Serie Generale n. 108 del 10-5-1988
LEGGI E DECRETI PRESIDENZIALI
MINISTERO DELLA SANITA'
MINISTERO DELLA SANITA'
DECRETO 24 febbraio 1988, n. 149
Metodi ufficiali di campionamento e di analisi delle caseine e dei caseinati alimentari. (GU Serie Generale n.108 del 10-05-1988)
Nota: note: Entrata in vigore del decreto: 25/05/1988

IL MINISTRO DELLA SANITA'
Vista la legge 30 aprile 1962, n. 283, pubblicata nella Gazzetta
Ufficiale n. 139 del 4 giugno 1962, relativa alla disciplina igienica
della produzione e della vendita delle sostanze alimentari ed in
particolare l'art. 21;
Visto il regolamento alla sopracitata legge n. 283/1962 approvato
con decreto del Presidente della Repubblica 26 marzo 1980, n. 327,
pubblicato nella Gazzetta Ufficiale n. 193 del 16 luglio 1980, ed in
particolare l'art. 9;
Vista la prima direttiva della commissione CEE del 25 ottobre 1985,
relativa ai metodi di analisi per le caseine ed i caseinati
alimentari (85/503/CEE), pubblicata nella "Gazzetta Ufficiale" CEE n.
L 308/12 del 20 novembre 1985;
Vista la prima direttiva della commissione CEE del 15 luglio 1986,
che fissa metodi di campionatura comunitari per le caseine ed i
caseinati alimentari ai fini dell'analisi chimica (86/424/CEE),
pubblicata nella "Gazzetta Ufficiale" CEE n. L 243/29 del 28 agosto
1986;
Ritenuto di dover recepire nell'ordinamento nazionale le
disposizioni che formano oggetto delle direttive sopra citate;
Sentita la commissione permanente per la determinazione dei metodi
ufficiali di analisi delle sostanze alimentari;
Decreta:
Art. 1.
Sono approvati i metodi ufficiali d'analisi, riportati in allegato
riguardanti:
i metodi di analisi per le caseine ed i caseinati alimentari
(allegato 1);
i metodi di campionatura per le caseine ed i caseinati alimentari
ai fini dell'analisi chimica (allegato 2).
Il presente decreto, munito del sigillo dello Stato, sarà inserito
nella Raccolta ufficiale degli atti normativi della Repubblica
italiana. È fatto obbligo a chiunque spetti di osservarlo e di farlo
osservare.
Roma, addì 24 febbraio 1988
Il Ministro: DONAT CATTIN
Visto, il Guardasigilli: VASSALLI

I. DISPOSIZIONI GENERALI.
II. Determinazione dell'umidità nelle seguenti sostanze:
- caseine acide (metodo 1, allegato I);
- caseine presamiche (metodo 1, allegato I);
- caseinati (metodo 1, allegato I).
III. Determinazione del tenore proteico nelle seguenti sostanze:
- caseine acide (metodo 2, allegato I);
- caseine presamiche (metodo 2, allegato I);
- caseinati (metodo 2, allegato I).
IV. Determinazione dell'acidità titolabile nelle seguenti sostanze:
- caseine acide (metodo 3, allegato I).
V. Determinazione delle ceneri (P2 O5 compreso) nelle seguenti
sostanze:
- caseine acide (metodo 4, allegato I);
- caseine presamiche (metodo 5, allegato I).
VI. Determinazione del pH nelle seguenti sostanze:
- caseinati (metodo 6, allegato I).

METODI D'ANALISI RELATIVI ALLA COMPOSIZIONE DELLE CASEINE E DEI
CASEINATI ALIMENTARI.

DISPOSIZIONI GENERALI
1. PREPARAZIONE DEL CAMPIONE PER ANALISI.
1.1. Generalità.
La massa del campione presentato al laboratorio per l'analisi deve
essere di almeno 200 g.
1.2. Preparazione del campione per analisi in laboratorio.
1.2.1. Mescolare accuratamente il campione di laboratorio agitando
ripetutamente capovolgendo il contenitore (se necessario, dopo aver
travasato tutto il campione di laboratorio in un contenitore a tenuta
stagna di capacità almeno doppia del volume del campione), avendo
cura di rompere gli eventuali grumi.
1.2.2. Travasare nel setaccio (5.9.) una porzione rappresentativa,
cioè circa 50 g del campione di laboratorio (1.2.1.) accuratamente
mescolato.
1.2.3. Se la porzione di campione di 50 g passa completamente o quasi
(almeno 95% della massa) attraverso il setaccio (3.3.), usare per la
determinazione il campione come preparato al punto 1.2.1.
1.2.4. Altrimenti, macinare la porzione i 50 g, facendo uso del
macinino (3.4.), finchè essa soddisfa i requisiti di setacciatura
(1.2.3.). Travasare immediatamente tutto il campione setacciato in un
contenitore a tenuta stagna di capacità sufficiente e mescolare
accuratamente agitando ripetutamente e capovolgendo. Durante queste
operazioni, fare in modo da evitare alterazioni nel contenuto di
umidità del prodotto.
1.2.5. Una volta preparato il campione di prova, procedere alla
determinazione (5.4.) al più presto.
1.3. Contenitori.
Il campione dev'essere sempre conservato in un contenitore a tenuta
d'aria, impermeabile all'aria e all'umidità.
2. REATTIVI.
2.1. Acqua.
2.1.1. Ovunque si faccia accenno all'acqua per soluzione, diluizione
o lavaggio, deve essere usata acqua distillata o demineralizzata o
acqua di purezza perlomeno equivalente.
2.1.2. Ovunque si faccia riferimento ad una "soluzione" oppure
"diluizione" senza ulteriori indicazioni, si intende "soluzione in
acqua" oppure "diluizione con acqua".
2.2. Reattivi.
Tutti i reattivi usati devono essere di purezza analitica
riconosciuta, salvo diverse specificazioni.
3. APPARECCHIATURA.
3.1. Elenchi di apparecchiature.
Gli elenchi di apparecchiature contengono solamente quelle ad uso
specializzato o con requisiti speciali.
3.2. Bilancia analitica.
Per bilancia analitica si intende una bilancia atta a pesare con la
precisione di almeno 0,1 mg.
3.3. Setaccio.
I setacci da usare devono essere provvisti di un coperchio, avere 200
mm di diametro, essere costruiti con una tela metallica avente
un'apertura nominale di 500 (Micron(m. Le tolleranze dell'apertura ed
i diametri dei fili della tela ammessi sono come specificati nella
ISO 3310/1. (Setacci - requisiti tecnici e controlli - Parte 1: tela
metallica. ISO 3310/1 - 1975). I setacci devono essere provvisti di
raccoglitore.
3.4. Macinino.
Deve permettere di macinare il campione di laboratorio (vedi 1.2.4.),
senza sviluppo di calore e senza perdita o assorbimento di umidità.
Non deve essere usato un apparecchio a martelli.
4. ESPRESSIONE DEI RISULTATI.
4.1. Risultati.
Il risultato da riportare nel certificato di analisi è rappresentato
dal valore medio ottenuto da due determinazioni che soddisfano al
criterio di ripetibilità fissato per quel dato metodo.
4.2. Calcolo della percentuale.
Salvo istruzioni contrarie, il risultato dev'essere calcolato come
percentuale in massa del campione.
5. RELAZIONE.
La relazione riguardante la prova deve definire il metodo d'analisi
usato e i risultati ottenuti. Inoltre, esso deve citare tutti i
particolari del procedimento che non siano specificati nel metodo
d'analisi o che siano facoltativi, nonchè eventuali circostanze che
abbiano influenzato i risultati ottenuti. La relazione deve fornire
tutti i dati necessari alla completa identificazione del campione.
Metodo 1 - DETERMINAZIONE DEL TENORE DI UMIDITA'
1. OGGETTO E CAMPO D'APPLICAZIONE.
Il presente metodo determina il tenore di umidità nelle seguenti
sostanze:
- caseine acide;
- caseine presamiche;
- caseinati.
2. DEFINIZIONE.
Per "tenore di umidità delle caseine o dei caseinati" si intende la
perdita di massa determinata col metodo appresso specificato.
3. PRINCIPIO.
La massa residua viene determinata previo riscaldamento a pressione
atmosferica in una stufa, alla temperatura di 102C (Più o Meno) 1C
fino a massa costante. La perdita di massa viene calcolata come
percentuale in massa del campione.
4. APPARECCHIATURA.
4.1. Bilancia analitica.
4.2. Capsule, a fondo piatto e di materiale non corrodibile nelle
condizioni dell'analisi, ad esempio nichel, alluminio, acciaio
inossidabile o vetro. Le capsule devono avere coperchi che combaciano
perfettamente, ma facili da rimuovere. Le dimensioni opportune sono
le seguenti: diametro da 60 a 80 mm e profondità di circa 25 mm.
4.3. Stufa da essiccazione a pressione atmosferica, ben ventilata,
controllata termostaticamente con una regolazione della temperatura
(a 102C (Più o Meno) 1C). La temperatura deve essere uniforme in
tutta la stufa.
4.4. Essiccatore contenente gel di silice attivato di recente, con un
indicatore del contenuto d'acqua, oppure un essiccante equivalente.
4.5. Opportuno strumento per prendere le capsule, ad esempio pinze da
laboratorio.
5. PROCEDIMENTO.
5.1. Preparazione del campione.
Come descritto nella sezione 1.2. delle disposizioni generali.
5.2. Preparazione della capsula.
5.2.1. Scaldare la capsula scoperta ed il suo coperchio (4.2.) nella
stufa (4.3.), mantenuta a 102 (Più o Meno) 1C per almeno un'ora.
5.2.2. Mettere il coperchio sulla capsula, trasferire la capsula
coperta nell'essiccatore (4.4.), lasciar raffreddare a temperatura
ambiente nella stanza delle bilance e pesare con l'approssimazione di
0,1 mg (Mo).
5.3. Porzione di campione.
Porre da 3 a 5 g di campione (5.1.) nella capsula, coprire con il
coperchio e pesare con l'approssimazione di 0,1 mg (M1).
5.4. Determinazione.
5.4.1. Scoprire la capsula e porla con il suo coperchio nella stufa
(4.3.), mantenuta a 102 (Più o Meno) 1C, per 4 ore.
5.4.2. Rimettere il coperchio sulla capsula, trasferire
nell'essiccatore, lasciar raffreddare a temperatura ambiente nella
stanza delle bilance e pesare con l'approssimazione di 0,1 mg.
5.4.3. Scoprire la capsula e scaldarla nuovamente con il suo
coperchio, nella stufa, per un'ora. Ripetere quindi l'operazione
5.4.2.
5.4.4. Se la massa ottenuta a 5.4.3. è inferiore a quella ottenuta
a 5.4.2. di oltre 1 mg, ripetere l'operazione 5.4.3.
Se si verifica un aumento di massa, usare nel calcolo la massa più
bassa registrata (6.1.).
Sia M2 la massa finale registrata, espressa in grammi.
Il tempo totale di essiccazione non deve di norma superare le 6 ore.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI.
6.1. Metodo di calcolo.
Calcolare la perdita di massa all'essiccazione del campione, espressa
come percentuale in massa, con la formula seguente:
M1 - M2
--------- x 100
M1 - M0
dove
M0 = massa, in g, della capsula e del suo coperchio dopo l'operazione
5.2.;
M1 = massa, in g, della capsula, del suo coperchio e della porzione
di campione prima dell'essiccazione (procedimento 5.3.);
M2 = massa, in g, della capsula, del suo coperchio e della porzione
di campione dopo essiccazione (procedimento 5.4.3. oppure 5.4.4.).
Calcolare la perdita all'essiccazione con l'approssimazione dello
0,01%.
6.2. Ripetibilità.
La differenza fra i risultati di due determinazioni eseguite
simultaneamente oppure in successione rapida sullo stesso campione,
dallo stesso analista, nelle stesse condizioni, non deve superare 0,1
g di umidità per 100 g di prodotto. Tale intervallo di ripetibilità
deve essere ottenuto nel 95% dei casi in cui il metodo è applicato
correttamente.

Metodo 2 - DETERMINAZIONE DEL TENORE PROTEICO

1. SCOPO E CAMPO DI APPLICAZIONE.
Il presente metodo determina il tenore proteico delle seguenti
sostanze:
- caseine acide;
- caseine presamiche;
- caseinati,
eccettuati quelli contenenti caseinato d'ammonio oppure altri
composti di ammonio o di azoto.
2. DEFINIZIONE.
Per tenore proteico s'intende il contenuto di azoto determinato con
il metodo specificato, moltiplicato per 6,38 ed espresso come
percentuale in massa.
3. PRINCIPIO.
Una porzione di campione viene digerita con una miscela di solfato
potassico e di acido solforico, in presenza di solfato di rame (II)
come catalizzatore, in modo da trasformare l'azoto organico in azoto
ammoniacale. L'ammoniaca viene distillata ed assorbita in una
soluzione di acido borico e titolata quindi con una soluzione
titolata di acido cloridrico. Il contenuto di azoto viene convertito
in tenore proteico moltiplicando per 6,38.
4. REATTIVI.
4.1. Acido solforico, concentrato H2 SO4 1,84 g/ml.
4.2. Solfato potassico, anidro (K2 SO4 ).
4.3. Solfato di rame (II) pentaidrato (CUSO4 5H2 O).
4.4. Saccarosio (C12 H22 O11 ).
4.5. Acido borico, soluzione a 40 g/l.
4.6. Idrossido di sodio, soluzione acquosa concentrata al 30% (m/m)
esente da carbonati.
4.7. Acido cloridrico, soluzione titolata 0,1 M/l.
4.8. Indicatore misto. Miscelare volumi eguali di una soluzione di 2
g/l di rosso metile in etanolo almeno al 95% e una soluzione di 1 g/l
di blu di metilene in etanolo almeno al 95% (V/V).
5. APPARECCHIATURA.
5.1. Bilancia analitica.
5.2. Pallone di Kjeldahl, con una capacità di 500 ml.
5.3. Apparecchio di digestione che tenga il pallone di Kjeldahl
(5.2.) in posizione inclinata e con un riscaldatore che non scaldi la
parte di pallone al di sopra della superficie del contenuto liquido.
5.4. Condensatore con tubo interno rettilineo.
5.5. Tubo di uscita con bulbo di sicurezza connesso con l'estremità
inferiore del condensatore (5.4.) da un raccordo di vetro smerigliato
o da un tubo di gomma. Se viene usato il tubo di gomma, le estremità
di vetro devono essere ravvicinate l'una all'altra.
5.6. Trappola anti-spruzzi collegata al pallone di Kjeldahl (5.2.) ed
al condensatore (5.4.) mediante un tappo di gomma soffice, aderente,
o mediante altri tipi opportuni di tappo.
5.7. Beuta, avente una capacità di 500 ml.
5.8. Cilindri graduati, aventi capacità di 50 ml e di 100 ml.
5.9. Buretta, di una capacità di 50 ml, graduata con divisioni da
0,1 ml.
5.10. Regolatori dell'ebollizione.
5.10.1. Per la digestione: piccoli pezzi di porcellana dura o palline
di vetro.
5.10.2. Per la distillazione: pezzi di pomice di recente calcinata.
6. PROCEDIMENTO.
6.1. Preparazione del campione per la prova.
Come descritto nella sezione 1.2. delle disposizioni generali.
6.2. Prova per la presenza di azoto ammoniacale.
Se si sospetta la presenza di caseinato ammonico o di altri composti
ammonici eseguire la seguente prova. Aggiungere a 1 g del campione,
in un piccolo matraccio, 10 ml d'acqua e 100 mg di ossido di
magnesio. Sciacquare eventuali residui di ossido di magnesio aderenti
alle pareti e chiudere il matraccio con un tappo di sughero,
inserendo una striscia di cartina di tornasole rossa umida tra il
tappo e il collo del matraccio. Mescolare accuratamente il contenuto
del matraccio e scaldarlo in bagnomaria a 60-65C. Se la cartina di
tornasole si colora in blu entro 15 minuti, vi è presenza di
ammoniaca ed il metodo non può essere applicato (cfr. sezione 1).
6.3. Prova in bianco.
Contemporaneamente alla determinazione del contenuto di azoto del
campione eseguire una prova in bianco usando 0,5 g del saccarosio
(4.4.) invece della porzione di campione, usando la stessa
apparecchiatura, gli stessi quantitativi di tutti i reattivi e lo
stesso procedimento descritto al punto 6.5. Se la titolazione nella
determinazione del bianco supera 0,5 ml di acido 0,1 M/l, i reattivi
devono essere controllati ed il reattivo od i reattivi impuri devono
essere purificati o sostituiti.
6.4. Porzione di campione.
Trasferire nel pallone di Kjeldahl (5.2.) da 0,3 a 0,4 g del campione
(6.1.), pesato con l'approssimazione di 0,1 mg.
6.5. Determinazione.
6.5.1. Introdurre nel matraccio qualche pezzettino di porcellana o
qualche pallina di vetro (5.10.1.), nonchè circa 15 g di solfato
potassico anidro (4.2.).
Aggiungere 0,2 g del solfato di rame (II) (4.3.) e sciacquare il
collo del matraccio con un pò d'acqua. Aggiungere 20 ml di acido
solforico concentrato (4.1.). Mescolare il contenuto del matraccio.
Scaldare delicatamente l'apparecchio di digestione (5.3.) fino a
scomparsa dell'eventuale schiuma. Portare a ebollizione leggera fino
a che la soluzione non diventi limpida e persiste un colore verde-blu
pallido. Durante il riscaldamento agitare il matraccio di tanto in
tanto.
Continuare l'ebollizione, regolando il calore in modo da condensare i
vapori nel mezzo del collo del matraccio. Continuare a riscaldare per
90 minuti evitando un surriscaldamento locale.
Far raffreddare a temperatura ambiente. Aggiungere cautamente circa
200 ml d'acqua e qualche pezzo di pietra pomice (5.10.2.). Mescolare
e raffreddare nuovamente.
6.5.2. Travasare nella beuta (5.7.) 50 ml della soluzione di acido
borico (4.5.) e 4 gocce dell'indicatore (4.8.). Mescolare. Sistemare
la beuta sotto il condensatore (5.4.) in modo che l'estremità del
tubo di uscita (5.5.) sia immersa nella soluzione di acido borico.
Facendo uso di un cilindro graduato (5.8.), aggiungere al pallone di
Kjeldahl 80 ml della soluzione di idrossido di sodio (4.6.). Durante
questa operazione, mantenere il pallone in posizione inclinata
facendo scorrere la soluzione di idrossido di sodio lungo la parete
della beuta in modo da formare uno strato sul fondo.
Collegare immediatamente il pallone di Kjeldahl al condensatore per
mezzo della trappola anti-spruzzi (5.6.).
Ruotare delicatamente il pallone di Kjeldahl in modo da mescolarne il
contenuto. Portare a leggera ebollizione evitando la formazione di
schiuma. Continuare la distillazione in modo che 150 ml di distillato
siano raccolti in circa 30 minuti.
Il distillato dovrà avere una temperatura al di sotto dei 25C.
Circa due minuti prima della fine della distillazione, abbassare il
matraccio in modo che l'estremità del tubo d'uscita non sia più
immerso d'acqua. Interrompere il riscaldamento, rimuovere il tubo di
uscita e sciacquarne le pareti esterne ed interne con un pò di
acqua, raccogliendo le acque di lavaggio nel matraccio.
6.5.3. Titolare il distillato nel matraccio, facendo uso di una
soluzione titolata di acido cloridrico (4.7.).
7. ESPRESSIONE DEI RISULTATI.
7.1. Formula e metodo di calcolo.
Il tenore proteico del campione, espresso come percentuale in peso,
è dato dalla seguente formula:
(V1 - V2) x T x 1.4 x 100 x 6.38
--------------------------------- =
m x 1000

8,932 (V1 - V2) x T
= -----------------------
m
dove
V1 è il volume, in millilitri, della soluzione titolata di acido
cloridrico (4.7.) usata nella determinazione (6.5.);
V2 è il volume, in millilitri, della soluzione titolata di acido
cloridrico (4.7.) usata nella prova in bianco (6.3.);
T è il titolo della soluzione titolata di acido cloridrico (4.7.) in
M/l;
m è la massa, in grammi, della porzione di campione.
Calcolare il tenore proteico con l'approssimazione di 0,1%.
7.2. Ripetibilità.
La differenza tra i risultati di due determinazioni eseguite
simultaneamente o in successione rapida sullo stesso campione, dallo
stesso analista, nelle stesse condizioni, non deve superare 0,5 g di
proteina per 100 g di prodotto.
Tale intervallo di ripetibilità deve essere ottenuto nel 95% dei
casi in cui il metodo è applicato correttamente.

Metodo 3 - DETERMINAZIONE DELL'ACIDITÀ TITOLABILE

1. SCOPO E CAMPO D'APPLICAZIONE.
Il metodo determina l'acidità titolabile delle
- caseine acide.
2. DEFINIZIONE.
Per acidità titolabile delle caseine acide si intende il volume, in
millilitri, di una soluzione standard di idrossido di sodio 0,1 M/l
necessario per neutralizzare un estratto acquoso di 1 g di sostanza.
3. PRINCIPIO.
Si prepara un estratto acquoso del campione a 60C e si filtra. Il
filtrato viene titolato con una soluzione titolata di idrossido di
sodio usando la fenolftaleina come indicatore.
4. REATTIVI.
L'acqua usata nell'esecuzione del metodo o nella preparazione dei
reattivi deve essere esente da anidride carbonica, per cui deve
essere bollita per 10 minuti prima dell'uso.
4.1. Soluzione di idrossido di sodio, 0,1 M/l.
4.2. Soluzione di fenolftaleina, 10 g/l in etanolo (95% v/v),
neutralizzato all'indicatore.
5. APPARECCHIATURA.
5.1. Bilancia analitica.
5.2. Beuta, avente una capacità di 500 ml, con collo smerigliato e
provvisto di tappo smerigliato.
5.3. Pipetta tarata, avente una capacità di 100 ml.
5.4. Pipetta, atta a misurare 0,5 ml di soluzione di indicatore
54.2.).
5.5. Beuta, da 250 ml.
5.6. Cilindro graduato, da 250 ml.
5.7. Buretta, graduata in 0,1 ml.
5.8. Bagnomaria termostatabile alla temperatura di 60 (Più o Meno)
2C.
5.9. Filtro adeguato.
6. PROCEDIMENTO.
6.1. Preparazione del campione per la prova.
Come descritto nella sezione 1.2. delle disposizioni generali.
6.2. Porzione di campione.
Pesare circa 10 g del campione (6.1.) con l'approssimazione di 10 mg
e travasarlo nella beuta (5.2.).
6.3. Determinazione.
Facendo uso del cilindro graduato da 250 ml (5.6.), aggiungere 200 ml
di acqua bollita di recente e raffreddata, previamente scaldata a
60C. Chiudere la beuta, mescolare agitando e sistemare in un
bagnomaria a 60C (5.8.) per 30 minuti.
Agitare la beuta ad intervalli di circa 10 minuti.
Filtrare e raffreddare il filtrato a circa 20C. Il filtrato deve
essere limpido.
Travasare 100 ml del filtrato raffreddato nella beuta (5.5.) facendo
uso della pipetta (5.3.). Aggiungere 0,5 ml della soluzione di
fenolftaleina (4.2.), usando la pipetta (5.4.). Titolare con
soluzione titolata di idrossido di sodio (4.1.), fino a comparsa di
colorazione rosa debole, persistente per almeno 30 secondi. Valutare
e registrare il volume usato con l'approssimazione di 0,01 ml.
7. ESPRESSIONE DEI RISULTATI.
7.1. Formula e metodo di calcolo.
L'acidità titolabile della caseina è data dalla seguente formula:
20 x V x T
-----------
m
dove
V è il volume, in millilitri, della soluzione titolata di idrossido
di sodio (4.1.) usata;
T è il titolo della soluzione titolata di idrossido di sodio (4.1.)
in mol/l;
m è la massa in grammi della porzione di campione.
Calcolare l'acidità titolabile con l'approssimazione di due cifre
decimali.
7.2. Ripetibilità.
La differenza fra i risultati di due determinazioni effettuate
simultaneamente oppure in successione rapida sullo stesso campione,
dallo stesso analista, nelle stesse condizioni, non deve superare
0,02 ml di idrossido di sodio 0,01 M/l per 1 g di prodotto.
Tale intervallo di ripetibilità deve essere ottenuto nel 95% dei
casi in cui il metodo è applicato correttamente.

Metodo 4 - DETERMINAZIONE DELLE CENERI
(P2O5 COMPRESO)

1. SCOPO E CAMPO D'APPLICAZIONE.
Il metodo determina il tenore di ceneri (P2O5 compreso) della
seguente sostanza:
- caseine acide.
2. DEFINIZIONE.
Il tenore di ceneri (P2O5 compreso) è il contenuto di ceneri
determinato col metodo appresso specificato.
3. PRINCIPIO.
Una porzione del campione viene calcinata a 825 (Più o Meno) 25C in
presenza di acetato di magnesio in modo da legare tutto il fosforo di
origine organica. La cenere finale viene calcolata dopo aver pesato
il residuo e dopo aver sottratto la massa della cenere derivata
dall'acetato di magnesio.
4. REATTIVI.
4.1.
Soluzione di acetato di magnesio tetraidrato, 120 g/l. Sciogliere 120
g di magnesio acetato tetraidrato (Mg (CH3 CO2 )2 4H2 O) in acqua e
portare al volume di 1 l con acqua.
5. APPARECCHIATURA.
5.1. Bilancia analitica.
5.2. Pipetta tarata, 5 ml.
5.3. Capsule di silice o di platino, aventi circa 70 mm di diametro e
dai 25 ai 50 mm di altezza.
5.4. Stufa di essiccazione, termostatabile a 102 (Più o Meno) 1C.
5.5. Forno elettrico a circolazione d'aria, termostatabile a 825
(Più o Meno) 25C.
5.6. Bagnomaria.
5.7. Essiccatore contenente gel di silice attivato di recente, con un
indicatore del tenore idrico, oppure un equivalente essiccante.
6. PROCEDIMENTO.
6.1. Preparazione del campione.
Come descritto nella sezione 1.2. delle disposizioni generali.
6.2. Preparazione delle capsule.
Scaldare due capsule (A, B) (5.3.) nel forno elettrico (5.5.),
mantenuto a 825 (Più o Meno) 25C, per 30 minuti. Lasciar
raffreddare un pò le capsule e metterle nell'essiccatore (5.7.).
Quando hanno raggiunto la temperatura ambiente nella stanza delle
bilance, pesare con l'approssimazione di 0,1 mg.
6.3. Porzione di campione.
Pesare con l'approssimazione di 0,1 mg in una delle capsule preparate
(A) circa 3 g del campione (6.1.).
6.4. Determinazione.
Facendo uso della pipetta (5.2.), aggiungere alla capsula (A)
esattamente 5 ml della soluzione di acetato di magnesio (4.1.) in
modo da bagnare tutta la porzione di campione e lasciare riposare per
20 minuti.
All'altra capsula preparata (B), aggiungere con la pipetta (5.2.)
esattamente 5 ml della soluzione di acetato di magnesio (4.1.).
Evaporare il contenuto di entrambe le capsule (A e B) fino ad
essiccazione sul bagnomaria bollente (5.6.).
Introdurre entrambe le capsule nella stufa (5.4.), mantenuta a 102
(Più o Meno) 1C, per 30 minuti.
Scaldare la capsula A col suo contenuto su una fiamma bassa o sotto
una lampada a raggi I/R o su una piastra scaldante finchè il residuo
è completamente carbonizzato, facendo attenzione a che non vada in
fiamme.
Trasferire entrambe le capsule (A e B) nel forno elettrico (5.5.),
mantenuto a 825 (Più o Meno) 25C e scaldare per almeno 1 ora
finchè tutto il carbone è scomparso dalla capsula A. Lasciar
raffreddare un pò entrambe le capsule, metterle nell'essiccatore
(5.7.). Quando hanno raggiunto la temperatura ambiente nella stanza
delle bilance, pesare con l'approssimazione di 0,1 mg.
Ripetere le operazioni di riscaldamento per circa 30 minuti, nel
forno elettrico, raffreddando e pesando, finchè la massa resta
costante entro
la variazione di 1 mg oppure comincia ad aumentare. Registrare la
massa minore.
7. ESPRESSIONE DEI RISULTATI.
7.1.
Metodo di calcolo.
Il tenore in "ceneri (P2O5 compreso)" del campione, come percentuale
in massa, è dato dalla formula:
(m1 - m2) - (m3 - m4)
----------------------- x 100
m0
dove
m0 è la massa, in grammi, della porzione di campione;
m1 è la massa, in grammi, della capsula A e residuo;
m2 è la massa, in grammi, della capsula preparata A;
m3 è la massa, in grammi, della capsula B e residuo;
m4 è la massa, in grammi, della capsula preparata B.
Calcolare il risultato finale con l'approssimazione di 0,01%.
7.2. Ripetibilità.
La differenza fra i risultati di due determinazioni eseguite
contemporaneamente od in successione rapida sullo stesso campione,
dallo stesso analista, nelle stesse condizioni, non deve superare 0,1
g per 100 g di prodotto. Tale intervallo di ripetibilità deve essere
ottenuto nel 95% dei casi in cui il metodo è applicato
correttamente.

Metodo 5 - DETERMINAZIONE DELLE CENERI
(P2O5 COMPRESO)

1. SCOPO E CAMPO D'APPLICAZIONE.
Il presente metodo determina il contenuto di ceneri nelle seguenti
sostanze:
- caseine presamiche.
2. DEFINIZIONE.
Per contenuto di "ceneri (P2O5 compreso)" si intende il contenuto di
ceneri determinato col metodo appresso specificato.
3. PRINCIPIO.
Una porzione del campione viene calcinata a 825 (Più o Meno) 25C
fino a peso costante. Il residuo viene determinato per pesata e
calcolato come percentuale in peso del campione.
4. APPARECCHIATURA.
4.1. Bilancia analitica.
4.2. Capsule di silice o di platino, avente un diametro di 70 mm ed
una altezza da 25 a 50 mm.
4.3. Forno elettrico a circolazione d'aria, atto ad essere mantenuto
a 825 (Più o Meno) 25C.
4.4. Essiccatore contenente gel di silice attivato di recente, con un
indicatore del contenuto d'acqua, oppure un essiccante equivalente.
5. PROCEDIMENTO.
5.1. Preparazione del campione per la prova.
Come descritto nella sezione 1.2. delle disposizioni generali.
5.2. Preparazione della capsula.
Scaldare la capsula (4.2.) nel forno elettrico (4.3.), mantenuto a
825 (Più o Meno) 25C per 30 minuti. Far raffreddare un pò la
capsula e metterla nell'essiccatore (4.4.). Quando ha raggiunto la
temperatura ambiente nella stanza delle bilance, pesare con
l'approssimazione di 0,1 mg.
5.3. Porzione di campione.
Pesare con l'approssimazione di 0,1 mg, nella capsula preparata,
circa 3 g del campione (5.1.).
5.4. Determinazione.
Scaldare la capsula con il suo contenuto su una fiamma bassa o sotto
una lampada a raggi I/R o su una piastra scaldante fino a che la
porzione è completamente calcinata, facendo attenzione che non si
incendi.
Trasferire la capsula nel forno elettrico (4.3.) mantenuto a 825
(Più o Meno) 25C e scaldare per almeno un'ora finchè tutto il
residuo carbonioso è scomparso dal piatto. Far raffreddare un pò la
capsula e metterla nell'essiccatore (4.4.). Quando ha raggiunto la
temperatura ambiente nella stanza delle bilance, pesare con
l'approssimazione di 0,1 mg.
Ripetere le operazioni di riscaldamento nel forno elettrico (4.3.),
per circa 30 minuti raffreddando e pesando, finchè la massa non
resta costante entro una variazione di 1 mg oppure non comincia ad
aumentare. Registrare la massa minore.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI.
6.1. Metodo di calcolo e formula.
Il tenore in "ceneri (P2O5 compreso)" del campione, come percentuale
in massa, è dato dalla formula:
m1 - m2
---------- x 100
m0
dove
m0 è la massa, in grammi, della porzione di campione;
m1 è la massa, in grammi, della capsula e del residuo;
m2 è la massa, in grammi, della capsula preparata.
Calcolare il risultato finale con l'approssimazione di 0,01%.
6.2. Ripetibilità.
La differenza tra i risultati di due determinazioni effettuate
simultaneamente o in successione rapida sullo stesso campione, dallo
stesso analista, nelle stesse condizioni, non deve superare 0,15 g di
ceneri per 100 g di prodotto. Tale intervallo di ripetibilità deve
essere ottenuto nel 95% dei casi in cui il metodo è applicato
correttamente.

Metodo 6 - DETERMINAZIONE DEL PH

1. SCOPO E CAMPO D'APPLICAZIONE.
Il presente metodo determina il pH delle seguenti sostanze:
- caseinati.
2. DEFINIZIONE.
Per pH dei caseinati si intende il pH, a 20C, di una soluzione
acquosa di caseinati, determinato col metodo appresso specificato.
3. PRINCIPIO.
La determinazione elettrometrica del pH di una soluzione acquosa di
caseinati facendo uso di un pH-metro.
4. REATTIVI.
L'acqua usata nella preparazione dei reattivi o nel procedimento (6)
deve essere distillata di recente e protetta dall'assorbimento di
diossido di carbonio.
4.1. Soluzioni tampone, per la taratura del pH-metro (5.2.).
Due soluzioni tampone standard con valori di pH a 20C, noti alla
seconda cifra decimale e delimitanti il pH del campione in analisi,
ad esempio soluzione di tampone ftalato avente un pH di circa 4 e
soluzione di tampone borace avente un pH di circa 9.
5. APPARECCHIATURA.
5.1. Bilancia, con la precisione di 0,1 g.
5.2. pH-metro, con una sensibilità minima di 0,05 unità di pH, con
un idoneo elettrodo calibrato ad esempio elettrodo di vetro o
elettrodo a calomelano o altro elettrodo di riferimento.
5.3. Termometro, con una precisione di 0,5C.
5.4. Beuta, della capacità di 100 ml provvista di tappo di vetro
smerigliato.
5.5. Becher, avente una capacità di 50 ml.
5.6. Agitatore.
5.7. Becher, per l'agitatore (5.6.) avente una capacità di almeno
250 ml.
6. PROCEDIMENTO.
6.1. Preparazione del campione.
Come descritto nella sezione 1.2. delle disposizioni generali.
6.2. Determinazione.
6.2.1. Taratura del pH-metro.
Regolare la temperatura delle soluzioni tampone (4.1.) a 20C e
tarare il pH-metro secondo le istruzioni del fabbricante.

I. DISPOSIZIONI GENERALI

1. ISTRUZIONI AMMINISTRATIVE.
1.1. Personale.
La campionatura dev'essere effettuata da una persona qualificata
delegata a questo fine in base alle norme in vigore nello Stato
membro. (vedi D.P.R. n. 1980/327 - All. A).
1.2. Sigillatura ed etichettatura dei campioni
Ciascun campione ufficiale dev'essere sigillato ed etichettato sul
luogo del prelievo e identificato secondo le norme in vigore nello
Stato membro. (vedi D.P.R. n. 1980/327 - All. A).
1.3. Prelevamento di campioni identici.
Prelevare, per le analisi, un campione globale del peso non inferiore
ad 1 kg da suddividere in 4 o 5 campioni equivalenti (aliquote di
campione globale).
I campioni devono essere inviati al laboratorio non appena possibile
dopo la campionatura.
1.4. Relazione.
I campioni devono essere accompagnati da un verbale di prelievo che
deve essere redatto secondo le norme vigenti.
2. APPARECCHI PER LA CAMPIONATURA.
Requisiti.
Le attrezzature per il campionamento non devono provocare nel
campione alterazioni che possano compromettere il risultato
dell'analisi. Le attrezzature devono essere robuste abbastanza da
impedire un'utilizzazione che modifichi i risultati.
È raccomandato l'uso dell'acciaio inossidabile. Le superfici di tali
attrezzature devono essere levigate, senza crepe e tutti gli angoli
devono essere arrotondati. Le attrezzature per il campionamento
devono essere tali da tener conto dei requisiti di ciascun prodotto
da campionare.
3. CONTENITORI DEL CAMPIONE.
Requisiti.
I contenitori ed i coperchi del campione devono essere di materiale e
di costruzione tale da proteggere adeguatamente il campione e da non
provocare nel campione stesso alterazioni che possano compromettere i
risultati delle successive analisi o esami. Materiali idonei sono il
vetro, alcuni metalli ed alcune materie plastiche. Di preferenza i
contenitori devono essere opachi. Se gli stessi contenitori sono
trasparenti, essi, una volta riempiti, dovranno essere conservati al
riparo dalla luce.
Contenitori e coperchi devono essere puliti ed asciutti. La forma e
la capacità del contenitore devono essere adeguate ai requisiti che
sono stati definiti per il prodotto da analizzare.
Possono essere usati contenitori di plastica monouso, compresi i
fogli di alluminio oppure sacchetti di plastica, con adeguati mezzi
di chiusura.
I contenitori diversi dai sacchetti di plastica devono essere
accuratamente chiusi con un opportuno sistema di chiusura con un
tappo a vite metallico o di materia plastica avente, se necessario,
un giunto a tenuta in materiale plastico insolubile, non assorbente e
impermeabile ai grassi e tale da non alterare l'odore, l'aroma, le
proprietà o la composizione del campione.
Se vengono usati tappi, questi ultimi devono essere fabbricati o
coperti con materiale non assorbente e inodore.
4. TECNICA DI CAMPIONATURA.
Il contenitore del campione deve essere chiuso immediatamente dopo la
campionatura.
5. CONSERVAZIONE DEI CAMPIONI.
Le temperature di conservazione raccomandate prima del trasporto dei
campioni dei vari tipi di caseina e di caseinati non devono superare
i 25C.
6. TRASPORTO DEI CAMPIONI.
I campioni devono essere trasportati al laboratorio che effettua
l'analisi al più presto (preferibilmente entro 24 ore) dopo la
campionatura. Durante il trasporto devono essere prese precauzioni
per evitare esposizioni ad odori contaminanti, a luce solare diretta
ed a temperature superiori ai 25C.

II Metodo - PRELEVAMENTO DI CAMPIONI DI CASEINE
E DI CASEINATI

1. OGGETTO: CAMPO DI APPLICAZIONE.
Il presente metodo descrive il prelevamento di campioni per le
analisi chimiche delle seguenti sostanze:
- caseine acide alimentari
- caseine presamiche alimentari
- caseinati alimentari.
2. ATTREZZATURA.
Vedasi la sezione 2 delle disposizioni generali.
2.1. Dispositivi di prelievo aventi una lunghezza sufficiente da
raggiungere il fondo del contenitore del prodotto. Sono adeguati i
dispositivi di prelievo conformi alla descrizione fornita nella parte
III dell'Allegato II alla presente direttiva.
2.2. Cucchiaino o spatola.
A paletta larga.
2.3. Contenitore del campione.
Vedasi sezione 3 delle disposizioni generali.
3. PROCEDIMENTO.
3.1. Generalità.
Si deve cercare di ridurre al minimo l'assorbimento di umidità
atmosferica da parte del prodotto durante o prima della campionaura
per l'analisi. Il contenitore del prodotto deve essere accuratamente
richiuso dopo la campionatura.
3.2.1. Prelevamento di campioni.
Deve essere prelevato un campione globale di peso non inferiore a
1000 g.
Il dispositivo di prelievo pulito ed asciutto deve essere fatto
passare attraverso il prodotto, se necessario inclinando o coricando
il contenitore sul lato. La fessura deve essere orientata verso il
basso e la penetrazione deve avvenire in maniera costante. Quando il
dispositivo di prelievo ha raggiunto il fondo del contenitore, esso
deve essere rotato di 180, ritirato e il contenuto versato nel
contenitore del campione. Devono essere effettuati uno o più
prelievi in modo da ottenere un campione globale non inferiore a 1000
g. Il campione globale va suddiviso in 4 o 5 campioni, ciascuno di
peso non inferiore a 200 g, da racchiudere in idonei contenitori. I
contenitori devono essere chiusi immediatamente. Questo prelievo deve
essere effettuato su una stessa partita.
3.2.2. Prelievo di campioni di prodotti confezionati in piccoli
contenitori destinati alla vendita.
Il campione globale sarà costituito da un numero di confezioni
originali tali da poter suddividere le stesse in 4 o 5 campioni di
peso non inferiore a 200 g ciascuno.
3.2.3. Conservazione e trasporto del campione.
Vedasi le sezioni 5 e 6 delle disposizioni generali.

III. DISPOSIZIONI PER IL PRELIEVO DELLE CASEINE
E DEI CASEINATI IN LOTTO

1. TIPI DI DISPOSITIVI DI PRELIEVO.
Tipo A: lungo
Tipo B: corto
(Vedasi fig. 1)
2. MATERIALI.
Paletta e asticciola, cucchiaino o spatola devono essere di metallo
levigato, preferibilmente di acciaio inossidabile.
L'impugnatura del tipo lungo dev'essere preferibilmente di acciaio
inossidabile.
Il dispositivo di prelievo del tipo corto deve avere una manopola di
tipo staccabile, in legno o in plastica, munita di una presa a
baionetta nella paletta.
3. COSTRUZIONE.
3.1. La dimensione, il materiale e la finitura devono essere tali da
consentire una facile pulitura del dispositivo di prelievo.
3.2. L'estremità sporgente della paletta del tipo A dev'essere
sufficientemente affilato da servire come raschietto.
3.3. La parte della paletta dev'essere sufficientemente acuminata in
modo da facilitare la campionatura.
4. DIMENSIONI PRINCIPALI.
I dispositivi di prelievo devono essere conformi alle dimensioni
riportate nella tabella seguente (con tolleranze del (Più o Meno)
10%):
Tipo A Tipo B
lungo corto
(mm) (mm)
Lunghezza della lama . . . . . . . . . 800 400
Spessore del metallo della lama . . . 1 a 2 1 a 2
Diametro interno della lama al punto . 18 32
Diametro interno della lama alla
manopola o all'asticciola . . . . . 22 28
Larghezza della fessura al punto di
introduzione . . . . . . . . . . . . 4 20
Larghezza della fessura alla manopola
o all'asticciola . . . . . . . . . . 14 14

5. NOTA SULL'USO DEI DISPOSITIVI DI PRELIEVO.
5.1.
Con polveri tendenti all'adesione, i dispositivi di prelievo possono
essere inseriti verticalmente. I dispositivi di tipo A vengono
riempiti completamente mediante rotazione e possono essere ritirati
verticalmente. I dispositivi di tipo B vengono già automaticamente
riempiti durante l'inserimento, ma devono essere estratti in
posizione obliqua in modo da prevenire perdite dall'estremità
inferiore.
5.2. Nel caso di una polvere più o meno scorrevole, i contenitori
devono essere inclinati e i dispositivi devono essere inseriti quasi
orizzontalmente con la fessura verso il basso ed estratti con la
fessura verso l'alto.


Parte di provvedimento in formato grafico