avaliada in vitro atraves de testes convencionais.Eles incluiram a cariotipagem das celulas, a atividade de fosfatase alcalina e a capacidade das celulas de formarem EBs complexos. Essas tres linhagens apresentaram cariotipo 40, XY normal,alta atividade de fosfatase alcalina, e formaram EBs complexos, com diversos tipos celulares e cardiomiocitos pulsantes, demonstrando um alto grau de diferenciacao (Figuras 1 e 6). Estas caracteristicas indicam um alto nivel de pluripotencia das novas linhagens de celulas ES USP-1, USP-2 e USP-3. Foi avaliada a capacidade da linhagemUSP-1 de popular a linhagem germinativa de animais quimericos. Atraves da agregacao e do cocultivo das celulas USP-1 com morulas de animais CD-1 (pelagem branca), foram gerados animais quimericos (Figura 3). O nivel de quimerismo, estimado a partir da coloracao da pelagem dos animais, variou de 0 a 100%. Os animais mais compostos de celulas derivadas das celulas USP-1, de pelagem predominantemente agouti, foram cruzados com femeas CD-1 Como a pelagem agouti e dominante sobre a pelagem branca dos animais CD-1, a pelagem agouti da ninhada resultante demonstrou a colonizacao da linhagem germinativa dos animais quimericos pela linhagem de celulas ES USP-1 (Figura 4). Essa linhagem esta, no momento, sendo utilizada para gerar um modelo animal para a sindrome de Marfan.Figura 3: Sistema de recombinacao CREloxP. Sequencias loxP estao representadas por triangulos verdes. O primeiro evento de recombinacao homologa introduz os sitios loxP entre o exon a ser deletado. Em um segundo evento, a expressao da proteina CRE ira mediara recombinacao entre os dois sitios loxP, deletando a sequencia entre eles. A expressao de CRE pode ser controlada de forma que induza a recombinacao somente em tecidos ou estagios de desenvolvimento especificos do camundongoGeracao de um modelo animal para a sindrome de Marfan:A sindrome de Marfan (SMF) e a mais comum das doencas geneticas tecido conjuntivo. Herdada de forma autossomica dominante, essa sindrome tem uma incidencia de, aproximadamente, 1 em 10.000 individuos (McKusick, 1955). O fenotipoda SMF e 100% penetrante, e suas manifestacoes clinicas afetam primariamente tres areas: esqueletica (crescimento excessivo dos membros, hiperextensibilidade articular, escoliose e deformidades na regiao anterior do torax); ocular (ectopia lentis, miopia e deslocamento da retina); e cardiovascular (dilatacao da raiz da aorta, disseccao da aorta, prolapso da valvula mitral e regurgitacao mitral). A sobrevida de pacientes com aSMF e de, aproximadamente, dois tercos do normal - 40 anos na media.Em 90% dos casos, a morte e causada por falha cardiovascular (McKusick,1955). O diagnostico precoce seguido de intervencao medica leva a um prolongamento da sobrevida.A SMF e causada por mutacoes no gene FBN1. Esse gene codifica a fibrilina-1, componente estrutural mais abundante das microfibras na matriz extracelular. As microfibras estao largamente distribuidas pelo organismo e se encontram associadas a elastina nas fibras elasticas. Acredita-se que mutacoes no gene FBN1 geram o fenotipo da SMF atraves do modelo dominante-negativo (Dietz et al., 1993). Segundo esse modelo, proteinas mutantes interagem com as fibrilinas normais, incorporando-se as microfibras e perturbando, assim, sua organizacao e integridade. Ainda de acordo com esse modelo, os individuos portadores de um alelo mutante com uma expressao de fibrilina-1 mais baixa podem apresentar um