Serie Generale n. 123 del 28-5-1994
SUPPLEMENTI ORDINARI
MINISTERO DELLE RISORSE AGRICOLE, ALIMENTARI E FORESTALI
MINISTERO DELLE RISORSE AGRICOLE, ALIMENTARI E FORESTALI
DECRETO MINISTERIALE 13 aprile 1994
Approvazione dei "Metodi di analisi per il controllo ufficiale degli alimenti per animali" - Supplemento n. 11. (GU Serie Generale n.123 del 28-05-1994 - Suppl. Ordinario n. 82)

IL MINISTERO DELLE RISORSE AGRICOLE, ALIMENTARI E FORESTALI
DI CONCERTO CON
IL MINISTERO DELLE FINANZE
IL MINISTERO DELLA SANITÀ
IL MINISTERO DELL'INDUSTRIA, COMMERCIO E ARTIGIANATO
Visto il decreto legislativo 3 febbraio 1993, n. 29, concernente
norme per la razionalizzazione dell'organizzazione delle
amministrazioni pubbliche e revisione della disciplina in materia di
pubblico impiego, a norma dell'art. 2 della legge 23 ottobre 1992, n.
421;
Visti l'art. 43 del regio decreto-legge 15 ottobre 1925, n. 2033,
convertito nella legge 18 marzo 1926, n. 562, riguardante la
repressione delle frodi nella preparazione e nel commercio di
sostanze di uso agrario e di prodotti agricoli, l'art. 108 del
regolamento per l'esecuzione dello stesso regio decreto-legge,
approvato con regio decreto 1 luglio 1926, n. 1361, i quali
prescrivono che le analisi occorrenti in applicazione delle norme
contenute nel regio decreto-legge e nel regolamento di esecuzione
suddetti dovranno essere eseguite dai lavoratori incaricati con i
metodi di analisi prescritti da questo Ministero, di concerto con il
Ministero delle finanze, il Ministero della sanità ed il Ministero
dell'industria, del commercio e dell'artigianato;
Visto il decreto ministeriale 9 novembre 1971, nella Gazzetta
Ufficiale della Repubblica italiana n. 308 del 6 dicembre 1971, con
il quale sono stati approvati i "Metodi ufficiali di analisi degli
alimenti per uso zootecnico", modificato ed integrato da ultimo con
decreto ministeriale 22 luglio 1985 - Supplemento n. 8;
Ritenuto necessario aggiornare i metodi di analisi macro e
microscopica approvati con il succitato decreto ministeriale 9
novembre 1971:
Sentito il parere della commissione per l'aggiornamento periodico
dei metodi ufficiali di analisi per i prodotti agrari e le sostanze
di uso agrario - sottocommissione per i mangimi - di cui al decreto
ministeriale 11 febbraio 1981 e successive modificazioni;
Visto l'art. 2 della legge 4 dicembre 1993, n. 491, che istituisce
il Ministero delle risorse agricole, alimentari e forestali;
Decreta:
Art. 1.
1. Sono approvati i "Metodi di analisi per il controllo ufficiale
degli alimenti per animali" descritti nel supplemento n. 11, allegato
al presente decreto.

Art. 2.
1. È abrogata la parte II: analisi macro e microscopica,
descritta nei "Metodi ufficiali di analisi degli alimenti per uso
zootecnico" di cui al decreto ministeriale 9 novembre 1971, citato
nelle premesse.

Art. 3.
1. I metodi di cui all'art. 1 entrano in vigore il giorno
successivo a quello di pubblicazione del presente decreto nella
Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana.
2. I metodi sopracitati sono applicabili al controllo dei prodotti
nazionali.

Art. 4.
Il presente decreto sarà pubblicato nella Gazzetta Ufficiale
della Repubblica italiana.
Roma, 13 aprile 1994
L'ispettore generale capo per la repressione delle frodi del
Ministero
delle risorse agricole, alimentari e forestali
GRIMALDI
Il direttore centrale del dipartimento delle dogane e imposte
indirette del Ministero delle finanze
FAVALE
Il direttore generale dei servizi veterinari del Ministero della
sanità
MARABELLI
Il direttore generale della produzione industriale del Ministero
dell'industria, del commercio e dell'artigianato
AMMASSARI

METODI DI ANALISI PER IL CONTROLLO UFFICIALE
DEGLI ALIMENTI PER ANIMALI
Supplemento n. 11
Metodi di analisi microscopica
PREMESSA
1. Gli ingredienti solidi utilizzati nella produzione dei mangimi,
raramente riconoscibili all'esame macroscopico in quanto costituiti
da materiali frantumati o da polveri fini, possono essere
identificati al microscopio: gli ingredienti di origine
vegetale/animale, in base ai caratteri fisico-morfologici esterni dei
frammenti che li costituiscono e in base alle strutture istologiche
interne che differenziano le specie vegetali e i tessuti animali; i
composti chimici in base ai caratteri esterni e alle proprietà
ottiche dei cristalli, oppure in base alla combinazione della
microscopia con tecniche di microchimica qualitativa adattate per
l'osservazione microscopica.
Nel controllo di qualità degli alimenti zootecnici, la microscopia
costituisce pertanto: 1) una tecnica essenziale per stabilire
l'identità dei mangimi semplici e la composizione delle miscele, in
termini di ingredienti vegetali e animali; per rilevare materiali
estranei, miscelazioni abusive, parti di piante tossiche;
differenziare i materiali naturali dai loro derivati; identificare le
tecnologie di produzione degli ingredienti; 2) una tecnica ausiliare
di identificazione rapida di alcuni prodotti minerali e di alcuni
composti organici.
La microscopia è inoltre utile per accertare le condizioni igieniche
e lo stato di conservazione degli alimenti, attraverso la ricerca e
identificazione di parassiti e di microrganismi dannosi.
Generalmente utilizzata per ricerche qualitative, la microscopia può
essere applicata per valutazioni quantitative di materiali estranei
solidi e dei componenti solidi delle miscele.
2. L'esposizione delle metodiche di analisi è suddivisa in due
parti:
- Parte I, relativa alle tecniche analitiche
- Parte II, descrittiva dei caratteri e delle strutture degli
ingredienti.
PARTE I
TECNICHE ANALITICHE
L'esposizione delle tecniche analitiche è articolata secondo i
seguenti criteri:
1. Microscopi
2. Tecniche microscopiche generali
3. Attrezzature
4. Reagenti
5. Prelevamento del campione di lavoro
6. Esame preliminare
7. Preparazione del campione di analisi
8. Analisi allo stereomicroscopio
9. Analisi al microscopio composto
10. Analisi chimico-microscopica
11. Analisi in fluorescenza
12. Identificazione delle muffe
13. Analisi quantitativa
1 MICROSCOPI
1.1 Nell'analisi di routine, sono utilizzabili due tipi di
microscopio ottico:
1) stereomicroscopio, a luce incidente, che produce una immagine
spaziale dei frammenti ingrandita fino a 50-100 volte. È utile per
gli esami preliminari delle caratteristiche merceologiche generali
dei prodotti, per l'osservazione dei caratteri esterni dei frammenti
e per le valutazioni quantitative;
2) microscopio composto, a luce trasmessa, che consente di osservare
le strutture per trasparenza; le immagini, ingrandite fino a 1000
volte, assumono rilievo per assorbimento differenziale della luce in
funzione delle diverse densità delle strutture. È utile per
esaminare le strutture interne delle particelle.
1.2. Per ricerche particolari, entrambi i microscopi possono essere
temporaneamente convertiti in microscopi in fluorescenza.
2 TECNICHE MICROSCOPICHE GENERALI
2.1 Le tecniche sono basate in generale sul riconoscimento visivo dei
frammenti/strutture degli ingredienti e sulla stima di tali
frammenti/strutture nel complesso del mangime; per i composti
chimici, sono basate in parte sul riconoscimento visivo dei cristalli
e in parte su saggi microchimici di identificazione di ioni o di
complessi.
Una serie di fattori oggettivi può ostacolare l'applicazione delle
tecniche di riconoscimento, per esempio: la variabilità nelle
dimensioni dei frammenti, che possono oscillare da alcuni millimetri
a pochi micron di diametro; la presenza di materiali fini, anche di
disgregazione, che ricoprono i frammenti più larghi rendendoli
talvolta irriconoscibili; l'aggiunta di sostanze leganti, di grassi o
sciroppi, che interferiscono sulle immagini microscopiche; le piccole
quantità con cui alcuni materiali sono introdotti nelle miscele; la
presenza di strutture poco trasparenti, nelle quali non sono
percepibili i dettagli di identificazione; la disomogeneità e
variabilità delle miscele e la complessità di alcune di esse, ecc.
In tali condizioni, l'analisi è facilitata da tecniche ausiliari,
quali: 1) frazionamento/separazione/concentrazione di ingredienti, 2)
rimozione di sostanze interferenti, 3) chiarificazione di tessuti, 4)
messa in risalto di strutture/proprietà ottiche, per mezzo di
colorazioni differenziali/dispositivi ottici addizionali.
2.2 Il procedimento di analisi qualitativa comporta: 1)
l'osservazione allo stereomicroscopio del campione allo stato
originario e l'esame dei materiali grossolani; 2) l'esame dei
materiali fini al microscopio composto; 3) con entrambi gli
strumenti, l'applicazione di saggi di microchimica in luce
fluorescente.
2.3 Le valutazioni quantitative possono essere ottenute, con
l'ausilio di entrambi i microscopi, per mezzo di tecniche anche
integrabili tra di loro: 1) estrazione e pesata di frammenti; 2)
conta/stima visiva di frammenti.
3 ATTREZZATURE
3.1 Microscopio binoculare stereoscopico, con oculari grandangolari.
Facoltativo: dispositivo per fluorescenza in luce UV
3.2 Microscopio binoculare composto con: oculari grandangolari,
obiettivi 4x-10x-25x-40x-60x, tavolino traslatore, accessori per
illuminazione in contrasto di fase e in luce polarizzata, micrometro
oggetto
Facoltativo: dispositivo per fluorescenza con filtri di eccitazione
nell'UV e nel blu-violetto
3.3 Cappa
3.4 Bilancia tecnica
3.5 Bilancia analitica
3.6 Divisore in quarti
3.7 Mortaio
3.8 Macinello elettrico
3.9 Stufa 0-100 (gradi centigradi) C
3.10 Microtomo (facoltativo)
3.11 Bagno termostatico (facoltativo)
3.12 Serie di setacci a maglie di diametro 3-2-1.5-1-0.5-0.2 mm, più
raccoglitore e coperchio
3.13 Setacciatore automatico a secco e umido (facoltativo)
3.14 Autoclave (facoltativo)
3.15 Imbuti separatori da 500 ml con foro (diametro) 7 mm
3.16 Scatole Petri (diametro) 9 e 12 cm
3.17 Capsule con becco: di plastica (capacità 100 ml); di porcellana
(capacità 250-750 ml) con fondo arrotondato
3.18 Filtri a pieghe, carta rapida, (diametro) 24 cm
3.19 Filtri Whatman n.3
3.20 Pinze da microscopia a punta curva, aghi da microscopia, ago di
platino, bisturi, vetrini portaoggetto, vetrini coprioggetto
(24x32mm), spatole, microspatole, lastra di vetro, Bunsen, siringhe,
garze, comune vetreria da laboratorio
3.21 Collezione di ingredienti
4 REAGENTI
I reagenti, per comodità di consultazione, sono elencati nei
rispettivi capitoli in cui ne è previsto l'uso.
Le soluzioni, ove non altrimenti indicato, si intendono in acqua
distillata.
5 PRELEVAMENTO DEL CAMPIONE DI LAVORO
Il campione destinato all'analisi microscopica deve poter essere
esaminato nelle sue condizioni originali. Pertanto è opportuno
disporre di un esemplare a parte, il quale non dovrà essere macinato
nè omogeneizzato prima dell'analisi microscopica. Non disponendo di
tale esemplare, si preleverà una quota del campione prima di
destinarlo ad altre analisi.
Formare il campione rappresentativo di lavoro procedendo nel seguente
modo:
a) mangimi secchi: con il dispositivo di divisione in quarti (3.6),
ridurre il campione a circa 100 g, dai quali si preleveranno le
aliquote di analisi;
b) mangimi umidi in scatola: versare il contenuto di una o più
scatole in mortaio (3.7), pestare leggermente e mescolare
accuratamente. Versare il tutto su una superficie liscia, disperdendo
il prodotto in uno strato circolare di 1-2 cm di spessore. Con
l'aiuto di una lama suddividere lo strato in quarti, riducendolo a
circa 100 g, dai quali si preleveranno le aliquote di analisi.
c) mangimi umidi con elevate quantità di parti fluide: per mezzo di
setaccio (3.12) a maglie larghe, separare le parti solide sulle quali
si opererà come indicato al punto b); raccogliere a parte il
liquido, che potrà essere esaminato direttamente al microscopio
composto.
6 ESAME PRELIMINARE
6.1 Scopo e applicazione
Ha lo scopo di accertare le caratteristiche
merceologiche/tecnologiche/organolettiche e le condizioni di
conservazione dei mangimi semplici e composti.
Per l'accertamento dello stato di conservazione il campione sarà
esaminato nel più breve tempo possibile dal momento del prelievo; in
alternativa, sarà conservato chiuso in frigorifero in attesa
dell'analisi.
6.2 Principio
Una aliquota di campione viene esaminata al microscopio stereoscopico
nelle sue condizioni originarie all'atto del prelievo.
6.3 Procedimento
6.3.1
a) Mangimi sfarinati trasferire in scatola Petri (3.16) 10 g circa di
campione ed esaminare allo stereomicroscopio a 5-20x;
rimuovendo il materiale con le pinze, osservare aspetto e tessitura
del prodotto nel suo complesso e ricercare anomalie nei caratteri
fisici e/o segni di infestazioni o contaminazioni.
b) Mangimi pellettati: triturare leggermente in mortaio 10 g di
campione e procedere come in a).
6.4 Valutazioni
6.4.1. Caratteristiche merceologiche/tecnologiche
Facendo anche riferimento alle denominazioni e descrizioni degli
ingredienti indicate nella normativa, si potra':
- differenziare i materiali grezzi dai derivati
- identificare le tecnologie di produzione
- valutare se le caratteristiche corrispondono alle indicazioni
fornite dal produttore
- stabilire l'identità di alcuni mangimi semplici a granulometria
grossolana omogenea, privi di consistenti quantità di parti fini
(es. grani di cereali spezzati, farina di estrazione di soia, crusche
ecc.)
6.4.2. Caratteri organolettici
Sono indici di alterazioni:
- colorazioni brune o nere dei frammenti, causate da surriscaldamento
o carbonizzazione, in particolare nei prodotti che hanno subito
trattamenti termici (farine di carne e di pesce, prodotti lattieri,
vegetali disidratati, residui dell'estrazione degli oli, ecc.);
- odore di ammoniaca, di idrogeno solforato, di rancido, di muffa.
6.4.3 Stato di conservazione
Sono indici di contaminazioni:
- presenza di parassiti animali vivi o di loro larve, uova, spoglie,
secreti o escreti: Coleotteri (Sitophilus, Tribolium, Calandra,
Oryzaephilus, Rhizoperta, Trogoderma, Tenebrioides ecc.); Lepidotteri
(Ephestia, Sitotroga, Tinea ecc.); Acari (Tyroglyphus);
- presenza di peli e detriti organici di Roditori;
- presenza di grumi feltrosi variamente colorati, costituiti da
miceli di muffe (prevalentemente Deuteromiceti, comprendenti varie
specie dei generi Aspergillus, Fusarium, Penicillium, Trichotecium
ecc., alcune delle quali potenzialmente tossigene) (v. anche Cap.
11).
Nota. Per ulteriori e più dettagliate informazioni sugli agenti
infestanti v. anche i Riferimenti bibliografici (6) e (10).
7 PREPARAZIONE DEL CAMPIONE DI ANALISI
7.1 Scopo e applicazione
Ha lo scopo di offrire all'osservazione microscopica particelle iso-
late, di dimensioni il più possibile omogenee, e con superfici il
più possibile ripulite da materiali fini aderenti o da sostanze
leganti.
Si applica sia ai mangimi semplici, nei quali facilita la ricerca di
materiali estranei, sia alle miscele, nelle quali produce una
approssimativa ripartizione degli ingredienti, utile anche ai fini di
eventuali stime quantitative.
7.2 Principio
L'aliquota di analisi viene posta in sospensione in tetracloruro di
carbonio, solvente a densità intermedia (1.59) tra quelle dei
prodotti organici (1.2-1.5) e inorganici (&gt;2.0).
Si separano due fasi:
1) una fase surnatante, nella quale confluiscono i materiali di
origine biologica e i composti chimici di natura organica;
2) un sedimento, nel quale vengono concentrati i tessuti animali
calcificati, i prodotti inorganici e, per l'elevata densità (1.72),
la vitamina C.
Ognuna delle due fasi viene suddivisa mediante setacciatura in più
frazioni granulometriche che saranno esaminate singolarmente al
microscopio.
I mangimi pellettati, melassati, grassati o umidi sono dapprima
trattati con acqua o etere, allo scopo di allontanare le sostanze che
interferiscono sulle immagini microscopiche e di ripristinare le
condizioni originarie delle particelle costituenti.
7.3 Reagenti
7.3.1 Tetracloruro di carbonio
7.3.2 Cloroformio
7.3.3 Acetone
7.3.4 Etere etilico
7.4 Procedimenti
7.4.1 Mangimi sfarinati e premiscele degli integratori
7.4.1.1 Trasferire 10 g di campione in imbuto separatore (3-15),
aggiungere 200 ml di tetracloruro di carbonio (7.3.1), mescolare e
lasciare in riposo per non oltre 5 minuti, durante i quali i
materiali organici salgono alla superficie del solvente, e quelli
inorganici sedimentano.
In alternativa, si potrà utilizzare cloroformio (7.3.2), benchè la
separazione risulti meno netta (nel sedimento confluiscono, tra
l'altro, i cristalli degli zuccheri e parte degli amidi).
Raccogliere il sedimento in capsula da 100 ml (3.17), lasciare in
riposo qualche minuto, decantare l'eventuale liquido eccedente e fare
evaporare all'aria il solvente residuo.
Trasferire il surnatante su filtro a pieghe (3.18) lavando le pareti
dell'imbuto con altro solvente e fare evaporare all'aria il solvente
residuo.
Raccogliere separatamente le due fasi asciutte.
Nota. Il solvente può essere recuperato, filtrato, eventualmente
distillato, e riutilizzato più volte.
7.4.1.2 Predisporre una serie di setacci (3.12-3.13), completa di
raccoglitore e coperchio, in ordine decrescente di diametro delle
maglie.
Orientativamente, in funzione della granulometria, predisporre:
- per prodotti molto grossolani, una serie 2.0-1.5-1.0-(0.5) mm;
- per prodotti medi, una serie 1.5-1.0-0.5-(0,2) mm;
- per prodotti fini e per il sedimento, il setaccio 0.5 (0.2) mm.
Setacciare le due fasi separatamente per 2-3 minuti o più secondo la
scorrevolezza del prodotto, e trasferire le singole frazioni ricavate
in scatole Petri (3.16) per l'esame microscopico.
Nota. I calibri indicati entro parentesi sono facoltativi e il loro
inserimento nella serie dipende dalla quantità e finezza dei
componenti fini del prodotto nel suo complesso.
7.4.2 Mangimi pellettati, granulati, in croste ecc., e loro miscele
con sfarinati. Mangimi melassati (&gt; 15% di melasso).
7.4.2.1 Trasferire 10 g di campione in bicchiere da 500 ml e
aggiungere 400 ml di acqua calda a 60 (gradi centigradi) C.
Rimescolando di tanto in tanto, lasciare nell'acqua: per 2-12 ore,
secondo la durezza, i prodotti pellettati; per 30 minuti i prodotti
melassati.
7.4.2.2 Trasferire la miscela su setaccio 0.2 mm e procedere al
lavaggio del residuo nel setacciatore automatico (3.13) predisposto
per setacciatura a umido oppure, in alternativa, sotto un abbondante
e forte getto di acqua corrente.
Trasferire il residuo su filtro a pieghe, lavare due volte con
acetone (7.3.3) e fare asciugare in stufa (3.9) a 60 (gradi
centigradi) C per 4-6 ore, quindi all'aria per 2-3 ore.
Se nel residuo si sono formati grumi, triturare leggermente in
mortaio (3.7).
Operare sul residuo secco come in 7.4.1.
Nota. Il lavaggio causa la perdita delle sostanze idrosolubili e di
piccole quantità, generalmente irrilevanti ai fini dell'analisi
qualitativa, di materiali fini.
Per ovviare, operare come in 7.4.1.1 su una seconda aliquota di
campione triturata in mortaio, per separare la fase inorganica, che
risulterà completa; setacciare la fase organica su setaccio 0.2 mm
per ottenere nel raccoglitore il materiale fine perduto.
7.4.3 Mangimi umidi
Trasferire 15-20 g di campione (o 5-10 g della parte solida) in
bicchiere da 500 ml, aggiungere 400 ml di acqua calda a 60 (gradi
centigradi) C.
Rimescolando di tanto in tanto, lasciare nell'acqua per 30 minuti.
Procedere come in 7.4.2.2.
Nota. Il lavaggio può causare la perdita di piccole quantità di
materiali fini, generalmente irrilevanti ai fini dell'analisi
qualitativa.
7.4.4 Mangimi con all'alto tenore in grassi (&gt; 10%)
Trasferire 10 g di campione in matraccio da 250 ml, aggiungere 200 ml
di etere etilico (7.3.4), tappare.
Lasciare per 10 minuti agitando e stappando di tanto in tanto.
Filtrare su filtro a pieghe e lasciare evaporare il solvente.
Operare sul residuo secco come in 7.4.1.
Se il mangime è anche granulato, triturare prima leggermente in
mortaio.
7.4.5. Prodotti lattieri e mangimi di allattamento
Procedere come in 7.4.1, utilizzando preferibilmente come liquido di
sedimentazione il cloroformio (7.3.2), allo scopo di concentrare nel
sedimento eventuali cristalli di lattosio.
Se il prodotto contiene un'alta percentuale di grassi, operare prima
come descritto in 7.4.4.
7.4.6. Mangimi costituiti da semi interi
Trasferire in scatola Petri:
- 25 g di campione per semi di cereali e altri semi di dimensioni
simili e per le miscele che li contengono;
- 10 g per semi di dimensioni inferiori.
7.5 Localizzazione dei materiali nelle varie frazioni
In conseguenza delle operazioni di preparazione, i materiali
risulteranno orientativamente localizzati nelle varie frazioni nel
seguente modo:
A - Fase organica
1) Frazioni grossolane (particelle &gt; 1.5 mm)
Frutti/semi interi e/o spezzati; la maggior parte di: crusche,
fiocchi, germi, cotiledoni di soia, steli, glume, radichette di orzo,
lolla di riso, tegumenti duri dei semi di cotone, di girasole, di
arachidi, di palme ecc., noccioli, polpe di barbabietola, gusci di
carrube; gelatina, unghie, peli, rachidi e barbe spezzate di penne;
sferette di urea; pellets di microrganismi, ecc.
2) Frazioni intermedie (particelle 1.5-0.5 mm)
La maggior parte di cruschelli, tritelli, semole, pula di riso, lolla
macinata, residui dell'estrazione dell'olio dai semi oleosi,
borlande, erbe, vinaccioli; grumi di carne, di pesce e di penne,
sangue secco macinato; pellets di microrganismi; cristalli interi di
saccarosio e di glucosio, microsfere di vitamina A,
3) Frazioni fini (particelle &lt; 0.5 mm)
Farinette di cereali, glutini, amidi, fecole; fibre muscolari isolate
di carne e di pesce, barbule di piume, sferette di sangue spray;
polveri di lieviti, di batteri di latte, di siero; cristallini di
urea, di lattosio; altri composti organici microcristallini o in
polveri (vitamine, antibiotici, ecc).
B - Sedimento
1) Frazione grossolana (particelle &gt; 0.5 mm)
La maggior parte di: ossa, scaglie di pesci, gusci di crostacei e di
molluschi; rocce triturate, sabbia grossolana; cristalli interi di
sali minerali (cloruro di sodio, solfati di rame, di magnesio ecc.)
2) Frazione fine (particelle &lt;0.5 mm)
Ossa polverizzate; cristallini e/o polveri di sali inorganici,
vitamina C, farine fossili, bentonite e altre argille, sabbia fine
ecc.
8 ANALISI ALLO STEREOMICROSCOPIO
8.1 Scopo e applicazione
Ha lo scopo di identificare i materiali grossolani (&gt; 0.5 mm di
diametro) costituenti i mangimi e i supporti degli integratori.
Può essere estesa ai materiali fini.
8.2 Principio
Consiste nell'esaminare a basso ingrandimento i caratteri fisico-
morfologici esterni dei frammenti dei materiali da identificare e nel
porli in correlazione con materiale noto.
8.3 Reagenti
8.3.1 Soluzione di Lugol diluita 20%
8.3.2 Soluzione di Floroglucina cloridrica (Sciogliere 5 g di
Floroglucina in 20 ml di etanolo 95 (gradi))
8.4 Procedimento
8.4.1 Disperdere in strato sottile, sul fondo delle rispettive
scatole Petri, le singole frazioni organiche ricavate come descritto
al cap. 7.
Osservare al microscopio (3.1), utilizzando come sfondo il lato nero
o il lato bianco del piattello, secondo il contrasto visivo che
risulti di volta in volta più opportuno.
Iniziare l'esame, con l'ingrandimento più basso, dalla frazione
organica contenente i frammenti più grandi e proseguire con le altre
frazioni, aumentando opportunamente l'ingrandimento.
Eseguire osservazioni incrociate partendo da un margine della scatola
verso il centro e proseguendo verso il margine opposto.
Rimuovere con le pinze i frammenti, osservarne aspetto, forma,
colore, e saggiarne la consistenza.
Allontanare le particelle esaminate da quelle ancora da esaminare, e
continuare finchè tutto il materiale sia stato osservato o si siano
rintracciati i prodotti da individuare.
8.4.2 Esaminare con la medesima tecnica le frazioni del sedimento.
8.4.3 Estrarre con le pinze i frammenti non identificati, da
sottoporre agli ulteriori opportuni esami.
8.5 Tecniche speciali
8.5.1 Per prodotti lattieri
Nei mangimi sfarinati, piccole quantità di polveri di latte/siero
possono sfuggire all'osservazione. Nei mangimi in pellet i prodotti
lattieri non sono visibili.
Una tecnica di rilevamento consiste in uno dei seguenti procedimenti:
1) Mangimi sfarinati
Disperdere uniformemente in strato sottile sul fondo di una scatola
Petri una piccola aliquota della frazione organica fine, aggiungere
alcune gocce di acqua, osservando contemporaneamente a 10-20x su
fondo nero. La presenza di latte o siero in polvere è indicata dalla
formazione di scie e correnti lattiginose di dissoluzione, con
origine nelle particelle lattee.
In alternativa, applicare il saggio di identificazione del lattosio
(10.6.3.2) ad una aliquota di mangime.
2) Mangimi in pellet
Applicare il saggio di identificazione del lattosio (10.6.3.2) ad una
aliquota di pellet macinato.
8.5.2 Per materiali proteici/amilacei
Le particelle medio-fini di alcuni prodotti proteici (es. semi di
soia, glutini) hanno aspetto simile a quello dei frammenti di alcuni
semi di natura amilacea (granoturco, riso, frumento duro, sorgo,
alcuni legumi).
Per differenziarli rapidamente con una prova orientativa, disperdere
in scatola Petri una aliquota di prodotto, aggiungere alcune gocce di
soluzione di Lugol (8.3.1) e osservare a 10-20x su fondo bianco la
colorazione assunta dai frammenti.
Colorazioni:
- frammenti proteici = bruno
- frammenti amilacei = blu scuro/nero
8.5.3 Per materiali lignificati
Possono essere aggiunti, talvolta finemente macinati, a scopo di
sofisticazione: tutoli di mais, vinaccioli, lolla di riso, segatura
di legno, noccioli ecc.
Per evidenziarli, disperdere in scatola Petri aliquote delle varie
frazioni organiche, aggiungere alcune gocce di Floroglucina
cloridrica (8.3.2) e osservare a 5-20x su fondo bianco la colorazione
de frammenti.
Colorazioni:
- materiali legnosi = rosso viola, che persiste anche dopo diluizione
del reagente con acqua
- materiali cellulosici = rosa intenso/rosso, che sbiadisce o
svanisce per aggiunta di acqua.
8.5.4 Per composti chimici
Alcuni composti cristallini non riconoscibili all'esame visivo sono
identificabili con reazioni cromatiche o microchimiche, che possono
essere seguite allo stereomicroscopio (v. Cap. 10).
8.5.5 Per stime quantitative
V. Cap. 13.
9 ANALISI AL MICROSCOPIO COMPOSTO
9.1. Scopo e applicazione
Ha lo scopo di identificare i materiali fini (&lt; 0.5 mm di diametro)
costituenti i mangimi e i supporti degli integratori.
Nella routine può essere limitata ai prodotti a granulometria fine,
ai componenti fini delle miscele, ai frammenti grossolani triturati
non identificati allo stereomicroscopio, ai liquidi dei mangimi in
scatola.
9.2 Principio
Consiste nell'esaminare, con ingrandimenti elevati, le strutture
interne e le proprietà ottiche delle particelle da identificare, e
nel porle in correlazione con strutture e proprietà note.
9.3 Reagenti
9.3.1 Dimetilsulfossido
9.3.2 Fenolo-glicerolo (13 g di fenolo cristallino in 87 ml di
glicerolo anidro)
9.3.3 Soluzione di cloralio idrato 50%
9.3.4 Etanolo 95 (gradi)
9.3.5 Soluzione di Lugol diluita al 5%
9.3.6 Clorojoduro di zinco (Sciogliere 50 g di cloruro di zinco e 16
g di joduro di potassio in 17 ml di acqua, aggiungere 3 g di Jodio
cristallino e lasciare in riposo alcuni giorni. Trasferire il
surnatante in bottiglia scura)
9.3.7 Floroglucina cloridrica (Sciogliere 5 g di Floroglucina in 20
ml di etanolo 95 (gradi))
9.3.8 Sodio idrato 50%
9.3.9 Soluzione di ferro solfato 1% in HCl 0.1N
9.3.10 Soluzione di Tionina 2% in etanolo 95 (gradi)
9.3.11 Soluzione di Sudan III (Sciogliere 0.1 g di Sudan III in 50 ml
di etanolo 95 (gradi) bollente, aggiungere 50 ml di glicerolo)
9.3.12 Soluzione di blu di metilene 0.1%
9.3.13 Soluzione di Rosso Congo 0.5%
9.3.14 Soluzione di Arancio acridina 0.1%
9.3.15 Acido nitrico concentrato
9.3.16 Acido acetico glaciale
9.3.17 Acqua ossigenata 10-12 vol.
9.3.18 Ammoniaca concentrata
9.3.19 Glicerina
9.4 Procedimenti
9.4.1 Tecnica di osservazione
Trasferire su vetrino portaoggetti 0.01 g circa (una punta di
microspatola) di prodotti fine, oppure la polvere ricavata dai
singoli frammenti non identificati allo stereomicroscopio, triturati
in mortaio, oppure alcune gocce dei liquidi di cottura dei mangimi in
scatola, secondo le circostanze.
Aggiungere 2-3 gocce di liquido montante (*), miscelare con ago (da
microscopia e coprire con coprioggetto, esercitando una leggera
pressione con movimento rotatorio, per disgregare le particelle e
ridurre al minimo lo spessore del preparato, evitando la formazione
di bolle di aria.
Iniziare l'esame al microscopio (3.2) con ingrandimento più basso
(40-100 x), per avere una prima visione di insieme, e aumentare
gradualmente l'ingrandimento per esaminare i dettagli delle
strutture.
Partendo dall'angolo sinistro del coprioggetto, per mezzo del
traslatore fare scorrere il vetrino lateralmente osservando ogni
campo del microscopio fino a raggiungere l'angolo destro; scendere di
un campo e fare scorrere il vetrino in senso inverso fino al margine
sinistro, scendere ancora di un campo e continuare con tale
procedimento finchè tutta l'area del coprioggetto sia stata
esaminata o si siano rintracciate le strutture ricercate.
Durante l'osservazione, a causa di possibili differenze di spessore
nelle particelle, sarà necessario focheggiare frequentemente il
preparato.
Eventuali misurazioni saranno eseguite per mezzo del micrometro
oggetto, seguendo le indicazioni fornite dalla ditta produttrice del
microscopio.
(*) I liquidi montanti aumentano la trasparenza delle particelle,
favoriscono la fuoruscita dei contenuti cellulari e consentono di
meglio visualizzare l'organizzazione dei tessuti.
In funzione delle caratteristiche fisico-chimiche delle particelle in
esame, utilizzare uno dei seguenti liquidi:
- acqua, di uso generale, e in particolare per particelle di
(diametro) &lt; 0.2 mm e per sostanze insolubili in acqua;
- dimetilsulfossido (9.3.1) o fenolo-glicerolo (9.3.2) o glicerina
(9.3.19), per particelle di cts &gt; 0.2 mm, per sostanze solubili in
acqua e per materiali calcificati;
- cloralio idrato (9.3..3) per strutture poco trasparenti.
9.4.2 Tecniche di illuminazione
1) In campo chiaro si osservano i caratteri morfologici delle
strutture e gli effetti delle colorazioni istologiche.
2) In contrasto di fase si osservano i dettagli, indistinti in campo
chiaro, di strutture delicate e trasparenti (cellule trasversali del
pericarpo dei cereali, punteggiature sulle pareti cellulari, barbule
di piume, scaglie di pesce, lieviti, batteri, miceli e spore fungine
ecc.).
3) In luce polarizzata, a nicol incrociati, si osservano le
proprietà ottiche, differenziando i materiali otticamente
anisotropi, birifrangenti, dai materiali isotropi:
- I materiali birifrangenti
sul fondo buio del campo del microscopio appaiono illuminati, alcuni
bianchi (monocromatici), altri colorati (pleocroici), e comprendono:
tutti i tessuti vegetali; i granuli di amido; le mucillagini; i
tessuti animali calcificati e quelli cornei; le fibre muscolari
striate; i grassi solidificati; i cristallini naturali di ossalato di
calcio nelle cellule vegetali; i microcristalli di guanina nei
tessuti dei pesci; i cristalli dei sali minerali (escluso il cloruro
di sodio) e in generale i cristalli di tutti i composti chimici.
- I materiali isotropi
sul fondo buio del campo del microscopio appaiono oscuri e
indifferenziati, e comprendono: i materiali proteici (vegetali e
animali); gli amidi gelatinizzati; le penne idrolizzate; i globuli di
oli; il cloruro di sodio; miceli e spore fungine; chitina.
Nella pratica routinaria, l'osservazione in luce polarizzata
costituisce una tecnica rapida per:
a) individuare materiali vegetali e cristallini nei prodotti di
origine animale e nei prodotti lattieri; individuare il siero in
polvere nelle farine di latte
b) evidenziare elementi strutturali diagnostici che differenziano
alcune specie vegetali: strati tegumentali delle Leguminose,
mucillagini in alcune Crucifere, tricomi delle erbe foraggere,
cristalli di ossalato di calcio presenti con forme caratteristiche
nella soia, nel sesamo, nei vinaccioli ecc.
c) verificare, dalla comparsa dell'isotropia, i trattamenti
tecnologici subiti da alcuni prodotti naturalmente birifrangenti
(amidi, penne)
d) differenziare i granuli di amido da altre strutture simili
(granuli di aleurone, globuli di olio, bolle di aria, spore e conidi
fungini ecc.)
e) differenziare amidi simili di specie diverse, verificando dettagli
strutturali, non sempre percepibili con altre tecniche di
illuminazione.
9.5 Tecniche speciali
9.5.1 Colorazione
Per mettere in risalto alcune strutture biologiche e facilitarne
l'identificazione, si può ricorrere a tecniche di colorazione con
coloranti biologici che reagiscono selettivamente con i componenti
naturali delle varie strutture.
I preparati sono allestiti con la tecnica descritta in 9.4.1,
utilizzando come montante la soluzione del colorante adeguato.
I coloranti e relativi contrasti visivi specifici delle strutture
sono sintetizzati in Tabella 1.
Tabella 1. Colorazioni specifiche delle strutture biologiche
___________________________________________________________________
| | | |
| Colorante | Struttura | Colorazione |
|________________________|________________________|_________________|
| | | |
| Soluzione di Lugol | Materiali proteici | Bruno |
| (9.3.5) | vegetali e animali, | |
| | lieviti, batteri | |
| | | |
| | Tessuti animali cornei,| Bruno chiaro/ |
| | connettivi, epiteliali | giallo |
| | penne | |
| | | |
| | Granuli di amido | Blu/viola |
| | Amidi gelatinizzati | Azzurro |
| | | |
| Cloroioduro di zinco | Cellulosa | Azzurro |
| (9.3.6) | | |
| | | |
| Floroglucina (9.3.7) | Lignina | Rosso porpora |
| | Cellulosa | Rosa/rosso |
| | | |
| Sodio idrato (9.3.8) | Tannini | Blu/viola |
| | | |
| Ferro solfato (9.3.9) | Tannini | Verde-azzuro/ |
| | | nero |
| | | |
| Tionina (9.3.10) | Mucillagini | Rosso |
| | | |
| Sudan III (9.3.11) | Oli e grassi | Arancio |
| | | |
| Blu di metilene | Miceli e spore | Azzurro |
| (9.3.12) | fungine | |
| | | |
| Arancio acridina | Materiali proteici | Arancio |
| (9.3.14) | | |
| | | |
| Rosso Congo | Amidi danneggiati | Rosso |
| (9.3.13) | | |
|________________________|________________________|_________________|
9.5.2 Concentrazione
Taluni tessuti resistenti (tessuti lignificati, tessuti collettivi,
cuoio, penne ecc.), se finemente macinati e/o presenti in piccole
quantità, possono essere concentrati.
Prelevare 1-2 g della frazione organica fine, oppure macinare 2-3 g
di campione, e trasferire in capsula di porcellana da 250 ml (3.17).
Aggiungere 20 ml di acido nitrico (9.3.15) e 20 ml di acido acetico
(9.3.16). Portare a ebollizione moderata per 20-30 secondi,
raffreddare, filtrare su carta rapida, lavare tre volte con acqua.
Trasferire su vetrino una parte del residuo umido, aggiungere una
goccia di acqua, coprire con coprioggetto ed esaminare al
microscopio.
Il trattamento distrugge la maggior parte delle strutture delicate e
consente una migliore visualizzazione dei dettagli istologici dei
tessuti residui.
9.5.3 Chiarificazione
Le strutture poco trasparenti (tegumenti di frutti/semi, noccioli,
strutture legnose ecc.), o divenute oscure per surriscaldamento,
nelle quali non siano percepibili i dettagli di identificazione,
possono essere chiarificate.
Isolare e triturare finemente in mortaio (3.7) i singoli frammenti e
trasferire su vetrino la polvere ricavata.
Applicarvi alcune gocce di acqua ossigenata (9.3.17) e dopo 2-3
minuti aggiungere una goccia di ammoniaca (9.3.18). Coprire con
coprioggetto ed esaminare al microscopio.
In alternativa, macinare finemente 2-3 g di campione e trasferire in
bicchiere da 50 ml con 20 ml di acqua ossigenata, miscelare e
lasciare in riposo 15 minuti.
Aggiungere 10 gocce di ammoniaca, agitare e lasciare in riposo 15
minuti. Filtrare su carta rapida, lavare una volta con acqua.
Trasferire su vetrino una quota del residuo umido, aggiungere una
goccia di acqua, coprire con coprioggetto, esaminare al microscopio.
9.5.4 Sezioni sottili
Occasionalmente può essere opportuno esaminare sezioni di tessuti di
difficile identificazione (es. tegumenti di semi di Crucifere, di
Leguminose ecc.).
Prelevare il seme o il frammento da identificare e immergerlo in
acqua per almeno 1 ora. Trasferirlo quindi tra due blocchetti di
sughero o di polistirene e sezionare con il microtomo (3.10), oppure,
in alternativa, a mano con il bisturi. Trasferire la sezione su
vetrino aggiungere alcune gocce di acqua ossigenata (9.3.17), coprire
con coprioggetto con leggera pressione, esaminare al microscopio.
9.5.6 Microscopia chimica
Alcuni composti chimici, non riconoscibili visivamente, possono
essere identificati con tecniche di microscopia chimica i cui esiti
possono essere controllati al microscopio composto (v. Cap. 10)
9.5.7 Stime quantitative
V. Cap. 13.
10 ANALISI CHIMICO-MICROSCOPICA
10.1 Scopo e applicazione
Ha lo scopo di: 1) confermare il riconoscimento di alcuni prodotti
chimici identificati visivamente allo stereomicroscopio; 2)
identificare altri prodotti che, benchè rilevabili nelle miscele e
differenziabili dagli ingredienti di origine biologica per forma,
colore, proprietà ottiche (isotropia, anisotropia, pleocroismo) dei
cristalli, non sono riconoscibili all'esame visivo.
Si applica ai mangimi e alle premiscele allo stato secco.
10.2 Principio
Aliquote di campione sono sottoposte a saggi di microchimica
qualitativa adattati per l'osservazione al microscopio, sia
stereoscopico che composto.
I saggi comportano: 1) precipitazione di microcristalli di nuovi
composti identificabili; 2) reazioni cromatiche specifiche, nelle
quali il colore è assorbito da un supporto oppure è assunto dalle
stesse particelle reattive o sviluppato da loro soluzioni.
Le reazioni sono sufficientemente caratteristiche, sensibili per
quantità minime di materiali e percepibili anche per particelle di
minime dimensioni, senza interferenze da parte di altri composti
chimici aggiunti o di sostanze contenute naturalmente nei materiali
di origine biologica.
10.3 Reagenti
Per prodotti inorganici
10.3.1 Argento nitrato 10%
10.3.2 Acido cloridrico 1:1
10.3.3 Ammonio molibdato:
a)- Soluzione I. A 15 ml di ammonio idrato aggiungere 27 ml di acqua
e 10 g di anidride molibdica. Lasciare raffreddare.
Soluzione II. A 115 ml di acqua aggiungere 50 ml di acido nitrico
concentrato. Lasciare raffreddare.
b)- Aggiungere lentamente, miscelando, la soluzione I alla soluzione
II. Lasciare in riposo alcuni giorni, decantare e filtrare il liquido
surnatante quando è limpido. Aggiungere a 100 ml del filtrato 10 ml
di soluzione al 10% di ammonio nitrato.
(Conservare in bottiglia scura).
10.3.4 Brucina in polvere
10.3.5 Soluzione di Lantanio nitrato 5%
10.3.6 Soluzione di Jodio 0.1N
10.3.7 Ammoniaca 1N
10.3.8 Acido solforico concentrato
10.3.9 Reattivo di Millon
10.3.10 Reattivo di Nessler
10.3.11 Acido solforico 10%
10.3.12 Soluzione satura di potassio antimoniato
10.3.13 Acido perclorico 70%
Per microelementi
10.3.14 Potassio prussiato (Sciogliere 1.7 g di potassio ferro-
cianuro e 0.4 g di potassio ferricianuro in 250 ml di acqua)
10.3.15 Soluzione di sodio-potassio tartrato 20%
10.3.16 Soluzione di Sale nitroso-R 4%
10.3.17 Carta-amido
10.3.18 Acido ipofosforoso
10.3.19 Acqua di bromo diluita
10.3.20 Sodio idrato 2N
10.3.21 Soluzione di Benzidina (Sciogliere 0.05 g di benzidina (o di
cloridrato di benzidina) in 10 ml di acido acetico glaciale, portare
a 100 ml con acqua, filtrare)
10.3.22 Soluzione di fosfato bipotassico 5%
10.3.23 Sodio idrato 20%
10.3.24 Acido citrico
10.3.25 Idrossilammina cloridrato
10.3.26 Soluzione di Dithizone (Sciogliere 10 mg di Dithizone in 100
ml di tetracloruro di carbonio)
Per composti organici
10.3.27 Ninidrina in polvere
10.3.28 Clinistick (Merck) per glucosio
10.3.29 Soluzione di cloruro di metilammonio 5%
10.3.30 Anthrone in polvere
10.3.31 Soluzione di cloruro stannoso e urea (Sciogliere a caldo 4 g
di urea e 0.2 g di cloruro stannoso in 10 ml di acido solforico al
40%)
10.3.32 Soluzione di Rosso cresolo 0.1% (Fare bollire per qualche
minuto 0.1 g di Rosso cresolo in 100 ml di acqua)
10.3.33 Ureasi in polvere microcristallina
10.3.34 Soluzione di Rosso cresolo e urea (Miscelare 80 ml di
soluzione di Rosso cresolo 0.1% (10.3.32) con 20 ml di glicerolo e 2
g di urea)
10.3.35 Reattivo di Carr-Price (20 g di tricloruro di antimonio in 80
ml di cloroformio)
10.3.36 Acido selenioso 5%
10.3.37 Reattivo di Sakaguchi (Sciogliere 1 g di acido borico
cristallino in 100 ml di acido solforico concentrato. Conservare in
frigorifero)
10.3.38 Cartina al tornasole rosso
Nota. Per i saggi che richiedono supporto di carta da filtro
utilizzare dischi di carta Wathman n.3 (3.19)
10.4 Preparazione del campione
Si può operare su aliquote delle frazioni del campione preparato
come descritto nel paragrafo 7.4.1, utilizzando: 1) il sedimento per
la ricerca di prodotti inorganici; 2) le frazioni della fase
surnatante per la ricerca di composti chimici organici.
Per i mangimi in pellet, è più opportuno macinare 10 g di campione
e operare direttamente su aliquote della polvere ricavata, senza
procedere a frazionamenti.
10.5 Procedimenti Per prodotti inorganici
10.5.1 Premessa
I prodotti inorganici, utilizzati nella produzione dei mangimi
possono essere costituiti da: 1) tessuti biologici calcificati;
2) derivati della macinazione di prodotti inorganici naturali; 3)
cristalli interi o frantumati di sali minerali.
L'analisi è basata sulla identificazione dei gruppi anionici e sulla
ricerca sistematica dei cationi ad essi riferibili. Può essere
effettuata, in funzione delle dimensioni delle particelle, su
cristalli o frammenti singoli oppure su aliquote di materiali fini,
anche misti, con una delle seguenti tecniche:
a) Per cristalli isolabili
Il cristallo, o frammento, viene estratto dal sedimento e frantumato
in più parti, oppure triturato leggermente in mortaio (se è troppo
piccolo per ulteriori suddivisioni si estrarranno più esemplari di
aspetto simile). I frammenti ricavati sono utilizzati singolarmente
per l'identificazione dell'anione/catione;
b) Per particelle non isolabili
Si prelevano piccole aliquote di sedimento fine, o di materiale
polverizzato, da saggiare separatamente sino ad ottenere
l'identificazione dei possibili anioni/cationi in esso presenti.
10.5.2 Anioni
10.5.2.1 Acetati, Cloruri, Fosfati mono e bibasici, Solfati
Reagente: Argento nitrato (10.3.1)
Procedimento
Trasferire una particella su vetrino portaoggetti e applicarvi una
goccia del reagente, senza miscelare.
In alternativa, disperdere uniformemente in strato sottile sul fondo
di una scatola Petri una punta di spatola di materiale, in modo tale
che le particelle risultino separate e distinte, e applicarvi a caso
qua e là alcune gocce del reagente, senza miscelare.
Osservazione: stereomicroscopio a 5-30x su fondo nero
Reazioni:
a) Anioni identificabili
- Acetati = sulla particella si sviluppano microcristalli incolori
aghiformi. (Confermare con il metodo 10.5.2.5
- Cloruri = precipitato bianco gessoso amorfo che si espande
lentamente e imbrunisce dopo qualche tempo
- Fosfati monobasici = precipitato giallo amorfo diffuso
- Fosfati bibasici = sulla particella si sviluppano microcristalli
gialli aghiformi o rombici
- Solfati = la particella si dissolve, quindi si forma
istantaneamente un precipitato di microcristalli rombici, incolori e
trasparenti
b) Altre possibilità
- la particella si dissolve senza reazione = probabilmente nitrati.
(Confermare con il metodo 10.5.2.4)
- nessuna reazione = altri gruppi anionici probabilmente carbonati,
fosfati tribasici, sabbia, ossa, che potranno essere identificati con
i metodi indicati nei rispettivi paragrafi.
Nota. In caso di miscele di più sali, gli anioni cloruri, fosfati,
solfati, sono identificabili contemporaneamente anche in una unica
goccia del reagente.
10.5.2.2 Carbonati
Reagente: Acido cloridrico (10.3.2)
Procedimento
Trasferire su vetrino un frammento isolato, oppure una punta di
microspatola di materiale, e applicarvi una o più gocce del
reagente.
Osservazione: stereomicroscopio a 5x su fondo nero
Reazione:
Le particelle di carbonato si dissolvono con effervescenza immediata
e rapida.
Nota. Una effervescenza lenta e debole può indicare che si tratti di
frammenti di ossa: trasferire su vetrino altro materiale, aggiungere
una goccia di fenolo-glicerolo (9.3.2), esaminare al microscopio
composto per confermare la struttura ossea; in alternativa, procedere
come in 10.5.2.7.
10.5.2.3 Fosfati tribasici
Reagente: Ammonio molibdato (10.3.3)
Procedimento
Trasferire su vetrino un frammento isolato, oppure una punta di
microspatola di materiale, e applicarvi una o più gocce del
reagente.
Osservazione: stereomicroscopio a 5x su fondo nero
Reazione:
In presenza di fosfati, dopo 10-20 minuti si forma un precipitato
giallo diffuso microcristallino.
Nota. Il saggio è positivo per tutti i fosfati. Gli ioni mono e
bivalenti sono differenziabili con il metodo 10.5.2.1, le ossa con il
procedimento 10.5.2.7.
10.5.2.4 Nitrati
Reagenti: 1) Brucina (10.3.4)
2) Argento nitrato (10.3.1)
Procedimento
Trasferire su vetrino una particella, oppure una punta di
microspatola di materiale, applicarvi una piccola aliquota del
reagente 1) e 1-2 gocce del reagente 2).
Osservazione: stereomicroscopio a 5x su fondo bianco
Reazione:
In presenza di nitrati, si forma una colorazione rosso vivo.
10.5.2.5 Acetati (v. anche 10.5.2.1)
Reagenti: 1) Lantanio nitrato (10.3.5)
2) Soluzione: di Jodio (10.3.6)
3) Ammoniaca (10.3.7)
Procedimento
Trasferire su vetrino un frammento di cristallo oppure una punta di
microspatola di materiale. Aggiungere una goccia di acqua e miscelare
con ago da microscopia. Aggiungere, in successione, una goccia dei
reagenti 1), 2) e 3), senza miscelare.
Osservazione: stereomicroscopio a 5x su fondo bianco
Reazione
In presenza di acetati, dopo circa 5 minuti, ai bordi del reagente si
forma una colorazione blu.
10.5.2.6 Sabbia
Reagente: Acido solforico (10.3.8)
Procedimento
Trasferire su vetrino un frammento, oppure una aliquota di materiale,
e applicarvi alcune gocce del reagente.
Osservazione: stereomicroscopio a 5-20x su fondo nero
Reazione
Nessuna: le particelle di sabbia rimangono indisciolte.
10.5.2.7 Ossa
Reagente: Reattivo di Millon (10.3.9)
Procedimento
Trasferire su vetrino un frammento, oppure una aliquota di materiale,
e applicarvi alcune gocce del reagente.
Osservazione: stereomicroscopio a 5-20x
Reazione:
Dopo 5-10 minuti le particelle di ossa si colorano in rosa. La
reazione è favorita da un leggero riscaldamento su fiamma debole.
Nelle ossa degelatinizzate la colorazione è debole o assente.
V. anche reazione dei Fosfati (10.5.2.3)
10.5.3 Cationi
10.5.3.1 Ammonio
Reagente: Reattivo di Nessler (10.3.10)
Procedimento
Trasferire su vetrino un frammento di cristallo, oppure una aliquota
di materiale, e applicarvi una goccia del reagente.
Osservazione: stereomicroscopio a 5x su fondo nero
Reazione:
In presenza di ammonio, si forma istantaneamente un precipitato
amorfo rosso-arancio caseoso.
10.5.3.2 Calcio
Reagente: Acido solforico 10% (10.3.11)
Procedimento
a) Su un lato di un vetrino depositare una goccia di acqua,
immergervi il cristallo o frammento e miscelare con ago di platino,
avendo cura di non espandere la goccia, che deve avere un diametro di
circa 7 mm (goccia-test).
b) Vicino alla goccia-test, ma non a contatto diretto, deporre tina
goccia del reagente delle medesime dimensioni.
Con l'ago creare un sottile canale di collegamento tra le due gocce,
facendo defluire il reagente nella goccia-test, avendo cura di non
provocare la fusione delle due gocce e di non coprire con
coprioggetto.
In alternativa al punto a), sospendere per qualche minuto una
aliquota di materiale in 20 ml di acqua, filtrare, trasferire una
goccia del filtrato su un lato di un vetrino (goccia-test) e
procedere come al punto b).
Osservazione: microscopio composto a 100x (con la massima rapidità
possibile, al fine di evitare corrosioni alla lente dell'obiettivo da
parte del reagente. L'osservazione potrà anche essere effettuata
dopo alcuni minuti, coprendo il tutto delicatamente con coprioggetto,
senza premere)
Reazione
In presenza di calcio, con inizio dalla periferia della goccia-test,
si formano rapidamente cristalli aghiformi, incolori, birifrangenti,
singoli oppure riuniti in fasci o rosette. Dopo qualche tempo i
cristalli possono trasformarsi in lamine rombiche, embricate a gruppi
di 2 o 4.
Prodotto formato: solfato di calcio.
10.5.3.3 Magnesio
Reagente: Potassio antimoniato (10.3.12)
Procedimento
Come per il Calcio (10.5.3.2)
Osservazione: microscopio composto a 250-400x
In presenza di magnesio, dopo 1-2 minuti, alla periferia della
goccia-test precipitano lamine esagonali.
Se la goccia-test è molto concentrata in magnesio si forma un
precipitato misto di materiale amorfo, cristalli monoclini e lamine
esagonali.
Prodotto formato: antimoniato di magnesio.
Nota. Il reagente è specifico anche per il sodio. In presenza
contemporanea di entrambi gli ioni, precipita per primo rapidamente
l'antimoniato di sodio (v. 10.5.3.5) e successivamente l'antimoniato
di magnesio.
10.5.3.4 Potassio
Reagente: Acido perclorico (10.3.13)
Procedimento
Come per il Calcio (10.5.3.2)
Osservazione: microscopio composto a 250-400,-
Razione
In presenza di potassio, alla periferia della goccia-test, si formano
all'inizio (e soprattutto se la goccia a molto concentrata in
potassio) masse o cristalli dendritici. Dopo alcuni minuti si
sviluppano prismi incolori ortorombici, corti, tozzi, terminanti
talvolta in piramidi, e sottili rombi laminari che successivamente si
trasformano in prismi. I cristalli sono debolmente birifrangenti.
Prodotto formato: perclorato di potassio.
Nota. Prismi e lamine rettangolari che talvolta si formano non sono
caratteristici del potassio.
10.5.3.5 Sodio
Reagente: Potassio antimoniato (10.3.12)
Procedimento
Come per il Calcio (10.5.3.2)
Osservazione: microscopio composto a 100-250x
Reazione
In presenza di sodio, alla periferia della goccia-test, precipitano
rapidamente piccoli cristalli fusiformi o sottili lamine ellittiche
confluenti in croci, stelle o masse globulari, birifrangenti.
Prodotto formato: antimoniato di sodio.
Nota. Il reagente è specifico anche per il magnesio (v. Nota al
par. 10.5.3.3).
10.5.4 Microelementi
10.5.4.1 Cobalto, Ferro, Manganese Rame
Metodo I
Reagente: Potassio prussiato (10.3.14)
Procedimento
Inumidire con il reagente un disco di carta da filtro deposto sul
fondo di una scatola Petri. Trasferirvi un cristallo singolo, oppure
disperdervi una punta di spatola di materiale.
Osservazione: stereomicroscopio a 5-10x
Reazioni:
Intorno ai cristalli, si formano istantaneamente sulla carta le
seguenti colorazioni:
- Cobalto = aloni grigio-viola
- Ferro = macchie verdi
- Manganese = aloni rosa-bruno chiaro (confermare eventualmente con
il metodo 10.5.4.3.)
- Rame = aloni marrone
Metodo II
Reagenti : 1) Sodio-potassio tartrato (10.3.15)
2) Sale nitroso-R (10.3.16)
Procedimento
Inumidire con il reagente 1) un disco di carta da filtro deposto sul
fondo di una scatola Petri. Trasferirvi un cristallo singolo, oppure
disperdervi una punta di spatola di materiale. Aggiungere alcune
gocce del reagente 2).
Osservazione: stereomicroscopio a 5-10x
Reazioni:
Intorno ai cristalli, si formano istantaneamente sulla carta le
seguenti colorazioni:
- Cobalto = macchie rosa
- Ferro = macchie verde intenso
- Rame = anello bruno intorno ai cristalli; macchie brune sparse
sulla carta, per le polveri.
Sensibilità del metodo:
- 1 ppm Cobalto carbonato equivalente
- 0.2 " " solfato "
- 1 Ferro solfato "
- 1:100.000 Rame carbonato "
10.5.4.2. Jodio
a) Jodati (di Calcio e di Potassio)
Reagenti: 1) Carta amido (10.3.17)
2) Acido ipofosforoso (10.3.18)
Procedimento
Inumidire con il reagente 2) un disco di carta amido 1) deposta sul
fondo di una scatola Petri. Trasferirvi un cristallo singolo oppure
un a punta di spatola di materiale.
Osservazione: stereomicroscopio a 5x
Reazione:
In presenza di Jodati, si formano macchie blu sulla carta intorno
alle particelle del sale.
La reazione è lenta. Se non avviene entro alcuni minuti, aggiungere
altro acido.
Sensibilità del metodo:
- 1 ppm Calcio jodato equivalente
b) Joduro (di Potassio)
Reagenti: 1) Carta amido (10.3.17)
2) Acqua di bromo (10.3.19)
Procedimento, osservazione e reazione: come per Jodati.
Sensibilità del metodo:
- 1 ppm Potassio joduro equivalente
10.5.4.3 Manganese
Reagenti: 1) Sodio idrato 2N (10.3.20)
2) Benzidina, (10.3.21)
Procedimento
Inumidire con il reagente 1) un disco di carta da filtro deposto sul
fondo di una scatola Petri. Depositarvi un cristallo, oppure una
punta di spatola di materiale.
Aggiungervi una o più gocce del reagente 2).
Osservazione: stereomicroscopio a 5x
Reazioni:
- Carbonato, solfato = macchie blu di dissoluzione che dai cristalli
si estendono sulla carta
- Ossido = aloni blu scuro o verde scuro intorno ai cristalli
Sensibilità del metodo:
- 1 ppm Ossido di manganese equivalente.
Nota. La reazione è immediata e il colore svanisce rapidamente.
Eventuali cristalli di Cobalto carbonato presenti nei materiali misti
si colorano in blu dopo 5 minuti.
10.5.4.4 Molibdeno
Reagente: Fosfato bipotassico (10.3.22)
Procedimento
Come per il Calcio (10.5.3.2), acidificando la goccia-test con una
goccia di acido nitrico diluito.
Osservazione: microscopio composto a 250-400x
Reazione:
In presenza di molibdeno, alla periferia della goccia-test si forma
un precipitato istantaneo giallo, denso, polverulento, dal quale si
sviluppano corpi sferici e quindi piccoli ottaedri isotropi.
Se dopo pochi secondi, la reazione non è avvenuta, scaldare
leggermente il vetrino su fiamma debole e lasciare raffreddare per
2-3 minuti.
Prodotto formato: fosfomolibdato di potassio.
10.5.4.5 Selenio
Reagenti: 1) Sodio idrato 20% (10.3.23)
2) Acido citrico (10.3.24)
3) Idrossilammina cloridrato (10.3.25)
Procedimento
a) Depositare su un vetrino una goccia del reagente 1) e immergervi
un cristallo miscelando sino a dissoluzione.
b) Aggiungere alcuni cristalli del reagente 2) e miscelare sino a
dissoluzione. Se si forma un precipitato, aggiungere altro acido
citrico fino a ottenere una goccia limpida. Aggiungere un frammento
del reagente 3).
In alternativa al punto a), immergere 1-2 g di materiale in 10-20 ml
del reagente 1) e filtrare. Trasferire una goccia del filtrato su
vetrino e procedere come al punto b).
Osservazione: stereomicroscopio a 5-20x su fondo bianco
Reazione:
In presenza di selenio, intorno al frammento del reagente 3) si forma
un anello di colore bruno.
Talvolta precipita selenio elementare di colore rosso vivo.
La reazione è lenta. Attendere almeno 1 ora prima di escludere o
confermare la presenza dell'elemento.
10.5.4.6 Zinco
Reagenti: 1) Sodio idrato 2N (10.3.20)
2) Dithizone (10.3.26)
Procedimento
Inumidire con il reagente 1) un disco di carta da filtro posato sul
fondo di una scatola Petri, depositarvi un cristallo, oppure
spargervi una punta di spatola di materiale, aggiungervi una o più
gocce del reagente 2).
Osservazione: stereomicroscopio a 5x
Reazione:
In presenza di zinco, si forma un colore fucsia intenso che si
espande sulla carta.
Nota. Eventuali cristalli di sali di rame presenti nel materiale si
colorano in blu.
10.6 Procedimenti per composti organici
10.6.1 Premessa
I prodotti organici utilizzati nella produzione dei mangimi possono
essere costituiti da cristalli grossolani, interi o frantumati, da
microcristalli, da polveri fini di svariate sostanze:
amminoacidi, zuccheri, vitamine ecc.
L'analisi è basata su reazioni cromatiche di identificazione di
gruppi o di complessi e può essere eseguita sia su cristalli singoli
sia su aliquote di materiali fini anche misti, con una delle seguenti
tecniche:
a) Per cristalli isolabili
Si estraggono uno o più cristalli o frammenti simili, da saggiare
separatamente fino all'identificazione del composto;
b) Per particelle non isolabili
Si prelevano aliquote di materiale, da saggiare separatamente.
10.6.2 Composti azotati
10.6.2.1 Amminoacidi
Reagente: Ninidrina (10.3.27)
Procedimento
Inumidire con acqua un disco di carta da filtro deposto in scatola
Petri. Trasferirvi un cristallo, oppure disperdervi una aliquota di
materiale, e spargervi sopra una punta di microspatola del reagente.
Osservazione: stereomicroscopio a 5-10x
Reazione
In presenza di amminoacidi, dopo alcuni minuti i cristalli di
ninidrina si colorano in viola.
10.6.2.2 Urea
Metodo I
Reagenti: 1) Rosso cresolo (10.3.32)
2) Ureasi (10.3.33) Procedimento
Saturare con il reagente 1) un disco di carta da filtro deposto in
scatola Petri. Trasferirvi un cristallo, oppure disperdervi una
aliquota di materiale, e spargervi sopra una punta di microspatola
del reagente 2).
Osservazione: stereomicroscopio a 5-10x
Reazione:
In presenza di urea si sviluppano, intorno ai cristallini di ureasi,
macchie rosso vivo che si espandono e possono confluire.
Nota. Eseguire contemporaneamente una prova in bianco senza ureasi,
per escludere eventuali interferenze da parte di materiali
suscettibili di sviluppare ammoniaca (es: idrolizzati proteici sali
ammoniacali ecc.).
Metodo II
Reagenti: 1) ureasi (10.3.33)
2) tornasole rosso (10.3.38)
Procedimento
Trasferire 1 g di campione macinato in provetta da 20 ml, aggiungere
una punta di microspatola del reagente 1), mescolare e coprire con
acqua. Tappare ermeticamente la provetta, inserendo tra il bordo e il
tappo una striscia di tornasole 2), avendo cura che la cartina resti
sospesa sul materiale senza toccarlo. Lasciare in riposo.
Osservazione: a occhio nudo
Entro 20 minuti, in presenza di urea la cartina si colora in blu.
Risultati positivi ottenuti oltre 20 minuti non sono significativi.
10.6.3 Zuccheri
10.6.3.1 Glucosio
Reagente: Clinistick (10.3.28)
Procedimento
Inumidire con acqua l'area reattiva e trasferirvi un cristallo.
Osservazione: stereomicroscopio a 5x
Reazione:
Intorno al cristallo l'area reattiva si colora in viola.
In alternativa, sospendere 1 g di materiale in 20 ml di acqua,
agitare per alcuni minuti e filtrare.
Immergere l'area reattiva nel filtrato e toglierla rapidamente.
osservazione: a occhio nudo
Reazione:
In presenza di glucosio, l'area reattiva si colora in viola.
Nota. Le reazioni avvengono entro 10 secondi. Eventuali colorazioni
in, tempi successivi non sono significative.
10.6.3.2 Lattosio
Reagente: 1) Cloruro di metilammonio (10.3.29)
2) Sodio idrato 20% (10.3.23)
Procedimento
Sospendere per alcuni minuti 2-3 g di mangime finemente macinato in
20-30 ml di acqua bollente e filtrare.
Trasferire 4 ml di filtrato in provetta, aggiungere 5 gocce del
reagente 1) e fare bollire per 30 secondi su fiamma leggera.
Rimuovere, aggiungere 5 gocce del reagente 2) e agitare per alcuni
secondi.
Osservazione: a occhio nudo
Reazione
In presenza di lattosio, la soluzione si colora istantaneamente in
giallo e quindi in rosso vivo. La reazione avviene entro pochi
secondi.
Nota. La reazione è significativa in assenza di maltosio.
10.6.3.3. Saccarosio
Metodo I
Reagenti: 1) Anthrone (10.3.30)
2) Acido solforico concentrato (10.3.8)
Procedimento
Trasferire su vetrino un cristallo, oppure una aliquota di materiale,
aggiungere 2-3 gocce di acqua, una punta di microspatola del reagente
1) e 2 gocce del reagente 2).
Osservazione: stereomicroscopio a 5x su fondo bianco.
Reazione:
In presenza di saccarosio appare un colore blu-verde intenso.
Metodo II
Reagente: Cloruro stannoso (10.3.31)
Procedimento
Sospendere 2-3 g di mangime finemente macinato in 20-40 ml acqua,
agitare per alcuni minuti e filtrare. Trasferire 1-2 gocce del
filtrato in provetta, aggiungere 10-20 gocce del reagente e scaldare
su fiamma leggera per 5 secondi, evitando l'ebollizione.
Osservazione: a occhio nudo
Reazione:
Dopo raffreddamento, ed entro 5 minuti, in presenza di saccarosio
appare una colorazione blu.
Nota. La reazione è significativa in assenza di glucosio. In
presenza contemporanea di saccarosio e glucosio, appare un colore
rosso intenso.
10.6.4. Vitamine
10.6.4.1 Preparati di Vitamina A
Reagente: Reattivo di Carr-Price (10.3.35)
Procedimento
Depositare in scatola Petri uno strato di reagente (spessore 2-3 mm)
e spargervi sopra uniformemente una aliquota di materiale, senza
miscelare.
Osservazione: stereomicroscopio a 10-30x su fondo bianco
Reazione:
Le sferette di vitamina A galleggiano e si colorano istantaneamente
in blu scuro. Intorno ad esse si formano quindi aloni o correnti di
dissoluzione del medesimo colore.
10.6.4.2 Vitamina C (acido ascorbico e derivati)
Reagente: acido selenioso (10.3.36)
Procedimento
Depositare in scatola Petri un sottile strato di reagente e
disperdervi sopra uniformemente una aliquota di materiale, senza
miscelare.
Osservazione: stereomicroscopio a 10-20x su fondo bianco
Reazione:
I cristallini o la polvere di vitamina C e dei suoi derivati si
colorano rapidamente in rosso scuro.
10.6.5 Antibiotici
10.6.5.1 Tetracicline, Eritromicina, Oleandomicina, Tylosina
Reagente: Reattivo di Sakaguchi (10.3.37)
Procedimento
Depositare in scatola Petri un sottile strato del reagente e
spargervi sopra uniformemente una aliquota di materiale fine, senza
miscelare.
Osservazione: stereomicroscopio a 10-20x su fondo bianco
Reazioni:
In corrispondenza delle particelle di antibiotico si formano
istantaneamente aloni e strie colorati:
- Clorotetraciclina = blu/viola intenso
- Ossitetraciclina = rosso vivo
- Eritromicina = rosso scuro
- Oleandomicina = bruno scuro
- Tylosina = verde oliva
Nota. Con il reagente, altri componenti delle miscele possono
sviluppare colori simili a quelli descritti:
- la vitamina A si colora in blu scuro;
- i frammenti proteici vegetali e animali si colorano (lentamente) in
bruno scuro.
L'esame deve pertanto essere immediato e volto anche a differenziare
visivamente le caratteristiche delle particelle colorate.
10.7 Procedimenti enzimatici
10.7.1. Ureasi (nei semi di soia e nei loro derivati)
Reagente: Soluzione di Rosso cresolo e urea (10.3.34)
Procedimento
Disperdere uniformemente su carta da filtro in scatola Petri una
aliquota di prodotto e spargervi sopra il reagente, senza miscelare.
(I semi interi saranno grossolanamente triturati).
Osservazione: stereomicroscopio a 5-20x
Reazioni:
- Prodotto non tostato: le particelle dei cotiledoni di soia non
tostata, o tostata in modo insufficiente, si colorano lentamente
(30-60 secondi) in rosso vivo. Intorno ad esse si formano aloni di
colore rosso scuro, i quali possono confluire fino a colorare tutto
il reagente.
- Prodotto sufficientemente tostato: si colorano rare particelle di
soia.
- Prodotto surriscaldato: nessuna colorazione
Note.
1) I tegumenti dei semi di soia non si colorano.
2) Le particelle molto fini si colorano con difficoltà.
3) Altre sostanze suscettibili di sviluppare ammoniaca si colorano in
rosso. Tuttavia esse si differenziano dalla soia non tostata per la
colorazione istantanea anzichè graduale.
11 ANALISI IN FLUORESCENZA
11.1 Scopo e applicazione
Ha lo scopo di facilitare la distinzione di prodotti vegetali e
animali e di consentire il rilevamento nelle miscele di quantità
anche minime di taluni additivi utilizzati in forma solida.
Si applica ai mangimi e agli integratori allo stato secco.
11.2 Principio
Alcune sostanze contenute naturalmente nei tessuti biologici sono
autofluorescenti (fluorescenza primaria); in altre sostanze una
fluorescenza secondaria può essere provocata da reagenti
(fluorescenza indotta) oppure da coloranti fluorescenti
(fluorocromia). Il microscopio convenzionale, stereoscopico o
composto, può essere convertito temporaneamente in microscopio in
fluorescenza mediante l'applicazione di una sorgente di luce ad alta
intensità nello spettro UV-visibile e di filtri di eccitazione
nell'UV e nel blu-violetto.
I colori di fluorescenza (giallo/verde/azzurro con filtro UV,
rosso/arancio con filtro blu) sono visualizzati in ambiente oscurato
(stereomicroscopio) o su fondo buio (microscopio composto).
11.3 Reagenti
11.3.1 Glicerina
11.3.2 Olio da immersione per fluorescenza
11.3.3 Soluzione di Arancio acridina
a) I. Sciogliere 0.1 g di Arancio acridina in 100 ml di acqua
(Soluzione stock stabile. Mantenere a 4 (gradi centigradi) C)
II. Tampone fosfato 0.05M a pH 7
b) Soluzione di lavoro: diluire la soluzione I allo 0.1% nella
soluzione II. (Stabile per una settimana. Mantenere a temperatura
ambiente).
11.3.4 Acido solforico concentrato
11.3.5 Soluzione alcalina di potassio ferricianuro (sciogliere 0.1 g
di potassio ferricianuro e 2.5 g di idrato di sodio in 100 ml di
acqua)
11.3.6 Cloralio idrato acidificato (pH 2-5) (Sciogliere 60 g di
cloralio idrato in 40 ml di acqua e aggiungere 10 gocce di acido
solforico concentrato. Stabile per un mese)
11.3.7 Fenolo-glicerolo (13 g di fenolo cristallino in 87 ml di
glicerolo anidro)
11.4 Preparazione del campione
Prelevare una aliquota (5-10 g) di campione, suddividerla in frazioni
granulometriche, utilizzando la serie di setacci più idonea, come
indicato in 7.4.1.2.
I mangimi pellettati o granulati saranno preventivamente triturati in
mortaio (3.7).
11.5 Autofluorescenza
11.5.1 Materiali autofluorescenti
Sono autofluorescenti: cellulosa, amido, aleurone, oli e grassi,
clorofilla, caroteni, alcaloidi, nei tessuti vegetali; tessuti
muscolari, collagene, porfirine, nei tessuti animali.
Benchè non sia sempre specifica, la fluorescenza naturale fornisce
informazioni orientative, che possono assumere significato
diagnostico in integrazione con esami delle strutture istologiche.
11.5.2 Tecniche di osservazione
Le tecniche di esame consistono dei seguenti procedimenti:
1) Stereomicroscopio
Disperdere in strato uniforme sul fondo di scatole Petri le varie
frazioni allo stato naturale ed esaminare direttamente al microscopio
in fluorescenza.
2) Microscopio composto
Allestire su vetrino, in acqua o glicerina (11.3.1) oppure in olio da
immersione (11.3.2), piccole aliquote della frazione più fine ed
esaminare al microscopio in fluorescenza a basso ingrandimento
(40-100x).
11.5.3 Colori di fluorescenza naturale
- Materiali cellulosici (tegumenti di frutti e semi, crusche, glume,
steli, paglia ecc.) = azzurro
- Amidi = azzurro
- Materiali proteici (aleurone, glutine, fibre muscolari, penne,
latte in polvere, ecc.) = verde
- Oli, grassi, residui di semi oleosi = giallo
- Foglie, steli di erbe foraggere = aree rosse (clorofilla) su fondo
azzurro (cellulosa)
- Cotiledoni dei semi di:
girasole = azzurro
cartamo = rosso cupo
mandorla (dolce e amara) = lilla
albicocche= verde-azzurro
Mohwra = grigio lattescente con zone di
colore ambra
- Bucce dei semi di Datura stramonium = verde-azzurro
11.6 Fluorescenza secondaria
La fluorescenza secondaria, altamente specifica, consente di: 1)
rilevare lieviti e batteri nelle miscele e stabilire se le cellule
sono state inattivate; 2) differenziare i tessuti muscolari dai
tessuti cornei e dal sangue; 3) individuare alcune vitamine e
antibiotici nelle miscele.
11.6.1 Lieviti, Batteri
Colorante: Arancio acridina (11.3.3)
Procedimento
Trasferire su vetrino una piccola aliquota di materiale fine,
aggiungere alcune gocce del colorante, miscelare. Dopo alcuni minuti
aggiungere una goccia di acqua e coprire con coprioggetto esercitando
una leggera pressione.
Osservazione: microscopio composto in fluorescenza a 400-600x
Reazioni:
-Lieviti vivi = le cellule mostrano l'autofluorescenza verde delle
proteine
-Lieviti morti = le cellule fluorescono in rosso-arancio
-Lieviti lisati = aloni fluorescenti rosso arancio luminoso ai bordi
delle cellule, assenza di colorazione nel citoplasma
- Batteri vivi = le cellule fluorescono in rosso-arancio
- Batteri morti = le cellule mostrano l'autofluorescenza verde delle
proteine
11.6.2 Sangue, Tessuti muscolari, Tessuti cornei
Reagente: Acido solforico (11.3.4)
Procedimento
Trasferire su vetrino una piccola aliquota di materiale fine,
applicarvi 1-2 gocce del reagente, miscelare e coprire con
coprioggetto.
Osservazione: microscopio composto in fluorescenza a 100-250x
Reazioni:
- le particelle di sangue fluorescono istantaneamente in rosso
intenso (conversione dell'emoglobina in protoporfirina), che
sbiadisce rapidamente
- nelle fibre muscolari, sul fondo verde autofluorescente dominante
delle proteine, si notano zone di colore rosa-rosso spento, dovute a
residui di emoglobina
- i tessuti cornei (unghie, peli, penne), privi di emoglobina,
mostrano l'autofluorescenza verde uniforme della cheratina
11.6.3 Vitamine
11.6.3.1 Vitamina B1
Reagente: Potassio ferricianuro (11.3.5)
Procedimento
Depositare sul fondo di una scatola Petri un sottile strato di
reagente e disperdervi sopra uniformemente una aliquota di materiale,
fine, senza miscelare.
Osservazione: stereomicroscopio in fluorescenza a 10-30x
Reazione:
Intorno ai cristallini di vitamina si formano aloni fluorescenti di
dissoluzione di colore azzurro.
In alternativa, trasferire su vetrino una aliquota di materiale fine,
aggiungere alcune gocce del reagente, coprire con coprioggetto e
osservare al microscopio composto in fluorescenza a 100x
Nota. Con il reagente anche il coccidiostatico Amprolium sviluppa
fluorescenza azzurra.
11.6.3.2 Vitamina B2
Reagente: cloralio idrato acidificato (11.3.6)
Procedimento
Depositare sul fondo di una scatola Petri un sottile strato di
reagente e disperdervi sopra uniformemente una aliquota di materiale,
fine, senza miscelare.
Osservazione: stereomicroscopio in fluorescenza 10-30x
Reazione:
In corrispondenza dei cristallini di vitamina si formano macchie o
aloni fluorescenti di colore giallo verde.
La fluorescenza è istantanea e svanisce rapidamente.
In alternativa, trasferire su vetrino una aliquota di materiale fine,
aggiungere alcune gocce del reagente, corpire con coprioggetto e
osservare al microscopio composto in fluorescenza 100x
11.6.4 Antibiotici
11.6.4.1 Tetracicline
Reagente: Fenolo-glicerolo (11.3.37)
Procedimento
Trasferire una aliquota di materiale fine in scatola Petri e
applicarvi alcune gocce del reagente.
Osservazione: stereomicroscopio in fluorescenza a 10-30x
Reazioni:
Intorno ad ogni particella di antibiotico e di supporto aderente
all'antibiotico si formano aloni fluorescenti di dissoluzione:
- Ossitetraciclina = verde-giallo
- Clorotetraciclina = giallo oro
12 IDENTIFICAZIONE DELLE MUFFE
12.1 Scopo e applicazione
Ha lo scopo di individuare negli alimenti miceti potenzialmente
tossigeni, manifesti o latenti, anche al fine di orientare eventuali
ricerche tossicologiche. Si applica a tutti i mangimi.
12.2 Principio
Consiste nell'esaminare al microscopio i caratteri morfologici e
strutturali delle muffe nel loro aspetto naturale, oppure in colonie
ottenute per coltura.
12.3 Reagenti
12.3.1 Terreno colturale M2 (Sciogliere 20 g di malto, 20 g di agar,
3 g di estratto di lievito in 1000 ml di acqua distillata. Fare
bollire miscelando frequentemente finchè il liquido diventa limpido.
Sterilizzare in autoclave (3.14) a 121 (gradi centigradi) C per 15
minuti).
12.3.2 Terreno colturale M5S5 (Sciogliere 50 g di malto, 20 g di
agar, 50 g di cloruro di sodio in 1000 ml di acqua distillata. Far
bollire miscelando frequentemente finchè il liquido diventa limpido.
Sterilizzare in autoclave a 121 (gradi centigradi) C per 15 minuti).
(pH 6.5)
12.3.3 Lattofenolo (Sciogliere 10 g di fenolo in 10 ml di acqua
calda in bagno termostatico (3.11) a 70 (gradi centigradi) C,
aggiungere 10 g di acido lattico e 20 g di glicerina)
12.3.4. Acqua glicerinata (20 ml di glicerina in 80 ml di acqua)
12.3.5. Tween 80
12.4 Procedimenti
1) Per alimenti visibilmente contaminati
Si può procedere in due modi:
- esame diretto delle muffe
- esame di colonie ottenute per coltura di porzioni dei miceli
2) Per alimenti sospetti di contaminazione senza manifestazioni
visibili di sviluppo di miceti
Si può controllare la potenziale presenza di micogermi latenti con
tecniche rapide di microcoltura
12.4.1 Esame diretto
a) Esaminare la muffa sul prodotto, osservando allo stereomicroscopio
a 20-30x: tessitura e colore del micelio, forma dei conidiofori,
disposizione dei conidi sui conidiofori.
b) Prelevare e trasferire su vetrino piccole porzioni di micelio e i
singoli conidiofori, aggiungere 2-3 gocce di acqua, coprire con
coprioggetto con leggera pressione. Osservare al microscopio
composto: a 100-250x forma e ramificazioni delle ife e dei
conidiofori, a 250-400x le caratteristiche dei conidi.
12.4.2 Esame di colonie
Prelevare dalle muffe piccole quantità di micelio, depositarle su
terreno colturale M2 (12.3.1) solidificato in almeno 2 scatole Petri,
eseguendo 6-8 inoculi per scatola, chiudere le scatole e lasciare a
temperatura ambiente.
Dopo 24 ore si saranno sviluppate piccole colonie sulle quali
effettuare le osservazioni indicate in 12.4.1.
12.4.3 Microcolture
Macinare finemente (3.8) 5-10 g di campione e miscelare accuratamente
la polvere ricavata.
Sospendere 1 g di prodotto macinato in 100 ml di acqua sterile con
alcune gocce di Tween (12.3.5). Agitare per 1 minuto. Diluire a 1:100
o 1:1000.
Versare separatamente in 2 scatole Petri i due terreni colturali
(12.3.1 e 12.3.2) allo stato liquido, in quantità sufficiente a
formare uno strato di circa 1 mm.
Dopo solidificazione, ritagliare con bisturi da ogni strato 4
porzioni di 10-15 mm di lato e deporre ogni porzione su vetrino
portaoggetto. Con una siringa inoculare la sospensione al centro di
ognuno dei quattro lati dei quadratini e coprire con coprioggetto.
Preparare per ogni tipo di terreno 4 scatole Petri contenenti
ciascuna: un foglio di carta da filtro inumidita con acqua
glicerinata (12.3.4); una bacchetta di vetro piegata ad U.
Depositare il vetrino sulla bacchetta, chiudere la scatola e incubare
per 7-10 giorni in stufa (3.9): a 25 (gradi centigradi) C per il
terreno 12.3.1, a 35 (gradi centigradi) C per il terreno 12.3.2.
Di tanto in tanto osservare allo stereomicroscopio l'eventuale
comparsa e sviluppo di miceti.
Quando i corpi fruttiferi si siano formati, staccare delicatamente
con le pinze i coprioggetti, farli asciugare perfettamente, e
trasferirli senza premere su vetrini portaoggetti sui quali sia stata
depositata 1 goccia di lattofenolo (12.3.3).
Osservare al microscopio composto a 100-400x le caratteristiche delle
strutture riproduttive mature che saranno rimaste aderenti al
coprioggetto.
Nota. Tutti gli oggetti utilizzati per la ricerca dovranno essere
sterilizzati in autoclave a 121 (gradi centigradi) C per 15 minuti.
Bisturi e pinze possono essere di volta in volta flambati con alcole.
12.4.4 Identificazione
Le più comuni muffe contaminanti gli alimenti zootecnici sono
elencate nella Tabella 2, nella quale sono indicati i principali
metaboliti e i più probabili substrati.
I principali caratteri morfologici e strutturali sono sintetizzati in
Tabella 3. (*)
Tabella 2. Principali muffe contaminanti gli alimenti zootecnici e
principali principi attivi.
_____________________________________________________________________
| Genere e | | |
| Specie | Principio attivo | Substrato |
|_____________________|______________________|______________________|
| Aspergillus | | |
| flavus | Aflatossine | |
| fumigatus | Fumigallina, chinoni | Fieni, cereali, erbe,|
| ochraceus | Ocratossine | farine di carne, |
| niger | Acido ossalico | semi oleosi |
| candidus | Candidulina | |
| nidulans | Sterigmatocistina | |
| | | |
| Penicillium | | |
| cyclopium | Acido penicillico | Cereali, erbe, farine|
| expansum | Clavacina | di carne |
| | | |
| Fusarium | | |
| graminearum | Zearalenone | Cereali |
| tricinctum | Scirpeni | |
| | | |
| Cladosporium | | |
| cladosporioides | Acido cladosporico | Frumento, farine |
| | | vegetali |
| | | |
| Alternaria spp | Flavipina | Cereali, erbe, farine|
| | | di carne |
| Trichotecium roseum | Tricotecina | Cereali, farine |
| | | vegetali |
| | | |
| Stachybotrys altra | Stachibotriotossina | Fieni, paglie |
|_____________________|______________________|______________________|
(*) V. anche Riferimento bibliografico (6).
Tabella 3. Principali caratteri colturali e strutturali di alcune
muffe comuni
____________________________________________________________________
|Genere e |Apparato vegetativo |Organi riproduttivi |
|Specie |______________________|____________________________|
| | Micelio |Conidiofori |Conidi |
| |______________________|_______________|____________|
| |Tessitura | Colore |Forma |Disposizione|
|_______________|__________|___________|_______________|____________|
|Aspergillus | |Testa | |
| | |conidiale: | |
| flavus |granulosa verde giallo|emisferica |Catene |
| fumigatus |rasata verde |emisferica |Catene |
| | petrolio | | |
| ochraceus |fioccosa giallo ocra |colonnare |Catene |
| niger |fioccosa nero |raggiata |Catene |
| candidus |granulosa bianco beige|raggiata |Catene |
| nidulans |rasata beige scuro |globosa |Catene |
|Penicillium | | | |
| cyclopium |granulosa verde |Penicillo |Catene |
| | petrolio | | |
| expansum |granulosa verde |Penicillo |Catene |
| | petrolio | | |
|Fusarium | | | |
| graminearum |cotonosa marrone |Indifferenziato|Gruppi |
| | giallastro | |apicali |
| tricinctum |compatta rosa |Indifferenziato|Gruppi |
| | | |apicali |
| | | | |
|Cladosporium | | | |
| cladosporioide|vellutata verde oliva |Indifferenziato|Catene |
| | | |ramificate |
|Alternaria spp |lanosa grigio,verde|Indifferenziato|Catene |
| | oliva | |ramificate |
|Trichotecium | | | |
| roseum |cotonosa rosa,arancio|Indifferenziato|Gruppi |
| | salmone | |apicali |
|Stachybotrys | | | |
| altra |rasata grigio, |Indifferenziato|Gruppi |
| | nerastro | |apicali |
|_______________|______________________|_______________|____________|
___________________________________________________________________
|Genere e |Organi riproduttivi |
|Specie |__________________________________________________|
| |Conidi |
| |__________________________________________________|
| |Forma | Dimensioni (um) | Colore |
|_______________|____________|___________________|_________________|
|Aspergillus | |
| flavus |Globosa Verde |
| fumigatus |Globosa Verde |
| ochraceus |Globosa 2-4 ocra |
| niger |Globosa marrone scuro |
| candidus |Globosa incolore |
| nidulans |Globosa verde beige |
|Penicillium | |
| cyclopium |Globosa 4-5 grigio verde |
| expansum |Globosa 4-5 grigio verde |
|Fusarium | |
| graminearum |A falce/5 setti 40x3 incolore |
| tricinctum |A falce/3 setti, 35x4 incolore |
| |microconidi ovali 8x4 incolore |
| | |
|Cladosporium | |
| cladosporioide|Piriforme 18x10 verde oliva |
| |bicellulare |
|Alternaria spp |A clava 30x10 verde oliva |
| |multicellulare |
|Trichotecium | |
| roseum |Ellittica 3-5 incolore |
|Stachybotrys | |
| altra |Ovale 10x7 nero |
|_______________|__________________________________________________|
13 ANALISI QUANTITATIVA
13.1 Scopo e applicazione
Ha lo scopo di: 1) valutare se eventuali impurezze, ingredienti
estranei, materiali adulteranti, parti di piante indesiderabili ecc.,
rientrano nei limiti tollerati dalla normativa; 2) controllare se
nelle miscele è rispettato l'ordine ponderale decrescente indicato
dal produttore.
Si applica ai mangimi semplici e composti allo stato secco.
13.2 Principio
Si suddivide in frazioni un peso noto di campione e si determina la
percentuale ponderale di ogni frazione rispetto al campione iniziale.
Si valuta in ogni frazione la percentuale del/dei componenti da
determinare.
La quantità totale ricercata viene calcolata a partire dalle
percentuali parziali valutate nelle diverse frazioni e dalle
percentuali di queste frazioni nel campione iniziale.
13.3 Preparazione del campione
Pesare, a (più o meno) 0.1 g: 10 g per i prodotti a granulometria
grossolana e media, 5 g per i prodotti fini.
Frazionare la quota stabilita seguendo uno dei procedimenti indicati
nel cap. 7, secondo il tipo di mangime (si potranno utilizzare le
medesime frazioni preparate per l'analisi qualitativa, se si avrà
cura di eseguire preventivamente le necessarie pesate).
Pesare a (più o meno) 0.01 g il sedimento asciutto (frazione S) e
calcolarne la percentuale (xs) sul campione iniziale.
Pesare a (più o meno) 0.01 g le singole frazioni organiche (frazione
I, II,... N) e calcolarne le percentuali (x1, x2...xn) rispetto al
totale del campione iniziale.
Operare quindi, secondo le circostanze, con uno dei procedimenti
sotto indicati (13.4 e 13.5).
13.4 Estrazione
13.4.1 Premessa
La tecnica è basata sull'estrazione manuale delle particelle di
dimensioni superiori a 0.5 mm di diametro, che possono essere
identificate allo stereomicroscopio e separate senza perdite
significative, e può essere integrata dalla stima visiva dei
componenti fini identificabili al microscopio composto.
Le aliquote minime necessarie per ottenere risultati medi
rappresentativi, sono le seguenti:
a) 1-2 g, o la totalità, delle frazioni con particelle di (diametro)
&gt; 1.5 mm
b) 0.5-1 g delle frazioni con particelle di (diametro) compreso fra
1.5-1 mm
c) - 0.05-0.1 g delle frazioni con particelle di (diametro) compreso
fra 1-0.5 mm
13.4.2 Procedimento
13.4.2.1 Pesare, a (più o meno) 0.01 g, per ogni frazione I, II,
..N-1, le aliquote a), b), c) stabilite e trasferire in scatola
Petri, disperdendo uniformemente in strato sottile.
Operando allo stereomicroscopio, estrarre da ogni aliquota tutte le
particelle del componente da determinare, raccoglierle separatamente
e pesare a (più o meno) 0.0001 g. Calcolare le percentuali a1, a2,
..an-1 del componente rispetto ad ogni frazione.
13.4.2.2 Prelevare una piccola aliquota (0.01 g) della frazione N e
allestire un preparato su vetrino.
Operando al microscopio composto, esaminare a caso un campo e stimare
la percentuale del componente da determinare, valutando i rapporti di
superficie delle particelle del componente rispetto al complesso di
tutte le particelle visibili in quel campo.
Esaminare almeno 3 preparati e 5 campi per ogni preparato e valutare
la percentuale media (an) rispetto alla frazione N.
13.4.3 Calcolo dei risultati
La percentuale del componente nel campione è data dalla formula:
a1x1 + a2x2 + ...anxn + asxs
-----------------------------
100
dove:
a1 = % del componente nella frazione I
a2 = % " " II
an = % " " N
as = % del " nel sedimento S
x1 = % della frazione I nel campione iniziale
x2 = % " II "
xn = % " N "
xs = % del sedimento S "
100 = x1+x2...+xn+ xs (*)
(*) Durante le varie manipolazioni del campione, si potranno
verificare piccole perdite, soprattutto a carico dei materiali fini,
di conseguenza il peso totale delle varie frazioni non risulterà
rigorosamente uguale al peso del campione iniziale. Tali perdite non
sono generalmente significative e la quota mancante potrà essere
addebitata all'ultima frazione N, il cui peso sarà calcolato per
differenza.
Nei mangimi pellettati, se le perdite dovute al lavaggio in acqua
sono consistenti, si potrà operare su un secondo campione triturato
in mortaio e setacciato, pesando le nuove frazioni e facendo
riferimento ai pesi ottenuti per calcolare le percentuali del
componente estratto dal primo campione.
Nota.
Le percentuali ottenute rappresentano, di norma, valori minimali,
leggermente inferiori ai valori reali.
13.5 Conta
13.5.1 Premessa
La tecnica è basata sulla conta delle particelle di dimensioni
superiori a 0.5 mm di diametro, che possono essere identificate allo
stereomicroscopio, e può essere integrata dalla stima visiva dei
componenti fini identificabili al microscopio composto.
Le aliquote minime necessarie per ottenere risultati medi
rappresentativi, sono le stesse indicate in 13.4.1.1.
13.5.2 Procedimento
13.5.2.1 Pesare, a (più o meno) 0.01 g, le aliquote stabilite per
ogni frazione I, II,...N-1, e disperdere uniformemente in strato
sottile sul fondo di scatole Petri.
Operando allo stereomicroscopio, per ogni aliquota esaminare a caso
un campo e contare le particelle del componente da determinare e
tutte le altre particelle visibili in quel campo, e calcolare la
percentuale del componente rispetto al complesso di tutte le
particelle.
Esaminare almeno 3 aliquote per ogni frazione e 5 campi per ogni
aliquota, e calcolare le percentuali medie (a1, a2,....an-1) del
componente rispetto ad ogni frazione.
13.5.2.2 Procedere come in 13.4.2.2.
13.5.3 Calcolo dei risultati
Come in 13.4.3.
Note.
1) Il metodo fornisce stime orientative ed è utile, nella routine,
per valutare l'ordine decrescente dei componenti delle miscele.
2) Miscele di confronto e di riferimento sono utili nella stima di
ingredienti estranei nei mangimi semplici.
13.6 Tolleranze del metodo
(più o meno) 5 unità per valori stimati pari o superiori a 30%
(più o meno) 3 unità " " " inferiori a 30% fino a 10%
(più o meno) 2 unità " " " " 10% " 5%
(più o meno) 1 unità " " " inferiori a 5%
13.7 Espressione dei risultati
Le percentuali accertate saranno espresse in numeri interi.
13.8 Tecniche speciali
13.8.1 Determinazione della lolla di riso
Reagente: acido nitrico concentrato (9.3.15)
Procedimento
Trasferire 10 g di prodotto tal quale (sfarinati) o leggermente
macinato (pellets) in capsula di porcellana da 750 ml (4.16).
Aggiungere 40 ml del reagente, miscelare e lasciare in riposo per 5
minuti.
Aggiungere 500 ml di acqua e bollire per 20 minuti, agitando di tanto
in tanto. Diluire con acqua fredda, mescolare e lasciare in riposo
1-2 minuti. Decantare parzialmente il liquido surnatante, lavare il
residuo con acqua corrente, imprimendo alla capsula un movimento
rotatorio per facilitare il deposito dei frammenti secondo la
densità, e decantare di nuovo rapidamente: la lolla si depositerà
sul fondo (sarà riconoscibile per la colorazione bruna dei
frammenti), mentre gli altri materiali, parzialmente disciolti dal
trattamento, resteranno in sospensione e verranno allontanati durante
la decantazione. Ripetere il lavaggio 2-3 volte. Essiccare il residuo
in stufa a 90 (gradi centigradi) C per 4 ore.
Esaminare il residuo allo stereomicroscopio e togliere eventuali
frammenti estranei alla lolla. Pesare, moltiplicare per il fattore di
correzione delle perdite per dilavamento, pari a 1.77.
Esprimere il risultato in g%.
13.8.2 Determinazione dei gusci di ricino
Reagenti: 1) acido nitrico 10%
2) sodio idrato 2.5%
Procedimento
Trasferire 100 g di prodotto tal quale (sfarinati) o leggermente
macinato (pellets) in capsula di porcellana da 750 ml aggiungere 500
ml del reagente 1), agitare, fare bollire per 30 secondi.
Filtrare su garza e lavare il residuo con acqua calda.
Trasferire il residuo in altra capsula, aggiungere 500 ml del
reagente 2), agitare, fare bollire per 30 secondi, filtrare su garza
e lavare con acqua calda.
Trasferire il residuo in cilindro da 1000 ml, riempire con acqua,
agitare e lasciare in riposo alcuni minuti.
Fare passare una leggera corrente di acqua per mezzo di un tubicino
(di vetro o di gomma) che raggiunga il terzo superiore del liquido.
Regolare il getto di acqua in modo da rimuovere solo leggermente il
deposito di fondo contenente i gusci. Allorchè saranno stati
allontanati i materiali leggeri, localizzati in superficie e in
sospensione, decantare 2/3 del liquido, filtrare il residuo su garza
e trasferirlo in scatola Petri disperdendo uniformemente.
Operando allo stereomicroscopio su fondo bianco, estrarre i frammenti
di gusci di ricino riconoscibili e porli ad essiccare in stufa a 100
(gradi centigradi) C per 4 ore. Raffreddare e pesare. Moltiplicare
per il fattore di correzione delle perdite per dilavamento, pari a
1.3.
Esprimere il risultato in mg/kg.
PARTE II
CARATTERI E STRUTTURE DEI PRINCIPALI INGREDIENTI
1. Gli ingredienti descritti sono suddivisi, secondo l'origine, in 5
gruppi, articolati secondo i seguenti criteri:
1) Ingredienti vegetali, suddivisi per categoria merceologica,
famiglia/specie botanica, parte utilizzata (frutto/seme/pianta
intera, prodotti, sottoprodotti)
1. cereali
2. frutti/semi oleosi
3. legumi
4. radici/tuberi
5. frutti vari
6. foraggi
7. residui vari
8. frutti/semi indesiderabili
2) Prodotti lattieri
1. derivati del latte
2. derivati del siero
3) Ingredienti animali, suddivisi per gruppo zoologico e parte
utilizzata
1. derivati di animali terrestri
2. derivati di animali marini
4) Prodotti inorganici
1. prodotti minerali naturali
2. sali minerali
5) Composti organici
1. composti azotati
2. zuccheri
3. vitamine
4. estrogeni
2. Per ogni ingrediente considerato sono descritti:
a) allo stereomicroscopio
le caratteristiche di composizione/tecnologiche e i caratteri fisico-
morfologici esterni dei frammenti che lo costituiscono.
Per gli ingredienti vegetali viene anche descritta la conformazione
di taluni organi interi e allo stato naturale.
Per i prodotti chimici riconoscibili visivamente, sono descritti i
caratteri fisico-morfologici: dei frammenti, per i derivati della
macinazione di prodotti naturali; dei cristalli interi, per i sali;
b) al microscopio composto
le strutture interne delle particelle che lo costituiscono.
Per i prodotti di origine biologica sono descritte le strutture dei
frammenti dei diversi tessuti vegetali/animali, e sono puntualizzati
i principali caratteri diagnostici, necessari e sufficienti a
distinguere, anche in assenza di strutture complete, la famiglia o
specie botanica/il gruppo zoologico/un nuovo prodotto derivato.
Per le famiglie botaniche rappresentate da più specie, viene anche
indicata la struttura generale dell'organo utilizzato.
Per i prodotti chimici riconoscibili visivamente, sono indicate la
morfologia, le proprietà ottiche e altre peculiarità dei singoli
cristalli interi.
1 INGREDIENTI DI ORIGINE VEGETALE
Sono costituiti raramente da organi delle piante agrarie interi,
completi o allo stato naturale. In massima parte sono derivati da
processi di macinazione, estrazione di componenti, fermentazioni
ecc., che alterano la conformazione naturale delle parti utilizzate e
che talvolta sottraggono parte dei tessuti e dei contenuti cellulari,
lasciando strutture frammentate, distorte, spesso incomplete.
Il riconoscimento è basato: 1) allo stereomicroscopio, sui
principali caratteri naturali (forma, dimensioni, colore, ecc.) degli
organi interi e sulle caratteristiche esterne dei frammenti dei
derivati; 2) al microscopio composto, sulla istologia di frammenti di
tessuti/strati cellulari, che di norma si presentano all'osservazione
in visione di superficie; sulla morfologia/dimensioni/dettagli di
cellule isolate o di gruppi di cellule, disposte secondo
l'orientamento casuale; sulla morfologia e proprietà dei contenuti
cellulari, talvolta fuorusciti dalle cellule e sparsi ovunque nei
preparati.
A - Struttura generale degli organi vegetali
Gli organi delle piante superiori, pur nella diversa conformazione
esterna, che varia secondo la famiglia o la specie botanica, hanno
struttura simile, costituita da una successione di tessuti,
dall'esterno verso l'interno, generalmente uguale per tutti, ma con
forme e contenuti cellulari differenti:
1) Frutto e seme
Il frutto è formato dal pericarpo, o frutto vero e proprio, che
avvolge uno o più semi. In alcune specie il pericarpo è rivestito
da residui fiorali strettamente aderenti (es. glume di alcuni
cereali).
La successione dei tessuti comprende:
- Glume: 1) epidermide superiore; 2) ipoderma fibroso; 3) mesofillo,
parenchima spugnoso intermedio; 4) epidermide inferiore
- Pericarpo: 1) epicarpo, rivestimento esterno più o meno
consistente; 2) ipoderma (non sempre presente); 3) mesocarpo, zona
intermedia, che può essere secco o molle; 4) endocarpo, rivestimento
interno che può consistere di una sottile membrana (es. cereali) o
di un guscio spesso e duro (es. palme, oliva, mandorla)
- Seme: 1) testa, tegumento esterno più o meno consistente; 2)
perisperma (non sempre presente); 3) endosperma; 4) embrione, con una
o due foglie embrionali (cotiledoni), nei quali si distingue
l'epidermide e il mesofillo. Perisperma, endosperma ed embrione
differiscono nelle varie famiglie botaniche per dimensioni e
sviluppo, e contengono, l'uno o l'altro o tutti, i materiali di
riserva del seme: proteine/grassi/amido.
2) Foglia
La foglia è formata dalla pagina superiore e dalla pagina inferiore
che racchiudono il mesofillo.
La struttura comprende: 1) epidermide superiore; 2) mesofillo,
tessuto parenchimatico contenente clorofilla e percorso da fasci
vascolari, corrispondenti alle nervature; 3) epidermide inferiore.
3) Radice, Rizoma, Tubero
Hanno struttura simile, costituita da: 1) epidermide, 2) sughero, 3)
corteccia, che insieme costituiscono il rivestimento esterno; 4)
parenchima con fasci fibrovascolari, che costituisce la polpa.
4) Fusto/stelo
La struttura comprende: 1) epidermide, 2) corteccia, che insieme
costituiscono il rivestimento esterno; 3) parenchima spugnoso, con
fasci fibrovascolari, che costituisce il cilindro centrale.
B - Principali tessuti ed elementi cellulari
- Parenchima: tessuto fondamentale formato da cellule isodiametriche
con pareti sottili
- Parenchima spugnoso: parenchima con grandi spazi intercellulari
- Sclerenchima: tessuto meccanico di sostegno formato da cellule con
pareti lignificate (sclereidi)
- Epidermide: tessuto cutaneo di rivestimento esterno o interno
(superiore o inferiore) di un organo (es. epicarpo del pericarpo,
pagina superiore o inferiore delle foglie)
- Stoma: apertura circolare nell'epidermide
- Tricoma: prolungamento uni o pluricellulare di una cellula
dell'epidermide
- Cellule a palizzata: cellule allungate in senso perpendicolare alla
superficie dell'organo
- Fasci vascolari e fibrovascolari: gruppi di elementi dei tessuti
conduttori, formati da vasi ramificati, con pareti variamente
strutturate (punteggiate, reticolate, anulate, spiralate), talvolta
accompagnati da fibre di sostegno
- Fibre: cellule dei tessuti meccanici di sostegno, allungate a
bastoncino con pareti lignificate
- Corteccia: tessuto protettivo tra l'epidermide, o il sughero, e il
parenchima interno del fusto o della radice
- Sughero: tessuto protettivo di cellule tabulari con pareti
pigmentate contenenti suberina
- Ilo: 1) punto di inserzione dei semi di alcune famiglie nel
pericarpo; 2) nucleo di cristallizzazione dei granuli dell'amido.
C - Contenuti cellulari e loro proprietà
- Amido: polisaccaridi (amilosio e amilopectine) in granuli di forme
e dimensioni variabili secondo la specie.
I granuli possono essere semplici o composti; hanno struttura
microcristallina submicroscopica con nucleo di origine in un punto
(ilo), talvolta visibile in campo chiaro, talvolta percepibile in
luce polarizzata. L'ilo può essere: centrale o eccentrico; semplice
o doppio o triplo (granuli composti); puntiforme o allungato e/o
fessurato. In alcune specie, intorno all'ilo sono visibili strie
concentriche chiare e scure alternate.
In luce polarizzata i granuli, birifrangenti, appaiono luminosi e
mostrano una croce nera di interferenza le cui braccia si congiungono
nell'ilo. Secondo la posizione dell'ilo, nei granuli di alcune specie
la croce è di forma regolare, in altre specie mostra braccia
asimmetriche, in altre mostra due sole braccia congiunte a formare
una V. I caratteri di polarizzazione, molto evidenti in alcuni amidi
(es. patata), meno evidenti in altri (es. frumento), possono
scomparire per effetto di danneggiamenti quali: trattamenti termici,
refrigerazione, macinazione spinta.
I processi termici di gelatinizzazione in presenza di acqua producono
nei granuli modificazioni di vari tipi, riconducibili essenzialmente
a tre: 1) aumento di volume, perdita graduale della birifrangenza
dall'ilo verso la periferia, 2) aumento di volume, distorsione della
forma, perdita della birifrangenza dalla periferia verso l'ilo, 3)
distorsione della forma, diminuzione di volume, birifrangenza
persistente, passaggio in soluzione.
Oltre che all'esame visivo, i granuli possono essere evidenziati con
procedimenti di colorazione differenziale, utili per: 1) rilevare
amido nei tessuti vegetali o in un alimento: con soluzione di Lugol
l'amido si colora in blu; 2) rilevare granuli strutturalmente
alterati (spezzati, gelatinizzati): con Rosso Congo 0.5% i granuli,
in qualsiasi modo danneggiati, si colorano per intero in rosa-
arancio, al contrario dei granuli integri che restano incolori.
- Mucillagini: sostanze gelatinose non organizzate (pectina, gomme)
con disposizione concentrica o stratificata o assiale, secondo la
famiglia/specie, birifrangenti, a volte con croce di polarizzazione.
Con Tionina si colorano in rosso.
- Inulina: polioso in forma colloidale, derivato dalla condensazione
del fruttosio. Con alcole etilico forma precipitati sferoidali di
cristalli aghiformi (sferocristalli)
- Aleurone: materiale proteico organizzato in corpi sferici,
contenenti, benchè raramente visibili nell'analisi di routine,
cristalloidi proteici, globoidi di fosfati e di sali organici,
cristalli di ossalato di calcio. Con soluzione di Lugol si colora in
bruno.
- Tannino: acido tannico in corpi non organizzati, individuabile con
reazioni microchimiche: con solfato ferroso si colora in verde
scuro/nero, con sodio idrato si colora in blu.
- Grassi, oli: corpi non organizzati. I grassi sono talvolta
solidificati in microcristalli aghiformi o raggiati, aggregati in
masse birifrangenti; gli oli sono visibili sotto forma di globuli.
Grassi e oli si colorano in rosso-arancio con Sudan III.
- Ossalato di calcio: cristallini birifrangenti di varie forme: 1)
aghiformi (rafidi), singoli o in fasci; 2) piramidali, semplici o
geminati; 3) prismatici, singoli o aggregati in rosette (druse); 4)
polvere microcristallina. È solubile in acido cloridrico, insolubile
in acido acetico.
1.1 Cereali e derivati
1.1.1 Graminacee
La cariosside delle Graminacee è un frutto con pericarpo saldato al
seme e, in alcune specie, saldato anche alle glume fiorali.
Le glume hanno forma convessa, talvolta con coste longitudinali più
o meno rilevate; nella maggior parte delle specie sono spesse e
fibrose, con superficie liscia o rugosa, in altre sono sottili e
membranacee; possono essere fornite o non di arista e di tricomi ad
una estremità.
Il pericarpo è consistente, e in alcune specie è fornito di un
ciuffo di tricomi ad un apice.
Nel seme, testa e perisperma sono poco evidenti; l'endosperma
cospicuo può essere vitreo o farinoso (secondo la specie o varietà
è presente una sola o entrambe le forme), contiene amido quale
principale costituente e piccole quantità di proteina; l'embrione
oleoso, più o meno consistente, comprende un solo cotiledone.
Sono utilizzati: grani interi, laminati, spezzati, macinati; derivati
della molitura, dell'estrazione di componenti, delle distillerie.
Istologia della cariosside
Glume: epidermide superiore di cellule allungate interrotte da
cellule rotonde, con o senza stomi, con tricomi; ipoderma di fibre
allungate; mesofillo spugnoso; epidermide inferiore di cellule
isodiametriche o allungate, con stomi.
Pericarpo: epicarpo di cellule allungate, a volte con tricomi;
ipoderma di cellule disposte in senso trasversale rispetto a quelle
dell'epicarpo (cellule trasversali); endocarpo formato da un solo
strato di cellule tubulari
Testa: uno strato di cellule allungate, a volte pigmentate in giallo
o bruno
Perisperma: uno strato di cellule indistinte
Endosperma: uno strato esterno di cellule isodiametriche contenenti
aleurone (cellule aleuroniche); parenchima interno di cellule
isodiametriche contenenti amido immerso in un sottile reticolo
proteico
Embrione: piccole cellule poligonali contenenti olio e proteina
Gli elementi più utili ai fini dell'identificazione sono: epidermide
superiore delle glume; cellule trasversali del pericarpo; cellule
aleuroniche; amido; tricomi.
1.1.1.1 Avena (Avena sativa)
Frutto
Cariosside ovale lunga 2-3 mm, appuntita alle estremità, a sezione
rotonda. È rivestita di glume di colore variabile da bruno chiaro a
bruno scuro secondo la varietà, con o senza arista, e fornite di
lunghi tricomi ad una estremità. Il pericarpo, di colore bruno
chiaro, è vellutato per la presenza di abbondanti tricomi sparsi,
lunghi e sottili; l'endosperma è bianco, farinoso; l'embrione è
piccolo.
Derivati
Composizione
Farina: endosperma in parte polverizzato in parte in frammenti
soffici, bianchi, alcuni con residui di pericarpo aderente di colore
bruno chiaro; frammenti rettangolari di glume spesse, con superficie
esterna liscia e lucida, sulla quale sono visibili numerosi stomi
(assenti nell'orzo); abbondanti e lunghi tricomi, spesso aggregati
tra di loro
Fiocchi: larghi frammenti bianchi laminari di cariossidi private
delle glume, pressate e cotte, con residui di pericarpo aderente
Istologia
Glume: cellule dell'epidermide superiore allungate, con pareti spesse
ondulate a zig zag, interrotte da numerosi stomi (assenti nell'orzo);
tricomi unicellulari conici, corti, con pareti spesse, base
arrotondata e lume cellulare largo
Pericarpo: cellule dell'epicarpo allungate, con pareti porose;
tricomi unicellulari, alcuni corti, altri lunghi fino a 2 mm, con
base stretta e lume cellulare più stretto delle pareti
Endosperma: cellule dello strato aleuronico tondeggianti, con pareti
sottili, e contenenti aleurone granulare; amido in piccoli granuli
poligonali ((diametro) 6-7 (m greco)m) con ilo centrale visibile in
luce polarizzata, spesso riuniti in aggregati arrotondati di
dimensioni variabili
1.1.1.2 Frumento tenero e duro (Triticum aestivum, T - durum), Farro
(Triticum dicoccum, T. monococcum)
Frutto
Cariosside ovale lunga 6-8 cm, svestita nel frumento, saldata a
sottili glume nel farro, a sezione ovoidale o triangolare con
fenditura longitudinale profonda nel lato ventrale.
Il pericarpo è di colore rosato nel frumento tenero e nel farro, di
colore crema nel frumento duro, e presenta un ciuffo di tricomi ad un
apice. L'endosperma è bianco e farinoso nel frumento tenero e nel
farro, di colore crema e vitreo nel frumento duro. L'embrione
consistente è facilmente separabile dal resto della cariosside.
Derivati
Composizione
Crusche, cruschelli, tritelli: frammenti laminari di pericarpo,
larghi nelle crusche, più piccoli nei cruschelli e nei tritelli, con
superficie esterna opaca di colore rosato o crema, e con residui di
endosperma farinoso o vitreo aderenti al lato interno; scarse
quantità di endosperma polverizzato nelle crusche, quantità più
consistenti nei cruschelli e nei tritelli; talvolta piccole quantità
di embrioni frantumati
Farinette: endosperma polverizzato; scarsi residui di crusca e di
embrioni
Germe: embrioni ovali, interi o spezzati, di colore crema, oleosi
alla pressione; residui di crusca e di endosperma
Panello di germe: conglomerati di embrioni interi o spezzati,
appiattiti, duri, privati dell'olio; piccole quantità residue di
crusca e di endosperma
Glutine: polvere bianca, costituita da fini particelle di proteina
solidificata dure, bianche o semitrasparenti (simili a particelle di
endosperma di frumento duro, riso, sorgo) Amido: polvere fine bianca
non differenziata, costituita da amido praticamente puro
Amido gelatinizzato: polvere bianca non differenziata, costituita da
amido trattato termicamente
Borlande di distillerie: v. 1.7.4 e 1.7.5
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo allungate, con pareti spesse e
porose; cellule trasversali disposte in colonne regolari affiancate,
con pareti interamente porose (nel farro le pareti sono più sottili
che nel frumento e nella parte terminale i pori sono quasi
indistinti); tricomi unicellulari lunghi fino a 1 mm, con base
allargata globulare e lume cellulare più stretto delle pareti
Endosperma: cellule dello strato aleuronico quadrangolari con pareti
spesse, talvolta con residui di aleurone granulare giallo o bruno
(nel T. monococcum con pigmento azzurro). Amido in granuli in parte
biconvessi di forma circolare, larghi 25-35 (m greco)m, raramente 50
(m greco)m (5-25 (m greco)m nel T. monococcum), in parte piccoli
anche poligonali (7-8 (m greco)m). L'ilo centrale è visibile in luce
polarizzata, e la croce di polarizzazione è sfumata. I granuli più
larghi talvolta mostrano anelli di accrescimento concentrici chiari e
scuri alternati
Embrione: struttura a piccole cellule quadrangolari allineate in file
Amido gelatinizzato: granuli di amido aumentati di volume, incurvati,
distorti, privi di croce di polarizzazione o con croce molto sfumata,
che si colorano in rosso con Rosso Congo 0.5%. Eventuali granuli
integri residui possono consentire l'identificazione della specie
Glutine: particelle tondeggianti, opache, prive di struttura,
isotrope, spesso riunite in aggregati, e riconoscibili come materiale
proteico per la colorazione bruna in soluzione di Lugol. Residui
occasionali di pericarpo e di granuli di amido sono sufficienti per
l'identificazione della specie
1.1.1.3 Granoturco (Zea mays)
Frutto
Cariosside appiattita, tondeggiante o triangolare, di dimensioni
molto variabili secondo la varietà.
Il pericarpo è coriaceo, semitrasparente; l'endosperma, giallo o
bianco, è vitreo nella parte esterna, soffice e farinoso nella parte
interna; l'embrione cospicuo è facilmente separabile dal resto della
cariosside.
L'infiorescenza a spiga (tutolo), talvolta presente in tracce
occasionali nei derivati, talvolta utilizzata a scopo di
sofisticazione, è voluminosa, cilindrica. È costituita da una zona
esterna legnosa, nella quale sono inserite le glume fiorali, alcune
spesse, altre membranacee, e da un midollo centrale spugnoso.
Derivati
Composizione
Crusca: lamine di pericarpo dure, semitrasparenti, incolori o
rossastre, con striature parallele; residui di endosperma giallo o
bianco polverizzato o in frammenti vitrei; tracce di embrioni interi
o spezzati di colore bruno chiaro; residui occasionali di glume,
alcune in frammenti spessi e coriacei, di colore giallino, altre in
forma di sottili pellicole rosse
Farinetta: endosperma polverizzato di colore giallo-grigio; residui
di crusca e di embrioni; tracce di glume
Semola: frammenti di endosperma vitreo, con tracce occasionali di
crusca e di embrioni spezzati
Fiocchi: larghi frammenti laminari di cariossidi pressate e cotte di
colore giallo, con residui occasionali di crusca
Germe: embrioni allungati ovali, interi o spezzati, di colore
giallino o bruno chiaro, oleosi alla pressione; residui di crusca e
di endosperma
Scarti e rotture: insieme disomogeneo di cariossidi spezzate e di
frammenti di crusca, con tracce di tutoli, di glume fiorali e di
embrioni
Panello, Farina di estrazione di germe: conglomerati irregolari di
residui di embrioni privati dell'olio di colore bruno chiaro o scuro,
appiattiti, duri; piccole quantità residue di crusca e di endosperma
Glutine: polvere gialla costituita da sferette di proteina
solidificata, di colore giallo oro, dure e opache, con scarsi residui
di crusca annerita
Farina glutinata: miscela di particelle gialle di glutine, di
frammenti di crusca annerita, alcuni isolati, altri inglobati nel
glutine, con tracce di endosperma annerito
Amido, Fecola: polveri finissime bianche non differenziate,
costituite da amido praticamente puro
Amido gelatinizzato: polvere bianca non differenziata, costituita da
amido trattato termicamente
Tutolo macinato: frammenti arrotondati, grossolani, durissimi, di
colore crema (zona esterna); frammenti bianchi, bucherellati, soffici
(zona midollare); glume come in Crusca
Residui di distillerie: v. 1.7.4 e 1.7.5
Istologia
Glume: nelle glume più consistenti l'epidermide esterna è formata
da cellule allungate con pareti diritte, spesse e porose miste a
cellule con pareti sottili lisce; nelle glume sottili le cellule
dell'epidermide sono allungate, con pareti sottili ondulate
Pericarpo: cellule dell'epicarpo e dell'ipoderma molto allungate, con
pareti spesse e porose;
Endosperma: cellule dello strato aleuronico poligonali, con pareti
sottili, con residui di aleurone granulare; amido in granuli
poligonali (parte vitrea) o leggermente tondeggianti (parte
farinosa), di dimensioni uniformi (10-25 (m greco)m), con ilo
centrale marcato, puntiforme o fessurato, e croce di polarizzazione
distinta
Embrione: struttura a piccole cellule poligonali, alcune allungate
con nucleo visibile marcato Tutolo: sclereidi allungate o
isodiametriche (zona esterna); cellule larghe isodiametriche con
pareti sottili (midollo); tricomi uni o pluricellulari, lisci o
punteggiati, con lume largo Glutine: sferette opache, gialle, prive
di struttura, isotrope, riconoscibili come materiale proteico per la
colorazione bruna in soluzione di Lugol. Residui occasionali di
pericarpo e di granuli di amido sono sufficienti per
l'identificazione della specie
Amido gelatinizzato: v. Frumento (1.1.1.2)
1.1.1.4 Miglio (Panicum miliaceum)
Frutto
Cariosside tondeggiante larga circa 2 mm, rivestita di glume
coriacee, lisce, di colore crema.
Il pericarpo è sottile, di colore crema; l'endosperma è bianco
farinoso; l'embrione è minuto.
Derivati
Composizione
Farina: endosperma bianco polverizzato; frammenti di glume dure,
lucide, di colore crema; fini particelle di pericarpo
Istologia
Glume: cellule dell'epidermide superiore isodiametriche o leggermente
allungate, con pareti spesse, profondamente ondulate con sinuosità
multiple
Endosperma: amido in granuli poligonali ((diametro) 18 (m greco)m)
con ilo puntiforme
1.1.1.5 Orzo (Hordeum vulgare)
Frutto
Cariosside ovale lunga 1.5-2 cm, appuntita ad una estremità e
rigonfia nella parte centrale, a sezione pentagonale, con coste
rilevate longitudinali. È rivestita di glume di colore giallo-
grigio, fornite di tricomi abbondanti ad una estremità. Il
pericarpo è sottile, di colore crema o grigio-azzurro; l'endosperma
è bianco, compatto; l'embrione è piccolo.
Derivati
Composizione
Farina: endosperma bianco, in parte polverizzato, in parte in
frammenti compatti arrotondati con residui di glume e di pericarpo
aderenti; frammenti triangolari di glume sottili, con superficie
esterna liscia e opaca, priva di stomi
Fiocchi: frammenti laminari di cariossidi private delle glume,
pressate e cotte, di colore bianco-grigio, con residui di pericarpo
grigio-azzurro aderenti
Borlande di birrerie: v. 1.7.2
Radichette di malto: v. 1.7.3
Residui di distillerie: v. 1.7.4 e 1.7.5

Istologia
Glume: cellule dell'epidermide superiore allungate, strette, con
pareti spesse a ondulazioni larghe, interrotte da piccole cellule
rotonde, senza stomi
Pericarpo: cellule trasversali dell'ipoderma, disposte in colonne
regolari affiancate, con pareti non porose; tricomi unicellulari
lunghi fino a 300 (m greco)m, con base arrotondata e lume cellulare
più largo delle pareti
Endosperma: cellule dello strato aleuronico (più piccole di quelle
del frumento e della segale) con contenuto giallo chiaro, azzurro in
alcune varietà; amido in granuli in parte ellittici, larghi 20-35 (m
greco)m in parte circolari e più piccoli (0 2-6 (m greco)m) molto
più numerosi che nel frumento, con ilo centrale o leggermente
eccentrico, spesso non visibile, talvolta puntiforme o fessurato a
ipsilon, con croce di polarizzazione sfumata
1.1.1.6 Riso (Oryza sativa)
Frutto
Cariosside ovale, a sezione ovale, di dimensioni variabili secondo la
varietà. È rivestita di glume (lolla) di colore bruno chiaro o
scuro, spesse e ruvide, con superficie esterna reticolata da
nervature longitudinali molto rilevate e da nervature trasversali
meno marcate, e provvista di tricomi silicei duri, appuntiti. La
cariosside svestita è di colore bianco argenteo traslucido ed è
marcata da coste longitudinali parallele.
Il pericarpo è molto sottile; l'endosperma è bianco, vitreo;
l'embrione consistente è facilmente separabile dal resto della
cariosside.
Derivati
Composizione
Lolla: frammenti irregolari di glume, con caratteristica
reticolazione quadrettata. Si colorano in rosso-violaceo con
Floroglucina cloridrica
Pula, farinaccio: sottili lamine di pericarpo di colore bruno chiaro
o rossastro; endosperma polverizzato o in frammenti bianchi, duri,
vitrei (più abbondante il pericarpo nella pula, più abbondante
l'endosperma nel farinaccio); frammenti di embrioni di colore crema;
scarsi frammenti di lolla
Puletta: miscela di lolla macinata e di elementi costitutivi della
pula e del farinaccio
Germe (gemma): embrioni ovali, interi o spezzati, di colore crema,
oleosi alla pressione
Panello, Farina di estrazione di germe: conglomerati irregolari di
residui di embrioni privati dell'olio, appiattiti, duri, interi o
spezzati, con residui di pericarpo, di endosperma e di lolla Rotture:
cariossidi spezzate o di scarto
Glutine: polvere bianca costituita da fini particelle di proteina
solidificata, dure, semitrasparenti
Amido, Fecola: polveri finissime bianche non differenziate costituite
da amido praticamente puro
Amido gelatinizzato: polvere bianca non differenziata, costituita da
amido trattato termicamente
Istologia
Glume: le cellule dell'epidermide superiore sono larghe e allungate,
e hanno pareti lignificate spesse e profondamente ondulate da
ripiegature multiple; sono disposte in file longitudinali e sono
interrotte da tricomi conici diritti, appuntiti, con lume largo
Pericarpo: cellule dell'epicarpo allungate, molto trasparenti, con
pareti diritte nelle parti laterali e ondulate nelle parti terminali
Endosperma: cellule dello strato aleuronico poligonali, con pareti
sottili; amido in piccoli granuli poligonali ((diametro) 3-5 (m
greco)m) con ilo centrale puntiforme difficilmente visibile o
visibile in luce polarizzata, spesso in aggregati angolari di 3 o
più granuli
Glutine: v. glutine di frumento (1.1.1.2)
Amido gelatinizzato: v. Frumento (1.1.1.2)
1.1.1.7 Segale (Secale cereale)
Frutto
Cariosside svestita, lunga 6-8 mm, affusolata e appuntita ad una
estremità, con fenditura longitudinale profonda nel lato ventrale.
Il pericarpo è sottile, grinzoso, di colore bruno, grigio o verde-
azzurro, ed è fornito di un ciuffo di tricomi ad un apice;
l'endosperma è farinoso, di colore verde-azzurro nella parte
esterna, bianco puro all'interno; l'embrione è piccolo.
Derivati
Composizione
Crusca, Cruschello: frammenti laminari di pericarpo, larghi nella
crusca, più piccoli nel cruschello, con superficie esterna grinzosa,
opaca, verdognola, e con residui di endosperma bianco e verde-azzurro
aderenti alla superficie interna; endosperma polverizzato o in
frammenti arrotondati; piccole quantità di embrioni frantumati
Farinetta: tutte le parti della cariosside polverizzata
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo allungate con pareti sottili fornite
di pori indistinti; cellule trasversali disposte in colonne regolari
affiancate, con pareti sottili e leggermente porose nelle parti
laterali, spesse e lisce nelle parti terminali; tricomi unicellulari
con base arrotondata e lume cellulare più largo delle pareti
Endosperma: cellule dello strato aleuronico poligonali, alcune con
contenuto giallo, altre con contenuto azzurro; amido in granuli per
la maggior parte sferoidali, larghi fino a 50 (m greco)m, in parte
più piccoli e rotondi, con ilo spesso visibile, centrale, puntiforme
o fessurato a stella (il 10% circa dei granuli più larghi di 10 (m
greco)m presenta ilo stellato)
1.1.1.8 Sorgo (Sorghum vulgare)
Frutto
Cariosside ovoidale o sferica o appuntita alle estremità, di
dimensioni variabili (4-6 o più mm), svestita o rivestita di glume
consistenti di vari colori (giallo, bruno, rosso), secondo le
varietà, e di sottili glume rossicce.
Il pericarpo è sottile, variamente colorato; il perisperma,
contrariamente alle altre Graminacee, è consistente, di colore
giallo o bruno; l'endosperma bianco è in massima parte vitreo;
l'embrione è piccolo.
Derivati
Composizione
Farina: endosperma bianco, generalmente in frammenti bianchi
semitrasparenti, alcuni con residui di pericarpo/perisperma aderente
rosso/giallo/bruno; frammenti di glume coriacee, abbondanti nelle
varietà a seme vestito, di forma convessa e variamente colorate, con
superficie esterna liscia e lucida; altre glume sottili e membranacee
Farina glutinata: polvere disomogenea costituita da particelle
irregolari di proteina solidificata di colore bruno scuro, abbastanza
dure alla pressione, e da residui di glume e di pericarpo
Istologia
Glume: nelle glume consistenti l'epidermide esterna è formata da
cellule allungate con pareti spesse e ondulate; nelle glume sottili
le cellule dell'epidermide sono allungate, con pareti sottili e
ondulate
Perisperma: uno strato di cellule quadrangolari contenenti pigmento
rosso, arancio o giallo
Endosperma: amido in granuli poligonali larghi fino a 30 (m greco)m,
con ilo centrale fessurato
1.1.2 Poligonacee
Alla famiglia appartiene il Grano saraceno, specie commercialmente
considerata tra i Cereali per l'attitudine alla panificazione del
seme che, strutturalmente e chimicamente, è simile alla cariosside
delle Graminacee.
1.1.2.1 Grano saraceno (Fagopyrum esclulentum)
Frutto
Frutto triangolare, lungo 4-6 (m greco)m, con pericarpo (guscio)
coriaceo, di colore grigio variegato di bruno, staccato dal seme. Il
seme comprende: testa sottile; endosperma amilaceo abbondante, bianco
e farinoso; embrione piccolo con due sottili cotiledoni piatti.
Viene utilizzato il seme macinato, generalmente privato del
pericarpo.
Gli elementi istologici più utili sono: epicarpo; amido.
Derivati
Composizione
Farina: prodotto non troppo raffinato di colore crema o bruno chiaro.
Contiene: endosperma polverizzato di colore bianco puro; sottili
pellicole del testa giallo-verdi o brune; residui di pericarpo
laminari, bruni, sottili e duri, con superficie esterna liscia e
lucida
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo allungate con pareti fornite di
punteggiature a spirali reticolate; parenchima con contenuto bruno
Testa: cellule dell'epidermide allungate con pareti ondulate;
parenchima spugnoso con granuli di clorofilla o pigmento bruno
Endosperma: uno strato aleuronico di cellule poligonali, simili a
quelle dei cereali; amido in piccoli granuli poligonali ((diametro)
medio 9 (m greco)m), riuniti in masse compatte che mantengono la
forma delle cellule, o in aggregati di forma ovale allungata nei
quali i granuli sono arrotondati
1.2 Frutti/semi oleosi e derivati
1.2.1 Composite
Il "seme" commerciale delle Composite è un frutto costituito da un
pericarpo lignificato (guscio) e da un seme oleoso.
Il pericarpo è variamente pigmentato; testa e endosperma del seme
sono sottili, saldati insieme a formare una leggera pellicola;
l'embrione abbondante comprende due cotiledoni oleoproteici.
Per l'estrazione dell'olio viene utilizzato il frutto completo,
oppure il seme privato del pericarpo. I sottoprodotti contengono
residui di semi e frammenti di gusci, più o meno abbondanti secondo
il grado di decorticazione.
Istologia del frutto
Pericarpo: epicarpo di cellule ovali allungate; ipoderma di cellule
di varie forme; in alcune specie, uno strato non cellulare di
pigmento (fitomelano) variamente distribuito; vari strati di fibre e
sclereidi; parenchima compresso
Testa: epidermide superiore di cellule allungate con pareti
punteggiate; il resto, tessuto non differenziato Endosperma e
embrione: piccole cellule poligonali contenenti olio e proteina
Gli elementi più utili ai fini dell'identificazione sono: epicarpo;
ipoderma; presenza o assenza di pigmento; epidermide del testa.
1.2.1.1 Cartamo (Carthamus tinctoris)
Frutto
Frutto ovoidale o piriforme, lungo 1.5-2 cm, con pappo ad un apice.
Il pericarpo è legnoso, di colore grigio chiaro o crema. Testa e
endosperma del seme formano una lamina perlacea che avvolge
l'embrione di colore crema.
Derivati
Composizione
Farina di estrazione: residui, di colore bruno chiaro, di embrioni
polverizzati; sottili pellicole perlacee (testa ed endosperma);
quantità variabili di frammenti grossolani di pericarpo spessi e
duri, con superficie esterna liscia e lucida di colore bruno chiaro e
con zona interna bianca fibrosa.
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo ovali, allungate (130 (m greco)m),
senza pigmento e senza tricomi, con pareti spesse, talvolta
punteggiate; sclereidi irregolari, alcune allungate fino a 150 (m
greco)m; fitomelano assente
Testa: cellule dell'epidermide larghe, con pareti punteggiate da
ampie aperture lenticolari
1.2.1.2 Girasole (Helianthus annuus)
Frutto
Frutto ovoidale, appuntito alla base e arrotondato alla sommità, a
sezione quadrangolare, lungo fino a 2 cm.
Il pericarpo è fibroso, bianco o nero o striato in senso
longitudinale, secondo la varietà. Testa e endosperma del seme
formano una pellicola argentea che avvolge l'embrione bianco.
Derivati
Composizione
Farina di estrazione: residui grigi di embrioni polverizzati; fragili
lamine argentee (testa ed endosperma);quantità variabili di
frammenti di pericarpo spessi, rettangolari, con superficie esterna
rugosa bianca o variamente pigmentata in nero e con zona interna
bianca fibrosa.
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo ovali allungate (fino a 200 (m
greco)m), con pareti porose, con o senza pigmento nero; tricomi
unicellulari appaiati lunghi fino a 500 (m greco)m, interi o
spezzati; cellule dell'ipoderma molto regolari, quadrangolari, con
pareti punteggiate; uno strato non cellulare di pigmento nero
(fitomelano) disposto a striscie longitudinali; fibre diritte,
fittamente punteggiate, lunghe fino a 800 (m greco)m, larghe 25 (m
greco)m, isolate o in gruppi
1.2.1.3 Neuk (Guizotia abyssinica)
Frutto
Frutto ovoidale, lungo 5 mm.
Il pericarpo è sottile, fibroso, nero. Testa e endosperma del seme
formano una sottilissima pellicola perlacea che avvolge l'embrione
bianco.
Derivati
Composizione
Panello: residui grigi di embrioni polverizzati; frammenti di
pericarpo lunghi e stretti, neri sottili e fragili, con superficie
esterna liscia e lucida
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo allungate con pareti lisce, senza
pigmento e senza tricomi; cellule dell'ipoderma a forma di tibia,
lunghe 20-50 (m greco)m, e larghe 10 (m greco)m, disposte a
palizzata, pigmentate in nero; strato non cellulare di pigmento nero
(fitomelano) disposto a striscie longitudinali discontinue
Testa: cellule dell'epidermide con pareti profondamente ondulate,
alcune con punteggiature allungate
1.2.2 Crucifere
Il seme delle Crucifere comprende: testa (buccia) sottile, a volte
mucillaginoso, più o meno reticolato secondo la specie o varietà;
endosperma non evidente; embrione consistente con due cotiledoni
oleoproteici nei quali sono localizzati principi attivi
(glucosinolati) responsabili delle proprietà tossiche dei semi di
alcune specie e dei loro sottoprodotti (v. 1.8.2).
Per l'estrazione dell'olio viene utilizzato il seme completo. I
sottoprodotti contengono residui di tutte le parti del seme cementate
insieme.
Istologia del seme
Testa: epidermide superiore di cellule poligonali, talvolta con
mucillagine; ipoderma poco evidente; uno strato di cellule disposte a
palizzata; parenchima compresso, a volta pigmentato Endosperma:
parenchima non differenziato
Embrione: piccole cellule poligonali contenenti olio e proteina Gli
elementi istologici più utili ai fini dell'identificazione sono:
presenza/assenza di mucillagine nell'epidermide superiore del testa;
cellule a palizzata del testa.
Le cellule a palizzata hanno pareti spesse, incolori o pigmentate, e
altezza variabile secondo la specie o varietà. Viste dall'alto sono
poligonali, con lume cellulare di ampiezza variabile rispetto alla
doppia parete di due cellule contigue. La variabilità nell'altezza,
che produce la reticolazione alla superficie del seme, è un
carattere altamente specifico visibile in sezione radiale: disponendo
di semi interi, è utile eseguire sezioni sottili del testa; nei
materiali frantumati, è utile ricercare nei preparati le particelle
del testa orientate in modo da produrre un effetto di sezione.
1.2.2.1 Colza (Brassica napus)
Seme
Seme sferico ((diametro) 2-3 mm) con testa sottile di colore bruno
rossiccio o grigio scuro, a reticolazione poco marcata, con ilo
piatto.
Derivati
Composizione
Panello, Farina di estrazione: particelle dure, giallastre, di
residui di embrioni che inglobano numerosi frammenti di bucce
sottili, di colore bruno scuro, con superficie esterna rugosa
Istologia
Testa: mucillagine assente; cellule a palizzata pigmentate in bruno
scuro, larghe 15-30 (m greco)m, di altezza uniforme (25 (m greco)m),
con lume cellulare uguale o più largo della doppia parete
1.2.2.2 Colza indiana (Brassica campestris Sarson)
Seme
Seme irregolarmente sferico e leggermente appiattito, lungo 2-3 mm,
con testa giallo/bruno, secondo la varietà, a reticolazione
leggermente più evidente che nella colza, con ilo piatto.
Derivati
Composizione
Come Colza
Istologia
Testa: mucillagine assente; cellule a palizzata incolori, larghe
12-25 (m greco)m), di altezza poco variabile (25 (m greco)m), con
lume cellulare più stretto della doppia parete
1.2.2.3 Ravizzone (Brassica campestris)
Seme
Seme sferico ((diametro) 2 mm) con testa bruno-nero a reticolazione
più evidente che nella colza, con ilo piatto.
Derivati
Composizione
Come Colza
Istologia
Testa: mucillagine assente; cellule a palizzata pigmentate in bruno
scuro, larghe fino a 20 (m greco)m), di altezza non del tutto
uniforme (max 35 (m greco)m), con lume cellulare uguale o più
stretto della doppia parete
1.2.3 Leguminose
Il seme delle Leguminose, contenuto in un pericarpo (baccello)
fibroso, comprende: testa (buccia) più o meno consistente, con ilo
marcato; endosperma non evidente; embrione con due cotiledoni molto
sviluppati, oleoproteici o amilacei, secondo la specie.
Per l'estrazione dell'olio dalle specie oleose viene utilizzato il
seme completo, più o meno privato del pericarpo, oppure il seme
privato della buccia. I sottoprodotti sono costituiti da residui di
semi, con o senza bucce, cui possono essere associati residui
occasionali di baccelli.
Istologia del seme
Testa: cellule dell'epidermide superiore generalmente disposte a
palizzata; ipoderma di cellule a clessidra, o colonnari o
prismatiche; epidermide inferiore poco evidente e non differenziata
Endosperma: tessuto non differenziato
Embrione: cotiledoni con epidermide di cellule isodiametriche o
ellittiche, variamente disposte; mesofillo di cellule parenchimatiche
contenenti olio e proteina oppure amido, secondo la specie
Gli elementi più utili ai fini dell'identificazione sono: cellule a
palizzata dell'epidermide superiore e cellule dell'ipoderma del
testa; contenuti cellulari dei cotiledoni.
Le cellule dell'ipoderma costituiscono un carattere altamente
specifico, ma essendo strettamente saldate agli altri tessuti, in
alcune specie sono raramente isolate e visibili. Per favorirne il
distacco è utile allestire preparati con sodio idrato al 5%.
1.2.3.1 Arachide (Arachis hypogea)
Seme
Seme sferico o cilindrico, lungo 10-20 mm.
Il testa, rosso mattone o rosso viola, e l'endosperma giallo sono
saldati insieme a formare una sottile membrana; i cotiledoni, di
colore bruno chiaro, sono oleoproteici.
Derivati
Composizione
Panello, Farina di estrazione: particelle bianche arrotondate di
cotiledoni inglobanti sottili pellicole con superficie rosso-viola in
un lato, gialla nell'altro; quantità variabili di frammenti di
baccelli fibrosi, spugnosi, di colore crema, bruno chiaro o giallo,
con larga reticolazione irregolare di nervature rilevate sulla
superficie esterna
Istologia
Pericarpo: fibre dell'ipoderma di varie forme bi e triforcute,
allungate, con pareti spesso fittamente punteggiate, isolate o
disposte in gruppi incrociati tra loro
Testa: l'epidermide superiore, atipica rispetto a quella delle altre
Leguminose, non ha cellule a palizzata bensì cellule tondeggianti,
larghe 40-50 (m greco)m, con pareti spesse e porose che presentano
profonde sinuosità appuntite nel lato interno, con effetto di
frangia
Cotiledoni: cellule del mesofillo larghe, con pareti spesse e porose,
contenenti aleurone, residui di olio e talvolta piccoli granuli
sferici di amido con ilo centrale visibile
1.2.3.2 Soia (Glycine max)
Seme
Seme ovoidale o sferico, lungo 12 mm circa, con ilo ovale centrale
evidente e distinto.
Il testa, generalmente di colore crema uniforme, in alcune varietà
può essere verde, bruno o nero, uniforme o variegato; l'ilo è bruno
scuro; i cotiledoni, di colore crema, sono oleoproteici.
Derivati
Composizione
Semi tostati: semi interi o spezzati trattati termicamente, più o
meno privati della buccia. Hanno i medesimi caratteri esterni dei
semi non trattati, dai quali possono essere differenziati con saggio
enzimatico (v. parte I, 10.7)
Farina di estrazione: particelle di cotiledoni arrotondate, con
aspetto ceroso, traslucide, dure, di colore crema o bruno chiaro;
quantità variabili di frammenti di bucce arrotolate di colore crema,
con superficie esterna punteggiata da leggere depressioni e con
superficie interna spugnosa (simili alle bucce dei piselli);
frammenti di ilo di colore bruno scuro
Panello: conglomerati di embrioni, di bucce e di ilo, di forme
irregolari, più spigolosi che arrotondati. Nell'insieme, il panello
è di colore più scuro della farina di estrazione
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide a palizzata, alte 40-60 (m greco)m,
con parte terminale piatta, isolate o in gruppi; cellule
dell'ipoderma a clessidra alte 30-75 (m greco)m, talvolta isolate.
Visti dall'alto, i frammenti del testa appaiono grigi, poco
trasparenti e disseminati di macchie nere ovali o raggiate,
corrispondenti al lume cellulare delle cellule a palizzata nel lato
terminale
Cotiledoni: cellule del mesofillo ovali, strette e allungate, con
pareti lisce, e contenenti: aleurone granulare, cristallini
bipiramidali di ossalato di calcio, talvolta residui di olio e, in
alcune varietà, piccoli granuli sferici di amido con ilo centrale
evidente
1.2.4 Linacee
1.2.4.1 Lino (Linum usitatissimum)
Seme
Seme ovale, lenticolare, piatto, appuntito ad una estremità, lungo
4-6 mm.
Il testa (buccia) è sottile, lucido, di colore variabile da giallo a
bruno scuro uniforme o variegato; l'endosperma e l'embrione, che
comprende due cotiledoni, sono entrambi consistenti, oleosi, di
colore giallo scuro.
Contiene il glucoside cianogenetico linamarina.
Per l'estrazione dell'olio viene utilizzato il seme completo.
Gli elementi istologici più utili sono i tessuti del testa.
Derivati
Composizione
Farina di estrazione: frammenti di bucce scolorite, quasi opache;
residui polverizzati delle altre parti del seme, di colore crema
Panello: conglomerati irregolari, appiattiti, di residui di
endosperma e di embrioni, di colore bruno chiaro, inglobanti
frammenti di bucce con superficie inalterata. Nell'insieme, il
panello è più scuro della farina di estrazione.
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide con mucillagine; cellule
parenchimatiche rotonde; fibre lunghe fino a 300 (m greco)m, disposte
in gruppi affiancati alternati; cellule allungate, disposte in senso
trasversale rispetto alle fibre; cellule poligonali contenenti
pigmento solido rosso bruno che nei preparato in acqua fuoriesce
dalle pareti cellulari in forme poligonali
I tessuti del testa, abbastanza trasparenti, sono strettamente
saldati insieme e nei frammenti è spesso visibile la successione
degli strati cellulari che forma una combinazione altamente
caratteristica
Endosperma, Embrione: tessuti non differenziati
1.2.5 Malvacee
1.2.5.1 Cotone (Gossypium herbaceum)
Seme
Seme ovoidale o piriforme lungo 12 mm, rivestito di abbondanti
tricomi, alcuni lunghi fino a 5 cm (che costituiscono la fibra
tessile), altri più corti, che formano una lanugine bianca.
Il testa (guscio) è consistente, fibroso, di colore bruno scuro o
rosso o nero, secondo la varietà; l'endosperma è sottile;
l'embrione comprende due cotiledoni abbondanti bianchi, oleosi, nei
quali è localizzato il pigmento tossico gossipolo.
Per l'estrazione dell'olio viene utilizzato il seme privato delle
fibre più lunghe e di parte dei gusci. I sottoprodotti contengono
residui di tutte le parti del seme e quantità variabili di fibre.
Gli elementi istologici più utili sono: epidermide e sclereidi a
palizzata del testa; tricomi (fibre) del testa e tricomi
dell'epidermide dei cotiledoni; residui di gossipolo.
Derivati
Composizione
Panello, Farina di estrazione: residui di embrioni polverizzati di
colore bruno; quantità variabili di frammenti di gusci convessi,
spessi, con superficie esterna rugosa, di colore da giallo a bruno;
lunghe fibre bianche, isolate o riunite in agglomerati, o aderenti ai
gusci, o inglobate nelle altre particelle. Residui di gossipolo
possono essere evidenziati nei frammenti dei cotiledoni con acido
solforico concentrato, nel quale il pigmento si scioglie con
formazione di punti colorati in rosso.
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide superiore con pareti spesse a
ondulazioni larghe (viste dall'alto hanno aspetto convoluto),
contenenti pigmento nero; frammenti di tricomi unicellulari piatti,
arrotolati, con pareti cellulosiche molto più sottili del lume
cellulare; sclereidi allungate, di forma prismatica, alte fino a 150
(m greco)m, disposte a palizzata
Perisperma: piccole cellule con pareti frangiate Cotiledoni: cellule
dell'epidermide con stomi e con tricomi corti, ovali, pluricellulari;
mesofillo parenchimatico con larghe cavità, originariamente
contenenti il gossipolo
1.2.6 Oleacee
1.2.6.1 Olivo (Olea europea)
Frutto
Frutto ovale o tondo, lungo 2-3 cm.
Il pericarpo è formato da: epicarpo (buccia) sottile di colore
verde, bianco, bluastro, rosso o nero, secondo la varietà; mesocarpo
(polpa) abbondante oleoso; endocarpo (nocciolo) molto spesso,
legnoso, che racchiude il seme. Il seme comprende: testa e endosperma
sottili; un piccolo embrione con due cotiledoni piatti.
Per l'estrazione dell'olio viene utilizzato il frutto completo. Il
sottoprodotto destinato all'alimentazione degli animali viene privato
il più possibile dei noccioli.
Gli elementi istologici più utili sono: sclereidi del meso e
endocarpo; epidermide del testa.
Derivati
Composizione
Sansa: residui di polpa polverizzata olivastra; frammenti di bucce
olivastre sottili, arrotolate, rugose; noccioli polverizzati o in
frammenti duri, arrotondati, di colore crema.
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo poligonali con contenuto granulare;
sclereidi del mesocarpo incolori di forme grottesche, variamente
ramificate, lunghe fino a 200 (m greco)m; sclereidi dell'endocarpo
incolori, di varie forme e dimensioni, alcune allungate fino a 160 (m
greco)m, con pareti molto spesse e porose
Testa: cellule dell'epidermide larghe fino a 90 (m grteco)m, con
pareti rigonfie di colore giallino; parenchima con pigmento bruno,
con minuti prismi di ossalato di calcio e con tessuto vascolare
abbondante
Endosperma, Embrione: tessuti non differenziati
1.2.7 Palme
La "noce" commerciale delle Palme è costituita dall'endocarpo
(guscio) del frutto e dal seme.
L'endocarpo è lignificato. Il seme comprende: testa più o meno
consistente; endosperma abbondante oleoso, saldato al testa; embrione
piccolo con un solo cotiledone.
Per l'estrazione dei grassi la noce viene privata dell'endocarpo. I
sottoprodotti contengono residui di semi più o meno polverizzati e
frammenti di gusci in quantità variabili secondo il grado di
decorticazione.
Istologia generale della noce
Endocarpo: più strati di sclereidi, di varie forme e dimensioni,
pigmentate o incolori
Testa: più strati di cellule di varie forme, talvolta con pigmento
Endosperma: larghe cellule, in parte isodiametriche in parte
rettangolari, contenenti olio o grassi e granuli di aleurone
Embrione: piccole cellule poligonali contenenti olio e proteina
Gli elementi istologici più utili ai fini dell'identificazione sono:
sclereidi dell'endocarpo; cellule dell'endosperma.
1.2.7.1 Babassu (Orbignya oleifera)
Noce
Noce oblunga (3-5 x 1-2 cm) con curvatura ad una estremità.
L'endocarpo è legnoso, durissimo; il testa è sottile bruno scuro;
l'endosperma è bianco.
Derivati
Composizione
Panello: residui di semi polverizzati di colore bruno chiaro;
endocarpo praticamente assente
Istologia
Testa: cellule della zona esterna molto allungate, talvolta con
residui di pigmento
Endosperma: cellule rettangolari lunghe 60-160 (m greco)m, larghe 50
(m greco)m, in massima parte con pareti lisce, alcune con pareti
punteggiate da aperture circolari larghe fino a 14 (m greco)m,
talvolta con residui di olio e di aleurone e con cristalli di
ossalato di calcio
1.2.7.2 Cocco (Cocos nucifera)
Noce
Noce di forma ovale o tondeggiante, larga oltre 10 cm. L'endocarpo
è spesso, fibroso, di colore bruno; il testa è consistente,
irregolarmente striato sulla superficie esterna, di colore bruno;
l'endosperma è bianco
Derivati
Composizione
Panello, Farina di estrazione (copra): residui di semi in parte
polverizzati, in parte in frammenti soffici, spugnosi, di colore
rosato; rari frammenti di endocarpo piatti, duri, di colore bruno
Istologia
Endocarpo: sclereidi, talvolta con residui di pigmento bruno, con
pareti leggermente ispessite, pigmentate in giallo/bruno, per la
maggior parte lunghe e appiattite e disposte in gruppi variamente
orientati (le sclereidi dello stesso gruppo sono allungate nella
medesima direzione); tessuto vascolare abbondante
Testa: cellule della zona esterna fusiformi, lunghe fino a 130 (m
greco)m e larghe 40 (m greco)m, disposte in varie direzioni, con
pareti brune punteggiate; cellule della zona interna isodiametriche
con pareti lisce e con contenuto bruno
Endosperma: cellule rettangolari lunghe da 160 a 300 (m greco)m,
larghe 40 (m greco)m, spesso deformate, con pareti sottili lisce,
talvolta contenenti residui di aleurone granulare, cristalloidi
proteici larghi oltre 25 (m greco)m, gocce di olio oppure grasso
cristallizzato in masse raggiate, birifrangenti, visibili in luce
polarizzata
1.2.7.3 Macoya (Acrocomia sclerocarpa)
Noce
Noce sferoidale, larga 2-3 cm.
L'endocarpo è legnoso; il testa è sottile, di colore giallo;
l'endosperma è bianco.
Derivati
Composizione
Panello, Farina di estrazione: residui di semi decorticati,
polverizzati o in frammenti irregolari, fibrosi, soffici, di colore
giallognolo; endocarpo praticamente assente.
Istologia
Testa: cellule esterne isodiametriche con pareti finemente
punteggiate; cellule interne pigmentate Endosperma: cellule
rettangolari con pareti sottili e lisce, simili a quelle del Cocco,
benchè di lunghezza inferiore (in media 80 (m greco)m
1.2.7.4 Palmisti (Elaeis guinaeensis)
Noce
Noce di forma ovale irregolare, con uno o più lati piatti, lunga 2-3
cm.
L'endocarpo è spesso, legnoso, di colore bruno o nero; il testa è
sottile di colore bruno scuro variegato di grigio; l'endosperma è
corneo, bianco o grigio.
Derivati
Composizione
Panello, Farina di estrazione: residui grigiastri di semi
polverizzati; abbondanti frammenti di endocarpo arrotondati,
durissimi, di colore bruno scuro
Istologia
Endocarpo: sclereidi generalmente isodiametriche, larghe in media 35
(m greco)m, raramente allungate (60x20 (m greco)m, con pareti molto
spesse, punteggiate, e con lume cellulare stretto contenente residui
di pigmento bruno, isolate o in gruppi
Testa: cellule della zona esterna allungate, con pareti brune,
disposte irregolarmente
Endosperma: cellule rettangolari (in media 130 x 45 (m greco)m, con
pareti punteggiate da aperture circolari larghe fino a 14 (m greco)m,
talvolta con residui di aleurone granulare, cristalloidi proteici
larghi fino a 25 (m greco)m, gocce di olio oppure grasso
cristallizato in masse raggiate birifrangenti, visibili in luce
polarizzata
1.2.8 Pedaliacee
1.2.8.1 Sesamo (Sesamum indicum)
Seme
Seme piriforme, appiattito, lungo 3 mm.
Il testa (buccia) è sottile, bruno o bianco secondo le varietà;
L'endosperma è sottile; l'embrione comprende due cotiledoni
abbondanti oleosi.
Per l'estrazione dell'olio viene utilizzato il seme completo. I
sottoprodotti contengono residui di tutte le parti del seme
polverizzato.
Il tessuto più utile ai fini dell'identificazione è l'epidermide
del testa.
Derivati
Composizione
Panello, Farina di estrazione: residui di embrioni grigi polverizzati
di colore crema; frammenti laminari di bucce con superficie esterna
leggermente venata di bruno o di grigio
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide disposte a palizzata, alte 30-40 (m
greco)m, viste dall'alto di forma poligonale, originariamente
contenenti ciascuna una drusa di ossalato di calcio Endosperma:
larghe cellule parenchimatiche con piccoli granuli di aleurone e
talvolta cristalli raggiati di grassi residui visibili in luce
polarizzata
Embrione: tessuti non differenziati
1.2.9 Sterculiacee
1.2.9.1 Cacao (Theobroma cacao)
Seme
Il seme è ovale, lungo fino a 30 mm.
Nel seme commerciale fermentato il testa (guscio) si è indurito ed
ha assunto un colore rossiccio o bruno; L'endosperma è poco
evidente; l'embrione comprende due cotiledoni abbondanti untuosi,
friabili, profondamente fessurati.
Nel guscio è localizzato l'alcaloide teobromina.
Per l'estrazione dei grassi viene utilizzato il seme privato del
guscio. I sottoprodotti sono costituiti da residui di embrioni misti
a frammenti di gusci, oppure da soli gusci spezzati.
Gli elementi istologici più utili sono i tessuti del testa e i
tricomi dei cotiledoni.
Derivati
Composizione
Gusci: frammenti piatti, rugosi, friabili, di colore bruno violaceo;
sottili pellicole chiare di endosperma
Farina di estrazione: residui di embrioni polverizzati di colore
bruno scuro; frammenti di gusci
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide allungate 30-200 (m greco)m; larghe
cellule ovali (100 (m greco)m x 1 mm) con mucillagine; parenchima
spugnoso bruno con tessuto vascolare abbondante; sclereidi
isodiametriche, larghe 25 (m greco)m, con pareti molto spesse
Cotiledoni: epidermide con tricomi ovali, corti, pluricellulari; il
resto, parenchima non differenziato
1.2.10 Vitacee
1.2.10.1 Uva (Vitis vinifera)
Seme
Seme piriforme, di colore bruno, lungo 5-6 mm, con due profonde
infossature nel lato ventrale, commercialmente denominato vinacciolo.
Il testa (guscio) è spesso e legnoso; l'endosperma abbondante è
vitreo, compatto, oleoproteico; l'embrione minuto comprende due
cotiledoni oleosi.
Per l'estrazione dell'olio viene utilizzato il seme completo. Il
sottoprodotto viene talvolta sottoposto a processi di
defibrizzazione.
Gli elementi istologici più utili sono: sclereidi e cellule
laticifere del testa; granuli di aleurone dell'endosperma; cristalli
di ossalato di calcio.
Derivati
Composizione
Farina di estrazione: frammenti di gusci di colore bruno scuro
violaceo, con superficie esterna rugosa, che visti in sezione
mostrano distinzione tra zona esterna tenera e zona interna dura;
residui bruni polverizzati delle altre parti del seme.
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide superiore allungate (30x60 (m greco)m,
con pareti porose; cellule parenchimatiche contenenti rafidi di
ossalato di calcio, singoli o in fasci; sclereidi pigmentate in
bruno, allungate fino a 1 mm, alcune con un singolo cristallo di
ossalato a forma di diamante; cellule laticifere rettangolari con
pareti punteggiate da apertura a rombo, con effetto di grata; cellule
dell'epidermide inferiore con pareti pigmentate in bruno chiaro e
finemente punteggiate
Endosperma: piccole cellule isodiametriche con pareti sottili, con
granuli di aleurone contenenti cristalloidi proteici, larghi globoidi
e druse di ossalato di calcio
1.3 Legumi
Per i caratteri generali del seme delle Leguminose v. 1.2.3.
1.3.1 Cece (Cicer arietinum)
Seme
Seme di forma irregolare, tondeggiante, largo 1-1.5 cm, di colore
crema, rosso, bruno o nero, secondo le varietà, con una prominenza a
uncino alla base della quale è situato un ilo minuto. Il testa è
ripiegato; l'endosperma è sottile; l'embrione comprende due
abbondanti cotiledoni amilacei di colore crema.
Istologia
Testa: cellule a palizzata di altezza variabile, a intervalli
regolari, da 100 a 160 (m greco)m, (la variabilità è visibile in
sezione radiale), con parte terminale arrotondata, e con pareti
ondulate nella parte centrale e lisce alle estremità; cellule a
clessidra piccole, isodiametriche (h 35x35 (m greco)m) Cotiledoni:
cellule del mesofillo isodiametriche o leggermente allungate, alcune
con pareti porose, altre con pareti lisce; amido in granuli per la
maggior parte sferoidali ((diametro) max 45 (m greco)m) con ilo
centrale a volte non visibile, a volte puntiforme o fessurato; altri
granuli ovali con ilo allungato fessurato e croce di polarizzazione
doppia
1.3.2 Fagiolo (Phaseolus vulgaris)
Seme
Seme ovoidale o sferico, di vari colori e dimensioni, con ilo
allungato.
Il testa è consistente, con superficie esterna liscia o leggermente
bucherellata; l'endosperma è sottile; l'embrione comprende due
abbondanti cotiledoni amilacei di colore crema.
Istologia
Testa: cellule a palizzata di alte 60 (m greco)m, con parte terminale
piatta; cellule dell'ipoderma di forma prismatica (h 30 (m greco)m),
contenenti ciascuna un prisma di ossalato di calcio Cotiledoni:
cellule del mesofillo larghe, isodiametriche , con pareti porose;
amido in granuli ellittici o rotondi, lunghi 30-50 (m greco)m) con
ilo a volta non visibile, a volta allungato fessurato, con croce di
polarizzazione doppia
1.3.3 Fava, Favetta (Vicia faba maior, equina, minor)
Seme
Seme ellissoidale o rettangolare, appiattito o tondeggiante, di
lunghezza variabile secondo la varietà (3.5 cm v. maior, 2 cm v.
equina, 1.3 cm v. minor) con ilo allungato situato alla sommità. Il
testa è consistente, di colore verde, bruno, viola o nero;
l'endosperma è sottile; l'embrione comprende due abbondanti
cotiledoni amilacei di colore crema.
Istologia
Testa: cellule a palizzata alte fino a 185 (m greco)m, con parte
terminale piatta; cellule a clessidra di grandi dimensioni (h 75x60
(m greco)m)
Cotiledoni: cellule del mesofillo larghe con pareti sottili non
porose;
amido in granuli di varie forme (ellittici, sferici, reniformi,
triangolari) lunghi 20-40 (m greco)m) con ilo allungato,
occasionalmente fessurato, e croce di polarizzazione doppia o tripla
1.3.4 Lenticchia (Lens esculenta)
Seme
Seme lenticolare, piatto, largo 8 mm, con ilo centrale stretto e
minuto.
Il testa, di colore giallo-grigio, bruno o nero, è coriaceo;
l'endosperma è sottile; l'embrione comprende due cotiledoni di
colore bruno chiaro, in parte amilacei in parte oleoproteici.
Istologia
Testa: cellule a palizzata di alte fino a 45 (m greco)m, arrotondate
nella parte terminale; piccole cellule a clessidra appiattita (h
25x30 (m greco)m)
Cotiledoni: cellule del mesofillo larghe, con pareti sottili non
porose, contenenti abbondante materiale proteico granulare e granuli
di amido di forme ellissoidali, reniformi o triangolari ((diametro)
max 40 (m greco)m) con ilo allungato fessurato e croce di
polarizzazione doppia
1.3.5 Lupini
1.3.5.1 Lupino bianco (Lupinus albus)
Seme
Seme tondeggiante, piatto, largo 1.5 cm, di colore crema, con ilo
rotondo arancio, lungo 2 mm, situato su una leggera prominenza
centrale.
Il testa e l'endosperma sono sottili; l'embrione comprende due
cotiledoni proteici compatti, di colore crema.
Istologia
Testa: cellule a palizzata alte fino a 125-130 (m greco)m, con
caratteristica leggera curvatura a spigolo, con parte terminale
piatta; cellule a clessidra di grandi dimensioni (h 70x60 (m greco)m)
Cotiledoni: cellule dell'epidermide con pareti non porose; cellule
del mesofillo con pareti moderatamente spesse e porose, contenenti
granuli di aleurone poligonali, larghi fino a 20 (m greco)m,
strettamente aggregati, che fuoriescono dalle cellule in gruppi
compatti di più granuli
1.3.5.2 Lupino giallo (Lupinus luteus)
Seme
Seme tondo, piatto, largo 8 mm, di colore bruno chiaro variegato in
bruno scuro o nero, con ilo depresso lungo 1 mm. Struttura come
Lupino bianco.
Istologia
Testa: cellule a palizzata come Lupino bianco, con parte terminale
arrotondata; cellule a clessidra isodiametriche (h 40x40 (m greco)m)
Cotiledoni: cellule dell'epidermide con pareti porose; cellule del
mesofillo come Lupino bianco
1.3.5.3 Lupino blu (Lupinus angustifolius)
Seme
Seme quasi sferico, largo 8 mm, di colore bianco opaco oppure bruno-
grigio variegato in bruno scuro secondo le varietà, con ilo
depresso. Struttura come Lupino bianco.
Istologia
Testa: cellule a palizzata come Lupino bianco; cellule a clessidra
isodiametriche (h 40x40 (m greco)m)
Cotiledoni: cellule dell'epidermide con pareti porose; cellule del
mesofillo con pareti porose molto spesse, particolarmente negli
angoli, con contenuto come Lupino bianco.
1.3.6 Pisello (Pisum sativum)
Seme
Seme sferico di vari colori, con ilo ovale, piccolo e poco evidente,
in posizione centrale.
Il testa sottile ha la superficie esterna bucherellata da leggere
infossature (è simile al testa della soia); l'endosperma è sottile;
l'embrione comprende due abbondanti cotiledoni verdi/gialli amilacei.
Istologia
Testa: cellule a palizzata alte 90 (m greco)m con parte terminale
piatta; piccole cellule a clessidra isodiametriche (h 25x25 (m
greco)m) con rigature spesso evidenti nelle pareti
Cotiledoni: epidermide con gruppi di cellule disposti a parquet;
cellule del mesofillo larghe, con pareti non porose; amido in granuli
di forme ellittiche, triangolari o tondeggianti ((diametro) medio 50
(m greco)m), con ilo non sempre visibile, talvolta allungato
leggermente fessurato, con croce di polarizzazione doppia o tripla
1.3.7 Veccia (Vicia sativa)
Seme
Seme lenticolare o sferico, largo 5-6 mm, con ilo stretto centrale
bianco.
Il testa è consistente, di colore bruno chiaro o nero, in parte
macchiettato; l'endosperma è sottile; l'embrione comprende due
abbondanti cotiledoni bianchi amilacei.
Istologia
Testa: cellule a palizzata alte 70 (m greco)m, arrotondate nella
parte terminale; piccole cellule a clessidra appiattita (h 27x40 (m
greco)m) con rigature nelle pareti, a volte con contenuto bruno
Cotiledoni: cellule del mesofillo larghe, con pareti porose; amido in
granuli ellissoidali lunghi 55 (m greco)m), con ilo non sempre
visibile, talvolta allungato e più o meno fessurato, con croce di
polarizzazione doppia o tripla
1.4 Derivati di radici/tuberi
Prodotti e sottoprodotti, essiccati/macinati, dell'estrazione di
componenti da radici/tuberi di varie specie agrarie.
Gli elementi di identificazione sono costituiti essenzialmente dai
contenuti cellulari della polpa.
1.4.1 Radici di Barbabietola da zucchero (Beta vulgaris altissima -
Chenopodiacee
Composizione
Polpe o fettucce:: strisce essiccate di polpa zuccherina di colore
bianco o grigio chiaro striato di scuro, dure e leggermente
arrotolate, con residui epidermici aderenti. Immerse in acqua, in
pochi minuti aumentano di volume diventando molli e soffici.
Istologia
Sughero: larghe cellule tabulari poligonali
Parenchima (polpa): larghe cellule contenenti polvere cristallina
birifrangente di ossalato di calcio e di saccarosio residuo,
monocromatico il primo, fortemente pleocroico il secondo; abbondanti
vasi larghi, alcuni punteggiati, altri reticolati con maglie larghe,
altri, nella zona del colletto, spiralati e spiralreticolati
1.4.2 Radici di Patata dolce o Batata (Ipomaea batatas -
Convolvulacee)
Composizione
Fettucce: strisce essiccate di polpa amilacea leggermente arrotolate,
di colore crema o arancio, con tessuti epidermici aderenti bianchi,
gialli o rosa
Istologia
Sughero: cellule tabulari quadrangolari
Parenchima (polpa): cellule tondeggianti, alcune contenenti amido,
altre una drusa di ossalato di calcio; larghe cellule laticifere
rettangolari con contenuto bruno; vasi punteggiati larghi fino a 50
(m greco)m
Amido: granuli sferici o emisferici o a campana ((diametro) max 50 (m
greco)m), con ilo eccentrico puntiforme, molto luminosi in luce
polarizzata e con croce di polarizzazione molto netta, spesso riuniti
in aggregati di 2-3-4 granuli
1.4.3 Radici di Manioca (Manihot spp. - Euforbiacee)
Composizione
Fettucce: strisce di polpa amilacea molto fragili, di colore bianco-
grigio, con tessuti epidermici aderenti di colore bruno violaceo
Farina: polvere fine grigia, soffice e lucente, con residui di
tessuti epidermici
Amido: polvere finissima bianca non differenziata, costituita da
amido praticamente puro
Amido gonfiato (pregelatinizzato): polvere bianca non differenziata,
costituita da amido trattato termicamente
I derivati della Manihot amara possono contenere residui di acido
cianidrico
Istologia
Sughero: cellule tabulari quadrangolari pigmentate in bruno
Parenchima (polpa): cellule della zona periferica rettangolari,
alcune con pareti spesse lignificate (sclereidi) disposte in gruppi
isolati; cellule amilifere isodiametriche; vasi finemente reticolati,
larghi fino a 200 (m greco)m
Amido: granuli sferici o emisferici o a fiasco ((diametro) max 35 (m
greco)m) talvolta con anelli evidenti, con ilo centrale puntiforme
molto luminosi in luce polarizzata e con croce di polarizzazione
molto netta, spesso riuniti in aggregati di 2-3 granuli Amido
pregelatinizzato: granuli di amido rigonfi, distorti, privi di croce
di polarizzazione o con croce molto sfumata, che si colorano in rosso
con Rosso Congo 0.5%
1.4.4 Tuberi di Patata (Solanum tuberosum - Solanacee)
Composizione
Polpa: frammenti irregolari, o strisce, di polpa amilacea essiccati,
fragili, giallastri, con tessuti epidermici bruni aderenti Fecola:
polvere finissima bianca non differenziata, costituita da amido
praticamente puro
Fecola pregelatinizzata: polvere bianca non differenziata, costituita
da amido trattato termicamente
Istologia
Sughero: cellule tabulari di forma irregolare o poligonale Parenchima
(polpa): larghe cellule amilifere isodiametriche; vasi di vari tipi
(spiralati, reticolati con maglie larghe, punteggiati) collegati
insieme in ampi reticoli
Amido/Fecola: granuli ellissoidali, ovoidali o sferici ((diametro)
max 100 (m greco)m), con ilo eccentrico puntiforme circondato da stre
concentriche chiare e scure alternate, con croce di polarizzazione
molto evidente
Fecola pregelatinizzata: granuli di amido rigonfi, distorti, privi di
croce di polarizzazione o con croce sfumata, che si colorano in rosso
con Rosso Congo 0.50%
1.4.5 Tuberi di Topinambour (Helianthus tuberosus - Composite)
Composizione
Fettucce: frammenti irregolari grossolani di polpa zuccherina
essiccata, di vari colori da bianco ad arancio, con tessuti
epidermici aderenti di colore giallo-bruno
Istologia
Sughero: cellule tabulari poligonali, pigmentate in giallo bruno
Corteccia: cellule poligonali con pareti impregnate di resina gialla,
interrotte da cavità oleoresinose, originariamente contenenti resina
solida gialla
Parenchima (polpa): cellule allungate, interrotte da vasi spiralati o
spiral-reticolati, larghi fino a 30 (m greco)m
Tutti i tessuti contengono inulina in soluzione, individuabile con
alcole etilico a 90 (gradi centigradi), con il quale forma un
precipitato di cristallini aghiformi aggregati in rosette
(sferocristalli)
1. 5 Derivati di frutti
1.5.1. Pastazzo di agrumi (Citrus spp. - Rutacee)
Composizione
Residui di tutte le parti del frutto di vari agrumi: frammenti
grossolani di scorza (epicarpo, ipoderma mesocarpo superiore saldati
insieme) duri, arrotolati, con superficie esterna bucherellata
annerita e con superficie interna di colore bruno; aggregati
compressi di residui di pellicole e vescicole degli spicchi
(mesocarpo inferiore, endocarpo) in lamine sottili arrotolate, di
colore crema o grigio; semi ovali interi o frantumati, con testa
rugoso annerito e con residui di embrioni gialli o verdi.
Istologia
Mesocarpo superiore: cellule larghe con pareti spesse, contenenti
prismi di ossalato di calcio; nei residui della arance sono talvolta
visibili microcristalli di esperidina, aghiformi, birifrangenti,
aggregati in rosette
Endocarpo: cellule delle vescicole, larghe e allungate, molto
trasparenti con pareti lisce e sottili; vescicole abortite isolate,
formate da 2-3 larghe cellule rotonde con pareti spesse e porose
Testa: cellule dell'epidermide superiore allungate con pareti porose,
con parte terminale lignificata e mucillaginosa estroflessa in un
prolungamento appuntito (visibile in sezione radiale)
1.5.2 Gusci di carrube (Ceratonia siliqua - Leguminose)
Composizione
Derivati della frantumazione del pericarpo zuccherino (baccello,
commercialmente denominato guscio) del frutto del carrubo, più o
meno privato dei semi, con forte odore caratteristico: frammenti
irregolari di pericarpo con superficie esterna liscia e lucida, di
colore bruno scuro, con zona intermedia opaca, spugnosa, di colore
bruno chiaro, disseminata di cavità e di punti colorati in bruno
rossastro, e con superficie interna membranacea, di colore giallo
bruno lucente; semi ovali, lunghi 9 mm, generalmente interi, con
testa sottile, bruno scuro o rosso, lucido, con endosperma
abbondante, durissimo grigio chiaro, e con embrione minuto.
Istologia
Pericarpo: alcune cellule del mesocarpo contengono tannino, hanno
forma allungata (alcune fino a 500 (m greco)m), e caratteristiche
pareti profondamente ripiegate, si colorano in blu-viola con idrato
di sodio, in verde scuro/nero con solfato ferroso
Testa: cellule dell'epidermide a palizzata alte fino a 175 (m
greco)m, con parte terminale piatta; cellule dell'ipoderma a
clessidra (h 35x30 (m greco)m) con pigmento bruno; cellule
parenchimatiche con pareti spesse talvolta pigmentate in bruno
Endosperma (tessuto normalmente assente nelle Leguminose): cellule
quadrangolari contenenti aleurone; altre cellule irregolari, con
larghe pareti di spessore irregolare: nelle pareti sono talvolta
visibili granuli di aleurone e globuli di olio
1.5.3 Polpa di mele (Pyrus malus - Rosacee)
Composizione
Residui di tutte le pareti del frutto: frammenti di epidermide del
ricettacolo dell'ovario (buccia) arrotolati, lisci e lucidi,
generalmente anneriti; aggregati compressi e fibrosi del ricettacolo
e del pericarpo (polpa) di colore chiaro; semi ovali, appuntiti,
interi o frantumati, con testa sottile e coriaceo, bruno e lucido;
residui di embrioni bianchi.
Istologia
Epidermide del ricettacolo: cellule quadrangolari con pareti spesse e
lisce, suddivise in 3-4 cellule figlie con pareti sottili. Le cellule
figlie sono larghe fino a 50 (m greco)m; alcune hanno pareti porose e
talvolta contengono residui di clorofilla o di pigmento rosso
Ricettacolo e pericarpo: cellule irregolari a sacco, molto larghe,
trasparenti, con pareti sottili e lisce, a volta con piccoli granuli
di amido sferici ((diametro) 15 (m greco)m); abbondanti fasci
vascolari con vasi spiralati, anulari, reticolati, punteggiati; druse
di ossalato di calcio; tricomi pluricellulari, a volte ramificati,
nei quali le singole cellule costituenti possono avere pareti lisce o
tuberolate o lignificate
Testa: cellule dell'epidermide superiore allungate, con pareti spesse
e con residui di mucillagine; fibre sclerenchimatiche larghe, brune,
con punteggiature diagonali nelle pareti
1.5.4 Polpa di pomodoro (Solanum lycopersicum - Solanacee)
Composizione
Residui di tutte le pareti del frutto: frammenti di epicarpo (buccia)
gialli, lisci e lucidi, sottili, con evidente struttura a cellule
poligonali; aggregati compressi, fibrosi, di mesocarpo (polpa) di
colore giallo arancio; semi rotondi, appiattiti, interi o frantumati,
con testa coriaceo di colore crema avvolto da uno strato di lanugine
ruvida
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo poligonali, con pareti porose,
contenenti pigmento giallo
Testa: le cellule dell'epidermide superiore sono formate da una parte
basale larga, arrotondata, con parete spessa lignificata,
profondamente ondulata, e da una parte terminale estroflessa in una
appendice rigida, lunga e stretta, con pareti lisce e diritte (simile
a un tricoma unicellulare)
1.5.5 Vinacce di uva (Vitis vinifera - Vitacee)
Composizione
Residui di tutte le parti del frutto (acino) di colore violaceo
nell'insieme: lamine sottili arrotolate di epicarpo (buccia);
mesocarpo (polpa) polverizzato; frammenti di semi (v. 1.2.10);
frammenti di piccioli e di raspi di forma cilindrica, fibrosi, più o
meno grossolani, di colore viola
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo poligonali, con pareti spesse;
cellule del mesocarpo larghe, rotonde, con pareti sottili;
cristallini aghiformi (rafidi) di ossalato di calcio isolati o in
fasci; fasci fibrovascolari abbondanti con piccoli vasi spiralati
Seme: v. 1.2.10
1.6 Foraggi
I foraggi sono costituiti in massima parte da piante intere di specie
erbacee, prevalentemente Leguminose e Graminacee. Contengono, in
proporzioni variabili secondo lo stato di maturazione alla raccolta,
steli, foglie, fiori e talvolta frutti e semi.
Altri foraggi provengono da parti di piante ottenute come residui di
lavorazione di varie specie agrarie.
Secondo la tecnologia di essiccazione si distinguono: 1) foraggi
disidratati artificialmente, di colore verde brillante, che sbiadisce
rapidamente per esposizione alla luce, fino a diventare grigio-bruno;
2) foraggi affienati, di colore grigio-verde/bruno.
Il colore bruno può anche essere indice di eccesso di steli, o di
abbondanza di Graminacee nelle Leguminose, di invecchiamento, di
conservazione inadeguata.
Nei foraggi non macinati, l'esame macroscopico è sufficiente a
distinguere sia la famiglia che la specie botanica, in base ai
caratteri esterni delle varie parti delle piante.
Nei foraggi macinati grossolani, l'esame stereoscopico è sufficiente
a distinguere la famiglia, in base ai caratteri dei frammenti degli
steli/foglie/fiori, e talvolta anche la specie, in base ai caratteri
di eventuali frutti/semi interi.
Nelle farine, l'esame stereoscopico può essere sufficiente a
distinguere la famiglia botanica, ma è insufficiente a distinguere
la specie; l'identificazione della specie è basata sull'esame
istologico delle particelle al microscopio composto.
1.6.1 Leguminose
a) Principali caratteri rappresentativi della famiglia
Conformazione generale della pianta
- Steli: cilindrici semilegnosi, privi di nodi, con superficie
esterna opaca, liscia o vellutata, e con cilindro centrale spugnoso
- Foglie: composto, sottili, arrotondate, talvolta dentellate, con
nervature decorrenti a ventaglio dalla nervatura centrale
- Fiori: singoli, che si sviluppano in frutti con baccello deiscente
- Frutti e semi: baccelli contenenti uno o più semi
Istologia generale
- Stelo: epidermide di cellule moderatamente allungate, con pareti
lisce e diritte, interrotte da stomi; uno strato subepidermico di
cellule contenenti ciascuna un prisma di ossalato di calcio;
parenchima spugnoso
- Foglia: epidermide superiore e inferiore di cellule di varie forme,
con pareti lisce, diritte o ondulate, interrotte da stomi; tricomi
pluricellulari con pareti tubercolate; mesofillo di cellule
parenchimatiche contenenti clorofilla e prismi di ossalato di calcio
- Fiore: struttura di tipo fogliare
- Seme: V. 1.2.3
b) Principali elementi istologici rappresentativi della specie
Allo stereomicroscopio: superficie degli steli; morfologia di
frutti/semi
Al miscroscopio composto: morfologia delle cellule della pagina
inferiore della foglia; tricomi; testa dei semi
1.6.1.1 Sfarinati di Erba medica (Medicago sativa)
Composizione
Frammenti rettangolari di steli di colore verde chiaro, con
superficie liscia opaca e zona interna spugnosa; lamine fogliari di
colore verde scuro, accartocciate o polverizzate (originariamente
oblunghe); talvolta piccoli baccelli arrotolati a spirale, interni o
spezzati, contenenti ciascuno più semi reniformi lunghi fino a 3 mm,
di colore verde oliva o grigio bruno.
Istologia
Stelo: cellule dell'epidermide isodiametriche, alcune allungate, con
pareti diritte lisce; gruppi di cellule del cilindro centrale
contenenti ciascuna un prisma di ossalato di calcio; parenchima
spugnoso
Foglia: cellule dell'epidermide superiore e inferiore isodiametriche,
con pareti lisce ondulate; tricomi unicellulari lunghi fino a 1.5 mm,
larghi 15 (m greco)m, con piccoli tubercoli sparsi su tutta la
parete; gruppi di cellule del mesofillo contenenti ciascuna un prisma
di ossalato di calcio
Seme: cellule a palizzata del testa alte 35 (m greco)m, con parte
terminale arrotondata; cellule dell'ipoderma a clessidra appiattita
(h 6x30 (m greco)m), con rigature evidenti nelle pareti
1.6.1.2 Sfarinati di Trifoglio violetto (Trifolium pratense)
Composizione
Simile a quella dell'Erba medica, dalla quale si distingue per la
superficie vellutata degli steli, per i piccoli baccelli ovali,
contenenti un solo seme, e per i semi piriformi, lunghi 2 mm, di
colore da giallo a viola, uniforme o variegato
Istologia
Stelo: cellule dell'epidermide leggermente allungate, con pareti
diritte, spesso porose; tricomi uni o pluricellulari come nelle
foglie; il resto dello stelo come Erba medica
Foglia: cellule dell'epidermide superiore isodiametriche con pareti
lisce, leggermente ondulate; cellule dell'epidermide inferiore
isodiametriche con pareti lisce, profondamente ondulate, che spesso
presentano nelle curve piccole estroflessioni; tricomi unicellulari
lunghi fino a 2 mm, con tubercoli molto pronunciati; tricomi
pluricellulari corti e lisci; mesofillo come Erba medica Seme:
cellule a palizzata del testa alte a 55 (m greco)m, con parte
terminale piatta; cellule dell'ipoderma a clessidra appiattita (h
15x27 (m greco)m), con rigature evidenti nelle pareti
1.6.1.3 Sfarinati di Trifoglio incarnato (Trifolium incarnatum)
Composizione
Simile a quella del Trifoglio violetto, dal quale si differenzia per
i semi ovali, lunghi circa 2.5 mm, di colore bruno chiaro
Istologia
Foglia: cellule dell'epidermide superiore e inferiore isodiametriche,
con pareti diritte e sottili, finemente ma distintamente porose;
tricomi unicellulari lunghi fino a 1.5 mm, larghi 30 (m greco)m, con
lume cellulare molto stretto e con tubercoli marcati; mesofillo come
Erba medica
Seme: come Trifoglio violetto
1.6.1.4 Sfarinati di Trifoglio ibrido (Trifolium hybridum)
Composizione
Simile a quella delle altre Leguminose, dalle quali si distingue per
la superficie degli steli, in parte liscia in parte vellutata, e per
i semi ovali, lunghi 1.5 mm, di colore grigio-bruno/verdastro
Istologia
Foglia: cellule dell'epidermide inferiore con pareti diritte e lisce;
rari tricomi unicellulari lunghi fino a 800 (m greco)m, larghi 15 (m
greco)m, con tubercoli poco marcati; mesofillo come Erba medica Seme:
cellule a palizzata del testa alte fino a 50 (m greco)m, con parte
terminale arrotondata; cellule dell'ipoderma a clessidra appiattita
(h 15x27um), con rigature evidenti nelle pareti
1.6.1.5 Sfarinati di Fieno greco (Trigonella foenum-graecum)
Composizione
Simile a quella delle altre Leguminose, dalle quali si distingue per
l'odore pungente caratteristico e per i semi reniformi, appiattiti,
con infossatura obliqua, lunghi circa 5 mm, di colore verde-bruno
Istologia
Seme: cellule a palizzata del testa con parte terminale appuntita;
cellule dell'ipoderma a clessidra appiattita (h 20 x 70 (m greco)m),
con rigature evidenti nelle pareti
1.6.2 Graminacee
a) Principali caratteri rappresentativi della famiglia
Conformazione generale della pianta
- Steli: cilindrici con nodi sui quali sono inguainate le foglie, con
superficie esterna liscia e lucida e con cilindro centrale spugnoso
- Foglie: singole, coriacee, rigide, strette e allungate, con
nervature longitudinali parallele alla nervatura centrale
generalmente molto pronunciata
- Fiori: infiorescenze composte, a spiga o a panicolo secondo la spe-
cie, formate da spighette contenenti uno o più fiori che si
sviluppano in glume e avvolgono il frutto
- Frutti/semi: cariossidi
Istologia
- Stelo: epidermide di cellule allungate, con pareti lisce e
ondulate, interrotte da cellule rotonde, con stoni occasionali; uno
strato subepidermico di sclereidi allungate con pareti punteggiate;
parenchima spugnoso
- Foglia: epidermide superiore e inferiore di cellule allungate, con
pareti lisce, diritte o leggermente ondulate, con numerosi stomi;
tricomi unicellulari corti e appuntiti, con pareti lisce; mesofillo
di cellule parenchimatiche con clorofilla
- Frutto (cariosside): v. 1.1.1
b) Principali elementi istologici rappresentativi della specie
Allo stereomicroscopio: morfologia delle infiorescenze e delle
cariossidi intere
Al miscroscopio composto: i tessuti delle varie specie di Graminacee
hanno strutture simili, variando talvolta le dimensioni delle cellule
e lo sviluppo degli strati cellulari
1.6.2.1 Paglia di cereali macinata
Composizione
Prodotto della macinazione di steli, foglie, spighe, spighette,
glume, cariossidi di Graminacee da granella, nell'insieme di colore
giallino, con le caratteristiche della famiglia: frammenti di steli
irregolari, piatti, di colore bruno chiaro, con superficie esterna
liscia e lucida e zona interna soffice e spugnosa; lamine fogliari
rigide, fragili, di colore giallo-grigio, frantumate o polverizzate;
glume e cariossidi intere o frantumate.
Istologia
Stelo: cellule dell'epidermide allungate in senso longitudinale, con
pareti leggermente ondulate e porose, interrotte da piccole cellule
rotonde e da rari stomi; fibre allungate, sottili, con pareti spesse
e punteggiate, cellule parenchimatiche del cilindro centrale con
pareti punteggiate; fasci fibrovascolari con vasi anulati, spiralati
e punteggiati
Foglia: cellule dell'epidermide inferiore rettangolari, con pareti
diritte e porose, interrotte da numerosi stomi e da tricomi
unicellulari conici, dentellati, corti, con base arrotondata e lume
largo
Glume e cariossidi: (v. Graminacee 1.1.1)
1.6.3 Altri foraggi
1.6.3.1 Foglie di Barbabietola (Beta vulgaris) macinate
Composizione
Frammenti di lamine fogliari di colore grigio/verde, consistenti, con
superficie liscia, con nervature inserite ad angolo acuto sulla
nervatura principale prominente. In alcune specie le nervature sono
rosse, la lamina fogliare tra le nervature è di colore rosso-bronzo
Istologia
Cellule dell'epidermide superiore e inferiore di forme irregolari,
con pareti lisce, ondulate, con stomi abbondanti (alcuni con piccole
estroflessioni) e con tricomi pluricellulari; mesofillo di cellule
parenchimatiche con clorofilla e con microcristalli di ossalato di
calcio riuniti in aggregati minuti o in masse sferiche, facilmente
disgregabili in finissima polvere
1.7 Residui vari
1.7.1 Melassi
Composizione
Residui della produzione dello zucchero dalla radice di Barbabietola
da zucchero (Beta vulgaris altissima - Chenopodiacee) o dal fusto
della Canna da zucchero (Saccharum officinarum - Graminacee).
Possono presentare in due forme:
1) sciroppi densi, di colore variabile da bruno chiaro a nero, con
odore sgradevole quelli provenienti dalle barbabietole, con odore
gradevole quelli della canna; se aggiunti ai mangimi solidi in
quantità rilevante ricoprono i frammenti grossolani degli altri
ingredienti di uno strato vischioso al quale aderiscono
successivamente le particelle più fini, e raggruppano le particelle
fini in sferette con zona centrale molle e sciropposa
2) prodotti solidi granulari, costituiti da frammenti irregolari di
melasso solidificato, di colore bruno chiaro o scuro, lucidi,
bucherellati, friabili.
Istologia
Melassi solidi: le particelle appaiono brune e opache; in acqua si
sciolgono lentamente con diffusione del colore, mostrando all'interno
e nel liquido circostante piccoli cristalli ellissoidali di
saccarosio, birifrangenti e pleocroici, che si dissolvono rapidamente
(dopo evaporazione dell'acqua, il saccarosio ricristallizza in forme
laminari raggiate o dendritiche, anch'esse birifrangenti)
Nota
Sia fluidi che essiccati, i melassi contengono residui di tessuti
vegetali che possono essere concentrati al fine di facilitare il
riconoscimento della specie di provenienza.
Sospendere per 30 minuti 2 g di prodotto in 200 ml di acqua calda a
60 (gradi centigradi) C e filtrare su carta rapida. Esaminando il
residuo umido al microscopio composto, si riscontrera': nei melassi
di barbabietola, residui dei vasi radicali della polpa di
barbabietola (v. 1.4.1); nei melassi di canna, residui di tessuti con
i caratteri istologici generali degli steli delle Graminacee (v
1.6.2.1)
1.7.2 Borlande di birreria
Composizione
Residui essiccati di cariossidi annerite, interne o spezzate, di orzo
singolo o in miscela con altri cereali, con frammenti anneriti di
glume e di altre parti delle cariossidi con l'aspetto caratteristico
della specie (v. 1.1.1).
Istologia
Delle strutture caratteristiche delle specie, rimangono inalterati i
tessuti delle glume e del pericarpo e alcuni granuli di amido
1.7.3 Radichette di malto
Composizione
Radici intere o spezzate dell'orzo o di altri cereali germogliati:
piccoli cilindri lunghi 1-2 mm, con diametro 0.5 mm, di colore giallo
o bruno, arrotolati in senso longitudinale, di aspetto poroso.
Possono esservi associati residui anneriti di glume e di altre parti
delle cariossidi
Istologia
In acqua, le singole radichette appaiono come cilindri più o meno
opachi; in cloralio idrato mostrano cellule larghe, trasparenti, non
differenziate, e sottili fasci vascolari
1.7.4 Distillati di cereali
Composizione
Residui essiccati delle cariossidi fermentate di uno o più cereali:
grumi anneriti di endosperma; frammenti di glume; lamine di pericarpo
di colore ambra, coriacee, piatte, rigide quelle del granoturco,
brune, fragili e arrotolate quelle di altri cereali
Istologia
V. Borlande di birreria (1.7.2)
1.7.5 Solubili di distilleria
Composizione
Derivati dall'essiccazione dei liquidi residui di distilleria dei
cereali: lamine irregolari, bucherellate, di colore rosso bruno, a
consistenza gommosa, con superficie lucida da un lato, rugosa
nell'altro, e con zone cristalline lucide sparse. Possono esservi
associati residui occasionali anneriti di altre parti di cariossidi
Istologia
In glicerina le particelle appaiono opache, di colore rosso scuro,
con aperture oblunghe e con zone chiare e scure dovute alle
differenze di spessore delle lamine; in acqua si sciolgono lentamente
con diffusione del colore
1.7.6 Distillati di melasso
Composizione
Derivati dall'essiccazione dei liquidi residui della fermentazione
del melasso dopo la rimozione dell'alcole per distillazione:
particelle granulari lucide di colore nero violaceo, leggere e
fragili
Istologia
In glicerina le particelle appaiono brune e opache; in acqua si
sciolgono espandendosi lentamente e mostrando all'interno cellule di
lieviti e talvolta residui di tessuti dei vegetali di origine
1.7.7 Lieviti
Composizione
Secondo l'origine si distinguono: 1) lievito di birra, in lamine
irregolari di colore crema/bruno chiaro, sottili, bucherellate,
fragili; 2) prodotti ottenuti dalla separazione delle cellule dei
lieviti dai substrati di coltura industriale: sono di colore bruno
chiaro e possono presentarsi come polvere fine, non differenziata,
oppure in piccoli pellets sferici o cilindrici, di aspetto ceroso,
friabili; 3) prodotti disomogenei, contenenti, oltre a lieviti, i
residui solidi dei substrati di coltura: hanno composizione variabile
in funzione del substrato e non sono riconoscibili allo
stereomicroscopio come prodotti a base di lieviti.
Istologia
Le singole cellule dei lieviti, che possono essere isolate o in
gruppi, hanno forma rotonda, ovale o allungata, secondo la specie o
le condizioni di coltura, e diametro medio 8-10 (m greco)m; sono
isotrope in luce polarizzata; si colorano in bruno con soluzione di
Lugol; con Arancio acridina si colorano in arancio; in luce UV le
cellule uccise fluorescono nel colore arancio, quelle vive mantengono
l'autofluorescenza verde delle proteine.
Nei prodotti contenenti anche il substrato di coltura, le singole
cellule dei lieviti sono in parte eclissate dalle preponderanti
strutture dei materiali dei substrati.
Tecnica di rilevamento di lieviti aggiunti in piccole quantità nelle
miscele
Trasferire 0.5 g di mangime finemente macinato, o della frazione
fine, in scatola Petri, ricoprire con 100 ml di acqua e lasciare in
scatola chiusa per 12-24 ore in stufa a 30 (gradi centigradi) C. Dopo
12-24 ore, le rare cellule rimaste vive dopo il processo di
inattivazione si saranno moltiplicate e le numerose nuove cellule
saranno più agevolmente rilevabili esaminando al microscopio una
goccia della sospensione.
1.7.8 Residui di panetterie, pastifici, pasticcerie
Composizione
Polveri non differenziate, di colore crema o bruno chiaro. Contengono
fini particelle di residui essiccati e macinati di pane, grissini,
crackers, biscotti, torte, pasta ecc., singoli o in miscele tra di
loro, separati meccanicamente dai materiali non commestibili
(alluminio, metalli, plastiche ecc.).
Istologia
In acqua le particelle si disgregano liberando granuli di amido in
massima parte distorti, isotropi, privi di croce di polarizzazione o
con croce molto sfumata, che si colorano in rosso con Rosso Congo
0.5%. Eventuali granuli integri residui possono consentire
l'identificazione della specie di provenienza
1.8 Funghi/frutti/semi indesiderabili
1.8.1 Ascomiceti
1.8.1.1 Segale cornuta (Claviceps purpurea)
Sclerozio
Corpo fruttifero della forma di sopravvivenza invernale del fungo. Ha
forma di cilindro arcuato, affusolato alle estremità, lungo fino a
30 mm, duro e compatto, ed è costituito da una sottile zona esterna
nera o viola saldata a un'abbondante zona interna bianca. Contiene
l'alcaloide clavorubina.
Istologia
Zona esterna: non differenziata
Zona interna: piccole cellule rotonde ((diametro) 3-10 (m greco)m)
formate dal micelio del fungo trasformato in pseudoparenchima. Per
riscaldamento in cloralio idrato, dalle cellule si liberano globuli
di olio
Saggio di identificazione
Reagente: soluzione fresca al 20% di carbonato di sodio anidro.
Procedimento: trasferire in capsula Petri il frammento da
identificare, oppure 2 mg di mangime finemente macinato o della
frazione fine, aggiungere alcune gocce del reagente e osservare allo
stereomicroscopio a 10-20x su fondo bianco.
Reazione: le particelle del fungo si colorano istantaneamente in
rosso viola. Il colore svanisce in 1 minuto.
1.8.2 Semi di Crucifere e derivati
Per i caratteri generali del seme delle Crucifere e dei derivati
dell'estrazione di oli v. 1.2.3
1.8.2.1 Senape cinese (Brassica juncea juncea lutea)
Seme
Seme irregolarmente sferico, (diametro) 2 mm, con testa bruno scuro o
giallo, secondo le varietà, a reticolazione molto marcata, con ilo
piatto.
Istologia
Testa: mucillagine, con croce di polarizzazione evidente; cellule a
palizzata pigmentate o a volte incolori, larghe 10-24 (m greco)m,
alte in media 37 (m greco)m nelle varietà brune, 23 (m greco)m nelle
gialle, con variabilità evidente
1.8.2.2 Senape indiana (Brassica juncea integrifolia)
Seme
Seme sferico, (diametro) 2 mm, con testa bruno scuro o rossiccio a
reticolazione molto marcata, con ilo piatto.
Istologia
Testa: mucillagine assente; cellule a palizzata pigmentate, larghe
10-24 (m greco)m, di altezza variabile (max 35 (m greco)m) a
intervalli regolari
1.8.2.3 Senape nera (Brassica nigra)
Seme
Seme sferico, (diametro) 1.5 mm, con testa bruno rossiccio a
reticolazione molto marcata, con ilo rilevato.
Istologia
Testa: mucillagine stratificata con croce di polarizzazione evidente;
cellule a palizzata pigmentate, larghe fino a 10 (m greco)m, con lume
cellulare più stretto della doppia parete; l'altezza è uniforme, ma
a intervalli regolari le pareti radiali si prolungano verso l'esterno
in sottili estroflessioni che contribuiscono a marcare la
reticolazione (visibile in sezione radiale)
1.8.2.4 Senape di Sarepte (Brassica juncea juncea)
Seme
Seme sferico, (diametro) 2 mm, con testa bruno scuro o giallo,
secondo le varietà, a reticolazione marcata, con ilo piatto.
Istologia
Testa: mucillagine concentrica con croce di polarizzazione evidente;
cellule a palizzata pigmentate o incolori, larghe 10-24 um, alte fino
a 35 (m greco)m, con variabilità evidente a intervalli regolari
1.8.2.5 Senape d'Etiopia (Brassica carinata)
Seme
Seme irregolarmente sferico, (diametro) 2-3 mm, con testa bruno
scuro, rossiccio o giallo, secondo le varietà, a reticolazione molto
marcata, con ilo rilevato.
Istologia
Come Senape di Sarepte (1.8.2.4)
1.8.2.6 Camelina (Camelina sativa)
Seme
Seme ovoidale allungato, con prominenza longitudinale dorsale, lungo
1.8 mm, con testa bruno rossiccio privo di reticolazione.
Istologia
Testa: mucillagine assiale, che in acqua fuoriesce dalle cellule in
forma di estroflessioni cilindriche; cellule a palizzata
pigpigmentate, larghe fino a 60 (m greco)m, di altezza uniforme, con
pareti spesse e lume cellulare largo
1.8.3 Semi di Euforbiacee e derivati
I semi delle specie indesiderabili comprendono un testa (guscio)
sottile, un endosperma abbondante oleoso e un embrione minuto con due
cotiledoni.
Nell'endosperma sono localizzati i principi attivi responsabili delle
proprietà tossiche dei semi e dei sottoprodotti dell'estrazione
degli oli.
Gli elementi istologici più utili sono i tessuti del testa,
opportunamente chiarificati.
1.8.3.1 Ricino (Ricinus communis)
Seme
Seme ovoidale, lungo 8-20 mm, con ilo prominente nella parte
terminale.
Il testa è di colore grigio screziato di macchie brune, opaco su
fondo lucido con effetto di variegature; è molto friabile e leggero
e si spezza in minuti frammenti con angoli appuntiti. L'endosperma
bianco, oleoso, contiene almeno tre principi tossici: la proteina
ricina, l'alcaloide ricinina e un allergene.
Derivati
Composizione
Panello/Farina di estrazione: prodotti disomogenei, friabili, di
colore grigio chiaro o scuro, contenenti lamine di endosperma
compresso di colore grigio, con minuti frammenti grigi o bruni di
gusci, in quantità variabili secondo il grado di decorticazione dei
semi
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide poligonali, appiattite, alcune
pigmentate e con pareti punteggiate; sclereidi allungate, leggermente
curve, pigmentate e punteggiate, disposte a palizzata, visibili
generalmente in gruppi (dettagli sono visibili dopo chiarificazione
dei tessuti); parenchima spugnoso di larghe cellule contenenti druse
di ossalato di calcio, interrotte da tessuto vascolare abbondante
formato da delicati vasi spiralati
1.8.3.2 Purgere (Jatropa curcas)
Seme
Seme ovoidale, lungo circa 2 cm, con due coste longitudinali
prominenti.
Il testa è grigio scuro/nero con minute infossature di colore crema,
spesso e duro, non friabile, a consistenza resinosa, talvolta con
residui aderenti di sottili pellicole membranacee grigie, provenienti
dall'endocarpo del frutto; il resto del seme come Ricino (1.8.3.1)
Derivati
Composizione
Panello: prodotto disomogeneo di colore grigio giallastro, con
endosperma polverizzato, frammenti neri di gusci, pellicole grigie
striate da venature, frammenti piatti di embrioni
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide colonnari, larghe 18 (m greco)m, alte
fino a 130 (m greco)m, contenenti pigmento nero (Viste dall'alto
mostrano disposizione a rosetta); cellule parenchimatiche
dell'ipoderma incolori, di forma irregolare o stellata; sclereidi
allungate e curve come Ricino
1.8.3.3 Croton (Croton tiglium)
Seme
Seme ovoidale, lungo 12 mm, a sezione quadrangolare con 4 coste
longitudinali più o meno prominenti.
Il testa è coriaceo, di colore arancio-bruno, arancio con superficie
liscia opaca, talvolta con residui aderenti di una sottile pellicola
polverosa, di colore bruno chiaro, proveniente dall'endocarpo del
frutto; l'endosperma è giallo
Derivati
Composizione
Panello: prodotto polverulento con endosperma polverizzato di colore
bruno e con frammenti di testa
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide poligonali, pigmentate in rosso-
arancio/bruno, talvolta con piccoli granuli di amido; cellule
dell'ipoderma a palizzata con pareti finemente striate; sclereidi
irregolari, isolate o in gruppi, con pareti punteggiate, sclereidi
allungate e curve come Ricino (1.8.3.1)
1.8.4 Frutti di Fagacee e derivati
1.8.4.1 Faggio (Fagus sylvatica)
Frutto
Frutto di forma piramidale, con 3 creste salienti, lungo 12-16 mm.
Il pericarpo (guscio) è liscio, friabile, di colore marrone, ed è
fornito di un ciuffo di tricomi corti ad un apice e di tricomi lunghi
e abbondanti sparsi sulla superficie interna.
Il seme comprende: testa sottile, bruno rossiccio, endosperma
inconsistente e un embrione con due cotiledoni abbondanti oleosi.
Nel pericarpo è localizzato l'alcaloide fagina, responsabile delle
proprietà tossiche dei semi e dei sottoprodotti di semi non
decorticati.
Derivati
Composizione
Panello di semi decorticati: prodotto grossolano di colore rosso-
bruno, contenente frammenti lamellari di tutte le parti del seme
Panello di semi non decorticati: prodotto grossolano di colore bruno
scuro, contenente residui di tutte le parti del seme e minuti
frammenti sottili di pericarpo
Istologia
Pericarpo: cellule dell'epicarpo poligonali, pigmentate in bruno, con
tricomi unicellulari lunghi fino a 400 (m greco)m; sclereidi del
mesocarpo pigmentate, alcune con cristalli di ossalato di calcio;
tricomi dell'endocarpo lunghi fino a 2-3 mm, con pareti sottili e
lume largo, contenenti corpi pigmentati in bruno Testa: cellule
dell'epidermide bulbose, pigmentate in bruno Endosperma: uno strato
di cellule poligonali contenenti aleurone Cotiledoni: parenchima con
residui di olio, druse di ossalato di calcio, granuli di amido e di
aleurone
1.8.5 Frutti di Graminacee
Per i caratteri generali del frutto delle Graminacee v. 1.1.1
1.8.5.1 Loglio o zizania (Lolium temulentum)
Frutto
Cariosside di forma obovata, lunga 4-6 mm, con depressione larga e
profonda nel lato ventrale. È rivestita di glume aderenti con
superficie opaca giallina marcata da 5 coste poco evidenti ed è
fornita di arista lunga fino a 15 mm o più.
La cariosside è spesso infetta, in modo macroscopicamente non
visibile, da Endoconidium temulentum, forma conidiale di Gleotinia
temulenta (Ascomiceti), ritenuto responsabile della elaborazione
degli alcaloidi tossici loliina e temulentina.
Istologia
Glume: le cellule rettangolari dell'epidermide esterna sono miste,
lunghe e corte, e sono interrotte da numerosissime cellule rotonde,
larghe, con pareti punteggiate, da file di stomi e da corti tricomi
conici
Pericarpo: cellule trasversali con pareti lisce e sottili, disposte
in colonne affiancate (come Orzo 1.1.1.5)
Endosperma: strato aleuronico non differenziato rispetto alle altre
Graminacee; amido in granuli poligonali ((diametro) max 7 (m
greco)m), spesso riuniti in aggregati ovoidali lunghi 25-30 (m
greco)m Fra il pericarpo e l'endosperma sono localizzate le ife
miceliali non settate del parassita lunghe, sottili, disposte in
grovigli
1.8.6 Frutti di Leguminose
Per i caratteri generali del seme delle Leguminose v. 1.2.4
1.8.6.1 Crotalaria (Crotalaria spp.)
Seme
Seme irregolarmente circolare o reniforme, talvolta appiattito, con
depressione profonda nel lato ventrale, in prossimità della parte
terminale più stretta.
Il testa è sottile; l'endosperma sottile è mucillaginoso;
l'embrione è abbondante, con due cotiledoni duri, oleosi, contenenti
l'alcaloide monocrotalina.
Dimensioni e colore del seme e forma dell'ilo variano secondo la spe-
cie:
1) c. spectabilis: 4-5 mm x 3-4 mm; testa liscio, grigio-bruno o
nero, lucido; ilo prominente
2) c. juncea: 7-8 mm x 4-5 mm; testa liscio, nero e lucido;
depressione profonda nella parte terminale anteriore che si incurva
prolungandosi sopra l'ilo
3) c. striata: 3-4 mm x 2-3 mm; testa liscio, giallo bruno
macchiettato di grigio scuro e nero; ilo incavato
4) c. intermedia: 2-3 mm x 2 mm; testa liscio, giallo paglia; ilo
prominente
L'identificazione di Crotalaria spp. è basata sulla istologia dei
tessuti del testa e su saggio cromatico.
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide a forma di ipsilon, disposte a
palizzata, alte fino a 100 (m greco)m, con parte terminale piatta o
smussata; cellule dell'ipoderma a forma di lagena (lagenosclereidi),
alte fino a 55 (m greco)m, larghe 30-70 (m greco)m nella parte basale
più larga
Endosperma: cellule non differenziate, con mucillagine
Cotiledoni: tessuti non differenziati
Nota. I tessuti del testa sono simili a quelli di Cyamopsis
tetragonoloba (Guar), Leguminosa non tossica.
Distinzione:
Guar (Cyamopsis tetragonoloba): le lagenosclereidi dell'ipoderma sono
più tozze, con collo più largo e più corto
Saggio di identificazione
Reagenti: 1) cloralio idrato + glicerolo + acqua (1:1:1)
2) soluzione di acido cloridrico (1:6)
3) soluzione di sodio idrato al 5%
Procedimento: trasferire in scatola Petri il frammento da
identificare, oppure 2 mg di mangime finemente macinato o della
frazione fine. Aggiungere 3 gocce del reagente 1) e 2 gocce del
reagente 2). Miscelare, lasciare in riposo 3-4 minuti e osservare
allo stereomicroscopio a 10-20x su fondo bianco.
Reazioni: i frammenti di Crotalaria si colorano in rosa-rosso;
aggiungendo un eccesso del reagente 3) il colore viva al blu.
1.8.7 Semi di Prunoidee (Rosacee)
Il seme delle Prunoidee è rinchiuso nell'endocarpo (nocciolo) del
frutto.
Il nocciolo ha forma ovale (mandola, pesca) o allungata (susina) o
tondeggiante (albicocca, ciliegia), e dimensioni variabili secondo la
specie; è legnoso, spesso, di colore bruno chiaro, con superficie
liscia (albicocca, ciliegia, susina) o bucherellata (mandorla,
pesca).
Il seme comprende: testa coriaceo; endosperma inconsistente saldato
al testa; embrione voluminoso con due cotiledoni molli, oleosi, nei
quali è localizzato il glucoside cianogenetico amigdalina,
particolarmente abbondante nell'albicocca e nella mandorla amara.
Nei sottoprodotti delle industrie conserviere/estrattive dei frutti
di Prunoidee, la distinzione delle specie indesiderabili da altre
specie non tossiche è basata essenzialmente sulla morfologia delle
sclereidi del testa dei semi, opportunamente chiarificato. Possono
essere di aiuto residui di tessuti di altre parti dei frutti.
1.8.7.1 Albicocca (Prunus armeniaca)
Istologia
Testa: sclereidi dell'epidermide superiore di forma tondeggiante,
alcune allungate (40x70 (m greco)m), con pareti di spessore uniforme,
completamente punteggiate
Strutture utili del frutto: epicarpo di piccole cellule poligonali,
larghe in media 60 (m greco)m; tricomi lunghi e corti, con base
allargata e lume cellulare largo; fibre del mesocarpo lunghe e
larghe, di forme spinose, con pareti fittamente punteggiate
Nota. Le sclereidi del testa sono simili a quelle di ciliegia e
susina
Distinzione:
1) Ciliegia (Prunus cerasus): le sclereidi sono di forma tronca o a
cupola, larghe 40-70 (m greco)m, con contorni spigolosi, talvolta con
estroflessioni negli angoli; le pareti, di spessore uniforme,
talvolta sono lisce, talvolta punteggiate in una sola metà della
cellula.
L'epicarpo del frutto ha cellule poligonali larghe fino a 100 (m
greco)m ed è privo di tricomi
2) Susina (Prunus domestica): le sclereidi sono coniche, con pareti
spesse in una metà, sottili nell'altra, punteggiate ovunque.
L'epicarpo del frutto ha piccole cellule poligonali ed è privo di
tricomi
1.8.7.2 Mandorla amara (Prunus amygdalus var. amara)
Istologia
Testa: sclereidi dell'epidermide superiore di forma irregolarmente
arrotondata, più o meno tronche, larghe 100-140 (m greco)m);le
pareti hanno spessore uniforme e di norma sono punteggiate solo in
una metà della cellula
Strutture utili del frutto: cellule dell'epicarpo poligonali; tricomi
lunghi, con base leggermente allargata e lume cellulare stretto
(forma intermedia tra albicocca e pesca)
Nota. Le sclereidi del testa sono simili a quelle di pesca e mandorla
dolce.
Distinzione:
1) Pesca (Prunus persica): le sclereidi sono di forma arrotondata o
conica, alcune larghe fino a 150 (m greco)m, altre più piccole
((diametro) 50 (m greco)m), con pareti spesse e lisce nella metà
più stretta assottigliate e punteggiate nella metà più larga.
L'epicarpo del frutto ha cellule poligonali con pareti sottili, e
tricomi corti e lunghi con base appuntita e lume cellulare stretto 2)
Mandorla dolce (Prunus amygdalus var. dulcis): nessuna distinzione
1.8.8 Semi di Sapotacee e derivati
1.8.8.1 Mowrah o Bassia o Madhuca o Illipè (Madhuca o Bassia
longifolia= Illipè malabrorum; Madhuca o Bassia latifolia = Madhuca
indica = Illipè latifolia)
Seme
Seme fusiforme, lungo 2-4 cm, con un lato curvo e uno piatto. Il
testa (guscio) è bruno scuro, legnoso, staccato dal resto del seme,
con superficie esterna liscia, lucida, e superficie interna opaca,
venata di striature biancastre/grigie; l'endosperma è sottile;
l'embrione abbondante comprende due cotiledoni ineguali, lucidi, di
colore bruno, contenenti grassi semisolidi.
Nei cotiledoni sono localizzate le saponine, responsabili delle
proprietà tossiche del seme e dei sottoprodotti dell'estrazione dei
grassi.
L'identificazione è basata sulla istologia del testa, opportunamente
chiarificato, e dei tessuti dei cotiledoni.
Derivati
Composizione
Panello: prodotto disomogeneo, contenente frammenti grossolani,
laminari, di embrioni compressi, lucidi, di colore bruno chiaro, e
frammenti di gusci scuri
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide poligonali, con pareti spesse,
punteggiate, pigmentate in bruno; sclereidi fusiformi, alcune
isodiametriche, con pareti spesse, punteggiate, incolori; tessuto
vascolare abbondante
Cotiledoni: epidermide inferiore con cellule laticifere unite in
catene lunghe fino a 1 mm; larghe cellule parenchimatiche del
mesofillo con pareti punteggiate da lunghe aperture disposte a
reticolo, alcune contenenti tannino
Nota. I tessuti dei cotiledoni sono simili a quelli dei semi di
Butyrospermum parkii e di Shorea splendida, specie entrambe non
tossiche.
Distinzione:
1) Butyrospermum parkii (Sapotacee): le catene di cellule laticifere
sono più corte (200 um); le cellule del mesofillo contenenti tannino
hanno pareti sia lisce, sia punteggiate da piccole aperture
puntiformi
2) Shorea splendida (Dipterocarpacee), talvolta commercialmente
denominata "Illipe'": le cellule laticifere sono assenti; le cellule
del mesofillo contenenti tannino hanno pareti lisce; altre cellule
contengono piccoli granuli di amido sferoidali ((diametro) 4-10 (m
greco)m) con ilo centrale marcato
1.8.9 Semi di Solanacee
1.8.9.1 Datura stramonium
Seme
Seme reniforme, appiattito, lungo 4 mm, di colore bruno scuro o nero,
più chiaro nella zona dell'ilo.
Il testa è rugoso; l'embrione cilindrico comprende due cotiledoni
bianchi oleosi.
Contiene gli alcaloidi iosciamina, atropina, scopolamina.
Istologia
Testa: cellule dell'epidermide contenenti pigmento nero, con pareti
spesse e profondamente ondulate (viste dall'alto, hanno forma
stellata). In luce UV, con acqua o cloralio idrato, i frammenti del
testa fluorescono in verde-azzurro, che diventa giallo oro per
aggiunta di sodio idrato 5%
2 PRODOTTI LATTIERI
I derivati dell'essiccazione del latte e del siero di latte, secondo
la tecnologia di produzione, si distinguono in due forme: 1) Spray;
2) Roller o Hatmaker
La distinzione delle due forme è basata sulle caratteristiche
tecnologiche osservabili allo stereomicroscopio.
2.1 Derivati del latte
2.1.1 Latte in polvere
Caratteristiche tecnologiche
1) Latte Spray: polvere fine, soffice, leggera, costituita da
microsfere di latte solidificato, talvolta cave ((diametro) 50-100
um), con superficie liscia e lucida o leggermente opaca,
semitrasparente.
Il colore varia da bianco crema nel latte intero o parzialmente
scremato a bianco puro nel latte magro.
2) Latte Roller o Hatmaker: prodotto soffice, leggero, costituito da
sottili lamine di latte solidificato, di forma irregolare e
dimensioni variabili, con superficie rugosa, opaca e bucherellata. Il
colore varia da giallino nel latte intero o parzialmente scremato a
bianco crema nel latte magro.
Istologia
Microsfere e lamine in acqua si sciolgono lentamente; in
dimetilsulfossido o glicerina appaiono grigie, poco trasparenti, e in
luce polarizzata mostrano all'interno microcristalli prismatici di
lattosio con birifrangenza monocromatica.
Globuli di olio di colore bruno chiaro sono visibili nel latte intero
o parzialmente scremato, raramente nel latte magro.
2.2 Derivati del siero
2.2.1 Siero di latte in polvere
Caratteristiche tecnologiche
Il siero Spray e il siero Roller/Hatmaker, di colore generalmente
giallino, presentano i medesimi caratteri morfologici dei
corrispondenti tipi di latte in polvere. Nella forma Spray sono
evidenti larghi cristalli di lattosio cuneiformi, incolori e
semitrasparenti.
Le polveri di siero sono igroscopiche e, per esposizione all'aria,
dopo qualche tempo si compattano formando blocchi induriti.
Istologia
Microsfere e lamine in acqua si sciolgono istantaneamente con effetto
di effervescenza; in dimetilsulfossido o glicerina appaiono grigie e
opache; in luce polarizzata mostrano all'interno numerosi
microcristalli prismatici di lattosio con birifrangenza
monocromatica.
Nel siero Spray, anche delattosato, sono evidenti tra le particelle
di latte cristalli singoli di lattosio monoidrato; hanno forma di
cuneo, possono essere lunghi fino a 100 (m greco)m, e sono
birifrangenti e fortemente pleocroici, con colori disposti in bande
parallele.
Sono assenti nei sieri i globuli di olio.
3. INGREDIENTI DI ORIGINE ANIMALE
I processi di cottura e/o di estrazione di componenti alterano o
distruggono la maggior parte delle fini strutture cellulari dei
tessuti animali. Il riconoscimento dei derivati è basato: 1) allo
stereomicroscopio, sulle caratteristiche di composizione; 2) al
microscopio composto sui caratteri strutturali sufficientemente
inalterati di alcuni tessuti: fibre muscolari striate, tessuti
calcificati, tessuti cornei.
3.1 Derivati di animali terrestri
3.1.1 Farina di carne, Farina di carne e ossa
Composizione
Residui solidi di parti di Mammiferi terrestri cotte, essiccate e
macinate, dopo separazione dei grassi e dei liquidi di cottura:
polveri, o aggregati di particelle più o meno grossolane, o miscele
di entrambe le forme, di colore variabile da bruno scuro nei derivati
della cottura a umido a grigio bruno o giallo nei derivati della
cottura a secco.
I possibili costituenti sono: muscoli, cartilagini, tendini, ossa, in
proporzioni variabili; piccole quantità di sangue, denti, pelle;
occasionalmente possono esservi associate tracce di visceri con
residui di tessuti vegetali provenienti dal loro contenuto.
Costituenti riconoscibili allo stereomicroscopio
Muscoli: fibre di colore bruno chiaro o scuro, isolate o in grumi o
inglobate nei coaguli dei tessuti connettivi
Connettivi: cartilagini e tendini sono fusi e solidificati in
particelle di gelatina di colore ambra chiaro o scuro, vitree, dure,
lucide, semitrasparenti
Ossa: frammenti duri, spesso grossolani, di colore bianco grigio o
bruno chiaro, di forme irregolari, con margini arrotondati e
superficie opaca. Mostrano la reazione positiva dei fosfati tribasici
Sangue: particelle irregolari nere, opache (v. anche 3.1.3) Denti:
frammenti irregolari, spigolosi, molto duri, bianchi, opachi o
semitrasparenti secondo lo spessore Peli, setole: sottili cilindri
cornei, interi o spezzati o distorti, bianchi o incolori o di varie
gradazioni di bruno, con superficie liscia e lucida
Corna e unghie: lamine di colore grigio o nero o ambra, traslucide e
dure, a volta con superficie sfaccettata o ondulata. Le particelle di
colore ambra sono simili a particelle di gelatina, dalle quali
possono essere differenziate per immersione in una soluzione di acido
acetico (1:1): dopo un'ora le particelle di gelatina sono ammorbidite
e rigonfie, le particelle cornee restano inalterate
Pelle: strisce dure, arrotolate, di colore bruno. Se provenienti da
scarti di concerie (cuoio), i frammenti hanno superficie colorata e
odore forte e penetrante caratteristico
Tessuti vegetali: comprendono parti di piante che hanno resistito
all'effetto dei processi digestivi (frammenti anneriti e distorti di
stelli di erbe, di gusci e bucce di frutti e semi, ecc.)
Istologia
Fibre muscolari: frammenti di fibre di forma cilindrica ((diametro)
50-100 (m greco)m), incolori o gialline, poco trasparenti, a volte
curvate o
arrotolate, isolate o in fasci. In alcune la superficie appare
liscia, in altre è marcata da sottili striature trasversali chiare e
scure alternate, evidenti anche in luce polarizzata per debole
birifrangenza (fibre striate). In luce UV, con acido solforico
concentrato, sulle particelle dei tessuti muscolari sono
evidenziabili residui di sangue in forma di zone fluorescenti rosse
sul fondo verde della proteina delle fibre Gelatina: particelle
opache, prive di struttura, isotrope in luce polarizzata
Ossa: particelle irregolari, opache o semitrasparenti secondo lo
spessore, con lacune rotonde o ellittiche che appaiono nere sul fondo
grigio delle lamine ossee. Nelle particelle più sottili sono
visibili sottili linee nere non ramificate, dirette in ogni direzione
(canalicoli). In luce polarizzata le particelle ossee mostrano debole
birifrangenza
Sangue: v. 3.1.3
Denti: particelle irregolari, opache o trasparenti secondo lo
spessore, debolmente birifrangenti. Nelle lamine più sottili
talvolta sono visibili i tubuli della dentina in forma di sottili
linee scure parallele, leggermente ondulate
Peli e setole: cilindri opachi, incolori o bruni, birifrangenti, di
dimensioni variabili, che possono apparire cavi quando è visibile la
zona interna midollare. Talvolta sono visibili, sulla superficie
esterna, residui delle piccole scaglie embricate della guaina di
rivestimento. Il midollo è continuo nei peli dei Mammiferi di grandi
dimensioni (bovini, suini, ovini, equini ecc.), settato nei peli dei
Roditori
Corna e unghie: lamine di colore grigio o ambra, opache o
semitrasparenti, con striature parallele ondulate interrotte da linee
di frattura trasversali. Sono birifrangenti con forte pleocroismo
Pelle, cuoio: particelle prive di struttura, isotrope; nei frammenti
più trasparenti sono visibili le fibrille del corium, in forma di
sottili linee parallele ondulate. Il cuoio idrolizzato è del tutto
privo di struttura
Visceri: frammenti trasparenti di mucose, con fibre elastiche e fibre
muscolari lisce prive di struttura visibile, talvolta disseminate di
nuclei evidenti
Tessuti vegetali: particelle birifrangenti che mostrano, parzialmente
alterate, le strutture tipiche dei tessuti vegetali di provenienza
3.1.2 Farine di fegato o di altre ghiandole
Composizione
Prodotti di colore giallo, bruno o bruno scuro, a volte leggermente
untuosi, con odore simile a quello della carne. Sono costituiti in
parte da polvere granulare, in parte da particelle larghe con
superficie bruna più o meno liscia
Istologia
Nessun tessuto caratteristico; talvolta sono visibili cellule
ghiandolari larghe, rotonde, spesso distorte, associate a globuli di
olio
3.1.3 Farine di sangue
Composizione
1) Sangue secco macinato: particelle irregolari nere, con superficie
esterna rugosa e opaca, con superfici di rottura lucide, di colore
rosso vino.
2) Sangue spray: polvere fine, soffice e leggera, costituita da
microsfere di sangue solidificato, larghe 50-100 (m greco)m, spesso
cave, di colore rosso mattone scuro, con superficie liscia e lucida,
semitrasparente.
Istologia
In acqua particelle e microsfere sono opache, di colore rosso vino, e
si sciolgono lentamente con diffusione del colore. Nel liquido di
dissoluzione non sono visibili i corpuscoli solidi del sangue In luce
UV, con acido solforico concentrato, le particelle fluorescono in
rosso vivo
3.1.4 Farina di scarti di macellazione del pollame
Composizione
Residuo solido essiccato e macinato della cottura di parti di
volatili e/o di volatili interi, simile alla farina di carne, benchè
più leggero e più soffice e di colore più chiaro.
I possibili costituenti sono: teste, zampe, tessuti muscolari, ossa
visceri, uova non sviluppate, tracce di penne e di gusci di uova.
Costituenti riconoscibili allo stereomicroscopio: Becchi, unghie:
frammenti duri, cornei bianchi, con superficie perlacea e margini
taglienti
Scaglie delle zampe: lamine cornee squamiformi, perlacee e
semitrasparenti, con bordi incurvati
Muscoli: fibre di colore crema, isolate o in grumi
Ossa: frammenti duri, irregolari, allungati, di colore crema,
bucherellati, con superficie opaca e margini taglienti Penne / piume:
frammenti grossolani di rachidi di forma tubulare appiattita, con
bordi seghettati nei punti di inserzione delle barbe spezzate, di
colore variabile da bianco ad ambra a bruno scuro; frammenti
cilindrici, sottili, di barbe non seghettate; piume ramificate con
barbule filiformi disposte a pettine Gusci di uova: lamine calcaree
spesse e leggermente convesse, con superficie bianca opaca, rugosa e
bucherellata. Mostrano la reazione positiva dei carbonati e del
calcio
Istologia
Becchi, unghie, scaglie: lamine incolori, opache o semitrasparenti,
con sottili striature parallele talvolta collegate da linee
trasversali
Fibre muscolari: frammenti di fibre striate di forma cilindrica,
incolori e semitrasparenti, isolate o in fasci, con striature
trasversali spesso evidenti (v. anche Farina di carne 3.1.1.) Ossa:
particelle grigie opache o semitrasparenti, con lacune oblunghe e
appiattite (molto numerose nelle ossa delle ali delle zampe) Penne e
piume: frammenti tubulari di rachidi, opachi, con margini seghettati
e zona interna settata; barbe cilindriche semitrasparenti, talvolta
con zona interna settata; barbule, isolate o in gruppi, in forma di
piccoli tubuli trasparenti inseriti l'uno nell'altro con
conformazione a nodi e segmentazioni (a canna di bambu'). Taluni
frammenti di penne in campo chiaro appaiono simili a fibre muscolari,
dalle quali si distinguono per la birifrangenza accentuata e per la
colorazione giallo chiaro in soluzione di Lugol; inoltre, in luce UV,
con acido solforico concentrato, le penne fluorescono nel verde
uniforme delle proteine (cheratina) privo di zone rosse dovute ai
residui di sangue sempre evidenziabili nei tessuti muscolari (v.
anche Farina di carne)
Visceri: come Farina di carne
3.1.5. Farina di penne idrolizzate
Composizione
Prodotto derivato dalla macinazione della massa fusa ed essiccata
delle penne e delle piume dei volatili, al termine del processo di
idrolisi delle cheratine: particelle tondeggianti compatte, vitree,
molto dure, di colore grigio, bruno o nero, alla superficie delle
quali sporgono frammenti di penne non completamente fuse.
Istologia
In acqua, le particelle sono poco trasparenti; con acido solforico
concentrato appaiono costituite da grovigli da grovigli di tubuli
arricciati: i grovigli si disgregano liberando i singoli costituenti,
tra i quali sono riconoscibili le barbule che mantengono inalterata
la caratteristica struttura a nodi e segmentazioni. In luce
polarizzata, le penne idrolizzate sono isotrope, le penne
surriscaldate o carbonizzate appaiono disseminate di numerosi punti
luminosi
Nota. Una tecnica di concentrazione facilita il rilevamento delle
penne idrolizzate nei mangimi composti.
Sospendere 2 mg di materiale fine in acido solforico all'80%,
lasciare in riposo 30 minuti circa, agitando di tanto in tanto.
Trasferire su vetrino alcune gocce della sospensione ed esaminare al
microscopio a 200-250x: la maggior parte dei tessuti vegetali e
quelli animali risulteranno distrutti o distorti, mentre saranno
evidenziate le strutture inalterate delle penne
3.2 Derivati di animali marini
3.2.1 Farine di pesce
Composizione
Residui solidi essiccati e macinati di pesci interi e/o di parti di
pesci (in prevalenza Teleostei a scheletro osseo, in misura minore
Elasmobranchi a scheletro cartilagineo), cotti e più o meno privati
dell'olio: polveri fini, o aggregati di particelle grossolane, o
miscele di entrambe le forme, di colore variabile da giallo a bruno a
bruno scuro, con odore forte e penetrante di pesce e a volte con
aspetto untuoso.
I possibili costituenti sono: per la maggior parte tessuti muscolari,
ossa scaglie, pelle; piccole quantità di altre parti dei pesci
(denti, occhi, uova ecc.).
Costituenti riconoscibili allo stereomicroscopio
Muscoli: fibre sottili, chiare, semitrasparenti, isolate o in fasci,
o inglobate nei coaguli dei tessuti connettivi che, sciolti durante i
processi di cottura, agiscono come collante per formare conglomerati
di particelle degli altri tessuti
Ossa: frammenti irregolari, alcuni allungati e appuntiti, altri
leggermente arrotondati, opachi, bianchi o grigi; piccole vertebre
isolate, generalmente intere
Ossa cartilaginee: frammenti piatti di colore bianco latte, a volte
con sfumature azzurre o con aspetto perlaceo, semitrasparenti, con
superficie liscia e lucida
Scaglie: corpi di natura connettivale, molto variabili per quantità,
forma, dimensioni e struttura. Nei Teleostei: lamine piatte o
leggermente arrotolate, alcune di forma circolare (tipo cicloide),
altre con un margine dentellato (tipo ctenoide); sono marcate da
strie concentriche di accrescimento e sono argentate o iridescenti
per il contenuto in cristalli di guanina. Negli Elasmobranchi:
dentelli cutanei con una estremità appuntita e l'altra rombica (tipo
placoide)
Occhi: sferette bianche opache, formate da sottili strati lamellari,
spesso staccati e frantumati, che avvolgono il cristallino sferici,
duro e vitreo, leggermente ruvido
Uova: sferette di dimensioni variabili, con superficie bruna rugosa,
isolate o in gruppi
Istologia
Fibre muscolari: frammenti di fibre striate cilindriche, spesso
incurvate, incolori e trasparenti (di diametro maggiore che nella
carne), con fini striature trasversali birifrangenti quasi sempre
visibili
Ossa: particelle irregolari grigie, opache o semitrasparenti, secondo
lo spessore. In alcuni gruppi di Pesci sono presenti lacune a
canalicoli: le lacune, che appaiono nere sul fondo grigio delle
lamine ossee, possono essere fusiformi (es. aringa, acciuga) o
filiformi (es. tonno); i canalicoli sono sottili linee nere ondulate
e, a differenza che nei Mammiferi, ramificate. In altri gruppi (es.
merluzzo) le lacune sono assenti e sono visibili soltanto leggere
striature parallele ramificate (fibre di Sharpey, peraltro sempre
presenti nelle ossa dei Pesci)
Ossa cartilaginee: particelle irregolari, opache, disseminate di min-
ute lacune globulari o compresse, prive di canalicoli. In alcune spe-
cie (es. squalo, palombo) la superficie della ossa appare formata da
piastre poligonali calcificate
Scaglie: nei Teleostei appaiono come lamine trasparenti,
riconoscibili, sia intere che in piccoli frammenti, dalla struttura a
bande concentriche alternate chiare e scure, dovute alla forte
calcificazione con disposizione ad anelli dello strato superficiale;
in alcune specie (es. aringa) gli anelli mostrano andamento
curvilineo con effetto di piccole placche arrotondate embricate.
Negli Elasmobranchi (es. squalo) le scaglie sono trasparenti e
appaiono formate da un corpo conico che si prolunga in una piastra
basale larga, generalmente rombica
Pelle: frammenti sottili e trasparenti, privi di struttura, talvolta
disseminati di corpi pigmentati neri, di forma stellata (melanofori)
Denti: corpi conici con base larga arrotondata; nei frammenti più
trasparenti sono visibili i tubuli della dentina in forma di sottili
linee parallele
Otoliti: lamine dell'orecchio a struttura cristallina, birifrangenti,
marcate da larghe bande di accrescimento chiare e scure alternate
dovute a concrezioni calcaree di cristalli di carbonato di calcio
aggregati in strati concentrici Guanina: contenuta nella pelle e
nelle scaglie in microcristalli aghiformi, che nei derivati sono
frantumati in polvere fine, fortemente birifrangente, disseminata su
tutti i tessuti
3.2.2 Farine di fegati di pesce
Composizione
Polveri di colore bruno chiaro, con odore caratteristico di fegato di
merluzzo.
Istologia
Nessun tessuto caratteristico. La struttura ghiandolare è distorta;
talvolta sono visibili cellule poligonali di dimensioni uniformi as-
sociate a globuli di olio
3.2.3 Solubili di pesce
Composizione
Derivati dalla condensazione o essiccazione dei liquidi residui della
cottura dei pesci dopo filtrazione dei materiali solidi e separazione
dell'olio: sciroppi o polveri di colore bruno scuro, con odore di
pesce forte e penetrante.
Istologia
Sia gli sciroppi che le polveri contengono elevate quantità di
guanina polverizzata e minuti frammenti residui di ossa/scaglie,
sufficienti per il riconoscimento
3.2.4 Concentrati proteici di pesce
Composizione
Derivati dalla condensazione o essiccazione dei liquidi derivati dai
processi di estrazione delle proteine totali dei pesci: sciroppi o
polveri di colore bruno o bruno scuro, con odore di pesce forte e
penetrante.
Istologia
V. Solubili di pesce (3.2.3)
3.2.5 Farina di gamberi
Composizione
Residui essiccati e macinati della lavorazione dei gamberi. Sono
caratterizzati da frammenti laminari di esoscheletro chitinoso in
parte calcificato, sottili, traslucidi, di colore rosso o grigio, e
da frammenti di antenne tubulari segmentate.
Istologia
Esoscheletro: particelle lamellari di chitina rosse o grigie, marcate
da striature nere parallele, unite a intervalli da linee trasversali;
in alcune sono visibili concrezioni calcaree sferoidali o piatte a
forma di croce o di rosetta, fortemente birifrangenti sul fondo
isotropo della chitina
Antenne: frammenti tubulari di tessuto sottile con strutture a
pettine
Altri tessuti: talvolta sono visibili cellule rettangolari, di colore
ambra, degli occhi composti
3.2.6. Farina di granchi
Composizione
Residui essiccati e macinati della lavorazione dei granchi. Sono
caratterizzati da frammenti di esoscheletro chitinoso, in parte
calcificato, e contengono visceri e parte della polpa.
I frammenti di esoscheletro sono irregolari, di colore da avorio a
rosso bruno; hanno tessitura lamellare, con spessore e durezza
variabili secondo le quantità di calcare depositato fra le lamelle
di chitina. Gli strati lamellari sono talvolta separati in forma di
sottili lamine arrotolate, alcune di colore bruno, altre incolori e
trasparenti (con aspetto simile a quello di crusche di cereali). Gli
altri tessuti, fragili, semitrasparenti, di colore da ambra a rosso,
sono polverizzati.
Istologia
Esoscheletro: particelle irregolari di chitina opache o
semitrasparenti, secondo lo spessore; quelle provenienti dalla
superficie esterna sono punteggiate da larghi pori esagonali
disposti a nido d'ape, visibili nei frammenti più sottili. Le
lamelle isolate di chitina, di colore giallino o grigio, sono
trasparenti con leggere striature chiare e scure alternate (simili a
quelle delle scaglie di pesce); in luce polarizzata le striature
scure, dovute ai depositi di calcare, sono birifrangenti sul fondo
isotropo della chitina
Altri tessuti: frammenti di fibre muscolari striate, simili a quelle
dei Pesci
4 PRODOTTI INORGANICI
Sono riconoscibili visivamente alcuni prodotti minerali naturali
macinati e alcuni sali inorganici non macinati. L'identificazione
visiva può essere confermata con i saggi microchimici indicati nella
Parte I, par. 10.5.
4.1 Prodotti minerali naturali
4.1.1. Farina di ossa degelatinizzate
Particelle fini bianche o grigie, dure, sfrangiate, spugnose, con
superfici di rottura opache. Al microscopio composto mostrano la
struttura lacunare del tessuto osseo dei Mammiferi (v. 3.1.1).
4.1.2 Rocce calciche macinate
Aggregati di fini cristalli, interi o frantumati, di carbonati
prevalentemente di calcio, di varie forme e dimensioni, incolori o
bianchi o variamente colorati, birifrangenti.
4.1.3 Rocce calciche granulate
Granuli irregolari, spigolosi, di varie dimensioni secondo il tipo di
granulazione, di colore bianco opaco o grigio, duri e compatti, con
superfici di rottura rugose e lucenti e con struttura cristallina
birifrangente.
4.1.4 Conchiglie macinate
Frammenti durissimi di varie forme e colori: quelli provenienti da
conchiglie di ostriche sono spessi e hanno superficie esterna rugosa,
opaca, di colore giallo-bruno, e superficie interna liscia,
iridescente; quelli di altri Molluschi sono sottili, alcuni piatti,
altri convessi, altri con tracce degli avvolgimenti a spirale o della
forma conica delle conchiglie originarie, e hanno superficie esterna
bianca o variamente colorata, liscia oppure marcata da coste,
sculture o disegni, e superficie interna bianca, liscia.
4.1.5 Alghe marine calcaree granulate o macinate
Granuli friabili, o polvere fine, secondo la tecnologia di
preparazione, di colore bianco o grigio.
Dopo lavaggio in acido cloridrico (1:1), sono visibili al microscopio
composto le forme ramificate del tallo delle alghe Corallinacee
spesso associate a microconchiglie sferiche, uni o pluriloculari, di
Molluschi Foraminiferi.
4.1.6 Sabbia
Frammenti irregolari, durissimi, di varie dimensioni e colori. Al
microscopio composto mostrano struttura cristallina birifrangente.
4.1.7 Farine fossili
Polveri finissime grigie, non differenziate.
Al microscopio composto sono visibili minuti frammenti degli
scheletri silicei delle alghe Diatomee fossili, con caratteristiche
forme, punteggiature e disegni vari.
4.2 Sali minerali
4.2.1 Carbonato di calcio precipipato
Cristallini esagonali, talvolta incolori e trasparenti, talvolta
colorati e opachi, birifrangenti.
4.2.2 Cloruro di sodio
Forme possibili: 1) cristalli cubici, giallastri o incolori secondi
il grado di purezza; 2) polvere cristallina bianca, non
differenziata.
Entrambe le forme sono isotrope.
4.2.3 Solfato di magnesio (eptaidrato)
Forme possibili: 1) cristalli allungati (rombici o monoclini) in
forme prismatico-piramidali, incolori o bianchi, semitrasparenti; 2)
polvere cristallina bianca costituita da microcristalli aghiformi.
Entrambe le forme sono birifrangenti.
4.2.4 Solfato di rame (pentaidrato)
Cristalli triclini di forma prismatica, azzurri, trasparenti,
riconoscibili per il colore anche se in rari e/o minuti frammenti.
Birifrangenti.
5 COMPOSTI ORGANICI
Sono riconoscibili visivamente rari prodotti cristallini di natura
organica. L'identificazione visiva deve essere preferibilmente
confermata con i saggi microchimici indicati nella Parte I, par.
10.6.
5.1 Composti azotati
5.1.1 Aminoacidi
5.1.1.1 dl-Metionina
Lamine monoclini, bianche e lucide, spesso aggregate in gruppi
squamosi. Sono fortemente birifrangenti e pleocroiche, con peculiari
effetti di variegature.
5.1.1.2 l-Lisina
Microcristalli aghiformi incolori, birifrangenti.
5.1.1.3 L-Cistina
Lamine o prismi esagonali incolori, birifrangenti e pleocroici.
5.1.2 Urea
Cristallini aghiformi, incolori, trasparenti e lucidi, isolati oppure
aggregati in sferette. I singoli cristalli sono birifrangenti e
pleocroici.
5.2 Zuccheri
5.2.1 Glucosio (monoidrato)
Cristalli laminari, incolori e trasparenti, con forma esagonale
allungata più o meno regolare secondo il grado di perfezione, spesso
aggregati in gruppi di cristalli intercresciuti o in masse
parzialmente fuse. Birifrangenti.
5.2.2 Lattosio
Forme possibili: 1) piccoli cristalli prismatici; 2) larghi cristalli
cuneiformi.
Entrambe le forme mostrano birifrangenza, la prima monocromatica, la
seconda pleocroica, con colori disposti in bande parallele.
5.2.3 Saccarosio
Cristalli incolori o giallini, semitrasparenti, con forme
pseudocubiche. Sono birifrangenti e pleocroici, con colori disposti
in bande parallele.
5.3 Vitamine
5.3.1 Preparati di Vitamina A
Microsfere larghe da 20 a 500 (m greco)m, di colore giallo o bruno,
con superficie rugosa. Sono costituite da gelatina, a volte mista ad
amidi, acidi grassi o zuccheri, inglobanti la vitamina A liquida o in
microcristalli prismatici giallini, birifrangenti.
5.3.2 Vitamina B1
Piccole lamine incolori di forme irregolari, birifrangenti e
pleocroiche.
5.3.3 Vitamina C
Forme possibili: 1) lamine incolori, spesso frantumate; 2)
microcristalli aghiformi bianchi o giallini.
Entrambe le forme sono birifrangenti.
5.4 Estrogeni
5.4.1 4 - metiltiouracile
Cristallini aghiformi o prismatici di colore giallino, aggregati in
gruppi irregolari o in complessi tabulari. I singoli cristalli sono
fortemente birifrangenti e pleocroici.
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