مطيافية الرنين المغناطيسي النووي

مطيافية الرنين المغناطيسي النووي (NMR)، وهي تقنية بحثية تستخدم الخواص المغناطيسية لبعض النويات الذرية. وهي تحدد الخواص الفيزيائية والكيميائية للذرات أو الجزيئات التي تضمها. وهي تعتمد على ظاهرة الرنين المغناطيسي النووي ويمكن أن تعطي معلومات تفصيلية عن بنية، وديناميكية، وحالة تفاعل، والبيئة الكيميائية للجزيئات. المجال المغناطيسي داخل الجزيء حول ذرة في جزيء ما يغير تردد الرنين، وهذا يعطي معلومات عن البنية الإلكترونية للجزيء.
يستخدم الكيميائيون والباحثون في الكيمياء الحيوية مطيافية الرنين المغناطيسي النووي للتحقق من خواص الجزيئات العضوية، مع أنه يستخدم على أي نوع من العينات التي تضم نويات ذات التفاف ذاتي.
طيف الرنين المغناطيسي النووي وحيد، وسهل الحل، ويمكن تحليله بسهولة، وغالبًا ما يمكن التنبؤ به للجزيئات الصغيرة. وبذلك فإنه يستخدم في الكيمياء العضوية لتأكيد هوية المادة. فالمجموعات الوظيفية المختلفة ممكنة التمييز بوضوح، والمجموعات الوظيفية المتطابقة مع المركبات المجاورة المغايرة ستعطي إشارات مميزة. وقد حل طيف الرنين المغناطيسي النووي محل اختبارات الكيمياء الرطبة التقليدية مثل كواشف اللون المستخدمة في تحديد المركبات بلونها. عيب هذه التقنية أنها تتطلب كمية كبيرة نسبيًا، 2-50 ملغ، من المادة النقية مع أنه يمكن استردادها. ويفضل أم تحل العينة في مذيب، لأن تحليل NMR للمواد الصلبة يتطلب آلة مطيافية للحالة الصلبة، وقد لا تعطي أطيافًا يمكن حلها بسهولة.
الفترة الزمنية لمطياف الرنين المغناطيسي النووي طويلة نسبيًا، ولذلك فهو غير مناسب لمراقبة الظواهر السريعة، ويعطي طيفًا متوسطًا فقط. ومع أن نسبة كبيرة من الشوائب يمكن أن تظهر في طيف NMR، إلا أنه توجد طرق أفضل للكشف عن الشوائب، فطريقة NMR بطبيعتها ليست حساسة جدًا.

المبدأ

تعتمد الطريقة على استغلال الرنين النووي المغناطيسي لأحد التفاعلات الرنانة بين العزم المغناطيسي للأنوية الذرية في العينة مع مجال مغناطيسي خارجي عالي التردد . تستخدم كعينات نظائر معينة ، لها لف مغزلي نووي مختلف عن الصفر في حالتها القاعية. أمثال تلك النظائر : ذرات الهيدروجين ( 
¹H ); و الديوتيريوم ( ²D );و الليثيوم ( ⁶Li ); و البورون-10 ( ¹⁰B ) و البورون-11 ( ¹¹B ) ، والكربون (¹³C ) ;و النيتروجين-15 ( ¹⁵N ) ;و الأكسجين-17 ( ¹⁷O) ، والكالسيوم-43 ( ⁴³Ca ).

تاريخ

تعود مطيافية الرنين النووي إلى تجربة أوتو شترن التي أجراها في عام 1922 . بين من تلك التجربة أن فيضا من ذرات الفضة ينقسم إلى فيضين عند مروره خلال مجال مغناطيسي ، كل فيض (شعاع) منهما يتكون من أنوية لها لف مغزلي إما علوي أو سفلي. وتعرف تلك التجربة في الفيزياء بتجربة شترن و جيرلاخ وقد حصل شترن على جائزة نوبل للفيزياء في عام 1943 على عمله هذا . 
وفي عام 1946 أثبت فيليكس بلوخ و إدوارد بورسيل لأول مرة وجود الرنين النووي المغناطيسي ، وحصلا على جائزة نوبل للفيزياء في عام 1952 . وعرضا في محاضرتهما أمام هيئة الجائزة أطيافا لانزياح جزيئات الإيثانول ، وبذلك بدأت تقنية مطيافية الرنين النووي . وتطورت الطريقة واصبحت أحد الطرق الهامة لتعيين البنية الجزيئية الكيميائية. واستخدمت أولا طريقة تسمى "طريقة الموجة المستمرة" Continuous-Wave-(CW)-Method ، وفيها يغيرون تردد المجال المغناطيسي الذي يحدث الرنين تدريجيا بحيث تتأثر الأنوية وتبدأ الرنين عند ترددات معينة ، الواحد تلو الآخر 
. 
وفي عام 1947 قام راسل فاريان و فيليكس بلوخ بتسجيل اخراع لمطياف رنين نووي . وقامت شركة "فاريان أسوسييشن " ببناء أو أجهزة مطياف الرنين النووي في بالو ألتو بالولايات المتحدة وعرضها في السوق. ونحو عام 1955 قامت شركة يابانية وهي " شركة جويل" ببناء تلك الأجهزة . ثم قامت العالمة الأمريكية "ميلدريد كون" في أوائل الستينيات من القرن الماضي باستخدام مطيافية الرنين النووي لدراسة عمليات التمثلي الغذائي على عينات جزيئات في المختبر. فكانت رائدة في هذا المجال وقامت بتطوير تطبيقاتها ، ويتبعها الكثيرون من الباحثين في هذا المجال.
قام كورت فوتريش ومجموعته العلمية ببناء مطياف رنين نووي في بعدين 2D ومتعدد الأبعاد Multi-Dimensions-NMR واصبحت طريقة هامة في التحليل الكيميائي وعلى الأخص في تحليل بنية المبلمرات البيولوجية Biopolymere مثل البروتينات . وحصل فوتريش على جائزة نوبل في الكيمياء في عام 2002 على هذا التطبيق . ويختلف تحليل الرنين النووي لبنية الجزيئات عن تحليل البنية بأشعة إكس في أن طريقة "فوتريش" يمكن تطبيقها على تحليل بنية الجزيئات في سوائل.

الأنوية المستخدمة

قابلية العزم المغناطيسي للنواة الذرية هي أضعف كثيرا من قابلية المواد ذات مغناطيسية مسايرة أو مغناطيسية مضادة (بنسبة :10⁴). في المغناطيسية المعاكسة و المغناطيسية المسايرة فإن القابلية للمغنطة هي خاصية للإلكترونات في الغلاف الذري .
يمكن التأثير على أنوية ذرات الهيدروجين بتردد منخفض (عدة كيلوهيرتز) ومجال مغناطيسي ضعيف . وتهم طريقة الرنين النووي في تعيين بناء الجزيئات معقدة التركيب ، إلا أن هذه تحتاج إلى استخدام ترددات عالية (60 ميجاهيرتز) و مجال مغناطيسي قوي تلك (1,4تسلا), بسبب حدوث انزياح كيميائي في المركب المحتوي على عدة ذرات للهيدروجين. وعادة تستخدم حيز واسع من الترددات وليس تردد واحد.
أنوية الذرات التي تحتوي على عدد فردي من البروتونات أو عدد فردي من النيوترونات يكون لها "سبن نووي" 
I. ويمكن أن يكون عدد الكم المغزلي النووي مساويا 1/2, 1, 3/2, …, 9/2) : 
للأنوية ذات تكافؤ uu تكون I = n (أي تساوي 1,2,3 ) ، بينما للأنوية ذات تكافؤ (فيزيائي) 
gu أو ug تكون I = (2n+1)/2 (أي تكون أنصافا 1/2, 3/2, 5/2,...). وفي حالة نظير له عدد مزدوج من البروتونات والنيوترونات (وتسمى هذه أنوية ذات تكافؤ gg) تكون I = 0.
يصحب "السبن النووي" الذي لا يكون صفرا عزما مغناطيسيا . ويعتمد مقدار العزم المغناطيسي علي النسبة المغناطيسية الدورانية للنظير. ويتخذ اتجاه العزم المغناطيسي للنواة في وجود مجال معناطيسي خارجي الاتجهات التي تحدده له ميكانيكا الكم . فإذا كان 
للنواة "سبن" I = ½ يكون شكل النواة كريا , وإذا كان للنواة سبن I > ½ 
يكون شكل النواة بيضويا ، وبذلك يكون له أيضا عزما رباعي الأقطاب كهربي „eQ“, وهذا يمكن أن يتآثر مع مجال كهربائي خارجي . يتسبب هذا التفاعل الإضافي الكهربائي إلى زيادة عرض خطوط الرنين النووي المعناطيسي ، وبالتالي يكون تفسيرها وتحليلها أصعب من حالة الخطوط الحادة ، التي تنتج من أنوية ذات عزم مغزلي نووي (سبن) ½ .
الأنوية التي تستخدم بكثرة في تعيين بناء المركبات الكيميائية هي النظائر ذات "سبن" ½. منها النوكليدات ¹H,و ¹³C,و ¹⁵N, و¹⁹F,و ²⁹Si و ³¹P.
يمكن للأنوية ذات سبن 1/2 أن تتخذا مستويين اثنين للطاقة ، إما أن تكون في اتجاه المجال المغناطيسي المسلط عليها من الخارج أو تكون في عكس اتجاهه. أي اتجاه آخر يكون ممنوعاً طبقاً لميكانيكا الكم. وينتسب الاتجاهين إلى مستويي طاقة مختلفتين . ويكون فرق الطاقتين لذلك المستويين متناسبا مع شدة المجال المغناطيسي الخارجي. ومعامل التناسب هو النسبة المغناطيسية الدورانية لنواة النظير المعني.
يمكن احداث انتقالات بين اتجاهات سبن النواة عن طريق تسليط موجات كهرومغناطيسية عليها من الخارج. عند ترددات معينة يظهر رنين للمجالات المغناطيسية (المجال الخارجي والمجال الناتج عن السبن) . ويكون تردد الرنين متناسبا مع الفرق بين مستويي الطاقة لمغزلية النواة (سبن) ويسمى تردد لارمور.
يوضح ذلك الرسم المجاور ، فلنتخيل نظام إحداثيات يكون فيه اتجاه المجال المغناطيسي الخارجي موازيا للمحور z . فتوجه نواة ذات مغزلية 1/2 نفسها بحيث يكون متجه السبن موازيا أو معكوسا لاتجاه المجال المغناطيسي. وإذا أخذنا في الاعتبار عدة من تلك الانوية ، ينشأ مخروطان معكوسان يمثلان بدارية السبن للحالة الموازية والحالة المعكوسة . ونظرا لاحتلاف مستويي الطاقتين للحالتين الموازية والمعكوسة ينشأ كثافة مختلفة للحالتين عند التوازن الحراري. يتبع هذا التوازن الحراري توزيع بولتزمان عند درجات الحرارة العالية وينتج عنه مغناطيسية زائدة في الاتجاه الموجب للمحور z .
تنتج نبضة الرنين النووي المغناطيسي عند تعريض العينة لتردد راديوي في وجود مجال معناطيسي. تتأثر مغزلية الأنوية بالمجال المغناطيسي بنبضة التردد الراديوي ، وتنقلب محصلة متجه الأنوية . فلا يصبح موازيا للمحور z ، وإنما يتخذ زاوية بالنسبة له ، وتتناسب تلك الزاوية مع شدة نبضة التردد الراديوي و زمنها . وفي العادة تبلغ النبضة بين 1–10  ميكروثانية. ويبلغ أقصي انحناء محصل اليبن بالنسبة لاتجاه المغناطيسية زاوية 90° .

مطيافية رنين نووي وحيدة البعد

مطيافية الرنين النووي وحيدة البعد هي أكثر ما يستخدم لتعيين بناء المركبات الكيميائية. وعن طريقها يقاس انزياح كيميائي لإحدى الذرات عن مادة مرجعية . الهيدروجين ¹H و الكربون-13 ¹³C لها انوية توجد في معظم المركبات العضوية ويمكن قياسها . وكذلك النتروجين-15 و الفوسفور-31 و الفلورين-19 وغيرها فيمكن استخدامها أيضا في مطيافية الرنين النووي.
يختلف شكل الطيف المقاس باختلاف طريقة القياس. عند قياس أطياف ¹H لا تستعمل عادة نظاقات واسعة للترددات . بذلك تتاح الفرصة لجميع ذرات الهيدروجين أن تربط "مغزليتها" بمغزلية نواة أخرى فيما يسمى تشابك سبن-سبن . بذلك تنتج نبضة عن انزاح كيميائي معين لذرة ، وانقسام النبضة يعطي معلومات عن محيط تلك الذرة ، ومنها يمكن استخلاص معلومات عن بنية المركب.
تقاس النظائر 
¹³C,و ¹⁵N,و ³¹P,و ¹⁹F في معظم الأحيان من دون اشتباك مع النطاق الواسع لترددات ¹H, بحيث لا يحدث انقسام لنبضة أنوية الهيدروجين ¹H.