1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 1
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►BDIRECTIVADO CONSELHO
de 22 de Novembro de 1973
relativa à aproximação daslegislações dosEstados-membrosrespeitantes aos métodosde controlo
da biodegradabilidade dos agentes de superfície aniónicos
(73/405/CEE)
(JO L 347 de 17.12.1973, p. 53)
Alterada por:
Jornal Oficial
n.opágina data
►M1Directiva do Conselho de 31 de março de 1982 (82/243/CEE) L 109 18 22.4.1982
▼B
DIRECTIVADO CONSELHO
de 22 de Novembro de 1973
relativa à aproximação das legislações dos Estados-membros
respeitantes aos métodos de controlo da biodegradabilidade dos
agentes de superfície aniónicos
(73/405/CEE)
O CONSELHO DAS COMUNIDADES EUROPEIAS,
Tendo em conta o Tratado que institui a Comunidade Económica Euro-
peia e, nomeadamente, o seu artigo 100o,
Tendo em conta a Directiva do Conselho, de 22 de Novembro de 1973,
respeitante à aproximação das legislações dos Estados relativas aos
detergentes(1) e, nomeadamente, o seu artigo 4o,
Tendo em conta a proposta da Comissão,Tendo em conta o parecer do Parlamento Europeu(
2),
Tendo em conta o parecer do Comité Económico e Social(3),
Considerando que, a fim de permitir aos Estados-membros medir a taxa
de biodegradabilidade dos agentes de superfície aniónicos, é oportunoempregar métodos de controlo já utilizados para esse efeito em algunsEstados-membros; que, em contrapartida, em caso de contestação, énecessário que o controlo da biodegradabilidade seja efectuado de
acordo com um método de referência comum;
Considerando que é conveniente, tal como prevê o artigo 4
oda Direc-
tiva de 22 de Novembro de 1973, fixar tolerâncias adequadas para amedição da biodegradabilidade a fim de tomarem precauções contraas incertezas dos métodos de controlo que podem conduzir a decisõesde rejeição, com consequências económicas importantes; que umadecisão de rejeição só deve ser tomada se uma análise indicar uma
taxa de biodegradabilidade inferior a 80%,
ADOPTOU A PRESENTE DIRECTIVA:
Artigo 1o
A presente directiva diz respeito aos métodos de controlo da biodegra-dabilidade dos agentes de superfície aniónicos ►
M1presentes nos
detergentes tais como os referidos no artigo 1oda Directiva 73/404/
/CEE◄.
Artigo 2o
Em conformidade com as prescrições do artigo 4oda Directiva 73/404/
/CEE relativa aos detergentes, os Estados-membros proibirão acolocação no mercado e a utilização no seu território de um detergentese a medição da taxa de biodegradabilidade dos agentes de superfícieaniónicos contidos neste detergente apresentar um resultado inferior a
80%, devendo esta medição ser efectuada de acordo com um dos
métodos seguintes:
— método OCDE, publicado no relatório técnico da Organização de
Cooperação e de Desenvolvimento Económicos de 11 de Junho de1976 «Proposta de método para a determinação da biodegradabili-dade dos agentes de superfície os (SIC! dos) detergentes sintéticos»,
— método em vigor na Alemanha, estabelecido pela «Verordnung über
die Abbaubarkeit anionischer und nichtionischer grenzflächenak-tiver Stoffe in Wasch- und Reinigungsmitteln» de 30 de Janeiro de1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 2
(1)J O no347 de 12. 12. 1973, p. 51.
(2)J O noC 10 de 5. 2. 1972, p. 29.
(3)J O noC 89 de 23. 8. 1972, p. 13.▼M1
▼M1
1977, publicado no Bundesgesetzblatt 1977, Parte I, página 244, na
versão do regulamento que altera este regulamento, de 18 de Junhode 1980, publicado no Bundesgesetzblatt 1980, Parte I, página 706,
— método em vigor em França, aprovado por despacho de 28 de
Dezembro de 1977 publicado no Journal Officiel (SIC! officiel) de
la République Française (SIC! française) de 18 de Janeiro de 1978,
páginas 514 e 515, e a norma experimental T 73-260 (Junho de1981), editada pela «Association Française de Normalization (SIC!Normalisation)»,
— método em vigor no Reino Unido, dito «Porous Pot Test» e descrito
no relatório técnico n
o70 (1978) do «Water Research Center».
Artigo 3o
No âmbito do procedimento definido no no2 do artigo 5oda Directiva
73/404/CEE, o parecer do laboratório será dado, no que respeita aosagentes de superfície aniónicos, com base no método de referência
(teste de confirmação) descrito no anexo da presente directiva.
Artigo 3
oA
As alterações necessárias para adaptar o anexo ao progresso técnico
serão adoptadas em conformidade com o procedimento do artigo 7oB
da Directiva 73/404/CEE.
Artigo 4o
1. Os Estados-membros porão em vigor as disposições legislativas
regulamentares e administrativas necessárias para darem cumprimentoà presente directiva no prazo de dezoito meses a contar da sua notifi-cação e desse facto informarão imediatamente a Comissão.
2. Os Estados-membros devem assegurar que seja comunicado à
Comissão o texto das principais disposições de direito nacional que
adoptarem no domínio regulado pela presente directiva.
Artigo 5
o
Os Estados-membros são destinatários da presente directiva.1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 3
▼B
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ANEXO
DETERMINAÇÃO DA BIODEGRADABILIDADE DOS AGENTES DE
SUPERFÍCIEANIÓNICOS
Método de referência (Teste de confirmação)
CAPÍTULO I
1.1.Definição
Nos termos da presente directiva, os agentes de superfície aniónicos são
os agentes que, após a passagem nos permutadores de iões catiónicos e
aniónicos, são separados por eluição fraccionada e determinados sob
forma de substância activa com o azul de metileno (MBAS) segundo o
método de análise descrito no Capítulo 3 (SIC! Capítulo III).
1.2Equipamento necessário.
O método de medição tem por base o emprego de uma instalação de
lama activada, esquematizada na figura 1 e representada de modo mais
pormenorizado na figura 2.
O equipamento compõe-se de um recipiente A, destinado a armanezar as
águas residuais sintéticas, de uma bomba doseadora B, de uma cuba de
arejamento C, de um Decantador D, de uma bomba de ar comprimido E,
para reciclar a lama activada, e de um recipiente F destinado a recolher
o efluente tratado.
Os recipientes A e F devem ser em vidro ou em matéria plástica
adequada e levar no mínimo 24 l. A bomba B deve assegurar uma
alimentação regular da cuba de arejamento em efluente sintético no
decurso do funcionamento normal, esta cuba deve conter 3 l de mistura.
Um vidro poroso G destinado à ventilação é suspenso na cuba C no
cimo do cone interior desta cuba. A quantidade de ar insuflado pelo
dispositivo de ventilação deve ser controlada por um rotâmetro H.
1.3.Efluente sintéctico
Para efectuar este ensaio, utiliza-se um efluente sintético.Dissolver por litro de água da torneira:— 160 mg de peptona,
— 110 mg de extracto de carne,
— 30 mg de ureia (CO (NH
2)2),
— 7 mg de cloreto de sódio (NaCl),— 4 mg de cloreto de cálcio (CaCl
2.2H2O),
— 2 mg de sulfato de magnésio (MgSO4.7H2O),
— 28 mg de monohidrogenofosfato de potássio (K2HPO4),
— 20 +− 2 mg de MBAS.
Extrai-se a MBAS do produto que é objecto do ensaio pelo método indi-
cado no Capítulo 2 (SIC! Capítulo II). O efluente sintético é preparado
todos os dias.
1.4.Preparação das amostras
1.4.1. Os agentes de superfície não formulados podem ser experimentados tal
como se apresentam. O teor em MBAS deve ser determinado para
preparar o efluente sintético (1.3).
1.4.2 No caso de formulações, procede-se à determinação do teor em MBAS e
em sabão. Procede-se a uma extracção alcoólica e a uma separação da
MBAS (ver capítulo 2 [SIC! ver Capítulo II]). É preciso conhecer o
teor em MBAS do extracto para preparar o efluente sintético.
1.5.Funcionamento da instalação
No início enche-se a cuba de arejamento C e o Decantador D com eflu-
ente sintético. O decantador D deve ser fixado a uma altura tal que a
cuba de arejamento C contenha 3 l.
Introduz-se 3 ml de um efluente secundário de boa qualidade, recente-
mente colhido numa instalação de tratamento de águas residuais,
essencialmente domésticas. O efluente deve ser mantido em condições
aeróbias durante o período compreendido entre a preparação das amos-
tras e a utilização. Em seguida põe-se em marcha o dispositivo de
ventilação, a bomba de ar comprimido E e a bomba doseadora B. O1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 4
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efluente sintético deve passar na cuba de arejamento C ao débito de 1 l
por hora o que dá um tempo médio de retenção de 3 horas.
É preciso regular o ritmo de arejamento de modo que o conteúdo da
cuba C fique constantemente em suspensão e que o teor em oxigénio
dissolvido seja um mínimo de 2 mg/l. A formação de espuma deve ser
impedida por meios adequados. Contudo não se utilizará agentes anties-
puma que tenham uma acção inibidora sobre a lama activada ou que
contenham MBAS. A bomba E deve ser regulada de tal modo que haja
na cuba de arejamento C uma reciclagem contínua e regular de lama
activada saída do decantador. A lama que se acumulou no cimo da
cuba de arejamento C, no fundo do decantador D ou no circuito de
circulação, deve ser reposta em circulação pelo menos uma vez por
meio de escova ou por qualquer outro meio adequado. Quando a lama
não decanta, pode favorecer-se essa decantação por adição, repetida se
for necessário, de fracção de 2 ml de uma solução a 5% de cloreto
férrico.
O efluente saído do decantador D é recolhido na cuba F durante 24
horas; no fim deste período retira-se uma amostra depois de se ter
procedido á homogeneização da mistura. A cuba F deve então ser cuida-
dosamente limpa.
1.6.Controlo do dispositivo de medida
O teor em MBAS (em mg/l) do efluente sintético é determinado imedia-
tamente antes da utilização.
O teor em MBAS (em mg/l) da água residual recolhida durante 24 horas
na cuba F deve ser determinada pelo mesmo método de análise, imedia-
tamente após a colheita, senão as amostras serão conservadas, de
preferência por congelação. A concentração deve ser determinada a
0,1 mg MBAS/l aproximadamente.
Para verificar o bom andamento da operação, mede-se pelo menos duas
vezes por semana a demanda química em oxigénio (DQO) ou o carbono
orgânico dissolvido (COD) do efluente filtrado sobre fibra de vidro,
acumulado na cuba F, e do efluente sintético filtrado que é armazenado
na cuba A.
A diminuição da DQO ou do COD deve estabilizar quando a biodegra-
dação diária da MBAS é mais ou menos regular, isto é, no fim do
período inicial indicado na figura 3.
O teor em matérias secas minerais da lama activada contido na cuba de
ventilação deve ser determinada (SIC! determinado) duas vezes por
semana (em g/l). Se ultrapassa (SIC! ultrapassar) 2,5 g/l, é preciso
eliminar o excesso de lama activada.
O ensaio de biodegradação é efectuado à temperatura ambiente; esta
temperatura deve ser regular e mantida entre 292 e 297 K (19-24 ºC).
1.7.Cálculo da biodegradação
A taxa de biodegradação da MBAS deve ser calculada diáriamente
(SIC! diariamente) a partir do teor em MBAS (expressa em mg/l) do
efluente sintético e da água residual correspondente recolhida na cuba
F. Os valores assim obtidos devem ser representados graficamente,
como é indicado na figura 3.
A biodegradabilidade da MBAS é calculada através da média aritmética
dos valores obtidos no decurso dos 21 dias seguintes ao período inicial,
prazo durante o qual a biodegradação deve ser regular e a instalação
deve ter funcionado sem qualquer perturbação. Em caso algum deve a
duração do período inicial ultrapassar seis semanas.
Os valores diários da biodegradação devem ser calculados a 0,1% apro-
ximadamente, mas o resultado final é determinado ao número inteiro.
Em certos casos, a frequência das colheitas pode ser diminuída, mas,
para calcular a média, serão utilizados os resultados de pelo menos 14
colheitas diárias repartidas no período de 21 dias que seguem o (SIC!
dias seguintes ao) período inicial.1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 5
▼M1
CAPÍTULO II
TRATAMENTO PRELIMINAR DOS PRODUTOS A EXAMINAR
2.1.Notas preliminares
2.1.1. Tratamento das amostras
O tratamento dos agentes de superfície aniónicos e dos detergentes
previamente à determinação da biodegradação pelo teste de confirmação
é o seguinte:
Produtos Tratamento
Agentes de superfícieaniónicosNenhum
Detergentes Extracção alcoólica seguida de separação
por troca de iões e de eluição fraccional a
partir do permutador de aniões
O objectivo da extracção alcoólica é eliminar dos produtos comerciali-
zados os componentes insolúveis e inorgânicos que podem, se for caso
disso, perturbar o teste de biodegradação.
2.1.2. Processo de permuta de iões
É necessário, para a exactidão dos testes de biodegradação, isolar e
separar os agentes de superfície aniónicos do sabão e dos agentes de
superfície não iónicos e catiónicos.
Este resultado é obtido mediante a aplicação duma técnica de permuta
de iões utilizando uma resina macroporosa permutadora de aniões e os
agentes de eluição adequados permitindo a eluição fraccionada. O sabão
e os agentes de superfície aniónicos e não iónicos são assim isolados
numa única operação.
2.1.3. Controlo analítico
Após a homogeneização, o teor em agentes de superfície aniónicos do
detergente sintético é determinado segundo o método de análise à
MBAS. O teor em sabão é determinado de acordo com um método
adequado. Esta análise dos produtos é necessária para o cálculo das
quantidades exigidas para a preparação das fracções destinadas aos
ensaios de biodegradação.
Uma extracção quantitativa não é necessária; todavia extrair-se-á pelo
menos 80% dos agentes de superfície aniónicos. Habitualmente, obtém-
-se 90% ou mais.
2.2.Princípio
A partir duma amostra homogénea (pós, pastas e líquidos dessecados),
obtém-se um extracto pelo etanol que contém os agentes de superfície,
o sabão e outros componentes solúveis do álcool, da amostra de deter-
gente.
O extracto pelo etanol evapora-se e dissolve-se numa mistura isopro-
panol/água; faz-se passar a solução assim obtida através dum
dispositivo misto permuta de catiões fortemente ácida/permuta de
amiões (SIC! aniões) macroporoso, levado à temperatura de 323 K
(50 ºC). Esta temperatura é necessária para impedir a precipitação dos
ácidos gordos em meio ácido.
Os agentes de superfície não iónicos permanecem no efluente.
Os ácidos gordos do sabão são separados por eluição com etanol
contendo dióxido de carbono. Obtém-se então os agentes de superfície
aniónicos sobforma de sais de amónio por eluição com uma solução
de bicarbonato de amónio numa mistura isopropanol/água. Estes sais de
amónio são utilizados para o teste de biodegradação.
Os agentes de superfície catiónicos, susceptíveis de perturbarem o teste
de biodegradação e o procedimento analítico, são eliminados pelo
permutador de catiões colocado em cima do permutador de aniões.
2.3.Produtos químicos e aparelhagem
2.3.1 Água desionisada1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 6
▼M1
2.3.2. Etanol, 95% (v/v) C2H5OH (desnaturantes admitidos: metiletilcetona ou
metanol).
2.3.3. Mistura isopropanol/água (50/50 v/v):
— 50 partes de isopropanol (CH3.CHOH CH3),
— 50 partes de água (2.3.1.).
2.3.4. Solução de dióxido de carbono no etanol (mais ou menos 0,1% de CO2):
por meio de um tubo de transferência provido de um disco em vidro
poroso incorporado, deixar mergulhar o dióxido de carbono (CO2)
através do etanol (2.3.2.) durante dez minutos. A solução deve ser
preparada extemporaneamente.
2.3.5. Solução de bicarbonato de amónio (60/40 v/v): 0,3 M de NH4HCO3 em
1 000 ml duma mistura isopropanol/água constituída de 60 partes de
isopropanol e de 40 partes de água (2.3.1.).
2.3.6 Permutador de catiões (KAT) fortemente ácido, resistente ao álcool (50-
-100 mesh).
2.3.7. Permutador de aniões (AAT), macroporoso, Merck Lewatit MP 7080
(70-150 mesh) ou equivalente.
2.3.8. Ácido clorídrico, 10% HCL (p/p).2.3.9. Balão de fundo redondo de 2 000 ml com esmerilado cónico e conden-
sador de refluxo.
2.3.10. Cadinho filtrante de 90 mm de diâmetro (podendo ser aquecido) para
filtros de papel.
2.3.11. Frasco de vácuo de 2 000 ml.2.3.12. Colunas de permutadores com câmara de aquecimento e torneira: tubo
interior de 60 mm de diâmetro e de 450 mm de altura (figura 4).
2.3.13. Banho-maria2.3.14. Estufa de secagem em vazio2.3.15. Termóstato2.3.16. Evaporador rotativo2.4.Extracção e separação dos agentes de superfície aniónicos
2.4.1. Preparação do extracto
A quantidade de agentes de superfície necessária para o ensaio da biode-
gradação é aproximadamente 50 g MBAS.
Normalmente a quantidade de produto a extrair não ultrapassa 1 000 g,
contudo pode ser necessário extrair quantidades suplementares da
amostra.
Por razões práticas, a quantidade de produto utilizado será na maior
parte das vezes limitada a 5 000 g aquando da preparação dos extractos
para o ensaio de biodegradação.
A experiência demonstrou que uma série de extracções limitadas é
preferível a uma única extracção de uma grande quantidade de produto.
No que diz respeito aos permutadores, as quantidades especificadas são
concebidas para uma capacidade de 600 a 700 mmol de agentes de
superfície e de sabão.
2.4.2. Isolamento dos componentes no álcool
Juntar 250 g do detergente a analisar a 1 250 ml de etanol e levar a
mistura até à ebulição, depois submetê-la ao refluxo durante uma hora,
agitando. Filtrar a solução alcoólica quente num cadinho filtrante de
poros largos, levado à temperatura de 323 K (50 ºC) e aspirar forte-
mente. Lavar o frasco e o cadinho filtrante com cerca de 200 ml de
etanol quente. Recolher o filtrado e a lavagem do filtro num frasco a
vácuo.
Quando os produtos a analisar são pastas ou líquidos, assegurar-se de
que a amostra não contém mais do que 55 g de agentes de superfície
aniónicos e 35 g de sabão. Evaporar esta amostra pesada até à desse-
cação completa. Dissolver o resíduo em 2 000 ml de etanol e proceder
como indicado acima.
No caso de pós de fraca densidade aparente (300 g/l), é recomendado
aumentar a proporção de etanol na relação 20/1.1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 7
▼M1
Evaporar o filtrado de etanol até á dessecação completa, de preferência
pelo meio de evaporador rotativo. Repetir a operação se for necessária
uma maior quantidade de extracto. Dissolver o resíduo em 500 ml de
uma mistura isopropanol/água.
2.4.3. Preparação das colunas permutadoras de iões
Coluna permutadora de catiões
Colocar 600 ml de resina permutadora de catiões (2.3.6.) num copo de
3 000 ml e cobrir juntando 2000 ml de ácido clorídrico (2.3.8.). Deixar
repousar durante pelo menos 2 horas agitando de tempos a tempos.
Decantar o ácido e transferir a resina à coluna (2.3.12.) por meio de
água desionizada. A coluna deve possuir um tampão de lã de vidro.
Lavar a coluna com a água desionizada a um débito de 10-30 ml/min,
até que o produto de eluição esteja isento de cloro. Arrastar a água
com 2 000 ml de uma mistura isopropanol/água (2.3.3.) a um débito de
10-30 ml/min. A coluna de permutadores está pronta para utilização.
Coluna permutadora de aniões
Colocar 600 ml de resina permutadora de aniões (2.3.6.) num copo de
3 000 ml e cobrir juntando 2 000 ml de água desionizada. Deixar o
permutador inchar durante pelo menos 2 horas. Transferir a resina para
a coluna com a água. A coluna deve possuir um tampão em lã de vidro
desionizado como camada de suporte dos permutadores.
Lavar a coluna com uma solução 0,3 mol de bicarbonato de amónio
(2.3.5.) até que ela fique isenta de cloro, o que necessita cerca de
5 000 ml de solução. Lavar em seguida com 2 000 ml de água desioni-
zada. Arrastar a água com 2000 ml de uma mistura isopropanol/água
(2.3.3.) a um débito de l0-30 ml/min. A coluna de permutadores está
agora sobforma OH e pronta para o emprego.
2.4.4. Procedimento de permuta de iões
Montar as colunas de permutadores de maneira que a coluna de permu-
tadores de catiões se encontre em cima da coluna de permutadores de
aniões. Levar as colunas à temperatura de 323 K (50 ºC) por meio deum termostato (SIC! termóstato). Aquecer 5000 ml da solução obtida
no ponto 2.4.2. até 333 K (60 ºC) e passar a solução através do grupo
de permutadores a um débito de 20 ml/min. Lavar as colunas com
1 000 ml de uma mistura quente de isopropanol/água (2.3.3.).
Para obter os agentes de superfície aniónicos sintéticos (MBAS)
desmontar a coluna KAT. Eluir os ácidos gordos do sabão da coluna
KAT por meio de 5 000 ml de uma solução de etanol/CO
2(a 323 K;
50 ºC). Rejeitar o eluído.
Eluir em seguida os MBAS da coluna AAT por meio de 5000 (SIC!) de
solução de bicarbonato de amónio (2.3.5.). Evaporar o eluído até à
dessecação sobre um banho de vapor ou num evaporador rotativo. Os
resíduos contêm os MBAS (sobforma de sal de amónio) e, eventual-
mente, os produtos aniónicos não tenso-activos que não prejudicam o
teste de biodegradação. Juntar água desionizada até à obtenção de um
volume determinado e dosear o teor em MBAS numa fracção aliquota
conforme ao capítulo 3 (SIC! Capítulo III). A solução é utilizada como
solução padrão dos detergentes aniónicos para o ensaio da biodegra-
dação. A solução deve ser mantida a uma temperatura inferior a 278K
(5 ºC).
2.4.5 Regeneração das resinas permutadoras de iões
O permutador de catiões deita-se fora depois do emprego.
Regenera-se a resina permutadora de aniões fazendo passar na coluna
uma quantidade suplementar de uma solução de bicarbonato de amónio
(2.3.5.) a um débito de cerca de 10 ml/min. até que o eluído esteja
isento de agentes de superfície aniónicos (ensaio com azul de metileno).
Lavar em seguida o permutador de aniões com 2000 ml com uma
mistura isopropanol/água (2.3.3.). O permutador de aniões pode ser de
novo utilizado.
CAPÍTULO III
DETERMINAÇÃO DOS AGENTES DE SUPERFÍCIE ANIÓNICOS NO
ENSAIO DE BIODEGRADAÇÃO
3.1.Princípio
O método baseia-se no facto de o corante catiónico que é o azul de
metileno produzir com os agentes de superfície aniónicos sais azuis1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 8
▼M1
que podem ser extraídos com clorofórmio. A fim de evitar interferên-
cias, a extracção é primeiramente efectuada a partir de uma solução
alcalina e o extracto é em seguida agitado com uma solução ácida de
azul de metileno. A absorvância da fase orgânica separada é medida
por fotometria no comprimento de onda de absorção máxima de 650 nm.
3.2.Reagentes e aparelhagem
3.2.1. Solução tampão ph (SIC! pH) 10: dissolver 24 g de bicarbonato de sódio
(Na HCO3) para análise e 27g de carbonato de sódio anidro (Na2CO3)
para análise em água desionizada e diluir a 1 000 ml.
3.2.2. Solução neutra de azul de metileno: dissolver 0,35 g de azul de metileno
para análise em água desionizada e diluir a 1 000 ml. Preparar a solução
pelo menos 24 horas antes da utilização. A absorvância da fase cloro-
fórmio do ensaio em branco, comparada à do clorofórmio puro, não
deve ultrapassar 0,015 para 1 cm de espessura da camada a 650 nm.
3.2.3. Solução ácida de azul de metileno: dissolver 0,35 g de azul de metileno
para análise em 500 ml de água desionizada e misturar com 6,5 ml de
H2SO4(d = 1,84 g/ml). Diluir com 1000 ml de água desionizada.
Preparar a solução pelo menos 24 horas antes do uso. A absorvância da
fase de clorofórmio do ensaio em branco, comparada com a do cloro-
fórmio puro, não deve ultrapassar 0,015 para 1 cm de espessura da
camada a 650 nm.
3.2.4. Clorofórmio (triclorometano) CHCL3para análise, recentemente desti-
lado.
3.2.5. Éstermetílico (SIC!) do dodecilbenzeno de ácido sulfónico.
3.2.6. Solução de hidróxido de potássio no etanol, KOH 0,1 M.
3.2.7. Etanol puro (C2H5OH).
3.2.8. Ácido sulfúrico (H2SO40,5 M).
3.2.9. Solução de fenolftaleína: dissolver 1 g de fenolftaleína em 50 ml de
etanol e adicionar 50 ml de água desionizada agitando continuamente.
Eliminar por filtração todo o precipitado obtido.
3.2.10. Ácido clorídrico e metanol: 250 ml de ácido clorídrico concentrado para
análise e 750 ml de metanol.
3.2.11. Ampola de decantação de 250 ml.
3.2.12. Frasco graduado de 50 ml.
3.2.13. Frasco graduado de 500 ml.3.2.14. Frasco graduado de 1 000 ml.3.2.15. Balão de fundo redondo com esmerilado em vidro, condensador de
refluxo de 250 ml; esferas de vidro para facilitar a ebulição.
3.2.16. PH neutro.3.2.17. Fotómetro para medidas a 650 nm, com cuvetes de 1 a 5 cm.
3.2.18. Papel filtro qualitativo.
3.3.Método
As amostras destinadas à análise não devem ser colhidas através duma
camada de espuma.
Depois de ter sido cuidadosamente limpa com água, a aparelhagem utili-
zada para a análise deve ser inteiramente lavada com uma solução de
ácido clorídrico e de metanol (3.2.10.), depois com água desionizada
antes da utilização.
Filtrar os efluentes de entrada e de saída da instalação com lama acti-
vada a examinar desde a amostragem. Eliminar os primeiros 100 ml
dos filtrados.
Colocar um volume medido da amostra, neutralizado se necessário,
numa ampola de decantação de 250 ml (3.2.11.). O volume da amostra
deve conter entre 20 e 150 µg de MBAS. Para um teor mais baixo em
MBAS, pode-se utilizar até 100 ml da amostra. Quando se utiliza menos
do que 100 ml, diluir a 100 ml com água desionizada. Adicionar à
amostra 10 ml da solução tampão (3.2.1.), 5 ml da solução neutra de
azul de metileno (3.2.2.) e 15 ml de clorofórmio (3.2.4.). Agitar a
mistura de modo regular e sem excessivo vigor durante um minuto.
Depois da separação de fases, deixar passar a camada de clorofórmio
numa segunda ampola de decantação contendo 110 ml de água desioni-1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 9
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zada e 5 ml de solução ácida de azul de metileno (3.2.3). Agitar a
mistura durante um minuto. Deixar passar a camada de clorofórmio
através de um filtro de algodão hidrófilo previamente lavado com álcool
e embebido de clorofórmio num frasco graduado (3.2.12.).
Extrair três vezes as soluções alcalinas e ácidas, por meio de 10 ml de
clorofórmio na altura da segunda e da terceira extracção. Filtrar os
extractos combinados de clorofórmio através do mesmo filtro de
algodão hidrófilo e diluir à marca no frasco de 50 ml (3.2.12.) com o
clorofórmio utilizado para tornar a lavar o algodão hidrófilo. Medir a
absorvância da solução de clorofórmio com um fotómetro a 650 nm
em cuvetes de 1 a 5 cm comparando com a do clorofórmio puro. Fazer
um ensaio de dosagem em branco no decurso do método.
3.4.Curva de aferição
Preparar uma solução de aferição a partir da substância padrão de éster-
metílico (SIC! estermetílico) do dodecilbenzeno de ácido sulfónico
(tetrapropileno tipo PM 340) após saponificação no sal de potássio. A
MBAS é expressa em dodecilbenzeno sulfonato de sódio (PM 348).
Pesar 400 a 450 mg de éstermetílico (SIC! estermetílico) do dodecilben-
zeno de ácido sulfónico (3.2.5.) a 0,1 mg aproximadamente num balão
de fundo redondo e adicionar 50 ml de solução de hidróxido de potássio
e de etanol (3.2.6.) e algumas bolas de vidro para facilitar a ebulição.
Depois de ter instalado o condensador de refluxo, deixar ferver durante
uma hora. Após arrefecimento, lavar o condensador e o esmerilado com
mais ou menos 30 ml de etanol e adicionar estas lavagens ao conteúdo
do balão. Filtrar a solução com ácido sulfúrico até à descoloração da
fenolftaleína. Transferir esta solução a um frasco graduado de 1000 ml
(3.2.14.), diluir à marca com água desionizada e misturar.
(SIC!)
Esta solução padrão contémE/C21;023
20000mg MBAS/ml representando E o
peso da amostra em mg.
Para estabelecer a curva de aferição, colher respectivamente 1, 2, 4, 6 e
8 ml da solução padrão e diluir cada uma destas colheitas em 100 ml de
água desionizada. Proceder em seguida como é indicado no ponto 3.3.
(incluindo um ensaio de dosagem em branco).
3.5.Cálculo dos resultados
A curva de aferição (3,4) indica a quantidade de agente de superfície
aniónico (MBAS) contida na amostra. O teor em MBAS da amostra é
indicada (SIC! indicado) por
mg MBAS /C21000
V= MBAS mg/I
V = o volume em ml da amostra utilizada.
Exprimir os resultados em dodecilbenzeno sulfonato de sódio (PM 348).
3.6.Expressão dos resultados
Exprimir os resultados em MBAS mg/l aproximado a 0,1 mg.1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 10
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Figura 1
A — Recipiente de armazenagem
B — Bomba doseadora
C — Cuba de arejamento
D — DecantadorE — Bomba de ar comprimido
F — Recipiente de recolha
G — Arejador (vidro poroso)H — Rotâmetro para o ar1973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 11
Figura 2
▼M11973L0405 — PT — 14.04.1982 — 001.001 — 12
Figura 3
Cálculo de biodegradabilidade — Teste de confirmação
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Figura 4
Coluna permutadora com câmara de aquecimento
(dimensões em milímetros)
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