CELEX: 31984L0425
Language: el
Date: 1984-07-25 00:00:00
Title: Δέκατη οδηγία 84/425/ΕΟΚ της Επιτροπής της 25ης Ιουλίου 1984 περί καθορισμού των μεθόδων κοινοτικής ανάλυσης για τον επίσημο έλεγχο των ζωοτροφών

Σημαντική ανακοίνωση νομικού περιεχομένου

|

31984L0425

Δέκατη οδηγία 84/425/ΕΟΚ της Επιτροπής της 25ης Ιουλίου 1984 περί καθορισμού των μεθόδων κοινοτικής ανάλυσης για τον επίσημο έλεγχο των ζωοτροφών  

Επίσημη Εφημερίδα αριθ. L 238 της 06/09/1984 σ. 0034 - 0038 Φινλανδική ειδική έκδοση: Κεφάλαιο 3 τόμος 18 σ. 0038  Ισπανική ειδική έκδοση: Κεφάλαιο 03 τόμος 32 σ. 0085  Σουηδική ειδική έκδοση: Κεφάλαιο 3 τόμος 18 σ. 0038  Πορτογαλική ειδική έκδοση : Κεφάλαιο 03 τόμος 32 σ. 0085  Ειδική έκδοση στη τσεχική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στην εσθονική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στην ουγγρική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στη λιθουανική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στη λεττονική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στη μαλτέζικη γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στην πολωνική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στη σλοβακική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115 Ειδική έκδοση στη σλοβενική γλώσσα Κεφάλαιο 03 τόμος 06 σ. 111  - 115

		Δεκατη Οδηγία της επιτροπήςτης 25ης Ιουλίου 1984περί καθορισμού των μεθόδων κοινοτικής αναλύσεως για τον επίσημο έλεγχο των ζωοτροφών(84/425/ΕΟΚ)Η ΕΠΙΤΡΟΠΗ ΤΩΝ ΕΥΡΩΠΑΪΚΩΝ ΚΟΙΝΟΤΗΤΩΝ, Έχοντας υπόψη:τη συνθήκη για την ίδρυση της Ευρωπαϊκής Οικονομικής Κοινότηταςτην οδηγία 70/373/ΕΟΚ του Συμβουλίου της 20ής Ιουλίου 1970 περί εισαγωγής τρόπων λήψεως δειγμάτων και μεθόδων κοινοτικής ανάλυσης για τον επίσημο έλεγχο των ζωοτροφών [1], όπως τροποποιήθηκε τελευταία από την πράξη προσχώρησης και ιδίως το άρθρο 2,Εκτιμώντας:ότι η οδηγία που αναφέρεται ανωτέρω προβλέπει ότι ο επίσημος έλεγχος των ζωοτροφών που αποβλέπει στη διαπίστωση ότι τηρούνται οι όροι που επιβάλλονται δυνάμει των νομοθετικών, κανονιστικών και διοικητικών διατάξεων σχετικά με την ποιότητα και τη σύνθεση των ζωοτροφών, πραγματοποιείται σύμφωνα με τους κοινοτικούς τρόπους λήψης δειγμάτων και ανάλυσης·ότι οι οδηγίες της Επιτροπής 71/250/ΕΟΚ [2], 73/46/ΕΟΚ [3], 74/203/ΕΟΚ [4], 75/84/ΕΟΚ [5], 76/372/ΕΟΚ [6], όπως τροποποιήθηκαν τελευταία από την οδηγία 81/680/ΕΟΚ [7], οι οδηγίες 71/393/ΕΟΚ [8], 72/199/EOK [9], 78/633/ΕΟΚ [10] 0), όπως τροποποιήθηκαν τελευταία από την οδηγία 84/4/ΕΟΚ [11] 1), καθώς και η οδηγία 81/715/ΕΟΚ [12] 2), έχουν ήδη καθορίσει ένα ορισμένο αριθμό μεθόδων κοινοτικής ανάλυσης· ότι, λαμβάνοντας υπόψη την κατάσταση προόδου των εργασιών που πραγματοποιούνται έκτοτε, πρέπει να θεσπιστεί μια νέα μέθοδος·ότι τα μέτρα που προβλέπονται στην παρούσα οδηγία είναι σύμφωνα με τη γνώμη της Μονίμου Επιτροπής Ζωοτροφών,ΕΞΕΔΩΣΕ ΤΗΝ ΠΑΡΟΥΣΑ ΟΔΗΓΙΑ:Άρθρο 1Τα κράτη μέλη επιβάλλουν οι αναλύσεις για τους επίσημους ελέγχους των ζωοτροφών, όσον αφορά την περιεκτικότητα τους σε spiramycine, να πραγματοποιούνται σύμφωνα με τη μέθοδο που περιγράφεται στο παράρτημα.Άρθρο 2Τα κράτη μέλη θέτουν σε ισχύ τις νομοθετικές κανονιστικές και διοικητικές διατάξεις που είναι αναγκαίες για να συμμορφωθούν προς τις διατάξεις της παρούσας οδηγίας το αργότερο στις 30 Ιουνίου 1985 και ενημερώνουν περί αυτού την Επιτροπή.Άρθρο 3Η παρούσα οδηγία απευθύνεται στα κράτη μέλη.Βρυξέλλες, 25 Ιουλίου 1984.Για την ΕπιτροπήPoul DalsagerΜέλος της Επιτροπής[1] ΕΕ αριθ. L 170 της 3. 8. 1970, σ. 2.[2] ΕΕ αριθ. L 155 της 12. 7. 1971, σ. 13.[3] ΕΕ αριθ. L 83 της 30. 3. 1973, σ. 21.[4] ΕΕ αριθ. L 108 της 22. 4. 1974, σ. 7.[5] ΕΕ αριθ. L 32 της 5. 2. 1975, σ. 26.[6] ΕΕ αριθ. L 102 της 15. 4. 1976, σ. 8.[7] ΕΕ αριθ. L 246 της 29. 8. 1981, σ. 32.[8] ΕΕ αριθ. L 279 της 20. 12. 1971, σ. 7.[9] ΕΕ αριθ. L 123 της 29. 5. 1972, σ. 6.[10] ΕΕ αριθ. L 206 της 29. 7. 1978, σ. 43.[11] ΕΕ αριθ. L 15 της 18. 1. 1984, σ. 28.[12] ΕΕ αριθ. L 257 της 10. 9. 1981, σ. 38.--------------------------------------------------ΠΑΡΑΡΤΗΜΑΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΣΠΕΙΡΑΜΥΚΙΝΗΣ ΑΙΑ ΔΙΑΧΥΣΕΩΣ ΣΕ ΑΓΑΡΟΥΧΟ ΘΡΕΠΤΙΚΟ ΥΛΙΚΟ1. Αντικείμενο και πεδίο εφαρμογήςΗ μέθοδος επιτρέπει τον προσδιορισμό της σπειραμυκίνης στις ζωοτροφές και τα προμίγματα. Το κατώτατο όριο προσδιορισμού είναι 1 mg/kg (1 ppm) [1].2. ΑρχήΤο δείγμα εκχυλίζεται με μίγμα μεθανόλης και ρυθμιστικού διαλύματος φωσφορικών-όξινων ανθρακικών σε ρΗ 8. Το εκχύλισμα μεταγγίζεται ή φυγοκεντρίζεται και αραιώνεται. Η αντιβιοτική του δραστικότης προσδιορίζεται μετρώντας τη διάχυση της σπειραμυκίνης στο αγαρούχο θρεπτικό υλικό που έχει ενοφθαλμιστεί με Micrococcus luteus. H διάχυση διαπιστώνεται από το σχηματισμό ζωνών αναστολής της μικροβιακής ανάπτυξης. Η διάμετρος των ζωνών αυτών θεωρείται ευθέως ανάλογη προς το λογάριθμο της συγκεντρώσεως του αντιβιοτικού για τις διάφορες συγκεντρώσεις που χρησιμοποιήθηκαν.3. Μικροοργανισμός: Micrococcus luteus ATCC 9341 (NCTC 8340, NCIB 8553)3.1. Διατήρηση μητρικής καλλιέργειαςΣωλήνες που περιέχουν κεκλιμένο θρεπτικό υλικό (4.1) ενοφθαλμίζονται με Micrococcus luteus και επωάζονται επί 24 ώρες στους 30 oC. Η καλλιέργεια διατηρείται σε ψυγείο στους 4 oC και ανανεώνεται κάθε δύο εβδομάδες.3.2. Προετοιμασία τον μικροβιακού εναιωρήματος [2]Συλλέγονται τα σπόρια από ένα σωλήνα με αγαρούχο θρεπτικό υλικό (3.1) πρόσφατης παρασκευής με τη βοήθεια 2 έως 3 ml διαλύματος χλωριούχου νατρίου (4.3). Το εναιώρημα αυτό χρησιμοποιείται για τον ενοφθαλμισμό 250 ml θρεπτικού υλικού (4.1) μέσα σε φιάλη Roux. Επωάζεται επί 18-20 ώρες στους 30 oC. Τα σπόρια συλλέγονται με τη βοήθεια 25 ml διαλύματος χλωριούχου νατρίου (4.3). Το εναιώρημα αναδεύεται και ακολούθως αραιώνεται στο 1/10 με διάλυμα χλωριούχου νατρίου (4.3). Στιβάδα του εναιωρήματος, πάχους 1 cm, εξεταζόμενη στα 650 nm ως προς διάλυμα χλωριούχου νατρίου (4.3) πρέπει να επιτρέπει τη δίοδο (light transmission) σε 75 % περίπου του προσπίπτοντος φωτός. Το εναιώρημα αυτό μπορεί να διατηρηθεί μία εβδομάδα στος 4 oC περίπου.4. Θρεπτικά υλικά και αντιδραστήριο4.1. θρεπτικό υλικό για τη διατήρηση τον στελέχονς [3]Πεπτόνη κρέατος | 6,0 g |Τρυπτόνη | 4,0 g |Εκχύλισμα μαγιάς | 3,0 g |Εκχύλισμα κρέατος | 1,5 g |Γλυκόζη | 1,0 g |Άγαρ | 10,0 — 20,0 g |Νερό | 1000 ml |pΗ 6,5 — 6,6 (μετά από αποστείρωση). | |4.2 Θρεητικό νλικό για τον προσδιορισμό [3]Τρυπτόνη | 5,0 g |Εκχύλισμα μαγιάς | 4,0 g |Εκχύλισμα κρέατος | 3,0 g |Άγαρ | 10,0 — 20,0 g |Νερό | 1000 ml |pΗ 8,0 (μετά από αποστείρωση). | |4.3. Διάλυμα χλωριούχου νατρίου 0,8 % (ρ/ν)Διαλύονται 8 g χλωριούχου νατρίου με νερό και αραιώνονται για να ληφθεί τελικός όγκος 1000 ml. Το διάλυμα αποστειρώνεται.4.4. Ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών-όξινων ανθρακικών, pΗ 8,0Όξινο φωσφορικό κάλιο, Κ2ΗΡΟ4 | 16,7 g |Δισόξινο φωσφορικό κάλιο, ΚΗ2ΡΟ4 | 0,5 g |Όξινο ανθρακικό νάτριο, NaHCO3 | 20,0 g |Νερό έως | 1000 ml |4.5 Μίγμα άνυδρης μεθανόλης/ρυθμιστικού διαλύματος φωσφορικών-όξινων ανθρακικών (4.4)50/50 (ν/ν).4.6. Πρότυπη ουσίαΣπειραμυκίνη γνωστής δραστικότητας (σε ΔΜ).5. Πρότνκα διαλύματαΔιαλύεται μια ακριβώς ζυγισμένη ποσότητα πρότυπης ουσίας (4.6) στο μίγμα (4.5) και αραιώνεται με το ίδιο μίγμα ώστε να προκύπτει μητρικό διάλυμα που περιέχει 1000 ΔΜ σπεφαμυκίνης ανά ml. Διατηρούμενο σε πωματισμένη φιάλη στους 4 oC, το διάλυμα αυτό παραμένει σταθερό επί 5 ημέρες.Από αυτό το μητρικό διάλυμα παρασκευάζονται μετά από διαδοχικές αραιώσεις με το μίγμα (4.5) τα ακόλουθα διαλύματα:s3 | 1 | ΔΜ/ml |s4 | 0,5 | ΔΜ/ml |s2 | 0,25 | ΔΜ/ml |s1 | 0,125 | ΔΜ/ml |6. Παρασκευή τον εκχυλίσματος και τον διαλυμάτων6.1. ΕκχύλισηΖυγίζονται 20,0 g δείγματος για τις ζωοτροφές από 1,0 έως 20,0 g για τα προμίγματα. Προστίθενται 100 ml μίγματος (4.5) και αναδεύονται επί 30 λεπτά. Το μίγμα που προκύπτει φυγοκεντρείται ή τοποθετείται σε διαχωριστική χοάνη, και το υπερκείμενο διάλυμα αραιώνεται με το μίγμα (4.5) έτσι ώστε η αναμενόμενη περιεκτικότητα σε σπειραμυκίνη να είναι 1 ΔΜ/ml (=U8).Όταν η αναμενόμενη περιεκτικότητα της σπειραμυκίνης στη ζωοτροφή είναι μικρότερη από 2,5 mg/kg η εκχύλιση πρέπει να γίνει κατά τον ακόλουθο τρόπο: Ζυγίζονται 20,0 g δείγματος Προστίθενται 100 ml μίγματος (4.5) και αναδεύονται επί 30 λεπτά. Φυγοκεντρείται επί λίγα λεπτά και από το υπερκείμενο διάλυμα λαμβάνονται 50 ml τα οποία εξατμίζονται υπό χαμηλή πίεση μέσα σε περιστρεφόμενη συσκευή εξατμίσεως και σε θερμοκρασία όχι μεγαλύτερη από 40 oC, έως ότου απομείνουν 4 ml. Το υπόλειμμα αραιώνεται με το μίγμα (4.5), έτσι ώστε η αναμενόμενη περιεκτικότητα σε σπειραμυκίνη να είναι 1 ΔΜ/ml (=U8).6.2. Διαλύματα του εκχυλίσματοςΑπό το διάλυμα U8 παρασκευάζονται τα διαλύματα U4 (αναμενόμενη συγκέντρωση: 0,5 ΔΜ/ml), U2 (αναμενόμενη συγκέντρωση: 0,25 ΔΜ/ml) και U1 (αναμενόμενη συγκέντρωση: 0,125 ΔΜ/ml) μετά από διαδοχικές αραιώσεις (1 + 1) με το μίγμα (4.5).7. Τρόπος προσδιορισμού7.1. Ενοφθαλμισμός του θρεπτικού υλικούΓίνεται ενοφθαλμισμός του θρεπτικού υλικού (4.2) με το μικροβιακό εναιώρημα (3.2) στους 50 oC περίπου. Από προκαταρκτικές δοκιμές σε τριβλία με θρεπτικό υλικό (4.2) προσδιορίζεται η ποσότητα του μικροβιακού εναιωρήματος που απαιτείται για να ληφθούν όσο το δυνατόν ευρύτερες και σαφέστερες ζώνες αναστολής με τις διάφορες συγκεντρώσεις σπειραμυκίνης.7.2. Προετοιμασία των τριβλίωνΗ διάχυση πάνω σε αγαρούχο θρεπτικό υλικό πραγματοποιείται μέσα σε τριδλία με τις τέσσερις συγκεντρώσεις του προτύπου διαλύματος (S8, S4, S2, S1,) και τις τέσσερις συγκεντρώσεις του διαλύματος του εκχυλίσματος (U8, U4, U2, U1). Σε κάθε τριδλίο πρέπει να τοποθετηθούν απαραίτητα οι τέσσερις αυτές συγκεντρώσεις εκχυλίσματος και προτύπου. Για το λόγο αυτό, το μέγεθος των τριβλίων πρέπει να είναι αρκετά μεγάλο ώστε να είναι δυνατόν να σχηματισθούν στο θρεπτικό υλικό τουλάχιστον οκτώ οπές διαμέτρου 10 έως 13 mm των οποίων τα κέντρα δεν απέχουν λιγότερο από 30 mm μεταξύ τους. Αντί των τριβλίων μπορούν να χρησιμοποιηθούν γυάλινες πλάκες πάνω από τις οποίες τοποθετούνται δακτύλιοι από αλουμίνιο ή πλαστικό, διαμετρου 200 mm, και ύψους 20 mm.Εισάγεται μέσα στα τριβλία ποσότητα θρεπτικού υλικού (4.2) η οποία έχει ενοφθαλμιστεί όπως περιγράφεται στο σημείο 7.1, έτσι ώστε να ληφθεί στιβάδα πάχους 2 mm περίπου (60 ml για τρι-βλίο διαμέτρου 200 mm). Αφήνεται να στερεοποιηθεί, ανοίγονται οι οπές και τοποθετούνται σ' αυτές επακριβώς μετρημένοι όγκοι διαλυμάτων του προτύπου και του εκχυλίσματος (0,10 έως 0,15 ml ανά οπή, ανάλογα με τη διάμετρο). Γίνονται τουλάχιστον 4 επαναλήψεις με κάθε συγκέντρωση, έτσι ώστε σε κάθε προσδιορισμό να υπολογίζονται 32 ζώνες αναστολής.7.3. ΕπώασηΤα τριβλία επωάζονται επί 16 έως 18 ώρες στους 30 oC ± 2 oC.8. ΥχολογισμόςΜετράται η διάμετρος των ζωνών αναστολής με ακρίβεια 0,1 mm. Για κάθε συγκέντρωση, οι μέσες τιμές των μετρήσεων καταγράφονται πάνω σε ημιλογαριθμικό χάρτη όπου παρισταται η σχέση του λογαρίθμου των συγκεντρώσεων ως προς τις διαμέτρους των ζωνών αναστολής. Χαράσσονται οι πιο αντιπροσωπευτικές ευθείες για το πρότυπο διάλυμα και το εκχύλισμα, ακολουθώντας τον τρόπο που περιγράφεται κατωτέρω.Προσδιορίζεται το "πιο αντιπροσωπευτικό" σημείο για το μεγαλύτερο διάλυμα του προτύπου (SH) βάσει του τύπου:α) SL=7s1+4s2+s4-2s810Προσδιορίζεται το "πιο αντιπροσωπευτικό" σημείο για το μικρότερο διάλυμα του προτύπου (SL) βάσει του τύπου:β) SH=7s8+4s4+s2-2s110Κατά τον ίδιο τρόπο υπολογίζονται τα "πιο αντιπροσωπευτικά" σημεία για το μικρότερο διάλυμα του εκχυλίσματος (UL) και το μεγαλύτερο διάλυμα του εκχυλίσματος (UH) αντικαθιστώντας τους παραπάνω τύπους τα s1, s2, s4 και s8 με u1, u2, u4 και u8 αντιστοίχως [4].Οι τιμές SL και SH καταγράφονται στο ίδιο διάγραμμα και συνδέοντας τα δύο σημεία λαμβάνεται η "πιο αντιπροσωπευτική" ευθεία για το πρότυπο διάλυμα. Ακολουθώντας τον τρόπο για τις τιμές UL και UH λαμβάνεται η "πιο αντιπροσωπευτική" ευθεία για το εκχύλισμα.Αν δεν υπάρχει παρεμβολή οι ευθείες πρέπει να είναι παράλληλες. Για πρακτικούς λόγους οι ευθείες μπορούν να θεωρηθούν παράλληλες αν οι τιμές (SH—SL) και (UH—UL) δεν αποκλίνουν περισσότερο από 10 % από το μέσο όρο τους.Αν οι ευθείες δεν είναι παράλληλες μπορούν να παραλειφθούν είτε τα u1 και s1 είτε τα u8 και s8. Στην περίπτωση αυτή τα SL, SH, UL και UH υπολογίζονται από τους ακόλουθους τύπους, προκειμένου να ληφθούν "πιο αντιπροσωπευτικές" ευθείες:α') SL=5s1+2s2-s46 ή 5s2+2s4-s86β') SH=5s4+2s2-s16 ή 5s8+2s4-s26Κατά τον ίδιο τρόπο υπολογίζονται τα UL και UH. Τα ίδια κριτήρια παραλληλίας πρέπει να ισχύουν και στην εναλλακτική αυτή λύση. Στην τελική έκθεση πρέπει να αναφέρεται ότι για τον υπολογισμό του αποτελέσματος χρησιμοποιήθηκαν τρία διαλύματα.Όταν οι ευθείες θεωρούνται παράλληλες ο λογάριθμος της σχετικής δραστικότητας (log. Α) υπολογίζεται από έναν από τους ακόλουθους τύπους, ανάλογα με το αν χρησιμοποιήθηκαν 3 ή 4 διαλύματα για την εκτίμηση της παραλληλίας:Για 4 διαλύματαγ) log. A =u1+u2+u4+u8-s1-s2-s4-s8× 0,602u4+u8+s4+s8-u1-u2-s1-s2Για 3 διαλύματαδ) log. A =u1+u2+u4-s1-s2-s4× 0,401u4+s4-u1-s1ήδ') log. A =u2+u4+u8-s2-s4-s8× 0,401u8+s8-u2-s2Δραστικότητα του εκχυλίσματος του δείγματος = Δραστικότητα του αντίστοιχου προτύπου × A(U8 = S8 × Α)Αν η τιμή της σχετικής δραστικότητας βρίσκεται έξω από τη σειρά των τιμών που περιλαμβάνονται μεταξύ 0,5 και 2,0, ο προσδιορισμός επαναλαμβάνεται ρυθμίζοντας κατάλληλα τις συγκεντρώσεις του εκχυλίσματος ή, ενδεχόμενα, τις συγκεντρώσεις των προτύπων διαλυμάτων. Όταν δεν μπορεί να επιτευχθεί σχετική δραστικότης που να βρίσκεται μέσα στα όρια των απαιτουμένων τιμών, το λαμβανόμενο αποτέλεσμα πρέπει να θεωρείται κατά προσέγγιση και αυτό να αναφέρεται στην τελική έκθεση.'Οταν οι ευθείες δεν θεωρούνται παράλληλες, ο προσδιορισμός επαναλαμβάνεται. Αν ποτέ δεν επιτευχθεί παραλληλία ο προσδιορισμός θεωρείται μη ικανοποιητικός.Τα αποτελέσματα εκφράζονται σε χιλιοστόγραμμα σπειραμυκίνης βάσης ανά χιλιόγραμμο ζωοτροφής.9. ΕπαναληψιμότηταΗ διαφορά μεταξύ των αποτελεσμάτων δύο προσδιορισμών που πραγματοποιήθηκαν στο ίδιο δείγμα από τον ίδιο αναλυτή δεν πρέπει να υπερβαίνει:- 2 mg/kg, σε απόλυτη τιμή, για περιεκτικότητες σε σπειραμυκίνη βάσης έως 10 mg/kg·- 20 % του υψηλότερου αποτελέσματος για περιεκτικότητες από 10 έως 25 mg/kg·- 5 mg/kg, σε απόλυτη τιμή, για περιεκτικότητες από 25 έως 50 mg/kg·- 10 % του υψηλότερου αποτελέσματος για περιεκτικότητες άνω των 50 mg/kg.[1] 1 mg βάσεως σπειρομυκίνης ισοδυναμεί με 3200 διεθνείς μονάδες (ΔΜ).[2] 'Αλλες μέθοδοι μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν, αν δίνουν, αποδεδειγμένα, ανάλογα μικροβιακά εναιωρήματα.[3] Μπορεί να χρησιμοποιηθεί οποιοδήποτε θρεπτικό υλικό του εμπορίου το οποίο έχει ανάλογη σύσταση και δίνει τα ίδια αποτελέσματα.[4] Τα μικρά στοιχεία "s" και "u" αναφέρονται στις διαμέτρους των ζωνών αναστολής.--------------------------------------------------