2)

lisätään E 960c(i):tä koskevan kohdan jälkeen kohdat seuraavasti: ”E 960c(ii) HYVIN PUHDISTETUISTA STEVIANLEHTIUUTTEISTA SAATAVASTA REBAUDIOSIDI A:STA ENTSYMAATTISEN KONVERSION AVULLA TUOTETTU REBAUDIOSIDI M Synonyymit Määritelmä Rebaudiosidi M on hyvin puhdistetuista stevianlehtiuutteista saatavasta rebaudiosidi A:sta entsymaattisen konversion avulla tuotettu stevioliglykosidi, joka koostuu pääasiassa rebaudiosidi M:stä sekä pienistä määristä muita stevioliglykosideja, kuten rebaudiosidi A:ta ja rebaudiosidi D:ta. Rebaudiosidi M:ää tuotetaan Stevia rebaudiana Bertoni -kasvista peräisin olevista hyvin puhdistetuista stevioliglykosidiuutteista saatavasta rebaudiosidi A:sta (stevioliglykosidipitoisuus 95 %) entsymaattisen konversion avulla käyttäen UDP-glukosyylitransferaasi- ja sakkaroosisyntaasi-entsyymejä, jotka on tuotettu muuntogeenisillä E. coli -kannoilla (pPM294, pFAF170 ja pSK401), jotka helpottavat glukoosin siirtymistä sakkaroosista ja UDP-glukoosista stevioliglykosideihin glykosidisidosten kautta. Kun entsyymit on poistettu neste-kiinteä-erotuksella ja lämpökäsittelyllä, puhdistuksessa rebaudiosidi M väkevöidään hartsiin imeyttämällä, minkä jälkeen stevioliglykosidit kiteytetään uudelleen, jolloin saadaan lopputuote, joka sisältää rebaudiosidi M:ää vähintään 95 %. Elintarvikelisäaineessa ei saa olla havaittavissa E. colin (pPM294, pFAF170 ja pSK401) elinkelpoisia soluja eikä DNA:ta. Kemiallinen nimi Rebaudiosidi M: 13-[(2-O-β-D-glukopyranosyyli-3-O-β-D-glukopyranosyyli-β-D-glukopyranosyyli)oksi]kaur-16-en-18-iinihappo, 2-O-β-D-glukopyranosyyli-3-O-β-D-glukopyranosyyli-β-D-glukopyranosyyliesteri Molekyylikaava Yleisnimi Kaava Muuntokerroin Rebaudiosidi M C56H90O33 0,25 Molekyylipaino ja CAS-numero Yleisnimi CAS-nro Molekyylipaino (g/mol) Rebaudiosidi M 1220616-44-3 1 291,29 Pitoisuus Vähintään 95 % rebaudiosidi M:ää kuiva-aineesta. Kuvaus Väriltään valkoisesta vaaleankeltaiseen vaihtelevaa jauhetta, noin 150–350 kertaa niin makeaa kuin sakkaroosi (sakkaroosiekvivalentti 5 %). Tunnistaminen Liukoisuus Liukoisuus veteen vaihtelee hyvin liukenevasta niukasti liukenevaan pH 4,5–7,0 (1:100 liuos) Puhtaus Kokonaistuhka Enintään 1 % Kuivaushäviö Enintään 6 % (105 °C, 2 h) Liuotinjäämät Enintään 5 000 mg kg:ssa etanolia Arseeni Enintään 0,015 mg/kg Lyijy Enintään 0,2 mg/kg Kadmium Enintään 0,015 mg/kg Elohopea Enintään 0,07 mg/kg Proteiinijäämät Enintään 5 mg/kg Partikkelikoko Vähintään 74 μm [kun käytetään seulaa nro 200, jossa hiukkaskoon raja 74 μm] E 960c(iii) HYVIN PUHDISTETUISTA STEVIANLEHTIUUTTEISTA SAATAVASTA REBAUDIOSIDI A:STA ENTSYMAATTISEN KONVERSION AVULLA TUOTETTU REBAUDIOSIDI D Synonyymit Määritelmä Rebaudiosidi D on hyvin puhdistetuista stevianlehtiuutteista saatavasta rebaudiosidi A:sta entsymaattisen konversion avulla tuotettu stevioliglykosidi, joka koostuu pääasiassa rebaudiosidi D:stä sekä pienistä määristä muita stevioliglykosideja, kuten rebaudiosidi A:ta ja rebaudiosidi M:ää. Rebaudiosidi D:tä tuotetaan Stevia rebaudiana Bertoni -kasvista peräisin olevista hyvin puhdistetuista stevioliglykosidiuutteista saatavasta rebaudiosidi A:sta (stevioliglykosidipitoisuus 95 %) entsymaattisen konversion avulla käyttäen UDP-glukosyylitransferaasi- ja sakkaroosisyntaasi-entsyymejä, jotka on tuotettu muuntogeenisillä E. coli -kannoilla (pPM294, pFAF170 ja pSK401), jotka helpottavat glukoosin siirtymistä sakkaroosista ja UDP-glukoosista stevioliglykosideihin glykosidisidosten kautta. Kun entsyymit on poistettu neste-kiinteä-erotuksella ja lämpökäsittelyllä, puhdistuksessa rebaudiosidi D väkevöidään hartsiin imeyttämällä, minkä jälkeen stevioliglykosidit kiteytetään uudelleen, jolloin saadaan lopputuote, joka sisältää rebaudiosidi D:tä ja A:ta vähintään 95 %. Elintarvikelisäaineessa ei saa olla havaittavissa E. colin (pPM294, pFAF170 ja pSK401) elinkelpoisia soluja eikä DNA:ta. Kemiallinen nimi Rebaudiosidi D: 13-[(2-O-β-D-glukopyranosyyli-3-O-β-D-glukopyranosyyli-β-D-glukopyranosyyli)oksi]kaur-16-en-18-iinihappo, 2-O-β-D-glukopyranosyyli-β-D-glukopyranosyyliesteri Rebaudiosidi A: 13-[(2-O-β-D-glukopyranosyyli-3-O-β-D-glukopyranosyyli-β-D-glukopyranosyl)oksi]kaur-16-en-18-iinihappo, β-D-glukopyranosyyliesteri Molekyylikaava Yleisnimi Kaava Muuntokerroin Rebaudiosidi D C50H80O28 0,29 Rebaudiosidi A C44H70O23 0,33 Molekyylipaino ja CAS-numero Yleisnimi CAS-nro Molekyylipaino (g/mol) Rebaudiosidi D 63279-13-0 1 291,15 Rebaudiosidi A 58543-16-1 967,01 Pitoisuus Vähintään 95 % rebaudiosidi D:tä ja A:ta kuiva-aineesta. Kuvaus Väriltään valkoisesta vaaleankeltaiseen vaihtelevaa jauhetta, noin 150–350 kertaa niin makeaa kuin sakkaroosi (sakkaroosiekvivalentti 5 %). Tunnistaminen Liukoisuus Liukoisuus veteen vaihtelee hyvin liukenevasta niukasti liukenevaan pH 4,5–7,0 (1:100 liuos) Puhtaus Kokonaistuhka Enintään 1 % Kuivaushäviö Enintään 6 % (105 °C, 2 h) Liuotinjäämät Enintään 5 000 mg kg:ssa etanolia Arseeni Enintään 0,015 mg/kg Lyijy Enintään 0,2 mg/kg Kadmium Enintään 0,015 mg/kg Elohopea Enintään 0,07 mg/kg Proteiinijäämät Enintään 5 mg/kg Partikkelikoko Vähintään 74 μm [kun käytetään seulaa nro 200, jossa hiukkaskoon raja 74 μm] E 960c(iv) HYVIN PUHDISTETUISTA STEVIANLEHTIUUTTEISTA SAATAVASTA STEVIOSIDISTÄ ENTSYMAATTISEN KONVERSION AVULLA TUOTETTU REBAUDIOSIDI AM Synonyymit Määritelmä Rebaudiosidi AM on hyvin puhdistetuista stevianlehtiuutteista saatavasta steviosidista entsymaattisen konversion avulla tuotettu stevioliglykosidi, joka koostuu pääasiassa rebaudiosidi AM:sta sekä pienistä määristä muita stevioliglykosideja, kuten steviosidia ja rebaudiosidi E:tä. Rebaudiosidi AM:ää tuotetaan Stevia rebaudiana Bertoni -kasvista peräisin olevista hyvin puhdistetuista stevioliglykosidiuutteista saatavasta steviosidista (stevioliglykosidipitoisuus 95 %) entsymaattisen konversion avulla käyttäen UDP-glukosyylitransferaasi- ja sakkaroosisyntaasi-entsyymejä, jotka on tuotettu muuntogeenisillä E. coli -kannoilla (pPM294, pFAF170 ja pSK401), jotka helpottavat glukoosin siirtymistä sakkaroosista ja UDP-glukoosista stevioliglykosideihin glykosidisidosten kautta. Kun entsyymit on poistettu neste-kiinteä-erotuksella ja lämpökäsittelyllä, puhdistuksessa rebaudiosidi AM väkevöidään hartsiin imeyttämällä, minkä jälkeen stevioliglykosidit kiteytetään uudelleen, jolloin saadaan lopputuote, joka sisältää rebaudiosidi AM:ää vähintään 95 %. Elintarvikelisäaineessa ei saa olla havaittavissa E. colin (pPM294, pFAF170 ja pSK401) elinkelpoisia soluja eikä DNA:ta. Kemiallinen nimi Rebaudiosidi AM: 13-[(2-O-β-D-glukopyranosyyli-β-D-glukopyranosyyli)oksi]kaur-16-en-18-iinihappo, 2-O-β-D-glukopyranosyyli-3-O-β-D-glukopyranosyyli-β-D-glukopyranosyyliesteri Molekyylikaava Yleisnimi Kaava Muuntokerroin Rebaudiosidi AM C50 H80 O28 0,29 Molekyylipaino ja CAS-numero Yleisnimi CAS-nro Molekyylipaino (g/mol) Rebaudiosidi AM 2222580-26-7 1 291,15 Pitoisuus Vähintään 95 % rebaudiosidi AM:ää kuiva-aineesta. Kuvaus Väriltään valkoisesta vaaleankeltaiseen vaihtelevaa jauhetta, noin 150–350 kertaa niin makeaa kuin sakkaroosi (sakkaroosiekvivalentti 5 %). Tunnistaminen Liukoisuus Liukoisuus veteen vaihtelee hyvin liukenevasta niukasti liukenevaan pH 4,5–7,0 (1:100 liuos) Puhtaus Kokonaistuhka Enintään 1 % Kuivaushäviö Enintään 6 % (105 °C, 2 h) Liuotinjäämät Enintään 5 000 mg kg:ssa etanolia Arseeni Enintään 0,015 mg/kg Lyijy Enintään 0,2 mg/kg Kadmium Enintään 0,015 mg/kg Elohopea Enintään 0,07 mg/kg Proteiinijäämät Enintään 5 mg/kg Partikkelikoko Vähintään 74 μm [kun käytetään seulaa nro 200, jossa hiukkaskoon raja 74 μm]”