ALLEGATO

1. Schemi di campionamento delle sementi, ad eccezione delle sementi delle varietà di Capsicum spp. notoriamente resistenti all’organismo nocivo specificato

Il campionamento delle sementi per le prove è effettuato nell’ambito dei seguenti schemi di campionamento, a seconda dei lotti di sementi, come indicato nella pertinente tabella della norma internazionale per le misure fitosanitarie n. 31, Metodologie per il campionamento delle partite (ISPM 31):

— per i lotti di sementi contenenti non oltre 3 000 sementi: applicazione di uno schema di campionamento ipergeometrico, in grado di individuare con un’affidabilità del 95 % un livello di presenza di piante infette del 10 % o superiore;

— per i lotti di sementi contenenti oltre 3 000 sementi ma meno di 30 000 sementi: applicazione di uno schema di campionamento in grado di individuare con un’affidabilità del 95 % un livello di presenza di piante infette dell’1 % o superiore;

— per i lotti di sementi contenenti oltre 30 000 sementi: applicazione di uno schema di campionamento in grado di individuare con un’affidabilità del 95 % un livello di presenza di piante infette dello 0,1 % o superiore.

Per i metodi di reazione a catena della polimerasi (PCR) i sottocampioni comprendono non oltre 1 000 sementi.

Per il metodo ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) i sottocampioni comprendono non oltre 250 sementi.

2. Schemi di campionamento delle piante da impianto, ad eccezione di quelle delle varietà di Capsicum spp. notoriamente resistenti all’organismo nocivo specificato

Per le piante da impianto, ad eccezione delle piante da impianto delle varietà di Capsicum spp. notoriamente resistenti all’organismo nocivo specificato, si raccolgono 200 foglie per sito di produzione e per cultivar, preferibilmente giovani foglie della parte superiore delle piante.

Nel caso di piante sintomatiche il campionamento per le prove è effettuato su almeno tre foglie sintomatiche.

3. Metodi di prova per rilevare e identificare l’organismo nocivo specificato sulle sementi, ad eccezione delle sementi delle varietà di Capsicum spp. notoriamente resistenti all’organismo nocivo specificato

Per rilevare l’organismo nocivo specificato sulle sementi specificate si applica uno dei metodi di prova seguenti:

— ELISA, fino al 1o ottobre 2020, solo per confermare l’indennità dall’organismo nocivo specificato ai fini dell’emissione dei passaporti delle piante o dei certificati fitosanitari;

— RT-PCR real-time con l’utilizzo dei primer e delle sonde descritti nel protocollo ISF (2020) (1);

— RT-PCR real-time con l’utilizzo dei primer e delle sonde di Menzel e Winter (Acta Horticulturae, in stampa).

Qualora la prova per il rilevamento dell’organismo nocivo abbia esito positivo, è eseguita una seconda prova con un metodo diverso da quello applicato per il rilevamento, scelto fra i metodi RT-PCR real-time sopraelencati, utilizzando lo stesso campione per confermare l’identificazione. In caso di conflitto tra i risultati del rilevamento e i risultati dell’identificazione ottenuti per le sementi confettate, il rivestimento delle sementi è rimosso e le sementi sono sottoposte a una nuova prova.

4. Metodi di prova per rilevare e identificare l’organismo nocivo specificato sulle piante da impianto specificate, ad eccezione delle piante da impianto delle varietà di Capsicum spp. notoriamente resistenti all’organismo nocivo specificato, e sui frutti specificati

Per rilevare e identificare l’organismo nocivo specificato sulle piante da impianto specificate, ad eccezione delle piante da impianto specificate delle varietà di Capsicum spp. notoriamente resistenti all’organismo nocivo specificato, e sui frutti specificati, si applica uno dei metodi di prova seguenti:

— ELISA, solo per il materiale sintomatico;

— RT-PCR convenzionale con l’utilizzo dei primer di Alkowni et al. (2019);

— RT-PCR convenzionale con l’utilizzo dei primer di Rodriguez-Mendoza et al. (2019);

— RT-PCR real-time con l’utilizzo dei primer e delle sonde descritti nel protocollo ISF (2020) (2);

— RT-PCR real-time con l’utilizzo dei primer e delle sonde di Menzel e Winter (Acta Horticulturae, in stampa).

Qualora la prova per il rilevamento dell’organismo nocivo abbia esito positivo, è eseguita una seconda prova con un metodo diverso da quello applicato per il rilevamento, scelto fra i metodi RT-PCR sopraelencati, utilizzando lo stesso campione per confermare l’identificazione.

(1) Protocollo elaborato dalla International Seed Federation (International Seed Health Initiative for Vegetable Crops, ISHI-Veg).

(2) Protocollo elaborato dalla International Seed Federation (International Seed Health Initiative for Vegetable Crops, ISHI-Veg).