2.

După rubrica referitoare la E 960c (i), se introduc următoarele rubrici: „E 960c (ii) REBAUDIOZIDA M PRODUSĂ PRIN CONVERSIA ENZIMATICĂ A REBAUDIOZIDEI A ÎNALT PURIFICATE EXTRASE DIN FRUNZE DE STEVIA Sinonime Definiție Rebaudiozida M produsă prin conversia enzimatică a rebaudiozidei A înalt purificate extrase din frunze de stevia este o glicozidă steviolică compusă predominant din rebaudiozidă M cu cantități minore de alte glicozide steviolice, cum ar fi rebaudiozida A și rebaudiozida D. Rebaudiozida M se obține prin conversia enzimatică a glicozidei steviolice rebaudiozidă A înalt purificată (95 % glicozide steviolice) extrasă din planta Stevia rebaudiana Bertoni, utilizând enzimele UDP-glucoziltransferază și sintaza zaharozei produse de tulpini modificate genetic ale E. coli (pPM294, pFAF170 și pSK401), care facilitează transformarea glucozei din zaharoză și UDP-glucoză în glicozide steviolice, prin intermediul legăturilor glicozidice. După îndepărtarea enzimelor prin separarea lichidelor de solide și prin tratament termic, purificarea implică concentrarea rebaudiozidei M prin adsorbția rășinii, urmată de recristalizarea glicozidelor steviolice, rezultând un produs final care conține cel puțin 95 % rebaudiozidă M. Trebuie să nu se detecteze în aditivul alimentar celule viabile de E. coli (pPM294, pFAF170 și pSK401) și nici ADN-ul acestora. Denumire chimică Rebaudiozida M: Esterul 2-O-β-D-glucopiranozil-3-O-β-D-glucopiranozil-β-D-glucopiranozil al acidului 13-[(2-O-β-D-glucopiranozil-3-O-β-D-glucopiranozil-β-D-glucopiranozil)oxi]kaur-16-en-18-oic Formula moleculară Denumire comună Formulă Factorul de conversie Rebaudiozida M C56H90O33 0,25 Masă moleculară și nr. CAS Denumire comună Numărul CAS Masă moleculară (g/mol) Rebaudiozida M 1220616-44-3 1 291,29 Test Cel puțin 95 % rebaudiozidă M pe bază uscată. Descriere Pulbere albă spre galben deschis, de aproximativ 150 – 350 de ori mai dulce decât zaharoza (la echivalență cu zaharoza 5 %). Identificare Solubilitate De la liber solubilă la puțin solubilă în apă pH Între 4,5 și 7,0 (soluție 1:100) Puritate Cenușă totală Cel mult 1 % Pierdere prin uscare Nu mai mult de 6 % (105 °C, 2 ore) Solvent rezidual Cel mult 5 000 mg/kg etanol Arsen Cel mult 0,015 mg/kg Plumb Cel mult 0,2 mg/kg Cadmiu Cel mult 0,015 mg/kg Mercur Cel mult 0,07 mg/kg Proteine reziduale Cel mult 5 mg/kg Dimensiunea particulelor Minimum 74 μm [utilizând o sită nr. 200 cu o limită a dimensiunii particulelor de 74 μm] E 960c (iii) REBAUDIOZIDA D PRODUSĂ PRIN CONVERSIA ENZIMATICĂ A REBAUDIOZIDEI A ÎNALT PURIFICATE EXTRASE DIN FRUNZE DE STEVIA Sinonime Definiție Rebaudiozida D produsă prin conversia enzimatică a rebaudiozidei A înalt purificate extrase din frunze de stevia este o glicozidă steviolică compusă predominant din rebaudiozidă D cu cantități minore de alte glicozide steviolice, cum ar fi rebaudiozida A și rebaudiozida M. Rebaudiozida D se obține prin conversia enzimatică a glicozidei steviolice rebaudiozidă A înalt purificată (95 % glicozide steviolice) extrasă din planta Stevia rebaudiana Bertoni, utilizând enzimele UDP-glucoziltransferază și sintaza zaharozei produse de tulpini modificate genetic ale E. coli (pPM294, pFAF170 și pSK401), care facilitează transformarea glucozei din zaharoză și UDP-glucoză în glicozide steviolice, prin intermediul legăturilor glicozidice. După îndepărtarea enzimelor prin separarea lichidelor de solide și prin tratament termic, purificarea implică concentrarea rebaudiozidei D prin adsorbția rășinii, urmată de recristalizarea glicozidelor steviolice, rezultând un produs final care conține cel puțin 95 % rebaudiozidă D și rebaudiozidă A. Trebuie să nu se detecteze în aditivul alimentar celule viabile de E. coli (pPM294, pFAF170 și pSK401) și nici ADN-ul acestora. Denumire chimică Rebaudiozida D: Esterul 2-O-β-D-glucopiranozil-β-D-glucopiranozil al acidului 13-[(2-O-β-D-glucopiranozil-3-O-β-D-glucopiranozil-β-D-glucopiranozil)oxi]kaur-16-en-18-oic Rebaudiozida A: Esterul β-D-glucopiranozil al acidului 13-[(2-O-β-D-glucopiranozil-3-O-β-D-glucopiranozil-β-D-glucopiranozil)oxi]kaur-16-en-18-oic Formula moleculară Denumire comună Formulă Factorul de conversie Rebaudiozida D C50H80O28 0,29 Rebaudiozida A C44H70O23 0,33 Masă moleculară și nr. CAS Denumire comună Numărul CAS Masă moleculară (g/mol) Rebaudiozida D 63279-13-0 1 291,15 Rebaudiozida A 58543-16-1 967,01 Test Cel puțin 95 % rebaudiozide D și A pe bază uscată. Descriere Pulbere albă spre galben deschis, de aproximativ 150-350 de ori mai dulce decât zaharoza (la echivalență cu zaharoza 5 %). Identificare Solubilitate De la liber solubilă la puțin solubilă în apă pH Între 4,5 și 7,0 (soluție 1:100) Puritate Cenușă totală Cel mult 1 % Pierdere prin uscare Nu mai mult de 6 % (105 °C, 2 ore) Solvent rezidual Cel mult 5 000 mg/kg etanol Arsen Cel mult 0,015 mg/kg Plumb Cel mult 0,2 mg/kg Cadmiu Cel mult 0,015 mg/kg Mercur Cel mult 0,07 mg/kg Proteine reziduale Cel mult 5 mg/kg Dimensiunea particulelor Minimum 74 μm [utilizând o sită nr. 200 cu o limită a dimensiunii particulelor de 74 μm] E 960c (iv) REBAUDIOZIDA AM PRODUSĂ PRIN CONVERSIA ENZIMATICĂ A STEVIOZIDEI ÎNALT PURIFICATE EXTRASE DIN FRUNZE DE STEVIA Sinonime Definiție Rebaudiozida AM produsă prin conversia enzimatică a steviozidei înalt purificate extrase din frunze de stevia este o glicozidă steviolică compusă predominant din rebaudiozidă AM cu cantități minore de alte glicozide steviolice, cum ar fi steviozida și rebaudiozida E. Rebaudiozida AM se obține prin conversia enzimatică a glicozidei steviolice steviozidă înalt purificată (95 % glicozide steviolice) extrasă din planta Stevia rebaudiana Bertoni, utilizând enzimele UDP-glucoziltransferază și sintaza zaharozei produse de tulpini modificate genetic ale E. coli (pPM294, pFAF170 și pSK401), care facilitează transformarea glucozei din zaharoză și UDP-glucoză în glicozide steviolice, prin intermediul legăturilor glicozidice. După îndepărtarea enzimelor prin separarea lichidelor de solide și prin tratament termic, purificarea implică concentrarea rebaudiozidei AM prin adsorbția rășinii, urmată de recristalizarea glicozidelor steviolice, rezultând un produs final care conține cel puțin 95 % rebaudiozidă AM. Trebuie să nu se detecteze în aditivul alimentar celule viabile de E. coli (pPM294, pFAF170 și pSK401) și nici ADN-ul acestora. Denumire chimică Rebaudiozida AM: Esterul 2-O-β-D-glucopiranozil-3-O-β-D-glucopiranozil-β-D-glucopiranozil al acidului 13-[(2-O-β-D-glucopiranozil-β-D-glucopiranozil)oxi]kaur-16-en-18-oic Formula moleculară Denumire comună Formulă Factorul de conversie Rebaudiozida AM C50 H80 O28 0,29 Masă moleculară și nr. CAS Denumire comună Numărul CAS Masă moleculară (g/mol) Rebaudiozida AM 2222580-26-7 1 291,15 Test Cel puțin 95 % rebaudiozidă AM pe bază uscată. Descriere Pulbere albă spre galben deschis, de aproximativ 150 – 350 de ori mai dulce decât zaharoza (la echivalență cu zaharoza 5 %). Identificare Solubilitate De la liber solubilă la puțin solubilă în apă pH Între 4,5 și 7,0 (soluție 1:100) Puritate Cenușă totală Cel mult 1 % Pierdere prin uscare Nu mai mult de 6 % (105 °C, 2 ore) Solvent rezidual Cel mult 5 000 mg/kg etanol Arsen Cel mult 0,015 mg/kg Plumb Cel mult 0,2 mg/kg Cadmiu Cel mult 0,015 mg/kg Mercur Cel mult 0,07 mg/kg Proteine reziduale Cel mult 5 mg/kg Dimensiunea particulelor Minimum 74 μm [utilizând o sită nr. 200 cu o limită a dimensiunii particulelor de 74 μm] ”