com o cuidado de nao seccionar a peca completamente e mantendo a sua orientacao anatomica, para que todo o tecido seja fixado em intervalo adequado.Dessa forma, todo o tecido removido nao sofrera autolise ao decorrer do tempo. Preferencialmente, esse procedimento deve ser orientado pelo pato logista, para adequar sua pratica ao exame macroscopico subsequente.Efeito da formolizacao em exames subsidiarios Enquanto a preservacao inadequada compromete a avaliacao histopatologica, a morfologia nao e afetada por excesso de formolizacao. Exposicao prolongada ao formol nao altera a arquitetura do tecido. Pecas antigas, mantidas anos em formol para uso didatico, podem ser amostradas e subsequentemente microscopicamente avaliadas. Infelizmente, o mesmo nao ocorre com a avaliacao de proteinas ou de seus segmentos especificos pelas tecnicas de imuno-histoquimica e hibri dizacao in situ.Os testes de imuno-histoquimica e hibridizacao in situ foram primariamente desenvolvidos em amostras a fresco. Atualmente, a quase totalidade dos testes de cunho diagnostico, prognostico e preditivo esta disponivel para ser realizada em amostras fixadas em formaldeido ou parafinadas.No entanto, a eficiencia de alguns anticorpos na deteccao de proteinas extranucleares pode ser comprometida tanto na vigencia de preservacao insuficiente como na fixacao excessiva.Os principais problemas na fase pre-analitica que comprometem a qualidade do resultado obtido sao a qualidade da fixacao, o tempo de fixacao e a manipulacao adequada da amostra.O Colegio Americano de Patologistas e a Sociedade Americana de Oncologia Clinica desenvolveram recomendacoes e orientacoes para preparo e envio de material e amostras para exame anatomopatologico e imuno-histoquimico.Esses cuidados sao primordiais para otimizar a eficiencia de avaliacao de fatores preditivos, a exemplo dos receptores de estrogeno, cuja expressao ja esta afetada apos duas horas sem fi xacao, ate o seu total comprometimento apos oito horas de isquemia.E importante ressaltar que a utilizacao de formol tamponado mini mizou muito o efeito e a fixacao por tempo prolongado em estudo equivalente.Recomendacoes da ASCO/CAP Seccionar os especimes cirurgicos e coloca-los em formol em ate uma hora apos a exerese.Amostras de menor volume como especimes de biopsia com agulha grossa ou biopsias cirurgicas requerem uma fixacao imediata e de no minimo 8 horas e no maximo de 48/72h. Idealmente, deve-se anotar no pedido do exame a hora em que o material foi colocado na solucao e utilizar o formol tamponado ou com pH variando de 7.0 a 7.4.Com o advento dos testes ISH (hibridizacao in situ) para o diagnostico de amplificacao do gene HER2, as questoes praticas de mani pulacao dos especimes cirurgicos foram estendidas para as condicoes desses testes tambem. Os resultados de testes FISH (hibridizacao in situ por fluorescencia), CISH (hibridizacao in situ cromogenica) e SISH (hibridizacao in situ por prata) sao afetados pelo tempo e pela qualidade da fi xacao, do mesmo modo que o exame imuno-histoquimico tradicional. Nesses tipos de hi bridi zacao o uso de etanol e especialmente danoso, sendo contraindicado, pois pode levar a resultados falso-po sitivos. A fixacao em etanol e uma das dificuldades para a rea lizacao de testes de ISH em amostras de citologia, pois elas sao frequentemente fixadas em solucoes contendo etanol.Concluindo, a adequada padronizacao da fase pre-analitica e um procedimento