Serie Generale n. 195 del 22-8-1995
DECRETI, DELIBERE E ORDINANZE MINISTERIALI
MINISTERO DELLA SANITA'
MINISTERO DELLA SANITA'
DECRETO 28 aprile 1995
Approvazione di alcuni metodi di analisi necessari per controllare la composizione di prodotti cosmetici, in attuazione della direttiva 93/73/CEE della Commissione. (GU Serie Generale n.195 del 22-08-1995)

IL MINISTRO DELLA SANITÀ
Vista la legge 11 ottobre 1986, n. 713, recante norme per
l'attuazione delle direttive della Comunità economica europea sulla
produzione e la vendita dei cosmetici;
Visti, in particolare, i commi 2 e 3 dell'art. 7 di detta legge, i
quali stabiliscono che il Ministro della sanità, tenendo conto delle
direttive comunitarie, determina con proprio decreto, fra l'altro, i
metodi necessari per controllare la composizione dei prodotti
cosmetici, nonchè le modalità da seguire per il prelievo dei
campioni;
Visto il decreto ministeriale 22 dicembre 1986, pubblicato nel
supplemento ordinario alla Gazzetta Ufficiale n. 18 del 23 gennaio
1987, con cui, in esecuzione delle predette disposizioni di legge,
sono state stabilite le modalità di prelevamento e trattamento dei
campioni di prodotti cosmetici e sono stati approvati alcuni metodi
di analisi necessari per controllare la composizione di tali
prodotti, secondo quanto previsto dalle direttive della Commissione
delle Comunità europee n. 80/1335/CEE del 22 dicembre 1980, n.
82/4/34/CEE del 14 maggio 1982, n. 83/514/CEE del 27 settembre 1983,
n. 85/490/CEE dell'11 ottobre 1985 e n. 87/143/CEE del 10 febbraio
1987;
Visto il decreto ministeriale 31 luglio 1990, pubblicato nella
Gazzetta Ufficiale n. 197 del 24 agosto 1990, con cui sono stati
approvati i metodi di analisi per l'identificazione ed il dosaggio
della formaldeide libera nei prodotti cosmetici, secondo quanto
previsto dalla direttiva della Commissione delle Comunità europee n.
90/207/CEE del 4 aprile 1990;
Vista la direttiva adottata il 9 settembre 1993 (direttiva
93/73/CEE) della Commissione delle Comunità europee;
Ritenuto di integrare, conseguentemente, i richiamati decreti
ministeriali 22 dicembre 1986 e 31 luglio 1990;
Visti i suggerimenti tecnici forniti dall'Istituto superiore di
sanità con lettera datata 1 giugno 1974;
Decreta:
Art. 1.
1. Nei controlli ufficiali dei prodotti cosmetici le competenti
autorità devono attenersi ai metodi descritti nell'allegato, per
quanto attiene all'identificazione ed al dosaggio delle sostanze ivi
contemplate.
2. Il presente decreto, unitamente all'allegato, che fa parte
integrante dello stesso, sarà pubblicato nella Gazzetta Ufficiale
della Repubblica italiana.
Roma, 28 aprile 1995
Il Ministro: GUZZANTI

IDENTIFICAZIONE E DETERMINAZIONE DEL NITRATO D'ARGENTO
A. Identificazione
1. Scopo e campo di applicazione
Questo metodo descrive l'identificazione del nitrato
d'argento, come ione argento nei prodotti cosmetici acquosi.
2. Principio
L'argento viene identificato dal caratteristico precipitato
bianco che si forma con ioni cloruro.
3. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica.
3.1. Soluzione 2 M di acido cloridrico
3.2. Soluzione di ammoniaca: diluire la soluzione di ammonio
idrossido concentrato (d20 = 0,88 g/ml) con un'eguale
quantità di acqua e mescolare.
3.3. Soluzione 2 M di acido nitrico
4. Apparecchiature
4.1. Normale apparecchiatura di laboratorio
4.2. Centrifuga
5. Procedimento
5.1. A circa 1 g di campione aggiungere, in un tubo da centrifuga,
la soluzione 2 M di acido cloridrico, goccia a goccia,
finchè la precipitazione sia completa; mescolare e
centrifugare.
5.2. Eliminare la soluzione surnatante, e lavare il precipitato
una volta con cinque gocce di acqua fredda. Eliminare il
liquido di lavaggio.
5.3. Aggiungere, nel tubo da centrifuga, una quantità di acqua
pari alla massa di precipitato. Riscaldare all'ebollizione e
mescolare.
5.4. Centrifugare a caldo e scartare il surnatante.
5.5. Aggiungere al precipitato qualche goccia di soluzione di
ammonio idrossido (3.2); mescolare e centrifugare.
5.6. Ad una goccia di surnatante aggiungere, su di un vetrino,
qualche goccia di soluzione 2 M di acido nitrico 2 M (3.3).
5.7. La formazione di un precipitato bianco, indica la presenza
dell'argento.
B. Determinazione
1. Scopo e campo di applicazione
Questo metodo è adatto alla determinazione del nitrato di
argento, come argento, in prodotti cosmetici destinati alla
colorazione di ciglia e sopracciglia.
2. Principio
Si determina l'argento per spettrometria di assorbimento
atomico.
3. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica.
3.1. Soluzione 0,02 M di acido nitrico
3.2. Soluzione standard di argento
3.2.1. Soluzione madre di argento standard, 1 000 (micro)g/ml in
soluzione 0,5 M di acido nitrico ("Spectrosol", o
equivalente).
3.2.2. Soluzione standard di argento, 100 (micro)g/ml: pipettare 10
ml di soluzione madre (3.2.1) in un matraccio tarato da 100
ml. Portare a volume con soluzione di acido nitrico 0,02 M
(3.1) e mescolare. Questa soluzione standard deve essere
preparata di fresco e conservata in bottiglia di vetro scuro.
4. Apparecchiature
4.1. Attrezzature normali di laboratorio
4.2. Spettrometro ad assorbimento atomico, dotato di lampada a
catodo cavo d'argento.
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione
Pesare, accuratamente, circa 0,1 g (m grammi) di campione
omogeneo. Trasferirlo accuratamente in un matraccio tarato
da 1000 ml portare a volume con soluzione 0,02 M di acido
nitrico (3.1) e mescolare.
5.2. Condizione per la spettrometria di assorbimento atomico
Fiamma: aria-acetilene
Lunghezza d'onda di lettura: 338,3 nm
Correzione del fondo: sì
Condizioni della miscela gassosa: miscela povera; per
ottenere un assorbimento massimo sarà necessario ottimizzare
l'altezza del bruciatore e le condizioni del carburante.
5.3. Calibrazione
5.3.1. Pipettare 1,0 - 2,0 - 3,0 - 4,0 e 5,0 ml della soluzione
standard di argento (3.2.2) rispettivamente in una serie di
matracci tarati da 100 ml. Portare a volume con la soluzione
0,02 M di acido nitrico (3.1) e mescolare. Queste soluzioni
contengono rispettivamente 1,0 - 2,0 - 3,0 - 4,0 e 5,0
(micro)g di argento per millilitro.
5.3.2. Misurare l'assorbanza della soluzione di acido nitrico 0,02 M
(3.1) ed usare il valore ottenuto come concentrazione di
argento pari a 0 per la curva di calibrazione. Misurare
l'assorbanza di ogni soluzione standard di argento (5.3.1).
Tracciare la curva di calibrazione, correlando i valori delle
assorbanze con le relative concentrazioni di argento.
5.4. Dosaggio
Misurare il valore dell'assorbanza della soluzione campione
(5.1). Dalla curva di calibrazione ricavare il valore della
concentrazione di argento dall'assorbanza ottenuta per la
soluzione campione.
6. Calcolo
Calcolare il contenuto in nitrato d'argento nel campione, in
percentuale di massa (% m/m), usando la formula:
1,5748 x c
% (m/m) di nitrato d'argento = -----------
10 x m
dove:
m = massa in grammi del campione prelevato per l'analisi (5.1);
c = concentrazione in argento nella soluzione campione (5.1),
espressa in (micro)g/ml, ottenuta dalla curva di calibrazione.
7. Ripetibilità (1)
Per un contenuto in nitrato di argento del 4% (m/m) la
differenza fra i risultati di due determinazioni condotte in
parallelo sullo stesso campione non deve superare lo 0,05%
(m/m).
____________________
(1) ISO 5725.
IDENTIFICAZIONE E DOSAGGIO DEL SELENIO DISOLFURO IN SHAMPOO
ANTIFORFORA
A. Identificazione
1. Scopo e campo di applicazione
Questo metodo descrive il procedimento per l'identificazione
del disolfuro di selenio come selenio negli shampoo
antiforfora.
2. Principio
Il selenio viene identificato per il caratteristico colore
giallo-arancio che si produce per reazione con urea e
potassio ioduro.
3. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica.
3.1. Acido nitrico concentrato (d20 = 1,42 g/ml)
3.2. Urea
3.3 Soluzione di ioduro di potassio al 10% (m/v): solubilizzare
10 g di potassio ioduro in 100 ml di acqua
4. Apparecchiatura
4.1. Attrezzatura normale di laboratorio
4.2. Tubi da digestione, della capacità di 100 ml
4.3. Blocco riscaldante da digestione
4.4. Carta da filtro (Whatman N 42 o equivalente) o membrana
filtrante da 0,45 (micro)m
5. Procedimento
5.1. Ad una quantità di shampoo, pari circa ad 1 g aggiungere, in
un tubo da digestione (4.2), 2,5 ml di acido nitrico
concentrato (3.1) e lasciare a 150 (gradi) C per 30 minuti
nel blocco riscaldante (4.3).
5.2. Diluire il campione trattato con acqua a 25 ml e filtrare
attraverso carta da filtro o membrana filtrante (4.4).
5.3. A 2,5 ml di filtrato aggiungere 5 ml di acqua, 2,5 g di urea
(3.2) e far bollire. Raffreddare ed aggiungere 1 ml di
soluzione di ioduro di potassio.
5.4. Un colore giallo-arancio, che imbrunisce rapidamente con il
tempo, indica la presenza del selenio.
B. Dosaggio
1. Scopo e campo di applicazione
Questo metodo è adatto per il dosaggio del disolfuro di
selenio, come selenio, in shampoo antiforfora contenenti fino
al 4,5% (m/m) di disolfuro di selenio.
2. Principio
Il campione è trattato con acido nitrico e il selenio
ottenuto viene dosato per spettrometria di assorbimento
atomico.
3. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica.
3.1. Acido nitrico concentrato (d20 = 1,42 g/ml).
3.2. Soluzione di acido nitrico al 5% (v/v): diluire 50 ml di
acido nitrico concentrato (3.1) a 500 ml di acqua, in un
beaker, agitando di continuo. Trasferire questa soluzione in
un matraccio tarato da 1000 ml e portare a volume con acqua.
3.3. Soluzione madre di selenio standard, 1000 (micro)g/ml in
soluzione di acido nitrico 0,5 M ("Spectrosol" o
equivalente).
4. Apparecchiatura
4.1. Normale attrezzatura di laboratorio
4.2. Tubi da digestione della capacità di 100 ml
4.3. Blocco riscaldante da digestione
4.4. Carta da filtro (Whatman N 42 o equivalente) o membrana
filtrante da 0,45 (micro)m
4.5. Spettrometro di assorbimento atomico, dotato di lampada a
catodo cavo al selenio.
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione
5.1.1. Pesare accuratamente una quantità di campione omogeneo pari
a circa 0,2 g (m grammi), in un tubo da digestione (4.2).
5.1.2. Aggiungere 5 ml di acido nitrico concentrato (3.1) e lasciare
a 150 (gradi) C per 1 ora nel blocco (4.3).
5.1.3. Lasciare raffreddare la soluzione ottenuta e diluirla a 100
ml con acqua. Filtrare mediante il dispositivo filtrante
(4.4) ed usare la soluzione filtrata per il dosaggio.
5.2. Condizioni operative dello spettrometro ad assorbimento
atomico
Fiamma: aria-acetilene
Lunghezza d'onda di determinazione: 196 nm
Correzione di fondo: sì
Condizioni della miscela gassosa: miscela povera; per
ottenere un assorbimento massimo sarà necessario ottimizzare
l'altezza del bruciatore e le condizioni del carburante.
5.3. Calibrazione
5.3.1. Pipettare 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 e 5,0 ml della soluzione madre
di selenio (3.3) rispettivamente in una serie di matracci
tarati da 100 ml. Portarli a volume con soluzione di acido
nitrico al 5% (3.2) e mescolare. Queste soluzioni conterranno
rispettivamente 10, 20, 30, 40 e 50 (micro)g/ml di selenio.
5.3.2. Misurare l'assorbanza della soluzione di acido nitrico al 5%
(3.2) ed usare il valore ottenuto per la curva di taratura,
attribuendogli il valore 0 come concentrazione di selenio.
Misurare le assorbanze di ogni soluzione standard di selenio
(5.3.1). Tracciare una curva di calibrazione correlando i
valori delle assorbanze ottenute con le concentrazioni di
selenio.
5.4. Determinazione
Misurare l'assorbanza della soluzione campione (5.1.3). Dalla
curva di calibrazione ricavare, in funzione dell'assorbanza
letta, la concentrazione di selenio.
6. Calcolo
Calcolare il contenuto in disolfuro di selenio presente nel
campione, espresso in percentuale di massa (% m/m), usando la
formula:
1,812 x c
% (m/m) di disolfuro di selenio = ----------
100 x m
dove:
m = massa in grammi del campione prelevato per l'analisi (5.1.1);
c = concentrazione del selenio nella soluzione in esame (5.1.3),
espressa in (micro)g/ml, ricavata dalla curva di calibrazione.
7. Ripetibilità (1)
Per un contenuto di disolfuro di selenio dell'1% (m/m) la
differenza fra i risultati di due determinazioni condotte in
parallelo sullo stesso campione non dovrebbe superare lo
0,05% (m/m).
____________________
(1) ISO 5725.
DETERMINAZIONE DEL BARIO E DELLO STRONZIO SOLUBILI IN PIGMENTI
SOTTO FORMA DI SALI E LACCHE
A. Determinazione del bario solubile
1. Scopo e campo di applicazione
Questo metodo descrive la procedura di estrazione e
determinazione del bario solubile dai pigmenti sotto forma di
sali e lacche.
2. Principio
Il pigmento è estratto con soluzione di acido cloridrico
0,07 M, in condizioni opportune, e la quantità di bario nel
mezzo estraente è determinata per spettrometria di
assorbimento atomico.
3. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica.
3.1. Etanolo anidro
3.2. Soluzione di acido cloridrico 0,07 M
3.3. Soluzione di acido cloridrico 0,5 M
3.4. Soluzione di potassio cloruro all'8% (m/v): solubilizzare 16
g di potassio cloruro in 200 ml di soluzione di acido
cloridrico 0,07 M (3.2)
3.5. Soluzione standard di bario
3.5.1. Soluzione madre di bario standard, 1000 (micro)g ml in
soluzione 0,5 M di acido nitrico ("Spectrosol" o equivalente)
3.5.2. Soluzione standard di bario, 200 (micro)g/ml: pipettare 20,0
ml della soluzione madre di bario standard (3.5.1) in un
matraccio tarato da 100 ml. Portare a volume con soluzione
0,07 M di acido cloridrico (3.2) e mescolare.
4. Apparecchiatura
4.1. Normale attrezzatura di laboratorio
4.2. Piaccametro con una precisione di + - 0,02 unità
4.3. Agitatore meccanico per beute
4.4. Membrana filtrante con una porosità di 0,45 (micro)m
4.5. Spettrometro di assorbimento atomico con lampada a catodo
cavo al bario
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione
5.1.1. Pesare accuratamente circa, 0,5 g (m grammi) di pigmento, in
una beuta conica, di almeno 150 ml di volume, per consentire
un'agitazione efficiente.
5.1.2. Pipettare 1,0 ml di etanolo (3.1) e ruotare la beuta per
ottenere una omogenea bagnabilità del pigmento. Aggiungere
con una buretta l'esatta quantità di soluzione 0,07 M di
volume di acido cloridrico (3.2), necessaria perchè il
rapporto volume di acido massa di pigmento sia esattamente di
50 ml per grammo. Sia quindi il volume totale di soluzione
impiegata, incluso l'etanolo, pari a V ml. Agitare per 5
secondi il contenuto della beuta, per assicurarne la perfetta
omogeneità.
5.1.3. Mediante il piaccametro (4.2), misurare il pH della
sospensione ottenuta e, se sopra 1,5, aggiungere goccia a
goccia la soluzione 0,5 M di acido cloridrico (3.3) fino a
raggiungere l'intervallo 1,4 - 1,5.
5.1.4. Chiudere ed agitare immediatamente la beuta per 60 minuti,
usando l'agitatore meccanico (4.3). L'agitatore deve operare
ad una velocità sufficientemente alta da produrre una
schiuma. Filtrare attraverso un filtro a membrana (4.4) e
raccogliere il filtrato. Non centrifugare prima della
filtrazione. Pipettare 5,0 ml di filtrato in un matraccio
tarato da 50 ml; portare a volume con soluzione 0,07 M di
acido cloridrico (3.2) e mescolare. Questa soluzione viene
usata anche per la determinazione dello stronzio (parte B).
5.1.5. Pipettare in un matraccio tarato da 100 ml 5,0 ml di
soluzione di potassio cloruro (3.4) ed un'aliquota (W ml) di
filtrato diluito (5.1.4) per ottenere una concentrazione
compresa tra 3 e 10 (micro)g di bario per ml. (Un'aliquota di
10 ml potrebbe essere sufficiente). Portare a volume con
soluzione 0,07 M (3.2) e mescolare.
5.1.6. Determinare la concentrazione in bario della soluzione
(5.1.5) per spettrometria di assorbimento atomico nello
stesso giorno.
5.2. Condizioni della spettrometria di assorbimento atomico
Fiamma: protossido di azoto/acetilene
Lunghezza d'onda: 553,5 nm
Correzione del fondo: no
Condizioni della miscela gassosa: miscela povera; per
ottenere un assorbimento massimo sarà necessario ottimizzare
l'altezza del bruciatore e le condizioni del carburante.
5.3. Calibrazione
5.3.1. In una serie di matracci tarati da 100 ml, pipettare 1,0;
2,0; 3,0; 4,0 e 5,0 ml di soluzione standard di bario
(3.5.2). Aggiungere ad ogni matraccio 5,0 ml di soluzione di
acido cloridrico (3.4); portare a volume con soluzione di
acido cloridrico (3.2) e mescolare. Queste soluzioni
contengono rispettivamente 2,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10,0 (micro)g
di bario per millilitro.
Preparare una soluzione bianco, omettendo l'aggiunta della
soluzione standard di bario.
5.3.2. Misurare l'assorbanza della soluzione bianco (5.3.1) ed usare
il valore ottenuto come valore 0 per la curva di standard di
calibrazione (5.3.1). Tracciare una curva di concentrazione
correlando i valori di assorbanza con le concentrazioni di
bario.
5.4. Determinazione
Misurare l'assorbanza della soluzione campione (5.1.5).
Dalla curva di calibrazione leggere la concentrazione di
bario corrispondente al valor di assorbanza ottenuto per la
soluzione in esame.
6. Calcolo
Il contenuto in bario solubile (% m/m) del pigmento è dato
dalla formula:
C x V
% (m/m) di bario solubile = -----------
10W(B3) x m
dove:
m = massa in grammi del campione prelevato per l'analisi (5.1.1);
c = concentrazione del bario nella soluzione (5.1.5), in
microgrammi per millilitro, ottenuta dalla curva di
calibrazione;
V = volume totale della soluzione estraente in millilitri (5.1.2)
W(B3) = volume dell'estratto in millilitri, prelevato in 5.1.5.
7. Ripetibilità
Il migliore valore stimato di ripetibilità (ISO 5725) per
questo metodo è dello 0,3% per un contenuto in bario
solubile del 2% (m/m).
8. Nota
8.1. In certe condizioni l'assorbanza del bario può essere
incrementata dalla presenza del calcio. Questo fenomeno può
essere minimizzato con l'aggiunta di ioni magnesio alla
concentrazione di 5 g per litro (1).
8.2. È possibile usare uno spettrometro a plasma accoppiato
induttivamente, come alternativa allo spettrometro di
assorbimento atomico a fiamma.
____________________
(1) "Magnesium as modifier for the determination of barium by flame
atomic emission spectrometry", Jerrow M. et al., Analytical
Proceedings, 1991, 28, 40.
B. Determinazione dello stronzio solubile
1. Scopo e campo di applicazione
Questo metodo descrive la procedura di estrazione e
determinazione dello stronzio solubile dai pigmenti sotto
forma di sali e lacche.
2. Principio
Il pigmento è estratto con soluzione di acido cloridrico
0,07 M, in condizioni opportune, e la quantità di stronzio
nel mezzo estraente è determinata per spettrometria di
assorbimento atomico.
3. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica.
3.1. Etanolo anidro
3.2. Soluzione di acido cloridrico 0,07 M
3.3. Soluzione di potassio cloruro all'8% (m/v): solubilizzare 16
g di potassio cloruro in 200 ml di soluzione di acido
cloridrico 0,07 M (3.2)
3.4. Soluzione standard di stronzio
3.4.1. Soluzione madre di stronzio standard, 1000 (micro)g/ml in
soluzione 0,5 M di acido nitrico ("Spectrosol" o equivalente)
3.4.2. Soluzione standard di stronzio, 100 (micro)g/ml: pipettare
10,0 ml della soluzione madre di bario standard (3.4.1) in un
matraccio tarato da 100 ml. Portare a volume con soluzione
0,07 M di acido cloridrico (3.2) e mescolare.
4. Apparecchiatura
4.1. Normale attrezzatura di laboratorio
4.2. Membrana filtrante con una porosità di 0,45 (micro)m
4.3. Spettrometro di assorbimento atomico con lampada a catodo
cavo allo stronzio.
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione
Per determinare il contenuto in stronzio solubile si usa la
soluzione preparata in A 5.1.4.
5.1.1. Pipettare 5,0 ml di soluzione di potassio cloruro (3.3) in un
matraccio tarato da 100 ml ed un'aliquota (W(S1) ml) di
soluzione filtrata diluita (A.5.1.4) per ottenere una
concentrazione compresa tra 2 e 5 (micro)g di stronzio per
ml. (Un'aliquota di 25 ml dovrebbe essere ottimale). Portare
a volume con soluzione di acido cloridrico 0,07 M (3.2) e
mescolare.
5.1.2. Determinare la concentrazione della soluzione (5.1.1) in
stronzio, per spettrometria di assorbimento atomico, nello
stesso giorno.
5.2. Condizioni della spettrometria di assorbimento atomico
Fiamma: protossido di azoto/acetilene
Lunghezza d'onda: 460,7 nm
Correzione del fondo: no
Condizioni della miscela gassosa: miscela povera; per
ottenere un assorbimento massimo sarà necessario ottimizzare
l'altezza del bruciatore e le condizioni del carburante.
5.3. Calibrazione
5.3.1. In una serie di matracci tarati da 100 ml, pipettare 1,0;
2,0; 3,0; 4,0 e 5,0 ml di soluzione standard di stronzio
(3.4.2). Aggiungere ad ogni matraccio 5,0 ml di soluzione di
potassio cloruro (3.3); portare a volume con soluzione di
acido cloridrico 0,07 M (3.2) e mescolare. Queste soluzioni
contengono rispettivamente 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 e 5,0 (micro)g
di stronzio per millilitro.
Preparare una soluzione bianco, omettendo l'aggiunta della
soluzione standard di stronzio.
5.3.2. Misurare l'assorbanza della soluzione bianco (5.3.1) ed usare
il valore ottenuto come valore 0 per la curva di standard di
calibrazione. Misurare l'assorbanza di ogni soluzione
standard di calibrazione (5.3.1). Tracciare una curva di
concentrazioni correlando i valori di assorbanza con le
concentrazioni di stronzio.
5.4. Determinazione
Misurare l'assorbanza della soluzione campione (5.1.1).
Dalla curva di calibrazione leggere la concentrazione di
bario corrispondente al valor di assorbanza ottenuto per la
soluzione in esame.
6. Calcolo
Il contenuto in stronzio solubile (% m/m) del pigmento è
dato dalla formula:
c x V
% (m/m) di stronzio solubile = -----------
10W(S1) x m
dove:
m = massa in grammi del campione prelevato per l'analisi (5.1.1);
c = concentrazione dello stronzio nella soluzione (5.1.1), in
microgrammi per millilitro, ottenuta dalla curva di calibrazione;
V = volume totale della soluzione estraente in millilitri (A.5.1.2);
W(S1) = volume dell'estratto in millilitri, prelevato in 5.1.1
7. Ripetibilità
Il migliore valore stimato di ripetibilità (ISO 5725) per
questo metodo è dello 0,09% per un contenuto in stronzio
solubile dello 0,6% (m/m).
8. Nota
È possibile usare uno spettrometro a plasma accoppiato
induttivamente, come alternativa allo spettrometro di
assorbimento atomico a fiamma.
IDENTIFICAZIONE E DOSAGGIO DELL'ALCOOL BENZILICO NEI PRODOTTI
COSMETICI
A. Identificazione
1. Oggetto e campo di applicazione
Questo metodo descrive l'identificazione dell'alcool
benzilico nei prodotti cosmetici.
2. Principio
L'alcool benzilico viene identificato per cromatografia su
strato sottile su lastrine di gel di silice.
3. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica.
3.1. Alcool benzilico
3.2. Cloroformio
3.3. Etanolo
3.4. n-Pentano
3.5. Solvente di sviluppo: etere etilico
3.6. Soluzione standard di alcool benzilico: trasferire 0,1 g di
alcool benzilico (3.1) in un matraccio da 100 ml, portare a
volume con etanolo (3.3) e mescolare.
3.7. Lastre di vetro per cromatografia su strato sottile di
dimensioni 100 mm x 200 mm o 200 mm x 200 mm, ricoperte con
uno strato di gel di silice 60 F254 di 0,25 mm di spessore.
3.8. Reattivo di visualizzazione: acido 12-fosfomolibdico al 10%
(m/v) in etanolo (3.3).
4. Attrezzatura
4.1. Attrezzatura normale di laboratorio per cromatografia su
strato sottile
4.2. Camera per cromatografia, a doppia vasca di dimensioni
esterne pari a circa 80 mm x 230 mm x 240 mm
4.3. Carta per cromatografia: Whatman, o analoga
4.4. Lampada a radiazioni u.v. con emissione alla lunghezza d'onda
di 254 nm
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione
Pesare 1,0 g del prodotto da analizzare in una provetta da 10
ml. Aggiungere 3 ml di cloroformio (3.2) ed agitare
vigorosamente fino a dispersione completa. Portare a volume
con etanolo (3.3) ed agitare energicamente fino ad ottenere
una soluzione limpida o quasi limpida.
5.2. Cromatografia su strato sottile
5.2.1. Saturare la vaschetta cromatografica (4.2) con n-pentano
(3.4) come segue: foderare la parete della camera adiacente
al fondo con carta cromatografica (4.3), assicurandosi che la
piega inferiore della carta sia nel pozzetto con il solvente.
Trasferire 25 ml di n-pentano (3.4) nel pozzetto facendo
scorrere il solvente sulla superficie esposta del foglio di
carta. Richiudere il coperchio e lasciare la vasca a riposo
per 15 minuti.
5.2.2. Depositare 10 (micro)l di soluzione campione (5.1) e 10
(micro)l di soluzione standard di alcool benzilico (3.6)
sulla linea di partenza di una lastrina cromatografica (3.7)
lasciare asciugare.
5.2.3. Pipettare 10 ml di etere etilico (3.5) nella vaschetta
anteriore e immediatamente dopo inserire la lastrina (5.2.2)
nella stessa vaschetta. Richiudere e sviluppare la lastrina
per 150 mm. Estrarre la lastrina ed asciugarla a temperatura
ambiente.
5.2.4. Esporre la lastrina (5.2.3) alla luce u.v. e segnare la
posizione delle macchie viola. Spruzzare con il reattivo di
visualizzazione (3.8) e riscaldare la lastra a 120 (gradi) C
per circa 15 minuti. L'alcool benzilico appare come una
macchia blu scura.
5.2.5. Calcolare il valore Rf ottenuto con la soluzione standard
d'alcool benzilico. Una macchia blu scura con lo stesso
valore Rf, ottenuto con la soluzione campione, conferma la
presenza d'alcool benzilico.
Limite di sensibilita': 0,1 (micro)g di alcool benzilico.
B. Dosaggio
1. Oggetto e campo di applicazione
Questo metodo descrive il dosaggio dell'alcool benzilico nei
prodotti cosmetici.
2. Definizione
La quantità di alcool benzilico determinata con questo
metodo viene espressa come percentuale di massa (% m/m).
3. Principio
Il campione è estratto con metanolo e la quantità di alcool
benzilico presente nell'estratto è determinata per
cromatografia liquida ad alta risoluzione (HPLC).
4. Reattivi
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica ed
idonei, quando richiesto, per HPLC.
4.1. Metanolo
4.2. 4-Etossifenolo
4.3. Alcool benzilico
4.4. Fase mobile: metanolo (4.1)/acqua (45: 55; v/v)
4.5. Soluzione madre di alcool benzilico: pesare accuratamente
circa 0,1 g di alcool benzilico (4.3) in un matraccio da 100
ml. Portare a volume con metanolo (4.1) e mescolare.
4.6. Soluzione madre di standard interno: pesare accuratamente
circa 0,1 g di etossifenolo (4.2) in un matraccio da 100 ml.
Portare a volume con metanolo e mescolare.
4.7. Soluzioni standard: in una serie di matracci da 25 ml,
pipettare quantità di soluzione madre di alcool benzilico
(4.5) e di soluzione madre di standard interno (4.6) secondo
le indicazioni della tabella sottoriportata.
Portare a volume con metanolo (4.1) e mescolare.
______________________________________ _____________________________
| |
| Concentrazione di alcool | Concentrazione di
| benzilico | 4-etossifenolo
Soluzione |__________________________|_____________________________
standard | | | |
| ml (4.5) |(micro)g/ml | ml (4.6) | (micro)g/ml
| addizionati | (*) | addizionati | (*)
___________|_____________|____________|_______________|_____________
| | | |
I | 0,5 | 20 | 2,0 | 80
| | | |
II | 1,0 | 40 | 2,0 | 80
| | | |
III | 2,0 | 80 | 2,0 | 80
| | | |
IV | 3,0 | 120 | 2,0 | 80
| | | |
V | 5,0 | 200 | 2,0 | 80
___________|_____________|____________|_______________|_____________
(*) Questi valori vengono riportati a solo titolo indicativo e
corrispondono alle concentrazioni di soluzioni standard preparare
usando soluzioni di alcool benzilico (4.5) e 4-etossifenolo (4.6) che
contengono esattamente lo 0,1% (m/v) dei rispettivi soluti.
_____________________________________________________________________
5. Apparecchiatura
5.1. Normale apparecchiatura di laboratorio
5.2. Cromatografo liquido ad alta risoluzione con detector a luce
ultravioletta a lunghezza d'onda variabile e loop da
iniezione da 10 (micro)l
5.3. Colonna analitica in acciaio inossidabile impaccata con
Spherisorb da 5 (micro)m di granulometria, lunga 250 mm e di
4,6 mm di diametro o equivalente
5.4. Bagnomaria
5.5. Bagno ad ultrasuoni
5.6. Centrifuga
5.7. Tubi da centrifuga da 15 ml di capacità
6. Procedimento
6.1. Preparazione del campione
6.1.1. Pesare accuratamente circa 0,1 g (m grammi) del campione in
un tubo da centrifuga (5.7) ed aggiungere 5 ml di metanolo
(4.1).
6.1.2. Riscaldare per 10 minuti in un bagnomaria (5.4) a 50 (gradi)
C, trasferendolo poi in un bagno ad ultrasuoni (5.5) fino a
dispersione.
6.1.3. Raffreddare e centrifugare a 3500 giri/min per 5 minuti.
6.1.4. Trasferire il surnatante in un matraccio tarato da 25 ml.
6.1.5. Estrarre nuovamente il campione con 5 ml di metanolo (4.1).
Riunire gli estratti nel matraccio tarato da 25 ml.
6.1.6. Pipettare 2,0 ml di soluzione di standard interno (4.6) nel
matraccio tarato da 25 ml. Portare a volume con metanolo
(4.1) e mescolare. Questa soluzione è usata nella fase
quantitativa dell'analisi descritta al punto 6.4.
6.2. Cromatografia
6.2.1. Preparare il cromatografo liquido (5.2) secondo le modalità
operative. Fissare il flusso della fase mobile (4.4) a 2,0 ml
al minuto.
6.2.2. Fissare la lunghezza d'onda del detector (5.2) a 210 nm.
6.3. Calibrazione
6.3.1. Iniettare 10 (micro)l di ogni soluzione standard di alcool
benzilico (4.7) e misurare le aree dei picchi dell'alcool
benzilico e del 4-etossifenolo.
6.3.2. Per ogni soluzione standard (4.7) calcolare il rapporto delle
aree dei picchi dell'alcool benzilico e del 4-etossifenolo.
Tracciare una curva di calibrazione usando questi rapporti
come ordinate e le corrispondenti concentrazioni di alcool
benzilico di (micro)g per ml come ascisse.
6.4. Determinazione
6.4.1. Iniettare 10 (micro)l della soluzione campione (6.1.6) e
misurare le aree dei picchi dell'alcool benzilico e del
4-etossifenolo. Calcolare il rapporto delle aree dei picchi
dell'alcool benzilico e del 4-etossifenolo. Ripetere
l'operazione con altre aliquote da 10 (micro)l della
soluzione campione finchè non si ottengano risultati
concordanti.
6.4.2. Dalla curva di calibrazione (6.3.2) leggere la concentrazione
di alcool benzilico corrispondente al rapporto dei picchi
alcool benzilico/4-etossifenolo.
7. Calcolo
Calcolare il contenuto del campione in alcool benzilico, come
percentuale di massa, usando la formula:
c
% (m/m) di alcool benzilico = -------
400 x m
dove:
m = massa espressa in grammi di campione prelevato per le analisi
(6.1.1);
c = concentrazione dell'alcool benzilico nella soluzione campione
(6.1.6), espressa in microgrammi per millilitro, ottenuta dalla
curva di calibrazione.
8. Ripetibilità (1)
Per contenuto in alcool benzilico pari all'1% (m/m) la
differenza tra i risultati di due determinazioni condotte in
parallelo sullo stesso campione non dovrebbe superare lo
0,1%.
____________________
(1) ISO 5725.
IDENTIFICAZIONE DELLO ZIRCONIO E DETERMINAZIONE DELLO ZIRCONIO,
DELL'ALLUMINIO E DEL CLORO NEGLI ANTIDIAFORETICI NON AEROSOL
Il metodo è articolato in cinque fasi:
A. Identificazione dello zirconio
B. Determinazione dello zirconio
C. Determinazione dell'alluminio
D. Determinazione del cloro
E. Calcolo dei rapporti tra gli atomi di alluminio e quelli di
zirconio e dei rapporti tra gli atomi di alluminio più zirconio
e quelli di cloro
A. Identificazione dello zirconio
1. Oggetto e campo di applicazione
Il metodo ha per oggetto l'identificazione dello zirconio
negli antidiaforetici non aerosol impiegati in cosmesi. Non
è stato effettuato alcun tentativo di descrivere metodi
adatti all'identificazione del complesso idrato
alluminio/zirconio/cloro (Al,Zr(OH), Cl, nH2O).
2. Principio
Lo zirconio è identificato attraverso il caratteristico
precipitato rosso-violetto ottenuto in condizioni fortemente
acide con rosso Alizarina S.
3. Reagenti
Tutti i reagenti devono avere il grado di purezza richiesto
per analisi.
3.1. Acido cloridrico concentrato (d20 = 1,18 g/ml).
3.2. Soluzione di rosso Alizarina S (Cl. 58005) in soluzione
acquosa al 2% di sodio alizarinsolfonato.
4. Apparecchiature
4.1. Attrezzature normali di laboratorio.
5. Procedimento
5.1. Diluire con 2 ml di acqua 1 g circa di campione in una
provetta. Tappare e agitare.
5.2. Aggiungere tre gocce di soluzione di rosso Alizarina S (3.2)
e poi aggiungere 2 ml di acido cloridrico concentrato (3.1).
Tappare e agitare.
5.3. Far riposare circa 2 minuti.
5.4. Una soluzione supernatante di colore rosso-violetto e un
precipitato indicano la presenza di zirconio.
B. Determinazione dello zirconio
1. Oggetto e campo di applicazione
Questo metodo è adatto alla determinazione dello zirconio
nei complessi idrati alluminio/zirconio/cloruro fino ad una
concentrazione massima di 7,5% (m/m) di zirconio negli
antidiaforetici non aerosol.
2. Principio
Lo zirconio è estratto dal prodotto in condizioni acide ed
è determinato mediante spettrometria di assorbimento atomico
su fiamma.
3. Reagenti
Tutti i reagenti devono essere della purezza richiesta per
analisi.
3.1. Acido cloridrico concentrato (d20 = 1,18 g/ml)
3.2. Soluzione di acido cloridrico, 10% (v/v): aggiungere 100 ml
di acido cloridrico concentrato a 500 ml di acqua in un
beaker, mescolando continuamente. Trasferire questa soluzione
in una beuta volumetrica da 1 l e completare a volume con
acqua.
3.3. Preparare una soluzione standard di zirconio da 1000
(micro)g/ml in una soluzione di acido cloridrico 0,5 M
("Spectrosol" o equivalente).
3.4. Reagente: cloruro di alluminio (idrato) (AlCl3 6H2O):
sciogliere 22,6 g di cloruro di alluminio esaidrato in 250 ml
di soluzione di acido cloridrico al 10% (v/v) (3.2).
3.5. Reagente: cloruro di ammonio; sciogliere 5,0 g di cloruro di
ammonio in 250 ml di soluzione di acido cloridrico al 10%
(v/v) (3.2).
4. Apparecchiature
4.1. Attrezzature normali da laboratorio.
4.2. Piastra riscaldante con agitatore magnetico.
4.3. Filtri di carta (Whatman n. 41 o equivalenti).
4.4. Spettrometro di assorbimento atomico dotato di lampada allo
zirconio a catodo cavo.
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione.
5.1.1. Pesare con precisione 1,0 g (m.grammi) di un campione
omogeneo del prodotto in un beaker da 150 ml. Diluire con 40
ml d'acqua e 10 ml di acido cloridrico concentrato (3.1).
5.1.2. Porre il beaker sul riscaldatore dotato di agitatore
magnetico (4.2). Iniziare a mescolare e riscaldare fino a
raggiungere il punto di ebollizione. Per evitare una rapida
essiccazione, porre un coperchio in vetro sopra il beaker.
Far bollire per 5 minuti, togliere il beaker dal fornello e
raffreddare a temperatura ambiente.
5.1.3. Servendosi del filtro di carta (4.3), procedere al filtraggio
del contenuto del beaker in una beuta volumetrica da 100 ml.
Risciacquare il beaker due volte con 10 ml d'acqua e
aggiungere nella beuta il liquido di lavaggio, dopo averlo
filtrato. Completare a volume con acqua e mescolare. Questa
soluzione è impiegata anche per la determinazione
dell'alluminio (parte C).
5.1.4. In una beuta volumetrica da 50 ml pipettare 20,00 ml di
soluzione campione (5.1.3), 5,00 ml di reagente al cloruro
d'alluminio (3.4) e 5,00 ml di reagente al cloruro d'ammonio
(3.5). Completare a volume con la soluzione di acido
cloridrico al 10% (v/v) (3.2) e mescolare.
5.2. Condizioni per la spettrometria ad assorbimento atomico
Fiamma: protossido di azoto/acetilene
Lunghezza d'onda: 360,1 nm
Correzione del fondo: no
Condizioni della miscela gassosa: miscela ricca; per ottenere
un assorbimento massimo sarà necessario ottimizzare
l'altezza del bruciatore e le condizioni del carburante.
5.3. Taratura
5.3.1. Pipettare in una serie di beute graduate da 50 ml 5,00;
10,00; 15,00; 20,00 e 25,00 ml della soluzione standard di
zirconio preparata in precedenza (3.3). Pipettare 5,00 ml di
reagente a base di cloruro di alluminio (3.4) e 5,00 ml di
reagente a base di cloruro d'ammonio (3.5) in ciascuna beuta
graduata. Completare a volume con la soluzione di acido
cloridrico al 10% (v/v) (3.2) e mescolare. Queste soluzioni
contengono rispettivamente 100, 200, 300, 400 e 500 (micro)g
di zirconio per millilitro.
Preparare nello stesso modo una soluzione di riferimento,
omettendo la soluzione standard di zirconio.
5.3.2. Misurare l'assorbanza della soluzione di riferimento (5.3.1)
e impiegare il valore ottenuto come concentrazione zero di
zirconio per la curva di taratura. Misurare l'assorbanza di
ciascuna soluzione di taratura dello zirconio (5.3.1).
Tracciare la curva di taratura dei valori di assorbanza in
funzione delle concentrazioni di zirconio.
5.4. Determinazione
Misurare l'assorbanza della soluzione campione (5.1.4).
Ricavare dalla curva di taratura la concentrazione di
zirconio corrispondente al valore di assorbanza ottenuto per
la soluzione campione.
6. Calcolo
Calcolare il contenuto di zirconio del campione, in
percentuale di massa, servendosi della seguente formula:
c
% (m/m) di zirconio = ------
40 x m
dove:
m = massa espressa in grammi del campione prelevato per analisi
(5.1.1);
c = concentrazione dello zirconio nella soluzione campione (5.1.4),
espressa in microgrammi per millilitro, ricavata dalla curva di
taratura.
7. Ripetibilità (1)
Per un contenuto di zirconio del 3,00% (m/m), la differenza
fra i risultati di due determinazioni effettuate in parallelo
sullo stesso campione non deve essere superiore a 0,10%
(m/m).
____________________
(1) ISO 5725.
8. Nota
L'impiego della spettrometria a plasma accoppiato
induttivamente è consentito, quale alternativa alla
spettrometria ad assorbimento atomico a fiamma.
C. Determinazione dell'alluminio
1. Oggetto e campo di applicazione
Questo metodo serve a determinare l'alluminio presente nei
complessi idrati alluminio/zirconio/cloruro, fino ad una
concentrazione massima del 12% (m/m) di alluminio negli
antidiaforetici non aerosol.
2. Principio
L'alluminio è estratto dal prodotto in mezzo acido ed è
determinato mediante spettrometria di assorbimento atomico a
fiamma.
3. Reagenti
Tutti i reagenti devono essere della purezza richiesta per
analisi.
3.1. Acido cloridrico concentrato (d20 = 1,18 g/ml).
3.2. Soluzione di acido cloridrico, 1% (v/v): diluire 10 ml di
acido cloridrico concentrato (3.1) a 500 ml d'acqua in un
beaker, mescolando continuamente. Trasferire questa soluzione
in un matraccio graduato da 1 l e completare a volume con
acqua.
3.3. Soluzione standard di alluminio, 1000 (micro)g/ml in
soluzione 0,5 M di acido nitrico ("Spectrosol" o
equivalenti).
3.4. Reagente a base di cloruro di potassio: sciogliere 10,0 g di
cloruro di potassio in 250 ml di soluzione di acido
cloridrico all'1% (v/v) (3.2).
4. Apparecchiature
4.1. Attrezzature normali da laboratorio
4.2. Spettrometro di assorbimento atomico dotato di lampada
all'alluminio a catodo cavo.
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione
La soluzione preparata al punto B.5.1.3 è impiegata per
determinare il contenuto di alluminio.
5.1.1. In una beuta graduata da 100 ml pipettare 5,00 di soluzione
campione (B.5.1.3), 10,00 ml di reagente a base di cloruro di
potassio (3.4). Completare a volume con la soluzione di acido
cloridrico all'1% (v/v) (3.2) e mescolare.
5.2. Condizioni per la spettrometria ad assorbimento atomico
Fiamma: protossido di azoto/acetilene
Lunghezza d'onda: 309,3 nm
Correzione del fondo: no
Condizioni della miscela gassosa: miscela ricca; per ottenere
una assorbanza massima, è necessario ottimizzare l'altezza
del bruciatore e le condizioni del carburante.
5.3. Taratura
5.3.1. In una serie di beute graduate da 100 ml, pipettare 1,00;
2,00; 3,00; 4,00 e 5,00 ml della soluzione standard di
alluminio (3.3). Pipettare in ciascuna beuta graduata 10,00
ml di reagente a base di cloruro di potassio (3.4) e
completare a volume con la soluzione di acido cloridrico
all'1% (v/v) (3.2) e mescolare. Queste soluzioni contengono
rispettivamente 10, 20, 30, 40 e 50 (micro)g di alluminio per
millilitro.
Preparare analogamente una soluzione di riferimento,
omettendo la soluzione standard di alluminio.
5.3.2. Misurare l'assorbanza della soluzione di riferimento (5.3.1)
e servirsi del valore ottenuto come concentrazione zero
dell'alluminio per la curva di taratura. Misurare
l'assorbanza di ciascuna soluzione standard di alluminio.
Tracciare la curva di taratura che esprime i valori di
assorbanza in rapporto alle concentrazioni di alluminio.
5.4. Determinazione
Misurare l'assorbanza della soluzione campione (5.1.1).
Ricavare dalla curva di taratura le concentrazioni di
alluminio corrispondenti ai valori ottenuti per la soluzione
campione.
6. Calcolo
Calcolare il contenuto di alluminio nel campione, in
percentuale di massa, servendosi della seguente formula:
c
% (m/m) di alluminio = -----
5 x m
dove:
m = massa espressa in grammi del campione prelevato per analisi
(B.5.1.1);
c = concentrazione dell'alluminio nella soluzione campione (5.1.1)
espressa in microgrammi per millilitro, ricavata dalla curva di
taratura.
7. Ripetibilità (1)
Per un contenuto di alluminio del 3,5% (m/m), la differenza
fra i risultati di due determinazioni effettuate in
parallelo sullo stesso campione non deve essere superiore a
0,10% (m/m).
____________________
(1) ISO 5725.
8. Nota
L'impiego della spettrometria a plasma accoppiato
induttivamente è consentito, quale alternativa alla
spettrometria di assorbimento atomico a fiamma.
D. Determinazione del cloro
1. Oggetto e campo di applicazione
Questo metodo serve a determinare il cloro presente come ione
cloruro nei complessi idrati alluminio/zirconio/cloruro negli
antidiaforetici non aerosol.
2. Principio
Il cloruro presente nel prodotto è determinato mediante
titolazione potenziometrica contro soluzione standard di
nitrato d'argento.
3. Reagenti
Tutti i reagenti devono essere della purezza richiesta per
analisi.
3.1. Acido nitrico concentrato (d20 = 1,42 g/ml).
3.2. Soluzione di acido nitrico al 5% (v/v): diluire 25 ml di
acido nitrico concentrato (3.1) in 250 ml d'acqua in un
beaker, mescolando di continuo. Trasferire questa soluzione
in un matraccio graduato da 500 ml e completare a volume con
acqua.
3.3. Acetone.
3.4. Nitrato d'argento, soluzione volumetrica 0,1 M ("AnalaR" o
equivalenti).
4. Apparecchiature
4.1. Attrezzature normali da laboratorio.
4.2. Piastra riscaldante con agitatore magnetico.
4.3. Elettrodo d'argento.
4.4. Elettrodo di riferimento al cloruro mercurioso.
4.5. pH/millivolt metro adatto alla titolazione potenziometrica.
5. Procedimento
5.1. Preparazione del campione
5.1.1. In un beaker da 250 ml pesare accuratamente 1,0 g (m.grammi)
di un campione omogeneo del prodotto. Aggiungere 80 ml
d'acqua e 20 ml di soluzione di acido nitrico al 5% (v/v)
(3.2).
5.1.2. Porre il beaker su una piastra riscaldante con agitatore
magnetico (4.2). Iniziare a mescolare e riscaldare fino a
raggiungere il punto di ebollizione. Per evitare che vada
rapidamente a secco, porre un coperchio di vetro sul
bicchiere. Far bollire per 5 minuti, togliere il bicchiere
dalla fonte di calore lasciare raffreddare a temperatura
ambiente.
5.1.3. Aggiungere 10 ml di acetone (3.3), immergere gli elettrodi
(4.3 e 4.4) al di sotto della superficie della soluzione e
iniziare a agitare. Titolare potenziometricamente con la
soluzione di nitrato d'argento 0,1 M (3.4) e tracciare una
curva differenziale per determinare il punto finale (V ml).
6. Calcolo
Calcolare il contenuto di cloro del campione, in percentuale
di massa, servendosi della formula seguente:
0,3545 x V
% (m/m) di cloro = ------------
m
dove:
m = massa espressa in grammi del campione prelevato per analisi
(5.1.1);
V = volume di nitrato d'argento 0,1 M, espresso in millilitri,
titolato al punto finale (5.1.3).
7. Ripetibilità (1)
Per un contenuto di cloro del 4,00% (m/m), la differenza tra
i risultati di due determinazioni eseguite in parallelo sullo
stesso campione non deve superare 0,10% (m/m).
____________________
(1) ISO 5725.
E. Calcolo dei rapporti degli atomi di alluminio rispetto a
quelli di zirconio e degli atomi di alluminio più gli atomi
di zirconio rispetto a quelli di cloro
1. Calcolo del rapporto degli atomi di alluminio rispetto agli
atomi di zirconio
Calcolare il rapporto Al : Zr mediante la formula:
Al % (m/m) x 91,22
rapporto Al : Zr = ------------------
Zr % (m/m) x 26,98
2. Calcolo del rapporto degli atomi di alluminio più gli atomi
di zirconio rispetto agli atomi di cloro
Calcolare il rapporto (Al + Zr) : Cl mediante la formula:
Al % (m/m) Zr % (m/m)
---------- + ----------
26,98 91,22
rapporto (Al + Zr) : Cl = -----------------------
Cl % (m/m)
----------
35,45
IDENTIFICAZIONE E DOSAGGIO DELL'ESAMIDINA, DELLA DIBROMOESAMIDINA,
DELLA DIBROMOPROPAMIDINA E DELLA CLOROESIDINA
1. Oggetto e campo di applicazione
Il metodo descrive la determinazione qualitativa e
quantitativa di:
- esamidina e suoi sali, tra cui l'isetionato e il
4-idrossibenzoato;
- dibromoesamidina e i suoi sali, tra cui l'isetionato;
- diacetato, digluconato e dicloridrato di cloroesidina
presenti nei cosmetici.
2. Definizione
Le concentrazioni di esamidina, dibromoesamidina,
dibromopropamidina e cloresidina determinate con questo
metodo sono espresse in percentuale di massa (% m/m) del
prodotto.
3. Principio
La determinazione qualitativa e quantitativa è effettuata
mediante cromatografia liquida ad alta risoluzione a fase
inversa per coppie ioniche, seguita da rilevamento mediante
spettrofotometria ad ultravioletti. L'esamidina, la
dibromoesamidina, dibromopropamidina e la clorsidina sono
identificate attraverso il tempo di ritenzione.
Il titolo di esamidina, dibromoesamidina, dibromopropamidina
e clorsidina misurato attraverso questo metodo è espresso in
percentuale di massa (% m/m) del prodotto.
4. Reagenti
Tutti i reagenti devono essere della purezza richiesta per
analisi e adatti alla cromatografia in fase liquida ad alta
risoluzione.
4.1. Metanolo
4.2. Sale sodico monoidrato dell'acido 1-eptansulfonico
4.3. Acido acetico glaciale (d20 = 1,05 g/ml).
4.4. Cloruro di sodio
4.5. Fasi mobili
4.5.1. Solvente I: soluzione in metanolo (4.1) 0,005 M di sale
sodico monoidrato dell'acido 1-eptansulfonico (4.2) portata
ad un pH apparente di 3,5 mediante acido acetico glaciale
(4.3).
4.5.2. Solvente II: soluzione acquosa 0,005 M di sale sodico
monoidrato dell'acido 1-eptansulfonico (4.2) portata a pH 3,5
mediante acido acetico (4.3).
Nota: Se necessario per migliorare la forma dei picchi, le fasi
mobili possono essere modificate e preparate con il metodo
seguente:
- Solvente I: sciogliere 5,84 g di cloruro di sodio (4.4) e
1,1013 g di sale sodico monoidrato dell'acido
1-eptansulfonico (4.2) in 100 ml di acqua. Aggiungere 900
ml di metanolo (4.1) e portare al pH apparente di 3,5
mediante acido acetico glaciale (4.3).
- Solvente II: sciogliere 5,84 g di cloruro di sodio (4.4) e
1,1013 g di sale sodico monoidrato dell'acido
1-eptansulfonico (4.2) in 1 l di acqua e portare a pH 3,5
mediante acido acetico glaciale (4.3).
4.6. Diisetionato di esamidina (C20H26N4O2 . 2C2H4O4S)
4.7. Diisetionato di dibromoesamidina (C20H24Br2N4O2 . 2C2H4O4S)
4.8. Diisetionato di dibromopropamidina (C17H18Br2N4O2 . 2C2H6O4S)
4.9. Diacetato di cloroesidina (C22H30Cl2N10 . 2C2H4O2)
4.10. Soluzioni di riferimento: preparare per ciascuno dei quattro
conservanti (da 4.6 a 4.9) soluzioni allo 0,005% (m/v) nel
solvente I (4.5.1).
4.11. 3,4,4'-triclorocarbanilide (triclorocarban)
4.12. 4,4'-dicloro-3-(trifluorometil) carbanilide (halocarban)
5. Apparecchiature
5.1. Materiale di impiego corrente in laboratorio
5.2. Cromatografo in fase liquida ad alta risoluzione con
rilevatore UV a lunghezze d'onde variabili
5.3. Colonna per analisi: acciaio inossidabile, lunghezza 30 cm,
diametro interno 4 mm, riempita con (micro)-Bondapack C1810
(micro)m o equivalente
5.4 Bagno ad ultrasuoni
6. Identificazione
6.1. Preparazione del campione.
Pesare circa 0,5 g di campione in una provetta graduata da 10
ml. Completare con il solvente I (4.5.1). Porre la provetta
graduata per 10 minuti in un bagno ad ultrasuoni (5.4).
Filtrare o centrifugare la soluzione. Raccogliere il filtrato
o il supernatante per la cromatografia.
6.2. Cromatografia
6.2.1. Gradiente di fase mobile
_________________________________________________________________
| |
Tempo | Solvente I | Solvente II
(min) | (% v/v) (4.5.1) | (% v/v) (4.5.2)
_______________|________________________|________________________
| |
0 | 50 | 50
| |
15 | 65 | 35
| |
30 | 65 | 35
| |
45 | 50 | 50
_______________|________________________|________________________
6.2.2. Regolare il flusso della fase mobile (6.2.1) a 1,5 ml/min e
fissare la temperatura della colonna a 35 (gradi) C.
6.2.3. Regolare la lunghezza d'onda del rilevatore su 264 nm.
6.2.4. Iniettare 10 (micro)l di ciascuna delle soluzioni di
riferimento (4.10) e registrarne i cromatogrammi.
6.2.5. Iniettare 10 (micro)l di soluzione campione (6.1) e
registrarne il cromatogramma.
6.3. Identificare la presenza della esamidina, della
dibromoesamidina, della dibromopropamidina o della
cloroesidina paragonando il/i tempo/i di ritenzione del/dei
picco/i registrato/i al punto 6.2.5 con quello/i ottenuto/i
dalle soluzioni di riferimento di cui al punto 6.2.4.
7. Determinazione
7.1. Preparazione delle soluzioni standard
Impiegare uno dei conservanti da (4.6 a 4.9) che sia assente
dal campione come standard interno. Qualora ciò non sia
possibile, impiegare il triclocarban (4.11), oppure
l'halocarban (4.12).
7.1.1. Soluzione madre allo 0,05% (m/v) nel solvente I (4.5.1) del
conservante identificato in 6.3.
7.1.2. Soluzione madre allo 0,05% (m/v) nel solvente I (4.5.1) del
conservante scelto come standard interno.
7.1.3. Per ciascun conservante identificato, preparare quattro
soluzioni standard trasferendo in una serie di provette
graduate da 10 ml campioni della soluzione madre del
conservante identificato (7.1.1) e adeguati quantitativi
della soluzione madre dello standard interno (7.1.2) secondo
la tabella seguente. Completare a volume ciascuna provetta
con il solvente I (4.5.1) e mescolare.
_____________________________________________________________________
| |
| Soluzione madre | Soluzione madre
| standard interno | conservante identificato
Soluzione |_____________________|___________________________________
standard | | |
| ml (7.1.2) aggiunti |ml (7.1.1) aggiunti|(micro)g ml (*)
___________|_____________________|___________________|_______________
| | |
I | 1,0 | 0,5 | 25
| | |
II | 1,0 | 1,0 | 50
| | |
III | 1,0 | 1,5 | 75
| | |
IV | 1,0 | 2,0 | 100
___________|_____________________|___________________|_______________
(*) Questi valori sono forniti a titolo indicativo e corrispondono
alle concentrazioni del conservante identificato nelle soluzioni
standard preparate impiegando una soluzione che contiene esattamente
0,05% del conservante identificato.
_____________________________________________________________________
7.2. Preparazione del campione
7.2.1. Pesare con esattezza 0,5 g di campione (p grammi) in una
provetta graduata da 10 ml; aggiungere 1,0 ml di soluzione
standard interno (7.1.2) e 6 ml di sovente I (4.5.1) e
mescolare.
7.2.2. Porre la provetta graduata per 10 minuti in un bagno
ultrasuoni (5.4). Dopo raffreddamento, completare a volume
con il solvente I e mescolare. Centrifugare o filtrare su
filtro di carta pieghettata. Raccogliere, se del caso, il
supernatante o il filtrato per l'analisi cromatografica.
7.3. Cromatografia
7.3.1. Regolare il gradiente di fase mobile, il suo flusso, la
temperatura della colonna e la lunghezza d'onda del
rilevatore del cromatografo in fase liquida ad alta
risoluzione (5.2) alle condizioni richieste nella fase di
identificazione (da 6.2.1. a 6.2.3).
7.3.2. Iniettare 10 (micro)l della soluzione campione (7.2.2) e
misurare la superficie dei picchi. Ripetere questo
procedimento con altri quantitativi da 10 (micro)l della
soluzione campione fino ad ottenere risultati coerenti.
Calcolare il rapporto della superficie del picco ottenuto con
il composto da analizzare, rispetto alla superficie del picco
ottenuto con lo standard interno.
7.4. Calibrazione
7.4.1. Iniettare 10 (micro)l di ciasuna delle soluzioni di
riferimento (7.1.3) e misurare la superficie dei picchi.
7.4.2. Per ciascuna soluzione di riferimento (7.1.3), calcolare il
rapporto della superficie del picco di esamidina,
dibromoesamidina, dibromopropamidina o cloroesidina rispetto
alla superficie del picco del riferimento interno. Tracciare
una curva di calibrazione indicando questi rapporti in
ordinata e le concentrazioni corrispondenti del conservante
identificato nelle soluzioni di riferimento, in microgrammi
per millimetro, in ascissa.
7.4.3. Leggere sulla curva di calibrazione (7.4.2) la concentrazione
del conservante identificato, corrispondente al rapporto
delle superfici dei picchi, calcolato al punto 7.3.2.
8. Calcolo
8.1. Calcolare il contenuto di esamidina, dibromoesamidina,
dibromopropamidina o cloroesidina nel campione, in
percentuale di massa, mediante la formula seguente:
c MW1
% (m/m) = -------- x ---
1000 x p MW2
dove:
p = massa in grammi del campione impiegato per analisi (7.2.1);
c = concentrazione del conservante nella soluzione campione, in
microgrammi per millimetro, ottenuta dalla curva di
calibrazione;
MW1 = peso molecolare del conservante presente come base;
MW2 = peso molecolare del sale corrispondente (vedi punto 10).
9. Ripetibilità (1)
Per una concentrazione dello 0,1% (m/m) di esamidina,
dibromoesamidina, dibromopropamidina o cloroesidina, la
differenza tra i risultati di 2 dosaggi paralleli sullo
stesso campione non deve superare lo 0,005%.
___________________
(1) ISO 5725.
10. Tables des poids formulaires
Esamidina C20H26N4O2 354,45
Diisetionato di esamidina C20H26N4O2 . 2C2H6O4S 606,72
Esamidina di-p-idrossibenzoato C20H26N4O2 . 2C7H6O3 630,71
Dibromoesamidina C20H24Br2N4O2 512,24
Diisetionato di dibromoesamidina C20H24Br2N4O2 . 2C2H6O4S 764,51
Dibromopropamidina C17H18Br2N4O2 470,18
Diisetionato di dibromopropamidina C17H18Br2N4O2 . 2C2H6O4S 722,43
Cloresidina C22H30Cl2N10 505,45
Diacetato di cloresidina C22H30Cl2N1O . 2C2H4O2 625,56
Digluconato di cloresidina C22H30Cl2N1O . 2C6H12O7 897,76
Diclorxidrato di cloresidina C22H30Cl2N1O . 2HCl 578,37
___________________
(1) ISO 5725.