Aplicacoes da Biologia Molecular na Odontologia: Conceitos e TecnicasSILVA, FB; SOUSA, SMGA analise molecular e um novo metodo de avaliacao que busca as alteracoes expressas em nivel genetico, ou seja, pelo DNA. O DNA genomico e obtido de qualquer material biologico, mas as amostras mais utilizadas sao sangue (leucocitos), tecidos biopsiados (celulas residentes), fluido amniotico e vilosidade corionica. Para extrair o DNA do nucleo celular, sao necessarias varias etapas, que compreendem lise celular, extracao das proteinas e do RNA, precipitacao do DNA, ate a purificacao. O DNA obtido sera digerido por enzimas de restricao que produzem muitos fragmentos de DNA do gene em estudo.A eletroforese em gel de agarose ou depoliacrilamida e um metodo simples e rapido que separa o DNA em fragmentos de tamanhos diferentes usando enzimas de restricao. Quando submetidas a um campo eletrico(matriz) em pH neutro, as moleculas de DNA sao atraidas para o polo positivo e repelidas do polo negativo.Depois de obtidos os fragmentos de DNA no gel, um certo segmento do DNA que contem o gene de interesse pode ser detectado pela hibridizacao com uma sonda especifica. Para isso, o DNA contido no gel e transferido para um filtro de nitrocelulose ou nailon por meio do metodo de transferencia chamado Southern blotting. Quando o material presente no gel e RNA, o metodo chama-se Northern blotting e, caso seja proteina, denomina-se Western blotting. Apos ser fotografado em UV, o gel e mergulhado em solucao de hidroxido de sodio, ocasionando a desnaturacao da dupla fita de DNA.Como resultado, observamos na auto-radiografia um padrao com uma ou mais bandas, indicando o numero e o tamanho dos fragmentos de DNA complementares a sonda.A microbiologia bucal e essencial para a identificacao e caracterizacao de varios microrganismos envolvidos nas infeccoes bucais. A bolsa periodontal tem cerca de 300 especies diferentes de bacterias. Alguns microrganismos tem sido associados com a doenca periodontal, como Actinobacillus actinomycetemcomintans (Aa), Fusobacterium nucleatum (Fn), Porphyromonas gingivalis (Pg), Prevotella intermedia (Pi) e Eikenella corrodens(Ec). Muitos metodos tem sido usados na deteccao da variacao fenotipica e genotipica para a caracterizacao desses patogenos periodontais, assim como na identificacao de bacterias da cavidade bucal. Por meio dessas tecnicas, o patogeno pode ser diagnosticado antes que a doenca esteja em estado avancado, sendo possivel identificar, simultaneamente, mais de um patogeno. Cadeia Respiratoria MitocondrialAspectos clinicos, bioquimicos, enzimaticos e moleculares e moleculares associados ao defice do Complexo IFERREIRA, M.; AGUIAR, T.; VILARINHO, L.A mitocondria e uma organela intracelular existente na maioria das celulas eucarioticas, desempenhando um importante papel na producao de ATP celular.A sua principal funcao e no metabolismo energetico, nomeadamente, -oxidacao dos acidos gordos, ciclo da ureia e na via final comum de producao de ATP cadeia respiratoria.Os complexos I, III e IV funcionam como uma bomba de protons. Estes acumulam-se no espaco intermembranar, criando uma diferenca de potencial eletroquimico, utilizado pela ATP sintase na formacao de ATP, a partir de ADP e Pi. A velocidade da respiracao mitocondrial pode ser controlada pela disponibilidade de ADP.As citopatias mitocondriais sao um grupo de doencas multissistemicas de expressao clinica heterogenea que tem na sua origem alteracoes do