A tecnica de coloracao de Gram e uma tecnica de coloracao diferencial que permite distinguir os dois principais grupos de bacterias por microscopia optica. Foi descoberta pelo fisico dinamarques Hans Christian Gram em 1884. Este cientista obteve com a coloracao realizada uma melhor visualizacao das bacterias em amostras de material infectado. Verificou, no entanto, que nem todas as bacterias coravam com este metodo o que o levou a sugerir a possibilidade de ser usado um contrastante. Gram morreu em 1935 sem ter conseguido que fosse reconhecida a devida importancia ao seu metodo de coloracao. Actualmente, esta tecnica e fundamental para a taxonomia e identificacao das bacterias, sendo utilizada como tecnica de rotina em laboratorios de bacteriologia.A tecnica de coloracao de Gram consiste em expor as celulas bacterianas a seguinte sequencia:Corante primario violeta de cristal: cora o citoplasma de purpura, independentemente do tipo de celula.Mordente solucao de iodo: aumenta a afinidade entre o violeta de cristal e a celula e forma com o corante um complexo insoluvel dentro da celula. Agente descolorante alcool, acetona ou ambos: solvente lipidico. Contrastante safranina ou fucsina basica: cora o citoplasma de vermelho. O que se verifica, quando se observam as diferentes bacterias sujeitas a esta coloracao ao microscopio, e que estas tem um comportamento diferente face a coloracao de Gram, o que permite classifica-las em: Bacterias Gram-positivo (apresentam cor purpura) Bacterias Gram-negativo (apresentam cor vermelha) Estudos de microscopia electronica e analises bioquimicas permitiram concluir que a parede celular bacteriana e a estrutura responsavel pelo diferente comportamento das bacterias a coloracao de Gram. As bacterias Gram-positivoapresentam uma parede espessa, homogenea, geralmente nao estratificada e predominantemente constituida por peptidoglicano. Deste modo, o precipitado insoluvel que se forma por accao do mordente, fica retido no interior da celula pela camada espessa de peptidoglicano, logo, estas celulas nao sao descoradas permanecendo com a coloracao conferida pelo corante primario (purpura).As bacterias Gram-negativo apresentam uma parede estratificada constituida por uma membrana externa e por uma camada mais interna que contem peptidoglicano e que e mais fina que a das Gram-positivo. Deste modo, o precipitado insoluvel, que se forma por accao do mordente, e removido (camada de peptidoglicano e mais fina que a das Gram-positivo e a membrana externa e parcial ou totalmente solubilizada pelo agente descolorante), pelo que as celulas ficam descoloradas, corando de vermelho pelo contrastante. Desta forma, a diferente estrutura da parede bacteriana e, em particular a espessura da camada de peptidoglicano, e a responsavel pelo diferente comportamento das bacterias face a coloracao de Gram.O peptidoglicano e um heteropolimero rigido e insoluvel na agua, constituido por cadeias lineares de dois acucares aminados NAG (acido n-acetilglucosamina) e NAM (acido n-acetilmuramico) ligados entre si por ligacoes glicosidicas. As cadeias lineares ligam-se entre si atraves de cadeias de quatro aminoacidos Perfusao Extra-Corporea Dentreas 36 especialidades e habilitacoes o Biomedico pode atuar na Perfusao ExtraCorporea. A perfusao ou circulacao extra-corporea (CEC) e o procedimento noqual se substitui temporariamente as funcoes dos pulmoes e do coracao enquanto estesorgaos ficam excluidos da circulacao, atraves de maquinas, aparelhos, circuitose tecnicas. O principio da CEC consiste em desviar o