1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 1
Tämä asiakirja on ainoastaan dokumentointitarkoituksiin.Toimielimet eivät vastaa sen sisällöstä.
►B KOMISSION ASETUS (ETY) N:o 2676/90,
annettu 17 päivänä syyskuuta 1990,
yhteisön viinianalyysimenetelmistä
(EYVL L 272, 3.10.1990, s. 1)
Muutettu:
virallinen lehti
N:o sivu päivämäärä
►M1 Komission asetus (ETY) N:o 2645/92, annettu 11 päivänä syyskuuta
1992L 266 10 12.9.1992
►M2 Komission asetus (EY) N:o 60/95, annettu 16 päivänä tammikuuta 1995 L 11 19 17.1.1995
►M3 Komission asetus (EY) N:o 69/96, annettu 18 päivänä tammikuuta 1996 L 14 13 19.1.1996
►M4 Komission asetus (EY) N:o 822/97, annettu 6 päivänä toukokuuta 1997 L 117 10 7.5.1997
►M5 Komission asetus (ETY) N:o 2348/91, annettu 29 päivänä heinäkuuta
1991L 214 39 2.8.1991
►M6 muutettu komission asetuksella (EY) N:o 1932/97, annettu 3 päivänä
lokakuuta 1997L 272 10 4.10.1997
►M7 Komission asetus (EY) N:o 761/1999, annettu 12 päivänä huhtikuuta
1999L 99 4 14.4.1999
►M8 Komission asetus (EY) N:o 440/2003, annettu 10 päivänä maaliskuuta
2003L 66 15 11.3.2003
▼B
KOMISSION ASETUS (ETY) N:o 2676/90,
annettu 17 päivänä syyskuuta 1990,
yhteisön viinianalyysimenetelmistä
EUROOPAN YHTEISÖJEN KOMISSIO, joka
ottaa huomioon Euroopan talousyhteisön perustamissopimuksen,
ottaa huomioon viinikaupan yhteisestä järjestämisestä 16 päivänä
maaliskuuta 1987 annetun neuvoston asetuksen (ETY) N:o 822/87 (1),
sellaisena kuin se on muutettuna asetuksella (ETY) N:o 1325/90 (2), ja
erityisesti sen 74 artiklan,
sekä katsoo, että
asetuksen (ETY) N:o 822/8774 artiklan 1 kohdassa säädetään sellaisten
määritysmenetelmien antamisesta, joiden avulla voidaan määrittäämainitun asetuksen 1 artiklassa tarkoitettujen tuotteiden koostumus, jasäännöistä, joiden avulla voidaan tarkastaa, onko näitä tuotteita
käsitelty sallittujen enologisten käytäntöjen vastaisesti,
jos yhteisö ei ole vielä antanut tiettyjen enologisten käytäntöjen käyttöä
luonnehtivien aineiden raja-arvoja ja taulukoita, joiden avulla voidaan
verrata määritystuloksia, jäsenvaltiot voivat määrittää nämä rajat,
asetuksen (ETY) N:o 822/8713 artiklan 1 kohdassa säädetään analyytti-
sesta tutkimuksesta, jolla määritetään vähintään kyseisten tma-laatuviinien mainitun asetuksen liitteessä lueteltujen luonteenomaisten
aineiden arvot,
kyseisiä tuotteita koskevissa asiakirjoissa olevien tietojen valvonta
tekee tarpeelliseksi sellaisten yhdenmukaisten määritysmenetelmien
laatimisen, joita käyttämällä varmistetaan tarkkojen ja verrattavissa
olevien tulosten saaminen; tämän vuoksi näiden menetelmien on oltavapakollisia kaikissa liiketoimissa ja kaikessa valvonnassa; kaupan rajoi-tettujen mahdollisuuksien perusteella olisi hyväksyttävä rajoitettumäärä tavanomaisia menetelmiä, joilla voidaan tehdä nopea ja tarpeeksi
varma tutkittavien aineiden määritys,
mahdollisuuksien mukaan on hyödyllistä omaksua menetelmiä, jotka on
hyväksytty yleisesti, kuten vuoden 1954 määritysmenetelmien yhte-näistämistä ja viinien arvioimista koskevan kansainvälisen sopimuksen
perusteella kehitetyt menetelmät, jotka kansainvälinen viinivirasto julk-
aisee teoksessa Recueil des méthodes internationales d'analyse des vins
(kokoelma kansainvälisiä viinien määritysmenetelmiä),
komission asetuksella (ETY) N:o 1108/82 (
3) on annettu viinialalla
sovellettavia yhteisön määritysmenetelmiä; tieteen kehityksen vuoksion osoittautunut tarpeelliseksi korvata tiettyjä menetelmiä sopivammillamenetelmillä, muuttaa menetelmiä ja esittää muita menetelmiä, erityi-sesti sellaisia, jotka kansainvälinen viinivirasto on jo hyväksynyt;näiden mukautusten suuren lukumäärän ja monimutkaisuuden vuoksi
kaikki määritysmenetelmät olisi yhdistettävä uuteen asetukseen ja
asetus (ETY) N:o 1108/82 olisi kumottava,
asetuksen (ETY) N:o 822/8774 artiklassa tarkoitettuja määritysmene-
telmiä käyttämällä saatujen tulosten vertailukelpoisuuden
varmistamiseksi olisi viitattava toistettavuuden ja näiden tulosten uusit-tavuuden osalta kansainvälisen viiniviraston laatimiin määritelmiin,
tieteen kehityksen ja virallisten laboratorioiden teknisen välineistön
huomioon ottamiseksi ja näiden laboratorioiden työn tehokkuuden jakannattavuuden parantamiseksi olisi sallittava automatisoitujenmääritysmenetelmien käyttö tietyin edellytyksin; on tärkeää täsmentää,että erimielisyyksien esiintyessä automatisoidut menetelmät eivät voikorvata vertailumenetelmiä ja tavanomaisia menetelmiä,1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 2
(1) EYVL N:o L 84, 27.3.1987, s. 1
(2) EYVL N:o L 132, 23.5.1990, s. 19
(3) EYVL N:o L 133, 14.5.1982, s. 1
▼B
taajuusvärähtelyn mittaamiseen perustuvalla automatisoidulla mene-
telmällä tiheysmittauksessa saatujen tulosten tarkkuus, toistettavuus jauusittavuus on vähintään sama kuin tämän asetuksen liitteessä olevassa
1 kohdassa esitetyillä menetelmillä saadut tulokset tiheyden ja suhteel-
lisen tiheyden mittauksen osalta; tämän vuoksi on suositeltavaaasetuksen (ETY) N:o 822/8774 artiklan 3 kohdan mukaisesti pitää tätäautomatisoitua menetelmää vastaavana kuin tämän asetuksen liitteessäesitettyjä edellä mainittuja menetelmiä,
tämän asetuksen liitteen 25 luvun 2.2.3.3.2 kohdassa kuvailtu menettely
viinien ja rypälemehujen rikkidioksidin kokonaispitoisuuden määrittä-miseksi, kun oletettu kokonaispitoisuus on vähemmän kuin 50 mg/l,
johtaa tämän aineen parempaan saantiin kuin asetuksen (ETY)
N:o 1108/82 liitteen 13 luvun 13.4 kohdassa kuvailtu menetelmä;tuloksena on määritettyjen tuotteiden korkeampi rikkidioksidin koko-naispitoisuus, joka voi olla erityisesti tiettyjen rypälemehujen osaltasuurempi kuin säädetty enimmäisraja; jo valmiin rypälemehun myynti-vaikeuksien välttämiseksi tämän asetuksen voimaan tullessa ja kunnes
valmistuksessa siirrytään täydellisempään rikinpoistoon rypälemehusta,
jonka käyminen on estetty tai keskeytetty alkoholia lisäämällä, on siir-tymäkautena syytä sallia mainitussa asetuksessa kuvaillun menettelynkäyttö edelleen, ja
tässä asetuksessa säädetyt toimenpiteet ovat viinin hallintokomitean
lausunnon mukaiset,
ON ANTANUT TÄMÄN ASETUKSEN:
1 artikla
1 Tämän asetuksen liitteessä esitetään viinialalla sovellettavat
yhteisön määritysmenetelmät, joilla liiketoimissa ja kaikessa valvon-nassa
— voidaan määrittää asetuksen (ETY) N:o 822/871 artiklassa tarkoitet-
tujen tuotteiden koostumus,
— voidaan määrittää, onko näitä tuotteita käsitelty sallittujen enolo-
gisten käytäntöjen vastaisesti.
2 Vertailumenetelmällä saadut tulokset ovat ensisijaisia sellaisten
aineiden osalta, joille vahvistetaan vertailumenetelmät ja tavanomaiset
menetelmät.
2 artikla
Tätä asetusta sovellettaessa:
a) toistettavuus edustaa arvoa, jonka alapuolella on tietyllä todennäköi-
syydellä kahden yksittäisen, käytetyillä menetelmillä samoissa
koeolosuhteissa (sama suorittaja, sama laite, sama laboratorio jalyhyt aikaväli) saadun tuloksen välisen erotuksen itseisarvo,
b) uusittavuus edustaa arvoa, jonka alapuolella on tietyllä todennäköi-
syydellä kahden yksittäisen eri koeolosuhteissa (eri suorittaja, erivälineistö ja/tai eri laboratorio ja/tai eri aika) saadun tuloksenvälisen erotuksen itseisarvo.
’Yksittäisellä tuloksella’ tarkoitetaan arvoa, joka saadaan käyttämällä
yhteen näytteeseen yhden kerran ja täydellisesti standardisoitua koeme-netelmää.
Jos muuta ei todeta, todennäköisyys on 95 prosenttia.
3 artikla
1 Automatisoidut määritysmenetelmät hyväksytään käytettäväksi
laboratorion johtajan vastuulla sillä edellytyksellä, että tulosten tark-kuus, toistettavuus ja uusittavuus vastaavat vähintään liitteessä
kuvatuilla määritysmenetelmillä saatuja tuloksia.
Jos erimielisyyksiä esiintyy, liitteessä kuvattuja menetelmiä ei voi
korvata automatisoiduilla menetelmillä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 3
▼B
2 Taajuusvärähtelyyn perustuvaa automatisoitua menetelmää tiheys-
mittauksessa pidetään tämän asetuksen liitteessä olevassa 1 kohdassakuvailtuja menetelmiä vastaavana.
4 artikla
Liuoksiin, laimentamiseen tai pesuun tarkoitetulla vedellä tarkoitetaan
tislattua tai vähintään vastaavan puhtausasteen omaavaa deminerali-
soitua vettä. Kaikkien kemikaalien on oltava puhtausasteeltaananalyysilaatua, jollei toisin määrätä.
5 artikla
Kumotaan asetus (ETY) N:o 1108/82.Mainitun asetuksen 1 artiklan 4 kohtaa sovelletaan kuitenkin 31
päivään joulukuuta 1990.
6 artikla
Tämä asetus tulee voimaan päivänä, jona se julkaistaan Euroopan
yhteisöjen virallisessa lehdessä .
Sitä sovelletaan 1 päivästä lokakuuta 1990.
Tämä asetus on kaikilta osiltaan velvoittava, ja sitä sovelletaan sellaise-
naan kaikissa jäsenvaltioissa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 4
▼B
LIITE
1TIHEYS JA SUHTEELLINEN TIHEYS 20 ºC:SSA
1 MÄÄRITELMÄT
Tiheys on viinin tai rypälemehun tietyn tilavuusyksikön massa
20 ºC:ssa. Se ilmoitetaan grammoina millilitrassa ja sen tunnus on
ρ20 ºC.
Suhteellinen tiheys 20 ºC:ssa tai tiheys 20 ºC/20 ºC on desimaalilu-
kuna ilmoitettu tietyn viini- tai rypälemehutilavuuden massan suhde
20 ºC:ssa saman vesitilavuuden massaan samassa lämpötilassa. Sen
tunnus on d20 ºC20 ºC.
2 PERIAATE
Tiheys ja suhteellinen tiheys 20 ºC:ssa mitataan määritettävästä
näytteestä:
— joko pyknometrillä: vertailumenetelmä,
— tai areometrillä tai densimetrillä käyttäen hydrostaattista vaakaa:
tavanomaiset menetelmät.
HuomautusHyvin tarkoissa määrityksissä rikkidioksidin vaikutus tiheyteen on
korjattava.
ρ
20 ºC=ρ'20 ºC− 0,0006 × S
jossa ρ20 ºC= korjattu tiheys
ρ'20 ºC= havaittu tiheys
S = rikkidioksidin kokonaismäärä g/l
3 NÄYTTEEN VALMISTAMINEN
Jos viini tai rypälemehu sisältää huomattavia määriä hiilidioksidia,
suurin osa siitä voidaan poistaa ravistelemalla 250 ml viiniä 1 000 ml
mittapullossa, tai suodattamalla alipaineessa läpi putken, jossa on 2 g
vanua.
4 VERTAILUMENETELMÄ4.1 Välineistö
Tavalliset laboratoriovälineet, ja erityisesti
4.1.1 Vetoisuudeltaan noin 100 ml:n pyrex-lasinen pyknometri (
1), jossa on
irrallinen hioksellinen lämpömittari, jonka 1/10 asteen välein oleva
asteikko on välillä 10-30 ºC. Tämän lämpömittarin on oltava hyväk-
sytty (kuvio 1).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 5
(1) Voidaan käyttää kaikkia ominaisuuksiltaan vastaavia pyknometrejä.
▼B
Kuvio 1
Pyknometri ja sen taara
Pyknometrissä on 25 mm:n pituinen, sisähalkaisijaltaan enintään
1 mm oleva sivuputki, joka päättyy hiokseen. Tähän sivuputkeen
voidaan liittää ”keräyspullo”, joka koostuu putkesta, jonka toisessa
päässä on kartiohios ja toisessa päässä kapea poistoputki. Tätä
käytetään paisuntasäiliönä.
Laitteen molempien hiosten on oltava hyvin huolellisesti tehtyjä.
4.1.2 Ulkotilavuudeltaan pyknometrin kokoinen taara (vähintään 1 ml:n
tarkkuudella), jonka massa on sama kuin nesteellä, jonka tiheys on
1,01 (2,0 % natriumkloridiliuos (m/v)), täytetyn pyknometrin massa.
Lämpöeristetty säiliö, joka mukautuu täydellisesti pyknometrin
muotoon.
4.1.3 Tasavarsivaaka, jonka vähimmäiskuormitus on 300 g ja tarkkuus 1/
10 mg
taiyksikuppivaaka, jonka vähimmäiskuormitus on 200 g ja tarkkuus 1/
10 mg.
4.2 Pyknometrin kalibrointi
Pyknometrin kalibrointi käsittää seuraavien ominaisuuksien määrittä-
misen:
— tyhjän pyknometrin taara,
— pyknometrin tilavuus 20 ºC:ssa,— vedellä täytetyn pyknometrin massa 20 ºC:ssa.
4.2.1 Menetelmä tasavarsivaakaa käytettäessä
Taara asetetaan tasavarsivaa'an vasempaan vaakakuppiin ja puhdas
kuiva pyknometri, joka on varustettu paisuntasäiliöllä, oikeaan vaaka-
kuppiin. Lisätään punnuksia siihen vaakakuppiin, jossa pyknometri
on, ja otetaan paino, kun tasapaino on saavutettu: se on p grammaa.
Pyknometri täytetään huolellisesti huoneenlämpöisellä tislatulla
vedellä ja lämpömittari asetetaan paikoilleen: pyknometri kuivataan
huolellisesti ja se asetetaan lämpöeristettyyn säiliöön. Sekoitetaan
kääntelemällä säiliötä, kunnes lämpömittarin osoittama lämpötila ei
muutu. Säädetään taso tarkalleen sivuputken reunaan. Kuivataan
sivuputki ja asetetaan paisuntasäiliö paikoilleen: luetaan lämpötila t
ºC:ssa huolellisesti ja korjataan mahdollinen lämpöasteikon epätark-
kuus. Punnitaan vedellä täytetty pyknometri ja luetaan paino p'
grammoina, kun tasapaino saavutetaan.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 6
▼B
Laskentakaavat (1):
Tyhjän pyknometrin taaraus:
tyhjän pyknometrin taara = p + m,
jossa m = pyknometrin sisältämän ilman massa,
m = 0,0012 (p − p').
Tilavuus 20 ºC:ssa:V
20 ºC=( p+m−p ' )×F1,
jossa F1= taulukossa 1 olevasta lämpötila t ºC sarakkeesta otettu
kerroin.
V20 ºCon tunnettava ± 0,001 ml:n tarkkuudella.
Veden massa 20 ºC:ssa:M
20 ºC=V20 ºC× 0,998203,
jossa 0,998203 on veden tiheys 20 ºC:ssa.
4.2.2 Menetelmä yksikuppivaakaa käytettäessä
Määritetään:
— puhtaan ja kuivan pyknometrin massa: P.
— vedellä täytetyn pyknometrin massa P1lämpötilassa t ºC 4.2.1
kohdassa kuvatulla tavalla.
— taaran massa: T0.
Laskentakaavat (2)
Tyhjän pyknometrin taaraus:tyhjän pyknometrin taara: P − m, jossam = pyknometrin sisältämän ilman massa
m = 0,0012 (P
1− P).
Tilavuus 20 ºC:ssa:V
20 ºC=[ P1− (P − m)] × F1,
jossa F1= taulukossa 1 olevasta lämpötila t ºC sarakkeesta otettu
kerroin.
Tilavuus 20 ºC:ssa on tunnettava ± 0,001 ml:n tarkkuudella.Veden massa 20 ºC:ssa:M
20 ºC=V20 ºC. 0,998203,
jossa 0,998203 on veden tiheys 20 ºC:ssa.
4.3 Mittausmenetelmä (2)
4.3.1 Menetelmä tasavarsivaakaa käytettäessä
Täytetään pyknometri määritystä varten valmistetulla näytteellä (3) ja
menetellään 4.2.1 kohdassa kuvatulla tavalla.
p“ on se paino grammoina, joka vaaditaan tasapainon saavuttamiseksi
lämpötilassa t ºC.
Pyknometrin sisältämän nesteen massa = p + m − p”.
Näennäinen tiheys t ºC:ssa:
ρtº C¼pþm/C0p”
V20 ºC
Tiheys 20 ºC:ssa lasketaan jäljempänä olevan korjaustaulukon avulla
tutkitun nesteen tyyppi huomioon ottaen: kuiva viini (taulukko II),
luonnollinen tai tiivistetty rypälemehu (taulukko III), makea viini
(taulukko IV).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 7
(1) Tämän luvun 6 kohdasa annetaan laskentaesimerkki.
(2) Tämän luvun 6 kohdassa annetaan laskentaesimerkki.
▼B
Viinin tiheys 20 ºC/20 ºC lasketaan jakamalla tiheys 20 ºC:ssa
luvulla 0,998203.
4.3.2 Menetelmä yksikuppivaakaa käytettäessä (1)
Taara punnitaan. Sen massa on T.Lasketaan dT = T
1−T0.
Tyhjän pyknometrin massa mittaushetkellä = P − m + dT.
Täytetään pyknometri määritystä varten valmistetulla näytteellä (3) ja
menetellään 4.2.1 kohdassa kuvatulla tavalla. P2on sen massa t
ºC:ssa.
Pyknometrin sisältämän nesteen massa t ºC:ssa = P2− (P − m + dT).
Näennäinen tiheys t ºC:ssa:
ρtº C¼P2/C0P/C0mþdT ðÞ
V20 ºC
Lasketaan tutkitun nesteen tiheys 20 ºC:ssa (kuiva viini, luonnollinen
tai tiivistetty rypälemehu, makea viini) 4.3.1 kohdassa esitetyllä
tavalla.
Tiheys 20 ºC/20 ºC lasketaan jakamalla tiheys 20 ºC:ssa luvulla
0,998203.
4.3.3 Tiheysmittausten toistettavuus
kuivat ja puolimakeat viinit: r = 0,00010
makeat viinit: r = 0,00018.
4.3.4 Tiheysmittausten uusittavuus
kuivat ja puolimakeat viinit: R = 0,00037
makeat viinit: R = 0,00045.
5 TAVANOMAISET MENETELMÄT5.1 Areometria
5.1.1 Välineistö
5.1.1.1 Areometri
Areometrien mittojen ja asteikoinnin on oltava ISO:n vaatimusten
mukaisia.
Niissä on oltava sylinterimäinen paksunnos, poikkileikkaukseltaan
pyöreä halkaisijaltaan vähintään 3 mm oleva varsi. Kuivien viinien
osalta niiden asteikon on oltava jaettu mittausalueella 0,983-1,003
0,0010 ja 0,0002 millimetrin välein. Jokaista tuhannesosaa osoittavan
ja sitä seuraavan vastaavan merkkiviivan välin on oltava vähintään
5 mm. Viinien, joista alkoholi on poistettu, makeiden viinien ja
rypälemehun tiheyden mittauksessa käytetään viittä areometria,
joiden asteikko on jaettu 1,000-1,030; 1,030-1060; 1,060-1,090;
1,090-1,120; 1,120-1,150. Tiheyden mittaamisessa 20 ºC:ssa näiden
laitteiden asteikot on jaettava vähintään 0,0010 ja 0,0005 välein siten,
että jokaisen tuhannesosaa osoittavan ja sitä seuraavan vastaavan
merkkiviivan väli on vähintään 3 mm.
Nämä areometrit on asteikoitava siten, että niitä luetaan ”meniskin
korkeimmasta kohdasta”. Asteikossa tai runkoon suljetussa paperi-
liuskassa on oltava maininta tiheyden 20 ºC:ssa tai suhteellisen
tiheyden 20 ºC:ssa asteikoinnista tai lukemisesta meniskin korkeim-
masta kohdasta.
Näiden laitteiden on oltava viranomaisten tarkastamia.
5.1.1.2 Tarkastettu lämpömittari, jonka asteikko on jaettu vähintään 0,5 ºC:n
välein.
5.1.1.3 Sisähalkaisijaltaan 36 mm ja korkeudeltaan 320 mm oleva mittalasi,
joka tuetaan pystyasentoon statiivilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 8
(1) Tämän luvun 6 kohdassa annetaan laskentaesimerkki.
▼B
5.1.2 Suoritus
5.1.2.1 Mittausmenetelmä
Mitataan 5.1.1.3 kohdassa tarkoitettuun mittalasiin 250 ml määritystä
varten valmistettua näytettä (3) ja sijoitetaan areometri ja lämpömit-
tari nesteeseen. Sekoitetaan lämpötilan tasaamiseksi ja luetaan
lämpötila minuutti sekoittamisen jälkeen. Poistetaan lämpömittari ja
luetaan areometristä näennäinen tiheys t ºC:ssa areometristä
minuuttia myöhemmin.
Korjataan lämpötilan vaikutus näennäiseen tiheyteen t ºC:ssa
käyttäen taulukoita, joita on laadittu kuiville viineille (taulukko V),
rypälemehuille (taulukko VI) ja sokeria sisältäville viineille (taulukko
VII).
Tiheys 20 ºC/20 ºC lasketaan jakamalla tiheys 20 ºC:ssa luvulla
0,998203.
5.2 Densimetria hydrostaattista vaakaa käyttäen
5.2.1 Välineistö
Hydrostaattinen vaaka.Hydrostaattinen vaaka, jonka enimmäiskuormitus on vähintään 100 g
ja tarkkuus 0,1 mg.
Molempien vaakakuppien alapuolelle ripustetaan Pyrex-lasiset uppo-
kappaleet, joiden tilavuus on vähintään 20 ml. Nämä uppokappaleet
ripustetaan paksuudeltaan enintään 0,1 mm olevalla langalla.
Oikeanpuoleisen vaakakupin alle ripustettu uppokappale on voitava
sijoittaa mittalasiin, jossa on tason osoittava merkki. Tämän mitta-
lasin sisähalkaisijan on oltava vähintään 6 mm suurempi kuin
uppokappaleen halkaisijan. Uppokappaleen on mahduttava kokonaan
mittalasissa olevan merkin alapuolelle ja mitattavan nesteen pinnan
saa rikkoa ainoastaan ripustuslanka. Mittalasissa olevan nesteen
lämpötila mitataan lämpömittarilla, jonka asteikko on jaettu 0,2 ºC:n
välein.
Voidaan käyttää myös yksikuppista hydrostaattista vakaa.
5.2.2 Suoritus
5.2.2.1 Hydrostaattisen vaa'an kalibrointi
Kun molemmat uppokappaleet ovat ilmassa, vaaka tasapainotetaan
sijoittamalla oikeaan vaakakuppiin punnuksia joiden massa on p.
Mittalasi täytetään merkkiin asti puhtaalla vedellä, sekoitetaan, anne-
taan seistä 2-3 minuuttia ja luetaan lämpötila t ºC.
Tasapainotetaan vaaka uudelleen oikeaan vaakakuppiin sijoitettujen
massojen avulla. Tämä merkitään p:llä.
Uppokappaleen tilavuus 20 ºC:ssa:
V
20 ºC=(ρ'−ρ)(F + 0,0012)
jossa F = taulukossa 1 olevasta lämpötila t ºC sarakkeesta otettu
kerroin.
pj aV20 ºCovat uppokappaleen ominaisuuksia.
5.2.2.2 Mittausmenetelmä
Upotetaan oikea uppokappale mittalasiin joka on täytetty merkkiin
viinillä (tai rypälemehulla). Luetaan viinin (tai rypälemehun)
lämpötila t ºC:
p‘ uudelleen tasapainotetaessa tarvittava massa
Ptº Cnäennäinen tiheys:
ρtº C¼p00/C0p ðÞ
Vþ0;0012
Tämä tiheys korjataan 20 ºC:seen käyttäen taulukoita II, III tai IV.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 9
▼B
6 ESIMERKKI TIHEYDEN 20 ºC JA TIHEYDEN 20 ºC/20 ºC
LASKEMISEKSI (VERTAILUMENETELMÄ)
6.1 Pyknometria tasavarsivaakaa käytettäessä
6.1.1 Pyknometrin parametrit
1 Puhtaan ja kuivan pyknometrin punnitseminen:
Taara = pyknometri+ p
p = 104,9454 g
2 Täynnä vettä olevan pyknometrin punnitseminen t ºC:ssa:
Taara = pyknometri+ vesi+ p'
p' = 1,2396 g, kun t = 20,5 ºC
3 Pyknometrin sisältämän ilman massan laskeminen:
m = 0,0012 (p − p')
m = 0,0012 (104,9454 − 1,2396)
m = 0,1244 g
4 Huomioon otettavat parametrit:
Tyhjän pyknometrin taara p + m:
p+ m = 104,9454 + 0,1244
p+ m = 105,0698 g
Tilavuus 20 ºC:ssa = (p + m − p') × Ftº C
F20,50 ºC= 1,001900
V20 ºC= (105,0698 − 1,2396) × 1,001900
V20 ºC= 104,0275 ml
Veden massa 20 ºC:ssa = V20 ºC× 0,998203
M20 ºC= 103,8405 g
6.1.2 Kuivan viinin tiheyden 20 ºC ja tiheyden 20 ºC/20 ºC laskeminen
ρ” = 1,2622 17,80 ºC:ssa
ρ17;80º C¼105 ;0698 /C01;2622
104 ;0275
ρ17,80 ºC= 0,99788 g/ml
Taulukon II avulla voidaan laskea ρ20 ºCρtº C:sta käyttäen suhdetta:
ρ20º C¼ρtº C±c
1 000
Kun t = 17,80 ºC ja alkoholipitoisuus 11 til-%, c = 0,54.
ρ20ºC¼0;99788 /C00;54
1 000
ρ20 ºC= 0,99734 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99734
0;998203¼0;99913
6.2 Pyknometria yksikuppivaakaa käytettäessä
6.2.1 Pyknometrin parametrit
1 Puhtaan ja kuivan pyknometrin punnitseminen:
P = 67,7913 g1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 10
▼B
2 Vedellä täytetyn pyknometrin punnitseminen t ºC:ssa:
P1= 169,2715 g 21,65 ºC:ssa
3 Pyknometrin sisältämän ilman massan laskeminen:
m = 0,0012 (P1−P )
m = 0,0012 × 101,4802m = 0,1218 g
4 Huomioon otettavat parametrit:
Tyhjän pyknometrin taara P − m:
P− m = 67,7913 − 0,1218
P− m = 67,6695 g
Tilavuus 20 ºC:ssa = [P
1− (P − m)] Ftº C
F21,65 ºC= 1,002140
V20 ºC= (169,2715 − 67,6695) × 1,002140
V20 ºC= 101,8194 ml
Veden massa 20 ºC:ssa = V20 ºC× 0,998203
M20 ºC= 101,6364 g
Taaran massa: T0
T0= 171,9160 g
6.2.2 Kuivan viinin tiheyden 20 ºC ja tiheyden 20 ºC/20 ºC laskeminen
T1= 171,9178 g
dT = 171,9178 − 171,9160 = 0,0018 gP − m + dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 g
P
2= 169,2799 18 ºC:ssa
ρ18 ºC¼169 ;2799 /C067;6713
101 ;8194
ρ18 ºC= 0,99793 g/ml
Taulukon II avulla voidaan laskea ρ20 ºCρtº C:sta käyttäen suhdetta:
ρ20 ºC¼ρtº C±c
1 000
Kun t = 18 ºC ja alkoholipitoisuus 11 til-%, c = 0,49.
ρ20 ºC¼0;99793 /C00;49
1 000
ρ20 ºC= 0,99744 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99744
0;998203¼0;999231990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 11
▼B
TAULUKKO I
F kertoimet,
joilla pyrex-lasisen pyknometrin tºC:ssa sisältämän veden massa 9 on kerrottava, pyknometrin
tilavuuden laskemiseksi 20 ºC:ssa
tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F
10,0 1,000398 13,0 1,000691 16,0 1,001097 19,0 1,001608 22,0 1,002215 25,0 1,002916 28,0 1,003704
,1 1,000406 ,1 1,000703 ,1 1,001113 ,1 1,001627 ,1 1,002238 ,1 1,002941 ,1 1,003731
,2 1,000414 ,2 1,000714 ,2 1,001128 ,2 1,001646 ,2 1,002260 ,2 1,002966 ,2 1,003759
,3 1,000422 ,3 1,000726 ,3 1,001144 ,3 1,001665 ,3 1,002282 ,3 1,002990 ,3 1,003787
,4 1,000430 ,4 1,000738 ,4 1,001159 ,4 1,001684 ,4 1,002304 ,4 1,003015 ,4 1,003815
10,5 1,000439 13,5 1,000752 16,5 1,001175 19,5 1,001703 22,5 1,002326 25,5 1,003041 28,5 1,003843
,6 1,000447 ,6 1,000764 ,6 1,001191 ,6 1,001722 ,6 1,002349 ,6 1,003066 ,6 1,003871
,7 1,000456 ,7 1,000777 ,7 1,001207 ,7 1,001741 ,7 1,002372 ,7 1,003092 ,7 1,003899
,8 1,000465 ,8 1,000789 ,8 1,001223 ,8 1,001761 ,8 1,002394 ,8 1,003117 ,8 1,003928
,9 1,000474 ,9 1,000803 ,9 1,001239 ,9 1,001780 ,9 1,002417 ,9 1,003143 ,9 1,003956
11,0 1,000483 14,0 1,000816 17,0 1,001257 20,0 1,001800 23,0 1,002439 26,0 1,003168 29,0 1,003984
,1 1,000492 ,1 1,000829 ,1 1,001273 ,1 1,001819 ,1 1,002462 ,1 1,003194 ,1 1,004013
,2 1,000501 ,2 1,000842 ,2 1,001290 ,2 1,001839 ,2 1,002485 ,2 1,003222 ,2 1,004042
,3 1,000511 ,3 1,000855 ,3 1,001306 ,3 1,001859 ,3 1,002508 ,3 1,003247 ,3 1,004071
,4 1,000520 ,4 1,000868 ,4 1,001323 ,4 1,001880 ,4 1,002531 ,4 1,003273 ,4 1,004099
11,5 1,000530 14,5 1,000882 17,5 1,001340 20,5 1,001900 23,5 1,002555 26,5 1,003299 29,5 1,004128
,6 1,000540 ,6 1,000895 ,6 1,001357 ,6 1,001920 ,6 1,002578 ,6 1,003326 ,6 1,004158
,7 1,000550 ,7 1,000909 ,7 1,001374 ,7 1,001941 ,7 1,002602 ,7 1,003352 ,7 1,004187
,8 1,000560 ,8 1,000923 ,8 1,001391 ,8 1,001961 ,8 1,002625 ,8 1,003379 ,8 1,004216
,9 1,000570 ,9 1,000937 ,9 1,001409 ,9 1,001982 ,9 1,002649 ,9 1,003405 ,9 1,004245
12,0 1,000580 15,0 1,000951 18,0 1,001427 21,0 1,002002 24,0 1,002672 27,0 1,003432 30,0 1,004275
,1 1,000591 ,1 1,000965 ,1 1,001445 ,1 1,002023 ,1 1,002696 ,1 1,003458
,2 1,000601 ,2 1,000979 ,2 1,001462 ,2 1,002044 ,2 1,002720 ,2 1,003485
,3 1,000612 ,3 1,000993 ,3 1,001480 ,3 1,002065 ,3 1,002745 ,3 1,003513
,4 1,000623 ,4 1,001008 ,4 1,001498 ,4 1,002086 ,4 1,002769 ,4 1,003540
12,5 1,000634 15,5 1,001022 18,5 1,001516 21,5 1,002107 24,5 1,002793 27,5 1,003567
,6 1,000645 ,6 1,001037 ,6 1,001534 ,6 1,002129 ,6 1,002817 ,6 1,003594
,7 1,000656 ,7 1,001052 ,7 1,001552 ,7 1,002151 ,7 1,002842 ,7 1,003621
,8 1,000668 ,8 1,001067 ,8 1,001570 ,8 1,002172 ,8 1,002866 ,8 1,003649
,9 1,000679 ,9 1,001082 ,9 1,001589 ,9 1,002194 ,9 1,002891 ,9 1,0036761990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 12
▼B
TAULUKKO II
Lämpötilan korjaukset c kuivien viinien ja kuivien viinien, joista alkoholi on poistettu, pyrex-lasisella pyknome-
trillä tºC:ssa mitatun tiheyden muuntamiseksi tiheydeksi 20 ºC:ssa
ρ20¼ρt±c
1 000− jostº on alle 20 ºC
+ jostº on yli20 ºC
Alkoholipitoisuus
056789 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 2 6 2 7Lämpötila ºC10 1,59 1,64 1,67 1,71 1,77 1,84 1,91 2,01 2,11 2,22 2,34 2,46 2,60 2,73 2,88 3,03 3,19 3,35 3,52 3,70 3,87 4,06 4,25 4,44
11 1,48 1,53 1,56 1,60 1,64 1,70 1,77 1,86 1,95 2,05 2,16 2,27 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,06 3,21 3,36 3,53 3,69 3,86 4,03
12 1,36 1,40 1,43 1,46 1,50 1,56 1,62 1,69 1,78 1,86 1,96 2,05 2,16 2,27 2,38 2,50 2,62 2,75 2,88 3,02 3,16 3,31 3,46 3,61
13 1,22 1,26 1,28 1,32 1,35 1,40 1,45 1,52 1,59 1,67 1,75 1,83 1,92 2,01 2,11 2,22 2,32 2,44 2,55 2,67 2,79 2,92 3,05 3,18
14 1,08 1,11 1,13 1,16 1,19 1,23 1,27 1,33 1,39 1,46 1,52 1,60 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,11 2,21 2,31 2,42 2,52 2,63 2,74
15 0,92 0,96 0,97 0,99 1,02 1,05 1,09 1,13 1,19 1,24 1,30 1,36 1,42 1,48 1,55 1,63 1,70 1,78 1,86 1,95 2,03 2,12 2,21 2,3016 0,76 0,79 0,80 0,81 0,84 0,86 0,89 0,93 0,97 1,01 1,06 1,10 1,16 1,21 1,26 1,32 1,38 1,44 1,51 1,57 1,64 1,71 1,78 1,85
17 0,59 0,61 0,62 0,63 0,65 0,67 0,69 0,72 0,75 0,78 0,81 0,85 0,88 0,95 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,25 1,30 1,35 1,40
18 0,40 0,42 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,49 0,51 0,53 0,55 0,57 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,74 0,77 0,81 0,84 0,87 0,91 0,94
19 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47
20
21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54 0,56 0,59 0,61 0,63 0,66 0,69 0,71 0,74 0,77 0,80 0,83 0,87 0,90 0,93 0,97
23 0,68 0,70 0,71 0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,83 0,86 0,90 0,93 0,96 1,00 1,03 1,08 1,13 1,17 1,22 1,26 1,31 1,37 1,41 1,46
24 0,93 0,96 0,97 0,99 1,01 1,03 1,06 1,10 1,13 1,18 1,22 1,26 1,31 1,36 1,41 1,47 1,52 1,58 1,64 1,71 1,77 1,84 1,90 1,97
25 1,19 1,23 1,25 1,27 1,29 1,32 1,36 1,40 1,45 1,50 1,55 1,61 1,67 1,73 1,80 1,86 1,93 2,00 2,08 2,16 2,24 2,32 2,40 2,4826 1,47 1,51 1,53 1,56 1,59 1,62 1,67 1,72 1,77 1,83 1,90 1,96 2,03 2,11 2,19 2,27 2,35 2,44 2,53 2,62 2,72 2,81 2,91 3,01
27 1,75 1,80 1,82 1,85 1,89 1,93 1,98 2,04 2,11 2,18 2,25 2,33 2,41 2,50 2,59 2,68 2,78 2,88 2,98 3,09 3,20 3,31 3,42 3,53
28 2,04 2,10 2,13 2,16 2,20 2,25 2,31 2,38 2,45 2,53 2,62 2,70 2,80 2,89 3,00 3,10 3,21 3,32 3,45 3,57 3,69 3,82 3,94 4,07
29 2,34 2,41 2,44 2,48 2,53 2,58 2,65 2,72 2,81 2,89 2,99 3,09 3,19 3,30 3,42 3,53 3,65 3,78 3,92 4,05 4,19 4,33 4,47 4,61
30 2,66 2,73 2,77 2,81 2,86 2,92 3,00 3,08 3,17 3,27 3,37 3,48 3,59 3,72 3,84 3,97 4,11 4,25 4,40 4,55 4,70 4,85 4,92 5,17
Huomautus: Tätä taulukkoa voidaan käyttää tiheyden d20tmuuttamisessa tiheydeksi d2020.
TAULUKKO III
Lämpötilan korjaukset c luonnollisen ja tiivistetyn rypälemehun pyrex-lasisella pyknometrillä tºC:ssa mitatun
tiheyden muuntamiseksi tiheydeksi 20 ºC:ssa
ρ20¼ρt±c
1 000− jostº on alle 20 ºC
+ jostº on yli20 ºC
Tiheys
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Lämpötila ºC10º 2,31 2,48 2,66 2,82 2,99 3,13 3,30 3,44 3,59 3,73 3,88 4,01 4,28 4,52 4,76 4,98 5,18 5,42 5,56 5,73 5,90 6,05
11º 2,12 2,28 2,42 2,57 2,72 2,86 2,99 3,12 3,25 3,37 3,50 3,62 3,85 4,08 4,29 4,48 4,67 4,84 5,00 5,16 5,31 5,45
12º 1,92 2,06 2,19 2,32 2,45 2,58 2,70 2,82 2,94 3,04 3,15 3,26 3,47 3,67 3,85 4,03 4,20 4,36 4,51 4,65 4,78 4,91
13º 1,72 1,84 1,95 2,06 2,17 2,27 2,38 2,48 2,58 2,69 2,78 2,88 3,05 3,22 3,39 3,55 3,65 3,84 3,98 4,11 4,24 4,36
14º 1,52 1,62 1,72 1,81 1,90 2,00 2,09 2,17 2,26 2,34 2,43 2,51 2,66 2,82 2,96 3,09 3,22 3,34 3,45 3,56 3,67 3,76
15º 1,28 1,36 1,44 1,52 1,60 1,67 1,75 1,82 1,89 1,96 2,04 2,11 2,24 2,36 2,48 2,59 2,69 2,79 2,88 2,97 3,03 3,10
16º 1,05 1,12 1,18 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,55 1,60 1,66 1,71 1,81 1,90 2,00 2,08 2,16 2,24 2,30 2,37 2,43 2,49
17º 0,80 0,86 0,90 0,95 1,00 1,04 1,09 1,13 1,18 1,22 1,26 1,30 1,37 1,44 1,51 1,57 1,62 1,68 1,72 1,76 1,80 1,84
18º 0,56 0,59 0,62 0,66 0,68 0,72 0,75 0,77 0,80 0,83 0,85 0,88 0,93 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,16 1,19 1,21 1,24
19º 0,29 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
20º21º 0,29 0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,58 0,59 0,60 0,61 0,62 0,62
22º 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,79 0,81 0,84 0,87 0,90 0,96 1,00 1,05 1,09 1,12 1,15 1,18 1,20 1,22 1,23
23º 0,89 0,94 0,99 1,03 1,08 1,12 1,16 1,20 1,25 1,29 1,33 1,37 1,44 1,51 1,57 1,63 1,67 1,73 1,77 1,80 1,82 1,84
24º 1,20 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,66 1,71 1,77 1,82 1,92 2,01 2,10 2,17 2,24 2,30 2,36 2,40 2,42 2,44
25º 1,51 1,59 1,66 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,23 2,30 2,42 2,53 2,63 2,72 2,82 2,89 2,95 2,99 3,01 3,0526º 1,84 1,92 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,42 2,50 2,58 2,65 2,73 2,87 3,00 3,13 3,25 3,36 3,47 3,57 3,65 3,72 3,79
27º 2,17 2,26 2,36 2,46 2,56 2,66 2,75 2,84 2,93 3,01 3,10 3,18 3,35 3,50 3,66 3,80 3,93 4,06 4,16 4,26 4,35 4,42
28º 2,50 2,62 2,74 2,85 2,96 3,07 3,18 3,28 3,40 3,50 3,60 3,69 3,87 4,04 4,21 4,36 4,50 4,64 4,75 4,86 4,94 5,00
29º 2,86 2,98 3,10 3,22 3,35 3,47 3,59 3,70 3,82 3,93 4,03 4,14 4,34 4,53 4,72 4,89 5,05 5,20 5,34 5,46 5,56 5,64
30º 3,20 3,35 3,49 3,64 3,77 3,91 4,05 4,17 4,30 4,43 4,55 4,67 4,90 5,12 5,39 5,51 5,68 5,84 5,96 6,08 6,16 6,22
Huomautus: Tätä taulukkoa voidaan käyttää tiheyden dt 20 muuttamisessa tiheydeksi d2020.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 13
▼B
TAULUKKO IV
Lämpötilan korjaukset c vähintään 13 til-% jäännössokeria sisältävien viinien pyrex-lasisella pyknometrillä
tºC:ssa mitatun tiheyden muuntamiseksi tiheydeksi 20 ºC:ssa
ρ20¼ρt±c
1 000−jostº on alle 20 ºC
+ jostº on yli20 ºC
Viinit 13 til-% Viinit 15 til-% Viinit 17 til-%
Tiheys Tiheys Tiheys
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Lämpötila ºC10º 2,36 2,71 3,06 3,42 3,72 3,96 4,32 2,64 2,99 3,36 3,68 3,99 4,30 4,59 2,94 3,29 3,64 3,98 4,29 4,60 4,89
11º 2,17 2,49 2,80 2,99 3,39 3,65 3,90 2,42 2,73 3,05 3,34 3,63 3,89 4,15 2,69 3,00 3,32 3,61 3,90 4,16 4,41
12º 1,97 2,25 2,53 2,79 3,05 3,29 3,52 2,19 2,47 2,75 3,01 3,27 3,51 3,73 2,42 2,70 2,98 3,24 3,50 3,74 3,96
13º 1,78 2,02 2,25 2,47 2,69 2,89 3,09 1,97 2,21 2,44 2,66 2,87 3,08 3,29 2,18 2,42 2,64 2,87 3,08 3,29 3,49
14º 1,57 1,78 1,98 2,16 2,35 2,53 2,70 1,74 1,94 2,14 2,32 2,52 2,69 2,86 1,91 2,11 2,31 2,50 2,69 2,86 3,03
15º 1,32 1,49 1,66 1,82 1,97 2,12 2,26 1,46 1,63 1,79 1,95 2,10 2,25 2,39 1,60 1,77 1,93 2,09 2,24 2,39 2,5316º 1,08 1,22 1,36 1,48 1,61 1,73 1,84 1,18 1,32 1,46 1,59 1,71 1,83 1,94 1,30 1,44 1,58 1,71 1,83 1,95 2,06
17º 0,83 0,94 1,04 1,13 1,22 1,31 1,40 0,91 1,02 1,12 1,21 1,30 1,39 1,48 1,00 1,10 1,20 1,30 1,39 1,48 1,56
18º 0,58 0,64 0,71 0,78 0,84 0,89 0,95 0,63 0,69 0,76 0,83 0,89 0,94 1,00 0,69 0,75 0,82 0,89 0,95 1,00 1,06
19º 0,30 0,34 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,52 0,36 0,39 0,42 0,46 0,49 0,52 0,54
20º21º 0,30 0,33 0,36 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,36 0,39 0,43 0,46 0,49 0,51 0,35 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54
22º 0,60 0,67 0,73 0,80 0,85 0,91 0,98 0,65 0,72 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 0,71 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 1,07
23º 0,93 1,02 1,12 1,22 1,30 1,39 1,49 1,01 1,10 1,20 1,29 1,38 1,46 1,55 1,10 1,19 1,29 1,38 1,46 1,55 1,63
24º 1,27 1,39 1,50 1,61 1,74 1,84 1,95 1,37 1,49 1,59 1,72 1,84 1,95 2,06 1,48 1,60 1,71 1,83 1,95 2,06 2,17
25º 1,61 1,75 1,90 2,05 2,19 2,33 2,47 1,73 1,87 2,02 2,17 2,31 2,45 2,59 1,87 2,01 2,16 2,31 2,45 2,59 2,73
26º 1,94 2,12 2,29 2,47 2,63 2,79 2,95 2,09 2,27 2,44 2,62 2,78 2,94 3,10 2,26 2,44 2,61 2,79 2,95 3,11 3,26
27º 2,30 2,51 2,70 2,90 3,09 3,27 3,44 2,48 2,68 2,87 3,07 3,27 3,45 3,62 2,67 2,88 3,07 3,27 3,46 3,64 3,81
28º 2,66 2,90 3,13 3,35 3,57 3,86 4,00 2,86 3,10 3,23 3,55 3,77 3,99 4,20 3,08 3,31 3,55 3,76 3,99 4,21 4,41
29º 3,05 3,31 3,56 3,79 4,04 4,27 4,49 3,28 3,53 3,77 4,02 4,26 4,49 4,71 3,52 3,77 4,01 4,26 4,50 4,73 4,95
30º 3,44 3,70 3,99 4,28 4,54 4,80 5,06 3,68 3,94 4,23 4,52 4,79 5,05 5,30 3,95 4,22 4,51 4,79 5,07 5,32 5,57
Viinit 19 til-% Viinit 21 til-%
Tiheys Tiheys
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Lämpötila ºC10º 3,27 3,62 3,97 4,30 4,62 4,92 5,21 3,62 3,97 4,32 4,66 4,97 5,27 5,56
11º 2,99 3,30 3,61 3,90 4,19 4,45 4,70 3,28 3,61 3,92 4,22 4,50 4,76 5,01
12º 2,68 2,96 3,24 3,50 3,76 4,00 4,21 2,96 3,24 3,52 3,78 4,03 4,27 4,49
13º 2,40 2,64 2,87 3,09 3,30 3,51 3,71 2,64 2,88 3,11 3,33 3,54 3,74 3,95
14º 2,11 2,31 2,51 2,69 2,88 3,05 3,22 2,31 2,51 2,71 2,89 3,08 3,25 3,43
15º 1,76 1,93 2,09 2,25 2,40 2,55 2,69 1,93 2,10 2,26 2,42 2,57 2,72 2,8616º 1,43 1,57 1,70 1,83 1,95 2,08 2,18 1,56 1,70 1,84 1,97 2,09 2,21 2,32
17º 1,09 1,20 1,30 1,39 1,48 1,57 1,65 1,20 1,31 1,41 1,50 1,59 1,68 1,77
18º 0,76 0,82 0,88 0,95 1,01 1,06 1,12 0,82 0,88 0,95 1,01 1,08 1,13 1,18
19º 0,39 0,42 0,45 0,49 0,52 0,55 0,57 0,42 0,46 0,49 0,52 0,55 0,58 0,61
20º
21º 0,38 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,41 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,60
22º 0,78 0,84 0,90 0,96 1,02 1,07 1,13 0,84 0,90 0,96 1,02 1,08 1,14 1,19
23º 1,19 1,28 1,38 1,47 1,55 1,64 1,72 1,29 1,39 1,48 1,57 1,65 1,74 1,82
24º 1,60 1,72 1,83 1,95 2,06 2,18 2,29 1,73 1,85 1,96 2,08 2,19 2,31 2,42
25º 2,02 2,16 2,31 2,46 2,60 2,74 2,88 2,18 2,32 2,47 2,62 2,76 2,90 3,0426º 2,44 2,62 2,79 2,96 3,12 3,28 3,43 2,53 2,81 2,97 3,15 3,31 3,47 3,62
27º 2,88 3,08 3,27 3,42 3,66 3,84 4,01 3,10 3,30 3,47 3,69 3,88 4,06 4,23
28º 3,31 3,54 3,78 4,00 4,22 4,44 4,64 3,56 3,79 4,03 4,25 4,47 4,69 4,89
29º 3,78 4,03 4,27 4,52 4,76 4,99 5,21 4,06 4,31 4,55 4,80 5,04 5,27 5,48
30º 4,24 4,51 4,80 5,08 5,36 5,61 5,86 4,54 4,82 5,11 5,39 5,66 5,91 6,161990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 14
▼B
TAULUKKO V
Lämpötilan korjaukset c luonnollisen ja tiivistetyn rypälemehun tavallisesta lasista valmistetulla pyknometrillä
tai areometrillä tºC:ssa mitatun tiheyden muuntamiseksi tiheydeksi 20 ºC:ssa
ρ20¼ρt±c
1 000−jostº on alle 20 ºC
+ jostº on yli20 ºC
Alkoholipitoisuus
0 5 6 7 8 9 1 01 11 21 31 41 51 61 71 81 92 02 12 22 32 42 52 62 7Lämpötila ºC10º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,31
11º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,15 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,90
12º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,94 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,49
13º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,73 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,07
14º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66
15º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,2316º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,96 0,99 1,05 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,80
17º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36
18º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,91
19º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46
20º
21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,96
23º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,91 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,45
24º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95
25º 1,16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,4526º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,92 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,96
27º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,72 2,82 2,93 3,04 3,14 3,25 3,37 3,48
28º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,63 2,73 2,83 2,93 3,03 3,14 3,26 3,38 3,50 3,62 3,75 3,85 4,00
29º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54
30º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38 3,50 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07
Huomautus: Tätä taulukkoa voidaan käyttää tiheyden d20tmuuttamisessa tiheydeksi d2020.
TAULUKKO VI
Lämpötilan korjaukset c luonnollisen ja tiivistetyn rypälemehun tavallisesta lasista valmistetulla pyknometrillä
tai areometrillä tºC:ssa mitatun tiheyden muuntamiseksi tiheydeksi 20 ºC:ssa
ρ20¼ρt±c
1 000− jostº on alle 20 ºC
+ jostº on yli20 ºC
Tiheys
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Lämpötila ºC10º 2,17 2,34 2,52 2,68 2,85 2,99 3,16 3,29 3,44 3,58 3,73 3,86 4,13 4,36 4,60 4,82 5,02 5,25 5,39 5,56 5,73 5,87
11º 2,00 2,16 2,29 2,44 2,59 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,37 3,48 3,71 3,94 4,15 4,33 4,52 4,69 4,85 5,01 5,15 5,29
12º 1,81 1,95 2,08 2,21 2,34 2,47 2,58 2,70 2,82 2,92 3,03 3,14 3,35 3,55 3,72 3,90 4,07 4,23 4,37 4,52 4,64 4,77
13º 1,62 1,74 1,85 1,96 2,07 2,17 2,28 2,38 2,48 2,59 2,68 2,77 2,94 3,11 3,28 3,44 3,54 3,72 3,86 3,99 4,12 4,24
14º 1,44 1,54 1,64 1,73 1,82 1,92 2,00 2,08 2,17 2,25 2,34 2,42 2,57 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,35 3,46 3,57 3,65
15º 1,21 1,29 1,37 1,45 1,53 1,60 1,68 1,75 1,82 1,89 1,97 2,03 2,16 2,28 2,40 2,51 2,61 2,71 2,80 2,89 2,94 3,01
16º 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,65 1,75 1,84 1,94 2,02 2,09 2,17 2,23 2,30 2,36 2,42
17º 0,76 0,82 0,86 0,91 0,96 1,00 1,05 1,09 1,14 1,18 1,22 1,25 1,32 1,39 1,46 1,52 1,57 1,63 1,67 1,71 1,75 1,79
18º 0,53 0,56 0,59 0,63 0,65 0,69 0,72 0,74 0,77 0,80 0,82 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,13 1,16 1,18 1,20
19º 0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,43 0,43 0,46 0,48 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
20º21º 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,51 0,54 0,56 0,57 0,58 0,59 0,60 0,60
22º 0,55 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,93 0,97 1,02 1,06 1,09 1,12 1,15 1,17 1,19 1,19
23º 0,85 0,90 0,95 0,99 1,04 1,08 1,12 1,16 1,21 1,25 1,29 1,32 1,39 1,46 1,52 1,58 1,62 1,68 1,72 1,75 1,77 1,79
24º 1,15 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,48 1,54 1,60 1,65 1,71 1,76 1,86 1,95 2,04 2,11 2,17 2,23 2,29 2,33 2,35 2,37
25º 1,44 1,52 1,59 1,67 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,22 2,34 2,45 2,55 2,64 2,74 2,81 2,87 2,90 2,92 2,9626º 1,76 1,84 1,93 2,02 2,10 2,18 2,25 2,33 2,41 2,49 2,56 2,64 2,78 2,91 3,03 3,15 3,26 3,37 3,47 3,55 3,62 3,60
27º 2,07 2,16 2,26 2,36 2,46 2,56 2,65 2,74 2,83 2,91 3,00 3,07 3,24 3,39 3,55 3,69 3,82 3,94 4,04 4,14 4,23 4,30
28º 2,39 2,51 2,63 2,74 2,85 2,96 3,06 3,16 3,28 3,38 3,48 3,57 3,75 3,92 4,08 4,23 4,37 4,51 4,62 4,73 4,80 4,86
29º 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22 3,34 3,46 3,57 3,69 3,80 3,90 4,00 4,20 4,39 4,58 4,74 4,90 5,05 5,19 5,31 5,40 5,48
30º 3,06 3,21 3,35 3,50 3,63 3,77 3,91 4,02 4,15 4,28 4,40 4,52 4,75 4,96 5,16 5,35 5,52 5,67 5,79 5,91 5,99 6,04
Huomautus: Tätä taulukkoa voidaan käyttää tiheyden dt20 muuttamisessa tiheydeksi d20201990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 15
▼B
TAULUKKO VII
Lämpötilan korjaukset c vähintään 13 til-% jäännössokeria sisältävien viinien tavallisesta lasista valmistetulla
pyknometrillä tai areometrillä tºC:ssa mitatun tiheyden muuntamiseksi tiheydeksi 20 ºC:ssa
ρ20¼ρt±c
1 000−jostº on alle 20 ºC
+ jostº on yli20 ºC
Viinit 13 til-% Viinit 15 til-% Viinit 17 til-%
Tiheys Tiheys Tiheys
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Lämpötila ºC10º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18 2,51 2,85 3,20 3,54 3,85 4,02 4,46 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74
11º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,78 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,02 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,28
12º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,40 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,61 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,84
13º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,00 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,19 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,39
14º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94
15º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,4716º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,78 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,88 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,00
17º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,36 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,44 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,52
18º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,92 0,60 0,66 0,73 0,80 0,85 0,91 0,97 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,03
19º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53
20º21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,47 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,50 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53
22º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,93 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,98 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04
23º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,43 0,97 1,06 1,16 1,25 1,34 1,42 1,51 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,59
24º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90 1,32 1,44 1,54 1,66 1,78 1,89 2,00 1,43 1,56 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11
25º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,66
26º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,87 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,01 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,17
27º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,35 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,52 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,71
28º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,89 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,07 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,30
29º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82
30º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42
Viinit 19 til-% Viinit 21 til-%
Tiheys Tiheys
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Lämpötila ºC10º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41
11º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,57 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,88
12º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,10 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,37
13º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,61 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,85
14º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33
15º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,8016º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,13 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,26
17º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,62 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,71
18º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,09 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,15
19º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
20º
21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
22º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,10 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,17
23º 1,15 1,30 1,34 1,43 1,51 1,60 1,68 1,25 1,34 1,44 1,63 1,61 1,70 1,78
24º 1,55 1,67 1,77 1,89 2,00 2,11 2,23 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36
25º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,9726º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,35 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,54
27º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,92 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,13
28º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,53 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,77
29º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36
30º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,021990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 16
▼B
2RYPÄLEMEHUN, TIIVISTETYN RYPÄLEMEHUN JA PUHDIS-
TETUN TIIVISTETYN RYPÄLEMEHUN SOKERIPITOISUUDEN
ARVIOINTI REFRAKTOMETRILLÄ
1 PERIAATE
Taitekerroin 20 ºC:ssa, esitettynä lukuarvona tai sakkaroosin massa-
prosentteina, annetaan vastaavissa taulukoissa, joista saadaan
rypälemehun, tiivistetyn rypälemehun ja puhdistetun tiivistetynrypälemehun sokeripitoisuus g/l ja g/kg.
2 VÄLINEISTÖ2.1 Abbe-refraktometri
Käytetyssä refraktometrissä on oltava asteikko, josta näkyy:
— joko sakkaroosin massaprosentti 0,1 %:n tarkkuudella,
— tai taitekertoimet neljällä desimaalilla.
Refraktometrissä on oltava lämpömittari, jonka asteikko ulottuu
mittausalueelle + 15 − 25 ºC, ja kiertovesijärjestelmä, joka mahdol-
listaa mittausten tekemisen 20 ºC ± 5 ºC lämpötilassa.
Tämän laitteen käyttöohjeita on noudatettava tarkasti, erityisesti kali-
broinnin ja valonlähteen osalta.
3 NÄYTTEEN VALMISTAMINEN3.1 Rypälemehut ja tiivistetyt rypälemehut
Rypälemehu suodatetaan tarvittaessa kuivan, neljään osaan taitetun
harson läpi, ensimmäiset suodostipat hylätään ja määritys tehdään
suodatetusta tuotteesta.
3.2 Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut
Konsentraation mukaan käytetään joko puhdistettua tiivistettyä
rypälemehua tai liuosta, joka saadaan laimentamalla 200 g puhdis-
tettua tiivistettyä rypälemehua 500 g:ksi vedellä; punnitseminen on
tehtävä tarkasti.
4 SUORITUS
Saatetaan näytteen lämpötila lähelle 20 ºC:ta. Asetetaan pieni näyte
refraktometrin alemmalle prismalle ja tarkastetaan, että prismojen
ollessa tiukasti toisiaan vasten näyte peittää lasipinnan kokonaan.
Mittaus tehdään käytetyn laitteen käyttöohjeiden mukaisesti.
Luetaan sakkaroosin massaprosentti 0,1 %:n tarkkuudella tai taiteker-
roin neljällä desimaalilla.
Samasta valmistetusta näytteestä tehdään vähintään 2 määritystä.
Kirjataan lämpötila t ºC.
5 LASKEMINEN
5.1 Lämpötilan korjaus
5.1.1 Laitteet, joissa asteikko on sakkaroosin massaprosentteja: lämpötilan
korjaamisessa käytetään taulukkoa I.
5.1.2 Laitteet, joissa asteikko on taitekerroin: etsitään t ºC:ssa mitattu taite-
kerroin taulukosta II, josta saadaan (sarake 1) sakkaroosin
massaprosenttit ºC:ssa. Tämä arvo korjataan lämpöti lan suhteen ja
ilmoitetaan 20 ºC:ssa taulukon I avulla.
5.2 Rypälemehun ja tiivistetyn rypälemehun sokeripitoisuus
Etsitään taulukosta II sakkaroosin massaprosentti 20 ºC:ssa, josta
saadaan sokeripitoisuus grammoina litrassa ja grammoina kilogram-
massa. Sokeripitoisuus ilmoitetaan inverttisokerina yhdellä
desimaalilla.
5.3 Puhdistetun tiivistetyn rypälemehun sokeripitoisuus
Etsitään taulukosta II sakkaroosin massaprosentti 20 ºC:ssa, josta
saadaan sokeripitoisuus grammoina litrassa ja grammoina kilogram-1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 17
▼B
massa. Sokeripitoisuus ilmoitetaan inverttisokerina yhdellä desimaa-
lilla.
Jos mittaus tehdään laimennetusta puhdistetusta tiivistetystä rypäle-
mehusta, tulos kerrotaan laimennuskertoimella.
5.4 Rypälemehun, tiivistetyn rypälemehun ja puhdistetun tiivistetyn
rypälemehun taitekerroin
Etsitään taulukosta II sakkaroosin massaprosentti 20 ºC:ssa, josta
saadaan taitekerroin 20 ºC:ssa. Tämä taitekerroin esitetään neljällä
desimaalilla.
TAULUKKO I
Tehtävät korjaukset, jos sakkaroosin massaprosentti on määritetty muussa lämpötilassa kuin
20 ºC
Lämpötila ºCSakkaroosigrammoi na 100 g:ssa tuotetta
5 1 01 52 03 04 05 06 07 07 5
Vähennetään
15 0,25 0,27 0,31 0,31 0,34 0,35 0,36 0,37 0,36 0,36
16 0,21 0,23 0,27 0,27 0,29 0,31 0,31 0,32 0,31 0,2317 0,16 0,18 0,20 0,20 0,22 0,23 0,23 0,23 0,20 0,17
18 0,11 0,12 0,14 0,15 0,16 0,16 0,15 0,12 0,12 0,09
19 0,06 0,07 0,08 0,08 0,08 0,09 0,09 0,08 0,07 0,05
Lisätään
21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
22 0,12 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,1423 0,18 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,2224 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29
25 0,30 0,32 0,32 0,34 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37
Lämpötila ei saa poiketa 20 ºC:sta yli ± 5 ºC:ta.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 18
▼B
TAULUKKO II
Taulukossa esitetään rypälemehun ja tiivistetyn rypälemehun sokeripitoisuus (1)grammoina
litrassa ja grammoina kilogrammassa, joka on määritetty refraktometrillä, jossa asteikko on
joko sakkaroosin massaprosentti 20 ºC:ssa tai taitekerroin 20 ºC:ssa.Myös tiheys 20 ºC:ssa on
esitetty.
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
10.0 1.34781 1.0390 82.3 79.2 4,89
10.1 1.34798 1.0394 83.4 80.2 4,95
10.2 1.34814 1.0398 84.5 81.3 5,02
10.3 1.34830 1.0402 85.6 82.2 5,09
10.4 1.34845 1.0406 86.6 83.2 5,14
10.5 1.34860 1.0410 87.6 84.1 5,20
10.6 1.34875 1.0414 88.6 85.1 5,26
10.7 1.34890 1.0419 89.7 86.1 5,33
10.8 1.34906 1.0423 90.8 87.1 5,39
10.9 1.34921 1.0427 91.8 88.1 5,45
11.0 1.34936 1.0431 92.9 89.1 5,52
11.1 1.34952 1.0435 94.0 90.0 5,58
11.2 1.34968 1.0439 95.0 91.0 5,64
11.3 1.34984 1.0443 96.1 92.0 5,71
11.4 1.34999 1.0447 97.1 92.9 5,77
11.5 1.35015 1.0452 98.2 94.0 5,83
11.6 1.35031 1.0456 99.3 95.0 5,90
11.7 1.35046 1.0460 100.3 95.9 5,96
11.8 1.35062 1.0464 101.4 96.9 6,02
11.9 1.35077 1.0468 102.5 97.9 6,09
12.0 1.35092 1.0473 103.6 98.9 6,15
12.1 1.35108 1.0477 104.7 99.9 6,22
12.2 1.35124 1.0481 105.7 100.8 6,28
12.3 1.35140 1.0485 106.8 101.9 6,35
12.4 1.35156 1.0489 107.9 102.9 6,41
12.5 1.35172 1.0494 109.0 103.8 6,47
12.6 1.35187 1.0498 110.0 104.8 6,53
12.7 1.35203 1.0502 111.1 105.8 6,60
12.8 1.35219 1.0506 112.2 106.8 6,66
12.9 1.35234 1.0510 113.2 107.8 6,73
13.0 1.35249 1.0514 114.3 108.7 6,79
13.1 1.35266 1.0519 115.4 109.7 6,86
13.2 1.35282 1.0523 116.5 110.7 6,92
13.3 1.35298 1.0527 117.6 111.7 6,99
13.4 1.35313 1.0531 118.6 112.6 7,05
13.5 1.35329 1.0536 119.7 113.6 7,11
13.6 1.35345 1.0540 120.8 114.6 7,18
13.7 1.35360 1.0544 121.8 115.6 7,24
13.8 1.35376 1.0548 122.9 116.5 7,30
13.9 1.35391 1.0552 124.0 117.5 7,37
14.0 1.35407 1.0557 125.1 118.5 7,43
14.1 1.35424 1.0561 126.2 119.5 7,50
14.2 1.35440 1.0565 127.3 120.5 7,56
14.3 1.35456 1.0569 128.4 121.5 7,63
14.4 1.35472 1.0574 129.5 122.5 7,69
14.5 1.35488 1.0578 130.6 123.4 7,76
14.6 1.35503 1.0582 131.6 124.4 7,82
14.7 1.35519 1.0586 132.7 125.4 7,88
14.8 1.35535 1.0591 133.8 126.3 7,95
14.9 1.35551 1.0595 134.9 127.3 8,011990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 19
(1) Sokeripitoisuus ilmoitetaan inverttisokerina.
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
15.0 1.35567 1.0599 136.0 128.3 8,08
15.1 1.35583 1.0603 137.1 129.3 8,15
15.2 1.35599 1.0608 138.2 130.3 8,21
15.3 1.35615 1.0612 139.3 131.3 8,27
15.4 1.35631 1.0616 140.4 132.3 8,34
15.5 1.35648 1.0621 141.5 133.2 8,41
15.6 1.35664 1.0625 142.6 134.2 8,47
15.7 1.35680 1.0629 143.7 135.2 8,54
15.8 1.35696 1.0633 144.8 136.2 8,60
15.9 1.35712 1.0638 145.9 137.2 8,67
16.0 1.35728 1.0642 147.0 138.1 8,73
16.1 1.35744 1.0646 148.1 139.1 8,80
16.2 1.35760 1.0651 149.2 140.1 8,86
16.3 1.35776 1.0655 150.3 141.1 8,93
16.4 1.35793 1.0660 151.5 142.1 9,00
16.5 1.35809 1.0664 152.6 143.1 9,06
16.6 1.35825 1.0668 153.7 144.1 9,13
16.7 1.35842 1.0672 154.8 145.0 9,20
16.8 1.35858 1.0677 155.9 146.0 9,26
16.9 1.35874 1.0681 157.0 147.0 9,33
17.0 1.35890 1.0685 158.1 148.0 9,39
17.1 1.35907 1.0690 159.3 149.0 9,46
17.2 1.35923 1.0694 160.4 150.0 9,53
17.3 1.35939 1.0699 161.5 151.0 9,59
17.4 1.35955 1.0703 162.6 151.9 9,66
17.5 1.35972 1.0707 163.7 152.9 9,73
17.6 1.35988 1.0711 164.8 153.9 9,79
17.7 1.36004 1.0716 165.9 154.8 9,86
17.8 1.36020 1.0720 167.0 155.8 9,92
17.9 1.36036 1.0724 168.1 156.8 9,99
18.0 1.36053 1.0729 169.3 157.8 10,06
18.1 1.36070 1.0733 170.4 158.8 10,12
18.2 1.36086 1.0738 171.5 159.7 10,19
18.3 1.36102 1.0742 172.6 160.7 10,25
18.4 1.36119 1.0746 173.7 161.6 10,32
18.5 1.36136 1.0751 174.9 162.6 10,39
18.6 1.36152 1.0755 176.0 163.6 10,46
18.7 1.36169 1.0760 177.2 164.6 10,53
18.8 1.36185 1.0764 178.3 165.6 10,59
18.9 1.36201 1.0768 179.4 166.6 10,66
19.0 1.36217 1.0773 180.5 167.6 10,72
19.1 1.36234 1.0777 181.7 168.6 10,80
19.2 1.36251 1.0782 182.8 169.5 10,86
19.3 1.36267 1.0786 183.9 170.5 10,93
19.4 1.36284 1.0791 185.1 171.5 11,00
19.5 1.36301 1.0795 186.3 172.5 11,07
19.6 1.36318 1.0800 187.4 173.5 11,13
19.7 1.36335 1.0804 188.6 174.5 11,21
19.8 1.36351 1.0809 189.7 175.5 11,27
19.9 1.36367 1.0813 190.8 176.5 11,341990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 20
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
20.0 1.36383 1.0817 191.9 177.4 11,40
20.1 1.36400 1.0822 193.1 178.4 11,47
20.2 1.36417 1.0826 194.2 179.4 11,54
20.3 1.36434 1.0831 195.3 180.4 11,60
20.4 1.36451 1.0835 196.5 181.4 11,67
20.5 1.36468 1.0840 197.7 182.3 11,75
20.6 1.36484 1.0844 198.8 183.3 11,81
20.7 1.36501 1.0849 200.0 184.3 11,88
20.8 1.36518 1.0853 201.1 185.3 11,96
20.9 1.36534 1.0857 202.2 186.2 12,01
21.0 1.36550 1.0862 203.3 187.2 12,08
21.1 1.36568 1.0866 204.5 188.2 12,15
21.2 1.36585 1.0871 205.7 189.2 12,22
21.3 1.36601 1.0875 206.8 190.2 12,29
21.4 1.36618 1.0880 207.9 191.1 12,35
21.5 1.36635 1.0884 209.1 192.1 12,42
21.6 1.36652 1.0889 210.3 193.1 12,49
21.7 1.36669 1.0893 211.4 194.1 12,56
21.8 1.36685 1.0897 212.5 195.0 12,63
21.9 1.36702 1.0902 213.6 196.0 12,69
22.0 1.36719 1.0906 214.8 196.9 12,76
22.1 1.36736 1.0911 216.0 198.0 12,83
22.2 1.36753 1.0916 217.2 199.0 12,90
22.3 1.36770 1.0920 218.3 199.9 12,97
22.4 1.36787 1.0925 219.5 200.9 13,04
22.5 1.36804 1.0929 220.6 201.8 13,11
22.6 1.36820 1.0933 221.7 202.8 13,17
22.7 1.36837 1.0938 222.9 203.8 13,24
22.8 1.36854 1.0943 224.1 204.8 13,31
22.9 1.36871 1.0947 225.2 205.8 13,38
23.0 1.36888 1.0952 226.4 206.7 13,45
23.1 1.36905 1.0956 227.6 207.7 13,52
23.2 1.36922 1.0961 228.7 208.7 13,59
23.3 1.36939 1.0965 229.9 209.7 13,66
23.4 1.36956 1.0970 231.1 210.7 13,73
23.5 1.36973 1.0975 232.3 211.6 13,80
23.6 1.36991 1.0979 233.4 212.6 13,87
23.7 1.37008 1.0984 234.6 213.6 13,94
23.8 1.37025 1.0988 235.8 214.6 14,01
23.9 1.37042 1.0993 237.0 215.6 14,08
24.0 1.37059 1.0998 238.2 216.6 14,15
24.1 1.37076 1.1007 239.3 217.4 14,22
24.2 1.37093 1.1011 240.3 218.2 14,28
24.3 1.37110 1.1016 241.6 219.4 14,35
24.4 1.37128 1.1022 243.0 220.5 14,44
24.5 1.37145 1.1026 244.0 221.3 14,50
24.6 1.37162 1.1030 245.0 222.1 14,56
24.7 1.37180 1.1035 246.4 223.2 14,64
24.8 1.37197 1.1041 247.7 224.4 14,72
24.9 1.37214 1.1045 248.7 225.2 14,781990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 21
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
25.0 1.37232 1.1049 249.7 226.0 14,84
25.1 1.37249 1.1053 250.7 226.8 14,90
25.2 1.37266 1.1057 251.7 227.6 14,96
25.3 1.37283 1.1062 253.0 228.7 15,03
25.4 1.37300 1.1068 254.4 229.9 15,11
25.5 1.37317 1.1072 255.4 230.7 15,17
25.6 1.37335 1.1076 256.4 231.5 15,23
25.7 1.37353 1.1081 257.8 232.6 15,32
25.8 1.37370 1.1087 259.1 233.7 15,39
25.9 1.37387 1.1091 260.1 234.5 15,45
26.0 1.37405 1.1095 261.1 235.3 15,51
26.1 1.37423 1.1100 262.5 236.4 15,60
26.2 1.37440 1.1106 263.8 237.5 15,67
26.3 1.37457 1.1110 264.8 238.3 15,73
26.4 1.37475 1.1114 265.8 239.2 15,79
26.5 1.37493 1.1119 267.2 240.3 15,88
26.6 1.37510 1.1125 268.5 241.4 15,95
26.7 1.37528 1.1129 269.5 242.2 16,01
26.8 1.37545 1.1133 270.5 243.0 16,07
26.9 1.37562 1.1138 271.8 244.1 16,15
27.0 1.37580 1.1144 273.2 245.2 16,23
27.1 1.37598 1.1148 274.2 246.0 16,29
27.2 1.37615 1.1152 275.2 246.8 16,35
27.3 1.37632 1.1157 276.5 247.9 16,43
27.4 1.37650 1.1163 277.9 249.0 16,51
27.5 1.37667 1.1167 278.9 249.8 16,57
27.6 1.37685 1.1171 279.9 250.6 16,63
27.7 1.37703 1.1176 281.3 251.6 16,71
27.8 1.37721 1.1182 282.6 252.7 16,79
27.9 1.37739 1.1186 283.6 253.5 16,85
28.0 1.37757 1.1190 284.6 254.3 16,91
28.1 1.37775 1.1195 286.0 255.4 16,99
28.2 1.37793 1.1201 287.3 256.5 17,07
28.3 1.37810 1.1205 288.3 257.3 17,13
28.4 1.37828 1.1209 289.3 258.1 17,19
28.5 1.37846 1.1214 290.7 259.2 17,27
28.6 1.37863 1.1220 292.0 260.3 17,35
28.7 1.37881 1.1224 293.0 261.0 17,41
28.8 1.37899 1.1228 294.0 261.8 17,47
28.9 1.37917 1.1233 295.3 262.9 17,55
29.0 1.37935 1.1239 296.7 264.0 17,63
29.1 1.37953 1.1244 298.1 265.1 17,71
29.2 1.37971 1.1250 299.4 266.1 17,79
29.3 1.37988 1.1254 300.4 266.9 17,85
29.4 1.38006 1.1258 301.4 267.7 17,91
29.5 1.38024 1.1263 302.8 268.8 17,99
29.6 1.38042 1.1269 304.1 269.9 18,07
29.7 1.38060 1.1273 305.1 270.6 18,13
29.8 1.38078 1.1277 306.1 271.4 18,19
29.9 1.38096 1.1282 307.4 272.5 18,261990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 22
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
30.0 1.38114 1.1288 308.8 273.6 18,35
30.1 1.38132 1.1293 310.0 274.5 18,42
30.2 1.38150 1.1298 311.2 275.5 18,49
30.3 1.38168 1.1302 312.4 276.4 18,56
30.4 1.38186 1.1307 313.6 277.3 18,63
30.5 1.38204 1.1312 314.8 278.3 18,70
30.6 1.38222 1.1317 316.0 279.2 18,77
30.7 1.38240 1.1322 317.2 280.2 18,85
30.8 1.38258 1.1327 318.4 281.1 18,92
30.9 1.38276 1.1332 319.6 282.0 18,99
31.0 1.38294 1.1336 320.8 283.0 19,06
31.1 1.38312 1.1341 322.0 283.9 19,13
31.2 1.38330 1.1346 323.2 284.9 19,20
31.3 1.38349 1.1351 324.4 285.8 19,27
31.4 1.38367 1.1356 325.6 286.8 19,35
31.5 1.38385 1.1361 326.8 287.7 19,42
31.6 1.38403 1.1366 328.1 288.6 19,49
31.7 1.38421 1.1371 329.3 289.6 19,56
31.8 1.38440 1.1376 330.5 290.5 19,64
31.9 1.38458 1.1380 331.7 291.5 19,71
32.0 1.38476 1.1385 332.9 292.4 19,78
32.1 1.38494 1.1391 334.2 293.4 19,86
32.2 1.38513 1.1396 335.5 294.4 19,93
32.3 1.38531 1.1401 336.7 295.4 20,00
32.4 1.38550 1.1406 338.0 296.4 20,08
32.5 1.38568 1.1411 339.3 297.3 20,16
32.6 1.38586 1.1416 340.6 298.3 20,24
32.7 1.38605 1.1422 341.9 299.3 20,31
32.8 1.38623 1.1427 343.1 300.3 20,38
32.9 1.38642 1.1432 344.4 301.3 20,46
33.0 1.38660 1.1437 345.7 302.3 20,54
33.1 1.38678 1.1442 346.9 303.2 20,61
33.2 1.38697 1.1447 348.1 304.1 20,68
33.3 1.38715 1.1452 349.3 305.0 20,75
33.4 1.38734 1.1457 350.5 305.9 20,82
33.5 1.38753 1.1461 351.7 306.9 20,90
33.6 1.38771 1.1466 352.9 307.8 20,97
33.7 1.38790 1.1471 354.1 308.7 21,04
33.8 1.38808 1.1476 355.3 309.6 21,11
33.9 1.38827 1.1481 356.5 310.5 21,18
34.0 1.38845 1.1486 357.7 311.4 21,25
34.1 1.38864 1.1491 359.0 312.4 21,33
34.2 1.38882 1.1496 360.3 313.4 21,41
34.3 1.38901 1.1501 361.5 314.3 21,48
34.4 1.38919 1.1506 362.8 315.3 21,55
34.5 1.38938 1.1512 364.1 316.3 21,63
34.6 1.38957 1.1517 365.4 317.3 21,71
34.7 1.38975 1.1522 366.7 318.2 21,79
34.8 1.38994 1.1527 367.9 319.2 21,86
34.9 1.39012 1.1532 369.2 320.2 21,941990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 23
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
35.0 1.39031 1.1537 370.5 321.1 22,01
35.1 1.39050 1.1543 371.8 322.1 22,09
35.2 1.39069 1.1548 373.0 323.0 22,16
35.3 1.39087 1.1553 374.3 324.0 22,24
35.4 1.39106 1.1558 375.6 325.0 22,32
35.5 1.39125 1.1563 376,9 325.9 22,39
35.6 1.39144 1.1568 378.1 326.9 22,45
35.7 1.39163 1.1573 379.4 327.8 22,54
35.8 1.39181 1.1579 380.7 328.8 22,62
35.9 1.39200 1.1584 381.9 329.7 22,69
36.0 1.39219 1.1589 383.2 330.7 22,77
36.1 1.39238 1.1594 384.5 331.6 22,85
36.2 1.39257 1.1599 385.8 332.6 22,92
36.3 1.39276 1.1604 387.0 333.5 22,99
36.4 1.39295 1.1610 388.3 334.5 23,07
36.5 1.39314 1.1615 389.6 335.4 23,15
36.6 1.39332 1.1620 390.9 336.4 23,22
36.7 1.39351 1.1625 392.2 337.3 23,30
36.8 1.39370 1.1630 393.4 338.3 23,37
36.9 1.39389 1.1635 394.7 339.2 23,45
37.0 1.39408 1.1641 396.0 340.2 23,53
37.1 1.39427 1.1646 397.3 341.1 23,60
37.2 1.39446 1.1651 398.6 342.1 23,68
37.3 1.39465 1.1656 399.8 343.0 23,75
37.4 1.39484 1.1661 401.1 344.0 23,83
37.5 1.39504 1.1666 402.4 344.9 23,91
37.6 1.39523 1.1672 403.7 345.9 23,99
37.7 1.39542 1.1677 405.0 346.8 24,06
37.8 1.39561 1.1682 406.2 347.7 24,13
37.9 1.39580 1.1687 407.5 348.7 24,21
38.0 1.39599 1.1692 408.8 349.6 24,29
38.1 1.39618 1.1698 410.1 350.6 24,37
38.2 1.39637 1.1703 411.3 351.5 24,44
38.3 1.39657 1.1708 412.6 352.4 24,51
38.4 1.39676 1.1713 413.9 353.4 24,59
38.5 1.39695 1.1718 415.2 354.3 24,67
38.6 1.39714 1.1723 416.4 355.2 24,74
38.7 1.39733 1.1728 417.7 356.1 24,82
38.8 1.39753 1.1733 419.0 357.1 24,90
38.9 1.39772 1.1739 420.2 358.0 24,97
39.0 1.39791 1.1744 421.5 358.9 25,04
39.1 1.39810 1.1749 422.8 359.8 25,12
39.2 1.39830 1.1754 424.1 360.8 25,20
39.3 1.39849 1.1759 425.3 361.7 25,27
39.4 1.39869 1.1764 426.6 362.6 25,35
39.5 1.39888 1.1770 427.9 363.6 25,42
39.6 1.39907 1.1775 429.2 364.5 25,50
39.7 1.39927 1.1780 430.5 365.4 25,58
39.8 1.39946 1.1785 431.7 366.3 25,65
39.9 1.39966 1.1790 433.0 367.3 25,731990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 24
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
40.0 1.39985 1.1796 434.3 368.2 25,80
40.1 1.40004 1.1801 435.6 369.2 25,88
40.2 1.40024 1.1806 437.0 370.1 25,96
40.3 1.40043 1.1812 438.3 371.1 26,04
40.4 1.40063 1.1817 439.7 372.1 26,12
40.5 1.40083 1.1823 441.0 373.0 26,20
40.6 1.40102 1.1828 442.3 374.0 26,28
40.7 1.40122 1.1833 443.7 374.9 26,36
40.8 1.40141 1.1839 445.0 375.9 26,44
40.9 1.40161 1.1844 446.4 376.9 26,52
41.0 1.40180 1.1850 447.7 377.8 26,60
41.1 1.40200 1.1855 449.0 378.7 26,68
41.2 1.40219 1.1860 450.2 379.6 26,75
41.3 1.40239 1.1865 451.5 380.5 26,83
41.4 1.40259 1.1870 452.8 381.4 26,90
41.5 1.40279 1.1875 454.1 382.3 26,98
41.6 1.40298 1.1881 455.3 383.2 27,05
41.7 1.40318 1.1886 456.6 384.2 27,13
41.8 1.40338 1.1891 457.9 385.1 27,21
41.9 1.40357 1.1896 459.1 386.0 27,28
42.0 1.40377 1.1901 460.4 386.9 27,35
42.1 1.40397 1.1907 461.7 387.8 27,43
42.2 1.40417 1.1912 463.1 388.8 27,52
42.3 1.40436 1.1917 464.4 389.7 27,59
42.4 1.40456 1.1923 465.8 390.7 27,68
42.5 1.40476 1.1928 467.2 391.6 27,76
42.6 1.40496 1.1934 468.5 392.6 27,84
42.7 1.40516 1.1939 469.9 393.5 27,92
42.8 1.40535 1.1945 471.2 394.5 28,00
42.9 1.40555 1.1950 472.6 395.4 28,08
43.0 1.40575 1.1956 473.9 396.4 28,16
43.1 1.40595 1.1961 475.2 397.3 28,23
43.2 1.40615 1.1967 476.6 398.3 28,32
43.3 1.40635 1.1972 477.9 399.2 28,40
43.4 1.40655 1.1977 479.3 400.1 28,48
43.5 1.40675 1.1983 480.6 401.1 28,56
43.6 1.40695 1.1988 481.9 402.0 28,63
43.7 1.40715 1.1994 483.3 402.9 28,72
43.8 1.40735 1.1999 484.6 403.9 28,79
43.9 1.40755 1.2005 486.0 404.8 28,88
44.0 1.40775 1.2010 487.3 405.7 28,95
44.1 1.40795 1.2015 488.6 406.7 29,03
44.2 1.40815 1.2021 490.0 407.6 29,11
44.3 1.40836 1.2026 491.3 408.5 29,19
44.4 1.40856 1.2032 492.7 409.5 29,27
44.5 1.40876 1.2037 494.0 410.4 29,35
44.6 1.40896 1.2042 495.3 411.3 29,43
44.7 1.40916 1.2048 496.7 412.3 29,51
44.8 1.40937 1.2053 498.0 413.2 29,59
44.9 1.40957 1.2059 499.4 414.1 29,671990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 25
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
45.0 1.40977 1.2064 500.7 415.0 29,75
45.1 1.40997 1.2070 502.1 416.0 29,83
45.2 1.41018 1.2076 503.5 417.0 29,92
45.3 1.41038 1.2081 504.9 417.9 30,00
45.4 1.41058 1.2087 506.3 418.9 30,08
45.5 1.41079 1.2093 507.8 419.9 30,17
45.6 1.41099 1.2098 509.2 420.9 30,25
45.7 1.41119 1.2104 510.6 421.8 30,34
45.8 1.41139 1.2110 512.0 422.8 30,42
45.9 1.41160 1.2115 513.4 423.7 30,50
46.0 1.41180 1.2121 514.8 424.7 30,59
46.1 1.41200 1.2127 516.1 425.6 30,66
46.2 1.41221 1.2132 517.5 426.5 30,75
46.3 1.41241 1.2137 518.8 427.5 30,82
46.4 1.41262 1.2143 520.2 428.4 30,91
46.5 1.41282 1.2148 521.5 429.3 30,99
46.6 1.41302 1.2154 522.8 430.2 31,06
46.7 1.41323 1.2159 524.2 431.1 31,15
46.8 1.41343 1.2165 525.5 432.0 31,22
46.9 1.41364 1.2170 526.9 432.9 31,31
47.0 1.41384 1.2175 528.2 433.8 31,38
47.1 1.41405 1.2181 529.6 434.8 31,47
47.2 1.41425 1.2187 531.0 435.7 31,55
47.3 1.41446 1.2192 532.4 436.7 31,63
47.4 1.41466 1.2198 533.8 437.6 31,72
47.5 1.41487 1.2204 535.3 438.6 31,81
47.6 1.41508 1.2210 536.7 439.5 31,89
47.7 1.41528 1.2215 538.1 440.5 31,97
47.8 1.41549 1.2221 539.5 441.4 32,05
47.9 1.41569 1.2227 540.9 442.4 32,14
48.0 1.41590 1.2232 542.3 443.3 32,22
48.1 1.41611 1.2238 543.6 444.2 32,30
48.2 1.41632 1.2243 545.0 445.1 32,38
48.3 1.41652 1.2249 546.3 446.0 32,46
48.4 1.41673 1.2254 547.7 446.9 32,59
48.5 1.41694 1.2260 549.1 447.8 32,63
48.6 1.41715 1.2265 550.4 448.7 32,70
48.7 1.41736 1.2271 551.8 449.7 32,79
48.8 1.41756 1.2276 553.1 450.6 32,86
48.9 1.41777 1.2282 554.5 451.4 32,95
49.0 1.41798 1.2287 555.8 452.3 33,02
49.1 1.41819 1.2293 557.2 453.3 33,11
49.2 1.41840 1.2298 558.6 454.2 33,19
49.3 1.41861 1.2304 560.0 455.1 33,27
49.4 1.41882 1.2310 561.4 456.1 33,36
49.5 1.41903 1.2315 562.8 457.0 33,44
49.6 1.41924 1.2321 564.2 457.9 33,52
49.7 1.41945 1.2327 565.6 458.8 33,61
49.8 1.41966 1.2332 567.0 459.8 33,69
49.9 1.41987 1.2338 568.4 460.7 33,771990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 26
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
50.0 1.42008 1.2344 569.8 461.6 33,86
50.1 1.42029 1.2349 571.2 462.5 33,94
50.2 1.42050 1.2355 572.6 463.5 34,02
50.3 1.42071 1.2361 574.0 464.4 34,10
50.4 1.42092 1.2366 575.4 465.3 34,19
50.5 1.42114 1.2372 576.9 466.2 34,28
50.6 1.42135 1.2378 578.3 467.2 34,36
50.7 1.42156 1.2384 579.7 468.1 34,44
50.8 1.42177 1.2389 581.1 469.0 34,53
50.9 1.42198 1.2395 582.5 469.9 34,61
51.0 1.42219 1.2401 583.9 470.9 34,69
51.1 1.42240 1.2407 585.4 471.8 34,78
51.2 1.42261 1.2413 586.9 472.8 34,87
51.3 1.42283 1.2419 588.3 473.8 34,95
51.4 1.42304 1.2425 589.8 474.7 35,04
51.5 1.42325 1.2431 591.3 475.7 35,13
51.6 1.42346 1.2437 592.8 476.6 35,22
51.7 1.42367 1.2443 594.3 477.6 35,31
51.8 1.42389 1.2449 595.7 478.6 35,39
51.9 1.42410 1.2455 597.2 479.5 35,48
52.0 1.42431 1.2461 598.7 480.5 35,57
52.1 1.42452 1.2466 600.1 481.4 35,65
52.2 1.42474 1.2472 601.5 482.3 35,74
52.3 1.42495 1.2478 602.9 483.2 35,82
52.4 1.42517 1.2483 604.3 484.1 35,91
52.5 1.42538 1.2489 605.8 485.0 35,99
52.6 1.42559 1.2495 607.2 485.9 36,08
52.7 1.42581 1.2500 608.6 486.8 36,16
52.8 1.42602 1.2506 610.0 487.7 36,24
52.9 1.42624 1.2512 611.4 488.6 36,33
53.0 1.42645 1.2518 612.8 489.6 36,41
53.1 1.42666 1.2524 614.3 490.5 36,50
53.2 1.42686 1.2530 615.8 491.4 36,59
53.3 1.42707 1.2536 617.2 492.4 36,67
53.4 1.42727 1.2542 618.7 493.3 36,76
53.5 1.42748 1.2548 620.2 494.3 36,85
53.6 1.42769 1.2554 621.7 495.2 36,94
53.7 1.42789 1.2560 623.2 496.2 37,03
53.8 1.42810 1.2566 624.6 497.1 37,11
53.9 1.42830 1.2571 626.1 498.0 37,20
54.0 1.42851 1.2577 627.6 499.0 37,29
54.1 1.42874 1.2583 629.0 499.9 37,37
54.2 1.42897 1.2589 630.4 500.8 37,45
54.3 1.42919 1.2595 631.8 501.7 37,54
54.4 1.42942 1.2600 633.2 502.6 37,62
54.5 1.42965 1.2606 634.7 503.5 37,71
54.6 1.42988 1.2612 636.1 504.3 37,79
54.7 1.43011 1.2617 637.5 505.2 37,88
54.8 1.43033 1.2623 638.9 506.1 37,96
54.9 1.43056 1.2629 640.3 507.0 38,041990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 27
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
55.0 1.43079 1.2635 641.7 507.9 38,11
55.1 1.43101 1.2640 643.2 508.8 38,22
55.2 1.43123 1.2646 644.6 509.7 38,30
55.3 1.43145 1.2652 646.1 510.7 38,39
55.4 1.43167 1.2658 647.6 511.6 38,48
55.5 1.43189 1.2664 649.1 512.5 38,57
55.6 1.43210 1.2670 650.5 513.4 38,65
55.7 1.43232 1.2676 652.0 514.3 38,74
55.8 1.43254 1.2682 653.5 515.3 38,83
55.9 1.43276 1.2688 654.9 516.2 38,91
56.0 1.43298 1.2694 656.4 517.1 39,00
56.1 1.43320 1.2700 657.9 518.0 39,09
56.2 1.43342 1.2706 659.4 518.9 39,18
56.3 1.43364 1.2712 660.8 519.9 39,26
56.4 1.43386 1.2718 662.3 520.8 39,35
56.5 1.43409 1.2724 663.8 521.7 39,44
56.6 1.43431 1.2730 665.3 522.6 39,53
56.7 1.43453 1.2736 666.8 523.5 39,62
56.8 1.43475 1.2742 668.2 524.4 39,70
56.9 1.43497 1.2748 669.7 525.4 39,79
57.0 1.43519 1.2754 671.2 526.3 39,88
57.1 1.43541 1.2760 672.7 527.2 39,97
57.2 1.43563 1.2766 674.3 528.2 40,06
57.3 1.43586 1.2773 675.8 529.1 40,15
57.4 1.43608 1.2779 677.4 530.1 40,25
57.5 1.43630 1.2785 678.9 531.0 40,34
57.6 1.43652 1.2791 680.4 532.0 40,43
57.7 1.43674 1.2797 682.0 532.9 40,52
57.8 1.43697 1.2804 683.5 533.8 40,61
57.9 1.43719 1.2810 685.1 534.8 40,70
58.0 1.43741 1.2816 686.6 535.7 40,80
58.1 1.43763 1.2822 688.1 536.6 40,88
58.2 1.43786 1.2828 689.6 537.5 40,97
58.3 1.43808 1.2834 691.0 538.4 41,06
58.4 1.43831 1.2840 692.5 539.3 41,14
58.5 1.43854 1.2846 694.0 540.2 41,23
58.6 1.43876 1.2852 695.5 541.1 41,32
58.7 1.43899 1.2858 697.0 542.0 41,41
58.8 1.43921 1.2864 698.4 542.9 41,50
58.9 1.43944 1.2870 699.9 543.8 41,58
59.0 1.43966 1.2876 701.4 544.7 41,67
59.1 1.43989 1.2882 702.9 545.7 41,76
59.2 1.44011 1.2888 704.5 546.6 41,86
59.3 1.44034 1.2895 706.0 547.5 41,95
59.4 1.44056 1.2901 707.6 548.5 42,04
59.5 1.44079 1.2907 709.1 549.4 42,13
59.6 1.44102 1.2913 710.6 550.3 42,22
59.7 1.44124 1.2920 712.2 551.2 42,32
59.8 1.44147 1.2926 713.7 552.2 42,41
59.9 1.44169 1.2932 715.3 553.1 42,501990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 28
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
60.0 1.44192 1.2938 716.8 554.0 42,59
60.1 1.44215 1.2944 718.3 554.9 42,68
60.2 1.44237 1.2950 719.8 555.8 42,77
60.3 1.44260 1.2956 721.2 556.7 42,85
60.4 1.44283 1.2962 722.7 557.6 42,94
60.5 1.44306 1.2968 724.2 558.4 43,03
60.6 1.44328 1.2974 725.7 559.3 43,12
60.7 1.44351 1.2980 727.2 560.2 43,21
60.8 1.44374 1.2986 728.6 561.1 43,29
60.9 1.44396 1.2992 730.1 562.0 43,38
61.0 1.44419 1.2998 731.6 562.8 43,47
61.1 1.44442 1.3004 733.1 563.8 43,56
61.2 1.44465 1.3011 734.7 564.7 43,65
61.3 1.44488 1.3017 736.2 565.6 43,74
61.4 1.44511 1.3023 737.8 566.5 43,84
61.5 1.44533 1.3030 739.4 567.4 43,93
61.6 1.44556 1.3036 740.9 568.4 44,02
61.7 1.44579 1.3042 742.5 569.3 44,12
61.8 1.44602 1.3048 744.0 570.2 44,21
61.9 1.44625 1.3055 745.6 571.1 44,30
62.0 1.44648 1.3061 747.1 572.0 44,39
62.1 1.44671 1.3067 748.6 572.9 44,48
62.2 1.44694 1.3073 750.2 573.8 44,57
62.3 1.44717 1.3080 751.7 574.7 44,66
62.4 1.44740 1.3086 753.3 575.6 44,76
62.5 1.44764 1.3092 754.8 576.5 44,85
62.6 1.44787 1.3098 756.3 577.4 44,94
62.7 1.44810 1.3104 757.9 578.3 45,03
62.8 1.44833 1.3111 759.4 579.2 45,12
62.9 1.44856 1.3117 761.0 580.1 45,21
63.0 1.44879 1.3123 762.5 581.0 45,31
63.1 1.44902 1.3130 764.1 582.0 45,40
63.2 1.44926 1.3136 765.7 582.9 45,49
63.3 1.44949 1.3143 767.3 583.8 45,59
63.4 1.44972 1.3149 768.9 584.8 45,69
63.5 1.44996 1.3156 770.6 585.7 45,79
63.6 1.45019 1.3162 772.2 586.6 45,88
63.7 1.45042 1.3169 773.8 587.6 45,98
63.8 1.45065 1.3175 775.4 588.5 46,07
63.9 1.45089 1.3182 777.0 589.4 46,17
64.0 1.45112 1.3188 778.6 590.4 46,26
64.1 1.45135 1.3195 780.1 591.3 46,35
64.2 1.45159 1.3201 781.7 592.1 46,45
64.3 1.45183 1.3207 783.2 593.0 46,53
64.4 1.45206 1.3213 784.8 593.9 46,63
64.5 1.45230 1.3219 786.3 594.8 46,72
64.6 1.45253 1.3226 787.8 595.7 46,81
64.7 1.45276 1.3232 789.4 596.6 46,90
64.8 1.45300 1.3238 790.9 597.5 46,99
64.9 1.45324 1.3244 792.5 598.3 47,091990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 29
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
65.0 1.45347 1.3251 794.0 599.2 47,18
65.1 1.45371 1.3257 795.6 600.1 47,27
65.2 1.45394 1.3264 797.2 601.1 47,37
65.3 1.45418 1.3270 798.8 602.0 47,46
65.4 1.45441 1.3277 800.4 602.9 47,56
65.5 1.45465 1.3283 802.1 603.8 47,66
65.6 1.45489 1.3290 803.7 604.7 47,75
65.7 1.45512 1.3296 805.3 605.6 47,85
65.8 1.45536 1.3303 806.9 606.6 47,94
65.9 1.45559 1.3309 808.5 607.5 48,04
66.0 1.45583 1.3316 810.1 608.4 48,13
66.1 1.45607 1.3322 811.6 609.3 48,22
66.2 1.45630 1.3328 813.2 610.1 48,32
66.3 1.45654 1.3335 814.8 611.0 48,41
66.4 1.45678 1.3341 816.3 611.9 48,50
66.5 1.45702 1.3347 817.9 612.8 48,60
66.6 1.45725 1.3353 819.4 613.6 48,69
66.7 1.45749 1.3360 820.9 614.5 48,77
66.8 1.45773 1.3366 822.5 615.4 48,87
66.9 1.45796 1.3372 824.1 616.2 48,97
67.0 1.45820 1.3378 825.6 617.1 49,05
67.1 1.45844 1.3385 827.2 618.0 49,15
67.2 1.45868 1.3391 828.8 618.9 49,24
67.3 1.45892 1.3398 830.4 619.8 49,34
67.4 1.45916 1.3404 832.0 620.7 49,43
67.5 1.45940 1.3411 833.7 621.6 49,53
67.6 1.45964 1.3418 835.3 622.5 49,63
67.7 1.45988 1.3424 836.9 623.4 49,73
67.8 1.46012 1.3431 838.5 624.3 49,82
67.9 1.46036 1.3437 840.1 625.2 49,92
68.0 1.46060 1.3444 841.7 626.1 50,01
68.1 1.46084 1.3450 843.4 627.0 50,11
68.2 1.46108 1.3457 845.1 628.0 50,21
68.3 1.46132 1.3464 846.7 628.9 50,31
68.4 1.46156 1.3471 848.4 629.8 50,41
68.5 1.46181 1.3478 850.1 630.8 50,51
68.6 1.46205 1.3484 851.8 631.7 50,61
68.7 1.46229 1.3491 853.5 632.6 50,71
68.8 1.46253 1.3498 855.1 633.5 50,81
68.9 1.46277 1.3505 856.8 634.5 50,91
69.0 1.46301 1.3512 858.5 635.4 51,01
69.1 1.46325 1.3518 860.1 636.3 51,10
69.2 1.46350 1.3525 861.7 637.2 51,20
69.3 1.46374 1.3531 863.3 638.0 51,29
69.4 1.46398 1.3538 864.9 638.9 51,39
69.5 1.46423 1.3544 866.6 639.8 51,49
69.6 1.46447 1.3551 868.2 640.7 51,58
69.7 1.46471 1.3557 869.8 641.6 51,68
69.8 1.46495 1.3564 871.4 642.4 51,78
69.9 1.46520 1.3570 873.0 643.3 51,871990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 30
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
70.0 1.46544 1.3577 874.6 644.2 51,97
70.1 1.46568 1.3583 876.2 645.1 52,06
70.2 1.46593 1.3590 877.8 645.9 52,15
70.3 1.46618 1.3596 879.4 646.8 52,25
70.4 1.46642 1.3603 881.0 647.7 52,35
70.5 1.46667 1.3609 882.7 648.6 52,45
70.6 1.46691 1.3616 884.3 649.4 52,54
70.7 1.46715 1.2622 885.9 650.3 52,64
70.8 1.46740 1.3629 887.5 651.2 52,73
70.9 1.46765 1.3635 889.1 652.1 52,83
71.0 1.46789 1.3642 890.7 652.9 52,92
71.1 1.46814 1.3649 892.4 653.8 53,02
71.2 1.46838 1.3655 894.1 654.7 53,12
71.3 1.46863 1.3662 895.7 655.6 53,22
71.4 1.46888 1.3669 897.4 656.5 53,32
71.5 1.46913 1.3676 899.1 657.4 53,42
71.6 1.46937 1.3683 900.8 658.3 53,52
71.7 1.46962 1.3689 902.5 659.2 53,62
71.8 1.46987 1.3696 904.1 660.1 53,72
71.9 1.47011 1.3703 905.8 661.0 53,82
72.0 1.47036 1.3710 907.5 661.9 53,92
72.1 1.47061 1.3717 909.2 662.8 54,02
72.2 1.47086 1.3723 910.8 663.7 54,12
72.3 1.47110 1.3730 912.5 664.6 54,22
72.4 1.47135 1.3737 914.2 665.5 54,32
72.5 1.47160 1.3744 915.9 666.4 54,42
72.6 1.47185 1.3750 917.5 667.3 54,51
72.7 1.47210 1.3757 919.2 668.2 54,62
72.8 1.47234 1.3764 920.9 669.0 54,72
72.9 1.47259 1.3771 922.5 669.9 54,81
73.0 1.47284 1.3777 924.2 670.8 54,91
73.1 1.47309 1.3784 925.9 671.7 55,01
73.2 1.47334 1.3791 927.6 672.6 55,11
73.3 1.47359 1.3798 929.2 673.5 55,21
73.4 1.47384 1.3804 930.9 674.4 55,31
73.5 1.47409 1.3811 932.6 675.2 55,41
73.6 1.47434 1.3818 934.3 676.1 55,51
73.7 1.47459 1.3825 936.0 677.0 55,61
73.8 1.47484 1.3832 937.6 677.9 55,71
73.9 1.47509 1.3838 939.3 678.8 55,81
74.0 1.47534 1.3845 941.0 679.7 55,91
74.1 1.47559 1.3852 942.7 680.5 56,01
74.2 1.47584 1.3859 944.4 681.4 56,11
74.3 1.47609 1.3866 946.0 682.3 56,21
74.4 1.47634 1.3872 947.7 683.2 56,31
74.5 1.47660 1.3879 949.4 684.0 56,41
74.6 1.47685 1.3886 951.1 684.9 56,51
74.7 1.47710 1.3893 952.8 685.8 56,61
74.8 1.47735 1.3900 954.4 686.7 56,71
74.9 1.47760 1.3906 956.1 687.5 56,811990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 31
▼B
TAULUKKO III
Taulukossa esitetään puhdistetun tiivistetyn rypälemehun sokeripitoisuus (1)grammoina litrassa
ja grammoina kilogrammassa, joka on määritetty refraktometrillä, jossa asteikko on joko
sakkaroosin massaprosentti 20 ºC:ssa tai taitekerroin 20 ºC:ssa.Myös tiheys 20 ºC:ssa on
esitetty.
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
50.0 1.42008 1.2342 627.6 508.5 37,28
50.1 1.42029 1.2348 629.3 509.6 37,38
50.2 1.42050 1.2355 630.9 510.6 37,48
50.3 1.42071 1.2362 632.4 511.6 37,56
50.4 1.42092 1.2367 634.1 512.7 37,66
50.5 1.42113 1.2374 635.7 513.7 37,76
50.6 1.42135 1.2381 637.3 514.7 37,85
50.7 1.42156 1.2386 638.7 515.7 37,94
50.8 1.42177 1.2391 640.4 516.8 38,04
50.9 1.42198 1.2396 641.9 517.8 38,13
51.0 1.42219 1.2401 643.4 518.8 38,22
51.1 1.42240 1.2406 645.0 519.9 38,31
51.2 1.42261 1.2411 646.5 520.9 38,40
51.3 1.42282 1.2416 648.1 522.0 38,50
51.4 1.42304 1.2421 649.6 523.0 38,59
51.5 1.42325 1.2427 651.2 524.0 38,68
51.6 1.42347 1.2434 652.9 525.1 38,78
51.7 1.42368 1.2441 654.5 526.1 38,88
51.8 1.42389 1.2447 656.1 527.1 38,97
51.9 1.42410 1.2454 657.8 528.2 39,07
52.0 1.42432 1.2461 659.4 529.2 39,17
52.1 1.42453 1.2466 661.0 530.2 39,26
52.2 1.42475 1.2470 662.5 531.3 39,35
52.3 1.42496 1.2475 664.1 532.3 39,45
52.4 1.42517 1.2480 665.6 533.3 39,54
52.5 1.42538 1.2486 667.2 534.4 39,63
52.6 1.42560 1.2493 668.9 535.4 39,73
52.7 1.42581 1.2500 670.5 536.4 39,83
52.8 1.42603 1.2506 672.2 537.5 39,93
52.9 1.42624 1.2513 673.8 538.5 40,02
53.0 1.42645 1.2520 675.5 539.5 40,12
53.1 1.42667 1.2525 677.1 540.6 40,22
53.2 1.42689 1.2530 678.5 541.5 40,30
53.3 1.42711 1.2535 680.2 542.6 40,40
53.4 1.42733 1.2540 681.8 543.7 40,50
53.5 1.42754 1.2546 683.4 544.7 40,59
53.6 1.42776 1.2553 685.1 545.8 40,69
53.7 1.42797 1.2560 686.7 546.7 40,79
53.8 1.42819 1.2566 688.4 547.8 40,89
53.9 1.42840 1.2573 690.1 548.9 40,99
54.0 1.42861 1.2580 691.7 549.8 41,09
54.1 1.42884 1.2585 693.3 550.9 41,18
54.2 1.42906 1.2590 694.9 551.9 41,28
54.3 1.42927 1.2595 696.5 553.0 41,37
54.4 1.42949 1.2600 698.1 554.0 41,47
54.5 1.42971 1.2606 699.7 555.1 41,56
54.6 1.42993 1.2613 701.4 556.1 41,66
54.7 1.43014 1.2620 703.1 557.1 41,76
54.8 1.43036 1.2625 704.7 558.2 41,86
54.9 1.43058 1.2630 706.2 559.1 41,951990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 32
(1) Sokeripitoisuus ilmoitetaan inverttisokerina.
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
55.0 1.43079 1.2635 707.8 560.2 42,04
55.1 1.43102 1.2639 709.4 561.3 42,14
55.2 1.43124 1.2645 711.0 562.3 42,23
55.3 1.43146 1.2652 712.7 563.3 42,33
55.4 1.43168 1.2659 714.4 564.3 42,44
55.5 1.43189 1.2665 716.1 565.4 42,54
55.6 1.43211 1.2672 717.8 566.4 42,64
55.7 1.43233 1.2679 719.5 567.5 42,74
55.8 1.43255 1.2685 721.1 568.5 42,83
55.9 1.43277 1.2692 722.8 569.5 42,93
56.0 1.43298 1.2699 724.5 570.5 43,04
56.1 1.43321 1.2703 726.1 571.6 43,13
56.2 1.43343 1.2708 727.7 572.6 43,23
56.3 1.43365 1.2713 729.3 573.7 43,32
56.4 1.43387 1.2718 730.9 574.7 43,42
56.5 1.43409 1.2724 732.6 575.8 43,52
56.6 1.43431 1.2731 734.3 576.8 43,62
56.7 1.43454 1.2738 736.0 577.8 43,72
56.8 1.43476 1.2744 737.6 578.8 43,81
56.9 1.43498 1.2751 739.4 579.9 43,92
57.0 1.43519 1.2758 741.1 580.9 44,02
57.1 1.43542 1.2763 742.8 582.0 44,12
57.2 1.43564 1.2768 744.4 583.0 44,22
57.3 1.43586 1.2773 745.9 584.0 44,31
57.4 1.43609 1.2778 747.6 585.1 44,41
57.5 1.43631 1.2784 749.3 586.1 44,51
57.6 1.43653 1.2791 751.0 587.1 44,61
57.7 1.43675 1.2798 752.7 588.1 44,71
57.8 1.43698 1.2804 754.4 589.2 44,81
57.9 1.43720 1.2810 756.1 590.2 44,91
58.0 1.43741 1.2818 757.8 591.2 45,01
58.1 1.43764 1.2822 759.5 592.3 45,11
58.2 1.43784 1.2827 761.1 593.4 45,21
58.3 1.43809 1.2832 762.6 594.3 45,30
58.4 1.43832 1.2837 764.3 595.4 45,40
58.5 1.43854 1.2843 766.0 596.4 45,50
58.6 1.43877 1.2850 767.8 597.5 45,61
58.7 1.43899 1.2857 769.5 598.5 45,71
58.8 1.43922 1.2863 771.1 599.5 45,80
58.9 1.43944 1.2869 772.9 600.6 45,91
59.0 1.43966 1.2876 774.6 601.6 46,01
59.1 1.43988 1.2882 776.3 602.6 46,11
59.2 1.44011 1.2889 778.1 603.7 46,22
59.3 1.44034 1.2896 779.8 604.7 46,32
59.4 1.44057 1.2902 781.6 605.8 46,43
59.5 1.44079 1.2909 783.3 606.8 46,53
59.6 1.44102 1.2916 785.2 607.9 46,64
59.7 1.44124 1.2921 786.8 608.9 46,74
59.8 1.44147 1.2926 788.4 609.9 46,83
59.9 1.44169 1.2931 790.0 610.9 46,931990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 33
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
60.0 1.44192 1.2936 791.7 612.0 47,03
60.1 1.44215 1.2942 793.3 613.0 47,12
60.2 1.44238 1.2949 795.2 614.1 47,23
60.3 1.44260 1.2956 796.9 615.1 47,34
60.4 1.44283 1.2962 798.6 616.1 47,44
60.5 1.44305 1.2969 800.5 617.2 47,55
60.6 1.44328 1.2976 802.2 618.2 47,65
60.7 1.44351 1.2981 803.9 619.3 47,75
60.8 1.44374 1.2986 805.5 620.3 47,85
60.9 1.44397 1.2991 807.1 621.3 47,94
61.0 1.44419 1.2996 808.7 622.3 48,04
61.1 1.44442 1.3002 810.5 623.4 48,14
61.2 1.44465 1.3009 812.3 624.4 48,25
61.3 1.44488 1.3016 814.2 625.5 48,36
61.4 1.44511 1.3022 815.8 626.5 48,46
61.5 1.44534 1.3029 817.7 627.6 48,57
61.6 1.44557 1.3036 819.4 628.6 48,67
61.7 1.44580 1.3042 821.3 629.7 48,79
61.8 1.44603 1.3049 823.0 630.7 48,89
61.9 1.44626 1.3056 824.8 631.7 48,99
62.0 1.44648 1.3062 826.6 632.8 49,10
62.1 1.44672 1.3068 828.3 633.8 49,20
62.2 1.44695 1.3075 830.0 634.8 49,30
62.3 1.44718 1.3080 831.8 635.9 49,40
62.4 1.44741 1.3085 833.4 636.9 49,50
62.5 1.44764 1.3090 835.1 638.0 49,60
62.6 1.44787 1.3095 836.8 639.0 49,71
62.7 1.44810 1.3101 838.5 640.0 49,81
62.8 1.44833 1.3108 840.2 641.0 49,91
62.9 1.44856 1.3115 842.1 642.1 50,02
63.0 1.44879 1.3121 843.8 643.1 50,12
63.1 1.44902 1.3128 845.7 644.2 50,23
63.2 1.44926 1.3135 847.5 645.2 50,34
63.3 1.44949 1.3141 849.3 646.3 50,45
63.4 1.44972 1.3148 851.1 647.3 50,56
63.5 1.44995 1.3155 853.0 648.4 50,67
63.6 1.45019 1.3161 854.7 649.4 50,77
63.7 1.45042 1.3168 856.5 650.4 50,88
63.8 1.45065 1.3175 858.4 651.5 50,99
63.9 1.45088 1.3180 860.0 652.5 51,08
64.0 1.45112 1.3185 861.6 653.5 51,18
64.1 1.45135 1.3190 863.4 654.6 51,29
64.2 1.45158 1.3195 865.1 655.6 51,39
64.3 1.45181 1.3201 866.9 656.7 51,49
64.4 1.45205 1.3208 868.7 657.7 51,60
64.5 1.45228 1.3215 870.6 658.8 51,71
64.6 1.45252 1.3221 872.3 659.8 51,81
64.7 1.45275 1.3228 874.1 660.8 51,92
64.8 1.45299 1.3235 876.0 661.9 52,03
64.9 1.45322 1.3241 877.8 662.9 52,141990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 34
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
65.0 1.45347 1.3248 879.7 664.0 52,25
65.1 1.45369 1.3255 881.5 665.0 52,36
65.2 1.45393 1.3261 883.2 666.0 52,46
65.3 1.45416 1.3268 885.0 667.0 52,57
65.4 1.45440 1.3275 886.9 668.1 52,68
65.5 1.45463 1.3281 888.8 669.2 52,79
65.6 1.45487 1.3288 890.6 670.2 52,90
65.7 1.45510 1.3295 892.4 671.2 53,01
65.8 1.45534 1.3301 894.2 672.3 53,12
65.9 1.45557 1.3308 896.0 673.3 53,22
66.0 1.45583 1.3315 898.0 674.4 53,34
66.1 1.45605 1.3320 899.6 675.4 53,44
66.2 1.45629 1.3325 901.3 676.4 53,54
66.3 1.45652 1.3330 903.1 677.5 53,64
66.4 1.45676 1.3335 904.8 678.5 53,75
66.5 1.45700 1.3341 906.7 679.6 53,86
66.6 1.45724 1.3348 908.5 680.6 53,96
66.7 1.45747 1.3355 910.4 681.7 54,08
66.8 1.45771 1.3361 912.2 682.7 54,18
66.9 1.45795 1.3367 913.9 683.7 54,29
67.0 1.45820 1.3374 915.9 684.8 54,40
67.1 1.45843 1.3380 917.6 685.8 54,51
67.2 1.45867 1.3387 919.6 686.9 54,62
67.3 1.45890 1.3395 921.4 687.9 54,73
67.4 1.45914 1.3400 923.1 688.9 54,83
67.5 1.45938 1.3407 925.1 690.0 54,95
67.6 1.45962 1.3415 927.0 691.0 55,06
67.7 1.45986 1.3420 928.8 692.1 55,17
67.8 1.46010 1.3427 930.6 693.1 55,28
67.9 1.46034 1.3434 932.6 694.2 55,40
68.0 1.46060 1.3440 934.4 695.2 55,50
68.1 1.46082 1.3447 936.2 696.2 55,61
68.2 1.46106 1.3454 938.0 697.2 55,72
68.3 1.46130 1.3460 939.9 698.3 55,83
68.4 1.46154 1.3466 941.8 699.4 55,94
68.5 1.46178 1.3473 943.7 700.4 56,06
68.6 1.46202 1.3479 945.4 701.4 56,16
68.7 1.46226 1.3486 947.4 702.5 56,28
68.8 1.46251 1.3493 949.2 703.5 56,38
68.9 1.46275 1.3499 951.1 704.6 56,50
69.0 1.46301 1.3506 953.0 705.6 56,61
69.1 1.46323 1.3513 954.8 706.6 56,72
69.2 1.46347 1.3519 956.7 707.7 56,83
69.3 1.46371 1.3526 958.6 708.7 56,94
69.4 1.46396 1.3533 960.6 709.8 57,06
69.5 1.46420 1.3539 962.4 710.8 57,17
69.6 1.46444 1.3546 964.3 711.9 57,28
69.7 1.46468 1.3553 966.2 712.9 57,39
69.8 1.46493 1.3560 968.2 714.0 57,51
69.9 1.46517 1.3566 970.0 715.0 57,621990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 35
▼B
Sakkaroosi
% (m/m)Taitekerroin
20 ºC:ssaTiheys 20 ºC:ssaSokeria
g/lSokeria
g/kgAlkoholipitoisu-
us til-%
20 ºC:ssa
70.0 1.46544 1.3573 971.8 716.0 57,72
70.1 1.46565 1.3579 973.8 717.1 57,84
70.2 1.46590 1.3586 975.6 718.1 57,95
70.3 1.46614 1.3593 977.6 719.2 58,07
70.4 1.46639 1.3599 979.4 720.2 58,18
70.5 1.46663 1.3606 981.3 721.2 58,29
70.6 1.46688 1.3613 983.3 722.3 58,41
70.7 1.46712 1.3619 985.2 723.4 58,52
70.8 1.46737 1.3626 987.1 724.4 58,63
70.9 1.46761 1.3633 988.9 725.4 58,74
71.0 1.46789 1.3639 990.9 726.5 58,86
71.1 1.46810 1.3646 992.8 727.5 58,97
71.2 1.46835 1.3653 994.8 728.6 59,09
71.3 1.46859 1.3659 996.6 729.6 59,20
71.4 1.46884 1.3665 998.5 730.7 59,31
71.5 1.46908 1.3672 1 000.4 731.7 59,42
71.6 1.46933 1.3678 1 002.2 732.7 59,53
71.7 1.46957 1.3685 1 004.2 733.8 59,65
71.8 1.46982 1.3692 1 006.1 734.8 59,76
71.9 1.47007 1.3698 1 008.0 735.9 59,88
72.0 1.47036 1.3705 1 009.9 736.9 59,99
72.1 1.47056 1.3712 1 012.0 738.0 60,11
72.2 1.47081 1.3718 1 013.8 739.0 60,22
72.3 1.47106 1.3725 1 015.7 740.0 60,33
72.4 1.47131 1.3732 1 017.7 741.1 60,45
72.5 1.47155 1.3738 1 019.5 742.1 60,56
72.6 1.47180 1.3745 1 021.5 743.2 60,68
72.7 1.47205 1.3752 1 023.4 744.2 60,79
72.8 1.47230 1.3758 1 025.4 745.3 60,91
72.9 1.47254 1.3765 1 027.3 746.3 61,02
73.0 1.47284 1.3772 1 029.3 747.4 61,14
73.1 1.47304 1.3778 1 031.2 748.4 61,25
73.2 1.47329 1.3785 1 033.2 749.5 61,37
73.3 1.47354 1.3792 1 035.1 750.5 61,48
73.4 1.47379 1.3798 1 037.1 751.6 61,60
73.5 1.47404 1.3805 1 039.0 752.6 61,72
73.6 1.47429 1.3812 1 040.9 753.6 61,83
73.7 1.47454 1.3818 1 042.8 754.7 61,94
73.8 1.47479 1.3825 1 044.8 755.7 62,06
73.9 1.47504 1.3832 1 046.8 756.8 62,18
74.0 1.47534 1.3838 1 048.6 757.8 62,28
74.1 1.47554 1.3845 1 050.7 758.9 62,41
74.2 1.47579 1.3852 1 052.6 759.9 62,52
74.3 1.47604 1.3858 1 054.6 761.0 62,64
74.4 1.47629 1.3865 1 056.5 762.0 62,76
74.5 1.47654 1.3871 1 058.5 763.1 62,87
74.6 1.47679 1.3878 1 060.4 764.1 62,99
74.7 1.47704 1.3885 1 062.3 765.1 63,10
74.8 1.47730 1.3892 1 064.4 766.2 63,23
74.9 1.47755 1.3898 1 066.3 767.2 63,33
75.0 1.47785 1.3905 1 068.3 768.3 63,461990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 36
▼B
3ALKOHOLIPITOISUUS TILAVUUSPROSENTTEINA
1 MÄÄRITELMÄ
Alkoholipitoisuus tilavuusprosentteina on samansuuruinen kuin
etanolin määrä litroina 100 litrassa viiniä, kun molemmat mitataan
20 ºC:ssa. Sen tunnus on ”til-%”.
Huomautus:
Etanolin homologit sekä estereihin sitoutunut etanoli ja etanolin
homologit kuuluvat tisleen alkoholipitoisuuteen.
2 PERIAATE
2.1 Kalsiumhydroksidiliuoksella emäksiseksi tehdyn viinin tislaus. Alko-
holipitoisuuden määrittäminen tisleestä.
2.2 Vertailumenetelmä: tisleen tiheyden määrittäminen pyknometrillä.
2.3 Tavanomaiset menetelmät
2.3.1 Tisleen alkoholipitoisuuden määrittäminen areometrisesti
2.3.2 Tisleen alkoholipitoisuuden määrittäminen densimetrisesti hydro-
staattisella vaa'alla
2.3.3 Tisleen alkoholipitoisuuden määrittäminen refraktometrisesti
Huomautus:
Alkoholipitoisuus saadaan tisleen tiheydestä käyttäen tämän luvun
liitteessä II olevia taulukoita I, II ja III. Ne on laskettu Lakisääteisen
mittaustoiminnan kansainvälisen järjestön vuonna 1972 julkaisemassa
suosituksessa N:o 22 esitetyn kansainvälisen alkoholipitoisuustau-
lukon perusteella ja OIV (Yleiskokous 1974) on hyväksynyt
taulukon.
Taulukossa I esitetään yleinen vesi-etanoliseosten tilavuusprosent-
teina annetun alkoholipitoisuuden ja tiheyden yhteys eri
lämpötiloissa.
3 TISLEEN VALMISTAMINEN3.1 Välineistö
3.1.1 Tislauslaitteisto, johon kuuluu:
— pyöreäpohjainen, hioksellinen tislauskolvi, jonka vetoisuus on 1
litra,
— noin 20 cm korkea tislauskolonni tai muu laite roiskumisen
estämiseksi,
— lämmönlähde: pyrolyysi on estettävä sopivalla laitteella,— jäähdytin, joka päättyy ulosmenoputkeen, joka ohjaa tisleen
muutaman millilitran vettä sisältävään mittapulloon.
3.1.2 Vesihöyrytislauslaitteisto, johon kuuluu:
1 vesihöyrykehitin,
2 tislauskolvi, jossa on putki vesihöyryn johtamiseksi,3 tislauskolonni,4 jäähdytin.
Voidaan käyttää mitä tahansa tislaus- tai vesihöyrytislauslaitteistoa
sillä edellytyksellä, että se läpäisee seuraavan kokeen: tislataan 5
kertaa peräkkäin alkoholipitoisuudeltaan 10 til-% oleva vesi-etanoli-
seos.Viidennen tislauskerran jälkeen tisleen alkoholipitoisuuden on
oltava vähintään 9,9 til-%, toisin sanoen tislauksen aikana alkoholipi-
toisuus ei saa laskea yli 0,02 til-%:lla.
3.2 Reagenssit
3.2.1 2 M kalsiumhydroksidisuspensio
Kaadetaan varovasti1 l kuumaa vettä (60- 70 ºC) 120 g:n sammutta-
mattoman kalkin (CaO) päälle.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 37
▼B
3.3 Näytteen valmistaminen
Nuorista viineistä ja kuohuviineistä poistetaan aluksi suurin osa
niiden sisältämästä hiilidioksidista ravistelemalla 250- 300 ml viiniä
500 ml mittapullossa.
3.4 Suoritus
Mittapulloon mitataan 200 ml viiniä. Viinin lämpötila kirjataan.
Näyte kaadetaan tislaus- tai vesihöyrytislauslaitteiston kolviin. Mitta-
pullo huuhdellaan neljä kertaa 5 ml vettä ja tämä vesili sätään
tislauskolviin. Lisätään 10 ml kalsiumhydroksidia (3.2.1) ja muutama
palanen inerttiä huokoista ainetta (hohkakiveä).
Tisle kerätään 200 ml:n mittapulloon, jota käytettiin viinin mittaami-
seen.
Tavallisessa tislauksessa tislettä otetaan noin 3/4 alkuperäisestä tila-
vuudesta ja vesihöyrytislauksessa 198-199 ml. Täytetään 200 ml:ksi
tislatulla vedellä lämpötilassa, joka ei poikkea alkuperäisestä lämpöti-
lasta yli± 2 ºC.
Sekoitetaan varovasti pyöreällä liikkeellä.Huomautus:
Jos viini sisältää erityisen paljon ammoniumioneja, tisle on mahdolli-
sesti tislattava uudelleen edellä kuvatuissa koeolosuhteissa siten, että
kalsiumhydroksidisuspensio korvataan 1 ml:lla 10 %:n (v/v) rikki-
happoa.
4 VERTAILUMENETELMÄ
Tisleen alkoholipitoisuuden määrittäminen pyknometrillä.
4.1 Välineistö
4.1.1 Käytetään ”Tiheys”-luvussa kuvattua kalibroitua pyknometriä.
4.2 Suoritus
Määritetään tisleen (3.4) näennäinen tiheys t ºC:ssa 1 luvussa
”Tiheys” olevan 4.3.1 ja 4.3.2 kohdan mukaisesti. Tämä tiheys on ρ
t.
4.3 Tulosten ilmoittaminen
4.3.1 Laskentamenetelmä
Alkoholipitoisuus 20 ºC:ssa löytyy taulukosta I. Taulukon vaakasuor-
alta riviltä, joka vastaa lämpötilaa T (ilmoitettu kokonaislukuna)
välittömästi t ºC:n alapuolella, etsitään pienin mahdollinen ρt:n
ylittävä tiheys. Tämän tiheyden alapuolella taulukossa annettua
erotusta käytetään tiheyden ρlaskemisessa lämpötilassa T.
Lämpötila T riviltä etsitään pienin mahdollinen ρ:n ylittävä tiheys ρ'
ja lasketaan näiden kahden tiheyden ρjaρ' erotus. Tämä erotus
jaetaan tiheyden ρ' oikealla puolella ilmoitetulla erotuksella.
Osamäärästä saadaan alkoholipitoisuuden desimaaliosa ja tämän
pitoisuuden kokonaislukuosa annetaan sen sarakkeen yläosassa, jossa
tiheys ρ' on.
Alkoholipitoisuuden laskemisesta annetaan esimerkki tämän luvun
liitteessä I.
Huomautus:
Tämä lämpötilakorjaus on sisällytetty tietokoneohjelmaan ja se
voidaan mahdollisesti tehdä automaattisesti.
4.3.2 Toistettavuus (r)
r = 0,10 til-%
4.3.3 Uusittavuus (R)
R = 0,19 til-%1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 38
▼B
5 TAVANOMAISET MENETELMÄT
5.1 Areometria
5.1.1 Välineistö
5.1.1.1 Al koholometri
Alkoholometrin on täytettävä OIML:n kansainvälisessä suosituksessa
N:o 44 ”Alkoholometrit ja areometrit” määriteltyihin luokkiin I tai II
kuuluvien laitteiden erityisvaatimukset.
5.1.1.2 Lämpömittari, jonka asteikko on asteen ja 0,1 ºC:n välein alueella 0-
40 ºC ja jonka mittaustarkkuus on tarkastusten mukaan 1/20 astetta.
5.1.1.3 Sisähalkaisijaltaan 36 mm ja korkeudeltaan 320 mm oleva mittalasi,
joka on tuettu pystyasentoon statiivilla.
5.1.2 Suoritus
Kaadetaan tisle (3.4) mittalasiin. Varmistetaan, että mittalasi on
pystysuorassa asennossa. Ravistellaan mittalasia lämpömittarin, alko-
holometrin ja tisleen lämpötilan tasaamiseksi, ja luetaan lämpötila
minuutti tämän jälkeen. Poistetaan lämpömittari ja annetaan seistä 1
minuutin ajan. Tämän jälkeen luetaan näennäinen alkoholipitoisuus.
Lukema otetaan vähintään kolme kertaa käyttäen apuna suurennus-
lasia. Lämpötilan vaikutus t ºC:ssa mitattuun näennäiseen
alkoholipitoisuuteen korjataan taulukon II avulla.
Nesteen lämpötila saa poiketa vain hieman ympäristön lämpötilasta
(korkeintaan 5 ºC).
5.2 Densimetria hydrostaattista vaakaa käyttäen
5.2.1 Välineistö
Käytetään hydrostaattista vaakaa ”Tiheys”-luvussa kuvatulla tavalla.
5.2.2 Suoritus
Määritetään tisleen näennäinen tiheys t ºC:ssa I luvussa ”Tiheys”
olevan 5.2.2 kohdan mukaisesti.
5.2.3 Tulosten ilmoittaminen
Alkoholipitoisuus 20 ºC:ssa saadaan 4.3.1 kohdassa kuvatulla tavalla
taulukkoa I käyttäen, jos uppokappale on pyrex-lasinen, tai taulukkoa
III käyttäen, jos uppokappale on tavallisesta lasista.
5.3 Refraktometria
5.3.1 Välineistö
5.3.1.1 Refraktometri, jolla voidaan mitata alueella 1,330-1,346 olevat taite-
kertoimet.
Laitetyypin mukaan mittaus voidaan tehdä:
— joko 20 ºC:ssa sopivalla välineellä,
— tai ympäristön lämpötilassa t ºC, välineellä, jossa on lämpömit-
tari, jolla lämpötila voidaan määrittää vähintään 0,05 ºC:n
tarkkuudella. Lämpötilan korjaustaulukko toimitetaan laitteen
mukana.
5.3.2 Suoritus
Taitekertoimen mittaus tehdään viinitisleestä (3.4) seuraten käytettyä
laitetyyppiä koskevia ohjeita.
5.3.3 Tulosten ilmoittaminen
Taulukosta IV saadaan taitekerrointa vastaava alkoholipitoisuus
20 ºC:ssa.
Huomautus:Taulukossa IV annetaan puhtaiden vesi-etanoliseosten ja viinitisleen
taitekerrointen välinen vastaavuus. Taulukossa otetaan huomioon
viinitisleen epäpuhtaudet (pääasiassa korkeammat alkoholit). Meta-
noli vähentää taitekerrointa ja tämän vuoksi myös alkoholipitoisuutta.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 39
▼B
6 ESIMERKKI VIININ ALKOHOLIPITOISUUDEN LASKEMI-
SESTA
6.1 Pyknometria tasavarsivaakaa käytettäessä
6.1.1 Pyknometrin parametrit on määritetty ja laskettu I luvussa ”Tiheys ja
suhteellinen tiheys” (6.1.1 kohta) kuvatulla tavalla.
6.1.2 Tisleellä täytetyn pyknometrin punnitseminen
Numeroesimerkki
Taara = pyknometri+ ti sle t ºC:ssa + p”/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146t ºC = 18,90 ºC
t ºC korjattu = 18,70 ºC
p” = 2,8074 g
p + m − p” = tisleen massa t ºC:ssa 105,0698 − 2,8074 = 102,2624 g
Näennäistiheys t ºC:ssa:
ρ
t¼pþm/C0p”
pyknometrin tilavuus 20 ºC : ssa/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C146ρ18 ;70ºC¼102 ;2624
104 ;0229¼0;983076
6.1.3 Alkoholipitoisuuden laskeminen
Käytetään vesi-etanoliseosten näennäisille
tiheyksille eri lämpötiloissa laadittua
taulukkoa edellä kuvatulla tavalla/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Näennäisten tiheyksien taulukon 18 ºC
-rivillä havaitun tiheyden 0,983076 pienin
ylittâvâ tiheys on sarakkeessa 11 til-%
oleva 0,98398
Tiheys 18 ºC on:
(98307,6 + 0,7 × 22) 10
−5= 0,98323
0,98398 − 0,98323 = 0,00075
alkoholipitoisuuden desimaaliosa on 75/
114 = 0,65
Alkoholipitoisuus on 11,65 til-%.
6.2 Pyknometria yksikuppista vaakaa käytettäessä
6.2.1 Pyknometrin parametrit on määritetty ja laskettu I luvun ”Tiheys ja
suhteellinen tiheys” 6.2.1 kohdassa.
6.2.2 Tisleellä täytetyn pyknometrin punnitseminen
Taaran paino määrityshetkellä
(grammoina): T1= 171,9178
Tisleellä täytetyn pyknometrin paino
20,50 ºC:ssa
(grammoina) P2= 167,8438
Ilman nosteen vaihtelu: dT = 171,9178 − 171,9160
=+ 0,0018
Tisleen massa 20,50 ºC:ssa: Lt= 167,8438 − (67,6695 + 0,0018)
= 100,1725
Tisleen näennäinen tiheys: ρ20;50 ºC¼100 ;1725
101 ;8194¼0;9838251990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 40
▼B
6.2.3 Alkoholipitoisuuden laskeminen
Käytetään vesi-etanoliseosten näennäisille
tiheyksille eri lämpötiloissa laadittua
taulukkoa edellä kuvatulla tavalla/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Näennäisten tiheyksien taulukon 20 ºC
-rivillä havaitun tiheyden 0,983825 pienin
ylittâvâ tiheys on sarakkeessa 10 til-%
oleva 0,98471
Tiheys 20 ºC on:
(98382,5 + 0,50 × 24) 10
−5= 0,983945
0,98471 − 0,983945 = 0,000765
alkoholipitoisuuden desimaaliosa on 76,5/
119 = 0,64
Alkoholipitoisuus on 10,64 til-%.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 41
▼B
YHTÄLÖ ALKOHOLIPITOISUUSTAULUKOIDEN LASKEMISEKSI ETYY-
LIALKOHOLI-VESISEOKSILLE
Etyylialkoholi-vesiseoksen tiheys ” ρ” kilogrammoina kuutiometrissä (kg/m3)
lämpötilassa t ºC saadaan lasketuksi seuraavasta yhtälöstä, joka on
— massaprosenttina annetun alkoholipitoisuuden ρsuhteellisen osuuden
funktio, jolloin ρon desimaaliluku (1),
— Celsiusasteina (IPTS -68) ilmoitetun lämpötilan t funktio,— ja jonka numeeriset kertoimet ilmoitetaan jäljempänä.
Yhtälö pätee lämpötila-alueella − 20 − + 40 ºC.
Yhtälön numeeriset kertoimet
k Ak
kg/m3Bk
1 9,982 012 300 × 102− 2,061 851 3 × 10−1kg/(m3× ºC)
2 − 1,929 769 495 × 102− 5,268 254 2 × 10−3kg/(m3×º C2)
3 3,891 238 958 × 1023,613 001 3 × 10−5kg/(m3×º C3)
4 − 1,668 103 923 × 103− 3,895 770 2 × 10−7kg/(m3×º C4)
5 1,352 215 441 × 1047,169 354 0 × 10−9kg/(m3×º C5)
6 − 8,829 278 388 × 104− 9,973 923 1 × 10−11kg/(m3×º C6)
7 3,062 874 042 × 105
8 − 6,138 381 234 × 105
9 7,470 172 998 × 105
10 − 5,478 461 354 × 105
11 2,234 460 334 × 105
12 − 3,903 285 426 × 104
k C1,k
kg/(m3× ºC)C2,k
kg/(m3×º C2)
1 1,693 443 461 530 087 × 10−1− 1,193 013 005 057 010 × 10−2
2 − 1,046 914 743 455 169 × 1012,517 399 633 803 461 × 10−1
3 7,196 353 469 546 523 × 101− 2,170 575 700 536 993
4 − 7,047 478 054 272 792 × 1021,353 034 988 843 029 × 101
5 3,924 090 430 035 045 × 103− 5,029 988 758 547 014 × 101
6 − 1,210 164 659 068 747 × 1041,096 355 666 577 570 × 102
7 2,248 646 550 400 788 × 104− 1,422 753 946 421 155 × 102
8 − 2,605 562 982 188 164 × 1041,080 435 942 856 230 × 102
9 1,852 373 922 069 467 × 104− 4,414 153 236 817 392 × 101
10 − 7,420 201 433 430 137 × 1037,442 971 530 188 783
11 1,285 617 841 998 974 × 103
k C3,k
kg/(m3×º C3)C4,k
kg/(m3×º C4)C5,k
kg/(m3×º C5)
1 − 6,802 995 733 503 803 × 10−44,075 376 675 622 027 × 10−6− 2,788 074 354 782 409 × 10−8
2 1,876 837 790 289 664 × 10−2− 8,763 058 573 471 110 × 10−61,345 612 883 493 354 × 10−8
3 − 2,002 561 813 734 156 × 10−16,515 031 360 099 368 × 10−6
4 1,022 992 966 719 220 − 1,515 784 836 987 210 × 10−6
5 − 2,895 696 483 903 638
6 4,810 060 584 300 675
7 − 4,672 147 440 794 683
8 2,458 043 105 903 461
9 − 5,411 227 621 436 812 × 10−11990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 42
(1) Esimerkki: alkoholipitoisuudelle 12 massa-%, ρ= 0,12.
▼B
TAULUKKO I
KANSAINVÄLINEN ALKOHOLIPITOISUUS 20 ºC:SSA
Taulukko vesi-alkoholiseoksen näennäisille tiheyksille — pyrex-lasinen pyknometri
Tiheys t ºC:ssa, ilman noste korjattu
tºAlkoholipitoisuus til-%
0123456789 1 0 1 1
0º 999,64 1,50 998,14 1,44 996,70 1,40 995,30 1,35 993,95 1,30 992,65 1,24 991,41 1,19 990,22 1,14 989,08 1,10 987,98 1,05 986,93 1,00 985,93 0,95
−0,07 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,01
1º 999,71 1,51 998,20 1,44 996,76 1,40 995,36 1,35 994,01 1,30 992,71 1,24 991,47 1,20 990,27 1,15 989,12 1,11 988,01 1,06 986,95 1,01 985,94 0,97
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01 0,00
2º 999,76 1,51 998,25 1,45 996,80 1,40 995,40 1,35 994,05 1,30 992,75 1,25 991,50 1,20 990,30 1,16 989,14 1,11 988,03 1,07 986,96 1,02 985,94 0,98
−0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,01 0,02
3º 999,79 1,51 998,28 1,45 996,83 1,41 995,42 1,35 994,07 1,30 992,77 1,25 991,52 1,21 990,31 1,16 989,15 1,12 988,03 1,08 986,95 1,03 985,92 1,00
−0,02 −0,02 −0,01 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04
4º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,36 994,08 1,30 992,78 1,26 991,52 1,21 990,31 1,17 989,14 1,13 988,01 1,09 986,92 1,04 985,88 1,00
0,00 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05
5º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,37 994,07 1,31 992,76 1,26 991,50 1,21 990,29 1,17 989,12 1,14 987,98 1,10 986,88 1,05 985,83 1,01
0,01 0,01 0,01 0,02 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,05 0,05 0,06
6º 999,80 1,51 998,29 1,46 996,83 1,41 995,42 1,36 994,06 1,32 992,74 1,27 991,47 1,22 990,25 1,18 989,07 1,14 987,93 1,10 986,83 1,06 985,77 1,03
0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09
7º 999,77 1,51 998,26 1,46 996,80 1,41 995,39 1,37 994,02 1,32 992,70 1,27 991,43 1,23 990,20 1,19 989,01 1,15 987,86 1,11 986,75 1,07 985,68 1,03
0,05 0,04 0,04 0,05 0,05 0,05 0,05 0,06 0,06 0,07 0,08 0,09
8º 999,72 1,50 998,22 1,46 996,76 1,42 995,34 1,37 993,97 1,32 992,65 1,27 991,38 1,24 990,14 1,19 988,95 1,16 987,79 1,12 986,67 1,08 985,59 1,05
0,05 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
9º 999,67 1,51 998,16 1,46 996,70 1,42 995,28 1,37 993,91 1,32 992,59 1,28 991,31 1,24 990,07 1,20 988,87 1,17 987,70 1,13 986,57 1,09 985,48 1,06
0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,09 0,09 0,10 0,11 0,12
10º 999,60 1,51 998,09 1,46 996,63 1,42 995,21 1,37 993,84 1,33 992,51 1,28 991,23 1,25 989,98 1,20 988,78 1,17 987,60 1,14 986,46 1,10 985,36 1,06
0,09 0,09 0,09 0,08 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,12 0,13
11º 999,51 1,51 998,00 1,46 996,54 1,41 995,13 1,38 993,75 1,33 992,42 1,29 991,13 1,25 989,88 1,21 988,67 1,18 987,49 1,15 986,34 1,11 985,23 1,07
0,10 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13 0,13 0,14
12º 999,41 1,50 997,91 1,46 996,45 1,42 995,03 1,38 993,65 1,34 992,31 1,29 991,02 1,25 989,77 1,22 988,55 1,19 987,36 1,15 986,21 1,12 985,09 1,09
0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,14 0,15 0,16
13º 999,30 1,50 997,80 1,46 996,34 1,42 994,92 1,38 993,54 1,34 992,20 1,30 990,90 1,25 989,65 1,23 988,42 1,20 987,22 1,16 986,06 1,13 984,93 1,09
0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16
14º 999,18 1,50 997,68 1,46 996,22 1,43 994,79 1,38 993,41 1,34 992,07 1,30 990,77 1,26 989,51 1,23 988,28 1,21 987,07 1,17 985,90 1,13 984,77 1,11
0,13 0,14 0,14 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16 0,17 0,18
15º 999,05 1,51 997,54 1,46 996,08 1,42 994,66 1,38 993,28 1,35 991,93 1,30 990,63 1,27 989,36 1,24 988,12 1,21 986,91 1,18 985,73 1,14 984,59 1,12
0,15 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,19
16º 998,90 1,50 997,40 1,46 995,94 1,43 994,51 1,38 993,13 1,35 991,78 1,31 990,47 1,27 989,20 1,25 987,95 1,21 986,74 1,19 985,55 1,15 984,40 1,13
0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19 0,20
17º 998,74 1,50 997,24 1,46 995,78 1,43 994,35 1,38 992,97 1,36 991,61 1,31 990,30 1,28 989,02 1,25 987,77 1,22 986,55 1,19 985,36 1,16 984,20 1,14
0,17 0,17 0,17 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22
18º 998,57 1,50 997,07 1,46 995,61 1,42 994,19 1,39 992,80 1,36 991,44 1,32 990,12 1,28 988,84 1,26 987,58 1,23 986,35 1,20 985,15 1,17 983,98 1,14
0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,22
19º 998,39 1,50 996,89 1,46 995,43 1,43 994,00 1,39 992,61 1,36 991,25 1,32 989,93 1,29 988,64 1,26 987,38 1,23 986,15 1,21 984,94 1,10 983,76 1,16
0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24
20º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
tºAlkoholipitoisuus til-%
0123456789 1 0 1 1
0º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
0,20 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24
21º 998,00 1,50 996,50 1,46 995,04 1,43 993,61 1,40 992,21 1,36 990,85 1,33 989,52 1,30 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,23 984,47 1,19 983,28 1,18
0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,24 0,26
22º 997,79 1,50 996,29 1,46 994,83 1,43 993,40 1,40 992,00 1,37 990,63 1,33 989,30 1,31 987,99 1,28 986,71 1,25 985,46 1,23 984,23 1,21 983,02 1,18
0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,25
23º 997,57 1,50 996,07 1,47 994,60 1,43 993,17 1,40 991,77 1,37 990,40 1,34 989,06 1,31 987,75 1,28 986,47 1,26 985,21 1,24 983,97 1,20 982,77 1,20
0,24 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,26 0,27 0,29
24º 997,33 1,49 995,84 1,47 994,37 1,43 992,94 1,41 991,53 1,37 990,16 1,34 988,82 1,32 987,50 1,29 986,21 1,26 984,95 1,25 983,70 1,22 982,48 1,20
0,24 0,25 0,24 0,25 0,24 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28
25º 997,09 1,50 995,59 1,46 994,13 1,44 992,69 1,40 991,29 1,38 989,91 1,35 988,56 1,32 987,24 1,29 985,95 1,27 984,68 1,26 983,42 1,22 982,20 1,21
0,25 0,25 0,26 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,28 0,28 0,28 0,30
26º 996,84 1,50 995,34 1,47 993,87 1,43 992,44 1,41 991,03 1,38 989,65 1,35 988,30 1,32 986,98 1,31 985,67 1,27 984,40 1,26 983,14 1,24 981,90 1,22
0,26 0,26 0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,30
27º 996,58 1,50 995,08 1,47 993,61 1,44 992,17 1,41 990,76 1,38 989,38 1,35 988,03 1,33 986,70 1,31 985,39 1,28 984,11 1,27 982,84 1,24 981,60 1,23
0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32
28º 996,31 1,50 994,81 1,47 993,34 1,44 991,90 1,42 990,48 1,38 989,10 1,36 987,74 1,33 986,41 1,31 985,10 1,29 983,81 1,28 982,53 1,25 981,28 1,23
0,28 0,28 0,28 0,29 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32
29º 996,03 1,50 994,53 1,47 993,06 1,45 991,61 1,41 990,20 1,39 988,81 1,36 987,45 1,34 986,11 1,32 984,79 1,29 983,50 1,28 982,22 1,26 980,96 1,24
0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,32 0,33
30º 995,75 1,51 994,24 1,47 992,77 1,45 991,32 1,42 989,90 1,39 988,51 1,37 987,14 1,34 985,80 1,32 984,48 1,30 983,18 1,28 981,90 1,27 980,63 1,25
0,30 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34 0,34
31º 995,45 1,51 993,94 1,47 992,47 1,45 991,02 1,43 989,59 1,39 988,20 1,37 986,83 1,34 985,49 1,33 984,16 1,31 982,85 1,29 981,56 1,27 980,29 1,26
0,31 0,31 0,31 0,32 0,31 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,36
32º 995,14 1,51 993,63 1,47 992,16 1,46 990,70 1,42 989,28 1,40 987,88 1,37 986,51 1,35 985,16 1,33 983,83 1,32 982,51 1,30 981,21 1,28 979,93 1,26
0,31 0,31 0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35
33º 994,83 1,51 993,32 1,48 991,84 1,46 990,38 1,42 988,96 1,41 987,55 1,37 986,18 1,36 984,82 1,34 983,48 1,32 982,16 1,30 980,86 1,28 979,58 1,28
0,32 0,33 0,33 0,33 0,35 0,34 0,35 0,35 0,34 0,35 0,36 0,37
34º 994,51 1,52 992,99 1,48 991,51 1,46 990,05 1,44 988,61 1,40 987,21 1,38 985,83 1,36 984,47 1,33 983,14 1,33 981,81 1,31 980,50 1,29 979,21 1,28
0,33 0,33 0,34 0,35 0,34 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37
35º 994,18 1,52 992,66 1,49 991,17 1,47 989,70 1,43 988,27 1,41 986,86 1,38 985,48 1,36 984,12 1,34 982,78 1,33 981,45 1,31 980,14 1,30 978,84 1,29
0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38
36º 993,84 1,53 992,31 1,49 990,82 1,47 989,35 1,43 987,92 1,41 986,51 1,38 985,13 1,37 983,76 1,34 982,42 1,34 981,08 1,31 979,77 1,31 978,46 1,29
0,35 0,35 0,36 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38 0,37 0,39 0,39
37º 993,49 1,53 991,96 1,50 990,46 1,46 989,00 1,44 987,56 1,41 986,15 1,39 984,76 1,37 983,39 1,35 982,04 1,33 980,71 1,33 979,38 1,31 978,07 1,30
0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39
38º 993,13 1,53 991,60 1,50 990,10 1,47 988,63 1,44 987,19 1,41 985,78 1,39 984,39 1,37 983,02 1,36 981,66 1,34 980,32 1,32 979,00 1,32 977,68 1,31
0,36 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,38 0,39 0,38 0,39 0,40 0,40
39º 992,77 1,54 991,23 1,50 989,73 1,47 988,26 1,45 986,81 1,41 985,40 1,39 984,01 1,38 982,63 1,35 981,28 1,35 979,93 1,33 978,60 1,32 977,28 1,32
0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39 0,39 0,39 0,40 0,39 0,40 0,41
40º 992,40 1,54 990,86 1,51 989,35 1,48 987,87 1,44 986,43 1,42 985,01 1,39 983,62 1,38 982,24 1,36 980,88 1,34 979,54 1,34 978,20 1,33 976,87 1,321990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 43
▼B
tºAlkoholipitoisuus til-%
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
0 986,93 1,00 985,93 0,95 984,98 0,92 984,06 0,88 983,18 0,84 982,34 0,80 981,54 0,78 980,76 0,75 980,01 0,73 979,28 0,72 978,56 0,70 977,86 0,70
−0,02 −0,01 0,01 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17
1 986,95 1,01 985,94 0,97 984,97 0,92 984,05 0,90 983,15 0,85 982,30 0,83 981,47 0,79 980,68 0,77 979,91 0,75 979,16 0,74 978,42 0,73 977,69 0,72
−0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
2 986,96 1,02 985,94 0,98 984,96 0,94 984,02 0,91 983,11 0,88 982,23 0,84 981,39 0,81 980,58 0,79 979,79 0,77 979,02 0,76 978,26 0,75 977,51 0,74
0,01 0,02 0,04 0,05 0,06 0,07 0,09 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19
3 986,95 1,03 985,92 1,00 984,92 0,95 983,97 0,92 983,05 0,89 982,16 0,86 981,30 0,83 980,47 0,81 979,66 0,79 978,87 0,78 978,09 0,77 977,32 0,77
0,03 0,04 0,04 0,06 0,07 0,09 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20
4 986,92 1,04 985,88 1,00 984,88 0,97 983,91 0,93 982,98 0,91 982,07 0,87 981,20 0,85 980,35 0,83 979,52 0,81 978,71 0,80 977,91 0,79 977,12 0,79
0,04 0,05 0,06 0,07 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,22
5 986,88 1,05 985,83 1,01 984,82 0,98 983,84 0,95 982,89 0,92 981,97 0,89 981,08 0,87 980,21 0,84 979,37 0,83 978,54 0,82 977,72 0,82 976,90 0,80
0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,13 0,14 0,17 0,19 0,21 0,22
6 986,83 1,06 985,77 1,03 984,74 0,99 983,75 0,96 982,79 0,94 981,85 0,90 980,95 0,88 980,07 0,87 979,20 0,85 978,35 0,84 977,51 0,83 976,68 0,83
0,08 0,09 0,09 0,10 0,12 0,13 0,15 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23
7 986,75 1,07 985,68 1,03 984,65 1,00 983,65 0,98 982,67 0,95 981,72 0,92 980,80 0,89 979,91 0,89 979,02 0,86 978,16 0,86 977,30 0,85 976,45 0,85
0,08 0,09 0,11 0,13 0,13 0,14 0,15 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25
8 986,67 1,08 985,59 1,05 984,54 1,02 983,52 0,98 982,54 0,96 981,58 0,93 980,65 0,92 979,73 0,90 978,83 0,88 977,95 0,88 977,07 0,87 976,20 0,87
0,10 0,11 0,12 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26
9 986,57 1,09 985,48 1,06 984,42 1,02 983,40 1,00 982,40 0,98 981,42 0,95 980,47 0,93 979,54 0,92 978,62 0,89 977,73 0,90 976,83 0,89 975,94 0,89
0,11 0,12 0,12 0,14 0,16 0,17 0,18 0,20 0,20 0,23 0,24 0,26
10 986,46 1,10 985,36 1,06 984,30 1,04 983,26 1,02 982,24 0,99 981,25 0,96 980,29 0,95 979,34 0,92 978,42 0,92 977,50 0,91 976,59 0,91 975,68 0,91
0,12 0,13 0,14 0,16 0,16 0,17 0,19 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29
11 986,34 1,11 985,23 1,07 984,16 1,06 983,10 1,02 982,08 1,00 981,08 0,98 980,10 0,96 979,14 0,95 978,19 0,94 977,25 0,93 976,32 0,93 975,39 0,92
0,13 0,14 0,16 0,16 0,18 0,19 0,21 0,22 0,24 0,25 0,27 0,28
12 986,21 1,12 985,09 1,09 984,00 1,06 982,94 1,04 981,90 1,01 980,89 1,00 979,89 0,97 978,92 0,97 977,95 0,95 977,00 0,95 976,05 0,94 975,11 0,95
0,15 0,16 0,16 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28 0,30
13 986,06 1,13 984,93 1,09 983,84 1,08 982,76 1,05 981,71 1,02 980,69 1,01 979,68 0,99 978,69 0,98 977,71 0,97 976,74 0,97 975,77 0,96 974,81 0,96
0,16 0,16 0,18 0,18 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30
14 985,90 1,13 984,77 1,11 983,66 1,08 982,58 1,07 981,51 1,04 980,47 1,02 979,45 1,00 978,45 1,00 977,45 0,98 976,47 0,98 975,49 0,98 975,51 0,98
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,24 0,25 0,26 0,28 0,30 0,32
15 985,73 1,14 984,59 1,12 983,47 1,09 982,38 1,08 981,30 1,05 960,25 1,04 979,21 1,01 978,20 1,01 977,19 1,00 976,19 1,00 975,19 1,00 974,19 1,00
0,18 0,19 0,20 0,22 0,22 0,24 0,24 0,27 0,28 0,30 0,31 0,32
16 985,55 1,15 984,40 1,13 983,27 1,11 982,16 1,08 981,08 1,07 980,01 1,04 978,97 1,04 977,93 1,02 976,91 1,02 975,89 1,01 974,88 1,01 973,87 1,02
0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,33
17 985,36 1,16 984,20 1,14 983,06 1,12 981,94 1,09 980,85 1,08 979,77 1,06 978,71 1,05 977,66 1,04 976,62 1,03 975,59 1,03 974,56 1,02 973,54 1,04
0,21 0,22 0,22 0,23 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,35
18 985,15 1,17 983,98 1,14 982,84 1,13 981,71 1,11 980,60 1,09 979,51 1,07 978,44 1,06 977,38 1,05 976,33 1,05 975,28 1,04 974,24 1,05 973,19 1,05
0,21 0,22 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35
19 984,94 1,18 983,76 1,16 982,60 1,13 981,47 1,12 980,35 1,10 979,25 1,09 978,16 1,07 977,09 1,07 976,02 1,06 974,96 1,06 973,90 1,06 972,84 1,06
0,23 0,24 0,24 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,36
20 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºAlkoholipitoisuus til-%
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,24 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37
21º 984,47 1,19 983,28 1,18 982,10 1,15 980,95 1,14 978,81 1,12 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,10 975,38 1,09 974,29 1,09 973,20 1,09 972,11 1,09
0,24 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,35 0,36 0,37
22º 984,23 1,21 983,02 1,18 981,84 1,17 980,67 1,15 979,52 1,13 978,39 1,12 977,27 1,12 976,15 1,10 975,05 1,11 973,94 1,10 972,84 1,10 971,74 1,12
0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,35 0,37 0,39
23º 983,97 1,20 982,77 1,20 981,57 1,18 980,39 1,16 979,23 1,15 978,08 1,13 976,95 1,13 975,82 1,12 974,70 1,11 973,59 1,12 972,47 1,12 972,47 1,12
0,27 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40
24º 983,70 1,22 982,48 1,20 981,28 1,18 980,10 1,17 978,93 1,16 977,77 1,15 976,62 1,13 975,49 1,14 974,35 1,13 973,22 1,13 972,09 1,14 970,95 1,14
0,28 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40
25º 983,42 1,22 982,20 1,21 980,99 1,20 979,79 1,18 978,61 1,17 977,44 1,15 976,29 1,15 975,14 1,15 973,99 1,14 972,85 1,15 971,70 1,15 970,55 1,16
0,28 0,30 0,31 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41
26º 983,14 1,24 981,90 1,22 980,68 1,20 979,48 1,19 978,29 1,18 977,11 1,17 975,94 1,16 974,78 1,16 973,62 1,16 972,46 1,16 971,30 1,16 970,14 1,17
0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,42
27º 982,84 1,24 981,60 1,23 980,37 1,21 979,16 1,20 977,96 1,19 976,77 1,18 975,59 1,17 974,42 1,18 973,24 1,17 972,07 1,17 970,90 1,18 969,72 1,18
0,31 0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,38 0,40 0,41 0,43
28º 982,53 1,25 981,28 1,23 980,05 1,22 978,83 1,21 977,62 1,20 976,42 1,19 975,23 1,19 974,04 1,18 972,86 1,19 971,67 1,18 970,49 1,20 969,29 1,20
0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,42 0,43
29º 982,22 1,26 980,96 1,24 979,72 1,23 978,49 1,22 977,27 1,21 976,06 1,20 974,86 1,20 973,66 1,20 972,46 1,19 971,27 1,20 970,07 1,21 968,86 1,22
0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45
30º 981,90 1,27 980,63 1,25 979,38 1,24 978,14 1,23 976,91 1,22 975,69 1,21 974,48 1,22 973,26 1,21 972,05 1,21 970,84 1,21 969,63 1,22 968,41 1,23
0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45
31º 981,56 1,27 980,29 1,26 979,03 1,25 977,78 1,24 976,54 1,23 975,31 1,23 974,08 1,22 972,86 1,22 971,64 1,22 970,42 1,23 969,19 1,23 967,96 1,24
0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,46
32º 981,21 1,28 979,93 1,26 978,67 1,26 977,41 1,25 976,16 1,24 974,92 1,23 973,69 1,23 972,46 1,24 971,22 1,23 969,99 1,24 968,75 1,25 967,50 1,25
0,35 0,35 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,45 0,46
33º 980,86 1,28 979,58 1,28 978,30 1,26 977,04 1,26 975,78 1,25 974,53 1,24 973,29 1,25 972,04 1,24 970,80 1,25 969,55 1,25 968,30 1,26 967,04 1,27
0,36 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47
34º 980,50 1,29 979,21 1,28 977,93 1,27 976,66 1,27 975,39 1,26 974,13 1,25 972,88 1,26 971,62 1,25 970,37 1,26 969,11 1,27 967,84 1,27 966,57 1,29
0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,46 0,46 0,48
35º 980,14 1,30 978,84 1,29 977,55 1,28 976,27 1,27 975,00 1,27 973,73 1,27 972,46 1,26 971,20 1,27 969,93 1,28 968,65 1,27 967,38 1,29 966,09 1,30
0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,45 0,47 0,48
36º 979,77 1,31 978,46 1,29 977,17 1,29 975,88 1,28 974,60 1,28 973,32 1,28 972,04 1,28 970,76 1,28 969,48 1,28 968,20 1,29 966,91 1,30 965,61 1,32
0,39 0,39 0,40 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49
37º 978,38 1,31 978,07 1,30 976,77 1,29 975,48 1,29 974,19 1,29 972,90 1,29 971,61 1,29 970,32 1,29 969,03 1,30 967,73 1,30 966,43 1,31 965,12 1,33
0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50
38º 979,00 1,32 977,68 1,31 976,37 1,30 975,07 1,30 973,77 1,30 972,47 1,30 971,17 1,30 969,87 1,30 968,57 1,31 967,26 1,32 965,94 1,32 964,62 1,34
0,40 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
39º 978,60 1,32 977,28 1,32 975,96 1,31 974,65 1,30 973,35 1,31 972,04 1,31 970,73 1,31 969,42 1,32 968,10 1,32 966,78 1,33 965,45 1,33 964,12 1,36
0,40 0,41 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51
40º 978,20 1,33 976,87 1,32 975,55 1,32 974,23 1,31 972,92 1,32 971,60 1,32 970,28 1,32 968,96 1,33 967,63 1,33 966,30 1,34 964,96 1,35 963,61 1,371990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 44
▼B
tºAlkoholipitoisuus til-%
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
0 978,56 0,70 977,86 0,70 977,16 0,69 976,47 0,71 975,76 0,71 975,05 0,72 974,33 0,75 973,58 0,77 972,81 0,80 972,01 0,83 971,18 0,87 970,31 0,90
0,14 0,17 0,19 0,22 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,39 0,41
1 978,42 0,73 977,69 0,72 976,97 0,72 976,25 0,73 975,52 0,73 974,79 0,75 974,04 0,77 973,27 0,80 972,47 0,82 971,65 0,86 970,79 0,89 969,90 0,92
0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,37 0,39 0,41
2 978,26 0,75 977,51 0,74 976,77 0,75 976,02 0,75 975,27 0,76 974,51 0,77 973,74 0,79 972,95 0,82 972,13 0,85 971,28 0,88 970,40 0,91 969,49 0,95
0,17 0,19 0,22 0,23 0,26 0,28 0,31 0,33 0,36 0,38 0,40 0,42
3 978,09 0,77 977,32 0,77 976,55 0,76 975,79 0,78 975,01 0,78 974,23 0,80 973,43 0,81 972,62 0,85 971,77 0,87 970,90 0,90 970,00 0,93 969,07 0,98
0,18 0,20 0,22 0,25 0,27 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,40 0,43
4 977,91 0,79 977,12 0,79 976,33 0,79 975,54 0,80 974,94 0,80 973,94 0,82 973,12 0,84 972,28 0,87 971,41 0,89 970,52 0,92 969,60 0,96 968,64 1,00
0,19 0,22 0,23 0,26 0,27 0,30 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44
5 977,72 0,82 976,90 0,80 976,10 0,82 975,28 0,81 974,47 0,83 973,64 0,85 972,79 0,86 971,93 0,89 971,04 0,91 970,13 0,95 969,18 0,98 968,20 1,01
0,21 0,22 0,25 0,26 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44
6 977,51 0,83 976,68 0,83 975,85 0,83 975,02 0,84 974,18 0,85 973,33 0,87 972,46 0,86 971,58 0,91 970,67 0,94 969,73 0,97 968,76 1,00 967,76 1,03
0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44
7 977,30 0,85 976,45 0,85 975,60 0,86 974,74 0,86 973,88 0,87 973,01 0,89 972,12 0,90 971,22 0,93 970,29 0,96 969,33 0,99 968,34 1,02 967,32 1,06
0,23 0,25 0,27 0,28 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,43 0,46
8 977,07 0,87 976,20 0,87 975,33 0,87 974,46 0,89 973,57 0,89 972,68 0,91 971,77 0,92 970,85 0,96 969,89 0,98 968,91 1,00 967,91 1,05 966,86 1,07
0,24 0,26 0,28 0,30 0,31 0,34 0,35 0,38 0,39 0,41 0,44 0,46
9 976,83 0,89 975,94 0,89 975,05 0,89 974,16 0,90 973,26 0,92 972,34 0,92 971,42 0,95 970,47 0,97 969,50 1,00 968,50 1,03 967,47 1,07 966,40 1,09
0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46
10 976,59 0,91 975,68 0,91 974,77 0,91 973,86 0,93 972,93 0,93 972,00 0,95 971,05 0,97 970,08 0,99 969,09 1,02 968,07 1,05 967,02 1,08 965,94 1,12
0,27 0,29 0,30 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47
11 976,32 0,93 975,39 0,92 974,47 0,94 973,53 0,94 972,59 0,95 971,64 0,97 970,67 0,99 969,68 1,01 968,67 1,04 967,63 1,07 966,56 1,09 965,47 1,13
0,27 0,28 0,31 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48
12 976,05 0,94 975,11 0,95 974,16 0,95 973,21 0,96 972,25 0,97 971,28 0,99 970,29 1,01 969,28 1,03 968,25 1,06 967,19 1,08 966,11 1,12 964,99 1,15
0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
13 975,77 0,96 974,81 0,96 973,85 0,97 972,88 0,98 971,90 0,99 970,91 1,01 969,90 1,03 968,87 1,05 967,82 1,08 966,74 1,10 965,64 1,14 964,50 1,17
0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
14 975,49 0,98 974,51 0,98 973,53 0,99 972,54 1,00 971,54 1,01 970,53 1,03 969,50 1,04 968,46 1,07 967,39 1,10 966,29 1,12 965,17 1,16 964,01 1,19
0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49
15 975,19 1,00 974,19 1,00 973,19 1,00 972,19 1,02 971,17 1,03 970,14 1,04 969,10 1,06 968,04 1,09 966,95 1,12 965,83 1,14 964,69 1,17 963,52 1,21
0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46 0,48 0,51
16 974,88 1,01 973,87 1,02 972,85 1,02 971,83 1,03 970,80 1,05 969,75 1,06 968,69 1,08 967,61 1,11 966,50 1,13 965,37 1,16 964,21 1,20 963,01 1,22
0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48 0,50 0,50
17 974,56 1,02 973,54 1,04 972,50 1,04 971,46 1,05 970,41 1,06 969,35 1,08 968,27 1,10 967,17 1,12 966,05 1,16 964,89 1,18 963,71 1,20 962,51 1,24
0,32 0,35 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,52
18 974,24 1,05 973,19 1,05 972,14 1,05 971,09 1,07 970,02 1,08 968,94 1,10 967,84 1,12 966,72 1,14 965,58 1,17 964,41 1,19 963,22 1,23 961,99 1,25
0,34 0,35 0,36 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,52
19 973,90 1,06 972,84 1,06 971,78 1,08 970,70 1,08 969,62 1,10 968,52 1,11 967,41 1,14 966,27 1,16 965,11 1,18 963,93 1,21 962,72 1,25 961,47 1,27
0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,45 0,46 0,47 0,49 0,51 0,52
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºAlkoholipitoisuus til-%
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,36 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,49 0,50 0,52 0,53
21 973,20 1,09 972,11 1,09 971,02 1,11 969,91 1,12 968,79 1,13 967,66 1,15 966,51 1,16 965,35 1,20 964,15 1,21 962,94 1,25 961,69 1,27 960,42 1,31
0,36 0,37 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54
22 972,84 1,10 971,74 1,12 970,62 1,12 969,50 1,13 968,37 1,15 967,22 1,16 966,06 1,19 964,87 1,21 963,66 1,23 962,43 1,26 961,17 1,29 959,88 1,32
0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,55
23 972,47 1,12 971,35 1,13 970,22 1,14 969,08 1,14 967,94 1,17 966,77 1,18 965,59 1,20 964,39 1,22 963,17 1,25 961,92 1,28 960,64 1,31 959,33 1,33
0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,54 0,55
24 972,09 1,14 970,95 1,14 969,81 1,15 968,66 1,16 967,50 1,18 966,32 1,20 965,12 1,22 963,90 1,24 962,66 1,26 961,40 1,30 960,10 1,32 958,78 1,35
0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55
25 971,70 1,15 970,55 1,16 969,39 1,16 968,23 1,18 967,05 1,20 965,85 1,21 964,64 1,23 963,41 1,26 962,15 1,28 960,87 1,31 959,56 1,33 958,23 1,37
0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,57
26 971,30 1,16 970,14 1,17 968,97 1,18 967,79 1,20 966,59 1,21 965,38 1,23 964,15 1,24 962,91 1,27 961,64 1,30 960,34 1,32 959,02 1,36 957,66 1,38
0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56
27 970,90 1,18 969,72 1,18 968,54 1,20 967,34 1,21 966,13 1,23 964,90 1,24 963,66 1,26 962,40 1,29 961,11 1,31 959,80 1,34 958,46 1,36 957,10 1,40
0,41 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59
28 970,49 1,20 969,29 1,20 968,09 1,21 966,88 1,22 965,66 1,24 964,42 1,26 963,16 1,28 961,88 1,31 960,57 1,33 959,24 1,35 957,89 1,38 956,51 1,41
0,42 0,43 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52 0,53 0,53 0,55 0,56 0,58
29 970,07 1,21 968,86 1,22 967,64 1,23 966,41 1,24 965,17 1,25 963,92 1,28 962,64 1,29 961,35 1,31 960,04 1,35 958,69 1,36 957,33 1,40 955,93 1,42
0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,55 0,55 0,58 0,58
30 969,63 1,22 968,41 1,23 967,18 1,24 965,94 1,26 964,68 1,26 963,42 1,29 962,13 1,31 960,82 1,33 959,49 1,35 958,14 1,39 956,75 1,40 955,35 1,44
0,44 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,57 0,58 0,60
31 969,19 1,23 967,96 1,24 966,72 1,26 965,46 1,27 964,19 1,28 962,91 1,30 961,61 1,32 960,29 1,35 958,94 1,37 957,57 1,40 956,17 1,42 954,75 1,44
0,44 0,46 0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59
32 968,75 1,25 967,50 1,25 966,25 1,27 964,98 1,29 963,69 1,29 962,40 1,32 961,08 1,33 959,75 1,36 958,39 1,39 957,00 1,41 955,59 1,43 954,16 1,46
0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,57 0,57 0,59 0,61
33 968,30 1,26 967,04 1,27 965,77 1,28 964,49 1,30 963,19 1,31 961,88 1,33 960,55 1,35 959,20 1,38 957,82 1,39 956,43 1,43 955,00 1,45 953,55 1,47
0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56 0,59 0,59 0,60
34 967,84 1,27 966,57 1,29 965,28 1,29 963,99 1,31 962,68 1,33 961,35 1,34 960,01 1,37 958,64 1,38 957,26 1,42 955,84 1,43 954,41 1,46 952,95 1,49
0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58 0,58 0,60 0,62
35 967,38 1,29 966,09 1,30 964,79 1,31 963,48 1,32 962,16 1,34 960,82 1,36 959,46 1,38 958,08 1,40 956,68 1,42 955,26 1,45 953,81 1,48 952,33 1,50
0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
36 966,91 1,30 965,61 1,32 964,29 1,32 962,97 1,34 961,63 1,35 960,28 1,37 958,91 1,40 957,51 1,41 956,10 1,44 954,66 1,46 953,20 1,49 951,71 1,51
0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
37 966,43 1,31 965,12 1,33 963,79 1,34 962,45 1,35 961,10 1,37 959,73 1,38 958,35 1,41 956,94 1,43 955,51 1,45 954,06 1,47 952,59 1,50 951,09 1,53
0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63
38 965,94 1,32 964,62 1,34 963,28 1,35 961,93 1,37 960,56 1,38 959,18 1,40 957,78 1,42 956,36 1,44 954,92 1,46 953,46 1,49 951,97 1,51 950,46 1,54
0,49 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
39 965,45 1,33 964,12 1,36 962,76 1,36 961,40 1,38 960,02 1,40 958,62 1,41 957,21 1,43 955,78 1,46 954,32 1,47 952,85 1,50 951,35 1,53 949,82 1,55
0,49 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63 0,64
40 964,96 1,35 963,61 1,37 962,24 1,38 960,86 1,39 959,47 1,41 958,06 1,43 956,63 1,44 955,19 1,47 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54 949,18 1,571990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 45
▼B
TAULUKKO II
KANSAINVÄLINEN ALKOHOLIPITOISUUS 20 ºC:SSA
Taulukko lämpötilan vaikutuksen näennäiseen alkoholipitoisuuteen korjaamiseksi
Näennäiseen alkoholipitoisuuteen t ºC:ssa (tavallisesta lasista valmistettu alkoholometri) lisätään tai siitä vähennetään
annettu korjausluku
Näennäinen alkoholipitoisuus t ºC:ssa
0123456789 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Lämpötila0º
Lisätään0,76 0,77 0,82 0,87 0,95 1,04 1,16 1,31 1,49 1,70 1,95 2,26 2,62 3,03 3,49 4,02 4,56
1º 0,81 0,83 0,87 0,92 1,00 1,09 1,20 1,35 1,52 1,73 1,97 2,26 2,59 2,97 3,40 3,87 4,36
2º 0,85 0,87 0,92 0,97 1,04 1,13 1,24 1,38 1,54 1,74 1,97 2,24 2,54 2,89 3,29 3,72 4,173º 0,88 0,91 0,95 1,00 1,07 1,15 1,26 1,39 1,55 1,73 1,95 2,20 2,48 2,80 3,16 3,55 3,954º 0,90 0,92 0,97 1,02 1,09 1,17 1,27 1,40 1,55 1,72 1,92 2,15 2,41 2,71 3,03 3,38 3,75
5º 0,91 0,93 0,98 1,03 1,10 1,17 1,27 1,39 1,53 1,69 1,87 2,08 2,33 2,60 2,89 3,21 3,54
6º 0,92 0,94 0,98 1,02 1,09 1,16 1,25 1,37 1,50 1,65 1,82 2,01 2,23 2,47 2,74 3,02 3,32
7º 0,91 0,93 0,97 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,45 1,59 1,75 1,92 2,12 2,34 2,58 2,83 3,10
8º 0,89 0,91 0,94 0,98 1,04 1,11 1,19 1,28 1,39 1,52 1,66 1,82 2,00 2,20 2,42 2,65 2,889º 0,86 0,88 0,91 0,95 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,44 1,57 1,71 1,87 2,05 2,24 2,44 2,65
10º 0,82 0,84 0,87 0,91 0,96 1,01 1,08 1,16 1,25 1,35 1,47 1,60 1,74 1,89 2,06 2,24 2,43
11º 0,78 0,79 0,82 0,86 0,90 0,95 1,01 1,08 1,16 1,25 1,36 1,47 1,60 1,73 1,88 2,03 2,20
12º 0,72 0,74 0,76 0,79 0,83 0,88 0,93 0,99 1,07 1,15 1,24 1,34 1,44 1,56 1,69 1,82 1,96
13º 0,66 0,67 0,69 0,72 0,76 0,80 0,84 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,38 1,49 1,61 1,73
14º 0,59 0,60 0,62 0,64 0,67 0,71 0,74 0,79 0,85 0,91 0,97 1,04 1,12 1,20 1,29 1,39 1,49
15º 0,51 0,52 0,53 0,55 0,58 0,61 0,64 0,68 0,73 0,77 0,83 0,89 0,95 1,02 1,09 1,16 1,24
16º 0,42 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,60 0,63 0,67 0,72 0,77 0,82 0,88 0,94 1,00
17º 0,33 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,46 0,48 0,51 0,55 0,59 0,62 0,67 0,71 0,7518º 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,45 0,48 0,5119º 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25
Näennäinen alkoholipitoisuus t ºC:ssa
0123456789 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Lämpötila21º
Vähennetään0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,19 0,20 0,22 0,23 0,25 0,26
22º 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,44 0,47 0,49 0,5223º 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,54 0,57 0,60 0,63 0,66 0,70 0,74 0,7824º 0,55 0,56 0,58 0,60 0,62 0,64 0,67 0,70 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04
25º 0,69 0,71 0,73 0,76 0,79 0,82 0,85 0,89 0,93 0,97 1,02 1,07 1,13 1,19 1,25 1,3126º 0,85 0,87 0,90 0,93 0,96 1,00 1,04 1,08 1,13 1,18 1,24 1,30 1,36 1,43 1,50 1,57
27º 1,03 1,07 1,11 1,15 1,19 1,23 1,28 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,8428º 1,21 1,25 1,29 1,33 1,38 1,43 1,49 1,55 1,62 1,69 1,77 1,85 1,93 2,02 2,1129º 1,39 1,43 1,47 1,52 1,58 1,63 1,70 1,76 1,84 1,92 2,01 2,10 2,19 2,29 2,39
30º 1,57 1,61 1,66 1,72 1,78 1,84 1,91 1,98 2,07 2,15 2,25 2,35 2,45 2,56 2,67
31º 1,75 1,80 1,86 1,92 1,98 2,05 2,13 2,21 2,30 2,39 2,49 2,60 2,71 2,83 2,94
32º 1,94 2,00 2,06 2,13 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22
33º 2,20 2,27 2,34 2,42 2,50 2,58 2,67 2,77 2,88 2,99 3,12 3,24 3,37 3,51
34º 2,41 2,48 2,56 2,64 2,72 2,81 2,91 3,02 3,13 3,25 3,38 3,51 3,65 3,79
35º 2,62 2,70 2,78 2,86 2,95 3,05 3,16 3,27 3,39 3,51 3,64 3,78 3,93 4,08
36º 2,83 2,91 3,00 3,09 3,19 3,29 3,41 3,53 3,65 3,78 3,91 4,05 4,21 4,37
37º 3,13 3,23 3,33 3,43 3,54 3,65 3,78 3,91 4,04 4,18 4,33 4,49 4,6538º 3,36 3,47 3,57 3,68 3,79 3,91 4,03 4,17 4,31 4,46 4,61 4,77 4,94
39º 3,59 3,70 3,81 3,93 4,05 4,17 4,30 4,44 4,58 4,74 4,90 5,06 5,23
40º 3,82 3,94 4,06 4,18 4,31 4,44 4,57 4,71 4,86 5,02 5,19 5,36 5,531990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 46
▼B
Näennäinen alkoholipitoisuus t ºC:ssa
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Lämpötila0º
Lisätään3,49 4,02 4,56 5,11 5,65 6,16 6,63 7,05 7,39 7,67 7,91 8,07 8,20 8,30 8,36 8,39 8,40
1º 3,40 3,87 4,36 4,86 5,35 5,82 6,26 6,64 6,96 7,23 7,45 7,62 7,75 7,85 7,91 7,95 7,96
2º 3,29 3,72 4,17 4,61 5,05 5,49 5,89 6,25 6,55 6,81 7,02 7,18 7,31 7,40 7,47 7,51 7,533º 3,16 3,55 3,95 4,36 4,77 5,17 5,53 5,85 6,14 6,39 6,59 6,74 6,86 6,97 7,03 7,07 7,094º 3,03 3,38 3,75 4,11 4,48 4,84 5,17 5,48 5,74 5,97 6,16 6,31 6,43 6,53 6,59 6,63 6,66
5º 2,89 3,21 3,54 3,86 4,20 4,52 4,83 5,11 5,35 5,56 5,74 5,89 6,00 6,10 6,16 6,20 6,236º 2,74 3,02 3,32 3,61 3,91 4,21 4,49 4,74 4,96 5,16 5,33 5,47 5,58 5,67 5,73 5,77 5,80
7º 2,58 2,83 3,10 3,36 3,63 3,90 4,15 4,38 4,58 4,77 4,92 5,05 5,15 5,24 5,30 5,34 5,378º 2,42 2,65 2,88 3,11 3,35 3,59 3,81 4,02 4,21 4,38 4,52 4,64 4,74 4,81 4,87 4,92 4,959º 2,24 2,44 2,65 2,86 3,07 3,28 3,48 3,67 3,84 3,99 4,12 4,23 4,32 4,39 4,45 4,50 4,53
10º 2,06 2,24 2,43 2,61 2,80 2,98 3,16 3,33 3,48 3,61 3,73 3,83 3,91 3,98 4,03 4,08 4,11
11º 1,88 2,03 2,20 2,36 2,52 2,68 2,83 2,98 3,12 3,24 3,34 3,43 3,50 3,57 3,62 3,66 3,69
12º 1,69 1,82 1,96 2,10 2,24 2,38 2,51 2,64 2,76 2,87 2,96 3,04 3,10 3,16 3,21 3,25 3,27
13º 1,49 1,61 1,73 1,84 1,96 2,08 2,20 2,31 2,41 2,50 2,58 2,65 2,71 2,76 2,80 2,83 2,8514º 1,29 1,39 1,49 1,58 1,68 1,78 1,88 1,97 2,06 2,13 2,20 2,26 2,31 2,36 2,39 2,42 2,44
15º 1,09 1,16 1,24 1,32 1,40 1,48 1,56 1,64 1,71 1,77 1,83 1,88 1,92 1,96 1,98 2,01 2,03
16º 0,88 0,94 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,36 1,41 1,46 1,50 1,53 1,56 1,58 1,60 1,62
17º 0,67 0,71 0,75 0,80 0,84 0,89 0,94 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,14 1,17 1,18 1,20 1,2118º 0,45 0,48 0,51 0,53 0,56 0,59 0,62 0,65 0,68 0,70 0,72 0,74 0,76 0,78 0,79 0,80 0,81
19º 0,23 0,24 0,25 0,27 0,28 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,40 0,41
Näennäinen alkoholipitoisuus t ºC:ssa
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Lämpötila21º
Vähennetään0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,35 0,37 0,38 0,38 0,39 0,39 0,40
22º 0,47 0,49 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,72 0,74 0,75 0,76 0,78 0,79 0,8023º 0,70 0,74 0,78 0,82 0,86 0,90 0,93 0,97 1,01 1,04 1,07 1,10 1,12 1,15 1,17 1,18 1,1924º 0,94 0,99 1,04 1,10 1,15 1,20 1,25 1,29 1,34 1,39 1,43 1,46 1,50 1,53 1,55 1,57 1,59
25º 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,56 1,62 1,68 1,73 1,78 1,83 1,87 1,90 1,94 1,97 1,99
26º 1,43 1,50 1,57 1,65 1,73 1,80 1,87 1,94 2,01 2,07 2,13 2,19 2,24 2,28 2,32 2,35 2,38
27º 1,68 1,76 1,84 1,93 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,41 2,48 2,55 2,61 2,66 2,70 2,74 2,77
28º 1,93 2,02 2,11 2,21 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,76 2,83 2,90 2,98 3,03 3,08 3,13 3,1729º 2,19 2,29 2,39 2,50 2,60 2,70 2,81 2,91 3,00 3,09 3,18 3,26 3,34 3,40 3,46 3,51 3,55
30º 2,45 2,56 2,67 2,78 2,90 3,01 3,12 3,23 3,34 3,44 3,53 3,62 3,70 3,77 3,84 3,90 3,95
31º 2,71 2,83 2,94 3,07 3,19 3,31 3,43 3,55 3,67 3,78 3,88 3,98 4,07 4,15 4,22 4,28 4,33
32º 2,97 3,09 3,22 3,36 3,49 3,62 3,74 3,87 4,00 4,11 4,22 4,33 4,43 4,51 4,59 4,66 4,72
33º 3,24 3,37 3,51 3,65 3,79 3,92 4,06 4,20 4,33 4,45 4,57 4,68 4,79 4,88 4,97 5,04 5,10
34º 3,51 3,65 3,79 3,94 4,09 4,23 4,37 4,52 4,66 4,79 4,91 5,03 5,15 5,25 5,34 5,42 5,49
35º 3,78 3,93 4,08 4,23 4,38 4,53 4,69 4,84 4,98 5,12 5,26 5,38 5,50 5,61 5,71 5,80 5,87
36º 4,05 4,21 4,37 4,52 4,68 4,84 5,00 5,16 5,31 5,46 5,60 5,73 5,86 5,97 6,08 6,17 6,25
37º 4,33 4,49 4,65 4,82 4,98 5,15 5,31 5,48 5,64 5,80 5,95 6,09 6,22 6,33 6,44 6,54 6,6338º 4,61 4,77 4,94 5,12 5,29 5,46 5,63 5,80 5,97 6,13 6,29 6,43 6,57 6,69 6,81 6,92 7,01
39º 4,90 5,06 5,23 5,41 5,59 5,77 5,94 6,12 6,30 6,47 6,63 6,78 6,93 7,06 7,18 7,29 7,39
40º 5,19 5,36 5,53 5,71 5,90 6,08 6,26 6,44 6,62 6,80 6,97 7,13 7,28 7,41 7,54 7,66 7,761990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 47
▼B
TAULUKKO III
KANSAINVÄLINEN ALKOHOLIPITOISUUS 20 ºC:SSA
Taulukko vesi-alkoholiseosten näennäisille tiheyksille - tavallisesta lasista valmistetut laitteet
Tiheys t ºC:ssa. ilman noste korjattu
tºAlkoholipitoisuus til-%
0123456789 1 0 1 1
0 999,34 1,52 997,82 1,45 996,37 1,39 994,98 1,35 993,63 1,29 992,34 1,24 991,10 1,18 989,92 1,15 988,77 1,09 987,68 1,05 986,63 1,00 985,63 0,96
−0,09 −0,09 −0,09 −0,08 −0,08 −0,08 −0,07 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02
1 999,43 1,52 997,91 1,45 996,46 1,40 995,06 1,35 993,71 1,29 992,42 1,25 991,17 1,20 989,97 1,15 988,82 1,10 987,72 1,06 986,66 1,01 985,65 0,97
−0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01
2 999,49 1,52 997,97 1,40 996,52 1,40 995,12 1,35 993,77 1,30 992,47 1,25 991,22 1,21 990,01 1,16 988,85 1,11 987,74 1,06 986,68 1,02 985,66 0,98
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 0,00 0,01
3 999,54 1,52 998,02 1,46 996,56 1,40 995,16 1,35 993,81 1,30 992,51 1,26 991,25 1,21 990,04 1,16 988,88 1,12 987,76 1,08 986,68 1,03 985,65 0,99
−0,03 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 0,00 0,01 0,01 0,02
4 999,57 1,52 998,05 1,46 996,59 1,40 995,19 1,36 993,83 1,30 992,53 1,26 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,13 987,75 1,08 986,67 1,04 985,63 1,00
−0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03
5 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,40 995,21 1,36 993,85 1,31 992,54 1,27 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,14 987,74 1,09 986,65 1,05 985,60 1,02
0,00 0,00 0,00 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,03 0,03 0,04 0,06
6 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,41 995,20 1,36 993,84 1,31 992,53 1,27 991,26 1,23 990,03 1,18 988,85 1,14 987,71 1,10 986,61 1,07 985,54 1,02
0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06
7 999,58 1,52 998,06 1,46 996,60 1,41 995,19 1,36 993,83 1,32 992,51 1,27 991,24 1,23 990,01 1,19 988,82 1,15 987,67 1,11 986,56 1,08 985,48 1,04
0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,05 0,05 0,06 0,07 0,07 0,08
8 999,55 1,52 998,03 1,46 996,57 1,41 995,16 1,37 993,79 1,32 992,47 1,28 991,19 1,23 989,96 1,20 988,76 1,16 987,60 1,11 986,49 1,09 985,40 1,05
0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,06 0,06 0,08 0,08
9 999,51 1,52 997,99 1,46 996,53 1,41 995,12 1,37 993,75 1,32 992,43 1,29 991,14 1,24 989,90 1,20 988,70 1,16 987,54 1,13 986,41 1,09 985,32 1,06
0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
10 999,45 1,52 997,93 1,46 996,47 1,41 995,06 1,37 993,69 1,33 992,36 1,29 991,07 1,24 989,83 1,21 988,62 1,17 987,45 1,14 986,31 1,10 985,21 1,07
0,07 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,10 0,11
11 999,38 1,51 997,87 1,46 996,41 1,42 994,99 1,37 993,62 1,33 992,29 1,29 991,00 1,25 989,75 1,22 988,53 1,18 987,35 1,14 986,21 1,11 985,10 1,08
0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13
12 999,29 1,51 997,78 1,46 996,32 1,42 994,90 1,37 993,53 1,33 992,20 1,30 990,90 1,26 989,64 1,22 988,42 1,18 987,24 1,15 986,09 1,12 984,97 1,09
0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,10 0,10 0,10 0,11 0,12 0,13 0,14
13 999,20 1,51 997,69 1,46 996,23 1,42 994,81 1,38 993,43 1,33 992,10 1,30 990,80 1,26 989,54 1,23 988,31 1,19 987,12 1,16 985,96 1,13 984,83 1,10
0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16
14 999,09 1,51 997,58 1,46 996,12 1,42 994,70 1,38 993,32 1,34 991,98 1,30 990,68 1,27 989,41 1,23 988,18 1,20 986,98 1,17 985,81 1,14 984,67 1,11
0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16
15 998,97 1,51 997,46 1,46 996,00 1,42 994,58 1,38 993,20 1,34 991,86 1,31 990,55 1,27 989,28 1,24 988,04 1,20 986,84 1,18 985,66 1,15 984,51 1,12
0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,17 0,17 0,18
16 998,84 1,51 997,33 1,46 995,87 1,42 994,45 1,39 993,06 1,34 991,72 1,31 990,41 1,28 989,13 1,24 987,89 1,22 986,67 1,18 985,49 1,16 984,33 1,13
0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,17 0,17 0,18
17 998,70 1,51 997,19 1,46 995,73 1,42 994,31 1,39 992,92 1,35 991,57 1,31 990,26 1,28 988,98 1,25 987,73 1,22 986,50 1,18 985,32 1,17 984,15 1,14
0,15 0,15 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19
18 998,55 1,51 997,04 1,47 995,57 1,42 994,15 1,39 992,76 1,35 991,41 1,32 990,09 1,28 988,81 1,26 987,55 1,23 986,32 1,19 985,13 1,17 983,96 1,15
0,17 0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21
19 998,38 1,50 996,88 1,47 995,41 1,42 993,99 1,39 992,60 1,35 991,25 1,33 989,92 1,29 988,63 1,26 987,37 1,24 986,13 1,20 984,93 1,18 983,75 1,16
0,18 0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23
20 998,20 1,50 996,70 1,47 995,23 1,42 993,81 1,40 992,41 1,35 991,06 1,33 989,73 1,30 988,43 1,27 987,16 1,24 985,92 1,21 984,71 1,19 983,52 1,17
tºAlkoholipitoisuus til-%
0123456789 1 0 1 1
20 998,20 1,50 996,70 1,47 995,23 1,42 993,81 1,40 992,41 1,35 991,06 1,33 989,73 1,30 988,43 1,27 987,16 1,24 985,92 1,21 984,71 1,19 983,52 1,17
0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,23
21 998,01 1,50 996,51 1,47 995,04 1,42 993,62 1,40 992,22 1,36 990,86 1,33 989,53 1,31 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,22 984,48 1,19 983,29 1,17
0,20 0,20 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24
22 987,81 1,50 996,31 1,46 994,85 1,43 993,42 1,40 992,02 1,36 990,66 1,34 989,32 1,31 988,01 1,28 986,73 1,25 985,48 1,23 984,25 1,20 983,05 1,18
0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,25
23 997,60 1,50 996,10 1,46 994,64 1,43 993,21 1,40 991,81 1,37 990,44 1,34 989,10 1,31 987,79 1,29 986,50 1,26 985,24 1,23 984,01 1,21 982,80 1,19
0,21 0,21 0,22 0,22 0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26
24 997,39 1,50 995,89 1,47 994,42 1,43 992,99 1,40 991,59 1,37 990,22 1,35 988,87 1,31 987,56 1,29 986,27 1,27 985,00 1,24 983,76 1,22 982,54 1,20
0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,25 0,25 0,26 0,27
25 997,16 1,50 995,66 1,47 994,19 1,43 992,76 1,41 991,35 1,37 989,98 1,35 988,63 1,32 987,31 1,29 986,02 1,27 984,75 1,25 983,50 1,23 982,27 1,21
0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,27 0,27 0,28
26 996,93 1,50 995,43 1,47 993,96 1,44 992,52 1,41 991,11 1,37 989,74 1,35 988,39 1,33 987,06 1,30 985,76 1,28 984,48 1,25 983,23 1,24 981,99 1,22
0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,29
27 996,68 1,50 995,18 1,47 993,71 1,44 992,27 1,41 990,86 1,38 989,48 1,35 988,13 1,33 986,80 1,31 985,49 1,29 984,20 1,26 982,94 1,24 981,70 1,23
0,25 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,29 0,30
28 996,43 1,50 994,93 1,48 993,45 1,44 992,01 1,41 990,60 1,38 989,22 1,36 987,86 1,34 986,52 1,31 985,21 1,29 983,92 1,27 982,65 1,25 981,40 1,23
0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31
29 996,17 1,51 994,66 1,48 993,18 1,44 991,74 1,41 990,33 1,39 988,94 1,36 987,58 1,34 986,24 1,32 984,92 1,29 983,63 1,28 982,35 1,26 981,09 1,24
0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32
30 995,90 1,51 994,39 1,48 992,91 1,45 991,46 1,41 990,05 1,39 988,66 1,37 987,29 1,34 985,95 1,32 984,63 1,30 983,33 1,29 982,04 1,27 980,77 1,25
0,29 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,32 0,32 0,32
31 995,61 1,51 994,10 1,48 992,62 1,45 991,17 1,42 989,75 1,39 988,36 1,37 986,99 1,35 985,64 1,33 984,31 1,30 983,01 1,29 981,72 1,27 980,45 1,26
0,29 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34
32 995,32 1,51 993,81 1,48 992,33 1,45 990,88 1,42 989,45 1,40 988,05 1,37 986,68 1,35 985,33 1,33 984,00 1,31 982,69 1,30 981,39 1,28 980,11 1,26
0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,33 0,34 0,34
33 995,02 1,52 993,50 1,48 992,02 1,45 990,57 1,43 989,14 1,40 987,74 1,37 986,37 1,36 985,01 1,34 983,67 1,31 982,36 1,31 981,05 1,28 979,77 1,27
0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35
34 994,72 1,53 993,19 1,48 991,71 1,45 990,26 1,43 988,83 1,41 987,42 1,38 986,04 1,36 984,68 1,34 983,34 1,32 982,02 1,31 980,71 1,29 979,42 1,28
0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35
35 994,40 1,53 992,87 1,48 991,39 1,46 989,93 1,43 988,50 1,41 987,09 1,38 985,71 1,36 984,35 1,34 983,01 1,33 981,68 1,31 980,37 1,30 979,07 1,29
0,32 0,32 0,33 0,33 0,33 0,33 0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37
36 994,08 1,53 992,55 1,49 991,06 1,46 989,60 1,43 988,17 1,41 986,76 1,39 985,37 1,36 984,01 1,35 982,66 1,33 981,33 1,32 980,01 1,31 978,70 1,29
0,33 0,34 0,34 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37
37 993,75 1,54 992,21 1,49 990,72 1,46 989,26 1,44 987,82 1,41 986,41 1,39 985,02 1,37 983,65 1,35 982,30 1,33 980,97 1,32 979,65 1,32 978,33 1,30
0,34 0,34 0,35 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37 0,38 0,38 0,38
38 993,41 1,54 991,87 1,50 990,37 1,47 988,90 1,44 987,46 1,41 986,05 1,39 984,66 1,37 983,29 1,36 981,93 1,34 980,59 1,32 979,27 1,32 977,95 1,31
0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39
39 993,06 1,54 991,52 1,51 990,01 1,47 988,54 1,44 987,10 1,41 985,68 1,39 984,29 1,37 982,92 1,36 981,56 1,34 980,22 1,33 978,89 1,33 977,56 1,31
0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,38 0,38 0,38 0,38 0,39 0,39 0,39
40 992,71 1,55 991,16 1,51 989,65 1,48 988,17 1,45 986,72 1,42 985,30 1,39 983,91 1,37 982,54 1,36 981,18 1,35 979,83 1,33 978,50 1,33 977,17 1,321990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 48
▼B
tºAlkoholipitoisuus til-%
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
0 986,63 1,00 985,63 0,96 984,67 0,92 983,75 0,87 982,88 0,84 982,04 0,81 981,23 0,77 980,46 0,75 979,71 0,73 978,98 0,72 978,26 0,70 977,56 0,70
−0,03 −0,02 −0,01 0,00 0,02 0,04 0,05 0,07 0,09 0,11 0,13 0,15
1 986,66 1,01 985,65 0,97 984,68 0,93 983,75 0,89 982,86 0,86 982,00 0,82 981,18 0,79 980,39 0,77 979,62 0,75 978,87 0,74 978,13 0,72 977,41 0,72
−0,02 −0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17
2 986,68 1,02 985,66 0,98 984,68 0,94 983,74 0,91 982,83 0,87 981,96 0,84 981,12 0,81 980,31 0,79 979,52 0,77 978,75 0,76 977,99 0,75 977,24 0,74
0,00 0,01 0,02 0,04 0,05 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
3 986,68 1,03 985,65 0,99 984,66 0,96 983,70 0,92 982,78 0,88 981,90 0,86 981,04 0,83 980,21 0,81 979,40 0,79 978,61 0,78 977,83 0,77 977,06 0,76
0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
4 986,67 1,04 985,63 1,00 984,63 0,97 983,66 0,93 982,73 0,90 981,83 0,87 980,96 0,85 980,11 0,83 979,28 0,81 978,47 0,80 977,67 0,79 976,88 0,79
0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,16 0,18 0,20
5 986,65 1,05 985,60 1,02 984,58 0,98 983,60 0,95 982,65 0,91 981,74 0,89 980,85 0,87 979,98 0,84 979,14 0,83 978,31 0,82 977,49 0,81 976,68 0,81
0,04 0,06 0,06 0,07 0,08 0,10 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19 0,21
6 986,61 1,07 985,54 1,02 984,52 0,99 983,53 0,96 982,57 0,93 981,64 0,90 980,74 0,89 979,85 0,86 978,99 0,85 978,14 0,84 977,30 0,83 976,47 0,83
0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,20 0,22
7 986,56 1,08 985,48 1,04 984,44 1,00 983,44 0,97 982,47 0,95 981,52 0,92 980,60 0,90 979,70 0,88 978,82 0,87 977,95 0,85 977,10 0,85 976,25 0,85
0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23
8 986,49 1,09 985,40 1,05 984,35 1,01 983,34 0,98 982,36 0,96 981,40 0,94 980,46 0,92 979,54 0,90 978,64 0,88 977,76 0,87 976,89 0,87 976,02 0,87
0,08 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,15 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24
9 986,41 1,09 985,32 1,06 984,26 1,03 983,23 1,00 982,23 0,97 981,26 0,95 980,31 0,93 979,38 0,92 978,48 0,90 977,56 0,89 976,67 0,89 975,78 0,89
0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 0,16 0,17 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25
10 986,31 1,10 985,21 1,07 984,14 1,04 983,10 1,01 982,09 0,99 981,10 0,96 980,14 0,94 979,20 0,93 978,27 0,92 977,35 0,91 976,44 0,91 975,53 0,91
0,10 0,11 0,12 0,13 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,23 0,25 0,27
11 986,21 1,11 985,10 1,08 984,02 1,05 982,97 1,03 981,94 1,00 980,94 0,97 979,97 0,96 979,01 0,95 978,06 0,94 977,12 0,93 976,19 0,93 975,26 0,92
0,12 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26 0,27
12 986,09 1,12 984,97 1,09 983,88 1,06 982,82 1,04 981,78 1,01 980,77 0,99 979,78 0,98 978,80 0,96 977,84 0,96 976,88 0,95 975,93 0,94 974,99 0,94
0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
13 985,96 1,13 984,83 1,10 983,73 1,07 982,66 1,05 981,61 1,03 980,58 1,00 979,58 0,99 978,59 0,98 977,61 0,97 976,64 0,97 975,67 0,96 974,71 0,96
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29
14 985,81 1,14 984,67 1,11 983,56 1,08 982,48 1,06 981,42 1,04 980,38 1,02 979,36 1,00 978,36 0,99 977,37 0,99 976,38 0,98 975,40 0,98 974,42 0,98
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30
15 985,66 1,15 984,51 1,12 983,39 1,09 982,30 1,07 981,23 1,05 980,18 1,04 979,14 1,02 978,12 1,01 977,11 1,00 976,11 0,99 975,12 1,00 974,12 1,00
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,25 0,26 0,28 0,30 0,31
16 985,49 1,16 984,33 1,13 983,20 1,10 982,10 1,08 981,02 1,06 979,96 1,05 978,91 1,04 977,87 1,02 976,85 1,02 975,83 1,01 974,82 1,01 973,81 1,02
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25 0,27 0,29 0,30 0,31
17 985,32 1,17 984,15 1,14 983,01 1,11 981,90 1,09 980,81 1,08 979,73 1,06 978,67 1,05 977,62 1,04 976,58 1,04 975,54 1,02 974,52 1,02 973,50 1,04
0,19 0,19 0,20 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33
18 985,13 1,17 983,96 1,15 982,81 1,13 981,68 1,11 980,57 1,09 979,48 1,07 978,41 1,06 977,35 1,05 976,30 1,05 975,25 1,04 974,21 1,04 973,17 1,05
0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,34
19 984,93 1,18 983,75 1,16 982,59 1,14 981,45 1,12 980,33 1,10 979,23 1,08 978,15 1,07 977,08 1,07 976,01 1,06 974,94 1,05 973,89 1,06 972,83 1,06
0,22 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,35
20 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºAlkoholipitoisuus til-%
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,23 0,23 0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
21º 984,48 1,19 983,29 1,17 982,12 1,16 980,96 1,14 979,82 1,13 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,09 975,39 1,09 974,30 1,09 973,21 1,09 972,12 1,09
0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
22 984,25 1,20 983,05 1,18 981,97 1,17 980,70 1,15 979,55 1,14 978,41 1,12 977,29 1,12 976,17 1,10 975,07 1,10 973,97 1,10 972,86 1,10 971,76 1,11
0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37
23 984,01 1,21 982,80 1,19 981,61 1,18 980,43 1,16 979,27 1,15 978,12 1,13 976,99 1,13 975,86 1,12 974,74 1,11 973,63 1,12 972,51 1,12 971,39 1,13
0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38
24 983,76 1,22 982,54 1,20 981,34 1,19 980,15 1,17 978,98 1,16 977,82 1,14 976,68 1,14 975,54 1,13 974,41 1,13 973,28 1,13 972,15 1,14 971,01 1,14
0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39
25 983,50 1,23 982,27 1,21 981,06 1,20 979,86 1,18 978,68 1,17 977,51 1,16 976,36 1,15 975,21 1,15 974,06 1,14 972,92 1,15 971,77 1,15 970,62 1,15
0,27 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39
26 983,23 1,24 981,99 1,22 980,77 1,20 979,57 1,19 978,38 1,18 977,20 1,17 976,03 1,16 974,87 1,16 973,71 1,16 972,55 1,16 971,39 1,16 970,23 1,17
0,29 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,38 0,39 0,41
27 982,94 1,24 981,70 1,23 980,47 1,21 979,26 1,20 978,06 1,19 976,87 1,18 975,69 1,18 974,51 1,17 973,34 1,17 972,17 1,17 921,00 1,18 969,82 1,18
0,29 0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,41
28 982,65 1,25 981,40 1,23 980,17 1,22 978,95 1,21 977,74 1,20 976,54 1,20 975,34 1,19 974,15 1,19 972,96 1,18 971,78 1,18 970,60 1,19 969,41 1,20
0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42
29 982,35 1,26 981,09 1,24 979,85 1,23 978,62 1,22 977,40 1,21 976,19 1,21 974,98 1,20 973,78 1,20 972,58 1,19 971,39 1,19 970,20 1,21 968,99 1,21
0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,40 0,42 0,43
30 982,04 1,27 980,77 1,25 979,52 1,24 978,28 1,23 977,05 1,22 975,83 1,21 974,62 1,21 973,41 1,21 972,20 1,21 970,99 1,21 969,78 1,22 968,56 1,23
0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43
31 981,72 1,27 980,45 1,26 979,19 1,25 977,94 1,24 976,70 1,23 975,47 1,22 974,25 1,22 973,03 1,22 971,81 1,22 970,59 1,23 969,36 1,23 968,13 1,24
0,33 0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45
32 981,39 1,28 980,11 1,26 978,85 1,26 977,59 1,25 976,34 1,24 975,10 1,23 973,87 1,23 972,64 1,23 971,41 1,24 970,17 1,24 968,93 1,25 967,68 1,26
0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45
33 981,05 1,28 979,77 1,27 978,50 1,26 977,24 1,26 975,78 1,25 974,73 1,25 973,48 1,24 972,24 1,24 971,00 1,25 969,75 1,25 968,50 1,27 967,23 1,27
0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45 0,45
34 980,71 1,29 979,42 1,28 978,14 1,27 976,87 1,27 975,60 1,26 974,34 1,26 973,08 1,25 971,83 1,25 970,58 1,26 969,32 1,27 968,05 1,27 966,78 1,29
0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45 0,47
35 980,37 1,30 979,07 1,29 977,78 1,28 976,50 1,28 975,22 1,27 973,95 1,27 972,68 1,26 971,42 1,27 970,15 1,27 968,88 1,28 967,60 1,29 966,31 1,30
0,36 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47
36 980,01 1,31 978,70 1,29 977,41 1,29 976,12 1,28 974,84 1,28 973,56 1,28 972,28 1,28 971,00 1,28 969,72 1,28 968,44 1,29 967,15 1,31 965,84 1,31
0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47
37 979,65 1,32 978,33 1,30 977,03 1,30 975,73 1,29 974,44 1,29 973,15 1,29 971,86 1,29 970,57 1,29 969,28 1,29 967,99 1,30 966,69 1,32 965,37 1,32
0,38 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,48
38 979,27 1,32 977,95 1,31 976,64 1,30 975,34 1,30 974,04 1,30 972,74 1,30 971,44 1,30 970,14 1,30 968,84 1,31 967,53 1,31 966,22 1,33 964,89 1,34
0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,48 0,49
39 978,89 1,33 977,56 1,31 976,25 1,31 974,94 1,31 973,63 1,31 972,32 1,31 971,01 1,31 969,70 1,31 968,39 1,32 967,07 1,33 965,74 1,34 964,40 1,36
0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
40 978,50 1,33 977,17 1,32 975,85 1,32 974,53 1,32 973,21 1,31 971,90 1,32 970,58 1,33 969,25 1,33 967,92 1,33 966,59 1,34 965,25 1,35 963,90 1,371990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 49
▼B
tºAlkoholipitoisuus til-%
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
0 978,26 0,70 977,56 0,70 976,86 0,69 976,17 0,70 975,47 0,72 974,75 0,72 974,03 0,74 973,29 0,77 972,52 0,80 971,72 0,83 970,89 0,87 970,02 0,90
0,13 0,15 0,17 0,20 0,22 0,24 0,27 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39
1 978,13 0,72 977,41 0,72 976,69 0,72 975,97 0,72 975,25 0,74 974,51 0,75 973,76 0,77 972,99 0,79 972,20 0,83 971,37 0,85 970,52 0,89 969,63 0,93
0,14 0,17 0,19 0,21 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,41
2 977,99 0,75 977,24 0,74 976,50 0,74 975,76 0,75 975,01 0,76 974,25 0,78 973,47 0,79 972,68 0,82 971,86 0,85 971,01 0,87 970,14 0,92 960,22 0,96
0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40
3 977,83 0,77 977,06 0,76 976,30 0,77 975,53 0,77 974,76 0,78 973,98 0,80 973,18 0,82 972,36 0,84 971,52 0,87 970,65 0,89 969,76 0,94 968,82 0,98
0,16 0,18 0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,42
4 977,67 0,79 976,88 0,79 976,09 0,79 975,30 0,79 974,51 0,81 973,70 0,82 972,88 0,84 972,04 0,86 971,18 0,89 970,29 0,92 969,37 0,96 968,40 1,00
0,18 0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,35 0,38 0,40 0,41
5 977,49 0,81 976,68 0,81 975,87 0,81 975,06 0,81 974,25 0,83 973,42 0,84 972,58 0,86 971,71 0,88 970,83 0,92 969,91 0,94 968,97 0,98 967,99 1,02
0,19 0,21 0,23 0,25 0,27 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43
6 977,30 0,83 976,47 0,83 975,64 0,83 974,81 0,84 973,97 0,85 973,12 0,87 972,25 0,88 971,37 0,91 970,46 0,94 969,52 0,96 968,56 1,00 967,56 1,04
0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43
7 976,10 0,85 976,25 0,85 975,40 0,85 974,55 0,86 973,69 0,87 972,82 0,89 971,93 0,91 971,02 0,93 970,09 0,96 969,13 0,98 968,15 1,02 967,13 1,06
0,21 0,23 0,25 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44
8 976,89 0,87 976,02 0,87 975,15 0,87 974,28 0,88 973,40 0,89 972,51 0,91 971,60 0,93 970,67 0,95 969,72 0,98 968,74 1,01 967,73 1,04 966,69 1,08
0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,41 0,43 0,45
9 976,67 0,89 975,78 0,89 974,89 0,89 974,00 0,90 973,10 0,91 972,19 0,93 971,26 0,95 970,31 0,98 969,33 1,00 968,33 1,03 967,30 1,06 966,24 1,09
0,23 0,25 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45
10 976,44 0,91 975,53 0,91 974,62 0,91 973,71 0,92 972,79 0,93 971,86 0,95 970,91 0,97 969,94 1,00 968,94 1,02 967,92 1,05 966,87 1,08 965,79 1,11
0,25 0,27 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45
11 976,11 0,93 975,26 0,92 974,34 0,93 973,41 0,94 972,47 0,95 971,52 0,97 970,55 0,99 969,56 1,02 968,54 1,04 967,50 1,07 966,43 1,09 965,34 1,13
0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46
12 975,93 0,94 974,99 0,94 974,05 0,95 973,10 0,96 972,14 0,97 971,17 0,99 970,18 1,01 969,17 1,03 968,14 1,06 967,08 1,09 965,99 1,11 964,88 1,15
0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47
13 975,67 0,96 974,71 0,96 973,75 0,97 972,78 0,98 971,80 0,99 970,81 1,01 969,80 1,02 968,78 1,05 967,73 1,08 966,65 1,11 965,54 1,13 964,41 1,17
0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47
14 975,40 0,98 974,42 0,98 973,44 0,99 972,45 1,00 971,45 1,01 970,44 1,02 969,42 1,04 968,38 1,07 967,31 1,10 966,21 1,12 965,09 1,15 963,94 1,19
0,28 0,30 0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
15 975,12 1,00 974,12 1,00 973,12 1,00 972,12 1,02 971,10 1,03 970,07 1,04 969,03 1,06 967,97 1,09 966,88 1,12 965,76 1,14 964,62 1,17 963,45 1,20
0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49
16 974,82 1,01 973,81 1,02 972,79 1,02 971,77 1,03 970,74 1,05 969,69 1,06 968,63 1,08 967,55 1,11 966,44 1,13 965,31 1,16 964,15 1,19 962,96 1,22
0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,49
17 974,52 1,02 973,50 1,04 972,46 1,04 971,42 1,05 970,37 1,06 969,31 1,08 968,23 1,10 967,13 1,12 966,01 1,15 964,86 1,18 963,68 1,21 962,47 1,24
0,31 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50
18 974,21 1,04 973,17 1,05 972,12 1,06 971,06 1,07 969,99 1,08 968,91 1,10 967,81 1,11 966,70 1,14 965,56 1,17 964,39 1,19 963,20 1,23 961,97 1,26
0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50
19 973,89 1,06 972,83 1,06 971,77 1,07 970,70 1,09 969,61 1,10 968,51 1,11 967,39 1,13 966,26 1,16 965,10 1,18 963,92 1,21 962,71 1,24 961,47 1,28
0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,14 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºAlkoholipitoisuus til-%
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20º 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,16 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52
21º 973,21 1,09 972,12 1,09 971,03 1,11 969,92 1,11 968,81 1,13 967,68 1,15 966,53 1,17 965,36 1,19 964,17 1,22 962,95 1,24 961,71 1,28 960,43 1,31
0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52
22 972,86 1,10 971,76 1,11 970,65 1,12 969,53 1,13 968,40 1,15 967,25 1,16 966,09 1,19 964,90 1,21 963,69 1,23 962,46 1,26 961,20 1,29 959,91 1,32
0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52 0,53
23 972,51 1,12 971,39 1,13 970,26 1,13 969,13 1,15 967,98 1,16 966,82 1,18 965,64 1,20 964,44 1,23 963,21 1,25 961,96 1,28 960,68 1,30 959,38 1,33
0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54
24 972,15 1,14 971,01 1,14 969,87 1,15 968,72 1,16 967,56 1,18 966,38 1,20 965,18 1,22 963,96 1,24 962,72 1,27 961,45 1,29 960,16 1,32 958,84 1,34
0,38 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54
25 971,77 1,15 970,62 1,15 969,47 1,17 968,30 1,18 967,12 1,19 965,93 1,21 964,72 1,24 963,48 1,26 962,22 1,28 960,94 1,31 959,63 1,33 958,30 1,36
0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55
26 971,39 1,16 970,23 1,17 969,06 1,18 967,88 1,20 966,68 1,21 965,47 1,23 964,24 1,25 962,99 1,27 961,72 1,30 960,42 1,32 959,10 1,35 957,75 1,38
0,39 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,52 0,53 0,55
27 971,00 1,18 969,82 1,18 968,64 1,20 967,44 1,21 966,23 1,22 965,01 1,25 963,76 1,27 962,49 1,28 961,21 1,31 959,90 1,33 958,57 1,37 957,20 1,40
0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56
28 970,60 1,19 969,41 1,20 968,21 1,21 967,00 1,23 965,77 1,24 964,53 1,26 963,27 1,28 961,99 1,30 960,69 1,32 959,37 1,35 958,02 1,38 956,64 1,41
0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,56
29 970,20 1,21 968,99 1,21 967,78 1,23 966,55 1,24 965,31 1,26 964,05 1,27 962,78 1,29 961,49 1,32 960,17 1,34 958,83 1,36 957,47 1,39 956,08 1,43
0,42 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,58
30 969,78 1,22 968,56 1,23 967,33 1,24 966,09 1,25 964,84 1,27 963,57 1,29 962,28 1,31 960,97 1,33 959,64 1,35 958,29 1,38 956,91 1,41 955,50 1,44
0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58
31 969,36 1,23 968,13 1,24 966,89 1,25 965,64 1,27 964,37 1,29 963,08 1,31 961,77 1,32 960,45 1,34 959,11 1,37 957,74 1,39 956,35 1,43 954,92 1,45
0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,56 0,57 0,58
32 968,93 1,25 967,68 1,25 966,43 1,27 965,16 1,28 963,88 1,30 962,58 1,32 961,26 1,33 959,93 1,36 958,57 1,39 957,18 1,40 955,78 1,44 954,34 1,47
0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59
33 968,50 1,27 967,23 1,27 965,96 1,28 964,68 1,30 963,38 1,31 962,07 1,33 960,74 1,35 959,39 1,37 958,02 1,40 956,62 1,42 955,20 1,45 953,75 1,48
0,45 0,45 0,47 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60
34 968,05 1,27 966,78 1,29 965,49 1,30 964,19 1,31 962,88 1,32 961,56 1,34 960,22 1,37 958,85 1,38 957,47 1,41 956,06 1,44 954,62 1,47 953,15 1,49
0,45 0,47 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
35 967,60 1,29 996,31 1,30 965,01 1,31 963,70 1,32 962,38 1,34 961,04 1,36 959,68 1,38 958,30 1,40 956,90 1,42 955,48 1,45 954,03 1,48 952,55 1,50
0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,59 0,60 0,61
36 967,15 1,31 965,84 1,31 964,53 1,32 963,21 1,34 961,87 1,36 960,51 1,37 959,14 1,39 957,75 1,42 956,33 1,44 954,89 1,46 953,43 1,49 951,94 1,51
0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61
37 966,69 1,32 965,37 1,32 964,05 1,34 962,71 1,36 961,35 1,37 959,98 1,39 958,59 1,40 957,19 1,43 955,76 1,45 954,31 1,48 952,83 1,50 951,33 1,52
0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,61
38 966,22 1,33 964,89 1,34 963,55 1,35 962,20 1,37 960,83 1,39 959,44 1,40 958,04 1,42 956,62 1,44 955,18 1,46 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54
0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
39 965,74 1,34 964,40 1,36 963,04 1,36 961,68 1,38 960,30 1,40 958,90 1,42 957,48 1,43 956,05 1,45 954,60 1,48 953,12 1,50 951,62 1,52 950,10 1,55
0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
40 965,25 1,35 963,90 1,37 962,53 1,38 961,15 1,39 959,76 1,41 958,35 1,43 956,92 1,45 955,47 1,47 954,00 1,49 952,51 1,51 951,00 1,54 949,49 1,561990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 50
▼B
TAULUKKO IV
Taulukko puhtaiden vesi-alkoholiseosten ja tisleiden taitekerrointoimille 20 ºC:ssa ja vastaaville alkoholipitoi-
suuksille 20 ºC:ssa
1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 51
▼B
4.KOKONAISUUTOS
Kokonaiskuiva-aine
1 MÄÄRITELMÄ
Kokonaisuutos tai kokonaiskuiva-aine sisältää kaikki aineet, jotka
eivät haihdu määritellyissä fysikaalisissa olosuhteissa. Näiden fysi-
kaalisten olosuhteiden on oltava sellaiset, että uutoksen muodostavat
aineet muuttuvat mahdollisimman vähän.
Sokeriton uutos on kokonaisuutoksen ja kokonaissokeripitoisuuden
välinen erotus.
Vähennetty uutos on kokonaisuutoksen ja 1 g/l ylittävän kokonaisso-
keripitoisuuden, 1 g/l ylittävän kaliumsulfaattipitoisuuden,
mahdollisen mannitolin sekä muiden viiniin mahdollisesti lisättyjen
kemikaalien välinen erotus.
Jäännösuutos on sokeriton uutos, josta on vähennetty kiinteät hapot,
ilmoitettuna viinihappona.
Uutos ilmoitetaan grammoina litrassa ja se on määritettävä 0,5 g:n
tarkkuudella.
2 PERIAATE
Ainoa menetelmä: densimetrillä mittaaminen.
Kokonaisuutos lasketaan epäsuorasti rypälemehun tiheydestä ja alko-
holittoman viinin tiheydestä.
Uutos ilmoitetaan sakkaroosin määränä, joka veteen liuotettuna ja
yhdeksi litraksi täytettynä antaa saman tiheyden kuin rypälemehu tai
alkoholiton viini. Tämä määrä saadaan taulukosta I.
3 SUORITUS
”Alkoholittoman viinin ” suhteellinen tiheys d2020(dr) saadaan
yhtälöstä:
dr=dv−da+ 1,000,
jossa
dv= viinin suhteellinen tiheys 20 ºC:ssa (haihtuvien happojen
vaikutus korjattu) (1),
da= viinin alkoholipitoisuutta vastaavan vesi-etanoliseoksen
suhteellinen tiheys 20 ºC:ssa.
drvoidaan myös laskea viinin tiheydestä ρvja vesi-etanoliseoksen
tiheydestä ρa20 ºC:ssa yhtälöllä:
dr= 1,0018( ρv−ρa) + 1,000,
jossa kerroin 1,0018 lähenee käytännössä 1:tä, kun ρvon alle 1,05,
mikä on yleisin tapaus.
4 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Käytetään taulukossa I olevia alkoholittoman viinin tiheyttä dr2020ja
rypälemehun tiheyttä d2020kokonaisuutoksen laskemiseksi grammoina
litrassa.
Kokonaisuutos ilmoitetaan grammoina litrassa yhdellä desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 52
(1) Ennen tämän laskutoimituksen tekemistä haihtuvien happojen vaikutus edellä kuvatulla
tavalla mitattuun viinin suhteelliseen tiheyteen (tai tiheyteen) on korjattava seuraavanyhtälön mukaisesti:d
v=d2020− 0,0000086 a taipv=ρ20− 0,0000086 a,
jossa a on haihtuvien happojen pitoisuus milliekvivalentteina litrassa.
▼B
TAULUKKO I
Kokonaisuutoksen laskemiseksi (grammoina litrassa)
Suhteellinen
tiheys kahdella
desimaalillaSuhteellisen tiheyden 3. desimaali
0123456789
Uutos g/l
1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2
1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,1
1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2
1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3
1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,5
1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,81,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4
1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8
1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,2
1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9
1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6
1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,4
1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,2
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1
1,20 527,8 —————————
Interpolointitaulukko
Suhteellisen
tiheyden 4. desi-
maaliUutos
g/lSuhteellisen
tiheyden 4. desi-
maaliUutos
g/lSuhteellisen
tiheyden 4. desi-
maaliUutos
g/l
1 0,3 4 1,0 7 1,8
2 0,5 5 1,3 8 2,1
3 0,8 6 1,6 9 2,31990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 53
▼B
5PELKISTÄVÄT SOKERIT
1 MÄÄRITELMÄ
Pelkistävillä sokereilla tarkoitetaan kaikkia sokereita, jotka osoittavat
ketonista tai aldehydistä toimintaa ja joiden määritys perustuu niiden
kykyyn pelkistää kuparisuolaa emäksisessä liuoksessa.
2 PERIAATE2.1 Kirkastaminen
2.1.1 Vertailumenetelmä: neutraloitu ja alkoholiton viini valutetaan asetaat-
timuodossa anioninvaihtokolonnin läpi, jossa anionit vaihtuvat
asetaatti-ioneihin, ja tämän jälkeen se kirkastetaan neutraalilla lyijya-
setaatilla.
2.1.2 Tavanomainen menetelmä: viini käsitellään toisella seuraavista
reagensseista:
2.1.2.1 Neutraalilyi jyasetaatti2.1.2.2 Sinkki(II)heksasyanoferraatti
2.2 Määritys
2.2.1 Ainoa menetelmä: tietyn määrän emäksistä kuparisuolaliuosta anne-
taan reagoida kirkastetun viinin tai rypälemehun kanssa ja
määritetään kupari-ionien ylijäämä jodometrisesti.
3 KIRKASTAMINEN
Määritettävän sokeripitoisuuden liuoksessa on oltava välillä 0,5-5 g/l.Kuivaa viiniä ei saa laimentaa kirkastamisen aikana; makea viini on
laimennettava kirkastamisen aikana sokeripitoisuuden saattamiseksi
mainittujen raja-arvojen välille seuraavan taulukon mukaisesti.
Nimitys Sockeriptoisuus (g/l) Tiheys Laimennus (%)
Rypälemehut ja
mistellet> 125 > 1,038 1
Makeat tislausta
varten väkevöidyt tai
väkevöimättömät
viinit25-125 1,005-1,038 4
Puolimakeat viinit 5-25 0,997-1,005 20
Kuivat viinit < 5 < 0,997 ei laimennusta
3.1 Vertailumenetelmä
3.1.1 Reagenssit
3.1.1.1 Kloorivetyhappoliuos (HCl), 1 M3.1.1.2 Natriumhydroksidiliuos (NaOH), 1 M3.1.1.3 Etikkahappoliuos (CH
3COOH), 4 M
3.1.1.4 Natriumhydroksidiliuos (NaOH), 2 M3.1.1.5 Anioninvaihtohartsi [Dowex 3 (20-50 mesh) tai vastaava hartsi].
Anioninvaihtokolonnin valmistaminen. Asetetaan byretin pohjalle
pieni lasivillatuppo ja 15 ml anioninvaihtohartsia (3.1.1.5).
Ennen käyttöönottoa hartsi on regeneroitava täydellisesti käsitte-
lemällä se kaksi kertaa peräkkäin 1 M kloorivetyhappo- (3.1.1.1) ja
natriumhydroksidiliuoksilla (3.1.1.2). Kun hartsi on huuhdottu
50 ml:lla tislattua vettä, se siirretään dekantterilasiin, lisätään
50 ml:1 M etikkahappoliuosta (3.1.1.3) ja sekoitetaan 5 minuutin
ajan. Täytetään byrettiuudelleen ja valutetaan 100 ml 4 M eti kkahap-
poliuosta (3.1.1.3) kolonnin läpi. (On suositeltavaa pitää varastossa
hartsia 4 M etikkahappoliuoksella täytetyssä pullossa.) Pestään
kolonnia tislatulla vedellä, kunnes eluaatti on muuttunut neutraaliksi.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 54
▼B
Hartsin regenerointi. Valutetaan 150 ml 2 M natriumhydroksidi-
liuosta hartsin läpi happojen ja useimpien hartsiin tarttuneiden
väriaineiden poistamiseksi. Huuhdotaan 100 ml:lla vettä, kaadetaan
100 ml 4 M etikkahappoliuosta hartsin läpi. Pestään kolonnia, kunnes
eluaattion neutraali .
3.1.1.6 Neutraali lyijyasetaattiliuos (lähes kyllästetty):
Neutraalilyi jyasetaattiPb (CH3COO)23H2O 250 g
Täytetään 500 ml:ksihyvi n kuumalla vedellä
Ravistellaan, kunnes lyijyasetaatti liukenee.
3.1.1.7 Kalsiumkarbonaatti CaCO3
3.1.2 Suoritus
3.1.2.1 Kuivat viinit
Kaadetaan 50 ml viiniä dekantterilasiin, jonka halkaisija on noin 10-
12 cm, ja lisätään 1/2 (n − 0,5) ml 0,1 M natriumhydroksidiliuosta
(3.1.1.2) (n = 0,1 M natriumhydroksidiliuostilavuus, joka kuluu, kun
kokonaishapot määritetään 10 lista viiniä.) Haihdutetaan kiehuvassa
vesihauteessa kuumassa ilmavirrassa, kunnes nestettä on jäljellä noin
20 ml.
Valutetaan 3 ml tätä nestettä asetaattimuodossa olevan anioninvaihto-
kolonnin (3.1.1.5) läpi joka toinen minuutti. Kerätään eluaatti
100 ml:n mittapulloon. Pestään dekantterilasi ja kolonni kuusi kertaa
10 ml:lla tislattua vettä, lisätään sekoittaen 2,5 ml kyllästettyä lyijya-
setaattiliuosta (3.1.1.6) ja 0,5 g kalsiumkarbonaattia (3.1.1.7),
ravistetaan useita kertoja ja annetaan seistä vähintään 15 minuuttia.
Täytetään merkkiin vedellä. Suodatetaan.
1 ml tätä suodosta vastaa 0,5 ml:aa viiniä.
3.1.2.2 Rypälemehut, mistellet, makeat ja puolimakeat viinit
Seuraavat laimennokset ovat ohjeellisia.
1)Rypälemehut ja mistellet
Valmistetaan 10-prosenttinen liuos ja otetaan siitä 10 ml:n näyte.
2)Makeat tislausta varten väkevöidyt tai väkevöimättömät viinit ,
joiden tiheys on välillä 1,005-1,038. Otetaan 20 ml:n näyte 20-
prosenttisesta liuoksesta.
3)Puolimakeat viinit , joiden tiheys on 0,997-1,005. Otetaan 20 ml:n
näyte laimentamattomasta viinistä.
Valutetaan edellä mainittu määrä viiniä tai rypälemehua 3 ml:n
erissä asetaattimuodossa olevan anioninvaihtokolonnin läpi joka
toinen minuutti. Kerätään eluaatti 100 ml:n mittapulloon, huuh-
dellaan kolonnia vedellä, kunnes saadaan noin 90 ml eluaattia.
Lisätään 0,5 g kalsiumkarbonaattia ja 1 ml kyllästettyä lyijyase-
taattiliuosta. Sekoitetaan ja annetaan seistä vähintään 15
minuuttia aina välillä sekoittaen. Täytetään merkkiin vedellä.
Suodatetaan.
Tapauksen mukaan:
1) 1 ml suodosta vastaa 0,01 ml:aa rypälemehua taimi stelleä,
2) 1 ml suodosta vastaa 0,04 ml:aa makeaa viiniä,3) 1 ml suodosta vastaa 0,20 ml:aa puolimakeaa viiniä.
3.2 Tavanomaiset menetelmät
3.2.1 Kirkastaminen neutraalilla lyijyasetaatilla
3.2.1.1 Reagenssit
Neutraali lyijyasetaattiliuos (lähes kyllästetty) (katso 3.1.1.6).
Kalsiumkarbonaatti
3.2.1.2 Suoritus
3.2.1.2.1 Kuivat viinit
Kaadetaan 50 ml viiniä 100 ml:n mittapulloon. Lisätään 1/2 (n−0,5)
ml 1 M natriumhydroksidiliuosta (3.1.1.2); n on 0,1 M natriumhy-
droksidiliuostilavuus, joka kuluu, kun kokonaishapot määritetään1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 55
▼B
10 ml:sta viiniä. Lisätään sekoittaen 2,5 ml kyllästettyä lyijyasetaatti-
liuosta (3.1.1.6) ja 0,5 g kalsiumkarbonaattia (3.1.1.7), ravistellaan
useita kertoja ja annetaan seistä vähintään 15 minuuttia. Täytetään
merkkiin vedellä. Suodatetaan.
1 ml suodosta vastaa 0,5 ml:aa viiniä.
3.2.1.2.2 Rypälemehut, mistellet ja puolimakeat viinit
Kaadetaan 100 ml:n mittapulloon määrätty määrä viiniä (tai rypäle-
mehua tai mistelleä) seuraavien ohjeellisten laimennosten mukaisesti:
1)Rypälemehut ja mistellet
Valmistetaan 10-prosenttinen liuos ja otetaan siitä 10 ml:n näyte.
2)Makeat väkevöidyt tai väkevöimättömät viinit , joiden tiheys on
1,005-1,038. Otetaan 20 ml:n näyte 20-prosenttisesta liuoksesta.
3)Puolimakeat viinit , joiden tiheys on 0,997-1,005. Otetaan 20 ml:n
näyte laimentamattomasta viinistä.
Lisätään 0,5 g kalsiumkarbonaattia, noin 60 ml vettä ja 0,5 tai 1
tai 2 ml kyllästettyä lyijyasetaattiliuosta. Sekoitetaan ja annetaan
seistä vähintään 15 minuuttia aina välillä sekoittaen. Täytetään
merkkiin vedellä. Suodatetaan.
Tapauksen mukaan:
1) 1 ml suodosta vastaa 0,01 ml:aa rypälemehua taimi stelleä,
2) 1 ml suodosta vastaa 0,04 ml:aa makeaa viiniä,3) 1 ml suodosta vastaa 0,20 ml:aa puolimakeaa viiniä.
3.2.2 Kirkastaminen sinkki(II)heksasyanoferraatilla
Tätä kirkastamismenetelmää saa käyttää ainoastaan valkoviiniin,
heikosti värillisiin makeisiin viineihin ja rypälemehuihin.
3.2.2.1 Reagenssit
3.2.2.1.1 Liuos I: Kalium(II)heksasyanoferraattiliuos
Kalium(II)heksasyanoferraatti [K
4Fe(CN)63H2O] 150 g
Täytetään vedellä 1 000 ml:ksi
3.2.2.1.2 Liuos II: Sinkkisulfaattiliuos
Sinkkisulfaatti (Zn SO47H2O) 300 g
Täytetään vedellä 1 000 ml:ksi
3.2.2.2 Suoritus
Kaadetaan 100 ml:n mittapulloon määrätty määrä viiniä (tai rypäle-
mehua tai mistelleä) seuraavien ohjeellisten laimennosten mukaisesti:
1)Rypälemehut ja mistellet
Valmistetaan 10-prosenttinen liuos ja otetaan siitä 10 ml:n näyte.
2)Makeat tislausta varten väkevöidyt tai väkevöimättömät viinit ,
joiden tiheys on 1,005-1,038. Otetaan 20 ml:n näyte 20-prosent-
tisesta liuoksesta.
3)Puolimakeat viinit , joiden tiheys on 0,997-1,005. Otetaan 20 ml:n
näyte laimentamattomasta viinistä.
4)Kuivat viinit
Otetaan 50 ml:n näyte laimentamattomasta viinistä.
Lisätään 5 ml kalium(II)heksasyanoferraattiliuosta I (3.2.2.1.1) ja
5 ml sinkkisulfaattiliuosta II (3.2.2.1.2). Sekoitetaan. Täytetään
merkkiin vedellä. Odotetaan 10 minuuttia. Suodatetaan.
Tapauksen mukaan:1) 1 ml suodosta vastaa 0,01 ml:aa rypälemehua taimi stellea,
2) 1 ml suodosta vastaa 0,04 ml:aa makeaa viiniä,
3) 1 ml suodosta vastaa 0,20 ml:aa puolimakeaa viiniä.
4) 1 ml suodosta vastaa 0,50 ml:aa kuivaa viiniä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 56
▼B
4 MÄÄRITYS
4.1 Reagenssit
4.1.1 Emäksinen kuparisuolaliuos
Kuparisulfaatti, puhdas (CuSO45H2O) 25 g
Sitruunahappo (C6H8O7H2O) 50 g
Kiteinen natriumkarbonaatti (Na2CO3H2O) 388 g
Täytetään vedellä 1 000 ml:ksi
Liuotetaan kuparisulfaatti 100 ml:aan vettä, sitruunahappo 300 ml:aan
vettä ja natriumkarbonaatti 300-400 ml:aan lämmintä vettä. Sekoite-
taan sitruunahappo- ja natriumkarbonaattiliuokset. Lisätään
kuparisulfaattiliuos ja täytetään yhdeksi litraksi.
4.1.2 30 % kaliumjodidiliuos
Kaliumjodidi (KI) 30 g
Täytetään vedellä 100 ml:ksi
Säilytetään värillisessä lasipullossa.
4.1.3 25 % rikkihappo
Rikkihappo, puhdas (H2SO4)ρ20= 1,84 g/
ml 25 g
Täytetään vedellä 100 ml:ksi
Happo kaadetaan varovastiveteen, annetaan jäähtyä ja täytetään
100 ml:ksi.
4.1.4 5 g/l tärkkelysliuos
Sekoitetaan 5 g tärkkelystä noin 500 ml:aan vettä. Kuumennetaan
kiehuvaksi koko ajan sekoittaen ja annetaan kiehua noin 10
minuuttia. Lisätään 200 g natriumkloridia (NaCl). Täytetään yhdeksi
litraksi jäähtymisen jälkeen.
— Natriumtiosulfaattiliuos, 0,1 M
— Inverttisokeriliuos, 5 g/l:
käytetään määritysmenetelmän tarkastamiseen.
Mitataan 200 ml:n mittapulloon seuraavat aineet
Puhdas sakkaroosi(C12H22O11) 4,75 g
Vesi, noin 100 ml
Kloorivetyhappo, puhdas (HCl) ( ρ
20= 1,16 − 1,19 g/ml) 5 ml
Pidetään mittapulloa 60 ºC:ssa vesihauteessa, kunnes liuoksen
lämpötila on 50 ºC ja pidetään tämä lämpötila 15 minuutin ajan.
Annetaan pullon jäähtyä 30 minuuttia itsekseen ja tämän jälkeen
jäähdytetään kylmässä vesihauteessa. Siirretään liuos 1 l:n mittapul-
loon. Täytetään litraksi. Tämä liuos säilyy käyttökelpoisena yhden
kuukauden ajan. Käyttöön otettaessa neutraloidaan määritettävä
näyte (tämä liuos on noin 0,06 M happo) natriumhydroksidiliuok-
sella.
4.2 Suoritus
Mitataan 300 ml:n mittapulloon 25 ml emäksistä kuparisuolaliuosta,
15 ml vettä ja 10 ml kirkastettua liuosta, joka saa sisältää enintään
60 mg inverttisokeria.
Lisätään muutamia hohkakivirakeita. Yhdistetään pystyjäähdyttimeen
ja kuumennetaan kiehumispisteeseen 2 minuutin kuluessa. Annetaan
kiehua tarkalleen 10 minuuttia.
Jäähdytetään välittömästi kylmässä juoksevassa vedessä. Kun liuos
on jäähtynyt täysin, lisätään 10 ml 30-prosenttista kaliumjodidiliuosta
(4.1.2), 25 ml 25-prosenttista rikkihappoa (4.1.3) ja 2 ml tärkkely-
sliuosta (4.1.4).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 57
▼B
Titrataan 0,1 M natriumtiosulfaattiliuoksella (4.1.5). n = käytetty
millilitramäärä.
Tehdään myös sokeakoe, jossa 10 ml sokeriliuosta korvataan 10 ml:lla
tislattua vettä. n' = titraukseen käytetty tiosulfaatin määrä.
4.3 Tulosten ilmoittaminen
4.3.1 Laskutoimitukset
Määritettävän näytteen sisältämä sokerimäärä, inverttisokerina ilmoi-
tettuna, annetaan jäljempänä olevassa taulukossa käytetyn tiosulfaatin
n' − n millilitramäärän funktiona.
Viinin sokeripitoisuus inverttisokeria grammoina litrassa on ilmoitet-
tava yhdellä desimaalilla ottaen huomioon kirkastamisen aikana
suoritetut laimennukset ja määritettävän näytteen tilavuus.
4.3.2 Toistettavuus
r = 0,015 xi
xi= inverttisokerin konsentraatio grammoina litrassa näytettä.
4.3.3 Uusittavuus
R = 0,058xi
xi= inverttisokerin konsentraatio grammoina litrassa näytettä.
0,1 M natriumtiosulfaattiliuoksen tilavuus,
(n′−n) ml, ja vastaava pelkistävien sokerien määrä milligrammoina
Na2S2O3(ml 0,1 M)Pelkistävät sokerit
(mg)ErotusNa2S2O3(ml 0,1 M)Pelkistävät sokerit
(mg)Erotus
1 2,4 2,4 13 33,0 2,7
2 4,8 2,4 14 35,7 2,8
3 7,2 2,5 15 38,5 2,84 9,7 2,5 16 41,3 2,9
5 12,2 2,5 17 44,2 2,9
6 14,7 2,6 18 47,2 2,9
7 17,2 2,6 19 50,0 3,0
8 19,8 2,6 20 53,0 3,0
9 22,4 2,6 21 56,0 3,1
10 25,0 2,6 22 59,1 3,1
11 27,6 2,7 23 62,2
12 30,3 2,71990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 58
▼B
6SAKKAROOSI
1 PERIAATE
I Kvalitatiivinen koemenetelmä ohutlevykromatografialla. Sakkar-
oosi erotetaan muista sokereista selluloosalla päällystetyllä levyllä
ja täplä kehitetään urea-kloorivetyhapporeagenssilla 105 ºC:ssa
lämpökaapissa.
II Koe- ja määritysmenetelmä suuren erotuskyvyn nestekromatogra-
fialla. Sakkaroosi erotetaan sidostetulla alkyyliamiinisilikakolon-
nilla, ja määritetään refraktometrillä. Tulos suhteutetaan samoissa
koeolosuhteissa määritettyyn ulkoisena standardina käytettyyn
aineeseen.
Huomautukset:Rypälemehun tai viinin aitous voidaan tarkistaa deuterium NMR-
menetelmällä, joka on kuvattu rypälemehujen, puhdistettujen
tiivistettyjen rypälemehujen ja viinien väkevöinnin osoittamiseksi.
Sakkaroosin toteamiseksi ja määrittämiseksi voidaan käyttää myös
42 luvun f kohdassa kuvattua kaasukromatografiaa.
2 KVALITATIIVINEN MENETELMÄ OHUTLEVYKROMATO-
GRAFIALLA
2.1 Laitteet
2.1.1 Selluloosalla päällystettyjä kromatografialevyjä2.1.2 Kromatografiakammio2.1.3 Mikroruisku tai mikropipetti2.1.4 Lämpökaappi, joka voidaan säätää 105 ºC ± 2 ºC:seen
2.2 Reagenssit
2.2.1 Aktiivihiili värin poistoon
2.2.2 Liikkuva faasi: dikloorimetaani — jääetikka ( ρ
20= 1,05 g/ml) —
etanoli— metanoli— vesi(50:25:9:6:10).
2.2.3 Kehitin
Urea 5 g
Kloorivetyhappo 2 M 20 ml
Etanoli100 ml
2.2.4 Vertailuliuos
Glukoosi35 g
Fruktoosi35 g
Sakkaroosi0,5 g
Täytetään vedellä 1 000 ml:ksi
2.3 Suoritus
2.3.1 Näytteen valmistaminen
Jos rypälemehun tai viinin väri on voimakas, väri poistetaan aktiivi-
hiilikäsittelyllä.
Kun kyseessä on puhdistettu tiivistetty rypälemehu käytetään liuosta,
jonka sokeripitoisuus on 25 % (m/m) (25ºBrix) ja joka on valmistettu
luvussa ”pH:n määrittäminen” olevassa 4.1.2 kohdassa kuvatulla
tavalla, ja laimennetaan mittapullossa 25 ml liuosta vedellä
100 ml:ksi.
2.3.2 Kromatografointi
Annostellaan 2,5 cm:n etäisyydelle levyn alareunasta:
— 10 µl näytettä,
— 10 µl vertailuliuosta.
Asetetaan levy liikkuvan faasin höyryllä kyllästettyyn kromatografia-
kammioon ja annetaan nesteen nousta 1 cm:n etäisyydelle1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 59
▼B
yläreunasta. Nostetaan levy pois ja kuivataan se lämpimässä ilmavir-
rassa. Toistetaan ajo kaksi kertaa ja kuivataan levy molemmilla
kerroilla. Sumutetaan levylle tasaisesti 15 ml kehitintä ja pidetään
sitä 105 ºC:ssa lämpökaapissa 5 minuuttia.
2.4 Tulokset
Sakkaroosi ja fruktoosi näkyvät tummansinisinä täplinä valkoisella
taustalla; glukoosin täplä on heikosti vihertävä.
3 KOE- JA MÄÄRITYSMENETELMÄ SUUREN EROTUSKYVYN
NESTEKROMATOGRAFIALLA
Kromatografiset olosuhteet ovat ohjeellisia.
3.1 Laitteet
3.1.1 Suuren erotuskyvyn nestekromatografi, jossa on:
1) 10 µl injektointiluuppi,
2) detektori, differentiaalinen refraktometri tai interferometri-refrak-
tometri,
3) sidostettu alkyyliamiinisilikakolonni (pituus 25 mm ja sisähalkai-
sija 4 mm),
4) samalla faasilla täytetty esikolonni,5) valmius esikolonnin ja kolonnin eristämiseksi ja lämpötilan
pysyttämiseksi (30 ºC),
6) piirturi ja mahdollisesti integraattori,7) liikkuvan faasin virtausnopeus: 1 ml/min.
3.1.2 Kalvosuodatuslaitteisto (0,45 µm)
3.2 Reagenssit
3.2.1 Kahdesti tislattu vesi
3.2.2 Asetonitriili (CH
3CN), HPLC-laatu
3.2.3 Liikkuva faasi: asetonitriili-vesi, suodatettu kalvon (0,45 µm) läpi,
(80-20 v/v).
Liikkuvasta faasista on poistettava kaasu ennen sen käyttöä.
3.2.4 Vertailuliuos: sakkaroosin vesiliuos 1,2 g/l. Suodatetaan kalvon
(0,45 µm) läpi.
3.3 Suoritus
3.3.1 Näytteen valmistaminen
— Viinit ja rypälemehut.
Suodatetaan kalvon (0,45 µm) läpi.
— Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut.
Käytetään liuosta, joka on valmistettu laimentamalla puhdistettu
tiivistetty rypälemehu 40 %:ksi (m/v) luvussa ”Kokonaishappopi-
toisuus” olevassa 5.1.2 kohdassa kuvatulla tavalla ja suodatettu
kalvon (0,45 µm) läpi.
3.3.2 Kromatografinen määrittäminen
Injektoidaan kromatografiin vuorotellen 10 µl vertailuliuosta ja 10 µl
3.3.1 kohdassa kuvatulla tavalla valmistettua näytettä. Toistetaan
injektoinnit samassa järjestyksessä.
Tulostetaan kromatogrammi.Sakkaroosin retentioaika on noin 10 minuuttia.
3.4 Laskutoimitukset
Laskutoimituksissa käytetään vertailuliuoksen ja näytteen kahden
määrityksen tulosten keskiarvoa.
3.4.1 Viinit ja rypälemehut
Lasketaan pitoisuus grammoina litrassa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 60
▼B
3.4.2 Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut
C g/l on 40 % (m/v) puhdistetun tiivistetyn rypälemehuliuoksen
sakkaroosipitoisuus.
Puhdistetun tiivistetyn rypälemehun sakkaroosipitoisuus grammoina
kilogrammassa: 2,5 × C.
3.5 Tulosten ilmoittaminen
Viinien, rypälemehujen ja puhdistettujen tiivistettyjen rypälemehujen
sakkaroosipitoisuus ilmoitetaan grammoina litrassa (viinit ja rypäle-
mehut) ja grammoina kilogrammassa (puhdistetut tiivistetyt
rypälemehut) yhdellä desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 61
▼B
7GLUKOOSI JA FRUKTOOSI
1 MÄÄRITELMÄ
Glukoosi ja fruktoosi voidaan määrittää erikseen entsymaattisella
menetelmällä, jonka ainoa tavoite on glukoosi/fruktoosi -suhteen
laskeminen.
2 PERIAATE
Glukoosi tuottaa adenosiinitrifosforihapon kanssa (ATP) heksokinaa-
silla (HK) katalysoidussa entsymaattisessa reaktiossa glukoosi-6-
fosfaattia (G6P) ja fruktoosi fruktoosi-6-fosfaattia (F6P).
glukoosi+ ATP
 G6P + ADP
fruktoosi+ ATP
 F6P + ADP
Aluksi glukoosi-6-fosfaatti hapetetaan nikotiiniamidi-adeniini-dinuk-
leotidi-fosfaatilla (NADP) glukonaatti-6-fosfaatiksi glukoosi-6-
fosfaattidehydrogenaasi-entsyymin (G6PDH) läsnäollessa. Pelkis-
tyneen nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi-fosfaatin (NADPH)
määrä vastaa glukoosi-6-fosfaatin määrää eli glukoosin määrää.
G6P + NADP+
Glukonaatti-6-fosfaatti + NADPH
+H+
Pelkistynyt nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi-fosfaatti määritetään
mittaamalla absorptio 340 nm:ssä.
Reaktion päättyessä fruktoosi-6-fosfaatti muutetaan fosfoglukoosi-
isomeraasilla (PGI) glukoosi-6-fosfaatiksi.
F6P
 G6P
lukoosi-6-fosfaatti reagoi jälleen nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi-
fosfaatin kanssa ja tuottaa glukonaatti-6-fosfaattia ja pelkistynyttä
nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi-fosfaattia: jälkimmäinen
määritetään.
3 LAITTEET
— Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittaus 340 nm:ssä, jossa
NADPH:n absorptio on suurin. Jos kyseessä ovat absoluuttiset
mittaukset (ei käytetä kalibrointisarjoja, vaan NADPH:n ekstink-
tiokerrointa), laitteen aallonpituus- ja absorbanssiarvot on
tarkistettava.
Jos tällaista spektrofotometriä ei ole saatavissa, käytetään spektro-
fotometriä, josta saadaan epäjatkuva spektri ja jolla voidaan tehdä
mittauksia 334 tai 365 nm:ssä.
— Lasikyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm tai kertakäyttöisiä
kyvettejä.
— Entsymaattisissa kokeissa käytettäviä pipettejä, 0,02 — 0,05 —
0,1 — 0,2 ml.
4 REAGENSSIT
4.1 Liuos 1: puskuriliuos (trietanoliamiini 0,3 M: pH = 7,6; 4 × 10−3M,
Mg2+). 150 ml:aan kahdesti tislattua vettä liuotetaan 11,2 g trietano-
liamiinihydrokloridia ((C2H5)3N × HCl) ja 0,2 g MgSO4×7H2O,
lisätään noin 4 ml 5 M natriumhydroksidiliuosta (NaOH) pH:n
säätämiseksi arvoon 7,6 ja täytetään 200 ml:ksi.
Tätä standardiliuosta voi säilyttää 4 viikkoa + 4 ºC:ssa.
4.2 Liuos 2: nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi-fosfaatti-liuos (noin
11,5 × 10−3M): 5 ml:aan kahdesti tislattua vettä liuotetaan 50 mg
dinatrium nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi-fosfaattia.
Liuos säilyy 4 viikkoa + 4 ºC:ssa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 62
▼B
4.3 Liuos 3: adenosiini-5'-trifosfaatti -liuos (noin 81 × 10−3M): 5 ml:aan
kahdesti tislattua vettä liuotetaan 250 mg dinatrium adenosiini-5'-
trifosfaattia ja 250 mg natriumvetykarbonaattia NaHCO3.
Liuos säilyy 4 viikkoa + 4 ºC:ssa.
4.4 Liuos 4: Heksokinaasi/glukoosi-6-fosfaatti-dehydraasi: sekoitetaan
0,5 ml heksokinaasia (2 mg proteiinia/ml tai 280 U/ml) ja 0,5 ml
glukoosi-6-fosfaatti-dehydraasia (1 mg proteiinia/ml).
Liuos säilyy yhden vuoden + 4 ºC:ssa.
4.5 Liuos 5 : Fosfoglukoosi-isomeraasi (2 mg proteiinia/ml tai 700 U/ml).
Liuosta käytetään laimentamattomana.
Liuos säilyy vuoden + 4 ºC:ssa.
Huomautus:
Kaikkia määrityksessä tarvittavia reagensseja on kaupallisesti saata-
villa.
5 SUORITUS5.1 Näytteen valmistaminen
Arvioidun glukoosi + fruktoosimäärän/l mukaan tehdään seuraavat
laimennukset:
Mittaus 340 ja
334 nm:ssäMittaus
365 nm:ssäLaimennus vedellä Laimennuskerroin F
0,4 g/l asti0,8 g/l — —
4,0 g/l asti8,0 g/l 1 + 9 1010,0 g/l asti20,0 g/l 1 + 24 2520,0 g/l asti40,0 g/l 1 + 49 5040,0 g/l asti80,0 g/l 1 + 99 100yli40,0 g/l 80,0 g/l 1 + 999 1 000
5.2 Määritys
Tehdään mittaukset 340 nm:n aallonpituudelle säädetyllä spektrofoto-
metrillä vertailuna ilma (ei kyvetti) tai vesi.
Lämpötila 20-25 ºC.
Annostellaan kahteen 1 cm:n kyvettiin:
vertailu määritys
Liuos 1 (4.1) (saatettu 20 ºC:ksi) 2,50 ml 2,50 ml
Liuos 2 (4.2) 0,10 ml 0,10 ml
Liuos 3 (4.3) 0,10 ml 0,10 ml
Määritettävä näyte 0,20 ml
Kahdestiti slattu vesi 0,20 ml
Sekoitetaan ja luetaan liuosten absorbanssi (A
1) noin 3 minuutin
kuluttua. Käynnistetään reaktio lisäämällä:
Liuos 4 (4.4) 0,02 ml 0,02 ml
Sekoitetaan; odotetaan 15 minuuttia; luetaan absorbanssi ja tarkiste-
taan, että reaktio on tapahtunut loppuun 2 minuutin kuluttua (A2).
Lisätään välittömästi:
Liuos 5 (4.5) 0,02 ml 0,02 ml
Sekoitetaan; luetaan absorbanssi 10 minuutin kuluttua; tarkistetaan,
että reaktio on tapahtunut loppuun 2 minuutin kuluttua (A3).
Lasketaan absorbanssin erotukset vertailu- ja määritysliuoksille:
A2−A1vastaa glukoosia,1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 63
▼B
A3−A2vastaa fruktoosia,
Lasketaan absorbanssien erotukset vertailu-( ∆AV) ja määritysliuok-
sille ( ∆AM), jolloin saadaan
glukoosille: ∆AG=∆AM−∆AV
fruktoosille: ∆AF=∆AM−∆AV
Huomautus:
Entsyymiaktiivisuuden loppuunsaattamiseen tarvittava aika voi vaih-
della erästä toiseen. Edellä annettu arvo on vain ohjeellinen. On
suositeltavaa määrittää aika erikseen jokaiselle erälle.
5.3 Tulosten ilmoittaminen
5.3.1 Laskeminen
Konsentraatioiden yleinen laskentakaava on:
C¼V/C2MP
ε/C2d/C2v/C21000∆Ag =lðÞ
jossa
V = koeliuoksen tilavuus (ml)
v = näytteen tilavuus (ml)
MP = määritettävän aineen molekyylimassa
d = kyvetin optinen pituus (cm)Σ = NADPH:n absorptiokerroin 340 nm:ssä = 6,3 (mmol
−1×1×
cm−1)
V = glukoosin määrityksessä 2,92 mlV = fruktoosin määrityksessä 2,94 ml
v = 0,20 ml
MP = 180d= 1
Saadaan:glukoosille: Cg/l = 0,417 ∆A
G
fruktoosille: Cg/l = 0,420 ∆AF
Jos näyte on laimennettu valmistamisen yhteydessä, tulos kerrotaan
laimennuskertoimella F.
Huomautus:Jos mittaukset on tehty aallonpituuksilla 334 tai 365 nm, saadaan:
— mittaus 334 nm:ssä: Σ= 6,2 (mmol
−1×1×c m−1)
glukoosille: Cg/l = 0,425 ∆AG
fruktoosille: Cg/l = 0,428 ∆AF
— mittaus 365 nm:ssä: Σ= 3,4 (mmol−1×1 ×c m−1)
glukoosille: Cg/l = 0,773 ∆AG
fruktoosille: Cg/l = 0,778 ∆AF
5.3.2 Toistettavuus (r)
r = 0,056x1
5.3.3 Uusittavuus (R)
R = 0,12 + 0,076x1
x1= glukoosi- tai fruktoosipitoisuus grammoina litrassa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 64
▼B
8RYPÄLEMEHUJEN, TIIVISTETTYJEN RYPÄLEMEHUJEN,
PUHDISTETTUJEN TIIVISTETTYJEN RYPÄLEMEHUJEN JA
VIININ VÄKEVÖINNIN HAVAITSEMINEN DEUTERIUMIN YDIN-
MAGNEETTISTA RESONANSSIA SOVELTAMALLA
1 MÄÄRITELMÄ
Käymisen jälkeen rypälemehussa ollut veden ja sokerien sisältämä
deuterium jakautuu uudelleen viinissä molekyyleihin I, II, III ja IV:
CH2DC H2OH CH3CHD OH
II I
CH3CH2OD HOD
III IV IV
Väkevöinti sokeria lisäämällä (chaptalisation) ennen rypälemehun
käymistä vaikuttaa deuteriumin jakautumiseen.
Verrattaessa saman alueen luonnollisen vertailuviinin parametrien
arvoihin, väkevöinti sokerilla johtaa seuraaviin muutoksiin:
Parametrit
Viini(D/H)I(D/H)II(D/H)WQR
— Luonnollinen
— Väkevöity
— juurikassokeri
— ruokosokeri
/C148/C147/C147/C147/C149/C147/C147/C147/C150
 — maissisokeri
(D/H)I: isotooppisuhde, joka liittyy molekyyliin I
(D/H)II: isotooppisuhde, joka liittyy molekyyliin II
(D/H)WQ: veden isotooppisuhde viinissä.
R = 2(D/H)II/(D/H)Iilmaisee deuteriumin suhteellisen jakautumisen
molekyyleissä I ja II: R mitataan suoraan signaalien h-voimak-
kuudesta ja tällöin R = 3hII/hI.
(D/H)Ion tunnusomainen erityisesti sokerin yhteyttäneelle kasvilajille
ja vähemmässä määrin satopaikan maantieteelliselle sijainnille (foto-
synteesin aikana käytetyn veden laatu).
(D/H)IIkuvaa viinirypäleiden tuotantopaikan ilmasto-oloja (sade-
veden luonne ja sääolosuhteet) ja vähemmässä määrin alkuperäisen
rypälemehun sokerikonsentraatiota.
(D/H)WQkuvaa tuotantopaikan ilmasto-oloja ja alkuperäisen rypäle-
mehun sokeripitoisuutta.
2 PERIAATE
Edellä määritellyt parametrit [R, (D/H)I, (D/H)II] määritetään deuter-
iumin ydinmagneettisella resonanssilla viinistä, tai rypälemehun,
tiivistetyn rypälemehun ja puhdistetun tiivistetyn rypälemehun anne-
tuissa olosuhteissa saaduista käymistuotteista erotetusta etanolista.
Määritystä voidaan mahdollisesti täydentää määrittämällä viinistä
erotetun veden isotooppisuhde, (D/H)WQja määrittämällä 13C/12Cisotooppisuhde etanolista.
3 NÄYTTEEN VALMISTAMINEN MÄÄRITYSTÄ VARTEN
3.1 Etanolin ja veden erottaminen viinistä
Huomautus:Etanolin erottamiseen voidaan käyttää mitä tahansa menetelmää sillä
edellytyksellä, että 98-98,5 % viinin sisältämästä kokonaisalkoholista
saadaan yhteen tisleeseen, jonka alkoholipitoisuus on 92-93 massa-%
(95 til-%).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 65
▼M5
▼B
▼B
3.1.1 Laitteet ja reagenssit
— Laitteisto etanolin erottamiseksi (kuva 1), jossa on
— tehonsäätimellä varustettu sähköhaude,
— 1 litran vetoinen hioksellinen keittopullo,— Cadiot-kolonni, jossa on pyörivä läpivienti (liikkuva osa
teflonia),
— hioksellisia 125 ml:n erlenmeyerkolveja,— muovitulpallisia 125 ja 60 ml:n pulloja.
— Reagensseja veden määrittämiseen Karl Fischerin menetelmällä
(esimerkiksi Merck 9241 ja 9243).
3.1.2 Suoritus
3.1.2.1 Määritetään viinin alkoholipitoisuus (t
v) vähintään 0,05 til-%:n tark-
kuudella.
3.1.2.2 Etanolin erottaminen
Mitataan 500 ml:n homogeeninen näyte alkoholipitoisuudeltaan tv
olevaa viiniä noin 0,9 vakiopalautussuhteen omaavan tislauslaitteen
tislauskolviin. Asetetaan aiemmin taarattu tisleen keräykseen tarkoi-
tettu 125 ml:n hioksellinen erlenmeyerpullo paikoilleen. Kerätään
78,0-78,2 ºC:ssa kiehuva neste, eli noin 40-60 ml. Jos lämpötila on
yli 78,5 ºC, keskeytetään keräys viideksi minuutiksi.
Kun lämpötila on palautunut 78 ºC:seen, jatketaan tisleen keräystä
78,5 ºC:seen saakka ja suoritus toistetaan, kunnes lämpötila
keräyksen keskeyttämisen jälkeen suljetussa järjestelmässä ei enää
muutu. Täydellinen tislaus kestää noin 5 tuntia. Tällä periaatteellavoidaan kerätä 98-98,5 % viinin kokonaisalkoholista tisleeseen, jonka
alkoholipitoisuus on 92-93 massa-% (95 til-%). Jäljempänä 4
kohdassa kuvatut NMR-olosuhteet on vahvistettu tälle pitoisuudelle.
Kerätty etanolipunni taan.
Tislausjäännöksen 60 ml:n suuruinen homogeeninen näyte säilytetään
60 ml:n mittapullossa ja se edustaa viinissä olevaa vettä. Sen isotoop-
pisuhde määritetään tarvittaessa.
Huomautus:Jos käytettävissä on spektrometri, joka on varustettu 10 mm:n näyte-
putkella (katso kuva 4), 300 ml:n suuruinen homogeeninen viininäyte
on riittävä.
3.1.2.3 Uutetun al koholin alkoholipitoisuuden määrittäminen
Noin 0,5 ml:n alkoholinäytteen, jonka massa p on tarkalleen tunnettu,
vesipitoisuus, p'g, määritetään Karl Fischerin menetelmällä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 66
▼B
Kuva 1 - Etanolin tislauslaite
Etanolin alkoholipitoisuus painoprosentteina saadaan kaavasta
tD
m¼p/C0p’
p/C2100
3.2 Rypälemehujen, tiivistettyjen rypälemehujen ja puhdistettujen
tiivistettyjen rypälemehujen fermentointi
3.2.1 Laitteet ja reagenssit
— viinihappo,
—Bacto Yeast Nitrogen, Base without amino acids DIFCO,
— aktiivisia kuivahiivoja (Saccharomyces cerevisiae).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 67
▼B
Jos veden isotooppisuhde rypälemehussa on tunnettu, hiivat voidaan
aktivoida etukäteen uudelleen pienessä määrässä tislaamatonta
haaleaa vettä (1 g/50 ml), jotta isotooppisuhde pysyisi lähellä viinin
sisältämän veden isotooppisuhdetta.
Jos veden isotooppisuhde viinissä ei ole tunnettu, on suositeltavaa
siirrostaa suoraan.
Käytettävien kuivahiivojen määrä on noin 1 g eli noin 1010solua/1 l
rypälemehua.
Vetoisuudeltaan 1,5 l oleva käymisastia, joka on varustettu astian
ilmatiiviinä pitävällä osalla ja jolla alkoholihöyryt voidaan tiivistää,
sillä etanolia ei saa hävitä käymisen aikana. Sokeri on fermentoitava
etanoliksi vähintään 98 %:n saannolla.
3.2.2 Suoritus
3.2.2.1 Rypälemehut
— Tuoreet rypälemehut
Mitataan käymisastiaan 1 l rypälemehua, jonka käymiskykyisten
sokerien konsentraatio on ennalta määritetty. Lisätään 1 g etukä-
teen aktivoitua kuivahiivaa. Asetetaan ilmatiiviyden pitävä osa
paikoilleen. Annetaan käydä noin 20 ºC:n lämpötilassa, kunnes
sokerit ovat käyneet loppuun. Kun käymistuotteen alkoholipitoi-
suus on määritetty ja sokerien käymisaste alkoholiksi laskettu,
käymisliuos sentrifugoidaan ja tislataan etanolin erottamiseksi.
— Rypälemehut, joissa käyminen on estetty rikkidioksidia lisäämällä
Poistetaan rikki hieman yli 1 l:n (1,2 l) rypälemehumäärästä
kuplittamalla typpeä rypälemehun läpi kuumassa vesihauteessa
70-80 ºC:ssa palautusjäähdyttimen alla, kunnes kokonaisrikki-
dioksidipitoisuus on alle 200 mg/l. Veden haihtumisesta
aiheutuva rypälemehun väkevöityminen on estettävä käyttämällä
tehokasta jäähdytintä.
Mitataan käymisastiaan 1 l rypälemehua, josta rikki on poistettu,
ja jatketaan suoritusta samalla tavoin kuin tuoreella rypäleme-
hulla.
Huomautus:
Jos rypälemehun rikittämiseen käytetään natriummetabisulfiittia,
rypälemehuun on lisättävä ennen rikin poistamista 0,25 ml
väkevää rikkihappoa ( ρ20= 1,84 g/ml) rypälemehulitraan
käytettyä metabisulfiittigrammaa kohti.
3.2.2.2 Tiivistetyt rypälemehut
Mitataan käymisastiaan V ml tiivistettyä rypälemehua, joka sisältää
tunnetun määrän sokeria, noin 170 g. Täytetään tilavuus 1 l:ksi
(1 000 − V) ml:lla vettä, jonka isotooppisuhde on sama kuin luonnol-
lisen vertailurypälemehun sisältämän veden isotooppisuhde.
Siirrostetaan 3.2.1 kohdassa kuvatulla tavalla. Lisätään 3 g Bacto
Yeast Nitrogen Base without amino acids DIFCO . Homogenoidaan
ja jatketaan suoritusta edellä kuvatulla tavalla.
3.2.2.3 Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut
Edetään 3.2.2.2 kohdassa kuvatulla tavalla täyttämällä tilavuus 1 l:ksi
(1 000 − V) ml:lla vettä, jonka isotooppisuhde on sama kuin luonnol-
lisen vertailurypälemehun, johon on liuotettu 3 g viinihappoa,
sisältämän veden isotooppisuhde.
Huomautus:Säästetään 50 ml:n näyte rypälemehusta tairypälemehusta, josta ri kki
on poistettu, tai tiivistetystä rypälemehusta tai puhdistetusta tiiviste-
tystä rypälemehusta, jotta voidaan tarvittaessa erottaa vesi ja
määrittää sen isotooppisuhde (D/H)
WQ.
Rypälemehujen sisältämä vesi voidaan erottaa aseotrooppisella
tislauksella käyttäen tolueenia.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 68
▼B
3.3 Alkoholinäytteen valmistaminen NMR-mittausta varten
3.3.1 Reagenssit
N,N-tetrametyyliurea (TMU): käytetään TMU-vertailunäytettä, jonka
isotooppisuhde D/H on tunnettu ja tarkistettu. Tämän näytteen voi
toimittaa:
Directorate-General for Science, Research and Development
Community Bureau of References
200 rue de la Loi,B-1049 BrusselsBelgia
3.3.2 Suoritus
— Halkaisijaltaan 15 mm oleva NMR-näyteputki:
Mitataan taarattuun pulloon 7 ml:aa 3.1.2 kohdan mukaisesti
saatua alkoholia ja punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella, m
A; tämän
jälkeen otetaan 3 ml:aa sisäistä standardia (TMU) ja punnitaan
0,1 mg:n tarkkuudella, mst. Homogenoidaan seos ravistelemalla.
— Halkaisijaltaan 10 mm oleva NMR-näyteputki:
Riittävä määrä on 3,2 ml alkoholia ja 1,3 ml TMU:ta.
Spektrometrin ja käytetyn näyteyksikön mukaan (ks. 4 kohta)
lisätään riittävä määrä heksafluorobentseeniä kenttätaajuuden
stabilointiaineeksi (lock).
SpektrometriNäyteputki
10 mm 15 mm
7,05 T 150 µl 200 µl
9 , 4T 3 5µ l 5 0µ l
3.4 Vesinäytteen valmistaminen NMR-mittausta varten isotooppisuh-
teen määrittämiseksi
3.4.1 Reagenssit
N,N-tetrametyyliurea (TMU): ks. 3.3.1.
3.4.2 Suoritus
Mitataan taarattuun pulloon 3 ml 3.1.2 tai 3.2 (huomautus) kohdan
mukaista vettä; punnitaan 0,1 mg:n tarkkuudella, m'E; tämän jälkeen
lisätään 4 ml sisäistä standardia (TMU) ja punnitaan 0,1 mg:n tark-
kuudella. Homogenoidaan ravistelemalla.
Huomautus:Jos laboratoriossa on massaspektrometri isotooppisuhteen määrittämi-
seen, tämä määritys voidaan tehdä tällä laitteella NMR-spektrometrin
kuormituksen vähentämiseksi. On tarpeen kalibroida T
IV-suhde (5.2)
jokaiselle tutkitulle viinisarjalle.
4 ALKOHOLIN JA VEDEN (2) H NMR-SPEKTRIEN TULOSTA-
MINEN
Isotooppisten parametrien määrittäminen.
4.1 Laitteet
— NMR-spektrometri, joka on varustettu erityisellä ”deuterium”
näyteyksiköllä, joka on viritetty Bo-kentälle (esimerkiksi kun Bo= 7,05 T niin Vo= 46,05 MHz ja kun Bo= 9,4 T niin Vo= 61,4 MHz) tyypilliselle taajuudelle Vo, ja jossa on protonin
irtautuskanava B2ja kenttäfrekvenssisuhteen stabilointikanava
(lock) fluorin frekvenssillä. Spektristä mitattu resoluutio muunne-
taan ilman eksponenttikerrointa (toisin sanoen LB = 0) (kuva 2 b)
ja ilmoitetaan etanolin metyyli- ja metyleenisignaalien ja TMU:n
metyylisignaalin puolileveytenä, ja sen on oltava alle 0,5 Hz.
Herkkyyden, joka mitataan eksponenttikertoimella LB = 2 (kuva
2 a), on oltava vähintään 150 95 til-%:ssa (93,5 massa-%) alkoho-
lissa olevan etanolin metyylisignaalille. Näissä koeolosuhteissa
signaalin korkeusmittauksen luotettavuusväli, joka on laskettu1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 69
▼B
97,5 %:n todennäköisyydelle (yksipuolinen koe) ja 10 spektrin
toistolle, on 0,35 %.
— Automaattinen näytteenvaihtaja (mahdollisesti).— Tietokoneohjelma tulosten käsittelyyn.— Spektrometrin ominaisuuksien mukaan 15 mm:n ja 10 mm:n
näyteputkia.
4.2 Spektrometrin kalibrointi ja tarkistus
4.2.1 Asetukset
Tehdään valmistajan antamien ohjeiden mukaiset tavalliset homogee-
nisuuden ja herkkyyden asetukset.
4.2.2 Kalibroinnin tarkastaminen
Käytetään vertailuetanoleja, jotka merkitään kirjaimilla C (ruokoso-
kerietanoli), V (viinietanoli) ja B (juurikasetanoli) ja joiden
isotooppipitoisuus on erilainen, mutta tarkalleen mitattu. Näillä
tarkoitetaan C: ruoko- tai maissisokerialkoholi; V: viinialkoholi ja
B: juurikasalkoholi. Yhteisön vertailumittaustoimisto toimittaa nämä
näytteet.
Määritetään näiden alkoholien isotooppiarvot 4.3 kohdassa kuvatun
menettelyn mukaisesti ja merkitään ne C
meas,Vmeas,Bmeas(ks. 5.3).
Verrataan näitä vastaaviin vertailuarvoihin ja merkitään alaindekseillä
Cst,Bst,Vst(ks. 5.3).
Kuva 2a
Viinin sisältämän etanolin ja sisäisen standardin
(TMU: N,N-tetrametyyliurea)2H NMR-spektri1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 70
▼B
Kuva 2b
Vastaavissa olosuhteissa kuin kuva 2 a, mutta ilman eksponenttiker-
rointa (LB = 0) ajettu etanolin2H spektri.
Jokaisen spektrin keskimäärin 10 toistosta saadun toistettavuuden
keskihajonnan on oltava alle 0,01 suhteelle R ja alle 0,3 ppm (D/
H)I:lle ja (D/H)II:lle.
Eri isotooppiparametrien [R, (D/H)I, (D/H)II] keskiarvojen on oltava
vastaavan, yhteisön vertailumittaustoimiston kolmen vertailualkoholin
parametreille ilmoittaman toistettavuuden keskihajonnan rajoissa. Jos
näin ei ole, on kalibrointi tehtävä uudelleen.
4.3 NMR-spektrien määritysolosuhteet
Kaadetaan 3.3 kohdan mukaisesti valmistettu alkoholinäyte (tai 3.4
kohdan mukaisesti valmistettu vesinäyte) 15 tai 10 mm:n putkeen ja
asetetaan näyteyksikköön.
NMR-spektrien määritysolosuhteet ovat seuraavat:
— Näyteputken lämpötilan (esimerkiksi 302 K) on säilyttävä
vakiona.
— Vähintään 6,8 sekunnin keräämisaika 1 200 Hz:n spektrin levey-
dellä (16 K muisti), eli noin 20 ppm 61,4 MHz:ssä tai 27 ppm
46,1 MHz:ssä.
— Pulssi: 90º.
— Keräämisajan asetus: arvon on oltava samaa luokkaa kuin näyte-
pisteiden poimintaväli ( dwell time ).
— neliöllinen ilmaiseminen: säädetään ”offset” 01 etanolille signaa-
lien OD ja CHD välillä ja vedelle signaalien HOD ja TMU
välillä.
— Määritetään irtautus-offset 02 protonispektristä, joka on mitattu
saman putken irtautuskäämillä. Hyvä irtautus saavutetaan, kun
02 on CH3-ja CH2--ryhmien frekvenssi-intervallin keskellä.
Käytetään laajakaistaista irtautusmenetelmää.
Jokaista spektriä kohti tehdään sellainen määrä NS-summauksia, että
saadaan 4.1. kohdassa annettu signaali-kohinasuhde ja tämä NS-
summaussarja toistetaan NE = 10 kertaa. NS-arvot riippuvat käyte-
tystä spektrometristä ja näyteyksiköstä (ks. 4 kohta). Voidaan valita
esimerkiksi:
SpektrometriNäyteputki
10 mm 15 mm
7,05 T NS = 304 NS = 200
9,4 T NS = 200 NS = 1281990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 71
▼B
5 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
5.1 Etanoli
Määritetään kaikille 10 spektrille (ks. etanolin NMR-spektri, kuva
2a):
—R¼3hII
hI¼3/C2signaalin II korkeus CH 3CHD OH ðÞ
signaalin I korkeus CH 2DC H 2OH ðÞ
—D=HðÞI¼1;5866 /C2TI/C2mst
mA/C2D=HðÞst
tD
m
—D=HðÞII¼2;3799 /C2TII/C2mst
mA/C2D=HðÞst
tD
m
joissa
—TI¼signaalin I korkeus CH 2DC H 2OH ðÞ
sis¨aisen standardin TMU ðÞ signaalin korkeus
—TII¼signaalin II korkeus CH 3T CHD OH ðÞ
sis¨aisen standardin TMU ðÞ signaalin korkeus
—C H3CHDOH mstja mA, ks. 3.3.2.
—tmDse 3.1.2.3.
— (D/H)st= sisäisen standardin (TMU) isotooppisuhde, joka on
merkitty yhteisön vertailumittaustoimiston toimittamaan pulloon.
Käytettäessä piikkien korkeuksia niiden pinta-alojen asemasta, mikä
on epätarkempaa, piikin puolileveyden on oltava sama kuin pinta-
alan. Tämä antaa kohtuullisen hyvän arvion (kuva 2b).
5.2 Vesi
Määritettäessä veden isotooppisuhdetta vesi-TMU-seoksesta NMR-
menetelmällä käytetään seuraavaa suhdetta:
—D=HðÞQ
W¼0;9306 /C2TIV/C2m’st
mrsquo E/C2D=HðÞst
jossa
—TIV¼Viinist¨ a erotetun veden HOD ðÞ signaalin pinta-ala
Sis¨aisen standardin TMU ðÞ signaalin pinta-ala
—m 'stja m'Eks. 3.4.2.
— (D/H)st= sisäisen standardin (TMU) isotooppisuhde, joka on
merkitty yhteisön vertailumittaustoimiston toimittamaan pulloon.
5.3 Jokaiselle isotooppiparametrille lasketaan 10 määrityksen keskiarvo
ja luotettavuusväli.
Spektrometrin tietokone täydennettynä sopivalla lisäohjelmistolla
(esimerkiksi SNIF-NMR) antaa mahdollisuuden suorittaa nämä lasku-
toimitukset suoraan.
Huomautus:Jos spektrometrin asetusten säätämisen jälkeen vertailualkoholien
tyypillisille isotoopeille saatujen keskiarvojen (4.2.2) ja yhteisön
vertailumittaustoimiston antamien arvojen välillä on järjestelmällinen
ero keskihajonnan rajoissa, oikean arvon saamiseksi mille tahansa
näytteelle X voidaan tehdä seuraavat korjaukset.
Interpolaatio tehdään ottamalla näytteen X arvon ympärillä olevat
vertailunäytearvot.
(D/H)
IX
meson mitattu arvo ja (D/H)IX
corron korjattu arvo. Tästä saadaan:
(D/H)IX
corr= (D/H)IB
st+α[ (D/H)IX
mes− (D/H)IB
mes]
jossa
α¼D=HðÞVst
I/C2D=HðÞBst
I
D=HðÞVmes
I/C2D=HðÞBmes
I
Esimerkki:
Yhteisön vertailumittaustoimiston toimittamat ja määrittämät vertai-
lunäytteet:
(D/H)IV
st= 102,0 ppm (D/H)IB
st= 91,95 ppm1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 72
▼B
Laboratorion mittaamat vertailunäytteet:
(D/H)IV
mes= 102,8 ppm (D/H)IB
mes= 93,0 ppm
Epävarma korjaamaton näyte:(D/H)
IX
mes= 100,2 ppm
Lasketaan α= 1,0255 ja (D/H)IX
corr= 99,3 ppm
6 TULOSTEN TULKITSEMINEN
Verrataan epävarman näytteen suhteelle R saatua arvoa RXvertailu-
viineille saatuihin suhteisiin. Jos RXeroaa vertailuviineille saadusta
keskiarvosta RTenemmän kuin kaksi kertaa keskihajonta, voidaan
epäillä väärentämistä.
6.1 Juurikassokerilla, ruokosokerilla tai maissiglukoosilla väkevöinti
6.1.1 Viinit
RXon suurempikui n RT: oletetaan, että on lisätty juurikassokeria.
RXon pienempi kuin RT: oletetaan, että on lisätty ruokosokeria tai
maissisokeria.
On huomattava, että (D/H)IIXja (D/H)WQXkasvavat.
Tutkitaan (D/H)IX. Oletetaan, että
— on lisätty juurikassokeria:
epävarman näytteen (D/H)IXon enemmän kuin keskihajonnan
verran pienempi kuin (D/H)ITvertailunäytteille saatu keskiarvo.
— on lisätty ruokosokeria tai maissisokeria:
(D/H)IXon enemmän kuin keskihajonnan verran suurempi kuin
(D/H)IT.
— Väkevöinnin E laskeminen, ilmaistuna etanolin til-%:na.
— Juurikassokerin lisääminen:
Et il-% ¼tvD=HðÞT
I/C0D=HðÞX
I
D=HðÞT
I/C0D=HðÞB
I
(D/H)IB− isotooppisuhde sijaintipaikan I juurikassokerista
valmistetussa alkoholissa:
(D/H)IB= 92,5 (1).
tv= määritetyn viinin (X) alkoholipitoisuus
— Ruoko- tai maissisokerin lisääminen:
Et il-% ¼tvD=HðÞX
I/C0D=HðÞT
I
D=HðÞC
I/C0D=HðÞT
I
(D/H)IC− isotooppisuhde sijaintipaikan I ruokosokerista tai
juurikassokerista valmistetussa alkoholissa: (D/H)IC= 110,5 (1).
tv= määritetyn viinin (X) alkoholipitoisuus.
6.1.2 Rypälemehut, tiivistetyt rypälemehut ja puhdistetut tiivistetyt rypäle-
mehut
Tutkitaan rypälemehun, tiivistetyn rypälemehun ja puhdistetun tiivis-
tetyn rypälemehun käymistuotteesta (3.2) 3.1 kohdan mukaisestierotetun alkoholin isotooppiparametrien arvot noudattaen kohdan 6
”Tulosten tulkitseminen” 6.1.1 alakohdassa annettuja ohjeita ja verra-
taan niitä luonnollisten vertailurypälemehujen käymistuotteista
erotettuun alkoholiin.
Väkevyys, E til-%, ilmaisee käyneeseen tuotteeseen lisätyn alkoholin
tilavuuden. Kun tunnetaan ennen käymistä mahdollisesti tehty
laimentaminen (tiivistetyt rypälemehut ja puhdistetut tiivistetyt
rypälemehut) ja oletetaan, että 16,83 g sokeria tuottaa 1 til-% alko-
holia, voidaan laskea yhteen litraan rypälemehua, tiivistettyä
rypälemehua tai puhdistettua tiivistettyä rypälemehua lisätyn sokerin
massamäärä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 73
(1) Nämä arvot annetaan yhteisön tietopankin perustamista odotettaessa.
▼B
6.2 Juurikassokeri-, ruokosokeri- ja maissiglukoosiseoksella
väkevöinti
Isotooppisuhteet (D/H)Ija R muuttuvat vähemmän kuin tehtäessä
väkevöinti yhdellä sokerilla.
(D/H)IIkasvaa, kuten myös (D/H)WO
Nämä lisäykset voidaan varmentaa määrittämällä etanolin13C/12C
suhde massaspektrometrillä: tässä tapauksessa suhde on korkeampi.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 74
▼B
9TUHKAPITOISUUS
1 MÄÄRITELMÄ
Tuhkalla tarkoitetaan kaikkia viinin haihdutusjäännöksen hehkutta-
misen jälkeen jäljelle jääneitä tuotteita. Hehkuttaminen on tehtävä
siten, että kaikki kationit (lukuun ottamatta ammoniumia) muuttuvat
karbonaateiksi tai muiksi vedettömiksi mineraalisuoloiksi.
2 PERIAATE
Hehkutetaan viiniuutetta 500-550 ºC:een lämpötilassa, kunnes orgaa-
ninen aines on palanut täydellisesti.
3 VÄLINEISTÖ
3.1 Vesihaude, 100 ºC.
3.2 Tarkkuudeltaan 0,1 mg oleva vaaka.3.3 Sähkölevy tai infrapunahaihdutin.
3.4 Sähköuuni, jonka lämpötilaa voidaan säätää.
3.5 Eksikkaattori.3.6 Laakeapohjainen platinamalja, jonka halkaisija on 70 mm ja korkeus
25 mm.
4 SUORITUS
Pipetoidaan 20 ml viiniä taarattuun platinamaljaan (P
og). Haihdute-
taan 100 ºC:ssa vesihauteessa, kuumennetaan jäännöstä 200 ºC:n
sähkölevyllä tai infrapunahaihduttimen alla hiiltymiseen asti. Kun
höyryä ei enää synny, sijoitetaan malja sähköuuniin, jota pidetään
525 ºC ± 25 ºC:ssa. 15 minuutin kuluttua hiiltymisestä otetaan malja
uunista, lisätään 5 ml tislattua vettä. Haihdutetaan tämän jälkeen
vesihauteessa tai infrapunahaihduttimessa ja kuumennetaan uudelleen
noin 10 minuutin ajan 525 ºC:ssa.
Jos hiiltyneiden hiukkasten palaminen ei ole täydellinen, toistetaan
hiiltyneiden hiukkasten pesu, veden haihduttaminen ja hehkutta-
minen.
Kun kyseessä ovat hyvin sokeripitoiset viinit, on tarkoituksenmu-
kaista lisätä uutteeseen muutama tippa puhdasta kasvisöljyä ennen
ensimmäistä hehkuttamista sisällön liiallisen kuohumisen estämiseksi.
Eksikkaattorissa jäähdyttämisen jälkeen malja punnitaan, P1g.
Näytettä (20 ml) vastaavan tuhkan paino on p = (P1−Po)g .
5 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Laskentamenetelmä
Tuhkan paino ilmoitettuna grammoina litrassa kahdella desimaalilla
on: P = 50 × p1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 75
▼B
10TUHKAN EMÄKSISYYS
1 MÄÄRITELMÄ
Tuhkan emäksisyydellä tarkoitetaan ammoniumia lukuun ottamatta
sellaisten kationien summaa, jotka ovat liittyneet viinin orgaanisiin
happoihin.
2 PERIAATE
Tuhka liuotetaan tunnettuun määrään kuumaa happoliuosta; ylijäämä
määritetään titraamalla käyttäen metyylioranssia indikaattorina.
3 REAGENSSIT JA LAITTEET
3.1 0,05 M rikkihappoliuos (H2SO4)
3.2 0,1 M natriumhydroksidiliuos (NaOH)
3.3 Metyylioranssiliuos, 0,1 g metyylioranssia/100 ml tislattua vettä3.4 Vesihaude, 100 ºC.
4 SUORITUS
Lisätään platinamaljaan, joka sisältää 20 ml:sta viiniä saadun tuhkan,
10 ml 0,05 M rikkihappoliuosta (3.1); asetetaan 100 ºC:seen vesihau-
teeseen noin 15 minuutiksi murskaten jäännös lasipuikolla
liukenemisen edistämiseksi. Tämän jälkeen lisätään kaksi tippaa
metyylioranssiliuosta ja titrataan rikkihappoylijäämää 0,1 M natrium-
hydroksidiliuoksella (3.2), kunnes indikaattorin väri muuttuu
keltaiseksi.
5 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Laskentamenetelmä
Tuhkan emäksisyys ilmoitettuna milliekvivalentteina litrassa yhdellä
desimaalilla on:
A = 5 (10 − n)
n = titrauksessa kuluneen 0,1 M natriumhydroksidin määrä millili-
troina.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 76
▼B
11KLORIDIT
1 PERIAATE
Kloridit määritetään suoraan viinistä potentiometrisesti käyttäen Ag/
AgCl-elektrodia.
2 VÄLINEISTÖ
2.1 Millivolttiasteikolla varustettu pH-mittari, jonka asteikko on jaettu
vähintään 2 mV:n välein.
2.2 Magneettisekoittaja.
2.3 Ag/AgCl-elektrodi, jossa elektrolyyttinä on kyllästetty kaliumnitraat-
tiliuos.
2.4 Mikrobyretti, jonka asteikko on jaettu 1/100 ml:n välein.2.5 Sekuntikello.
3 REAGENSSIT
3.1 Kloridistandardiliuos: liuotetaan tislattuun veteen 2,1027 g kaliumk-
loridia, KCl (max. 0,005 % Br), jota on kuivattu ennen käyttöä
eksikkaattorissa usean päivän ajan; täytetään yhdeksi litraksi; 1 ml
tätä liuosta sisältää 1 mg Cl:a.
3.2 Hopeanitraattititrausliuos: 4,7912 g analyysilaatua olevaa hopeani-
traattia, AgNO
3, liuotetaan 10 % (v/v) alkoholiliuokseen ja täytetään
yhdeksi litraksi; 1 ml tätä liuosta vastaa 1 mg Cl:a.
3.3 Typpihappo, puhtaus vähintään 65 % ( ρ20= 1,40 g/ml).
4 SUORITUS
4.1 Mitataan 5,0 ml kloridistandardiliuosta 150 ml:n vetoiseen magneet-
tisekoittajaan asetettuun lieriönmuotoiseen astiaan, laimennetaan noin
100 ml:ksi tislatulla vedellä ja hapotetaan 1,0 ml:lla vähintään 65 %
typpihappoa. Kun elektrodi on upotettu liuokseen, titrataan lisäämällä
mikrobyretillä hopeanitraattititrausliuosta sekoittaen kohtuullisesti.
Aloitetaan lisäämällä 1,00 ml neljää ensimmäistä ml:aa kohti ja
luetaan vastaavat millivolttiarvot. Tämän jälkeen lisätään 2 ml
0,20 ml:n erissä. Jatketaan lisäämistä 1 ml:n erissä, kunnes on lisätty
yhteensä 10 ml. Jokaisen lisäyksen jälkeen odotetaan noin 30
sekuntia ennen vastaavien millivolttien lukemista. Siirretään saadut
arvot millimetripaperille siten, että ne vastaavat titrausliuoksen milli-
litroja ja määritetään ekvivalenttipisteen potentiaali saadun käyrän
yksittäisen pisteen perusteella.
4.2 150 ml:n lieriömäiseen astiaan mitataan 5 ml kloridistandardiliuosta
sekä 95 ml tislattua vettä ja 1 ml vähintään 65 % typpihappoa.
Upotetaan elektrodi liuokseen ja titrataan sekoittaen, kunnes saavute-
taan ekvivalenttipisteen potentiaali. Tämä määritys toistetaan, kunnes
saavutetaan tulosten hyvä yhdenmukaisuus. Tämä tarkistus on tehtävä
ennen kloridien mittaussarjan tekemistä näytteestä.
4.3 Mitataan 50 ml määritettävää viiniä 150 ml:n lieriömäiseen astiaan.
Lisätään 50 ml tislattua vettä ja 1 ml vähintään 65 % typpihappoa
ja titrataan 4.2 kohdan mukaisesti.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 77
▼B
5 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
5.1 Laskutoimitukset
Jos n edustaa hopeanitraattititrausliuoksen millilitramäärää, tutkitun
liuoksen kloriittipitoisuus on:
20 × n ilmoitettuna milligrammoina Cl:a litrassa,
0,5633 × n ilmoitettuna milliekvivalentteina litrassa;32,9 × n ilmoitettuna milligrammoina natriumkloridia litrassa.
5.2 Toistettavuus (r)
r = 1,2 mg Cl:a litrassa
r = 0,03 mek/lr = 2,0 mg NaCl/l.
5.3 Uusittavuus (R)
R = 4,1 mg Cl:a litrassa
R = 0,12 mek/lR = 6,8 mg NaCl/l.
6 Huomautus:
Erittäin tarkat määritykset
Käytetään hopeanitraattiliuoksella koeliuoksen määrityksessä saatua
titrauskäyrää.
a) Mitataan 50 ml määritettävää viiniä 150 ml:n lieriömäiseen
astiaan. Lisätään 50 ml tislattua vettä ja 1 ml vähintään 65 %
typpihappoa. Titrataan hopeanitraattiliuoksella 0,5 ml:n lisäyksin
ja luetaan vastaavat millivolttipotentiaalit. Johdetaan tästä ensim-
mäisestä titrauksesta tarvittavan hopeanitraattiliuoksen
likimääräinen tilavuus.
b) Toistetaan määritys samoissa koeolosuhteissa. Aluksi lisätään
titrausliuosta 0,5 ml kerrallaan, kunnes lisätty tilavuus on 1,5-
2 ml pienempi kuin a alakohdassa määritetty tilavuus. Tämän
jälkeen lisätään 0,2 ml kerrallaan; jatketaan likimääräisesti
määritetyn ekvivalenttipisteen jälkeen liuoksen lisäämistä symme-
trisesti, aluksi 0,2 ml:n ja sitten 0,5 ml:n erissä.
Määrityksen päätepiste ja käytetyn hopeanitraattiliuoksen tarkka tila-
vuus saadaan:
— joko piirtämällä käyrä ja määrittämällä ekvivalenttipiste,
— taiseuraavalla yhtälöllä:
V¼V’þ∆Vi
∆∆E1
∆∆E1þ∆∆E2
jossa
V = titrausliuoksen tilavuus ekvivalenttipisteessä,
V' = titrausliuoksen tilavuus ennen suurinta potentiaalin
muutosta,
∆Vi= lisätyn titrausliuoserän vakiotilavuus, 0,2 ml,
∆∆E1= toinen potentiaaliero ennen potentiaalin suurinta
muutosta,
∆∆E2= toinen potentiaaliero potentiaalin suurimman
muutoksen jälkeen.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 78
▼B
Esimerkki:
AgNO3titrausliuoksen tila-
vuusE potentiaali
mVErotus
∆EToinen
erotus
∆∆E
0 204
4
0,2 208 0
4
0,4 212 2
6
0,6 218 0
6
0,8 224 0
6
1,0 230 2
8
1,2 238 4
12
1,4 250 10
22
1,6 272 22
44
1,8 316 10
34
2,0 350 8
26
2,2 376 6
20
2,4 396
Tässä esimerkissä titrauksen päätepiste on 1,6 ja 1,8 ml:n välillä:
tällä välillä esiintyy potentiaalin suurin muutos ( ∆E = 44 mV).
Käytetyn hopeanitraattititrausliuoksen tilavuus kloridin määrittämi-
seksinäytteestä on:
V¼1;6þ0;222
22þ10¼1;74 ml :1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 79
▼B
12SULFAATIT
1 PERIAATE1.1 Vertailumenetelmä
Saostetaan bariumsulfaattina ja punnitaan. Samoissa koeolosuhteissa
saostunut bariumfosfaatti poistetaan pesemällä sakka kloorivetyha-
polla.
Jos rypälemehu tai viini sisältää runsaasti rikkidioksidia, on suositel-
tavaa poistaa rikki ilmatiiviissä astiassa keittämällä.
1.2 Nopea koemenetelmä
Viinit luokitellaan moniin laatuluokkiin käyttäen ns. rajamenetelmää,
joka perustuu bariumsulfaatin saostamiseen bariumionititrausliuok-
sella.
2 VERTAILUMENETELMÄ2.1 Reagenssit
2.1.1 2 M kloorivetyhappoliuos.2.1.2 Bariumkloridiliuos, BaCl
2,2H2O, 200 g/l.
2.2 Suoritus
2.2.1 Yleinen suoritus
Mitataan 50 ml:n sentrifugiputkeen 40 ml määritettävää näytettä;
lisätään 2 ml 2 M kloorivetyhappoa ja 2 ml 200 g/l bariumkloridi-liuosta; sekoitetaan lasipuikolla; huuhdotaan lasipuikko pienellä
määrällä tislattua vettä ja annetaan seistä viisi minuuttia. Sentrifugoi-
daan 5 minuutin ajan ja dekantoidaan supernatantti varovasti.
Tämän jälkeen pestään bariumsulfaattisakka seuraavasti: lisätään
10 ml 2 M kloorivetyhappoa, suspendoidaan sakka ja sentrifugoidaan
5 minuutin ajan. Erotetaan supernatantti varovasti. Toistetaan sakan
pesu kaksi kertaa samoissa koeolosuhteissa aina 15 ml:lla tislattua
vettä.
Siirretään sakka kvantitatiivisesti tislatulla vedellä huuhtoen taarat-
tuun platinamaljaan ja haihdutetaan kuivaksi 100 ºC:ssa
vesihauteessa. Kuivattu sakka hehkutetaan nopeasti liekillä useita
kertoja, kunnes saadaan valkea jäännös. Annetaan jäähtyä eksikkaat-
torissa ja punnitaan.
Saadun bariumsulfaatin massa milligrammoina on m.
2.2.2 Erityinen suoritus: rikitetyt rypälemehut ja viinit, joiden rikkidioksidi-
pitoisuus on korkea
Aluksi poistetaan rikkidioksidi.Mitataan 500 ml:n erlenmeyerkolviin, joka on varustettu tiputussup-
pilolla ja päästöputkella, 25 ml vettä ja 1 ml puhdasta
kloorivetyhappoa ( ρ
20= 1,15-1,18 g/ml). Kiehautetaan tämä liuos
ilman poistamiseksi ja lisätään 100 ml viiniä tiputussuppilon kautta
koko ajan kiehuttaen. Annetaan kiehua, kunnes kolvin sisältämä
nestetilavuus on vähentynyt 75 ml:aan ja siirretään kvantitatiivisesti
jäähdyttämisen jälkeen 100 ml:n mittapulloon. Täytetään merkkiin
vedellä. Määritetään sulfaattipitoisuus 40 ml:n näytteestä 2.2.1
kohdan mukaisesti.
2.3 Tulosten ilmoittaminen
2.3.1 Laskutoimitukset
Sulfaattipitoisuus, ilmoitettuna milligrammoina kaliumsulfaattia,
K2SO4, litrassa, on:
18,67 × mRypälemehun tai viinin sulfaattipitoisuus ilmoitetaan kokonaislukuna
milligrammoina kaliumsulfaattia litrassa.
2.3.2 Toistettavuus
1 000 mg/l asti: r = 27 mg/l1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 80
▼B
noin 1 500 mg/l: r = 41 mg/l
2.3.3 Uusittavuus
1 000 mg/l asti: R = 51 mg/lnoin 1 500 mg/l: R = 81 mg/l.
3 NOPEA KOEMENETELMÄ
3.1 Reagenssit
3.1.1 Bariumkloridititrausliuos
Liuotetaan 2,804 g bariumkloridia, BaCl
2,2H2O, ja 10 ml kloorivety-
happoa ( ρ20= 1,15-1,18 g/ml) sellaiseen vesimäärään, että saadaan
1 l liuosta. 1 ml tätä liuosta saostaa 2 mg kaliumsulfaattia vastaavan
määrän sulfaatti-ioneja.
3.1.2 Rikkihappo ( ρ20= 1,84 g/ml) suhteessa 1/10 (m/v) laimennettu
liuos.
3.2 Suoritus
Mitataan kolmeen koeputkeen 10 ml rypälemehua tai viiniä; lisätään
koeputkeen n:o 1 3,5 ml, koeputkeen n:o 2 5 ml ja koeputkeen n:o 3
10 ml bariumkloridiliuosta. Ravistellaan ja kuumennetaan kiehumis-
pisteeseen; annetaan seisoa 1-2 tuntia. Jokaisen koeputken sisältämä
neste dekantoidaan, suodatetaan ja jaetaan kahteen osaan. Toiseen
osaan lisätään muutama tippa laimennettua rikkihappoliuosta ja
toiseen lisätään muutama tippa bariumkloridiliuosta. Tutkitaan kaikki
koeputket ja pannaan merkille, onko liuos kirkasta vai sameaa.
Tämän tulkitseminen esitetään seuraavassa taulukossa.
Viini BariumkloridiSuodatettu viini +
laimennettu rikki-
happobariumkloridi-
liuos
Koe 1(ml) (ml) samea kirkas
10 3,5(alle 0,7 g K2SO4/l)
samea kirkas
(yli0,7 g K2SO4/l)
Koe 2 10 5samea kirkas
(alle 1 g K2SO4/l)
samea kirkas
(yli1 g K2SO4/l)
Koe 3 10 10samea kirkas
(alle 2 g K2SO4/l)
samea kirkas
(yli2 g K2SO4/l)1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 81
▼B
13.KOKONAISHAPPOPITOISUUS
1 MÄÄRITELMÄ
Kokonaishappopitoisuudella tarkoitetaan titrattavien happojen
yhteismäärää, kun pH säädetään arvoon 7 emäksisellä titrausliuok-
sella.
Hiilidioksidi ei kuulu kokonaishappopitoisuuteen.
2 PERIAATE
Potentiometrinen titraus tai titraus indikaattori bromtymolisininen ja
vertaaminen päätepisteen värimalliin.
3 REAGENSSIT
3.1 Standardiliuos pH 7,0:
Monokaliumfosfaatti KH2PO4: 107,3 g
1 M natriumhydroksidiliuos (NaOH): 500 mlTäytetään vedellä 1 000 ml:ksi.Voidaan käyttää myös kaupallisesti saatavissa olevia vertailupuskuri-
liuoksia.
3.2 0,1 M natriumhydroksidiliuos (NaOH).3.3 4 g/ml bromtymolisininen indikaattoriliuos.
Bromtymolisininen (C
27H28Br2O4S ) …........... 4 g
Neutraalietanoli96 ti l-% …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 200 ml
Liuotetaan ja lisätään:Vesi, CO
2-vapaa …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 200 ml
1 M natriumhydroksidiliuosta, kunnes väri
muuttuu sinivihreäksi (pH 7) … . . . . . . . . . . . . . . . . . 7,5 ml
täytetään vedellä … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 000 ml:ksi
4 VÄLINEISTÖ
4.1 Vesivakuumipumppu.
4.2 500 ml:n vakuumipullo.4.3 Potentiometri, jonka asteikko on jaettu pH-yksiköihin ja elektrodeja.
Lasielektrodia on säilytettävä tislatussa vedessä. Kalomeli/kyllästetty
kaliumkloridi-elektrodia on säilytettävä kyllästetyssä kaliumkloridi-
liuoksessa. Useimmiten käytetään yhdistettyä elektrodia, jota
säilytetään tislatussa vedessä.
4.4 Vetoisuudeltaan 50 ml olevia mittalaseja (viinit) ja vetoisuudeltaan
100 ml olevia mittalaseja (puhdistetut tiivistetyt rypälemehut).
5 SUORITUS
5.1 Näytteen valmistaminen
5.1.1 Viinit
Poistetaan hiilidioksidi. Mitataan noin 50 ml viiniä vakuumipulloon,
ravistellaan ja samanaikaisesti poistetaan ilma käyttäen vesivakuumi-
pumppua. Ravistelun on kestettävä 1-2 minuuttia.
5.1.2 Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut
Mitataan tarkalleen 200 g puhdistettua tiivistettyä rypälemehua
500 ml:n mittapulloon. Täytetään merkkiin vedellä. Homogenoidaan.
5.2 Potentiometrinen titraus
5.2.1 pH-mittarin kalibrointi
Valmistajan ohjeita noudattaen kalibroidaan pH-mittari 20 ºC:ssa
puskuriliuoksella, jonka pH-arvo 20 ºC:ssa on 7.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 82
▼B
5.2.2 Mittausmenetelmä
Mitataan mittalasiin (4.4) 5.1 kohdan mukaisesti valmistettua näytettä
10 ml, kun kyseessä on viini, ja 50 ml, kun kyseessä on puhdistettu
tiivistetty rypälemehu. Lisätään noin 10 ml tislattua vettä ja byretillä
0,1 M natriumhydroksidiliuosta (3.2), kunnes pH-arvo 20 ºC:ssa on 7.
Emäksisen nesteen lisääminen on tehtävä hitaasti ja liuosta on sekoi-
tettava koko ajan. Lisätyn 0,1 M NaOH:n millilitramäärä on n.
5.3 Indikaattorititraus (bromtymolisininen)
5.3.1 Esikoe: värimallin määrittäminen
Mitataan mittalasiin (4.4) 25 ml keitettyä tislattua vettä, 1 ml brom-
tymolisinisen liuosta (3.3) ja 10 ml viiniä tai 50 ml puhdistettua
tiivistettyä rypälemehua, joka on valmistettu 5.1 kohdan mukaisesti.
Lisätään 0,1 M natriumhydroksidiliuosta (3.2), kunnes väri muuttuu
sinivihreäksi. Lisätään 5 ml puskuriliuosta (3.1), jonka pH-arvo on 7.
5.3.2 Määritys
Mitataan mittalasiin (4.4) 30 ml keitettyä tislattua vettä, 1 ml brom-
tymolisinisen liuosta (3.3) ja 10 ml viiniä tai 50 ml puhdistettua
tiivistettyä rypälemehua, joka on valmistettu 5.1 kohdan mukaisesti.
Lisätään 0,1 M natriumhydroksidiliuosta (3.2), kunnes värinmuutos
on samanlainen kuin esikokeessa (5.3.1) saatu väri. Lisätyn 0,1 M
natriumhydroksidin millilitramäärä on n.
6 TULOSTEN ILMOITTAMINEN6.1 Laskentamenetelmä
6.1.1 Viinit
Kokonaishappopitoisuus ilmoitettuna milliekvivalentteina litrassa on:A = 10 n
Tulos annetaan yhdellä desimaalilla.
Kokonaishappopitoisuus ilmoitettuna grammoina viinihappoa litrassa
on:
A' = 0,075 × ATulos annetaan yhdellä desimaalilla.
6.1.2 Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut
— Kokonaishappopitoisuus ilmoitettuna milliekvivalentteina kilo-
grammassa puhdistettua tiivistettyä rypälemehua: a = 5 × n
— Kokonaishappopitoisuus ilmoitettuna milliekvivalentteina kilo-
grammassa kokonaissokereita:
A¼
500/C2n
P
P = kokonaissokerien pitoisuus %:eina (m/m).
Se ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.
6.2 Titrauksen toistettavuus (r) indikaattorilla
r = 0,9 mek/l
r = 0,07 g viinihappoa/l
valko-, rosee- ja punaviineille.
6.3 Titrauksen (5.3) uusittavuus (R) indikaattorilla
Valko- ja roseeviineille:R = 3,6 mek/l
R = 0,3 g viinihappoa/l.
Punaviineille:
R = 5,1 mek/l
R = 0,4 g viinihappoa/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 83
▼B
14HAIHTUVAT HAPOT
1 MÄÄRITELMÄ
Haihtuvat hapot muodostuvat etikkahappoihin kuuluvista hapoista,
joita on viinissä sekä vapaina happoina että suoloina.
2 MENETELMÄ
Erotetaan haihtuvat hapot viinistä vesihöyrytislauksella ja titrataan
tisleestä.
Viinistä poistetaan aluksi hiilidioksidi.Näissä koeolosuhteissa tislattava vapaa rikkidioksidi ja sitoutunut
rikkidioksidi on vähennettävä tisleen happopitoisuudesta.
Mahdollisesti viiniin lisätyn sorbiinihapon pitoisuus on myös vähen-
nettävä.
Huomautus:Joissain maissa viinit stabiloidaan ennen määritystä salisyylihapolla,
jota löytyy tisleestä. Se on määritettävä ja vähennettävä happopitoi-
suudesta. Määritysmenetelmä selostetaan tämän luvun 7 kohdassa.
3 REAGENSSIT
3.1 Kiteinen viinihappo (C
4H6O6).
3.2 0,1 M natriumhydroksidiliuos (NaOH).3.3 1 % fenoliftaleiiniliuos 96 til-% neutraalissa alkoholissa.3.4 Kloorivetyhappo ( ρ
20= 1,18-1,19 g/ml) laimennettu suhteessa 1/4
(v/v).
3.5 0,005 M jodiliuos (I2).
3.6 Kiteinen kaliumjodidi (KI).3.7 5 g/l tärkkelysliuos:
Sekoitetaan 5 g tärkkelystä noin 500 ml:aan vettä. Kuumennetaan
kiehuvaksi koko ajan sekoittaen ja annetaan kiehua noin 10
minuuttia; lisätään 200 g natriumkloridia. Täytetään 1 litraksi jäähty-
misen jälkeen.
3.8 Kyllästetty natriumboraattiliuos (Na
2B4O7,10H2O), elinoi n 55 g/l
20 ºC:ssa.
4 VÄLINEISTÖ
4.1 Vesihöyrytislauslaitteisto, johon kuuluu:
1) vesihöyrykehitin: vesihöyryn on oltava hiilidioksidivapaata,
2) tislauskolvi, jossa on putki vesihöyryn johtamiseksi,
3) tislauskolonni,4) jäähdytin.
Tämän laitteen on läpäistävä seuraavat kolme koetta:
a) Mitataan tislauskolviin 20 ml keitettyä vettä; kerätään 250 ml
tislettä ja lisätään 0,1 ml 0,1 M natriumhydroksidiliuosta (3.2)
ja 2 tippaa fenoliftaleiiniliuosta (3.3); vaaleanpunaisen värin on
pysyttävä muuttumattomana vähintään 10 sekunnin ajan (hiili-
dioksidista vapaa vesihöyry).
b) Mitataan tislauskolviin 20 ml 0,1 M etikkahappoliuosta.
Kerätään 250 ml tislettä. Titrataan 0,1 M natriumhydroksidi-
liuoksella (3.2). Käytetyn tilavuuden on oltava vähintään
19,9 ml. (Tislattu etikkahappo ≥99,5 %).
c) Mitataan tislauskolviin 20 ml 1 M maitohappoliuosta. Kerätään
250 ml tislettä ja titrataan happo 0,1 M natriumhydroksidi-
liuoksella (3.2).
Kulutettu tilavuus saa olla enintään 1,0 ml (tislattu maitohappo
≤0,5 %).
Mikä tahansa laite tai menetelmä, joka läpäisee nämä kokeet,
katsotaan viralliseksi kansainväliseksi laitteeksi tai mene-
telmäksi.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 84
▼B
4.2 Vesivakuumipumppu.
4.3 Vakuumipullo.
5 SUORITUS
5.1 Näytteen valmistaminen hiilidioksidin poistaminen.
Mitataan noin 50 ml viiniä vakuumipulloon; koko ajan ravistellen
imetään ilma pullosta vesivakuumipumpulla. Ravistelun on kestettävä
1-2 minuuttia.
5.2 Vesihöyrytislaus
Mitataan tislauskolviin 20 ml viiniä, josta hiilidioksidi on poistettu
5.1 kohdan mukaisesti. Lisätään noin 0,5 g viinihappoa (3.1).
Kerätään vähintään 250 ml tislettä.
5.3 Titraus
Titrataan 0,1 M natriumhydroksidiliuoksella (3.2) käyttäen indikaat-
torina kahta tippaa fenoliftaleiiniliuosta (3.3), käytetty tilavuus on n
ml.
Lisätään 4 tippaa suhteessa 1/4 laimennettua kloorivetyhappoa (3.4),
2 ml tärkkelysliuosta (3.7) ja muutamia kaliumjodikiteitä (3.6). Titra-
taan vapaa rikkidioksidi 0,005 M jodiliuoksella (3.5). Käytetty
tilavuus on n' ml.
Lisätään kyllästettyä natriumboraattiliuosta (3.8), kunnes vaaleanpu-
nainen väri ilmestyy uudelleen. Titrataan sitoutunut rikkidioksidi
0,005 M jodiliuoksella (3.5). Käytetty tilavuus on n” ml.
6 TULOSTEN ILMOITTAMINEN6.1 Laskentamenetelmä
Haihtuvat hapot ilmoitettuna milliekvivalentteina litrassa yhdellä
desimaalilla ovat:
A = 5 (n − 0,1 n' − 0,05 n”)Haihtuvat hapot ilmoitettuna grammoina etikkahappoa litrassa
kahdella desimaalilla ovat:
0,300 (n − 0,1 n' − 0,05 n”)
6.2 Toistettavuus (r)
r = 0,7 mek/l
r = 0,04 etikkahappoa g/l.
6.3 Uusittavuus (R)
R = 1,3 mek/l
R = 0,08 etikkahappoa g/l.
6.4 Viini, johon on lisätty sorbiinihappoa
Koska 250 ml:n tisleeseen saadaan vesihöyrytislauksella 96 % sorbii-
nihaposta, se on vähennettävä haihtuvista hapoista. Tiedetään, että
100 mg sorbiinihappoa vastaa 0,89 milliekvivalenttia, tai 0,053 g
etikkahappoa, ja tunnetaan sorbiinihappopitoisuus, joka on määritetty
muilla menetelmillä.
7 SALISYYLIHAPON MÄÄRITTÄMINEN HAIHTUVIA HAPPOJA
SISÄLTÄVÄSTÄ TISLEESTÄ
7.1 Periaate
Haihtuvien happojen määrittämisen ja rikkidioksidin suhteen tehdyn
korjauksen jälkeen, salisyylihappo osoitetaan happamaksi tehdystä
liuoksesta rauta(III)suolalla, joka antaa violetin värin.
Haihtuvia happoja sisältävään tisleeseen tislautuva salisyylihappo
määritetään toisesta tisleestä, jonka tilavuus on sama kuin tisleen,
josta haihtuvat hapot on määritetty. Salisyylihappo määritetään tästä1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 85
▼B
tisleestä kolorimetrisellä vertailumenetelmällä. Se on vähennettävä
haihtuvat hapot sisältävän tisleen happopitoisuudesta.
7.2 Reagenssit
7.2.1 Kloorivetyhappo (HCl) ( ρ20= 1,18-1,19 g/ml).
7.2.2 0,1 M natriumtiosulfaatti (Na2S2O3,5 H2O).
7.2.3 10 % (m/v) rauta(III)ammoniumsulfaattiliuos [Fe2(SO4)3.(NH4)2SO4× 24H2O]
7.2.4 0,01 M natriumsalisylaattiliuos. Liuos sisältää 1,60 g/l natriumsalisy-
laattia (NaC7H5O3).
7.3 Suoritus
7.3.1 Salisyylihapon tunnistaminen haihtuvia happoja sisältävästä tisleestä
Välittömästi haihtuvien happojen määrittämisen ja vapaan ja sitou-
tuneen rikkidioksidin suhteen tehdyn korjauksen jälkeen lisätään
pulloon 0,5 ml kloorivetyhappoa (7.2.1), 3 ml 0,1 M natriumtiosul-
faattiliuosta (7.2.2) ja 1 ml rauta(III)ammoniumsulfaattiliuosta
(7.2.3).
Jos salisyylihappoa esiintyy, ilmaantuu violetti väri.
7.3.2 Salisyylihapon määrittäminen
Tehdään mainittuun keräyspulloon merkki tisleen tilavuuden
kohdalle. Tyhjennetään ja huuhdotaan pullo.
Otetaan viinistä uusi 20 ml:n näyte, joka tislataan vesihöyrytislauk-
sella ja kerätään tislettä keräyspullossa olevaan merkkiin asti.
Lisätään 0,3 ml puhdasta kloorivetyhappoa (7.2.1) ja 1 ml
rauta(III)ammoniumsulfaattiliuosta (7.2.3). Pullon sisältö värjäytyy
violetiksi, jos salisyylihappoa esiintyy.
Kaadetaan samanlaiseen pulloon tislattua vettä edellisessä pullossa
olevan tisleen tasolle. Lisätään 0,3 ml puhdasta kloorivetyhappoa
(7.2.1) ja 1 ml rauta(III)ammoniumsulfaattiliuosta (7.2.3). Lisätään
byretillä 0,01 M natriumsalisylaattiliuosta (7.2.4), kunnes saadaan
saman intensiteetin omaava violetti väri kuin viinitisleen sisältämässä
pullossa.
Käytetty millilitramäärä on n' ”.
7.4 Haihtuvien happojen pitoisuuden korjaaminen
Vähennetään tilavuus 0,1 × n' ” 0,1 M natriumhydroksidiliuoksen n
ml tilavuudesta, joka kului, kun haihtuvat hapot titrattiin tisleestä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 86
▼B
15.KIINTEÄT HAPOT
1 PERIAATE
Kiinteät hapot määritetään kokonaishappojen pitoisuuden ja haihtu-
vien happojen pitoisuuden erotuksesta.
2 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Kiinteät hapot ilmoitetaan:
— milliekvivalentteina litrassa,
— grammoina viinihappoa litrassa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 87
▼B
16.VIINIHAPPO
1 PERIAATE1.1 Vertailumenetelmä
Viinihappo saostetaan kalsiumtartraattina ja määritetään gravimetri-
sesti. Tätä määritystä voidaan täydentää volumetrisellä
vertailumenetelmällä. Saostamisolosuhteet: pH, käytetty kokonaistila-
vuus, saostamisioneiden konsentraatio ovat sellaisia, että raseemisenkalsiumtartraatin saostuminen on täydellinen, kun taas kalsiumD(−
)tartraattipysyy li uoksessa.
Kun viiniin on lisätty mesoviinihappoa, joka aiheuttaa kalsiumtar-
traatin epätäydellisen saostumisen, se on hydrolysoitava ennen
määritystä.
1.2 Tavanomainen menetelmä
Anioninvaihtokolonnissa erotettu viinihappo määritetään eluaatista
kolorimetrisesti mittaamalla vanadiinihapolla saatu punainen väri.
Tämä eluaatti sisältää myös maito- ja omenahappoja, jotka eivät
häiritse määritystä.
2 VERTAILUMENETELMÄ2.1 Gravimetrinen menetelmä
2.1.1 Reagenssit
2.1.1.1 Kalsiumasetaattiliuos, joka sisältää kalsiumia 10 g/l:
Kalsiumkarbonaatti: CaCO
3… ......................... 2 5 g
Etikkahappo (CH3COOH) ( ρ20= 1,05 g/ml) …. . . . . . . . . 40 ml
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 l:ksi
2.1.1.2 Kiteytetty kalsiumtartraatti: CaC4O6H4.4H2O:
itataan 400 ml:n dekantterilasiin 20 ml L(+)viinihappoliuosta (5 g/l),
20 ml ammoniumD(−)tartraattiliuosta (6,126 g/l) ja 6 ml kalsiumase-
taattiliuosta, joka sisältää kalsiumia 10 g/l (2.1.1.1).
Annetaan saostua kahden tunnin ajan. Kootaan sakka huokoisuudel-
taan 4 olevaan lasisintteriin ja pestään se kolmeen kertaan noin
30 ml:lla tislattua vettä. Kuivataan lämpökaapissa 70 ºC:n lämpöti-
lassa, kunnes paino pysyy vakiona. Käyttäen mainittuja
reagenssimääriä saadaan noin 340 mg kiteistä raseemista kalsiumtar-
traattia.
Säilytetään tulpalla suljetussa pullossa.
2.1.1.3 Saostusliuos (pH 4,75):
— D(−)viinihappo … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 122 mg
— 25 % (v/v) ammoniumhydroksidiliuos ( ρ20= 0,97 g/ml) …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 0,3 ml
— Kalsiumasetaattiliuos, joka sisältää 10 g
kalsiumia litrassa … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8,8 ml
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 000 ml:ksi
Liuotetaan D(−)viinihappo ja lisätään ammoniumhydroksidi;
säädetään tilavuus noin 900 ml:ksi; lisätään 8,8 ml kalsiumasetaatti-
liuosta (2.1.1.1) ja sekoittamisen jälkeen säädetään pH etikkahapolla
arvoon 4,75. Täytetään yhdeksi litraksi.
Koska raseemista kalsiumtartraattia liukenee niukasti tähän liuokseen,
siihen on lisättävä 5 mg raseemista kalsiumtartraattia litrassa, ravis-
tellaan 12 tunnin ajan ja suodatetaan.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 88
▼B
2.1.2 Suoritus
2.1.2.1 Viinit, joihin ei ole lisätty mesoviinihappoa
Mitataan 600 ml:n dekantterilasiin 500 ml saostusliuosta ja 10 ml
viiniä. Sekoitetaan ja aloitetaan saostaminen hieromalla lasin pintaa
lasipuikolla. Annetaan saostua 12 tunnin ajan (yön yli).
Suodatetaan liuos ja sakka puhtaan vakuumipullon päälle asetetun
taaratun huokoisuudeltaan 4 olevan lasisintterin läpi. Huuhdotaan
saostusastia suodoksella sen varmistamiseksi, että koko sakka on
saatu kerätyksi.
Kuivataan lämpökaapissa 70 ºC:n lämpötilassa, kunnes paino pysyy
vakiona. Punnitaan: p on kiteytyneen, neljä vesimolekyyliä sisältävän
kalsiumtartraatin CaC4O6H4paino.
2.1.2.2 Viinit, joihin on lisätty mesoviiniha ppoa
Määritettäessä viinejä, joihin on lisätty mesoviinihappoa tai joihin
epäillään lisätyn mesoviinihappoa, tämä happo hydrolysoidaan seur-
aavissa olosuhteissa.
Mitataan 50 ml:n keittopulloon 10 ml viiniä ja 0,4 ml puhdasta etik-
kahappoa (CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml). Yhdistetään pystyjäähdytin
pulloon ja kuumennetaan kiehuvaksi 30 minuutissa. Jäähtymisen
jälkeen siirretään neste 600 ml:n dekantterilasiin; huuhdotaan pullo
2 kertaa 5 ml:lla vettä ja jatketaan suoritusta edellä kuvatulla tavalla.
Mesoviinihappo lasketaan viinihapoksi.
2.1.3 Tulosten ilmoittaminen
Yksi raseeminen kalsiumtartraattimolekyyli vastaa puolta L(+)viini-
hapon molekyyliä.
Viinihapon määrä litrassa viiniä, ilmoitettuna milliekvivalentteina, on
384,5 p.
Se ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.
Viinihapon määrä litrassa viiniä, ilmoitettuna grammoina viini-
happoa, on 28,84 p.
Se ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.
Viinihapon määrä litrassa viiniä, ilmoitettuna grammoina kaliumvety-
tartraattia, on 36,15 p.
Se ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.
2.2 Volumetrinen vertailumenetelmä
2.2.1 Reagenssit
2.2.1.1 Kloorivetyhappo (HCl) ( ρ20= 1,18-1,19 g/ml) laimennetaan suhteessa
1/5 (v/v).
2.2.1.2 0,05 M EDTA-liuos:
EDTA (etyleenidiamiinitetraetikkahapon dinatriumsuola)
(C10H14N2O8Na2,2 H2O) … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18,61 g
Täytetään tislatulla vedellä … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 000 ml:ksi
2.2.1.3 40 % (m/v) natriumhydroksidiliuos:
Natriumhydroksidi (NaOH) …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40 g
Täytetään tislatulla vedellä … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 ml:ksi
2.2.1.4 Kalkoni-karbonihappo kompleksometrinen indikaattori: 1 % (m/m)
Kalkoni-karbonihappo tai 2-hydroksi-1-(2-hydroksi-4-sulfo-
1-naftyyliatso)-3-naftaleenihappo (C21H14N2O7S, 3H2O) … . . . 1 g
Vedetön natriumsulfaatti …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 g1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 89
▼B
2.2.2 Suoritus
Punnitsemisen jälkeen raseeminen kalsiumtartraattisakan sisältävä
lasisintteri pannan imupullon päälle ja liuotetaan sakka 10 ml:lla
laimennettua kloorivetyhappoa (2.2.1.1). Pestään lasisintteri 50 ml:lla
tislattua vettä.
Lisätään 5 ml 40 % natriumhydroksidiliuosta (2.2.1.3) ja noin 30 mg
indikaattoria (2.2.1.4). Titrataan 0,05 M EDTA-liuoksella (2.2.1.2).
Käytetty millilitramäärä on n.
2.2.3 Tulosten ilmoittaminen
Viinihapon määrä litrassa viiniä, milliekvivalentteina ilmoitettuna, on
5n .
Se ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.Viinihapon määrä litrassa viiniä, ilmoitettuna grammoina viini-
happoa, on 0,375 n.
Se ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.Viinihapon määrä litrassa viiniä, ilmoitettuna grammoina kaliumvety-
tartraattia, on 0,470 n.
Se ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.
3 TAVANOMAINEN MENETELMÄ3.1 Reagenssit
3.1.1 Viinin esikäsittelyssä
3.1.1.1 Etikkahappo CH
3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml) laimennettu 30 %:ksi (v/v).
3.1.1.2 Vahvasti emäksinen anioninvaihtohartsi (esimerkiksi Merck III 20-50
meshiä) asetaattimuodossa. Asetetaan anioninvaihtohartsia (noin
100 g) 200 ml:aan 30 %:ksi laimennettua etikkahappoa (3.1.1.1).
Annetaan seistä vähintään 24 tuntia ennen käyttöä.
Ioninvaihtohartsia säilytetään myöhempää käyttöä varten 30 %:ssa
etikkahapossa.
3.1.1.3 Etikkahappo CH3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml) laimennettu 0,5 %:ksi (v/
v).
3.1.1.4 Natriumsulfaattiliuos, 7,1 g/100 ml (0,5 M).
Liuotetaan 71 g vedetöntä natriumsulfaattia (Na2SO4) tislattuun
veteen ja täytetään 1 000 ml:ksiti slatulla vedellä.
3.1.2 Viinihapon määrittämisessä
3.1.2.1 Natriumasetaattiliuos (NaCH3COO) 27 % (m/v).
Liuotetaan 270 g vedetöntä natriumasetaattia, NaCH3COO, tislattuun
veteen ja täytetään 1 000 ml:ksi.
3.1.2.2 Vanadiinireagenssi
Liuotetaan 10 g ammoniummetavanadaattia (NH4VO3) 150 ml:aan
1 M natriumhydroksidiliuosta (3.1.2.10). Siirretään tämä liuos
500 ml:n mittapulloon, lisätään 200 ml 27 % natriumasetaattiliuosta
(3.1.2.1). Täytetään 500 ml:ksiti slatulla vedellä.
3.1.2.3 1 M H2SO4-liuos.
3.1.2.4 0,5 M H2SO4-liuos.
3.1.2.5 0,05 M H2SO4-liuos.
3.1.2.6 0,05 M perjodihappoliuos.
Mitataan 1 000 ml:n mittapulloon 10,696 g natriumperjodaattia,
NaIO4, 50 ml 0,5 M rikkihappoa (3.1.2.4) ja täytetään 1 000 ml:ksi
tislatulla vedellä.
3.1.2.7 Glyseroliliuos, 10 % (m/v).
Mitataan 100 ml:n mittapulloon 10 g glyserolia C3H8O3; täytetään
100 ml:ksiti slatulla vedellä.
3.1.2.8 Natriumsulfaattiliuos, 7,1 g/100 ml (ks. 3.1.1.4).3.1.2.9 Viinihappoliuos, 1 g/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 90
▼B
Mitataan 500 ml:n mittapulloon 0,5 g viinihappoa, 6,66 ml 1 M
natriumhydroksidiliuosta (3.1.2.10) ja täytetään 500 ml:ksi 7,1 %:lla
natriumsulfaattiliuoksella (3.1.1.4).
3.1.2.10 1 M natriumhydroksidiliuos, NaOH.
3.2 Välineistö
3.2.1 Lasikolonni, jonka pituus on noin 300 mm ja sisähalkaisija 10-11 mm
ja joka on varustettu hanalla.
3.2.2 Spektrometri, jolla voidaan tehdä absorbanssimittaukset 490 nm:n
aallonpituudella, ja kyvettejä, joiden optinen pituus on 10 mm.
3.3 Suoritus
3.3.1 Ioninvaihtokolonnin valmistaminen
Pannaan lasivillatuppo lasikolonniin hanan yläpuolelle (3.2.1). Kostu-
tetaan tuppo tislatulla vedellä. Kaadetaan kolonniin 10 ml
asetaattimuodossa olevan ioninvaihtohartsin suspensiota (3.1.1.2).
Annetaan laskeutua. Asetetaan lasivillatuppo hartsipatsaan päälle
(siten, että vältetään hartsipatsaan hajoaminen myöhempien pesujen
aikana).
Ioninvaihtohartsia saa käyttää ainoastaan yhteen määritykseen.
3.3.2 Orgaanisten happojen erottaminen
Avataan hana ja annetaan etikkahapon valua siten, että pinta on noin
2-3 mm hartsin päällä olevan lasivillatupon yläpuolella.
Lisätään 10 ml 0,5 % etikkahappoliuosta (3.1.1.3), ja valutetaan neste
samalle tasolle kuin edellä. Toistetaan tämä pesu vielä 4 kertaa.
Viimeisen pesun jälkeen suljetaan hana, kaadetaan vaihtimeen 10 ml
viiniä tai rypälemehua. Annetaan viinin valua tipoittain (keskimää-
räinen virtausnopeus 1 tippa sekunnissa) ja pysäytetään valuminen
täsmälleen ioninvaihtohartsin yläpuolelle. Lisätään kolonniin uudel-
leen 10 ml 0,5 % etikkahappoliuosta (3.1.1.3), annetaan valua
samalla nopeudella kuin edellä ja toistetaan pesu 7 kertaa aina
10 ml:lla vettä. Viimeisen pesun aikana suljetaan hana heti, kun
nesteen taso on hieman lasivillatupon yläpuolella.
Eluoidaan kiinteät hapot ioninvaihtohartsista 7,1 % natriumsulfaatti-
liuoksella (3.1.1.4); otetaan eluaattia 100 ml:n mittapullon merkkiin
asti.
3.3.3 Viinihapon määrittäminen
3.3.3.1 Viinit, joihin ei ole lisätty mesoviinihappoa
Mitataan kahteen erlenmeyerpulloon, ajab, 20 ml eluaattia.
Pulloakäytetään määrittämiseen ja pulloa b, josta viinihappo
hävitetään perjodihapolla, käytetään vertailuun.
Pulloonamitataan:
— 2 ml 1 M H2SO4(3.1.2.3).
— 5 ml 0,05 M H2SO4(3.1.2.5).
— 1 ml 10 % glyserolia (3.1.2.7).
Pulloonbmitataan:
— 2 ml 1 M H2SO4(3.1.2.3).
— 5 ml 0,05 M perjodihappoliuos (3.1.2.6).
Odotetaan 15 minuuttia ja lisätään:
1 ml 10 % glyserolia (3.1.2.7) perjodihappoylijäämän hävittämiseksi.
Odotetaan 2 minuuttia.
Samalla kun sekoitetaan, pipetoidaan pulloon bja välittömästi tämän
jälkeen pulloon a5 ml vanadiinireagenssia (3.1.2.2). Käynnistetään
sekuntikello viipymättä ja kaadetaan pullojen ajabsisältö spektrofo-
tometrin kyvetteihin. 90 sekunnin kuluttua mitataan pullossa aolevan
nesteen absorbanssi 490 nm:ssä (määritys) käyttäen vertailuun
nestettäb(sokea).
Jos eluaatin viinihappopitoisuus on niin korkea, että sen antama
absorbanssi ylittää korkeimman vertailun, on eluaatti laimennettava1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 91
▼B
7,1 % natriumsulfaattiliuoksella; mittaus tehdään laimennetusta liuok-
sesta.
3.3.3.2 Viinit, joihin on lisätty mesoviinihappoa
Määritettäessä viinejä, joihin on lisätty mesoviinihappoa tai joihin
epäillään lisätyn mesoviinihappoa, tämä happo hydrolysoidaan vertai-lumenetelmän mukaisesti.
Jäähtymisen jälkeen erlenmeyerpullon sisältö samoin kuin huuhto-
misvesi (5 ml kahdesti) kaadetaan ioninvaihtokolonnin yläosaan.
Määritystä jatketaan edellä esitetyllä tavalla.
Mesoviinihappo lasketaan määritystuloksessa viinihapoksi.
3.3.4 Kalibrointikäyrän esittäminen graafisesti
Mitataan 100 ml:n mittapulloihin viinihappoliuosta (1 g/l) (3.1.2.9)
10, 20, 30, 40 ja 50 ml ja täytetään 100 ml:ksi7,1 % natri umsulfaat-
tiliuoksella (3.1.1.4). Näiden liuosten konsentraatiot vastaavat
viineistä saatuja ja eluaatteja, joissa on viinihappoa 1, 2, 3, 4 ja 5 g
litrassa.
Mitataan kahteen erlenmeyerpulloon, ajab, 20 ml kutakin liuosta ja
jatketaan määritystä edellä kuvatulla tavalla.
Näiden liuosten absorbanssien graafinen kuvaaja viinihappopitoi-
suuden funktiona on suora, joka kaartuu hieman nollakohtaa kohti.
Tämä osa käyrästä voidaan tarvittaessa piirtää tarkemmin käyttäen
määrityksiin liuoksia, joissa konsentraatiot ovat alle 1,0 g/l ja tarkal-
leen tunnettuja.
3.3.5 Tulosten ilmoittaminen
Etsitään kalibrointikäyrältä eluaatille mitattu absorbanssi ja tätä
vastaava viinin viinihappopitoisuus grammoina litrassa.
Tämä pitoisuus ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 92
▼B
17.SITRUUNAHAPPO
1 PERIAATE
Sitruunahappo muutetaan sitraattilyaasilla (CL) katalysoidussa reak-
tiossa oksaaliasetaatiksi ja asetaatiksi:
sitraatti
 oksaaliasetaatti + asetaatti
Malaattidehydrogenaasin (MDH) ja laktaattidehydrogenaasin läsnäol-
lessa oksaaliasetaatti ja sen dekarboksylaatiojohdannainen, pyruvaatti,
pelkistyvät nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidilla (NADH) L-malaa-
tiksi ja L-laktaatiksi:
Oksaaliasetaatti + NADH + H+
L-malaatti+ NAD+
Pyruvaatti+ NADH + H+
L-laktaatti+ NAD+
Näissä reaktioissa NAD+:ksihapettuneen NADH on verrannolli nen
sitraattimäärään. NADH:n hapettuminen mitataan sen absorbanssin
pienenemisestä 340 nm:n aallonpituudella.
2 REAGENSSIT
2.1 Standardiliuos pH 7,8
(0,51 M glysyyliglysiini; pH = 7,8; Zn2+: 0,6 × 10−3M):
Liuotetaan 7,13 g glysyyliglysiiniä noin 70 ml:aan kahdesti tislattua
vettä.
Säädetään pH arvoon 7,8 noin 13 ml:lla 5 M natriumhydroksidi-
liuosta; lisätään 10 ml sinkkikloridiliuosta ZnCL2(80 mg/100 ml) ja
täytetään kahdesti tislatulla vedellä 100 ml:ksi.
Liuos säilyy vähintään 4 viikon ajan + 4 ºC:ssa.
2.2 Pelkistynyt nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi (NADH) -liuos, noin
6×1 0−3M, liuotetaan 30 mg NADH:ta ja 60 mg NaHCO36 ml:aan
kahdestiti slattua vettä.
2.3 Malaattidehydrogenaasi/laktaattidehydrogenaasi -liuos, (MDH/LDH)
(0,5 mg MDH/ml; 2,5 mg LDH/ml): sekoitetaan 0,1 ml MDH:ta
(5 mg MDH/ml), 0,4 ml ammoniumsulfaattiliuosta (3,2 M) ja 0,5 ml
LDH:ta (5 mg/ml). Tämä liuos säilyy vähintään yhden vuoden
+ 4 ºC:ssa.
2.4 Sitraattilyaasi CL (5 mg proteiinia/ml). Liuotetaan 168 mg lyofiili-
saattia 1 ml:aan jäävettä. Liuos säilyy vähintään yhden viikon ajan
+ 4 ºC:ssa ja vähintään neljän viikon ajan jäädytettynä.
On suositeltavaa varmistaa entsyymin aktiivisuus ennen määritystä.
2.5 Polyvinyylipolypyrrolidoni (PVPP)
Huomautus:Kaikki tähän määritykseen tarvittavat reagenssit ovat kaupallisesti
saatavilla.
3 VÄLINEISTÖ
3.1 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittauksia 340 nm:ssä, jossa
NADH:n absorptio on korkeimmillaan.
Jos tällaista spektrofotometriä ei ole saatavissa, käytetään epäjat-
kuvan spektrin omaavaa fotometriä, jolla voidaan mitata 334 tai
365 nm:ssä. Jos kyseessä ovat absoluuttiset absorbanssimittaukset (ei
käytetä kalibrointisarjoja, vaan NADH:n ekstinktiokerrointa), laitteen
aallonpituus- ja absorbanssiasteikkojen on oltava tarkistettuja.
3.2 Lasikyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm, tai kertakäyttöisiä
kyvettejä.
3.3 Mikropipettejä, joilla voidaan pipetoida 0,02 - 2 ml:n suuruisia tila-
vuuksia.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 93
▼B
4 NÄYTTEEN VALMISTAMINEN
Sitraatti määritetään tavallisesti suoraan viinistä ilman, että väriaineet
poistetaan ennen määritystä tai viini laimennetaan, jos sitruunahappo-
pitoisuus on alle 400 mg/l. Jos näin ei ole laimennetaan viini siten,
että sen sitraattikonsentraatio on välillä 20-400 mg/l (näytteen sitraat-
timäärä välillä 5-80 µg.
Kun kyseessä on runsaasti fenolisia yhdisteitä sisältävä punaviini, on
suositeltavaa käsitellä viini ennen määritystä PVPP:llä:
Suspendoidaan veteen noin 0,2 g PVPP:tä, annetaan seistä 15
minuutin ajan. Suodatetaan laskostetun suodattimen läpi.
50 ml:n erlenmeyerpulloon mitataan 10 ml viiniä, lisätään lastalla
suodattimesta otettua kosteaa PVPP:tä. Ravistellaan 2-3 minuuttia.
Suodatetaan.
5 SUORITUS
Tehdään 340 nm:n aallonpituudelle kalibroidulla spektrofotometrillä
absorptiomittaukset 1 cm:n kyvettejä käyttäen; absorbanssiasteikko
nollataan ilmaa (ei kyvettiä) vastaan. Mitataan 1 cm:n kyvetteihin:
vertailu määritys
Liuos 2.1 1,00 ml 1,00 ml
Liuos 2.2 0,10 ml 0,10 ml
Näyte — 0,20 ml
Kahdestiti slattu vesi 2,00 ml 1,80 mlLiuos 2.3 0,02 ml 0,02 ml
Sekoitetaan; noin 5 minuutin kuluttua luetaan vertailu- ja määrity-
sliuosten absorbanssit (A
1).
Lisätään:
Liuos 2.4 0,02 ml 0,02 ml
Sekoitetaan; odotetaan reaktion päättymistä (noin 5 minuuttia) ja
luetaan vertailu- ja määritysliuosten absorbanssit (A2).
Lasketaan vertailu- ja määritysliuosten absorbanssien erotus (A1−
A2).
Lasketaan vertailuliuoksen absorbanssien erotuksen ja määrity-
sliuoksen absorbanssien erotuksen erotus:
∆A= ∆AD−∆AT
Huomautus:
Entsyymien aktiivisuuden loppuunsaattamiseksi tarvittava aika voi
vaihdella eri erien kohdalla. Edellä annettu arvo on vain ohjeellinen.
On suositeltavaa määrittää se erikseen jokaisesta erästä.
6 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Sitruunahappopitoisuus ilmoitetaan kokonaislukuna milligrammoina
litrassa (mg/l).
6.1 Laskentamenetelmä
Konsentraatio milligrammoina litrassa saadaan yleisestä yhtälöstä:
C¼V/C2MP
ε/C2d/C2v/C2∆A
V = koeliuoksen tilavuus millilitroina (tässä 3,14 ml)
v = näytteen tilavuus millilitroina (tässä 0,2 ml)
MP = määritettävän aineen molekyylimassa (tässä vedetön sitruu-
nahappo = 192,1)
d = kyvetin optinen pituus senttimetreinä (tässä 1 cm)1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 94
▼B
ε = NADH:n absorptiokerroin; 340 nm:ssä, ε= 6,3 mmol−1×1×
cm−1.
Saadaan:
C = 479 × ∆A
Jos näytettä valmistettaessa on tehty laimennus, kerrotaan tulos
laimennuskertoimella.
Huomautus:
334 nm:ssä: C = 488 × ∆A(ε= 6,2 mmol−1×1×c m−1)
365 nm:ssä: C = 887 × ∆A(ε= 3,4 mmol−1×1×c m−1)
6.2 Toistettavuus (r)
Sitruunahappopitoisuus alle 400 mg/l: r = 14 mg/l.
Sitruunahappopitoisuus yli 400 mg/l: r = 28 mg/l.
6.3 Uusittavuus (R)
Sitruunahappopitoisuus alle 400 mg/l: R = 39 mg/l.
Sitruunahappopitoisuus yli 400 mg/l: R = 65 mg/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 95
▼B
18.MAITOHAPPO
1 PERIAATE1.1 Vertailumenetelmä
Maitohapot (L-laktaatti ja D-laktaatti) hapetetaan nikotiiniamidi-
adeniini-dinukleotidilla (NAD) pyruvaatiksi L-laktaattidehydrogen-
aasin (L-LDH) ja D-laktaattidehydrogenaasin (D-LDH)
katalysoimassa reaktiossa.
Reaktion tasapaino on laktaatin puolella. Pyruvaatin poistaminen
reaktioseoksesta siirtää reaktion tasapainon pyruvaatin muodostu-
misen suuntaan.
L-glutamaatti muuttaa pyruvaatin L-alaniiniksi glutamaatti-pyru-
vaatti-transaminaasin (GPT) katalysoimassa reaktiossa:
1) L-laktaatti+ NAD
+
pyruvaatti+ NADH + H+
2) D-laktaatti+ NAD+
pyruvaatti+ NADH + H+
3) Pyruvaatti+ L-glutamaatti
 L-alaniini + α-ketoglu-
taraatti
NADH:n muodostuminen, joka mitataan absorbanssin kasvuna
aallonpituudella 340 nm, on verrannollinen laktaattimäärään.
Huomautus:L-maitohappo voidaan määrittää erikseen reaktioilla 1 ja 3.D-maitohappo voidaan määrittää erikseen reaktioilla 2 ja 3.
1.2 Tavanomainen menetelmä
Anioninvaihtokolonnilla erotettu maitohappo hapetetaan asetaldehy-
diksi ja määritetään kolorimetrisesti antamalla aldehydin ensin
reagoida natriumnitroprussidin ja piperidiinin kanssa.
2. VERTAILUMENETELMÄ2.1 Reagenssit
2.1.1 Standardiliuos pH 10 (glysyyliglysiini 0,6 mol/l; L-glutamaatti
0,1 mol/l).
Liuotetaan 4,75 g glysyyliglysiiniä ja 0,88 g L-glutaamihappoa noin
50 ml:aan kahdestiti slattua vettä; säädetään pH arvoon 10 muuta-
malla millilitralla 10 M natriumhydroksidiliuosta ja täytetään
60 ml:ksikahdestiti slatulla vedellä.
Liuos säilyy vähintään 12 viikkoa + 4 ºC:ssa.
2.1.2 Nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi (NAD) -liuos, noin 40 × 10
−3M;
liuotetaan 900 mg NAD:tä 30 ml:aan kahdesti tislattua vettä. Liuos
säilyy vähintään 4 viikkoa + 4 ºC:ssa.
2.1.3 Glutamaatti-pyruvaatti-transaminaasi (GPT) -liuos, 20 mg/ml. Liuos
säilyy vähintään yhden vuoden + 4 ºC:ssa.
2.1.4 L-laktaattidehydrogenaasi (L-LDH) -liuos, 5 mg/ml. Liuos säilyy
vähintään yhden vuoden + 4 ºC:ssa.
2.1.5 D-laktaattidehydrogenaasi (D-LDH) -liuos, 5 mg/l. Liuos säilyy
vähintään yhden vuoden + 4 ºC:ssa.
On suositeltavaa varmistaa entsyymin aktiivisuus ennen määritystä.Huomautus:Kaikki määritykseen tarvittavat reagenssit ovat kaupallisesti saata-
villa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 96
▼B
2.2 Välineistö
2.2.1 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittauksia 340 nm:ssä, jossa
NADH:n absorptio on korkeimmillaan.
Jos tällaista spektrofotometriä ei ole saatavissa, käytetään epäjat-
kuvan spektrin omaavaa fotometriä, jolla voidaan tehdä mittauksia
334 tai365 nm:ssä.
Jos kyseessä ovat absoluuttiset absorbanssimittaukset (ei käytetä kali-
brointisarjoja, vaan NADH:n ekstinktiokerrointa), laitteen
aallonpituus- ja absorbanssiasteikkojen on oltava tarkistettuja.
2.2.2 Lasikyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm, tai kertakäyttöisiä
kyvettejä.
2.2.3 Mikropipettejä, joilla voidaan pipetoida 0,02-2 ml:n suuruisia
näytteitä.
2.3 Näytteen valmistaminen
Reaktioseosten kanssa kosketuksiin joutuvia lasitavaroiden osia ei saa
koskea sormin, sillä kosketuksesta voi siirtyä reaktioseokseen
tuloksen vääristävää L-maitohappoa.
Laktaatin määrittäminen tehdään yleensä suoraan viinistä ilman, että
väriaineet poistetaan ennen määrittämistä tai viini laimennetaan, jos
maitohappopitoisuus on alle 100 mg/l. Jos viinin maitohappokonsen-
traatio on välillä:
100 mg/l-1 g/l laimennetaan suhteessa 1/10 kahdesti tislatulla
vedellä,
1-2,5 g/l laimennetaan suhteessa 1/25 kahdesti tislatulla vedellä,
2,5-5 g/l laimennetaan suhteessa 1/50 kahdesti tislatulla vedellä.
2.4 Suoritus
2.4.1 Kokonaismaitohappopitoisuuden määrittäminen
Standardiliuoksen lämpötilan on oltava 20-25 ºC ennen määrityksen
aloittamista.
Tehdään aallonpituudelle 340 nm kalibroidulla spektrofotometrillä
absorptiomittaukset 1 cm:n kyvettejä käyttäen, absorbanssiasteikko
nollataan ilmaa (ei kyvettiä) tai vettä vastaan.
Mitataan kyvetteihin, joiden optinen pituus on 1 cm:
vertailu määritys
Liuos 2.1.1 1,00 ml 1,00 ml
Liuos 2.1.2 0,20 ml 0,20 ml
Kahdestiti slattu vesi 1,00 ml 0,80 ml
Liuos 2.1.3 0,02 ml 0,02 ml
Näyte — 0,20 ml
Sekoitetaan lasisekoittajalla tai synteettisestä materiaalista valmiste-
tulla litteäpäisellä puikolla; noin 5 minuutin kuluttua luetaan
vertailu- ja määritysliuosten absorbanssit (A1).
Lisätään 0,02 ml 2.1.4 -liuosta ja 0,05 ml 2.1.5 -liuosta, homogenoi-
daan, odotetaan reaktion päättymistä (noin 30 minuuttia) ja mitataan
vertailu- ja määritysliuosten absorbanssit (A2).
Lasketaan vertailu- ja määritysliuosten absorbanssien erotus (A2−A1).
Lasketaan vertailuliuoksen absorbanssien erotuksen ja määrity-
sliuoksen absorbanssien erotuksen erotus:
∆A= ∆AM−∆AV
2.4.2 L-maitohapon ja D-maitohapon määrittäminen
L-maitohappo ja D-maitohappo voidaan määrittää erikseen noudat-
taen kokonaismaitohapon määritysmenetelmää, mutta A1:n
määrittämisen jälkeen jatketaan määritystä seuraavasti:1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 97
▼B
Lisätään 0,02 ml 2.1.4 -liuosta, homogenoidaan, odotetaan reaktion
loppuun kulumista (noin 20 minuuttia) ja mitataan vertailu- ja
määritysliuosten absorbanssit (A2).
Lisätään 0,05 ml 2.1.5 -liuosta, homogenoidaan, odotetaan reaktion
loppuun kulumista (noin 30 minuuttia) ja mitataan vertailu- ja
määritysliuosten absorbanssit (A3).
Lasketaan vertailu- ja määritysliuosten absorbanssien erotus L-maito-
hapon (A2−A1) ja D-maitohapon (A3−A2) osalta.
Lasketaan vertailuliuoksen absorbanssien erotuksen ja määrity-
sliuoksen absorbanssien erotuksen erotus:
∆A= ∆AM−∆AV
Huomautus:
Entsyymiaktiivisuuden loppuun saattamiseksi tarvittava aika voi vaih-
della eri erien kohdalla. Edellä annettu arvo on vain ohjeellinen. On
suositeltavaa määrittää se erikseen jokaiselle erälle. Määritettäessä
ainoastaan L-maitohappoa L-laktaattidehydrogenaasin lisäämisen
jälkeen inkubointiaika voidaan vähentää 10 minuuttiin.
2.5 Tulosten ilmoittaminen
Maitohappopitoisuus ilmoitetaan grammoina litrassa (g/l) yhdellä
desimaalilla.
2.5.1 Laskentamenetelmä
Konsentraatio grammoina litrassa lasketaan yleisellä yhtälöllä:
C¼V/C2MP
ε/C2d/C2v/C21 000/C2∆A
V = koeliuoksen tilavuus millilitroina (L-maitohappo V = 2,24 ml,
D-maitohappo ja kokonaismaitohappo V = 2,29)
v = näytteen tilavuus millilitroina (tässä 0,2 ml)MP = määritettävän aineen molekyylimassa (tässä DL-maitohappo
= 90,08)
d = kyvetin optinen pituus senttimetreinä (tässä 1 cm)ε = NADH:n absorptiokerroin 340 nm:ssä, ε= 6,3 mmol
−1×1×
cm−1.
2.5.1.1 Kokonaismaitohappo ja D-maitohappo
C = 0,164 × ∆A
Jos näytettä valmistettaessa on tehty laimennus, kerrotaan tulos
laimennuskertoimella.
Huomautus:
Mittaus 334 nm:ssä: C = 0,167 × ∆A(ε= 6,2 mmol−1×1×c m−1)
Mittaus 365 nm:ssä: C = 0,303 × ∆A(ε= 3,4 mmol−1×1×c m−1)
2.5.1.2 L-maitohappo
C = 0,160 × ∆A
Jos näytettä valmistettaessa on tehty laimennus, kerrotaan tulos
laimennuskertoimella.
Huomautus:Mittaus 334 nm:ssä: C = 0,163 × ∆A(ε= 6,2 mmol
−1×1×c m−1)
Mittaus 365 nm:ssä: C = 0,297 × ∆A(ε= 3,4 mmol−1×1×c m−1)
2.5.2 Toistettavuus (r)
r = 0,02 + 0,07x1g/l
xi= näytteen maitohappokonsentraatio grammoina litrassa.
2.5.3 Uusittavuus (R)
R = 0,05 + 0,125x1g/l.
xiär mjölksyrakoncentrati onen iprovet ig/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 98
▼B
3. TAVANOMAINEN MENETELMÄ
3.1.1 Viinin esikäsittely
Ks. luku ”Viinihappo”, tavanomainen menetelmä, 3.1.1 kohta.
3.1.2 Maitohapon måärittäminen
3.1.2.1 0,1 M cerium(IV)sulfaattiliuos 0,35 M rikkihapossa.
Pidetään linos viileänä ja liuotetaan 40,431 g cerium(IV)sulfaattia,
Ce(SO4)2,4 H2O, 350 ml:aan tarkalleen mitattua 1 M rikkihappo-
liuosta (3.1.2.4). Täytetään 1 000 ml:ksi tislatulla vedellä.
3.1.2.2 2,5 M natriumhydroksidiliuos (NaOH).3.1.2.3 Natriumasetaattiliuos, 270 g/l (valmistetaan kuivasta natriumasetaa-
tista, NaCH
3COO).
3.1.2.4 1 M rikkihappoliuos (H2SO4).
3.1.2.5 (m/v) natriumnitrosinihappoliuos [Na2(Fe(CN)5NO × 2H2O]
Säilytetään valolta suojattuna hyvin suljetussa pullossa.Liuoksen säilytysaika on 8 päivää.
3.1.2.6 1 (v/v) piperidiiniliuos (C
5H11N).
3.1.2.7 1 M maitohappoliuos.
Liuotetaan 100 ml maitohappoa (C3H6O3) 400 ml:aan vettä. Liuos
kaadetaan haihdutusmaljaan ja sitälämmitetään kiehuvassa vesihau-
teessa 4 tunnin ajan täyttämällä tilavuus ajoittain tislatulla vedellä.
Jäähtymisen jälkeen täytetään yhdeksi litraksi. Titrataan maitohappo
10 ml:sta tätä liuosta 1 M natriumhydroksidiliuoksella (3.1.2.8).
Säädetään linos 1 M maitohapoksi (90 g).
3.1.2.8 1 M natriumhydroksidiliuos (NaOH).
3.2 Välineistö
3.2.1 Lasikolonni, jonka pituus on noin 300 mm ja sisähalkaisija 10-11 mm,
ja joka on varustettu hanalla virtauksen säätämiseksi.
3.2.2 Vesihaude, joka on säädetty 65 ºC:seen.3.2.3 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä absorbanssimittaukset aallonpi-
tuudella 570 nm, ja kyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm.
3.3 Suoritus
3.3.1 loninvaihtokolonnin valmistaminen
Ks. luku ”Viinihappo”, tavanomainen menetelmä, 3.3.1 kohta.
3.3.2 Orgaanisten happojen erottaminen
Ks. luku ”Viinihappo”, tavanomainen menetelmä, 3.3.2 kohta.
3.3.3 Maitohapon määrittäminen
Mitataan 50 ml:n hiostulpalliseen lasiseen koeputkeen 10 ml
eluaattia, lisätään 10 ml ceriumsulfaattiliuosta (3.1.2.1). Sekoitetaan;asetetaan koeputki65 ºC:seen säädettyyn vesi hauteeseen tarkalleen
10 minuutiksi. Upotusvaiheessa irrotetaan tulppa muutaman sekunnin
ajaksi siten, että lämmittämisestä aiheutuva paine tasoittuu ja tämän
jälkeen suljetaan koeputki tiiviisti, jotta vältetään muodostuvan
asetaldehydin hä- viäminen. Otetaan koeputki hauteesta, jäähdytetään
virtaavan veden alla noin 20 ºC:ksi, lisätään 5 ml 2,5 M natriumhy-
droksidiliuosta (3.1.2.2), sekoitetaan ja suodatetaan.
Otetaan 15 ml suodosta 50 ml:n hiokselliseen mittapulloon, joka
sisältää homogeenisena seoksena 5 ml 27 %:sta natriumasetaattia
(3.1.2.3) ja 2 ml 1 M rikkihappoa (3.1.2.4). Lisätään 5 ml natriumni-
troprussidiliuosta (3.1.2.5), sekoitetaan ja tämän jälkeen lisätään 5 ml
piperidiiniliuosta (3.1.2.6), sekoitetaan nopeasti ja kaadetaan
viipymättä tämä linos spektrofotometrin kyvettiin. Vihreästä violettiin
vaihteleva väri mitataan 570 nm:ssä ilmaa (ei kyvettiä) vastaan: värin
voimakkuus kasvaa ja sitten heikkenee nopeasti.
Vastaavan absorbanssin kehitystä seurataan ja valitaan lopulliseksi
arvoksisen suuri n arvo.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 99
▼B
Jos eluaatti sisältää runsaasti maitohappoa ja absorbanssi on liian
korkea, laimennetaan eluaatti 7,1 % natriumsulfaattiliuoksella (3.1.1)
ja tehdään mittaus laimennetusta liuoksesta.
3.3.4 Kalibrointikäyrän esittäminen gruafisesti
Mitataan 1 000 ml: n mittapulloon 10 ml maitohappoliuosta (3.1.2.7)
ja 10 ml titrattua 1 M natriumhydroksidiliuosta (3.1.2.8) ja täytetään
merkkiin 7,1 % natriumsulfaattiliuoksella. Otetaan tätä liuosta
100 ml:n mittapulloihin 5, 10, 15, 20 ja 25 ml. Täytetään merkkiin
7,1 % natriumsulfaattiliuoksella (3.1.1). Otetaan jokaista liuosta
10 ml ja määritetään näille absorbanssiarvo 3.3.3 kohdan mukaisesti.
Nämä liuokset vastaavat eluaatteja, jotka saadaan 0,45; 0,9; 1,35;
1,80 ja 2,25 g/l maitohappoa sisältävistä viineistä.
Näiden liuosten absorbanssien graafinen kuvaaja maitohappopitoi-
suuden funktiona on suora.
3.4 Tulosten ilmoittaminen
Etsitään kalibrointikäyrältä eluaatille mitattu absorbanssi ja tätä
vastaava viinin maitohappopitoisuus grammoina litrassa.
Tämä pitoisuus ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.
Huomautus:
Yli 250 mg/l rikkidioksidia sisältävissä viineissä voi olla hydroksie-
taanisulfonihappoa, jokalasketaan mukaan maitohappopitoisuuteen.
Tässä tapauksessa määritystulos on kojattava tuloksella, jokasaadaan
seuraavalla lisämäärityksellä: 15 ml eluaattia sekoitetaan hiostulpalla
sulje tussa koeputkessa 5 ml: aan 27 % natriumasetaattia (3.1.2.3)ja
2 ml: aan 0,775 M H2SO4:a (77,5 ml 1 M H2SO4täytetään 100 ml:ksi
tislatulla vedellä). Tämän jälkeen lisätään, kuten maitohappoa
määritettäessä, 5 ml 2 % natriumnitroprussidia (3.1.2.5) ja 5 ml
10 % piperidiinia (3.1.2.6). Sekoittamisen jälkeen mitataan absor-
banssi maitohapon määrittämisessä kuvatuissa koeolosuhteissa.
Tämä absorbanssi sijoitetaan kalibrointikäyrälle,jotta saataisiin hydro-
ksietaanisulfonihaposta johtuva näennäinen arvo B maitohappoa
grammoina litrassa. Jos L on viinin sisältämän maitohapon
näennäinen pitoisuus grammoina litrassa, todellinen maitohappopitoi-
suus L saadaan:
L = L' − B × 0,4 (g/l)1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 100
▼B
19.L-OMENAHAPPO
1 PERIAATE
Nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi (NAD) hapettaa L-omenahapon
(L-malaatti) oksaaliasetaatiksi L- malaattidehydrogenaasin (L-MDH)
katalysoimassa reaktiossa.
Reaktion tasapaino on malaatin puolella. Oksaaliasetaatin poista-
minen reaktioseoksesta siirtää reaktion tasapainoa oksaaliasetaatin
muodostumisen suuntaan. L-glutamaatinläsnäollessa oksaaliasetaatti
muutetaan L-aspartaatiksi glutamaatti-oksaaliasetaatti-transaminaasin
(GOT) katalysoimassa reaktiossa:
1)L-malaatti+ NAD+
oksaaliasetaatti + NADH + H+
2)Oksaaliasetaatti + L-glutamaatti
 L-aspartaatti+ α-
ketoglutaraatti
Muodostunut NADH mitataan absorbanssin kasvuna aallonpituudella
340 nm ja se on verrannollinen L-maltaatin määrään.
2 REAGENSSIT
2.1 Puskuriliuos pH 10
(Glysyyliglysiini 0,6 mol/l, L-glutamaatti 0,1 mol/l).
Liuotetaan 4,75 g glysyyliglysiiniä ja 0,88 g L-glutaamihappoa noin
50 ml: aan kahdesti tislattua vettä; säädetään pH arvoon 10 noin
4,6 ml:lla 10 M natriumhydroksidiliuosta ja täytetään 60 ml:ksi
kahdestiti slatulla vedellä.
Liuos säilyy vähintään 12 viikkoa + 4 ºC:ssa.
2.2 Nikotiiniamidi-adeniini-dinukleotidi (NAD) -liuos, noin 40 × 10−3M;
liuotetaan 420 mg NAD:tä 12 ml:aan kahdesti tislattua vettä. Liuos
säilyy vähintään 4 viikkoa + 4 ºC:ssa.
2.3 Glutamaatti-oksaaliasetaatti-transaminaasi (GOT) -liuos, 2 mg/ml.
Liuos säilyy vähintään yhden vuoden + 4 ºC:ssa.
2.4 L-malaattidehydrogenaasi (L-MDH) -liuos, 5 mg/ml. Liuos säilyy
vähintään yhden vuoden + 4 ºC: ssa.
Huomautus:Kaikki määritykseen tarvittavat reagenssit ovat kaupallisesti saata-
villa.
3 VÄLINEISTÖ
3.1 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä absorbanssimittaukset aallonpi-
tuudella 340 nm, jossa NADH: n absorptio on korkeimmillaan.
Jos tällaista spektrofotometriä ei ole saatavissa, käytetään epäjat-
kuvan spektrin omaavaa fotometriä, jolla voidaan tehdä mittauksia
334 tai365 nm:ssä.
Jos kyseessä ovat absoluuttiset absorbanssimittaukset (ei käytetä kali-
brointisarjoja, vaan NADH:n ekstink- tiokerrointa), laitteen
aallonpituus- ja absorbanssiasteikkojen on oltava tarkistettuja.
3.2 Lasikyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm, tai kertakäyttöisiä
kyvettejä.
3.3 Mikropipettejä, joilla voidaan pipetoida 0,01 - 2 ml:n suuruisia tila-
vuuksia.
4 NÄYTTEEN VALMISTAMINEN
L-malaatin määrittäminen tehdään tavallisesti suoraan viinistä ilman,
että väriaineet poistetaan ennen määrittämistä tai viini laimennetaan,
jos L-omenahappopitoisuus on alle 350 mg/l (mitattu 365 nm:ssä).
Jos näin ei ole, laimennetaan viini kahdesti tislatulla vedellä siten,
että sen L-malaattikonsentraatio on välillä 30-350 mg/l (näytteen L-
malaattimäärä välillä 3-35 µg).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 101
▼B
Jos viinin malaattikonsentraatio on alle 30 mg/l, näytteen tilavuus
voidaan nostaa 1 ml: aan. Tässä tapauksessa lisättävän veden tila-
vuutta vähennetään siten, että molemmissa kyveteissä
kokonaistilavuus on sama.
5. SUORITUS
Tehdään aallonpituudelle 340 nm kalibroidulla spektrofotometrillä
absorptiomittaukset 1 cm:n kyvettejä käyttäen; absorbanssiasteikko
nollataan ilmaa (ei kyvettiä) tai vettä vastaan.
Mitataan kyvetteihin, joiden optinen pituus on 1 cm:
vertailu määritys
Liuos 2.1 1,00 ml 1,00 ml
Liuos 2.2 0,20 ml 0,20 ml
Kahdestiti slattu vesi 1,00 ml 0,90 ml
Liuos 2.3 0,01 ml 0,01 ml
Näyte — 0,10 ml
Sekoitetaan; noin 3 minuutin kuluttua mitataan vertailu- ja määrity-
sliuosten absorbanssi (A1).
Lisätään:
Liuos 2.4 0,01 ml 0,01 ml
Sekoitetaan; odotetaan reaktion päättymistä (noin 5-10 minuuttia) ja
mitataan vertailu- ja määritysliuosten absorbanssi (A2).
Lasketaan vertailu- ja määritysliuosten absorbanssien erotus (A2−
A1).
Lasketaan vertailuliuoksen absorbanssien erotuksen ja määrity-
sliuoksen absorbanssien erotuksen erotus:
∆A= ∆AD−∆AT
Huomautus:
Entsyymiaktiivisuuden loppuun saattamiseksi tarvittava aika voi vaih-
della eri erien kohdalla. Edellä annettu arvo on vain ohjeellinen. On
suositeltavaa määrittää se erikseen jokaisesta erästä.
6. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
L-omenahappokonsentraatio ilmoitetaan grammoina litrassa (g/l)
yhdellä desimaalilla.
6.1 Laskentamenetelmä
Konsentraatio grammoina litrassa lasketaan yleisellä yhtälöllä:
C¼V/C2MP
ε/C2d/C2v/C21 000/C2∆A
V = koeliuoksen tilavuus millilitroina (tässä 2,22 ml)
v = näytteen tilavuus millilitroina (tässä 0,1 ml)MP = määritettävän aineen molekyylimassa (tässä L-omenahappo
= 134,09)
d = kyvetin optinen pituus senttimetreinä (tässä 1 cm)
ε = NADH:n absorptiokerroin 340 nm:ssä, ε= 6,3 mmol
−1×1×
cm−1.
L-malaatille saadaan:C = 0,473 × ∆A g/l
Jos näytettä valmistettaessa on tehty laimennus, kerrotaan tulos
laimennuskertoimella.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 102
▼B
Huomautus:
Mittaus 334 nm:ssä: C = 0,482 × ∆A
Mittaus 365 nm:ssä: C = 0,876 × ∆A
6.2 Toistettavuus (r)
r = 0,03 + 0,034xi
xi= näytteen omenahappopitoisuus grammoina litrassa.
6.3 Uusittavuus (R)
R = 0,05 + 0,071xi
xi= näytteen omenahappopitoisuus grammoina litrassa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 103
▼M7
20.D-OMENAHAPPO
(Entsymaattinen määritysmenetelmä)
1. PERIAATE
D-omenahappodehydrogenaasin (D-MDH) ja nikotiiniamidiadeniini-
dinukleotidin (NAD) läsnäollessa D-omenahappo hapettuu
oksaloasetaatiksi. Oksaloasetaatti muuttuu pyruvaatiksi ja hiilidioksi-
diksi.
D-omenahappo þNADþ/harpoonleftrightD-MDHpyruvaatti þCO2þNADH þHþ
Muodostuneen NADH:n määrä, joka mitataan absorbanssin lisäänty-
misenä aallonpituudella 334, 340 tai 365 nm, on suhteessa D-
omenahapon määrään.
2. REAGENSSIT
Reagenssit, joilla voidaan tehdä noin 30 määritystä, ovat saatavina
kaupallisesti testipakkauksina, joissa on:
a) pullo 1, jossa on noin 30 ml Hepes-puskuriliuosta [N-(2-hydro-
ksietyyli)piperatsiini-N'-2-etaanisulfonihappo], pH = 9,0, ja
stabilisaattoreita;
b) pullo 2, jossa on noin 210 mg kylmäkuivattua NAD:tä;
c) pullo 3 (kolme kappaletta), joissa on kylmäkuivattua D-MDH:ta,
noin 8 yksikköä.
Liuosten valmistus
1. Pullon 1 sisältö käytetään laimentamatta. Liuos saatetaan
lämpötilaan 20-25 ºC ennen käyttöä.
2. Pullon 2 sisältö liuotetaan 4 ml:aan kahdesti tislattua vettä.
3. Pullon 3 sisältö liuotetaan 0,6 ml:aan kahdesti tislattua vettä.
Liuos saatetaan lämpötilaan 20-25 ºC ennen käyttöä.
Liuosten säilyvyys
Pullon 1 sisältö säilyy ainakin vuoden lämpötilassa + 4 ºC; liuos 2
säilyy noin 3 viikkoa + 4 ºC:ssa ja 2 kuukautta − 20 ºC:ssa; liuos 3
säilyy 5 päivää + 4 ºC:ssa.
3. VÄLINEET
3.1 Spektrofotometri, jolla voidaan mitata aallonpituudella 340 nm
(NADH:n absorptiomaksimi). Jos tällaista spektrofotometriä ei ole,
voidaan käyttää (suodatin)fotometriä, jolla voidaan mitata aallonpi-
tuuksilla 334 nm tai 365 nm. Koska mitataan absoluuttisia
absorbanssiarvoja (ei kalibrointikäyrää, vaan vertailuna käytetään
NADH:n ekstinktiokerrointa), laitteen aallonpituus- ja absorbanssias-
teikot on kalibroitava.
3.2 Lasi- tai kertakäyttökyvettejä, joiden valotie on 1 cm.
3.3 Mikropipettejä, joilla voidaan käsitellä tilavuuksia välillä 0,01-2ml.
4. NÄYTTEEN VALMISTUS
D-omenahappo määritetään tavallisesti suoraan viinistä ilman värin-
poistoa.
Koska D-omenahapon määrän kyvetissä pitää olla välillä 2-50 µg, on
viininäyte laimennettava siten, että omenahappokonsentraatio on
välillä 0,02-0,5 g/l tai välillä 0,02-0,3 g/l (laitteistosta riippuen).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 104
▼M7
Laimennustaulukko:
D-omenahapon arvioitu määrä
litrassa
Laimennus
vedelläLaimennusker-
roin F Mittaus aallonpituudella:
340 tai334 nm 365 nm
< 0,3 g < 0,5 g — 1
0,3-3,0 g 0,5-5,0 g 1 + 9 10
5. SUORITUS
Spektrofotometrissä valitaan aallonpituus 340 nm ja absorbanssimit-
taukset tehdään kyveteissä, joiden valotie on 1 cm. Nolla-
absorbanssi määritetään ilmaa vastaan (ei kyvettiä valotiessä) tai
vettä vastaan.
Pipetoidaan kyvettiin, jonka valotie on 1 cm:
KontrolliNäyte
liuosta 1 1,00 ml 1,00 ml
liuosta 2 0,10 ml 0,10 ml
tislattua vettä 1,80 ml 1,70 mlnäyteliuosta — 0,10 ml
Sekoitetaan. Noin 6 minuutin kuluttua mitataan kontrolli- ja näyte-
liuoksen absorbanssi (A
1).
Lisätään:
KontrolliNäyte
liuosta 3 0,05 ml 0,05 ml
Sekoitetaan. Odotetaan, että reaktio loppuu (noin 20 min) ja mitataan
kontrolli- ja näyteliuoksen absorbanssi (A2).
Lasketaan absorbanssien erotukset (A2−A1) sekä kontrollille ( ∆AT)
että näytteelle ( ∆AE). Vähennetään kontrollin absorbanssiero näytteen
absorbanssierosta: ∆A= ∆AE−∆AT
Huom.
Entsyymivaikutuksen kesto voi vaihdella näyte-erien välillä. Suosi-
teltu aika on vain ohjeellinen. Suositellaan, että vaikutusaikaa
määritetään kullekin näyte-erälle.
D-omenahappo reagoi nopeasti. Jos entsyymiä on ylimäärin, se
vaikuttaa myös L-viinihappoon, vaikka reaktionopeus on paljon
pienempi. Tämän vuoksi esiintyy heikkoa sivureaktioita, jonka
vaikutus voidaan korjata ekstrapoloimalla (ks. lisäys A).
6. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Konsentraatio milligrammoina litraa kohti lasketaan seuraavalla
yleiskaavalla:
C¼V/C2PM
ε/C2d/C2ν/C2∆A
missä:
V = mittaliuoksen tilavuus millilitroina (tässä 2,95 ml)
v = näytteen tilavuus millilitroina (tässä 0,1 ml)
PM = mitattavan aineen molekyylimassa (tässä D-
omenahappo = 134,09)1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 105
▼M7
d = kyvetin valotie senttimetreinä (tässä 1 cm)
ε = NADH:n absorptiokerroin
aallonpituudella 340 nm = 6,3 (l mmol−1cm−1)
aallonpituudella 365 nm = 3,4 (l mmol−1cm−1)
aallonpituudella 334 nm = 6,18 (l mmol−1cm−1).
Jos näytettä on laimennettu, tulos kerrotaan laimennuskertoimella.D-omenahapon konsentraatio ilmoitetaan milligrammoina litraa kohti
(mg/l) ilman desimaaleja.
7. LUOTETTAVUUS
Laboratorioiden väliset luotettavuuskokeet esitetään liitteessä B.
Laboratorioiden välisestä kokeesta saatuja arvoja ei välttämättä voi
käyttää, jos analyyttikonsentraatiot ja matriisit ovat erilaisia kuin
lisäyksessä B käytetyt.
7.1 Toistettavuus
Absoluuttinen ero kahden yksittäisen tuloksen välillä, jotka sama
määrityksentekijä on saanut samalla laitteistolla samasta näytemater-
iaalista hyvin lyhyin aikavälein, ei saa ylittää toistettavuusarvoa r
enemmässä kuin 5 prosentissa määrityksistä.
Tämä r-arvo = 11 mg/l
7.2 Uusittavuus
Absoluuttinen ero kahden yksittäisen tuloksen välillä, jotka on saatu
samasta näytemateriaalista kahdessa eri laboratoriossa, ei saa ylittää
uusittavuusarvoa R enemmässä kuin 5 prosentissa määrityksistä.
Tämä R-arvo = 20 mg/l
8. PIENTEN D-OMENAHAPPOPITOISUUKSIEN (D(+)-OMENA-
HAPPO) MÄÄRITYS VIINISSÄ
8.1 Sovellusala
Kuvattua menetelmää käytetään alle 50 mg/l olevien D-omenahappo-
pitoisuuksien entsymaattiseen määrittämiseen viineistä.
8.2 Periaate
Menetelmän periaate on selostettu kohdassa 1. Kun mittakyvettiin
lisätään liuosta, jonka pitoisuus on 50 mg D-omenahappoa litraa
kohden, NADH:n muodostuminen on suoraan verrannollista läsnä
olevan D-malaatin määrään, ja sitä mitataan määrittämällä absor-
banssin lisääntyminen aallonpituudella 340 nm.
8.3 Reagenssit
0,199 g D-omenahappoa litraa kohden sisältävä liuos sekä kohdassa 2
mainitut reagenssit.
8.4 Välineistö
Kohdassa 3 mainittu välineistö.
8.5 Näytteen valmistaminen
Kohdan 4 mukaisesti.
8.6 Menetelmä
Menetelmä on kohdassa 5 kuvatun kaltainen, paitsi siltä osin, että
mittakyvettiin lisätään liuosta, jonka D-omenahappopitoisuus on
50 mg/l (0,025 ml:n lisäys liuosta, jonka D-omenahappopitoisuus on
0,199 g/l; sillä korvataan vastaava tilavuus vettä); saaduista mittaus-
tuloksista vähennetään pitoisuus 50 mg/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 106
▼M8
▼M8
8.7 Sisäinen validointi
Seuraavassa taulukossa on yhteenveto 50 mg litraa kohden sisältävän
liuoksen lisäämisen jälkeen tapahtuvaan D(+)-omenahapon pitoi-
suuden määrittämiseen käytettävän menetelmän sisäisestä
validoinnista.
Mittausalue 0—70 mg D-omenahappoa litrassa.
Tällä alueella menetelmä on lineaarinen korrelaatioker-
toimen vaihdellessa välillä 0,990—0,994
Kvantitatiivisen määrityksen
alaraja24,4 mg/l
Havaintoraja 8,3 mg/l
Herkkyys 0,0015 abs/mg/l
Saanto 87,5—115,0 % valkoviineille ja 75—105 % punaviineille
Toistettavuus 12,4 mg/l valkoviineille (OIV-menetelmän mukaan
12,5 mg/l)
12,6 mg/l punaviineille (OIV-menetelmän mukaan 12,7 mg/
l)
Variaatiokerroin 4,2—7,6 % (valko- ja punaviinit)
Laboratorioiden välinen
hajontaCV = 7,4 % (s = 4,4 mg/l; keskiarvo = 59,3 mg/l)1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 107
▼M7
Lisäys A
Entsymaattisten sivureaktioiden huomioon ottaminen
Sivureaktiot johtuvat yleensä entsyymin toissijaisista reaktioista, muiden entsyy-
mien läsnäolosta näytematriisissa tai yhden tai useamman matriisikomponentin
reaktiosta entsyymireaktion jonkin kofaktorin kanssa.
Tavanomaisessa reaktiossa absorbanssi saavuttaa pysyvän arvon tietyn ajan,
yleensä noin 10-20 minuutin kuluttua riippuen spesifisestä entsyymireaktiosta.
Jos esiintyy toissijaisia reaktioita, absorbanssiarvo ei vakiinnu, vaan nousee
ajan funktiona. Tämän tyyppistä reaktiota sanotaan sivureaktioksi.
Kun tällainen ongelma esiintyy, on suositeltavaa mitata liuoksen absorbanssi
säännöllisin väliajoin (2-5 min) sen jälkeen kun kalibrointiliuos on saavuttanut
lopullisen absorbanssin. Jos absorbanssi nousee säännöllisesti, tehdään 5-6
mittausta, minkä jälkeen suoritetaan graafinen tai laskennallinen ekstrapolaatio,
jonka avulla saadaan liuoksen absorbanssi hetkellä, jolloin entsyymi lisättiin
(T0). Tälle hetkelle ekstrapoloitua absorbanssieroa (Af−Ai) käytetään substraatti-
konsentraation laskemiseen.
Kuva 1: Sivureaktio1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 108
▼M7
Lisäys B
Laboratorioidenvälisen kokeen tulokset
Suoritusvuosi: 1995
Laboratorioiden lukumäärä: 8
Näytteiden määrä: 5, joihin oli lisätty D-omenahappoa
Näyte ABCDE
Hyväksyttyjen laboratorioiden lukumäärä, kun oli
poistettu ne laboratoriot, jossa oli saatu vääriä tuloksia 7 8 7 8 7
Niiden laboratorioiden lukumäärä, joissa oli saatu
vääriä tuloksia 1 — 1 — 1
Hyväksyttyjen tulosten lukumäärä 35 41 35 41 36
Keskiarvo ( χ-) (mg/l) 161,7 65,9 33,1 106,9 111,0
Toistettavuuden keskihajonta (sr) (mg/l) 4,53 4,24 1,93 4,36 4,47
Toistettavuuden suhteellinen keskihajonta (RSDr) (%) 2,8 6,4 5,8 4,1 4,00
Toistettavuusraja (r) (mg/l) 12,7 11,9 5,4 12,2 12,5
Uusittavuuden keskihajonta (sR) (mg/l) 9,26 7,24 5,89 6,36 6,08
Uusittavuuden suhteellinen keskihajonta (RSDR) (%) 5,7 11 17,8 5,9 5,5
Uusittavuusraja (R) (mg/l) 25,9 20,3 16,5 17,8 17,0
Näytetyypit:
A: punaviini; B: punaviini; C: valkoviini; D: valkoviini; E: valkoviini.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 109
▼B
21.KOKONAISOMENAHAPPO
TAVANOMAINEN MENETELMA
1 PERIAATE
Anioninvaihtokolonnilla erotettu omenahappo määritetään kolorime-
trisesti eluaatista mittaamalla keltainen väri, joka saadaan 96 %rikkihapon kromotropahapon avulla. Eluaatin sisältämät aineet häirit-
sevät reaktiossa. Nämä aineet reagoivat vielä, toisin kuin
omenahappo, 86 % rikkihapossa kromotropahapon kanssa. Häiriön
poistamiseksi vähennetään kromotropahapolla 96 % rikkihapossa
saadusta absorbanssista kromatokropahapolla 86 % rikkihapossa
saatu absorbanssi.
2 VÄLINEISTÖ
2.1 Lasikolonni, jonka pituus on noin 250 mm ja sisähalkaisija 35 mm ja
joka on varustettu hanalla.
2.2 Lasikolonni, jonka pituus on noin 300 mm ja sisähalkaisija 10-11 mm
ja joka on varustettu hanalla.
2.3 Vesihaude, 100 ºC.
2.4 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä absorbanssimittaukset aallonpi-
tuudella 420 nm, ja kyvettejä, joiden optinen pituus on 10 mm.
3 REAGENSSIT
3.1 Vahvasti emäksinen anioninvaihtohartsi (esimerkiksi Merck III).
3.2 5 % (m/v) natriumhydroksidi.
3.3 30 % (m/v) etikkahappo.
3.4 0,5 % (m/v) etikkahappo.
3.5 10 % (m/v) natriumsulfaattiliuos (Na
2SO4).
3.6 95-97 % (m/m) väkevä rikkihappo.
3.7 86 % (m/m) rikkihappo.
3.8 5 % (m/v) kromotropahappoliuos.
Tuore liuos valmistetaan ennen jokaista määritystä liuottamalla
500 mg kromotropahapon natriumsuolaa (C10H6Na2O8S2,2 H2O)
10 ml:aan tislattua vettä.
3.9 DL-omenahappoliuos, 0,5 g/l.
Liuotetaan 250 mg/l omenahappoa (C4H6O5) riittävään määrään 10 %
natriumsulfaattiliuosta (3.5) ja täytetään 500 ml:ksi.
4 SUORITUS
4.1 Ioninvaihtohartsin esikäsittely
Asetetaan tislatulla vedellä kostutettu vanutuppo kolonnin
(35 × 250 mm) pohjalle hanan yläpuolelle. Kaadetaan anioninvaihto-
hartsi lasikolonniin. Nesteen olisi ulotuttava 50 mm hartsin
yläpuolelle. Huuhdotaan 1 000 ml: lla tislattua vettä. Pestään kolonni
natriumhydroksidiliuoksella (5 %), annetaan valua 2-3 mm hartsin
yläpuolelle, toistetaan 5 % natriumhydroksidiliuoksella pesu kaksi
kertaa ja annetaan seistä tunnin ajan. Pestään kolonni 1 000 ml:lla
tislattua vettä. Täytetään kolonni uudelleen 30 % etikkahapolla, anne-
taan valua 2-3 mm etäisyydelle hartsin yläpinnasta ja toistetaan 30 %
etikkahapolla pesu kaksi kertaa. Annetaan seistä vähintään 24 tuntia
ennen käyttöä. Myöhempiä määrityksiä varten ioninvaihtohartsia
säilytetään etikkahapossa (30 %).
4.2 Ioninvaihtokolonnin valmistaminen
Asetetaan vanutuppo kolonnin (11 × 300 mm) pohjalle hanan yläpuo-
lelle. Kaadetaan 4.1 kohdassa kuvatulla tavalla valmistettua
ioninvaihtohartsia lasikolonniin 10 cm:n korkeudelle. Avataan hana
ja annetaan etikkahappoliuoksen (30 %) valua 2-3 mm hartsin
yläpuolelle. Pestään 50 ml: lla etikkahappoa (0,5 %).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 110
▼B
4.3 DL-omenahapon erottaminen
Kaadetaan 4.2 kohdan mukaisesti valmistettuun kolonniin 10 ml
viiniä tai rypälemehua. Annetaan virrata tipoittain (keskimääräinen
virtausnopeus 1 tippa sekunnissa) ja pysäytetään virtaus 2-3 mm
hartsin yläpuolelle. Pestään kolonni 50 ml: lla etikkahappoa (0,5 %)
ja tämän jälkeen 50 ml:lla tislattua vettä, annetaan virrata samalla
nopeudella kuin edellä ja pysäytetään virtaus 2-3 mm etäisyydelle
hartsin yläosasta.
Eluoidaan hartsiin absorboituneet hapot 10 % natriumsulfaattiliuok-
sella (3.5). Kerätään eluaatti100 ml:n mi ttapulloon.
Kolonni voidaan regeneroida käyttäen 4.1 kohdassa kuvattua mene-
telmää.
4.4 Omenahapon määrittäminen
Otetaan kaksi laajakaulaista lasihiostulpallista 30 ml: n putkea ja
nimetään ne putkiksi A ja B. Lisätään molempiin putkiin 1,0 ml
eluaattia (4.3) ja 1 ml kromotropahappoa (5 %). Lisätään putkeen A
10 ml 86 % rikkihappoa (vertailu) ja putkeen B 10 ml 96 % rikki-
happoa (nayte). Suljetaan ja homogenoidaan ravistelemalla
lasitulpan kastumista varoen. Upotetaan putket kiehuvaan vesihautee-
seen tarkalleen 10 minuutiksi. Jäähdytetään putkia valolta suojattuna
20 ºC:ssa tarkalleen 90 minuuttia. Mitataan absorbanssi viipymättä
vertailunäytettä vastaan 420 nm:ssä 10 mm:n kyvetissä.
4.5 Kalibrointikäyrän esittäminen graafisesti
Pipetoidaan neljään 50 ml:n mittapulloon 5,0; 10,0; 15,0 ja 20 ml
näytettä. Täytetään merkkiin natriumsulfaattiliuoksella (10 %).
Nämä liuokset vastaavat eluaatteja, jotka saadaan 0,5; 1,0; 1,5 ja
2,0 g/l omenahappoa sisältävistä viineista.
Jatketaan 4.4 kohdassa kuvatulla tavalla.Näiden liuosten absorbanssien graafinen kuvaaja maitohappopitoi-
suuden funktiona on origon kautta kulkeva suora.
Syntyvän värin intensiteetti riippuu suuressa määrin käytetyn rikki-
hapon vakevyydesta. On tarpeen tarkistaa kalibrointi jokaisen
suorasarjan suhteen ainakin yhdellä pisteellä sen tarkastamiseksi,
onko rikkihapon väkevyys muuttunut.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Arvioimalla mitatusta absorbanssista kalibrointikäyrän avulla eluaatin
konsentraatio saadaan vastaava omenahappokonsentraatio g/l. Tulos
ilmoitetaan yhdellä desimaalilla.
Toistettavuus:
pitoisuus < 2 g/l:r = 0,1 g/l
pitoisuus > 2 g/l:r = 0,2 g/l.
Uusittavuus:
R = 0,3 g/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 111
▼B
22.SORBIINIHAPPO
1. PERIAATE
1.1 Määrittäminen ultraviolettiabsorptiospektrofotometrisesti
Sorbiinihappo (trans. 2,4-heksadieenihappo), joka on erotettu vesi-
höyrytislauslaitteistolla, määritetään viinitisleestä
ultraviolettiabsorptiospektrofotometrisesti. Ultravioletin absorptiomit-
tauksessa häiriöitä aiheuttavat aineet poistetaan haihduttamalla
hieman emaksiseksi tehty tislenäyte kuivaksi kalsiumhydroksidiiiuok-
selia. Alle 20 mg/l olevat pitoisuudet on varmistettava
ohutlevykromatografialla (herkkyys: 1 mg/l).
1.2 Määrittäminen kaasukromatografialla
Etyylieetterissä erotettu sorbiinihappo määritetään kaasukromatogra-
fialla sisäisen standardin kanssa.
1.3 Jälkien tunnistaminen ohutlevykromatografialla
Etyylieetterissä erotettu sorbiinihappo erotetaan ohutlevykromatogra-
fialla ja sen konsentraatio arvioidaan semi-kvantitatiivisesti.
2. MÄÄRITTÄMINEN ULTRAVIOLETTIABSORPTIOSPEKTROFO-
TOMETRISESTI
2.1 Reagenssit
2.1.1 Kiteinen viinihappo (C4H6O6).
2.1.2 Noin 0,02 M kalsiumhydroksidiliuos, Ca (OH)2.
2.1.3 Sorbiinihappovertailuliuos, 20 mg/l.
Liuotetaan 20 mg sorbiinihappoa, C4H8O6, noin 2 ml:aan 0,1 M
natriumhydroksidiliuosta. Kaadetaan 1 000 ml:n mittapulloon,
täytetään merkkiin vedellä. Voidaan myös liuottaa 26,8 mg kalium-
sorbaattia, C6H7KO2, veteen ja täyttää 1 000 ml:ksivedellä.
2.2 Välineistö
2.2.1 Vesihöyrytislauslaite (ks. ”Haihtuvat hapot”).2.2.2 Vesihaude, 100 ºC.
2.2.3 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittaukset aallonpituudella
256 nm, ja kvartsikyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm.
2.3 Suoritus
2.3.1 Tislaus
Mitataan 10 ml viiniä vesihöyrytislauslaitteen tislauskolviin, lisätään
1-2 g viinihappoa (2.2.1). Kerätään 250 ml tislettä.
2.3.2 Kalibrointikäyrä
Valmistetaan vertailuliuoksesta (2.3.1) veteen 4 laimennettua vertai-
luliuosta, joiden pitoisuudet ovat 0,5; 1; 2,5 ja 5 mg viinihappoa
litrassa; mitataan spektrofotometrillä niiden absorbanssit tislattua
vettä vastaan 256 nm: ssä. Piirretaan absorbanssin kuvaaja, joka
esittää muutoksen konsentraatioiden funktiona. Kuvaaja on lineaar-
inen.
2.3.3 Määritys
Mitataan 55 mm halkaisijaltaan olevaan haihdutusmaljaan 5 ml
tislettä, lisätään 1 ml kalsiumhydroksidfiiuosta (2.1.2). Haihdutetaan
kuivaksi kiehuvassa vesihauteessa.
Liuotetaan jäännös muutamaan millilitraan tislattua vettä, siirretään
kvantitatiivisesti 20 ml:n mittapulloonja täytetään merkkiin huuhtelu-
vedellä. Mitataan absorbanssi spektrofotometrillä 256 nm:ssä
vertailuliuostavastaan, joka on saatu laimentamalla 1 ml kalsiumhy-
droksidil iuo sta (2.1.2) 20 ml:lla vettä.
Merkitään mitattu absorbanssiarvo kalibrointikäyrälle ja johdetaan
siitä liuoksen sorbiinihappokonsentraatio C.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 112
▼B
Huomautus:
Käytännössä kuivaksi haihduttaminen voidaan ohittaa. Mitataan
absorbanssi tislattua vettävastaan suoraan tisleestä, joka on laimen-
nettu suhteessa 1/4.
2.4 Tulosten ilmoittaminen
2.4.1 Laskentamenetelmä
Viinin sorbiinihappokonsentraatio ilmoitettuna milligrammoina
litrassa on:
100 × C
C = spektrofotometrisesti määritetyn liuoksen sorbiinihappokonsen-
traatio, ilmoitettuna milligrammoina litrassa.
3 MÄÄRITTÄMINEN KAASUKROMATOGRAFIALLA3.1 Reagenssit
3.1.1 Etyylieetteri, (C
2H5)2O, tislataan juuri ennen käyttöä.
3.1.2 Sisäinen standardiliuos: undekaanihappoliuos, C11H22O2, 95 til-%
etanolissa ja pitoisuus 1 g/l.
3.1.3 Vedellä laimennettu nkkihappo, H2SO4(ρ= 1,84 g/ml), laimennettu
suhteessa 1/3 (v/v).
3.2 Välineistö
3.2.1 Kaasukromatografi, jossa on liekki-ionisaatiodetektori ja ruostumatto-
masta teräksestä valmistettu kolonni(4 m × 1/8 tuuma), joka on
käsitelty dimetyylikloorisilaanilla ja pakattu stationaarifaasilla,
Gaschrom Q80 — 100 mesh, johon sidottu dietyleeniglykolisukki-
naatin (5 %) ja fosforihapon (1 %) seos (DEGS — H3PO4) tai
dietyleeniglykoliadipaatin (7 %) ja fosforihapon (1 %) seos (DEGA
—H3PO4).
Dimetyylikloorisilaani (DMDCS) -käsittelyssä johdetaan kolonnin
läpi liuosta, jovka sisältää 2-3 gDMDCS:ia tolueenissa. Pestään
kolonni välittömästi metanolilla; johdetaan kolonnllll typpivirta ja
tämän jälkeen hekseenivirta ja uudelleen typpivirta. Tämän jälkeen
se täytetään.
Suoritusolosuhteet:
Uunin lämpötila: 175 ºC.
Injektorin ja detektorin lämpötila: 230 ºC.Kantokaasu: typpi (virtausnopeus 20 ml/min).
3.2.2 Vetoisuudeltaan 10 mikrolitraa oleva mikroruisku, jonka asteikko on
jaettu 0,1 mikrolitran välein.
Huomautus:Myös muilla kolonneilla voidaan saada aikaan hyvä erottuminen,
erityisesti kapillaarikolonnilla (esimerkiksi FFAP).
Jäljempänä kuvattu suoritus annetaan esimerkkinä.
3.3 Suoritus
3.3.1 Näytteen valmistaminen määritystä varten
Kaadetaan noin 40 ml: n hiostulpalliseen lasiseen koeputkeen 20 ml
viiniä, lisätään 2 ml sisäistä standardiliuosta (3.1.2) ja 1 ml laimen-
nettua rikkihappoliuosta (3.1.3).
Sekoitetaan liuos kääntelemällä koeputkea ylösalaisin, lisätään
putkeen 10 ml etyylieetteriä (3.1.1). Uutetaan sorbiinihappo orgaani-
seen faasiin ravistelemalla putkea 5 minuutin ajan. Annetaan erottua.
3.3.2 Vertailuliuoksen valmistaminen
Valitaan viini, jonka eetteriuutteen kromatogrammissa ei esiinny
yhtään sorbiinihapon eluoitumista vastaavaa piikkiä; lisätään tähän
viiniin sorbiinihappoa 100 mg litrassa. Käsitellään 20 ml näin valmis-
tettua näytettä 3.3.1 kohdassa kuvatulla tavalla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 113
▼B
3.3.3 Kromatografia
Injektoidaan kromatografiin mikroruiskulla vuorotellen 2 µl 3.3.2
kohdassa kuvatulla tavalla saatua eetterifaasia ja 2 µl 3.3.1 kohdassa
kuvatulla tavalla saatua eetterifaasia.
Tulostetaan vastaavat kromatogrammit: tarkistetaan sorbiinihapon ja
sisäisen standardin retentioaikojen identtisyys. Mitataan molempien
piikkien korkeus tai pinta-ala.
3.4 Tulosten ilmoittaminen
3.4.1 Laskentamenetelmä
Määritetyn viinin sorbiinihappokonsentraatio, ilmoitettuna milligram-
moina litrassa, on:
100/C2h
H/C21
i
H = sorbiinihapon piikin korkeus vertailuliuoksessa
h = sorbiinihapon piikin korkeus määritettävässä näytteessä
I = sisäisen standardin piikin korkeus vertailunäytteessä
i = sisäisen standardin piikin korkeus määritettävässä näytteessä
Huomautus:
Sorbiinihappokonsentraatio voidaan määrittää samalla tavoin vastaa-
vien piikkien pinta-alojen mittauksista.
4 SORBIINIHAPPOJÄLKIEN TUNNISTAMINEN OHUTLEVYKRO-
MATOGRAFIALLA
4.1 Reagenssit
4.1.1 Etyylieetteri, (C2H5)2O.
4.1.2 Vedellä laimennettu rikkihappo, H2SO4(ρ= 1,84 glml), laimennettu
suhteessa 1/3 (v/v).
4.1.3 Sorbiinihappovertailuliuos, noin 10 til-% etanoli-vesiseoksessa,
20 mg/l.
4.14 Liikkuva faasi: heksaani - pentaani - etikkahappo (20:20:3)
(C6H14—C5H12—C H3COOH, ρ= 1,05 g/ml).
4.2 Välineistö
4.2.1 Käyttövalmiita ohutlevykromatografialevyjä, 20 × 20 cm jotka on
päällystetty polyamidigeelillä (paksuus:0,15 mm), johon on lisätty
fluorenssi-indikaattoria.
4.2.2 Ohutlevykromatografiakammio4.2.3 Tarkkuudeltaan ± 0,1 mikrolitraa oleva mikropipetti tai mikroruisku,
jolla voidaan siirtää 5 mikrolitransuuruisia tilavuuksia.
4.2.4 Ultraviolettilamppu (254 nm).
4.3 Suoritus
4.3.1 Näytteen valmistaminen määritystä varten
Kaadetaan noin 25 ml: n hiostulpalliseen lasiseen koeputkeen 10 ml
viiniä, lisätään 1 ml laimennettuarikkihappoliuosta (4.1.2) ja 5 ml
etyylieetteriä (4.1.1). Sekoitetaan kääntelemällä koeputkea ylösa-
laisin. Annetaan erottua.
4.3.2 Laimennettujen vertailuliuosten valmistaminen
Valmistetaan 4.1.3 kohdan liuoksesta 5 laimennettua vertailuliuosta,
joissa pitoisuudet ovat 2, 4, 6, 8 ja 10 mg sorbiinihappoa litrassa.
4.3.3 Kromatografia
Annostellaan mikroruiskulla tai mikropipetillä 2 cm etäisyydelle
levyn alareunasta ja 2 cm etäisyydelletoisistaan 5 µl eetterifaasia,
joka on saatu 4.3.1 kohdassa kuvatulla tavalla ja 5 µl kaikkia laimen-
nettujavertailuliuoksia (4.3.2).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 114
▼B
Pannaan liikkuvaa faasia (4.1.4) kromatografiakammioon noin 0,5 cm
korkeuteen ja annetaan kammionilman kyllästyä liuotinhöyrystä.
Asetetaan levy kammion. Annetaan levyn kehittyä 12-15 cm: iin(ke-
hittymisaika noin 30 minuuttia). Kuivataan levy kylmässä
ilmavirrassa. Tutkitaan kromatogrammiultraviolettilampun alla
254 nm:ssä.
Sorbiinihappotäplät ilmenevät tumman violetteina levyn fluorenssi-
keltaista taustaa vasten.
4.4 Tulosten ilmoittaminen
Määritettävän näytteen ja vertailuliuosten täpliä vertailemalla voidaan
arvioida semi-kvantitatiivisestisorbiinihappokonsentraatio välillä 2-
10 mg litrassa. Suuruudeltaan 1 mg litrassa oleva konsentraatio
voidaan määrittää 10 µl:n suuruisesta näyte-erästä.
10 mg litrassa suuremmat konsentraatiot voidaan määrittää alle 5 µl:n
suuruisesta näyteliuoserästä (mitattumikroruiskulla).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 115
▼B
23.L-ASKORBIINIHAPPO
1. MENETELMIEN PERIAATE
Ehdotetuilla menetelmillä on mahdollista määrittää viineissä ja
rypälemehuissa oleva L-askorbiinihappo ja dehydroaskorbiinihappo.
1.1 Vertailumenetelmä (fluorometria)
L-askorbiinihappo hapetetaan aktiivihiilellä dehydroaskorbiiniha-
poksi. Tämä muodostaa fluoresoivan yhdisteen reagoimalla
ortofenyleenidiamiinin (OPDA) kanssa. Vertailukokeella boorihapon
kanssa voidaan määrittää häiriöfluorenssi (boorihappo — dehydroas-
korbiinihppo -kompleksin muodostumisella) ja johtaa siitä
fluorometrinen määritys.
1.2 Tavanomainen menetelmä (kolorimetria)
L-askorbiinihappo hapetetaan jodilla dehydroaskorbiinihapoksi. Tämä
saostuu 2,4-dinitrofenyylihydrat siinilla ja tuottaa bis(2,4-dinitrofe-
nyylihydratsoni):n. Ohutlevykromatografialla erottamisen ja
etikkahappoiseen liuokseen liuottamisen jälkeen y tämä väriltään
punainen yhdiste määritetään spektrofo tometrillä 500 nm:ssä.
2. VERTAILUMENETELMÄ (FLUOROMETRINEN MENETELMÄ)
2.1 Reagenssit
2.1.1 Ortofenyleenidiamiini- dihydrokloridi -liuos (C6H10Cl2N2), 0,02 g/
100 ml, valmistetaan juuri ennen käyttöä.
2.1.2 Natriumasetaatti trihydraatti (CH3COONa-3H2O), 500 g/l.
2.1.3 Boorihapon ja natriumasetaatin liuos.
Liuotetaan 3 g boorihappoa (H3BO3) 100 ml: aan natriumasetaatti-
liuosta (2.1.2). Tämä liuos on valmistettava juuri ennen käyttöä.
2.1.4 Jääetikkaliuos CH3COOH, ( ρ= 1,05 g/ml) laimennettu 56 %: ksi (v/
v), pH noin 1,2.
2.1.5 L-askorbiinihappo-vertailuliuos, 1 g/l:
Liuotetaan juuri ennen käyttöä 50 mg L-askorbiinihappoliuosta
(C6H8O6), joka on aiemmin kuivattu eksikkaattorissa valolta suojat-
tuna, 50 ml:aan etikkahappoliuosta (2.1.4).
2.1.6 Erittäin puhdas analyysilaatua oleva aktiivihiili (1)
Mitataan 2 l:n erlenmeyerpulloon 100 g aktiivihiiltä, lisätään 500 ml
10 % (v/v) kloorivetyhappoliuosta (Hcl), ( ρ20= 1,19 g/ml). Kuumen-
netaan kiehuvaksi, suodatetaan huokoisuudeltaan 3 olevaa
lasisintteriä käyttäen. Kerätään tällä tavoin käsitelty hiili 2 l: n
pulloon, lisätään 1 l vettä, ravistellaan ja suodatetaan huokoisuudel-
taan 3 olevaa lasisintteriä käyttäen. Toistetaan tämä suoritus kaksikertaa. Asetetaan jäännös 115 ± 5 ºC:n uuniin 12 tunnin ajaksi
(esimerkiksi yhdeksi yöksi).
2.2 Välineistö
2.2.1 Fluorometri. Käytetään spektrofluorometriä, jossa lamppu antaa
jatkuvan spektrin, kun sitä käytetään sen pienimmällä teholla.
Kokeen optimaaliset heräte- ja emissioaallonpituudet määritetään
ennen suoritusta ja ne riippuvat käytetystä laitteesta. Ohjeellinen
heräteaallonpituus on noin 350 nm ja ohjeellinen emissioaallonpituus
noin 430 nm.
Kyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm.
2.2.2 Huokoisuudeltaan 3 oleva lasisintteri.2.2.3 Koeputkia (halkaisija noin 10 mm).2.2.4 Sekoitin koeputkille.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 116
(1) Yksi kauppanimike on ”norite”.
▼B
2.3 Suoritus
2.3.1 Viini- ja rypälemehunäytteen valmistaminen
Otetaan tilavuus viiniä tai rypälemehua ja laimennetaan se mittapul-
lossa 100 ml: ksi 56 % etikkahappoliuoksella (2.1.4) siten, että
saadaan liuos, jonka L-askorbiinihappokonsentraatio on välillä 0-
60 mg/litra. Homogenoidaan mittapullon sisältö ravistelemalla.
Lisätään 2 g aktiivihiiltä (2.1.6) ja annetaan seistä 15 minuutin ajan
ajoittain ravistellen. Suodatetaan tavallisen suodatinpaperin läpi
hyläten suodoksen ensimmäiset millilitrat.
Mitataan kahteen 100 ml:n mittapulloon 5 ml suodosta ja ensimmäi-
seen mittapulloon 5 ml boorihapon ja natriumasetaatin liuosta (2.1.3)
(vertailu) ja toiseen mittapulloon 5 ml natriumasetaattiliuosta (2.1.2)
(näyte). Annetaan seistä 15 minuuttia ajoittain ravistellen, täytetään
100 ml:ksiti slatulla vedellä.
Otetaan 2 ml kummankin mittapullon sisällöstä, lisätään 5 ml ortofe-
nyleenidiamiiniliuosta (2.1.1), ravistellaan; annetaan reagoida 30
minuuttia kunnes liuos tummenee, tämän jälkeen tehdään mittaus
spektrofluorometrillä.
2.3.2 Kalibrointikäyrä
Mitataan kolmeen 100 ml:n mittapulloon 2, 4 ja 6 ml L-askorbiini-
happo-vertailuliuosta (2.1.5), täytetään 100 ml:ksi
etikkahappoliuoksella (2.1.4), homogenoidaan ravistelemalla. Valmis-
tetut vertailuliuokset sisältävät 2-4-6 mg/100 ml.
Lisätään 2 g aktiivihiiltä (2.1.6) jokaiseen mittapulloon ja annetaan
seistä 15 minuuttia ajoittain ravistellen. Suodatetaan tavallisen suoda-
tinpaperin läpi hyläten suodoksen ensimmäiset millilitrat. Mitataan
jokaista kerättyä suodosta 5 ml kolmeen 100 ml:n mittapulloon
(ensimmäinen sarja), toistetaan suoritus toisen kolmen mittapuilo-
saijan saamiseksi. Lisätään jokaiseen ensimmäisen sarjan
mittapulloon (vastaavat vertailunäytettä) 5 ml boorihapon ja natriu-
masetaatin liuosta (2.1.3) ja jokaiseen toisen sarjan mittapulloon 5 ml
natriumasetaattiliuosta (2.1.2).
Annetaan seistä 15 minuuttia ajoittain ravistellen, täytetään 100 ml:
ksi tislatulla vedellä. Otetaan 2 ml jokaisesta mittapullosta, lisätään
5 ml ortofenyleenidiamiiniliuosta (2.1.1), ravistellaan, annetaan
reagoida 30 minuuttia kunnes liuos tummenee, tämän jälkeen tehdään
mittaus spektrofluorometrillä.
2.3.3 Fluorometrinen måäritys
Säädetään jokaiselle kalibrointiliuokselle ja määritysliuokselle nolla-
kohta mittausasteikolla käyttäen vastaavia vertailukoenäytteitä.
Tämän jälkeen mitataan fluorenssin intensiteetti jokaiselle kalibrointi-
sarjan liuokselle ja määritysliuokselle.
Piirretään kalibrointikäyrä: sen on oltava lineaarinen ja kuljettava
origon kautta. Etsitään tältä kuvaajalta määritystä vastaava arvoj
ajohdetaan määritettävän liuoksen L-askorbiinihapon + dehydroaskor-
biinihapon pitoisuus C.
2.3.4 Tulosten ilmoittaminen
Viinin L-askorbiinihappo + dehydroaskorbiinihappo -konsentraatio,
ilmoitettuna milligrammoina litrassa, on:
C×F
F = laimennuskerroin
3. TAVANOMAINEN MENETELMÄ (KOLORIMETRINEN MENE-
TELMÄ)
3.1 Reagenssit
3.1.1 30 % (m/v) metafosforihappoliuos.
Otetaan 30 g aiemmin huhmareessa jauhettua metafosforihappoa
(HPO3)n. Pestään nopeasti upottamalla tislattuun veteen ja ravistele-
malla. Liuotetaan pesty happo tislattuun veteen 100 ml:n
mittapullossa ravistellen, täytetään merkkiin. Saadun liuoksen meta-
fosforihappopitoisuus noin 30 % (m/v).
3.1.2 3 % (m/v) metafosforihappoliuos, valmistettu juuri ennen käyttöä
laimentamalla liuos 3.1.1 tislatulla vedellä suhteessa 1/10.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 117
▼B
3.1.3 1 % (m/v) metafosforihappoliuos, valmistettu juuri ennen käyttöä
laimentamalla liuos 3.1.1 tislatulla vedellä suhteessa 1/30.
3.1.4 Polyamidisuspensio.
Suspendoidaan 10 g kromatografiaan tarkoitettua polyamidijauhetta
ja 60 ml tislattua vettä, annetaan seistä 2 tuntia. Valmistettu määrä
riittää 4 määritykseen.
3.1.5 Tiourea (H2NCSNH2).
3.1.6 0,05 M jodiliuos (I2).
3.1.7 6 % (m/v) 2,4-dinitrofenyylihydratsiiniliuos. Suspendoidaan 6 g 2,4-
dinitrofenyylihydratsiinia (C6H6N4O4) 50 ml:aan jääetikkaa( ρ20= 1,05 g/ml); lisätään 50 ml rikkihappoa ( ρ20= 1,84 g/ml); liuotetaan
2,4- dinitrofenyylihydratsiini ravistelemalla.
3.1.8 Etyyliasetaatti (C4H802), johon on lisätty 2 % (v/v) jääetikkaa
(3.1.12).
3.1.9 Kloroformi(CHCl3).
3.1.10 0,5 % (m/v) tärkkelyksen vesiliuos.
3.1.11 Liikkuva faasi:
etyyliasetaatti …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50 til.
kloroformi…. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 60 ti l.
jääetikka … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 til.
Annetaan liuotinseoksen seistä 12 tuntia ennen käyttöä.
3.1.12 Jääetikka CH3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml).
3.1.13 L-askorbiinihappoliuos, 0,1 g/100 ml 1 % metafosforihappoliuos
(3.1.3).
3.2 Välineistö
3.2.1 Laboratoriosentrifugi ja 50 ml: n hiostulpallisia sentrifugiputkia.3.2.2 Kylmä vesihaude, joka on säädetty välille 5-10 ºC.
3.2.3 Vesihaude, joka on säädetty 20 ºC:seen.
3.2.4 Käyttövalmiita ohutlevykromatografialevyjä, 20 × 20 cm, jotka on
päällystetty silikageelillä G (paksuus: 0,25 tai 0,3 mm).
3.2.5 Kromatografiakammio.3.2.6 Mikropipetti, jolla voidaan mitata 0,2 ml:n suuruisia tilavuuksia.3.2.7 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä absorbanssimittauksia
500 nm:ssä, ja kyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm.
3.3 Suoritus
3.3.1 L-askorbiinihapon hapettaminen dehydroaskorbiinihapoksi
Mitataan 50 ml viiniä 100 ml:n mittapulloon, lisätään 15 ml polyami-
disuspensiota (3.1.4) ja täytetään merkkiin 3 %
metafosforihappoliuoksella (3.1.2). Annetaan seistä tunnin ajan ravis-
tellen säännöllisin välein. Suodatetaan laskostetun suodatinpaperin
läpi. Kerätään 20 ml suodosta sentrifugiputkeen, lisätään 1 ml
0,05 M jodiliuosta (3.1.6). Homogenoidaan tulpalla suljetun sentrifu-
giputken sisältö ravistelemalla ja minuutin kuluttua poistetaan
ylimääräinen jodi lisäämällä noin 25 mg tioureaa.
3.3.2 Diketogulonihapon bis (2,4-dinitrofenyylihydratsoni) -johdannaisen
muodostuminen ja uuttaminen
Asetetaan putki 5-10 ºC:seen jäähdytettyyn vesihauteeseen, lisätään
4 ml 2,4-dinitro fenyylihydratsiiniliuosta (3.1.7). Homogenoidaan
putken sisältö varoen tulpan kastumista. Avataan putki huolellisestija
asetetaan se 20 ºC:n vesihauteeseen noin 16 tunnin ajaksi (esimer-
kiksi yhdeksi yöksi).
Lisätään sentrifugiputkeen 15 ml etyyliasetaattia (3.1. 8), suljetaan
putkiuudelleen, ravistellaan 30 sekuntiaja sentrifugoidaan 5 minuutin
ajan käyttäen 350-400 g:n keskipakoisvoimaa. Pipetoidaan 10 ml
etyyliasetaattiuutetta hiostulpalliseen pulloon. Lisätään sentrifugi-1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 118
▼B
putken sisältöön 5 ml etyyliasetaattia (3.1.8). Suljetaan putki. Ravis-
tellaan 30 sekuntia ja sentrifugoidaan 5 minuuttia samalla nopeudella.
Otetaan 5 ml etyyliasetaattiuutetta ja lisätään tämä tilavuus pullon
sisältämään ensimmäiseen uuteliuokseen. Homogenoidaan seos
sekoittamalla.
3.3.3. Bis (2,4-dinitrofenyylihydratsonin) erottaminen kromatografialla:
tehdään uuttamista seuraavien 2 tunninaikana (3.3.2)
Levitetään vaakasuorana vyöhykkeenä 2 cm:n etäisyydelle levyn ala-
ja sivureunoista 0,2 ml etyyliasetaattiuutetta. Pannaan liikkuvaa
faasia (3.1.11) kammioon noin 1 cm korkeuteen ja annetaan
kammion ilman kyllästyä liuotinhöyryistä. Asetetaan levy kammioon,
annetaan liuottimen nousta levyn yläreunaan saakka, kuivataan levyä
vetokaapissa tunnin ajan. Irrotetaan lastalla kohtisuorasti nousuvyö-
hykettä vastaan punaiseksi värjäytynyt vyöhyke (ominaista 2,4-
dinitro fenyylihydratsonille). Kerätään aine kiiltopaperille ja siir-
retään se kvantitatiivisesti hiostulpalliseen mittapulloon, lisätään 4 ml
etikkahappoa (3.1.12). Annetaan seistä 30 minuutin ajan ravistellen
säännöllisesti. Suodatetaan laskostetun suodatinpaperin läpi suoraan
spektrofotometrin kyvettiin (3.2.7). Suodoksen on oltava kirkasta.
Säädetään etikkahapolla (3.1.12) absorbanssiasteikon nollakohta
500 nm:ssä, mitataan nesteen absorbanssi.
3.3.4 Kalibrointikäyrä
Mitataan kolmeen 100 ml:n mittapulloon 5, 10 ja 15 ml L-askorbiini-
happoliuosta (3.1.13), täytetään merkkiin 1 %
metafosforihappoliuoksella (3.1.3). Valmistetut liuokset sisältävät 50,
100 ja 150 mg/litrassa askorbiinihappoa.
Otetaan kutakin liuosta 50 ml ja menetellään 3.3.1; 3.3.2 ja 3.3.3
kohdassa kuvatulla tavalla. Piirretään kalibrointikäyrä, jonka on
oltava lineaarinen ja kuljettava origon kautta.
3.3.5 Tulosten ilmaiseminen
Viinin L-askorbiinihappo + dehydroaskorbiinihappo -konsentraatio
ilmoitetaan milligrammoina litrassa.
3.3.5.1 Laskeminen
Etsitaan kalibrointikäyrältä 3.3.3 kohdassa mitattu absorbanssiarvo ja
johdetaan siitä maaritetyn liuoksen L-askorbiinihappo + dehydroas-
korbiinihappo -konsentraatio.
Huomautus:
Jos L-askorbiinihappo + dehydroaskorbiinihappo -konsentraatio on
yli 150 mg/l, pienennetään viininäytteen tilavuutta 25, 20 tai
10 ml:aan ja kerrotaan saatu tulos laimennuskertoimella F.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 119
▼B
24.pH
1 PERIAATE
Mitataan potentiaaliero kahden tutkittavaan nesteeseen upotetun elek-
trodin välillä. Toisen elektrodin potentiaali on nesteen pH:n funktio,
toisen potentiaali on kiinteä ja tunnettuja se muodostaa vertailuelek-
trodin.
2 LAITTEET
2.1 pH-mittari, jonka asteikko on kalibroitu pH-yksiköiksi ja jolla
voidaan tehdä mittaukset vähintään 0,05 pH-yksikön tarkkuudella.
2.2 Elektrodit:
2.2.1 Lasielektrodi, säilytetään tislatussa vedessä.
2.2.2. Kalomeli/kyllästetty natriumklo ridi -vertailuelektrodi, säilytetään
kyllästetyssä kaliumkloridiliuoksessa.
2.2.3 Tai yhdistetty elektrodi, säilytetään tislatussa vedessä.
3 REAGENSSIT
3.1 Puskuriliuokset:
3.1.1 Kaliumvetytartraatilla kyllästetty liuos. Liuos sisältää vähintään 5,7 g/
l kaliumvetytartraattia (C4H5KO6) 20 ºC:ssa. Tätä liuosta voidaan
säilyttää 2 kuukautta lisäämällä siihen 0,1 g tymolia 200 ml:aa kohti.
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,57 20 ºC:ssa
3,56 25 ºC:ssa
3,55 30 ºC:ssa
3.1.2 0,05 M kaliumvetyftalaattiliuos. Liuos sisältää 10,211 g/l kaliumve-
tyftalaattia (C
8H5KO4) 20 ºC:ssa. (Pisin säilytysaika: 2 kuukautta).
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,999 15 ºC:ssa
4,003 20 ºC:ssa
4,008 25 ºC:ssa4,015 30 ºC:ssa
3.1.3 Liuos, joka sisältåä:
onokaliumfosfaatti, KH
2PO4…. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3,402 g
Dikaliumfosfaatti, K2HPO4…. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4,354 g
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 l:ksi
(Pisin säilytysaika: 2 kuukautta)
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1466,90 15 ºC:ssa
6,88 20 ºC:ssa
6,86 25 ºC:ssa6,85 30 ºC:ssa
Huomautus:
Voidaan käyttää myös kaupallisia vertailupuskuriliuoksia.
4 SUORITUS
4.1 Näytteen valmistaminen määritystä varten
4.1.1 Rypälemehu ja viini
Käytetään rypälemehua tai viiniä sellaisenaan.
4.1.2 Puhdistettu tiivistetty rypalemehu1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 120
▼B
Laimennetaan puhdistettu tiivistetty rypälemehu vedellä, jotta saatai-
siin suuruudeltaan 25 + 0,5 % (m/m) oleva
kokonaissokerikonsentraatio (25ºBrix).
JosPon puhdistetun tiivistetyn rypälemehun kokonaissokerin pitoi-
suus prosentteina (m/m), punnitaan massa, joka vastaa
2 500
P
ja täytetään 100 g:ksivedellä. Käytetyn veden johtokyvyn on oltava
alle 2 mikrosiemensiä senttimetriä kohti.
4.2 Laitteen säätäminen nollaan
Laitteen säätäminen nollaan tehdään ennen mittausta käytetyn lait-
teen käyttöohjeiden mukaisesti.
4.3 pH-mittarin kalibrointi
Kalibrointi tehdään 20 ºC:ssa puskuriliuoksilla, joiden pH-arvot
20 ºC:ssa ovat 6,88 ja 3,57, käytetyn laitteen käyttöohjeiden mukai-
sesti.
Asteikon kalibrointi tarkistetaan puskuriliuoksella, jonka pH-arvo
20 ºC:ssa on 4,00.
4.4 Mittaus
Upotetaan elektrodi määritettävään näytteeseen, jonka lämpötilan on
oltava välillä 20-25 ºC ja mahdollisimman lähellä 20 ºC. Luetaan
pH-arvo suoraan asteikolta.
Samasta näytteestä tehdään vähintään kaksi määritystä.Tulokseksi otetaan kahden määrityksen aritmeettinen keskiarvo.
5 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Rypälemehun, viinin tai 25 % (m/m) (25 ºBrix) puhdistetusta tiiviste-
tystä rypälemehusta valmistetun liuoksen pH-arvo ilmoitetaan
kahdella desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 121
▼B
25.RIKKIDIOKSIDI
1 MÄÄRITELMÄT
Rikkidioksidilla tarkoitetaan rypälemehussa ja viinissä seuraavissa
muodoissa olevaa rikkidioksidia: H2SO3, HSO3−. Näiden muotojen
tasapaino on pH:n ja lämpötilan funktio:
H2SO3
H++ HSO3−
H2SO3edustaa molekulaarista rikkidioksidia.
Kokonaisrikkidioksidilla tarkoitetaan viinissä vapaana olevien tai sen
ainesosiin sitoutuneiden rikkidioksidimuotojen yhteenlaskettua
määrää.
2 VAPAA RIKKIDIOKSIDI JA KOKONAISRIKKIDIOKSIDI
2.1 Menetelmien periaate
2.1.1 Vertailumenetelmä
2.1.1.1 Viinit ja rypälemehut
Rikkidioksidi erotetaan ilma- tai typpivirralla: se sidotaan ja hapete-
taan kuplittamalla kaasuvirta laimenne- tun neutraalin
vetyperoksidiliuoksen läpi. Muodostunut rikkihappo määritetään
titraamalla natriumhydroksidiliuoksella. Vapaa rikkidioksidi erotetaan
viinistä tislaamalla matalassa lämpötilassa (10 ºC).
Kokonaisrikkidioksidi erotetaan viinistä tislaamalla korkeassa
lämpötilassa (noin 10 ºC).
2.1.1.2 Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut
Kokonaisrikkidioksidi erotetaan kuumassa (noin 100 ºC) aiemmin
laimennetusta puhdistetusta tiivistetystä rypälemehusta.
2.1.2 Nopea koemenetelmä (viinit ja rypälemehut)
Vapaa rikkidioksidi määritetään suoralla jodometrisellä titrauksella.
Tämän jälkeen määritetään sitoutunut rikkidioksidi emäs-hydrolyysin
jälkeen jodometrisellä titrauksella. Kun se lisätään vapaaseen rikki-
dioksidiin, saadaan kokonaisrikkidioksidi.
2.2 Vertailumenetelmä
2.2.1 Välineistö
2.2.1.1 Käytettävän laitteen, erityisesti jäähdyttimen, on oltava alla olevan
kaavion mukainen.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 122
▼B
Kuva 1
Mitat on annettu millimetreinä.Jäähdyttimen muodostaa neljä
samankeskeistä putkea, joiden sisähalkaisijat ovat 45, 34, 27 ja
10 mm.
Kaasun syöttöputki kuplimisastiassa B päättyy halkaisijaltaan 1 cm
olevaan palloon, jonka laajimmalla vaakasuoralla kehällä on 20 halk-
aisijaltaan 0,2 mm olevaa reikää. Tämä putki voi myös päättyä
huokoiseen lasilaattaan, jolla saadaan aikaan paljon pieniä kuplia ja
tällä tavoin varmistetaan hyvä kosketus kaasu- ja nestefaasien välillä.
Laitteen läpi kulkevan kaasuvirran nopeuden on oltava noin 40 l/h.
Laitteen oikealla puolella olevan pullon tarkoituksena on rajoittaa
vesipumpulla aikaan saatu paineen aleneminen 20-30 cm:iin vettä.
Vakuumin säätämiseksi oikeaan arvoonsa olisi kuplimisastian ja
pullon väliin sijoitettava puolikapillaariputkella varustettu virtausmit-
tari.
2.2.1.2 Mikrobyretti.
2.2.2 Reagenssit
2.2.2.1 85 % fosforihappo (H3PO4)(ρ20= 1,71 g/ml).
2.2.2.2 Vetyperoksidiliuos, 9,1 g H2O2/l (3 tilavuutta).
2.2.2.3 Indikaattorireagenssi:
metyylipunaine …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 mg
metyleenisininen …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50 mgalkoholi, 50 til-% …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 100 ml
2.2.2.4 Natriumhydroksidiliuos (NaOH), 0,01 M
2.2.3 Suoritus
2.2.3.1 Vapaan rikkidioksidin määrittäminen
Viini on säilytettävä suljetussa täysinäisessä pullossa 20 ºC:ssa 2
vuorokauden ajan ennen määritystä.
— Kuplituslaitteeseen B mitataan 2-3 ml vetyperoksidiliuosta
(2.2.2.2), 2 tippaa indikaattorireagenssia ja neutraloidaan vetypér-
oksidiliuos 0,01 M natriumhydroksidiliuoksella (2.2.2.4).
Liitetään kuplituslaite laitteeseen.
— Tislauslaitteen 250 ml:n pulloon A mitataan 50 ml näytettä ja
15 ml fosforihappoa (2.2.2.1). Liitetään pullo laitteeseen.
Tämän jälkeen kuplitetaan ilmaa (tai typpeä) 15 minuuttia.
Ylikulkeutuva vapaa rikkidioksidi hapettuu rikkihapoksi. Irrote-
taan kuplituslaite ja titrataan muodostunut happo 0,01 M1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 123
▼B
natriumhydroksidiliuoksella (2.2.2.4). Käytetty millilitramäärä on
n.
2.2.3.2 Tulosten ilmoittaminen
Vapaa rikkidioksidi ilmoitetaan kokonaislukuna milligrammoina
litrassa (mg/l).
2.2.3.2.1 Laskeminen
Vapaa rikkidioksidi milligrammoina litrassa: 6,4 n.
2.2.3.3 Kokonaisrikkidioksidin määrittäminen2.2.3.3.1 Määritettäessä puhdistettuja tiivistettyjä rypälemehuja käytetään
liuosta, joka on saatu laimentamalla määritettävä näyte 40 %: ksi
(m/v) luvussa ”Kokonaishappopitoisuus” olevassa 5.1.2 kohdassa
kuvatulla tavalla. Tislauslaitteen 250 ml:n pulloon A mitataan 50 ml
tätä liuosta ja 5 ml fosforihappoa (2.2.2.1). Liitetään pullo laitteeseen.
2.2.3.3.2 Viinit ja rypälemehut
Näytteen arvioitu pitoisuus ≤50 mg/ kokonais-SO
2|reset|} litrassa.
Tislauslaitteen 250 ml:n pulloon A mitataan 50 ml näytettä ja 15 ml
fosforihappoa (2.2.2.1). Liitetään pullo laitteeseen.
Kuitenkin rypäletäysmehun rikkidioksidipitoisuuden määrittämisessä
käytetään ►M331 päivään elokuuta 1996 ◄saakka 5 ml fosfori-
happoa (2.2.2.1), joka on laimennettu 25 %:ksi (m/v).
2.2.3.3.3 Näytteen arvioitu pitoisuus ≥50 mg/kokonais-SO2litrassa. Tislaus-
laitteen 250 ml:n pulloon A mitataan 20 ml näytettä ja 5 ml
fosforihappoa (2.2.2.1). Liitetään pullo laitteeseen.
Mitataan kuplitusastiaan B 2-3 ml vetyperoksidiliuosta (2.2.2.2),
neutraloidaan se edellä kuvatulla tavalla, kuumennetaan pullon A
sisältämä viini kiehumispisteeseen pienellä noin 4-5 cm korkealla
liekillä, joka koskettaa suoraan pullon pohjaa. Pullon alle ei saa
asettaa metalliverkkoa, mutta sen voi asettaa levylle, jossa on 30 mm
halkaisijaltaan oleva reikä. Tällä tavoin vältetään viinistä erottuvien
pullon seinämiin tarttuneiden aineiden ylikuumentuminen.
Pidetään kiehuvana ja johdetaan samalla ilmavirtaa (tai typpivirtaa).
15 minuutissa kokonaisrikkidioksidi on kulkeutunut yli ja hapettunut.
Määritetään muodostunut rikkihappo titraamalla 0,01 M natriumhy-
droksidilla (2.2.2.4).
Käytetty millilitramäärä on n.
2.2.3.4 Tulosten ilmoittaminen
Kokonaisrikkidioksidi ilmoitetaan kokonaislukuna milligrammoina
litrassa (mg/l) tai vastaavasti milligrammoina kilogrammassa (mg/
kg) kokonaissokeria.
2.2.3.4.1 Laskeminen
—Viinit ja rypälemehut
Kokonaisrikkidioksidipitoisuus milligrammoina litrassa.
— näytteet, joiden rikkidioksidipitoisuus on matala (näyte 50 ml):
6,4 × n
— muut näytteet (näyte 20 ml):
16 × n.
—Puhdistetut tiivistetyt rypälemehut
Rikkidioksidi milligrammoina kilogrammassa kokonaissokeria
(näyte 50 ml valmistetusta näytteestä) (2.2.3.3.1):
1600 /C2n
P
P = kokonaissokerin pitoisuus prosentteina (m/m)
2.2.3.4.2 Toistettavuus (r)
Pitoisuus < 50 mg/l (näyte 50 ml), r = 1 mg/l.
Pitoisuus > 50 mg/l (näyte 20 ml), r = 6 mg/l.
2.2.3.4.3 Uusittavuus (R)
Pitoisuus < 50 mg/l (näyte 50 ml), R = 9 mg/l.
Pitoisuus > 50 mg/l (näyte 20 ml), R = 15 mg/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 124
▼B
2.3 Nopea koemenetelmä
2.3.1 Reagenssit
2.3.1.1 EDTA (Complexone III): etyleenidiamiinitetraetikkahapon dinatrium-
suola (C10H14N2O8,2 H2O).
2.3.1.2 4 M natriumhydroksidiliuos NaOH (160 g/l).2.3.1.3 Rikkihappo H
2SO4(ρ20= 1,84 g/ml, laimennettu suhteessa 1/10 (v/v)).
2.3.1.4 Tärkkelysliuos, 5 g/l.
Sekoitetaan 5 g tärkkelystä noin 500 ml:aan vetta. Kuumennetaan
kiehuvaksi sekoittaenja annetaan kiehua 10 minuutin ajan; lisätään
200 g natriumkloridia (NaCI). Täytetään litraksi jäähtymisen jälkeen.
2.3.1.5 0,025 M jodiliuos (I2).
2.3.2 Välineet
2.3.2.1 500 ml:n erlenmeyerpulloja.2.3.2.2 Byretti.2.3.2.3 1, 2, 5 ja 50 ml:n pipettejä.
2.3.3 Suoritus
2.3.3.1 Vapaa rikkidioksidi
Mitataan 500 ml:n erlenmeyerpulloon:
— 50 ml viiniä,
— 5 ml tärkkelysliuosta (2.3.1.4),— 30 mg EDTA (2.3.1.1),— 3 ml H
2SO4, 1/10 (v/v) (2.3.1.3).
Titrataan viipymättä 0,025 M jodilla (2.3.1.5), kunnes sininen väri
säilyy selvänä 10-5 sekuntia. Käytetty joditilavuus on n.
2.3.3.2 Sitoutunut rikkidioksidi
Lisätään 8 ml 4 M natriumhydroksidiliuosta (2.3.1.2), ravistetaan
kerran ja annetaan seistä 5 minuutin ajan. Kaadetaan yhdellä kertaa
voimakkaasti sekoittaen pieneen dekantterilasiin mitattu 10 ml 1/10
rikkihappoa (2.3.1.3). Titrataan viipymättä 0,025 M jodilla (2.3.1.5).
Käytetty joditilavuus on n'.
Lisätään 20 ml 4 M natriumhydroksidiliuosta (2.3.1.2), ravistetaan
yhden kerran ja annetaan seistä 5 minuutin ajan. Laimennetaan
200 ml:lla jääkylmää vettä.
Kaadetaan yhdellä kertaa voimakkaasti ravistellen koeputkeen mitattu
30 ml 1/10 rikkihappoa (2.3.1.3). Titrataan vapautunut rikkidioksidi
0,025 M jodilla (2.3.1.5). Käytetty joditilavuus on n”.
2.3.4 Tulosten ilmoittaminen
2.3.4.1 Laskeminen
Vapaa rikkidioksidi milligrammoina litrassa: 32n.Kokonaisrikkidioksidi milligrammoina litrassa: 32 (n + n' + n”).Huomautukset:1 Sellaisten punaviinien määrityksessä, joiden SO
2-pitoisuus on
matala, on hyödyllistä käyttää laimeampaa kuin 0,025 M jodia,
esimerkiksi 0,01 M. Korvataan edellä esitettyjen yhtälöiden kerroin
32 kertoimella 12,8.
2 Punaviinejä määritettäessä on hyödyllistä valaista viini alhaalta
päin keltaisella valolla, joka saadaan antamalla tavallisen hehku-
lampun valaista kaliumkromaattiliuoksen läpi tai natriumlampulla.
Määritys on tehtävä pimeässä huoneessa ja viinin läpikuultavuutta
on tarkkailtava. Viini muuttuu sameaksi kun tärkkelyksen väri
vaihtuu.
3 Jos rikkidioksidin määrä on lähellä hyväksyttyä rajaa tai ylittää
sen, kokonaisrikkidioksidipitoisuus on määritettävä vertailumene-
telmällä.
4 Jos vaaditaan erityisesti vapaan rikkidioksidin määrittämistä, se
tehdään yleensä näytteestä, jota on pidetty ennen määritystä 21990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 125
▼B
päivän ajan anaerobisissa olosuhteissa 20 ºC:n lämpötilassa; myös
määritys tehdään tässä lämpötilassa.
5 Koska jodi hapettaa tiettyjä aineita happamassa liuoksessa, tarkem-
missa määrityksissä on tarpeen arvioida tähän käytetty jodimäärä.
Tässä tarkoituksessa on sidottava vapaa rikkidioksidi ylimääräisellä
asetaldehydillä tai propionaldehydillä ennen jodititrauksen teke-
mistä. Mitataan 300 ml:n mittapulloon 50 ml viiniä, lisätään 5 ml
asetaldehydiliuosta (C2H4O, 7 g/l) tai 5 ml propionaldehydiliuosta
(C3H6O, 10 g/l).
Suljetaan pullo ja annetaan seistä vähintään 30 minuutin ajan.
Lisätään 3 ml 1/10 rikkihappoa (2.3.1.3) ja tärkkelyksen värimuu-
tokseen tarvittava määrä 0,025 M jodia (2.3.1.5). Käytetty
joditilavuus on n'”. Se on vähennettävä n:stä (vapaa rikkidioksidi)
ja n + n' + n”:stä (kokonaisrikkidioksidi).
n'” on yleensä pieni: 0,2-0,3 ml 0,025 M jodia. Jos viiniin on
lisätty sorbiinihappoa, n'” on paljon suurempi ja tämän aineen
määrä voidaan mitata, ainakin likimain, n'” arvosta, sillä 1 ml
0,025 M jodia hapettaa 4,4 mg askorbiinihappoa. Määrittämällä
n'” on mahdollista löytää helposti hapettumaton askorbiinihap-
pojäännös viineistä, joihin on lisätty yli 20 mg/l askorbiinihappoa.
3 MOLEKULAARINEN RIKKIDIOKSIDI3.1 Menetelmän periaate
Molekulaarisen rikkodioksidin, H
2SO3, prosentuaalinen osuus
vapaassa rikkihapokkeessa arvioidaan pH:n, alkoholipitoisuuden ja
lämpötilan funktiona.
Kun lämpötila ja alkoholipitoisuus ovat annettuja:
H2SO3
H++ HSO3−
(1) H2SO3 ½/C138 ¼L
10pH/C2pkM ðÞþ1
jossa
pKM=p K T/C0Aﬃﬃ
Ip
1þBﬃﬃ
Ip
L= [ H2SO3] + [HSO3]
I = ionivahvuus
A ja B = kertoimet, jotka vaihtelevat lämpötilan ja alkoholipitoi-
suuden mukaan
KT= termodynaaminen dissosiaatiovakio
KM= yhdistetty dissosiaatiovakio
Kun ionivahvuuden I:n keskiarvoksi otetaan 0,038, saadaan taulu-
kosta 2 ρKMarvot lämpötilan ja alkoholipitoisuuden funktiona.
Yhtälöä 1 käyttäen laskettu molekulaarinen rikkidioksidi saadaan
taulukosta 3 pH:n, lämpötilan ja alkoholipitoisuuden funktiona.
3.2 Laskeminen
Kun tunnetaan viinin pH-arvo ja sen alkoholipitoisuus, saadaan mole-
kulaarisen rikkidioksidin prosentuaalinen osuus taulukosta 3
lämpötilassa t ºC: tämä on X %.
Molekulaarisen rikkidioksidin pitoisuus mg/l:X×CC = vapaan rikkidioksidin pitoisuus mg/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 126
▼B
TAULUKKO 1
Termodynaamisen vakion pKTarvot
Alkoholipitoisuus
til-%Lämpötila ºC
20 25 30 35 40
0 1,798 2,000 2,219 2,334 2,493
5 1,897 2,098 2,299 2,397 2,527
10 1,997 2,198 2,394 2,488 2,606
15 2,099 2,301 2,503 2,607 2,728
20 2,203 2,406 2,628 2,754 2,895
TAULUKKO 2
Yhdistetyn vakion pKMarvot (I = 0,038)
Alkoholipitoisuus
til-%Lämpötila ºC
20 25 30 35 40
0 1,723 1,925 2,143 2,257 2,416
5 1,819 2,020 2,220 2,317 2,446
10 1,916 2,116 2,311 2,405 2,522
15 2,014 2,216 2,417 2,520 2,640
20 2,114 2,317 2,538 2,663 2,803
TAULUKKO 3
Molekulaarisen rikkidioksidin prosentuaalinen ossus vapaasta rikkidioksi-
dista (I = 0,038)
pHT = 20 ºC
Alkoholipitoisuus til-%
0 5 10 15 20
2,8 7,73 9,46 11,55 14,07 17,09
2,9 6,24 7,66 9,40 11,51 14,07
3,0 5,02 6,18 7,61 9,36 11,51
3,1 4,03 4,98 6,14 7,58 9,36
3,2 3,22 3,99 4,94 6,12 7,58
3,3 2,58 3,20 3,98 4,92 6,12
3,4 2,06 2,56 3,18 3,95 4,92
3,5 1,64 2,04 2,54 3,16 3,95
3,6 1,31 1,63 2,03 2,53 3,16
3,7 1,04 1,30 1,62 2,02 2,53
3,8 0,83 1,03 1,29 1,61 2,02
T = 25 ºC
2,8 11,47 14,23 17,15 20,67 24,752,9 9,58 11,65 14,12 17,15 22,71
3,0 7,76 9,48 11,55 14,12 17,18
3,1 6,27 7,68 9,40 11,55 14,15
3,2 5,04 6,20 7,61 9,40 11,58
3,3 4,05 4,99 6,14 7,61 9,42
3,4 3,24 4,00 4,94 6,14 7,63
3,5 2,60 3,20 3,97 4,94 6,16
3,6 2,07 2,56 3,18 3,97 4,55
3,7 1,65 2,05 2,54 3,18 3,98
3,8 1,32 1,63 2,03 2,54 3,181990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 127
▼B
pHT = 20 ºC
Alkoholipitoisuus til-%
0 5 10 15 20
T = 30 ºC
2,8 18,05 20,83 24,49 29,28 35,36
2,9 14,89 17,28 20,48 24,75 30,29
3,0 12,20 14,23 16,98 20,71 25,66
3,1 9,94 11,65 13,98 17,18 21,52
3,2 8,06 9,48 11,44 14,15 17,88
3,3 6,51 7,68 9,30 11,58 14,75
3,4 5,24 6,20 7,53 9,42 12,08
3,5 4,21 4,99 6,08 7,63 9,84
3,6 3,37 4,00 4,89 6,16 7,98
3,7 2,69 3,21 3,92 4,95 6,44
3,8 2,16 2,56 3,14 3,98 5,19
T = 35 ºC
2,8 22,27 24,75 28,71 34,42 42,18
2,9 18,53 20,71 24,24 29,42 36,69
3,0 15,31 17,18 20,26 24,88 31,52
3,1 12,55 14,15 16,79 20,83 26,77
3,2 10,24 11,58 13,82 17,28 22,51
3,3 8,31 9,42 11,30 14,23 18,74
3,4 6,71 7,63 9,19 11,65 15,49
3,5 5,44 6,16 7,44 9,48 12,71
3,6 4,34 4,95 6,00 7,68 10,36
3,7 3,48 3,98 4,88 6,20 8,41
3,8 2,78 3,18 3,87 4,99 6,80
T = 40 ºC
2,8 29,23 30,68 34,52 40,89 50,142,9 24,70 26,01 29,52 35,47 44,74
3,0 20,67 21,83 24,96 30,39 38,85
3,1 17,15 18,16 20,90 25,75 33,54
3,2 14,12 14,98 17,35 21,60 28,62
3,3 11,55 12,28 14,29 17,96 24,15
3,4 9,40 10,00 11,70 14,81 20,19
3,5 7,61 8,11 9,52 12,13 16,73
3,6 6,14 6,56 7,71 9,88 13,77
3,7 4,94 5,28 6,22 8,01 11,25
3,8 3,97 4,24 5,01 6,47 9,151990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 128
▼B
26.NATRIUM
1 MENETELMIEN PERIAATE1.1 Vertailumenetelmä: atomiabsorptiospektrofotometria
Natrium määritetään suoraan viinistä atorniabsorptiospektrofotometri-
sesti sen jälkeen, kun siihen on lisätty ionisaatiota vaimentavaksi
aineeksi cesiumkloridia.
1.2 Tavanomainen menetelmä: liekkifotometria
Natrium määritetään suoraan vähintään suhteessa 1/10 laimennetusta
viinistä liekkifotometnsesti.
2 VERTAILUMENETELMÄ2.1 Reagenssit
2.1.1 Natriumliuos, 1 g/l
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa standardiliuosta, joka
sisältää natriumia 1 g/l. Tarma liuos voidaan valmistaa liuottamalla
2,542 g kuivaa natriumkloridia, NaCl, tislattuun veteen ja täyttämällä
tilavuus yhdeksi litraksi.
Tätä liuosta säilytetään polyetyleenipullossa.
2.1.2 Matriisiliuos
Sitruunahappo C
6H8O7,H2O … .................... 3 , 5 g
SakkaroosiC12H22O11… ........................... 1 , 5 g
GlyseroliC3H8O3…............................... 5 , 0 g
Vedetön kalsiumkloridi CaCl2… .................. 5 0 m g
Vedetön magnesiumkloridi MgCl2… .............. 5 0 m g
Absoluuttinen alkoholi C2H5O H … ................ 5 0 m l
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 500 ml:ksi
2.1.3 Cesiumkloridiliuos, joka sisältää 5 % cesiumia
Liuotetaan 6,330 g cesiumkloridia, CsCI, 100 ml:aan tislattua vettä.
2.2 Laitteet
2.2.1 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on ilma-asetyleenipoltin.2.2.2 Natriumonttokatodilamppu.
2.3 Suoritus
2.3.1 Näytteen valmistaminen
Mitataan 2,5 ml viiniä 50 ml:n mittapulloon, lisätään 1 ml cesiumk-
londiliuosta (2.1.3) ja täytetään merkkiin tislatulla vedellä.
2.3.2 Kalibrointi
Mitataan 100 ml:n mittapulloista koostuvan sarjan jokaiseen mitta-
pulloon 5,0 ml matriisiliuosta, lisätään suhteessa 1/100 laimennettua
1 g/l natriumliuosta (2.1.1) 0; 2,5; 5; 7,5 ja 10 ml, lisätään kaikkiin
pulloihin 2 ml cesiumkloridiliuosta (2.1.3) ja täytetään tilavuus
100 ml: ksiti slatulla vedellä.
Valmistettujen vertailuliuosten pitoisuudet ovat 0; 0,25; 0,50; 0,75 ja
1,00 mg natriumia litrassa ja nesisältävät 1 g cesiumia litrassa. Näitä
liuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa.
2.3.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 589,0 nm. Säädetään 1 g cesiumia litrassa
sisältävällä matriisiliuoksella (2.3.2) absorbanssiasteikon nollakohta.
Imetään laimennettu viini suoraan spektrofotometrin polttimoon ja
tämänjälkeen vertailuliuokset (2.3.2) vuorotellen. Luetaan absor-
banssit. Toistetaan määritykset.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 129
▼B
2.4 Tulosten ilmoittaminen
2.4.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssi vertailuliuosten natriumkonsentraation funk-
tiona.
Etsitään käyrältä näytteelle saatujen absorbanssien keskiarvo ja
luetaan vastaava natriumkonsentraatio Cmilligrammoina litrassa.
Natriumkonsentraatio ilmoitettuna kokonaislukuná milligrammoina
litrassa viiniä on: 20 × C
2.4.2 Toistettavuus (r)
r = 1 + 0,024 ximg/l
xi= näytteen natriumkonsentraatio mg/l.
2.4.3 Uusittavuus (R)
R = 2,5 + 0,05 ximg/l
xi= näytteen natrtumkonsentraatio mg/l.
3. Tavanomainen menetelmä
3.1 Reagenssit
3.1.1 Vertailuliuos, joka sisältää natriumia 20 mg/l
Absoluuttinen alkoholi (C2H5OH) … ................. 1 0 m l
Sitruunahappo (C6H8O7,H2O ) … .................... 7 0 0 m g
Sakkaroosi(C12H22O11) … ........................... 3 0 0 m g
Glyseroli(C3H8O3) … ............................... 10 0 0 m g
Kaliumvetytartraatti (C4H5KO6)…. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 481,3 mg
Vedetön kalsiumkloridi (CaCl2) … .................. 1 0 m g
Vedetön magnesiumklondi (MgCI2) ….............. 1 0 m g
Kuiva natriumkloridi (NaCl) …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50,84 mg
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 l:ksi
3.1.2 Laimennusijuos
Absoluuttinen alkoholi (C2H5OH) … ................. 1 0 m l
Sitruunahappo (C6H8O7,H2) O … .................... 7 0 0 m g
Sakkaroosi(C12H22O11) … ........................... 3 0 0 m g
Glyseroli(C3H8O3) … ............................... 10 0 0 m g
Kaliumvetytartraatti (C4H5KO6)…. . . . . . . . . . . . . . . . . . . 481,3 mg
Vedetön kalsiumkloridi (CaCI2) … .................. 1 0 m g
Vedetön magnesiuinkîoiidi (MgCl2) … .............. 1 0 m g
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 l:ksi
Liuoksia 3.1.1 ja 3.1.2 valmistettaessa liuotetaan kaliumvetytartraatti
noin 500 ml:aan hyvin kuumaatislattua vettä, sekoitetaan liuos
muihin kemikaaleihin, jotka on tätä ennen liuotettu 400 ml:aan tislat-
tuavettä, ja täytetään yhdeksi litraksi.
Näitä liuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa lisäämällä niihin 2
tippaa allyyli-isotiosyanaattia.
3.2 Laite
3.2.1 Ilma-butaani -seos liekkifotometri.
3.3 Suoritus
3.3.1 Kalibrointi
Mitataan viiteen 100 ml:n mittapulloon 5; 10; 15; 20 ja 25 ml 20 mg/
l natriumliuosta (3.1.1) ja täytetään100 ml:ksi laimennusliuoksella1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 130
▼B
(3.1.2). Tällä tavoin saadaan liuokset, jotka sisältävät 1; 2; 3; 4 ja 5
mgnatriumia litrassa.
3.3.2 Määritys
Tehdään mittaukset 589,0 nm:ssä. Säädetään 100-prosenttinen trans-
missio tislatulla vedellä. Imetään vertailuliuokset (3.3.1) vuorotellensuoraan fotometrin polttimoon ja tämän jälkeen tislatulla vedellä
suhteessa 1/10 laimennettu viini ja kirjataan transmissioprosentit.
Tarpeen vaatiessa laimennetaan jo suhteessa 1/10 laimennettu viini
laimennusliuoksella (3.1.2).
3.4 Tulosten ilmoittaminen
3.4.1 Laskentamenetelmä
Piirretään transmissioprosentit vertailuliuosten natriumkonsentraation
funktiona. Etsitään tältä käyrältä viininäytteelle saatu transmissio ja
määritetään natriumkonsentraatio C. Natriumkonsentraatio ilmoitet-
tuna kokonaislukuna milligrammoina litrassa on:
C×F
F = laimennuskerroin.
3.4.2 Toistettavuus (r)
(lukuun ottamatta väkevä viini) r = 1,4 mg/l
Väkevä viini r = 2,0 mg/l.
3.4.3 Uusittavuus (R)
R = 4,7 + 0,08 x
img/l
xi= näytteen natnumkonsentraatio mg/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 131
▼B
27.KALIUM
1. MENETELMIEN PERIAATE1.1 Vertailumenetelmä
Kalium määritetään suoraan laimennetusta viinistä atomiabsorptios-
pektrofotometrisesti sen jälkeen, kun siihen on lisätty ionisaatiota
vaimentavaksi aineeksi cesiumkloridia.
1.2 Tavanomainen menetelmä
Kalium määritetään suoraan laimennetusta viinistä liekkifotometri-
sesti.
2. VERTAILUMENETELMÄ2.1 Reagenssit
2.1.1 Kaliumliuos, 1 g/l
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa standardiliuosta, joka
sisältää kaliumia 1 g/l. Tämä liuos voidaanvalmistaa liuottamalla
4,813 g kaliumvetytartraattia (C
4H5KO6) tislattuun veteen ja
täyttämällä tilavuusyhdeksi litraksi.
2.1.2 Matriisiliuos
Sitruunahappo C6H8O7,H2O … .................... 3 , 5 g
SakkaroosiC12H22O11… ........................... 1 , 5 g
GlyseroliC3H8O3…............................... 5 , 0 g
Vedetön kalsiumkloridi CaCl2… .................. 5 0 m g
Vedetön magnesiumkloridi MgCl2… .............. 5 0 m g
Absoluuttinen alkoholi C2H5O H … ................ 5 0 m l
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 500 ml:ksi
2.1.3 Cesiumkloridiliuos, joka sisältää 5 % cesiumia
Liuotetaan 6,330 g cesiumkloridia (CsCl) 100 ml:aan tislattua vettä.
2.2 Laitteet
2.2.1 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on ilma-asetyleenipoltin.2.2.2 Kaliumonttokatodilamppu.
2.3 Suoritus
2.3.1 Näytteen valmistaminen
Mitataan 2,5 ml viiniä (laimennettu suhteessa 1/10) 50 ml:n mittapul-
loon, lisätään 1 ml cesiumkloridiliuosta (2.1.3) ja täytetään merkkiin
tislatulla vedellä.
2.3.2 Kalibrointi
Mitataan 100 ml:n mittapulloista koostuvan sarjan jokaiseen pulloon
5 ml matriisiliuosta (2.1.2), lisätäänkaliumliuosta (1 g/l) (2.1.1)
(laimennettu suhteessa 1/10) 0; 2,0; 4,0; 6,0 ja 8,0 ml, lisätään kaik-
kiin
pulloihin 2 ml cesiumkloridiliuosta (2.1.3), täytetään tilavuus
100 ml:ksi tislatulla vedellä. Valmistettujen vertailuliuosten pitoi-
suudet ovat 0; 2; 4; 6 ja 8 mg kaliumia litrassa ja ne sisältävät 1 g
cesiumia litrassa. Näitä liuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa.
2.3.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 769,9 mn. Säädetään 1 g cesiumia litrassa
sisältävällä matriisiliuoksella (2.3.2) absorbanssiasteikon nollakohta.
Imetään laimennettu viini (2.3.1) suoraan spektrofotometrin po ltti-
moon ja tämän jälkeen vertailuliuokset (2.3.2) vuorotellen; luetaan
absorbanssit. Toistetaan määritykset.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 132
▼B
2.4 Tulosten ilmoittaminen
2.4.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit vertailuliuosten kaliumkonsentraation funk-
tiona.
Etsitään tältä käyrältä laimennetulle viininäytteelle saatujen absor-
banssien keskiarvo ja luetaan vastaava kaliumkonsentraatio C
milligrammoina litrassa.
Kaliumkonsentraatio ilmoitettuna kokonaislukuna milligrammoina
litrassa viiniä on: F × C
F = laimennuskerroin (tässä 200).
2.4.2 Toistettavuus (r)
r = 35 mg/l.
2.4.3 Uusittavuus (R)
R = 66 mg/l.
2.4.4 Muut tulosten ilmaisutavat
— milliekvivalentteina litrassa: 0,0256 × F × C
— milligrammoina kaliumvetytartraattia litrassa
4,813 × F × C
3. TAVANOMAINEN MENETELMÄ: LIEKKIFOTOMETRIA3.1 Reagenssit
3.1.1 Vertailuliuos, joka sisältää kaliumia 100 mg/l
Absoluuttinen alkoholi (C
2H5OH) … ............. 1 0 m l
Sitruunahappo (C6H8O7,H2O ) … ................ 7 0 0 m g
Sakkaroosi(C12H22O11) … ....................... 3 0 0 m g
Glyserolil (C3H8O3) … .......................... 10 0 0 m g
Natriumkloridi (NaCl) …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50,8 mg
Vedetön kalsiumkloridi (CaCl2) … .............. 1 0 m g
Vedetön magnesiumkloridi (MgCl2) … .......... 1 0 m g
Kuiva kaliumvetytartraatti (C4H5KO6) …. . . . . . . . 481,3 mg
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 000 ml:ksi
Liuotetaan kaliumvetytartraatti noin 500 ml:aan hyvin kuumaa
tislattua vettä, sekoitetaan seos muihin kemikaaleihin, jotka on tätä
ennen liuotettu 400 ml:aan tislattua vettä ja täytetään yhdeksi litraksi.
3.1.2 Laimennusliuos
Absoluuttinen alkoholi (C2H5OH) … ............. 1 0 m l
Sitruunahappo (C6H8O7,H2O ) … ................ 7 0 0 m g
Sakkaroosi(C12H22O11) … ....................... 3 0 0 m g
Glyseroli(C3H8O3) … ........................... 10 0 0 m g
Natriumkloridi (NaCl) …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50,8 mgVedetön kalsiumkloridi (CaCl
2) … .............. 1 0 m g
Vedetön magnesiumkloridi (MgCl2) … .......... 1 0 m g
Viinihappoa (C4H6O6) … ........................ 3 8 3 m g
Täytetään vedellä …. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 000 ml:ksi
Näitä liuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa lisäämällä niihin 2
tippaa allyyli-isotiosyanaattia.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 133
▼B
3.2 Laitteet
3.2.1 Ilma-butaani -seoksella toimiva liekkifotometri.
3.3 Suoritus
3.3.1 Kalibrointi
Mitataan neljään 100 ml:n mittapulloon 25; 50; 75 ja 100 ml vertai-
luliuosta (3.1.1) ja täytetään 100 ml:ksi laimennusliuoksella (3.1.2).Tällä tavoin saadaan liuokset, jotka sisältävät 25; 50; 75 ja 100 mg
kaliumia litrassa.
3.3.2 Määritys
Tehdään mittaukset 766 nm:ssä. Säädetään transmissio 100 %:iin
tislatulla vedellä. Imetään vuorotellen suoraan fotometrin polttimoon
vertailuliuokset (3.3.1) ja tämän jälkeen tislatulla vedellä suhteessa 1/
10 laimennettu viini ja kirjataan transmissioprosentit. Tarpeen
vaatiessa laimennetaan jo suhteessa 1/10 laimennettu viini laimennus-
liuoksella (3.1.2).
3.4 Tulosten ilmoittaminen
3.4.1 Laskentamenetelmä
Piirretään transmissioprosentit vertailuliuosten kaliumkonsentraation
funktiona vertailuliuoksissa. Etsitään tältä käyrältä laimennetulle
viininäytteelle saatu transmissio ja luetaan vastaava kaliumkonsen-
traatio C.
Kaliumkonsentraatio ilmoitettuna kokonaislukuna milligrammoina
litrassa on:
C×F
F = laimennuskerroin.
3.4.2 Toistettavuus (r)
r = 17 mg/l
3.4.3 Uusittavuus (R)
R = 66 mg/l
3.4.4 Muut tulosten ilmaisutavat
— milliekvivalentteina litrassa: 0,0256 × F × C
— milligrammoina kaliumvetytartraattia litrassa 4,813 × F × C.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 134
▼B
28.MAGNESIUM
1. PERIAATE
Magnesium määritetään suoraan sopivasti laimennetusta viinistä
atomiabsorptiospektrofotometrisesti.
2. REAGENSSIT
2.1 Väkevä vertailuliuos, jonka magnesiumpitoisuus on 1 g/l
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa magnesiumstandardiliuosta,
jonka pitoisuus on 1 g/l. Tämä liuos voidaan valmistaa liuottamalla
8,3646 g magnesiumkloridia (MgCl2,6 H2O) tislattuun veteen ja
täyttämällä tilavuus yhdeksi litraksi.
2.2 Laimennettu standardiliuos, jonka magnesiumpitoisuus on 5 mg/l
Huomautus:Näitä magnesiumstandardiliuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa.
3. LAITTEISTO
3.1 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on ilma-asetyleenipoltin.
3.2 Magnesiumonttokatodilamppu.
4. SUORITUS4.1 Naytteen valmistaminen
Laimennetaan viini tislatulla vedellä suhteessa 1/100.
4.2 Kalibrointi
Mitataan 100 ml:n mittapulloista koostuvaan sarjaan 5; 10; 15 ja
20 ml liuosta 2.2 ja täytetään 100 ml:ksi tislatulla vedellä. Valmistet-
tujen vertailuliuosten pitoisuudet ovat 0,25; 0,50; 0,75 ja 1 mg
magnesiumia litrassa. Näitä liuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa.
4.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 285 nm. Säädetään tislatulla vedellä absorbans-
siasteikon nollakohta. Imetään laimennettu viini suoraan
spektrofotometrin polttimoon ja tämän jälkeen vuorotellen 4.2
kohdan mukaisesti valmistetut vertailuliuokset.
Luetaan absorbanssit; toistetaan määritykset.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN5.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit vertailuliuosten magnesiumkonsentraation
funktiona.
Etsitään tältä käyrältä laimennetulle viininäytteelle saatujen absor-
banssien keskiarvo ja luetaan vastaava magnesiumkonsentraatio C.
Magnesiumkonsentraatio ilmoitettuna kokonaislukuna milligram-
moina litrassa viiniä on:
100 × C.
5.2 Toistettavuus (r)
r = 3 mg/l.
5.3 Uusittavuus (R)
R = 8 mg/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 135
▼B
29.KALSIUM
1. PERIAATE
Kalsium määritetään suoraan sopivasti laimennetusta viinistä
atomiabsorptiospektrofotometrisesti sen jälkeen, kun siihen on lisätty
ionisaation vaimentavaa ainetta.
2. REAGENSSIT
2.1 Vertailuliuos, jonka kalsiumpitoisuus on 1 g/l
Kaytetaan kaupallisesti saatavissa olevaa kalsiumstandardiliuosta,
jonka pitoisuus on 1 g/l. Tämä liuos voidaan valmistaa liuottamalla
2,5 g kalsiumkarbonaattia (CaCO3) sen liuottamiseksi tarvittavaan
määrään suhteessa 1/10 (v/v) laimennettua HCl:a ja täyttämällä tila-
vuus yhdeksi litraksi tislatulla vedellä.
2.2 Laimennettu standardiliuos, jonka kalsiumpitoisuus on 50 mg/l
Huomautus:Näitä kalsiumstandardiliuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa.
2.3 Lantaanikloridiliuos, jonka lantaanipitoisuus on 50 g/l
Liuotetaan 13,369 g lantaanikloridia (LaCi
3,7H2O) tislattuun veteen;
lisätään 1 ml suhteessa 1/10 (v/v) laimennettua HCl:a ja täytetään
tilavuus 100 ml:ksi.
3. LAITTEISTO
3.1 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on ilma-asetyleenipoltin.
3.2 Kalsiumonttokatodilamppu.
4. SUORITUS
4.1 Näytteen valmistaminen
Mitataan 20 ml:n mittapulloon 1 ml viiniä, 2 ml 2.3 liuosta ja
täytetään merkkiin tislatulla vedellä. Suhteessa 1/20 laimennetun
viinin lantaanipitoisuus on 5 g/l.
Huomautus:
Makeiden viinien määrityksessä riittää 5 g/l:n suuruinen lantaanikon-
sentraatio sillä edellytyksellä, että laimennuksen jälkeen
sokeripitoisuus on vähintään 2,5 g/l. Jos viinin sokerikonsentraa- tio
on korkeampi, on tarpeen säätää lantaanipitoisuus 10 g/l:aan.
4.2 Kalibrointi
Mitataan viiteen 100 ml:n mittapullon sarjaan 0; 5; 10; 15 ja 20 ml
2.2 liuosta, lisätään kaikkiin pulloihin 10 ml 2.3. liuosta ja taytetaan
100 ml:ksi tislatulla vedellä. Valmistettujen vertailuliuosten pitoi-
suudet ovat 0; 2,5; 5; 7,5 ja 10 mg kalsiumia litrassa ja ne sisältävät
lantaania 5 g/l. Näitä liuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa.
4.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 422,7 nm. Saadetaan lantaania 5 g/l sisältävällä
liuoksella (4.2) absorbanssiasteikon nollakohta. Imetään laimennettu
viini suoraan spektrofotometrin polttimoon ja tämän jälkeen vuoro-
tellen 4.2 kohdan mukaisesti valmistetut vertailuliuokset. Luetaan
absorbanssit. Toistetaan maaritykset.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
5.1 Laskentamenetelmä
Piirretaan absorbanssit vertailuliuosten kalsiumkonsentraation funk-
tiona.
Etsitään tältä käyrältä laimennetulle viininäytteelle saatujen absor-
banssien keskiarvo ja luetaan vastaava kalsiumkonsentraatio C.
Kalsiumkonsentraatio ilmoitettuna kokonaislukuna milligrammoina
litrassa viiniä on:1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 136
▼B
20 × C
5.2 Toistettavuus (r)
Pitoisuus < 60 mg/l: r = 2,7 mg/l.
Pitoisuus > 60 mg/l: r = 4 mg/l.
5.3 Uusittavuus (R)
R = 0,114 x1− 0,5
xi= näytteen konsentraatio mg/l.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 137
▼B
30.RAUTA
1. MENETELMIEN PERIAATE1.1 Vertailumenetelmä
Rauta määritetään suoraan atomiabsorptiospektrofotometrisesti sen
jälkeen, kun viini on laimennettu sopivassa suhteessa ja alkoholi on
poistettu.
Tavanomainen menetelmä
Viini digestoidaan 30 % vetyperoksidin kanssa, jolloin kaikki rauta
hapettuu rauta(III):ksi. Rauta(III) pelkistetään rauta(II)-muotoon ja
määritetään ortofenantroliinilla, joka antaa rauta(II):n kanssa
punaisen värin.
2. VERTAILUMENETELMÄ
2.1 Reagenssit
2.1.1 Väkevä vertailuliuos, jonka rauta(III)pitoisuus on 1 g/l.
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa standardiliuosta, jonka
rauta(III)pitoisuus on 1 g/l. Tämä liuos voidaan valmistaa liuotta-
malla 8,6341 g rauta(III)sulfaattia ja ammoniumsulfaattia
(FeNH
4(SO4)2, 12H2O) tislattuun 1 M kloorivetyhapolla happamaksi
tehtyyn veteen ja täyttämällä tilavuus yhdeksi litraksi.
2.1.2 Laimennettu vertailuliuos, jonka rautapitoisuus on 100 mg/l.
2.2 Laitteisto
2.2.1 Pyöröhaihdutin ja säädettävä vesihaude.2.2.2 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on ilma-asetyleenipoltin.2.2.3 Rautaonttokatodilamppu.
2.3 Suoritus
2.3.1 Näytteen valmistaminen
Poistetaan viinistä alkoholi haihduttamalla näytteen tilavuus puoleen
alkuperäisestä pyöröhaih duttimessa (50-60 ºC). Täytetään alkuperäi-
seen tilavuuteensa tislatulla vedellä.
Tarpeen vaatiessa tehdään laimennus ennen määritystä.
2.3.2 Kalibrointi
Mitataan viiteen 100 ml:n mittapullon sarjaan 1, 2, 3, 4 ja 5 ml
100 mg/l rautaliuosta (2.1.2), täytetään 100 ml:ksi tislatulla vedellä.
Valmistettujen liuosten pitoisuudet ovat 1, 2, 3, 4 ja 5 mg rautaa
litrassa.
Näitä liuoksia säilytetään polyetyleenipulloissa.
2.3.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 248,3 nm. Säädetään tislatulla vedellä absor-
banssiasteikon nollakohta. Imetään laimennettu näyte suoraan
spektrofotometrin polttimoon ja tämän jälkeen vuorotellen 2.3.2
kohdan mukaisesti valmistetut vertailuliuokset. Luetaan absorbanssit.
Toistetaan määritykset.
2.4 Tulosten ilmoittaminen
2.4.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit vertailuliuosten rautakonsentraation funktiona.
Etsitään tältä käyrältä laimennetulleviininäytteelle saadun absor-
banssin keskiarvo ja luetaan vastaava rautakonsentraatio C.
Rautakonsentraatio ilmoitettuna milligrammoina litrassa viiniä
yhdellä desimaalilla on:
C×FF = laimennuskerroin.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 138
▼B
3. TAVANOMAINEN MENETELMÄ
3.1 Reagenssit
3.1.1 Vetyperoksidiliuos (H2O2), 30 % (m/v), rautavapaa.
3.1.2 1 M kloorivetyhappoliuos, rautavapaa.3.1.3 Ammoniumhydroksidi, NH
4OH ( ρ20= 0,92 g/ml).
3.1.4 Hohkakiviä, jotka on käsitelty suhteessa 1/2 laimennetulla kiehuvalla
kloorivetyhapolla ja pesty tislatulla vedellä.
3.1.5 2,5 % hydrokinoniliuos (C6H6O2), hapotettu 1 ml:lla väkevää rikki-
happoa( ρ20= 1,84 g/ml) 100 ml:aa liuosta kohti. Tätä liuosta
säilytetään kylmäkaapissa keltaisessa pullossa ja se on hylättävä
heti, kun vähäisintäkään tummenemista esiintyy.
3.1.6 20 % natriumsulfiittiliuos (Na2SO3), joka on valmistettu neutraalista
vedettömästä sulfiitista.
3.1.7 0,5 % ortofenantroliiniliuos (C12H8N2,H2O) 96 til-% alkoholissa.
3.1.8 20 % (m/v) ammoniumasetaattiliuos (CH3COONH4).
3.1.9 Rauta(III)liuos, joka sisältää rautaa 1 g/l. Käytetään kaupallisesti
saatavissa olevaa standardiliuosta. Tämä liuos voidaan valmistaa
liuottamalla 8,6341 g rautasulfaattia ja ammoniumsulfaattia
(NH4Fe(SO4)2, 12H2O) 100 ml:aan 1 M kloorivetyhappoliuosta
(3.1.2) ja täyttämällä tilavuus yhdeksi litraksi 1 M kloorivetyhappo-
liuoksella (3.1.2).
3.1.10 Laimennettu vertailuliuos, joka sisältää rautaa 100 mg/l.
3.2 Laitteisto
3.2.1 100 ml:n vetoinen Kjeldahl-kolvi.3.2.2 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittauksia 508 mn:n aallonpi-
tuudella.
3.3 Suoritus
3.3.1 Digestointi
3.3.1.1 Viinit, joiden sokeripitoisuus on alle 50 g/l
Mitataan Kjeldahl-kolviin 25 ml viiniä ja 10 ml vetyperoksidiliuosta
(3.1.1) sekä lisätään muutamiahohkakivijyväsiä (3.1.4). Tiivistetään
neste 2-3 ml:n tilavuuteen.
Jäähtymisen jälkeen lisätään jäännökseen, kolvin seinämien kastu-
mista varoen, tarvittava määrä ammoniumhydroksidia (3.1.3), jotta
liuos tulee emäksiseksi ja hydroksidit saostuvat.
Jäähtymisen jälkeen lisätään emäksiseen liuokseen tarvittava määrä
1 M kloorivetyhappoliuosta (3.1.2) hydroksidisakan liuottamiseksi ja
siirretään liuos 100 ml:n mittapulloon. Huuhdellaan Kjeldahl-kolvi
1 M kloorivetyhappoliuoksella (3.1.2) ja täytetään mittapullon tila-
vuus 100 ml:ksitällä li uoksella.
3.3.1.2 Rypälemehut ja viinit, joiden sokeripitoisuus on yli 50 g/l3.3.1.2.1 Sokeripitoisuus välillä 50 - 200 g/l:
25 ml:n suuruinen rypälemehu- tai viininäyte käsitellään 20 ml:lla
vetyperoksidiliuosta (3.1.1). Jatketaan suoritusta 3.3.1.1 kohdassa
kuvatulla tavalla.
3.3.1.2.2 Sokeripitoisuus yli 200 g/l:
Rypälemehu- ja viininäytteet on laimennettava suhteessa 1/2 tai jopa
suhteessa 1/4 ja käsiteltävä 3.3.1.2.1 kohdassa kuvatulla tavalla.
3.3.2 Sokeakoe
Tehdään sokeakoe tislatulla vedellä käyttäen digestoinnissa yhtä
paljon vetyperoksidiliuosta (3.1.1) ja seuraten 3.3.1.1 kohdassa
kuvattua suoritustapaa.
3.3.3 Määritys
Mitataan 20 ml kloorivetyhapoista digestoimalla saatua näytettä
(3.3.1.1) ja 20 ml ”sokeakokeen” kloorivetyhappoliuosta (3.3.2)
kahteen 50 ml:n mittapulloon. Lisätään molempiin pulloihin 2 ml1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 139
▼B
hydrokinoniliuosta (3.1.5), 2 ml sulfiittiliuosta (3.1.6) ja 1 ml ortofe-
nantroliiniliuosta (3.1.7). Annetaan seistä 15 minuutin ajan, jotta
rauta(III) pelkistyisi rauta(II)muotoon. Lisätään 10 ml ammoniumase-
taattiliuosta (3.1.8), täytetään tilavuus 50 ml:ksi tislatulla vedellä ja
ravistellaan molempia mittapulloja. Mitataan määritettävän liuoksen
absorbanssi 508 nm:ssä säätäen absorbanssiasteikon nollakohta
sokeakokeesta peräisin olevalla liuoksella.
3.3.4 Kalibrointi
Mitataan neljään 50 ml:n mittapulloon 0,5; 1; 1,5 ja 2 ml 100 mg/l
rautaliuosta (3.1.10) ja 20 ml tislattua vettä; jatketaan 3.3.3 kohdassa
kuvatulla tavalla. Nämä liuokset sisältävät 50, 100, 150 ja 200 mikro-
grammaa rautaa.
3.4 Tulosten ilmoittaminen
3.4.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit vertailuliuosten rautakonsentraation funktiona.
Etsitään määritettävälle liuokselle saatu absorbanssi ja luetaan
vastaava rautakonsentraatio C 20 ml:ssa digestoimalla saatua kloori-
vetyhappoista liuosta, toisin sanoen 5 ml:ssa määritettävää näytettä.
Rautakonsentraatio ilmoitettuna milligrammoina litrassa viiniä
yhdellä desimaalilla on:
200 × C.Jos viiniä (tai rypälemehua) on laimennettu, rautakonsentraatio ilmoi-
tettuna milligrammoina litrassa viiniä yhden desimaalin tarkkuudella
on:
200 × C × F.
F = laimennuskerroin.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 140
▼B
31.KUPARI
1. MENETELMÄN PERIAATE
Käytetään atomiabsorptiospektrofotometriaa.
2. LAITTEET
2.1 Platinamalja.2.2 Atomiabsorptiospektrofotometri.2.3 Kuparionttokatodilamppu.2.4 Polttokaasu: ilma-asetyleeni tai typpioksiduuli-asetyleeni.
3. REAGENSSIT
3.1 Kuparimetalli.
3.2 Väkevä 65 % typpihappo (HNO
3,ρ20= 1,38 g/ml).
3.3 Suhteessa 1/2 (v/v) laimennettu typpihappo.
3.4 Kupariliuos, 1 g/l
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa kuparistandardiliuosta,
jonka pitoisuus on 1 g/l. Tämä liuos voidaan valmistaa punnitsemalla
1,000 g kuparimetallia ja siirtämällä se kvantitatiivisesti 1 000 ml:n
mittapulloon. Lisätään metallin liuottamiseen tarvittava määrä
suhteessa 1/2 laimennettua typpihappoa (3.3), lisätään 10 ml
väkevää typpihappoa (3.2), täytetään merkkiin kahdesti tislatulla
vedellä.
3.5 Kupariliuos, 100 mg/l
Mitataan 10 ml 3.4 liuosta 100 ml:n mittapulloon ja täytetään tila-
vuus kahdestiti slatulla vedellä.
4. SUORITUS4.1 Näytteen vaimistaminen ja kuparin määrittäminen
Tarvittaessa valmistetaan sopiva laimennos kahdesti tislatulla vedellä.
4.2 Kalibrointi
Mitataan 100 ml:n mittapulloihin 0,5; 1 ja 2 ml liuosta 3.5 ja
täytetään tilavuus kahdesti tislatulla vedellä; saadut liuokset sisältävät
kuparia 0,5; 1 ja 2 mg.
4.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 324,8 nm. Säädetään kahdesti tislatulla vedellä
absorbanssiasteikon nollakohta. Imetään laimennettu näyte suoraan
spektrofotometrin polttimoon ja tämän jälkeen vuorotellen 4.2
kohdan mukaisesti valmistetut vertailuliuokset. Luetaan absorbanssit.
Toistetaan määritykset.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN5.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit vertailuliuosten kuparikonsentraation funk-
tiona.
Etsitään kalibrointikäyrältä laimennetulle viininäytteelle saatu absor-
banssija luetaan vastaava konsentraati o C mg/l.
Jos F on laimennuskerroin, viinin kuparipitoisuus milligrammoina
litrassa on: F × C. Se annetaan kahdella desimaalilla.
Huomautukset:
a) Kalibrointikäyrän laadinnassa käytetyt liuokset ja näytelaimen-
nokset on aina valittava käytetyn laitteenherkkyyden ja näytteen
kuparikonsentraation mukaan.
b) Jos näytteen kuparikonsentraatio on hyvin pieni, edetään seuraa-
vasti: mitataan 100 ml näytettä platinamaljaan, haihdutetaan1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 141
▼B
100 ºC:ssa vesihauteessa, kunnes näyte muuttuu siirappimaiseksi,
lisätään tipoittain 2,5 ml väkevää typpihappoa (3.2) siten, että
astian pohja peittyy kokonaan. Poltetaan jäännös varovasti
tuhkaksi sähkölevyllä tai pienellä liekillä; tämän jälkeen siirretään
astia 500 ºC ± 25 ºC:een säädettyyn muhveliuuniin noin yhden
tunnin ajaksi. Jäähtynyt tuhka kostutetaan noin 1 ml:lla väkevää
typpihappoa (3.2) murskaten se pienellä lasipuikolla, haihdutetaan
ja poltetaan uudelleen tuhkaksi edellä kuvatulla tavalla. Siirretään
astia uudelleen uuniin 15 minuutin ajaksi; toistetaan käsittely
väkevällä typpihapolla vähintään kolme kertaa. Liuotetaan tuhka
lisäämällä astiaan1 ml väkevää typpihappoa (3.2) ja 2 ml kahdesti
tislattua vettä; siirretään 10 ml:n mittapulloon. Pestään astia
kolme kertaa aina 2 ml:lla kahdesti tislattua vettä, täytetään merk-
kiin kahdesti tislatulla vedellä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 142
▼B
32.KADMIUM
1. MENETELMÄN PERIAATE
Kadmium määritetään suoraan viinistä liekittömällä atomiabsorptios-
pektrofotometrialla.
2. VÄLINEISTÖ
Kaikki lasitavarat on pestävä ennen käyttöä kuumalla (70-80 ºC)
väkevällä typpihapolla ja huuhdottava kahdesti tislatulla vedellä.
2.1 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on grafiittiuuni, taustankorjain
ja monikanavapiirturi.
2.2 Kadmiumonttokatodilamppu.
2.3 Vetoisuudeltaan 5 µl olevia mikropipettejä, joissa on atomiabsorp-
tionmittauksiin tarkoitetut erikoispäät.
3. REAGENSSIT
Käytettävän veden on oltava borosilikaattilasista valmistetussa lait-
teessa kahdestiti slattua vettä taivastaavan puhtausasteen omaavaa
vettä. Kaikkien reagenssien on oltava puhtaudeltaan yleisesti hyväk-
syttyä analyyttista laatua ja erityisesti kadmiumvapaita.
3.1 85 % fosforihappo ( ρ20= 1,71 g/ml).
3.2 Fosforihappoliuos, joka saadaan laimentamalla 8 ml fosforihappoa
100 ml:ksivedellä.
3.3 0,02 M etyleenidiamiinitetraetikkahapon dinatriumsuola -liuos
(EDTA).
3.4 pH-arvoltaan 9 oleva puskunliuos, joka saadaan liuottamalla 100 ml:n
mittapullossa 5,4 g ammoniumklo- ridia muutamaan millilitraan
vettä, lisäämällä 35 ml 25 %:ksi (v/v) laimennettua ammoniumhy-
droksidiliuosta(ρ20= 0,92 g/ml) ja täyttämällä merkkiin vedellä.
3.5 Eriokromimusta T: 1 % (w/w) kiinteä liuos natriumkloridissa.
3.6 Kadmiumsulfaatti (3CdSO4,8 H2O)
Kadmiumsulfaattipitoisuus on tarkastettava seuraavasti:
Punnitaan tarkalleen 102,6 mg suuruinen kadmiumsulfaattinäyte, siir-
retään veden kanssa kvantitatiivisesti mittalasiin, ravistellaan, kunnes
se on liuennut; lisätään 5 ml pH-arvoltaan 9 olevaa puskuriliuosta ja
noin 20 mg eriokromimustaa T. Titrataan EDTA-liuoksella, kunnes
indikaattori muuttuu siniseksi.
Käytetyn EDTA-liuoksen tilavuuden on oltava 20 ml. Jos tilavuus on
eri, on vertailuliuoksen valmistukseen käytetyn punnitun kadmium-
sulfaattin määrä korjattava.
3.7 Vertailuliuos, jonka kadmiumpitoisuus on 1 g/l
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa standardiliuosta. Tämä liuos
voidaan valmistaa liuottamalla 2,2820 g kadmiumsulfaattia veteen ja
täyttämällä tilavuus yhdeksi litraksi. Liuosta säilytetään hiostulpalli-
sessa borosilikaattilasista valmistetussa pullossa.
4. SUORITUS4.1 Näytteen valmistaminen
Laimennetaan viini suhteessa 1/2 (v/v) fosforihappoliuoksella.
4.2 Kalibrointisarjan liuosten valmistaminen
Valmistetaan kadmiumvertailuliuoksesta peräkkäisillä laimennuksilla
liuokset, jotka sisältävät kadmiumia 2,5, 5, 10 ja - 15 mikrogrammaa
litrassa.
4.3 Määritys
4.3.1 Uunin säätäminen (vain ohjeellinen)
Kuivaaminen 100 ºC:ssa 30 sekuntia.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 143
▼B
Mineralisaatio 900 ºC:ssa 20 sekuntia.
Atomisaatio 2 250 ºC:ssa 2-3 sekuntia.
Typen virtausnopeus (huuhtelukaasu): 6 litraa minuutissa.Huomautus:
Suorituksen lopussa lämpötila nostetaan 2 700 ºC:seen uunin puhdis-
tamiseksi.
4.3.2 Atomiabsorptiomittaukset
Valitaan aallonpituus 228,8 nm. Säädetään kahdesti tislatulla vedellä
absorbanssiasteikon nollakohta. Ruiskutetaan mikropipetillä uuniin
kolme kertaa 5 µl kaikkia kalibrointisarjan liuoksia ja määritettävää
näyteliuosta. Luetaan mitatut absorbanssit. Lasketaan absorbanssin
keskiarvo kolmen ruiskutuksen tuloksista.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN5.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit kalibrointiliuosten kadmiumkonsentraatioiden
funktiona. Kuvaaja on lineaarinen. Etsitään kalibrointisuoralta näyte-
liuoksen absorbanssin keskiarvo ja johdetaan siitä
kadmiumkonsentraatio C. Kadmiumkonsentraatio ilmoitettuna mikro-
grammoina litrassa viiniä on:
2C .1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 144
▼B
33.HOPEA
1. MENETELMÄN PERIAATE
Käytetään atomiabsorptiospektrofotometriaa, jota edeltää näytteen
polttaminen.
2. VÄLINEISTÖ
2.1 Platinamalja.2.2 100 ºC:seen sââdetty vesihaude.
2.3 500-525 ºC:seen säädetty uuni.
2.4 Atomiabsorptiospektrofotometri.2.5 Hopeaonttokatodilamppu.2.6 Polttokaasu: ilma-asetyleeni.
3. REAGENSSIT
3.1 Hopeanitraatti (AgNO
3).
3.2 Väkevä 65 % typpihappo (HNO3p20= 1,38 g/ml).
3.3 Suhteessa 1/10 (v/v) laimennettu typpihappo.
3.4 Hopealiuos, 1 g/l
Käytetään kaupallisesti saatavaa hopeastandardiliuosta.Tämä liuos voidaan valmistaa liuottamalla 1,575 g hopeanitraattia
laimennettuun typpihappoon ja täyttämällä tilavuus 1 000 ml:ksi
laimennetulla typpihapolla.
3.5 Hopealiuos, 10 mg/l
Laimennetaan 10 ml 3.4 liuosta 1 000 ml:ksi laimennetulla typpiha-
polla.
4. SUORITUS4.1 Näytteen valmistaminen
Mitataan 20 ml näytettä platinamaljaan, haihdutetaan kuiviin
100 ºC:ssa kiehuvassa vesihauteessa. Poltetaan 500-525 ºC:ssa
uunissa valkeaksi tuhkaksi. Kostutetaan tuhka 1 ml:lla väkeväâ typpi-
happoa (3.2), haihdutetaan 100 ºC:ssa vesihauteessa, lisätään
uudelleen 1 ml typpihappoa (3.2) ja haihdutetaan. Lisätään 5 ml
laimennettua typpihappoa (3.3) ja lämmitetään varovasti, kunnes
jäännös on liuennut.
4.2 Kalibrointi
Mitataan 100 ml:n mittapulloista koostuvaan sarjaan 2; 4; 6; 8; 10 ja
20 ml 10 g/l hopeaa sisältävää 3.5 liuosta ja täytetään merkkiin
laimennetulla typpihapolla (3.3). Nämä liuokset sisältävät hopeaa
0,20; 0,40; 0,60; 0,80; 1,0 ja 2,0 mg/l.
4.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 328,1 nm. Säädetään laimennetulla typpihapolla
(3.3) absorbanssiasteikon nollakohta. Imetään 4.1 kohdan mukaisesti
saatu neste suoraan spektrofotometrin polttimoon ja tämän jälkeen
vuorotellen vertailuliuokset. Luetaan absorbanssit. Toistetaan
määritykset.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN5.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit vertailuliuosten hopeakonsentraation funk-
tiona.
Etsitään kalibrointikäyrältä 4.1 kohdan mukaisesti saadun nesteen
absorbanssija johdetaan konsentraati o C mg/l.
Viinin hopeapitoisuus ilmoitettuna mikrogrammoina litrassa on:1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 145
▼B
0,25 C. Se annetaan kahdella desimaalilla.
Huomautus:
Kalibrointikäyrän laadinnassa käytettyjä vertailuliuoksia, näytemäärää
ja lopullista nestetilavuutta voidaan muuttaa käytetyn laitteen herk-
kyyden mukaan.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 146
▼B
34.SINKKI
1 PERIAATE
Sinkki määritetään suoraan viinistä atomiabsorptiospektrofotometri-
sesti alkoholin poistamisen jälkeen.
2 REAGENSSIT
Käytettävän veden on oltava borosilikaattilasista valmistetussa lait-
teessa kahdestiti slattua vettä taivastaavan puhtausasteen omaavaa
vettä.
2.1 Vertailuliuos, jonka sinkkipitoisuus on 1 g/l.
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa sinkkistandardiliuosta.
Tämä liuos voidaan valmistaa liuottamalla 4,3975 g sinkkisulfaattia
(ZnSO4,7 H2O) veteen ja täyttämällä tilavuus yhdeksi litraksi.
2.2 Laimennettu vertailuliuos, jonka sinkkipitoisuus on 100 mg/l.
3. LAITTEISTO
3.1 Pyöröhaihdutin ja säädettävä vesihaude.
3.2 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on ilma-asetyleenipoltin.
3.3 Sinkkionttokatodilamppu.
4. SUORITUS4.1 Näytteen valmistaminen
Poistetaan viinin sisaltama alkoholi tiivistamalla viinin tilavuus
puoleen pyöröhaihduttimessa (lämpötila: 50-60 ºC), täytetään alku-
peräiseen 100 ml:n tilavuuteen kahdesti tislatulla vedellä.
4.2 Kalibrointi
Mitataan neljään 100 ml:n mittapulloon 0,5; 1; - 1,5 ja 2 ml 100 mg/l
sinklriliuosta (2.2) ja täytetään merkkiin kahdesti tislatulla vedellä.
Liuosten sinkkipitoisuudet ovat 0,5; 1; 1,5 ja 2 mg/l.
4.3 Määritys
Valitaan aallonpituus 213,9 nm. Säädetään kahdesti tislatulla vedellä
absorbanssiasteikon nollakohta. Ime- tään viini suoraan spektrofoto-
metrin polttimoon ja tämän jälkeen vuorotellen vertailuliuokset.
Luetaan absorbanssit. Toistetaan määritykset.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN5.1 Laskentamenetelmä
Piirretään absorbanssit vertailuliuosten sinkkikonsentraation funk-
tiona. Etsitään viinille saatujen absorbans- sien keskiarvo ja luetaan
vastaava sinkkikonsentraatio C milligrammoina litrassa viiniä yhdellä
desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 147
▼B
35.LYIJY
1. MENETELMÄN PERIAATE
Lyijy määritetään suoraan viinistä liekittömällä atomiabsorptiospek-
trofotometrialla.
2. VÄLINEISTÖ
Kaikki lasitavarat on pestävä ennen käyttöä kuumalla (70-80 ºC)
väkevällä typpihapollaja huuh dottava kahdesti tislatulla vedellä.
2.1 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on grafiittiuuni, epaspesifinen
absorptionkorjain ja monikanavapiir- turi.
2.2 Lyijyonttokatodilamppu.
2.3 Vetoisuudeltaan 5 µl olevia mikropipettejä, joissa on atomiabsorp-
tionmittauksiin tarkoitetut erikoispäät.
3. REAGENSSIT
Kaikkien reagenssien on oltava puhtaudeltaan yleisesti hyväksyttyä
analyyttista laatua ja erityisesti Iyijyvapaita. Käytettävän veden on
oltava borosilikaattilasista valmistetussa laitteessa kahdesti tislattua
vettä taivastaavan puhtausasteen omaavaa vettä.
3.1 85 % fosforihappo( ρ20= 1,71 g/ml).
3.2 Fosforihappoliuos, joka saadaan laimentamalla 8 ml fosforihappoa
100 ml:ksivedellä.
3.3 Typpihappo ( ρ20= 1,38 g/ml).
3.4 Lyijyliuos 1 g/l.
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa standardiliuosta. Tämä lions
voidaan valmistaa liuottamatta 1,600 g Iyijy(II)nitraattia, Pb(NO3)2,
1 %:ksi (v/v) laimennettuun typpihappoonja täyttämällä tilavuus
yhdeksi litraksi. Liuosta säilytetään hiostulpallisessa borosilikaattila-
sista valmistetussa pullossa.
4. SUORITUS
4.1 Näytteen valmistaminen
Laimennetaan viini suhteessa 1/2 tai 1/3 fosforihappoliuoksella (3.2)
oletetun Iyijykonsentraation mukaan.
4.2 Kalibrointisarjan liuosten valmistaminen
Valmistetaan Iyijyvertailuliuoksesta kahdesti tislatulla vedellä
peräkkäin laimentaen liuokset, jotka sisältävät Iyijyä 25, 50, 100 ja
150 mikrogrammaa litrassa.
4.3 Määritys
4.3.1 Uunin säätäminen (vain ohjeellinen)
Kuivaaminen 100 ºC:ssa 30 sekuntia.
Mineralisaatio 900 ºC:ssa 20 sekuntia.Atomisaatio 2 250 ºC:ssa 2-3 sekuntia.
Typen virtausnopeus (huuhtelukaasu): 6 litraa minuutissa.
Huomautus:Suorituksen jälkeen lämpötila nostetaan 2 700 ºC:seen uunin puhdis-
tamiseksi.
4.3.2 Mittaukset
Valitaan aallonpituus 217 nm. Säädetään kahdesti tislatulla vedellä
absorbanssiasteikon nollakohta. Ruisku- tetaan mikropipetillä uuniin
kolme kertaa 5 µl kaikkia kalibrointisarjan liuoksia ja määritettävää
näyteliuosta. Luetaan mitatut absorbanssit. Lasketaan absorbanssin
keskiarvo kolmen ruiskutuksen tuloksista.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 148
▼B
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
5.1 Laskeminen
Piirretään absorbanssit kalibrointiliuosten Iyijykonsentraatioiden
funktiona. Kuvaaja on lineaarinen. Etsitään kalibrointisuoralta näyte-
liuoksen absorbanssin keskiarvo ja johdetaan siitä Iyijykonsentraatio
C. Lyijykonsentraatio ilmoitettuna mikrogrammoina litrassa viiniä
on:
C×FF = laimennuskerroin.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 149
▼B
36.FLUORIDIT
1. PERIAATE
Fluoridipitoisuus määritetäänpuskuriliuokseenlisätystäviinistäkiinteä-
kalvoelektrodilla. Mitattu potentiaali on verrannollinen fluoridi-
ionien aktiviteetin logaritmiin määritettävässä liuoksessa seuraavan
yhtälön mukaisesti:
E = Eo ± S log aF
E = ioniselektiivisen elektrodin potentiaali mitattuna suhteessa
vertailuelektrodiin määritettävässä liuoksessa
Eo= anturin normaalipotentiaali
S = ioniselektiivisen elektrodin potentiaalin nousukerroin (Nernst-
tekijä). Lämpötilassa 25 ºC teoreettinen potentiaalin nousu-
kerroin on 59,2 mV.
aF= fluoridi-ioniaktiviteetti määritettävässä liuoksessa.
2. VÄLINEISTÖ
2.1 Fluondi-ioniselektiiv inen kidekalvoelektrodi.
2.2 Vertailuelektrodi (Kalomeli tai Ag/AgCI).2.3 Millivolttimittari (pH-mittari, jossa on laajennettu millivolttias-
teikko), tarkkuus 0,1 mV.
2.4 Magneettisekoittaja, jossa on eristelaatta määritettävän liuoksen
suojaamiseksi moottorin lämmöltä (polyetyleeni tai vastaava mate-
naali).
2.5 Vetoisuudeltaan 30 tai 50 ml olevia muovisia mittalaseja tai muovisia
mittapulloja (polyetyleeni tai vastaava materiaali).
2.6 Tarkkuuspipettejä (pipettejä, joiden asteikko on jaettu mikrolitroihin
tai muita vastaavia pipettejä).
3. REAGENSSIT
3.1 Fluoridikantaliuos, 1 g/l.
Käytetään kaupallisesti saatavissa olevaa 1 g/l standardiliuosta. Tämä
liuos voidaan valmistaa liuottamalla 2,210 g natriumfluoridia
(kuivattu 3-4 tuntia 105 ºC:ssa) tislattuun veteen. Täytetään
1 000 ml:ksi tislatulla vedellä. Liuosta säilytetään muovipullossa.
3.2 Konsentraatioltaan sopivat fluoridivertailuliuokset valmistetaan
laimentamalla kantaliuosta tislatulla vedellä ja niitä säilytetään
muovipulloissa. Fluoridipitoisuudeltaan 1 mg/l olevat vertailuliuokset
on valmistettava juuri ennen käyttöä.
3.3 Puskunliuos, pH 5,5.
Lisätään 10 g 1,2-sykloheksaanidiamiinitetraetikkahappoa (CDTA)
veteen (noin 50 ml); lisätään 700 ml:aan tislattua vettä, johon on
liuotettu 58 g natriumkloridia ja 29,4 g trinatriumsitraattia. CDTA
liukenee lisättäessä 32 % (m/v) natriumhydroksidiliuosta (noin 6 ml).
Lopuksi lisätään 57 ml etikkahappoa(p
20= 1,05 g/ml) ja säädetään
pH arvoon 5,5 32 % natriumhydrok- sidiliuoksella (noin 45 ml).
Annetaan jäähtyä ja täytetään yhdeksi litraksi tislatulla vedellä.
4. SUORITUS
Alkuhuomautus:
On huolehdittava siitä, että kaikkia liuoksia pidetään mittauksen
aikana lämpötilassa 25 ± 1 ºC. (Yli ± 1 ºC:n poikkeama aiheuttaa
noin ± 0,2 mV:n muutoksen.)
4.1 Suora menetelmä
Mitataan muoviseen dekantterilasiin määrätty määrä viiniä ja sama
tilavuus puskuriliuosta.
Sekoitetaan liuosta tasaisesti ja maltillisesti. Kun lukema on vakaa
(vakaa tila saavutetaan kun potentiaali vaihtelee korkeintaan 0,2-
0,3 mV/3 minuuttia), luetaan potentiaalin arvo mV.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 150
▼B
4.2 Tunnettujen lisäysten menetelmä
Koko ajan sekoittaen lisätään tutkittavaan aineeseen tarkkuuspipetillä
tunnettu tilavuus fluoridivertailuliuosta. Kun lukema on vakaa,
luetaan potentiaalin arvo mV.
Valitaan lisättävän vertailuliuoksen konsentraatio seuraavasti:
a) kerrotaan tutkittavan aineen fluoridikonsentraatio kahdella tai
kolmella,
b) määritettävän aineen tilavuuden on pysyttävä käytännössä vakiona
(tilavuuden lisäys ≤1 %).
Ehto b yksinkertaistaa laskemista (ks. 5).
Tutkittavan aineen likimääräinen konsentraatio luetaan kalibrointi-
suoralta, joka piirretään puolilogantmias- teikolle
fluoripitoisuudeltaan 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 ja 2,0 mg/l olevien vertailu-
liuosten kanssa.
Huomautus:Jos tutkittavan aineen likimääräinen konsentraatio on konsentraatioa-
lueen ulkopuolella, laimennetaan näyte.
Esimerkki:
Tutkittavan aineen (tilavuus 20 ml) likimääräinen pitoisuus on
0,25 mg/l F
−; konsentraatiota on lisättävä 0,25 mg/l. Tämä tehdään
esimerkiksi lisäämällä liuokseen sopivalla tarkkuuspipetillä 0,20 ml
(=1 %) vertailuliuosta, joka sisältää 25 mg/l F−tai0,050 ml vertai lu-
liuosta, joka sisältää 100 mg/l F−.
5. LASKEMINEN
Tutkittavan aineen fluoridipitoisuus, ilmoitettuna milligrammoina
litrassa, saadaan seuraavalla yhtälöllä:
CF¼Va/C2Ca
Vo/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
CF= tutkittavan aineen fluoridikonsentraatio (mg/l)
Ca= tutkittavaan aineeseen (Va) lisätyn fluoridin konsentraatio
(mg/l)
Vo= tutkittavan aineen alkutilavuus ennen liikakuormitusta
Va= liikakuormitetun liuoksen tilavuus (ml)
∆E = 4.1 ja 4.2 kohdan mukaisesti saatujen potentiaalien E1ja E2välinen erotus (mV)
S = tutkittavassa liuoksessa olevan elektrodin potentiaalin nousu-
kerroin
Jos Vaon kovin lähellä Vo:ta, käytetään seuraavaa yksinkertaistettua
yhtälöä:
CF¼Ca/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
Saatu arvo on kerrottava laimennuskertoimella, joka saadaan puskur-
iliuoslisäyksestä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 151
▼B
37.HIILIDIOKSIDI
1. MENETELMIEN PERIAATE1.1 Vertailumenetelmä
1.1.1 Hiilihapottomat viinit (CO
2-ylipaine ≤0,5 × 105Pa) (1)
Tietyn tilavuinen viininäyte jäähdytetään lähelle 0 ºC ja sekoitetaan
sellaiseen määrään natriumhydroksidiliuosta, että pH-arvoksi tulee
10-11. Titrataan happoliuoksella karboanhydraasin läsnäollessa. Hiili-
dioksidipitoisuus lasketaan pH:n muuttamiseksi arvosta 8,6 (bikarbo-
naattimuoto) arvoon 4,0 (hiilihappo) tarvittavasta happotilavuudesta.
Sokeatitraus tehdään samoissa koeolosuhteissa viinistä, josta hiili-
happo on poistettu, jotta voitaisiin ottaa huomioon viinin happojen
kuluttama natriumhydroksidiliuoksen tilavuus.
1.1.2 Helmeilevät viinit ja kuohuviinit
Jäähdytetään määritettävästä viinistä otettu näyte lähelle jäätymispis-
tettä. Otetaan tietty tilavuus viiniä, jota käytetään hiilihapon
poistamisen jälkeen sokeanäytteenä. Tehdään pulloon jäänyt viini
emäksiseksi kaiken CO2:n sitomiseksi Na2CO3ksi. Titrataan happo-
liuoksen kanssa karboanhydraasin läsnäollessa. Hiilidioksidipitoisuus
lasketaan pH:n muuttamiseksi arvosta 8,6 (bikarbonaattimuoto)
arvoon 4,0 (hiilihappo) tarvittavasta happotilavuudesta. Sokeatitraus
tehdään samoissa koeolosuhteissa viinistä, josta hiilihappo on pois-
tettu, jotta voitaisiin ottaa huomioon viinin happojen kuluttama
natriumhydroksidiliuoksen tilavuus.
1.2 Tavanomainen menetelmä: helmeilevät viinit ja kuohuviinit
Manometrinen menetelmä: mitataan hiilidioksidiylipaine suoraan
pullosta afrometrillä.
2. VERTAILUMENETELMÄ
2.1 Hiilihapottomat viinit (CO2-ylipaine ≤0,5 × 105Pa).
2.1.1 Välineistö
2.1.1.1 Magneettisekoittaja.2.1.1.2 pH-mittari.2.1.2 Reagenssit
2.1.2.1 Natriumhydroksidiliuos (NaOH), 0,1 M.
2.1.2.2 Rikkihappoliuos (H
2SO4), 0,05 M.
2.1.2.3 Karboanhydraasiliuos, 1 g/l.2.1.3 Suoritus
Jäähdytetään viininäyte sekä näytteenottoon käytettävä 10 ml:n
pipetti noin 0 ºC:seen.
Mitataan 100 ml:n dekantterilasiin 25 ml natriumhydroksidiliuosta
(2.1.2.1); lisätään 2 tippaa vesikarboanhydraasiliuosta (2.1.2.3).
Lisätään 10 ml viiniä 0 ºC:seen jäähdytetyllä pipetillä.
Asetetaan dekantterilasi magneettisekoittajalle, sijoitetaan elektrodi ja
magneettitanko liuokseen ja sekoitetaan maltillisesti.
Kun neste on saavuttanut ympäristön lämpötilan, titrataan hitaasti
rikkihappoliuoksella (2.1.2.2), kunnes pH-arvo on 8,6.
Jatketaan rikkihappotitrausta (2.1.2.2), kunnes pH-arvo on 4,0. pH:n
8,6 ja pH:n 4,0 välillä käytetty tilavuus on n.
Poistetaan CO
2noin 50 ml:sta viininäytettä ravistelemalla sitä vakuu-
missa 3 minuutin ajan, lämmittäen pulloa noin 25 ºC:ssa
vesihauteessa.
Toistetaan edellä kuvattu suoritus 10 ml:lle viiniä, josta on poistettu
hiilihappo; käytetty tilavuus on n'.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 152
(1)1 05pascalia (Pa) = 1 bar.
▼B
2.1.4 Tulosten ilmoittaminen
1 ml 0,1 M natriumhydroksidititrausliuosta vastaa 4,4 mg CO2:a.
CO2-määrä grammoina litrassa viiniä saadaan yhtälöstä:
0,44 (n−n')Se ilmoitetaan kahdella desimaalilla.Huomautus:Jos viinin CO
2-pitoisuus on matala (CO2< 1 g/l), eiole tarpeen li sätä
karboanhydraasia katalysoimaan CO2:n hydratoitumista.
2.2 Helmeilevät viinit ja kuohuviinit
2.2.1 Välineistö
2.2.1.1 Magneettisekoittaja.2.2.1.2 pH-mittari.2.2.2 Reagenssit
2.2.2.1 Natriumhydroksidiliuos (NaOH), 50 % (m/m).2.2.2.2 Rikkihappoliuos (H
2SO4), 0,05 M.
2.2.2.3 Karboanhydraasiliuos, 1 g/l.2.2.3 Suoritus
Tehdään pulloon merkki määritettävän viinin täyttökorkeudelle ja
jäähdytetään, kunnes jäätyminen alkaa.
Annetaan pullon lämmetä hieman koko ajan ravistellen, kunnes
jääkiteet häviävät.
Avataan pullo nopeasti ja otetaan mittalasiin 45-50 ml viiniä sokeati-
trausta varten. Tämän näytteen tarkka tilavuus, v ml, luetaan
mittalasista sen jälkeen, kun se on palautunut ympäristön lämpöti-
laan.
Heti sokeatitrausnäytteen ottamisen jälkeen lisätään 750 ml:n pulloon
20 ml natriumhydroksidiliuosta (2.2.2.1).
Odotetaan viinin palautumista ympäristön lämpötilaan.Mitataan 100 ml:n dekantterilasiin 30 ml keitettyä tislattua vettä ja 2
tippaa karboanhydraasiliuosta (2.2.2.3). Lisätään 10 ml emäksistä
viiniä.
Asetetaan dekantterilasi magneettisekoittajalle, sijoitetaan elektrodi ja
magneettitanko liuokseen ja sekoitetaan maltillisesti.
Kun neste on saavuttanut ympäristön lämpötilan, titrataan hitaasti
rikkihappoliuoksella (2.2.2.2), kunnes pH-arvo on 8,6.
Jatketaan rikkihappotitrausta (2.2.2.2), kunnes pH-arvo on 4,0. pH:n
8,6 ja pH:n 4,0 välillä käytetty tilavuus on n.
Poistetaan CO
2noin v ml:sta sokeatitraukseen varattua viiniä raviste-
lemalla sitä vakuumissa 3 minuutin ajan, lämmittäen pulloa noin
25 ºC:ssa vesihauteessa. Mitataan 10 ml viiniä, josta on poistettu
hiilihappo, 30 ml:aan keitettyä tislattua vettä, lisätään 2-3 tippaa
natriumhydroksidiliuosta (2.2.2.1) pH:n saattamiseksi arvoon 10-11.
Seurataan edellä kuvattua suoritustapaa. Käytetty 0,05 M rikkihappo-
tilavuus on n'.
2.2.4 Tulosten ilmoittaminen
1 ml 0,05 M rikkihappoliuosta vastaa 4,4 mg CO2:a.
Kaadetaan emäksinen viini pullosta ja määritetään yhden ml:n tark-
kuudella pullon sisältämän alkuperäisen viinin tilavuus täyttämällä
pullo merkkiin vedellä. Tämä on V ml.
CO2-määrä grammoina litrassa viiniä saadaan yhtälöstä:
0;44 n /C0n’ ðÞ /C2V/C0vþ20
V/C0v
Se ilmoitetaan kahdella desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 153
▼B
2.3 Ylipaineen laskeminen
Ylipaine 20 ºC:ssa, Paph20, ilmoitettuna pascaleina, saadaan yhtälöstä:
Paph 20¼Q
1;951/C210/C050;86/C00;01 A ðÞ 1/C00;00144 S ðÞ/C0Patm
jossa
Q: CO2-pitoisuus grammoina litrassa viiniä
A: viinin alkoholipitoisuus 20 ºC:ssaS: viinin sokeripitoisuus grammoina litrassaPatm: ilmanpaine, ilmoitettuna pascaleina.
3. TAVANOMAINEN MENETELMÄ (HELMEILEVÄT VIINIT JA
KUOHUVIINIT)
3.1 Välineistö
3.1.1 Afrometri
Laitetta, jolla voidaan suorittaa ylipaineen mittaus helmeilevää viiniä
tai kuohuviiniä sisältävistä pulloista, kutsutaan afrometriksi. Se on eri
muotoinen sen mukaan, miten pullo on suljettu (metallinen kapseli,
kruunukorkki, korkkiaineesta tai muovista valmistettu korkki, ks.
kuviot 1 ja 2).
Afrometrien asteikot on jaettu pascaleihin (lyhenne Pa) (
1). On
käytännöllisempää käyttää yksikkönä 105pascalia tai kilopascalia
(kPa).
Afrometrit kuuluvat eri luokkiin. Manometrin luokka on lukeman
tarkkuus suhteessa koko asteikkoonilmoitettuna prosentteina (esimer-
kiksi 1 000 kPa manometri luokka I tarkoittaa, että
suurimmassamahdollisessa käyttöpaineessa 1 000 kPa lukema
± 10 kPa). Luokkaa I suositellaan tarkkoihin mittauksiin.
Afrometrit on tarkistettava säännöllisesti (vähintään kerran vuodessa).
3.2 Suoritus
Mittaus on suoritettava pulloista, joiden lämpötilan on annettu
tasaantua vähintään 24 tunnin ajan.
Kun korkki on lävistetty, pulloa ravistellaan voimakkaasti, kunnes
paine on asettunut mittauk sen suorittamiseksi.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 154
(1) 1 pascal (Pa) = 1 n/m2=1 0−5bar.
▼B
Kuva 1 — Kapveliafrometri
 Kuva 2 - Korkkiafrometri
3.3 Tulosten ilmoittaminen
Ylipaine 20 ºC:ssa (Paph20) ilmoitetaan pascaleina (Pa) tai kilopasca-
leina (kPa).
Se on ilmoitettava yhtäpitävästi manometrin tarkkuuden kanssa
(esimerkiksi: 6,3. 105Pa tai630 kPa, ei6,33.105Pa tai633 kPa
luokan I manometrille, jossa on 1 000 kPa:n lukema-asteikko).
Jos mittauslämpötila ei ole 20 ºC, on tehtävä korjaus kertomalla
mitattu paine kertoimella
Paph 20
Paph 1
joka annetaan taulukossa 1. Tällä tavoin suhteutetaan tulos20 ºC:seen.
4. PAINEEN JA KUOHUVIININ SISÄLTÄMÄN HIILIDIOKSIDIN
VÄLINEN SUHDE (
1)
Absoluuttinen paine 20 ºC:ssa (Pabs20) lasketaan paineesta 20 ºC:ssa
(Paph20) seuraavalla yhtälöllä:
Pabs20= Patm + Paph20
jossa Patm on ilman paine ilmoitettuna pascaleina.
Viinin sisältämä hiilidioksidimäärä annetaan seuraavina suhteina:
— litroina CO2:a litrassa viiniä:
0,987 × 10−5Pabs20(0,86 − 0,01A)(1 − 0,00144S),
— grammoina CO2:a litrassa viiniä:
1,951 × 10−5Pabs20(0,86 − 0,01A)(1 − 0,00144S),
jossa:
A on viinin alkoholipitoisuus 20 ºC:ssa.S on viinin sokeripitoisuus, ilmoitettuna grammoina litrassa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 155
(1) Muita kaasuja (O2,N2jne.), joiden määrä on niin alhainen, etteivät ne vaikuta painee-
seen, eioteta huomi oon.
▼B
TAULUKKO 1
20 ºC:n helmeilevän viinin tai kuohuviinin ylipaineen Paph20suhde ylipai-
neeseen Paph, lämpötilassa t
0 1,85 13 1,24
1 1,80 14 1,20
2 1,74 15 1,16
3 1,68 16 1,13
4 1,64 17 1,09
5 1,59 18 1,06
6 1,54 19 1,03
7 1,50 20 1,00
8 1,45 21 0,97
9 1,40 22 0,95
10 1,36 23 0,93
11 1,32 24 0,91
12 1,28 25 0,881990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 156
▼M7
38.SYAANIVETYHAPON JOHDANNAISET
(Huom. Kemiallisten aineiden kuten kloramiini-T:n, pyridiinin, kaliumsyanidin,
suolahapon ja fosforihapon käsittelyssä on noudatettava turvaohjeita. Käytetyt
aineet on hävitettävä sopivalla tavalla asianmukaisia ekologisia määräyksiä ja
asetuksia noudattaen. Happamaksi tehtyä viiniä tislattaessa vapautuvaa syaanive-
tyhappoa on varottava.)
1. PERIAATE
Vapaa kokonaissyaanivetyhappo vapautetaan happohydrolyysillä ja
erotetaan tislaamalla. Sen annetaan reagoida kloramiini T:n ja pyri-
diinin kanssa, minkä jälkeen muodostunut glutakonihappodialdehydi
määritetään kolorimetrisesti mittaamalla sininen väri, joka muodostuu
sen reagoidessa 1,3-dimetyylibarbituurihapon kanssa.
2. VÄLINEET JA LAITTEET2.1 Tislauslaitteisto
Käytetään tislauslaitteistoa, joka on kuvattu viinin alkoholinmääri-
tystä varten.
2.2 500 ml:n tislauskolvi, jossa on vakiohios2.3 Vesihaude, joka on säädetty 20 ºC:een
2.4 Spektrofotometri, jolla voidaan mitata aallonpituudella 590 nm
2.5 Lasi- tai kertakäyttökyvettejä, joiden valotie on 20 mm
3. REAGENSSIT
3.1 Fosforihappo (H
3PO4), 25 % (m/v)
3.2 Kloramiini T -liuos (C7H7ClNNaO2S, 3H2O), 3 % (m/v)
3.3 1,3-dimetyylibarbituurihappoliuos: liuotetaan 3,658 g 1,3-dimetyyli-
barbituurihappoa (C6H8N2O3) 15 ml:aan pyridiiniä ja 3 ml:aan suola-
happoa ( ρ20= 1,19 g/ml) ja täytetään 50 ml:aan tislatulla vedellä
3.4 Kaliumsyanidi (KCN)3.5 Kaliumjodidiliuos (KI) 10 % (m/v)3.6 Hopeanitraattiliuos (AgNO
3), 0,1 M
4. SUORITUS
4.1 Tislaus
Lisätään 500 ml:n tislauskolviin (kohta 2.2) 25 ml viiniä, 50 ml
tislattua vettä, 1 ml fosforihappoa (kohta 3.1) ja muutama lasihelmi.
Kolvi kiinnitetään heti tislauslaitteistoon. Tisle johdetaan kapenevan
putken kautta 50 ml:n mittapulloon, jossa on 10 ml vettä. Mittapullo
upotetaan jääveteen. Kerätään 30-35 ml tislettä (ts. mittapullossa on
kaikkiaan noin 45 ml nestettä).
Pestään jäähdytyslaitteen kapeneva putki muutamalla millilitralla
tislattua vettä, lämmitetään tisle 20 ºC:een ja täytetään merkkiin tisla-
tulla vedellä.
4.2 Mittaus
Siirretään 25 ml tislettä 50 ml:n kartiokolviin, jossa on hiostulppa,
lisätään 1 ml kloramiini T -liuosta (kohta 3.2) ja suljetaan tiiviisti.
Täsmälleen 60 sekunnin kuluttua lisätään 3 ml 1,3-dimetyylibarbi-
tuurihappoliuosta (kohta 3.3), suljetaan tiiviisti ja odotetaan 10 min.
Mitataan absorbanssi standardia vastaan (25 ml tislattua vettä tisleen
sijasta) aallonpituudella 590 nm kyveteissä, joiden valotie on 20 mm.
5. KALIBROINTIKÄYRÄN MÄÄRITYS
5.1 Kaliumsyanidin titraus hopeanitraatilla
Liuotetaan 300 ml:n mittapullossa 0,2 g (tarkasti punnittu) KCN:a
(kohta 3.4) 100 ml:aan tislattua vettä. Lisätään 0,2 ml kaliumjodidi-
liuosta (kohta 3.5) ja titrataan 0,1 M hopeanitraattiliuoksella (kohta
3.6), kunnes saadaan pysyvä kellertävä väri.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 157
▼M7
1 ml 0,1 M hopeanitraattia vastaa 13,2 mg:aa KCN:a, josta lasketaan
näytteen KCN-pitoisuus.
5.2 Kalibrointikäyrä
5.2.1 Kalibrointiliuosten valmistus
Kun tunnetaan KCN-pitoisuus, joka on määritetty kohdan 5.1 mukai-
sesti, valmistetaan kalibrointiliuos, jossa on 30 mg/l
syaanivetyhappoa (30 mg HCN /approxorequal72,3 mg KCN). Liuos laimenne-
taan suhteessa 1/10.
Lisätään 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 ja 5,0 ml kalibrointiliuoksen laimennosta
100 ml:n mittapulloihin ja täytetään merkkiin tislatulla vedellä.
Liuokset vastaavat 30:tä, 60:tä, 90:tä, 120:tä ja 150:tä µg/l syaanive-
tyhappoa.
5.2.2 Määritys
Otetaan 25 ml näin saaduista liuoksista ja jatketaan, kuten edellä
kohdissa 4.1 ja 4.2 selostetaan.
Kuvaaja, jossa esitetään kalibrointiliuoksille saadut absorbanssiarvot
vastaavien syaanivetyhappopitoisuuksien funktiona, on origon kautta
kulkeva suora.
6. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Syaanivetyhappo ilmaistaan mikrogrammoina litraa kohti ( µg/l)
ilman desimaaleja.
6.1 Laskeminen
Syaanivetyhappopitoisuus luetaan kalibrointikäyrältä. Jos näytettä on
laimennettu, saatu tulos kerrotaan laimennuskertoimella.
Toistettavuus (r) ja uusittavuus (R)
Valkoviini = r = 3,1 µg/l elinoi n 6 % · xi
R= 12 µg/l elinoi n 25 % · xi
Punaviini = r = 6,4 µg/l elinoi n 8 % · xi
R= 23 µg/l elinoi n 29 % · xi
xi= HCN:n keskimääräinen pitoisuus viinissä
xi= 48,4 µg/l valkoviinille
xi= 80,5 µg/l punaviinille.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 158
▼B
39.ALLYYLI-ISOTIOSYANAATTI
1 MENETELMÄN PERIAATE
Viinin mahdollisesti sisältämä allyyli-isotiosyanaatti kerätään tislaa-
malla ja tunnistetaan kaasukromatografisesti.
2 REAGENSSIT
2.1 Absoluuttinen etanoli.2.2 Vertailuliuos: absoluuttisessa alkoholissa oleva allyyli-isotiosyanaatti-
liuos, joka sisältää 15 mg allyyli-isotiosyanaattia litrassa.
2.3 Jäähdytysseos, joka koostuu etanolin ja hiilihappojään seoksesta
(lämpötila−60 ºC).
3. LAITTEET
3.1 Kuvion mukainen laitteisto typpivirrassa tislaamista varten.3.2 Säädettävä lämpöhaude.3.3 Virtausmittari.3.4 Kaasukromatografi, liekkifotometridetektorilla, jossa on rikkiyhdis-
teille selektiivinen suodatin (aallonpituus = 394 nm) tai muu tähän
laiteeseen soveltuva detektori.
3.5 Ruostumattomasta teräksestä valmistettu kromatografiakolonni,
sisähalkaisija 3 mm, pituus 3 m; täytetty 10 % Carbowax 20 M 80-
100 meshin Chromosorb WHP:llä.
3.6 Mikroruisku, 10 µl.
4 SUORITUS
Mitataan 2 litraa viiniä tislauskolviin. Lisätään muutama millilitra
etanolia (2.1) kahteen keräysputkeen siten, että kaasudispersioputken
huokoiset osat peittyvät kokonaan. Jäähdytetään putket ulkopuolelta
jäähdytysseoksella. Liitetään kolvi keräysputkiin ja annetaan typen
virrata laitteeseen noin 3 I/tunnissa. Lämmitetään viini 80- C:ise ksi
säätämällä lämpöhaude sopivalla tavalla ja kerätään yhteensä 45-
50 ml tislettä.
Stabiloidaan kromatografi. Seuraavat suoritusolosuhteet ovat suositel-
tavia:
— injektorin lämpötila: 200 ºC,
— kolonnin lämpötila: 130 ºC,
— helium-kantokaasun virtausnopeus: 20 ml/minuutti.
Ruiskutetaan mikroruiskulla sellainen määrä vertailuliuosta, että
allyyli-isotiosyanaattia vastaava piikki voidaan tunnistaa kromato-
grammilta helposti.
Lisäksi ruiskutetaan tisleestä otettu näyte ja tarkistetaan, että saadun
piikin retentioaika vastaa allyyli-isotiosyanaatin piikkiä.
Edellä kuvatuissa koeolosuhteissa mikään viinin luontainen aine ei
aiheuta häiritsevää piikkiä tutkittavan näytteen kromatogrammissa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 159
▼B
Latteisto typpivirrassa tislaamista varten
1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 160
▼B
40.VÄRIOMINAISUUDET
1 VIINIT JA RYPÄLEMEHUT1.1 Määritelmät
Viinin väriominaisuuksilla tarkoitetaan sen luminositeettia ja sen
kromaattisuutta.
Luminositeetti vastaa transmittanssia. Se muuttuu käänteisesti viinin
värin voimakkuuden kanssa.
Kromaattisuus vastaa hallitsevaa aallonpituutta (joka luonnehtii
värisävyä) ja puhtautta.
Perinteisesti ja mukavuussyistä, puna- ja roseeviinien väriominai-
suudet esitetään värin intensiteettinä ja sävynä noudattaen
tavanomaiseksi menetelmäksi omaksuttua menettelytapaa.
1.2 Menetelmien periaate
1.2.1 Vertailumenetelmä
Spektrofotometrinen menetelmä, jolla voidaan määrittää tristimulu-
sarvot ja kolme värikoordinaattia, joitatarvitaan värin
laatuvaatimuksille kansainvälisen valaistustoimikunnan (CIE) mukai-
sesti.
1.2.2 Tavanomainen menetelmä (sovellettavissa puna- ja roseeviineihin)
Spektrofotometrinen menetelmä, jolla väriominaisuudet ilmoitetaan
perinteisesti seuraavalla tavalla:
Väri-intensiteetti annetaan aallonpituuksilla 420, 520 ja 620 nm
mitattujen niiden absorbanssien summana,jotka saadaan 1 cm:n opti-
sella pituudella.
Värisävy ilmoitetaan absorbanssien suhteena 420 ja 520 nm:ssä.
1.3 Vertailumenetelmä
1.3.1 Välineistö
1.3.1.1 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittaukset 300-700 nm:n
välillä.
1.3.1.2 Pareittain saatavissa olevia lasikyvettejä, joiden optinen pituus b on
0,1; 0,2; 0,5; 1; 2 ja 4 cm.
1.3.2 Suoritus
1.3.2.1 Näytteen valmistaminen
Samea viini on kirkastettava sentnfugoimalla.Mahdollisimman suuri määrä uusien viinien ja kuohuviinien
sisältämästä hiilidioksidista on poistettava ravistelemalla vakuumissa.
1.3.2.2 Mittaukset
Käytettävien kyvettien optinen pituus, b, on valittava siten, että
mitattu absorbanssi on välillä 0,3-0,7.
Ohjeellisesti on suositeltavaa käyttää valkoviinejä määritettäessä
kyvettejä, joiden optinen pituus on 2 cm (tai 4 cm), roseeviinejä
määritettäessä kyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm, ja puna-
viinejä määritettäessä kyvettejä, joiden optinen pituus on 0,1 cm (tai
0,2 cm).
Spektrofotometriset mittaukset tehdään käyttäen vertailuliuoksena
tislattua vettä, saman optisen pituuden, b, omaavassa kyvetissä,
absorbanssiasteikon nollakohdan säätämiseksi aallonpituuksilla 445,
495, 550 ja 625 nm.
Viinille mitataan optisella pituudella b neljä absorbanssia, A
445,A495,
A530ja A625(kolmella desimaalilla).
1.3.3 Laskeminen
Käyttäen taulukossa 1 esitettyjä b cm optisen pituuden absorbanssiar-
voja etsitään vastaavat trans mittanssit (T %): T445,T495,T550ja T625.
— Lasketaan tristimulusarvot X, Y ja Z, ilmoitettuna kymmenmurto-
lukuina:1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 161
▼B
X = 0,42 × T625+ 0,35 × T550+ 0,21 × T445
Y = 0,20 × T625+ 0,63 × T550+ 0,17 × T495
Z = 0,24 × T495+ 0,94 × T445
— Lasketaan värikoordinaatit x ja y:
x¼X
XþYþZy¼Y
XþYþZ
1.3.4 Tulosten ilmoittaminen
1.3.4.1 Suhteellinen luminositeetti annetaan Y:n arvona prosentteina. (Musta
Y % = 0, väritön: Y % = 100).
1.3.4.2 Kromaattisuus ilmoitetaan hallitsevalla aallonpituudella ja puhtau-
della.
Näiden määrittämiseen käytetään spektripaikoilla yhdistettyä
kromaattisuusdiagrammia, joka määritelläänkuviossa 1. O-pistevastaa käytettyä valkoista valonlähdettä ja edustaa standardilähteen
C koordinaatteja x
O= 0,3101 ja yO= 0,3163, joka edustaa keskimää-
räisen kirkkauden omaavaa päivänvaloa.
— Hallitseva aallonpituus
Sijoitetaan kromaattisuusdiagrammiin x ja y koordinaatein piste
C. Jos piste C sijaitsee kolmion AOB ulkopuolella, piirretään
suora, joka yhdistää pisteen O pisteeseen C, ja jatketaan sitä,
kunnes se leikkaa spektripaikan pisteessä S, joka vastaa hallit-
sevaa aallonpituutta.
Jos piste C sijaitsee kolmion AOB sisäpuolella, piirretään suora
C:stä O:hon; se leikkaa spektripaikan pisteessä, joka vastaa viinin
komplementtivärin aallonpituutta. Tämä aallonpituus ilmoitetaan
arvona, jota seuraa kirjain C.
— Puhtaus:
Jos piste C sijaitsee kolmion AOB ulkopuolella, puhtaus ilmoite-
taan prosentteina suhteella:
100/C2et¨aisyys C : st¨ a O : hon
et¨aisyys O : sta S : ¨ a¨an
Jos piste C sijaitsee kolmion AOB sisäpuolella, puhtaus ilmoite-
taan prosentteina suhteella:
100 ×etäisyys C:stä O:hon (1)
etäisyys O:stä P:hen
Piste P on piste, jossa suora OC leikkaa purppuralinjan.
Puhtaus annetaan myös suoraan kromaattisuusdiagrammissa
tunnetuista arvoista x ja y (kuviot 2, 3, 4, 5 ja 6).
1.3.4.3 Tulokset
Luminositeetti, kromaattisuus (ilmoitettuna hallitsevalla aallonpituu-
della) ja puhtaus määrittävät täydellisesti viininvann.
Ne on ilmoitettava määritysselosteessa, samoin kuin optinen pituus,
jolla mittaukset tehtiin.
4. TAVANOMAINEN MENETELMÄ
1.4.1 Välineistö
1.4.1.1 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittauksia 300-700 mn:n
välillä.
1.4.1.2 Pareittain saatavissa olevia lasikyvettejä, joiden optinen pituus b on
0,1; 0,2; 0,5 ja 1 cm.
1.4.2 Näytteen valmistaminen
Samea viini on kirkastettava sentnfugoimalla.
Mahdollisimman suuri määrä uusien viinien ja kuohuviinien
sisältämästä hiilidioksidista on poistettavaravistelemalla vakuumissa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 162
(1) Tämä etäisyys on annettava suunnassa O:sta C:hen.
▼B
1.4.3 Suoritus
Mittauskyvettien optinen pituus, b, on valittava siten, että absorbanssi
A on välillä 0,3-0,7.
Spektrofotometriset mittaukset tehdään käyttäen vertailuliuoksena
tislattua vettä, saman optisen pituuden,b, omaavassa kyvetissä, absor-banssiasteikon nollakohdan säätämiseksi aallonpituuksilla 420, 520 ja
620 nm.
1.4.4 Tulosten ilmoittaminen
1.4.4.1 Laskeminen
Lasketaan absorbanssit kolmella aallonpituudella 1 cm:n optisella
pituudella jakamalla mitatut absorbanssit b:llä, ilmoitettuna cm:inä:
A
420,A520ja A620.
Intensiteetti saadaan perinteisesti:
I=A420+A520+A620
Se ilmoitetaan kolmella desimaalilla.
Värisävy saadaan perinteisesti:
N¼A420
A520
Se annetaan kolmella desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 163
▼B
TAULUKKO 1
Absorbanssien muuttaminen transmittansseiksi (T %)
Käyttöohje:Luetaan absorbanssiarvon ensimmäinen desimaali pystysuorasta
sarakkeesta 1 ja toinen desimaalivaakasuorasta sarakkeesta 2.
Luetaan niiden leikkauskohdassa sijaitseva luku. Transmittanssin
saamiseksi tämä luku on jaettava 10:lläjos absorbanssin arvo on alle
1, 100:lla jos se on välillä 1-2, 1 000:lla jos se on välillä 2-3.
Huomautus:
Jokaisen lokeron oikeassa yläkulmassa olevan luvun avulla voidaan
ottaa interpoloimalla huomioon absorbanssiarvon kolmas desimaali.
0123456789
0 1000
23977229552293321912218912087120851198321981319
1 79418776187591774117724167081669216676156611564615
2 63114617146031458914575135621354913537125251251312
3 50111490114791146811457104479436942710417104079
4 3989389938093718363835583478339833173248
5 3167309730272957288628272756269626362576
6 2516245524062345229522452195214520952045
7 1994195519041864182417841744170416641624
8 1583155415131484144414131383135313231293
9 1263123312031172115311221103107210531022
Exempel:
Absorbans 0,47 1,47 2,47 3,47
T% 33,9 % 3,4 % 0,3 % 0 %
Transmittanssit T % on ilmoitettava 0,1 %:n tarkkuudella1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 164
▼B
KUVA 1
Kromaattisuusdiagrammi, jossa on kaikki spektrin värit1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 165
▼B
KUVA 2
Kromaattisuusdiagrammi heleänpunaisille punaviineille ja
ruskeanpunaisille punaviineille1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 166
▼B
KUVA 3
Kromaattisuusdiagrammi heleänpunaisille punaviineille ja
ruskeanpunaisille punaviineille1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 167
▼B
KUVA 4
Kromaattisuusdiagrammi heleänpunaisille punaviineille ja purp-
puranpunaisille punaviineille1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 168
▼B
KUVA 5
Kromaattisuusdiagrammi heleänpunaisille punaviineille ja purp-
puranpunaisille punaviineille1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 169
▼B
KUVA 6
Kromaattisuusdiagrammi ruskeanpunaisille punaviineille ja
purppuranpunaisille punaviineille1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 170
▼B
2 PUHDISTETUT TIIVISTETYT RYPÄLEMEHUT
2.1 Periaate
Mitataan absorbanssi 452 nm:ssä 1 cm:n paksuudessa sen jälkeen,
kun puhdistetun tiivistetyn rypälemehunsokerikonsentraatio on
saatettu 25 %:ksi(m/m) (25 ºBri x).
2.2 Laitteet
2.2.1 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittauksia välillä 300-700 nm.
2.2.2 Lasikyvettejä, joiden optinen pituus on 1 cm.
2.2.3 Kalvosuodatin, jonka huokoisuus on 0,45 µm.
2.3 Suoritus
2.3.1 Näytteen valmistaminen
Käytetään liuosta, jonka sokeripitoisuus on 25 % (m/m) (25 ºBrix) ja
joka on valmistettu luvun ”pH” 4.1.2 kohdassa kuvatulla tavalla.
Suodatetaan kalvosuodattimen läpi, jonka huokoisuus on 0,45 µm.
2.3.2 Absorbanssin määrittäminen
Säädetään absorbanssin nollakohta aallonpituudella 425 nm käyttäen
tislattua vettä sisältävää kyvettiä, jonka optinen pituus on 1 cm.
Mitataan 25 % (25 ºBrix) sokeria sisältävän nesteen, joka on valmis-
tettu 2.3.1 kohdassa kuvatullatavalla, 1 cm:n optisen pituuden
omaavassa kyvetissä, absorbanssi A samalla aallonpituudella.
2.4 Tulosten ilmoittaminen
25 % (m/m) sokeria sisältävän (25 ºBrix) puhdistetun tiivistetyn rypa-
lemehun absorbanssi 425 nm:ssäilmoitetaan kahdella desimaalilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 171
▼B
41.FOLIN-CIOCALTEU-LUKU
1 MÄÄRITELMÄ
Folin-Ciocalteu-luku on jäljempänä kuvatulla menetelmällä saatu
tulos.
2 PERIAATE
Kaikki viinin sisältämät fenoliset yhdisteet hapetetaan Folin-
Ciocalteu-jreagenssilla. Reagenssi koostuu fosfovolframihapon
(H3PW12O40) ja fosfomolybdeenihapon (H3PMo12O40) seoksesta, joka
pelkistyy fenolien hapettuessa sinisiksi volframi- (W8O23) ja molyb-
deenioksideiksi (Mo8O23).
Sinisen värin absorptio on korkeimmillaan noin 750 nm:ssä. Se on
verrannollinen fenolisten yhdisteiden kokonaismäärään.
3 REAGENSSIT
Reagenssien on oltava analyysilaatua. Käytetyn veden on oltava
tislattua vettä tai vastaavan puhtausasteeno maavaa vettä.
3.1 Folin-Ciocalteu-reagenssi
Tätä reagenssia on kaupallisesti saatavissa suoraan käytettävässä
muodossa. Se voidaan valmistaaseuraavasti: liuotetaan 100 g
natriumvolframaattia (Na2WO4,2H2O) ja 25 g natriummolybdaattia
(Na2MoO42H2O) 700 ml:aan tislattua vetta; lisätään 50 ml 85 %
fosforihappoa (p20= 1,71 g/ml) ja 100 ml väkevää kloorivetyhappoa
(p20= 1,19 g/ml). Kuumennetaan kiehuvaksi ja keitetään 10 tuntiapys-
tyjäähdyttimellä varustetussa kolvissa, tämän jälkeen lisätään 150 g
litiumsulfaattia (Li2SO4H2O), muutama bromitippa ja keitetään
uudelleen 15 minuutin ajan. Jäähdytetään ja täytetään yhdeksi litraksi
tislatulla vedellä.
3.2 Vedetön natriumkarbonaatti (Na2CO3), 20 % (m/v) -liuos.
4 VÄLINEISTÖ
Tavalliset laboratoriovälineet ja erityisesti:
4.1 100 ml:n mittapulloja.4.2 Spektrofotometri, jota voidaan käyttää 750 nm:ssä.
5. SUORITUS5.1 Punaviinit
Mitataan 100 ml:n (4.1) mittapulloon seuraavassa järjestyksessä:
1 ml suhteessa 1/5 laimennettua viiniä,
50 ml tislattua vettä,
5 ml Folin-Ciocalteu-reagenssia (3.1),
20 ml natriumkarbonaattiliuosta (3.2).
Täytetään 100 ml:ksiti slatulla vedellä.
Homogenoidaan ravistelemalla. Odotetaan 30 minuuttia reaktion
tasoittumista. Määritetään absorbanssi 750 nm:ssä 1 cm:n optisella
pituudella suhteessa vertailunäytteeseen, jossa on käytetty viinin
sijasta tislattua vettä.
Jos absorbanssi ei ole lähellä 0,3:a, on viinin laimennusta muutettava.
5.2 Valkoviinit
Tehdään määritys samalla tavalla 1 ml:sta laimentamatonta viiniä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 172
▼B
5.3 Puhdistetut tuvistetyt rypälemehut
5.3.1 Näytteen valmistaminen
Käytetään liuosta, jonka sokeripitoisuus on 25 % (m/m) (25 ºBrix) ja
joka on valmistettu luvun ”pH” 4.1.2 kohdassa kuvatulla tavalla.
5.3.2 Mittaus
Tehdään mittaus samalla tavoin kuin punaviineille (5.1) 5 ml:sta
5.3.1 kohdan mukaisesti valmistettuanäytettä ja mitataan absorbanssi
suhteessa vertailunäytteeseen, joka on valmistettu 5 ml:sta 25 % (m/
m)inverttisokeriliuosta.
6. TULOSTEN ILMOITTAMINEN6.1 Laskentatapa
Tulos ilmoitetaan lukuna, joka saadaan kertomalla absorbanssi
100:lla, jos kyseessä ovat suhteessa 1/5 laimennetut punaviinit (tai
käytettyä laimennusta vastaavalla kertoimella), ja 20:llä, jos kyseessä
ova tvalkoviinit. Kun kyseessä ovat puhdistetut tiivistetyt rypäle-
mehut, absorbanssikerrotaan 16:lla.
6.2 Toistettavuus
Saman henkilön kahden samanaikaisesti tai nopeasti peräkkäin
tekemän määrityksen välinen ero ei saa olla yli 1.
Tulosten hyvä toistettavuus saavutetaan käyttämällä erittäin puhtaita
välineitä (mittapullot ja spektrofotometrin kyvetit).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 173
▼B
42.PUHDISTETTUJEN TIIVISTETTYJEN RYPÄLEMEHUJEN
ERITYISET MÄÄRITYSEENETELMÄT
a) KATIONIEN KOKONAISMÄÄRÄ1 PERIAATE
Käsitellään näyte vahvasti happamalla kationinvaihtajalla. Kationit
vaihdetaan H
+:ksi. Ne ilmoitetaan eluaatin kokonaishappopitoisuuden
ja näytteen kokonaishappopitoisuuden erotuksena.
2 VÄLINEISTÖ
2.1 Pituudeltaan noin 300 mm ja sisähalkaisijaltaan 10-11 mm oleva lasi-
kolonni, jossa on hana.
2.2 pH-mittari, jonka asteikko on jaettu vähintään 0,1 pH-yksiköihin.2.3 Elektrodit:
— lasielektrodi, säilytetään tislatussa vedessä.
— kalomeli/kyllästetty kaliumkloridi-vertailuelektrodi, säilytetään-
kyllästetyssä kaliumkloridiliuoksessa,
— tai yhdistetty elektrodi, säilytetään tislatussa vedessä.
3 REAGENSSIT
3.1 Vahvasti hapan kationinvaihtaja H
+-muodossa. Ennen käyttöä hartsia
on turvotettava vedessä yliyön.
3.2 0,1 M natnumhydroksidiliuos.
3.3 pH-indikaattoripaperi.
4 SUORITUS4.1 Näytteen valmistaminen
Käytetään liuosta, joka on saatu laimentamalla puhdistettu tiivistetty
rypälemehu 40 %:ksi (m/v) luvun ”Kokonaishappopitoisuus” 5.1.2
kohdassa kuvatulla tavalla.
4.2 Ioninvaihtokolonnin valmistaminen
Asetetaan kolonniin noin 10 ml H
+-muodossa olevaa paisutettua
ioninvaihtohartsia; huuhdellaan kolonnia tislatulla vedellä, kunnes
happo on peseytynyt pois; tämä todetaan indikaattoripaperilla.
4.3 Ioninvaihto
Valutetaan kolonnin läpi 100 ml puhdistetusta tiivistetystä rypäleme-
husta 4.1 kohdan mukaisesti valmistettua liuosta 1 tippa sekunnissa.
Kerätään eluaatti mittalasiin. Huuhdotaan kolonni 50 ml:lla tislattua
vettä. Titrataan eluaatin happopitoisuus (mukaan lukien huuhteluvesi)
0,1 M natriumhydroksidili uoksella pH-arvoon 7 20 ºC:ssa.
Emäksistä liuosta on lisättävä hitaasti ja liuosta on ravisteltava koko
ajan. Käytetyn 0,1 M natriumhydroksidiliuoksen tilavuus on n ml.
5 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Kationien kokonaismäärä ilmoitetaan milliekvivalentteina kilogram-
massa kokonaissokeria yhdellä desimaalilla.
5.1 Laskeminen
— Eluaatin happopitoisuus ilmoitettuna milliekvivalentteina kilo-
grammassa puhdistettua tiivistettyä rypälemehua:
E = 2,5 × n.
— Puhdistetun tiivistetyn rypälemehun kokonaishappopitoisuus
milliekvivalentteina kilogrammassa (ks. ”Kokonaishappopitoi-
suus” 6.1.2 kohta): a
— Kationien kokonaismäärä milliekvivalentteina kilogrammassa
kokonaissokeria:
2;5n/C0a
P/C21001990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 174
▼B
P = kokonaissokerien pitoisuus prosentteina (m/m).
b) JOHTOKYKY1 PERIAATE
Nestepatsaan sähkönjohtavuus määritetään kahdella samansuuntai-
sella platinaelektrodilla, jotka muodostavat yhden haaran
Wheatstonen sillan kytkennässä.
Johtokyky vaihtelee lämpötilan mukaan. Se ilmoitetaan 20 ºC:ssa.
2. LAITE
2.1 Johtokykymittari, jolla voidaan tehdä johtokykymittauksia alueella 1-
1 000 mikrosiemensiä/cm.
2.2 Vesihaude, jolla voidaan saattaa määritettävien näytteiden lämpötila
noin 20 ºC:seen (20 ± 2 ºC).
3 REAGENSSIT
3.1 Demineralisoitu vesi, jonka ominaisjohtokyky on alle 2 mikrosie-
mensiä/cm 20 ºC:ssa.
3.2 Kaliumkloridivertailuliuos.
Liuotetaan 0,581 g aiemmin 105 ºC:ssa vakiopainoon kuivattua
kaliumkloridia, KCI, demineralisoituun veteen (3.1). Täytetään
yhdeksi litraksi demineralisoidulla vedellä (3.1). Tämä liuoksen
johtokyky on 1 000 mikrosiemensiä/cm 20 ºC:ssa. Se säilyy 3
kuukautta.
4 SUORITUS4.1 Näytteen valmistaminen määritystä varten
Käytetään liuosta, jonka kokonaissokenpitoisuus on 25 % (m/m)
(25 ºBrix), kuten kuvataan luvun ”pH:n määrittäminen” 4.1.2
kohdassa.
4.2 Johtokyvyn määrittäminen
Saatetaan määritettävä näyte 20 ºC:seen vesihauteessa. Pidetään
lämpötila vakiona 0,1 ºC:n tarkkuudella.
Huuhdotaan johtokykymittarin mittauskenno kaksi kertaa tutkittavalla
liuoksella.
Mitataan johtokyky ilmoitettuna mikrosiemenseinä senttimetriä kohti.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Puhdistetusta tiivistetystä rypälemehusta valmistetun 25 % (m/m)
(25 ºBrix) liuoksen johtokyky ilmoitetaan kokonaislukuna mikrosie-
menseinä senttimetriä kohti (Scm
−1) 20 ºC:ssa.
5.1 Laskeminen
Jos laitteessa ei ole lämpötilankompensoijaa, mitattu johtokyky korja-
taan taulukon 1 avulla. Jos lämpötila on alle 20 ºC, lisätään korjaus;
jos lämpötila on yli 20 ºC, vähennetään korjaus.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 175
▼B
TAULUKKO 1
Johtokykyyn tehtävät korjaukset, kun lämpötila eroaa 20 ºC:sta, mikrosiemenseinä cm−1
JohtokykyLämpötilat
20,2
19,820,4
19,620,6
19,420,8
19,221,0
19,021,2
18,821,4
18,621,6
18,421,8
18,222,0 (1)
18,0 (2)
0 000 000000 0
5 0 001 111122 2
1 0 0 011 223334 41 5 0 112 334556 72 0 0 123 345678 92 5 0 123 46789 1 0 1 13 0 0 134 5789 1 1 1 2 1 3350 1 3 5 6 8 9 11 12 14 154 0 0 2 3 5 7 91 11 21 41 6 1 8
450 2 3 6 8 10 12 14 16 18 20
500 2 4 7 9 11 13 15 18 20 225 5 0 2 5 7 1 01 21 41 71 92 2 2 46 0 0 3 5 8 1 11 31 61 82 12 4 2 6
(1) Korjaus vähennetään.
(2) Korjaus lisätään.
c) HYDROKSHIMETYYLIFURFURAALI
1 MENETELMIEN PERIAATE1.1 Kolorimetrinen menetelmä
Furaanista johdetut aldehydit, joista tärkein on hydroksimetyylifurfur-
aali, reagoivat barbituurihapon ja paratoluidiinin kanssa ja reaktiossa
syntyy punainen yhdiste, joka määritetään kolorimetrisesti
550 nm:ssä.
1.2 Suuren erotuskyvyn nestekromatografia
Erottaminen kolonnissa käänteisfaasilla ja määrittäminen 280 nm:ssä.
2. KOLORIMETRINEN MENETELMÄ2.1 Laitteet
2.1.1 Spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittauksia välillä 300-700 nm.2.1.2 Lasikyvettejä, optinen pituus 1 cm.
2.2 Reagenssit
2.2.1 Barbituurihappo, 0,5 % liuos (m/v)
Liuotetaan 500 mg barbituurihappoa, C
4O3N2H4, tislattuun veteen
lämmittäen hieman 100 ºC:ssa vesihauteessa; täytetään 100 ml:ksi
tislatulla vedellä. Liuos säilyy noin yhden viikon.
2.2.2 Paratoluidiini, 10 % liuos (m/v)
Mitataan 10 g paratoluidiinia, C6H4(CH3)NH2, 100 ml:n mittapulloon;
lisätään 50 ml isopropanolia, CH3CH(OH)CH3, ja 10 ml jääetikkaa,
CH3COOH( ρ20= 1,05 g/ml); täytetään 100 ml:ksi isopropanolilla.
Tämä liuos on uusittava päivittäin.
2.2.3 Asetaldehydi (CH3CHO), 1 % vesiliuos (m/v)
Valmistetaan juuri ennen käyttöä.
2.2.4 Hydroksimetyylifurfuraali, C6O3H6, 1 g/l vesiliuos
Valmistetaan perättäisillä laimennuksilla liuokset, joiden pitoisuudet
ovat 5; 10; 20; 30 ja 40 mg/l. Pitoisuudeltaan 1 g/l oleva liuos ja
sen laimennokset on valmistettava juuri ennen käyttöä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 176
▼B
2.3 Suoritus
2.3.1 Näytteen valmistaminen
Käytetään liuosta, joka on saatu laimentamalla puhdistettu tiivistetty
rypälemehu 40 %:ksi (m/v) luvun ”Kokonaishappopitoisuus” 5.1.2
kohdan mukaisesti. Tehdään määritys 2 ml:sta tätä liuosta.
2.3.2 Kolorimetrinen måäritys
Mitataan kahteen 25 ml:n hiostulpalliseen pulloon ajab2m l
näytettä, joka on valmistettu 2.3.1 kohdan mukaisesti. Mitataan
molempiin pulloihin 5 ml paratoluidiiniliuosta (2.2.2); sekoitetaan.
Lisätään pulloon b(vertailu) 1 ml tislattua vettä, ja pulloon a
(mittaus) 1 ml barbituurihappoliuosta (2.2.1). Homogenoidaan ravis-
telemalla. Siirretään pullojen sisältö spektrofotometrin 1 cm:n
kyvetteihin. Säädetään absor- banssiasteikon nollakohta aallonpituu-
delle 550 nm käyttäen pullon bsisältöä, seurataan pullon asisällön
absorbanssin muutosta; mitataan sen suurin arvo A, joka saavutetaan
2-5 minuutissa.
Näytteet, joiden hydroksimetyylifurfuraalipitoisuus on yli 30 mg/l, on
laimennettava ennen määritystä.
2.3.3 Kalibrointikäyrän laatiminen
Mitataan kahteen 25 ml:n pulloon ajab2 ml hydroksimetyylifurfur-
aaliliuoksia, joiden pitoisuudet ovat 5; 10; 20; 30 ja 40 mg/l (2.2.4) ja
käsitellään ne 2.3.2 kohdassa kuvatulla tavalla.
Graafinen kuvaaja, joka esittää absorbanssin muutoksen vertailu-
liuosten hydroksimetyylifurfuraalipitoisuuksien milligrammoina
litrassa funktiona on origon kautta kulkeva suora.
2.4 Tulosten ilmoittaminen
Puhdistettujen tiivistettyjen rypälemehujen hydroksimetyylifurfuraali-
pitoisuus ilmoitetaan milligrammoina kilogrammassa
kokonaissokeria.
2.4.1 Laskentatapa
Määritettävän näytteen hydroksimetyylifurfuraalipitoisuus C mg/l on
kalibrointikäyrältä saatava pitoisuus, joka vastaa tästä näytteestä
mitattua absorbanssia A.
Hydroksimetyylifurfuraalipitoisuus milligrammoina kilogrammassa
kokonaissokeria:
250/C2C
P
P = puhdistetun tiivistetyn rypälemehun kokonaissokerien pitoisuus
prosentteina (m/m).
3. SUUREN EROTUSKYVYN NESTEKROMATOGRAFIA
3.1 Laitteet
3.1.1 Suuren erotuskyvyn nestekromatografi, jossa on:
— 5-10 µl injektointiluuppi,
— detektori, spektrofotometri, jolla voidaan tehdä mittauksia
280 nm:ssä,
— kolonni, silikaan sidottu oktadesyyli (esimerkiksi: Bondapak C18-
Corasil, Water Ass.),
— piirturi ja mahdollisesti integraattori.
Liikkuvan faasin virtausnopeus: 1,5 ml/min.
3.1.2 Kalvosuodatuslaitteisto (0,45 µm)
3.2 Reagenssit
3.2.1 Kahdesti tislattu vesi.3.2.2 Metanoli, CH
3OH, tislattu tai HPLC-laatua.
3.2.3 Etikkahappo, CH3COOH( ρ20= 1,05 g/ml).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 177
▼B
3.2.4 Liikkuva faasi: vesi-metanoli (3.2.2) - etikkahappo (3.2.3) suodatettu
kalvosuodattimen (0,45 µm) läpi, (40 - 9 - 1 v/v).
Tämä liikkuva faasi on valmistettava päivittäin ja kaasut on poistet-
tava ennen käyttöä.
3.2.5 Hydroksimetyylifurfuraalivertailuliuos, 25 mg/l (m/v).
Mitataan 100 ml:n mittapulloon tarkalleen 25 mg hydroksimetyylifur-
furaalia, C6H3O6, ja täytetään tilavuus merkkiin metanolilla (3.2.2).
Tämä liuos laimennetaan metanolilla (3.2.2) suhteessa 1/10 ja suoda-
tetaan kalvosuodattimen (0,45 µm) läpi.
Ruskeassa ilmatiiviisti suljetussa pullossa jääkaapissa säilytettynä
tämä liuos säilyy 2-3 kuukautta.
3.3 Suoritus
3.3.1 Näytteen valmistaminen
Käytetään liuosta, joka on saatu laimentamalla puhdistettu tiivistetty
rypälemehu 40 %:ksi (m/v) luvun ”Kokonaishappopitoisuus” 5.1.2
kohdan mukaisesti ja suodattamalla liuos kalvosuodattimen (0,45 µm)
läpi.
3.3.2 Kromatografinen määritys
Injektoidaan kromatografiin 5 (tai 10) µl 3.3.1 kohdan mukaisesti
valmistettua näytettä ja 5 (tai 10) µl hydroksimetyylifurfuraalivertai-
luliuosta (3.2.5). Tulostetaan kromatogrammi.
Hydroksimetyylifurfuraalin retentioaika on noin 6-7 minuuttia.
3.4 Tulosten ilmoittaminen
Puhdistettujen tiivistettyjen rypälemehujen hydroksimetyylifuriuraali-
pitoisuus ilmoitetaan milligrammoina kilogrammassa
kokonaissokeria.
3.4.1 Laskentatapa
Puhdistetusta tiivistetystä rypälemehusta saadun 40 % (m/v) liuoksen
hydroksimetyylifurfuraalipitoisuus on C mg/l.
Hydroksimetyylifurfuraalipitoisuus milligrammoina kilogrammassa
kokonaissokeria:
250/C2C
P
P = puhdistetun tiivistetyn rypälemehun kokonaissokerien pitoisuus
prosentteina (m/m).
d) RASKASMETALLIT1. PERIAATTEET
I. Raskasmetallien nopea arviointimenetelmä
Raskasmetallit osoitetaan sopivasti laimennetusta puhdistetusta tiivis-
tetystä rypälemehusta värillä, jonka sulfidien muodostuminen tuottaa.
Ne arvioidaan vertaamalla Iyijyvertailuliuokseen, joka vastaa
korkeinta hyväksyttyä pitoisuutta.
II. Lyijypitoisuuden määrittäminen atomiabsorptiospektrofotometri-
sesti
Kelaatti, jonka lyijy muodostaa ammoniumpyrrolidiiniditiokarba-
maatin kanssa, uutetaan metyyli-isobutyyliketonilla ja absorbanssi
mitataan 283,3 nm: ssä. Lyijypitoisuus määritetään lisäysmene-
telmällä.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 178
▼B
2. RASKASMETALLIEN NOPEA ARVIOINTIMENETELMÄ
2.1 Reagenssit
2.1.1 Laimennettu kloorivetyhappo, 70 % (m/v)
Mitataan 70 g kloorivetyhappoa (Hcl),( ρ20= 1,16-1,19 g/ml), ja
täytetään vedellä 100 ml:ksi.
2.1.2 Laimennettu kloorivetyhappo, 20 % (m/v)
Mitataan 20 g kloorivetyhappoa (Hcl), ( ρ20= 1,16-1,19 g/ml), ja
täytetään vedellä 100 ml:ksi.
2.1.3 Laimennettu ammoniakki
Mitataan 14 g ammoniakkia (NH3),(ρ20= 0,931-0,934 g/ml), ja
täytetään vedellä 100 ml:ksi.
2.1.4 Puskuriliuos, pH 3,5
Liuotetaan 25 g ammoniumasetaattia (CH3COONH4) 25 ml:aan vettä
ja lisätään 38 ml laimennettua kloorivetyhappoa (2.1.1). Tarpeen
vaatiessa säädetään pH laimennetulla rikkihapolla (2.1.2) tai laimen-
netulla ammoniakilla (2.1.3) ja täytetään vedellä 100 ml:ksi.
2.1.5 Tioasetamidiliuos, (C2H5NS), 4 % (m/v)
2.1.6 Glyseroliliuos (C3H8O3), 85 % (m/v)
(nD20 ºC= 1,449-1,455).
2.1.7 Tioasetamidireagenssi
Lisätään 0,2 ml:aan tioasetamidiliuosta (2.1.5) 1 ml seosta, jossa on
5 ml vettä, 15 ml 1 M natriumhydroksidiliuosta ja 20 ml glyserolia
(2.1.6). Lämmitetään 100 ºC:ssa vesihauteessa 20 sekuntia. Valmiste-
taan juuriennen käyttöä.
2.1.8 Lyijyliuos, 0,002 g/l
Valmistetaan 1 g/l lyijyä sisältävä liuos liuottamalla veteen 0,400 g
Iyijynitraattia, Pb(NO3)2, ja täytetään vedellä 250 ml:ksi. Laimenne-
taan tämä liuos vedellä juuri ennen käyttöä 2‰:ksi, jotta saadaan
lyijyä 0,002 g/l sisältävä liuos.
2.2 Suoritus
Liuotetaan puhdistetusta tiivistetystä rypälemehusta otettu 10 g:n
suuruinen näyte 10 ml:aan vettä. Lisätään 2 ml puskuriliuosta, jonka
pH-arvo on 3,5 (2.1.4); sekoitetaan. Lisätään 1,2 ml tioasetamidirea-
genssia (2.1.7). Sekoitetaan viipymättä. Valmistetaan vertailunäyte
samoissa koeolosuhteissa käyttäen10 ml lyijyä 0,002 g/l sisältävää
liuosta (2.1.8).
Puhdistettuun tiivistettyyn rypälemehuun mahdollisesti muodostunut
ruskea väri ei saa olla kahden minuutin kuluttua tummempi kuin
vertailuliuoksen väri.
2.3 Laskeininen
Käytetyissä koeolosuhteissa vertailukoe vastaa korkeinta hyväksyttyä
raskasmetallipitoisuutta ilmoitettunalyijynä 2 mg/kg:ssa puhdistettua
tiivistettyä rypälemehua.
3 LYLTYPITOISUUDEN MÄÄRITTÄMINEN ATOMIABSORP-
TIOSPEKTROFOTOMETRILLÄ
3.1 Laitteet
3.1.1 Atomiabsorptiospektrofotometri, jossa on ilma-asetyleenipoltin.
3.1.2 Lyijyonttokatodilamppu.
3.2 Reagenssit
3.2.1 Laimennettu etikkahappo.
Mitataan 12 g jääetikkaa( ρ20= 1,05 g/ml) ja täytetään vedellä
100 ml:ksi.
3.2.2 Ammoniumpyrrolidiiniditiokarbamaattiliuos C5H12N2S2, 1 % (m/v).1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 179
▼B
3.2.3 Metyyli-isobutyyliketoni, (CH3)2CHCH2COCH3).
3.2.4 Lyijyliuos, joka sisältää lyijyä 0,010 g/l.
Laimennetaan 1 g/l lyijyä sisältävä lyijyliuos (2.1.8) 1 %:ksi (v/v).
3.3 Suoritus
3.3.1 Tutkittava liuos
Liuotetaan 10 g puhdistettua tiivistettyä rypälemehua seokseen, joka
sisältää yhtä suuret tilavuudet laimennettua etikkahappoa (3.2.1) ja
vettä, ja täytetään tällä seoksella 100 ml:ksi.
Lisätään 2 ml ammoniumpyrrolidiiniditiokarbamaattiliuosta (3.2.2) ja
10 ml metyyli-isobutyyliketoni (3.2.3). Ravistellaan 30 sekuntia
valolta suojattuna. Annetaan kerrosten erottua. Käytetään metyyli-
isobutyyliketonikerros.
3.3.2 Vertailuliuokset
Valmistetaan 3 vertailuliuosta, jotka sisältävät 10 g puhdistettua
tiivistettyä rypälemehua, 1, 2 ja 3 ml 0,010 g/l lyijyliuosta (3.2.4).
Käsitellään liuokset samalla tavoin kuin määritettävä liuos.
3.3.3 Sokeakoe
Valmistetaan sokeakoeliuos 3.3.1 kohdan koeolosuhteissa, mutta ei
lisätä liuokseen puhdistettua tiivistettyä rypälemehua.
3.3.4 Määritys
Valitaan aallonpituus 283,3 nm.Atomisoidaan sokeakokeesta peräisin oleva metyyli-isobutyyliketoni
liekissä ja säädetään absorbanssin nollakohta.
Käyttäen vastaavia liuosuutteita määritetään tutkittavan liuoksen ja
vertailuliuosten absorbanssit.
3.4 Tulosten ilmoittaminen
Lyijypitoisuus ilmoitetaan milligrammoina kilogrammassa puhdis-
tettua tiivistettyä rypälemehua.
3.4.1 Laskeminen
Piirretään käyrä, joka edustaa absorbanssien muuttumista vertailu-
liuoksiin lisätyn Iyijyn konsentraation funktiona, kun
nollakonsentraatio vastaa tutkittavaa liuosta.
Ekstrapoloidaan pisteet yhdistävä suora, kunnes se leikkaa konsen-
traatioakselin negatiivisella osalla. Tämän pisteen etäisyys origosta
antaa tutkittavan liuoksen Iyijykonsentraation.
e) ETANOLIN KEMIALLINEN MÄÄRITYS
Tätä määritysmenetelmää käytetään määritettäessä alkoholipitoisuus
vähän alkoholia sisältävistä nesteistä, kuten rypälemehut, tiivistetyt
rypälemehut ja puhdistetut tiivistetyt rypälemehut.
1 PERIAATE
Nesteen yksinkertainen tislaus. Tisleen sisältämän etanolin hapetta-
minen kaliumdikromaatilla. Dikromaattiylijäämän titraus rauta (II)
liuoksella.
2. LAITE
2.1 Käytetään luvun ”Alkoholipitoisuus” 3.2 kohdassa kuvattua tislauslai-
tetta.
3. REAGENSSIT3.1 Kaliumdikromaattiliuos
Liuotetaan 33,600 g kaliumdikromaattia (K
2Cr2O7) sellaiseen määrään
vettä, että liuosta on 20 ºC:ssa yksi litra.
Yksi millilitra tätä liuosta hapettaa 7,8924 mg alkoholia.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 180
▼B
3.2 Rauta (II) ammoniumsulfaattiliuos
Liuotetaan 135 g rauta(II)ammoniumsulfaattia, FeSO4.(NH4)2SO46H2O sellaiseen määrään vettä, että siitä tulee 1 litra livosta ja
lisätään 20 ml väkevää rikkihappoa (H2SO4), (ρ20= 1,84 g/ml). Juuri
valmistettuna tämä liuos vastaa noin puolen tilavuutensa kokoista
dikromaattiliuosta. Tämän jälkeen se hapettuu hitaasti.
3.3 Kaliumpermanganaattiliuos
Liuotetaan 1,088 g kaliumpermanganaattia, KMnO4, sellaiseen
määrään vettä, että saadaan liuosta 1 litra.
3.4 Suhteessa 1/2 (v/v) laimennettu rikkihappo
Lisätään ravistellen ja hieman kerrallaan 500 ml:aan vettä 500 ml
rikkihappoa (H2SO4)(ρ20= 1,84 g/ml).
3.5 Rauta-ortofenantroliini -reagenssi
Liuotetaan 0,695 g rautasulfaattia, FeSO4.7 H2O 100 ml:aan vettä,
lisätään 1,485 g ortofenantroliinimonohydraattia, C12H8N2,H2O.
Lämmitetään liukenemisen helpottamiseksi. Tämä kirkkaan punainen
liuos säilyy erittäin hyvin.
4 SUORITUS
4.1 Tislaus
Mitataan tislauskolviin 100 g puhdistettua tiivistettyä rypälemehua ja
100 ml vettä. Kerätään tisle 100 ml:n mittapulloon ja täytetään merk-
kiin vedellä.
4.2 Hapettaminen
Mitataan 300 ml:n hiostulpalliseen pulloon, joka voidaan huuhdella
ilman hävikkiä laajennetun kaulaosansa ansiota, 20 ml kaliumdikro-
maattiliuosta (3.1), 20 ml suhteessa 1/2 (v/v) laimennettua
rikkihappoa (3.4) ja ravistellaan. Lisätään 20 ml tislettä. Suljetaan
pullo, ravistellaan ja odotetaan vähintään 30 minuuttia ravistellen
pulloa ajoittain (”määritys” -pullo).
Tehdään rauta (II) ammoniumsulfaattiliuoksella titraus (3.2) kalium-
dikromaattiliuoksen suhteen mittaamalla samanlaiseen pulloon sama
määrä reagensseja, mutta korvaamalla 20 ml tislettä 20 ml:lla
tislattua vettä (”vertailu” -pullo).
4.3 Titraus
Lisätään 4 tippaa ortofenantroliinireagenssia (3.5) ”määritys”
-pulloon. Titrataandikromaattiylijäämä lisää- mällä pulloon rauta (II)
ammoniumsulfaattiliuosta (3.2). Keskeytetään rautaliuoksen
lisääminen, kun seos muuttuu sinivihreästä ruskeaksi.
Loppukohdan tarkentamiseksi muutetaan ruskea liuos sinivihreäksi
kaliumpermanganaattiliuoksella (3.3). Vähennetään kymmenesosa
tämän liuoksen tilavuuden rauta (II) sulfaattiliuoksen tilavuudesta.
Tämä erotus on n.
Toistetaan suoritus samalla tavoin ”vertailu” -pullolle. Erotus on n'.
5. TULOSTEN ILMOITTAMINEN
Etanoli ilmoitetaan grammoina kilogrammassa kokonaissokeria
yhdellä desimaalilla.
5.1 Laskentatapa
n' ml rautaliuosta pelkistää 20 ml dikromaattiliuosta, joka hapettaa
157,85 mg puhdasta etanolia.
Yhdellä millilitralla rauta (II) liuosta on sama pelkistävä vaikutus
kuin:
157 ;85
n’mg etanol1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 181
▼B
n' − n ml:lla rauta (II) liuosta on sama pelkistävä vaikutus kuin:
157 ;85/C2n’/C0n
n’mg etanol
Etanolia g/kg puhdistettua tiivistettyä rypälemehua:
7;892/C2n’/C0n
n’
Etanolia g/kg kokonaissokeria:
789 ;2/C2n’/C0n
n’/C2P
jossa
P = kokonaissokerien pitoisuus prosentteina (m/m).
f) MESOINOSITOLI, SKYLLOINOSITOLI JA SAKKAROOSI
1 PERIAATE
Silanoitujen johdannaisten kaasukromatografia.
2 REAGENSSIT
2.1 Sisäinen standardi: xylitoli (10 g/l vesiliuos, johon on lisätty
lastankärjellinen natriumatsidia).
2.2 Bistrimetyylisilyylitrifluoroasetamidi - BSTFA - (C8H18F3NOSi2).
2.3 Trimetyylikloorisilaani (C3H9ClSi).
2.4 Pyridiini, analyysilaatua (C5H5N).
2.5 Mesoinositoli (C6H12O6).
3. VÄLINEISTÖ
3.1 Kaasukromatografi, jossa on:3.2 Kapillaarikolonni (esimerkiksi sulatettu silikakapillaarikolonni, OV 1,
kalvon paksuus 0,15 µm, pituus 25 m ja sisähalkaisija 0,3 mm).
Suoritusolosuhteet:
— kantokaasu: vety taiheli um,
— kaasun virtausnopeus: noin 2 ml/minuutissa,— injektorin ja detektorin lämpötila: 300 ºC,
— lämpötilan ohjelmointi: 1 minuutti 160 ºC, 4 ºC/minuutti, kunnes
saavutetaan 260 ºC, isotermisesti 260 ºC:ssa 15 minuuttia,
— jakosuhde: noin 1 1-20.
3.3 Integraanori.3.4 Mikroruisku, 10 µl.3.5 Mikropipettejä, 50, 100 ja 200 µl.3.6 2 ml:n mittapulloja, joissa on teflonkorkki.3.7 Uuni.
4. SUORITUS
Mitataan 50 ml:n mittapulloon tarkalleen 5 g puhdistettua tiivistettyä
rypälemehua, 1 ml xylitolistandardiliuosta (2.1) ja täytetään merkkiin
vedellä. Näytteen homogenoinnin jälkeen otetaan 100 µl liuosta
mittapulloon ja kuivataan kevyessä ilmavirrassa (3.6). Haihtumisen
helpottamiseksi on mahdollista lisätä 100 µl absoluuttista etanolia.
Liuotetaan jäännös huolellisesti 100 µl:aan pyridiiniä (2.4), lisätään
100 µl bistrimetyylisilyylitrifluoroasetamidia (2.2) ja 10 µl trimetyy-
likloorisilaania (2.3), suljetaan pullo teflonkorkilla ja asetetaan
60 ºC:n uuniin tunnin ajaksi.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 182
▼B
Otetaan 0,5 µl kirkasta nestettä ja injektoidaan se käyttäen onttoa
lämmitettyä neulaa edellä mainitun jaka ja suhteen mukaisesti.
5 TULOSTEN LASKEMINEN
5.1 Valmistetaan liuos, joka sisältää:
60 g/l glukoosia, 60 g/l fruktoosia, 1 g/l mesoinositolia ja 1 g/l
sakkaroosia.
Punnitaan 5 g tätä liuosta ja edetään 4 kohdassa kuvatulla tavalla.
Lasketaan mesoinositolin ja sakkaroosinkertoimet xylitolin suhteen
saadusta kromatogrammista.
Skylloinositolille, jota ei ole kaupallisesti saatavissa ja jonka reten-
tioaika on glukoosin anomeriamuotojen viimeisen piikin ja
mesoinositolin viimeisen piikin välillä (ks. liitekuva), käytetään
mesoinositolin kerrointa.
6 TULOSTEN ILMOITTAMINEN
6.1 Mesoinositoli ja skylloinositoli ilmoitetaan milligrammoina kilogram-
massa kokonaissokeria. Sakkaroosi ilmoitetaan grammoina
kilogrammassa rypälemehua.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 183
▼B
Kuva: Mesoinositolin, skylloinositolin ja sakkaroosin kaasukromatogrammi.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 184
▼M4
43.VEDEN 18- JA 16-HAPPI-ISOTOOPPIEN SUHTEEN MÄÄRITTÄ-
MINEN VIINISSÄ
I. MENETELMÄN KUVAUS
1. Menetelmän tarkoitus
Tällä menetelmällä määritetään eri alkuperää olevan veden 18- ja 16-
happi-isotooppien suhde. Isotooppisuhde18O/16O voidaan ilmaista
poikkeamana δ‰ suhteessa kansainvälisen vertailumateriaalin
V.SMOW isotooppisuhteesta:
δiè0½/C138 ¼Ri
RSMOW/C01/C20/C21
/C21 000
2. Periaate
Isotooppisuhde18O/16O määritetään isotooppisuhdemassaspektrome-
trialla (IRMS) ionivirroista m/z 46 (12C16O18O) ja m/z 44 (12C16O2),
jotka muodostuvat hiilidioksidista, kun viinissä olevan veden kanssa
on tapahtunut vaihto reaktiossa
C16O2+H218O↔C16O18O+H216O
Määritykseen käytetään kaasufaasissa olevaa hiilidioksidia.
3. Reagenssit
— Hiilidioksidi, analyysilaatu
— SMOW (Standard Mean Ocean Water)
— GISP (Greenland Ice Sheet Precipitation)
— SLAP (Standard Light Arctic Precipitation)
— Vertailuvetenä puhdas laboratoriovesi, joka on tarkasti kalibroitu
Wienissä toimivan kansainvälisen atomienergiajärjestön (IAEA)
vertailumateriaalien avulla
4. Laboratoriolaitteet
— isotooppisuhdemassaspektrometri, jonka sisäinen toistettavuus on
0,05 ‰.
— kolme kerääjää, jotta voidaan samanaikaisesti rekisteröidä ionit
m/z 44, 45 ja 46 taijolleitällai sta ole, kaksikerääjää, jotta
voidaan määrittää ionit m/z 44 ja 46
— termostoitu laitteisto (± 0,5º C) hiilidioksidin ja viinissä olevan
veden tasapainottamiseksi
— tyhjöpumppu, jolla voidaan saavuttaa 0,13 Pa:n sisäinen paine
— näyteampulleja, tilavuus 15 ml, joissa on kapillaariputki, jonka
sisähalkaisija on noin 0,015 mm
— Eppendorf-pipetti, jossa on kertakäyttöinen muovikärki
5. Koemääritykset
5.1. Manuaalinen menetelmä
Tasapainotusmenetelmä
Näytteen aplikointi
— Otetaan 1,5 ml:n kiinteätilavuuksinen Eppendorf-pipetti, kiinni-
tetään siihen kärki ja pipetoidaan analysoitavaa nestettä
pyörökolviin. Kolvin kaula ympärille levitetään silikonirasvaa ja
kiinnitetään kolvi venttiiliin sekä tarkistetaan, että se on kunnolla
suljettu.
— Toistetaan kaikkien kolvien osalta koko näytetelineessä ja yhteen
kolviin pannaan vertailulaboratoriovettä.
Kaasunpoisto telineestä
Molemmat näytetelineet jäähdytetään nestemäisellä typellä, jonka
jälkeen koko laitteisto huuhdotaan, kunnes saavutetaan 0,1 mmHg:n
paine avaamalla venttiilit.
Tämän jälkeen venttiilit suljetaan ja annetaan lämmetä. Kaasunpoisto
toistetaan, kunnes ei enää esiinny paineenvaihtelua.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 185
▼M4
Veden ja hiilidioksidin tasapainotus
Näytetelineet jäähdytetään −70 ºC:seen (nestemäisen typen ja alko-
holin seoksella) veden jäädyttämiseksi ja näytteet pannaan tyhjöön.
Kun tyhjä on vakiintunut, telineet eristetään venttiilillä, ja hiilidiok-
sidin syöttöjärjestelmä huuhdotaan. Kaasumainen hiilidioksidi
päästetään telineeseen, kun se on eristetty muusta laitteistosta, ja
teline pannaan 25 ºC:n (±0,5 ºC) termostoituun hauteeseen 12
tunniksi (yön yli). Jotta tasapainotusaika on mahdollisimman oikea,
näytteet kannattaa valmistaa iltapäivällä ja jättää tasapainottumaan
yön yli.
Vaihtuneen CO2:n siirtäminen mittauskyvetteihin
Näyteteline, jossa on yhtä monta mittauskyvettiä kuin vaihtunutta
CO2:ta sisältävää kolvia, kiinnitetään tyhjölinjaan työtelineen viereen.
Tyhjät kyvetit huuhdotaan huolellisesti, ja kolveissa olevat vaihtuneet
kaasunäytteet siirretään yksitellen nestemäisellä typellä jäähdytet-
tyihin mittauskyvetteihin. Mittauskyvettien annetaan lämmetä
huoneenlämpötilaan.
5.2. Automaattisen näytteenvaihtajan käyttö
Tasapainottamista varten näyteampullit täytetään joko 2 ml:lla viiniä
tai 2 ml:lla vettä (laboratoriovertailunäyte) ja jäähdytetään
− 18 ºC:seen. Näytetelineet, joissa jäädytetyt näytteet ovat, kiinni-
tetään tasapainotuslaitteistoon, ja sen jälkeen, kun laitteisto on
kytketty tyhjöön, siihen päästetään hiilidioksidi 800 hPa:n paineessa.
Tasapaino saavutetaan 22±0,5 ºC:n lämpötilassa vähintään 5 tunnin
kuluttua ravistaen kohtalaisesti. Koska tasapainottumisaika riippuu
ampullin muodosta, oikea aika käytettävälle laitteistolle on
määritettävä etukäteen.
Ampulleissa oleva hiilidioksidi siirretään sitten massaspektrometrin
syöttökammioon kapillaariputken kautta, ja määritys suoritetaan
kunkin laitetyypin ohjeiden mukaisesti.
6. Tulosten laskeminen ja ilmoittaminen
Ionien m/z 46 ja 44 (I46/I44) suhteellinen ero δ′näytteen ja vertailuma-
teriaalin välillä ilmaistaan ‰:na seuraavan yhtälön avulla:
δ0n¨ayte¼I46=I44 ðÞ n¨ayte
I46=I44 ðÞ vertailumateriaali/C01/C20/C21
/C21 000
Näytteen18O-pitoisuus suhteessa vertailumateriaaliin V.SMOW astei-
kolla V.SMOW/SLAP saadaan suhteesta
δ018O¼δ0n¨ayte/C0δ0SMOW
δ0SMOW /C0δ0SLAP/C20/C21
/C255;5
SLAP-vedelle hyväksytty arvo on − 55,5 ‰ suhteessa V.SMOW:hen.
Vertailumateriaalin isotooppisuhde on määritettävä aina 10 tuntemat-
toman näytteen mittauksen sarjan jälkeen.
7. Luotettavuus
— toistettavuuden (r) on oltava 0,24 ‰
— uusittavuuden (R) on oltava 0,50 ‰.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 186
▼M7
44.ETYYLIKARBAMAATIN MÄÄRITYS VIINEISTÄ: SELEKTII-
VINEN MENETELMÄ KAASUKROMATOGRAFIA-MASSASPEK-
TROMETRIALLA
(Soveltuu etyylikarbamaatin määritykseen, kun sen konsentraatio on välillä 10-
200 µg/l)
(Huomio: Kemikaalien kuten etanolin ja asetonin sekä syöpää aiheuttavien
aineiden kuten etyylikarbamaatin ja dikloorimetaanin käsittelyssä on noudatet-
tava turvaohjeita. Käytetyt liuottimet on käsiteltävä tai hävitettävä niihin
sovellettavien ympäristönsuojelua koskevien sääntöjen ja määräysten mukai-
sesti.)
A.Menetelmän periaate
Näytteeseen lisätään propyylikarbamaattia sisäiseksi standardiksi, liuosta
laimennetaan vedellä, ja se pannaan 50 ml:n kiinteäfaasierotuspylvääseen.
Etyylikarbamaatti ja propyylikarbamaatti eluoidaan dikloorimetaanilla.
Eluaatti konsentroidaan tyhjiöpyöröhaihdutuslaitteessa. Konsentraatti analy-
soidaan kaasukromatografisesti (GC), ja ilmaisimena käytetään
massaspektrometriä fragmentometriamenetelmällä SIM-toimintamuodossa
(Selected ions monitoring).
B.Kromatografialaitteet ja -olosuhteet (esimerkiksi)
a) Kaasukromatografi-massaspektrometri (GC/MS) ja mahdollisesti
näytteenvaihtolaite ja tulostenkäsittelylaite tai vastaava.
Kapillaarikolonni, jossa on piihappojohdannaista, 30 m (1) × 0,25 mm
sisähalkaisija, 0,25 µm tyyppiä Carbowax 20M.
Suoritus: injektori 180 ºC, kantajakaasuna helium, virtaus 1 ml/min,
25 ºC, injektio ”Splitless / split”-menetelmällä.
Lämpötilaohjelmointi: 40 ºC, 0,75 min, sen jälkeen 10 ºC/min, kunnes
saavutetaan 60 ºC, sitten 3 ºC/min, kunnes saavutetaan 150 ºC (2), jatke-
taan 220 ºC:een, ja pidetään 4,25 minuutin ajan 220 ºC:ssa.
Etyylikarbamaatin spesifinen retentioaika on 23-27 min ja propyylikarba-
maatin 27-31 min.
Kaasukromatografin ja massaspektrometrin liitännän lämpötila 220 ºC.
Massaspektrometriparametrit säädetään manuaalisti perfluoritributyylia-
miinilla ja optimoidaan matalammalle massaherkkyydelle, SIM-
mittausmuoto, liuottimen eluutioaika ja mittausten alkamisaika 22 min,
viipymisaika ionia kohti 100 ms.
b) Tyhjiöpyöröhaihdutuslaite tai Kuderna Danish -tyyppinen konsentrointi-
laitteisto.
(Huom. Näytteen etyylikarbamaatin saannon C(g) on oltava tässä
vaiheessa välillä 90-110 %).
c) Kolvi — päärynänmuotoinen, 300 ml, yksi kaula, jossa hios.
d) Konsentrointiputki — 4 ml, asteikollinen, liitoskohdassa teflontiiviste ja
tulppa.
C.Reagenssit
a) Asetoni— nestekromatografi alaatua.
Huom. Jokaisesta erästä on tarkastettava GC/MS:llä, että siinä ei esiinny
ioneja, joiden massavaraussuhde m/z on 62, 74 ja 89.
b) Dikloorimetaani—
Huom. Jokaisesta erästä on tarkastettava 200-kertaisen konsentroinnin
jälkeen GC/MS:llä, että siinä ei esiinny ioneja, joiden m/z on 62, 74 ja
89.
c) Etanoli— vedetön
d) Etyylikarbamaatti (EK), standardiliuokset
1. Kantaliuos — 1,00 mg/ml. Punnitaan 100 mg etyylikarbamaattia
(puhtaus ≥99 %) 100 ml:n mittapulloon ja laimennetaan asetonilla.
2. Työstandardi— 10,0 µg/ml. Siirretään 1 ml kantaliuosta 100 ml:n
mittapulloon ja täytetään merkkiin asetonilla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 187
(1) Tietyille erittäin täyteläisille viineille voi olla suositeltavaa käyttää 50 metriä pitkää
kapillaarikolonnia.
(2) Tietyille erittäin täyteläisille viineille voi olla suositeltavaa käyttää lämpötilaohjel-
mointia, jossa lämpötila muuttuu 2 ºC minuutissa.
▼M7
e) Propyylikarbamaatti (PK), standardiliuokset
1. Kantaliuos — 1,00 mg/ml. Punnitaan 100 mg propyylikarbamaattia
(reagenssilaatu) 100 ml:n mittapulloon ja laimennetaan asetonilla
merkkiin asti.
2. Työstandardi— 10,0 µg/ml. Siirretään 1 ml kantaliuosta 100 ml:n
mittapulloon ja täytetään merkkiin asetonilla.
3. Sisäinen standardi — 400 ng/ml. Siirretään 4 ml työstandardia
100 ml:n mittapulloon ja täytetään merkkiin vedellä.
f) EK-PK-standardiliuokset
Laimennetaan työstandardeja (d) 2 ja (e) 2 dikloorimetaanilla siten, että
saadaan:
1. (100 ng EK ja 400 ng PK)/ml,
2. (200 ng EK ja 400 ng PK)/ml,3. (400 ng EK ja 400 ng PK)/ml,4. (800 ng EK ja 400 ng PK)/ml,5. (1 600 ng EK ja 400 ng PK)/ml.
g) Vertailunäyte — 100 ng EK/ml 40 % etanolissa.
Siirretään 1 ml työstandardiliuosta (d) 2 100 ml:n mittapulloon ja
täytetään merkkiin 40 % etanolilla.
h) Kiinteäfaasiuuttokolonni — Kertakäyttöisiä, pakattu piimaalla, tilavuus
50 ml.
Huom. Jokaisesta kolonnierästä on tarkastettava etyyli- ja propyylikarba-
maatin saanto ja se, ettei niissä esiinny ioneja, joiden m/z on 62, 74 tai
89. Valmistetaan vertailunäyte, jossa on 100 ng EK/ml (g). Analysoidaan
5,00 ml vertailunäytettä kohtien D(a), E ja F mukaisesti. Saanto välillä
90-110 ng EK/ml on tyydyttävä. Absorbenteista, joiden hiukkasten halk-
aisijat vaihtelevat, eluutio tapahtuu usein hitaasti, mikä vaikuttaa etyyli-
ja propyylikarbamaatin saantoon. Jos saantoarvoa 90-110 % mittausnäyt-
teen arvosta ei saada useiden yritysten jälkeen, on vaihdettava kolonni tai
käytettävä korjattua kalibrointikäyrää etyylikarbamaatin saannon
määrittämiseksi. Korjattu kalibrointikäyrä saadaan käyttämällä kohdassa
(f) esitetyllä tavalla valmistettuja standardiliuoksia, joissa on käytetty
40 % etanolia dikloorimetaanin sijasta.
Analysoidaan 1 ml kalibrointistandardiliuosta kuten on esitetty kohdissa
D, E ja F.
Laaditaan uusi kalibrointikäyrä käyttämällä uutettujen standardien EK/
PK-suhdetta.
D.Mittausnäytteen valmistus
Analysoitavaa näytemateriaalia pannaan kahteen 100 ml:n dekanterilasiin
seuraavat määrät:
a) Viinit, joissa on yli 14 tilavuus-% alkoholia: 5,00 ml ± 0,01 ml.
b) Viinit, joissa on korkeintaan 14 tilavuus-% alkoholia: 20,00 ml ± 0,01 ml.
Kuhunkin dekanterilasiin lisätään 1 ml sisäistä PK-standardiliuosta C(e) 3 ja
vettä siten, että kokonaistilavuus on 40 ml (tai 40 g).
E.Uutto
Uutto tehdään vetokaapissa, jossa on riittävä ilmanvaihto.Kohdassa D valmistettu liuos lisätään uuttokolonniin.
Dekanterilasi huuhdellaan 10 ml:lla vettä ja huuhteluvesi lisätään kolonniin.
Annetaan nesteen imeytyä kolonniin 4 minuutin ajan, ja eluoidaan
2 × 80 ml:lla dikloorimetaania. Eluaatti kerätään 300 ml:n kartiokolviin.
Eluaatti haihdutetaan 2-3 ml:aan pyöröhaihduttajalla 30 ºC:n vesihauteessa.
(Huom. Ei saa antaa haihtua kuiviin).
Siirretään konsentroitu jäännös 4 ml:n asteikolliseen putkeen Pasteur-pipe-
tillä.
Huuhdellaan kolvi 1 ml:lla dikloorimetaania ja siirretään huuhteluneste
putkeen. Näyte konsentroidaan 1 ml:ksi heikossa typpivirtauksessa.
Jos käytetään näytteenvaihtajaa, siirretään konsentraatti näytteenvaihtajapul-
loon GC/MS-analyysiä varten.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 188
▼M7
F.GC/MS-analyysi
a) Kalibrointikäyrä
Injektoidaan 1 µl kutakin kalibrointistandardiliuosta C (f) GC/MS-laitteis-
toon. Kuvaajassa esitetään y-akselilla etyylikarbamaatin ja
propyylikarbamaatin m/z 62 -ionin pinta-alojen suhde ja x-akselilla etyy-
likarbamaatin määrä ng/ml (100, 200, 400, 800, 1 600 ng/ml).
b) Etyylikarbamaatin määrittäminen
Injektoidaan 1 µl konsentroitua uutetta E GC/MS-laitteistoon ja lasketaan
etyylikarbamaatin ja propyylikarbamaatin m/z 62 -ionin pinta-alojen
suhde. Uutteen etyylikarbamaattikonsentraatio (ng/ml) määritetään
sisäisen standardin kalibrointikäyrän avulla. Etyylikarbamaatin konsen-
traatio näytteessä (ng/ml) lasketaan jakamalla uutteen
etyylikarbamaattimäärä CE (ng/ml) näytteen tilavuudella (ml).
c) Etyylikarbamaatin puhtauden todentaminen
Tarkistetaan, esiintyvätkö ionien m/z 62, 74 ja 89 signaalit etyylikarba-
maatin retentioajan kohdalla. Nämä signaalit ovat luonteenomaisia
tärkeimmille fragmenteille (M - C2H2)+ja (M - CH3)+sekä molekyyli-
ionille (M). Etyylikarbamaatin läsnäolon vahvistaa se, että näiden ionien
vasteiden suhteet poikkeavat enintään 20 % etyylikarbamaattistandardin
vastaavien ionien suhteesta. Uutetta on mahdollisesti konsentroitava
uudelleen, jotta saadaan riittävä signaali ionille m/z 89.
G.Yhteistyölaboratorioiden tulosten analyysi
Taulukossa 1 esitetään esimerkkinäytteelle ja kahdelle viinityypille saadut
yksittäiset tulokset.
Cochranin testin seurauksena eliminoitiin kahden määrityksen tulokset (yksi
viinille, jonka alkoholipitoisuus on yli 14 tilavuus-% ja yksi viinille, jonka
alkoholipitoisuus on korkeintaan 14 tilavuus-%). Nämä tulokset olivat peräi-
sin eri laboratorioista.
Uusittavuus näyttää pienenevän etyylikarbamaattikonsentraation kasvaessa.
Alkoholijuomien Sisältämän etyylikarbamaatin GC-MS-määrityksen suoritusarvot
NäyteEK-
konsen-
traatio
(ng/ml)Lisätyn
EK:n
saanto
(%)SrSRRSDr(%)RSDR(%)
Viini, jonka alkoho-
lipit. on yli 14 tila-
vuus-%40 1,59 4,77 4,01 12,02
80 89 3,32 7,00 4,14 8,74
162 90 8,20 11,11 5,05 6,84
Viini, jonka alkoho-
lipit. on korkeintaan 14
tilavuus-%11 0,43 2,03 3,94 18,47
25 93 1,67 2,67 6,73 10,73
48 93 1,97 4,25 4,10 8,861990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 189
▼M8
45.VIINIETANOLIN TAI RYPÄLEEN PURISTEMEHUJEN, TIIVIS-
TETTYJEN RYPÄLEEN PURISTEMEHUJEN JA PUHDISTET-
TUJEN TIIVISTETTYJEN RYPÄLEEN PURISTEMEHUJEN
KÄYMISESTÄ SAADUN ETANOLIN13C- ja12C-ISOTOOPPIEN
SUHTEEN MÄÄRITTÄMINEN MASSASPEKTROMETRISIN
MENETELMIN
1. SOVELLUSALA
Menetelmällä voidaan mitata13C- ja12C-isotooppien suhde viinietanolissa
ja viinirypäletuotteiden (rypäleen puristemehujen, tiivistettyjen rypäleen
puristemehujen ja puhdistettujen tiivistettyjen rypäleen puristemehujen)
käymisestä saadussa etanolissa.
2. VIITESTANDARDIT
ISO: 5725:1994 ”Mittausmenetelmien virheettö-
myys (oikeellisuus ja tarkkuus):
perusmenetelmä standardimittausmenetelmän
toistettavuuden ja uusittavuuden määrittämi-
seksi”.
V-PDB: Vienna-Pee-Dee Belemnite (belemniitti)
(RPDB= 0,0112372).
Tämän asetuksen liitteessä esitetty menetelmä 8: ”Rypäleen puristemehujen, tiivistettyjen
rypäleen puristemehujen ja puhdistettujentiivistettyjen rypäleen puristemehujen ja
viinien rikastamisen määrittäminen käyttäen
hyväksi deuteriumin ydinmagneettista reso-
nanssia (SNIF-NMR)”.
3. TERMIT JA MÄÄRITELMÄT
13C/12C:13C:n ja12C:n isotooppien suhde näytteessä.
δ13C: Hiili-13-isotoopin eli13C:n pitoisuus ilmaistuna promilleina
(‰).
SNIF-NMR: Isotooppien fraktiointi ydinmagneettisen resonanssin avulla.
V-PDB: Vienna-Pee-Dee Belemnite (belemniitti). PDB on ensisi-
jainen vertailuaine mitattaessa hiili-13-pitoisuuden
luonnollisia vaihteluja. Se koostuu Yhdysvaltojen Etelä-
Carolinan osavaltiossa sijaitsevan Pee Dee -joen varrella
sijaitsevasta esiintymästä löytyvien liitukaudelta peräisin
olevien belemniitti-nimisten nilviäisten fossiilien
sisältämästä kalsiumkarbonaatista. Sen13C- ja12C-isotoop-
pien suhde eli RPDBon 0,0112372. PDB-varannot ovat
loppuneet jo aikaa sitten, mutta se on säilyttänyt asemansa
ensisijaisena vertailuaineena mitattaessa hiili-13-pitoi-
suuden luonnollisia vaihteluja, ja sen avulla kalibroidaan
Wienissä Itävallassa sijaitsevan Kansainvälisen atomiener-
giajärjestön (IAEA:n) käyttämät vertailuaineet. Luonnossa
esiintyvän hiili-13-isotoopin pitoisuudet ilmoitetaan tavalli-
sestisuhteessa V-PDB:n vastaavaan arvoon.
m/z: Massan ja varauksen suhde.
4. PERIAATE
Yhteyttämisessä kasvit sitovat hiilidioksidia kahden erilaisen aineenvaih-
duntamekanismin avulla. Ne ovat C3-sykli (Calvinin kierto) ja C4-sykli
(Hatch-Slack-prosessi). Näissä kahdessa yhteyttämisprosessissa isotoopit
jakautuvat eritavalla. C4-prosessia käyttävien kasvien tuotteissa, kuten
sokereissa ja käymistietä valmistetussa alkoholissa esiintyy enemmän
hiili-13-isotooppia kuin vastaavissa C3-prosessia käyttävien kasvien tuot-
teissa. Useimmat kasvit, mukaan luettuina viiniköynnökset ja
sokerijuurikkaat, käyttävät C3-prosessia. Sokeriruoko ja maissi käyttävät
C4-prosessia. Mittaamalla hiili-13-isotoopin pitoisuus voidaan osoittaa ja
arvioida rypäletuotteisiin (kuten rypäleen puristemehuihin ja viineihin)
lisätyt C4-prosessista (sokeriruo'osta tai maissi-isoglukoosista) peräisin
olevat sokerit. Hiili-13-isotoopin pitoisuudesta sekä SNIF-NMR-mittauk-
sista saatavien tietojen avulla voidaan määrittää, paljonko tuotteisiin on
lisätty C3-j aC4-kasveista peräisin olevia sokeri- tai alkoholiseoksia.
Hiili-13-isotoopin pitoisuus määritetään hiilidioksidista, joka syntyy
näytteen täydellisessä palamisessa. Massaspektrometrin kolmeen eri ilmai-
simeen tulevien ionivirtojen avulla määritetään käytännössä esiintyvien
isotopomeerien suhteellinen määrä. Ne ovat massaluvuiltaan 44 (12C16O2),
45 (13C16O2ja12C17O16O) sekä 46 (12C16O18O) edustaen isotooppien18O,1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 190
▼M8
17O,16O,13Cj a12C erilaisia mahdollisia yhdistelmiä. Isotopomeerien
13C17O16Oj a12C17O2vaikutusta ei tarvitse ottaa huomioon, koska niiden
määrät ovat niin pieniä. Massan ja varauksen suhdetta m/z = 45 vastaavan
ionivirran arvo korjataan ottaen huomioon12C17O16O-isopotomeerin
vaikutus, joka lasketaan massan ja varauksen suhteelle m/z = 46 mitatun
virranvoimakkuuden mukaisesti ottaen huomioon isotooppien18Oj a17O
suhteellinen yleisyys (Craigin korjaus). Vertaamalla tuloksia näytteeseen,
joka on kalibroitu kansainvälisen V-PDB-vertailunäytteen avulla, voidaan
hiili-13-isotoopin pitoisuus laskea ja ilmaista suhteellisella δ13C-asteikolla.
5. REAGENSSIT
Aineet ja tarvikkeet määräytyvät laboratorion käyttämän välineistön (6)
mukaan. Yleensä käytetyt järjestelmät perustuvat alkuaineanalysaattor-
eihin. Nämä järjestelmät voidaan varustaa niin, että näytteet voidaan
tuoda niihin suljetuissa metallikapseleissa tai ruiskuttaa nestemäisinä
septumin läpi injektioneulaa käyttäen.
Käytettävän laitteen mukaan voidaan käyttää seuraavia vertailuaineita,
reagensseja ja tarvikkeita:
— vertailuaineet
— IAEA:sta saatavat:
Nimi Aineδ13-lukema verrattuna V-
PDB:hen (9)
— IAEA-CH-6 sakkaroosi- 10,4 ‰
— IAEA-CH-7 polyeteeni- 31,8 ‰
— NBS22 öljy - 29,7 ‰
— USGS24 grafiitti - 16,1 ‰
— Aineet, joita toimittaa Geelissä Belgiassa sijaitseva vertailuaineiden ja
mittausten tutkimuslaitos IRMM:
Nimi Aineδ13C-lukema verrattuna V-
PDB:hen (9)
— CRM/BCR 656 viinialkoholi - 26,93 ‰
— CRM/BCR 657 glukoosi- 10,75 ‰
— CRM/BCR 660 vesi-alkoholiseos (12 tila-
vuus-%)- 26,72 ‰
— Käytettävä standardinäyte, jonka13C/12C-suhde tunnetaan ja joka on
kalibroitu kansainvälisten vertailuaineiden avulla.
— Seuraavassa on suuntaa-antava luettelo jatkuvaa virtausta käyttävissä
järjestelmissä käytettävistä tarvikkeista:
— analyysipuhdas helium (CAS 07440-59-7),
— analyysipuhdas happi (CAS 07782-44-7),
— analyysipuhdas hiilidioksidi käytettäväksi toissijaisena vertailuai-
neena hiili-13-isotoopin pitoisuudelle (CAS 00124-38-9),
— hapetusreagenssi näytteenpolttojärjestelmän uuniin, esimerkiksi
alkuaineanalyysiin tarkoitettu kupari (II) oksidi (CAS 1317-38-0),
— kuivausaine palamisessa syntyvän veden poistamiseen, esimerkiksi
alkuaineanalyysiin tarkoitettu vedetön magnesiumperkloraatti
kauppanimeltään Anhydrone (CAS 10034-81-8) (Tätä ei tarvita
laitteissa, jotka on varustettu vedenpoistojärjestelmillä, joissa
käytetään kylmäloukkuja tai valikoivasti läpäiseviä kapillaareja).
6. VÄLINEISTÖ JA LAITTEET6.1 Isotooppisuhde-massaspektrometri (IRMS)
Isotooppisuhde-massaspektrometri (IRMS), joka kykenee määrittämään
luonnossa esiintyvän hiilidioksidin suhteellisen
13C-pitoisuuden siten, että
sisäinen tarkkuus on suhteellisena arvona (9) ilmoitettuna 0,05 ‰ tai
parempi. Tässä yhteydessä sisäinen tarkkuus määritellään siten, että se on
kahden samasta hiilidioksidinäytteestä saadun mittausarvon ero. Isotooppi-
suhteiden mittaamiseen käytettävä massaspektrometri on yleensä
varustettu kolmoisilmaisimella, jotta voidaan samanaikaisesti mitata
massan ja varauksen suhteita m/z = 44, 45 ja 46 vastaavat intensiteetit.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 191
▼M8
Isotooppisuhde-massaspektrometrissä on joko oltava kaksi tuloaukkoa
näytteille, jotta mitattava näyte ja vertailunäyte voidaan mitata vuoro-
tellen, tai siinä on oltava integroitu järjestelmä, jossa näytteet poltetaan
kvantitatiivisesti ja hiilidioksidi erotetaan muista palamistuotteista ennen
massaspektrometrimittausta.
6.2 Polttovälineistö
Polttovälineistö, jonka on kyettävä kvantitatiivisesti muuttamaan etanoli
hiilidioksidiksi ja poistamaan kaikki muut palamistuotteet, kuten vesi,
ilman että tapahtuu mitään isotooppien fraktioitumista. Välineistö voi olla
joko jatkuvaan virtaukseen perustuva, massaspektrometriin integroitu laite
(6.2.1) tai erillinen polttojärjestelmä (6.2.2). Välineistön on mahdollistet-
tava vähintään kohdassa (11) mainittu tarkkuus.
6.2.1Jatkuvaa virtausta käyttävät järjestelmät
Näissä laitteissa on joko alkuaineanalysaattori tai kaasukromatografi
liitettynä online-periaatteella toimivaan polttojärjestelmään.
Järjestelmissä, joissa näyte tuodaan mitattavaksi metallikapselissa, tarvi-
taan seuraavat laboratoriovälineet:
— kalibroitu mikroruisku tai -pipetti, jossa on asianmukainen kärki,
— vaaka, jonka tarkkuus on 1 µg taiparempi ,
— pinsetit kapselointia varten,— tinakapseleita nestemäisiä näytteitä varten,— tinakapseleita kiinteitä näytteitä varten.
Huomaa:Jotta etanolinäytteiden haihtumisvaara olisi vähäisempi, kapseleihin
voidaan laittaa absorboivaa materiaalia (kuten Chromosorb W 45-60
mesh), kunhan absorbtioaine ensin mitataan ilman näytettä sen varmista-
miseksi, ettei se sisällä merkittäviä määriä hiiltä, mikä saattaisi vaikuttaa
tuloksiin.
Käytettäessä alkuaineanalysaattoria, jossa on nestemäisen näytteen ruisku-
tuslaite, tai kun käytössä on näytteenpolttokromatografiajärjestelmä,tarvitaan seuraavat laboratoriovälineet:
— injektioruisku nesteitä varten,
— pulloja, joissa on ilmatiiviit sulkimet ja inertit septumit.
Luetteloissa mainitut laboratoriovälineet ovat esimerkkejä, ja ne voidaan
korvata muilla vastaavantasoisilla välineillä laboratoriossa käytettävän
polttomenetelmän ja massaspektrometrilaitteen mukaan.
6.2.2Erillinen näytteenvalmistusjärjestelmä
Analysoitavien näytteiden polttamisessa syntyneet hiilidioksidinäytteet
sekä vertailunäyte kerätään pulloihin, jotka asetetaan isotooppianalyysiin
tarkoitetun spektrometrin molempiin sisääntuloaukkoihin. Useita erilaisia
kirjallisuudessa kuvattuja polttolaitteita voidaan käyttää:
— suljettu polttojärjestelmä, jossa kiertää happea,
— helium- ja happivirtauksella varustettu alkuaineanalysaattori,— suljettu lasipullo, jossa on hapettimena kupari (II) oksidia.
7. NÄYTTEIDEN VALMISTAMINEN TESTEJÄ VARTEN
Etanoli on uutettava viinistä ennen isotooppitestiä. Se tehdään tislaamalla
viini menetelmän nro 8 (SNIF-NMR) kohdassa 3.1 kuvatulla tavalla.
Rypäleen puristemehujen, tiivistettyjen rypäleen puristemehujen ja puhdis-
tettujen tiivistettyjen rypäleen puristemehujen sisältämät sokerit on ensin
käytettävä alkoholiksi menetelmän nro 8 kohdassa 3.2 kuvatulla tavalla.
8. MENETELMÄ
Kaikki valmisteluvaiheet on tehtävä ilman, että alkoholia haihtuisi
merkittäviä määriä, mikä saattaisi muuttaa näytteen isotooppikoostumusta.
Seuraavassa kuvataan menetelmää, jota yleensä käytetään etanolinäyt-
teiden polttamiseen kaupallisesti saatavien automaattisten
polttojärjestelmien avulla. Hiilidioksidin valmistamiseksi isotooppiana-
lyysia varten voidaan käyttää myös muita menetelmiä, kunhan niillä
voidaan varmistaa, että kaikki etanoli muuttuu hiilidioksidiksi ilman, että
sitä häviää haihtumalla.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 192
▼M8
Koejärjestely alkuaineanalysaattoria käyttäen:
a) Näytteiden kapselointi:
— käytä puhtaita kapseleita, pinsettejä ja valmistelualustaa,
— tartu pinseteillä oikean kokoiseen kapseliin,— lisää kapseliin oikea määrä nestettä mikropipetin avulla,—Huomaa:
Tarvitaan 3,84 mg absoluuttista etanolia tai 4,17 mg tislettä, jonka
alkoholipitoisuus on 92 painoprosenttia, jotta saadaan 2 mg hiiltä.
Vaadittava tislemäärä on laskettava tällä perusteella ottaen
huomioon massaspektrometrin herkkyyden edellyttämä hiilimäärä.
— sulje kapseli pinsettien avulla,— jokainen kapseli on suljettava tiiviisti, ja huonosti suljetut kapselit
on hylättävä ja korvattava uudella,
— jokaisesta näytteestä on valmistettava kaksi kapselia,— aseta kapselit oikeaan paikkaan alkuaineanalysaattorin automaat-
tisen näytteensyöttölaiteen pitimeen; jokaisessa kapselissa on
oltava sarjanumero tunnistamista varten,
— aseta käytettävät vertailunäytteet järjestelmällisesti näytesarjan
alkuun ja loppuun,
— laita säännöllisesti näytesarjoihin mukaan vertailunäytteitä.
b) Alkuaineanalyysi- ja massaspektrometrilaitteiden tarkastus ja säätö
— säädä alkuaineanalysaattoreiden uunien lämpötila sekä heliumin ja
hapen virtaus niin, että näytteen palaminen tapahtuu parhaalla
mahdollisella tavalla,
— tarkasta, ettei alkuaineanalyysi- ja massaspektrometrijärjestelmässä
ole vuotoja (esimerkiksi tarkastamalla ionivirta massan ja
varauksen suhteelle m/z = 28, mikä vastaa typpimolekyyliä),
— säädä massaspektrometri mittaamaan ionivirtoja, joissa massan ja
varauksen suhde m/z = 44, 45 ja 46,
— tarkasta järjestelmän toiminta käyttäen tunnettuja näytteitä, ennen
kuin mittaat varsinaisia koenäytteitä.
c) Mittaussarjan tekeminen
Alkuaineanalysaattorin (tai kromatografin) automaattiseen näytteen-
syöttölaitteeseen asetetut näytteet menevät kukin vuorollaan
mitattavaksi. Kunkin näytteen palamisesta syntyvä hiilidioksidi eluoi-
daan massaspektrometriin, joka mittaa ionivirrat. Laitteistoon liitetty
tietokone kirjaa ionivirrat ja laskee δ-arvon kullekin näytteelle (9).
9. LASKENTAMENETELMÄ
Mittausmenetelmän tarkoituksena on mitata
13C- ja12C-isotooppien
suhdetta etanolissa, joka on peräisin viinistä tai muista käyneistä rypäle-
tuotteista.13C- ja12C-isotooppien suhde voidaan ilmaista ilmoittamalla
sen poikkeama käytettävästä vertailunäytteestä. Hiili-13-isotoopin pitoi-
suuden poikkeama ( δ13C) lasketaan poikkeaman tuhannesosina ( δ/1 000)
vertaamalla mitattavasta näytteestä saatuja tuloksia tuloksiin, jotka on
saatu käyttäen vertailunäytettä, joka on sitä ennen kalibroitu ensisijaisen
kansainvälisen vertailunäytteen (V-PDB) avulla. δ13C-arvot verrattuna
vertailunäytteeseen ilmaistaan seuraavasti:
δ13Csam/ref‰ = 1 000 × (Rsam-Rref)/Rref
missä Rsamon mitattavan näytteen13C- ja12C-isotooppien suhde ja Rrefvastaava arvo vertailunäytteenä käytetylle hiilidioksidille.δ
13C-arvot verrattuna V-PDB-vertailumateriaaliin ilmaistaan seuraavasti:
δ13Csam/V-PDB‰= δ13Csam/ref+δ13Cref/V-PDB+(δ13Csam/ref×δ13Cref/V-PDB)/1 000,
missä δ13Cref/V-PDBon etukäteen määritetty käytetyn vertailunäytteen
isotooppisuhteen poikkeama V-PDB:n vastaavasta arvosta.
Pientä laitteista johtuvaa vaihtelua saattaa ilmetä tehtäessä on line
-mittauksia. Tässä tapauksessa näytteille mitatut δ13C-arvot on korjattava
käytetyn vertailunäytteen mitatun δ13C-arvon ja todellisen arvon välisen
eron perusteella. Vertailunäytteen todellinen δ13C-arvo tiedetään, koska se
on aiemmin kalibroitu käyttäen jotain kansainvälistä vertailuainetta.
Kahden vertailumateriaalista tehdyn mittauksen välisen vaihtelun, ja niin
ollen myös näytteistä saatuihin tuloksiin tehtävien korjausten, oletetaan
olevan lineaarisia. Vertailumateriaali on mitattava kaikkien mittaussar-
jojen alussa ja lopussa. Näin kullekin näytteelle voidaan sen jälkeen
laskea korjaus lineaarista interpolaatiota käyttäen.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 193
▼M8
10. LAADUNVARMISTUS JA -VALVONTA
Tarkista, ettei käytettävälle vertailuaineelle mitattu13C-arvo poikkea salli-
tusta enempää kuin 0,5 ‰. Muussa tapauksessa spektrometrilaitteen
asetukset on tarkistettava ja tarvittaessa korjattava.
Tarkista, että kahden peräkkäin mitatun saman näytteen arvojen välinen
ero on pienempi kuin 0,3 ‰. Kunkin näyte-erän lopullinen tulos on
kahden kapselin arvojen keskiarvo. Jos ero on suurempi kuin 0,3 ‰,
mittaus on uusittava.
Mittaus voidaan tarkistaa käyttäen massan ja varauksen suhdetta m/z = 44
vastaavaa ionivirtaa, joka on verrannollinen alkuaineanalysaattoriin
syötettävän hiilen määrään. Vakio-olosuhteissa ionivirran pitäisi olla
analysoitaville näytteille lähes vakio. Merkittävä poikkeama saattaa olla
merkki etanolin haihtumisesta (esimerkiksi kapselin huonon sulkemisen
takia) tai alkuaineanalysaattorin tai massaspektrometrin epävakaudesta.
11. MENETELMÄN SUORITUSKYKY (TARKKUUS)
Alustava tutkimus (11.1) tehtiin laboratorioiden välisenä yhteistyönä
käyttäen tisleitä, joiden alkoholi oli peräisin viinistä, sokeriruo'osta ja
sokerijuurikkaasta, sekä käyttäen erilaisia näistä kolmesta lähteestä peräi-
sin olevia alkoholiseoksia. Koska tässä tutkimuksessa ei otettu huomioon
tislausvaihetta, käsiteltäväksi otettiin myös muista laboratorioiden välisistä
viiniä koskevista vertailututkimuksista saatuja tietoja (11.2) sekä erityi-
sesti sarja isotooppimittausten soveltuvuuskokeita (11.3). Tulokset
osoittavat, että tyydyttävissä oloissa ja erityisesti SNIF-NMR-menetelmää
käytettäessä erilaiset tislausmenetelmät eivät aiheuta merkittävää vaihtelua
viinietanolin δ13C-arvon määrityksessä. Tarkkuutta kuvaavien viineille
saatujen parametrien arvojen todettiin olevan lähes samat kuin tisleitä
koskevissa yhteistutkimuksessa (11.1).
11.1 Tisleitä koskeva yhteistutkimus
Laboratorioiden välisten testien tekovuosi: 1996
Osallistuneiden laboratorioiden lukumäärä: 20
Näytteiden määrä: 6 näytettä kaksoissokkomää-
rityksenä
Analyytti: etanolin δ13C-arvo
Näytteen koodiViinistä peräisin olevaa
alkoholiaSokerijuurikkaasta pe-
räisin olevaa alkoholiaSokeriruo'osta peräisin
olevaa alkoholia
A&G 8 0% 1 0% 1 0%
B & C 90 % 10 % 0 %D & F 0 % 100 % 0 %E & I 90 % 0 % 10 %
H & K 100 % 0 % 0 %
J & L 0 % 0 % 100 %
Näyttet A/G B/C D/F E/I H/K J/L
Huomattavastipoi k-
keavien tulosten elim-
inoinnin jälkeen
jäljelle jääneiden
laboratorioiden määrä19 18 17 19 19 19
Tutkimukseen mukaan
hyväksyttyjen tulosten
määrä38 36 34 38 38 38
Keskimääräinen arvo
(δ13C) ‰- 25,32 - 26,75 - 27,79 - 25,26 - 26,63 - 12,541990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 194
▼M8
Näyttet A/G B/C D/F E/I H/K J/L
Sr20,0064 0,0077 0,0031 0,0127 0,0069 0,0041
Toistettavuuden keski-
hajonta (Sr)‰0,08 0,09 0,06 0,11 0,08 0,06
Toistettavuusraja r
(2,8 × Sr)‰0,22 0,25 0,16 0,32 0,23 0,18
SR20,0389 0,0309 0,0382 0,0459 0,0316 0,0584
Uusittavuuden keski-
hajonta (SR)‰0,20 0,18 0,20 0,21 0,18 0,24
Uusittavuusraja R
(2,8 × SR)‰0,55 0,49 0,55 0,60 0,50 0,68
11.2 Laboratorioidenvälinen vertailututkimus kahdesta viinistä ja yhdestä
alkoholista
Laboratorioidenvälisten testien tekovuosi: 1996
Osallistuneiden laboratorioiden määrä: viinien tislaamiseen osallistui
14 laboratoriota, joista seit-
semän myös mittasi
viinietanolin δ13C-arvon
alkoholinäytteen δ13C-arvon
mittaamiseen osallistui
kahdeksan laboratoriota
Näytteiden määrä: kolme (valkoviini, jonka alko-
holipitoisuus oli 9,3
tilavuusprosenttia, valkoviini,
jonka alkoholipitoisuus oli 9,6
tilavuusprosenttia, sekä alko-
holiliuos, jonka vahvuus oli
93 painoprosenttia).
Analyytti: etanolin δ13C-arvo
Näyttet Punaviini Valkoviini Alkoholi
Laboratorioiden määrä 7 7 8
Tutkimukseen hyväk-
syttyjen mittaustu-
losten määrä778
Keskimääräinen
mittaustulos ( δ13C) ‰- 26,20 - 26,20 - 25,08
Uusittavuuden
varianssi SR20,0525 0,0740 0,0962
Uusittavuuden keski-
hajonta (SR)‰0,23 0,27 0,31
Uusittavuusraja R
(2,8 × SR)‰0,64 0,76 0,87
Tutkimukseen osallistuneet laboratoriot käyttivät erilaisia tislausjärjes-
telmiä. Yhdessä laboratoriossa kaikille osallistuvien laboratorioidenpalauttamille tisleille tehdyt isotooppimääritykset ( δ
13C-arvojen
määritykset) eivät antaneet epäsäännöllisiä tai oleellisesti keskiarvosta
poikkeavia tuloksia. Tulosten varianssi (S2= 0,0059) on sopusoinnussa
tisleiden yhteistutkimuksessa (11.1) saatujen toistettavuuden varianssin
Sr2arvojen kanssa.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 195
▼M8
11.3 Isotooppitestauksen soveltuvuuden valvonnan tulokset
Isotooppimittausten soveltuvuutta viinien ja alkoholien (96 tilavuuspro-
senttia alkoholia sisältävien tisleiden) tutkimiseen on valvottu
kansainvälisellä tasolla säännöllisesti joulukuusta 1994 lähtien. Tulosten
avulla osallistuvat laboratoriot voivat tarkastaa analyysiensä laadun. Tilas-
tollisin menetelmin voidaan ottaa huomioon tulosten vaihtelu
uusittavuuden asettamissa rajoissa ja näin arvioida varianssin ja uusitta-
vuusrajan arvot. Seuraavassa taulukossa on viinien ja tisleiden sisältämän
etanolin δ13C-arvojen määrittämisessä saatujen tulosten yhteenveto:
PäivämääräViinit Tisleet
NSRS2
RRNSRS2
RR
Joulukuu 1994 6 0,210 0,044 0,59 6 0,151 0,023 0,42
Kesäkuu 1995 8 0,133 0,018 0,37 8 0,147 0,021 0,41Joulukuu 1995 7 0,075 0,006 0,21 8 0,115 0,013 0,32
Maaliskuu 1996 9 0,249 0,062 0,70 11 0,278 0,077 0,78
Kesäkuu 1996 8 0,127 0,016 0,36 8 0,189 0,036 0,53
Syyskuu 1996 10 0,147 0,022 0,41 11 0,224 0,050 0,63
Joulukuu 1996 10 0,330 0,109 0,92 9 0,057 0,003 0,16
Maaliskuu 1997 10 0,069 0,005 0,19 8 0,059 0,003 0,16
Kesäkuu 1997 11 0,280 0,079 0,78 11 0,175 0,031 0,49
Syyskuu 1997 12 0,237 0,056 0,66 11 0,203 0,041 0,57
Joulukuu 1997 11 0,127 0,016 0,36 12 0,156 0,024 0,44
Maaliskuu 1998 12 0,285 0,081 0,80 13 0,245 0,060 0,69
Kesäkuu 1998 12 0,182 0,033 0,51 12 0,263 0,069 0,74
Syyskuu 1998 11 0,264 0,070 0,74 12 0,327 0,107 0,91
Painotettu
keskiarvo0,215 0,046 0,60 0,209 0,044 0,59
N: osallistuneiden laboratorioiden määrä
11.4 Toistettavuus- ja uusittavuusrajat
Edellä olevissa taulukoissa esitettyjen laboratorioiden välisistä tutkimuk-
sista saatujen tulosten perusteella voidaan tälle menetelmälle tislausvaihe
mukaan luettuna määrittää seuraavat toistettavuus- ja uusittavuusrajat:
Toistettavuusraja r: 0,24
Uusittavuusraja R: 0,6.1990R2676 — FI — 18.03.2003 — 007.001 — 196