Serie Generale n. 113 del 17-5-2005
DECRETI, DELIBERE E ORDINANZE MINISTERIALI
MINISTERO DELLA SALUTE
MINISTERO DELLA SALUTE
DECRETO 4 marzo 2005
Revisione dei medicinali per uso veterinario. (GU Serie Generale n.113 del 17-05-2005)

IL MINISTRO DELLA SALUTE

Visto il testo unico delle leggi sanitarie, approvato con regio
decreto il 27 luglio 1934, n. 1265, e successive modifiche;
Visto l'art. 29 della legge 23 dicembre 1978, n. 833, e successive
modifiche;
Visto l'art. 16 del decreto legislativo 29 maggio 1991, n. 178, e
successive modifiche;
Visto il decreto legislativo 27 gennaio 1992, n. 119, e successive
modifiche;
Visto il regolamento (CEE) n. 2377/90 del Consiglio, del 26 giugno
1990, che definisce una procedura comunitaria per la determinazione
dei limiti massimi di residui dei medicinali veterinari negli
alimenti di origine animale;
Considerato che negli ultimi anni la Commissione europea ha
definito i limiti massimi residuali per i principi attivi utilizzati
nei medicinali per uso veterinario destinati alle specie da reddito
al fine di consentire il monitoraggio dei residui nei tessuti ed
organi degli animali trattati e la definizione di adeguati tempi di
sospensione;
Tenuto conto che, per i medicinali per uso veterinario autorizzati
prima dell'entrata in vigore dei limiti massimi residuali definitivi
su richiamati, i tempi di sospensione potrebbero non essere adeguati;
Ritenuto, pertanto, necessario procedere ad una verifica
dell'innocuità e dell'efficacia dei medicinali per uso veterinario
attualmente autorizzati;
Rilevato che, nelle more della procedura di revisione non è
possibile, per ragioni di tutela del benessere animale, diminuire la
disponibilità di presidi terapeutici indispensabili alla cura degli
animali;
Ritenuto, altresì, necessario tutelare la salute del consumatore
di prodotti di origine animale stabilendo tempi di sospensione
cautelativi;
Sentita la Commissione consultiva del farmaco veterinario, di cui
all'art. 17-bis del decreto legislativo del 9 aprile 2003, n. 71,
che, convenendo sulla necessità di fissare tempi di sospensione
cautelativi da applicare d'ufficio ai medicinali per uso veterinario
autorizzati o, comunque, immessi in commercio alla data del
1° gennaio 2000, ha elaborato la proposta degli stessi;
Acquisito il parere favorevole del Consiglio superiore di sanità,
espresso nella seduta della IV sezione, riunitasi in data 22 dicembre
2004;
Decreta:

Art. 1.
1. È disposta la revisione di tutti i medicinali per uso
veterinario destinati alle specie produttrici di alimenti per il
consumo umano autorizzati o, comunque, immessi in commercio alla data
del 1° gennaio 2000.
2. I titolari delle autorizzazioni all'immissione in commercio dei
medicinali di cui al comma 1 devono presentare al Ministero della
salute - Dipartimento della prevenzione e della comunicazione -
Direzione generale della sanità veterinaria e degli alimenti -
Ufficio XI, un dossier predisposto come indicato nel presente
decreto.
3. I dossiers di cui al comma 2 sono presentati secondo il
calendario riportato in allegato 1.
4. Sono esclusi dall'applicazione del presente decreto i medicinali
per uso veterinario per i quali sono già stati autorizzati i
relativi tempi di sospensione a seguito della presentazione di studi
di deplezione residuale, condotti tenendo conto dei limiti massimi
residuali definitivi previsti per il principio attivo o i principi
attivi presenti nella composizione, stabiliti dal regolamento (CE)
2377/90 del Consiglio ed effettuati secondo le linee guida
comunitarie attualmente in vigore. I titolari delle autorizzazioni
all'immissione in commercio di detti medicinali devono dichiarare, ai
fini dell'esclusione, la sussistenza delle condizioni del presente
comma.
5. Ove il medicinale per uso veterinario sia autorizzato anche per
specie animali non da reddito, si applica integralmente il comma 1,
salvo che il titolare dell'autorizzazione all'immissione in commercio
non presenti, secondo le procedure in vigore, apposita domanda di
modifica degli stampati al fine di separare le confezioni destinate
agli animali da reddito da quelle destinate agli animali da
compagnia.

Art. 2.
1. La documentazione tecnico-scientifica inerente i medicinali per
uso veterinario di cui all'art. 1 è redatta conformemente
all'allegato I del decreto legislativo 27 gennaio 1992, n. 119, e
successive modifiche ed integrazioni e nel rispetto delle linee guida
emanate in sede comunitaria.
2. La documentazione a sostegno della congruità dei tempi di
sospensione già autorizzati o per il loro adeguamento deve tener
conto dei limiti massimi residuali definiti in sede comunitaria per
ogni sostanza farmacologicamente attiva presente nella composizione
del medicinale.
3. Gli specifici studi sperimentali di deplezione residuale devono
essere condotti secondo quanto indicato nell'apposita linea-guida di
cui all'allegato 2.
4. La documentazione di efficacia clinica deve essere presentata se
sussistono variazioni o carenze negli ultimi stampati autorizzati
rispetto a quanto previsto dalla normativa in vigore per quanto
riguarda le indispensabili informazioni necessarie al fine di una
corretta somministrazione del farmaco. Qualora la documentazione
relativa all'efficacia clinica sia presentata in forma bibliografica,
comunque strettamente attinente alle caratteristiche del prodotto, al
dossier deve essere acclusa la bibliografia di riferimento,
approntata in modo da consentire un'agevole consultazione.
5. La documentazione di tecnica farmaceutica deve essere presentata
a seguito di carenze evidenziate sugli stampati approvati che non
consentano un corretto impiego del medicinale.

Art. 3.
1. La valutazione della documentazione tecnico-scientifica è
effettuata avvalendosi della Commissione consultiva del farmaco
veterinario di cui all'art. 17-bis del decreto legislativo 27 gennaio
1992, n. 119, e successive modifiche ed integrazioni. L'ufficio
competente si riserva di richiedere, ove necessario, una
documentazione integrativa.

Art. 4.
1. Sono, altresì, stabiliti per i medicinali per uso veterinario
di cui all'art. 1 tempi di sospensione cautelativi, calcolati secondo
quanto riportato nella tabella di cui all'allegato 3.
2. Le ditte titolari delle autorizzazioni all'immissione in
commercio dei medicinali per uso veterinario di cui al comma 1
devono, entro sei mesi dalla data di pubblicazione del presente
decreto, modificare quanto riportato negli stampati illustrativi
autorizzati, aggiornando il materiale di confezionamento e
l'eventuale foglietto illustrativo con i tempi di sospensione
cautelativi. È cura delle ditte stesse assicurare che siano
intraprese tutte le misure necessarie affinchè non entrino nel
circuito commerciale, alla scadenza dei sei mesi previsti, medicinali
per uso veterinario non conformi a quanto disposto dal presente
comma.
3. In deroga a quanto previsto al comma 1, le ditte che possono
dimostrare, entro trenta giorni dalla data di pubblicazione del
presente decreto, di aver effettuato, per uno o più medicinali per
uso veterinario di cui sono titolari dell'autorizzazione
all'immissione in commercio, appositi studi sperimentali di
deplezione residuale o, comunque, di averli in esecuzione o
commissionati ad un idoneo laboratorio/centro, sono esentate, per
tali medicinali, dall'applicazione dei tempi di sospensione
cautelativi di cui al comma 1.
4. Entro sessanta giorni dalla pubblicazione del presente decreto
è pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana
l'elenco dei medicinali per uso veterinario per i quali sono
definiti, per ciascuna specie di destinazione produttrice di alimenti
di origine animale autorizzata, i tempi di sospensione cautelativi di
cui al comma 1. Detti tempi di sospensione devono essere applicati
dai medici veterinari prescrittori a partire dal quindicesimo giorno
dalla pubblicazione dell'elenco.
5. Il Ministero della salute provvederà alla più ampia
diffusione, anche tramite le organizzazioni dei veterinari e le
associazioni di categoria, delle disposizioni di cui al presente
decreto, in particolare ai fini dell'applicazione del comma 4 del
presente articolo. Le ditte titolari delle autorizzazioni
all'immissione in commercio dei medicinali per uso veterinario per i
quali sono stati definiti i tempi di sospensione cautelativi,
provvedono ad informare in modo efficace e capillare tutte le figure
professionali che operano nel settore del farmaco veterinario al fine
del rispetto dei tempi di sospensione cautelativi stabiliti.
6. I tempi di sospensione cautelativi di cui al comma 1, stabiliti
per uno o più medicinali per uso veterinario, sono aumentati se
dagli esiti della valutazione della documentazione di deplezione
residuale relativa ad un medicinale per uso veterinario avente
composizione sovrapponibile è stato evidenziato un tempo di
sospensione maggiore rispetto a quello cautelativo stabilito.
7. I tempi di sospensione attribuiti ai medicinali per uso
veterinario compresi nell'elenco di cui al comma 4 sono, comunque,
suscettibili di modifica secondo le normali procedure attualmente in
vigore, su richiesta delle ditte titolari dell'autorizzazione
all'immissione in commercio.

Art. 5.
1. Il mancato invio, entro le scadenze indicate nell'allegato 1 al
presente decreto o la non conformità alla linea guida della
documentazione relativa agli studi sperimentali di deplezione
residuale, da parte delle ditte titolari dell'autorizzazione
all'immissione in commercio dei medicinali per uso veterinario che
usufruiscono della deroga prevista dall'art. 4, comma 3 del presente
decreto, comporta la revoca dell'autorizzazione del medicinale, ai
sensi delle disposizioni vigenti.

Art. 6.
1. Il Ministero della salute si riserva di rivalutare, sotto il
profilo della cinetica residuale, i medicinali per uso veterinario ai
quali sono stati applicati i tempi di sospensione cautelativi secondo
quanto previsto dall'art. 4, comma 1.

Art. 7.
1. Il presente decreto è inviato alla Corte dei conti per la
registrazione ed entra in vigore alla data di pubblicazione nella
Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana.
Roma, 4 marzo 2005
Il Ministro: Sirchia

Registrato alla Corte dei conti il 26 aprile 2005

Ufficio di controllo preventivo sui Ministeri dei servizi alla
persona e dei beni culturali, registro n. 2, foglio n. 132

Allegato I

L'invio della documentazione tecnico-scientifica andrà
effettuato entro i tempi sottoindicati per ogni categoria di
medicinale per uso veterinario, a partire dalla pubblicazione del
presente decreto:
entro trentasei mesi: medicinali per uso veterinario contenenti
principi attivi ad attività antibatterica (ad esclusione dei
preparati per uso orale);
entro quarantadue mesi: medicinali per uso veterinario
contenenti principi attivi ad attività antinfiammatoria;
entro quarantotto mesi: medicinali per uso veterinario
contenenti principi attivi ad attività sistemica antiparassitaria.
entro cinquantaquattro mesi: principi attivi ad attività
antibatterica per uso orale, premiscele per alimenti medicamentosi e
medicinali veterinari prefabbricati.
Il Ministero della salute si riserva di richiedere in tempi
successivi la documentazione tecnico-scientifica relativa ad altre
tipologie di medicinali per uso veterinario per le quali, in base ad
una analisi del rischio, si renda necessario un approfondimento
relativo agli aspetti di deplezione residuale, di efficacia clinica o
di tossicità.

Allegato II

LINEE GUIDA

Proposta di linea guida per l'esecuzione di studi di deplezione
residuale in specie animali destinate alla produzione di alimenti per
l'uomo.

Scopo e campo di applicazione.

La presente linea guida ha lo scopo di raggruppare le indicazioni
presenti nella normativa europea circa i requisiti degli studi di
deplezione residuale eseguiti in specie animali produttrici di
alimenti destinati all'uomo e di integrare tali indicazioni in modo
da consentire una omogeneità nei criteri con cui vengono allestite e
condotte queste sperimentazioni. In particolare risponde alla
necessità di sviluppare le problematiche derivanti dagli aspetti
peculiari della realtà zootecnica italiana, quali ad esempio
l'allevamento cunicolo e di selvatici.
Le indicazioni fornite dalla presente linea guida si applicano a
tutti gli studi finalizzati a determinare il tempo di sospensione dei
medicinali veterinari destinati ad essere immessi in commercio, siano
essi sotto forma di specialità, medicinale veterinario prefabbricato
o di premiscela per alimenti medicamentosi.

Normativa di riferimento:

1) decreto del Presidente della Repubblica n. 236/1988
attuazione della direttiva n. 80/778/CEE concernente la qualità
delle acque destinate al consumo umano;
2) regolamento (CEE) n. 2377/90 del Consiglio, del 26 giugno
1990, che definisce una procedura comunitaria per la determinazione
dei limiti massimi di residui di medicinali veterinari negli alimenti
di origine animale;
3) decreto-legge n. 116/1992 attuazione della direttiva n.
86/609/CEE in materia di protezione degli animali utilizzati a fini
sperimentali o ad altri fini scientifici;
4) decreto-legge n. 119/1992 attuazione delle direttive n.
81/851/CEE, n. 81/852/CEE, n. 87/20/CEE e n. 90/676/CEE relative ai
medicinali veterinari;
5) decreto-legge n. 120/1992 attuazione delle direttive n.
88/320/CEE e n. 90/18/CEE in materia di ispezione e verifica della
Buona pratica di laboratorio (BPL) come modificata dal decreto
ministeriale 2 agosto 1999 disposizioni relative all'ispezione e
verifica della buona prassi di laboratorio in recepimento delle
direttive 1999/11/CE e 1999/12/CE;
6) EMEA/CVMP/036/95-FINAL. Note for guidance: approach towards
harmonisation of withdrawal periods;
7) EMEA/CVMP/153a/97-FINAL. Note for guidance on the
establishment of maximum residue limits for minor animal species;
8) EMEA/CVMP/153b/97-FINAL. Note for guidance on the
establishment of maximum residue limits for Salmonidae and other fin
fish;
9) EMEA/CVMP/473/98-FINAL. Note for guidance for the
determination of withdrawal periods for milk;
10) EMEA/CVMP/187/00-FINAL. Note for guidance on the risk
analysis approach for residues of veterinary medicinal products in
food of animal origin;
11) volume 8 Notice to applicants and note for guidance.
Establishment of maximum residue limits (MRLs) for residues of
veterinary medicinal products in foodstuffs of animal origin.
September 2001;
12) direttiva 2001/82/CE del Parlamento europeo e del Consiglio
del 6 novembre 2001 recante un codice comunitario relativo ai
medicinali veterinari allegato 1. Titolo 1. Parte 3B Studio dei
residui;
13) decisione 2002/657/CE della Commissione del 12 agosto 2002
che attua la direttiva 96/23/CE del Consiglio relativa al rendimento
dei metodi analitici e all'interpretazione dei risultati.

Esecuzione degli studi.

Negli studi di deplezione residuale si possono distinguere due
fasi, una zootecnica e una analitica. La prima si svolge in una
stalla dove gli animali sono mantenuti e sottoposti a trattamento
farmacologico e in un macello autorizzato dove si eseguono i prelievi
dei tessuti e/o organi. In alternativa questa fase può svolgersi
interamente in uno stabulario autorizzato. La fase analitica ha luogo
in un laboratorio di analisi dove vengono eseguite le determinazioni
dei residui nei tessuti target. La fase zootecnica deve essere
eseguita presso centri che operino in accordo con le BPL. Gli studi
analitici devono essere condotti presso centri di saggio dotati di
certificazione attestanti le BPL oppure presso strutture pubbliche
(Istituto superiore di sanità, istituti zooprofilattici
sperimentali, università e centri di ricerca) non certificate
secondo le Buone pratiche di laboratorio (BPL), che operino sulla
base dell'osservanza dei criteri sperimentali riportati nella
presente linea guida.
I dati grezzi inerenti sia alla fase zootecnica che a quella
analitica devono essere conservati presso il centro di saggio per
almeno cinque anni.

1. Animali e condizioni di stabulazione.

La normativa europea distingue le specie zootecniche in maggiori
e minori. Questa distinzione è primariamente finalizzata a
facilitare l'iter per la definizione dei limiti massimi di residui
nelle specie cosiddette minori e, anche se non investe direttamente
le modalità di esecuzione degli studi residuali, viene adottata nel
presente documento per facilitare la classificazione.
In questa sezione si affronta fondamentalmente il problema della
numerosità degli animali per gruppo, che varia in funzione della
specie. La normativa europea fornisce raccomandazioni circa il numero
di animali da utilizzare negli studi di deplezione finalizzati alla
definizione dei limiti massimi di residui e solo in alcuni casi
definisce anche il numero di animali da utilizzare negli studi di
deplezione finalizzati a determinare il tempo di sospensione. A
questo fine il numero di animali indicato nella normativa per la
definizione dei limiti massimi di residui va inteso come numero
minimo, tenendo presente che l'approccio statistico alla
determinazione dei tempi di attesa necessita in alcuni casi di un
numero di animali superiore. Anche se mancano ulteriori dettagli,
questo aspetto è sottolineato nel volume 8, pag. 67 (Notice to
applicants and note for guidance. Establishment of maximum residue
limits (MRLs) for residues of veterinary medicinal products in
foodstuffs of animal origin. September 2001). Inoltre, l'inserimento
di alcuni animali in soprannumero rispetto a quello minimo garantisce
inoltre il buon esito dell'esperimento nel caso di episodi di
mortalità o di esclusione dalla prova di soggetti con patologie in
atto.
1.1. Specie maggiori.
Le specie maggiori sono rappresentate da bovini e ovini da carne,
bovini da latte, suini, polli (sia come produttori di carne che di
uova da consumo), salmonidi e api.
1.1.1. Bovini.
All'interno del gruppo dei bovini sono compresi i bovini da latte
e da carne oltre ai vitelli. Nei bovini da latte la deplezione
residuale viene studiata sul latte. In questo caso il numero
raccomandato di animali, per poter eseguire una valutazione
statistica dei risultati e in particolare per definire il limite
superiore di tolleranza della regressione dei residui è di almeno
dicianove animali. Per i vitelli e i bovini da carne sono previsti
gruppi di almeno quattro animali per ogni punto di macellazione.
Un medicinale veterinario destinato al bovino da carne viene in
pratica utilizzato su animali di peso ed età notevolmente variabile.
In questo caso gli animali su cui eseguire lo studio dei residui
devono essere scelti basandosi sulle indicazioni riportate nel foglio
illustrativo e devono comunque essere destinati alla produzione della
carne ed essere ruminanti, a meno che non ci siano specifiche
indicazioni per il vitello da latte.
1.1.2. Pecore (da carne).
Sono previsti almeno quattro animali per ogni punto di
macellazione.
1.1.3. Suini.
Sono previsti almeno quattro animali per ogni punto di
macellazione.
1.1.4. Polli (carne).
Nel caso di studi di residui nella carne la normativa prevede
almeno sei polli da carne (broiler) per ogni punto di macellazione,
ma è opportuno che il protocollo sperimentale fissi in almeno otto
gli animali di ogni singolo gruppo. Questa prassi tutela il buon
esito dell'esperimento nel caso si verifichino episodi di mortalità
o si sia costretti a escludere, per motivazioni diverse, degli
animali dalla sperimentazione.
1.1.5. Polli (uova).
Nel caso di studi condotti su ovaiole il numero degli animali
deve essere sufficiente a garantire una produzione di almeno dieci
uova per punto sperimentale: si ritiene di suggerire un approccio
cautelativo che preveda venti animali in ovodeposizione per gruppo.
1.1.6. Pesci (salmonidi).
Sono previsti dieci animali per ogni punto di osservazione. Anche
in questo caso si ritiene opportuno aumentare a tredici-quindici
animali il numero dei soggetti trattati per ogni tempo di
macellazione; ciò al fine di tutelare il buon esito della
sperimentazione nel caso si verifichino episodi di mortalità o si
sia costretti a escludere, per motivazioni diverse, degli animali
dalla sperimentazione. In genere si prevede l'impiego di pesci di
circa 200 g.
1.1.7. Api.
Sono previsti trattamenti su almeno cinque alveari con cinque
prelievi da ciascuno di essi ai tempi prestabiliti dal protocollo
sperimentale; i prelievi del miele saranno fissati in base al momento
in cui è stato fatto il trattamento e all'andamento della
produzione.
1.2. Specie minori.
Tra le specie minori sono comprese specie ruminanti domestiche e
selvatiche come la bufalina e la caprina (intese come produttrici di
carne e di latte), gli ovini (intesi come produttori di latte, le
specie aviarie diverse dal pollo (intese come produttrici di carne e
di uova), le specie ittiche non-salmonidi ed altre specie come quella
equina e quella cunicola. Non esistono indicazioni precise circa la
numerosità dei gruppi sperimentali negli studi di deplezione
residuale sulle specie minori. Si ritiene però che possano essere
estesi i criteri adottati per quelle maggiori, come specificato in
tabella.

=====================================================================
Specie maggiore di | |
riferimento | Specie minore | N. animali per gruppo
=====================================================================
|Altri ruminanti |
|(caprini da carne, |
Bovini (carne) |bufali, ecc.) |4 (consigliati 5)
---------------------------------------------------------------------
|Altri ruminanti |
|(ovini, caprini, |
Bovini (latte) |bufalini, ecc.) |19
---------------------------------------------------------------------
|Altri volatili |
|(tacchini, fagiani, |
|quaglie, selvaggina da|6 (consigliati 8); per
Polli |penna, struzzo) |le uova raccomandati 20
---------------------------------------------------------------------
Bovini |Equini |4
---------------------------------------------------------------------
Monogastrici |Conigli |6 (consigliati 8)*
---------------------------------------------------------------------
Salmonidi |Altri pesci |10 (consigliati 13-15)

* Le specie maggiori di riferimento per il coniglio
sono quelle monogastriche; ne consegue che la
sperimentazione deve prevedere almeno quattro animali per
ogni tempo di macellazione. Le dimensioni dei soggetti
appartenenti alla specie cunicola e la possibilità di
stabulazione in spazi relativamente limitati consente però
di aumentare il numero di animali per ogni punto di
macellazione a sei-otto, in modo da consentire la
disponibilità di un numero maggiore di dati che permettano
una più agevole valutazione dei risultati dello studio ed
una più idonea proposta di tempo di sospensione.

Si sottolinea inoltre che un aumento del numero dei soggetti è
particolarmente importante in questa specie in considerazione della
criticità di allevamento e della peculiare sensibilità a patologie
diverse.
1.3. Condizioni di stabulazione.

1.3.1. Tipo di stabulazione.

Il tipo di stabulazione deve riproporre, per quanto possibile, le
abituali condizioni di allevamento. Pertanto, in assenza di adeguate
e reali motivazioni, è preferibile non ricorrere all'impiego di
gabbie da stabulario. Inoltre, qualora esistano diverse tipologie di
allevamento, quella riproposta dovrebbe essere quella che presenta la
massima possibilità di contatto tra gli animali e gli escrementi
tramite i quali il farmaco somministrato ed i suoi eventuali
metaboliti vengono eliminati.
Ad esempio, per il suino la stabulazione a terra rispetto a
quella su grigliato appare più «sfavorevole» all'allontanamento dei
residui, e quindi uno studio eseguito in queste condizioni dovrebbe
fornire risultati in grado di garantire una maggiore tutela della
salute del consumatore. In ogni caso il tipo di stabulazione deve
essere conforme alle disposizioni vigenti sul benessere animale.

1.3.2. Identificazione degli animali.

Gli animali devono essere identificati singolarmente, con marca
auricolare, tatuaggio od appositi bracciali, anche se mantenuti in
box multipli. Questa misura, che per alcune specie rappresenta già
una pratica zootecnica, consente un maggiore controllo sugli animali
in esperimento durante lo svolgimento della prova.

1.3.3. Alimentazione e abbeverata.

Durante il periodo di acclimatamento e quello di sperimentazione
deve essere utilizzato il medesimo mangime impiegato nell'allevamento
di provenienza degli animali, in modo da minimizzare lo stress
conseguente al trasporto e al cambio di ambiente.
Le caratteristiche chimico-fisiche dell'acqua sono importanti
quando la somministrazione del farmaco avviene tramite sua
solubilizzazione nell'acqua di abbeverata. Conoscerne una serie di
parametri quali pH; durezza; concentrazioni di nitriti e nitrati,
ammoniaca, calcio e ferro; conducibilità, può essere d'aiuto nella
valutazione dell'idoneità del trattamento. È opportuno indagare
questi aspetti anche, ad esempio, durante il periodo di
acclimatamento degli animali.
Nell'allevamento del coniglio per ottenere elevati incrementi
ponderali è prassi abituale l'utilizzo di un'acqua artificialmente
addolcita e/o acidificata; uno studio di deplezione residuale con
somministrazione del medicinale con l'acqua di abbeverata deve tenere
conto di questa prassi zootecnica.

1.3.4. Altri trattamenti.

Normalmente è buona prassi utilizzare animali sani e non
sottoposti ad alcun trattamento farmacologico.
Nell'allevamento del coniglio, del pollo, del tacchino e dei
volatili in generale in molti casi gli animali sono sottoposti per
gran parte del ciclo produttivo a trattamenti con coccidiostatici.
Nel caso il trattamento con coccidiostatici non possa essere
interrotto durante la fase sperimentale, sarà necessario verificare
l'assenza di interferenza analitica del/i coccidiostatico/i con la
determinazione del/i residuo/i marcatore/i.

1.3.5. Determinazione del peso vivo.

Il peso degli animali deve essere determinato all'inizio della
sperimentazione e immediatamente prima dei trattamenti per consentire
la somministrazione della dose preconizzata. Se il trattamento è
ripetuto per 3-5 giorni il peso vivo deve essere determinato anche
alla fine del trattamento. Per durate di trattamento superiori è
necessaria una determinazione del peso vivo a metà circa del periodo
di trattamento finalizzata all'aggiustamento della dose. Un'ultima
pesata deve essere effettuata prima della macellazione. Si ritiene
che 4 rilievi ponderali effettuati per ciascun animale siano
indispensabili per un corretto monitoraggio del metabolismo animale.

1.3.6. Controllo clinico.

Questa tipologia di esperimenti deve essere eseguita su animali
sani. Lo stato di salute degli animali deve pertanto essere
verificato e registrato da un medico veterinario mediante una visita
approfondita al momento dell'arrivo degli animali sul luogo dello
studio e mediante ulteriori controlli a scadenze giornaliere.
Il rilievo clinico di una patologia che investe almeno il 20%
degli animali deve determinare la sospensione e l'invalidamento della
prova.

1.3.7. Periodo di acclimatamento.

Il periodo di acclimatamento è finalizzato a neutralizzare lo
stress da trasporto, a consentire l'eliminazione dei farmaci
eventualmente somministrati nell'allevamento di provenienza e ad
adattare gli animali alla nuova collocazione. La sua durata è
abitualmente fissata in 7 giorni, ma particolari situazioni possono
determinarne un allungamento (ad esempio, uno stress da trasporto
durante la stagione calda o un eventuale trattamento farmacologico
effettuato nell'allevamento di provenienza). Nel coniglio il periodo
di acclimatamento è particolarmente critico per la suscettibilità
di questa specie alle patologie più diverse; in questo caso,
perciò, tale periodo potrà essere di durata più limitata ma
comunque non inferiore ai 5 giorni.
2. Prodotto e trattamento.
In generale deve essere garantita la tracciabilità di tutte le
operazioni effettuate durante la sperimentazione e soprattutto quelle
relative alla determinazione e alla somministrazione della dose
preconizzata. Tutte le operazioni effettuate (come la determinazione
del peso vivo, i dettagli descrittivi della formulazione
farmaceutica, le modalità di preparazione della dose da
somministrare, l'utilizzo delle attrezzature, i controlli e le
verifiche effettuati) devono essere condotte sulla base di scelte
adeguatamente motivate nel protocollo sperimentale e comunque
documentate nel rapporto finale, con lo scopo di permettere un
preciso confronto tra la dose preconizzata e quella effettivamente
assunta dagli animali in esperimento.
2.1. Prodotto.
La Ditta che richiede la prova (committente) deve fornire al
centro di saggio un numero di confezioni di prodotto sufficienti ad
eseguire i trattamenti. Deve fornire inoltre il Certificato di
Analisi del prodotto oggetto della prova e possibilmente anche della
materia prima (principio/i attivo/i). Almeno una confezione, integra
e sigillata, deve essere conservata presso il Centro di saggio per 12
mesi dopo la data di scadenza.
2.2. Trattamenti individuali.
Si tratta in genere di trattamenti intramuscolari. È importante
che il punto in cui viene fatta ogni iniezione sia contrassegnato in
modo indelebile affinchè possa essere identificato al momento del
prelievo. Volumi elevati di soluzione possono essere frazionati e
iniettati in più punti; in caso di ripetizione del trattamento si
esegue l'iniezione in punti diversi. Anche per la somministrazione
sottocutanea deve essere contrassegnato in modo indelebile il sito di
inoculo perchè si possa in seguito prelevare il muscolo sottostante,
I punti d'inoculo dovranno essere quelli abitualmente adottati nella
pratica medico veterinaria per la specie animale oggetto della
sperimentazione.
2.3. Trattamenti di gruppo.
Sono i più frequenti e simulano i trattamenti di massa. In
questo caso, anche se gli animali sono marcati singolarmente, il
calcolo e il controllo del dosaggio non sono individuali ma
rappresentati da valori medi del gruppo. Di ogni gruppo devono essere
determinati il consumo di acqua e/o di mangime almeno una volta al
giorno per tutta la durata del trattamento, in modo da poter
calcolare la dose di farmaco effettivamente assunta.
2.3.1. Somministrazione col mangime.
La quantità di mangime medicato con la premiscela oggetto dello
studio viene preparata o dalla Ditta committente o da un mangimificio
autorizzato e deve essere corredata da certificato di analisi del
titolo del/i principio/i attivo/i.
2.3.2. Somministrazione in acqua di abbeverata o nel mangime
liquido.
La modalità di somministrazione deve riproporre quanto più
possibile le condizioni di allevamento, oltre a riprodurre la
situazione più «sfavorevole» alla deplezione del residuo. In questa
ottica è preferibile evitare di somministrare la dose in poca acqua
ad animali assetati, ma viceversa lasciare a disposizione l'acqua
medicata ad libitum.
L'acqua medicata deve essere rinnovata di volta in volta ed i
residui di acqua medicata non consumati devono essere misurati (per
poter calcolare la dose effettivamente assunta) ed eliminati.
3. Prelievi.
3.1. Punti di macellazione o di prelievo.
I punti di macellazione devono essere previsti in modo che il
tempo di sospensione non debba essere ottenuto per estrapolazione, ma
con una valutazione statistica basata su un'analisi di regressione.
Quindi, bisogna prevedere almeno 3-5 punti, di cui uno rappresentato
da un controllo positivo, cioè da un gruppo macellato subito dopo
l'ultimo trattamento o comunque entro le 24 ore da questo. È molto
importante che sia previsto anche un gruppo di controllo negativo,
ossia un gruppo costituito da animali trattati (relativamente a
stabulazione, alimentazione, ecc.) come gli altri animali oggetto
della prova sperimentale ma che, a differenza di questi, non vengano
sottoposti a trattamento con il farmaco in studio. Il gruppo di
animali controllo negativi deve essere macellato allo stesso tempo
del gruppo di controllo positivo.
Per le uova i punti di prelievo devono tenere conto della
fisiologia della produzione dell'uovo, in particolare del tempo
necessario alla produzione dell'albume e del tuorlo che potrebbero
determinare errori di valutazione se i prelievi non vengono protratti
per un tempo adeguato.
3.2. Tessuti edibili e altri prodotti.
Per la deplezione negli animali da carne si devono effettuare
prelievi dei tessuti marker muscolo, fegato, rene e grasso. Nel caso
della specie suina e del pollo da carne (e quindi anche delle altre
specie aviarie) il grasso è sostituito da pelle e grasso in
proporzioni naturali. Questa espressione fornisce indicazioni molto
sommarie, e in particolare omette di specificare se il grasso debba
essere quello sottocutaneo o quello viscerale o entrambi. Inoltre le
proporzioni tra cute e grasso variano moltissimo sia in funzione
dell'età e dello sviluppo dell'animale, sia della sede anatomica in
cui viene eseguito il prelievo. La presenza della frazione di grasso
è molto importante, soprattutto nel caso di composti liposolubili,
quindi le «proporzioni naturali» devono fare riferimento ad uno
standard stabilito dal Centro di saggio che consenta di ottenere un
campione in cui sono effettivamente rappresentati sia la cute che il
grasso. Nel pollo da carne (broiler) deve essere evitata la cute
della regione sovrasternale per la possibile presenza di lesioni
dovute al decubito sternale, mentre è preferibile la zona
interscapolare.
Nel caso del fegato per organi molto grandi occorre prevedere un
prelievo che interessi una sezione ampia dell'organo, più
rappresentativa di un prelievo eseguito ad esempio all'apice di un
lobo.
Nel pesce devono essere analizzati muscolo e pelle in proporzioni
naturali, lì prelievo si può effettuare nella zona retrobranchiale
raccogliendo entrambe le componenti.
Gli altri prodotti sono rappresentati da latte, uova e miele.
Per l'uovo occorre analizzare tutto l'uovo, cioè tuono e albume
insieme, dal momento che il Limite Massimo di Residui è fissato per
l'uovo in toto.
3.3. Modalità di prelievo.
I quantitativi indicativi dei diversi tessuti e prodotti da
prelevare (in grammi o ml) sono schematizzati nella seguente tabella:

=====================================================================
Mammi|feri | Vola|tili | Pe|sci| A|pi
=====================================================================
| | | |Muscolo + | | |
Muscoli (a)|300 |Muscolo |100 |cute |20 |Miele|50
---------------------------------------------------------------------
| |Grasso + | | | | |
Grasso (b) |50 |cute |50 | | | |
---------------------------------------------------------------------
Fegato (c) |300 |Fegato |tutto | | | |
---------------------------------------------------------------------
Rene |entrambi|Rene |entrambi| | | |

(a) in caso di somministrazione Intramuscolare occorre aggiungere
il prelievo del muscolo in corrispondenza del sito o dei siti di
iniezione.
(b) nel caso del maiale il prelievo è di grasso + cute in
proporzioni naturali: vedi punto 3.2.
(c) per animali di piccola taglia si preleva tutto l'organo.
Il prelievo deve essere eseguito immediatamente dopo la
macellazione e il campione congelato al più presto possibile ed
eventualmente trasportato in seguito al Laboratorio senza
interrompere la catena del freddo. lì campione viene scongelato nel
Laboratorio per poterlo omogeneizzare e suddividere in almeno due
aliquote, una da utilizzare per le analisi e una come campione di
riserva. Entrambe vengono ricongelate fino al momento delle
determinazioni analitiche.
Il miele viene prelevato dal melario in modo sparso su almeno 5
telaini diversi.
3.4. Conservazione dei campioni biologici.
I campioni di materiale biologico devono essere conservati dal
Centro di Saggio fino al momento dell'emissione del rapporto sulla
prova eseguita, dopodichè possono essere distrutti previa
autorizzazione della Ditta committente.
4. Metodica.
Il metodo di analisi utilizzato deve essere descritto in
dettaglio, deve essere convalidato e deve essere in grado di
identificare il/i residuo/i marker indicato/i in Gazzetta Ufficiale
dell'Unione europea secondo i criteri di:
specificità;
linearità;
precisione;
limite di rivelazione (LOD);
limite di quantificazione (LOQ).
Il limite di quantificazione deve normalmente essere pari ad
almeno la metà del LMR definito in sede comunitaria (Position Paper
EMEA/CVMP/247/96-FINAL).
Analisi dei risultati.
I risultati dello studio di deplezione residuale di un medicinale
veterinario sono utilizzati per definire un tempo di sospensione
adeguato affinchè i prodotti di origine animale non contengano
residui superiori ai limiti consentiti, In pratica si deve utilizzare
una sequenza di dati ottenuti in un campione per prevedere il
comportamento di una popolazione. Epreferibile utilizzare pertanto un
approccio statistico, che garantisca un buon risultato di questa
estrapolazione. Di questo approccio bisogna essere già consapevoli
all'atto della stesura del protocollo, nonchè dell'esecuzione della
prova, soprattutto per quanto riguarda la numerosità degli animali
per gruppo e dei punti di prelievo.
Per calcolare il tempo di sospensione i risultati della prova
sperimentale devono essere elaborati secondo quanto previsto dalle
linee guida europee, utilizzando i seguenti software reperibili su
http://www.emea.eu.int/index/indexv1.htm:
EMEA/CVMP/563/02 Updated Application Software relating to Note
for Guidance on Approach towards Harmonisation of Withdrawal Periods
for Meat;
EMEA/CVMP/231/00 Rev. 1 Updated Application Software relating
to Note for Guidance for the Determination of Withdrawal Periods for
Milk.
Nel caso non sia possibile effettuare un'analisi statistica
soddisfacente si ricorda che il tempo di sospensione verrà definito
considerando il tempo di sacrificio in cui i residui rintracciati
sono inferiori al valore di MRL in tutti i tessuti o campioni
analizzati e maggiorando questo tempo del 10-30%, come indicato nel
documento EMEA/CVMP/036/95 Final «Approach towards harmonisation of
withdrawal periods».

Allegato 3

TEMPI DI SOSPENSIONE CAUTELATIVI

CARNI:

=====================================================================
Tempi di sospensione autorizzati | Tempi di sospensione cautelativi
=====================================================================
0-5 giorni -&gt; +5 |(Es. 3 + 5 = 8)
6-14 giorni -&gt; raddoppio |(Es. 11 + 11 = 22)
Oltre 14 giorni -&gt; +14 |(Es. 30 + 14 = 44)

LATTE, CARNI AVICOLE, CONIGLI, UOVA E MIELE:

=====================================================================
Tempi di sospensione autorizzati | Tempi di sospensione cautelativi
=====================================================================
0-6 giorni -&gt; +3 |(Es. 3 + 5 = 8)
7-8 giorni -&gt; +4 |(Es. 7 + 4 = 11)
9-10 giorni -&gt; +5 |(Es. 9 + 5 = 14)
11-12 giorni -&gt; +6 |(Es. 12 + 6 = 18)
Oltre 12 giorni -&gt; +7 |(Es. 16 + 7 = 23)