e determinar a capacidade do microrganismo excretar uma enzima hidrolitica extracelular capaz de degradar a caseina. A caseina e a mais importante proteina do leite, sendo uma macromolecula, composta por aminoacidos ligados entre si por ligacoes peptidicas, incapaz de penetrar na membrana celular dos microrganismos. Para que a caseina seja utilizada pelos microrganismos, tem de ser degradada em peptonas, polipeptideos, dipeptideos e finalmente em aminoacidos. Este processo e possivel porque os microrganismos produzem enzimas proteoliticas (proteases) que catalisam a hidrolise da caseina em aminoacidos, os quais sao depois assimilados e catabolizados pelas celulas. Hidrolise de Gelatina Bacterias proteoliticas sao capazes de decompor ou hidrolisar a gelatina, fazendo-a perder suas caracteristicas geleificantes. Prepara-se um meio de cultura adequado ao crescimento da especie que se investiga e procede-se ao semeio. Apos certo tempo, tubos para os quais repicou-se a bacteria juntamente com tubos controle sao transferidos para geladeira e apos 30-60 minutos, examinados. Se o meio ainda estiver liquido, houve hidrolise.Teste de Indol Usado para diferenciar se a bacteria e capaz de produzir indol, amonia e acido piruvico usando a enzima triptofanase a partir do triptofano. Em organismos indol positivos, os reagentes HCl e dimetilaminobenzaldeido se reagem com o indol para produzir um corante que torna a superficie do meio vermelho.Methyl Red Tem como objetivo determinar a capacidade dos microrganismos para oxidar a glicose com producao e manutencao de concentracoes altas de produtos finais acidos.Voges-Proskauer (VP) O objetivo e determinar a capacidade dos microrganismos produzirem produtos finais nao acidos ou neutros, como o acetilmetilcarbinol, a partir dos acidos organicos que resultam da metabolizacao da glicose.Citrato Este teste determina se a bacteria e capaz de utilizar o citrato de sodio como unica fonte de carbono para o metabolismo e crescimento. Deve ser utilizado o meio Citrato de Simmons, contendo citrato de sodio, fosfato de amonia e azul de bromotimol. Com a facilidade do transporte de citrato pela citrato-permease ha a sua utilizacao pela citrase, com producao de hidroxido de amonia que eleva o pH, fazendo com que a reacao se torne azul. Nesse teste, utilizam-se tubos com meio inclinado para a cultura ter mais acesso ao oxigenio, que e necessario para utilizacao do citrato. O CO2 produzido reage com o sodio do citrato formando carbonatos de reacao alcalina.Urease Certas bacterias sao capazes de produzir urease, uma enzima que decompoem a ureia com liberacao de amonia. Os testes geralmente envolvem a utilizacao de meios de cultura contendo ureia em sua composicao e a constatacao de atividade de urease e feita com indicadores para detectar o aumento do pH.B-galactosidade Alguns microrganismos, como a Escherichia coli, podem usar a lactose como a sua unica fonte de carbono. As enzimas essenciais ao metabolismo deste hidrato de carbono sao a b-galactosidase que hidrolisa a lactose, a galactose e glicose e uma permease que transporta a lactose atraves da membrana celular, tornando-a disponivel para a b-galactosidase intracelular. Os verdadeiros nao fermentadores da lactose nao possuem a b-galactosidase.Nitrato Muitas bacterias sao capazes de reduzir nitratos a nitritos, ocorrendo mais rapidamente em condicoes anaerobias (condicao em que o nitrato substitui o oxigenio como