RNA de interferencia e Silenciamento de Genesin: http://www.biojobblog.com/tags/rnai/De uma maneira simplista, o silenciamento de genes e conseguido atraves da insercao na celula, de um segmento curto de RNA (short interference RNA - siRNA).Este iRNA, que e homologo do gene que queremos silenciar, vai formar um complexo com uma nuclease para formar o RISC (RNA induced silencing complex). Para haver a activacao da RISC, a dupla cadeia de iRNA tem que se separar, formando uma cadeia simples.De seguida, a cadeia simples de iRNA emparelha com o mRNA, seu complementar, levando a clivagem do mRNA nesse local e por isso suprimindo gene de interesse.Retirado de: http://biotecnaffuc.blogspot.com/2010/11/rna-de-interferencia-e-silenciamento-de.html Silenciadores Geneticos Plasmideo shRNADescricao de plasmideo shRNAo termo shRNa refere-se a RNA que tem a forma de um pequeno ou curto grampo de cabeloPlasmideos que codificam shRNA penetram na celula atraves de transfeccao usando agentes de base lipidicaplasmideos shRNA sao capazes de inibibir temporaria ou permanentemente a expressao de genes alvo.Plasmideos shRNA sao fornecidos como um colecao de 3 a 5 plasmideos com vetor de lentivirus os quais codificam alvos especificos de 19-25 nucleotideos shRNA com 6 pares de base em "loop"20 g, ate 20 transfeccoesa transcripcao de shRNA e controlada por promotor de transcricao H1fornecido na forma de plasmideo DNA pronto para transfeccao.Apos a transfeccao, celulas que expressam shRNA de forma permanente podem ser selecionadas com puromicinaProdutos auxiliares para silenciadores geneticos do tipo plasmideo shRNAAnticorpos controle compativeis estao disponiveisRT-PCR Primers estao disponiveisReagente para transfeccao plasmideo shRNA, sc-108061Meio para transfeccao Plasmideo shRNA, sc-108062Plasmideo shRNA Controle-A, sc-108060Plasmideo shRNA Controle-B, sc-108065Plasmideo shRNA Controle-C, sc-108066Confirma a eficiencia do Silenciador Genetico tipo plasmideo shRNA com o plasmideo controle copGFP: sc-108083Celulas geradas com expressao permanente de shRNACopia de: idem.Como funcionam os silenciadores geneticos tipo Plasmideo shRNA? "Para alem dos limites: aumentando a longevidadeCarta de Harvard2006-04-06Por Por Tiago OuteiroHa uns anos atras (sic), os cientistas acreditavam que o envelhecimento era, para alem da deterioracao, o resultado do desenvolvimento programado codificado pelos nossos genes. Pensava-se que quando um individuo alcancava a maturidade os genes do envelhecimento iniciavam a sua actividade levando, em ultima instancia, a morte. Esta ideia caiu em descredito, pensando-se hoje que o envelhecimento e apenas o resultado do uso e desgaste ao longo do tempo, uma vez que os mecanismos de manutencao e reparacao do organismo perdem actividade e deixam de funcionar. Segundo a logica da evolucao e seleccao natural, nao faz muito sentido que o organismo mantenha esses mecanismos a funcionar depois de passar a idade reprodutora.Varios investigadores, dedicados ao estudo de uma familia de genes envolvidos em respostas de stress (como as altas temperaturas ou escassez de alimentos ou agua), descobriram que eles mantem as suas actividades intactas independentemente da idade. Se conseguirmos manter estes genes activos durante o tempo suficiente, estes genes podem assim melhorar a saude e prolongar a esperanca de vida. Estes genes seriam assim os genes da longevidade.Alguns genes descobertos recentemente afectam a resistencia ao stress e a longevidade em animais de laboratorio, sugerindo que possam ser parte de um mecanismo fundamental para sobreviver a condicoes adversas. Mas ha outros tipos de genes envolvidos, como o