2,00
                              
                              
                                 ≤ 1,70
                              
                           
                                 K232
                                 
                              
                              
                                 ≤ 2,50
                              
                              
                                 ≤ 2,60
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 Valur tal-perossidu
                                 (mEq O2/kg)
                              
                              
                                 ≤ 20,0
                              
                              
                                 ≤ 20,0
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 5,0
                              
                              
                                 ≤ 15,0
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 5,0
                              
                              
                                 ≤ 15,0
                              
                           
                                 Aċidità
                                 (%) (*)
                              
                              
                                 ≤ 0,80
                              
                              
                                 ≤ 2,0
                              
                              
                                 > 2,0
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                           
                                 Kategorija
                              
                              
                                 
                                             1.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa straverġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             2.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa verġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             3.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġ lampante
                                          
                                       
                              
                                 
                                             4.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa raffinat
                                          
                                       
                              
                                 
                                             5.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa magħmul minn żejt taż-żebbuġa raffinat u żjut taż-żebbuġa verġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             6.
                                          
                                          
                                             Żejt mhux raffinat mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                              
                                 
                                             7.
                                          
                                          
                                             Żejt raffinat mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                              
                                 
                                             8.
                                          
                                          
                                             Żejt mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                           
                        Karatteristiċi tal-purità
                     
                     
                                 2-gliċeril monopalmitat
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ≤ 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 1,0 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ta' > 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ≤ 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 1,0 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ta' > 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ≤ 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 1,1 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun > 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ≤ 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 1,1 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ta' > 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 0,9 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun ta' > 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 1,0 jekk il-perċentwal totali ta' aċidu palmitiku jkun > 14,00 %
                              
                              
                                 ≤ 1,4
                              
                              
                                 ≤ 1,4
                              
                              
                                 ≤ 1,2
                              
                           
                                 Differenza: ECN42 (HPLC) u ECN42
                                 (kalkolu teoretiku)
                              
                              
                                 ≤ |0,20|
                              
                              
                                 ≤ |0,20|
                              
                              
                                 ≤ |0,30|
                              
                              
                                 ≤ |0,30|
                              
                              
                                 ≤ |0,30|
                              
                              
                                 ≤ |0,60|
                              
                              
                                 ≤ |0,50|
                              
                              
                                 ≤ |0,50|
                              
                           
                                 Stigmasta- dienes
                                 (mg/kg) (3)
                                 
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 —
                              
                           
                                 Total ta' isomeri linolejċi + translinoleniċi
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,10
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,10
                              
                              
                                 ≤ 0,35
                              
                              
                                 ≤ 0,35
                              
                           
                                 Ammont totali ta' isomeri transolejċi
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,05
                              
                              
                                 ≤ 0,10
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                              
                                 ≤ 0,40
                              
                           
                                 Kompożizzjoni ta' aċidi xaħmin (2)
                                 
                              
                              
                                 Linjoċeriku
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                           
                                 Beeniku
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,20
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                              
                                 ≤ 0,30
                              
                           
                                 Ejkosenojku
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                              
                                 ≤ 0,50
                              
                           
                                 Arakidiku
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                              
                                 ≤ 0,60
                              
                           
                                 Linoleniku
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                              
                                 ≤ 1,00
                              
                           
                                 Miristiku
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                              
                                 ≤ 0,03
                              
                           
                                 Kategorija
                              
                              
                                 
                                             1.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa straverġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             2.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa verġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             3.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġ lampante
                                          
                                       
                              
                                 
                                             4.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa raffinat
                                          
                                       
                              
                                 
                                             5.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa magħmul minn żejt taż-żebbuġa raffinat u żjut taż-żebbuġa verġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             6.
                                          
                                          
                                             Żejt mhux raffinat mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                              
                                 
                                             7.
                                          
                                          
                                             Żejt raffinat mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                              
                                 
                                             8.
                                          
                                          
                                             Żejt mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                           
                        
                     
                                 Xama' (mg/kg)
                                 (**)
                              
                              
                                 C42 + C44 + C46 ≤ 150
                              
                              
                                 C42 + C44 + C46 ≤ 150
                              
                              
                                 C40 + C42 + C44 + C46 ≤ 300 (6)
                                 
                              
                              
                                 C40 + C42 + C44 + C46 ≤ 350
                              
                              
                                 C40 + C42 + C44 + C46 ≤ 350
                              
                              
                                 C40 + C42 + C44 + C46 > 350 (7)
                                 
                              
                              
                                 C40 + C42 + C44 + C46 > 350
                              
                              
                                 C40 + C42 + C44 + C46 > 350
                              
                           
                                 Eritrodijol u uvaol
                                 (%) (**)
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                              
                                 ≤ 4,5 (6)
                                 
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                              
                                 ≤ 4,5
                              
                              
                                 > 4,5 (7)
                                 
                              
                              
                                 > 4,5
                              
                              
                                 > 4,5
                              
                           
                                 Total ta' steroli
                                 (mg/kg)
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≥ 1 000 
                              
                              
                                 ≥ 2 500 
                              
                              
                                 ≥ 1 800 
                              
                              
                                 ≥ 1 600 
                              
                           
                                 Kompożizzjoni tal-isteroli
                              
                              
                                 Delta-7-stigmastenol (4)
                                 
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                           
                                 App β-sitosterol (5)
                                 
                                 (%)
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                              
                                 ≥ 93,0
                              
                           
                                 Stigmasterol
                                 (%)
                              
                              
                                 < Kamp.
                              
                              
                                 < Kamp.
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 < Kamp.
                              
                              
                                 < Kamp.
                              
                              
                                 —
                              
                              
                                 < Kamp.
                              
                              
                                 < Kamp.
                              
                           
                                 Kampesterol (4)
                                 
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                              
                                 ≤ 4,0
                              
                           
                                 Brassikasterol
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 0,1
                              
                              
                                 ≤ 0,2
                              
                              
                                 ≤ 0,2
                              
                              
                                 ≤ 0,2
                              
                           
                                 Kolesterol
                                 (%)
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                              
                                 ≤ 0,5
                              
                           
                                 Kategorija
                              
                              
                                 
                                             1.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa straverġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             2.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa verġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             3.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġ lampante
                                          
                                       
                              
                                 
                                             4.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa raffinat
                                          
                                       
                              
                                 
                                             5.
                                          
                                          
                                             Żejt taż-żebbuġa magħmul minn żejt taż-żebbuġa raffinat u żjut taż-żebbuġa verġni
                                          
                                       
                              
                                 
                                             6.
                                          
                                          
                                             Żejt mhux raffinat mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                              
                                 
                                             7.
                                          
                                          
                                             Żejt raffinat mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                              
                                 
                                             8.
                                          
                                          
                                             Żejt mir-residwi taż-żebbuġ
                                          
                                       
                           Noti:
                     
                                 (a)
                              
                              
                                 Ir-riżultati tal-analiżijiet għandhom jingħataw bl-istess għadd ta' ċifri wara l-punt deċimali bħal dak użat għal kull karatteristika. L-aħħar ċifra trid tiżdied b'unità waħda jekk iċ-ċifra ta' warajha tkun ta' iktar minn 4.
                              
                           
                                 (b)
                              
                              
                                 Jekk karatteristika waħda biss ma tkunx konformi mal-valuri ddikjarati, għall-għanijiet ta' dan ir-Regolament, il-kategorija taż-żejt tista' tinbidel jew iż-żejt jista' jiġi ddikjarat bħala mhux konformi.
                              
                           
                                 (c)
                              
                              
                                 Għaż-żejt taż-żebbuġa lampante, iż-żewġ karatteristiċi tal-kwalità mmarkati b'asterisk (*) jistgħu jvarjaw b'mod simultanju mil-limiti stabbiliti għal dik il-kategorija.
                              
                           
                                 (d)
                              
                              
                                 Jekk karatteristika tkun immarkata b'żewġ asterisks (**), dan ifisser li għaż-żejt mhux raffinat mir-residwi taż-żebbuġ, huwa possibbli li ż-żewġ limiti rilevanti jkunu differenti mill-valuri ddikjarati fl-istess ħin. Għaż-żejt mir-residwi taż-żebbuġ u għaż-żejt raffinat mir-residwi taż-żebbuġ wieħed mil-limiti rilevanti jista' jkun differenti mill-valuri ddikjarati.
                              
                           
               
               
                  
                     Appendiċi
                     
                        Siġar tad-deċiżjonijiet
                     
                     Dijagramma tad-deċiżjonijiet għall-kampesterol għaż-għaż-żjut taż-żebbuġa verġni u straverġni:
                     
                        
                     Il-parametri l-oħra għandhom ikunu konformi mal-limiti stabbiliti f'dan ir-Regolament.
                     Siġra tad-deċiżjonijiet ta' Delta-7-stigmastenol għal:
                     
                                 —
                              
                              
                                 Żjut taż-żebbuġa straverġni u verġni
                                 
                                    
                              
                           Il-parametri l-oħra għandhom ikunu konformi mal-limiti stabbiliti f'dan ir-Regolament.
                     
                                 —
                              
                              
                                 Żjut mir-residwi taż-żebbuġ (mhux raffinati u raffinati)
                                 
                                    
                              
                           Il-parametri l-oħra għandhom ikunu konformi mal-limiti stabbiliti f'dan ir-Regolament.
                  
               ”
            
               (1)  Il-medjan tad-difett jista' jkun ta' 3,5 jew inqas meta l-medjan tat-togħma ta' frott huwa ta' 0,0.
            
               (2)  Kontenut ta' aċidi xaħmin oħrajn (%): palmitiku: 7,50-20,00; palmitolejku: 0,30-3,50; ettadekanojku: ≤ 0,40; ettadekanojku ≤ 0,60; steariku: 0,50-5,00; olejku: 55,00- 83,00; linolejku: 2,50-21,00.
            
               (3)  L-isomeri kollha li setgħu (jew li ma setgħux) jiġu separati permezz tal-kolonna kapillari.
            
               (4)  Ara l-Appendiċi ta' dan l-Anness.
            
               (5)  App β-sitosterol: Delta-5,23-stigmastadjenol+klerosterol+beta-sitosterol+sitostanol+delta-5-avenasterol+delta-5,24-stigmastadjenol.
            
               (6)  Iż-żjut li jkollhom bejn 300 mg/kg u 350 mg/kg ta' xama' jitqiesu bħala żjut taż-żebbuġa lampante jekk il-kontenut totali ta' alkoħol alifatiku jkun ta' 350 mg/kg jew inqas jew jekk il-kontenut tagħhom ta' eritrodiol u uvaol ikun ta' 3,5 % jew inqas.
            
               (7)  Iż-żjut li jkollhom bejn 300 mg/kg u 350 mg/kg ta' xama' jitqiesu bħala żjut mhux raffinati mir-residwi taż-żebbuġ jekk il-kontenut totali ta' alkoħol alifatiku jkun ta' aktar minn 350 mg/kg u jekk il-kontenut tal-eritrodiol u l-uvaol fihom ikun ta' aktar minn 3,5 %.
         
      
      
         
            ANNESS III
            
               
                  
                     “ANNESS Ib
                     
                        DIJAGRAMMA SEKWENZJALI BIEX JIĠI VVERIFIKAT JEKK KAMPJUN TAŻ-ŻEJT TAŻ-ŻEBBUĠA HUWIEX KONSISTENTI MAL-KATEGORIJA DDIKJARATA JEW LE
                     
                     
                        Tabella ġenerali
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 1 — Żejt taż-Żebbuġa Straverġini — Kriterji ta' kwalità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 2 — Żejt taż-Żebbuġa Verġni — Kriterji ta' kwalità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 3 — Żejt taż-Żebbuġa Straverġini u Żejt taż-Żebbuġa Verġni — Kriterji ta' purità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 4 — Żejt taż-Żebbuġa Lampante — Kriterji ta' purità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 5 — Żejt taż-Żebbuġa Raffinat — Kriterji ta' kwalità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 6 — Żejt taż-żebbuġa (magħmul minn taħlita ta' żejt taż-żebbuġa raffinat u żjut taż-żebbuġa verġni) — Kriterji ta' kwalità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 7 — Żejt taż-Żebbuġa Raffinat u żejt taż-żebbuġa magħmul minn żejt taż-żebbuġa raffinat u Żjut taż-Żebbuġa Verġni — Kriterji ta' purità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 8 — Żejt Mhux Raffinat mir-Residwi taż-Żebbuġ — Kriterji ta' purità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 9 — Żejt Raffinat mir-Residwi taż-Żebbuġ -– Kriterji ta' kwalità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 10 — Żejt mir-Residwi taż-Żebbuġ – Kriterji ta' kwalità
                     
                     
                        
                     
                        Tabella 11 — Żejt Raffinat mir-Residwi taż-Żebbuġ u Żejt mir-Residwi taż-Żebbuġ — Kriterji ta' purità
                     
                     
                        
                  
               ”;
         
      
      
         
            ANNESS IV
            L-Anness XII huwa emendat kif ġej:
            
                        (1)
                     
                     
                        il-punt 3.3 huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        “3.3.   Terminoloġija fakultattiva għall-finijiet ta' ttikkettar
                        
                        Fuq talba, il-kap tal-bord jista' jiċċertifika li ż-żjut li ġew ivvalutati huma konformi mad-definizzjonijiet u mal-gradi li jikkorrispondu biss mat-termini li ġejjin, skont l-intensità u l-perċezzjoni tal-attributi.
                        Attributi pożittivi (togħma ta' frott, morr u punġenti): Skont l-intensità tal-perċezzjoni:
                        
                                    —
                                 
                                 
                                    
                                       Qawwija, meta l-valur medjan tal-attribut ikun aktar minn 6,0;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    
                                       Medjan, meta l-valur medjan tal-attribut ikun bejn 3,0 u 6,0;
                                 
                              
                                    —
                                 
                                 
                                    
                                       Ħafifa, meta l-valur medjan tal-attribut ikun anqas minn 3,0.
                                 
                              
                                    
                                       Togħma ta' frott
                                    
                                 
                                 
                                    Sett ta' sensazzjonijiet marbutin mas-sens tax-xamm li huma tipiċi għaż-żejt, skont il-varjetà taż-żebbuġ u li jiġu miż-żebbuġ frisk u b'saħħtu, u li fihom la tiddomina t-togħma tal-frott aħdar u lanqas dik tal-frott li jkun sar. Dawn jiġu nnutati direttament u/jew permezz tan-naħa ta' wara tal-imnieħer.
                                 
                              
                                    
                                       Togħma ta' frott aħdar
                                    
                                 
                                 
                                    Sett ta' sensazzjonijiet olfattivi li huma tipiċi għaż-żejt u li jfakkru fil-frott aħdar, skont il-varjetà ta' żebbuġ u li jiġu miż-żebbuġ aħdar, frisk, u b'saħħtu. Dawn jiġu nnutati direttament u/jew permezz tan-naħa ta' wara tal-imnieħer.
                                 
                              
                                    
                                       Togħma ta' frott misjur
                                    
                                 
                                 
                                    Sett ta' sensazzjonijiet olfattivi li huma tipiċi għaż-żejt u li jfakkru fil-frott misjur, skont il-varjetà taż-żebbuġ u li jiġu miż-żebbuġ frisk u b'saħħtu. Dawn jiġu nnutati direttament u/jew permezz tan-naħa ta' wara tal-imnieħer.
                                 
                              
                                    
                                       Togħma bbilanċjata
                                    
                                 
                                 
                                    Żejt li ma jurix nuqqas ta' bilanċ, jiġifieri s-sensazzjoni tattili u marbuta mas-sens tax-xamm u tat-togħma li fiha l-valur medjan tal-attribut tat-togħma morra u l-valur medjan tal-attribut punġenti ma jkunux iktar minn żewġ punti ogħla minn dak tat-togħma tal-frott.
                                 
                              
                                    
                                       Żejt ta' togħma mmoderata
                                    
                                 
                                 
                                    Żejt li l-valur medjan tal-attributi tat-togħma morra u punġenti jkun ta' 2,0 jew inqas.
                                 
                              Lista ta' termini skont l-intensità tal-perċezzjoni:
                        
                                    Termini soġġetti għall-produzzjoni ta' ċertifikat tat-test organolettiku
                                 
                                 
                                    Valur medjan tal-attribut
                                 
                              
                                    Togħma ta' frott
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    Togħma ta' frott misjur
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    Togħma ta' frott aħdar
                                 
                                 
                                    —
                                 
                              
                                    Togħma ta' frott ħafifa
                                 
                                 
                                    ≤ 3,0
                                 
                              
                                    Togħma ta' frott medja
                                 
                                 
                                    3,0 < Me ≤ 6,0
                                 
                              
                                    Togħma ta' frott qawwija
                                 
                                 
                                    > 6,0
                                 
                              
                                    Togħma ħafifa ta' frott misjur
                                 
                                 
                                    ≤ 3,0
                                 
                              
                                    Togħma medja ta' frott misjur
                                 
                                 
                                    3,0 < Me ≤ 6,0
                                 
                              
                                    Togħma qawwija ta' frott misjur
                                 
                                 
                                    > 6,0
                                 
                              
                                    Togħma ħafifa ta' frott aħdar
                                 
                                 
                                    ≤ 3,0
                                 
                              
                                    Togħma medja ta' frott aħdar
                                 
                                 
                                    3,0 < Me ≤ 6,0
                                 
                              
                                    Togħma qawwija ta' frott aħdar
                                 
                                 
                                    > 6,0
                                 
                              
                                    Togħma ħafifa morra
                                 
                                 
                                    ≤ 3,0
                                 
                              
                                    Togħma medja morra
                                 
                                 
                                    3,0 < Me ≤ 6,0
                                 
                              
                                    Togħma qawwija morra
                                 
                                 
                                    > 6,0
                                 
                              
                                    Togħma punġenti ħafifa
                                 
                                 
                                    ≤ 3,0
                                 
                              
                                    Togħma punġenti medja
                                 
                                 
                                    3,0 < Me ≤ 6,0
                                 
                              
                                    Togħma punġenti qawwija
                                 
                                 
                                    > 6,0
                                 
                              
                                    Żejt ibbilanċjat
                                 
                                 
                                    Il-valur medjan tal-attribut tat-togħma morra u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma punġenti jkunu mhux aktar minn 2,0 punti ogħla mill-punt medjan tat-togħma tal-frott
                                 
                              
                                    Żejt ta' togħma moderata
                                 
                                 
                                    Il-valur medjan tal-attribut tat-togħma morra u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma punġenti huma 2,0 jew anqas.”;
                                 
                              
                  
                        (2)
                     
                     
                        il-punt 9.4 huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        “9.4.   Il-klassifikazzjoni taż-żejt
                        
                        Iż-żejt għandu jiġi kklassifikat kif ġej, skont il-valur medjan tad-difetti u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma tal-frott. Il-valur medjan tad-difetti huwa ddefinit bħala l-valur medjan tad-difett innutat bl-akbar intensità. Il-valur medjan tad-difetti u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma tal-frott jingħataw bħala numri b'ċifra waħda wara l-punt deċimali.
                        Iż-żejt jiġi kklassifikat billi l-valur medjan tad-difetti u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma tal-frott jitqabblu mal-firxiet ta' valuri ta' referenza mogħtija hawn taħt. L-iżball tal-metodu tqies meta kienu qed jiġu stabbiliti l-limiti ta' dawn il-firxiet u allura dawn għandhom jitqiesu bħala assoluti. Il-pakketti ta' softwer tal-kompjuter jippermettu li l-klassifika tintwera fil-forma ta' tabella tal-istatistika jew graff.
                        
                                    (a)
                                 
                                 
                                    Żejt taż-żebbuġa straverġni: il-valur medjan tad-difetti huwa 0,0 u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma ta' frott huwa ta' aktar minn 0,0;
                                 
                              
                                    (b)
                                 
                                 
                                    Żejt taż-żebbuġa verġni: il-valur medjan tad-difetti huwa ta' aktar minn 0,0 iżda ta' mhux aktar minn 3,5 u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma ta' frott huwa ta' aktar minn 0,0;
                                 
                              
                                    (c)
                                 
                                 
                                    Żejt taż-żebbuġa verġni lampante: il-valur medjan tad-difetti huwa ta' iktar minn 3,5 jew huwa ta' 3,5 jew inqas, u l-valur medjan tal-attribut tat-togħma ta' frott huwa ta' 0,0.
                                 
                              
                                    
                                       Nota 1:
                                    
                                 
                                 
                                    Meta l-valur medjan tal-attribut tat-togħma morra u/jew qawwija jkun ta' iktar minn 5,0, il-kap tal-bord għandu jiddikjara dan fuq iċ-ċertifikat tat-test.
                                 
                              Fil-każ tal-valutazzjonijiet imwettqa għall-kontroll tal-konformità, għandu jsir test wieħed. Fil-każ ta' kontrovalutazzjonijiet, l-analiżi trid titwettaq darbtejn u f'sessjonijiet tad-dewqan differenti; Ir-riżultati tal-analiżi duplikata jridu jkunu omoġenji b'mod sistematiku. (Ara l-punt 9.5). Jekk le, il-kampjun irid jerġa' jiġi analizzat darbtejn. Il-valur finali tal-medjan tal-attributi tal-klassifikazzjoni jiġi kkalkulat billi tintuża l-medja taż-żewġ valuri medjani.”.
                     
                  
      
      
         
            ANNESS V
            L-Anness XVII huwa emendat kif ġej:
            
                        (1)
                     
                     
                        il-punt 5.1 huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        
                                    “5.1.
                                 
                                 
                                    Eżan jew taħlita ta' alkani b'intervall b.p. 65 sa 70 °C, distillat(i) b'kolonna rettifikata. L-eżan jista' jiġi sostitwit bl-iso-ottan (2,2,4-trimetil pentan fi grad ta' kromatografija), dejjem jekk jinkisbu l-valuri ta' preċiżjoni komparabbli. Ir-residwu wara l-evaporazzjoni ta' 100 ml ta' solvent jista' jiġi kkontrollat. Solventi b'punt tat-togħlija ogħla mill-n-eżan jieħdu aktar żmien biex jevaporaw. Madankollu, huma ppreferuti minħabba fit-tossiċità tal-eżan.”;
                                 
                              
                  
                        (2)
                     
                     
                        fil-punt 6.3.3, jiżdied it-test li ġej:
                        “Nota 10. Meta f'konċentrazzjonijiet ta' aktar minn 4 mg/kg jidhru stigmastadienes, jekk tkun meħtieġa kwantifikazzjoni, irid jiġi applikat il-metodu tal-Kunsill Internazzjonali taż-Żebbug għad-determinazzjoni tal-isterenes f'żejt raffinat.”
                     
                  
      
      
         
            ANNESS VI
            L-Anness XVIII huwa emendat kif ġej:
            
                        (1)
                     
                     
                        il-punt 4.2.1. huwa sostitwit b'dan li ġej:
                        
                                    “4.2.1.
                                 
                                 
                                    Etere tal-petroleum 40-60 °C grad kromatografiku jew eżan L-eżan jista' jiġi sostitwit bl-iso-ottan (2,2,4-trimetil pentan fi grad ta' kromatografija), dejjem jekk jinkisbu l-valuri ta' preċiżjoni komparabbli. Solventi b'punt tat-togħlija ogħla minn tal-n-eżan jieħdu aktar żmien biex jevaporaw. Madankollu, huma ppreferuti minħabba t-tossiċità tal-eżan.”;
                                 
                              
                  
                        (2)
                     
                     
                        jiżdied il-punt 4.2.12 li ġej:
                        
                                    “4.2.12.
                                 
                                 
                                    Ettan, kwalità kromatografika. L-ettan jista' jiġi sostitwit bl-iso-ottan (2,2,4-trimetil pentan fi grad ta' kromatografija).”.
                                 
                              
                  
      
      
         
            ANNESS VII
            
               
                  
                     “ANNESS XIX
                     
                        DETERMINAZZJONI TAL-KOMPOŻIZZJONI U TAL-KONTENUT TAL-ISTEROLI U TAL-KOMPOSTI ALKOĦOLIĊI PERMEZZ TAL-KROMATOGRAFIJA B'FAŻI GASSUŻA F'KOLONNA KAPILLARI
                     
                     1.   KAMP TA' APPLIKAZZJONI
                     Il-metodu jiddeskrivi proċedura għad-determinazzjoni tal-kontenut totali ta' komposti alkoħoliċi ta' żjut taż-żebbuġa u żjut mir-residwi taż-żebbuġ kif ukoll taħlitiet ta' dawn iż-żewġt iżjut.
                     Il-komposti alokoliċi fiż-żjut taż-żebbuġa u fiż-żjut mir-residwi taż-żebbuġa jinkludu l-akoħol alifatiku, l-isteroli u d-dialkoħol triterpeniku.
                     2.   PRINĊIPJU
                     Iż-żjut, b'α-kolestanol u 1-ejkosanol miżjuda bħala standards interni, jiġu sapunifikati bl-idrossidu tal-potassju f'soluzzjoni etanolika u l-materja mhux sapunifikabbli u mbagħad tiġi estratta bl-eteru etiliku.
                     Il-frazzjonijiet ta' komposti alkoħoliċi differenti jiġu separati mill-materja mhux sapunifikabbli bi kromatografija ta' saff irqiq fuq pjanċar tal-ġell tas-siliċ bażika (metodu ta' referenza) jew permezz tal-HPLC b'kolonna tal-ġell tas-siliċe. Il-frazzjonijiet irkuprati mill-ġell tas-siliċe jinbidlu f'eteri tat-trimetilsilil u mbagħad jiġu analizzati permezz tal-kromatografija b'fażi gassuża f'kolonna kapillari.
                     
                        IL-PARTI 1
                     
                     
                        TĦEJJIJA TAL-MATERJA MHUX SAPUNIFIKABBLI
                     
                     1.   KAMP TA' APPLIKAZZJONI
                     Din il-Parti tiddeskrivi l-preparazzjoni u l-estrazzjoni tal-materja mhux sapunifikabbli. Hija tinkludi l-preparazzjoni u l-estrazzjoni tal-materja mhux sapunifikabbli minn żjut taż-żebbuġa u żjut mir-residwi taż-żebbuġ.
                     2.   PRINĊIPJU
                     Porzjon tat-test jiġi sapunifikat bit-togħlija taħt rifluss b'soluzzjoni tal-idrossidu tal-potassju etanoliku. Il-materja mhux sapunifikabbli tiġi estratta bl-etere dietiliku.
                     3.   TAGĦMIR
                     It-tagħmir tal-laboratorju tas-soltu u b'mod partikolari dan li ġej:
                     
                                 3.1.
                              
                              
                                 Flask b'qiegħ tond mgħammar b'kondensatur ta' rifluss b'ġonot tal-ħġieġ mitħun, 250 ml.
                              
                           
                                 3.2.
                              
                              
                                 Lembut ta' separazzjoni, 500 mL.
                              
                           
                                 3.3.
                              
                              
                                 Flasks, 250 mL.
                              
                           
                                 3.4.
                              
                              
                                 Mikrosiringi, 100 μL u 500 μL.
                              
                           
                                 3.5.
                              
                              
                                 Lembut b'filtru forma ta' ċilindru b'septum poruż ta' G3 (b'porożità ta' 15-il μm sa 40 μm) li jkollu dijametru ta' madwar 2 ċm u jkun fond 5 ċm, li jkun adattat għall-filtrazzjoni f'vakwu b'ġonta interna tal-ħġieġ żmeriljat.
                              
                           
                                 3.6.
                              
                              
                                 Flask koniku b'ġonta esterna tal-ħġieġ mitħun, 50 mL li jista' jitwaħħal mal-lembut tal-filtru (3.5).
                              
                           
                                 3.7.
                              
                              
                                 Tubu tat-testijiet bil-qiegħ li jidjieq u tapp tal-ħġieġ li jissiġilla, 10 mL.
                              
                           
                                 3.8.
                              
                              
                                 Dessikatur tal-klorur tal-kalċju.
                              
                           4.   REAĠENTI
                     
                                 4.1.
                              
                              
                                 Titru minimu ta' idrossidu tal-potassju ta' 85 %.
                              
                           
                                 4.2.
                              
                              
                                 Madwar 2 M ta' soluzzjoni etanolika tal-idrossidu tal-potassju.
                                 Dewweb 130 g ta' idrossidu tal-potassju (4.1) permezz tat-tkessiħ f'200 ml ta' ilma distillat u mbagħad żidu bl-etanol (4.7) sa ma jkollok litru. Żomm is-soluzzjoni fi fliexken tal-ħġieġ skur magħluqin sewwa b'tapp u maħżuna għal mhux aktar minn jumejn.
                              
                           
                                 4.3.
                              
                              
                                 Etere etiliku għall-kwalità tal-analiżi.
                              
                           
                                 4.4.
                              
                              
                                 Sulfat tas-sodju anidru, għall-kwalità tal-analiżi.
                              
                           
                                 4.5.
                              
                              
                                 Aċeton għall-kwalità tal-kromatografija.
                              
                           
                                 4.6.
                              
                              
                                 Etere etiliku għall-kwalità tal-kromatografija.
                              
                           
                                 4.7.
                              
                              
                                 Etanol ta' kwalità analitika.
                              
                           
                                 4.8.
                              
                              
                                 Aċetat etiliku ta' kwalità analitika.
                              
                           
                                 4.9.
                              
                              
                                 Standard intern, α-kolestanol b'purità ta' aktar minn 99 % (il-purità trid tiġi ċċekkjata permezz ta' analiżi GC).
                              
                           
                                 4.10.
                              
                              
                                 Soluzzjoni standard interna ta' α-kolestanol, 0,2 soluzzjoni (m/V) f'aċetat etiliku (4.8).
                              
                           
                                 4.11.
                              
                              
                                 Soluzzjoni tal-fenolftaleina, 10 g/L fl-etanol (4.7).
                              
                           
                                 4.12.
                              
                              
                                 0,1 % (m/v) soluzzjoni ta' 1-ejkosanol f'aċetat etiliku (standard intern).
                              
                           5.   PROĊEDURA
                     Filwaqt li tuża mikrosiringa ta' 500 μl (3.4), fil-flask ta' 250 ml (3.1) introduċi volum tas-soluzzjoni standard interna ta' α-kolestanol (4.12) u volum ta' 1-ejkosanol (4.12) b'ammont ta' kolestanol u ejkosanol li jikkorrispondi ma' madwar 10 % tal-kontenut ta' steroli u alkoħol tal-kampjun. Pereżempju, għal 5 g ta' kampjun ta' żejt taż-żebbuġa żid 500 μL tas-soluzzjoni α-kolestanol (4.10) u 250 μL ta' soluzzjoni 1-ejkosanol (4.12). Għal żjut mir-residwi taż-żebbuġ żid 1500 μL kemm ta' soluzzjoni α-kolestanol (4.10) kif ukoll ta' 1-ejkosanol (4.12). Evapora sakemm tnixxef b'kurrent ġentili ta' nitroġenu f'banju tal-ilma fietel. Wara li tkessaħ il-flask, iżen 5,00 ± 0,01 g tal-kampjun iffiltrat niexef fl-istess flask.
                     
                                 
                                    Nota 1:
                                 
                              
                              
                                 Iż-żjut u x-xaħmijiet tal-annimali jew veġetali li jkun fihom kwantitajiet kbar ta' kolesterol jistgħu juru quċċata li l-ħin ta' żamma tagħha huwa identiku għal dak tal-kolestanol. Jekk dan iseħħ, il-frazzjoni tal-isteroli jkollha tiġi analizzata darbtejn, bl-istandard intern u mingħajru.
                              
                           Żid 50 mL ta' 2M ta' soluzzjoni etanolika tal-idrossidu tal-potassju (4.2) u xi ftit ħaffiefa, poġġi l-kondensatur ta' rifluss u saħħan it-taħlita sakemm din tibda tagħli bil-mod u sa ma s-soluzzjoni ssir qisha sapun (sa ma ssir ċara). Kompli saħħan għal 20 minuta oħra mbagħad żid 50 mL ta' ilma ddistillat mill-parti ta' fuq tal-kondensatur, aqla' l-kondensatur u kessaħ il-flask sa ma jkollu bejn wieħed u ieħor temperatura ta' 30 °C.
                     Ittrasferixxi l-kontenut tal-flask b'mod kwantitattiv f'lembut ta' separazzjoni ta' 500 mL (3.2) billi tuża diversi porzjonijiet ta' ilma ddistillat (50 mL). Żid bejn wieħed u ieħor 80 ml ta' etere etiliku (4.6), ħawwad sew għal madwar 60 sekonda, filwaqt li tirrilaxxa l-pressjoni b'mod regolari billi taqleb il-lembut ta' separazzjoni ta' taħt fuq u tiftaħ it-tapp. Ħalli t-taħlita toqgħod sa ma jkun hemm separazzjoni kompluta taż-żewġ fażijiet (ara n-Nota 2). Imbagħad neħħi s-soluzzjoni tas-sapun b'mod kemm jista' jkun komplut u poġġieħa f'lembut tas-separazzjoni ieħor. Bl-istess mod, agħmel żewġ estrazzjonijiet oħra tal-fażi tal-ilma u l-alkoħol billi tuża 60 sa 70 ml ta' etere etiliku (4.6).
                     
                                 
                                    Nota 2:
                                 
                              
                              
                                 Kwalunkwe emulsjoni tista' tiġi meqruda biż-żieda ta' kwantitajiet żgħar ta' etanol (4.7).
                              
                           Ħallat it-tliet estratti tal-etere f'lembut ta' separazzjoni wieħed li jkun fih 50 mL ta' ilma. Kompli aħsel bl-ilma (50 ml) sakemm l-ilma tal-ħasil ma jibqax jagħti kulur roża meta tiżdiedlu qatra ta' soluzzjoni tal-fenolftaleina (4.12). Meta l-ilma tal-ħasil ikun tneħħa, iffiltra bis-sulfat tas-sodju anidru (4.4) fi flask ta' 250 mL li jkun intiżen qabel, filwaqt li taħsel il-lembut u l-filtru bi kwantitajiet żgħar ta' etere etiliku (4.6).
                     Ħalli s-solvent jevapora permezz tad-distillazzjoni f'evaporatur rotatorju fi 30 °C f'vakwu. Żid 5 mL ta' aċeton (4.5) u neħħi s-solvent volatili kompletament f'kurrent ħafif ta' nitroġenu. Nixxef ir-residwu fil-forn f'temperatura ta' 103 °C ± 2 °C għal kwarta. Kessaħ f'dessikaturi u iżen sal-eqreb 0,1 mg.
                     
                        PARTI 2
                     
                     
                        IS-SEPARAZZJONI TAL-FRAZZJONIJIET TA' KOMPOSTI ALKOĦOLIĊI
                     
                     1.   KAMP TA' APPLIKAZZJONI
                     Il-materja mhux sapunifikabbli ppreparata fil-Parti 1 tiġi frazzjonata f'komposti alkoħoliċi differenti, alkoħol alifatiku, steroli u dialkoħol triterpeniku (eritrodijol u uvaol).
                     2.   PRINĊIPJU
                     Il-materja mhux sapunifikabbli tista' tiġi frazzjonata bl-użu ta' kromatografija bażika ta' saff irqiq (metodu ta' referenza), żvelata u l-faxex korrispondenti migrufa u estratti. Bħala metodu ta' separazzjoni alternattiv, HPLC bl-użu ta' kolonna tal-ġell tas-siliċe u individwatur tal-UV u l-frazzjonijiet differenti miġbura. L-alkoħol alifatiku u triterpeniku kif ukoll id-dialkoħol tal-isteroli u triterpeniku jiġu iżolati flimkien.
                     3.   TAGĦMIR
                     L-apparat tal-laboratorju tas-soltu u b'mod partikolari dan li ġej:
                     
                                 3.1.
                              
                              
                                 Apparat komplut għall-analiżi bil-kromatografija b'saff irqiq bl-użu ta' pjanċi tal-ħġieġ ta' 20 cm b'20 cm.
                              
                           
                                 3.2.
                              
                              
                                 Lampa tar-radjazzjoni ultravjola b'tul tal-mewġa ta' 366 nm jew 254 nm.
                              
                           
                                 3.3.
                              
                              
                                 Mikrosiringi, 100 μL u 500 μL.
                              
                           
                                 3.4.
                              
                              
                                 Lembut b'filtru forma ta' ċilindru b'septum poruż ta' G3 (b'porożità ta' 15-il μm sa 40 μm) li jkollu dijametru ta' madwar 2 ċm u jkun fond 5 ċm, li jkun adattat għall-filtrazzjoni f'vakwu b'ġonta interna tal-ħġieġ żmeriljat.
                              
                           
                                 3.5.
                              
                              
                                 Flask koniku b'ġonta esterna tal-ħġieġ mitħun, 50 mL li jista' jitwaħħal mal-lembut tal-filtru (3.4.).
                              
                           
                                 3.6.
                              
                              
                                 Tubu tat-testijiet bil-qiegħ li jidjieq u tapp tal-ħġieġ li jissiġilla, 10 mL.
                              
                           
                                 3.7.
                              
                              
                                 Dessikatur tal-klorur tal-kalċju.
                              
                           
                                 3.8.
                              
                              
                                 Sistema tal-HPLC, li tikkonsisti minn:
                                 
                                             3.8.1.
                                          
                                          
                                             Pompa binarja.
                                          
                                       
                                             3.8.2.
                                          
                                          
                                             Injettur manwali jew awtomatiku mgħammar b'loop tal-injezzjoni ta' 200 μL.
                                          
                                       
                                             3.8.3.
                                          
                                          
                                             Apparat li jneħħi l-gass in-line.
                                          
                                       
                                             3.8.4.
                                          
                                          
                                             Individwatur UV-VIS jew IR.
                                          
                                       
                           
                                 3.9.
                              
                              
                                 Kolonna tal-HPLC (25 cm × 4 mm i.d.) b'ġell tas-siliċe 60 (daqs tal-partikuli ta' 5 μm).
                              
                           
                                 3.10.
                              
                              
                                 Filtru tas-siringa, 0,45 μm
                              
                           
                                 3.11.
                              
                              
                                 Flask koniku, 25 mL.
                              
                           4.   REAĠENTI
                     
                                 4.1.
                              
                              
                                 85 % ta' titru minimu ta' idrossidu tal-potassju.
                              
                           
                                 4.2.
                              
                              
                                 Madwar 2 M ta' soluzzjoni etanolika tal-idrossidu tal-potassju.
                                 Dewweb 130 g ta' idrossidu tal-potassju (4.1) permezz tat-tkessiħ f'200 ml ta' ilma distillat u mbagħad żidu b'litru etanol (4.9). Żomm is-soluzzjoni fi fliexken tal-ħġieġ skur magħluqin sewwa b'tapp u maħżuna għal mhux aktar minn jumejn.
                              
                           
                                 4.3.
                              
                              
                                 Etere etiliku, għall-kwalità tal-analiżi.
                              
                           
                                 4.4.
                              
                              
                                 Madwar 0,2 M ta' soluzzjoni etanolika tal-idrossidu tal-potassju.
                                 Dewweb 13-il g ta' idrossidu tal-potassju (4.1) f'20 ml ta' ilma distillat u żidu b'litru etanol (4.9).
                              
                           
                                 4.5.
                              
                              
                                 Pjanċi tal-ħġieġ 20x20 miksijin bil-ġell tas-silika, mingħajr indikatur tal-fluworexxenza, u bi ħxuna ta' 0,25 mm (dawn jinsabu għall-bejgħ lesti għall-użu).
                              
                           
                                 4.6.
                              
                              
                                 Aċeton għall-kwalità tal-kromatografija.
                              
                           
                                 4.7.
                              
                              
                                 n-Eżan għall-kwalità tal-kromatografija.
                              
                           
                                 4.8.
                              
                              
                                 Etere etiliku, għall-kwalità tal-kromatografija.
                              
                           
                                 4.9.
                              
                              
                                 Etanol ta' kwalità analitika.
                              
                           
                                 4.10.
                              
                              
                                 Aċitat etiliku ta' kwalità analitika.
                              
                           
                                 4.11.
                              
                              
                                 Soluzzjoni ta' referenza għall-kromatografija b'saff irqiq: Soluzzjoni ta' 5 % kolesterol, fitosteroli, alkoħol, u Eritrodijol f'Aċetat etiliku (4.10.).
                              
                           
                                 4.12.
                              
                              
                                 Soluzzjoni ta' 2,7-diklorofluworexxein, 0,2 % f'soluzzjoni etanolika. Ġibha ftit bażika billi żżid xi qtar ta' soluzzjoni alkoħolika ta' 2 M ta' soluzzjoni tal-idrossidu tal-potassju (4.2).
                              
                           
                                 4.13.
                              
                              
                                 Taħlita ta' 65:35 (V/V) ta' n-eżan (4.7)/etere etiliku (4.8).
                              
                           
                                 4.14.
                              
                              
                                 (1:1) (V/V) n-eżan (4.7)/etere etiliku (4.8) fażi mobbli ta' HPLC.
                              
                           5.   METODU TA' REFERENZA: IS-SEPARAZZJONI TAL-KOMPOSTI ALKOĦOLIĊI PERMEZZ TA' PJANĊA BAŻIKA TA' KROMATOGRAFIJA FUQ SAFF IRQIQ (TLC)
                     Ipprepara l-pjanċi bażiċi ta' kromatografija fuq saff irqiq. Għaddas il-pjanċi tal-ġell tas-silika (4.5) madwar 4 cm fis-soluzzjoni etanolika tal-idrossidu tal-potassju ta' 0,2 M (4.4) għal 10 sekondi, imbagħad ħallihom sagħtejn jinxfu f'kabinett għad-dħaħen u fl-aħħar poġġihom f'forn f'temperatura 100 °C għal siegħa.
                     Neħħihom mill-forn u żommhom f'dessikatur tal-klorur tal-kalċju (3.7) sa ma jkun hemm bżonn jintużaw (il-pjanċi li jkunu għaddew minn din il-proċedura jridu jintużaw fi żmien ħmistax).
                     Qiegħed it-taħlita ta' eżan/etere etiliku (4.13) (Nota 3) fil-kompartiment tal-iżvilupp, f'fond ta' madwar 1 cm. Agħlaq il-kompartiment b'għatu xieraq u ħallih hekk għal mhux anqas minn nofs siegħa, f'post frisk, sabiex jiġi stabbilit l-ekwilibriju ta' bejn il-likwidu u l-fwar. Jistgħu jitpoġġew strippi ta' filtri tal-karta mgħaddsa fl-eluent fuq il-wiċċ ġewwieni tal-kamra. Dan inaqqas il-ħin tal-iżvilupp bejn wieħed u ieħor b'terz u jwassal għal elwizzjoni aktar uniformi u regolari tal-komponenti.
                     
                                 
                                    Nota 3:
                                 
                              
                              
                                 It-taħlita tal-iżvilupp għandha tinbidel għal kull test sabiex jinkisbu kondizzjonijiet ta' elużjoni perfettament riproduċibbli. Jista' jintuża solvent alternattiv 50:50 (V/V) n-eżan/etere etiliku.
                              
                           Ipprepara soluzzjoni ta' madwar 5 % ta' dik mhux sapunifikabbli ppreparata fil-Parti 1 fl-aċitat etiliku (4.10) u, bl-użu tal-mikrosiringa ta' 100 μl (3.3), poġġi 0.3 ml mis-soluzzjoni fuq strixxa dejqa u uniformi fin-naħa t'isfel (2 cm) tal-pjanċa kromatografika (4.5). B'mod parallel mal-istrixxa, qiegħed bejn 2 u 3 μL tas-soluzzjoni ta' referenza tal-materjal (4.11) sabiex il-faxex tal-isterol, tad-dialkoħol triterpen u tal-alkoħol ikunu jistgħu jiġu identifikati wara l-iżvilupp.
                     Qiegħed il-pjanċa fil-kompartiment tal-iżvilupp (3.1). It-temperatura ambjentali għandha tinżamm bejn 15 u 20 °C (Nota 4). Agħlaq il-kamra mal-ewwel bl-għatu u ħalli l-proċess ta' elużjoni jseħħ sa ma l-parti ta' quddiem tas-solvent tasal madwar ċentimetru mit-tarf ta' fuq tal-pjanċa. Neħħi l-pjanċa mill-kamra tal-iżvilupp u ħalli s-solvent jevapora f'kurrent ta' arja sħuna jew billi tħalli l-pjanċa għal ftit ħin taħt għata.
                     
                                 
                                    Nota 4:
                                 
                              
                              
                                 Temperatura ogħla minn hekk tista' tgħarraq is-separazzjoni.
                              
                           Sprejja l-pjanċa kemm kemm u b'mod uniformi bis-soluzzjoni ta' 2,7-diklorofluworexxein(4.12) u mbagħad ħalliha tinxef. Meta l-pjanċa tiġi osservata f'dawl ultravjola (3.2), il-faxex tal-isteroli, tad-dialkoħol tat-triterpen u tal-alkoħol ikunu jistgħu jiġu identifikati billi jiġu allinjati mat-tbajja' miksubin permezz tas-soluzzjoni ta' referenza (4.11). Immarka l-limiti tal-faxex mat-truf tal-fluworexxenza b'lapes iswed (ara l-pjanċa tat-TLC f'Figura 1).
                     Obrox il-ġell tas-silika minn fuq il-parti mmarkata billi tuża spatula tal-metall. Poġġi l-materjal mitħun fin li jkun tneħħa fil-lembut tal-filtru (3.4). Żid 10 mL ta' aċetat etiliku sħun (4.10), ħawdu bil-mod bl-ispatula tal-metall u ffiltrah (f'vakwu jekk ikun meħtieġ), filwaqt li tiġbor il-filtrat fil-flask koniku (3.5.) imwaħħal mal-lembut b'filtru.
                     Aħsel ir-residwu fil-flask tliet darbiet bl-etere etiliku (4.3) (madwar 10 mL kull darba), filwaqt li tiġbor il-filtrat fl-istess flask imwaħħal mal-lembut, evapora l-filtrat sa ma jintlaħaq volum ta' bejn 4 u 5 mL, ittrasferixxi s-soluzzjoni li jifdal għal ġot-tubu tat-testijiet ta' 10 mL li jkun intiżen minn qabel (3.6), evaporaha permezz ta' tisħin ħafif fi fluss ħafif ta' nitroġenu sa ma jinxef, erġa' oħloqha mill-ġdid billi tuża ftit qtar ta' aċeton (4.6) u evaporaha għal darb'oħra sa ma tinxef. Ir-residwu fit-tubu tat-testijiet jikkonsisti mill-isteroli u d-dialkoħol tat-triterpen jew mill-alkoħol u frazzjonijiet ta' alkoħol triterpeniku.
                     6.   IS-SEPARAZZJONI TAL-FRAZZJONI ALKOĦOLIKA PERMEZZ TAL-HPLC
                     Is-soluzzjoni mhux sapunifikabbli miksuba mill-Parti 1 tiġi maħlula fi 3 mL tal-fażi mobbli (4.14), iffiltra s-soluzzjoni b'filtru tas-siringa (3.10 u rriżerva.
                     Injetta 200 μL tas-soluzzjoni mhux sapunifikabbli ffiltrata fl-HPLC (3.8).
                     Wettaq is-separazzjoni tal-HPLC b'0,8 mL/min, armi l-ewwel 5 min. u iġbor fi flasks koniċi ta' 25 mL (3.11) bejn il-5 u 10 min. għal alkoħol alifatiku u triterpeniku u bejn 11 u 25 min għal steroli u eritrodijol u uvaol (Nota 5).
                     Is-separazzjoni tista' tiġi mmonitorjata b'individwatur tal-UV b'tul tal-mewġa ta' 210 nm jew individwatur tal-indiċi rifrattiv (ara l-Figura 6).
                     Il-frazzjonijiet jiġu evaporati sat-tnixxif u jiġu mħejjija għal analiżi kromatografika.
                     
                                 
                                    Nota 5:
                                 
                              
                              
                                 Ikkontrolla l-pressjoni tal-pompa tal-HPLC bir-reqqa, l-eteru etiliku jista' jżid il-pressjoni, aġġusta l-fluss biex iżżomm il-pressjoni taħt kontroll.
                              
                           
                        PARTI 3
                     
                     
                        ANALIŻI KROMATOGRAFIKA TAL-GASS TAL-FRAZZJONIJIET TA' KOMPOSTI ALKOĦOLIĊI
                     
                     1.   KAMP TA' APPLIKAZZJONI
                     Din il-parti tagħti gwida ġenerali għall-applikazzjoni tal-kromatografija b'fażi gassuża f'kolonna kapillari, sabiex tiġi ddeterminata l-kompożizzjoni kwalitattiva u kwantitattiva tal-komposti alkoħoliċi iżolati skont il-metodu speċifikat fil-Parti 2 ta' dan il-metodu.
                     2.   PRINĊIPJU
                     Il-frazzjonijiet miġbura mill-materja mhux sapunifikabbli bl-użu tat-TLC jew tal-HPLC jiġi derivatizzati f'eteri tat-trimetilsilil u analizzati bi kromatografija b'fażi gassuża f'kolonna kapillari b'injezzjoni maqsuma u individwatur tal-jonizzazzjoni tal-fjamma.
                     3.   APPARAT
                     L-apparat tas-soltu tal-laboratorju u b'mod partikulari dan li ġej:
                     
                                 3.1.
                              
                              
                                 Tubu tat-testijiet bil-qiegħ li jidjieq u tapp tal-ħġieġ li jissiġilla, 10 mL.
                              
                           
                                 3.2.
                              
                              
                                 Kromatografu b'fażi gassuża li jkun jista' jintuża ma' kolonna kapillari, li jkollu sistema ta' injezzjoni maqsuma u li jkun magħmul minn:
                                 
                                             3.2.1.
                                          
                                          
                                             Kompartiment termostatiku għall-kolonni li jifilħu jżommu t-temperatura mixtieqa bi preċiżjoni ta' ± 1 °C;
                                          
                                       
                                             3.2.2.
                                          
                                          
                                             Unità ta' injezzjoni b'temperatura li tista' tiġi adattata li jkollha element ta' vaporizzazzjoni tal-ħġieġ persilanizzat u sistema maqsuma;
                                          
                                       
                                             3.2.3.
                                          
                                          
                                             Individwatur tal-jonizzazzjoni bi fjamma (FID);
                                          
                                       
                                             3.2.4.
                                          
                                          
                                             Sistema għall-ksib tad-data xierqa għall-użu mal-individwatur FID (3.10.3.), b'kapaċità ta' integrazzjoni manwali.
                                          
                                       
                           
                                 3.3.
                              
                              
                                 Kolonna kapillari tas-silika mdewba twila bejn 20 u 30 m, b'dijametru intern ta' bejn 0,25 mm u 0,32 mm, miksija b'5 % Difenil u 95 % Dimetilpolisilossan (il-fażi stazzjonarja ta' SE-52 jew SE-54 jew l-ekwivalenti), hekk li jkollha ħxuna uniformi ta' bejn 0,10 μm u 0.30 μm.
                              
                           
                                 3.4.
                              
                              
                                 Mikrosiringa, b'kapaċità ta' 10 μL, għall-kromatografija b'fażi gassuża, b'labra mwaħħla adattata għall-injezzjoni maqsuma.
                              
                           4.   REAĠENTI
                     
                                 4.1.
                              
                              
                                 Piridin anidruż, għall-kwalità tal-kromatografija.
                              
                           
                                 4.2.
                              
                              
                                 Disilażan tal-eżametil ta' kwalità analitika.
                              
                           
                                 4.3.
                              
                              
                                 Trimetilklorosilan ta' kwalità analitika.
                              
                           
                                 4.4.
                              
                              
                                 Mudelli tas-soluzzjonijiet tal-eteri tat-trimetilsilil tal-isteroli. Dawn għandhom jitħejjew fil-ħin tal-użu mill-isteroli u l-eritrodiol miksubin miż-żjut li jkun fihom dawn is-sustanzi.
                              
                           
                                 4.5.
                              
                              
                                 Soluzzjonijiet standard ta' eteri tat-trimetilsilil ta' alkoħol alifatiku minn C20 sa C28. Dawn jistgħu jiġu mħejjija minn taħlitiet ta' alkoħol pur fil-ħin li jkunu meħtieġa għall-użu.
                              
                           
                                 4.6.
                              
                              
                                 Gass trasportatur: l-idroġenu jew l-elju, pur għall-kromatografija tal-gass.
                              
                           
                                 4.7.
                              
                              
                                 Gassijiet awżiljarji: l-idroġenu, l-elju, in-nitroġenu u l-arja, li jkunu puri għall-kromatografija tal-gass.
                              
                           
                                 4.8.
                              
                              
                                 Reaġent ta' sililazzjoni, li jikkonsisti f'taħlita ta' 9:3:1 (V/V/V) ta' piridina/disilażan tal-eżametil/trimetilklorosilan.
                              
                           
                                 4.9.
                              
                              
                                 n-Eżan, għall-kwalità tal-kromatografija.
                              
                           5.   TĦEJJIJA TAL-ETERI TAT-TRIMETILSILIL
                     Żid ir-reaġent ta' sililazzjoni (4.8) (Nota 6), fil-proporzjon ta' 50 μl għal kull milligramma ta' kompost alkoħoliku, fit-tubu tat-testijiet (3.1) li jkun fih il-frazzjoni ta' komposti alkoħoliċi, filwaqt li tevita kwalunkwe assorbiment ta' umdità (Nota 7).
                     
                                 
                                    Nota 6:
                                 
                              
                              
                                 Wieħed jista' jsib għall-bejgħ soluzzjonijiet lesti għall-użu. Wieħed jista' jsib ukoll reaġenti ta' sililazzjoni oħrajn bħal, pereżempju, il-bistrimetilsilil trifluwor aċetammid + 1 % trimetilklorosilan, li jrid jiġi dilwit bl-istess volum ta' piridina anidruża. Minflok il-piridina jista' jintuża l-istess ammont ta' aċetonitril.
                              
                           
                                 
                                    Nota 7:
                                 
                              
                              
                                 L-opalexxenza ħafifa li tista' tirriżulta hija normali u ma toħloq l-ebda anomalija. Il-formazzjoni ta' bjuda jew l-apparenza ta' kulur roża jindikaw il-preżenza ta' umdità jew deterjorament tar-reaġent. Jekk dan iseħħ, it-test irid jerġa' jsir (jekk jintuża l-eżametildisilażan jew it-trimetilklorosilan biss).
                              
                           Agħlaq it-tubu tat-testijiet (3.1), ħawdu bil-galbu (mingħajr ma taqilbu rasu 'l isfel) sakemm il-komponenti jinħallu kompletament. Ħallih joqgħod għal mill-inqas kwarta f'temperatura ambjentali u mbagħad ħawdu b'azzjoni ċentrifuga għal ftit minuti. Is-soluzzjoni ċara tkun lesta biex tiġi analizzata bil-kromatografija b'fażi gassuża.
                     6.   ANALIŻI TAL-KROMATOGRAFIJA B'FAŻI GASSUŻA
                     6.1.   L-operazzjonijiet preliminari, il-kundizzjonament tal-kolonna kapillari.
                     Waħħal il-kolonna (3.3) fil-kromatografu b'fażi gassuża billi tqabbad it-tarf ta' ġewwa mal-apparat għall-injezzjoni maqsuma u t-tarf ta' barra mal-individwatur.
                     Wettaq kontrolli ġenerali fuq il-kromatografu b'fażi gassuża (nixxijiet miċ-ċirkwiti tal-gass, l-effiċjenza tal-individwatur, l-effiċjenza tas-sistema ta' separazzjoni u s-sistema ta' reġistrazzjoni, eċċ.).
                     Jekk il-kolonna tkun qed tintuża għall-ewwel darba, huwa rrakkomandat li għandha tiġi soġġetta għal kundizzjonament: jingħadda fluss ħafif ta' gass mill-kolonna nnifisha, imbagħad jitqabbad il-kromatografu b'fażi gassuża u jibda t-tisħin b'mod gradwali sa ma tintlaħaq temperatura ta' mill-anqas 20 °C aktar mit-temperatura ta' tħaddim (Nota 8). Żomm din it-temperatura għal mill-inqas sagħtejn, imbagħad qiegħed l-apparat kollu fil-modalità tat-tħaddim (l-aġġustament tal-kurrenti tal-gass u tas-sistema ta' separazzjoni, it-tqabbid tal-fjamma, il-konnessjoni mas-sistema tal-kompjuter, l-aġġustament tat-temperatura tal-kolonna, tal-individwatur u tal-apparat għall-injezzjoni, eċċ.) u mbagħad irreġistra s-sinjal b'sensittività li tkun mill-inqas darbtejn iktar minn dik maħsuba għall-analiżi. Ir-rotta tal-linja ta' referenza trid tkun lineari, mingħajr ebda quċċata, u m'għandhiex turi devjazzjonijiet. Drift negattiva f'linja dritta tindika nixxija mill-konnessjonijiet tal-kolonna: drift pożittiv tindika kundizzjonament inadegwat tal-kolonna.
                     
                                 
                                    Nota 8:
                                 
                              
                              
                                 It-temperatura tal-kundizzjonament dejjem trid tkun mill-inqas 20 °C inqas mit-temperatura massima speċifikata għall-fażi stazzjonarja użata.
                              
                           6.2.   Kundizzjonijiet ta' tħaddim
                     Ottimizza l-programm tat-temperatura u l-fluss tal-gass trasportatur sabiex ikunu jistgħu jinkisbu l-kromatogrammi simili għall-Figuri minn 3 sa 6.
                     Il-parametri li ġejjin ġew ittestjati u nsabu utli:
                     6.2.1.   Alkoħol alfatiku
                     
                                 Programm tal-Forn
                              
                              
                                 180 °C (8 min.) → 260 °C (at 5 °C/min) → 260 °C (15 min)
                              
                           
                                 Temperatura tal-Injettur
                              
                              
                                 280 °C
                              
                           
                                 Temperatura tal-Individwatur
                              
                              
                                 290 °C
                              
                           
                                 Veloċità Lineari tal-Gass trasportatur
                              
                              
                                 Elju (bejn 20 u 30 cm/s); Idroġenu – (bejn 30 u 50 cm/s)
                              
                           
                                 Proporzjon tal-Qasma
                              
                              
                                 bejn 1:50 u 1:100
                              
                           
                                 Volum Injettat
                              
                              
                                 bejn 0,5 u 1 μl tas-soluzzjoni ta' TMSE
                              
                           6.2.2.   Steroli u dialkoħol triterpeniku
                     
                                 Programm tal-Forn
                              
                              
                                 260 ± 5 °C Isotermiku
                              
                           
                                 Temperatura tal-Injettur
                              
                              
                                 280 – 300 °C
                              
                           
                                 Temperatura tal-Individwatur
                              
                              
                                 280 – 300 °C
                              
                           
                                 Veloċità Lineari tal-Gass trasportatur
                              
                              
                                 Elju (bejn 20 u 30 cm/s); Idroġenu (bejn 30 u 50 cm/s)
                              
                           
                                 Proporzjon tal-firda
                              
                              
                                 bejn 1:50 u 1:100
                              
                           
                                 Volum Injettat
                              
                              
                                 0,5 sa 1 μl tas-soluzzjoni TMSE
                              
                           Dawn il-kundizzjonijiet jistgħu jinbidlu skont il-karatteristiċi tal-kolonna u tal-kromatografu b'fażi gassuża sabiex jinkisbu kromatogrammi li jilħqu r-rekwiżiti li ġejjin:
                     
                                 —
                              
                              
                                 Il-ħin ta' żamma tal-alkoħol C26 għandha tkun 18 ± 5 minuti.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Il-quċċata tal-alkoħol C22 għandha tkun 80 ± 20 % tal-valur tal-iskala sħiħa għaż-żejt taż-żebbuġa u 40 ± 20 % tal-valur tal-iskala sħiħa għaż-żejt mir-residwi taż-żebbuġ.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Il-ħin ta' żamma għall-quċċata tal-β-sitosterol għandu jkun ta' 20 ± 5 min.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 Il-quċċata tal-kampesterol għandha tkun: għaż-żejt taż-żebbuġa (b'kontenut medju ta' 3 %) 20 ± 5 % tal-iskala sħiħa.
                              
                           
                                 —
                              
                              
                                 L-isteroli kollha preżenti jridu jiġu separati. Barra milli jkunu mifrudin, il-qċaċet għandhom jkunu wkoll maqtugħin għal kollox, i.e. il-linja tal-quċċata għandha tmur lura lejn il-linja bażi qabel ma titlaq għall-quċċata li jmiss. Madankollu, jista' jkun hemm riżoluzzjoni mhux sħiħa, dejjem jekk il-quċċata f'RRT 1,02 (is-sitostanol) tkun tista' tiġi kkwantifikata permezz tal-linja perpendikulari.
                              
                           6.3.   Il-proċedura analitika
                     Ħu 1 μl ta' eżan billi tuża l-mikrosiringa ta' 10 μl (3.4), iġbed għal ġo fiha 0,5 μl ta' arja u mbagħad 0,5 μl sa 1 μl tas-soluzzjoni tal-kampjun. Għolli l-planġer tas-siringa iktar sabiex il-labra tiżvojta. Imbotta l-labra fil-membrejn tal-apparat għall-injezzjoni u wara sekonda jew tnejn injetta malajr, imbagħad neħħi l-labra bil-mod wara madwar ħames sekondi. Jista' jintuża wkoll apparat awtomatiku għall-injezzjoni.
                     Irreġistra sakemm it-TMSE tal-komposti alkoħoliċi korrispondenti preżenti jiġu kompletament elwiti. Il-linja bażi trid tkompli tissodisfa r-rekwiżiti tal-kundizzjonijiet ta' tħaddim korrispondenti (6.2.1 jew 6.2.2).
                     6.4.   L-identifikazzjoni tal-qċaċet
                     Identifika l-qċaċet individwali fuq il-bażi tal-ħinijiet ta' żamma u billi tqabbel mat-taħlita tal-alkoħol alifatiku u triterpeniku u t-TMSE tad-dialkoħol tal-isterol u t-triperpen, anlizzati bl-istess kundizzjonijiet. Kromatogramma tal-frazzjoni ta' alkoħol alifatiku u triterpeniku tintwera f'Figura 3 u l-kromatogrammi korrispondenti għall-isteroli u d-dialkoħol triterpeniku jintwerew f'Figura 2.
                     L-alkoħol alifatiku jiġi elwit fl-ordni li ġejja: C20-ol (I.S.), C22-ol, C23-ol, C24-ol, C25-ol, C26-ol, C27-ol u C28-ol.
                     L-isteroli u d-d-dialkoħol tat-triterpen huma elwiti fl-ordni li ġejja: kolesterol, brassikasterol, ergosterol, 24-metilin-kolesterol, kampesterol, kampestanol, stigmasterol, Δ7-kampesterol, Δ5,23-stigmastadienol, klerosterol, ß-sistosterol, sitostanol, Δ5-avenasterol, Δ5,24-stigmastadienol, Δ7-stigmastenol, Δ7-avenasterol, eritrodiol u uvaol.
                     6.5.   Evalwazzjoni kwantitattiva
                     L-erji tal-quċċata ta' 1-ejkosanol u tal-alkoħol alifatiku C22, C24, C26, C28 jiġu kkalkulati minn sistema tal-akkwiżizzjoni tad-data. Il-fattur ta' rispons għall-α-ejkosanol għandu jitqies daqs 1.
                     Ikkalkula l-erjas tal-α-kolestanol u l-qċaċet tal-isteroli u tad-dialkoħol tat-triterpen billi tuża s-sistema tal-kompjuter. Tagħtix każ tal-qċaċet għal kwalunkwe sustanza komposta li mhix inkluża fost dawk elenkati fit-Tabella 1 (l-ergosterol ma jridx jiġi kkalkulat). Il-fattur tat-tweġiba għall-α-kolestanol għandu jitqies li huwa ta' 1.
                     Ikkalkula l-konċentrazzjoni ta' kull kompost alkoħoliku individwali, f'mg/kg ta' materjal xaħmi, kif ġej:
                     
                        
                     fejn:
                     
                                 Ax
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 L-erja tal-quċċata għall-kompost alkoħoliku x, f'komputazzjonijiet tas-sistema tal-kompjuter.
                              
                           
                                 As
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 L-erja tal-quċċata tal-1-ejkosanol/α-kolestanol f'komputazzjonijiet tas-sistema tal-kompjuter.
                              
                           
                                 ms
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Il-massa ta' 1-ejkosanol/α-kolestanol miżjud, f'milligrammi;
                              
                           
                                 m
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Il-massa tal-kampjun użat għad-determinazzjoni, fi grammi.
                              
                           7.   ESPRESSJONI TAR-RIŻULTATI
                     Irrapporta l-konċentrazzjonijiet tal-alkoħol triterpeniku u alifatiku individwali individwali f'mg/kg ta' materjal xaħmi u t-total tagħhom bħala ‘kontenut totali ta' alkoħol alifatiku’. Il-kontenut totali huwa t-total ta' C22, C24, C26 u C28.
                     Il-kompożizzjoni ta' kull wieħed mill-komposti alkoħoliċi individwali għandu jiġi espress sa punt deċimali wieħed.
                     Il-konċentrazzjoni totali ta' steroli għandha tiġi espressa mingħajr l-ebda punt deċimali.
                     Ikkalkula l-perċentwal ta' kull sterol individwali mill-proporzjon tal-erja tal-quċċata rilevanti mal-arja totali tal-quċċata għall-isteroli:
                     
                        
                     fejn:
                     
                                 Ax
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Erja tal-quċċata għal sterol x.
                              
                           
                                 
                                    ΣA
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 L-erja totali tal-quċċata għall-isteroli.
                              
                           β-sitosterol evidenti: Δ5,23-stigmastadienol + klerosterol + β-sitosterol + sitostanol + Δ5-avenasterol + Δ5,24-stigmastadienol.
                     Ikkalkula l-perċentwal ta' eritrodijol u uvaol:
                     
                        
                     fejn:
                     
                                 AEr
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 L-erja ta' Eritrodijol f'komputazzjonijiet tas-sistema tal-kompjuter.
                              
                           
                                 AUv
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 L-erja ta' Uvaol f'komputazzjonijiet tas-sistema tal-kompjuter.
                              
                           
                                 
                                    Σ
                                    ΑΤ
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 L-erja totali tal-isteroli + l-eritrodijol + l-uvaol f'komputazzjonijiet tas-sistema tal-kompjuter.
                              
                           Barra mill-kalkolu tal-perċentwal relattiv ta' steroli u uniċi u diajalkoħol triterpeniku u l-konċentrazzjoni totali ta' steroli, trid tiġi kkalkulata l-konċentrazzjoni ta' eritrodijol u ta' uvaol u t-total tagħhom, f'mg/kg ta' materjal xaħmi, skont l-espressjonijiet li ġejjin:
                     
                        
                     
                        
                     fejn:
                     
                                 AEr
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Erja tal-quċċata tal-Eritrodiol, f'komputazzjonijiet ta' sistema kompjuterizzata.
                              
                           
                                 AUv
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Erja ta' Uvaol f'komputazzjonijiet tas-sistema kompjuterizzata.
                              
                           
                                 As
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Erja tal-quċċata ta' α-kolestanol, f'komputazzjonijiet tas-sistema kompjuterizzata.
                              
                           
                                 ms
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Massa ta' α-kolestanol miżjud, f'milligrammi.
                              
                           
                                 m
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 Massa tal-kampjun użat għad-determinazzjoni, fi grammi.
                              
                           
               
               
                  
                     Appendiċi
                     
                                 
                                    
                              
                              
                                 
                                             1
                                          
                                          
                                             Idrokarburi
                                          
                                       
                                             2
                                          
                                          
                                             α-Tokoferol
                                          
                                       
                                             3
                                          
                                          
                                             Prenoli
                                          
                                       
                                             4
                                          
                                          
                                             Alkoħol Triterpeniku
                                          
                                       
                                             5
                                          
                                          
                                             Alkoħol Alfatiku
                                          
                                       
                                             6
                                          
                                          
                                             Steroli tal-Metil
                                          
                                       
                                             7
                                          
                                          
                                             Steroli
                                          
                                       
                                             8
                                          
                                          
                                             Dialkoħol Triterpeniku
                                          
                                       
                           
                        Figura 1 — TLC tal-frazzjoni mhux sapunifikabbli miż-żejt mir-residwi taż-żebbuġ elwit darbtejn bl-eżan: etere dieteiliku (65:35), żviluppat b'SO4H2 (50 %) u msaħħan. Il-faxex li għandhom jintremew huma dawk fir-rettangolu, 1 huma l-faxex għall-alkoħol alifatiku u 2 għall-isteroli u għad-dialkoħol triterpeniku.
                     
                        Tabella I — Il-ħinijiet relattivi ta' żamma għall-isteroli
                     
                     
                                 Quċċata
                              
                              
                                 Identifikazzjoni
                              
                              
                                 Il-ħin relattiv ta' żamma
                              
                           
                                 Il-kolonna SE 54
                              
                              
                                 Il-kolonna SE 52
                              
                           
                                 1
                              
                              
                                 Kolesterol
                              
                              
                                 Δ-5-kolesten-3ß-ol
                              
                              
                                 0,67
                              
                              
                                 0,63
                              
                           
                                 2
                              
                              
                                 Kolestanol
                              
                              
                                 5α-kolestan-3ß-ol
                              
                              
                                 0,68
                              
                              
                                 0,64
                              
                           
                                 3
                              
                              
                                 Brassikasterol
                              
                              
                                 [24S]-24-metil-Δ-5,22-kolestadijen-3β-ol
                              
                              
                                 0,73
                              
                              
                                 0,71
                              
                           
                                 *
                              
                              
                                 Ergosterol
                              
                              
                                 [24S]-24-metil-Δ-5,7,22 kolestatrijen-3β-ol
                              
                              
                                 0,78
                              
                              
                                 0,76
                              
                           
                                 4
                              
                              
                                 24-metilen -kolesterol
                              
                              
                                 24-metilen-Δ-5,24-kolestadijen-3ß-o1
                              
                              
                                 0,82
                              
                              
                                 0,80
                              
                           
                                 5
                              
                              
                                 Kampesterol
                              
                              
                                 (24R)-24-metil-Δ-5-kolesten-3ß-ol
                              
                              
                                 0,83
                              
                              
                                 0,81
                              
                           
                                 6
                              
                              
                                 Kampestanol
                              
                              
                                 (24R)-24-metil-kolestan-3ß-ol
                              
                              
                                 0,85
                              
                              
                                 0,82
                              
                           
                                 7
                              
                              
                                 Stigmasterol
                              
                              
                                 (24S)-24-etil-Δ-5,22-kolestadien-3ß-ol
                              
                              
                                 0,88
                              
                              
                                 0,87
                              
                           
                                 8
                              
                              
                                 Δ-7-kampesterol
                              
                              
                                 (24R)-24-metil-Δ-7-kolesten-3ß-ol
                              
                              
                                 0,93
                              
                              
                                 0,92
                              
                           
                                 9
                              
                              
                                 Δ-5,23-kampesterol
                              
                              
                                 (24R,S)-24-etil-Δ-5,23-kolestadien-3ß-ol
                              
                              
                                 0,95
                              
                              
                                 0,95
                              
                           
                                 10
                              
                              
                                 Klerosterol
                              
                              
                                 (24S)-24-etil-Δ-5,25-kolestadien-3ß-ol
                              
                              
                                 0,96
                              
                              
                                 0,96
                              
                           
                                 11
                              
                              
                                 ß-sitosterol
                              
                              
                                 (24R)-24-etil-Δ-5-kolesten-3ß-ol
                              
                              
                                 1,00
                              
                              
                                 1,00
                              
                           
                                 12
                              
                              
                                 Sitostanol
                              
                              
                                 24-etil-kolestan-3ß-ol
                              
                              
                                 1,02
                              
                              
                                 1,02
                              
                           
                                 13
                              
                              
                                 Δ-5-kampesterol
                              
                              
                                 (24Z)-24-etiliden-Δ-kolesten-3ß-ol
                              
                              
                                 1,03
                              
                              
                                 1,03
                              
                           
                                 14
                              
                              
                                 Δ-5,24-stigmastadienol
                              
                              
                                 (24R,S)-24-etil-Δ-5,24-kolestadien-3ß-ol
                              
                              
                                 1,08
                              
                              
                                 1,08
                              
                           
                                 15
                              
                              
                                 Δ-7-stigmastenol
                              
                              
                                 (24R,S)-24-etil-Δ-7-kolesten-3ß-ol
                              
                              
                                 1,12
                              
                              
                                 1,12
                              
                           
                                 16
                              
                              
                                 Δ-7-avenasterol
                              
                              
                                 (24Z)-24-etiliden-Δ-7-kolesten-3ß-ol
                              
                              
                                 1,16
                              
                              
                                 1,16
                              
                           
                                 17
                              
                              
                                 Eritrodiol
                              
                              
                                 5α-olean-12-en-3β,28-diol
                              
                              
                                 1,41
                              
                              
                                 1,41
                              
                           
                                 18
                              
                              
                                 Uvaol
                              
                              
                                 Δ12-ursen-3β,28-diol
                              
                              
                                 1,52
                              
                              
                                 1,52
                              
                           
                        Figura 2 — Profil kromatografiku GC-FID tal-isterol u tad-dialkoħol triterpeniku miż-żejt taż-żebbuġa raffinat. (1) Kolesterol, (2) α-kolestanol (I.S.), (3) 24-metilenkolesterol, (4) kampesterol, (5) kampestanol, (6) stigmasterol, (7) Δ5,23-stigmastadienol, (8) klerosterol, (9) β-sitosterol, (10) sitostanol, (11) Δ5-avenasterol, (12) Δ5,24-stigmastadienol, (13) Δ7-stigmastenol, (14) Δ7-avenasterol, (15) eritrodiol, (16) uvaol.
                     
                        Figura 3 — Profil kromatografiku GC-FID tal-isteroli u tad-dialkoħol triterpeniku miż-żejt taż-żebbuġa lampante. (1) Kolesterol, (2) α-kolestanol, (3) brassikasterol, (4) 24-metilenkolesterol, (5) kampesterol, (6) kampestanol, (7) stigmasterol, (8) Δ7-kampesterol, (9) Δ5,23-stigmastadienol, (10) klerosterol, (11) β-sitosterol, (12) sitostanol, (13) Δ5-avenasterol, (14) Δ5,24-stigmastadienol, (15) Δ7-stigmastenol, (16) Δ7-avenasterol, (17) eritrodiol, (18) uvaol.
                     
                        Figura 4 — Profil kromatografiku GC-FID ta' alkoħol alifatiku u alkoħol triterpeniku taż-żejt taż-żebbuġa. (I.S.) C20-ol, (1) C22-ol, (2) C24-ol, (3) C26-ol, (4) C28-ol, (5) alkoħol triterpeniku.
                     
                        Figura 5 — Profil kromatografiku GC-FID ta' alkoħol alifatiku u alkoħol triterpeniku ta' żejt taż-żebbuġa raffinat u żejt taż-żebbuġa tat-tieni ċentrifugazzjoni. (I.S.) C20-ol, (1) C22-ol, (2) C24-ol, (3) C26-ol, (4) C28-ol, (5) alkoħol triterpeniku.
                     
                        Figura 6 — Kromatogramma tal-HPLC ta' żejt taż-żebbuġa mhux sapunifikabbli separat permezz tal-HPLC bl-użu ta' individwatur tal-UV. (1) Alkoħol alifatiku u triperpeniku; (2) Steroli u dialkoħol triterpeniku.
                  
               ”.