Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum y Ureaplasma urealyticum son especies relacionadas con enfermedades del tracto genitourinario, y particularmente con la uretritis no gonocócica (UNG) en el hombre. Los cultivos de estos microorganismos resultan complicados, por lo que las técnicas moleculares, principalmente la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se han convertido en el principal método de detección de estos organismos. Objetivo: Implementar un método molecular basado en tecnología de genes para el diagnóstico de estas cuatro especies de micoplasmas genitales, aplicándolo en muestras clínicas de pacientes con UNG. Material y métodos: Se crearon las condiciones para un PCR-Múltiple para identificar estas especies empleando como muestra ADN de referencia, utilizando los juegos de cebadores complementarios a fragmentos de los genes de la proteína adhesiva de M. genitalium (MgPa), ARN ribosomal 16S de M. hominis, región espaciadora entre los genes del ARN ribosomal 16S y 23S de U. parvum, y de la región espaciadora adyacente al gen de la ureasa y específico para U. urealyticum, siendo un método específico y sensible. Resultados: Al analizar 34 muestras de exudado uretral, 27 correspondieron a la clase Mollicutes, obteniéndose 14,8% de positividad a M. genitalium, 18,5% a M. hominis, 11,1% a U. urealyticum y 3,7%. a U. parvum. Con este trabajo se realizó por primera vez el diagnóstico de M. genitalium, M. hominis, U. parvum y U. urealyticum en muestras uretrales de pacientes cubanos. Conclusión: Se recomienda incluir el diagnóstico de estas especies en un mayor número de pacientes cubanos con síntomas uretrales, para validar el método propuesto y conocer la relación de estos microorganismos con la UNG.

Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum and Ureaplasma urealyticum are species related with some pathologies of the urogenital tract, and particularly with non gonococal urethritis (NGU) in men. The culture of these microorganisms is very dificult, that’s why the molecular techniques, mainly the polymerase chain reaction, have become in the main detection method of this organisms. Objectives: To improve a molecular method based in technology of genes for the diagnosis of this four genital micoplasma species, applying the same in clinical samples from patients with NGU. Materials and methods: The conditions were created for a Multiplex-PCR for identify this species, using as sample reference DNA, the pairs of primer complementary to the adhesion protein gene of M. genitalium (MgPa), the rRNA 16S of M. hominis, an specific region between rRNA 16S and rRNA 23S genes of U. parvum, and the adjacent region to the urease gene specific for U. urealyticum, being a specific and sensitive method. Results: When analyzing 34 urethral sawbs samples, 27 corresponded to the Mollicutes Class, being 14,8% positive to M. genitalium, 18,5% to M. hominis, 11,1% to U. urealyticum and 3,7% to U. parvum. It was realized for fist time the diagnosis of M. genitalium, M. hominis, U. parvum and U. urealyticum in urethral samples from Cuban patients. Conclusion: It is recommended to include the diagnosis of these species in other Cuban patients with urethral symptoms, to validate the proposed method and to know the relation of these microorganisms with the NGU.