en
stringlengths
1
8.65k
vi
stringlengths
1
3.19k
A simple, highly sensitive and reproducible method for the assay of gamma-glutamyl transpeptidase (EC 2.3.2-) activity is introduced, using gamma-glutamyl-p-nitroanilide as a substrate and glycylglycine as an acceptor in 50 g/l of polyoxyethylene nonylphenol. Serum transpeptidase activity was assayed in 1080 healthy adults, the normal mean value being 14.8 mU/ml. The diagnostic evaluation of the enzyme in various hepatobiliary diseases is also discussed.
Nghiên cứu hoạt tính của enzyme transpeptidase (EC 2.3.2-) bằng phương pháp đơn giản, có độ nhạy cao và có thể tái sản xuất được, sử dụng chất nền là gamma-glutamyl-p-nitroanilide và chất nhận là glycylglycine trong 50 g/l polyoxyethylene nonylphenol. Hoạt tính của enzyme transpeptidase huyết thanh được khảo sát trên 1080 người trưởng thành khỏe mạnh, giá trị trung bình bình thường là 14,8 mU/ml.
There are different types of renal hypertension: hypertension due to parenchymal renal disease, renovascular hypertension, hypertension due to urological disease, hypertension of endstage renal disease. Treatment has to consider-above all-the possibility of specific, medical or surgical procedures that may cause the underlying condition. If the underlying disease is not amenable to specific therapy, symptomatic medical treatment to lower blood pressure is indicated: besides control of sodium-intake and body weight antihypertensive drugs are generally indicated. We use them, alone or in combination, in the following line of order: diuretics, beta-adrenergic blockers, dihydralazine, reserpine, clonidine, alpha-methyldopa, guanethidine.
Tăng huyết áp thận có nhiều dạng: tăng huyết áp do bệnh lý nhu mô thận, tăng huyết áp cải biên, tăng huyết áp do bệnh lý tiết niệu, tăng huyết áp bệnh thận giai đoạn cuối. Điều trị phải xem xét trước hết khả năng gây ra bệnh lý nền bằng các thủ thuật đặc hiệu, y học hoặc phẫu thuật. Nếu bệnh lý nền không thể điều trị đặc hiệu, cần chỉ định điều trị y học triệu chứng để hạ huyết áp: bên cạnh việc kiểm soát uống natri và cân nặng, thường chỉ định sử dụng đơn độc hoặc kết hợp các thuốc hạ huyết áp theo thứ tự sau:
1. Some effects of sodium salicylate upon anaerobic glycolysis have been studied in normal human erythrocytes incubated for up to 6 h at 37 degrees C in autologous sera. 2. Both glucose consumption and lactate production were stimulated by concentrations of salicylate up to 60 mmol/l but at the highest concentration used (90 mmol/l) an initial stimulus was followed by inhibition of glycolysis. 3. Losses occurred of adenosine 5'-triphosphate (ATP), adenosine 5'-diphosphate (ADP) and adenosine 5'-phosphate(AMP)at higher concentrations of salicylate and there was a concomitant increase of inorganic phosphate. 4. Other phosphate esters underwent concentration changes at higher concentrations of salicylate that reflected inadequate concentrations of ATP for glycolysis. 5. The rates of sodium efflux from, and potassium influx into, erythrocytes were unaffected by the presence of salicylate at concentrations sufficient to stimulate glycolysis.
1. Một số tác dụng của natri salicylate lên đường phân kỵ khí đã được nghiên cứu trên hồng cầu người bình thường ủ đến 6 giờ ở 37 độ C. 2. Cả tiêu thụ glucose và sản xuất lactate đều được kích thích bởi nồng độ salicylate lên đến 60 mmol/l nhưng ở nồng độ cao nhất (90 mmol/l) một kích thích ban đầu đã được tiếp theo là ức chế đường phân. 3. Sự tổn thất xảy ra của adenosine 5 '-triphosphate (ATP), adenosine 5' - dip
In 4 dogs injected intravenously (i.v.) with 125I labeled fibrinogen, 51Cr labeled platelets and 99mTc labeled albumin, and subjected to successively increasing amounts of i.v. infused monomethylmethacrylate, doses corresponding to the amounts released into the blood stream following implantation of acrylic cement during total hip replacements did not affect the clotting mechanism, did not cause trapping of platelets and fibrin in the lungs, did not generate fat emboli, and did not cause depression of the arterial oxygen tension or blood pressure. Monomethylmethacrylate in whole blood was associated with both blood cells and plasma.
4 chó được tiêm tĩnh mạch fibrinogen nhãn 125I, tiểu cầu nhãn 51Cr và albumin nhãn 99mTc, đồng thời tăng dần liều monomethylmethacrylate truyền tĩnh mạch, liều tương ứng với lượng giải phóng vào máu sau khi cấy xi măng acrylic trong thay thế toàn bộ hông không ảnh hưởng đến cơ chế đông máu, không gây tắc nghẽn tiểu cầu và fibrin trong phổi, không gây tắc mạch mỡ, không gây giảm áp lực oxy hoặc huyết áp động mạch. Monomethylmethacrylate trong máu toàn phần có liên
1. We measured the minute ventilation and arterial blood catecholamine concentrations in four normal men standing and at two levels of moderate treadmill exercise breathing 14% oxygen or air. 2. Minute ventilation was significantly higher during hypoxic exercise than during normoxic exercise at an oxygen uptake of 1500 ml/min. 3. Arterial plasma noradrenaline during hypoxic exercise at an oxygen uptake of 1500 ml/min was significantly greater than at rest. 4. Arterial plasma noradrenaline during normoxic exercise at an oxygen uptake of 1500 ml/min was not elevated above the resting concentration. 5. The results are compatible with the suggestion that increased concentrations of arterial plasma noradrenaline contribute to the hypoxic potentiation of the respiratory response to moderate exercise.
1. Chúng tôi đo nồng độ catecholamine máu động mạch ở 4 người bình thường đứng và ở 2 mức độ tập luyện trên máy chạy bộ vừa phải thở 14% oxy hoặc không khí. 2. Thở máy phút trong thời gian tập thiếu oxy cao hơn có ý nghĩa so với thời gian tập bình thường ở mức hấp thu oxy 1500 ml/phút. 3. Noradrenaline động mạch trong thời gian tập thiếu oxy ở mức hấp thu oxy 1500 ml/phút lớn hơn có ý nghĩa so với thời gian nghỉ. 4. Noradrenaline động mạch trong thời gian
Clinical impressions about the problem of defibrillation during states of acid-base imbalance and hypoxia have been influenced by studies involving the effect of these derangements on the ventricular fibrillation threshold. Based on body weight, energy requirements for defibrillation in normal dogs were compared to requirements in dogs subjected to commonly encountered acid-base disturbances and severe hypoxemia. No significant differences were found. Seventy-five percent of all animals in the study were electrically converted with low-to-moderate levels of energy. The incidence of spontaneous resumption of circulation following defibrillation was lowest in animals subjected to metabolic acidosis and hypoxia. The results suggest that pH and blood gas alterations, previously shown to influence the normal ventricular fibrillation threshold, do not significantly affect the normal defibrillation threshold.
Ấn tượng lâm sàng về vấn đề rung nhĩ trong tình trạng mất cân bằng acid-base và thiếu oxy bị ảnh hưởng bởi các nghiên cứu liên quan đến ảnh hưởng của các biến dạng này lên ngưỡng rung thất. Dựa trên cân nặng cơ thể, nhu cầu năng lượng cho việc rung nhĩ ở chó bình thường được so sánh với nhu cầu ở chó thường gặp rối loạn acid-base và thiếu oxy nặng. Không có sự khác biệt đáng kể. 75% số động vật trong nghiên cứu được chuyển hóa điện với mức năng lượng thấp đến trung bình. Tỷ lệ tự hồi phục tuần hoàn sau rung nhĩ thấp nhất ở
A patient with aortitis syndrome had a pleural effusion which subsided but reappeared with an exacerbation of aortitis symptoms while under antituberculosis treatment. The character of the fluid was that of an exudate, and the glucose concentration was normal. Clinical and laboratory features of the case suggest that the effusion was part of the aortitis syndrome per se.
Bệnh nhân hội chứng viêm động mạch chủ có tràn dịch màng phổi giảm nhưng tái phát với triệu chứng viêm động mạch chủ nặng trong khi điều trị chống lao. Dịch có đặc điểm là dịch tiết, nồng độ glucose bình thường. Đặc điểm lâm sàng và cận lâm sàng của trường hợp này cho thấy tràn dịch là một phần của hội chứng viêm động mạch chủ.
At the Department of Plastic Surgery and Burns, Berufsgenossenschaftliche Unfalklinik Ludwigshafen-Oggersheim, a skinbank with typed skin has been established. The storage system consists of deep-freezing at -196 degrees C in liquid nitrogen. The transplantation of HL-A typed skin was evaluated from the clinical and histological point of view. Due to the effort necessary for such an undertaking this method is critically reviewed.
Tại khoa Phẫu thuật tạo hình và Bỏng, Berufsgenossenschaftliche Unfalklinik Ludwigshafen-Oggersheim, một ngân hàng da với da dạng đã được thiết lập. Hệ thống bảo quản bao gồm đông lạnh sâu ở -196 độ C trong nitơ lỏng. Việc ghép da dạng HL-A được đánh giá từ góc độ lâm sàng và mô học. Do những nỗ lực cần thiết cho việc thực hiện phương pháp này, phương pháp này được xem xét một cách nghiêm túc.
The apparent isoelectric points (pI) in isoelectric focusing (IF) of human pituitary and amniotic fluid prolactin (hPRL), both non-iodinated and iodinated, were determined. Unresolved mixtures of pituitary hPRL isohormones E and F, and of at least five isohormones found in amniotic fluid, and plasma hPRL exhibit an average pI value of 6.5 - 6.7. Transient state pH values observed or previously reported for hPRL components range from pH 5.9 to 6.8 after correction to standard conditions. At pH 8.1, the major isohormone, hPRL-F, carriers a charge of 2.2 net protons per molecule. The net charge differences among isohormones E, F and G are compatible with acquisition or loss of single charged groups per 20,000 molecular weight. This net charge is similar to that of the least prolactin-bioactive major isohormone of human growth hormone (hGH-B), while the hGH with a bioactivity comparable to that of hPRL exhibits a net charge of 3.4 valence units. The "large" isohormones J and H increased net charges, by a factor of 2-3, in direct proportion to their size increments.
Các điểm đẳng điện biểu kiến (pI) trong tập trung đẳng điện (IF) của prolactin (hPRL) tuyến yên và dịch ối người (cả không iốt và iốt) đã được xác định. Các hỗn hợp chưa được giải quyết của các isohormone E và F tuyến yên, và của ít nhất năm isohormone được tìm thấy trong dịch ối, và hPRL huyết tương thể hiện giá trị pI trung bình là 6,5-6,7. Các giá trị pH trạng thái thoáng qua đã quan sát hoặc được báo cáo trước đây
The feasibility of using isoelectric focusing for the separation of primate pituitary growth hormone from prolactin and for the characterization of polymorphic forms of these hormones was explored. In a pH 3--10 gradient, extracts of both human and cynomolgus monkey pituitaries were each resolved into 4 growth hormone components and at least 3 prolactin components, as shown by radioimmunoassay. In narrower gradients (of 2--3 pH units) greater resolution was achieved; the principal growth hormone components were well separated from the principal prolactin components but there was overlapping of some minor components. A partially purified human prolactin preparation was found to contain 4 prolactin components, one of which had a prolactin/growth hormone ratio of 760. Clinical grade human growth hormone was also resolved into at least 5 prolactin and 5 growth hormone components, many of which had higher pI values than those found in pituitary extract. Under the conditions used, both growth hormone and prolactin were found to be polymorphic with respect to isoelectric point. Some of the human prolactin components were found to contain less than 0.2% growth hormone by radioimmunoassay. Monkey growth hormone containing 0.01% prolactin was isolated. These findings demonstrate that isoelectric focusing is useful for the preparation of both growth hormone and prolactin which are essentially free of one another. Furthermore, the polymorphic forms were repeatedly found in preparations obtained by several methods and from 2 different species, suggesting that these forms are not artifacts.
Tính khả thi của phương pháp lấy nét đẳng điện trong tách hormone tăng trưởng tuyến yên từ prolactin và đặc điểm đa hình của các dạng hormone này đã được khảo sát. Trong độ pH 3-10, dịch chiết từ tuyến yên của cả người và cynomolgus mỗi loại phân giải thành 4 thành phần hormone tăng trưởng và ít nhất 3 thành phần prolactin như được thể hiện trong xét nghiệm miễn dịch phóng xạ. Trong độ pH hẹp hơn (2-3 đơn vị pH) đã cho độ phân giải cao hơn; các thành phần hormone tăng trưởng chính được tách riêng tốt khỏi các thành phần prolactin chính nhưng có sự chồng chéo của một số thành phần nhỏ. Chế phẩm prolactin tinh khiết một phần của người cũng được phân giải thành ít nhất 5 thành phần prolactin và 5 thành phần hormone tăng trưởng, trong đó có một số thành phần có pI cao hơn so với chế phẩm chiết từ tuyến yên. Trong điều kiện sử dụng, cả hormone tăng trưởng và prolactin đều được tìm thấy có tính đa hình về điểm đẳng điện. Một số thành phần prolactin của người được phân lập có chứa ít hơn 0,2% hormone tăng trưởng. Hormon tăng trưởng của khỉ chứa 0,01% prolactin đã được phân lập. Những phát hiện này cho thấy việc lấy nét đẳng điện rất hữu ích trong việc chế tạo cả hormone tăng trưởng và prolactin vốn về cơ bản không có lẫn nhau. Hơn nữa, các dạng đa hình này được tìm thấy nhiều lần trong các chế phẩm thu được bằng nhiều phương pháp và từ 2 loài khác nhau, cho thấy các dạng này không phải là tạo tác.
Both UDP-glucuronyltransferase (GT) and beta-glucuronidase (betaG) were assayed in untreated liver microsomes. Optimum assay conditions were established with rat liver microsomes using p-nitrophenol (pNP) and its glucuronide (pNPGA) at the pH optima of GT (7.5) and betaG (4.5). The activities of the two enzymes were compared using microsomes from rats, mice, pigs, cattle and horses, with pNP, pNPGA, and phenolphthalein as substrate, in the presence of various cofactors and inhibitors at pH 7.5 and 4.5. These data disclose pronounced differences with respect to species, substrate and other experimental conditions, thereby precluding the establishment of general optimum conditions. The two enzymes were also assayed under strictly identical conditions using pNP and pNPGA and rat liver microsomes at pH 7.5 in the presence and absence of UDP-glucuronate disodium (UDPGA), activators (ATP;UDP-N-acetylglucosamine) and inhibitors. When provided with a functional level of UDPGA, both enzymes proved active under those conditions, and a conjugation-deconjugation interplay was indicated. The two processes could be selectively and totally inhibited by Zn2+ and saccharolactone. The results suggest that conjugation-deconjugation-reconjugation cycles may be operative in the metabolism of drugs in vivo, taking place already at the level of the liver endoplasmic reticulum.
Cả hai enzyme UDP-glucuronyltransferase (GT) và beta-glucuronidase (betaG) đều được khảo sát trên vi thể gan chưa được điều trị. Các điều kiện tối ưu được thiết lập với vi thể gan chuột sử dụng p-nitrophenol (pNP) và glucuronide (pNPGA) ở pH tối ưu của GT (7,5) và betaG (4,5 ). Hoạt tính của hai enzyme được so sánh với các vi thể chuột, chuột nhắt, lợn
In omnivorous creatures, the diet is acidogenic, especially as a result of the meat content, which gives rise to phosphoric and sulphuric acids, i.e., to metabolic acidosis. In the short term, metabolic acids are buffered by tissue proteins and bicarbonate (the 'alkali reserve'). In the longer term, acid must be excreted, or neutralized with base which is also generated from the diet, by conversion of dietary amino-nitrogen to ammonia. The final steps of this process occur in the kidney, which converts circulating glutamine to ammonia, and to carbon products such as glucose and carbon dioxide, by metabolic reactions which adapt during acidosis to generate more ammonia and maintain an increased renal ammonia content. The complex mechanisms which govern the formation of ammonia, glucose and carbon dioxide from glutamine, involving the reactions of amino acids, the tricarboxylic acid cycle, and gluconeogenesis, are reviewed.
Ở các sinh vật ăn tạp, chế độ ăn có tính axit, đặc biệt là do hàm lượng thịt làm phát sinh axit photphoric và axit sunfuric, tức là nhiễm toan chuyển hóa. Về ngắn hạn, các axit chuyển hóa được đệm bởi protein mô và bicarbonate (" dự trữ kali " ). Về lâu dài, axit phải được bài tiết hoặc trung hòa bằng bazơ cũng được tạo ra từ chế độ ăn uống, bằng cách chuyển hóa amino-nitrogen thành amoniac. Các bước cuối cùng của quá trình này xảy ra ở thận, thận chuyển hóa glutamine lưu thông
Serum, liver and renal gamma-glutamyl transpeptidase (GGT) activities were studied in four groups of rabbits: controls, rabbits with obstructive extrahepatic cholestasis, rabbits with obstructive anuria, and animals with combined obstructive extrahepatic cholestasis and obstructive anuria. Serum GGT was essentially increased in rabbits with obstructive extrahepatic cholestasis, showing peak values in the combined cholestasis + obstructive anuria group, and practically normal values in animals with anuria. Liver GGT was increased in both cholestasis groups, but the increase was less prominent than the increase in serum GGT and there was no correlation between them. In both anuric groups renal GGT was reduced, probably as a result of inhibited enzyme synthesis secondary to the altered conditions for adequate renal function. The results obtained are suggestive of a probable renal involvement in the formation of the serum GGT activity level.
Hoạt tính GGT huyết thanh, gan và thận của GGT được nghiên cứu trên 4 nhóm thỏ: nhóm chứng, thỏ ứ mật ngoài gan tắc nghẽn, thỏ có hậu môn tắc nghẽn và thỏ ứ mật ngoài gan tắc nghẽn kết hợp với hậu môn tắc nghẽn. Nồng độ GGT huyết thanh tăng chủ yếu ở thỏ ứ mật ngoài gan tắc nghẽn, thể hiện giá trị cao nhất ở nhóm ứ mật kết hợp với hậu môn tắc nghẽn và giá trị thực tế bình thường ở thỏ có hậu môn tắc nghẽn. GGT gan tăng ở cả 2 nhóm ứ mật nhưng sự gia tăng ít nổi bật
The mechanism responsible for the changes in serum and liver gamma-glutamyl transpeptidase (gamma-GT) activity was studied in a model of experimental hexachlorobenzene porphyria in rabbits. Porphyria followed the administration of hexachlorobenzene in doses of 280 mumol - kg-1 body weight, which were given daily through a gastric tube over a 20-day period. Serum gamma-GT activity and the activities of the lysosomal enzymes beta-N-acetylglucosaminidase and alpha-mannosidase were increased, whereas L-aspartate: 2-oxoglutarate aminotransferase and L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase and L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase remained unaltered. There was a considerable increase in liver microsomal protein, gamma-GT, cytochrome P-450, anilinehydroxylase, aminopyrine-demethylase and delta-aminolevulinic acid synthase. In the liver gamma-GT was detected in the microsomes as well as in the cytoplasm where enzymatic activity was higher. The high correlation coefficient between liver gamma-GT, cytochrome P-450 and delta-aminolevulinic acid synthase witnesses a hexachlorobenzene-induced gamma-GT formation in the liver. A statistically significant correlation between serum and liver gamma-GT activity was also found. These data strongly suggest that the increase in serum gamma-GT activity may result from the induction of the enzyme in the liver.
Cơ chế gây ra sự thay đổi hoạt độ gamma-glutamyl transpeptidase (gamma-GT) trong máu và gan được nghiên cứu trên mô hình thực nghiệm porphyria hexachlorobenzene (HTA) trên thỏ. Sau đó, cho thỏ uống hexachlorobenzene với liều 280 mumol-kg-1, truyền qua dạ dày trong thời gian 20 ngày. Hoạt độ gamma-GT trong máu và hoạt độ các enzyme lysosome beta-N-acetylglucosaminidase và alpha-mannosidase tăng lên, trong khi L-aspartate: 2-oxoglutarate aminotransferase và L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase và L-alanine: 2-oxoglutarate aminotransferase không thay đổi. Ở gan, gamma-GT được phát hiện ở microsome cũng như trong tế bào chất nơi hoạt độ enzyme cao hơn. Hệ số tương quan cao giữa gamma-GT, cytochrome P-450 và delta-aminolevulinic acid synthase chứng tỏ sự gia tăng hoạt độ gamma-GT ở gan. Các dữ liệu này gợi ý mạnh mẽ rằng sự gia tăng hoạt độ gamma-GT trong máu có thể là kết quả của sự khởi phát enzyme ở gan.
15 untrained women were subjected to a walking treadmill test to determine the influence of maximal exercise upon synthesis of erythrocyte 2,3 DPG. Although there was a 9.8% increase in the 2,3 DPG content following exercise, there was a concomitant 9.4% increase in the hemoglobin level; therefore, when 2,3 DPG is expressed as a ratio to hemoglobin (See Article), there was no significant change as a result of exercise stress. It was suggested that three additive factors produced during strenuous exercise; decreased pH; increased hemoglobin concentration; and increased CO2 production result in by-product inhibition of 2,3 DPG synthesis. It is concluded that 2,3 DPG does not provide a physiologic benefit in the adaptation of the oxygen transport system to exercise.
15 bệnh nhân nữ chưa qua đào tạo được tiến hành thử nghiệm trên máy đi bộ để xác định ảnh hưởng của tập luyện thể dục tối đa lên quá trình tổng hợp 2,3 DPG. Hàm lượng 2,3 DPG tăng 9,8% sau tập luyện nhưng Hemoglobin tăng 9,4% đồng thời; do đó, khi tỷ lệ 2,3 DPG so với hemoglobin (xem bài viết) không có sự thay đổi đáng kể do stress khi tập luyện. Có ba yếu tố phụ gia được tạo ra trong quá trình tập luyện vất vả: giảm pH
1. Chloroplasts isolated from leaves of spinach-beet (Beta vulgaris L. ssp. vulgaris) do not catalyse the hydroxylation of p-coumaric acid in the dark unless a reductant (such as ascorbate, NADH or NADPH) is added. Superoxide dismutase has no effect on this reaction. 2. Illuminated chloroplasts catalyse the hydroxylation in the absence of added reductant. This reaction is completely inhibited by superoxide dismutase, but catalase has little effect. 3. Both hydroxylation in the light and hydroxylation in the dark in the presence of reductants are inhibited by diethyldithiocarbamate, EDTA, cyanide and 2-mercaptoethanol. 4. It is proposed that O-2- generated by illuminated chloroplasts is involved in the provision of a reductant to the enzyme phenolase.
1. Lục lạp phân lập từ lá củ cải bẹ (Beta vulgaris L.ssp. vulgaris) không xúc tác quá trình hydroxyl hóa axit p-coumaric trong bóng tối trừ khi bổ sung chất khử (như ascorbate, NADH hoặc NADPH ). Superoxide dismutase không ảnh hưởng đến phản ứng này. 2. Lục lạp phát quang xúc tác quá trình hydroxyl hóa trong trường hợp không bổ sung chất khử. Phản ứng này bị ức chế hoàn toàn bởi superoxide dismutase, nhưng cat
35Cl minus-nuclear magnetic resonance (NMR) studies indicate that various digests of human hemoglobin with carboxypeptidase A and B, or a combination of the two, may be used for the identification of chloride binding sites. All the digestion products contain, like hemoglobin itself, at least two classes of binding sites, one of high, the others of low affinity. The pH dependence of the excess linewidth of the 35Cl minus NMR signal indicates that in the simple digests with either carboxypeptidase A or B, chloride is bound with high affinity at or near His-beta146-Asp-beta94 and at or near Val-alpha1-Arg-alpha141. The high-affinity sites show, in the case of the simple digests, a strong oxygen linkage which is lost in the forms digested with both carboxypeptidase A and B; this linkage may thus be correlated to the presence of conformational changes. Organic phosphates, like inositol hexaphosphate, show competition for some of the high-affinity chloride binding sites in hemoglobin and in the simple digests. This competition is likewise lost in the doubly digested hemoglobins.
Các nghiên cứu cộng hưởng từ hạt nhân 35Cl trừ (NMR) chỉ ra rằng có thể sử dụng nhiều cách tiêu hóa khác nhau của hemoglobin ở người với carboxypeptidase A và B, hoặc kết hợp cả hai, để xác định vị trí gắn clorua. Giống như bản thân hemoglobin, tất cả các sản phẩm tiêu hóa đều chứa ít nhất hai loại vị trí gắn kết, một loại có ái lực cao, loại kia có ái lực thấp. Sự phụ thuộc pH của độ rộng đường truyền vượt quá của tín hiệu NMR 35
1. The intracellular pH was measured in growing Clostridium pasteurianum with and acid-base equilibrium distribution method. [14C]Dimethyloxazolidinedione, [14]methylamine and [14C]acetic acid were used as "deltapH-indicators". During growth the extracellular pH decreased from 7.1 to 5.1; simultaneously the intracellular pH changed from 7.5 to 5.9. Thus, the intracellular pH was more alkaline than the extracellular pH by 0.4 to 0.8 pH-units. 2. This pH gradient (interior alkaline) was abolished by the proton conductor carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone and the ATPase inhibitor N,N'-dicyclohexylcarbodiimide. The pH gradient could not be demonstrated in cells depleted of an energy substrate. These results suggest that the pH gradient is formed by an ATPase-driven extrusion of protons from the cells rather than by a Donnan potential. 3. Growth of the organism was inhibited by low concentrations of both carbonylcyanide m-chlorophenylhydrazone (5 muM) and dicyclohexylcarbodiimide (5 muM). This finding suggests that the pH gradient is essential for the growing cell as it may be required for substrate accumulation and other types of transport processes.
1. Độ pH nội bào được đo bằng phương pháp nuôi cấy Clostridium pasteurianum với phương pháp cân bằng acid-base. [14C] Dimhyloxazolidinedione, [14] Methylamine và acid acetic được sử dụng như các chất chỉ thị "deltapH-indicator". Trong quá trình nuôi cấy, độ pH ngoại bào giảm từ 7,1 xuống 5,1; đồng thời, độ pH nội bào thay đổi từ 7,5 xuống 5,9. Như vậy, độ pH nội bào có tính
Membranes of the bacterial form and the stable and unstable L-forms of Proteus mirabilis contain LD and DD-carboxypeptidase. The DD-carboxypeptidase is inhibited non-competitively by penicillin G. The enzyme of the bacterial form is highly penicillin-sensitive (Ki - 4 X 10(-9) M penicillin G). Inhibition is only partly reversible by treatment with penicillinase or by dialysis against buffer. In contrast, the DD-carboxypeptidase of the unstable L-form, grown in the presence of penicillin, is 175-fold less penicillin-sensitive (Ki = 7 X 10(7) M penicillin G). Inhibition is completely reversed by penicillinase or dialysis. After inhibition by penicillin and subsequent reactivation the penicillin sensitivity of the bacterial DD-carboxtpeptidase is similar to the sensitivity of the enzyme of the unstable L-form. The hypothesis is proposed that P. mirabilis contains two DD-carboxypeptidases of different penicillin sensitivity and with different mechanisms of penicillin binding. Peptidoglycan synthesis in the cell walls of the unstable L-form is probably carried out with the help of only one DD-carboxypeptidase, viz. the completely reactivatable enzyme with the lower penicillin sensitivity.
Màng của vi khuẩn và dạng L ổn định và không ổn định của Proteus mirabilis chứa LD và DD-carboxypeptidase. DD-carboxypeptidase bị ức chế không cạnh tranh bởi penicillin G. Enzyme của dạng vi khuẩn nhạy cảm với penicillin cao (Ki-4 X 10 (- 9) M penicillin G).
NAD kinase was purified from pigeon liver by an improved procedure which included chromatography on phosphocellulose. The resultant preparation was homogeneous as judged by gel electrophoresis, but electrofocusing gave indications of heterogeneity. The enzyme appeared to be of molecular weight 270000, and to consist of subunits of molecular weight 34000; it may therefore be an octomer. Kinetic studies over a wide range of substrate concentrations revealed departures from Michaelis-Menten behaviour with the substrate NAD+; these were interpreted tentatively in terms of negative homotropic interactions between identical binding sites, since thermal and chemical inactivation studies revealed no evidence for more than one type of catalytic site. The significance of the kinetics and of the type of inhibition produced by NADPH is discussed in terms of the regulation of NAD kinase activity in vivo.
NAD kinase được tinh sạch từ gan bồ câu bằng một quy trình cải tiến bao gồm sắc ký trên phosphocellulose. Kết quả điều chế enzyme là đồng nhất khi đánh giá bằng điện di gel, nhưng tập trung điện cho thấy sự không đồng nhất. Enzym có trọng lượng phân tử 270000 và bao gồm các tiểu đơn vị có trọng lượng phân tử 34000; do đó nó có thể là một octome. Các nghiên cứu động học trên một loạt các nồng độ chất nền cho thấy sự khác biệt với hành vi Michaelis-Menten với
The effect of acid-base alterations was analyzed using isolated rat hearts perfused at constant coronary perfusion pressure, and stimulated to contract at constant rat. The amount of shortening in the major axis and its derivative were measured to assess myocardial contractility. Both the 'respiratory' and 'metabolic' alterations affected the contractile behavior to the same extent. In the physiological range studied by us, acidosis depresses and alkalosis increases myocardial contraction. However acidosis seems to depress contractility more than the enhancement produced by the same change in pH towards the alkalotic side. When either amount of shortening or max dl/dt was plotted as a function of hydrogen ion acitvity (aH+) a linear correlation was obtained, either with pure 'metabolic' or 'respiratory' acid-base induced alterations (correlation coefficients higher than -.95; P less than .01). Our findings suggest that in the range studied by us, contraction of the perfused rat heart following acid-base alterations, is a linear function of hydrogen ion activity.
Sự thay đổi acid-base được phân tích bằng cách sử dụng tim chuột cô lập được truyền ở áp suất tưới máu mạch vành không đổi và kích thích co bóp ở chuột không đổi. Lượng ngắn trục chính và dẫn xuất của nó được đo để đánh giá khả năng co bóp của cơ tim. Cả hai thay đổi " hô hấp " và " chuyển hóa " đều ảnh hưởng đến hành vi co bóp ở cùng một mức độ. Trong phạm vi sinh lý học mà chúng tôi nghiên cứu, nhiễm toan làm giảm và nhiễm kiềm làm tăng sự co bóp của cơ tim. Tuy nhiên, nhiễm toan dường như làm giảm khả
21 patients with cirrhosis of the liver and 24 control patients were studied before and after a protein load (120 g protein per day during one week). An EEG was recorded and a visual assessment of frequency pattern was performed. Venous admixture was estimated during hyperoxia. According to the EEG frequency pattern the patient group with cirrhosis was subdivided into those with EEG slowing after the protein load (n = 7) and those without (n = 14). The following results were obtained: 1) Resting arterial blood gases did not change in either group. 2) There was a significant increase of the AaD02 (difference between alveolar p02 and peripheral arterial p02) in cirrhotics and controls. 3) The increase in AaD02 was significantly larger in those cirrhotics showing EEG slowing compared to those without EEG - slowing or to the controls. 4) Fractional venous admisture increased significantly in those cirrhotics showing EEG slowing. There was no significant change in those patients who did not show EEG changes or in the controls.
21 bệnh nhân xơ gan và 24 bệnh nhân không xơ gan được nghiên cứu trước và sau khi nạp protein (120 g protein/ngày trong 1 tuần ). Điện não đồ được ghi nhận và đánh giá tần số bằng thị giác. Đánh giá sự pha trộn tĩnh mạch gan trong quá trình tăng oxy máu. Theo tần số điện não đồ, nhóm bệnh nhân xơ gan được chia thành nhóm có điện não đồ chậm sau nạp protein (n = 7) và nhóm không có điện não đồ chậm (n = 14).
Two main aspects of the in vitro mouse foetal liver cell assay for Erythroid Stimulating Factor (ESF) in human sera have been investigated. The haem extraction process has been shown to give specific and quantitative recovery of 59Fe labelled haem from haemoglobin thus confirming that the material assayed in human sera is stimulating the synthesis of this protein. The extraction procedure can be simplified considerably by prior mixing of the reagents without significantly influencing the results. Several serum constituents (citrate, testosterone, B12, folic acid and iron) have been investigated over a range of concentrations for possible effects on the cultures. Generally only small effects on haem synthesis were observed. It is concluded that variations in the levels of these factors in sera from treated patients will not produce any significant alterations in the estimated ESF concentrations.
Hai khía cạnh chính của xét nghiệm tế bào gan gan chuột in vitro đối với yếu tố kích thích ESF (ESF) trong huyết thanh người đã được nghiên cứu. Quá trình chiết xuất hemat đã cho thấy sự phục hồi cụ thể và định lượng của 59Fe được dán nhãn hemat từ hemoglobin, do đó khẳng định rằng các chất được khảo sát trong huyết thanh người đang kích thích tổng hợp protein này. Quy trình chiết xuất có thể được đơn giản hóa đáng kể bằng cách trộn các thuốc thử trước đó mà không ảnh hưởng đáng kể đến kết quả. Một số thành
Some derivatives of isoindoline were prepared in order to test their cardiovascular activity. Pharmacological tests showed that some of the compounds had moderate alpha-blocking and coronarodilatory activity whereas others had some local anesthetic activity.
Một số dẫn xuất của isoindoline đã được điều chế để kiểm tra hoạt động tim mạch của chúng. Các thử nghiệm dược lý cho thấy một số hợp chất có hoạt tính chặn alpha và giãn nở trung bình trong khi một số hợp chất khác có hoạt tính gây tê cục bộ.
In white rats both adapted and unadapted to cold, the RQ dynamics during cold exposure, noradrenaline and ganglion blocking agent administration, were studied. The adapted animals' RQ in thermoneutral conditions was shown to be a little higher than in the control rats; 0.5 mg/kg noradrenaline injections induced a clear RQ decrease in the former and did not influence the latters' RQ. Cold exposure was followed by a RQ decrease in both. Ganglion blocking agent administration decreased the RQ in the adapted animals and prevented it from falling in the control those. Noradrenaline is supposed to be the main but not the only factor activating lipolysis in the cold adapted animals.
Nghiên cứu trên chuột cống trắng thích nghi và không thích nghi với lạnh, động lực học RQ trong quá trình tiếp xúc lạnh, tiêm noradrenaline và ức chế hạch. RQ của chuột thích nghi trong điều kiện nhiệt trung tính cao hơn một chút so với chuột đối chứng; tiêm noradrenaline 0,5 mg/kg gây giảm RQ rõ ràng ở chuột thích nghi và không ảnh hưởng đến RQ của chuột. Tiếp xúc lạnh làm giảm RQ ở cả hai đối tượng. Sử dụng chất ức chế hạch làm giảm RQ ở chuột thích nghi và ngăn không cho RQ rơi vào kiểm
A sulfonamide-resistant mutant of pneumococcus, sulr-c, displays a genetic instability, regularly segregating to wild type. DNA extracts of derivatives of the strain possess transforming activities for both the mutant and wild-type alleles, establishing that the strain is a partial diploid. The linkage of sulr-c to strr-61, a stable chromosomal marker, was established, thus defining a chromosomal locus for sulr-c. DNA isolated from sulr-c cells transforms two mutant recipient strains at the same low efficiency as it does a wild-type recipient, although the mutant property of these strains makes them capable of integrating classical "low-efficiency" donor markers equally as efficiently as "high efficiency" markers. Hence sulr-c must have a different basis for its low efficiency than do classical low efficiency point mutations. We suggest that the DNA in the region of the sulr-c mutation has a structural abnormality which leads both to its frequent segregation during growth and its difficulty in efficiently mediating genetic transformation.
Đột biến kháng sulfonamide của phế cầu khuẩn, sulr-c cho thấy sự bất ổn về di truyền, thường xuyên phân tách thành dạng hoang dại. Dịch chiết DNA dẫn xuất của chủng có hoạt tính biến nạp cho cả alen đột biến và alen hoang dã, xác định rằng chủng này là lưỡng bội một phần. Mối liên hệ giữa sulr-c với strr-61, một dấu ấn nhiễm sắc thể ổn định, được thiết lập, từ đó xác định locus nhiễm sắc thể cho sulr-c. DNA phân lập từ tế bào sulr-c
Conditions are described in which the pneumococcal mutant strain sulr-c, resistant to the drug sulfanilamide, gives rise to sensitive segregants resistant to nitrobenzoic acid at a frequency constant with time. This segregant frequency is markedly enhanced upon exposure of the cells to doses of ultraviolet light or mitomycin C that permit survival of 50% to 90% of the cells. Treatment with acridine orange diminishes the segregant frequency. From the known influences of these three agents on genetic recombination, we propose that a recombination event is necessary in the generation of segregants.--During a period of incubation following treatment with ultraviolet light or mitomycin C, cell division resumes and the original segregant frequency is restored. Thus potential segregants are either unable to replicate in the absence of selection, or they are under-represented among the cells dividing soon after treatment.--If the sulr-c mutation is introduced into a mutant pneumococcal strain lacking an ATP-dependent exonuclease activity and deficient in recombination with transforming DNA, segregant frequencies are unaffected. This fact may indicate limits upon the type of recombination event responsible for segregation.
Trong điều kiện nghiên cứu, chủng phế cầu khuẩn sulr-c, kháng thuốc sulfanilamide, đã tạo ra các chất kết tập nhạy cảm kháng acid nitrobenzoic với tần số không đổi theo thời gian. Tần số của chất kết tập này được tăng cường rõ rệt khi tế bào tiếp xúc với liều tia cực tím hoặc mitomycin C cho phép tế bào sống sót từ 50% đến 90 %. Điều trị bằng cam acridine làm giảm tần số của chất kết tập. Từ ảnh hưởng đã biết của ba chất này đối với sự tái tổ hợp di truyền, chúng tôi
A patient is reported with mast cell infiltration of the small intestine in the absence of the skin involvement characteristic of mast cell disease. She also had subtotal villous atrophy responsive to a gluten-free diet. Criteria for diagnosing mast cell disease of the small intestine are proposed. The literature of small intestinal mast cell disease is reviewed and the relationship to coeliac disease is discussed.
Bệnh nhân được ghi nhận có sự xâm nhập của tế bào mast vào ruột non trong trường hợp không có sự liên quan đến da đặc trưng của bệnh tế bào mast. Cô cũng bị teo lông nhung dưới mức đáp ứng với chế độ ăn không có gluten. Tiêu chuẩn chẩn đoán bệnh tế bào mast của ruột non được đề xuất. Tài liệu về bệnh tế bào mast ruột non được xem xét và mối liên quan với bệnh celiac được thảo luận.
The microflora and pH of gastric contents were determined in breast-fed and in bottle-fed normal infants, in well nourished infants with acute diarrhoea and in infants with chronic diarrhoea and protein-calorie malnutrition. The last group of infants was reevaluated after recovery from diarrhoea and protein-calorie malnutrition. A bactericidal pH effect below 2-5 was observed. Bottle-fed controls had low pH values and low bacterial concentrations, whereas infants with chronic diarrhoea and protein-calorie malnutrition had high pH values and bacterial overgrowth, essentially of Gram-negative bacilli. After recovery, the only remaining alteration was the frequent isolation of yeast-like fungi in low concentrations. Infants with acute diarrhoea, except for the isolation more frequently of yeast-like fungi, presented no alterations; this seems to indicate that pH alterations and Gram-negative bacilli overgrowth occurred during the evolution of the disease to a chronic state. Breast-fed normal infants had hydrogen-ion concentrations similar to those of the chronic diarrhoea group, but without Gram-negative bacilli overgrowth, suggesting that other factors, besides pH, regulate bacterial growth in the gastric contents of these groups of infants.
Hệ vi sinh vật và pH của dịch vị được xác định ở trẻ bú mẹ và bú bình, ở trẻ bị tiêu chảy cấp và ở trẻ bị tiêu chảy mạn và suy dinh dưỡng protein. Nhóm trẻ cuối cùng được đánh giá lại sau khi phục hồi sau tiêu chảy và suy dinh dưỡng protein. Hiệu quả pH diệt khuẩn dưới 2-5 được ghi nhận. Nhóm bú bình có pH và nồng độ vi khuẩn thấp, trong khi nhóm tiêu chảy mạn và suy dinh dưỡng protein có pH và sự phát triển quá mức của vi khuẩn, chủ yếu là trực khuẩn Gram âm. Sau khi phục hồi, sự thay đổi duy nhất còn lại là sự phân lập thường xuyên của các loại nấm giống men ở nồng độ thấp. Trẻ bị tiêu chảy cấp, ngoại trừ sự phân lập thường xuyên hơn của các loại nấm giống men, không có sự thay đổi nào; điều này dường như chỉ ra rằng sự thay đổi pH và sự phát triển quá mức của trực khuẩn Gram âm xảy ra trong quá trình tiến hóa của bệnh đến trạng thái mãn tính. Trẻ bình thường bú sữa mẹ có nồng độ hydro-ion tương tự như nhóm tiêu chảy mạn, nhưng không có sự phát triển quá mức của trực khuẩn Gram âm, cho thấy các yếu tố khác, ngoài pH, điều chỉnh sự phát triển của vi khuẩn trong dịch vị của các nhóm trẻ này.
Adrenaline-induced gastric ulceration was studied in rats. Adrenaline in high doses caused gastric ulcer, which was completely blocked by pretreatment with alpha-blockers (phenoxybenzamine, dibenamine), but not by pretreatment with propranolol or atropine, nor by vagotomy, hypophysectomy or adrenalectomy. After successive administration of adrenaline, once daily for 7 days, however, no gastric ulcer was observed. Recovery from the ulcerogenic action of adrenaline was seen after 4 weeks withdrawal. Pretreatment with a small dose of adrenaline inhibited the ulcerogenic action of a high dose of adrenaline. Pretreatment with reserpine, pyrogallol or iproniazid inhibited the action of adrenaline. It is concluded that adrenaline has a biphasic effect on gastric ulceration, the ulcerogenic action is due to its alpha-action and antiulcerogenic effect is due to development of tachyphylaxis.
Loét dạ dày do adrenaline được nghiên cứu trên chuột nhắt trắng. Adrenaline ở liều cao gây loét dạ dày, bị chặn hoàn toàn bằng tiền xử lý bằng thuốc chẹn alpha (phenoxybenzamine, dibenamine) nhưng không phải bằng tiền xử lý bằng propranolol hoặc atropine, cũng không phải bằng phẫu thuật cắt âm đạo, cắt bỏ niêm mạc hoặc cắt tuyến thượng thận. Sau khi liên tiếp cho adrenaline uống, mỗi ngày một lần trong 7 ngày, không thấy loét dạ dày. Sự phục hồi sau tác dụng gây loét của adrenaline được ghi nhận sau 4 tuần cai
Adrenaline and isoproterenol elicited nearly maximal relaxation of the colon even in small doses, whereas increase in the doses caused greater relaxation in the duodenum. In the colon, these drugs prevented, to a great extent the contraction induced by acetylcholine (ACh) and serotonin but in the duodenum were totally ineffective. Dibenamine and propranolol reduced adrenaline- and isoproterenol-induced relaxation in the duodenum, though propranolol decreased the relaxation caused by isoproterenol. Atropine prevented ACh-induced contraction in both the colon and duodenum in the same way. After 2-bromolysergic acid diethylamide, duodenal contraction caused by ACh or serotonin decreased by over 70%; however, the contraction of the colon was not significantly inhibited. Methysergide had similar effects, but to a lesser degree. In calcium-free bathing fluid without addition of Na2EDTA, ACh and prostaglandin E1 elicited contraction in the colon, but not in the duodenum.
Adrenaline và isoproterenol làm giãn đại tràng gần như tối đa ngay cả ở liều nhỏ, trong khi tăng liều gây giãn đại tràng nhiều hơn ở tá tràng. Ở đại tràng, các thuốc này ngăn chặn phần lớn sự co thắt do acetylcholine (ACh) và serotonin nhưng ở tá tràng hoàn toàn không hiệu quả. Dibenamine và propranolol làm giảm sự thư giãn do adrenaline và isoproterenol gây ra ở tá tràng, mặc dù propranolol làm giảm sự thư giãn do isoproterenol gây ra. At
Enzymic properties of monoamine oxidase (MAO) in dog serum were studied and the following results were obtained. Some of enzymic properties of MAO in dog serum differed from that of mitochondrial MAO. When dog serum was fractionated by ammonium sulfate, proteins were concentrated in two fractions, such as 25 approximately 33% and 67 approximately 80% of saturated ammonium sulfate fraction, while MAO activity was concentrated in 40 approximately 50% of saturated ammonium sulfate fraction. The reaction rate of MAO in dog serum was found to be proportional to enzyme concentration. The optimum pH of MAO in dog serum was 7.0 which differed from that of MAO in rabbit serum (pH 8.0). Tris-HCl buffer strongly inhibited MAO activity in dog serum. When benzylamine was used as substrate, the highest activity was obtained compared with the other substrate used. The activities with butylamine, amylamine, beta-phenylethylamine and tyramine showed about 30% while tryptamine and serotonin showed 3 approximately 10% compared to that with benzymlamine as substrate. The value of pI50 of catron was about 3 X 10(-6) M and that of harmaline was about 3 X 10(-5) M, but pargyline did not inhibit MAO activity in dog serum at the concentration of 1 X 10(-4) M.
Các đặc tính enzyme của enzyme monoamin oxidase (MAO) trong huyết thanh chó được nghiên cứu và thu được kết quả như sau. Các đặc tính enzyme của MAO trong huyết thanh chó khác với MAO ty thể. Khi phân đoạn bằng amoni sunfat, protein được tập trung ở hai phân đoạn, như 25 (khoảng 33% ) và 67 (khoảng 80% ) amoni sunfat bão hòa, trong khi hoạt tính của MAO tập trung ở 40 (khoảng 50% ) amoni sunfat bão hòa. Tốc độ phản ứng của MAO trong huyết thanh chó tỷ lệ thuận với nồng độ enzyme. Độ pH tối ưu của MAO trong huyết thanh chó là 7,0 (khác với MAO trong huyết thanh thỏ (pH 8,0 ). Tris-HCl đệm ức chế mạnh hoạt tính MAO trong huyết thanh chó. Khi sử dụng chất nền benzylamine, hoạt tính đạt được cao nhất so với các chất nền khác được sử dụng. Hoạt tính với butylamine, amylamine, beta-phenylethylamine và tyramine cho thấy khoảng 30% trong khi tryptamine và serotonin cho thấy khoảng 10% so với với benzymlamine làm chất nền. Giá trị pI50 của catron là khoảng 3 X 10 (-6) M và của harmaline là khoảng 3 X 10 (-5) M, nhưng pargyline không ức chế hoạt tính MAO trong huyết thanh chó ở nồng độ 1 X 10 (-4) M.
A combination of two or more drugs may exert a drug-drug interaction, in which case the effect can be potentiated or antagonized. Such synergistic effects are well known in the case of pyrabital (barbital + aminopyrine) or irgapyrine (phenylbutazone + aminopyrine). Bucolome (BCP), a non-steroidal anti-inflammatory agent, has the chemical structure of a barbiturate and also resembles the formula of pheylbutazone. Thus the influence of BCP combination on the pharmacological activities of various pyrazolone derivatives was examined. BCP potentiated the analgesic and antipyretic effects of 4-aminoantipyrine (4A), methylaminoantipyrine (MA), aminopyrine (AM) and isopropylaminoantipyrine (IPA), which were substituted by the alkylamino group at 4-position of the pyrazolone ring. This potentiation occurred when the dose of BCP exceeded that of the pyrazolones, and was especially marked when combination ratio of BCP exceeded that of the pyrazolones, and was especially marked when combination ratio of BCP and pyrazolone was 2:1 mola. The analgesic effects of antipyrine (AN), isopropylantipyrine (IP) and aminopropylone (AP), which were substituted by alkyl group or aminoacylamino group at 4-position, were not potentiated by BCP in any combination ratio. Most pyrazolones showed additive acute toxicity in their combination with BCP, but acute toxicities of 4A and AM, which were potentiated in analgesic effects, were decreased and antagonized when combined with BCP. The plasma concentration of AM was increased and prolonged by BCP, while that of IP remained much the same. These results suggest that the pharmacological activities are associated with certain molecular interactions between BCP and pyrazolones, which are substituted by the alkylamino group at 4-position of the pyrazolone ring.
Sự kết hợp của hai hay nhiều thuốc có thể tạo ra tương tác thuốc, trong trường hợp này tác dụng có thể tăng lên hoặc đối kháng với thuốc. Tác dụng hiệp đồng này đã được biết đến trong trường hợp thuốc Pyrabital (barbital + aminopyrine) hoặc thuốc Irgaccorrine (phenylbutazone + aminopyrine ). Bucolome (BCP) là một chất kháng viêm không steroid, có cấu trúc hóa học của một barbiturat và cũng giống với công thức của pheylbutazone. Do đó, ảnh hưởng của sự kết hợp BCP đến hoạt tính dược lý của các dẫn xuất pyrazolone đã được khảo sát. BCP đã làm tăng tác dụng giảm đau và hạ sốt của 4-aminoantipyrine (4A); methylaminoantipyrine (MA); aminopyrine (AM); isopropylaminoantipyrine (IPA); được thay thế bằng nhóm alkylamino tại vị trí 4 của vòng pyrazolone. Sự tăng tác dụng này xảy ra khi liều BCP vượt quá liều của nhóm pyrazolone và đặc biệt rõ rệt khi tỷ lệ kết hợp của BCP và pyrazolone là 2: 1 mola. Tác dụng giảm đau của antipyrine (AN); isopropylantipyrine (IP); aminopropylone (AP) được thay thế bằng nhóm alkyl hoặc nhóm aminoacylamino tại vị trí 4 không được BCP tăng lên theo bất kỳ tỷ lệ kết hợp nào. Đa số các thuốc nhóm pyrazolone đều có độc tính cấp khi kết hợp với BCP, nhưng độc tính cấp của nhóm 4A và nhóm AM, vốn đã tăng lên tác dụng giảm đau, lại giảm đi và đối kháng với BCP khi kết hợp với BCP. Nồng độ AM tăng lên và kéo dài hơn khi kết hợp với BCP, trong khi đó nồng độ IP vẫn giữ nguyên. Kết quả này gợi ý rằng hoạt tính dược lý có liên quan đến một số tương tác phân tử giữa BCP và pyrazolone, được thay thế bằng nhóm alkylamino tại vị trí 4 của vòng pyrazolone.
We have already reported that bucolome (BCP), a non-steroidal anti-inflammatory agent, potentiates significantly the analgesic and antipyretic effects of pyrazolones which are substituted by alkylamino group at 4-position of the pyrazolone ring. Physical and quantum chemistry were applied to the mechanism of this synergistic action. The solubility of BCP was markedly increased in proportion to elevation of aminopyrine (AM) concentration, but not by a combination with isopropylantipyrine (IP). The binding of BCP to bovine serum albumin was slightly inhibited by AM, but not by IP. The mixture of AM and BCP in aqueous media generated optical absorption in the ultraviolet differential spectrum, due to the charge transfer interaction. The results of the infrared or NMR spectrum demonstrated the formation of a hydrogen binding in non-aqueous media between BCP and AM. From the calculation of the charge on an atom, the energy of the highest occupied molecular orbital and the frontier electron density, BCP is considered to be a good electron acceptor. The beta-units of Mho of pyrazolones were found to correlate with the potentiation coefficient of analgesic activity in combination drugs. These results suggest that the complex formation between BCP and pyrazolones is an important factor for the synergism of action and is due to the charge transfer interaction and the hydrogen binding of both molecules.
Chúng tôi đã báo cáo rằng bucolome (BCP) là một chất kháng viêm không steroid, có tác dụng giảm đau và hạ sốt đáng kể của pyrazolones, được thay thế bằng nhóm alkylamino ở vị trí 4 của vòng pyrazolone. Các chất hóa lý và lượng tử đã được áp dụng cho cơ chế hoạt động hiệp đồng này. Độ hòa tan của BCP tăng rõ rệt theo tỷ lệ tăng nồng độ aminopyrine (AM ), nhưng không phải do kết hợp với isopropylantipyrine (IP ). Sự gắn kết của B
FDP aldolase was found to be present in the cell-free extracts of Rhizobium leguminosarum, Rhizobium phaseoli, Rhizobium trifolii, Rhizobium meliloti, Rhizobium lupini, Rhizobium japonicum and Rhizobium species from Arachis hypogaea and Sesbania cannabina. The enzyme in 3 representative species has optimal activity at pH 8.4 in 0.2M veronal buffer. The enzyme activity was completely lost by treatment at 60 degrees C for 15 min. The Km values were in the range from 2.38 to 4.55 X 10(-6)M FDP. Metal chelating agents inhibited enzyme activity, but monovalent or bivalent metal ions failed to stimulate the activity. Bivalent metal ions in general were rather inhibitory.
FDP aldolase được tìm thấy trong dịch chiết không có tế bào của các loài Rhizobium leguminosarum, Rhizobium phaseoli, Rhizobium trifolii, Rhizobium meliloti, Rhizobium lupini, Rhizobium japonicum và Rhizobium từ cây Arachis hypogaea và Sesbania cannabina. Hoạt tính của enzyme ở 3 loài đại diện có pH 8,4 trong đệm veronal 0,2M. Hoạt tính của enzyme bị mất hoàn toàn khi xử lý ở
In the presence of amino sugars D-glucosamine and D-galactosamine no spontaneous competence could be observed in the highly transformable R6bd strain of Pneumococcus or it was decreased by several orders of magnitude. The highest inhibition of competence was detected when the amino sugar at a concentration 5 mg/ml of the medium was added not only to the transformation but also to the pretransformation medium. After a 150 min growth in the transformation medium in the presence of the amino sugar a 3--4-fold greater number of cells (as a viable count) could be detected as compared with the control without the amino sugar. It was found microscopically that the amino sugar prevents natural agglutination, which normally occurs in the competent culture. The role of specific amino sugar determinants for binding of the competence factor on the cell surface and the resulting inhibitory effect of these sugars on the development of competence are discussed.
Với sự có mặt của đường amino D-glucosamine và D-galactosamine, không thể quan sát thấy khả năng tự phát của chủng phế cầu khuẩn R6bd có khả năng biến nạp cao hoặc bị giảm đáng kể về cường độ. Sự ức chế khả năng tự phát cao nhất được phát hiện khi đường amin ở nồng độ 5 mg/ml môi trường được thêm vào không chỉ quá trình biến nạp mà còn vào môi trường tiền biến nạp. Sau 150 phút tăng trưởng trong môi trường biến nạp, với sự có mặt của đường amin, số lượng tế bào có thể tăng gấp 3-4
The inhibitory effect of molybdenum ions on growth of yeasts at pH 5.5 was found to be decreased by aldoses in the following order: D-talose greater than L-mannose greater than L-ribose greater than D-lyxose greater than L-galactose greater than L-arabinose greater than L-glucose greater than L-xylose. Increased concentrations of molybdenum brought about morphological changes of yeast cells. Cells grown under these conditions were smaller, had thicker walls and formed clusters.
Tác dụng ức chế sự phát triển của ion molypden đối với nấm men ở pH 5,5 được tìm thấy là giảm bởi aldose theo thứ tự sau: D-talose lớn hơn L-mannose lớn hơn L-ribose lớn hơn D-lyxose lớn hơn L-galactose lớn hơn L-arabinose lớn hơn L-glucose lớn hơn L-xylose. Nồng độ molypden tăng lên đã gây ra những thay đổi về hình thái của tế bào nấm men. Tế bào phát triển trong điều kiện này nhỏ hơn, có thành dày hơn và
The glucose transport system of membrane vesicles isolated from Acholeplasma laidlawii is saturable, with a Km of 21.2 mum and V of 0.68 nmol min-1 (mg protein)-1. The process is pH-dependent and a break occurs in the Arrhenius plot at 15 degrees C. Exogenous substrates did not stimulate glucose transport probably due to their inability to penetrate into membrane vesicles. 3-O-Methylglucose and 6-deoxyglucose competitively inhibited glucose transport. Maltose inhibited transport of glucose noncompetitively. These sugars also elicited glucose efflux from preloaded membrane vesicles.
Hệ thống vận chuyển glucose của túi màng phân lập từ Acholeplasma laidlawii bão hòa được, với Km 21,2 mum và V 0,68 nmol min-1 (mg protein) -1. Quá trình này phụ thuộc pH và sự phá vỡ xảy ra ở Arrhenius ở 15 độ C. Các chất nền ngoại sinh không kích thích vận chuyển glucose có lẽ do không có khả năng xâm nhập vào túi màng. 3-O-Methylglucose và 6-deoxyglucose ức chế cạnh tranh vận chuyển glucose. Các đường này cũng ức chế vận
Tritium-labelled 4-deoxy-D-glucose (4-dglc) and 6-deoxy-D-glucose (6-dgcl) were prepared by catalytic hydrogenolysis of the corresponding deoxyiodo derivatives with gaseous tritium. The two sugars are transported into Saccharomyces cerevisiae by both the constitutive glucose and the inducible galactose carrier. Uranyl ions are powerful inhibitors. The pH optimum in uninduced cells lies at 5.5 for both sugars, the apparent activation energies (between 15 and 35 degrees C) are 25.1 kJ/mol and 16.5 kJ/mol, respectively. The steady-state intracellular concentration of both sugars is less than the extracellular one (no uphill transport). Neither of them is a substrate of yeast hexokinase. 4-Deoxy-D-glucose undergoes a dinitrophenol-sensitive conversion to an unknown metabolite which is not phosphorylated and may represent one of its oxidation products.
Triti 4-deoxy-D-glucose (4-dglc) và 6-deoxy-D-glucose (6-dgcl) được điều chế bằng cách xúc tác hydrolysis các dẫn xuất deoxyiodo tương ứng với khí triti. Hai loại đường này được vận chuyển vào Saccharomyces cerevisiae bằng cả glucose cấu thành và galactose cảm ứng. Các ion Uranyl là chất ức chế mạnh. Độ pH tối ưu trong tế bào không gây ra là 5,5 cho cả hai loại đường, năng lượng hoạt hóa biểu kiến
Twenty-five Penicillium species isolated from Egyptian soil were examined for their ability to produce gluconic acid in surface culture. Of the eight species capable of producing gluconic acid, Penicillium puberulum gave the maximum yield (91% gluconic acid from glucose after 7 days of fermentation with 3% CaCO3). Peptone was the best nitrogen source for acid fermentation and glucose was superior to sucrose. Addition of low concentrations of KH2PO4 and MgSO4 - 7 H2O stimulated acid production. An initial pH of 6.1 was most favourable for acid accumulation and addition of CaCO3 was necessary for maximum acid production.
25 loài Penicillium phân lập từ đất Ai Cập đã được khảo sát khả năng sản xuất acid gluconic trong nuôi cấy bề mặt. Trong số 8 loài có khả năng sản xuất acid gluconic, Penicillium puberulum cho năng suất tối đa (91% acid gluconic từ glucose sau 7 ngày lên men với 3% CaCO3). Peptone là nguồn nitrogen tốt nhất cho lên men acid và glucose vượt trội so với sucrose. Việc bổ sung KH2PO4 nồng độ thấp và MgSO4-7 H2O kích thích sản
A simple method of isolation and purification of cultures of higher fungi, mainly wood-rotting fungi, without special requirements for the presence of nitrogencontaining nutrients is described. Parts of fruiting bodies, spores or infected wood is inoculated on Petri dishes with an agar medium of the following composition: 1.0 g KH2PO4, 0.2 g MgSO4 - 7 H2O, 0.1 g caSO4, 0.01 g Fe2(SO4)3, 10.0 g glucose, tap water to 1 litre; 20.0 g agar. This medium does not suit most of the contaminants but fungal hyphae overgrow the whole surface of the dish so that a purified culture can be obtained from parts distant from the inoculation site.
Mô tả một phương pháp đơn giản để phân lập và tinh chế các chủng nấm bậc cao, chủ yếu là nấm mục gỗ, không có yêu cầu đặc biệt về sự có mặt của các chất dinh dưỡng chứa nitrogencon. Các bộ phận của cơ thể quả, bào tử hoặc gỗ bị nhiễm bệnh được cấy trên đĩa Petri với môi trường thạch có thành phần sau: 1,0 g KH2PO4, 0,2 g MgSO4-7 H2O, 0,1 g caSO4, 0,01 g Fe2 (SO4) 3,
This report concerns the feasibility of low volume priming extracorporeal circulation. Through this study, the bubble oxygenator with Zuhdi's heat exchange was used. Moderate hypothermia with surface cooling and hemodilution perfusion with 5 per cent D/W was evaluated in 32 mongrel dogs and 16 clinical open heart cases. The results obtained here were as follow: 1) Body temperature reduction by surface cooling before bypass provided more even cooling than did core cooling by low flow partial bypass alone. 2) In regard to cardiac loading on returning the whole perfusate of the circuit to patient, approximately 20 ml/kg of 5 per cent D/W was feasible as a priming solution. 3) To reduce the blood visicosity, hemodilution technique with 5 per cent D/W was superior, and hemodilution effect during postoperative periods was temporaly. 4) The excess lactate volume postulated by Huckabee was a available index to evaluate metabolic acidosis during the extracorporeal circulation. 5) With aid of surface cooling, the acid-base balance during perfusion was kept to lesser extent than that of core cooling only. 6) This study indicated that the low priming perfusion in conjunction with surface cooling hypothermia was a reliable technique for the open heart operation and may be applied in more prolonged perfusion.
Nghiên cứu này đánh giá tính khả thi của phương pháp điều trị ngoại bào bằng phương pháp khởi động thể tích thấp. Sử dụng máy tạo ô xy bong bóng trao đổi nhiệt Zuhdi. Đánh giá giảm thân nhiệt vừa bằng phương pháp làm lạnh bề mặt và tưới máu pha loãng 5% D/W trên 32 bệnh nhân chó lai và 16 bệnh nhân tim hở. Kết quả như sau: 1) Giảm thân nhiệt bằng phương pháp làm lạnh bề mặt trước phẫu thuật làm lạnh bề mặt trước phẫu thuật giúp giảm thân nhiệt đều hơn so với phương pháp làm lạnh trung tâm đơn thuần bằng dòng chảy thấp. 2) Đối với tải trọng tim khi trả lại toàn bộ màng nhầy của mạch cho bệnh nhân, phương pháp khởi động khả thi với liều lượng khoảng 20 ml/kg thể tích 5% D/W. 3) Để giảm thể tích bề mặt máu, phương pháp pha loãng với 5% D/W là ưu việt, hiệu quả pha loãng trong thời gian sau phẫu thuật là tạm thời. 4) Thể tích lactate dư thừa theo Huckabee là một chỉ số sẵn có để đánh giá nhiễm toan chuyển hóa trong quá trình tuần hoàn ngoài cơ thể. 5) Với sự hỗ trợ của phương pháp làm lạnh bề mặt, cân bằng acid-base trong quá trình tưới máu được giữ ở mức thấp hơn so với chỉ làm lạnh trung tâm. 6) Nghiên cứu này chỉ ra rằng việc tưới máu pha loãng kết hợp với hạ thân nhiệt thể tích thấp là một kỹ thuật đáng tin cậy cho phẫu thuật tim hở và có thể áp dụng kéo dài hơn.
Twenty mongrel dogs, weighing between 7.5 and 13.0 kg were used to investigate the percentage limits permissible for hemodilution using a double-helical reservoir heart-lung machine which has a 1,100 ml of priming volume. In both 40 and 50 per cent groups of intentional hemodilution by 30 minute extracorporeal circulation, remarkable anemia was inevitable and recovery was extremely slow, especially in the 50 per cent dilution group. In both 40 and 50 per cent groups of intentional hemodilutions by 30 minute extracorporeal circulation, metabolic acidosis was observed. In 50 per cent group of intentional hemodilution, no improvement of metabolic acidosis was observed even after perfusion. When sodium bicarbonate was administered to 40 per cent hemodilution group, minimum alterations of acid-base balance and of serum electrolytes were observed during and after extracorporeal perfusion. When sodium bicarbonate was administered to 50 per cent hemodilution group, metabolic acidosis was more evident than in 40 per cent hemodilution group accompanied with an increase in serum sodium concentration and a decrease in serum chloride concentration. These data qualify the use of 40 per cent intentional hemodilution using Lactate Ringer's solution or low molecular weight dextran for 30 minute extracorporeal circulation when sodium bicarbonate is administered in adequate amounts.
20 con chó lai, nặng từ 7,5 đến 13,0 kg được sử dụng để khảo sát giới hạn phần trăm cho phép trong điều trị ngoại bào bằng máy tim phổi hai tháp có dung tích mồi 1.100 ml. Trong cả hai nhóm điều trị ngoại bào có chủ đích 40 và 50% thời gian lưu thông máu ngoài cơ thể 30 phút đều không thể thiếu máu và thời gian phục hồi rất chậm, đặc biệt ở nhóm pha loãng 50 %. Trong cả hai nhóm điều trị ngoại bào có chủ đích 40 và 50% thời gian lưu thông máu ngoài
A procedure for the purification of phosphodiesterase from Crotalus venom on DEAE-cellulose at alkaline pH is described. The enzyme gives a single band in polyacrylamide gels and is free of contaminating nucleolytic enzymes. The molecular weight is about 115000. Concentration in an Amicon ultrafiltrator gave a highly concentrated active enzyme. Phosphodiesterase is relatively stable and can be stored at 4 degrees C in the presence of Mg2 and serum albumin for years. For the detection of contaminating endonuclease, an assay was used in which tRNA was the substrate and possible internal breaks were detected in polyacrylamide gel after denaturation. With bis(p-nitrophenyl) phosphate as substrate, 15mM Mg2 was necessary for optimal activity. The reaction remained linear for at least 15 min at 22 degrees C. At 45 degrees C, the liberation of p-nitrophenol was highest within 25 min of incubation. At 75 degrees C, inactivation of the enzyme occurred after 4 min.
Nghiên cứu đã xây dựng quy trình tinh sạch phosphodiesterase từ nọc độc Crotalus trên gel polyacrylamide ở pH kiềm. Enzym tạo ra một dải đơn trong gel polyacrylamide và không gây ô nhiễm cho các enzyme phân giải nhân. Trọng lượng phân tử khoảng 115000. Nồng độ trong máy siêu lọc Amicon cho hoạt tính enzyme có nồng độ cao. Phosphodiesterase tương đối ổn định và có thể lưu trữ ở 4 độ C với sự có mặt của Mg2 và albumin huyết thanh trong nhiều năm. Để
Digestion of tRNA by electrophoretically pure phosphodiesterase is limited to a short sequence of nucleotides at the 3'-terminus. On the average, four percent of all nucleotides can be released from tRNA. The optimum Mg2 concentration is 10mM and the optimum pH 9.2. The mode of action is a random attack by the enzyme on the substrate. The terminal AMP is completely removed at 15 degrees C after short incubation; about 400 mol of AMP were removed per min by 1 mol of enzyme. The following CMP residues are released much more slowly; at 15 degrees C incompletely, and at 37 degrees C more or less completely in 1 h. In about 50% of the tRNA molecules, the fourth nucleotide could be removed in very long incubations or with very high enzyme concentrations.
Việc tiêu hóa tRNA bằng phosphodiesterase tinh khiết về mặt lý thuyết bị giới hạn ở một chuỗi ngắn các nucleotide ở điểm cuối 3 '-terminus. Trung bình, bốn phần trăm tất cả các nucleotide có thể được giải phóng khỏi tRNA. Nồng độ Mg2 tối ưu là 10mM và pH tối ưu là 9,2. Phương thức hoạt động là một cuộc tấn công ngẫu nhiên của enzyme lên cơ chất. AMP cuối cùng được loại bỏ hoàn toàn ở 15 độ C sau khi ủ ngắn; khoảng 40
In the blowfly, the formation of 3-dehydroecdysone from the insect molting hormone ecdysone is catalyzed by an enzyme which carries hydrogen from ecdysone and ecdysterone to oxygen. The enzyme is therefore called "ecdysone oxidase". Two methods are described for the detection of ecdysone oxidase activity, one using a radiolabelled substrate which is separated from the product by thin-layer chromatography after the reaction, and the other using dichloroindophenol, which is discoloured by the redox reaction. The ecdysone oxidase is purified by a factor of 2200 from prepupae of Calliphora erythrocephala using salt precipitation and ion exchange chromatography. The ecdysone oxidase has a Km value for ecdysone of 42muM. The pH optimum is 6.5. The temperature optimum lies at 45 degrees C. The ecdysone oxidase has a molecular weight of 240000.
Ở ruồi hút dầu, sự hình thành 3-dehydroecdysone từ hormone tiết ra côn trùng ecdysone được xúc tác bởi enzyme mang hydro từ ecdysone và ecdysterone đến oxy. Do đó enzyme này được gọi là "ecdysone oxidase". Hai phương pháp được mô tả để phát hiện hoạt tính của ecdysone oxidase, một phương pháp sử dụng chất nền phóng xạ được tách ra khỏi sản phẩm bằng sắc ký lớp mỏng sau phản ứng, phương pháp còn lại sử dụng dichloroindophenol bị đổi màu do phản ứng oxi hoá khử
An outpatient with phobias related to enclosed places, hospitals, doctors, and cancer was treated by systematic desensitization; the facilities of a general hospital were used for part of the process. Steps in treatment included securing a complete psychiatric and social history, teaching the patient relaxation therapy techniques, and establishing a hierarchy of anxiety-provoking stimuli specifically related to the patient's fears. After desensitization the patient was able to enter the hospital for tests for a physical ailment and showed a general decrease in her fears.
Bệnh nhân ngoại trú với các ám ảnh liên quan đến những nơi kín đáo, bệnh viện, bác sĩ và ung thư được điều trị bằng phương pháp giải mẫn cảm có hệ thống; các cơ sở vật chất của bệnh viện đa khoa cũng là một phần của quá trình điều trị. Các bước điều trị bao gồm đảm bảo đầy đủ tiền sử tâm thần và xã hội, dạy các kỹ thuật trị liệu thư giãn và thiết lập hệ thống các kích thích gây lo âu liên quan đến nỗi sợ hãi của bệnh nhân. Sau khi giải mẫn cảm, bệnh nhân có thể vào bệnh viện để kiểm tra bệnh lý và nỗi sợ
The kinetics and cellular characteristics of immunosuppression in (CBA-p X C57/Bl)F1 mice during graft-versus-host (GVH) reaction induced with spleen cells from either parental strain have been investigated. Effects on PFC responses to thymus-dependent (chicken red blood cells) and independent (levan) antigens have been compared. The unresponsive state which developed in GVH mice was expressed to comparable extent by their spleen cells following transfer to irradiated recipients. Furthermore, GVH spleen cells suppressed normal spleen cells in a mixed transfer system, but this effect was lost completely by day 21 whereas the original donors (or their cells) were still totally refractory after 80 days. This active suppressor effect was found to be mediated by T cells of perental origin based on cell fractionation analysis and selective deletion of donor or host cells by alloimmune attack. The delayed transfer of GVH cells to irradiated repopulated recipients challenged with antigen, indicated that suppressor T cells exert an anti-mitotic influence on antigen-stimulated B-cell proliferation. Supplementation of macrophage-depleted, anti-theta-treated GVH spleen cells with purified normal T cells demonstrated that B cells in GVH mice are normally reactive even when active suppression by T cells is no longer demonstrable. The likelihood that this later phase of immunosuppression is attributable to another mechanism is discussed.
Các đặc điểm động học và tế bào của ức chế miễn dịch ở chuột nhắt trắng (chuột CBA-p X C57/Bl) F1 trong phản ứng ghép chống chủ (GVH) gây ra bởi tế bào lách của một trong hai chủng bố mẹ đã được nghiên cứu. Các tác động lên phản ứng PFC đối với kháng nguyên phụ thuộc tuyến ức (tế bào hồng cầu gà) và kháng nguyên độc lập (levan) đã được so sánh. Tình trạng không đáp ứng phát triển ở chuột nhắt trắng được thể hiện ở mức độ tương đương bởi tế
Opsonization of Streptococcus pneumoniae may be mediated by the alternate complement pathway. To study the importance of this interaction to human disease, complement consumption by pneumococci of various serotypes was measured in humwn serum chelated with ethyleneglycoltraacetic acid, a substance that blocks the classic but not the alternate complement pathwway. Serotype I, in contrast to all other types studied, lacked ability to consume complement in this system. The ability for serotypes III, IV, and VIII to activate the alternate pathway could be eliminated by prior serum absorption at O C with they type in question, a condition that would remove antibody but not complement. Types VII, XII, XIV, and XXV readily activated the alternate pathway in unabsorbed and absorbed sera. Differences could not be related to properties of the capsules. It was concluded that types I, III, IV, and VIII lack intrinsic ability to activate and thus be opsonized by the alternate complement pathway, although types III, IV, and VIII can do so in concert with specific antibody. The fact that these same types are especially prominent in human disease suggests that the ability to evade opsonization by the alternate complement pathway in pre-antibody phases of infection may be a virulence factor in pneumococci.
Sự Opsonin hóa Streptococcus pneumoniae có thể được trung gian bởi con đường bổ sung thay thế. Để nghiên cứu tầm quan trọng của tương tác này đối với bệnh ở người, tiêu thụ bổ sung bằng phế cầu khuẩn của các loại huyết thanh khác nhau được đo bằng dung dịch acid ethyleneglycoltraacetic, một chất ngăn chặn đường dẫn truyền bổ sung kinh điển nhưng không ngăn chặn đường dẫn truyền bổ sung thay thế. Serotype I, trái ngược với tất cả các loại huyết thanh khác được nghiên cứu, thiếu khả năng tiêu thụ bổ sung trong hệ thống này. Khả năng
Mycobacterial growth inhibitory factor (MycoIF), found in supernatant fluids of mouse spleen cell cultures that have been stimulated in vitro with homologous antigen, inhibited the intracellular multiplication of virulent tubercle bacilli within normal mouse peritoneal macrophages in vitro. Antigenically stimulated H37Ra-immunized mouse spleen cells required 72 h of incubation to produce supernatant fluids that would cause intracellular inhibition. Supernatant fluids from 48-h mouse spleen cell cultures were not able to produce intracellular inhibition. Investigation of the culture conditions showed that at lease 1.0% human serum was required in the tissue culture medium for the production of MycoIF by spleen cells from immunized mice. MycoIF activity was noted only in supernatant fluids from spleen cell cultures incubated with antigen for 72 h. MycoIF was nondialyzable and unaffected by freezing, lyophilization, or incubation at 60 C for 30 min. However, MycoIF was inactivated after incubation at 80 C for 30 min. MycoIF was unaffected by low hydrogen ion concentrations (pH 7 to 12), but exposure to higher hydrogen ion concentrations (pH 6, pH 5) significantly decrease MycoIF activity, and exposure to pH 4 to 2 abolished all activity. Supernatant fluids diluted 1:32 were still able to produce significant intracellular inhibition of growth of virulent tubercle bacilli.
Yếu tố ức chế tăng trưởng mycobacterium (MycoIF) được tìm thấy trong dịch nổi của tế bào lách chuột đã được kích thích in vitro với kháng nguyên tương đồng, ức chế sự nhân lên nội bào của trực khuẩn lao độc lực trong đại thực bào phúc mạc chuột bình thường in vitro. Tế bào lách chuột được miễn dịch H37Ra kích thích kháng nguyên cần 72 giờ ủ để tạo ra dịch nổi có thể gây ức chế nội bào. Dịch nổi từ tế bào lách chuột nuôi cấy 48 giờ không thể tạo ra ức chế nội bào. Điều tra
Infections due to Streptococcus pneumoniae and products from the organism have been associated with alterations in blood clotting and function of platelets. Pneumococci and pneumococcal polysaccharide shortened the clotting times of whole blood, platelet-rich plasma (PRP), and platelet-poor plasma (PPP) in vitro. Clotting times of PPP and PRP from C6-deficient animals were likewise decreased. The bacteria had no effect on the one-stage prothrombin time or the partial thromboplastin time when the organisms were used as activating agents. Platelets aggregated in the presence of pneumococci, but aggregation was prevented by the addition of cyclic adenosine 3', 5'-monophosphate (cAMP). Furthermore, cAMP corrected the shortened clotting time of PRP in the presence of pneumococci. The clumping and release of polymorphonuclear coagulant that was induced by pneumococci was not prevented by cAMP. Thus, pneumococci exert several dose-dependent thromboplastic effects: (i) release of platelet thromboplastic substances; (ii) a direct thromboplastic effect; and (iii) release of polymorphonuclear coagulant.
Nhiễm trùng do Streptococcus pneumoniae và các sản phẩm từ sinh vật có liên quan đến sự thay đổi về đông máu và chức năng của tiểu cầu. Phế cầu khuẩn và polysaccharide của phế cầu khuẩn rút ngắn thời gian đông máu của máu toàn phần, huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) và huyết tương nghèo tiểu cầu (PPP) in vitro. Thời gian đông máu của PPP và PRP của động vật thiếu C6 cũng giảm tương tự. Vi khuẩn không ảnh hưởng đến thời gian prothrombin một giai đoạn hoặc thời gian đông máu
Envelope preparations of Neisseria gonorrhoeae strain GC1 (a stable, piliated strain of intermediate colony morphology) and type T1 possess a D-alanine carboxypeptidase which releases the terminal alanine residue from the uridine 5'-diphosphate-N-acetyl muramylpentapeptide substrate (isolated from Bacillus cereus T). The D-alanine carboxypeptidase of the GC1 envelopes has a broad pH optimum between pH 8.0 to 10.0. When the molarity of the tris(hydroxymethyl)aminomethane buffer was varied, the activity showed an optimum over the range 0.2 to 0.4 M. Activity was higher (135% of control level) when 20 to 80 mM Mg2+ was present. The Km for the enzyme was 0.25 mM. The D-alanine carboxypeptidase was inhibited by several beta-lactam antibiotics and the 50% inhibitory levels were 10(-8) M penicillin G, 10(-8) M ampicillin, 10(-5) M cloxacillin, and 5 x 10(-7) M methicillin.
Phong bì chủng Neisseria gonorrhoeae GC1 (một chủng ổn định, có kết dính, có hình thái khuẩn lạc trung gian) và T1 có chứa D-alanine carboxypeptidase giải phóng dư lượng alanine cuối cùng từ chất nền uridine 5 '-diphosphate-N-acetyl muramylpentapeptide (tách biệt với Bacillus cereus T ). Carboxypeptidase của phong bì GC1 có độ pH tối ưu rộng từ pH 8,0 đến 10,
Resistance to pneumococcal infection was tested in T-lymphocyte-deficient, nude (nu/nu) mice. Pneumococcal serum opsonizing activity, in vivo phagocytosis of the pneumococcus, and the mean lethal dose for the pneumococcus were all found to be the same in nude mice as in control (+/+) mice. T-lymphocytes do not appear to play a significant role in the host's defense against the pneumococcus.
Nghiên cứu được tiến hành trên chuột nhắt trắng (chuột/chuột) thiếu T-lymphocyte, sống khỏa thân (nu/nu ). Hoạt tính phóng xạ huyết thanh phế cầu khuẩn, thực bào in vivo của phế cầu khuẩn và liều trung bình gây chết tế bào phế cầu khuẩn ở chuột trần đều giống nhau. T-lymphocyte dường như không đóng vai trò quan trọng trong việc bảo vệ vật chủ chống lại phế cầu khuẩn.
PR-D-92-EA was tested on isolated guinea pig ileum and rat stomach strips for activity against mediators probably released after allergen antibody union. It antagonized the response produced by histamine, bradykinin, serotonin, prostaglandin E2, prostaglandin F2ALPHA and slow-reacting substance of anaphylaxis (SRS-A). The concentrations which blocked 50% of the response were 150, 145, 92, 70, 47, and 32 mug/ml, respectively. This compound may be useful in the treatment of allergic conditions.
PR-D-92-EA được thử nghiệm trên băng gạc chuột lang và băng dạ dày chuột cống cô lập cho thấy hoạt tính chống lại các chất trung gian có thể giải phóng sau khi kết hợp kháng thể gây dị ứng. Nó đối kháng với phản ứng tạo ra bởi histamin, bradykinin, serotonin, prostaglandin E2, prostaglandin F2ALPHA và chất phản ứng chậm của sốc phản vệ (SRS-A ). Nồng độ ngăn chặn 50% phản ứng lần lượt là 150, 145,
Tyrosine aminotransferase (TAT) induction by glucagon and dexamethasone in the liver of tumor-bearing chickens was studied and compared with induction in healthy animals. The transplantable tumor was caused by inoculation of cells from a cell line induced by MC29 avian leukosis virus. TAT was hardly detectable in tumor tissue of control and dexamethasone-treated chickens, but it was induced by glucagon to levels which were significant although very low when compared to those in host liver or the liver of non-tumor-bearing controls after glucagon treatment. Dexamethasone failed to induce TAT in host liver at 8 A.M. while it significantly indiced TAT in the normal liver at the same time of the day. Similar failure of TAT induction was not detectable when glucagon was used instead of dexamethasone. Furthermore, it was found that diurnal variations in basal and dexamethasone or glucagon-induced TAT levels are considerably mitigated in host liver as compared to those observed in the liver of healthy animals. The possible reasons for these findings are discussed.
Gây tê tyrosine aminotransferase (TAT) bằng glucagon và dexamethasone ở gan gà có khối u được nghiên cứu và so sánh với gây tê ở động vật khỏe mạnh. Khối u có thể cấy ghép được gây ra bởi tiêm tế bào từ dòng tế bào gây ra bởi virus gây bệnh bạch cầu gia cầm MC29. TAT hầu như không thể phát hiện được ở gà đối chứng và gà được xử lý dexamethasone, nhưng nó được gây ra bởi glucagon với nồng độ đáng kể mặc dù rất thấp so với gan hoặc
This paper described a Behavior Modification Training Program, emphasizing self-control, for staff working with drug addicts. The program, which is primarily geared toward the training of paraprofessionals, takes place in ten 1-1/2 hour sessions and includes an overview of behavior modification as well as instruction in techniques of relaxation, desensitization, self-image improvement, behavior analysis, behavior control, assertive training, rational thinking, and how to set up and run similar behavior modification training programs for staff and patients. Since this training began at the New Jersey Neuropsychiatric Institute in November 1971, a total of 898 staff members, mostly paraprofessionals working with addicts, alcoholics, mentally ill patients, and inmates, including 53 from our own institution, 576 persons from other facilities in New Jersey, and 269 from facilities in other states, have been trained, while 2,021 patients have been trained in similar programs. Most of this training has been accomplished by paraprofessionals. Preliminary evaluation data have been promising and the response of participants enthusiastic.
Trong một bài viết khác, tôi đã trình bày về chương trình đào tạo thay đổi hành vi, nhấn mạnh khả năng tự kiểm soát đối với nhân viên làm việc với người nghiện ma túy. Chương trình này chủ yếu hướng đến việc đào tạo các chuyên viên tư vấn, diễn ra trong 10 buổi tập kéo dài 1-1/2 giờ và bao gồm một cái nhìn tổng quan về việc thay đổi hành vi cũng như hướng dẫn các kỹ thuật thư giãn, giải mẫn cảm, cải thiện nhận thức bản thân, phân tích hành vi, kiểm soát hành vi, rèn luyện quyết đoán, tư duy lý trí và
Hydrolysis rates of N-acetyl dehydroalanine methyl ester (methyl 2-acetamidoacrylate) and related model compounds were measured in aqueous, organic and mixed aqueous media. Adding dimethylsulfoxide (DMSO) to water, retarded hydrolysis of the ester by a factor of 2 to 500, depending on the pH of the medium and concentration of DMSO. Ethanol also slowed hydrolysis, but the effect was not so pronounced. Related studies show that the acetamido group C-N bond of sodium 2-acetamido-acrylate is hydrolyzed only about 1/130 as fast as the ester group C-O bond. Aqueous dimethyl sulfoxide should by a useful medium for synthesis of peptide, amino acid and protein derivatives of N-acetyl dehydroalanine methyl ester.
Tốc độ thủy phân của N-acetyl dehydroalanine methyl ester (methyl 2-acetamidoacrylate) và các hợp chất mô hình liên quan được đo trong môi trường nước hữu cơ và hỗn hợp. Thêm dimethylsulfoxide (DMSO) vào nước, làm chậm quá trình thủy phân ester theo hệ số từ 2 đến 500, tùy thuộc vào độ pH của môi trường và nồng độ DMSO. Ethanol cũng làm chậm quá trình thủy phân nhưng hiệu quả không rõ rệt. Các nghiên cứu liên quan cho thấy
In order for the ophthalmologist to achieve the greatest earning power and personal satisfaction, he or she must devise traffic flow techniques that efficiently allow for maximum utilization of all examining areas and paramedical personnel in the office without dehumanizing patients. By delegating as much responsibility as possible to staff, the ophthalmologist will have the opportunity of performing his or her specialized skills to the fullest extent, and therefore will achieve optimal personal gratification. This emotional reward indemnifies the future of private practice, because it can exist only in the presence of a close patient-physician relationship, which is the cornerstone of the private practice of ophthalmology.
Để đạt được thu nhập cao nhất và sự hài lòng cá nhân, bác sĩ nhãn khoa phải đưa ra các kỹ thuật lưu thông giao thông hiệu quả cho phép tận dụng tối đa tất cả các lĩnh vực khám và nhân viên y tế trong phòng khám mà không làm mất nhân tính của bệnh nhân. Bằng cách giao phó càng nhiều trách nhiệm cho nhân viên, bác sĩ nhãn khoa sẽ có cơ hội thực hiện hết mức các kỹ năng chuyên môn của mình, từ đó đạt được sự hài lòng cá nhân tối ưu. Phần thưởng cảm xúc này đền đáp cho tương lai của nghề tư, bởi vì nó chỉ tồn tại khi
The spontaneous activity exhibited in vitro by smooth muscle strips from the urinary bladder of the rabbit under the influence of Urecholine in concentrations from 0.3 to 30 muM has been characterized in terms of three parameters: mean tension, frequency of contraction, and contractile deviation, all obtained by computer an alysis. While mean tension and frequency monotonically increased with concentration, the contractile deviation rose to a peak in the vicinity of 3.0 to 6.0 muM and thereafter decreased. At concentrations less than 10 muM the contractile patterns were almost periodic, while at 10 and 30 muM, the patterns became highly erratic. Histologic examination of a limited number of tissues showed longitudinally oriented muscle bundles with multiple anastomosing.
Hoạt động tự phát thể hiện trong ống nghiệm bằng các dải cơ trơn từ bàng quang tiết niệu thỏ dưới tác động của Urecholine ở nồng độ từ 0,3 đến 30 muM được mô tả theo ba thông số: lực căng trung bình, tần số co bóp và độ lệch co bóp, tất cả đều thu được bằng phương pháp phân tích trên máy tính. Trong khi lực căng trung bình và tần số đơn điệu tăng theo nồng độ, độ lệch co bóp tăng lên đỉnh trong khoảng 3,0 đến 6,0 muM và sau đó giảm xuống. Ở nồng độ dưới 10 muM
Non-occluded virions of a nuclear polyhedrosis virus of the alfalfa looper, Autographa californica, found in the medium of cell cultures of infected fall armyworm, Spodopter frugiperda, and in the hemolymph of infected S. frugiperda larvae were partially characterized by biological, chemical and physical methods. Also, the rate of appearance of the virions was studied in cell culture and the host insect to determine maximum virion production. Virions obtained from both sources were heat-sensitive, acid-labile and inactivated by several organic solvents. The non-occluded virions found in the insect cell culture fluid and in the hemolymph were identical, and both were enveloped nucleocapsids. Visualization of the fragilely enveloped nucleocapsid was accomplished only after fixation with glutaraldehyde. Differences between the non-occluded and occluded virions of nuclear polyhedrosis viruses are discussed.
Virion không bao gồm của virus polyhedrosis hạt nhân thuộc loài cỏ linh lăng (Antographa californica ), được tìm thấy trong môi trường nuôi cấy tế bào của giun đũa, Spodopter frugiperda và trong dịch thể của ấu trùng S. frugiperda bị nhiễm được đặc trưng một phần bằng các phương pháp sinh học, hóa học và vật lý. Tốc độ xuất hiện của virion cũng được nghiên cứu trong nuôi cấy tế bào và côn trùng chủ để xác định sản xuất virion tối đa. Các virion thu được từ cả hai nguồn đều nhạy cảm với nhiệt
Extensively degraded RNA was isolated from virions of influenza virus which had been oxidized with sodium m-periodate. Similarly, although to a lesser extent, RNA isolated from periodate-treated ribonucleoprotein of influenza virus was also degraded. In contrast, influenza virus RNA, if first freed from other virion components, was not degraded by periodate oxidation.
Phân lập rộng rãi RNA phân hủy phân lập từ các virion của vi rút cúm đã bị oxy hóa bằng natri m-periodate. Tương tự, mặc dù ở mức độ thấp hơn, RNA phân lập từ ribonucleoprotein của vi rút cúm đã được xử lý định kỳ cũng bị phân hủy. Ngược lại, RNA của vi rút cúm, nếu lần đầu tiên được giải phóng khỏi các thành phần virion khác, thì không bị phân hủy bởi quá trình oxy hóa định kỳ.
Rubella virus failed to replicate in mosquitoes (Aedes albopictus and Culex fatigans) following parenteral inoculation. The virus demonstrated in mosquitoes tested immediately after inoculation but was not detected in insects sampled 7, 14 and 21 days postinoculation. This experiment provides further evidence that rubella is not an arbovirus, but does not invalidate its classification as a togavirus.
Vi rút Rubella không nhân lên được trên muỗi (Aedes albopictus và Culex fatigans) sau tiêm chủng. Vi rút được phát hiện trên muỗi được xét nghiệm ngay sau tiêm chủng nhưng không được phát hiện trên các côn trùng được lấy mẫu sau 7,14 và 21 ngày. Thí nghiệm này cung cấp thêm bằng chứng cho thấy Rubella không phải là một loại arbovirus nhưng không làm mất hiệu lực phân loại là togavirus.
Minoxidil in daily doses of 6 to 40 mg was administered to 11 patients with severe hypertension. Two patients died of causes unrelated to the drug and one patient withdrew from the study. Blood pressure was controlled in the remaining eight subjects, who received the drug for periods ranging from 5 to 40 months. In three patients minoxidil could subsequently be replaced by conventional antihypertensive therapy. Adverse effects of minoxidil included fluid retention (as assessed by edema and plasma volume studies), nonspecific ECG changes, hypertrichosis and conjunctival redness. Concomitant administration of diuretic and beta-adrenergic blocking agents resulted in excellent tolerance of the treatment and high patient compliance.
Minoxidil liều hàng ngày 6-40mg được sử dụng cho 11 bệnh nhân tăng huyết áp nặng. Hai bệnh nhân tử vong do các nguyên nhân không liên quan đến thuốc và một bệnh nhân rút khỏi nghiên cứu. Huyết áp được kiểm soát ở tám đối tượng còn lại, được dùng thuốc trong thời gian từ 5-40 tháng. Ở ba bệnh nhân minoxidil sau đó có thể được thay thế bằng thuốc hạ huyết áp thông thường. Tác dụng không mong muốn của minoxidil bao gồm tình trạng ứ nước (được đánh giá bằng phù và thể tích huyết tương ), thay đổi điện
The secretion of alpha-amylase and electrolytes by the parotid gland is now well understood and similarities exist in this respect between man and animals. Many modern drugs influence parotid secretion and morphology, and these are discussed.
Hiện nay, sự tiết alpha-amylase và điện giải của tuyến mang tai đã được hiểu rõ và có sự tương đồng về mặt này giữa người và động vật. Nhiều loại thuốc hiện đại có ảnh hưởng đến sự tiết parotid và hình thái, và những điều này sẽ được thảo luận sau.
Acute renal failure is a life-threatening situation for which satisfactory treatment is currently available. Death is usually related to concomitant infection rather than uremia. Prompt recognition and treatment of underlying factors that predispose to renal insufficiency can frequently prevent the development of intrinsic acute renal failure.
Suy thận cấp là tình trạng nguy hiểm đến tính mạng, hiện nay điều trị ổn định. Tử vong thường liên quan đến nhiễm trùng đồng thời chứ không phải là nhiễm niệu. Việc phát hiện và điều trị kịp thời các yếu tố nguy cơ dẫn đến suy thận có thể thường xuyên ngăn chặn sự phát triển của suy thận cấp.
Local control of pulmonary resistance and lung compliance was studied in the in situ left lower lobe of the canine lung. Recirculation of blood through the lobe while the Pco2 of the ventilatory gas was varied resulted in an increase in resistance and a decrease in compliance only when the pulmonary venous pH was greater than 7.42. Alternating sodium bicarbonate and lactic acid infusion while alveolar Pco2 was maintained below 5 mmHg demonstrated the dependence of the hypocapnic response on the acid-base status of the blood perfusing the respiratory airways. The increase in resistance and decrease in compliance observed at a pulmonary venous pH of 7.64 was comparable to that observed after lobar pulmonary artery occlusion. Varying degrees of hypoxia did not significantly affect bronchomotor tone, nor was the bronchoconstriction following lobar pulmonary artery occlusion affected by the hypoxia. Vagal stimulation superimposed on a stepwise increase in pulmonary venous pH from 7.32 to 7.62 resulted in an increase in resistance which paralleled the increase in resistance when pulmonary venous pH alone was increased. Compliance was not significantly affected by vagal stimulation at any level of pulmonary venous pH.
Sự kiểm soát tại chỗ sức cản phổi và độ giãn nở phổi được nghiên cứu ở thùy dưới trái tại chỗ của phổi chó. Việc tuần hoàn máu qua thùy trong khi khí Pco2 của khí thở thay đổi làm tăng sức cản và giảm độ giãn nở chỉ khi pH tĩnh mạch phổi lớn hơn 7,42. Truyền thay thế natri bicacbonat và acid lactic trong khi Pco2 duy trì dưới 5 mmHg cho thấy sự phụ thuộc của đáp ứng hypocapnic vào tình trạng acid-base của máu truyền qua đường hô hấp. Sự gia tăng sức cản và giảm độ giãn nở
A new esterification procedure was developed to form 2-chloroethyl esters for 10 common herbicidal acids, using dicyclohexyl carbodiimide and 2-chloroethanol. This reagent was found to be more desirable than the commonly used boron trichloride/2-chloroethanol reagent. Maximum esterification was given for picloram at a lower reaction temperature with a shorter reaction time. Also, maximum esterification of dicamba and 2,3,6-TBA was achieved. The boron trichloride/2-chlorethanol gave poor or little esterification with these 2 acids under the various conditions investigated. The effect of solvents on esterification with the 2 reagents was also explored.
Nghiên cứu đã phát triển quy trình este hóa mới để tạo este 2-cloroethyl cho 10 axit diệt cỏ thông dụng, sử dụng dicyclohexyl carbodiimide và 2-cloroethanol. Thuốc thử này được đánh giá là có hiệu quả hơn so với thuốc thử boron trichloride/2-cloroethanol thông dụng. Phương pháp este hóa tối đa cho picloram ở nhiệt độ phản ứng thấp hơn với thời gian phản ứng ngắn hơn. Phương pháp este hóa tối đa cho dicamba và 2,3
A previously unrecognized enzyme, citrate lyase deacetylase, has been purified about 140-fold from cell extracts of Rhodopseudomonas gelatinosa. It catalyzed the conversion of enzymatically active acetyl-S-citrate lyase into the inactive HS-form and acetate. The enzyme exhibited an optimal rate of inactivation at pH 8.1. Because of the instability of acetyl-S-citrate lyase at acidic and alkaline pH values, all assays were carried out at pH 7.2, where the spontaneous hydrolysis of the acetyl-S-citrate lyase was negligible and deacetylase showed 70% of the activity at pH 8.1. The apparent Km value for citrate lyase was 10(-7) M at pH 7.2 and 30 C. The activity of the deacetylase was restricted to the citrate lyase from R. gelatinosa. The corresponding lyases from Enterobacter aerogenes (formerly Klebsiella aerogenes) and Streptococcus diacetilactis were not deacetylated; likewise, thioesters such as acetyl-S coenzyme A, acetoacetyl-S coenzyme A, and N-acetyl-S-acetyl-cysteamine were also not hydrolyzed. Citrate lyase deacetylase was present in very small amounts in cells of R. gelatinosa grown with acetate or succinate; it was induced by citrate along with the citrate lyase. L-(+)-Glutamate strongly inhibited the deacetylase. Fifty percent inhibition was obtained at a concentration of 1.4 X 10(-4) L-(+)-glutamate. D-(-)-Glutamate, alpha-ketoglutarate, L-alpha-hydroxyglutarate, L-(-)-proline, and other metabolites were less effective.
Một enzyme chưa được công nhận trước đây, citrate lyase deacetylase, đã được tinh sạch khoảng 140 lần từ dịch chiết tế bào của Rhodopseudomonas gelatinosa. Enzyme này xúc tác cho sự chuyển hóa acetyl-S-citrate lyase hoạt động enzyme thành dạng HS-và acetate không hoạt động. Tốc độ bất hoạt enzyme tối ưu ở pH 8.1. Do sự không ổn định của acetyl-S-citrate lyase ở pH axit và kiềm, tất cả các thử nghiệm đều được thực hiện ở pH 7.2, trong đó hoạt tính tự thủy phân của acetyl-S-citrate lyase là không đáng kể và hoạt tính khử là 70% ở pH 8.1. Giá trị Km rõ ràng của citrate lyase là 10 (- 7) M ở pH 7.2 và 30 C. Hoạt tính của deacetylase thu được ở nồng độ 1,4 X 10 (- 4) L-( +) - glucutamate. D-(-) - Glucase, alpha-ketoglutarate, L-alpha-hydroxyglutarate, L-(-) - proline và các chất chuyển hóa khác đều kém hiệu quả. Enzyme citrate lyase được citrate lyase thu được với hàm lượng rất nhỏ trong tế bào R. gelatinosa được nuôi cấy với acetate hoặc succinate; hoạt tính được citrate tạo ra cùng với citrate lyase. L-( +) - Glucase ức chế mạnh deacetylase. Ở nồng độ 1,4 X 10 (- 4) L-( +) - glucutamate, D-(-) - Glucase, alpha-glutamate, L-alpha-hydroxyglutarate, L-(-) - proline và các chất chuyển hóa khác đều kém hiệu quả.
The purification and properties of a novel type of murein transglycosylase from Escherichia coli are described. The purified enzyme appears as a single band on sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels and has an apparent molecular weight of approximately 65,000 as estimated by gel filtration and gel electrophoresis. It degrades pure murein sacculi from E. coli almost completely into low-molecular-weight products. The two prominent muropeptide fragments in the digest are the disaccharide-tripeptide N-acetylglucosamine-N-acetylmuramic acid-L-alanine-D-iso-glutamic acid-meso-diaminopimelic acid and the corresponding disaccharide-tetrapeptide N-acetylglucosamine-N-acetylmuramic acid-L-alanine-D-iso-glutamic acid-meso-diaminopimelic acid-D-alanine. The unique feature of these compounds is that the disaccharide has no reducing end group and that the muramic acid residue possesses an internal 1 leads to 6 anhydro linkage. The new lytic enzyme is designated as a murein: murein transglycosylase. Its possible role in the rearrangement of murein during cell growth and division is discussed.
Nghiên cứu tinh sạch và đặc tính của một loại enzyme mới là murein transglycosylase từ Escherichia coli. Enzyme được tinh sạch này xuất hiện dưới dạng một dải duy nhất trên gel natri dodecyl sulfate-polyacrylamide và có trọng lượng phân tử khoảng 65.000 theo ước tính bằng phương pháp lọc gel và điện di gel. Enzyme này phân hủy gần như hoàn toàn thành các sản phẩm có trọng lượng phân tử thấp. Hai đoạn muropeptide nổi bật trong quá trình tổng hợp là disaccharide-tripeptide
2-Keto-3-deoxygluconate aldolase of Aspergillus niger, an enzyme that has not been reported previously, was purified 468-fold. Maximal activity was obtained at pH 8.0 and 50 C. The enzyme exhibited relative stereochemical specificity with respect to glyceraldehyde. The Km values for 2-keto-3-deoxygluconate, glyceraldehyde, and pyruvate were 10, 13.3, and 3.0 mM, respectively. The effects of some compounds and inhibitors on enzyme activity were examined. Stability of the enzyme under different conditions was investigated. The equilibrium constant was about 0.33 X 10(-3) M.
Aldolase 2-Keto-3-deoxygluconate của Aspergillus niger, một enzyme chưa được công bố trước đây, đã được tinh sạch 468 lần. Hoạt tính tối đa đạt được ở pH 8,0 và 50 C. Enzym thể hiện tính đặc hiệu hóa học lập thể tương đối với glyceraldehyde. Giá trị Km của 2-keto-3-deoxygluconate, glyceraldehyde và pyruvate lần lượt là 10,13,3 và 3,0 mM. Ảnh
A motile Streptococcus was isolated and its chemotactic behavior toward sugars and amino acids was studied. Motility was optimal in the presence of an exogenous energy source and a nonionic detergent, e.g., Tween 80 or Brij-36. Both glucose and pyruvate could serve as energy source. Chemotaxis toward leucine was optimal at pH 7 to 8.5 and a temperature between 30 and 37 C. The Streptococcus showed a chemotactic response toward a variety of sugars. All commonly occurring L-amino acids, except alanine, asparagine, aspartate, glutamate, arginine, and lysine, were attractants. From concentration response curves the thresholds, peak concentrations, and optimal responses were determined.
Một hợp chất Streptococcus có khả năng vận động đã được phân lập và nghiên cứu hoạt tính hóa học của nó đối với đường và axit amin. Khả năng vận động là tối ưu khi có nguồn năng lượng ngoại sinh và chất tẩy rửa không ion như Tween 80 hoặc Brij-36. Cả glucose và pyruvate đều có thể đóng vai trò là nguồn năng lượng. Hoạt tính hóa học đối với leucine là tối ưu ở pH 7 đến 8,5 và nhiệt độ từ 30 đến 37 C. Streptococcus cho thấy phản ứng hóa học đối với
A phospholipase hydrolyzing cardiolipin to phosphatidic acid and phosphatidyl glycerol was characterized in gram-negative bacteria but was absent in preparations of gram-positive bacteria, Saccharomyces cerevisiae, and rat liver mitochondria. In cell-free extracts of Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Proteus vulgaris, and Pseudomonase aeruginosa, this cardiolipin-hydrolyzing enzyme had similar pH and Mg2+ requirements and displayed a specificity which excluded phosphatidyl glycerol and phosphatidyl ethanolamine as substrates.
Enzyme thủy phân cardiolipin thành phosphatidic acid và phosphatidyl glycerol đặc trưng cho vi khuẩn gram âm nhưng không có trong các chế phẩm vi khuẩn gram dương, Saccharomyces cerevisiae và ty thể gan chuột. Trong dịch chiết không tế bào Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Proteus vulgaris và Pseudomonase aeruginosa, enzyme thủy phân cardiolipin có yêu cầu pH và Mg2+ tương tự và thể hiện tính đặc hiệu loại trừ phosphatidyl gly
An alcohol dehydrogenase linked to nicotinamide adenine dinucleotide and requiring glutathione has been isolated and partially purified from two methanol-assimilating yeasts. It differs from previously described methanol-oxidizing enzymes in pH optima, electron acceptor specificity, substrate specificity, inhibition pattern, and stability.
Một hợp chất alcohol dehydrogenase liên kết với nicotinamide adenine dinucleotide đòi hỏi glutathione đã được phân lập và tinh chế một phần từ hai men đồng hóa với methanol. Hợp chất này khác với các enzyme oxy hóa methanol đã được mô tả trước đây về pH optima, tính đặc hiệu của chất nhận electron, tính đặc hiệu của chất nền, mô hình ức chế và tính ổn định.
The normal hut (histidine utilization) operons, as well as those with mutations affecting the regulation of their expression, of Salmonella typhimurium were introduced on an F' episome into cells of S. typhimurium and Klebsiella aerogenes whose chromosomal hut genes had been deleted and into cells of Escherichia coli, whose chromosome does not carry hut genes. The episomal hut operons respond in a manner very similar to induction and catabolite repression in all three organisms. The small differences found reflect both different abilities to take up inducers from the medium and different degrees of catabolite repression exerted by glucose.
Các operon túp lều bình thường (sử dụng histidine) cũng như các operon có đột biến ảnh hưởng đến sự điều tiết biểu hiện của chúng của Salmonella typhimurium đã được đưa vào một episome F vào tế bào của S. typhimurium và Klebsiella aerogenes mà gen túp lều nhiễm sắc thể đã bị xóa và vào tế bào của Escherichia coli, mà nhiễm sắc thể không mang gen túp lều. Các operon túp lều episomal phản ứng theo cách rất giống với phản ứng gây cảm ứng và
In merodiploid strains of Klebsiella aerogenes with chromosomal hut genes of K. aerogenes and episomal hut genes of Salmonella typhimurium, the repressor of either species can regulate the hut operons of the other species. The repression exerted by the homologous repressor on the left-hand hut operon is, in both organisms, stronger than that exerted by the heterologous repressor.
Trong các chủng lưỡng bội của Klebsiella aerogenes với các gen túp lều nhiễm sắc thể của K. aerogenes và các gen túp lều biểu sinh của Salmonella typhimurium, chất ức chế của một trong hai loài có thể điều hòa operon túp lều của loài kia. Chất ức chế tương đồng trên operon túp lều bên trái ở cả hai loài đều mạnh hơn chất ức chế dị thể.
The transport of 99MoO42- into dinitrogen-fixing cells of Clostridium pasteurianum was investigated. Transport of molybdate in this organism is energy dependent; sucrose is required in the minimal media, and the system is inhibited by the glycolysis inhibitors, NaF, iodoacetic acid, and arsenate. The cells accumulate molybdate against a concentration gradient, and the uptake shows a marked dependence on temperature (optimum 37 C) and pH (optimum 6.0). The rate of molybdate uptake with increasing molybdate concentrations shows saturation kinetics with an apparent Km and Vmax of 4.8 X 10(-5) M and 55 nmol/g of dry cells per min, respectively. Inhibition studies with the anions SO42-, S2O32-, WO42-, and VO32- show that SO42- and WO42- competitively inhibit MoO42- uptake (apparent Ki [SO42-] is 3.0 X 10(-5) M; apparent Ki [WO42-] is 2.4 X 10(-5), whereas S2O32- and VO32- have no inhibitory effect. Exchange experiments with MoO42- show that only a small percentage of the 99MoO42- taken up by the cells is exchangeable. Exchange experiments with WO42- and SO42- indicate that once inside the cells WO42- and SO42- cannot substitute for MoO42-.
Nghiên cứu vận chuyển 99MoO42-vào tế bào cố định dinitrogen của Clostridium pasteurianum. Vận chuyển molybdat ở sinh vật này phụ thuộc vào năng lượng; sucrose là cần thiết trong môi trường tối thiểu, và hệ thống bị ức chế bởi các chất ức chế đường phân, NaF, acid iodoacetic và asenat. Các tế bào tích lũy molybdat so với một gradient nồng độ, và sự hấp thu cho thấy sự phụ thuộc rõ rệt vào nhiệt độ (tối ưu 37 C) và p
The first committed step of aromatic amino acid biosynthesis in Salmonella typhimurium was shown to be catalyzed by three isoenzymes of 3-deoxy-D-arabino-heptulosonic acid 7-phosphate (DAHP) synthase. Mutations in each of the genes specifying the isoenzymes were isolated and mapped. aroG, the structural gene for the phenylalanine-inhibitable isoenzyme, was linked to gal, and aroH, the structural gene for the tryptophan-inhibitable isoenzyme, was linked to aroE. aroF, the structural gene for the tyrosine-inhibitable isoenzyme, was linked to pheA and tyrA, which specify the phenylalanine- and tyrosine-specific branch-point enzymes, respectively. The phenylalanine-inhibitable isoenzyme was the predominant DAHP synthase in wild-type cells, and only the tryosine-inhibitable isoenzyme was completely repressed, as well as inhibited, by low levels of its allosteric effector. The DAHP synthase isoenzymes were separated by chromatography on diethylaminoethyl-cellulose with a phosphate gradient which contained enolpyruvate phosphate to protect the otherwise unstable phenylalanine-inhibitable isoenzyme. No cross-inhibition of either the tyrosine- or phenylalanine-inhibitable isoenzyme was observed at inhibitor concentrations up to 1 mM. The tryptophan-inhibitable isoenzyme was partially purified from extracts of a strain lacking the other two isoenzymes and shown to be inhibited about 30% by 1 mM tryptophan. A preliminary study of interference by tryptophan in the periodate-thiobarbiturate assay for DAHP suggested a combined effect of tryptophan and erythrose 4-phosphate, or an aldehydic compound resulting from degradation of erythrose 4-phosphate by periodate.
Bước đầu tiên của quá trình tổng hợp amino acid thơm trong Salmonella typhimurium đã được xúc tác bởi ba isoenzyme của axit 3-deoxy-D-arabino-heptulosonic 7-phosphate (DAHP) synthase. Các đột biến ở mỗi gen chỉ định các isoenzyme này đã được phân lập và lập bản đồ. AroG, gen cấu trúc của isoenzyme phenylalanine-inhibitable, được liên kết với gal, và aroH, gen cấu trúc của isoenzyme tryptophan-
The cellular localization of enzymes in Diplococcus pneumoniae was examined by fractionation of spheroplasts. A deoxyribonuclease implicated in the entry of deoxyribonucleic acid (DNA) into the cell during genetic transformation was located in the cell membrane. This enzyme, the major endonuclease of the cell (endonuclease I), which is necessary for the conversion of donor DNA to single strands inside the cell and oligonucleotides outside, thus could act at the cell surface. Another enzyme, the cell wall lysin (autolysin), was also found in the membrane fraction. Other enzymes, including amylomaltase, two exonucleases, and adenosine triphosphate-dependent deoxyribonuclease, and a restriction type endonuclease, were located in the cytosol within the cell. None of the enzymes examined were predominantly periplasmic in location. Spheroplasts were obtained spontaneously on incubation of pneumococcal cells in concentrated sugar solutions. The autolytic enzyme appears to be involved in this process. Cells that were physiologically competent to take up DNA formed osmotically sensitive spheroplasts two to three times faster than cells that were not in the competent state. Although some genetically incompetent mutants also formed spheroplasts more slowly, other such mutants formed them at the faster rate.
Sự định vị của các enzyme trong vi khuẩn Diplococcus pneumoniae được kiểm tra bằng cách phân đoạn các spheroplasts. Enzyme deoxyribonuclease liên quan đến sự xâm nhập của acid deoxyribonucleic (DNA) vào tế bào trong quá trình biến nạp di truyền được đặt ở màng tế bào. Enzyme này, endonuclease chính của tế bào (endonuclease I) cần thiết cho sự chuyển đổi DNA của người cho thành các chuỗi đơn bên trong tế bào và các oligonucleotide bên ngoài, do đó có thể hoạt động ở bề mặt tế bào. Enzyme khác, thành tế bào lysin (autolysin) cũng được tìm thấy ở phân đoạn màng tế bào. Các enzyme khác, bao gồm amylomaltase, hai exonuclease và deoxyribonuclease phụ thuộc adenosine triphosphate và một endonuclease dạng giới hạn, nằm trong cytosol bên trong tế bào. Không có enzyme nào được kiểm tra chủ yếu là periplasmic ở vị trí. Các spheroplasts thu được một cách tự nhiên khi nuôi cấy tế bào phế cầu khuẩn trong dung dịch đường cô đặc. Enzyme tự phân giải dường như tham gia vào quá trình này. Các tế bào có khả năng sinh lý để tiếp nhận DNA hình thành các spheroplasts nhạy cảm thẩm thấu nhanh hơn hai đến ba lần so với các tế bào không ở trạng thái có khả năng. Mặc dù một số đột biến gen không có khả năng hình thành cũng hình thành spheroplasts chậm hơn, nhưng các đột biến khác hình thành chúng với tốc độ nhanh hơn.
A four- to sixfold increase in specific activity of dihydrodipicolinic acid synthase was observed during sporulation of Bacillus cereus. The enzyme from cells harvested before and after the increase in specific activity appeared to be very similar as judged by pH optima, heat denaturation kinetics, apparent Michaelis constants, chromatography on diethylaminoethyl-cellulose and Sephadex G-200, and polyacrylamide gel electrophoresis. Studies with various combinations of amino acids and one of the enzyme substrates, pyruvate, failed to give evidence for control of the enzyme by activation, inhibition, repression, induction, or stabilization. Omission of calcium from the sporulation medium had no significant effect on the specific activity pattern of the enzyme as a function of age of culture.
Hoạt tính đặc hiệu của enzyme dihydrodipicolinic synthase tăng gấp 4-6 lần trong quá trình tạo bào tử của cây ngũ cốc. Enzyme từ tế bào thu hoạch trước và sau khi tăng hoạt tính đặc hiệu có vẻ rất giống nhau khi đánh giá bằng pH optima, động học biến tính nhiệt, hằng số Michaelis rõ ràng, sắc ký diethylaminoethyl-cellulose và Sephadex G-200 và điện di gel polyacrylamide. Các nghiên cứu với sự kết hợp khác nhau của các axit amin và một trong các cơ chất của
D-Lactate dehydrogenase has been purified to near homogeneity from Peptostreptococcus elsdenii. As isolated, the enzyme contains flavine adenine dinucleotide and a tightly bound metal cofactor. Inactivation by ortho-phenanthroline occurs in two steps and is partially blocked by D-lactate. Reactivation by divalent metal ions occurs, with divalent zinc being the most effective. When ferricyanide is used as the electron acceptor, D-lactate has an apparent K0.5 of 3.3 M0.46; its binding is negatively cooperative with a Hill coefficient of 0.46. Replacement of ferricyanide by the other components of the electron transport system yields hyperbolic kinetics with an apparent Km for D-lactate of 26 mM. The apparent Km for ferricyanide is 2.2 X 10(-4) M. Phosphate and pyrophosphate compounds stimulate the D-lactate:ferricyanide activity. These properties suggest that interaction of this enzyme with other electron transport proteins in the chain may enhance D-lactate binding and, hence, the rate of electron transport.
D-Lactate dehydrogenase đã được tinh sạch đến mức gần đồng nhất từ vi khuẩn Peptostreptococcus elsdenii. Khi phân lập, enzyme chứa flavine adenine dinucleotide và một đồng yếu tố kim loại liên kết chặt chẽ. Sự bất hoạt của ortho-phenanthroline xảy ra theo hai bước và bị chặn một phần bởi D-lactate. Sự hoạt hóa bằng ion kim loại hóa trị hai xảy ra, trong đó kẽm hóa trị hai là hiệu quả nhất. Khi được sử dụng làm chất nhận electron, D-
Coenzyme A (CoA) transferase from Peptostreptococcus elsdenii has been purified and crystallized, and some of its properties have been established. The work was facilitated by a newly developed coupled and continuous spectrophotometric assay in which the disappearance of added acrylate could be followed at 245 nm. The rate-limiting conversion of acetyl- and beta-hydroxypropionyl CoA to acrylyl CoA by CoA transferase was followed by the non-rate-limiting conversion to beta-hydroxypropionyl CoA by excess crotonase. Thus, a small priming quantity of acetyl CoA served to generate acrylyl CoA, which, by hydration, generated beta-hydroxypropionyl CoA. This product then served to generate more acrylyl CoA in cyclic fashion. The net result was the CoA transferase-limited conversion of acrylate to beta-hydroxypropionate. The purified transferase has a molecular weight of 125,000 and is composed of two subunits of 63,000 each, as determined by disc gel electrophoresis. Short-chain-length monocarboxylic acids are substrates, whereas dicarboxylic or beta-ketocarboxylic acids are not. The reaction kinetics are typical of a ping-pong bi bi mechanism composed of two half reactions linked by a covalent enzyme intermediate. Incubation of the transferase with acetyl CoA in the absence of a fatty acid acceptor yielded a stable intermediate which, by absorption spectrophotometry, radioactivity measurements, reduction with borohydride, reactivity with hydroxylamine, and catalytic activity, was identified as an enzyme-CoA compound. Kinetic constants for CoA transferase are: final specific activity, 110 U/mg of protein corresponding to 1.38 X 10(4) mumol of acrylate activated per mumol of transferase; Km for acrylate, 1.2 X 10(-3) M; Km for acetyl CoA (beta-hydroxypropionyl CoA), 2.4 X 10(-5) M.
Coenzyme A (CoA) transferase từ vi khuẩn Peptostreptococcus elsdenii đã được tinh sạch và kết tinh, một số tính chất của nó đã được thiết lập. Nghiên cứu này được thực hiện bằng phương pháp quang phổ kế kết hợp và liên tục (CCP ), theo đó có thể theo dõi sự biến mất của acrylate ở bước sóng 245 nm. Việc chuyển hóa có giới hạn tốc độ của acetyl-và beta-hydroxypropionyl CoA thành acrylyl CoA bằng CoA transferase được tiếp nối bằng cách chuyển hóa không giới hạn tốc độ thành beta-hydroxypropionyl CoA bằng crotonase dư thừa. Như vậy, một lượng nhỏ acetyl CoA được dùng để tạo ra acrylyl CoA, sau đó, bằng cách hydrat hóa, các axit dicarboxylic hoặc beta-ketocarboxylic được dùng để tạo ra nhiều acrylyl CoA hơn theo chu kỳ. Kết quả cuối cùng là sự chuyển hóa có giới hạn CoA của acrylate thành beta-hydroxypropionate. Acrylate tinh sạch có trọng lượng phân tử 125.000 và gồm hai tiểu đơn vị 63.000 mỗi tiểu đơn vị, được xác định bằng điện di gel. Các axit đơn chuỗi có độ dài ngắn là các chất nền, trong khi các axit dicarboxylic hoặc beta-ketocarboxylic thì không. Động học của phản ứng là đặc trưng của cơ chế sinh học sinh học ping-pong gồm hai nửa phản ứng liên kết với nhau bởi một enzyme trung gian cộng hóa trị. Việc ủ của enzyme với acetyl CoA trong điều kiện không có chất nhận axit béo cho ra một chất trung gian ổn định, bằng phương pháp quang phổ hấp thụ, đo phóng xạ, khử bằng borohydrid, phản ứng với hydroxylamin và hoạt tính xúc tác được xác định là hợp chất enzyme-CoA. Hằng số động học của CoA transferase là: hoạt tính đặc hiệu cuối cùng, 110 U/mg protein tương ứng với 1,38 X 10 (4) mumol của acrylate được hoạt hóa trên mỗi mumol của enzyme transferase; K đối với acrylate là 1,2 X 10 (- 3) M;
Studies were made on the physical and chemical properties of polysaccharides synthesized by cell-free extracts of Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, and Streptococcus sp. and their susceptibilities to dextranases. Among the polysaccharides examined, insoluble glucans were rather resistant to available dextranase preparations, and the insoluble, sticky glucan produced by S. mutans OMZ 176, which could be important in formation of dental plaques, was the most resistant. By enrichment culture of soil specimens, using OMZ 176 glucans as the sole carbon source, an organism was isolated that produced colonies surrounded by a clear lytic zone on opaque agar plates containing the OMZ 176 glucan. The organism was identified as a strain of Flavobacterium and named the Ek-14 bacterium. EK-14 bacterium was grown in Trypticase soy broth, and an enzyme capable of hydrolyzing the OMZ 176 glucan was concentrated from the culture supernatant and purified by negative adsorption on a diethylaminoethyl-cellulose (DE-32) column and gradient elution chromatography with a carboxymethyl-cellulose (CM-32) column. The enzyme was a basic protein with an isoelectric point of pH 8.5 and molecular weight of 65,000. Its optimum pH was 6.3 and its optimal temperature was 42 C. The purified enzyme released 11% of the total glucose residues of the OMZ 176 glucan as reducing sugars and solubilized about half of the substrate glucan. The products were found to be isomaltose, nigerose, and nigerotriose, with some oligosaccharides. The purified enzyme split the alpha-1,3-glucan endolytically and was inactive toward glucans containing alpha-1,6, alpha-1,4, beta-1,3, beta-1,4, and/or beta-1,6 bonds as the main linkages.
Các nghiên cứu đã được thực hiện để tìm hiểu các đặc tính vật lý và hóa học của các polysaccharide được tổng hợp từ dịch chiết không có tế bào của Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, Streptococcus sp. và tính nhạy cảm của chúng với dextranases. Trong số các polysaccharide được khảo sát, glucan không hòa tan khá kháng với các chế phẩm dextranase sẵn có, và glucan dính, không hòa tan do S. mutans sản xuất OMZ 176 (có vai trò quan trọng trong việc hình thành mảng bám răng) là kháng mạnh nhất. Bằng cách nuôi cấy làm giàu mẫu đất, sử dụng nguồn cacbon duy nhất OMZ 176 glucan, một sinh vật được phân lập và tạo ra các khuẩn lạc bao quanh bởi vùng lytic trên đĩa thạch đục chứa OMZ 176 glucan. Sinh vật được xác định là một chủng vi khuẩn Flavobacterium và được đặt tên là Ek-14. Vi khuẩn EK-14 được nuôi cấy trong môi trường nước tương Trypticase, và enzyme thủy phân OMZ 176 glucan được cô đặc từ dịch nuôi cấy nổi và được tinh sạch bằng sự hấp phụ âm tính trên cột diethylaminoethyl cellulose (DE-32) và sắc ký pha loãng gradient với cột carboxymethyl cellulose (CM-32 ). Enzyme là protein cơ bản với điểm đẳng điện pH 8,5 và trọng lượng phân tử 65.000. Độ pH tối ưu của enzyme là 6,3 và nhiệt độ tối ưu là 42 C. Enzyme tinh sạch giải phóng 11% tổng lượng glucose còn lại của glucan dưới dạng đường khử và hòa tan khoảng một nửa glucan cơ chất. Các sản phẩm được tìm thấy là isomaltose, nigerose và nigerotriose, với một số oligosaccharide. Enzyme tinh sạch phân tách nội phân tử alpha-1,3-glucan và không hoạt động với các glucan chứa alpha-1,6, alpha-1,4, beta-1,3, beta-1,4 và/hoặc beta-1,6.
The synthesis by Streptomyces sp. no. 6 of an extracellular chitosanase was induced by glucosamine. The enzyme was purified to homogeneity by Sephadex G-100, carboxymethyl-cellulose, and diethylaminoethyl-cellulose chromatography. The purified enzyme hydrolyzed chitosan (the beta-1,4-linked polymer of glucosamine) but not chitin nor carboxymethyl-cellulose. The only products of the hydrolysis detectable by paper chromatography were di- and triglucosamine. Sephadex G-100 chromatography and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis indicated that the molecular weight of the enzyme was between 29,000 and 26,000. Acid hydrolysates of the enzyme contained no cysteic acid or glucosamine or other carbohydrate. At 25 C, maximum activity was obtained between pH 4.5 and 6.5. The enzymatic hydrolysis of chitosan occurred over a wide range of temperatures and was maximal at 60 C. The rate of the reaction was inhibited by concentrations of soluble chitosan higher than 0.5 g/liter. The apparent Km calculated from a Lineweaver-Burke plot was 0.688 g/liter at pH 5.5. The enzyme prevented spore germination and caused a significant decrease in the turbidity of germinated spore suspensions of the Mucor strains tested. Such a decrease was the result of a partial lysis of the cell wall.
Sự tổng hợp chitosanase ngoại bào của Streptomyces sp. no. 6 được tạo ra bởi glucosamine. Enzym được tinh sạch đến tính đồng nhất bằng sắc ký sắc ký Sephadex G-100, carboxymethyl cellulose và diethylaminoethyl cellulose. Enzym tinh sạch thủy phân chitosan (polymer liên kết beta-1,4 của glucosamine) nhưng không chứa chitin hay carboxymethyl cellulose. Sản phẩm thủy phân duy nhất có thể phát hiện bằng sắc ký giấy là di-và triglucosamine. Sắc ký
After mutagenesis, surviving yeast cells are grown on plates at 25 C and later exposed to 37 C. The plates are then overlaid with a soft agar containing p-nitrophenylphosphate at pH 9.7. Lysed cells liberate alkaline phosphatase which gives rise to a yellow color on and around colonies.
Sau khi gây đột biến, các tế bào nấm men sống sót được nuôi cấy trên đĩa ở 25 C và sau đó tiếp xúc với 37 C. Các đĩa sau đó được phủ một lớp thạch mềm có chứa p-nitrophenylphosphate ở pH 9,7. Các tế bào ly giải giải phóng phosphatase kiềm làm phát sinh màu vàng trên và xung quanh các khuẩn lạc.
A deoxyribonuclease, which requires nucleoside triphosphate for reaction, has been purified about 150-fold from extracts of Bacillus laterosporus. Potassium phosphate and ethylene glycol stabilize the purified enzyme. The enzyme degrades double-stranded DNA about 100 times faster than heat-denatured DNA in the presence of nucleoside triphosphate. Double-stranded DNA is not degraded to any measurable extent in the absence of ATP, but the enzyme exhibits activity toward denatured DNA in the absence of nucleoside triphosphate, and this activity seems to be an intrinsic property of this enzyme protein. The optimum pH is 8.5 and the maximum activity is obtained in the copresence of Mg2+ (8.0 X 10(-3)M) and Mn2+ (7.0 X 10(-5)M). ATP and dATP are most effective and nucleoside di- or monophosphates are ineffective. ATP is converted to ADP and inorganic phosphate during the reaction and the ratio of the amount of ATP cleaved to that of hydrolyzed phosphodiester bonds of DNA is about 3:1. An inhibitor of the enzyme was observed in bacterial extracts prepared by sonic disruption; the inhibitory substance is produced in the bacteria in the later stages of cell growth. Preliminary results show that the inhibitor emerged near the void volume of a Sephadex G-200 column, and was relatively heat-stable, RNase-resistant, and DNase-sensitive.
Một hợp chất deoxyribonuclease đòi hỏi phải có nucleoside triphosphate cho phản ứng, đã được tinh sạch khoảng 150 lần từ dịch chiết của Bacillus laterosporus. Kali phosphate và ethylene glycol làm ổn định enzyme đã tinh sạch. Khi có nucleoside triphosphate, enzyme phân giải DNA sợi kép nhanh gấp khoảng 100 lần so với DNA bị biến tính nhiệt. Khi không có ATP, DNA sợi kép không bị phân giải ở bất kỳ mức độ nào, nhưng enzyme thể hiện hoạt tính đối với DNA bị biến tính, và hoạt tính này dường như là một đặc tính nội tại của protein enzyme này. Độ pH tối ưu là 8,5 và hoạt tính tối đa đạt được khi có sự đồng phân của Mg2+ (8,0 X 10 (-3) M) và Mn2+ (7,0 X 10 (-5) M ). ATP và dATP có hiệu quả nhất và nucleoside di-hoặc monophosphat không hiệu quả. ATP được chuyển hóa thành ADP và phosphate vô cơ trong quá trình phản ứng và tỷ lệ ATP được cắt so với liên kết phosphodiester thủy phân của DNA là khoảng 3: 1. Chất ức chế enzyme đã được quan sát thấy trong dịch chiết vi khuẩn được điều chế bằng cách phá vỡ âm thanh; chất ức chế được tạo ra ở vi khuẩn ở giai đoạn sau của quá trình phát triển tế bào. Kết quả bước đầu cho thấy chất ức chế xuất hiện gần thể tích rỗng của cột Sephadex G-200, tương đối ổn định về nhiệt, kháng RNase và nhạy cảm với DNase.
A radioimmunoassay procedure for guanosine 3',5'-cyclic monophosphate (CGMP) is described. The procedure is based on competitive binding between [3H]CGMP and non-radioactive CGMP, with separation of bound and unbound CGMP by Millipore filtration. The binding reaction showed very high specificity to CGMP, had a broad pH optimum, and reached equilibrium within a short time. A simple procedure for the pruification of assay samples using Dowex AG 50W-X2 resin is also described. CGMP contents in urine samples were assayed without purification. Injection of glucagon into healthy human volunteers resulted in a small but significant reduction in urinary CGMP level, whereas CAMP excretion increased dramatically.
Mô tả quy trình miễn dịch phóng xạ đối với guanosine 3 ', 5' - monophosphate vòng (CGMP).
1. Tryptophan was administered to rats under various nutritional conditions: fasted for 24 hr, fasted and refed with glucose or corn-oil, fasted and administered glycerol intramuscularly, and nonfasted. 2. The changes in the contents of glycolytic intermediates in the livers indicated that the phosphoenolpyruvate carboxykinase [EC 4.1.1.32] reaction is inhibited by tryptophan administration in all groups of rats. The inversely related changes in the contents of malate and phosphoenolpyruvate were associated with the accumulation of quinolinate in the livers. The content of quinolinate which exhibited the half-maximal effect on the contents of both metabolites was 0.1-0.2 mumole per g liver. 3. The rate of incorporation of 3H from 3H2O into the total hepatic fatty acids was increased about 2-fold by the administration of this amino acid to the fasted rats. The enhancement of the rate was closely related to the increase in the citrate content. The hyperlipogenesis was also related to the decrease of acetyl-CoA and the increase of malonyl-CoA. The content of long-chain acyl-CoA was not affected. These effects of tryptophan administration on the hepatic fatty acid metabolism were found in all groups of rats. The liver content of glycerol 3-phosphate was decreased by tryptophan administration was markedly increased by glycerol injection. The injection of glycerol into the control and the tryptophan-treated rats produced a marked increase of glycerol 3-phosphate but did not affect the rate of fatty acid synthesis in the livers of either group. 4. It may be concluded that, in the livers of rats under various nutritional conditions, the short-term control of fatty acid synthesis by tryptophan administration is most likely due to the activation of acetyl-coenzyme A carboxylase [EC 6.4.1.2] by citrate.
1. Chuột cống trắng được cho uống tryptophan trong điều kiện dinh dưỡng khác nhau: nhịn ăn 24 giờ, cho ăn glucose hoặc dầu ngô, cho ăn bắp và không nhịn ăn glycerol. 2. Sự thay đổi hàm lượng glycolytic intermediates trong gan cho thấy phản ứng phosphoenolpyruvate carboxykinase (EC 4.1.1.32) bị ức chế khi cho uống tryptophan ở tất cả các lô chuột. Sự thay đổi ngược lại về hàm lượng của malate và phosphoenolpyruvate có liên quan với sự tích tụ quinolinate trong gan. Hàm lượng quinolinate thể hiện tác dụng nửa tối đa trên cả hai chất chuyển hóa là 0,1-0,2 mumole/g gan. 3. Tốc độ kết hợp 3H từ 3H2O vào acid béo toàn phần của gan tăng khoảng 2 lần khi cho chuột đang nhịn ăn uống. Sự tăng cường hàm lượng citrate có liên quan chặt chẽ với sự gia tăng hàm lượng citrate. Tăng lipid cũng liên quan với sự giảm acetyl-CoA và malonyl-CoA. Hàm lượng acyl-CoA chuỗi dài không bị ảnh hưởng. Những tác động này của tryptophan lên quá trình chuyển hóa acid béo của gan đã được tìm thấy ở tất cả các lô chuột. Hàm lượng gan của glycerol 3-phosphate bị giảm khi cho uống tryptophan và tăng rõ rệt khi tiêm glycerol. Việc tiêm glycerol vào lô đối chứng và chuột đã xử lý tryptophan đã làm tăng đáng kể hàm lượng glycerol 3-phosphate nhưng không ảnh hưởng đến tốc độ tổng hợp acid béo ở cả hai lô. 4. Có thể kết luận rằng, ở gan chuột trong điều kiện dinh dưỡng khác nhau, sự kiểm soát ngắn hạn quá trình tổng hợp acid béo bằng tryptophan rất có thể là do sự hoạt hóa acetyl-coenzyme A carboxylase (EC 6.4.1.2) bởi citrate.
In order to clarify how the electrophoretic behavior reflects the conformational transition of globular proteins, moving boundary electrophoresis was applied to analysis of the acid conformational change of alpha-lactalbumin. The appearance of only a single electrophoretic boundary in the transition region of the protein suggests a very rapid transition with a half-time estimated to be smaller than 7 min on the basis of the theory of isomerizing systems in electrophoresis. The transition is clearly reflected in the dependence of the mobility on the protein net charge, which shows a sigmoidal curve closely similar to that obtained by a Linderstrøm-Lang pH-tritration plot for the carboxyl groups of alpha-lactalbumin. It was also concluded from the transition curves that the acidfication does not result in complete unfolding, but that a compact structure is maintained in the acidic region with an apparently expanded form as compared to the native state of the protein. All results obtained by electrophoresis were also supported by the results of pH-jump studies, analytical gel chromatography, and CD measurements.
Để làm rõ hoạt động điện di phản ánh sự chuyển tiếp về hình dạng của protein hình cầu như thế nào, phương pháp điện di biên dịch chuyển được áp dụng để phân tích sự thay đổi hình dạng acid của alpha-lactalbumin. Sự xuất hiện của một biên điện di duy nhất ở vùng chuyển tiếp của protein cho thấy sự chuyển tiếp rất nhanh với thời gian nửa thời gian ước tính nhỏ hơn 7 phút trên cơ sở lý thuyết về hệ thống đồng phân hóa trong điện di. Sự chuyển tiếp được phản ánh rõ ràng ở sự phụ thuộc của tính di động vào điện tích thuần của protein, cho
Recombination of ciliary dyneins of Tetrahymena pyriformis with the outer fibers was investigated using turbidimetry, co-sedimentation analysis and electron microscopy. As reported by Gibbons, 30S dynein could recombine with the outer fibers, while 14S dynein did to so a lesser extent. At acidic pH, however, most of the 14S dynein was also rebound to the outer fibers. When an excess of crude dynein fraction was added to the outer fiber fraction at pH 8.2, electron microscopic observations showed that the outer doublet microtubules were decorated not only with arms but also with other electron-dense materials. On the other hand, when crude dynein fraction was mixed with the outer fibers in an appropriate quantity, only arms were reconstituted at the regular positions of A-subfibers. ATP had an inhibitory effect on the recombination of dynein with the outer fibers.
Tái tổ hợp dynein mật của Tetrahymena pyriformis với các sợi bên ngoài đã được nghiên cứu bằng phương pháp đo đục, phân tích lắng và kính hiển vi điện tử. Theo báo cáo của Gibbons, dynein 30S có thể tái tổ hợp với các sợi bên ngoài, trong khi dynein 14S có thể tái tổ hợp ở mức độ thấp hơn. Tuy nhiên, ở pH acid, hầu hết dynein 14S cũng phản ứng lại với các sợi bên ngoài. Khi một phần dynein thô dư thừa được thêm vào phần
The acetylenic substrate, D-2-amino-4-pentynoic acid (D-propargylglycine), was oxidatively deaminated by hog kidney D-amino acid oxidase[EC 1.4.3.3], with accompanying inactivation of the enzyme. The flavin which was extracted by hot methanol from the inactivated enzyme was identical with authentic FAD by thin-layer chromatography and circular dichroism. The excitation spectrum of emission at 520 nm of the released flavin was very similar to the absorption spectrum of oxidized FAD. The released flavin was reduced by potassium borohydride. The apoenzyme prepared after propargylglycine treatment did not show restored D-amino acid oxidase activity on adding exogenous FAD. The absorption spectrum of this inactivated apoenzyme showed absorption peaks at 279 and 317 nm, and a shoulder at about 290 nm. These results strongly indicate that the inactivation reaction is a dynamic affinity labeling with D-propargylglycine which produces irreversible inactivation of the enzyme by a covalent modification of an amino acid residue at the active site.
Chất nền acetylenic, axit D-2-amino-4-pentynoic (D-propargylglycine) đã bị ôxi hoá bởi D-amino acid oxidase (EC 1.4.3.3) thận lợn, kèm theo đó là sự bất hoạt của enzyme. Flavin được chiết xuất bằng methanol nóng từ enzyme bất hoạt giống hệt với FAD đích thực bằng sắc ký lớp mỏng và dicroism vòng tròn. Phổ kích thích phát xạ ở bước sóng 520 nm của flavin phóng thích rất giống với phổ hấp thụ
To clarify the properties and functions of a trypsin inhibitor from Japanese barley in comparison with the inhibitor from Pirkka barley, an inhibitor was isolated from the barley Hordeum distichum L var. emend Lamark by extraction with 1% NaCl, ammonium sulfate fractionation and repeated chromatography on DEAE-cellulose and CM-cellulose. The final purified preparation of the inhibitor was found to be homogeneous by both chromatographic and electrophoretic analysis. The inhibitor was thermostable and was stable over the broad pH range from 2 to 11. No inhibition was observed by heavy metal ions and many reagents at 10(-2) M, except that p-chloromercuribenzoate caused a 69% loss of activity. The inhibitor was subjected to isoelectric focusing at pH 7.51 and its molecular weight was calculated to be 14,200+/-900 by polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulfate. The apparent dissociation constant for the complex between the inhibitor and trypsin[EC 3.4.21.4] was 1.64 X 10(-7)M with casein as a substrate. One microgram of purified inhibitor inhibited 1.5 mug of pure trypsin in the hydrolysis of alpha-N-benzoyl-DL-arginine-p-nitroanilide. By chemical modification of arginyl residues in the inhibitor with 1,2-cyclohexanedione, the inhibitor was shown to be an arginine inhibitor. The inhibitor contained relatively many basic amino acids and few half cystines as compared with Pirkka barley trypsin inhibitor.
Để làm rõ đặc tính và chức năng của chất ức chế trypsin từ lúa mạch Nhật Bản so với chất ức chế từ lúa mạch Pirkka, chất ức chế đã được phân lập từ lúa mạch Hordeum distichum L var. emend Lamark bằng chiết xuất với NaCl 1 %, phân đoạn amoni sulfat và sắc ký lặp lại trên DEAE-cellulose và CM-cellulose. Chất ức chế được tinh sạch cuối cùng được xác định là đồng nhất bằng cả hai phương pháp sắc ký và điện di. Chất ức chế có tính ổn định, ổn
Adenine and pyridine nucleotide levels as well as those of phosphate, phosphocreatine, lactate, pyruvate, beta-hydroxybutyrate, acetoacetate, glucose, and glycogen were measured in histologically defined parietal and mucous cell sections of biopsies of dog gastric mucosa at rest, and in various secretory states. As a result of stimulation of secretion, there appeared to be no change in adenine nucleotide levels, or phosphocreatine, but there was a rise in inorganic phosphate and a fall in phosphorylation potential. However, there was a marked increase in NADH, but no change in NADPH with onset of acid secretion. The increase in the lactate to pyruvate ratio showed that the increased NADH level occurred in the cytoplasm and these data are discussed with reference to change in cell pH.
Nồng độ adenine và pyridine nucleotide cũng như nồng độ phosphate, phosphocreatine, lactate, pyruvate, beta-hydroxybutyrate, acetoacetate, glucose và glycogen được đo ở các phần tế bào thành phần và tế bào nhầy của niêm mạc dạ dày chó khi nghỉ ngơi và ở các trạng thái tiết khác nhau. Kết quả kích thích tiết không làm thay đổi nồng độ adenine nucleotide hay phosphocreatine, nhưng làm tăng nồng độ phosphate vô cơ và khả năng phosphoryl hóa giảm. Tuy nhiên
Cytochrome P-450 from bovine adrenocortical mitochondria exists in three forms of molecular weight: 850,000 (protein 16), of one-half (protein 8), and of one-quarter of this value (protein 4). The forms of the enzyme are named according to the number of subunits and all appear to be active in converting cholesterol to 3beta-hydroxy-5-pregnen-20-one (side chain cleavage) (Shikita, M., and Hall, P.F. (1973) J. Biol. Chem. 248, 5606). To determine whether all three forms are active at their characteristic molecular weights, the three cytochromes were each layered onto separate sucrose density gradients and centrifuged at 49,000 rpm for 60 min; the gradients contained all the factors necessary for side chain cleavage including one of the following substrates: cholesterol, 20S-hydroxycholesterol, and 20S,22R-dihydroxycholesterol. Regardless of the form of P-450 layered onto the gradient and regardless of the substrate, enzyme activity (side chain cleavage) was observed only in fractions corresponding to a sedimentation coefficient of 20 to 22 S which is that for protein 16. No activity was observed at S values corresponding to either protein 8 or protein 4. These findings indicate that the active form of cytochrome P-450 from adrenocortical mitochondria is that containing 16 subunits, i.e. the form in which the cytochrome is normally isolated from adrenal mitochondria. Forms consisting of eight and four subunits which can be prepared from protein 16 become active only by forming protein 16, at least in an aqueous medium in vitro.
Cytochrome P-450 từ ty thể vỏ thượng thận bò tồn tại dưới 3 dạng có khối lượng phân tử: 850.000 (protein 16); 1/2 (protein 8) và 1/4 (protein 4).
Clostridium perfringens sialidase was purified by affinity chromatography. Kinetic properties of the enzyme were examined with sialyllactose and with mixed sialoglycolipids (gangliosides) as substrates. With the latter substrate in 0.01 M Tris-acete in the absence of strong electrolyte, the pH optimum for enzymatic activity was 6.8. Addition of strong electrolyte (0.01 to 0.10 M Nac1) to the reaction medium caused an acidic shift and a broadening of the pH optimum, Enzymatic activity at pH 5.8 rose approximately 2.5-fold; a concomitant loss of activity at pH 6.8 was also observed. The alteration of enzymatic activity caused by strong electrolyte were dependent upon changes in Vmax. Km remained nearly invariant. Thus, a reversible transition of the enzyme from a relatively inactive to a highly active form occurred as a function of strong electrolyte concentration. Determination of the pK values of the active functional groups of C. perfringens sialidase revealed that the effects of strong electrolyte were exerted upon the pKa group of the enzyme. Strong electrolyte appeared to shield unfavorable electrostatic interactions between polyanionic sialoglycolipid micelles and the enzyme molecule, thus protecting the pKa group from inactivation. In comparision with the effects of strong electrolyte upon enzymatic activity toward the sialoglycolipid substrate, those observed with the monovalent substrate, sialyllacthose, were minor. Collectively, these findings indicate that ionic environment may effectively control the activity and relative substrate specificity of C. perfringens sialidase at a given pH. Furthermore, they explain the low pH optima and skewed pH profiles previously reported for enzymatic activity toward high molecular weight substrates.
Chất nền của enzyme là sialyllactose và sialoglycolipid (gangliosides) đã được tinh sạch bằng sắc ký ái lực. Các đặc tính động học của enzyme được khảo sát bằng chất nền là sialyllactose và sialoglycolipid hỗn hợp. Khi không có chất điện li mạnh, pH tối ưu cho hoạt động enzyme là 6,8 M tris-acete. Việc bổ sung chất điện li mạnh (0,01-0,10 M Nac1) vào môi trường phản ứng đã làm thay đổi tính acid và mở rộng pH tối ưu. Hoạt tính của enzyme ở pH 5,8 tăng gần 2,5 lần; đồng thời mất hoạt tính ở pH 6,8. Sự thay đổi hoạt tính của enzyme do chất điện li mạnh phụ thuộc vào sự thay đổi nồng độ Vmax. Km gần như bất biến. Như vậy, sự chuyển tiếp có thể đảo ngược của enzyme từ dạng tương đối không hoạt động sang dạng hoạt động cao đã xảy ra do sự thay đổi nồng độ điện li mạnh. Việc xác định giá trị pK của các nhóm chức năng hoạt động của C. perfringens sialidase cho thấy tác động của chất điện li mạnh lên nhóm pKa của enzyme. Chất điện li mạnh có vẻ bảo vệ các tương tác tĩnh điện bất lợi giữa các mixen của polyanionic sialoglycolipid và phân tử enzyme, do đó bảo vệ nhóm pKa khỏi bị bất hoạt. So sánh với tác động của chất điện li mạnh lên hoạt tính của enzyme đối với chất nền của sialoglycolipid, các tác động của chất nền đơn trị, sialyllacthose, là không đáng kể. Nói chung, những phát hiện này cho thấy môi trường ion có thể kiểm soát hiệu quả hoạt động và độ đặc hiệu của chất nền tương đối của enzyme đối với chất nền có trọng lượng phân tử cao.
Reduced coenzyme Q-cytochrome c reductase from bovine heart mitochondria (complex III) was incorporated into phospholipid vesicles by the cholate dialysis procedure. Soybean phospholipids or mixtures of purified phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, and cardiolipin could be used. Oxidation of reduced coenzyme Q2 by the reconstituted vesicles with cytochrome c as oxidant showed the following energy-coupling phenomena. 1. Protons were translocated outward with a coupling ratio, H+/2e, of 1.9 +/- 0.2. Measurements with mitochondria under similar conditions showed an H+/2e ratio of 1.8. Proton translocation was not seen in the presence of uncoupling agents and was in addition to the net acidification of the medium from the over-all oxidation reaction. 2. Potassium ions were taken up by the reconstituted vesicles in the presence of valinomycin in a reaction coupled to electron transfer. The coupling ratio for K+ uptake, K+/2e, was 2.0 in the vesicles and approximately 1.5 in mitochondria. 3. The rate of oxidation of reduced coenzyme Q2 by the reconstituted vesicles was stimulated up to 10-fold by uncouplers or by valinomycin plus nigericin and K+ ions. Addition of valinomycin alone in a K+ medium caused a transient stimulation of electron transfer. The results indicate that energy coupling can be observed with isolated reduced coenzyme Q-cytochrome c reductase if the enzyme complex is properly incorporated into a phospholipid vesicle.
Coenzyme Q-cytochrome c reductase giảm từ ty thể tim bò (phức hợp III) được kết hợp vào túi phospholipid bằng phương pháp lọc cholipid. Có thể sử dụng các chất phospholipid đậu nành hoặc hỗn hợp phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine và cardiolipin tinh khiết. Quá trình oxy hóa coenzyme Q2 giảm bằng túi tái lập bằng cytochrome c cho thấy hiện tượng tách năng lượng như sau. 1. Các proton được chuyển ra ngoài với
NADH-coenzyme Q reductase from bovine heart mitochondria (complex I) was incorporated into phospholipid vesicles by the cholate dialysis procedure. Mixtures of purified phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine were required. Oxidation of NADH by coenzyme Q1 catalyzed by the reconstituted vesicles was coupled to proton translocation, directed inward, with an H+/2e ratio greater than 1.4. Similar experiments measuring proton translocation in submitochondrial particles gave an H+/2e ratio of 1.8. The proton translocation in both systems was not seen in the presence of uncoupling agents and was in addition to the net proton uptake from the reduction of coenzyme Q1 by NADH. Electron transfer in the reconstituted vesicles also caused the uptake of the permeant anion tetraphenylboron. The rate of electron transfer by the reconstituted vesicles was stimulated about 3-fold by uncouplers or by valinomycin plus nigericin and K+ ions. The results indicate that energy coupling can be observed with isolated NADH-coenzyme Q reductase if the enzyme complex is properly incorporated into a phospholipid vesicle.
NADH-coenzyme Q reductase từ ty thể tim bò (phức hợp I) được tích hợp vào túi chứa phospholipid bằng phương pháp lọc cholate. Cần có hỗn hợp phosphatidylcholine và phosphatidylethanolamine tinh khiết. Quá trình oxy hóa NADH bằng coenzyme Q1 xúc tác bởi túi được tái lập được kết hợp với sự chuyển vị proton, hướng vào trong với tỷ lệ H+/2e lớn hơn 1,4. Các thí nghiệm tương tự đo sự chuyển vị proton trong các
Crude particulate preparations obtained from anaerobic, light-grown cells of Rhodopseudomonas spheroides have been shown to possess a significant level of sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase (EC 2.3.1.15) activity. In contrast to the enzyme from Escherichia coli, the R. spheroides glycerophosphate acyltransferase has a high specificity for acyl thiolester derivatives of acyl carrier protein (ACP) as acyl donors for the reaction. Only limited , nonlinear glycerophosphate incorporation into lipid occurs when acyl coenzyme A (CoA) derivatives are employed as acyl substrate. With oleyl-ACP as substrate, maximal enzyme activity was observed at 40 degrees, over a broad pH range (6.0 to 8.5) and did not require a divalent metal cation. The presence of dithiothreitol stimulated enzyme-activity 15 to 20%. When oleyl-ACP or palmityl-ACP was employed as sole acyl group donor, the major products recoverable from the reaction mixtures were lysophosphatidic acid, phosphatidic acid, and monoglyceride. Althouh oleyl-ACP and palmityl-ACP gave comparable maximal velocities in the initial acylation of glycerophosphate, the formation of phosphatidic acid occurred preferentially with the unsaturated acyl-ACP derivative.
Chế phẩm hạt thô thu được từ tế bào vi khuẩn kỵ khí, phát triển nhẹ của Rhodopseudomonas spheroides có hoạt tính sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase (EC 2.3.1.15 ). Trái ngược với enzyme từ Escherichia coli, glycerophosphate acyltransferase của R.spheroides có tính đặc hiệu cao đối với các dẫn xuất acyl thilosphat của protein vận chuyển acyl (ACP) như là chất cho acyl
Thyroxine-binding globulin was isolated from human plasma by ammonium sulfate fractionation, chromatographic separations on diethylaminoethyl-Sephadex, gel chromatography, and two different electrophoretic procedures. The highly purified was homogeneous when subjected to polyacrylamide gel electrophoresis, ultracentrifugation analyses, and immunochemical determinations. The weight average molecular weight as determined by sedimentation equilibrium ultracentrifugations was 54,000 and by sedimentation diffusion data 55,000. Amino acid analyses indicated a minimum of 110 amino acid residues per molecule. By determination of the minimum in the curve for the fraction of maximum deviation from the amino acid analyses it was found that the minimum molecular weight for the polypeptide was 12,200. Carbohydrate analyses demonstrated the presence f equimolar amounts of amnnose, galactose, and glucosamine, and the carbohydrate portion constituted 7.5% of the total weight. The amino acid analyses suggested that thyroxine-binding globulin is composed of 4 subunits. Molecular weight determinations by gel chromatography in 6 M guanidine hydrochloride indicated the presence of three species of globulin with apparent molecular weights 52,000, 25,000, and 13,500, respectively. Prolonged storage in guanidine hydrochloride promoted a more than 60% yield of the monomeric species. Moreover, a half-molecule of thyroxine-binding globulin was isolated and shown to consist of two polypeptide chains of similar molecular weight...
Globulin liên kết thyroxine được phân lập từ huyết tương người bằng các phương pháp phân đoạn sulfate amoni, phân tách sắc ký trên diethylaminoethyl-Sephadex, sắc ký gel và hai phương pháp điện di khác nhau. Các chất này được tinh sạch cao và đồng nhất khi được điện di gel polyacrylamide, siêu li tâm và xác định hóa miễn dịch. Trọng lượng phân tử trung bình được xác định bằng siêu li tâm cân bằng lắng là 54.000 và bằng số liệu khuếch tán lắng là 55.000. Phân tích
Heterogeneities of the two ovalbumin glycopeptides, (Man)5(GlcNAc)2Asn and (Man)6(GlcNAc)2Asn, were revealed by borate paper electrophoresis of oligosaccharide alcohols obtained from the glycopeptides by endo-beta-N-acetylglucosaminidase H digestion and NaB3H4 reduction. The structures of the major components of the oligosaccharides were determined by the combination of methylation analysis, acetolysis, and alpha-mannosidase digestion. Based on the results, the whole structures of the major components of (Man)5(GlcNAc)2Asn and (Man)6(GlcNAc)2Asn were elucidated as Manalpha1 leads to 6[Manalpha1 leads to 3]-Manalpha1 leads to 6[Manalpha1 leads to 3[Manbeta1 leads to 4GlcNAcbeta1 leads to 4GlcNAc leads to Asn and Manalpha1 leads to 6[Manalpha1 leads to 3]Manalpha1 leads to 6[Manalpha1 leads to 2Manalpha1 leads to 3]Manbeta1 leads to 4GlcNAcbeta1 leads to GlcNAc leads to Asn, respectively. Since endo-beta-N-acetylglucosamini dase D hydrolyzes (Man)5(GlcNAc)2Asn but not (Man)6(GlcNAc)2Asn, the presence of the unsubstituted alpha-mannosyl residue linked at the C-3 position of the terminal mannose of Manbeta1 leads to 4GlcNAcbeta1 leads to 4 GlcNAcAsn core must be essential for the action of the enzyme.
Sự đa dạng của hai glycopeptide ovalbumin (Man) 5 (GlcNAc) 2Asn và (Man) 6 (GlcNAc) 2Asn được phát hiện bằng phương pháp điện di trên giấy borate của rượu oligosaccharide thu được từ glycopeptide bằng cách tiêu hóa endo-beta-N-acetylglucosaminidase H và khử NaB3H4. Cấu trúc của các thành phần chính của oligosaccharide được xác định bằng cách kết hợp phân tích methyl
The apoprotein of hog kidney D-amino acid oxidase was reconstituted with 5-deazaflavin adenine dinucleotide (5-deazaFAD) to yield a protein which contains 1.5 mol of 5-deazaFAD/mol of enzyme. The deazaFAD-containing enzyme forms complexes with benzoate, 2-amino benzoate, and 4-aminobenzoate which are both qualitatively and quantitatively similar to those observed with native enzyme. The complex with 2-aminobenzoate exhibits a new long wavelength absorption band characteristic of a flavin charge-transfer complex. The reconstituted enzyme exhibits no activity when assayed by D-alanine oxidation. However, the bound chromophore can be reduced by alanine, phenylalanine, proline, methionine, and valine, but not by glutamate or aspartate, indicating the deazaFAD enzyme retains the substrate specificity of the native enzyme. Reduction of the enzyme by D-alanine exhibits a 1.6-fold deuterium isotope effect. Reoxidation of the reduced enzyme occurred in the presence of pyruvate plus ammonia, but not with pyruvate alone or ammonia alone. beta-Phenylpyruvate and alpha-ketobutyrate, but not alpha-ketoglutarate could replace pyruvate. Reduced enzyme isolated following reaction with [alpha-3H]alanine was found to contain 0.5 mol of tritium/mol of deazaFADH2. After denaturation of the tritium-labeled enzyme, the radioactivity was identified as deazaFADH2. Reaction of the reduced tritium-labeled enzyme with pyruvate plus ammonia prior to denaturation yields [alpha-3H]alanine and unlabeled deazaFAD. These results suggest that reduction and reoxidation of enzyme-bound deazaFAD involves the stereo-specific transfer of alpha-hydrogen from substrate to deazaFAD.
Các protein apoprotein của enzyme thận lợn được tái tổ hợp với 5-deazaflavin adenine dinucleotide (5-deazaFAD) để tạo thành một protein chứa 1,5 mol 5-deazaFAD/mol của enzyme. Các enzyme chứa deazaFAD tạo thành các phức hợp với benzoate, 2-amino benzoate và 4-aminobenzoate, cả về chất lượng và số lượng tương tự như các phức hợp enzyme bản địa. Phức hợp 2-aminobenzoate thể hiện một dải hấp thụ bước sóng dài đặc trưng của phức chất chuyển điện flavin. Enzyme tái tổ hợp không có hoạt tính khi thử nghiệm oxy hóa bằng D-alanine. Tuy nhiên, chất nhiễm sắc thể liên kết có thể bị khử bởi alanine, phenylalanine, proline, methionine và valine, nhưng không phải bởi glutamate hoặc aspartate, cho thấy enzyme deazaFAD vẫn giữ được tính đặc hiệu của cơ chất enzyme bản địa. Phản ứng khử enzyme bằng D-alanine thể hiện hiệu ứng đồng vị deuterium gấp 1,6 lần. Phản ứng tái oxy hóa enzyme giảm xảy ra khi có pyruvate cộng với amoniac, nhưng không phải với pyruvate hoặc amoniac. Beta-Phenylpyruvate và alpha-ketobutyrate, nhưng không phải alpha-ketoglutarate có thể thay thế pyruvate. Enzyme khử phân lập được sau phản ứng với deazaFADH2. Phản ứng của enzyme khử với pyruvate cộng với amoniac trước khi enzyme biến tính tạo thành deazaFADH2.