הרמזים המצטברים מההקלטות העתיקות ומתגובותיה של גלאדוס מעלים שצ'ל היא ביתם של קייב ג'ונסון וקרוליין, ושגלאדוס היא העתק מוחה של קרוליין לתוך בינה מלאכותית.
הן מגיעות למעלה לאזור ניסויים חדש שוויטלי בנה, ובו חידות פשוטות שבפשוטות והכלאה מוזרה בין שני צריחים לקוביה שמקפצת בחוסר ישע וממלמלת דברים לא ברורים. הן מתחילות להתקדם בסדרת המבחנים בקלות, אך אז וויטלי מגלה אוסף מבחנים שגלאדוס הותירה אחריה והאתגר נעשה קשה במידה רבה. וויטלי חושף שמרגע שמונה למנהל המפעל נכפתה עליו אובססיה - הוא חייב לבחון כל הזמן, ולכן הוא שמח שגלאדוס וצ'ל חזרו. גלאדוס מערימה עליו וגורמת לו לומר פתרון של מבחן, ומסתבר שברגע שהוא עושה זאת הוא חוטף מכת חשמל.
לבסוף גלאדוס וצ'ל מגלות שוויטלי מצא דרך שאינה תלויה בהן לבחון, והוא מתכוון להרוג אותן. וויטלי מנסה להרוג את צ'ל כמה פעמים. אך צ'ל וגלדוס נמלטות ומגיעות בסופו של דבר לחדרו של וויטלי. צ'ל מתמודדת עם וויטלי, בכך שהיא משתקת אותו ומחדירה לו ליבות פגומות. היא הולכת ללחוץ על כפתור בשביל להשבית את וויטלי אך ברגע האחרון וויטלי מפוצץ את החדר. למזלה של צ'ל, עוצמת הפיצוץ פתחה את התקרה והראתה לצ'ל את הירח. היא שולחת פורטל לירח (הירח, שמהאבנים שבו מייצרים את הג'ל הלבן, מוליך פורטלים מעולה) ווויטלי וליבת החלל נתקעים בחלל. צ'ל מתעוררת בליווי אטלס ופי-בודי במעלית. גלאדוס מדברת אל צ'ל באהבה בד בבד אומרת שצ'ל מסוכנת מדי בשבילה ולכן היא תניח לה ללכת, והמשפט האחרון הוא "היה כיף. אל תחזרי". גלאדוס משחררת את צ'ל במעלית כלפי פני השטח. בשלב מסוים המעלית עוצרת ודלת נפתחת אל חדר ובו הרבה צריחים, השרים לצ'ל שיר אהבה אופראי. המעלית ממשיכה ומוציאה את השחקן בבקתה בתוך שדה חיטה. השחקן יוצא מהתא, מסתכל סביב ודלת התא נטרקת סופית. אחרי הטריקה שיר הסיום (Want you gone) מתנגן, ולסיום יש סצנה קצרה בה וויטלי מביע את הצער והחרטה שלו לצ'ל וגלאדוס.
משחק רב-משתתפים.
בין בריחתה של צ'ל ב-פורטל 2 לחלק 9 (The Part When He Kills You), בונה גלאדוס שני רובוטים שדגמיהם הנקראים ATLAS ו-P-BODY כיוון שצ'ל הרגה את גלאדוס ולא רצתה למות שוב. ATLAS (אטלס) הוא רובוט בעל מבנה גוף גס ולא מסודר, בעל אישיות עם תכונות של בן אדם זכר. P-BODY (פי-בודי) הוא רובוט בעל צורה הדומה מעט לגוף של אישה, עם מבנה מדויק. לפי-בודי יש אלמנטים באישיות המיוחסים לנשים בדרך כלל. הרובוטים נבנו ככל הנראה בהסתמך על תוכניות ישנות לבדיקות צוותים, אחרי שבדיקות צוותים של בני אדם נהפכו לכישלון, כיוון שהפרטנרים לא היו מגובשים והרגו אחד את השני בהזדמנות הראשונה. מכיוון שאטלס ופי-בודי הם רובוטים, גלאדוס יכולה פשוט להשתמש בגיבוי הזיכרון ולבנותם מחדש. גלאדוס בודקת את הרובוטים בחמישה קורסים שונים (לא כולל ה-PEER REVIEW), ובסופו של כל אחד מהם (פרט לחמישי ולשישי) היא שולחת את הרובוטים למשרדים נטושים במעבדות שלגלאדוס אין גישה אליהם, וגורמת להם להכניס דיסקי אבטחה המאפשרים לה להשיג שליטה באזור. במהלך הבדיקות הרובוטים מקבלים תכונות של בני אדם, גלאדוס אינה מרוצה משיתוף הפעולה ביניהם ובקורס מסוים מנסה גלאדוס לפרק את הקשר ההדוק. למשל, כשהרובוטים מנפנפים אחד לשני לשלום, גלאדוס אומרת: אני לא יודעת מה אתם חושבים שאתם עושים, אבל אני לא אוהבת את זה. אני רוצה שתפסיקו." ובקורס החמישי, נשלחים הרובוטים אל אזור נידח שננעל ונאטם עוד בשנות ה-80', ומתבקשים לפתוח כספת קריונית (הנקראת "Extended Relaxation Annex") המכילה נסיינים (Test Subjects) אנושיים לניסויים. מכיוון שלאטלס ולפי-בודי יש תכונות אנושיות, הם הצליחו להיכנס לכספת, ובסופו של דבר נתנו ל-גלאדוס גישה לאספקת בני האדם הזו והרובוטים חוגגים. במשחק ניתן גם להגיע לקורס שישי שהוא Extra Course.
הדמויות במשחק.
צ'ל.
צ'ל (באנגלית: Chell, מסתבר שאפילו בחברת Valve אין הסכמה אם שמה מבוטא "שֶל" או "צֶ'ל") - רשומה כ"נבחנת #1" אבל לשעבר כ-#1498, הייתה הנבחנת של Aperture Science, והייתה מעורבת בבדיקות החברה ל-Handheld Portal Device (ידוע גם כ-Portal Gun).
היא הדמות הראשית השקטה של עלילת השחקן-יחיד. מעט מאוד ידוע על עברה, מעבר לרצון העז שלה לחיות.
אף על פי כן, במהלך הבריחה שלה מגלאדוס, וויטלי וצ'ל נתקלים בפרויקט מדעי שהתבצע ב-"יום הבא את בתך לעבודה". הבנות ניסו להפיק חשמל מתפוחי אדמה, ובאחת מעמדות העבודה, נרשמה שמה של "צ'ל". ככל הנראה "צ'ל" הייתה בתו של אחד העובדים ב-Aperture Science, אולי אף של מנכ"ל החברה ומזכירתו. נוסף על כך, קיים דמיון במבנה גופה של "צ'ל" לבין תמונתה של "קרולין" (העוזרת האישית של "קייב ג'ונסון"), הדבר מרמז כי גלאדוס היא בעצם אמה של "צ'ל", ומסביר את התנהגותה הרחמנית של גלאדוס בסוף המשחק.
צ'ל מוקנטת ואף מאוימת ברצח על ידי ה-AI (אינטליגנציה מלאכותית) והמשגיחה על המפעל, GlaDOS (בעברית: גלאדוס) במהלך מבחניה. היא מחזיקה ברובה פורטלים, ומשתמשת בו על מנת לחמוק ממלכודות שונות ולנווט במפעל על מנת לברוח.
גלאדוס.
גלאדוס (באנגלית: GlaDOS; ראשי תיבות: Genetic Lifeform and Disk Operating System) - הליבה המרכזית המועצבת לשלוט, להדריך ולהשגיח על Aperture Science. עם היכולת להחליף ולהזיז מתקנים וחדרים, גלאדוס יכולה ליצור המוני עיצובי מבחנים בזמן שהיא נמצאת בחדר ה-AI (אינטליגנציה מלאכותית) המרכזי, ממנו היא שולטת על כל אזורי המבחנים ועל רוב תפקודי המפעל.
שמה המקורי של גלאדוס הוא קרולין, והיא הייתה העוזרת האישית של ראש מעבדות אפרצ'ר, קייב ג'ונסון. לפי אחת מבקשותיו האחרונות של ג'ונסון, אישיותה וזכרונותיה של קרולין הוכנסו דיגיטלית לליבת המידע המרכזית של המעבדות, גלאדוס.
גלאדוס פיתחה אישיות פסיכופתית, ורצחה את עובדי המפעל באמצעות גז עצבים. המהנדסים ניסו למנוע ממנה להמשיך לרצוח באמצעות ליבות בינה מלאכותית שונות שהצמידו אליה, אך נכשלו בכל נסיונותיהם, ובסופו של דבר רק צ'ל נותרה בחיים, שרויה בשינה מלאכותית, מבין כל הצוות ונבדקי הניסויים.
לגלאדוס קול נשי, והיא דמות המשנה של המשחק הראשון ובחציו השני של עלילת השחקן-יחיד במשחק השני. במצב-משחק הרב-משתתפים, גלאדוס היא המשגיחה והמנחה של אטלס ופי-בודי, ומנסה לסכסך ביניהם ללא הצלחה - ומסתבר שמבחינתה מדובר רק במבחן נוסף. גלאדוס יבשושית, סרקסטית ונהנית ללעוג לצ'ל לאורך המבחנים ולתאר לה מה תעשה לאחר שצ'ל תמות.
קרולין וגלאדוס מדובבות על ידי זמרת האופרה והמדובבת אלן מקליין.
וויטלי.
וויטלי (באנגלית: Wheatley) - אחת מהליבות שהוצמדו לגלאדוס על מנת לבלום אותה - על ידי תכנותו להחליט תמיד החלטות שגויות ולהגות רעיונות שהוגדרו על ידי גלאדוס "אידיוטיים". הוא בעל מבטא בריטי ומתבטא בסגנון דיבור בריטי אופייני.
וויטלי מנחה את צ'ל במהלך מאמצי השניים לברוח ממפעל Aperture Science, ובשלב מסוים הוא פולט בטעות שהוא מתעב בני אדם ורואה בהם יצורים נחותים. צ'ל מצליחה להדיח את גלאדוס ולשים את וויטלי בראש המפעל, אך וויטלי, מסנוור מכוחותיו החדשים, הופך למגלומן ונקמן ונהיה האנטגוניסט הראשי של המשחק.
וויטלי מדובב על ידי השחקן והקומיקאי הבריטי סטיבן מרצ'נט.
קייב ג'ונסון.
קייב ג'ונסון (באנגלית: Cave Johnson) - הבעלים של Aperture Science, שהתפתחה מקודמיה, Aperture Fixtures ולאחר מכן Aperture Science Inovators. קייב ג'ונסון הופיע לראשונה בתחילת אחת מהמאורות של ראטמן במהלך המשחק הראשון, ולאחר מכן הוצג וקיבל פרטים נוספים במהלך Portal ARG.
בפורטל 2, קייב ג'ונסון הפך לדמות בולטת דרך כמה הקלטות קוליות אוטומטיות שהוקלטו משנות ה-40' המאוחרות ולפעמים משנות ה-80'. מצבו הנוכחי ומיקומו לא ידועים, אבל הוא הוכרז כמת לאחר חשיפתו למוצרים רעילים שזוקקו מאבני ירח.
קייב ג'ונסון דובב על ידי השחקן האמריקאי ג. ק. סימונס.
קרולין.
דמות לא נראית בעלילת המשחק-יחיד של פורטל 2 חוץ מבתמונה, קרולין (באנגלית: Caroline) הייתה עוזרת אישית של המנכ"ל לשעבר של Aperture Science– קייב ג'ונסון, עד שלאחר מכן הפכה ליורשתו. לא הרבה ידוע על דמותה, כאשר היא נשמעת בקצרה דרך חלקים קצרים בהקלטותיו המוכנות-מראש של קייב ג'ונסון.
מההקלטות, ברור שקייב ג'ונסון שם אותה במעמד גבוה, והכריז ש"היא עמוד השדרה של המפעל הזה". לאחר מכן מינה אותה ג'ונסון להיות יורשתו כאחת ממשאלות-המוות שלו.
הזמן בו היא הפכה למנכ"לית אינו ידוע, אך ברור שג'ונסון הילל אותה כדי לחלץ את ישותה אל ליבה המשגיחה על פעילותו של המפעל, הליבה אשר הפכה לגלאדוס.
קרולין מדובבת על ידי אלן מקליין.
P-Body ו-Atlas.
שני רובוטים שתוכננו במיוחד לניסויים של שיתוף פעולה. פעילים במצב co-op. הרובוטים נוצרו על ידי גלאדוס למבחנים, ככל הנראה מתוכניות ישנות ממערכת המעבדות.
ראטמן.
דאג ראטמן (באנגלית: Doug Rattman) - העובד היחיד של אפרצ'ור סייאנס ששרד את הנוירוטוקסין בזכות היותו פרנואיד וצפה את זה. עדיין חי בתוך המתקן. הוא שם את צ'ל בשינה קריוגנית. ככל הנראה נהרג על ידי צריח שמירה. דאג ראטמן אינו מופיע במשחק כלל, אבל משאיר רמזים בחדרים סודיים וישנים ברחבי אפרצ'יור סיינס.
הג'לים.
במשחק ישנם שלושה סוגים של ג'ל: הג'ל הכחול, הג'ל הכתום והג'ל הלבן. לשלושתם יש תפקיד שונה ומאפיינים שונים במשחק:
הג'ל הכתום (Propulsion Gel).