1. INTRODUCAOAs celulas podem ser rompidas devarias maneiras; por exemplo, por intermedio de choque osmotico, pelo uso devibracoes ultra-sonicas e por metodos mecanicos quando sao forcadas a passarpor um pequeno orificio ou sao homogeneizadas. A aplicacao cuidadosa dessesprocedimentos permite que organelas como nucleo, mitocondrias, complexo deGolgi e Peroxissomos fiquem intactas e tambem muitas vesiculas derivadas doreticulo endoplasmatico, chamadas microssomos, mantenham muito de suaspropriedades bioquimicas originais.2. OBJETIVOSeparar os componentes celularesatraves do fracionamento por centrifugacao para o estudo da organizacaomolecular e do funcionamento da celula.3. MATERIAL02 a 03 Folhas de Tradescantia purpurea (manto-de-viuva ou trapoeraba);Figura 1: Detalhe da flor de Tradescantia purpurea conhecidavulgarmente como manto-de-viuva ou trapoeraba (Foto: Guilherme Araujo Lacerda).01 Amofariz (gral) e 01 pistilo (ou pires e colher);02 a 04 tubos de microcentrifuga;01 Microscopio optico;02 Pipetas Pasteur ou conta-gotas;01 Minicentrifuga (ver pratica 001/2013);05 mL de detergente de louca (liquido ou gel);100 mL de Agua acidulada (2 a 3 gotas de vinagre ou acido acetico em mais ou menos 100 mL de agua).4. METODOS1) Coloque 3 mL de agua acidulada em umalmofariz (ou um pires). A razao para usar agua acidulada e porque o pigmentoantocianina que iremos separar dos cloroplastos e rosa ou roxo em pH acido, masverde em pH alcalino. Como iremos separar a antocianina da clorofila, quetambem e verde, ficara dificil de notar a diferenca dos dois pigmentos se porventura a agua de sua torneira for levemente alcalina.2) Esmague nessa solucao 2 a 3 folhas deTradescantia com um pistilo (ou uma colher);3) Transfira com uma pipeta de Pasteur aparte liquida do homogeneizado para um tubo de minicentrifuga e centrifuguerapidamente (15 seg) para retirar fibras de celulose e outros residuos maiores;4) Transfira o sobrenadante para um novotubo. Observe que o liquido tem cor marrom. Centrifugue por 5 minutos; Pode-sever claramente, apos a centrifugacao, que o sobrenadante e um liquido roxo,pela presenca do pigmento hidrossoluvel antocianina. No fundo do tubo fica umprecipitado verde, pela presenca dos cloroplastos, que sao organelas grandes epor isso vao para o fundo do tubo.5) Transfira o sobrenadante para um novotubo;6) Com a pipeta Pasteur, ressuspenda oprecipitado (cloroplastos) em agua acidulada. Sugira aos alunos que descrevam edesenhem o que acontece;7) Acrescente uma gota de detergente notubo contendo a solucao verde e agite o tubo por mais ou menos um minuto;8) Centrifugue por cinco minutos os tuboscom o sobrenadante (solucao roxa) e com o precipitado (solucao verde).9) Observe e descreva o que aconteceu como material contido nos tubos. Note que agora os cloroplastos nao precipitammais, uma vez que deixaram de existir, pois o detergente desmanchou asmembranas daquela organela. O liquido do tubo fica todo verde, porque aodestruir os cloroplastos o detergente libera a clorofila. Como esta e uma pequenamolecula, a forca centrifuga aplicada nao consegue precipita-la, como tambemnao precipita a antocianina, que tambem e uma molecula pequena.5. REFERENCIASBIBLIOGRAFICASLORETO, E.L.S.; SEPEL, L.M.N. Atividades experimentais edidaticas em biologia molecular e celular. 2a Ed. Sao Paulo: SociedadeBrasileira de Genetica, 2003. p.27-29. ObjetivoReconhecer uma celula animal em suas estruturas ecaracteristicas.IntroducaoAs celulas animais sao basicamente compostas por membranaplasmatica, citoplasma e nucleo, com excecao das hemacias que sao anucleadas,nao possuem nucleo. Devido a esse fato as