Serie Generale n. 161 del 7-7-2021
DECRETI, DELIBERE E ORDINANZE MINISTERIALI
MINISTERO DELLA SALUTE
MINISTERO DELLA SALUTE
ORDINANZA 23 giugno 2021
Proroga con modifiche dell'ordinanza 28 maggio 2015, recante: «Misure straordinarie di polizia veterinaria in materia di tubercolosi, brucellosi bovina e bufalina, brucellosi ovi-caprina, leucosi bovina enzootica». (21A04133) (GU Serie Generale n.161 del 07-07-2021)

IL MINISTRO DELLA SALUTE

Visto il testo unico delle leggi sanitarie approvato con regio
decreto 27 luglio 1934, n. 1265, e successive modificazioni;
Visto il regolamento di polizia veterinaria approvato con decreto
del Presidente della Repubblica 8 febbraio 1954, n. 320, e successive
modificazioni;
Vista la legge 9 giugno 1964, n. 615, concernente la bonifica
sanitaria degli allevamenti dalla tubercolosi e dalla brucellosi, e
successive modificazioni;
Visto l'art. 32, comma 1, della legge 23 dicembre 1978, n. 833,
recante «Istituzione del servizio sanitario nazionale» relativamente
al potere del Ministro della sanità di emettere ordinanze di
carattere contingibile e urgente, in materia di igiene e sanità
pubblica e di polizia veterinaria, con efficacia estesa all'intero
territorio nazionale o a parte di esso comprendente più regioni;
Visto l'art. 117, comma 1, del decreto legislativo 31 marzo 1998,
n. 112, recante «Conferimento di funzioni e compiti amministrativi
dello Stato alle regioni ed agli enti locali, in attuazione del capo
I della legge 15 marzo 1997, n. 59»;
Visto il decreto del Ministro della sanità 28 marzo 1989,
pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 29
marzo 1989, n. 73, concernente l'obbligo in tutto il territorio
nazionale delle operazioni di profilassi e di risanamento degli
allevamenti bovini da brucellosi;
Visto il decreto del Ministro della sanità 2 luglio 1992, n. 453,
pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 23
novembre 1992, n. 276, concernente «Regolamento concernente il piano
nazionale per l'eradicazione della brucellosi negli allevamenti ovini
e caprini» e successive modificazioni;
Visto il decreto del Ministro della sanità 27 agosto 1994, n. 651,
pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 26
novembre 1994, n. 277, concernente il piano nazionale per
l'eradicazione della brucellosi negli allevamenti bovini, e
successive modificazioni;
Visto il decreto del Ministro della sanità 15 dicembre 1995, n.
592, pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 30
maggio 1996, n. 125 concernente il piano nazionale per l'eradicazione
della tubercolosi negli allevamenti bovini e bufalini, e successive
modificazioni;
Visto il decreto del Presidente della Repubblica 30 aprile 1996, n.
317, concernente «Regolamento recante norme per l'attuazione della
direttiva 92/102/CEE del Consiglio del 27 novembre 1992, relativa
all'identificazione e alla registrazione degli animali»;
Visto il decreto del Ministro della sanità 2 maggio 1996, n. 358,
pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 10
luglio 1996, n. 160, recante «Regolamento concernente il piano
nazionale per l'eradicazione della leucosi bovina enzootica», e
successive modificazioni;
Visto il decreto legislativo 22 maggio 1999, n. 196, recante
«Attuazione della direttiva 97/12/CE, che modifica e aggiorna la
direttiva 64/432/CEE del Consiglio del 26 giugno 1964 relativa ai
problemi di polizia sanitaria in materia di scambi intracomunitari di
animali della specie bovina e suina»;
Visto il decreto legislativo 29 gennaio 2004, n. 58, recante
«Disposizioni sanzionatorie per le violazioni del regolamento (CE) n.
1760/2000 e del regolamento (CE) n. 1825/2000, relativi
all'identificazione e registrazione dei bovini, nonchè
all'etichettatura delle carni bovine e dei prodotti a base di carni
bovine, a norma dell'art. 3 della legge 1° marzo 2002, n. 39»;
Visto il decreto legislativo 19 agosto 2005, n. 193, recante
«Attuazione della direttiva 2003/50/CE relativa al rafforzamento dei
controlli sui movimenti di ovini e caprini»;
Vista l'ordinanza del Ministro della salute 14 novembre 2006,
pubblicata nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 7
dicembre 2006, n. 285, S.O., relativa a misure straordinarie di
polizia veterinaria in materia di tubercolosi, brucellosi bovina e
bufalina, brucellosi ovi-caprina, leucosi in Calabria, Campania,
Puglia e Sicilia;
Vista l'ordinanza del Ministro della salute 9 agosto 2012,
pubblicata nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 11
settembre 2012, n. 212, relativa a misure straordinarie di polizia
veterinaria in materia di tubercolosi, brucellosi bovina e bufalina,
brucellosi ovi-caprina, leucosi in Calabria, Campania, Puglia e
Sicilia;
Vista la decisione di esecuzione della Commissione 2014/288/UE del
12 maggio 2014 concernente i requisiti uniformi per la notifica dei
programmi nazionali di eradicazione, di lotta e sorveglianza relativi
ad alcune malattie degli animali e zoonosi cofinanziati dall'Unione e
che abroga la decisione 2008/940/CE;
Visto il regolamento (UE) n. 652/2014 del Parlamento europeo e del
Consiglio del 15 maggio 2014 che fissa le disposizioni per la
gestione delle spese relative alla filiera alimentare, alla salute e
al benessere degli animali, alla sanità delle piante e al materiale
riproduttivo vegetale;
Visto il regolamento (UE) n. 653/2014 del Parlamento europeo e del
Consiglio del 15 maggio 2014, che modifica il regolamento (CE) n.
1760/2000 per quanto riguarda l'identificazione elettronica dei
bovini e l'etichettatura delle carni bovine;
Vista l'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio 2015, recante
misure straordinarie di polizia veterinaria in materia di
tubercolosi, brucellosi bovina e bufalina, brucellosi ovi-caprina,
leucosi bovina enzootica, pubblicata nella Gazzetta Ufficiale della
Repubblica italiana 24 giugno 2015, n. 144, prorogata, da ultimo, con
l'ordinanza del Ministro della salute 23 giugno 2020, pubblicata
nella Gazzetta Ufficiale della Repubblica italiana 7 luglio 2020, n.
169;
Visto il decreto del Ministro della salute 28 giugno 2016 di
modifica dell'allegato IV del decreto del Presidente della Repubblica
30 aprile 1996, n. 317, recante «Regolamento recante norme per
l'attuazione della direttiva 92/102/CEE relativa all'identificazione
e alla registrazione degli animali» e in particolare l'art. 2, comma
1, che introduce, dal 2 settembre 2017, l'obbligo della compilazione
della dichiarazione di provenienza e destinazione degli animali
(Modello 4) esclusivamente in modalità informatica;
Visto il regolamento (UE) n. 2016/429 del Parlamento europeo e del
Consiglio del 9 marzo 2016 relativo alle malattie animali
trasmissibili e che modifica e abroga taluni atti di sanità animale
(«normativa in materia di sanità animale»);
Visto il regolamento (UE) n. 2017/625 del Parlamento europeo e del
Consiglio del 15 marzo 2017 relativo ai controlli ufficiali e alle
altre attività ufficiali effettuati per garantire l'applicazione
della legislazione sugli alimenti e sui mangimi, delle norme sulla
salute e sul benessere degli animali, sulla sanità delle piante
nonchè sui prodotti fitosanitari, che ha abrogato il regolamento
(CE) n. 882/2004 del Parlamento europeo e del Consiglio;
Vista la decisione di esecuzione n. 2017/1910/UE della Commissione
del 17 ottobre 2017, con cui l'Italia è stata dichiarata
ufficialmente indenne da leucosi bovina enzootica;
Visto il regolamento di esecuzione (UE) n. 2018/1882 della
Commissione del 3 dicembre 2018 relativo all'applicazione di
determinate norme di prevenzione e controllo delle malattie alle
categorie di malattie elencate e che stabilisce un elenco di specie e
gruppi di specie che comportano un notevole rischio di diffusione di
tali malattie elencate;
Visto il regolamento delegato (UE) n. 2019/2035 della Commissione
del 28 giugno 2019, che integra il regolamento (UE) n. 2016/429 per
le norme relative agli stabilimenti che detengono animali terrestri e
agli incubatoi, nonchè alla tracciabilità di determinati animali;
Visto il regolamento delegato (UE) n. 2020/687 della Commissione
del 17 dicembre 2019, che integra il regolamento (UE) n. 2016/429 per
quanto riguarda le norme relative alla prevenzione e al controllo di
determinate malattie elencate;
Visto il regolamento delegato (UE) n. 2020/688 della Commissione
del 17 dicembre 2019, che integra il regolamento (UE) n. 2016/429 per
le norme relative ai movimenti di animali terrestri e uova da cova
all'interno dell'Unione;
Visto il regolamento delegato (UE) n. 2020/689 della Commissione
del 17 dicembre 2019, che integra il regolamento (UE) n. 2016/429 per
quanto riguarda le norme relative alla sorveglianza, ai programmi di
eradicazione e allo status di indenne da malattia per determinate
malattie elencate ed emergenti;
Visto il regolamento di esecuzione (UE) n. 2020/690 della
Commissione, del 17 dicembre 2019, recante modalità di applicazione
del regolamento (UE) n. 2016/429 per quanto riguarda le malattie
elencate oggetto di programmi di sorveglianza dell'Unione, l'ambito
geografico di applicazione di tali programmi e le malattie elencate
per le quali può essere stabilito lo status di indenne da malattia
dei compartimenti;
Visto il regolamento di esecuzione (UE) n. 2020/2002 della
Commissione del 7 dicembre 2020 recante modalità di applicazione del
regolamento (UE) n. 2016/429 per quanto riguarda la notifica
nell'Unione e la comunicazione nell'Unione delle malattie elencate, i
formati e le procedure per la presentazione e la comunicazione dei
programmi di sorveglianza dell'Unione e dei programmi di eradicazione
nonchè per le domande di riconoscimento dello status di indenne da
malattia, e il sistema informatico per il trattamento delle
informazioni;
Visto il decreto legislativo 2 febbraio 2021, n. 27, recante
«Disposizioni per l'adeguamento della normativa nazionale alle
disposizioni del regolamento (UE) n. 2017/625 ai sensi dell'art. 12,
lettere a), b), c), d) ed e) della legge 4 ottobre 2019, n. 117»;
Vista la decisione di esecuzione (UE) 2021/385 della Commissione
del 2 marzo 2021, che modifica l'allegato II della decisione
93/52/CEE per quanto riguarda la qualifica di ufficialmente indenni
da brucellosi (B.melitensis), gli allegati I e II della decisione
2003/4677CE per quanto riguarda la qualifica di ufficialmente indenni
da tubercolosi e brucellosi;
Vista la legge 22 aprile 2021, n. 53, recante «Delega al Governo
per il recepimento delle direttive europee e l'attuazione di altri
atti dell'Unione europea - legge di delegazione 2019-2020» e, in
particolare, l'art. 14;
Considerato che, con l'applicazione dei piani di eradicazione
previsti dall'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio 2015
anche a seguito delle proroghe disposte con le ordinanze del Ministro
della salute 6 giugno 2017, 11 maggio 2018, 13 maggio 2019, 23 giugno
2020, è stato accertato un generale calo di prevalenza delle
malattie infettive ivi disciplinate pur non raggiungendo tutti gli
obiettivi prefissati;
Considerato che, con la citata decisione di esecuzione (UE)
2021/385, lo status di ufficialmente indenne è stato assegnato alla
Regione Molise per tubercolosi bovina, alla Provincia di Matera per
tubercolosi bovina, alle Province di Sud Sardegna e Città
metropolitana di Cagliari per tubercolosi bovina, alla Regione
Abruzzo per brucellosi ovi-caprina, alle Province di Bari, Barletta -
Andria - Trani e Taranto per brucellosi ovi-caprina, alle Province di
Bari, Barletta - Andria - Trani e Lecce per brucellosi bovina, alle
Province di Avellino, Benevento e Napoli per brucellosi bovina e
bufalina;
Considerato che è stato registrato nell'anno 2020 un aumento della
prevalenza per la brucellosi e tubercolosi bufalina nella Provincia
di Caserta;
Rilevato che l'applicazione delle misure sanitarie contenute
nell'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio 2015 e successive
modificazioni ha consentito all'Italia di adempiere a quanto
raccomandato dalla Commissione europea nel report dell'audit FVO 6979
del 2013 sulla brucellosi, svoltosi nelle Regioni Puglia e Calabria,
e nel report dell'audit FVO 8407 del 2010 per la valutazione delle
attività di eradicazione della tubercolosi, come attestato dalla
stessa Commissione nell'ambito del general Audit per la valutazione
del Country Profile svoltosi nei giorni 12-16 dicembre 2016;
Ritenuto necessario assicurare livelli elevati di tutela della
salute animale e di sanità pubblica, anche a seguito dell'entrata in
vigore il 21 aprile 2021 del regolamento (UE) n. 429/2016 del
Parlamento europeo e del Consiglio del 9 marzo 2016, il quale prevede
misure per il potenziamento delle misure sanitarie in materia di
sanità animale;
Considerato che sono in corso di predisposizione i decreti
legislativi per l'attuazione del citato art. 14 della legge 22 aprile
2021, n. 53, per l'adeguamento dell'ordinamento interno alle
disposizioni del regolamento (UE) n. 2016/429 con specifico
riferimento alle misure di prevenzione e controllo delle malattie
animali trasmissibili e alle disposizioni per l'identificazione e la
registrazione di animali e stabilimenti;
Considerato che, con nota prot. 9763 DGSAF del 20 aprile 2021, il
Ministero della salute ha fornito indicazioni applicative nelle more
dell'emanazione dei predetti decreti legislativi;
Considerato che, nelle more dell'emanazione dei sopra richiamati
decreti legislativi, è altresì necessario assicurare livelli
elevati di tutela della salute animale e pubblica in materia di
tubercolosi, brucellosi bovina e bufalina, brucellosi ovi-caprina,
leucosi bovina enzootica attraverso l'applicazione delle misure
contenute nell'ordinanza 28 maggio 2015 al fine di poter continuare a
garantire un ulteriore calo di prevalenza delle infezioni sul
territorio nazionale e procedere nelle attività di eradicazione
della brucellosi bufalina nella Provincia di Caserta;
Sentiti il Centro nazionale di referenza per le brucellosi di
Teramo, il Centro nazionale di referenza per la tubercolosi da
Mycobacterium bovis di Brescia e il Centro nazionale di referenza per
la leucosi bovina enzootica di Perugia;
Ritenuto pertanto necessario, per i motivi suesposti, confermare le
misure introdotte con la citata ordinanza del Ministro della salute
28 maggio 2015 e successive modificazioni, la cui efficacia cesserà
il 26 giugno 2021, posto che le attività di sorveglianza veterinaria
sono indispensabili per garantire l'attuazione delle misure di
prevenzione che interessano l'uomo, stante il carattere zoonotico
delle malattie;

Ordina:

Art. 1

Modifiche all'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio 2015

1. All'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio 2015, sono
apportate le seguenti modifiche:
a) all'art. 4, il comma 1, è sostituto dal seguente: «1. Le
prove ufficiali per la diagnosi di tubercolosi, brucellosi bovina e
bufalina, brucellosi ovi-caprina e leucosi bovina enzootica sono
descritte nell'allegato III del regolamento delegato (UE) n.
2020/689.»;
b) all'art. 7, il comma 1, è sostituito dal seguente: «1. Fermo
restando quanto stabilito dal regolamento (UE) n. 2016/429 e
dall'art. 2, paragrafo 2, del regolamento delegato (UE) n. 2020/688,
gli allevamenti da ingrasso sono costituiti da animali provenienti da
allevamenti U.I. da tubercolosi, brucellosi, leucosi e indenni da
brucellosi, sottoposti ad accertamento diagnostico favorevole, nei
trenta giorni precedenti l'introduzione: nei confronti della
tubercolosi, se trattasi di animali di età superiore a sei
settimane; nei confronti della brucellosi bovina se trattasi di
animali di età superiore a dodici mesi; nei confronti della leucosi
se trattasi di animali di età superiore a ventiquattro mesi; nei
confronti della brucellosi ovi-caprina se trattasi di animali di età
superiore a sei mesi. L'accertamento diagnostico non è richiesto per
gli animali provenienti da province U.I. o se movimentati all'interno
di queste ultime.»;
c) all'art. 12, comma 1, lettera b), alla fine del periodo, è
inserito il seguente: «I responsabili dei servizi veterinari di
sanità animale delle aziende sanitarie locali verificano l'efficacia
dei controlli attraverso i cruscotti sanità animale pubblicati nella
sezione Statistiche del portale VETINFO ove sono visualizzate le
informazioni registrate nei sistemi informativi.»;
d) gli allegati 1 e 3 dell'ordinanza 28 maggio 2015 sono
sostituiti, rispettivamente, dall'allegato 1 e dall'allegato 2 della
presente ordinanza;
e) dopo l'allegato 3 dell'ordinanza 28 maggio 2015, è inserito
l'allegato 3-bis di cui all'allegato 3 della presente ordinanza.

Art. 2

Proroga dell'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio 2015

1. L'efficacia dell'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio
2015, prorogata, da ultimo, con l'ordinanza 23 giugno 2020, è
prorogata di un ulteriore anno a decorrere dalla data del 27 giugno
2021.
La presente ordinanza è inviata alla Corte dei conti per la
registrazione ed è pubblicata nella Gazzetta Ufficiale della
Repubblica Italiana
Roma, 23 giugno 2021

Il Ministro: Speranza

Registrato alla Corte dei conti il 26 giugno 2021
Ufficio controllo atti MIUR, MIBAC, Min. salute e Min. lavoro e
politiche sociali, reg.ne prev. n. 2026

Allegato 1

L'Allegato 1 dell'ordinanza del Ministro della Salute 28 maggio 2015
è sostituito dal seguente "Allegato 1
PROVE SIEROLOGICHE UFFICIALI PER IL CONTROLLO DELLA BRUCELLOSI NEI
TERRITORI NON U.I.
Le prove sierologiche ufficiali sono:
a. la prova della sieroagglutinazione rapida con antigene Rosa
Bengala (SAR) da eseguirsi su tutti i campioni ematici prelevati;
b. la prova della fissazione del complemento (FDC) da eseguirsi su
tutti i campioni positivi alla SAR e su tutti gli animali
dell'allevamento nel caso di allevamenti non indenni o non
ufficialmente indenni e sottoposti a controllo per l'acquisizione
della qualifica. Negli allevamenti ovi-caprini la FDC è anche
effettuata su tutti gli animali dell'allevamento nel caso in cui uno
o più animali abbiano reagito positivamente alla SAR. La prova della
FDC è considerata positiva ad un titolo uguale o maggiore a 20
UIFC/ml. Per le bovine o bufaline vaccinate con Buck 19 e di età
inferiore a 18 mesi è tollerato un titolo di positività in FDC fino
a 30 UIFC/ml.
c. milk-ELISA può essere utilizzata come test di screening in
allevamenti indenni senza vaccinazione, presenti in province indenni
senza vaccinazione, su un campione di latte di massa proveniente da
aziende in cui almeno il 30 % delle vacche da latte sia in
lattazione. Se si ricorre a tale metodica, ci si deve assicurare che
i campioni prelevati per l'analisi permettano di risalire
univocamente ai singoli animali da cui proviene il latte esaminato.
Interpretazione dei risultati delle prove:
a. Nel caso in cui il siero di un animale esaminato fornisca esito
negativo alla SAR ed alla FDC, l'animale è da considerare non
infetto;
b. nel caso il siero di un animale esaminato fornisca esito positivo
alla FDC (maggiore o uguale a 20 UIFC/ml) e negativo o positivo alla
SAR l'animale è da considerare infetto;
c. nel caso in cui il siero di un animale esaminato fornisca esito
positivo alla SAR e negativo alla FDC, l'esito è da considerare
dubbio e l'animale sospetto d'infezione. All'allevamento di
provenienza è sospesa la qualifica sanitaria e il controllo
sull'animale sarà ripetuto. Nel caso in cui tale risultato sia
ottenuto su sieri di animali presenti in allevamenti infetti, i capi
con SAR positiva e FDC negativa sono considerati in ogni caso
infetti.
Per gli allevamenti non infetti nei quali si ripetono esiti dubbi
durante i controlli successivi, la Regione può richiedere
l'intervento dell'I.Z.S. competente per territorio e del Centro di
referenza nazionale per le brucellosi per eventuali approfondimenti
diagnostici.
c. In caso di positività del latte di massa esaminato, eventuali
prove di conferma devono essere effettuate su campioni di siero
prelevato dai singoli animali presenti in azienda che avevano
costituito il pool di latte. I lotti di kit utilizzati sul territorio
nazionale devono essere controllati dal laboratorio di referenza
nazionale per le brucellosi, che verifica l'idoneità rispetto alla
sensibilità analitica stabilita con i sieri standard internazionali
e la numerosità dei campioni costituenti il pool compatibile con
livelli accettabili di sensibilità diagnostica."

Allegato 2

L'Allegato 3 dell'ordinanza del Ministro della Salute 28 maggio 2015
è sostituito dal seguente:

"Allegato 3
PROTOCOLLO PER IL CONTROLLO DI ANIMALI ADULTI VACCINATI CON RB51
SENZA AUTORIZZAZIONE

L'utilizzo del vaccino vivo RB51 deve essere autorizzato dal
Ministero della Salute nell'ambito di uno specifico protocollo
sanitario che ne preveda l'utilizzo sotto lo stretto controllo dei
servizi veterinari ufficiali, con l'applicazione di tutte le misure
atte a ridurre i possibili rischi per la salute animale e pubblica.
Agli allevamenti con probabile vaccinazione di animali adulti con
vaccino RB51 sono immediatamente sospese le qualifiche di aziende
Indenne senza vaccinazione o Indenne con vaccinazione fino alla
conferma della positività.
Nel caso di positività di un numero di animali superiore al numero
massimo di animali positivi compatibile con delle false positività,
secondo quanto indicato nella tabella sotto riportata, l'allevamento
è considerato positivo per RB51, mentre se il numero risulterà
inferiore o uguale al numero massimo di animali positivi compatibile
con delle false positività, l'ASL procede alla conferma tramite
prova brucellinica. (vedi paragrafo prove diagnostiche).
Una volta confermato l'utilizzo non autorizzato di vaccino RB51,
secondo le suddette modalità la qualifica rimane sospesa fino a
quando saranno presenti in allevamento animali sierologicamente
positivi alla prova FDC-RB51*, che non risultano vaccinati
ufficialmente dai registri di stalla.

Quando tutti gli animali positivi alla FdC-RB51 avranno dato i due
esiti negativi consecutivi eseguiti contestualmente all'esecuzione
delle prove di profilassi di Stato, l'azienda può essere considerata
non più un rischio e gli viene assegnata la qualifica di indenne con
vaccinazione.

La qualifica di Azienda indenne con vaccinazione potrà essere
elevata a quella di Azienda indenne senza vaccinazione solo dopo che
siano trascorsi almeno tre anni dal termine delle attività di
followup della positività alla FdC-RB51.

Per la tutela della salute dei lavoratori presenti nell'azienda nei
confronti del rischio d'infezione derivante dalla manipolazione del
latte o da eventuali aborti di animali vaccinati in gravidanza,
l'autorità sanitaria competente adotterà le misure sanitarie
previste per la sorveglianza ed eradicazione della brucella
selvaggia, applicabili anche in caso di uso del vaccino RB51.

*Nel caso in cui l'azienda decida di abbattere gli animali positivi
alla CFT per RB51, devono essere eseguiti i seguenti controlli per
l'assegnazione della qualifica di indenne con vaccinazione:
1) in presenza di animali a basso titolo (inferiore a 1:8, quindi
esclusivamente per titoli di 1:4, +1:8, ++1:8, +++1:8):
trascorso un mese dall'abbattimento dei positivi, 2 controlli
sierologici per RB51 ad esito negativo, da effettuarsi
in un tempo compatibile con le prove CFT per il controllo della
brucella selvaggia, secondo la tempistica prevista dalla normativa;
2) in presenza di animali ad alto titolo potenziali eliminatori di
RB51, al fine di scongiurare il pericolo di conferimento di latte
contaminato: trascorsi sei mesi dall'abbattimento dei positivi, 2
controlli sierologici per RB51 ad esito negativo, (per avere la
massima probabilità che non siano ancora presenti in azienda animali
eliminatori) da effettuarsi in un tempo compatibile con le prove CFT
per il controllo della brucella selvaggia, secondo la tempistica
prevista dalla normativa. "

Allegato 3

Dopo l'Allegato 3 dell'ordinanza del Ministro della salute 28 maggio
2015 è inserito il seguente:
"Allegato 3-bis PROVE DIAGNOSTICHE PER LA RICERCA DI ANTICORPI
ANTI-RB51
Il test sierologico per la ricerca di anticorpi anti-RB51 è la prova
della Fissazione del Complemento (FdC-RB51) specifica per RB51. Tutti
i capi dell'allevamento in cui si sospetti l'uso illecito di vaccino
devono essere sottoposti a prelievo ufficiale di sangue da parte
della ASL competente per territorio e saggiati mediante la prova
FdC-RB51.
La FdC-RB51, se eseguita durante i primi mesi dopo l'ultima
somministrazione di vaccino RB51, ha una sensibilità elevata, cioè
un'elevata probabilità di identificare correttamente un animale
vaccinato.
Questa sensibilità nei bovini e nei bufali è prossima o superiore
al 90% nei primi 4 mesi, per scemare poi progressivamente, in animali
vaccinati in età prepubere e con tripla dose con richiamo. La
specificità della prova, cioè la sua capacità di identificare
correttamente animali non vaccinati, è stata stimata usando sieri di
campo di bovini e bufali non sottoposti a vaccinazione con RB51 ed è
risultata pari a 99.9% (C.I. 99.73-99.96%).
Per l'esecuzione della prova deve essere utilizzato l'antigene
omologo prodotto con vaccino RB51 titolato con siero di riferimento
di bovino e di bufalo. La FDC deve essere effettuata nel seguente
modo:
1) inattivare i sieri bovini/bufalini, nativi o prediluiti, a 58°C
per trenta minuti;
2) distribuire 0,025 ml di ciascun siero in esame inattivato in
micropiastra e diluirli per raddoppio, dalla diluizione 1:4 alla
diluizione 1:128;
3) distribuire 0,025 ml di antigene liofilizzato e pronto all'uso,
in ciascun pozzetto contenente il siero diluito ed inattivato;
4) distribuire 0,025 ml di complemento precedentemente titolato a 2
Unità fissanti il complemento al 100%;
5) agitare e porre in incubazione a 37°C per trenta minuti in
bagnomaria o in termostato;
6) dopo la prima incubazione, aggiungere 0,025 ml di sistema
emolitico contenente due unità di emolisina (siero iperimmune di
coniglio anti-globuli rossi di montone) precedentemente titolate, ed
una sospensione di globuli rossi di montone al 2%;
7) agitare e porre in incubazione a 37°C per trenta minuti in
bagnomaria o in termostato;
8) dopo la seconda incubazione, centrifugare la micropiastra e
procedere con la lettura. Verificare che i controlli presentino la
reattività attesa;
9) leggere e registrare il titolo dei sieri in esame, che è
rappresentato dalla più alta diluizione del siero che ha determinato
fissazione del complemento. Il valore soglia per la positività della
prova è 1:4 al 100% di fissazione.
La prova intradermica della Brucellina (BST), se eseguita durante i
primi mesi dopo l'ultima somministrazione di RB51, ha una
sensibilità piuttosto bassa, inferiore alla FdC-RB51, che però si
mantiene costante nel tempo invece di scemare rapidamente. Inoltre,
la specificità della BST (cioè la probabilità di dare risultato
negativo in un animale non vaccinato) è molto alta. L'effetto
combinato di questa bassa sensibilità e alta specificità rende la
prova inadatta a certificare che un animale non è stato vaccinato (o
nel caso dell'infezione da brucella selvaggia, che l'animale è
sano), quindi si tratta di una prova inadatta per la certificazione
degli animali nel commercio internazionale.
Contemporaneamente, data l'elevata specificità, se un animale
risulta positivo alla BST ha un'elevata probabilità di essere venuto
a contatto con l'antigene brucellare (vaccinale o selvaggio che sia).
Procedere nel modo seguente:
- Tosare l'area da sottoporre ad inoculo tra il terzo distale del
collo e la spalla facendo attenzione a non lesionare la cute.
L'area di inoculo non deve essere raggiungibile dalle corna nè
deve essere soggetta al contatto ripetuto con eventuali strutture
dell'allevamento.
- Misurare lo spessore della cute, sollevata in plica, mediante
cutimetro.
- Registrare lo spessore della cute rilevata sul modello 2/33
- Inoculare per via intradermica di 0,1 ml di Brucellergene OCB®
con una siringa da insulina, sollevando in plica la cute
dell'area da inoculare. Inserire l'ago parallelamente alla cute
in modo da effettuare una inoculazione intradermica. Dopo
inoculazione della brucellina si osserverà la comparsa di un
piccolo pomfo. Evidenziare l'area di inoculo mediante apposizione
di simbolo colorato.
- Dopo 72h, lo stesso personale che ha eseguito l'inoculo si
recerà di nuovo in azienda per la verifica dell'eventuale
reazione intradermica effettuando le seguenti operazioni:
o Osservazione del punto di inoculo per evidenziare l'eventuale
comparsa di una reazione cutanea visibile e palpabile;
o Misurazione dello spessore della cute dell'area di inoculo con
cutimetro
o Un aumento dello spessore della cute uguale o maggiore ai 2 mm
è considerato come esito positivo alla prova di
intradermoreazione.

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|   Numero animali | Numero massimo |
| esaminati |animali positivi |
+===================+=================+
|1,131 |1 |
+-------------------+-----------------+
|132,303 |2 |
+-------------------+-----------------+
|304,506 |3 |
+-------------------+-----------------+
|507,73 |4 |
+-------------------+-----------------+
|731,968 |5 |
+-------------------+-----------------+
|969,1218 |6 |
+-------------------+-----------------+
|1219,1475 |7 |
+-------------------+-----------------+
|1476,174 |8 |
+-------------------+-----------------+
|1741,2011 |9 |
+-------------------+-----------------+
|2012,2286 |10 |
+-------------------+-----------------+
|2287,2566 |11 |
+-------------------+-----------------+
|2567,285 |12 |
+-------------------+-----------------+
|2851,3137 |13 |
+-------------------+-----------------+
|3138,3426 |14 |
+-------------------+-----------------+
|3427,3719 |15 |
+-------------------+-----------------+
|3720,4014 |16 |
+-------------------+-----------------+
|4015,4311 |17 |
+-------------------+-----------------+
|4312,461 |18 |
+-------------------+-----------------+
|4611,4912 |19 |
+-------------------+-----------------+
|4913,5214 |20 |
+-------------------+-----------------+