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Titolo: UV e colorazione di Gram

Ciao
volevo sapere se qualcuno sa se tenere dei vetrini non colorati in una cappa
con gli UV accesi mi può alterare la successiva colorazione di questi con il
Gram.Avevo sentito parlare che gli UV potrebbero agire sulla struttura di
alcune proteine ma non so se possano alterare lo strato fosfolipidico e
quindi inficiare l'azione dei vari coloranti.
SunRex

 Gram.
A me è successo una volta , ma avevo lasciato il preparato da colorare sotto UV
per 10-12 gg... poi ho fatto la Gram ed è venuta una schifezza.... :-((
Il Bonucci spiega che i raggi UV agiscono sui lipidi insaturi formando 
gruppi aldeidici mediante l'auto-ossidazione dei gruppi etilenici
nei preparati lasciati esposti, in questo caso sotto cappa.
Cmq la velocità di ossidazione dei gruppi etilenici varia moltissimo in base
alla natura del preparato (il libro parla di tessuti, ma fa niente...).
Se puoi, usa uno solo dei preparati per evidenziare l'eventuale formazione di
gr. aldeidici mediante reattivo di Schiff. Nel qual caso, non puoi fare la Gram...
Ciao
-- 
Andrea
***
Io ne ho viste cose che voi Umani non potreste immaginare...
(Blade Runner - 1973)
La sequenza non è che l'inizio...
(J. Craig Venter, Celera Genomics - 2000)

 Gram.
A me è successo una volta , ma avevo lasciato il preparato da colorare sotto
UV
per 10-12 gg... poi ho fatto la Gram ed è venuta una schifezza.... :-((
Il Bonucci spiega che i raggi UV agiscono sui lipidi insaturi formando
gruppi aldeidici mediante l'auto-ossidazione dei gruppi etilenici
nei preparati lasciati esposti, in questo caso sotto cappa.
Cmq la velocità di ossidazione dei gruppi etilenici varia moltissimo in base
alla natura del preparato (il libro parla di tessuti, ma fa niente...).
Se puoi, usa uno solo dei preparati per evidenziare l'eventuale formazione
di
gr. aldeidici mediante reattivo di Schiff. Nel qual caso, non puoi fare la
Gram...
Ciao
--
Andrea
***
Molto interessante, chissà quel'è la velocità di questa reazione, nel senso
che io li
vorrei tenere sotto cappa con gli UV accesi per circa 15-18 ore.Grazie per
la spiegazione
precisa, oltre che col reattivo di Schiff (mi sa che in lab non ce lo
abbiamo...) proverò
a fare una prova in doppio (un vetrino sotto UV e l'altro no) di un
gonococco che
mi dicono sia particolarmente delicato come germe.
SunRex


 vorrei tenere sotto cappa con gli UV accesi per circa 15-18 ore.
Secondo me la reazione è più veloce: la normale radiazione luminosa
agisce immediatamente ad esempio sul cloro Cl2 realizzando fotolisi
e producendo radicali cloro in reazioni con gli alcani; l'innesco è rapidissimo, 
dell'ordine di secondi.
La luce UV se non erro è più "lenta" della visibile ma penetra di più
sulle molecole organiche... ma non ricordo più tanto bene, devo 
andare a rivedermi ste cose :-((
Ora, ammettendo lo stesso meccanismo di decomposizione
su un doppio legame, se non ho sbagliato la scala delle frequenze,
posso immaginare un ordine temporale di minuti.
La mia esperienza è stata accidentale, ma secondo me 15-18 ore sono già troppe.
Prova a temporizzare sull'ordine di 10-15 minuti. Credo che già con questi tempi
la Gram non venga più tanto bene....
Facci sapere che cosa hai scoperto... ;-)
Ciao e buon lavoro.
-- 
Andrea
***
