CELEX: 32015R1833
Language: ro
Date: 2015-10-12 00:00:00
Title: Regulamentul de punere în aplicare (UE) 2015/1833 al Comisiei din 12 octombrie 2015 de modificare a Regulamentului (CEE) nr. 2568/91 privind caracteristicile uleiurilor de măsline și ale uleiurilor din resturi de măsline, precum și metodele de analiză a acestora

13.10.2015   
            
            
               RO
            
            
               Jurnalul Oficial al Uniunii Europene
            
            
               L 266/29
            
         REGULAMENTUL DE PUNERE ÎN APLICARE (UE) 2015/1833 AL COMISIEI
   din 12 octombrie 2015
   de modificare a Regulamentului (CEE) nr. 2568/91 privind caracteristicile uleiurilor de măsline și ale uleiurilor din resturi de măsline, precum și metodele de analiză a acestora
   COMISIA EUROPEANĂ,
   având în vedere Tratatul privind funcționarea Uniunii Europene,
   având în vedere Regulamentul (UE) nr. 1308/2013 al Parlamentului European și al Consiliului din 17 decembrie 2013 de instituire a unei organizări comune a piețelor produselor agricole și de abrogare a Regulamentelor (CEE) nr. 922/72, (CEE) nr. 234/79, (CE) nr. 1037/2001 și (CE) nr. 1234/2007 ale Consiliului (1), în special articolul 91 primul paragraf litera (d) și articolul 91 al doilea paragraf,
   întrucât:
   
               (1)
            
            
               Regulamentul (CEE) nr. 2568/91 al Comisiei (2) definește caracteristicile fizico-chimice și organoleptice ale uleiului de măsline și ale uleiului din resturi de măsline și stabilește metodele de evaluare a acestor caracteristici. Aceste metode sunt actualizate periodic pe baza avizului experților chimiști și în conformitate cu activitățile desfășurate în cadrul Consiliul Oleicol Internațional (IOC).
            
         
               (2)
            
            
               Pentru a se asigura punerea în aplicare la nivelul Uniunii a celor mai recente standarde internaționale stabilite de IOC, este necesară actualizarea anumitor metode de analiză prevăzute în Regulamentul (CEE) nr. 2568/91.
            
         
               (3)
            
            
               În lumina experienței, se constată că metoda de detectare a prezenței în uleiurile de măsline a uleiurilor vegetale străine poate conduce la rezultate false pozitive. Așadar, referirile la această metodă trebuie eliminate.
            
         
               (4)
            
            
               Prin urmare, Regulamentul (CEE) nr. 2568/91 ar trebui modificat în consecință.
            
         
               (5)
            
            
               Măsurile prevăzute de prezentul regulament sunt conforme cu avizul Comitetului pentru organizarea comună a piețelor agricole,
            
         ADOPTĂ PREZENTUL REGULAMENT:
   Articolul 1
   Regulamentul (CEE) nr. 2568/91 se modifică după cum urmează:
   
               1.
            
            
               Articolul 2 alineatul (1) se modifică după cum urmează:
               
                           (a)
                        
                        
                           primul paragraf se modifică după cum urmează:
                           
                                       (i)
                                    
                                    
                                       litera (g) se înlocuiește cu următorul text:
                                       
                                                   „(g)
                                                
                                                
                                                   pentru determinarea compoziției de acizi grași, metoda prevăzută în anexa X;”;
                                                
                                             
                                 
                                       (ii)
                                    
                                    
                                       litera (l) se înlocuiește cu următorul text:
                                       
                                                   „(l)
                                                
                                                
                                                   pentru determinarea conținutului de alcooli alifatici și triterpenici, metoda prevăzută în anexa XIX;”;
                                                
                                             
                                 
                     
                           (b)
                        
                        
                           al doilea paragraf se elimină.
                        
                     
         
               2.
            
            
               Rezumatul anexelor se modifică după cum urmează:
               
                           (a)
                        
                        
                           trimiterile la anexa X A și la anexa X B, inclusiv la titlurile acestor anexe, se înlocuiesc cu următoarea trimitere unică:
                           „Anexa X: Determinarea esterilor metilici ai acizilor grași prin cromatografie în fază gazoasă”;
                        
                     
                           (b)
                        
                        
                           în trimiterea la anexa XIX, titlul se înlocuiește astfel:
                           „Determinarea conținutului de alcooli alifatici și triterpenici prin cromatografie în fază gazoasă cu coloană capilară”;
                        
                     
                           (c)
                        
                        
                           trimiterea la anexa XXa se elimină.
                        
                     
         
               3.
            
            
               Apendicele 1 la anexa Ib se modifică în conformitate cu anexa I la prezentul regulament.
            
         
               4.
            
            
               Anexa V se modifică în conformitate cu anexa II la prezentul regulament.
            
         
               5.
            
            
               Anexa IX se înlocuiește cu textul prevăzut în anexa III la prezentul regulament.
            
         
               6.
            
            
               Anexele X A și X B se înlocuiesc cu textul prevăzut la anexa IV la prezentul regulament.
            
         
               7.
            
            
               Anexa XII se modifică în conformitate cu anexa V la prezentul regulament.
            
         
               8.
            
            
               Anexa XIX se modifică în conformitate cu anexa VI la prezentul regulament.
            
         
               9.
            
            
               Anexa XXa se elimină.
            
         Articolul 2
   Prezentul regulament intră în vigoare în a treia zi de la data publicării sale în Jurnalul Oficial al Uniunii Europene.
   
      Prezentul regulament este obligatoriu în toate elementele sale și se aplică direct în toate statele membre.
      Adoptat la Bruxelles, 12 octombrie 2015.
      
         
            Pentru Comisie
         
         
            Președintele
         
         Jean-Claude JUNCKER
      
   
   
      (1)  JO L 347, 20.12.2013, p. 671.
   
      (2)  Regulamentul (CEE) nr. 2568/91 al Comisiei din 11 iulie 1991 privind caracteristicile uleiurilor de măsline și ale uleiurilor din resturi de măsline, precum și metodele de analiză a acestora (JO L 248, 5.9.1991, p. 1).
   
      ANEXA I
      În apendicele 1 la anexa Ib la Regulamentul (CEE) nr. 2568/91, tabelul de corespondență se modifică după cum urmează:
      
                  1.
               
               
                  Rândurile privind izomerii trans ai acizilor grași și conținutul de acizi grași se înlocuiesc cu următoarele:
                  
                              
                                          „—
                                       
                                       
                                          Izomeri trans ai acizilor grași
                                       
                                    
                           
                              Anexa X
                           
                           
                              Analiza prin cromatografie în fază gazoasă a esterilor metilici ai acizilor grași
                           
                        
                              
                                          —
                                       
                                       
                                          Conținutul de acizi grași
                                       
                                    
                           
                              Anexa X
                           
                           
                              Analiza prin cromatografie în fază gazoasă a esterilor metilici ai acizilor grași”.
                           
                        
            
                  2.
               
               
                  Rândul privind alcoolii alifatici se înlocuiește cu următorul:
                  
                              
                                          „—
                                       
                                       
                                          Alcooli alifatici și triterpenici
                                       
                                    
                           
                              Anexa XIX
                           
                           
                              Determinarea conținutului de alcooli alifatici și triterpenici prin cromatografie în fază gazoasă cu coloană capilară”.
                           
                        
            
   
      ANEXA II
      În anexa V la Regulamentul (CEE) nr. 2568/91, punctul 6.2 se înlocuiește cu următorul:
      
         
                     „6.2.
                  
                  
                     Se calculează procentul fiecărui sterol pornind de la raportul dintre aria valorii de vârf corespondente și suma ariilor valorilor de vârf pentru steroli:
                     
                        
                     unde:
                     
                                 Ax
                                 
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 aria valorii de vârf pentru x;
                              
                           
                                 ΣA
                              
                              
                                 =
                              
                              
                                 suma ariilor valorilor de vârf pentru steroli.”
                              
                           
               
   
   
      ANEXA III
      
         
            „ANEXA IX
            
               ANALIZĂ SPECTROFOTOMETRICĂ ÎN ULTRAVIOLET
            
            INTRODUCERE
            Examinarea spectrofotometrică în ultraviolet poate furniza indicații privind calitatea unei materii grase, starea de conservare a acesteia și modificările datorate proceselor tehnologice. Absorbțiile cu lungimi de undă prevăzute în metodă sunt datorate prezenței sistemelor de diene și triene conjugate rezultând din procese de oxidare și/sau din practici de rafinare. Valorile acestor absorbții sunt exprimate ca extincția specifică (extincția unei soluții de substanță grasă de 1 % greutate volumetrică în solventul prescris, într-o cuvă de 10 mm) notată în mod convențional cu K (denumit, de asemenea, «coeficient de extincție»).
            1.   DOMENIUL DE APLICARE
            Prezenta anexă descrie procedeul executării examinării spectrofotometrice în ultraviolet a uleiurilor de măsline.
            2.   PRINCIPIUL METODEI
            Mostra se dizolvă în solventul necesar, apoi se măsoară absorbanța soluției la lungimile de undă prevăzute, în raport cu solventul pur.
            Extincțiile specifice la 232 nm și 268 nm în izooctan sau la 232 nm și 270 nm în ciclohexan se calculează pentru o concentrație de 1 % greutate volumetrică într-o cuvă de 10 mm.
            3.   APARATURĂ
            3.1.   Un spectofotometru adecvat pentru măsurători la lungimi de undă ultravioletă (între 220 nm și 360 nm), cu posibilitate de citire pentru fiecare unitate nanometrică. Se recomandă o verificare regulată a preciziei și reproductibilității scărilor de absorbanță și de lungime de undă, precum și a luminii difuze.
            3.1.1.   Scara lungimii de undă: aceasta se poate verifica folosind un material de referință constând într-un filtru optic de sticlă ce conține oxid de holmiu sau o soluție de oxid de holmiu (sigilată sau nu), care are benzi de absorbție distincte. Materialele de referință sunt concepute pentru verificarea și calibrarea scării lungimilor de undă a spectrofotometrelor în domeniul vizibil și ultraviolet având lărgimea de bandă nominală spectrală de cel mult 5 nm. Măsurătorile sunt efectuate în raport cu o probă martor de aer, pe intervalul de lungimi de undă cuprins între 640 și 240 nm, conform instrucțiunilor care însoțesc materialele de referință. O corecție de referință se efectuează cu calea goală a fasciculului la fiecare modificare a lărgimii fantei. Lungimile de undă ale standardului sunt enumerate în certificatul materialului de referință.
            3.1.2.   Scara absorbanței: aceasta se poate verifica folosind materiale de referință sigilate disponibile în comerț constând în soluții de dicromat de potasiu în mediu acid, în anumite concentrații și cu valori certificate ale absorbanței la λmax (în 4 soluții de dicromat de potasiu în acid percloric, sigilate în patru cuve UV din cuarț pentru măsurarea liniarității și a preciziei fotometrice de referință în UV). Soluțiile de dicromat de potasiu sunt măsurate în raport cu o probă martor din acidul utilizat, după corecția de referință, conform instrucțiunilor care însoțesc materialul de referință. Valorile absorbanței sunt enumerate în certificatul materialului de referință.
            O altă posibilitate de verificare a răspunsului celulei fotoelectrice și al fotomultiplicatorului este procedura următoare: se cântăresc aproximativ 0,2000 g de cromat de potasiu pur pentru sepctrofotometrie și se dizolvă în soluție de hidroxid de potasiu 0,05 N într-un balon gradat de 1 000 ml și se completează până la gradație. Se iau exact 25 ml din soluția obținută, se transferă într-un balon gradat de 500 ml și se diluează până la gradație, utilizând aceeași soluție de hidroxid de potasiu.
            Se măsoară extincția soluției astfel obținute la 275 nm, utilizând soluția de hidroxid de potasiu ca referință. Extincția măsurată cu ajutorul unei cuve de 1 cm ar trebui să fie de 0,200 ± 0,005.
            3.2.   Cuve de cuarț dreptunghiulare, cu capac, adecvate pentru măsurători la lungimi de undă ultravioletă (între 220 și 360 nm) cu o lungime a parcursului optic de 10 mm. Cuvele, umplute cu apă sau cu alt solvent adecvat, nu trebuie să prezinte diferențe între ele mai mari de 0,01 unități de extincție.
            3.3.   Baloane volumetrice gradate, cu o capacitate de 25 ml, clasa A.
            3.4.   Balanță analitică, ce să poată fi citită cu o precizie de 0,0001 g.
            4.   REACTIVI
            Pe durata analizei, dacă nu se specifică altfel, se utilizează numai reactivi de puritate analitică recunoscută și apă distilată sau demineralizată sau apă de puritate echivalentă.
            Solventul: Izooctan (2,2,4-trimetilpentan) pentru măsurătorile la 232 nm și 268 nm și ciclohexan pentru măsurători la 232 nm și 270 nm, având o absorbanță mai mică de 0,12 la 232 nm și mai mică de 0,05 la 270 nm în raport cu apa distilată, măsurată într-o cuvă de 10 mm.
            5.   MOD DE LUCRU
            5.1.   Proba trebuie să fie perfect omogenă și lipsită de impurități în suspensie. În caz contrar, aceasta trebuie să fie filtrată printr-un filtru de hârtie la o temperatură de aproximativ 30 °C.
            5.2.   Se cântăresc aproximativ 0,25 g (cu o precizie de 1 mg) din proba astfel preparată într-un balon gradat de 25 ml, se completează până la gradație cu solventul prescris și se omogenizează. Soluția obținută trebuie să fie perfect limpede. În cazul în care soluția ar prezenta opalescență sau turbiditate, se filtrează rapid printr-un filtru de hârtie.
            
               NOTĂ: în general, o masă de 0,25-0,30 g este suficientă pentru măsurarea absorbanței uleiului de măsline virgin și extravirgin la 268 nm și la 270 nm. Pentru măsurători la 232 nm, este necesară o probă de 0,05 g, fiind preparate de obicei două soluții diferite. Pentru măsurători ale absorbanței uleiurilor din resturi de măsline, a uleiurilor rafinate de măsline și a uleiurilor modificate de măsline, este de obicei necesară o proporție mai redusă din probă, de exemplu 0,1 g, ca urmare a absorbanței mai ridicate.
            5.3.   Dacă este necesar, se aplică o corecție a referinței (între 220 și 290 nm) cu solvent din ambele cuve de cuarț (probă și referință), apoi se umple cuva de cuarț a probei cu soluția de test și se măsoară extincțiile la 232, 268 sau 270 nm în raport cu solventul utilizat ca referință.
            Valorile de extincție înregistrate trebuie să fie cuprinse în intervalul 0,1-0,8 sau în intervalul liniarității specrofotometrului care ar trebui verificat. În caz contrar, este necesară repetarea măsurătorilor folosindu-se soluții mai concentrate sau mai diluate, după caz.
            5.4.   După măsurarea absorbanței la 268 sau 270 nm, se măsoară absorbanța la λmax, λmax + 4 și λmax – 4. Aceste valori ale absorbanței sunt utilizate pentru a determina variația extincției specifice (ΔΚ).
            
               NOTĂ: se consideră că λmax este 268 nm pentru izooctanul utilizat ca solvent și 270 nm pentru ciclohexan.
            6.   EXPRIMAREA REZULTATELOR
            6.1.   Se înregistrează extincțiile specifice (coeficienții de extincție) la diferitele lungimi de undă, calculate după cum urmează:
            
               
            unde:
            
                        Kλ
                     
                     
                        =
                     
                     
                        extincție specifică la lungimea de undă λ;
                     
                  
                        Eλ
                     
                     
                        =
                     
                     
                        extincție măsurată la lungimea de undă λ:
                     
                  
                        c
                     
                     
                        =
                     
                     
                        concentrația soluției în g/100 ml;
                     
                  
                        s
                     
                     
                        =
                     
                     
                        lungimea parcursului cuvei de cuarț în cm.
                     
                  Rezultatele sunt exprimate cu două decimale.
            6.2.   Variația extincției specifice (ΔΚ)
            Variația valorii absolute a extincției (ΔΚ) este dată de:
            
               
            unde Km reprezintă extincția specifică la lungimea de undă corespunzătoare absorbției maxime de 270 nm pentru ciclohexan și de 268 nm, în funcție de solventul utilizat.
            Rezultatele sunt exprimate cu două decimale.”
         
      
   
   
      ANEXA IV
      „
            ANEXA X
            
               DETERMINAREA ESTERILOR METILICI AI ACIZILOR GRAȘI PRIN CROMATOGRAFIE ÎN FAZĂ GAZOASĂ
            
            1.   DOMENIUL DE APLICARE
            Prezenta anexă oferă orientări privind determinarea prin cromatografie în fază gazoasă a acizilor grași liberi și legați din grăsimile și uleiurile vegetale în urma conversiei lor în esteri metilici ai acizilor grași (EMAG).
            Acizii grași legați ai triacilglicerolilor (TAG) și, în funcție de metoda de esterificare, acizii grași liberi sunt convertiți în esteri metilici ai acizilor grași (EMAG), care sunt determinați prin cromatografie în fază gazoasă cu coloană capilară.
            Metoda descrisă în prezenta anexă permite determinarea esterilor metilici ai acizilor grași de la C12 la C24, inclusiv a esterilor metilici ai acizilor grași saturați, cis și trans mononesaturați și cis și trans polinesaturați.
            2.   PRINCIPIU
            Cromatografia în fază gazoasă este utilizată pentru analiza cantitativă a esterilor metilici ai acizilor grași. Esterii metilici ai acizilor grași se prepară în conformitate cu partea A. Aceștia sunt injectați și vaporizați în injector. Separarea esterilor metilici ai acizilor grași se realizează pe coloane analitice cu polaritate și lungime specifice. Un detector cu ionizare în flacără (FID) este utilizat pentru detectarea esterilor metilici ai acizilor grași. Condițiile pentru analiză sunt indicate în partea B.
            Hidrogenul sau heliul se poate utiliza ca gaz purtător (faza mobilă) în cromatografia în fază gazoasă a esterilor metilici ai acizilor grași cu detector cu ionizare în flacără. Hidrogenul accelerează separarea și oferă vârfuri mai clare. Faza staționară este un strat microscopic al unei pelicule subțiri de lichid pe o suprafață solidă inertă din silice topită.
            Pe măsură ce trec prin coloana capilară, compușii volatilizați analizați interacționează cu filmul fazei staționare de pe suprafața interioară a coloanei. Ca urmare a acestei interacțiuni între diferiți compuși, ei eluează la momente diferite, un astfel de moment purtând denumirea de timp de retenție a compusului pentru un set dat de parametri de analiză. Comparația timpilor de retenție este utilizată pentru identificarea diferiților compuși.
            PARTEA A
            
               PREPARAREA ESTERILOR METILICI AI ACIZILOR GRAȘI DIN ULEIUL DE MĂSLINE ȘI DIN ULEIUL DIN RESTURI DE MĂSLINE
            
            1.   DOMENIUL DE APLICARE
            Această parte descrie prepararea esterilor metilici ai acizilor grași. Ea include metode pentru prepararea esterilor metilici ai acizilor grași din uleiurile de măsline și din uleiurile din resturi de măsline.
            2.   SFERA DE APLICARE
            Prepararea esterilor metilici ai acizilor grași din uleiurile de măsline și din uleiurile din resturi de măsline se realizează prin transesterificarea cu soluție metanolică de hidroxid de potasiu la temperatura camerei. Necesitatea de purificare a probei anterior transesterificării depinde de conținutul de acizi grași liberi al probei și de parametrul analitic care trebuie determinat; se poate alege în funcție de tabelul următor:
            
                        Categoria uleiului
                     
                     
                        Metoda
                     
                  
                        Ulei de măsline virgin cu o aciditate ≤ 2,0 %
                     
                     
                        
                                    1.
                                 
                                 
                                    Acizi grași
                                 
                              
                                    2.
                                 
                                 
                                    Acizi grași trans
                                    
                                 
                              
                                    3.
                                 
                                 
                                    ΔECN42 (după purificare cu silicagel SPE)
                                 
                              
                  
                        Ulei de măsline rafinat
                     
                  
                        Ulei de măsline compus din uleiuri de măsline rafinate și uleiuri de măsline virgine
                     
                  
                        Ulei rafinat din resturi de măsline
                     
                  
                        Ulei din resturi de măsline
                     
                  
                        Ulei de măsline virgin cu o aciditate > 2,0 %
                        Ulei brut din resturi de măsline
                     
                     
                        
                                    1.
                                 
                                 
                                    Acizi grași (după purificare cu silicagel SPE)
                                 
                              
                                    2.
                                 
                                 
                                    Acizi grași trans (după purificare cu silicagel SPE)
                                 
                              
                                    3.
                                 
                                 
                                    ΔECN42 (după purificare cu silicagel SPE)
                                 
                              
                  3.   METODOLOGIE
            3.1.   Transesterificarea cu soluție metanolică de hidroxid de potasiu la temperatura camerei.
            
            3.1.1.   Principiu
            
            Esterii metilici se formează prin transesterificare cu hidroxid de potasiu metanolic ca o etapă intermediară înainte de a avea loc saponificarea.
            3.1.2.   Reactivi
            
            3.1.2.1.   Metanol cu un conținut maxim de apă de 0,5 % (m/m).
            3.1.2.2.   Hexan, de calitate cromatografică.
            3.1.2.3.   Heptan, de calitate cromatografică.
            3.1.2.4.   Dietil eter, stabilizat pentru analiză.
            3.1.2.5.   Acetonă, de calitate cromatografică.
            3.1.2.6.   Solvent de eluare pentru purificarea uleiului prin cromatografie în coloană/extracție în fază solidă (SPE), amestec hexan/dietil eter 87/13 (v/v).
            3.1.2.7.   Hidroxid de potasiu, soluție metanolică de aproximativ 2M: se dizolvă 11,2 g de hidroxid de potasiu în 100 ml de metanol.
            3.1.2.8.   Cartușe de silicagel, 1 g (6 ml), pentru extracție în fază solidă.
            3.1.3.   Aparatură
            
            3.1.3.1.   Eprubete cu dop filetat (5 ml volum), cu capac prevăzut cu o îmbinare cu PTFE.
            3.1.3.2.   Pipete gradate sau automate, 2 ml și 0,2 ml.
            3.1.4.   Purificarea probelor de ulei
            
            Când este necesar, probele vor fi purificate prin trecerea uleiului printr-un cartuș de silicagel pentru extracție în fază solidă. Un cartuș de silicagel (3.1.2.8) este plasat într-un aparat de eluare sub vid și se spală cu 6 ml de hexan (3.1.2.2); spălarea se realizează fără vid. Apoi se încărcă pe coloană o soluție de ulei (aproximativ 0,12 g) în 0,5 ml de hexan (3.1.2.2). Soluția este trasă în jos și eluată apoi cu 10 ml de hexan/dietil eter (87:13 v/v) (3.1.2.6). Eluatele combinate sunt omogenizate și împărțite în două volume similare. O parte alicotă se evaporă până la uscare într-un evaporator rotativ la presiune scăzută și la temperatura camerei. Se dizolvă reziduul în 1 ml de heptan și soluția este pregătită pentru analiza acizilor grași prin cromatografie în fază gazoasă. A doua parte alicotă se evaporă, iar reziduul se dizolvă în 1 ml de acetonă pentru analiza trigliceridelor prin HPLC, dacă este necesar.
            3.1.5.   Procedură
            
            Într-o eprubetă cu dop filetat de 5 ml (3.1.3.1), se cântărește o probă de ulei de aproximativ 0,1 g. Se adaugă 2 ml de heptan (3.1.2.2) și se agită. Se adaugă 0,2 ml din soluția de hidroxid de potasiu metanolic (3.1.2.7), se așază capacul prevăzut cu o îmbinare cu PTFE, se strânge capacul și se agită energic timp de 30 de secunde. Se lasă să se stratifice până când devine limpede soluția de deasupra. Se decantează stratul superior care conține esterii metilici. Soluția de heptan este pregătită pentru injectare în cromatograful în fază gazoasă. Se recomandă ca soluția să fie păstrată la frigider până la analiza cromatografică în fază gazoasă. Nu se recomandă depozitarea soluției pentru o perioadă mai mare de 12 ore.
            PARTEA B
            
               ANALIZA ESTERILOR METILICI AI ACIZILOR GRAȘI PRIN CROMATOGRAFIE ÎN FAZĂ GAZOASĂ
            
            1.   DOMENIUL DE APLICARE
            Această parte oferă orientări generale pentru aplicarea cromatografiei în fază gazoasă cu coloană capilară pentru a se determina compoziția calitativă și cantitativă a unui amestec de esteri metilici ai acizilor grași obținut conform metodei specificate în partea A.
            Această parte nu este aplicabilă acizilor grași polimerizați.
            2.   REACTIVI
            2.1.   Gaz purtător
            
            Gaz inert (heliu sau hidrogen), complet uscat și cu un conținut de oxigen mai mic 10 mg/kg.
            
                        
                           Nota 1:
                        
                     
                     
                        Hidrogenul poate dubla viteza de analiză, însă este periculos. Există dispozitive de securitate.
                     
                  2.2.   Gaze auxiliare
            
            2.2.1.   Hidrogen (cu puritate ≥ 99,9 %) care nu conține impurități organice.
            2.2.2.   Aer sau oxigen care nu conține impurități organice.
            2.2.3.   Azot (cu puritate > 99 %).
            2.3.   Produse de etalonare
            
            Amestec de esteri metilici ai acizilor grași puri sau de esteri metilici ai unei substanțe grase cu compoziție cunoscută, de preferat similară cu cea a substanței grase de analizat. Izomerii cis și trans ai esterilor metilici octadecenoici, octadecadienoici și octadecatrienoici sunt utili pentru identificarea izomerilor trans ai acizilor nesaturați.
            Ar trebui să se facă eforturi pentru a se preveni oxidarea acizilor grași polinesaturați.
            3.   APARATURĂ
            Instrucțiunile se referă la aparatele obișnuite de cromatografie în fază gazoasă care utilizează coloane capilare și un detector cu ionizare prin flacără.
            3.1.   Cromatograful în fază gazoasă
            
            Cromatograful în fază gazoasă trebuie să cuprindă următoarele elemente.
            3.1.1.   Dispozitiv de injecție
            
            Se utilizează un dispozitiv de injecție cu coloane capilare, caz în care dispozitivul de injecție trebuie să fie conceput special pentru utilizarea cu astfel de coloane. Poate fi cu divizare sau fără, cu injector pe coloană rece.
            3.1.2.   Cuptor
            
            Cuptorul trebuie să fie în măsură să aducă coloana capilară la o temperatură de minimum 260 °C și să mențină temperatura dorită în limita a 0,1 °C. Această ultimă cerință este importantă îndeosebi atunci când se utilizează un tub de silice topită.
            Utilizarea unui aparat de încălzit echipat cu un programator de temperatură este recomandată în toate cazurile, în special în prezența acizilor grași cu mai puțin de 16 atomi de carbon.
            3.1.3.   Coloană capilară
            
            3.1.3.1.   Tub din material inert față de substanțele de analizat (în general de sticlă sau de silice topită). Diametrul intern trebuie să fie cuprins între 0,20 și 0,32 mm. În interior, trebuie să suporte tratamente adecvate (prepararea stării de suprafață, inactivarea) înainte de a primi filmul fazei staționare. O lungime de 60 m este suficientă pentru acizii grași și pentru izomerii cis și trans ai acizilor grași.
            3.1.3.2.   Fază staționară, coloanele de tip polisiloxani polari (cianopropil-silicon) grefate (reticulate) sunt adecvate.
            
                        
                           Nota 2:
                        
                     
                     
                        Polisiloxanii polari riscă să creeze dificultăți în identificarea și separarea acidului linolenic și a acizilor C20.
                     
                  Grosimile filmului trebuie să fie reduse: 0,1-0,2 μm.
            3.1.3.3.   Montajul și condiționarea coloanei
            Se respectă precauțiile obișnuite de montare a coloanelor capilare, adică dispunerea coloanei în cuptor (suport), alegerea și montarea îmbinărilor (etanșeitate), poziționarea extremităților coloanei în injector și detectorul (reducerea volumelor moarte). Se pune coloana sub un flux de gaz purtător [de exemplu, 0,3 bar (30 kPa) pentru o coloană de 25 de metri lungime și cu un diametru interior de 0,3 mm].
            Se condiționează coloana prin programarea temperaturii cuptorului la 3 °C/minut de la temperatura ambiantă până la o temperatură cu 10 °C sub limita de descompunere a fazei staționare. Se menține cuptorul la această temperatură timp de o oră, până la stabilizarea liniei de bază. Se revine la 180 °C pentru a se lucra în condiții izoterme.
            
                        
                           Nota 3:
                        
                     
                     
                        În comerț sunt disponibile coloane precondiționate adecvate.
                     
                  3.1.4.   Detector cu ionizare în flacără și convertor-amplificator
            
            3.2.   Seringa
            
            Seringa trebuie să aibă o capacitate de maximum 10 μl și să fie gradată la 0,1 μl.
            3.3.   Sistem de culegere a datelor
            
            Sistemul de culegere a datelor, conectat online cu detectoare și utilizat cu un program software adecvat pentru integrarea și normalizarea vârfurilor.
            4.   MOD DE LUCRU
            Operațiunile descrise la punctele 4.1-4.3 vizează utilizarea unui detector cu ionizare în flacără.
            4.1.   Condiții de testare
            
            4.1.1.   Alegerea condițiilor optime de operare pentru coloane capilare
            
            Datorită eficienței și permeabilității coloanelor capilare, separarea constituenților și durata analizei sunt dependente în mare măsură de debitul gazului purtător în coloană. Prin urmare, va fi necesar să se optimizeze condițiile de operare prin ajustarea acestui parametru (sau pur și simplu pierderea încărcăturii din capul coloanei), în funcție de ceea ce se dorește, adică îmbunătățirea separărilor sau realizarea rapidă a analizei.
            Următoarele condiții s-au dovedit adecvate pentru separarea esterilor metilici ai acizilor grași (C4-C26). Exemple de cromatograme sunt prezentate în apendicele B:
            
                        Temperatura injectorului:
                     
                     
                        250 °C
                     
                  
                        Temperatura detectorului:
                     
                     
                        250 °C
                     
                  
                        Temperatura cuptorului:
                     
                     
                        165 °C (8 min) la 210 °C la 2 °C/min
                     
                  
                        Gaz purtător: hidrogen:
                     
                     
                        presiune în capul coloanei: 179 kPa
                     
                  
                        Flux total:
                     
                     
                        154,0 ml/min;
                     
                  
                        Raportul de splitare:
                     
                     
                        1:100
                     
                  
                        Volumul de injectare:
                     
                     
                        1 μl
                     
                  4.1.2.   Determinarea rezoluției (a se vedea apendicele A)
            
            Se calculează rezoluția, R, a două vârfuri vecine I și II, cu ajutorul formulei:
            
               R = 2 × [(dr(II)
                – d
               r(I))/(ω(I) + ω(II))] or R = 2 × [(tr(II)
                – t
               r(I))/(ω(I) + ω(II))] (USP) (United States Pharmacopeia),
            sau
            
               R = 1,18 × [(tr(II)
                – tr(I))/(ω0,5(I) + ω0,5(II))] (EP, BP, JP, DAB) [JP (Japanese Pharmacopeia), EP (Pharmacopée Européenne), BP (British Pharmacopeia)],
            unde:
            
                         
                     
                     
                        
                           d
                           r(I) este distanța de retenție a vârfului I;
                     
                  
                         
                     
                     
                        
                           d
                           r(II) este distanța de retenție a vârfului II;
                     
                  
                         
                     
                     
                        
                           t
                           r(I) este timpul de retenție al vârfului;
                     
                  
                         
                     
                     
                        
                           t
                           r(II) este timpul de retenție al vârfului II;
                     
                  
                         
                     
                     
                        ω(I) este lățimea bazei vârfului I;
                     
                  
                         
                     
                     
                        ω(II) este lățimea bazei vârfului II;
                     
                  
                         
                     
                     
                        ω0,5 este lățimea vârfului compusului specificat, la jumătatea înălțimii vârfului;
                     
                  Dacă ω(I) ≈ ω(II), R se calculează cu ajutorul următoarelor formule:
            
               R = (dr(II)
                – d
               r(I))/ω = (dr(II)
                – d
               r(I))/4σ
            unde:
            σ este deviația standard (a se vedea apendicele A, figura 1).
            Dacă distanța dr dintre cele două vârfuri d
               r(II) – d
               r(I) este egală cu 4σ, factorul de rezoluție R = 1.
            Dacă două vârfuri nu sunt separate complet, tangentele la punctele de inflexiune ale celor două vârfuri se intersectează în punctul C. Pentru a se separa complet cele două vârfuri, distanța dintre cele două vârfuri trebuie să fie egală cu:
            
               d
               r(II) – d
               r(I) = 6 σ de unde R = 1,5 (a se vedea apendicele A, figura 3).
            5.   EXPRIMAREA REZULTATELOR
            5.1.   Analiza cantitativă
            
            Se identifică vârfurile esterului metilic al probei din cromatograma din apendicele B figura 1, dacă este necesar prin interpolare, sau prin comparație cu cele ale amestecurilor etalon de esteri metilici (în conformitate cu punctul 2.3).
            5.2.   Analiza cantitativă
            
            5.2.1.   Determinarea compoziției
            
            Se calculează fracțiunea de masă w
                  i
                a esterilor metilici ai acizilor grași individuali, exprimată în procentaj de masă de esteri metilici, după cum urmează:
            5.2.2.   Mod de calcul
            
            5.2.2.1.   Caz general
            Se calculează conținutul unui constituent dat i, exprimat în procentaj de masă de esteri metilici, prin determinarea procentajului reprezentat de aria vârfului corespunzător în raport cu suma ariilor tuturor vârfurilor, cu ajutorul următoarei formule:
            wi = (Ai/ΣA) × 100,
            unde:
            
                         
                     
                     
                        Ai este aria valorii de vârf a esterilor metilici ai acizilor grași individuali i;
                     
                  
                         
                     
                     
                        ΣA este suma ariilor totalității valorilor de vârf ale tuturor esterilor metilici ai acizilor grași individuali.
                     
                  Rezultatele sunt exprimate cu două decimale.
            
                        
                           Nota 4:
                        
                     
                     
                        Pentru grăsimi și uleiuri, fracția masică a esterilor metilici ai acizilor grași este egală cu fracția masică a triacilglicerolilor în grame per 100 g. Pentru cazurile în care această ipoteză nu este permisă, a se vedea 5.2.2.2.
                     
                  5.2.2.2.   Utilizarea factorilor de corecție
            În anumite cazuri, de exemplu în prezența acizilor grași cu mai puțin de opt atomi de carbon sau a acizilor cu funcții secundare, ariile se corectează cu factori de corecție specifici (Fci). Acești factori se determină pentru fiecare instrument. În acest scop, se utilizează materiale de referință adecvate, cu compoziție de acizi grași certificată în intervalul corespunzător.
            
                        
                           Nota 5:
                        
                     
                     
                        Acești factori de corecție nu sunt identici cu factorii de corecție teoretici FID, care sunt specificați în apendicele A, întrucât includ, de asemenea, performanța sistemului de injecție etc. Cu toate acestea, în cazul unor diferențe mai mari, întregul sistem ar trebui verificat din punctul de vedere al performanței.
                     
                  Pentru acest amestec etalon, procentajul în masă al esterilor metilici ai acizilor grași i este dat de formula:
            
               wi
                = (mi
               /Σm) × 100,
            unde
            
                         
                     
                     
                        m
                              i
                            este masa esterilor metilici ai acizilor grași i în amestecul etalon;
                     
                  
                         
                     
                     
                        Σm este suma maselor diverșilor constituenți, precum esterii metilici ai acizilor grași, ai amestecului etalon.
                     
                  Pornind de la cromatograma amestecului etalon, se calculează procentajul ca arie al esterilor metilici ai acizilor grași i, astfel:
            wi = (Ai/ΣA) × 100,
            unde:
            
                         
                     
                     
                        Ai este aria esterilor metilici ai acizilor grași i în amestecul etalon;
                     
                  
                         
                     
                     
                        ΣA este suma tuturor ariilor ale tuturor esterilor metilici ai acizilor grași din amestecul etalon.
                     
                  Factorul de corecție Fc este deci:
            Fc = (mi × ΣA)/(Ai/Σm).
            Pentru probă, procentajul ca masă al fiecărui ester metilic al acizilor grași i este:
            wi = (Fi × Ai)/Σ (Fi × Ai).
            Rezultatele sunt exprimate cu două decimale.
            
                        
                           Nota 6:
                        
                     
                     
                        Valoarea calculată corespunde procentajului în masă al acidului gras individual calculat ca triacilgliceroli per 100 g de substanță grasă.
                     
                  5.2.2.3.   Utilizarea unui etalon intern
            În anumite analize (de exemplu, când nu sunt cuantificați toți acizii grași, precum atunci când acizii în C4 și în C6 sunt prezenți alături de acizii în C16 și C18, sau când este necesară determinarea cantității absolute de acizi grași dintr-o probă), este necesară utilizarea unui etalon intern. Acizii grași în C5, C15 sau C17 sunt utilizați în mod frecvent. Se determină factorul de corecție al etalonului intern (dacă este necesar).
            Procentajul în masă al compusului i, exprimat în esteri metilici, este dat în continuare de formula:
            
               wi
                = (mIS × Fi × Ai)/(m × FIS × AIS),
            unde:
            
                         
                     
                     
                        A
                              i
                            este aria esterilor metilici ai acizilor grași i;
                     
                  
                         
                     
                     
                        A
                              IS
                            este aria etalonului intern;
                     
                  
                         
                     
                     
                        F
                              i
                            este factorul de corecție al acidului gras i, exprimat ca EMAG;
                     
                  
                         
                     
                     
                        F
                              IS
                            este factorul de corecție al etalonului intern;
                     
                  
                         
                     
                     
                        m este masa probei de testare, în miligrame
                     
                  
                         
                     
                     
                        m
                              IS
                            este masa etalonului intern, în miligrame.
                     
                  Rezultatele sunt exprimate cu două decimale.
            6.   PROCESUL-VERBAL DE TESTARE
            Procesul-verbal de testare trebuie să specifice metodele utilizate pentru prepararea esterilor metilici și pentru analiza prin cromatografie în fază gazoasă. Acesta trebuie să menționeze, de asemenea, toate detaliile de operare nespecificate în prezenta metodă standard sau considerate opționale, împreună cu detalii privind eventualele incidente care ar fi putut influența rezultatele.
            Procesul-verbal de testare trebuie să includă toate informațiile necesare pentru identificarea completă a probei.
            7.   PRECIZIA
            7.1.   Rezultatele testului între laboratoare
            
            Detaliile unui test între laboratoare privind precizia metodei sunt prezentate în anexa C la standardul IOC/T.20/Doc. nr. 33. Valorile derivate din acest test între laboratoare pot să nu fie aplicabile intervalelor de concentrație și matricelor, altele decât cele prezentate.
            7.2.   Repetabilitatea
            
            Diferența absolută dintre două rezultate independente ale unui singur test, obținute prin aceeași metodă pe o substanță de testare identică, în același laborator, de către același operator, folosind același echipament la un interval scurt de timp, va fi mai mare în cel mult 5 % dintre cazuri decât valoarea R indicată în tabelele 1-14 din anexa C la standardul IOC/T.20/Doc. nr. 33.
            7.3.   Reproductibilitatea
            
            Diferența absolută dintre două rezultate ale unui singur test, obținute prin aceeași metodă pe o substanță de testare identică, în laboratoare diferite, cu operatori diferiți, folosind echipamente diferite, va fi mai mare în cel mult 5 % dintre cazuri decât valoarea R indicată în tabelele 1-14 din anexa C la standardul IOC/T.20/Doc. nr. 33.
            
               Apendicele A
               
                  Figura 1
               
               
                  
               ω0,5 reprezintă lățimea la jumătatea înălțimii triunghiului (ABC) și b reprezintă lățimea la jumătatea înălțimii triunghiului (NPM).
               
                           
                              Figura 2
                           
                        
                        
                           
                              Figura 3
                           
                        
                     
                           
                              
                        
                        
                           
                              
                        
                     
            
               Apendicele B
               
                  Figura 1
               
               
                  Profilul cromatografic în fază gazoasă obținut prin metoda de metilare la rece din ulei din resturi de măsline
               
               Vârfurile cromatografice corespund esterilor metilici și etilici, cu excepția cazurilor în care există indicații contrare.
            
         ”
   
   
      ANEXA V
      Anexa XII la Regulamentul (CEE) nr. 2568/91 se modifică după cum urmează:
      
                  1.
               
               
                  Punctul 1 se înlocuiește cu următorul text:
                  „1.   SCOPUL ȘI DOMENIUL DE APLICARE
                  Scopul metodei internaționale descrise în prezenta anexă este de a determina procedura de evaluare a caracteristicilor organoleptice ale uleiului de măsline virgin în sensul punctului 1 din partea VIII a anexei VII la Regulamentul (UE) nr. 1308/2013 al Parlamentului European și a Consiliului (1) și de a stabili metoda de clasare a uleiului de măsline virgin pe baza acestor caracteristici. Metoda conține și indicații pentru etichetarea opțională.
                  Metoda prezentată nu se aplică decât uleiurilor de măsline virgine și clasificării sau etichetării acestora în funcție de intensitatea defectelor percepute și a gustului fructat, determinate de un grup de degustători selecționați, formați și monitorizați, constituiți într-o comisie.
                  Standardele COI menționate în prezenta anexă se utilizează în ultima versiune disponibilă.
                  
                     (1)  Regulamentul (UE) nr. 1308/2013 al Parlamentului European și al Consiliului din 17 decembrie 2013 de instituire a unei organizări comune a piețelor produselor agricole și de abrogare a Regulamentelor (CEE) nr. 922/72, (CEE) nr. 234/79, (CE) nr. 1037/2001 și (CE) nr. 1234/2007 ale Consiliului (JO L 347, 20.12.2013, p. 671).”"
						
               
            
                  2.
               
               
                  Punctele 3.2, 3.3 și 3.4 se înlocuiesc cu următorul text:
                  „3.1.1.   Alte atribute negative
                  
                  
                              
                                 Încălzit sau ars
                              
                           
                           
                              Aromă caracteristică a uleiurilor, care provine din încălzirea excesivă și/sau prelungită în cursul obținerii acestora și, în special, în timpul malaxării termice a pastei, dacă aceasta se realizează în condiții termice necorespunzătoare.
                           
                        
                              
                                 De fân-lemnos
                              
                           
                           
                              Aromă caracteristică anumitor uleiuri care provin din măsline uscate.
                           
                        
                              
                                 Grosier
                              
                           
                           
                              Senzație bucotactilă densă și păstoasă produsă de anumite uleiuri vechi.
                           
                        
                              
                                 De lubrifianți
                              
                           
                           
                              Aromă a uleiului care amintește de motorină, de grăsime sau de uleiul mineral.
                           
                        
                              
                                 De ape de vegetație
                              
                           
                           
                              Aromă dobândită de ulei în urma unui contact prelungit cu apele de vegetație care au suferit procese de fermentare.
                           
                        
                              
                                 De saramură
                              
                           
                           
                              Aroma uleiului obținut din măsline conservate în saramură.
                           
                        
                              
                                 Metalică
                              
                           
                           
                              Aromă care amintește de cea a metalelor. Aceasta este caracteristică uleiului care a rămas în contact îndelungat cu suprafețe metalice, pe durata procesului de măcinare, de malaxare, de presare sau de stocare.
                           
                        
                              
                                 Rogoz
                              
                           
                           
                              Aromă caracteristică uleiului obținut din măsline presate între rogojini împletite din rogoz nou. Aroma poate fi diferită în funcție de materialul folosit la fabricarea rogojinilor, și anume rogoz verde sau rogoz uscat.
                           
                        
                              
                                 Mâncat de viermi
                              
                           
                           
                              Aroma uleiului provenit din măsline care au fost supuse unui atac puternic al larvelor muștei măslinului (Bactrocera oleae).
                           
                        
                              
                                 Castravete
                              
                           
                           
                              Aromă care apare ca urmare a ambalării ermetice a uleiului, prelungite în mod excesiv, în special în recipiente de tinichea, și care este atribuită formării de 2,6 nonadienal.
                           
                        3.2.   Atribute pozitive
                  
                  
                              
                                 Fructat
                              
                           
                           
                              Ansamblul senzațiilor olfactive caracteristice ale uleiului, în funcție de soiul măslinelor, provenind de la fructe sănătoase și proaspete, verzi sau coapte. Senzațiile sunt percepute direct și/sau retronazal.
                           
                        
                              
                                 Amar
                              
                           
                           
                              Gust elementar caracteristic al uleiului obținut din măsline verzi sau în stadiul de coacere. Este perceput de papilele caliciforme care formează «V»-ul lingual.
                           
                        
                              
                                 Picant
                              
                           
                           
                              Senzație tactilă de pișcătură, caracteristică uleiurilor produse la începutul sezonului, în principal pe bază de măsline încă verzi. Senzația poate fi percepută în toată cavitatea bucală, în special în gât.
                           
                        3.3.   Terminologie opțională în scopul etichetării
                  
                  La cerere, președintele comisiei poate atesta faptul că uleiurile evaluate respectă definițiile și intervalele corespunzătoare expresiilor și adjectivelor următoare în funcție de intensitatea și de percepția atributelor.
                  Atributele pozitive (fructat, amar și picant): În funcție de intensitatea percepției:
                  
                              —
                           
                           
                              
                                 intens, atunci când mediana atributului este mai mare de 6;
                           
                        
                              —
                           
                           
                              
                                 mediu, atunci când mediana atributului este cuprinsă între 3 și 6;
                           
                        
                              —
                           
                           
                              
                                 ușor, atunci când mediana atributului este mai mică de 3.
                           
                        
                              
                                 Fructat
                              
                           
                           
                              Ansamblul senzațiilor olfactive caracteristice ale uleiului, în funcție de soiul măslinelor, provenind de la fructe sănătoase și proaspete, în care nu predomină nici gustul fructat verde și nici gustul fructat copt. Senzațiile sunt percepute direct și/sau retronazal.
                           
                        
                              
                                 Fructat verde
                              
                           
                           
                              Set de senzații olfactive caracteristice uleiului, care amintesc de cele ale fructelor verzi, în funcție de soiul măslinelor, provenind de la fructe verzi, sănătoase și proaspete. Senzațiile sunt percepute direct și/sau retronazal.
                           
                        
                              
                                 Fructat copt
                              
                           
                           
                              Set de senzații olfactive caracteristice uleiului, care amintesc de cele ale fructelor coapte, în funcție de soiul măslinelor, provenind de la fructe sănătoase și proaspete. Senzațiile sunt percepute direct și/sau retronazal.
                           
                        
                              
                                 Echilibrat
                              
                           
                           
                              Ulei care nu este dezechilibrat, adică senzația olfactivă, gustativă și tactilă a uleiului în cazul căruia mediana atributului amar și/sau cea a atributului picant este mai mare cu două puncte decât mediana atributului fructat.
                           
                        
                              
                                 Ulei dulce
                              
                           
                           
                              Un ulei în cazul căruia mediana atributului amar și cea a atributului picant sunt mai mici sau egale cu 2.”
                           
                        
            
                  3.
               
               
                  La punctul 7, după punctul 7.1, se introduce următorul punct:
                  „7.1.1.   Președintele adjunct al comisiei
                  
                  Din motive întemeiate, președintele comisiei poate fi înlocuit cu un președinte al comisiei adjunct care poate prelua sarcinile legate de efectuarea testelor. Acest înlocuitor trebuie să dețină toate competențele necesare solicitate unui președinte al comisiei.”
               
            
                  4.
               
               
                  Punctul 7.2 se înlocuiește cu următorul text:
                  „7.2.   Degustătorii
                  
                  Persoanele care au calitatea de degustători în testarea organoleptică a uleiurilor de măsline trebuie să facă acest lucru în mod voluntar. Prin urmare, se recomandă depunerea unei cereri scrise de către candidați. Candidații sunt selecționați, formați și monitorizați de către președintele comisiei, în conformitate cu capacitatea lor de a face distincția între probe similare, ținând cont de faptul că precizia lor se va îmbunătăți ca urmare a formării.
                  Degustătorii trebuie să se comporte ca adevărați observatori senzoriali, lăsându-și deoparte gusturile personale și raportând doar senzațiile pe care le percep. În acest sens, ei trebuie să-și desfășoare întotdeauna activitatea în tăcere, într-un mod relaxat și lipsit de grabă, acordând o atenție senzorială maximă probei pe care o degustă.
                  Pentru fiecare test sunt necesari între 8 și 12 degustători, dar trebuie să se prevadă câțiva degustători suplimentari care să poată fi folosiți în cazul unei eventuale absențe.”
               
            
                  5.
               
               
                  Punctul 9.3 se înlocuiește cu următorul text:
                  „9.3.   Utilizarea datelor de către președintele comisiei
                  
                  Președintele comisiei strânge foile de profil completate de fiecare degustător și trece în revistă intensitățile consemnate pentru diferitele atribute. Dacă identifică vreo anomalie, invită degustătorul să își revizuiască foaia de profil și, dacă este necesar, să repete testul.
                  Președintele comisiei introduce datele referitoare la evaluarea fiecărui membru al comisiei într-un program informatic de tipul celor prevăzute de standardul IOC/T.20/Doc. nr. 15, în vederea calculării din punct de vedere statistic a rezultatelor analizei, pe baza calculării medianei acestora. A se vedea punctul 9.4 și apendicele la prezenta anexă. Datele pentru o anumită probă se introduc cu ajutorul unei matrice care conține 9 coloane, reprezentând cele 9 atributele senzoriale, și n linii corespunzătoare celor n membri care fac parte din comisie.
                  Atunci când se percepe un defect care se înregistrează la rubrica «altele» de către cel puțin 50 % din comisie, președintele comisiei calculează mediana defectului și obține clasarea corespunzătoare.
                  Valoarea coeficientului de variație robust care definește clasarea (defectul cu cea mai mare intensitate și atributul fructat) trebuie să nu fie mai mare de 20 %.
                  În caz contrar, președintele comisiei trebuie să repete evaluarea probei respective într-o altă sesiune de degustare.
                  Dacă această situație este frecventă, se recomandă ca președintele comisiei să ofere degustătorilor o formare specifică suplimentară (IOC/T.20/Doc. nr. 14, punctul 5) și să utilizeze indicele de repetabilitate și indicele de deviație pentru a verifica performanțele degustătorilor (IOC/T.20/Doc. nr. 14, punctul 6).”
               
            
                  6.
               
               
                  Punctul 9.4 se înlocuiește cu următorul text:
                  „9.4.   Clasarea uleiului
                  
                  Uleiul se clasează în categoriile de mai jos, în funcție de mediana defectelor și de mediana atributului fructat. Mediana defectelor se definește ca mediana defectului perceput cu cea mai mare intensitate. Mediana defectelor și mediana atributului fructat sunt exprimate cu o precizie de o zecimală.
                  Clasarea uleiului se efectuează prin compararea valorii medianei defectelor și a medianei atributului fructat cu intervalele de referință prezentate în cele ce urmează. Întrucât limitele acestor intervale s-au stabilit ținându-se cont de eroarea metodei, acestea sunt considerate absolute. Programele software permit să se afișeze clasarea într-un tabel de date statistice sau ca grafic.
                  
                              (a)
                           
                           
                              În cazul uleiului de măsline extravirgin, mediana defectelor este egală cu 0, iar mediana atributului fructat este mai mare de 0.
                           
                        
                              (b)
                           
                           
                              în cazul uleiului de măsline virgin, mediana defectelor este mai mare de 0, dar nu mai mare de 3,5, iar mediana atributului fructat este mai mare de 0.
                           
                        
                              (c)
                           
                           
                              în cazul uleiului de măsline lampant, mediana defectelor depășește 3,5 sau mediana defectelor este mai mică sau egală cu 3,5, iar mediana atributului fructat este egală cu 0.
                           
                        
                              
                                 Nota 1:
                              
                           
                           
                              Atunci când mediana atributului amar și/sau a atributului picant depășește 5,0, președintele comisiei trebuie să declare acest lucru pe certificatul de test.
                           
                        Pentru evaluările care au ca scop monitorizarea conformității, trebuie efectuat un test. În cazul contraevaluărilor, președintele comisiei trebuie să ia măsuri pentru ca evaluarea să se desfășoare în duplicat, în sesiuni diferite; mediana atributelor va fi calculată pe baza tuturor datelor din foile de profil pentru ambele teste”
               
            
                  7.
               
               
                  Figura 1 se înlocuiește cu următoarea:
                  
                     „Figura 1
                  
                  
                     FOAIA DE PROFIL PENTRU ULEIUL DE MĂSLINE VIRGIN
                  
                  
                              
                                 Intensitatea perceperii defectelor
                              
                           
                        
                              Stătut/de drojdie
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Mucegăit/umed/de pământ
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              De vin/oțetit
                              acid/acru
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Măsline înghețate
                              (lemn umed)
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Rânced
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Alte atribute negative:
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Descriptor:
                           
                           
                              Metalic ☐ De fân ☐ Mâncat de viermi ☐ Grosier ☐
                              De saramură ☐ Încălzit sau ars ☐ De ape de vegetație ☐
                              Rogoz ☐ Castravete ☐ De lubrifianți ☐
                           
                        
                              
                                 Intensitatea perceperii atributelor pozitive
                              
                           
                        
                              Fructat
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                               
                           
                           
                              Verde ☐
                           
                           
                              Copt ☐
                           
                        
                              Amar
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Picant
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                               
                           
                           
                               
                           
                           
                               
                           
                        
                              Numele degustătorului:
                           
                           
                               
                           
                           
                              Codul degustătorului:
                           
                        
                              Codul probei:
                           
                           
                              Semnătura:
                           
                        
                              Data:
                           
                        
                              Observații:”
                           
                        
            
   
      ANEXA VI
      Anexa XIX la Regulamentul (CEE) nr. 2568/91 se modifică după cum urmează:
      
                  1.
               
               
                  Titlul se înlocuiește cu următorul text:
                  
                     „DETERMINAREA CONȚINUTULUI DE ALCOOLI ALIFATICI ȘI TRITERPENICI PRIN CROMATOGRAFIE ÎN FAZĂ GAZOASĂ CU COLOANĂ CAPILARĂ”
                  
               
            
                  2.
               
               
                  Punctul 1 se înlocuiește cu următorul text:
                  „1.   OBIECT
                  Prezenta anexă descrie o metodă de determinare a conținutului de alcooli alifatici și triterpenici din uleiuri și grăsimi.”
               
            
                  3.
               
               
                  Punctul 4.11 se înlocuiește cu următorul text:
                  
                              „4.11.
                           
                           
                              Soluție de referință pentru cromatografie în strat subțire: alcooli C20-C28 de 0,5 % în cloroform, sau o fracțiune de alcooli obținută conform indicațiilor de la punctul 5.2 din substanța nesaponificabilă a unui ulei din resturi de măsline.”
                           
                        
            
                  4.
               
               
                  Punctele 5.2.5 și 5.2.6 se înlocuiesc cu următorul text:
                  
                              „5.2.5.
                           
                           
                              Placa se pulverizează ușor și uniform cu soluție de 2′, 7′-diclorofluoresceină atunci când placa este observată în lumină ultravioletă. Banda de alcooli alifatici poate fi identificată prin faptul că este aliniată cu pata obținută din soluția de referință: se marchează limitele benzii cu un creion negru; evidențiind banda de alcooli alifatici și banda imediat superioară, care este banda de alcooli terpenici, împreună (nota 4).
                              
                                          
                                             Nota 4:
                                          
                                       
                                       
                                          Banda alcoolilor alifatici și banda alcoolilor terpenici trebuie grupate împreună în vederea posibilei migrări a unor alcooli alifatici în banda alcoolilor triterpenici. Un exemplu de separare TLC este oferit în figura 1 din apendice.
                                       
                                    
                        
                              5.2.6.
                           
                           
                              Se răzuiește silicagelul cu o spatulă metalică în zona delimitată. Materialul extras, sfărâmat fin, se introduce în pâlnia de filtrare (3.7). Se adaugă 10 ml de cloroform cald, se amestecă cu grijă cu o spatulă metalică și se filtrează cu ajutorul vidului, apoi se colectează filtratul în balonul conic (3.8) conectat la pâlnia de filtrare.
                              Se spală silicagelul din balon de trei ori cu eter etilic (aproximativ 10 ml de fiecare dată) și se colectează filtratul în același balon conectat la pâlnie. Se evaporă filtratul până ajunge la un volum de 4-5 ml, se transvazează soluția reziduală în eprubeta de 10 ml (3.9) cântărită în prealabil, se evaporă până la uscare prin încălzire ușoară într-un curent ușor de azot, se completează din nou folosind câteva picături de acetonă, se evaporă din nou până la uscare, se introduce într-un cuptor la 105 °C timp de aproximativ 10 minute și apoi se lasă să se răcească în exsicator și se cântărește.
                              Reziduul din interiorul eprubetei este compus din fracțiunea alcoolilor.”
                           
                        
            
                  5.
               
               
                  Punctul 5.4.4 se înlocuiește cu următorul text:
                  „5.4.4.   Identificarea valorilor de vârf
                  
                  Identificarea valorilor de vârf individuale se efectuează pe baza timpilor de retenție și prin comparație cu amestecul etalon TMSE, analizați în aceleași condiții.
                  Exemple de cromatogramă pentru fracțiunea alcoolilor unui ulei de măsline rafinat sunt prezentate în figurile 2 și 3 din apendice.”
               
            
                  6.
               
               
                  Apendicele se înlocuiește cu următorul text:
                  
                     „Apendice
                     
                        Exemplu de separare TLC și exemple de cromatogramă
                     
                     
                        Figura 1
                     
                     
                        Placă pentru cromatografie pe strat subțire a fracțiunii nesaponificabile din uleiul de măsline eluat cu hexan/eter etilic (65/35)
                     
                     
                        Figura 2
                     
                     
                        Cromatograma fracțiunii alcoolice a unui ulei rafinat
                     
                     
                        Figura 3
                     
                     
                        Alcooli alifatici și triterpenici ai uleiului de măsline rafinat și ai unui ulei de măsline obținut la a doua centrifugare