1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 1
Detta dokument är endast avsett som dokumentationshjälpmedel och institutionerna ansvarar inte för innehållet
►B RÅDETS DIREKTIV
av den 22 november 1973
om tillnärmning av medlemsstaternas lagar om testmetoder för anjoniska ytaktiva ämnens biolo-
giska nedbrytbarhet
(73/405/EEG)
(EGT L 347, 17.12.1973, s. 53)
Ändrat genom:
Officiella tidningen
nr sida datum
►M1 Rådets direktiv av den 31 mars 1982 (82/243/EEG) L 109 18 22.4.1982
▼B
RÅDETS DIREKTIV
av den 22 november 1973
om tillnärmning av medlemsstaternas lagar om testmetoder för
anjoniska ytaktiva ämnens biologiska nedbrytbarhet
(73/405/EEG)
EUROPEISKA GEMENSKAPERNAS RÅD HAR ANTAGIT DETTA
DIREKTIV
med beaktande av Fördraget om upprättandet av Europeiska ekono-
miska gemenskapen, särskilt artikel 100 i detta,
med beaktande av rådets direktiv av den 22 november 1973 (1)o m
tillnärmning av medlemsstaternas lagar om tvätt- och rengöringsmedel,särskilt artikel 4 i detta,
med beaktande av kommissionens förslag,
med beaktande av Europaparlamentets yttrande (
2),
med beaktande av Ekonomiska och sociala kommitténs yttrande (3), och
med beaktande av följande:För att göra det möjligt för medlemsstaterna att fastställa graden av
biologisk nedbrytbarhet hos ett anjon-ytaktivt ämne är det lämpligt att
utnyttja testmetoder som redan används för detta ändamål ivi ssa
medlemsstater. Vid en eventuell tvist måste dock den biologiskanedbrytbarheten testas med en gemensam metod.
För tillnärmningen av medlemsstaternas lagar om tvätt- och rengörings-
medel bör lämpliga toleransgränser för mätningen av biologisk
nedbrytbarhet fastställas, som föreskrivs i artikel 4 i rådets direktiv av
den 22 november 1973, för att inte testmetodernas otillförlitlighet skallleda till avslagsbeslut med avsevärda ekonomiska konsekvenser. Ettbeslut om avslag bör därför fattas endast om analysen visar en biolo-gisk nedbrytbarhet som understiger 80 procent.
HÄRIGENOM FÖRESKRIVS FÖLJANDE.
Artikel 1
Detta direktiv avser metoder för att testa den biologiska nedbrytbar-
heten hos anjon-ytaktiva ämnen ►M1isådana tvätt- och
rengöringsmedel som avses i artikel 1 i direktiv 73/404/EEG ◄.
Artikel 2
Enligt artikel 4 i direktiv 73/404/EEG om tvätt- och rengöringsmedel
skall medlemsstaterna förbjuda att tvätt- och rengöringsmedel släpps
ut på marknaden eller används inom deras territorier, om medleninnehåller anjon-ytaktiva ämnen vilkas biologiska nedbrytbarhet ärlägre än 80 procent, bestämd med en av följande metoder:
— OECD-metoden, publicerad i OECDs tekniska rapport av den 11
juni 1976 med titeln ”Proposed Method for the Determination of
the Biodegradability of Surfactants used in Synthetic Detergents”.
— Den metod som används iTyskland, fastställd genom ”Verordnung
Über die Abbaubarkeit anionischer und nichtionischer grenzfläche-naktiver Stoffe in Wasch- und Reinigungsmitteln” av den 30 januari1977, publicerad i Bundesgesetzblatt 1977, del 1 s. 244, och som
beskrivs i ändringen av den 18 juni 1980, publicerad i Bundesge-
setzblatt 1980, del 1 s. 706.1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 2
(1) EGT nr L 347, 17.12.1973, s. 51.
(2) EGT nr C 10, 5.2.1972, s. 29.
(3) EGT nr C 89, 23.8.1972, s. 13.▼M1
▼M1
— Den metod som används iFrankri ke och som godkänts genom
förordningen av den 28 december 1977, publicerad i Journal offi-
ciel de la Republique française av den 18 januari1978, si dorna
514 och 515, och experimentstandarden T 73-260 från juni 1981,
utgiven av ”Association française de normalisation” (AFNOR).
— Den metod som används i Storbritannien och som går under benäm-
ningen ”Porous Pot Test”, enligt beskrivningen i Technical Reportnr. 70/1978, utgiven av Water Research Centre.
Artikel 3
Vid tillämpningen av förfarandet i artikel 5.2 i direktiv 73/404/EEG
skall laboratorieutlåtandet om ickejoniska ytaktiva ämnen grundas påden referensmetod (kontrollprov) som beskrivs i bilagan till dettadirektiv.
Artikel 3a
De ändringar som erfordras för att anpassa bilagan till den tekniska
utvecklingen skall antas enligt det förfarande som fastställs i artikel
7b i direktiv 73/404/EEG.
Artikel 4
1. Medlemsstaterna skall sätta ikraft de lagar och andra författ-
ningar som är nödvändiga för att följa detta direktiv inom 18 månaderefter dagen för anmälan och skall genast underrätta kommissionen omdetta.
2. Medlemsstaterna skall se till att till kommissionen överlämna
texterna till centrala bestämmelser i nationell lagstiftning som de antar
inom det område som omfattas av detta direktiv.
Artikel 5
Detta direktiv riktar sig till medlemsstaterna.1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 3
▼B
▼M1
BILAGA
BESTÄMNING AV DEN BIOLOGISKA NEDBRYTBARHETEN HOS
ANJON-YTAKTIVA ÄMNEN
Referensmetod (kontrollprov)
KAPITEL 1
1.1.Definition
I detta direktiv avses med ”anjon-ytaktiva ämnen” sådana ytaktiva
ämnen som efter att ha passerat genom katjonaktiva och anjon-aktiva
jonbytare frånskiljs med fraktionell eluering och bestäms med mety-
lenblått (MBAS) enligt det analysförfarande som beskrivs i kapitel 3.
1.2.Erforderlig mätutrustning
Mätmetoden utnyttjar en liten aktivslam-anläggning som visas i figur 1
och mer detaljerat ifi gur 2.
Utrustningen består av ett lagringskärl A för syntetiskt avloppsvatten,
doseringspump B, luftningskärl C, sedimenteringskärl D, luftpump E
för återföring av det aktiva slammet samt kärl F för uppsamling av det
behandlade avloppsvattnet.
Kärlen A och F måste vara av glas eller lämplig plast och rymma minst
24 liter. Pumpen B måste ge ett konstant flöde syntetiskt avloppsvatten
till luftningskärlet, vilket under normal drift innehåller 3 liter blandad
vätska. En sintrad luftningskub G är upphängd i kärlet C vid den
koniska delens spets. Den luftmängd som blåses genom luftaren skall
kontrolleras med en flödesmätare H.
1.3.Syntetiskt avloppsvatten
För provningen används syntetiskt avloppsvatten. Lös upp följande
ämnen per liter vattenledningsvatten:
160 mg pepton110 mg köttextrakt
30 mg karbamid CO(NH
2)2
7 mg natriumklorid (NaCl)4 mg kalciumklorid (CaCl
2·2 H2O)
2 mg magnesiumsulfat (MgSO4·7 H2O)
28 mg dikaliumvätefosfat (K2HPO4) och
20 ± 2 mg MBAS
MBAS extraheras från den produkt som skall testas med den metod som
anges i kapitel 2. Nytt syntetiskt avloppsvattnet (SIC! avloppsvatten)
skall beredas varje dag.
1.4.Beredning av prover
1.4.1. Enkla ytaktiva ämnen kan analyseras i sitt ursprungliga tillstånd. Halten
MBAS måste fastställas för att kunna bereda det syntetiska avlopps-
vattnet (1.3).
1.4.2. Formulerade produkter analyseras med avseende på halten av MBAS
och tvål. Dessa skall alkoholextraheras och MBAS skall avskiljas (se
kapitel 2). MBAS-halten i extraktet måste vara känd för att kunna
bereda det syntetiska avloppsvattnet.
1.5.Användning av utrustningen
Fyll först luftningskärlet C och sedimenteringskärlet D med syntetiskt
avloppsvatten. Kärlet D skall vara så högt placerat att luftningskärlet C
innehåller tre liter.
Utför ympningen genom att tillföra 3 ml sekundärt utflöde av god
kvalitet, nyligen uppsamlat från en behandlingsanläggning som i
huvudsak tar hand om hushållsavloppsvatten. Utflödet skall hållas aerobt
under tiden mellan provtagningen och själva användningen. Starta sedan
luftaren G, luftpumpen E och doseringsapparaten B. Det syntetiska
avloppsvattnet måste passera genom syresättningskärlet C med en1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 4
▼M1
hastighet av en liter i timmen, vilket ger en genomsnittlig retentionstid
på tre timmar.
Luftningshastigheten skall regleras så att innehållet i kärlet C ständigt
hålls suspenderat och halten löst syre är minst 2 mg/l. Skumbildning
måste förhindras på lämpligt sätt. Skumdämpande medel som hämmar
det aktiva slammet eller innehåller MBAS får inte användas. Luft-
pumpen E skall vara inställd så att det aktiva slammet från
sedimenteringskärlet ständigt och regelbundet återförs till luftningskärlet
C. Slam som samlats iöverdelen av luftni ngskärlet C, ibotten av sedi -
menteringskärlet D eller i rörsystemet skall återföras till cirkulationen
minst en gång om dagen genom avborstning eller på annat sätt. Om
slammet inte sedimenterar kan man öka dess densitet genom att tillsätta
5 %-lösning av järnklorid, 2 ml i taget, så många gånger som behövs.
Utflödet från sedimenteringskärlet D samlas upp i kärlet F under 24
timmar varefter man tar ut ett prov efter omsorgsfull blandning. Rengör
sedan kärlet F omsorgsfullt.
1.6.Kontroll av mätutrustningen
MBAS-halten (img/l) idet synteti ska avloppsvattnet bestäms omedel-
bart före användningen.
MBAS-halten (img/l) idet utflöde som samlats upp ikärlet F under 24
timmar bör bestämmas analytiskt med samma metod omedelbart efter
uppsamlingen. I annat fall måste proverna bevaras, helst genom frys-
ning. Halterna måste bestämmas med en noggrannhet av 0,1 mg/l
MBAS.
Som kontroll på processens effektivitet mäter man minst två gånger i
veckan det kemiska syrebehovet (COD) eller upplöst organiskt kol
(DOC) i utflödet, som filtrerats genom glasfiber och samlats upp i kärlet
F samt i det filtrerade syntetiska avloppsvattnet i kärl A.
Reduceringen av COD eller DOC bör plana ut när den biologiska
nedbrytningen av MBAS är ungefär densamma varje dag, dvs. mot
slutet av inkörningsperioden enligt figur 3.
Halten torrsubstans idet akti va slammet iluftni ngskärlet bör fastställas
två gånger iveckan, ig/l. Om den är högre än 2,5 g/l skall överskottet
av det aktiva slammet kasseras.
Provet utförs irumstemperatur, som skall hållas konstant mellan 292
och 297 K (19-24 ºC).
1.7.Beräkning av biologisk netbrytbarhet
Den procentuella netbrytningen av MBAS skall beräknas varje dag på
grundval av MBAS-halten img/l idet synteti ska avloppsvattnet och
motsvarande utflöde som samlats upp ikärlet F. De värden för nedbryt-
ningen som då erhålls skall presenteras grafiskt enligt figur 3.
Netbrytningen av MBAS bör beräknas som medeltalet av de värden som
erhålls under 21 dagar som följer efter inkörningsperioden, under vilken
nedbrytningen har varit regelbunden och anläggningen har fungerat utan
problem. Under alla förhållanden bör inkörningsperioden inte vara
längre än sex veckor.
De dagliga nedbrytningsvärdena beräknas till närmaste 0,1 %, men slut-
resultatet anges inärmaste heltal.
I vissa fall kan det vara tillåtet att minska provtagningsfrekvensen, men
minst 14 resultat insamlade under de 21 dagarna efter inkörningspe-
rioden skall användas vid beräkning av genomsnittet.
KAPITEL 2
FÖRBEREDANDE BEHANDLING AV VAROR SOM SKALL TESTAS
2.1.Inledande kommentarer
2.1.1. Behandling av prover
Innan den biologiska nedbrytbarheten bestäms genom kontrollprovet
behandlas anjon-ytaktiva medel och formulerade tvätt- och rengörings-
medel på följande sätt:
Produkter Behandling
Anjon-ytaktiva medel Formulerade tvätt- och rengöringsmedel1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 5
▼M1
Produkter Behandling
Ingen Alkoholextraktion följd av separation av
anjon-ytaktiva medel genom jonbyte
Avsikten med alkoholextraktionen är att avskilja de olösliga och oorga-
niska beståndsdelarna i den kommersiella varan, vilka i vissa fall kan
störa testningen av biologisk nedbrytbarhet.
2.1.2. Jonbyte
Isolering och separering av de anjon-ytaktiva ämnena från tvål, icke-
joniska ytaktiva ämnen och katjon-ytaktiva ämnen krävs för korrekta
tester av den biologiska nedbrytbarheten.
Detta kan göras genom jonbyte med en makroporös jonbytarmassa och
lämpliga elueringsmedel för fraktionerad eluering. Tvål, anjon-ytaktiva
och icke-joniska ytaktiva ämnen kan alltså isoleras med ett och samma
förfarande.
2.1.3. Analytisk kontroll
Efter homogenisering fastställs halten av anjon-ytaktiva ämnen i tvätt-
och rengöringsmedlet med analysförfarandet för MBAS. Tvålhalten
bestäms med en lämplig analysmetod. Denna analys av varorna är
nödvändig för beräkning av de mängder som behövs för beredning av
de prover som skall användas för testerna av den biologiska nedbrytbar-
heten.
En kvantitativ extraktion är inte nödvändig, men minst 80 % av de
anjon-ytaktiva ämnena bör extraheras. Normalt uppnås 90 % eller mer.
2.2.Princip
Från ett homogent prov (pulver, torkade pastor och torkade vätskor)
erhålls ett etanolextrakt som innehåller de ytaktiva ämnena, tvål och
andra beståndsdelar i det syntetiska tvätt- och rengöringsmedelsprovet
som är lösliga i alkohol.
Etanolextraktet får avdunsta helt och löses upp i en blandning av isopro-
panol och vatten, varpå den erhållna lösningen får passera genom en
starkt sur katjonbytare och en makroporös anjonbytare i kombination,
uppvärmd till 323 K (50 ºC). Denna temperatur är nödvändig för att
förhindra utfällning av de fettsyror som kan förekomma i sura medier.
De icke-joniska ytaktiva ämnena blir kvar i utflödet.
Fettsyror i tvål separeras genom upplösning med etanol innehållande
CO2. De anjon-ytaktiva ämnena erhålls sedan som ammoniumsalter
genom upplösning med en isopropanollösning av ammoniumbikarbonat.
Dessa ammoniumsalter används för nedbrytningstestet.
Katjon-ytaktiva ämnen som kan störa testningen av den biologiska
nedbrytbarheten och analysen avlägsnas genom att katjonbytaren
placeras ovanför anjonbytaren.
2.3.Kemikalier och utrustning
2.3.1. Avjoniserat vatten.
2.3.2. Etanol, 95 % (volym/volym) C2H5OH (tillåtet denatureringsmedel: mety-
letylketon eller metanol).
2.3.3. Blandning av isopropanol/vatten (50/50 volym/volym):
50 delar isopropanol (CH3CH(OH) · CH3) och 50 delar vatten (2.3.1).
2.3.4. Lösning av koldioxid i etanol (ca. 0,1 % CO2): Via ett rör med inbyggd
sintring får koldioxiden CO2flyta genom etanolen (2.3.2) i10 mi nuter.
Använd bara nyberedda lösningar.
2.3.5. Lösning av ammoniumbikarbonat (60/40 volym/volym): 0,3-mol
NH4HCO3i 1 000 ml av blandningen isopropanol/vatten, 60 volymdelar
isopropanol och 40 volymdelar vatten (2.3.1).
2.3.6. Katjonbytare (KAT), starkt sur alkoholresistent (50-100 mesh).
2.3.7. Anjonbytare (AAT), makroporös, Merck Lewatit MP 7080 (70-
150 mesh) eller likvärdig.
2.3.8. Saltsyra, 10 % HCl (vikt/vikt).2.3.9. En 2 000-ml rundkolv med slipad glaspropp samt återflödeskylare.1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 6
▼M1
2.3.10. Sugfilter (uppvärmbart) för filtrerpapper, diameter 90 mm.
2.3.11. 2 000-ml filtrerkolv.
2.3.12. Jonbytarkolonner med uppvärmningshölje och kran, innerslang, diameter
60 mm, höjd 450 mm (figur 4).
2.3.13. Vattenbad.
2.3.14. Vakuum-torkugn.
2.3.15. Termostat.
2.3.16. Roterande indunstare.
2.4.Beredning av extrakt och separation av anjonaktiva ämnen
2.4.1. Beredning av extrakt
Den mängd ytaktiva ämnen som erfordras för testning av biologisk
nedbrytbarhet är cirka 50 g MBAS.
Normalt behöver inte mer än 1 000 g av varan extraheras, men det kan
bli nödvändigt att extrahera ytterligare mängder av provet. Av praktiska
skäl bör den mängd av varan som extraheras begränsas till 5 000 g vid
beredning av extrakt för testning av biologisk nedbrytbarhet.
Erfarenheten har visat att det är fördelaktigt att använda flera mindre
extraktioner i stället för en stor. De kvantiteter bytare som här anges är
avsedda för en arbetskapacitet på 600-700 mmol ytaktiva ämnen och
tvål.
2.4.2. Isolering av beståndsdelar som är lösliga i alkohol
Tillsätt 250 g av det syntetiska tvätt- och rengöringsmedel som skall
analyseras till 1250 ml etanol, värm blandningen till kokpunkten och
återloppskoka i en timme under omrörning. Häll den varma alkoholhal-
tiga lösningen genom ett grovporigt sugfilter uppvärmt till 323 K (50 ºC)
och filtrera snabbt. Tvätta kolven och sugfiltret med cirka 200 ml varm
etanol. Samla upp filtratet och materialet från det tvättade filtret i en
filtrerkolv.
Vid analys av pastor eller flytande produkter tillförsäkras att inte mer än
55 g anjon-ytaktiva ämnen och 35 g tvål finns med i provet. Indunsta
det vägda provet tills det är helt torrt. Lös upp restmaterialet i 2 000 ml
etanol och fortsätt enligt beskrivningen ovan.
För pulver med uppenbart låg densitet (> 300 g/l) är det lämpligt att öka
etanolhalten till 20:1.
Indunsta etanolfiltratet till torrhet, helst med en roterande indunstare.
Upprepa detta om större extraktmängd behövs. Lös upp restmaterialet i
5 000 ml av en blandning av isopropanol och vatten.
2.4.3. Tillverkning av jonbytarkolonnerna
Katjonbytarkolonn
Placera 600 ml katjonbytarmassa (2.3.6) ien 3 000-ml bägare och täck
den genom att tillsätta 2 000 ml saltsyra (2.3.8). Låt detta stå i minst två
timmar med omrörning då och då. Häll av syran och för över jonbytar-
massan till kolonnen (2.3.12) med hjälp av avjoniserat vatten. Kolonnen
skall innehålla en glasullspropp. Tvätta kolonnen med avjoniserat vatten
med en hastighet av 10-30 ml/min tills eluatet är kloridfritt. Avlägsna
vattnet med 2 000 ml av blandningen isopropanol/vatten (2.3.3) vid en
hastighet på 10-30 ml/min. Jonbytarkolonnen är nu klar för användning.
Anjonbytarkolonn
Placera 600 ml anjonbytarmassa (2.3.7) ien 3 000-ml bägare och täck
genom att tillsätta 2 000 ml avjoniserat vatten. Låt massan svälla i minst
två timmar. Överför massan till kolonnen med hjälp av avjoniserat
vatten. Kolonnen skall innehålla en glasullspropp.
Tvätta kolonnen med 0,3 M ammoniumbikarbonatlösning (2.3.5) tills
den är fri från klorid. För detta erfordras ungefär 5 000 ml lösning.
Tvätta igen med 2 000 ml avjoniserat vatten. Avlägsna vattnet med
2 000 ml av blandningen isopropanol och vatten (2.3.3) med en
hastighet av 10-30 ml/min. Jonbytarkolonnen är nu i OH-tillståndet och
klar för användning.
2.4.4. Jonbytesförfarande
Anslut jonbytarkolonnerna så att katjonbytaren är placerad ovanpå
anjonbytaren. Värm båda jonbytarkolonnerna till 323 K (50 ºC) med1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 7
▼M1
termostatstyrning. Värm 5 000 ml av den lösning som erhållits enligt
2.4.2 ovan till 333 K (60 ºC) och låt lösningen rinna genom jonbytar-
kombinationen med en hastighet av 20 ml/min. Tvätta kolonnerna med
1 000 ml varm blandning isopropanol/vatten (2.3.3).
Koppla ifrån katjonbytaren (KAT) för att få fram de anjon-ytaktiva
medlen (MBAS). Driv ut tvålfettsyrorna ur katjonbytaren med 5 000 ml
lösning etanol/CO2(323 K, 50 ºC) (2.3.4). Kassera eluatet.
Driv sedan ut MBAS ur anjonbytaren (AAT) med 5 000 ml bikarbo-
natlösning (2.3.5). Låt all vätska avdunsta på ett ångbad eller i en
roterande indunstare. Det återstående restmaterialet innehåller MBAS
(som ammoniumsalt) och eventuella icke ytaktiva anjoner, vilka inte
stör testningen av biologisk nedbrytning. Tillsätt avjoniserat vatten till
restmaterialet tills en bestämd volym erhålls och fastställ MBAS-halten
i en delmängd enligt kapitel 3. Lösningen används som standardlösning
av anjonaktiva syntetiska tvätt- och rengöringsmedel för testning av
biologisk nedbrytbarhet. Lösningen skall hållas vid en temperatur under
278 K (5 ºC).
2.4.5. Regenerering av jonbytarmassorna
Katjonbytaren kasseras efter användningen.Anjonbytarmassan regenereras genom att en ammoniumbikarbonatlös-
ning (2.3.5) får passera genom kolonnen med en flödeshastighet av
cirka 10 ml/min tills eluatet är fritt från anjonytaktiva ämnen (test med
metylenblått). Skölj sedan anjonbytaren med 2 000 ml av blandningen
isopropanol och vatten (2.3.3). Därmed är anjonbytaren klar för
återanvändning.
KAPITEL 3
BESTÄMNING AV ANJON-YTAKTIVA ÄMNEN VID TESTNING AV
BIOLOGISK NEDBRYTBARHET
3.1.Princip
Metoden är baserad på att den katjonaktiva färgen metylenblått bildar
blå salter med anjonytaktiva ämnen som kan extraheras med kloroform.
För att eliminera störningar utförs extraktionen först från en alkalisk
lösning, varpå extraktet skakas med en sur lösning av metylenblått.
Den frånskilda organiska fasens absorbans mäts med en fotometer vid
den våglängd som ger maximal absorption, dvs. 650 nm.
3.2.Reagenser och utrustning
3.2.1. Buffertlösning pH 10:
Lös upp 24 g natriumbikarbonat (NaHCO
3) p.a. och 27 g vattenfritt
natriumkarbonat (Na2CO3) p.a. i avjoniserat vatten och späd till 1 000 ml.
3.2.2. Neutral lösning av metylenblått:
Lös upp 0,35 g metylenblått (p.a.) i avjoniserat vatten och späd till
1 000 ml. Bered lösningen minst 24 timmar innan den skall användas.
Den blanka kloroformfasens absorbans, som mäts gentemot kloroform,
får inte överskrida 0,015 per 1 cm av skiktets tjocklek vid 650 nm.
3.2.3. Sur lösning av metylenblått:
Lös upp 0,35 g metylenblått (p.a.) i500 ml avjoni serat vatten och
blanda med 6,5 ml H2SO4(d = 1,84 g/ml). Späd till 1 000 ml med avjo-
niserat vatten. Bered lösningen minst 24 timmar innan den skall
användas. Den blanka kloroformfasens absorbans, som mäts gentemot
kloroform, får inte överskrida 0,015 per 1 cm av skiktets tjocklek vid
650 nm.
3.2.4. Kloroform (triklorometan) (p.a) nydestillerad.
3.2.5. Dodecylbensensulfonsyrametylester.
3.2.6. Etanolkaliumhydroxidlösning KOH 0,1 M.3.2.7. Ren etanol, C
2H5OH.
3.2.8. Svavelsyra, H2SO40,5 M.
3.2.9. Fenolftaleinlösning:
Lös upp 1 g fenolftalein i 50 ml etanol och tillsätt 50 ml avjoniserat
vatten under ständig omrörning. Filtrera bort eventuell fällning.1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 8
▼M1
3.2.10. Metanolsaltsyra: 250 ml saltsyra p.a. och 750 ml metanol.
3.2.11. Separertratt, 250 ml.3.2.12. Kolv graderad till 50 ml.3.2.13. Kolv graderad till 500 ml.3.2.14. Kolv graderad till 1 000 ml.
3.2.15. Rundkolv med slipad glaspropp och återloppskylare, 250 ml, kokstenar.
3.2.16. pH-mätare.3.2.17. Fotometer för mätningar vid 650 nm, med encentimeters till femcenti-
meters celler.
3.2.18. Filtrerpapper, kvalitativt.3.3.Förfarande
Prov som skall analyseras får inte tas genom ett skumskikt.Efter omsorgsfull rengöring med vatten måste analysutrustningen sköljas
grundligt med metanolsaltsyra (3.2.10) och därefter med avjoniserat
vatten innan den används.
Filtrera dels det vatten som rinner in i aktivslamanläggningen, dels även
utflödet omedelbart vid provtagningen. Kassera de första 100 ml av filt-
raten.
Överför en uppmätt volym av provet, neutraliserad om så erfordras, till
en 250-ml separertratt (3.2.11). Provmängden bör innehålla mellan 20
och 150 µg MBAS. Vid lägre MBAS-halter kan man använda upp till
100 ml av provet. Om mindre än 100 ml används, späds med avjoniserat
vatten till 100 ml. Tillsätt 10 ml av buffertlösningen (3.2.1), 5 ml neutral
lösning av metylenblått (3.2.2) och 15 ml kloroform (3.2.4). Skaka
blandningen jämnt men inte alltför kraftigt i en minut. Efter fasseparer-
ingen överförs kloroformskiktet till en annan separertratt, som innehåller
110 ml avjoniserat vatten och 5 ml sur lösning av metylenblått (3.2.3).
Skaka blandningen i en minut. Tappa ner kloroformskiktet i en graderad
kolv (3.2.12) genom ett bomullsfilter som tidigare rengjorts och fuktats
med kloroform.
Extrahera de alkaliska och sura lösningarna tre gånger med användning
av 10 ml kloroform för den andra och tredje extraktionen. Filtrera de
kombinerade kloroformextrakten genom samma bomullsfilter och späd
till märket på 50 ml-kolven (3.2.12) med den kloroform som används
för tvättning av bomullen. Mät kloroformlösningens absorbans med en
fotometer vid 650 nm i encentimeters till femcentimeters celler gent-
emot kloroform. Gör ett blindtest med hela förfarandet.
3.4.Kalibreringskurva
Bered en kalibreringslösning med standarden dodecylbensensulfonsyra-
metylester (tetrapropylentyp molvikt 340) efter förtvålning till
kaliumsalt. MBAS beräknas som natriumdodecylbensensulfonat (molvikt
348).
Väg upp 400-450 mg dodecylbensensulfonsyrametylester (3.2.5) ien
rundkolv med vågpipett (noggrannhet 0,1 mg) och tillsätt 50 ml etanol-
kaliumhydroxidlösning (3.2.6) och några kokstenar. Sätt på
återloppskylaren och koka i en timme. Tvätta kylaren och kulslipningen
med cirka 30 ml etanol när vätskan svalnat och sätt det tvättade materi-
alet till innehållet i kolven. Titrera lösningen med svavelsyra mot
fenolftalein tills den blir färglös. Överför lösningen till en kolv graderad
till 1 000 ml (3.2.14), späd till märket med avjoniserat vatten och
blanda.
En del av denna ytaktiva stamlösning späds sedan ytterligare. Ta ut
25 ml och överför till en graderad kolv på 500 ml (3.2.13), späd till
märket med avjoniserat vatten och blanda.
Denna standardlösning innehåller
E/C21;023
20 000mg MBAS per ml, där E är
provets vikt i mg. För att göra upp kalibreringskurvan ta ut 1, 2, 4, 6,
8 ml av standardlösningen och späd varje sådan andel till 100 ml med
avjoniserat vatten. Fortsätt sedan enligt punkt 3.3, inkl. blindtestet.1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 9
▼M1
3.5.Resultatberäkning
Mängden anjon-ytaktivt ämne (MBAS) i provet avläses från kalibrering-
skurvan (3.4). MBAS-halten iprovet erhålls av formeln
mg MBAS /C21000
V= MBAS mg/l
där V = ml volym iprovet.
Uttryck resultatet som natriumdodecylbensensulfonat (molvikt 348).
3.6.Redovisning av resultaten
Uttryck resultaten som MBAS mg/l, avrundat till närmaste 0,1.1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 10
▼M1
Figur 2 (SIC! 1)
A: Lagringskärl
B: DoseringsapparatC: Luftningskärl (kapacitet 3 liter)D: Sedimenteringskärl
E: Luftpump
F: UppsamlingskärlG: Sintrad luftare
H: Luftflödesmätare1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 11
Figur 2
▼M11973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 12
Figur 3
Beräkning av biologisk nedbrytbarhet - Kontrollprov
▼M11973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 13
▼M1
Figur 4
Uppvärmd jonbytarkolonn
(Mått i millimeter)
1973L0405 — SV — 14.04.1982 — 001.001 — 14