Serie Generale n. 80 del 7-4-1994
DECRETI, DELIBERE E ORDINANZE MINISTERIALI
MINISTERO DELLA SANITA'
MINISTERO DELLA SANITA'
DECRETO 19 febbraio 1994
Attuazione delle direttive 89/360, 91/499 e 91/687 CEE che modificano la direttiva 64/432/CEE relativa a problemi di polizia sanitaria in materia di scambi intracomunitari di animali delle specie bovina e suina. (GU Serie Generale n.80 del 07-04-1994)

IL MINISTRO DELLA SANITÀ
Visto il testo unico delle leggi sanitarie approvato con regio
decreto 27 luglio 1934, n. 1265;
Visto il regolamento di polizia veterinaria dell'8 febbraio 1954,
n. 320;
Vista la legge 30 aprile 1976, n. 397;
Visto il decreto del Presidente della Repubblica 1 marzo 1992, n.
230;
Visto il decreto legislativo 30 gennaio 1993, n. 28;
Viste le direttive 89/360, 91/499 e 91/687 CEE, relative a problemi
di polizia sanitaria in materia di scambi intracomunitari di animali
delle specie bovina e suina;
In applicazione dell'art. 20 della legge 16 aprile 1987, n. 183;
Decreta:
Art. 1.
1. Alla legge 3 aprile 1976, n. 397, modificata dal decreto del
Presidente della Repubblica 1 marzo 1992, n. 230:
a) all'art. 3, lettera c), punto 2, sono soppresse le parole "da
peste suina";
b) all'art. 3, dopo la lettera j), è aggiunta la lettera k) con
il seguente testo: "gli animali della specie suina non devono
provenire da una azienda o da una regione in cui siano applicate
misure restrittive nei riguardi della peste suina classica ai sensi
del decreto 18 ottobre 1991, n. 427";
c) all'art. 7, comma 2, le parole "suini di peso superiore a 25
chilogrammi" sono sostituite dalle parole "suini riproduttori di età
superiore a quattro mesi".

Art. 2.
1. Al decreto del Presidente della Repubblica 1 marzo 1992, n.
230:
a) all'art. 1, comma 1, lettera i), punto 2), sono soppresse le
parole "di peste suina";
b) all'art. 1, comma 2), sono abrogate le lettere o), p) e q);
c) è abrogato l'art. 4.

Art. 3.
1. Agli allegati di cui al decreto del Presidente della Repubblica
1 marzo 1992, n. 230:
a) il testo dell'allegato A, punto II-A, lettera c), sottolettera
ii), è sostituito dal seguente:
"ii) sono controllati annualmente per stabilire l'assenza di
brucellosi mediante tre prove dell'anello, oppure tre saggi ELISA su
latte, effettuati ad intervalli di almeno tre mesi o mediante due
prove dell'anello, o due saggi ELISA su latte, effettuati ad
intervalli di almeno tre mesi ed una prova sierologica (prova di
sieroagglutinazione, prova all'antigene di brucella tamponato, prova
di plasmoagglutinazione o saggio singolo ELISA su sangue) effettuata
non meno di sei settimane dopo la seconda prova dell'anello od il
secondo saggio ELISA sul latte. Se non vengono effettuate le prove
dell'anello o il saggio ELISA sul latte, si devono effettuare ogni
anno due prove sierologiche (prova di sieroagglutinazione, prova
dell'anelo di latte su plasma sanguigno, prova di microagglutinazione
o saggio singolo ELISA su sangue) ad un intervallo non inferiore a
tre mesi e non superiore a sei mesi.
Se in uno Stato membro o in una regione di uno Stato membro in cui
tutti gli allevamenti bovini sono sottoposti ad operazioni ufficiali
di lotta contro la brucellosi la percentuale degli allevamenti di
bovini infetti non supera l'1%, è sufficiente effettuare ogni anno
due prove dell'anello o due saggi ELISA su latte ad intervalli di
almeno tre mesi, oppure una prova sierologica (prova di
sieroagglutinazione, prova all'antigene di brucella tamponato, prova
di plasmoagglutinazione o saggio singolo ELISA su sangue).
In caso di controllo mediante prove dell'anello sulle cisterne gli
esami di cui ai commi precedenti devono essere raddoppiati e gli
intervalli tra le prove devono essere ridotti della metà;";
b) al titolo dell'allegato G capitolo II sono aggiunte le
seguenti parole "e della brucellosi bovina";
c) all'allegato G, il punto C è così sostituito:
"C. Saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) per la ricerca
della leucosi bovina enzootica e della brucellosi bovina.
1. Per procedere al saggio ELISA occorrono le attrezzature ed i
reattivi qui indicati:
a) micropiastre, cuvette o qualsiasi altro recipiente per la fase
solida;
b) l'antigene è fissato sulla fase solida con o senza l'ausilio
di anticorpi leganti policlonali o monoclonali. Se la fase solida è
rivestita direttamente dall'antigene, tutti i campioni in esame che
presentano reazione positiva devono essere riesaminati facendo
riferimento all'antigene di controllo nel caso dell'EBL. L'antigene
di controllo dovrebbe essere identico all'antigene in questione,
fatta eccezione per gli antigeni del virus della leucosi bovina. Se
gli anticorpi leganti sono distribuiti sulla fase solida, gli
anticorpi non devono reagire ad antigeni diversi da quelli del virus
della leucosi bovina;
c) il fluido biologico da esaminare;
d) controlli positivi e controlli negativi corrispondenti;
e) il coniugato;
f) un substrato adatto all'enzima impiegato;
g) una soluzione di arresto, se necessario;
h) soluzioni per la diluizione dei campioni per la preparazione
dei reattivi e per il lavaggio;
i) un sistema di lettura corrispondente al substrato impiegato.
2. Standardizzazione e sensibilità della prova:
a) Per la leucosi bovina enzootica la sensibilità del saggio
ELISA deve essere di livello tale che il siero E4 risulti positivo
quando è diluito 10 volte (campioni di siero) o 250 volte (campioni
di latte più della diluizione ottenuta da singoli campioni presi
congiuntamente).
Nelle prove in cui i campioni (siero e latte) sono esaminati
individualmente, il siero E4 diluito nella proporzione di 1:10 (nel
siero negativo) o di 1:250 (nel latte negativo) deve presentare una
reazione positiva quando è esaminato in una diluizione di prova
uguale a quella impiegata per le prove individuali. Gli istituti
ufficiali indicati nel punto A.2 sono responsabili del controllo di
qualità del metodo ELISA, in particolare per determinare per ogni
lotto di produzione, il numero di campioni da mettere in comune in
funzione del titolo ottenuto per il siero E4.
Il siero E4 è fornito dal laboratorio veterinario nazionale di
Copenaghen.
b) Per la brucellosi:
1) i campioni di latte sfuso vengono classificati negativi se
danno una reazione inferiore al 50% di quella data da una diluizione:
1:10.000 del secondo siero standard internazionale della brucellosi
diluito in latte negativo;
2) i campioni singoli di siero vengono classificati negativi se
danno una reazione inferiore al 10% di quella data da una diluizione
di 1:200 del secondo siero standard internazionale della brucellosi
diluito in soluzione salina o qualsiasi altra soluzione riconosciuta
secondo la procedura prevista all'art. 12 previo parere del comitato
scientifico veterinario.
Gli standard ELISA della brucellosi devono essere quelli
specificati nell'allegato C, punti A.1 e A.2 (da usare alle
diluizioni indicate sull'etichetta).
3. Condizioni di impiego del saggio ELISA per la ricerca della
leucosi bovina enzootica e della brucellosi bovina:
Il metodo ELISA può essere utilizzato su un campione di latte o di
siero prelevato dal latte proveniente da un'azienda in cui almeno il
30% delle vacche da latte sono in lattazione.
In caso di ricorso alla facoltà precitata devono essere prese
misure per assicurare una corrispondenza tra i campioni prelevati e
gli animali da cui provengono il latte o i sieri esaminati.
In caso di risultato positivo su uno dei campioni, sono applicabili
le disposizioni previste nell'allegato A, capitolo II, punto A.1 c)
i) per quanto concerne la brucellosi bovina e nel presente
all'allegato, capitolo I, punto A.1 per quanto concerne la EBL.";
d) all'allegato F, modello I, al punto V, il testo della lettera
e) è sostituito dal seguente:
" e) - sono stati mantenuti negli ultimi dodici mesi (5) o, se di
età inferiore a dodici mesi (5), dalla nascita, in un allevamento
indenne dalla leucosi bovina enzootica (2) (11),
- hanno reagito negativamente entro il termine prescritto di
trenta giorni (5) ad un esame individuale (2) per la ricerca della
leucosi bovina enzootica (2), (11),
- sono destinati all'ingrasso (11)".
La nota a piè di pagina (11) è sostituita dalla nota seguente:
"(11) questa eccezione è consentita solo per i bovini di età
inferiore a trenta mesi destinati all'ingrasso, semprechè gli
animali
- provengano da un allevamento in cui nessun caso di leucosi
bovina enzootica sia stato notificato e confermato negli ultimi due
anni;
- rechino un contrassegno distintivo e siano sottoposti ad un
controllo particolare nel Paese di destinazione";
e) all'allegato F, modello III, punto V, è soppressa la lettera
c) e le lettere d), e), f) e g), diventano rispettivamente c), d), ed
f).

Art. 4.
1. Il presente decreto entra in vigore il giorno successivo a
quello della sua pubblicazione nella Gazzetta Ufficiale della
Repubblica italiana.
Roma, 19 febbraio 1994
Il Ministro: GARAVAGLIA
Registrato alla Corte dei conti l'11 marzo 1994
Registro n. 1 Sanità, foglio n. 13