^TI I EUROPEISKA GEMENSKAPERNAS KOMMISSION 
xr fr i 
,». w I 
Bryssel den 24.07.1996 
KOM(96) 365 slutlig 
RAPPORT FRÅN KOMMISSIONEN 
UTVECKLING, VALIDERING OCH JURIDISKT GODKÄNNANDE AV 
ALTERNATIVA METODER TILL DJURFÖRSÖK INOM KOSMETIKABRANSCHEN 
1995 

UTVECKLING, VALIDERING OCH JURIDISKT GODKÄNNANDE AV 
ALTERNATIVA METODER TILL DJURFÖRSÖK INOM KOSMETIKABRANSCHEN 
1995 
SAMMANFATTNING 
I. INLEDNING 
Kommissionens skvldiflheter 
I artikel 4 i) i direktiv 76/768/EEG, ändrat genom direktiv 93/35/EEG, preciseras det att 
"medlemsstaterna skall förbjuda att man släpper ut på marknaden kosmetiska produkter som 
innehåller... beståndsdelar eller kombinationer av beståndsdelar som utprovats på djur efter den 
1 januari 1988". 
Otydligheten i formuleringen "kombinationer av beståndsdelar" har lösts för kommissionens del, 
eftersom kommissionen anser att förbudet även gäller färdiga kosmetiska produkter. 
Genomförandet av detta förbud är kopplat till utarbetandet av "tillfredsställande metoder som kan 
ersätta djurförsök... som har kunnat valideras vetenskapligt som likvärdiga i fråga om skyddsnivån 
för konsumenterna". 
För att regelbunden information om situationens utveckling lämnas, anges det att "kommissionen 
skall lämna en årlig rapport till Europaparlamentet och rådet om de framsteg som gjorts i 
utvecklingen, valideringen och det juridiska godkännandet av alternativa metoder som kan ersätta 
sådana som förutsätter djurförsök. Denna rapport skall innehålla exakta uppgifter om antal och 
slag av försök avseende kosmetika som utförts på djur". 
1994 års rapport 
En första rapport presenterades år 1994.1 den beskrivs intressanta, men begränsade, resultat "som 
inte gjorde det möjligt att ersätta djurmodellerna, men som kunde bidra till att minska antalet 
använda djur". Dock var utsikterna rimligt optimistiska vad gäller valideringen av alternativa 
metoder för tester som gäller ögonirritation, upptagning genom huden, fototoxicitet/fotoirritation 
och grundtester för mutageni tet. Man betonade även att det "på nuvarande kunskapsstadium var 
föga troligt att tänka sig att helt och hållet ersätta djurförsök i toxicitetsstudier för bedömning av 
system i sk a risker", det vill säga p.g.a. en inverkan på hela organet genom hj ärt-kärlsystemet efter 
upptagning genom huden. 
IL 1995 ÅRS RAPPORT 
Rapportens syfte och begreppet potentiell risk för människors hälsa är desamma som i 1994 års 
rapport. 
De aktörer som är berörda av genomförandet av denna bestämmelse är 
Europeiska kommissionen: GD XI, GD-Gemensamma forskningscentrumet, GD XXIV, 
GD XII, 
den europeiska industrin, som företräds av COLIPA (Europeiska förbindelsekommittén 
för kosmetikindustrin), 
amerikanska myndigheter och amerikanska kosmetologifederationen CFTA, 
japanska myndigheter och japanska kosmetologifederationen JCIA, 
OECD. 
1. Klargörande av valideringsetapperna 
Validering är det tillvägagångssätt genom vilket en metods tillförlitlighet och relevans fastställs 
i ett bestämt syfte. Detta har visat sig mer komplicerat än man hade trott, och kommer att ta mer 
tid än beräknat. 
Det har varit nödvändigt att bättre fastställa etapperna för utvärdering av nya tester (utarbetande 
av ett test och framställning av protokoll; för-validering; egentlig validering; objektiv och 
oberoende bedömning av studien, utveckling mot juridiskt godkännande). 
2. Initiativen. 
De olika aktörerna har tagit ett antal initiativ för att uppnå de föreskrivna målen. 
GDXI 
GD XI ansvarar dels för direktiv 86/609/EEG om skydd av djur som används för försök 
och andra vetenskapliga ändamål, och har av det skälet i uppgift att samla in statistiska 
uppgifter om de djur som används; dels för direktiv 67/548/EEG om klassificering, 
förpackning och märkning av farliga ämnen, där de testmetoder som erkänns av EU 
fastställs i bilagan. 
GD-Gemensamma forskningscentrumet 
ECVAM (Europeiska centrumet för validering av alternativa metoder) har redan anordnat 
14 seminarier om utveckling och validering av alternativa metoder. Sju av metoderna 
gällde kosmetiska produkters säkerhet och rapporterna från dessa har offentliggjorts. Även 
två andra rapporter, om förfarandet för för-validering och validering, finns tillgängliga. 
ECB (Europeiska kemikaliekontoret) tillhandahåller det nödvändiga tekniska och 
vetenskapliga stödet för GD XI. 
GD XXIV/CSC ( Vetenskapliga kosmetologikommittén) 
GD XXIV spelar en drivande roll i verksamheten, eftersom det ansvarar för direktivet 
"Kosmetiska produkter" och har till uppgift att för kommissionens räkning 
förbereda åtgärdsplaner för senareläggning av förbudet mot djurförsök, om detta visar sig 
nödvändigt. 
\\ 
CSC och dess avdelning för alternativa metoder har utvärderat olika dokument och 
handlingar som framlagts av COLIPA; de har även antagit dokumentet "Nödvändig 
information för vetenskaplig utvärdering av valideringsstudier om alternativa tester för 
bedömningen av kosmetiska produkters säkerhet". 
GDXII 
GD XII har bekostat olika forskningsprogram om utveckling och validering av alternativa 
metoder. 
COLIPA/SCAAT (Steering Commitee on Alternatives to Animal Testing) 
Utöver utarbetandet av ärenden och deltagandet i ett stort antal studier anordnade 
COLIPA en internationell vetenskaplig konferens om alternativ till djurförsök i Bryssel 
den 29-30 november 1995. 
USA 
Den amerikanska regeringen eftersträvar aktivt ett internationellt samarbete som skulle 
bidra till att utfärda rekommendationer. 
FDA (Food and Drug Administration), som är det ansvariga organet för kosmetiska 
produkters säkerhet, har uttryckt farhågor över förbudet av djurförsök i genomförandet 
av direktiv 93/35/EEG. 
OECD 
OECD offentliggör riktlinjer för toxicitetstester, vilka godkänns av medlemsstaterna. 
Riktlinjer för in v/Yro-kontroll av upptagning genom huden diskuteras för närvarande. 
3. Statistiska uppgifter over djurförsök. 
Insamlingen av uppgifter som särskilt gäller beståndsdelar och kosmetiska produkter har varit svår 
på grund av att insamlingen av uppgifter om antalet djur som används i experiment eller andra 
vetenskapliga ändamål genom tillämpning av direktiv 86/609/EEG inte är utformad på årsbasis. 
8 medlemsstater har förklarat att man inte genomför djurtester för färdiga kosmetiska 
produkter på deras territorium (Italien, Grekland, Belgien, Irland, Sverige, Finland, 
Luxemburg, Tyskland). 
6 medlemsstater har förklarat att man inte genomför djurtester för beståndsdelar i 
kosmetiska produkter på deras territorium (Grekland, Nederländerna, Irland, Sverige, 
Finland, Luxemburg). 
3 medlemsstater (Österrike, Frankrike, Förenade kungariket) har meddelat sifferuppgifter 
med några anmärkningar om att dessa siffror var osäkra och inte kunde tolkas. 
\W 
Det bör dessutom noteras att det är möjligt att vissa medlemsstater, som själva inte tillverkar 
beståndsdelar, använder beståndsdelar som testats i andra medlemsstater eller i tredje land, och 
att vissa beståndsdelar kan ha testats i andra syften. 
4. Slutsatser och perspektiv vad gäller utveckling av alternativa metoder för olika 
toxicitetstester som används i bedömningen av säkerheten i beståndsdelar och kosmetiska 
produkter. 
4-1 Beståndsdelar 
Fototoxicitet/fotoirritation (hudreaktion efter epidermal påstrykning av ett kemiskt ämne 
i närvaro av ultravioletta strålar). Detta gäller särskilt UV-filter. 
Resultaten av fas II av den internationella valideringsstudien EU/COLIPA om in vitro-
tester beträffande fotoirritation har redan lett till stora framsteg. Man planerar en tredje 
fas. En kompletterande studie om UV-filter är nödvändig. Validering är möjlig inom en 
nära framtid. 
Upptagning genom huden 
Nya riktlinjer om in vitro-tester beträffande upptagning genom huden kan eventuellt 
godtas av medlemsstaterna och OECD inom en nära framtid. 
Hudirritation 
Man föreslår att hudirritation på grund av beståndsdelar i kosmetiska produkter bedöms 
på frivilliga personer. Detta kan bli möjligt om tidigare studier av risker för toxiska 
reaktioner ger tillräckliga garantier. 
Hudkänslighet 
Bedömning in vitro av hudkänslighet kräver mer ingående forskning om den mekanistiska 
basen för känsligheten innan en värderingsstudie kan komma i fråga. 
Ögonirritation 
Resultaten av valideringsstudierna av alternativa metoder till Draize-testet för 
ögonirritation har varit nedslående (studien EU/Home Office och COLIPA-studien) och 
inget av de tester som använts motsvarade studiernas syften. Ett mer flexibelt synsätt i 
experimenteringen borde uppmuntras, genom att man godtar en kombination av 
vetenskapligt validerade metoder och utvärderar toxicitet i undersökta ämnen i förhållande 
till lämpliga standariserade kontrollämnen (benchmark substances). 
Fotomutagenicitet (helheten av förändringar av informationsinnehållet av det genetiska 
materialet som sker vid UV-strålning) 
Man har föreslagit rekommendationer vad gäller kriterier för fastställande av protokoll 
för in vitro-tester. 
V) 
Hudfrätande egenskaper 
Frätande beståndsdelar används inte i kosmetiska produkter. Emellertid kan ECVAM:s 
valideringsstudie beträffande in vitro-tester av hudfrätande egenskaper vara användbar i 
gallringsfasen, och ge väsentlig information innan man planerar för studier med frivilliga 
personer. 
Mutagenecitet 
In vitro-tester är vanliga för utvärdering av mutagena egenskaper i kosmetiska produkters 
beståndsdelar. Man utför tester på levande djur endast om in v/Yro-testernas resultat är 
tvivelaktiga. 
Det blir troligen omöjligt att inom en överskådlig framtid helt och håller ersätta tester på 
levande djur för utvärdering av systemiska risker, som t.ex. tester för akut toxicitet, 
subkronisk toxicitet, kancerogenicitet, fortplantings- och utvecklingstoxicitet. 
Förbättringen av de metoder som används har dock redan lett till att antalet djur som 
används minskat betydligt. 
4.2. Färdiga kosmetiska produkter 
Ögon- och hudtolerans av färdiga kosmetiska produkter kan vanligtvis bedömas in vitro 
om uppgifterna om beståndsdelarnas toxicitet och fysiska och kemiska egenskaper är 
kända och ger den nödvändiga garantin. 
Hudkompatibilitet (frånvaro av hudirritation) hos färdiga kosmetiska produkter kan 
utvärderas på människor om det sker inom ramen för strängt bevakade kliniska studier. 
Det är viktigt att betona att användningen av frivilliga personer i stället för djurförsök är 
en metod som bör behandlas med största försiktighet. Sådana studier, vars etiska 
dimension är uppenbar, bör endast tillåtas om studier in vitro och på levande djur bevisar 
att det inte föreligger risk för allvarliga följder. 
Sammanfattningsvis: - Validering av alternativa metoder för utvärdering av upptagning 
genom huden och fotoirritation vad gäller beståndsdelar, och för 
utvärdering av ögontolerans och hudtolerans för färdiga 
produkter, kan vara tänkbar inom en nära framtid. 
Utarbetandet av alternativa metoder för bedömning av 
ögonirritation, hudirritation och hudkänslighet vad gäller 
beståndsdelar, kräver att man först genomför ytterligare studier. 
Utarbetandet av in v/Yro-metoder inom områden där en system isk 
risk kan finnas föreligger inte inom överskådlig framtid, även om 
antalet djur kan minskas. 
V/ 
FÖRKORTNINGAR 
CAPT: Committee of Adaptation to Technical Progress 
CAAT: Centre for Alternatives to Animal Testing (John Hopkins University. USA) 
CFTA: Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association (USA) 
COLIPA: European Cosmetic, Toiletry and Perfumery Association 
DEREK: Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge 
ECB: European Chemicals Bureau 
ECVAM: European Centre for the Validation of Alternative Methods 
ERGATT: European Research Group for Alternatives in Toxicity Testing 
ES AC. ECVAM Scientific Advisory Committee 
EU: European Union 
EU/HO international validation study: 
European Union/Home Office international validation study 
FDA: Food and Drug Administration (USA) 
FDCA: Food, Drug and Cosmetics Act (USA) 
FLT: Fluorescein Leakage Test 
FRAME: Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments 
GLP: Good Laboratory Practice 
ICCVAM: US Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative 
Methods 
IFAW: International Fund for Animal Welfare 
IRAG: Interagency Regulatory Alternatives Group 
IVTIP: In Vitro Testing Industrial Platform 
JCIA: Japanese Cosmetics Industry Association 
JRC: Joint Research Centre 
MM AS: Modified Maximum Average Score 
MHW: Ministry for Health and Welfare (Japan) 
NIEHS: National Institute of Environmental Health Sciences (USA) 
NRU: Neutral Red Uptake Assay 
NTP: National Toxicology Program (USA) 
PM: Prediction Model 
OECD: Organisation for Economic Cooperation and Development 
QSAR: Quantitative Structure-Activity Relationships 
RBC: Red Blood Cell Haemolysis Test 
SCAAT: Steering Committee on Alternatives to Animal Testing 
SCC: Scientific Committee on Cosmetology 
SIAT: Scweizerisches Institut fur Alternativen zu Tierversuchen 
TEA: Tissue Equivalent Assay 
UV: Ultra Violet 
ZEBET: Zentralstelle zur Erfassung und Bewertung von Ersatz und Ergänzungsmethoden 
zum Tierversuch im Bundesgesundheitsamt 
VI 
INNEHÂLLSFÔTECKNING 
SIDE 
A. INLEDNING 2 
B. NY UTVECKLING PÄ VALIDERINGSOMRÄDET 2-4 
- Validering av alternativa metoder som används för olika syften. 3 
- Led i udvärdering av nya försök 3 
C INITIATIV UNDER 1995 4-11 
Aktörerna 4 
Initiativ 5 
1. EUROPEISKA UNIONEN 
GDXI 5 
GD-GFC 6 
GD XXIV/VKK 8 
GD XII 9 
COLIPA/ SCAAT: 10 
2. USA 11 
3. JAPAN 11 
4. OECD 11 
D. LÄGESRAPPORT FÖR ARBETET 12-15 
E. STATISTIK OM DJURFÖRSÖK 15 
F. SLUTSATSER 15-16 
G. PERSPEKTIV 17 
A. INLEDNING 
Denna rapport är den andra som kommissionen ärligen skall lämna till Europaparlamentet och rådet om 
de framsteg som gjorts i fråga om utveckling, validering och rättsligt godkännande av metoder som kan 
användas i stället för djurförsök för att testa kosmetika. 
"Kommissionen skall lämna en årlig rapport till Europaparlamentet och rådet om de framsteg som 
gjorts i utvecklingen, valideringen och det juridiska godkännandet av alternativa metoder som kan 
ersätta sådana som förutsätter djurförsök. Denna rapport skall innehålla exakta uppgifter om 
antal och slag av försök avseende kosmetika som utförts på djur. Medlemsstaterna skall vara 
skyldiga att samla in sådana uppgifter utöver den statistikinsamling som fastställs i direktiv 
86/609/EEG om skydd av djur som används för försök och andra vetenskapliga ändamål. 
Kommissionen skall särskilt säkerställa att försöksmetoder, i vilka levande djur inte används, 
utvecklas, valideras och godkänns i lagstiftningen. " (Direktiv 93/35/EEG art. 4 i) 
Med undantag av målen, aktörerna och uppfattningen om potentiell risk för människors hälsa, där ingen 
förändring skett, redogörs i tur och ordning för de punkter som behandlas i den första årsrapporten 
(KOM(94)606). 
* Ny utveckling på valideringsområdet.(B) 
* Initiativ under 1995(C) 
* Lägesrapport för det pågående arbetet.(D) 
* Statistik om djurförsök.(E) 
* Slutsatser.(F) 
* Perspektiv.(G) 
B. NY UTVECKLING PÅ VALIDERINGS­
OMRÄDET 
Kommissionens framstå mål ir oförändrat att verka for utveckling, validering och rättsligt 
godkännande av alternativa metoder som kan ge konsumenten en skyddsnivå som är likvärdig med 
eller bättre än den som uppnås genom djurförsök. 
Validering är den process genom vilken tillförlitligheten och relevansen hos ett försök upprättas i ett 
givet syfte. 
De led i arbetet som måste genomföras för att nå detta resultat har visat sig vara fler och processen mer 
komplicerad än vad man ursprungligen räknade med. 
På det första arbetssammanträdet som hölls i Amden i Schweiz 1990) upprättades den teoretiska grund som 
är grundläggande för valideringsprocessen, dvs. utvärdering och validering inom eller i samarbete mellan 
laboratorier, utveckling av databaser och utvärdering av resultaten. 
De erfarenheter som gjorts vid de valideringsstudier som genomförts sedan 1990 har visat att det är 
nödvändigt att bättre definiera de olika målen för valideringsstudieraa och att införa ytterligare led i 
utvärderingsprocessen för nya tester. 
ECVAM (europeiskt centrum för validering av alternativa metoder), en enhet inom miljöinstitutet i det 
gemensamma forskningscentret (Ispra), har en central roll i diskussionerna om validering, och betydande 
bidrag har lämnats inom följande områden: 
* Praktiska aspekter på validering. 
* Förvalideringsmodell. 
* Internationella diskussioner med ICCVAM (Inter-Agency Coordinating Committee for the 
Validation of Alternative Methods) i USA och med OECD (Ekonomiska samarbets- och 
utvecklingsorganisationen) om harmoniseringen av kriterierna för validering och godkännande. 
Rekommendationer om de praktiska och organisatoriska aspekterna på valideringen av alternativa försök 
gavs vid det andra sammanträdet i Amden (24-28 januari 1994) som organiserades i samarbete mellan 
ECVAM och ERG ATT (Europeiska forskningsgruppen för alternativ för testning av toxicitet) och finns 
beskrivna i ECVAM:s rapport nr 5. 
Validering av alternativa metoder som används för olika syften. 
Validering av försök genomförs för att nå fyra slag av huvudmål. Man skiljer mellan: 
1. Validering av alternativa förfaranden som skall användas inom ej föreskrivna studier. 
2. Validering av alternativa försök som en del av en metod med föreskrivna riktlinjer. 
3. Validering av alternativa försök som syftar till att ersätta befintliga riktlinjer. 
4. Validering av alternativa försök som är avsedda att ge en del av den information som krävs för 
en föreskriven riktlinje. 
Led i udvärdering av nya försök 
1. Utveckling av ett försök och utarbetande av ett försöksprotokoll 
Vid utvecklingen av ett försök beaktas i första hand kriterier som rör beskrivningen av basen för 
metoden, definitionen av dess vetenskapliga mål, den biologiska specifikationen och graden av 
finalitet, resultatens uttrycksform och tolkning med hjälp av en prediktionsmodell (PM). 
Prediktionsmodellen skall göra det möjligt att omvandla varje resultat som uppnåtts med en 
alternativ metod till en korrekt förutsägelse om in vivo-toxiciteten 
Prediktionsmodellen är av avgörande betydelse för att ett valideringsprogram skall kunna 
genomföras framgångsrikt. Den gör det möjligt att testa en klart definierad hypotes och att 
objektivt utvärdera försökets egenskaper samt är vägledande när valideringsstudien planeras. 
2. Förvalidering 
Erfarenheten har visat att resultatet av omfattande och kostsamma valideringsstudier kan äventyras 
om inte deras ledare insisterar på att optimerade försöksprotokoll och bevis på att de genomförts 
lämnas in innan den formella valideringsstudien inleds. I rapport nr 1 från "ECVAM Prevalidation 
Task Force" beskrivs förvalideringsprocessens syfte och en plan för denna. 
Förvalideringen syftar till att 
optimera och standardisera försöksprotokollet 
utvärdera metodens överförbarhet. 
Förvalideringsarbetet omfattar följande tre etapper: 
En precisering av försöksprotokollet i samarbete mellan det laboratorium som har 
utvecklat metoden och det laboratorium som utsetts för att optimera den. 
överföring av försöksprotokollet i samarbete mellan dessa båda laboratorier och det 
laboratorium som utsetts för överföringen. 
Ett blindtest med deltagande av åtminstone dessa tre laboratorier, som utsetts för att 
studera försöksprotokollets egenskaper. 
3. Validering: 
Valideringen omfattar en formell studie i samverkan mellan olika laboratorier. 
De viktigaste leden i valideringen är 
planering av studien, 
val av försök, 
val av laboratorier, 
val och distribution av försöksmaterial, 
insamling och analys av resultaten, och 
utvärdering av studien. 
Oberoende bedömning av studiens utförande och resultat. 
Denna bör inbegripa en objektiv utvärdering av vetenskapligt validerade försöks värde jämfört med 
andra försök och med hänsyn till målen för valideringen. 
Vägen mot rättsligt godkännande 
Det är av största vikt att varje ny metod som anses adekvat validerad som ersättning för en redan 
existerande metod får så vidsträckt internationellt godkännande som möjligt. OECD:s riktlinjer för 
försök är till exempel särskilt viktiga i detta avseende eftersom de används för försök som utförs 
i medlemsstater i Europa, Nordamerika och i Japan, Australien och Nya Zeeland. Dessutom har 
medlemsstaterna inom ramen för OECD:s överenskommelse om ömsesidigt godkännande av 
uppgifter kommit överens om att godkänna resultat från försök som utförts enligt OECD:s 
riktlinjer för försök, förutsatt att principerna för god laboratoriesed (GLP) iakttas. OECD har 
upprättat ett förfarande för att uppdatera riktlinjerna för försök och för införandet av nya 
försöksmetoder. 
INITIATIV UNDER 1995 
AKTÖRERNA 
De viktigaste aktörerna som främjar forskning, utveckling och validering av alternativa metoder är, som 
tidigare nämnts, \ 
1. EUROPEISKA UNIONEN 
Europeiska kommissionen: 
Flera tjänstemän inom kommissionen arbetar med frågor om djurförsök och utvecklingen och 
utvärderingen av alternativa metoder. 
GD XL miljö, kärnsäkerhet och civilskvdd. förvaltar och ansvarar för direktiv 86/609/EEG om 
skydd av djur som används för försök och andra vetenskapliga ändamål, och för direktiv 
67/548/EEG om klassificering, förpackning och märkning av farliga ämnen. 
GD-GFC, Gemensamma forskningscentret 
ECVAM, europeiskt centrum för validering av alternativa metoder 
ES AC. ECVAM: s vetenskapliga rådgivande kommitté 
ECB, Europeiska byrån för kemikalier 
GD XXIV: Konsumentpolitik 
Enhet 4. politik för produktkvalitet och -försäljning, förvaltar direktiv 76/768/EEG 
(kosmetikadirektivet) 
Vetenskapliga kommittén för kosmetologi (kommissionens rådgivande kommitté) 
GD XII, vetenskap, forskning och utveckling subventionerar forskningsprogram: 
Europeisk industri 
1. COLIPA - "Comité de Liaison Européen des Industrie Cosmétiques, des Produits de toilette et 
de la Parfumerie" har inrättat SCAAT: 
SCAAT - "Steering Committee on Alternatives to Animal Testing" övervakar COLIPA:s 
valideringsstudier och samordnar kosmetikaindustrins valideringsarbete på global basis. 
2. USA 
CTFA - "Cosmetic, toiletry and fragrance association" stöder CAAT:s verksamhet 
CAAT - Centrum för alternativ till djurförsök vid John Hopkins-universitetet 
3. JAPAN 
JCLA - "Japanese Cosmetic Industry Association" 
4. ORGANISATIONEN FÖR EKONOMISKT SAMARBETE OCH UTVECKLING (OECD) 
OECD ger ut riktlinjer för försök som godkänts genom samförstånd mellan dess medlemsländer. Dessa 
riktlinjer är nästan identiska med EU:s försöksmetoder i bilaga V, och ger i förening med principen för 
ömsesidigt godkännande av uppgifter tillfälle till internationell harmonisering och till ett rationellt 
förhållningssätt till principerna om att minska, förbättra och ersätta djurförsöken. 
INITIATIV 
1. EUROPEISKA UNIONEN 
GDXI 
GD XL miliö. kärnsäkerhet och civilskvdd. har träffat en överenskommelse med medlemsstaterna om den 
lämpligaste metoden för att vartannat år samla in de statistiska uppgifter som krävs i artiklarna 13 och 26 i 
direktiv 86/609/EEG om skydd av djur som används för försök och andra vetenskapliga ändamål. Den tabellen 
som medlemsstaterna skall sammanställa inbegriper en uppgift om det sammanlagda antal djur som använts för 
kosmetikaförsök. GD XI är också ansvarigt för direktiv 67/548/EEG och för EU:s försöksmetoder, som 
föreskrivs i kommissionens direktiv 87/302/EEG och i bilagan till kommissionens direktiv 92/69/EEG (del B -
metoder för att bestämma toxicitet). 
GD XI stödde EU/HO.s internationella valideringsstudie om alternativ till Draize-försöket för ögonirritation och 
även EU/COLIPA:s internationella valideringsstudie om in vitro fototoxicitet. 
GD-GFC 
ECVAM. europeiskt centrum för validering av alternativa metoder står till förfogande för alla 
generaldirektorat som sysslar med frågor kring alternativa metoder. 
ECVAM upprättades av den Europeiska kommissionen i enlighet med ett meddelande från kommissionen till 
rådet och Europaparlamentet i oktober 1991 och som svar på artikel 23 i direktiv 86/609/EEG som fastslår 
följande: 
"Kommissionen och medlemsstaterna skall främja forskning med sikte på utveckling och validering av 
alternativa metoder, som kan ge lika ingående information som den som kan uppnås genom försök med djur, 
men som innebär användning av färre djur eller mindre smärtsamma tillvägagångssätt. De skall vidta alla andra 
åtgärder som de anser lämpliga för att främja forskningen på detta område." 
ECVAM har främst till uppgift att 
• samordna valideringen av alternativa metoder på gemenskapsnivå, 
• vara ett forum för utbyte av information om utvecklingen av alternativa försöksmetoder, 
• utveckla och förvalta en databas om alternativa metoder, och 
• verka för en dialog mellan lagstiftare, industri, biomedicinska forskare, konsumentorganisationer och 
djurskyddsföreningar, med inriktning på utveckling, validering och internationellt erkännande av alternativa 
försöksmetoder. 
ECVAM:s inledande symposium i Ispra den 18 oktober 1994 ägnades åt validering av alternativa metoder.// 
Under detta symposium övervägdes EC VAM:s roll i utvecklingen, valideringen och godkännandet av alternativa 
metoder och teststrategier, inbegripet de för testningen av kosmetika övervägdes och kan sammanfattas på 
följande sätt: 
• Att bidra till utformningen av riktlinjer genom valideringsprocessen i sig och dess samband med 
utvecklingen och godkännandet av relevanta och tillförlitliga försök för specifika ändamål. 
Att bestämma prioriteringar med beaktande av vetenskapliga framsteg inom enskilda områden. 
Att säkerställa att de alternativa metoderna bygger på enkla, avgränsade och väldefinierade biologiska 
försöksparametrar och att det finns en god förståelse av de grundläggande mekanismerna för dessa. 
Att verka för en tvärvetenskaplig metod, med sikte på utveckling av integrerade försöksstrategier som 
omfattar kvantitativa struktur/aktivitetssamband (QSAR), biokinetik samt cell- och vävnadsmodeller. 
Att söka lösa de svårigheter som uppstår på grund av bristen på försöksmaterial för vilka in v/vo-data av 
god kvalitet finns. 
Att verka för en förnyad utvärdering av de befintliga riktlinjerna och av de rättsliga förfarandena. 
Att nå samförstånd genom att arbeta tillsammans med relevanta organ inom det offentliga området, 
näringslivet, högskolorna osv. 
• Att upprätta valideringskriterier för en oberoende utvärdering av resultaten av valideringsstudierna och för 
rättsligt godkännande av alternativa tester och teststrategier genom ett aktivt samarbete med bl.a. OECD och 
ICC V AM (Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative Methods, USA). 
Hittills har ECVAM organiserat flera arbetssammanträden om utveckling och validering av alternativa 
försöksmetoder och publicerat rapporter från 14 av dessa.. ECVAM har prioriterat alternativ för testning 
av kosmetika. De rapporter som är av direkt intresse för utvärderingen för säkerheten hos kosmetika är 
följande: 
- rapport 2 - In vitro phototoxicity testing (1994) 
- rapport 5 - Practical aspects of the validation of toxicity tests procedures (1995) 
- rapport 6 - A prevalidation study on in vitro skin corrosivity testing (1995) 
- rapport 7 - Development and validation of non-animal tests and testing strategies: the identification of a 
coordinated response to the challenge and the opportunity presented by the sixth amendment 
to the Cosmetic directive (1995) 
- rapport 8 - The integrated use of alternative approaches for predicting toxic hazard (1995) 
- rapport 11 - The three Rs: The Way Forward (1995) 
- rapport 13 - Methods for assessing percutaneous absorption (1995) 
Två broschyrer har publicerats under 1995 om 
"the validation of alternative test methods"(ett gemensamt utlåtande från ECVAM och 
ECB) 
den första "ECVAM Prevalidation Task Force Report" 
Till de områdena som ECVAM prioriterar i fråga om kosmetika hör också för åren 1995-1998 
utvecklingstoxicitet, 
metabolism, 
frätande egenskaper, 
fototoxicitet 
hudgenomträngning 
ögon- och hudirritation 
sensibilisering 
ECB (Europeiska byrån för kemikalier) tillhandahåller tekniskt och vetenskapligt stöd till GD XI vid 
klassificering och märkning av farliga ämnen, vid anmälan av nya ämnen, vid befintliga kemikalier, vid 
export/import kontroll av farliga ämnen och vid försöksmetoder (enligt bilaga V i direktiv 67/548/EEG). En 
effektiv förbindelse är under utveckling mellan ECB och ECVAM i fråga om ersättande av alternativa 
försöksmetoder, och förändringar av djurförsök som minskar det antal djur som krävs eller minskar lidandet för 
de djur som är nödvändiga för att följa regler och riktlinjer. 
GD XXIV/Vetenskapliga 
kommittén för 
kosmetologi 
GD XXIV - konsumentpolitik - som förvaltar "kosmetikadirektivet" (direktiv 76/768/Hl-Xi) har fortsatt med 
sin pådrivande uppgift och har inlett allt fler åtgärder i syfte att så långt som möjligt följa bestämmelserna i 
direktiv 93/35/EEG inom de föreskrivna tidsgränserna. 
Om inte några alternativa metoder har kunnat valideras vetenskapligt och godkännas rättsligt har DG 
XXIV till uppgift att för kommissionens räkning utarbeta ett förslag till åtgärder i syfte att flytta fram 
det datum då djurförsök skall förbjudas enligt det förfarande som gäller för kommittén för anpassning 
till teknisk utveckling (art. 10 i dir. 76/768/EEG). 
Denna kommitté för teknisk anpassning består av företrädare för medlemsstaterna med en företrädare för 
kommissionen som ordförande. Ordföranden förelägger kommittén ett förslag till åtgärder. 
Yttrandet avges med kvalificerad majoritet. 
Enligt det nya förfarandet med gemensamma beslut skall Europaparlamentet underrättas samtidigt och på samma 
sätt om samtliga åtgärdsförslag som föreläggs kommittén. 
"Om inte tillräckliga framsteg har uppnåtts i utvecklingen av tillfredsställande metoder som kan ersätta 
djurförsök, särskilt i sådana fall då alternativa provningsmetoder, trots att alla rimliga ansträngningar har 
gjorts, inte har kunnat valideras vetenskapligt som likvärdiga ifråga om skyddsnivån för konsumenterna med 
beaktande av OECD:s riktlinjer för toxicitetstester, skall kommissionen senast den / januari 1997 lämna 
förslag till åtgärder för att uppskjuta det datum då denna bestämmelse skall träda i kraft under rimlig tid, 
och i vart fall minst två år, i enlighet med det förfarande som fastställs i artikel 10. Kommissionen skall 
rådfråga Vetenskapliga kommittén för kosmetologi, innan den lämnar sådana förslag." (Dir. 93/35/EEG, art. 
4 i) 
GD XXIV har upprepade gånger uppmanat medlemsstaterna att fullgöra sina förpliktelser i fråga om insamling 
av exakta uppgifter om de djurförsök som utförts beträffande beståndsdelar i kosmetika och färdiga kosmetiska 
produkter. De tabeller som medlemsstaterna skall sammanställa för att uppfylla kraven i direktiv 86/609 gäller 
hela kosmetikaområdet. Den statistikinsamling som föreskrivs i direktiv 93/35 går dock utöver dessa basfakta 
i fråga om kosmetika, och man har begärt att medlemsstaterna skall lämna mer detaljerade resultat på årsbasis 
(se tabell i bilagan). 
GD XXIV har haft regelbundna kontakter i första hand med GD XI och ECVAM och har underlättat 
kommunikationerna mellan alla aktörer. 
Vetenskapliga kommittén för kosmetologi. kommissionens rådgivande kommitté, har till uppgift att lämna 
ett vetenskapligt yttrande till GD XXIV om möjligheterna att tillämpa alternativa metoder som validerats inom 
processen för säkerhetsutvärdering av kosmetika för humant bruk. 
Kommitténs utskott Alternativa metoder/Riktlinjer från Vetenskapliga kommittén för kosmetologi har 
organiserat två arbetssammankomster (2 februari, 11 maj) och två sammanträden tillsammans med 
SCAAT/COLIPA (19 september, 1 december), vid vilka följande program har utvecklats: 
I. Utvärdering av dokument och akter som framlagts av COLIPA 
Fotoirritation in vitro (GD XI/ECVAM/ZEBET) 
Analysen av de data som framlagts av COLIPA - dvs. delresultat som redovisats i litteraturen från 
förvalideringsetappen och delinformation om den andra etappen i valideringsstudiema har inte gjort det 
möjligt för Vetenskapliga kommittén för kosmetologi att lämna ett vetenskapligt yttrande om projektet som 
helhet. 
Kommittén understryker dock att djurmodeller är otillräckliga för att förutsäga de fototoxiska verkningarna 
på människor och finner att ett studium in vitro av den fototoxiska potentialen är ett viktigt steg i 
processen med säkerhetsutvärdering av kosmetiska produkter som innehåller UV-filter. 
Perkutan absorption in vitro (COLIPA) 
Efter att ha analyserat de dokument som lagts fram av COLIPA - riktlinjer för försök med perkutan 
absorption in vitro, standardiserade försöksprotokoll och en allmän översikt över sambanden mellan in vitro 
och in v/vo-undersökningar - rekommenderar kommittén att metodiken för perkutan absorption in vitro 
presenteras på ett enhetligt sätt och kompletteras med resultat som uppnåtts inom eller i samarbete mellan 
laboratorier på lämpligt valda försöksmaterial och bärare. 
Fotomutagenicitet (COLIPA) 
I COLIPA:s rekommendationer i den slutrapport som lämnats till kommittén anges vilka kriterier som bör 
utnyttjas vid definitionen av försöksprotokollen. 
Kommittén beklagar att man ännu inte kan bygga utvärderingen av UV-filters fotomutagena potential på 
vederbörligen validerade metoder, trots att kommittén tagit fram allmänna kriterier för genomförandet av 
fotomutagenicitetsförsök 1990 (SPC/803/90). 
2. Information som krävs för den vetenskapliga utvärderingen av studier för validering av alternativa 
försök i svftc att de skall kunna utnvttias i säkerhetsutvärderingen av kosmetika 
Med hänsyn till problemen med att validera alternativa metoder har kommittén funnit det vara viktigt att 
ställa samman ett dokument som är ett direkt bidrag till kommande valideringsstudier. 
De kvalitativa och kvantitativa aspekterna på valideringsproblemen tas upp i denna rapport. 
De valda kriterierna 
gäller den vetenskapliga valideringen av försöken, 
gör det möjligt att mäta toxicitetsgrad, 
skall tillämpas på beståndsdelar i kosmetika, 
leder till en definition av den statistiska terminologin. 
Nödvändigheten av att kunna styrka optimering av försöksprotokollen och av att formalisera förhållandet 
mellan in vitro- och in vivo-data i form av en matematisk relation framstår klart. 
GDXH 
GD XII, vetenskap, forskning och utveckling finansierar forskningsprogram, särskilt i fråga om utveckling 
och validering av alternativa metoder enligt Europaparlamentets och rådets beslut nr 1110/94/EG av den 26 april 
1994 om det fjärde ramprogrammet för Europeiska gemenskapens verksamhet inom området för forskning och 
teknisk utveckling, som tydligt fastställer följande instruktioner: "Försök med och tester på djur skall alltid, när 
så är möjligt, ersättas med in vifro-försök eller andra metoder." 
Ett flertal program för utveckling och validering av in vitro-försök har stötts av GD XII eller pågår. Några av 
projekten skulle kunna vara till nytta för kosmetikaområdet: 
BRIDGE - Slutlig rapport (EUR 15777, utgiven 1995) 
Utveckling av ett förutsägande in vitro-försök för upptäckt av sensibilitctsföreningar. 
BIOTECH (1992-1994) 
Några projekt berör in vitro utvecklingstoxikologi. 
BIOTECH (1994-1998) 
Arbetsprogrammet förutser standardförberedande forskning om in vitro alternativ till djurförsök inom 
farmakotoxikologi. 
IVTIP (In Vitro Testing Industrial Platform): forum som bildats för att förbättra kontakterna mellan 
teknologiproducenter och- användare. Två möten hölls 1995 om det fjärde ramprogrammets framgångar och en 
översikt över framstegen med validering. 
COLIPA/SCAAT 
SCAAT har för varje forskningsområde inrättat särskilda arbetsgrupper, där flera experter deltar, för att 
genomföra valideringsarbetet. 
Ett internationellt vetenskapligt symposium om alternativ till djurförsök organiserades av COLIPA i Bryssel den 
29 och 30 november 1995 för företrädare för industrin, forskare, kommissionen, Europaparlamentet och 
dj ursky ddsföreningar. 
Den första programpunkten ägnades åt VALIDERING. Prediktionsmodellemas avgörande betydelse betonades 
och en sammanfattning gjordes av de pågående valideringsstudierna beträffande fotoirritation och ögonirritation. 
Denna del av symposiet avslutades med ett runda bordssamtal om den förväntade utvecklingen på 
lagstiftningsområdet. 
I den andra programpunkten med temat UTVECKLING ingick presentationer inom områdena perkutan 
absorption samt hudkompatibilitet och sensibilisering. 
Under det tredje passet, som tog upp RISKUTVÄRDERING, berördes de initiativ som tagits av Vetenskapliga 
kommittén för kosmetologi och de reglerande myndighetemas inställning i Storbritannien och Tyskland. Man 
betonade betydelsen av att vetenskapliga data ställdes till förfogande som stöd till industrins företagsinterna 
studier och teststrategier. 
Presentationerna kompletterades med en poster-utställning. 
I samband med denna utställning fick deltagarna en broschyr med en schematisk framställning av de metoder 
som förespråkas av IFAW (International fund for Animal Welfare). 
Eftersom det står klart att det inte är möjligt att ersätta djurförsök med ett enkelt in vitro-försök, lägger IFAW 
fram en strategi i etapper som huvudsakligen baseras på ersättningsalternativ där i första hand celler och 
vävnader från människa används och varje form av djurförsök in vivo utesluts, medan in vivo-försök på frivilliga 
försökspersoner förordas. 
Symposiet gav klart uttryck för den ledande roll som spelas av COLIPA (den europeiska kosmetikaindustrin) 
när det gäller att företa forskning om, utveckling och validering av alternativa metoder. De insatser som de stora 
europeiska kosmetikaföretagen gör är avsevärda med hänsyn till det antal djur som används vid testning av 
kosmetika, och de förvärvade kunskaperna är till betydande nytta för andra industrigrenar. 
Symposiet bidrog till att på ett vetenskapligt och exakt sätt informera de olika berörda parterna och gav upphov 
till intressanta meningsutbyten. I slutdokumentet efterlystes samordnade insatser från industrin och 
kommissionen för att snabbt kunna ersätta djurförsök med alternativa metoder i fråga om hudkompatibilitet, 
fotoirritation och perkutan absorption. 
10 
2. USA 
USA:s regering är angelägen om internationellt samarbete för att rekommendera ett tillvägagångssätt och 
fastställa kriterierna för rättsligt antagande av nya alternativa metoder som klart upprättar villkoren enligt vilka 
dessa metoder används (biologiska resultat, relevans för olika ämnesgrupper osv). I december 1995 i Arlington, 
Virginia organiserade ICCVAM ett arbetssammanträde om valideringen och det rättsliga godkännandet av 
alternativa toxikologiska försöksmetoder, sponsrat av the National Institute of Environmental Health Sciences 
(NIEHS) och the National Toxicology Program(NTP). Arbetsammanträdets syfte var att diskutera utkastet till 
ICCVAM:s rapport om rekommendationer om kriterier och processer för validering och rättsligt godkännande 
av nya och reviderade toxikologiska försöksmetoder. 
The Food and Drug Administration (FDA) är den myndighet i USA som ansvarar för säkerhet vad gäller 
kosmetika. FDA samverkar med de offentliga och privata organ som berörs av utvecklingen och valideringen 
av alternativa tester och koncentrerar sig på metoder som ger solida vetenskapliga data. 
FDA uttrycker oro i fråga om förbudet mot djurförsök till följd av genomförandet av direktiv 
93/35/EEG.. Vissa slag av kosmetika som tillverkas inom EU skulle därigenom kanske inte uppfylla 
säkerhetsvillkoren (för hälsa) enligt den amerikanska lagstiftningen (Food, Drug and Cosmetic Act). 
3. JAPAN 
Det japanska social- och hälsovårdsministeriet ansvarar för testning och riktlinjer för testning i Japan. De 
japanska forskningsgrupperna är i synnerhet engagerade i validering av försök som kan användas som alternativ 
till Draize-testet. Godkännandet av dessa beror på deras specifika användning i utvärderingen av ögonirritation 
(screening, eller utbyte, som enskilt test eller del av ett testbatteri). JCIA anser att det kommer att bli svårt att 
rekommendera ett test eller testbatteri för regelbunden säkerhetsutvärdering av kosmetika som inte har ett 
prediktionsvärde som motsvarar in vivo-metodernas. 
4. OECD 
På det femte mötet för de nationella samordnama av OECD:s program för testriktlinjer i oktober 1994 kom man 
överens om att sträva mot att harmomsera de olika publicerade och förordade idéerna till validering av 
alternativa försöksmetoder. Med hänsyn till den internationella debatten i ämnet ansåg man att tiden var den 
rätta för OECD att tillhandahålla ett diskussionsforum för alla berörda parter, genom vilken det skulle kunna 
vara möjligt att nå internationellt samförstånd om kriterier för validering och godkännande. De nationella 
samordnarna underströk att befintliga förslag skull användas som grund för ett internationellt godtagbart 
tillvägagångssätt, i stället för att utveckla ännu ett förslag. I detta avseende värdesattes det arbete som utförts 
i till exempel CAAT (John Hopkins University Center for Alternatives to Animal Testing) i USA, ECVAM i 
EU, ERGATT, och flera andra nationella center och kommittéer (till exempel FRAME i Förenade Kungariket, 
IRAQ och ICCVAM i USA, NCA i Nederländerna, SIAT i Schweiz och ZEBET i Tyskland). 
De nationella samordnarna kom överens om att ett OECD-arbetssammanträde skulle vara det bästa 
tillvägagångssättet, eftersom ett sådant möte skulle erbjuda en god möjlighet för alla berörda parter att diskutera 
ämnet och försöka nå samförstånd. Vidare ansågs det vara av största vikt att medlemsstaterna skulle inbegripa 
personer med ansvar för lagstiftningen i sina nomineringar. Sverige erbjöd sig att åtaga sig värdskapet för 
arbetssammanträdet. 
En styrande kommitté upprättades i januari 1995 för att råda OECD:s sekretariat om arbetssammanträdets 
innehåll och struktur, och att bidra till utvecklingen av ett program för arbetssammanträdet, vilket planlades till 
den 22-24 januari i Solna, Sverige. ECVAM och ZEBET var representerade i denna kommitté. 
11 
D. LÄGESRAPPORT FÖR ARBETET 
METODER SOM FÖR NÄRVARANDE UTVECKLAS ELLER VALIDERAS 
Hudsensibilisering 
Sensibilisering är ett stort forskningsområde och är i högsta grad relevant för säkerheten när det gäller 
kosmetika. En intressant metod för att utvärdera hudsensibilisering in vitro presenterades vid det symposium 
som organiserades av COLIPA (29-30 november 1995). Ett arbetssarnmanträde organiserat av ECVAM om 
hudsensibilisering hölls under 1995, och en rapport därifrån kommer att publiceras under 1996. 
Omfattande undersökningar har gjorts av olika föreningars kemiska struktur och sensibiliseringspotential, och 
expertdatasystem som DEREK (Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge) utvecklas för att 
upptäcka strukturella varningssignaler i korrelation till den sensibiliserande potentialen. En möjlig 
prediktionsmetod skulle kunna baseras på mätning av de molekylära signaler som sensibiliserande ämnen ger 
upphov till i cellkulturer. 
I synnerhet inom detta område måste det understrykas att prediktionen av sensibiliseringspotentialen hos 
människor fortfarande är en av de största svårigheterna på grund av de individuella variationerna mellan 
reaktionerna hos människor. 
Fotomutagenicitet (COLIPA) 
COLIPA har sedan 1990 lagt fram dokumentation om UV-filter med uppgifter om fotomutagenicitet som 
erhållits med olika försökstyper. 
Man har organiserat ett ringförsök för att fastställa ett lämpligt försöksprotokoll med användning av två ämnen 
med känd fotomutagen potential, aktiverade av UV A, och olika bakteriestammar. Resultaten av detta ringförsök 
har gjort det möjligt att utarbeta rekommendationer om kriterierna för valet av bakteriestammar eller 
cellkulturer, solsimulator, teknik för bestrålning av proverna, UV-stråldoser, doser av försöksämnen och 
användningen av positiva kontroller. 
Det är svårt att planera en valideringsstudie då referensuppgifter in vivo saknas. 
Perkutan absorption (ECVAM) 
ECVAM, COLIPA och OECD samarbetar för att underlätta det internationella antagandet av en riktlinje för 
testning av perkutan absorption in vitro. 
Fotoirritation/Fototosicitet: validering: etapp II (EU/COLIPA) 
ECVAM och GD XI är företrädda i ledningsgruppen för studien som samordnas av ZEBET, och undersöker 
möjligheten av ännu en valideringsstudie som utformas för att förutsäga den foto-irriterande potentialen hos UV-
filter. 
I den första etappen av förvalideringen kunde man med hjälp av resultaten av ett cellviabilitetsförsök fastställa 
en gränsfaktor som skiljer fotoirriterande från icke-fo to irriterande ämnen. Målet för den andra valideringsetappen 
som var utformad som ett blindtest var att fastställa om ett celltoxicitetsförsök och ett försök som mäter skador 
på cellerna (NRU'-försöket och det kombinerade RBC2-försöket (fotohemolys+hemoglobinoxidering)) gör det 
NRU: Neutral red uptake assay, använder cellerna som mål och celltoxicitet är det biologiska slutmålet. 
12 
möjligt att korrekt förutsäga den fotoimterande potentialen hos 32 kemiska ämnen som leds systemiskt eller 
topiskt i människan. 
De preliminära resultaten av etapp II som avslutades under 1995 är begränsade till NRU-försöket som använts 
på alla laboratorier. RBC-försöket användes endast på tre laboratorier. 
De preliminära statistiska utvärderingarna gör det ännu inte möjligt att entydigt påvisa förekomst eller frånvaro 
av fotoirriterande potential. 
Kompletterande statistiska utvärderingar görs av en oberoende biostatistiker och kommer att bli tillgängliga 
under första halvåret 1996. 
ögonirritation - Slutrapport från EU/HO:» studie av alternativ till Dratee-testet f5r ögonirritation 
Målet för denna studie var att fastställa om nio alternativa försök, ensamma eller i kombination, kunde ersätta 
Draize-testet i fråga om starkt irriterande testmaterial eller för att utvärdera irritationspotentialen hos kemiska 
ämnen med eller utan samband med den kemiska ämnesgruppen och inom hela området för mätbar potential. 
Totalt 60 kemiska ämnen genomgick oberoende analyser i 37 laboratorier. Resultaten jämfördes med de MMAS-
resultat (Modified maximum average score) som erhållits med Draize-testet och som utvärderades statistiskt. 
Med undantag av prediktionen av ytaktiva ämnens irritationspotential uppfyllde inget av de nio försöken de 
uppställda målen. 
Många värdefulla erfarenheter gjordes under denna studie, vilka togs med i beräkningen för planeringen av 
COLIPA-studien. De ledde också till att ECVAM arrangerade ett arbetssammanträde om praktiska aspekter av 
validering, och utvecklade en plan för prevalidering. Variationerna vad gäller in v/vo-uppgifterna pekades ut 
som ett stort hinder för relevans och tillförlitlighet i in vivoförsöken. 
OgonifTitatfon: vaHderfrg (COWA) 
Valideringsverksamheten har gällt 23 beståndsdelar i kosmetika (ytaktiva ämnen, alkoholer, konserverings­
medel), varav 20 är gemensamma med den ovannämnda EU/HO-studien, och 32 kosmetiska sammansättningar 
(inom ett brett spektrum av fysikalisk-kemiska former). Försöksmaterialen har undersökts in vivo enligt OECD:s 
riktlinjer (OECD 405). 
De särskilda målen för denna studie var att fastställa om data från tio in vifr-o-försöksprotokoll som för 
närvarande används i kosmetikaindustrin (och varav fem var gemensamma med EU/HO-studien) 
uppvisar en acceptabel korrelationsnivå med MMAS (modified maximum average score), 
kan korreleras på ett acceptabelt sätt med individuella noteringar och de återhämtningstider som beskrivs 
i riktlinjen OECD 405, och 
ger en korrekt prediktion av potentialen för ögonirritation hos kanin på grundval av alternativa algoritmer. 
F5r första gången Ien valideringsstudie har prediktionsmodeuer (PM) upprättats innan studien inleddes. 
I dessa anges exakt vilka biologiska försöksparametrar som kan användas vid varje in vitro-metod och hur varje 
biologisk in v J frö-parameter skall omvandlas för att förutsäga potentialen för ögonirritation. 
De prediktionsmodeller som används i denna studie är baserade på de tidigare redovisade fakta som finns att 
tillgå för beståndsdelar och sammansättningar som är av intresse för kosmetikaindustrin, och särskilt för ämnen 
med en låg till måttlig irritationspotential. 
2RBC: Red blood cell haemolysis test, utvärderar skador på cellmembranen. 
13 
Programmet har inte möjliggjort en fullständig validering på grund av att endast ett litet antal 
laboratorier har deltagit i de enskilda testerna inom programmet. 
Ingen av de provade metoderna kan ännu på ett tillfredsställande sätt ersätta Draize-testet for 
ögonirritation. 
Prediktionsmodellernas tillförlitlighet har utvärderats genom en bedömning av resultatens reproducerbarhet 
mellan laboratorier och av om uppgifterna låg inom de förutbestämda prediktionsintervallen för modellerna. 
Försöksprotokollet RBC uppvisade god reproducerbarhet mellan laboratorier och uppfyllde även tillförlitlighets-
kriterierna. 
Tre av de testade försöksprotokollen visar tillfredsställande överensstämmelse med sina prediktionsmodeller 
(FLT3, RBC, TEA4), men ytterligare studier krävs för att lösa fler tekniska frågor som sammanhänger med 
prediktionsmodellerna, innan några definitiva slutsatser kan dras om deras egenskaper. 
Denna valideringsstudie visar på betydelsen av "m vivo-data av god kvalitet". 
Tillgängliga in vivo-data är tillräckliga för en riskutvärdering. För att jämföra in vivo- och in vitro-data måste 
dock de båda uppgiftsserierna teoretiskt sett uppvisa minsta möjliga variation så att en exakt statistisk 
utvärdering kan göras. Erfarenheterna har visat att så inte alltid är fallet. 
Undersökningen av resultaten visar på att vissa av prediktionsmodellerna skulle kunna utvecklas vidare och 
testas i en kommande studie. 
Frätande egenskaper for huden; forvalidering (ECVAM) 
Fyra tester för hudfrätande egenskaper genomgår utvärdering och optimering (TER = "rat skin transcutaneous 
electrical resistance array", CORROSITEX™, skin2™ och EPISKIN™) i syfte att planera ett formellt 
valideringsprogram för 1996. 
Kompatibilitet med huden (COLIPA) 
Kompatibilitet med huden definieras som avsaknad av hudirritation vid normal användning och vid sådana 
former av felaktig användning som rimligen kan förutses. 
Sju företag som är medlemmar av COLIPA utvärderar hudkompatibiliteten för människor hos sina färdiga 
kosmetiska produkter under kontrollerade förhållanden, eftersom irritationspotentialen är mycket låg hos de 
flesta kosmetiska produkter. 
COLIPA har tagit fram riktlinjer för utvärdering av färdiga kosmetiska produkters kompatibilitet med mänsklig 
hud: 
beaktar de etiska kraven, studier på människa måste utföras i enlighet med Helsingforsdeklarationen ( 1964, 
1989), 
bygger på en försiktig uppläggning steg för steg av testerna, och 
framhåller behovet av förhandskunskap om de testade produkternas sammansättning och stabilitet samt av 
en inledande utvärdering av toxicitetsdata för produkternas beståndsdelar. 
3FLT: Fluorescent leakage test, mäter de skador som orsakas på en cellbarriär. 
4TEA: Tissue equivalent assay, mäter hur lång tid som krävs för att med 50 % reducera 
cellviabiliteten hos celler från människa i samkulturer. 
14 
Riktlinjer för kompatibilitet med huden hos beståndsdelar i kosmetika utarbetas för närvarande. 
Studier på frivilliga försökspersoner (ECVAM) 
Studier på frivilliga försökspersoner föreslås ofta som ett alternativ till djurförsök. De problem som är förenade 
därmed, etiska, rättsliga, logistiska och vetenskapliga problem samt problem med säkerheten, undersöks för 
närvarande av EVCAM i samarbete med universiteten i Pavia och Nottingham och ett antal kosmetikaföretag. 
E. STATISTIK OM DJURFÖRSÖK 
Den insamling av uppgifter om antalet djur som används för försök eller andra vetenskapliga ändamål som skall 
ske enligt artiklarna 13 och 26 i direktiv 86/609/EEG sker inte varje år. 
Detta förklarar delvis svårigheterna med att årligen samla in specifika uppgifter för beståndsdelar i kosmetika 
och för färdiga kosmetiska produkter. 
Kommissionen har dock upprepade gånger av medlemsstaterna begärt att få de statistiska uppgifter som krävs, 
vilket även GD XXIV och GD XI har påmint dem om inom ramen för sin verksamhet. 
1. 8 medlemsstater har meddelat att det på deras territorium inte har utförts några djurförsök som avser 
kosmetiska produkter (Italien, Grekland, Belgien, Irland, Sverige, Finland, Luxemburg, Tyskland). 
2. Sex medlemsstater har meddelat att det på deras territorium inte har utförts några djurförsök som avser 
beståndsdelar i kosmetika (Grekland, Nederländerna, Irland, Sverige, Finland och Luxemburg). 
3. Uppgifter om det antal djur som använts har endast meddelats av tre medlemsstater (Österrike, Frankrike 
och Förenade Kungariket) som samtidigt påpekar att det delvis inte var möjligt att tolka dessa uppgifter 
och att det fortfarande råder osäkerhet vad gäller uppgifternas tillförlitlighet. På grund av omständigheterna 
är det därför inte möjligt att i denna rapport framlägga några jämförande tabeller med uppgifter i 
sifferform, eftersom en sådan uppställning skulle ge en felaktig bild av den verkliga situationen. 
4. När det gäller de länder som meddelat att inga försök förekommit, måste det ändå påpekas att vissa 
medlemsstater utan egen produktion av kosmetiska beståndsdelar med all sannolikhet använder 
beståndsdelar som har testats i andra medlemsstater eller i tredje land och att vissa beståndsdelar i 
kosmetiska produkter kan ha testats för andra ändamål. 
Kommissionen beklagar djupt att den för tillfället inte har tillgång till mer exakta uppgifter, men kommissionen 
är beroende av medlemsstaterna när det gäller insamlingen av dessa uppgifter. 
F. SLUTSATSER 
De framsteg som gjorts under 1995 i fråga om alternativa testmetoder och deras validering kan 
sammanfattas på följande sätt: 
Rapporten om etapp II av EU/COLIPA:s internationella valideringsstudie om test in vitro för 
fototoxicitet (fotoirritation) kommer att vara tillgänglig 1996, men det står redan klart att 
valideringen av NRU cellkulturtestet har varit mycket framgångsrik. De som arbetat med studien 
15 
anser att en godtagbar OECD-riktlinje kan läggas fram inom de närmaste två åren, del vill säga 
efter det att den slutliga rapporten om studien har publicerats och mindre förbättringar av 
protokollen har gjorts. 
Den europeiska kosmetikaindustrins samlade erfarenheter inom det viktiga området perkutan 
absorption har lett till ett konkret förslag till OECD-riktlinje för ett test in vitro. ECVAM och 
COLIPA samarbetar med OECD och andra för att underlätta antagandet av en riktlinje för ett 
försök in vitro av OECD:s medlemsländer. 
Resultaten av EU/HO:s internationella valideringsstudie av alternativ till Draize-testet var 
otillfredsställande, eftersom inget av försöken uppfyllde studiens mål. Mycket av värde inhämtades 
dock under studien, och detta kommer att leda till att kvalitén på framtida valideringsstudier 
avsevärt kommer att förbättras. 
Den första etappen av COLIPA.s utvärdering av alternativa metoder till Draize-testet för 
ögonirritation som utfördes på mindre omfattande material än EU/HO studien, gav mer lovande 
resultat och visade på värdet av att införliva prediktionsmodeller i försöksprotokoll. 
5 Som ett resultat av COLIPA-studien har ett utkast till rekommendationer gjorts om kriterier som 
skall antas för att definiera in v/frö-försöksprotokoll för fotomutagenicitet. 
6 Som resultat av ett annat COLIPA-initiativ har riktlinjer utvecklats för testning av 
hudkompatibilitet mellan kosmetiska produkter och deras beståndsdelar å ena sidan och människan 
å andra sidan. 
7 Användandet av frivilliga personer som ett alternativ förtjänar vidare granskning, men det måste 
understrykas att sådana studier endast bör utföras på basis av resultat från tidigare in vivo och/eller 
in vitro studier för att undvika allvarliga konsekvenser. 
8 Validering har visat sig vara ännu svårare, mer tidsödande och kostsammare än väntat. 
Diskussioner pågår faktiskt fortfarande om vad validering egentligen betyder och hur alternativa 
metoders relevans och tillförlitlighet bäst kan fastställas. ECVAM befinner sig mitt uppe i dessa 
diskussioner och har i flera avseenden kommit med särskilt viktiga inlägg. 
9 ECVAM:s prevalideringsplan, som för närvarande är under internationell utvärdering, kommer 
troligen att bidra till att valideringsstudierna leder till bättre resultat, och till att förkorta den tid 
det tar att utföra dem, liksom till att minska kostnaderna för dem. 
10 Internationella diskussioner har förts inom Europa och med USA och Japan om harmoniseringen 
av kriterier för validering och godkännandet av ersättande alternativa försöksmetoder. 
16 
G. PERSPEKTIV 
1. Uppkomsten av mer realistiska förväntningar på valideringsprocessen och framgången 
för internationella diskussioner om kriterier for validering samt godkännande av 
alternativa metoder kan forväntas leda till avsevärda framsteg i framtiden. 
2. Efter avslutningen av ännu en mindre studie av kemikalier av särskild betydelse för 
Vetenskapliga kommittén för kosmetologi kan det förväntas att ett utkast till rättsliga 
riktlinjer för fototoxkitetsförsök in vitro kommer att författas och läggas fram för de 
lagstiftande myndigheternas godkännande. 
3. Förhoppningsvis kommer en ny riktlinje för försök av perkutan absorption in vitro 
inom kort att godkännas av medlemsstaterna i EU och OECD: s medlemsländer. 
4. Snabbare framsteg mot utvecklingen av standardiserade och lämpliga försök in vitro 
för att upptäcka sensibiliseringspotentialen kan förväntas. 
5. Ett nytt övervägande för vad som kan förväntas av försök med ögonirritation (in vivo 
och in vitro) kommer att vara nödvändig. Under tiden bör en mer flexibel inställning 
till försök uppmuntras, till exempel genom att godkänna utvärdering av nya produkters 
och beståndsdelars toxicitet i jämförelse med kunskap om lämpliga 
standardkontroUämnen. 
6. Man skulle kunna ha större nytta av det faktum att ögontolerans och hudtolerans av 
färdiga kosmetiska produkter kan utvärderas in vitro om ett avgörande villkor är 
uppfyllt, nämligen att tidigare kännedom om toxicitetsuppgifter gällande 
beståndsdelarna och deras fysisk-kemiska egenskaper. Dessutom kan 
hudkompatibiliteten hos färdiga kosmetiska produkter utvärderas i samband med strikt 
kontrollerade kliniska studier. 
7. Ett lyckat resultat kan förväntas för ECVAM:s valideringsstudie om test av 
hudkorrosivitet, som till exempel skulle kunna användas för att tillhandahålla en del 
av den information som anses viktig innan studier på frivilliga försökspersoner kan 
tillåta». 
8. Den integrerade användningen av olika tillvägagångssätt (till exempel datorbaserade 
prediktioner, försök in vitro) kommer att understrykas, liksom även hierarkiska 
försöksstrategier för att minska, förbättra och ersätta användandet av djur i 
försökssyfte. 
Den sjätte ändringen till direktiv 76/768/EEG ger en unik möjlighet till förnuftig utveckling 
mot alternativ till djurförsök inom kosmetikaområdet. Sådan utveckling pågår, men om den 
skall fortsätta måste ett gott förhållande och effektivt samarbete mellan samtliga berörda 
parter upprätthållas. De berörda parterna är kommissionen och dess rådgivande 
kommitttéer, medlemsstaterna, kosmetikaindustrin och de lagstiftande myndigheterna. 
17 
ISSN 1024-4506 
KOM(96) 365 slutlig 
DOKUMENT 
SV 10 15 05 03 
Katalognummcr : CB-CO-96-366-SV-C 
ISBN 92-78-07199-4 
Byrån för Europeiska gemeaskapemas officiella publikationer 
L-2985 Luxemburg 
IX