2.

l’allegato VI è così modificato: a) la parte II è così modificata: i) nel capitolo 1, sezione 1, la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «Le visite sanitarie e il campionamento ai fini della sorveglianza di cui all’articolo 3, paragrafo 2, lettera b), punti ii) e iii), devono soddisfare le seguenti prescrizioni:»; ii) il capitolo 2 è così modificato: — nella sezione 1, la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «Le visite sanitarie e il campionamento ai fini della sorveglianza di cui all’articolo 3, paragrafo 2, lettera b), punti ii) e iii), devono soddisfare le seguenti prescrizioni:»; — la sezione 5 è sostituita dalla seguente: «Sezione 5 Metodi diagnostici e di campionamento 1. Gli organi o il materiale tissutale da sottoporre a campionamento ed esame sono: a) istologia: rene anteriore, fegato, cuore, pancreas, intestino, milza e branchie; b) immunoistochimica: rene medio e cuore, comprese le valvole e il bulbo arterioso; c) analisi RT-PCR tradizionale e RT-qPCR: rene medio e cuore; d) coltura virale: rene medio, cuore e milza. Si possono aggregare nel medesimo pool parti di organi provenienti da un massimo di cinque pesci. 2. Il metodo diagnostico da utilizzare per la concessione o il mantenimento dello status di indenne da infezione da ISAV con delezione a livello di HPR a norma delle sezioni 2, 3 e 4 deve essere la RT-qPCR, seguita da RT-PCR tradizionale e sequenziamento del gene codificante la proteina HE dei campioni positivi conformemente a procedure e metodi particolareggiati, che devono essere gli stessi approvati dal laboratorio di riferimento dell’Unione europea per le malattie dei pesci. In caso di esito positivo del sequenziamento dell’ISAV con delezione a livello di HPR, prima di attuare le prime misure di controllo di cui agli articoli da 55 a 65 devono essere sottoposti a prove ulteriori campioni. Tali campioni devono essere sottoposti alle seguenti prove, conformemente alle procedure e ai metodi particolareggiati approvati dal laboratorio di riferimento dell’Unione europea per le malattie dei pesci: a) analisi dei campioni con RT-qPCR, seguita da RT-PCR tradizionale e sequenziamento del gene codificante la proteina HE dei campioni positivi per verificare la delezione a livello di HPR; oppure b) ricerca dell’antigene dell’ISAV nei preparati tissutali mediante anticorpi specifici contro l’ISAV; oppure c) isolamento in coltura cellulare, seguito da identificazione dell’ISAV con delezione a livello di HPR. 3. Quando è necessario confermare o escludere un sospetto di infezione da ISAV con delezione a livello di HPR conformemente all’articolo 55, le procedure per le visite, il campionamento e le prove devono soddisfare le prescrizioni riportate di seguito: a) lo stabilimento sospetto deve essere sottoposto ad almeno una visita sanitaria e a un campionamento di 10 pesci moribondi, se sono stati riscontrati segni clinici o lesioni post mortem compatibili con l’infezione da ISAV con delezione a livello di HPR, o di almeno 30 pesci, se non sono stati riscontrati segni clinici o lesioni post mortem di tale genere. I campioni devono essere sottoposti a prove mediante uno o più dei metodi diagnostici di cui al punto 2, conformemente alle procedure e ai metodi diagnostici particolareggiati approvati dal laboratorio di riferimento dell’Unione europea per le malattie dei pesci; b) in caso di esito positivo per l’infezione da ISAV con delezione a livello di HPR, prima di attuare le prime misure di controllo di cui all’articolo 58 devono essere sottoposti a prove ulteriori campioni. Un caso sospetto di infezione da ISAV con delezione a livello di HPR deve essere confermato conformemente ai criteri seguenti, mediante uno o più procedure e metodi diagnostici particolareggiati approvati dal laboratorio di riferimento dell’Unione europea per le malattie dei pesci: i) ricerca dell’ISAV con RT-qPCR, seguita da RT-PCR tradizionale e sequenziamento del gene codificante la proteina HE per verificare la delezione a livello di HPR; oppure ii) ricerca dell’ISAV nei preparati tissutali mediante anticorpi specifici contro l’ISAV; oppure iii) isolamento e identificazione dell’ISAV su coltura cellulare prelevata da almeno un campione di qualsiasi pesce proveniente dallo stabilimento; c) se sono stati riscontrati risultati clinici, anatomopatologici o istopatologici compatibili con l’infezione, tali risultati devono essere corroborati mediante uno o più metodi diagnostici tra quelli stabiliti al punto 3, lettera b), conformemente alle procedure e ai metodi particolareggiati approvati dal laboratorio di riferimento dell’Unione europea per le malattie dei pesci. Il sospetto di infezione da ISAV con delezione a livello di HPR può essere escluso se le prove e le visite sanitarie effettuate nel corso di un periodo di 12 mesi dalla data del sospetto non evidenziano alcun ulteriore elemento comprovante la presenza del virus.»; iii) nel capitolo 3, sezione 1, la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «Le visite sanitarie e il campionamento ai fini della sorveglianza di cui all’articolo 3, paragrafo 2, lettera b), punti ii) e iii), devono soddisfare le seguenti prescrizioni:»; iv) nel capitolo 4, sezione 1, la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «Le visite sanitarie e il campionamento ai fini della sorveglianza di cui all’articolo 3, paragrafo 2, lettera b), punti ii) e iii), devono soddisfare le seguenti prescrizioni:»; v) nel capitolo 5, sezione 1, la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «Le visite sanitarie e il campionamento ai fini della sorveglianza di cui all’articolo 3, paragrafo 2, lettera b), punti ii) e iii), devono soddisfare le seguenti prescrizioni:»; vi) nel capitolo 6, sezione 1, la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «Le visite sanitarie e il campionamento ai fini della sorveglianza di cui all’articolo 3, paragrafo 2, lettera b), punti ii) e iii), devono soddisfare le seguenti prescrizioni:»; b) la parte III è così modificata: i) nel capitolo 3, sezione 3, lettera b), la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «b) il ripopolamento sia effettuato con molluschi provenienti da stabilimenti:»; ii) nel capitolo 4, sezione 3, lettera b), la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «b) il ripopolamento sia effettuato con molluschi provenienti da stabilimenti:»; iii) nel capitolo 5, sezione 3, lettera b), la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «b) il ripopolamento sia effettuato con molluschi provenienti da stabilimenti:»; iv) nel capitolo 6, sezione 3, lettera b), la frase introduttiva è sostituita dalla seguente: «b) il ripopolamento sia effettuato con crostacei provenienti da stabilimenti:».