1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 1
Tämä asiakirja on ainoastaan dokumentointitarkoituksiin. Toimielimet eivät vastaa sen sisällöstä.
►B KOMISSION PÄÄTÖS,
tehty15 päivänä heinäkuuta 1994,
eläinten terveyttä koskevista vaatimuksista ja eläinlääkärintodistuksista naudan siemennesteen
tuonnissa kolmansista maista
(94/577/EY)
(EYVL L 221, 26.8.1994, s. 26)
Muutettu:
virallinen lehti
N:osivu päivämäärä
►M1Komission päätös 1999/495/EY, tehty 1 päivänä heinäkuuta 1999 L 192 56 24.7.1999
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 2
▼B
KOMISSION PÄÄTÖS,
tehty15 päivänä heinäkuuta 1994,
eläinten terveyttä koskevista vaatimuksista ja eläinlääkärintodis-
tuksista naudan siemennesteen tuonnissa kolmansista maista
(94/577/EY)
EUROOPAN YHTEISÖJEN KOMISSIO, joka
ottaa huomioon Euroopan yhteisön perustamissopimuksen,
ottaa huomioon eläinten terveyttä koskevista vaatimuksista yhteisön
sisäisessä naudansukuisten kotieläinten pakastetun siemennesteenkaupassa ja tuonnissa 14 päivänä kesäkuuta 1988 annetun neuvostondirektiivin 88/407/ETY (
1), sellaisena kuin se on viimeksi muutettuna
direktiivillä 93/60/ETY (2), ja erityisesti sen 10 ja 11 artiklan,
sekä katsoo, ettäluettelo kolmansista maista, joista peräisin olevan kotieläimenä pidetyn
naudansukuisen eläimen siemennesteen tuonnin jäsenvaltiot sallivat,jäljempänä 'luettelo',on laadittu komission päätöksellä 90/14/ETY (
3),
sellaisena kuin se on muutettuna päätöksellä 91/276/ETY (4),
Israelin tautitilanne on aiheuttanut tähän maahan kohdistuvan komission
päätöksessä 91/277/ETY (5) määrätyn tuontikiellon,
komission päätöksissä 91/479/ETY (6), 91/549/ETY (7), 91/123/ETY (8),
91/124/ETY (9), 91/125/ETY (10), 91/126/ETY (11), 91/127/ETY (12), 91/
128/ETY (13), 92/386/ETY (14), 92/387/ETY (15) ja 92/455/ETY (16)
määrätään eläinten terveyttä koskevista vaatimuksista ja eläinlääkärito-distuksista tuotaessa naudan siemennestettä, joka on peräisin vastaa-vassa järjestyksessä Amerikan yhdysvalloista, Kanadasta, Puolasta,Suomesta, Uudesta-Seelannista, Australiasta, Sveitsistä, Ruotsista,Unkarista, Norjasta ja Tsekkoslovakiasta,
direktiivillä 93/60/ETY, joka on pantava täytäntöön jäsenvaltioissa
viimeistään 1 päivänä heinäkuuta 1994, muutetaan direktiiviä 88/407/ETY ja siksi on tarpeen muuttaa edellä mainittuja kolmansia maitakoskevia päätöksiä; yhteisön tätä alaa koskevan lainsäädännön yksinker-taistamiseksi on aiheellista ryhmitellä edellä mainitut päätökset jakumota kutakin maata koskevat erilliset päätökset,
ottaen huomioon Euroopan talousalueesta annetut määräykset, ei ole
tarpeen säilyttää eläinlääkärintodistuksia tuotaessa Itävallasta,Suomesta, Norjasta ja Ruotsista naudansukuisten eläinten siemennes-tettä,
eläinlääkintäalan tiedekomitean lausunnon mukaisesti vaaditaan lisäksi
uusi koe epitsoottisen verenvuototaudin toteamiseksi,
Kanada on ainoa maa, jossa tehdään rutiinikokeita mainitun taudin
toteamiseksi kuuden kuukauden välein ennen siemennesteen keräämistä,
(1) EYVL N:oL 194, 22.7.1988, s. 10
(2) EYVL N:oL 186, 28.7.1993, s. 28
(3) EYVL N:oL 8, 11.1.1990, s. 71
(4) EYVL N:oL 135, 30.5.1991, s. 58
(5) EYVL N:oL 135, 30.5.1991, s. 60
(6) EYVL N:oL 258, 16.9.1991, s. 1
(7) EYVL N:oL 298, 29.10.1991, s. 6
(8) EYVL N:oL 48, 22.2.1992, s. 1
(9) EYVL N:oL 48, 22.2.1992, s. 10
(10) EYVL N:oL 48, 22.2.1992, s. 19
(11) EYVL N:oL 48, 22.2.1992, s. 28
(12) EYVL N:oL 48, 22.2.1992, s. 37
(13) EYVL N:oL 48, 22.2.1992, s. 46
(14) EYVL N:oL 204, 21.7.1992, s. 13
(15) EYVL N:oL 204, 21.7.1992, s. 22
(16) EYVL N:oL 247, 27.8.1992, s. 1
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 3
▼B
on tarpeen sallia Kanadalle siirtymäaika tämän päätöksen soveltami-
selle, jotta Kanadan eläinlääkintäviranomaisilla on tarpeeksi aikaa lisätäuusi koe rutiinitarkastuksiinsa,
ottaen huomioon bluetongue-taudin epidemiologiassa viime aikoina
saavutettu kehitys, on mahdollista sallia naudan siemennesteen tuontiAustraliasta,
luettelossa olevien kolmansien maiden eläinlääkinnällinen tilanne on
hyvä ja sitä valvoo siemennesteen välityksellä tarttuvien tautien osaltarakenteeltaan hyvä ja hyvin järjestetty eläinlääkintätoimi,
luettelossa olevien kolmansien maiden toimivaltaiset eläinlääkintävira-
nomaiset ovat sitoutuneet 24 tunnin kuluessa ilmoittamaan teleksillä taitelekopiolla Euroopan yhteisön komissiolle ja jäsenvaltioille vahvis-tuksen jonkin Maailman eläintautijärjestön (OIE) A-luettelossa olevantaudin esiintymisestä tai näihin tauteihin sovellettavien rokotusohjel-mien muutoksesta tai ilmoittamaan kohtuullisessa määräajassa OIE:nB-luettelossa olevan taudin esiintymisestä ja kaikista muutosehdotuk-sista kotieläinten tai niiden siemennesteen tai alkioiden tuontiin sovel-lettavissa säännöissä,
luettelossa olevien kolmansien maiden viranomaiset ovat sitoutuneet
virallisesti valvomaan tämän päätöksen mukaisten todistusten antamistaja valvomaan, että kaikki todistukset, poikkeukset ja laboratorioko-keiden tulokset, joihin tämä todistus pohjautuu, säilytetään vähintään 12kuukautta virallisessa arkistossa kyseisen siemennesteen toimituksenjälkeen,
luettelossa olevien kolmansien maiden toimivaltaiset eläinlääkintävira-
nomaiset ovat sitoutuneet neuvoston direktiivin 88/407/ETY 9 artiklanmukaisesti virallisesti hyväksymään keinosiemennysasemat, joistaviedään naudan siemennestettä Euroopan talousyhteisöön,
eläinten terveyttä koskevat vaatimukset ja eläinlääkärintodistukset on
mukautettava kyseisen kolmannen maan terveydelliseen tilanteeseen, ja
tässä päätöksessä määrätyt toimenpiteet ovat pysyvän eläinlääkintäko-
mitean lausunnon mukaiset,
ON TEHNYT TÄMÄN PÄÄTÖKSEN:
1 artikla
Jäsenvaltiot sallivat liitteissä A, B, C ja D olevan 1 osan todistusten
ehdot täyttävän ja yksinomaan liitteissä A, B, C ja D olevassa 2 osassavastaavasti luetelluista maista peräisin olevan naudan siemennesteentuonnin.
Ne sallivat kuitenkin Kanadasta peräisin olevan, päätöksen 91/549/ETY
mukaisesti kerätyn ja käsitellyn naudan siemennesteen tuonnin 31päivään joulukuuta 1994 asti.
2 artikla
Kumotaan päätökset 91/479/ETY, 92/123/ETY, 92/124/ETY, 92/
125/ETY, 92/126/ETY, 92/127/ETY, 92/128/ETY, 92/386/ETY, 92/387/ETY ja 92/455/ETY.
Kumotaan päätös 91/549/ETY 1 päivästä tammikuuta 1995 alkaen.
3 artikla
Edellä 1 artiklan 1 kohdassa tarkoitettuja Kanadaa koskevia määräyksiä
sovelletaan 1 päivästä tammikuuta 1995.
4 artikla
Tämä päätös on osoitettu kaikille jäsenvaltioille.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 4
▼B
LIITE A
1 OSA
TERVEYSTODISTUS
naudan siemennesteen tuontia varten

1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 5
▼B
13. Minä allekirjoittanut virkaeläinlääkäri vakuutan luettuani neuvoston direktiivin 88/407/ETY ja perehdyttyän i
siihen, että:
a) ............................................................................................................................. .....
(viejämaa)
on ollut vapaa karjarutosta ja suu- ja sorkkataudista vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä välittömäst i
edeltävän 12 kuukauden ajan ja tämän lähettämispäivään asti eikä näitä tauteja vastaan ole tänä saman a
aikana annettu rokotuksia.
b) Vientiin tarkoitetun siemennesteen keräyksen tehnyt keinosiemennysasema:
i) on hyväksytty direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan I luvun ehtojen mukaisesti;
ii) hoidetaan ja valvotaan direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan II luvun ehtojen mukaisesti;
iii) on ollut vapaa raivotaudista, tuberkuloosista, luomistaudista, pernarutosta ja naudan tarttuvasta keuhko -
rutosta vientiin tarkoitetun sperman keräystä edeltävän 30 päivän ja sitä seuraavan 30 päivän ajan (jo s
kyseessä on tuore siemenneste, lähetyspäivään asti).
c) Keinosiemennysasemalla olevat naudat:
i) ovat peräisin direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvun ehdot täyttävistä karjoista ja/ta i
lehmistä;
ii) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvussa luetellut kokeet ennen niide n
saapumista eritysasemalle;
iii) ne ovat täyttäneet eristysvaatimukset ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa I luvussa määräty t
sisäänottoa edeltävien kokeiden tulokset ovat olleet vaatimusten mukaisia;
iv) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa II luvussa määrätyt rutiinitarkastukset, jo s
ne ovat olleet keinosiemennysasemalla vähintään vuoden.
d) Vientiin tarkoitettu siemenneste:
i) on peräisin luovuttajista, jotka ovat olleet
.............................................................................................................................
(viejämaa)
vientiin tarkoitetun ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä C määrätyt ehdot täyttävän siemennestee n
keräystä välittömästi edeltävän kuuden kuukauden ajan;
ii) on peräisin luovuttajista,
— jotka ovat olleet keinosiemennysasemalla, jossa vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edel -
tävän 12 kuukauden aikana naudoille tarttuvan naudan rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarise n
vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatiokokeen tai ELISA-kokeen tulos on ollut nega -
tiivinen(1)
tai
— joille vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edeltävän 12 kuukauden aikana tarttuvan nauda n
rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarisen vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatioko -
keen tai ELISA-kokeen tulos on ollut negatiivinen(1)
tai
— jotka ovat seropositiivisia direktiivin 88/407/ETY(1) liitteessä B olevan II luvun mukaisesti annetu n
rokotuksen vuoksi ja joille hyväksytyllä keinosiemennysasemalla tehdyn seroneutralisaatiokokee n
tai ELISA-kokeen tulos on ollut negatiivinen ennen rokotusta(1);
(1) Tarpeeton yliviivataan.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 6
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) on käsitelty, varastoitu ja kuljetettu direktiivin 88/407/ETY määräysten mukaisesti.
Tehty............................................................,
(paikka)....................................................................
(päivämäärä)
/SS74Leima(2)Allekirjoitus(2): .....................................................................
Nimi suuraakkosin: ..................................................................
Virka-asema: .. .......................................................................
►(2)◄
(2) Allekirjoituksen ja leiman värin tulee olla painoväristä poikkeavia.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 7
▼B
2 OSA
Luettelo maista, joiden sallitaan käyttää liitteessä A olevan 1 osan mukaista
terveystodistusta
TSEKIN TASAVALTAUNKARIUUSI-SEELANTIPUOLAROMANIASVEITSISLOVAKIAN TASAVALTA
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 8
▼B
LIITE B
1 OSA
TERVEYSTODISTUS
Amerikan yhdysvalloista peräisin olevan naudan siemennesteen tuontia varten

1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 9
▼B
13. Minä allekirjoittanut virkaeläinlääkäri vakuutan luettuani neuvoston direktiivin 88/407/ETY ja perehdyttyän i
siihen, että:
a) ............................................................................................................................. .....
(viejämaa)
on ollut vapaa karjarutosta ja suu- ja sorkkataudista vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä välittömäst i
edeltävän 12 kuukauden ajan ja tämän lähettämispäivään asti eikä näitä tauteja vastaan ole tänä saman a
aikana annettu rokotuksia.
b) Vientiin tarkoitetun siemennesteen keräyksen tehnyt keinosiemennysasema:
i) on hyväksytty direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan I luvun ehtojen mukaisesti;
ii) hoidetaan ja valvotaan direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan II luvun ehtojen mukaisesti;
iii) on ollut vapaa raivotaudista, tuberkuloosista, luomistaudista, pernarutosta ja naudan tarttuvasta keuhko -
rutosta vientiin tarkoitetun sperman keräystä edeltävän 30 päivän ja sitä seuraavan 30 päivän ajan (jo s
kyseessä on tuore siemenneste, lähetyspäivään asti).
c) Keinosiemennysasemalla olevat naudat:
i) ovat peräisin direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvun ehdot täyttävistä karjoista ja/ta i
lehmistä;
ii) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvussa luetellut kokeet ennen niide n
saapumista eritysasemalle;
iii) ne ovat täyttäneet eristysvaatimukset ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa I luvussa määräty t
sisäänottoa edeltävien kokeiden tulokset ovat olleet vaatimusten mukaisia;
iv) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa II luvussa määrätyt rutiinitarkastukset, jo s
ne ovat olleet keinosiemennysasemalla vähintään vuoden.
d) Vientiin tarkoitettu siemenneste:
i) on peräisin luovuttajista, jotka ovat olleet
.............................................................................................................................
(viejämaa)
vientiin tarkoitetun ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä C määrätyt ehdot täyttävän siemennestee n
keräystä välittömästi edeltävän kuuden kuukauden ajan;
ii) on peräisin luovuttajista,
— jotka ovat olleet keinosiemennysasemalla, jossa vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edel -
tävän 12 kuukauden aikana naudoille tarttuvan naudan rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarise n
vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatiokokeen tai ELISA-kokeen tulos on ollut nega -
tiivinen(1)
tai
— joille vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edeltävän 12 kuukauden aikana tarttuvan nauda n
rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarisen, vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatioko -
keen tai ELISA-kokeen tulos on ollut negatiivinen(1)
tai
— jotka ovat seropositiivisia direktiivin 88/407/ETY(1) liitteessä B olevan II luvun mukaisesti annetu n
rokotuksen vuoksi ja joille hyväksytyllä keinosiemennysasemalla tehdyn seroneutralisaatiokokee n
tai ELISA-kokeen tulos on ollut negatiivinen ennen rokotusta(1);
(1) Tarpeeton yliviivataan.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 10
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) on käsitelty, varastoitu ja kuljetettu direktiivin 88/407/ETY määräysten mukaisesti.iv) on peräisin sonneista, joille on tehty hyväksytyssä laboratoriossa kaksi kertaa, keräystä ennen ja se
n
jälkeen, 12 kuukauden välein (keräystä seuraava koe on tehtävä verinäytteestä, joka on otettu vähintää n
21 päivää vientiin tarkoitetun siemennesteen keräyksen jälkeen), seuraavat kokeet negatiivisin tuloksin:
— ELISA-koe bluetongue-taudin toteamiseksi liitteen E mukaisesti,
— geeli-immunodiffuusiokoe liitteen E mukaisesti ja seroneutralisaatiokoe kaikkien viejämaass a
tunnettujen epitsoottisen verenvuototaudin serotyyppien toteamiseksi.
Tehty............................................................,
(paikka)....................................................................
(päivämäärä)
/SS74Leima(2)Allekirjoitus(2): .....................................................................
Nimi suuraakkosin: ..................................................................
Virka-asema: .. .......................................................................
►(2)◄
(2) Allekirjoituksen leiman värin tulee olla painoväristä poikkeava.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 11
▼B
2 OSA
Luettelo maista, joiden sallitaan käyttävän liitteessä B olevan 1 osan
mukaista terveystodistusta
AMERIKAN YHDYSVALLAT
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 12
▼B
LIITE C
1 OSA
TERVEYSTODISTUS
naudan siemennesteen tuontia varten

1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 13
▼B
13. Minä allekirjoittanut virkaeläinlääkäri vakuutan luettuani neuvoston direktiivin 88/407/ETY ja perehdyttyän i
siihen, että:
a) ............................................................................................................................. .....
(viejämaa)
on ollut vapaa karjarutosta ja suu- ja sorkkataudista vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä välittömäst i
edeltävän 12 kuukauden ajan ja tämän lähettämispäivään asti eikä näitä tauteja vastaan ole tänä saman a
aikana annettu rokotuksia.
b) Vientiin tarkoitetun siemennesteen keräyksen tehnyt keinosiemennysasema:
i) on hyväksytty direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan I luvun ehtojen mukaisesti;
ii) hoidetaan ja valvotaan direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan II luvun ehtojen mukaisesti;
iii) on ollut vapaa raivotaudista, tuberkuloosista, luomistaudista, pernarutosta ja naudan tarttuvasta keuhko -
rutosta vientiin tarkoitetun sperman keräystä edeltävän 30 päivän ja sitä seuraavan 30 päivän ajan (jo s
kyseessä on tuore siemenneste, lähetyspäivään asti).
c) Keinosiemennysasemalla olevat naudat:
i) ovat peräisin direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvun ehdot täyttävistä karjoista ja/ta i
lehmistä;
ii) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvussa luetellut kokeet ennen niide n
saapumista eritysasemalle;
iii) ne ovat täyttäneet eristysvaatimukset ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa I luvssa määräty t
sisäänottoa edeltävien kokeiden tulokset ovat olleet vaatimusten mukaisia;
iv) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa II luvussa määrätyt rutiinitarkastukset, jo s
ne ovat olleet keinosiemennysasemalla vähintään vuoden.
d) Vientiin tarkoitettu siemenneste:
i) on peräisin luovuttajista, jotka ovat olleet
.............................................................................................................................
(viejämaa)
vientiin tarkoitetun ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä C määrätyt ehdot täyttävän siemennestee n
keräystä välittömästi edeltävän kuuden kuukauden ajan;
ii) on peräisin luovuttajista,
— jotka ovat olleet keinosiemennysasemalla, jossa vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edel -
tävän 12 kuukauden aikana naudoille tarttuvan naudan rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarise n
vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatiokokeen tai ELISA-kokeen tulos on ollut nega -
tiivinen(1)
tai
— joille vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edeltävän 12 kuukauden aikana tarttuvan nauda n
rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarisen vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatioko -
keen tai ELISA-kokeen tulos on ollut negatiivinen(1)
tai
— jotka ovat seropositiivisia direktiivin 88/407/ETY(1) liitteessä B olevan II, luvun mukaisest i
annetun rokotuksen vuoksi ja joille hyväksytyllä keinosiemennysasemalla tehdyn seroneutralisaatio -
kokeen tai ELISA-kokeen tulos on ollut negatiivinen ennen rokotusta(1);
(1) Tarpeeton yliviivataan.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 14
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) on käsitelty, varastoitu ja kuljetettu direktiivin 88/407/ETY määräysten mukaisesti.iv) on peräisin sonneista:
— jotka ovat joko olleet hyväksytyllä keinosiemennysasemalla 1 päivänä heinäkuuta 1994,
— tai jotka on tuotu hyväksytylle keinosiemennysasemalle 1 päivän heinäkuuta jälkeen ja joille o
n
ennen asemalle tuloaan tehty hyväksytyssä laboratoriossa seuraavat kokeet bluetongue -taudin j a
epitsoottisen verenvuototaudin toteamiseksi negatiivisin tuloksin,
ja joille, kummassakin tapauksessa, on tehty hyväksytyssä laboratoriossa kuuden kuukauden välei n
negatiivisin tuloksin seuraavat kokeet:— ELISA-koe bluetongue-taudin toteamiseksi liitteen E mukaisesti,— geeli-immunodiffuusiokoe liitteen C mukaisesti ja seroneutralisaatiokoe kaikkien viejämaass
a
tunnettujen epitsoottisen verenvuototaudin serotyyppien toteamiseksi.
Tehty.............................................................,
(paikka)....................................................................
(päivämäärä)
/SS74Leima(2)Allekirjoitus(2): .....................................................................
Nimi suuraakkosin: .................................................................
Virka-asema: . .......................................................................
►(2)◄
(2) Allekirjoituksen ja leiman värin tulee olla painoväristä poikkeavia.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 15
▼B
2 OSA
Luettelo maista, joiden sallitaan käyttävän liitteessä C olevan 1 osan
mukaista terveystodistusta
KANADA: lukuun ottamatta Okanaganin laaksoa Brittiläisessä Kolumbiassa,
alue määritellään vyöhykkeenä linjan sisällä, joka lähtee Kanadan jaAmerikan yhdysvaltojen rajalta pisteestä 120 °15 /prime1pituutta ja 49 °
leveyttä, jatkuu pohjoiseen pisteeseen 119 °35 /prime1pituutta ja 50 °30 /prime1’
leveyttä, koilliseen pisteeseen 119 °pituutta ja 50 °45’ leveyttä,
etelään Kanadan ja Amerikan yhdysvaltojen rajalla sijaitsevaanpisteeseen 118 °15 /prime1pituutta ja 49 °leveyttä
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 16
▼B
LIITE D
1 OSA
TERVEYSTODISTUS
Australiasta peräisin olevan naudan siemennesteen tuontia varten

1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 17
▼B
13. Minä allekirjoittanut virkaeläinlääkäri vakuutan luettuani neuvoston direktiivin 88/407/ETY ja perehdyttyän i
siihen, että:
a) ............................................................................................................................. .....
(viejämaa)
on ollut vapaa karjarutosta ja suu- ja sorkkataudista vientiin tukoitetun siemennesteen keräystä välittömäst i
edeltävän 12 kuukauden ajan ja tämän lähettämispäivään asti eikä näitä tauteja vastaan ole tänä saman a
aikana annettu rokotuksia.
b) Vientiin tarkoitetun siemennesteen keräyksen tehnyt keinosiemennysasema:
i) on hyväksytty direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan I luvun ehtojen mukaisesti;
ii) hoidetaan ja valvotaan direktiivin 88/407/ETY liitteessä A olevan II luvun ehtojen mukaisesti;
iii) on ollut vapaa raivotaudista, tuberkuloosista, luomistaudista, pernarutosta ja naudan tarttuvasta keuhko -
rutosta vientiin tarkoitetun sperman keräystä edeltävän 30 päivän ja sitä seuraavan 30 päivän ajan (jo s
kyseessä on tuore siemenneste, lähetyspäivään asti).
c) Keinosiemennysasemalla olevat naudat:
i) ovat peräisin direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvun ehdot täyttävistä karjoista ja/ta i
lehmistä;
ii) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevan I luvussa luetellut kokeet ennen niide n
saapumista eritysasemalle;
iii) ne ovat täyttäneet eristysvaatimukset ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa I luvussa määräty t
sisäänottoa edeltävien kokeiden tulokset ovat olleet vaatimusten mukaisia;
iv) niille on tehty direktiivin 88/407/ETY liitteessä B olevassa II luvussa määrätyt rutiinitarkastukset, jo s
ne ovat olleet keinosiemennysasemalla vähintään vuoden.
d) Vientiin tarkoitettu siemenneste:
i) on peräisin luovuttajista, jotka ovat olleet
.............................................................................................................................
(viejämaa)
vientiin tarkoitetun ja direktiivin 88/407/ETY liitteessä C määrätyt ehdot täyttävän siemennestee n
keräystä välittömästi edeltävän kuuden kuukauden ajan;
ii) on peräisin luovuttajista,
— jotka ovat olleet keinosiemennysasemalla, jossa vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edel -
tävän 12 kuukauden aikana naudoille tarttuvan naudan rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarise n
vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatiokokeen tai ELISA-kokeen tulos on ollut nega -
tiivinen(1)
tai
— joille vientiin tarkoitetun siemennesteen keräystä edeltävän 12 kuukauden aikana tarttuvan nauda n
rinotrakeiitin tai tarttuvan pustulaarisen vulvovaginiitin toteamiseksi tehdyn seroneutralisaatioko -
keen tai ELISA-kokeen tulos on ollut nagatiivinen(1)
tai
— jotka ovat seropositiivisia direktiivin 88/407/ETY(1) liitteessä B olevan II luvun mukaisesti annetu n
rokotuksen vuoksi ja joille hyväksytyllä keinosiemennysasemalla tehdyn seroneutralisaatiokokee n
tai ELISA-kokeen tulos on ollut negatiivinen ennen rokotusta(1);
(1) Tarpeeton yliviivataan.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 18
▼B
►(1)◄
►(2)◄
iii) on käsitelty; varastoitu ja kuljetettu direktiivin 88/407/ETY määräysten mukaisesti;iv) on peräisin sonneista, joille on tehty hyväksytyssä laboratoriossa kaksi kertaa, keräystä ennen ja se
n
jälkeen, 12 kuukauden välein (keräystä seuraava koe on tehtävä verinäytteestä, joka on otettu vähintää n
21 päivää vientiin tarkoitetun siemennesteen keräyksen jälkeen), seuraavat kokeet negatiivisin tuloksin:
— ELISA-koe bluetongue-taudin toteamiseksi liitteen E mukaisesti,
— geeli-immunodiffuusiokoe liitteen E mukaisesti ja seroneutralisaatiokoe, kaikkien viejämaass a
tunnettujen epitsoottisen verenvuototaudin serotyyppien toteamiseksi,
— seroneutralisaatiokoe akabane-viruksen toteamiseksi.
Tehty.............................................................,
(paikka)....................................................................
(päivämäärä)
/SS74Leima(2)Allekirjoitus(2): .....................................................................
Nimi suuraakkosin: ..................................................................
Virka-asema: .. .......................................................................
►(2)◄
(2) Allekirjoituksen ja leiman värin tulee olla painoväristä poikkeavia.
►(1)M1
►(2)M1
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 19
▼B
2 OSA
Luettelo maista, joiden sallitaan käyttää liitteessä D olevan 1 osan mukaista
terveystodistusta
AUSTRALIA
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 20
▼B
LIITE E
Toimintaohjeet poissulkevan tai vertailevan entsyymivälitteisen immunosor-
benttimäärityksen tekemiseksi ryhmäspesifisen monokloonisen vasta-aineen
avulla bluetongue-taudin virusvasta-aineiden toteamiseksi
VERTAILEVA ELISA-KOE BLUETONGUE-TAUDIN TOTEAMISEKSI
MONOKLOONISEN 3-17-A3 VASTA-AINEEN AVULLA
Vertailevalla ELISA-kokeella monokloonista 3-17-A3 vasta-ainetta käyttäen
voidaan havaita kaikki bluetongue-tautiviruksen (BTV) tunnetut seerumityypit.
Kokeessa on periaatteena, että BTV:n antigeenin ja lajiryhmän (3-17-A3)
monokloonisen vasta-aineen reaktio keskeytetään lisäämällä koeseeruminlaimennoksia. Koeseerumissa olevat BTV:n vasta-aineet estävät monokloonisenvasta-aineen (MKV) reagoinnin ja entsyymiuutteen lisäys heikentää odotettuavärimuutosta.
TARVIKKEET JA REAGENSSIT
1. Tasapohjaiset mikrotitrauslevyt.
2. Antigeeni: valmistetaan jäljempänä esitetyllä menetelmällä.3. Estopuskuri: 5 % (w/v) ”Marvel” kuivattua maitojauhetta, 0,1 % (v/v) Tween-
20: tä (polyoksietyleenisorbitonimonolauraatti-siirapin muodossa) fosfaatti-puskuroidussa suolaliuoksessa (PBS).
4. Monoklooninen vasta-aine (MKV): 3-17-A3 (hybridomin kudosviljelmän
kelluvana nesteenä) varastoidaan −20 °C:ssa tai kylmäkuivataan, laimennet-
tuna estopuskurilla suhteessa 1/50 ennen käyttöä, kohdistetaan ryhmäspesi-fistä p7 polypeptidiä vastaan.
5. Konjugaatti: kanin hiirivasta-aine (absorboituna ja eluoituna), retikkaperoksi-
daasiin konjugoituna ja säilytettynä pimeässä 4 °C:ssa.
6. Substraatti ja kromogeeni: 0,2 g ortofenyleeniä (OPD) liuotettuna puskuri-
liuokseen, jossa on 2,553 g sitruunahappoa ja 4,574 g dinatriumvetyortofos-faattia joka on saatettu 500 ml:ksi tislatulla vedellä, jaettuna 25 ml:n annok-siksi ja säilytettynä pimeässä −20 °C: ssä, välittömästi ennen käyttöä lisätään
12µl/25 ml vetyperoksidia (30 % w/v).
OPD:TÄ ON KÄSITELTÄVÄ VAROEN - ON KÄYTETTÄVÄ KUMIKÄ-
SINEITÄ - TUOTETTA EPÄILLÄÄN MUTAGEENISEKSI.
7. Rikkihappoa, 1 M: 26,6 ml happoa lisätään 473,4 ml:aan tislattua vettä.
HUOM.: HAPPO ON AINA LISÄTTÄVÄ VETEEN, EI KOSKAAN
VETTÄ HAPPOON.
8. Orbital-ravistelija9. ELISA-levynlukija (koe voidaan lukea silmämääräisesti).
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 21
▼B
KOEKAAVAKE
KOEMENETTELY
Nollausrivi
Rivi 1 A: sta H: hon on nollausrivi, joka sisältää BTV-antigeenin ja konjugaatin.
Kokeella Elisa-lukija voidaan kalibroida.
MKV-koe
Rivillä 2 A: sta H: hon on monokloonisen vasta-aineen koe ja siihen kuuluvat
BTV: n antigeeni, monoklooninen vasta-aine ja konjugaatti. Kysymyksessä onnegatiivinen tarkastus. Tämän koerivin optisen tiheyden keskiarvo vastaa 0prosentin inhibitioarvoa.
Positiivinen tarkastus
Rivillä 3 A:sta H:hon on positiivinen tarkastus. Siihen kuuluvat BTV:n antigeeni,
BTV-positiiviset antiseerumilaimennokset, monoklooninen vasta-aine ja konju-gaatti. Tällä osoitetaan, että koe sujuu oikein ja että kokeesta toiseen inhibi-tioarvo on sama.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 22
▼B
Koeseerumit
Edellä mainitussa koekaavakkeessa 18 seerumia voidaan testata laimennoksilla
1/2, 1/4, 1/8 ja 1/16. Tulokseksi saadaan tietoja koeseerumien vasta-aineidenpitoisuuksista. Laimennossarjaa voitaisiin vielä laajentaa seerumilaimennostenloppupitoisuuksien saamiseksi. Suuressa mittakaavassa suoritettavissa serologi-sissa kokeissa yhden (1/4) tai kahden (1/2 ja 1/4) laimennoksen seerumikoettavoitaisiin vaihtoehtoisesti käyttää nopeana seulontakokeena.
MENETTELY
1. BTV-antigeeni laimennetaan pitoisuudeltaan esititrattuun puskuroituun suola-
liuokseen (PBS). Käsitellään lyhyesti ultraäänellä yhteen kasautuneidenvirusten hajoittamiseksi (ellei tätä laitetta ole käytettävissä, pipetoidaanvoimakkaasti) ja liuosta annostellaan 50 µl ELISA-levyn jokaiseen syvennyk-
seen. Reunoja naputtamalla antigeeni jaetaan tasaisesti levylle.
2. Inkuboidaan 37 °C:ssa 60 minuuttia orbital-ravistelijassa. Levyt pestään
kolmeen kertaan huuhtelemalla ja syvennykset tyhjennetään epästeriililläpuskuroidulla suolaliuoksella (PBS) ja kuivataan imupaperilla.
3. Estopuskuria annostellaan 50 µl levysyvennystä kohti. Koeseerumit ja yksi
positiivinen seerumi pannaan asianomaisiin syvennyksiin ja levyn sisältölaimennetaan monikanavaisen pipetin avulla. Seerumia ei saa lisätäsokeakoe-ja MKV-koekohtiin.
4. Heti koeseerumien lisäämisen jälkeen MTV laimennetaan estopuskurilla
(esititrattuun laimennokseen) ja levyn kaikkiin syvennyksiin sokeakoesyven-nystä lukuunottamatta lisätään 50 µl.
5. Inkuboidaan 37 °C:ssa 60 minuuttia orbital-ravistelijassa. Levyt pestään
kolmeen kertaan puskuroidulla suolaliuoksella (PBS) ja kuivataan imupape-rilla.
6. Kanin hiirivasta-aineen konsentraatti laimennetaan suhteessa 1/5 000 estopus-
kuriin ja levyn kaikkiin syvennyksiin lisätään 50 µl.
7. Inkuboidaan 37 °C:ssa 60 minuuttia orbital-ravistelijassa. Levyt pestään
kolmeen kertaan PBS: lla ja kuivataan imupaperilla.
8. OPD sulatetaan ja välittömästi ennen käyttöä lisätään 12 µl 30 %:sta vetype-
roksidia jokaista OPD:n 25 ml:aa kohti. Levyn jokaiseen syvennykseen lisä-tään 50 µl. Värin muuttumista odotetaan noin 10 minuuttia ja reaktio keskey-
tetään 1 M:lla rikkihapolla (50 µl/syvennys). Värin pitäisi muuttua MKV-
koesyvennyksissä ja BTV-vastaaineettomissa seerumisyvennyksissä.
9. Levyt tutkitaan joko silmämääräisesti tai spektrofotometrin avulla ja tulokset
kirjataan.
TULOSTEN MÄÄRITYS
MKV-kokeiden avulla lasketaan OD-keskiarvo. Se vastaa 0 %:n inhibitioarvoa.
Koeseerumien optiset tiheysarvot ilmaistaan inhibitioarvoprosentteina seuraavankaavan mukaisesti:
inhibitioarvo % = 100 −OD koeseerumin esiintyessäOD koeseerumin puuttuessa
× 100
Positiivisena pidetään 1/4-seerumilaimennosta, jonka inhibitioarvot ylittävät 40
%. Silmämääräinen tulosten luku on mahdollista, koska 40 %:n inhibitioarvo onalhaisin paljain silmin luettavissa oleva arvo.
BTV-ELISA-ANTIGEENIN ESIKÄSITTELY
1. Yhtyvien BHK-21:n solujen 10 Roux-pulloa pestään kolme kertaa seerumit-
tomalla Eagle kasvualustalla ja infektoidaan BTV:n serotyypin 1 avullaseerumittomalla Eagle-kasvualustalla.
2. Inkuboidaan 37 °C:ssa ja solutuhovaikutus (cpe) tutkitaan päivittäin.
3. Kun cpe tulee esille 80-90 %:sti jokaisen Roux-pullon solulevyllä, virus
kerätään ravistamalla solut irti seinämästä.
4. Solut sentrifugoidaan rakeiksi nopeudella 2 000 tai 3 000 kierrosta minuu-
tissa.
5. Kelluva jae heitetään pois ja solut suspendoidaan uudelleen noin 30 ml:ssa
puskuroitua suolaliuosta (PBS), jossa o n 1 % ”Sarkosyliä” ja 2 ml fenyyli-
metyylisulfonyylifluoridia (lysis-puskuri). Tämä voi aiheuttaa solujen hyyte-löitymistä, jolloin on lisättävä enemmän lysispuskuria.
Huom!fenyylimetyylisulfonyylifluoridi on vaarallista, sitä on käsiteltävä
äärimmäisen huolellisesti.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 23
▼B
6. Solut irrotetaan 60 sekunniksi 30 mikronin amplitudilla toimivan ultraääni-
sondin avulla.
7. Sentrifugoidaan kymmenen minuutin ajan nopeudella 10 000 kierrosta
minuutissa.
8. Kelluva jae varastoidaan +4 °C:seen ja jäljellä olevat solurakeet suspendoi-
daan uudelleen 10-20 ml:aan lysispuskuria.
9. Sekoitetaan ultraäänilaitteella ja selkeytetään. Kelluva jae varastoidaan
kussakin vaiheessa, kaikkiaan kolme kertaa.
10. Kelluvat jakeet yhdistetään ja sentrifugoidaan nopeudella 24 000 kierrosta
minuutissa 120 minuutin ajan 4 °C: een lämpötilassa 5 ml:n tyynyllä 40
%:sta sakkaroosia (w/v PBS:ssa) käyttäen Beckmannin 30 ml:n sentrifugi-putkia ja SW 28 roottoria.
11. Kelluva jae heitetään pois, putket tyhjennetään hyvin ja rakeet suspendoi-
daan uudelleen puskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) ultraäänen avulla. Anti-geeni varastoidaan määräosissa −70 °C:ssa.
BTV-ANTIGEENIN ELISA-TITRAUS
Bluetongue-taudin antigeeni ELISA-koetta varten titrataan epäsuoralla ELISA-
tekniikalla. Antigeenin kaksoislaimennokset titrataan monokloonisen vasta-aineen 3-17-A3 vakiolaimennoksella (1/50). Koetapa on seuraava:
MENETTELY
1. BTV-antigeeni laimennetaan PBS:lla mikrotitrauslevyllä kaksoislaimennosten
(50µl/syvennys) sarjana käyttäen monikanavapipettiä.
2. Inkuboidaan orbital-ravistelijassa tunnin ajan 37 °C:ssa.
3. Levyt pestään kolmeen kertaan puskuroidulla suolaliuoksella (PBS).4. Monokloonista vasta-ainetta 3-17-A3 (laimennos 1/50) lisätään 50 µl mikro-
titrauslevyn jokaiseen syvennykseen.
5. Inkuboidaan orbital-ravistelijassa tunnin ajan 37 °C:ssa.
6. Levyt pestään kolmeen kertaan puskuroidulla suolaliuoksella (PBS).7. Mikrotitrauslevyn jokaiseen syvennykseen pannaan 50 µl kanin hiirivasta-
aineglobuliinia retikka-peroksidaasiin konjugoituneena, joka on laimennettuesititrattuun optimaaliseen pitoisuuteen.
8. Inkuboidaan orbital-ravistelijassa tunnin ajan 37 °C:ssa.
9. Lisätään substraatti ja kromogeeni kuten edellä. Reaktio pysäytetään 10
minuutin kuluttua lisäämällä 1 M:sta rikkihappoa (50 µl/syvennys).
Koska vertailukokeessa monokloonista vasta-ainetta on oltava ylimäärin, on
valittava antigeenilaimennos, joka on titrauskäyrällä (eikä tasaisella alueella),joka antaa suunnilleen 0,8 OD:n kymmenen minuutin jälkeen.
Toimintaohjeet epitsoottisen verenvuototaudin vasta-aineiden toteamiseksi
agargeeli-immunodiffuusiokokeen avulla
Agargeeli-immunodiffuusiokoe tehdään seuraavalla tavalla:
TARVIKKEET JA REAGENSSIT
1. Antigeeni
Saostava antigeeni valmistetaan millä tahansa soluviljelyjärjestelmällä, jossa
solun jakautuminen on yhtä nopeaa kuin Bluetongue-viruksen asianomaisissaserotyypeissä. Suositellaan BHK-tai Vero-soluja. Antigeeni esiintyy virus-kasvun lopussa kelluvassa nesteessä, mutta ollakseen tehokas se on väkevöi-tävä 50-100-kertaiseksi. Tähän päästään millä tahansa proteiinien väkevöinninstandardimenetelmällä, antigeenivirus voidaan inaktivoida lisäämäilä 0,3 %(v/v) beetapropiolaktonia.
2. Tunnettu positiivinen tarkastusseerumi
Kansainvälisestä vertailuseerumista ja antigeenista tehdään kansallinen
seerumi, joka standardoidaan optimaalisen suhteen aikaansaamiseksi kansain-välisen seerumin kanssa, ja joka kylmäkuivataan ja jota käytetään kaikkienkokeiden tunnettuna tarkastusseerumina.
3. Koeseerumi
MENETTELY
1. Kaadetaan 1-prosenttista agaroosia boraatti- tai natriumbarbitolipuskurissa,
pH 8,5-9,0, vähintään 3,0 mm:n syvyiseen petrimaljaan.
2. Agariin koverretaan seitsemän kosteudesta vapaata, halkaisijaltaan 5,0 mm:n
kuoppaa. Kuviossa keskelle tulee yksi kuoppa ja sen ympärille 3 mm:nsäteellä 6 kuoppaa.
1994D0577 — FI — 05.07.1999 — 001.001 — 24
▼B
3. Keskimmäinen kuoppa täytetään standardiantigeenilla. Kehällä olevat kuopat
2, 4 ja 6 täytetään tunnetuilla positiivisilla seerumeilla, kuopat 1, 3 ja 5koeseerumeilla.
4. Järjestelmää inkuboidaan korkeintaan 72 tuntia huoneenlämmössä kosteassa
hyvin suljetussa tilassa.
TULKINTA
Koeseerumi on positiivinen, jos se muodostaa määrätyn presipitiinilinjan anti-
geenin kanssa sekä täysin samanlaisen linjan tarkastusseerumin kanssa. Koesee-rumi on negatiivinen, ellei se muodosta määrättyä linjaa antigeenin kanssa eikätaivuta tarkastusseerumin linjaa. Petrimaljoja on tutkittava tummaa taustaa vastenja epäsuorassa valossa.