Serie Generale n. 209 del 8-9-2011
DECRETI, DELIBERE E ORDINANZE MINISTERIALI
MINISTERO DELLA SALUTE
MINISTERO DELLA SALUTE
ORDINANZA 4 agosto 2011
Norme sanitarie in materia di encefalomielite equina di tipo West Nile (West Nile Disease) e attivita' di sorveglianza sul territorio nazionale. (11A11622) (GU Serie Generale n.209 del 08-09-2011)

IL MINISTRO DELLA SALUTE

Visto il Testo unico delle leggi sanitarie, approvato con regio
decreto 27 luglio 1934, n. 1265, e successive modificazioni;
Visto il Regolamento di polizia veterinaria, approvato con decreto
del Presidente della Repubblica 8 febbraio 1954, n. 320, e successive
modificazioni;
Visto l'art. 32 della legge 23 dicembre 1978, n. 833;
Vista l'ordinanza del Ministero della sanità 6 ottobre 1984,
recante «Norme relative alla denuncia di alcune malattie infettive
degli animali nella Comunità economica europea», pubblicata nella
Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 10 ottobre 1984, n. 279;
Visto il decreto del Presidente della Repubblica 11 febbraio 1994,
n. 243, «Regolamento recante attuazione della direttiva 90/426/CEE
relativa alle condizioni di polizia sanitaria che disciplinano i
movimenti e le importazioni di equini di provenienza da Paesi terzi,
con le modifiche apportate dalla direttiva 92/36/CEE»;
Visto l'art. 117 del decreto legislativo 31 marzo 1998, n. 112, e
successive modificazioni;
Visto l'art. 8, comma 15, della legge 1° agosto 2003, n. 200, di
conversione del decreto-legge 24 giugno 2003, n. 147, che stabilisce
che sulla base delle linee guida e dei principi stabiliti dal
Ministro delle politiche agricole, alimentari e forestali, l'UNIRE
organizza e gestisce l'anagrafe equina nell'ambito del Sistema
Informativo Agricolo Nazionale (SIAN) di cui all'art. 15 del decreto
legislativo 30 aprile 1998, n. 173;
Visto il decreto ministeriale 29 novembre 2007, recante
approvazione del Piano di sorveglianza nazionale per la
encefalomielite di tipo West Nile (West Nile Disease), pubblicato
nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 12 febbraio 2008,
n. 36;
Visto il decreto ministeriale 7 marzo 2008, recante «Organizzazione
e funzioni del Centro nazionale di lotta ed emergenza contro le
malattie animali e dell'Unità centrale di crisi», pubblicato nella
Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 1° luglio 2008, n. 152;
Visto il regolamento (CE) n. 504/2008 della Commissione del 6
giugno 2008, recante attuazione delle direttive 90/426/CEE e
90/427/CEE del 26 giugno 1990 del Consiglio, per quanto riguarda i
metodi di identificazione degli equidi;
Viste le note del direttore generale della sanità animale e del
farmaco veterinario del Ministero del lavoro, della salute e delle
politiche sociali, prot. n. 18618-P, del 17 settembre 2008, e n.
21036, del 24 ottobre 2008, con le quali sono state impartite
istruzioni per implementare, in tempi rapidi, il sistema informativo
per la registrazione delle attività relative al Piano di
sorveglianza per West Nile Disease;
Vista l'ordinanza del Ministero del lavoro, della salute e delle
politiche sociali 5 novembre 2008, recante «West Nile Disease -
Notifica alla Commissione europea e all'OIE - Piano di sorveglianza
straordinaria», pubblicata nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica
italiana 26 novembre 2008, n. 277;
Vista la nota del Ministero del lavoro, della salute e delle
politiche sociali, prot. n. DGSA/13691, del 24 luglio 2009, con cui
viene comunicata l'attivazione del Sistema informativo Malattie
Animali Nazionale (SIMAN) per la notifica informatizzata dei focolai
di malattie animali soggette a denuncia, ai sensi dell'art. 1, del
citato decreto del Presidente della Repubblica 8 febbraio 1954, n.
320;
Visto il decreto del direttore generale della sanità animale e del
farmaco veterinario del Ministero del lavoro, della salute e delle
politiche sociali del 15 settembre 2009, recante: «Procedure
operative d'intervento e flussi informativi nell'ambito del Piano
della di sorveglianza nazionale per la Encefalomielite di tipo West
Nile (West Nile Disease) - art. 2, comma 2, del decreto ministeriale
29 novembre 2007», pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della
Repubblica italiana 12 febbraio 2008, n. 36, e successive
modificazioni;
Visto il decreto del Ministero delle politiche agricole alimentari
e forestali 29 dicembre 2009, recante: «Linee guida e principi per
l'organizzazione e la gestione dell'anagrafe equina da parte
dell'UNIRE (art. 8, comma 15, legge 1° agosto 2003, n. 200)»;
Vista la circolare del Dipartimento della prevenzione e della
comunicazione del Ministero della salute prot. n. 14381-P, del 15
giugno 2011, con la quale sono stati stabiliti, tra l'altro, i
criteri della sorveglianza umana della West Nile Disease;
Visto il parere del Centro di referenza nazionale per le malattie
esotiche, presso l'Istituto zooprofilattico sperimentale dell'Abruzzo
e del Molise, reso in data 10 novembre 2010;
Acquisito il parere tecnico del Centro nazionale di lotta ed
emergenza contro le malattie animali - Direzione strategica del
Dipartimento per la sanità pubblica veterinaria, la nutrizione e la
sicurezza degli alimenti, reso in data 10 novembre 2010;
Visto l'art. 2 dell'ordinanza del Ministero della salute 3 agosto
2011, in corso di registrazione, concernente «Norme sanitarie in
materia di encefalomielite equina»;
Visto il decreto ministeriale 1° aprile 2010 recante «Delega di
attribuzioni del Ministro della salute, per taluni atti di competenza
dell'amministrazione, al Sottosegretario di Stato on. Francesca
Martini»;
Rilevato che si sono evidenziati casi di encefalomielite di tipo
West Nile dalla fine del mese di agosto 2008, e che alcune
positività riscontrate nel 2009 e nel corso del 2010, hanno
coinvolto anche aree del territorio nazionale non considerate a
rischio e non interessate dall'epidemia del 2008;
Ritenuto pertanto necessario confermare e integrare le misure
straordinarie introdotte con la citata ordinanza ministeriale, tenuto
conto che l'infezione ha interessato territori diversi da quelli
sottoposti a monitoraggio nel triennio 2008-2010 e che i dati
epidemiologici derivanti dalle attività di sorveglianza veterinaria
straordinaria sono utili e indispensabili per le misure preventive
che interessano l'uomo, stante il carattere zoonotico della malattia;

Ordina:

Art. 1


Finalità e definizioni

1. Le misure della presente ordinanza si applicano nei casi di
insorgenza di encefalomielite di tipo West Nile (West Nile Disease).
2. Ai fini della presente ordinanza si applicano le seguenti
definizioni:
a) equide sospetto di West Nile Disease: un equide che, nel
periodo di attività dei vettori, presenta atassia locomotoria o
morte improvvisa, in particolare in una zona a rischio come definita
all'allegato A) della presente ordinanza, oppure un equide che, nel
periodo di attività dei vettori, presenta almeno uno dei seguenti
sintomi: movimenti in circolo; incapacità a mantenere la stazione
quadrupedale; paralisi/paresi agli arti; fascicolazioni muscolari;
deficit propiocettivi. Tali sintomi possono essere accompagnati da:
debolezza degli arti posteriori; cecità; ptosi del labbro inferiore,
o paresi dei muscoli labiali o facciali; digrignamento dei denti.
Deve essere considerato come sospetto di encefalomielite di tipo West
Nile anche un risultato sierologico positivo in assenza di
sintomatologia clinica;
b) conferma del sospetto diagnostico: avviene quando i campioni
prelevati dall'equide sospetto di cui alla lettera a) risultano
positivi a uno o più esami di laboratorio di conferma effettuati dal
Centro di referenza nazionale per le malattie esotiche presso
l'Istituto zooprofilattico sperimentale delle regioni Abruzzo e
Molise;
c) positività recente e autoctona: una positività confermata
per la quale dall'indagine epidemiologica e dal quadro degli esami di
laboratorio si può presumere che l'infezione sia la conseguenza
della circolazione del virus nel luogo in cui è stato tenuto
l'animale negli ultimi due mesi.

Art. 2


Ambito di applicazione e criteri

1. L'attuazione del Piano di sorveglianza per encefalomielite di
tipo West Nile (West Nile Disease) di cui al decreto ministeriale 29
novembre 2007 è obbligatoria nei territori individuati secondo i
criteri di cui all'allegato A) della presente ordinanza.
2. Il Piano di sorveglianza di cui al precedente comma è annuale e
si applica ad integrazione delle attività già previste sull'intero
territorio nazionale ai sensi del decreto ministeriale 29 novembre
2007.
3. Sulla base dell'evoluzione epidemiologica l'allegato A) della
presente ordinanza è modificato annualmente con decreto del
direttore generale della sanità animale e del farmaco veterinario
del Ministero della salute, sentito il Centro di referenza nazionale
per le malattie esotiche presso l'Istituto zooprofilattico
sperimentale delle regioni Abruzzo e Molise e acquisito il parere
tecnico della Direzione strategica del Centro nazionale di lotta ed
emergenza contro le malattie animali.

Art. 3


Flussi informativi

1. Sulla base dei dati anamnestici e dei risultati dell'indagine
epidemiologica, la Direzione generale della sanità animale e del
farmaco veterinario del Ministero della salute, di concerto con il
Centro di referenza nazionale per le malattie esotiche presso
l'Istituto zooprofilattico sperimentale delle regioni Abruzzo e
Molise e il servizio veterinario delle Regioni coinvolte,
identificano l'area interessata dalla circolazione virale.
2. Al fine di tutelare la salute umana, i servizi veterinari delle
aziende sanitarie locali competenti per territorio, segnalano,
contestualmente alla regione e ai dipartimenti di prevenzione,
servizi d'igiene e di sanità pubblica delle aziende sanitarie locali
competenti per territorio, le positività recenti e autoctone
rilevate nell'area interessata dalla circolazione virale, ai sensi
dell'art. 5 del decreto del Presidente della Repubblica 8 febbraio
1954, n. 320, e successive modificazioni.
3. I dipartimenti di prevenzione, servizi d'igiene e di sanità
pubblica delle aziende sanitarie locali competenti per territorio
segnalano ai servizi veterinari delle aziende sanitarie locali
competenti per territorio le positività accertate nell'uomo. Tale
informativa è comunicata anche alla Direzione generale della sanità
animale e del farmaco veterinario del Ministero della salute e al
Centro di referenza nazionale per le malattie esotiche presso
l'Istituto zooprofilattico sperimentale delle regioni Abruzzo e
Molise.
4. Nell'area interessata dalla circolazione virale non si applicano
gli ulteriori provvedimenti di restrizione delle movimentazioni
previste dal decreto del Presidente della Repubblica 8 febbraio 1954,
n. 320, e successive modificazioni.

Art. 4


Identificazione degli equidi

1. Gli equidi sottoposti alle misure previste dalla presente
ordinanza devono essere identificati ai sensi del decreto del
Ministro delle politiche agricole, alimentari e forestali 29 dicembre
2009.
2. Gli equidi di cui alla presente ordinanza non possono essere
movimentati prima del termine delle prove diagnostiche, ad eccezione
di quelli identificati e rintracciati sulla base delle disposizioni
previste dal decreto del Ministro delle politiche agricole,
alimentari e forestali 29 dicembre 2009.

Art. 5


Sistema informativo

1. Al fine di adempiere agli obblighi previsti dagli articoli 3, 4,
5, 6 e 7 dell'ordinanza del Ministero della sanità 6 ottobre 1984,
le regioni e le province autonome di Trento e Bolzano utilizzano il
Sistema Informativo per la Notifica delle Malattie Animali (SIMAN) di
cui alla nota DGSA prot. - 13691 del 24 luglio 2009, del Ministero
del lavoro, della salute e delle politiche sociali.
2. Gli Istituti zooprofilattici sperimentali competenti per
territorio e autorizzati all'esecuzione delle prove di laboratorio,
con cadenza quindicinale, nell'ambito delle attività previste
all'allegato A) della presente ordinanza, effettuano la registrazione
presso il SIMAN degli esiti degli esami di laboratorio.
3. I servizi veterinari regionali o locali delle regioni e province
autonome di Trento e Bolzano utilizzano le apposite applicazioni
informatiche del SIMAN per la registrazione delle attività di
sorveglianza svolte sugli equidi, identificati e registrati secondo
il decreto del Ministro delle politiche agricole, alimentari e
forestali del 29 dicembre 2009, e sui gruppi di polli sentinella.

Art. 6


Vaccinazione facoltativa degli equidi

1. Su specifica richiesta delle regioni e province autonome di
Trento e Bolzano, il Ministero della salute espleta le procedure per
rendere disponibile un presidio immunizzante per consentire la
vaccinazione facoltativa a carico dei proprietari/detentori degli
equidi.
2. L'avvenuta vaccinazione di cui al comma 1 è registrata
sull'apposita sezione del documento di identità (passaporto)
dell'equide, di cui al decreto del Ministro delle politiche agricole,
alimentari e forestali 29 dicembre 2009, e contestualmente, sulla
Banca dati nazionale degli equidi.

Art. 7


Entrata in vigore e durata

1. La presente ordinanza entra in vigore 7 giorni successivi alla
sua pubblicazione nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana
e ha validità di 24 mesi dalla pubblicazione.
La presente ordinanza è inviata alla Corte dei conti per la
registrazione.
Roma, 4 agosto 2011

p. Il Ministro
Il Sottosegretario di Stato
Martini

Registrato alla Corte dei conti il 12 agosto 2011
Ufficio di controllo preventivo sui Ministeri dei servizi alla
persona e dei beni culturali, registro n. 11, foglio n. 145

Allegato

WEST NILE DISEASE

Procedure operative di intervento e flussi informativi nell'ambito
del Piano di sorveglianza nazionale per la Encefalomielite di tipo
West Nile (West Nile Disease)
2011

1 INTRODUZIONE

Le procedure operative di intervento e i flussi informativi descritti
nel presente documento per l'anno 2011 sono adottate nell'ambito del
Piano di sorveglianza per la West Nile Disease (WND) e, come per gli
anni precedenti, hanno il fine di individuare il più precocemente
possibile la circolazione del virus West Nile (WNV) sia nelle aree
dove già si è avuta nel passato la circolazione del virus sia nelle
restanti parti del territorio nazionale.

Obiettivi

1. Individuare precocemente la circolazione del virus della West Nile
sul territorio nazionale.
2. Verificare la circolazione virale nelle popolazioni di equidi
presenti sul territorio per poter individuare precocemente il
passaggio del virus dagli uccelli ai mammiferi.
3. Verificare la persistenza e la possibile endemizzazione
dell'infezione anche ai fini di sanità pubblica.

2 CRITERI GENERALI PER LA SORVEGLIANZA DELLA WND

La sorveglianza nei confronti della WND si basa sulle seguenti
componenti:
1. sorveglianza su uccelli stanziali di specie "sinantropiche". In
caso di mancato raggiungimento del 50% delle attività previste, è
possibile, in alternativa, attuare la sorveglianza su allevamenti
avicoli rurali o all'aperto o tramite il posizionamento di gruppi di
polli sentinella,
2. sorveglianza negli equidi,
3. sorveglianza entomologica,
4. sorveglianza dell'avifauna selvatica di specie migratorie.
Le modalità di attuazione delle 4 componenti differiscono a seconda
della situazione epidemiologica riscontrata.
Sono individuate 3 aree geografiche distinte:
A. area con circolazione virale (ACV) (Figura 1). È l'area che è
stata interessata dalla circolazione del virus della West Nile nel
corso degli ultimi anni. L'elenco dei territori inclusi nell'ACV è
riportato nella Sezione I;
B. area di sorveglianza esterna alla ACV (AE), estesa per un raggio
di 20 km intorno ai casi verificatisi nelle zone più esterne
dell'ACV (Figura 1). L'elenco dei territori inclusi nell'area di
sorveglianza è riportato nella Sezione II;
C. resto del territorio nazionale (aree a rischio - AR) (Figura 1):
ABRUZZO: Foce del fiume Vomano 42°39' N - 14°02' E
BASILICATA: Lago di San Giuliano 40°38' N - 16°30' E
CALABRIA: Foce del Fiume Neto 39°12' N - 17°08' E
CAMPANIA: Serre Persano 40°33' N - 15°08 E
MARCHE: Sentina 43°28' N - 13°38' E
PIEMONTE: Garzaia di Marengo 44°49' N - 8°40' E
SARDEGNA: Stagno di S'Ena Arrubia 39°49' N - 08°34' E
SICILIA: Oasi del Simeto 37°19' N - 14°55' E
TOSCANA: Padule di Fucecchio 43°49' N - 10°47' E
L'elenco dei Comuni inclusi nelle aree di studio è riportato nella
Sezione III.
In Tabella 1 è riportata una sintesi delle attività previste per
ciascuna area.

3 AREA CON CIRCOLAZIONE VIRALE (ACV)

3.1 Unità geografica di riferimento

Al fine di standardizzare opportunamente le attività di sorveglianza
nell'ambito dell'area, si considera come unità geografica di
riferimento il territorio avente una superficie complessiva di circa
1200-1600 km2. In tal modo, per le aree incluse nell'ACV di ciascuna
Provincia è possibile definire il numero di unità geografiche di
riferimento che essa include (Tabella 2). Ne consegue che, ad
esempio, se nel territorio incluso nell'ACV di una Provincia il
numero di unità geografiche da esso rappresentato è pari a 0.5, il
numero di unità campionarie previste dal presente documento
nell'ambito delle diverse azioni di sorveglianza per ciascuna unità
geografica di riferimento dovrà essere ridotto alla metà (esempio:
numero di allevamenti rurali o all'aperto da campionare per unità di
riferimento = 60, numero di allevamenti effettivamente da campionare
sul territorio incluso nell'ACV della Provincia = 30), mentre, al
contrario se il numero di unità geografiche da esso rappresentato è
pari a 1.5, il numero di unità campionarie previste per ciascuna
unità geografica di riferimento dovrà essere aumentato della metà
(esempio: numero di siti da sorvegliare tramite specie aviarie
sentinella per ciascuna unità = 4, numero di siti effettivamente da
sorvegliare sul territorio incluso nell'ACV della Provincia = 6).

3.2 Sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a specie
"sinantropiche"

Si definiscono specie "sinantropiche" gli uccelli appartenenti alle
seguenti specie:
- Cornacchia grigia (Corvus corone cornix),
- Taccola (Corvus monedula),
- Gazza (Pica pica),
- Ghiandaia (Garrulus glandarius),
- Piccione o colombo (Columba livia),
- Storni (Sturnus vulgaris).
Tali specie animali sono sottoposte a sorveglianza attiva nell'ACV
allo scopo di individuare precocemente la ripresa della circolazione
virale.
Poichè i piani di cattura e/o depopolamento all'interno dell'ACV
differiscono in base alla giurisdizione amministrativa interessata
(Amministrazione Provinciale, aree protette) sarà cura delle Regioni
competenti individuare gli Enti/Organizzazioni incaricati dello
svolgimento di tale programma e coordinare le attività di prelievo
dagli esemplari sottoposti ad eutanasia e l'invio dei campioni al
Centro di Referenza Nazionale per le malattie esostiche presso
l'Istituto Zooprifilattico Sperimentale delle regioni Abruzzo e
Molise, di seguito "CESME". L'IZS competente invia idonei campioni di
organo (cuore, cervello, rene e milza) al CESME per la diagnosi di
WND.
Per ogni specie prelevata dovrà essere compilata una scheda W02 di
accompagnamento.
Dovranno essere campionati almeno 100 esemplari per unità geografica
di riferimento.
In aggiunta agli organi sopra menzionati è possibile inviare al
CESME campioni di sangue/siero prelevati da uccelli di specie
sinantropiche. Per ogni specie prelevata dovrà essere compilata una
scheda W02 di accompagnamento.
Nelle aree dove la sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a
specie "sinantropiche" non può essere attivata o si prevede che non
sarà in grado di raggiungere almeno il 50% dei controlli previsti,
occorre effettuare le attività previste in allevamenti avicoli
rurali e all'aperto (vedi capitolo 3.3.1) o, in alternativa, quelle
conseguenti al posizionamento di gruppi di animali sentinella (vedi
capitolo 3.3.2).

3.3 Sorveglianza nelle specie avicole

3.3.1 Sorveglianza in allevamenti avicoli rurali e all'aperto

Nelle aree dove la sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a
specie "sinantropiche" non può essere attivata o si prevede che non
sarà in grado di raggiungere almeno il 50% dei controlli previsti,
è possibile, in alternativa, controllare sierologicamente un
campione rappresentativo di allevamenti avicoli rurali o all'aperto,
inclusi gli allevamenti di selvaggina da penna.
Nella scelta delle aziende da campionare verranno privilegiati gli
allevamenti in possesso delle seguenti caratteristiche:
- prossimità ad aree umide o comunque dove si registra un'elevata
concentrazione di avifauna selvatica, sia stanziale che di passo,
- allevamenti all'aperto,
- allevamenti di selvaggina, aziende faunistico-venatorie e
agri-faunistiche.
Sulla base del numero delle aziende presenti nel territorio incluso
nell'ACV di ciascuna provincia, il numero di allevamenti da
campionare è riportato in Tabella 3.
All'interno di ciascuno allevamento verranno sottoposti a prelievo un
numero di animali, possibilmente di età inferiore ai 6 mesi, come
riportato in Tabella 4.
Le attività di campionamento iniziano a marzo e terminano entro la
fine di novembre. I prelievi possono essere effettuati
contestualmente a quelli del piano di monitoraggio dell'influenza
aviaria.
Gli operatori, devono prelevare per ciascun animale 2 campioni di
sangue da porre in 2 provette: una senza anticoagulante e una con
EDTA(1 ) (minimo 2 ml di sangue per provetta da conservare a
temperatura di +4 °C).
--------

(1 ) Non usare l'eparina come anticoagulante perchè interferisce

con la PCR.

I campioni, inviati al CESME, dovranno essere accompagnati dalla
scheda WO1 già pre-compilata nella parte anagrafica (vedi le
indicazioni contenute nel capitolo 9 del presente documento).
Si considera positivo un animale che abbia dato esito positivo ad un
esame sierologico e/o virologico specifico per il virus della West
Nile.
In caso di positività ai test diagnostici di laboratorio, il CESME
comunica subito i risultati alla Direzione Generale della Sanità
Animale e del Farmaco Veterinario, al servizio veterinario della
Regione competente ed all'IZS che ne aveva fatto richiesta.

3.3.2 Sorveglianza attraverso il posizionamento di gruppi di animali
sentinella

Nelle aree dove la sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a
specie "sinantropiche" non può essere attivata o si prevede che non
sarà in grado di raggiungere almeno il 50% dei controlli previsti,
è possibile, in alternativa, utilizzare esemplari in gabbia di
specie avicole (polli o galline a fine carriera). Per ciascuna unità
geografica di riferimento devono essere selezionati 4 siti di
sorveglianza, dove posizionare, per ciascuno di essi, almeno 30
esemplari suddivisi in due gruppi di 15 animali ciascuno; è
preferibile, ove possibile, posizionare le sentinelle all'interno di
aziende zootecniche operanti nell'area di studio e poste
preferibilmente entro circa 800 m dalle aree di concentrazione
dell'avifauna e/o di zone umide (raccolte d'acqua dolce o salmastra
di qualunque tipo). Le sentinelle al primo prelievo devono risultare
negative nei confronti del virus della WN.
A partire dal 15 marzo e fino al 30 ottobre, devono essere effettuati
prelievi di sangue ogni 15 giorni, alternando i prelievi sui due
sottogruppi.
Gli operatori devono prelevare per ciascun animale 2 campioni di
sangue da porre in 2 provette: una senza anticoagulante e una con
EDTA (minimo 2 ml di sangue per provetta da conservare a temperatura
di +4 °C). I campioni inviati dovranno essere accompagnati dalla
scheda WO1 pre-compilata nella parte anagrafica (vedi le indicazioni
contenute nel capitolo 9 del presente documento).
In caso di positività ai test diagnostici di laboratorio, il CESME
comunica subito i risultati alla Direzione Generale della Sanità
Animale e del Farmaco Veterinario, ai servizi veterinari regionali
della Regione ed all'IZS che ne aveva fatto richiesta.

3.4 Sorveglianza negli equidi

Nella zona ACV non si effettua la sorveglianza attiva negli equidi,
per la presenza di numerosi equidi già sierologicamente positivi.
Sulla base degli esiti dei precedenti controlli, o individuando
animali giovani (puledri) come oggetto di campionamento, le Regioni
possono attivare specifici piani di controllo sierologico su animali
sentinella in tutto o parte del territorio di loro competenza.
Qualora tali piani vengano attivati dovranno rispettare le cadenze
dei controlli previsti per il controllo negli equidi sentinella di
cui al capitolo 4.4. I campioni inviati dovranno essere accompagnati
dalla scheda W03 pre-compilata nella parte anagrafica (vedi le
indicazioni contenute nel capitolo 9 del presente documento). In caso
di positività ai test diagnostici di laboratorio, il CESME comunica
subito alla Direzione Generale della Sanità Animale e del Farmaco
Veterinario, al servizio veterinario della Regione competente ed
all'IZS che ne aveva fatto richiesta. Per le definizioni di sospetto
e di conferma si rimanda al comma 2, ad. 1 della presente ordinanza.
Per quanto riguarda la sorveglianza clinica su casi sospetti di
encefalite si rimanda a quanto riportato nel capitolo 6 del presente
documento.

3.5 Sorveglianza entomologica

La sorveglianza entomologica ha i seguenti obiettivi:
- identificare le specie di zanzare responsabili della trasmissione
virale nel ciclo enzootico,
- identificare le specie di zanzare responsabili della trasmissione
virale ai cavalli,
- valutare l'overwintering delle zanzare e del virus nelle specie di
zanzare,
- valutare la precocità del rilievo del virus nelle zanzare.
La sorveglianza entomologica è effettuata in almeno 2 aziende per
ciascuna unità geografica di riferimento.
Le aziende scelte devono avere le seguenti caratteristiche:
- aziende nelle quali nel corso dei precedenti anni sono stati
riscontrati casi clinici o sieroconversioni negli animali sentinella
o positività nei culicidi,
- aziende situate in prossimità di aree umide e con un'elevata
concentrazione di avifauna selvatica.
Presso le aziende prescelte vengono installate:
- 1 trappola di tipo CO2-CDC,
- 1 trappola del tipo gravid trap,
- 1 trappola del tipo BG sentinel.
Le catture vengono effettuate con cadenza mensile durante tutto
l'anno. La gravid trap e la BG sentinel devono essere attive per due
giorni e due notti consecutive e le catture vengono ritirate al
termine delle due giornate. La CO2-CDC deve essere attiva per due
notti (dal crepuscolo alla mattina successiva) di seguito e le
catture vengono ritirate al termine di ogni notte di cattura.
Contestualmente alle catture eseguite con le trappole, vanno
effettuate in ogni azienda catture di zanzare adulte tramite
aspirazione nei ricoveri degli animali.
I campioni inviati dovranno essere inviati al CESME ed accompagnati
dalla scheda W05 pre-compilata nella parte anagrafica qualora si
tratti di aziende zootecniche (vedi le indicazioni contenute nel
capitolo 9 del presente documento).
Qualora in ambito regionale sia approvato un programma di
sorveglianza entomologica che prevede attività di sorveglianza
coerenti con il presente Piano, i dati devono essere inseriti nel
sistema informativo nazionale secondo i criteri stabiliti dal
Ministero della Salute, sentito il CESME.

3.6 Sorveglianza dell'avifauna selvatica delle specie migratorie

Durante il periodo delle migrazioni, uccelli migratori viremici
possono essere responsabili dell'introduzione del virus nelle aree di
sosta o in quelle di nidificazione. Le aree dove si vengono a
concentrare maggiormente questi animali sono le zone umide situate
lungo le rotte migratorie.
Per poter mettere in evidenza l'arrivo di uccelli viremici e
l'eventuale instaurarsi del ciclo silvestre, è utile predisporre un
sistema di controllo per individuare precocemente l'introduzione del
virus.
Le Regioni, pertanto, che intendano attivare la sorveglianza
sull'avifauna selvatica devono seguire le indicazioni di seguito
riportate.
Il programma di monitoraggio sull'avifauna selvatica prevede tre
campionamenti annuali da effettuare:
- il primo durante il passo primaverile (marzo-aprile),
- il secondo alla fine di agosto,
- il terzo fra la metà e la fine di settembre.
Le catture di uccelli selvatici devono essere effettuate da personale
addestrato allo scopo (inanellatori) provvisto di patentino di
inanellamento di categoria A ed un veterinario debitamente addestrato
ad effettuare prelievi di sangue negli uccelli selvatici, in
collaborazione con gli agenti di Polizia Provinciale, gli Agenti del
C.F.S., l'Istituto Superiore per la Protezione e la Ricerca
Ambientale, il Ce.R.M.A.S. e le autorità locali.
Le specie da sottoporre a monitoraggio devono includere sia
passeriformi sia non passeriformi.
Il campione di sangue può essere prelevato da punti di repere
differenti: negli animali di piccole dimensioni (da piccoli
passeriformi fino a piccoli limicoli) il prelievo è consigliabile
dalla vena giugulare; per animali di maggiori dimensioni il prelievo
può essere fatto dalla vena brachiale dell'ala o dalla vena
metatarsale della zampa. La quantità di siero prelevabile è legata,
owiamente, al peso dell'animale.
I campioni prelevati dovranno essere conservati alla temperatura di
+4° C ed inviati al CESME per gli esami di laboratorio. Si raccomanda
di inviare i campioni in condizioni di conservazione ed
immediatamente, proprio per la esiguità del campione; per ogni
specie di uccello prelevata va compilata una scheda W06 di
accompagnamento. I campioni inviati dovranno essere accompagnati
dalla scheda W06 debitamente compilata.

4 AREA DI SORVEGLIANZA ESTERNA

4.1 Unità geografica di riferimento

Al fine di standardizzare opportunamente le attività di sorveglianza
nell'ambito dell'area, si considera come unità geografica di
riferimento il territorio di uno o più Comuni e avente una
superficie complessiva di circa 1200-1600 km2. In tal modo, per le
aree incluse nell'area di sorveglianza esterna di ciascuna Provincia
è possibile definire il numero di unità geografiche di riferimento
che essa include (Tabella 5). Per il calcolo del numero di unità
campionarie per il territorio incluso nell'area di sorveglianza di
ciascuna Provincia, ci si comporta come nel caso dell'ACV (vedi
capitolo 3.1 del presente documento).

4.2 Sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a specie
"sinantropiche"

La sorveglianza sulle specie di uccelli sinantropici awiene con le
stesse modalità previste per I'ACV nel capitolo 3.2.

4.3 Sorveglianza nelle specie avicole

Il campionamento degli allevamenti avicoli rurali o all'aperto o, in
alternativa, la sorveglianza tramite il posizionamento di gruppi di
animali sentinella di specie aviarie è effettuata con le stesse
modalità descritte per I'ACV (vedi capitolo 3.3 del presente
documento).

4.4 Sorveglianza negli equidi

La sorveglianza negli equidi viene effettuata con le seguenti
modalita':
1. entro il 31 marzo di ciascun anno i Servizi Veterinari
dell'Aziende USL competenti selezionano 28 cavalli per ciascuna
unità geografica di riferimento su cui effettuare il controllo
sierologico (animali sentinella).
2. I capi sentinella dovranno essere scelti nelle aziende in modo
tale da essere il più possibile rappresentativi dell'intero
territorio sotto sorveglianza.
Poichè l'obiettivo principale è di individuare l'inizio o la
ripresa della circolazione virale negli equidi per determinare il
passaggio del virus dagli uccelli ai mammiferi ed il rischio per
l'uomo, è opportuno utilizzare cavalli stanziali (per i quali non si
prevede movimentazione durante il periodo dei controlli) oppure
cavalli per i quali sia possibile escludere qualunque contatto
precedente con il virus (puledri di età &lt;= 6 mesi). Le attività di
campionamento iniziano ad aprile e terminano a settembre; nel corso
di tale periodo i cavalli vengono prelevati 3 volte, la prima
all'inizio del periodo (aprile-maggio), la seconda volta nell'ultima
settimana di agosto, ed una terza nell'ultima settimana di settembre.
I prelievi possono essere effettuati contestualmente a quelli del
piano di sorveglianza nazionale dell'anemia infettiva equina (OM 8
Agosto 2010) o altri piani di sorveglianza, concentrando l'attività
nei mesi a rischio per la ricerca di IgM previa verifica che:
- gli equidi siano stanziali e che non si siano movimentati negli
ultimi 6 mesi;
- gli equidi non siano stati vaccinati per la West Nile disease.
I prelievi devono essere effettuati sempre sugli stessi cavalli. I
campioni inviati dovranno essere accompagnati dalla scheda W03
pre-compilata nella parte anagrafica scegliendo "Motivo del prelievo
[2]:cavalli sentinella" (vedi le indicazioni contenute nel capitolo 9
del presente documento).
In caso di positività ai test diagnostici di laboratorio, il CESME
comunica subito alla Direzione Generale della Sanità Animale e del
Farmaco Veterinario, al servizio veterinario della Regione competente
ed al richiedente. In caso di positività verranno eseguite le
attività riportate nel Punto 8.2 del documento. Per le definizioni
di sospetto e di conferma si rimanda al comma 2, art. 1 della
presente ordinanza.
Per quanto riguarda la sorveglianza clinica su casi sospetti di
encefalite si rimanda a quanto riportato nel capitolo 6 del presente
documento.

4.5 Sorveglianza entomologica

La sorveglianza entomologica nelle aree di sorveglianza esterna ha
l'obiettivo principale di valutare l'overwintering delle zanzare e la
precocità del rilievo del virus nelle specie di zanzare, qualora si
verificasse la circolazione del virus in tali zone.
Contestualmente alle catture eseguite con le trappole, devono essere
effettuate in ogni azienda catture di zanzare adulte tramite
aspirazione nei ricoveri degli animali.
La sorveglianza entomologica è effettuata in 2 aziende per ciascuna
unità geografica di riferimento, in cui sia attiva la sorveglianza
sierologica sugli equini.
Presso le aziende prescelte verranno installate:
- 1 trappola di tipo CO2-CDC,
- 1 trappola del tipo gravid trap,
- 1 trappola del tipo BG sentinel.
Le catture vengono effettuate seguendo le stesse modalità descritte
per I'ACV (vedi capitolo 3.5 del presente documento).

5 AREE A RISCHIO

5.1 Unità geografica di riferimento

Nel caso delle aree di studio presenti sul territorio nazionale ed
elencate nella Sezione III, al fine di semplificare l'esecuzione
delle attività di sorveglianza, si considera come unità geografica
di riferimento il territorio di ciascuna area di studio.

5.2 Sorveglianza su uccelli stanziali appartenenti a specie
"sinantropiche"

La sorveglianza sulle specie di uccelli sinantropici awiene con le
stesse modalità previste per I'ACV nel capitolo 3.2.

5.3 Sorveglianza nelle specie avicole

Il campionamento negli allevamenti avicoli rurali o all'aperto o, in
alternativa, la sorveglianza tramite il posizionamento di gruppi di
animali sentinella di specie aviarie è effettuata con le stesse
modalità descritte per I'ACV e per le aree di sorveglianza esterna
(vedi capitolo 3.3 del presente documento).

5.4 Sorveglianza negli equidi

La sorveglianza attiva degli Equidi nelle aree di studio viene
effettuata con le stesse modalità descritte per le aree di
sorveglianza esterna (vedi capitolo 4.4 del presente documento).

5.5 Sorveglianza entomologica

La sorveglianza entomologica nelle aree a rischio ha come obiettivo
quello di definire la composizione della fauna culicidica in tali
aree.
Per ciascuna area di studio deve essere selezionata 1 azienda
sentinella, che può essere sia un'azienda equina sia un allevamento
avicolo all'aperto; l'azienda deve essere situata in prossimità di
zone umide e/o con un'elevata concentrazione di avifauna selvatica.
Presso l'azienda prescelta verranno installate:
- 1 trappola di tipo CO2-CDC,
- 1 trappola del tipo BG sentinel.
Le catture vengono effettuate con le stesse modalità descritte per
la zona ACV, una volta al mese a partire dalla fine di marzo fino
alla fine di ottobre. I campioni devono essere inviati al CESME
accompagnati dalla scheda W05.
Per tutte le attività di cattura entomologica descritte per le 3
diverse Aree, visionare la Sezione IV esplicativo:
"Modalità di cattura/gestione del campione entomologico".

5.6 Sorveglianza dell'avifauna selvatica delle specie migratorie

La sorveglianza sulle specie di uccelli migratori awiene con le
stesse modalità previste per I'ACV nel capitolo 3.6.

6 SORVEGLIANZA CLINICA NEGLI EQUIDI

La sorveglianza clinica negli Equidi si attua su tutto il territorio
nazionale. Tutti i casi di sintomatologia nervosa negli Equidi devono
essere notificati e sottoposti ad indagini approfondite per escludere
o confermare la WND, indipendentemente dall'area geografica dove
questi si manifestano.
Sintomi tipici della malattia nei cavalli sono i seguenti:
- movimenti in circolo,
- debolezza arti posteriori,
- incapacità a mantenere la stazione quadrupedale,
- paralisi/paresi agli arti,
- fascicolazioni muscolari,
- deficit propriocettivi,
- cecità,
- ptosi labbro inferiore o paresi/paralisi dei muscoli labiali o
facciali,
- digrignamento dei denti.
Nel caso di sospetta sintomatologia neurologica in Equidi, il
servizio veterinario dell'Azienda USL competente per territorio
provvede a darne immediata comunicazione alla Direzione Generale
della Sanità Animale e del Farmaco Veterinario ed al servizio
veterinario della Regione. Il servizio veterinario dell'Azienda USL
provvede altresì ad informare l'Istituto Zooprofilattico
Sperimentale competente per territorio e il CESME, e ad eseguire
prelievi di sangue sugli equidi che manifestano sintomatologia
clinica riferibile a WND. I campioni di sangue sono inviati
all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale di competenza con la
relativa scheda W03 - scegliendo come "Motivo del prelievo"
[1]:presenza di cavalli con sintomi clinici -per il successivo
inoltro al CESME.
Qualora il sospetto riguardi animali deceduti o soppressi in seguito
a sindrome neurologica, il servizio veterinario dell'Azienda USL
competente per territorio, in collaborazione con l'Istituto
Zooprofilattico Sperimentale competente per territorio effettua
l'esame anatomo-patologico ed il prelievo del cervello e del midollo
spinale, del cuore e della milza che devono essere inviati
immediatamente al CESME, in quantità idonea, perfettamente
confezionati e conservati, accompagnati dalla scheda W03 - Motivo del
prelievo [5]: controllo su cavalli deceduti/abbattuti - debitamente
compilata.
In caso di positività ai test diagnostici di laboratorio, il CESME
comunica i risultati alla Direzione Generale della Sanità Animale e
del Farmaco Veterinario,ed al servizio veterinario della Regione
competente ed al richiedente.
In caso di positività confermata dagli esami di laboratorio eseguiti
dal CESME, il servizio veterinario dell'Azienda USL provvederà ad
eseguire prelievi di sangue su tutti gli equidi presenti in azienda.
I campioni di sangue sono inviati all'Istituto Zooprofilattico
Sperimentale di competenza con la relativa scheda W03 -scegliendo
come "Motivo del prelievo" [4]: controllo su cavalli presenti nella
stessa azienda in cui si trova il caso confermato - per il successivo
inoltro al CESME.
Per ciascun animale devono essere prelevati due campioni di sangue da
porre in due provette: una senza anticoagulante ed una con EDTA
(almeno 8 ml di sangue per provetta da conservare a temperatura di +4
°C).

7 SORVEGLIANZA SULLA MORTALITÀ NEGLI UCCELLI SELVATICI

La sorveglianza passiva sull'avifauna selvatica si effettua su tutto
il territorio nazionale. In seguito alla segnalazione di mortalità
anomala o di aumento dell'incidenza della mortalità nell'avifauna
selvatica, gli animali rinvenuti morti devono essere raccolti e
inviati all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale competente per
territorio che, una volta effettuato l'esame anatomo-patologico,
invia i campioni di organo (cuore, cervello, rene e milza) al CESME
per la ricerca del virus. I campioni devono essere inviati secondo le
raccomandazioni indicate nella Circolare n. 3 del 8 maggio 2003 e
accompagnati dalla scheda W02 debitamente compilata. Per ogni specie
di uccello prelevata va compilata una distinta scheda W02 di
accompagnamento.

8 MISURE DA ADOTTARE IN CASO DI POSITIVITÀ

8.1 Positività in allevamenti avicoli rurali e all'aperto o in
gruppi di animali sentinella delle specie aviarie

In caso di positività confermate in soggetti di allevamenti avicoli
rurali o all'aperto, oppure in animali sentinella delle specie
aviarie, il servizio veterinario dell'Azienda USL, ricevuta la
comunicazione della conferma di positività, prowede ad abbattere gli
animali positivi ed ad inviarli, accompagnati dalla scheda W01,
all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale competente per territorio,
che prowede ad eseguire gli esami anatomo-patologici su tutti i
soggetti pervenuti e ad inviare subito al CESME i campioni di rene,
cuore, milza e cervello di tutti gli animali, contestualmente a copia
della scheda WO1 (vedi le indicazioni contenute nel capitolo 9 del
presente documento).
Qualora la positività sia confermata anche dagli esami virologici o
di ricerca del genoma virale (PCR) negli organi, e nel caso ci si
trovi in aree diverse dalle aree con circolazione virale (ACV), il
servizio veterinario dell'Azienda USL competente per territorio
provvede a:
- effettuare catture esaustive dei culicidi presenti nell'azienda,
- sottoporre a prelievo di sangue e siero un numero rappresentativo
di animali presenti nell'azienda avicola,
- sottoporre a prelievo un campione di equidi presenti nel raggio di
4 km dall'allevamento avicolo o gruppo di animali sentinella con
esiti positivi. Il campione di animali da prelevare è calcolato
sulla base della Tabella 4. I campioni di sangue sono inviati
all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale di competenza con la
relativa scheda W03 - Motivo del prelievo [3]: controllo a campione
su cavalli stanziali presenti nelle aziende a 4 Km rispetto al
focolaio - per il successivo inoltro al CESME.

8.2 Sieroconversione in cavalli sentinella, positività diagnostica o
conferma di sospetto clinico

In caso di sieroconversione in cavalli sentinella, di positività
diagnostica confermata o qualora un sospetto clinico sia confermato
dagli esami di laboratorio, il servizio veterinario dell'Azienda USL,
ricevuta la comunicazione della conferma di positività, provvede a:
- sottoporre a visita clinica tutti gli equidi presenti in azienda,
- effettuare un prelievo di sangue e siero in tutti gli equidi
presenti in azienda ed inviarlo al CESME, I campioni di sangue sono
inviati all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale di competenza con
la relativa scheda W03 - Motivo del prelievo [4]: controllo su
cavalli presenti nella stessa azienda in cui si trova il caso
confermato - per il successivo inoltro al CESME.
- effettuare catture esaustive dei culicidi presenti nell'azienda.
Inoltre, nel caso ci si trovi in aree diverse dalle aree con
circolazione virale (ACV), il servizio veterinario dell'Azienda USL
competente procede a:
- sottoporre a prelievo un campione di equidi presenti nel raggio di
4 km dall'allevamento di equidi con esiti positivi. H campione di
animali da prelevare è calcolato sulla base della Tabella 4. I
campioni di sangue sono inviati all'Istituto Zooprofilattico
Sperimentale di competenza con la relativa scheda W03 -Motivo del
prelievo [3]: controllo a campione su cavalli stanziali presenti
nelle aziende a 4 Km rispetto al focolaio - per il successivo inoltro
al CESME.

8.3 Altre evidenze di circolazione del virus West Nile

Ogni qual volta venga sospettata la circolazione del virus in un
territorio precedentemente non interessato dall'infezione, sulla base
degli esiti degli esami virologici o di ricerca del genoma virale in
culicidi e/o nell'avifauna, il servizio veterinario dell'Azienda USL
competente per territorio provvede a:
- sottoporre a visita clinica tutti gli equidi presenti nel raggio di
4 km dal sito in cui la positività è stata rilevata,
- sottoporre a prelievo un campione di equidi presenti nel raggio di
4 km dal sito in cui la positività è stata rilevata. Il campione di
animali da prelevare è calcolato sulla base della Tabella 4. I
campioni di sangue sono inviati all'Istituto Zooprofilattico
Sperimentale di competenza con la relativa scheda W03 - Motivo del
prelievo [3]: controllo a campione su cavalli stanziali presenti
nelle aziende a 4 Km rispetto al focolaio - per il successivo inoltro
al CESME.

8.4 Controllo su altri animali

Nel caso di rilievo di circolazione virale nelle aree sottoposte a
sorveglianza, la Direzione Generale della Sanità Animale e del
Farmaco Veterinario, in collaborazione con il CESME ed i servizi
veterinari delle Regioni e delle ASL interessate, potrà caso per
caso, proporre l'esecuzione di controlli aggiuntivi anche su specie
animali diverse da quelle contemplate nei precedenti capitoli.

9 REGISTRAZIONE DEI DATI E FLUSSI INFORMATIVI

Tutti i campioni prelevati per la diagnosi di WND vengono analizzati
dal CESME. L'esame di prima istanza (ELISA) per i campioni prelevati
nella zona ACV e nella zona di sorveglianza esterna possono essere
eseguiti da parte degli IIZZSS previsti nella nota DGSA prot. N.
19116 del 26 settembre 2008. In tal caso gli IIZZSS che eseguono tali
analisi prowedono ad aggiornare con gli esiti di laboratorio il
Sistema Informativo Nazionale per la notifica dei focolai di malattie
animali (SIMAN); l'aggiornamento verrà eseguito con cadenza
settimanale. Si ricorda che per accedere al SIMAN è necessario
registrarsi. Qualora si sia sprowisti dell'accesso, il servizio
veterinario regionale può inviare richiesta al seguente indirizzo di
mail: emergenze.support@izs.it. La modulistica è inoltre disponibile
dal sito dedicato alla West Nile all'indirizzo
http://sorveglianza.izs.it/emergenze/west nile/emergenze.htm

9.1 Allevamenti avicoli I gruppi di animali sentinella delle specie
aviarie

Per quanto riguarda gli allevamenti avicoli rurali o all'aperto,
questi debbono essere preventivamente registrati presso la BDN, anche
per il tramite del Sistema Informativo Veterinario
(http://sorveglianza.izs.it/emergenze/west nile/caricamento dati.htm)
.
Per quanto concerne i gruppi di animali sentinella delle specie
aviarie, nel caso in cui le sentinelle siano posizionate all'interno
di aziende zootecniche, il gruppo verrà identificato dallo stesso
codice aziendale attribuito all'azienda zootecnica ospitante e
registrato in BDN. In caso contrario il gruppo di sentinelle dovrà
comunque essere registrato in BDN come struttura sentinella
assegnandogli un codice aziendale.
A ciascun sottogruppo è attribuito un numero progressivo di
identificazione, da mantenere fisso per tutta la durata dei
controlli. Ogni singolo animale dovrà essere contraddistinto da un
numero univoco (per esempio utilizzando un anello da posizionare alla
zampa), che sarà utilizzato per tutta la durata del campionamento.
I campioni devono essere accompagnati dalla scheda WO1 pre-compilata
per tutti i dati anagrafici, che potrà essere stampata dalla BDN
anche per il tramite del sistema informativo nazionale.

9.2 Sorveglianza su uccelli "sinantropici"

I campioni prelevati da uccelli appartenenti a specie "sinantropiche"
ai sensi dei capitoli 3.2, 4.2 e 5.2 del presente documento devono
essere accompagnati dalla scheda W02 debitamente compilata.

9.3 Sorveglianza tramite cavalli sentinella

Le informazioni relative agli allevamenti ed ai cavalli selezionati
debbono essere preventivamente registrati in BDN utilizzando come
codice identificativo il microchip o il passaporto.
I campioni devono essere accompagnati dalla scheda W03 pre-compilata
per tutti i dati anagrafici, che potrà essere stampata dalla BDN
anche per il tramite del sistema informativo nazionale.

9.4 Equini - sorveglianza sindromica (sindromi neurologiche e cavalli
deceduti o soppressi)

Il Servizio Veterinario dell'AUSL preleva, secondo le modalità
descritte nel capitolo 6 del presente documento, i campioni di siero,
sangue e organi nelle aziende equine dove si sono verificati casi
riferibili a WND. I campioni devono essere accompagnati dalla scheda
W03 e consegnati all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale
territorialmente competente che li invia al CESME.

9.5 Insetti

Il Servizio Veterinario dell'AUSL preleva, secondo le modalità
descritte nei capitoli 3.5, 4.5 e 5.5, i campioni di insetti nelle
aziende prescelte. I campioni devono essere accompagnati dalla scheda
W05 e consegnati all'Istituto Zooprofilattico Sperimentale
territorialmente competente che li invia al CESME.

Altre attività

Le Regioni interessate concordano con il CESME e con la Direzione
Generale della Sanità Animale e del Farmaco Veterinario le modalità
operative per l'attuazione delle seguenti attività di studio:
- definizione del ruolo degli uccelli migratori: sorveglianza sugli
uccelli migratori per l'individuazione delle specie responsabili
dell'introduzione e dell'amplificazione del virus della West Nile,
- studio entomologico: individuare le specie di zanzare responsabili
della trasmissione del WNV, sia nel ciclo epizootico che enzootico
della malattia, e la loro capacità di overwintering (del vettore e
del virus) nelle aree con circolazione virale,
- studio su altre specie vertebrate: valutazione del sistema di
sorveglianza basato su animali sentinella come indicatore della
presenza dell'infezione.


Parte di provvedimento in formato grafico


SEZIONE IV - MODALITÀ DI CATTURA / GESTIONE DEL CAMPIONE
ENTOMOLOGICO.

Linee guida per l'effettuazione delle catture entomologiche e
gestione del campione

Modalità di cattura:

• CDC light-trap con CO2:
è composta da un sistema di aspirazione costituito da un tubo
cilindrico alla cui sommità è posta una apertura tale da consentire
l'entrata alle zanzare. Nella parte opposta del tubo c'è una ventola
(per spingere le zanzare dentro la sacca sottostante) azionata da un
motorino elettrico a batterie (4 pile torcia).
È utilizzata per catturare esemplari adulti appartenenti a
differenti specie di Culicidi.
Preferibilmente deve essere posizionata ad 1mt e 1/2 di altezza, in
prossimità dei ricoveri degli animali presenti in azienda o dove gli
stessi stazionano più frequentemente.
La luce rappresenta l'attrattivo per la cattura delle specie
notturne, la CO2 (che può essere aggiunta alla CDC all'interno di un
thermos da appendere vicino al sito d'ingresso delle zanzare,
sostituendo il tappo con una garza) può essere utilizzata per le
catture notturne in aggiunta alla luce per potenziare il potere
attrattivo della trappola.
La trappola deve essere attivata (dal pomeriggio alla mattina
successiva, per due notti consecutive); le catture vengono ritirate
al termine di ogni notte (2 raccolte distinte).
• Gravid trap:
è composta da un sistema di aspirazione (tubo cilindrico dotato da
una parte di ventola e dalla parte opposta di una retina per la
raccolta delle zanzare simile a quello della CDC light-trap) che
poggia su un catino al cui interno vi è dell'acqua stagnante
utilizzata come attrattivo (miscela composta da: acqua, lievito di
birra e fieno, il tutto lasciato a macerare per 1 o 2 giorni).
Viene usata per catturare le femmine gravide (soprattutto del genere
Culex) che, dovendo deporre le uova, si avvicinano all'acqua. In
questo modo è possibile collezionare femmine adulte che hanno
compiuto e digerito almeno un pasto di sangue, e potrebbero albergare
il virus nelle ghiandole salivari Nel tardo pomeriggio sono
attrattive soprattutto per Culex spp., durante le ore mattutine
possono anche attrarre altre specie come Ochlerotatus spp. e Aedes
spp.
Preferibilmente deve essere posizionata in zone protette da
condizioni ambientali avverse (forte vento, sole diretto o pioggia
diretta) e in vicinanza dei ricoveri degli animali.
In questo caso la trappola deve rimanere attiva per due giorni e due
notti consecutive; le catture vengono ritirate al termine delle due
giornate (1 sola raccolta).
• BG sentinel:
Trappola originariamente progettata per catturare la zanzara
responsabile della febbre gialla (Aedes aegypti), ma efficace anche
nei confronti di altre zanzare quali Aedes albopictus (zanzara tigre)
Deve essere posizionata a terra e preferibilmente in vicinanza dei
ricoveri degli animali.
È dotata di un sistema di aspirazione e normalmente è usata in
combinazione con un attrattivo artificiale che simula il sudore umano
(combinazione di acido lattico, ammoniaca e altre sostanze
organiche). L'attrattivo viene inserito all'interno della trappola,
nell'apposito alloggiamento. La miscela di odori attrattivi che viene
emanata si diffonde nell'ambiente attraverso la garza che copre la
trappola. Al centro della garza si trova un'apertura che permette di
applicare un imbuto nero. In tal modo le zanzare vengono guidate nel
sacchetto di cattura situato sotto l'apertura.
La trappola deve essere attivata per due giorni e due notti
consecutive; le catture vengono ritirate o al termine dei due giorni
(1 unica raccolta).
• Aspirazione
Questo metodo è utilizzato per collezionare femmine adulte ingorgate
(cioè che hanno fatto il pasto di sangue e che cominciano a
digerirlo) all'interno dei siti di riposo (soprattutto lungo le
pareti/soffitti di box, di pollai o di ogni tipo di ricovero animale)
durante le prime ore della mattina.
Si può utilizzare un aspiratore a bocca o elettrico.
L'aspiratore a bocca è costituito essenzialmente da un tubo di
plexiglass di - 1,5 cm. 0 e di - 40 cm. di lunghezza collegato con un
tubo flessibile di gomma per l'aspirazione; tra i due viene posto
velo di tulle come filtro. Una volta catturate, le zanzare vengono
riposte in un bicchiere di carta/plastica chiuso superiormente con
del tulle fissato con un elastico e sul cui fondo è stato praticato
un foro tale da permettere l'inserimento del tubo dell'aspiratore: il
foro poi si può riempire con cotone o carta per impedire la fuga
delle zanzare.
• Raccolte larvali

Si possono effettuare in azienda e/o in focolai larvali(4 ) siti in

zone limitrofe all'azienda stessa.
Il campionamento va effettuato mediante un apposito "pescalarve"
standard (in alternativa anche contenitori di plastica, o mestoli)
montati su manici di lunghezza appropriata per prelevare l'acqua
con le larve dal focolaio. In presenza di raccolte d'acqua estese
quali stagni, impaludamenti, canali di bonifica, ecc. gli stadi
acquatici delle zanzare vanno cercati solamente lungo i bordi
erbosi o in pozze isolate dal corpo d'acqua principale. Usualmente
solo le larve di 4 stadio (cioè quelle di maggiori dimensioni)
sono utili per l'identificazione di specie.
--------

(4 ) È definito come focolaio larvale qualunque raccolta d'acqua

(naturale o artificiale, temporanea o perenne) nella quale vengano
rinvenute, anche sporadicamente, larve di zanzara (ad es. aree
allagate aperte, aree allagate boschive, stagni o pozze, rigagnoli e
ruscelli, canali d'irrigazione, vasche, abbeveratoi, canalette di
scolo e contenitori di varia natura).

CATTURE IN CASO DI POSITIVITÀ

In caso di circolazione virale si devono effettuare, il più
rapidamente possibile dalla comunicazione della positività, delle
"catture esaustive" volte sia a determinare la composizione della
fauna Culicidica del posto, sia a ricercare il virus nelle zanzare,
per poter identificare le specie responsabili della trasmissione del
WNV. Per il raggiungimento di quest' obiettivo si utilizzano le
seguenti tipologie cattura:
CDC light-trap con CO2,
• Gravid trap
• BG sentinel trap
• Aspirazione
• Catture larvali
È possibile anche utilizzare altre tipologie di cattura, che vanno
concordate con il CESME (ad esempio trappole ad esca come le
bird-baited traps).

GESTIONE DEL CAMPIONE

Gli adulti uccisi per congelamento (-20 C° per il tempo necessario,
da 10 min a 1 ora), vanno riposti in provette tipo Falcon, tra due
strati di cotone idrofilo non eccessivamente pigiato.
La provetta deve contenere per circa 1/4 del suo volume del gel di
silice o altro disseccante per evitare la formazione di muffe. I due
strati di cotone, posti senza comprimere il campione, dovranno essere
posti in maniera tale da impedire movimenti durante la spedizione che
comporterebbero la perdita dei caratteri utili all'identificazione.
Le larve prelevate devono essere poste in alcool etilico al 70% in
provette sufficientemente capienti a chiusura ermetica.
In caso di catture in seguito a positività le zanzare adulte devono
essere uccise preferibilmente a -80°C, o in alternativa
stordite/uccise a -20°C per pochi minuti, per evitare di uccidere
anche il virus eventualmente presente e compromettere l'isolamento
virale. I campioni devono poi essere conservati ed inviati
refrigerati (+4°C).
I campioni devono essere etichettati (tipo di trappola, luogo e data)
e accompagnati dalla scheda W05. Va utilizzata una scheda W05 per
ogni data di cattura. Per data di cattura si intende la data della
mattina in cui si raccolgono gli insetti (es. trappola BG-Sentinel
accesa il 01 gennaio, insetti raccolti il 03 gennaio: data cattura 03
gennaio).

SEZIONE V- MODULISTICA

La modulistica è reperibile al seguente indirizzo web:
http://sorveglianza.izs.it/emergenze/west nile/stampa modelli/stampa
modelli.htm