63.-Deficiencia GLUT1

Los estudios de captación de eritrocitos y fibroblastos 3-OMG revelan una actividad reducida de Glut1.

Se realizó un estudio donde se evalúa el efecto de la cafeína y la teofilina en el transporte de glucosa mediado por Glut1,en el cual los  resultados confirman los riesgos hipotéticos que estos compuestos plantean para los pacientes con Glut1DS.

metodos: Se obtuvieron muestras de sangre de cuatro pacientes diagnosticados con Glut1DS. Se utilizaron muestras de madres ( *n* = 4) como controles intraensayos.Los cuatro pacientes informados en este estudio tienen mutaciones heterocigotas (un alelo normal y un alelo mutante) en el gen GLUT1 . El paciente 1 tiene hemicigosis GLUT1. Los pacientes 3 y 17 tienen mutaciones heterocigotas heterocigotas en diferentes ubicaciones del gen, mientras que el paciente 15 tiene una mutación heterocigótica de inserción.

### **Entrada de eritrocitos 3-OMG.**

La captación de Cero-trans 3-OMG se determina en cuatro pacientes para confirmar el diagnóstico clínico de Glut1DS. Las muestras de las madres sirven como controles normales. La captación de 3-OMG se expresa como el logaritmo natural de la relación de radioactividad intracelular en cada punto de tiempo y en el equilibrio en *función del*tiempo ( Fig. 1 ). Los cuatro pacientes muestran disminución (paciente 1, 51%; 3, 45%; 15, 31%; 17, 52%) de la captación de 3-OMG en comparación con los controles.

### Curso temporal de la afluencia de 3-OMG en presencia y ausencia de cafeína.

Para decidir el intervalo de captación adecuado, se siguió el curso temporal de la captación de 3-OMG durante un período de 25 s. La concentración de 3-OMG (5 mM) se aproxima a la concentración de d-glucosa en sangre. La inhibición de la captación de glucosa se observa dentro de los 5 s de la incubación con cafeína 3 mM, como se muestra en la Figura 2 *A* (paciente 1 y control materno 1). El recuadro muestra los datos agrupados de observaciones similares en tres pacientes (1, 3 y 17) y tres controles maternos (1, 3 y 17).  La cafeína  altera los valores de captación de 3-OMG tanto en los controles como en los pacientes. DHA, también transportado por Glut1 , demuestra una inhibición similar por la cafeína. Se muestra en la Figura 2 *B*La coincubación de 15 s con 3 mM de cafeína disminuye significativamente la captación de DHA por eritrocitos tanto en el paciente 1 como en el control materno 1.

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Influencia de la concentración de cafeína en la entrada de trans-cero 3-OMG.

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La Figura 3A muestra que, tanto en controles como en pacientes, la
cafeína aparentemente inhibe la captación de glucosa en concentraciones de 1 mM y superiores. Esto es similar a la concentración mínima (1 mM) requerida para la inhibición con fenobarbital (18). A concentraciones más altas de cafeína, el influjo de 3-OMG se inhibe cada vez más. En los pacientes, incluso las bajas concentraciones de cafeína inhiben el influjo de 3-OMG El influjo de 3-OMG en los eritrocitos de los pacientes se inhibe aún más del 10 al 18% del valor de control materno de referencia.

El influjo de 3-OMG fue inhibido por la cafeína en una forma hiperbólica dependiente de la dosis.

**Efectos de la cafeína en la cinética de afluencia cero-trans 3-OMG**

La adición de cafeína 3 mM a los eritrocitos inhibe la entrada de 3-OMG al disminuir predominantemente la *V*Valores máximos en controles maternos y pacientes ( fig. 4 , *A – C* ). Los datos individuales para *V*max aparente y *Km* valores se resumen en la Figura 4 , *D* y *E* . *Los* valores *V*max se reducen significativamente en todos los sujetos, mientras que la disminución en los valores de *K m* es significativa solo en los tres controles maternos y el paciente 3.

**El fenobarbital no potencia significativamente la inhibición de la cafeína en la captación de 3-OMG.**

La comparación de la Figura 5 , *A* y *B* revela la menor captación de 3-OMG esperada en el paciente en
comparación con el control en ausencia de cafeína o fenobarbital. De acuerdo con los resultados anteriores, la adición de cafeína o fenobarbital solo inhibe sustancialmente la captación de 3-OMG tanto en el paciente ( Fig. 5 *A* ) como en el control materno ( Fig. 5*B* ). La combinación de cafeína y fenobarbital aumenta ligeramente la inhibición en comparación con cada compuesto solo. Esta inhibición adicional, sin embargo, no es estadísticamente significativa.