1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 1
Este documento constitui um instrumento de documentação e não vincula as instituições
►BREGULAMENTO (CEE) N.o2676/90 DA COMISSÃO
de 17 de Setembro de 1990
que determina os métodos de análise comunitários aplicáveis no sector do vinho
(JO L 272 de 3.10.1990, p. 1)
Alterado por:
Jornal Oficial
n.opágina data
►M1Regulamento (CEE) n.o2645/92 da Comissão de 11 de Setembro de
1992L 266 10 12.9.1992
►M2Regulamento (CE) n.o60/95 da Comissão de 16 de Janeiro de 1995 L 11 19 17.1.1995
►M3Regulamento (CE) n.o69/96 da Comissão de 18 de Janeiro de 1996 L 14 13 19.1.1996
►M4Regulamento (CE) n.o822/97 da Comissão de 6 de Maio de 1997 L 117 10 7.5.1997
►M5Regulamento (CEE) n.o2348/91 da Comissão de 29 de Julho de 1991 L 214 39 2.8.1991
►M6alterado pelo Regulamento (CE) n.o1932/97 da Comissão de 3 de
Outubro de 1997L 272 10 4.10.1997
►M7Regulamento (CE) n.o761/1999 da Comissão de 12 de Abril de 1999 L 99 4 14.4.1999
►M8Regulamento (CE) n.o440/2003 da Comissão de 10 de Março de 2003 L 66 15 11.3.2003
▼B
REGULAMENTO (CEE) N.o2676/90 DA COMISSÃO
de 17 de Setembro de 1990
que determina os métodos de análise comunitários aplicáveis no
sector do vinho
A COMISSÃO DAS COMUNIDADES EUROPEIAS,
Tendo em conta o Tratado que institui a Comunidade Económica Euro-peia,
Tendo em conta o Regulamento (CEE) n.
o822/87 do Conselho, de 16
de Março de 1987, que estabelece a organização comum do mercado
vitivinícola (1), alterado pelo Regulamento (CEE) n.o1325/90 (2), e,
nomeadamente, o seu artigo 4.o,
Considerando que o n.o1 do artigo 74.odo Regulamento (CEE) n.o822/
/87 determina a adopção dos métodos de análise que permitemestabelecer a composição dos produtos referidos no artigo 1.
odesse
regulamento e as regras que permitem estabelecer se esses produtosforam objecto de tratamento com violação das práticas enológicas auto-rizadas;
Considerando que, uma vez que a Comunidade ainda não estabeleceu
os teores-limite dos elementos presentes que caracterizam a utilizaçãode certas práticas nem quadros que permitam a comparação dos dadosanalíticos, é conveniente autorizar os Estados-membros a determinar os
limites;
Considerando que o n.
o1 do artigo 13.odo Regulamento (CEE) n.o822/
/87 prevê um exame analítico respeitante aos valores mínimos dos
elementos característicos dos vqprd em causa, que figuram entre os
enumerados no anexo do referido regulamento;
Considerando que o controlo das indicações que constam dos docu-
mentos relativos aos produtos em causa torna necessária a
implementação de métodos de análise uniformes que assegurem a
obtenção de dados precisos e comparáveis; que, por consequência, estesmétodos devem ser obrigatórios em qualquer transacção comercial ouem qualquer operação de controlo e, dadas as possibilidades limitadasdo comércio, é conveniente admitir um número limitado de processos
usuais que permitam uma determinação rápida e suficientemente segura
dos elementos pesquisados;
Considerando que é útil reter como métodos, na medida do possível,
aqueles que beneficiam do reconhecimento geral, tais como os métodos
desenvolvidos no âmbito da Convenção Internacional para a Unificação
dos Métodos de Análise e a Aplicação dos Vinhos de 1954, publicadospelo «Office International de la Vigne et du Vin» na Colectânea dosMétodos Internacionais de Análise dos Vinhos (Recueil des méthodes
internationales d'analyse des vins);
Considerando que o Regulamento (CEE) n.
o1108/82 (3) estabelece
métodos de análise comunitários aplicáveis no sector do vinho; que,tendo em conta o progresso científico, se tornou necessário substituirdeterminados métodos por métodos mais adequados, alterar alguns
métodos e introduzir outros, nomeadamente aqueles que foram desde
há muito aprovados pelo «Office International de la Vigne et du Vin»;que devido ao grande número e à complexidade destas adaptações, éconveniente agrupar todas as análises num novo regulamento e revogaro Regulamento (CEE) n.
o1108/82;
Considerando que, para assegurar a comparabilidade dos resultados
obtidos na aplicação dos métodos de análise mencionados no artigo74.
odo Regulamento (CEE) n.o822/87, convém que se refira, no que
respeita à exactidão, repetibilidade e reprodutividade desses resultados,1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 2
(1)J O n .oL 84 de 27. 3. 1987, p. 1.
(2)J O n .oL 132 de 23. 5. 1990, p. 19.
(3)J O n .oL 133 de 14. 5. 1982, p. 1.
▼B
às definições estabelecidas pelo «Office International de la Vigne et du
Vin»;
Considerando que, tendo em conta todo o progresso científico, por um
lado, e o equipamento técnico dos laboratórios oficiais, pelo outro, ecom o objectivo de tornar o trabalho destes laboratórios mais eficaz e
mais rentável, há lugar para permitir a aplicação de métodos de análise
automatizados sobdeterminadas condições; convém especificar que,em caso de litígio, os métodos automatizados não podem substituir osmétodos de referência nem os métodos usuais;
Considerando que os resultados de uma medição da densidade pelo
método automatizado baseado no princípio de um ressonador de flexãosão, no que respeita à exactidão, à sua repetibilidade e reprodutibili-dade, pelo menos iguais aos resultados obtidos pelos métodos
constantes do ponto 1 do anexo do presente regulamento para medir a
massa volúmica ou a densidade relativa; que é, portanto, indicado, emvirtude do n.
o3 do artigo 74.odo Regulamento (CEE) n.o822/87, consi-
derar este método automatizado como equivalente aos métodosreferidos, constantes do anexo do presente regulamento;
Considerando que o método operatório, descrito no ponto 2.2.3.3.2 do
capítulo 25 do anexo do presente regulamento para análise do teor dedióxido de enxofre total dos vinhos e dos mostos com um teor presu-
mido de menos de 50 miligramas por litro, leva a uma melhor
extracção daquela substância relativamente ao modo operatório descritono ponto 13.4 do capítulo 13 do anexo do Regulamento (CEE) n.
o1108/
/82; que deste facto resultam teores mais elevados de dióxido deenxofre total dos produtos analisados que podem exceder, nomeada-
mente no caso de determinados sumos de uva, o limite máximo
prescrito; que, a fim de evitar dificuldades para o escoamento dossumos de uva já elaborados aquando da entrada em vigor do presenteregulamento e enquanto se aguarda que os processos de elaboraçãosejam adaptados para levar a uma dessulfitação mais completa dosmostos de uva amuados, há que permitir, durante um período transi-
tório, que o modo operatório descrito no regulamento atrás referido
seja ainda utilizado;
Considerando que as medidas previstas no presente regulamento estão
em conformidade com o parecer do Comité de Gestão dos Vinhos,
ADOPTOU O PRESENTE REGULAMENTO:
Artigo 1.o
1. Os métodos de análise comunitários aplicáveis no sector do vinhoque, aquando das transacções comerciais e de toda a operação decontrolo, permitem:
— estabelecer a composição dos produtos referidos no artigo 1.
odo
Regulamento (CEE) n.o822/87,
— estabelecer se estes produtos foram objecto de tratamentos que
violam as práticas enológicas autorizadas,
são os que figuram no anexo do presente regulamento.2. Para as matérias para as quais os métodos de referência e os
métodos usuais estão fixados, prevalecem os resultados obtidos poraplicação dos métodos de referência.
Artigo 2.
o
Para efeitos de aplicação do presente regulamento:
a) A repetibilidade representa o valor abaixo do qual se situa, com
uma probabilidade específica, o valor absoluto da diferença dosdois resultados individuais obtidos a partir de medidas efectuadas1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 3
Nota:Os quadros, os diagramas e uma parte das figuras que constam do anexo
foram postos à disposição da Comissão das Comunidades Europeias pelo
«Office International de la Vigne et du Vin», de Paris.
▼B
nas mesmas condições (mesmo operador, mesmo aparelho, mesmo
laboratório e num curto espaço de tempo);
b) A reprodutividade representa o valor abaixo do qual se situa, com
uma probabilidade específica, o valor absoluto da diferença de doisresultados individuais obtidos em condições diferentes (operadoresdiferentes, aparelhos diferentes, e/ou laboratórios diferentes e/ouépocas diferentes).
O termo «resultado individual» é o valor obtido quando se aplica, uma
vez e completamente, o método de ensaio normalizado a uma única
amostra.
Na ausência de indicação, a probabilidade é de 95 %.
Artigo 3.
o
1. São admitidos métodos de análise automatizados, soba responsa-
bilidade do director do laboratório, desde que a exactidão, arepetibilidade e a reprodutividade dos resultados sejam pelo menosequivalentes às dos resultados obtidos com os métodos de análise cons-tantes do anexo.
Em caso de litígio, os métodos constantes do anexo não podem ser
substituídos pelos métodos automatizados.
2. O método automatizado para medição da densidade, baseado no
princípio de um ressonador de flexão é considerado equivalente aométodo constante no ponto 1 do anexo do presente regulamento.
Artigo 4.
o
Quando for feita referência à água para soluções, diluições ou lavagens,
trata-se de água destilada ou de água desmineralizada de pureza pelomenos equivalente. Todos os produtos químicos devem, salvo especifi-cação em contrário, ser de qualidade analítica.
Artigo 5.
o
Fica revogado o Regulamento (CEE) n.o1108/82.
Todavia o n.o4 do artigo 1.odo referido regulamento continua em vigor
até 31 de Dezembro de 1990.
Artigo 6.o
O presente regulamento entra em vigor na data da sua publicação no
Jornal Oficial das Comunidades Europeias .
É aplicável a partir de 1 de Outubro de 1990.
O presente regulamento é obrigatório em todos os seus elementos e
directamente aplicável em todos os Estados-Membros.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 4
▼B
ANEXO
1.MASSA VOLÚMICA A 20 ºC E DENSIDADERELATIVAA 20 ºC
1. DEFINIÇÕES
A massa volúmica é o quociente entre a massa de um determinado
volume de vinho ou de mosto a 20 ºC e esse volume. Exprime-se em
gramas por mililitro e o seu símbolo é ρ20 ºC.
A densidade relativa a 20 ºC ou densidade 20 ºC/20 ºC é a razão,
expressa em número decimal, entre a massa dum certo volume de
vinho ou de mosto a 20 ºC e a massa do mesmo volume de água à
mesma temperatura. O seu símbolo é d20 ºC20 ºC.
2. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
A massa volúmica e a densidade relativa a 20 ºC são determinadas
na amostra por ensaio:
quer por picnometria: método de referência,
quer por areometria ou densimetria por balança hidrostática:
métodos usuais.
Nota:Para determinações muito precisas, a massa volúmica deve ser corri-
gida da acção do dióxido de enxofre
ρ
20 ºC=ρ′20 ºC − 0,0006 · S,
ρ20 ºC= massa volúmica corrigida,
ρ′20 ºC= massa volúmica observada,
S = dióxido de enxofre total g/l.
3. TRATAMENTO PRÉVIO DA AMOSTRA
Se o vinho ou o mosto contêm quantidades notáveis de dióxido de
carbono, expulsar a maior quantidade possível por agitação de
250 ml de vinho num frasco de 1 000 ml ou por filtração sobpressão
reduzida sobre 2 g de algodão colocado numa alonga.
4. MÉTODO DE REFERÊNCIA4.1.Aparelhagem
Material corrente de laboratório e, nomeadamente:
4.1.1. Picnómetro (
1), em vidro pyrex, com uma capacidade de cerca de
100 ml, com um termómetro móvel com polidura de esmeril,
graduado em décimos de grau de 10º a 30 ºC. Este termómetro
deve ser controlado (ver figura 1).1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 5
(1) Pode ser utilizado qualquer picnómetro de características equivalentes.
▼B
Figura 1
Picnómetro e seu frasco-tara
Este picnómetro dispõe de um tubo lateral de 25 mm de compri-
mento, com um diâmetro interno máximo de 1 mm, terminado por
uma parte cónica esmerilada. Este tubo lateral pode ter uma «rolha
receptora» constituída por um tubo cónico esmerilado terminado por
uma parte afilada. Esta rolha serve de câmara de dilatação.
As duas esmerilagens do aparelho devem ser feitas com muito
cuidado.
4.1.2. Frasco-tara com o mesmo volume externo (a menos de 1 ml aproxi-
madamente) que o picnómetro e de massa igual à massa do
picnómetro cheio com um líquido de densidade 1,01 (solução a 2 %
(m/v) de cloreto de sódio).
Recipiente envolvente tornado calorífugo que se adapte exactamente
ao corpo do picnómetro.
4.1.3. Balança de dois pratos com capacidade de pelo menos 300 g,
sensível à décima de miligrama
ou
Balança de prato único com capacidade de pelo menos 200 g,
sensível à décima de miligrama.
4.2.Calibração do picnómetro
A calibração do picnómetro inclui a determinação das seguintes
características:
— tara quando vazio,
— volume a 20 ºC,— massa de água a 20 ºC.
4.2.1.Utilização de uma balança de dois pratos
Depois de colocar o frasco-tara no prato esquerdo da balança e o
picnómetro, limpo, seco e munido da respectiva «rolha receptora»,
no prato direito, obter o equilíbrio colocando ao lado do picnómetro
massas marcadas: sendo p gramas.
Encher o picnómetro, cuidadosamente, com água destilada à tempe-
ratura ambiente e introduzir o termómetro; enxugar cuidadosamente
o picnómetro e colocá-lo no recipiente calorífugo; agitar por viragem
até que a temperatura lida no termómetro seja constante. Nivelarexactamente pelo bordo superior do tubo lateral. Enxugar este tubo
lateral, colocar a rolha receptora; ler a temperatura t ºC com cuidado
e corrigi-la, eventualmente, da inexactidão da escala do termómetro.
Pesar o picnómetro cheio de água, seja p ′a massa em gramas que
origina o equilíbrio.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 6
▼B
Cálculos (1)
Tara do picnómetro vazio:Tara quando vazio = p + mm = massa de ar contido no picnómetro
m = 0,0012 (p − p ′).
Volume a 20 ºC:
V
20 ºC=( p+m−p ′)·Ft
Ft= factor constante da tabela I para a temperatura t ºC
V20 ºCdeve ser conhecido com uma aproximação de ± 0,001 ml.
Massa de água a 20 ºC:
M20 ºCV20 ºC· 0,998203
0,998203 = massa volúmica a 20 ºC.
4.2.2. Utilização de uma balança de prato único
Determinar:
— a massa do picnómetro limpo e seco: P,
— a massa do picnómetro cheio de água a t ºC: P1seguindo as indi-
cações descritas em 4.2.1.,
— a massa do frasco tara To.
Cálculos(1)
Tara do picnómetro vazio:
Tara quando vazio: P − mm = massa de ar existente no picnómetro
m = 0,0012 (P
1− P).
Volume a 20 ºC
V20 ºC=[ P1− (P − m)] · Ft
Ft= factor constante da tabela I para a temperatura t ºC.
O volume a 20 ºC deve ser conhecido com uma aproximação de
± 0,001 ml.
Massa de água a 20 ºC:M
20 ºC=V20 ºC· 0,998203
0,998203 = massa volúmica da água a 20 ºC.
4.3.Técnica de uma medição (1)
4.3.1. Utilização de uma balança de dois pratos
Pesar o picnómetro cheio com a amostra preparada para ensaios, (3)
segundo as indicações descritas em 4.2.1., seja p ″a massa em
gramas que origina o equilíbrio a t ºC.
Massa do líquido contido no picnómetro = p + m − p ″.
Massa volúmica aparente a t ºC:
ρtº C¼pþm/C0p00
V20 ºC
Calcular a massa volúmica a 20 ºC por meio de uma das tabelas de
correcção seguintes, consoante a natureza do líquido estudado: vinho
seco (tabela II), mosto natural ou concentrado (tabela III), vinho
doce (tabela IV).
Exprime-se a densidade 20 ºC/20 ºC do vinho dividindo a massa
volúmica a 20 ºC por 0,998203.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 7
(1) É dado um exemplo numérico no ponto 6 do presente capítulo.
▼B
4.3.2. Utilização de uma balança de prato único (1)
Pesar o frasco-tara, sendo T1a sua massa
Calcular dT = T1−To
Massa do picnómetro vazio no momento da medição = P − m + dT.Pesar o picnómetro cheio com a amostra preparada para ensaios (3)
seguindo as indicações descritas em 4.2.1. ou seja P
2a massa a t ºC.
Massa do líquido contido no picnómetro a t ºC = P2− (P − m + dT).
Massa volúmica aparente a t ºC:
ρtº C¼P2/C0P/C0mþdT ðÞ
V20ºC
Calcular a massa volúmica a 20º C do líquido estudado: vinho seco,
mosto natural e concentrado, vinho doce, como é indicado em 4.3.1.
A densidade 20 ºC/ 20 ºC é obtida dividindo a massa volúmica a
20 ºC por 0,998203.
Repetibilidade da massa volúmica:para os vinhos secos e macios: r = 0,00010,
para os vinhos doces: r = 0,00018.
4.3.4. Reprodutibilidade da massa volúmica:
para os vinhos secos e adamados: R = 0,00037,
para os vinhos doces: R = 0,00045.
5. MÉTODOS USUAIS
5.1.Areometria
5.1.1. Aparelhagem
5.1.1.1. Areómetro
Os areómetros devem responder às prescrições da ISO no que diz
respeito à suas dimensões e graduações.
Devem ter um carena cilíndrica, uma haste de secção circular de,
pelo menos, 3 mm de diâmetro. Para os vinhos secos, devem ser
graduados de 0,983 a 1,003 por milésimo e quinto de milésimo.
Cada milésimo deve ser separado por, pelo menos, 5 mm do milé-
simo seguinte. Para a medição da densidade dos vinhos
desalcoolizados, dos vinhos doces e dos mostos, utiliza-se um jogo
de 5 aerómetros graduados de 1,000 — 1,030; — 1,030 — 1,060;
1,060 — 1,090; 1,090 — 1,120; 1,120 — 1,150. Estes aparelhos
são graduados em massas volúmicas a 20 ºC por milésimo e meio
milésimo, pelo menos, sendo cada milésimo separado por, pelo
menos, 3 mm do milésimo seguinte.
Estes areómetros devem ser graduados de modo a que a leitura seja
feita pelo «cimo do menisco». A indicação da graduação em massa
volúmica a 20 ºC ou em densidade relativa a 20 ºC e da leitura ao
nível do cimo do menisco é inscrita quer na escala graduada quer
numa banda de papel existente dentro de carena.
Estes aparelhos devem ser controlados por um serviço oficial.
5.1.1.2. Termómetro controlado graduado em, pelo menos, meios graus
Celsius.
5.1.1.3. Proveta cilíndrica de 36 mm de diâmetro interno e de 320 mm de
altura, mantida verticalmente por meio de um suporte de roscas de
nivelamento.
5.1.2. Modo operatório
T é c n i c ad em e d i ç ã oNa proveta (5.1.1.3) colocar 250 ml da amostra preparada para
ensaios (3) e introduzir o areómetro e o termómetro. Ler o termó-1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 8
(1) É dado um exemplo numérico no ponto 6 do presente capítulo.
▼B
metro um minuto depois de ter agitado para obter o equilíbrio de
temperatura. Retirar o termómetro e ler a massa volúmica aparente
a t ºC na escala do areómetro após um minuto de repouso.
Corrigir a massa volúmica aparente lida a t ºC da acção da tempera-
tura por meio de tabelas que se aplicam aos casos dos vinhos secos
(tabela V), dos mostos (tabela VI) e dos vinhos que contêm açúcar
(tabela VII).
A densidade 20 ºC/20 ºC é obtida dividindo a massa volúmica a
20 ºC por 0,998203.
5.2.Densimetria por balança hidrostática
5.2.1. Aparelhagem
Balança hidrostáticaBalança hidrostática, cuja capacidade máxima seja, pelo menos, de
100 g, sensível a 1/10 de mg.
Em cada prato é fixado um flutuador em vidro pyrex, com um
volume de, pelo menos, 20 ml. Estes dois flutuadores idênticos são
suspensos por um fio de diâmetro inferior ou igual a 0,1 mm.
O flutuador suspenso no prato direito deve poder ser introduzido
numa proveta cilíndrica com um indicador de nível. Esta proveta
deve ter um diâmetro interno superior ao flutuador em, pelo menos,
6 mm. Este último deve caber inteiramente no volume da proveta
situado abaixo do indicador, devendo a superfície do líquido a medir
ser apenas atravessada pelo fio de suspensão. A temperatura do
líquido contido na proveta é medida por um termómetro graduado
em 1/5 de grau.
Pode também utilizar-se uma balança hidrostática de prato único.
5.2.2. Modo operatório
5.2.2.1. Calibração de uma balança hidrostática
Com os dois flutuadores no ar, estabelecer o equilíbrio colocando no
prato direito massas marcadas p.
Encher a proveta de água pura até ao indicador, 1er a temperatura t
ºC após agitação e repouso de 2 ou 3 min.
Restabelecer o equilíbrio por meio das massas marcadas colocadas
no prato da direita, ou seja p' essas massas.
Volume do flutuador a 20 ºC:
V
20 ºC=( p′− p) (F + 0,0012).
F = factor dado pela tabela I para a temperatura t ºC.peV
20são as características do flutuador.
5.2.2.2. Técnica de uma medição
O flutuador da direita é mergulhado na proveta cheia de vinho (ou
de mosto) até ao indicador. Ler a temperatura t ºC do vinho (ou
mosto), sendo:
p″as massas marcadas que restabelecem o equilíbrio ρt ºC, massa
volúmica aparente:
ρtº C¼p00/C0p ðÞ
Vþ0;0012
Expressar esta massa volúmica a 20 ºC utilizando uma das tabelas II,
III ou IV.
6. EXEMPLO DE CÁLCULO DA MASSA VOLÚMICA A 20 ºC E
DA DENSIDADE 20 ºC/20 ºC (MÉTODO DE REFERÊNCIA)
6.1.Picnometria em balança de dois pratos
6.1.1. Estabelecimento das constantes do picnómetro
1. Pesagem do picnómetro limpo e seco:
Tara = picnómetro + p1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 9
▼B
p = 104,9454 g.
2. Pesagem do picnómetro cheio de água à temperatura t ºC:
Tara = picnómetro + água + p ′
p′= 1,2396 g para t = 20,5 ºC.
3. Cálculo da massa de ar existente no picnómetro:
m = 0,0012 (p − p ′)
m = 0,0012 (104,9454 − 1,2396)
m = 0,1244 g.
4. Características a considerar:
Tara do picnómetro vazio, p + m:p + m = 104,9454 + 0,1244,
p + m = 105,0698 g.
Volume a 20 ºC = (p + m − p ′)·F
tº C
F20,50 ºC= 1,001900
V20 ºC= (105,0698 − 1,2396) · 1,001900
V20 ºC= 104,0275 ml.
Massa de água a 20 ºC = V20 ºC· 0,998203
M20 ºC= 103,8405 g.
6.1.2. Determinação da massa volúmica a 20º C e da densidade 20º C/20º
C de um vinho seco:
p″= 1,2622 a 17,80 ºC
ρ17;80ºC¼105;0698 /C01;2622
104;0275
ρ17,80 ºC= 0,99788 g/ml
A tabela II permite calcular ρ20ºCa partir de ρtºCpor meio da relação:
ρ20 ºC¼ρtº C±c
1000
Para t: 17,80 ºC e para um título alcoométrico de 11 % vol.,
encontra-se c = 0,54
ρ20 ºC¼0;99788 /C00;54
1000
ρ20 ºC= 0,99734 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99734
0;998203¼0;99913 :
6.2.Picnometria em balança de prato único
6.2.1. Estabelecimento das constantes do picnómetro
1. Pesagem do picnómetro limpo e seco
P = 67,7913 g.
2. Pesagem do picnómetro cheio de água à temperatura de t ºC:
P1= 169,2715 a 21,65 ºC.
3. Cálculo da massa de ar contida no picnómetro:
m = 0,0012 (P1−P )
m = 0,0012 · 101,48021990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 10
▼B
m = 0,1218 g.
4. Características a considerar:
Tara do picnómetro vazio, P − m:P − m = 67,7913 − 0,1218
P − m = 67,6695 g
Volume a 20 ºC = [P
1− (P − m)] Ftº C
F21,65 ºC= 1,002140
V20 ºC= (169,2715 − 67,6695) · 1,002140
V20 ºC= 101,8194 ml
Massa de água a 20 ºC = V20 ºC· 0,998203
M20 ºC= 101,6364 g
Massa do frasco tara: To
To= 171,9160 g.
6.2.2. Determinação da massa volúmica a 20º C e da densidade 20º C/20º
C de um vinho seco:
T1= 171,9178 g
dT = 171,9178 − 171,9160 = 0,0018 gP − m + dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 g
P
2= 169,2799 a 18 ºC
ρ18 ºC¼169;2799 /C067;6713
101;8194
ρ18 ºC= 0,99793 g/ml
A tabela II permite calcular ρ20ºCa partir de ρtºCpor meio da relação:
ρ20 ºC¼ρtº C±c
1000
Para t = 18 ºC e um título alcoometrico de 11 % vol., obtém-se c
= 0,49
ρ20 ºC¼0;99793 /C00;49
1000
ρ20 ºC= 0,99744 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99744
0;998203¼0;99923 :1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 11
▼B
TABELA I
Tabela de factores F
pelosquaisé necessáriomultiplicar amassadeáguacontidanopicnómetro emvidropyrex atº,
para calcular o volume do picnómetro a 20 ºC.
tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F
10,0 1,000398 13,0 1,000691 16,0 1,001097 19,0 1,001608 22,0 1,002215 25,0 1,002916 28,0 1,003704
,1 1,000406 ,1 1,000703 ,1 1,001113 ,1 1,001627 ,1 1,002238 ,1 1,002941 ,1 1,003731
,2 1,000414 ,2 1,000714 ,2 1,001128 ,2 1,001646 ,2 1,002260 ,2 1,002966 ,2 1,003759
,3 1,000422 ,3 1,000726 ,3 1,001144 ,3 1,001665 ,3 1,002282 ,3 1,002990 ,3 1,003787
,4 1,000430 ,4 1,000738 ,4 1,001159 ,4 1,001684 ,4 1,002304 ,4 1,003015 ,4 1,003815
10,5 1,000439 13,5 1,000752 16,5 1,001175 19,5 1,001703 22,5 1,002326 25,5 1,003041 28,5 1,003843
,6 1,000447 ,6 1,000764 ,6 1,001191 ,6 1,001722 ,6 1,002349 ,6 1,003066 ,6 1,003871
,7 1,000456 ,7 1,000777 ,7 1,001207 ,7 1,001741 ,7 1,002372 ,7 1,003092 ,7 1,003899
,8 1,000465 ,8 1,000789 ,8 1,001223 ,8 1,001761 ,8 1,002394 ,8 1,003117 ,8 1,003928
,9 1,000474 ,9 1,000803 ,9 1,001239 ,9 1,001780 ,9 1,002417 ,9 1,003143 ,9 1,003956
11,0 1,000483 14,0 1,000816 17,0 1,001257 20,0 1,001800 23,0 1,002439 26,0 1,003168 29,0 1,003984
,1 1,000492 ,1 1,000829 ,1 1,001273 ,1 1,001819 ,1 1,002462 ,1 1,003194 ,1 1,004013
,2 1,000501 ,2 1,000842 ,2 1,001290 ,2 1,001839 ,2 1,002485 ,2 1,003222 ,2 1,004042
,3 1,000511 ,3 1,000855 ,3 1,001306 ,3 1,001859 ,3 1,002508 ,3 1,003247 ,3 1,004071
,4 1,000520 ,4 1,000868 ,4 1,001323 ,4 1,001880 ,4 1,002531 ,4 1,003273 ,4 1,004099
11,5 1,000530 14,5 1,000882 17,5 1,001340 20,5 1,001900 23,5 1,002555 26,5 1,003299 29,5 1,004128
,6 1,000540 ,6 1,000895 ,6 1,001357 ,6 1,001920 ,6 1,002578 ,6 1,003326 ,6 1,004158
,7 1,000550 ,7 1,000909 ,7 1,001374 ,7 1,001941 ,7 1,002602 ,7 1,003352 ,7 1,004187
,8 1,000560 ,8 1,000923 ,8 1,001391 ,8 1,001961 ,8 1,002625 ,8 1,003379 ,8 1,004216
,9 1,000570 ,9 1,000937 ,9 1,001409 ,9 1,001982 ,9 1,002649 ,9 1,003405 ,9 1,004245
12,0 1,000580 15,0 1,000951 18,0 1,001427 21,0 1,002002 24,0 1,002672 27,0 1,003432 30,0 1,004275
,1 1,000591 ,1 1,000965 ,1 1,001445 ,1 1,002023 ,1 1,002696 ,1 1,003458
,2 1,000601 ,2 1,000979 ,2 1,001462 ,2 1,002044 ,2 1,002720 ,2 1,003485
,3 1,000612 ,3 1,000993 ,3 1,001480 ,3 1,002065 ,3 1,002745 ,3 1,003513
,4 1,000623 ,4 1,001008 ,4 1,001498 ,4 1,002086 ,4 1,002769 ,4 1,003540
12,5 1,000634 15,5 1,001022 18,5 1,001516 21,5 1,002107 24,5 1,002793 27,5 1,003567
,6 1,000645 ,6 1,001037 ,6 1,001534 ,6 1,002129 ,6 1,002817 ,6 1,003594
,7 1,000656 ,7 1,001052 ,7 1,001552 ,7 1,002151 ,7 1,002842 ,7 1,003621
,8 1,000668 ,8 1,001067 ,8 1,001570 ,8 1,002172 ,8 1,002866 ,8 1,003649
,9 1,000679 ,9 1,001082 ,9 1,001589 ,9 1,002194 ,9 1,002891 ,9 1,0036761990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 12
▼B
TABELA II
Correcções c de temperatura sobre a massa volúmica de vinhos secos e de vinhos secos desalcoolizados medida
num picnómetro em vidro pyrex a tº, para a referir a 20 ºC
ρ20¼ρt±c
1000− se tº é inferior a 20 ºC
+ se tº é superior a 20 ºC
Títulos alcoométricos
0567891 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 2 6 2 7Temperaturas em ºC10 1,59 1,64 1,67 1,71 1,77 1,84 1,91 2,01 2,11 2,22 2,34 2,46 2,60 2,73 2,88 3,03 3,19 3,35 3,52 3,70 3,87 4,06 4,25 4,44
11 1,48 1,53 1,56 1,60 1,64 1,70 1,77 1,86 1,95 2,05 2,16 2,27 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,06 3,21 3,36 3,53 3,69 3,86 4,03
12 1,36 1,40 1,43 1,46 1,50 1,56 1,62 1,69 1,78 1,86 1,96 2,05 2,16 2,27 2,38 2,50 2,62 2,75 2,88 3,02 3,16 3,31 3,46 3,61
13 1,22 1,26 1,28 1,32 1,35 1,40 1,45 1,52 1,59 1,67 1,75 1,83 1,92 2,01 2,11 2,22 2,32 2,44 2,55 2,67 2,79 2,92 3,05 3,18
14 1,08 1,11 1,13 1,16 1,19 1,23 1,27 1,33 1,39 1,46 1,52 1,60 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,11 2,21 2,31 2,42 2,52 2,63 2,74
15 0,92 0,96 0,97 0,99 1,02 1,05 1,09 1,13 1,19 1,24 1,30 1,36 1,42 1,48 1,55 1,63 1,70 1,78 1,86 1,95 2,03 2,12 2,21 2,3016 0,76 0,79 0,80 0,81 0,84 0,86 0,89 0,93 0,97 1,01 1,06 1,10 1,16 1,21 1,26 1,32 1,38 1,44 1,51 1,57 1,64 1,71 1,78 1,85
17 0,59 0,61 0,62 0,63 0,65 0,67 0,69 0,72 0,75 0,78 0,81 0,85 0,88 0,95 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,25 1,30 1,35 1,40
18 0,40 0,42 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,49 0,51 0,53 0,55 0,57 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,74 0,77 0,81 0,84 0,87 0,91 0,94
19 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47
20
21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54 0,56 0,59 0,61 0,63 0,66 0,69 0,71 0,74 0,77 0,80 0,83 0,87 0,90 0,93 0,97
23 0,68 0,70 0,71 0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,83 0,86 0,90 0,93 0,96 1,00 1,03 1,08 1,13 1,17 1,22 1,26 1,31 1,37 1,41 1,46
24 0,93 0,96 0,97 0,99 1,01 1,03 1,06 1,10 1,13 1,18 1,22 1,26 1,31 1,36 1,41 1,47 1,52 1,58 1,64 1,71 1,77 1,84 1,90 1,97
25 1,19 1,23 1,25 1,27 1,29 1,32 1,36 1,40 1,45 1,50 1,55 1,61 1,67 1,73 1,80 1,86 1,93 2,00 2,08 2,16 2,24 2,32 2,40 2,4826 1,47 1,51 1,53 1,56 1,59 1,62 1,67 1,72 1,77 1,83 1,90 1,96 2,03 2,11 2,19 2,27 2,35 2,44 2,53 2,62 2,72 2,81 2,91 3,01
27 1,75 1,80 1,82 1,85 1,89 1,93 1,98 2,04 2,11 2,18 2,25 2,33 2,41 2,50 2,59 2,68 2,78 2,88 2,98 3,09 3,20 3,31 3,42 3,53
28 2,04 2,10 2,13 2,16 2,20 2,25 2,31 2,38 2,45 2,53 2,62 2,70 2,80 2,89 3,00 3,10 3,21 3,32 3,45 3,57 3,69 3,82 3,94 4,07
29 2,34 2,41 2,44 2,48 2,53 2,58 2,65 2,72 2,81 2,89 2,99 3,09 3,19 3,30 3,42 3,53 3,65 3,78 3,92 4,05 4,19 4,33 4,47 4,61
30 2,66 2,73 2,77 2,81 2,86 2,92 3,00 3,08 3,17 3,27 3,37 3,48 3,59 3,72 3,84 3,97 4,11 4,25 4,40 4,55 4,70 4,85 4,92 5,17
Nota:Pode utilizar-se esta tabela para transformar a densidade d20tem densidade d2020.
TABELA III
Correcções c da temperatura a introduzir na massa volúmica de mostos naturais e dos mostos concentrados
medida a tº por meio de um picnómetro em vidro pyrex para referir o resultado a 20 ºC
ρ20¼ρt±c
1000− se tº é inferior a 20 ºC
+ se tº é superior a 20 ºC
Massas volúmicas
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Temperaturas em ºC10º 2,31 2,48 2,66 2,82 2,99 3,13 3,30 3,44 3,59 3,73 3,88 4,01 4,28 4,52 4,76 4,98 5,18 5,42 5,56 5,73 5,90 6,05
11º 2,12 2,28 2,42 2,57 2,72 2,86 2,99 3,12 3,25 3,37 3,50 3,62 3,85 4,08 4,29 4,48 4,67 4,84 5,00 5,16 5,31 5,45
12º 1,92 2,06 2,19 2,32 2,45 2,58 2,70 2,82 2,94 3,04 3,15 3,26 3,47 3,67 3,85 4,03 4,20 4,36 4,51 4,65 4,78 4,91
13º 1,72 1,84 1,95 2,06 2,17 2,27 2,38 2,48 2,58 2,69 2,78 2,88 3,05 3,22 3,39 3,55 3,65 3,84 3,98 4,11 4,24 4,36
14º 1,52 1,62 1,72 1,81 1,90 2,00 2,09 2,17 2,26 2,34 2,43 2,51 2,66 2,82 2,96 3,09 3,22 3,34 3,45 3,56 3,67 3,76
15º 1,28 1,36 1,44 1,52 1,60 1,67 1,75 1,82 1,89 1,96 2,04 2,11 2,24 2,36 2,48 2,59 2,69 2,79 2,88 2,97 3,03 3,10
16º 1,05 1,12 1,18 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,55 1,60 1,66 1,71 1,81 1,90 2,00 2,08 2,16 2,24 2,30 2,37 2,43 2,49
17º 0,80 0,86 0,90 0,95 1,00 1,04 1,09 1,13 1,18 1,22 1,26 1,30 1,37 1,44 1,51 1,57 1,62 1,68 1,72 1,76 1,80 1,84
18º 0,56 0,59 0,62 0,66 0,68 0,72 0,75 0,77 0,80 0,83 0,85 0,88 0,93 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,16 1,19 1,21 1,24
19º 0,29 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
20º21º 0,29 0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,58 0,59 0,60 0,61 0,62 0,62
22º 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,79 0,81 0,84 0,87 0,90 0,96 1,00 1,05 1,09 1,12 1,15 1,18 1,20 1,22 1,23
23º 0,89 0,94 0,99 1,03 1,08 1,12 1,16 1,20 1,25 1,29 1,33 1,37 1,44 1,51 1,57 1,63 1,67 1,73 1,77 1,80 1,82 1,84
24º 1,20 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,66 1,71 1,77 1,82 1,92 2,01 2,10 2,17 2,24 2,30 2,36 2,40 2,42 2,44
25º 1,51 1,59 1,66 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,23 2,30 2,42 2,53 2,63 2,72 2,82 2,89 2,95 2,99 3,01 3,0526º 1,84 1,92 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,42 2,50 2,58 2,65 2,73 2,87 3,00 3,13 3,25 3,36 3,47 3,57 3,65 3,72 3,79
27º 2,17 2,26 2,36 2,46 2,56 2,66 2,75 2,84 2,93 3,01 3,10 3,18 3,35 3,50 3,66 3,80 3,93 4,06 4,16 4,26 4,35 4,42
28º 2,50 2,62 2,74 2,85 2,96 3,07 3,18 3,28 3,40 3,50 3,60 3,69 3,87 4,04 4,21 4,36 4,50 4,64 4,75 4,86 4,94 5,00
29º 2,86 2,98 3,10 3,22 3,35 3,47 3,59 3,70 3,82 3,93 4,03 4,14 4,34 4,53 4,72 4,89 5,05 5,20 5,34 5,46 5,56 5,64
30º 3,20 3,35 3,49 3,64 3,77 3,91 4,05 4,17 4,30 4,43 4,55 4,67 4,90 5,12 5,39 5,51 5,68 5,84 5,96 6,08 6,16 6,22
Nota:Pode utilizar-se esta tabela para transformar a densidade d20tem densidade d2020.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 13
▼B
TABELA IV
Correcções c da temperatura sobre a massa volúmica de vinhos de 13 % vol. e mais, contendo açúcar, medida
por meio de um picnómetro em vidro pyrex a tº, para a referir a 20 ºC
ρ20¼ρt±c
1000− se tº é inferior a 20 ºC
+ se tº é superior a 20 ºC
Vinhos de 13 % vol. Vinhos 15 % vol. Vinhos de 17 % vol.
Massas volúmicas Massas volúmicas Massas volúmicas
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperaturas em ºC10º 2,36 2,71 3,06 3,42 3,72 3,96 4,32 2,64 2,99 3,36 3,68 3,99 4,30 4,59 2,94 3,29 3,64 3,98 4,29 4,60 4,89
11º 2,17 2,49 2,80 2,99 3,39 3,65 3,90 2,42 2,73 3,05 3,34 3,63 3,89 4,15 2,69 3,00 3,32 3,61 3,90 4,16 4,41
12º 1,97 2,25 2,53 2,79 3,05 3,29 3,52 2,19 2,47 2,75 3,01 3,27 3,51 3,73 2,42 2,70 2,98 3,24 3,50 3,74 3,96
13º 1,78 2,02 2,25 2,47 2,69 2,89 3,09 1,97 2,21 2,44 2,66 2,87 3,08 3,29 2,18 2,42 2,64 2,87 3,08 3,29 3,49
14º 1,57 1,78 1,98 2,16 2,35 2,53 2,70 1,74 1,94 2,14 2,32 2,52 2,69 2,86 1,91 2,11 2,31 2,50 2,69 2,86 3,03
15º 1,32 1,49 1,66 1,82 1,97 2,12 2,26 1,46 1,63 1,79 1,95 2,10 2,25 2,39 1,60 1,77 1,93 2,09 2,24 2,39 2,5316º 1,08 1,22 1,36 1,48 1,61 1,73 1,84 1,18 1,32 1,46 1,59 1,71 1,83 1,94 1,30 1,44 1,58 1,71 1,83 1,95 2,06
17º 0,83 0,94 1,04 1,13 1,22 1,31 1,40 0,91 1,02 1,12 1,21 1,30 1,39 1,48 1,00 1,10 1,20 1,30 1,39 1,48 1,56
18º 0,58 0,64 0,71 0,78 0,84 0,89 0,95 0,63 0,69 0,76 0,83 0,89 0,94 1,00 0,69 0,75 0,82 0,89 0,95 1,00 1,06
19º 0,30 0,34 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,52 0,36 0,39 0,42 0,46 0,49 0,52 0,54
20º21º 0,30 0,33 0,36 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,36 0,39 0,43 0,46 0,49 0,51 0,35 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54
22º 0,60 0,67 0,73 0,80 0,85 0,91 0,98 0,65 0,72 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 0,71 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 1,07
23º 0,93 1,02 1,12 1,22 1,30 1,39 1,49 1,01 1,10 1,20 1,29 1,38 1,46 1,55 1,10 1,19 1,29 1,38 1,46 1,55 1,63
24º 1,27 1,39 1,50 1,61 1,74 1,84 1,95 1,37 1,49 1,59 1,72 1,84 1,95 2,06 1,48 1,60 1,71 1,83 1,95 2,06 2,17
25º 1,61 1,75 1,90 2,05 2,19 2,33 2,47 1,73 1,87 2,02 2,17 2,31 2,45 2,59 1,87 2,01 2,16 2,31 2,45 2,59 2,73
26º 1,94 2,12 2,29 2,47 2,63 2,79 2,95 2,09 2,27 2,44 2,62 2,78 2,94 3,10 2,26 2,44 2,61 2,79 2,95 3,11 3,26
27º 2,30 2,51 2,70 2,90 3,09 3,27 3,44 2,48 2,68 2,87 3,07 3,27 3,45 3,62 2,67 2,88 3,07 3,27 3,46 3,64 3,81
28º 2,66 2,90 3,13 3,35 3,57 3,86 4,00 2,86 3,10 3,23 3,55 3,77 3,99 4,20 3,08 3,31 3,55 3,76 3,99 4,21 4,41
29º 3,05 3,31 3,56 3,79 4,04 4,27 4,49 3,28 3,53 3,77 4,02 4,26 4,49 4,71 3,52 3,77 4,01 4,26 4,50 4,73 4,95
30º 3,44 3,70 3,99 4,28 4,54 4,80 5,06 3,68 3,94 4,23 4,52 4,79 5,05 5,30 3,95 4,22 4,51 4,79 5,07 5,32 5,57
Vinhos de 19 % vol. Vinhos de 21 % vol.
Massas volúmicas Massas volúmicas
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperaturas em ºC10º 3,27 3,62 3,97 4,30 4,62 4,92 5,21 3,62 3,97 4,32 4,66 4,97 5,27 5,56
11º 2,99 3,30 3,61 3,90 4,19 4,45 4,70 3,28 3,61 3,92 4,22 4,50 4,76 5,01
12º 2,68 2,96 3,24 3,50 3,76 4,00 4,21 2,96 3,24 3,52 3,78 4,03 4,27 4,49
13º 2,40 2,64 2,87 3,09 3,30 3,51 3,71 2,64 2,88 3,11 3,33 3,54 3,74 3,95
14º 2,11 2,31 2,51 2,69 2,88 3,05 3,22 2,31 2,51 2,71 2,89 3,08 3,25 3,43
15º 1,76 1,93 2,09 2,25 2,40 2,55 2,69 1,93 2,10 2,26 2,42 2,57 2,72 2,8616º 1,43 1,57 1,70 1,83 1,95 2,08 2,18 1,56 1,70 1,84 1,97 2,09 2,21 2,32
17º 1,09 1,20 1,30 1,39 1,48 1,57 1,65 1,20 1,31 1,41 1,50 1,59 1,68 1,77
18º 0,76 0,82 0,88 0,95 1,01 1,06 1,12 0,82 0,88 0,95 1,01 1,08 1,13 1,18
19º 0,39 0,42 0,45 0,49 0,52 0,55 0,57 0,42 0,46 0,49 0,52 0,55 0,58 0,61
20º
21º 0,38 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,41 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,60
22º 0,78 0,84 0,90 0,96 1,02 1,07 1,13 0,84 0,90 0,96 1,02 1,08 1,14 1,19
23º 1,19 1,28 1,38 1,47 1,55 1,64 1,72 1,29 1,39 1,48 1,57 1,65 1,74 1,82
24º 1,60 1,72 1,83 1,95 2,06 2,18 2,29 1,73 1,85 1,96 2,08 2,19 2,31 2,42
25º 2,02 2,16 2,31 2,46 2,60 2,74 2,88 2,18 2,32 2,47 2,62 2,76 2,90 3,0426º 2,44 2,62 2,79 2,96 3,12 3,28 3,43 2,53 2,81 2,97 3,15 3,31 3,47 3,62
27º 2,88 3,08 3,27 3,42 3,66 3,84 4,01 3,10 3,30 3,47 3,69 3,88 4,06 4,23
28º 3,31 3,54 3,78 4,00 4,22 4,44 4,64 3,56 3,79 4,03 4,25 4,47 4,69 4,89
29º 3,78 4,03 4,27 4,52 4,76 4,99 5,21 4,06 4,31 4,55 4,80 5,04 5,27 5,48
30º 4,24 4,51 4,80 5,08 5,36 5,61 5,86 4,54 4,82 5,11 5,39 5,66 5,91 6,161990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 14
▼B
TABELA V
Correcções c de temperatura a introduzir na massa volúmica de vinhos secos e de vinhos secos desalcoolízados
medida por meio de um picnómetro ou de um areómetro em vidro vulgar a tº, para a referir a 20 ºC
ρ20¼ρt±c
1000− se tº é inferior a 20 ºC
+ se tº é superior a 20 ºC
Títulos alcoométricos
0 5 6 7 8 9 1 01 11 21 31 41 51 61 71 81 92 02 12 22 32 42 52 62 7Temperaturas em ºC10º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,31
11º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,15 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,90
12º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,94 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,49
13º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,73 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,07
14º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66
15º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,2316º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,96 0,99 1,05 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,80
17º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36
18º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,91
19º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46
20º21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,96
23º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,91 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,45
24º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95
25º 1,16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,4526º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,92 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,96
27º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,72 2,82 2,93 3,04 3,14 3,25 3,37 3,48
28º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,63 2,73 2,83 2,93 3,03 3,14 3,26 3,38 3,50 3,62 3,75 3,85 4,00
29º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54
30º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38 3,50 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07
Nota:Pode-se utilizar esta tabela para transformar a densidade d20tem densidade d2020.
TABELA VI
Correcções c da temperatura a introduzir na massa volúmica de mostos naturais e de mostos concentrados
medida a tº por meio de um picnómetro ou de um areómetro em vidro vulgar para a referir a 20 ºC
ρ20¼ρt±c
1000− se tº é inferior a 20 ºC
+ se tº é superior a 20 ºC
Massas volúmicas
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Temperaturas em ºC10º 2,17 2,34 2,52 2,68 2,85 2,99 3,16 3,29 3,44 3,58 3,73 3,86 4,13 4,36 4,60 4,82 5,02 5,25 5,39 5,56 5,73 5,87
11º 2,00 2,16 2,29 2,44 2,59 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,37 3,48 3,71 3,94 4,15 4,33 4,52 4,69 4,85 5,01 5,15 5,29
12º 1,81 1,95 2,08 2,21 2,34 2,47 2,58 2,70 2,82 2,92 3,03 3,14 3,35 3,55 3,72 3,90 4,07 4,23 4,37 4,52 4,64 4,77
13º 1,62 1,74 1,85 1,96 2,07 2,17 2,28 2,38 2,48 2,59 2,68 2,77 2,94 3,11 3,28 3,44 3,54 3,72 3,86 3,99 4,12 4,24
14º 1,44 1,54 1,64 1,73 1,82 1,92 2,00 2,08 2,17 2,25 2,34 2,42 2,57 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,35 3,46 3,57 3,65
15º 1,21 1,29 1,37 1,45 1,53 1,60 1,68 1,75 1,82 1,89 1,97 2,03 2,16 2,28 2,40 2,51 2,61 2,71 2,80 2,89 2,94 3,0116º 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,65 1,75 1,84 1,94 2,02 2,09 2,17 2,23 2,30 2,36 2,42
17º 0,76 0,82 0,86 0,91 0,96 1,00 1,05 1,09 1,14 1,18 1,22 1,25 1,32 1,39 1,46 1,52 1,57 1,63 1,67 1,71 1,75 1,79
18º 0,53 0,56 0,59 0,63 0,65 0,69 0,72 0,74 0,77 0,80 0,82 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,13 1,16 1,18 1,20
19º 0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,43 0,43 0,46 0,48 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
20º21º 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,51 0,54 0,56 0,57 0,58 0,59 0,60 0,60
22º 0,55 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,93 0,97 1,02 1,06 1,09 1,12 1,15 1,17 1,19 1,1923º 0,85 0,90 0,95 0,99 1,04 1,08 1,12 1,16 1,21 1,25 1,29 1,32 1,39 1,46 1,52 1,58 1,62 1,68 1,72 1,75 1,77 1,79
24º 1,15 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,48 1,54 1,60 1,65 1,71 1,76 1,86 1,95 2,04 2,11 2,17 2,23 2,29 2,33 2,35 2,37
25º 1,44 1,52 1,59 1,67 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,22 2,34 2,45 2,55 2,64 2,74 2,81 2,87 2,90 2,92 2,9626º 1,76 1,84 1,93 2,02 2,10 2,18 2,25 2,33 2,41 2,49 2,56 2,64 2,78 2,91 3,03 3,15 3,26 3,37 3,47 3,55 3,62 3,60
27º 2,07 2,16 2,26 2,36 2,46 2,56 2,65 2,74 2,83 2,91 3,00 3,07 3,24 3,39 3,55 3,69 3,82 3,94 4,04 4,14 4,23 4,30
28º 2,39 2,51 2,63 2,74 2,85 2,96 3,06 3,16 3,28 3,38 3,48 3,57 3,75 3,92 4,08 4,23 4,37 4,51 4,62 4,73 4,80 4,86
29º 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22 3,34 3,46 3,57 3,69 3,80 3,90 4,00 4,20 4,39 4,58 4,74 4,90 5,05 5,19 5,31 5,40 5,48
30º 3,06 3,21 3,35 3,50 3,63 3,77 3,91 4,02 4,15 4,28 4,40 4,52 4,75 4,96 5,16 5,35 5,52 5,67 5,79 5,91 5,99 6,04
Nota:Pode-se utilizar esta tabela para transformar a densidade d20tem densidade d2020.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 15
▼B
TABELA VII
Correcções c de temperatura sobre a massa volúmica de vinhos de 13 % vol. e mais,
contendo açúcar residual, medida por meio de um areómetro ou de um picnómetro em vidro vulgar a t º para referir a
20 ºC
ρ20¼ρt±c
1000− se tº é inferior a 20 ºC
+ se tº é superior a 20 ºC
Vinhos de 13 % volume Vinhos de 15 % volume Vinhos de 17 % volume
Massas volúmicas Massas volúmicas Massas volúmicas
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperaturas em ºC10º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18 2,51 2,85 3,20 3,54 3,85 4,02 4,46 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74
11º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,78 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,02 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,28
12º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,40 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,61 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,84
13º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,00 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,19 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,39
14º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94
15º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,4716º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,78 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,88 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,00
17º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,36 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,44 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,52
18º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,92 0,60 0,66 0,73 0,80 0,85 0,91 0,97 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,03
19º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53
20º21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,47 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,50 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53
22º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,93 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,98 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04
23º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,43 0,97 1,06 1,16 1,25 1,34 1,42 1,51 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,59
24º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90 1,32 1,44 1,54 1,66 1,78 1,89 2,00 1,43 1,56 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11
25º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,66
26º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,87 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,01 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,17
27º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,35 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,52 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,71
28º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,89 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,07 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,30
29º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82
30º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42
Vinhos de 19 % volume Vinhos de 21 % volume
Massas volúmicas Massas volúmicas
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperaturas em ºC10º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41
11º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,57 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,88
12º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,10 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,37
13º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,61 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,85
14º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33
15º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,8016º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,13 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,26
17º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,62 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,71
18º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,09 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,15
19º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
20º
21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
22º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,10 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,17
23º 1,15 1,30 1,34 1,43 1,51 1,60 1,68 1,25 1,34 1,44 1,63 1,61 1,70 1,78
24º 1,55 1,67 1,77 1,89 2,00 2,11 2,23 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36
25º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,9726º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,35 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,54
27º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,92 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,13
28º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,53 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,77
29º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36
30º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,021990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 16
▼B
2.AVALIAÇÃO DO TEOR DE AÇÚCARES DOS MOSTOS, MOSTOS
CONCENTRADOS E MOSTOS CONCENTRADOS RECTIFICADOS
POR REFRACTOMETRIA
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
O teor de açúcares em gramas por litro e em gramas por quilograma
de mostos, mostos concentrados e mostos concentrados rectificados
é obtido a partir do índice de refracção a 20 ºC, expresso em índice
absoluto ou em percentagem em massa de sacarose, utilizando a
tabela correspondente.
2. APARELHAGEM2.1.Refractómetro do tipo Abbé
O refractómetro utilizado deve dispor de uma escala que indique:
— quer as percentagens em massa de sacarose a 0,1 %,
— quer os índices de refracção com 4 decimais.
O refractómetro deve dispor de um termómetro cuja escala se
estenda, pelo menos, de + 15 ºC a + 25 ºC, e de um dispositivo de
circulação de água que permita fazer medições a uma temperatura de
20 ºC ± 5 ºC.
As instruções operatórias deste instrumento devem ser estritamente
respeitadas, nomeadamente no que respeita à calibração e à fonte
luminosa.
3. PREPARAÇÃO DA AMOSTRA3.1.Mostos e mostos concentrados
Passar, eventualmente, os mostos através de uma gaze seca dobrada
em quatro e, depois de eliminadas as primeiras gotas de filtrado,
fazer a determinação no produto filtrado.
3.2.Mostos concentrados rectificados
Utilizar, consoante a sua concentração, quer o mosto concentrado
rectificado quer a solução obtida levando 200 g de mosto concen-
trado rectificado, pesados exactamente, a 500 g, com água.
4. MODO OPERATÓRIO
Levar a amostra a uma temperatura próxima de 20 ºC. Colocar uma
pequena quantidade de toma de ensaio no prisma inferior do refrac-
tómetro tendo o cuidado de que, quando os prismas estiverem
pressionados um contra o outro, a toma de ensaio cubra uniforme-
mente a superfície do vidro; efectuar a medição em conformidade
com as instruções operatórias do aparelho utilizado.
Ler a percentagem em massa de sacarose com uma aproximação de
0,1 % ou anotar o índice de refracção com 4 decimais.
Efectuar pelo menos duas determinações em cada amostra preparada.Anotar a temperatura t ºC.
5. CÁLCULOS5.1.Correcção de temperatura
5.1.1. Aparelhos graduados em % em massa de sacarose: utilizar a tabela I
para a correcção de temperatura.
5.1.2. Aparelhos graduados em índices de refracção: a partir do índice
medido a t ºC utilizar a tabela I, a fim de obter (coluna 1) o valor
correspondente da percentagem em massa de sacarose a t ºC. Este
valor é corrigido no que respeita à temperatura e expresso a 20 ºC,
por meio da tabela I.
5.2.Teor de açúcares de mostos e de mostos concentrados
A partir da percentagem em massa de sacarose a 20 ºC utilizar a
tabela II, a fim de obter o teor de açúcares em gramas por litro e1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 17
▼B
em gramas por quilograma. O teor de açúcares é expresso em açúcar
invertido com um decimal.
5.3.Teor de açúcares de mosto concentrado rectificado
A partir da percentagem em massa de sacarose a 20 ºC utilizar a
tabela III, a fim de obter o teor de açúcares em gramas por litro e
em gramas por quilograma. O teor de açúcares é expresso em açúcar
invertido com um decimal.
Se a medição tiver sido efectuada com mosto concentrado rectifi-
cado diluído, multiplicar o resultado pelo factor de diluição.
5.4.Índice de refracção de mostos, mostos concentrados e mostos
concentrados rectificados
A partir da percentagem em massa de sacarose a 20 ºC utilizar a
tabela II, a fim de obter o índice de refracção a 20 ºC. Este índice
é expresso com 4 decimais.
TABELA I
Correcção a introduzir no caso de a percentagem em massa de sacarose ter sido determinada a
uma temperatura diferente de 20 ºC
Temperatura em ºCSacarose em gramas por 100 g de produto
51 01 52 03 04 05 06 07 07 5
Subtrair
15 0,25 0,27 0,31 0,31 0,34 0,35 0,36 0,37 0,36 0,36
16 0,21 0,23 0,27 0,27 0,29 0,31 0,31 0,32 0,31 0,2317 0,16 0,18 0,20 0,20 0,22 0,23 0,23 0,23 0,20 0,17
18 0,11 0,12 0,14 0,15 0,16 0,16 0,15 0,12 0,12 0,09
19 0,06 0,07 0,08 0,08 0,08 0,09 0,09 0,08 0,07 0,05
Adicionar
21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
22 0,12 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,1423 0,18 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,2224 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29
25 0,30 0,32 0,32 0,34 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37
As variações da temperatura em relação a 20 ºC não devem exceder
± 5 ºC.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 18
▼B
TABELA II
Tabela que indica o teor de açúcares (1)de mostos e mostos concentrados em gramas por litro e
em gramas por quilograma, determinado por meio de um refractómetro graduado quer em
percentragem em massa de sacarose a 20 ºC quer em índice de refracção a 20 ºC. É igualmente
indicada a massa volúmica a 20 ºC
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
10.0 1.34781 1.0390 82.3 79.2 4,89
10.1 1.34798 1.0394 83.4 80.2 4,95
10.2 1.34814 1.0398 84.5 81.3 5,02
10.3 1.34830 1.0402 85.6 82.2 5,09
10.4 1.34845 1.0406 86.6 83.2 5,14
10.5 1.34860 1.0410 87.6 84.1 5,20
10.6 1.34875 1.0414 88.6 85.1 5,26
10.7 1.34890 1.0419 89.7 86.1 5,33
10.8 1.34906 1.0423 90.8 87.1 5,39
10.9 1.34921 1.0427 91.8 88.1 5,45
11.0 1.34936 1.0431 92.9 89.1 5,52
11.1 1.34952 1.0435 94.0 90.0 5,58
11.2 1.34968 1.0439 95.0 91.0 5,64
11.3 1.34984 1.0443 96.1 92.0 5,71
11.4 1.34999 1.0447 97.1 92.9 5,77
11.5 1.35015 1.0452 98.2 94.0 5,83
11.6 1.35031 1.0456 99.3 95.0 5,90
11.7 1.35046 1.0460 100.3 95.9 5,96
11.8 1.35062 1.0464 101.4 96.9 6,02
11.9 1.35077 1.0468 102.5 97.9 6,09
12.0 1.35092 1.0473 103.6 98.9 6,15
12.1 1.35108 1.0477 104.7 99.9 6,22
12.2 1.35124 1.0481 105.7 100.8 6,28
12.3 1.35140 1.0485 106.8 101.9 6,35
12.4 1.35156 1.0489 107.9 102.9 6,41
12.5 1.35172 1.0494 109.0 103.8 6,47
12.6 1.35187 1.0498 110.0 104.8 6,53
12.7 1.35203 1.0502 111.1 105.8 6,60
12.8 1.35219 1.0506 112.2 106.8 6,66
12.9 1.35234 1.0510 113.2 107.8 6,73
13.0 1.35249 1.0514 114.3 108.7 6,79
13.1 1.35266 1.0519 115.4 109.7 6,86
13.2 1.35282 1.0523 116.5 110.7 6,92
13.3 1.35298 1.0527 117.6 111.7 6,99
13.4 1.35313 1.0531 118.6 112.6 7,05
13.5 1.35329 1.0536 119.7 113.6 7,11
13.6 1.35345 1.0540 120.8 114.6 7,18
13.7 1.35360 1.0544 121.8 115.6 7,24
13.8 1.35376 1.0548 122.9 116.5 7,30
13.9 1.35391 1.0552 124.0 117.5 7,37
14.0 1.35407 1.0557 125.1 118.5 7,43
14.1 1.35424 1.0561 126.2 119.5 7,50
14.2 1.35440 1.0565 127.3 120.5 7,56
14.3 1.35456 1.0569 128.4 121.5 7,63
14.4 1.35472 1.0574 129.5 122.5 7,69
14.5 1.35488 1.0578 130.6 123.4 7,76
14.6 1.35503 1.0582 131.6 124.4 7,82
14.7 1.35519 1.0586 132.7 125.4 7,88
14.8 1.35535 1.0591 133.8 126.3 7,95
14.9 1.35551 1.0595 134.9 127.3 8,011990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 19
(1) O teor de açúcares é expresso em açúcar invertido.
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
15.0 1.35567 1.0599 136.0 128.3 8,08
15.1 1.35583 1.0603 137.1 129.3 8,15
15.2 1.35599 1.0608 138.2 130.3 8,21
15.3 1.35615 1.0612 139.3 131.3 8,27
15.4 1.35631 1.0616 140.4 132.3 8,34
15.5 1.35648 1.0621 141.5 133.2 8,41
15.6 1.35664 1.0625 142.6 134.2 8,47
15.7 1.35680 1.0629 143.7 135.2 8,54
15.8 1.35696 1.0633 144.8 136.2 8,60
15.9 1.35712 1.0638 145.9 137.2 8,67
16.0 1.35728 1.0642 147.0 138.1 8,73
16.1 1.35744 1.0646 148.1 139.1 8,80
16.2 1.35760 1.0651 149.2 140.1 8,86
16.3 1.35776 1.0655 150.3 141.1 8,93
16.4 1.35793 1.0660 151.5 142.1 9,00
16.5 1.35809 1.0664 152.6 143.1 9,06
16.6 1.35825 1.0668 153.7 144.1 9,13
16.7 1.35842 1.0672 154.8 145.0 9,20
16.8 1.35858 1.0677 155.9 146.0 9,26
16.9 1.35874 1.0681 157.0 147.0 9,33
17.0 1.35890 1.0685 158.1 148.0 9,39
17.1 1.35907 1.0690 159.3 149.0 9,46
17.2 1.35923 1.0694 160.4 150.0 9,53
17.3 1.35939 1.0699 161.5 151.0 9,59
17.4 1.35955 1.0703 162.6 151.9 9,66
17.5 1.35972 1.0707 163.7 152.9 9,73
17.6 1.35988 1.0711 164.8 153.9 9,79
17.7 1.36004 1.0716 165.9 154.8 9,86
17.8 1.36020 1.0720 167.0 155.8 9,92
17.9 1.36036 1.0724 168.1 156.8 9,99
18.0 1.36053 1.0729 169.3 157.8 10,06
18.1 1.36070 1.0733 170.4 158.8 10,12
18.2 1.36086 1.0738 171.5 159.7 10,19
18.3 1.36102 1.0742 172.6 160.7 10,25
18.4 1.36119 1.0746 173.7 161.6 10,32
18.5 1.36136 1.0751 174.9 162.6 10,39
18.6 1.36152 1.0755 176.0 163.6 10,46
18.7 1.36169 1.0760 177.2 164.6 10,53
18.8 1.36185 1.0764 178.3 165.6 10,59
18.9 1.36201 1.0768 179.4 166.6 10,66
19.0 1.36217 1.0773 180.5 167.6 10,72
19.1 1.36234 1.0777 181.7 168.6 10,80
19.2 1.36251 1.0782 182.8 169.5 10,86
19.3 1.36267 1.0786 183.9 170.5 10,93
19.4 1.36284 1.0791 185.1 171.5 11,00
19.5 1.36301 1.0795 186.3 172.5 11,07
19.6 1.36318 1.0800 187.4 173.5 11,13
19.7 1.36335 1.0804 188.6 174.5 11,21
19.8 1.36351 1.0809 189.7 175.5 11,27
19.9 1.36367 1.0813 190.8 176.5 11,341990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 20
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
20.0 1.36383 1.0817 191.9 177.4 11,40
20.1 1.36400 1.0822 193.1 178.4 11,47
20.2 1.36417 1.0826 194.2 179.4 11,54
20.3 1.36434 1.0831 195.3 180.4 11,60
20.4 1.36451 1.0835 196.5 181.4 11,67
20.5 1.36468 1.0840 197.7 182.3 11,75
20.6 1.36484 1.0844 198.8 183.3 11,81
20.7 1.36501 1.0849 200.0 184.3 11,88
20.8 1.36518 1.0853 201.1 185.3 11,96
20.9 1.36534 1.0857 202.2 186.2 12,01
21.0 1.36550 1.0862 203.3 187.2 12,08
21.1 1.36568 1.0866 204.5 188.2 12,15
21.2 1.36585 1.0871 205.7 189.2 12,22
21.3 1.36601 1.0875 206.8 190.2 12,29
21.4 1.36618 1.0880 207.9 191.1 12,35
21.5 1.36635 1.0884 209.1 192.1 12,42
21.6 1.36652 1.0889 210.3 193.1 12,49
21.7 1.36669 1.0893 211.4 194.1 12,56
21.8 1.36685 1.0897 212.5 195.0 12,63
21.9 1.36702 1.0902 213.6 196.0 12,69
22.0 1.36719 1.0906 214.8 196.9 12,76
22.1 1.36736 1.0911 216.0 198.0 12,83
22.2 1.36753 1.0916 217.2 199.0 12,90
22.3 1.36770 1.0920 218.3 199.9 12,97
22.4 1.36787 1.0925 219.5 200.9 13,04
22.5 1.36804 1.0929 220.6 201.8 13,11
22.6 1.36820 1.0933 221.7 202.8 13,17
22.7 1.36837 1.0938 222.9 203.8 13,24
22.8 1.36854 1.0943 224.1 204.8 13,31
22.9 1.36871 1.0947 225.2 205.8 13,38
23.0 1.36888 1.0952 226.4 206.7 13,45
23.1 1.36905 1.0956 227.6 207.7 13,52
23.2 1.36922 1.0961 228.7 208.7 13,59
23.3 1.36939 1.0965 229.9 209.7 13,66
23.4 1.36956 1.0970 231.1 210.7 13,73
23.5 1.36973 1.0975 232.3 211.6 13,80
23.6 1.36991 1.0979 233.4 212.6 13,87
23.7 1.37008 1.0984 234.6 213.6 13,94
23.8 1.37025 1.0988 235.8 214.6 14,01
23.9 1.37042 1.0993 237.0 215.6 14,08
24.0 1.37059 1.0998 238.2 216.6 14,15
24.1 1.37076 1.1007 239.3 217.4 14,22
24.2 1.37093 1.1011 240.3 218.2 14,28
24.3 1.37110 1.1016 241.6 219.4 14,35
24.4 1.37128 1.1022 243.0 220.5 14,44
24.5 1.37145 1.1026 244.0 221.3 14,50
24.6 1.37162 1.1030 245.0 222.1 14,56
24.7 1.37180 1.1035 246.4 223.2 14,64
24.8 1.37197 1.1041 247.7 224.4 14,72
24.9 1.37214 1.1045 248.7 225.2 14,781990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 21
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
25.0 1.37232 1.1049 249.7 226.0 14,84
25.1 1.37249 1.1053 250.7 226.8 14,90
25.2 1.37266 1.1057 251.7 227.6 14,96
25.3 1.37283 1.1062 253.0 228.7 15,03
25.4 1.37300 1.1068 254.4 229.9 15,11
25.5 1.37317 1.1072 255.4 230.7 15,17
25.6 1.37335 1.1076 256.4 231.5 15,23
25.7 1.37353 1.1081 257.8 232.6 15,32
25.8 1.37370 1.1087 259.1 233.7 15,39
25.9 1.37387 1.1091 260.1 234.5 15,45
26.0 1.37405 1.1095 261.1 235.3 15,51
26.1 1.37423 1.1100 262.5 236.4 15,60
26.2 1.37440 1.1106 263.8 237.5 15,67
26.3 1.37457 1.1110 264.8 238.3 15,73
26.4 1.37475 1.1114 265.8 239.2 15,79
26.5 1.37493 1.1119 267.2 240.3 15,88
26.6 1.37510 1.1125 268.5 241.4 15,95
26.7 1.37528 1.1129 269.5 242.2 16,01
26.8 1.37545 1.1133 270.5 243.0 16,07
26.9 1.37562 1.1138 271.8 244.1 16,15
27.0 1.37580 1.1144 273.2 245.2 16,23
27.1 1.37598 1.1148 274.2 246.0 16,29
27.2 1.37615 1.1152 275.2 246.8 16,35
27.3 1.37632 1.1157 276.5 247.9 16,43
27.4 1.37650 1.1163 277.9 249.0 16,51
27.5 1.37667 1.1167 278.9 249.8 16,57
27.6 1.37685 1.1171 279.9 250.6 16,63
27.7 1.37703 1.1176 281.3 251.6 16,71
27.8 1.37721 1.1182 282.6 252.7 16,79
27.9 1.37739 1.1186 283.6 253.5 16,85
28.0 1.37757 1.1190 284.6 254.3 16,91
28.1 1.37775 1.1195 286.0 255.4 16,99
28.2 1.37793 1.1201 287.3 256.5 17,07
28.3 1.37810 1.1205 288.3 257.3 17,13
28.4 1.37828 1.1209 289.3 258.1 17,19
28.5 1.37846 1.1214 290.7 259.2 17,27
28.6 1.37863 1.1220 292.0 260.3 17,35
28.7 1.37881 1.1224 293.0 261.0 17,41
28.8 1.37899 1.1228 294.0 261.8 17,47
28.9 1.37917 1.1233 295.3 262.9 17,55
29.0 1.37935 1.1239 296.7 264.0 17,63
29.1 1.37953 1.1244 298.1 265.1 17,71
29.2 1.37971 1.1250 299.4 266.1 17,79
29.3 1.37988 1.1254 300.4 266.9 17,85
29.4 1.38006 1.1258 301.4 267.7 17,91
29.5 1.38024 1.1263 302.8 268.8 17,99
29.6 1.38042 1.1269 304.1 269.9 18,07
29.7 1.38060 1.1273 305.1 270.6 18,13
29.8 1.38078 1.1277 306.1 271.4 18,19
29.9 1.38096 1.1282 307.4 272.5 18,261990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 22
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
30.0 1.38114 1.1288 308.8 273.6 18,35
30.1 1.38132 1.1293 310.0 274.5 18,42
30.2 1.38150 1.1298 311.2 275.5 18,49
30.3 1.38168 1.1302 312.4 276.4 18,56
30.4 1.38186 1.1307 313.6 277.3 18,63
30.5 1.38204 1.1312 314.8 278.3 18,70
30.6 1.38222 1.1317 316.0 279.2 18,77
30.7 1.38240 1.1322 317.2 280.2 18,85
30.8 1.38258 1.1327 318.4 281.1 18,92
30.9 1.38276 1.1332 319.6 282.0 18,99
31.0 1.38294 1.1336 320.8 283.0 19,06
31.1 1.38312 1.1341 322.0 283.9 19,13
31.2 1.38330 1.1346 323.2 284.9 19,20
31.3 1.38349 1.1351 324.4 285.8 19,27
31.4 1.38367 1.1356 325.6 286.8 19,35
31.5 1.38385 1.1361 326.8 287.7 19,42
31.6 1.38403 1.1366 328.1 288.6 19,49
31.7 1.38421 1.1371 329.3 289.6 19,56
31.8 1.38440 1.1376 330.5 290.5 19,64
31.9 1.38458 1.1380 331.7 291.5 19,71
32.0 1.38476 1.1385 332.9 292.4 19,78
32.1 1.38494 1.1391 334.2 293.4 19,86
32.2 1.38513 1.1396 335.5 294.4 19,93
32.3 1.38531 1.1401 336.7 295.4 20,00
32.4 1.38550 1.1406 338.0 296.4 20,08
32.5 1.38568 1.1411 339.3 297.3 20,16
32.6 1.38586 1.1416 340.6 298.3 20,24
32.7 1.38605 1.1422 341.9 299.3 20,31
32.8 1.38623 1.1427 343.1 300.3 20,38
32.9 1.38642 1.1432 344.4 301.3 20,46
33.0 1.38660 1.1437 345.7 302.3 20,54
33.1 1.38678 1.1442 346.9 303.2 20,61
33.2 1.38697 1.1447 348.1 304.1 20,68
33.3 1.38715 1.1452 349.3 305.0 20,75
33.4 1.38734 1.1457 350.5 305.9 20,82
33.5 1.38753 1.1461 351.7 306.9 20,90
33.6 1.38771 1.1466 352.9 307.8 20,97
33.7 1.38790 1.1471 354.1 308.7 21,04
33.8 1.38808 1.1476 355.3 309.6 21,11
33.9 1.38827 1.1481 356.5 310.5 21,18
34.0 1.38845 1.1486 357.7 311.4 21,25
34.1 1.38864 1.1491 359.0 312.4 21,33
34.2 1.38882 1.1496 360.3 313.4 21,41
34.3 1.38901 1.1501 361.5 314.3 21,48
34.4 1.38919 1.1506 362.8 315.3 21,55
34.5 1.38938 1.1512 364.1 316.3 21,63
34.6 1.38957 1.1517 365.4 317.3 21,71
34.7 1.38975 1.1522 366.7 318.2 21,79
34.8 1.38994 1.1527 367.9 319.2 21,86
34.9 1.39012 1.1532 369.2 320.2 21,941990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 23
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
35.0 1.39031 1.1537 370.5 321.1 22,01
35.1 1.39050 1.1543 371.8 322.1 22,09
35.2 1.39069 1.1548 373.0 323.0 22,16
35.3 1.39087 1.1553 374.3 324.0 22,24
35.4 1.39106 1.1558 375.6 325.0 22,32
35.5 1.39125 1.1563 376,9 325.9 22,39
35.6 1.39144 1.1568 378.1 326.9 22,45
35.7 1.39163 1.1573 379.4 327.8 22,54
35.8 1.39181 1.1579 380.7 328.8 22,62
35.9 1.39200 1.1584 381.9 329.7 22,69
36.0 1.39219 1.1589 383.2 330.7 22,77
36.1 1.39238 1.1594 384.5 331.6 22,85
36.2 1.39257 1.1599 385.8 332.6 22,92
36.3 1.39276 1.1604 387.0 333.5 22,99
36.4 1.39295 1.1610 388.3 334.5 23,07
36.5 1.39314 1.1615 389.6 335.4 23,15
36.6 1.39332 1.1620 390.9 336.4 23,22
36.7 1.39351 1.1625 392.2 337.3 23,30
36.8 1.39370 1.1630 393.4 338.3 23,37
36.9 1.39389 1.1635 394.7 339.2 23,45
37.0 1.39408 1.1641 396.0 340.2 23,53
37.1 1.39427 1.1646 397.3 341.1 23,60
37.2 1.39446 1.1651 398.6 342.1 23,68
37.3 1.39465 1.1656 399.8 343.0 23,75
37.4 1.39484 1.1661 401.1 344.0 23,83
37.5 1.39504 1.1666 402.4 344.9 23,91
37.6 1.39523 1.1672 403.7 345.9 23,99
37.7 1.39542 1.1677 405.0 346.8 24,06
37.8 1.39561 1.1682 406.2 347.7 24,13
37.9 1.39580 1.1687 407.5 348.7 24,21
38.0 1.39599 1.1692 408.8 349.6 24,29
38.1 1.39618 1.1698 410.1 350.6 24,37
38.2 1.39637 1.1703 411.3 351.5 24,44
38.3 1.39657 1.1708 412.6 352.4 24,51
38.4 1.39676 1.1713 413.9 353.4 24,59
38.5 1.39695 1.1718 415.2 354.3 24,67
38.6 1.39714 1.1723 416.4 355.2 24,74
38.7 1.39733 1.1728 417.7 356.1 24,82
38.8 1.39753 1.1733 419.0 357.1 24,90
38.9 1.39772 1.1739 420.2 358.0 24,97
39.0 1.39791 1.1744 421.5 358.9 25,04
39.1 1.39810 1.1749 422.8 359.8 25,12
39.2 1.39830 1.1754 424.1 360.8 25,20
39.3 1.39849 1.1759 425.3 361.7 25,27
39.4 1.39869 1.1764 426.6 362.6 25,35
39.5 1.39888 1.1770 427.9 363.6 25,42
39.6 1.39907 1.1775 429.2 364.5 25,50
39.7 1.39927 1.1780 430.5 365.4 25,58
39.8 1.39946 1.1785 431.7 366.3 25,65
39.9 1.39966 1.1790 433.0 367.3 25,731990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 24
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
40.0 1.39985 1.1796 434.3 368.2 25,80
40.1 1.40004 1.1801 435.6 369.2 25,88
40.2 1.40024 1.1806 437.0 370.1 25,96
40.3 1.40043 1.1812 438.3 371.1 26,04
40.4 1.40063 1.1817 439.7 372.1 26,12
40.5 1.40083 1.1823 441.0 373.0 26,20
40.6 1.40102 1.1828 442.3 374.0 26,28
40.7 1.40122 1.1833 443.7 374.9 26,36
40.8 1.40141 1.1839 445.0 375.9 26,44
40.9 1.40161 1.1844 446.4 376.9 26,52
41.0 1.40180 1.1850 447.7 377.8 26,60
41.1 1.40200 1.1855 449.0 378.7 26,68
41.2 1.40219 1.1860 450.2 379.6 26,75
41.3 1.40239 1.1865 451.5 380.5 26,83
41.4 1.40259 1.1870 452.8 381.4 26,90
41.5 1.40279 1.1875 454.1 382.3 26,98
41.6 1.40298 1.1881 455.3 383.2 27,05
41.7 1.40318 1.1886 456.6 384.2 27,13
41.8 1.40338 1.1891 457.9 385.1 27,21
41.9 1.40357 1.1896 459.1 386.0 27,28
42.0 1.40377 1.1901 460.4 386.9 27,35
42.1 1.40397 1.1907 461.7 387.8 27,43
42.2 1.40417 1.1912 463.1 388.8 27,52
42.3 1.40436 1.1917 464.4 389.7 27,59
42.4 1.40456 1.1923 465.8 390.7 27,68
42.5 1.40476 1.1928 467.2 391.6 27,76
42.6 1.40496 1.1934 468.5 392.6 27,84
42.7 1.40516 1.1939 469.9 393.5 27,92
42.8 1.40535 1.1945 471.2 394.5 28,00
42.9 1.40555 1.1950 472.6 395.4 28,08
43.0 1.40575 1.1956 473.9 396.4 28,16
43.1 1.40595 1.1961 475.2 397.3 28,23
43.2 1.40615 1.1967 476.6 398.3 28,32
43.3 1.40635 1.1972 477.9 399.2 28,40
43.4 1.40655 1.1977 479.3 400.1 28,48
43.5 1.40675 1.1983 480.6 401.1 28,56
43.6 1.40695 1.1988 481.9 402.0 28,63
43.7 1.40715 1.1994 483.3 402.9 28,72
43.8 1.40735 1.1999 484.6 403.9 28,79
43.9 1.40755 1.2005 486.0 404.8 28,88
44.0 1.40775 1.2010 487.3 405.7 28,95
44.1 1.40795 1.2015 488.6 406.7 29,03
44.2 1.40815 1.2021 490.0 407.6 29,11
44.3 1.40836 1.2026 491.3 408.5 29,19
44.4 1.40856 1.2032 492.7 409.5 29,27
44.5 1.40876 1.2037 494.0 410.4 29,35
44.6 1.40896 1.2042 495.3 411.3 29,43
44.7 1.40916 1.2048 496.7 412.3 29,51
44.8 1.40937 1.2053 498.0 413.2 29,59
44.9 1.40957 1.2059 499.4 414.1 29,671990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 25
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
45.0 1.40977 1.2064 500.7 415.0 29,75
45.1 1.40997 1.2070 502.1 416.0 29,83
45.2 1.41018 1.2076 503.5 417.0 29,92
45.3 1.41038 1.2081 504.9 417.9 30,00
45.4 1.41058 1.2087 506.3 418.9 30,08
45.5 1.41079 1.2093 507.8 419.9 30,17
45.6 1.41099 1.2098 509.2 420.9 30,25
45.7 1.41119 1.2104 510.6 421.8 30,34
45.8 1.41139 1.2110 512.0 422.8 30,42
45.9 1.41160 1.2115 513.4 423.7 30,50
46.0 1.41180 1.2121 514.8 424.7 30,59
46.1 1.41200 1.2127 516.1 425.6 30,66
46.2 1.41221 1.2132 517.5 426.5 30,75
46.3 1.41241 1.2137 518.8 427.5 30,82
46.4 1.41262 1.2143 520.2 428.4 30,91
46.5 1.41282 1.2148 521.5 429.3 30,99
46.6 1.41302 1.2154 522.8 430.2 31,06
46.7 1.41323 1.2159 524.2 431.1 31,15
46.8 1.41343 1.2165 525.5 432.0 31,22
46.9 1.41364 1.2170 526.9 432.9 31,31
47.0 1.41384 1.2175 528.2 433.8 31,38
47.1 1.41405 1.2181 529.6 434.8 31,47
47.2 1.41425 1.2187 531.0 435.7 31,55
47.3 1.41446 1.2192 532.4 436.7 31,63
47.4 1.41466 1.2198 533.8 437.6 31,72
47.5 1.41487 1.2204 535.3 438.6 31,81
47.6 1.41508 1.2210 536.7 439.5 31,89
47.7 1.41528 1.2215 538.1 440.5 31,97
47.8 1.41549 1.2221 539.5 441.4 32,05
47.9 1.41569 1.2227 540.9 442.4 32,14
48.0 1.41590 1.2232 542.3 443.3 32,22
48.1 1.41611 1.2238 543.6 444.2 32,30
48.2 1.41632 1.2243 545.0 445.1 32,38
48.3 1.41652 1.2249 546.3 446.0 32,46
48.4 1.41673 1.2254 547.7 446.9 32,59
48.5 1.41694 1.2260 549.1 447.8 32,63
48.6 1.41715 1.2265 550.4 448.7 32,70
48.7 1.41736 1.2271 551.8 449.7 32,79
48.8 1.41756 1.2276 553.1 450.6 32,86
48.9 1.41777 1.2282 554.5 451.4 32,95
49.0 1.41798 1.2287 555.8 452.3 33,02
49.1 1.41819 1.2293 557.2 453.3 33,11
49.2 1.41840 1.2298 558.6 454.2 33,19
49.3 1.41861 1.2304 560.0 455.1 33,27
49.4 1.41882 1.2310 561.4 456.1 33,36
49.5 1.41903 1.2315 562.8 457.0 33,44
49.6 1.41924 1.2321 564.2 457.9 33,52
49.7 1.41945 1.2327 565.6 458.8 33,61
49.8 1.41966 1.2332 567.0 459.8 33,69
49.9 1.41987 1.2338 568.4 460.7 33,771990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 26
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
50.0 1.42008 1.2344 569.8 461.6 33,86
50.1 1.42029 1.2349 571.2 462.5 33,94
50.2 1.42050 1.2355 572.6 463.5 34,02
50.3 1.42071 1.2361 574.0 464.4 34,10
50.4 1.42092 1.2366 575.4 465.3 34,19
50.5 1.42114 1.2372 576.9 466.2 34,28
50.6 1.42135 1.2378 578.3 467.2 34,36
50.7 1.42156 1.2384 579.7 468.1 34,44
50.8 1.42177 1.2389 581.1 469.0 34,53
50.9 1.42198 1.2395 582.5 469.9 34,61
51.0 1.42219 1.2401 583.9 470.9 34,69
51.1 1.42240 1.2407 585.4 471.8 34,78
51.2 1.42261 1.2413 586.9 472.8 34,87
51.3 1.42283 1.2419 588.3 473.8 34,95
51.4 1.42304 1.2425 589.8 474.7 35,04
51.5 1.42325 1.2431 591.3 475.7 35,13
51.6 1.42346 1.2437 592.8 476.6 35,22
51.7 1.42367 1.2443 594.3 477.6 35,31
51.8 1.42389 1.2449 595.7 478.6 35,39
51.9 1.42410 1.2455 597.2 479.5 35,48
52.0 1.42431 1.2461 598.7 480.5 35,57
52.1 1.42452 1.2466 600.1 481.4 35,65
52.2 1.42474 1.2472 601.5 482.3 35,74
52.3 1.42495 1.2478 602.9 483.2 35,82
52.4 1.42517 1.2483 604.3 484.1 35,91
52.5 1.42538 1.2489 605.8 485.0 35,99
52.6 1.42559 1.2495 607.2 485.9 36,08
52.7 1.42581 1.2500 608.6 486.8 36,16
52.8 1.42602 1.2506 610.0 487.7 36,24
52.9 1.42624 1.2512 611.4 488.6 36,33
53.0 1.42645 1.2518 612.8 489.6 36,41
53.1 1.42666 1.2524 614.3 490.5 36,50
53.2 1.42686 1.2530 615.8 491.4 36,59
53.3 1.42707 1.2536 617.2 492.4 36,67
53.4 1.42727 1.2542 618.7 493.3 36,76
53.5 1.42748 1.2548 620.2 494.3 36,85
53.6 1.42769 1.2554 621.7 495.2 36,94
53.7 1.42789 1.2560 623.2 496.2 37,03
53.8 1.42810 1.2566 624.6 497.1 37,11
53.9 1.42830 1.2571 626.1 498.0 37,20
54.0 1.42851 1.2577 627.6 499.0 37,29
54.1 1.42874 1.2583 629.0 499.9 37,37
54.2 1.42897 1.2589 630.4 500.8 37,45
54.3 1.42919 1.2595 631.8 501.7 37,54
54.4 1.42942 1.2600 633.2 502.6 37,62
54.5 1.42965 1.2606 634.7 503.5 37,71
54.6 1.42988 1.2612 636.1 504.3 37,79
54.7 1.43011 1.2617 637.5 505.2 37,88
54.8 1.43033 1.2623 638.9 506.1 37,96
54.9 1.43056 1.2629 640.3 507.0 38,041990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 27
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
55.0 1.43079 1.2635 641.7 507.9 38,11
55.1 1.43101 1.2640 643.2 508.8 38,22
55.2 1.43123 1.2646 644.6 509.7 38,30
55.3 1.43145 1.2652 646.1 510.7 38,39
55.4 1.43167 1.2658 647.6 511.6 38,48
55.5 1.43189 1.2664 649.1 512.5 38,57
55.6 1.43210 1.2670 650.5 513.4 38,65
55.7 1.43232 1.2676 652.0 514.3 38,74
55.8 1.43254 1.2682 653.5 515.3 38,83
55.9 1.43276 1.2688 654.9 516.2 38,91
56.0 1.43298 1.2694 656.4 517.1 39,00
56.1 1.43320 1.2700 657.9 518.0 39,09
56.2 1.43342 1.2706 659.4 518.9 39,18
56.3 1.43364 1.2712 660.8 519.9 39,26
56.4 1.43386 1.2718 662.3 520.8 39,35
56.5 1.43409 1.2724 663.8 521.7 39,44
56.6 1.43431 1.2730 665.3 522.6 39,53
56.7 1.43453 1.2736 666.8 523.5 39,62
56.8 1.43475 1.2742 668.2 524.4 39,70
56.9 1.43497 1.2748 669.7 525.4 39,79
57.0 1.43519 1.2754 671.2 526.3 39,88
57.1 1.43541 1.2760 672.7 527.2 39,97
57.2 1.43563 1.2766 674.3 528.2 40,06
57.3 1.43586 1.2773 675.8 529.1 40,15
57.4 1.43608 1.2779 677.4 530.1 40,25
57.5 1.43630 1.2785 678.9 531.0 40,34
57.6 1.43652 1.2791 680.4 532.0 40,43
57.7 1.43674 1.2797 682.0 532.9 40,52
57.8 1.43697 1.2804 683.5 533.8 40,61
57.9 1.43719 1.2810 685.1 534.8 40,70
58.0 1.43741 1.2816 686.6 535.7 40,80
58.1 1.43763 1.2822 688.1 536.6 40,88
58.2 1.43786 1.2828 689.6 537.5 40,97
58.3 1.43808 1.2834 691.0 538.4 41,06
58.4 1.43831 1.2840 692.5 539.3 41,14
58.5 1.43854 1.2846 694.0 540.2 41,23
58.6 1.43876 1.2852 695.5 541.1 41,32
58.7 1.43899 1.2858 697.0 542.0 41,41
58.8 1.43921 1.2864 698.4 542.9 41,50
58.9 1.43944 1.2870 699.9 543.8 41,58
59.0 1.43966 1.2876 701.4 544.7 41,67
59.1 1.43989 1.2882 702.9 545.7 41,76
59.2 1.44011 1.2888 704.5 546.6 41,86
59.3 1.44034 1.2895 706.0 547.5 41,95
59.4 1.44056 1.2901 707.6 548.5 42,04
59.5 1.44079 1.2907 709.1 549.4 42,13
59.6 1.44102 1.2913 710.6 550.3 42,22
59.7 1.44124 1.2920 712.2 551.2 42,32
59.8 1.44147 1.2926 713.7 552.2 42,41
59.9 1.44169 1.2932 715.3 553.1 42,501990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 28
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
60.0 1.44192 1.2938 716.8 554.0 42,59
60.1 1.44215 1.2944 718.3 554.9 42,68
60.2 1.44237 1.2950 719.8 555.8 42,77
60.3 1.44260 1.2956 721.2 556.7 42,85
60.4 1.44283 1.2962 722.7 557.6 42,94
60.5 1.44306 1.2968 724.2 558.4 43,03
60.6 1.44328 1.2974 725.7 559.3 43,12
60.7 1.44351 1.2980 727.2 560.2 43,21
60.8 1.44374 1.2986 728.6 561.1 43,29
60.9 1.44396 1.2992 730.1 562.0 43,38
61.0 1.44419 1.2998 731.6 562.8 43,47
61.1 1.44442 1.3004 733.1 563.8 43,56
61.2 1.44465 1.3011 734.7 564.7 43,65
61.3 1.44488 1.3017 736.2 565.6 43,74
61.4 1.44511 1.3023 737.8 566.5 43,84
61.5 1.44533 1.3030 739.4 567.4 43,93
61.6 1.44556 1.3036 740.9 568.4 44,02
61.7 1.44579 1.3042 742.5 569.3 44,12
61.8 1.44602 1.3048 744.0 570.2 44,21
61.9 1.44625 1.3055 745.6 571.1 44,30
62.0 1.44648 1.3061 747.1 572.0 44,39
62.1 1.44671 1.3067 748.6 572.9 44,48
62.2 1.44694 1.3073 750.2 573.8 44,57
62.3 1.44717 1.3080 751.7 574.7 44,66
62.4 1.44740 1.3086 753.3 575.6 44,76
62.5 1.44764 1.3092 754.8 576.5 44,85
62.6 1.44787 1.3098 756.3 577.4 44,94
62.7 1.44810 1.3104 757.9 578.3 45,03
62.8 1.44833 1.3111 759.4 579.2 45,12
62.9 1.44856 1.3117 761.0 580.1 45,21
63.0 1.44879 1.3123 762.5 581.0 45,31
63.1 1.44902 1.3130 764.1 582.0 45,40
63.2 1.44926 1.3136 765.7 582.9 45,49
63.3 1.44949 1.3143 767.3 583.8 45,59
63.4 1.44972 1.3149 768.9 584.8 45,69
63.5 1.44996 1.3156 770.6 585.7 45,79
63.6 1.45019 1.3162 772.2 586.6 45,88
63.7 1.45042 1.3169 773.8 587.6 45,98
63.8 1.45065 1.3175 775.4 588.5 46,07
63.9 1.45089 1.3182 777.0 589.4 46,17
64.0 1.45112 1.3188 778.6 590.4 46,26
64.1 1.45135 1.3195 780.1 591.3 46,35
64.2 1.45159 1.3201 781.7 592.1 46,45
64.3 1.45183 1.3207 783.2 593.0 46,53
64.4 1.45206 1.3213 784.8 593.9 46,63
64.5 1.45230 1.3219 786.3 594.8 46,72
64.6 1.45253 1.3226 787.8 595.7 46,81
64.7 1.45276 1.3232 789.4 596.6 46,90
64.8 1.45300 1.3238 790.9 597.5 46,99
64.9 1.45324 1.3244 792.5 598.3 47,091990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 29
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
65.0 1.45347 1.3251 794.0 599.2 47,18
65.1 1.45371 1.3257 795.6 600.1 47,27
65.2 1.45394 1.3264 797.2 601.1 47,37
65.3 1.45418 1.3270 798.8 602.0 47,46
65.4 1.45441 1.3277 800.4 602.9 47,56
65.5 1.45465 1.3283 802.1 603.8 47,66
65.6 1.45489 1.3290 803.7 604.7 47,75
65.7 1.45512 1.3296 805.3 605.6 47,85
65.8 1.45536 1.3303 806.9 606.6 47,94
65.9 1.45559 1.3309 808.5 607.5 48,04
66.0 1.45583 1.3316 810.1 608.4 48,13
66.1 1.45607 1.3322 811.6 609.3 48,22
66.2 1.45630 1.3328 813.2 610.1 48,32
66.3 1.45654 1.3335 814.8 611.0 48,41
66.4 1.45678 1.3341 816.3 611.9 48,50
66.5 1.45702 1.3347 817.9 612.8 48,60
66.6 1.45725 1.3353 819.4 613.6 48,69
66.7 1.45749 1.3360 820.9 614.5 48,77
66.8 1.45773 1.3366 822.5 615.4 48,87
66.9 1.45796 1.3372 824.1 616.2 48,97
67.0 1.45820 1.3378 825.6 617.1 49,05
67.1 1.45844 1.3385 827.2 618.0 49,15
67.2 1.45868 1.3391 828.8 618.9 49,24
67.3 1.45892 1.3398 830.4 619.8 49,34
67.4 1.45916 1.3404 832.0 620.7 49,43
67.5 1.45940 1.3411 833.7 621.6 49,53
67.6 1.45964 1.3418 835.3 622.5 49,63
67.7 1.45988 1.3424 836.9 623.4 49,73
67.8 1.46012 1.3431 838.5 624.3 49,82
67.9 1.46036 1.3437 840.1 625.2 49,92
68.0 1.46060 1.3444 841.7 626.1 50,01
68.1 1.46084 1.3450 843.4 627.0 50,11
68.2 1.46108 1.3457 845.1 628.0 50,21
68.3 1.46132 1.3464 846.7 628.9 50,31
68.4 1.46156 1.3471 848.4 629.8 50,41
68.5 1.46181 1.3478 850.1 630.8 50,51
68.6 1.46205 1.3484 851.8 631.7 50,61
68.7 1.46229 1.3491 853.5 632.6 50,71
68.8 1.46253 1.3498 855.1 633.5 50,81
68.9 1.46277 1.3505 856.8 634.5 50,91
69.0 1.46301 1.3512 858.5 635.4 51,01
69.1 1.46325 1.3518 860.1 636.3 51,10
69.2 1.46350 1.3525 861.7 637.2 51,20
69.3 1.46374 1.3531 863.3 638.0 51,29
69.4 1.46398 1.3538 864.9 638.9 51,39
69.5 1.46423 1.3544 866.6 639.8 51,49
69.6 1.46447 1.3551 868.2 640.7 51,58
69.7 1.46471 1.3557 869.8 641.6 51,68
69.8 1.46495 1.3564 871.4 642.4 51,78
69.9 1.46520 1.3570 873.0 643.3 51,871990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 30
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
70.0 1.46544 1.3577 874.6 644.2 51,97
70.1 1.46568 1.3583 876.2 645.1 52,06
70.2 1.46593 1.3590 877.8 645.9 52,15
70.3 1.46618 1.3596 879.4 646.8 52,25
70.4 1.46642 1.3603 881.0 647.7 52,35
70.5 1.46667 1.3609 882.7 648.6 52,45
70.6 1.46691 1.3616 884.3 649.4 52,54
70.7 1.46715 1.2622 885.9 650.3 52,64
70.8 1.46740 1.3629 887.5 651.2 52,73
70.9 1.46765 1.3635 889.1 652.1 52,83
71.0 1.46789 1.3642 890.7 652.9 52,92
71.1 1.46814 1.3649 892.4 653.8 53,02
71.2 1.46838 1.3655 894.1 654.7 53,12
71.3 1.46863 1.3662 895.7 655.6 53,22
71.4 1.46888 1.3669 897.4 656.5 53,32
71.5 1.46913 1.3676 899.1 657.4 53,42
71.6 1.46937 1.3683 900.8 658.3 53,52
71.7 1.46962 1.3689 902.5 659.2 53,62
71.8 1.46987 1.3696 904.1 660.1 53,72
71.9 1.47011 1.3703 905.8 661.0 53,82
72.0 1.47036 1.3710 907.5 661.9 53,92
72.1 1.47061 1.3717 909.2 662.8 54,02
72.2 1.47086 1.3723 910.8 663.7 54,12
72.3 1.47110 1.3730 912.5 664.6 54,22
72.4 1.47135 1.3737 914.2 665.5 54,32
72.5 1.47160 1.3744 915.9 666.4 54,42
72.6 1.47185 1.3750 917.5 667.3 54,51
72.7 1.47210 1.3757 919.2 668.2 54,62
72.8 1.47234 1.3764 920.9 669.0 54,72
72.9 1.47259 1.3771 922.5 669.9 54,81
73.0 1.47284 1.3777 924.2 670.8 54,91
73.1 1.47309 1.3784 925.9 671.7 55,01
73.2 1.47334 1.3791 927.6 672.6 55,11
73.3 1.47359 1.3798 929.2 673.5 55,21
73.4 1.47384 1.3804 930.9 674.4 55,31
73.5 1.47409 1.3811 932.6 675.2 55,41
73.6 1.47434 1.3818 934.3 676.1 55,51
73.7 1.47459 1.3825 936.0 677.0 55,61
73.8 1.47484 1.3832 937.6 677.9 55,71
73.9 1.47509 1.3838 939.3 678.8 55,81
74.0 1.47534 1.3845 941.0 679.7 55,91
74.1 1.47559 1.3852 942.7 680.5 56,01
74.2 1.47584 1.3859 944.4 681.4 56,11
74.3 1.47609 1.3866 946.0 682.3 56,21
74.4 1.47634 1.3872 947.7 683.2 56,31
74.5 1.47660 1.3879 949.4 684.0 56,41
74.6 1.47685 1.3886 951.1 684.9 56,51
74.7 1.47710 1.3893 952.8 685.8 56,61
74.8 1.47735 1.3900 954.4 686.7 56,71
74.9 1.47760 1.3906 956.1 687.5 56,811990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 31
▼B
TABELA III
Tabelaqueindicaoteordeaçúcares (1)demostosconcentradosrectificadosemgramasporlitro
e em gramas por quilograma, determinado por meio de um refractómetro graduado quer em
percentagem em massa de sacarose a 20 ºC quer em índice de refracção a 20 ºC. É igualmente
indicada a massa volúmica a 20 ºC.
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
50.0 1.42008 1.2342 627.6 508.5 37,28
50.1 1.42029 1.2348 629.3 509.6 37,38
50.2 1.42050 1.2355 630.9 510.6 37,48
50.3 1.42071 1.2362 632.4 511.6 37,56
50.4 1.42092 1.2367 634.1 512.7 37,66
50.5 1.42113 1.2374 635.7 513.7 37,76
50.6 1.42135 1.2381 637.3 514.7 37,85
50.7 1.42156 1.2386 638.7 515.7 37,94
50.8 1.42177 1.2391 640.4 516.8 38,04
50.9 1.42198 1.2396 641.9 517.8 38,13
51.0 1.42219 1.2401 643.4 518.8 38,22
51.1 1.42240 1.2406 645.0 519.9 38,31
51.2 1.42261 1.2411 646.5 520.9 38,40
51.3 1.42282 1.2416 648.1 522.0 38,50
51.4 1.42304 1.2421 649.6 523.0 38,59
51.5 1.42325 1.2427 651.2 524.0 38,68
51.6 1.42347 1.2434 652.9 525.1 38,78
51.7 1.42368 1.2441 654.5 526.1 38,88
51.8 1.42389 1.2447 656.1 527.1 38,97
51.9 1.42410 1.2454 657.8 528.2 39,07
52.0 1.42432 1.2461 659.4 529.2 39,17
52.1 1.42453 1.2466 661.0 530.2 39,26
52.2 1.42475 1.2470 662.5 531.3 39,35
52.3 1.42496 1.2475 664.1 532.3 39,45
52.4 1.42517 1.2480 665.6 533.3 39,54
52.5 1.42538 1.2486 667.2 534.4 39,63
52.6 1.42560 1.2493 668.9 535.4 39,73
52.7 1.42581 1.2500 670.5 536.4 39,83
52.8 1.42603 1.2506 672.2 537.5 39,93
52.9 1.42624 1.2513 673.8 538.5 40,02
53.0 1.42645 1.2520 675.5 539.5 40,12
53.1 1.42667 1.2525 677.1 540.6 40,22
53.2 1.42689 1.2530 678.5 541.5 40,30
53.3 1.42711 1.2535 680.2 542.6 40,40
53.4 1.42733 1.2540 681.8 543.7 40,50
53.5 1.42754 1.2546 683.4 544.7 40,59
53.6 1.42776 1.2553 685.1 545.8 40,69
53.7 1.42797 1.2560 686.7 546.7 40,79
53.8 1.42819 1.2566 688.4 547.8 40,89
53.9 1.42840 1.2573 690.1 548.9 40,99
54.0 1.42861 1.2580 691.7 549.8 41,09
54.1 1.42884 1.2585 693.3 550.9 41,18
54.2 1.42906 1.2590 694.9 551.9 41,28
54.3 1.42927 1.2595 696.5 553.0 41,37
54.4 1.42949 1.2600 698.1 554.0 41,47
54.5 1.42971 1.2606 699.7 555.1 41,56
54.6 1.42993 1.2613 701.4 556.1 41,66
54.7 1.43014 1.2620 703.1 557.1 41,76
54.8 1.43036 1.2625 704.7 558.2 41,86
54.9 1.43058 1.2630 706.2 559.1 41,951990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 32
(1) O teor de açúcares é expresso em açúcar invertido.
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
55.0 1.43079 1.2635 707.8 560.2 42,04
55.1 1.43102 1.2639 709.4 561.3 42,14
55.2 1.43124 1.2645 711.0 562.3 42,23
55.3 1.43146 1.2652 712.7 563.3 42,33
55.4 1.43168 1.2659 714.4 564.3 42,44
55.5 1.43189 1.2665 716.1 565.4 42,54
55.6 1.43211 1.2672 717.8 566.4 42,64
55.7 1.43233 1.2679 719.5 567.5 42,74
55.8 1.43255 1.2685 721.1 568.5 42,83
55.9 1.43277 1.2692 722.8 569.5 42,93
56.0 1.43298 1.2699 724.5 570.5 43,04
56.1 1.43321 1.2703 726.1 571.6 43,13
56.2 1.43343 1.2708 727.7 572.6 43,23
56.3 1.43365 1.2713 729.3 573.7 43,32
56.4 1.43387 1.2718 730.9 574.7 43,42
56.5 1.43409 1.2724 732.6 575.8 43,52
56.6 1.43431 1.2731 734.3 576.8 43,62
56.7 1.43454 1.2738 736.0 577.8 43,72
56.8 1.43476 1.2744 737.6 578.8 43,81
56.9 1.43498 1.2751 739.4 579.9 43,92
57.0 1.43519 1.2758 741.1 580.9 44,02
57.1 1.43542 1.2763 742.8 582.0 44,12
57.2 1.43564 1.2768 744.4 583.0 44,22
57.3 1.43586 1.2773 745.9 584.0 44,31
57.4 1.43609 1.2778 747.6 585.1 44,41
57.5 1.43631 1.2784 749.3 586.1 44,51
57.6 1.43653 1.2791 751.0 587.1 44,61
57.7 1.43675 1.2798 752.7 588.1 44,71
57.8 1.43698 1.2804 754.4 589.2 44,81
57.9 1.43720 1.2810 756.1 590.2 44,91
58.0 1.43741 1.2818 757.8 591.2 45,01
58.1 1.43764 1.2822 759.5 592.3 45,11
58.2 1.43784 1.2827 761.1 593.4 45,21
58.3 1.43809 1.2832 762.6 594.3 45,30
58.4 1.43832 1.2837 764.3 595.4 45,40
58.5 1.43854 1.2843 766.0 596.4 45,50
58.6 1.43877 1.2850 767.8 597.5 45,61
58.7 1.43899 1.2857 769.5 598.5 45,71
58.8 1.43922 1.2863 771.1 599.5 45,80
58.9 1.43944 1.2869 772.9 600.6 45,91
59.0 1.43966 1.2876 774.6 601.6 46,01
59.1 1.43988 1.2882 776.3 602.6 46,11
59.2 1.44011 1.2889 778.1 603.7 46,22
59.3 1.44034 1.2896 779.8 604.7 46,32
59.4 1.44057 1.2902 781.6 605.8 46,43
59.5 1.44079 1.2909 783.3 606.8 46,53
59.6 1.44102 1.2916 785.2 607.9 46,64
59.7 1.44124 1.2921 786.8 608.9 46,74
59.8 1.44147 1.2926 788.4 609.9 46,83
59.9 1.44169 1.2931 790.0 610.9 46,931990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 33
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
60.0 1.44192 1.2936 791.7 612.0 47,03
60.1 1.44215 1.2942 793.3 613.0 47,12
60.2 1.44238 1.2949 795.2 614.1 47,23
60.3 1.44260 1.2956 796.9 615.1 47,34
60.4 1.44283 1.2962 798.6 616.1 47,44
60.5 1.44305 1.2969 800.5 617.2 47,55
60.6 1.44328 1.2976 802.2 618.2 47,65
60.7 1.44351 1.2981 803.9 619.3 47,75
60.8 1.44374 1.2986 805.5 620.3 47,85
60.9 1.44397 1.2991 807.1 621.3 47,94
61.0 1.44419 1.2996 808.7 622.3 48,04
61.1 1.44442 1.3002 810.5 623.4 48,14
61.2 1.44465 1.3009 812.3 624.4 48,25
61.3 1.44488 1.3016 814.2 625.5 48,36
61.4 1.44511 1.3022 815.8 626.5 48,46
61.5 1.44534 1.3029 817.7 627.6 48,57
61.6 1.44557 1.3036 819.4 628.6 48,67
61.7 1.44580 1.3042 821.3 629.7 48,79
61.8 1.44603 1.3049 823.0 630.7 48,89
61.9 1.44626 1.3056 824.8 631.7 48,99
62.0 1.44648 1.3062 826.6 632.8 49,10
62.1 1.44672 1.3068 828.3 633.8 49,20
62.2 1.44695 1.3075 830.0 634.8 49,30
62.3 1.44718 1.3080 831.8 635.9 49,40
62.4 1.44741 1.3085 833.4 636.9 49,50
62.5 1.44764 1.3090 835.1 638.0 49,60
62.6 1.44787 1.3095 836.8 639.0 49,71
62.7 1.44810 1.3101 838.5 640.0 49,81
62.8 1.44833 1.3108 840.2 641.0 49,91
62.9 1.44856 1.3115 842.1 642.1 50,02
63.0 1.44879 1.3121 843.8 643.1 50,12
63.1 1.44902 1.3128 845.7 644.2 50,23
63.2 1.44926 1.3135 847.5 645.2 50,34
63.3 1.44949 1.3141 849.3 646.3 50,45
63.4 1.44972 1.3148 851.1 647.3 50,56
63.5 1.44995 1.3155 853.0 648.4 50,67
63.6 1.45019 1.3161 854.7 649.4 50,77
63.7 1.45042 1.3168 856.5 650.4 50,88
63.8 1.45065 1.3175 858.4 651.5 50,99
63.9 1.45088 1.3180 860.0 652.5 51,08
64.0 1.45112 1.3185 861.6 653.5 51,18
64.1 1.45135 1.3190 863.4 654.6 51,29
64.2 1.45158 1.3195 865.1 655.6 51,39
64.3 1.45181 1.3201 866.9 656.7 51,49
64.4 1.45205 1.3208 868.7 657.7 51,60
64.5 1.45228 1.3215 870.6 658.8 51,71
64.6 1.45252 1.3221 872.3 659.8 51,81
64.7 1.45275 1.3228 874.1 660.8 51,92
64.8 1.45299 1.3235 876.0 661.9 52,03
64.9 1.45322 1.3241 877.8 662.9 52,141990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 34
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
65.0 1.45347 1.3248 879.7 664.0 52,25
65.1 1.45369 1.3255 881.5 665.0 52,36
65.2 1.45393 1.3261 883.2 666.0 52,46
65.3 1.45416 1.3268 885.0 667.0 52,57
65.4 1.45440 1.3275 886.9 668.1 52,68
65.5 1.45463 1.3281 888.8 669.2 52,79
65.6 1.45487 1.3288 890.6 670.2 52,90
65.7 1.45510 1.3295 892.4 671.2 53,01
65.8 1.45534 1.3301 894.2 672.3 53,12
65.9 1.45557 1.3308 896.0 673.3 53,22
66.0 1.45583 1.3315 898.0 674.4 53,34
66.1 1.45605 1.3320 899.6 675.4 53,44
66.2 1.45629 1.3325 901.3 676.4 53,54
66.3 1.45652 1.3330 903.1 677.5 53,64
66.4 1.45676 1.3335 904.8 678.5 53,75
66.5 1.45700 1.3341 906.7 679.6 53,86
66.6 1.45724 1.3348 908.5 680.6 53,96
66.7 1.45747 1.3355 910.4 681.7 54,08
66.8 1.45771 1.3361 912.2 682.7 54,18
66.9 1.45795 1.3367 913.9 683.7 54,29
67.0 1.45820 1.3374 915.9 684.8 54,40
67.1 1.45843 1.3380 917.6 685.8 54,51
67.2 1.45867 1.3387 919.6 686.9 54,62
67.3 1.45890 1.3395 921.4 687.9 54,73
67.4 1.45914 1.3400 923.1 688.9 54,83
67.5 1.45938 1.3407 925.1 690.0 54,95
67.6 1.45962 1.3415 927.0 691.0 55,06
67.7 1.45986 1.3420 928.8 692.1 55,17
67.8 1.46010 1.3427 930.6 693.1 55,28
67.9 1.46034 1.3434 932.6 694.2 55,40
68.0 1.46060 1.3440 934.4 695.2 55,50
68.1 1.46082 1.3447 936.2 696.2 55,61
68.2 1.46106 1.3454 938.0 697.2 55,72
68.3 1.46130 1.3460 939.9 698.3 55,83
68.4 1.46154 1.3466 941.8 699.4 55,94
68.5 1.46178 1.3473 943.7 700.4 56,06
68.6 1.46202 1.3479 945.4 701.4 56,16
68.7 1.46226 1.3486 947.4 702.5 56,28
68.8 1.46251 1.3493 949.2 703.5 56,38
68.9 1.46275 1.3499 951.1 704.6 56,50
69.0 1.46301 1.3506 953.0 705.6 56,61
69.1 1.46323 1.3513 954.8 706.6 56,72
69.2 1.46347 1.3519 956.7 707.7 56,83
69.3 1.46371 1.3526 958.6 708.7 56,94
69.4 1.46396 1.3533 960.6 709.8 57,06
69.5 1.46420 1.3539 962.4 710.8 57,17
69.6 1.46444 1.3546 964.3 711.9 57,28
69.7 1.46468 1.3553 966.2 712.9 57,39
69.8 1.46493 1.3560 968.2 714.0 57,51
69.9 1.46517 1.3566 970.0 715.0 57,621990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 35
▼B
Sacarose
% (m/m)Índice de
refracção a
20 ºCMassa volúmica
a2 0º CAçúcares em
g/lAçúcares em
g/kgTítulo
alcoométrico
% vol. 20 ºC
70.0 1.46544 1.3573 971.8 716.0 57,72
70.1 1.46565 1.3579 973.8 717.1 57,84
70.2 1.46590 1.3586 975.6 718.1 57,95
70.3 1.46614 1.3593 977.6 719.2 58,07
70.4 1.46639 1.3599 979.4 720.2 58,18
70.5 1.46663 1.3606 981.3 721.2 58,29
70.6 1.46688 1.3613 983.3 722.3 58,41
70.7 1.46712 1.3619 985.2 723.4 58,52
70.8 1.46737 1.3626 987.1 724.4 58,63
70.9 1.46761 1.3633 988.9 725.4 58,74
71.0 1.46789 1.3639 990.9 726.5 58,86
71.1 1.46810 1.3646 992.8 727.5 58,97
71.2 1.46835 1.3653 994.8 728.6 59,09
71.3 1.46859 1.3659 996.6 729.6 59,20
71.4 1.46884 1.3665 998.5 730.7 59,31
71.5 1.46908 1.3672 1 000.4 731.7 59,42
71.6 1.46933 1.3678 1 002.2 732.7 59,53
71.7 1.46957 1.3685 1 004.2 733.8 59,65
71.8 1.46982 1.3692 1 006.1 734.8 59,76
71.9 1.47007 1.3698 1 008.0 735.9 59,88
72.0 1.47036 1.3705 1 009.9 736.9 59,99
72.1 1.47056 1.3712 1 012.0 738.0 60,11
72.2 1.47081 1.3718 1 013.8 739.0 60,22
72.3 1.47106 1.3725 1 015.7 740.0 60,33
72.4 1.47131 1.3732 1 017.7 741.1 60,45
72.5 1.47155 1.3738 1 019.5 742.1 60,56
72.6 1.47180 1.3745 1 021.5 743.2 60,68
72.7 1.47205 1.3752 1 023.4 744.2 60,79
72.8 1.47230 1.3758 1 025.4 745.3 60,91
72.9 1.47254 1.3765 1 027.3 746.3 61,02
73.0 1.47284 1.3772 1 029.3 747.4 61,14
73.1 1.47304 1.3778 1 031.2 748.4 61,25
73.2 1.47329 1.3785 1 033.2 749.5 61,37
73.3 1.47354 1.3792 1 035.1 750.5 61,48
73.4 1.47379 1.3798 1 037.1 751.6 61,60
73.5 1.47404 1.3805 1 039.0 752.6 61,72
73.6 1.47429 1.3812 1 040.9 753.6 61,83
73.7 1.47454 1.3818 1 042.8 754.7 61,94
73.8 1.47479 1.3825 1 044.8 755.7 62,06
73.9 1.47504 1.3832 1 046.8 756.8 62,18
74.0 1.47534 1.3838 1 048.6 757.8 62,28
74.1 1.47554 1.3845 1 050.7 758.9 62,41
74.2 1.47579 1.3852 1 052.6 759.9 62,52
74.3 1.47604 1.3858 1 054.6 761.0 62,64
74.4 1.47629 1.3865 1 056.5 762.0 62,76
74.5 1.47654 1.3871 1 058.5 763.1 62,87
74.6 1.47679 1.3878 1 060.4 764.1 62,99
74.7 1.47704 1.3885 1 062.3 765.1 63,10
74.8 1.47730 1.3892 1 064.4 766.2 63,23
74.9 1.47755 1.3898 1 066.3 767.2 63,33
75.0 1.47785 1.3905 1 068.3 768.3 63,461990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 36
▼B
3.TÍTULO ALCOOMÉTRICO VOLÚMICO
1. DEFINIÇÃO
O título alcoométrico volúmico é igual ao número de litros de etanol
contidos em 100 litros de vinho, sendo ambos os volumes medidos à
temperatura de 20 ºC. O seu símbolo é «% vol.».
Nota:
Os homólogos do etanol, bem como etanol e os homólogos do
etanol, compreendidos nos ésteres etílicos, estão incluídos no título
alcoométrico, dado que se encontram no destilado.
2. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
2.1. Destilação do vinho alcalinizado por uma suspensão de hidróxido de
cálcio. Determinação do título alcoométrico do destilado.
2.2. Método de referência: determinação da massa volúmica do destilado
por picnometria.
2.3.Métodos usuais
2.3.1. Determinação do título alcoométrico do destilado por areometria
2.3.2. Determinação do título alcoométrico do destilado por densometria
por balança hidrostática.
2.3.3. Determinação do título alcoométrico do destilado por refractome-
tria.
Nota:Para exprimir o título alcoométrico a partir da massa volúmica do
destilado, utilizar as tabelas práticas I, II, II, dadas no anexo II do
presente capítulo. Estas foram calculadas a partir da tabela alcoomé-
trica internacional publicada em 1972 pela organização internacional
de metrologia legal na sua recomendação n.
o22 e adoptada pela OIV
(Assembleia geral de 1974).
Na tabela I é dada a equação geral que relaciona o título alcoomé-
trico volumétrico e a massa volúmica das misturas hidroalcoólicas
em função da temperatura.
3. OBTENÇÃO DO DESTILADO
3.1.Aparelhagem
3.1.1. Aparelho de destilação que inclui:
— um balão de um litro de capacidade, de esmerilagem normali-
zada,
— uma coluna rectificadora de, aproximadamente, 20 cm de altura
ou qualquer dispositivo destinado a evitar o arrastamento,
— uma fonte de calor: qualquer pirogenização das matérias extrac-
tivas deve ser evitada com dispositivo apropriado,
— um refrigerante terminado por um tubo delgado que conduza o
destilado ao fundo do balão graduado receptor, contendo alguns
mililitros de água.
3.1.2. Aparelho de arrastamento pelo vapor de água, que inclui:
1. Um gerador de vapor de água.
2. Um borbulhador,3. Uma coluna rectificadora.4. Um refrigerante.
Pode ser utilizado qualquer modelo de aparelho de destilação ou
qualquer aparelho de arrastamento pelo vapor de água, desde que
satisfaça o seguinte ensaio:
Destilar cinco vezes sucessivas uma mistura hidroalcoólica com um
título alcoométrico de 10 % vol. O destilado deve apresentar um
título alcoométrico de, pelo menos, 9,9 vol. depois da quinta desti-
lação, ou seja, não deve ocorrer uma perda de álcool superior a
0,02 vol. no decurso de uma destilação.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 37
▼B
3.2.Reagentes
3.2.1. Suspensão de hidróxido de cálcio 2 M
Obtida deitando, com cuidado, 1 litro de água quente (60 — 70 ºC)
sobre 120 g de cal viva CaO.
3.3.Preparação da amostra
Aos vinhos novos e espumantes é previamente retirada a maior
quantidade possível do seu dióxido de carbono, através de agitação
de 250 — 300 ml de vinho num frasco de 500 ml.
3.4.Modo operatório
Tomar, por meio de balão graduado, um volume de 200 ml de vinho.
Anotar a temperatura do vinho.
Deitá-lo no balão do aparelho de destilação ou no borbulhador do
aparelho de arrastamento por vapor de água. Lavar quatro vezes o
balão graduado com 5 ml de água que se adiciona ao balão ou ao
borbulhador. Juntar 10 ml de hidróxido de cálcio 2 M e alguns frag-
mentos de uma matéria porosa inerte (pedra-pomes) no caso da
destilação.
Recolher o destilado no balão graduado de 200 ml utilizado na
medição do vinho.
Recolher um volume igual a, aproximadamente, três quartos de
volume inicial no caso de destilação e recolher 198 — 199 ml de
destilado no caso do arrastamento por vapor de água. Completar até
200 ml com água destilada, após o destilado estar a uma temperatura
idêntica à inicial, com uma aproximação de ± 2 ºC.
Homogeneizar com cuidado, por meio de um movimento circular.
Nota:
No caso de vinhos especialmente ricos em iões amoniacais, redes-
tilar, eventualmente, o destilado nas condições acima descritas,
substituindo a suspensão de hidróxido de cálcio por 1 ml de ácido
sulfúrico a 10 % (v/v).
4. MÉTODOS DE REFERÊNCIA
Determinação do título alcoométrico do destilado por picnometria.
4.1.Aparelhagem
4.1.1. Utilizar o picnómetro calibrado como indicado no capítulo «Massa
volúmica».
4.2.Modo operatório
Proceder à determinação da massa volúmica aparente do destilado a
t ºC, (3.4.) como indicado no capítulo 1 «Massa volúmica» em 4.3.1
e 4.3.2, ou seja ρtesta massa volúmica.
4.3.Expressão dos resultados
4.3.1. Modo de cálculo
Exprimir o título alcoométrico a 20 ºC por meio da tabela I. Na
tabela, procurar na linha horizontal correspondente à temperatura T
(expresso em número inteiro), imediatamenteinferior a t ºC, a menor
massa volúmica superior a ρt. Utilizar a diferença tabular lida por
baixo desta massa volúmica para calcular a massa volúmica ρta
esta temperatura T.
Na linha desta temperatura T procurar a massa volúmica ρ′imedia-
tamente superior a ρe calcular a diferença entre estas duas massas
volúmicas ρeρ′. Esta diferença é dividida pela diferença tabular
lida à direita da massa volúmica ρ′. O quociente dá a parte decimal
do título alcoométrico, enquanto a parte inteira deste título é indi-
cada no cimo da coluna em que se encontra a massa volúmica ρ′.
É dado um exemplo de cálculo do título alcoométrico no anexo I do
presente capítulo.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 38
▼B
Nota:
Esta correcção da temperatura foi introduzida num programa e pode,
eventualmente, ser efectuada automaticamente.
4.3.2. Repetibilidade (r):
r = 0,10 % vol.
4.3.3. Reprodutibilidade (R):
R = 0,19 % vol.
5. MÉTODOS USUAIS
5.1.Areometria
5.1.1. Aparelhagem
5.1.1.1. Alcoómetro
O alcoómetro deve responder às especificações para aparelhos da
classe I ou da classe II definidas na recomendação internacional
n.o44 «Alcoómetros e areómetros para álcool» da OIML (Organi-
zação Internacional de Metrologia Legal).
5.1.1.2. Termómetro graduado em graus e 1/10 de grau de 0 ºC a 40 ºC,
verificado com uma aproximação de 1/20.
5.1.1.3. Proveta cilíndrica de 36 m de diâmetro e 320 mm de altura, mantida
na vertical por meio de um suporte de parafusos niveladores.
5.1.2. Modo operatório
Deitar o destilado (3.4.) na proveta cilíndrica. Mantê-la bem vertical.
Introduzir o termómetro e o alcoómetro. A leitura do termómetro é
feita um minuto depois de se ter agitado para obter a estabilização e
homogeneidade de temperatura da proveta, do termómetro, do alcoó-
metro e do destilado. Retirar o termómetro e ler o título
alcoométrico aparente depois de um minuto de repouso. Fazer pelo
menos três leituras por meio de uma lupa. O título aparente medido
a t ºC será corrigido na acção da temperatura por meio da tabela II.
É necessário que a temperatura do líquido seja pouco diferente da
temperatura ambiente (5 ºC de diferença no máximo).
5.2.Densimetria por balança hidrostática
5.2.1. Aparelhagem
5.2.1.1. Utilizar a balança hidrostática como é indicado no capítulo «Massa
volúmica».
5.2.2. Modo operatório
Proceder à determinação da massa volúmica aparente a t ºC do desti-
lado como é indicado no capítulo «Massa volúmica» em 5.2.2.
5.2.3. Expressão dos resultados
Exprimir o título alcoométrico a 20 ºC, segundo as indicações de
4.3.1. por meio da tabela I, caso o flutuador seja de vidro pyrexou
da tabela III, caso o flutuador seja de vidro vulgar.
5.3.Refractometria
5.3.1. Aparelhagem
5.3.1.1. Refractómetro que permita a medição dos índices de refracção
compreendidos entre 1,330 e 1,346.
Consoante o tipo de aparelho, as medições são feitas:
— quer a 20 ºC, por meio de um dispositivo adequado,
— quer à temperatura ambiente t ºC, medida por meio de um termó-
metro que a permita determinar com uma aproximação de, pelo
menos, 0,05 ºC. É fornecida com o aparelho uma tabela de
correcção da temperatura.
5.3.2. Modo operatório
A medição do índice de refracção é efectuada no destilado de vinho
(3.4.), segundo o modo operatório prescrito para o tipo de aparelho
utilizado.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 39
▼B
5.3.3. Expressão dos resultados
O índice de refracção a 20 ºC é introduzido na tabela IV de modo a
obter o título alcoométrico.
Nota:
A tabela IV dá a correspondência entre os índices de refracção das
misturas hidroalcoólicas puras e dos destilados de vinho. No caso
dos destilados de vinho, tem em conta as impurezas do destilado
(alcoóis superiores principalmente). A presença de metanol é tradu-
zida por uma diminuição do índice de refracção e, por conseguinte,
do título alcoométrico.
6. EXEMPLO DE CÁLCULO DO TÍTULO ALCOOMÉTRICO DE
UM VINHO
6.1.Picnometria em balança de dois pratos
6.1.1. As constantes do picnómetro foram determinadas e calculadas de
acordo com o indicado no capítulo 1 «Massa volúmica e densidade
relativa» no ponto 6.1.1.
6.1.2. Pesagem do picnómetro cheio de destilado
Exemplo numérico
Tara = picnómetro + destilado a tº C + p ″/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146tº C = 18,90º C
tº C corrigida = 18,70º C
p″ = 2,8074 g
p+m−p ″= massa do destilado a tº C 105,0698 − 2,8074 = 102,2624 g
Massa volúmica aparente a tº C
ρ
t¼pþm/C0p00
volume do picn´ ometro a 20 ºC/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C146ρ18;70ºC¼102;2624
104;0229¼0;983076
6.1.3. Cálculo do título alcoométrico
Consulte-se a tabela de massas volúmicas
aparentes de misturas hidroalcoólicas a
diferentes temperaturas, como indicado
anteriormente./C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Na linha 18º da tabela de massas volú-
micas aparentes, a mais pequena massa
superior à massa observada 0,983076 é
0,98398, na coluna 11 %
A massa volúmica a 18º é:
(98307,6 + 0,7 × 22) 10
−5= 0,98323
0,98398 − 0,98323 = 0,00075
A parte decimal do título alcoométrico é
75/114 = 0,65
O título alcoométrico é:
11,65 % vol.
6.2.Picnometria em balança de prato único
6.2.1. As constantes do picnómetro foram determinadas e calculadas no
capítulo 1 «Massa volúmica e densidade relativa» em 6.2.1.
6.2.2. Pesagem do picnómetro cheio de destilado
Peso do frasco-tara no momento da
determinação (em gramas): T1= 171,9178
Picnómetro cheio de destilado a
20,50º C (em gramas): P2= 167,8438
Variação da pressão do ar: dT = 171,9178 − 171,9160
= + 0,0018
Massa do destilado a 20,50º C: Lt= 167,8438 − (67,6695 + 0,0018)
= 100,17251990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 40
▼B
Massa volúmica aparente do desti-
lado: ρ20;50 ºC¼100;1725
101;8194¼0;983825
6.2.3. Cálculo do título alcoométrico
Consulte-se a tabela de massas volúmicas
aparentes de misturas hidroalcoólicas a
diferentes temperaturas, como indicado
anteriormente./C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Na linha 20º da tabela de massas volú-
micas aparentes, a mais pequena massa
superior à massa observada 0,983825 é
0,98471, na coluna 10 %
A massa volúmica a 20º é:
(98382,5 + 0,50 × 24) 10
−5= 0,983945
0,98471 − 0,983945 = 0,000765
A parte decimal do título alcoométrico é
76,5/119 = 0,64
O título alcoométrico é:
10,64 % vol.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 41
▼B
FÓRMULA QUE PERMITE CALCULAR AS TABELAS ALCOOMÉTRICAS
DAS MISTURAS DE ÁLCOOL ETÍLICO E DE ÁGUA
A massa volúmica « ρ», expressa em quilogramas por metro cúbico (kg/m3), de
uma mistura de álcool etílico e de água à temperatura t, expressa em graus
Celsius, é dada pela fórmula seguinte em função:
— do título mássico p expresso por um número decimal (1),
— da temperatura t expressa em graus Celsius (EIPT 68),
— dos coeficientes numéricos seguintes.
A fórmula é válida para as temperaturas compreendidas entre −20 ºC e + 40 ºC.
Coeficientes numéricos da fórmula
kAk
kg/m3Bk
1 9,982 012 300 · 102− 2,061 851 3 · 10−1kg/(m3· ºC)
2 − 1,929 769 495 · 102− 5,268 254 2 · 10−3kg/(m3·º C2)
3 3,891 238 958 · 1023,613 001 3 · 10−5kg/(m3·º C3)
4 − 1,668 103 923 · 103− 3,895 770 2 · 10−7kg/(m3·º C4)
5 1,352 215 441 · 1047,169 354 0 · 10−9kg/(m3·º C5)
6 − 8,829 278 388 · 104− 9,973 923 1 · 10−11kg/(m3·º C6)
7 3,062 874 042 · 105
8 − 6,138 381 234 · 105
9 7,470 172 998 · 105
10 − 5,478 461 354 · 105
11 2,234 460 334 · 105
12 − 3,903 285 426 · 104
kC1,k
kg/(m3· ºC)C2,k
kg/(m3·º C2)
1 1,693 443 461 530 087 · 10−1− 1,193 013 005 057 010 · 10−2
2 − 1,046 914 743 455 169 · 1012,517 399 633 803 461 · 10−1
3 7,196 353 469 546 523 · 101− 2,170 575 700 536 993
4 − 7,047 478 054 272 792 · 1021,353 034 988 843 029 · 101
5 3,924 090 430 035 045 · 103− 5,029 988 758 547 014 · 101
6 − 1,210 164 659 068 747 · 1041,096 355 666 577 570 · 102
7 2,248 646 550 400 788 · 104− 1,422 753 946 421 155 · 102
8 − 2,605 562 982 188 164 · 1041,080 435 942 856 230 · 102
9 1,852 373 922 069 467 · 104− 4,414 153 236 817 392 · 101
10 − 7,420 201 433 430 137 · 1037,442 971 530 188 783
11 1,285 617 841 998 974 · 103
kC3,k
kg/(m3·º C3)C4,k
kg/(m3·º C4)C5,k
kg/(m3·º C5)
1 − 6,802 995 733 503 803 · 10−44,075 376 675 622 027 · 10−6− 2,788 074 354 782 409 · 10−8
2 1,876 837 790 289 664 · 10−2− 8,763 058 573 471 110 · 10−61,345 612 883 493 354 · 10−8
3 − 2,002 561 813 734 156 · 10−16,515 031 360 099 368 · 10−6
4 1,022 992 966 719 220 − 1,515 784 836 987 210 · 10−6
5 − 2,895 696 483 903 638
6 4,810 060 584 300 675
7 − 4,672 147 440 794 683
8 2,458 043 105 903 461
9 − 5,411 227 621 436 812 · 10−11990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 42
(1) Exemplo: para um título mássico de 12 %: p = 0,12.
▼B
TABELA I
TÍTULO ALCOOMÉTRICO INTERNACIONAL A 20º C
Tabela das massas volúmicas aparentes das misturas hidroalcoólicas — picnómetro em pyrex
Massas volúmicas a tº, corrigidas da pressão do ar
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
01234567891 0 1 1
0º 999,64 1,50 998,14 1,44 996,70 1,40 995,30 1,35 993,95 1,30 992,65 1,24 991,41 1,19 990,22 1,14 989,08 1,10 987,98 1,05 986,93 1,00 985,93 0,95
−0,07 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,01
1º 999,71 1,51 998,20 1,44 996,76 1,40 995,36 1,35 994,01 1,30 992,71 1,24 991,47 1,20 990,27 1,15 989,12 1,11 988,01 1,06 986,95 1,01 985,94 0,97
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01 0,00
2º 999,76 1,51 998,25 1,45 996,80 1,40 995,40 1,35 994,05 1,30 992,75 1,25 991,50 1,20 990,30 1,16 989,14 1,11 988,03 1,07 986,96 1,02 985,94 0,98
−0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,01 0,02
3º 999,79 1,51 998,28 1,45 996,83 1,41 995,42 1,35 994,07 1,30 992,77 1,25 991,52 1,21 990,31 1,16 989,15 1,12 988,03 1,08 986,95 1,03 985,92 1,00
−0,02 −0,02 −0,01 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04
4º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,36 994,08 1,30 992,78 1,26 991,52 1,21 990,31 1,17 989,14 1,13 988,01 1,09 986,92 1,04 985,88 1,00
0,00 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05
5º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,37 994,07 1,31 992,76 1,26 991,50 1,21 990,29 1,17 989,12 1,14 987,98 1,10 986,88 1,05 985,83 1,01
0,01 0,01 0,01 0,02 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,05 0,05 0,06
6º 999,80 1,51 998,29 1,46 996,83 1,41 995,42 1,36 994,06 1,32 992,74 1,27 991,47 1,22 990,25 1,18 989,07 1,14 987,93 1,10 986,83 1,06 985,77 1,03
0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09
7º 999,77 1,51 998,26 1,46 996,80 1,41 995,39 1,37 994,02 1,32 992,70 1,27 991,43 1,23 990,20 1,19 989,01 1,15 987,86 1,11 986,75 1,07 985,68 1,03
0,05 0,04 0,04 0,05 0,05 0,05 0,05 0,06 0,06 0,07 0,08 0,09
8º 999,72 1,50 998,22 1,46 996,76 1,42 995,34 1,37 993,97 1,32 992,65 1,27 991,38 1,24 990,14 1,19 988,95 1,16 987,79 1,12 986,67 1,08 985,59 1,05
0,05 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
9º 999,67 1,51 998,16 1,46 996,70 1,42 995,28 1,37 993,91 1,32 992,59 1,28 991,31 1,24 990,07 1,20 988,87 1,17 987,70 1,13 986,57 1,09 985,48 1,06
0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,09 0,09 0,10 0,11 0,12
10º 999,60 1,51 998,09 1,46 996,63 1,42 995,21 1,37 993,84 1,33 992,51 1,28 991,23 1,25 989,98 1,20 988,78 1,17 987,60 1,14 986,46 1,10 985,36 1,06
0,09 0,09 0,09 0,08 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,12 0,13
11º 999,51 1,51 998,00 1,46 996,54 1,41 995,13 1,38 993,75 1,33 992,42 1,29 991,13 1,25 989,88 1,21 988,67 1,18 987,49 1,15 986,34 1,11 985,23 1,07
0,10 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13 0,13 0,14
12º 999,41 1,50 997,91 1,46 996,45 1,42 995,03 1,38 993,65 1,34 992,31 1,29 991,02 1,25 989,77 1,22 988,55 1,19 987,36 1,15 986,21 1,12 985,09 1,09
0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,14 0,15 0,16
13º 999,30 1,50 997,80 1,46 996,34 1,42 994,92 1,38 993,54 1,34 992,20 1,30 990,90 1,25 989,65 1,23 988,42 1,20 987,22 1,16 986,06 1,13 984,93 1,09
0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16
14º 999,18 1,50 997,68 1,46 996,22 1,43 994,79 1,38 993,41 1,34 992,07 1,30 990,77 1,26 989,51 1,23 988,28 1,21 987,07 1,17 985,90 1,13 984,77 1,11
0,13 0,14 0,14 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16 0,17 0,18
15º 999,05 1,51 997,54 1,46 996,08 1,42 994,66 1,38 993,28 1,35 991,93 1,30 990,63 1,27 989,36 1,24 988,12 1,21 986,91 1,18 985,73 1,14 984,59 1,12
0,15 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,19
16º 998,90 1,50 997,40 1,46 995,94 1,43 994,51 1,38 993,13 1,35 991,78 1,31 990,47 1,27 989,20 1,25 987,95 1,21 986,74 1,19 985,55 1,15 984,40 1,13
0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19 0,20
17º 998,74 1,50 997,24 1,46 995,78 1,43 994,35 1,38 992,97 1,36 991,61 1,31 990,30 1,28 989,02 1,25 987,77 1,22 986,55 1,19 985,36 1,16 984,20 1,14
0,17 0,17 0,17 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22
18º 998,57 1,50 997,07 1,46 995,61 1,42 994,19 1,39 992,80 1,36 991,44 1,32 990,12 1,28 988,84 1,26 987,58 1,23 986,35 1,20 985,15 1,17 983,98 1,14
0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,22
19º 998,39 1,50 996,89 1,46 995,43 1,43 994,00 1,39 992,61 1,36 991,25 1,32 989,93 1,29 988,64 1,26 987,38 1,23 986,15 1,21 984,94 1,10 983,76 1,16
0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24
20º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
01234567891 0 1 1
20º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
0,20 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24
21º 998,00 1,50 996,50 1,46 995,04 1,43 993,61 1,40 992,21 1,36 990,85 1,33 989,52 1,30 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,23 984,47 1,19 983,28 1,18
0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,24 0,26
22º 997,79 1,50 996,29 1,46 994,83 1,43 993,40 1,40 992,00 1,37 990,63 1,33 989,30 1,31 987,99 1,28 986,71 1,25 985,46 1,23 984,23 1,21 983,02 1,18
0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,25
23º 997,57 1,50 996,07 1,47 994,60 1,43 993,17 1,40 991,77 1,37 990,40 1,34 989,06 1,31 987,75 1,28 986,47 1,26 985,21 1,24 983,97 1,20 982,77 1,20
0,24 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,26 0,27 0,29
24º 997,33 1,49 995,84 1,47 994,37 1,43 992,94 1,41 991,53 1,37 990,16 1,34 988,82 1,32 987,50 1,29 986,21 1,26 984,95 1,25 983,70 1,22 982,48 1,20
0,24 0,25 0,24 0,25 0,24 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28
25º 997,09 1,50 995,59 1,46 994,13 1,44 992,69 1,40 991,29 1,38 989,91 1,35 988,56 1,32 987,24 1,29 985,95 1,27 984,68 1,26 983,42 1,22 982,20 1,21
0,25 0,25 0,26 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,28 0,28 0,28 0,30
26º 996,84 1,50 995,34 1,47 993,87 1,43 992,44 1,41 991,03 1,38 989,65 1,35 988,30 1,32 986,98 1,31 985,67 1,27 984,40 1,26 983,14 1,24 981,90 1,22
0,26 0,26 0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,30
27º 996,58 1,50 995,08 1,47 993,61 1,44 992,17 1,41 990,76 1,38 989,38 1,35 988,03 1,33 986,70 1,31 985,39 1,28 984,11 1,27 982,84 1,24 981,60 1,23
0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32
28º 996,31 1,50 994,81 1,47 993,34 1,44 991,90 1,42 990,48 1,38 989,10 1,36 987,74 1,33 986,41 1,31 985,10 1,29 983,81 1,28 982,53 1,25 981,28 1,23
0,28 0,28 0,28 0,29 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32
29º 996,03 1,50 994,53 1,47 993,06 1,45 991,61 1,41 990,20 1,39 988,81 1,36 987,45 1,34 986,11 1,32 984,79 1,29 983,50 1,28 982,22 1,26 980,96 1,24
0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,32 0,33
30º 995,75 1,51 994,24 1,47 992,77 1,45 991,32 1,42 989,90 1,39 988,51 1,37 987,14 1,34 985,80 1,32 984,48 1,30 983,18 1,28 981,90 1,27 980,63 1,25
0,30 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34 0,34
31º 995,45 1,51 993,94 1,47 992,47 1,45 991,02 1,43 989,59 1,39 988,20 1,37 986,83 1,34 985,49 1,33 984,16 1,31 982,85 1,29 981,56 1,27 980,29 1,26
0,31 0,31 0,31 0,32 0,31 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,36
32º 995,14 1,51 993,63 1,47 992,16 1,46 990,70 1,42 989,28 1,40 987,88 1,37 986,51 1,35 985,16 1,33 983,83 1,32 982,51 1,30 981,21 1,28 979,93 1,26
0,31 0,31 0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35
33º 994,83 1,51 993,32 1,48 991,84 1,46 990,38 1,42 988,96 1,41 987,55 1,37 986,18 1,36 984,82 1,34 983,48 1,32 982,16 1,30 980,86 1,28 979,58 1,28
0,32 0,33 0,33 0,33 0,35 0,34 0,35 0,35 0,34 0,35 0,36 0,37
34º 994,51 1,52 992,99 1,48 991,51 1,46 990,05 1,44 988,61 1,40 987,21 1,38 985,83 1,36 984,47 1,33 983,14 1,33 981,81 1,31 980,50 1,29 979,21 1,28
0,33 0,33 0,34 0,35 0,34 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37
35º 994,18 1,52 992,66 1,49 991,17 1,47 989,70 1,43 988,27 1,41 986,86 1,38 985,48 1,36 984,12 1,34 982,78 1,33 981,45 1,31 980,14 1,30 978,84 1,29
0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38
36º 993,84 1,53 992,31 1,49 990,82 1,47 989,35 1,43 987,92 1,41 986,51 1,38 985,13 1,37 983,76 1,34 982,42 1,34 981,08 1,31 979,77 1,31 978,46 1,29
0,35 0,35 0,36 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38 0,37 0,39 0,39
37º 993,49 1,53 991,96 1,50 990,46 1,46 989,00 1,44 987,56 1,41 986,15 1,39 984,76 1,37 983,39 1,35 982,04 1,33 980,71 1,33 979,38 1,31 978,07 1,30
0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39
38º 993,13 1,53 991,60 1,50 990,10 1,47 988,63 1,44 987,19 1,41 985,78 1,39 984,39 1,37 983,02 1,36 981,66 1,34 980,32 1,32 979,00 1,32 977,68 1,31
0,36 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,38 0,39 0,38 0,39 0,40 0,40
39º 992,77 1,54 991,23 1,50 989,73 1,47 988,26 1,45 986,81 1,41 985,40 1,39 984,01 1,38 982,63 1,35 981,28 1,35 979,93 1,33 978,60 1,32 977,28 1,32
0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39 0,39 0,39 0,40 0,39 0,40 0,41
40º 992,40 1,54 990,86 1,51 989,35 1,48 987,87 1,44 986,43 1,42 985,01 1,39 983,62 1,38 982,24 1,36 980,88 1,34 979,54 1,34 978,20 1,33 976,87 1,321990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 43
▼B
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
0 986,93 1,00 985,93 0,95 984,98 0,92 984,06 0,88 983,18 0,84 982,34 0,80 981,54 0,78 980,76 0,75 980,01 0,73 979,28 0,72 978,56 0,70 977,86 0,70
−0,02 −0,01 0,01 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17
1 986,95 1,01 985,94 0,97 984,97 0,92 984,05 0,90 983,15 0,85 982,30 0,83 981,47 0,79 980,68 0,77 979,91 0,75 979,16 0,74 978,42 0,73 977,69 0,72
−0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
2 986,96 1,02 985,94 0,98 984,96 0,94 984,02 0,91 983,11 0,88 982,23 0,84 981,39 0,81 980,58 0,79 979,79 0,77 979,02 0,76 978,26 0,75 977,51 0,74
0,01 0,02 0,04 0,05 0,06 0,07 0,09 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19
3 986,95 1,03 985,92 1,00 984,92 0,95 983,97 0,92 983,05 0,89 982,16 0,86 981,30 0,83 980,47 0,81 979,66 0,79 978,87 0,78 978,09 0,77 977,32 0,77
0,03 0,04 0,04 0,06 0,07 0,09 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20
4 986,92 1,04 985,88 1,00 984,88 0,97 983,91 0,93 982,98 0,91 982,07 0,87 981,20 0,85 980,35 0,83 979,52 0,81 978,71 0,80 977,91 0,79 977,12 0,79
0,04 0,05 0,06 0,07 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,22
5 986,88 1,05 985,83 1,01 984,82 0,98 983,84 0,95 982,89 0,92 981,97 0,89 981,08 0,87 980,21 0,84 979,37 0,83 978,54 0,82 977,72 0,82 976,90 0,80
0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,13 0,14 0,17 0,19 0,21 0,22
6 986,83 1,06 985,77 1,03 984,74 0,99 983,75 0,96 982,79 0,94 981,85 0,90 980,95 0,88 980,07 0,87 979,20 0,85 978,35 0,84 977,51 0,83 976,68 0,83
0,08 0,09 0,09 0,10 0,12 0,13 0,15 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23
7 986,75 1,07 985,68 1,03 984,65 1,00 983,65 0,98 982,67 0,95 981,72 0,92 980,80 0,89 979,91 0,89 979,02 0,86 978,16 0,86 977,30 0,85 976,45 0,85
0,08 0,09 0,11 0,13 0,13 0,14 0,15 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25
8 986,67 1,08 985,59 1,05 984,54 1,02 983,52 0,98 982,54 0,96 981,58 0,93 980,65 0,92 979,73 0,90 978,83 0,88 977,95 0,88 977,07 0,87 976,20 0,87
0,10 0,11 0,12 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26
9 986,57 1,09 985,48 1,06 984,42 1,02 983,40 1,00 982,40 0,98 981,42 0,95 980,47 0,93 979,54 0,92 978,62 0,89 977,73 0,90 976,83 0,89 975,94 0,89
0,11 0,12 0,12 0,14 0,16 0,17 0,18 0,20 0,20 0,23 0,24 0,26
10 986,46 1,10 985,36 1,06 984,30 1,04 983,26 1,02 982,24 0,99 981,25 0,96 980,29 0,95 979,34 0,92 978,42 0,92 977,50 0,91 976,59 0,91 975,68 0,91
0,12 0,13 0,14 0,16 0,16 0,17 0,19 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29
11 986,34 1,11 985,23 1,07 984,16 1,06 983,10 1,02 982,08 1,00 981,08 0,98 980,10 0,96 979,14 0,95 978,19 0,94 977,25 0,93 976,32 0,93 975,39 0,92
0,13 0,14 0,16 0,16 0,18 0,19 0,21 0,22 0,24 0,25 0,27 0,28
12 986,21 1,12 985,09 1,09 984,00 1,06 982,94 1,04 981,90 1,01 980,89 1,00 979,89 0,97 978,92 0,97 977,95 0,95 977,00 0,95 976,05 0,94 975,11 0,95
0,15 0,16 0,16 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28 0,30
13 986,06 1,13 984,93 1,09 983,84 1,08 982,76 1,05 981,71 1,02 980,69 1,01 979,68 0,99 978,69 0,98 977,71 0,97 976,74 0,97 975,77 0,96 974,81 0,96
0,16 0,16 0,18 0,18 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30
14 985,90 1,13 984,77 1,11 983,66 1,08 982,58 1,07 981,51 1,04 980,47 1,02 979,45 1,00 978,45 1,00 977,45 0,98 976,47 0,98 975,49 0,98 975,51 0,98
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,24 0,25 0,26 0,28 0,30 0,32
15 985,73 1,14 984,59 1,12 983,47 1,09 982,38 1,08 981,30 1,05 960,25 1,04 979,21 1,01 978,20 1,01 977,19 1,00 976,19 1,00 975,19 1,00 974,19 1,00
0,18 0,19 0,20 0,22 0,22 0,24 0,24 0,27 0,28 0,30 0,31 0,32
16 985,55 1,15 984,40 1,13 983,27 1,11 982,16 1,08 981,08 1,07 980,01 1,04 978,97 1,04 977,93 1,02 976,91 1,02 975,89 1,01 974,88 1,01 973,87 1,02
0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,33
17 985,36 1,16 984,20 1,14 983,06 1,12 981,94 1,09 980,85 1,08 979,77 1,06 978,71 1,05 977,66 1,04 976,62 1,03 975,59 1,03 974,56 1,02 973,54 1,04
0,21 0,22 0,22 0,23 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,35
18 985,15 1,17 983,98 1,14 982,84 1,13 981,71 1,11 980,60 1,09 979,51 1,07 978,44 1,06 977,38 1,05 976,33 1,05 975,28 1,04 974,24 1,05 973,19 1,05
0,21 0,22 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35
19 984,94 1,18 983,76 1,16 982,60 1,13 981,47 1,12 980,35 1,10 979,25 1,09 978,16 1,07 977,09 1,07 976,02 1,06 974,96 1,06 973,90 1,06 972,84 1,06
0,23 0,24 0,24 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,36
20 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,24 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37
21º 984,47 1,19 983,28 1,18 982,10 1,15 980,95 1,14 978,81 1,12 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,10 975,38 1,09 974,29 1,09 973,20 1,09 972,11 1,09
0,24 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,35 0,36 0,37
22º 984,23 1,21 983,02 1,18 981,84 1,17 980,67 1,15 979,52 1,13 978,39 1,12 977,27 1,12 976,15 1,10 975,05 1,11 973,94 1,10 972,84 1,10 971,74 1,12
0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,35 0,37 0,39
23º 983,97 1,20 982,77 1,20 981,57 1,18 980,39 1,16 979,23 1,15 978,08 1,13 976,95 1,13 975,82 1,12 974,70 1,11 973,59 1,12 972,47 1,12 972,47 1,12
0,27 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40
24º 983,70 1,22 982,48 1,20 981,28 1,18 980,10 1,17 978,93 1,16 977,77 1,15 976,62 1,13 975,49 1,14 974,35 1,13 973,22 1,13 972,09 1,14 970,95 1,14
0,28 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40
25º 983,42 1,22 982,20 1,21 980,99 1,20 979,79 1,18 978,61 1,17 977,44 1,15 976,29 1,15 975,14 1,15 973,99 1,14 972,85 1,15 971,70 1,15 970,55 1,16
0,28 0,30 0,31 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41
26º 983,14 1,24 981,90 1,22 980,68 1,20 979,48 1,19 978,29 1,18 977,11 1,17 975,94 1,16 974,78 1,16 973,62 1,16 972,46 1,16 971,30 1,16 970,14 1,17
0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,42
27º 982,84 1,24 981,60 1,23 980,37 1,21 979,16 1,20 977,96 1,19 976,77 1,18 975,59 1,17 974,42 1,18 973,24 1,17 972,07 1,17 970,90 1,18 969,72 1,18
0,31 0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,38 0,40 0,41 0,43
28º 982,53 1,25 981,28 1,23 980,05 1,22 978,83 1,21 977,62 1,20 976,42 1,19 975,23 1,19 974,04 1,18 972,86 1,19 971,67 1,18 970,49 1,20 969,29 1,20
0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,42 0,43
29º 982,22 1,26 980,96 1,24 979,72 1,23 978,49 1,22 977,27 1,21 976,06 1,20 974,86 1,20 973,66 1,20 972,46 1,19 971,27 1,20 970,07 1,21 968,86 1,22
0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45
30º 981,90 1,27 980,63 1,25 979,38 1,24 978,14 1,23 976,91 1,22 975,69 1,21 974,48 1,22 973,26 1,21 972,05 1,21 970,84 1,21 969,63 1,22 968,41 1,23
0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45
31º 981,56 1,27 980,29 1,26 979,03 1,25 977,78 1,24 976,54 1,23 975,31 1,23 974,08 1,22 972,86 1,22 971,64 1,22 970,42 1,23 969,19 1,23 967,96 1,24
0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,46
32º 981,21 1,28 979,93 1,26 978,67 1,26 977,41 1,25 976,16 1,24 974,92 1,23 973,69 1,23 972,46 1,24 971,22 1,23 969,99 1,24 968,75 1,25 967,50 1,25
0,35 0,35 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,45 0,46
33º 980,86 1,28 979,58 1,28 978,30 1,26 977,04 1,26 975,78 1,25 974,53 1,24 973,29 1,25 972,04 1,24 970,80 1,25 969,55 1,25 968,30 1,26 967,04 1,27
0,36 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47
34º 980,50 1,29 979,21 1,28 977,93 1,27 976,66 1,27 975,39 1,26 974,13 1,25 972,88 1,26 971,62 1,25 970,37 1,26 969,11 1,27 967,84 1,27 966,57 1,29
0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,46 0,46 0,48
35º 980,14 1,30 978,84 1,29 977,55 1,28 976,27 1,27 975,00 1,27 973,73 1,27 972,46 1,26 971,20 1,27 969,93 1,28 968,65 1,27 967,38 1,29 966,09 1,30
0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,45 0,47 0,48
36º 979,77 1,31 978,46 1,29 977,17 1,29 975,88 1,28 974,60 1,28 973,32 1,28 972,04 1,28 970,76 1,28 969,48 1,28 968,20 1,29 966,91 1,30 965,61 1,32
0,39 0,39 0,40 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49
37º 978,38 1,31 978,07 1,30 976,77 1,29 975,48 1,29 974,19 1,29 972,90 1,29 971,61 1,29 970,32 1,29 969,03 1,30 967,73 1,30 966,43 1,31 965,12 1,33
0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50
38º 979,00 1,32 977,68 1,31 976,37 1,30 975,07 1,30 973,77 1,30 972,47 1,30 971,17 1,30 969,87 1,30 968,57 1,31 967,26 1,32 965,94 1,32 964,62 1,34
0,40 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
39º 978,60 1,32 977,28 1,32 975,96 1,31 974,65 1,30 973,35 1,31 972,04 1,31 970,73 1,31 969,42 1,32 968,10 1,32 966,78 1,33 965,45 1,33 964,12 1,36
0,40 0,41 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51
40º 978,20 1,33 976,87 1,32 975,55 1,32 974,23 1,31 972,92 1,32 971,60 1,32 970,28 1,32 968,96 1,33 967,63 1,33 966,30 1,34 964,96 1,35 963,61 1,371990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 44
▼B
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
0 978,56 0,70 977,86 0,70 977,16 0,69 976,47 0,71 975,76 0,71 975,05 0,72 974,33 0,75 973,58 0,77 972,81 0,80 972,01 0,83 971,18 0,87 970,31 0,90
0,14 0,17 0,19 0,22 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,39 0,41
1 978,42 0,73 977,69 0,72 976,97 0,72 976,25 0,73 975,52 0,73 974,79 0,75 974,04 0,77 973,27 0,80 972,47 0,82 971,65 0,86 970,79 0,89 969,90 0,92
0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,37 0,39 0,41
2 978,26 0,75 977,51 0,74 976,77 0,75 976,02 0,75 975,27 0,76 974,51 0,77 973,74 0,79 972,95 0,82 972,13 0,85 971,28 0,88 970,40 0,91 969,49 0,95
0,17 0,19 0,22 0,23 0,26 0,28 0,31 0,33 0,36 0,38 0,40 0,42
3 978,09 0,77 977,32 0,77 976,55 0,76 975,79 0,78 975,01 0,78 974,23 0,80 973,43 0,81 972,62 0,85 971,77 0,87 970,90 0,90 970,00 0,93 969,07 0,98
0,18 0,20 0,22 0,25 0,27 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,40 0,43
4 977,91 0,79 977,12 0,79 976,33 0,79 975,54 0,80 974,94 0,80 973,94 0,82 973,12 0,84 972,28 0,87 971,41 0,89 970,52 0,92 969,60 0,96 968,64 1,00
0,19 0,22 0,23 0,26 0,27 0,30 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44
5 977,72 0,82 976,90 0,80 976,10 0,82 975,28 0,81 974,47 0,83 973,64 0,85 972,79 0,86 971,93 0,89 971,04 0,91 970,13 0,95 969,18 0,98 968,20 1,01
0,21 0,22 0,25 0,26 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44
6 977,51 0,83 976,68 0,83 975,85 0,83 975,02 0,84 974,18 0,85 973,33 0,87 972,46 0,86 971,58 0,91 970,67 0,94 969,73 0,97 968,76 1,00 967,76 1,03
0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44
7 977,30 0,85 976,45 0,85 975,60 0,86 974,74 0,86 973,88 0,87 973,01 0,89 972,12 0,90 971,22 0,93 970,29 0,96 969,33 0,99 968,34 1,02 967,32 1,06
0,23 0,25 0,27 0,28 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,43 0,46
8 977,07 0,87 976,20 0,87 975,33 0,87 974,46 0,89 973,57 0,89 972,68 0,91 971,77 0,92 970,85 0,96 969,89 0,98 968,91 1,00 967,91 1,05 966,86 1,07
0,24 0,26 0,28 0,30 0,31 0,34 0,35 0,38 0,39 0,41 0,44 0,46
9 976,83 0,89 975,94 0,89 975,05 0,89 974,16 0,90 973,26 0,92 972,34 0,92 971,42 0,95 970,47 0,97 969,50 1,00 968,50 1,03 967,47 1,07 966,40 1,09
0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46
10 976,59 0,91 975,68 0,91 974,77 0,91 973,86 0,93 972,93 0,93 972,00 0,95 971,05 0,97 970,08 0,99 969,09 1,02 968,07 1,05 967,02 1,08 965,94 1,12
0,27 0,29 0,30 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47
11 976,32 0,93 975,39 0,92 974,47 0,94 973,53 0,94 972,59 0,95 971,64 0,97 970,67 0,99 969,68 1,01 968,67 1,04 967,63 1,07 966,56 1,09 965,47 1,13
0,27 0,28 0,31 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48
12 976,05 0,94 975,11 0,95 974,16 0,95 973,21 0,96 972,25 0,97 971,28 0,99 970,29 1,01 969,28 1,03 968,25 1,06 967,19 1,08 966,11 1,12 964,99 1,15
0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
13 975,77 0,96 974,81 0,96 973,85 0,97 972,88 0,98 971,90 0,99 970,91 1,01 969,90 1,03 968,87 1,05 967,82 1,08 966,74 1,10 965,64 1,14 964,50 1,17
0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
14 975,49 0,98 974,51 0,98 973,53 0,99 972,54 1,00 971,54 1,01 970,53 1,03 969,50 1,04 968,46 1,07 967,39 1,10 966,29 1,12 965,17 1,16 964,01 1,19
0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49
15 975,19 1,00 974,19 1,00 973,19 1,00 972,19 1,02 971,17 1,03 970,14 1,04 969,10 1,06 968,04 1,09 966,95 1,12 965,83 1,14 964,69 1,17 963,52 1,21
0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46 0,48 0,51
16 974,88 1,01 973,87 1,02 972,85 1,02 971,83 1,03 970,80 1,05 969,75 1,06 968,69 1,08 967,61 1,11 966,50 1,13 965,37 1,16 964,21 1,20 963,01 1,22
0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48 0,50 0,50
17 974,56 1,02 973,54 1,04 972,50 1,04 971,46 1,05 970,41 1,06 969,35 1,08 968,27 1,10 967,17 1,12 966,05 1,16 964,89 1,18 963,71 1,20 962,51 1,24
0,32 0,35 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,52
18 974,24 1,05 973,19 1,05 972,14 1,05 971,09 1,07 970,02 1,08 968,94 1,10 967,84 1,12 966,72 1,14 965,58 1,17 964,41 1,19 963,22 1,23 961,99 1,25
0,34 0,35 0,36 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,52
19 973,90 1,06 972,84 1,06 971,78 1,08 970,70 1,08 969,62 1,10 968,52 1,11 967,41 1,14 966,27 1,16 965,11 1,18 963,93 1,21 962,72 1,25 961,47 1,27
0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,45 0,46 0,47 0,49 0,51 0,52
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,36 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,49 0,50 0,52 0,53
21 973,20 1,09 972,11 1,09 971,02 1,11 969,91 1,12 968,79 1,13 967,66 1,15 966,51 1,16 965,35 1,20 964,15 1,21 962,94 1,25 961,69 1,27 960,42 1,31
0,36 0,37 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54
22 972,84 1,10 971,74 1,12 970,62 1,12 969,50 1,13 968,37 1,15 967,22 1,16 966,06 1,19 964,87 1,21 963,66 1,23 962,43 1,26 961,17 1,29 959,88 1,32
0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,55
23 972,47 1,12 971,35 1,13 970,22 1,14 969,08 1,14 967,94 1,17 966,77 1,18 965,59 1,20 964,39 1,22 963,17 1,25 961,92 1,28 960,64 1,31 959,33 1,33
0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,54 0,55
24 972,09 1,14 970,95 1,14 969,81 1,15 968,66 1,16 967,50 1,18 966,32 1,20 965,12 1,22 963,90 1,24 962,66 1,26 961,40 1,30 960,10 1,32 958,78 1,35
0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55
25 971,70 1,15 970,55 1,16 969,39 1,16 968,23 1,18 967,05 1,20 965,85 1,21 964,64 1,23 963,41 1,26 962,15 1,28 960,87 1,31 959,56 1,33 958,23 1,37
0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,57
26 971,30 1,16 970,14 1,17 968,97 1,18 967,79 1,20 966,59 1,21 965,38 1,23 964,15 1,24 962,91 1,27 961,64 1,30 960,34 1,32 959,02 1,36 957,66 1,38
0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56
27 970,90 1,18 969,72 1,18 968,54 1,20 967,34 1,21 966,13 1,23 964,90 1,24 963,66 1,26 962,40 1,29 961,11 1,31 959,80 1,34 958,46 1,36 957,10 1,40
0,41 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59
28 970,49 1,20 969,29 1,20 968,09 1,21 966,88 1,22 965,66 1,24 964,42 1,26 963,16 1,28 961,88 1,31 960,57 1,33 959,24 1,35 957,89 1,38 956,51 1,41
0,42 0,43 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52 0,53 0,53 0,55 0,56 0,58
29 970,07 1,21 968,86 1,22 967,64 1,23 966,41 1,24 965,17 1,25 963,92 1,28 962,64 1,29 961,35 1,31 960,04 1,35 958,69 1,36 957,33 1,40 955,93 1,42
0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,55 0,55 0,58 0,58
30 969,63 1,22 968,41 1,23 967,18 1,24 965,94 1,26 964,68 1,26 963,42 1,29 962,13 1,31 960,82 1,33 959,49 1,35 958,14 1,39 956,75 1,40 955,35 1,44
0,44 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,57 0,58 0,60
31 969,19 1,23 967,96 1,24 966,72 1,26 965,46 1,27 964,19 1,28 962,91 1,30 961,61 1,32 960,29 1,35 958,94 1,37 957,57 1,40 956,17 1,42 954,75 1,44
0,44 0,46 0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59
32 968,75 1,25 967,50 1,25 966,25 1,27 964,98 1,29 963,69 1,29 962,40 1,32 961,08 1,33 959,75 1,36 958,39 1,39 957,00 1,41 955,59 1,43 954,16 1,46
0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,57 0,57 0,59 0,61
33 968,30 1,26 967,04 1,27 965,77 1,28 964,49 1,30 963,19 1,31 961,88 1,33 960,55 1,35 959,20 1,38 957,82 1,39 956,43 1,43 955,00 1,45 953,55 1,47
0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56 0,59 0,59 0,60
34 967,84 1,27 966,57 1,29 965,28 1,29 963,99 1,31 962,68 1,33 961,35 1,34 960,01 1,37 958,64 1,38 957,26 1,42 955,84 1,43 954,41 1,46 952,95 1,49
0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58 0,58 0,60 0,62
35 967,38 1,29 966,09 1,30 964,79 1,31 963,48 1,32 962,16 1,34 960,82 1,36 959,46 1,38 958,08 1,40 956,68 1,42 955,26 1,45 953,81 1,48 952,33 1,50
0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
36 966,91 1,30 965,61 1,32 964,29 1,32 962,97 1,34 961,63 1,35 960,28 1,37 958,91 1,40 957,51 1,41 956,10 1,44 954,66 1,46 953,20 1,49 951,71 1,51
0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
37 966,43 1,31 965,12 1,33 963,79 1,34 962,45 1,35 961,10 1,37 959,73 1,38 958,35 1,41 956,94 1,43 955,51 1,45 954,06 1,47 952,59 1,50 951,09 1,53
0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63
38 965,94 1,32 964,62 1,34 963,28 1,35 961,93 1,37 960,56 1,38 959,18 1,40 957,78 1,42 956,36 1,44 954,92 1,46 953,46 1,49 951,97 1,51 950,46 1,54
0,49 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
39 965,45 1,33 964,12 1,36 962,76 1,36 961,40 1,38 960,02 1,40 958,62 1,41 957,21 1,43 955,78 1,46 954,32 1,47 952,85 1,50 951,35 1,53 949,82 1,55
0,49 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63 0,64
40 964,96 1,35 963,61 1,37 962,24 1,38 960,86 1,39 959,47 1,41 958,06 1,43 956,63 1,44 955,19 1,47 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54 949,18 1,571990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 45
▼B
TABELA II
TÍTULO ALCOOMÉTRICO INTERNACIONAL A 20º C
Tabela de correcções a efectuar no grau alcoólico aparente para corrigir a acção da temperatura
Adicionar ou subtrair ao grau alcoólico aparente a tº (alcoómetro em vidro vulgar) a correcção abaixo indicada
Títulos alcoométricos aparentes a t ºC
01234567891 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Temperaturas0º
adicionar0,76 0,77 0,82 0,87 0,95 1,04 1,16 1,31 1,49 1,70 1,95 2,26 2,62 3,03 3,49 4,02 4,56
1º 0,81 0,83 0,87 0,92 1,00 1,09 1,20 1,35 1,52 1,73 1,97 2,26 2,59 2,97 3,40 3,87 4,36
2º 0,85 0,87 0,92 0,97 1,04 1,13 1,24 1,38 1,54 1,74 1,97 2,24 2,54 2,89 3,29 3,72 4,17
3º 0,88 0,91 0,95 1,00 1,07 1,15 1,26 1,39 1,55 1,73 1,95 2,20 2,48 2,80 3,16 3,55 3,95
4º 0,90 0,92 0,97 1,02 1,09 1,17 1,27 1,40 1,55 1,72 1,92 2,15 2,41 2,71 3,03 3,38 3,75
5º 0,91 0,93 0,98 1,03 1,10 1,17 1,27 1,39 1,53 1,69 1,87 2,08 2,33 2,60 2,89 3,21 3,54
6º 0,92 0,94 0,98 1,02 1,09 1,16 1,25 1,37 1,50 1,65 1,82 2,01 2,23 2,47 2,74 3,02 3,32
7º 0,91 0,93 0,97 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,45 1,59 1,75 1,92 2,12 2,34 2,58 2,83 3,108º 0,89 0,91 0,94 0,98 1,04 1,11 1,19 1,28 1,39 1,52 1,66 1,82 2,00 2,20 2,42 2,65 2,88
9º 0,86 0,88 0,91 0,95 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,44 1,57 1,71 1,87 2,05 2,24 2,44 2,65
10º 0,82 0,84 0,87 0,91 0,96 1,01 1,08 1,16 1,25 1,35 1,47 1,60 1,74 1,89 2,06 2,24 2,43
11º 0,78 0,79 0,82 0,86 0,90 0,95 1,01 1,08 1,16 1,25 1,36 1,47 1,60 1,73 1,88 2,03 2,20
12º 0,72 0,74 0,76 0,79 0,83 0,88 0,93 0,99 1,07 1,15 1,24 1,34 1,44 1,56 1,69 1,82 1,9613º 0,66 0,67 0,69 0,72 0,76 0,80 0,84 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,38 1,49 1,61 1,7314º 0,59 0,60 0,62 0,64 0,67 0,71 0,74 0,79 0,85 0,91 0,97 1,04 1,12 1,20 1,29 1,39 1,49
15º 0,51 0,52 0,53 0,55 0,58 0,61 0,64 0,68 0,73 0,77 0,83 0,89 0,95 1,02 1,09 1,16 1,24
16º 0,42 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,60 0,63 0,67 0,72 0,77 0,82 0,88 0,94 1,00
17º 0,33 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,46 0,48 0,51 0,55 0,59 0,62 0,67 0,71 0,75
18º 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,45 0,48 0,5119º 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25
Títulos alcoométricos aparentes a t ºC
01234567891 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Temperaturas21º
subtrair0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,19 0,20 0,22 0,23 0,25 0,26
22º 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,44 0,47 0,49 0,5223º 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,54 0,57 0,60 0,63 0,66 0,70 0,74 0,7824º 0,55 0,56 0,58 0,60 0,62 0,64 0,67 0,70 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04
25º 0,69 0,71 0,73 0,76 0,79 0,82 0,85 0,89 0,93 0,97 1,02 1,07 1,13 1,19 1,25 1,3126º 0,85 0,87 0,90 0,93 0,96 1,00 1,04 1,08 1,13 1,18 1,24 1,30 1,36 1,43 1,50 1,57
27º 1,03 1,07 1,11 1,15 1,19 1,23 1,28 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,8428º 1,21 1,25 1,29 1,33 1,38 1,43 1,49 1,55 1,62 1,69 1,77 1,85 1,93 2,02 2,1129º 1,39 1,43 1,47 1,52 1,58 1,63 1,70 1,76 1,84 1,92 2,01 2,10 2,19 2,29 2,39
30º 1,57 1,61 1,66 1,72 1,78 1,84 1,91 1,98 2,07 2,15 2,25 2,35 2,45 2,56 2,67
31º 1,75 1,80 1,86 1,92 1,98 2,05 2,13 2,21 2,30 2,39 2,49 2,60 2,71 2,83 2,94
32º 1,94 2,00 2,06 2,13 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22
33º 2,20 2,27 2,34 2,42 2,50 2,58 2,67 2,77 2,88 2,99 3,12 3,24 3,37 3,51
34º 2,41 2,48 2,56 2,64 2,72 2,81 2,91 3,02 3,13 3,25 3,38 3,51 3,65 3,79
35º 2,62 2,70 2,78 2,86 2,95 3,05 3,16 3,27 3,39 3,51 3,64 3,78 3,93 4,08
36º 2,83 2,91 3,00 3,09 3,19 3,29 3,41 3,53 3,65 3,78 3,91 4,05 4,21 4,37
37º 3,13 3,23 3,33 3,43 3,54 3,65 3,78 3,91 4,04 4,18 4,33 4,49 4,6538º 3,36 3,47 3,57 3,68 3,79 3,91 4,03 4,17 4,31 4,46 4,61 4,77 4,94
39º 3,59 3,70 3,81 3,93 4,05 4,17 4,30 4,44 4,58 4,74 4,90 5,06 5,23
40º 3,82 3,94 4,06 4,18 4,31 4,44 4,57 4,71 4,86 5,02 5,19 5,36 5,531990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 46
▼B
Títulos alcoométricos aparentes a t ºC
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Temperaturas0º
adicionar3,49 4,02 4,56 5,11 5,65 6,16 6,63 7,05 7,39 7,67 7,91 8,07 8,20 8,30 8,36 8,39 8,40
1º 3,40 3,87 4,36 4,86 5,35 5,82 6,26 6,64 6,96 7,23 7,45 7,62 7,75 7,85 7,91 7,95 7,96
2º 3,29 3,72 4,17 4,61 5,05 5,49 5,89 6,25 6,55 6,81 7,02 7,18 7,31 7,40 7,47 7,51 7,533º 3,16 3,55 3,95 4,36 4,77 5,17 5,53 5,85 6,14 6,39 6,59 6,74 6,86 6,97 7,03 7,07 7,094º 3,03 3,38 3,75 4,11 4,48 4,84 5,17 5,48 5,74 5,97 6,16 6,31 6,43 6,53 6,59 6,63 6,66
5º 2,89 3,21 3,54 3,86 4,20 4,52 4,83 5,11 5,35 5,56 5,74 5,89 6,00 6,10 6,16 6,20 6,236º 2,74 3,02 3,32 3,61 3,91 4,21 4,49 4,74 4,96 5,16 5,33 5,47 5,58 5,67 5,73 5,77 5,80
7º 2,58 2,83 3,10 3,36 3,63 3,90 4,15 4,38 4,58 4,77 4,92 5,05 5,15 5,24 5,30 5,34 5,378º 2,42 2,65 2,88 3,11 3,35 3,59 3,81 4,02 4,21 4,38 4,52 4,64 4,74 4,81 4,87 4,92 4,959º 2,24 2,44 2,65 2,86 3,07 3,28 3,48 3,67 3,84 3,99 4,12 4,23 4,32 4,39 4,45 4,50 4,53
10º 2,06 2,24 2,43 2,61 2,80 2,98 3,16 3,33 3,48 3,61 3,73 3,83 3,91 3,98 4,03 4,08 4,11
11º 1,88 2,03 2,20 2,36 2,52 2,68 2,83 2,98 3,12 3,24 3,34 3,43 3,50 3,57 3,62 3,66 3,69
12º 1,69 1,82 1,96 2,10 2,24 2,38 2,51 2,64 2,76 2,87 2,96 3,04 3,10 3,16 3,21 3,25 3,27
13º 1,49 1,61 1,73 1,84 1,96 2,08 2,20 2,31 2,41 2,50 2,58 2,65 2,71 2,76 2,80 2,83 2,8514º 1,29 1,39 1,49 1,58 1,68 1,78 1,88 1,97 2,06 2,13 2,20 2,26 2,31 2,36 2,39 2,42 2,44
15º 1,09 1,16 1,24 1,32 1,40 1,48 1,56 1,64 1,71 1,77 1,83 1,88 1,92 1,96 1,98 2,01 2,03
16º 0,88 0,94 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,36 1,41 1,46 1,50 1,53 1,56 1,58 1,60 1,62
17º 0,67 0,71 0,75 0,80 0,84 0,89 0,94 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,14 1,17 1,18 1,20 1,2118º 0,45 0,48 0,51 0,53 0,56 0,59 0,62 0,65 0,68 0,70 0,72 0,74 0,76 0,78 0,79 0,80 0,81
19º 0,23 0,24 0,25 0,27 0,28 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,40 0,41
Títulos alcoométricos aparentes a t ºC
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Temperaturas21º
subtrair0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,35 0,37 0,38 0,38 0,39 0,39 0,40
22º 0,47 0,49 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,72 0,74 0,75 0,76 0,78 0,79 0,8023º 0,70 0,74 0,78 0,82 0,86 0,90 0,93 0,97 1,01 1,04 1,07 1,10 1,12 1,15 1,17 1,18 1,1924º 0,94 0,99 1,04 1,10 1,15 1,20 1,25 1,29 1,34 1,39 1,43 1,46 1,50 1,53 1,55 1,57 1,59
25º 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,56 1,62 1,68 1,73 1,78 1,83 1,87 1,90 1,94 1,97 1,99
26º 1,43 1,50 1,57 1,65 1,73 1,80 1,87 1,94 2,01 2,07 2,13 2,19 2,24 2,28 2,32 2,35 2,38
27º 1,68 1,76 1,84 1,93 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,41 2,48 2,55 2,61 2,66 2,70 2,74 2,77
28º 1,93 2,02 2,11 2,21 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,76 2,83 2,90 2,98 3,03 3,08 3,13 3,1729º 2,19 2,29 2,39 2,50 2,60 2,70 2,81 2,91 3,00 3,09 3,18 3,26 3,34 3,40 3,46 3,51 3,55
30º 2,45 2,56 2,67 2,78 2,90 3,01 3,12 3,23 3,34 3,44 3,53 3,62 3,70 3,77 3,84 3,90 3,95
31º 2,71 2,83 2,94 3,07 3,19 3,31 3,43 3,55 3,67 3,78 3,88 3,98 4,07 4,15 4,22 4,28 4,33
32º 2,97 3,09 3,22 3,36 3,49 3,62 3,74 3,87 4,00 4,11 4,22 4,33 4,43 4,51 4,59 4,66 4,72
33º 3,24 3,37 3,51 3,65 3,79 3,92 4,06 4,20 4,33 4,45 4,57 4,68 4,79 4,88 4,97 5,04 5,10
34º 3,51 3,65 3,79 3,94 4,09 4,23 4,37 4,52 4,66 4,79 4,91 5,03 5,15 5,25 5,34 5,42 5,49
35º 3,78 3,93 4,08 4,23 4,38 4,53 4,69 4,84 4,98 5,12 5,26 5,38 5,50 5,61 5,71 5,80 5,87
36º 4,05 4,21 4,37 4,52 4,68 4,84 5,00 5,16 5,31 5,46 5,60 5,73 5,86 5,97 6,08 6,17 6,25
37º 4,33 4,49 4,65 4,82 4,98 5,15 5,31 5,48 5,64 5,80 5,95 6,09 6,22 6,33 6,44 6,54 6,6338º 4,61 4,77 4,94 5,12 5,29 5,46 5,63 5,80 5,97 6,13 6,29 6,43 6,57 6,69 6,81 6,92 7,01
39º 4,90 5,06 5,23 5,41 5,59 5,77 5,94 6,12 6,30 6,47 6,63 6,78 6,93 7,06 7,18 7,29 7,39
40º 5,19 5,36 5,53 5,71 5,90 6,08 6,26 6,44 6,62 6,80 6,97 7,13 7,28 7,41 7,54 7,66 7,761990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 47
▼B
TABELA III
TÍTULO ALCOOMÉTRICO INTERNACIONAL A 20º C
Tabela das massas volúmicas aparentes das misturas hidroalcoólicas — aparelhos em vidro vulgar
Massas volúmicas a tº, corrigidas da pressão do ar
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
01234567891 0 1 1
0 999,34 1,52 997,82 1,45 996,37 1,39 994,98 1,35 993,63 1,29 992,34 1,24 991,10 1,18 989,92 1,15 988,77 1,09 987,68 1,05 986,63 1,00 985,63 0,96
−0,09 −0,09 −0,09 −0,08 −0,08 −0,08 −0,07 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02
1 999,43 1,52 997,91 1,45 996,46 1,40 995,06 1,35 993,71 1,29 992,42 1,25 991,17 1,20 989,97 1,15 988,82 1,10 987,72 1,06 986,66 1,01 985,65 0,97
−0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01
2 999,49 1,52 997,97 1,40 996,52 1,40 995,12 1,35 993,77 1,30 992,47 1,25 991,22 1,21 990,01 1,16 988,85 1,11 987,74 1,06 986,68 1,02 985,66 0,98
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 0,00 0,01
3 999,54 1,52 998,02 1,46 996,56 1,40 995,16 1,35 993,81 1,30 992,51 1,26 991,25 1,21 990,04 1,16 988,88 1,12 987,76 1,08 986,68 1,03 985,65 0,99
−0,03 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 0,00 0,01 0,01 0,02
4 999,57 1,52 998,05 1,46 996,59 1,40 995,19 1,36 993,83 1,30 992,53 1,26 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,13 987,75 1,08 986,67 1,04 985,63 1,00
−0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03
5 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,40 995,21 1,36 993,85 1,31 992,54 1,27 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,14 987,74 1,09 986,65 1,05 985,60 1,02
0,00 0,00 0,00 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,03 0,03 0,04 0,06
6 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,41 995,20 1,36 993,84 1,31 992,53 1,27 991,26 1,23 990,03 1,18 988,85 1,14 987,71 1,10 986,61 1,07 985,54 1,02
0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06
7 999,58 1,52 998,06 1,46 996,60 1,41 995,19 1,36 993,83 1,32 992,51 1,27 991,24 1,23 990,01 1,19 988,82 1,15 987,67 1,11 986,56 1,08 985,48 1,04
0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,05 0,05 0,06 0,07 0,07 0,08
8 999,55 1,52 998,03 1,46 996,57 1,41 995,16 1,37 993,79 1,32 992,47 1,28 991,19 1,23 989,96 1,20 988,76 1,16 987,60 1,11 986,49 1,09 985,40 1,05
0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,06 0,06 0,08 0,08
9 999,51 1,52 997,99 1,46 996,53 1,41 995,12 1,37 993,75 1,32 992,43 1,29 991,14 1,24 989,90 1,20 988,70 1,16 987,54 1,13 986,41 1,09 985,32 1,06
0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
10 999,45 1,52 997,93 1,46 996,47 1,41 995,06 1,37 993,69 1,33 992,36 1,29 991,07 1,24 989,83 1,21 988,62 1,17 987,45 1,14 986,31 1,10 985,21 1,07
0,07 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,10 0,11
11 999,38 1,51 997,87 1,46 996,41 1,42 994,99 1,37 993,62 1,33 992,29 1,29 991,00 1,25 989,75 1,22 988,53 1,18 987,35 1,14 986,21 1,11 985,10 1,08
0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13
12 999,29 1,51 997,78 1,46 996,32 1,42 994,90 1,37 993,53 1,33 992,20 1,30 990,90 1,26 989,64 1,22 988,42 1,18 987,24 1,15 986,09 1,12 984,97 1,09
0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,10 0,10 0,10 0,11 0,12 0,13 0,14
13 999,20 1,51 997,69 1,46 996,23 1,42 994,81 1,38 993,43 1,33 992,10 1,30 990,80 1,26 989,54 1,23 988,31 1,19 987,12 1,16 985,96 1,13 984,83 1,10
0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16
14 999,09 1,51 997,58 1,46 996,12 1,42 994,70 1,38 993,32 1,34 991,98 1,30 990,68 1,27 989,41 1,23 988,18 1,20 986,98 1,17 985,81 1,14 984,67 1,11
0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16
15 998,97 1,51 997,46 1,46 996,00 1,42 994,58 1,38 993,20 1,34 991,86 1,31 990,55 1,27 989,28 1,24 988,04 1,20 986,84 1,18 985,66 1,15 984,51 1,12
0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,17 0,17 0,18
16 998,84 1,51 997,33 1,46 995,87 1,42 994,45 1,39 993,06 1,34 991,72 1,31 990,41 1,28 989,13 1,24 987,89 1,22 986,67 1,18 985,49 1,16 984,33 1,13
0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,17 0,17 0,18
17 998,70 1,51 997,19 1,46 995,73 1,42 994,31 1,39 992,92 1,35 991,57 1,31 990,26 1,28 988,98 1,25 987,73 1,22 986,50 1,18 985,32 1,17 984,15 1,14
0,15 0,15 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19
18 998,55 1,51 997,04 1,47 995,57 1,42 994,15 1,39 992,76 1,35 991,41 1,32 990,09 1,28 988,81 1,26 987,55 1,23 986,32 1,19 985,13 1,17 983,96 1,15
0,17 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21
19 998,38 1,50 996,88 1,47 995,41 1,42 993,99 1,39 992,60 1,35 991,25 1,33 989,92 1,29 988,63 1,26 987,37 1,24 986,13 1,20 984,93 1,18 983,75 1,16
0,18 0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23
20 998,20 1,50 996,70 1,47 995,23 1,42 993,81 1,40 992,41 1,35 991,06 1,33 989,73 1,30 988,43 1,27 987,16 1,24 985,92 1,21 984,71 1,19 983,52 1,17
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
01234567891 0 1 1
20 998,20 1,50 996,70 1,47 995,23 1,42 993,81 1,40 992,41 1,35 991,06 1,33 989,73 1,30 988,43 1,27 987,16 1,24 985,92 1,21 984,71 1,19 983,52 1,17
0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,23
21 998,01 1,50 996,51 1,47 995,04 1,42 993,62 1,40 992,22 1,36 990,86 1,33 989,53 1,31 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,22 984,48 1,19 983,29 1,17
0,20 0,20 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24
22 987,81 1,50 996,31 1,46 994,85 1,43 993,42 1,40 992,02 1,36 990,66 1,34 989,32 1,31 988,01 1,28 986,73 1,25 985,48 1,23 984,25 1,20 983,05 1,18
0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,25
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0,21 0,21 0,22 0,22 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26
24 997,39 1,50 995,89 1,47 994,42 1,43 992,99 1,40 991,59 1,37 990,22 1,35 988,87 1,31 987,56 1,29 986,27 1,27 985,00 1,24 983,76 1,22 982,54 1,20
0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,25 0,25 0,26 0,27
25 997,16 1,50 995,66 1,47 994,19 1,43 992,76 1,41 991,35 1,37 989,98 1,35 988,63 1,32 987,31 1,29 986,02 1,27 984,75 1,25 983,50 1,23 982,27 1,21
0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,27 0,27 0,28
26 996,93 1,50 995,43 1,47 993,96 1,44 992,52 1,41 991,11 1,37 989,74 1,35 988,39 1,33 987,06 1,30 985,76 1,28 984,48 1,25 983,23 1,24 981,99 1,22
0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,29
27 996,68 1,50 995,18 1,47 993,71 1,44 992,27 1,41 990,86 1,38 989,48 1,35 988,13 1,33 986,80 1,31 985,49 1,29 984,20 1,26 982,94 1,24 981,70 1,23
0,25 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,29 0,30
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0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31
29 996,17 1,51 994,66 1,48 993,18 1,44 991,74 1,41 990,33 1,39 988,94 1,36 987,58 1,34 986,24 1,32 984,92 1,29 983,63 1,28 982,35 1,26 981,09 1,24
0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32
30 995,90 1,51 994,39 1,48 992,91 1,45 991,46 1,41 990,05 1,39 988,66 1,37 987,29 1,34 985,95 1,32 984,63 1,30 983,33 1,29 982,04 1,27 980,77 1,25
0,29 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,32 0,32 0,32
31 995,61 1,51 994,10 1,48 992,62 1,45 991,17 1,42 989,75 1,39 988,36 1,37 986,99 1,35 985,64 1,33 984,31 1,30 983,01 1,29 981,72 1,27 980,45 1,26
0,29 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34
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0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,33 0,34 0,34
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0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35
34 994,72 1,53 993,19 1,48 991,71 1,45 990,26 1,43 988,83 1,41 987,42 1,38 986,04 1,36 984,68 1,34 983,34 1,32 982,02 1,31 980,71 1,29 979,42 1,28
0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35
35 994,40 1,53 992,87 1,48 991,39 1,46 989,93 1,43 988,50 1,41 987,09 1,38 985,71 1,36 984,35 1,34 983,01 1,33 981,68 1,31 980,37 1,30 979,07 1,29
0,32 0,32 0,33 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37
36 994,08 1,53 992,55 1,49 991,06 1,46 989,60 1,43 988,17 1,41 986,76 1,39 985,37 1,36 984,01 1,35 982,66 1,33 981,33 1,32 980,01 1,31 978,70 1,29
0,33 0,34 0,34 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37
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0,34 0,34 0,35 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37 0,38 0,38 0,38
38 993,41 1,54 991,87 1,50 990,37 1,47 988,90 1,44 987,46 1,41 986,05 1,39 984,66 1,37 983,29 1,36 981,93 1,34 980,59 1,32 979,27 1,32 977,95 1,31
0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39
39 993,06 1,54 991,52 1,51 990,01 1,47 988,54 1,44 987,10 1,41 985,68 1,39 984,29 1,37 982,92 1,36 981,56 1,34 980,22 1,33 978,89 1,33 977,56 1,31
0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,39 0,39 0,39
40 992,71 1,55 991,16 1,51 989,65 1,48 988,17 1,45 986,72 1,42 985,30 1,39 983,91 1,37 982,54 1,36 981,18 1,35 979,83 1,33 978,50 1,33 977,17 1,321990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 48
▼B
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
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−0,03 −0,02 −0,01 0,00 0,02 0,04 0,05 0,07 0,09 0,11 0,13 0,15
1 986,66 1,01 985,65 0,97 984,68 0,93 983,75 0,89 982,86 0,86 982,00 0,82 981,18 0,79 980,39 0,77 979,62 0,75 978,87 0,74 978,13 0,72 977,41 0,72
−0,02 −0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17
2 986,68 1,02 985,66 0,98 984,68 0,94 983,74 0,91 982,83 0,87 981,96 0,84 981,12 0,81 980,31 0,79 979,52 0,77 978,75 0,76 977,99 0,75 977,24 0,74
0,00 0,01 0,02 0,04 0,05 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
3 986,68 1,03 985,65 0,99 984,66 0,96 983,70 0,92 982,78 0,88 981,90 0,86 981,04 0,83 980,21 0,81 979,40 0,79 978,61 0,78 977,83 0,77 977,06 0,76
0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
4 986,67 1,04 985,63 1,00 984,63 0,97 983,66 0,93 982,73 0,90 981,83 0,87 980,96 0,85 980,11 0,83 979,28 0,81 978,47 0,80 977,67 0,79 976,88 0,79
0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,16 0,18 0,20
5 986,65 1,05 985,60 1,02 984,58 0,98 983,60 0,95 982,65 0,91 981,74 0,89 980,85 0,87 979,98 0,84 979,14 0,83 978,31 0,82 977,49 0,81 976,68 0,81
0,04 0,06 0,06 0,07 0,08 0,10 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19 0,21
6 986,61 1,07 985,54 1,02 984,52 0,99 983,53 0,96 982,57 0,93 981,64 0,90 980,74 0,89 979,85 0,86 978,99 0,85 978,14 0,84 977,30 0,83 976,47 0,83
0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,20 0,22
7 986,56 1,08 985,48 1,04 984,44 1,00 983,44 0,97 982,47 0,95 981,52 0,92 980,60 0,90 979,70 0,88 978,82 0,87 977,95 0,85 977,10 0,85 976,25 0,85
0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23
8 986,49 1,09 985,40 1,05 984,35 1,01 983,34 0,98 982,36 0,96 981,40 0,94 980,46 0,92 979,54 0,90 978,64 0,88 977,76 0,87 976,89 0,87 976,02 0,87
0,08 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,15 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24
9 986,41 1,09 985,32 1,06 984,26 1,03 983,23 1,00 982,23 0,97 981,26 0,95 980,31 0,93 979,38 0,92 978,48 0,90 977,56 0,89 976,67 0,89 975,78 0,89
0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 0,16 0,17 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25
10 986,31 1,10 985,21 1,07 984,14 1,04 983,10 1,01 982,09 0,99 981,10 0,96 980,14 0,94 979,20 0,93 978,27 0,92 977,35 0,91 976,44 0,91 975,53 0,91
0,10 0,11 0,12 0,13 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,23 0,25 0,27
11 986,21 1,11 985,10 1,08 984,02 1,05 982,97 1,03 981,94 1,00 980,94 0,97 979,97 0,96 979,01 0,95 978,06 0,94 977,12 0,93 976,19 0,93 975,26 0,92
0,12 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26 0,27
12 986,09 1,12 984,97 1,09 983,88 1,06 982,82 1,04 981,78 1,01 980,77 0,99 979,78 0,98 978,80 0,96 977,84 0,96 976,88 0,95 975,93 0,94 974,99 0,94
0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
13 985,96 1,13 984,83 1,10 983,73 1,07 982,66 1,05 981,61 1,03 980,58 1,00 979,58 0,99 978,59 0,98 977,61 0,97 976,64 0,97 975,67 0,96 974,71 0,96
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29
14 985,81 1,14 984,67 1,11 983,56 1,08 982,48 1,06 981,42 1,04 980,38 1,02 979,36 1,00 978,36 0,99 977,37 0,99 976,38 0,98 975,40 0,98 974,42 0,98
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30
15 985,66 1,15 984,51 1,12 983,39 1,09 982,30 1,07 981,23 1,05 980,18 1,04 979,14 1,02 978,12 1,01 977,11 1,00 976,11 0,99 975,12 1,00 974,12 1,00
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,25 0,26 0,28 0,30 0,31
16 985,49 1,16 984,33 1,13 983,20 1,10 982,10 1,08 981,02 1,06 979,96 1,05 978,91 1,04 977,87 1,02 976,85 1,02 975,83 1,01 974,82 1,01 973,81 1,02
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25 0,27 0,29 0,30 0,31
17 985,32 1,17 984,15 1,14 983,01 1,11 981,90 1,09 980,81 1,08 979,73 1,06 978,67 1,05 977,62 1,04 976,58 1,04 975,54 1,02 974,52 1,02 973,50 1,04
0,19 0,19 0,20 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33
18 985,13 1,17 983,96 1,15 982,81 1,13 981,68 1,11 980,57 1,09 979,48 1,07 978,41 1,06 977,35 1,05 976,30 1,05 975,25 1,04 974,21 1,04 973,17 1,05
0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,34
19 984,93 1,18 983,75 1,16 982,59 1,14 981,45 1,12 980,33 1,10 979,23 1,08 978,15 1,07 977,08 1,07 976,01 1,06 974,94 1,05 973,89 1,06 972,83 1,06
0,22 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,35
20 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,23 0,23 0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
21º 984,48 1,19 983,29 1,17 982,12 1,16 980,96 1,14 979,82 1,13 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,09 975,39 1,09 974,30 1,09 973,21 1,09 972,12 1,09
0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
22 984,25 1,20 983,05 1,18 981,97 1,17 980,70 1,15 979,55 1,14 978,41 1,12 977,29 1,12 976,17 1,10 975,07 1,10 973,97 1,10 972,86 1,10 971,76 1,11
0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37
23 984,01 1,21 982,80 1,19 981,61 1,18 980,43 1,16 979,27 1,15 978,12 1,13 976,99 1,13 975,86 1,12 974,74 1,11 973,63 1,12 972,51 1,12 971,39 1,13
0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38
24 983,76 1,22 982,54 1,20 981,34 1,19 980,15 1,17 978,98 1,16 977,82 1,14 976,68 1,14 975,54 1,13 974,41 1,13 973,28 1,13 972,15 1,14 971,01 1,14
0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39
25 983,50 1,23 982,27 1,21 981,06 1,20 979,86 1,18 978,68 1,17 977,51 1,16 976,36 1,15 975,21 1,15 974,06 1,14 972,92 1,15 971,77 1,15 970,62 1,15
0,27 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39
26 983,23 1,24 981,99 1,22 980,77 1,20 979,57 1,19 978,38 1,18 977,20 1,17 976,03 1,16 974,87 1,16 973,71 1,16 972,55 1,16 971,39 1,16 970,23 1,17
0,29 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,38 0,39 0,41
27 982,94 1,24 981,70 1,23 980,47 1,21 979,26 1,20 978,06 1,19 976,87 1,18 975,69 1,18 974,51 1,17 973,34 1,17 972,17 1,17 921,00 1,18 969,82 1,18
0,29 0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,41
28 982,65 1,25 981,40 1,23 980,17 1,22 978,95 1,21 977,74 1,20 976,54 1,20 975,34 1,19 974,15 1,19 972,96 1,18 971,78 1,18 970,60 1,19 969,41 1,20
0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42
29 982,35 1,26 981,09 1,24 979,85 1,23 978,62 1,22 977,40 1,21 976,19 1,21 974,98 1,20 973,78 1,20 972,58 1,19 971,39 1,19 970,20 1,21 968,99 1,21
0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,40 0,42 0,43
30 982,04 1,27 980,77 1,25 979,52 1,24 978,28 1,23 977,05 1,22 975,83 1,21 974,62 1,21 973,41 1,21 972,20 1,21 970,99 1,21 969,78 1,22 968,56 1,23
0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43
31 981,72 1,27 980,45 1,26 979,19 1,25 977,94 1,24 976,70 1,23 975,47 1,22 974,25 1,22 973,03 1,22 971,81 1,22 970,59 1,23 969,36 1,23 968,13 1,24
0,33 0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45
32 981,39 1,28 980,11 1,26 978,85 1,26 977,59 1,25 976,34 1,24 975,10 1,23 973,87 1,23 972,64 1,23 971,41 1,24 970,17 1,24 968,93 1,25 967,68 1,26
0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45
33 981,05 1,28 979,77 1,27 978,50 1,26 977,24 1,26 975,78 1,25 974,73 1,25 973,48 1,24 972,24 1,24 971,00 1,25 969,75 1,25 968,50 1,27 967,23 1,27
0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45 0,45
34 980,71 1,29 979,42 1,28 978,14 1,27 976,87 1,27 975,60 1,26 974,34 1,26 973,08 1,25 971,83 1,25 970,58 1,26 969,32 1,27 968,05 1,27 966,78 1,29
0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45 0,47
35 980,37 1,30 979,07 1,29 977,78 1,28 976,50 1,28 975,22 1,27 973,95 1,27 972,68 1,26 971,42 1,27 970,15 1,27 968,88 1,28 967,60 1,29 966,31 1,30
0,36 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47
36 980,01 1,31 978,70 1,29 977,41 1,29 976,12 1,28 974,84 1,28 973,56 1,28 972,28 1,28 971,00 1,28 969,72 1,28 968,44 1,29 967,15 1,31 965,84 1,31
0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47
37 979,65 1,32 978,33 1,30 977,03 1,30 975,73 1,29 974,44 1,29 973,15 1,29 971,86 1,29 970,57 1,29 969,28 1,29 967,99 1,30 966,69 1,32 965,37 1,32
0,38 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,48
38 979,27 1,32 977,95 1,31 976,64 1,30 975,34 1,30 974,04 1,30 972,74 1,30 971,44 1,30 970,14 1,30 968,84 1,31 967,53 1,31 966,22 1,33 964,89 1,34
0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,48 0,49
39 978,89 1,33 977,56 1,31 976,25 1,31 974,94 1,31 973,63 1,31 972,32 1,31 971,01 1,31 969,70 1,31 968,39 1,32 967,07 1,33 965,74 1,34 964,40 1,36
0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
40 978,50 1,33 977,17 1,32 975,85 1,32 974,53 1,32 973,21 1,31 971,90 1,32 970,58 1,33 969,25 1,33 967,92 1,33 966,59 1,34 965,25 1,35 963,90 1,371990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 49
▼B
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
0 978,26 0,70 977,56 0,70 976,86 0,69 976,17 0,70 975,47 0,72 974,75 0,72 974,03 0,74 973,29 0,77 972,52 0,80 971,72 0,83 970,89 0,87 970,02 0,90
0,13 0,15 0,17 0,20 0,22 0,24 0,27 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39
1 978,13 0,72 977,41 0,72 976,69 0,72 975,97 0,72 975,25 0,74 974,51 0,75 973,76 0,77 972,99 0,79 972,20 0,83 971,37 0,85 970,52 0,89 969,63 0,93
0,14 0,17 0,19 0,21 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,41
2 977,99 0,75 977,24 0,74 976,50 0,74 975,76 0,75 975,01 0,76 974,25 0,78 973,47 0,79 972,68 0,82 971,86 0,85 971,01 0,87 970,14 0,92 960,22 0,96
0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40
3 977,83 0,77 977,06 0,76 976,30 0,77 975,53 0,77 974,76 0,78 973,98 0,80 973,18 0,82 972,36 0,84 971,52 0,87 970,65 0,89 969,76 0,94 968,82 0,98
0,16 0,18 0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,42
4 977,67 0,79 976,88 0,79 976,09 0,79 975,30 0,79 974,51 0,81 973,70 0,82 972,88 0,84 972,04 0,86 971,18 0,89 970,29 0,92 969,37 0,96 968,40 1,00
0,18 0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,35 0,38 0,40 0,41
5 977,49 0,81 976,68 0,81 975,87 0,81 975,06 0,81 974,25 0,83 973,42 0,84 972,58 0,86 971,71 0,88 970,83 0,92 969,91 0,94 968,97 0,98 967,99 1,02
0,19 0,21 0,23 0,25 0,27 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43
6 977,30 0,83 976,47 0,83 975,64 0,83 974,81 0,84 973,97 0,85 973,12 0,87 972,25 0,88 971,37 0,91 970,46 0,94 969,52 0,96 968,56 1,00 967,56 1,04
0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43
7 976,10 0,85 976,25 0,85 975,40 0,85 974,55 0,86 973,69 0,87 972,82 0,89 971,93 0,91 971,02 0,93 970,09 0,96 969,13 0,98 968,15 1,02 967,13 1,06
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0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,41 0,43 0,45
9 976,67 0,89 975,78 0,89 974,89 0,89 974,00 0,90 973,10 0,91 972,19 0,93 971,26 0,95 970,31 0,98 969,33 1,00 968,33 1,03 967,30 1,06 966,24 1,09
0,23 0,25 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45
10 976,44 0,91 975,53 0,91 974,62 0,91 973,71 0,92 972,79 0,93 971,86 0,95 970,91 0,97 969,94 1,00 968,94 1,02 967,92 1,05 966,87 1,08 965,79 1,11
0,25 0,27 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45
11 976,11 0,93 975,26 0,92 974,34 0,93 973,41 0,94 972,47 0,95 971,52 0,97 970,55 0,99 969,56 1,02 968,54 1,04 967,50 1,07 966,43 1,09 965,34 1,13
0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46
12 975,93 0,94 974,99 0,94 974,05 0,95 973,10 0,96 972,14 0,97 971,17 0,99 970,18 1,01 969,17 1,03 968,14 1,06 967,08 1,09 965,99 1,11 964,88 1,15
0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47
13 975,67 0,96 974,71 0,96 973,75 0,97 972,78 0,98 971,80 0,99 970,81 1,01 969,80 1,02 968,78 1,05 967,73 1,08 966,65 1,11 965,54 1,13 964,41 1,17
0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47
14 975,40 0,98 974,42 0,98 973,44 0,99 972,45 1,00 971,45 1,01 970,44 1,02 969,42 1,04 968,38 1,07 967,31 1,10 966,21 1,12 965,09 1,15 963,94 1,19
0,28 0,30 0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
15 975,12 1,00 974,12 1,00 973,12 1,00 972,12 1,02 971,10 1,03 970,07 1,04 969,03 1,06 967,97 1,09 966,88 1,12 965,76 1,14 964,62 1,17 963,45 1,20
0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49
16 974,82 1,01 973,81 1,02 972,79 1,02 971,77 1,03 970,74 1,05 969,69 1,06 968,63 1,08 967,55 1,11 966,44 1,13 965,31 1,16 964,15 1,19 962,96 1,22
0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,49
17 974,52 1,02 973,50 1,04 972,46 1,04 971,42 1,05 970,37 1,06 969,31 1,08 968,23 1,10 967,13 1,12 966,01 1,15 964,86 1,18 963,68 1,21 962,47 1,24
0,31 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50
18 974,21 1,04 973,17 1,05 972,12 1,06 971,06 1,07 969,99 1,08 968,91 1,10 967,81 1,11 966,70 1,14 965,56 1,17 964,39 1,19 963,20 1,23 961,97 1,26
0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50
19 973,89 1,06 972,83 1,06 971,77 1,07 970,70 1,09 969,61 1,10 968,51 1,11 967,39 1,13 966,26 1,16 965,10 1,18 963,92 1,21 962,71 1,24 961,47 1,28
0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,14 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºTítulo alcoométrico volúmico em %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20º 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,16 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52
21º 973,21 1,09 972,12 1,09 971,03 1,11 969,92 1,11 968,81 1,13 967,68 1,15 966,53 1,17 965,36 1,19 964,17 1,22 962,95 1,24 961,71 1,28 960,43 1,31
0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52
22 972,86 1,10 971,76 1,11 970,65 1,12 969,53 1,13 968,40 1,15 967,25 1,16 966,09 1,19 964,90 1,21 963,69 1,23 962,46 1,26 961,20 1,29 959,91 1,32
0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52 0,53
23 972,51 1,12 971,39 1,13 970,26 1,13 969,13 1,15 967,98 1,16 966,82 1,18 965,64 1,20 964,44 1,23 963,21 1,25 961,96 1,28 960,68 1,30 959,38 1,33
0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54
24 972,15 1,14 971,01 1,14 969,87 1,15 968,72 1,16 967,56 1,18 966,38 1,20 965,18 1,22 963,96 1,24 962,72 1,27 961,45 1,29 960,16 1,32 958,84 1,34
0,38 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54
25 971,77 1,15 970,62 1,15 969,47 1,17 968,30 1,18 967,12 1,19 965,93 1,21 964,72 1,24 963,48 1,26 962,22 1,28 960,94 1,31 959,63 1,33 958,30 1,36
0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55
26 971,39 1,16 970,23 1,17 969,06 1,18 967,88 1,20 966,68 1,21 965,47 1,23 964,24 1,25 962,99 1,27 961,72 1,30 960,42 1,32 959,10 1,35 957,75 1,38
0,39 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,52 0,53 0,55
27 971,00 1,18 969,82 1,18 968,64 1,20 967,44 1,21 966,23 1,22 965,01 1,25 963,76 1,27 962,49 1,28 961,21 1,31 959,90 1,33 958,57 1,37 957,20 1,40
0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56
28 970,60 1,19 969,41 1,20 968,21 1,21 967,00 1,23 965,77 1,24 964,53 1,26 963,27 1,28 961,99 1,30 960,69 1,32 959,37 1,35 958,02 1,38 956,64 1,41
0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,56
29 970,20 1,21 968,99 1,21 967,78 1,23 966,55 1,24 965,31 1,26 964,05 1,27 962,78 1,29 961,49 1,32 960,17 1,34 958,83 1,36 957,47 1,39 956,08 1,43
0,42 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,58
30 969,78 1,22 968,56 1,23 967,33 1,24 966,09 1,25 964,84 1,27 963,57 1,29 962,28 1,31 960,97 1,33 959,64 1,35 958,29 1,38 956,91 1,41 955,50 1,44
0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58
31 969,36 1,23 968,13 1,24 966,89 1,25 965,64 1,27 964,37 1,29 963,08 1,31 961,77 1,32 960,45 1,34 959,11 1,37 957,74 1,39 956,35 1,43 954,92 1,45
0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,56 0,57 0,58
32 968,93 1,25 967,68 1,25 966,43 1,27 965,16 1,28 963,88 1,30 962,58 1,32 961,26 1,33 959,93 1,36 958,57 1,39 957,18 1,40 955,78 1,44 954,34 1,47
0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59
33 968,50 1,27 967,23 1,27 965,96 1,28 964,68 1,30 963,38 1,31 962,07 1,33 960,74 1,35 959,39 1,37 958,02 1,40 956,62 1,42 955,20 1,45 953,75 1,48
0,45 0,45 0,47 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60
34 968,05 1,27 966,78 1,29 965,49 1,30 964,19 1,31 962,88 1,32 961,56 1,34 960,22 1,37 958,85 1,38 957,47 1,41 956,06 1,44 954,62 1,47 953,15 1,49
0,45 0,47 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
35 967,60 1,29 996,31 1,30 965,01 1,31 963,70 1,32 962,38 1,34 961,04 1,36 959,68 1,38 958,30 1,40 956,90 1,42 955,48 1,45 954,03 1,48 952,55 1,50
0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,59 0,60 0,61
36 967,15 1,31 965,84 1,31 964,53 1,32 963,21 1,34 961,87 1,36 960,51 1,37 959,14 1,39 957,75 1,42 956,33 1,44 954,89 1,46 953,43 1,49 951,94 1,51
0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61
37 966,69 1,32 965,37 1,32 964,05 1,34 962,71 1,36 961,35 1,37 959,98 1,39 958,59 1,40 957,19 1,43 955,76 1,45 954,31 1,48 952,83 1,50 951,33 1,52
0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,61
38 966,22 1,33 964,89 1,34 963,55 1,35 962,20 1,37 960,83 1,39 959,44 1,40 958,04 1,42 956,62 1,44 955,18 1,46 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54
0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
39 965,74 1,34 964,40 1,36 963,04 1,36 961,68 1,38 960,30 1,40 958,90 1,42 957,48 1,43 956,05 1,45 954,60 1,48 953,12 1,50 951,62 1,52 950,10 1,55
0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
40 965,25 1,35 963,90 1,37 962,53 1,38 961,15 1,39 959,76 1,41 958,35 1,43 956,92 1,45 955,47 1,47 954,00 1,49 952,51 1,51 951,00 1,54 949,49 1,561990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 50
▼B
TABELA IV
Tabela de correspondência entre os índices de refracção a 20 ºC e os títulos alcoométricos a 20º C dasmisturas
hidroalcoólicas puras e dos destilados
1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 51
▼B
4.EXTRACTO SECO TOTAL
Matérias secas totais
1. DEFINIÇÃO
O extracto seco total ou matérias secas totais é o conjunto de todas
as substâncias que em condições físicas determinadas não se volati-
lizam. Estas condições físicas devem ser fixadas de tal modo que as
substâncias componentes desse extracto sofram o mínimo de alte-
rações.
O extracto não redutor é o extracto seco total diminuído dos
açúcares totais.
O extracto reduzido é o extracto seco total diminuído dos açúcares
totais que excedem 1 g/l, do sulfato de potássio que exceda 1 g/l,
do manitol se existir e de todas as substâncias químicas eventual-
mente adicionadas ao vinho.
O resto de extracto é o extracto não redutor diminuído da acidez
fixa, expressa em ácido tartárico.
O extracto é expresso em gramas por litro e deve ser determinado
com uma aproximação de 0,5 g.
2. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Método único: método densimétricoO extracto seco total é calculado indirectamente a partir do valor da
densidade do mosto e, no caso do vinho, a partir da densidade do
vinho desalcoolizado.
Este extracto seco é expresso pela quantidade de sacarose que,
dissolvida numa quantidade de água suficiente para perfazer 1 litro,
dá uma solução da mesma densidade que o mosto ou que o vinho
desalcoolizado. Esta quantidade é dada pela tabela I.
3. MODO OPERATÓRIO
A densidade relativa d
2020dovinho desalcoolizado (dr) é dada pela
fórmula:
dr=dv−da+ 1,000
em que
dv= densidade relativa do vinho a 20º C (corrigido da acidez
volátil) (1),
da= densidade relativa a 20º C da mistura hidroalcoólica com o
mesmo título alcoométrico do vinho,
pode, igualmente, calcular-se dra partir das massas volúmicas a 20º
C,ρvdo vinho e ρada mistura hidroalcoólica com o mesmo título
alcoométrico pela fórmula:
dr= 1,0018 ( ρv−ρa) + 1,000
em que o coeficiente 1,0018 pode na prática ser equiparado a 1
quando ρvfor inferior a 1,05, o que é o caso mais frequente.
4. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
Partindo da densidade dr2020do vinho desalcoolizado ou da densidade
d2020do mosto, utilizar a tabela I a fim de obter o peso do extracto
seco total em gramas por litros.
O peso do extracto seco total é expresso em gramas por litro com
uma decimal.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 52
(1) Antes de fazer este cálculo, a densidade relativa (ou a massa volúmica) do vinho
medida como é indicado anteriormente deve ser corrigida da acção da acidez volátilde acordo com a fórmula:d
v=d2020− 0,0000086 a ou ρv=20− 0,0000086 a
em que a é a acidez volátil, em miliequivalentes por litro.
▼B
TABELA I
para o cálculo do teor de extracto seco total (g/l)
Densidade rela-
tiva com 2 deci-
maisTerceira decimal da densidade relativa
0123456789
Gramas de extracto por litro
1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2
1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,1
1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2
1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3
1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,5
1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,81,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4
1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8
1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,2
1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9
1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6
1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,4
1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,2
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1
1,20 527,8 —————————
Tabela intercalar
4.adecimal da
densidade rela-
tivaGramas de
extracto por litro4.adecimal da
densidade rela-
tivaGramas de
extracto por litro4.adecimal da
densidade rela-
tivaGramas de
extracto por litro
1 0,3 4 1,0 7 1,8
2 0,5 5 1,3 8 2,1
3 0,8 6 1,6 9 2,31990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 53
▼B
5.AÇÚCARESREDUTORES
1. DEFINIÇÃO
Os açúcares redutores são constituídos pelo conjunto dos açúcares de
função cetónica ou aldeídica doseados pela sua acção redutora sobre
a solução cupro-alcalina.
2. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS2.1.Defecação
2.1.1. Método de referência: passagem do vinho neutralizado e desalcooli-
zado por uma coluna permutadora de aniões soba forma de acetato
onde os seus aniões são trocados por iões acéticos, seguida da defe-
cação por acetato neutro de chumbo.
2.1.2. Métodos usuais: o vinho é tratado por um dos seguintes reagentes:
2.1.2.1. Acetato neutro de chumbo.2.1.2.2. Hexacianoferrato (II) de zinco
2.2.Doseamento
2.2.1. Método único: depois de ter feito reagir o vinho ou o mosto defe-
cado com uma quantidade determinada de solução cupro-alcalina, o
excesso de iões cúpricos é doseado por iodometria.
3. DEFECAÇÃO
O líquido em que os açúcares são doseados deve apresentar um teor
de açúcares compreendido entre 0,5 e 5 g/l.
Se o vinho for seco deve evitar-se a sua diluição durante a defe-
cação; se for doce é necessário diluí-lo ao mesmo tempo que se
procede à sua defecação, de modo a que o teor de açúcares varie
entre os referidos limites, de acordo com o quadro seguinte:
DenominaçãoTeor de açúcares
compreendido entre
(g/l)Massa volúmica
compreendida entreDiluição prevista (%)
Mostos e jeropigas > 125 > 1,038 1
vinhos doces, aguar-
dentados ou não25 e 125 1,005 e 1,038 4
vinhos adamados 5 e 25 0,997 e 1,005 20
vinhos secos < 5 < 0,997 não se procede a
diluição
4.3.1.Métodos de referência
4.3.1.1. Reagentes
3.1.1.1. Solução de ácido clorídrico (HCl), 1 M
3.1.1.2. Solução de hidróxido de sódio (NaOH), 1 M
3.1.1.3. Solução de ácido acético (CH3COOH), 4 M
3.1.1.4. Solução de hidróxido de sódio (NaOH), 2 M
3.1.1.5. Resina permutadora de aniões [tipo Dowex 3 (20-50 mesh) ou resina
equivalente]
Preparação da coluna de resina permutadora de aniões.
Colocar no fundo da bureta um pequeno tampão de lã de vidro e
15 ml de resina permutadora de aniões (3.1.1.5).
Aquando da utilização da resina, submetê-la a dois ciclos completos
de regeneração com passagens alternadas de solução de ácido clorí-
drico (3.1.1.1) e de hidróxido de sódio (3.1.1.2). Depois da lavagem
com 50 ml de água destilada, transvasar a resina para um vaso cilín-
drico, juntar 50 ml de solução 4 M de ácido acético (3.1.1.3) e agitar
durante 5 minutos. Encher de novo a bureta e fazer passar através da
coluna 100 ml de solução 4 M de ácido acético (3.1.1.3). (É
preferível ter uma reserva de resina conservada num frasco cheio1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 54
▼B
com esta solução 4 M de ácido acético). Lavar a coluna com água
destilada até que o efluente seja neutro.
Regeneração da coluna de resina. Fazer passar 150 ml duma solução
2 M de hidróxido de sódio para eliminar os ácidos e uma grande
parte da matéria corante fixada na resina. Lavar com 100 ml de
água, fazer passar 100 ml de solução 4 M de ácido acético. Lavar a
coluna até que o efluente seja neutro.
3.1.1.6. Solução de acetato neutro de chumbo (aproximadamente saturada):
Acetato neutro de chumbo Pb (CH3COO)2,3
H2O 250 g
Água muito quente q.b. para 500 ml
Agitar até dissolução.
3.1.1.7. Carbonato de cálcio, Ca CO3
3.1.2. Modo operatório
3.1.2.1. Vinhos secos
50 ml de vinho colocados num vaso cilíndrico de, aproximadamente,
10-12 cm de diâmetro, a que se adicionaram 1/2 (n − 0,5) ml de uma
solução M de hidróxido de sódio (3.1.1.2) (sendo n o volume de
uma solução 0,1 M de hidróxido de sódio utilizado para a dosagem
da acidez total em 10 ml de vinho), são evaporados num banho de
água a ferver utilizando um jacto de ar quente até que o líquido
esteja reduzido a, aproximadamente, 20 ml.
Fazer passar esse líquido através de uma coluna de resina permuta-
dora de aniões soba forma de acetato (3.1.1.5) à razão de 3 ml todos
os 2 minutos. Recolher o efluente num balão graduado de 100 ml.
Lavar 6 vezes o vaso e a coluna com 10 ml de água destilada e
juntar, agitando, 2,5 ml de solução saturada de acetato de chumbo
(3.1.1.6) e 0,5 g de carbonato de cálcio (3.1.1.7), agitar diversas
vezes e deixar em repouso, durante, pelo menos, 15 minutos;perfazer com água até ao traço de graduação. Filtrar.
1 ml deste filtrado corresponde a 0,5 ml de vinho.
3.1.2.2. Mostos, jeropigas, vinhos doces e vinhos adamados
As diluições abaixo sugeridas são dadas a título indicativo
1.Mostos e jeropigas. Diluir a 10 % o líquido a analisar e recolher
10 ml desta diluição.
2.Vinhos doces, aguardentados ou não, cuja massa volúmica está
compreendida entre 1,005 e 1,038. Recolher 20 ml de líquido a
analisar, previamente diluído a 20 %.
3.Vinhos adamados, cuja massa volúmica está compreendida entre
0,997 e 1,005. Recolher 20 ml de vinho não diluído.
Fazer passar o volume de vinho ou de mosto anteriormente indi-
cado através de uma coluna permutadora de aniões soba forma
de acetato, à razão de 3 ml todos os 2 minutos. Recolher o eflu-
ente num balão graduado de 100 ml, lavar a coluna com água
até à obtenção de, aproximadamente, 90 ml de efluente. Juntar
0,5 g de carbonato de cálcio e 1 ml de acetato de chumbo em
solução saturada; agitar e deixar em repouso durante pelo menos
15 minutos agitando de tempos a tempos: perfazer com água até
ao traço de graduação. Filtrar.
No caso:
1. 1 ml de filtrado corresponde a 0,01 ml de mosto ou de jero-
piga.
2. 1 ml de filtrado corresponde a 0,04 ml de vinho doce.3. 1 ml de filtrado corresponde a 0,20 ml de vinho adamado.
3.2.Métodos usuais
3.2.1. Defecação com acetato neutro de chumbo
3.2.1.1. Reagentes
Solução de acetato neutro de chumbo (aproximadamente saturada)
(ver 3.1.1.6).1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 55
▼B
Carbonato de cálcio.
3.2.1.2. Modo operatório
3.2.1.2.1. Vinhos secos
Colocar 50 ml de vinho num balão graduado de 100 ml; juntar 1/2
(n−0,5) ml de solução M de hidróxido de sódio (3.1.1.2) sendo n o
volume de solução 0,1 M utilizado para dosear a acidez total de
10 ml de vinho. Juntar, agitando, 2,5 ml de solução saturada de
acetato de chumbo (3.1.1.6) e 0,5 g de carbonato de cálcio;
(3.1.1.7) agitar diversas vezes e deixar em repouso durante, pelo
menos, 15 minutos; perfazer com água até ao traço de graduação.
Filtrar.
1 ml de filtrado corresponde a 0,5 ml de vinho.
3.2.1.2.2. Mostos, jeropigas, vinhos doces e vinhos adamados
Num balão graduado de 100 ml, colocar um volume de vinho (ou de
mosto ou de jeropigas) assim definido, sendo as diluições seguintes
dadas a título indicativo:
1.Mostos e jeropigas. Diluir a 10 % o líquido a analisar, recolher
10 ml desta diluição.
2.Vinhos doces, aguardentados ou não , cuja massa volúmica
esteja compreendida entre 1,005 e 1,038. Recolher 20 ml de
líquido a analisar previamente diluído a 20 %.
3.Vinhos adamados , cuja massa volúmica seja compreendida entre
0,997 e 1,005. Recolher 20 ml de vinho não diluído.
Juntar 0,5 g de carbonato de cálcio, aproximadamente 60 ml de
água e 0,5 ou 1 ou 2 ml de acetato de chumbo em solução satu-
rada, agitar e deixar em repouso durante, pelo menos, 15
minutos, agitando de tempos a tempos. Perfazer com água até
ao traço da graduação. Filtrar.
No caso:
1. 1 ml de filtrado corresponde a 0,01 ml de mosto ou de jero-
piga.
2. 1 ml de filtrado corresponde a 0,04 ml de vinho doce.3. 1 ml de filtrado corresponde a 0,20 ml de vinho adamado.
3.2.2. Defecação por haxecianoferrato (II) de zinco
Este processo de defecação deve apenas ser utilizado para os vinhos
brancos, vinhos doces pouco corados e mostos.
3.2.2.1. Reagentes
3.2.2.1.1. Solução de hexacianoferrato (II) de potássio.
Hexacianoferrato (II) de potássio (K
4FE
(CN)6·3H2O) 150 g
Água q.b. para 1 000 ml
3.2.2.1.2. Solução II de sulfato de zinco:
Sulfato de zinco (Zn SO4·7H2O) 300 g
Água q.b. para 1 000 ml
3.2.2.2. Modo operatório
Num balão graduado de 100 ml, colocar um volume de vinho (ou de
mosto ou de jeropiga) assim definido, sendo as diluições seguintes
dadas a título indicativo:
1.Mostos e jeropigas: Diluir a 10 % o líquido a analisar, recolher
10 ml desta diluição.
2.Vinhos doces, aguardentados ou não , cuja massa volúmica
esteja compreendida entre 1,005 e 1,0038. Recolher 20 ml de
líquido a analisar, previamente diluído a 20 %.
3.Vinhos adamados , cuja massa volúmica esteja compreendida
entre 0,997 e 1,005. Recolher 20 ml de vinho não diluído.
4.Vinhos secos , recolher 50 ml de vinho não diluído.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 56
▼B
Juntar 5 ml de solução de hixacionaferrato (II) de potássio
(3.2.2.1.1) e 5 ml de solução II de sulfato de zinco (3.2.2.1.2).
Homogeneizar. Perfazer com água até ao traço de graduação.
Esperar 10 m. Filtrar.
No caso:1. 1 ml de filtrado correspondente a 0,01 ml de mosto ou de
jeropiga.
2. 1 ml de filtrado correspondente a 0,04 ml de vinho doce.
3. 1 ml de filtrado correspondente a 0,20 ml de vinho adamado.4. 1 ml de filtrado correspondente a 0,50 ml de vinho seco.
4. DOSEAMENTO4.1.Reagentes
4.1.1. Solução cuproalcalina
Sulfato de cobre puro (CuSO
4·5H2O) 25 g
Ácido cítrico (C6H8O7·H2O) 50 g
Carbonato de sódio cristalizado (Na2CO3·1 0
H2O) 388 g
Água q.b. para 1 000 ml
Dissolver o sulfato de cobre em 100 ml de água, o ácido cítrico em
300 ml de água e o carbonato de sódio em 300 a 400 ml de água
quente. Misturar a solução de ácido cítrico e a solução de carbonato
de sódio. Em seguida, juntar a solução do sulfato de cobre e perfazer
até ao litro.
4.1.2. Solução de iodeto de potássio a 30 %:
iodeto de potássio (Kl) 30 g
Água q.b. para 100 ml.
Conservar em frasco de vidro de cor.
4.1.3. Ácido sulfúrico a 25 %:
Ácido sulfúrico (H2SO4)ρ20= 1,84 g/ml 25 g
Água q.b. para 100 ml
Deitar o ácido na água, deixar arrefecer e levar o volume a 100 ml.
4.1.4. Goma de amido a 5 g/l:
Diluir 5 g de amido em aproximadamente 500 ml de água. Levar a
ebulição agitando e manter a ebulição durante 10 minutos. Adicionar
200 g de cloreto de sódio (Na Cl). Perfazer um litro depois do arre-
fecimento.
— Tiossulfato de sódio, 0,1 M
— Solução de açúcar invertido a 5 g/l:
Solução a utilizar para verificar a técnica de dosagem.
Num balão graduado de 200 ml, colocar:
Sacarose pura (C12H22O11) 4,75 g
Água, aproximadamente 100 ml
Ácido clorídrico puro (HCl) ρ2 0= 1,16−
1,19 g/ml) 5 ml
Mergulhar o balão em banho de água a 60º C durante o tempo sufi-
ciente para a temperatura da solução atingir 50º C, temperatura essa
que se mantém durante 15 minutos. Em seguida, deixar o balão arre-
fecer espontaneamente durante 30 minutos; arrefecer depois por
imersão num banho de água fria. Transvasar num balão graduado
de 1 l, perfazer até ao litro. Esta solução conserva-se bem durante
um mês. No momento da utilização, neutralizar a toma de ensaio
(esta solução é, aproximadamente, 0,06M ácida), com uma solução
de hidróxido de sódio.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 57
▼B
4.2.Modo operatório
Num balão cónico de 300 ml deitar 25 ml de solução cuproalcalina,
15 ml de água e 10 ml de solução proveniente da defecação. Este
volume de solução açucarada não deve conter mais de 60 mg de
açúcar invertido.
Juntar alguns grãos de pedra-pomes. Adaptar ao balão um refrige-
rante de refluxo e levar à ebulição, que deve ser alcançada em 2
minutos. Mantê-la durante, exactamente, 10 minutos.
Arrefecer imediatamente debaixo de uma corrente de água fria.
Depois do arrefecimento completo, juntar 10 ml de solução de
iodeto de potássio a 30 % (4.1.2), 25 ml de ácido sulfúrico a 25 %
(4.1.3) e 2 ml de goma de amido (4.1.4).
Titular com a solução 0,1 M de tiossulfato de sódio (4.1.5), ou seja,
no número de mililitros utilizados.
Paralelamente, efectuar uma dosagem testemunha em que 10 ml de
água destilada substituem os 10 ml de solução açucarada, sendo n ′o
volume de tiossulfato utilizado.
4.3.Expressão dos resultados
4.3.1. Cálculos
A quantidade de açúcar, expressa em açúcar invertido, contida na
toma de ensaio, é dada no quadro seguinte em função do número n ′
− n de mililitros de tiossulfato utilizados.
Exprimir o teor do vinho em gramas de açúcar invertido por litro
com um decimal, tendo em conta as diluições efectuadas no decurso
da defecação e o volume da toma de ensaio.
4.3.2. Repetibilidade
r = 0,015 xi
xi= concentração de açúcar invertido em g/l da amostra.
4.3.3. Reprodutibilidade
R = 0,058 xi
xi= concentração do açúcar invertido em g/l da amostra.
Quadro de correspondência entre o volume de solução 0,1 M de tiosulfato de sódio, (n′−n )ml, e a quantidade
de açúcares redutores em miligramas
Na2S2O3(ml 0,1 M)Açúcares redutores
(em miligramas)Diff.Na2S2O3(ml 0,1 M)Açúcares redutores
(em miligramas)Dife-
rença
1 2,4 2,4 13 33,0 2,7
2 4,8 2,4 14 35,7 2,8
3 7,2 2,5 15 38,5 2,8
4 9,7 2,5 16 41,3 2,9
5 12,2 2,5 17 44,2 2,9
6 14,7 2,6 18 47,2 2,9
7 17,2 2,6 19 50,0 3,0
8 19,8 2,6 20 53,0 3,0
9 22,4 2,6 21 56,0 3,1
10 25,0 2,6 22 59,1 3,1
11 27,6 2,7 23 62,2
12 30,3 2,71990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 58
▼B
6.SACAROSE
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
I. Método de pesquisa qualitativa por cromatografia em camada
fina. A sacarose é separada dos outros açúcares por cromato-
grafia em camada fina de celulose e revelada pelo reagente
ureia-ácido clorídrico, em estufa a 105º C.
II. Método de pesquisa e dosagem por cromatografia líquida de
elevada resolução. A sacarose é separada numa coluna de sílica
ligada com alquilamina e detectada por refractometria. A quanti-
ficação é feita relativamente a um padrão externo analisado nas
mesmas condições.
Nota:A autenticidade de um mosto ou de um vinho pode ser contro-
lada pelo método que utiliza a RMN de deutério descrito para a
detecção de enriquecimento dos mostos, mostos concentrados
rectificados e de vinhos.
Para a pesquisa e a dosagem da sacarose pode ser igualmente
utilizada a cromatografia em fase gasosa descrita na alínea f) do
capítulo 42.
2. MÉTODO DE PESQUISA QUALITATIVA POR CROMATO-
GRAFIA EM CAMADA FINA
2.1.Material
2.1.1. Placas para cromatografia cobertas por uma camada fina de celulose.
2.1.2. Cuba para cromatografia
2.1.3. Seringa micrométrica ou micropipeta
2.1.4. Estufa regulável a 105 ± 2º C
2.2.Reagentes
2.2.1. Carvão descorante
2.2.2. Fase móvel: cloreto de metileno-ácido acético ( ρ
20= 1,05 g/ml) —
etanol — metanol — água (50: 25: 9: 6: 10).
2.2.3. Revelador
Ureia 5 g
Ácido clorídrico 2 M 20 ml
Etanol 100 ml
2.2.4. Solução de referência
Glicose 35 g
Frutose 35 g
Sacarose 0,5 g
Água q. b. para 1 000 ml
2.3.Modo operatório
2.3.1. Preparação da amostra
Quando o mosto ou o vinho são muito corados, proceder à remoção
da cor tratando-os com carvão activo.
No caso do mosto concentrado rectificado, utilizar a solução cujo
teor de açúcares é de 25 % (m/m) (25º Brix), preparada como indi-
cado na capítulo «Determinação do pH», noponto 4.1.2, e diluí-la a
um quarto, levando com água, 25 ml de amostra a um volume de
100 ml, utilizando um balão aferido.
2.3.2. Obtenção do cromatograma
A 2,5 cm do bordo inferior da placa depositar:
— 10µl da amostra,
— 10µl da solução de referência.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 59
▼B
Colocar a placa na cuba para cromatografia saturada com os vapores
da fase móvel e deixar migrar o líquido até 1 cm do bordo superior.
Retirar a placa e secá-la sobuma corrente de ar quente. Repetir duas
vezes a migração secando de cada vez a placa. Pulverizar uniforme-
mente a placa com 15 ml do revelador e mantê-la na estufa a 105º C
durante 5 minutos.
2.4.Resultados
A sacarose e a frutose aparecem soba forma de manchas com cor
azul escuro sobre fundo branco. A glicose dá uma mancha esver-
deada menos intensa.
3. MÉTODO DE PESQUISA E DOSAGEM POR CROMATO-
GRAFIA LÍQUIDA DE ELEVADA RESOLUÇÃO
As condições cromatográficas são apenas dadas a título indicativo.
3.1.Aparelhos
3.1.1. Cromatógrafo de fase líquida de elevada resolução equipado com:
1. Um injector com «loop» de 10 µl.2. Um detector, refractómetro diferencial ou refractómetro interfe-
rómetro.
3. Uma coluna de sílica ligada a alkilamida (250 mm de compri-
mento e 4 mm de diâmetro interno).
4. Uma pré-coluna cheia com a mesma fase.
5. Um dispositivo de isolamento ou de termostatização a 30º C
para o conjunto da pré-coluna/coluna.
6. Um registador, eventualmente um integrador.
7. Débito da fase móvel: 1 ml/min.
3.1.2. Dispositivo de filtração com membrana (0,45µm)
3.2.Reagentes
3.2.1. Água bidestilada
3.2.2. Acetonitrilo (CH
3CN) de qualidade própria para HPLC
3.2.3. Fasemóvel: acetonitrilo-água, previamente filtrados sobre membrana
(0,45 µm), (80-20, v/v).
Esta fase móvel deve ser desgaseificada antes da utilização.
3.2.4. Solução de referência: solução aquosa de sacarose a 1,2 g/l. Filtrá-la
por membrana (0,45 µm).
3.3.Modo operatório
3.3.1. Preparação da amostra
— Caso dos vinhos e dos mostos.
Filtrar com membrana (0,45 µm).
— Caso dos mostos concentrados rectificados.
Utilizar a solução obtida diluindo o mosto concentrado rectifi-
cado a 40 % (m/v) como indicado na capítulo «Acidez total»
em 5.1.2 e filtrá-la com membrana (0,45 µm).
3.3.2. Determinação cromatográfica
Injectar sucessivamente no cromatógrafo 10 µl da solução de
referência e 10 µl da amostra preparada como indicado em 3.3.1.
Repetir estas injecções na mesma ordem.
Registar o cromatograma.
O tempo de retenção da sacarose é próximo de 10 minutos.
3.4.Cálculos
Utilizar para o cálculo a média das duas respostas quer para a
solução de referência quer para a amostra.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 60
▼B
3.4.1. Caso dos vinhos e dos mostos
Calcular o teor em g/l.
3.4.2. Caso dos mostos concentrados rectificados
Seja C g/l o teor de sacarose da solução de mosto concentrado recti-
ficado a 40 % (m/v).
Teor de sacarose em gramas por quilograma de mostos concentrado
rectificados: 2,5 · C.
3.5.Expressão dos resultados
O teor de sacarose dos vinhos, mostos e mostos concentrados recti-
ficados é expresso em gramas por litro (vinhos e mostos) e em
gramas por quilograma (mostos concentrados rectificados) com um
decimal.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 61
▼B
7.GLICOSE E FRUTOSE
1. DEFINIÇÃO
A glicose e a frutose podem ser doseadas individualmente por
método enzimático, com vista unicamente ao cálculo da relação
glicose/frutose.
2. PRINCÍPIO
A glicose e a frutose são fosforiladas pelo adenosina-trifosfato
(ATP) no decurso de uma reacção enzimática-catalizada pela hexo-
quinase (HK) e originam glicose-6-fosfato (G6P) e frutose-6-fosfato
(F6P):
glicose + ATP
 G6P + ADP
frutose + ATP
 F6P + ADP
Numa primeira fase o glicose-6-fosfato é oxidado em gluconato-6-
-fosfato pelo nicotinamida-adenina-dinucleótido-fosfato (NADP), em
presença da enzima glicose-6-fosfato-desidrogenase (G6 PDH). A
quantidade de nicotinamida-adenina-dinucleótido-fosfato reduzido
(NADPH) surgido corresponde à quantidade de glicose-6-fosfato e,
portanto, à de glicose.
G6P + NADP+
Gluconato-6-fosfato + NADPH + H+
É o nicotinamida-adenina-dinucleótido-fosfato reduzido que é
doseado tendo por base a sua absorvência a 340 mm.
Quando esta reacção termina, o frutose-6-fosfato é transformado, sob
a acção da fosfoglicose-isomerase (PGl), em glicose-6-fosfato.
F6P
 G6P
O glicose-6-fosfato reage de novo com o nicotinamida-adenina-dinu-
cleótido-fosfato para originar gluconato-6-fosfato e nicotinamida-
-adenina-dinucleótido-fosfato reduzido; este será doseado.
3. APARELHAGEM
— Espectrofotómetro que permita efectuar a medição a 340 nm,
máximo de absorção do NADPH. Dado que se trata de medições
absolutas (sem calibração, mas com referência ao coeficiente de
extinção do NADPH) as escalas dos comprimentos de onda e das
absorvências do aparelho devem ser controladas.
Na ausência, utilizar um espectrofotómetro de espectro
descontínuo que permita efectuar medições a 334 nm ou a
365 nm,
— Cubas de vidro de 1 cm de trajecto óptico ou cubas de utilização
única,
— Pipetas para teste enzimático de 0,02 - 0,05 - 0,1 - 0,2 ml.
4. REAGENTES
4.1.Solução 1: tampão (trietanolamina 0,3 M; pH = 7,6; 4 10−3Me m
Mg2+): 11,2 g de cloridrato de trietanolamina (C2H5)3N · HCL) e
0,2 g de Mg SO4·7H2O são dissolvidos em 150 ml de água bides-
tilada; adicionar aproximadamente 4 ml da solução 5 M de hidróxido
de sódio (NaOH) para obter um pH de 7,6 e levar o volume a
200 ml.
Esta solução tampão pode conservar-se 4 semanas a +4 ºC.
4.2.Solução 2: solução de nicotinamida-adenina-dinucleótido-fosfato
(cerca de 11,5 10−3M: dissolvem-se 50 mg de nicotinamida-adenina-
-dinucleótido-fosfato-dissódico em 5 ml de água bidestilada.
A solução conserva-se a +4 ºC durante 4 semanas.
4.3.Solução 3: solução de adenosina-5 ′-trifosfato (aproximadamente 81
10−3M: são dissolvidos 250 mg de adenosina-5 ′-trifosfato dissódico1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 62
▼B
e 250 mg de hidrogenocarbonato de sódio (NaHCO3) em 5 ml de
água bidestilada.
Esta solução conserva-se durante 4 semanas a +4 ºC.
4.4.Solução 4: Hexoquinase/glicose-6-fosfato-desidrogenase: misturar
0,5 ml de hexoquinase (2 mg de proteína/ml ou seja 280 U/ml) e
0,5 ml de glicose-6-fosfato-desidrogenase (1 mg de proteína por ml).
A solução conserva-se durante um ano a +4 ºC.
4.5.Solução5: Fosfoglicose-isomerase (2 mg de proteína por ml, ou seja
700 U/ml). A suspensão é utilizada sem diluição.
A solução conserva-se um ano a +4 ºC.
Nota:O conjunto dos reagentes necessários para este doseamento está
comercializado.
5. MODO OPERATÓRIO
5.1.Preparação da amostra
Em função da quantidade estimada de glicose + frutose por litro,
efectuar as seguintes diluições:
Medição a 340 e 334 nm 365 nm Diluição com água Factor F de diluição
Até 0,4 g/l 0,8 g/l — —
Até 4,0 g/l 8,0 g/l 1+ 9 10Até 10,0 g/l 20,0 g/l 1+ 24 25Até 20,0 g/l 40,0 g/l 1+ 49 50Até 40,0 g/l 80,0 g/l 1+ 99 100acima de 40,0 g/l 80,0 g/l 1+999 1 000
5.2.Dosagem
Com o espectrofotómetro regulado no comprimento de onda 340 nm,
efectuar as medições em relação ao ar (sem cuba no trajecto óptico)
ou em relação à àgua.
Temperatura 20 a 25 ºC.
Em 2 cubas de 1 cm de trajecto óptico, introduzir:
Testemunha Dosagem
Solução 1 (4.1) (referida a 20 ºC) 2,50 ml 2,50 ml
Solução 2 (4.2) 0,10 ml 0,10 ml
Solução 3 (4.3) 0,10 ml 0,10 ml
Amostra a dosear — 0,20 ml
Água bidestilada 0,20 ml —
Misturar e, depois de aproximadamente 3 minutos, ler a absorvência
das soluções (A
1).
Desencadear a reacção adicionando:
Solução 4(4.4) 0,02 ml 0,02 ml
Misturar; esperar 15 minutos; efectuar a medição da absorvência e
verificar a paragem da reacção após 2 minutos. (A2).
Adicionar imediatamente:
Solução 5 (4.5) 0,02 ml 0,02 ml
Misturar; efectuar a leitura ao fim de 10 minutos; verificar a
paragem da reacção após 2 minutos. (A3).
Determinar as diferenças de absorvência:
—A2−A1corresponde à glicose,1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 63
▼B
—A3−A2corresponde à frutose.
Para a testemunha e para a dosagem.
Deduzir a diferença de absorvência da testemunha ( ∆AT)ead o
doseamento ( ∆AD) e estabelecer:
para a glicose: ∆AG=∆AD−∆AT
para a frutose: ∆AF=∆AD−∆AT.
Nota:
O tempo necessário para a acção dos enzimas pode variar de um lote
para outro. Ele só é dado aqui a título indicativo. Recomenda-se que
seja determinado, sempre, para cada lote.
5.3.Expressão dos resultados
5.3.1. Cálculo
A fórmula geral para o cálculo das concentrações é a seguinte:
C¼V/C1PM
ε/C1d/C1v/C11000∆Ag =lðÞ
V = volume do teste (ml)
v = volume da amostra (ml)
PM = massa molecular da substância a dosear
d = trajecto óptico da cuba (cm)ε= coeficiente de absorção do NADPH a 340 nm = 6,3
(mmole
−1.l .c m−1)
V = 2,92 ml para o doseamento da glicoseV = 2,94 ml para o doseamento da frutose
v = 0,20 ml
PM = 180d= 1
Obtém-se:para a glicose: Cg/l = 0,417 · ∆A
G
para a frutose: Cg/l = 0,420 · ∆AF
Se tiver sido efectuada uma diluição aquando da preparação da
amostra, multiplicar o resultado pelo factor F.
Nota:Se as medidas forem feitas nos comprimentos de onda 334 ou
365 nm, obtém-se:
— medida a 334 nm: ε= 6,2 (mmole · l · cm
−1)
para a glicose: Cg/l = 0,425 · ∆AG
para a frutose: Cg/l = 0,428 · ∆AF
— medida a 365 nm: ε= 3,4 (mmole · l · cm−1)
para a glicose: Cg/l = 0,773 · ∆AG
para a frutose: Cg/l = 0,778 · ∆AF
5.3.2. Repetibilidade (r)
r = 0,056 xi
5.3.3. Reprodutibilidade (R)
R = 0,12 + 0,076 xi
xi= teor em glicose ou frutose em g/l1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 64
▼B
8.DETECÇÃO DO ENRIQUECIMENTO DOS MOSTOS DE UVAS,
MOSTOS DE UVAS CONCENTRADOS, MOSTOS DE UVAS
CONCENTRADOS RECTIFICADOS E DE VINHOS POR APLI-
CAÇÃO DA RESSONÂNCIA MAGNÉTICA NUCLEAR DO
DEUTÉRIO (RMN-FINS/SNIF-NMR)
1. DEFINIÇÃO
Os átomos de deutério existentes nos açúcares e na água de um
mosto de uma uva vão ser redistribuídos após a fermentação nas
moléculas I, II, III e IV do vinho:
CH2DC H2OH CH3CHD OH
II I
CH3CH2OD HOD
III IV
A adição de açúcares exógenos (chaptalização) antes da fermentação
do mosto reflectir-se-á na redistribuição do deutério.
Por comparação com os valores dos parâmetros relativos a um vinho
testemunha natural da mesma região, o enriquecimento com um
açúcar exógeno traduzir-se-á pelas seguintes variações:
Parâmetros
Vinho(D/H)I(D/H)II(D/H)WQR
— Natural
— Enriquecido
— açúcar de beterraba
— açúcar de cana
/C148/C147/C147/C147/C149/C147/C147/C147/C150
 — açúcar de milho
(D/H)I: relação isotópica associada à molécula I
(D/H)II: relação isotópica associada à molécula II
(D/H)WQ: relação isotópica da água do vinho.
R = 2(D/H)II/(D/H)I, exprime a distribuição relativa do deutério
nas moléculas I e II; R é medido directamente a partir das
intensidades h dos picos sendo R = 3hII/hI.
(D/H)I, caracteriza principalmente a espécie vegetal que sintetizou o
açúcar e, em menor grau, a geografia do local de colheita (natureza
da água utilizada no decurso da fotossíntese).
(D/H)IIrepresenta a climatologia do local de produção das uvas
(natureza da água da chuva e condições meteorológicas) e, em
menor grau, a concentração em açúcares do mosto inicial.
(D/H)WQrepresenta a climatologia do local de produção e a riqueza
em açúcares do mosto inicial.
2. PRINCÍPIO
A determinação dos parâmetros anteriormente definidos [determi-
nação de R, (D/H)I(D/H)II], é efectuada por RNM do deutério no
etanol extraído do vinho ou dos produtos da fermentação do mosto,
do mosto concentrado ou do mosto concentrado rectificado obtidos
em determinadas condições e é eventualmente completada pela
determinação da relação isotópica da água extraída do vinho (D/
/H)WQe pela determinação da relação isotópica 13C/12Cdo etanol.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 65
▼M5
▼B
3. PREPARAÇÃO DA AMOSTRA PARA ANÁLISE
3.1.Extracção do etanol e da água do vinho
Nota:Pode ser utilizado qualquer dispositivo de extracção do etanol desde
que permita recuperar de 98 a 98,5 % do etanol do vinho ou do
produto fermentado num destilado cujo teor será de 92 a 93 % mas
(95 % vol.).
3.1.1. Aparelhagem e reagentes
Dispositivo para a extracção do etanol (fig. 1) constituído por:
— Placa de aquecimento eléctrico regulável,
— Balão esmerilado de 1 l,— Coluna Cadiot de banda giratória (móvel em Teflon),— Balões cónicos esmerilados de 125 ml,— Frascos de rolha plástica de 125 e 60 ml.
— Reagentes para a dosagem da água segundo a técnica de Karl
Fischer (por exemplo Merck 9241 e 9243).
3.1.2. Modo operatório
3.1.2.1. Determinar o título alcoométrico do vinho, t
v, com a uma aproxi-
mação igual ou superior a 0,05 % vol.
3.1.2.2. Extracção do etanol
Introduzir uma toma homogénea de 500 ml de vinho de título alco-
ométrico tvno balão do aparelho de destilação com uma taxa de
refluxo constante de, aproximadamente, 0,9. Colocar um balão
cónico esmerilado de 125 ml, previamente tarado, para receber o
destilado. Recolher do líquido em ebulição, entre 78,0 e 78,2 ºC,
aproximadamente, 40 a 60 ml. Quando a temperatura exceder
78,5 ºC parar a recolha durante 5 minutos.
Quando a temperatura voltar a 78 ºC recolher de novo o destilado
até 78,5 ºC e repetir esta operação até que a temperatura, após
paragem da recolha e funcionamento em circuito fechado, não volte
a descer. A destilação completa dura cerca de 5 horas. Este procedi-mento permite recuperar entre 98 a 98,5 % do álcool total do vinho
num destilado que apresenta um título alcoométrico entre 92 e 93 %
mas (95 % vol.), título para o qual as condições RMN descritas no
n.
o4 foram estabelecidas.
O etanol recuperado é pesado.É conservada num frasco de 60 ml uma toma de ensaio homogénea
de 60 ml das fracções finais de destilação que representa a água do
vinho. A sua relação isotópica será eventualmente determinada.
Nota:Se se dispõe dum espectómetro equipado com uma sonda de 10 mm
(cf. 4), é suficiente uma toma homogénea de 300 ml de vinho.
3.1.2.3. Determinação do título alcoométrico do álcool extraído
Pelo método de Karl Fischer, determina-se a massa de água, p ′g,
existente numa toma de ensaio de cerca de 0,5 ml de álcool de
massa p, conhecida com exactidão.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 66
▼B
Figura 1
Dispositivo para extracção do etanol
O teor mássico de etanol é dado por:
tD
m¼p/C0p0
p/C2100
3.2.Fermentação dos mostos, mostos concentrados e mostos concen-
trados rectificados
3.2.1. Material e reagentes
— Ácido tartárico,
— Bacto Yeast Nitrogen (Base without amino acids) DIFCO,
— Leveduras secas activas (Saccharomyces cerevisiae).1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 67
▼B
Se se conhecer a relação isotópica da água do mosto, podem reac-
tivar-se as leveduras, previamente à inoculação durante 15 minutos
num mínimo de água morna (1 g em 50 ml) não destilada, que tenha
uma relação isotópica vizinha à da água do mosto.
Quando não se conhecer a relação isotópica da água do mosto, é
preferível inocular directamente.
A quantidade de leveduras secas a utilizar é da ordem de 1 g ou seja
à volta de 1010células para 1 l de mosto.
Recipiente para a fermentação, com uma capacidade de 1,5 l,
munido de um dispositivo que permita operar ao abrigo do ar e
condensar os vapores do álcool, pois não é tolerável a perda de
etanol durante a fermentação. A taxa de conversão dos açúcares
fermentescíveis em etanol deve ser superior a 98 %.
3.2.2. Modo operatório
3.2.2.1. Caso dos mostos
— Mostos frescos
Colocar 1 l de mosto cuja concentração em açúcares redutores
fermentescíveis foi previamente determinada, no recipiente
previsto para a fermentação. Adicionar 1 g de leveduras secas
previamente reactivadas. Instalar um dispositivo que permita
operar ao abrigo do ar. Conduzir a fermentação a uma tempera-
tura próxima de 20 ºC até ao esgotamento dos açúcares. Após
determinação do título alcoométrico do produto da fermentação
e cálculo da taxa de conversão dos açúcares em álcool, o líquido
fermentado obtido é centrifugado e submetido à destilação para
extrair o etanol.
— Mostos amuados com dióxido de enxofre
Dessulfitar um volume de mosto ligeiramente superior a 1 l
(1,2 l) fazendo borbulhar uma corrente de azoto no mosto levado
a banho-maria com refluxo, a 70-80 ºC, até que o teor total em
dióxido de enxofre seja inferior a 200 mg/l. Evitar provocar
qualquer concentração de mosto por evaporação da água, utili-
zando para tal um refrigerante eficaz.
Colocar 1 l de mosto dessulfitado num recipiente para fermen-
tação e prosseguir tal como é indicado para os mostos frescos.
Nota:
Se se tiver utilizado metabissulfito de potássio para sulfitar o
mosto, é necessário, antes de dissulfitar, adicionar ao mosto
ácido sulfúrico à razão de 0,25 ml de ácido sulfúrico concentrado
(ρ20= 1,84 g/ml) por grama de metabissulfito utilizado em cada
litro de mosto.
3.2.2.2. Caso dos mostos concentrados
No recipiente para fermentação, colocar um volume V ml de mosto
concentrado contendo uma quantidade conhecida da açúcar, próxima
de 170 g. Perfazer o volume de 1 l com (1 000−V) ml de água com
a mesma relação isotópica que a água do mosto natural testemunha.
Inocular como está indicado em 3.2.1, adicionar 3 g de Bacto Yeast
Nitrogen (Base Without amino acids) DIFCO. Homogeneizar e pros-
seguir como anteriormente.
3.2.2.3. Caso dos mostos concentrados rectificados
Proceder segundo a técnica descrita no ponto 3.2.2.2, perfazendo o
volume de 1 l com (1 000−V) ml de água com a mesma relação
isotópica que a água do mosto natural testemunha, no qual serão
dissolvidos 3 g de ácido tartárico.
Nota: Reservar um volume de 50 ml de amostra de mosto, de mosto
dissulfitado ou do mosto concentrado, ou de mosto concentrado
rectificado com vista à eventual extracção de água e à determinação
da sua relação isotópica (D/H)WQ.
A extracção da água dos mostos poderá ser feita muito simplesmente
através da destilação azeotrópica com tolueno.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 68
▼B
3.3.Preparação da amostra de álcool para a medida RMN
3.3.1. Reagentes
N,N-tetrametilureia (TMU); utilizar uma amostra de TMU de
referência de relação isotópica D/H dada e controlada. Esta amostra
pode ser fornecida por:
— Direcção-Geral da Ciência, Investigação e Desenvolvimento,
Gabinete Comunitário de Referência,Rue de la Loi 200,
B-1049 Bruxelas.
3.3.2. Modo operatório
— Sonda RMN de 15 mm de diâmetro:
Num frasco previamente tarado, introduzir 7 ml do álcool obtido
como em 3.1.2 e pesá-lo com uma aproximação de 0,1 mg, ou
seja m
A; colher, em seguida, 3 ml do padrão interno (TMU) e
pesar com uma aproximação de 0, 1 mg, ou seja mst· Homoge-
neizar a mistura por agitação,
— Sonda RMN de 10 mm de diâmetro:
São suficientes 3,2 ml de álcool e 1,3 ml de TMU.
Conforme o tipo de espectómetro e de sonda utilizados (Cf. n.o4),
adicionar uma quantidade suficiente de hexafluorobenzeno como
substância da estabilização campo-frequência (lock).
EspectómetroSonda
10 mm 15 mm
7,05 T 150 µl 200 µl
9 , 4T 3 5µ l 5 0µ l
3.4.Preparação da amostra de água para a medida de RMN, com
vista à eventual determinação da sua relação isotópica
3.4.1. Reagentes
N,N-tetrametilureia (TMU): ver ponto 3.3.1.
3.4.2. Modo operatório
Num frasco tarado, introduzir 3 ml de água obtida como em 3.1.2 ou
3.2 (nota). Pesá-los a 0,1 mg aproximadamente, ou seja m ′E; intro-
duzir em seguida 4 ml do padrão interno (TMU) e pesá-los a
0,1 mg aproximadamente, ou seja m ′st. Homogeneizar por agitação.
Nota: Se o laboratório dispuser de um espectómetro de massa de
relações isotópicas, esta medida poderá ser determinada com este
aparelho, de modo a aligeirar a carga do espectómetro RMN, dado
que é necessário calibrar a relação TIV(5.2) para cada série de
vinhos estudados.
4. REGISTO DO ESPECTRO RMN2H DO ÁLCOOL E DA ÁGUA
Determinação dos parâmetros isotópicos.
4.1.Material
— Espectómetro RMN munido de um sonda específica «deutério»
regulado na frequênciaocaracterística, do campo Bo(por
exemplo, para Bo= 7,05 T, Vo= 46,05 MHz e para Bo= 9,4 T,
Vo= 61,4 MHz), possuidor de um canal de separação do protão
B2e de um canal de estabilização campo-frequência (lock)na
frequência doflúor. A resolução, medida sobre o espectro, trans-
formada sem multiplicação exponencial (isto é, LB = 0) (fig. 2b)
e expressa pela largura medida a meia altura dos picos de metilo
e metileno do etanol e do pico metilo do TMU, deve ser inferior
a 0,5 Hz.
A sensibilidade medida com um factor de multiplicação expo-
nencial LB igual a 2 (fig. 2a) deve ser igual ou superior a 150
para o pico metilo do etanol com teor alcoólico 95 % vol
(93,5 % mas). Nestas condições, o intervalo de confiança da1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 69
▼B
medida da altura do pico calculado com uma probabilidade de
97,5 % (teste a 1 aile) e 10 repetições do espectro, é de 0,35 %.
— Dispositivo de troca automática de amostras (eventualmente),— Equipamento para o tratamento de dados,
— Tubos de amostras de 15 mm ou 10 mm, consoante a «perfor-
mance» do espectómetro.
4.2.Regulação do espectómetro e verificações
4.2.1. Regulação
Proceder às regulações habituais da homogeneidade e da sensibili-
dade, segundo as indicações do fabricante.
4.2.2. Verificação da validade das regulações
Utilizar etanóis de referência designados pelas letras C (etanol da
cana do açúcar), V (etanol do vinho), B (etanol da beterraba), que
apresentem um teor isotópico diferente, mas precisamente calibrado.
O seu significado é o seguinte: C — álcool de cana de açúcar ou de
milho; V — álcool de vinho e B — álcool de beterraba. Estas amos-
tras são fornecidas pelo «Bureau communautaire de référence».
Seguindo o modo operatório descrito em 4.3 determinar os valores
isotópicos dos álcoois já designados, anotando Cmes, Vmes, Bmes
(ver 5.3)
Compará-los com os valores de referência correspondentes, desig-
nados anotando Cst, Bst, Vst (ver 5.3).
Figura 2a
Espectro RMN2H de um etanol de vinho com um padrão interno
(TMU: N,N-tetrametilureia)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 70
▼B
Figura 2b
Espectro2H do etanol realizado nas mesmas condições que as da
figura 2a, mas sem multiplicação exponencial (LB = 0)
O desvio-padrão da repetibilidade obtido com a média de 10 repe-
tições de cada espectro deve ser inferior a 0,01 para a relação R e
inferior a 0,3 ppm para (D/H)Ie (D/H)II.
Os valores médios obtidos para os diferentes parâmetros isotópicos
[R, (D/H)I(D/H)II] devem situar-se no desvio-padrão da repetibili-
dade correspondente, dado, para estes parâmetros, para os três
álcoois de referência, pelo «Bureau communautaire de référence».
Caso contrário, refazer as regulações.
4.3.Condições de obtenção dos espectros RMN
Colocar a amostra de álcool preparada como em 3.3 (ou a amostra
de água preparada em 3.4) num tubo de 10 ou 15 mm e introduzir
na sonda.
As condições de aquisição de espectros RMN são as seguintes:
— a temperatura da sonda deve ser constante (por exemplo 302 K),
— tempo de aquisição de 6,8 s, pelo menos, para 1200 Hz de
largura do espectro. (Memória 16K) a 61,4 Mz, isto é, aproxima-
damente 20 ppm a 61,4 MHz ou 27 ppm a 46,1 MHz,
— impulsão: 90º,
— regular o prazo da aquisição; o seu valor deve ser da mesma
ordem de grandeza que o tempo de amostragem (dwell time) ,
— detecção em quadratura: fixar o «offset» 01 entre os sinais de
referência -OD e -CHD para o etanol e entre os sinais de
referência HOD e TMU para a água,
— determinar o valor do «offset» de separação 02 a partir do
espectro protónico medido pela bobina de separação no mesmo
tubo. É obtida uma boa separação quando O2se situar no meio
do intervalo de frequência existente entre os grupos CH3-e-
-CH2-. Utilizar o método de separação por banda larga.
Efectuar um número NS suficiente de acumulações para cada
espectro a fim de obter a relação sinal/ruído dado em n.o4-1 e
repetir NE = 10 vezes esta série de NS acumulações. Os valores de
NS dependem do tipo de espectómetro e da sonda utilizados (cf.
n.o4) e escolher-se-á, por exemplo:
EspectómetroSonda
10 mm 15 mm
7,05 T NS = 304 NS = 200
9,04 T NS = 200 NS = 1281990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 71
▼B
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
5.1.Caso do etanol
Para cada um dos 10 espectros determinar (ver espectro RMN do
etanol, fig. 2a):
Determinar:
—R¼3hII
hI¼3/C1altura do pico II CH 3CHD OH ðÞ
altura do pico I CH 2DC H2OH ðÞ
—D=HðÞI¼1;5866 /C1TI/C1mst
mA/C1D=HðÞst
tD
m
—D=HðÞII¼2;3799 /C1TII/C1mst
mA/C1D=HðÞst
tD
m
sendo
—TI¼altura do pico I CH 2DC H2OH ðÞ
altura do pico do padr ˜ao interno TMU ðÞ
—TII¼altura do pico II CH 3T CHD OH ðÞ
altura do pico do padr ˜ao interno TMU ðÞ
—C H3CHDOH mstemAver 3.3.2
—tmDver 3.1.2.3.
— (D/H)st= relação isotópica do padrão interno
(TMU) indicado no frasco fornecido pelo «Bureau communautaire
de référence» (BCR).
A utilização das alturas dos sinais, dado que tem mais precisão do
que as áreas mensuráveis, pressupõe larguras de pico a meia-altura
iguais, o que é uma aproximação razoável (figura 2b).
5.2.Caso da água
Quando a relação isotópica da água é determinada por RMN, a partir
da mistura água — TMU, utiliza-se a seguinte relação:
—D=HðÞQ
W¼0;9306 /C1TIV/C1m0
st
m0E/C1D=HðÞst
sendo
—
TIV¼´Area do pico HOD ðÞda ´agua extra´ ıda do vinho
´Area do pico do padr ˜ao interno TMU ðÞ
—m′stem′Ever 3.4.2,
— (D/H)st= relação isotópica do padrão interno (TMU) indicado no
frasco fornecido pelo «Bureau communautaire de référence»
(BCR).
5.3. Para cada um dos parâmetros isotópicos, calcular a média de 10
determinações e o intervalo de confiança.
É possível efectuar estes cálculos em série utilizando um equipa-
mento de tratamento de dados adaptável ao calculador do
espectómetro (Exemplo: RMN-FINS).
Nota:
Se após a regulação do espectómetro, existir um desvio sistemático
entre os valores médios obtidos para as características isotópicas dos
álcoois de referência (4.2.2) e os valores indicados pelo «Bureau
communautaire de référence», com uma aproximação ao desvio-
-padrão, pode aplicar-se a correcção seguinte para encontrar o valor
verdadeiro duma amostra X, qualquer.
A interpolação efectuar-se-á tomando os valores das amostras de
referência que enquadram as da amostra X.
Sendo (D/H)iX
meso valor medido e (D/H)iX
corro valor corrigido, ter-se-á:
(D/H)iX
corr= (D/H)iB
st+α[ (D/H)iX
mes− (D/H)iB
mes]
com
α¼D=HðÞVst
i/C0D=HðÞBst
i
D=HðÞVmes
i/C0D=HðÞBmes
i1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 72
▼B
Exemplo:
Amostras de referência fornecidas e padronizadas pelo Gabinete
Comunitário de Referências:
(D/H)IV
st= 102,0 ppm (D/H)IB
st= 91,95 ppm.
Amostras de referência analisadas pelo laboratório:
(D/H)IV
mes= 102,8 ppm (D/H)IB
mes= 93,0 ppm.
Amostra suspeita, não corrigida(D/H)
IX
mes= 100,2 ppm.
Calcula-se α= 1,0255 e (D/H)IX
corr= 99,3 ppm.
6. INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS
Comparar o valor RXobtido para a relação R da amostra suspeita
com as relações obtidas para os vinhos testemunha. Se RXse afastar
mais de 2 desvios-padrão do valor médio RTobtido para os vinhos
testemunha, deve presumir-se que houve adulteração.
6.1.Enriquecimento com açúcar de beterraba, açúcar de cana ou
glicose de milho
6.1.1. Caso dos vinhos
RXsuperior a RT: suspeita de adição de açúcar de beterraba.
RXinferior a RT: suspeita de adição de açúcar de cana ou de açúcar
de milho.
Notar que (D/H)IXet (D/H)WQXse apresentam aumentados.
Examinar (D/H)IX. Existe suspeita de:
— enriquecimento com açúcar de beterraba:
(D/H)IXda amostra suspeita é inferior a (D/H)IT, valor médio
obtido para as amostras testemunhas, em mais de um desvio-
-padrão da medição,
— enriquecimento com açúcar de cana ou açúcar de milho:
(D/H)IXé superior a (D/H)IT, em mais de um desvio-padrão.
Cálculo de enriquecimento, E, expresso em % vol. de etanol:
— Caso de um enriquecimento com açúcar de beterraba:
E % vol :¼tVD=HðÞT
I/C0D=HðÞX
I
D=HðÞT
I/C0D=HðÞB
I
(D/H)IB= relação isotópica para a situação I do álcool de
beterraba:
(D/H)IB= 92,5(1)
tV= título alcoométrico do vinho analisado (X).
— Caso de um enriquecimento com açúcar de cana ou de milho:
E % vol :¼tVD=HðÞX
I/C0D=HðÞT
I
D=HðÞC
I/C0D=HðÞT
I
(D/H)IC= relação isotópica para a situação do álcool de cana
de açúcar ou de milho: (D/H)IC= 110,5(1),
tV= título alcoométrico do vinho analisado (X).
6.1.2. Caso dos mostos, mostos concentrados e mostos concentrados recti-
ficados
Os valores dos parâmetros isotópicos do álcool extraído, como indi-
cado em 3.1, do produto fermentado obtido (3.2) a partir do mosto,
mosto concentrado e mosto concentrado rectificado são examinados,
de acordo com as prescrições do ponto 6. «Interpretação dos resul-
tados», ponto 6.1.1, comparativamente ao álcool extraído do
produto de fermentação dos mostos naturais testemunha.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 73
(1) Estes valores são dados, enquanto se espera a constituição de um banco de dados
comunitário.
▼B
O enriquecimento, E % vol, exprime o volume de álcool adicionado
ao produto fermentado. Conhecendo a diluição eventualmente efec-
tuada antes da fermentação (mostos concentrados e mostos
concentrados rectificados) e admitindo que 16,83 g de açúcar dão
origem a 1 % vol de álcool, calcular a quantidade, em massa, de
açúcar adicionado por litro de mosto, mosto concentrado ou mosto
concentrado rectificado.
6.2.Enriquecimento com uma mistura de açúcar de beterraba e de
açúcar de cana ou de glicose de milho
As relações isotópicas (D/H)Ie R são menos alteradas do que no
caso do enriquecimento com um único tipo de açúcar.
(D/H)IIé aumentado, bem como (D/H)WQ.
A confirmação destas adições pode ser feita através da determinação
da relação13C/12C do etanol por espectrometria de massa; neste caso,
essa relação é aumentada.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 74
▼B
9.CINZAS
1. DEFINIÇÃO
Chama-se cinzas ao conjunto dos produtos da incineração do resíduo
da evaporação do vinho, conduzida de modo a obter a totalidade dos
catiões (excluindo o amónio) soba forma de carb onatos e outros sais
minerais anidros.
2. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Incineração do extracto do vinho conduzida entre 500 ºC e 550 ºC
até à combustão completa do carbono.
3. APARELHAGEM E UTENSÍLIOS
3.1. Banho de água a 100 ºC.
3.2. Balança sensível a 1/10 de miligrama.3.3. Placa de aquecimento ou evaporador de infra-vermelho.
3.4. Forno eléctrico com regulação da temperatura.
3.5. Exsicador.3.6. Cápsula de platina de 70 mm de diâmetro e 25 mm de altura de
fundo plano.
4. MODO OPERATÓRIO
Colocar 20 ml de vinho numa cápsula de platina, previamente tarada
(P
og). Evaporar em banho de água a 100 ºC e aquecer o resíduo
numa placa de aquecimento a 200 ºC ou debaixo do evaporador de
infra-vermelho até à carbonização. Quando o resíduo não emitir
vapor, colocar a cápsula no forno eléctrico levado a 525 ºC ± 25 ºC.
Após 15 min. de carbonização, retirar a cápsula do forno, juntar 5 ml
de água destilada que se evapora em banho de água ou debaixo do
evaporador de infra-vermelho, e aquecer de novo a 525 ºC durante
dez minutos.
Se a combustão das partículas carbonizadas não for total, recomeçar
as operações de lavagem das partículas carbonizadas, de evaporação
de água e de incineração.
Em relação aos vinhos ricos em açúcares, recomenda-se a adição de
algumas gotas de óleo vegetal puro ao extracto, antes da primeira
incineração, para evitar o transbordar do conteúdo.
Após arrefecimento no exsicador, a cápsula é pesada, sendo P1g.
O peso de cinzas correspondente à toma de ensaio é: p = (P1−Po)g .
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
5.1. Modo de cálculo
O peso p das cinzas expresso em gramas por litro com dois decimais
é: P = 50 · p.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 75
▼B
10.ALCALINIDADEDASCINZAS
1. DEFINIÇÃO
Chama-se alcalinidade das cinzas à soma dos catiões, com excepção
do amónio, combinados com os ácidos orgânicos do vinho.
2. FUNDAMENTO DO MÉTODO
Titulação, em presença de metil-laranja, das cinzas solubilizadas a
quente por um excesso conhecido de ácido titulado.
3. REAGENTES E MATERIAL
3.1. Solução 0,05 M de ácido sulfúrico (H2SO4).
3.2. Solução 0,1 M de hidróxido de sódio (NaOH).3.3. Solução de metil-laranja a 0,1 g p. 100 ml em água destilada.
3.4. Banho de água a 100 ºC.
4. MODO OPERATÓRIO
Na cápsula de platina que contém as cinzas de 20 ml de vinho,
colocar 10 ml de solução 0,05 M de ácido sulfúrico (3.1); colocar
num banho de água a 100 ºC durante aproximadamente 15 min.,
esmagando o resíduo com uma vareta de vidro para activar a disso-
lução. Em seguida, juntar duas gotas de solução de metil-laranja e
titular o excesso de ácido sulfúrico com a solução de hidróxido de
sódio (3.2) até à viragem do indicador para amarelo.
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
Modo de cálculo
A alcanilidade das cinzas, expressa em miliequivalentes por litro,
com um decimal é:
A = 5 (10−n),n = número de mililitros de hidróxido de sódio 0,1 M.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 76
▼B
11.CLORETOS
1. FUNDAMENTO DO MÉTODO
Os cloretos são doseados directamente no vinho por potenciometria
utilizando o eléctrodo Ag/AgCl.
2. APARELHAGEM
2.1. Medidor de pH milivoltimetro graduado de 2 em 2 mV, pelo menos.2.2. Agitador magnético.2.3. Eléctrodo Ag/AgCl, com uma solução saturada de nitrato de potássio
como electrólito.
2.4. Microbureta graduada em 1/100 de ml.2.5. Cronómetro.
3. REAGENTES
3.1. Solução-padrão de cloretos; dissolvem-se em água destilada 2,1027 g
de cloreto de potássio, KCl (max. 0,005 % ºBrix), desidratados antes
da utilização por conservação durante alguns dias num exsicador;
perfazer um litro; 1 ml desta solução contém 1 mg de Cl
−.
3.2. Solução titulada de nitrato de prata: dissolvem-se 4,7912 g de nitrato
prata, AgNO3, para análise e perfaz-se 1 litro com uma solução
alcoólica a 10 p. 100 (v/v): 1 ml desta solução corresponde a 1 mg
de Cl−.
3.3. Ácido nítrico puro a, pelo menos, 65 p. 100 ( ρ20= 1,40 g/ml).
4. MODO OPERATÓRIO
4.1. Introduzem-se 5,0 ml de solução-padrão de cloretos num vaso cilín-
drico de 150 ml colocado sobre um agitador magnético, dilui-se até
cerca de 100 ml com água destilada e acidifica-se com 1,0 ml de
ácido nítrico a 65 p. 100, no mínimo. Depois de se mergulhar o eléc-
trodo, titular, adicionando com a microbureta, a solução titulada de
nitrato de prata, agitando moderadamente. As adições efectuadas são
de início de 1,00 ml para os quatro primeiros ml; ler os valores
correspondentes em milivolts. Seguidamente, adicionar os 2 ml
seguintes por fracções de 0,20 ml; por fim, retomar as adições por
fracções de 1 ml até que se tenha deitado 10 ml no total. Após
cada adição, esperar cerca de 30 s antes de efectuar a leitura dos
milivolts correspondentes. Registar os valores obtidos em papel mili-
métrico, em função dos mililitros de solução titulada
correspondentes e determinar o potencial do ponto de equivalência
segundo o ponto de inflexão da curva obtida.
4.2. Introduzem-se 5 ml da solução-padrão de cloretos num vaso cilín-
drico de 150 ml, bem como 95 ml de água destilada e 1 ml de
ácido nítrico a 65 p. 100, no mínimo. Mergulhar o eléctrodo e
titular, agitando até à obtenção do potencial do ponto de equi-
valência. Repete-se esta determinação até que se tenha obtido uma
boa concordância dos resultados. É necessário efectuar este controlo
antes de cada série de doseamentos de cloretos nas amostras.
4.3. Deitam-se 50 ml de vinho a analisar num vaso cilíndrico de 150 ml.
Adicionam-se 50 ml de água destilada e 1 ml de ácido nítrico a, pelo
menos, 65 p. 100 e titula-se como indicado em 4.2.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 77
▼B
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
5.1.Cálculos
Se n representar o número de mililitros de solução titulada de nitrato
de prata, o teor em cloreto de líquido estudado é:
20 × n expresso em miligramas de Cl por litro,0,5633 × n expresso em miliequivalentes por litro,32,9 × n expresso em miligramas de cloreto de sódio por litro.
5.2.Repetibilidade (r):
r = 1,2 mg de Cl por litro
r = 0,03 mé/l
r = 2,0 mg NaCl/l.
5.3.Reprodutibilidade (R):
R = 4,1 mg de Cl por litro
R = 0,12 mé/l
R = 6,8 mg NaCl/l.
6. Nota:
Doseamento muito precisoFaz-se utilizando a curva de titulação completa obtida no decurso do
doseamento do líquido estudado com a solução-padrão de nitrato de
prata.
a) Deitar 50 ml de vinho a analisar num vaso cilíndrico de 150 ml.
Adicionar 50 ml de água destilada e 1 ml de ácido nítrico a, pelo
menos, 65 p. 100. Titular com a solução de nitrato de prata,
procedendo a adições de 0,5 ml em relação às quais se regista o
potencial correspondente em milivolts. Deduzir desta primeira
titulação o volume aproximado de solução de nitrato de prata
necessário
b) Recomeçar o doseamento nas mesmas condições. Em primeiro
lugar, proceder a adições de 0,5 ml de solução titulante até que
o volume adicionado seja inferior em 1,5 a 2 ml ao volume deter-
minado em a). Proceder de seguida a adições de 0,2 ml;
continuar as adições para além do ponto de equivalência aproxi-
madamente detectado, de um modo simétrico, por adição de
0,2 ml, e, depois, de 0,5 ml.
O ponto final do doseamento e o volume de solução de nitrato de
prata exactamente gasto é obtido:
— quer traçando a curva e determinado o ponto de equivalência,
— quer pelo cálculo:
V¼V
0þ∆Vi∆∆E1
∆∆E1þ∆∆E2
sendo:
V = volume de solução titulada no ponto de equivalência.
V′= volume de solução titulada antes do maior salto de
potencial.
∆Vi= volume constante adicionado das fracções de solução
titulada, ou seja 0,2 ml.
∆∆E1= segunda diferença de potencial antes da maior
variação do potencial.
∆∆E2= segunda diferença de potencial depois da maior
variação do potencial.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 78
▼B
Exemplo:
Volume de solução titulada
de AgNO3Potencial E
em mVDiferença
∆ESegunda
diferença
∆∆E
0 204
4
0,2 208 0
4
0,4 212 2
6
0,6 218 0
6
0,8 224 0
6
1,0 230 2
8
1,2 238 4
12
1,4 250 10
22
1,6 272 22
44
1,8 316 10
34
2,0 350 8
26
2,2 376 6
20
2,4 396
Neste exemplo, o ponto final da titulação situa-se entre 1,6 e 1,8 ml:
pois é neste intervalo que aparece o maior salto de potencial ( ∆E
= 44 mV). O volume de solução titulada de nitrato de prata consu-
mido para dosear os cloretos na toma de ensaio é:
V¼1;6þ0;222
22þ10¼1;74 ml1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 79
▼B
12.SULFATOS
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS1.1.Método de referência
Precipitação do sulfato de bário e pesagem. O fosfato de bário preci-
pitado nas mesmas condições é eliminado através de uma lavagem
do precipitado com ácido clorídrico.
No caso dos mostos ou dos vinhos ricos em dióxido de enxofre,
deve ser realizada uma dessulfitagem prévia por ebulição ao abrigo
do ar.
1.2.Método rápido de ensaio
Classificação dos vinhos em várias categorias pelo método dito dos
limites, baseado na precipitação do sulfato de bário mediante utili-
zação de uma solução titulada do ião bário.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA2.1.Reagentes
2.1.1. Ácido clorídrico em solução 2 M.
2.1.2. Cloreto de bário em solução a 200 g/l de BaCl
2,2 H2O.
2.2.Modo operatório
2.2.1. Caso geral
Deitar 40 ml da amostra a analisar num tubo de centrifugação de
50 ml; adicionar 2 ml de ácido clorídrico 2 M e 2 ml de solução
de cloreto de bário a 200 g/l; agitar com uma vareta de vidro; lavar
a vareta com um pouco de água destilada e deixar em repouso
durante 5 minutos. Centrifugar durante 5 min. e, depois, decantar
com precaução o líquido sobrenadante.
De seguida, lavar o precipitado de sulfato de bário procedendo do
seguinte modo: adicionar 10 ml de ácido clorídrico 2 M, colocar o
precipitado em suspensão e centrifugar durante 5 min. Separar com
precaução o líquido sobrenadante. Repetir duas vezes a lavagem do
precipitado nas mesmas condições com 15 ml de água destilada de
cada vez.
Transvasar quantitativamente, lavando com água destilada, o precipi-
tado para uma cápsula de platina tarada que se coloca sobre um
banho de água a 100 ºC até evaporação a seco. O precipitado seco
é calcinado várias vezes durante pouco tempo sobre uma chama até
à obtenção de um resíduo branco. Deixar arrefecer num exsicador e
pesar.
Sendo m a massa em miligramas de sulfato de bário obtida.
2.2.2. Caso particular: mostos sulfitados e vinho com elevado teor em
dióxido de enxofre
Realizar previamente à eliminação do dióxido de enxofre.
Num balão cónico de 500 ml, munido de uma ampola com torneira e
de um tubo de escape, introduzir 25 ml de água e 1 ml de ácido
clorídrico puro ( ρ20= 1,15 — 1,18 g/ml). Levar esta solução à
ebulição para expulsar o ar e introduzir 100 ml de vinho pela ampola
com torneira, mantendo a solução em ebulição. Prosseguir a ebulição
até que o volume de líquido contido no balão cónico esteja reduzido
a cerca de 75 ml; transvasar quantitativamente, após arrefecimento,
para um balão graduado de 100 ml. Completar até ao traço de
referência com água. Proceder ao doseamento dos sulfatos a partir
duma toma de ensaio de 40 ml, tal como indicado em 2.2.1.
2.3.Expressão dos resultados
2.3.1. Cálculos
O teor em sulfatos, expresso em miligramas por litro de sulfato de
potássio, K2SO4,é :
18,67 × m.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 80
▼B
O teor do mosto ou do vinho em sulfatos é expresso em miligramas
por litro de sulfato de potássio, sem decimal.
2.3.2. Repetibilidade:
até 1000 mg/l: r = 27 mg/l
cerca de 1 500mg/l: r = 41 mg/l.
2.3.3. Reprodutibilidade:
até 1000 mg/l: R = 51 mg/l
cerca de 1 500 mg/l: R = 81 mg/l.
3. MÉTODO RÁPIDO DE ENSAIO3.1.Reagentes
3.1.1. Solução titulada de cloreto de bário
Dissolvem-se 2,804 g de cloreto de bário, BaCl
2,2 H2O, e 10 ml de
ácido clorídrico ( ρ20= 1,15 a 1,18 g/ml) numa quantidade de água
suficiente para obter 1 litro de solução; 1 ml desta solução precipita
uma quantidade de iões sulfato equivalente a 2 mg de sulfato de
potássio.
3.1.2. Ácido sulfúrico ( ρ20= 1,84 g/ml) em solução diluída 1/10 (m/v).
3.2.Modo operatório
Em três tubos de ensaio, deitar 10 ml de mosto ou de vinho;
adicionar ao tubo n.o1: 3,5 ml, ao n.o2: 5 ml e ao n.o3: 10 ml da
solução de cloreto de bário. Agitar e levar à ebulição; deixar
repousar uma a duas horas. O líquido de cada tubo, decantado, é
filtrado e dividido em duas partes. A uma, adicionar algumas gotas
da solução diluída de ácido sulfúrico, à outra adicionar algumas
gotas da solução de cloreto de bário. Examinar cada tubo e anotar a
sua limpidez ou o seu aspecto turvo. A interpretação é dada no
quadro seguinte.
Vinho Cloreto de bárioVinho filtrado +
ácido sulfúrico
diluídosolução de
cloreto de bário
1.oensaio(ml) (ml) turvo límpido
10 3,5(menos de 0,7 g K2SO4/l)
límpido turvo
(mais de 0,7 g K2SO4/l)
2.oensaio 10 5turvo límpido
(menos de 1 g K2SO4/l)
límpido turvo
(mais de 1 g K2SO4/l)
3.oensaio 10 10turvo límpido
(menos de 2 g K2SO4/l)
límpido turvo
(mais de 2 g K2SO4/l)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 81
▼B
13.ACIDEZ TOTAL
1. DEFINIÇÃO
A acidez total do vinho é a soma dos ácidos tituláveis quando se
leva o pH do vinho a 7 por adição de uma solução alcalina titulada.
O dióxido de carbono não está incluído na acidez total.
2. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Titulação potenciométrica, ou titulação em presença de azul de
bromotimol, como indicador do fim da reacção, por comparação
com um padrão de cor.
3. REAGENTES
3.1. Solução tampão pH 7,0:
Fosfato monopotássico KH2PO4: 107,3 g
Solução M de hidróxido de sódio (NaOH): 500 ml,Água q.b. para: 1 000 ml.
As soluções tampão de referência comerciais podem igualmente ser
utilizadas.
3.2. Solução 0,1 M de hidróxido de sódio (NaOH).
3.3. Solução de azul de bromotimol a 4 g/l.
Azul de bromotimol (C
27H28Br2O5S)…............. 4g
Álcool neutro a 96 % vol. …...................... 200 ml
Após solubilidade, juntar:
Água isenta de CO2… ............................. 200ml
Solução M de hidróxido de sódio
q.b. para coloração azul-verde (pH 7) …........... 7,5 ml
Água q.b. para ….................................. 1 000 ml
4. APARELHAGEM
4.1. Trompa de vácuo de água.4.2. Balão de vácuo de 500 ml.
4.3. Potenciómetro de escala calibrada em unidades pH e eléctrodos. O
electródio de vidro deve ser conservado em água destilada. O eléc-
trodos de calomel-cloreto de potássio saturado deve ser conservado
numa solução saturada de cloreto de potássio. Um eléctrodos combi-
nado é o mais frequentemente utilizado; deve conservar-se em água
destilada.
4.4. Vaso cilíndrico de 50 ml de capacidade (caso dos vinhos) e de
100 ml de capacidade (caso dos mostos concentrados rectificados).
5. MODO OPERATÓRIO5.1.Preparação da amostra
5.1.1. Caso dos vinhos
Eliminação do dióxido de carbono. Colocar cerca de 50 ml de vinho
num balão de vácuo; agitar e, simultaneamente, fazer o vácuo por
meio da trompa de vácuo de água. A agitação deve durar 1 a 2 min.
5.1.2. Caso dos mostos concentrados rectificados
Introduzir 20 ml de mosto concentrado rectificado, pesado exacta-
mente, num balão aferido de 500 ml. Completar com água até ao
traço. Homogeneizar.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 82
▼B
5.2.Titulação potenciométrica
5.2.1. Calibração do potenciómetro
A calibração do potenciómetro faz-se a 20 ºC seguindo as indicações
dadas para o aparelho utilizado com a solução-tampão de pH 7,00 a
20 ºC.
5.2.2. Técnica de uma medição
Num vaso cílindrico (4.4) colocar um volume de amostra preparado
como indicado em 5.1, igual a 10 ml no caso do vinho e a 50 ml no
caso do mosto concentrado rectificado. Juntar aproximadamente
10 ml de água destilada e deitar por meio de bureta a solução 0,1 M
de hidróxido de sódio (3.2) até que o pH seja igual a 7,0 a 20 ºC. A
adição do licor alcalino deve ser efectuada lentamente e a solução
agitada de um modo constante. Seja n o número de mililitros de
NaOH 0,1 M adicionados.
5.3.Titulação com indicador (azul de bromotimol)
5.3.1. Ensaio prévio: estabelecimento do padrão de cor
Num vaso cilíndrico (4.4), deitar 25 ml de água destilada fervida,
1 ml de solução de azul de bromotimol (3.3) e um volume de
amostra preparado como indicado em 5.1, igual a 10 ml no caso do
vinho e a 50 ml no caso do mosto concentrado rectificado. Adicionar
a solução 0,1 M de hidróxido de sódio (3.2) até à obtenção de uma
coloração azul-verde. Juntar 5 ml da solução-tampão pH 7 (3.1).
5.3.2. Dosagem
Num vaso cilíndrico (4.4), deitar 30 ml de água destilada fervida,
1 ml de solução de azul de bromotimol (3.3) e um volume preparado
como indicado em 5.1, igual a 10 ml no caso do vinho e a 50 ml no
caso do mosto concentrado rectificado. Adicionar a solução 0,1 m de
hidróxido de sódio (3.2) até à obtenção de uma coloração idêntica à
obtida no ensaio prévio (5.3.1). Seja n o número de mililitros de
solução de hidróxido de sódio 0,1 M adicionados.
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS6.1.Modo de cálculo
6.1.1. Caso dos vinhos
A acidez total, expressa em miliequivalentes por litro, será:A = 10 n.É expressa com um decimal.A acidez total, expressa em gramas de ácido tartárico por litro, será:
A′= 0,075 · A
É dada com um decimal.
6.1.2. Caso dos mostos concentrados rectificados
— Acidez total expressa em miliequivalentes por quilo de mosto
concentrado rectificado:
a=5·n .
— Acidez total expressa em miliequivalentes por quilo de açúcares
totais:
A¼
500/C1n
P
P = teor p. 100 (m/m) de açúcares totais.
É expressa com um decimal.
6.2.Repetibilidade (r) para a titulação com indicador
r = 0,9 me/l
r = 0,07 g de ácido tartárico/l
para vinhos brancos, rosados e tintos.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 83
▼B
6.3.Reprodutibilidade (R): para a titulação com indicador (5.3)
Para os vinhos brancos e rosados:
R = 3,6 me/l
R = 0,3 g de ácido tartárico/l.
Para os vinhos tintos:R = 5,1 me/l
R = 0,4 g de ácido tartárico/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 84
▼B
14.ACIDEZ VOLÁTIL
1. DEFINIÇÃO
A acidez volátil é constituída pelos ácidos que pertencem à série
acética e que se encontram no vinho quer no estado livre quer sob
a forma de sais.
2. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Titulação dos ácidos voláteis, separados do vinho, por arrastamento
com vapor de água e rectificação dos vapores.
O vinho é previamente desembaraçado do dióxido de carbono.A acidez do dióxido de enxofre livre e do dióxido de enxofre combi-
nado destilado nestas condições deve ser descontada da acidez do
destilado.
A acidez do ácido sórbico eventualmente adicionado ao vinho deve
igualmente ser descontada.
Nota:O ácido salicílico utilizado em alguns países para estabilizar os
vinhos previamente à análise, encontra-se em parte no destilado. É
necessário doseá-lo e descontá-lo na acidez. O método de dosea-
mento é dado no n.
o7 deste capítulo.
3. REAGENTES
3.1. Ácido tartárico cristalizado (C4H6O6)
3.2. Solução 0,1 M de hidróxido de sódio (NaOH)3.3. Solução de fenolftaleína a 1 por 100 em álcool a 96 % vol. neutro3.4. Ácido clorídrico ( ρ
20= 1,18 a 1,19 g/ml) diluído ¼ (v/v)
3.5. Solução 0,005 M de iodo (I2)
3.6. Iodeto de potássio cristalizado (KI)
3.7. Goma de amido a 5 g/l
Dissolver 5 g de amido em aproximadamente 500 ml de água. Levar
à ebulição, agitando e mantendo a ebulição durante 10 minutos;
adicionar 200 g de cloreto de sódio. Levar o volume ao litro depois
de arrefecer.
3.8. Solução saturada de borato de sódio (Na2B4O7,1 0H2O), aproximada-
mente 55 g/l a 20 ºC
4. APARELHOS
4.1. Aparelho de arrastamento de vapor de água composto por:
1. Um gerador de vapor de água; o vapor de água produzido deve
estar isento de dióxido de carbono;
2. Um borbulhador;
3. Uma coluna rectificadora;
4. Um refrigerante.
Este aparelho deve corresponder aos três ensaios seguintes:
a) Colocar no borbulhador 20 ml de água fervida; recolher 250 ml
de destilado e adicionar 0,1 ml de solução 0,1 M de hidróxido
de sódio (3.2) e 2 gotas de solução de fenolftaleína (3.3), a
coloração rosa deve ser estável durante, pelo menos, 10
segundos (vapor de água isento de dióxido de carbono).
b) Colocar no borbulhador 20 ml de uma solução 0,1 M de ácido
acético. Recolher 250 ml de destilado. Titular com a solução
0,1 M de hidróxido de sódio (3.2). O volume empregue deve
ser inferior ou igual a 19,9 ml. (Ácido acético arrastado
≥99,5 %.)
c) Colocar no borbulhador 20 ml de uma solução M de ácido
láctico. Recolher 250 ml de destilado e titular com a solução
0,1 M de hidróxido de sódio (3.2). O volume empregue deve
ser inferior ou igual a 1,0 ml. (Ácido láctico destilado
≤0,5 %.)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 85
▼B
Qualquer aparelho ou técnica que satisfaça estes ensaios cons-
titui um aparelho ou uma técnica oficial internacional.
4.2. Trompa de vácuo de água
4.3. Balão de vácuo
5. MODO OPERATÓRIO
5.1.Preparação da amostra: eliminação do dióxido de carbono.
Colocar cerca de 50 ml de vinho num balão de vácuo; agitar e,
simultâneamente, fazer o vácuo por meio de uma trompa de vácuo
de água. A agitação deve durar 1 a 2 min.
5.2.Arrastamento por vapor de água
Colocar no borbulhador 20 ml de vinho ao qual foi retirado o
dióxido de carbono como indicado em 5.1. Juntar aproximadamente
0,5 g de ácido tartárico (3.1). Recolher pelo menos 250 ml de desti-
lado.
5.3.Titulação
Titular com a solução 0,1 M de hidróxido de sódio (3.2) em
presença de duas gotas de solução de fenolftaleina (3.3), sendo n
ml o volume utilizado.
Adicionar 4 gotas de ácido clorídrico diluído ¼ (3.4), 2 ml de goma
de amido (3.7) e alguns cristais de iodeto de potássio (3.6). Titular o
dióxido de enxofre livre com a solução 0,005 M de iodo (3.5), sendo
n′ml o volume empregue.
Juntar a solução saturada de borato de sódio (3.8) até ao reapareci-
mento da coloração rosa. Titular o dióxido de enxofre combinado
com a solução 0,005 M de iodo (3.5), sendo n ″ml o volume
empregue.
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
6.1.Modo de cálculo
A acidez volátil expressa em miliequivalentes por litro, com um
decimal, será:
A = 5 (n − 0,1 n ′− 0,05 n ″).
A acidez volátil, expressa em g de ácido acético por litro, com dois
decimais, será:
0,300 (n − 0,1 n ′− 0,05 n ″).
6.2.Repetibilidade (r)
r = 0,7 mé/l
r = 0,04 g de ácido acético/l.
6.3.Reprodutibilidade (R)
R = 1,3 mé/l
R = 0,08 g de ácido acético/l.
6.4.Caso de um vinho adicionado de ácido sórbico
Dado que o ácido sórbico é susceptível de arrastamento pelo vapor
de água a 96 % para um volume de destilado de 250 ml, a sua
acidez deve ser deduzida da acidez volátil, tendo em conta que
100 mg de ácido sórbico correspondem a uma acidez de 0,89 milie-
quivalentes ou a 0,053 g de ácido acético e conhecendo o teor de
ácido sórbico (mg/l) determinado pelo método correspondente.
7. DOSAGEM DO ÁCIDO SALICÍLICO ARRASTADO NO DESTI-
LADO DA ACIDEZ VOLÁTIL
7.1.Fundamento
Após dosagem da acidez volátil e correcção do dióxido de enxofre, a
presença do ácido salicílico é caracterizada, após acidificação, pela
coloração violeta que surge pela adição de um sal de ferro III.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 86
▼B
A dosagem do ácido salicílico arrastado com a acidez volátil para o
destilado é efectuada num segundo destilado, de volume igual àquele
com que foi feita a dosagem da acidez volátil. Neste destilado, o
ácido salicílico é doseado por um método colorimétrico de compa-
ração, sendo depois deduzido da acidez do destilado da acidez
volátil.
7.2.Reagentes
7.2.1. Ácido clorídrico (HCL) ( ρ20= 1,18 à 1,19 g/ml)
7.2.2. Tiossulfato de sódio (Na2S2O3,5H2O) 0,1 M
7.2.3. Solução de sulfato de ferro III e de amónia [Fe2(SO4)3, (NH4)2SO4.
24 H2O] a 10 p. 100 (m/v)
7.2.4. Solução de salicilato de sódio 0,01 M. Solução contendo 1,60 g/l de
salicilato de sódio (NaC7H5O3)
7.3.Modo operatório
7.3.1. Caracterização do ácido salicílico no destilado da acidez volátil
Imediatamente após dosagem da acidez volátil e à correcção do
dióxido de enxofre livre e combinado, juntar no balão cónico 0,5 ml
de ácido clorídrico (7.2.1), 3 ml da solução 0,1 M de tiossulfato de
sódio (7.2.2) e 1 ml da solução de sulfato de ferro III e de amónia
(7.2.3).
Em presença de ácido salicílico, surge uma coloração violeta.
7.3.2. Dosagem do ácido salicílico
No balão cónico mencionado anteriormente, marcar com um traço
de referência o volume de destilado. Esvaziar e lavar o balão.
Submeter uma nova toma de 20 ml de vinho ao arrastamento com
vapor de água e recolher o destilado no balão cónico até ao traço
de referência. Juntar 0,3 ml de ácido clorídrico puro (7.2.1) e 1 ml
da solução de sulfato de ferro III e de amónia (7.2.3). O conteúdo do
balão cónico adquire uma coloração violeta.
Num balão cónico idêntico ao balão com o traço de referência,
deitar águar destilada até ao mesmo nível que o do destilado. Juntar
0,3 ml de ácido clorídrico puro (7.2.1) e 1 ml de solução de sulfato
de ferro III e de amónia (7.2.3). Deitar por meio de bureta a solução
de salicilato de sódio 0,01 M (7.2.4) até à obtenção de uma colo-
ração violeta da mesma intensidade que a do balão cónico que
contém o destilado de vinho.
Seja n/tripleprimeo número de mililitros gastos.
7.4.Correcção da acidez volátil
Subtrair o volume 0,1 · n /tripleprimeml do volume n ml de solução de hidró-
xido de sódio 0,1 M utilizada para titular a acidez do destilado usado
na dosagem da acidez volátil.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 87
▼B
15.ACIDEZ FIXA
1. PRINCÍPIO
A acidez fixa é determinada pela diferença entre a acidez total e a
acidez volátil.
2. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
A acidez fixa é expressa:
— Em miliequivalentes por litro;
— Em gramas de ácido tartárico por litro.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 88
▼B
16.ÁCIDO TARTÁRICO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
1.1.Método de referência
O ácido tartárico, precipitado soba forma de racemato de cálcio, é
doseado por gravimetria. Este doseamento pode ser completado por
um doseamento volumétrico de comparação. As condições de preci-
pitação — pH, volume total empregado, concentração dos iões
precipitantes — são tais que a precipitação do racemato de cálcio é
total, enquanto que o D.(−) tartarato de cálcio fica em solução.
Quando o vinho tiver sido adicionado de ácido metatartárico, este
deverá ser previamente hidrolizado, pois induz a uma precipitação
incompleta do racemato de cálcio.
1.2.Método usual
O ácido tartárico, isolado com a ajuda de uma coluna permutadora
de aniões, é doseado colorimetricamente no eluído, graças à colo-
ração vermelha que produz em reacção com o ácido vanádico. Este
eluído contém ainda ácido málico e ácido láctico que não são inter-
ferentes.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA
2.1.Método ponderal
2.1.1. Reagentes
2.1.1.1. Solução de acetato de cálcio contendo 10 g/l de cálcio
Carbonato de cálcio puro: Ca CO3…................. 25 g
Ácido acético (CH3COOH) ( ρ20= 1,05 g/ml) …...... 40 ml
Água, q.b. para: … .................................... 1 l
2.1.1.2. Racemato de cálcio cristalizado: Ca C4O6H4,4 H2O
Num vaso cilíndrico de 400 ml, introduzir 20 ml de uma solução de
ácido L (+) tartárico a 5 g/l, 20 ml de uma solução de D (−) tartarato
de amónio a 6,126 g/l e 6 ml da solução de acetato de cálcio a 10 g/l
de cálcio (2.1.1.1).
Deixar precipitar durante duas horas. Recolher o precipitado sobre
um cadinho filtrante de porosidade n.o4, lavá-lo três vezes com
30 ml de água destilada (aproximadamente). Secar na estufa a 70 ºC
até peso constante. Com as quantidades de reagente utilizadas,
obtêm-se aproximadamente 340 mg de racemato de cálcio cristali-
zado.
Conservar num frasco tapado.
2.1.1.3. Licor de precipitação (pH 4,75)
— ácido D (−) tartárico …........................ 122 mg
— Hidróxido de amónio ( ρ20= 0,97 g/ml)
diluído a 25 % (v/v) … ......................... 0,3ml
— solução de acetato de cálcio a 10 g por litro …. 8,8 ml— Água q.b.: …................................... 1 000 ml
Dissolver o ácido D (−) tartárico e adicionar o hidróxido de amónio;
levar o volume aproximadamente a 900 ml; adicionar 8,8 ml de
solução de acetato de cálcio (2.1.1.1) e, depois de misturar, ajustar
o pH a 4,75 com ácido acético.
Acertar o litro.
O racemato de cálcio, sendo ligeiramente solúvel neste licor,
convém aí introduzir 5 mg de racemato de cálcio por litro,
submetê-lo a agitação durante 12 h e filtrá-lo.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 89
▼B
2.1.2. Modo operatório
2.1.2.1. Caso dos vinhos não adicionados de ácido metatartárico
Num vaso cilíndrico de 600 ml, colocar 500 ml de licor de precipi-
tação e 10 ml de vinho. Misturar, friccionando as paredes do vaso
com a extremidade de uma vareta de vidro. Deixar precipitar durante
12 horas (uma noite).
Filtrar por um cadinho filtrante, de porosidade n.o4, tarado e
disposto sobre um balão de vácuo limpo, arrastando o precipitado.
Lavar o frasco onde se efectuou a precipitação com o filtrado e
arrastar as últimas partículas de precipitado.
Secar na estufa a 70 ºC até peso constante. Pesar, sendo p o peso de
racemato de cálcio Ca C4O6H4cristalizado com 4 moléculas de água.
2.1.2.2. Caso dos vinhos adicionados de ácido metatartárico
Quando se trabalha com um vinho a que foi adicionado ácido meta-
tartárico ou quando se suspeita desta adição, deve proceder-se à
hidrólise do ácido nas condições seguintes.
Num balão cónico de 50 ml, colocar 10 ml de vinho e 0,4 ml de
ácido acético puro (CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml). Fechar o balão
com uma rolha munida de um descarregador e levar à ebulição
durante 30 minutos.
Depois de arrefecer, transvasar o líquido contido no balão cónico
para um vaso cilíndrico; enxaguar o balão cónico 2 vezes com 5 ml
de água e continuar como está indicado no modo acima referido.
No resultado do doseamento, o ácido metatartárico é contabilizado
como ácido tartárico.
2.1.3. Expressão dos resultados
Uma molécula de racemato de cálcio corresponde a meia molécula
de ácido L (+) tartárico do vinho.
A quantidade de ácido tartárico por litro de vinho, expressa em
miliequivalentes, é igual a: 384,5 p.
Ela é dada com uma casa decimal.
A quantidade de ácido tartárico por litro de vinho expresso em
gramas de ácido tartárico, é igual a: 28,84 p.
Ela é dada com uma casa decimal.
A quantidade de ácido tartárico por litro de vinho, expressa em
gramas de tartarato ácido de potássio, é igual a: 36,15 p.
Ela é dada com uma casa decimal.
2.2.Doseamento volumétrico de comparação
2.2.1. Reagentes
2.2.1.1. Ácido clorídrico (HCL) ( ρ20= 1,18 a 1,19 g/ml) diluído a 1/5 (v/v).
2.2.1.2. Solução de EDTA 0,05 M
EDTA (sal dissódico bihidratado do ácido etilenodia-
mino-tetracético (C10H14N2O8Na2,2 H2O) …............. 18,61 g
Água destilada q.b. …................................. 1 000 ml
2.2.1.3. Solução de hidróxido de sódio a 40 % (m/v)
Hidróxido de sódio (NaOH) …........................ 40 g
Água destilada q.b. …................................ 100 ml
2.2.1.4. Indicador complexométrico com ácido calcon-carbónico: 1 % (m/m)
Ácido calcon-carbónico ou ácido 2-hidroxi-4-sulfo-1-nafti-
lazo-3-naftoico (C21H14N2O7S,3H2O)….................... 1g
Sulfato de sódio anidro (Na2SO4)… ....................... 100g1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 90
▼B
2.2.2. Modo operatório
Após pesagem, colocar de novo o cadinho filtrante contendo o race-
mato de cálcio no balão de vácuo. Dissolver o precipitado com 10 ml
de ácido clorídrico diluído (2.2.1.1). Lavar o cadinho com 50 ml de
água destilada.
Adicionar 5 ml da solução de hidróxido de sódio a 40 % (2.2.1.3) e
cerca de 30 mg do indicador (2.2.1.4). Titular com EDTA 0,05 M
(2.2.1.2). Seja n o número de mililitros gastos.
2.2.3. Expressão de resultados
A quantidade de ácido tartárico por litro de vinho, expresso em
miliequivalentes, é igual a: 5 n.
É dada com um decimal.
A quantidade de ácido tartárico por litro de vinho, expressa em
gramas de ácido tartárico, é igual a: 0,375 n.
É dada com um decimal.
A quantidade de ácido tartárico por litro de vinho, expressa em
gramas de tartarato ácido de potássio, é igual a: 0,470 n.
É dada com um decimal.
3. MÉTODO USUAL3.1.Reagentes
3.1.1. Para o tratamento preliminar do vinho
3.1.1.1. Ácido acético (CH
3COOH ρ20= 1,05 g/ml) diluído a 30 p. 100 (v/
/v).
3.1.1.2. Permutador de aniões de forte basicidade (ex: permutador de aniões
III da Merck de 20—50 mesh) soba forma de acetato. Preparar uma
suspensão do permutador (100 g aproximadamente) em 200 ml de
ácido acético diluído a 30 % (3.1.1.1); deixar em contacto,
pelo menos, 24 h antes de o utilizar. Conservar o permutador em
ácido acético diluído a 30 p. 100 até doseamentos posteriores.
3.1.1.3. Ácido acético (CH3COOH ρ20= 1,05 g/ml) diluído a 0,5 p. 100 (v/
/v).
3.1.1.4. Solução de sulfato de sódio a 7,1 g p. 100 ml (0,5 M)
Dissolver 71 g de sulfato de sódio (Na2SO4) anidro em água desti-
lada e perfazer o volume de 1000 ml com água destilada.
3.1.2. Para o doseamento do ácido tartárico:
3.1.2.1. Solução de acetato de sódio (Na CH3COO) a 27 p. 100 (m/v)
Dissolver 270 g de acetato de sódio anidro, Na CH3COO, em água
destilada e completar até ao volume de 1 000 ml.
3.1.2.2. Reagente vanádico
Dissolver 10 g de meta-vanadato de amónio, (NH4VO3), em 150 ml
de solução de hidróxido de sódio M (3.1.2.10). Transvasar esta
solução para um balão graduado de 500 ml e juntar 200 ml da
solução de acetato de sódio a 27 p. 100 (3.1.2.1). Levar o volume a
500 ml com água destilada.
3.1.2.3. Solução de H2SO41M
3.1.2.4. Solução de H2SO40,5 M
3.1.2.5. Solução de H2SO40,05 M
3.1.2.6. Solução de ácido periódico 0,05 M
Num balão graduado de 1 000 ml, introduzir 10,696 g de periodato
de sódio Na IO4, 50 ml de ácido sulfúrico 0,5 M (3.1.2.4) e
completar até 1 000 ml com água destilada.
3.1.2.7. Solução de glicerol a 10 p. 100 (m/v)
Num balão graduado de 100 ml, colocar 10 g de glicerol C3H8O3;
completar até 100 ml com água destilada.
3.1.2.8. Solução de sulfato de sódio a 7,1 g p. 100 ml (ver 3.1.1.4)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 91
▼B
3.1.2.9. Solução de ácido tartárico a 1 g/l
Num balão graduado de 500 ml, introduzir 0,5 g de ácido tartárico,
6,66 ml de solução de hidróxido de sódio M (3.1.2.10) e completar
até 500 ml com a solução de sulfato de sódio a 7,1 p. 100 (ver
3.1.1.4).
3.1.2.10. Solução de hidróxido de sódio, NaOH, 1 M.
3.2.Aparelhagem
3.2.1. Coluna de vidro de 300 mm, aproximadamente, de comprimento e
10—11 mm de diâmetro interno, munida de uma torneira.
3.2.2. Espectrofotómetro que permita a medição da absorvência no compri-
mento de onda de 490 nm, com cubas de 10 mm de trajecto óptico.
3.3.Modo operatório
3.3.1. Preparação da coluna permutadora de iões
Colocar na coluna de vidro, acima da torneira (3.2.1), um tampão de
algodão de vidro. Impregnar este tampão com água destilada. Deitar
na coluna 10 ml da suspensão do permutadorde iões na fase acetato
(3.1.1.2). Deixar decantar. Colocar um tampão de algodão de vidro
na superfície do permutador depositado (de modo a evitar, no
decurso das lavagens posteriores, que o permutador entre de novo
em suspensão).
O permutador deve ser utilizado apenas numa única operação.
3.3.2. Isolamento dos ácidos orgânicos
Uma vez aberta a torneira, deixar correr a solução de ácido acético
até aproximadamente 2—3 mm acima do tampão de algodão de
vidro, colocado acima do permutador.
Juntar 10 ml de solução de ácido acético a 0,5 p. 100 (3.1.1.3) e
deixar depois correr o líquido até ao mesmo nível da operação ante-
rior. Repetir 4 vezes esta operação de lavagem.
Após a última lavagem, fechar a torneira e deitar, sobre o permu-
tador, 10 ml de vinho ou de mosto. Deixar o vinho escoar gota a
gota (débito médio de 1 gota/segundo) e parar o escoamento exacta-
mente acima do permutador. Deitar de novo, na coluna, 10 ml de
solução de ácido acético a 0,5/100 (3.1.1.3), deixar escoar à mesma
velocidade da operação anterior e repetir 7 vezes a operação de
lavagem, utilizando 10 ml de água de cada vez. Na última lavagem,
fechar a torneira logo que o nível do líquido se encontre um pouco
acima do tampão de algodão de vidro superior.
Eluir os ácidos fixados no permutador com a solução de sulfato de
sódio a 7,1/100 (3.1.1.4), recolher o eluído, num balão graduado de
100 ml, até ao traço de referência.
3.3.3. Dosagem do ácido tartárico
3.3.3.1. Caso dos vinhos aos quais não foi adicionado ácido
metatartárico
O balãoaé utilizado no doseamento, enquanto o balão b, no qual o
ácido tartárico é destruído pelo ácido periódico, constitui a teste-
munha.
Introduzir no balão a:
— 2 ml de H2SO4M (3.1.2.3)
— 5 ml de H2SO40,05 M (3.1.2.5)
— 1 ml de glicerol a 10 p. 100 (3.1.2.7).
Introduzir no balão b:
— 2 ml de H2SO4M (3.1.2.3)
— 5 ml de solução de ácido periódico 0,05 M (3.1.2.6)
Após 15 minutos juntar:
— 1 ml de solução de glicerol a 10 p. 100 (3.1.2.7) para destruir o
excesso de ácido periódico.
Esperar 2 min.
Deitar, agitando, primeiro no balão be depois no balão a, 5 ml de
reagente vanádico (3.1.2.2). Ligar imediatamente um cronómetro e1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 92
▼B
colocar o conteúdo dos balões aebnas cubas do espectrofotómetro.
Passados 90 segundos, medir a absorvência a 490 nm do líquido
proveniente do balão a (doseamento) em relação à testemunha (balão
b).
Se o eluído é muito rico em ácido tartárico e se a absorvência for
muito elevada, diluir o eluído com a solução de sulfato de sódio a
7,1 p. 100 e proceder à medição sobre a solução diluída.
3.3.3.2. Caso dos vi nhos aos quais foi adicionado ácido metatar-
tárico
No caso de um vinho ao qual foi adicionado ácido metatartárico, ou
se se suspeitar dessa adição, proceder à hidrólise deste ácido como é
indicado no método de referência.
Após arrefecimento, o conteúdo do balão cónico é introduzido na
coluna do que contém o permutador, bem como as águas de lavagem
do balão (2 vezes 5 ml).
Continuar como está indicado anteriormente.No resultado do doseamento, o ácido metatartárico é contabilizado
como ácido tartárico.
3.3.4. Determinação da curva de calibração
Introduzir 10, 20, 30, 20 e 50 ml da solução de ácido tartárico a 1 g/
/l (3.1.2.9) em balões graduados de 100 ml e completar até 100 ml
com a solução de sulfato de sódio a 7,1 p. 100 ml (3.1.1.4). As
concentrações destas soluções correspondem aos eluídos obtidos a
partir de vinhos que contenham 1, 2, 3, 4 e 5 g de ácido tartárico
por litro.
Em 2 balões cónicos aeb, introduzir 20 ml destas soluções e conti-
nuar como indicado para o eluído do vinho.
A representação gráfica das absorvências destas soluções, em função
do teor de ácido tartárico, é uma recta que curva ligeiramente para o
ponto zero. Especificar, se necessário, esta parte da curva, subme-
tendo-a à medição de soluções de título exactamente conhecido
inferior a 1,0 g/l.
3.3.5. Expressão dos resultados
Relacionar a absorvência medida para o eluído, utilizando a curva de
calibração para obter o teor de ácido tartárico no vinho, expresso em
gramas por litro.
Este teor é expresso com 1 decimal.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 93
▼B
17.ÁCIDO CÍTRICO
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
O ácido cítrico é transformado em oxaloacetato e acetato numa
reacção catalizada pela citrato-liase (CL):
citrato
 oxaloacetato + acetato
Na presença da malato-desidrogenase (MDH) e da lactato-desidroge-
nase (LDH), o oxaloacetato e o seu derivado de descarboxilação, o
piruvato, são reduzidos em L-malato e L-lactato pelo nicotinamida-
-adenina-dinucleótido reduzido (NADH):
Oxaloacetato + NADH + H+
L-malato + NAD+
Piruvato + NADH + H+
L-lactato + NAD+
Nestas reacções, a quantidade de NADH oxidado em NAD+é
proporcional ao citrato presente. A oxidação do NADH é medida
pela diminuição da sua absorvência no comprimento de onda 340 nm.
2. REAGENTES
2.1. Tampão pH 7,8
(glicilglicina 0,51 M; pH − 7,8; Zn2+: 0,6 · 10−3M)
Dissolver 7,13 g de glicilglicina em aproximadamente 70 ml de água
bidestilada; ajustar o pH a 7,8, com cerca de 13 ml de solução de
hidróxido de sódio NaOH 5 M; juntar 10 ml de solução de cloretode zinco ZnCl
2, de 80 mg em 100 ml e levar a 100 ml com água
bidestilada.
A solução permanece estável durante pelo menos 4 semanas a + 4 ºC.
2.2. Solução de nicotinamida-adenina-dinucleótido reduzida (NADH),
aproximadamente 6.10−3M. Dissolver 30 mg NADH e 60 mg
NaHCO3em 6 ml de água bidestilada.
2.3. Solução de malato desidrogenase/lactato desidrogenase, (MDH/
/LDH) (0,5 mg MDH/ml; 2,5 mg LDH/ml). Mistura-se 0,1 ml MDH
(5 mg MDH/ml), 0,4 ml de solução de sulfato de amónio (3,2 M) e
0,5 ml LDH (5 mg/ml).
Esta suspensão é estável durante pelo menos um ano a + 4 ºC.
2.4. Citrato-liase CL (5 mg de proteína/ml). Dissolver 168 mg do liofili-
zado em 1 ml de água gelada.
A solução é estável durante pelo menos uma semana a + 4 ºC e
durante pelo menos 4 semanas na forma congelada.
Recomenda-se que se proceda, previamente ao doseamento, à verifi-
cação da actividade da enzima.
2.5. Polivinilpolipirrolidona (PVPP)
Nota:
O conjunto dos reagentes necessários para este doseamento, estão
comercializados.
3. APARELHAGEM
3.1. Espectrofotómetro que permita efectuar medições a 340 nm, máximo
de absorção do NADH
Na sua ausência, fotómetro de espectro descontínuo que permita
efectuar as medições a 334 nm ou a 365 nm. Dado tratar-se de
medições absolutas de absorvência (sem série de calibragens, mas
com referência ao coeficiente de extinção do NADH), as escalas
dos comprimentos de onda e das absorvências do aparelho devem
ser controladas.
3.2. Cubas de vidro de 1 cm de trajecto óptico ou cubas de utilização
única1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 94
▼B
3.3. Micropipetas que permitam recolher volumes compreendidos entre
0,02 e 2 ml
4. PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
De um modo geral, o doseamento do citrato efectua-se directamente
no vinho sem descoloração prévia nem diluição, desde que o teor de
ácido cítrico seja inferior a 400 mg/l. Caso contrário, proceder à
diluição do vinho de modo a que a concentração em citrato se situe
entre 20 e 400 mg/l (quantidade de citrato na toma de ensaio
compreendida entre 5 µg e 80 µg).
No caso de um vinho tinto rico em compostos fenólicos, é acon-
selhável tratá-lo previamente pela PVPP:
Colocar em suspensão em água 0,2 g de PVPP, aproximadamente,
deixar repousar 15 minutos. Filtrar através de um filtro plissado.
Juntar a 10 ml de vinho colocado num balão cónico de 50 ml o
PVPP húmido tirado com uma espátula do filtro. Agitar durante 2 a
3 minutos. Filtrar.
5. MODO OPERATÓRIO
Dado o espectrofotómetro ser regulado no comprimento de onda de
340 nm, as medições da absorvência são feitas em cubas de 1 cm,
sendo a absorvência zero regulada em relação ao ar (sem cuba no
trajecto óptico). Introduzir nas cubas de 1 cm de espessura:
Testemunha Dosagem
Solução 2.1 1,00 ml 1,00 ml
Solução 2.2 0,10 ml 0,10 mlAmostra — 0,20 ml
Água bidestilada 2,00 ml 1,80 ml
Solução 2.3 0,02 ml 0,02 ml.
Misturar; após cerca de 5 min. ler as absorvências das soluções
testemunha e de doseamento (A
1).
Juntar:
Solução 2.4 0,02 ml 0,02 ml.
Misturar; esperar o fim da reacção (cerca de 5 minutos) e ler as
absorvências das soluções testemunha e de doseamento (A2).
Determinar as diferenças de absorvências (A1−A2) da testemunha e
da solução de doseamento.
Deduzir a diferença de absorvências da testemunha da diferença de
absorvências do doseamento.
∆A= ∆AD−∆AT
Nota:
O tempo necessário à acção das enzimas pode variar de lote para
lote; o que foi mencionado anteriormente foi-o apenas a título indi-
cativo. Recomenda-se a sua determinação para cada lote.
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
O teor em ácido cítrico é dado em miligramas por litro (mg/l), sem
decimais.
6.1.Modo de cálculo
A concentração em miligramas por litro é dada pela fórmula geral:
C¼V/C1PM
ε/C1d/C1v/C1∆A
V = volume do teste em ml (neste caso 3,14 ml)
v = volume da amostra em ml (neste caso 0,2 ml)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 95
▼B
P.M. = massa molecular da substância a dosear (neste caso ácido
cítrico anidro = 192,1)
d = trajecto óptico da cuba em cm (neste caso 1 cm)
ε= coeficiente de absorção do NADH a 340 nm,
ε= 6,3 mmole−1. 1.cm−1.
Obtém-se:
C = 479 · ∆A.
Se uma diluição tiver sido efectuada aquando da preparação da
amostra, multiplicar o resultado pelo factor de diluição.
Nota:
a 334 nm: C = 488 · ∆A (= 6,2 mmole−1·l·c m−1)
a 365 nm: C = 887 · ∆A (= 3,4 mmole−1·l·c m−1)
6.2.Repetibilidade (r)
Teor em ácido cítrico inferior a 400 mg/l: r = 14 mg/l.Teor em ácido cítrico superior a 400 mg/l: r = 28 mg/l.
6.3.Reprodutibilidade (R)
Teor em ácido cítrico inferior a 400 mg/l: R = 39 mg/l.
Teor em ácido cítrico superior a 400 mg/l: R = 65 mg/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 96
▼B
18.ÁCIDO LÁCTICO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS1.1.Método de referência
Em presença do nicotinamida-adenina-dinucleótido (NAD), o ácido
láctico total (L-lactato e D-lactato) é oxidado em piruvato numa
reacção catalizada pelas L-lactato desidrogenase (L-LDH) e D-
-lactato desidrogenase (D-LDH).
O equilíbrio da reacção é em favor do lactato. A eliminação do piru-
vato do meio de reacção desloca o equilíbrio no sentido da formação
de piruvato.
Em presença de L-glutamato, o piruvato é transformado em L-
-alanina, reacção que é catalizada pela glutamato-piruvato-
-transaminase (GPT).
(1)L-lactato + NAD
+
piruvato + NADH + H+
(2)D-lactato + NAD+
piruvato + NADH + H+
(3)Piruvato + L-glutamato
 L-alanina + α-cetogluta-
rato
A formação de NADH, medida pelo aumento da absorvência no
comprimento de onda de 340 nm, é proporcional à quantidade de
lactato presente.
Nota:
O ácido L-láctico pode ser determinado individualmente pela apli-
cação das reacções (1) e (3).
O ácido D-láctico pode ser determinado individualmente pela apli-
cação das reacções (2) e (3).
1.2.Método usual
Após separação do ácido láctico numa coluna de resina permutadora
de aniões, este composto é oxidado em etanal e doseado por colori-
metria após reacção com o nitroprussiato de sódio e a piperidina.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA2.1.Reagentes
2.1.1. Solução tampão pH 10 (glicilglicina 0,6 mole/l; L-glutamato
0,1 mole/l)
Dissolver 4,75 g de glicilglicina, 0,88 g de ácido L-glutâmico em
cerca de 50 ml de água bidestilada; ajustar o pH a 10 com alguns
mililitros de solução de hidróxido de sódio 10 M e acertar a 60 ml
com água bidestilada. A solução permanece estável durante pelo
menos 12 semanas a +4 ºC.
2.1.2. Solução de nicotinamida-adenina-dinucleótido (NAD) cerca de
40 · 10
−3M. Dissolver 900 mg de NAD em 30 ml de água
bidestilada. A solução permanece estável durante pelo menos 4
semanas a + 4 ºC.
2.1.3. Suspensão de glutamato-piruvato-transaminase (GPT) a 20 mg/ml
A suspensão é estável durante pelo menos um ano a + 4 ºC.
2.1.4. Suspensão de L-lactato-desidrogenase (L-LDH) a 5 mg/ml
A suspensão é estável durante pelo menos um ano a + 4 ºC.
2.1.5. Suspensão de D-lactato-desidrogenase (D-LDH) a 5 mg/ml
A suspensão é estável durante pelo menos um ano a + 4 ºC.É aconselhável proceder, antes do doseamento, à verificação da acti-
vidade da enzima.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 97
▼B
Nota:
O conjunto dos reagentes necessários para este doseamento está
comercializado.
2.2.Aparelhagem
2.2.1. Espectrofotómetro que permita efectuar medições a 340 nm, máximo
de absorção de NADH
Na sua ausência, fotómetro de espectro descontínuo que permita
efectuar medições a 334 nm ou a 365 nm.
Dado tratar-se de medições absolutas de absorvência (sem série de
calibragens, mas com referência ao coeficiente de extinção do
NADH), as escalas dos comprimentos de onda e das absorvências
do aparelho devem ser controladas.
2.2.2. Cubas de vidro de 1 cm de trajecto óptico ou cubas de utilização
única
2.2.3. Micropipetas que permitam recolher volumes compreendidos entre
0,02 e 2 ml
2.3.Preparação da amostra
Evitar tocar com os dedos nos vidros que entram em contacto com o
meio de reacção, dado que tal poderá provocar um aumento de ácido
L-láctico que falsearia os resultados.
De um modo geral, o doseamento do lactato é efectuado directa-
mente no vinho sem descoloração prévia e sem diluição, quando a
concentração em ácido láctico for inferior a 100 mg/l. Se a concen-
tração do vinho em ácido láctico for compreendida entre:
100 mg/l e 1 g/l — diluir 1/10 com água bidestilada;
1 g/l e 2,5 g/l — diluir 1/25 com água bidestilada;2,5 g/l e 5 g/l — diluir 1/50 com água bidestilada.
2.4.Modo operatório
2.4.1. Doseamento do ácido láctico total
A solução-tampão deve estar com uma temperatura entre 20-25 ºC
antes de se proceder ao doseamento.
Dado o espectrofotómetro ser regulado no comprimento de onda de
340 nm, as medições da absorvência são feitas em cubas de 1 cm de
trajecto óptico, sendo a absorvência zero regulada em relação ao ar
(sem cuba no trajecto óptico) ou em relação à água.
Nas cubas de 1 cm de trajecto óptico, introduzir:
Testemunha Dosagem
Solução 2.1.1 1,00 ml 1,00 ml
Solução 2.1.2 0,20 ml 0,20 ml
Água bidestilada 1,00 ml 0,80 ml
Suspensão 2.1.3 0,02 ml 0,02 ml
Amostra — 0,20 ml
Misturar com a ajuda de um agitador de vidro ou de uma vareta em
matéria sintética com extremidade plana; após cerca de 5 min.,
medir as absorvências das soluções testemunha e de doseamento
(A
1).
Juntar 0,02 ml de solução 2.1.4 e 0,05 ml de solução 2.1.5, homoge-
neizar, esperar o final da reacção (cerca de 30 min.) e medir as
absorvências das soluções testemunha e de doseamento (A2).
Determinar as diferenças de absorvência (A2−A1) da testemunha e
do doseamento.
Deduzir a diferença de absorvência da testemunha da diferença de
absorvência do doseamento.
∆A= ∆AD−∆AT.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 98
▼B
2.4.2. Doseamento do ácido L-láctico e do ácido D-láctico
O doseamento do ácido L-láctico e ácido D-láctico pode ser efec-
tuado individualmente aplicando a técnica indicada para o ácido
láctico total, desde que A1tenha sido previamente determinado:
Juntar 0,02 ml da solução 2.1.4, homogeneizar, esperar o final da
reacção (aproximadamente 20 min.) e medir as absorvências das
soluções testemunha e de doseamento (A2).
Adicionar 0,05 ml da solução 2.1.5, homogeneizar, esperar o fim da
reacção (cerca de 30 min.) e medir as absorvências das soluções
testemunha e de doseamento (A3).
Determinar as diferenças de absorvência (A2−A1) para o ácido L-
-láctico e (A3−A2) para o ácido D-láctico no caso da testemunha e
no caso do doseamento.
Deduzir a diferença de absorvência da testemunha da diferença de
absorvência do doseamento.
∆A= ∆AD−∆AT.
Nota:O tempo necessário à acção das enzimas pode variar de lote para
lote; o tempo mencionado anteriormente apenas o foi a título indica-
tivo. Recomenda-se a sua determinação para cada lote. Quando se
doseia apenas o ácido L-láctico, o tempo de incubação após a adição
da L-lactato desidrogenase pode ser alterado para 10 minutos.
2.5.Expressão dos resultados
A concentração de ácido láctico é dada em gramas por litro (g/l)
com 1 decimal.
2.5.1. Modo de cálculo
A concentração em gramas por litro é calculada pela fórmula geral:
C¼
V/C1PM
ε/C1d/C1v/C11000/C1∆A
V = volume do teste em ml (V = 2,24 ml para o ácido L-láctico,
V = 2,29 ml para o ácido D-láctico e o ácido láctico total)
v = volume da amostra em ml (neste caso 0,2 ml)PM = massa molecular da substância a dosear (neste caso DL
láctico = 90,08)
d = trajecto óptico da cuba em cm (neste caso 1 cm)ε= coeficiente de absorção do NADH a 340 nm
ε= 6,3 (mmole
−1·l·c m−1).
2.5.1.1. Ácido láctico total e ácido D-láctico
C = 0,164 · ∆A.
Se foi efectuada uma diluição aquando da preparação da amostra,
multiplicar o resultado pelo factor de diluição.
Nota:
Medição a 334 nm: C = 0,167 · ∆A(ε= 6,2 mmole−1·l·c m−1).
Medição a 365 nm: C = 0,303 · ∆A(ε= 3,4 mmole−1·l·c m−1).
2.5.1.2. Ácido L-láctico
C = 0,160 · ∆A.
Se foi efectuada uma diluição aquando da preparação da amostra,
multiplicar o resultado pelo factor de diluição.
Nota:
Medição a 334 nm: C = 0,163 · ∆A(ε= 6,2 mmole−1·l·c m−1).
Medição a 365 nm: C = 0,297 · ∆A(ε= 3,4 mmole−1·l·c m−1).
2.5.2. Repetibilidade (r)
r = 0,02 + 0,07 xig/l
xi= concentração de ácido láctico da amostra em g/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 99
▼B
2.5.3. Reprodutibilidade (R)
R = 0,05 + 0,125 xig/l
xi= concentração de ácido láctico da amostra em g/l.
3. MÉTODO USUAL
3.1.1. Para o tratamento preliminar do vinho
Reportar-se ao capítulo «Ácido Tartárico», método usual, em 3.1.1.
3.1.2. Para o doseamento do ácido láctico
3.1.2.1. Solução 0,1 M de sulfato de cério IV em ácido sulfúrico 0,35 M
Dissolver, a frio, 40,431 g de sulfato de cério IV, Ce (SO4)2,4 H2O,
em 350 ml de uma solução M de ácido sulfúrico exactamente titu-
lada (3.1.2.4). Levar o volume a 1 000 ml com água destilada.
3.1.2.2. Solução de hidróxido de sódio (NaOH) 2,5 M3.1.2.3. Solução de acetato de sódio a 270 g por litro (preparada a partir de
acetato de sódio seco, Na CH
3COO)
3.1.2.4. Solução de ácido sulfúrico (H2SO4)1M
3.1.2.5. Solução de nitroprussiato de sódio [Na2(Fe (CN)5NO), 2H2O] a 2 p.
100 (m/v)
Conservar o frasco bem fechado e ao abrigo da luz.Limite de conservação da solução: 8 dias.
3.1.2.6. Solução de piperidina (C
5H11N) a 10 p. 100 (v/v)
3.1.2.7. Solução de ácido láctico M
Diluir 100 ml de ácido láctico (C3H6O3) em 400 ml de água. Esta
solução, colocada numa cápsula, é aquecida num banho de água
fervente durante 4 horas, sendo o volume completado, de tempos a
tempos, com água destilada. Levar o volume a 1 litro após arrefeci-
mento. Titular o ácido láctico existente em 10 ml desta solução com
uma solução de hidróxido de sódio M (3.1.2.8). Ajustar a solução a
1 M de ácido láctico (90 g).
3.1.2.8. Solução de hidróxido de sódio (NaOH) 1 M
3.2.Aparelhagem
3.2.1. Coluna de vidro de, aproximadamente, 300 mm de comprimento e
10—11 mm de diâmetro interno, munida de um regulador de débito
(torneira)
3.2.2. Banho de água termostatizado a 65 ºC3.2.3. Espectrofotómetro que permita medições de absorvência no compri-
mento de onda de 570 nm com cubas de 1 cm de trajecto óptico
3.3.Modo operatório
3.3.1. Preparação da coluna permutadora de iões
Ver capítulo «Ácido tartárico», método usual, em 3.3.1.
3.3.2. Isolamento dos ácidos orgânicos
Reportar-se ao capítulo «Ácido tartárico», método usual, em 3.3.2.
3.3.3. Doseamento do ácido láctico
Introduzir 10 ml de eluído num tubo de vidro de 50 ml de capaci-
dade munido de rolha esmerilada e juntar 10 ml de solução de
sulfato de cério (3.1.2.1). Agitar; colocar o tubo num banho de
água com termóstato, a 65 ºC, durante exactamente 10 minutos. No
momento da imersão, retirar durante alguns segundos a rolha de
vidro, de modo a compensar a pressão devido ao aquecimento, e,
em seguida, voltar a fechar hermeticamente, de forma a evitar perdas
do etanal formado. Retirar o tubo, arrefecer sob fluxo de água para
obter uma temperatura próxima de 20 ºC, juntar 5 ml da solução de
hidróxido de sódio 2,5 M (3.1.2.2), misturar e filtrar.
Recolher 15 ml de filtrado, deitá-los num balão de 50 ml, com rolha
esmerilada, que contenha já uma mistura homogénea de 5 ml de
solução de acetato de sódio a 27 p. 100 (3.1.2.1), e de 2 ml de1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 100
▼B
ácido sulfúrico M (3.1.2.4). Juntar 5 ml da solução de nitroprussiato
de sódio (3.1.2.5), misturar, adicionar 5 ml da solução de piperidina
(3.1.2.6), misturar com rapidez e introduzir imediatamente esta
solução na cuba do espectrofotómetro. A coloração produzida, que
varia do verde ao violeta, é medida a 570 nm em relação ao ar
(sem cuba no trajecto óptico). Esta coloração aumenta, para diminuir
em seguida rapidamente.
Seguir a evolução da absorvência correspondente e escolher como
valor definitivo o seu valor máximo.
Se o eluído for demasiado rico em ácido láctico e a absorvência
demasiado elevada, diluir o eluído com a solução de sulfato de sódio
a 7,1 p. 100 (3.1.1) e proceder à medição na solução diluída.
3.3.4. Determinação da curva de calibração
Introduzir 10 ml da solução de ácido láctico 1 M (3.1.2.7) e 10 ml
de solução titulada de hidróxido de sódio 1 M (3.1.2.8) num balão
graduado de 1 000 ml até ao traço com a solução de sulfato de sódio
a 7,1 p. 100 (3.1.1). Recolher, em balão, 5, 10, 15, 20 e 25 ml e
introduzilos em balões graduados de 100 ml. Completar até ao
traço de referência com a solução de sulfato de sódio a 7,1 p. 100.
Recolher 10 ml das soluções assim obtidas e determinar para cada
uma o valor da absorvência, de acordo com a técnica descrita em
3.3.3 para o eluído.
Estas soluções correspondem aos eluídos obtidos a partir de vinhos
que contenham 0,45 — 0,90 — 1,35 — 1,80 e 2,25 g/l de ácido
láctico.
A representação gráfica das absorvências destas soluções, em função
do teor de ácido láctico, é uma recta.
3.4.Expressão dos resultados
A partir da absorvência medida para o eluído, e utilizando a curva
de calibração, obtém-se o teor de ácido láctico do vinho, expresso
em gramas por litro.
Este teor é expresso com 1 decimal.Nota:
Os vinhos que contêm mais de 250 mg/l de dióxido de enxofre
podem apresentar um teor de ácido etanalsulfónico que é contabili-
zado como ácido láctico. Neste caso, é necessário corrigir o
resultado do doseamento pelo obtido pela seguinte operação comple-
mentar: numa proveta com rolha esmerilada são misturados 15 ml de
eluído com 5 ml de acetato de sódio a 27 p. 100 (3.1.2.3) e 2 ml de
H
2SO40,775 M (77,5 ml de H2SO4M são completados, até 100 ml,
com água destilada). Seguidamente, tal como no doseamento do
ácido láctico, adicionam-se 5 ml de nitroprussiato de sódio (3.1.2.5)
a 2 p. 100 e 5 ml de piperidina a 10 p. 100 (3.1.2.6). Depois de ter
misturado, medir a absorvência nas condições descritas para o dose-
amento de ácido láctico. A partir desta absorvência, utilizar a curva
de calibração para obter o valor aparente B de ácido láctico,
expresso em gramas por litro, devido ao ácido etanalsulfónico. Se
L' for o teor aparente de ácido láctico do vinho, em gramas por litro,
o teor real L de ácido láctico é obtido pela fórmula:
L = L'− B · 0,4 (g/l).1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 101
▼B
19.ÁCIDO L-MÁLICO
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Em presença do nicotinamida-adenina-dinucleótido (NAD) o ácido
L-málico (L-malato) é oxidado em oxaloacetato numa reacção cata-
lizada pela L-malato desidrogenase (L-MDH).
O equilíbrio da reacção é a favor do malato. A eliminação do
oxaloacetato do meio de reacção desloca o seu equilíbrio no sentido
da formação de oxaloacetato. Em presença de L-glutamato, o
oxaloacetato é transformado em L-aspartato, reacção que é catali-
zada pela glutamato-oxaloacetato-transminase (GOT).
(1)L-malato + NAD+
oxaloacetato + NADH + H+
(2)Oxaloacetato + L-glutamato
 L-aspartato + α-ceto-
glutarato
A formação de NADH, medida pelo aumento da absorvência no
comprimento de onda de 340 nm, é proporcional à quantitade de L-
-malato presente.
2. REAGENTES
2.1. Tampão pH 10
(Glicilglicina 0,60 M, L-glutamato 0,1 M)Dissolver 4,75 g de glicilglicina e 0,88 g de ácido L-glutâmico em
cerca de 50 ml de água bidestilada; ajustar o pH a 10 com aproxi-
madamente 4,6 ml de solução de hidróxido de sódio 10 M e
completar o volume a 60 ml com água bidestilada.
A solução permanece estável durante pelo menos 12 semanas a
+ 4 ºC.
2.2. Solução de nicotinamida-adenina-dinucleótido (NAD), cerca de
47 · 10
−3M
Dissolver 420 mg de NAD em 12 ml de água bidestilada. A solução
permanece estável durante pelo menos 4 semanas a + 4 ºC.
2.3. Suspensão de glutamato-oxaloacetato-transaminase (GOT) a 2 mg/
/ml
A suspensão é estável durante pelo menos um ano a + 4 ºC.
2.4. Solução de L-malato-desidrogenase (L-MDH) a 5 mg/ml
A solução é estável durante pelo menos um ano a + 4 ºC.Nota:O conjunto dos reagentes necessários para este doseamento estão
comercializados.
3. APARELHAGEM
3.1. Espectrofotómetro que permita efectuar medições a 340 nm, máximo
de absorção do NADH
Na sua ausência, fotómetro de espectro descontínuo que permita
efectuar medições a 334 nm ou a 365 nm.
Dado tratar-se de medições absolutas de absorvência (sem série de
calibragens, mas com referência ao coeficiente de extinção do
NADH), as escalas dos comprimentos de onda e das absorvências
do aparelho devem ser controladas.
3.2. Cubas de vidro de 1 cm de trajecto óptico ou cubas de utilização
única
3.3. Micropipetas que permitam recolher volumes compreendidos entre
0,01 e 2 ml
4. PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
De um modo geral, o doseamento do L-malato é efectuado directa-
mente no vinho sem descoloração prévia e sem diluição, desde que o1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 102
▼B
teor em ácido L-málico seja inferior a350 mg/l (medição a 365 nm).
Caso contrário, proceder à diluição do vinho com água bidestilada,
de modo a que a concentração de L-malato se situe entre 30 e
350 mg/l (quantidade de L-malato na toma de ensaio compreendida
entre 3 e 35 µg).
Se a concentração em malato no vinho for inferior a 30 mg/l, o
volume da toma de ensaio pode ser aumentado até 1 ml. Neste
caso, o volume de água a juntar é reduzido de modo a que os
volumes totais sejam os mesmos nas duas cubas.
5. MODO OPERATÓRIO
Dado que o espectrofotómetro é regulado no comprimento de onda
de 340 nm, as medições de absorvência são feitas em cubas de 1 cm
de trajecto óptico, sendo a absorvência zero regulada em relação ao
ar (sem cuba no trajecto óptico) ou em relação à água.
Nas cubas de 1 cm de trajecto óptico introduzir:
Testemunha Doseamento
Solução 2.1 1,00 ml 1,00 ml
Solução 2.2 0,20 ml 0,20 ml
Água bidestilada 1,00 ml 0,90 ml
Suspensão 2.3 0,01 ml 0,01 ml
Amostra — 0,10 ml.
Misturar; após cerca de 3 min., medir as absorvências das soluções
testemunha e de doseamento (A1).
Juntar:
Solução 2.4 0,01 ml 0,01 ml.
Misturar; esperar o final da reacção (cerca de 5 a 10 min.) e medir
as absorvências das soluções testemunhas e doseamento (A2).
Determinar as diferenças de absorvência (A2−A1) da testemunha e
do doseamento.
Deduzir a diferença de absorvência da testemunha da diferença de
absorvência do doseamento.
∆A= ∆AD−∆AT.
Nota:O tempo necessário à acção das enzimas pode variar de um lote para
outro; o tempo que foi mencionado anteriormente apenas o foi a
título indicativo. Recomenda-se a sua determinação para cada lote.
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
A concentração de ácido L-málico é dada em gramas por litro (g/l)
com 1 decimal.
6.1.Modo de cálculo
A concentração em gramas por litro é calculada pela fórmula geral:
C¼
V/C1PM
ε/C1d/C1v/C11000/C1∆A
V = volume do teste em ml (neste caso 2,22 ml)
v = volume da amostra em ml (neste caso 0,1 ml)
PM = massa molecular da substância a dosear (neste caso ácido L-
-málico = 134,09)
d = trajecto óptico da cuba em cm (neste caso 1 cm)
ε= coeficiente de absorção do NADH, a 340 nm ε
= 6,3 mmole−1·l·c m−1.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 103
▼B
Obtem-se para o L-malato:
C = 0,473 · ∆A g/l.
Se foi efectuada uma diluição aquando da preparação da amostra,
multiplicar o resultado pelo factor de diluição.
Nota:
medição a 334 nm C = 0,482 × ∆A
medição a 365 nm C = 0,876 × ∆A.
6.2.Repetibilidade (r)
r = 0,03 + 0,034 xi
xi= concentração em ácido málico da amostra, em g/l.
6.3.Reprodutibilidade (R)
R = 0,05 + 0,071 xi
xi= concentração em ácido málico da amostra em g/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 104
▼M7
20.ÁCIDO D-MÁLICO
(Determinação por via enzimática)
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Na presença de D-malato-desidrogenase (D-MDH), o ácido D-
-málico (D-malato) é oxidado em oxaloacetato pelo nicotinamida-
-adenina-dinucleótido (NAD). O oxaloacetato formado é
transformado em piruvato e dióxido de carbono.
D-malato þNADþ/harpoonleftrightD-MDHpiruvato þCO2þNADH þHþ
A formação de NADH, medida pelo aumento da absorvância nos
comprimentos de onda de 334, 340 ou 365 nm, é proporcional à
quantidade de D-malato presente.
2. REAGENTES
São comercializados conjuntos de reagentes para cerca de 30 deter-
minações, constituídos por:
a) Um frasco 1, com cerca de 30 ml de solução-tampão Hepes
(ácido N-(2-hidroxietil)piperazina-N'-2-etanossulfónico) a pH 9,0
e estabilizadores;
b) Um frasco 2, com cerca de 210 mg de liofilizado de NAD;
c) Três frascos 3 com liofilizado de D-MDH (título: cerca de 8
unidades).
Preparação das soluções
1. Utilizar o conteúdo do frasco 1 sem diluição. Levar a solução a
20-25 ºC antes do seu emprego.
2. Dissolver o conteúdo do frasco 2 em 4 ml de água bidestilada.3. Dissolver o conteúdo de um dos frascos 3 em 0,6 ml de água
bidestilada. Levar a solução a 20-25 ºC antes do seu emprego.
Estabilidade das soluções
O conteúdo do frasco 1 conserva-se pelo menos um ano a + 4 ºC; a
solução 2 conserva-se cerca de três semanas a + 4 ºC e dois meses a
− 20 ºC; a solução 3 conserva-se cinco dias a + 4 ºC.
3. APARELHAGEM
3.1. Espectrofotómetro com capacidade de leitura a 340 nm, máximo de
absorção do NADH. Na sua falta, utilizar um fotómetro de espectro
descontínuo com capacidade de leitura a 334 nm e 365 nm. Se
forem medidas absorvâncias absolutas (coeficiente de extinção do
NADH, sem curva de calibração), verificar as escalas de compri-
mentos de onda e de absorvâncias do aparelho.
3.2. Células de vidro com 1 cm de percurso óptico ou células descartá-
veis (uma só utilização).
3.3. Micropipetas para volumes compreendidos entre 0,01 ml e 2 ml.
4. PREPARAÇÃO DA AMOSTRA
A determinação do D-malato efectua-se, em geral, directamente no
vinho, sem descoloração prévia.
Dado que a quantidade de D-malato presente na célula deve estar
compreendida entre 2 e 50 µg, é necessário diluir o vinho de modo
que a concentração de D-malato fique compreendida entre 0,02 e 0,5
g/l ou 0,02 e 0,3 g/l (conforme a aparelhagem utilizada).1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 105
▼M7
Quadro de diluições
Quantidade estimada de D-malato/
/litro
Diluição com
águaFactor de
diluição F Leitura a:
340 ou 334 nm 365 nm
< 0,3 g < 0,5 g — 1
0,3 - 3,0 g 0,5 - 5,0 g 1 + 9 10
5. MODO OPERATÓRIO
Com o espectrofotómetro regulado no comprimento de onda de
340 nm, efectua-se a leitura das absorvâncias em células com 1 cm
de percurso óptico. O zero de absorvância é regulado com ar (sem
célula no percurso óptico) ou com água.
Introduzir nas células com 1 cm de percurso óptico:
Branco Solução de teste
Solução 1 1,00 ml 1,00 ml
Solução 2 0,10 ml 0,10 ml
Água bidestilada 1,80 ml 1,70 ml
Amostra — 0,10 ml
Misturar. Cerca de seis minutos depois, ler as absorvâncias (A1)d o
branco e da solução de teste.
Adicionar:
Branco Solução de teste
Solução 3 0,05 ml 0,05 ml
Misturar. Depois de terminada a reacção (cerca de 20 minutos), ler
as absorvâncias (A2) do branco e da solução de teste.
Determinar as diferenças de absorvância (A2−A1) do branco ( ∆AT)
e da solução de teste ( ∆AE). Deduzir a diferença de absorvância do
branco à diferença de absorvância da solução de teste: ∆A= ∆AE −
∆AT
Nota:O tempo necessário à acção das enzimas pode variar de lote para
lote, tendo sido referido apenas a título indicativo. É conveniente
proceder à sua determinação para cada lote.
O ácido D-málico reage rapidamente. Dado que a enzima transforma
igualmente o ácido L-tartárico, embora muito mais lentamente,
existe uma ligeira reacção parasita, cujo efeito pode ser corrigido
por extrapolação (ver o apêndice A).
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
A concentração em miligrama por litro é calculada pela seguinte
fórmula geral:
C¼
V/C2PM
ε/C2d/C2ν/C2∆A
em que:
V = volume utilizado na determinação, em ml (neste caso,
2,95 ml)
υ= volume de amostra, em ml (neste caso, 0,1 ml)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 106
▼M7
PM = massa molecular da substância a determinar (neste caso, o
ácido D-málico: 134,09)
d = percurso óptico na célula, em cm (neste caso, 1 cm)ε= coeficiente de absorção do NADH:
a 340 nm = 6,3 (1 mmol
−1cm−1)
a 365 nm = 3,4 (1 mmol−1cm−1)
a 334 nm = 6,18 (1 mmol−1cm−1).
Se tiver havido diluições durante a preparação da amostra, multi-
plicar o resultado pelo factor de diluição.
A concentração de ácido D-málico é apresentada em miligrama por
litro (mg/l), sem decimais.
7. FIABILIDADE
São apresentados no apêndice B os resultados do teste interlaborato-
rial da fiabilidade do método. Os dados extraídos do teste
interlaboratorial podem não ser aplicáveis a concentrações de analito
e matrizes distintas das indicadas no apêndice B.
7.1.REPETIBILIDADE
A diferença absoluta entre dois resultados individuais, obtidos o
mais rapidamente possível um a seguir ao outro para uma mesma
amostra, analisada pelo mesmo analista com a mesma aparelhagem,
não excederá o valor da repetibilidade, r, em mais que 5 % dos
casos.
O valor de r é 11 mg/l.
7.2.REPRODUTIBILIDADE
A diferença absoluta entre dois resultados individuais obtidos para
uma mesma amostra analisada em dois laboratórios diferentes não
excederá o valor da reprodutibilidade, R, em mais que 5 % dos
casos.
O valor de R é 20 mg/l.
8. DOSEAMENTO DE BAIXOS TEORES DE ÁCIDO D(+)-MÁLICO
NO VINHO
8.1.Âmbito de aplicação
O método descrito é aplicável ao doseamento, por via enzimática, do
ácido D-málico, em vinhos com teores do mesmo inferiores a 50 mg/
/l.
8.2.Princípio
O princípio do método é descrito no ponto 1. A formação de NADH,
determinada pelo aumento da absorvância a 340 nm, é proporcional
à quantidade de D-malato presente, após a introdução na célula de
medida de uma quantidade de ácido D-málico equivalente a 50 mg/l.
8.3.Reagentes
Solução de ácido D-málico a 0,199 g/l, além dos reagentes indicados
no ponto 2.
8.4.Equipamento
O equipamento a utilizar é descrito no ponto 3.
8.5.Preparação da amostra
A preparação da amostra é descrita no ponto 4.
8.6.Procedimento
O procedimento é descrito no ponto 5, introduzindo-se na célula de
medida uma quantidade de ácido D-málico equivalente a 50 mg/l
(0,025 ml de solução de ácido D-málico a 0,199 g/l em substituição1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 107
▼M8
▼M8
do volume de água equivalente); os valores obtidos são reduzidos
em 50 mg/l.
8.7.Validação interna
O quadro seguinte resume o processo de validação interna do
método de doseamento do ácido D-málico após a adição de 50 mg/
/l deste isómero.
Gama de trabalho 0 mg a 70 mg de ácido D-málico por litro.
Na gama em causa, o método é linear, com um coeficiente
de correlação compreendido entre 0,990 e 0,994
Limite de quantificação 24,4 mg/l
Limite de detecção 8,3 mg/l
Sensibilidade 0,0015 abs/mg/lTaxa de recuperação 87,5 a 115,0 % para o vinho branco; 75 a 105 % para o
vinho tinto
Repetibilidade = 12,4 mg/l para o vinho branco (de acordo com o método
OIV, = 12,5 mg/l)
= 12,6 mg/l para o vinho tinto (de acordo com o método
OIV, = 12,7 mg/l)
Coeficiente de variação 4,2 % à 7,6 % (vinho branco e tinto)
Variabilidade intralaborato-
rialCV=7,4 % (s = 4,4 mg/l; média = 59,3 mg/l)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 108
▼M7
Apêndice A
Resolução do problema das reacções parasitas
As reacções parasitas devem-se, geralmente, a reacções secundárias da enzima,
à presença de outras enzimas na matriz da amostra ou à interacção de um ou
mais elementos da matriz com um co-factor da reacção enzimática.
Se a reacção decorrer normalmente, a absorvância atinge um valor constante ao
fim de um certo tempo, em geral entre 10 e 20 minutos, conforme a velocidade
da reacção enzimática específica. Verificando-se reacções secundárias, a
absorvância não atinge, porém, um valor constante, antes aumentando regular-
mente à medida que o tempo passa. Este tipo de processo é vulgarmente
designado por «reacção parasita».
Quando o problema se colocar, deve medir-se a absorvância da solução a inter-
valos regulares (2 a 5 minutos) depois de transcorrido o tempo necessário para
que a solução-padrão atinja a sua absorvância final. Quando a absorvância
começar a aumentar regularmente, efectuar cinco ou seis leituras, posto o que
uma extrapolação gráfica ou através de cálculos para o momento (T0) da adição
da enzima final permitirá obter a absorvância que a solução teria apresentado
sem a reacção parasita. Utilizar-se-á no cálculo da concentração do substrato a
diferença de absorvâncias (Af — Ai) obtida depois da extrapolação para esse
momento.
Figura 1: Reacção parasita1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 109
▼M7
Apêndice B
Resultados estatísticos do teste interlaboratorial
Ano do teste interlaboratorial: 1995
Número de laboratórios: 8
Número de amostras: 5, com adição de ácido D-málico
Amostra ABCDE
Número de laboratórios, depois de eliminados os labo-
ratórios com resultados aberrantes 7 8 7 8 7
Número de laboratórios com resultados aberrantes 1 — 1 — 1
Número de resultados aceite 35 41 35 41 36
Valor médio ( χ-) (mg/l) 161,7 65,9 33,1 106,9 111,0
Desvio-padrão da repetibilidade (sr) (mg/l) 4,53 4,24 1,93 4,36 4,47
Desvio-padrão relativo da repetibilidade (RSDr) (%) 2,8 6,4 5,8 4,1 4,00
Limite de repetibilidade (r) (mg/l) 12,7 11,9 5,4 12,2 12,5Desvio-padrão da reprodutibilidade (s
R) (mg/l) 9,26 7,24 5,89 6,36 6,08
Desvio-padrão relativo da reprodutibilidade (RSDR)
(%) 5,7 11 17,8 5,9 5,5
Limite de reprodutibilidade (R) (mg/l) 25,9 20,3 16,5 17,8 17,0
Tipos de amostra:
A: vinho tinto; B: vinho tinto; C: vinho branco; D: vinho branco; E: vinho
branco.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 110
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21.ÁCIDO MÁLICO TOTAL
MÉTODO USUAL
1. FUNDAMENTO DO MÉTODO
O ácido málico, isolado com a ajuda de uma coluna de resina
permutadora de aniões, doseia-se colorimetricamente no eluído,
graças à coloração amarela que ele dá, sobacção do ácido sulfúrico
a 96 p. 100 e do ácido cromotrópico. As substâncias contidas no
eluído interferem nesta reacção. Contrariamente ao ácido málico,
estas substâncias reagem com o ácido sulfúrico a 86 p. 100 e com
o ácido cromotrópico. Para eliminar esta interferência, basta subtraír,da absorvência obtida depois da reacção com o ácido cromotrópico e
o ácido sulfúrico a 96 p. 100, a absorvência obtida pela reacção do
ácido cromotrópico com o ácido sulfúrico a 86 p. 100.
2. APARELHAGEM
2.1. Coluna de vidro com 250 mm de comprimento e de 35 mm de
diâmetro interno, munida de uma torneira
2.2. Coluna de vidro de aproximadamente 300 mm de comprimento e 10-
-11 mm de diâmetro interno, munida de uma torneira
2.3. Banho de água a 100 ºC
2.4. Espectrofotómetro que permita efectuar medições da absorvência no
comprimento de onda de 420 nm com cubas de 10 mm de trajecto
óptico
3. REAGENTES
3.1. Permutador de aniões de forte basicidade (p.e. Merck III)
3.2. Hidróxido de sódio a 5 p. 100 (m/v)
3.3. Ácido acético a 30 p. 100 (m/v)3.4. Ácido acético a 0,5 p. 100 (m/v)
3.5. Solução de sulfato de sódio (Na
2SO4) a 10 p. 100 (m/v)
3.6. Ácido sulfúrico concentrado a 95-97 % (m/m)3.7. Ácido sulfúrico a 86 p. 100 (m/m)
3.8. Solução de ácido cromotrópico a 5 p. 100 (m/v)
A preparar extemporaneamente, antes de cada doseamento, dissol-
vendo 500 mg de cromotropato de sódio (C
10H16Na2O8S2,2 H2O) em
10 ml de água destilada.
3.9. Solução de ácido DL-málico a 0,5 g/l.
Dissolver 250 mg/l de ácido málico (C4H6O5) numa quantidade sufi-
ciente de solução de sulfato de sódio a 10 p. 100 (3.5) para obter
500 ml.
4. MODO OPERATÓRIO4.1.Preparação do permutador de iões
Colocar na coluna de vidro de 35 × 250 mm acima da torneira, um
tampão de algodão de vidro impregnado de água destilada. Deitar na
coluna o permutador de iões posto em suspensãoem água, de forma
a ter um espaço livre, de cerca de 50 mm, por cima da superfície do
permutador de iões. Depois de lavar com 1000 ml de água destilada,
encher a coluna com a solução de hidróxido de sódio a 5 p. 100, e
deixar correr o líquido até cerca de 2-3 mm acima da superfície do
permutador de iões; repetir ainda duas vezes esta operação de deixar
em contacto durante 1 hora. Lavar com 1000 ml de água destilada.
Em seguida, encher a coluna com a solução de ácido acético, a 30 p.
100, e deixar correr o líquido até cerca de 2-3 mm acima da
superfície do permutador de iões; repetir a operação 2 vezes e deixar
em contacto, pelo menos 24 h, antes de a utilizar. Conservar o
permutador de iões em ácido acético a 30 p. 100 para doseamentos
posteriores.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 111
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4.2.Preparação da coluna de permutadorés de iões
Colocar na coluna de vidro de 11 × 300 mm acima da torneira um
tampão de algodão de vidro. Deitar na coluna o permutador de iões,
preparado como se descreveu em 4.1, com uma altura de 10 cm.
Estando a torneira aberta, deixar passar a solução de ácido acético
a 30 p. 100 até cerca de 2-3 mm acima da superfície do permutador.
Lavar o permutador com 50 ml da solução de ácido acético a 0,5 p.
100.
4.3.Isolamento do ácido DL-málico
Deitar sobre o permutador, preparado como se descreveu em 4.2,
10 ml de vinho ou de mosto. Deixar passar o vinho, gota a gota
(débito médio uma gota por segundo), até cerca de 2-3 mm acima
da superfície do permutador de iões. Lavar a coluna então com cerca
de 50 ml da solução de ácido acético a 0,5 p. 100 e, depois, com
cerca de 50 ml de água destilada; deixar escoar estes líquidos com
a mesma velocidade da do vinho.
Eluir os ácidos fixados sobre o permutador de iões com a ajuda da
solução de sulfato de sódio a 10 p. 100 com a mesma velocidade das
operações precedentes (1 gota/seg.); recolher o eluído num balão
graduado de 100 ml até atingir o traço de referência.
Pode regenerar-se o permutador como se descreveu em 4.1.
4.4.Doseamento do ácido málico
Tomar dois tubos de abertura larga de 30 ml, esmerilados e
fechados, «A» e «B». Introduzir em cada tubo 1,0 ml do eluído e
1,0 ml da solução de ácido cromotrópico a 5 p. 100. Juntar no tubo
«A» 10,0 ml de ácido sulfúrico a 86 p. 100 (testemunha) e no tubo
«B» 10,0 ml de ácido sulfúrico a 96 p. 100 (doseamento). Fechar e
agitar para obter uma homogeneidade perfeita, sem molhar o esme-
rilado. Mergulhar os tubos durante 10 minutos exactamente num
banho de água levada previamente a ebulição. Arrefecer os tubos a
20 ºC na obscuridade. Exactamente 90 minutos depois do começo do
arrefecimento, medir a absorvêncira do tubo «B» em relação à teste-
munha (tubo «A») no comprimento de onda de 420 nm, nas cubas
de 1 cm de trajecto óptico.
4.5.Determinação da curva-padrão
Recolher 5-10-15 e 20 ml da solução de ácido málico a 0,5 g/l e
introduzi-los em balões graduados de 50 ml; levar ao traço de
referência, com a solução de sulfato de sódio a 10 p. 100.
As soluções assim obtidas correspondem aos eluídos obtidos a partir
de vinhos contendo 0,5-1, 0-1,5 e 2,0 g de ácido DL-málico por
litro.
Continuar como se indicou em 4.4.Os valores da absorvência obtidos com estas soluções-padrão, rela-
cionadas em função dos teores de ácido málico correspondentes,
alinham-se numa recta que passa pela origem.
Sabendo-se que a intensidade da colocação depende muito da
concentração do ácido sulfúrico, é ncessário verificar a curva-
-padrão, pelo menos num ponto, sempre em cada série de medições,
para pôr em evidência uma eventual mudança na concentração do
ácido sulfúrico.
5. EXPRESSÃO DE RESULTADOS
Relacionar a absorvência medida para o eluído sobre a curva-padrão
para obter o teor de ácido DL-málico em gramas por litro. Este teor
é expresso com 1 decimal.
Repetibilidade:
Teor < 2 g/l: r = 0,1 g/l
Teor > 2 g/l: r = 0,2 g/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 112
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Reprodutibilidade:
R = 0,3 g/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 113
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22.ÁCIDO SÓRBICO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
1.1Método de doseamento por espectrofotometria de absorção no
ultra-violeta
O ácido sórbico (ácido hexadieno — 2,4 óico trans, trans), extraído
por arrastamento pelo vapor de água, é doseado no destilado de
vinho por espectrofotometria de absorção no ultra-violeta. As
substâncias interferentes, medidas na mesma absorção no ultra-
-violeta, são eliminadas por evaporação a seco da toma de ensaios
do destilado, ligeiramente alcalinizado por uma solução de hidróxidode cálcio. Os teores inferiores a 20 mg/l devem ser confirmados pela
caracterização por cromatografia em camada fina (sensibilidade:
1 mg/l).
1.2.Método de doseamento por cromatografia gasosa
O ácido sórbico extraído pelo éter etílico é doseado por cromato-
grafia em fase gasosa em presença de um padrão interno.
1.3.Método de pesquisa de vestígios por cromatografia em camada
fina
O ácido sórbico extraído pelo éter etílico é separado por cromato-
grafia em camada fina e a sua concentração é avaliada semi-
-quantitativamente.
2. MÉTODO DE DOSEAMENTO POR ESPECTROFOTOMETRIA
DE ABSORÇÃO NO ULTRA-VIOLETA
2.1.Reagentes
2.1.1. Ácido tartárico, C
4H6O6, cristalizado
2.1.2. Solução de hidróxido de cálcio Ca(OH)2aproximadamente 0,02 M
2.1.3. Solução de referência de ácido sórbico a 20 mg por litro
Dissolver 20 mg de ácido sórbico, C6H8O2, em aproximadamente
2 ml de solução 0,1 M de hidróxido de sódio. Deitar num balão
graduado de 1 000 ml e ajustar ao traço de referência com água.
Pode, igualmente, dissolver-se 26,8 mg de sorbato de potássio
C6H7KO2em água e completar até 1000 ml com água.
2.2.Aparelhagem
2.2.1. Aparelho de arrastamento pelo vapor de água (cf. Acidez volátil)2.2.2. Banho de água a 100 ºC
2.2.3. Espectrofotómetro que permita efectuar medições no comprimento
de onda 256 nm com cubas de quartzo de 1 cm de trajecto óptico
2.3.Modo operatório
2.3.1. Destilação
Colocar no borbulhador do aparelho de arrastamento pelo vapor de
água 10 ml de vinho adicionados de 1 a 2 g de ácido tartárico
(2.1.1). Recolher 250 ml de destilado.
2.3.2. Curva de calibração
Preparar, por meio de diluições com água a partir da solução de
referência (2.1.3), quatro soluções de referência diluídas que titulem,
respectivamente, 0,5 - 1,0 - 2,5 e 5,0 mg deácido sórbico por litro;
medir por meio de espectrofotómetro as suas absorvências a 256 nm
em relação à água destilada. Traçar a curva das variações da
absorvência em função das concentrações das soluções. A variação
é linear.
2.3.3. Doseamento
Numa cápsula de 55 mm de diâmetro, colocar 5 ml de destilado e
juntar 1 ml de solução de hidróxido de cálcio (2.1.2). Evaporar à
secura num banho de água em ebulição. Com alguns mililitros de
água destilada, arrastar o resíduo para um balão graduado de 20 ml
e ajustar o volume ao traço de referência com as águas de lavagem.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 114
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Medir a absorvência a 256 nm, por meio de espectrofotómetro,
comparativamente a uma solução testemunha obtida por diluição de
1 ml de solução de hidróxido de cálcio (2.1.2) em 20 ml de água. A
partir do valor da absorvência medida, utilizar a curva de calibração
para obter a concentração C, da solução, em ácido sórbico.
Nota:
Na prática corrente, esta evaporação a seco, pode não ser feita. Ler
directamente a absorvência no destilado diluído a 1/4 em relação à
água destilada.
2.4.Expressão dos resultados
2.4.1. Modo de cálculo
A concentração de ácido sórbico do vinho é expressa em miligramas
por litro e é igual a:
100 × C
C = concentração de ácido sórbico da solução, analisada por
espectrofotometria, expressa em miligramas por litro.
3. MÉTODO DE DOSEAMENTO POR CROMATOGRAFIA EM
FASE GASOSA
3.1.Reagentes
3.1.1. Éter etílico, (C2H5)2O, destilado no momento de utilização
3.1.2. Solução de padrão interno: solução de ácido undecanóico, C11H22O2,
em etanol a 95 p. 100 (vol.), que titule 1 g por litro
3.1.3. Solução aquosa de ácido sulfúrico, H2SO4(ρ20= 1,84 g/ml), diluído
1/3 (v/v)
3.2.Aparelhagem
3.2.1. Cromatógrafo de fase gasosa equipado com um detector de ioni-
zação de chama e uma coluna de aço inoxidável (4 m × 1/8 de
polegada) previamente tratada com dimetildiclorosilano e cheia com
uma fase estacionária, constituída por uma mistura de dietilenoglicol
succinato (5 %) e ácido fosfórico (1 %) (DEGS — H3PO4) ou por
uma mistura de dietilenoglicol adipato (7 %) e ácido fosfórico (1 %)
(DEGA — H3PO4) fixada em Gaschrom Q80 — 100 mesh
Para o tratamento do dimetildidorosilano (DMDCS), fazer passar na
coluna ume solução que titule 2 a 3 g de DMDCS no tolueno. Lavar
imediatamente a coluna com metanol; fazer passar uma corrente de
azoto e, seguidamente, de hexano e, de novo, uma corrente de azoto.
Encher seguidamente.
Condições operatórias:
Temperatura do forno: 175 ºC.
Temperatura do injector e do detector: 230 ºC.
Gás vector: azoto (débito: 20 ml/min.).
3.2.2. Microseringa de 10 microlitros de capacidade graduada em 0,1
microlitros
Nota:
Podem igualmente usar-se outros tipos de colunas, que permitam
uma boa separação, especialmente a coluna capilar (p.e. FFAP). O
modo operatório, descrito abaixo, é dado a título de exemplo.
3.3.Modo operatório
3.3.1. Preparação da amostra a analisar
Num tubo de vidro, de aproximadamente 40 ml de capacidade,
munido de rolha esmerilada, introduzir 20 ml de vinho e juntar 2 ml
de solução de padrão interno (3.1.2) e 1 ml de solução diluída de
ácido sulfúrico (3.1.3).
Após agitação por viragens sucessivas, juntar ao conteúdo do tubo
10 ml de éter etílico (3.1.1). Extrair o ácido sórbico na fase orgânica
por agitação do tubo durante 5 minutos. Deixar decantar.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 115
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3.3.2. Preparação da solução de referência
Seleccionar um vinho cujo cromatograma do produto extraído pelo
éter não apresente qualquer pico ao nível da eluição sórbica. Enri-
quecer este vinho em ácido sórbico com uma concentração de
100 mg por litro. Tratar 20 ml da amostra assim preparada de acordo
com a técnica descrita em 3.3.1.
3.3.3. Cromatografia
Injectar sucessivamente no cromatógrafo com uma micro-seringa,
2 µl da fase etérea obtida em 3.3.2 e 2 µl da fase etérea obtida em
3.3.1.
Registar os cromatogramas respectivos: verificar a identidade dos
tempos de retenção do ácido sórbico e do padrão interno. Medir a
altura (ou a superfície) de cada um dos picos registados.
3.4.Expressão dos resultados
3.4.1. Modo de cálculo
A concentração de ácido sórbico do vinho analisado, expressa em
miligramas por litro, é igual a
100/C1h
H/C1I
i
H = altura do pico do ácido sórbico na solução de referência
h = altura do pico do ácido sórbico na amostra a analisarI = altura do pico do padrão interno na solução de referência
i= altura do pico do padrão interno na amostra a analisar.
Nota:
A concentração de ácido sórbico pode ser determinada do mesmo
modo, a partir das medidas da superficie dos respectivos picos.
4. MÉTODO DE PESQUISA DE VESTÍGIOS DE ÁCIDO SÓRBICO
POR CROMATOGRAFIA EM CAMADA FINA
4.1.Reagentes
4.1.1. Éter etílico, (C
2H5)2O
4.1.2. Solução aquosa de ácido sulfúrico H2SO4(ρ20= 1,84 g/ml), diluído a
1/3 (v/v)
4.1.3. Solução de referência de ácido sórbico numa mistura hidro-etanólica
a 10 % de etanol (vol.) que titule aproximadamente 20 mg por litro
4.1.4. Fase móvel: hexano — pentano — ácido acético (20:20:3)
(C6H14—C5H12—C H3COOH, ρ20= 1,05 g/ml)
4.2.Aparelhagem
4.2.1. Placas para cromatografia em camada fina prontas para utilizar,
20 × 20 cm, cobertas de gel de poliamida (espessura de 0,15 mm)
adicionado de um indicador de fluorescência
4.2.2. Cuba para cromatografia em camada fina
4.2.3. Micropipeta ou micro-seringa que permita medir volumes de 5
microlitros, com uma aproximação de ± 0,1 microlitros
4.2.4. Lâmpada de radiações ultra-violetas (254 nm)
4.3.Modo operatório
4.3.1. Preparação da amostra a analisar
Num tubo de vidro de aproximadamente 25 ml, munido de rolha
esmerilada, introduzir 10 ml de vinho e adicionar 1 ml de solução
de ácido sulfúrico diluído (4.1.2) e 5 ml de éter etílico (4.1.1).
Agitar por viragens sucessivas. Deixar decantar.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 116
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4.3.2. Preparação de soluções diluídas de referência
A partir da solução 4.1.3, preparar cinco soluções diluídas de
referência que titulem, respectivamente, 2 - 4 - 6 - 8 e 10 mg de
ácido sórbico por litro.
4.3.3. Cromatografia
A 2 cm do bordo inferior da placa, colocar com micro-seringa ou
micropipeta, 5 µl de fase etérea obtida em 4.3.1 e 5 µl de cada uma
das soluções diluídas de referência (4.3.2); a distância entre os
pontos em que se colocarem as soluções deverá ser de 2 cm.
Colocar a fase móvel (4.1.4) na cuba para cromatografia até uma
altura de cerca de 0,5 cm e deixar a atmosfera da cuba ficar saturada
dos vapores dos solventes. Colocar a placa na cuba. Deixar desen-
volver o cromatograma em 12 a 15 cm (a duração do
desenvolvimento é, aproximadamente, de 30 minutos). Secar a placa
numa corrente de ar frio; examinar o cromatograma com uma
lâmpada de radiação ultra-violeta a 254 nm.
As manchas relativas ao ácido sórbico surgem com uma cor violeta-
-escuro, sobre o fundo amarelo fluorescente da placa.
4.4.Expressão dos resultados
A comparação da intensidade da mancha da amostra a analisar e das
manchas das soluções de referência permite avaliar semi-quantitati-
vamente a concentração do ácido sórbico entre 2 e 10 mg por litro.
Poderá ser determinada uma concentração igual a 1 mg por litro com
um depósito de 10 µl de solução da amostra a analisar. As concen-
trações superiores a 10 mg por litro poderão ser determinadas com
um volume de depósito da solução a analisar inferior a 5 µl (medida
com uma micro-seringa).1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 117
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23.ÁCIDO L — ASCÓRBICO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
Os métodos propostos permitem dosear o ácido L-ascórbico e o
ácido dehidroascórbico presentes nos vinhos ou nos mostos.
1.1.Método de referência (fluorimétrico)
O ácido L-ascórbico é oxidado por acção do carvão activo em ácido
dehidroascórbico. Este composto forma um outro composto fluores-
cente por reacção com a ortofenilenodiamina (OPDA). A realização
de um ensaio testemunha em presença de ácido bórico permite deter-minar a fluorescência parasita (por formação de um complexo ácido
bórico-ácido dehidroascórbico) e de a deduzir do doseamento fluori-
métrico.
1.2.Método usual (colorimétrico)
O ácido L-ascórbico é oxidado pelo iodo em ácido dehidroascórbico,
que precipita com a 2,4 dinitrofenilhidrazina na forma bis (2,4 —
dinitrofenilhidrazona). Após a separação por cromatografia em
camada fina e solubilização em meio acético, este composto, corado
de vermelho, é doseado colorimetricamente a 500 nm.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA (MÉTODO FLUORIMÉTRICO)
2.1.Reagentes
2.1.1. Solução de dihidrocloreto de ortofenilenodiamina (C
6H10Cl2N2)a
0,02 g por 100 ml, preparado no momento.
2.1.2. Solução de acetato de sódio trihidratado (CH3COONa 3H2O), a
500 g/litro.
2.1.3. Solução mista de ácido bórico e de acetato de sódio.
Dissolver 3 g de ácido bórico (H3BO3), em 100 ml de solução de
acetato de sódio (2.1.2). Esta solução deve ser preparada no
momento.
2.1.4. Solução de ácido acético cristalizável CH3COOH, ( ρ20= 1,05 g/ml)
diluído a 56 p. 100 (v/v) de pH vizinho de 1,2.
2.1.5. Solução de referência de ácido L-ascórbico a 1 g por litro.
Dissolver, no momento de utilização, 50 mg de ácido L-ascórbico
(C6H8O6), previamente desidratado, num exsicador ao abrigo da luz,
em 50 ml de solução de ácido acético (2.1.4).
2.1.6. Carvão activo muito puro para análise (1)
Introduzir 100 g de carvão activo num balão cónico de 2 l de capa-
cidade e juntar 500 ml de uma solução de ácido clorídrico (HCl),
(ρ20= 1,19 g/ml) a 10 p. 100 (v/v). Levar à ebulição, e filtrar por
filtro de vidro calcinado de porosidade 3. Recolher o carvão assim
tratado num balão cónico de 2 l de capacidade, juntar 1 l de água,
agitar e filtrar por filtro de vidro calcinado de porosidade 3. Repetir
duas vezes esta operação. Colocar o resíduo numa estufa regulada a
115 ºC ± 5 ºC durante 12 horas (uma noite por exemplo).
2.2.Aparelhagem
2.2.1. Fluorímetro. Utilizar um espectroflorímetro equipado com uma
lâmpada de espectro contínuo, utilizada na sua potência mínima. Os
comprimentos de onda de excitação e de emissão óptimos para o
ensaio serão determinados previamente e dependem do aparelho
utilizado. A título indicativo, os comprimentos de onda de excitação
e de emissão situam-se, respectivamente, na proximidade de 350 nm
e de 430 nm. Cubas com 1 cm de trajecto óptico.
2.2.2. Filtro em vidro calcinado de porosidade 3.
2.2.3. Tubos de ensaio (diâmetro /asymptequal10 mm).
2.2.4. Agitador para tubos de ensaio.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 118
(1) Uma das designações comerciais é «norite».
▼B
2.3.Modo operatório
2.3.1. Preparação da amostra de vinho ou de mosto
Tomar um volume de vinho ou de mosto e diluí-lo para 100 ml num
balão graduado com a solução de ácido acético a 56 % (2.1.4), a fim
de obter uma solução cuja concentração em ácido L-ascórbico esteja
compreendida entre 0 e 60 mg/litro. Homogeneizar o conteúdo do
balão graduado por meio de agitação. Juntar 2 g de carvão activo
(2.1.6) e deixar em contacto durante 15 minutos agitando de vez
em quando. Filtrar por papel de filtro vulgar, eliminando os
primeiros mililitros de filtrado.
Em dois balões graduados de 100 ml introduzir 5 ml de filtrado e,
respectivamente, 5 ml de solução mista de ácido bórico e de acetato
de sódio (2.1.3) solução testemunha e 5 ml de solução de acetato de
sódio (2.1.2) solução problema. Deixar em contacto durante 15
minutos, agitando de vez em quando, e completar até 100 ml com
água destilada.
Recolher 2 ml do conteúdo de cada um dos balões, juntar 5 ml de
solução de ortofenilenodiamina (2.1.1) e agitar; deixar desenvolver
a reacção durante 30 minutos, ao abrigo da luz, e efectuar em
seguida a medição no espectrofluorímetro.
2.3.2. Curva de calibração
Em 3 balões graduados de 100 ml colocar, respectivamente, 2, 4,
6 ml de solução de referência de ácido L-ascórbico (2.1.5),
completar até 100 ml com a solução de ácido acético (2.1.4) e
homogeneizar por agitação.
As soluções de referência preparadas contêm, respectivamente, 2, 4 e
6 mg/100 ml. Juntar 2 g de carvão activado (2.1.6) a cada um dos
balões e deixar em contacto 15 minutos agitando de vez em quando.
Filtrar por papel de filtro vulgar, eliminando os primeiros mililitros
do filtrado. Introduzir 5 ml de cada um dos filtrados recolhidos em
três balões graduados de 100 ml (primeira série) e repetir a operação
numa segunda série de três balões graduados. Juntar a cada um dos
balões da primeira série (correspondentes ao ensaio testemunha) 5 ml
de solução mista de ácido bórico e acetato de sódio (2.1.3) e a cada
um dos balões da segunda série 5 ml de solução de acetato de sódio
(2.1.2).
Deixar em contacto durante 15 minutos, agitando de vez em quando,
e completar até 100 ml com água destilada. Recolher 2 ml do
conteúdo de cada um dos balões, juntar 5 ml de solução de ortofeni-
lenodiamina (2.1.1) e agitar; deixar a reacção desenvolver-se durante
30 minutos, ao abrigo da luz, e efectuar em seguida a medição
espectrofluorimétrica.
2.3.3. Determinação fluorimétrica
Regular para cada solução da curva de calibração e para a solução
de doseamento, o zero da escala das medições sobre o ensaio teste-
munha correspondente. Efectuar, em seguida, a medição da
intensidade da fluorescência para cada solução da gama de cali-
bração e para a do doseamento. Traçar a curva de calibração; esta
deve ser linear e passar pela origem. Relacionar sobre esta recta o
valor relativo ao doseamento e deduzir o teor C de ácido L-ascór-
bico + ácido dehidroascórbico da solução analisada.
2.3.4. Expressão dos resultados
A concentração do vinho em ácido L-ascórbico + ácido dehidroas-
córbico, expressa em miligramas por litro, será:
C·FF = factor de diluição.
3. MÉTODO USUAL (COLORIMÉTRICO)
3.1.Reagentes
3.1.1. Solução de ácido metafosfórico a 30 p. 100 (m/v).
Tomar 30 g de ácido metafosfórico (HPO
3)n, previamente triturado
num almofariz. Lavar rapidamente por imersão e agitação em água
destilada. Dissolver o ácido lavado em água destilada, por agitação
num balão graduado de 100 ml e ajustar o volume ao traço de1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 119
▼B
referência. A solução obtida titula cerca de 30 p. 100 (m/v) de ácido
metafosfórico.
3.1.2. Solução de ácido metafosfórico a 3 p. 100 (m/v) preparada no
momento por dilução a 1/10, com água destilada, da solução 3.1.1.
3.1.3. Solução de ácido metafosfórico a 1 p. 100 (m/v) preparada no
momento por diluição a 1/30, com água destilada, da solução 3.1.1.
3.1.4. Suspensão de poliamida
Colocar em suspensão 10 g de pó de poliamida para cromatografia
com 60 ml de água destilada e deixar em contacto durante 2 horas.
A quantidade preparada é suficiente para 4 determinações.
3.1.5. Tioureia (H2NCSNH2)
3.1.6. Solução de iodo (I2) 0,05 M.
3.1.7. Solução de 2,4-dinitrofenilhidrazina a 6 % (m/v). Colocar em
suspensão 6 g de 2,4-dinitrofenilhidrazina (C6H6N4O4)e m5 0m ld e
ácido acético cristalizável ( ρ20= 1,05 g/ml); juntar 50 ml de ácido
sulfúrico ( ρ20= 1,84 g/ml) e agitar para dissolver a 2,4-dinitrofenilhi-
drazina dissolve-se por agitação.
3.1.8. Acetato de etilo (C4H8O2) adicionado de 2 p. 100 (v/v) de ácido
acético cristalizável (3.1.12).
3.1.9. Clorofórmio (CHCl3).
3.1.10. Solução aquosa de amido a 0,5 p. 100 (m/v).
3.1.11. Fase móvel:
acetato de etilo …........................................ 50 vol.
clorofórmio …............................................ 60 vol.
ácido acético cristalizável ….............................. 5 vol.
Deixar a mistura solvente em repouso 12 horas antes da utilização.
3.1.12. Ácido acético cristalizável (CH3COOH) ( ρ20= 1,05 g/ml).
3.1.13. Solução de ácido L-ascórbico a 0,1 g p. 100 ml de solução de ácido
metafosfórico a 1 p. 100 (3.1.3).
3.2.Aparelhagem
3.2.1. Centrífuga de laboratório e tubos de centrífuga de 50 ml de capaci-
dade e com rolhas esmeriladas.
3.2.2. Banho de água arrefecido, com termóstato, entre 5 e 10 ºC.
3.2.3. Banho de água arrefecido, com termóstato a 20 ºC.
3.2.4. Placas para cromatografia em camada fina, prontas a utilizar,
20 × 20 cm, cobertas de gel de sílica G (espessura 0,25 ou 0,3 mm).
3.2.5. Cuba para cromatografia.
3.2.6. Micropipeta que permita depositar volumes de 0,2 ml.
3.2.7. Espectrofotómetro que permita efectuar medições da absorvência a
500 nm, equipado com cubas de 1 cm de trajecto óptico.
3.3.Modo operatório
3.3.1. Oxidação do ácido L-ascórbico em ácido dehidroascórbico
Introduzir 50 ml de vinho num balão graduado de 100 ml, juntar
15 ml de suspensão de poliamida (3.1.4) e ajustar até ao traço de
referência com a solução de ácido metafosfórico a 3 p. 100 (3.1.2).
Deixar em contacto durante 1 hora, agitando frequentemente. Filtrar
por um filtro plissado. Recolher 20 ml de filtrado num tubo de
centrífuga e juntar 1 ml de solução 0,05 M de iodo (3.1.6). Homoge-
neizar por agitação o conteúdo do tubo de centrífuga e, após 1
minuto, reduzir o excesso de iodo com aproximadamente 25 mg de
tioureia (3.1.5).1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 120
▼B
3.3.2. Formação e extracção da bis(2,4-dinitrofenilhidrazona) do ácido
dicetogulónico
Colocar o tubo num banho de água arrefecida entre 5 e 10 ºC e
juntar 4 ml de solução de 2,4-dinitrofenilhidrazina (3.1.7). Homoge-
neizar o conteúdo do tubo, evitando molhar a rolha de vidro. Rolhar
cuidadosamente o tubo e deixá-lo num banho de água a 20 ºC
durante cerca de 16 horas (uma noite, por exemplo).
Adicionar 15 ml de acetato de etilo (3.1.8) ao conteúdo do tubo de
centrífuga, voltar a rolhar o tubo, agitar 30 segundos e centrifugar
durante 5 minutos, aplicando uma força centrífuga de 350 a 400 g.
Pipetar 10 ml de acetato de etilo da extracção para um balão cónico
de rolha esmerilada. Juntar 5 ml de acetato de etilo (3.1.8) ao
conteúdo do tubo de centrífuga, rolhar o tubo, agitar 30 segundos e
centrifugar durante 5 minutos, à mesma velocidade. Tomar 5 ml de
acetato de etilo da extracção e adicionar este volume à solução da
primeira extracção no balão cónico. Homogeneizar a mistura por
agitação.
3.3.3. Separação por cromatografia da bis(2,4-dinitrofenilhidrazona), a
efectuar nas 2 horas seguintes à extracção (3.3.2)
A partir de uma margem de 2 cm na parte inferior e de 2 cm na
parte lateral, depositar linearmente em todo o comprimento 0,2 ml
de extracto de acetato de etilo. Colocar a fase móvel (3.1.11) na
cuba a uma altura de 1 cm e deixar a atmosfera do recipiente
saturar-se de vapores dos solventes. Introduzir a placa, deixar o
solvente migrar até ao bordo superior da placa e secá-la durante
uma hora sobuma hotteventilada. Com uma espátula, soltar perpen-
dicularmente à zona de migração a zona corada de vermelho
(característica da 2,4-dinitrofenilhidrazona). Recolher o substracto
numa folha de papel glacée transvasá-lo para um balão cónico e
rolha esmerilada, juntando depois 4 ml de ácido acético (3.1.12).
Deixar em contacto durante 30 minutos, agitando-o frequentemente.
Filtrar por papel de filtro plissado directamente para a cuba do
espectrofotómetro (3.2.7). O filtrado obtido deve estar límpido.
Regular o zero da escala das absorvências a 500 nm com o ácido
acético (3.1.12), medir a absorvência da solução.
3.3.4. Curva de calibração
Colocar em 3 balões graduados de 100 ml respectivamente 5, 10 e
15 ml de solução de ácido L-ascórbico (3.1.13) e ajustar até ao
traço de referência com a solução de ácido metafosfórico a 1 p.
100 (3.1.3). As soluções obtidas titulam, respectivamente, 50, 100 e
150 mg/litro em ácido ascórbico.
Tratar 50 ml de cada uma destas soluções de acordo com a técnica
descrita em 3.3.1, 3.3.2 e 3.3.3. Traçar a curva de calibração, que
deve ser linear e passar pela origem.
3.3.5. Expressão dos resultados
A concentração do vinho em ácido L-ascórbico + ácido dehidroas-
córbico é expressa em miligramas por litro.
3.3.5.1. Cálculo
A partir do valor da absorvência medida em 3.3.3 utilizar a curva de
calibração para obter a concentração em ácido L-ascórbico e ácido
dehidroascórbico da solução analisada.
N.B.:
Se a concentração de ácido L-ascórbico + ácido dehidroascórbico for
superior a 150 mg/litro, reduzir o volume da toma de ensaio para
25,20 ou 10 ml de vinho e multiplicar o resultado obtido pelo factor
F de diluição.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 121
▼B
24.pH
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Medir a diferença de potencial entre dois eléctrodos mergulhados no
líquido estudado. Um dos eléctrodos tem um potencial que é uma
função definida do pH deste líquido, o outro tem um potencial fixo
e conhecido, e constitui o eléctrodo de referência.
2. APARELHAGEM
2.1. pH-metro com escala aferida em unidades de pH, que permita efec-
tuar medições com uma aproximação de 0,05 da unidade, nomínimo.
2.2. Eléctrodos:2.2.1. Eléctrodo de vidro, a conservar em água destilada.2.2.2. Eléctrodo de referência de calomel-cloreto de potássio saturado, a
conservar numa solução saturada de cloreto de potássio.
2.2.3. Ou eléctrodo combinado a conservar em água destilada.
3. REAGENTES
3.1. Soluções-tampão:
3.1.1. Solução saturada de tartarato ácido de potássio. Solução contendo
pelo menos 5,7 g/l de tartarato ácido de potássio (C
4H5KO6), a
20 ºC. (Esta solução pode conservar-se dois meses em presença de
0,1 g de timol por 200 ml.)
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,57 a 20 ºC
3,56 a 25 ºC
3,55 a 30 ºC
3.1.2. Solução 0,05 M de ftalato ácido de potássio. Solução contendo
10,211 g/l de ftalato ácido de potássio (C
8H5KO4), a 20 ºC. (Duração
máxima de conservação: 2 meses)
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,999 a 15 ºC
4,003 a 20 ºC
4,008 a 25 ºC4,015 a 30 ºC
3.1.3. Solução que contenha:
Fosfato monopotássico, KH
2PO4…...................... 3,402 g
Fosfato dipotássico, K2HP O4…......................... 4,354 g
Água q.b. para …........................................ 1 l
(Duração máxima de conservação: 2 meses)
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1466,90 a 15 ºC
6,88 a 20 ºC
6,86 a 25 ºC
6,85 a 30 ºC
N.B.:
Podem, igualmente, ser utilizadas as soluções-tampão de referência
do comércio.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 122
▼B
4. MODO OPERATÓRIO
4.1.Preparação da amostra a analisar
4.1.1. Caso do mosto e do vinho
Trabalhar directamente com o mosto ou o vinho.
4.1.2. Caso do mosto concentrado rectificado
Diluir o mosto concentrado rectificado em água, para obter uma
concentração de 25 ± 0,5 p. 100 (m/m) de açúcares totais (25 ºBrix).
Se P for o teor em p. 100 (m/m) de açúcares totais do mosto concen-
trado rectificado, pesar uma massa igual a
2500
P
e completar até 100 g com água. A água utilizada deve ter uma
condutividade inferior a 2 microsiemens por centímetro.
4.2.Regulação do zero do aparelho
A regulação do zero efectua-se antes de qualquer medição, de
acordo com as indicações dadas para o aparelho utilizado.
4.3.Calibração do potenciómetro
A calibração efectua-se a 20 ºC, seguindo as indicações dadas para o
aparelho utilizado, com as soluções-tampão de pH 6,88 e 3,57 a
20 ºC.
Utilizar a solução-tampão de pH 4,00 a 20 ºC para controlar a cali-
bração da escala.
4.4.Medição
Mergulhar o eléctrodo na amostra analisada, cuja temperatura deve
estar compreendida entre 20 e 25 ºC e tão próxima quanto possível
dos 20 ºC. Ler directamente na escala o valor do pH.
Efectuar pelo menos duas determinações na mesma amostra.Tomar como resultado a média aritmética das leituras efectuadas.
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
O pH do mosto, do vinho ou da solução a 25 p. 100 (m/m) (25 ºBrix)
do mosto concentrado rectificado é expresso com dois decimais.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 123
▼B
25.DIÓXIDODE ENXOFRE
1. DEFINIÇÕES
Chama-se «dióxido de enxofre» ao dióxido de enxofre presente no
mosto ou no vinho sobas formas seguintes: H2SO3,HS O3−cujo
equilíbrio é função do pH e da temperatura:
H2SO3
H++ HSO3−
H2SO3representa o dióxido de enxofre molecular.
Chama-se «dióxido de enxofre total» ao conjunto das diferentes
formas de dióxido de enxofre presentes no vinho, no estado livre
ou combinado com os seus constituintes.
2. DIÓXIDO DE ENXOFRE LIVRE E TOTAL2.1.Princípio dos métodos
2.1.1. Método de referência
2.1.1.1. O caso dos vinhos e dos mostos:
O dióxido de enxofre é arrastado por uma corrente de ar ou de
azoto; é fixado e oxidado por borbulhagem numa solução diluída e
neutra de peróxido de hidrogénio. O ácido sulfúrico formado é
doseado por uma solução titulada de hidróxido de sódio. O dióxido
de enxofre livre é extraído do vinho por arrastamento a frio (10 ºC).
O dióxido de enxofre total é extraído do vinho por arrastamento a
quente (aproximadamente 100 ºC).
2.1.1.2. Caso dos mostos concentrados rectificados:
O dióxido de enxofre total é extraído por arrastamento a quente
(100 ºC aproximadamente) do mosto concentrado rectificado, previa-
mente diluído).
2.1.2. Método rápido de ensaio (vinhos e mostos)
O dióxido de enxofre livre é doseado por titulação iodométrica
directa.
O dióxido de enxofre combinado é doseado, em seguida, por titu-
lação iodométrica após hidrólise alcalina. Adicionado ao dióxido de
enxofre livre, ele permite obter o dióxido de enxofre total.
2.2.Método de referência
2.2.1. Aparelhagem
2.2.1.1. O aparelho utilizado deve ser conforme ao esquema seguinte, princi-
palmente no que respeita ao refrigerante.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 124
▼B
Fig. 1
As dimensões estão indicadas em milímetros. Os diâmetros
internos dos quatro tubos concêntricos que constituem o refrige-
rante são de 45, 34, 27 e 10 mm.
O tubo de entrada dos gases no borbulhador «B» termina por uma
pequena esfera de 1 cm de diâmetro que comporta, no seu grande
círculo horizontal, 20 furos de 0,2 mm de diâmetro. Pode-se, igual-
mente, terminá-la por uma placa de vidro calcinado que assegure a
formação de um grande número de pequeníssimas bolhas, permi-
tindo um bom contacto das fases gasosa e líquida.
O débito gasoso que deve percorrer o aparelho deve ser de cerca de
40 l/h. O frasco colocado à direita do aparelho destina-se a limitar a
20 a 30 cm de água a depressão produzida pela trompa de água. Para
poder regular esta depressão, de modo a que o débito seja correcto, é
conveniente colocar entre o borbulhador e o frasco um medidor de
débito em tubo semicapilar.
2.2.1.2. Microbureta2.2.2. Reagentes
2.2.2.1. Ácido fosfórico a 85 p. 100 (H
3PO4)(ρ20= 1,71 g/ml).
2.2.2.2. Solução de peróxido de hidróxido a 9,1 g de H2O2/litro (3 volumes).
2.2.2.3. Reagente indicador:
vermelho de metilo …................................... 100 mg
azul de metileno …...................................... 50 mg
álcool a 50 % vol … ..................................... 100ml
2.2.2.4. Solução de hidróxido de sódio (NaOH), 0,01 M.
2.2.3. Modo operatório
2.2.3.1. Doseamento do dióxido de e nxofre livre
Antes do doseamento, o vinho deve tér sido mantido a 20 ºC num
frasco cheio e rolhado durante 2 dias.
— No borbulhador «B» colocar 2 a 3 ml de solução de peróxido de
hidrogénio (2.2.2.2) e 2 gotas de reagente indicador, e neutralizar
a solução de peróxido de hidrogénio com a solução 0,01 M de
hidróxido de sódio (2.2.2.4).
Adaptar este borbulhador ao aparelho.
— No balão «A» de 250 ml do aparelho de arrastamento, introduzir
50 ml da amostra e 15 ml de ácido fosfórico (2.2.2.1). Colocar o
balão no aparelho.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 125
▼B
Em seguida, fazer borbulhar ar (ou azoto) durante 15 minutos. O
dióxido de enxofre livre arrastado é oxidado em ácido sulfúrico.
Retirar o borbulhador do aparelho e titular o ácido formado com
a solução de hidróxido de sódio 0,01 M (2.2.2.4).
Seja «n» o número de mililitros utilizados.
2.2.3.2. Expressão dos resultados
O dióxido de enxofre livre exprime-se em miligramas por litro (mg/
/l) sem decimais.
2.2.3.2.1. Cálculo
Dióxido de enxofre livre em miligramas por litro: 6,4 n.
2.2.3.3. Doseamento de dióxido de e nxofre total
2.2.3.3.1. No caso dos mostos concentrados rectificados, diluir a amostra a
analisar a 40 % (m/v) como é indicado na capítulo «Acidez total»,
em 5.1.2. No balão «A» de 250 ml do aparelho de arrastamento,
colocar 50 ml da solução de diluição e 5 ml de ácido fosfórico
(2.2.2.1). Colocar o balão no aparelho.
2.2.3.3.2. Caso dos vinhos e mostos
Teor previsível da amostra < 50 mg/l SO2total. No balão «A» de
250 ml do aparelho de arrastamento, introduzir 50 ml da amostra e
15 ml de ácido fosfórico (2.2.2.1). Colocar o balão no seu lugar.
Todavia, admite-se que, até ►M331 de Agosto de 1996 ◄, o mais
tardar, para as análises do teor em dióxido de enxofre dos sumos de
uvas, se empregue 5 ml de ácido fosfórico (2.2.2.1) diluído a 25 p.
100 (m/v).
2.2.3.3.3. Teor previsível da amostra > 50 mg/l de SO2total. No balão «A» de
100 ml do aparelho de arrastamento, introduzir 20 ml de amostra e
5 ml de ácido fosfórico (2.2.2.1). Colocar o balão no seu lugar.
Colocar no borbulhador «B» 2 a 3 ml de solução de peróxido de
hidrogénio (2.2.2.2), neutralizá-la como anteriormente e levar o
vinho contido no balão «A» à ebulição por meio de uma pequenachama de 4 a 5 cm de altura, que deve tocar directamente o fundo
do balão. Não colocar uma tela metálica debaixo do balão, mas
pousá-lo num disco com uma abertura de 30 mm de diâmetro.
Evita-se deste modo a pirogenação das matérias extractivas do vinho
nas paredes do balão.
Manter a ebulição durante a passagem da corrente de ar (ou de
azoto). Em 15 minutos, o dióxido de enxofre total fol arrastado e
oxidado. Dosear o ácido sulfúrico formado pela solução 0,01 M de
hidróxido de sódio (2.2.2.4).
Seja «n» o número de mililitros empregues.
2.2.3.4. Expressão dos resultados
O dióxido de enxofre total expressa-se em miligramas por litro (mg/
/l) ou em miligramas por quilograma (mg/kg) de açúcares totais, sem
decimais.
2.2.3.4.1. Cálculo
— Caso dos vinhos e dos mostos
Dióxido de enxofre total, expresso em miligramas por litro:
— Amostras pobres em dióxido de enxofre (toma de ensaio de
50 ml):
6,4 · n
— Outras amostras (toma de ensaio de 20 ml):
16 · n
— Caso dos mostos concentrados rectificados
Dióxido de enxofre em miligramas por quilo de açúcares totais
[toma de ensaio de 50 ml de amostra preparada (2.2.3.3.1)]:
1600 /C1n
P
P = teor p. 100 (m/m) em açúcares totais.
2.2.3.4.2. Repetibilidade (r)
Teor < 50 mg/l (toma de ensaio de 50 ml), r = 1 mg/l1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 126
▼B
Teor > 50 mg/l (toma de ensaio de 20 ml), r = 6 mg/l
2.2.3.4.3. Reprodutibilidade (R)
Teor < 50 mg/l (toma de ensaio de 50 ml), R = 9 mg/l
Teor > 50 mg/l (toma de ensaio de 20 ml), R = 15 mg/l
2.3.Método rápido de ensaio
2.3.1. Reagentes
2.3.1.1. EDTA (Complexona III): sal dissódico do ácido etileno-diamina-
-tetracético. (C10H14N2Na2O8,2 H2O).
2.3.1.2. Solução 4 M de hidróxido de sódio NaOH (160 g/l).
2.3.1.3. Ácido sulfúrico H2SO4(ρ20= 1,84 g/ml), solução a 1/10 (v/v).
2.3.1.4. Solução de amido a 5 g/l.
Diluir 5 g de amido em cerca de 500 ml de água. Levar à ebulição
agitando e manter em ebulição durante 10 minutos; juntar 200 g de
cloreto de sódio (NaCl). Levar até 1 litro após arrefecimento.
2.3.1.5. Solução de 0,025 M de iodo (I2)
2.3.2. Material
2.3.2.1. Balões cónicos de 500 ml
2.3.2.2. Bureta2.3.2.3. Pipetas de 1, 2, 5 e 50 ml
2.3.3. Modo operatório
2.3.3.1. Dióxido de enxofre livre
Num balão cónico de 500 ml, colocar:
— 50 ml de vinho
— 5 ml de goma de amido (2.3.1.4)— 30 mg de EDTA (2.3.1.1)
— 3 ml de H
2SO4a 1/10 (v/v) (2.3.1.3)
Titular imediatamente com iodo 0,025 M (2.3.1.5) até que a colo-
ração azul persista nitidamente durante 10 a 15 segundos, sendo «n
ml» o volume de iodo utilizado.
2.3.3.2. Dióxido de enxofre combinado
Juntar 8 ml de solução 4 M de hidróxido de sódio (2.3.1.2), agitar
uma só vez e deixar em contacto durante 5 minutos. Deitar de uma
só vez e, agitando energicamente o conteúdo de um pequeno copo
em que se colocaram 10 ml de ácido sulfúrico a 1/10 (2.3.1.3),
titular imediatamente com iodo 0,025 M (2.3.1.5) sendo «n ′»o
volume de iodo empregue.
Juntar 20 ml de solução 4 M de hidróxido de sódio (2.3.1.2), deixar
em contacto 5 minutos depois de ter agitado uma só vez. Diluir com
200 ml de água tão fria quanto possível.
Agitando-o energicamente, deitar de uma só vez 30 ml de ácido
sulfúrico a 1/10 (2.3.1.3) colocados previamente numa proveta.
Titular o dióxido de enxofre libertado com iodo 0,025 M (2.3.1.5)
sendo «n ″» o volume de iodo utilizado.
2.3.4. Expressão dos resultados
2.3.4.1. Cálculo:
Dióxido de enxofre livre, expresso em miligramas por litro: 32 n.Dióxido de enxofre total, expresso em miligramas por litro: 32 (n +
n′+n″).
Notas:
1. Para os vinhos tintos pobres em SO
2, é conveniente utilizar iodo
mais diluído do que 0,025 M, por exemplo: 0,01 M. Substituir o
coeficiente 32 por 12,8 nas fórmulas anteriores.
2. Para os vinhos tintos, é conveniente iluminar o vinho por baixo,
com um feixe de luz amarela obtida com uma lâmpada eléctrica
vulgar e uma solução de cromato de potássio ou por meio de uma
lâmpada de vapor de sódio. É necessário estar numa câmara1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 127
▼B
escura e observar a transparência do vinho, que se torna opaco
logo que a viragem da goma se atinge.
3. Quando a quantidade de dióxido de enxofre encontrada se apro-
xima do limite legal ou o excede, convém dosear o dióxido de
enxofre total pelo método de referência.
4. Quando se tem um interesse especial no doseamento do dióxido
de enxofre, ele será convencionalmente determinado numa
amostra mantida durante dois dias ao abrigo do ar, à temperatura
de 20 ºC, antes da análise, e esta será igualmente executada à
temperatura de 20 ºC.
5. Dado que certas substâncias são oxidadas pelo iodo em meio
ácido, é necessário — para doseamentos mais rigorosos —
avaliar a quantidade de iodo assim utilizado. Para tal, é
necessário combinar o dióxido de enxofre livre com um excesso
de etanal ou de propanal antes de executar a titulação com iodo.
Juntar a 50 ml de vinho, colocados num balão cónico de 300 ml,
5 ml de solução de etanal (C2H4O) a 7 g/l ou 5 ml de uma
solução de propanal (C3H6O) a 10 g/l.
Tapar com uma rolha e deixar em repouso durante pelo menos 30
minutos. Juntar 3 ml de ácido sulfúrico a 1/10 (2.3.1.3) e iodo
0,025 M (2.3.1.5) em quantidade suficiente para fazer virar a
goma de amido. Que «n /tripleprime» seja o volume de iodo utilizado. A
este valor deve ser subtraído n (dióxido de enxofre livre) e n +
n′+n″(dióxido de enxofre total).
Geralmente, n /tripleprimeé fraco: 0,2 a 0,3 ml de iodo 0,025 M. Se o vinho
foi adicionado de ácido ascórbico, n /tripleprimeé bastante mais elevado e é
possível, pelo menos aproximadamente, medir a quantidade deste
produto por meio do valor de n /tripleprime, sabendo que 1 ml de iodo
0,025 M oxida 4,4 mg de ácido ascórbico. Pela medição de n /tripleprime
podem detectar-se, sem dificuldades, os vinhos a que se
adicionou ácido ascórbico em quantidade superior a 20 mg/l e
que não se transformou em produtos de oxidação.
3. DIÓXIDO DE ENXOFRE MOLECULAR3.1.Princípio do método
A percentagem de dióxido de enxofre molecular, H
2SO3, no dióxido
de enxofre livre, é avaliada em função do pH, do título alcoométrico
e da temperatura.
Para uma temperatura e um título alcoométrico dados:
H2SO3
H++ HSO3−
(1) H2SO3 ½/C138 ¼L
10pH/C0pKM ðÞþ1
com
pKM=p KT/C0Aﬃﬃ
Ip
1þBﬃﬃ
Ip
L= [ H2SO3] + [HSO3−]
I = força iónica.A e B = coeficientes que variam com a temperatura e o título alco-
ométrico.
K
T= constante termodinâmica de dissociação; o valor de pkTé
dado no quadro 1 em função do título alcoométrico e da
temperatura.
KM= constante mista de dissociação.
Tomando para a força iónica I o valor médio 0,038, o quadro 2
indica os valores de pkMem função da temperatura e do título alco-
ométrico.
O teor de dióxido de enxofre molecular calculado a partir da relação
(1) é dado no quadro 3 em função do pH, da temperatura e do título
alcoométrico.
3.2.Cálculo
Se se conhecer o pH do vinho e o seu título alcoométrico, a percen-
tagem de dióxido de enxofre molecular é dada pelo quadro 3, para a
temperatura t ºC; seja X %.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 128
▼B
Teor de dióxido de enxofre molecular em mg/l:
X·CC = teor de dióxido de enxofre livre em mg/l.
QUADRO 1
Valores da constante termodinâmica pK
T
Álcool(% em
volume)Temperatura ºC
20 25 30 35 40
0 1,798 2,000 2,219 2,334 2,493
5 1,897 2,098 2,299 2,397 2,527
10 1,997 2,198 2,394 2,488 2,606
15 2,099 2,301 2,503 2,607 2,728
20 2,203 2,406 2,628 2,754 2,895
QUADRO 2
Valores da constante mista pKM(I = 0,038)
Álcool(% em
volume)Temperatura ºC
20 25 30 35 40
0 1,723 1,925 2,143 2,257 2,416
5 1,819 2,020 2,220 2,317 2,446
10 1,916 2,116 2,311 2,405 2,522
15 2,014 2,216 2,417 2,520 2,640
20 2,114 2,317 2,538 2,663 2,803
QUADRO 3
Dióxido de enxofre molecular em percentagem do dióxido de enxofre livre
SO2molecular
%d oS O2livreT = 20 ºC
I = 0,038
pHÁlcool (% em volume)
0 5 10 15 20
2,8 7,73 9,46 11,55 14,07 17,09
2,9 6,24 7,66 9,40 11,51 14,07
3,0 5,02 6,18 7,61 9,36 11,51
3,1 4,03 4,98 6,14 7,58 9,36
3,2 3,22 3,99 4,94 6,12 7,58
3,3 2,58 3,20 3,98 4,92 6,12
3,4 2,06 2,56 3,18 3,95 4,92
3,5 1,64 2,04 2,54 3,16 3,95
3,6 1,31 1,63 2,03 2,53 3,16
3,7 1,04 1,30 1,62 2,02 2,53
3,8 0,83 1,03 1,29 1,61 2,02
T = 25 ºC
2,8 11,47 14,23 17,15 20,67 24,752,9 9,58 11,65 14,12 17,15 22,71
3,0 7,76 9,48 11,55 14,12 17,18
3,1 6,27 7,68 9,40 11,55 14,15
3,2 5,04 6,20 7,61 9,40 11,58
3,3 4,05 4,99 6,14 7,61 9,42
3,4 3,24 4,00 4,94 6,14 7,63
3,5 2,60 3,20 3,97 4,94 6,16
3,6 2,07 2,56 3,18 3,97 4,55
3,7 1,65 2,05 2,54 3,18 3,98
3,8 1,32 1,63 2,03 2,54 3,181990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 129
▼B
SO2molecular
%d oS O2livreT = 20 ºC
I = 0,038
pHÁlcool (% em volume)
0 5 10 15 20
T = 30 ºC
2,8 18,05 20,83 24,49 29,28 35,36
2,9 14,89 17,28 20,48 24,75 30,29
3,0 12,20 14,23 16,98 20,71 25,66
3,1 9,94 11,65 13,98 17,18 21,52
3,2 8,06 9,48 11,44 14,15 17,88
3,3 6,51 7,68 9,30 11,58 14,75
3,4 5,24 6,20 7,53 9,42 12,08
3,5 4,21 4,99 6,08 7,63 9,84
3,6 3,37 4,00 4,89 6,16 7,98
3,7 2,69 3,21 3,92 4,95 6,44
3,8 2,16 2,56 3,14 3,98 5,19
T = 35 ºC
2,8 22,27 24,75 28,71 34,42 42,182,9 18,53 20,71 24,24 29,42 36,69
3,0 15,31 17,18 20,26 24,88 31,52
3,1 12,55 14,15 16,79 20,83 26,77
3,2 10,24 11,58 13,82 17,28 22,51
3,3 8,31 9,42 11,30 14,23 18,74
3,4 6,71 7,63 9,19 11,65 15,49
3,5 5,44 6,16 7,44 9,48 12,71
3,6 4,34 4,95 6,00 7,68 10,36
3,7 3,48 3,98 4,88 6,20 8,41
3,8 2,78 3,18 3,87 4,99 6,80
T = 40 ºC
2,8 29,23 30,68 34,52 40,89 50,142,9 24,70 26,01 29,52 35,47 44,74
3,0 20,67 21,83 24,96 30,39 38,85
3,1 17,15 18,16 20,90 25,75 33,54
3,2 14,12 14,98 17,35 21,60 28,62
3,3 11,55 12,28 14,29 17,96 24,15
3,4 9,40 10,00 11,70 14,81 20,19
3,5 7,61 8,11 9,52 12,13 16,73
3,6 6,14 6,56 7,71 9,88 13,77
3,7 4,94 5,28 6,22 8,01 11,25
3,8 3,97 4,24 5,01 6,47 9,151990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 130
▼B
26.SÓDIO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS1.1.Método de referência: Espectrofotometria de absorção atómica
O sódio é doseado directamente no vinho por espectrofotometria de
absorção atómica, após adição de um tampão espectral de cloreto de
césio para evitar a ionização do sódio.
1.2.Método usual: fotometria de chama
O sódio é doseado directamente no vinho diluído pelo menos a 1/10
por fotometria de chama.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA2.1.Reagentes
2.1.1. Solução de sódio a 1 g/l
Utilizar uma solução-padrão, comercial, de sódio a 1 g/l. Esta
solução pode ser preparada dissolvendo 2,542 g de cloreto de sódio
(NaCl) seco, em água destilada e perfazendo o volume de 1 litro.
Conservar esta solução num frasco de polietileno.
2.1.2. Solução-modelo
Ácido cítrico C
6H8O7,H2O… ........................ 3,5 g
Sacarose C12H22O11… ................................ 1,5 g
Glicerol C3H8O3…................................... 5,0 g
Cloreto de cálcio anidro Ca Cl2…................... 50 mg
Cloreto de magnésio anidro Mg Cl2…............... 50 mg
Álcool etílico absoluto C2H5OH… ................... 50 ml
Água q.b. para ….................................... 500 ml
2.1.3. Solução de cloreto de césio a 5 p. 100 (m/v) em césio
Dissolver 6,330 g de cloreto de césio (Cs Cl) em 100 ml de água
destilada.
2.2.Aparelhagem
2.2.1. Espectrofotómetro de absorção atómica, equipado com queimador
alimentado com ar e acetileno.
2.2.2. Lâmpada de cátodo oco de sódio.
2.3.Modo operatório
2.3.1. Preparação da amostra
Introduzir 2,5 ml de vinho num balão marcado de precisão de 50 ml,
juntar 1 ml da solução de cloreto de césio (2.1.3) e perfazer o
volume com água destilada.
2.3.2. Calibração
Numa série de balões marcados de precisão de 100 ml introduzir
5,0 ml de solução-modelo, adicionar 0 - 2,5 - 5 - 7,5 - 10 ml da
solução-padrão de sódio a 1 g/l (2.1.1) previamente diluída a 1/100,
juntar a todos os balões 2 ml da solução de cloreto de césio (2.1.3) e
perfazer o volume com água destilada.
As soluções-padrão preparadas contêm, respectivamente, 0 - 0,25 -
0,50 - 0,75 - 1,00 mg de sódio e 1 g de césio por litro. Estas
soluções devem ser conservadas em frascos de polietileno.
2.3.3. Doseamento
Seleccionar o comprimento de onda de 589,0 nm. Regular o zero
com a solução-modelo que contém 1 g de césio por litro (2.3.2).
Aspirar directamente o vinho diluído no queimador do espectrofotó-1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 131
▼B
metro e depois, sucessivamente, as soluções-padrão (2.3.2). Ler as
absorvências. Efectuar as determinações em duplicado.
2.4.Resultados
2.4.1. Cálculo
Traçar a curva de variação da absorvência em função da concen-
tração de sódio das soluções-padrão.
A partir do valor médio das absorvências obtidas na amostra, deter-
minar a concentração C de sódio, em miligramas por litro, utilizando
a curva de referência.
A concentração de sódio, expressa em miligramas por litro de vinho,
sem decimais, será:
20 × C
2.4.2. Repetibilidade: r
r = 1 + 0,024 ximg/l
xi= Concentração em sódio da amostra expressa em mg/l.
2.4.3. Reprodutibilidade: R
R = 2,5 + 0,05 ximg/l
xi= Concentração de sódio na amostra em mg/l.
3. MÉTODO USUAL
3.1.Reagentes
3.1.1. Solução-padrão de sódio a 20 mg por litro
Álcool absoluto (C2H5OH)…...................... 10 ml
Ácido cítrico (C6H8O7,H2O)….................... 700 mg
Sacarose (C12H22O11)…............................ 300 mg
Glicerol (C3H8O3)… ............................... 1000 mg
Tartarato ácido de potássio (C4H5KO6) ….......... 481,3 mg
Cloreto de cálcio anidro (Ca Cl2)…................ 10 mg
Cloreto de magnésio anidro (Mg Cl2)…............ 10 mg
Cloreto de sódio seco (NaCl) …................... 50,84 mg
Água q.b. para ….................................. 1 l
3.1.2. Solução de diluição
Álcool absoluto (C2H5OH)…...................... 10 ml
Ácido cítrico (C6H8O7,H2O)….................... 700 mg
Sacarose (C12H22O11)…............................ 300 mg
Glicerol (C3H8O3)… ............................... 1000 mg
Tartarato ácido de potássio (C4H5KO6) ….......... 481,3 mg
Cloreto de cálcio anidro (Ca Cl2)…................ 10 mg
Cloreto de magnésio anidro (Mg Cl2)…............ 10 mg
Água q.b. para ….................................. 1 l
Para preparar as soluções 3.1.1 e 3.1.2 dissolver o tartarato ácido de
potássio em cerca de 500 ml de água destilada muito quente,
misturar a solução com os outros constituntes previamente dissol-
vidos em 400 ml de água destilada e perfazer o volume de 1 litro.
As soluções, a que se adicionou 2 gotas de isocianato de alilo, são
conservadas em frascos de polietileno.
3.2.Aparelhagem
3.2.1. Fotómetro de chama alimentado por uma mistura de ar-butano.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 132
▼B
3.3.Modo operatório
3.3.1. Calibração
Numa série de balões marcados de precisão de 100 ml, colocar 5 -
10 - 15 - 20 - 25 ml de solução de sódio a 20 mg/l (3.1.1) e
completar o volume de 100 ml com solução de diluição (3.1.2).Obtêm-se soluções que contêm, respectivamente, 1 - 2 - 3 - 4 -
5 mg de sódio por litro.
3.3.2. Doseamento
Efectuar as medições a 589,0 nm. Regular o valor de 100 % de
transmitância com água destilada. Aspirar, directa e sucessivamente,
no queimador do fotómetro, as soluções padrão (3.3.1), depois o
vinho a 1/10 com água destilada e registar as percentagens de trans-
mitância. Se necessário, diluir o vinho já diluído a 1/10 com a
solução (3.1.2).
3.4.Resultados
3.4.1. Cálculo
Traçar a curva de variação da percentagem de transmitância em
função da concentração de sódio das soluções-padrão. A partir do
valor médio das percentagens de transmitância obtidas na amostra,
determinar a concentração C de sódio a partir da curva de referência.
Sendo F o factor de diluição, a concentração de sódio, expressa em
miligramas por litro, sem decimais, será:
C×F
F = Factor de diluição.
3.4.2. Repetibilidade: r
Vinhos(salvo licorosos): r = 1,4 mg/l
Vinhoslicorosos: r = 2,0 mg/l.
3.4.3. Reprodutibilidade: R
R = 4,7 + 0,08 x
img/l.
i= concentração de sódio da amostra em mg/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 133
▼B
27.POTÁSSIO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
1.1.Método de referência: Espectrofotometria de absorção atómica
O potássio é doseado directamente no vinho diluído por espectrofo-
tómetro de absorção atómica, após adição de um tampão espectral de
cloreto de césio para evitar a ionização do potássio.
1.2.Método usual: Fotometria de chama
O potássio é doseado directamente no vinho diluído por fotometria
de chama.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA
2.1.Reagentes
2.1.1. Solução-padrão de potássio a 1 g/l
Utilizar uma solução-padrão, comercial, de potássio a 1 g/l. Esta
solução pode ser preparada dissolvendo 4,813 g de tartarato ácido
de potássio (C4H5KO6) em água destilada e perfazendo o volume de
1 litro.
2.1.2. Solução modelo
Ácido cítrico (C6H8O7,H2O)…...................... 3,5 g
Sacarose (C12H22O11)….............................. 1,5 g
Glicerol (C3H8O3)… ................................. 5,0 g
Cloreto de cálcio anidro (Ca Cl2)….................. 50 mg
Cloreto de magnésio anidro (Mg Cl2)….............. 50 mg
Álcool etílico absoluto (C2H5OH)…................. 50 ml
Água q.b. para ….................................... 500 ml
2.1.3. Solução de cloreto de césio a 5 p. 100 em césio
Dissolver 6,330 g de cloreto de césio (Cs Cl) em 100 ml de água
destilada.
2.2.Aparelhagem
2.2.1. Espectrofotómetro de absorção atómica, equipado com queimador
alimentado com ar e acetileno.
2.2.2. Lâmpada de cátodo oco de potássio.
2.3.Modo operatório
2.3.1. Preparação da amostra
Introduzir 2,5 ml de vinho previamente diluído 1/10 num balão
marcado de precisão de 50 ml, juntar 1 ml da solução de cloreto de
césio (2.1.3) e perfazer o volume com água destilada.
2.3.2. Calibração
Numa série de balões marcados de precisão de 100 ml, introduzir
5 ml de solução modelo (2.1.2), medir 0 - 2,0 - 4,0 - 6,0 - 8,0 ml
de solução de potássio a 1 g/l, (2.1.1) previamentediluída a 1/10.
Juntar a todos os balões 2 ml da solução de cloreto de césio (2.1.3)
e perfazer o volume com água destilada. As soluções-padrão prepa-
radas contêm, respectivamente, 0 - 2 - 4 - 6 - 8 mg de potássio e 1 g
de césio, por litro. Estas soluções serão conservadas em frascos de
polietileno.
2.3.3. Doseamento
Seleccionar o comprimento de onda de 769,9 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com a solução-modelo que contém 1 g de
césio por litro (2.3.2). Aspirar directamente o vinho diluído (2.3.1)
no queimador do espectrofotómetro e depois, sucessivamente, as1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 134
▼B
soluções-padrão (2.3.2). Registar as absorvências. Efectuar as deter-
minações em duplicado.
2.4.Expressão dos resultados
2.4.1. Cálculo
Traçar a curva de variação da absorvência em função da concen-
tração de potássio das soluções-padrão. A partir do valor médio das
absorvências obtidas na amostra, determinar a concentração C de
potássio em miligramas por litro, utilizando a curva de referência.
Sendo F o factor de diluição (neste caso 200), a concentração de
potássio, expressa em miligramas por litro de vinho, sem decimais,
será:
F×C
2.4.2. Repetibilidade: r
r = 35 mg/l.
2.4.3. Reprodutibilidade: R
R = 66 mg/l.
2.4.4. Outras formas de expressar os resultados
— Em miliequivalentes por litro: 0,0256 × F × C
— Em tartarato ácido de potássio em miligramas por litro: 4,813 ×
F×C
3. MÉTODO USUAL: Espectrofotometria de chama3.1.Reagentes
3.3.1. Solução de referência a 100 mg por litro, de potássio:
Álcool absoluto (C
2H5OH)…...................... 10 ml
Ácido cítrico (C6H8O7,H2O)….................... 700 mg
Sacarose (C12H22O11)…............................ 300 mg
Glicerol (C3H8O3)… ............................... 1000 mg
Cloreto de sódio (NaCl) … ......................... 50,8 mg
Cloreto de cálcio anidro (Ca Cl2)…................ 10 mg
Cloreto de magnésio anidro (Mg Cl2)…............ 10 mg
Tartarato ácido de potássio desidratado (C4H5KO6) … 481,3 mg
Água q.b. para ….................................. 1 000 ml
Para a preparação destas soluções, dissolver o tartarato ácido de
potássio em cerca de 500 ml de água destilada muito quente,
misturar a solução com os outros constituintes previamente dissol-
vidos em 400 ml de água destilada e perfazer o volume de 1000 ml.
3.1.2. Solução de diluição
Álcool absoluto (C2H5OH)…...................... 10 ml
Ácido cítrico (C6H8O7,H2O)….................... 700 mg
Sacarose (C12H22O11)…............................ 300 mg
Glicerol (C3H8O3)… ............................... 1000 mg
Cloreto de sódio (NaCl) … ......................... 50,8 mg
Cloreto de cálcio anidro (Ca Cl2)…................ 10 mg
Cloreto de magnésio anidro (Mg Cl2)…............ 10 mg
Ácido tartárico (C4H6O6)…........................ 383 mg
Água q.b. para ….................................. 1 000 ml
As soluções, a que se adicionou 2 gotas de isotiocianato de alilo, são
conservadas em frascos de polietileno.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 135
▼B
3.2.Aparelhagem
3.2.1. Fotómetro de chama alimentado por uma mistura de ar-butano.
3.3.Modo operatório
3.3.1. Calibração
Em quatro balões marcados de precisão de 100 ml, colocar 25 - 50 -
75 - 100 ml de solução de referência (3.1.1) e completar o volumede 100 ml com solução de diluição (3.1.2). Obtêm-se soluções que
contêm, respectivamente, 25 - 50 - 75 - 100 mg de potássio por litro.
3.3.2. Doseamento
Efectuar as medições a 766 nm. Regular o valor de 100 % de trans-
mitância com água destilada. Aspirar directa e sucessivamente, no
queimador do fotómetro, as soluções-padrão (3.3.1), depois o vinho
diluído a 1/10 com água destilada e registar as percentagens de
transmitância. Se necessário, diluir o vinho já diluído a 1/10 com a
solução de diluição (3.1.2).
3.4.Resultados
3.4.1. Modo de cálculo
Traçar a curva de variação da percentagem de transmitância em
função da concentração de potássio das soluções-padrão. A partir
da valor médio das percentagens de transmitâncias obtidas na
amostra de vinho diluído, determinar a concentração C de potássio
a partir da curva de referência.
A concentração de potássio, expressa em miligramas por litro, sem
decimais, será:
C×FF = Factor de diluição.
3.4.2. Repetibilidade: r
r= 17 mg/l.
3.4.3. Reprodutibilidade: R
R= 66 mg/l.
3.4.4. Outras formas de expressar os resultados:
— Em miliequivalentes por litro: 0,0256 × F × C
— Em tartarato ácido de potássio em miligramas por litro: 4,813 ×
F×C .1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 136
▼B
28.MAGNÉSIO
1. PRINCÍPIO
O magnésio é doseado directamente no vinho, convenientemente
diluído, por espectrofotometria de absorção atómica.
2. REAGENTES
2.1.Solução-padrão concentrada de magnésio que contenha 1 g por
litro
Utilizar uma solução-padrão de magnésio do comércio. Esta solução
pode ser preparada dissolvendo 8,3646 g de cloreto de magnésio
(MgCl2,6H2O) em água destilada e perfazendo o volume de 1 litro.
2.2. Solução-padrão diluída de magnésio que contenha 5 mg por litro.
Nota:Conservar as soluções-padrão de magnésio em frascos de polietileno.
3. APARELHAGEM
3.1. Espectrofotómetro de absorção átomica equipado com um queimador
alimentado por ar e acetileno.
3.2. Lâmpada de cátodo oco de magnésio.
4. MODO OPERATÓRIO4.1.Preparação da amostra
Diluir o vinho a 1/100 com água destilada.
4.2.Calibração
Numa série de balões graduados de 100 ml, colocar 5 - 10 - 15 e
20 ml da solução 2.2 e completar até 100 ml com água destilada.
As soluções preparadas contêm, respectivamente, 0,25 - 0,50 - 0,75
- 1 mg de magnésio por litro. Estas soluções são conservadas em
frascos de polietileno.
4.3.Doseamento
Seleccionar o comprimento de onda de 285 nm.
Regular o zero da escala das absorvências com água destilada.
Aspirar directamente o vinho diluído no queimador do espectrofotó-
metro e depois, sucessivamente, as soluções-padrão preparadas em
4.2.
Registar as absorvências; efectuar as determinações em duplicado.
5. RESULTADOS5.1.Modo de cálculo
Traçar a curva de variação da absorvência em função da concen-
tração de magnésio das soluções-padrão.
A partir do valor médio das absorvências obtidas na amostra de
vinho diluído, utilizar esta curva para determinar a concentração C
de magnésio.
A concentração de magnésio, expressa em miligramas por litro de
vinho, arredondada às unidades, será:
100 × C
5.2.Repetibilidade: r
r = 3 mg/l.
5.3.Reprodutibilidade: R
R = 8 mg/l.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 137
▼B
29.CÁLCIO
1. PRINCÍPIO
O cálcio é doseado directamente no vinho, convenientemente
diluído, por espectrofotometria de absorção atómica, após adição de
um tampão espectral.
2. REAGENTES
2.1.Solução-padrão de cálcio que contenha 1 g por litro
Utilizar uma solução-padrão de cálcio do comércio a 1 g/l. Esta
solução pode ser preparada dissolvendo 2,5 g de carbonato de cálcio
(Ca CO3) numa quantidade suficiente de HCl a 1/10 (v/v) para obter
a sua dissolução e ajustando o volume a 1 litro com água destilada.
2.2.Solução-padrão diluída de cálcio que contenha 50 mg por litro
Nota:
Conservar as soluções-padrão de cálcio em frascos de polietileno.
2.3.Solução de cloreto de lantânio a 50 g/l em lantânio
Dissolver 13,369 g de cloreto de lantântio (La Cl3,7H2O) em água
destilada; juntar 1 ml de HCl diluído a 1/10 (v/v) e ajustar o volume
a 100 ml.
3. APARELHAGEM
3.1. Espectrofotómetro de absorção atómica equipado com um queimador
alimentado por ar e acetileno.
3.2. Lâmpada de cátodo oco de cálcio.
4. MODO OPERATÓRIO
4.1.Preparação da amostra
Num balão graduado de 20 ml, colocar 1 ml de vinho, 2 ml da
solução 2.3 e perfazer o volume com água destilada. O vinho diluído
a 1/20 contém 5 g de lantânio por litro.
Nota:
Relativamente aos vinhos doces, a concentração de 5 g de lantânio
por litro é suficiente desde que a diluição origine teores de açúcares
inferiores a 2,5 g por litro. Para concentrações superiores de
açúcares é necessário elevar o teor de lantânio a 10 g por litro.
4.2.Calibração
Em cinco balões graduados de 100 ml, colocar 0 - 5 - 10 - 15 e
20 ml da solução 2.2, juntar 10 ml da solução 2.3 a todos os balões
e perfazer o volume com água destilada. As soluções-padrão prepa-
radas contêm, respectivamente, 0 - 2,5 - 5 - 7,5 e 10 mg de cálcio
por litro e 5 g de lantânio por litro. Estas soluções são conservadas
em frascos de polietileno.
4.3.Doseamento
Seleccionar o comprimento de onda de 422,7 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com a solução que contém 5 g de lantânio
por litro (4.2). Aspirar directamente o vinho diluído no queimador
do espectrofotómetro e depois, sucessivamente, as soluções-padrão
preparadas em 4.2. Registar as absorvências. Efectuar as determi-
nações em duplicado.
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
5.1.Cálculo
Traçar a curva de variação da absorvência em função da concen-
tração de cálcio das soluções-padrão.
A partir do valor médio das absorvências obtidas com a amostra de
vinho diluído utilizar esta curva para determinar a sua concentração1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 138
▼B
C de cálcio. A concentração de cálcio, expressa em miligramas por
litro de vinho, arredondada às unidades, será:
20. C
5.2.Repetibilidade: r
Teor< 60 mg/l: r = 2,7 mg/l.
Teor> 60 mg/l: r = 4 mg/l.
5.3.Reprodutibilidade: R
R = 0,114 xi− 0,5
xi= concentração em mg/l da amostra.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 139
▼B
30.FERRO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
Método de referência
Após diluição conveniente do vinho e eliminação do álcool, o ferro é
doseado por espectrometria de absorção atómica.
Método usual
Após mineralização do vinho com perhidrol, o ferro que se encontra
no estado de Fe III é reduzido ao estado de Fe II doseado devido à
coloração vermelha a que dá origem com ortofenantrolina.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA2.1.Reagentes
2.1.1. Solução-padrão concentrada de ferro III que contenha 1 g por litro.
Utilizar uma solução-padrão do comércio, a 1 g/l. Esta solução pode
ser preparada dissolvendo 8,6341 g de sulfato de ferro III e de
amónio [FeNH
4(SO4)2, 12H2O] em água destilada, ligeiramente acidi-
ficada pelo ácido clorídico M e perfazendo o volume de 1 litro.
2.1.2. Solução-padrão diluída de ferro, que contenha 100 miligramas por
litro.
2.2.Aparelhagem
2.2.1. Evaporador rotativo com banho de água com termóstato.2.2.2. Espectrofotómetro de absorção atómica equipado com um queimador
alimentado por ar e acetileno.
2.2.3. Lâmpada de cátodo oco de ferro.
2.3.Modo operatório
2.3.1. Preparação da amostra
Eliminar o álcool do vinho por concentração do volume da amostra
para metade, através de um evaporador rotativo (50-60º C). Levar
até ao volume inicial com água destilada.
Se necessário, efectuar uma diluição antes da dosagem.
2.3.2. Calibração
Em einco balões graduados de 100 ml, colocar 1 - 2 - 3 - 4 - 5 ml de
solução de ferro a 100 miligramas por litro (2.1.2) e completar até
100 ml com água destilada. As soluções preparadas contêm, respec-
tivamente, 1 - 2 - 3 - 4 - 5 mg de ferro por litro.
Estas soluções são conservadas em frascos de polietileno.
2.3.3. Doseamento
Seleccionar o comprimento de onda de 248,3 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com água destilada. Aspirar directamente a
amostra diluída no queimadordo espectrofotómetro e depois, sucessi-
vamente, as soluções-padrão preparadas em 2.3.2. Registar as
absorvências. Efectuar as determinações em duplicado.
2.4. Resultados2.4.1. Cálculo
Traçar a curva de variação da absorvência em função da concen-
tração de ferro das soluções-padrão. A partir do valor médio da
absorvência obtida com a amostra de vinho diluído, utilizar esta
curva para determinar a concentração de ferro C.
A concentração de ferro, expressa em miligramas por litro de vinho,
arredondado às decimais, será:
C·F
F = factor de diluição.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 140
▼B
3. MÉTODO USUAL
3.1.Reagentes
3.1.1. Solução de peróxido de hidrogénio (H2O2) a 30 p. 100 (m/v), isento
de ferro.
3.1.2. Solução de ácido clorídrico (HCl), isento de ferro, 1 M.3.1.3. Hidróxido de amónio, NH
4OH ( ρ20= 0,92 g/ml).
3.1.4. Pedra-pomes tratada com ácido clorídrico a 1/2 em ebulição e lavada
com água destilada.
3.1.5. Solução de hidroquinona (C6H6O2) a 2,5 p. 100 acidificada com 1 ml
de ácido sulfúrico puro ( ρ20= 1,84 g/ml) para 100 ml de solução.
Esta solução é conservada num frasco amarelo no frigorífico e
substituída logo que surja o menor acastanhamento.
3.1.6. Solução de sulfito de sódio (Na2SO3) a 20 p. 100 preparada a partir
do sulfito neutro e anidro.
3.1.7. Solução de ortofenantrolina (C12H8N2,H2O) a 0,5 p. 100 em álcool a
96 % vol.
3.1.8. Solução de acetato de amónio (CH3COONH4) a 20 p. 100 (m/v).
3.1.9. Solução de ferro III a 1 g de ferro por litro. Utilizar uma solução-
-padrão do comércio. Esta solução pode ser preparada dissolvendo
8,6341 g de sulfato de ferro e amónio [NH4Fe(SO4)2, 12H2O] em
100 ml de solução 1M de ácido clorídrico (3.1.2) perfazendo o
volume a 1 litro com a solução 1M de ácido clorídrico (3.1.2).
3.1.10. Solução-padrão diluída de ferro a 100 miligramas por litro.
3.2.Aparelhagem
3.2.1. Balão de Kjeldahl de 100 ml.3.2.2. Espectrofotómetro que permita efectuar medições no comprimento
de onda de 508 nm.
3.3.Modo operatório
3.3.1. Mineralização
3.3.1.1. Vinho cujo teor de açúcar é inferior a 50 g/l:
Num balão de Kjeldahl colocar 25 ml de vinho, 10 ml de solução de
peróxido de hidrogénio (3.1.1) e alguns grãos de pedra-pomes
(3.1.4). Concentrar o líquido até um volume de 2 a 3 ml.
Após arrefecimento, juntar ao resíduo, obtido sem molhar as paredes
do balão, o hidróxido de amónio (3.1.3) em quantidade necessária
para alcalinizar o meio e precipitar os hidróxidos.
Após arrefecimento, adicionar ao líquido alcalino a solução 1M de
ácido clorídrico (3.1.2) em quantidade necessária para dissolver o
precipitado dos hidróxidos e passar a solução obtida para um balão
graduado de 100 ml. Após lavagem do balão de Kjeldahl com a
solução M de ácido clorídrico (3.1.2.) ajustar o volume a 100 ml
utilizando a mesma solução.
3.3.1.2. Mostos e vi nhos cujo teor de açúcares é superior a 50 g/l:
3.3.1.2.1. Teor de açúcares compeendido entre 50 e 200 g/l:
A toma de ensaio de 25 ml de mosto ou de vinho é tratada com
20 ml de solução de peróxido de hidrogénio (3.1.1).
Continuar como se descreveu em 3.3.1.1.
3.3.1.2.2. Teor de açúcares superior a 200 g/l:
As amostras de mosto ou de vinho devem ser previamente diluídas a
1/2 ou mesmo a 1/4 e tratadas segundo o modo operatório 3.3.1.2.1.
3.3.2. Ensaio em branco
Efectuar um ensaio em branco com água destilada, utilizando o
mesmo volume de solução de peróxido de hidrogénio (3.1.1) que o
empregue para a mineralização e seguindo o protocolo experimental
descrito em 3.3.1.1.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 141
▼B
3.3.3. Doseamento
Recolher 20 ml da solução clorídrica do produto da mineralização da
amostra (3.3.1.1) e 20 ml da solução clorídrica do ensaio em branco
(3.3.2) e introduzi-las em dois balões graduados de 50 ml. Juntar em
cada balão 2 ml da solução de hidroquinona (3.1.5), 2 ml da solução
de sulfito de sódio (3.1.6) e 1 ml da solução de ortofenantrolina
(3.1.7). Deixar em repouso durante 15 minutos para favorecer a
redução de Fe III em Fe II. Juntar 10 ml da solução de acetato de
amónio (3.1.8), ajustar o volume a 50 ml com água destilada e agitar
os dois balões graduados. Medir a absorvência a 508 nm da solução
a dosear regulando o zero da escala das absorvências com a solução
proveniente do ensaio em branco.
3.3.4. Calibração
Em quatro balões graduados de 50 ml, colocar 0,5 - 1 - 1,5 - 2 ml da
solução a 100 mg de ferro por litro (3.1.10) e 20 ml de água desti-
lada; continuar segundo a técnica descrita em 3.3.3 e medir a
absorvência de cada uma das soluções-padrão preparadas, correspon-
dendo, respectivamente, a 50 - 100 - 150 - 200 microgramas de ferro
na toma de ensaio.
3.4.Expressão de resultados
3.4.1. Modo de cálculo
Traçar a curva de variação da absorvência em função da concen-
tração de ferro das soluções-padrão. A partir da absorvência obtida
com a solução a examinar, utilizar essa curva para determinar a
concentração de ferro C da toma de ensaio de 20 ml de solução
clorídrica de mineralização, ou seja, em 5 ml da amostra a analisar.
A concentração de ferro, expressa em miligramas por litro de vinho,
arredondado às decimais, será:
200 · C
Se o vinho (ou o mosto) tiver sido diluído, a concentração de ferro,
expressa em miligramas por litro de vinho, arredondado às decimais,
será:
2 0 0·C·F
F = factor de diluição.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 142
▼B
31.COBRE
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
Utilização da espectrofotometria de absorção atómica.
2. APARELHAGEM
2.1. Cápsula de platina.2.2. Espectrofotómetro de absorção atómica.
2.3. Lâmpada de cátodo oco, de cobre.
2.4. Gás de alimentação: ar, acetileno e/ou protóxido de azoto/acetileno.
3. REAGENTES
3.1. Cobre metálico.3.2. Ácido nítrico concentrado a 65 % (HNO
3,ρ20= 1,38 g/ml).
3.3. Ácido nítrico diluído a 1/2 (v/v).
3.4.Solução de cobre a 1 g/l
Utilizar uma solução-padrão de cobre do comércio a 1 g/l. Esta
solução pode ser preparada pesando 1,00 g de cobre metálico e
transferindo-o quantitativamente para um balão graduado de
1 000 ml.
Juntar ácido nítrico diluído a 1/2 (3.3), em quantidade estritamente
suficiente para dissolver o metal, adicionar 10 ml de ácido nítrico
concentrado (3.2) e levar até ao traço de referência com água bides-
tilada.
3.5.Solução de cobre a 100 mg/l
Tomar 10 ml da solução 3.4 e introduzi-los num balão marcado de
precisão de 100 ml completando o volume com água bidestilada.
4. MODO OPERATÓRIO
4.1.Preparação da amostra
Se necessário, preparar uma diluição adequada com água bidestilada.
4.2.Determinação da curva de calibração
Numa série de balões marcados de precisão, de 100 ml, introduzir
0,5 - 1 - 2 ml da solução 3.5 (100 mg de cobre por litro), perfazendo
o volume com água bidestilada. As soluções obtidas contêm respec-
tivamente 0,5, 1 e 2 mg/l de cobre.
4.3.Doseamento
Seleccionar o comprimento de onda de 324,8 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com água destilada. Aspirar directamente a
amostra diluída no queimador do espectrofotómetro e depois, suces-
sivamente, as soluções-padrão preparadas em 4.2. Ler as
absorvências. Efectuar as determinações em duplicado.
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
5.1.Cálculo
A partir da absorvência obtida na amostra, determinar a concen-
tração C, em miligramas por litro, de cobre, utilizando a curva de
calibração.
Tomar a absorvência verificada para a amostra do vinho diluído na
curva de calibração e anotar a concentração C em mg/l.
Sendo F o factor de diluição, a concentração de cobre no vinho,
expresso em miligramas por litro, será:
F·C
O resultado é apresentado com 2 decimais.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 143
▼B
Observações:
a) As soluções para a determinação da curva de calibração e as
diluições da amostra devem ser sempre escolhidas em função da
sensibilidade do aparelho utilizado e da concentração de cobre
presente na amostra.
b) Para concentrações de cobre na amostra muito reduzidas, o modo
operatório é a seguinte: colocar 100 ml da amostra numa cápsula
de platina, evaporar em banho de água até à consistência de
xarope e juntar, gota a gota, 2,5 ml de ácido nítrico concentrado
(3.2), procurando cobrir todo o fundo da cápsula. Proceder com
precaução à incineração do resíduo sobre uma placa eléctrica de
aquecimento ou sobre uma pequena chama; em seguida, intro-
duzir a cápsula num forno com mufla regulado a 500 ºC ± 25ºC,
deixando repousar durante cerca de uma hora. Após arrefeci-
mento, humedecer as cinzas com 1 ml de ácido nítrico
concentrado (3.2) esmagando-as com uma vareta de vidro,
evaporar e incinerar de novo como anteriormente. Levar de
novo a cápsula ao forno durante 15 minutos; repetir pelo menos
três vezes este tratamento com ácido nítrico concentrado.
Dissolver as cinzas juntando à cápsula 1 ml de ácido nítrico
concentrado (3.2) e 2 ml de água bidestilada; transvasar para um
balão graduado de 10 ml. Lavar a cápsula três vezes com 2 ml de
cada vez de água bidestilada; completar até ao traço de aferição
com água bidestilada.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 144
▼B
32.CÁDMIO
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
O cádmio é directamente doseado no vinho por espectrofotometria
de absorção atómica sem chama.
2. APARELHAGEM
Todos os utensílios de vidro devem ser previamente lavados,
primeiro com ácido nítrico concentrado quente (70-80 ºC) e de
seguida com água bidestilada.
2.1. Espectrofotómetro de absorção atómica equipado com um forno de
grafite, um corrector de ruído de fundo e um registador multipoten-
ciométrico.
2.2. Lâmpada de cátodo oco de cádmio.2.3. Micropipetas de 5 µl munidas de extremidades especiais para
medidas de absorção atómica.
3. REAGENTES
A água utilizada deve ser água bidestilada num aparelho de vidro
borossilicatado ou água de pureza equivalente. Todos os reagentes
devem ser de pureza analítica reconhecida e, em especial, isentos
de cádmio.
3.1. Ácido fosfórico a 85 p. 100 ( ρ
20= 1,71 g/ml).
3.2. Solução de ácido fosfórico obtida por diluição com água de 8 ml de
ácido fosfórico para 100 ml.
3.3. Solução 0,02 M de sal dissódico do ácido etilenodiaminotetracético
(EDTA).
3.4. Solução-tampão pH 9 obtida por dissolução, num balão graduado de
100 ml, de 5,4 g de cloreto de amónio com alguns mililitros de água,
adição de 35 ml de solução de hidróxido de amónio ( ρ20= 0,92 g/
/ml) diluída a 25 % (v/v) e ajustada até ao traço de referência com
água.
3.5. Negro de eriocromo T: diluição sólida a 1 % (m/m) em cloreto de
sódio.
3.6.Sulfato de cádmio (3CdSO4,8 H2O)
O título do sulfato de cádmio deve ser verificado de acordo com o
seguinte modo operatório:
Pesar exactamente 102,6 mg da amostra de sulfato de cádmio, trans-
ferir quantitativamente para um copo de precipitação com água,
agitar até à dissolução; adicionar 5 ml de solução-tampão pH 9,
cerca de 20 mg de negro de eriocromo T. Titular com a solução de
EDTA até à viragem do indicador para azul.
O volume de EDTA adicionado deve ser igual a 20 ml. Se o volume
for um pouco diferente, corrigir a toma de amostra do sulfato de
cádmio pesada utilizada para a preparação da solução de referência.
3.7.Solução-padrão de cádmio a 1 g por litro
Utilizar uma solução-padrão comercial. Esta solução pode ser obtida
por dissolução de 2,2820 g de sulfato de cádmio em água ajustando,
seguidamente, o volume para 1 litro. Conservar a solução num
frasco de vidro borossilicatado com rolha esmerilada.
4. MODO OPERATÓRIO4.1.Preparação da amostra
Diluir o vinho para 1/2 (v/v) com a solução de ácido fosfórico.
4.2.Preparação das soluções-padrão de calibração
A partir da solução-padrão a 1 g/l de cádmio, preparar por diluições
sucessivas-soluções com os títulos respectivamente de 2,5 - 5 - 10 -
15 microgramas de cádmio por litro.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 145
▼B
4.3.Determinação
4.3.1. Programa do forno (proposta a título indicativo):
Secagem a 100 ºC durante 30 segundos.Mineralização a 900 ºC durante 20 segundos.
Atomização a 2250 ºC durante 2 a 3 segundos.
Fluxo de azoto (gás de arrastamento): 6 litros/minuto.N.B.:
No final da operação, subida da temperatura até 2700 ºC para purgar
o forno.
4.3.2. Medidas de absorção atómica
Seleccionar o comprimento de onda 228,2 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com água bidestilada. Injectar no forno,
utilizando uma micropipeta, três vezes 5 µl de cada uma das
soluções-padrão de calibração e da solução da amostra a analisar.
Registar as absorvências medidas. Calcular o valor médio da
absorvência a partir dos resultados relativos às três injecções.
5. RESULTADOS
5.1.Cálculo
Traçar a curva das variações da absorvência em função das concen-
trações em cádmio das soluções-padrão de calibração. A variação é
linear. Marcar o valor médio da absorvência da solução da amostra
sobre a recta de calibração e determinar a concentração C de
cádmio. A concentração de cádmio expressa em microgramas por
litro de vinho é:
2C .1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 146
▼B
33.PRATA
1. PRINCÍPIO
Utilização da espectrofotometria de absorção atómica, precedida de
mineralização da amostra.
2. APARELHAGEM
2.1. Cápsula de platina.
2.2. Banho de água, com termóstato a 100 ºC.
2.3. Mufla regulada a 500-525 ºC.2.4. Espectrofotómetro de absorção atómica.2.5. Lâmpada de cátodo oco, de prata.2.6. Gás de alimentação: ar/acetileno.
3. REAGENTES
3.1. Nitrato de prata (AgNO
3).
3.2. Ácido nítrico concentrado a 65 % (HNO3), (ρ20= 1,38 g/ml).
3.3. Ácido nítrico diluído a 1/10 (v/v).
3.4.Solução de prata a 1 g/l
Utilizar uma solução-padrão de prata, do comércio.
Esta solução pode ser preparada dissolvendo 1,575 g de nitrato de
prata em ácido nítrico diluído (3.3) perfazendo o volume de
1 000 ml com o mesmo ácido.
3.5.Solução de prata a 10 mg/l
Diluir 10 ml de solução 3.4 a 1 000 ml com ácido nítrico diluído
(3.3).
4. MODO OPERATÓRIO4.1.Preparação da amostra
Colocar 20 ml da amostra numa cápsula de platina, evaporar a seco
num banho de água a 100 ºC em ebulição. Incinerar no forno a 500-
-525 ºC até que as cinzas fiquem brancas. Retomar as cinzas com
1 ml de ácido nítrico concentrado (3.2), evaporar em banho de
água a 100 ºC; repetir a adição de 1 ml de ácido nítrico (3.2) e
evaporar. Adicionar 5 ml de ácido nítrico diluído (3.3) e aquecer
ligeiramente até à dissolução.
4.2.Calibração
Para uma série de balões marcados de precisão de 100 ml, medir 2 -
4 - 6 - 8 - 10 e 20 ml da solução 3.5 a 10 mg de prata por litro e
perfazer o volume com ácido nítrico diluído (3.3). Estas soluções
contêm respectivamente 0,20 - 0,40 - 0,60 - 0,80 - 1,0 et 2,0 mg/l
de prata.
4.3.Doseamento
Seleccionar o comprimento de onda 328,1 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com ácido nítrico diluído (3.3). Aspirar
directamente o líquido obtido como em 4.1 noqueimador do espec-
trofotómetro, e depois as soluções-padrão, sucessivamente. Ler as
absorvências. Efectuar as determinações em duplicado.
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS5.1.Modo de cálculo
A partir da absorvência lida na amostra, determinar a concentração
C, em miligramas por litro, de prata, utilizando a curva de cali-
bração.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 147
▼B
Tomar a absorvência verificada para o líquido obtido em conformi-
dade com 4.1 na curva de calibração e anotar a concentração C em
mg/l.
A concentração de prata no vinho, expresso em miligramas por litro,
será:
0,25 · C
O resultado é apresentado com 2 decimais.
Notas:As soluções para determinação da curva de calibração, a quantidade
da amostra colhida e o volume final do líquido podem ser escolhidas
em função da sensibilidade do aparelho utilizado.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 148
▼B
34.ZINCO
1. PRINCÍPIO
O zinco é doseado directamente no vinho desalcoolizado por espec-
trofotometria de absorção atómica.
2. REAGENTES
A água utilizada deve ser água bidestilada num aparelho de vidro
borossilicatado ou água de pureza equivalente.
2.1. Solução-padrão de zinco a 1 g por litro.
Utilizar uma solução-padrão de zinco do comércio. Esta solução
pode ser preparada dissolvendo 4,3975 g de sulfato de zinco (Zn
SO4,7H2O) em água e ajustando o volume a 1 litro.
2.2. Solução-padrão diluída de zinco que contenha 100 miligramas por
litro.
3. APARELHAGEM
3.1. Evaporador rotativo com banho de água com termóstato.
3.2. Espectrofotómetro de absorção atómica equipado com um queimador
alimentado por ar e acetileno.
3.3. Lâmpada de cátodo oco de zinco.
4. MODO OPERATÓRIO
4.1.Preparação da amostra
Eliminar o álcool do vinho por concentração a ½ de 100 ml de vinho
colocados num evaporador rotativo (temperatura: 50-60 ºC). Levar
ao volume inicial de 100 ml com água bidestilada.
4.2.Calibração
Em quatro balões graduados de 100 ml, colocar 0,5 - 1 - 1,5 - 2 ml
da solução de zinco a 100 mg/l (2.2) e ajustar ao traço de referência
com água bidestilada. As soluções-padrão correspondem, respectiva-
mente, a 0,5 - 1 - 1,5 e 2 mg de zinco por litro.
4.3.Dosagem
Seleccionar o comprimento de onda de 213,9 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com água bidestilada. Aspirar directamente
o vinho no queimador do espectrofotómetro e depois, sucessiva-
mente, as soluções-padrão. Ler as absorvências. Efectuar as
determinações em duplicado.
5. RESULTADOS5.1.Cálculo
Traçar a curva de variação da absorvência em função da concen-
tração de zinco das soluções-padrão. Registar o valor médio das
absorvências obtidas com o vinho e determinar a concentração de
zinco, em miligramas por litro de vinho, com 1 decimal.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 149
▼B
35.CHUMBO
1. PRINCÍPIO
O chumbo é directamente doseado no vinho por espectrofotometria
de absorção atómica sem chama.
2. APARELHAGEM
Todos os utensílios de vidro devem ser previamente lavados,
primeiro com ácido nítrico concentrado quente (70-80 ºC) e de
seguida com água bidestilada.
2.1. Espectrofotómetro de absorção atómica equipado com um forno de
grafite, um corrector de absorção não específico e um registador
multipotenciométrico.
2.2. Lâmpada de cátodo oco de chumbo.2.3. Micropipetas de 5 µl munidas de extremidades especiais para
medidas de absorção atómica.
3. REAGENTES
Todos os reagentes devem ser de pureza analítica reconhecida e, em
especial, isentos de chumbo. A água utilizada deve ser água bidesti-
lada num aparelho de vidro borossilicatado ou água de pureza
equivalente.
3.1. Ácido fosfórico a 85 p. 100 ( ρ
20= 1,71 g/ml).
3.2. Solução de ácido fosfórico obtida por diluição de 8 ml de ácido
fosfórico para 100 ml, com água.
3.3. Ácido nítrico ( ρ20= 1,38 g/ml).
3.4. Solução de chumbo a 1 g por litro.
Utilizar uma solução-padrão comercial. Esta solução pode ser obtida
por dissolução de 1,600 g de nitrato de chumbo II, Pb(NO3)2,e m
ácido nítrico diluído a 1 % (v/v), após o que se perfaz o volume de
1 litro. Conservar a solução num frasco de vidro borossilicatado com
rolha esmerilada.
4. MODO OPERATÓRIO4.1.Preparação da amostra
Diluir o vinho para ½ ou para ⅓com a solução de ácido fosfórico de
acordo com a suposta concentração de chumbo.
4.2.Preparação das soluções-padrão de calibração
A partir da solução de referência de chumbo, preparar, por diluições
sucessivas com água bidestilada, soluções com os títulos de, respec-
tivamente, 25 - 50 - 100 - 150 microgramas de chumbo por litro.
4.3.Determinação
4.3.1. Programa do forno (proposto a título indicativo):
Secagem a 100 ºC durante 30 segundos.Mineralização a 900 ºC durante 20 segundos.
Atomização a 2 250 ºC durante 2 a 3 segundos.
Fluxo de azoto (gás de arrastamento): 6 litros/minuto.N.B.:No final da operação, subida da temperatura até 2700 ºC para
purgar o forno.
4.3.2. Medidas
Seleccionar o comprimento de onda de 217 nm. Regular o zero da
escala das absorvências com água bidestilada. Injectar no forno
programado, mediante utilização de uma micropipeta, três vezes 5 µl
de cada uma das soluções-padrão de calibração e da solução de
amostra a analisar. Ler as absorvências medidas. Calcular o valor1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 150
▼B
médio da absorvência a partir dos resultados relativos às três inje-
cções.
5. RESULTADOS5.1.Cálculo
Traçar a curva das variações da absorvência em função das concen-
trações em chumbo das soluções-padrão de calibração. A variação élinear. Marcar o valor médio da absorvência da solução da amostra
na recta de calibração e determinar a concentração C em chumbo. A
concentração em chumbo, expressa em microgramas por litro de
vinho, é igual a:
C×F
F = Factor de diluição1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 151
▼B
36.FLUORETOS
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
O teor em fluoretos do vinho, adicionado de uma solução-tampão,
determina-se utilizando um eléctrodo específico com membrana
sólida. O potencial medido é proporcional ao logaritmo da activi-
dade dos iões fluoretos no meio estudado de acordo com a relação:
E=Eo± S log aF
E = potencial do eléctrodo iónico específico medido em relação
ao eléctrodo de referência no meio estudado.
Eo= potencial-padrão da célula de medida.
S = declive do eléctrodo iónico específico (factor de Nernst). A
25 ºC o declive teórico é igual a 59,2 mV.
aF= actividade dos iões fluoretos na solução estudada.
2. APARELHAGEM
2.1. Eléctrodo com membrana cristalina específica do ião fluor.2.2. Eléctrodo de referência (Calomel ou Ag/AgCl).
2.3. Milivoltímetro (medidor de pH com uma graduação em milivolts),
precisão 0,1 mV.
2.4. Agitador magnético com placa isolante para proteger a solução
analisada do calor do motor. Cilindro agitador revestido de plástico
(polietileno ou material equivalente).
2.5. Copos de plástico, de 30 ou de 50 ml, e frascos de plástico (polieti-
leno ou material equivalente).
2.6. Pipetas de precisão (pipetas graduadas em microlitros ou outras
pipetas equivalentes).
3. REAGENTES
3.1. Solução-mãe de fluoreto a 1 g/l.
Utilizar uma solução-padrão do comércio a 1 g/l. Esta solução pode
ser preparada dissolvendo 2,210 g de fluoreto de sódio (seco 3 a 4
horas a 105 ºC) em água destilada. Levar ao traço de referência de
1 000 ml com água destilada. A solução é conservada num frasco
plástico.
3.2. Preparam-se soluções-padrão de fluoreto de concentração adequada
mediante diluição da solução-mãe com água destilada e conservam-
-se em frascos de plástico. As soluções-padrão cujo teor em fluoreto
é da ordem de 1 mg/l devem ser preparadas na altura de serem utili-
zadas.
3.3. Solução-tampão pH 5,5.
Adicionam-se 10 g de ácido ciclohexano-diamina (1,2)-tetracético
(CDT) a cerca de 50 ml de água; adicionar uma solução contendo
58 g de cloreto de sódio e 29,4 g de citrato trisódico em 700 ml de
água destilada. Dissolve-se o CDTA adicionando-lhe uma solução de
hidróxido de sódio a 32 p. 100 (m/v) (cerca de 6 ml).
Por fim, adicionar 57 ml de ácido acético ( ρ
20= 1,05 g/ml) e levar o
pH a 5,5 com a solução de hidróxido de sódio a 32 p. 100 (cerca de
45 ml). Deixar arrefecer e perfazer um litro com água destilada.
4. MODO OPERATÓRIO
Nota preliminar:
É necessário garantir que todas estas soluções se conservem durante
a determinação a uma temperatura de 25 ± 1 ºC (um desvio de ± 1 ºC
provoca uma alteração de cerca de ± 0,2 mV).
4.1.Método directo
Deitar num copo de plástico um volume definido de vinho e um
volume igual de solução-tampão.
Agita-se a solução de um modo regular e moderado. Quando o
aparelho indicador estabilizar (obtém-se a estabilidade quando o1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 152
▼B
potencial varia no máximo de 0,2-0,3 mV/3 min.), ler o valor do
potencial em mV.
4.2.Método das adições conhecidas
Sem interromper a agitação, adiciona-se ao meio estudado, por inter-
médio de uma pipeta de precisão, um volume conhecido de solução-
-padrão de fluoreto. Quando o aparelho indicador estabilizar, ler o
valor do potencial em mV.
Escolher a concentração da solução-padrão adicionada do seguinte
modo:
a) Duplicar ou triplicar a concentração em fluoreto do meio estu-
dado;
b) O volume do meio estudado deve permanecer praticamente cons-
tante (aumento do volume ≤1 %).
[A condição b) simplifica os cálculos, ver ponto 5].
A concentração aproximada do meio estudado é lida sobre uma recta
de calibração que é traçada em coordenadas semilogarítmicas com as
soluções-padrão titulando 0,1 - 0,2 - 0,5 - 1,0 - 2,0 mg/l de fluoreto.
Nota:Se a concentração aproximada do meio estudado ultrapassar o
domínio de concentração das soluções-padrão, diluir a amostra.
Exemplo:
Sendo de 0,25 mg/l F
−o teor aproximado do meio estudado (volume
20 ml), a concentração deve ser majorada de 0,25 mg/l. Para tal,
adicionar, por exemplo, à solução, com a pipeta de precisão
adequada, 0,20 ml (= 1 %) de uma solução-padrão contendo 25 mg/
/l F−ou 0,050 ml de uma solução-padrão de 100 mg/l F−.
5. CÁLCULOS
O teor em fluoretos do meio estudado, expresso em mg/l, obtém-se
utilizando a fórmula seguinte:
CF¼Va/C2Ca
Vo/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
CF= a concentração em fluoreto do meio estudado (mg/l).
Ca= a concentração do fluoreto adicionado (mg/l) no meio estu-
dado (Va).
Vo= volume inicial do meio estudado antes da sobrecarga (ml).
Va= volume da solução sobrecarregada (ml).
∆E = diferença entre os potenciais E1eE2obtidos em 4.1 e 4.2
(mV).
S = declive do eléctrodo na solução estudada.
Se Vafor muito próximo de Vo(ver 4.2), a fórmula simplifica-se e
transforma-se em:
CF¼Ca/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
O valor obtido deve ser multiplicado pelo factor de diluição proveni-
ente da adição do tampão.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 153
▼B
37.DIÓXIDO DE CARBONO
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS1.1.Método de referência
1.1.1. Caso dos vinhos tranquilos (sobrepressão de CO
2≤0,5 · 105Pa)(1)
O volume de vinho tomado da amostra e levado a cerca de 0 ºC é
adicionado a um excesso suficiente de solução titulada de hidróxido
de sódio para ter um pH de 10-11. Titula-se com uma solução ácida
em presença de anidrase carbónica. O teor em dióxido de carbono é
deduzido do volume vertido para passar de pH 8,6 (forma de carbo-
nato ácido) a 4,0 (ácido carbónico). Uma titulação testemunha
efectuada nas mesmas condições com o vinho descarbonificado
permite ter em conta o volume de solução de hidróxido de sódio
consumido pelos ácidos do vinho.
1.1.2. Caso dos vinhos frisantes e vinhos espumantes
A amostra de vinho a analisar é levada próximo do seu ponto de
congelação. Depois de retirar um determinado volume destinado a
servir de testemunha após descarbonificação, alcaliniza-se o restante
volume da garrafa para fixar todo o CO2soba forma de Na2CO3.
Titula-se com uma solução ácida em presença de anidrase carbónica.
O teor de dióxido de carbono é deduzido do volume de solução
ácida gasta para passar de pH 8,6 (forma de carbonato ácido) a pH
4,0 (ácido carbónico). Uma titulação testemunha efectuada nas
mesmas condições com vinho descarbonificado permiter ter em
conta o volume de solução de hidróxido de sódio consumida pelos
ácidos do vinho.
1.2.Método usual: caso dos vinhos frisantes e espumantes
Método manométrico: medição da sobrepressão de dióxido de
carbono directamente na garrafa, por meio de um afrómetro.
2. MÉTODO DE REFERÊNCIA
2.1. Caso dos vinhos tranquilos (sobrepressão de CO2≤0,5 · 105Pa).
2.1.1. Aparelhagem
2.1.1.1. Agitador magnético.
2.1.1.2. pH-metro.2.1.2. Reagentes
2.1.2.1. Solução de hidróxido de sódio (NaOH), 0,1 M.
2.1.2.2. Solução de ácido sulfúrico (H
2SO4), 0,05 M.
2.1.2.3. Solução de anidrase carbónica a 1 grama por litro.2.1.3. Modo operatório
Arrefecer a amostra de vinho a cerca de 0 ºC, assim como a pipeta
de 10 ml utilizada para a sua recolha.
Retirar para um vaso cilíndrico de 100 ml, 25 ml de solução de
hidróxido de sódio (2.1.2.1); juntar duas gotas de solução aquosa de
anidrase carbónica (2.1.2.3) e aí introduzir 10 ml de vinho por meio
da pipeta arrefecida a 0 ºC.
Colocar o vaso cilíndrico sobre o agitador magnético, introduzir o
eléctrodo e a barra magnética e proceder a uma agitação moderada.
Quando o líquido tiver voltado à temperatura ambiente, deitar por
afusão lenta a solução de ácido sulfúrico (2.1.2.2) até pH 8,6.
Continuar as afusões de ácido sulfúrico (2.1.2.2) até pH 4,0. Seja «n
ml» o volume utilizado entre pH 8,6 e 4,0.
Por outro lado, proceder à eliminação de CO
2em cerca de 50 ml de
amostra de vinho por agitação no vácuo durante 3 minutos, aque-
cendo o balão num banho de água a 25 ºC aproximadamente.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 154
(1)1 05Pascal (Pa) = 1 bar.
▼B
Aplicar sobre 10 ml de vinho descarbonificado a técnica anterior:
seja «n′ml» o volume utilizado.
2.1.Expressão de resultados
1 ml de solução titulada de hidróxido de sódio 0,1 M corresponde a
4,4 mg de CO2.
A quantidade de CO2em gramas por litro de vinho é dada por:
0,44 (n − n ′)
Exprime-se com 2 decimais.Nota:Nos casos de vinhos com pouco CO
2(CO2< 1 g/l), a adição de
anidrase carbónica para catalisar a hidratação do CO2não é
necessária.
2.2.Caso dos vinhos frisantes e dos vinhos espumantes
2.2.1. Aparelhagem
2.2.1.1. Agitador magnético.2.2.1.2. pH-metro.
2.2.2. Reagentes
2.2.2.1. Solução de hidróxido de sódio (NaOH), a 50 p. 100 (m/m).2.2.2.2. Solução de ácido sulfúrico (H
2SO4), 0,05 M.
2.2.2.3. Solução de anidrase carbónica a 1 grama por litro.
2.2.3. Modo operatório
Na garrafa de vinho a analisar, traçar uma marca ao nível do enchi-
mento e arrefecê-la até ao início de congelação.
Deixar a garrafa aquecer ligeiramente, agitando-a até ao desapareci-
mento dos cristais de gelo.
Desrolhar rapidamente e pôr de lado, numa proveta graduada, 45 a
50 ml de vinho que servirão para o doseamento testemunha. O
volume exacto desta amostra, «v ml», será determinado pela leitura
na proveta após o seu regresso à temperatura ambiente.
Juntar, logo que esta recolha tiver sido efectuada, 20 ml de solução
de hidróxido de sódio (2.2.2.1) na garrafa para uma capacidade de
750 ml.
Esperar que o vinho volte à temperatura ambiente.Colocar num recipiente cilíndrico de 100 ml, 30 ml de água desti-
lada fervida e 2 gotas da solução de anidrase carbónica (2.2.2.3).
Adicionar-lhe 10 ml de vinho alcalinizado.
Colocar o recipiente sobre o agitador magnético, introduzir-lhe o
eléctrodo e a barra magnética e proceder a uma agitação moderada.
Deitar por afusão lenta a solução de ácido sulfúrico (2.2.2.2) até pH
8,6.
Continuar as afusões de ácido sulfúrico (2.2.2.2) até pH 4,0. Seja «n
ml» o volume utilizado entre pH 8,6 e 4,0.
Por outro lado, proceder à eliminação do CO
2nos «v ml» de vinho
retirado para o doseamento testemunha, por agitação no vácuo
durante três minutos, e aquecendo o balão num banho de água a
cerca de 25 ºC. Introduzir 10 ml de vinho descarbonificado em
30 ml de água destilada fervida, juntar duas a três gotas de solução
de hidróxido de sódio (2.2.2.1) para levar o pH a 10-11. Em seguida
aplicar o modo operatório anterior. Seja de «n ′ml», o volume de
ácido sulfúrico 0,05 M utilizado.
2.2.4. Expressão dos resultados
1 ml de solução de ácido sulfúrico 0,05 M corresponde a 4,4 mg de
CO2.
Esvaziar a garrafa que contém o vinho alcalinizado e determinar,
com a aproximação de 1 ml, o volume inicial do vinho, enchendo-a
com água até ao traço marcado, seja «V ml».1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 155
▼B
A quantidade de CO2en g/l de vinho é dada por:
0;44n/C0n0 ðÞ /C1V/C0vþ20 ðÞ
V/C0v
É expressa com 2 decimais.
2.3.Cálculo da sobrepressão
A sobrepressão a 20 ºC, Paph20, expresso em pascais, é dada pela
fórmula:
Paph20¼Q
1;951/C210/C050;86/C00;01 A ðÞ 1/C00;00144 S ðÞ/C0Patm
sendo:
Q: Teor em gramas de CO2por litro de vinho.
A: Título alcoométrico do vinho a 20 ºC.
S: Teor em açúcares do vinho em gramas por litro.
Patm: Pressão atmosférica, expressa em pascais.
3. MÉTODO USUAL (VINHOS FRISANTES E ESPUMANTES)3.1.Aparelhagem
3.1.1. Afrómetro
O aparelho que permite medir a sobrepressão em garrafas de vinhos
frisantes e espumantes denomina-se afrómetro. Apresenta-se de
modos diferentes consoante a rolha da garrafa (cápsula metálica,
coroa, rolha de cortiça ou de plástico, ver figuras 1 e 2).
Os aparelhos são graduados em pascais (abreviatura Pa)(
1). É mais
prático utilizar como unidade 105pascal (105Pa) ou o quilopascal
(kPa).
Os aparelhos podem ser de diferentes classes. A classe de um manó-
metro é a precisão da leitura em relação à escala completa expressa
em percentagem (por exemplo, manómetro 1000 kPa classe 1 signi-
fica pressão de utilização máxima 1000 kPa, leitura a ± 10 kPa). A
classe 1 é recomendada para medições rigorosas.
Os afrómetros devem ser verificados regularmente (pelo menos uma
vez por ano).
3.2.Modo operatório
A medição deve efectuar-se em garrafas cuja temperatura esteja esta-
bilizada desde há 24 horas, pelo menos. Após ter perfurado a cápsula
ou a rolha, deve agitar-se em seguida vigorosamente a garrafa até
obter uma pressão constante para efectuar a leitura.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 156
(1) 1 Pascal (Pa) = 1 N/m2=1 0−5bar.
▼B
Figura 1 — Afrómetro para cápsulas
 Figura 2 — Afrómetro para rolhas
3.3.Expressão dos resultados
A sobrepressão a 20 ºC (Paph20) é expressa em pascal (Pa) ou em
quilopascal (kPa).
Esta deve estar em concordância com a precisão do manómetro
(exemplo: 6,3 105Pa ou 630 kPa e não 6,33 105Pa ou 633 kPa
para um manómetro 1000 kPa, escala completa, de classe 1).
Quando a temperatura de medição for diferente de 20 ºC, é conveni-
ente introduzir uma correcção, multiplicando a pressão medida pelo
coeficiente:
Paph20
Papht;
dado pelo quadro 1, para a levar a 20 ºC.
4. RELAÇÃO ENTRE A PRESSÃO E A QUANTIDADE DE
DIÓXIDO DE CARBONO CONTIDO NUM VINHO ESPU-
MANTE(1)
A partir da sobrepressão a 20 ºC (Paph20), calcula-se a pressão abso-
luta a 20 ºC (Pabs20) pela fórmula:
Pabs20= Patm + Paph20
sendo Patm a pressão atmosférica expressa em pascais.
A quantidade de dióxido de carbono contido num vinho é dada pelas
relações seguintes:
— em litros de CO2por litro de vinho:
0,987 · 10−5Pabs20(0,86 − 0,01A) (1 − 0,00144S)
— em gramas de CO2por litro de vinho:
1,951 · 10−5Pabs20(0,86 − 0,01A) (1 − 0,00144S)
sendo:
A é o título alcoométrico do vinho a 20 ºC.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 157
(1) Não se toma em conta outros gases presentes (O2,N2, etc…) em fraquíssimas quanti-
dades para ter uma influência sobre a sobrepressão.
▼B
S é o teor de açúcares do vinho, expresso em gramas por litro.
QUADRO 1
Relação entre a sobrepressão Paph20de um vinho frisante ou espumante a
20 ºC e a sobrepressão Paphta uma temperatura t
0 1,85 13 1,24
1 1,80 14 1,20
2 1,74 15 1,16
3 1,68 16 1,13
4 1,64 17 1,09
5 1,59 18 1,06
6 1,54 19 1,03
7 1,50 20 1,00
8 1,45 21 0,97
9 1,40 22 0,95
10 1,36 23 0,93
11 1,32 24 0,91
12 1,28 25 0,881990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 158
▼M7
38.DERIVADOSCIANADOS
(Atenção: Respeitar as normas de segurança para a manipulação de produtos
químicos (cloramina T, piridina, cianeto de potássio, ácido clorídrico e ácido
fosfórico). Descartar os produtos usados de forma compatível com as regras e
a regulamentação aplicáveis em matéria de protecção do ambiente. Tomar
precauções especiais com o ácido cianídrico libertado na destilação do vinho
acidificado.)
1. PRINCÍPIO
Obtenção por hidrólise ácida e separação por destilação do ácido
cianídrico livre total do vinho. Reacção com cloramina T e piridina
e determinação colorimétrica do dialdeído glutacónico formado,
graças à coloração azul que este produz com o ácido 1,3-dimetilbar-
bitúrico.
2. APARELHAGEM2.1.Aparelho de destilação
Utilizar o aparelho de destilação descrito para a determinação do
título alcoométrico volúmico do vinho.
2.2. Balão de 500 ml com esmerilado normalizado.
2.3. Banho de água termostatizado a 20 ºC.
2.4. Espectrofotómetro com capacidade para leituras de absorvância a
590 nm.
2.5. Células de vidro com 20 mm de percurso óptico ou células descartá-
veis (uma só utilização).
3. REAGENTES
3.1. Ácido fosfórico (H
3PO4) a 25 % (m/v).
3.2. Solução de cloramina T (C7H7ClNNaO2S,3H2O) a 3 % (m/v).
3.3. Solução do ácido 1,3-dimetilbarbitúrico: dissolver 3,658 g de ácido
1,3-dimetilbarbitúrico (C6H8N2O3) em 15 ml de piridina e 3 ml de
ácido clorídrico ( ρ20= 1,19 g/ml) e completar o volume até 50 ml
com água destilada.
3.4. Cianeto de potássio (KCN).
3.5. Solução de iodeto de potássio (KI) a 10 % (m/v).3.6. Solução 0,1 M de nitrato de prata (AgNO
3).
4. MODO OPERATÓRIO
4.1.Destilação:
Introduzir 25 ml de vinho, 50 ml de água destilada, 1 ml de ácido
fosfórico (3.1) e algumas esferas de vidro num balão de 500 ml
(2.2) e colocá-lo imediatamente no aparelho de destilação. Por meio
de um tubo afilado, conduzir o destilado para um balão aferido de
50 ml, já com 10 ml de água, imerso em água gelada. Recolher 30-
-35 ml de destilado (até um volume total de líquido no balão de cerca
de 45 ml).
Lavar o tubo afilado do refrigerante com alguns mililitros de água
destilada, elevar a temperatura do destilado até 20 ºC e completar o
volume com água até ao traço de aferição.
4.2.Medições:
Introduzir 25 ml de destilado num balão de fundo plano de 50 ml
com tampa esmerilada, adicionar 1 ml de solução de cloramina T
(3.2) e tapar hermeticamente. Transcorridos exactamente 60
segundos, adicionar 3 ml de solução de ácido 1,3-dimetilbarbitúrico
(3.3), tapar hermeticamente e deixar em repouso durante 10 minutos.
Fazer a leitura da absorvância em relação a um branco (25 ml de
água destilada em vez de 25 ml de destilado) no comprimento de
onda de 590 nm, em células de 20 mm de percurso óptico.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 159
▼M7
5. TRAÇADO DA CURVA DE CALIBRAÇÃO
5.1.Titulação argentimétrica do cianeto de potássio
Num balão aferido de 300 ml, dissolver cerca de 0,2 g de KCN
(3.4), pesados com exactidão, em 100 ml de água destilada.
Adicionar 0,2 ml de solução de iodeto de potássio (3.5) e titular
com a solução 0,1 M de nitrato de prata (3.6) até à obtenção de
uma coloração amarelada estável.
Calcular o título desta solução de KCN, sabendo que 1 ml de
solução 0,1 M de nitrato de prata correspondem a 13,2 mg de KCN.
5.2.Curva de calibração
5.2.1. Preparação das soluções-padrão
Conhecido o título de KCN determinado em 5.1, preparar uma
solução-padrão de ácido cianídrico com a concentração de 30 mg/l
(30 mg de HCN /approxorequal72,3 mg de KCN). Diluir esta solução 1:10.
Introduzir 1,0/2,0/3,0/4,0/5,0 ml da solução-padrão diluída em balões
aferidos de 100 ml e completar o volume com água destilada até ao
traço de aferição. A concentração de ácido cianídrico nas soluções
preparadas é, respectivamente, 30/60/90/120/150 µg/l.
5.2.2. Determinação
Tomar 25 ml das soluções assim obtidas e prosseguir conforme
descrito em 4.1. e 4.2.
Os valores de absorvância obtidos para estas soluções-padrão em
função dos teores de ácido cianídrico correspondentes definem uma
recta com ordenada na origem.
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
O teor de ácido cianídrico é apresentado em microgramas por litro (
µg/1), sem decimais.
6.1.Cálculo
Ler o teor de ácido cianídrico na curva de calibração. Se tiver
havido diluições, multiplicar o resultado pelo factor de diluição.
Repetibilidade (r) e reprodutibilidade (R)Vinho branco = r = 3,1 µg/I, cerca de 6 % de x
i
R= 12 µg/1, cerca de 25 % de xi
Vinho tinto = r = 6,4 µg/l, cerca de 8 % de xi
R= 23 µg/I, cerca de 29 % de xi
em que:
xi= concentração média de HCN no vinho;
xi= 48,4 µg/l para o vinho branco;
xi= 80,5 µg/l para o vinho tinto.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 160
▼B
39.ISOTIOCIANATODE ALILO
1. PRINCÍPIO DO MÉTODO
O isotiocianato de alilo, eventualmente presente no vinho, recupe-
rado por destilação é identificado por técnica de cromatografia em
fase gasosa.
2. REAGENTES
2.1. Etanol absoluto.
2.2. Solução-padrão: solução em álcool absoluto de isotiocianato de alilo
com 15 mg/l de princípio activo.
2.3. Mistura refrigerante constituída por etanol e neve carbónica (tempe-
ratura −60 ºC).
3. APARELHAGEM
3.1. Aparelhos de destilação por arrastamento com corrente de azoto
segundo a figura.
3.2. Recipiente de aquecimento termorregulável.
3.3. Medidor do débito.
3.4. Cromatógrafo de fase gasosa com detector de espectrofotómetro de
chama, munido de um filtro selectivo para os compostos sulfurosos
(λ= 394 nm) ou qualquer outro detector adaptado a esta medida.
3.5. Coluna de cromatografia em aço inoxidável, com diâmetro interno
de 3 mm e comprimento de 3 m; cheia de Carbowax 20 M a 10 %
sobre chromosorb WHP, 80-100 mesh.
3.6. Microsseringa de 10 µl.
4. MODO OPERATÓRIO
Tomar 2 litros de vinho e introduzi-los no balão de destilação.
Colocar seguidamente alguns mililitros de etanol (2.1) nos dois tubos
de recuperação até que a parte porosa destinada à dispersão gasosa
se encontre completamente imersa. Arrefecer, exteriormente, os
dois tubos com a mistura refrigerante. Ligar o balão aos tubos recep-
tores e dar início à introdução no aparelho de uma corrente de azoto
de cerca de 3 litros por hora. Reaquecer o vinho a 80 ºC, regulando
convenientemente a temperatura do recipiente de aquecimento e
recuperar um total de 45-50 ml de destilado.
Estabilizar o cromatógrafo; aconselha-se que se respeitem as
seguintes condições operatórias:
— temperatura do injector: 200 ºC,
— temperatura da coluna: 130 ºC,
— gás-vector: hélio, a um débito de 20 ml por minuto.
Injectar, por meio da microsseringa, uma quantidade de solução-
-padrão tal que o pico correspondente ao isotiocianato de alilo possa
ser identificado com facilidade no cromatograma.
Injectar, igualmente, uma parte alíquota de destilado e controlar a
correspondência entre o tempo de retenção do isotiocianato de alilo
e do pico obtido.
Nas condições indicadas para o ensaio, nenhum composto natural do
vinho produz interferência correspondente ao tempo de retenção da
substância pesquisada.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 161
▼B
Aparelho de destilação com corrente de azoto
1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 162
▼B
40.CARACTERÍSTICASCROMÁTICAS
1. CASO DOS VINHOS E DOS MOSTOS
1.1.Definições
Chamam-se características cromáticas de um vinho à sua luminosi-
dade e cromaticidade.
A luminosidade corresponde à transmitância. Varia na razão inversa
da intensidade corante do vinho.
A cromaticidade corresponde ao comprimento de onda dominante
(que caracteriza o tom) e à pureza.
Convencionalmente, e por razões de comodidade, as características
cromáticas dos vinhos tintos e rosados são expressas pela intensidade
corante e pelo tom, segundo um procedimento adoptado como
método usual.
1.2.Princípio dos métodos
1.2.1. Método de referência
Método espectrofotométrico que permite o cálculo dos valores tristi-
mulares e dos coeficientes tricromáticos necessários à especificação
da cor nos termos da Comissão Internacional de Iluminação (CIE).
1.2.2. Método usual (aplicável aos vinhos tintos e rosados)
Método espectrofotométrico segundo o qual as características cromá-
ticas são expressas convencionalmente do seguinte modo:
A intensidade é dada pela soma das absorvências, sob 1 cm de
trajecto óptico, para as radiações de comprimento de onda iguais a
420, 520 e 620 nm.
O tom é expresso pela relação da absorvência a 420 nm e a 520 nm.
1.3.Método de referência
1.3.1. Aparelhagem
1.3.1.1. Espectrofotómetro que permita efectuar medições entre 300 e
700 nm.
1.3.1.2. Cubas de vidro, disponíveis aos pares, de trajecto óptico, b, igual a
0,1, 0,2, 0,5, 1, 2 e 4 cm.
1.3.2. Modo operatório
1.3.2.1. Preparação da amostra
Se o vinho estiver turvo, deve ser clarificado por centrifugação.
Deve extrair-se a maior parte do dióxido de carbono existente nos
vinhos novos e espumantes, por agitação no vácuo.
1.3.2.2. Medições
O trajecto óptico, b, das cubas utilizadas deve ser escolhido de modo
a que a absorvência medida esteja compreendida entre 0,3 e 0,7.
A título indicativo, aconselha-se a utilização dos cubas de 2 cm (ou
4 cm) de trajecto óptico para os vinhos brancos, 1 cm para os vinhos
rosados e 0,1 cm (ou 0,2 cm) para os vinhos tintos.
Efectuar as medições espectrofotométricas utilizando como líquido
de referência a água destilada colocada numa cuba com o mesmo
trajecto óptico, b, para regular o zero da escala das absorvências
nos comprimentos de onda de 445, 495, 550 e 625 nm.
Registar, para o trajecto óptico b, as quatro absorvências obtidas
para o vinho, sendo A445,A495,A550,A625(com três decimais).
1.3.3. Cálculos
A partir dos valores das absorvências relativas a b cm de trajecto
óptico, utilizar a tabela I e registar as transmitências (T %) corres-
pondentes, sendo: T445,T495,T550,T625.
— Calcular os valores tristimulares X, Y e Z, expressos em fracções
decimais:
X = 0,42 · T625+ 0,35 · T550+ 0,21 · T4451990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 163
▼B
Y = 0,20 · T625+ 0,63 · T550+ 0,17 · T495
Z = 0,24 · T495+ 0,94 · T445
— Calcular as coordenadas da cor x e y:
x¼X
XþYþZy¼Y
XþYþZ
1.3.4. Expressão dos resultados
1.3.4.1. A luminosidade relativa é dada pelo valor Y expresso em percen-
tagem, (para o preto Y % = 0, para o incolor Y % = 100).
1.3.4.2. A cromaticidade é expressa pelo comprimento de onda dominante e
a pureza.
A sua determinação é feita por meio do diagrama de cromaticidade,
delimitado pelo espectrum locus , dado na figura 1. Inclui o ponto O
que corresponde à fonte de luz branca utilizada, representada pelo
iluminante-padrão C, de coordenadas xo= 0,3101 e yo= 0,3163,
correspondente à luz de um dia medianamente claro.
— Comprimento de onda dominante
Colocar no diagrama o ponto C de coordenadas x e y. Quando o
ponto C se encontrar no exterior do triângulo AOB, traçar a recta
que une o ponto O ao ponto C e prolongá-la; esta recta corta o
espectrum locus num ponto S, que corresponde ao comprimento
de onda dominante.
Quando o ponto C se encontra no interior do triângulo AOB,
traçar a recta que une C a O; esta recta corta o espectrum locus
num ponto que corresponde ao comprimento de onda da cor
completamentar do vinho. Este comprimento de onda é expresso
pelo seu valor, seguido da letra C.
— Pureza
Quando o ponto C se encontra no exterior do triângulo AOB, a
pureza é expressa em percentagem, pela relação:
100/C1distˆancia do ponto C ao ponto O
distˆancia do ponto O ao ponto S
Quando o ponto C se encontra no interior do triângulo AOC, a
pureza é expressa em percentagem, pela relação:
100 ·distância do ponto C ao ponto O(1)
distância do ponto O ao ponto P
O ponto P é o ponto em que a recta OC corta a linha dos
púrpuras.
A pureza é também dada directamente pelos diagramas de
cromaticidade, se se conhecer x e y (figuras 2, 3, 4, 5 e 6).
1.3.4.3. Resultados
A luminosidade, a cromaticidade (expressa pelo comprimento de
onda dominante) e a pureza definem completamente a cor de um
vinho.
Devem ser indicadas no boletim de análise com o valor do trajecto
óptico sobo qual foram efectuadas as medições.
4. MÉTODO USUAL
1.4.1. Aparelhagem
1.4.1.1. Espectrofotómetro que permita efectuar medições entre 300 e
700 nm.
1.4.1.2. Cubas de vidro disponíveis aos pares, de trajecto óptico, b, igual a
0,1, 0,2, 0,5 e 1 cm.
1.4.2. Tratamento prévio da amostra
Se o vinho estiver turvo, deve ser clarificado por centrifugação.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 164
(1) Esta distância deve ser contada no sentido OC.
▼B
Deve extrair-se a maior parte do dióxido de carbono existente nos
vinhos novos e espumantes, por agitação no vácuo.
1.4.3. Modo operatório
O trajecto óptico, b, da cuba de medição deve ser escolhido de modo
a que a absorvência A esteja compreendida entre 0,3 e 0,7.
Efectuar as medições espectrofotométricas utilizando como líquido
de referência a água destilada, colocada numa cuba com o mesmo
trajecto óptico, b, para regular o zero da escala das absorvências do
aparelho nos comprimentos de onda de 420, 520 e 620 nm.
1.4.4. Expressão dos resultados
1.4.4.1. Cálculos
Calcular as absorvências para 1 cm de trajecto óptico, relativas aos
três comprimentos de onda, dividindo por b, expresso em cm, as
absorvências registadas; seja A420,A520eA620.
A intensidade é convencionalmente dada por:I=A
420+A520+A620
sendo expressa com três decimais.O tom é, convencionalmente, dado por:
N¼
A420
A520
sendo expresso com três decimais.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 165
▼B
QUADRO I
Transformação das absorvências em transmitâncias (T %)
Modo de utilização:Ler o primeiro algarismo decimal do valor da absorvência na coluna
vertical 1 e o segundo algarismo decimal na horizontal 2.
Registar o algarismo situado na sua intercepção. Para obter a trans-
mitância, este algarismo deve ser dividido por 10 se a absorvência
for inferior a 1, por 100 se estiver compreendida entre 1 e 2, e por
1 000 se for compreendida entre 2 e 3.
Nota:O algarismo existente no alto e à direita de cada casa permite ter em
conta, por interpolação, o terceiro algarismo decimal do valor da
absorvência.
0123456789
0 1000
23977229552293321912218912087120851198321981319
1 79418776187591774117724167081669216676156611564615
2 63114617146031458914575135621354913537125251251312
3 50111490114791146811457104479436942710417104079
4 3989389938093718363835583478339833173248
5 3167309730272957288628272756269626362576
6 2516245524062345229522452195214520952045
7 1994195519041864182417841744170416641624
8 1583155415131484144414131383135313231293
9 1263123312031172115311221103107210531022
Exemplo:
Absorvência 0,47 1,47 2,47 3,47
T % 33,9 % 3,4 % 0,3 % 0 %
As transmitâncias T % serão expressas com uma aproximação de
0,1 %.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 166
▼B
Figura 1
Diagrama da cromaticidade que representa o locus de todas as
cores do espectro.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 167
▼B
Figura 2
Diagramadacromaticidadeparaosvinhostintosdecorfrancae
os vinhos tintos atijolados.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 168
▼B
Figura 3
Diagramadacromaticidadeparaosvinhostintosdecorfrancae
os vinhos tintos atijolados.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 169
▼B
Figura 4
Diagramadacromaticidadeparaosvinhostintosdecorfrancae
os vinhos tintos purpúreos.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 170
▼B
Figura 5
Diagramadacromaticidadeparaosvinhostintosdecorfrancae
os vinhos tintos purpúreos.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 171
▼B
Figura 6
Diagrama da cromaticidade para os vinhos tintos atijolados e os
vinhos tintos purpúreos.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 172
▼B
2. CASO DOS MOSTOS CONCENTRADOS RECTIFICADOS
2.1.Princípio
Medição da absorvência a 425 nm, sob 1 cm de espessura, do mosto
concentrado rectificado cuja concentração de açúcares tenha sido
levada a 25 p. 100 (m/m) (25 º Brix).
2.2.Aparelhagem
2.2.1. Espectrofotómetro que permita efectuar medições entre 300 e
700 nm.
2.2.2. Cubas de vidro, de trajecto óptico igual a 1 cm.2.2.3. Filtro de membrana, com porosidade de 0,45 µm.
2.3.Modo operatório
2.3.1. Preparação da amostra
Utilizar a solução cujo título de açúcares é 25 p. 100 (m/m) (25º
Brix), preparada como indicado no capítulo «pH» em 4.1.2, filtrá-la
num filtro de membrana, de porosidade 0,45 µm.
2.3.2. Determinação da absorvência
Regular a absorvência zero para o comprimento de onda de 425 nm
com uma cuba de 1 cm de trajecto óptico que contenha água desti-
lada.
Registar a absorvência A, nesse comprimento de onda, da solução a
25 p. 100 de açúcares (25 º Brix) obtida em 2.3.1 e colocada numa
cuba de 1 cm de trajecto óptico.
2.4.Expressão dos resultados
A absorvência a 425 nm do mosto concentrado rectificado em
solução a 25 p. 100 (m/m) de açúcares (25 º Brix) é expressa com
dois decimais.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 173
▼B
41.ÍNDICEDE FOLIN-CIOCALTEU
1. DEFINIÇÃO
O índice de Folin-Ciocalteu é o resultado obtido pela aplicação do
método descrito posteriormente.
2. PRINCÍPIO
O conjunto dos compostos fenólicos do vinho é oxidado pelo
reagente de Folin-Ciocalteu. Este último é constituído por uma
mistura de ácido fosfotúngstico (H3PW12O40) e de ácido fosfomolíb-
dico (H3PMo12O40) que é reduzido, aquando da oxidação dos fenóis,
numa mistura de óxidos azuis de tungsténio (W8O23) e de molibdénio
(Mo8O23).
A cor azul produzida possui uma absorção máxima na proximidade
dos 750 nm. É proporcional à taxa de compostos fenólicos.
3. REAGENTES
Os reagentes devem ser de qualidade analítica. A água utilizada deve
ser água destilada ou água de pureza equivalente.
3.1.Reagente de Folin-Ciocalteu
Este reagente encontra-se disponível no comércio, pronto para utili-
zação. Pode ser preparado do seguinte modo: são dissolvidos 100 g
de tungstato de sódio (Na2WO4,2H2O) e 25 g de molibdato de sódio
(Na2MoO4,2H2O) em 700 ml de água destilada; juntar 50 ml de
ácido fosfórico a 85 % ( ρ20= 1,71 g/ml), e 100 ml de ácido clorí-
drico concentrado ( ρ20= 1,19 g/ml). Levar à ebulição sob refluxo
durante 10 horas, juntar em seguida 150 g de sulfato de lítio
(Li2SO4·H2O), algumas gotas de bromo e levar de novo à ebulição
durante 15 minutos. Arrefecer e completar até 1 litro com água
destilada.
3.2. Carbonato de sódio (Na2CO3) anidro em solução a 20 % (m/v).
4. APARELHAGEM
Material corrente de laboratório e, nomeadamente:
4.1. Balões graduados de 100 ml.
4.2. Espectrofotómetro que permita trabalhar a 750 nm.
5. MODO OPERATÓRIO5.1.Caso dos vinhos tintos
Num balão graduado de 100 ml (4.1), introduzir, respeitando a
ordem seguinte:
1 ml de vinho diluído a 1/5
50 ml de água destilada
5 ml de reagente de Folin-Ciocalteu (3.1)
20 ml de solução de carbonato de sódio (3.2)
Levar o volume a 100 ml com água destilada.
Agitar para homogeneizar. Esperar 30 minutos de modo a obter a
estabilização da reacção. Determinar a absorvência a 750 nm sob
1 cm em relação à testemunha preparada com água destilada em
substituição do vinho.
Se a absorvência lida não for próxima de 0,3, é conveniente alterar a
diluição do vinho.
5.2.Caso dos vinhos brancos
Trabalhar nas mesmas condições com 1 ml de vinho não diluído.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 174
▼B
5.3.Caso dos mostos concentrados rectificados
5.3.1. Preparação da amostra
Utilizar a solução cujo teor de açúcares é de 25 p. 100 (m/m) (25º
Brix), preparada como indicado no capítulo «pH», em 4.1.2.
5.3.2. Medição
Proceder como descrito no caso dos vinhos tintos (5.1), utilizando
5 ml de amostra preparada de acordo com 5.3.1, medir a absorvência
em relação a uma testemunha preparada com 5 ml de uma solução
de açúcar invertido a 25 p. 100 (m/m).
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS6.1.Modo de cálculo
O resultado é expresso soba forma de um índice ob tido multipli-
cando a absorvência por 100, no caso dos vinhos tintos diluídos a
1/5 (ou pelo factor correspondente à diluição utilizada), e por 20,
no caso dos vinhos brancos. No caso dos mostos concentrados recti-
ficados, a absorvência é multiplicada por 16.
6.2.Repetibilidade
A diferença entre os resultados de duas determinações efectuadas
simultaneamente ou imediatamente uma após a outra pelo mesmo
analista não deve ser superior a 1.
Uma boa repetibilidade dos resultados está ligada à utilização de
uma aparelhagem (balões graduados e cubas do espectrofotómetro)
rigorosamente limpos.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 175
▼B
42.MÉTODOS DE ANÁLISE ESPECIAIS PARA MOSTOS DE UVAS
CONCENTRADOSRECTIFICADOS
a) CATIÕES TOTAIS1. FUNDAMENTO
A toma de ensaio é tratada com um permutador de catiões forte-
mente ácido. Os catiões são trocados por H
+, e expressos pela
diferença entre a acidez total do fluente e a da toma de ensaio.
2. APARELHAGEM
2.1. Coluna de vidro de, aproximadamente, 300 mm de comprimento e
10-11 mm de diâmetro interno, munida de torneira.
2.2. pH-metro que permita leituras de pH, pelo menos em décimas de
unidade.
2.3. Eléctrodos:
— eléctrodo de vidro, a conservar em água destilada,
— eléctrodo de referência de calomel - cloreto de potássio saturado,
a conservar numa solução saturada de cloreto de potássio,
— ou eléctrodo combinado a conservar em água destilada.
3. REAGENTES
3.1. Permutador de catiões fortemente ácido, em forma de H+. Previa-
mente ao seu emprego, fazer dilatar a resina por imersão em água,
durante uma noite.
3.2. Solução 0,1 M de hidróxido de sódio.3.3. Papel indicador do pH.
4. MODO OPERATÓRIO
4.1.Preparação da amostra
Utilizar a solução obtida diluindo o mosto concentrado rectificado a
40 % (m/v), como indicada no capítulo «Acidez total», em 5.1.2.
4.2.Preparação da coluna permutadora de iões
Introduzir na coluna cerca de 10 ml de permutador de iões previa-
mente dilatados na forma H
+; lavar a coluna com água destilada até
à eliminação da acidez, que se controla com o papel indicador.
4.3.Permutador de iões
Fazer passar através da coluna 100 ml da solução de mosto concen-
trado rectificado, preparado como indicado em 4.1, à razão de uma
gota por segundo. Recolher o efluente num vaso cilíndrico. Lavar a
coluna com 50 ml de água destilada. Titular a acidez do efluente
(incluindo a água de lavagem) com a solução 0,1 M de hidróxido
de sódio até que o pH seja igual a 7 a 20º C. A adição de licor alca-
lino deve ser feita lentamente e a solução agitada de modo
constante, sendo n ml o volume de solução 0,1 M de hidróxido de
sódio utilizado.
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
Os catiões totais são expressos em miliequivalentes por quilo de
açúcares totais, com um decimal.
5.1. Cálculos
— Acidez do efluente expressa em miliequivalentes por quilo de
mosto concentrado rectificado:
E = 2,5 · n
— Acidez total de mosto concentrado rectificado em miliequiva-
lentes por quilo (ver «Acidez total» em 6.1.2): a.
— Catiões totais em miliequivalentes por quilo de açúcares totais:
2;5n/C0a
P/C11001990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 176
▼B
P = teor em p. 100 (m/m) de açúcares totais.
b) CONDUTIVIDADE1. PRINCÍPIO
Medição da condutividade eléctrica de uma coluna de líquido, deli-
mitada por dois eléctrodos de platina mantidos paralelos,
constituindo uma das ramificações de um ponto de Wheatstone.
A condutividade varia com a temperatura, expressa a 20º C.
2. APARELHOS
2.1. Condutímetro que permita efectuar medições de condutividade num
domínio compreendido entre 1 e 1000 microsiemens por cm.
2.2. Banho de água que permita levar a temperatura das amostras a
analisar a cerca de 20º C (20 ± 2º C).
3. REAGENTES
3.1. Água desmineralizada de condutividade específica inferior a 2
microsiemens por cm a 20º C.
3.2. Solução de cloreto de potássio de referência.
Dissolver 0,581 g de cloreto de potássio, KCl, previamente seco até
à massa constante à temperatura de 105º C, em água desminerali-
zada (3.1). Completar até 1 litro com água desmineralizada (3.1).
Esta solução tem uma condutividade de 1000 microsiemens por cm
a 20º C. O seu período de conservação é de apenas três meses.
4. MODO OPERATÓRIO4.1.Preparação da amostra a analisar
Utilizar a solução cujo teor de açúcares totais é de 25 p. 100 (m/m)
(25 º Brix), como está indicado no capítulo «pH», em 4.1.2.
4.2.Determinação da condutividade
Levar a amostra a analisar a 20º C por imersão num banho de água.
Controlar a temperatura com uma aproximação de 0,1º C.
Lavar duas vezes a célula de medida do condutímetro com a solução
a examinar.
Medir a condutividade expressa em microsiemens por cm.
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
A condutividade é expressa em microsiemens por cm (yScm
−1) a 20º
C, sem decimal, para a solução a 25 p. 100 (m/m) (25º Brix) de
mosto concentrado rectificado.
5.1.CÁLCULO
Se o aparelho não dispuser de um compensador de temperatura,
corrigir a condutividade medida por meio da tabela I. Se a tempera-
tura for inferior a 20º C, adicionar a correcção; se a temperatura for
superior a 20º C, subtrair a correcção.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 177
▼B
TABELA I
Correcções de condutividade para temperaturas diferentes de 20º C em microsiemens cm−1
Conduti-
vidadeTemperaturas
20.2
19.820.4
19.620.6
19.420.8
19.221.0
19.021.2
18.821.4
18.621.6
18.421.8
18.222.0 (1)
18.0 (2)
0 000000000 0
5 0 001111122 2
1 0 0 011223334 41 5 0 112334556 72 0 0 123345678 92 5 0 12346789 1 01 13 0 0 1345789 1 1 1 21 3350 1 3 5 6 8 9 11 12 14 15400 2 3 5 7 9 11 12 14 16 18
4 5 0 2 3 6 81 01 21 41 61 8 2 0
5 0 0 2 4 7 91 11 31 51 82 0 2 2550 2 5 7 10 12 14 17 19 22 24600 3 5 8 11 13 16 18 21 24 26
(1) Subtrair a correcção.
(2) Adicionar a correcção.
c) HIDROXIMETILFURFURAL
1. PRINCÍPIO DOS MÉTODOS
1.1.Método colorimétrico
Os aldeídos derivados do furano, dos quais o principal é o hidroxi-
metilfurfural, reagem com o ácido barbitúrico e a paratoluidina para
dar um composto vermelho que é doseado por colorimetria a 550 nm.
1.2.Método por cromatografia líquida de elevada resolução
Separação numa coluna de fase inversa e determinação a 280 nm.
2. MÉTODO COLORIMÉTRICO
2.1.Aparelhos
2.1.1. Espectrofotómetro que permita efectuar medições entre 300 e
700 nm.
2.1.2. Cubas de vidro, de trajecto óptico igual a 1 cm.
2.2.Reagentes
2.2.1. Ácido barbitúrico em solução a 0,5 p. 100 (m/v).
Dissolver 500 ml de ácido barbitúrico, C4O3N2H4, em água destilada,
aquecendo ligeiramente num banho de água a 100 º C; levar a 100 ml
com água destilada. A solução conserva-se durante, aproximada-
mente, uma semana.
2.2.2. Paratoluidina em solução a 10 p. 100 (m/v).
Introduzir num balão graduado de 100 ml 10 g de paratoluidina,
C6H4(CH3)N H2; adicionar 50 ml de isopropanol, CH3CH(OH)CH3,
e 10 ml de ácido acético glacial, CH3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml);
completar até 100 ml com isopropanol. Esta solução deve ser reno-
vada todos os dias.
2.2.3. Etanal (CH3CHO) em solução aquosa a 1 p. 100 (m/v).
A preparar na altura de uso.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 178
▼B
2.2.4. Hidroximetilfurfural, C6O3H6, em solução aquosa a 1 g/l.
Preparar, por diluições sucessivas, soluções que titulem 5, 10, 20, 30
e 40 mg/l. A solução a 1 g/l e as suas diluições devem ser prepa-
radas de fresco.
2.3.Modo operatório
2.3.1. Preparação da amostra
Utilizar a solução obtida diluindo o mosto concentrado rectificado a
40 p. 100 (m/v), como indicado no capítulo «Acidez total» em 5.1.2.
Efectuar o doseamento a partir de 2 ml desta solução.
2.3.2. Doseamento colorimétrico
Em dois frascos aebde 25 ml com rolha de esmeril, introduzir 2 ml
de amostra preparada como indicado em 2.3.1. Colocar em cada
frasco 5 ml de solução de paratoluidina (2.2.2) e misturar. Juntar
no frascob(testemunha) 1 ml de água destilada e no frasco amedir
1 ml de solução de ácido barbitúrico (2.2.1). Agitar para homoge-
neizar. Transvazar o conteúdo dos frascos para as cubas de 1 cm de
trajecto óptico do espectrofotómetro. Regular o zero da escala das
absorvências relativamente ao conteúdo do frasco bpara o compri-
mento de onda de 550 nm, acompanhar a variação da absorvência
do conteúdo do frasco a; registar o seu valor máximo A que é alca-
nçado entre dois a cinco minutos.
As amostras cujo teor de hidroximetilfurfural seja superior a 30 mg/l
devem ser diluídas antes da análise.
2.3.3. Determinação da curva de calibração
Em dois frascos aebde 25 ml, introduzir 2 ml de cada uma das
soluções de hidroximetilfurfural a 5, 10, 20, 30 e 40 mg/l (2.2.4) e
tratá-las como descrito em 2.3.2.
A representação gráfica das absorvências em função dos teores, em
mg/l, de hidroximetilfurfural das soluções-padrão é uma recta que
passa na origem.
2.4.Expressão dos resultados
O teor de hidroximetilfurfural dos mostos concentrados rectificados
é expresso em mg/kg de açúcares totais.
2.4.1 Modo de cálculo
O teor C mg/l de hidroximetilfurfural da amostra a analisar é obtido
a partir da absorvência A determinada com essa amostra, utilizando
a curva de calibração.
Teor de hidroximetilfurfural em mg/kg de açúcares totais:
250/C1C
P
P = teor p. 100 (m/m) de açúcares totais do mosto concentrado
rectificado.
3. MÉTODO POR CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA RESO-
LUÇÃO
3.1.Aparelhagem
3.1.1. Cromatógrafo em fase líquida de alta resolução, equipada com:
— injector de loopde 5 ou 10 µl,
— detector espectrofotómetro que permita efectuar medições a
280 nm,
— coluna de sílica marcada octadecilada (por exemplo: Bondapak
C18— Corasil, Waters Ass.),
— registador e, eventualmente um integrador,— débito da fase móvel: 1,5 ml/min.
3.1.2. Dispositivo de filtração em membrana (0,45 µm)1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 179
▼B
3.2.Reagentes
3.2.1. Água bidestilada.
3.2.2. Metanol, CH3OH destilado ou de qualidade HPLC.
3.2.3. Ácido acético, CH3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml).
3.2.4. Fase móvel: água-metanol (3.2.2) ácido acético (3.2.3) previamente
filtrados numa membrana (0,45 µm), (40 - 9 - 1 v/v).
Esta fase móvel deve ser preparada todos os dias e desgaseificada
antes da sua utilização.
3.2.5. Solução de referência de hidroximetilfurfural a 25 mg/l (m/v). Intro-
duzir num balão graduado de 100 ml, 25 mg de hidroximetilfurfural,
C6H3O6pesados com exactidão, e completar o volume com metanol
(3.2.2). Diluir esta solução a 1/10 com metanol (3.2.2) e filtrá-la
numa membrana (0,45 µm).
Esta solução, colocada no frigorífico num frasco de vidro castanho,
hermeticamente fechado, conserva-se durante dois a três meses.
3.3.Modo operatório
3.3.1. Preparação da amostra
Utilizar a solução obtida diluindo o mosto concentrado rectificado a
40 p. 100 (m/v), como está indicado no capítulo «Acidez total» em
5.1.2 e filtrar por uma membrana (0,45 µm).
3.3.2. Determinação cromatográfica
Injectar no cromatógrafo 5 (ou 10) µl da amostra preparada como se
indicou em 3.3.1 e 5 (ou 10) µl de solução de referência de hidro-
ximetilfurfural (3.2.5). Registar o cromatograma.
O tempo de retenção do hidroximetilfurfural é próximo de 6 a 7
minutos.
3.4.Expressão dos resultados
O teor de hidroximetilfurfural dos mostos concentrados rectificados
é expresso em mg/kg de açúcares totais.
3.4.1. Modo de cálculo
Sendo C mg/l o teor de hidroximetilfurfural da solução de mosto
concentrado rectificado a 40 p. 100 (m/v).
O teor de hidroximetilfurfural em mg/kg de açúcares totais:
250/C1C
P
P = teor em p. 100 (m/m) de açúcares totais do mosto concentrado
rectificado.
d) METAIS PESADOS1. PRINCÍPIOSI.Método rápido de avaliação dos metais pesados
Os metais pesados são postos em evidência no mosto concentrado
rectificado, devidamente diluído, por uma coloração originada pela
formação de sulfuretos. São avaliados comparativamente a uma
solução-padrão de chumbo correspondente ao teor máximo
admissível.
II.Determinação do teor de chumbo por espectrofotometria de
absorção atómica
O quelato formado pelo chumbo com a pirrolidinaditiocarbamato de
amónio é extraído pela metilisobutilcetona, cuja absorvência é
medida a 283,3 nm. O teor de chumbo é determinado pelo método
das adições.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 180
▼B
2. MÉTODO RÁPIDO DE AVALIAÇÃO DOS METAIS PESADOS
2.1.Reagentes
2.1.1. Ácido clorídrico diluído a 70 p. 100 (m/v)
Tomar 70 g de ácido clorídrico (HCl), ( ρ20= 1,16 — 1,19 g/ml) e
completar até 100 ml com água.
2.1.2. Ácido clorídrico diluído a 20 p. 100 (m/v)
Tomar 20 g de ácido clorídrico (HCl), ( ρ20= 1,16 — 1,19 g/ml) e
completar até 100 ml com água.
2.1.3. Amoníaco diluído
Tomar 14 g de amoníaco (NH3), (ρ20= 0,931 — 0,934 g/ml) e
completar até 100 ml com água.
2.1.4. Solução tampão de pH 3,5
Dissolver 25 g de acetato de amónio (CH3COONH4)e m2 5m ld e
água e juntar 38 ml de ácido clorídrico diluído (2.1.1). Ajustar o
pH, se necessário, com o ácido clorídrico diluído (2.1.2) ou
amoníaco diluído (2.1.3.) e completar a 100 ml com água.
2.1.5. Solução de tioacetamida, (C2H5NS), a 4 p. 100 (m/v)
2.1.6. Solução de glicerol (C3H8O3), a 85 p. 100 (m/v)
(nD20º C= 1,449 — 1,455).
2.1.7. Reagente de tioacetamida
A 0,2 ml de solução de tioacetamida (2.1.5), juntar 1 ml de uma
mistura de 5 ml de água, 15 ml de hidróxido de sódio em solução
1 M e 20 ml de glicerol (2.1.6). Aquecer em banho de água a 100º
C durante 20 segundos. Preparar na altura de usar.
2.1.8. Solução de chumbo a 0,002 g/l
Preparar uma solução a 1 g/l de chumbo dissolvendo em água
0,400 g de nitrato de chumbo, Pb (NO3)2, e completar até 250 ml
com água. No momento de utilização, diluir esta solução a 2 p.
1 000 (v/v) com água para obter uma solução a 0,002 g/l.
2.2.Modo operatório
Dissolver uma toma de ensaio de 10 g de mosto concentrado rectifi-
cado em 10 ml de água. Juntar 2 ml de solução tampão de pH 3,5
(2.1.4) e misturar. Adicionar 1,2 ml de reagente de tioacetamida
(2.1.7) e misturar imediatamente. Preparar a testemunha nas mesmas
condições, utilizando 10 ml de solução a 0,002 g/l de chumbo
(2.1.8).
Após dois minutos, a coloração castanha da solução de mosto
concentrado rectificado não deve ser mais intensa do que a da teste-
munha.
2.3.Cálculos
O ensaio testemunha, nas condições operatórias, corresponde ao teor
máximo admissível de metais pesados, expressos em chumbo, de
2 mg/kg de mosto concentrado rectificado.
3. DETERMINAÇÃO DO TEOR DE CHUMBO POR ESPECTROFO-
TOMETRIA DE ABSORÇÃO ATÓMICA
3.1.Aparelhagem
3.1.1. Espectrofotómetro de absorção atómica equipado com um queimador
alimentado por ar e acetileno.
3.1.2. Lâmpada de chumbo de cátodo oco.
3.2.Reagentes
3.2.1. Ácido acético diluído
Tomar 12 g de ácido acético glacial ( ρ20= 1,05 g/ml) e completar
até 100 ml com água.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 181
▼B
3.2.2. Solução de pirrolidinaditiocarbamato de amónio, C5H12N2S2,a1p .
100 (m/v)
3.2.3. Metilisobutilcetona, (CH3)2CHCH2COCH3
3.2.4. Solução de chumbo a 0,010 g/l de chumbo
Diluir a 1 p. 100 (v/v) a solução de chumbo a 1 g/l (2.1.8).
3.3.Modo operatório
3.3.1. Solução a examinar
Dissolver 10 g de mosto concentrado rectificado numa mistura de
volumes iguais de ácido acético diluído (3.2.1) e de água e
completar até 100 ml.
Juntar 2 ml de solução de pirrolidinaditiocarbamato de amónio
(3.2.2) e 10 ml de metilisobutilcetona (3.2.3). Agitar ao abrigo da
luz viva durante 30 segundos. Deixar separar as duas fases. Utilizar
a fase de metilisobutilcetona.
3.3.2. Solução de referência
Preparar três soluções de referência que contenham, além dos 10 g
de mosto concentrado rectificado, respectivamente 1, 2 e 3 ml da
solução de chumbo a 0,010 g/l (3.2.4). Tratá-los como a solução a
examinar.
3.3.3. Testemunha
Preparar uma testemunha procedendo nas mesmas condições que em
3.3.1 para a solução a examinar, mas sem adição de mosto concen-
trado rectificado.
3.3.4. Determinação
Seleccionar o comprimento de onda de 283,3 nm.Pulverizar na chama a metilisobutilcetona proveniente do ensaio
testemunha e regular a absorvência zero.
Utilizar os respectivos solventes de extracção e determinar as
absorvência correspondentes à solução a examinar e às soluções de
referência.
3.4.Expressão dos resultados
Expressar o teor de chumbo em mg/kg de mosto concentrado rectifi-
cado, com um decimal.
3.4.1. Cálculos
Traçar a curva que representa a variação das absorvências em função
da concentração de chumbo adicionado às soluções de referência,
correspondendo a concentração zero à solução a examinar.
Extrapolar a recta que une os pontos até que esta encontre o eixo das
concentrações do lado negativo. A distância deste ponto à origem
representa a concentração em chumbo da solução a examinar.
e) DOSEAMENTO QUÍMICO DO ETANOL
Este método de doseamento é utilizado para a determinação do título
alcoométrico de líquidos pouco alcoólicos tais como mostos, mostos
concentrados e mostos concentrados rectificados.
1. FUNDAMENTO
Destilação simples do líquido. Oxidação do etanol do destilado pelo
dicromato de potássio. Titulação do excesso de dicromato por uma
solução de ferro (II).
2. APARELHOS
2.1. Utilizar o aparelho de destilação descrito em 3.2 no capítulo «Título
alcoométrico».1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 182
▼B
3. REAGENTES
3.1.Solução de dicromato de potássio
Dissolver 33,600 g de dicromato de potássio (K2Cr2O7) numa quanti-
dade suficiente de água para perfazer 1 litro a 20º C.
Um mililitro desta solução oxida 7,8924 mg de álcool.
3.2.Solução de sulfato de ferro (II) e de amónio
Dissolver 135 g de sulfato de ferro (II) e de amónio, Fe SO4,
(NH4)2SO4,6H2O numa quantidade de água suficiente para perfazer
1 litro e juntar 20 ml de ácido sulfúrico concentrado (H2SO4), (ρ20= 1,84 g/ml). Esta solução corresponde sensivelmente ao seu meio-
-volume de solução de dicromato quando acaba de ser preparada. Em
seguida, oxida-se lentamente.
3.3.Solução de permanganato de potássio
Dissolver 1,088 g de permanganato de potássio, KMnO4, numa quan-
tidade suficiente de água para perfazer 1 litro.
3.4.Ácido sulfúrico diluído a 1/2 (v/v)
A 500 ml de água juntar progressivamente, e agitando-a, 500 ml de
ácido sulfúrico (H2SO4)(ρ20= 1,84 g/ml).
3.5.Reagente de ortofenantrolina ferroso
Dissolver 0,695 g de sulfato ferroso, FeSO4,7H2O, em 100 ml de
água, juntar 1,485 g de ortofenantrolina monohidratada C12H8N2,
H2O. Aquecer para favorecer a dissolução. Esta solução, de cor
vermelha viva, conserva-se muito bem.
4. MODO OPERATÓRIO4.1.Destilação
Introduzir no balão de destilação 100 g de mosto concentrado recti-
ficado e 100 ml de água. Recolher o destilado num balão graduado
de 100 ml e levar ao traço de referência com água.
4.2.Oxidação
Num frasco de 300 ml, com rolha esmerilada cujo gargalo seja
terminado por uma parte mais larga, o que permite lavar o gargalo
sem perdas, introduzir 20 ml de solução titulada de dicromato de
potássio (3.1), 20 ml de ácido sulfúrico diluído a 1/2 (v/v) (3.4) e
agitar. Adicionar 20 ml de destilado, rolhar o frasco, agitar e esperar
pelo menos 30 minutos, agitando de tempos a tempos (frasco «dose-
amento»).
Proceder à titulação da solução de sulfato de ferro (II) e de amónio
(3.2) em relação à solução de dicromato de potássio, introduzindo
num frasco idêntico as mesmas quantidades de reagentes, mas
substituindo os 20 ml de destilado por 20 ml de água destilada
(frasco «testemunha»).
4.3.Titulação
Juntar quatro gotas de reagente de ortofenantrolina (3.5) ao conteúdo
do frasco «doseamento». Titular o excesso de dicromato com a
solução de sulfato de ferro (II) (3.2) e de amónio. Parar a adição da
solução ferrosa quando o meio passar do azul esverdeado para
castanho.
Para tornar a viragem mais exacta, voltar do castanho ao azul esver-
deado com a solução de permanganato de potássio (3.3). Subtrair um
décimo do volume utilizado desta solução do volume de solução de
sulfato de ferro (II) gasto, sendo n ′esta diferença.
Proceder do mesmo modo com o frasco «Testemunha», sendo n ′a
diferença.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 183
▼B
5. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
O etanol é expresso em gramas por quilo de açúcares totais com um
decimal.
5.1.Modo de cálculo
n′ml de solução ferrosa reduzem 20 ml de solução de dicromato que
oxidam 157,85 mg de etanol puro.
Um mililitro de solução de ferro (II) tem o mesmo poder redutor
que:
157;85
n0mg de etanol
n′− n ml de solução de ferro (II) têm o mesmo poder redutor que:
157;85/C1n0/C0n
n0mg de etanol
Etanol em g/kg de mosto concentrado rectificado:
7;892/C1n0/C0n
n0
Etanol em g/kg de açúcares totais:
789;2/C1n0/C0n
n0/C1P
sendo
P = teor p. 100 (m/m) de açúcares totais.
f) MESO-INOSITOL, SCILO-INOSITOL E SACAROSE
1. PRINCÍPIO
Cromatografia em fase gasosa de derivados silanisados.
2. REAGENTES
2.1. Padrão interno: xilitol (solução aquosa com cerca de 10 g/l adicio-
nada de uma pitada de azida sódica).
2.2. Bistrimetilsililtrifluoroacetamida — BST FA—( C8H18F3NOSi2).
2.3. Trimetilclorosilano (C3H9ClSi).
2.4. Piridina p.a. (C5H5N).
2.5. Meso-inositol (C6H12O6).
3. APARELHAGEM
3.1. Cromatógrafo de fase gasosa equipado com:3.2. Coluna capilar, por exemplo, de sílica fundida, OV 1 (0,15 µ —
espessura do filme, 25 m de comprimento e 0,3 mm de diâmetro
interno).
Condições operatórias: gás vector: hidrogénio e hélio
— fluxo do gás vector: cerca de 2 ml/min,
— temperatura do injector e do detector: 300º C,
— programação da temperatura: 1 minuto a 160º C, 4º C/minuto até
260º C, isotérmica a 260º C durante 15 minutos,
— razão de split:cerca de 1 para 20.
3.3. Integrador.
3.4. Seringa micrométrica de 10 µl.3.5. Micropipetas de 50, 100 e 200 µl.
3.6. Frasco de 2 ml com rolha de teflon.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 184
▼B
3.7. Estufa.
4. MODO OPERATÓRIO
A cerca de 5 g de MCR, pesados com exactidão num matraz de
50 ml, junta-se 1 ml de solução-padrão de xilitol (2.1) e perfaz-se o
volume com água. Depois de se ter homogeneizado a amostra,
colhem-se 100 µl de solução que se colocam no frasco (3.6) e que
se submetem a evaporação sob uma ligeira corrente de ar, após
eventual adição de 100 µl de etanol absoluto para facilitar essa
evaporação.
Dissolve-se o resíduo em 100 µl de piridina (2.4), adicionam-se
100 µl de bistrimetilsililtrifluoroacetamida (2.2) e 10 µl de trimetil-
clorosilano (2.3), fecha-se o frasco com a rolha de teflone coloca-se
na estufa a 60º C durante uma hora.
Colhem-se 0,5 µl da fase límpida injectando-a com «agulha vazia e
quente» de acordo com o splitacima indicado.
5. CÁLCULO DOS FACTORES DE RESPOSTA
5.1. Prepara-se uma solução com:
60 g/l de glicose, 60 g/l de frutose, 1 g/l de meso-inositol e 1 g/l de
sacarose.
Pesam-se 5 g desta solução e procede-se como no ponto 4.
A partir do cromatograma obtido, calculam-se os factores de
resposta do meso-inositol e da sacarose em relação ao xilitol.
Para o xilo-inositol, não disponível no comércio, que tem um tempo
de retenção compreendido entre o último pico das formas anomé-
ricas da glicose e do meso-inositol (ver figura anexa), usa-se o
mesmo factor de resposta obtido para o meso-inositol.
6. EXPRESSÃO DOS RESULTADOS
6.1. O meso-inositol e o xilo-inositol expressam-se em mg/kg de
açúcares totais. A sacarose expressa-se em g/kg de mosto.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 185
▼B
Figura — Cromatograma em fase gasosa de meso-inositol, de scilo-inositol e de
sacarose.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 186
▼M4
43.DETERMINAÇÃO DA RELAÇÃO ISOTÓPICA18O/16O DA ÁGUA
DOS VINHOS
I. DESCRIÇÃO DO MÉTODO
1.Objectivo
O objectivo do presente método é a determinação da relação isotó-
pica18O/16O de águas de diferentes origens. A relação isotópica
18O/16O pode ser expressa na forma de um desvio δ(em permilagem)
relativamente ao valor da relação isotópica da refererência interna-
cional V.SMOW:
δiè0½/C138 ¼Ri
RSMOW/C01/C20/C21
/C21000
2.Princípio
Determina-se a relação isotópica18O/16O por espectrometria de
massa das relações isotópicas (EMRI) a partir das correntes iónicas
m/z 46 (12C16O18O) e m/z 44 (12C16O2) produzidas pelo dióxido de
carbono obtido após permuta com a água do vinho de acordo com
a reacção:
C16O2+H218O↔C16O18O+H216O
É utilizado na análise o dióxido de carbono da fase gasosa.
3.Reagentes
— Dióxido de carbono pró-análise;
— SMOW ( Standard Mean Ocean Water );
— GISP (Greenland Icee Sheet Precipitation );
— SLAP ( Standard Light Artic Precipitation );
— Água de referência do laboratório, cuidadosamente aferida pelas
amostras de referência da Agência Internacional da Energia
Atómica (AIEA) de Viena.
4.Equipamento de laboratório
— Espectrómetro de massa de relações isotópicas com uma repeti-
bilidade interna de 0,05 ‰.
— Colector triplo para registo simultâneo dos iões m/z 44, 45 e 46
ou, na falta deste, um colector duplo para a determinação dos
iões m/z 44 e 46.
— Sistema termostático (± 0,5 ºC) para estabelecimento de um
equilíbrio entre o CO2e a água do vinho.
— Bomba de vácuo capaz de atingir uma pressão interna de 0,13 Pa.— Recipientes para as amostras com 15 ml de capacidade e um
tubo capilar anexo com aproximadamente 0,015 mm de diâmetro
interno.
— Pipeta Eppendorf com ponta de plástico descartável.
5.Determinações experimentais
5.1. Método manual
Técnica do método de estabelecimento do equilíbrio
Introdução da amostra
— Adapta-se uma ponta a uma pipeta Eppendorf com um volume
fixo de 1,5 ml e pipeta-se o líquido a analiser para um balão.
Unta-se o gargalo do balão com gordura de silicone e adapta-se
o balão à válvula, verificando se esta se encontra bem fechada.
— Repete-se a operação para cada balão de bateria de trabalho e
introduz-se água de referência do laboratório num dos balões.
Desgasificação das baterias
Arrefecem-se as duas baterias com azoto líquido e, abrindo as
válvulas, purga-se em seguida todo o sistema até 0,1 mm de Hg.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 187
▼M4
Fecham-se as válvulas e deixa-se aquecer o conjunto. Repete-se o
ciclo de desgasificação até já não haver variação da pressão.
Estabelecimento de um equilíbrio entre a água e o CO2
Arrefece-se a bateria de trabalho a − 70 ºC (mistura de azoto líquido
e álcool) para congelar a água e coloca-se o conjunto sobvácuo.Uma vez estabilizado o vácuo, isola-se a bateria por meio da válvula
correspondente e purga-se o sistema de introdução do CO
2. Introduz-
-se então CO2gasoso na bateria de trabalho, isola-se esta do resto do
sistema e coloca-se a bateria num banho termostático a 25 ºC
(± 0,5 ºC) durante 12 h (uma noite). Para optimizar o tempo
necessário ao estabelecimento de um equilíbrio, é aconselhável
preparar as amostras no final do dia e deixar que o equilíbrio se esta-
beleça durante a noite.
Transferência do CO2permutado para as células de
medição
Adapta-se à linha de vácuo, junto da bateria de trabalho, um porta-
-amostras com um número de células de medição igual ao número de
balões com CO2, permutado. Purgam-se cuidadosamente as células
vazias e transfere-se o gás permutado contido em cada balão para a
célula de medição respectiva, arrefecida com azoto líquido. Em
seguida, deixam-se aquecer as células de medição à temperatura
ambiente.
5.2. Utilização de aparelhagem de permuta automática
Para estabelecer o equilíbrio, introduzem-se 2 ml de vinho ou 2 ml
de água (água de referência de trabalho de laboratório) nos reci-
pientes das amostras e arrefecem-se estes a − 18 ºC. Adaptam-se os
porta-amostras com os produtos congelados ao sistema de estabeleci-
mento do equilíbrio e coloca-se este sob vácuo, posto o que se
introduz dióxido de carbono à pressão de 800 hPa.
Estabelece-se o equilíbrio à temperatura de 22 ºC±0,5 ºC, após um
mínimo de 5 h sobagitação moderada. Uma vez que o tempo
necessário para se estabelecer um equilíbrio depende da geometria
do recipiente, deve determinar-se previamente qual o tempo óptimo
para o sistema utilizado.
Transfere-se, em seguida, o dióxido de carbono contido nos reci-
pientes, por meio de um tubo capilar, para a câmara de introdução
do espectrómetro de massa e efectuam-se as determinações segundo
a técnica correspondente ao tipo de aparelhagem em questão.
6.Cálculo e expressão dos resultados
A diferença relativa δ′da relação das intensidades dos iões m/z 46 e
44 (I46/I44) entre a amostra e a referência é expressa em permilagem
(‰) através da seguinte equação:
δ0amostra ¼I46=I44 ðÞ amostra
I46=I44 ðÞ referˆencia/C01/C20/C21
/C21000
O teor de18O da amostra em relação à referência V.SMOW na
escala V.SMOW-SLAP é dado pela seguinte equação:
δ018O ¼δ0amostra /C0δ0SMOW
δ0SMOW /C0δ0SLAP/C20/C21
/C255;5
O valor aceite para a água da SLAP é de − 55,5 ‰ relativamente à
V.SMOW.
Deve determinar-se a relação isotópica da referência após cada série
de 10 determinações em amostras desconhecidas.
7.Fiabilidade
— repetibilidade (r): 0,24 ‰;
— reprodutibilidade (R): 0,50 ‰.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 188
▼M7
44.DETERMINAÇÃO DO CARBAMATO DE ETILO NOS VINHOS:
MÉTODO DE DETECÇÃO SELECTIVA POR CROMATOGRAFIA
EM FASE GASOSA/ESPECTROMETRIADE MASSA
(Aplicável na determinação de concentrações de carbamato de etilo compreen-
didas entre 10 e 200 µg/1.)
(Atenção: Respeitar as normas de segurança para a manipulação de produtos
químicos (etanol, acetona e os produtos cancerígenos carbamato de etilo e diclo-
rometano). Descartar os solventes usados de forma compatível com as regras e a
regulamentação aplicáveis em matéria de protecção do ambiente).
A.Princípio do método
Adiciona-se carbamato de propilo a uma amostra como padrão interno, dilui-
-se a solução com água e introduz-se a solução resultante numa coluna de
extracção em fase sólida de 50 ml. Eluem-se o carbamato de etilo e o carba-
mato de propilo com diclorometano.
Concentra-se o eluato num evaporador rotativo sobvácuo. Na análise do
concentrado, utiliza-se a cromatografia em fase gasosa (CG) como método
separativo e a espectrometria de massa [fragmentometria em modo SIM
(selected ions monitoring , detecção selectiva de iões)] como método de
detecção.
B.Aparelhagem e condições cromatográficas (exemplo)
a) Cromatógrafo de fase gasosa/espectrómetro de massa (CG/BM) e, even-
tualmente, um amostrador automático de amostras e um sistema de
tratamento de dados ou equivalente.
Coluna capilar silicatada com 30 m (1) × 0,25 mm de diâmetro interno e
um filme do tipo Carbowax 20M com 0,25 µm de espessura.
Modo operatório: injector a 180 ºC; gás vector hélio (1 ml/minutos,
25 ºC); injecção com e sem divisão da amostra (splitless/split) .
Programa de temperaturas: 40 ºC durante 0,75 minutos; depois progra-
mação de 10 ºC/minutos até aos 60 ºC; a seguir 3 ºC/minutos até aos150 ºC (
2), elevar a temperatura até 220 ºC e mantê-la durante 4,25
minutos. O tempo de retenção específico do carbamato de etilo é de 23-
-27 minutos; o do carbamato de propilo de 27-31 minutos.
Interface do cromatógrafo de fase gasosa e do espectrómetro de massa:
canal de transferência a 220 ºC. Os parâmetros do espectrómetro de
massa são acertados manualmente com perfluorotributilamina e optimi-
zados para uma sensibilidade de massa mais baixa; modo de aquisição:
SIM; tempo de espera devido ao solvente e de começo da aquisição: 22
minutos; tempo de manutenção/ião: 100 ms.
b) Evaporador rotativo sob vácuo ou sistema de concentração do tipo
Kuderna Danish.
(Nota:Durante o processo, a taxa de recuperação do carbamato de etilo
da solução de teste, C(g), deve estar compreendida entre 90 % e 110 %.)
c) Balão — de 300 ml, fundo plano e gargalo único com esmerilado.
d) Tubo de concentração — 4 ml de capacidade, graduado, com junta de
película de teflon e tampa.
C.Reagentes
a) Acetona para cromatografia líquida (grau LC)
Nota:Antes da primeira utilização de um lote em CG/EM, comprovar a
ausência de resposta para os iões de m/z 62, 74 e 89.
b) Diclorometano
Nota:Antes da primeira utilização de um lote em CG/EM, proceder a
uma concentração de 200 vezes e comprovar a ausência de resposta
para os iões de m/z 62, 74 e 89.
c) Etanol anidro
d) Soluções-padrão de carbamato de etilo
1. Solução-mãe 1,00 mg/ml: pesar 100 mg de carbamato de etilo (pureza
≥99 %) para um balão aferido de 100 ml e diluir com acetona.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 189
(1) No caso de alguns vinhos particularmente ricos, pode ser aconselhável utilizar uma
coluna capilar com 50 m de comprimento.
(2) No caso de alguns vinhos particularmente ricos, pode ser aconselhável programar a
variação de temperatura para 2 ºC/minutos.
▼M7
2. Solução-padrão de trabalho 10,0 µg/ml: transferir 1 ml da solução-mãe
de carbamato de etilo para um balão aferido de 100 ml e diluir com
acetona até ao traço de calibração.
e) Soluções padrão de carbamato de propilo
1. Solução-mãe 1,00 mg/ml: pesar 100 mg de carbamato de propilo (grau
de reagente) para um balão aferido de 100 ml e diluir com acetona até
ao traço de calibração.
2. Solução-padrão de trabalho 10,0 µg/ml: transferir 1 ml da solução-mãe
de carbamato de propilo para um balão aferido de 100 ml e diluir com
acetona até ao traço de calibração.
3. Solução de padrão interno de carbamato de propilo 400 ng/ml: trans-
ferir 4 ml da solução de trabalho de carbamato de propilo para um
balão aferido de 100 ml e diluir com água até ao traço de calibração.
f) Soluções-padrão de calibração de carbamato de etilo e de carbamato de
propilo
Diluir as soluções-padrão de trabalho de carbamato de etilo (d.2) e de
carbamato de propilo (e.2) com diclorometano de modo a obter:
1. (100 ng de carbamato de etilo e 400 ng de carbamato de propilo)/ml;
2. (200 ng de carbamato de etilo e 400 ng de carbamato de propilo)/ml;
3. (400 ng de carbamato de etilo e 400 ng de carbamato de propilo)/ml;4. (800 ng de carbamato de etilo e 400 ng de carbamato de propilo)/ml;
5. (1 600 ng de carbamato de etilo e 400 ng de carbamato de propilo)/ml.
g) Solução de teste de carbamato de etilo 100 ng/ml em etanol a 40%:
Transferir 1 ml da solução-padrão de trabalho de carbamato de etilo (d.2)
para um balão aferido de 100 ml e diluir com etanol a 40 % até ao traço
de calibração.
h) Coluna de extracção em fase sólida — material descartável, pré-emba-
lado com terra de diatomáceas, com 50 ml de capacidade.
Nota:Antes da primeira utilização de cada lote de colunas de extracção
nas análises, verificar a recuperação do carbamato de etilo e do carba-
mato de propilo e comprovar a ausência de resposta para os iões de m/z
62, 74 e 89. Preparar a solução de teste de carbamato de etilo 100 ng/ml
(g) e analisar 5,00 ml da mesma conforme descrito em D.a), E e F.
Considera-se satisfatória uma recuperação de carbamato de etilo de 90-
-110 ng/ml. Os produtos absorventes de granulometria irregular podem
gerar caudais muito baixos, o que afectará a recuperação do carbamato
de etilo e do carbamato de propilo. Se, depois de várias tentativas, não
forem obtidos 90-110 % da amostra de teste, mudar a coluna ou utilizar
uma curva de calibração da recuperação corrigida para quantificar o
carbamato de etilo. Para obter a curva de calibração corrigida, preparar
soluções-padrão conforme descrito em f), utilizando etanol a 40 % em
lugar de diclorometano.
Analisar 1 ml da solução-padrão de calibração conforme descrito em D,
EeF .
Traçar uma nova curva de calibração utilizando a relação carbamato de
etilo/carbamato de propilo dos padrões extraídos.
D.Preparação da amostra a analisar
Introduzir as quantidades a seguir indicadas do produto a analisar em dois
copos de 100 ml:
a) Vinhos com mais de 14 % vol. de álcool: 5,00 ml ± 0,01 ml.
b) Vinhos de teor alcoólico inferior ou igual a 14 % vol.: 20,00 ml ± 0,01 ml.
Em cada copo, adicionar 1 ml da solução de padrão interno de carbamato de
propilo, C.e.3, e a água necessária para obter um volume total de 40 ml (ou
40 g).
E.Extracção
Efectuar a extracção debaixo de um exaustor em funcionamento, com venti-
lação adequada.
Transferir a preparação produzida em D para a coluna de extracção.Lavar o copo com 10 ml de água e transferir as águas de lavagem para a
coluna.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 190
▼M7
Deixar que o líquido seja absorvido na coluna durante 4 minutos e eluir com
2 × 80 ml de diclorometano. Recolher o eluato num balão de fundo plano de
300 ml.
Evaporar o eluato até um volume de 2 a 3 ml no evaporador rotativo com
banho de água a 30 ºC. ( Nota:Não deixar evaporar até à secura.)
Com uma pipeta de Pasteur, transferir o resíduo concentrado para um tubo
graduado de 4 ml.
Lavar o balão com 1 ml de diclorometano e transferir o líquido de lavagem
para o tubo. Concentrar o líquido obtido até ao volume de 1 ml sob ligeira
corrente de azoto.
Se for caso disso, transferir o concentrado para um dos recipientes do
injector automático de amostras para a análise por cromatografia em fase
gasosa/espectrometria de massa.
F.Análise por cromatografia em fase gasosa/espectrometria de massa
(sistema CG/EM)
a) Curva de calibração
Injectar 1 µl de cada solução-padrão de calibração, C.f), no sistema CG/
/EM. Traçar o gráfico respectivo, inscrevendo em ordenadas a razão das
áreas CE/CP obtidas para o ião m/z 62 e em abcissas a concentração de
carbamato de etilo em ng/ml (isto é, 100, 200, 400, 800 e 1 600 ng/ml).
b) Quantificação do carbamato de etilo
Injectar 1 µl do extracto concentrado obtido em E no sistema CG/EM e
calcular a razão das áreas CE/CP para o ião m/z 62. Determinar a
concentração (em ng/ml) de carbamato de etilo no extracto utilizando a
curva de calibração obtida com o padrão interno. Calcular a concentração
(em ng/ml) de carbamato de etilo na solução de teste dividindo a quanti-
dade de carbamato de etilo (ng) no extracto pelo volume da solução de
teste (ml).
c) Verificação da pureza do carbamato de etilo
Verificar se as respostas para os iões de m/z 62, 74 e 89 coincidem com
o tempo de retenção do carbamato de etilo, pois trata-se das respostas
características dos fragmentos principais (M - C2H2)+e( M-C H3)+ed o
ião molecular (M), respectivamente. A presença de carbamato de etilo
fica confirmada se as proporções relativas destes iões não se afastarem
mais de 20 % das proporções relativas no padrão de carbamato de etilo.
Para obter uma resposta satisfatória para o ião de m/z 89, pode ser
necessário voltar a concentrar o extracto.
G.Teste interlaboratorial
O quadro reúne os resultados individuais obtidos para a amostra de treino e
para os dois tipos de vinho.
Tanto no caso do vinho de teor alcoólico superior a 14 % vol., como no caso
do vinho de teor alcoólico inferior ou igual a 14 % vol., a aplicação do teste
de Cochran eliminou apenas um par de resultados, de laboratórios diferentes.
A reprodutibilidade relativa tende a diminuir com o aumento da concen-
tração de carbamato de etilo.
Resultados obtidos com o método de determinação de carbamato de etilo (CE) em bebidas
alcoólicas por cromatografia em fase gasosa/espectrometria de massa
AmostraMédia do
carbamato
de etilo
determi-
nado
(ng/ml)Recupe-
ração do
carbamato
de etilo
adicionado
(%)SrSRRSDr(%)RSDR(%)
Vinho com mais de
14 % vol.40 1,59 4,77 4,01 12,02
80 89 3,32 7,00 4,14 8,74
162 90 8,20 11,11 5,05 6,84
Vinho com menos de
14 % vol.11 0,43 2,03 3,94 18,47
25 93 1,67 2,67 6,73 10,73
48 93 1,97 4,25 4,10 8,861990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 191
▼M8
45.DETERMINAÇÃO POR ESPECTROMETRIA DE MASSA ISOTÓ-
PICA DA RAZÃO ISOTÓPICA13C/12C DO ETANOL DO VINHO OU
DO ETANOL OBTIDO POR FERMENTAÇÃO DE MOSTOS DE
UVAS, DE MOSTOS DE UVAS CONCENTRADOS OU DE MOSTOS
DE UVAS CONCENTRADOSRECTIFICADOS
1. ÂMBITO DE APLICAÇÃO
O presente método permite determinar a razão isotópica13C/12C do etanol
do vinho e do etanol obtido por fermentação de produtos vitícolas (mosto
de uvas, mosto de uvas concentrado, mosto de uvas concentrado rectifi-
cado).
2. REFERÊNCIAS NORMATIVAS
ISO: 5725:1994 «Fidelidade dos métodos de ensaio —
Determinação da repetibilidade e da reprodutibi-
lidade de um método de ensaio normalizado por
recurso a ensaios interlaboratoriais.»
V-PDB: Vienna-Pee-Dee Belemnite (RPDB= 0,0112372).
Método 8 do anexo do presente regulamento: «Detecção do enriquecimento dos mostos de
uvas, mostos de uvas concentrados, mostos de
uvas concentrados rectificados e de vinhos por
aplicação da ressonância magnética nuclear do
deutério (RMN-FINE)»
3. TERMOS E DEFINIÇÕES
13C/12C: Razão isotópica do carbono (13Ce12C) numa determinada
amostra.
δ13C: Teor de carbono 13 (13C), expresso em permilagem (‰).
RMN-FINE: Fraccionamento Isotópico Natural Específico, estudado por
Ressonância Magnética Nuclear.
V-PDB: Vienna Pee Dee Belemnite. A PDB, referência primária
para a determinação das variações naturais dos teores
isotópicos de carbono 13, consiste num carbonato de
cálcio proveniente de um rostro de belemnite do Cretácico
da formação Pee-Dee da Carolina do Sul (Estados
Unidos). A sua razão isotópica13C/12Co uRPDBéRPDB= 0,0112372. A PDB encontra-se esgotada desde há muito,tendo, contudo, permanecido a referência primária para
exprimir as variações naturais dos teores isotópicos de
carbono 13 pela qual são calibrados os materiais de
referência disponíveis na Agência Internacional da Energia
Atómica (IAEA), em Viena (Áustria). Convencionalmente,
as determinações isotópicas da abundância natural decarbono 13 são expressas em relação à V-PDB.
m/z: Relação massa/carga.
4. PRINCÍPIO
A assimilação do dióxido de carbono pelas plantas durante a fotossíntese
realiza-se principalmente por duas vias metabólicas, designadamente o
metabolismo C
3(ciclo de Calvin) e o metabolismo C4(Hatch e Slack).
Estes dois mecanismos de fotossíntese apresentam um fraccionamento
isotópico diverso. Deste modo, os produtos provenientes de plantas C4,
tais como os açúcares e o álcool de fermentação, possuem teores de
carbono 13 superiores aos seus homólogos provenientes de plantas C3.A
maioria das plantas, nomeadamente a vinha e a beterraba, pertencem ao
grupo C3. A cana-de-açúcar e o milho pertencem ao grupo C4. A determi-
nação do teor de carbono 13 permite, pois, a detecção e a avaliação do
açúcar de origem C4(açúcar de cana ou isoglucose de milho) adicionado
aos produtos da vinha (mostos de uva, vinho, etc.). A confrontação das
informações de teor de carbono 13 com as informações obtidas por
RMN-FINE permitem também quantificar a adição de misturas de
açúcares ou álcoois provenientes de plantas C3eC4.
O teor de carbono 13 é determinado no dióxido de carbono resultante da
combustão completa da amostra. As abundâncias dos principais isotopó-
meros de massas 44 (12C16O2), 45 (13C16O2e12C17O16O) e 46 (12C16O18O),
decorrentes das diversas combinações possíveis dos isótopos18O,17O,
16O,13Ce12C, são determinadas a partir das correntes iónicas medidas em
três colectores diferentes de um espectrómetro de massa isotópica. As
contribuições dos isotopómeros13C17O16Oe12C17O2podem ser despre-1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 192
▼M8
zadas devido à sua fraca abundância. A corrente iónica correspondente a
m/z = 45 é corrigida de forma a tomar em conta a contribuição do
12C17O16O, calculada em função da intensidade da corrente medida para
m/z = 46 atendendo às abundâncias relativas de18Oe17O (correcção de
Craig). A comparação com uma referência calibrada pela referência inter-
nacional V-PDB permite o cálculo do teor de carbono 13 na escala
relativa δ13C.
5. REAGENTES
Os materiais e consumíveis dependem dos instrumentos (6) utilizados
pelo laboratório. Os sistemas geralmente utilizados baseiam-se num anali-
sador elementar, que pode ser equipado para a introdução de amostras
colocadas em cápsulas metálicas seladas ou para a injecção de amostras
líquidas através de um septo, por recurso a uma seringa.
Em função do tipo de instrumentos utilizados, podem utilizar-se os
seguintes materiais de referência, reagentes e consumíveis:
— materiais de referência:
— fornecidos pelo IAEA:
Denominação Material δ13CversusV-PDB (9)
— IAEA-CH-6 sacarose - 10,4 ‰
— IAEA-CH-7 polietileno - 31,8 ‰
— NBS22 óleo - 29,7 ‰
— USGS24 grafite - 16,1 ‰
— fornecidos pelo IMMR de Geel (B) (Instituto dos Materiais e Medidas
de Referência):
Denominação Material δ13CversusV-PDB (9)
— CRM/BCR 656 álcool de vinho - 26,93 ‰
— CRM/BCR 657 glucose - 10,75 ‰
— CRM/BCR 660 solução hidro-alcoólica
(TAV 12 %)- 26,72 ‰
— amostra-padrão de trabalho com uma relação13C/12C conhecida, cali-
brada por materiais de referência internacionais.
— a lista indicativa de consumíveis infraé estabelecida para sistemas de
fluxo contínuo:
— hélio de qualidade analítica (CAS 07440-59-7),
— oxigénio de qualidade analítica (CAS 07782-44-7),— dióxido de carbono de qualidade analítica, utilizado como gás de
referência secundário para o teor de carbono 13 (CAS 00124-38-
-9),
— reagente de oxidação para o forno do sistema de combustão —
por exemplo, óxido de cobre ( ΙΙ)para análise elementar (CAS
1317-38-0),
— exsicante destinado a eliminar a água produzida pela combustão
— por exemplo, anidrona para análise elementar (perclorato de
magnésio) (CAS 10034-81-8). (Não necessário no caso de apare-
lhos munidos de um sistema de eliminação crioscópica de água ou
de um capilar de permeabilidade selectiva).
6. APARELHOS E UTENSÍLIOS
6.1.Espectrómetro de massa de razão isotópica
Espectrómetro de massa de razão isotópica que permita determinar o teor
natural relativo de
13Cd oC O2gasoso com uma precisão interna de 0,05
‰ ou mais, expressa em valor relativo (9). A precisão interna é definida
como a diferença entre duas medições com a mesma amostra de CO2.O
espectrómetro de massa destinado à medição das razões isotópicas
encontra-se geralmente munido de um colector triplo com o objectivo de
medir em simultâneo as intensidades correspondentes a m/z = 44, 45 e
46. O espectrómetro de massa de razão isotópica deve ser também
munido de um sistema duplo de introdução da amostra, de forma a efec-1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 193
▼M8
tuar medições alternativas da amostra desconhecida e da amostra de
referência, ou utilizar um sistema integrado que efectue a combustão
quantitativa das amostras e separe o dióxido de carbono dos restantes
produtos de combustão antes da determinação no espectrómetro de massa.
6.2.Dispositivo de combustão
Dispositivo de combustão que permita a conversão quantitativa de etanol
em dióxido de carbono e a eliminação de todos os restantes produtos de
combustão, incluindo a água, sem qualquer fraccionamento isotópico. O
dispositivo pode consistir num sistema de fluxo contínuo integrado no
espectrómetro de massa (6.2.1) ou num sistema de combustão autónomo
(6.2.2). O dispositivo em causa deverá permitir obter uma precisão pelo
menos equivalente à indicada em (11).
6.2.1.Sistemas de fluxo contínuo
Estes sistemas são constituídos por um analisador elementar ou por um
cromatógrafo de gás munido de um sistema de combustão em linha.
No caso de sistemas equipados para a introdução das amostras contidas
em cápsulas metálicas, utiliza-se o seguinte material de laboratório:
— microsseringa ou micropipeta volumétrica, com extremidade
adequada,
— balança com aproximação mínima de 1 µg,
— encapsulador,
— cápsulas de estanho para amostras líquidas,
— cápsulas de estanho para amostras sólidas,
Nota:Para limitar os riscos de evaporação das amostras de etanol, é possível
colocar nas cápsulas um material absorvente (por exemplo, chromosorb
W 45-60 mesh ) desde que se verifique previamente, através de um ensaio
em branco, que o mesmo não contém uma quantidade significativa de
carbono que possa alterar as medições.
Em caso de utilização de um analisador elementar munido de um injector
para líquidos ou de um sistema de preparação por cromatografia-
-combustão, utiliza-se o seguinte material de laboratório:
— seringa para líquidos,
— recipientes com sistema de vedação estanque e septos inertes.
Os materiais de laboratório indicados nas listas supraconstituem exem-
plos e podem ser substituídos por outros materiais de desempenho
equivalente, em função do dispositivo de combustão e do espectrómetro
de massa utilizados pelo laboratório.
6.2.2.Sistemas autónomos de preparação
Neste caso, as amostras de dióxido de carbono resultantes da combustão
das amostras em estudo e da amostra de referência são recolhidos em
ampolas, que são posteriormente instaladas no sistema duplo de entrada
do espectrómetro para proceder à análise isotópica. Podem utilizar-se
diversos tipos de dispositivos de combustão descritos na literatura:
— sistema de combustão fechado com oxigénio gasoso em circulação,
— analisador elementar com fluxo de hélio e de oxigénio,
— ampola de vidro selada, com enchimento de óxido de cobre ( ΙΙ)utili-
zado como agente de oxidação.
7. PREPARAÇÃO DAS AMOSTRAS PARA ANÁLISE
O etanol deve ser extraído do vinho antes da determinação isotópica. A
extracção é efectuada através da destilação do vinho descrita no ponto
3.1 do método n.
o8 (RMN-FINE).
No caso do mosto de uvas, do mosto de uvas concentrado e do mosto de
uvas concentrado rectificado, os açúcares deverão primeiro ser fermen-
tados, com formação de etanol, como descrito no ponto 3.2 do método
n.o8.
8. PROCEDIMENTO
Todas as etapas preparatórias devem ser efectuadas sem perdas significa-
tivas de etanol por evaporação, facto que alteraria a composição isotópica
da amostra.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 194
▼M8
A descrição que se segue faz referência aos procedimentos geralmente
utilizados para a combustão de amostras de etanol por intermédio de
sistemas automatizados de combustão existentes nos circuitos comerciais.
Podem utilizar-se outros métodos adequados de preparação do dióxido de
carbono para análise isotópica que assegurem a conversão quantitativa da
amostra de etanol em dióxido de carbono sem perdas por evaporação.
Procedimento experimental baseado na utilização de um analisador
elementar:
a) Colocação das amostras nas cápsulas:
— utilizar cápsulas, um encapsulador e uma placa de preparação
limpos,
— pegar numa cápsula de dimensão adequada, com o encapsulador,— introduzir na cápsula o volume necessário de líquido, por recurso à
micropipeta,
—nota:
são necessários 3,84 mg de etanol absoluto ou 4,17 mg de desti-
lado com um título alcoólico de 92 % (m/m) para obter 2 mg de
carbono. A quantidade adequada de destilado deve ser calculada
da mesma forma, atendendo à quantidade de carbono necessária
em função da sensibilidade do espectrómetro de massa,
— vedar as cápsulas por intermédio dos encapsuladores,— cada cápsula deverá ser vedada de forma totalmente estanque.
Caso contrário, deverá ser rejeitada, preparando-se uma nova
cápsula,
— preparar duas cápsulas para cada amostra,— colocar as cápsulas numa posição adequada, na placa do transpor-
tador automático de amostras do analisador elementar. Cada
cápsula deve ser cuidadosamente identificada por um número de
ordem,
— colocar sistematicamente no início e no final da série de amostras
cápsulas com as referências de trabalho,
— inserir regularmente amostras de controlo na série de amostras;
b) Controlo e ajustamento do analisador elementar e do espectrómetro de
massa:
— ajustar a temperatura dos fornos do analisador elementar e os
caudais de hélio e oxigénio, tendo em vista uma combustão óptima
da amostra.
— verificar a ausência de fugas no sistema de análise elementar e de
espectrometria de massa (por exemplo, regulando a corrente iónica
para m/z = 28, correspondente a N
2.).
— ajustar o espectrómetro de massa para determinar as intensidades
das correntes iónicas correspondentes a m/z = 44, 45 e 46.
— com o auxílio de amostras de controlo conhecidas, verificar o
sistema antes de iniciar as medições com as amostras.
c) Realização de uma série de medições
As amostras colocadas no transportador automático de amostras do
analisador elementar (ou do cromatógrafo) são introduzidas sucessiva-
mente. O dióxido de carbono produzido pela combustão de cada
amostra é eluído para o espectrómetro de massa, que mede as
correntes iónicas. O computador acoplado aos instrumentos regista as
intensidades das correntes iónicas e calcula os valores de δrespei-
tantes a cada amostra (9).
9. CÁLCULOS
O objectivo do método consiste em determinar a razão isotópica
13C/12Cdo etanol extraído do vinho ou de produtos da fermentação de
uvas. A razão isotópica13C/12Cpode ser expressa pelo seu desvio relativa-
mente a uma referência de trabalho. O desvio isotópico do carbono 13
(δ13C) é calculado, numa escala δ/1000, por comparação dos resultados
obtidos para a amostra em estudo com os resultados obtidos para areferência de trabalho, previamente calibrada pela referência primária
internacional (V-PDB). Os valores de δ
13C são expressos em relação à
referência de trabalho de acordo com a fórmula:
δ13Cech/ref‰ = 1 000 × (Rech-Rref)/Rref
em que RecheRrefsão, respectivamente, as razões isotópicas13C/12Cd a
amostra e do dióxido de carbono utilizado como gás de referência.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 195
▼M8
Os valores de δ13C são expressos em relação à V-PDB de acordo com a
fórmula:
δ13Cech/V-PDB‰= δ13Cech/ref+δ13Cref/V-PDB+(δ13Cech/ref×δ13Cref/V-PDB)/1 000,
em que δ13Cref/V-PDBé o desvio isotópico previamente determinado para a
referência de trabalho em relação à V-PDB.
Durante a medição em linha, poderão observar-se pequenos desvios atri-
buíveis à variação das condições instrumentais. Neste caso, os valores de
δ13C das amostras devem ser corrigidos em função da diferença entre o
valor de δ13C medido para a amostra-padrão de trabalho e o seu valor
real, anteriormente calibrado pela V-PDB por comparação com um dos
materiais de referência internacional.Pode presumir-se que, entre duasmedições com a amostra-padrão de trabalho, o desvio e, consequente-
mente, a correcção a aplicar aos resultados obtidos para as amostras, são
lineares. Deve efectuar-se uma medição com a amostra-padrão de
trabalho no início e no final de cada série de amostras. Poderá assim
calcular-se, por interpolação linear, a correcção aplicável a cada amostra.
10. CONTROLO E GARANTIA DA QUALIDADE
Verificar que o valor de
13C para a referência de trabalho não excede em
mais de 0,5 ‰ o valor admitido. No caso contrário, deverá verificar-se a
regulação do espectrómetro e, eventualmente, reajustá-la.
Verificar, para cada amostra, que a diferença de resultado entre duas
cápsulas medidas sucessivamente é inferior a 0,3 ‰. Nestas condições,
o resultado final de uma determinada amostra é o valor médio das duas
cápsulas. Se o desvio for superior a 0,3‰, deverá repetir-se a medição.
A verificação da realização correcta da medição poderá basear-se na
intensidade da corrente iónica para m/z = 44, que é proporcional à quan-
tidade de carbono injectado no analisador elementar. Nas condições-
-padrão, a intensidade da corrente iónica deve ser praticamente constante
para todas as amostras em estudo. A observação de desvios significativospoderá decorrer da evaporação de etanol (por exemplo, uma cápsula mal
vedada) ou de uma instabilidade do analisador elementar ou do espectró-
metro de massa.
11. CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO DO MÉTODO (PRECISÃO)
Foi realizada um primeiro estudo de colaboração interlaboratorial (11.1)
com destilados de álcoois de origem vínica e de álcoois de cana e beter-
raba, bem como de diversas misturas das três origens. Uma vez que o
estudo em causa não abrangeu a etapa de destilação, foram também utili-
zadas informações complementares provenientes de outros ensaios
interlaboratoriais realizados com vinhos (11.2), nomeadamente testes
interlaboratoriais de aptidão (11.3) para as medições isotópicas. Os resul-
tados demonstram que os diversos sistemas de destilação utilizados em
condições satisfatórias, nomeadamente os sistemas aplicáveis às medições
RMN-FINE, não determinam uma variabilidade significativa para as
determinações de δ
13C do etanol do vinho. Os parâmetros de fiabilidade
observados para os vinhos são praticamente idênticos aos obtidos no
estudo de colaboração interlaboratorial (11.1) com destilados.
11.1.Estudo de colaboração interlaboratorial com destilados
Ano do ensaio interlaboratorial: 1996
Número de laboratórios: 20
Número de amostras: 6 amostras em duplicado em teste cego
Analito: δ13C do etanol
Código das amostras Álcool de origem vínica Álcool de beterraba Álcool de cana
A&G 8 0% 1 0% 1 0%
B & C 90 % 10 % 0 %
D & F 0 % 100 % 0 %
E & I 90 % 0 % 10 %H & K 100 % 0 % 0 %1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 196
▼M8
Código das amostras Álcool de origem vínica Álcool de beterraba Álcool de cana
J & L 0 % 0 % 100 %
Amostras A/G B/C D/F E/I H/K J/L
Número de laborató-
rios considerados,
após a eliminação dos
resultados anómalos19 18 17 19 19 19
Número de resultados
aceites38 36 34 38 38 38
Valor médio ( δ13C) ‰ - 25,32 - 26,75 - 27,79 - 25,26 - 26,63 - 12,54
Sr20,0064 0,0077 0,0031 0,0127 0,0069 0,0041
Desvio-padrão da
repetibilidade (Sr)‰0,08 0,09 0,06 0,11 0,08 0,06
Limite de repetibili-
dade r (2,8 × Sr)‰0,22 0,25 0,16 0,32 0,23 0,18
SR20,0389 0,0309 0,0382 0,0459 0,0316 0,0584
Desvio-padrão da
reprodutibilidade
(SR)‰0,20 0,18 0,20 0,21 0,18 0,24
Limite de reprodutibi-
lidade R (2,8 × SR)‰0,55 0,49 0,55 0,60 0,50 0,68
11.2.Estudo interlaboratorial de dois vinhos e um álcool
Ano do ensaio interlaboratorial: 1996
Número de laboratórios: 14 no respeitante à destilação de vinhos,
dos quais sete também para a determi-
nação do δ13C do etanol dos vinhos,
oito no respeitante à medição de δ13C
da amostra de álcool.
Número de amostras: três (vinho branco de TAV 9,3 %.;
vinho branco de TAV 9,6 %; álcool de
título alcoométrico 93 % m/m).
Analito: δ13C do etanol
Amostras Vinho tinto Vinho branco Álcool
Número de laborató-
rios778
Número de resultados
aceites778
Valor médio ( δ13C) ‰ - 26,20 - 26,20 - 25,08
Variância da reprodu-
tibilidade SR20,0525 0,0740 0,0962
Desvio-padrão da
reprodutibilidade
(SR)‰0,23 0,27 0,311990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 197
▼M8
Amostras Vinho tinto Vinho branco Álcool
Limite de reprodutibi-
lidade R (2,8× SR)‰0,64 0,76 0,87
Os laboratórios participantes utilizaram diversos sistemas de destilação.
As determinações isotópicas δ13C realizadas num único laboratório ao
conjunto dos destilados enviados pelos participantes não mostram nem
valores anómalos nem valores significativamente distintos dos valores
médios. A variância dos resultados (S2= 0,0059) é comparável às variân-
cias de repetibilidade Sr2do estudo de colaboração interlaboratorial com
destilados (11.1).
11.3.Resultados dos testes interlaboratoriais de aptidão para as determi-
nações isotópicas
Desde Dezembro de 1994, organizam-se regularmente estudos internacio-
nais exercícios de aptidão para as determinações isotópicas em vinhos e
álcoois (destilados com TAV = 96 %.). Os resultados permitem aos labo-
ratórios participantes o controlo da qualidade das suas análises. A
exploração estatística dos resultados permite avaliar a variabilidade das
determinações em condições de reprodutibilidade e, consequentemente,
estimar os parâmetros de variância e de limite de reprodutibilidade. Os
resultados obtidos para as determinações de δ13C do etanol dos vinhos e
destilados são resumidos no quadro seguinte:
DataVinhos Destilados
NSRS2
RRNSRS2
RR
Dez. 1994 6 0,210 0,044 0,59 6 0,151 0,023 0,42
Junho 1995 8 0,133 0,018 0,37 8 0,147 0,021 0,41
Dez. 1995 7 0,075 0,006 0,21 8 0,115 0,013 0,32
Março 1996 9 0,249 0,062 0,70 11 0,278 0,077 0,78
Junho 1996 8 0,127 0,016 0,36 8 0,189 0,036 0,53
Set. 1996 10 0,147 0,022 0,41 11 0,224 0,050 0,63
Dez. 1996 10 0,330 0,109 0,92 9 0,057 0,003 0,16Março 1997 10 0,069 0,005 0,19 8 0,059 0,003 0,16
Junho 1997 11 0,280 0,079 0,78 11 0,175 0,031 0,49
Set. 1997 12 0,237 0,056 0,66 11 0,203 0,041 0,57
Dez. 1997 11 0,127 0,016 0,36 12 0,156 0,024 0,44
Março 1998 12 0,285 0,081 0,80 13 0,245 0,060 0,69
Junho 1998 12 0,182 0,033 0,51 12 0,263 0,069 0,74
Set. 1998 11 0,264 0,070 0,74 12 0,327 0,107 0,91
Média ponderada 0,215 0,046 0,60 0,209 0,044 0,59
N: número de laboratórios participantes.
11.4.Limites de repetibilidade e de reprodutibilidade
Os dados dos diversos estudos interlaboratoriais apresentados nos quadros
precedentes permitem estabelecer para o presente método, incluindo a
etapa de destilação, os seguintes limites de repetibilidade e de reproduti-
bilidade:
Limite de repetibilidade r: 0,24
Limite de reprodutibilidade R: 0,6.1990R2676 — PT — 18.03.2003 — 007.001 — 198