bombeamento bem elevadas sob a fase movel, e e isso que permite a utilizacao de particulas tao pequenas no interior da coluna e a alta velocidade da corrida cromatografica. (Skoog, 2009).A escolha das fases movel e estacionaria depende de varios fatores como a natureza dos analitos e os objetivos da analise. Porem, de uma maneira geral, a fase movel deve ser de alto grau de pureza ou de facil purificacao, deve dissolver a amostra sem decompor seus componentes, nao deve decompor nem dissolver a fase estacionaria, deve apresentar baixa viscosidade e baixo ponto de ebulicao, ser compativel com o tipo de detector utilizado, permitir a recuperacao da amostra se desejada, de preferencia apresentar baixa toxicidade e, em caso de misturas, ter miscibilidade completa. (Slide, Rosangela).As Fases estacionarias na CLAE devem resistir a pressoes relativamente altas, resultando em enchimento estavel e colunas eficientes de particulas pequenas. Os Solidos rigidos a base de silica sao os recheios mais usados atualmente. Outro criterio importante e o tamanho das particulas, pois esse fator controla o processo de difusao das moleculas da amostra e quanto menor o diametro mais facil sera a saida da fase movel com a amostra. Alem disso, as particulas da fase estacionaria precisam ser regulares no seu formato, pois, para se a obter distribuicao homogenea do recheio em toda extensao da coluna, o que aumenta a eficiencia da separacao, as particulas devem ter a menor variacao de diametro possivel. Por isso as particulas esfericas sao melhores do que as irregulares, mas estas tem menor custo. (CEFET - RJ).As fases movel e estacionaria normalmente devem apresentar caracteristicas de polaridade contrastantes, de modo que a amostra possa interagir de forma diferente com ambas. Quando se utiliza uma fase estacionaria mais polar que a fase movel a CLAE e classificada como normal, contudo quando a fase movel e mais polar que a fase estacionaria denomina-se a tecnica cromatografica como reversa. (Slide, Rosangela).Os mecanismos que permitem a separacao dos analitos durante a corrida cromatografica dependem da natureza das fases movel e estacionaria e sao classificados em adsorcao, particao, troca ionica, exclusao por tamanho e bioafinidade. Sendo que, cada um destes pode acontecer isoladamente ou em conjunto, levando assim a separacao dos componentes da amostra. (Slide, Rosangela).A adsorcao baseia-se na interacao superficial dos componentes presentes na amostra com a fase estacionaria, processo que se da na interface entre a fase movel e o recheio da coluna. Ja a particao consiste na dispersao seletiva de uma especie quimica presente na amostra entre a fase movel e a fase estacionaria, a qual consiste de um filme liquido que envolve o suporte solido. (Slide, Rosangela).A troca ionica fundamenta-se na adsorcao reversivel e diferencial de analitos ionicos presentes na amostra por uma carga fixa (grupo funcional) da fase estacionaria. A exclusao por tamanho, por sua vez, parte do principio da presenca de uma fase estacionaria porosa que separa os componentes da amostra mecanicamente, as moleculas menores atravessam os poros e levam mais tempo para eluir, enquanto as moleculas maiores sao carregadas pela fase movel. (Slide, Rosangela).Por fim, o fenomeno da bioafinidade esta