Foram coletadas tres amostras de cada temporada.Estes Melipona especies manter o mel em compartimentos dentro das colmeias, conhecido como potes, e por esta razao foi utilizada uma adaptacao 20 mL seringa contendo um tubo esteril para retirar o mel dos potes. Este procedimento foi levado a cabo por tecnicos treinados ACP. O mel foi retirado imediatamente armazenados em recipientes estereis de vidro escuro para evitar a fotodegradacao, e mantida a 5 C.Tres amostras de mel comerciais tambem foram incluidos neste estudo: o mel de eucalipto (predominante floracao) do Rio Grande do Sul (Mel B); mel produzido por Apis sp. abelhas do Ceara (mel C), e mel produzido pelas abelhas sem ferrao conhecidas como Jandaira ( M. subnitida , Apidae, Meliponinae), produzido pelos apicultores da comunidade da Reserva de Desenvolvimento Sustentavel do Tupe (RDS Tupe), localizado na zona rural de Manaus (mel D). A colheita de BD mel ocorreu em 2009.Cepas bacterianasEstirpes de Staphylococcus aureus , Escherichia coli (O157: H7), Proteus vulgaris, Shigella sonnei, Salmonella paratyphi e Klebsiella sp. foram gentilmente cedidas pelo Laboratorio de Virologia Tropical do INPA. As culturas bacterianas foram mantidas em agar nutriente a 36 C.As cepas bacterianas foram previamente testados quanto a sua sensibilidade aos antibioticos, como mostra a Tabela 1 .Tabela 1. susceptibilidade aos antibioticos apresentados por diferentes estirpes bacterianas utilizadas no presente trabalhoEnsaios de atividade antibacterianaPara os ensaios antimicrobianos as estirpes bacterianas foram cultivadas durante a noite em caldo de Mueller-Hilton a 36,5 C. A concentracao de bacterias foi padronizada a 3 x 10 8 CFU ml -1 utilizando a escala de McFarland.Neste estudo de dois ensaios diferentes foram realizadas para avaliar o potencial anti-bacteriano das amostras de mel: em agar e de difusao macrodiluicao.Para o ensaio de difusao em poco de Mueller-Hilton meios solidos foi preparada em placas de petri, seguido por tratamento em autoclave a 121 C durante 20 min.Cerca de 5 ml do meio esterilizado foi vertida em pratos (65 x 15 mm), num ambiente asseptico. O teste de difusao foi realizada de acordo com Hernandez et al. [ 10 ], com algumas modificacoes. Sete pocos, de 3 mm, foram feitas em meio agarized apos a inoculacao com as estirpes bacterianas. Amostras de mel foram diluidos em agua bidestilada, nas proporcoes de 1:1, 1:2, 1:4 e 1:8 (v / v). Os pocos foram cheios com 30 ul das amostras de mel (amostras diluidas, as amostras nao diluidas e de agua bidestilada, como controlo negativo). As placas foram incubadas a 36,5 C durante 24 h antes de avaliacao visual das zonas de inibicao. A experiencia foi repetida tres vezes. A quantificacao da inibicao do crescimento microbiano foi determinada medindo o diametro das zonas claras de crescimento microbiano em torno dos pocos no agar (incluindo o proprio poco). A concentracao inibitoria minima (CIM) foi considerada a concentracao mais baixa capaz de inibir o crescimento bacteriano visivel.Para o ensaio de macrodiluicao bacteriana, quantidades apropriadas de amostras de mel e o caldo de cultura para se obter as concentracoes desejadas (1:1, 1:2, 1:4, 1:06 e 1:08, v / v), foram colocados no interior tubos de 5 ml.