Serie Generale n. 165 del 18-7-2014
DECRETI, DELIBERE E ORDINANZE MINISTERIALI
MINISTERO DELLA SALUTE
MINISTERO DELLA SALUTE
DECRETO 3 giugno 2014
WEST NILE DISEASE. Procedure operative di intervento e flussi informativi nell'ambito del Piano di sorveglianza nazionale per la Encefalomielite di tipo West Nile (West Nile Disease), anno 2014. (14A05608) (GU Serie Generale n.165 del 18-07-2014)

IL DIRETTORE GENERALE
della sanità animale e dei farmaci veterinari

Visto il testo unico delle leggi sanitarie approvato con regio
decreto 27 luglio 1934, n. 1265, e successive modifiche;
Visto il regolamento di polizia veterinaria approvato con decreto
del Presidente della Repubblica 8 febbraio 1954, n. 320;
Visto l'art. 32 della legge 23 dicembre 1978, n. 833;
Visto l'art. 117 del decreto legislativo 31 marzo 1998, n. 112 e
successive modificazioni;
Visto il decreto del Presidente della Repubblica 11 febbraio 1994,
n. 243, regolamento recante attuazione della direttiva 90/426/CEE
relativa alle condizioni di polizia sanitaria che disciplinano i
movimenti e le importazioni di equini di provenienza da Paesi terzi,
con le modifiche apportate dalla direttiva 92/36/CEE;
Visto il decreto ministeriale 29 novembre 2007 recante approvazione
del Piano di sorveglianza nazionale per la encefalomielite di tipo
West Nile (West Nile Disease) pubblicato nella Gazzetta Ufficiale
della Repubblica italiana n. 36 del 12 febbraio 2008;
Vista l'ordinanza 4 agosto 2011 recante «Norme sanitarie in materia
di encefalomielite equina di tipo West Nile (West Nile Disease) e
attività di sorveglianza sul territorio nazionale», pubblicata nella
Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana n. 209 dell'8 settembre
2011, la cui efficacia è stata prorogata dall'ordinanza 6 agosto
2013 recante «Proroga ordinanza 4 agosto 2011, recante «Norme
sanitarie in materia di encefalomielite equina di tipo West Nile
(West Nile Disease) e attività di sorveglianza sul territorio
nazionale», pubblicata nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica
italiana n. 210 del 7 settembre 2013;
Visto che l'art. 2 della predetta ordinanza 4 agosto 2011, la cui
efficacia è stata prorogata dall'ordinanza 6 agosto 2013, prevede la
modifica del piano annuale con decreto del direttore generale della
sanità animale e dei farmaci veterinari del Ministero della salute;
Rilevato che la diffusione dell'infezione avvenuta nel corso degli
ultimi anni in Italia, con il coinvolgimento di nuovi territori,
induce ad una profonda revisione dell'attuale piano di sorveglianza
nei confronti della West Nile Disease (WND) pur restando fermo il
principale e fondamentale obiettivo di tutela della salute pubblica
del piano stesso;
Rilevato che per il rilievo precoce dell'infezione la sorveglianza
più efficace è quella effettuata sugli insetti vettori e sugli
uccelli, tenuto conto che sono quest'ultimi ospiti a infettarsi più
precocemente nel corso della stagione epidemica;
Ritenuto che per quanto riguarda gli aspetti diagnostici è
indispensabile che gli accertamenti di primo intervento (ELISA, PCR)
siano delegati agli istituti zooprofilattici sperimentali competenti
per territorio;
Acquisite le osservazioni e integrazioni trasmesse dal gruppo di
lavoro costituito da alcune regioni e istituti zooprofilattici
sperimentali;
Rilevato che il Centro di referenza nazionale per le malattie
esotiche presso l'Istituto zooprofilattico sperimentale dell'Abruzzo
e del Molise «G. Caporale» ha predisposto di concerto con la
scrivente Direzione generale il programma per l'esecuzione delle
«Procedure operative di intervento e flussi informativi nell'ambito
del piano di sorveglianza nazionale per la encefalomielite di tipo
West Nile (West Nile Disease)»;

Dispone:

1. In conformità a quanto previsto al comma 2, art. 2
dell'ordinanza 4 agosto 2011, la cui efficacia è stata prorogata
dall'ordinanza 6 agosto 2013, è resa operativa, per l'anno 2014, sul
territorio nazionale l'esecuzione delle «Procedure operative di
intervento e flussi informativi nell'ambito del piano di sorveglianza
nazionale per la encefalomielite di tipo West Nile (West Nile
Disease)» di cui all'allegato A del presente dispositivo.
2. Il presente atto è inviato all'Ufficio centrale del bilancio
per la registrazione e alla Gazzetta Ufficiale della Repubblica
italiana per la sua pubblicazione.
Roma, 3 giugno 2014

Il direttore generale: Ferri

Registrato alla Corte dei conti il 1° luglio 2014
Ufficio di controllo sugli atti del MIUR, MIBAC, Min. salute e Min.
lavoro, foglio n. 2534

Allegato A

PROCEDURE OPERATIVE DI INTERVENTO E FLUSSI INFORMATIVI NELL'AMBITO
DEL PIANO DI SORVEGLIANZA NAZIONALE PER LA ENCEFALOMIELITE DI TIPO
WEST NILE (WEST NILE DISEASE) 2014

1. Introduzione.
Le procedure operative di intervento e i flussi informativi
descritti nel presente documento per l'anno 2014 sono adottate
nell'ambito del piano di sorveglianza per la West Nile Disease (WND)
e, come per gli anni precedenti, hanno il fine di individuare il più
precocemente possibile la circolazione del virus West Nile (WNV) sia
nelle aree dove l'infezione è già apparsa nel passato sia nelle
restanti parti del territorio nazionale al fine di mettere il
Servizio sanitario nazionale nelle condizioni migliori e più
efficaci per porre in atto tutte le misure preventive necessarie a
tutelare la salute pubblica.
L'obiettivo principale del piano, pertanto, è quello di
individuare precocemente la circolazione del WNV sul territorio
nazionale negli uccelli, insetti o mammiferi attraverso programmi di
sorveglianza mirati.
2. Criteri generali per la sorveglianza della WND.
La sorveglianza nei confronti della WND si avvale di:
1) sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a specie
bersaglio. È possibile, in alternativa attuare la sorveglianza su
allevamenti avicoli rurali o all'aperto o tramite l'allestimento di
gruppi di polli sentinella;
2) sorveglianza negli equidi;
3) sorveglianza entomologica;
4) sorveglianza su carcasse di uccelli selvatici.
Le modalità di attuazione delle diverse attività di
sorveglianza differiscono a seconda della situazione epidemiologica
riscontrata. Le aree oggetto del piano sono individuate sulla base
delle evidenze epidemiologiche riferite agli anni precedenti, nonchè
sulla base di informazioni epidemiologiche/ecologiche/ambientali.
Premesso che le regioni possono definire piani straordinari, da
inviare preventivamente al Ministero e al CESME per una valutazione,
finalizzati a rimodulare la sorveglianza sulla base delle evidenze
che si manifestano nel corso dell'attività stessa, sono individuate
2 aree geografiche distinte.
A. Aree endemiche. Il territorio dove il WNV sta circolando o ha
circolato nel corso degli anni precedenti e dove, quindi, si sono
ripetutamente osservati episodi di infezione, nonchè le aree
limitrofe o subito a ridosso delle stesse:
Italia continentale: aree già interessate dalla circolazione
virale (vedi tabella 1);
Italia insulare: regione Sardegna e parte della regione Sicilia
(vedi tabella 1).
In queste aree la sorveglianza deve essere attuata tramite:
il controllo su uccelli stanziali appartenenti a specie
bersaglio, o in alternativa su allevamenti avicoli rurali o
all'aperto oppure su gruppi di polli sentinella appositamente
allestiti;
la sorveglianza entomologica.
B. Resto del territorio nazionale. In queste aree le attività di
sorveglianza prevedono: il monitoraggio sierologico a campione su
sieri di cavalli per rilevare la presenza di IgM, secondo la
numerosità campionaria riportata in tabella 4.
Al fine di completare le informazioni epidemiologiche
rappresentative per tutto il territorio di competenza, le regioni
possono effettuare, previa formalizzazione al Ministero e in accordo
con il CESME, un monitoraggio sierologico a campione:
sui sieri di bovini ed ovi-caprini prelevati come sentinelle
nell'ambito del piano di sorveglianza sierologica della bluetongue,
oppure
su altre specie animali (ad es. cani in aree urbane).
Su tutto il territorio nazionale, inoltre, è obbligatoria la
notifica immediata di tutti i casi sospetti di sintomatologia nervosa
negli equidi e di tutti gli episodi di mortalità in uccelli
selvatici non riferibili ad altre patologie infettive.
3. Sorveglianza della WND nelle aree endemiche.
3.1. Aree endemiche: unità geografica di riferimento.
Per poter meglio uniformare le attività di sorveglianza
nell'ambito dell'area, si considera come unità geografica di
riferimento il territorio con una superficie complessiva di circa
1200-1600 km². In tal modo, per le aree endemiche di ciascuna
provincia è possibile definire il numero di unità geografiche di
riferimento che essa include (tabella 1). Ne consegue che, ad
esempio, se nel territorio di una provincia il numero di unità
geografiche da esso rappresentato è pari a 0,5, il numero di unità
campionarie previste dal presente documento nell'ambito delle diverse
azioni di sorveglianza per ciascuna unità geografica di riferimento
dovrà essere ridotto alla metà (esempio: numero di siti di cattura
entomologica = 2, numero di siti effettivi di cattura da attivare sul
territorio della provincia = 1), mentre, al contrario se il numero di
unità geografiche da esso rappresentato è pari a 1,5, il numero di
unità campionarie previste per ciascuna unità geografica di
riferimento dovrà essere aumentato della metà (esempio: numero di
siti cattura entomologica = 2, numero di siti effettivi di cattura da
attivare sul territorio della provincia = 3).
3.2. Sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a specie
bersaglio.
Per specie bersaglio si intende quel gruppo di specie recettive
al virus che, dal punto di vista gestionale, sono sottoposte a
controlli di popolazione nella gran parte del loro areale di
distribuzione.
Appartengono alle specie bersaglio:
Gazza (Pica pica);
Cornacchia grigia (Corvus corone cornix);
Ghiandaia (Garrulus glandarius).
Per ogni unità geografica di riferimento si devono campionare
almeno 100 esemplari di specie bersaglio avendo cura di eseguire le
attività di campionamento nel periodo da marzo a novembre, avendo
cura di distribuire i prelievi nel corso dell'intero periodo e
tenendo in considerazione il periodo durante il quale è possibile
effettuare il depopolamento.
Da ogni animale il cuore, cervello, rene e milza sono esaminati
mediante RT-PCR presso i laboratori dell'IZS competente per
territorio. I campioni positivi (porzioni dell'organo, omogenato,
RNA) sono inviati, il prima possibile (entro e non oltre due giorni
lavorativi) al Centro di referenza nazionale per le malattie esotiche
(CESME) per la conferma. Per ogni specie prelevata deve essere
compilata una scheda W02 di accompagnamento. Il CESME effettua gli
esami di conferma entro dieci giorni lavorativi dal ricevimento del
campione. Il CESME trasmette il rapporto di prova all'IZS, alla
regione territorialmente competente e, in caso di positività, ai
competenti uffici del Ministero della salute.
Nel caso non fosse possibile effettuare il campionamento delle
specie bersaglio, si possono, in alternativa, campionare animali di
allevamenti avicoli rurali e all'aperto (vedi capitolo 3.3) o
allestire gruppi di polli sentinella da cui effettuare prelievi
regolari (vedi capitolo 3.4).
3.3. Sorveglianza in allevamenti avicoli rurali e all'aperto.
Nelle aree dove la sorveglianza sugli uccelli stanziali
appartenenti a specie bersaglio non può essere attivata o si prevede
che non sarà in grado di raggiungere almeno il 50% dei controlli
previsti, è possibile, in alternativa, controllare sierologicamente
un campione rappresentativo di allevamenti avicoli rurali o
all'aperto, inclusi gli allevamenti di selvaggina da penna.
Nella scelta delle aziende da campionare saranno privilegiati gli
allevamenti in prossimità di aree umide o comunque dove si registra
un'elevata concentrazione di avifauna selvatica, sia stanziale che di
passo.
Il numero di allevamenti da campionare è calcolato in base al
numero delle aziende presenti in ciascuna provincia così come
riportato in tabella 2. All'interno di ciascun allevamento sono
sottoposti a prelievo gli animali di età inferiore ai 6 mesi. In
tabella 3 è riportato il numero di animali da prelevare. Le
attività di campionamento devono iniziare a marzo e terminare entro
la fine di novembre. I prelievi possono essere effettuati
contestualmente a quelli del piano di monitoraggio dell'influenza
aviaria.
Gli operatori, devono prelevare per ciascun animale 2 campioni di
sangue da porre in altrettante provette: una senza anticoagulante e
una con EDTA (1) (minimo 2 ml di sangue per provetta da conservare
alla temperatura di +4 °C).
I campioni, accompagnati dalla scheda W01 già pre-compilata
nella parte anagrafica (vedi le indicazioni contenute nel capitolo 9
del presente documento), sono inviati all'IZS competente per
territorio che provvede ad effettuare l'esame di prima istanza
(ELISA) sul siero e, in caso di positività, la RT-PCR sul sangue con
EDTA. In caso di positività i campioni (siero e sangue con EDTA)
sono inviati al CESME per la conferma il prima possibile (entro e non
oltre due giorni lavorativi). Il CESME effettua gli esami di conferma
entro dieci giorni lavorativi dal ricevimento del campione. Il CESME
trasmette il rapporto di prova all'IZS, alla regione territorialmente
competente e, in caso di positività, ai competenti uffici del
Ministero della salute.
3.4. Sorveglianza attraverso l'utilizzo di gruppi di animali
sentinella.
Nelle aree dove la sorveglianza sugli uccelli stanziali
appartenenti a specie bersaglio non può essere attivata o si prevede
che non sarà in grado di raggiungere almeno il 50% dei controlli
previsti, è possibile, in alternativa, utilizzare esemplari di
specie avicole (polli o galline a fine carriera) in gabbia. Per ogni
unità geografica di riferimento devono essere selezionati 4 siti di
sorveglianza. In ciascun sito devono essere collocati 30 animali
suddivisi in due gruppi di 15. Gli animali sentinella al momento
della selezione non devono avere anticorpi nei confronti del WNV.
Laddove possibile, è preferibile posizionarli in aziende zootecniche
localizzate entro circa 800 m dalle aree di concentrazione
dell'avifauna e/o di zone umide (raccolte d'acqua dolce o salmastra
di qualunque tipo).
Dal 15 marzo e fino al 30 ottobre, devono essere effettuati
prelievi di sangue con cadenza quindicinale, alternando i prelievi
sui due sottogruppi.
Gli operatori devono prelevare per ciascun animale 2 campioni di
sangue da porre in altrettante provette: una senza anticoagulante e
una con EDTA (minimo 2 ml di sangue per provetta da conservare a
temperatura di +4 °C). I campioni, accompagnati dalla scheda W01
pre-compilata nella parte anagrafica (vedi le indicazioni contenute
nel capitolo 9 del presente documento), sono inviati all'IZS
competente per territorio che provvede ad effettuare l'esame di prima
istanza (ELISA) sul siero e, in caso di positività, la RT-PCR sul
sangue con EDTA. In caso di positività i campioni (siero e sangue
con EDTA) sono inviati al CESME per la conferma il prima possibile
(entro e non oltre due giorni lavorativi). Il CESME effettua gli
esami di conferma entro dieci giorni lavorativi dal ricevimento del
campione. Il CESME trasmette il rapporto di prova all'IZS, alla
regione territorialmente competente e, in caso di positività, ai
competenti uffici del Ministero della salute.
3.5. Sorveglianza entomologica.
La sorveglianza entomologica è effettuata in almeno 2 aziende
per ciascuna unità geografica di riferimento.
Le aziende scelte devono avere le seguenti caratteristiche:
aziende/siti dove nel corso dei precedenti anni sono stati
riscontrati casi clinici, sieroconversioni negli animali sentinella o
positività nei culicidi;
aziende/siti in prossimità di aree umide e con un'elevata
concentrazione di avifauna selvatica.
In ogni azienda/sito è installata almeno 1 trappola di tipo CO2
-CDC. Le catture sono effettuate con cadenza quindicinale, nel
periodo da aprile a quando due catture consecutive non rilevano la
presenza di alcun esemplare di zanzara, e comunque almeno fino alla
fine di ottobre. La trappola deve essere attiva per almeno una notte
(dal crepuscolo alla mattina successiva). In caso di più notti di
cattura, le zanzare sono raccolte al termine di ogni notte di
cattura.
Le azioni di sorveglianza entomologica possono essere garantite
da altre attività di sorveglianza e controllo della fauna culicidica
già predisposte dalle regioni.
I campioni, accompagnati dalla scheda W05, devono essere inviati
all'IZS competente per territorio che provvede ad effettuare
l'identificazione degli esemplari catturati e la RT-PCR sui pool di
insetti.
I risultati relativi alle specie identificate (specie, numero,
sesso) e ai pool analizzati per la ricerca virologica, devono essere
inseriti nel sistema informativo nazionale per la WND secondo quanto
riportato al capitolo 9.6.
In caso di positività alla RT-PCR i campioni (pool di insetti
della medesima cattura e RNA) devono essere inviati al CESME il prima
possibile (entro e non oltre due giorni lavorativi). Il CESME
effettua gli esami di conferma entro dieci giorni lavorativi dal
ricevimento del campione. Il CESME trasmette il rapporto di prova
all'IZS, alla regione territorialmente competente e, in caso di
positività, ai competenti uffici del Ministero della salute.
4. Attività di sorveglianza della WND nella restante parte del
territorio nazionale.
4.1. Sorveglianza sierologica a campione negli equidi.
Considerata la difficoltà di trovare animali sieronegativi da
arruolare nel piano di sorveglianza come animali sentinella, è
istituito un piano di controllo a campione sui sieri di equidi nei
confronti della WND secondo la numerosità campionaria di cui alla
tabella 4, da svolgere su campioni prelevati da luglio a novembre per
altri motivi (ad esempio per anemia infettiva equina) e volto ad
evidenziare gli stadi iniziali d'infezione (evidenza sierologica di
anticorpi IgM verso il WNV). Nel periodo da luglio a novembre devono
essere campionati complessivamente 4621 capi, secondo la ripartizione
provinciale di cui alla tabella 4.
Tali campioni, accompagnati dalla scheda W03 pre-compilata nella
parte anagrafica e barrando l'opzione [4]: «controllo a campione»
come motivo del prelievo, devono essere inviati all'IZS competente
per territorio che provvederà ad effettuare la prova di ELISA-IgM.
In caso di positività i campioni (siero positivo) devono essere
inviati al CESME, il prima possibile (entro e non oltre due giorni
lavorativi). Il CESME effettua gli esami di conferma entro dieci
giorni lavorativi dal ricevimento del campione. Il CESME trasmette il
rapporto di prova all'IZS, alla regione territorialmente competente
e, in caso di positività, ai competenti uffici del Ministero della
salute.
4.2. Sorveglianza sierologica a campione sui sieri di altre specie
animali.
In aggiunta a quanto riportato al capitolo precedente, al fine di
completare le informazioni epidemiologiche rappresentative per tutto
il territorio di competenza, le regioni possono effettuare, previa
formalizzazione al Ministero e in accordo con il CESME, un
monitoraggio sierologico a campione:
sui sieri di bovini ed ovi-caprini prelevati come sentinelle
nell'ambito del piano di sorveglianza sierologica della bluetongue
(almeno 2309 capi secondo la ripartizione di cui alla tabella 5).
Tali campioni sono selezionati casualmente dal personale degli IZS
competenti per territorio e successivamente esaminati mediante
metodica ELISA. In caso di positività i campioni (siero positivo)
devono essere inviati al CESME il prima possibile (entro e non oltre
due giorni lavorativi); oppure
su altre specie animali (ad es. cani) previa intesa con il
Ministero e il CESME.
Per ogni specie prelevata deve essere compilata una scheda W04 di
accompagnamento.
5. Sorveglianza clinica negli equidi.
La sorveglianza clinica negli equidi si attua su tutto il
territorio nazionale. Tutti i casi di sintomatologia nervosa negli
equidi devono essere notificati e sottoposti ad indagini approfondite
per escludere o confermare la WND, indipendentemente dall'area
geografica dove questi si manifestano.
Sintomi tipici della malattia negli equidi sono i seguenti:
debolezza arti posteriori;
incapacità a mantenere la stazione quadrupedale;
paralisi/paresi agli arti;
fascicolazioni muscolari;
deficit propriocettivi;
cecità;
ptosi labbro inferiore o paresi/paralisi dei muscoli labiali o
facciali;
digrignamento dei denti.
Nel caso di sintomatologia neurologica riferibile a WND in
equidi, il servizio veterinario dell'azienda USL competente per
territorio deve darne immediata comunicazione alla Direzione generale
della sanità animale e del farmaco veterinario e al servizio
veterinario della regione, attraverso la registrazione del sospetto
in SIMAN. Il servizio veterinario dell'ASL esegue i prelievi di
sangue con e senza anticoagulante EDTA (2) sugli equidi che
manifestano sintomatologia clinica riferibile a WND. I campioni di
sangue con la relativa scheda W03 - scegliendo come motivo del
prelievo [1]: «equidi con sintomi clinici» sono inviati all'Istituto
zooprofilattico sperimentale competente per territorio che
provvederà ad effettuare la prova di ELISA-IgM sul siero e la RT-PCR
sul sangue con EDTA. In caso di positività i campioni devono essere
inviati al CESME, il prima possibile (entro e non oltre due giorni
lavorativi). Il CESME effettua gli esami di conferma entro cinque
giorni lavorativi dal ricevimento del campione. Il CESME trasmette il
rapporto di prova all'IZS, alla regione territorialmente competente
e, in caso di positività, ai competenti uffici del Ministero della
salute.
Qualora il sospetto riguardi animali deceduti o soppressi in
seguito a sindrome neurologica, il servizio veterinario dell'azienda
USL competente per territorio, in collaborazione con l'Istituto
zooprofilattico sperimentale competente per territorio esegue l'esame
anatomo-patologico ed il prelievo del cervello e del midollo spinale,
del cuore, del rene e della milza, I campioni, accompagnati dalla
scheda W03 - motivo del prelievo [3]: «controllo su equidi
deceduti/abbattuti» - debitamente compilata devono essere inviati
all'IZS competente per territorio che provvede ad effettuare la
RT-PCR. In caso di positività alla RT-PCR i campioni devono essere
inviati al CESME il prima possibile (entro e non oltre due giorni
lavorativi) in quantità idonea, perfettamente confezionati e
conservati, accompagnati dalla scheda W03. Il CESME effettua gli
esami di conferma entro cinque giorni lavorativi dal ricevimento del
campione. Il CESME trasmette il rapporto di prova all'IZS, alla
regione territorialmente competente e, in caso di positività, ai
competenti uffici del Ministero della salute.
6. Sorveglianza su carcasse di uccelli selvatici.
La sorveglianza passiva sull'avifauna selvatica si esegue su
tutto il territorio nazionale e deve essere intensificata durante il
periodo di attività degli insetti vettori. Ogni animale trovato
morto ed appartenente agli ordini dei passeriformi, ciconiiformi,
caradriiformi e strigiformi deve essere recuperato ed inviato
all'Istituto zooprofilattico sperimentale competente per territorio
per l'esame anatomo-patologico. Da ogni animale il cuore, cervello,
rene e milza sono esaminati tramite RT-PCR presso i laboratori
dell'IZS competente per territorio. I campioni positivi (porzioni
dell'organo, omogenato, RNA) sono inviati, il prima possibile (entro
e non oltre due giorni lavorativi) al Centro di referenza nazionale
per le malattie esotiche (CESME). I campioni devono essere
accompagnati dalla scheda W02 debitamente compilata. Per ogni specie
di uccello va compilata una distinta scheda W02 di accompagnamento.
Analogamente si dovrà procedere in tutti gli episodi di mortalità
anomala o di aumento dell'incidenza della mortalità nell'avifauna
selvatica segnalati per ogni altra specie nelle aree di presenza e
durante il periodo di attività dei vettori. Il CESME effettua gli
esami di conferma entro dieci giorni lavorativi dal ricevimento del
campione. Il CESME trasmette il rapporto di prova all'IZS, alla
regione territorialmente competente e, in caso di positività, ai
competenti uffici del Ministero della salute.
7. Interpretazione dei risultati diagnostici.
Un caso è considerato sospetto di WND quando si ha:
sieroconversione al test ELISA in polli o galline sentinella;
positività al test ELISA in soggetti di allevamenti avicoli
rurali o all'aperto di età inferiore ai sei mesi;
positività al test ELISA IgM in equidi in assenza di
sintomatologia;
positività al test ELISA IgM e/o al saggio RT-PCR in equidi con
sintomatologia clinica riconducibile a WND effettuato/i presso gli
IZS competenti per territorio;
positività al test RT-PCR in organi o sangue di uccelli
(catturati, campionati, ritrovati morti) effettuato presso gli IZS
competenti per territorio;
positività al test RT-PCR in pool di zanzare effettuato presso
gli IZS competenti per territorio.
Tutti i casi sospetti devono essere confermati dal CESME.
Un caso è considerato confermato quando si ha:
sieroconversione al test ELISA in polli o galline sentinella
confermata dal saggio di sieroneutralizzazione effettuato dal CESME;
positività al test ELISA in soggetti di allevamenti avicoli
rurali o all'aperto di età inferiore ai sei mesi confermata dal
saggio di sieroneutralizzazione effettuato dal CESME;
positività al test ELISA IgM in equidi, confermata dagli esami
sierologici effettuati dal CESME;
positività al test ELISA IgM e/o agli esami virologici (RT-PCR)
in equidi con sintomatologia clinica riconducibile a WND riscontrata
presso gli IZS competenti per territorio e confermata dal CESME;
positività al test (RT-PCR) in organi o sangue di uccelli
(catturati, campionati, ritrovati morti), riscontrata presso gli IZS
competenti per territorio e confermata dal CESME;
positività agli esami virologici (RT-PCR) in pool di zanzare
riscontrata presso gli IZS competenti per territorio e confermata dal
CESME.
8. Misure da adottare in caso di positività.
Qualora si abbiano casi confermati in soggetti di allevamenti
avicoli rurali o all'aperto, oppure in animali sentinella delle
specie aviarie, il servizio veterinario dell'azienda USL, ricevuta la
comunicazione della conferma di positività, in accordo con il
proprietario provvede ad abbattere ed inviare gli animali positivi
accompagnati dalla scheda W01, all'Istituto zooprofilattico
sperimentale competente per territorio. Il personale dell'Istituto
zooprofilattico sperimentale esegue gli esami anatomo-patologici su
tutti i soggetti pervenuti ed esamina il cuore, cervello, rene e
milza di ciascun animale mediante RT-PCR. I campioni positivi
(porzioni dell'organo, omogenato, RNA) sono inviati, contestualmente
a copia della scheda W01 (vedi le indicazioni contenute nel capitolo
9 del presente documento), il prima possibile (entro e non oltre due
giorni lavorativi) al Centro di referenza nazionale per le malattie
esotiche (CESME) per la conferma. Il CESME effettua gli esami di
conferma entro dieci giorni lavorativi dal ricevimento del campione e
trasmette il rapporto di prova all'IZS, alla regione territorialmente
competente e, in caso di positività, ai competenti uffici del
Ministero della salute.
Qualora si abbiano casi confermati in equidi, il servizio
veterinario dell'azienda USL effettua:
un'indagine epidemiologica volta a definire il probabile sito di
infezione dell'animale infetto;
un campionamento entomologico (utilizzando trappole del tipo
CO2-CDC, Gravid traps, BG-Sentinel e aspirazione). Il protocollo di
cattura (frequenza e durata) è stabilito di volta in volta tra l'IZS
competente per territorio e il CESME;
una visita clinica ed il prelievo di campioni di sangue in un
campione degli equidi presenti nell'azienda secondo la numerosità
descritta in tabella 3. I campioni di sangue sono inviati
all'Istituto zooprofilattico sperimentale di competenza con la
relativa scheda W03 che provvederà ad effettuare la prova di
ELISA-IgM. In caso di positività i campioni devono essere inviati al
CESME, il prima possibile (entro e non oltre due giorni lavorativi).
Il CESME effettua gli esami entro dieci giorni lavorativi dal
ricevimento del campione e trasmette il rapporto di prova all'IZS,
alla regione territorialmente competente e, in caso di positività,
ai competenti uffici del Ministero della salute.
Qualora i casi confermati in qualsiasi specie riguardino aziende
situate in territori provinciali non interessati in passato dalla
circolazione del WNV, il servizio veterinario dell'azienda USL
competente per territorio sottopone:
a sorveglianza entomologica l'azienda interessata (utilizzando
trappole del tipo CO2-CDC, Gravid traps, BG-Sentinel e aspirazione).
Il protocollo di cattura (frequenza e durata) è stabilito di volta
in volta tra l'IZS competente per territorio e il CESME;
a prelievo ematico un campione di equidi stanziali non vaccinati
per West Nile, presenti nel raggio di 4 km dall'allevamento con i
casi confermati. Il campione di animali da prelevare è calcolato
sulla base della tabella 3. I campioni di sangue sono inviati
all'Istituto zooprofilattico sperimentale di competenza con la
relativa scheda W03 - motivo del prelievo [2]: «controllo a campione
su equidi stanziali presenti nelle aziende a 4 km rispetto al
focolaio». L'IZS competente per territorio provvederà ad effettuare
la prova di ELISA-IgM. In caso di positività i campioni devono
essere inviati al CESME, il prima possibile (entro e non oltre due
giorni lavorativi). Il CESME effettua gli esami entro dieci giorni
lavorativi dal ricevimento del campione e trasmette il rapporto di
prova all'IZS, alla regione territorialmente competente e, in caso di
positività, ai competenti uffici del Ministero della salute.
Nel caso di riscontro di positività al test ELISA, confermata
dal saggio di sieroneutralizzazione effettuato dal CESME, in bovini e
ovi-caprini prelevati come sentinelle nell'ambito del piano di
sorveglianza sierologica della bluetongue o in altre specie animali,
se in territori provinciali non interessati in passato dalla
circolazione del WNV, il Ministero della salute, di concerto con il
CESME e il servizio veterinario della regione interessata, potrà
disporre ulteriori e specifiche indagini al fine di stabilire
l'origine e l'estensione dell'infezione riscontrata.
9. Registrazione dei dati e flussi informativi.
9.1. Allevamenti avicoli/gruppi di animali sentinella delle specie
aviarie.
Per quanto riguarda gli allevamenti avicoli rurali o all'aperto,
questi devono essere preventivamente registrati presso la BDN, anche
per il tramite del Sistema informativo veterinario
(http://sorveglianza.izs.it/emergenze/west_nile/caricamento_dati.htm)
.
Per quanto concerne i gruppi di animali sentinella delle specie
aviarie, nel caso in cui le sentinelle si trovino all'interno di
aziende zootecniche, il gruppo deve essere identificato dallo stesso
codice aziendale attribuito all'azienda zootecnica ospitante e
registrato in BDN. In caso contrario, il gruppo di sentinelle deve
comunque essere registrato in BDN come struttura sentinella
assegnandogli un codice aziendale.
A ciascun sottogruppo è attribuito un numero progressivo di
identificazione, da mantenere fisso per tutta la durata dei
controlli. Ogni singolo animale deve essere contraddistinto da un
numero univoco (per esempio utilizzando un anello da porre sulla
zampa) per tutta la durata del campionamento.
I campioni devono essere accompagnati dalla scheda W01
pre-compilata per tutti i dati anagrafici, che può essere stampata
dalla BDN anche per il tramite del sistema informativo nazionale.
9.2. Sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a specie
bersaglio.
I campioni prelevati da uccelli appartenenti a specie bersaglio
ai sensi dei capitoli 3.2 del presente documento devono essere
accompagnati dalla scheda W02 debitamente compilata.
9.3. Controlli a campione su sieri di equidi prelevati per altri
motivi.
I campioni devono essere accompagnati dalla scheda W03
pre-compilata per tutti i dati anagrafici. Tutti i capi sottoposti a
controllo devono essere identificati con codice identificativo
(microchip o passaporto).
9.4. Equidi - sorveglianza sindromica (sindromi neurologiche e equidi
deceduti o soppressi).
Il Servizio veterinario dell'AUSL preleva, secondo le modalità
descritte nel capitolo 5 del presente documento, i campioni di siero,
sangue e organi dagli animali delle aziende equine dove si sono
verificati casi di WND. I campioni devono essere accompagnati dalla
scheda W03 e consegnati all'Istituto zooprofilattico sperimentale
territorialmente competente che li invia al CESME.
9.5. Insetti.
I campioni devono essere accompagnati dalla scheda W05 e
consegnati all'Istituto zooprofilattico sperimentale territorialmente
competente.
9.6. Flussi dati.
Gli Istituti zooprofilattici sperimentali devono registrare con
cadenza settimanale tutti i dati degli esami da loro effettuati, ai
sensi del presente provvedimento, nel sistema informativo nazionale
per la WND, secondo le modalità tecniche definite dal CESME.
Il Servizio veterinario dell'ASL deve registrare nel Sistema
informativo malattie animali nazionale (SIMAN) puntualmente, e
comunque entro due giorni lavorativi i casi confermati di avicoli,
uccelli stanziali appartenenti a specie bersaglio, uccelli selvatici,
e pool di zanzare. I casi confermati negli equidi devono essere
registrati in SIMAN entro 24 ore. La definizione di casi sospetti e
confermati è stabilita nel capitolo 7 del presente documento. La
data sospetto deve corrispondere alla data del prelievo e la data
conferma alla data di emissione del rapporto di prova del CESME. La
chiusura dei focolai confermati di WND deve avvenire entro la fine di
febbraio dell'anno successivo al riscontro della positività.

Parte di provvedimento in formato grafico


(1) Non usare l'eparina come anticoagulante perchè interferisce con
la PCR.

(2) Non usare l'eparina come anticoagulante perchè interferisce con
la PCR.