Serie Generale n. 24 del 30-1-1997
DECRETI, DELIBERE E ORDINANZE MINISTERIALI
MINISTERO DELLA SANITA'
MINISTERO DELLA SANITA'
DECRETO 6 dicembre 1996
Modificazioni degli allegati II, parte A, punto 4, e III, parte A, punto 5 (metodi analitici), del decreto legislativo 17 marzo 1995, n. 194, in attuazione della direttiva della Commissione europea 96/46/CE. (GU Serie Generale n.24 del 30-01-1997)

IL MINISTRO DELLA SANITÀ
Visto il decreto legislativo 17 marzo 1995, n. 194, relativo alla
"Attuazione della direttiva 91/414/CEE in materia di immissione in
commercio di prodotti fitosanitari";
Vista la direttiva del Consiglio 91/414/CEE del 15 luglio 1991,
relativa all'immissione in commercio dei prodotti fitosanitari;
Tenuto conto della direttiva 96/46/CE della Commissione del 16
luglio 1996, recante modifica agli allegati II, parte A, punto 4, e
III, parte A, punto 5, concernenti "Metodi analitici", degli allegati
II e III della direttiva 91/414/CEE;
Visto l'art. 21 del decreto legislativo 17 marzo 1995, n. 194;
Ritenuto di dover procedere all'adeguamento alle nuove disposizioni
comunitarie degli allegati II e III del citato decreto legislativo 17
marzo 1995, n. 194;
E M A N A
il seguente decreto:
Art. 1.
1. L'allegato II, parte A, punto 4, del decreto legislativo 17
marzo 1995, n. 194, è modificato come specificato nell'allegato 1
del presente decreto.
2. L'allegato III, parte A, punto 5, del decreto legislativo 17
marzo 1995, n. 194, è modificato come specificato nell'allegato 2
del presente decreto.
Il presente decreto sarà pubblicato nella Gazzetta Ufficiale della
Repubblica italiana.
Roma, 6 dicembre 1996
Il Ministro: BINDI
Registrato alla Corte dei conti il 27 dicembre 1996
Registro n. 1 Sanità, foglio n. 360

ALLEGATO 1
MODIFICA DELL'ALLEGATO II, PARTE A, PUNTO 4, DEL DECRETO LEGISLATIVO
17 MARZO 1995, N. 194, IN ATTUAZIONE DELLA DIRETTIVA 96/46/CE.
4. METODI ANALITICI.
Introduzione.
Il presente capitolo verte esclusivamente sui metodi analitici
richiesti per il controllo post-registrazione e la sorveglianza.
Per i metodi analitici impiegati ai fini dell'elaborazione di dati
in conformità della presente direttiva, o per altri scopi, il
richiedente deve giustificare il metodo utilizzato; se necessario,
verranno messe a punto apposite istruzioni per questo tipo di metodi,
sulla base degli stessi requisiti prescritti per i metodi impiegati a
fini di controllo post-registrazione e di sorveglianza.
Devono essere fornite descrizioni di metodi comprendenti
informazioni particolareggiate sulle attrezzature e i materiali
utilizzati e le condizioni necessarie.
Ove possibile, questi metodi devono essere semplici, economici e
basati sull'impiego di apparecchiature comunemente disponibili.
Ai fini del presente allegato si applicano le seguenti
definizioni:
Impurezze: qualsiasi componente diverso dalla sostanza attiva
pura presente nella sostanza attiva prodotta (compresi gli isomeri
inattivi) risultante dal procedimento di fabbricazione o dalla
degradazione durante la conservazione.
Impurezze rilevanti: impurezze aventi rilevanza tossicologica e/o
ecotossicologica o ambientale.
Impurezze significative: impurezze contenute nella sostanza
attiva prodotta in ragione di X 1 g/Kg.
Metaboliti: metaboliti, compresi i prodotti risultanti dalla
degradazione o dalla reazione della sostanza attiva.
Metaboliti rilevanti: metaboliti aventi rilevanza tossicologica
e/o ecotossicologica o ambientale.
Devono essere forniti, su richiesta i seguenti campioni:
i) norme di analisi della sostanza attiva pura;
ii) campioni della sostanza attiva prodotta;
iii) norme di analisi dei metaboliti rilevanti e/o di altri
componenti compresi nella definizione di residuo;
iv) se disponibili, campioni delle sostanze di riferimento delle
impurezze rilevanti.
4.1. Metodi per l'analisi della sostanza attiva prodotta.
Si applicano in merito le seguenti definizioni:
i) Specificita': la specificità e la capacità di un metodo di
distinguere dalle altre la sostanza oggetto dell'analisi.
ii) Linearita': per linearità si intende la capacità del
metodo, in una data gamma, di ottenere una correlazione lineare
accettabile tra i risultati e la concentrazione della sostanza da
analizzare nei campioni.
iii) Accuratezza: l'accuratezza di un metodo è il grado in cui
il valore determinato della sostanza da analizzare in un campione
corrisponde al valore di riferimento accettato (per esempio in
riferimento a ISO 5725).
iv) Precisione: la precisione è la concordanza tra risultati di
prove indipendenti ottenuti nelle condizioni prescritte.
Ripetibilita': precisione in condizioni di ripetibilità, cioè in
condizioni in cui i risultati di prove indipendenti sono ottenuti con
lo stesso metodo su materiale di prova identico, nello stesso
laboratorio, dallo stesso operatore con la stessa attrezzatura in
brevi intervalli di tempo.
La riproducibilità non è richiesta per la sostanza attiva
prodotta (per la definizione di riproducibilità vedi ISO 5725).
4.1.1. Devono essere forniti e descritti per intero i metodi per
la determinazione della sostanza attiva pura nella sostanza attiva
prodotta, conformemente alla specifica presentata a corredo della
domanda di inclusione nell'allegato 1 della direttiva 91/414/CEE.
Deve essere segnalata l'applicabilità di metodi CIPAC esistenti.
4.1.2. Devono essere indicati anche i metodi per la
determinazione, nella sostanza attiva prodotta, di impurezze
significative e/o rilevanti e di additivi (per esempio agenti
stabilizzanti).
4.1.3. Specificità, linearità, accuratezza e ripetibilità.
4.1.3.1. Deve essere dimostrata e indicata la specificità dei
metodi presentati. Dev'essere inoltre determinato il grado
d'interferenza di altre sostanze presenti nella sostanza attiva
prodotta (per esempio isomeri, impurezze o additivi).
Mentre le interferenze dovute ad altre componenti possono essere
identificate come errori sistematici nella valutazione
dell'accuratezza dei metodi proposti per la determinazione della
sostanza attiva pura nella sostanza attiva prodotta, si deve fornire
una spiegazione per ogni eventuale interferenza riscontrata che
contribuisca per più del 3% alla quantità totale determinata.
Il grado di interferenza deve essere calcolato anche per i metodi
di determinazione delle impurezze.
4.1.3.2. Deve essere determinata e indicata la linearità dei
metodi proposti su una gamma adeguata. Per la determinazione della
sostanza attiva pura, la gamma della calibrazione deve estendere (di
almeno il 20%) il tenore nominale più elevato e più basso della
sostanza da analizzare nelle soluzioni analitiche pertinenti. Le
doppie calibrazioni devono essere effettuate in 3 o più
concentrazioni. Alternativamente, sono accettabili 5 concentrazioni,
ciascuna come misura unica. Le relazioni presentate devono includere
l'equazione della linea di calibrazione ed il coefficiente di
correlazione, nonchè la documentazione dell'analisi rappresentativa
e correttamente etichettata, per esempio i cromatogrammi.
4.1.3.3. L'accuratezza è richiesta per i metodi di determinazione
della sostanza attiva pura e delle impurezze significative e/o
rilevanti nella sostanza attiva prodotta.
4.1.3.4. Per la ripetibilità nella determinazione della sostanza
attiva pura, in linea di massima occorre un minimo di 5
determinazioni. Deve essere indicata la deviazione standard relativa
(% RSD). I valori fuori scala identificati per mezzo di un metodo
appropriato (per esempio Dixons o Grubbs) possono essere eliminati.
L'eliminazione dei valori fuori scala deve essere chiaramente
indicata. Si tenterà di spiegare perchè si sono verificati singoli
valori fuori scala.
4.2. Metodi per la determinazione dei residui.
I metodi devono essere atti a determinare la sostanza attiva e/o i
metaboliti rilevanti. Per ogni metodo e per ogni matrice
rappresentativa, si devono determinare in via sperimentale e indicare
la specificità, la precisione, il recupero ed il limite di
determinazione.
In linea di massima, i metodi proposti per la determinazione dei
residui dovrebbero essere metodi multiresiduo. Un metodo multiresiduo
standard deve essere valutato e indicato come idoneo alla
determinazione dei residui. Se i metodi proposti non sono metodi
multiresiduo, o non sono compatibili con tali metodi, dovrà essere
proposto un metodo alternativo. Qualora ne consegua un eccesso di
metodi per i singoli composti, potrà essere accettato un "metodo
medio comune".
Ai fini del presente allegato si applicano le seguenti
definizioni:
i) Specificita': la specificità è la capacità di un metodo di
distinguere la sostanza oggetto dell'analisi misurata da altre
sostanze.
ii) Precisione: la precisione è la concordanza tra risultati di
prove indipendenti ottenuti nelle condizioni prescritte.
Ripetibilita': precisione in condizioni di ripetibilità, cioè in
condizioni in cui i risultati di prove indipendenti sono ottenuti con
lo stesso metodo su materiale di prova identico, nello stesso
laboratorio, dallo stesso operatore con la stessa attrezzatura in
brevi intervalli di tempo.
Riproducibilita': poichè la riproducibilità, quale definita
nelle pubblicazioni pertinenti (per esempio in ISO 5725) non è
applicabile ai metodi per la determinazione dei residui, la
riproducibilità nel contesto della presente direttiva implica una
convalida della ripetibilità del recupero, da matrici
rappresentative e a livelli rappresentativi, da parte di almeno un
laboratorio indipendente da quello che aveva convalidato inizialmente
lo studio (questo laboratorio indipendente può tuttavia appartenere
alla stessa societa') (convalida indipendente in laboratorio).
iii) Recupero: per recupero si intende la percentuale di sostanza
attiva o di metabolita rilevante originariamente aggiunta ad un
campione della matrice appropriata, che non contenga un livello
misurabile della sostanza da analizzare.
iv) Limite di determinazione: il limite di determinazione (spesso
designato come limite di quantificazione) è la minima concentrazione
di sostanza da analizzare alla quale si ha un recupero medio
accettabile (normalmente il 70-110% con una deviazione standard
relativa preferibilmente del W 20%. In certi casi giustificati
possono essere accettati tassi di recupero medi inferiori o superiori
nonchè una deviazione standard relativa più elevata).
4.2.1. Residui nei o sui vegetali, prodotti vegetali, prodotti
alimentari (di origine vegetale e animale), alimenti per animali.
I metodi presentati devono essere idonei alla determinazione di
tutti i componenti che rientrano nella definizione di residuo
presentata conformemente al punto 6, paragrafi 6.1 e 6.2, affinchè
gli Stati membri possano accertare il rispetto dei LRM stabiliti o
determinare i residui eliminabili.
La specificità dei metodi deve permettere di determinare tutti i
componenti che rientrano nella definizione di residuo, se necessario
con un metodo di conferma supplementare.
La ripetibilità deve essere determinata e indicata. Le porzioni
analitiche identiche per la prova possono essere preparate in base ad
un campione comune trattato sul terreno, contenente i residui
riscontrati. In via alternativa le porzioni analitiche identiche
possono essere preparate in base ad un campione comune non trattato,
con aliquote arricchite nella misura richiesta.
Devono essere indicati i risultati di una convalida ad opera di un
laboratorio indipendente.
Il limite di determinazione, compreso il recupero individuale e
medio, deve essere determinato e indicato. La deviazione standard
relativa globale, come pure la deviazione standard relativa per ogni
livello di arricchimento devono essere determinate in via
sperimentale e riferite.
4.2.2. Residui nel suolo.
Devono essere presentati i metodi di analisi del suolo per il
composto originario e/o i metaboliti rilevanti.
La specificità dei metodi deve permettere di determinare il
composto originario e/o i metaboliti rilevanti, se necessario con un
metodo di conferma supplementare.
La ripetibilità, il recupero ed il limite di determinazione,
compresi il recupero individuale e quello medio, devono essere
determinati e indicati. La deviazione standard relativa globale, come
pure la deviazione standard relativa per ogni livello di
arricchimento devono essere determinate in via sperimentale e
riferite.
Il limite di determinazione proposto non deve superare una
concentrazione allarmante in caso di esposizione di organismi non
bersaglio o per eventuali effetti fitotossici. Di norma, il limite di
determinazione non dovrebbe essere superiore a 0,05 mg/kg.
4.2.3. Residui nell'acqua (compresa l'acqua potabile, le acque
sotterranee e le acque superficiali).
Devono essere presentati i metodi di analisi dell'acqua per il
composto originario e/o i metaboliti rilevanti.
La specificità dei metodi deve permettere di determinare il
composto originario e/o i metaboliti rilevanti, se necessario con un
metodo di conferma supplementare.
La ripetibilità, il recupero ed il limite di determinazione,
compresi il recupero individuale e quello medio, devono essere
determinati e indicati. La deviazione standard relativa globale, come
pure la deviazione standard relativa per ogni livello di
arricchimento devono essere determinate in via sperimentale e
riferite.
Il limite di determinazione proposto per l'acqua potabile non deve
superare 0,1 mcg/l. Per le acque superficiali, esso non deve superare
una concentrazione i cui effetti sugli organismi non bersaglio siano
considerati inaccettabili in base alle disposizioni dell'allegato VI.
4.2.4. Residui nell'aria.
Devono essere indicati i metodi per la determinazione della
sostanza attiva e/o dei metaboliti rilevanti, formatisi durante o
poco dopo l'applicazione, nell'aria, a meno che non si possa
dimostrare l'improbabilità dell'esposizione di operatori o altre
persone presenti.
La specificità dei metodi deve permettere di determinare il
composto originario e/o i metaboliti rilevanti, se necessario con un
metodo di conferma supplementare.
La ripetibilità, il recupero ed il limite di determinazione,
compresi il recupero individuale e quello medio, devono essere
determinati e indicati. La deviazione standard relativa globale, come
pure la deviazione standard relativa per ogni livello di
arricchimento devono essere determinate in via sperimentale e
riferite.
Il limite di determinazione proposto deve tenere conto dei valori
limite basati su considerazioni sanitarie o del livello di
esposizione pertinente.
4.2.5. Residui nei liquidi fisiologici e nei tessuti.
Quando una sostanza attiva è classificata come tossica o molto
tossica, si devono presentare metodi di analisi adatti.
La specificità dei metodi deve permettere di determinare il
composto originario e/o i metaboliti rilevanti, se necessario con un
metodo di conferma supplementare.
La ripetibilità, il recupero ed il limite di determinazione,
compresi il recupero individuale e quello medio, devono essere
determinati e indicati. La deviazione standard relativa globale, come
pure la deviazione standard relativa per ogni livello di
arricchimento devono essere determinate in via sperimentale e
riferite.

ALLEGATO 2
MODIFICA DELL'ALLEGATO III, PARTE A, PUNTO 5, DEL DECRETO LEGISLATIVO
17 MARZO 1995, N. 194, IN ATTUAZIONE DELLA DIRETTIVA 96/46/CE.
4. METODI ANALITICI.
Introduzione.
Il presente allegato riguarda esclusivamente i metodi analitici
richiesti per il controllo post-registrazione e per la sorveglianza.
Per i metodi analitici impiegati ai fini dell'elaborazione di
dati, in conformità della presente direttiva o per altri scopi, il
richiedente deve giustificare il metodo utilizzato; se necessario,
verranno messe a punto apposite istruzioni per questo tipo di metodi,
sulla base degli stessi requisiti prescritti per i metodi impiegati a
fini di controllo post-registrazione e di sorveglianza.
Devono essere fornite descrizioni di metodi comprendenti
informazioni particolareggiate sulle attrezzature e i materiali
utilizzati e le condizioni necessarie.
Ove possibile, questi metodi devono essere semplici, economici e
basati sull'impiego di apparecchiature comunemente disponibili.
Ai fini del presente allegato si applicano le seguenti
definizioni:
Impurezze: qualsiasi componente diverso dalla sostanza attiva
pura presente nella sostanza attiva prodotta (compresi gli isomeri
inattivi) risultante dal procedimento di fabbricazione o dalla
degradazione durante la conservazione.
Impurezze rilevanti: impurezze aventi rilevanza tossicologica e/o
ecotossicologica o ambientale.
Metaboliti: i metaboliti comprendono i prodotti risultanti dalla
degradazione o dalla reazione della sostanza attiva.
Metaboliti rilevanti: metaboliti aventi rilevanza tossicologica
e/o ecotossicologica o ambientale.
Devono essere forniti, su richiesta, i seguenti campioni:
i) campioni della preparazione;
ii) norme di analisi della sostanza attiva pura;
iii) campioni della sostanza attiva prodotta;
iv) norme di analisi dei metaboliti rilevanti e/o di altri
componenti compresi nella definizione di residuo;
v) se disponibili, campioni delle sostanze di riferimento delle
impurezze rilevanti.
Per le definizioni vedi l'allegato II, paragrafo 4, punti 4.1 e
4.2.
5.1. Metodi per l'analisi della preparazione (Prodotto fitosanitario
pronto per l'uso).
5.1.1. Devono essere forniti e descritti in modo completo i metodi
per la determinazione della sostanza attiva nella preparazione. Nel
caso di preparazioni contenenti più di una sostanza attiva, dovrebbe
essere fornito un metodo atto a determinare ciascuna di esse in
presenza dell'altra. Se non è presentato un metodo combinato, devono
esserne addotte le ragioni tecniche. Deve essere segnalata
l'applicabilità di metodi CIPAC esistenti.
5.1.2. Devono essere indicati anche i metodi per la
determinazione, nella preparazione, delle impurezze rilevanti, se la
composizione della preparazione è tale che - sulla base di
considerazioni teoriche - queste impurezze possono formarsi per
effetto del procedimento di fabbricazione o di una degradazione
durante la conservazione.
A richiesta, devono essere presentati i metodi per la
determinazione dei formulanti o dei costituenti dei formulanti nella
preparazione.
5.1.3. Specificità, linearità, accuratezza e ripetibilità.
5.1.3.1. Deve essere dimostrata e indicata la specificità dei
metodi presentati. Dev'essere inoltre determinato il grado
d'interferenza di altre sostanze presenti nella preparazione.
Mentre le interferenze dovute ad altre componenti possono essere
identificate come errori sistematici nella valutazione
dell'accuratezza dei metodi proposti, si deve fornire una spiegazione
se un interferenza riscontrata contribuisce per più del 3% alla
quantità totale determinata.
5.1.3.2. Deve essere determinata e indicata la linearità dei
metodi proposti su una gamma adeguata. La gamma della calibrazione
deve estendere (di almeno il 20%) il tenore nominale più elevato e
più basso della sostanza da analizzare nelle soluzioni analitiche
pertinenti della preparazione. Le doppie calibrazioni devono essere
effettuate in 3 o più concentrazioni. Alternativamente, sono
accettabili 5 concentrazioni, ciascuna come misura unica. Le
relazioni presentate devono includere l'equazione della linea di
calibrazione ed il coefficiente di correlazione, nonchè la
documentazione dell'analisi rappresentativa e correttamente
etichettata, per esempio i cromatogrammi.
5.1.3.3. L'accuratezza è generalmente richiesta soltanto per i
metodi di determinazione della sostanza attiva pura e delle impurezze
rilevanti nella preparazione.
5.1.3.4. Per la ripetibilità, in linea di massima occorre un
minimo di 5 determinazioni. Deve essere indicata la deviazione
standard relativa (% RSD). I valori fuori scala identificati per
mezzo di un metodo appropriato (per esempio Dixons o Grubbs) possono
essere eliminati. L'eliminazione dei valori fuori scala deve essere
chiaramente indicata. Si tenterà di spiegare perchè si sono
verificati singoli valori fuori scala.
5.2. Metodi analitici per la determinazione dei residui.
I metodi analitici per la determinazione dei residui devono essere
presentati, a meno che non risulti giustificata l'applicazione dei
metodi già presentati conformemente all'allegato II, paragrafo 4,
punto 4.2.
Si applicano le stesse disposizioni dell'allegato II, punto 4,
paragrafo 4.2.