ANEXA III

Prelevarea de probe și testarea menționate la articolul 4 alineatul (7)

1. Prelevarea de probe și testarea pentru anchetele oficiale de depistare prevăzute la articolul 4 alineatele (1) și (2) se efectuează după cum urmează: O prelevare pe baza unei probe de sol cu o dimensiune standard de cel puțin 1 500 ml sol/ha, prelevată de la cel puțin 100 de cuiburi/ha, de preferință într-o grilă dreptunghiulară care acoperă întregul sit de producție, cu o lățime de cel puțin 5 metri și o lungime de cel mult 20 de metri între punctele de prelevare. Întreaga probă este utilizată pentru o examinare aprofundată, și anume extracția de chisturi, identificarea speciei și, după caz, determinarea patovarului/grupului de virulență. Testarea prin aplicarea următoarelor metode de extracție a organismului dăunător specificat, care sunt descrise în protocoalele de diagnostic relevante validate și recunoscute la nivel internațional: (a) în ceea ce privește extracția, metode bazate pe separatorul Fenwick, centrifuga Schuiling, elutriatorul Seinhorst sau elutriatorul Kort; (b) în ceea ce privește depistarea și identificarea, una dintre următoarele metode: (i) izolarea chisturilor Globodera din resturi vegetale pe baza morfologiei chisturilor, urmată de identificarea speciei pe baza morfologiei chisturilor individuale și a puieților, combinată cu testul PCR convențional bazat pe Bulman & Marshall, 1997 (1) [în cazul în care există îndoieli cu privire la prezența G. tabacum, testul PCR convențional bazat pe Skantar et al., 2007 (2) poate fi efectuat în plus]; (ii) izolarea chisturilor de Globodera din resturi vegetale pe baza morfologiei chisturilor, urmată de identificarea speciei pe baza morfologiei chisturilor individuale și a puieților, combinată cu test PCR în timp real bazat pe Gamel et al., 2017 (3); (iii) izolarea chisturilor de nematozi din resturi vegetale, urmată de detectarea speciei cu un test PCR în timp real bazat pe Gamel et al., 2017 (3).

2. Prelevarea de probe pentru ancheta oficială de monitorizare, menționată la articolul 7, se efectuează în conformitate cu unul dintre următoarele criterii: (a) prelevarea de probe menționată la punctul 1, cu o probă de sol având o dimensiune de cel puțin 400 ml/ha; (b) o prelevare specifică de cel puțin 400 ml de sol după examinarea vizuală a rădăcinilor, în cazul în care apar simptome vizibile; sau (c) o prelevare, după recoltă, a cel puțin 400 ml de sol în care au fost cultivați cartofii, cu condiția ca situl de producție pe care au fost cultivați cartofii să fie identificabil. Testarea pentru ancheta oficială de monitorizare menționată la articolul 7 se efectuează în conformitate cu punctul 1.

3. Prin derogare de la punctul 1, dimensiunea standard de prelevare poate fi redusă la minimum 400 ml sol/ha în fiecare dintre următoarele cazuri: (a) există probe documentate care atestă că niciunul dintre soiurile de cartofi sau alte plante enumerate la punctul 1 din anexa I nu a fost cultivat și nu a fost prezent pe situl de producție în cursul unei perioade de șase ani anteriori anchetei oficiale de depistare; (b) niciun specimen al organismului dăunător specificat nu a fost depistat în cursul ultimelor două anchete oficiale succesive de depistare prin prelevări de 1 500 ml sol/ha și după efectuarea primei anchete oficiale de depistare, niciun soi de cartof sau plante enumerate la punctul 1 din anexa I nu a fost cultivat, cu excepția celor pentru care este necesară o anchetă oficială de depistare în conformitate cu articolul 4 alineatul (1); (c) să nu fi fost depistați niciun specimen al organismului dăunător specificat sau chisturi ale organismului dăunător specificat, fără conținut viu, pe parcursul ultimei anchete oficiale de depistare, care trebuie să fi constat în probe de cel puțin 1 500 ml sol/ha și, de la efectuarea ultimei anchete oficiale de depistare, să nu fi fost cultivat pe situl de producție niciun soi de cartof sau de plante dintre cele enumerate la punctul 1 din anexa I, cu excepția celor pentru care este necesară o anchetă oficială de depistare în conformitate cu articolul 4 alineatul (1).

4. Rata de prelevare poate fi redusă pentru terenurile mai mari de 8 ha și, respectiv, de 4 ha, în fiecare dintre următoarele cazuri: (a) în cazul ratei standard menționate la punctul 1, primele 8 ha sunt prelevate la rata specificată la punctul respectiv, însă aceasta poate fi redusă pentru fiecare hectar suplimentar la minimum 400 ml sol/ha; (b) în cazul ratei reduse menționate la punctul 3, primele 4 ha sunt prelevate la rata specificată la punctul respectiv, însă aceasta poate fi redusă mai mult, pentru fiecare hectar suplimentar, la minimum 200 ml sol/ha.

5. Utilizarea unei probe de dimensiuni reduse, conform mențiunii de la punctele 3 și 4, poate fi continuată în anchetele oficiale de depistare menționate la articolul 3 alineatul (1) care sunt efectuate ulterior, până când organismele dăunătoare specificate nu mai sunt depistate în situl de producție în cauză.

6. Dimensiunea standard a probei de sol poate fi redusă la minimum 200 ml sol/ha, cu condiția ca situl de producție să fie situat într-o zonă declarată indemnă de organismul dăunător specificat și să fie desemnat, întreținut și supravegheat în conformitate cu standardele internaționale relevante pentru măsuri fitosanitare (ISPM nr. 4) (4).

7. Dimensiunea minimă a probei de sol este, în toate cazurile, de 200 ml de sol per sit de producție.

(1) Bulman, S.R., & Marshall, J.W., 1997, Differentiation of Australasian potato cyst nematode (PCN) populations using the Polymerase Chain Reaction (PCR), New Zealand Journal of Crop and Horticultural Science 25, 123-129.

(2) Skantar, A.M., Handoo, Z.A., Carta, L.K., Chitwood, D.J., 2007, Morphological and molecular identification of Globodera pallida associated with Potato in Idaho, Journal of Nematology 39(2), 133-144.

(3) Gamel, S., Letort, A., Fouville, D., Folcher, L., Grenier, E., 2017, Development and validation of real-time PCR assays based on novel molecular markers for the simultaneous detection and identification of Globodera pallida, G. rostochiensis and Heterodera schachtii, Nematology 19 (7):789-804.

(4) ISPM 4. 1995. Requirements for the establishment of pest free areas. Roma, IPPC, FAO. https://www.ippc.int/en/publications/614/