1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 1
Dit document vormt slechts een documentatiehulpmiddel en versch ĳnt buiten de verantwoordel ĳkheid van de instellingen
►B BESCHIKKING VAN DE COMMISSIE
van 15 juli 1994
tot vaststelling van de veterinairrechtel ĳke voorschriften en van de voorschriften inzake veteri-
naire certificering voor de invoer van sperma van runderen uit derde landen
(94/577/EG)
(PB L 221 van 26.8.1994, blz. 26)
Gewĳzigd b ĳ:
Publicatieblad
nr. blz. datum
►M1Beschikking 1999/495/EG van de Commissie van 1 juli 1999 L 192 56 24.7.1999
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 2
▼B
BESCHIKKING VAN DE COMMISSIE
van 15 juli 1994
totvaststellingvandeveterinairrechtel ĳkevoorschriftenenvande
voorschriften inzake veterinaire certificering voor de invoer van
sperma van runderen uit derde landen
(94/577/EG)
DE COMMISSIE VAN DE EUROPESE GEMEENSCHAPPEN,
Gelet op het Verdrag tot oprichting van de Europese Gemeenschap,
Gelet op Richtl ĳn 88/407/EEG van de Raad van 14 juni 1988 tot
vaststelling van de veterinairrechtel ĳke voorschriften van toepassing op
het intracommunautaire handelsverkeer in sperma van runderen en deinvoer daarvan (
1), laatstel ĳk gew ĳzigd b ĳRichtl ĳn 93/60/EEG (2), en
met name op de artikelen 10 en 11,
Overwegende dat de l ĳst van derde landen van waaruit de invoer van
diepgevroren sperma van runderen door de Lid-Staten wordt toegestaan,hierna „de l ĳst van derde landen” genoemd, is vastgesteld b ĳBeschik-
king 90/14/EEG van de Commissie (
3), gew ĳzigd b ĳBeschikking 91/
276/EEG (4);
Overwegende dat in verband met de gezondheidssituatie in Israël de
invoer uit dat land b ĳBeschikking 91/277/EEG van de
Commissie (5)werd verboden;
Overwegende dat de veterinairrechtel ĳke voorschriften en die inzake
veterinaire certificering voor de invoer van sperma van runderen uit deVerenigde Staten van Amerika, Canada, Polen, Finland, Nieuw-Zeeland, Oostenr ĳk, Zwitserland, Zweden, Hongar ĳe, Noorwegen, en
Tsjechoslovak ĳezĳn vastgesteld b ĳ, respectievel ĳk, de Beschikkingen
91/479/EEG (
6), 91/549/EEG (7), 92/123/EEG (8), 92/124/EEG (9), 92/
125/EEG (10), 92/126/EEG (11), 92/127/EEG (12), 92/128/EEG (13), 92/
386/EEG (14), 92/387/EEG (15), en 92/445/EEG (16) van de Commissie;
Overwegende dat Richtl ĳn 88/407/EEG is gew ĳzigd b ĳRichtl ĳn 93/
60/EEG die door de Lid-Staten vóór 1 juli 1994 ten uitvoer dient teworden gelegd; dat bovengenoemde beschikkingen voor derde landenbĳgevolg eveneens moeten worden gew ĳzigd; dat, om de communau-
taire wetgeving ter zake te vereenvoudigen en te verduidel ĳken, boven-
genoemde beschikkingen in één tekst dienen te worden b ĳeengebracht
en de voor elk land afzonderl ĳke beschikkingen derhalve dienen te
worden ingetrokken;
Overwegende dat in verband met de Overeenkomst betreffende de
Europese Economische Ruimte de veterinaire certificaten voor deinvoer van rundersperma uit Oostenr ĳk, Finland, Noorwegen en
Zweden niet behoeven te worden gehandhaafd;
(1) PB nr. L 194 van 22. 7. 1988, blz. 10.
(2) PB nr. L 186 van 28. 7. 1993, blz. 28.
(3) PB nr. L 8 van 11. 1. 1990, blz. 71.
(4) PB nr. L 135 van 30. 5. 1991, blz. 58.
(5) PB nr. L 135 van 30. 5. 1991, blz. 60.
(6) PB nr. L 258 van 16. 9. 1991, blz. 1.
(7) PB nr. L 298 van 29. 10. 1991, blz. 6.
(8) PB nr. L 48 van 22. 2. 1992, blz. 1.
(9) PB nr. L 48 van 22. 2. 1992, blz. 10.
(10) PB nr. L 48 van 22. 2. 1992, blz. 19.
(11) PB nr. L 48 van 22. 2. 1992, blz. 28.
(12) PB nr. L 48 van 22. 2. 1992, blz. 37.
(13) PB nr. L 48 van 22. 2. 1992, blz. 46.
(14) PB nr. L 204 van 21. 7. 1992, blz. 13.
(15) PB nr. L 204 van 21. 7. 1992, blz. 22.
(16) PB nr. L 247 van 27. 8. 1992, blz. 1.
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 3
▼B
Overwegende dat overeenkomstig het advies van het Wetenschappel ĳk
Veterinair Comité een b ĳkomende test op epizoötische hemorragische
ziekte wordt vereist;
Overwegende dat alleen voor Canada geldt dat de routinetests op deze
ziekte om de zes maanden vóór de spermawinning worden uitgevoerd;dat voor Canada b ĳgevolg in een overgangsperiode voor de invoering
van het b ĳdeze beschikking bepaalde dient te worden voorzien ten
einde de Canadese veterinaire autoriteiten de nodige t ĳd te gunnen om
de nieuwe test in het routineprogramma op te nemen;
Overwegende dat, aangezien recentel ĳk een beter inzicht in de epizoöti-
ologie van „blue tongue” is verkregen, bovendien thans de invoer vansperma van runderen uit Australië kan worden toegestaan;
Overwegende dat de diergezondheidssituatie in de landen van de l ĳst
van derde landen ten aanzien van ziekten die door sperma kunnenworden overgedragen, goed bl ĳkt te z ĳn en door goed gestructureerde
en georganiseerde veterinaire diensten wordt gecontroleerd;
Overwegende dat de bevoegde veterinaire autoriteiten van de landen op
de lĳst van derde landen zich ertoe hebben verbonden de Commissie en
de Lid-Staten per telex- of per fax-bericht binnen 24 uur van elkebevestigde uitbraak van een van de ziekten van l ĳst A van het Interna-
tionaal Bureau voor besmettel ĳke veeziekten (OIE) en van elke w ĳzi-
ging in het vaccinatiebeleid ten aanzien van een van deze ziekten inkennis te stellen, en, binnen een redel ĳke term ĳn, van elke uitbraak van
een van de ziekten van l ĳst B van het OIE en van elke voorgestelde
wĳziging in de invoerregeling voor huisdieren en sperma en embryo’s
daarvan;
Overwegende dat de bevoegde veterinaire autoriteiten van de landen op
de lĳst van derde landen zich ertoe hebben verbonden op de afgifte van
certificaten op grond van deze beschikking officieel toezicht te houdenen ervoor te zorgen dat alle certificaten, alle uitzonderingen en allelaboratoriumresultaten op grond waarvan een certificaat is afgegeven,gedurende ten minste twaalf maanden na de verzending van het spermawaarop z ĳbetrekking hebben, in de officiële databestanden bl ĳven;
Overwegende dat de bevoegde veterinaire autoriteiten van de landen op
de lĳst van derde landen zich voor de uitvoer van sperma van runderen
naar de Europese Gemeenschap ertoe hebben verbonden spermacentraofficieel te erkennen, overeenkomstig artikel 9 van Richtl ĳn 88/
407/EEG;
Overwegende dat de veterinairrechtel ĳke voorschriften en die inzake
veterinaire certificering naar gelang van de diergezondheidssituatie inhet betrokken derde land aanpassing behoeven;
Overwegende dat de in deze beschikking vervatte maatregelen in over-
eenstemming z ĳn met het advies van het Permanent Veterinair Comité,
HEEFT DE VOLGENDE BESCHIKKING GEGEVEN:
Artikel 1
De Lid-Staten staan de invoer toe van sperma van runderen dat voldoet
aan de eisen die z ĳn vastgesteld in de certificaten volgens de modellen
in deel 1 van de b ĳlagen A, B, C, respectievel ĳk D, doch alleen uit die
derde landen die in deel 2 van de b ĳlagen A, B, C, respectievel ĳkD
zĳn opgenomen.
De Lid-Staten staan tot en met 31 december 1994 de invoer uit Canada
toe van sperma van runderen dat is gewonnen en behandeld overeen-komstig Beschikking 91/549/EEG.
Artikel 2
De Beschikkingen 91/479/EEG, 92/123/EEG, 92/124/EEG, 92/
125/EEG, 92/126/EEG, 92/127/EEG, 92/128/EEG, 92/386/EEG, 92/387/EEG en 92/445/EEG worden ingetrokken.
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 4
▼B
Beschikking 91/549/EEG wordt ingetrokken op 1 januari 1995.
Artikel 3
De in artikel 1, eerste alinea, vervatte voorschriften z ĳn met betrekking
tot Canada van toepassing met ingang van 1 januari 1995.
Artikel 4
Deze beschikking is gericht tot de Lid-Staten.
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 5
▼B
BĲLAGE A
DEEL 1
GEZONDHEIDSCERTIFICAAT
voor de invoer van rundersperma

1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 6
▼B
13. Ondergetekende, officieel dierenarts, verklaart van de inhoud van Richtl ĳn 88/407/EEG van de Raad, zoal s
sedertdien gew ĳzigd, kennis te hebben genomen en verklaart voorts hetgeen volgt:
a) ............................................................................................................................. .....
(naam van het land van uitvoer)
is in de laatste twaalf maanden vóór de winning van het voor uitvoer bestemde sperma en tot de datum va n
verzending daarvan vr ĳgeweest van runderpest en van mond- en klauwzeer en tegen geen van dez e
ziekten is in die periode ingeënt;
b) het spermacentrum waar het voor uitvoer bestemde sperma is gewonnen:
i) is erkend overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
ii) functioneert en wordt gecontroleerd overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk II, va n
Richtl ĳn 88/407/EEG;
iii) is in de laatste dertig dagen vóór de datum waarop het uit te voeren sperma is gewonnen en tot derti g
dagen na de spermawinning (wanneer het om vers sperma gaat, tot op de dag van verzending) vr ĳ
geweest van rabies, tuberculose, brucellose, miltvuur en besmettel ĳke boviene pleuropneumonie;
c) de runderen in het spermacentrum:
i) komen uit beslagen en/of z ĳn geboren uit moederdieren die voldoen aan de in b ĳlage B, hoofdstuk I,
van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen;
ii) hebben, alvorens z ĳzĳn geïsoleerd, de krachtens b ĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EE G
vereiste tests ondergaan;
iii) z ĳn, alvorens z ĳtot het centrum z ĳn toegelaten, geïsoleerd en onderzocht overeenkomstig het bepaald e
in bĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
iv) hebben, indien z ĳsedert ten minste één jaar in het spermacentrum verbl ĳven, de in b ĳlage B,
hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG vastgestelde routinetests ondergaan;
d) het uit te voeren sperma:
i) komt van donordieren die in de laatste zes maanden vóór het winnen van het uit te voeren sperma i n
.............................................................................................................................
(naam van het land van uitvoer)
hebben verbleven en die aan de in b ĳlage C van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen voldoen;
ii) komt van donordieren die:
— in een spermacentrum verbl ĳven waar alle runderen in de laatste twaalf maanden vóór de winnin g
van het uit te voeren sperma met negatief resultaat een serumneutralisatietest of een Elisa o p
infectieuze boviene rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) hebben onder -
gaan, (1)
of
— negatief hebben gereageerd op een serumneutralisatietest of een Elisa op infectieuze bovien e
rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) die in de laatste twaalf maande n
vóór de winning van het uit te voeren sperma is verricht, (1)
of
—z ĳn ingeënt overeenkomstig b ĳlage B hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG ►(1)(1);◄
(1) Doorhalen wat niet van toepassing is.
►(1)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 7
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) werd behandeld, opgeslagen en vervoerd overeenkomstig de eisen in Richtl ĳn 88/407/EEG.
Gedaan te .......................................................,
(plaats)....................................................................
(datum)
/SS74(stempel) (2)Handtekening (2): ...................................................................
Naam in drukletters: ................................................................
Officiële titel: .......................................................................
(1) Doorhalen wat niet van toepassing is.
(2) De kleur van de handtekening en van het stempel moet verschillen van die van de gedrukte tekst.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 8
▼B
DEEL 2
Lĳst van landen die gebruik mogen maken van het gezondheidscertificaat
volgens het model in deel 1 van deze b ĳlage
TSJECHIËHONGAR ĲE
NIEUW-ZEELANDPOLENROEMENIËZWITSERLANDSLOWAK ĲE
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 9
▼B
BĲLAGE B
DEEL 1
GEZONDHEIDSCERTIFICAAT
voor de invoer van rundersperma uit de Verenigde Staten van Amerika

1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 10
▼B
13. Ondergetekende, officieel dierenarts, verklaart van de inhoud van Richtl ĳn 88/407/EEG van de Raad, zoal s
sedertdien gew ĳzigd, kennis te hebben genomen en verklaart voorts hetgeen volgt:
a) ............................................................................................................................. .....
(naam van het land van uitvoer)
is in de laatste twaalf maanden vóór de winning van het voor uitvoer bestemde sperma en tot de datum va n
verzending daarvan vr ĳgeweest van runderpest en van mond- en klauwzeer en tegen geen van dez e
ziekten is in die periode ingeënt;
b) het spermacentrum waar het voor uitvoer bestemde sperma is gewonnen:
i) is erkend overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
ii) functioneert en wordt gecontroleerd overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk II, va n
Richtl ĳn 88/407/EEG;
iii) is in de laatste dertig dagen vóór de datum waarop het uit te voeren sperma is gewonnen en tot derti g
dagen na de spermawinning (wanneer het om vers sperma gaat, tot op de dag van verzending) vr ĳ
geweest van rabies, tuberculose, brucellose, miltvuur en besmettel ĳke boviene pleuropneumonie;
c) de runderen in het spermacentrum:
i) komen uit beslagen en/of z ĳn geboren uit moederdieren die voldoen aan de in b ĳlage B, hoofdstuk I,
van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen;
ii) hebben, alvorens z ĳzĳn geïsoleerd, de krachtens b ĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EE G
vereiste tests ondergaan;
iii) z ĳn, alvorens z ĳtot het centrum z ĳn toegelaten, geïsoleerd en onderzocht overeenkomstig het bepaald e
in bĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
iv) hebben, indien z ĳsedert ten minste één jaar in het spermacentrum verbl ĳven, de in b ĳlage B,
hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG vastgestelde routinetests ondergaan;
d) het uit te voeren sperma:
i) komt van donordieren die in de laatste zes maanden vóór het winnen van het uit te voeren sperma i n
.............................................................................................................................
(naam van het land van uitvoer)
hebben verbleven en die aan de in b ĳlage C van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen voldoen;
ii) komt van donordieren die:
— in een spermacentrum verbl ĳven waar alle runderen in de laatste twaalf maanden vóór de winnin g
van het uit te voeren sperma met negatief resultaat een serumneutralisatietest of een Elisa o p
infectieuze boviene rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) hebben onder -
gaan, (1)
of
— negatief hebben gereageerd op een serumneutralisatietest of een Elisa op infectieuze bovien e
rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) die in de laatste twaalf maande n
vóór de winning van het uit te voeren sperma is verricht, (1)
of
—z ĳn ingeënt overeenkomstig b ĳlage B, hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG ►(1)(1);◄
(1) Doorhalen wat niet van toepassing is.
►(1)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 11
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) werd behandeld, opgeslagen en vervoerd overeenkomstig het bepaalde in Richtl ĳn 88/407/EEG;
iv) komt van donorstieren waarb ĳtweemaal, met een tussenpoos van ten hoogste twaalf maanden, me t
negatief resultaat de volgende tests z ĳn verricht vóór en na een spermawinning (de test na d e
spermawinning moet z ĳn verricht op het monster dat ten minste 21 dagen na het winnen van het voo r
uitvoer bestemde sperma is genomen):
— een competitieve Elisa op „blue tongue” overeenkomstig b ĳlage E;
— een agargelimmunodiffusietest overeenkomstig b ĳlage E en een virusneutralisatietest op alle sero -
types van epizoötische hemorragische ziekte waarvan bekend is dat z ĳin het land van uitvoe r
voorkomen.
Gedaan te .......................................................,
(plaats)...................................................................
(datum)
/SS74(stempel) (2)Handtekening (2): ...................................................................
Naam in drukletters: ................................................................
Officiële titel: .......................................................................
(1) Doorhalen wat niet van toepassing is.
(2) De kleur van de handtekening en van het stempel moet verschillen van die van de gedrukte tekst.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 12
▼B
DEEL 2
Lĳst van landen die gebruik mogen maken van het gezondheidscertificaat
volgens het model in deel 1 van deze b ĳlage
VERENIGDE STATEN VAN AMERIKA
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 13
▼B
BĲLAGE C
DEEL 1
GEZONDHEIDSCERTIFICAAT
voor de invoer van rundersperma

1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 14
▼B
13. Ondergetekende, officieel dierenarts, verklaart van de inhoud van Richtl ĳn 88/407/EEG van de Raad, zoal s
sedertdien gew ĳzigd, kennis te hebben genomen en verklaart voorts hetgeen volgt:
a) ............................................................................................................................. .....
(naam van het land van uitvoer)
is in de laatste twaalf maanden vóór de winning van het voor uitvoer bestemde sperma en tot de datum va n
verzending daarvan vr ĳgeweest van runderpest en van mond- en klauwzeer en tegen geen van dez e
ziekten is in die periode ingeënt;
b) het spermacentrum waar het voor uitvoer bestemde sperma is gewonnen:
i) is erkend overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
ii) functioneert en wordt gecontroleerd overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk II, va n
Richtl ĳn 88/407/EEG;
iii) is in de laatste dertig dagen vóór de datum waarop het uit te voeren sperma is gewonnen en tot derti g
dagen na de spermawinning (wanneer het om vers sperma gaat, tot op de dag van verzending) vr ĳ
geweest van rabies, tuberculose, brucellose, miltvuur en besmettel ĳke boviene pleuropneumonie;
c) de runderen in het spermacentrum:
i) komen uit beslagen en/of z ĳn geboren uit moederdieren die voldoen aan de in b ĳlage B, hoofdstuk I,
van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen;
ii) hebben, alvorens z ĳzĳn geïsoleerd, de krachtens b ĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EE G
vereiste tests ondergaan;
iii) z ĳn, alvorens z ĳtot het centrum z ĳn toegelaten, geïsoleerd en onderzocht overeenkomstig het bepaald e
in bĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
iv) hebben, indien z ĳsedert ten minste één jaar in het spermacentrum verbl ĳven, de in b ĳlage B,
hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG vastgestelde routinetests ondergaan;
d) het uit te voeren sperma:
i) komt van donordieren die in de laatste zes maanden vóór het winnen van het uit te voeren sperma i n
.............................................................................................................................
(naam van het land van uitvoer)
hebben verbleven en die aan de in b ĳlage C van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen voldoen;
ii) komt van donordieren die:
— in een spermacentrum verbl ĳven waar alle runderen in de laatste twaalf maanden vóór de winnin g
van het uit te voeren sperma met negatief resultaat een serumneutralisatietest of een Elisa o p
infectieuze boviene rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) hebben onder -
gaan, (1)
of
— negatief hebben gereageerd op een serumneutralisatietest of een Elisa op infectieuze bovien e
rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) die is verricht in de laatste twaal f
maanden vóór de winning van het uit te voeren sperma, (1)
of
—z ĳn ingeënt overeenkomstig b ĳlage B, hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG ►(1)(1);◄
(1) Doorhaten wat met van toepassmg is.
►(1)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 15
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) werd behandeld, opgeslagen en vervoerd overeenkomstig het bepaalde in Richtl ĳn 88/407/EEG;
iv) komt van donorstieren die verbl ĳven in spermacentra waar alle runderen in de isolatieperiode di e
voorafgaat aan het binnenbrengen op het centrum, en vervolgens om de zes maanden de volgende test s
hebben ondergaan:
— na 1 juli 1994 in het erkende spermacentrum z ĳn binnengebracht nadat, z ĳ, alvorens z ĳwerden
binnengebracht, met negatief resultaat in een erkend laboratorium op „blue tongue” en op epizoö -
tische hemorragische ziekte z ĳn onderzocht met een van de onderstaande tests,
en die in beide gevallen vervolgens om de zes maanden met negatief resultaat in een erkend laborato -
rium de volgende tests hebben ondergaan:— een competitieve Elisa op „blue tongue” overeenkomstig b ĳlage E;
— een agargelimmunodiffustietest overeenkomstig b ĳlage E en een virusneutralisatietest op all
e
serotypes van epizoötische hemorragische ziekte waarvan bekend is dat z ĳin het land van uitvoe r
voorkomen.
Gedaan te .......................................................,
(plaats)....................................................................
(datum)
/SS74(stempel) (2)Handtekening (2): ...................................................................
Naam in drukletters: ................................................................
Officiële titel: .......................................................................
(1) Doorhalen wat niet van toepassing is.
(2) De kleur van de handtekening en van het stempel moet verschillen van die van de gedrukte tekst.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 16
▼B
DEEL 2
Lĳst van landen die gebruik mogen maken van het gezondheidscertificaat
volgens het model in deel 1 van deze b ĳlage
CANADA Met uitzondering van het gebied Okanagan Valley in Brits Columbia,
omschreven als het gebied dat omsloten wordt door een l ĳn vanaf het
punt op de grens tussen Canada en de Verenigde Staten van Amerikamet de coördinaten 120 °15/prime1WL, 49 °NB, noordwaarts tot het punt
met de coördinaten 119 °35/prime1WL, 50 °30/prime1NB, noordoostwaarts tot
het punt met de coördinaten 119 °WL, 50 °45/prime1NB, zuidwaarts tot het
punt op de grens tussen Canada en de Verenigde Staten van Amerikamet de coördinaten 118 °15/prime1WL, 49 °NB.
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 17
▼B
BĲLAGE D
DEEL 1
GEZONDHEIDSCERTIFICAAT
voor de invoer van rundersperma

1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 18
▼B
13. Ondergetekende, officieel dierenarts, verklaart van de inhoud van Richtl ĳn 88/407/EEG van de Raad, zoal s
sedertdien gew ĳzigd, kennis te hebben genomen en verklaart voorts hetgeen volgt:
a) ............................................................................................................................. .....
(naam van het land van uitvoer)
is in de laatste twaalf maanden vóór de winning van het voor uitvoer bestemde sperma en tot de datum va n
verzending daarvan vr ĳgeweest van runderpest en van mond- en klauwzeer en tegen geen van dez e
ziekten is in die periode ingeënt;
b) het spermacentrum waar het voor uitvoer bestemde sperma is gewonnen:
i) is erkend overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
ii) functioneert en wordt gecontroleerd overeenkomstig het bepaalde in b ĳlage A, hoofdstuk II, va n
Richtl ĳn 88/407/EEG;
iii) is in de laatste dertig dagen vóór de datum waarop het uit te voeren sperma is gewonnen en tot derti g
dagen na de spermawinning (wanneer het om vers sperma gaat, tot op de dag van verzending) vr ĳ
geweest van rabies, tuberculose, brucellose, miltvuur en besmettel ĳke boviene pleuropneumonie;
c) de runderen in het spermacentrum:
i) komen uit beslagen en/of z ĳn geboren uit moederdieren die voldoen aan de in b ĳlage B, hoofdstuk I,
van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen;
ii) hebben, alvorens z ĳzĳn geïsoleerd, de krachtens b ĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EE G
vereiste tests ondergaan;
iii) z ĳn, alvorens z ĳtot het centrum z ĳn toegelaten, geïsoleerd en onderzocht overeenkomstig het bepaald e
in bĳlage B, hoofdstuk I, van Richtl ĳn 88/407/EEG;
iv) hebben, indien z ĳsedert ten minste één jaar in het spermacentrum verbl ĳven, de in b ĳlage B,
hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG vastgestelde routinetests ondergaan;
d) het uit te voeren sperma:
i) komt van donordieren die in de laatste zes maanden vóór het winnen van het uit te voeren sperma i n
.............................................................................................................................
(naam van het land van uitvoer)
hebben verbleven en die aan de in b ĳlage C van Richtl ĳn 88/407/EEG vervatte eisen voldoen;
ii) komt van donordieren die:
— in een spermacentrum verbl ĳven waar alle runderen in de laatste twaalf maanden vóór de winnin g
van het uit te voeren sperma met negatief resultaat een serumneutralisatietest of een Elisa o p
infectieuze boviene rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) hebben onder -
gaan, (1)
of
— negatief hebben gereageerd op een serumneutralisatietest of een Elisa op infectieuze bovien e
rhinotracheïtis/infectieuze pustuleuze vulvovaginitis (IBR/IPV) die is verricht in de laatste twaal f
maanden vóór de winning van het uit te voeren sperma, (1)
of
—z ĳn ingeënt overeenkomstig b ĳlage B, hoofdstuk II, van Richtl ĳn 88/407/EEG ►(1)(1);◄
(1) Doorhalen wat niet van toepassing is.
►(1)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 19
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) werd behandeld, opgeslagen en vervoerd overeenkomstig het bepaalde in Richtl ĳn 88/407/EEG;
iv) komt van donorstieren waarb ĳtweemaal, met een tussenpoos van ten hoogste twaalf maanden, me t
negatief resultaat de volgende tests z ĳn verricht voor en na een spermawinning (de test na d e
spermawinning moet z ĳn verricht op het monster dat ten minste 21 dagen na het winnen van het voo r
uitvoer bestemde sperma is genomen):
— een competitieve Elisa op „blue tongue” overeenkomstig b ĳlage E;
— een agargelimmunodiffusietest overeenkomstig b ĳlage E en een virusneutralisatietest op alle sero -
types van epizoötische hemorragische ziekte waarvan bekend is dat z ĳin het land van uitvoe r
voorkomen;
— een serumneutralisatietest op het Akabanevirus.
Gedaan te .......................................................,
(plaats)...................................................................
(datum)
/SS74(stempel) (2)Handtekening (2): ...................................................................
Naam in drukletters: ................................................................
Officiële titel: .......................................................................
(1) Doorhalen wat niet van toepassing is.
(2) De kleur van de handtekening en van het stempel moet verschillen van die van de gedrukte tekst.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 20
▼B
DEEL 2
Lĳstvanderdelandendievanhetgezondheidscertificaatvolgenshetmodel
in deel 1 van deze b ĳlage gebruik mogen maken
AUSTRALIË
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 21
▼B
BĲLAGE E
Protocol voor een „blocking” of competitieve Elisa („enzyme-linked immu-
nosorbent assay”) met gebruik van een groepspecifiek monoklonaal antili-
chaam voor de opsporing van antilichamen tegen virus van blue tongue
COMPETITIEVE ELISAVOOR DE OPSPORING VA N BLUE TONGUE
MET GEBRUIK VAN EEN MONOKLONAAL ANTILICHAAM 3-17-A3
Met de test kunnen antilichamen tegen alle bekende serotypes van het blue-
tonguevirus (BTV) worden opgespoord.
Het principe van de test is de onderbreking van de reactie tussen BTV-antigeen
en een groepspecifiek monoklonaal antilichaam (3-17-A3) door toevoeging vanverdunningen van het testserum. De in het testserum aanwezige antilichamentegen BTV blokkeren de reactiviteit van het monoklonaal antilichaam (MAB) enleiden tot een vermindering van de verwachte kleurontwikkeling b ĳtoevoeging
van enzymsubstraat.
MATERIALEN EN REAGENTIA
1. Microtiterplaatjes met vlakke bodem.
2. Antigeen: bereid zoals hierna beschreven.3. Blokkeerbuffer: 5 % (g/V) „Marvel” gedroogd melkpoeder, 0,1 % (V/V).
Tween 20 (geleverd als polyoxyethyleensorbitonmonolauraat-siroop) in
PBS.
4. Monoklonaal antilichaam: 3-17-A3 (geleverd in de vorm van supernatant
van hybridoom weefselcultuur) opgeslagen b ĳ−2 0 °C of gevriesdroogd,
vóór gebruik verdund tot 1/50 met een blokkeerbuffer, en gericht tegen hetgroepspecifieke polypeptide p7.
5. Conjugaat: kon ĳn-antimuis-globuline (geadsorbeerd en geëlueerd), gecon-
jugeerd met mierikswortelperoxidase en in het donker bewaard b ĳ4°C.
6. Substraat en chromogeen: 0,2 g orthofenyleendiamine (OPD), opgelost in
een buffer bestaande uit 2,553 g citroenzuur en 4,574 g dinatriumhydroge-enorthofosfaat, waaraan tot 500 ml gedistilleerd water is toegevoegd,verdeeld in fracties van 25 ml en in het donker bewaard b ĳ−2 0 °C, met
12µ/25 ml waterstofperoxide (30 % g/v) die onmiddell ĳk vóór gebruik
worden toegevoegd.
VOORZICHTIG MET ORTHOFENYLEENDIAMINE — GEBRUIK
GUMMIHANDSCHOENEN. VERMOEDEL ĲK MUTAGEEN.
7. Een molair zwavelzuur: 26,6 ml zuur, toegevoegd aan 473,4 ml gedistil-
leerd water.
LET OP: STEEDS ZUUR TOEVOEGEN AAN WATER, NOOIT
WATER AAN ZUUR.
8. Roteerschudapparaat.9. Elisa-afleesapparaat (de test kan visueel worden afgelezen).
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 22
▼B
PROEFOPSTELLING
PROTOCOL
Blanco-controle
Rĳ1.A-H is een blanco-controle, bestaande uit BTV-antigeen en conjugaat. Deze
kan worden gebruikt om een nulwaarde in te stellen op het Elisa-afleesapparaat.
MAB-controle
Rĳ2.A-H is de MAB-controle en bestaat uit BTV-antigeen, monoklonaal antili-
chaam en conjugaat. Dit vormt een negatieve controle. Het gemiddelde van degemeten optische dichtheid van deze controler ĳis de 0 %-inhibitiewaarde.
Positieve controle
Rĳ3.A-H is de positieve controle. Deze bestaat uit BTV-antigeen, voor BTV
positieve antiserumverdunningen, monoklonaal antilichaam en conjugaat. Dezecontrole wordt in de test opgenomen om na te gaan of de test goed functioneerten voor alle tests zouden analoge inhibitieniveaus moeten worden verkregen.
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 23
▼B
Testsera
Bĳde hierboven beschreven proefopstelling kunnen 18 sera worden getest in de
verdunningen 1/2, 1/4, 1/8 en 1/16. Dit zal een indicatie geven van de antili-chaamtiter in de testsera. De verdunningsreeks zou verder kunnen worden uitge-breid ter verkr ĳging van eindpunttiters van de serumverdunning. Anderz ĳds
kunnen, in het kader van serologische controles op grote schaal, sera wordengetest in één enkele verdunning (1/4) of in twee verdunningen (1/2 en 1/4) alseen snelle screeningtest.
METHODE
1. Verdun BTV-antigeen tot een gepretitreerde concentratie in PBS, bewerk
kort met ultrasone trillingen ten einde de virusklontjes te verdunnen(indien geen ultrasoonapparaat beschikbaar is, krachtig pipetteren) en voeg50µl toe aan alle putjes van de Elisa-plaat. Tik tegen de z ĳkanten van de
plaat om het antigeen te verspreiden.
2. Incubeer b ĳ37 °C gedurende 60 minuten op een roteerschudapparaat.
Spoel de platen driemaal door ze onder water te zetten en de putjes metniet-steriele PBS te ledigen en droog af op absorberend papier.
3. Voeg per putje 50 µl blokkeerbuffer toe. Voeg testsera en positief serum
toe aan de juiste putjes en verdun alle putjes met behulp van een meerka-naalspipet. Voeg geen sera toe aan de blanco-controle of de MAB-controle.
4. Los, onmiddell ĳk na toevoeging van de testsera, MAB op in een blokkeer-
buffer (tot een vooraf getitreerde oplossing) en voeg 50 µl toe aan alle
putjes van de plaat, met uitzondering van de blanco-controle.
5. Incubeer b ĳ37 °C gedurende 60 minuten op een roteerschudapparaat.
Spoel driemaal met PBS en droog af.
6. Verdun kon ĳn-antimuisconcentraat tot 1/5 000 in de blokkeerbuffer en
voeg 50 µl toe aan alle putjes van de plaat.
7. Incubeer b ĳ37 °C gedurende 60 minuten op een roteerschudapparaat.
Spoel driemaal met PBS en droog af.
8. Ontdooi de OPD en voeg onmiddell ĳk vóór gebruik 12 µl van 30 %
waterstofperoxide toe aan elke 25 ml OPD. Voeg 50 µl toe aan alle putjes
van de plaat. Laat de kleur ontwikkelen gedurende ongeveer tien minutenen stop de reactie met 1 M zwavelzuur (50 µl per putje). De kleur zou
moeten ontwikkelen in de MAB-controleputjes en in die putjes die serabevatten zonder antilichaam tegen BTV.
9. Onderzoek de platen en registreer de resultaten hetz ĳoptisch, hetz ĳmet
gebruik van een spectrofotometer.
ANALYSE VAN DE RESULTATEN
Bereken het gemiddelde OD-resultaat van de MAB-controles. Dit is de 0 %-inhi-
bitiewaarde. De gemeten optische dichtheid van de testsera wordt uitgedrukt inprocentuele inhibitiewaarden, met gebruik van de volgende formule:
Procentuele inhibitiewaarde = 100 − OD in aanwezigheid van testserumOD in
afwezigheid van testserum × 100.
Inhibitiewaarden van meer dan 40 %, b ĳeen serumverdunning van 1/4, worden
als positief beschouwd. Optisch lezen is mogel ĳk aangezien 40 % inhibitie de
laagste waarde is die gemakkel ĳk met het oog kan worden onderscheiden.
BEREIDING VAN HET BTV-ELISA-ANTIGEEN
1. Spoel tien Rouxkolven met BHK.21-celcultures driemaal met een
serumvr ĳEagle’s medium, en besmet ze met blue-tonguevirus serotype 1
in serumvr ĳEagle’s medium.
2. Incubeer b ĳ37°C en onderzoek dagel ĳks op cytopathogeen effect (cpe)
3. Wanneer cpe duidel ĳki sb ĳ80-90 % van de cellaag van elke Rouxkolf,
verzamel dan het virus door het losschudden van mogel ĳk nog aan het
glas vastgehechte cellen.
4. Centrifugeer b ĳ2 000-3 000 rpm ten einde de cellen neer te slaan.
5. Verw ĳder het supernatant en suspendeer de cellen opnieuw in ongeveer
30 ml PBS, me t 1 % „Sarkosyl” en 2 ml fenylmethylsulfonyl-fluoride
(lysisbuffermengsel). Dit kan er de oorzaak van z ĳn dat de cellen een gel
vormen en om dit effect te verminderen kan meer lysisbuffermengselworden toegevoegd.
NB:fenylmethylsulfonyl-fluoride is schadel ĳk — hanteer met uiterste
voorzichtigheid.
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 24
▼B
6. Breek de cellen gedurende 60 seconden met een ultrasone sonde b ĳeen
amplitude van 30 micron.
7. Centrifugeer tien minuten b ĳ10 000 rpm.
8. Bewaar het supernatant b ĳ+4 °C en breng de overbl ĳvende celpellet
opnieuw in suspensie in 10-20 ml lysisbuffermengsel.
9. Bewerk met ultrasone trillingen en laat uitklaren, en sla het supernatant
telkens op: doe dit in totaal driemaal.
10. Voeg de supernatants samen en centrifugeer bi j24 000 rpm gedurende
120 minuten, b ĳ+4 °C op een 5 ml-kussen van 40 % sucrose (G/V in
PBS) met behulp van 30 ml Beckmann-centrifugeerbuizen en een SW28-rotor.
11. Giet het supernatant weg, verw ĳder de vloeistof grondig uit de buisjes en
breng de pellet opnieuw in suspensie in PBS met het ultrasoonapparaat.Sla het antigeen op in gel ĳke delen b ĳ−7 0 °C.
TITRERING VAN BTV-ELISA-ANTIGEEN
Blue-tongue-Elisa-antigeen wordt getitreerd met de indirecte Elisa. Tweevoudige
oplossingen van antigeen worden getitreerd tegen een constante verdunning(1/50) van monoklonaal antilichaam 3-17-A3. De test wordt uitgevoerd metinachtneming van de onderstaande voorschriften.
METHODE
1. Verdun BTV-antigeen in PBS op de hele microtiterplaat met een meerka-
naalspipet in een tweevoudige verdunningsserie (50 µl/putje).
2. Incubeer gedurende een uur b ĳ37 °C op een roteerschudapparaat.
3. Spoel de platen driemaal met PBS.4. Voeg 50 µl monoklonaal antilichaam 3-17-A3 (verdund tot 1/50) toe aan
elk putje van de microtiterplaat.
5. Incubeer gedurende een uur b ĳ37 °C op een roteerschudapparaat.
6. Spoel de platen driemaal met PBS.7. Voeg aan elk putje van de microtiterplaat 50 µl kon ĳn-antimuisglobuline
toe, geconjugeerd met mierikswortelperoxidase en verdund tot een gepreti-treerde optimale concentratie.
8. Incubeer gedurende een uur b ĳ37 °C op een roteerschudapparaat.
9. Voeg substraat en chromogeen toe, zoals hierboven beschreven. Zet de
reactie stop na tien minuten door toevoeging van 1 molair zwavelzuur (50µl/putje).
In de competitieve test moet het monoklonaal antilichaam in overmaat aanwezig
zĳn; daarom wordt een verdunning van het antigeen gekozen die ligt op de
titratiecurve (niet op het horizontale gedeelte), wat ongeveer 0,8 OD geeft na tienminuten.
Protocol voor een agargelimmunodiffusietest voor de opsporing van antili-
chamen tegen epizoötische hemorragische ziekte
De agargelimmunodiffusietest wordt uitgevoerd met inachtneming van de onder-
staande voorschriften:
MATERIAAL EN REAGENTIA
1. Antigeen
Precipiterend antigeen wordt bereid in een celcultuur die geschikt is voor de
snelle vermeerdering van een referentiestam van het blue-tonguevirus. B ĳ
voorkeur wordt hiervoor gebruik gemaakt van BHK- of Verocellen. Hetantigeen bevindt zich in het aan het einde van de virusgroei verkregensupernatant, maar moet 50 tot 100 keer worden geconcentreerd om effectief tezĳn. Daartoe kan om het even welke gestandaardiseerde methode voor eiwit-
concentratie worden gebruikt; het virus in het antigeen kan worden geïnacti-veerd door toevoeging van 0,3 % (v/v) beta-propiolacton.
2. Positief controleserum
Met gebruikmaking van het internationale referentie-antiserum en -antigeen
wordt een nationaal standaardserum geproduceerd, dat voor een optimaleverhouding wordt gestandaardiseerd ten opzichte van het internationale refe-rentieserum; vervolgens wordt het gevriesdroogd en b ĳiedere test als positief
controleserum gebruikt.
1994D0577 — NL — 05.07.1999 — 001.001 — 25
▼B
3. Testserum
PROCEDURE
1. 1 %-ige agar, in een boraat- of natriumbarbituraatbuffer, pH 8,5 à 9,0,
wordt in een petrischaaltje gegoten, en wel zo dat het laagje agar een dikteheeft van ten minste 3,0 mm.
2. In de agar worden zeven vochtvr ĳe putjes gemaakt, met een diameter van
elk 5 mm. Eén putje ligt centraal en de zes andere liggen er omheen in eencirkel met een straal van 3 mm:
3. Het centrale putje wordt gevuld met het standaardantigeen. De perifere
putjes 2, 4 en 6 worden gevuld met het positieve controleserum en deputjes 1, 3 en 5 met het testserum.
4. Het geheel wordt gedurende 72 uur b ĳkamertemperatuur geïncubeerd in
een gesloten vochtige kamer.
INTERPRETATIE
Een testserum is positief indien het een specifieke precipitatiel ĳn vormt met het
antigeen en een volledig identieke l ĳn met het controleserum. Een testserum is
negatief indien het geen specifieke l ĳn vormt met het antigeen en indien het de
lĳn van het controleserum niet buigt. De petrischaaltjes moeten worden bekeken
bĳdonkerveldbelichting met indirect licht.