16 DE JANEIRO DE 1985993Sempre que estes reagentes forem utilizados segundo a técnica recomendada pelo produtor, não deverá surgir nenhum fenómeno serológico anormal como:a) Efeito de prozona;b) An «complementaridade.2 — Actividade:A) Reagentes de grupagem tecidular utilizados nas técnicas de citotoxidade em linfócitos:Determina-se o título de um tal reagente procedendo a diluições duplas sucessivas do reagente estudado em soro AB inactivado de um dador negativo para o antigénio (ou os antigénios) correspondente(s) ao anticorpo (ou aos anticorpos) contido(s) no reagente. O dador não deverá além disso ter sido imunizado contra os antigénios de tecidos, após transfusão, gravidez, etc.Cada diluição é então ensaiada com linfócitos conhecidos por conterem o antigénio (ou os antigénios) correspondenle(s) no reagente segundo a técnica recomendada pelo produtor. O título é o recíproco do número representando a mais forte diluição do soro onde seja observada uma reacção nitidamente positiva, sendo a diluição calculada, não tendo em conta o volume da suspensão cetular ou de qualquer outro aditivo contido no volume total.B) Reagentes de grupagem tecidular a utilizar na técnica de fixação do complemento em plaquetas:Determina-se o título deste reagente procedendo a diluições duplas sucessivas do reagente estudado em soro AB inactivado a 10 % em tampão de veronal. Cada soro deverá ser seguidamente testado com plaquetas conhecidas contendo os antigénios homólogos aos anticorpos contidos no reagente, segundo a técnica recomendada pelo produtor. O título é o recíproco do número representando a mais forte diluição de soro onde seja novamente observada uma reacção nitidamente positiva, sendo a diluição calculada sem ter em conta o volume da suspensão celular ou de qualquer outro aditivo contido no volume total.Outras disposições para os reagentes de grupagem tecidular a utilizar nas técnicas de citotoxidade em linfócitos e para os reagentes a utilizar nas técnicas de fixação do complemento em plaquetas:3 — Conservação:Os reagentes de grupagem tecidular podem ser conservados no estado líquido ou sob forma desidratada. Os reagentes líquidos devem ser conservados a uma temperatura não inferior a — 70"C e os reagentes desidratados a uma temperatura não superior a —4"C.É necessário evitar tanto quanto possível descongelar e recongelar os reagentes durante o período dc armazenagem.Os reagentes desidratados deverão ser conservados numa atmosfera de gás inerte ou no vácuo, no recipiente em que tenham sido desidratados e que deverá ser fechado de forma a evitar qualquer penetração de humidade.Um reagente desidratado não deverá perder mais de 0,5 % do seu peso quando é testado acentuando a sua desidratação por meio de anidrido fosforoso a uma pressão que não ultrapasse 0,02 mm de mercúrio durante 24 horas.Os reagentes deverão ser preparados com as necessárias precauções de assepsia e devem estar isentos de qualquer contaminação bacteriológica. A fim de evitaro aparecimento de bactérias, o produtor poderá prescrever a adição de um antiséptico e ou de um antibiótico ao reagente. Nestes casos o reagente deverá continuar a preencher as condições de especificidade e dc actividade em presença da substância adicionada.O mesmo se passa em relação a qualquer outro aditivo, por exemplo os anticoagulantes. Os reagentes após a descongelação ou reconstituição deverão apresentar-se transparentes e não deverão conter quaisquer resíduos, vestígios de coagulação ou partículas visíveis.4 — Estabilidade e prazo de validade: Qualquer reagente conservado nas condições de armazenagem apropriadas deverá conservar as propriedades requeridas durante pelo menos 1 ano.O prazo de validade dc um reagente no estado líquido mencionado no rótulo não deverá ultrapassar o período de 1 ano a contar da data do último teste de actividade satisfatória.O prazo de validade poderá ser prolongado por períodos de 1 ano sc se repetirem os testes dc actividade.O prazo de validade dos reagentes sob forma desidratada, mencionado no rótulo deverá estar conforme às conclusões obtidas das experiências de estabilidade.5 — Preparação e volume por amostra:Os reagentes de grupagem tecidular serão preparados c repartidos de tal forma que os reagentes contidos num determinado recipiente permitam efectuar testes com cédulas de controle positivo e negativo c testes com células desconhecidas.O volume contido num determinado recipiente deverá ser tal que, se necessário, possa permitir a execução dos testes de actividade apropriados descritos no presente Protocolo.6 — Registo dos resultados e amostras:O laboratório produtor deverá anotar por escrito todas as operações relativas à produção e controle dos reagentes de grupagem sanguínea. Deverá conservar amostras apropriadas de todos os reagentes que tenha produzido até que, razoavelmente, possa ser considerado inutilizável o lote a que os mesmos digam respeito.7 — Remessa:Os reagentes congelados deverão ser expedidos por forma a permanecerem congelados até à chegada. Deverão ser tomadas todas as precauções necessárias para evitar que os reagentes não sejam desactivados pela penetração de C02. Os reagentes desidratados podem ser expedidos à temperatura ambiente.8 — Rótulos, folhetos e certificados:Deverão ser aplicados em cada recipiente definititvo 2 rótulos impressos a negro sobre papel branco, um em inglês e outro em francês, que deverão mencionar as seguintes indicações:a) Nome e endereço do produtor;b) Nome do reagente tal como figura no título da especificação cm causa;c) Nome e quantidade de antisséptico e ou de antibiótico ou a indicação da não existência destas substâncias;d) Volume ou, se o reagente é desidratado, volume e composição do líquido necessário à sua reconstituição;e) Prazo de validade; /) Número do lote;g) Condições de armazenagem;h) Resultados da prova HB — Ag.