Datasets:

presencesw

/

pubmed_envi_stage_1

like 0

(--)-alpha-Bisabolol has a primary antipeptic action depending on dosage, which is not caused by an alteration of the pH-value. The proteolytic activity of pepsin is reduced by 50 percent through addition of bisabolol in the ratio of 1/0.5. The antipeptic action of bisabolol only occurs in case of direct contact. In case of a previous contact with the substrate, the inhibiting effect is lost.

(--) - Alpha-Bisabolol có tác dụng chống viêm loét dạ dày tá tràng nguyên phát tùy thuộc vào liều dùng, không phải do sự thay đổi giá trị pH. Hoạt tính phân giải protein của pepsin giảm 50% khi bổ sung bisabolol theo tỷ lệ 1/0,5. Tác dụng chống viêm loét của bisabolol chỉ xảy ra khi tiếp xúc trực tiếp. Trong trường hợp tiếp xúc trước đó với chất nền thì tác dụng ức chế bị mất.

A report is given on the recent discovery of outstanding immunological properties in BA 1 [N-(2-cyanoethylene)-urea] having a (low) molecular mass M = 111.104. Experiments in 214 DS carcinosarcoma bearing Wistar rats have shown that BA 1, at a dosage of only about 12 percent LD50 (150 mg kg) and negligible lethality (1.7 percent), results in a recovery rate of 40 percent without hyperglycemia and, in one test, of 80 percent with hyperglycemia. Under otherwise unchanged conditions the reference substance ifosfamide (IF) -- a further development of cyclophosphamide -- applied without hyperglycemia in its most efficient dosage of 47 percent LD50 (150 mg kg) brought about a recovery rate of 25 percent at a lethality of 18 percent. (Contrary to BA 1, 250-min hyperglycemia caused no further improvement of the recovery rate.) However this comparison is characterized by the fact that both substances exhibit two quite different (complementary) mechanisms of action. Leucocyte counts made after application of the said cancerostatics and dosages have shown a pronounced stimulation with BA 1 and with ifosfamide, the known suppression in the post-therapeutic interval usually found with standard cancerostatics. In combination with the cited plaque test for BA 1, blood pictures then allow conclusions on the immunity status. Since IF can be taken as one of the most efficient cancerostatics--there is no other chemotherapeutic known up to now that has a more significant effect on the DS carcinosarcoma in rats -- these findings are of special importance. Finally, the total amount of leucocytes and lymphocytes as well as their time behaviour was determined from the blood picture of tumour-free rats after i.v. application of BA 1. The thus obtained numerical values clearly show that further research work on the prophylactic use of this substance seems to be necessary and very promising.

Nghiên cứu đã phát hiện ra các đặc tính miễn dịch nổi bật của BA 1 (N-(2-cyanoethylene) - urea) có khối lượng phân tử (thấp) M = 111.104. Các thí nghiệm trên 214 carcinoza mang dòng máu Wistar cho thấy BA 1, với liều lượng chỉ khoảng 12% LD50 (150 mg kg) và tỷ lệ tử vong không đáng kể (1,7% ), cho kết quả tỷ lệ phục hồi là 40% mà không tăng đường huyết và trong một thí nghiệm là 80% với tỷ lệ tăng đường huyết. Trong điều kiện không thay đổi, chất ifosfamide (IF) - với sự phát triển thêm của cyclophosphamide - khi được sử dụng với liều hiệu quả nhất là 47% LD50 (150 mg kg) đã cho kết quả là 25% phục hồi với tỷ lệ tử vong là 18% ( khác với BA 1, tăng đường huyết 250 phút không làm tăng thêm tỷ lệ phục hồi.) Tuy nhiên, sự so sánh này được đặc trưng bởi thực tế là cả hai chất đều thể hiện hai cơ chế hoạt động hoàn toàn khác nhau. Số lượng bạch cầu được thực hiện sau khi sử dụng các chất điều trị ung thư và liều lượng nói trên đã cho thấy sự kích thích rõ rệt với BA 1 và với ifosfamide, sự ức chế trong khoảng thời gian sau điều trị thường được tìm thấy với các chất điều trị ung thư tiêu chuẩn. Kết hợp với xét nghiệm mảng bám được trích dẫn đối với BA 1, hình ảnh máu sau đó cho phép kết luận về tình trạng miễn dịch. Vì IF có thể được coi là một trong những chất điều trị ung thư hiệu quả nhất-cho đến nay chưa có hóa trị liệu nào khác có tác dụng đáng kể hơn đối với carcinoza ở chuột - những phát hiện này có tầm quan trọng đặc biệt. Cuối cùng, tổng lượng bạch cầu và lymphocyte cũng như hành vi thời gian của chúng được xác định từ hình ảnh máu của những con chuột không có khối u sau khi áp dụng BA 1. Các giá trị số học thu được cho thấy rõ ràng rằng công việc nghiên cứu sâu hơn về việc sử dụng chất dự phòng này dường như là cần thiết và rất hứa

The distribution of blood flow to the subendocardial, medium and subepicardial layers of the left ventricular free wall was studied in anaesthetized dogs under normoxic (A), hypoxic (B) conditions and under pharmacologically induced (etafenone) coronary vasodilation (C). Regional myocardial blood flow was determined by means of the particle distribution method. In normoxia a transmural gradient of flow was observed, with the subendocardial layers receiving a significantly higher flow rate compared with the subepicardial layers. In hypoxia induced vasodilation this transmural gradient of flow was persistent. In contrast a marked redistribution of regional flow was observed under pharmacologically induced vasodilation. The transmural gradient decreased. In contrast to some findings these experiments demonstrate that a considerable vasodilatory capacity exists in all layers of the myocardium and can be utilized by drugs. The differences observed for the intramural distribution pattern of flow under hypoxia and drug induced vasodilation support the hypothesis that this pattern reflects corresponding gradients of regional myocardial metabolism.

Sự phân bố lưu lượng máu đến các lớp dưới nội tâm mạc, trung bình và dưới màng ngoài tim của thành thất trái không có biến dạng được nghiên cứu trên chó gây mê trong điều kiện bình thường (A ), thiếu oxy (B) và giãn mạch vành do dược lý (etafenone ). Lưu lượng máu cơ tim khu vực được xác định bằng phương pháp phân bố hạt. Trong điều kiện bình thường, gradient xuyên màng được quan sát thấy, với các lớp dưới nội tâm mạc nhận được lưu lượng dòng chảy cao hơn đáng kể so với các lớp dưới màng ngoài tim. Trong điều kiện

The virostatic compound N,N-diethyl-4-[2-(2-oxo-3-tetradecyl-1-imidazolidinyl)-ethyl]-1-piperazinecarboxamide-hydrochloride (5531) was analyzed as to its effect on the induction of tryptophan-pyrrolase and tyrosineaminotransferase in rat liver. 1. The basic activity of the enzymes was not influenced by the substance either in normal or in adrenalectomized animals. 2. The induction of the enzymes by cortisone increased in the presence of the compound whereas the substrate induction remained unchanged. 3. The induction of tyrosine-aminotransferase by dexamethasonephosphate in tissue culture is inhibited if the dose of compound 5531 is higher than 5 mug/ml.

Hợp chất virostatic N, N-diethyl-4 - [2 - (2-oxo-3 - tetradecyl-1 -imidazolidinyl) -ethyl] -1 - piperazinecarboxamide-hydrochloride (5531) được phân tích tác dụng gây cảm ứng tryptophan-pyrrolase và tyrosineaminotransferase ở gan chuột. 1. Hoạt tính cơ bản của enzyme không bị ảnh hưởng bởi chất này ở động vật bình thường và động vật bị phẫu thuật thượng thận. 2. Sự gây

RMI 61 140, RMI 61 144 and RMI 61 280 are newly synthetized N-[8-R-dibenzo(b,f)oxepin-10-yl]-N'-methyl-piperazine-maleates which show interesting psychopharmacologic effects. This work contains the results of a study performed with these three compounds, in order to demonstrate their neuropsycholeptic activity in comparison with chloropromazine (CPZ) and chlordiazepoxide (CPD). The inhibition of motility observed in mice shows that the compounds reduce the normal spontaneous motility as well as the muscle tone. The central-depressant activity is evidenced by increased barbiturate-induced sleep and a remarkable eyelid ptosis can also be observed. Our compounds do not show any activity on electroshock just as do CPZ and CPD. As to the antipsychotic outline, our compounds show strong reduction of lethality due to amphetamine in grouped mice and a strong antiapomorphine activity. They show also an antiaggressive effect and an inhibitory activity on avoidance behaviour much stronger than CPZ. We have also found extrapyramidal effects, as catalepsy, common to many tranquillizers of the kind of the standards used by us. As for vegetative phenomena, the compounds show hypotensive dose related action ranging from moderate to strong, probably due to an a-receptor inhibition. Adrenolytic activity against lethal doses of adrenaline, antiserotonin and antihistaminic effects, as well as other actions (hypothermia, analgesia, etc.) confirm that RMI 61 140, RMI 61 144 and RMI 61 280 are endowed with pharmacologic properties similar and more potent than those of CPZ. Studies on the metabolism of brain catecholamines show that they are similar to CPZ, although with less effect on dopamine level.

Các hợp chất RMI 61 140, RMI 61 144 và RMI 61 280 là các hợp chất mới được tổng hợp từ các hợp chất N-( 8-R-dibenzo (b, f) oxepin-10-yl]-N '-methyl-piperazine-maleate, cho thấy tác dụng thú vị về tâm sinh lý. Nghiên cứu này bao gồm kết quả của một nghiên cứu được thực hiện với ba hợp chất này, nhằm chứng minh hoạt tính thần kinh tâm thần của chúng so với chloropromazine (CPZ) và chlordiazepoxide (CPD ). Hoạt tính ức chế vận động quan sát được ở chuột cho thấy các hợp chất này làm giảm nhu động tự phát bình thường cũng như trương lực cơ. Hoạt tính giảm trung tâm của các hợp chất được chứng minh bằng cách tăng giấc ngủ do barbiturat gây ra và làm tẹo mí mắt đáng kể. Các hợp chất của chúng tôi không cho thấy bất kỳ hoạt tính nào trên sốc điện như CPZ và CPD. Về tác dụng chống loạn thần, các hợp chất của chúng tôi cho thấy tác dụng giảm huyết áp mạnh do chất amphetamine ở chuột và có hoạt tính chống apomorphine mạnh. Chúng cũng cho thấy tác dụng chống tiến triển và ức chế hành vi tránh thuốc mạnh hơn nhiều so với CPZ. Chúng tôi cũng đã tìm thấy các tác dụng ngoại tháp, như catalepsy, phổ biến đối với nhiều loại thuốc an thần thuộc loại mà chúng tôi sử dụng. Đối với hiện tượng sinh dưỡng, các hợp chất cho thấy tác dụng liên quan đến liều hạ huyết áp từ trung bình đến mạnh, có lẽ là do ức chế thụ thể a. Hoạt tính adrenolytic chống lại liều gây chết người của adrenaline, antiserotonin và thuốc kháng histamin, cũng như các tác dụng khác (hạ thân nhiệt, giảm đau, v. v.) xác nhận rằng RMI 61 140, RMI 61 144 và RMI 61 280 có đặc tính dược lý tương tự và mạnh hơn so với CPZ. Các nghiên cứu về chuyển hóa catecholamine trong não cho thấy chúng tương tự như CPZ, mặc dù ít ảnh hưởng đến mức độ dopamine.

A double-blind study with intra-individual comparisons was carried out to investigate the effects of 15 mg of (8r)-3alpha-hydroxy-8-isopropyl-1alphaH-tropanium bromide(+/-)-tropate (Sch 1000), 15 mg Sch 1000 + 10 mg oxazepam, 10 mg oxazepam and placebo with oral administration in randomized sequence on gastric juice volume, amount of acid, concentration and pH values in 12 healthy volunteers. The secretion parameters were measured during a 1-h basal period and a 2-h stimulation period. The gastric juice was obtained in 15 min portions via stomach tube. Stimulation was effected by 1 mug/kg/h pentagastrin via drip infusion. The Friedman test was used for the comparative statistical evaluation, and individual comparisons were carried out by means of the Wilcoxon test (pair-differences rank). The results show that Sch 1000 and Sch 1000 + oxazepam were equal in effect on basal and stimulated secretion volume. As compared with placebo, it was not possible to establish an effect on secretion volume for oxazepam alone. Sch 1000 and Sch 1000 + oxazepam were found to be equipotent in reducing the amount of basal acid, while oxazepam reduced this quantity only during the first 30 min of basal secretion. None of the three active preparations was capable of inhibiting the stimulated acid, although both Sch 1000 preparations produced a clear trend towards lowered mean values. During the basal secretion period, all three test preparations had an inhibiting action on acid concentration, but none of them had a significant effect during the stimulation period. The pH value was savely increased only by Sch 1000 and Sch 1000 + oxazepam, and this even only during the basal period. The results are discussed.

Nghiên cứu mù đôi có so sánh từng cá nhân được thực hiện để khảo sát tác dụng của 15mg (8r) - 3alpha-hydroxy-8-isopropyl-1alphaH-tropani bromide (+/-)-tropat (Sch 1000); 15mg Sch 1000 + 10mg oxazepam; 10mg oxazepam và giả dược, uống theo trình tự ngẫu nhiên trên thể tích dịch, lượng acid, nồng độ và pH dịch tiết ở 12 người khỏe mạnh. Kích thích được thực hiện bằng cách uống 1 cốc/kg/h pentagastrin. Kích thích được thực hiện bằng cách truyền dịch 15 phút. Nghiệm pháp Friedman được sử dụng để đánh giá thống kê so sánh, và so sánh từng cá nhân được thực hiện bằng nghiệm pháp Wilcoxon (chênh lệch mức độ).

Seven distinct glycosidases (EC 3.2) have been characterized in guinea-pig epidermis. Their properties indicate them to be of lysosomal origin. The 'profile' of the epidermal glycosidases is significantly different from that reported for whole skin, the activities of beta-galactosidase and beta-acetylglucosaminidase being very high and those of the remaining enzymes relatively low in epidermis.

Bảy glycosidase riêng biệt (EC 3.2) đã được đặc trưng ở lớp biểu bì của lợn lang. Đặc điểm của chúng cho thấy chúng có nguồn gốc lysosome. " Cấu trúc " của các glycosidase biểu bì khác biệt đáng kể so với báo cáo cho toàn bộ da, hoạt động của beta-galactosidase và beta-acetylglucosaminidase rất cao và các enzyme còn lại tương đối thấp ở lớp biểu bì.

Five distinct ester hydrolases (EC 3-1) have been characterized in guinea-pig epidermis. These are carboxylic esterase, acid phosphatase, pyrophosphatase, and arylsulphatase A and B. Their properties are consistent with those of lysosomal enzymes.

Năm enzyme hydrolase ester (EC 3-1) khác biệt đã được đặc trưng ở lớp biểu bì của lợn lang. Đó là các enzyme carboxylic, phosphatase acid, pyrophosphatase và arylsulphatase A và B. Các đặc tính của chúng phù hợp với các enzyme lysosome.

A serum agglutinin reactive with red cells in the presence of polycarboxyl groups is reported. It is likely that this represents an additional example of the type of agglutinin previously described as agglutinating red cells in the absence of ionized calcium. Experimental evidence is presented indicating that it is free polycarboxyl groups that potentiate agglutination and that any metal ion, such as calcium, capable of chelating with these groups will prove to be inhibitory.

Báo cáo cho thấy phản ứng ngưng kết hồng cầu trong huyết thanh với các nhóm polycarboxyl. Có khả năng đây là một ví dụ bổ sung của loại ngưng kết hồng cầu được mô tả trước đây như ngưng kết hồng cầu trong trường hợp không có canxi ion hóa. Bằng chứng thực nghiệm được trình bày cho thấy nhóm polycarboxyl tự do có khả năng gây ngưng kết và bất kỳ ion kim loại nào, chẳng hạn canxi, có khả năng chelating với các nhóm này sẽ bị ức chế.

Stroma from either normal or PNH-like red cells is capable of inhibiting, to some extent, lysis in the sucrose test and enhancing lysis in the acidified-serum test. The same opposing effects are displayed by the exclusion peaks from Sephadex G-200 obtained from each stroma preparation, suggesting that the same factor could be responsible for both activities. Stromata and peaks also induce lysis of PNH-like cells in unacidified serum, indicating activation of complement through the alternate pathway. This is confirmed by immunoelectrophoretic observation. When serum previously activated through the alternate pathway is used in the sucrose test the amount of lysis is markedly reduced. This would indicate that the classical pathway activation can be controlled by the alternate pathway. The possible clinical significance of these factors in determining the haemolytic crisis in PNH patients is discussed.

Chất nền từ tế bào hồng cầu bình thường hoặc giống PNH có khả năng ức chế, ở một mức độ nào đó, quá trình ly giải trong xét nghiệm sucrose và tăng cường ly giải trong xét nghiệm huyết thanh tăng axit. Các hiệu ứng đối lập tương tự được thể hiện qua các đỉnh loại trừ Sephadex G-200 thu được từ mỗi lần pha chế chất nền, cho thấy cùng một yếu tố có thể chịu trách nhiệm cho cả hai hoạt động. Stromata và các đỉnh cũng gây ra sự ly giải tế bào giống PNH trong huyết thanh chưa được tăng

The effect of the major metabolite of aspirin, namely salicylic acid, upon the pentose phosphate pathway (PPP) of normal and G6PD-deficient red cells has been studied. Salicylic acid was shown to inhibit this pathway in proportion to the amount present. At any concentration of this substance there was greater inhibition of the PPP in G6PD-deficient than in normal red cells.

Chất chuyển hóa chính của aspirin là acid salicylic có tác dụng ức chế con đường phát triển của tế bào hồng cầu bình thường và thiếu hụt G6PD. Axit salicylic đã được chứng minh là có tác dụng ức chế con đường này tương ứng với số lượng tế bào hiện có. Ở nồng độ nào của chất này, sự ức chế PPP ở tế bào thiếu hụt G6PD cao hơn so với tế bào bình thường.

1. In one experiment the effect on rumen pH of feeding with restricted amounts of whole or pelleted barley was studied. With whole barley there was little variation in rumen pH associated with feeding time, but with pelleted barley the pH decreased from about 7-0 before feeding to about 5-3, 2--3 h after feeding. 2. The rate of disappearance of dried grass during incubation in the rumens of sheep receiving either whole or pelleted barley was studied in a second experiment. After 24 h incubation only 423 mg/g incubated had disappeared in the rumen of sheep receiving pelleted barley while 625 mg/g incubated had disappeared when it was incubated in the rumen of sheep receiving whole barley. 3. The voluntary intake of dried grass of lambs was studied in a third experiment when they received supplements of either 25 or 50 g whole or pelleted barley/kg live weight 0-75. At the high level, pelleted barley reduced intake of dried grass by 534 g/kg but whole barley reduced it by only 352 g/kg. The digestibility of acid-detergent fibre was reduced more by pelleted barley than by whole barley but there was a tendency for a small increase in digestibility of the barley due to processing. 4. The implications of these findings on supplementation of roughages with cereals are discussed.

1. Trong một thí nghiệm, ảnh hưởng của việc cho ăn lúa mạch nguyên cám hoặc lúa mạch cắt nhỏ lên độ pH của dạ cỏ. Độ pH của lúa mạch nguyên cám ít thay đổi so với thời gian cho ăn, nhưng với lúa mạch cắt nhỏ độ pH giảm từ 7-0 trước khi cho ăn xuống còn 5-3 giờ, 2-3 giờ sau khi cho ăn. 2. Tỷ lệ cỏ khô biến mất trong quá trình ấp ở cừu nhận lúa mạch nguyên cám hoặc lúa mạch cắt nhỏ được nghiên cứu ở thí nghiệm thứ hai. Sau 24 giờ ấp chỉ có 423 mg/g cỏ khô biến mất ở cừu nhận lúa mạch cắt nhỏ, trong khi 625 mg/g cỏ khô biến mất ở cừu nhận lúa mạch nguyên cám. 3. Việc tự nguyện ăn cỏ khô của cừu được nghiên cứu ở thí nghiệm thứ ba khi chúng nhận bổ sung 25-50 g lúa mạch nguyên cám hoặc lúa mạch cắt nhỏ/kg thể trọng 0-75. Ở mức cao, lúa mạch cắt nhỏ giảm lượng cỏ khô xuống 534 g/kg nhưng lúa mạch nguyên cám chỉ giảm 352 g/kg. Khả năng tiêu hóa của các loại xơ có tính axit-chất tẩy rửa được giảm bởi lúa mạch cắt nhỏ hơn lúa mạch nguyên cám nhưng có xu hướng tăng nhẹ khả năng tiêu hóa của lúa mạch do quá trình chế biến. 4. Những hệ quả của phát hiện này đối với việc bổ sung lúa mạch thô với ngũ cốc được thảo luận.

Poly(8-aminoguanylic acid) has in neutral solution a novel ordered structure of high stability. The 8-amino group permits formation of three hydrogen bonds between two residues along the "top", or long axis, of the purines. The usual hydrogen bonding protons and Watson-Crick pairing sites are not involved in the association. The bonding scheme has a twofold rotation axis and is hemiprotonated at N(7). Poly(8NH2G) is converted by alkaline titration (pK = 9.7) to a quite different ordered structure, which is the favored form over the range approximately pH 10-11. The bonding scheme appears to be composed of a planar, tetrameric array of guanine residues, in which the 8-amino group does not participate in interbase hydrogen bonding. Poly (8NH2G) does not interact with poly(C) in neutral solution because of the high stability of the hemiprotonated G-G self-structure. Titration to the alkaline plateau, however, permits ready formation of a two-stranded Watson-Crick helix. In contrast to the monomer 8NH2GMP, poly(8NH2G) does not form a triple helix with poly(C) under any conditions. The properties of the ordered structures are interpreted in terms of a strong tendency of the 8-amino group to form a third interbase hydrogen bond, when this possibility is not prevented by high pH.

Poly (8-aminoguanylic acid) trong dung dịch trung tính có cấu trúc mới có trật tự với độ ổn định cao. Nhóm 8-amino cho phép hình thành ba liên kết hydro giữa hai phần dư dọc theo trục dài của các purin. Các proton liên kết hydro thông thường và các điểm ghép cặp Watson-Crick không tham gia vào liên kết này. Sơ đồ liên kết có trục quay gấp đôi và được hemiproton hoá ở N (7). Poly (8NH2G) được chuyển đổi bằng chuẩn độ kiềm (pK = 9,7) thành

The reaction of glutamate dehydrogenase and glutamate (gl) with NAD+ and NADP+ has been studied with stopped-flow techniques. The enzyme was in all experiments present in excess of the coenzyme. The results indicate that the ternary complex (E-NAD(P)H-kg) is present as an intermediate in the formation of the stable complex (E-NAD(P)H-gl). The identification of the complexes is based on their absorption spectra. The binding of the coenzyme to (E-gl) is the rate-limiting step in the formation of (E-NAD(P)H-kg) while the dissociation of alpha-ketoglutarate (kg) from this complex is the rate-limiting step in the formation of (E-NAD(P)H-gl). The Km for glutamate was 20-25 mM in the first reaction and 3 mM in the formation of the stable complex. The Km values were independent of the coenzyme. The reaction rates with NAD+ were approximately 50% greater than those with NADP+. Furthermore, high glutamate concentration inhibited the formation of (E-NADH-kg) while no substrate inhibition was found with NADP+ as coenzyme. ADP enhanced while GTP reduced the rate of (E-NAD(P)H-gl) formation. The rate of formation of (E-NAD(P)H-kg) was inhibited by ADP, while it increased at high glutamate concentration when small amounts of GTP were added. The results show that the higher activity found with NAD+ compared to NADP+ under steady-state assay conditions do not necessarily involve binding of NAD+ to the ADP activating site of the enzyme. Moreover, the substrate inhibition found at high glutamate concentration under steady-state assay condition is not due to the formation of (E-NAD(P)H-gl) as this complex is formed with Km of 3 mM glutamate, and the substrate inhibition is only significant at 20-30 times this concentration.

Phản ứng của glutamate dehydrogenase và glutamate (gl) với NAD+ và NADP+ đã được nghiên cứu bằng kỹ thuật dòng dừng. Trong tất cả các thí nghiệm, enzyme đều có mặt trong lượng lớn coenzyme. Kết quả chỉ ra rằng phức hợp bậc ba (E-NAD (P) H-kg) hiện diện như một chất trung gian trong quá trình hình thành phức hợp bền vững (E-NAD (P) H-gl ). Việc xác định các phức hợp dựa trên phổ hấp thụ của chúng. Sự gắn kết của coenzyme với (E-gl) là bước giới hạn tốc độ hình thành (E-NAD (P) H-kg) trong khi sự phân ly của alpha-ketoglutarate (kg) từ phức hợp này là bước giới hạn tốc độ hình thành (E-NAD (P) H-gl ). Giá trị Km độc lập với coenzyme. Tốc độ phản ứng với NAD+ lớn hơn khoảng 50% so với tốc độ phản ứng với NADP+. Hơn nữa, nồng độ glutamate cao đã ức chế sự hình thành (E-NADH-kg) trong khi không có sự ức chế cơ chất nào được tìm thấy với NADP+ khi có thêm một lượng nhỏ GTP. Kết quả cho thấy, hoạt tính cao hơn được tìm thấy với NAD+ so với NADP+ trong điều kiện ổn định không nhất thiết liên quan đến sự hình thành (E-NAD (P) H-gl) vì phức hợp này được hình thành với Km của glutamate 3 mM và sự ức chế cơ chất chỉ có ý nghĩa ở nồng độ gấp 20-30 lần nồng độ này.

Choline acetyltransferase (EC 2.3.1.6) catalyzes the biosynthesis of acetylcholine according to the following chemical equation: acetyl-CoA + choline in equilibrium to acetylcholine + CoA. In addition to nervous tissue, primate placenta is the only other animal source which contains appreciable acetylcholine and its biosynthetic enzyme. Human brain caudate nucleus and human placental choline acetyltransferase were purified to electrophoretic homogeneity using ion-exchange and blue dextran-Sepharose affinity chromatography. The molecular weights determined by Sephadex G-150 gel filtration and sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis are 67000 plus or minus 3000. N-Ethylmaleimide, p-chloromercuribenzoate, and dithiobis(2-nitrobenzoic acid) inhibit the enzyme. Dithiothreitol reverses the inhibition produced by the latter two reagents. The pKa of the group associated with N-ethylmaleimide inhibition is 8.6 plus or minus 0.3. A chemically competent acetyl-thioenzyme is isolable by Sephadex gel filtration. The enzymes from the brain and placenta are thus far physically and biochemically indistinguishable.

Cholin acetyltransferase (EC 2.3.1.6) xúc tác cho quá trình sinh tổng hợp acetylcholine theo phương trình hóa học sau: acetyl-CoA + cholin ở trạng thái cân bằng thành acetylcholine + CoA. Ngoài mô thần kinh, nhau thai linh trưởng là nguồn duy nhất chứa acetylcholine và enzyme sinh tổng hợp của nó. Nhân đuôi ngựa của não người và cholin acetyltransferase nhau thai của người được tinh sạch để đồng nhất điện di bằng trao đổi ion và sắc ký

Increasing concentrations of chloride were found to increase the resolution between two visible absorbance spectral transitions associated with acidification of ferricytochrome c. Analysis of a variety of spectral and viscosity measurements indicates that protonation of a single group having an apparent pK of 2.1 +/- 0.2 and an intrinsic pK of about 5.3 displaces the methionine ligand without significantly perturbing the native globular conformation. Analysis of methylated ferricytochrome c suggests that protonation of a carboxylate ion, most likely a heme propionate residue, is responsible for displacement of the methionine ligand. Addition of a proton to a second group having an apparent pK of 1.2 +/- 0.1 displaces the histidine ligand and unfolds the protein from a globular conformation into a random coil. It is most likely that the second protonation occurs on the imidazole ring of the histidine ligand itself. Chloride is proposed to perturb these transitions by ligation in the fifth coordination position of the heme ion. Such ligation stabilizes a globular conformation of ferricytochrome c at pH 0.0 and 25 degrees.

Nồng độ clorua tăng lên làm tăng độ phân giải giữa hai chuyển tiếp phổ hấp thụ nhìn thấy được liên quan đến quá trình axit hóa của ferricytochrome c. Phân tích nhiều phép đo phổ và độ nhớt chỉ ra rằng proton hóa của một nhóm đơn lẻ có pK rõ ràng là 2,1 +/- 0,2 và pK nội tại khoảng 5,3 thay thế cho phối tử methionine mà không làm nhiễu loạn đáng kể cấu trúc hình cầu tự nhiên. Phân tích ferricytochrome c methyl hóa cho thấy proton hóa ion carboxyl

The properties of the functional groups in a protein can be used as built-in-probes of the structure of the protein. We have developed a general procedure whereby the ionization constant and chemical reactivity of solitary functional groups in proteins may be determined. The method may be applied to the side chain of histidine, tyrosine, lysine, and cysteine, as well as to the amino terminus of the protein. The method, which is an extension of the competitive labeling technique using [3H]- and [14C]1-fluoro-2,4-dinitrobenzene (N2ph-F) in a double-labeling procedure, is rapid and sensitive. Advantage is taken of the fact that after acid hydrolysis of a dinitrophenylated protein, a derivative is obtained which must be derived from a unique position in the protein. The method has been applied to the solitary histidine residue of lysozyme, alpha-lytic protease, and Streptomyces griseus (S.G.) trypsin, as well as to the amino terminus of the latter protein. The following parameters were obtained for reaction with N2ph-F at 20 degrees C in 0.1 N KCl: the histidine of hen egg-white lysozyme, pKa of 6.4 and second-order velocity constant of 0.188 M-1 min-1; the histidine of alpha-lytic protease, pKa of 6.5 and second-order velocity constant of 0.0235 M-1 min-1; the histidine of S.G. trypsin, pKa of 6.5 and second-order velocity constant of 0.0328 M-1 min-1; the valyl amino terminus of S.G. trypsin, pKa of 8.1 and second-order velocity constant of 0.403 M-1 min-1. In addition, the results obtained provide clues as to the microenvironments of these functional groups, and indicate that the proteins studied undergo pH-dependent conformational changes which affect the microenvironment, and hence the chemical reactivity of these groups.

Các đặc tính của các nhóm chức năng trong protein có thể được sử dụng như các đầu dò cấu trúc của protein. Chúng tôi đã phát triển một quy trình tổng quát theo đó có thể xác định hằng số ion hóa và phản ứng hóa học của các nhóm chức năng đơn độc trong protein. Phương pháp này có thể được áp dụng cho chuỗi bên histidine, tyrosine, lysine và cystein, cũng như đầu amino của protein. Phương pháp này là một phần mở rộng của kỹ thuật dán nhãn cạnh tranh sử dụng [3H] - và [14C]1-fluoro

Primary amines react with 2,4-pentanedione at pH 6-9 to form enamines, N-alkyl-4-amino-3-penten-2-ones. The latter compounds readily regenerate the primary amine at low pH or on treatment with hydroxylamine. Guanidine and substituted guanidines react with 2,4-pentanedione to form N-substituted 2-amino-4,6-dimethylpyrimidines at a rate which is lower by at least a factor of 20 than the rate of reaction of 2,4-pentanedione with primary amines. Selective modification of lysine and arginine side chains in proteins can readily be achieved with 2,4-pentanedione. Modification of lysine is favored by reaction at pH 7 or for short reaction times at pH 9. Selective modification of arginine is achieved by reaction with 2,4-pentanedione for long times at pH 9, followed by treatment of the protein with hydroxylamine. The extent of modification of lysine and arginine side chains can readily be measured spectrophotometrically. Modification of lysozyme with 2,4-pentanedione at pH 7 results in modification of 3.8 lysine residues and less than 0.4 arginine residue in 24 hr. Modification of lysozyme with 2,4-pentanedione at pH 9 results in modification of 4 lysine residues and 4.5 arginine residues in 100 hr. Treatment of this modified protein with hydroxylamine regenerated the modified lysine residues but caused no change in the modified arginine residues. One arginine residue seems to be essential for the catalytic activity of the enzyme.

Các amin bậc 1 phản ứng với 2,4-pentanedione ở pH 6-9 để tạo thành enamin, N-alkyl-4-amino-3-penten-2-ones. Các hợp chất sau dễ dàng tái tạo amin bậc 1 ở pH thấp hoặc khi xử lý bằng hydroxylamin. Guanidine và guanidine thay thế phản ứng với 2,4-pentanedione để tạo thành N-amino-4,6-dimethylpyrimidine thay thế với tốc độ thấp hơn ít nhất 20 lần so với tốc độ phản ứng của 2,4-pentanedione với amin bậc 1. Điều chỉnh có chọn lọc chuỗi bên lysine và arginine trong protein có thể dễ dàng đạt được với 2,4-pentanedione. Việc điều chỉnh lysine được ưa chuộng bởi phản ứng ở pH 7 hoặc cho thời gian phản ứng ngắn ở pH 9. Điều chỉnh có chọn lọc arginine đạt được bằng phản ứng với 2,4-pentanedione trong thời gian dài ở pH 9, sau đó xử lý protein bằng hydroxylamin. Mức độ điều chỉnh chuỗi bên lysine và arginine có thể dễ dàng đo bằng quang phổ. Điều chỉnh lysozyme với 2,4-pentanedione ở pH 7 dẫn đến điều chỉnh dư lượng lysine 3,8 và dư lượng arginine dưới 0,4 trong 24 giờ. Điều chỉnh lysozyme với 2,4-pentanedione ở pH 9 dẫn đến điều chỉnh dư lượng 4 lysine và dư lượng arginine trong 100 giờ. Điều trị protein đã được điều chỉnh này bằng hydroxylamin đã tái tạo dư lượng lysine đã được điều chỉnh nhưng không gây ra sự thay đổi dư lượng arginine đã được điều chỉnh. Dư lượng arginine có vẻ rất cần thiết cho hoạt động xúc tác của enzyme.

Above pH 8.5, pepsinogen is converted into a form which cannot be activated to pepsin on exposure to low pH. Intermediate exposure to neutral pH, however, returns the protein to a form which can be activated. Evidence is presented for a reversible, small conformational change in the molecule, distinct from the unfolding of the protein. At the same time, the molecule is converted to a form of limited solubility, which is precipitated at low pH, where activation is normally seen. The results are interpreted in terms of the peculiar structure of the pepsinogen molecule. Titration of the basic NH2-terminal region produced an open form, which can return to the native form at neutral pH, but which is maintained at low pH by neutralization of carboxylate groups in the pepsin portion.

Với pH trên 8,5, pepsinogen được chuyển hóa thành dạng không thể hoạt hóa thành pepsin khi tiếp xúc với pH thấp. Tuy nhiên, khi tiếp xúc trung gian với pH trung tính, protein sẽ trở lại dạng có thể hoạt hóa được. Bằng chứng được đưa ra cho thấy sự thay đổi nhỏ về hình dạng của phân tử, có thể đảo ngược được, khác với khi protein mở ra. Đồng thời, phân tử được chuyển hóa thành dạng có độ hòa tan giới hạn, kết tủa ở pH thấp, nơi thường thấy sự hoạt hóa. Kết quả được giải

A purification procedure is reported for obtaining bovine liver dihydrofolate reductase in high yield and amounts of 100-200 mg. A key step in the procedure is the use of an affinity gel prepared by coupling pteroyl-L-lysine to Sepharose. The purified reductase has a specific activity of about 100 units/mg and is homogeneous as judged by analytical ultracentrifugation, polyacrylamide gel electrophoresis, and titration with methotrexate. The products of the first step of Edman degradation indicated a minimum purity of 79%. The reductase has a molecular weight of about 21500 on the basis of amino acid composition and 22100 +/- 300 from equilibrium sedimentation. It is not inhibited by antiserum to the Streptococcus faecium reductase (isoenzyme 2). Unlike the reductase of many other vertebrate tissues, the bovine enzyme is inhibited by mercurials rather than activated and it has a single pH optimum at both low and high ionic strength. However, the position of the pH optimum is shifted and the activity increased by increasing ionic strength. Automatic Edman degradation has been used to determine 34 of the amino-terminal 37 amino acid residues. Considerable homology exists between this region and the corresponding regions of the reductase from S. faecium and from Escherichia coli. This strengthens the idea that this region contributes to the structure of the binding site for dihydrofolate.

Đã có một quy trình tinh sạch để thu được dihydrofolate reductase ở gan bò với năng suất cao và hàm lượng 100-200 mg. Bước quan trọng trong quy trình này là sử dụng gel có ái lực được điều chế bằng cách kết hợp pteroyl-L-lysine với Sepharose. Reductase tinh sạch có hoạt tính đặc hiệu khoảng 100 đơn vị/mg và đồng nhất được đánh giá bằng phương pháp siêu ly tâm, điện di gel polyacrylamide và chuẩn độ bằng methotrexate. Sản phẩm của bước đầu tiên của quá trình phân hủy Edman cho thấy độ tinh khiết tối thiểu là 79 %. Reductase có trọng lượng phân tử khoảng 21.500 trên cơ sở thành phần axit amin và 22.100 +/- 300 từ quá trình lắng cân bằng. Nó không bị ức chế bởi kháng huyết thanh với Streptococcus faecium reductase (isoenzyme 2 ). Không giống như reductase của nhiều mô động vật có xương sống khác, enzyme bò bị ức chế bởi thủy ngân hơn là hoạt hóa và có độ pH tối ưu ở cả độ mạnh ion thấp và cao. Tuy nhiên, vị trí của pH tối ưu bị thay đổi và hoạt tính tăng lên khi tăng cường độ ion. Quá trình phân hủy Edman tự động đã được sử dụng để xác định 34 trong số 37 dư lượng axit amin cuối amino. Đáng kể có sự tương đồng giữa vùng này với các vùng tương ứng của reductase từ S.faecium và từ Escherichia coli. Điều này củng cố ý tưởng cho rằng vùng này góp phần vào cấu trúc của vị trí gắn dihydrofolate.

Dihydrofolate reductase has been purified 40-fold to apparent homogeneity from a trimethoprim-resistant strain of Escherichia coli (RT 500) using a procedure that includes methotrexate affinity column chromatography. Determinations of the molecular weight of the enzyme based on its amino acid composition, sedimentation velocity, and sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis gave values of 17680, 17470 and 18300, respectively. An aggregated form of the enzyme with a low specific activity can be separated from the monomer by gel filtration; treatment of the aggregate with mercaptoethanol or dithiothreitol results in an increase in enzymic activity and a regeneration of the monomer. Also, multiple molecular forms of the monomer have been detected by polyacrylamide gel electrophoresis. The unresolved enzyme exhibits two pH optima (pH 4.5 and pH 7.0) with dihydrofolate as a substrate. Highest activities are observed in buffers containing large organic cations. In 100 mM imidazolium chloride (pH 7), the specific activity is 47 mumol of dihydrofolate reduced per min per mg at 30 degrees. Folic acid also serves as a substrate with a single pH optimum of pH 4.5. At this pH the Km for folate is 16 muM, and the Vmax is 1/1000 of the rate observed with dihydrofolate as the substrate. Monovalent cations (Na+, K+, Rb+, and Cs+) inhibit dihydrofolate reductase; at a given ionic strength the degree of inhibition is a function of the ionic radius of the cation. Divalent cations are more potent inhibitors; the I50 of BaCl2 is 250 muM, as compared to 125 mM for KCl. Anions neither inhibit nor activate the enzyme.

Dihydrofolate reductase đã được tinh sạch 40 lần đến mức đồng nhất rõ ràng từ chủng Escherichia coli kháng trimethoprim (RT 500) bằng phương pháp sắc ký cột ái lực methotrexate. Các kết quả xác định trọng lượng phân tử của enzyme dựa trên thành phần acid amin, vận tốc lắng và điện di gel natri dodecyl sulfate cho giá trị lần lượt là 17680, 17470 và 18300. Có thể tách dạng tổng hợp của enzyme có hoạt tính đặc hiệu thấp ra khỏi monome bằng cách lọc gel; xử lý tổng hợp bằng mercaptoethanol hoặc dithiothreitol làm tăng hoạt tính của enzyme và tái sinh monome. Ngoài ra, điện di gel polyacrylamide cũng phát hiện nhiều dạng phân tử của monome. Enzym chưa được giải phóng có hai pH tối ưu (pH 4,5 và pH 7,0) với dihydrofolate làm chất nền. Hoạt tính cao nhất được quan sát thấy trong các chất đệm chứa cation hữu cơ lớn. Trong 100 mM imidazolium clorua (pH 7) thì hoạt tính đặc hiệu là 47 mumol dihydrofolate giảm mỗi phút một mg ở 30 độ C. Axit folic cũng đóng vai trò là chất nền với pH tối ưu là 4,5. Ở pH này, Km đối với folate là 16 muM, và Vmax là 1/1000 của tỷ lệ quan sát được với dihydrofolate làm chất nền. Các cation đơn trị (Na+, K+, Rb+ và Cs+) ức chế dihydrofolate reductase; ở một cường độ ion nhất định, mức độ ức chế là một chức năng của bán kính ion của cation. Các cation hóa trị hai là chất ức chế mạnh hơn; I50 của BaCl2 là 250 muM, so với 125 mM đối với KCl. Anion không ức chế cũng như không kích hoạt enzyme.

Ionization effects on the binding of the potential transition state analogues 2-phosphoglycolate and 2-phosphoglycolohydroxamate appear to be attributable to the changing state of ionization of the ligands themselves, therefore it is unnecessary to postulate the additional involvement of an ionizing residue at the active site of triosephosphate isomerase to explain the influence of changing pH on Ki in the neutral range. The binding of the competitive inhibitor inorganic sulfate is insensitive to changing pH in the neutral range. 3-Chloroacetol sulfate, synthesized as an active-site-specific reagent for triosephosphate isomerase, is used to provide an indication of the pKa of the essential carboxyl group of this enzyme. Previously described active-site-specific reagents for the isomerase were phosphate esters, and their changing state of ionization (accompanied by possible changes in their affinity for the active site) may have complicated earlier attempts to determine the pKa of the essential carboxyl group from the pH dependence of the rate of inactivation. Being a strong monoprotic acid, chloroacetol sulfate is better suited to the determination of the pKa of the carboxyl group. Chloroacetol sulfate inactivates triosephosphate isomerase by the selective esterification of the same carboxyl group as that which is esterified by the phosphate esters described earlier. From the pH dependence of the rate of inactivation of yeast triosephosphate isomerase, the apparent pKa of the active-site carboxyl group is estimated as 3.9 +/- 0.1.

Tác động của ion hóa lên sự gắn kết của các chất tương tự trạng thái chuyển tiếp 2-phosphoglycolate và 2-phosphoglycolohydroxamate dường như là do sự thay đổi trạng thái ion hóa của chính các phối tử, do đó không cần thiết phải đưa ra sự liên quan bổ sung của dư lượng ion hóa tại vị trí hoạt động của triosephosphate isomerase để giải thích ảnh hưởng của sự thay đổi pH lên K i trong khoảng trung tính. Sự gắn kết của chất ức chế cạnh tranh sulfat vô cơ không nhạy cảm với sự thay đổi pH trong khoảng trung tính. 3-Cloroacetol sulfate, được tổng hợp như một chất phản ứng đặc hiệu tại chỗ hoạt động cho isomerase triosephosphate, được sử dụng để chỉ ra pKa của nhóm carboxyl thiết yếu của enzyme này. Các chất phản ứng đặc hiệu tại chỗ hoạt động được mô tả trước đây cho nhóm isomerase là các este phosphate, và sự thay đổi pH (đi kèm với những thay đổi có thể có trong ái lực của chúng đối với vị trí hoạt động) có thể đã có những nỗ lực phức tạp trước đó để xác định pKa của nhóm carboxyl thiết yếu từ sự phụ thuộc của pH vào tốc độ bất hoạt của nhóm này. Là một axit monoprotic mạnh, chloroacetol sulfate phù hợp hơn để xác định pKa của nhóm carboxyl. Chloroacetol sulfate làm bất hoạt triosephosphate isomerase bằng cách este hóa chọn lọc của cùng nhóm carboxyl như đã được este hóa bởi các este phosphate được mô tả trước đó. Từ sự phụ thuộc pH của tốc độ bất hoạt của triosephosphate isomerase của nấm men, pKa biểu kiến của nhóm carboxyl hoạt động được ước tính là 3,9 +/- 0,1.

Bovine erythrocyte superoxide dismutase was slowly and irreversibly inactivated by hydrogen peroxide. The rate of this inactivation was directly dependent upon the concentrations of both H2O2 and of enzyme, and its second-order rate constant at pH 10.0 and 25 degrees was 6.7 M-1 sec-1. Inactivation was preceded by a bleaching due to rapid reduction of Cu2+ on the enzyme, and following this there was a gradual reappearance of a new absorption in the visible region, which was coincident with the loss of catalytic activity. Inactivation of the enzyme was pH-dependent and indicated an essential ionization whose pKa was approximately 10.2. Replacement of H2O by D2O raised this pKa but did not diminish the catalytic activity of superoxide dismutase, measured at pH 10.0. Several compounds, including xanthine, urate, formate, and azide, protected the enzyme against inactivation by H2O2. Alcohols and benzoate, which scavenge hydroxyl radical, did not protect. Compounds with special affinity for singlet oxygen were similarly ineffective. The data were interpreted in terms of the reduction of the enzyme-bound Cu2+ to Cu+, by H2O2, followed by a Fenton's type reaction of the Cu+ with additional H2O2. This would generate Cu2+-OH- or its ionized equivalent, Cu2+-O--, which could then oxidatively attack an adjacent histidine and thus inactivate the enzyme. Compounds which protected the enzyme could have done so by reacting with the bound oxidant, in competition with the adjacent histidine.

Hồng cầu bò bị bất hoạt từ từ và không thể phục hồi bởi chất hydro peroxid. Tốc độ bất hoạt phụ thuộc trực tiếp vào nồng độ của cả H2O2 và enzyme, và hằng số tốc độ bậc hai của nó ở pH 10,0 và 25 độ là 6,7 M-1 sec-1. Trước đó enzyme bị bất hoạt bằng cách tẩy trắng do sự khử Cu2+ nhanh chóng trên enzyme, và sau đó xuất hiện sự hấp thụ mới từ từ ở vùng nhìn thấy được, trùng với sự mất hoạt tính xúc tác. Sự bất hoạt của enzyme phụ thuộc vào pH và biểu hiện sự ion hóa thiết yếu có pKa xấp xỉ 10,2. Thay thế H2O bằng D2O làm tăng pKa này nhưng không làm giảm hoạt tính xúc tác của superoxide dismutase, đo ở pH 10,0. Một số hợp chất, bao gồm xanthine, urat, formate và azide, đã bảo vệ enzyme chống lại sự bất hoạt của H2O2. Rượu và benzoat, vốn làm sạch gốc hydroxyl, không bảo vệ được enzyme. Các hợp chất có ái lực đặc biệt với oxy nhóm đơn cũng không hiệu quả tương tự. Các dữ liệu được giải thích theo cách khử Cu2+ liên kết với Cu+ bằng H2O2, tiếp theo là phản ứng kiểu Fenton của Cu+ với H2O2 bổ sung. Điều này sẽ tạo ra Cu2+-OH-hoặc tương đương ion hóa của nó, Cu2+-O--, sau đó có thể tấn công oxy hóa histidine lân cận và do đó làm bất hoạt enzyme. Các hợp chất bảo vệ enzyme có thể làm như vậy bằng cách phản ứng với chất oxy hóa liên kết, cạnh tranh với histidine lân cận.

The near-ultraviolet circular dichroism (CD) of three homogeneous anti-type III pneumococcal antibodies in the absence and the presence of the specific hexasaccharide ligand was studied. In addition recombinations and hybridizations of H and L chains derived from two of these antibodies were carried out and the CD spectra of bound and free reconstituted IgG molecules were measured. The results indicate that the CD spectra of the native antibodies in the 260-310-nm range are very similar in shape and sign and exhibit a positive band at 285 nm. The homologous reconstituted antibody molecules exhibited CD spectra very similar in shape and sign to those of the native antibody molecules although recombinant molecules are no longer stabilized by interchain disulfide bonds. Upon addition of the hexasaccharide ligand, a significant decrease in amplitude of the CD spectra (18-21%) occurred in all three native antibodies and their Fab fragments as well as in the homologous recombinant molecules. No CD spectral changes could be detected upon interaction of the hapten ligand with the heterologous recombinants. All homogeneous antibodies studied exhibited fluorescence quenching upon oligosaccharide binding and a blue shift of the emission maximum. This property allowed the determination of the binding constant of one selected antibody to be made. Taken together, CD and fluorescence spectroscopic data suggest that oligosaccharide ligands induced detectable conformational changes in the Fab fragment of the antibody.

Nghiên cứu đã xác định được sự đồng nhất của 3 loại kháng thể kháng viêm phổi loại III không có và có sự hiện diện của các phối tử hexasaccharide. Bên cạnh đó, chúng tôi cũng tái tổ hợp và lai các chuỗi H và L từ 2 trong số các kháng thể này và đo phổ CD của các phân tử IgG tái tổ hợp tự do và liên kết. Kết quả cho thấy phổ CD của các kháng thể tự nhiên trong khoảng bước sóng 260-310 nm rất giống nhau về hình dạng và dấu hiệu và thể hiện dải dương ở bước sóng 285 nm. Các phân tử kháng thể tái tổ hợp tương đồng thể hiện phổ CD rất giống nhau về hình dạng và dấu hiệu so với các phân tử kháng thể tự nhiên mặc dù các phân tử tái tổ hợp không còn ổn định bởi liên kết disulfide interchain. Khi bổ sung phối tử hexasaccharide, biên độ phổ CD giảm đáng kể (18-21% ) xảy ra ở cả ba kháng thể tự nhiên và các mảnh Fab của chúng cũng như ở các phân tử tái tổ hợp tương đồng. Không phát hiện được sự thay đổi phổ CD khi có sự tương tác của phối tử hapten với các kháng thể dị hợp tử. Tất cả các kháng thể đồng nhất nghiên cứu đều thể hiện sự làm nguội huỳnh quang khi có liên kết oligosaccharide và sự dịch chuyển cực đại phát xạ. Đặc tính này cho phép xác định hằng số liên kết của một kháng thể được chọn. Kết hợp với nhau, các dữ liệu phổ CD và huỳnh quang cho thấy các phối tử oligosaccharide tạo ra những thay đổi về hình dạng có thể phát hiện được ở mảnh Fab của kháng thể.

The circular polarization of luminescence (CPL) emitted by tryptophan residues was used as a sensitive probe for measuring ligand-induced structural changes in a homogeneous type III pneumococcal antibody. A series of oligosaccharide ligands of increasing size derived from type III polysaccharide by partial acid hydrolysis was assayed. Ligand-induced changes in the circular polarization of fluorescence of the antibody were observed for all antigens tested, including tetra-, hexa-, and octasaccharides and a 16-residue oligomer, the largest changes being recorded upon interaction with the intact soluble type III pneumococcal (SIII) polysaccharide. When Fab' or F(ab')2 fragments were used instead of the antibody IgG for binding of SIII polysaccharide, the extent of conformational changes was decreased. This suggests interactions between Fab and Fc portions in the IgG molecule and subsequent conformational changes in Fc part upon antigen binding. Reduction of interchain disulfide bonds abolished the additional spectral changes attributed to the Fc part but not the changes observed in the Fab part, thus suggesting that the presence of the interchain disulfide bond in the hinge region is required for maximal CPL changes to occur. Small monovalent ligands, i.e., the tetra-, hexa-, and octasaccharides, were capable of inducing CPL changes in the Fab part of the antibody molecule as well as CPL changes attributed to the Fc portion. A multivalent ligand containing about 16 sugar residues appears to be the minimal antigenic size required for triggering conformational changes attributed to the Fc part, similar to those seen in the interaction with the whole polysaccharide antigen.

Sự phân cực vòng tròn của phát quang do dư lượng tryptophan phát ra được sử dụng như một đầu dò nhạy cảm để đo lường sự thay đổi cấu trúc do ligand gây ra trong kháng thể phế cầu khuẩn loại III đồng nhất. Một loạt các ligand oligosaccharide có kích thước tăng dần có nguồn gốc từ polysaccharide loại III bằng thủy phân một phần acid đã được thử nghiệm. Sự thay đổi do ligand gây ra trong sự phân cực vòng tròn của huỳnh quang của kháng thể đã được quan sát thấy đối với tất cả các kháng nguyên được thử

The functional role of the Bacillus stearothermophilus 50S ribosomal protein B-L3 (probably homologous to the Escherichia coli protein L2) was examined by chemical modification. The complex [B-L3-23S RNA] was photooxidized in the presence of rose bengal and the modified protein incorporated by reconstitution into 50S ribosomal subunits containing all other unmodified components. Particles containing photooxidized B-L3 are defective in several functional assays, including (1) poly(U)-directed poly(Phe) synthesis, (2) peptidyltransferase activity, (3) ability to associate with a [30S-poly(U)-Phe-tRNA] complex, and (4) binding of elongation factor G and GTP. The rates of loss of the partial functional activities during photooxidation of B-L3 indicate that at least two independent inactivating events are occurring, a faster one, involving oxidation of one or more histidine residues, affecting peptidyltransferase and subunit association activities and a slower one affecting EF-G binding. Therefore the protein B-L3 has one or more histidine residues which are essential for peptidyltransferase and subunit association, and another residue which is essential for EF-G-GTP binding. B-L3 may be the ribosomal peptidyltransferase protein, or a part of the active site, and may contribute functional groups to the other active sites as well.

Vai trò chức năng của protein ribosome Bacillus stearothermophilus 50S B-L3 (có thể tương đồng với protein Escherichia coli L2) đã được kiểm tra bằng phương pháp biến nạp hóa học. Phức hợp B-L3-23S RNA đã được quang hóa với sự có mặt của hồng cầu và protein biến nạp kết hợp với sự phục hồi thành các tiểu đơn vị ribosome 50S chứa tất cả các thành phần chưa biến nạp khác. Các hạt chứa photooxidized B-L3 bị khiếm khuyết trong một số

The localization of the previously postulated interface recognition site (IRS) in porcine pancreatic phospholipase A2, required for a specific interaction between the enzyme and organized lipid-water interfaces, was investigated by ultraviolet difference spectroscopy, by measurements of the intrinsic fluorescence of the unique Trp residue, and by protection experiments against specific tryptic hydrolysis. Using the enzymically nondegradable substrate analogues: CnH(2n+1)(0-)OOCH2CH2N+(CH3)3-(H,OH), it is shown that the rather hydrophobic N-terminal sequence of the enzyme, viz., Ala-Leu-Trp-Gln-Phe-Arg, is directly involved in the interaction with the lipid-water interface. Besides hydrophobic probably also polar interactions contribute to the binding process. At neutral or acidic pH the presence of a salt bridge between the N-terminal alpha-NH3+ group and a negatively charged side chain stablizes the interface recognition site and allows the enzyme to penetrate micellar surfaces, even in the absence of metal ion. At alkaline pH, interaction of the enzyme with micellar interfaces requires the presence of Ca2+ (Ba2+) ions.

Vùng nhận diện giao diện (IRS) đã được giả định trước đây trong enzyme phospholipase A2 ở tụy lợn, cần thiết cho tương tác đặc hiệu giữa enzyme và các giao diện lipid-nước có tổ chức, đã được khảo sát bằng quang phổ khác biệt tia cực tím, bằng các phép đo huỳnh quang nội tại của dư lượng Trp độc nhất, và bằng các thí nghiệm bảo vệ chống thủy phân tryptic đặc hiệu. Sử dụng các chất tương tự chất nền không phân hủy: CnH (2n+1) (0-) OOCH2CH2N

The spontaneous inactivation of yeast glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase was found to fit a simple two-state model at pH 8.5 and 25 degrees. The first step is a relatively rapid dissociation of the tetramer to dimers with the equilibrium largely in favor of the tetramer. In the absence of NAD+ the dimer inactivates irreversibly. The apoenzyme is quite stable with a half-life for complete activity loss proportional to the square root of the enzyme concentration. Perturbances of the protein structure (by pH, ionic strength, and specific salts), which have no effect on the tetrameric state of the molecule, result in an alteration of the cooperativity of NAD+ binding, the reactivity of the active-site sulfhydryl group, and the catalytic activity of the enzyme. Covalent modification of two of the four active-site sulfhydryl groups has profound effects on the enzymic activity which are mediated by changes in the subunit interactions. Sedimentation analysis and hybridization studies indicate that the interaction between subunits remains strong after covalent modification. Under normal physiological and equilibrium dialysis conditions the protein is a tetramer. Equilibrium dialysis studies of NAD+ binding to the enzyme at pH 8.5 and 25 degrees reveal a mixed cooperativity pattern. A model consistent with these observations and the observed half-of-the-sites reactivity is that of ligand induced sequential conformational changes which are transferred across strongly interacting subunit domains. Methods for distinguishing negatively cooperative binding patterns from mixtures of denatured enzyme and multiple species are discussed.

Sự bất hoạt tự phát của enzyme glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase đã được tìm thấy phù hợp với mô hình hai trạng thái đơn giản ở pH 8,5 và 25 độ. Bước đầu tiên là sự phân ly tương đối nhanh của tetramer với các dime với trạng thái cân bằng chủ yếu thuận lợi cho tetramer. Khi không có NAD+, dimer bất hoạt không thể phục hồi. Apoenzyme khá ổn định với chu kỳ bán rã để mất hoạt động hoàn toàn tỷ lệ thuận với căn bậc hai nồng độ enzyme. Sự nhiễu loạn của cấu trúc protein (theo pH, cường độ ion và muối đặc hiệu) không ảnh hưởng đến trạng thái tetrameric của phân tử dẫn đến sự thay đổi tính hợp tác của liên kết NAD+, phản ứng của nhóm sulfhydryl tại chỗ hoạt động và hoạt động xúc tác của enzyme. Sự điều chỉnh cộng hóa trị của hai trong số bốn nhóm sulfhydryl tại chỗ hoạt động có ảnh hưởng sâu sắc đến hoạt động của enzyme được trung gian bởi những thay đổi trong tương tác của các tiểu đơn vị. Phân tích lắng và nghiên cứu lai tạo chỉ ra rằng sự tương tác giữa các tiểu đơn vị vẫn còn mạnh sau khi điều chỉnh cộng hóa trị. Trong điều kiện lọc máu sinh lý và cân bằng bình thường, protein là một tetramer. Các nghiên cứu lọc máu cân bằng đối với liên kết NAD+ với enzyme ở pH 8,5 và 25 độ cho thấy một mô hình hợp tác hỗn hợp. Một mô hình phù hợp với những quan sát này và phản ứng nửa nguyên tử quan sát được là sự thay đổi liên tiếp về hình dạng do phối tử gây ra được chuyển qua các tiểu đơn vị tương tác mạnh. Các phương pháp phân biệt mô hình liên kết hợp tác âm với hỗn hợp các enzyme bị biến tính và nhiều loài được thảo luận.

The kinetics of the pH-induced dissociation of the 3 X 10(6) mol wt hemoglobin from Lumbricus terrestris (the earthworm) have been studied in a light-scattering stopped-flow apparatus. The ligand dependent dissociation data were fit well by a simple sequential model. The data for CO and oxyhemoglobin are consistent with Hb12 leads to 2Hb6 leads to 12Hb. Methemoglobin at pH 7 appears to be hexameric and the dissociation is consistent with the model: Hb6 leads to 6Hb. In a sequential decay scheme for which light-scattering changes are monitored, the relative amounts of rapid and slow phase are determined by the rate constants as well as the molecular weights of intermediate species. Assignment of the hexameric intermediate is supported by an investigation of the sensitivity of the theoretical kinetic curves to the molecular weights of the intermediates. This assignment is further supported by the following: (1) the same model will fit the data for oxy- and CO-hemoglobin at all three temperatures (a 24-29-fold variation in rate constants), (2) evidence from electron microscopy shows hexameric forms, and (3) methemoglobin is apparently stable as a hexamer at pH 7. When CO replaces O2 as the ligand, the dissociation rate increases by a factor of four. The met is about 20 times faster than the initial oxyhemoglobin dissociation rate, but perhaps more relevant for comparing dissociation of the hexamer, the met rate was respectively 100 times and 500 times faster than that for the assumed hexameric forms of CO- and oxy-hemoglobin. The activation energies for the dodecamer to hexamer dissociation and for the dissociation of the hexamer to smaller forms were about 30 kcal/mol for oxy-, CO-, and methemoglobin.

Động lực học của sự phân ly do pH của 3 X 10 (6) mol hemoglobin từ giun đất đã được nghiên cứu trong một thiết bị ngừng dòng chảy tán xạ ánh sáng. Các số liệu phân ly phụ thuộc phối tử phù hợp với một mô hình tuần tự đơn giản. Số liệu cho CO và oxyhemoglobin phù hợp với Hb12 dẫn đến 2Hb6 dẫn đến 12Hb. Methemoglobin ở pH 7 có vẻ là dạng hexameric và sự phân ly phù hợp với mô hình: Hb6 dẫn đến 6Hb. Trong một sơ đồ phân rã liên tiếp theo dõi sự thay đổi của ánh sáng, các pha tương đối nhanh và chậm được xác định bởi các hằng số tốc độ cũng như trọng lượng phân tử của các loài trung gian. Việc gán cho các chất trung gian hexameric được hỗ trợ bởi một nghiên cứu về độ nhạy của các đường cong động học lý thuyết đối với trọng lượng phân tử của các chất trung gian. Việc gán này được hỗ trợ thêm bởi: ( 1) cùng một mô hình sẽ phù hợp với số liệu cho oxy-và CO-hemoglobin ở cả ba nhiệt độ (biến đổi 24-29 lần hằng số tốc độ); (2) bằng chứng từ kính hiển vi điện tử cho thấy các dạng nhanh và (3) methemoglobin có vẻ ổn định như một hexamer ở pH 7. Khi CO thay thế O2 làm phối tử, tốc độ phân ly tăng gấp 4 lần. Tốc độ met nhanh hơn khoảng 20 lần so với tốc độ phân ly oxyhemoglobin ban đầu, nhưng có lẽ phù hợp hơn khi so sánh sự phân ly của hexamer, tốc độ met lần lượt nhanh hơn 100 lần và 500 lần so với các dạng hexameric giả định của CO-và oxy-hemoglobin. Năng lượng hoạt hóa cho dodecamer để phân ly hexamer và cho sự phân ly hexamer thành dạng nhỏ hơn khoảng 30 kcal/mol đối với oxy-, CO-và methemoglobin.

The reduction of metmyoglobin by the iron(II) complex of trans-1,2-diaminocyclohexane-N,N,N'N'-tetraacetate (FeCDTA2-) has been investigated. The equilibrium constant, measured spectrophotometrically, is 0.21 with a resulting reduction potential of 0.050 V for Mb0. The rate constant for the reduction is 28 M-1 sec-1 with a deltaH ++ of 13 kcal M-1 and deltaS ++ of -11 eu. Both CN- and OH- inhibit the reduction because of the relatively low reactivity of cyanometmyoglobin (Mb+CN-) and ionized metmyglobin (Mb+OH-). The rate constant for the reduction of Mb+CN- by FeCDTA2- is 4.0 X 10(-2) M-1 sec-1 and that for reduction of Mb+OH- is 4.8 M-1 sec-1. The nitric oxide complex of metmyoglobin is reduced with a rate constant of 10 M-1 sec-1. The kinetics of oxidation of oxymyoglobin by FeCDTA- were studied. The data are consistent with a mechanism where oxidation takes place entirely through the deoxy form. A rate constant of 1.45 X 10(2) M-1 sec-1 was calculated for the oxidation of deoxymyoglobin by FeCDTA-, in equilibrium constant and rate constant for reduction. The above data are discussed in terms of a simple outer-sphere reduction reaction.

Việc khử metmyoglobin bằng phức chất sắt (II) của trans-1,2-diaminocyclohexane-N, N, N 'N' tetraacetate (FeCDTA2-) đã được nghiên cứu. Hằng số cân bằng, đo bằng quang phổ, là 0,21 với tiềm năng khử là 0,050 V đối với Mb0. Hằng số tốc độ khử là 28 M-1 sec-1 với deltaH + + 13 kcal M-1 và deltaS + + -11 eu. Cả

1. A new procedure is described for selecting nitrogenase-derepressed mutants based on the method of Brenchley et al. (Brenchley, J.E., Prival, M.J. and Magasanik, B. (1973) J. Biol. Chem. 248, 6122-6128) for isolating histidase-constitutive mutants of a non-N2-fixing bacterium. 2. Nitrogenase levels of the new mutants in the presence of NH4+ were as high as 100% of the nitrogenase activity detected in the absence of NH4+. 3. Biochemical characterization of these nitrogen fixation (nif) derepressed mutants reveals that they fall into three classes. Three mutants (strains SK-24, 28 and 29), requiring glutamate for growth, synthesize nitrogenase and glutamine synthetase constitutively (in the presence of NH4+). A second class of mutants (strains SK-27 and 37) requiring glutamine for growth produces derepressed levels of nitrogenase activity and synthesized catalytically inactive glutamine synthetase protein, as determined immunologically. A third class of glutamine-requiring, nitrogenase-derepressed mutants (strain SK-25 and 26) synthesizes neither a catalytically active glutamine synthetase enzyme nor an immunologically cross-reactive glutamine synthetase protein. 4. F-prime complementation analysis reveals that the mutant strains SK-25, 26, 27, 37 map in a segment of the Klebsiella chromosome corresponding to the region coding for glutamine synthetase. Since the mutant strains SK-27 and SK-37 produce inactive glutamine synthetase protein, it is concluded that these mutations map within the glutamine synthetase structural gene.

1. Nghiên cứu này thực hiện một quy trình chọn lọc đột biến kháng nguyên nitơase dựa trên phương pháp chọn lọc của Brenchley và cộng sự (Brenchley, J.E., Priv, M.J.và Magasanik, B. (1973) J. Biol. Chem. 248, 6122-6128) để phân lập các đột biến cấu thành histidase của vi khuẩn không cố định N2.

1. The superoxide anion radical (O2-) reacts with ferricytochrome c to form ferrocytochrome c. No intermediate complexes are observable. No reaction could be detected between O2- and ferrocytochrome c. 2. At 20 degrees C the rate constant for the reaction at pH 4.7 to 6.7 is 1.4-10(6) M-1. S -1 and as the pH increases above 6.7 the rate constant steadily decreases. The dependence on pH is the same for tuna heart and horse heart cytochrome c. No reaction could be demonstrated between O2- and the form of cytochrome c which exists above pH approximately 9.2. The dependence of the rate constant on pH can be explained if cytochrome c has pKs of 7.45 and 9.2, and O2- reacts with the form present below pH 7.45 with k = 1.4-10(6) M-1 - S-1, the form above pH 7.45 with k = 3.0- 10(5) M-1 - S-1, and the form present above pH 9.2 with k = 0. 3. The reaction has an activation energy of 20 kJ mol-1 and an enthalpy of activation at 25 degrees C of 18 kJ mol-1 both above and below pH 7.45. It is suggested that O2- may reduce cytochrome c through a track composed of aromatic amino acids, and that little protein rearrangement is required for the formation of the activated complex. 4. No reduction of ferricytochrome c by HO2 radicals could be demonstrated at pH 1.2-6.2 but at pH 5.3, HO2 radicals oxidize ferrocytochrome c with a rate constant of about 5-10(5)-5-10(6) M-1 - S-1.

1. Gốc anion superoxit (O2-) phản ứng với ferricytochrome c tạo thành ferrocytochrome c. Không quan sát thấy bất kỳ phức chất trung gian nào. Không phát hiện được phản ứng giữa O2-và ferrocytochrome c. 2. Ở 20 độ C, hằng số tốc độ phản ứng ở pH 4,7 đến 6,7 là 1,4-10 (6) M-1. S-1 và khi pH tăng trên 6,7 hằng số tốc độ giảm dần. Sự phụ thuộc vào pH cũng tương tự ở tim cá ngừ và tim ngựa đối với cytochrome c. Không thể chứng minh được phản ứng giữa O2-và dạng cytochrome c, tồn tại ở pH xấp xỉ 9,2. Sự phụ thuộc của hằng số tốc độ vào pH có thể được giải thích nếu cytochrome c có pK 7,45 và 9,2, và O2-phản ứng ở dạng dưới pH 7,45 với k = 1,4-10 (6) M-1 - S-1, dạng trên pH 7,45 với k = 3,0-10 (5) M-1 - S-1, và dạng trên pH 9,2 với k = 0,3. Phản ứng có năng lượng hoạt hoá 20 kJ mol-1 và entanpy hoạt hoá ở 25 độ C là 18 kJ mol-1 ở cả pH trên và dưới pH 7,45. Có ý kiến cho rằng O2-có thể khử cytochrome c thông qua một đường bao gồm các amino acid thơm, và cần ít sự sắp xếp lại protein để tạo thành phức chất hoạt hoá. 4. Không thể chứng minh sự khử của ferricytochrome c bởi các gốc HO2 ở pH 1,2-6,2 nhưng ở pH 5,3, các gốc HO2 oxy hoá ferrocytochrome c với hằng số tốc độ khoảng 5-10 (5) - 5-10 (6) M-1 - S-1.

After a 500 mus laser flash a 120 mus phase in the decay of delayed fluorescence is visible under a variety of circumstances in spinach chloroplasts and subchloroplast particles enriched in Photosystem II prepared by means of digitonin. The level of this phase is high in the case of inhibition of oxygen evolution at the donor side of Photosystem II. Comparison with the results of Babcock and Sauer (1975) Biochim. Bio-phys. Acta 376, 329-344, indicates that their EPR signal IIf which they suppose to be due to Z+, the oxidized first secondary donor of Photosystem II, is well correlated with a large amplitude of our 120 mus phase. We explain our 120 mus phase by the intrinsic back reaction of the excited reaction center in the presence of Z+, as predicted by Van Gorkom and Donze (1973) Photochem. Photobiol. 17, 333-342. The redox state of Z+ is dependent on the internal pH of the thylakoids. The results on the effect of pH in the mus region are compared with those obtained in the ms region.

Sau khi lóe sáng tia laser 500 mus, có thể thấy pha 120 mus trong quá trình phân rã huỳnh quang chậm trong nhiều trường hợp ở lục lạp rau bina và các hạt hạ lục lạp được làm giàu trong hệ quang hệ II được điều chế bằng Digitonin. Mức độ pha này cao trong trường hợp ức chế tiến hóa oxy ở phía cho của hệ quang hệ II. So sánh với kết quả của Babcock và Sauer (1975) Biochim. Sinh lý học Acta 376, 329-344 chỉ ra rằng tín

Photosystem II reaction center components have been studied in small system II particles prepared with digitonin. Upon illumination the reduction of the primary acceptor was indicated by absorbance changes due to the reduction of a plastoquinone to the semiquinone anion and by a small blue shifts of absorption bands near 545 nm (C550) and 685 nm. The semiquinone to chlorophyll ratio was between 1/20 and 1/70 in various preparations. The terminal electron donor in this reaction did not cause large absorbance changes but its oxidized form was revealed by a hitherto unknown electron spin resonance (ESR) signal, which had some properties of the well-known signal II but a linewidth and g-value much nearer to those of signal I. Upon darkening absorbance and ESR changes decayed together in a cyclic or back reaction which was stimulated by 3-(3,4 dichlorophenyl)-1,1-dimethylurea. The donor could be oxidized by ferricyanide in the dark. Illumination in the presence of ferricyanide induced absorbance and ESR changes, rapidly reversed upon darkening, which may be ascribed to the oxidation of a chlorophyll a dimer, possibly the primary electron donor of photosystem II. In addition an ESR signal with 15 to 20 gauss linewidth and a slower dark decay was observed, which may have been caused by a secondary donor.

Các thành phần trung tâm phản ứng của hệ thống quang II đã được nghiên cứu trong các hạt hệ thống II nhỏ được điều chế bằng digitonin. Khi chiếu sáng, sự giảm chất nhận chính được biểu thị bằng các thay đổi độ hấp thụ do giảm một plastoquinone thành anion semiquinone và bởi các dải hấp thụ nhỏ màu xanh lam gần 545 nm (C550) và 685 nm. Tỷ lệ semiquinone so với chlorophyll là từ 1/20 đến 1/70 trong các chế phẩm khác nhau. Chất cho

1. Crude extracts and partially purified enzyme preparations from potato tubers catalyse, at pH 5-7, the conversion of linoleic acid hydroperoxides to a range of oxygenated fatty acid derivatives. 2. 9-D- and 13-L-hydroperoxide isomers are converted at similar rates to equivalent (isomeric) products. 3. The major products from the 13-hydroperoxide isomer were identified as the corresponding monohydroxydienoic acid derivative, threo-11-hydroxy-trans12,13-epoxy-octadec-cis9-enoic acid and 9,12,13-trihydroxy-octadec-trans10-enoic acid. The corresponding products from the 9-hydroperoxide were the monohydroxydienoic acid, 9,10-epoxy-11-hydroxy-octadec-12-enoic acid and 9,10,13-trihydroxy-octadec-11-enoic acid. 4. No separation of activities forming the different products was achieved by partial purification of enzyme extracts. 5. Product formation was unaffected by EDTA, CN-, sulphydryl reagents or glutathione but was reduced by boiling the extracts. 6. This system is compared with the 9-hydroperoxide-specific enzymic formation of divinyl ether derivatives by potato extracts.

1. Cao chiết nguyên khai và chế phẩm enzyme tinh chế một phần từ củ khoai tây, ở pH 5-7, có sự chuyển hóa các hydroperoxit axit linoleic thành một loạt các dẫn xuất của axit béo oxy hóa. 2. Các đồng phân 9-D-và 13-L-hydroperoxide được chuyển hóa với tỷ lệ tương đương nhau thành các sản phẩm tương đương (đồng phân ). 3. Các sản phẩm chính từ đồng phân 13-hydroperoxide được xác định là dẫn xuất của axit monohydroxydienoic, axit threo-11

Microsomal phosphatidate phosphohydrolase (phosphatidate phosphatase EC 3.1.3.4) was solubilized and fractionated to yield at least two distinct enzymatically active fractions. One, denoted FA, was non-specific, had a relatively high Km for phosphatidic acid and was insensitive to inhibition by diacylglycerol. The second fraction, FB, was specific for phosphatidates, had a low Km, and was inhibited, non-competitively, by diacylglycerol. FA exhibited a sigmoid substrate-activity curve. The isolated FB aggregated to particles of about 10(6) in the absence of salts and could be dissociated by the addition of monovalent cations at ionic strength 0.4-0.6 to about 2-10(5) daltons and thereby doubled its activity. Dissociation was time- and temperature-dependent. F- was inhibitory. Divalent ions were not required for the activity of FA or FB and inhibited at concentrations exceeding 1 mM.

Microsomal phosphatidate phosphohydrolase (phosphatidate phosphatase EC 3.1.3.4) được hòa tan và phân đoạn để tạo ra ít nhất hai phân đoạn hoạt tính enzyme khác biệt. Một phân đoạn, ký hiệu FA, không đặc hiệu, có độ nhạy Km tương đối với axit phosphatidic và không nhạy cảm với sự ức chế bởi diacylglycerol. Phân đoạn thứ hai, FB, đặc hiệu với phosphatidates, có độ nhạy Km thấp và bị ức chế, không cạnh

Rabbit liver microsomal preparations fortified with 0.1 mM NADPH effectively promote hydroxylation of [3beta-3H]- or [24-14C]allochenodeoxycholic acid or [5alpha,6alpha-3H2]5alpha-cholestane-3alpha,7alpha-diol to their respective 12alpha-hydroxyl derivatives in yields of about 25 or 65% in 60 min. Minor amounts of other products are formed from the diol. The requirements for activity of rabbit liver microsomal 12alpha-hydroxylase resemble those of rat liver microsomes. Of a number of enzyme inhibitors studied only p-chloromercuribenzoate demonstrated a marked ability to inhibit the reaction with either tritiated substrate. There was no difference in the quantity of product produced from the tritiated acid or the 14C-labeled acid. No clear sex difference was found in activity of the enzyme, nor was an appreciable difference noted in activity of the enzyme between mature and immature animals.

Chế phẩm vi sinh vật gan thỏ được tăng cường 0,1 mM NADPH có tác dụng thúc đẩy quá trình hydroxyl hoá axit [3beta-3H]-hoặc axit [24-14C]allochenodeoxycholic hoặc [5alpha, 6alpha-3H2]5alpha-cholestane-3alpha, 7alpha-diol thành các dẫn xuất 12alpha-hydroxyl tương ứng với sản lượng khoảng 25% hoặc 65% trong 60 phút. Một lượng nhỏ

Properties of the phenobarbital induced cytoplasmic aldehyde dehydrogenase (EC 1.2.1.3) have been studied in rat liver. 7-12-Fold higher levels were seen in the cytoplasmic activities after phenobarbital treatment in reactor compared to non-reactor animals with high concentrations of acetaldehyde (18 mM) and propionaldehyde (9 mM). No difference was found with 0.12 mM acetaldehyde, 2 mM glycolaldehyde, 6 mM formaldehyde or 0.5 mM betaine aldehyde. The reactor group also had slightly higher activity in the mitochondrial fraction with the high acetaldehyde and propionaldehyde concentrations. In the microsomal fraction, the activities showed no differences at any substrate concentration. An induced aldehyde dehydrogenase was purified 70-fold by chromatographic techniques. It had different molecular and enzymic properties than the main high-Km enzyme normally present in rat liver cytoplasm. The pI of the induced enzyme was about 7.0 as measured by isoelectric focusing. It was active with several aliphatic and aromatic aldehydes but not with formaldehyde, glycolaldehyde or D-glyceraldehyde. The Km-values for propionaldehyde and acetaldehyde were in the millimolar range. Millimolar concentrations of aromatic aldehydes caused a strong substrate inhibition. The enzyme was inhibited by submicromolar concentrations of disulfiram. Estrone, deoxycorticosterone, progesterone and diethylstilbestrol also affected the enzyme activity.

Các đặc tính của aldehyde dehydrogenase (EC 1.2.1.3) gây ức chế tế bào chất đã được nghiên cứu trên gan chuột. Hoạt tính tế bào chất của enzyme phenobarbital sau khi được xử lý phenobarbital trong lò phản ứng có nồng độ acetaldehyde (18 mM) và propionaldehyde (9 mM) cao hơn 7-12 lần so với động vật không lò phản ứng. Không có sự khác biệt với 0,12 mM acetaldehyde, 2 mM glycolaldehyde, 6 mM formaldehyde và 0,5 mM betaine aldehyde. Hoạt tính của enzyme gây ức chế tế bào chất ở phân đoạn ty thể cao hơn một chút so với phân đoạn vi thể. Hoạt tính của enzyme gây ức chế tế bào chất không có sự khác biệt ở bất kỳ nồng độ nào. Một aldehyde dehydrogenase gây ức chế tế bào chất được tinh sạch 70 lần bằng kỹ thuật sắc ký. Enzyme có các đặc tính phân tử và enzyme khác nhau so với enzyme chính có nồng độ cao Km thường có trong tế bào chất của gan chuột. PI của enzyme gây ức chế tế bào chất là 7,0 được đo bằng phương pháp tập trung đẳng điện. Enzyme hoạt động với một số aldehyd dạng aliphatic và aromatic nhưng không hoạt động với formaldehyde, glycolaldehyde hoặc D-glyceraldehyde. Giá trị Km của propionaldehyde và acetaldehyde nằm trong khoảng milimol. Nồng độ aldehyd dạng millimol gây ức chế cơ chất mạnh. Enzyme bị ức chế bởi nồng độ disulfiram dưới nồng độ micromol. Estrone, deoxycorticosterone, progesterone và diethylstilbestrol cũng ảnh hưởng đến hoạt tính của enzyme.

Enzymes capable of hydrolyzing esters of thiocholine have been assayed in extracts of Solanum melongena L. (eggplant) and Zea Mays L. (corn). The enzymes from both species are inhibited by the anti-cholinesterases neostigmine, physostigmine, and 284c51 and by AMO-1618, a plant growth retardant and they both have pH optima near pH 8.0. The enzyme from eggplant is maximally active at a substrate concentration of 0.15 mM acetylthiocholine and is inhibited at higher substrate concentrations. On the basis of this last property, the magnitude of inhibition by the various inhibitors, and the substrate specificity, we conclude that the enzyme from eggplant, but not that from corn, is a cholinesterase.

Enzyme có khả năng thủy phân este thiocholine đã được khảo sát trong dịch chiết từ cây cà tím (Solanum melongena L.) và cây ngô (Zea Mays L.).

The hydrolysis of p-nitrophenyl phosphate by wheat germ acid phosphatase (orthophosphoric monoester phosphohydrolase, EC 3.1.3.2) has been investigated in mixtures of aqueous buffers with acetone, dioxane and acetonitrile. The enzyme was either in free solution or immobilized on a pellicular support which consisted of a porous carbonaceous layer on solid glass beads. The highest enzyme activity was obtained in acetone and acetonitrile mixed with citrate buffer over a wide range of organic solvent concentration. In 50% (v/v) acetone both V and Km of the immobilized enzyme were about half of the values in the neat aqueous buffer, but the Ki for inorganic phosphate was unchanged. In 50% (v/v) mixtures of various solvents and citrate buffers of different pH, the enzymic activity was found to depend on the pH of the aqueous buffer component rather than the pH of the hydro-organic mixture as measured with the glass-calomel electrode. The relatively high rates of p-nitrophenol liberation in the presence of glucose even at high organic solvent concentrations suggest that transphosphorylation is facilitated at low water activity.

Sự thủy phân p-nitrophenyl phosphate bằng phosphatase acid mầm lúa mì (orthophosphoric monoester phosphohydrolase, EC 3.1.3.2) đã được nghiên cứu trong hỗn hợp dung dịch đệm với acetone, dioxane và acetonitril. Enzym được thể hiện hoặc trong dung dịch tự do hoặc cố định trên nền dạng màng bao bọc, trong đó có lớp carbonaceous xốp trên hạt thủy tinh rắn. Hoạt tính enzyme cao nhất thu được trong acetonitril và acetonitril trộn với dung

A strain of Bacillus sp (Bacillus R-4) produces a protease and a carbohydrolase both of which have the ability to lyse Rhizopus cell walls. Of the enzymes, the carbohydrolase has been purified to an ultracentrifugally and electrophoretically homogeneous state, and identified as a chitosanase. The enzyme was active on glycol chitosan as well as chitosan. Molecular weight of the purified enzyme was estimated as 31 000 and isoelectric point as pH 8.30. The enzyme was most active at pH 5.6 and at 40 degrees C with either Rhizopus cell wall or glycol chitosan as substrate, and was stable over a range of pH 4.5 to 7.5 at 40 degrees C for 3 h. The activity was lost by sulfhydryl reagents and restored by either reduced glutathione of L-cysteine. An abrupt decrease in viscosity of the reaction mixture suggested an endowise cleavage of chitosan by this enzyme.

Một chủng Bacillus sp (Bacillus R-4) tạo ra một protease và một carbohydrolase, cả hai đều có khả năng ly giải thành tế bào Rhizopus. Trong số các enzyme, carbohydrolase đã được tinh sạch đến trạng thái đồng nhất về mặt điện và siêu li tâm và được xác định là chitosanase. Enzym hoạt động trên chitosan glycol cũng như chitosan. Trọng lượng phân tử của enzyme tinh sạch được ước tính là 31 000 và điểm đẳng điện là pH 8,30. Enzym hoạt động mạnh nhất ở pH 5,6 và 40 độ C với thành tế bào Rhizopus hoặc chitosan glycol làm cơ chất và ổn định trong khoảng pH 4,5 đến 7,5 ở 40 độ C trong 3 giờ. Hoạt tính bị mất bởi thuốc thử sulfhydryl và được phục hồi bằng cách giảm glutathione của L-cysteine. Sự giảm đột ngột về độ nhớt của hỗn hợp phản ứng cho thấy enzyme này đã tạo ra sự phân cắt chitosan.

Oligosaccharides containing terminal non-reducing alpha(1 leads to 2)-, alpha(1 leads to 3)-, and alpha(1 leads to 6)-linked mannose residues, isolated from human and bovine mannosidosis urines were used as substrates to test the specificities of acidic alpha-mannosidases isolated from human and bovine liver. The enzymes released all the alpha-linked mannose residues from each oligosaccharide and were most effective on the smallest substrate. Enzyme A in each case was less active on the oligosaccharides than alpha-mannosidase B2, even though the apparent Km value for the substrates was the same with each enzyme. The human acidic alpha-mannosidases were also found to be more active on substrates isolated from human rather than bovine mannosidosis urine. Human alpha-mannosidase C, which has a neutral pH optimum when assayed with a synthetic substrate, did not hydrolyse any of the oligosaccharides at neutral pH, but was found to be active at an acidic pH.

Các oligosaccharide chứa các chất không khử alpha (1 dẫn đến 2) -, alpha (1 dẫn đến 3) - và alpha (1 dẫn đến 6) - mannose liên kết cuối phân lập từ các urin gây bệnh gan bò và người được sử dụng làm chất nền để kiểm tra tính đặc hiệu của các enzyme alpha-mannosidase liên kết alpha phân lập từ gan bò và người. Các enzyme này giải phóng tất cả các chất mannose liên kết alpha từ mỗi oligosaccharide và có hiệu quả nhất trên chất nền nhỏ nhất. Trong mỗi trường

The characterization and localization of a Ca(2+)-ATPase (ATP phosphohydrolase, EC 3.6.1.3) in the tooth germ of the porcine fetus are reported. This enzyme, a microsome fraction, is preferentially activated by Ca(2+). In the presence of 0.5 mM ATP, maximal enzyme activity is obtained at 0.5--1.0 mM CaCl2. The maximal rate of ATP hydrolysis is approx. 20 mumol per h per mg of protein as the enzyme preparation is used here. At optimal Ca(2+) concentration, the Mg(2+) has an inhibitory effect. The enzyme does not require Na+ or/and K+ for activation by Ca(2+). Other nucleotide triphosphates may serve as the substrate, but V for ATP is the highest. The Km for ATP is 8.85 - 10(-5) M. The optimal pH for Ca(2+) activation of the enzyme lies around 9.2. Well known inhibitors of (Na+ + K+)-ATPase, mitochondria ATPase and Ca(2+)-ATPase in the erthrocyte do not inhibit the enzyme. In the subcellular order the enzyme may be assumed to be localized in the smooth endoplasmic reticulum fraction containing cell and Golgi body membrane fragments and in the tissue order in the enamel organ containing an ameloblast layer, stratum intermedium and stellate reticulum.

Đặc điểm và sự nội địa hóa của Ca (2+) - ATPase (ATP phosphohydrolase, EC 3.6.1.3) trong mầm răng của bào thai lợn được báo cáo. Enzyme này, một phần vi mô, được ưu tiên hoạt hóa bởi Ca (2+).

Purified skeletal muscle myosin (EC 3.6.1.3) has been covalently bound to Sepharose 4B by the cyanogen bromide procedure. The resulting complex, Sepharose-Myosin, possesses adenosine triphosphatase activity and is relatively stable for long periods of time. Under optimal binding conditions, approximately 33% of the specific ATPase activity of the bound myosin is retained. Polyacrylamide gel electrophoresis of polypeptides released from denatured Sepharose-Myosin indicates that 85% of the myosin is attached to the agarose beads through the heavy chains and the remainder through the light chains, in agreement with predictions of binding and release based upon either the lysine contents or molecular weights of themyosin subunits. The adenosine triphosphatase of the immobilized myosin has been investigated under conditions of varying pH, ionic strength, and cation concentration. The ATPase profiles of immobilized myosin are quite similar to those for free myosin, however subtle differences are found. The Sepharose-Myosin ATPase is not as sensitive as myosin to alterations in salt concentration and the apparent KM is approximately two-fold higher than that of myosin. These differences are probably due to chemical modification in the region of the attachment site(s) to the agarose beads and hydration and diffusion limitations imposed by the polymeric agarose matrix.

Myosin cơ xương tinh khiết (EC 3.6.1.3) được liên kết cộng hóa trị với Sepharose 4B bằng phương pháp cyanogen bromide. Phức hợp Sepharose-Myosin tạo ra có hoạt tính adenosine triphosphatase và tương đối ổn định trong thời gian dài. Trong điều kiện liên kết tối ưu, khoảng 33% hoạt tính ATPase cụ thể của myosin liên kết được giữ lại. Điện di gel polyacrylamide của polypeptide giải phóng từ sự biến tính của Seph

1. Based on incorporation of radioactively labeled N-ethylmaleimide, the readily reactive thiol groups of isolated myosin (EC 3.6.1.3) from fast, slow and cardiac muscles could be classified into 3 types. All 3 myosins contain 2 thiol-1, 2 thiol-2 and a variable number of thiol-3 groups per molecule. Both thiol-1 and thiol-2 groups which are essential for functioning of the K+-stimulated ATPase, are located in the heavy chains in all 3 myosin types. 2. The variation in the incorporation pattern of N-ethylmaleimide over the 3 thiol group classes under steady-state conditions of Mg(2+) - ATP hydrolysis allowed different conformations of some reaction intermediates to be characterized. In all 3 types of myosin the hydrolytic cycle of Mg(2+) - ATP was found to be controlled by the same step at 25 degrees C. In all three cases, this rate-limiting step is changed in the same way by lowereing temperature. 3. Using the chemically determined molecular weights for myosin light chains, their stoichiometry was found on the basis of sodium dodecyl sulfate electrophoresis to be 1.2 : 2.1 : 0.8 for light chain-1: light chain-2:light chain-3 per molecule of fast myosin, 2.0 : 1.9 for light chain-1:light chain-2 per molecule of slow myosin and 1.9 : 1.9 for light chain-1:light chain-2 per molecule of cardiac myosin. This qualitative difference in light subunit composition between the fast and the two types of slow myosin is not reflected in the small variations of the characteristics exhibited by the isolated myosins, but rather seems to be connected with their respective myofibrillar ATPase activities.

1. Trên cơ sở kết hợp với N-ethylmaleimide được dán nhãn phóng xạ, nhóm thiol dễ phản ứng của myosin phân lập (EC 3.6.1.3) từ cơ nhanh, cơ chậm và cơ tim có thể được phân thành 3 loại. Cả 3 loại myosin đều chứa 2 thiol-1,2 thiol-2 và số lượng thay đổi của các nhóm thiol-3 trên mỗi phân tử. Cả hai nhóm thiol-1 và thiol-2 đều cần thiết cho hoạt động của ATPase kích thích K+, nằm trong các chuỗi nặng ở cả 3 loại myosin. 2. Sự thay đổi mô hình kết hợp của N-ethylmaleimide so với 3 nhóm thiol trong điều kiện thủy phân Mg (2+) - ATP ở trạng thái ổn định cho phép đặc trưng sự phù hợp khác nhau của một số chất trung gian phản ứng. Trong cả 3 loại myosin, chu trình thủy phân của Mg (2+) - ATP được kiểm soát bởi cùng một bước ở 25 độ C. Trong cả 3 trường hợp, bước giới hạn tỷ lệ này được thay đổi theo cùng một cách do nhiệt độ thấp. 3. Sử dụng khối lượng phân tử đã xác định đối với chuỗi ánh sáng myosin, cân bằng hàm lượng của chúng được tìm thấy trên cơ sở điện di natri dodecyl sulfat là 1,2: 2,1: 0,8 đối với chuỗi ánh sáng-1: chuỗi ánh sáng-2: chuỗi ánh sáng-3 trên mỗi phân tử myosin nhanh và 1,9: 1,9 đối với chuỗi ánh sáng-1: chuỗi ánh sáng-2 trên mỗi phân tử myosin tim. Sự khác biệt về thành phần tiểu đơn vị ánh sáng giữa nhóm nhanh và hai loại myosin chậm không phản ánh ở sự thay đổi nhỏ về các đặc điểm của các myosin phân lập mà có vẻ liên quan đến hoạt động của myofibrillar ATPase tương ứng.

1. The pH dependencies of the apparent Michaelis constant for oxidized glutathione and the apparent turnover number of yeast glutathione reductase (EC 1.6.4.2) have been determined at a fixed concentration of 0.1 mM NADPH in the range pH 4.5--8.0. Between pH 5.5 and 7.6, both of these parameters are relatively constant. The principal effect of low pH on the kinetics of the enzyme-catalyzed reaction is the observation of a pH-dependent substrate inhibition by oxidized glutathione at pH less than or equal 7, which is shown to correlate with the binding of oxidized glutathione to the oxidized form of the enzyme. 2. The catalytic activity of yeast glutathione reductase at pH 5.5 is affected by the sodium acetate buffer concentration. The stability of the oxidized and reduced forms of the enzyme at pH 5.5 and 25 degrees C in the absence of bovine serum albumin was studied as a function of sodium acetate concentration. The results show that activation of the catalytic activity of the enzyme at low sodium acetate concentration correlates with an effect of sodium acetate on a reduced form of the enzyme. In contrast, inhibition of the catalytic activity of the enzyme at high sodium acetate concentration correlates with an effect of sodium acetate on the oxidized form of the enzyme.

1. Độ pH phụ thuộc của hằng số Michaelis biểu kiến đối với glutathion oxy hóa và số vòng quay biểu kiến của men glutathion reductase (EC 1.6.4.2) đã được xác định ở nồng độ cố định 0,1 mM NADPH trong khoảng pH 4,5-8,0. Trong khoảng pH 5,5 và 7,6, cả hai thông số này đều tương đối ổn định. Ảnh hưởng chính của pH thấp đến động học của phản ứng xúc tác enzyme là quan sát sự ức chế chất nền phụ thuộc pH của glutathion oxy hóa ở pH nhỏ hơn hoặc bằng 7, cho thấy có tương quan với sự gắn kết của glutathion oxy hóa với dạng oxy hóa của enzyme. 2. Hoạt tính xúc tác của men glutathion reductase bị ảnh hưởng bởi nồng độ đệm natri axetat. Sự ổn định của dạng oxy hóa và dạng khử của enzyme ở pH 5,5 và 25 độ C khi không có albumin huyết thanh bò được nghiên cứu như là một chức năng của nồng độ natri axetat. Kết quả cho thấy, hoạt tính xúc tác của enzyme ở nồng độ natri axetat thấp tương quan với tác dụng của natri axetat lên dạng oxy hóa của enzyme. Ngược lại, hoạt tính xúc tác của enzyme ở nồng độ natri axetat cao tương quan với tác dụng của natri axetat lên dạng oxy hóa của enzyme.

The phosphorylated form of liver glycogen phosphorylase (alpha-1,4-glucan : orthophosphate alpha-glucosyl-transferase, EC 2.4.1.1) (phosphorylase a) is active and easily measured while the dephosphorylated form (phosphorylase b), in contrast to the muscle enzyme, has been reported to be essentially inactive even in the presence of AMP. We have purified both forms of phosphorylase from rat liver and studied the characteristics of each. Phosphorylase b activity can be measured with our assay conditions. The phosphorylase b we obtained was stimulated by high concentrations of sulfate, and was a substrate for muscle phosphorylase kinase whereas phosphorylase a was inhibited by sulfate, and was a substrate for liver phosphorylase phosphatase. Substrate binding to phosphorylase b was poor (KM glycogen = 2.5 mM, glucose-1-P = 250 mM) compared to phosphorylase a (KM glycogen = 1.8 mM, KM glucose-1-P = 0.7 mM). Liver phosphorylase b was active in the absence of AMP. However, AMP lowered the KM for glucose-1-P to 80 mM for purified phosphorylase b and to 60 mM for the enzyme in crude extract (Ka = 0.5 mM). Using appropriate substrate, buffer and AMP concentrations, assay conditions have been developed which allow determination of phosphorylase a and 90% of the phosphorylase b activity in liver extracts. Interconversion of the two forms can be demonstrated in vivo (under acute stimulation) and in vitro with little change in total activity. A decrease in total phosphorylase activity has been observed after prolonged starvation and in diabetes.

Phosphatase gan (phosphorylase a) dạng phosphoryl hóa (alpha-1,4-glucan: orthophosphate alpha-glucosyl-transferase, EC 2.4.1.1) hoạt động và đo được dễ dàng, còn dạng khử phosphatlase (phosphorylase b) thì ngược lại, hoạt tính của enzyme cơ, được ghi nhận là không hoạt động ngay cả khi có mặt enzyme AMP. Chúng tôi đã tinh sạch cả hai dạng phosphorylase từ gan chuột và nghiên cứu đặc điểm của từng dạng. Hoạt tính của phosphorylase có thể đo được bằng điều kiện thí nghiệm. Phosporylase b thu được có nồng độ sulfate cao, là chất nền cho enzyme cơ phosphorylase kinase, còn phosphorylase a thì bị sulfate ức chế, là chất nền cho enzyme phosphorylase phosphatase. Chất nền gắn với phosphorylase b kém (KM glycogen = 2,5 mM, glucose-1-P = 250 mM) so với phosphorylase a (KM glycogen = 1,8 mM, KM glucose-1-P = 0,7 mM ). Trong điều kiện không có AMP, phosphorylase b hoạt động trong gan. Tuy nhiên, AMP đã hạ nồng độ KM của glucose-1-P xuống còn 80 mM và của phosphorylase b tinh sạch còn 60 mM (Ka = 0,5 mM ). Sử dụng chất nền, chất đệm thích hợp và nồng độ AMP, điều kiện thí nghiệm đã cho phép xác định hoạt tính phosphorylase a và 90% của phosphorylase b trong dịch chiết gan. Sự chuyển hóa giữa hai dạng có thể được chứng minh trên thực nghiệm (trong điều kiện kích thích cấp tính) và in vitro với ít thay đổi về tổng hoạt tính. Sau khi bị đói kéo dài và bệnh đái tháo đường, hoạt tính phosphorylase giảm.

Two rabbit erythrocyte casein kinases, GTP:casein kinase I and GTP:casein kinase II, have been purified 29 000- and 47 000-fold, respectively. Studies employing sucrose density gradient centrifugation indicate that kinase I has a molecular weight of about 9.5 - 10(5) (25 S) and kinase II about 1.4 - 10(6) (32 S). These enzymes can utilize either ATP or GTP as the phosphoryl donor. Among various protein substrates examined, these kinases catalyze the phosphorylation of casein greater than 50% dephosphorylated phosvitin congruent to 50% dephosphorylated casein greater than phosvitin. Histones, protamine and bovine serum albumin are poor phosphoryl acceptors. Kinetic data indicate that both enzymes are inhibited by high casein substrate concentrations which may be partially relieved by NaCl. Both phosphotransferases require Mg(2+) for activity and are optimally active at pH 9.0. The enzymes have apparent Km values of 2.5 - 10(-5) M for GTP, 2 - 10(-5) M for ATP, and 0.4--0.6 mg/ml for casein. The incorporation of the terminal phosphate of GTP into casein as catalyzed by these enzymes is inhibited to varying degrees by ATP, ITP, ADP, and GDP but not by UTP, CTP, GMP, adenosine 3':5'-cyclic monophosphate, and guanosine 3':5'-cyclic monophosphate. In addition, NaF and 2,3-diphosphoglyceric acid are also found to inhibit the activity of both kinases. The effect of 2,3-diphosphoglycerate is interesting and suggests that this metabolite may regulate the activity of the casein kinases in the red blood cells.

Hai enzyme erythrocyte casein kinase (GTP: casein kinase I và GTP: casein kinase II) đã được tinh sạch lần lượt 29 000 và 47 000 lần. Các nghiên cứu sử dụng ly tâm gradient mật độ sucrose cho thấy kinase I có trọng lượng phân tử khoảng 9,5-10 (5) (25 S) và kinase II khoảng 1,4-10 (6) (32 S). Các enzyme này có thể sử dụng ATP hoặc GTP như chất cho phosphoryl. Trong số các chất nền protein khác nhau được khảo sát, các kinase này xúc tác quá trình phosphoryl hóa casein lớn hơn 50% khử phosvitin và lớn hơn 50% khử phosphoryl hóa phosvitin. Histone, protamine và albumin huyết thanh bò là các chất nhận phosphoryl kém. Các dữ liệu động học cho thấy cả hai enzyme đều bị ức chế bởi nồng độ casein cao và có thể được giảm bớt một phần bởi NaCl. Cả hai phosphotransferase đều đòi hỏi Mg (2+) cho hoạt động và hoạt động tối ưu ở pH 9,0. Sự kết hợp của phosphate cuối của GTP vào casein do các enzyme này xúc tác bị ức chế ở các mức độ khác nhau bởi ATP, ITP, ADP và GDP nhưng không phải bởi UTP, CTP, GMP, adenosine 3 ': 5' - monophosphate và guanosine 3 ': 5' - monophosphate. Ngoài ra, NaF và axit 2,3-diphosphoglyceric cũng được tìm thấy có tác dụng ức chế hoạt động của cả hai kinase. Tác dụng của 2,3-diphosphoglycerate rất thú vị và cho thấy chất chuyển hóa này có thể điều chỉnh hoạt động của casein kinase trong hồng cầu.

A technique has been developed to separate and measure kallikrein in a heterogeneous population of rat renal cortical cells in suspension. After rat kidneys were perfused in situ in anaesthetized rats, viable, counted cortical cell suspensions were obtained. Cells were suspended in a sucrose/Tris buffer containing 0.5% deoxycholate, homogenized, centrifuged, dialyzed, and gel filtered on Sephadex G-25. Column chromatography on DEAE-cellulose resulted in a single peak of esterase activity between 0.20 to 0.25 M NaCl/sodium phosphate buffer. Subsequent elution yielded an alkaline esterase which was identical to kallikrein isolated from rat urine, insofar as pH optimum, effects of inhibitors, bioassay activity and immunological properties were concerned. Calculated yields were about 70% of the total esterase activity present in the parent cell homogenates. Recoveries of a purified rat urinary kallikrein added to the cell homogenates, the DEAE-cellulose columns, or the eluates from the columns ranged from 83-108% (mean 96%). Using this technique, it was found that the amount of kallikrein activity present in non-incubated renal cortical cells ranged from 0.6-10(-2) to 4.6 - 10(-2) alpha-N-tosyl-L-arginine methyl ester (Tos-Arg-OMe) esterase units per 10(8) cells. However, cells incubated in a nutrient medium at 37 degrees C for 3-8 h contained no measurable kallikrein activity, whereas the surrounding medium had kallikrein activity which could be significantly increased by aldosterone and decreased by spironolactone.

Đã xây dựng được kỹ thuật tách và đo hoạt độ kallikrein trong huyền phù vỏ thận ở chuột cống trắng. Sau khi truyền tại chỗ thận ở chuột cống trắng trên mô hình gây mê, thu được thể tích trung bình, tính được hoạt độ của huyền phù tế bào vỏ. Tế bào được thả lơ lửng trong dung dịch sucrose/Tris chứa 0,5% deoxycholate, đồng nhất hóa, ly tâm, quay số và gel lọc trên Sephadex G-25. Sắc ký cột DEAE-cellulose cho kết quả hoạt độ đỉnh của esterase trong khoảng 0,20 đến 0,25 M NaCl/natri phosphate. Sau đó, các kết quả phân tích cho thấy có hoạt độ esterase kiềm giống với kallikrein phân lập từ tế bào mẹ. Hoạt độ kallikrein nước tiểu tinh khiết được bổ sung vào các tế bào đồng nhất, các cột DEAE-cellulose hoặc các eluate từ các cột có hoạt độ từ 83-108% ( trung bình 96% ). Sử dụng kỹ thuật này, các tế bào nuôi cấy trong môi trường dinh dưỡng 37 độ C trong 3-8 giờ không có hoạt độ kallikrein đo được, trong khi môi trường xung quanh có hoạt độ kallikrein tăng lên đáng kể nhờ aldosterone và giảm đi nhờ spironolactone.

The electrochemical behaviour of ferricytochrome c, metmyoglobin and methemoglobin was studied using d.c., a.c. and differential pulse polarography, and controlled potential electrolysis. 1. The three hemoproteins yield d.c. polarographic steps, and peaks in differential pulse polarograms, the height of which is proportional to concentration. The charge transfer is influenced by strong adsorption. 2. The concentration dependence of the a.c. polarograms indicates structural changes in the adsorbed molecules. 3. The reduction products of controlled potential electrolysis of metmyoglobin and methemoglobin have absorption spectra identical with the native control samples. The affinity for oxygen and the cooperativity in hemoglobin are not affected by the reaction at the electrode. 4. The charge transfer proceeds via adsorbed, already reduced, molecules to freely diffusible proteins.

Hoạt tính điện hóa của ferricytochrome c, metmyoglobin và methemoglobin được nghiên cứu bằng phương pháp phân cực d.c., a.c. và phân cực xung vi sai và điện phân tiềm năng có kiểm soát. 1. Ba loại protein huyết tương tạo ra các bước phân cực d.c. và các đỉnh trên phân cực xung vi sai, chiều cao tỷ lệ thuận với nồng độ. Sự truyền điện tích bị ảnh hưởng bởi sự hấp phụ mạnh. 2. Sự phụ thuộc nồng độ của phân cực a.c. cho thấy sự thay đổi cấu trúc của

Theory is presented relating to the binding of an effector to two states of a protein acceptor coexisting in equilibrium. The problem is treated in terms of the four possible cases which specify relations between numbers of binding sites and intrinsic binding constants relevant to the acceptor states. It is shown that a distinction between these cases may be possible on the basis of the form of a plot of unbound effector concentration versus the constituent equilibrium coefficient which may be calculated from the sedimentation coefficient of the protein constituent. Particularly noteworthy in this respect is the finding that a turning point may exist in this plot for defined conditions with systems in which binding sites are not conserved (and binding affinities are altered) on polymer formation. The latter type of system is exemplified by studies on methaemoglobin A in 0.25 M sodium acetate, pH 5.4. In the absence of added organic phosphate effectors, a dimer-tetramer equilibrium operates governed by an association constant of 4.15 +/- 0.06 X 10(3) 1/mol, determined from sedimentation equilibrium results. Correlation of sedimentation velocity and equilibrium results shows that addition of adenosine 5'-triphosphate (ATP) results in its binding to one site on each of the dimeric (alpha beta) and tetrameric (alpha beta)2 species with intrinsic binding constants 1.03-10(3)-1.20-10(3) and 1.1-10(4)-2.1-10(4) 1/mol, respectively. It is also shown that 2,3-diphosphoglycerate perturbs the dimer-tetramer equilibrium in a similar way to ATP.

Lý thuyết được trình bày liên quan đến sự gắn kết của một tác nhân với hai trạng thái của một chất nhận cùng tồn tại ở trạng thái cân bằng. Vấn đề được xử lý dưới dạng bốn trường hợp có thể, trong đó xác định mối quan hệ giữa số lượng vị trí gắn kết và hằng số liên kết nội tại phù hợp với trạng thái chấp nhận. Có thể phân biệt được các trường hợp này trên cơ sở hình thức của biểu đồ nồng độ tác nhân không ràng buộc so với hệ số cân bằng cấu thành có thể tính được từ hệ số lắng của thành phần protein. Đặc biệt đáng chú ý ở

Human hemoglobin was spin labeled with 4-isothiocanato-2,2,6,6-tetramethyl-piperdinooxyl, which is known to bind specifically to the N-terminal alpha-amino groups of proteins and slightly to the reactive sulfhydryl groups. Electron spin resonance (ESR) analysis indicated a partially resolved five-line spectrum, suggesting that the label was attached to at least two different binding sites. Using specific blocking reagents prior to spin labeling, the two binding sites were attributed to the sulfhydryl group of beta-93 (immobile) and the alpha-amino group of the N-terminal valines (mobile). The relative motion of the spin at one set of binding sites was restricted regardless of the state of ligation and pH, while the motion at the other site showed dependence on those parameters, e.g. the spin-labeled N-terminal ends of deoxyhemoglobin have restricted motion at all pH ranges studied, while those of oxyhemoglobin are relatively free to move at the basic pH range, but become more restricted in the acidic pH range.

Hemoglobin ở người được đánh dấu spin với 4-isothiocanato-2,2,6,6-tetramethyl-piperdinooxyl, được biết là liên kết đặc hiệu với nhóm protein alpha-amino đầu N và hơi liên kết với nhóm sulfhydryl phản ứng. Cộng hưởng spin điện tử (ESR) cho thấy phổ 5 dòng được phân giải một phần, cho thấy nhãn được gắn vào ít nhất hai vị trí liên kết khác nhau. Sử dụng các thuốc thử ngăn chặn cụ thể trước khi đánh dấu spin, hai vị trí liên kết được cho

1. Holo-superoxide dismutase from bovine erythrocytes has been shown to undergo a reversible structural modification in the pH 3-5 range. 2. The spectral alterations observed on changing from neutrality to pH 2 were: a slight attenuation of the 680 nm absorbance; the loss of the 450 nm shoulder, apparent in the optical spectrum of the native protein; and a new band appeared at 330 nm. The circular dichroism at 600 nm was essentially lost while a weak negative band appeared at approx. 380 nm and a positive band at 310 nm. 3. The EPR spectrum was also modified on changing from the native to the low pH form: A parallel increased from approximately 130 to approximately 150 G, g parallel remained unchanged at approximately 2.27, and gm decreased from approximately 2.09 to approximately 2.08. The apparent linewidth remained essentially constant. 4. High resolution (220 MHz) PMR spectra of holo- and apoproteins revealed that the metals influence the three-dimensional structure of the protein. 5. PMR studies indicated that at pH 3 the apoprotein existed almost entirely in a random coil form and that it assumed a compact well-ordered structure on returning to neutral pH. The holoprotein maintained a compact, apparently dimeric, structure even at pH 3.

1. Holo-superoxide dismutase từ hồng cầu bò đã được chứng minh là có thể đảo ngược được trong phạm vi pH 3-5. 2. Các thay đổi phổ quan sát được khi thay đổi từ pH trung tính sang pH 2 là: độ hấp thụ 680 nm giảm nhẹ; vai 450 nm mất đi, rõ ràng trong phổ quang học của protein tự nhiên; và một dải mới xuất hiện ở 330 nm. Sự hình thành dicroism vòng ở 600 nm về cơ bản bị mất đi trong khi một dải âm yếu xuất hiện ở khoảng 380 nm và một dải dương ở 310 nm. 3. Phổ EPR cũng được sửa đổi khi thay đổi từ dạng tự nhiên sang dạng pH thấp: một dải song song tăng từ khoảng 130 lên khoảng 150 G, g song song không thay đổi ở khoảng 2,27 và gm giảm từ khoảng 2,09 xuống khoảng 2,08. Độ rộng đường truyền rõ ràng về cơ bản vẫn không đổi. 4. Phổ PMR có độ phân giải cao (220 MHz) của các protein nổi và protein ngầm cho thấy các kim loại có ảnh hưởng đến cấu trúc ba chiều của protein. 5. Các nghiên cứu PMR chỉ ra rằng ở pH 3, apoprotein tồn tại gần như hoàn toàn ở dạng cuộn ngẫu nhiên và nó giả định cấu trúc nhỏ gọn, có vẻ mờ nhạt khi trở về pH trung tính. Các holoprotein duy trì cấu trúc nhỏ gọn, có vẻ mờ nhạt ngay cả ở pH 3.

Hb Köln (beta 98 Val leads to Met) was found to precipitate rapidly during mechanical shaking. The rate of precipitation of Hb Köln is 5-6 times faster than that of Hb S. The kinetics of precipitation of the patient's hemolysate, which is a mixture of Hb Köln and Hb A, showed a biphasic curve indicating that Hb Köln precipitates independently from Hb A. The instability of Hb Köln may be attributed to the conformational change in the vicinity of heme. The mechanical shaking may be used as a new method for detection and quantitation of hemoglobin Köln and other unstable hemoglobins.

Hb K ?? ln (beta 98 Val dẫn đến Met) được phát hiện kết tủa nhanh chóng trong quá trình lắc cơ học. Tốc độ kết tủa Hb K ?? ln nhanh gấp 5-6 lần so với Hb S. Động học kết tủa hemolysate của bệnh nhân là hỗn hợp Hb K ?? ln và Hb A cho thấy đường cong hai pha cho thấy Hb K ?? ln kết tủa độc lập với Hb A. Sự bất ổn của Hb K ?? ln có thể là do sự thay đổi hình dạng vùng lân cận của heme. Sự lắc cơ học có thể được

The erythrocruorin of the leech Haemopis grandis possessed an S20,w of 57 S at neutral pH, its isoelectric point at pH 6.0 and exhibited a slightly sigmoid oxygenation curve with n approximately 2.1 and P50 = 11.2 mm at pH 7.4. A minimum molecular weight of 24000 +/- 1500 per heme group was determined from the iron and heme contents, 0.22 +/- 0.01 and 2.73 +/- 0.14 weight %, respectively. The subunit composition of the erythrocruorin was investigated using gel filtration in sodium dodecyl sulfate and polyacrylamide gel electrophoresis in sodium dodecyl sulfate at neutral pH. Haemopis erythrocruorin dissociated in the presence of sodium dodecyl sulfate into four subunits (1 through 4) possessing molecular weights of about 27000, 23000, 21000 and 13500, respectively. When the erythrocruorin was reduced with mercaptoethanol prior to sodium dodecyl sulfate electrophoresis, three subunits were observed, possessing molecular weights of about 13000 (I), 16500 (II) and 28000 (III). Sodium dodecyl sulfate electrophoresis of the isolated subunits 1 through 4 showed that subunit I was provided by subunits 1 and 4, subunit II was provided by subunit 1 and subunit III was provided by both subunit 2 and subunit 3. Haemopis erythrocruorin thus appeared to consist of at least five different polypeptide chains. It is likely that not all of the constituent polypeptide chains were associated each with a heme group. The shape of the Haemopis erythrocruorin observed by electron microscopy appeared to be consistent with the two-tiered hexagonal array characteristic of annelid erythrocruorins and chlorocruorins.

erythrocruorin của loài đỉa Haemopis grandis có S20,w là 57 S ở pH trung tính, điểm đẳng điện của nó ở pH 6.0 và biểu hiện đường cong oxy hóa hơi xích ma với n khoảng 2.1 và P50 = 11.2 mm ở pH 7.4. Trọng lượng phân tử tối thiểu 24000 +/- 1500 trong mỗi nhóm heme được xác định từ hàm lượng sắt và heme, 0,22 +/- 0,01 và 2,73 +/- 0,14 %. Thành phần tiểu đơn vị erythrocruorin được khảo sát bằng phương pháp lọc gel trong điện di gel natri dodecyl sulfat và polyacrylamide trong natri dodecyl sulfat ở pH trung tính. Hemopis erythrocruorin phân ly khi có mặt natri dodecyl sulfat, có khối lượng phân tử lần lượt khoảng 27000, 23000, 21000 và 13500. Khi phân lập erythrocruorin bằng phương pháp khử bằng mercaptoethanol trước khi phân lập bằng điện di natri dodecyl sulfat, ba tiểu đơn vị đã được khảo sát có khối lượng phân tử khoảng 13000 (I ), 16500 (II) và 28000 (III ). Điện di natri dodecyl sulfat của các tiểu đơn vị phân lập từ 1 đến 4 cho thấy tiểu đơn vị I được phân lập bởi tiểu đơn vị 1 và 4, tiểu đơn vị II được phân lập bởi tiểu đơn vị 1 và tiểu đơn vị III được phân lập bởi cả tiểu đơn vị 2 và tiểu đơn vị 3. Như vậy, hemopis erythrocruorin có ít nhất năm chuỗi polypeptide khác nhau. Có khả năng không phải tất cả các chuỗi polypeptide cấu thành đều liên kết với một nhóm heme. Hình dạng của hemopis erythrocruorin quan sát bằng kính hiển vi điện tử phù hợp với đặc điểm hình lục giác hai lớp của erythrocruorin annelid và chlorocruorin.

The contractile proteins from arterial smooth muscle are highly soluble, and can be extracted at I = 0.05. However, they can be precipitated by a prolonged dialysis at pH 6 to give an actomyosin with a high, although variable, actin:myosin ratio. The sedimentation behavior of this actomyosin at high ionic strength was examined as a function of pH, protein concentration and composition by preparative ultracentrifugation. Comparisons with synthetic skeletal muscle actomyosins of similar composition demonstrated significant differences in the behaviors of these two systems. It was found that much smooth muscle actomyosin is not dissociated by normally relaxing conditions, and that it sediments at a slower rate than F-actin. The solubility of the supernatant protein (a myosin-enriched actomyosin) in 0.2 M K Cl (pH 7) depended on the pH during centrifugation. A lower solubility was associated only with a higher actin concentration in the supernatant, suggesting a dependence on actin repolymerization. Pure myosin was selectively precipitated from the supernatant by polyethylene glycol-6000, but only when the protein was soluble at low ionic strength. The solubility of purified myosin was similar to that of myosin from striated muscles. A relationship between the presence of depolymerized actin and the high solubility of smooth muscle contractile proteins is suggested.

Các protein co bóp từ cơ trơn động mạch có độ hòa tan cao, có thể được chiết xuất ở pH 6. Tuy nhiên, chúng có thể được kết tủa bằng phương pháp thẩm tách kéo dài ở pH 6 để tạo ra một actomyosin có tỷ lệ actin: myosin cao, mặc dù có thể thay đổi. Hoạt tính lắng đọng của actomyosin này ở cường độ ion cao được kiểm tra về pH, nồng độ protein và thành phần bằng phương pháp siêu ly tâm chuẩn bị trước. So sánh với các actomyosin cơ xương tổng hợp có thành phần tương tự đã chứng minh sự khác biệt đáng kể về hoạt động của hai hệ thống này. Người ta thấy rằng phần lớn actomyosin cơ trơn không bị phân ly bởi điều kiện thư giãn thông thường và nó lắng đọng với tốc độ chậm hơn F-actin. Độ hòa tan của protein nổi (actomyosin giàu myosin) trong 0,2 M K Cl (pH 7) phụ thuộc vào pH trong quá trình ly tâm. Độ hòa tan thấp hơn chỉ liên quan đến nồng độ actin cao hơn trong phần nổi, cho thấy sự phụ thuộc vào quá trình tái polyme hóa actin. Myosin tinh khiết được kết tủa có chọn lọc từ phần nổi bằng polyethylene glycol-6000 nhưng chỉ khi protein được hòa tan ở cường độ ion thấp. Độ hòa tan của myosin tinh khiết tương tự như myosin từ cơ vân. Mối liên quan giữa sự hiện diện của actin bị khử polyme và độ hòa tan cao của các protein co bóp cơ trơn được đề xuất.

The activities of hybrid dimers of alkaline phosphatase containing two chemically modified subunits have been investigated. One hybrid species was prepared by dissociation and reconstitution of a mixture of two variants produced by chemical modification of the native enzyme with succinic anhydride and tetranitromethane, respectively. The succinyl-nitrotyrosyl hybrid was separated from the other members of the hybrid set by DEAE-Sephadex chromatography and then converted to a succinyl-aminotyrosyl hybrid by reduction of the modified tyrosine residues with sodium dithionite. A comparison of the activities of these two hybrids with the activities of the succinyl, nitrotyrosyl and aminotyrosyl derivatives has shown that either the subunits of alkaline phosphatase function independently or if the subunits turnover alternately in a reciprocating mechanism, then the intrinsic activity of each subunit must be strongly dependent on its partner subunit.

Hoạt tính của các dime lai của enzyme phosphatase kiềm chứa hai tiểu đơn vị biến đổi hóa học đã được nghiên cứu. Một loài lai được điều chế bằng cách phân ly và tái tạo hỗn hợp hai biến thể được tạo ra bằng biến đổi hóa học của enzyme bản địa với anhydrid succinic và tetranitromethane. Loài lai succinyl-nitrotyrosyl được tách ra khỏi các thành viên khác của bộ lai bằng sắc ký DEAE-Sephadex và sau đó chuyển thành lai succinyl-aminotyrosyl

Hb-Manitoba was discovered in 1970 [1] in a Canadian family of British origin. Recently we observed the same variant in a second family, and found that the oxy-derivative of Hb-Manitoba is slightly unstable at 65 degrees C, dissociates less readily at alkaline pH than does Hb-A, and forms asymmetric hybrids with other hemoglobins which are readily detectable by electrophoresis.

Hb-Manitoba được phát hiện vào năm 1970 trong một gia đình người Canada gốc Anh. Gần đây chúng tôi đã quan sát thấy biến thể tương tự trong một gia đình thứ hai, và thấy rằng dẫn xuất oxy của Hb-Manitoba hơi không ổn định ở 65 độ C, phân ly ít dễ dàng hơn ở pH kiềm so với Hb-A, và tạo thành các giống lai không đối xứng với các hemoglobin khác dễ dàng phát hiện bằng điện di.

The oxygen affinity was investigated of purified Hb Tak, a human haemoglobin variant with elongated beta-chains. A very low P50 value was found which was not influenced by the addition of 2,3 diphosphoglycerate. The n value was 1, indicating non-cooperativity. The oxygen equilibrium curve of the whole blood haemolysate containing Hbs A and Tak was close to that of Hb A at the top of the curve, while the bottom of the curve greatly deviated from the latter, indicative of small if any interaction between Hb A and Tak during oxygenation.

Mối tương quan oxy được khảo sát với Hb Tak tinh khiết, một biến thể hemoglobin ở người với các chuỗi beta kéo dài. Giá trị P50 rất thấp không bị ảnh hưởng bởi việc bổ sung 2,3 diphosphoglycerate. Giá trị n là 1, cho thấy sự không tương tác. Đường cong cân bằng oxy của haemolysate máu toàn phần chứa Hbs A và Tak gần với Hb A ở đỉnh đường cong, trong khi đường cong dưới lệch rất lớn so với đường cong sau, cho thấy sự tương tác nhỏ nếu có giữa Hb A và Tak trong quá

1. Fragments of isolated rat liver plasma membrane possess a ribonuclease activity which at pH 7.8 in the presence of 10 mM EDTA can digest polyuridylic acid (poly(U)) and polycytidylic acid (poly(C)) but not polyadenylic acid (poly(A)) and polyguanylic acid (poly(G)). Under these conditions, the membrane preparation does not degrade native or denatured DNA. 2. The products of the reaction with poly(U) (10 mM EDTA present) can be separated on DEAE-Sephadex into oligonucleotides of increasing chain length. Most of the products are di- to hexa-nucleotides which contain terminal 3'-phosphate groups. 3. When EDTA is not present (pH 7.8 or 8.8) the plasma membrane preparation degrades both poly(A) and poly(U). With poly(A) the product is all nucleoside while with poly(U) as substrate most of the product is nucleoside, but also some oligonucleotides are produced. 4. The ribonuclease releases acid soluble products very slowly from high concentrations of poly(U) (mg/ml). 5. Uridine trinucleotide with and without a terminal 3'-phosphate group is degraded by rat liver plasma membrane. The trinucleotide diphosphate is rapidly hydrolyzed to nucleoside while the trinucleotide itself is slowly digested and yields intermediate products, including nucleoside.

1. Mảnh vỡ màng sinh chất gan chuột bị cô lập có hoạt tính ribonuclease ở pH 7,8 với sự có mặt của 10 mM EDTA có thể tiêu hóa được acid polyuridylic (poly (U) ) và acid polycytidylic (poly (C) ) nhưng không thể tiêu hóa được acid polyadenylic (poly (A) ) và acid polyguanylic (poly (G) ). Trong điều kiện này, việc chế tạo màng không làm suy giảm DNA tự nhiên hoặc biến tính. 2.

A preparation of ATPase from the membranes of Micrococcus lysodeikticus, solubilized and more than 95% pure, showed two main bands in analytical polyacrylamide gel electrophoresis. They did not correspond to isoenzymes because one band could be converted into the other by exposure to a mildly alkaline pH value. The conversion was paralleled by changes in molecular weight, circular dichroism and catalytic properties. Denaturation by pH at 25 degrees C was followed by means of circular dichroism, ultracentrifugation and polyacrylamide gel electrophoresis. A large conformational transition took place in the acid range with midpoints at about pH = 3.6 (I = 10(-4) M), 4.3 (I = 0.03 M) and 5.3 (I = 0.1 M). The transition was irreversible. Strong aggregation of the protein occurred in this range of pH. The final product was largely random coil, but even at pH 1.5 dissociation into individual subunits was not complete. However, partial dissociation took place at pH 5 (I = 0.028 M). At this pH value the enzyme was inactive, but 20-30% of the activity could be recovered when the pH was returned to 7.5. In the alkaline region the midpoint of the transition occurred near pH = 11 (I = 0.028 M). The pK of most of the tyrosine residues of the protein was about 10.9. The unfolding was irreversible and the protein was soon converted into peptide species with molecular weights lower than those determined for the subunits by gel electrophoresis in the presence of sodium dodecyl sulphate. Conventional proteolysis did not account for the transformation.

Kết quả phân tích cho thấy, trong điện di gel polyacrylamide phân tích từ màng của vi khuẩn Micrococcus lysodeikticus, hai dải chính không tương ứng với các isoenzyme do một dải có thể được chuyển đổi thành dải còn lại khi tiếp xúc với pH kiềm nhẹ. Sự chuyển đổi diễn ra song song với sự thay đổi về trọng lượng phân tử, sự phân cực tròn và các đặc tính xúc tác. Sự biến tính theo pH ở 25 độ C được tiếp nối bằng sự phân cực tròn, siêu li tâm và điện di gel polyacrylamide. Sự chuyển đổi hình dạng diễn ra ở pH acid với các điểm trung bình ở pH khoảng 3,6 (I = 10 (- 4) M) và 4,3 (I = 0,03 M) và 5,3 (I = 0,1 M) với sự chuyển đổi không thuận nghịch. Sự kết tập protein mạnh xảy ra ở pH này. Sản phẩm cuối cùng là cuộn dây ngẫu nhiên, nhưng ngay cả ở pH 1,5 sự phân ly thành các tiểu đơn vị riêng lẻ cũng không hoàn tất. Tuy nhiên, sự phân ly từng phần diễn ra ở pH 5 (I = 0,028 M ). Ở pH này, enzyme không hoạt động, nhưng có thể phục hồi 20-30% hoạt tính khi pH trở lại 7,5. Ở vùng kiềm, điểm trung bình của quá trình chuyển đổi diễn ra ở pH gần 11 (I = 0,028 M ). PK của hầu hết các dư lượng tyrosine của protein là khoảng 10,9. Sự mở ra là không thuận nghịch và protein nhanh chóng được chuyển đổi thành các peptide có trọng lượng phân tử thấp hơn so với các tiểu đơn vị được xác định bằng điện di gel với sự có mặt của natri dodecyl sulphate. Sự phân giải protein thông thường không phải là nguyên nhân của sự chuyển đổi này.

Protease activity was detected in membranes of human bovine erythrocytes prepared by the conventional procedures which include washing and removal of the "buffy layer". The enzyme was extracted by 0.75 M KCNS or (NH4)2SO4 and was activated by 0.4 to 0.5 M of the same salts. Colored, particulate hide powder-azure, membrane fractions and soluble proteins such as hemoglobin, casein or albumin were susceptible to hydrolysis by the membraneous protease. Partial purification of the enzyme was accomplished through disc-gel electrophoresis on polyacrylamide in the presence of 0.25% positively charged detergents like cetyltrimethylammonium bromide. An alkaline protease (pH 7.4) with properties similar to those of the erythrocyte enzyme was found in leucocytes. The similarity between the properties of the leucocytic and erythrocytic proteases and the correlation of the activity in erythrocyte membranes with content of white cells in these preparations, suggest that enzymatic activities in the contaminating leucocytes are responsible for the activity of membraneous proteases in erythrocytes.

Hoạt tính của protease được phát hiện trên màng hồng cầu người được điều chế theo quy trình thông thường bao gồm rửa và loại bỏ "lớp phồng". Enzym được chiết xuất bằng 0,75 M KCNS hoặc (NH4) 2SO4 và được hoạt hoá bằng 0,4 đến 0,5 M cùng loại muối. Các protein tan trong màng như hemoglobin, casein hoặc albumin có màu sắc, hạt, dễ bị thủy phân. Việc tinh sạch một phần enzyme được thực hiện bằng phương pháp điện di đĩa trên polyacrylamide với sự

In connection with the modelling of biomembranes regularities of the formation and development of interphase adsorption layers of lysozyme at liquid borders under different conditions and depending on the nature of carbohydrate phase were investigated by the determination of mechanical characteristics of such layers. The investigations carried out showed that the most solid layers appeared under the conditions which assured the formation of the maximum number of intermolecular bonds (which in a common case is performed with maximum disorderlinesss of the macromolecules which get at the interphase).

Liên quan đến mô hình hóa các màng sinh học có tính đều đặn trong sự hình thành và phát triển các lớp hấp phụ kỳ trung gian của lysozyme tại các viền chất lỏng trong các điều kiện khác nhau và tùy thuộc vào bản chất của pha carbohydrate đã được khảo sát bằng cách xác định các đặc tính cơ học của các lớp đó. Các nghiên cứu được thực hiện cho thấy các lớp rắn nhất xuất hiện trong các điều kiện đảm bảo sự hình thành số lượng liên kết giữa các phân tử tối đa (trong một trường hợp thông thường được thực hiện với sự rối loạn tối đa của các đại phân tử đạt

The fluorescence probe(4-dimethylaminochalcone; DMH) was noncovalently linked to human serum albumin (HSA). The variation of pH was due to serum albumin structural changes, which was determined in terms of DMH and HSA fluorescence and CD spectra. Considerable changes of fluorescence and CD spectra were observed at pH 8 and 10, where there is ionization of two more recently titrated tyrosin residues. It is assumed that these two tyrosine residues are in binding region and quench the fluorescence of DMH between pH 4 to 8. Quenching disappears if these residues are ionized (pH greater than 8) or if the protein undergoes the N -F transition (pH less than 4).

Đầu dò huỳnh quang (4-dimethylaminochalcone; DMH) có mối liên quan không cộng hóa trị với albumin huyết thanh người (HSA ). Sự biến đổi pH là do sự thay đổi cấu trúc albumin huyết thanh được xác định về phổ huỳnh quang và phổ huỳnh quang HSA. Những thay đổi đáng kể về pH 8 và 10, trong đó có sự ion hóa hai dư lượng tyrosin chuẩn độ gần đây. Người ta giả định rằng hai dư lượng tyrosine này nằm trong vùng liên kết và làm dịu sự phát huỳnh quang

The helix to coil transition of poly(L-glutamic acid) was investigated in 0.05 and 0.005 M aqueous potassium chloride solutions by use of potentiometric titration and circular dichroism measurement. Polymer concentration dependence of the transition was observed in the range from 0.006 to 0.04 monomol/e in 0.005 M KG1 solution. The polymer concentration dependence can be interpreted by current theories of the transition of charged polypeptides and of titration curves of linear weak polyelectrolytes taking the effect of polymer concentration into consideration.

Sự chuyển tiếp từ chuỗi sang cuộn của poly (axit L-glutamic) được khảo sát trong dung dịch kali clorua 0,05 và 0,005 M bằng chuẩn độ điện thế và đo dicroism vòng. Sự phụ thuộc nồng độ polymer trong chuyển tiếp được quan sát thấy trong khoảng 0,006 đến 0,04 monomol/e trong dung dịch 0,005 M KG1. Sự phụ thuộc nồng độ polymer có thể được giải thích bằng các lý thuyết hiện hành về chuyển tiếp của các polypeptide tích điện và các đường cong

Results are presented of measuring fibrinogen fluorescence parameters in temperature range of 20-80 degrees C at different pH of the solution. It was found that the temperature increase from 20 to 40 degrees C for solutions with pH of 4,5-9,3 were not accompanied by the conformational changes of fibrinogen macromolecules. In the temperature range of 40-50 degrees C for neutral solutions conformational reconstruction of fibrinogen of undenatured character took place. Temperature increase above 50-55 degrees C brings about significant structural changes of fibrinogen molecule which are of denaturation nature.

Đã có kết quả đo các thông số huỳnh quang fibrinogen ở nhiệt độ 20-80 độ C ở các pH khác nhau của dung dịch. Kết quả cho thấy, nhiệt độ tăng từ 20-40 độ C đối với dung dịch có pH 4,5-9,3 không kèm theo sự thay đổi về hình dạng của các đại phân tử fibrinogen. Trong nhiệt độ 40-50 độ C đối với dung dịch trung tính đã tái tạo hình dạng fibrinogen có đặc tính không biến tính. Nhiệt độ tăng trên 50-55 độ

Experiments were conducted on cats under nembutal anesthesia; a study was made of pulse activity of bulbar respiratory neurons, electrical activity of the diaphragm and of the intercostal muscles; pO2, pCO2, pH, arterial blood oxygen saturation were determined in combined action of hypoxia and hypercapnia. When hypoxic gaseous mixture was given for respiration the developing hypocapnia disturbed the discharge rhythmic activity of the respiratory neurons, the respiration acquiring a pathological character of the Cheyne--Stokes type. After addition to the hypoxic gaseous mixture of 2% CO2 the gaseous composition of the arterial blood approached the initial values; this addition prevented the development of hypercapnia and disturbances of rhythmic discharge activity of the respiratory neurons. Addition of 5% CO2 to the hypoxic gaseous mixture produced a negative effect: at first it intensified and then depressed the pulse activity of the respiratory neurons, caused metabolic and respiratory acidosis, and promoted asphyxia.

Các thí nghiệm trên mèo được gây mê tuyến trùng; nghiên cứu hoạt động mạch của các tế bào thần kinh hô hấp bulbar, hoạt động điện của cơ hoành và cơ liên sườn; pO2, pCO2, pH, độ bão hòa oxy máu động mạch được xác định trong tác dụng kết hợp của giảm oxy máu và tăng CO2. Khi cho hỗn hợp khí thiếu oxy vào hô hấp, sự phát triển của CO2 làm xáo trộn hoạt động nhịp nhàng thải của các tế bào thần kinh hô hấp, hô hấp có đặc điểm bệnh lý thuộc loại Cheyne-Sto

Experiments were conducted on male rats. A study was made of the content of nicotinamide coenzymes in the liver and myocardium 24 hours after the administration of 0.5 ml of dichloroethane into the stomach. In parallel with disturbance of the morphological structure of the liver and of the myocardium, increase in the activity of alanine and aspargic aminotranspherases in the blood serum, dichloroethane reduced the content of nicotinamide coenzymes and deranged the ratio of their oxidized and reduced forms in these organs.

Chuột cống đực được tiến hành thí nghiệm. Nghiên cứu được tiến hành trên chuột cống đực về hàm lượng các coenzyme nicotinamide trong gan và cơ tim sau 24 giờ uống 0,5 ml dichloroethane vào dạ dày. Song song với sự rối loạn cấu trúc hình thái của gan và cơ tim, sự gia tăng hoạt động của alanine và aspargic aminotranspherase trong huyết thanh, dichloroethane làm giảm hàm lượng các coenzyme nicotinamide và làm rối loạn tỷ lệ các dạng oxy hóa và giảm của chúng trong các cơ quan này.

Chronic experiments were conducted on rats and rabbits; a study was made of the effect of carbidine on the conditioned defence reflexes in stimulation of the mesencephalic part of the reticular formation. Carbidine prevented the depression of the conditioned defence reflexes caused by stimulation of the mesencephalic portion of the reticular formation. This pointed to its depressive influence on the mentioned structures, and was confirmed by experiments on rabbits in recording changes in biocurrents under conditions of stimulation of the mesencephalic reticular formation.

Các thí nghiệm mạn tính trên chuột cống và thỏ; nghiên cứu tác dụng của carbidine đối với phản xạ phòng vệ có điều kiện trong kích thích phần trung não hình thành lưới. Carbidine ngăn chặn sự suy giảm phản xạ phòng vệ có điều kiện gây ra bởi kích thích phần trung não hình thành lưới. Điều này cho thấy ảnh hưởng trầm cảm của nó lên các cấu trúc nói trên, và được xác nhận bằng các thí nghiệm trên thỏ trong ghi nhận những thay đổi trong các đợt tái diễn sinh học trong điều kiện kích thích hình thành lưới trung não.

It was shown in acute experiments on rats that one hour after an intraperitoneal injection of theophylline (50 mg/kg) there was a decrease in the NAD + NADP content by 19.4%, a tendency to a fall of NAD.H2 + NADP.H2 was expressed, and the total nicotinamide coferment level was reduced. A tendency to decrease NAD + NADP and the total pyridine nucleotide level was seen after caffeine administration. The action of catecholamines and methylxanthines was compared. Theobromine produced no significant effect on the indices under study. It was shown that isadrine decreased the NAD + NADP level; adrenaline (25 mkg/kg) increased the content of both the oxidized (by 24%) and of the reduced (by 48%) forms of pyridine nucleotides. An increase of adrenaline dose to 1000 mkg/kg was accompanied by reduction of the oxidized forms (by 22.2%) and of the total nicotinamide coferment level (by 18%).

Các thí nghiệm cấp tính trên chuột cống trắng cho thấy sau 1 giờ tiêm theophylline trong phúc mạc (50 mg/kg) hàm lượng NAD + NADP giảm 19,4 %, xu hướng giảm NAD.H2 + NADP.H2 và nồng độ tổng số nicotinamide giảm. Sau khi uống caffeine, có xu hướng giảm NAD + NADP và tổng số nucleotide pyridine. Tác dụng của catecholamine và methylxanthines được so sánh. Theobromine không có tác dụng

Drinking water supplies of 161 rural communities, in Georgetown County, South Carolina, were randomly selected for sample collection. The analysis showed that most of the waters were slightly acidic. Low, but acceptable concentrations of chloride, copper, fluoride, sodium, cadmium, nitrate and phosphate were found. A few water samples showed higher then recommended levels of arsenic, mercury, zinc and lead. Although only 2% of the samples exceeded the mandatory limit of 0.05 ppm for arsenic, 72% exceeded the recommended level of 0.01 ppm. The mandatory limit for manganese was exceeded in 37% of the waters while 88% exceeded the limit for iron. The high iron content was generally responsible for the high turbidity found in 45% of the samples. The well depth and the consumer income had some bearing on water quality. Statistical evidence suggested that septic tank seepage was partially responsible for nitrate, phosphate, iron and arsenic contamination of shallow water supplies. Lead concentrations appear to vary according to the plumbing used and the pH of the waters.

Nguồn nước uống của 161 cộng đồng nông thôn ở hạt Georgetown, Nam Carolina được chọn ngẫu nhiên để lấy mẫu. Phân tích cho thấy hầu hết các nguồn nước đều có tính axit nhẹ. Nồng độ clorua, đồng, florua, natri, cadmium, nitrat và phosphat thấp nhưng chấp nhận được. Một số mẫu nước cho thấy nồng độ asen, thủy ngân, kẽm và chì cao hơn so với khuyến cáo. Mặc dù chỉ có 2% mẫu vượt quá giới hạn bắt buộc 0,05 ppm đối với asen, 72% vượt quá giới hạn khuyến

This study has investigated the relationship between duodenogastric reflux, gastritis and certain symptoms 6-12 months after three operations for uncomplicated duodenal ulcer. The operations studied were proximal gastric vagotomy (PGV, 20 cases), truncal vagotomy and pyloroplasty (TV+P, 22 cases) and truncal vagotomy and antrectomy (TV+A, 21 cases). Duodenogastric reflux was assessed both by a radiological technique and by measuring the concentration of bilirubin in the gastric aspirate before and after operation. Incidence and severity of postoperative gastritis were determined by endoscopic biopsy. Symptoms were assessed by symptomatic score and Visick grading. There was a significant correlation between duodenal reflux and histological evidence of both severe superficial gastritis and glandular atrophy (P less than 0-01). There was also a close association between the degree of reflux and the presence of severe heartburn, epigastric pain and bile vomiting after operation. The amount of reflux did not differ before operation. There was significantly less reflux following PGV than after either TV+P (P less than 0-025) or TV+A (P less than 0-001). The results indicate that an operation which preserves an innervated and intact antrum and pylorus will protect against postoperative duodenogastric reflux, gastritis and symptoms.

Nghiên cứu này khảo sát mối liên quan giữa trào ngược, viêm dạ dày tá tràng và một số triệu chứng sau phẫu thuật 3 tháng ở bệnh nhân loét tá tràng không biến chứng. Các phẫu thuật được thực hiện gồm cắt thần kinh lang thang (PGV, 20 ca); cắt thần kinh lang thang và tạo hình vòm (TV+P, 22 ca); cắt thần kinh lang thang và tạo hình chống trực tràng (TV+A, 21 ca ). Sự tăng sinh dịch tá tràng được đánh giá bằng kỹ thuật X quang và đo nồng độ bilirubin trong dịch hút dạ dày trước và sau mổ. Tỷ lệ và mức độ nặng của viêm dạ dày được xác định bằng sinh thiết nội soi. Triệu chứng được đánh giá bằng điểm số triệu chứng và phân độ Visick. Có mối tương quan có ý nghĩa thống kê giữa trào ngược dịch tá tràng với bằng chứng mô học của viêm dạ dày nông nặng và teo tuyến (P < 0-01 ). Có mối tương quan chặt chẽ giữa mức độ trào ngược với sự hiện diện của ợ nóng, đau thượng vị và nôn mật sau mổ. Lượng trào ngược không khác biệt trước mổ. Sau phẫu thuật PGV, mức độ trào ngược ít hơn đáng kể so với sau phẫu thuật TV+P (P < 0-025) hoặc TV+A (P < 0-001 ). Kết quả cho thấy phẫu thuật bảo tồn ổ bụng, niêm mạc và phình sẽ bảo vệ chống lại trào ngược, viêm dạ dày và các triệu chứng sau phẫu thuật.

A new haemoglobin with increased oxygen affinity, beta82 (EF6) lysine leads to threonine (Hb Rahere), was found during the investigation of a patient who was found to have a raised haemoglobin concentration after a routine blood count. The substitution affects one of the 2, 3-diphosphoglycerate binding sites, resulting in an increased affinity for oxygen, but both the haem-haem interaction and the alkaline Bohr effect are normal in the haemolysate. This variant had the same mobility as haemoglobin A on electrophoresis at alkaline pH but was detected by measuring the whole blood oxygen affinity; it could be separated from haemoglobin A, however, by electrophoresis in agar at acid pH. The raised haemoglobin concentration was mainly due to a reduction in plasma volume (a relative polycythaemia) and was associated with a persistently raised white blood count. This case emphasises the need to measure the oxygen affinity of haemoglobin in all patients with absolute or relative polycythaemia when some obvious cause is not evident.

Một loại huyết sắc tố mới có ái lực oxy tăng là beta82 (EF6) lysine dẫn đến threonine (Hb Rahere) đã được tìm thấy trong quá trình nghiên cứu một bệnh nhân được phát hiện có nồng độ hemoglobin tăng sau khi làm xét nghiệm công thức máu. Sự thay thế ảnh hưởng đến một trong các vị trí gắn 2,3-diphosphoglycerate, dẫn đến tăng ái lực với oxy, nhưng cả tương tác hem-haem và hiệu ứng Bohr kiềm đều bình thường trong hematolysate. Biến thể

Endoscopic papillotomy was attempted in 59 patients with extrahepatic obstruction of the biliary duct system and was actually performed in 50 patients. A special high-frequency diathermy knife was introduced via a duodenoscope into the terminal common bile duct and the roof of the papilla was incised. In 33 out of 39 patients with choledocholithiasis the stones passed into the duodenum spontaneously or were removed endoscopically. Papillary stenosis without ductal stones was successfully treated with this method in eight out of 11 patients. One perforation of the duodenocholedochal junction occurred and was repaired surgically. Endoscopic papillotomy and stone extraction is a relatively safe and effective method of treating extrahepatic jaundice.

59 bệnh nhân vàng da đường mật do tắc đường mật được phẫu thuật nội soi cắt u nhú, 50 bệnh nhân được chẩn đoán vàng da đường mật. Sử dụng dao cạo mật chủ tần số cao, đặc biệt rạch vào đường mật chung cuối và rạch tầng nhú. 33/39 bệnh nhân sỏi mật được phẫu thuật nội soi cắt sỏi thành công. 8/11 bệnh nhân được phẫu thuật cắt u nhú đường mật và lấy sỏi thành công. Phẫu thuật nội soi cắt u nhú và lấy sỏi là phương pháp điều trị vàng da đường mật tương đối an toàn và hiệu quả

The actions of glycine, GABA, alpha-alanine, beta-alanine and taurine were studied by intracellular recordings from lumbar motoneurons of the isolated spinal cord of the frog. All amino acids tested produced a reduction in the amplitude of postsynaptic potentials, a blockade of the antidromic action potential and an increase of membrane conductance. Furthermore, membrane polarizations occurred, which were always in the same direction as the IPSP. All these effects indicate a postsynaptic inhibitory action of these amino acids. When the relative strength of different amino acids was compared, taurine had the strongest inhibitory potency, followed by beta-alanine, alpha-alanine, GABA and glycine. Topically applied strychnine and picrotoxin induced different changes of post-synaptic potentials, indicating that distinct inhibitory systems might be influenced by these two convulsants. Interactions with amino acids showed that picrotoxin seletively diminished the postsymaptic actions of GABA, while strychnine reduced the effects of taurine, glycine, alpha- and beta-alanine. But differences in the susceptibility of these amino acid actions to strychnine could be detected: the action of taurine was more sensitively blocked by strychnine compared with glycine, alpha- and beta-alanine. With regard to these results the importance of taurine and GABA as transmitters of postsynaptic inhibition on motoneurons in the spinal cord of the frog is discussed.

Tác dụng của glycine, GABA, alpha-alanine, beta-alanine và taurine được nghiên cứu bằng cách ghi nhận nội bào từ các tế bào thần kinh vận động thắt lưng của tủy sống ếch. Các axit amin được thử nghiệm làm giảm biên độ điện thế hoạt động sau synap, phong tỏa điện thế hoạt động chống sắc tố và tăng độ dẫn truyền màng tế bào. Hơn nữa, hiện tượng phân cực màng tế bào luôn xảy ra theo cùng một hướng với IPSP. Tất cả các tác dụng này đều chỉ ra tác dụng ức chế sau synap của các axit amin này. Khi so sánh độ mạnh tương đối của các axit amin khác nhau, taurine có hiệu lực ức chế mạnh nhất, tiếp theo là beta-alanine, alpha-alanine, GABA và glycine. Strychnine và picrotoxin bôi tại chỗ gây ra những thay đổi khác nhau về điện thế hoạt động sau synap, cho thấy các hệ thống ức chế khác nhau có thể bị ảnh hưởng bởi hai chất gây co giật này. Tương tác với các axit amin cho thấy picrotoxin làm giảm tác dụng sau synap của GABA, trong khi strychnine làm giảm tác dụng của taurine, glycine, alpha-và beta-alanine. Nhưng có thể phát hiện sự khác biệt về tính nhạy cảm của các axit amin này đối với strychnine: hoạt động của taurine bị chặn bởi strychnine nhiều hơn so với glycine, alpha-và beta-alanine. Đối với những kết quả này, tầm quan trọng của taurine và GABA trong vai trò chất truyền ức chế sau synap lên các tế bào thần kinh vận động ở tủy sống ếch được đề cập.

The effects of acid-base changes on cardiac output during diethyl ether anaesthesia were studied in 25 mongrel dogs prepared by surgically implanting a plastic encased non-ferrous core electromagnetic probe on the ascending aorta. The findings are: (1) Metabolic acidaemia produced only slight decrease in cardiac output but a more marked fall became evident with decreasing pH(2) Respiratory acidaemia led to a slight rise in cardiac output. (3) Respiratory alkalaemia decreased cardiac output. (4) Metabolic alkalaemia also produced a decline in cardiac output.

Nghiên cứu ảnh hưởng của thay đổi acid-base lên cung lượng tim trong gây mê DDEET trên 25 chó lai được phẫu thuật cấy ghép đầu dò điện từ lõi không màu bọc nhựa lên động mạch chủ lên. Kết quả cho thấy: ( 1) Acidaemia chuyển hóa chỉ làm giảm cung lượng tim nhẹ nhưng giảm rõ rệt hơn khi pH giảm (2) Acidaemia hô hấp làm tăng cung lượng tim nhẹ. (3) Alkalaemia hô hấp làm giảm cung lượng tim. (4) Alkalaemia chuyển hóa cũng làm giảm cung lượng tim.

Many eyes donated for use in corneal grafting are rejected because of signs of autolysis in the donor material. The purpose of this experimental study was to determine whether hydrocortisone acting as a lysosome membrane stabilizer could prevent or retard autolysis of the corneas under storage, and if so, what was the most efficacious concentration. Different groups of rabbit corneas were placed in saline as controls or in varying concentrations of hydrocortisone (10(-10) M to 10(-4) M at pH 7.4) at 37 degrees C and 4 degrees C. Acid phosphatase released after six hours was measured biochemically. This enzyme was used as a marker enzyme reflecting lysosomal labilization. Results showed a significant stabilization of the lysosomal membrane at 4 degrees C as compared to 37 degrees C. A trend towards stabilization of the lysosomal membrane was seen when 10(-8) M concentration of hydrocortisone at 37 degrees C was used, there being no demonstrable stabilization at 4 degrees C.

Nhiều mắt được hiến để sử dụng trong ghép giác mạc bị từ chối do có dấu hiệu tự phân hủy trong vật liệu cho. Mục đích của nghiên cứu này là xác định hydrocortisone hoạt động như một chất ổn định màng lysosome có thể ngăn ngừa hoặc làm chậm sự tự phân hủy của giác mạc đang được bảo quản hay không, và nếu có thì nồng độ nào là hiệu quả nhất. Các nhóm giác mạc thỏ khác nhau được đặt trong nước muối để đối chứng hoặc ở các nồng độ hydrocortisone khác nhau (10 (- 10) M đến 10 (-

Mock cerebrospinal fluid (pH 5.37-8.38) or 2,4-dinitrophenol (DNP) (0.15-1.5 mg) was injected into the subarachnoid space of the ventral brain stem of exteriorized fetal sheep. Changes in pH on the ventral surface of the medulla did not stimulate respiratory efforts or induce significant cardiovascular changes. The respiratory response to DNP injections ranged from no response to prolonged rhythmic ventilation that was independent of the peripheral chemoreceptors or the control arterial pH and blood gas tensions. This inconsistency suggests an effector site somewhat removed from the immediate surface of the medulla. The heart rate and blood pressure were not affected. It is concluded that increased H+ concentration in the extracellular fluid of the fetal ventral medulla does not initiate respiration, and any respiratory response to metabolic inhibitors applied to this area therefore is not attributable to a secondary change in surface pH.

Dịch não tủy giả (pH 5,37-8,38) hoặc 2,4-dinitrophenol (DNP) ( 0,15-1,5 mg) được tiêm vào khoang dưới nhện của thân não thất của cừu ngoại bào. Sự thay đổi pH trên bề mặt thất của tủy không kích thích hô hấp hoặc gây ra những thay đổi đáng kể về tim mạch. Phản ứng hô hấp khi tiêm DNP dao động từ không đáp ứng đến thở nhịp kéo dài độc lập với các chất hóa học ngoại biên hoặc sự căng thẳng khí máu và pH động mạch

Axenic, washed conidia of Fusarium solani f. sp. phaseoli, Aspergillus flavus, and Verticillium albo-atrum were placed on washed Difco purified agar discs along with an inorganic salt solution containing various levels of carbon and nitrogen substrates. These discs were exposed to volatiles from six soils (pH 5.1-8.6). Fusarium solani macroconidial germination was inhibited mostly by volatiles from soils of pH 5.1, 6.1, 7.0, and 7.5, but high levels of glucose and NH4Cl reversed this inhibition, raising germination to that of no-soil, no-carbon or nitrogen controls. Conidial germination of A. flavus was inhibited mainly by volatiles from high pH (7.0, 7.8, and 8.6) soils, and increased levels of glucose plus an amino acid mixture nullified this inhibition. Volatiles from soils of pH 5.1, 6.1, and 7.5 stimulated A. flavus conidial germination. Assays after the removal of CO2 from the air above soil of pH 5.1 demonstrated that volatiles inhibitory to A. flavus were produced by this soil. Assays indicated that a KOH-soluble compound was a fungistatic soil volatile to F. solani macroconidial germination. The nullification by carbon and nitrogen substrates of F. solani and A. flavus inhibition caused by soil volatiles parallels that for soil fungistasis. Conidial germination of V. albo-atrum was markedly stimulated by volatiles in all soils tested, and was not affected by removal of CO2. Inhibitory soil volatiles may increase the nutritional requirements for spore germination of certain fungi.

Các hợp chất Axenic, conidia rửa của Fusarium solani f. sp. phaseoli, Aspergillus flavus và Verticillium albo-atrum được đặt trên đĩa thạch tinh khiết Difco cùng với dung dịch muối vô cơ chứa nhiều loại cacbon và nitơ. Các đĩa này tiếp xúc với chất bay hơi từ 6 loại đất (pH 5,1-8,6 ). Sự nảy mầm của Fusarium solani vĩ mô bị ức chế chủ yếu bởi các chất bay hơi từ các loại đất có pH 5,1,6,1,7,0 và 7,5, nhưng hàm lượng glucose và NH4Cl cao đã đảo ngược sự ức chế này, làm tăng khả năng nảy mầm thành loại không đất, không cacbon hoặc nitơ. Sự nảy mầm của A. flavus bị ức chế chủ yếu bởi các chất bay hơi từ các loại đất có pH cao (7,0,7,8 và 8,6 ), đồng thời hàm lượng glucose và hỗn hợp acid amin tăng lên đã làm mất tác dụng của sự ức chế này. Các chất bay hơi từ đất có pH 5,1,6,1 và 7,5 đã kích thích sự nảy mầm của A. flavus. Các thí nghiệm sau khi loại bỏ CO2 khỏi không khí ở trên đất có pH 5,1 đã chứng minh rằng đất có khả năng ức chế sự nảy mầm của A. flavus là do đất có tính bay hơi. Sự mất tác dụng của các chất bay hơi và các chất nitơ của F. solani và A. flavus cũng tương tự như đối với sự phát triển của nấm trong đất. Sự nảy mầm của V. albo-atrum được kích thích rõ rệt bởi các chất bay hơi ở tất cả các loại đất được khảo sát, và không bị ảnh hưởng bởi sự loại bỏ CO2. Các chất bay hơi trong đất có thể làm tăng nhu cầu dinh dưỡng cho sự nảy mầm bào tử của một số loại nấm.

Earlier work showed that Escherichia coli contains at least two enzymes which reduce nitrofurazone and other nitrofuran derivatives. One of these enzymes is lacking in some nitrofurazone-resistant mutant strains. We now report that there are three separable nitrofuran reductases in this organism: reductase I (mol. wt. approximately 50 000, insensitive to O2), reductase IIa (mol. wt. approximately 120 000, inhibited by oxygen), reductase IIb (mol. wt. approximately 700 000, inhibited by O2). Unstable metabolites formed during the reduction of nitrofurazone by preparations containing reductases IIa and IIb produce breaks in DNA in vitro. In vivo experiments with nitrofurazone-resistant strains, which lack reductase II but contain reductases IIa and IIb, demonstrated that lethality, mutation, and DNA breakage are all greatly increased when cultures are incubated under anaerobic conditions, i.e., conditions such that reductase II is active. These results provide further evidence for the importance of reductive activation of nitrofurazone.

Các nghiên cứu trước đây cho thấy Escherichia coli có chứa ít nhất hai enzyme làm giảm nitrofurazone và các dẫn xuất nitrofuran khác. Một trong số các enzyme này thiếu ở một số chủng đột biến kháng nitrofurazone. Hiện nay chúng tôi báo cáo rằng có ba chất khử nitrofuran tách được ở sinh vật này: reductase I (mol. wt. khoảng 50 000, không nhạy cảm với O2), reductase IIa (mol. wt. khoảng 120 000,

The mixture of polysaccharides in the gelling component of agar (agarose) is hydrolyzed to D-galactose and 3,6-anhydro-L-galactose by a series of hydrolytic enzymes obtained from Pseudomonas atlantica. The final degradative step in the pathway of agarose decomposition is the hydrolysis of the alpha-linkage in the dissaccharide neoagarobiose yielding D-galactose and 3,6-anhydro-L-galactose. Pseudomonas atlantica when grown on agar produces two specific enzymes, p-nitrophenyl alpha-galactose hydrolase and neoagarobiose hydrolase. The purification and partial characterization of both enzymes are presented.

Hỗn hợp polysaccharide trong thành phần gel agar (agarose) được thủy phân thành D-galactose và 3,6-anhydro-L-galactose bằng một loạt enzyme thủy phân thu được từ cây Pseudomonas atlantica. Bước phân hủy cuối cùng trong quá trình phân hủy agarose là thủy phân liên kết alpha trong dissaccharide neoagarobiose tạo ra D-galactose và 3,6-anhydro-L-galactose. Pseudomonas atlantica khi trồng trên thạch tạo ra hai enzyme đặc hiệu là p

A glucose-containing mineral medium supplemented with 0.01% yeast extract is described upon which all the species of thermophilic and thermotolerant fungi tested will grow. Thirteen of the 21 species do not require the yeast extract supplement for growth. Using this solid, supplemented mineral medium, the pH and temperature optima for growth of all strains were measured. No correlation was found between temperature optimum and pH optimum among members of the group tested.

Mô tả môi trường khoáng chất chứa glucose có bổ sung cao chiết nấm men 0,01% trên đó tất cả các loài nấm ưa nhiệt và chịu nhiệt được khảo sát sẽ phát triển. 13/21 loài nấm không cần bổ sung cao chiết nấm men để phát triển. Sử dụng môi trường khoáng chất bổ sung rắn này, đo được pH và nhiệt độ tối ưu cho sự phát triển của tất cả các chủng nấm. Không tìm thấy mối tương quan giữa nhiệt độ tối ưu và pH tối ưu giữa các thành viên trong nhóm khảo sát.

Significant differences in amylase, beta-glucosidase, and phosphatase activities were observed among four Phytophthora cinnamomi isolates grown in nutrient-amended sterilized soil for 20 days. Amylase pH optima for the four isolates were within a relatively narrow range; at pH 5.5 each isolate was within 90% of its peak activity. Isolates SB-216-1, 1-281, and C-39 each exhibited maximal beta-glucosidase activity at pH 5.0 and maximal phosphatase activity at pH 5.0-5.5. Maximal activity for these two enzymes of isolate A-7725 occurred at pH 3.5. In timed experiments, isolates 1-281 and A-7725 exhibited greater amylase activities than did the other two isolates. For beta-glucosidase, greatest activity was observed for SB-216-1; ACTivity of 1-281 was intermediate and least activity was observed for isolates A-7725 and C-39. Isolates SB-216-1 and 1-281 exhibited greatest phosphatase activities; isolate C-39 was intermediate in activity, and A-7725 was least active. Results indicate that significant differences exist among the isolates tested and that these differences can be quantitatively measured by the methods described.

Sự khác biệt có ý nghĩa về hoạt tính của amylase, beta-glucosidase và phosphatase đã được quan sát thấy ở 4 chủng Phytophthora cinnamomi được trồng trong đất khử trùng bổ sung chất dinh dưỡng trong 20 ngày. Độ pH tối ưu của amylase đối với 4 chủng phân lập nằm trong khoảng tương đối hẹp; ở pH 5,5 mỗi chủng phân lập có hoạt tính đạt 90 %. Hoạt tính tối đa của mỗi chủng SB-216-1, 1-281 và C-39 ở p

An intracellular invertase was induced in cultures of Clostridium pasteurianum utilizing sucrose as its carbon source for growth. This enzyme synthesis could be repressed by the addition of fructose of a sucrose-growing culture. In contrast, invertase activity was not affected by the addition of glucose to sucrose-growing cells and this enzyme could be induced in a glucose-metabolizing culture by the addition of sucrose. This enzyme was purified 10.5-fold over the induced lese, EC 3.2.1.26) by substrate-specificity studies. Invertase had a pH optimum of 6.5 and an apparent Km of 79.5 mM for sucrose, and required high concentration of potassium phosphate for maximum activity. Invertase was completely inactivated by a 2-min heat treatment at 60 degrees C. This enzyme was strongly inhibited by p-hydroxymercuribenzoate (pCMB) and weakly inhibited by 5,5'-dithiobis(2-nitrobenzoic acid), while cysteine could substantially reverse pCMB) inhibition, suggesting that sulfhydryl group(s) were necessary for invertase activity.

Invertase nội bào được tạo ra trong môi trường nuôi cấy Clostridium pasteurianum sử dụng sucrose làm nguồn cacbon cho sinh trưởng. Quá trình tổng hợp enzyme này có thể được ức chế bằng cách bổ sung fructose của môi trường nuôi cấy sucrose. Ngược lại, hoạt động invertase không bị ảnh hưởng bởi việc bổ sung glucose vào tế bào sinh trưởng sucrose và enzyme này có thể được tạo ra trong môi trường nuôi cấy chuyển hóa glucose bằng cách bổ sung sucrose. Enzym này được tinh sạch gấp 10,5 lần so với lese tạo ra

Within 2 km of a zinc (Zn) smelter in Palmerton, Pennsylvania, near the Lehigh Water Gap, up to 13.5% Zn by weight has been measured in the O2 horizon of the soil, and up to 8% Zn in the A1 horizon. The total numbers of bacteria, actinomycetes, and fungi (measured by dilution plate counts) were greatly reduced in the most severely Zn-contaminated soils compared with control soils. The reduction of microbial populations may be a partial cause of the decreased rate of litter decomposition at Lehigh Gap. Growth of most bacteria from control sites was reduced by 100 to 200 muM Zn, most actinomycetes by 100 muM Zn, and most fungi by 100 to 1000 muM Zn in thin-Pablum extract agar (TPab). All the tested actinomycetes and non-spore-forming bacteria isolated from Zn-contaminated Lehigh Gap soils were Zn-tolerant, growing normally in media containing 600-2000 muM Zn. Most fungi, regardless of source, were capable of at least 50% of normal growth at 700 muM Zn. Zinc-tolerant bacteria, actinomycetes, and fungi were readily isolated from low-Zn soils, suggesting that selection for Zn tolerance may proceed rapidly. Acidophilic Mortierella species have been selectively eliminated near the smelter, apparently because of elevated soil pH. Peryronellaea glomerata (Corda) Goidanich and Coniothyrium spp. were found only in the high-Zn soils.

Trong phạm vi 2 km của một lò luyện kẽm (Zn) ở Palmerton, Pennsylvania, gần khe nước Lehigh, đã đo được tổng lượng Zn lên tới 13,5% theo trọng lượng ở chân trời O2 của đất, và lên tới 8% theo chân trời A1. Tổng số vi khuẩn, actinomycetes và nấm (được đo bằng số lượng mảng pha loãng) đã giảm đáng kể ở các loại đất bị nhiễm Zn nặng nhất so với đất đối chứng. Sự giảm số lượng vi sinh vật có thể là một phần nguyên nhân làm giảm tỷ lệ phân hủy rác ở khe Lehigh. Sự phát triển của hầu hết vi khuẩn từ các vị trí đối chứng đã giảm 100 đến 200 muM Zn, hầu hết các actinomycetes giảm 100 muM Zn và hầu hết các loại nấm giảm 100 đến 1000 muM Zn trong thạch chiết mỏng Pablum (TPab ). Tất cả các vi khuẩn actinomycetes và vi khuẩn không hình thành bào tử phân lập từ đất khe Lehigh bị nhiễm Zn đều có khả năng chịu Zn, phát triển bình thường ở môi trường chứa 600-2000 muM Zn. Hầu hết các loại nấm, bất kể từ nguồn nào, đều có khả năng sinh trưởng bình thường ở 700 muM Zn. Các vi khuẩn chịu kẽm, actinomycetes và nấm dễ dàng phân lập từ đất có độ pH thấp Zn, cho thấy việc lựa chọn để chịu Zn có thể tiến hành nhanh chóng. Các loài Mortierella ưa acid đã được loại bỏ có chọn lọc ở gần lò luyện kẽm, rõ ràng là do pH đất tăng cao. Peryronellaea glomerata (Corda) Goidanich và Coniothyrium spp. chỉ được tìm thấy ở các vùng đất có độ pH cao.

alpha-Naphthoflavone activates the aryl hydroxymethyl synthetase of both the microsomal membrane-bound and soluble enzymes of rat liver and rat lung. The enzyme catalyzes the hydroxymethylation of benzo(alpha)pyrene to the 6-hydroxymethyl derivative.

alpha-Naphthoflavon kích hoạt aryl hydroxymethyl synthetase của cả enzyme liên kết màng microsome và enzyme hòa tan của gan chuột cống và phổi chuột cống. Enzyme này xúc tác cho quá trình hydroxymethyl hóa benzo (alpha) pyrene thành dẫn xuất 6-hydroxymethyl.

The system involved in the reduction of 2-[4'-di(2''-bromopropyl) aminophenylazolbenzoic acid (CB10-252), an agent designed for treating primary liver cell cancer, has been demonstrated to be localised mainly in the 108 000 X g supernatant fraction of rat liver homogenate. It is also present in other organs particularly in the spleen. DAB-azoreductase as shown previously is present almost entirely in the microsomal fraction and is found in high concentration only in liver. The pH maximum for CB10-252-azoreductase implying the importance of the 2'-carboxyl group in determining substrate specificity. The use of enzyme inhibitors and other additives showed that CB10-252 WAS NOT AXANTHINE OXIDASE OR DIHYDROFOLATE REDUCTASE. Its activity was not affected by carbon monoxide, phenobarbitone (PB), or 3-methylcholanthrene (MC) pretreatment. Enhancement of the activity by ferrous ions and FAD indicated that at least part of the reduction system could involve a flavoprotein with FAD as the prosthetic group. The activity of CB10-252-azoreductase and methylred-azoreductase was reduced by menadione (vitamin K3), cyanide and propylgallate. A diaphorase preparation from pig heart reduced both CB10-252 and methylred with both NADPH- and NADH-generating systems.

Hệ thống khử 2 - '4' - di (2 '' - brômopropyl) aminophenylazolbenzoic acid (CB10-252) là một tác nhân được thiết kế để điều trị ung thư gan nguyên phát, được chứng minh là có mặt chủ yếu ở phần nổi 108 000 X g của homogenate gan chuột. DAB-azoreductase như đã trình bày trước đây hầu như hoàn toàn có mặt ở phần microsome và chỉ có ở nồng độ cao. Độ pH tối đa của CB10

(1) Subcutaneous or intra-abdominal injections of 8 mg of HgCl2/100 g body weight markedly depressed hepatic fatty acid synthetase activity of chicks at 1 h post-injection. The depression occurred despite the fact that the chicks continued to eat up until the time they were killed. Under these same conditions, the hepatic activity of acetyl-CoA carboxylase (EC 6.4.1.2) was not affected by HgCl2, while the activity of the mitochondrial system of fatty acid elongation was stimulated. (2) When 2-mercaptoethanol was included in the incubation medium for a highly purified preparation of fatty acid synthetase, 500 muM HgCl2 was required to show definite inhibition of the enzyme. When 2-mercaptoethanol was omitted, 50 muM HgCl2 was inhibitory and 100 muM HgCl2 abolished enzyme activity. (3) 2 mM dithiothreitol completely protected the purified fatty acid synthetase preparation from inhibition by 100 muM HgCl2. When dithiothreitol was added after the addition of enzyme to the mercury-containing medium, protection of the enzyme was not complete. (4) Dialysis of cytosol fractions from chicks injected with HgCl2 against 500 vol. of 0.2 M potassium phosphate buffer (pH 7.0) containing 1 mM EDTA and 10 mM dithiothreitol for 4 h at 4 degrees stimulated the fatty acid synthetase activity of the fractions. Dialysis of cytosol fractions from noninjected chicks under the same conditions was without effect on fatty acid synthetase activity. (5) These data support the hypothesis that the inhibitory effect of HgCl2 administered in vivo on hepatic fatty acid synthetase activity in chicks is mediated through the interaction of mercury with the sulfhydryl groups of the enzyme.

( 1) Tiêm dưới da hoặc trong ổ bụng liều 8 mg HgCl2/100 g thể trọng đã làm suy giảm rõ rệt hoạt tính tổng hợp acid béo ở gan gà con sau 1 giờ tiêm. Mặc dù gà con tiếp tục ăn cho đến khi bị giết chết nhưng hoạt tính của enzyme vẫn bị suy giảm rõ rệt. Trong điều kiện tương tự, hoạt tính của acetyl-CoA carboxylase (EC 6.4.1.2) ở gan không bị ảnh hưởng bởi HgCl2, trong khi đó hoạt tính của hệ thống ty thể của acid béo được kích thích. (2) Khi đưa 2-mercaptoethanol vào môi trường nuôi cấy để chế biến acid béo synthetase tinh khiết cao, cần phải có 500 muM HgCl2 để ức chế enzyme. Khi bỏ 2-mercaptoethanol, 50 muM HgCl2 bị ức chế và 100 muM HgCl2 bị loại bỏ hoạt tính. (3) 2 mM dithiothreitol bảo vệ hoàn toàn chế phẩm acid béo synthetase tinh khiết bằng 100 muM HgCl2. Khi bổ sung dithiothreitol sau khi bổ sung vào môi trường chứa thủy ngân, hoạt tính của enzyme vẫn chưa hoàn toàn được bảo vệ. (4) Lọc phân đoạn cytosol của gà con tiêm HgCl2 với dung dịch đệm potassium phosphate 0,2 M (pH 7,0) chứa 1 mM EDTA và 10 mM dithiothreitol trong 4 giờ ở 4 độ trong điều kiện tương tự không làm ảnh hưởng đến hoạt tính tổng hợp acid béo của các phân đoạn. (5) Những số liệu này đã củng cố giả thuyết cho rằng tác dụng ức chế của HgCl2 tiêm in vivo đối với hoạt tính tổng hợp acid béo ở gan gà con được trung gian thông qua tương tác của thủy ngân với các nhóm sulfhydryl của enzyme.

It is confirmed that N. nigricollis venom contains several phospholipases one of these is a basic phospholipase A. This enzyme is toxic for mice when injected intravenously. In vitro it reacts on egg yolk lecithin producing lysolecithin and prevents the phenomenon of blood clotting. An immunological identity has been established between this basic phospholipase and two acidic phospholipases present in the same venom.

N.nigricollis được xác nhận là có chứa nhiều phospholipase, một trong số đó là phospholipase A cơ bản. Enzyme này gây độc cho chuột khi tiêm tĩnh mạch. Trong ống nghiệm, enzyme phản ứng với lecithin lòng đỏ trứng tạo ra lysolecithin và ngăn ngừa hiện tượng đông máu. Một nhận dạng miễn dịch đã được thiết lập giữa phospholipase cơ bản này và hai phospholipase có tính axit có trong cùng một nọc độc.

We have observed a high and significant mortality in spontaneously hypertensive rats compared to normotensive and hypotensive controls, in the fifth generation. The hypertensive rats exhibited a high frequency of cerebral haemorrhage and periarteritis nodosa.

Tỉ lệ tử vong ở chuột tự phát tăng huyết áp cao và có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng tăng huyết áp và hạ huyết áp, ở thế hệ thứ năm. Chuột tăng huyết áp có tần suất xuất huyết não và viêm quanh điểm sinh dục cao.

The influence of the sympathetic nervous system on the cerebral circulatory response to graded reductions in mean arterial blood pressure was studied in anesthetized baboons. Cerebral blood flow was measured by the 133Xe clearance method, and arterial blood pressure was decreased by controlled hemorrhage. In normal baboons, the constancy of cerebral blood flow was maintained until mean arterial blood pressure was approximately 65% of the base-line value; thereafter, cerebral blood flow decreased when arterial blood pressure was reduced. Superior cervical sympathectomy of 2-3 weeks duration did not affect the normal response. In contrast, both acute surgical sympathectomy (cervical trunk division) and alpha-receptor blockade (1.5 mg/kg of phenoxybenzamine) enhanced the maintenance of cerebral blood flow in the face of hemorrhagic hypotension in that cerebral blood flow did not decrease until mean arterial blood pressure was approximately 35% of the base-line value. The results indicate that the sympathetic nervous system is not involved in the maintenance of cerebral blood flow in the face of a fall in arterial blood pressure. Indeed, the implication is that the sympathicoadrenal discharge accompanying hemorrhagic hypotension is detrimental to, rather than responsible for, cerebral autoregulation.

Nghiên cứu ảnh hưởng của hệ thần kinh giao cảm lên đáp ứng tuần hoàn não trước giảm huyết áp trung bình ở khỉ đầu chó gây mê. Lưu lượng máu não được đo bằng phương pháp thanh thải 133Xe và huyết áp giảm khi xuất huyết có kiểm soát. Ở khỉ đầu chó bình thường, lưu lượng máu não duy trì ổn định cho đến khi huyết áp trung bình đạt khoảng 65% giá trị đường cơ sở; sau đó, lưu lượng máu não giảm khi huyết áp giảm. Cắt hạch giao cảm cổ trên trong thời gian 2-3 tuần không ảnh hưởng đến đáp ứng bình thường. Ngược lại, cả

An isolated perfused canine lung preparation in which determinants of vascular caliber could be individually controlled was developed. The relation of pulmonary arterial (Pa), venous (PV), and alveolar (PA) pressures was such that Pa greater than PA greater than PV throughout the whole lung. The addition of isoprenaline to the perfusate abolished vascular reactivity. Once stability was reached, vascular cross-sectional area remained acceptably constant for 2.25 hours as judged by normalized conductance. The influence of perfusate hematocrit, blood gas tensions, and pH on pressure-flow relations was then studied in 15 isolated canine lungs. The hematocrit-vascular conductance relation was derived at constant perfusion pressure. Conductance varied linearly with hematocrit over a range of 16.5 to 89.5%. Mean pulmonary arterial blood gas tensions were: PO2 = 121 mm Hg, PCO2 = 28 mm Hg, and pH = 7.46. Acute respiratory acidosis (PO2 = 30 mm Hg, PCO2 = 81 mm Hg, pH = 7.17) and lactic acidosis and hypoxemia (PO2 = 32 mm Hg, PCO2 = 21 mm Hg, pH = 6.96) did not significantly alter this relation. Transformation of the conductance-hematocrit data indicated that hematocrit was the most important determinant of relative apparent viscosity of the blood. Both acute respiratory and lactic acidosis failed to significantly increase relative viscosity within the range of hematocrit usually found in secondary polycythemia.

Nghiên cứu tiến hành điều chế chế phẩm dịch phổi chó có thể kiểm soát riêng lẻ các yếu tố quyết định hoạt động mạch phổi. Mối liên quan giữa áp lực động mạch phổi (Pa ), tĩnh mạch phổi (PV) và phế nang phổi (PA) lớn hơn Pa lớn hơn PA trong toàn bộ phổi. Việc bổ sung isoprenaline vào perfusate làm mất hoạt tính của mạch máu. Khi đã đạt được sự ổn định, diện tích mặt cắt ngang của mạch máu vẫn ổn định trong 2,25 giờ theo đánh giá bằng độ dẫn bình thường. Ảnh hưởng của he

The interaction of chemoreflex and pulmonary inflation reflex control of the coronary circulation was examined in conscious dogs by comparing the responses to chemoreflex stimulation (intracarotid injection of nicotine) when ventilation was allowed to increase with those when ventilation was controlled. The responses were also compared with those elicited by both forced mechanical and spontaneous hyperinflation. When the heart rate was constant, intracarotidly administered nicotine induced an increase in the depth of respiration followed closely by an increase in late diastolic coronary flow from 48 +/- 2 to 106 +/- 8 ml/min and a reduction in late diastolic coronary resistance from 1.62 +/- 0.08 to 0.78 +/- 0.06 mm Hg/ml min-1. After beta-receptor and cholinergic blockade, a similar coronary dilation in response to nicotine occurred only when ventilation was allowed to increase. However, when ventilation was controlled, intracarotidly administered nicotine increased coronary resistance after combined beta-receptor and cholinergic blockade. The reflex coronary dilation was not observed after carotid sinus nerve section or after alpha-receptor blockade. Thus, nicotine stimulation of the carotid chemoreflex results in a striking coronary dilation that has two components. The minor component involves a chemoreflex with its efferent pathway in tthe vagi. The major component of coronary dilation follows an increase in the depth of respiration, and its efferent component appears to involve withdrawal of alpha-adrenergic constrictor tone. An almost identical period of reflex coronary dilation followed either forced mechanical or spontaneous hyperinflation in the conscious dog.

Nghiên cứu tương tác của thuốc chống tăng nhãn áp và kiểm soát tăng áp phổi của tuần hoàn vành được thực hiện trên chó có ý thức bằng cách so sánh phản ứng kích thích chemoreflex (tiêm ni-cô-tin vào khoang động mạch cảnh) khi được phép thở tăng với phản ứng kích thích khi kiểm soát thông khí. Phản ứng cũng được so sánh với phản ứng kích thích bởi cả tăng áp lực cơ và tăng áp lực tự phát. Khi nhịp tim không đổi, dùng ni-cô-tin trong động mạch cảnh làm tăng độ sâu hô hấp, sau đó tăng lưu lượng cuối tâm trương từ 48 +/- 2 đến 106 +/- 8 ml/phút và giảm sức cản cuối tâm trương từ 1,62 +/- 0,08 đến 0,78 +/- 0,06 mm Hg/ml min-1. Sau khi ức chế thụ thể beta và cholinergic, sự giãn nở mạch vành tương tự để đáp ứng với nicotine chỉ xảy ra khi cho phép tăng thông khí. Tuy nhiên, khi kiểm soát thông khí, dùng ni-cô-tin trong động mạch cảnh làm tăng sức cản mạch vành sau khi bị phong tỏa kết hợp giữa thụ thể beta và cholinergic. Sự giãn nở mạch vành phản xạ không được quan sát thấy sau khi cắt đoạn thần kinh xoang động mạch cảnh hoặc sau khi bị phong tỏa thụ thể alpha. Do đó, kích thích bằng ni-cô-tin của chemoreflex gây ra sự giãn nở mạch vành nổi bật có hai thành phần. Thành phần thứ nhất liên quan đến chemoreflex với đường đi của nó trong phế vị. Thành phần chính của sự giãn nở mạch vành sau khi tăng độ sâu hô hấp, và thành phần đi ra của nó dường như liên quan đến sự rút lại trương lực co thắt alpha-adrenergic. Thời gian giãn mạch vành phản xạ gần như giống nhau theo sau tăng áp lực cơ hoặc tự phát ở chó có ý thức.

The rate of coronary blood flow was varied in isolated working rat heart preparations to determine its influence on the rate of glocose utilization, tissue high-energy phosphates, and intracellular pH. A 60% reduction in coronary blood flow resulted in a 30% reduction in oxygen consumption, an accelerated rate of glusoe utilization, lower tissue levels of high-energy phosphate, and higher tissue levels of lactate and H+. Ventricular performance deteriorated as reflected by a decrease in heart rate and peak systolic pressure. Further reductions in coronary blood flow resulted in inhibition of glycolysis, a greater decrease in tissue levels of high-energy phosphates, and higher tissue levels of both lactate and H+. These changes in glycolytic flux, tissue metabolites, and ventricular performance were proportional to the degree of restriction in coronary blood flow. The importance of coronary blood flow and washout of the interstitial space in the maintenance of accelerated glycolytic flux in oxygen-deficient hearts is emphasized. It is concluded that acceleration of ATP production from glycolysis can occur only in the marginally ischemic tissue in the peripheral area of tissue supplied by an occluded artery. The central area of tissue which receives a low rate of coronary blood flow will have a reduced rate of ATP production due to both a lack of oxygen and an inhibition of glycolysis.

Tỷ lệ lưu lượng máu mạch vành thay đổi trong chế phẩm tim chuột cống trắng đơn độc nhằm xác định ảnh hưởng của nó lên tỷ lệ sử dụng glocose, phosphat năng lượng cao và pH nội bào. Giảm 60% lưu lượng máu mạch vành làm giảm 30% lượng oxy tiêu thụ, tăng tốc độ sử dụng glusoe, giảm nồng độ mô phosphat năng lượng cao, nồng độ mô lactate và H+ cao hơn. Hiệu suất thất giảm do giảm nhịp tim và huyết áp tâm thu. Giảm lưu lượng máu mạch vành hơn nữa dẫn đến ức chế đường phân, giảm nồng độ mô phosphat năng lượng cao và nồng độ mô lactate và H+ cao hơn. Những thay đổi này trong dòng glycolytic, chất chuyển hóa mô và hiệu suất thất tỷ lệ thuận với mức độ hạn chế lưu lượng máu mạch vành. Vai trò của dòng máu mạch vành và rửa khoang kẽ trong việc duy trì dòng glycolytic tăng tốc ở tim thiếu oxy được nhấn mạnh. Kết luận rằng việc tăng tốc độ sản xuất ATP từ đường phân chỉ có thể xảy ra ở vùng thiếu máu cục bộ ở vùng ngoại vi của mô do động mạch bị tắc cung cấp. Vùng trung tâm của mô nhận được lưu lượng máu mạch vành thấp sẽ làm giảm tỷ lệ sản xuất ATP do thiếu oxy và ức chế đường phân.

The mechanisms of glycolytic inhibition in ischemic myocardium were investigated in the isolated, perfused rat heart. Glycolysis was inhibited at the level of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. The major factors that accounted for the glycolytic inhibition in the ischemic heart compared with the anoxic heart appeared to be higher tissue levels of lactate and H+ in the ischemic tissue. Increased extracellular pH inhibited glycolysis in anoxic and hypoxic hearts much more readily than it did in aerobic hearts. However, maintenance of both extracellular and intracellular pH caused only a modest acceleration of glycolysis in ischemic hearts. Accumulation of tissue lactate and inhibition of glycolysis were directly proportional to the reduction in coronary bloow flow in both anoxic and ischemic hearts. At intracellular lactate concentrations between 15 and 20 mM, glycolysis was inhibited under both conditions. Addition of either 10, 20, or 40 mM lactate to the perfusate inhibited glycolysis in aerobic, anoxic, and ischemic hearts. The effect of lactate did not appear to be mediated through changes in intracellular pH. It is concluded that accumulation of lactate represents a major factor in the inhibition of glycolysis that develops in ischemic hearts.

Nghiên cứu cơ chế ức chế đường phân ở bệnh nhân tim thiếu máu cục bộ được thực hiện trên bệnh nhân tim chuột được truyền dịch. Đường phân bị ức chế ở nồng độ glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase. Yếu tố chính gây ức chế đường phân ở tim thiếu máu cục bộ so với tim thiếu máu cục bộ là nồng độ lactate và H+ trong mô thiếu máu cục bộ cao hơn. pH ngoại bào tăng ức chế đường phân ở tim thiếu máu cục bộ và thiếu máu cục bộ dễ dàng hơn nhiều so với tim hiếu khí. Tuy nhiên, việc duy trì pH ngoại bào và nội bào chỉ làm tăng tốc độ đường phân ở tim thiếu máu cục bộ. Tích lũy lactate mô và ức chế đường phân tỷ lệ thuận với việc giảm lưu lượng dòng chảy của phù mạch ở cả tim thiếu máu cục bộ và tim thiếu máu cục bộ. Ở nồng độ lactate nội bào từ 15 đến 20 mM, đường phân bị ức chế trong cả hai điều kiện. Việc bổ sung 10,20 hoặc 40 mM lactate vào perfusate đã ức chế đường phân ở tim hiếu khí, thiếu máu cục bộ và thiếu máu cục bộ. Tác dụng của lactate dường như không được trung gian thông qua những thay đổi pH nội bào. Kết luận rằng tích lũy lactate thể hiện một yếu tố chính trong việc ức chế đường phân phát triển ở tim thiếu máu cục bộ.

This study compared the contractile performance of a canine right atrial trabecula with that of a macroscopically indistinguishable trabecula isolated from the right ventricular apex. The heart was removed from nine mongrel puppies weighing 6-8 kg and placed in Krebs-Ringer's bicarbonate solution. The bathing solution contained only 1.25 mmoles of Ca2+ and was bubbled with a 95% O2-5% CO2 gas mixture. Each atrial trabecula was specially selected from the right atrial appendage. Histologically, these trabeculae showed a remarkable longitudinal orientation of the fibers. At Lmax (the length of the muscle at which developed tension was maximum) under identical conditions of temperature, rate of stimulation, ionic milieu, pH, and O2 and CO2 supply, right atrial trabeculae achieved the same developed and total tensions but in a much shorter time than did ventricular trabeculae. In both muscle groups the maximum developed tension averaged about 2.5 g/mm2. Since Lo (expressed as a fraction of Lmax) was less in atrial muscle than it was in ventribular muscle, we concluded that atrial muscle can be stretched considerably more than can ventricular muscle before optimum length is reached. At any given initial muscle length, the maximum of tension rise for atrial trabeculae amounted to at least twice that for ventricular trabeculae. At any given load up to 1.5 g/mm2, the maximum velocity of shortening of an atrial trabecula was about three to four times that of a ventricular trabecula. These results collectively indicate that the contractile performance of the right atrial muscle is in many respects superior to that of the right ventricle, at least under the conditions of these experiments.

Nghiên cứu so sánh sự co bóp của cơ tam nhĩ phải với sự co bóp của cơ tam nhĩ phải phân lập từ đỉnh thất phải dưới kính hiển vi. Tim được lấy ra từ 9 con chó lai nặng 6-8 kg và đặt trong dung dịch bicacbonat Krebs-Ringer. Dung dịch tắm chỉ chứa 1,25 mmol Ca2+ và được pha với hỗn hợp khí O2-5% CO2. Mỗi cơ tam nhĩ phải được chọn lọc đặc biệt từ phần phụ nhĩ phải. Về mặt mô học, các cơ tam nhĩ phải được chọn lọc theo chiều dọc. Tại Lmax (chiều dài cơ phát triển căng nhất) trong điều kiện nhiệt độ, tốc độ kích thích, môi trường ion, pH, O2 và CO2 giống nhau, cơ tam nhĩ phải có cùng sự phát triển và tổng căng nhưng trong thời gian ngắn hơn nhiều so với cơ thất. Trong cả hai nhóm cơ, sự căng tối đa phát triển trung bình khoảng 2,5 g/mm2. Do Lo (được biểu thị bằng phần của Lmax) ít hơn ở cơ nhĩ so với cơ thất, chúng tôi kết luận rằng cơ nhĩ có thể căng nhiều hơn đáng kể so với cơ thất trước khi đạt được chiều dài tối ưu. Tại bất kỳ chiều dài cơ nào ban đầu, sự căng tăng tối đa đối với cơ tam nhĩ ít nhất gấp đôi so với cơ tam thất. Tại bất kỳ tải trọng nào lên tới 1,5 g/mm2, tốc độ rút ngắn tối đa của cơ tam nhĩ phải gấp khoảng ba đến bốn lần so với cơ tam thất. Kết quả này cho thấy sự co bóp của cơ tam nhĩ phải trên nhiều khía cạnh vượt trội so với cơ thất phải, ít nhất là trong điều kiện của các thí nghiệm này.

1. The lactate dehydrogenase activity of 89 sera from patients suffering myocardial infarction and of 55 sera from patients with hepatocellular damage was assayed under optimal conditions using pyruvate, alpha-oxobutyrate, hydroxypyruvate and glyoxylate as substrates. Activity was also measured with lactate as substrate at different pH values. 2. The ratios of activities under these different assay conditions were calculated for both series of patients. Correct differentiations for single ratios ranged from virtually nil for hydroxypyruvate/alpha-oxobutyrate to is greater than 93 per cent for glyoxylate/hydroxypyruvate and glyoxylate/alpha-oxobutyrate. This was little improved by the use of multiple ratios involving up to seven separate assays. 3. The activity ratio of hydroxypyruvate to pyruvate which is consistently greater than unity was found to be inverted in a case of morphine poisoning.

1. Hoạt tính lactate dehydrogenase của 89 huyết thanh bệnh nhân nhồi máu cơ tim và 55 huyết thanh bệnh nhân tổn thương tế bào gan được khảo sát trong điều kiện tối ưu sử dụng các chất nền pyruvate, alpha-oxobutyrate, hydroxypyruvate và glyoxylate. Hoạt tính cũng được đo bằng lactate làm chất nền ở các giá trị pH khác nhau. 2. Các tỷ lệ hoạt tính trong các điều kiện khảo sát khác nhau này được tính cho cả hai nhóm bệnh nhân. Sự khác biệt chính xác giữa các tỷ lệ đơn dao

We describe a simple, rapid fluorometric assay for separate quantitative analysis of procainamide and N-acetylprocainamide in mixtures. The effective lenear range (fluorescence vs. concentration) in serum is 0.1 to 10.0 mg/liter, regardless of the ratio (by weight) of the two drugs from 1:10 to 10:1. Analytical recoveries by the extraction method used were 100.0 +/- 3.0% and 98.0 +/- 4.0%, respectively. For determination of either compound, the maximum coefficient of variation was 10%.

Chúng tôi mô tả một phương pháp phân tích định lượng đơn giản, nhanh chóng bằng phép đo huỳnh quang để phân tích định lượng riêng biệt hai hợp chất procainamide và N-acetylprocainamide trong hỗn hợp. Phạm vi nồng độ huỳnh quang trong huyết thanh từ 0,1 đến 10,0 mg/lít, không phụ thuộc vào tỷ lệ (theo trọng lượng) của hai thuốc từ 1:10 đến 10:1. Phục hồi phân tích bằng phương pháp chiết được sử dụng lần lượt là 100,0 +/- 3,0% và 9

In this method, blood is collected in ammonium heparinized microhematocrit tubes and lactate is directly determined in the plasma, separated within 15 min from the erythrocytes. Lactate is assayed by mixing 10 mul of sample with NAD+ and lactate dehydrogenase in tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrazine buffer. The rate of increase in absorbance of the NADH formed, measured at 340 nm, is proportional to lactate concentration. The assay is complete in 4 min and absorbance is linearly related to concentration from 0.625 to 15 mmol/liter. Analytical recoveries of lactate added to plasma averaged 104% (range, 91-116%). Results compared well for plasma samples analyzed by this method with the CentrifiChem and the Du Pont aca.

Trong phương pháp này, máu được thu thập trong ống microhematocrit amoni heparin hóa và lactate được xác định trực tiếp trong huyết tương, tách ra trong vòng 15 phút từ hồng cầu. Lactate được khảo sát bằng cách trộn 10 mul mẫu với NAD+ và lactate dehydrogenase trong chất đệm tris (hydroxymethyl) aminomethane hydrazine. Tốc độ tăng độ hấp thụ của NADH hình thành, đo ở 340 nm, tỷ lệ thuận với nồng độ lactate. Khảo sát hoàn thành trong 4

High-voltage paper electrophoresis of small samples of serum and urine at pH 6.0 resolves basic and acidic amino acids and separates them from the neutral amino acids. For separation and identification of the neutral amino acids, the appropriate area of the electrophoretogram is cut out, sewn onto a second sheet of paper, and rerun at pH 1.9. By this method, amino acids are rapidly resolved. It is suited for use with special procedures such as oxidation of biological fluid with performic acid and specific staining for confirmation of amino acid identification.

Điện di trên giấy cao áp trên mẫu nhỏ huyết thanh và nước tiểu ở pH 6,0 giải quyết acid amin cơ bản và acidic và tách chúng ra khỏi acid amin trung tính. Để tách và nhận diện acid amin trung tính, điện di được cắt ra, khâu vào tờ giấy thứ hai và chạy lại ở pH 1,9. Bằng phương pháp này, acid amin được giải quyết nhanh chóng. Phương pháp này phù hợp để sử dụng với các quy trình đặc biệt như oxy hóa dịch sinh học với acid performic và nhuộm đặc hiệu để xác nhận nhận diện acid amin.