o exame de DNA para fins de identificacao pessoal e determinacao de paternidade passou a atingir niveis de certeza quase absoluta.Contudo o material coletado na cena do crime e o proprio exame de DNA requerem recursos humanos altamente qualificados e elevados custos para a aquisicao dos materiais e equipamentos laboratoriais necessarios. O exame de DNA inclui diferentes etapas que vao deste a coleta do material ate o perfil final do DNA e envolvem diferentes procedimentos. Talvez o mais importante seja o uso de enzimas restritivas para fragmentar o DNA, gerando um padrao comparativo.Diversas enzimas restritivas tem sido utilizadas em analises de DNA. Cabe perguntar o que sao estas enzimas? Como funciona o corte do DNA atraves delas? Estas serao algumas das questoes a serem abordadas por este trabalho.2 A FUNCAO DAS ENZIMAS RESTRITIVAS NA ANALISE DO DNAEnzimas restritivas sao enzimas bacterianas e segundo a Wikipedia (2008), elas atuam como tesouras moleculares, reconhecendo sequencias de pares de bases especificas em moleculas de DNA e cortando-as nesses pontos.Portanto, com estas enzimas o DNA pode ser dividido em fragmentos de diferentes comprimentos dependendo da sequencia genica do individuo. E ainda de acordo com Borem e Santos (2004, p.165), Um individuo que apresenta a sequencia AAGCTT, reconhecida como sitio de corte pela enzima Hind III, tera seu DNA fragmentado por esta enzima em tantos fragmentos quantos forem as vezes que esta sequencia ocorrer.FIGURA 1 PONTO DE CLIVAGEM DE DUAS ENZIMAS DIFERENTESDisponivel em:<http://www.sobiologia.com.br/conteudos/Biotecnologia/%20enzimasderestricao.php>. Acesso em: 10 set. 2008. FIGURA 2 - ACAO DA ENZIMA EcoR1Disponivelem:<http://www.sobiologia.com.br/conteudos/Biotecnologia/%20enzimasderestricao.php>. Acesso em: 10 set. 2008. 3 ETAPAS E PROCEDIMENTOS PARA ANALISE DE MATERIAL GENETICO NA PRATICA FORENSEExistem diversas etapas e procedimentos para se chegar ao perfil final do DNA, o procedimento, de forma simplificada, inclui sete etapas: coleta da amostra, isolamento do DNA, corte do DNA, separacao dos fragmentos, transferencia do DNA, hibridizacao de sondas e perfil do DNA (BOREM E SANTOS, 2004). A coleta de amostra pode ser constituida de qualquer material biologico, como pelos, semen, sangue etc., onde o isolamento do DNA podera ser realizado atraves de uma simples goticula ou fracao deste material.Apos o isolamento do DNA pode-se proceder com a fragmentacao do DNA pelas enzimas de restricao, cujo resultado sera um grande numero de fragmentos de diferentes tamanhos. Devemos levar em consideracao que todo este processo e bastante complexo, assim como a separacao dos fragmentos por tamanho, que sao de ordem nanometrica, e segundo Borem e Santos (2004, p. 167):Tal procedimento consiste em submeter os fragmentos do DNA, dentro de um gel, a uma corrente eletrica. [...] O procedimento consiste, portanto, em depositar os fragmentos de DNA em uma canaleta (um pequeno sulco) moldada na extremidade do gel proximo do eletrodo negativo. Com a corrente eletrica, o DNA migrara dentro do gel na direcao oposta, isto e, em direcao ao eletrodo positivo. Os fragmentos menores de DNA migrar-se-ao mais rapidamente do que os maiores, permitindo dessa forma, separa-los por tamanho.Apos a separacao dos fragmentos por tamanho, eles sao transferidos e fixados numa membrana de nailon, por capilaridade, a partir deste ponto eles podem ser manipulados para sua visualizacao