File size: 24,700 Bytes
c6f6063 |
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267 268 269 270 271 272 273 274 275 276 277 278 279 280 281 282 283 284 285 286 287 288 289 290 291 292 293 294 295 296 297 298 299 300 301 302 303 304 305 306 307 308 309 310 311 312 313 314 315 316 317 318 319 320 321 322 323 324 325 326 327 328 329 330 331 332 333 334 335 336 337 338 339 340 341 342 343 344 345 346 347 348 349 350 351 352 353 354 355 356 357 358 359 360 361 362 363 364 365 366 367 368 369 370 371 372 373 374 375 376 377 378 379 380 381 382 383 384 385 386 387 388 389 390 391 392 393 394 395 396 397 398 399 400 401 402 403 404 405 406 407 408 409 410 411 412 413 414 415 416 417 418 419 420 421 422 423 424 425 426 427 428 429 430 431 432 433 434 435 436 437 438 439 440 441 442 443 444 445 446 447 448 449 450 451 452 453 454 455 456 457 458 459 460 461 462 463 464 465 466 467 468 469 470 471 472 473 474 475 476 477 478 479 480 481 482 483 484 485 486 487 488 489 490 491 492 493 494 495 496 497 498 499 500 501 502 503 504 505 506 507 508 509 510 511 512 513 514 515 516 517 518 519 520 521 522 523 524 525 526 527 528 529 530 531 532 533 534 535 536 537 538 539 540 541 542 543 544 545 546 547 548 549 550 551 552 553 554 555 556 557 558 559 560 561 562 563 564 565 566 567 568 569 570 571 572 573 574 575 576 577 578 579 580 581 582 583 584 585 586 587 588 589 590 591 592 593 594 595 596 597 598 599 600 601 602 603 604 605 606 607 608 609 610 611 612 613 614 615 616 617 618 619 620 621 622 623 624 625 626 627 628 629 630 631 632 633 634 635 636 637 638 639 640 641 642 643 644 645 646 647 648 649 650 651 652 653 654 655 656 657 658 659 660 661 662 663 664 665 666 667 668 669 670 671 672 673 674 675 676 677 678 679 680 681 682 683 684 685 686 687 688 689 690 691 692 693 694 695 696 697 698 699 700 701 702 703 704 705 706 707 708 709 710 711 712 713 714 715 716 717 718 719 720 721 722 723 724 725 726 727 728 729 730 731 732 733 734 735 736 737 738 739 740 741 742 743 744 745 746 747 748 749 750 751 752 753 754 755 756 757 758 759 760 761 762 763 764 765 766 767 768 769 770 771 772 773 774 775 776 777 778 779 780 781 782 783 784 785 786 787 788 789 790 791 792 793 794 795 796 797 798 799 800 801 802 803 804 805 806 807 808 809 810 811 812 813 814 815 816 817 818 819 820 821 822 823 824 825 826 827 828 829 830 831 832 833 834 835 836 837 838 839 840 841 842 843 844 845 846 847 848 849 850 851 852 853 854 855 856 857 858 859 860 861 862 863 864 |
1
00:00:02,800 --> 00:00:05,820
نبدأ اليوم إن شاء الله بالمعمل الرابع بعنوان
2
00:00:05,820 --> 00:00:10,760
Arabic Colonic Count بنرمز له ACC أو له مصطلح
3
00:00:10,760 --> 00:00:14,360
ثاني Total Viable Count لاحظوا أنا عمالي بأحكي
4
00:00:14,360 --> 00:00:19,380
كلمة Count معناها فيها عدّ الشغلة، فيها عدّ معناها
5
00:00:19,380 --> 00:00:21,640
هي من ضمن الـ food analysis اللي هي الـ quantitative
6
00:00:21,640 --> 00:00:26,350
مش qualitative، Total يعني عدّ جميع أنواع البكتيريا
7
00:00:26,350 --> 00:00:30,210
بغض النظر عن نوعها، طيب بدي أعدّ الكل يعني الـ media
8
00:00:30,210 --> 00:00:33,590
مش هيكون فيها أي inhibitors، فهي الـ media بيسميها
9
00:00:33,590 --> 00:00:39,510
general media، مثال عليها الـ nutrient agar، viable
10
00:00:39,510 --> 00:00:43,870
يعني بكتيريا حية، بكتيريا حية لأن هذه هي اللي هتكون
11
00:00:43,870 --> 00:00:47,610
عندها القدرة إنها تلمّ و تتكثر أو تتضاعف في الـ size
12
00:00:47,610 --> 00:00:50,790
وسيلها multiplication، وتظهر بالنهاية على شكل
13
00:00:50,790 --> 00:00:57,740
كولونية، نبدأ بملخص للمعمل وبعدين هنمشي على الـ
14
00:00:57,740 --> 00:01:02,340
سلايدات، حكينا إنه في عند الـ sample line خط إنتاج
15
00:01:02,340 --> 00:01:07,680
لكل خط إنتاج له lot، والـ lot له lot number، قلنا من
16
00:01:07,680 --> 00:01:10,880
العجينة أو من الـ lot بأخد حاجة اسمها الـ sample
17
00:01:10,880 --> 00:01:15,320
unit، الـ sample unit على الأقل بتكون 100 جرام أو
18
00:01:15,320 --> 00:01:18,500
مل، ليش 100 على الأقل؟ هيتعتبر statistical
19
00:01:18,500 --> 00:01:24,000
significant، من الـ Sample Unit بأخد منه مقدار من 25
20
00:01:24,000 --> 00:01:28,660
لـ 50 جرام أو مل، سميناها الـ Analytical Unit وهي
21
00:01:28,660 --> 00:01:32,440
هي اللي بشتر عليها في المعمل، اليوم بدنا نعدّي
22
00:01:32,440 --> 00:01:38,470
البكتيريا الموجودة في أي عينة، ممكن نصل لـ، بحكي لي
23
00:01:38,470 --> 00:01:42,950
بمجرد ما تجيني العينة، يستحسن نعملها dilution، نعمل
24
00:01:42,950 --> 00:01:47,370
تخفيف، ليش بدّي أعمل تخفيف للعينة؟ مش إنه أخد العين
25
00:01:47,370 --> 00:01:52,190
مباشرة وأزرعها، لأنه ممكن لو أخدت مباشرة أو زرعتها
26
00:01:52,190 --> 00:01:56,190
هيكون عندي عدد الكولونيات كثير كبير عندي في الطبق
27
00:01:56,190 --> 00:02:01,150
الصعب أنه أنا أعدّه، فإيه الجواب؟ to dilute bacteria
28
00:02:01,150 --> 00:02:04,170
in the sample، مشان أخفف البكتيريا في العينات هي
29
00:02:04,170 --> 00:02:08,170
واحدة الشغلة الثانية to avoid saying لحتى ما يطلع
30
00:02:08,170 --> 00:02:14,790
معي النتيجة to numerous to count TNTC لو طلع العدد
31
00:02:14,790 --> 00:02:18,950
صعب جداً أنه أنا أعدّ أكثر من 250 كولوني في الطبق
32
00:02:18,950 --> 00:02:24,810
بسميها to numerous to count، طيب أنا قلت بدي أخفف
33
00:02:24,810 --> 00:02:28,950
العينة بمجرد ما تصلني بدي أخففها، معناته بحتاج إلى
34
00:02:28,950 --> 00:02:34,090
diluent، شغلات بخفف فيها، عندي ثلاث أنواع لـ diluent
35
00:02:34,090 --> 00:02:37,510
أول شيء الـ normal saline وهذا بدنا نستخدمه بشكل
36
00:02:37,510 --> 00:02:41,970
كبير في ما عملنا، normal saline هو ملح طعام مع
37
00:02:41,970 --> 00:02:46,720
distilled water، هي هيك بس محلول ملح اسمه، التركيز
38
00:02:46,720 --> 00:02:52,260
اللي بيلزمني 85 من 100%، لاحظوا أنه هذا التركيز ما
39
00:02:52,260 --> 00:02:56,280
بعمل shrinking أو swallowing للبكتيريا، ما بيخليها
40
00:02:56,280 --> 00:03:01,600
تتقلص أو أنها تنتفخ، كيف بدي أحضر 85 من 100% normal
41
00:03:01,600 --> 00:03:09,420
saline، على الميزان بأوزن 85 من 100 جرام NaCl بحط
42
00:03:09,420 --> 00:03:15,260
عليها 100 مل distilled water، طيب فيما لو كنت محتاجة إني
43
00:03:15,260 --> 00:03:19,340
أحضر فيه ألف مل distilled water، بحط الألف تحت المية
44
00:03:19,340 --> 00:03:23,540
وطرفين في وسطين وهيك بيصير عندي الـ weight للـ NACL
45
00:03:23,540 --> 00:03:28,960
8.5 جرام، الـ daily wanted الثاني هو الـ peptone
46
00:03:28,960 --> 00:03:35,550
الـ peptone هي البروتينات الصغيرة، النشأات من وين صار
47
00:03:35,550 --> 00:03:39,710
في تكسير جزء للبروتينات، partial hydrolysis of
48
00:03:39,710 --> 00:03:44,510
proteins، بتعطيني peptone، فهي الـ peptone بتكون عندي
49
00:03:44,510 --> 00:03:48,950
على شكل powder، التركيز اللي راح يلزمني من الـ peptone
50
00:03:48,950 --> 00:03:55,850
1 من 10%، كيف بدي أحضر 1 من 10% peptone؟ بقول لي على
51
00:03:55,850 --> 00:04:01,710
الميزان بدي أوزن 1 من 10، 0.1 جرام من الـ
52
00:04:01,710 --> 00:04:06,170
powder بحطها في flask وبحط عليها 100 مل distilled
53
00:04:06,170 --> 00:04:10,430
water، طيب لو بدي أحضر في 1000 مل distilled water
54
00:04:10,430 --> 00:04:15,690
طرفين في وسطين وبطلع معي الـ peptone 1 جرام، الـ
55
00:04:15,690 --> 00:04:19,620
daily wanted third هو الـ peptone saline، هو عبارة عن
56
00:04:19,620 --> 00:04:24,360
peptone زائد normal saline، طب كيف بدي أحضر الـ peptone
57
00:04:24,360 --> 00:04:30,240
saline؟ بحط 0.1 جرام من الـ peptone، 85 من 100
58
00:04:30,240 --> 00:04:34,620
جرام NaCl، والاتنين بحط عليهم 100 مل distilled water
59
00:04:35,230 --> 00:04:39,630
بأخلط الـ 0.1 مع الـ 85 من 100 بحط عليهم
60
00:04:39,630 --> 00:04:44,230
100 ml distilled water، قلت ليش بحتاج الـ diluent؟
61
00:04:44,230 --> 00:04:47,790
لأن هي بتعملي تخفيف للـ analytical unit لحتى ما
62
00:04:47,790 --> 00:04:51,950
يطلع معي to numerous to count، لما نرجع للجامعة إن
63
00:04:51,950 --> 00:04:54,790
شاء الله بدّي نشتغل المعمل هذا على عينات الـ yogurt
64
00:04:54,790 --> 00:04:59,270
أو اللبن السائل، بتجيني أو بدي أشتريها من الـ ..
65
00:04:59,270 --> 00:05:02,790
من الـ supermarket، بتكون عندي علبة فيها 100 مل من
66
00:05:02,790 --> 00:05:07,470
الـ yogurt، تمام، 100 مل هي .. هي بمثابة الـ sample
67
00:05:07,470 --> 00:05:10,170
unit، لسه بدي أخد منها الـ analytical unit اللي هي
68
00:05:10,170 --> 00:05:15,330
25 مل، بدنا إياها، قبل اللي أخد الـ 25 ml، قلنا لازم أضمن
69
00:05:15,330 --> 00:05:19,350
هي تكون عينة ممثلة، يعني بدّي أعمل mix للـ Meat Meal
70
00:05:19,350 --> 00:05:25,130
بعملها mix عادي برجها باستخدام تيب معقّم، بسحب 25 ml
71
00:05:25,130 --> 00:05:28,210
من اللي جرت، بحطها في flask مغسول بالماء والصابون
72
00:05:28,210 --> 00:05:32,090
والـ distilled water، أنا هيك صار عندي عينتي لسه
73
00:05:32,090 --> 00:05:36,410
مركزة كده يعني بدي أخففها باستخدام Normal Saline
74
00:05:36,410 --> 00:05:42,720
225 ml Normal Saline، قداش صار عندي التخفيف dilution
75
00:05:42,720 --> 00:05:45,480
بيساوي الـ sample على الـ sample زائد الـ diluent
76
00:05:45,480 --> 00:05:52,480
بيساوي 25 على 25 زائد 225، 1 إلى 10 أو 10 أس سالب 1
77
00:05:54,070 --> 00:05:59,730
فهيك خففت العينة 1 إلى 10، بقول لي الأفضل نبدأ
78
00:05:59,730 --> 00:06:04,250
بتخفيف 1 إلى 10، بغض النظر عن الكميات يعني قبل
79
00:06:04,250 --> 00:06:07,710
شوية أنا هيني حضرت تخفيف 1 إلى 10 من خلال 25
80
00:06:07,710 --> 00:06:13,170
sample، 225 من الـ diluent، بقدر كمان إنه أحضر
81
00:06:13,170 --> 00:06:17,010
1 إلى 10 باستخدام 10 sample أو 90 من
82
00:06:17,010 --> 00:06:21,830
الـ diluent، اللي هي بتصير 10 على 10 زائد، بقدر
83
00:06:21,830 --> 00:06:27,330
كمان إنه أحضر 1 إلى 10 من خلال 11 sample و99 من
84
00:06:27,330 --> 00:06:31,450
الـ diluent، فهي أول نقطة إنه بدي أبدأ بتخفيف 1
85
00:06:31,450 --> 00:06:35,070
إلى 10، النقطة الثانية بيقول لي يفضل إنه أمشي
86
00:06:35,070 --> 00:06:39,910
مضاعفات الـ 10، يعني أول شيء بعمل تخفيف 1 إلى 10
87
00:06:39,910 --> 00:06:44,090
بعد هيك بعمل serial dilution، تخفيف 10 أس سالب
88
00:06:44,090 --> 00:06:47,430
2 أو 1 إلى 100، 10 أس سالب 3 أو 1 إلى 1000 وهكذا
89
00:06:47,430 --> 00:06:53,120
هكذا، شغلنا بيكون على شكل جروبات، لكل جروب عنده
90
00:06:53,120 --> 00:06:56,720
أربع تيوبات، كل تيوب فيه 9 مل normal saline،
91
00:06:56,720 --> 00:06:59,780
بدي أوحد الـ diluent وبدي أغيّر في محتوى
92
00:06:59,780 --> 00:07:03,140
البكتيريا، فالـ diluent كلهم في كل التيوبات هتكون
93
00:07:03,140 --> 00:07:08,310
عنده واحدة 9 مل، شو بدي أعمل؟ بدي أخد من الـ
94
00:07:08,310 --> 00:07:11,910
flask 1 مل، بدي أحطه على التيوب الأول، التيوب
95
00:07:11,910 --> 00:07:15,050
الأول بأخد منه 1 مل، بحطه على التيوب الثاني،
96
00:07:15,050 --> 00:07:17,790
التيوب الثاني 1 مل على التيوب الثالث وعلى
97
00:07:17,790 --> 00:07:21,290
الرابع، بالآخر فبسحب 1 مل من الرابع أو بكبّه
98
00:07:24,250 --> 00:07:29,490
قلنا إنه للفلاسك تخفيفه 1 إلى 10 بأخد منه 1
99
00:07:29,490 --> 00:07:32,610
مل بدي أحطه على أول التيوب، كيف بدي أخد الـ 1 مل
100
00:07:32,610 --> 00:07:37,030
بأشيل السلفان عن الفلاسك بعقم الفوهة على اللهب
101
00:07:37,030 --> 00:07:42,250
فبسحب 1 مل باستخدام تيب معقّم، بعقم الفوهة ثاني
102
00:07:42,250 --> 00:07:46,270
أو بسكر بالسلفان، بروح على أول تيوب بافتح عنه
103
00:07:46,270 --> 00:07:50,930
القطن سواب، بعقم، بحط فيه الـ 1 مل، بعقم ثاني و
104
00:07:50,930 --> 00:07:56,890
بسكر، تمام، هيك قداش صار عندي الـ dilution في التيوب
105
00:07:56,890 --> 00:08:01,550
الأول، التيوب الأول لحاله تخفيفه صار 1 مل حطينا
106
00:08:01,550 --> 00:08:04,670
عليه، دي هي الـ sample و9 مل من الـ diluent، صار 1
107
00:08:04,670 --> 00:08:09,390
على 9، صار 1 إلى 10، بس أنا هاي الـ 1 مل كنت ماخدها
108
00:08:09,390 --> 00:08:14,470
من الـ flask لتخفيفه 1 إلى 10، معناته الـ total
109
00:08:14,470 --> 00:08:18,930
dilution للتيوب رقم 1، تخفيفه في تخفيف التيوب اللي
110
00:08:18,930 --> 00:08:24,270
قبله، 1 إلى 10 في 1 إلى 10، صار تخفيف للـ tube الأول 10
111
00:08:24,270 --> 00:08:29,470
أس سالب 2، بالـ marker بكتب عليها 10 أس سالب 2، أنا
112
00:08:29,470 --> 00:08:35,630
حطيت 1 مل، تمام، هل بينفع أخد الـ 1 مل مباشرة وأحطه
113
00:08:35,630 --> 00:08:40,250
على الـ tube الثاني؟ طبعاً لا، لازم أعمل mix، بعمل mix
114
00:08:40,250 --> 00:08:44,850
مظبوط باستخدام جهاز اسمه الـ vortex، بحطه على الـ
115
00:08:44,850 --> 00:08:49,880
vortex، بيعمل mix للعينة، بعدين بروح أفتح الـ cotton
116
00:08:49,880 --> 00:08:53,860
swab على الـ tube الأول، بعقم الفوهة، بأخد 1 مل
117
00:08:53,860 --> 00:08:58,600
بعقم ثاني وبسكر، وبروح على الـ tube الثاني بحط
118
00:08:58,600 --> 00:09:04,540
عليه الـ 1 مل، صار عندي الـ volume لـ أول الـ tube صار
119
00:09:04,540 --> 00:09:08,040
فيه بس 9 مل، لأن أنا سحبت منه مل وأديته على الـ
120
00:09:08,040 --> 00:09:11,970
tube الثاني، طيب، التيوب الثاني صار فيه 9 مل من الـ
121
00:09:11,970 --> 00:09:15,430
Normal Saline و1 مل اللي أخدته من التيوب رقم 1،
122
00:09:15,430 --> 00:09:20,170
يعني صار فيه 10 مل، قداش الـ Concentration أو الـ
123
00:09:20,170 --> 00:09:24,710
Dilution، 1 على 9، 1 إلى 10، بس أنا هاي الـ 1
124
00:09:24,710 --> 00:09:29,110
ماخده من التيوب، تخفيفه 10 أس سالب 2 أصلاً، فبالتالي تخفيف
125
00:09:29,110 --> 00:09:33,940
التيوب الثاني في تخفيف التيوب اللي قبله، صار 1
126
00:09:33,940 --> 00:09:37,160
إلى 10 في 1 إلى 100، صار تخفيفه 10 أس سالب 3
127
00:09:37,160 --> 00:09:41,200
أو 1 إلى 1000، فبكتب عليه بالـ marker 1 إلى 1000، بعدين
128
00:09:41,200 --> 00:09:43,260
بروح أخد 1 ml من الـ tube الثاني على الـ tube
129
00:09:43,260 --> 00:09:47,740
الثالث، صار عند الـ volume في الـ tube الثاني صار فيه
130
00:09:47,740 --> 00:09:52,360
شو؟ 9 ml، فبضطر أخد أخد 1 ml بديّه في آخر tube
131
00:09:52,360 --> 00:09:55,000
حيصير عندي إنه 9 ml و1 ml جبناها من الـ
132
00:09:55,000 --> 00:09:59,540
tube الثالث، شو بدي أعمل؟ بعمل mix وبعدين بتخلص من
133
00:09:59,540 --> 00:10:05,730
1 ml، هاي اسمها الـ serial dilution، تخفيف أي
134
00:10:05,730 --> 00:10:10,410
تيوب هو تخفيفه مضروب تخفيف التيوب اللي قبله، بعد
135
00:10:10,410 --> 00:10:14,850
هيك من كل تخفيف بروح أخد 100 microliter أو 0.1
136
00:10:14,850 --> 00:10:20,850
مل، هي هي وبزرعها على طبق فيه nutrient agar، بتكون
137
00:10:20,850 --> 00:10:25,910
عندي الـ media solid متصلبة وجاهزة، باستخدام tip
138
00:10:25,910 --> 00:10:30,470
معقّم، بأخد 100 micro من كل تيوب وبحطه على الطبق
139
00:10:30,470 --> 00:10:34,380
لقباله، وبكتب بالـ marker 10 أس سالب 2، 10
140
00:10:34,380 --> 00:10:38,180
أس سالب 3، 10 أس سالب 4، طبعاً بحطه في النص
141
00:10:38,180 --> 00:10:41,180
الـ 100 microliter بحطه في النص، بعدين بروح أجيب ال
142
00:10:41,180 --> 00:10:45,560
spreader أو الـ قلشاب، بعقمه كيف قلنا، بنعقم في
143
00:10:45,560 --> 00:10:49,780
الكحول، وبعدين بمرره على اللهب، بحطه على عينتي، و
144
00:10:49,780 --> 00:10:53,040
بقفرده على الطبق كمان
145
00:10:54,680 --> 00:10:59,720
صار عندي أربع تخفيفات أو أربع تيوبات، كل تيوب فيه
146
00:10:59,720 --> 00:11:03,780
له قبلات على التخفيف اللي له، طب احنا قلنا بنعمل
147
00:11:03,780 --> 00:11:08,660
marker على الـ ... للتيوب على ظهره، بكتب عشرة أقصر
148
00:11:08,660 --> 00:11:13,280
بتنين، عشر أقصر، بتلاتة، تمام، بقى بتركه شوية، بعد فترة
149
00:11:13,280 --> 00:11:17,920
بقلبه بحيث أنه تكون الغطاية لتحت، inverted position
150
00:11:17,920 --> 00:11:22,180
أو بسميها upside down، بقلبه وبحطه في الـ incubator
151
00:11:22,180 --> 00:11:28,950
هو مقلوب، بخليه 24 hour على درجة حرارة 37، طيب ليش
152
00:11:28,950 --> 00:11:32,050
بصبر عليها شوية؟ طب أنا كان بإمكاني أنه أزرع و
153
00:11:32,050 --> 00:11:36,450
أقلبه مباشرة، لو قلبته على طول، فكل اللي أنا حاطيته
154
00:11:36,450 --> 00:11:39,690
أو كل اللي زرعته هينزل تاني على الغطاء، ومعناته مش
155
00:11:39,690 --> 00:11:44,650
راح يتكون عندي كلونيات خالص، احنا قلنا بدي نزرع
156
00:11:44,650 --> 00:11:48,030
اليوم على الـ Nutrient Agar، طيب لو أنا كنت حابة أنه
157
00:11:48,030 --> 00:11:51,430
أنمي نوع واحد من البكتيريا والآخر مثلا الـ staph
158
00:11:51,430 --> 00:11:54,220
aureus، شو اللي راح يختلف عندي في التقنية بتاعت
159
00:11:54,220 --> 00:11:58,280
اليوم؟ راح أعمل تخفيف للعينة عادي جدا باستخدام
160
00:11:58,280 --> 00:12:01,420
Normal Saline، راح أعمل Serial Dilution عادي جدا
161
00:12:01,420 --> 00:12:05,170
عادي جدا، لكن الاختلاف اللي هيكون فقط في الـ Media
162
00:12:05,170 --> 00:12:08,750
في الوسط اللي راح أستخدمه، لإن بستخدم الـ Media حسب
163
00:12:08,750 --> 00:12:12,130
نوع البكتيريا اللي بدي أنميها، فلو بدي أنمي جميع
164
00:12:12,130 --> 00:12:14,950
أنواع البكتيريا، بستخدم General Media، ما فيش فيها
165
00:12:14,950 --> 00:12:17,750
Inhibitors، لو بدي أنمي نوع معين من البكتيريا
166
00:12:17,750 --> 00:12:21,090
بستخدم Media بحيث أنها تعمل Inhibition لأي نوع
167
00:12:21,090 --> 00:12:26,010
ثاني، طيب، ممكن تجينا عينات لحمة، شو بدي أعمل فيها؟
168
00:12:26,010 --> 00:12:29,190
أو كيف بدي أشتغل عينات اللحمة؟ أولا من ناحية الـ
169
00:12:29,190 --> 00:12:31,610
Sample، you know، أنت بدي أخد من أكثر من مكان،
170
00:12:31,610 --> 00:12:38,040
بعدين؟ بأحطها في الـ «blender» أو الـ «stomacher»
171
00:12:38,040 --> 00:12:41,240
حتى أطحنها من solid إلى liquid، بحط عليها الـ
172
00:12:41,240 --> 00:12:46,100
«diluent»، لكن إلا يعني ما تظل عندي جزيئات كثير
173
00:12:46,100 --> 00:12:49,960
صغيرة، فباجي أزرع منها على الطبق، فبفكر هذه
174
00:12:49,960 --> 00:12:52,440
الجزيئات إنها كولونيات، لكن هي بالأساس بتكون
175
00:12:52,440 --> 00:12:56,220
particles من اللحمة، فهي بيسميها «interfering
176
00:12:56,220 --> 00:13:00,450
particles»، شغلات ممكن تتدخل معي مع عد الكولونيات، كيف
177
00:13:00,450 --> 00:13:04,410
بدي أتخلص منها؟ بقول لي عندي طريقتين لأتخلص من
178
00:13:04,410 --> 00:13:08,550
الـ interfering particles، الطريقة الأولى أن ممكن أعمل
179
00:13:08,550 --> 00:13:14,230
طبقين لكل تخفيف لـ tube، الأول بحط له طبقين، باخد 100
180
00:13:14,230 --> 00:13:18,850
micro على أول طبق وبزرع، بعدين باخد كمان 100 micro
181
00:13:18,850 --> 00:13:21,630
على الطبق الثاني وبزرع، هم الاثنين تخفيفهم عشرة
182
00:13:21,630 --> 00:13:26,590
أضعاف بإثنين، لكن الاختلاف اللي يصير، في طبق بحطه في
183
00:13:26,590 --> 00:13:29,770
الثلاجة أو طبق بحطه في الـ incubator، احنا عارفين
184
00:13:29,770 --> 00:13:32,630
لو بدنا نمي البكتيريا ونوفر لها الظروف من ناحية
185
00:13:32,630 --> 00:13:37,150
الحرارة، بدي أحطها في الـ incubator، لو حطيت الطبق
186
00:13:37,150 --> 00:13:41,390
في الثلاجة، مش راح تنمو البكتيريا، في الطبق هذه
187
00:13:41,390 --> 00:13:45,750
اللي في الثلاجة، لو لقيت أي شيء على الـ media،
188
00:13:45,750 --> 00:13:48,490
معناته هذه، على الأكيد بدها تكون interfering
189
00:13:48,490 --> 00:13:53,450
particles، لأن البكتيريا ما بتنمو في الثلاجة، تمام؟
190
00:13:54,080 --> 00:13:58,820
فبروح بحدد مكان الـ interfering particles، حجمها،
191
00:13:58,820 --> 00:14:02,480
عددها وبقارنهم مع الـ plate اللي كان في ال
192
00:14:02,480 --> 00:14:07,820
incubator وبأطرحهم من بعض، الطريقة الثانية ممكن بعد
193
00:14:07,820 --> 00:14:11,360
ما أزرع البكتيريا وأطلعها وأطلعها من الـ incubator
194
00:14:11,360 --> 00:14:16,040
قبل اللي قاعد لسه، شو بعمل؟ بأضيف 2 مل من مادة اسمها
195
00:14:16,040 --> 00:14:25,410
2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride، هي المادة
196
00:14:25,410 --> 00:14:29,310
عندها القدرة إنها ترتبط بالبكتيريا وتلونها للون
197
00:14:29,310 --> 00:14:32,930
أحمر، فباجي عندي هناك في الطبق، بتطلع اللي لونها
198
00:14:32,930 --> 00:14:36,650
أحمر بدها تكون high colonies، فبعدها اللي مش ملونة
199
00:14:36,650 --> 00:14:40,330
هي بدها تكون interfering particles، طيب شو سبب
200
00:14:40,330 --> 00:14:45,110
اللون الأحمر اللي عندها؟ بقول لي الـ TTC تيجي
201
00:14:45,110 --> 00:14:50,150
البكتيريا بتعمل لها reduction، اختزال، بتحولها إلى
202
00:14:50,150 --> 00:14:53,670
مادة اسمها الـ Formazan وهي لونها أحمر، يعني الـ
203
00:14:53,670 --> 00:14:58,330
TTC بيصير لها reduction بوسط البكتيريا بتتحول إلى
204
00:14:58,330 --> 00:15:04,470
Formazan وهي لونها أحمر، لكن في مشكلة بتواجهني لما
205
00:15:04,470 --> 00:15:08,090
أستخدم الـ TTC أنه ما بقدر أستخدم الـ colonies
206
00:15:08,090 --> 00:15:13,390
المعادلة بالـ TTC for isolation and identification
207
00:15:13,390 --> 00:15:17,170
of bacteria، لو عندي نوع بكتيريا وبدي أعرف شو هي
208
00:15:17,170 --> 00:15:21,810
البكتيريا بالضبط، شو اسمها؟ ما بقدر أجري عليها ال
209
00:15:21,810 --> 00:15:26,390
biochemical test، ما بنفع طول ما هي فيها TTC، ما
210
00:15:26,390 --> 00:15:30,680
بنفعليش؟ لأن البكتيريا أو الـ colonies هتكون فقدت
211
00:15:30,680 --> 00:15:35,200
بعضًا من خصائصها وبالتالي هتعطيني نتائج غير صحيحة
212
00:15:35,200 --> 00:15:38,060
فمشان أشتغل الـ biochemical test أو ال
213
00:15:38,060 --> 00:15:41,400
identification بشكل عام، لازم أنها تكون الـ colonies
214
00:15:41,400 --> 00:15:45,660
fresh، مش معالجة خالص، يعني ما فيش عليها أي مادة، هيك
215
00:15:45,660 --> 00:15:49,040
تقريبًا بنكون خلصنا المحاضرة، وحاليًا بدي نمشي على ال
216
00:15:49,040 --> 00:15:50,060
slides، على السريع
|