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Titolo: eparina

Buongiorno!
Qualcuno saprebbe cortesemente dirmi se esistono dei reagenti che
legandosi all'eparina la colorano?Questo puň rientrare nella cosě detta
colorimetria?Qualcuno puň darmi altrimenti indicazioni su che tipo di
processo si tratta e dove posso trovare informazioni a riguardo?
Spero di non esser stata troppo imprecisa.
Grazie in anticipo e buona giornata,
                 chiara
-- 
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ab...@newsland.it

Stavo stampando i bigliettini per l'esame di domani quando
chiarag...@yahoo.it
 (chiara) ha attirato la mia attenzione
scrivendo:
...snip...
In realtà l'eparina non è una sostanza singola ma una famiglia di
glicosaminoglicani solfatati (mucopolisaccaridi) con una gamma di pesi
molecolari che varia da 3000 a 40000. Esiste una grande variabilità
tra le molecole di eparina.
Noi abbiamo usato l'eparina per valutare l'interazione eparina-
antitrombina in termini di frazione di proteina legata. Per
raggiungere l'obiettivo abbiamo progressivamente aggiunto piccole
quantità di farmaco registrando di volta in volta le variazioni del
picco nello  spettro di emissione a 345nm. Il legame tra eparina ed il
sito sull'antitrombina determina l'esposizione dei residui di
triptofano in seguito a variazione conformazionale: conseguenza di ciò
è l'aumento di emissione registrato dopo l'avvenuta interazione.
La colorimetria è una delle applicazioni più importanti della
spettrofotometria. Numerose sostanze non hanno un coefficiente
d'estinzione significativo nel visibile, ma possono reagire
quantitativamente con un'altra sostanza per formare un prodotto
colorato. Questa proprietà viene sfruttata per la determinazione
quantitativa di tali sostanze.
Spesso è importante conoscere la concentrazione di proteine in un
campione. Ad esempio, durante la purificazione di un enzima il
progresso della purificazione può essere seguito confrontando la
quantità totale dell'attività enzimatica desiderata con la quantità
totale di proteine dopo ogni passaggio di frazionamento. Se la
purificazione sta procedendo in modo appropriato, mano a mano che
l'enzima diventa più puro, la quantità d'attività enzimatica relativa
alla concentrazione totale delle proteine aumenta. Analogamente, si
può supporre di trattare delle cellule con un reagente, come un ormone
o un farmaco, e di voler determinare se l'attività specifica di un
particolare enzima viene influenzata dal trattamento. Ciò richiederà
di nuovo la determinazione della concentrazione proteica. In ogni
caso, la formazione del prodotto colorato (cromoforo) deve avvenire in
condizioni standardizzate secondo un rapporto stechiometrico con la
sostanza, al fine di misurare l'estinzione dei campioni rispetto a
quella di un bianco, contenuto nella cuvetta di riferimento e
costituito da tutti i reagenti tranne la sostanza da determinare.
--
Downfall_ (22, 75&120, VE)
Polo TDI HL & AR 146L 1.6t.s.
Biotechnology for Life
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 è l'aumento di emissione
Tutto perfetto... ho solamente un dubbio: sicuro di aver misurato
l'*emissione* a 345nm e non l'*estinzione*? Potrei sbagliarmi, ma non mi
sembra di ricordare il W come fluorescente... O__o
-- 
Io non credo nella guerra come strumento.
C'è un dato inoppugnabile: che la guerra è uno strumento che non funziona,
semplicemente non funziona...

sembra di ricordare il W come fluorescente... O__o
L'esperimento è stato fatto al fluorimetro.
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 L'esperimento è stato fatto al fluorimetro.
Mea culpa... come già anticipato... mi sbagliavo.
Fluorescenza del Triptofano: eccitazione a 295nm e emissione a 345nm.
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Io non credo nella guerra come strumento.
C'è un dato inoppugnabile, che la guerra è uno strumento che non funziona,
semplicemente non funziona...

Mea culpa... 
Scherzi!?
Mica ci possiamo ricordare tutto in ogni momento...io me lo ricordavo
perchè ho fatto l'esperimento solo qualche mese fa :-)
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 perchè ho fatto l'esperimento solo qualche mese fa :-)
...nemmeno avessi detto che per cotal mancanza avrei portato il cilicio per due
settimane... :-)
Alla prossima.
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Alla prossima.
Certo.
