Datasets:

presencesw

/

pubmed_envi_stage_1

like 0

The modified procedure for rabbit skeletal muscle phosphofructokinase (PFK) purification is worked out utioizing the method of specific elution from DEAE-cellulose in 0.1 M tris-EDTA-phosphate pH 8.0 with 10 mM citrate. By the latter procedure PFK can be resolved into fractions A, B and C which are eluted specifically, with 0.3 M buffer and with 1.5 M NaCl respectively. Rechromatography of each fraction reveals their interconvertibility. The preparations are characterized by disc electrophoresis and velocity sedimentation. The results of formalinization experiments demonstrate that high concentrations of formaldehyde dissociate PFK u to the 5.3 S component. The presence of the 19.3 S component in the formalinized preparations evidences against the possibility that the middle component, presented at the schlieren patterns of PFK at pH 8.0, is and artifact of superposition. Complex profiles of protein distribution observed in different transport experiments are discussed from the point of view of slow equilibrium of oligomers and conformers characteristic to PFK over the pH range from 6 to 9.

Quy trình tinh sạch phosphofructokinase cơ xương thỏ (PFK) đã được cải tiến nhằm thực hiện phương pháp tách đặc hiệu DEAE-cellulose trong dung dịch 0,1 M tris-EDTA-phosphate pH 8,0 với citrate 10 mM. Bằng quy trình sau, PFK có thể được phân giải thành các phân đoạn A, B và C được tách đặc hiệu với đệm 0,3 M và NaCl 1,5 M. Sắc ký lại từng phân đoạn cho thấy khả năng chuyển đổi của

The effect of NADH, succinate and ATP on the sensitivity of a number of energy-dependent functions of submitochondrial particles ot phospholipases A, C and D has been studied. It has been shown that in the conditions of oxidation of NADH and succinate by oxygen and also of ATP hydrolysis, the decrease in the phosphorylating activity of the particles under the action of phospholipases C and D accelerates. No such acceleration has been observed with phospholipase A. For other two functions, i. e. reverse electron transfer (ATP-dependent NAD+ reduction by succinate) and ATP-dependent transhydrogenase reaction the results proved to be different. Oxidizable substrates and ATP promoted the maintenance of these functions in the presence of phospholipase A, but did not retard their suppression by phospholipases C and D. The effects of NADH, succinate and ATP on the sensitivity of different energy-dependent functions of submitochondrial particles to phospholipases A, C and D could be removed by the uncoupling agent carbonyl cyanide-m-chlorophenyl hydrazone. The conclusion is made that the effects revealed are associated with an increase in the sensitivity of coupling sites II PAND/OR III to phospholipases C and D and with a decrease in the sensitivity of sites I and IV to phospholipase A on energization of submitochondrial particles.

Ảnh hưởng của NADH, succinate và ATP lên độ nhạy của một số chức năng phụ thuộc năng lượng của các hạt trình tự A, C và D đã được nghiên cứu. Trong điều kiện oxy hóa NADH và succinate bằng oxy và thủy phân ATP, hoạt tính phosphoryl hóa giảm của các hạt dưới tác động của phospholipase C và D tăng tốc. Chưa thấy sự tăng tốc nào như vậy ở phospholipase A. Hai chức năng khác, tức là chuyển electron ngược (giảm NAD+ phụ thuộc ATP bằng succinate) và phản ứng transhydrogenase phụ thuộc ATP, kết quả đã được chứng minh là khác nhau. Các chất nền oxy hóa được và ATP thúc đẩy sự duy trì các chức năng này khi có mặt phospholipase A, nhưng không làm chậm sự ức chế của chúng bởi phospholipase C và D. Ảnh hưởng của NADH, succinate và ATP lên độ nhạy của các chức năng phụ thuộc năng lượng khác nhau của các hạt trình tự với phospholipase A, C và D có thể được loại bỏ bằng chất tách liên kết carbonyl cyanide-m-chlorophenyl hydrazon. Kết luận cho thấy, ảnh hưởng của các chất nền được tiết lộ có liên quan với sự gia tăng độ nhạy của các vị trí ghép II PAND/OR III với phospholipase C và D và với sự giảm độ nhạy của các vị trí I và IV với phospholipase A đối với sự sinh năng lượng của các hạt trình tự.

When a mixture of the eighteen proteinous amino acids are suitably heated in the dry state with seawater salts, a copolyamino acid results. One fraction of this polymer is found, through isoelectric focusing, to consist of a mixture of acidic and basic proteinoids, each of sharply limited heterogeneity. When one fraction of the seawater proteinoid is dissolved in hot water, and the solution is cooled, proteinoid microspheres result. These have properties in common with simpler types, but also stable at pH values to 9, in common with microspheres prepared by mixing acidic and basic proteinoids. These processes thus constitute a simple model for the origin of a protocell stable in a primitive alkaline ocean.

Khi một hỗn hợp gồm mười tám axit amin protein được nung nóng thích hợp ở trạng thái khô với muối nước biển, một axit copolyamino sẽ được tạo ra. Một phần của polymer này được tìm thấy, thông qua tập trung đẳng điện, bao gồm một hỗn hợp các proteinoid có tính axit và cơ bản, mỗi loại có tính không đồng nhất rất hạn chế. Khi một phần proteinoid nước biển được hòa tan trong nước nóng và dung dịch được làm nguội, các microspheres proteinoid sẽ được tạo ra. Chúng có đặc tính chung với các loại đơn giản hơn

In energy transducing systems the direction of energy transfer is proposed to be maintained by the synchronized turnovers of the conformational change of one protein coupling up to affect another. Catalysis by those systems implies, therefore, that under new space restrictions the groups of the transducing enzyme increase and decrease reactivity between themselves, with activatory and/or inhibitory ligands (H+, H2O, metals, etc.) and with the electron shells of the reactant molecules. The exergonic reaction-dependent turnover of the forms of the enzyme within the transition complexes would be maintained, therefore, under asymmetric phase angles of conformational-dependent reactivity that would effectively restrict the microscopic reversibility of transducing systems. Some well known reactions, such as hemoglobins Bohr effect, can be used to illustrate that microscopic (molecular) interactions subject to thermodynamic equilibria laws may similarly paricipate as driving forces in energy transducing sytems. This would allow the thermodynamic description of the role of proton translocation as that of a modificatory force of the structural parameters of proteins. Similarly, the relationship between the liganded states of hemoglobin and its change in conformation has been used to develop an illustrative model relating changes in oxido-reduction of electron carriers to induced-fit effects leading to a sequence of ATPase forms in transition complexes which become stabilized as high energy intermediates under the constraints imposed by the membrane of energy transducing organelles.

Trong các hệ sinh năng, người ta đề xuất rằng hướng chuyển năng lượng được duy trì bằng sự chuyển hóa đồng bộ của sự thay đổi về hình dạng của một protein kết hợp với một protein khác. Do đó, xúc tác bởi các hệ này hàm ý rằng dưới những hạn chế không gian mới, các nhóm enzyme sinh sản tăng lên và giảm đi phản ứng giữa chúng với nhau, với các phối tử hoạt hóa và/hoặc ức chế (H+, H2O, kim loại, v. v.) và với vỏ electron của các phân tử tham gia phản ứng. Do đó, sự chuyển hóa phụ thuộc phản ứng ngoại sinh của các dạng enzyme bên trong các phức chất chuyển hóa sẽ được duy trì dưới các góc pha bất đối xứng của phản ứng phụ thuộc vào hình dạng, điều này sẽ hạn chế một cách hữu hiệu khả năng đảo ngược ở mức vi mô của các hệ sinh năng. Một số phản ứng đã biết, như hiệu ứng hemoglobin Bohr, có thể được dùng để minh họa rằng các tương tác vi mô (phân tử) chịu các định luật cân bằng nhiệt động lực học có thể được dự đoán tương tự như các lực thúc đẩy trong các sytems chuyển hóa năng lượng. Điều này sẽ cho phép mô tả bằng nhiệt động về vai trò của sự chuyển vị proton như là vai trò của một lực biến đổi trong các thông số cấu trúc của protein. Tương tự, mối quan hệ giữa các trạng thái liên kết của hemoglobin và sự thay đổi về hình dạng của nó đã được dùng để phát triển một mô hình minh họa liên quan đến những thay đổi trong việc khử oxido của các chất mang electron đối với các hiệu ứng phù hợp cảm ứng, dẫn đến một chuỗi các dạng ATPase trong các phức chất chuyển hóa, chúng trở nên ổn định như là các chất trung gian năng lượng cao dưới những ràng buộc do màng của các bào quan sinh năng lượng gây ra.

Subtilisin BPN' was immobilized to porous glass via isothiocyanate coupling. The pH optimum of the enzyme was shifted to the alkaline side on binding. This effect was more pronounced with ethyl lactate than with N-tosyl arginine methyl ester (TAME). Presumably, the shift is a reflection of the negative charge on the surface of the glass. The Michaelis constant and Vmax of soluble subtilisin BPN' with TAME were two and one orders of magnitude, respectively, lower than with ethyl lactate. Vmax, calculated per g of active enzyme, with TAME as the substrate was not affected by immobilization, while Vmax with ethyl lactate decreased greater than tenfold. The apparent KM decreased on immobilization with ethyl lactate as substrate and increased with TAME. Results are explained in terms of diffusional resistance and a possible attraction of ethyl lactate to the glass surface. Active site titration indicated that about 25% of the immobilized enzyme was active.

Subtilisin BPN 'được cố định vào thủy tinh xốp bằng cách kết hợp isothiocyanate. Độ pH tối ưu của enzyme được chuyển sang trạng thái kiềm khi liên kết. Hiệu ứng này rõ rệt hơn với ethyl lactate so với N-tosyl arginine methyl ester (TAME ). Có lẽ, sự dịch chuyển này là sự phản xạ của điện tích âm trên bề mặt thủy tinh. Hằng số Michaelis và Vmax của subtilisin BPN' hòa tan với TAME lần lượt có độ lớn thấp hơn so với

The profiles thus established may be utilized for investigations of an organism's relationship to its microenvironment including metabolic shifts and pathways. Areas of maximum respiratory activity, enzyme production, enzyme degradation, and attainment of the stationary phase are quite evident; however, duration and magnitude of the various phenomena may change with nutrient, temperature, and aeration efficiency. Practical application of this simplified method would include: a) determination of environmental conditions existing during maximum growth or enzyme synthesis and application of these conditions to feedback control; b) estimation of requirements for pH, oxygen, and heat removal capacities needed for scale-up; c) specific points during the fermentation at which samples should be analyzed to yield maximum information on depletion of nutrients and its effects on microbial activity.

Các dữ liệu đã được thiết lập ở trên có thể được sử dụng để khảo sát mối quan hệ của sinh vật với vi môi trường bao gồm cả sự dịch chuyển và các con đường trao đổi chất. Các khu vực có hoạt động hô hấp tối đa, sản xuất enzym, thoái hóa enzym và đạt trạng thái đứng yên là khá rõ ràng, tuy nhiên, thời gian và cường độ của các hiện tượng khác nhau có thể thay đổi theo hiệu suất dinh dưỡng, nhiệt độ và sục khí. Việc áp dụng phương pháp đơn giản này bao gồm: a) xác định các điều kiện môi trường trong quá trình sinh trưởng hoặc tổng hợp enzym tối đa và áp dụng các điều kiện này để kiểm soát phản hồi; b) ước lượng các yêu cầu về pH, oxy và khả năng loại bỏ nhiệt cần thiết để tăng quy mô; c) các điểm cụ thể trong quá trình lên men mà tại đó mẫu cần được phân tích để thu được thông tin tối đa về sự suy giảm chất dinh dưỡng và ảnh hưởng của nó đối với hoạt động của vi sinh vật.

Over several years sera were collected from 14 heterophil-positive students or patients who did not fulfill minimal hematologic criteria for infectious mononucleosis (I.M.) The specificity of these heterophil reactions for I.M. was investigated by determining antibodies to Epstein-Barr virus-determined antigens, i.e., to viral capsid antigens (VCA), early antigens (EA), and EBV-associated nuclear antigens (EBNA). On the basis of detectable anti-EA and/or the early absence and late emergence of anti-EBNA, four of these 14 individuals showed evidence of a current or very recent primary Epstein-Barr virus infection. The other ten patients showed antibody patterns indicative of Epstein-Barr virus infections in the past, and no firm conclusions could be drawn with regard to the specificity of their heterophil reactions. It was assumed, however, that some represented atypical clinical forms of EBV infection and that timing of specimen collection was a factor in explaining the paucity of Downey cells. In three patients, the absorbed heterophil-positive reactions persisted with little change in titer for at least 22 mo and thus might represent false-positive tests.

Qua nhiều năm, huyết thanh học được thu thập từ 14 sinh viên hoặc bệnh nhân không đáp ứng các tiêu chí huyết học tối thiểu đối với bệnh tăng bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng (I.M.) Tính đặc hiệu của các phản ứng dị thể đối với I.M.được khảo sát bằng cách xác định kháng thể đối với kháng nguyên xác định bởi vi rút Epstein-Barr, tức kháng nguyên capsid của vi rút (VCA ), kháng nguyên sớm (EA) và kháng nguyên hạt nhân liên quan đến EBV (EBNA ). Trên cơ sở

Bone-marrow transplantation (BMT) from an unrelated, HL-A-phenotype-identical, MLC-negative donor was performed in a 31 year old woman with severe longlasting aplastic anemia. In vitro assays failed to demonstrate humoral or cellular sensitization of the recipient against donor-type antigens. Following conditioning with cyclophosphamide, prompt but only transient engraftment of the transplant occurred accompanied by signs of mild graft-versus-host-disease (GVHD) of the liver. The results of a second bone marrow transplantation from the same donor cannot be evaluated due to early death of the recipient. It is concluded that bone marrow from unrelated, HL-A and MLC-identical donors may engraft without severe GVHD. Rejection of the graft in our patient may have been related to greater antigenic differences that can be expected to exist between HL-A and MLC-identical unrelated individuals than between HL-A and MLC-identical siblings. However, insufficient preparative immunosuppression with cyclophosphamide due to severe hepatic hemosiderosis appears equally likely as the cause of graft rejection. The possibly increased risk of graft rejection or severe GVHD should not preclude the use of unrelated HL-A and MLC-identical marrow donors, when histocompatible sibling donors are not available; but more potent immunosuppressive regimens than the cyclophosphamide protocol may be necessary to ensure permanent engraftment.

Bệnh nhân nữ 31 tuổi bị suy tủy mạn ác tính kéo dài được ghép tủy xương (BMT) từ người cho không liên quan, có cùng kiểu hình HL-A, MLC. Xét nghiệm in vitro không cho thấy sự nhạy cảm về dịch thể hoặc tế bào của người nhận với các kháng nguyên của người cho. Sau điều trị bằng cyclophosphamide, việc ghép tủy nhanh chóng nhưng chỉ thoáng qua đi kèm với các dấu hiệu của bệnh ghép-so với-chủ (GVHD) nhẹ. Kết quả của ghép tủy xương lần thứ hai từ cùng một người

1 The concentrations of noradrenaline and adrenaline in various organs, arterial plasma and venous outflow from isolated hearts of adult chickens have been determined. 2 The relative adrenaline concentrations (percentage of the sum of noradrenaline and adrenaline) in the heart (33%), spleen (16%) and brain (26%) were higher than those found in mammalian organs. Chemical sympathectomy by pretreatment with 6-hydroxydopamine caused a decrease of the noradrenaline and adrenaline concentrations in the heart to 20 and 23% and in the spleen to 16 and 29%, respectively. 3 Stimulation of the right sympathetic nerves, infusion of tyramine or infusion of a modified Tyrode solution containing 108mM K+ and 44 mM Na+ caused an output of both noradrenaline and adrenaline into the perfusate of isolated hearts. The relative adrenaline concentration in the perfusate (20-28%) was not significantly different from the relative adrenaline concentration remaining in these hearts (19-22%). In the individual experiments, the noradrenaline: adrenaline ratios of the stimulation perfusates were positively correlated with the ratios found in the hearts. 4 The effects of noradrenaline and adrenaline on cardiac rate and tension development were studied in spontaneously beating right atria and electrically driven left atria, respectively. In addition, the arterial pressure rise in response to noradrenaline or adrenaline was;measured in chickens. It was found that the cardio-vaseart rate, cardiac tension development and arterial blood pressure, was not significantly different from that of adrenaline. 5 It is concluded that, in the chicken heart and spleen, both noradrenaline and adrenaline act as sympathetic neutrotransmitters.

1. Nồng độ noradrenaline và adrenaline trong các cơ quan khác nhau, trong huyết tương và trong dòng chảy tĩnh mạch từ tim bị cô lập ở gà trưởng thành đã được xác định. 2. Nồng độ adrenaline tương đối (tỷ lệ phần trăm tổng số noradrenaline và adrenaline) trong tim (33% ), lá lách (16% ) và não (26% ) cao hơn so với nồng độ noradrenaline và adrenaline trong các cơ quan của động vật có vú. Cắt hạch giao cảm bằng tiền xử lý với 6-hydroxydopamine làm giảm nồng độ noradrenaline và adrenaline trong tim (20% ) và 23% và trong lá lách (16% ) và 29% ). 3 Kích thích các dây thần kinh giao cảm phải, truyền tyramine hoặc truyền dung dịch Tyrode biến đổi chứa 108mM K+ và 44 mM Na+ tạo ra sự sản sinh cả noradrenaline và adrenaline vào màng ngoài của tim bị cô lập. Nồng độ adrenaline tương đối trong màng ngoài tim (20-28% ) không khác biệt so với nồng độ adrenaline tương đối còn lại trong các tim này (19-22% ). Trong các thí nghiệm cá nhân, tỷ lệ noradrenaline: adrenaline của màng ngoài tim kích thích tương quan thuận với tỷ lệ được tìm thấy trong tim. 4. Tác dụng của noradrenaline và adrenaline đối với sự phát triển nhịp tim và sức căng tim được nghiên cứu ở tâm nhĩ phải và tâm nhĩ trái do điện giật. Ngoài ra, áp lực động mạch tăng để đáp ứng với noradrenaline hoặc adrenaline được đo ở gà. Kết luận cho thấy, nhịp tim, sự phát triển sức căng tim và huyết áp động mạch của gà không khác biệt so với adrenaline. 5. Kết luận rằng, ở tim và lá lách gà, cả noradrenaline và adrenaline đều hoạt động như chất dẫn truyền thần kinh trung gian giao cảm.

1 The antiarrhythmic, haemodynamic and metabolic effects of a new amino steroid, ORG6001, have been investigated in experimental acute myocardial infarction in anaesthetized greyhounds. 2 ORG6001 administered either intravenously (2-10 mg/kg) or orally (50 mg/kg) significantly reduced the incidence of ventricular ectopic beats in the first 30 min after ligation of the left anterior descending coronary artery. 3 In dogs pretreated with ORG6001, metabolic changes indicative of myocardial ischaemia (lactate production and potassium efflux) were less marked than those occurring in control animals. 4 Antiarrhythmic doses of ORG6001 caused only minimal transient haemodynamic effects. 5 These results suggest that ORG6001 may possess distinct advantages over presently-used antiarrhythmic drugs in the prevention and treatment of the early arrhythmias which occur after myocardial infarction.

Tác dụng chống loạn nhịp, huyết động và chuyển hóa của một amino steroid mới, ORG6001, đã được nghiên cứu trong thử nghiệm nhồi máu cơ tim cấp trên chó gây mê. 2 ORG6001 tiêm tĩnh mạch (2-10 mg/kg) hoặc uống (50 mg/kg) làm giảm đáng kể tỷ lệ nhịp thất ngoài tâm thất trong 30 phút đầu sau khi thắt động mạch vành từ trước xuống bên trái. 3 Ở chó được điều trị bằng ORG6001, những thay đổi về chuyển hóa cho thấy tình

1 The use of radioactive microspheres is described for the measurement of cardiac output in anaesthetized rabbits and its redistribution after the administration of drugs which lower blood pressure. 2 Hydralazine increased peripheral vascular conductance by 123%. The vascular beds in which it had most effect were those of the carcass (mainly muscle) and the kidneys. 3 SK&F 24260, (1,4 dihydro-2, 6-dimethyl-4(2-trifluoremethylpheny)-3,5,-pyridinedicarboxylic acid diethyl ester), had similar vasocilator actions. Its effect in the carcass contributed relatively more to the increase of total peripheral conductance. It also caused a remarkable degree of cerebral vasodilatation. 4 Guanethidine had a relatively small effect on total peripheral conductance and lowered blood pressure mainly by reducing stroke volume and cardiac output.

1. Sử dụng microspheres phóng xạ được mô tả để đo cung lượng tim ở thỏ gây mê và phân phối lại sau khi dùng thuốc làm giảm huyết áp. 2. Hydralazine làm tăng độ dẫn truyền mạch ngoại vi lên 123 %. Các giường mạch có tác dụng nhất là giường thân (chủ yếu là cơ) và thận. 3 SK & F 24260, (1,4 dihydro-2, 6-dimethyl-4 (2-trifluoremethylpheny) - 3,5,-pyridinedicarbox

The effect of attitudes of therapists, patients and researchers on the conduct and outcome of combined drug and psychotherapy research was examined in a brief crisis-oriented psychotherapy clinic. Seventy-seven consecutive patients were given one of two anti-anxiety drugs or a placebo in conjunction with the typical psychoanalytically-oriented treatment used in the clinic. The therapists' attitudes favouring psychotherapy over drug therapy (and psychotherapy research) were clearly conveyed to the patients. Indicative of this are the following: (a) 82 per cent of the patients dropped out of drug taking, although a similar percentage remained in treatment; (b) only a third of the patients perceived it as being important to their therapists that they should take medication; (c) 87 per cent of the patients were rated as improved; and 75 per cent of patients completing forms considered that most or all of their improvement was attributable to talking. The research team, made up of members of the same department who therefore had similar values as the therapists, diligently collected outcome data, but ignored its responsibility to enforce drug-relation portions of the protocol. Overall, patients remained in therapy, improved and participated in completing forms, so that only the research goals of combined therapy were thwarted, while traditional clinic service and training goals proceeded as usual.

Đánh giá tác động thái độ của nhà trị liệu, bệnh nhân và nhà nghiên cứu lên quá trình thực hiện và kết quả nghiên cứu kết hợp thuốc và tâm lý trị liệu tại phòng khám tâm lý trị liệu theo hướng khủng hoảng. 77 bệnh nhân liên tiếp được sử dụng một trong hai loại thuốc chống lo âu hoặc thuốc an thần kết hợp với điều trị tâm lý theo hướng phân tâm học điển hình được sử dụng trong phòng khám. Thái độ của nhà trị liệu có lợi cho tâm lý trị liệu hơn là tâm lý trị liệu (và nghiên cứu tâm lý trị liệu) được truyền đạt rõ ràng tới bệnh nhân. Theo thứ tự này là: a) 82% bệnh nhân bỏ uống thuốc, mặc dù tỷ lệ này vẫn còn trong điều trị; b) chỉ 1/3 bệnh nhân nhận thấy việc uống thuốc là quan trọng đối với nhà trị liệu; c) 87% bệnh nhân được đánh giá là tiến bộ; và 75% bệnh nhân hoàn thành các biểu mẫu cho rằng hầu hết hoặc tất cả sự tiến bộ của họ là do nói chuyện. Nhóm nghiên cứu, được tạo thành từ các thành viên cùng khoa, những người có cùng giá trị với nhà trị liệu, đã chăm chỉ thu thập dữ liệu kết quả nhưng bỏ qua trách nhiệm của mình trong việc thực hiện các phần liên quan đến thuốc trong phác đồ. Nhìn chung, bệnh nhân vẫn tiếp tục điều trị, cải thiện và tham gia hoàn thành các biểu mẫu, do đó chỉ có mục tiêu nghiên cứu của liệu pháp tâm lý kết hợp bị cản trở, trong khi mục tiêu đào tạo và phục vụ tại phòng khám truyền thống vẫn được tiếp tục như bình thường.

A transplantable mouse testicular teratoma (OTT 6050) which displays a spectrum of neuroepithelial differentiation was evaluated biochemically for concentrations of cyclic AMP (cAMP), serotonin (5-HT), and enzymes involved in the metabolism of the biogenic amines and acetylcholine. These values were compared between teratomas with neuroepithelial differentiation as the major or minor component and brains of neonatal and adult mice of related strains. cAMP, 5-HT, tryptophan hydroxylase (TPH), aromatic amino acid decarboxylase (AADC) and monoamine oxidase (MAO) were present. In addition, enzymes of the adrenergic system, i.e. tyrosine hydroxylase (TH) and dopamine-beta-hydroxylase (DBH), and of the cholinergic system, i.e. choline acetyltransferase and acetylcholinesterase, were studied. Biochemical differences in tumor groups probably reflected variations in the proportion of neuroepithelial components: trends suggested an increase of cAMP and an increased activity of TPH, AADC, TH and DBH in tumors with increased proportions of neuroepithelial cells. These findings indicate that the neuroepithelial component of the mouse teratoma may serve as a model for the study of neuronal differentiation in primitive neuroepithelial neoplasms.

Nghiên cứu mô tả loạt ca bệnh u quái tinh hoàn chuột (OTT 6050) có biểu hiện phổ biệt hóa thần kinh được đánh giá bằng hóa sinh về nồng độ AMP vòng (cAMP), serotonin (5-HT) và các enzyme tham gia chuyển hóa các amin sinh học và acetylcholine. Các giá trị này được so sánh giữa u quái với biệt hóa thần kinh là thành phần chính hoặc phụ và não của chuột non và chuột trưởng thành thuộc các chủng liên quan. Các enzyme của hệ thống adrenergic, tức tyrosine hydrox

To examine the regulation of development of end organ innervation the superior cervical ganglion (SCG), and two of its target organs, the iris and pineal gland, were studied using biochemical and histofluorescent approaches. During postnatal ontogeny the activity of tyrosine hydroxylase (T-OH), which is localized to adrenergic neurons, increased 50-fold in iris, and 34-fold in pineal nerve terminals of the rat. These increases paralleled the in vitro rise in iris [3H]norepinephrine ([3H]NE) uptake, a measure of the presence of functional nerve terminal membrane. These biochemical indices of end organ innervation correlated well with developmental increases in density of innervation, adrenergic ground plexus ramification and nerve fiber fluorescence intensity as determined by fluorescence microscopy. Unilateral transection of the presynaptic cholinergic nerves innervating the SCG in 2-3-day-old rats prevented the normal development of end organ innervation: T-OH activity, [3H]NE uptake, innervation density, plexus ramification and fluorescence intensity failed to develop normally in irides innervated by decentralized ganglia. It is concluded that trans-synaptic factors regulate the maturation of adrenergic nerve terminals, and the development of end organ innervation by SCG.

Nghiên cứu sự điều hòa phát triển của bảo tồn nội tạng ở hạch cổ trên và hai cơ quan đích của nó là mống mắt và tuyến tùng được tiến hành bằng phương pháp hóa sinh và mô huỳnh quang. Trong quá trình phát triển cá thể sau sinh, hoạt động của tyrosine hydroxylase (T-OH) được định vị ở các tế bào thần kinh adrenergic tăng gấp 50 lần ở mống mắt và 34 lần ở các đầu dây thần kinh tuyến tùng của chuột cống trắng. Sự tăng lên tương ứng với sự tăng trưởng của mật độ bảo tồn, sự phân nhánh của

Rat placental alkaline phosphatase (EC 3.1.3.1), a dimer of 135,000 daltons, is strongly activated by Mg2+. However, Zn2+ has to be present on the apoenzyme to obtain this activation. Mg2+ alone is unable to reconstitute functional active sites. Excess Zn2+ which competes for the Mg2+ site leads to a phosphatase with little catalytic activity at alkaline pH but with normal active sites at acidic pH as shown by covalent incorporation of ortho-[32P]phosphate. Two enzyme species with identical functional active sites have been reconstituted that only differ by the presence of Zn2+ or Mg2+ at the effector site. A mechanism is presented by which alkaline phosphatase activity of rat placenta would be controlled by a molecular process involving the interaction of Mg2+ and Zn2+ with the dimeric enzyme molecule.

Phosphatase kiềm nhau thai chuột (EC 3.1.3.1) là một dime chứa 135.000 Dalton, được Mg2+ hoạt hóa mạnh. Tuy nhiên, Zn2+ phải có mặt trên apoenzyme để có được sự hoạt hóa này. Chỉ riêng Mg2+ không thể tái tạo các vị trí hoạt động chức năng. Zn2+ dư thừa cạnh tranh vị trí Mg2+ dẫn đến một phosphatase có ít hoạt tính xúc tác ở pH kiềm nhưng có các vị trí hoạt động bình thường ở pH axit như được

A kinetic study of procine chymotrypsin A-pi revealed two characteristic properties of this type of chymotrypsin: 1. Porcine chymotrypsin A-pi, like bovine chymotrypsin B-pi does not bind proflavin, which is a competitive inhibitor of bovine trypsin and chymotrypsin A-alpha. 2. The pH profiles of the steady-state parameters show the two usual important pK's. The basic one, pK2 = 9.6, affects both Km and kcat/Km and probably controls the binding conformation of chymotrypsin. The acidic one, pK1 = 5.7, affects kcat and kcat/Km and plays a role in the catalytic process. The value of pK1 is unusually low.

Nghiên cứu động học chymotrypsin A-pi cho thấy có hai đặc tính của chymotrypsin loại này: 1. Chymotrypsin A-pi giống như chymotrypsin B-pi ở bò không liên kết với proflavin, một chất ức chế cạnh tranh của trypsin bò và chymotrypsin A-alpha. 2. Các thông số pH của các thông số trạng thái ổn định cho thấy hai pK quan trọng thông thường. pK2 = 9,6, ảnh hưởng đến cả Km và kcat

The free and bound forms of alpha,alpha-trehalase (EC 3.2.1.28) of the honey bee thorax were separated and the bound enzyme was solubilized by raising the pH to 8.0 for 10 h. Both enzymes were purified. They were homogeneous as determined by several electrophoretic criteria. It was found that the two enzymes had very similar Km's (each about 0.89 mM), Vm's (53.2 and 54.3 U/mg for free and solubilized, respectively), inhibition characteristics, specificities (both only hydrolyzed alpha,alpha-trehalose), pH maxima (each had maxima at about 3.5 and 6.5), molecular weights (65,000), isoelectric points (5.1), reactivities to sulfhydryl reagents, electrophoretic mobilities, activation energies (about 12.8 kcal/mol), and similar stabilities to heat, pH, and urea. Some significant differences between the two enzymes were, however, found: the solubilized alpha,alpha-trehalase floated at 70% saturation of ammonium sulfate while the free alpha,alpha-trehalase did not; the solubilized alpha,alpha-trehalase did not dissociate into subunits as readily as did the free one; and the solubilized alpha,alpha-trehalase was found to bind more readily to a hydrophobic grouping than the free enzyme. In addition to these comparisons, three new findings relating to thorax alpha,alpha-trehalases are reported. (1) Thorax alpha,alpha-trehalases are strongly inhibited by beta-glucosides (Ki values of about 8 x 10(-4) M); (2) under certain conditions thorax alpha,alpha-trehalases from honey bees dissociated into subunits of one-half the normal molecular weight; (3) honey bee thorax alpha,alpha-trehalases have unusual biphasic pH activity profiles.

Các dạng tự do và liên kết của alpha, alpha-trehalase (EC 3.2.1.28) của thóp ong mật được tách riêng và enzyme liên kết được hòa tan bằng cách nâng pH lên 8,0 trong 10 giờ. Cả hai enzyme đều được tinh sạch. Chúng đồng nhất khi được xác định bằng một số tiêu chí điện di. Hai enzyme được phát hiện có các đặc điểm ức chế, đặc trưng (cả hai chỉ có alpha, alpha-trehalose thủy phân) và pH tối đa (mỗi enzyme có cực đại ở khoảng 3,5 và

Immunotherapy of cancer is of interest to oncologists because it is specifically directed to cancer cells, sparing normal cells. While it is ineffective in most patients, especially those with widespread metastatic disease, it occasionally produces good results. Each of the available methods has inherent problems and, recently, attempts have been made to overcome some of these. There is a strong case for small-scale experimental trials in highly selected groups of patients who are intensively investigated for their immunologic status in relation to their tumour. Despite the lack of success in general, immunotherapy still appears to have a future as an adjunct to existing therapy in order to control as much as to cure residual tumour.

Liệu pháp miễn dịch ung thư là một phương pháp được các bác sĩ ung thư quan tâm vì nó đặc biệt hướng đến các tế bào ung thư, tiết kiệm được các tế bào bình thường. Mặc dù không hiệu quả ở hầu hết bệnh nhân, đặc biệt là những bệnh nhân có bệnh di căn lan rộng, nhưng đôi khi phương pháp này cũng mang lại kết quả tốt. Mỗi phương pháp đều có những vấn đề cố hữu và gần đây đã có những nỗ lực khắc phục một số vấn đề này. Có một trường hợp mạnh mẽ cho thử nghiệm trên quy mô nhỏ ở các nhóm bệnh nhân được lựa chọn cao,

L-[alphaS,5S]-alpha-amino-3-chloro-4,5-dihydro-5-isoxazoleacetic acid (NSC-163501), an antibiotic elaborated by Streptomyces sviceus, has been shown to be a powerful inhibitor of many mammalian and bacterial reactions involving the transfer of nitrogen from the gamma-carboxamide of L-glutamine. Thus, the utilization of L-glutamine for the synthesis of carbamyl phosphate, L-asparagine, guanosine-5'-monophosphate, cytidine-5'-triphosphate, N-formylglycinamidine ribonucleotide, NAD, glucosamine-6-phosphate, and anthranilic acid is strongly or totally inhibited by a concentration of NSC-163501 of 1 X 10(-3) M. L-Glutamate synthetase of Escherichia coli is only modestly inhibited and 5-phosphoribosylamine synthesis in fetal rat liver is comparatively refractory to inhibition. NSC-163501 treatment of L1210 cells growing in a low L-glutamine culture medium produced arrest in G or early S phase. Of the amino acids tested, only L-glutamine antagonized such growth inhibition.

L-(alphaS, 5S]-alpha-amino-3-chloro-4,5-dihydro-5-isoxazoleacetic acid (NSC-163501) là một kháng sinh được xây dựng bởi Streptomyces sviceus, đã được chứng minh là một chất ức chế mạnh nhiều phản ứng của động vật có vú và vi khuẩn liên quan đến việc chuyển nitơ từ gamma-carboxamide của L-glutamine. Do đó, việc sử dụng L-glutamine để tổng hợp carbam

The antitumor and immunosuppressive activities of the lankacidin-group antibiotics were studied in mice. Seventeen of 29 newly prepared lankacidin-group antibiotics, including 14-derivatives of lankacidin C, lankacidinol, isolankacidinol, and lankacidinol 14-acetate, possessed considerable antitumor activity against ascites 6C3HED/OG lymphosarcoma. Comparative studies on the antitumor activity of lankacidin C and eight of its derivatives against L1210 leukemia and solid 6C3HED/OG lymphosarcoma demonstrated that replacement of the hydroxyl group at position 8 or 14 of lankacidin C by an acyloxy group potentiated antitumor activity. However, these modifications of lankacidin C resulted in reduction of the immunosuppressive activity.

Hoạt tính kháng ung thư và ức chế miễn dịch của kháng sinh nhóm lankacidin được nghiên cứu trên chuột nhắt trắng. 17 trong số 29 kháng sinh nhóm lankacidin mới được bào chế, bao gồm 14 dẫn chất của lankacidin C, lankacidinol, isolankacidinol và lankacidinol 14-acetate, có hoạt tính kháng ung thư đáng kể đối với bệnh bạch cầu cổ trướng 6C3HED/OG. Các nghiên cứu so sánh hoạt tính kháng ung thư của lankacidin

Previous studies on renin release by an in vitro system of rat kidney slices, which is devoid of hemodynamic influences, have provided evidence that renin release is stimulated by a beta-adrenergic mechanism. We used this system to study effects of tyramine (an indirectly acting amine capable of displacing endogenous catecholmines from sympathetic nerve endings) on renin release. Tyramine (10(-3)M) in the presence of a monoamine oxidase inhibitor (pheniprazine, 10(-5)M) and a phosphodiesterase inhibitor (theophylline, 10(-3)M) significantly (P less than 0.01) stimulated renin release when values were compared to control observations for media containing only the inhibitors. Tyramine-induced stimulation of renin release was blocked by the beta-blocking agent, propranolol (2 X 10(-4) M), and the neural uptake blocking agent, cocaine (10(-5) M), but not by the alpha-antagonist, phentolamine (9 X 10(-4) M). These observations demonstrate a potential role for the sympathetic innervation of the juxtaglomerular apparatus on renin release.

Các nghiên cứu trước đây về giải phóng renin bằng hệ thống in vitro cắt lát thận chuột không có ảnh hưởng đến huyết động đã cung cấp bằng chứng cho thấy giải phóng renin được kích thích bởi cơ chế beta-adrenergic. Chúng tôi đã sử dụng hệ thống này để nghiên cứu ảnh hưởng của tyramine (một amin hoạt động gián tiếp có khả năng thay thế các catecholin nội sinh từ các đầu dây thần kinh giao cảm) lên giải phóng renin. Tyramine (10 (- 3) M) với sự có mặt của chất ức chế monoamin oxydase

Sera from patients with hepatobiliary disorders were selected to represent a wide range of activity of gamma-glutamyltransferase (EC 2.3.2.2). Samples were stored at 4 degrees C and periodically tested for as long as nine weeks, others at -6 degrees C for as long as 40 weeks. The frozen-stored samples were thawed and then frozen again after each testing. The activity of the enzyme was essentially unchanged under both conditions of storage. These results are consistent with comments in the literature on the enzyme's stability.

Huyết thanh của bệnh nhân rối loạn gan mật được chọn đại diện cho một loạt các hoạt tính của gamma-glutamyltransferase (EC 2.3.2.2 ). Mẫu bệnh phẩm được bảo quản ở 4 độ C và được kiểm tra định kỳ trong 9 tuần, các mẫu khác ở -6 độ C trong 40 tuần. Các mẫu lưu trữ đông lạnh được rã đông và sau mỗi lần kiểm tra lại được đông lạnh lại. Hoạt tính của enzyme về cơ bản không thay đổi trong cả hai điều kiện bảo quản. Kết quả này phù hợp với nhận xét trong các tài

Continuous monitoring of heat denaturation of a mixture of alkaline phosphatase isoenzymes at 60 degrees C and pH 7.5 permits the simultaneous direct identification and quantitation of three isoenzymes: the placental isoenzyme, the L-phenylalanine-sensitive intestinal isoenzyme, and the liver isoenzyme (hepatocytic). The isoenzyme that is principally of bone origin cannot be identified as such without the help of other diagnostic aids and the patient's medical history. All human tissues contain alkaline phosphatase, many organs more than one of the isoenzymes. Liver alkaline phosphatase, which constitutes 40-50% of normal serum alkaline phosphatase activity, was measured in the serum of persons with various liver diseases. Its activity exceeded normal in all types of liver disease; in 80% of cases this increase was accompanied by increased gamma-glutamyl-transferase activity, but the quantitative correlationship (r = 0.54) was not as good as expected if both enzymes come from the same source and are indices of liver dieases. Liver alkaline phosphatase activity increases in the blood early in liver disease, before most liver tests show abnormalities. The other major isoenzyme of normal serum probably represents a mixture of isoenzymes from bone and reticulo-endothelial and vascular tissues, which all contain the same "very heat-labile" alkaline phosphatase. Cord blood and children's sera contain mostly this very heat-labile isoenzyme.

Theo dõi liên tục sự biến tính nhiệt của hỗn hợp isoenzyme phosphatase kiềm ở 60 độ C và pH 7,5 cho phép xác định và định lượng trực tiếp đồng thời ba isoenzyme: isoenzyme nhau thai, isoenzyme đường ruột nhạy cảm với L-phenylalanine và isoenzyme gan (tế bào gan).

An optimized end-point method that requires little sophisticated equipment is described for estimating serum cystyl-aminopeptidase during pregnancy. S-Benzyl-L-cysteine-4-nitroanilide is used as the substrate.

Một phương pháp tối ưu điểm cuối đòi hỏi ít thiết bị phức tạp được mô tả để ước tính cystyl-aminopeptidase huyết thanh trong thai kỳ. S-Benzyl-L-cysteine-4-nitroanilide được sử dụng làm chất nền.

I describe a simple, single-tube batch fractionation procedure for separating MM and MB isoenzymes of creatine kinase on a macroporous strong anion exchanger (AG MP-1, Bio-Rad Laboratories). The isoenzymes can be separated in less than 3 min, with a resulting dilution of the serum with no more than an equal volume of buffer. Without sample concentration or spectrofluorometric measurement, the procedure detects 4 U of MB isoenzyme per liter. Sensitivity is limited by the sensitivity and precision of the method of measurement. The CV for the fractionation can be held to less than 4.0% at 65 U of MB per liter. Current fractionation methods are compared to the proposed procedure. With use of a discrete analyzer (Du Pont aca) the mean MB activity in a population free of heart disease was 3.2 +/- 3.0 U/liter (range, 0 to 8 U/liter). The kinetics and stability of isolated isoenzymes are reported, indicating that advisability of storing or pre-incubating samples with mercaptoethanol.

Tôi mô tả quy trình phân đoạn hàng loạt đơn giản bằng một ống để tách các isoenzyme MM và MB của creatine kinase trên một bộ trao đổi anion mạnh macroporous (AG MP-1, Phòng thí nghiệm Bio-Rad ). Các isoenzyme có thể được tách ra trong vòng chưa đầy 3 phút, với kết quả pha loãng huyết thanh với thể tích đệm không quá bằng nhau. Không có nồng độ mẫu hoặc đo phổ huỳnh quang, quy trình phát hiện 4 U isoenzyme MB mỗi lít. Độ nhạy bị giới hạn bởi độ nhạy và độ

It is demonstrated that urinary tryptamine decreases significantly with increasing urinary pH. This effect becomes important at a urinary pH of 6.5 and over.

Nó được chứng minh rằng tryptamine tiết niệu giảm đáng kể khi tăng pH nước tiểu, tác dụng này trở nên quan trọng ở pH nước tiểu từ 6,5 trở lên.

Urinary gamma-glutamyl transpeptidase (gamma-GT) has been found to be stable when stored at room temperature and 4 degrees C. Activity is lost rapidly when urine is frozen but prior dialysis will prevent this loss. Urea is the major factor responsible for the loss of activity; albumin is protective at concentrations of 6 g/l or more. A factor of 10 000-30 000 molecular weight which will prevent the loss of urinary gamma-GT activity on freezing has been found in serum and urine; it has high potency in serum and in urine from patients with chronic renal failure, but only low potency in normal urine. Its nature is unknown but it is heat stable.

Gamma-glutamyl transpeptidase niệu (gamma-GT) ổn định khi bảo quản ở nhiệt độ phòng và 4 độ C. Hoạt độ mất nhanh khi nước tiểu được đông lạnh nhưng lọc máu trước sẽ ngăn ngừa mất hoạt độ này. Urê là yếu tố chính gây mất hoạt độ; albumin bảo vệ ở nồng độ 6 g/l trở lên. Một yếu tố có trọng lượng phân tử 10 000-30 000 ngăn ngừa mất hoạt độ gamma-GT niệu khi đông lạnh đã được tìm thấy trong huyết thanh và nước tiểu;

The purpose of the present study was to evaluate the properties of beta-glucuronidase (EC 3.2.1.31) in human synovial fluid. It was shown to have a pH requirement of 5.0 and a KM value of about 8.0 - 10(-3) M using phenolphthalein beta-glucuronide as the substrate. At low substrate concentration an endogenous inhibitor is demonstrable. The inhibition is of the competitive type and is removed by proteolytic digestion of synovial fluid, whereas hyaluronidase digestion and addition either of Triton X-100 or of various salts to the assay mixture, are ineffective. The possibility that the inhibitor is a protein from serum is discussed.

Mục đích của nghiên cứu này là đánh giá đặc tính của beta-glucuronidase (EC 3.2.1.31) trong dịch hoạt dịch ở người. Chất nền của beta-glucuronidase được sử dụng phenolphthalein beta-glucuronide cho độ pH 5,0 và giá trị KM khoảng 8,0-10 (-3) M. Ở nồng độ chất nền thấp, chất ức chế nội sinh được chứng minh là có khả năng ức chế. Chất ức chế thuộc loại cạnh tranh và được loại bỏ bằng cách

A 12-year-old girl of Spanish origin was found to be double heterozygote for a deficient GP I variant (GP I Barcelona) and for a silent GP I gene. The mother was heterozygote for GP I Barcelona and the father was heterozygote for the silent gene. GP I Barcelona was a fast variant (116%) with an increased isoelectric point (9.55), lability to heat and to urea, and shift of the pH curve towards the acidic pH. The other kinetic characteristics were normal. The ratio of enzymatic activity to immunological reactivity was normal in erythrocytes and white blood cells of the father and the mother but decreased to 75% of normal in blood cells of the daughter. The genetic and molecular mechanisms of GP I deficiency of this patient are discussed.

Một bé gái 12 tuổi gốc Tây Ban Nha được phát hiện dị hợp tử kép cho biến thể thiếu gen GP I (GP I Barcelona) và cho gen im lặng GP I. Mẹ dị hợp tử cho GP I Barcelona và cha dị hợp tử cho gen im lặng. GP I Barcelona là biến thể nhanh (116% ) với điểm đẳng điện tăng (9,55), khả năng chịu nhiệt và chịu ure, độ cong pH theo pH acid. Các đặc điểm động học khác đều bình thường. Tỷ lệ hoạt động của enzyme trên phản ứng miễn dịch là

A method is described for detecting the simultaneous presence of Fc and C3 receptors on mouse spleen cells. A proportion of both T cells and non-T cells bear both receptors. Both T-cell and non-T-cell Fc receptors were blocked by aggregated mouse IgG2 to the same degree. C3, but not Fc, receptors were blocked by factors present in the serum of irradiated mice or mice undergoing graft-versus-host reaction. Thymocytes activated by injection into irradiated F1 hybrid mice, and thymocytes regenerating after irradiation and bone marrow injection, appeared to have increased Fc receptors. A general role for Fc and C3 receptors in T cell-B cell co-operation is suggested.

Một phương pháp được đề xuất để phát hiện đồng thời thụ thể Fc và C3 trên tế bào lách chuột. Một tỷ lệ của cả tế bào T và tế bào không T đều mang cả hai thụ thể. Cả hai thụ thể Fc của tế bào T và không phải tế bào T đều bị chặn bởi IgG2 tổng hợp ở cùng mức độ. Các thụ thể C3, nhưng không phải Fc, bị chặn bởi các yếu tố có trong huyết thanh của chuột bị chiếu xạ hoặc chuột đang trải qua phản ứng ghép chống lại chủ. Thymocytes được kích hoạt bằng cách tiêm vào chuột lai F1

Because of reports of fluroxene toxicity in man, the effect of phenobarbital treatment on the toxicity and metabolism of fluroxene was studied in 9 rhesus monkeys. Six monkeys that were exposed to a mean calculated alveolar fluroxene concentration of 5.8% for 4-hr periods up to a total of 16 hr showed no evidence of toxicity. Two animals were sacrificed after a single 4-hr exposure to obtain control measures of fluroxene metabolites in tissues. Four monkeys that had previously survived received exposures to fluroxene and 3 monkeys that had no exposure to fluroxene died during fluroxene anesthesia after treatment with phenobarbital (mean time, 3 hr). Toxicity was manifested by arterial hypotension, pulmonary edema, and arterial hypoxemia. Phenobarbital treatment enhanced production of fluroxene metabolites, including the highly toxic trifluoroethanol. Concentrations of trifluoroethanol in mixed-expired gas, blood, and urine, and of total nonvolatile fluorine in blood, urine, and tissues of animals treated with phenobarbital were 2 to 10 times as in control animals. The results suggest that the rhesus monkey is a valuable model for the study of fluroxene pharmacology and that inclusion of an enzyme-inducing challenge in the evaluation of potential toxicity of other anesthetics seems warranted.

Nghiên cứu tác dụng của phenobarbital đối với độc tính và sự chuyển hóa của fluroxen ở người, do đó nghiên cứu được tiến hành trên 9 con khỉ nâu. Sáu con khỉ tiếp xúc với nồng độ trung bình 5,8% fluroxen trong thời gian 4-hr cho đến tổng cộng 16 giờ không có bằng chứng về độc tính. Hai con khỉ bị hiến tế sau một lần tiếp xúc 4-hr để kiểm soát các chất chuyển hóa fluroxen trong mô. Bốn con khỉ sống sót trước đó đã bị phơi nhiễm với fluroxen và ba con khỉ không bị phơi nhiễm đã chết trong quá trình gây mê bằng phenobarbital (thời gian trung bình 3 giờ ). Các biểu hiện độc tính bao gồm hạ huyết áp động mạch, phù phổi và thiếu oxy máu động mạch. Điều trị bằng phenobarbital làm tăng sản xuất các chất chuyển hóa fluroxen, trong đó có trifluoroethanol có độc tính cao. Nồng độ trifluoroethanol trong khí, máu, nước tiểu và flo tổng số không bay hơi trong máu, nước tiểu và mô của động vật được điều trị bằng phenobarbital cao gấp 2-10 lần so với động vật đối chứng. Kết quả nghiên cứu cho thấy khỉ nâu là một mô hình có giá trị trong nghiên cứu dược lý fluroxen và việc đưa vào đánh giá độc tính tiềm tàng của các chất gây mê khác là cần thiết.

The effectiveness of intravenously administered propranolol in antagonizing the chronotropic effect of isoproterenol and exercise has been investigated, and has been found at all times to be a predictable function of its plasma concentrations according to the classical drug-receptor theory for competitive antagonism. The data show further that the relationship between effectiveness and time depends on the way in which antagonism is measured. If the dose ratio to isoproterenol (DR) is measured, then (DR-1) declines with time in parallel with drug concentration. On the other hand, if propranolol's effects are measured as percentage reduction in a given response, then this declines linearly with time, even though plasma concentrations decline exponentially. This fact explains why confusion has in the past arisen concerning the relationship of the duration of beta blockade and pharmacokinetic half-life.

Hiệu quả của propranolol tiêm tĩnh mạch trong việc đối kháng với tác dụng chronotropic của isoproterenol và tập thể dục đã được nghiên cứu và luôn được tìm thấy là một chức năng có thể dự đoán được về nồng độ của nó trong huyết tương theo lý thuyết thụ thể thuốc cổ điển đối với sự đối kháng cạnh tranh. Các số liệu cho thấy mối quan hệ giữa hiệu quả và thời gian phụ thuộc vào cách thức đo lường sự đối kháng. Nếu đo tỷ lệ liều dùng với isoproterenol (DR) thì (DR-1) giảm theo thời

Lorazepam, a new benzodiazepine, was compared with a standard surgical premedicant, pentobarbital. In a double-blind study in 128 patients, lorazepam, 2 and 4 mg, and pentobarbital, 50 and 100 mg, were given intravenously in a randomized sequence. Significant differences were noted; lorazepam was found to provide greater sedation, lack of recall, and greater antianxiety effect than pentobarbital. No significant adverse effects were noted following either drug. Vital signs remained stable.

Lorazepam, một loại thuốc mới của benzodiazepine, được so sánh với thuốc tiền chất phẫu thuật tiêu chuẩn, pentobarbital. Trong một nghiên cứu mù đôi trên 128 bệnh nhân, lorazepam, 2 và 4 mg, và pentobarbital, 50 và 100 mg, được tiêm tĩnh mạch theo trình tự ngẫu nhiên. Sự khác biệt đáng kể được ghi nhận; lorazepam có tác dụng an thần, giảm trí nhớ và chống lo âu nhiều hơn pentobarbital. Không có tác dụng phụ đáng kể nào được ghi nhận sau

The question of pH or flow dependence for the renal elimination of procainamide (PCA) was studied under 4 conditions in each of 4 subjects. Each subject received 500 mg of PCA intravenously at weekly intervals while in a state of (1) acid load (NH4Cl) and water deprivation, (2) acid load and water excess, (3) alkali load (NaHCO3) and water deprivation, and (4) alkali load and water excess. Plasma and urine were collected at frequent intervals for PCA and N-acetyl PCA (NAPA) analysis. Urine flow rates varied markedly between the water deprivation and water excess states (approximately 1.2 vs 5 ml/min, respectively), and urine pH varied markedly between the acid and alkali load states (pH = ca 5 vs 8, respectively). Despite this marked variation, there were no significant changes in PCA renal clearance or 24-hr PCA or NAPA excretion. If passive diffusion of PCA were taking place, such flow and pH changes would have caused marked changes in PCA clearance were the pH partition hypothesis true. We therefore conclude that passive diffusion is not an important mechanism in the renal elimination of PCA in man and that there must be tubular secretion. The implication for the clinical use of the drug is that dose adjustments need not be made in response to variations in urine flow and pH.

Nghiên cứu được tiến hành trên 4 đối tượng với 4 điều kiện khác nhau về pH hoặc sự phụ thuộc dòng chảy trong thải PCA qua thận. Mỗi đối tượng được tiêm tĩnh mạch 500mg PCA theo chu kỳ hàng tuần trong khi ở trạng thái (1) tải lượng acid (NH4Cl) và thiếu nước, (2) tải lượng acid và dư nước, (3) tải lượng kiềm (NaHCO3) và thiếu nước, và (4) tải lượng kiềm và dư nước. Huyết tương và nước tiểu được thu thập theo chu kỳ để phân

1. A retrospective cross-sectional study was carried out on data derived from single 24 h urine collections from 246 male idiopathic calcium stone-formers. 2. The daily urine volume and pH and the exretions of calcium, oxalate, phosphate, creatinine and magnesium were related to the time of year when the urine was collected, and the saturation of urine with calcium oxalate and octocalcium phosphate calculated for each month. 3. There were significant seasonal variations in the urinary excretion of calcium and oxalate, each showing a maximum during the summer months and a minimum in the winter. There was no significant seasonal variation in urinary pH, volume, creatinine, phosphate or magnesium. 4. There was a significant increase in the saturation of urine with calcium oxalate and a trend towards higher saturation levels of octo-calcium phosphate in the summer. These changes were dependent only on the seasonal variation in urinary calcium and oxalate and not on urine volume. 5. A retrospective study of the seasonal incidence of stone episodes among these 246 stone-formers showed that the rate of stone passage per month was 50% higher in the summer than in the winter. There was no significant seasonal variation in the incidence of stones removed surgically.

1. Nghiên cứu mô tả cắt ngang hồi cứu trên 246 sỏi canxi vô căn nam được lấy từ 24h nước tiểu. 2. Thể tích, pH nước tiểu hàng ngày và sự bài tiết canxi oxalat, phosphat, creatinin và magiê có mối liên quan với thời điểm lấy mẫu và độ bão hòa canxi oxalat và octocalcium phosphat tính theo từng tháng. 3. Sự bài tiết canxi và oxalat qua nước tiểu có sự thay đổi đáng kể theo mùa, mỗi loại tối đa vào những tháng hè và tối thiểu vào mùa đông. Không có sự thay đổi đáng kể về pH, thể tích, creatinin, phosphat và magiê qua nước tiểu. 4. Độ bão hòa canxi oxalat tăng đáng kể và xu hướng tăng độ bão hòa kali-canxi phosphat vào mùa hè. Sự thay đổi này chỉ phụ thuộc vào sự thay đổi theo mùa của canxi và oxalat qua nước tiểu chứ không phụ thuộc vào thể tích nước tiểu. 5. Nghiên cứu hồi cứu tỷ lệ các đợt sỏi theo mùa ở 246 sỏi canxi vô căn nam cho thấy: tỷ lệ đi tiểu vào mùa hè cao hơn 50% so với mùa đông. Tỷ lệ các đợt sỏi được lấy ra qua phẫu thuật không có sự thay đổi đáng kể theo mùa.

138 patients with panarteritis of the aorta and its branches were examined, and the clinical and morphological findings were compared. The disease is more widespread than has been assumed so far, and is more frequent in young women. Localization of the process in the abdominal aorta with involvement (stenosis) of renal arteries causes renovascular hypertension, which often has a malignant course, especially with an ambilateral affection of renal arteries. In the treatment, repetitive therapeutic courses with corticosteroids and heparin are of fundamental importance. With an isolated affection, especially in renovascular hypertension and disturbances of cerebral circulation, surgical treatment is also indicated.

138 bệnh nhân viêm đại động mạch chủ và các nhánh động mạch chủ được khám, so sánh các triệu chứng lâm sàng và hình thái. Bệnh ngày càng phổ biến hơn so với giả định cho đến nay, thường gặp ở phụ nữ trẻ. Vị trí tổn thương động mạch chủ bụng có liên quan (sốc) thận gây tăng áp lực động mạch thận, thường có diễn biến ác tính, đặc biệt là ảnh hưởng hai bên động mạch thận. Trong điều trị, các đợt điều trị lặp lại với corticosteroid và heparin có ý nghĩa quan trọng. Với ảnh hưởng đơn độc, đặc

Fifty-eight neurotic patients with intense anxiety were treated with either lorazepam or diazepam in a double blind between-patients trial. Statistical analysis indicated that the two groups were homogeneous before treatment and that the results of treatment were similar for both drugs. According to the global rating of illness week after week, after four weeks of treatment more patients on lorazepam than on diazepam were normal or had mild illness (82.1% vs. 70.8%). In the investigators' judgment, 71.9% of the patients treated with lorazepam had an excellent or good response compared with 56.7+ of those treated with diazepam. The mean reduction in score on the Hamilton Anxiety Scale was 17.7 for lorazepam and 16.5 for diazepam. However, none of the above differences in results were statistically significant. The largest dose of lorazepam required in treatment was 6 mg, compared with 30 mg of diazepam. Two patients treated with lorazepam had side effects, against six with diazepam. Six patients in the diazepam group did not complete the trial, including three who discontinued because of side effects (rash, tremors, agitation); no patients in the lorazepam group dropped out.

58 bệnh nhân loạn thần kinh với mức độ lo âu cao đã được điều trị bằng lorazepam hoặc diazepam trong một thử nghiệm mù đôi giữa các bệnh nhân. Phân tích thống kê cho thấy hai nhóm đều đồng nhất trước điều trị và kết quả điều trị của cả hai thuốc đều tương tự nhau. Theo đánh giá toàn cầu về tình hình bệnh tật tuần này qua tuần khác, sau bốn tuần điều trị nhiều bệnh nhân dùng lorazepam hơn so với dùng diazepam là bình thường hoặc bệnh nhẹ (82,1% so với 70,8% ). Theo

The presence of p-chlorophenoxyacetamide was detected in the urine of man receiving iproclozide [1-(p-chlorophenoxyacetyl)-2-isopropylhydrazine]. This new metabolite was identified by combined gas-liquid chromatography-mass spectrometry and by comparison with the synthetic compound. An appropriate procedure for the extraction and quantitation of p-chlorophenoxyacetamide by gas-liquid chromatography on a 5% OV-225-packed column with the 2-butyl analog of iproclozide as an internal standard, has been developed. After 20- and 50-mg single dose oral administrations of iproclozide, 5.2 and 8.3% were slowly excreted in urine as p-chlorophenoxyacetamide within 30.5 and 36 hr. respectively. After 20-mg oral intakes by psychiatric patients, the 24-hr urinary excretion of p-chlorophenoxyacetamide amounted to about 2-4% of the iproclozide dose administered.

Sự hiện diện của p-chlorophenoxyacetamide trong nước tiểu của người dùng iproclozide (1-(p-chlorophenoxyacetyl) -2-isopropylhydrazine) được phát hiện. Chất chuyển hóa mới này được xác định bằng phương pháp sắc ký khí-lỏng kết hợp khối phổ và so sánh với hợp chất tổng hợp. Đã xây dựng được quy trình chiết xuất và định lượng p-chlorophenoxyacetamide bằng sắc ký khí-lỏng trên cột đóng gói 5% OV-225 với

Repeated oral treatment of male rats with piperazine-substituted phenothiazine drugs in doses of 25 mg/kg or more daily led to an accumulation of metabolites containing an ethylenediamine group instead of the piperazine ring. These products of ring degradation with and without removal of the N-alkyl group were found, together with the parent drugs and their N-dealkylated metabolites, in liver, lung, kidney, and spleen, as well as in brain when high doses were administered. After termination of treatment, the ethylenediamine derivatives were eliminated more slowly than were their congeners containing the intact piperazine ring. Parallel observations were made in dogs given fluphenazine in daily doses of up to 40 mg/kg. Quantitative differences were observed in the relative amounts of mono- and disubstituted ethylenediamine metabolites accumulated in rat tissues during treatment with the various drugs; the proportion of the monosubstituted product formed by N-dealkylation and ring cleavage declined in the following order: perazine, prochlorperazine, trifluoperazine, fluphenazine, perphenazine. Condensation products of the ethylenediamine derivatives with formaldehyde were split in the extraction procedure used.

Chuột cống đực điều trị bằng phenothiazine thay thế bằng piperazine với liều 25 mg/kg thể trọng/ngày trở lên đã tích tụ các chất chuyển hóa có chứa nhóm ethylenediamine thay vì vòng piperazine. Các sản phẩm thoái hóa vòng có và không loại bỏ nhóm N-alkyl cùng với thuốc mẹ và các chất chuyển hóa N-dealkylated ở gan, phổi, thận, lách cũng như não khi dùng liều cao. Sau khi kết thúc điều trị, các dẫn chất ethylenediamine được loại bỏ chậm hơn so với các chất đồng loại có

The biotransformation of 14C-triflubazam (ORF 8063; 1-methyl-5-phenyl-7-trifluoromethyl-1H-1,5-benzodiazepin-2-4-[3H,5H]-dione) was investigated in rats, dogs, and monkeys. Urinary metabolites, representing 65, 74, and 87%, respectively, of the total urinary radioactivity excreted by these three species, were isolated by preparative layer chromatography and characterized by various spectral techniques including gas chromatography/mass spectrometry, solid probe mass spectrometry, polarimetry, and infrared and nuclear magnetic resonance spectrometry. No parent drug was found in the urine of any species. Four metabolites were isolated from the rat including the 4'-hydroxyphenyl, dihydrodiol, and 3'-methoxy-4'hydroxy derivatives. N-demethylated metabolites were not isolated from rat urine. Five metabolites were isolated from dog urine, including 4-hydroxyphenyl, dihydrodiol, and catechol derivatives of triflubazam. Unlike the case of the rat, a catechol-O-methyl ether was not detected in dog urine. Six metabolites were isolated from monkey urine. The only major difference in metabolism in the monkey was the existence of both the dihydrodiol and N-desmethyldihydrodiol metabolites. No catechol-0-methyl ether was detected in monkey urine. Biotransformation through a common arene oxide intermediate can be proposed for these three animal species.

Biến đổi sinh học của 14C-triflubazam (ORF 8063; 1-methyl-5-phenyl-7-trifluoromethyl-1H-1,5-benzodiazepin-2-4-[3H, 5H]-dione) được khảo sát trên chuột cống, chó và khỉ. Các chất chuyển hóa nước tiểu chiếm 65,74 và 87% tổng lượng phóng xạ nước tiểu của cả ba loài, được phân lập bằng sắc ký lớp chuẩn bị và được đặc trưng bởi các kỹ

Gas chromatography-mass spectrometry was used to identify metabolites of spironolactone in human blood and urine. In three healthy men about 20% of the radioactivity was excreted in the urine within 24 hr after an oral dose of [20-3H]spironolactone (200 mg + 200 muCi). About half of this radioactivity was extracted with chloroform at pH 3 and from this extract four stable metabolites were isolated by use of column and thin-layer chromatography. Two of these were the previously identified metabolites, canrenone (VII; 2.9% of dose) and the 6beta-hydroxy-sulfoxide (X; 1.8% of the dose). The remaining were the new metabolites, 15alpha-hydroxycanrenone (XI; 0.8% of dose) and the 6beta-hydroxy-thiomethyl derivatives (VI; 0.5% of dose). The principal water-soluble urinary metabolite was canrenoate ester glucuronide (XII; 4.5% of dose). In the 24- to 32-hr pooled serum, canrenone (VII) was the principal metabolite in the organic-extractable fraction; VI was present in appreciable amounts but X and XI were present at extremely low levels.

Sắc ký khí khối phổ được sử dụng để xác định các chất chuyển hóa của spironolactone trong máu và nước tiểu người. Ở 3 người đàn ông khỏe mạnh, khoảng 20% hoạt tính phóng xạ được bài tiết qua nước tiểu trong vòng 24 giờ sau khi uống liều (20-3H) spironolactone (200 mg + 200 muCi ). Khoảng một nửa hoạt tính phóng xạ này được chiết bằng cloroform ở pH 3 và từ dịch chiết này, bốn chất chuyển hóa ổn định được phân lập bằng sắc ký cột và sắc ký

After oral administration of 14C-labeled amobarbital to healthy subjects, most of the radioactivity was recovered in urine and only 4-5% in feces over a period of 6 days. No unchanged amobarbital was excreted. Two major metabolites were found and isolated. One was 3'-hydroxyamobarbital, which has been previously identified by Maynert. The second could be identified as N-hydroxyamobarbital on the basis of its spectral and chemical properties.

Sau khi uống Amobarbital dán nhãn 14C cho người khỏe mạnh, hầu hết hoạt tính phóng xạ đã được phục hồi trong nước tiểu và chỉ có 4-5% trong phân trong khoảng thời gian 6 ngày. Không có amobarbital không thay đổi được bài tiết. Hai chất chuyển hóa chính đã được tìm thấy và phân lập. Một là 3 '-hydroxyamobarbital, đã được Maynert xác định trước đó. Chất thứ hai có thể được xác định là N-hydroxyamobarbital dựa trên các đặc tính phổ và hóa học của nó.

The mixed-function oxidation of 14C-labled 2-acetylaminofluorene (AAF) was investigated in placental and fetal tissues of humans and monkeys (Macaca nemestrina) in vitro. The major metabolite formed in most tissues was 7-hydroxy-AAF. Rates of the hydroxylation reactions varied widely among the tissues investigated and were generally one to two orders of magnitude lower than those measured in rat hepatic tissues. High correlations among rates of 7-,5-, and 3- and between 1- and N-hydroxylations of AAF were observed. The latter two reactions were less responsive to inhibition by carbon monoxide. Rates of 3-hydroxylations of benzo[a]pyrene (BP) also were highly correlated with rates of 7-, 5-, and 3-hydroxylations of AAF but were not correlated with rates of 1- and N-hydroxylations in human placental microsomes. A lack of statistically significant correlations was observed among rates of many of these hydroxylation reactions studied in primate fetal tissues. Rates of 7-, 5-, and 3-hydroxylations of AAF were not statistically correlated with rates of 3-hydroxylation of BP in homogenates of primate fetal tissues in most instances, but statistically significant correlations among rates of 3-hydroxylation of BP and 1- and N-hydroxylations of AAF were observed in those preparations. The results suggested two separate mechanisms for the genetic control of rates of placental aromatic ring- and N-hydroxylation reactions as opposed to apparent multiple genetic controls for rates of these hydroxylation reactions in primate fetal tissues.

Phản ứng oxy hóa hỗn hợp 2-acetylaminofluorene (AAF) 14C được khảo sát trên mô nhau thai và mô thai ở người và khỉ (Macaca nemestrina) in vitro. Chất chuyển hóa chính hình thành trong hầu hết các mô là 7-hydroxy-AAF. Tỷ lệ phản ứng hydroxyl hóa khác nhau rất lớn giữa các mô khảo sát và thường thấp hơn 1-2 bậc so với mô gan chuột. Tỷ lệ phản ứng 7-, 5-, 3-và giữa phản ứng 1-và N-hydro

An increase in the metabolism of phenacetin to N-acetyl-p-aminophenol is correlated with benzo[a]pyrene hydroxylase induction by 3-methylcholanthrene among several inbred mouse strains. While the magnitude of induction of phenacetin O-dealkylation is considerably less than that of benzo[a]pyrene hydroxylation, the data indicate that in mice, the metabolism of these two substrates is under similar regulatory control.

Sự gia tăng chuyển hóa phenacetin thành N-acetyl-p-aminophenol có tương quan với cảm ứng benzo (a) pyrene hydroxylase bằng 3-methylcholanthrene ở một số giống chuột nhắt trắng. Trong khi mức độ cảm ứng của phenacetin O-dealkylation thấp hơn đáng kể so với cảm ứng benzo (a) pyrene hydroxylase, các dữ liệu chỉ ra rằng ở chuột, quá trình chuyển hóa của hai cơ chất này được kiểm soát tương tự nhau.

The enhancing effect of metyrapone upon the p-hydroxylation of acetanilide has been confirmed with the use of a new gas-chromatographic method for the determination of acetaminophen. This effect has been shown not to be due to inhibition of hydrolysis of acetaminophen or interference with its determination, or to preferential formation of other phenolic metabolites. This effect of metyrapone is remarkably substrate-specific: phenol formation from the homologues of acetanilide, formanilide and propionanilide, and that from the sulfonamide analog of acetanilide, methanesulfonanilide, is inhibited by metyrapone over the concentration range in which acetanilide hydroxylation is enhanced. The same substrate specificity was observed when the modifier was acetophenone. alpha,alpha'-Dipyridyl, however, enhances phenol formation from all three carbonacylanilides, but does not affect that from methanesulfonanilide.

Tác dụng tăng cường của metyrapone đối với quá trình p-hydroxyl hóa acetanilide đã được khẳng định bằng phương pháp sắc ký khí mới để xác định acetaminophen. Tác dụng này đã được chứng minh không phải do ức chế thủy phân acetaminophen hoặc can thiệp vào quá trình xác định acetaminophen, hoặc do sự hình thành ưu tiên của các chất chuyển hóa phenolic khác. Tác dụng này của metyrapone đặc trưng đáng kể về chất nền: sự hình thành phenol từ các chất tương đồng của acetanilide, formanil

Radioactive carbaryl, carbofuran, parathion, leptophos, and DDT were added to cigarettes and the mainstream smoke was directed to the lungs of rats via the trachea. Total radiocarbon transfer to the lungs ranged from 9 to 15% of that in the tobacco burned during a smoking process involving eight 5-ml puffs. Exhalation of 14C residues during this time was 24 to 30% of that inhaled with all insecticides except carbofuran, of which 42% of the residues was exhaled. After 5 hr, total exhalation of the consumed radiocarbon was 35% for parathion, 65% for carbofuran, and approximately 50% for the other products. The nature of the 14C residues inhaled, their urinary and fecal excretion, and their deposition in and dissipation from various organs and tissues are presented.

Carbaryl phóng xạ, carbofuran, parathion, leptophos và DDT được cho vào thuốc lá và khói thuốc lá được đưa vào phổi chuột thông qua khí quản. Tổng lượng carbon phóng xạ truyền vào phổi trong thuốc lá là từ 9-15% trong khi hút 8 điếu thuốc 5ml. Lượng dư lượng 14C trong thời gian này là 24-30% khi hít tất cả các loại thuốc trừ carbofuran, trong đó 42% dư lượng được thở ra. Sau 5 giờ, tổng lượng carbon phóng xạ tiêu thụ là 35% đối

2-[4-(2,2-Dichlorocyclopropyl)phenoxy]-2-methylpropanoic acid, Win 35,833, was readily absorbed after oral administration; in rats, rhesus monkeys, and human volunteers, peak concentrations of drug in plasma were attained within 2 hr of medication. The time-concentration curve of administered drug was biphasic in monkeys and men, while in rats the kinetics of a one-compartment model were observed. Distribution studies of 14C-labeled drug in the rat showed that most of the radioactivity was excreted in the feces and that significant quantities of 14C were sequestered by depot fat. Monkeys and human subjects both eliminated Win 35,833 primarily through the kidneys. The drug was excreted in rat bile and human urine, both as the free acid and conjugated with glucuronic acid. At physiological concentrations, Win 35,833 was extensively bound to rat, monkey, and human plasma proteins. A gas-chromatographic method for the analysis of drug in plasma, urine, or bile gave a linear relationship between peak height ratios and concentrations, in the range of 1-60 mug/ml.

Acid 2-(4-(2,2-Dichlorocyclopropyl) phenoxy]-2-methylpropanoic, Win 35.833 dễ dàng được hấp thu sau khi uống; ở chuột, khỉ rhesus và người tình nguyện, nồng độ thuốc cao nhất trong huyết tương đạt được trong vòng 2 giờ sau khi uống thuốc. Đường cong nồng độ thời gian của thuốc được ghi nhận ở chuột và người, trong khi ở chuột, động học của mô hình một ngăn được quan sát. Các nghiên cứu phân phối thuốc trên chuột cho thấy hầu hết

The absorption of dl-methadone from the gastrointestinal tract of the Sprague-Dawley rat was examined by the in vivo segment technique. Duodenal absorption, measured as a function of time and dose, followed first-order kinetics with a half-life of 15.6 min. Absorption was not influenced by prior or concomitant administration of a variety of drugs. Absorption from other regions of the intestine was similar to that from the duodenum; in contrast, absorption from the stomach was markedly slower. Gastric absorption was increased by alkalinization of stomach contents but was still considerably slower than from the duodenum. Gastric emptying of methadone appears to be the rate-limiting step in the overall gastrointestinal absorption of the drug, since the rate of emptying following intubation of the drug into the stomach was also considerably slower than the rate of duodenal absorption.

Sự hấp thu dl-methadone từ đường tiêu hóa của chuột Sprague-Dawley được khảo sát bằng kỹ thuật phân đoạn in vivo. Sự hấp thu tá tràng, được đo bằng hàm lượng thời gian và liều lượng, theo sau là động học bậc 1 với chu kỳ bán rã 15,6 phút. Hấp thu không bị ảnh hưởng bởi việc sử dụng trước hoặc đồng thời nhiều loại thuốc. Hấp thu từ các vùng khác nhau của ruột tương tự như từ tá tràng; ngược lại, sự hấp thu từ dạ dày chậm hơn rõ rệt. Sự hấp thu của dạ dày tăng lên do alkalin hóa

The 24-hr LD50 of colchicine in newborn rats is 0.24 mg/kg, which is about 1/10 that observed in the adult. The 24-hr LD50 of colchicine was relatively constant in rats over 25 days of age. In an attempt to determine the mechanism of the increased sensitivity of the newborn rat to the toxic action of colchicine, the distribution of 3H after the administration of 3H-colchicine (0.1 mg/kg) was measured in 10- and 35-day-old rats. The concentration of 3H was higher in all tissues of the newborn than the adult after ip administration, suggesting an immaturity in the pathway for colchicine elimination. After iv administration, radioactivity disappeared much more slowly from the plasma of the newborn rat than from the adult. This was due to a lower capacity of the liver of the newborn to concentrate colchicine and to excrete it into the bile. Development of the hepatic excretory mechanism responsible for excretion of colchicine occurred at the same age as did the increase in LD50. These results suggest that colchicine is more toxic in the newborn because the drug remains in the body for a longer time due to immaturity of the liver excretory process.

LD50 24-hr của colchicine ở chuột non là 0,24 mg/kg thể trọng, bằng 1/10 thể trọng ở chuột trưởng thành. LD50 24-hr của colchicine tương đối ổn định ở chuột trên 25 ngày tuổi. Trong một nỗ lực nhằm xác định cơ chế tăng độ nhạy của chuột non với tác dụng độc hại của colchicine, phân bố 3H sau khi dùng 3H-colchicine (0,1 mg/kg thể trọng) được đo ở chuột 10 và 35 ngày tuổi. Nồng độ 3H trong tất cả các mô của chuột non cao hơn so với chuột trưởng thành sau khi dùng ip, cho thấy sự thiếu trưởng thành trong con đường bài tiết colchicine. Sau khi dùng iv, hoạt tính phóng xạ biến mất chậm hơn nhiều từ huyết tương của chuột non so với chuột trưởng thành. Điều này là do gan của chuột non có khả năng bài tiết colchicine và bài tiết vào mật thấp hơn. Sự phát triển cơ chế bài tiết qua gan chịu trách nhiệm bài tiết colchicine xảy ra ở cùng lứa tuổi với sự gia tăng LD50. Kết quả này cho thấy colchicine độc hại hơn ở chuột non vì thuốc tồn tại trong cơ thể lâu hơn do quá trình bài tiết của gan chưa trưởng thành.

A polyoxypropylene-polyoxyethylene block copolymer of about 4750 daltons (Poloxamer 108, Pluronic F-38) used in a new protein fractionation procedure may be infused into patients receiving therapeutic plasma fractions. We studied the disposition and pharmacokinetics of Poloxamer 108 in rats as an initial step towards understanding its behavior in man. After iv administration in rats, about 94% of 7 or 100 mg/kg doses of ethylene-14C-labeled polymer was excreted in the urine in 3 days. About 6% of the label appeared in feces. Erythrocyte membranes were not permeable to the polymer, and only the parent compound was demonstrable in urine. Twenty hours after dosing, small residues were detectable only in the kidney, liver, small intestine, and carcass. The third phase of the plasma disappearance pattern was evident only at the larger dose, but plasma disappearance kinetics were independent of the dose in the range used here. Thus, most of poloxamer 108 was eliminated rapidly in rats by renal excretion, and a smaller portion probably was removed by biliary excretion. These results will be applied to continuing studies of Poloxamer 108 disposition in man.

Một chất đồng phân khối polyoxypropylene-polyoxyethylene với khoảng 4750 daltons (Poloxamer 108, Pluronic F-38) được sử dụng trong một quy trình phân đoạn protein mới có thể được truyền cho bệnh nhân đang được điều trị huyết tương. Chúng tôi đã nghiên cứu cấu trúc và dược động học của Poloxamer 108 trên chuột cống trắng như là bước đầu tiên để tìm hiểu hành vi của nó ở người. Sau khi truyền tĩnh mạch trên chuột cống trắng, khoảng 94% liều 7 hoặc 100 mg/kg polyme được bài tiết qua nước tiểu trong 3 ngày. Khoảng 6% nhãn xuất hiện trong phân. Màng hồng cầu không thấm vào polyme, và chỉ có hợp chất gốc xuất hiện trong nước tiểu. Hai mươi giờ sau khi dùng thuốc, dư lượng nhỏ chỉ phát hiện được ở thận, gan, ruột non và xác. Giai đoạn thứ ba của sự biến mất huyết tương chỉ rõ ràng ở liều lớn hơn, nhưng động học biến mất huyết tương độc lập với liều trong phạm vi được sử dụng ở đây. Như vậy, hầu hết poloxamer 108 đã được loại bỏ nhanh chóng ở chuột bằng bài tiết qua thận, và một phần nhỏ hơn có lẽ đã được loại bỏ bằng bài tiết đường mật. Những kết quả này sẽ được áp dụng cho các nghiên cứu tiếp theo về cấu trúc của Poloxamer 108 ở người.

The uptake, metabolism, and release of aldrin and dieldrin by the lungs were studied by use of isolated perfused rabbit lungs that were artificially ventilated and perfused through the pulmonary artery. Both recirculating and single-pass experiments were conducted using an artificial medium as perfusate. Aldrin accumulated in the lung from the perfusate through two distinct phases of uptake: a rapid phase involving simple diffusion and nonspecific binding and a slower phase representing its metabolic turnover as dieldrin. Dieldrin was not metabolized but accumulated in the lungs by a saturable and a nonsaturable process. Single-pass experiments with aldrin indicated that the initial velocity of uptake could be fitted to one component and a constant representing the rate of metabolism. Uptake of dieldrin was biphasic: one phase independent of the perfusate concentration and the other saturable with respect to the perfusate concentration. By the application of Michaelis-Menten kinetics, the maximum amount of dieldrin accumulation attributable to the saturable component was calculated to be 0.64 mumol/lung. Our results indicate that the accumulation of these chlorinated xenobiotics takes place through the processes of simple diffusion followed by nonspecific tissue binding. There was no evidence for irreversible binding of aldrin or dieldrin, its epoxide, in the lung. While the lung plays a role in metabolizing aldrin to dieldrin followed by a transient storage, neither substrate has the potential for long-term storage in the lung.

Sự hấp thu, chuyển hóa và giải phóng aldrin và dieldrin của phổi được nghiên cứu bằng cách sử dụng phổi thỏ được truyền dịch cô lập được thông khí và truyền dịch nhân tạo qua động mạch phổi. Cả hai thí nghiệm tuần hoàn và tuần hoàn đơn đều được tiến hành bằng môi trường nhân tạo làm perfusate. Aldrin tích lũy trong phổi từ perfusate thông qua hai giai đoạn hấp thu khác nhau: giai đoạn nhanh gồm khuếch tán đơn giản và liên kết không đặc hiệu và giai đoạn chậm hơn đại diện cho sự thay đổi chuyển hóa của nó như dieldrin. Dieldrin không được chuyển hóa mà tích lũy trong phổi bằng một quá trình bão hòa và không bão hòa. Các thí nghiệm đơn với aldrin chỉ ra rằng tốc độ hấp thu ban đầu có thể phù hợp với một thành phần và một hằng số đại diện cho tốc độ trao đổi chất. Uptake của dieldrin là hai pha: một pha độc lập với nồng độ perfusate và pha kia bão hòa đối với nồng độ perfusate. Bằng cách áp dụng động học Michaelis-Menten, lượng tích lũy dieldrin tối đa do thành phần bão hòa được tính là 0,64 mumol/lung. Kết quả của chúng tôi chỉ ra rằng sự tích lũy của xenobiotics clo hóa diễn ra thông qua các quá trình khuếch tán đơn giản sau đó là liên kết mô không đặc hiệu. Không có bằng chứng cho thấy sự gắn kết không thể đảo ngược của aldrin hoặc dieldrin, epoxide của nó, trong phổi. Trong khi phổi đóng vai trò trong việc chuyển hóa aldrin thành dieldrin sau đó là lưu trữ thoáng qua, thì không chất nền nào có tiềm năng lưu trữ lâu dài trong phổi.

The nature of the inhibitory effects of the major metabolite of diphenylhydantoin, 5-(p-hydroxyphenyl)-5-phenylhydantoin (HPPH), on the in vitro metabolism of ethylmorphine and aniline by rat hepatic microsomes was examined. The N-demethylation of ethylmorphine was competitively inhibited by HPPH, whereas inhibition of the hydroxylation of aniline was not competitive. The spectrum produced by HPPH when added to microsomal suspensions does not resemble the classical type I or type II spectra, but rather a reversed type I spectrum. Spectral evidence is presented indicating that HPPH also diminishes the magnitude of the spectral change produced by type I and II compounds.

Nghiên cứu đã khảo sát tác dụng ức chế sự chuyển hóa in vitro của chất chuyển hóa chính diphenylhydantoin, 5-( p-hydroxyphenyl) -5-phenylhydantoin (HPPH) đối với sự chuyển hóa ethylmorphine và anilin của vi thể gan chuột. Sự ức chế cạnh tranh của HPPH đối với sự chuyển hóa N-demethylation của ethylmorphine trong khi sự ức chế của hydroxylation của anilin không có tính cạnh tranh. Phổ tạo ra bởi H

The effect of Walker tumor on sulphacetamide distribution was studied in rats 21 days after tumor implantation in a hind leg. After oral administration of sulphacetamide (5 and 20 min), the concentration of the drug was found to be lower in the plasma and liver of tumor-bearing rats when compared with that of control group. However, 90 min after sulphacetamide administration, the concentration of the drug in these same tissues was found to be higher in tumor-bearing rats than in control animals. Whereas the tumor had no apparent effect on sulphacetamide concentration in the brain, drug concentrations in the fat tissue of tumor-bearing rats were constantly higher than those of control animals. These changes in sulphacentamide disposition kinetics could be explained in part by delay in gastrointestinal absorption of the drug. Contrary to what was observed after oral administration, constantly higher drug concentrations were found in the plasma of tumor-bearing rats after iv injection of sulphacetamide. Furthermore, the half-life of sulphacetamide in these same animals was much higher than in control animals. It is concluded that, in Walker tumor-bearing rats, there are changes in the kinetics of sulphacetamide which are functions of the route of administration of the drug.

Nghiên cứu tác dụng của u Walker trên phân bố sulphacetamide trên chuột sau 21 ngày cấy u ở chân sau. Sau khi uống sulphacetamide (5 và 20 phút ), nồng độ thuốc trong huyết tương và gan của chuột mang u thấp hơn so với chuột đối chứng. Tuy nhiên, sau 90 phút uống sulphacetamide, nồng độ thuốc trong cùng mô này cao hơn ở chuột có khối u so với chuột đối chứng. Trong khi khối u không có tác dụng rõ ràng đối với nồng độ sulphacetamide trong não, nồng độ thuốc trong mô mỡ của chuột mang khối u liên tục cao hơn so với chuột đối chứng. Những thay đổi về động học sắp xếp sulphacentamide có thể được giải thích một phần bởi sự chậm trễ trong hấp thu thuốc qua đường tiêu hóa. Trái ngược với những gì đã được quan sát sau khi uống, nồng độ thuốc liên tục cao hơn trong huyết tương của chuột mang khối u sau khi tiêm tĩnh mạch sulphacetamide. Hơn nữa, chu kỳ bán rã của sulphacetamide ở cùng động vật cao hơn nhiều so với chuột đối chứng. Kết luận rằng, ở chuột mang khối u Walker, có những thay đổi về động học của sulphacetamide là chức năng của đường dùng thuốc.

Cytochrome P-450 was assayed in rat liver homogenates and microsomes in order to calculate microsomal recoveries and correct for losses during ultracentrifugation or sedimentation in presence of CaCl2. The values obtained for corrected microsomal protein in untreated female Sprague-Dawley rats were between 40 and 50 mg/g of liver. The assay of cytochrome P-450 in liver homogenate is accurate enough to calculate a reproducible recovery factor. The value of the method lies in its rapidity, its capacity to correct over a wide range of losses, and its capacity to yield reliable values of the total microsomal protein mass. The limits of this method include overestimation of homogenate cytochrome P-450 and inability to correct for nonmicrosomal protein contamination. Overestimation of cytochrome P-450 can be corrected by measuring the difference in absorbance between 450 and 510 nm with the extinction coefficient of 100 mM-1cm-1. To be accurate, cytochrome P-450 determination on microsomes must be done at protein concentrations of about 3 mg/ml. The error inherent to the method may be kept constant and minimal. The use of correction for microsomal losses is recommended in order to obtain uniformity between results from various laboratories and adequate correlation with in vivo studies of microsomal functions.

Cytochrome P-450 đã được thử nghiệm trên các vi thể đồng nhất và gan chuột cống trắng nhằm tính toán sự phục hồi của vi thể và điều chỉnh tổn thất trong quá trình siêu li tâm hoặc lắng cặn có CaCl2. Giá trị thu được đối với protein vi thể đã được hiệu chỉnh trên chuột cống trắng cái không được điều trị là từ 40 đến 50 mg/g gan. Việc thử nghiệm cytochrome P-450 trên vi thể đồng nhất gan đủ chính xác để tính toán một yếu tố phục hồi tái tạo. Giá trị của phương pháp này nằm ở tốc độ nhanh, khả năng hiệu chỉnh tổn thất trên diện rộng và khả năng mang lại giá trị đáng tin cậy của tổng khối lượng protein vi thể. Giới hạn của phương pháp này bao gồm việc đánh giá quá cao cytochrome P-450 đồng nhất và không có khả năng hiệu chỉnh đối với ô nhiễm protein không phải vi thể. Đánh giá quá cao cytochrome P-450 có thể được hiệu chỉnh bằng cách đo chênh lệch độ hấp thụ trong khoảng 450 đến 510 nm với hệ số tuyệt chủng 100 mM-1cm-1. Để chính xác, việc xác định cytochrome P-450 trên vi thể phải được thực hiện ở nồng độ protein khoảng 3 mg/ml. Sai số vốn có của phương pháp có thể được giữ ổn định và tối thiểu. Việc sử dụng hiệu chỉnh tổn thất vi thể được khuyến cáo để có được sự thống nhất giữa các kết quả từ các phòng thí nghiệm khác nhau và có mối tương quan đầy đủ với nghiên cứu in vivo về chức năng của vi thể.

Because of increasing evidence for the heterogeneity of polypeptide hormones, studies of the molecular species of human placental lactogen (hPL) were initiated. When extracts of freshly delivered human placentas were passed over Sephadex G-100 in 0.05M ammonium carbonate, three immunoreactive peaks were detected. In addition to a peak corresponding to native hPL (Kav = 0.39) and one in the void volume, a consistent peak which eluted before hPL (Kav = 0.20) was present. The latter represented 2-25% of total hormonal activity and could be rerun without significant conversion to hPL. In 8M urea, the peak continued to behave as a large molecular weight form on both Sephadex chromatography and on polyacrylamide disc gel electrophoresis. Extraction procedures at both neutral and alkaline pH produced similar quantities of the larger material. [125I]iodo-hPL was not converted to the larger form by the conditions of extraction or analysis. These properties are consistent with a larger molecular weight, non-aggregated form of hPL. In comparison with the native hormone, the idsplacement curves for the larger form were parallel in radioimmunoassay studies. Sera obtained from pregnant women during various stages of gestation also showed consistent evidence for a large molecular weight form of the hormone. These observations provide direct evidence, both in placental tissue and in serum for "big" hPL.

Do có nhiều bằng chứng về tính không đồng nhất của các hormone polypeptide, các nghiên cứu về các loài phân tử của lactogen nhau thai người (hPL) đã được tiến hành. Khi dịch chiết nhau thai người mới sinh được đưa qua Sephadex G-100 trong dung dịch amoni cacbonat 0,05M, ba đỉnh hoạt tính miễn dịch đã được phát hiện. Ngoài một đỉnh tương ứng với hPL tự nhiên (Kav = 0,39) và một đỉnh trong thể tích rỗng, một đỉnh tương ứng được rửa giải trước hPL (Kav = 0,20) đã được phát hiện. Đỉnh sau chiếm 2-25% tổng hoạt tính của hPL và có thể được thực hiện lại mà không cần chuyển đổi đáng kể thành hPL. Trong urê 8M, đỉnh tiếp tục hoạt động như một dạng có trọng lượng phân tử lớn trên cả sắc ký Sephadex và điện di trên đĩa gel polyacrylamide. Quy trình chiết ở cả pH trung tính và kiềm đều tạo ra lượng tương tự của vật liệu lớn hơn. iperio-hPL không được chuyển đổi thành dạng lớn hơn bởi các điều kiện chiết hoặc phân tích. Những đặc tính này phù hợp với một dạng hPL có trọng lượng phân tử lớn hơn, không tổng hợp. So với hPL tự nhiên, các đường cong chuyển vị của dạng lớn hơn đã được song song trong các nghiên cứu miễn dịch phóng xạ. Huyết thanh thu được từ phụ nữ mang thai ở các giai đoạn khác nhau của thai kỳ cũng cho thấy bằng chứng phù hợp cho dạng có trọng lượng phân tử lớn của hPL. Những quan sát này cung cấp bằng chứng trực tiếp, cả trong mô nhau thai và huyết thanh cho hPL "lớn".

The transfer of 35SO4= from water to air by bursting bubbles was studied as a function of three levels each of three variables in a bubbling solution. The variables were pH, surfactant concentration, and Na2 35SO4 concentration. One combination of the above variables was also studied at three different temperatures. Sterile water solutions containing different combinations of the above factors and a fixed amount of 22NaCl were bubbled in an enclosure for 1 hour. After bubbling, samples of the aerosol produced, the larger drops that fell out of the air, and the bulk solution were collected and assayed for their 35S and 22Na content using liquid scintillation counting. The 35S/22Na enrichment for each droplet sample as compared to the ratio for the bulk solution was determined, and it was found to be dependent upon the combination of the factor levels being bubbled. Both positive and negative enrichments were found, with large positive enrichments being found consistently only for the highest value of surfactant concentration. The temperature study showed no significant enrichment differences for any of the three temperatures studied.

Nghiên cứu chuyển 35SO4 = từ nước vào không khí bằng cách làm nổ bong bóng được thực hiện theo phương pháp hàm 3 mức của 3 biến số trong dung dịch sủi bọt. Các biến số bao gồm pH, nồng độ chất hoạt động bề mặt và nồng độ Na2,35SO4. Một tổ hợp của các biến số trên cũng được nghiên cứu ở 3 nhiệt độ khác nhau. Dung dịch nước vô trùng chứa các tổ hợp khác nhau của các yếu tố trên và một lượng cố định 22NaCl được sủi bọt trong 1 giờ. Sau khi sủi bọt, các mẫu khí dung được tạo ra, các giọt lớn rơi ra khỏi không khí và dung dịch khối được thu thập và thử nghiệm hàm lượng 35S và 22Na bằng cách đếm huỳnh quang lỏng. Việc làm giàu 35S/22Na cho mỗi mẫu giọt so với tỷ lệ cho dung dịch khối được xác định và phụ thuộc vào sự kết hợp của các yếu tố được sủi bọt. Các mẫu làm giàu 35S/22Na được tìm thấy, trong đó các mẫu làm giàu dương lớn chỉ được tìm thấy liên tục cho các giá trị cao nhất của nồng độ chất hoạt động bề mặt. Nghiên cứu nhiệt độ cho thấy không có sự khác biệt đáng kể về độ làm giàu đối với bất kỳ nhiệt độ nào trong ba nhiệt độ được nghiên cứu.

Epileptiform after discharges evoked by repetitive electrical stimulation of chronically isolated cortical slabs (cat) were shortened by low doses of phenobarbital but not affected by hypnotic doses of pentobarbital. Both pentobarbital and phenobarbital raised threshold and lowered spike amplitude in isolated sciatic nerves. The action of both drugs was increased by reducing Na in the medium and by decreasing the Ringer's pH. Similar to the action of other general anesthetics, the axonal effect of pentobarbital was enhanced by D2O replacement for H2O in the Ringer's (suggesting that tissue water is involved in pentobarbital action), whereas D2O replacement did not modify the action of phenobarbital or of local anesthetics. These results suggest that the varying in vivo effects of pentobarbital and phenobarbital may be due to a difference in their action upon excitable membranes (rather than to a different regional distribution in brain).

Dị dạng biểu mô sau khi phóng điện được kích thích lặp đi lặp lại ở các tấm vỏ não bị cô lập kinh niên (con mèo) được rút ngắn bằng phenobarbital liều thấp nhưng không bị ảnh hưởng bởi liều pentobarbital thôi miên. Cả pentobarbital và phenobarbital đều tăng ngưỡng và giảm biên độ gai ở các dây thần kinh hông bị cô lập. Tác dụng của cả hai thuốc đều tăng lên bằng cách giảm Na trong môi trường và giảm pH của Ringer. Tương tự như tác dụng của các thuốc gây mê nói chung khác, tác dụng trục của pentob

Horse liver alcohol dehydrogenase was reacted with glyoxal at different pH values ranging from 6.0 to 9.0. At pH 9.0 the enzyme undergoes a rapid activation over the first minutes of reaction, followed by a decline of activity, which reaches 10% of that of the native enzyme. Chemical analysis of the inactivated enzyme after sodium borohydride reduction shows that 11 argi-ine and 11 lysine residues per mole are modified. At pH 7.7 the enzyme activity increases during the first hour of the reaction with glyoxal and then decreases slowly. Chemical analysis shows that 4 arginine and 3 lysine residues per mole are modified in the enzyme at the maximum of activation. At pH 7.0 the enzyme undergoes a 4-fold activation. Chemical analysis shows that in this activated enzyme 3 lysine and no arginine residues per mole have been modified. Steady-state kinetic analysis suggests that the activated enzyme is not subjected to substrate inhibition and that its Michaelis constant for ethanol is three times larger than that of the native enzyme. The possible role of arginine and lysine residues in the catalytic function of liver alcohol dehydrogenase is discussed.

Rượu gan ngựa dehydrogenase được phản ứng với glyoxal ở các độ pH khác nhau từ 6,0 đến 9,0. Ở pH 9,0 enzyme trải qua quá trình hoạt hóa nhanh trong những phút đầu phản ứng, sau đó giảm hoạt tính xuống còn 10% so với enzyme gốc. Phân tích hóa học của enzyme bất hoạt sau khi khử natri borohydride cho thấy hoạt tính của enzyme tăng lên trong giờ đầu phản ứng với glyoxal và sau đó giảm dần. Phân tích hóa học cho thấy enzyme có 4 dư lượng arginine và 3 dư lượng lysine trên mỗi mol khi enzyme hoạt hóa tối đa. Ở pH 7,0 enzyme trải qua quá trình hoạt hóa gấp 4 lần. Phân tích hóa học cho thấy enzyme hoạt hóa này có 3 lysine và không có dư lượng arginine trên mỗi mol. Phân tích động học trạng thái ổn định cho thấy enzyme hoạt hóa không bị ức chế cơ chất và hằng số Michaelis của ethanol lớn gấp 3 lần so với hằng số Michaelis của enzyme gốc. Vai trò có thể có của dư lượng arginine và lysine trong chức năng xúc tác của rượu gan dehydrogenase được thảo luận.

The kinetic mechanism of action of octopine dehydrogenase was investigated. This enzyme catalyses the reversible dehydrogenation of D-octopine to L-arginine and pyruvate, in the presence of nicotinamide-adenine dinucleotide. Initial velocity and product inhibition studies were carried out in both directions. Most of the results are consistent with a bi-ter sequential mechanism where NAD+ binds first to the enzyme followed by D-octopine, and the products are released in the order L-arginine, pyruvate and NADH. Various kinetic parameters were determined for each reactant at 33 degrees C, at pH 9.6 for NAD reduction, at pH 6.6 for NADH oxidation.

Nghiên cứu cơ chế hoạt động động học của octopine dehydrogenase. Enzyme này xúc tác cho quá trình khử hydro thuận nghịch của D-octopine thành L-arginine và pyruvate, với sự có mặt của nicotinamide-adenine dinucleotide. Các nghiên cứu vận tốc ban đầu và ức chế sản phẩm được thực hiện theo cả hai hướng. Hầu hết các kết quả đều phù hợp với cơ chế tuần tự Bi-ter trong đó NAD+ liên kết trước với enzyme, sau đó là D-octopine và sản phẩm được

1. The steady-state kinetics of the interconversion of CO2 and HCO3 catalyzed by human carbonic anhydrase C was studied using 1H2O and 2H2O as solvents. The pH-independent parts of the parameters k(cat) and Km are 3-4 times larger in 1H2O than in 2H2O for both directions of the reaction, while the ratios k(cat)/Km show much smaller isotope effects. With either CO2 or HCO3 as substrate the major pH dependence is observed in k(cat), while Km appears independent of pH. The pKa value characterizing the pH-rate profiles is approximately 0.5 unit larger in 2H2O than in 1H2O. 2. The hydrolysis of p-nitrophenyl acetate catalyzed by human carbonic anhudrase C is approximately 35% faster in 2H2O than in 1H2O. In both solvents the pKa values of the pH-rate profiles are similar to those observed for the CO2-HCO3 interconversion. 3. It is tentatively proposed that the rate-limiting step at saturating concentrations of CO2 or HCO3 is an intramolecular proton transfer between two ionizing groups in the active site. It cannot be decided whether the transformation between enzyme-bound CO2 and HCO3 involves a proton trnasfer or not.

1. Động học trạng thái ổn định của quá trình chuyển đổi giữa CO2 và HCO3 được xúc tác bởi anhydase carbonic C ở người được nghiên cứu sử dụng dung môi 1H2O và 2H2O. Phần độc lập pH của các thông số k (cat) và Km trong 1H2O lớn hơn 3-4 lần so với 2H2O cho cả hai hướng của phản ứng, trong khi tỷ lệ k (cat) / Km cho thấy hiệu ứng đồng vị nhỏ hơn nhiều. Với chất nền là CO2 hoặc HCO3,

Two isoenzymes of an NADP+ -dependent cinnamyl alcohol dehydrogenase and an NAD+ - dependent aliphatic alcohol dehydrogenase were extracted from cell suspension cultures of soybean (Glycine max L., var. Mandarin) which form lignin during growth. These enzymes could be separated from each other by chromatography on DEAE-cellulose and hydroxyapatite. The cinnamyl alcohol dehydrogenase isoenzymes were partially purified by (NH4)2SO4 fractionation, and column chromatography on DEAE-cellulose, Sephadex G-100, and hydroxyapatite. The molecular weight of the enzymes were estimated by the elution volumes from a Sephadex G-100 column and were found to be about 43,000 (isoenzyme 1) and 69,000 (isoenzyme 2). Maximum rates of reaction were observed in the case of coniferyl alcohol oxidation at pH 9.2 (Isoenzyme 1) and pH 8.8 (isoenzyme 2); in the reverse reaction pH 6.5 was optimal for isoenzyme 2. Whereas isoenzyme 1 is specific for coniferyl alcohol, isoenzyme 2 can also oxidize cinnamyl alcohol and a number of substituted cinnamyl alcohols, Km values for substituted cinnamaldehydes are 3-11 times lower than for the corresponding alcohols. Neither isoenzyme reacted with benzyl alcohol, anisic alcohol or ethanol. Substrate inhibition for the forward and reverse reaction was found with isoenzyme 2 but not with isoenzyme 1. The equilibrium constant was determined to be about 10(9) in favour of coniferaldehyde reduction. The possible role of the cinnamyl alcohol dehydrogenase in lignin biosynthesis is discussed.

Hai isoenzyme của một cinnamyl alcohol dehydrogenase phụ thuộc NADP+ và một aliphatic alcohol dehydrogenase phụ thuộc NAD+ được chiết xuất từ các mẫu huyền phù tế bào đậu tương (Glycine max L., var. Mandarin) tạo thành lignin trong quá trình sinh trưởng. Các enzyme này có thể được tách ra khỏi nhau bằng sắc ký DEAE-cellulose và hydroxyapatite. Các isoenzyme cinnamyl alcohol dehydrogenase được tinh sạch một phần bằng phân đoạn (

The presence of activators(AMP and sulphate) or inhibitors(acetyl-CoA) has no influence on the Hill coefficient of the S-shaped [pyruvate]--velocity curve of either the pyruvate-NAD+ overall reaction(h equals 2.5) or that of the pyruvate-K3Fe(CN)6 ACTIVITY OF THE FIRST ENZYME (H EQUALs 1.3). pH STUDIES INDICATED THAT THE Hill coefficient is dependent on subunit ionization within the pyruvate-containing complex and not on those in the free complex. It is concluded that pyruvate conversion rather that pyruvate binding is responsible for the allosteric pattern. The activity is due to absence of a protein kinase, mainly regulated at the acetyl-CoA/CoA, and NADH/NAD+ levels and by the value of the energy charge.

Sự có mặt của các chất hoạt hóa (AMP và sulphate) hoặc chất ức chế (acetyl-CoA) không ảnh hưởng đến hệ số Hill của đường cong vận tốc (pyruvate) hình chữ S của phản ứng tổng thể pyruvate-NAD + (h bằng 2,5) hoặc của hoạt tính pyruvate-K3Fe (CN) 6 của ENZYME đầu tiên (H EQUALs 1,3 ). Nghiên cứu chỉ ra rằng hệ số Hill phụ thuộc vào sự ion

Arginine decarboxylase which makes its appearance in Lathyrus sativus seedlings after 24 h of seed germination reaches its highest level around 5-7 days, the cotyledons containing about 60% of the total activity in the seedlings at day 5. The cytosol enzyme was purified 977-fold from whole seedlings by steps involving manganese chloride treatment, ammonium sulphate and acetone fractionations, positive adsorption on alumina C-gamma gel, DEAE-Sephadex chromatography followed by preparative disc gel electrophoresis. The enzyme was shown to be homogeneous by electrophoretic and immunological criteria, had a molecular weight of 220,000 and appears to be a hexamer with identical subunits. The optimal pH and temperature for the enzyme activity were 8.5 and 45 degrees C respectively. The enzyme follows typical Michaelis-Menten kinetics with a Km value of 1.73 mM for arginine. Though Mn2+ at lower concentrations stimulated the enzyme activity, there was no dependence of the enzyme on any metal for the activity. The arginine decarboxylase of L. sativus is a sulfhydryl enzyme. The data on co-factor requirement, inhibition by carbonyl reagents, reducing agents and pyridoxal phosphate inhibitors, and a partial reversal by pyridoxal phosphate of inhibition by pyridoxal-HCl suggests that pyridoxal 5'-phosphate is involved as a co-factor for the enzyme. The enzyme activity was inhibited competitively by various amines including the product agmatine. Highest inhibition was obtained with spermine and arcain. The substrate analogue, L-canavanine, homologue L-homoarginine and other basic amino acids like L-lysine and L-ornithine inhibited the enzyme activity competitively, homoarginine being the most effective in this respect.

Arginine decarboxylase xuất hiện trên cây giống Lathyrus sativus sau 24 giờ nảy mầm, đạt mức sinh trưởng cao nhất vào khoảng 5-7 ngày, lá mầm chứa khoảng 60% tổng số hoạt tính của cây con vào ngày thứ 5. Enzym cytosol được tinh sạch 977 lần từ cây con bằng các bước xử lý bằng mangan clorua, phân đoạn amoni sunfat và acetone, hấp phụ dương tính trên gel alumina C-gamma, sắc ký DEAE-Sephadex và điện di đĩa đệm. Enzym được chứng minh là đồng nhất theo tiêu chuẩn Michaelis-Menten với pH tối ưu là 8,5 và 45 độ C. Hoạt tính của arginine theo động học Michaelis-Menten điển hình với giá trị Km tương ứng là 1,73 mM. Mặc dù Mn2+ ở nồng độ thấp hơn kích thích hoạt tính của enzyme, nhưng không có sự phụ thuộc của enzyme vào bất kỳ kim loại nào cho hoạt tính. Arginine decarboxylase của L. sativus là một enzyme sulfhydryl. Các dữ liệu về yêu cầu đồng yếu tố, ức chế bởi thuốc thử carbonyl, chất khử và chất ức chế pyridoxal phosphate và đảo ngược một phần bằng pyridoxal phosphate ức chế bởi pyridoxal-HCl cho thấy rằng pyridoxal 5 '-phosphate là đồng yếu tố của enzyme. Hoạt tính của enzyme bị ức chế cạnh tranh bởi các amin khác nhau bao gồm agmatine và agmatine. Ức chế cao nhất đạt được với spermine và arcain. Chất tương tự, L-canavanine, L-homoarginine tương đồng và các axit amin cơ bản khác như L-lysine và L-ornithine ức chế cạnh tranh hoạt tính của enzyme, homoarginine là chất ức chế hiệu quả nhất về mặt này.

Yeast hexokinase A (ATP:D-hexose 6-phosphotransferase, EC2.7.1.1) dissociates into its subunits upon reaction with succinic anhydride. The chemically modified subunits could be isolated in a catalytically active form. The Km values found for ATP and for glucose were of the some order as those found for the native enzyme. Of the 37 amino groups present per enzyme subunit, 2-3 of these groups might be located in the proximity of the region of subunit interactions. The 50% loss of the initial activity, which follows the succinylation of these more reactive amino groups, does not seem to be due to the modification of a residue on the enzyme active site or to a change of the tertiary structure of the protein. This 50%loss of the enzyme activity may be related to the dissociation of the dimer into monomers. Both native enzyme and the succinylated subunits have the same H-dependent denaturation rate profiles in response to 2 M urea. Moreover, the apparent pK of the group involved in the transition from a more stable conformation of the protein in the acid range to a less stable one at alkaline pH seems to be similar to the pK of the group implicated in the transition between the protonated inactive form of the enzyme and an active deprotonated form. The succinylated subunit presents 'negative co-operativity' with respect to ATP at slightly acid pH; however, the burst-type slow transient in the reaction progress curve and the activation effect induced by physiological polyanions, effects observed for the native enzyme, were not detected in the standard experimental conditions with the succinylated subunit.

Nấm men hexokinase A (ATP: D-hexose 6-phosphotransferase, EC2.7.1.1) phân ly thành các tiểu đơn vị khi phản ứng với anhydrid succinic. Các tiểu đơn vị đã được biến đổi về mặt hóa học có thể được phân lập ở dạng hoạt động xúc tác. Giá trị Km tìm thấy đối với ATP và glucose có một số thứ tự như đối với enzyme bản địa. Trong số 37 nhóm amino có mặt trong mỗi tiểu đơn vị enzyme, 2-3 trong số các nhóm này có thể nằm gần khu vực tương tác tiểu đơn vị. Sự mất 50% hoạt động ban đầu, theo sau sự phản ứng succinyl hóa của các nhóm amino phản ứng mạnh hơn này, dường như không phải do sự thay đổi dư lượng trên vị trí hoạt động của enzyme hoặc do sự thay đổi cấu trúc bậc ba của protein. Sự mất 50% hoạt động của enzyme có thể liên quan đến sự phân ly của dimer thành monome. Cả enzyme bản địa và tiểu đơn vị succinyl hóa đều có cùng tốc độ biến tính phụ thuộc H khi phản ứng với urê 2 M. Hơn nữa, pK rõ ràng của nhóm liên quan đến quá trình chuyển đổi từ dạng ổn định hơn của protein trong phạm vi axit sang dạng kém ổn định hơn ở pH kiềm có vẻ tương tự như pK của nhóm liên quan đến quá trình chuyển đổi giữa dạng hoạt động của enzyme và dạng khử proton hoạt động. Tiểu đơn vị succinyl hóa thể hiện " tính tương tác âm " đối với ATP ở pH hơi axit; tuy nhiên, sự bùng nổ thoáng qua trong đường cong tiến trình phản ứng và hiệu ứng kích hoạt gây ra bởi các polyme sinh lý, các hiệu ứng quan sát được đối với enzyme bản địa, đã không được phát hiện trong điều kiện thí nghiệm tiêu chuẩn với tiểu đơn vị succinyl hóa.

Chymotrypsinogen has been successfully renatured in solution, after reduction of its 5 disulfide bonds in 6 M guanidine-HCl. This has been made possible by the study of the renaturation of a model derivative, polyalanyl-chymotrypsinogen. The reduced derivative is shown to refold and reoxodize spontaneously, with a 30-40% yield, into molecules which are monomeric and fully susceptible to activation by trypsin. Chymotrypsinogen can also be renatured but only in the presence of reagents allowing disulfide interchange and of moderate concentrations of guanidine-HCl or urea. These results illustrate how the kinetic trapping of incorrectly folded molecules by wrong S-S bonds and aggregation can be overcome, thus allowing the correct refolding of the protein.

Chymotrypsinogen đã được tái hóa thành công trong dung dịch sau khi khử 5 liên kết disulfide trong 6 M guanidine-HCl. Điều này đã được thực hiện bằng nghiên cứu tái hóa một dẫn xuất mô hình polyalanyl-chymotrypsinogen. Dẫn xuất khử đã được chứng minh là có khả năng gấp lại và tái oxy hóa một cách tự nhiên, với năng suất 30-40% thành các phân tử đơn phân và hoàn toàn dễ bị kích hoạt bởi trypsin. Chymotrypsinogen cũng có thể

Lipid peroxide formation was initiated by the addition of either ADP-complexed Fe3+ or cumene hydroperoxide to a suspension of isolated hepatocytes. The reaction was monitored by malonaldehyde measurements. Upon the addition of iron, malonaldehyde production in the cells started immediately but ceased within 30-60 min, and the response was dose-related with iron concentrations ranging from 19 to 187 muM. Malonaldehyde formation was associated with increased oxygen uptake and conjugated diene production. The addition in vitro of N,N,N',N'-tetramethyl-p-phenylenediamine, menadione or p-benzoquinone inhibited the iron-induced malonaldehyde production. It was also possible to demonstrate an apparent disappearance of malonaldehyde from fresh cells by addition of adequate amounts of N,N,N',N'-tetramethyl-p-phenylenediamine (100 muM). The attenuation of the iron-induced malonaldehyde production was found to be correlated with an increased binding of iron to an intracellular ferritin fraction. Further, malonaldehyde formation was also associated with a conversion of reduced glutathione to the oxidized form which, in turn, revealed a faster permeation out of the cells into the surrounding medium of the oxidized than of the reduced thiol. So, concomitant with the redox alterations, there was also an overall loss of glutathione from the cells. Cumene hydroperoxide-induced malonaldehyde production could be initiated by the addition of this peroxide in concentrations ranging from 150 muM to the liver cell incubate. With concentrations below 150 muM, a lag phase was present which seemed to be glutathione-dependent. It is concluded that iron enters the cell, then is probably reduced inside the cell by NADPH via the NADPH-cytochrome P-450 reductase, and in the reduced state initiates lipid peroxidation. The reaction is inhibited by intracellular mechanisms, the glutathione redox system being of principal importance, and possibly terminated by the iron-apoferritin complex formation.

Quá trình hình thành lipid peroxide được bắt đầu bằng việc bổ sung hoặc Fe3+ phức hợp ADP hoặc hydroperoxide cumene vào huyền phù tế bào gan bị cô lập. Phản ứng được theo dõi bằng các phép đo malonaldehyd. Khi bổ sung sắt, quá trình sản xuất malonaldehyd trong tế bào bắt đầu ngay lập tức nhưng chấm dứt trong vòng 30-60 phút, và phản ứng liên quan đến liều với nồng độ sắt từ 19 đến 187 muM. Sự hình thành malonaldehyd có liên quan đến sự tăng hấp thu oxy và sản xuất diene liên hợp. Việc bổ sung in vitro N, N, N ', N' - tetramethyl-p-phenylenediamine, menadione hoặc p-benzoquinon đã ức chế sự sản xuất malonaldehyd do sắt gây ra. Cũng có thể chứng minh sự biến mất rõ ràng của malonaldehyd từ tế bào tươi bằng cách bổ sung đủ lượng N, N, N '-tetramethyl-p-phenylenediamine (100 muM).

1. The existence of two different D-glucose-6-phosphate dehydrogenases in Pseudomonas fluorescens has been demonstrated. Based on their different specificity and their different metabolic regulation one enzyme is appointed to the Entner-Doudoroff pathway and the other to the hexose monophosphate pathway. 2. A procedure is described for the isolation of that D-glucose-6-phosphate dehydrogenase which forms part of the Entner-Doudoroff pathway (Entner-Doudoroff enzyme). A 950-fold purification was achieved with an overall yield of 44%. The final preparation, having a specific activity of about 300 mumol NADH formed per min per mg protein, was shown to be homogeneous. 3. The molecular weight of the Entner-Doudoroff enzyme has been determined to be 220000 by gel permeation chromatography, and that of the other enzyme (Zwischenferment) has been shown to be 265000. 4. The pI of the Entner-Doudoroff enzyme has been shown to be 5.24 and that of the Zwischenferment 4.27. The Entner-Doudoroff enzyme is stable in the range of pH 6 to 10.5 and shows its maximal activity at pH 8.9. 5. The Entner-Doudoroff enzyme showed specificity for NAD+ as well as for NADP+ and exhibited homotropic effects for D-glucose 6-phosphate. It is inhibited by ATP which acts as a negative allosteric effector. Other nucleoside triphosphates as well as ADP are also inhibitory. 6. The enzyme catalyzes the transfer of the axial hydrogen at carbon-1 of beta-D-glucopyranose 6-phosphate to the si face of carbon-4 of the nicotinamide ring and must be classified as B-side stereospecific dehydrogenase.

1. Sự tồn tại của hai enzyme D-glucose-6-phosphate dehydrogenase trong Pseudomonas fluorescens đã được chứng minh. Dựa trên tính đặc hiệu và các điều hòa chuyển hóa khác nhau của chúng, một enzyme được chỉ định vào con đường Entner-Doudoroff và enzyme còn lại được chỉ định vào con đường hexose monophosphate. 2. Một quy trình phân lập D-glucose-6-phosphate dehydrogenase (Entner-Doudoroff enzyme) đã được mô tả. Quá trình tinh sạch đạt được 950 lần với hiệu suất tổng thể là 44 %. Kết quả cho thấy, quá trình tinh sạch cuối cùng có hoạt tính đặc hiệu khoảng 300 NADH hình thành trong mỗi phút cho mỗi mg protein. 3. Trọng lượng phân tử của enzyme Entner-Doudoroff đã được xác định là 220000 bằng sắc ký gel thấm, của enzyme còn lại (Zwischenferment) là 265000. 4. Độ pI của enzyme Entner-Doudoroff đã được chỉ định là 5,24 và pI của Zwischenferment là 4,27. Enzym Entner-Doudoroff ổn định trong khoảng pH 6 đến 10,5 và hoạt động tối đa ở pH 8,9. 5. Enzym Entner-Doudoroff có hoạt tính đặc hiệu với cả NAD+ và NADP+. ATP hoạt động như một tác nhân dị lập thể âm. Các triphosphate nucleoside khác cũng như ADP đều bị ức chế. 6. Enzyme xúc tác quá trình chuyển hydro theo trục tại carbon-1 của beta-D-glucopyranose 6-phosphate tới mặt si của carbon-4 của vòng nicotinamide và phải được phân loại là dehydrogenase đặc hiệu B.

Q-Enzyme, the enzyme that synthesizes the 1,6-alpha-glucosidic branch linkages of amylopectin, has been purified from potato to near homogeneity. The molecular weight of the enzyme is 85000. The active enzyme is a monomer, with a molar activity at pH 7.0 and 24 degrees C of 15. The energy of activation is 25 kJ/mol below 15 degrees C, changing sharply to 63 kJ/mol above that temperature. Enzyme activity is not affected by Mg2+ or ATP. There are about 11 readily titratable sulfhydryl groups per molecule. The evidence that the enzyme is a single protein entity, without hydrolytic activity towards amylose, contrasts with an earlier report that Q-enzyme consists of two components, a hydrolase with molecular weight 70000, and a transferase with molecular weight 20000. Q-enzyme acts on native and synthetic amyloses to give products resembling amylopectin in terms of average unit chain length, degress of beta-amylolysis and iodine stain. The profiles of the unit chains of these synthetic products are, however, different from that of native amylopectin. Additional branch linkages are introduced by Q-enzyme into potato amylopectin, but the product bears no resemblance to phytoglycogen.

Q-Enzyme là enzyme tổng hợp các nhánh liên kết 1,6-alpha-glucosidic của amylopectin, đã được tinh chế từ khoai tây đến mức gần như đồng nhất. Trọng lượng phân tử của enzyme là 85000. Enzyme hoạt động là monome, có hoạt tính phân tử ở pH 7,0 và 24 độ C là 15. Năng lượng hoạt hóa là 25 kJ/mol dưới 15 độ C, thay đổi mạnh thành 63 kJ/mol trên nhiệt độ đó. Hoạt tính của enzyme không bị ảnh hưởng bởi Mg2+ hoặc ATP. Có khoảng 11 nhóm sulfhydryl dễ chuẩn độ trên mỗi phân tử. Bằng chứng cho thấy enzyme là một thực thể protein đơn lẻ, không có hoạt tính thủy phân đối với amylose, trái ngược với báo cáo trước đó cho thấy Q-enzyme bao gồm hai thành phần, một hydrolase có trọng lượng phân tử 70000 và một transferase có trọng lượng phân tử 20000. Q-enzyme hoạt động trên các amylos tự nhiên và tổng hợp để tạo ra các sản phẩm giống amylopectin về chiều dài chuỗi đơn vị trung bình, sự phá vỡ của quá trình beta-amylolysis và nhuộm iốt. Tuy nhiên, cấu hình chuỗi đơn vị của các sản phẩm tổng hợp này khác với amylopectin tự nhiên. Q-enzyme bổ sung các nhánh liên kết vào amylopectin khoai tây nhưng sản phẩm không giống với phytoglycogen.

Ultracentrifugation analyses were performed on lectins under varying conditions of pH, ionic strength and temperature. It has been demonstrated that the phytohemagglutinin from Phaseolus vulgaris, the wheat germ agglutinin and the soybean agglutinin are stable when these parameters are varied, whereas the concanavalin A molecule exhibits a striking reversible dimer-tetramer transition with variation in pH (from 6.0 to 7.2) and temperature (from 4 degrees up to 37 degrees C). It has also been demonstrated that, in agglutination experiments undertaken at different temperatures, cells do eventually aggregate with the first three lectins provided that incubation time is sufficient, whereas the concanavalin-A-induced agglutination was previously found to be temperature-sensitive. These results strongly suggest that the effect of temperature on agglutination by lectins may essentially be due to a structural transition of the lectin itself and nott only to modification of cell surface properties.

Các phân tích siêu ly tâm được thực hiện trên lectin trong các điều kiện khác nhau về pH, cường độ ion và nhiệt độ. Các thông số này được chứng minh là ổn định khi các thông số này thay đổi, trong khi đó phân tử concanavalin A thể hiện sự chuyển tiếp dimer-tetramer thuận nghịch với sự thay đổi pH (từ 6,0 đến 7,2) và nhiệt độ (từ 4 độ đến 37 độ C ). Các thí nghiệm ngưng kết ở các nhiệt độ khác nhau cho thấy các tế bào cuối cùng cũng kết hợp với ba lectin

The chemical composition of axoplasm extracted from the giant axon of Myxicola infundibulum has been analysed, and some of the factors which disperse its gel structure have been identified. 2. The axoplasm contains about 3-6% protein, and 0-12% lipid. It is isosmotic with sea water and has a pH near 7-0. 3. Inorganic ions in extracted axoplasm include: Na+, 13m-mole/kg wet wtl; K+, 280; Cl-, 24; Ca2+, 0-3; Mg2+, 3. 4. Free organic ions in axoplasm include: gly, 180 m-mole/kg wet st.; cysteic acid, 120; asp, 75; glu, 10; ala, 7; tau, 5; thr, 2; gln and ser, trace; homarine, 63; isethionate, 0. 5. The gel structure is dispersed by solutions containing 1--10 mM-Ca2+, because this ion activates an endogenous protease. The gel can also be dispersed without proteilysis by solutions containing 0-5 M-KCl, or 0-5 M guanidine hydrochloride, or 3-5 M urea, all of which break down neurofilaments. 6. It is argued that many aspects of the composition and dispersal properties of Myxicola axoplasm are similar to those in other axons.

Thành phần hóa học của sợi trục được chiết xuất từ sợi trục khổng lồ của Myxicola infundibulum đã được phân tích, và một số yếu tố làm phân tán cấu trúc gel của nó đã được xác định. 2. Sợi trục chứa khoảng 3-6% protein, và 0-12% lipid. Nó đẳng tích với nước biển và có độ pH gần 7-0. 3. Các ion vô cơ trong sợi trục được chiết xuất bao gồm: Na+, 13m-mole/kg wtl ướt; K+, 280; Cl-, 2

Acinetobacter NCIB 9871 was isolated by elective culture on cyclohexanol and grows with this compound as sole source of carbon. It displays a restricted growth spectrum, being unable to grow on a wide range of alternative alicyclic alcohols and ketones. Cyclohexanol-grown cells oxidize the growth substrate at a rate of 230 mul of O2/h per mg dry wt with the consumption of 5.65 mumol of O2/mumol substrate. Cyclohexanone is oxidized at a similar rate with the consumption of 4.85 mumol of O2/mumol. 1-Oxa-2-oxocycloheptane and 6-hydroxyhexanoate are both oxidized at the same slow rate of 44 mul of O2/h per mg dry wt and adipate is not oxidized. Studies with cell extracts reveal the presence of inducible dehydrogenases for cyclohexanol, 6-hydroxyhexanoate and 6-oxohexanoate and a monooxygenase, that in conjunction with a lactonase converts cyclohexanone to 6-hydroxyhexanoate. The monooxygenase is therefore presumed to be of the lactone-forming type and the pathway for conversion of cyclohexanol to adipate; cyclohexanol leads to cyclohexanone leads to 1-oxa-2-oxocycloheptane leads to 6-hydroxyhexanoate leads to 6-oxohexanoate leads to adipate; for which key intermediates have been identified chromatographically, is identical with the route for the oxidation of cyclohexanol by Nocardia globerula CL1.

Vi khuẩn Acinetobacter NCIB 9871 được phân lập bằng nuôi cấy điện tử trên cyclohexanol và phát triển với hợp chất này là nguồn cacbon duy nhất. Nó thể hiện phổ phát triển hạn chế, không thể phát triển trên một loạt các rượu và keton thay thế. Các tế bào nuôi cấy cyclohexanol oxy hóa chất nền tăng trưởng với tốc độ 230 m3 O2/h trên mỗi mg wt khô với mức tiêu thụ 5,65 mumol O2/mumol. Cyclohex

The initial enzymic step in mercapturic acid formation is catalyzed by glutathione S-transferase. Several species of this enzyme, designated as transferases alpha, beta, gamma, delta and epsilon on the basis of increasing isoelectric points, were isolated from human liver. Evidence is presented that each of the purified species is homogeneous with respect to sodium dodecylsulfate-gel electrophoresis. Transferases alpha, beta and epsilon each appear as a single band on gel electrofocusing; transferases gamma and delta are present as two and three bands, respectively, with each band catalytically active. Amino acid analysis indicated the five transferases to be either very closely related or identical in this respect. All enzyme species have a molecular weight of about 48500 and consist of two apparently identical subunits. The spectrum of substrates is the same for each although the enzymes differ slightly in specific activity. As is the case for the rat liver enzymes, each of the human transferases binds bilirubin although this compound is not a substrate.

Bước đầu tiên trong quá trình hình thành acid mercapturic là xúc tác của enzyme glutathione S-transferase. Enzyme này được phân lập từ gan người với các tên gọi: transferase alpha, beta, gamma, delta và epsilon trên cơ sở tăng các điểm đẳng điện. Các enzyme này được phân lập từ gan người dưới dạng tinh khiết và có tính đồng nhất cao. Các enzyme chuyển hóa alpha, beta và epsilon được biểu hiện dưới dạng một dải duy nhất trên điện di gel; các enzyme chuyển hóa gamma và delta lần lượt là hai và ba dải với mỗi dải hoạt động xúc tác. Phân tích axit amin cho thấy 5 enzyme này có quan hệ hoặc là rất gần gũi hoặc là giống hệt nhau về mặt này. Tất cả các enzyme đều có trọng lượng phân tử khoảng 48.500 và chứa hai tiểu đơn vị có vẻ như giống nhau. Phổ của các chất nền là giống nhau đối với mỗi enzyme mặc dù các enzyme có khác nhau đôi chút về hoạt tính cụ thể. Giống như các enzyme gan chuột, mỗi enzyme ở người liên kết với bilirubin mặc dù hợp chất này không phải là chất nền.

In this report we describe a new method which is useful for measuring hydrophobic interactions between aliphatic hydrocarbon chains and proteins in aqueous environment. The method is based on partition of proteins in an aqueous two-phase system containing dextran and poly(ethylene glycol) and different fatty acid esters of poly(ethylene glycol). The partition is measured under conditions where contributions from electrostatic interactions are eliminated. The difference in partition of proteins in phase systems with and without hyrocarbon groups bound to poly(ethylene glycol), deltalog K, where K is the partition coefficient, is taken as a measure of hydrophobic interaction. Deltalog K varies with size of hydrocarbon chain and type of protein. The length of the aliphatic chain should be greater than 8 carbon atoms in order to get a measurable effect in terms of deltalog K. Bovine serum albumin, beta-lactoglobulin, hemoglobin and myoglobin have been shown to have different affinities for palmitic acid ester of poly(ethylene glycol). No hydrophobic effect could be observed for ovalbumin, cytochrome c or alpha-chymotrypsinogen A.

Trong nghiên cứu này, chúng tôi mô tả một phương pháp mới hữu ích để đo tương tác kỵ nước giữa các chuỗi hydrocarbon béo và protein trong môi trường nước. Phương pháp này dựa trên sự phân chia protein trong hệ thống hai pha chứa dextran và poly(ethylene glycol) và các este axit béo khác nhau của poly(ethylene glycol ). Sự phân chia được đo trong điều kiện các đóng góp từ tương tác tĩnh điện bị loại bỏ. Sự khác biệt trong phân chia protein trong các hệ pha có và không có các nhóm hyrocarbon liên kết với poly(ethylene glycol)

Rabbit muscle phosphofructokinase, spin-labelled at its most reactive thiol group, has an electron spin resonance spectrum which is very sensitive to the binding of substrates and allosteric effectors. The spectral changes have been interpreted in terms of a concerted allosteric transition between two conformational states with non-exclusive binding of effectors. On this basis MgATP, fructose 6-phosphate plus ATP, and NH+4ions behave as potent positive effectors, inorganic phosphate, sulphate, AMP, fructose 6-phosphate and fructose 1,6-bisphosphate are less potent activators, and free ATP and H+ions are negative effectors, in agreement with the kinetic behaviour, but citrate behaves anomalously. In addition, the allosteric equilibrium can be displaced towards the inhibited state by selectively modifying two further thiol groups. Strong positive cooperativity occurs under suitable conditions with ATP, metal-ATP and fructose 6-phosphate. Biphasic changes of conformation, attributed to binding at the catalytic and inhibitory sites, have been observed in titrations with ATP. The differentiation of the two ATP binding sites arises in the presence of fructose 6-phosphate because of a distinct concerted effect on conformation between the two substrates at the active site. A similar effect occurs between ATP and citrate. Other heterotropic effects are more consistent with simple models; phosphates favour the binding, and reduce the cooperativity, of fructose 6-phosphate and metal-ATP, whereas excess ATP and H+ ions antagonise the binding and increase the cooperativity of fructose 6-phosphate. The observations are related to existing kinetic and binding studies where possible. Anomalous features of the behaviour suggest that the model should be regarded only as a first approximation.

Phosphofructokinase cơ thỏ (Tạp chí Dược liệu, tập 25, số 4/2020) có nhóm thiol phản ứng mạnh nhất, có phổ cộng hưởng spin electron rất nhạy với sự gắn kết của các cơ chất và các tác nhân dị lập thể. Những thay đổi phổ này được giải thích bằng sự chuyển tiếp dị lập thể có phối hợp giữa hai trạng thái hình dạng với sự gắn kết không độc quyền của các tác nhân. Trên cơ sở đó, MgATP, fructose 6-phosphate cộng với ATP và NH+4 hoạt động như các tác nhân dương mạnh, phosphate vô cơ, sulphate, AMP, fructose 6-phosphate và fructose 1,6-bisphosphate là các chất hoạt hóa kém mạnh hơn, và ATP tự do và H+ion là các tác nhân âm, phù hợp với hành vi động học, nhưng citrate lại có hành vi bất thường. Ngoài ra, trạng thái cân bằng dị lập thể có thể được thay đổi về trạng thái ức chế bằng cách điều chỉnh có chọn lọc hai nhóm thiol tiếp theo. Tính hợp tác tích cực mạnh xảy ra trong điều kiện thích hợp với ATP, kim loại-ATP và fructose 6-phosphate. Sự thay đổi hai pha về hình dạng, do sự gắn kết tại các vị trí xúc tác và ức chế, đã được quan sát thấy trong chuẩn độ với ATP. Sự khác biệt của hai vị trí gắn kết ATP phát sinh khi có sự hiện diện của fructose 6-phosphate do có tác dụng phối hợp rõ rệt đối với hình dạng giữa hai cơ chất tại vị trí hoạt động. Một hiệu ứng tương tự xảy ra giữa ATP và citrate. Các hiệu ứng dị hướng khác phù hợp hơn với các mô hình đơn giản; các phosphat có lợi cho sự gắn kết và giảm tính hợp tác của fructose 6-phosphate và kim loại-ATP, trong khi các ion ATP và H+ dư thừa đối kháng với sự gắn kết và tăng tính hợp tác của fructose 6-phosphate. Các quan sát liên quan đến các nghiên cứu động học và gắn kết hiện có khi có thể. Các đặc điểm dị thường của hành vi cho thấy mô hình chỉ nên được coi là xấp xỉ

A cytochrome c derivative from which iron is removed has been prepared and characterized. Several lines of evidence indicate that native and porphyrin cytochrome c have similar conformations: they have similar elution characteristics on Sephadex gel chromatography; in both proteins the tryptophan fluorescence is quenched and the pK values of protonation of the porphyrin are identical. Porphyrin cytochrome c does not substitute for native cytochrome c in either the oxidase reaction or in restoring electron transport in cytochrome-c-depleted mitochondria. It does however competitively inhibit native cytochrome c in these reactions, the Ki for inhibition being larger than the Km for reaction. The absorption and emission spectra, and the polarized excitation spectrum of the porphyrin cytochrome c are characteristic of free base porphyrin. The absence of fluorescence quenching of porphyrin cytochrome c when the protein is bound to cytochrome oxidase suggests that heme to heme distance between these proteins is larger than 0.5 to 0.9 nm depending upon orientation. Binding of the porphyrin cytochrome c to phospholipids or to mitochondria increases the fluorescence polarization of a positively polarized absorption band, which indicates that the bound form of the protein does not rotate freely within the time scale of relaxation from the excited state.

Một dẫn xuất cytochrome c mà từ đó sắt bị loại bỏ đã được điều chế và mô tả đặc điểm. Một số bằng chứng cho thấy rằng cytochrome c tự nhiên và porphyrin có sự phù hợp tương tự nhau: chúng có đặc điểm tách dòng tương tự nhau trên sắc ký gel Sephadex; trong cả hai protein đều có huỳnh quang tryptophan bị dập tắt và giá trị pK của proton hóa porphyrin là như nhau. Cytochrome c của porphyrin không thay thế cho cytochrome c tự nhiên trong cả hai phản ứng oxy

From a crude extract of chick peas (Cicer arietinum L.) inhibitors of trypsin and chymotrypsin were isolated by affinity chromatography on a column of trypsin-Sepharose 6B. The content of inhibitors was found to be 1.5 g/kg. They were further separated into six isoinhibitors by ion-exchange chromatography on DEAE-Sephadex A-25. Two of the isoinhibitors accounted for about 50% of the isolated inhibitors and were further purified to a homogeneous state. The isoinhibitors had a molecular weight of about 10000 as determined by molecular-sieve chromatography on Sephadex G-75. They were stable towards extremes of pH and temperatures up to 75 degrees C or towards digestion by pepsin. They were also stable in 6 M urea but not in 6 M guanidine-HCl. The intact inhibitors were destroyed when the peas were cooked at 100 degrees C or when they were toasted at 130 degrees C. The four major inhibitors had similar amino acid compositions and did not contain detectable amounts of free sulfhydryl groups, tryptophan or carbohydrate. Cysteine is the dominant amino acid residue in all of them and accounted for about 20% of their amino acid content. The isoelectric point of the isoinhibitors lies in the range of pH 4.9-8.6 and two of the major inhibitors had isoelectric points of pH 4.75 and pH 4.96. They inhibited chymotrypsin to the same extent but differed in their inhibitory activities towards trypsin, indicating that they are mixtures of native and trypsinmodified forms and that they probably have separate sites for the two enzymes. They did not inhibit other proteolytic enzymes belonging to two groups (i.e., serine or cysteine enzymes) or originating from different sources (i.e., animals, plants or bacteria).

Từ dịch chiết nguyên khai đậu gà (Cicer arietinum L.) các chất ức chế trypsin và chymotrypsin được phân lập bằng sắc ký ái lực trên cột trypsin-Sepharose 6B. Hàm lượng các chất ức chế là 1,5 g/kg. Sau đó, chúng được tách thành 6 đồng ức chế bằng sắc ký trao đổi ion trên DEAE-Sephadex A-25. Hai đồng ức chế chiếm khoảng 50% các chất ức chế đã được tách và tinh sạch đến trạng thái đồng nhất. Các đồng ức chế có trọng lượng phân tử khoảng 10000 được xác định bằng sắc ký phân tử trên Sephadex G-75. Chúng ổn định ở pH và nhiệt độ lên đến 75 độ C hoặc theo quá trình tiêu hóa bởi pepsin. Chúng cũng ổn định trong urê 6 M nhưng không ổn định trong guanidine-HCl 6 M. Các chất ức chế nguyên vẹn đã bị phá hủy khi đậu được nấu ở 100 độ C hoặc khi được nướng ở 130 độ C. Bốn chất ức chế chính có thành phần axit amin tương tự nhau và không chứa các nhóm sulfhydryl tự do, tryptophan hoặc carbohydrate. Cystein là amino acid chiếm ưu thế trong tất cả các chất và chiếm khoảng 20% hàm lượng axit amin của chúng. Điểm đẳng điện của các chất ức chế nằm trong khoảng pH 4,9-8,6 và hai trong số các chất ức chế chính có điểm đẳng điện 4,75 và pH 4,96. Chúng ức chế chymotrypsin ở cùng mức độ nhưng khác nhau về hoạt tính ức chế đối với trypsin, điều này cho thấy chúng là hỗn hợp của các dạng trypsin tự nhiên và có thể có vị trí riêng biệt cho hai enzyme. Chúng không ức chế các enzyme phân giải protein khác thuộc hai nhóm (enzym serine hoặc cystein) hoặc có nguồn gốc từ các nguồn khác nhau (động vật, thực vật hoặc vi khuẩn).

It was shown by gel electrophoresis in sodium dodecylsulphate solution that 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase from Achromobacter IVS is composed of two different subunits with molecular weights of about 78000 and 96000, respectively. The biotin is bound to the heavier subunit. It was previously found that 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase contains four biotin molecules per complex. A complex composed of four of each subunit would thus have a molecular weight of about 700000. This is compatible with the molecular weight of 760000 determined earlier by analytical ultracentrifugation. Both subunits were isolated preparatively. As the subunits, unlike the complex, are very sensitive to oxygen, special precautions had to be taken during isolation. The biotin-containing subunit was isolated by chromatography on DEAE-cellulose in 5 M urea. It no longer catalyzed the overall reaction, yet could still carboxylate free biotin. The biotin-free subunit was separated after dissociation of the enzyme by three-days' dialysis at pH 9.8 under nitrogen. On chromatography over a Sepharose-bound avidin column, the biotin-subunit was fixed and the biotin-free subunit was eluted unretarded. The latter subunit showed no enzymic activity. After the addition of the biotin-containing subunit, overall activity was regenerated. The speed of reassociation is very much enhanced by 3-methylcrotonyl-CoA. It was shown by reassociation experiments under different conditions that probably an initial complex, AxBy is formed, possessing a binding site for 3-methylcrotonyl-CoA. Upon the binding of this substrate the conformation may be changed to a form favourable for reconstitution. Finally, the structures of biotin enzymes from different sources are compared. In the course of evolution there is a tendency toward integration of the different constituent proteins into only one polypeptide chain.

Bằng phương pháp điện di gel trong dung dịch natri dodecylsulphate, 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase của vi khuẩn Achromobacter IVS đã được chứng minh là bao gồm hai tiểu đơn vị khác nhau có khối lượng phân tử lần lượt là 78000 và 96000. Biotin liên kết với tiểu đơn vị nặng hơn. Trước đây, 3-methylcrotonyl-CoA carboxylase chứa bốn phân tử biotin trong mỗi phức hợp. Một phức hợp gồm bốn tiểu đơn vị sẽ có trọng lượng phân tử khoảng 700000. Điều này tương thích với trọng lượng phân tử 760000 được xác định trước đó bằng phương pháp siêu ly tâm. Cả hai tiểu đơn vị đều được phân lập trước. Vì các tiểu đơn vị này không giống như phức hợp trên, chúng rất nhạy cảm với oxy, nên cần phải có biện pháp phòng ngừa đặc biệt trong quá trình phân lập. Tiểu đơn vị chứa biotin được phân lập bằng phương pháp sắc ký trên DEAE-cellulose trong urê 5 M. Tiểu đơn vị không chứa biotin được tách ra sau khi phân ly trong ba ngày ở pH 9,8 dưới tác dụng của nitơ. Trên sắc ký cột avidin liên kết Sepharose, tiểu đơn vị không chứa biotin được cố định và tiểu đơn vị không chứa biotin được rửa giải không chậm trễ. Tiểu đơn vị thứ hai không có hoạt tính enzyme. Sau khi bổ sung tiểu đơn vị không chứa biotin, hoạt tính enzyme được tái sinh. Tốc độ tái liên kết được tăng lên rất nhiều nhờ 3-methylcrotonyl-CoA. Các thí nghiệm tái liên kết đã chứng minh trong các điều kiện khác nhau rằng có lẽ một phức hợp ban đầu, AxBy, có một vị trí gắn kết với 3-methylcrotonyl-CoA. Khi liên kết với chất nền này, cấu trúc enzyme có thể được thay đổi thành dạng thuận lợi cho việc tái tạo. Cuối cùng, cấu trúc enzyme biotin từ các nguồn khác nhau được so sánh. Trong quá trình tiến hóa, có xu hướng tích hợp các protein thành phần khác nhau vào một chuỗi polypeptide duy nhất.

After incubating root apices from two-day-old bean seedlings with [3H] adenine the RNA was extracted from whole cells or polysomes, and the poly (A) sequences were isolated by nuclease digestion followed by poly(U)-Sepharose chromatography. The alterations of the RNA molecules due to the various treatments were monitored by sucrose density gradients. It was found that sequential extraction first at pH 7.6 then at pH 9.0 did not result in a separation between RNA poor in poly(A) sequences and poly(A)-rich RNA. Furthermore chromatography analysis of hydrolysates from nuclease-resistant RNA extracted either at pH 7.6 or pH 9.0 revealed that AMP constituted nearly 95% of the bases and that the poly(A) sequences, about 200 bases, were located at the 3' terminus of the polyadenylated RNA. No size difference was found for the poly(A) segment between the pH-7.6-extracted RNA and that extracted at pH 9.0.

Sau khi ủ các đỉnh rễ của cây đậu con 2 ngày tuổi với adenine (3H ), RNA được tách ra từ tế bào toàn phần hoặc polysome, và chuỗi poly (A) được phân lập bằng quá trình tiêu hóa nuclease sau đó là sắc ký đa (U) - Sepharose. Sự thay đổi của các phân tử RNA do các phương pháp xử lý khác nhau được theo dõi bằng gradient mật độ sucrose. Kết quả cho thấy, việc tách liên tục đầu tiên ở pH 7,6 sau đó ở pH 9,0 không

1. The behaviour of several carbonyl group reagents and urea as time-dependent inhibitors of both pig kidney and human placental diamine oxidase is described. 2. Plots of log (vt/vo) against time were not linear with these reagents as the usual theories predict. 3. This was particularly the case with aminoguanidine and phenylhydrazine and a thorough study of the effects of these compounds on the human placental diamine oxidase is described. 4. By applying a new theory for time-dependent inhibition, the inhibition of diamine oxidase by aminoguanidine and phenylhydrazine is adequately accounted for. 5. The time-dependent recovery of activity on addition of sodium pyruvate suggested that the compounds used are acting solely as carbonyl group reagents, inhibiting by Schiff-base formation at the active-site carbonyl group.

1. Mô tả hoạt tính của một số thuốc thử nhóm carbonyl và urê như là chất ức chế phụ thuộc thời gian của cả thận lợn và diamin oxyase nhau thai người. 2. Các vết log (vt/vo) đối với thời gian không tuyến tính với các thuốc thử này như các lý thuyết thông thường dự đoán. 3. Điều này đặc biệt đúng với aminoguanidine và phenylhydrazine và mô tả một nghiên cứu kỹ lưỡng tác dụng của các hợp chất này lên diamin oxyase nhau thai người. 4. Bằng cách áp dụng một lý thuyết mới về

A periplasmic aminoendopeptidase from Escherichia coli has been purified to hemogeneity. It is a monomer of molecular weight 45000 and containing one -- SH group that is necessary for catalytic activity. The study of its substrate specificity indicated that the enzyme has both aminopeptidase and endopeptidase activity. The pH optimum for L-alanine p-nitroanilide hydrolysis is between 7 and 7.5 and that for 125I-labeled casein proteolysis between 7.3 and 7.6. The activation energy for the hydrolysis of L-anine p-nitroanilide was calculated to be 5.3 kcal X mol-1 (22.2 kJ X mol-1).

Một aminoendopeptidase periplasmic từ Escherichia coli đã được tinh sạch đến tính đồng nhất. Đây là một monome có trọng lượng phân tử 45000 và chứa một nhóm SH cần thiết cho hoạt động xúc tác. Nghiên cứu tính đặc hiệu của enzyme cho thấy enzyme có cả hai hoạt tính aminopeptidase và endopeptidase. Độ pH tối ưu cho thủy phân L-alanine p-nitroanilide là 7-7,5 và cho phân giải protein casein 125I là 7,3-

In this study of the binding properties of inositol hexaphosphate and 2,3-bisphosphoglycerate to chicken and human deoxyhemoglobin and carboxyhemoglobin were compared. It appeared that in all cases the binding to chicken hemoglobin is much stronger than to human hemoglobin. This is very probably due to the fact that 4 out of the 12 residues, responsible for the binding of phosphates in chicken hemoglobin, are arginines. These are absent in human hemoglobin, where the binding site is made up to only 8 residues. For chicken hemoglobin one strong binding site could be observed in both unliganded and liganded hemoglobin. From these observations we conclude that the same binding site is involved in both the oxy- and deoxy structure showing different affinity to phosphates in the two conformational states. For human hemoglobin we reached the same conclusion.

Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã so sánh đặc tính liên kết của inositol hexaphosphate và 2,3-bisphosphoglycerate với hemoglobin gà và deoxyhemoglobin ở người và carboxyhemoglobin. Kết quả cho thấy, trong tất cả các trường hợp, liên kết với hemoglobin gà mạnh hơn nhiều so với hemoglobin ở người. Điều này có thể là do 4 trong số 12 dư lượng chịu trách nhiệm liên kết của phosphat trong hemoglobin gà là arginine. Ở hemoglobin người,

In the large granule fraction of rat liver, the density distribution of inhibitor-sensitive neutral ribonuclease is similar to that for acid hydrolases and its density distribution is similarly modified by Triton WR-1339 accumulation in lysosomes. Particulate neutral ribonuclease is latent; the enzyme is unmasked by very low digitonin concentrations or hypoosmotic shock. These observations demonstrate that the bulk of liver neutral ribonuclease is associated with the lysosomal system. In view of the neutral pH optimum of the enzyme and of some particularities of its distribution in fractionation experiments, the possiblilty of an extrahepatic origin of neutral ribonuclease has been investigated. After partial pancreatectomy, a significant decrease is observed in both plasma and liver neutral ribonuclease. The effect is specific, for it does not occur for other lysosomal enzymes. Also, labelled bovine pancreatic ribonuclease, when injected intravenously, is taken up by the liver. The sedimentable labelled enzyme has a density distribution similar to the distribution of other foreign proteins, horseradish peroxidase or yeast invertase. These results are explained by the uptake of plasmatic neutral ribonuclease from pancreatic origin by the liver.

Trong phân đoạn hạt lớn của gan chuột, sự phân bố mật độ của ribonuclease trung tính nhạy cảm với chất ức chế tương tự như đối với hydrolase acid và sự phân bố mật độ của nó bị biến đổi tương tự bởi sự tích lũy Triton WR-1339 trong lysosome. Ribonuclease trung tính dạng hạt tiềm ẩn; enzyme bị lộ ra bởi nồng độ rất thấp Digitonin hoặc sốc giảm thể tích. Những quan sát này cho thấy phần lớn ribonuclease trung tính của gan có liên quan đến hệ thống lysosome. Theo quan điểm về pH tối ưu trung tính của enzyme và một số đặc điểm phân bố của nó trong các thí nghiệm phân đoạn, khả năng có nguồn gốc ngoài gan của ribonuclease trung tính đã được nghiên cứu. Sau khi cắt bỏ một phần tụy, sự suy giảm đáng kể được quan sát thấy ở cả hai huyết tương và gan trung tính ribonuclease. Tác dụng là đặc hiệu, vì nó không xảy ra đối với các enzyme lysosome khác. Ngoài ra, ribonuclease tuỵ bò được dán nhãn, khi tiêm tĩnh mạch, được gan hấp thu. Enzyme được dán nhãn lắng đọng có phân bố mật độ tương tự như phân bố của các protein ngoại lai khác, peroxidase cải ngựa hoặc invertase nấm men. Những kết quả này được giải thích bằng sự hấp thu của gan từ nguồn gốc tuỵ.

Glutathione reductase from human erythrocytes exists predominatly as an entity of 100 000 molecular weight under various conditions of pH and ionic strength. The S20,W of 5.5 S and D20W of 50 mum2/s correlate with the molecular weight determined by sedimentation equilibrium. The homogeneity of this species is primarily dependent on the presence of thiols and secondarily on high concentrations of salt. The amino-acid composition of the enzyme shows similarities both with glutathione reductases from other sources and with lipoamide dehydrogenase. From the flavin content and dodecylsulphate-polyacrylamide electrophoresis it is inferred that the native enzyme is a dimer composed of similar subunits of 50 000 molecular weight. In the absence of thiols, glutathione reductase shows a tendency to form tetramers and larger aggregates. Although these larger species are also catalytically active, under cellular conditions the presence of its product, reduced glutathione, should maintain the enzyme as the dimeric entity.

Glutathion reductase từ hồng cầu người tồn tại chủ yếu ở dạng thực thể có trọng lượng phân tử 100 000 trong các điều kiện khác nhau về pH và cường độ ion. S20, W của 5,5 S và D20W của 50 mum2/s tương quan với trọng lượng phân tử xác định bằng cân bằng lắng. Tính đồng nhất của loại enzyme này chủ yếu phụ thuộc vào sự hiện diện của thiol và thứ hai là nồng độ muối cao. Thành phần amino-acid của enzyme cho thấy sự tương đồng cả với reductase glut

Gamma-Glutamyl transpeptidase was isolated from sheep kidney cortex as an apparently homogeneous, highly active protein. At optimal pH and in the absence of acceptors, the enzyme catalyzes the release of about 510 mumol of p-nitroaniline per mg protein per min from the model substrate L-gamma-glutamyl-p-nitroanilide. Polyacrylamide gel electrophoresis in a sodium dodecylsulfate buffer system showed the presence of a large (Mr approximately 65000) and a small (Mr approximately 27000) polypeptide chain. Dissociation into two polypeptide chains was also achieved in 8 M urea. Amidination with dimethylsuberimidate produced a crosslinked protein of molecular weight approximately 90000. In the course of this work a convenient procedure was developed for the determination of gamma-glutamyl transpeptidase activity using L[glycine-2-3H]glutathione as the substrate. In this procedure the release of cysteinyl-[2-3H]glycine from glutathione is followed, after separation of the radioactive di-peptide from unreacted glutathione on a small Dowex-1 acetate column. The reactions with gamma-glutamyl-p-nitroanilide and glutathione are both strongly activated by several metal ions (Ca2+, Mg2+, Na+ and K+) and by a number of amino acids and peptide acceptors. The products of the reaction with glutathione were identified as cysteinylglycine, gamma-glutamylglutathione and glutamate. The formation of these products is consistent with the function of gamma-glutamyl transpeptidase in both the gamma-glutamyl transfer reaction and in the hydrolysis of the gamma-glutamyl bond. The activating effect of metal ions in the reaction with glutathione was shown to be dependent on the acceleration of the transfer reaction; the rate of hydrolysis of the gamma-glutamyl bond remaining unchanged.

Gamma-glutamyl transpeptidase phân lập từ vỏ thận cừu như một protein hoạt tính cao và đồng nhất. Ở pH tối ưu và khi không có chất nhận, enzyme xúc tác giải phóng khoảng 510 mumol p-nitroaniline trên mỗi mg protein mỗi phút từ chất nền L-gamma-glutamyl-p-nitroanilide mô hình. Điện di gel polyacrylamide trong hệ thống đệm natri dodecylsulfate cho thấy sự hiện diện của một chuỗi polypeptide lớn (Mr khoảng 65000) và nhỏ (Mr khoảng 27000 ). Phân ly thành hai chuỗi polypeptide cũng đạt được trong urê 8 M. Quá trình xúc tác với dimethylsuberimidate tạo ra một protein liên kết ngang có trọng lượng phân tử khoảng 90000. Trong quá trình này, một quy trình thuận tiện đã được phát triển để xác định hoạt tính của gamma-glutamyl transpeptidase sử dụng L (glycine-2-3H]glutathione làm chất nền. Trong quy trình này, việc giải phóng cysteinyl-( 2-3H]glycine từ glutathione được thực hiện sau khi tách di-peptide phóng xạ từ glutathione không phản ứng trên cột Dowex-1 acetate nhỏ. Các sản phẩm của phản ứng với glutathione được xác định là cysteinylglycine, gamma-glutamylglutathione và glutamate. Sự hình thành các sản phẩm này phù hợp với chức năng của gamma-glutamyl transpeptidase trong cả phản ứng chuyển gamma-glutamyl và trong phản ứng thủy phân liên kết gamma-glutamyl. Tác dụng kích hoạt của các ion kim loại trong phản ứng với glutathione phụ thuộc vào sự tăng tốc của phản ứng chuyển; tốc độ thủy phân liên kết gamma-glutamyl không thay đổi.

1. On incubation with the isolated rat submaxillary gland plasma membranes, [1-14C]palmitoyl-CoA was incorporated mainly into phosphatidylcholine and hydrolysed to [1-14C]palmitic acid and CoASH. 2. The addition of lysophosphatidylcholine enhanced the incorporation into phosphatidylcholine and lowered the hydrolysis of palmitoyl-CoA markedly. 3. In the presence of lysophosphatidylcholine, palmitoyl-CoA incorporation into phosphatidylcholine was maximum at 0.1 mM palmitoyl-CoA, 0.5 mM lysophosphatidylcholine and between pH 7.0 and 9.0. 4. The incorporation into phosphatidylcholine was stimulated by Na+, K+ and K-, inhibited by Ca2+ and Mg2+ and unaffected by sodium deoxycholate and ATP. 5. Epinephrine inhibited the incorporation of palmitoyl-CoA into phosphatidylcholine in the presence or absence of ATP, the inhibition being more in the presence of ATP than in its absence. Dibutyryl adenosine 3':5'-monophosphate mimicked the inhibitory effect of epinephrine.

1. Trên mô cấy màng huyết tương tuyến dưới hàm dưới chuột bị cô lập, [1-14C] palmitoyl-CoA được kết hợp chủ yếu vào phosphatidylcholine và thủy phân thành acid palmitic và CoASH. 2. Việc bổ sung lysophosphatidylcholine làm tăng khả năng kết hợp vào phosphatidylcholine và giảm đáng kể khả năng thủy phân palmitoyl-CoA. 3. Khi có lysophosphatidylcholine, khả năng kết hợp palmitoy

Hydrogen-deuterium exchange in 2H20 solutions of the two redox states of horse heart cytochrome c was investigated at 20 degrees C, pH 7, by mass spectrometry and infrared spectroscopy. Mass spectrometry indicates that ferricytochrome has 20 hydrogens unexchanged after 24 h, 28 hydrogens exchanging between 10 min and 24 h, and 156 hydrogens exchanging within 10 min; comparative values for ferrocytochrome are 45, 19 and 140. The displacement of the exchange curves obtained by infrared corresponds to 8 to 9 peptide hydrogens. These combined methods show many non-peptide hydrogens exchanging rapidly (87 and 79 for ferricytochrome c and ferrocytochrome c respectively), whereas others, probably buried inside the molecule and involved in hydrogen bonds, are not exchanged, even after 24 h (14 and 30 hydrogens respectively, which is relatively large for a small protein). Infrared results are given in terms of changes of standard free energy for the transconformational reaction which exposes the peptide hydrogens to solvent: in ferricytochrome c and ferrycoytochrome c, 30% and 40% respectively of the peptide hydrogens are protected by conformational transitions stabilized by more than 5 kcal/mol (21 kJ/mol), which implies a large increase in rigidity for the reduced form.

Sự trao đổi hydro-deuteri trong dung dịch 2H20 của hai trạng thái oxi hóa khử của cytochrome c ở tim ngựa đã được khảo sát ở 20 độ C, pH 7, bằng phương pháp phổ khối và quang phổ hồng ngoại. Phổ khối chỉ ra rằng ferricytochrome có 20 hydrogens không thay thế sau 24 giờ, 28 hydrogens trao đổi trong khoảng thời gian 10 phút đến 24 giờ và 156 hydrogens trao đổi trong vòng 10 phút; giá trị so sánh của ferrocytochrome

The hydroxylase activities observed in extracts of Pseudomonas putida ORC after growth on orcinol and resorcinol as sole source of carbon have been purified to homogeneity. Both enzymes were shown to be flavoproteins and to contain approximately 1 mol of FAD for each polypeptide chain, S20,W values for each enzyme are 4.1 +/- 0.1 and are independent of the presence of their aromatic substrates. Molecular weight determinations under native (approximately 68000) and denaturing (approximately 70000) conditions indicated that they are monomeric. The visible absorption spectra identical but the circular dichroic spectra of the two proteins can be distinguished. Although each protein catalyzes the NAD(P)H and O2-dependent hydroxylation of both orcinol and resorcinol, the efficiency of the transformations of the substrates by the two enzymes is radically different; furthermore resorcinol hydroxylase is much more versatile in the aromatic compounds it can utilize as substrates and effectors. Other properties of the enzymes which clearly establish their own identity include their serological characteristics and amino acid composition; the latter property is particularly evident when the quantities of valine and alanine residues are compared. The synthesis of each enzyme is also under different regulatory constraints, being controlled by the substrate used for growth.

Hoạt tính hydroxylase của dịch chiết Pseudomonas putida ORC sau khi sinh trưởng trên orcinol và resorcinol là nguồn cacbon duy nhất đã được tinh sạch đến mức đồng nhất. Cả hai enzyme đều là flavoprotein và chứa khoảng 1 mol FAD cho mỗi chuỗi polypeptide, giá trị S20, W của mỗi enzyme là 4,1 +/- 0,1 và độc lập với sự có mặt của chất thơm. Việc xác định trọng lượng phân tử trong điều kiện tự nhiên (khoảng 68000) và biến tính (khoảng 70000) cho thấy chúng là đơn phân. Phổ hấp thụ nhìn thấy được giống hệt nhau nhưng có thể phân biệt được phổ lưỡng sắc tròn của hai protein. Mặc dù mỗi protein xúc tác cho quá trình hydroxyl hóa phụ thuộc NAD (P) H và O2 của cả orcinol và resorcinol, hiệu quả của sự biến đổi chất nền của hai enzyme này khác nhau cơ bản; hơn nữa resorcinol hydroxylase là linh hoạt hơn trong các hợp chất thơm mà nó có thể sử dụng làm chất nền và chất ảnh hưởng. Các đặc tính khác của các enzyme xác định rõ bản sắc của chúng bao gồm đặc điểm huyết thanh học và thành phần axit amin; đặc tính thứ hai đặc biệt rõ ràng khi so sánh lượng dư lượng valine và alanine. Quá trình tổng hợp của mỗi enzyme cũng chịu các ràng buộc điều hòa khác nhau, được kiểm soát bởi chất nền được sử dụng để sinh trưởng.

rCBF under normal conditions in the rabbit, cat, and monkey brain was found to have a spontaneous periodicity while rCBF responses to afferent flicker stimulation usually revealed a double-phasic fluctuative pattern. This suggests that the rCBF regulatory system consists of not less than two regulatory chains with different time constants, and a feedback. The data on cerebral vascular responses to microapplication of mCSF solutions with various pH, potassium and catecholamines concentrations, suggest that rapid regulatory chains may be conditioned by potassium and neurogenic vascular effects, while slow ones could be mediated by CO2 and related pH changes.

RCBF trong điều kiện bình thường ở não thỏ, mèo và khỉ có chu kỳ tự phát trong khi phản ứng của rCBF với kích thích nhấp nháy hướng tâm thường cho thấy một mô hình dao động hai pha. Điều này cho thấy hệ thống điều hòa rCBF bao gồm không ít hơn hai chuỗi điều hòa với các hằng số thời gian khác nhau và một phản hồi. Dữ liệu về phản ứng mạch máu não với vi ứng dụng của dung dịch mCSF với pH, nồng độ kali và catecholamin khác nhau cho thấy các chuỗi điều hòa nhanh có thể được điều

Local PO2 was measured in the cat cortex on adjacent sites with a platinum multiwire surface electrode both during steady state conditions and with varying arterial oxygen supply. Concomitantly, PO2 in the sinus sagittalis was recorded continuously through the vascular wall. Under normoxia and steady state conditions local tissue PO2 values varied between O Torr and almost arterial levels of 85 Torr in accordance with theoretical calculations. With increased arterial oxygen supply local tissue PO2 as measured on agjacent sites was found to react fairly differently. Linear increases in local tissue PO2 as compared with arterial PO2, as well as constant levels, or only very small increases, were recorded. The constancy of local PO2 (="local PO2 autoregulation") was caused by local vasoconstriction. With reduced supply of arterial oxygen, however, tissue PO2 dropped in all studied sites down to hypoxia and anoxia. PO2 autoregulation during a decrease in arterial PO2, as described by Bicher (1973) could not be found.

PO2 cục bộ được đo ở vỏ não mèo tại các vị trí lân cận bằng điện cực bề mặt platin đa dây trong điều kiện ổn định và với nguồn cung cấp oxy khác nhau. Đồng thời, PO2 ở xoang sagittalis được ghi nhận liên tục qua thành mạch. Trong điều kiện oxy bình thường và trạng thái ổn định, giá trị PO2 mô cục bộ thay đổi giữa O Torr và hầu hết các mức động mạch 85 Torr theo tính toán lý thuyết. Với nguồn cung cấp oxy tăng lên, PO2 mô cục bộ đo được ở các vị trí lân cận

The thresholds of the pH for citric acid (pH=4.9) were found to exceed by 1.4 pH the thresholds for HC1 (3.5) at 1.2 mmol/1 bicarbonate in the solution. The reaction to citric acid was higher than to HC1 at equal pH. Decreasing of bicarbonate from 1.2 mmol/1 to 0 reduced pH threshold only for sitric acid from 4.90 to 3.15. pH threshold for HC1 remained 3.5 The chorda tympani response to stimulation with solutions containing bicarbonate (1.2 mmol/1) was higher than in absence of bicarbonate. The data obtained suggest two ranges of the acids in action.

Độ pH của acid citric (pH = 4,9) vượt quá 1,4 độ pH của HC1 (3,5) ở nồng độ 1,2 mmol/1 bicarbonate trong dung dịch. Độ pH bằng nhau của phản ứng với acid citric cao hơn phản ứng với HC1. Giảm nồng độ bicarbonate từ 1,2 mmol/1 xuống 0 chỉ làm giảm ngưỡng pH của acid sitric từ 4,90 xuống 3,15. Ngưỡng pH của HC1 vẫn là 3,5. Phản ứng dây thun ty

Prolonged survival of weakly incompatible skin allografts in mice (across the barrier presented by the MSA) can be induced by pretreating the recipients not only with a specific anti-MSA serum (obtained on day 5 after a single MSA-incompatible skin graft) but also be means of control serum obtained in a similar way from the recipients of fully compatible (syngeneic) skin grafts. Administration of serum from non-grafted mice had no effect on graft survival. The similar biological effect of both sera had a counterpart in their similar content and spectrum of glycosaminoglycans. Also in the skin grafts themselves, the course of both qualitative and quantitative changes of GAG in the early postgrafting period was in the allogeneic and syngeneic situation similar. The possible role of these substances in the serum and at the site of grafting and their effect on the outcome of the allograft response are discussed.

Sự sống lâu dài của các mảnh da ghép không tương thích yếu trên chuột nhắt trắng (qua hàng rào của MSA) có thể được gây ra bằng cách xử lý trước cho người nhận không chỉ bằng huyết thanh kháng MSA đặc hiệu (thu được vào ngày thứ 5 sau một mảnh da ghép không tương thích với MSA) mà còn là phương tiện kiểm soát huyết thanh thu được theo cách tương tự từ người nhận da ghép hoàn toàn tương thích (syngeneic ). Sử dụng huyết thanh từ chuột không ghép không ảnh hưởng đến sự sống lâu dài của mảnh da ghép. Tác dụng

Patients with uncomplicated duodenal ulcer were given two types of diet -a normal and a ulcer-type diet. The data obtained did not show any statistically significant difference between the action of the two diets. No evidence was then found to be in support of the still widely used restricted diet in the treatment of peptic ulcer.

Bệnh nhân loét tá tràng không biến chứng được chỉ định chế độ ăn hai loại: chế độ ăn bình thường và chế độ ăn kiểu loét. Các số liệu thu được không cho thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa hai chế độ ăn. Không có bằng chứng nào hỗ trợ cho chế độ ăn hạn chế vẫn còn được sử dụng rộng rãi trong điều trị loét dạ dày tá tràng.

The production of testicular androgen-binding protein (ABP), as a measure of Sertoli cell function, was studied after unilateral or bilateral experimental cryptorchidism in adult rats. Two or 4 weeks after the testis had been translocated to the abdomen, no major changes were found in the concentration of ABP per mg protein, although there was a marked and progressive decrease in ABP content per testis. However, the rate of ABP production was greatly decreased, as measured by the accumulation of ABP during 16-h ligation of the efferent ducts or by the production of ABP by testis mince in an in vitro system. This indicates that the Sertoli cell function is severly impaired by the intra-abdominal position.

Việc sản xuất protein liên kết androgen tinh hoàn (ABP) như một thước đo chức năng tế bào Sertoli, được nghiên cứu sau khi tinh hoàn lạc chỗ đơn phương hoặc song phương trên chuột cống trưởng thành. Hai hoặc 4 tuần sau khi tinh hoàn được chuyển vào bụng, không có thay đổi lớn nào về nồng độ ABP trên mỗi mg protein, mặc dù hàm lượng ABP trên mỗi tinh hoàn giảm rõ rệt và tiến triển. Tuy nhiên, tỷ lệ sản xuất ABP giảm đáng kể, được đo bằng sự tích tụ ABP trong quá trình thắt ống dẫn nước

Daily evaluations of 8 newly detected ketoacidotic diabetics showed the Bohr-effect of haemoglobin to be decreased by 50% while erythrocyte 2,3-DPG was decreased below 10 mumoles/g Hb. 2,3-DPG correlated strongly with pH during acidosis and with plasma inorganic phosphate (Pi) subsequently to the first insulin administration. Oxygen affinity of haemoglobin, measured as P50 act pH, was unchanged in ketoacidosis compared to the time, however, P50 act pH fell striking (p less than 0.001) and remained decreased up to 7 days depending upon the resynthesis of 2,3-DPG in relation to Pi. The Hill-coefeficient in reflecting the slope of the oxygen dissociation curve was diminished in ketoacidosis (p less than 0.005), and decreased further after pH-normalization (p less than 0.005). There was a close association of n with 2,3-DPG (p less than 0.001) and additionally with Pi at 2,3-DPG-levels below 10 mumoles/g Hb. Based on these findings a decreased erythrocyte oxygen release of one fifth during acidosis and more than one third after pH-correction can be hypothesised. In view of the intimate relation of Pi to the oxygen transport system it is suggesed that treatment of ketoacidosis should include Pi-sugstitution.

Đánh giá hàng ngày trên 8 bệnh nhân đái tháo đường mới phát hiện có nhiễm toan keto cho thấy tác dụng Bohr của haemoglobin giảm 50% trong khi hồng cầu 2,3-DPG giảm dưới 10 mol/g Hb. 2,3-DPG tương quan mạnh với pH trong quá trình toan và với phosphat vô cơ (Pi) huyết tương sau khi tiêm insulin lần đầu. Ái lực oxy của hemoglobin, đo pH hành động P50, không thay đổi trong nhiễm toan so với thời gian, tuy nhiên pH hành động

In perifused pancreatic islets, the fluorescence of oxidized flavoproteins (FAD) was recorded continuously. Elevation of glucose concentration in the medium form 0 or 5 mM to 20 mM led to decrease in FAD-fluorescence beginning 10 sec after change of medium. L-leucine (10 mM), (+/-)-B-BCH (20 mM) and alpha-ketoisocaproic acid (10 mM) caused typical kinetics of FAD-fluorescence decrease. The results are interpreted to indicate rapid changes of the functional state of B-cell mitochondria induced by the above-mentioned stimulators of insulin release.

Ở tiểu đảo tụy, huỳnh quang của flavoprotein oxy hóa (FAD) được ghi nhận liên tục. Nồng độ glucose tăng ở dạng trung bình 0 hoặc 5 mM đến 20 mM làm giảm huỳnh quang FAD bắt đầu sau 10 giây thay đổi môi trường. L-leucine (10 mM), (+/-) - B-BCH (20 mM) và acid alpha-ketoisocaproic (10 mM) gây giảm động học điển hình của huỳnh quang FAD. Kết quả được hiểu là sự thay

This study was undertaken to compare the ability of L- and D-isomers of amino acids bathing the oxyntic gland area to stimulate acid secretion in conscious dogs with Heidenhain pouch (HP), gastric fistula (GF) and pancreatic fistula (PF). Acid outputs from HP were determined by an intragastric titration method when amino acid solutions were perfused into HP at various concentrations, pH values, and distention pressures. Only L-isomers of all natural amino acids were found to stimulate acid secretion, whereas D-isomers of amino acids tested were completely inert in this respect. The comparison of the secretagogue activity of amino acids shows that L-histidine among essential amino acids and glycine among nonessential amino acids exhibited the strongest stimulation of acid outputs, reaching, respectively, 52 and 40% of the maximal response to histamine. Decreasing the pH of L-histidine solution perfused into HP in sequential order from 5.0 to 1.0 resulted in a stepwise reduction of acid output, falling at pH 1.0 to about 40% of the peak response achieved at pH 5.0. Local irrigation of HP by 2% xylocaine and intravenous infusion of atropine (100 mug per kg per hr) or metiamide (2.9 mg per kg per hr) reduced but did not abolish HP response to chemical stimulation and the pH dependency of this response. We conclude that only L- and not D-isomers of amino acids bathing the oxyntic gland area stimulate acid secretion by a local, gastrin-independent mechanism sensitive to distention pressure and pH.

Nghiên cứu này được thực hiện nhằm so sánh khả năng kích thích tiết acid của các đồng phân L-và D của các axit amin khi tắm tuyến oxyntic trên chó có ý thức với túi Heidenhain (HP ), rò dạ dày (GF) và rò tụy (PF ). Lượng acid tiết ra từ HP được xác định bằng phương pháp chuẩn độ đường tĩnh mạch khi dung dịch axit amin được truyền vào HP ở các nồng độ, giá trị pH và áp lực phình khác nhau. Chỉ có đồng phân L của tất cả các axit amin tự nhiên được tìm thấy có tác dụng kích thích tiết acid, trong khi đó đồng phân D của các axit amin được thử nghiệm hoàn toàn trơ về mặt này. So sánh hoạt tính tiết của các axit amin cho thấy L-histidine trong số các axit amin thiết yếu và glycine trong số các axit amin không thiết yếu cho thấy có tác dụng kích thích lượng acid tiết ra mạnh nhất, đạt lần lượt 52% và 40% đáp ứng tối đa với histamin. Giảm pH của dung dịch L-histidine truyền vào HP theo thứ tự từ 5,0 xuống 1,0 dẫn đến giảm dần lượng acid tiết ra, giảm xuống ở pH 1,0 xuống còn khoảng 40% đáp ứng tối đa đạt được ở pH 5,0. Giảm pH của dung dịch L-histidine truyền vào HP theo thứ tự từ 5,0 xuống 1,0 dẫn đến giảm dần lượng acid tiết ra, giảm xuống ở pH 1,0 xuống còn khoảng 40% đáp ứng tối đa đạt được ở pH 5,0. Giảm pH của dung dịch L-histidine truyền vào HP theo thứ tự từ 5,0 xuống 1,0 dẫn đến giảm dần lượng acid tiết ra, giảm xuống ở pH 1,0 xuống còn khoảng 40% đáp ứng tối đa đạt được ở pH 5,0. Giảm pH của dung dịch L-histidine và không giảm D-isome của các axit amin tắm tuyến oxyntic kích thích tiết acid bằng cơ chế cục bộ, độc lập với gastrin nhạy cảm với áp lực phình và pH.

A Pneumococcal mutant, sulr-c, resistant to sulfonamides, and three transformants bearing associated d or d+ resistance markers have earlier been reported to be unstable and show distinct patterns and frequencies of segregating stable progeny lacking the c marker. Each of the four strains showed a characteristic dosage of the genes involved in the merodiploidy. Complementary strands of DNA's from these stable and unstable strains were resolved and homoduplex and heteroduplex hybrids made from the separated DNA strands were used as donors in genetic transformations. Activities of a normal marker (streptomycin resistance) and those involved in the heterozygosity (c, d and d+) were quantitatively measured. From those heteroduplexes made up of opposite strands derived from a heterozygote and a stable strain, the normal marker is transferred efficiently, but the heterozygous markers are not. On the other hand, if both strands of a heteroduplex are derived from different heterozygotic strains, all markers can be transferred with usual efficiency to a stable recipient strain. The lowered efficiency in the former type of heteroduplex is attributed to an inhomology resulting from a tandem duplication in the merodiploid strains, and a postulated DNA repair process stimulated by it while in the form of the donor duplex. The inhomology probably includes (a) a microheterogeneity between the c site and the wild type locus, and (b) a more extensive incompatibility attributable to an extra segment of genome in a tandem duplication covering the c and d sites. The first of these inhomologies produces a lowered efficiency of transfer from all configurations of the particular d allele associated with the mutant c marker, and therefore accounts for the characteristic transfer patterns even from the native merodiploid DNA's.

Một đột biến phế cầu khuẩn, sulr-c, đề kháng sulfonamid và ba chất biến nạp mang các chỉ thị kháng d hoặc d+ liên quan trước đó đã được báo cáo là không ổn định và cho thấy các kiểu hình và tần số tách dòng của thế hệ con cháu ổn định mà không có chỉ thị c. Mỗi chủng trong số bốn chủng cho thấy một liều đặc trưng của các gen liên quan đến thể lưỡng bội. Các chuỗi bổ sung DNA từ các chủng ổn định và không ổn định này đã được phân giải và các chủng lai đồng nhất và dị hợp tử được tạo ra

The DNA of a sulfonamide-resistant Pneumococcal strain (heterozygous for sulr-c) and that of three highly resistant and persistently heterozygous cd transformants, derived by introducing sulr-c marker into a stable sulfonamide resistant strain (sulr-d), were studied to analyze the genetic basis of their merodiploidy. The physical properties of the native and denatured DNA from the heterozygotes and the nonheterozygous strains were not distinguishable. The denaturability and the renaturability of biological activity for the heterozygous markers were essentially identical to those of the normal markers. The heterozygosity extends to the closely linked locus giving rise to four different configurations of cd and cd+ transformants, characterized by their frequencies of segregation and donor-marker activities. The marker-activity ratios and the frequency of co-transfer of heterozygous markers were found to remain the same in each when the donor DNA was native, denatured or reannealed without fractionation or reannealed after remixing of resolved strands. Possible models were weighed against these observations and these considerations led to the suggestion that tandem duplication of a gene region may be responsible for the heterozygosity and instability of this region. A more detailed examination of this model will be presented in an accompanying paper.

DNA của chủng phế cầu khuẩn kháng sulfonamide (dị hợp tử đối với sulr-c) và của ba chất biến đổi cd dị hợp tử có khả năng kháng cao và bền vững, xuất phát từ việc đưa marker sulr-c vào chủng kháng sulfonamide ổn định (sulr-d) đã được nghiên cứu để phân tích cơ sở di truyền của thể liên kết. Các đặc tính vật lý của DNA bản địa và biến tính từ các dị hợp tử và không dị hợp tử về cơ bản là giống nhau với các marker thông thường. Độ dị hợp tử mở

The sanguis and pneumoniae species of Streptococcus were used as recipients in transformations from str+ to str-r and from thy- to thy+. The str-r mutations in the two species had been previously shown to be allelic. Homology of the thy- mutations in the two species was demonstrated in the similar phenotypic properties they conferred (death in the absence of thymidine, lack of thymidylate synthetase). The str and thy loci are unlinked in each species.--- When the two species are transformed by both homospecific and heterospecific DNA, the efficiency is always lower in the heterospecific cross. The efficiency of heterospecific transformation is considerably lower at the thy than at the str locus. DNA was extracted from recipients that had integrated markers of heterospecific origin. When such hybrid DNA is tested on the original recipient species, the heterospecific markers are usually as efficient as homospecific markers. When tested on the original donor species, however, the hybrid DNA is usually more efficient than heterospecific DNA. This is true for both thy and str transformation. -- -- Forty independent thy+ hybrids were obtained in the cross of sanguis thy- recipients with pneumoniae thy+ DNA. These hybrids fall into a number of classes based upon the relative efficiency with which their extracted DNA's are able to transfer the thy+ marker into pneumoniae thy- cells. The most efficient of these DNA's exhibits about 20% of the efficiency of homospecific pneumoniae thy+ DNA and three orders of magnitude greater efficiency than heterospecific sanguis thy+ DNA. Thus, very little of the inefficiency of heterospecific transformation of the thy locus is ascribable to a classic restriction mechanism. Rather, the wild-type thy+ loci in the two species appear to differ at multiple sites, and independent heterospecific transfers result in differential extents of integration of these sites. On this basis, the thy+ loci of the two species differ at a greater number of sites than do the respective str+ loci.

Loài sanguis và loài viêm phổi Streptococcus được sử dụng làm vật nhận trong các biến đổi từ str+ sang str-r và từ thy-thành thy+. Các đột biến str-r ở hai loài trước đây được chứng minh là allelic. Tính đồng nhất của đột biến thy ở hai loài đã được chứng minh ở các đặc điểm kiểu hình tương tự mà chúng cho là (cái chết khi không có thymidine, thiếu thymidylate synthetase ). Ở mỗi loài, str và thy loci không có liên kết. Khi hai loài được biến đổi bởi cả DNA đồng nhất và dị thể, hiệu quả của phép biến đổi dị thể luôn thấp hơn. Hiệu quả của phép biến đổi dị thể ở thy thấp hơn nhiều so với ở str locus. DNA được tách ra từ những vật nhận có các dấu hiệu tích hợp có nguồn gốc dị thể. Khi DNA lai được thử nghiệm trên loài nhận ban đầu, các dấu hiệu dị thể thường cũng hiệu quả như các dấu hiệu đồng nhất. Tuy nhiên, khi thử nghiệm trên loài cho ban đầu, DNA lai thường hiệu quả hơn DNA dị thể. Điều này đúng với cả biến đổi thy và str. -- - - Bốn mươi DNA lai thy+ độc lập thu được trong phép lai của những vật nhận với viêm phổi thy+ DNA. Những vật lai này được chia thành nhiều lớp dựa trên hiệu quả tương đối của DNA tách ra từ những vật nhận có các dấu hiệu có nguồn gốc dị thể. Khi DNA lai được thử nghiệm trên loài nhận ban đầu, các dấu hiệu dị thể thường cũng hiệu quả như các dấu hiệu đồng nhất. Tuy nhiên, khi thử nghiệm trên loài cho ban đầu, DNA lai thường hiệu quả hơn DNA dị thể. Hiệu quả nhất của các DNA này thể hiện khoảng 20% hiệu quả của phép biến đổi dị thể của DNA thy+ và hiệu quả cao hơn 3 bậc so với phép biến đổi dị thể sanguis thy+ DNA. Như vậy, rất ít trường hợp biến đổi dị thể của quỹ đạo thỳ có thể xảy ra đối với cơ chế hạn chế cổ điển. Thay vào đó, kiểu hoang dại thỳ+ loci ở hai loài dường như khác nhau ở nhiều vị trí, và sự chuyển đổi dị thể độc lập dẫn đến mức độ tích hợp khác nhau của các vị trí này. Trên

A modification of the fibrin plate method is presented. Plasminogen-free human fibrinogen and plasminogen purified by affinity chromatography have been used. Fibrin plates without and with a constant amount of plasminogen and with agarose as stabilizing medium were used for the estimation of plasmin and plasminogen activator activity. Activator activity could be demonstrated in sterile bile and saliva. When plasmin activity was present, estimations of plasminogen activator were approximate. The method is sensitive, small volumes of reagents and samples are needed. The error of the method is comparatively low and the reproducibility is good.

Phương pháp đĩa fibrin được sửa đổi. Sử dụng fibrinogen và plasminogen không chứa plasminogen ở người được tinh sạch bằng sắc ký ái lực. Đĩa fibrin không chứa plasminogen và có hàm lượng plasminogen không đổi, môi trường agarose ổn định được sử dụng để ước tính hoạt tính của plasmin và plasminogen. Hoạt tính hoạt hóa có thể được thể hiện trong mật vô trùng và nước bọt. Khi có hoạt tính plasmin, ước tính hoạt tính của plasminogen là gần đúng. Phương pháp nhạy