CELEX: 31977R1058
Language: el
Date: 1977-05-18 00:00:00
Title: Κανονισμός (ΕΟΚ) αριθ. 1058/77 τής Επιτροπής τής 18ης Μαΐου 1977 περί τών χαρακτηριστικών τών ελαιολάδων καί ορισμένων προϊόντων πού περιέχουν ελαιόλαδο καί περί τροποποιήσεως τής ονοματολογίας τού Κοινού Δασμολογίου σέ ό,τι αφορά τό ελαιόλαδο

46                                  Επίσημη ' Εφημερίδα τών Εύρωπαϊκών Κοινοτήτων
377R1058
'Αριθ. N 128/6                        Επίσημη Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων                                24.5.77
                                 ΚΑΝΟΝΙΣΜΟΣ (ΕΟΚ) άριθ. 1058/77 ΤΗΣ ΕΠΙΤΡΟΠΗΣ
                                                  τής 18ης Μαΐου 1977
                περί των χαρακτηριστικών τών ελαιολάδων καί όρισμένων προϊόντων πού περιέχουν έλαιό­
                λαδο καί περί τροποποιήσεως της όνοματολογίας τοΰ κοινού δασμολογίου σέ δ,τι άφορα τό
                                                        ελαιόλαδο
H ΕΠΙΤΡΟΠΗ ΤΩΝ ΕΥΡΩΠΑΪΚΩΝ ΚΟΙΝΟΤΗΤΩΝ,                          ότι γιά νά εξασφαλισθεί ή ορθή λειτουργία τοϋ συστή­
                                                               ματος τών εισφορών οί όποιες έφαρμόζονται κατά τήν
Έχοντας ύπόψη :
                                                               εισαγωγή έλαιοπυρήνων πρέπει νά προβλεφθεί μία
τή συνθήκη περί ιδρύσεως της Ευρωπαϊκής Οικονομι­              ένιαία μέθοδος, γιά τόν προσδιορισμό τής περιεκτικό­
κής Κοινότητος,                                                τητος σέ έλαιο τών έν λόγω προϊόντων
τόν κανονισμό άριθ. 136/66/ΕΟΚ του Συμβουλίου τής              ότι ό κανονισμός (ΕΟΚ) άριθ. 618/72 τής ' Επιτροπής
22ας Σεπτεμβρίου 1966 περί δημιουργίας κοινής οργα­            τής 29ης Μαρτίου 1972 περί τών χαρακτηριστικών
νώσεως άγοράς στόν τομέα τών λιπαρών ούσιών (*)                τών ελαιολάδων καθώς καί όρισμένων προϊόντων πού
όπως τροποποιήθηκε τελευταία άπό τόν κανονισμό                 περιέχουν έλαιόλαδο (7), τροποποιήθηκε επανειλημμέ­
(ΕΟΚ) άριθ . 1 707/73 (2), καί ίδίως τά άρθρα 13 παρά­         νως, ιδίως άπό τόν κανονισμό (ΕΟΚ) άριθ. 3366/75 (8)·
γραφος 4 καί 18 παράγραφος 3 ,                                  δτι λαμβανομένων ύπόψη τών νέων τροποποιήσεων
                                                                πού θά επέλθουν, κρίθηκε σκόπιμο νά καταργηθεί αυ­
τόν κανονισμό άριθ . 162/66/ΕΟΚ τοϋ Συμβουλίου τής              τός καί νά ένσωματωθεί σέ ενα νέο κανονισμό τό σύ­
27ης ' Οκτωβρίου 1966 περί τών συναλλαγών λιπαρών               νολο τών διατάξεων
ουσιών μεταξύ τής Κοινότητος καί τής Ελλάδος (3),
                                                                δτι τά μέτρα πού προβλέπονται στόν παρόντα κανονι­
καί Ιδίως τά άρθρα 3 παράγραφοι 4 καί 9,
                                                                σμό είναι σύμφωνα μέ τή γνώμη τής ' Επιτροπής Δια­
τόν κανονισμό (ΕΟΚ) άριθ . 443/72 τοϋ Συμβουλίου τής            χειρίσεως Λιπαρών Ούσιών,
29ης Φεβρουαρίου 1972 περί τών εισφορών πού έφαρ­
                                                                ΕΞΕΔΩΣΕ ΤΟΝ ΠΑΡΟΝΤΑ ΚΑΝΟΝΙΣΜΟ :
μόζονται στό έλαιόλαδο πού έχει υποβληθεί σέ διαδι­
κασία έξευγενισμοϋ καθώς καί σέ όρισμένα προϊόντα                                         "Άρθρο 1
 πού περιέχουν έλαιόλαδο (4), καί ίδίως τό άρθρο 8,
                                                                1 . Τό μόνο πού θεωρείται ώς έλαιόλαδο κατά τήν
  Εκτιμώντας:                                                   έννοια τής διακρίσεως 15.07 A τοϋ κοινοΰ δασμολο­
                                                                γίου , είναι τό έλαιο , πού προέρχεται άποκλειστικά άπό
δτι, επί τοϋ παρόντος, όλα τά παρθένα έλαιόλαδα έ­              τήν έπεξεργασία έλαιών, έξαιρέσει τοϋ άναεστερο­
μπίπτουν στή διάκριση 15.07 A II α) του κοινοΰ δασμο­           ποιημένου ελαιολάδου καί κάθε άλλου μείγματος
λογίου· ότι, έκ τοϋ γεγονότος αυτού, μία καί μόνη               ελαιολάδου μέ έλαιο άλλης φύσεως .
εισφορά καθορίζεται γιά τά προϊόντα αυτά- δτι, γιά νά
δύναται ή εισφορά κατά τήν εισαγωγή νά έπιτυγχάνει              Ή έξακρίβωση τής παρουσίας άναεστεροποιημένου
τό σκοπό της, πρέπει αυτή νά καθορίζεται άνάλογα μέ             έλαιολάδου ή άλλης φύσεως έλαίων πραγματοποιείται
τούς διαφόρους τύπους παρθένου έλαιολάδου καί νά                μέ τίς μεθόδους πού περιλαμβάνονται άντίστοιχα στά
διακριθοΰν, πρός τό σκοπό αυτό, οί τύποι παρθένου               παραρτήματα VII καί VIII .
ελαιολάδου άνάλογα μέ τά φυσικά καί χημικά χαρα­                2. Τά έλαια, τά όποια έχουν τά χαρακτηριστικά πού
κτηριστικά τους· δτι πρέπει ώς έκ τούτου νά προσαρ­             εμφαίνονται στό παράρτημα I σημεία 1 , 2 καί 3 κατα­
 μοσθεί ή ονοματολογία του κοινοΰ δασμολογίου·                   τάσσονται στίς διακρίσεις 15.07 A I α), 15.07 A I β) καί
δτι ή δασμολογική ονοματολογία πού προκύπτει άπό                 15.07 A I γ) τοϋ κοινοΰ δασμολογίου. Γιά τόν προσδιο­
 τήν έφαρμογή τοϋ κανονισμοΰ άριθ. 136/66/ΕΟΚ εν­                ρισμό τών άνωτέρω άναφερομένων χαρακτηριστικών
 σωματώνεται στό κοινό δασμολόγιο τό όποϊο προσαρ­               χρησιμοποιούνται μέθοδοι οί όποιες περιγράφονται
 τάται στόν κανονισμό (ΕΟΚ) άριθ . 950/68 (5), δπως              στά παραρτήματα IV , V καί VI .
 τροποποιήθηκε τελευταία άπό τόν κανονισμό (ΕΟΚ)                 3 . Τά έλαια τά όποϊα έχουν τά χαρακτηριστικά πού
 άριθ . 874/77 (6)·                                              περιλαμβάνονται στό παράρτημα I σημείο 4 κατατάσ­
                                                                 σονται στή διάκριση 15.07 A II α) τοϋ κοινοΰ δασμο­
                                                                 λογίου .
  C)  ΕΕ άριθ . 172 τής 30.9.1966, σ. 3025/66.
  (2) ΕΕ άριθ . N 175 τής 29.6.1973, σ . 5.                      4 . Τά προϊόντα τής κλάσεως 15.17 τά όποια έχουν τά
  (3) ΕΕ άριθ.  197 τής 29.10.1966, σ. 3393/66.                   χαρακτηριστικά πού έμφαίνονται στό παράρτημα II
  (4) EE άριθ.  N 54 τής 3.3.1972, σ. 3.
  (5) ΕΕ άριθ . N 172 τής 22.7.1968, σ . 1 .                    f) ΕΕ άριθ . N 78 τής 31.3.1972, σ, 5.
  (6) ΕΕ άριθ.  N 106 τής 29.4.1977, σ . 20.                    Π ΕΕ άριθ . N 333 τής 30.12.1975, σ . 13 .
 ---pagebreak---                                      Επίσημη Εφημερίδα των Εύρωπαϊκών Κοινοτήτων                                          47
οέν κατατάσσονται στη διάκριση 15.17 A του κοινού                                                 "Αρθρο 3
δασμολογίου.
                                                                        Τό κοινό δασμολόγιο τό όποιο προσαρτάται στόν κα­
                                                                        νονισμό (ΕΟΚ) άριθ. 950/68 τροποποιείται ώς εξής:
                          "Αρθρο 2
                                                                        1 . Στή συμπληρωματική σημείωση 1 τοϋ κεφαλαίου
1 . Ή περιεκτικότητα σέ έλαιόλαδο των έλαιοπυρή­                         15 οί δροι «τής κλάσεως 15.07» άντικαθίστανται άπό
νων καί των λοιπών υπολειμμάτων πού άπομένουν μετά                      «τής διακρίσεως 15.07 Δ».
τή λήψη τοϋ έλαιολάδου τά όποια υπάγονται στή διά­
κριση 23.04 A προσδιορίζεται σύμφωνα μέ τή μέθοδο                       2. Οί συμπληρωματικές σημειώσεις 2, 3 καί 4 του
πού περιγράφεται στό παράρτημα IX.                                      κεφαλαίου 15 άντικαθίστανται άπό τίς συμπληρωματι­
                                                                        κές σημειώσεις 2, 3 καί 4 πού εμφαίνονται στό παράρ­
                                                                        τημα III του παρόντος κανονισμού .
2. Ή περιεκτικότητα σέ έλαιόλαδο, πού άναφέρεται
στήν παράγραφο 1 , έκφράζεται μέ τό βάρος του ύπό                       3 . Ή διάκριση 15.07 A άντικαθίσταται άπό τό ακό­
μορφή ποσοστού έπί τοις % ξηράς ουσίας.                                 λουθο κείμενο :
                                                                                               Δασμοί
               Δασμολογική                 Περιγραφή έμπορευμάτων
                  κλάση
                                                                                 Αύτόνομοι %           Συμβατικοί %
                    1                                 2                               3                     4
             15.07            A. " Ελάιον έλαιών :
                                   I. Μή έπεξεργασμένον:
                                       α) "Ελαιο έλαιών παρθένον                    20 (E)
                                       6) Έλαιον έλαιών παρθένον
                                           φωτιστικόν                               20 (E)
                                       γ) Λοιπόν                                    20 (E)
                                  II . "Ετερον :
                                        α) Ληφθέν δι' έπεξεργασίας
                                           τών ελαίων τών διακρί­
                                            σεων 15.07 A I α) ή 15.07
                                            A I θ), εστω καί μεμιγμέ­
                                            νον μέ παρθένον έλαιόλα­
                                            δον                                     20 (E)
                                        θ) Μή κατονομαζόμενο                       20 (E)
                                                                 "Αρθρο 4
            Σέ όλες τίς κοινοτικές πράξεις στίς όποιες γίνεται άναφορά στίς διακρίσεις 15.07 A II ή
            15.07 Αία) καί θ) τοϋ κοινού δασμολογίου, οί έν λόγω άναφορές πρέπει νά θεωρούνται,
            άναλόγως τών χαρακτηριστικών τοϋ προϊόντος, ότι άναφέρονται άντίστοιχα στίς διακρί­
            σεις 15.07 A I α), β) καί γ) καί 15.07 A II α) καί β) τοϋ κοινοΰ δασμολογίου.
                                                                  Αρθρο 5
            Ό κανονισμός (ΕΟΚ) άριθ . 618/72 τής Επιτροπής καταργείται.
                                                                 "Αρθρο 6
            Ό παρών κανονισμός άρχίζει νά ισχύει τήν τεσσαρακοστή τρίτη ήμέρα άπό τή δημο­
            σίευσή του στήν 'Επίσημη Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων.
            Ό παρών κανονισμός είναι δεσμευτικός ώς πρός όλα του τά μέρη καί έφαρμόζεται άμεσα
            σέ όλα τά Κράτη μέλη .
            "Εγινε στίς Βρυξέλλες, στίς 18 Μαΐου 1977 .
                                                                                        Γιά την Επιτροπή
                                                                                         Finn GUNDELACH
                                                                                            Ά ντιπρόεδρος
 ---pagebreak--- 48                         Επίσημη ' Εφημερίδα τών Εύρωπαϊκών Κοινοτήτων
                                               ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ /
                                  ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΤΩΝ ΕΛΑΙΟΛΑΔΩΝ
   1 . Θεωρείται ώς ελαιον έλαιών παρθένον (παρθένο έλαιόλαδο), κατά τήν έννοια τής διακρίσεως 15.07
       Αία) του κοινού δασμολογίου, τό φυσικό έλαιόλαδο τό όποιο λαμβάνεται άποκλειστικά μέ
       μηχανικές διαδικασίες, περιλαμβανομένης τής πιέσεως, έξαιρέσει κάθε άναμίξεως μέ έλαιόλαδο
       πού άποκτήθηκε κατ' άλλο τρόπο καί πού έχει τά κατωτέρω χαρακτηριστικά:
       α) περιεκτικότητα σέ έλεύθερα λιπαρά όξέα, έκπεφρασμένα σέ έλαϊκό όξύ, όχι ανωτέρα του 3%·
       β) συντελεστή άποσβέσεως Κ270 [άπορρόφηση διαλύματος πάχους 1 cm περιέχοντος 1 gr έλαίου
           άνά 100 ml , έντός ίσοοκτανίου (2,2,4, τριμεθυλοπεντάνιο) σέ μήκος κύματος 270 nm] όχι
           άνώτερο του 0,25 καί , κατόπιν έπεξεργασίας τοΰ δείγματος έλαίου μέ ένεργοποιημένη άλουμίνα
           όχι άνώτερο του 0,11 *
       γ) άπόκλιση συντελεστή άποσβέσεως στήν περιοχή τών 270 nm, όχι άνώτερη τοΰ 0,01 .
           Ή εν λόγω άπόκλιση προσδιορίζεται άπό :
                                          ΔΚ = Km - 0,5 (Km__ 4 + Km+4)
           οπου Km          είναι ό συντελεστής άποσβέσεως στό μήκος κύματος του μέγιστου τής καμπύ­
                            λης άπορροφήσεως στήν περιοχή τών 270 nm καί
           K m_4 καί K m+4 είναι οί συντελεστές άποσθέσεως σέ μήκη κύματος κατά 4 nm κατώτερα καί
                            άνώτερα, άντιστοίχως άπό αυτό του Km *
       δ) άρνητικές άντιδράσεις Bellier καί τροποποιημένη Vizern πραγματοποιούμενες μέ τίς μεθόδους
           πού περιλαμβάνονται στό παράρτημα V ύπό A καί B*
       ε) άρνητική δοκιμασία σαπώνων, πραγματοποιούμενη σύμφωνα μέ τή μέθοδο πού περιγράφεται
           στό Παράρτημα VI .
   2. Κατά τήν έννοια τής διακρίσεως 1 5.07 A I θ) τοΰ κοινού δασμολογίου νοείται ώς ελαιον έλαιών
       παρθένον φωτιστικόν (παρθένο μειονεκτικό έλαιόλαδο λαμπάντε), όποιαδήποτε κι άν είναι ή
       όξύτητά του, τό έλαιόλαδο πού παρουσιάζει τά άκόλουθα χαρακτηριστικά :
       α) συντελεστή άποσβέσεως Κ270 άνώτερο άπό 0,25, καί μετά άπό έπεξεργασία τοΰ δείγματος μέ
            ενεργοποιημένη άλουμίνα, όχι άνώτερο τοΰ 0,11 .
            "Ελαια έχοντα περιεκτικότητα έλευθέρων λιπαρών όξέων, έκφρασμένη σέ έλαϊκό όξύ , μεγαλύ­
            τερη άπό 3% μπορούν νά έχουν , μετά άπό διέλευση διά μέσου ένεργοποιημένης άλουμίνας,
            συντελεστή άποσθέσεως Κ 27ο άνώτερο άπό 0,11 . Στήν περίπτωση αύτή , μετά άπό εξουδετέρωση
            καί άποχρωματισμό στό έργαστήριο μέ τή μέθοδο πού καθορίζεται στό Παράρτημα IV , πρέπει
            νά έχουν τά άκόλουθα χαρακτηριστικά :
           — συντελεστή άποσβέσεως Κ 27ο όχι άνώτερο τοΰ 1,10,
           — άπόκλιση συντελεστή άποσβέσεως, σέ περιοχή 270 nm, άνώτερη άπό 0,01 όχι όμως άνώ­
               τερη άπό 0,16­
       β) άντιδράσεις Bellier καί τροποποιημένη Vizern άρνητικές, πραγματοποιούμενες μέ τίς μεθόδους
            πού άναφέρονται στό Παράρτημα V ύπό A καί B*
       γ) άναζήτηση σαπώνων άρνητική , πραγματοποιούμενη σύμφωνα μέ τή μέθοδο πού περιγράφεται
            στό παράρτημα VI .
   3. Θεωρούνται ώς "υπαγόμενα στή διάκριση 15.07 A I γ) τοΰ κοινοΰ δασμολογίου ιδίως τά έλαια άπό
       «έλαιοπυρήνες», πού έμφανίζουν τά άκόλουθα χαρακτηριστικά:
       α) περιεκτικότητα σέ έλεύθερα λιπαρά όξέα, εκφραζόμενη σέ έλαϊκό όξύ , άνώτερη άπό 3% *
        θ) άντιδράσεις Bellier καί τροποποιημένη Vizern θετικές , πραγματοποιούμενες μέ τίς μεθόδους πού
            περιγράφονται στό Παράρτημα V ύπό A καί B*
       γ) άναζήτηση σαπώνων άρνητική , πραγματοποιούμενη μέ τή μέθοδο πού περιλαμβάνεται στό
            παράρτημα VI .
   4. Θεωρείται ώς υπαγόμενο στή διάκριση 15.07 A II α) τοΰ κοινοΰ δασμολογίου τό έλαιόλαδο πού
       λαμβάνεται μετά άπό έπεξεργασία τών έλαιολάδων τών διακρίσεων 15.07 A I α) ή 15.07 A I β), έστω
       καί μεμιγμένο μέ παρθένο έλαιόλαδο, καί πού εχει τά άκόλουθα χαρακτηριστικά:
       α) περιεκτικότητα σέ έλεύθερα λιπαρά όξέα, έκπεφρασμένη σέ έλαϊκό οξύ, μή υπερβαίνουσα τό
           3%·
       θ) άναζήτηση σαπώνων θετική , πραγματοποιούμενη μέ τή μέθοδο πού περιγράφεται στό Παράρ­
           τημα VI,
 ---pagebreak---                           Επίσημη ' Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων                            49
          γ) απόκλιση συντελεστή αποσβέσεως στήν περιοχή τών 270 μή υπερβαίνουσα τό 0,01 .
              Αύτή ή άπόκλιση όρίζεται άπό :
            ΔΚ - Km — 0,5 (^m—4 + ^+4)
              όπου Km           είναι ό συντελεστής άποσβέσεως στό μήκος κύματος του μεγίστου τής
                                καμπύλης άπορροφήσεως στήν περιοχή 270 nm καί
              Km—4 KQi Km+4 είναι οί συντελεστές άποσθέσεως στό μήκος κύματος κατά 4 nm
                               κατώτερο καί άνώτερο, άντιστοίχως, άπό εκείνο τοΰ Km ·
          δ) άρνητικές άντιδράσεις Bellier καί τροποποιημένη Vizern·
          ε) άρνητικό τεστ σαπωνων .
   II . Θεωρείται ως ελαιον έλαιών φωτιστικόν (παρθένο μειονεκτικό έλαιόλαδο (λαμπάντε), κατά
         την έννοια τής διακρίσεως 15.07 A I β)), άνεξαρτήτως όξύτητος, τό έλαιόλαδο πού έχει τά
         παρακάτω χαρακτηριστικά :
         α) συντελεστή άποσθέσεως Κ270 άνώτερο του 0,25 καί, μετά άπό έπεξεργασία τοΰ δείγμα­
              τος μέ ένεργό άλουμίνα, όχι άνώτερο τοΰ 0,11 . "Ελαια πού έχουν περιεκτικότητα σέ
              έλεύθερα λιπαρά όξέα, έκφρασμένη σέ έλαϊκό όξύ άνωτέρα τοΰ 3 % , δύνανται νά έχουν,
              μετά άπό διέλευση διά μέσου ένεργοποιημένης άλουμίνας, συντελεστή άποσβέσεως
              K.27ο άνώτερο τοΰ 0,11 . Στήν περίπτωση αυτή , μετά άπό έξουδετέρωση καί άποχρωματι­
              σμό στό έργαστήριο , πρέπει νά έχουν τά παρακάτω χαρακτηριστικά :
              — συντελεστή άποσθέσεως Κ270 όχι άνώτερο άπό 1,10.
              — άπόκλιση συντελεστή άποσθέσεως στήν περιοχή 270 nm, άνωτέρα τοΰ 0,01 , άλλά
                  όχι πέραν τοΰ 0, 1 6­
          θ) άρνητικές άντιδράσεις Bellier καί τροποποιημένη Vizern"
          γ) αρνητικό τέστ σαπώνων .
   III . Θεωρούνται ώς προϊόντα υπαγόμενα στή διάκριση 15.07 A I γ) τά έλαια, ιδίως τά έλαια
         «έλαιοπυρήνων», πού εμφανίζουν τά κατωτέρω χαρακτηριστικά:
          α) περιεκτικότητα σέ έλεύθερα λιπαρά όξέα, έκφρασμένη σέ έλαϊκό όξύ , άνωτέρα τοΰ 3 %·
          β) θετική άντίδραση Bellier καί/ή τροποποιημένη Vizern·
          γ) αρνητικά τέστ σαπώνων .
Γ. Υπάγεται στή διάκριση 15.07 A II α) τό έλαιόλαδο, τό λαμβανόμενο μετά άπό έπεξεργασία τών
   έλαίων τών διακρίσεων 15.07 Αία) καί/ή 15.07 A I θ), έστω καί μεμιγμένο μέ παρθένο
   έλαιόλαδο, πού έχει τά κατωτέρω χαρακτηριστικά :
   α) περιεκτικότητα σέ έλεύθερα λιπαρά όξέα, έκπεφρασμένη σέ έλαϊκό οξύ , μή υπερβαίνουσα τό
        3%·
   θ) — θετικό τέστ σαπώνων ή συντελεστή άποσβέσεως, Κ27ο άνώτερο τοΰ 0,25, άλλά όχι
            άνώτερο τοΰ 1,10 καί , μετά άπό έπεξεργασία τοΰ δείγματος έλαιολάδου μέ ένεργοποιη­
            μένη άλουμίνα, άνώτερο τοΰ 0,11 καί
        — απόκλιση συντελεστή άποσβέσεως , στήν περιοχή 270 nm, ανωτέρα τοΰ 0,01 άλλά όχι πέ­
            ραν τοΰ 0,16 .
            Αυτή ή άπόκλιση ορίζεται άπό τόν άκόλουθο τύπο :
            ΔΚ — Km — 0,5 (Km—4 + Km+4)
             όπου Km =          ό συντελεστής άποσβέσεως στό μήκος κύματος τοΰ μέγιστου τής κα­
                                μπύλης άπορροφήσεως στήν περιοχή τών 270 nm καί
               Km_4Kai Km+4 συντελεστές άποσθέσεως σέ μήκος κύματος κατά 4 nm κατώτερο καί
                                άνώτερο άντιστοίχως , άπό έκεΐνο τοΰ Κ_·
     γ) άρνητικές άντιδράσεις Bellier και τροποποιημένη Vizern .
 ---pagebreak--- 50                          Επίσημη ' Εφημερίδα των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων
          — ή συντελεστή αποσβέσεως Κ270 άνώτερο του 0,25 όχι όμως άνώτερο τοΰ 1,10 καί μετά άπό
              επεξεργασία τοΰ δείγματος τοΰ έλαίου μέ ένεργοποιημένη άλουμίνα, ύψηλότερο τοΰ 0,11 ,
              καί :
          — άπόκλιση συντελεστή άποσβέσεως , σέ περιοχή 270 nm, άνώτερη τοΰ 0,01 όχι όμως άνώτερη
              τοΰ 0,16.
              Ή απόκλιση αυτή προσδιορίζεται άπό τόν τύπο :
                                          ΔΚ = Km - 0,5 (K m_4 + Km+4 )
              όπου Km είναι ό συντελεστής άποσθέσεως στό μήκος κύματος τοΰ μεγίστου τής καμπύλης
              άπορροφήσεως σέ περιοχή 270 nm
              καί K m.._4 καί K m+4 είναι οί συντελεστές άποσθέσεως σέ μήκος κύματος 4 nm κατά
              κατώτερο καί άνώτερο, άντιστοίχως έκείνου τοΰ Km ·
       γ) άντιδράσεις Bellier καί τροποποιημένη Vizern άρνητικές, πραγματοποιούμενες μέ τίς μεθόδους
           πού περιλαμβάνονται στό Παράρτημα V ύπό A καί B.
                                             ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ II
                           ΠΡΟΪΟΝΤΑ ΥΠΑΓΟΜΕΝΑ ΣΤΗ ΔΙΑΚΡΙΣΗ 15.17 A
    Αποκλείονται τής διακρίσεως 15.17 A :
   α) υπολείμματα προερχόμενα άπό τήν έπεξεργασία λιπαρών σωμάτων, πού περιέχουν έλαιο τοΰ
       όποιου ό δείκτης ιωδίου προσδιοριζόμενος μέ τή μέθοδο Wijs χωρίς καταλύτη, είναι κατώτερος τοΰ
       70 ή άνώτερος τοΰ 100*
   β) ύπολείμματα, προερχόμενα άπό τήν έπεξεργασία λιπαρών σωμάτων, περιέχοντα έλαιο τοΰ όποιου ό
       δείκτης ιωδίου περιλαμβάνεται μεταξύ 70 καί 100, άλλά τοΰ όποιου ή έπιφάνεια τής καμπύλης (PIC)
       πού άντιστοιχεϊ στήν β-σιτοστερόλη , προσδιοριζόμενη σύμφωνα μέ τίς διατάξεις τοΰ Παραρτήμα­
       τος VIII, άντιπροσωπεύει όλιγώτερο άπό τό 93 % τής συνολικής έπιφανείας τών καμπυλών ιών
       στερολών .
                                             ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ III
        ΣΥΜΠΛΗΡΩΜΑΤΙΚΕΣ ΣΗΜΕΙΩΣΕΙΣ 2, 3 ΚΑΙ 4 ΤΟΥ ΚΕΦΑΛΑΙΟΥ 15 ΤΟΥ ΚΟΙΝΟΥ
                                              ΔΑΣΜΟΛΟΓΙΟΥ
    2. A. Το μόνο πού θεωρείται ώς έλαιόλαδο κατά τήν έννοια τής διακρίσεως 15.07 A είναι τό «έλαιο»
           πού προέρχεται άποκλειστικά άπό τήν έπεξεργασία έλαιών , άποκλειομένου τοΰ άναεστερο­
           ποιημένου έλαιολάδου, καί κάθε μίγματος έλαιολάδου μέ έλαια άλλης φύσεως .
       B. Θεωρούνται ώς μή έπεξεργασμένα ελαιόλαδα , τά έλαια τά προσδιοριζόμενα στά σημεία I , II καί
           III ώς κάτωθι :
            I. Τό μόνο πού θεωρείται ώς παρθένο έλαιόλαδο , κατά τήν έννοια τής διακρίσεως 15.07 A I α),
                είναι τό φυσικό έλαιόλαδο , πού λαμβάνεται άποκλειστικά μέ μηχανική έπεξεργασία, συ­
                μπεριλαμβανομένης τής πιέσεως, έξαιρέσει κάθε μίγματος μέ έλαιόλαδο λαμβανόμενο
                διαφορετικά , καί πού παρουσιάζει τά κατωτέρω χαρακτηριστικά :
                α) περιεκτικότητα σέ έλεύθερα λιπαρά όξέα, εκφρασμένη σέ έλαϊκό οξύ όχι μεγαλύτερη
                    άπό 3 %·
                θ) συντελεστή άποσθέσεως Κ270 [άπορρόφηση διαλύματος πάχους 1 έκατοστοΰ, περιέχο­
                    ντος 1 γραμμάριο ελαιολάδου άνά 100 χιλιοστόλιτρα, έντός ισο-όκτανίου (2,2,4-τριμε­
                    θυλοπεντάνιο) σέ μήκος κύματος 270 nm] όχι άνώτερο τοΰ 0,25 καί , μετά άπό έπεξεργα­
                    σία τοΰ δείγματος ελαιολάδου μέ ένεργοποιημένη άλουμίνα , όχι άνώτερο τοΰ 0,11 '
 ---pagebreak---                          Επίσημη ' Εφημερίδα των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων                                51
3 . Εξαιρούνταν τής διακρίσεως 15.17:
     α) υπολείμματα, προερχόμενα άπό τήν έπεξεργασία λιπαρών σωμάτων περιέχοντα έλαιο τοϋ
          οποίου ό δείκτης ιωδίου προσδιοριζόμενος μέ τή μέθοδο Wijs χωρίς καταλύτη , είναι κατώτερος
          άπό 70 ή άνώτερος άπό 100·
     6) υπολείμματα, προερχόμενα άπό τήν έπεξεργασία λιπαρών σωμάτων, περιέχοντα έλαιο του
          οποίου ό δείκτης ίωδίου περιλαμβάνεται μεταξύ 70 καί 100, του όποιου δμως ή έπιφάνεια τής
          καμπύλης πού άντιστοιχεΐ στή θ-σιτοστερόλη , προσδιοριζόμενη σύμφωνα μέ τίς διατάξεις
           Παραρτήματος VIII τοΰ κανονισμού πού άναφέρεται στήν άνωτέρω συμπληρωματική σημείωση
          4, άντιπροσωπεύει όλιγώτερο άπό τό 93 %, τής συνολικής έπιφανείας τών καμπυλών τών
          στερολών .
4. Οί άναλυτικές μέθοδοι γιά τόν προσδιορισμό τών χαρακτηριστικών τών προϊόντων πού άναφέρο­
     νται άνωτέρω, είναι εκείνες πού προβλέπονται άντίστοιχα στά Παραρτήματα του κανονισμού
     (ΕΟΚ) άριθ. 1058/ 77.
                                             ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ IV
I. ΕΠΕΞΕΡΓΑΣΙΑ ΔΕΙΓΜΑΤΟΣ ΜΕ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΜΕΝΗ ΑΛΟΥΜΙΝΑ
      1 . Μέσα σέ στήλη χρωματογραφίας διαμέτρου περίπου 35 mm καί μήκους 450 mm έφοδιασμένη μέ
          σωλήνα άποχύσεως διαμέτρου 10 mm περίπου , θέτουμε 30 g βασικής άλουμίνας παρασκευασμέ­
          νης σύμφωνα μέ τή διαδικασία πού περιγράφεται στήν παράγραφο 2 .
          Συμπιέζουμε μηχανικά τήν άλουμίνα, κτυπώντας τή στήλη έλαφρά, άρκετές φορές, διατηρώντας
          την κάθετη , επάνω σέ ξύλινη έπιφάνεια . Μέσα στή στήλη παρασκευασμένη μέ τόν άνωτέρω
          τρόπο, εισάγουμε 100 ml διαλύματος 10 % έλαίου σέ έξάνιο .
          Συλλέγουμε τό εκλουσμα καί έξατμίζουμε τό διαλύτη έν κενώ σέ θερμοκρασία κατωτέρα τών
          25 °C .
          Ό προσδιορισμός τοΰ συντελεστή άποσβέσεως στά 270 nm πρέπει νά έκτελεϊται άμέσως στό
          έλαιο πού έλήφθη μέ τόν τρόπο αυτό .
     2. Ή βασική άλουμίνα δραστικότητος Brockmann I (0 % ΰδωρ) παρασκευάζεται διά θερμάνσεως,
          επί τρεις ώρες σέ 380 - 400° C, βασικής άλουμίνας (χρωματογραφίας), μεγέθους τεμαχίων άπό
          30 μιη μέχρι 130 μπι (80 μπι κατά μέσο όρο). Προκειμένου νά λάβουμε βασική άλουμίνα μέ
          δραστικότητα, Brockmann μεταξύ II καί III προσθέτουμε 5 ml άπεσταγμένου ϋδατος σέ 100 g του
          προϊόντος αύτου . ' Αναδεύουμε συχνά καί τό άφήνουμε νά παραμείνει ήρεμο μία νύχτα σέ
          έρμητι'κά κλεισμένο δοχείο .
          Δοκιμή δραστικότητος τής άλουμίνας
          Μέσα σέ στήλη χρωματογραφίας διαμέτρου περίπου 35 mm καί μήκους 450 mm, τοποθετούμε
          30 g βασικής άλουμίνας (παρασκευή μέ τόν τρόπο πού περιγράφεται άνωτέρω). Μίγμα 95 %
          παρθένου έλαιολάδου, μέ συντελεστή άποσβέσεως Κ270 όχι άνώτερο τοΰ 0,18, καί 5 % έλαίου
          άραχίδος, έπεξεργασμένου κατά τή στιγμή τής διυλίσεώς του μέ λευκαντικό πηλό μέ συντελε­
          στή άποσβέσεως Κ270 όχι κατώτερο τοΰ 4, φέρεται μέσω αυτής τής στήλης μέ τίς συνθήκες πού
          ορίζονται άπό τή μέθοδο. 'Εάν τό μίγμα εχει συντελεστή άποσθέσεως άνώτερο τοΰ 0,11 , ή
          άλουμίνα γίνεται άποδεκτή . ' Εάν τά συζυγή τριένια παραμένουν άνέκλουστα άπό τήν άλουμίνα,
          είναι άναγκαϊο νά χρησιμοποιήσουμε άλουμίνα μέ μεγαλύτερο βαθμό ύδατώσεως, άφοΰ επαλη­
          θεύσουμε δτι Ικανοποιεί τίς άπαιτήσεις τοΰ προηγουμένου τέστ .
II . ΕΞΟΥΔΕΤΕΡΩΣΗ ΚΑΙ ΑΠΟΧΡΩΜΑΤΙΣΜΟΣ ΤΟΥ ΕΛΑΙΟΛΑΔΟΥ ΣΤΟ ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ
     A. ΕΞΟΥΔΕΤΕΡΩΣΗ ΤΟΥ ΕΛΑΙΟΥ
           1 . Εξοπλισμός
               —  υάλινο ποτήρι 300 ml ύψηλοΰ σχήματος ,
               —  έργαστηριακή φυγόκεντρος μέ σωλήνες τών 100 ml ,
               —  υάλινο ποτήρι τών 250 ml ,
               —  σφαιρικές φιάλες τών 100 ml ,
               —  διαχωριστική χοάνη ένός λίτρου .
 ---pagebreak--- 52                      Επίσημη Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων
      2 . Αντιδραστήρια
           —   υδατικό διάλυμα 12% υδροξειδίου τοΰ νατρίου,
           —   αιθανολικό διάλυμα 1 % φαινολοφθαλεΐνης,
           —   έξάνιο καθαρό , p . a,
           —   ισοπροπυλική αλκοόλη καθαρή p . a .
      3 . Τρόπος εργασίας
           α) Έλαια όξύτητος εκπεφρασμένης σέ έλαϊκό όξύ μέχρι 30 % .
               Τοποθετοΰμε 50 g άκατεργάστου έλαίου μέσα σέ υψηλό ποτήριο ζέσεως τών 300 ml καί
               θερμαίνουμε σέ ύδρόλουτρο μέχρι τούς 65 "C. ' Αναδεύοντας άργά, προσθέτουμε ποσό­
               τητα διαλύματος ύδροξειδίου τοΰ νατρίου 12 % άντιστοιχούσα στήν έλεύθερη όξύτητα
               τοΰ έλαίου , μέ περίσσεια 5 % . Συνεχίζουμε τήν άνάδευση γιά πέντε λεπτά διατηρώντας τή
               θερμοκρασία στούς 65 °C .
               Μεταφέρουμε τό μίγμα στούς δοκιμαστικούς σωλήνες τής φυγοκέντρου , τών 100 ml, καί
               διαχωρίζουμε τό σαπούνι μέ φυγοκέντριση . Άποχύνουμε καί μεταγγίζουμε τό έλαιο σέ
               ποτήρι ζέσεως τών 250 ml, τό ξεπλένουμε μέ 50 έως 60 ml ζέοντος άπεσταγμένου ύδατος,
               άπομακρύνοντας συγχρόνως τή στιβάδα τοΰ ύδατος μέ σιφώνιο. ' Επαναλαμβάνουμε τίς
               έκπλύσεις μέχρις ότου έξαφανισθοΰν τά ϊχνη ύπολειμμάτων σάπωνος (έξαφάνιση τής
               ροδαλής χροιάς τής φαινολοφθαλεΐνης).
               Φυγοκεντροΰμε τό έλαιο προκειμένου νά άπομακρύνουμε τίς άπομένουσες μικρές ποσό­
               τητες νεροΰ .
           θ) "Ελαια όξύτητος εκπεφρασμένης σέ έλαϊκό όξύ άνω τον 30 % .
               Εντός διαχωριστικής χοάνης τοΰ ένός λίτρου διαβιβάζουμε 50 g άκατεργάστου έλαίου,
               200 ml έξανίου, 100 ml ίσοπροπυλικής άλκοόλης καί ποσότητα διαλύματος ύδροξειδίου
               τοΰ νατρίου 12 % άντιστοιχούσα στήν έλεύθερη όξύτητα τοΰ έλαίου μέ περίσσεια 0,3 % .
               ' Αναδεύουμε ισχυρά για ένα λεπτό . Προσθέτουμε 100 ml άπεσταγμένου ύδατος, άνατα­
               ράσσουμε έκ νέου καί άφήνουμε νά ήρεμήσει .
               Μετά τόν διαχωρισμό τών στιβάδων, άφήνουμε νά έκχυθεΐ ή κατώτερη στιβάδα πού
               περιέχει τούς σάπωνες . Μεταξύ τών δύο στιβάδων (έλαιώδης πρός τά άνω καί ύδατίνη
               πρός τά κάτω) δημιουργείται συχνά μία ένδιάμεση στιβάδα άπό μυκηλίωμα καί άδιάλυτα
               συστατικά ή όποία πρέπει έπίσης νά άπομακρυνθεΐ .
   B. ΑΠΟΧΡΩΜΑΤΙΣΜΟΣ ΤΟΥ ΕΞΟΥΔΕΤΕΡΩΜΕΝΟΥ ΕΛΑΙΟΥ
       1 . Εξοπλισμός
           — σφαιρική φιάλη τών 250 ml μέ τρεις λαιμούς έσμυρισμένους γιά τήν τοποθέτηση :
                α) θερμομέτρου βαθμολογημένου σέ βαθμούς καί επιτρέποντος τή λήψη ένδείξεων μέχρι
                    τούς 90 °C,
                 θ) μηχανικοΰ άναδευτήρα πραγματοποιούντος 250 έως 300 στροφές τό λεπτό, καταλλή­
                    λου γιά έργασία έν κενώ - ."
                γ) συνδέσεως μέ άντλία κενοΰ,
           — άντλία κενοΰ, εφοδιασμένη μέ μανόμετρο, δυναμένη νά δώσει πιέσεις 1 5 έως 30 millibars.
       2 . Τρόπος εργασίας
           Ζυγίζουμε περίπου 100 g έξουδετερωθέντος έλαίου έντός τής τριλαίμου σφαιρικής φιάλης .
           Εισάγουμε τό θερμόμετρο καί τόν άναδευτήρα, συνδέουμε τήν άντλία κενοΰ καί θερμαί­
           νουμε στούς 90 °C άναδεύοντας συνεχώς . Διατηροΰμε τή θερμοκρασία αύτή , πάντα ύπό
           άνάδευση , μέχρις ότου τό πρός άνάλυση έλαιο άπαλλαγεϊ πλήρως άπό τήν ύγρασία, (περί­
            που γιά 30 λεπτά). Τότε διακόπτουμε τό κενό καί προσθέτουμε 2 εως 3 g ένεργοΰ γης .
            Άποκαθιστοΰμε τό κενό έως ότου ή παραμένουσα πίεση φθάσει τά 15 έως 30 millibars καί ,
            διατηρώντας τή θερμοκρασία στούς 90 °C άναδεύουμε έπί τριάντα λεπτά μέ 250 στροφές άνά
            λεπτό περίπου .
            ' Εν συνεχεία διηθοΰμε έν θερμώ έντός κλιβάνου ρυθμιζομένης θερμοκρασίας (50 έως 60 °C).
 ---pagebreak---                          Επίσημη Εφημερίδα των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων                                53
                                         ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ V
        ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΤΗΣ ΠΑΡΟΥΣΙΑΣ ΠΥΡΗΝΕΛΑΙΟΥ ΕΝΤΟΣ ΤΩΝ ΕΛΑΙΟΛΑΔΩΝ
A. ΜΕΘΟΔΟΣ ΚΑΛΟΥΜΕΝΗ « BELLIER »
   1 . Εξοπλισμός
        — σφαιρική φιάλη των 100 ml εφοδιασμένη μέ ψυκτικό έπαναρροής,
        — σιφώνιο των 5 ml , βαθμολογημένο σέ δέκατα,
        — σύστημα θερμάνσεως μέ τό όποιο νά δύναται νά έπιτευχθεϊ θερμοκρασία περίπου 80 °C,
        — θερμόμετρο βαθμολογημένο άπό 15 έως 60 °C .
   2. 'Αντιδραστήρια
        — Διάλυμα ύδατικό-άλκοολικό τοΰ υδροξειδίου τοΰ καλίου (42,5 g ΚΟΗ διαλύονται έντός 72 ml
            άπεσταγμένου ύδατος· ό όγκος τελικώς τοΰ διαλύματος γίνεται 500 ml μέ προσθήκη αιθυλι­
             κής άλκοόλης 95 °),
        — διάλυμα αιθυλικής άλκοόλης 70°,
        — ' Υδατικό διάλυμα όξεϊκοΰ όξέος, 1 + 2 (κατ' όγκο), παρασκευασμένο εις τρόπον ώστε 1,5 ml
             αύτοΰ νά έξουδετερώνουν άκριθώς 5 ml έκ τοΰ ύδατικοΰ-άλκοολικοΰ διαλύματος τοΰ υδρο­
             ξειδίου τοΰ καλίου παρουσία φαινολοφθαλεΐνης .
   3 . Παρασκευή τοΰ δείγματος
        ' Απομακρύνουμε τήν υγρασία άπό τό έλαιο μέ μετάγγιση καί διήθηση μέσω χάρτου , έκτελώντας
        τίς έργασίες αυτές σέ θερμοκρασία λίγο υψηλότερη άπό τό σημείο τήξεως όρισμένων στερεών
        συστατικών τά όποια θά κινδύνευαν νά διαχωρισθοΰν άπό τή ρευστή λιπαρή ουσία.
   4. Τρόπος εργασίας
        ' Εντός σφαιρικής φιάλης τοποθετοΰμε περίπου 1 ml έλαίου παρασκευασμένου όπως δείχνει ή
        παράγραφος 3 . Προσθέτουμε 5 ml ύδατικοΰ-άλκοολικοΰ διαλύματος ύδροξειδίου τοΰ καλίου.
        Τοποθετοΰμε τόν ψυκτήρα καί φέρουμε σέ βρασμό έπί 10 λεπτά άναδεύοντας άπό καιροΰ εις
        καιρό. 'Αφήνουμε νά ψυχθεί στή θερμοκρασία τοΰ δωματίου. Προσθέτουμε 1,5 ml ύδατικοΰ
        διαλύματος όξεϊκοΰ όξέος καί 50 ml διαλύματος αιθυλικής άλκοόλης προηγουμένως θερμανθεί­
        σης στούς 50 °C. ' Αναμιγνύουμε μέ άνάδευση , εισάγουμε τό θερμόμετρο καί άφήνουμε νά
        ψυχθεί, παρατηρώντας προσεκτικά τό διάλυμα όταν αυτό πλησιάσει τή θερμοκρασία τών 45 °C.
        "Αν σχηματισθεί ίζημα φλοκώδες μέ μορφή νιφάδων σέ θερμοκρασία ύψηλότερη τών 40 °C ή
         άντίδραση είναι θετική . "Αν δέν έμφανισθεϊ τό χαρακτηριστικό ίζημα μέ μορφή νιφάδων,
         διατηροΰμε τό υγρό σέ θερμοκρασία δωματίου ή όποία πρέπει νά ευρίσκεται μεταξύ 20° καί
         22 °C, γιά 24 ώρες τουλάχιστο ή έάν είναι άπαραίτητο γιά 48 ώρες . Παρατηρούμε έκ νέου τό
         διάλυμα: ό σχηματισμός ιζήματος μέ μορφή νιφάδων έν αίωρήσει έντός τοΰ ύγροΰ άποδεικνύει
         επίσης δτι ή άντίδραση είναι θετική .
         "Εκφραση τών αποτελεσμάτων
         ' Αναζήτηση τής παρουσίας πυρηνελαίου (μέθοδος Bellier) θετική ή άρνητική .
B. ΜΕΘΟΔΟΣ ΚΑΛΟΥΜΕΝΗ «ΤΡΟΠΟΠΟΙΗΜΕΝΗ V1ZERN»
   Τά άσαπωνοποίητα συστατικά τοΰ πρός άνάλυση έλαίου άπομονώνονται καί έξετάζεται ή συμπε­
    ριφορά τους μέσα σέ άλκοόλη 85° κάτω άπό όρισμένες συνθήκες .
    1 . Συσκευές
        — ύάλινη σφαιρική φιάλη τών 300 ml άνθεκτική στά άλκάλια καί έφοδιασμένη μέ ψυκτήρα
             έπαναρροής,
        — διαχωριστικές χοάνες τών 500 ml ή 1000 ml ,
         — ποτήρια ζεσεως τών 300 ml καί 250 ml,
        — υάλινοι δοκιμαστικοί σωλήνες .
 ---pagebreak--- 54
                        Επίσημη ' Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων
   2. 'Αντιδραστήρια
       —    αλκοολικό διάλυμα ύδροξειδίου τοΰ καλίου 2 N,
       —    πετρελαϊκός αίθήρ,
       —    αιθυλική άλκοόλη 50 %,
       —    αιθυλική άλκοόλη 96°, ταυτοποιημένη δι' άλκοολομέτρου,
       —    υπεροξείδιο του υδρογόνου 10 όγκων,
       —    αιθυλική άλκοόλη 85°, ταυτοποιημένη δι' άλκοολομέτρου .
   3 . Τρόπος έργασίας
       ' Εντός σφαιρικής φιάλης των 300 ml ζυγίζουμε περίπου 5 g άπό τό πρός άνάλυση δείγμα.
       Προσθέτουμε 50 ml άλκοολικοΟ διαλύματος υδροξειδίου του καλίου 2 N. Τοποθετούμε τόν
       ψυκτήρα καί φέρομε σέ ήπιο βρασμό . Μετά θέρμανση μιδς ώρας, άναδεύουμε καί ψύχουμε
       στούς 30 0 έως 35 °C . Μεταφέρουμε τό περιεχόμενο τής φιάλης έντός διαχωριστικής χοάνης,
       χρησιμοποιώντας 50 ml άπεσταγμένου ϋδατος .
       Ξεπλένουμε τή φιάλη προσεκτικά μέ 50 ml πετρελαϊκού αίθέρος έπαναλαμθάνοντας τήν έργασία
       άρκετές φορές . Μεταφέρουμε τόν πετρελαϊκό αίθέρα έντός διαχωριστικής χοάνης . ' Ανακινούμε
       ισχυρώς τό περιεχόμενο γιά περισσότερο άπό ένα λεπτό . Μετά τό διαχωρισμό μεταφέρουμε τήν
       ύδατίνη στιβάδα έντός δευτέρας διαχωριστικής χοάνης . Προσθέτουμε άλλα 50 ml πετρελαϊκού
       αίθέρος, άνακινούμε τό περιεχόμενο ισχυρώς γιά περισσότερο άπό ένα λεπτό καί άκολουθεϊ ό
       διαχωρισμός. Μεταφέρουμε πάλι τήν ύδατίνη στιβάδα σέ τρίτη διαχωριστική χοάνη , προσθέ­
       τουμε 50 ml πετρελαϊκού αίθέρος. 'Ανακινούμε ισχυρώς καί άκολουθεϊ διαχωρισμός.
       Συλλέγουμε έντός διαχωριστικής χοάνης τά αίθερικά έκχυλίσματα τά προερχόμενα άπό τίς
       έκχυλίσεις τών άσαπωνοποίητων συστατικών καί τά ξεπλένουμε τουλάχιστον τρεις φορές μέ
       διάλυμα άλκοόλης 50 % (50 ml κάθε φορά) έως ότου τά ύγρά τών έκπλύοόων δέν δίδουν
       άλκαλική άντίδραση φαινολοφθαλεΐνης .
       Διηθούμε τό διάλυμα τών άσαπωνοποιήτων συστατικών μέσα σέ ποτήρι ζέσεως τών 300 ml ,
       ξεπλένουμε τόν ήθμό μέ πετρελαϊκό αίθέρα καί άπομακρύνουμε τό διαλύτη δι' άποστάξεως .
       Προσθέτουμε 10 ml άλκοόλης 96° καί μετά άπό μέτρια θέρμανση (περίπου στούς 40 °C),
       διηθούμε έντός ποτηριού τών 100 ml . Ξεπλένουμε τό ποτήρι τών 300 ml μέ 10 ml άλκοόλης 96°
       καί έν συνεχεία διηθούμε έντός τού δευτέρου ποτηριού .
        ' Εντός τού ποτηριού τών 100 ml περιέχοντος τά άλκοολικά έκχυλίσματα τών άσαπωνοποιήτων
       συστατικών, προσθέτουμε 5 ml υπεροξειδίου τού υδρογόνου τών 10 όγκων, θερμαίνουμε έντός
       ύδρολούτρου μέχρι πλήρους έξατμίσεως . Προσθέτουμε άλλα 20 ml άλκοόλης 96° καί 5 ml
       υπεροξειδίου τού υδρογόνου - άφήνουμε έκ νέου νά έξατμισθούν πλήρως .
       ' Απομακρύνουμε τό ποτήρι άπό τό ύδρόλουτρο καί προσθέτουμε 20 ml άλκοόλης 85° . Θερμαί­
       νουμε έλαφρώς σέ ύδρόλουτρο , ένεργώντας πολύ προσεκτικά γιά νά μήν προκαλέσουμε άπώ­
       λειες τής άλκοόλης καί μειώσουμε έτσι τή συγκέντρωση . Πρόκειται γιά ένα στοιχείο πολύ
       σημαντικό πού δέν πρέπει νά παραβλέπουμε .
       Διηθούμε μέσω ήθμού, άκολούθως ψύχουμε καί έξετάζουμε προσεκτικά τό διάλυμα στό τέλος
       τής πρώτης ώρας καί πάλι στό τέλος τής τέταρτης ώρας. "Αν τό διάλυμα είναι άπολύτως
       διαφανές στό τέλος τής πρώτης ώρας ή δοκιμή είναι άρνητική , δηλαδή δέν ύπάρχει πυρηνέλαιο.
        "Αν τό διάλυμα είναι θολό στό τέλος τής πρώτης ώρας έπαναλαμβάνουμε τήν παρατήρηση μετά
        άπό τέσσερις ώρες .
       "Αν στό τέλος τής τέταρτης ώρας τό διάλυμα είναι άκόμη θολό , άλλά δέν έμφανίζει νιφάδες, ή
       δοκιμή είναι καί πάλι άρνητική . "Αν άντιθέτως παρατηρήσουμε σχηματισμό νιφάδων, ή δοκιμή
       είναι θετική δηλαδή έχουμε παρουσία πυρηνελαίου .
         Εκφραση τών άποτελεσμάτων
          Αναζήτηση τής παρουσίας πυρηνελαίου (μέθοδος τροποποιημένη Vizern): θετική ή άρνητική .
       Παρατηρήσεις
       Τά έλαιόλαδα δίδουν διαφανές ή , τό πολύ, έλαφρώς γαλακτώδες διάλυμα καθ' δλη τή διάρκεια
        τής δοκιμής. Τά καθαρά ή μεμιγμένα πυρηνέλαια έμφανίζουν χαρακτηριστικές νιφάδες, αιω­
         ρούμενες σάν μικρά νέφη , οί όποιες τελικώς καθιζάνουν άν τό διάλυμα μείνει σέ ήρεμία γιά
        άρκετές ώρες .
 ---pagebreak---                        Επίσημη ' Εφημερίδα των Εύρωπαϊκων Κοινοτήτων                              55
                                         ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ VI
        ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΣΑΠΩΝΩΝ ΔΙΑ ΤΗΣ ΕΞΑΚΡΙΒΩΣΕΩΣ ΤΗΣ ΑΛΚΑΛΙΚΟΤΗΤΟΣ
' Αρχή τής μεθόδου :
Ή άποκάλυψη των άλκαλικών σαπώνων ώς έκ της δράσεως τους έπί του μπλε τής θρωμοφαινόλης .
Αντιδραστήρια
— διάλυμα 0,1 % μπλέ τής θρωμοφαινόλης σέ αΐθανόλη 96 % (ν/ν),
— προσφάτως άποσταχθείσα άκετόνη , στήν όποία προσετέθη 2 % (ν/ν) νερό .
 Ή άκετόνη 2 % μέ τό νερό πρέπει, μέ προσθήκη μερικών σταγόνων διαλύματος μπλέ τής θρωμοφαινό­
 λης, νά δίδει κίτρινη ή πρασινοκίτρινη χρώση .
Συσκευαί
— Δοκιμαστικοί σωλήνες 150 mm x 15 mm.
 Τρόπος εργασίας
 Εισάγουμε μέσα σέ δοκιμαστικό σωλήνα 10 ml άκετόνης καί μία σταγόνα διαλύματος μπλέ-θρωμο­
  φαινόλης. Τό διάλυμα πρέπει νά χρωματισθεί κίτρινο. "Αν όχι, διαβρέχουμε τό σωλήνα καί τό πώμα
  του μέ άκετόνη μέχρις ότου έξαφανισθεϊ ό μπλέ χρωματισμός. Προσθέτουμε 10 g έλαίου μέσα στό
  σωλήνα, τόν κλείομε μέ τό πώμα του, άνακινουμε καί άφήνουμε σέ ήρεμία. Ό μπλέ χρωματισμός στήν
  άνωτέρα στιβάδα τής άκετόνης δεικνύει τήν παρουσία σάπωνος.
 'Έκφραση τών αποτελεσμάτων
  Τά άποτελέσματα εκφράζονται ώς θετικά ή άρνητικά.
                                         ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ VII
             ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΤΗΣ ΠΑΡΟΥΣΙΑΣ ΑΝΑΕΣΤΕΡΟΠΟΙΗΜΕΝΩΝ ΕΛΑΙΩΝ
 Σκοπός τής μεθόδου είναι ό προσδιορισμός, εντός τών έλαίων καί λιπών, τής συνθέσεως του κλάσμα­
 τος τών λιπαρών οξέων τά όποια είναι έστεροποιημένα στή θέση 2 (θέση β ή έσωτερική θέση) τής
 γλυκερίνης, δεδομένου ότι τά άναεστεροποιημένα έλαιόλαδα περιέχουν περισσότερο παλμιτικό όξύ
 στή θέση 2 άπό δ ,τι τά μή άναεστεροποιημένα έλαιόλαδα .
   Αρχή
   H μέθοδος αυτή βασίζεται στή μερική καί ειδική υδρόλυση τών τριγλυκεριδίων μέ παγκρεατική
  λίπαση καί προτιμησιακό σχηματισμό 2-μονογλυκεριδίων. Αυτή ή ύδρόλυση δίδει ένα μίγμα περιέχον
  διγλυκερίδια, 2-μονογλυκερίδια καί μερικά έλεύθερα λιπαρά όξέα καί έπιπροσθέτως μή ύδρολυθέντα
 τριγλυκερίδια. Αύτό τό μίγμα διαχωρίζεται διά χρωματογραφίας λεπτής στιβάδος καί τά μονογλυκερί­
  δια άπομονώνονται . Τά μονογλυκερίδια μετατρέπονται μέ μεθανόλη σέ μεθυλεστέρες, οί όποιοι άνα­
  λύονται μέ άέριο χρωματογραφία .
 "Αν τό ποσοστό του παλμιτικοΰ όξέος στή θέση 2 τών τριγλυκεριδίων υπερβαίνει τό 2 %, τό άναλυθέν
  προϊόν πρέπει νά θεωρείται ότι περιέχει προσμίξεις άναεστεροποιημένων έλαίων.
  1.  Εξοπλισμός
      — διαχωριστική χοάνη τών 500 ml,
      — υαλίνη χρωματογραφική στήλη , έσωτερικής διαμέτρου 13 mm καί μήκους 400 mm, έφοδια­
         σμένη μέ πλάκα εξ ύάλου fritté καί στρόφιγγα,
      — ευρύλαιμο σφαιρική φιάλη τών 250 ml,
      — σφαιρική φιάλη τών 100 ml,
      — δοκιμαστικοί σωλήνες φυγοκέντρου, μέ έσμυρισμένο πώμα, τών 10 ml,
      — ύποδερμική σύριγγα του 1 ml έφοδιασμένη μέ λεπτή βελόνα,
 ---pagebreak--- 56                         Επίσημη ' Εφημερίδα των Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων
          — σφαιρική φιάλη των 25 ml, μέ άεριοψυκτήρα μήκους 1 m μέ έσμυρισμένη σύνδεση ,
         — ποτήρι ζεσεως των 50 ml ,
         — προχοΐδα 5 ml , βαθμολογημένη εις 1 /20 ml ,
         — έπιστρωτή χρωματογραφίας λεπτής στιθάδος μέ υάλινες πλάκες 20 x 20 cm,
         — μικροσΰριγγα δίδουσα σταγόνες τών 3 έως 4 ml,
         — δοχείο αναπτύξεως χρωματογραφίας λεπτής στιθάδος,
         — περιστροφικό βραστήρα,
         — πυριαντήριο ρυθμισμένο στούς 103 ° ± 2 °C,
         — θερμοστάτη ρυθμισμένο μεταξύ 30 καί 45 °C μέ άνοχή ± 0,5 °C,
         — άναδευτήρα ήλεκτρικό δονούμενο, κατάλληλο γιά ισχυρή ανατάραξη τών δοκιμαστικών σω­
              λήνων της φυγοκέντρου,
         — ψεκαστήρα, χρωματογραφίας λεπτής στιθάδος,
         — λυχνία υπεριωδών γιά τήν έξέταση τών χρωματογραφικών πλακών,
         — εργαστηριακό άναδευτήρα γιά τή διασπορά καί τήν άνάμιξη έτερογενών υλικών,
         — πεχάμετρο,
         — αναδευτήρα με έλικα,
         — χρονομετρο .
   2 . 'Αντιδραστήρια
         — υδατικό διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου 12% (m/v),
         — διάλυμα φαινολοφθαλεΐνης 1 % (m/v) σέ αίθανόλη 95% (ν/ν),
         — διαιθυλικό αιθέρα, έλεύθερο υπεροξειδίων,
         — ίσοπροπυλική ή αιθυλική άλκοόλη , 95% (ν/ν), p. a.
         — ενεργοποιημένη άλουμίνα χρωματογραφίας, ουδέτερη , βαθμού δραστικότητος Brockmann I ,
             προσφάτου ένεργοποιήσεως διά θερμάνσεως έπί 2 ώρες στούς 206 °C καί έν συνεχεία διατηρή­
             σεως εντός ξηραντήρος ,
         — έξάνιο ή έλλείψει τούτου, πετρελαϊκός αιθέρας (σημείο ζέσεως: 30 εως 50 °C), χ^ωματογραφι­
             κής καθαρότητος,
         — μυρμικικό όξύ τουλάχιστον 98 % (m/m),
         — παγκρεατική λίπαση καταλλήλου δραστικότητος (σημειώσεις 1 καί 2),
         — ρυθμιστικό διάλυμα συνιστάμενο άπό υδατικό διάλυμα 1 M τριυδροξυμεθυλαμινομεθανίου
             προσαρμοζόμενο σέ ρΗ 8 δι' ύδροχλωρικοΟ όξέος 6 N (ποτενσιομετρικός ελεγχος),
         — υδατικό διάλυμα 0,1 % (m/v) χολικού νατρίου (ένζυματικού θαθμοϋ),
         — διάλυμα υδροχλωρικού όξέος 6 N,
         — διαλύτης άναπτύξεως πού περιλαμβάνει έξάνιο (ή , έλλείψει τούτου, πετρελαϊκό αιθέρα) /διαι­
              θυλικό αίθέρα/μυρμικικό οξύ σ' άναλογίες 70/30/ 1 (ν/ν/v),
         — ύδατικό διάλυμα άραθικοΰ κόμμεος 10 % (m/ v),
         — ύδατικό διάλυμα χλωριούχου άσθεστίου (CaCl2) 22 % (m/ v),
         — άλκοολικό διάλυμα τής2'-7'-διχλωροφλουορεσκεΐνης 0,2 % (m/v) καθιστάμενο έλαφρά άλκα­
              λικό μέ προσθήκη μίας σταγόνας διαλύματος υδροξειδίου τού νατρίου 1 N άνά 100 ml,
         — οξείδιο του πυριτίου σέ σκόνη μετά συνδετικού ύλικου καθαρότητος χρωματογραφίας λεπτής
              στιθάδος,
         — ύδατικό διάλυμα χολικού νατρίου 20 % (m/v),
         — υδατικό διάλυμα του ύδροξειδίου νατρίου 0,1 N,
         — έξουδετερωθέν έλαιο φυτικό .
   3.    Προετοιμασία του δείγματος
         "Αν ή οξύτητα τοΟ δείγματος είναι μέχρι 3% : άμεση έξουδετέρωση διά μέσου άλουμίνας όπως στό
         3.2.
         "Αν ή οξύτητα του δείγματος ύπερβαίνει τό 3% : έξουδετέρωση δι' άλκάλεως .παρουσία διαλύτου
         όπως στό 3.1 καί έν συνεχεία διέλευση διά μέσου άλουμίνας όπως στό 3.2.
   3.1 . Έξουδετέρωση δι ' άλκάλεως παρουσία διαλύτου
         ' Εντός διαχωριστικής χοάνης 500 ml έγχύσατε περίπου 10 g άνεπεξέργαστου έλαίου, 100 ml
         έξανίου ή , έλλείψει τούτου, πετρελαϊκού αίθέρα, 50 ml ίσοπροπυλικής άλκοόλης ή αιθυλικής
         άλκοόλης 95°, μερικές σταγόνες διαλύματος φαινολοφθαλεΐνης καί ποσότητα διαλύματος ύδρο­
         ξειδίου τού νατρίου 12 % άντιστοιχούσα στήν έλεύθερη όξύτητα τού έλαίου μέ περίσσεια 0,3 %.
         ' Αναδεύουμε ισχυρώς γιά ένα λεπτό, προσθέτομε 50 ml άπεσταγμένου ύδατος, άναδεύουμε εκ νέου
         καί άφήνουμε σέ ήρεμία.
         Μετά τό διαχειρισμό, άπομακρύνουμε τήν κατωτέρα στιβάδα τήν περιέχουσα τούς σάπωνες.
         'Απομακρύνουμε τίς τυχόν ένδιάμεσες στιβάδες (μηκυλιώματα καί άδιάλυτα συστατικά), ξεπλέ­
         νουμε άπό τό διάλυμα του έξανίου τό έξουδετερωθέν έλαιο, διαδοχικά, μέ ποσότητες 25 ή 30 ml
         διαλύματος 1:1 (ν/ν) ίσοπροπυλικής άλκοόλης ή αιθυλικής άλκοόλης καί άπεσταγμένου νερού
         μέχρι εξαφανίσεως τού ροδαλού χρώματος της φαινολοφθαλεΐνης . ' Απομακρύνουμε τό μεγαλύ­
         τερο μέρος τού έξανίου μέ άπόσταξη σέ κενό καί θέτομε τό έλαιο πρός ξήρανση στούς 30° εως 40°
         C, έν κενώ, σέ ρεύμα καθαρού άζώτου, μέχρι πλήρους έξατμίσεως τού διαλύτου.
 ---pagebreak---                         Επίσημη ' Εφημερίδα των Εύρωπαϊκών Κοινοτήτων                             57
3.2. Πέρασμα διά μέσου άλουμίνας
      Παρασκευάζουμε αιώρημα άπό 15 g ένεργοποιημένης άλουμίνας έντός 50 ml έξανίου ή έλλείψει
      αύτοΰ πετρελαϊκού αιθέρος καί τό είσάγουμε, άναδεύοντες, μέσα σέ υαλίνη χρωματογραφική
      στήλη . Ρυθμίζουμε τήν κατανομή τής άλουμίνας καί άπομακρύνουμε τό διαλύτη μέχρις ότου
      φθάσει σέ έπίπεδο κατά 1-2 mm άνώτερο άπό τήν άνω έπιφάνεια του άπορροφητικοΰ . Είσάγουμε
      προσεκτικός στή στήλη διάλυμα, παρασκευασθέν 15 λεπτά ένωρίτερα διά διαλύσεως 5 g έλαίου
      έντός 25 ml έξανίου ή έλλείψει αύτοΰ πετρελαϊκού αίθέρος καί συλλέγουμε μέσα σέ σφαιρική
      φιάλη των 100 ml όλη τή ρέουσα ποσότητα .
      Άπομακρύνουμε τό μεγαλύτερο μέρος του διαλύτου μέ άπόσταξη έν κενώ καί θέτουμε τό έλαιο
      πρός ξήρανση στούς 30° έως 40 °C, έν κενώ, μέσα σέ ρεύμα καθαρού άζώτου μέχρι πλήρους
      άπομακρύνσεως τού διαλύτου .
4.    Προετοιμασία των χρωματογραφικών πλακών
      Έντός εύρυλαίμου σφαιρικής φιάλης τών 250 ml τοποθετούμε 30 g όξειδίου τού πυριτίου σέ
      σκόνη καί 60 ml άπεσταγμένου ύδατος καί άνακινούμε μέχρι τελείας όμογενοποιήσεως. Έξαε­
      ρούμε διά τής τοποθετήσεως ύπό κενό άντλίας νερού γιά ένα λεπτό .
      Επιστρώνουμε τό υλικό κατά τό συνήθη τρόπο στίς πλάκες μέ τή βοήθεια τού έπιστρωτού, καί μέ
      πάχος στρώσεως 0,25 mm.
      Αύτή ή ποσότης τού υλικού είναι άρκετή γιά έπίστρωση πέντε πλακών 20 x 20 cm.
      'Ακολούθως οί πλάκες ξηραίνονται στόν άέρα γιά 15 λεπτά περίπου καί άκολουθει ξήρανση μέσα
      σέ φούρνο θερμοκρασίας 103 0 ± 2 °C έπί δύο ώρες.
      Φυλάσσονται οί πλάκες σέ ξηραντήρα.
5.     Τρόπος εργασίας
5.1 . Υδρόλυση μέ παγκρεατική λίπαση
       Μέσα σέ δοκιμαστικό σωλήνα φυγοκέντρου τών 10 ml ζυγίζουμε 0,1 g περίπου τού παρασκευα­
       σθέντος δείγματος .
       Προσθέτουμε 20 mg λιπάσης καί 2 ml ρυθμιστικού διαλύματος. 'Αναδεύουμε προσεκτικώς καί μέ
       κατάλληλες προφυλάξεις, καί μετά προσθέτουμε 0,5 ml διαλύματος χολικού νατρίου 0,1 % καί
       0,2 ml διαλύματος χλωριούχου άσθεστίου . Κλείνουμε τό σωλήνα δι' έσμυρισμένου πώματος
       άνακινούμε προσεκτικώς (χωρίς νά βραχεί τό πώμα) καί θέτομε άμέσως τό σωλήνα έντός θερμο­
       στάτου ρυθμισμένου στούς 40 °C ± 0,5 "C γιά ένα λεπτό άκριθώς καί ύπό συνεχή άνάδευση .
       Άπομακρύνουμε τό σωλήνα άπό τό θερμοστάτη καί άνακινούμε ισχυρώς γνά δύο λεπτά άκριθώς .
       Ψύχουμε άμέσως κάτω άπό ρέον νερό καί προσθέτουμε 1 ml διαλύματος ύδροχλωρικού όξέος 6 N
       καί 1 ml διαιθυλικού αιθέρα. Πωματίζουμε καί άνακινούμε ίσχυρώς . Αφήνουμε νά ήρεμήσει καί
       έν συνεχεία λαμβάνουμε τήν άνωτέρα όργανική στιβάδα μέ σύριγγα .
5.2. Διαχωρισμός τών μονογλυκεριδίων διά χρωματογραφίας λεπτής στιβάδος
       Έπί χρωματογραφική ς πλακός , καί είς άπόσταση 1,5 cm άπό τήν κατωτέρα πλευρά, άναπτύσ­
       σουμε τό έκχύλισμα σέ συνεχή όμοιόμορφο γραμμή ώστε νά έπιτύχουμε όσο τό δυνατό λεπτότερη
       γραμμή έκκινήσεως .
      Είσάγουμε τήν πλάκα έντός καλώς κεκορεσμένου δοχείου άναπτύξεως καί άναπτύσσουμε μέ τό
       διαλύτη άναπτύξεως μέχρι 1 cm κάτω άπό τό άνω μέρος τής πλάκας. Ή άνάπτυξη τής πλάκας
       πρέπει νά λαμβάνει χώρα σέ θερμοκρασία περίπου 20 °C .
      Ξηραίνουμε τήν πλάκα στόν άέρα στή θερμοκρασία τού δοχείου καί ψεκάζουμε μέ τό διάλυμα τής
     2'-7'-διχλωροφλουορεσκεΐνης. Ταυτοποιούμε τήν ταινία τών μονογλυκεριδίων (Rf = 0,035 πε­
       ρίπου) σέ υπεριώδες φώς, άπομακρύνουμε αύτά μέ μία μεταλλική σπάτουλα (άποφεύγουμε τή
       μετακίνηση κάθε συστατικού πού παρέμεινε στή βασική γραμμή) καί τοποθετούμε τό όξείδιο τού
      πυριτίου σέ σφαιρική φιάλη μεθυλιώσεως τών 25 ml .
       Μετατρέπουμε τά μονογλυκερίδια στούς άντίστοιχους μεθυλεστέρες σύμφωνα μέ τή γενική μέ­
      θοδο παρασκευής τών μεθυλεστέρων τών λιπαρών όξέων πού άναφέρονται στό σημείο 7.3 , άφού
      προηγουμένως συλλεγεΐ τό όξείδιο τού πυριτίου . Κατόπιν διενεργούμε τήν άέριο χρωματογραφία
      τών εστέρων σύμφωνα μέ τή μέθοδο πού δίδεται στό σημείο 7.4 .
      Εις τό αύτό δείγμα προσδιορίζουμε τή σύσταση τών συνολικών λιπαρών όξέων, τής όποιας ή
      σύγκριση μέ έκείνη τών λιπαρών όξέων στή θέση - 2 είναι χρήσιμη γιά τήν έρμηνεία τών ληφθέ­
      ντων άποτελεσμάτων .
6. Έκφραση τών άποτελεσμάτων
      ' Υπολογίζουμε τήν περιεκτικότητα σέ λιπαρά όξέα στή θέση -2 έπί τοις έκατό μέ ένα δεκαδικό
      ψηφίο (Σημείωση 3).
 ---pagebreak--- 58                               Επίσημη ' Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων
   7.     Σημειώσεις
    7.1 . Δοκιμή ένεργότητος τής λιπάσης
           Παρασκευάζουμε γαλάκτωμα έλαίου κατόπιν άναμίξεως, 165 ml διαλύματος άραβικού κόμμεως
           10 %, 15 g σπασμένου πάγου καί 20 ml έλαίου ήδη έξουδετερωθέντος, έντός καταλλήλου άνα­
           μικτήρος δι' άναδεύσεως έπί ΙΟλεπτον .
           Έντός ποτηριού 50 ml θέτουμε διαδοχικά 10 ml γαλακτώματος, 0,3 ml διαλύματος χολικού να­
          τρίου 20 % καί 20 ml άπεσταγμένου ύδατος.
          Τοποθετούμε τό ποτήρι σέ θερμοστάτη ρυθμισμένο στούς 37 ± 0,5 °C καί εισάγουμε σ' αυτό τά
          ήλεκτρόδια πεχαμέτρου καί έναν άναδευτήρα μέ έλικα.
           Μέ τή βοήθεια προχοΐδος τών 5 ml, προσθέτουμε στάγδην διάλυμα υδροξειδίου του νατρίου 0,1 N
           έως δτου τό ρΗ γίνει 8,5.
          Προσθέτουμε έπαρκή ποσότητα αιωρήματος κόνεως λιπάσης έντός ύδατος (βλέπε κατωτέρω).
          "Οταν τό ρΗ κατέβει στό 8,3, θέτουμε σέ λειτουργία τό χρονόμετρο καί προσθέτουμε τό διάλυμα
          ύδροξειδίου τού νατρίου 0,1 N μέ κατάλληλο ρυθμό ώστε τό ρΗ νά διατηρείται στό 8,3 . Σημειώ­
          νουμε κάθε λεπτό τόν όγκο τοΰ άναλισκομένου άλκάλεως .
          Φέρουμε τά ληφθέντα στοιχεία σέ σύστημα συντεταγμένων, στόν άξονα τών τετμημένων τούς
          χρόνους καί στόν άξονα τών τεταγμένων τά ml τοΰ άναλωθέντος άλκαλικοΰ διαλύματος γιά τή
          διατήρηση τοΰ ρΗ σταθεροΰ. Πρέπει νά ληφθεί γραμμική καμπύλη .
          Τό αίώρημα τής λιπάσης πού άναφέρεται στήν προηγούμενη παράγραφο είναι αιώρημα 1 % κατά
           βάρος έντός ύδατος. Γιά τή δοκιμή χρησιμοποιούμε κατάλληλη ποσότητα αιωρήματος ετσι ώστε
           νά καταναλώνουμε μέσα σέ τέσσερα έως πέντε λεπτά περίπου, 1 ml άλκάλεως . Τούτο έπιτυγχάνε­
          ται χρησιμοποιώντας 1 έως 5 mg σκόνης .
           Ώς μονάδα λιπάσης όρίζεται ή ποσότης έκείνη ένζύμου πού έλευθερώνει 10 μικροϊσοδύναμα
           όξέος άνά λεπτό .
           Ένεργότης A τής χρησιμοποιουμένης σκόνης, μετρουμένη σέ μονάδες λιπάσης άνά mg:
                                                      V x 10
                                                 A =
                                                         m
           δπου V = ό άριθμός τών ml τοΰ διαλύματος τοΰ ύδροξειδίου τοΰ νατρίου 0,1 N άνά λεπτό,
                          ύπολογιζόμενος άπό τό διάγραμμα
                  m = ή μάζα τής σκόνης πού χρησιμοποιήσαμε γιά τή δοκιμή , σέ mg.
           Ή χρησιμοποιουμένη λιπάση πρέπει νά έχει ένεργότητα όχι μικρότερη τών 0,8 καί όχι μεγαλύ­
           τερη τών 2 μονάδων λιπάσης άνά mg.
     7.2. Παρασκευή τής λιπάσης
           Λιπάση μέ ικανοποιητική λιπασική ένεργότητα εύρίσκεται στό έμπόριο . Είναι έπίσης δυνατό νά
           παρασκευασθεί στό έργαστήριο ώς έξής:
           Ψύχουμε στούς 0 °C, 5 kg νωποΰ παγκρέατος χοίρου, άπαλλαγμένου άπό τό περιβάλλον στερεό
           λίπος καί τό συνδετικό iστό καί τό άλέθουμε σέ μύλο μέ μαχαίρια ώστε νά λάβουμε μία ρευστή
           πάστα . ' Αναταράσσουμε έν ψυχρώ τήν πάστα αύτή έπί 4 έως 6 ώρες μέ 2,5 1 άνύδρου άκετόνης καί
           έν συνεχεία φυγοκεντροΰμε . Εκχυλίζουμε τό ύπόλειμμα τρεις άκόμη φορές μέ τόν αυτό όγκο
           άκετόνης, δύο φορές μέ μίγμα 1 : 1 (ν/ν) άκετόνης καί διαιθυλεθέρος καί δύο φορές μέ διαιθυλαι­
           θέρα.
            Ξηραίνουμε τό υπόλειμμα γιά 48 ώρες έν κενώ, ώστε νά λάβουμε σταθερή σκόνη ή όποία πρέπει
            νά διατηρείται έντός ψυγείου .
     7.3 . Γενική μέθοδος παρασκευής τών μεθυλεστέρων τών λιπαρών οξέων
           Σύμφωνα μέ τή μέθοδο πού περιγράφεται στό σημείο II τοΰ παραρτήματος VI τοΰ κανονισμού
           (ΕΟΚ) άριθ . 72/77 τής ' Επιτροπής τής 13ης ' Ιανουαρίου 1977 περί τροποποιήσεως τοΰ κανονι­
            σμοΰ (ΕΟΚ) άριθ. 1470/68 περί τής λήψεως καί άναγωγής τών δειγμάτων καί τοΰ προσδιορισμού
           τής περιεκτικότητος σέ έλαιο, ξένα σώματα καί ύγρασία τών έλαιούχων σπόρων ( Χ).
     7.4. 'Αέριος χρωματογραφία τών μεθυλεστέρων τών λιπαρών όξέων
           Σύμφωνα μέ τή μέθοδο πού περιγράφεται στό σημείο III τοΰ παραρτήματος VI τοΰ κανονισμοΰ
           (ΕΟΚ) άριθ. 72/ 77 .
   C ) EE άριθ . N 12 τής 15.1.1977 , σ . 11 .
 ---pagebreak---                            ' Επίσημη 'Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων                             59
                                           ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ VIII
ΑΝΑΖΗΤΗΣΗ ΤΗΣ ΠΑΡΟΥΣΙΑΣ ΑΛΛΩΝ ΕΛΑΙΩΝ ΕΝΤΟΣ ΤΟΥ ΕΛΑΙΟΛΑΔΟΥ: ΑΝΑΛΥΣΗ
                    ΤΟΥ ΣΤΕΡΟΛΙΚΟΥ ΚΛΑΣΜΑΤΟΣ ΤΩΝ ΛΙΠΑΡΩΝ ΣΩΜΑΤΩΝ
 Αρχή
' Αέριος χρωματογραφία τών στερολών παρασκευασμένων μέ χρησιμοποίηση χρωματογραφίας λε­
πτής στιβάδος άπό τά προσεκτικώς ξηρανθέντα άσαπωνοποίητα συστατικά.
 Εξοπλισμός
 1 . Συσκευή χρωματογραφίας λεπτής στιβάδος, περιλαμβάνουσα είδικώτερα τέσσερις υάλινες πλάκες
       διαστάσεων 20 x 20 x 0,4 cm, δύο πλάκες διαστάσεων 20 x 5 x 0,4 cm καί μία μικροσύριγγα
       0,1 ml.
2 . Ποτήρι ζέσεως τών 50 ml .
3 . Πορώδη φίλτρα, διαμέτρου 15 mm, πορώδους 3 .
4. Σφαιρική φιάλη τών 100 ml .
5. Δοκιμαστικοί σωλήνες φυγοκέντρου κωνικής βάσεως τών 10 ml, έφοδιασμένοι μέ έσμυρισμένο
       πώμα.
6. Σιφώνια βαθμολογημένα του 1 ml .
7. Συσκευή άερίου χρωματογραφίας έφοδιασμένη μέ άνιχνευτή ίονισμοΟ φλογός μετά συστήματος
       ενέσεως έξ άργύρου ή ύάλου ή μέ σύστημα άπ' εύθείας ένέσεως στή στήλη συνδεδεμένη μέ κατα­
       γραφέα.
8. Στήλη άερίου χρωματογραφίας άπό ΰαλο ή άνοξείδωτο χάλυβα σχήματος U ή σπιράλ μήκους 1 δως
       2 μέτρων καί έσωτερικής διαμέτρου 3 έως 4 mm, μέ στατική φάση έλαστικής σιλικόνης [(Μεθυλι­
       κοϋ τύπου) C1)] σταθερή τουλάχιστον μέχρι τούς 300 °C, έμποτίζουσα σέ ποσοστό 2-4 % μία άποτε­
       φρωμένη γή διατομών, καθαρισθείσα μέ όξύ καί σιλανοποιημένη κοκκομετρικής συστάσεως 80/ 100
       ή 100/ 120 mesh.
       Σημείωση: Συνιστούμε τήν ύάλινη στήλη, διότι μερικοί τύποι άνοξειδώτου χάλυβος δύνανται νά
                   προκαλέσουν λανθασμένα άποτελέσματα λόγω άποσυνθέσεως τών στερολών .
9. Μικροσύριγγα δυνάμενη νά δώσει δόσεις πού φθάνουν τά 5 ή 10 μΐ .
 Αντιδραστήρια
   1 . Χλωροφορμιο, χρωματογραφικής καθαρότητος .
   2 . Βενζόλιο, χρωματογραφικής καθαρότητος .
   3 . Επτάνιο .
   4 . Silica gel (παραδείγματος χάριν Kieselgel G).
    5 . Διάλυμα συγκρίσεως γιά χρωματογραφία έπί πλακός περιέχον 5 % χοληστερόλη έντός χλωρο­
         φορμίου .
   6. ' Ακετόνη χρωματογραφίας.
   7. Διάλυμα 0,1 % τοΰ μετά νατρίου άλατος τής2'-7'-διχλωροφλουορεσκεΐνης έντός άπολύτου άλκοό­
         λης .
   8 . Πυριδίνη .
   9. ' Εξαμεθυλοδισιλαζάνιο (hexametnyldisilazane).
 10. Τριμεθυλοχλωροσιλάνιο .
 11 . Διάλυμα γιά τό τέστ ευαισθησίας περιέχον 1 mg χοληστερόλης άνά ml κανονικού πεντανίου.
 12. Διάλυμα προτύπου δοκιμής τών καμπυλών περιέχον 0,9 mg φυτοστερολών έλαίου κραμβοσπόρων
         καί 0,1 mg χοληστερόλης άνά ml κανονικού πεντανίου . Οί στερόλες πρέπει νά είναι πρόσφατα
         παρασκευασμένες σύμφωνα μέ τή μέθοδο πού περιγράφεται στήν περίπτωση B του τρόπου έργα­
         σίας .
 13. Διάλυμα συγκριτικής δοκιμής περιέχον 1 mg φυτοστερολών ήλιανθέλαιου πρόσφατα παρασκευα­
         σμένων όπως περιγράφεται στήν περίπτωση B τού τρόπου έργασίας, άνά ml κανονικού πεντανίου .
Παρασκευή τών χρωματογραφικών πλακών
 Έπί τοΰ έπιστρωτού τοποθετούμε κατά σειρά μία πλάκα 20 x 5 x 0,4 cm τέσσερις πλάκες 20 x 20 x
 0,4 cm καί μία πλάκα 20 x 5 x 0,4 cm .
 ί1) Παραδείγματος χάριν SE 30.
 ---pagebreak--- 60                        Επίσημη Εφημερίδα τών Εύρωπαϊκών Κοινοτήτων
   Σέ ευρύλαιμο σφαιρική φιάλη τών 500 ml θέτουμε 40 gr silica gel καί 80 ml νεροΰ . 'Αναδεύουμε μέ
   υάλινη ράβδο ή ενδεχόμενα μέ ύάλινο μηχανικό άναδευτήρα μέχρι τελείας όμογενοποιήσεως. ' Απο­
   μακρύνομε κάθε άέριο διά δημιουργίας κενοΰ, χρησιμοποιώντας άντλία δδατος, γιά ένα τουλάχιστο
   λεπτό . Κατόπιν , μεταφέρουμε τό αιώρημα έπί τοΰ έπιστρωτοΰ καί έπιστρώνουμε τίς πλάκες όμοιομόρ­
   φως μέ πάχος 0,5 mm . ' Ακολουθεί ξήρανση τών πλακών στόν άέρα γιά 15 λεπτά περίπου καί έν
   συνεχεία ξήρανση μέσα σέ φούρνο στούς 105 °C γιά δύο ώρες . Φυλάσσομε τίς ούτω παρασκευασθεΐσες
   πλάκες μέσα σέ ξηραντήρα κενοΰ .
                                          ΤΡΟΠΟΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ
   A. Παρασκευή τών άσαπωνοποίητων συστατικών
      Εισαγωγή
        Ασαπωνοποίητα συστατικά όρίζονται οί διαλυτές στό λίπος ουσίες, οί όποιες, μετά τή σαπωνο­
       ποίηση , είναι άδιάλυτες στό νερό άλλά διαλυτές στό διαλύτη πού χρησιμοποιούμε στόν προσδιο­
       ρισμό . Αυτά περιλαμβάνουν τά φυσικά συστατικά τών λιπαρών ουσιών (στερόλες, άλκοόλες καί
       υδρογονάνθρακες) καθώς έπίσης καί τίς μή πτητικές στούς 100 °C όργανικές ϋλες (ορυκτέλαια)
       ξένες πρός τίς λιπαρές ύλες πού είναι δυνατόν νά περιέχονται . Ό πετρελαϊκός αιθέρας ή ό διαιθυ­
       λαιθέρας είναι οί συνήθως χρησιμοποιούμενοι διαλύτες . Πρέπει νά λαμβάνεται ύπόψη ότι τά
       άποτελέσματα διαφέρουν τίς περισσότερες φορές, άνάλογα μέ τό διαλύτη , γενικώς δέ μέ τό διαιθυ­
       λαιθέρα έξευρίσκονται περιεκτικότητες % άνώτερες . Στήν περίπτωση τοΰ ελαιολάδου , ό πετρελαϊ­
       κός αιθέρας εχει άναγνωρισθεΐ ως ό διαλύτης πού πρέπει νά χρησιμοποιείται , λαμβανομένων
       ύπόψη τών κλιματικών συνθηκών στίς όποιες ευρίσκονται τά περισσότερα έργαστήρια.
       Μέθοδος πετρελαϊκού αιθέρος
       Εξοπλισμός
       — φιάλη τών 150 ml δυναμένη νά προσαρμοστεί σέ ψυκτήρα επαναφοράς,
       — διαχωριστικές χοάνες 500 ml ,
       — φοΰρνος ρυθμισμένος στούς 103 °C (± 2 °C).
        Αντιδραστήρια
       Αιθανολικό διάλυμα υδροξειδίου τοΰ καλίου κανονικότητος περίπου 2 N έντός αίθανόλης 95 %
       ( ν/ν). Τό άντιδραστήριο δέν πρέπει νά είναι χρώματος σκοτεινότερου άπό τό άχυρόχρουν.
       Πετρελαϊκός αιθέρας (άποστάζων στούς 40 ° έως 60 °C, μέ δείκτη βρωμίου κατώτερο τοΰ 1 , χωρίς
       υπολείμματα).
       Τρόπος έργασίας
       Ζυγίζουμε περίπου 5 g λιπαρής ουσίας μέ άκρίβεια 0,01 g έντός τής φιάλης .
        Προσθέτουμε 50 ml αίθανολικοΰ διαλύματος υδροξειδίου τοΰ καλίου 2 N περίπου . Προσαρμό­
        ζουμε στόν ψυκτήρα . Βράζουμε μέ ήπιο βρασμό , γιά μία ώρα.
        Σταματούμε τή θέρμανση . Προσθέτουμε 50 ml άπεσταγμένου ϋδατος άπό τό επάνω μέρος τοΰ
        ψυκτήρος καί άνακινοΰμε .
        Μετά ψύξη , μεταφέρουμε τό δλο έντός διαχωριστικής χοάνης καί ξεπλένουμε τή φιάλη άρκετές
        φορές χρησιμοποιώντας συνολικά 50 ml πετρελαϊκοΰ αίθέρος .
        ' Ανακινούμε δυνατά γιά ένα λεπτό .
       'Αφήνουμε τή φιάλη νά ήρεμήσει μέχρι πλήρους διαχωρισμοΰ τών δύο φάσεων καί συλλέγουμε τό
        διάλυμα τοΰ σάπωνος μέσα σέ δεύτερη διαχωριστική χοάνη . ' Εάν σχηματισθεί , κατ' εξαίρεση ,
        γαλάκτωμα, τό καταστρέφουμε μέ προσθήκη μικρών ποσοτήτων αίθανόλης ή συμπυκνωμένου
        διαλύματος ύδροξειδίου τοΰ καλίου .
        ' Εκπλένουμε τήν παραμένουσα φάση δύο άκόμη φορές, χρησιμοποιώντας 50 ml πετρελαϊκοΰ αιθέ­
        ρος κάθε φορά .
        Συγκεντρώνουμε τά τρία αίθερικά κλάσματα μέσα στήν αυτή διαχωριστική χοάνη , τά ξεπλένουμε
        τρεις φορές μέ 50 ml αίθανόλης 50 % (ν/ ν).
        Μεταγγίζουμε τό αίθερικό εκχύλισμα ποσοτικώς , μέ περισσότερες τής μιας κινήσεις έάν χρειάζε­
        ται, άπό τήν κορυφή τής χοάνης, μέσα σέ προζυγισθείσα φιάλη τών 250 ml (ξεπλένοντας τή χοάνη
        μέ μικρές ποσότητες πετρελαϊκοΰ αίθέρος).
        ' Απομακρύνουμε τό διαλύτη διά προσεκτικής θερμάνσεως έν κενώ καί ξηραίνομε τό υπόλειμμα έν
        κενώ σέ θερμοκρασία κατωτέρα τών 50 °C γιά νά άποφύγουμε άνεπιθύμητες οξειδώσεις .
 ---pagebreak---                         Επίσημη Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων                                     61
B. Διαχωρισμός τοΰ κλάσματος τών στερολών μέ χρήση χρωματογραφίας λεπτής στιβάδος
   ' Εντός θαλάμου άναπτύξεως τοποθετούμε μέχρι ύψους 1 cm περίπου μίγμα 85/ 15 (ν/ν) η-έπτανίου
   καί άκετόνης ή 95/5 (ν/ν) βενζολίου καί άκετόνης. Κλείνουμε μέ τό σκέπασμα καί άκολούθως
   περιμένουμε κατ ' έλάχιστο τρεις ώρες ώστε v' άποκατασταθεΐ ισορροπία μεταξύ ύγροΰ καί άτμοϋ .
   Συνιστάται νά τοποθετούνται λωρίδες διηθητικού χάρτου έπί τών έσωτερικών τοιχωμάτων του
   θαλάμου βυθισμένες στό υγρό άναπτύξεως. Μέ τόν τρόπο αύτό θά έλαττωθεϊ στό τρίτο ό χρόνος
   μετακινήσεως τοϋ μετώπου τοΰ ύγροΰ καί θά έπιτευχθεί περισσότερο, όμοιόμορφη εκλουση .
   ' Εν τώ μεταξύ, παρασκευάζουμε διάλυμα 5 % τών άσαπωνοποιήτων συστατικών έκχυλισθέντων διά
   πετρελαϊκού αιθέρος, έντός χλωροφορμίου. Λαμβάνουμε 0,3 ml άπό αύτό τό διάλυμα καί τό άποθέ­
   τουμε, χρησιμοποιώντας τή μικροσύριγγα τών 0,1 ml, σέ συνεχή καί όμοιόμορφο γραμμή , έπί τής
   χρωματογραφικής πλακός καί σέ ϋψος 1,5 cm άπό τό κάτω μέρος τής πλάκας, έτσι ώστε νά
   λάβουμε μία λεπτή κατά τό δυνατό, γραμμή βάσεως. Στή συνέχεια, μέ τή συνήθη τεχνική , άποθέ­
   τουμε μερικά ml τοϋ προτύπου διαλύματος πού περιέχει τή χοληστερόλη στό ένα άκρο τής πλάκας
   ετσι ώστε νά έλέγξουμε τήν τιμή του Rf του κλάσματος τών στερολών .
   Τοποθετούμε έντός τοΰ θαλάμου άναπτύξεως τήν πλάκα παρασκευασμένη όπως έπεξηγεΐται άνω­
   τέρω . Ή θερμοκρασία δωματίου πρέπει νά είναι γύρω στούς 20 °C. Κλείομε τό θάλαμο μέ τό
   σκέπασμα καί άναπτύσσουμε μέχρις ότου τό μέτωπο του διαλύτου άνέλθει σέ ϋψος 1 cm , κάτω άπό
   τό άνω άκρο τής πλάκας . ' Εξάγουμε τήν πλάκα άπό τό δοχείο καί άκολουθεϊ έξάτμιση τοΰ διαλύ­
   του σέ ρεύμα θερμού άζώτου .
   Ψεκάζουμε τήν πλάκα προσεκτικώς καί όμοιομόρφως μέ τό αίθανολικό διάλυμα τοΰ μετά νατρίου
   άλατος τής 2'-7'-διχλωροφλουορεσκεΐνης . Μέ έξέταση τής πλάκας σέ υπεριώδες φώς, προσδιορί­
   ζεται ή θέση τών στερολών χάρη στήν εύθυγράμμισή τους μέ τήν κηλίδα τής χοληστερόλης πού
   προέρχεται άπό τό πρότυπο διάλυμα. Συλλέγουμε τή λωρίδα τών στερολών ξύνοντάς την μέ μία
   μεταλλική σπάτουλα. Τοποθετούμε τήν παραληφθείσα Silica gel μέσα σέ ποτήρι ζέσεως τών 50 ml
   μαζί μέ 15 ml θερμοΰ χλωροφορμίου, άνακινοΰμε καί μεταφέρουμε τό όλο μέσα στό πορώδες
   φίλτρο καί διηθοΰμε .
   Ξεπλένουμε τό φίλτρο τρεις φορές, κάθε φορά μέ 15 ml θερμοΰ χλωροφορμίου, συλλέγοντες τό
   διήθημα μέσα σέ φιάλη σφαιρική τών 100 ml .
    ' Εξατμίζουμε τό χλωροφόρμιο μέχρι τελικού όγκου 4 έως 5 ml καί τοποθετούμε αύτό έντός προζυ­
   γισθέντος δοκιμαστικού σωλήνος φυγοκέντρου έφοδιασμένου μέ έσμυρισμένο πώμα . Ξηραίνουμε,
   εξατμίζοντας τό διαλύτη μέ προσεκτική θέρμανση σέ ρεΰμα άζώτου, καί ζυγίζουμε τό ληφθέν
   κλάσμα τών στερολών .
Γ. Άεριοχρωματογραφική ανάλυση τών στερολών
     1 . Παρασκευή τών τριμεθυλοσιλιλαιθέρων (TMSE)
         Έντός του δοκιμαστικοΰ .σωλήνος τοποθετούμε, γιά κάθε mg στερολών, 0,02 ml άντιδραστηρίου
         σιλιλαιθεροποιήσεως (Silanization) άποτελούμενο άπό μίγμα 9/3/ 1 (ν/ν/ν) πυριδίνης, έξαμεθυλο­
         δισιλαζανίου καί τριμεθυλοχλωροσιλανίου ένεργοΰντες προσεκτικά γιά τήν άποφυγή κάθε
         ίχνους ύγρασίας . Τοποθετοΰμε τό σωλήνα έντός ξηραντήρος έπί 30 λεπτά περίπου, κατόπιν
         τοποθετούμε τό πώμα του καί φυγοκεντροΰμε γιά μερικά λεπτά . Τό άπομένον διάλυμα λαμβάνε­
         ται γιά τήν πραγματοποίηση τής έπομένης άναλύσεως .
    2 . Συνθήκες άεριοχρωματογραφικής άναλύσεως
         Θερμοκρασία στήλης: 220 έως 250 °C .
         "Αν θερμαίνεται ξεχωριστά, τό σύστημα ύποδοχής τοΰ δείγματος πρέπει νά έχει θερμοκρασία
         κατά 20° έως 40° άνωτέρα άπό τή θερμοκρασία τής στήλης. Ροή άζώτου: 30 έως 60 ml άνά
         λεπτό . ' Αποσυνδέεται ό άνιχνευτής καί ισορροπείται κάθε νέα στήλη στίς άνωτέρω συνθήκες
         γιά 16 έως 24 ώρες . Συνδέουμε τόν άνιχνευτή , άνάβουμε τή φλόγα ρυθμίζοντας τήν ταχύτητα
          ροής υδρογόνου , όξυγόνου ή άέρος έτσι ώστε νά έχουμε τό έπιθυμητό ΰψος φλόγας καί ευαι­
         σθησία . Θέτουμε σέ λειτουργία τόν καταγραφέα, ρυθμίζουμε τήν ταχύτητα τοΰ χάρτου, τό μηδέν
         καί τήν ευαισθησία . "Οταν ή γραμμή βάσεως σταθεροποιηθεί ή συσκευή είναι έτοιμη πρός
         χρησιμοποίηση .
     3 . Δοκιμή ευαισθησίας
         Λαμβάνουμε 5 ml τοΰ διαλύματος τοΰ τέστ ευαισθησίας, έξατμίζουμε τό διαλύτη καί ένεργοΰμε
         όπως στήν παράγραφο 1 . Ένίουμε (j, 1 έως 0,2 ml τοΰ διαλύματος TMS . Μόνον ή καμπύλη τής
         χοληστερόλης πρέπει νά έμφανισθεΐ στό χρωματογράφημα .
          Ρυθμίζουμε τήν ευαισθησία έτσι ώστε νά χρησιμοποιοΰμε περίπου όλη τήν κλίμακα τοΰ κατα­
         γραφέα .
 ---pagebreak--- 62                            Επίσημη Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων
       4. Δοκιμή αναλύσεως τών καμπυλών
           Λαμβάνουμε 5 ml τοΰ παρασκευασθέντος διαλύματος δοκιμής άναλύσεως τών καμπυλών .
            ' Εξατμίζουμε τό διαλύτη ένεργοΰντες δπως στήν παράγραφο 1 .
           Ένίουμε 0,1 έως 0,2 ml τοΰ παρασκευασθέντος διαλύματος TMS .
            Οί καμπύλες τής χοληστερόλης, τής βρασσικαστερόλης, τής καμπεστερόλης καί τής β-σιτο­
            στερόλης πρέπει νά έμφανίζονται στό χρωματογράφημα. Μετρούμε τίς άποστάσεις κατακρατή­
            σεως (άπόσταση μεταξύ τοΰ σημείου ένέσεως καί τοΰ σημείου μεγίστου ϋψους τής καμπύλης),
            τών καμπυλών,           γιά χοληστερόλη , dB γιά τήν βρασσικαστερόλη , de γιά τήν καμπεστερόλη
            καί ds γιά τήν 6-σιτοστερόλη καί τά πλάτη τών κορυφών στίς βάσεις τους (μήκος κατακρατή­
            σεως μεταξύ τών σημείων τομής τών έφαπτομένων στά σημεία καμπής τών πλευρών τών
            καμπυλών μέ τή γραμμή βάσεως) coCH γιά τήν χοληστερόλη cog γιά τή βρασσικαστερόλη . Ή
            άνάλυση τών καμπυλών, έκφραζόμενη μέ τόν τύπο
                                                PR = 2 (dB ~ ^η)
                                                             ωΒ + coCH
            πρέπει νά έχει έλαχίστη τιμή 1 .
            ' Υπολογίζουμε τούς σχετικούς χρόνους κατακρατήσεως (χοληστερόλη = 1,00) γιά τίς βρασσι­
            καστερόλη , καμπεστερόλη καί θ-σιτοστερόλη .
       5 . Τέστ συγκρίσεως
             Λαμβάνουμε 5 ml τοΰ διαλύματος συγκρίσεως, έξατμίζουμε τό διαλύτη , ένεργοΰντες δπως στήν
            παράγραφο 1 , ένίουμε 0,1 έως 0,2 ml τοΰ παρασκευασθέντος διαλύματος TMS . Οί κορυφές τής
             καμπεστερόλης, στιγμαστερόλης, β-σιτοστερόλης Δ 7 στιγμαστερόλης έμφανίζονται στό χρω­
            ματογράφημα.
            Μετρούμε τίς άποστάσεις κατακρατήσεως τών καμπυλών de γιά τήν καμπεστερόλη , dST γιά τή
            στιγμαστερόλη , ds γιά τή β-σιτοστερόλη , dsx.7 γιά τή Δ7-στιγμαστερόλη .
             'Υπολογίζουμε τούς σχετικούς χρόνους κατακρατήσεως πού είναι κατά προσέγγιση :
                                       cholesterol                                           1,0
                                       brassicasterol                                        1,1
                                       campesterol                                           1,3
                                       stigmasterol                                          1,4
                                       β-sitosterol                                          1,60
                                       Δ7 - stigmasterol                                     1,8 (2)
        6 . Ανάλυση
              Ενίουμε 0,1 έως 0,2 μΐ στερολικοΰ διαλύματος TMS τό όποιο άναλύεται καί καταγράφεται το
             χρωματογράφημα .
   Δ . Έκφραση τών άποτελεσμάτων
        Γιά τήν έρμηνεία τής συνθέσεως τοΰ άναλυθέντος κλάσματος στερολών, αγνοούμε κάθε κορυφή
        πού εχει χρόνο κατακρατήσεως διαφορετικό άπό εκείνους πού προσδιορίστηκαν πειραματικώς γιά
        τίς έξη στερόλες πού άναφέρονται άνωτέρω .
        Ή περιεκτικότης έπί τοις % σέ β-σιτοστερόλη δίδεται άπό τόν τύπο :
                                      Εμβαδόν καμπύλης τής β-σιτοστερόλης                                   χ ^
                           "Αθροισμα τών έμθαδών τών έξι καμπυλών τών στερολών
        Ή περιεχόμενη β-σιτοστερόλη δέν πρέπει νά είναι κατώτερη τοΰ 93 % εν σχέσει πρός τή σύνθεση
        έπί τοις % τών συνολικών στερολών .
   ( ) Εάν άλλαι στερόλαι έχουν, όπως ή A5-avenasteroI , ύπό τίς αύτές συνθήκες, τόν αύτό όγκο κατακρατήσεως όπως ή θ-sitosterol .
       θεωρούνται ώς θ-sitosterol .
   (2) Εάν άλλες στερόλες 6χουν ύπό τίς αύτές συνθήκες τόν αυτόν όγκο κατακρατήσεως όπως καί ή A7-stigmasterol , θεωρούνται ώς
       A7-stigmasterol .
 ---pagebreak---                        Επίσημη Εφημερίδα τών Ευρωπαϊκών Κοινοτήτων                                63
                                         ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ IX
                      ΠΕΡΙΕΚΤΙΚΟΤΗΣ ΣΕ ΕΛΑΙΟ ΤΩΝ ΕΛΑΙΟΠΥΡΗΝΩΝ
 Εξοπλισμός
— κατάλληλη συσκευή έκχυλίσεως εφοδιασμένη μέ σφαιρική φιάλη τών 200 εως 250 ml,
— λουτρό ήλεκτρικής θερμάνσεως (άμμόλουτρο, ύδρόλουτρο κλπ.) ή θερμαινόμενη πλάκα,
— άναλυτικός ζυγός,
— φούρνος ρυθμισμένος στούς 80 °C τό μέγιστο,
— φούρνος ήλεκτρικής θερμάνσεως έφοδιασμένος μέ θερμοστατικό μηχάνημα, ρυθμισμένος στούς
    103 ± 2 °C μέ μηχανισμό έμφυσήσεως άέρος ή μειώσεως τής πιέσεως,
— μηχανικός μύλος, εύκολα καθοριζόμενος πού νά έπιτρέπει τή σύνθλιψη, χωρίς νά έπιφέρει άνύ­
    ψωση τής θερμοκρασίας ή αισθητή μεταβολή τής περιεκτικότητος σέ ύγρασία καί έλαιο,
— δακτύλιος έκχυλίσεως καί έριοθάμθαξ ή διηθητικός χάρτης, άπαλλαγμένα συστατικών έκχυλιζο­
    μένων μέ τό έξάνιο,
— ξηραντήρ,
— κόσκινο διαμέτρου όπών 1 mm,
— μικρά τεμαχίδια ξηρανθείσης έλαφρόπετρας .
 Αντιδραστήρια
Κανονικό έξάνιο (technical grade), τό όποιο μετά άπό πλήρη έξάτμιση νά άφήνει ύπόλειμμα τό πολύ
0,002 g άνά 100 ml .
                                       ΤΡΟΠΟΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ
Παρασκευή τοΰ δείγματος δοκιμής
' Αλέθουμε τό έργαστηριακό δείγμα, έάν παρίσταται άνάγκη , μέ μηχανικό μύλο, καλά καθαρισμένο,
ώστε νά λάβουμε τεμάχια πού νά δύνανται νά διέλθουν άπό τό κόσκινο .
Χρησιμοποιούμε τό εικοστό περίπου τοΰ δείγματος γιά τόν πλήρη καθαρισμό τοΰ μύλου, άπορρί­
πτουμε τό άλεσμα αύτό, άλέθουμε τήν υπόλοιπη ποσότητα, τή συλλέγουμε, τήν άναμιγνύουμε προ­
σεκτικά καί τήν άναλύουμε άμέσως .
Ποσότης δοκιμής
Μόλις όλοκληρωθεΐ ή εργασία λειοτριθήσεως, ζυγίζουμε 10 g τοΰ δείγματος δοκιμής μέ άκρίθεια
0,01 g .
Προετοιμασία τών έκχυλιστικών δακτυλίων (cartouche)
Τοποθετούμε τό δείγμα δοκιμής έντός τοΰ δακτυλίου καί πωματίζουμε μέ έριοβάμβακα . "Αν χρησιμο­
ποιείται διηθητικός χάρτης , τό άλεσμα τυλίγεται μέσα σ' αύτό .
Προκαταρκτική ξήρανση
"Αν ό έλαιοπυρήνας είναι πολύ ύγρός (π . χ. περιεκτικότητα σέ ύγρασία καί πτητικές ϋλες άνω τοΰ
 10 %), ξηραίνουμε αυτόν προκαταρκτικώς διά τοποθετήσεως τοΰ έτοιμου δακτυλίου (ή τοΰ διηθητικοΰ
 χάρτου) έπί τι χρονικό διάστημα μέσα σέ φοΰρνο θερμανθέντα σέ θερμοκρασία όχι άνώτερη τών 80 °C
 γιά νά έλαττώσουμε τήν περιεκτικότητα σέ ύγρασία καί πτητικές ΰλες κάτω τοΰ 10 % .
Προετοιμασία τής σφαιρικής φιάλης
 Ζυγίζουμε , μέ άκρίθεια 1 mg, φιάλη περιέχουσα ένα ή δύο τεμαχίδια έλαφρόπετρας, προηγουμένως
 ξηρανθείσα μέσα σέ φοΰρνο στούς 103 ± 2 °C καί έν συνεχεία ψυχθείσα μέσα σέ ξηραντήρα γιά
 διάστημα τουλάχιστον μίας ώρας .
Πρώτη εκχύλιση
 Μέσα στή συσκευή εκχυλίσεως είσάγουμε τό δακτύλιο (ή τό διηθητικό χάρτη) πού περιέχει τήν
 ποσότητα δοκιμής . Χύνουμε έντός τής σφαιρικής φιάλης τήν άπαραίτητη ποσότητα έξανίου . Συν­
 δέουμε τή φιάλη μέ τή συσκευή έκχυλίσεως καί τό σύνολο τοποθετείται στό ηλεκτρικά θερμαινόμενο
 λουτρό . Ρυθμίζουμε τή θέρμανση κατά τέτοιο τρόπο ώστε ή ταχύτης έπαναρροής νά είναι τουλάχιστον
 3 σταγόνες τό δευτερόλεπτο (βρασμός μέτριος όχι ισχυρός). Μετά τέσσερις ώρες έκχυλίσεως ψύ­
 χουμε . 'Απομακρύνουμε τό δακτύλιο άπό τή συσκευή έκχυλίσεως καί τό θέτουμε σέ ρεΰμα άέρος γιά
 νά άπομακρύνουμε τόν έμποτισθέντα διαλύτη .
 ---pagebreak--- 64                         Επίσημη Εφημερίδα των Εύρωπαϊκών Κοινοτήτων
   Δεύτερη εκχύλιση
   ' Αδειάζουμε τό δακτύλιο έντός μικρο-άλεστήρος καί άλέθουμε σέ όσο τό δυνατό λεπτότερα τεμάχια .
    ' Επαναφέρουμε τό μίγμα πάλι μέσα στό δακτύλιο ποσοτικά καί τοποθετούμε τό δακτύλιο μέσα στή
    συσκευή έκχυλίσεως .
   Συνεχίζουμε τήν έκχύλιση γιά δύο έπί πλέον ώρες, χρησιμοποιώντας τήν ϊδια σφαιρική φιάλη πού
    περιέχει τό πρώτο έκχύλισμα.
   Τό λαμβανόμενο στή φιάλη έκχυλίσεως διάλυμα πρέπει νά είναι διαυγές. "Αν δέν είναι, τό διηθούμε μέ
   διηθητικό χάρτη καί ξεπλένουμε τήν άρχική φιάλη καί τό διηθητικό χάρτη άρκετές φορές μέ έξάνιο.
   Συλλέγουμε τό διήθημα καί τό διαλύτη τής πλύσεως έντός δευτέρας σφαιρικής φιάλης, ή όποία εχει
   προηγουμένως ξηρανθεί καί ζυγισθεί μέ άκρίβεια 1 mg.
   ' Απομάκρυνση τοΰ διαλύτου καί ζύγιση του έκχυλίσματος
    ' Απομακρύνουμε τό μεγαλύτερο μέρος του διαλύτου δι' άποστάξεως έπί ήλεκτρικώς θερμαινομένου
    λουτρού. 'Απομακρύνουμε τά τελευταία ϊχνη τοϋ διαλύτου θερμαίνοντας τή φιάλη μέσα σέ φούρνο
    στούς 103 ° ± 2 °C γιά 20 λεπτά. Διευκολύνουμε τήν άπομάκρυνση αυτή εϊτε δι' έμφυσήσεως, κατά
    διαλείμματα άέρος, ή προτιμότερο άδρανοΰς άερίου είτε διά μειώσεως της πιέσεως .
    ' Αφήνουμε τή φιάλη νά ψυχθεί μέσα σέ ξηραντήρα έπί μία τουλάχιστον ώρα καί ζυγίζουμε μέ
    άκρίβεια 1 mg.
    Θερμαίνουμε έκ νέου γιά 10 λεπτά μέ τίς ϊδιες συνθήκες, ψύχουμε μέσα στόν ξηραντήρα καί ζυγίζουμε .
    Ή διαφορά μεταξύ τών δύο ζυγίσεων δέν πρέπει νά υπερβαίνει τά 10 mg. "Αν όχι θερμαίνουμε έκ νέου
    γιά διάστημα 10 λεπτών, ψύχουμε καί ζυγίζουμε, έπαναλαμβάνοντας τήν έργασία μέχρις ότου ή
    διαφορά βάρους μεταξύ δύο ζυγίσεων νά μήν είναι μεγαλύτερη άπό 10 mg. Λαμβάνουμε ύπόψη τήν
    τελευταία ζύγιση τής φιάλης .
    ' Εκτελούμε δύο προσδιορισμούς έπί τοΰ αυτού δείγματος δοκιμής .
                                   ΕΚΦΡΑΣΗ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ
    Τρόπος ύπολογισμοδ καί τύπος
     α) Τό έκχύλισμα έκπεφρασμένο έπί τοις έκατό κατά μάζα τοΰ προϊόντος ώς εχει , ίσοΰται μέ:
                                                            100
                                               S = "i ! x
                                                            m0
         οπου S είναι τό ποσοστό έπί τοις % κατά μάζα τοΰ έκχυλίσματος τοΰ προϊόντος ώς εχει ,
               m0 είναι ή μάζα, σέ γραμμάρια, τής ποσότητος δοκιμής,
               mx είναι ή μάζα, σέ γραμμάρια, τοΰ έκχυλίσματος μετά τήν ξήρανση .
         Λαμβάνουμε ώς άποτέλεσμα τόν άριθμητικό μέσο όρο τών δύο προσδιορισμών έφ' όσον πληρού­
         νται οί προϋποθέσεις έπαναληπτικότητος .
         ' Εκφράζουμε τό άποτέλεσμα μέ ενα δεκαδικό ψηφίο .
      8) Τό έκχύλισμα άνάγεται έπί ξηράς ούσίας μέ τόν άκόλουθο τύπο:
                          S x ———= έκχύλισμα έπί τοις έκατό λιπαρό/ξηρό
                               100 — U
          όπου S είναι τό ποσοστό κατά μάζα τοΰ έκχυλίσματος τοΰ προϊόντος ώς εχει (βλέπε α ).
               U είναι ή περιεκτικότης σέ υγρασία καί πτητικές όλες .
      Επαναληπτικότης
       H διαφορά μεταξύ τών άποτελεσμάτων τών δύο προσδιορισμών , οι όποιοι πραγματοποιούνται συγ­
      χρόνως ή ταχέως ό ένας μετά τόν άλλο άπό τόν ίδιο άναλυτή , δέν πρέπει νά ύπερβαίνει τά 0,2 g
     έκχυλίσματος έξανίου άνά 100 g δείγματος .
      Σέ άντίθετη περίπτωση , έπαναλαμθάνουμε τήν άνάλυση μέ δύο άλλες ποσότητες δοκιμής . "Αν καί
      πάλι ή διαφορά ύπερβαίνει τά 0,2 g λαμβάνουμε ώς άποτέλεσμα τόν άριθμητικό μέσο όρο τών
      τεσσάρων πραγματοποιηθέντων προσδιορισμών.