Por selecao natural, foram obtidas linhagens com producao de 60mg/litro. Gracas a tecnicas de inducao de mutacoes e selecao de mutantes, alem da melhoria das condicoes de cultivo, os aumentos foram constantes ate atingir o valor de 7g/litro. Atualmente, estima-se que existam linhagens industriais de Penicillium capazes de produzir mais de 50g/litro, ou seja, um aumento de 25.000 vezes em relacao a linhagem original de Fleming (figura 4). Esse exemplo demonstra a importancia das tecnicas classicas no melhoramento genetico de microrganismos de valor industrial. Alias, foi com a producao de antibioticos que a biotecnologia teve seu inicio efetivo na decada de 40, adquirindo em seguida a importancia que tem atualmente, quando acrescida das modernas tecnologias, especialmente a do DNA recombinante. E na industria de antibioticos que existem outros exemplos comparaveis ao descrito para a penicilina, tanto utilizando fungos como bacterias. A producao de acidos organicosDiferentes acidos organicos sao produzidos industrialmente por fungos. Dentre estes fungos, destaca-se o Aspergillus niger, responsavel pela producao de varios compostos uteis, incluindo o acido citrico. Exemplos de melhoramento genetico empregando-se tecnicas de genetica classica e molecular nesse fungo tem sido descritos. No Estado de Sao Paulo, uma linhagem industrial utilizada para producao de acido citrico em cultura de superficie, isto e, em bandejas contendo meio de cultura liquido com sacarose como fonte de carbono, foi melhorada no laboratorio do Setor de Genetica de Microrganismos do Instituto de Genetica da Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, da Universidade de Sao Paulo (ESALQ/USP), em Piracicaba, resultando em um aumento na producao de ate 30% de acido, em relacao a cultura original. Foram utilizadas tecnicas de mutacao, selecao e fusao de protoplastos (figura 5). Quando as linhagens melhoradas foram levadas a industria, ocorreram aumentos consideraveis na producao de acido citrico. Esse e um dos exemplos brasileiros que demonstram que os principios geneticos na biotecnologia, quando racionalmente aplicados, podem levar, com poucos custos, a ganhos substanciais na industria. Protoplastos de um fungo. Os protoplastos foram corados, mostrando que eles possuem varios nucleos (corpos azuis) no seu interior.A producao de etanolO Brasil tem larga experiencia na producao de alcool combustivel. O Programa Nacional do Alcool desencadeado no final dos anos 70, decorrente da crise do petroleo, gerou uma serie de tecnologias proprias, tornando o nosso pais lider mundial nesse sentido. Nao poderia deixar de ocorrer, portanto, o desenvolvimento de processos visando a producao de linhagens melhoradas da levedura Saccharomyces cerevisiae, responsavel pela producao de etanol. Linhagens mais produtivas, com caracteristicas desejaveis para producao de etanol e com monitoramento na industria por tecnicas de marcacao molecular, foram desenvolvidas em varios laboratorios, salientando-se mais uma vez os da ESALQ/USP, em Piracicaba. Por tecnologia do DNA recombinante, os laboratorios de pesquisa das universidades de Brasilia e da USP desenvolveram em conjunto linhagens de leveduras contendo genes de amilases capazes de utilizar o amido, por exemplo de mandioca ou batata-doce, na producao de etanol. Essas leveduras manipuladas geneticamente estao sendo aperfeicoadas e poderao desempenhar um importante papel na producao de etanol. A tecnologia do DNA recombinante tem sido tambem usada por esses e outros laboratorios