"Tweet !function(d,s,id){var js,fjs=d.getElementsByTagName(s)[0];if(!d.getElementById(id)){js=d.createElement(s);js.id=id;js.src="//platform.twitter.com/widgets.js";fjs.parentNode.insertBefore(js,fjs);}}(document,"script","twitter-wjs"); Por Karina ToledoAgencia FAPESP Um kit semelhante ao dos testes de gravidez vendidos em farmacia foi desenvolvido no Instituto Butantan para ajudar a diagnosticar a causa da diarreia aguda, doenca que mata anualmente 1,5 milhao de criancas menores de 5 anos no mundo, segundo a Organizacao Mundial da Saude (OMS).O exame e capaz de detectar tres categorias da bacteriaEscherichia coli, responsavel por 30% a 40% dos casos nos paises em desenvolvimento. Basta colocar uma tira de papel em uma amostra de fezes previamente preparada e, em 15 minutos, linhas vermelhas indicam se um dos tres tipos do bacilo esta presente.Existem seis categorias de E. coli capazes de causar diarreia, cada uma com diferentes caracteristicas de virulencia e epidemiologicas, explicou a pesquisadora Roxane Maria Fontes Piazza, que coordenou o projeto Imunodiagnostico de Escherichia coli diarreiogenica, financiado pela FAPESP.O teste abrange duas categorias consideradas endemicas no Brasil: a enteropatogenica (EPEC) e a enterotoxigenica (ETEC). Detecta tambem a E. coli produtora da toxina de Shiga (STEC), que, embora seja rara no pais, preocupa os orgaos de saude por causar formas graves da doenca, podendo levar a colite hemorragica e a falencia renal.Ha outra categoria bastante comum no Brasil que ficou de fora, a enteroagregativa (EAEC). Isso porque ela nao produz uma proteina-alvo que permita sua identificacao em testes desse tipo, explicou Piazza.Piazza coordena ha 13 anos projetos de pesquisa apoiados pela FAPESP para melhorar o diagnostico das infeccoes por E. coli. Os primeiros trabalhos obtiveram os anticorpos contra as proteinas ou toxinas produzidas por essas tres categorias da bacteria. Em seguida, os anticorpos foram testados em outros metodos de diagnostico para avaliar sua sensibilidade.Quando estavamos com todos os anticorpos em maos, decidimos padronizar esse kit para realizacao do exame imunocromatografico. Esse metodo e mais rapido, mais facil de ser executado e tem custo acessivel, podendo ser usado em qualquer laboratorio clinico, disse Piazza.O trabalho resultou no doutorado de Leticia Barboza Rocha, realizado com Bolsa da FAPESP.Como funcionaO kit e composto por uma fita de 6 centimetros de comprimento por 0,5 centimetro de largura. Nessa fita, tres tipos de papel foram sobrepostos em uma base plastica.No inicio tem uma fibra de celulose de alta absorcao, responsavel por puxar a amostra e leva-la ate a regiao da fita onde estao os reagentes. Em seguida vem a fibra de vidro, onde estao fixadas pequenas particulas de ouro chamadas de ouro coloidal. Nessas particulas esfericas, de apenas 20 nanometros de diametro, estao aderidos os anticorpos, explicou Rocha.Os antigenos da bacteria, quando presentes, sao absorvidos pela fibra de celulose, ligam-se aos anticorpos aderidos ao ouro coloidal e continuam pela fita ate chegar a uma membrana de nitrocelulose, na qual sai o resultado do teste.Ha varias linhas nessa membrana e o que determina qual e a categoria de E. coli presente na amostra e a regiao em que as linhas aparecem na fita. A reacao e considerada positiva quando as duas linhas, teste e controle, apresentam-se coloridas, disse Rocha.A funcao do ouro e tornar as linhas visiveis. Para garantir a sensibilidade do metodo, porem, a fita nao deve