Celulas-tronco sofrem mudancas cromossomicas depois de longo tempo em cultura18/01/2012Por Fabio de CastroAgencia FAPESP Quando sao mantidas por longo tempo em cultura, as celulas-tronco embrionarias humanas apresentam alteracoes cromossomicas que podem comprometer as condicoes ideais para aplicacoes terapeuticas, de acordo com um amplo estudo internacional realizado com participacao brasileira.A pesquisa, que foi capa da edicao de dezembro da revista Nature Biotechnology, analisou 125 linhagens de celulas-tronco embrionarias humanas e 11 linhagens de celulas-tronco pluripotentes induzidas. O objetivo era identificar possiveis mudancas geneticas em culturas in vitro ao longo do tempo.O trabalho foi coordenado pela International Stem Cell Initiative (ISCI), que envolve 38 laboratorios de todo o mundo, incluindo o Laboratorio Nacional de Celulas-tronco Embrionarias (LaNCE), do Instituto de Biociencias (IB) da Universidade de Sao Paulo (USP), coordenado por Lygia da Veiga Pereira.O grupo do LaNCE obteve, em 2008, a primeira linhagem de celulas-tronco desenvolvida na America Latina, a BR-1, cujas amostras foram agora utilizadas no estudo da ISCI. Alem de Pereira, o estudo teve a participacao de sua orientanda Ana Fraga, que cursa doutorado no IB-USP comBolsa da FAPESP.Segundo Fraga, a maior parte das linhagens permanecia normal por algum tempo, em relacao ao cariotipo, o conjunto de cromossomos. Mas, ao longo de um periodo de seis meses em cultura, as celulas apresentaram uma tendencia progressiva a adquirir modificacoes, afetando os cromossomos 1, 12, 17 e 20.Nem todos os genes envolvidos nessas alteracoes cromossomicas sao conhecidos. Mas sabemos que o cromossomo 20, por exemplo, tem um gene importante relacionado a morte celular. Sera preciso testar, a partir de agora, ate que ponto essas modificacoes poderiam gerar efeitos colaterais em aplicacoes terapeuticas, disse a Agencia FAPESP.De acordo com a pesquisadora, ja se sabia que as celulas cultivadas apresentam alguma instabilidade, passivel de comprometer sua aplicacao em terapias. Mas pela primeira vez as mudancas cromossomicas em celulas mantidas em cultura por longo tempo foram confirmadas por um estudo robusto.A vantagem deste estudo e que ele reuniu analises de mais de uma centena de linhagens de celulas-tronco embrionarias provenientes de diferentes origens etnicas. E tudo isso foi realizado de forma muito rigorosa, sob os mesmos parametros, no mesmo laboratorio, com os mesmos protocolos de pesquisa e mesma metodologia, disse.Fraga explica que o DNA extraido de celulas das linhagens das varias partes do mundo, incluindo a BR-1, foi enviado para analises epigeneticas em Cingapura. Um lote de celulas congeladas seguiu para o Reino Unido, para a realizacao de analises citogeneticas.Existe a possibilidade de que as alteracoes sejam selecionadas pelas atuais condicoes de cultivo das celulas. Essa hipotese sera testada em estudos futuros. As modificacoes, no entanto, nao significam necessariamente que o cultivo inviabilize as aplicacoes terapeuticas das linhagens, disse.Aplicacao e efeitosAo cultivar celulas-tronco embrionarias humanas, os cientistas imitam a metodologia utilizada para a analise de linhagens de celulas de camundongos. O que os estudos mais recentes estao mostrando, segundo Fraga, e que as celulas humanas nao se comportam exatamente como as celulas murinas.Quando fazemos um modelo animal, as variacoes podem nao fazer tanta diferenca para o experimento. Mas em celulas humanas precisamos nos aproximar o maximo possivel