N°C 146/12 Diario Oficial de las Comunidades Europeas 5. 6. 91 
II 
(Actos jurídicos preparatorios) 
COMISIÓN 
Propuesta de Reglamento (CEE) del Consejo por el que se establecen medidas comunitarias 
para la lucha contra la enfermedad de Newcastle 
(91/C 146/14) 
COM(91) 137 final 
(Presentada por la Comisión el 16 de mayo de 1991) 
EL CONSEJO DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS, 
Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Econó­
mica Europea y, en particular, su artículo 43, 
Vista la propuesta de la Comisión, 
Visto el dictamen del Parlamento Europeo, 
Visto el dictamen del Comité Económico y Social, 
Considerando que el sector de las aves de corral figura 
en el Anexo II del Tratado y que su comercialización 
constituye una importante fuente de ingresos para los 
productores agrarios; 
Considerando que es necesario establecer medidas de 
control a escala comunitaria para que sean adoptadas en 
caso de presentarse brotes de la enfermedad de New­
castle a fin de asegurar el desarrollo del sector de las 
aves de corral y contribuir a la protección de la salud 
animal en la Comunidad; 
Considerando que los brotes de la enfermedad de New­
castle pueden adquirir rápidamente un carácter epizoó­
tico y provocar una mortalidad y unas perturbaciones ta­
les que comprometan seriamente la rentabilidad de las 
explotaciones de aves de corral; 
Considerando que es necesario tomar medidas en cuanto 
existan indicios de esta enfermedad de manera que, si se 
confirma, sea posible adoptar inmediatamente medidas 
eficaces para luchar contra ella; que las autoridades 
competentes de cada país deberán adaptar esas medidas 
teniendo en cuenta si un país está aplicando o no un pro­
grama de vacunación preventiva en todo su territorio o 
en parte de él; 
Considerando que, tan pronto como se declare un brote 
de esta enfermedad, es necesario evitar su propagación 
controlando de modo estricto los movimientos de anima­
les y la utilización de productos que puedan estar conta­
minados, recurriendo, en su caso, a la vacunación; Considerando que el diagnóstico de la enfermedad debe 
efectuarse bajo los auspicios de los laboratorios respon­
sables, que deberán estar coordinados por un laboratorio 
de referencia designado por la Comunidad; 
Considerando que es necesario prever que los Estados 
miembros que recurran a la vacunación elaboren planes 
de vacunación y los comuniquen a la Comisión y a los 
demás Estados miembros; 
Considerando que es conveniente conferir a la Comisión 
la función de adoptar las normas de desarrollo necesa­
rias, 
HA ADOPTADO EL PRESENTE REGLAMENTO: 
Artículo 1 
1. El presente Reglamento define las medidas comuni­
tarias de lucha contra la enfermedad de Newcastle apli­
cables en caso de aparición de esta enfermedad en explo­
taciones de aves de corral que no sean palomas mensaje­
ras, sin perjuicio de las disposiciones comunitarias que 
regulan el comercio intracomunitario. 
2. El presente Reglamento no se aplicará en caso de 
que se detecte la enfermedad de Newcastle en otras aves. 
Sin embargo, los Estados miembros deberán informar a 
la Comisión de las medidas que hayan adoptado. 
5.6.91 Diario Oficial de las Comunidades Europeas N°C 146/13 
Artículo 2 
1. A los efectos del presente Reglamento, se utilizarán 
cuando proceda las definiciones del artículo 2 de la Di­
rectiva 90/539/CEE del Consejo (»). 
2. Además, se entenderá por: 
a) «Ave de corral infectada»: 
— toda ave de corral en la que un examen de labora­
torio haya permitido comprobar oficialmente la 
enfermedad de Newcastle, 
— tratándose de un segundo brote o de brotes subsi­
guientes, toda ave de corral en la que se hayan 
encontrado síntomas clínicos o lesiones post mor-
tem propios de la enfermedad de Newcastle; 
b) «Ave de corral sospechosa de estar infectada»: toda 
ave de corral con síntomas clínicos o lesiones post 
mortem tales que se pueda sospechar legítimamente la 
presencia de la enfermedad de Newcastle; 
c) «Ave de corral sospechosa de estar contaminada»: 
toda ave de corral que haya podido estar, directa o 
indirectamente, en contacto con el virus de la enfer­
medad de Newcastle; 
d) «Aguas grasas»: los desperdicios procedentes de coci­
nas, restaurantes o, en su caso, industrias cárnicas; 
e) «Autoridad competente»: la autoridad veterinaria de­
signada al efecto por la administración nacional del 
país de que se trate, responsable directamente ante 
ésta en el marco del presente Reglamento y encar­
gada de informar a través de la administración nacio­
nal; 
f) «Veterinario oficial»: el veterinario designado por la 
autoridad competente de un Estado miembro. 
Articulo 3 
Toda sospecha de enfermedad de Newcastle deberá ser 
notificada inmediatamente a la autoridad competente. 
Artículo 4 
1. Cuando se sospeche que aves de corral están infec­
tadas o contaminadas con la enfermedad de Newcastle, 
el veterinario oficial deberá realizar inmediatamente una 
investigación para confirmar o rechazar la presencia de 
esta enfermedad; en particular, deberá tomar o procurar 
que se tomen muestras adecuadas para analizarlas en el 
laboratorio. 
(') DO n° L 303 de 31. 10. 1990, p. 6. 2. En cuanto se le notifique la sospecha de infección, 
la autoridad competente pondrá la explotación bajo vigi­
lancia oficial y ordenará, en particular: 
a) la realización de un censo de todas las aves de corral 
de la explotación en el que se precise, por categorías, 
el número de aves de corral muertas, cuántas presen­
tan síntomas clínicos y cuántas no. Este censo deberá 
actualizarse y presentarse cuando se solicite y podrá 
controlarse en cada visita; 
b) la reclusión de todas las aves de corral de la explota­
ción dentro de sus locales habituales o de cualquier 
otro lugar en el que queden aisladas, sin ningún con­
tacto con otras aves; 
c) la prohibición tanto de la entrada de aves de corral en 
la explotación como la salida de las que se encuentren 
en ésta; 
d) la prohibición, salvo autorización del veterinario ofi­
cial: 
— de todo movimiento de personas, animales o vehí­
culos cuyo destino u origen sea la explotación; 
— de toda salida de la explotación de carne o cana­
les de aves de corral, piensos, material, desechos, 
cama de paja o cualquier otro elemento suscepti­
ble de transmitir la enfermedad de Newcastle a 
partir de la explotación; 
e) la prohibición de la salida de la explotación de huevos 
que no estén destinados al consumo y que no hayan 
sido desinfectados a satisfacción del veterinario ofi­
cial; 
f) la instalación de medios de desinfección apropiados 
en las entradas y salidas de la explotación y de los 
edificios que alberguen las aves de corral; 
g) una investigación epizootiológica con arreglo a lo dis­
puesto en el artículo 7. 
3. Hasta que entren en vigor las medidas oficiales 
contempladas en el apartado 2, el propietario o avicultor 
de toda explotación en la que se sospeche la presencia de 
la enfermedad adoptará todas las medidas razonables 
que conduzcan al cumplimiento de las disposiciones con­
templadas en las letras b) a e) del apartado 2. 
4. La autoridad competente podrá hacer extensivas las 
medidas previstas en el apartado 2 a otras explotaciones 
cuando su ubicación, configuración o los contactos con 
la explotación en que se sospeche la existencia de la en­
fermedad permitan sospechar una posible contaminación. 
5. Las medidas contempladas en los apartados 2, 3 y 4 
no serán retiradas hasta que la sospecha de la enferme­
dad de Newcastle haya sido desmentida por el veterina­
rio oficial. 
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Artículo 5 
1. En cuanto se confirme oficialmente la presencia en 
una explotación de la enfermedad de Newcastle, la auto­
ridad competente, además de las medidas enumeradas en 
el apartado 2 del artículo 4, ordenará que se lleven a 
cabo inmediatamente las siguientes operaciones: 
a) el sacrificio in situ de todas las aves de corral que se 
encuentren en la explotación y la destrucción de las 
aves de corral muertas o sacrificadas y de los huevos 
que se hallen en la explotación. Estas operaciones se 
efectuarán de manera que se reduzca al mínimo el 
riesgo de propagación de la enfermedad; 
b) la destrucción o el tratamiento de todas las materias o 
desechos, como piensos, camas y estiércol que pudie­
ren estar contaminados. El tratamiento deberá reali­
zarse ateniéndose a las instrucciones del veterinario 
oficial y deberá garantizar la destrucción total del vi­
rus de la enfermedad de Newcastle; 
c) en lo posible, la búsqueda y destrucción de la carne 
de las aves de corral que hayan sido sacrificadas du­
rante el período presunto de incubación de la enfer­
medad; 
d) en lo posible, la búsqueda y destrucción de los huevos 
que, producidos durante el período presunto de incu­
bación, hayan salido de la explotación; las aves de co­
rral que hayan nacido de esos huevos estarán someti­
das a vigilancia oficial; 
e) después de haberse llevado a cabo las operaciones in­
dicadas en la letra a), la limpieza y desinfección, con 
arreglo al artículo 11, de los edificios en que vivan las 
aves de corral y de sus alrededores, de los vehículos 
de transporte y de todo el material que pudiere estar 
contaminado; 
f) después de realizar las operaciones indicadas en la 
letra e), transcurrirá un mínimo de 21 días antes de 
volver a introducir aves de corral en la explotación; 
g) realización de una investigación epizootiológica con 
arreglo a lo dispuesto en el artículo 7. 
2. La autoridad competente podrá aplicar las medidas 
previstas en el apartado 1 a otras explotaciones cuando 
su ubicación, configuración o los contactos con la explo­
tación en la que se haya confirmado la enfermedad per­
mitan sospechar una posible contaminación. 
Artículo 6 
1. Cuando las explotaciones estén formadas por dos o 
más manadas independientes, la autoridad competente 
podrá exceptuar de la aplicación de las medidas enuncia­
das en la letra a) del apartado 1 del artículo 5 las mana­
das sanas de una explotación infectada, siempre que el 
veterinario oficial haya confirmado que la estructura de 
las unidades, su tamaño y las operaciones que en ella se 
realicen reúnen unas características tales que las hacen 
completamente independientes, tanto desde el punto de 
vista del alojamiento, mantenimiento y alimentación de 
las manadas como del de la inmunidad por vacunación, 
de modo que no haya peligro de propagación del virus. 2. De conformidad con el artículo 24, la Comisión fi­
jará los criterios aplicables a la concesión de la excepción 
prevista en el apartado 1. 
Artículo 7 
1. La investigación epizootiológica estudiará los si­
guientes aspectos: 
— período de la posible presencia de la enfermedad de 
Newcastle en la explotación; 
— posible origen de la enfermedad de Newcastle por lo 
que se refiere a la explotación e identificación de las 
demás explotaciones en las que se encuentren aves de 
corral que hayan podido infectarse o contaminarse a 
partir del mismo foco; 
— los movimientos de personas, aves de corral u otros 
animales, vehículos, huevos, carne, canales, y cual­
quier utensilio o material que haya podido transmitir 
el virus de la enfermedad de Newcastle a la explota­
ción afectada o propagarlo a partir de ella. 
2. Se creará una unidad de crisis para coordinar todas 
las medidas necesarias para erradicar la enfermedad de 
Newcastle lo más rápidamente posible y realizar la inves­
tigación epizootiológica. 
Se aplicarán las normas generales relativas a las unidades 
de crisis nacionales y a la unidad de crisis comunitaria 
que figuran en el Reglamento (CEE) n° . . ./ .. del Con­
sejo. 
Artículo 8 
1. Cuando el veterinario oficial tenga motivos para 
sospechar que las aves de corral de una explotación pue­
dan estar contaminadas debido a movimientos de perso­
nas, animales y vehículos o a cualquier otro medio, las 
explotaciones afectadas se someterán a control oficial 
con arreglo a lo dispuesto en el apartado 2. 
2. El control oficial tendrá como finalidad detectar in­
mediatamente cualquier indicio de la enfermedad de 
Newcastle, llevar a cabo el censo de las aves de corral, 
controlar sus movimientos y, en su caso, aplicar las me­
didas previstas en el apartado 3. 
3. Cuando una explotación esté sometida al control 
oficial de conformidad con las disposiciones del apartado 
2, la autoridad competente prohibirá la salida de las aves 
de corral de la explotación cuando no sea para su trans­
porte directo a un matadero bajo control oficial para su 
sacrificio inmediato. Antes de que pueda autorizarse tal 
salida, el veterinario oficial deberá haber efectuado un 
examen clínico de todas las aves de corral que demuestre 
que la explotación está indemne de la enfermedad de 
Newcastle. Las restricciones de movimientos antes men­
cionadas se aplicarán durante un período mínimo de 21 
días a partir de la última fecha en que pudiera haberse 
producido la contaminación; si durante ese período de 
21 días se detectara una posible contaminación, el perío­
do de estas restricciones durará al menos 7 días. 
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4. Cuando considere que las condiciones lo permiten, 
la autoridad competente podrá limitar la aplicación de 
las medidas establecidas en el presente artículo a una 
parte de la explotación y a las aves de corral que se ha­
llen en ésta, siempre que hayan sido alojadas, mantenidas 
y alimentadas de forma totalmente separada y por dife­
rente personal. 
Artículo 9 
1. Cuando el diagnóstico de la enfermedad de New-
castle se haya confirmado oficialmente, la autoridad 
competente delimitará una zona infectada alrededor de 
la explotación infectada. Esta zona estará compuesta por 
una zona de protección de un radio mínimo de 3 km y 
una zona de vigilancia de un radio mínimo de 10 km. 
Para la delimitación de estas zonas deberán tenerse en 
cuenta las barreras naturales y las características epizoó­
ticas del brote de la enfermedad. 
2. En la zona de protección se aplicarán las siguientes 
medidas: 
a) localización de todas las explotaciones de la zona en 
las que se encuentren aves de corral; 
b) visitas periódicas a todas las explotaciones en que se 
encuentren aves de corral, con exámenes clínicos de 
éstas y, en su caso, toma de muestras para su examen 
de laboratorio; se llevará un registro de visitas y re­
sultados de los exámenes; 
c) mantenimiento de las aves de corral en su alojamiento 
habitual o en cualquier otro lugar que permita aislar­
las; 
d) utilización de sistemas de desinfección apropiados en 
las entradas y salidas de las explotaciones; 
e) control de los movimientos de entrada y salida de las 
explotaciones de las personas que manipulen aves de 
corral vivas o muertas y huevos y de los vehículos que 
transporten tales productos; en general, se prohibirá 
el transporte de las aves, exceptuando el tránsito por 
las carreteras y líneas férreas más importantes; 
f) prohibición de sacar aves de corral y huevos para in­
cubar de la explotación en que se encuentren, salvo 
que la autoridad competente autorice el transporte: 
i) de las aves para su sacrificio inmediato, preferen­
temente en un matadero situado en la zona infec­
tada, o, si no fuera posible, en uno situado fuera 
de ésta y designado por la autoridad competente. 
La carne de esas aves deberá llevar la marca sani­
taria especial establecida en el apartado 1 del ar­
tículo 6 del Reglamento . . ./ . ./CEE del Consejo, 
[sobre las condiciones de policía sanitaria a las 
que deben ajustarse los intercambios intracomuni-
tarios y las importaciones de carnes frescas de 
aves de corral y de aves de caza de cría, proce­
dentes de terceros países]; ii) de pollitos de un día de edad o de pollas que es­
tén a punto de poner a una explotación situada 
dentro de la zona infectada y que no tenga otras 
aves de corral. Esta explotación estará sometida al 
control oficial previsto en el apartado 2 del ar­
tículo 8; 
iii) de huevos para incubar bien a una incubadora si­
tuada dentro de la zona infectada o a una incuba­
dora situada fuera de ella, designada por la auto­
ridad competente; los huevos y sus envases debe­
rán desinfectarse antes de ser enviados. 
Los movimientos indicados en los incisos i), ii) y iii) 
deberán ser realizados directamente bajo control ofi­
cial y únicamente se autorizarán después de que el 
veterinario oficial haya efectuado una inspección sa­
nitaria de la explotación. Los medios de transporte 
empleados deberán limpiarse y desinfectarse antes y 
después de su utilización; 
g) prohibición de retirar o esparcir sin autorización el 
estiércol de las aves de corral o sus camas de paja; 
h) prohibición de celebrar ferias, mercados, exposiciones 
y demás concentraciones de aves de corral o de cual­
quier otro tipo de aves. 
3. Las medidas aplicadas en la zona de protección se 
mantendrán al menos durante 21 días después de que se 
hayan efectuado en la explotación infectada las opera­
ciones preliminares de limpieza y desinfección con arre­
glo a lo dispuesto en el artículo 11. A partir de ese mo­
mento, la zona de protección pasará a formar parte de la 
zona de vigilancia. 
4. Las medidas aplicadas en la zona de vigilancia in­
cluirán : 
a) la localización de todas las explotaciones de la zona 
con aves de corral; 
b) el control de los movimientos de las aves de corral y 
de los huevos para incubar dentro de la zona; 
c) la prohibición de sacar aves de corral fuera de la zona 
durante los 15 primeros días, excepto para enviarlas 
directamente a un matadero situado fuera de la zona 
infectada y designado por la autoridad competente, 
en cuyo caso la carne de estas aves deberá llevar la 
marca sanitaria especial establecida en el artículo 6 
del Reglamento n° . . ./. ./CEE [sobre las condiciones 
de policía sanitaria a las que deben ajustarse los inter­
cambios intracomunitarios y las importaciones de car­
nes frescas de aves de corral y de aves de caza de cría 
procedentes de terceros países]; 
d) la prohibición de sacar huevos para incubar fuera de 
la zona infectada, salvo que se envíen a un local de­
signado por la autoridad competente. Antes de ser en­
viados, los huevos y sus envases deberán ser desinfec­
tados; 
e) la prohibición del transporte de estiércol de aves de 
corral o sus camas de paja fuera de la zona; 
N°C 146/16 Diario Oficial de las Comunidades Europeas 5.6.91 
f) la prohibición de celebrar ferias, mercados, exposicio­
nes y demás concentraciones de aves de corral o de 
cualquier otro tipo de aves; 
g) sin perjuicio de las disposiciones contempladas en las 
letras b) y c), la prohibición de transportar aves de 
corral, exceptuando el tránsito por carretera y líneas 
férreas más importantes. 
5. Las medidas aplicadas en la zona de vigilancia se 
mantendrán al menos durante 30 días después de haberse 
realizado en la explotación infectada las operaciones pre­
liminares de limpieza y desinfección con arreglo a lo dis­
puesto en el artículo 11. 
Artículo 10 
1. La autoridad competente determinará las modalida­
des de control de los movimientos de huevos y de aves 
de corral. 
2. A petición de la autoridad competente, el propieta­
rio de aves de corral o el avicultor deberá facilitarle los 
datos sobre las entradas y salidas de su explotación de 
aves y huevos. 
3. Toda persona que se dedique al transporte o al co­
mercio de aves de corral y de huevos deberá poder infor­
mar a la autoridad competente sobre los movimientos de 
aves que haya transportado o comercializado y aportar 
una documentación detallada al respecto. 
Artículo 11 
1. Los desinfectantes que se vayan a utilizar así como 
su concentración deberán estar autorizados por la autori­
dad competente. 
2. Las operaciones de limpieza y desinfección deberán 
efectuarse bajo la supervisión oficial y con arreglo a las 
instrucciones del veterinario oficial. 
Artículo 12 
Las tomas de muestras y los análisis de laboratorio que 
se efectúen para detectar el virus de la enfermedad de 
Newcastle deberán realizarse con arreglo a las disposi­
ciones del Anexo I. 
Artículo 13 
1. Los Estados miembros designarán: 
a) uno o varios laboratorios nacionales que dispongan 
de instalaciones y de personal especializado para rea­
lizar permanentemente la tipificación completa de las 
características antigénicas y biológicas del virus de la 
enfermedad de Newcastle y confirmar los resultados 
obtenidos por los laboratorios de diagnóstico regiona­
les; 
b) uno o varios laboratorios nacionales encargados de 
controlar los reactivos utilizados por los laboratorios 
regionales; c) uno o varios institutos o laboratorios nacionales en­
cargados de controlar la eficacia, potencia y pureza 
de las vacunas utilizadas con carácter preventivo en 
su país o almacenadas para una intervención de ur­
gencia. 
2. Los laboratorios nacionales enumerados en el 
Anexo II se encargarán de la coordinación de las normas 
y los métodos de diagnóstico, el uso de reactivos y el 
control de vacunas. 
3. Los laboratorios nacionales a que hace referencia el 
apartado 2 se encargarán de la coordinación de las nor­
mas y los métodos de diagnóstico establecidos en cada 
laboratorio de diagnóstico de la enfermedad de New­
castle en el Estado miembro. A tal fin: 
a) podrán proporcionar a los laboratorios regionales 
reactivos para el diagnóstico; 
b) controlarán la calidad de todos los reactivos para 
diagnóstico utilizados en ese Estado miembro; 
c) organizarán periódicamente pruebas comparativas; 
d) mantendrán aislados virus de la enfermedad de New­
castle provenientes de casos confirmados en ese Es­
tado miembro; 
e) confirmarán los resultados positivos obtenidos en los 
laboratorios de diagnóstico regionales. 
4. Los laboratorios nacionales enumerados en el 
Anexo II mantendrán contactos con el laboratorio comu­
nitario de referencia mencionado en el artículo 14. 
Artículo 14 
En el Anexo III se menciona el laboratorio comunitario 
de referencia para el diagnóstico de la enfermedad de 
Newcastle. Las funciones y obligaciones de dicho labora­
torio se determinarán de acuerdo con el procedimiento 
establecido en el artículo 24, siempre y cuando no estén 
cubiertas por el artículo 28 de la Decisión 90/424/CEE 
del Consejo (*). 
Artículo 15 
1. La vacunación contra la enfermedad de Newcastle 
con vacunas autorizadas por la autoridad competente 
podrá realizarse con carácter preventivo o bien como 
complemento de las medidas de control que se adopten 
cuando se declare la enfermedad. 
2. Únicamente se autorizarán las vacunas que satisfa­
gan las siguientes condiciones: 
a) deberán cumplir los requisitos de la farmacopea euro­
pea y haber sido producidas, controladas y distribui­
das bajo vigilancia oficial, 
(') DO n° L 224 de 18. 8. 1990, p. 19. 
5.6.91 Diario Oficial de las Comunidades Europeas N°C 146/17 
b) cuando se trate de vacunas importadas de terceros 
países, deberán cumplir los requisitos indicados en la 
letra a). 
3. Por otra parte, con arreglo a lo dispuesto en el ar­
tículo 24, podrán fijarse otros criterios relativos a la utili­
zación de vacunas contra la enfermedad de Newcastle. 
Artículo 16 
1. Los Estados miembros en los que se practique la 
vacunación preventiva, facultativa u obligatoria, contra la 
enfermedad de Newcastle informarán de ello a la Comi­
sión y a los demás Estados miembros. 
2. En la información transmitida con arreglo al apar­
tado 1, deberán precisarse: 
— las características y composición de cada tipo de va­
cuna utilizado; 
— las modalidades de supervisión, distribución, almace­
namiento y utilización de las vacunas; 
— las especies y categorías de aves de corral que vayan 
a ser vacunadas o que puedan serlo; 
— las zonas en que pueda o deba efectuarse la vacuna­
ción. 
Artículo 17 
1. Cuando se haya comprobado un brote de enferme­
dad de Newcastle, la autoridad competente, con el fin de 
completar las otras medidas de control previstas en el 
presente Reglamento, podrá delimitar un territorio y un 
período en los que, bajo control oficial, se realizará la 
vacunación rápida y sistemática (vacunación de urgencia) 
de las especies designadas de aves de corral. Los Estados 
miembros que apliquen la vacunación de urgencia infor­
marán a la Comisión y a los demás Estados miembros a 
través del Comité veterinario permanente, creado me­
diante la Decisión 68/361/CEE del Consejo ('), sobre el 
estado de la enfermedad de Newcastle y el programa de 
vacunación de emergencia. 
2. En el caso contemplado en el apartado 1 estará 
prohibido vacunar o revacunar aves de corral en las ex­
plotaciones a que se refiere el artículo 4. 
3. En el caso contemplado en el apartado 1: 
a) deberán vacunarse lo antes posible las especies de aves 
de corral designadas; 
b) toda ave de corral de las especies designadas nacida o 
introducida en una explotación de la zona de vacuna­
ción deberá ser o estar vacunada; 
(') DO n° L 255 de 18. 10. 1968, p. 23. c) durante la vacunación contemplada en el apartado 1, 
toda ave de corral de las especies designadas deberá 
permanecer en la zona de vacunación, excepto 
cuando se trate de: 
— pollitos de un día de edad destinados a una explo­
tación de la zona de vacunación donde serán va­
cunados; 
— aves trasladadas directamente a un matadero de la 
zona de vacunación para su sacrificio inmediato. 
Cuando el matadero esté situado fuera de la zona 
de vacunación, únicamente se permitirán movi­
mientos de aves de corral después de que el veteri­
nario oficial haya efectuado una inspección sanita­
ria de la explotación; 
d) al término de las operaciones de vacunación previstas 
en la letra a), podrá autorizarse la salida de la zona 
de vacunación de: 
— pollitos de un día destinados a la producción cár­
nica de una explotación, siempre y cuando se va­
cunen en ella; la explotación deberá mantenerse 
bajo vigilancia hasta que las aves que se trasladan 
hayan sido sacrificadas; 
— aves de corral vacunadas más de 21 días antes, 
siempre que vayan a ser sacrificadas inmediata­
mente; 
— huevos para incubar procedentes de una manada 
productora vacunada al menos 21 días antes, 
siempre que se desinfecten antes de su salida los 
huevos y envases. 
4. Las medidas previstas en las letras b) y d) del apar­
tado 3 se aplicarán durante un período de tres meses, 
renovable por períodos sucesivos de tres meses, al tér­
mino de las operaciones de vacunación establecidas en el 
apartado 1. 
5. No obstante lo dispuesto en las letras a) y b) del 
apartado 3, la autoridad competente podrá decidir que 
no se sometan a vacunación sistemática a determinadas 
manadas de aves de corral de especial valor científico, 
siempre y cuando la autoridad competente adopte todas 
las disposiciones necesarias para proteger su salud y las 
sometan a controles serológicos periódicos. 
6. La Comisión seguirá de cerca la evolución de la si­
tuación de la enfermedad y, si fuere necesario, recurrirá 
al procedimiento establecido en el artículo 24 para tomar 
una decisión, especialmente en cuanto al control de mo­
vimientos y al vacunación. 
Artículo 18 
1. Cuando en una determinada región una epizootia 
de la enfermedad de Newcastle presente un carácter ex-
cepcionalmente grave y una tendencia a propagarse, el 
Estado miembro afectado deberá: 
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— declarar «zona de alto riesgo sanitario» una zona de­
limitada territorialmente que abarque como mínimo 
todas las zonas de protección y vigilancia que se en­
cuentren dentro de la zona en cuestión; 
— aplicar las medidas previstas en el apartado 3 del ar­
tículo 9 en la «zona de alto riesgo sanitario»; 
— prohibir la salida de toda ave de corral viva y todo 
huevo para incubar de la «zona de alto riesgo sanita­
rio»; 
— informar a la Comisión y a los demás Estados miem­
bros a través del Comité veterinario permanente so­
bre la situación de la enfermedad y las medidas de 
control aplicadas. 
2. Los límites de la «zona de alto riesgo sanitario» po­
drán modificarse eliminando progresivamente las zonas 
de vigilancia. Las disposiciones del apartado 1 dejarán de 
aplicarse cuando se haya suprimido la última zona de vi­
gilancia. 
3. En caso de que persista la situación excepcional-
mente grave, las medidas que deba adoptar el Estado 
miembro afectado, en particular la determinación de la 
«zona de alto riesgo sanitario» y la aplicación de las dis­
posiciones del artículo 17, deberán decidirse con arreglo 
al procedimiento establecido en el artículo 24. 
Artículo 19 
1. Queda prohibido utilizar en la alimentación de las 
aves de corral las aguas grasas procedentes de medios de 
transporte internacionales, tales como buques, vehículos 
terrestres y aeronaves. Estas aguas grasas deberán ser re­
cogidas y destruidas bajo supervisión oficial. 
2. La utilización de aguas grasas distintas de las indi­
cadas en el apañado 1 o de restos de aves de corral en la 
alimentación de las aves de corral únicamente podrá au­
torizarse tras haberlos sometido a un tratamiento térmico 
que garantice la destrucción del virus de la enfermedad 
de Newcastle. 
3. En caso necesario, la Comisión establecerá las nor­
mas de desarrollo del apartado 2, con arreglo al procedi­
miento contemplado en el artículo 24. 
Artículo 20 
1. Cada Estado miembro elaborará un plan de inter­
vención en el que se especificarán las medidas que debe­
rán aplicarse a escala nacional en caso de que se regis­
tren brotes de la enfermedad de Newcastle. 
Este plan deberá permitir el acceso a las instalaciones, 
equipos, personal y cualquier otro material adecuado ne­
cesario para la rápida y eficaz erradicación del brote. 
Deberá contener una indicación precisa de las vacunas 
que cada Estado miembro interesado considera necesa­
rias para una vacunación de urgencia. 2. Los criterios que deberán aplicarse en la elabora­
ción del plan de intervención serán los establecidos en la 
Decisión 91/42/CEE de la Comisión ('), que se aplicará 
mutatis mutandis. 
De conformidad con lo dispuesto en el artículo 24, la 
Comisión podrá modificar o completar los criterios en 
función de las características específicas de la enferme­
dad de Newcastle. 
3. Los planes elaborados con arreglo a los criterios a 
los que se refiere el apartado 2 serán sometidos a la Co­
misión, a más tardar, doce meses después de la entrada 
en vigor del presente Reglamento. 
4. La Comisión examinará los planes para determinar 
si permiten alcanzar el objetivo perseguido y sugerirá a 
los Estados miembros cualquier modificación que sea ne­
cesario introducir para hacer sus planes compatibles con 
los de los demás Estados miembros. 
La Comisión aprobará los planes, eventualmente modifi­
cados, con arreglo al procedimiento establecido en el ar­
tículo 24. 
Con arreglo al mismo procedimiento, los planes podrán 
ser posteriormente modificados o completados para tener 
en cuenta la evolución de la situación. 
Artículo 21 
Los veterinarios especializados de la Comisión podrán, 
en la medida en que sea necesario para garantizar la 
aplicación uniforme del presente Reglamento, realizar 
inspecciones in situ en colaboración con las autoridades 
del Estado miembro de que se trate. La Comisión infor­
mará a los Estados miembros acerca de los resultados de 
la investigación. 
Los Estados miembros en cuyo territorio se esté reali­
zando una inspección prestarán a los expertos la necesa­
ria asistencia para el desempeño de sus funciones. 
Las normas generales de desarrollo del presente artículo 
serán determinadas con arreglo al procedimiento estable­
cido en el artículo 24. 
Artículo 22 
En la Decisión 90/424/CEE se fijan las normas que re­
gulan la participación financiera de la Comunidad en las 
acciones resultantes de la aplicación del presente Regla­
mento. 
Artículo 23 
Los Anexos del presente Reglamento podrán ser modifi­
cados por la Comisión, con arreglo al procedimiento es­
tablecido en el artículo 24, en particular a fin de adap­
tarlo a la evolución de los procedimientos de diagnós­
tico. 
O DO n° L 33 de 29. 1. 1991, p. 29. 
5. 6. 91 Diario Oficial de las Comunidades Europeas N° C 146/19 
Artículo 24 
1. La Comisión estará asistida por el Comité veterina­
rio permanente, en adelante denominado «el Comité». 
2. En caso de que se haga referencia al procedimiento 
establecido en el presente artículo, se aplicarán las dispo­
siciones siguientes: 
El representante de la Comisión someterá al Comité un 
proyecto de las medidas que deban adoptarse. El Comité 
emitirá su dictamen sobre dicho proyecto en un plazo 
que el presidente podrá fijar en función de la urgencia 
del asunto, procediendo, en su caso, a una votación. 
ANEXO I 
PROCEDIMIENTOS PARA LA CONFIRMACIÓN Y DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DE LA 
ENFERMEDAD DE NEWCASTLE 
Los siguientes procedimientos de aislamiento y caracterización de los virus de la enfermedad de Newcastle 
han de considerarse como directrices y constituyen los requisitos mínimos que deben aplicarse en el 
diagnóstico de dicha enfermedad. 
El virus responsable de la enfermedad de Newcastle es la especie tipo de la familia Paramyxoviridae. Hasta 
ahora, existen nueve grupos serológicamente diferenciables de paramixovirus aviarios, que se han denomi­
nado PMV-1 a PMV-9. Todos los virus de la enfermedad de Newcastle se sitúan en el grupo PMV-1. A 
los efectos de los procedimientos de diagnóstico para la confirmación y el diagnóstico diferencial de la 
enfermedad de Newcastle, se empleará la siguiente definición: 
Por enfermedad de Newcastle se entiende una infección de las aves de corral producida por cualquier cepa 
aviaria del paramixovirus 1, con un índice de patogenicidad intracerebral (IPIC) superior a 0,7 en pollitos 
de un día de edad. 
CAPÍTULO 1 
Toma de muestras y tratamiento de las mismas 
1. Muestras 
Hisopos de cloaca (o materias fecales) e hisopos traqueales de aves enfermas; materias fecales o conte­
nido intestinal, tejido cerebral, tráquea, pulmones, hígado, bazo y otros órganos manifiestamente afecta­
dos procedentes de aves recién fallecidas. 
2. Tratamiento de las muestras 
Aunque los órganos y los tejidos arriba mencionados pueden mezclarse, las materias fecales deberán 
tratarse por separado. Se sumergirán completamente los hisopos en una cantidad suficiente de medio 
con antibióticos. A su vez, las muestras de materias fecales y de órganos deberán homogeneizarse (en un 
mezclador cerrado o utilizando un mortero y arena esterilizada) en un medio con antibióticos para 
convertirlas en suspensiones en ese medio al 10-20 % p/v. Posteriormente, esas suspensiones se dejarán 
a temperatura ambiente durante dos horas aproximadamente (o durante más tiempo a una temperatura 
de 4 °C) y se clarificarán por centrifugación (por ejemplo, de 800 a 1 000 x gramo durante 10 minu­
tos). El dictamen se incluirá en el acta; además, cada Estado 
miembro tendrá derecho a solicitar que su posición 
conste en acta. 
La Comisión tendrá en cuenta, en la mayor medida posi­
ble, el dictamen emitido por el Comité. Informará al Co­
mité de la manera en que ha tenido en cuenta dicho dic­
tamen. 
Artículo 25 
El presente Reglamento entrará en vigor el 1 de julio de 
1991. 
El presente Reglamento será obligatorio en todos sus 
elementos y directamente aplicable en cada Estado 
miembro. 
N° C 146/20 Diario Oficial de las Comunidades Europeas 5. 6. 91 
3. Medio con antibióticos 
Diferentes laboratorios han utilizado distintos medios con antibióticos con buenos resultados. En cada 
país, los laboratorios enumerados en el Anexo II podrán asesorar al respecto. Para las muestras de 
materias fecales es necesaria una fuerte concentración de antibióticos; así, una mezcla típica es la si­
guiente: 10 000 unidades/ml de penicilina, 10 mg/ml de estreptomicina, 0,25 mg/ml de gentamicina y 
5 000 unidades/ml de micostatina en una solución salina amortiguadora de fosfato. Estos niveles pueden 
reducirse hasta cinco veces cuando se trabaje con tejidos e hisopos traqueales. Para evitar el crecimiento 
de Chlamydia, pueden añadirse 50 mg/ml de oxitetraciclina. Al elaborar el medio, es imprescindible 
comprobar el pH después de añadir los antibióticos y corregirlo hasta que fluctúe entre 7,0 y 7,4. 
CAPITULO 2 
Aislamiento del virus 
Aislamiento del virus en huevos embrionados de aves de corral 
Deberán inocularse dosis de 0,1 a 0,2 mi del líquido sobrenadante clarificado dentro de la cavidad alantoi-
dea de al menos cuatro huevos embrionados que hayan sido incubados de ocho a diez días. Es preferible 
que los huevos procedan de una manada exenta de patógenos específicos, aunque, si ello no fuera posible, 
podrán utilizarse huevos de una manada exenta de anticuerpos del virus de la enfermedad de Newcastle. 
Los huevos inoculados deberán mantenerse a 37 °C y se examinarán al trasluz diariamente. Los huevos que 
contengan embriones muertos o moribundos serán refrigerados a 4 °C a medida que se vayan compro­
bando. Los demás lo serán a la misma temperatura 6 días después de la inoculación. Los fluidos alantoideos 
o amnióticos se someterán además a la prueba de hemaglutinación. Si la prueba de hemaglutinación resul­
tase negativa, deberá repetirse el procedimiento anterior utilizando fluido alantoideo o amniótico como 
inoculo. 
Cuando la hemaglutinación sea positiva, deberá descartarse la posible presencia de bacterias mediante la 
realización de un cultivo. Si se confirma la presencia de bacterias, podrán filtrarse los fluidos con un filtro 
de membrana de 450 nm, añadirse más antibióticos e inocularse en huevos embrionados como ya se explicó 
anteriormente. 
CAPÍTULO 3 
Diagnóstico diferencial 
1. Diferenciación preliminar 
Todos los virus hemaglutinantes deberán enviarse al laboratorio nacional enumerado en el Anexo II 
para que sean objeto de pruebas de identificación, caracterización y patogenicidad más completas. No 
obstante, como es fundamental que se adopten mientras tanto medidas para limitar la extensión de la 
enfermedad de Newcastle lo antes posible, los laboratorios regionales deberán ser capaces de detectar el 
virus de dicha enfermedad. Por ello, los fluidos hemaglutinantes deberán someterse a las pruebas de 
inhibición de la hemaglutinación descritas en los capítulos 5 y 6. Una inhibición positiva, es decir de 2' o 
más, con antisuero policlonal específico para el virus de la enfermedad de Newcastle (con un título 
conocido de al menos 2') se considerará una identificación preliminar suficiente para imponer medidas 
provisionales para la lucha contra la enfermedad. 
2. Identificación confirmatoria 
El laboratorio nacional deberá efectuar un diagnóstico diferencial completo de todos los agentes hema­
glutinantes. La presencia del virus de la enfermedad de Newcasde volverá a confirmarse por inhibición 
realizando pruebas de inhibición de la hemaglutinación con antisueros de gallina monoespecíficos. Todo 
el material positivo deberá someterse a la prueba del índice de patogenicidad intracerebral con arreglo a 
las directrices del capítulo 7. Los índices de patogenicidad superiores a 0,7 indicarán que la presencia del 
virus exige la aplicación de todas las medidas de lucha contra la enfermedad. 
Gracias a los últimos progresos realizados en materia de tipificación de los virus de la enfermedad de 
Newcastle, especialmente las técnicas de anticuerpos monoclonales, ha sido posible agrupar las cepas y 
microorganismos aislados. Concretamente, se dispone de algunos anticuerpos monoclonales específicos 
para las cepas utilizadas en las vacunas de la Comunidad Europea. Estos anticuerpos pueden emplearse 
en pruebas sencillas de inhibición de la hemaglutinación. Dado que a partir de las aves de corral utiliza­
das como muestra a menudo pueden aislarse vivas las cepas utilizadas en las vacunas, resulta obvia la 
ventaja de que los laboratorios nacionales que figuran en el Anexo II puedan identificarlas con rapidez. 
El laboratorio comunitario de referencia contemplado en el artículo 14 obtendrá esos anticuerpos mo­
noclonales y se los facilitará a los laboratorios nacionales para que puedan confirmar el aislamiento de 
los virus utilizados en las vacunas. 
5.6.91 Diario Oficial de las Comunidades Europeas N°C 146/21 
Los laboratorios nacionales deberán enviar todos los agentes hemaglutinantes al laboratorio comunitario 
de referencia. 
3. Tipificación y caracterización adicional de los virus aislados 
Los laboratorios nacionales enviarán al laboratorio comunitario de referencia todos los virus hemagluti­
nantes y éste, en consonancia con las funciones y cometidos que le han sido asignados, someterá esos 
virus a estudios antigénicos y genéticos adicionales para llegar a un mejor conocimiento de la epizootio-
logía de la enfermedad o enfermedades en la Comunidad Europea. 
CAPÍTULO 4 
Pruebas rápidas para la detección del virus y los anticuerpos de la enfermedad de Newcastle 
A continuación se enumeran las pruebas rápidas para la detección del virus de la enfermedad de Newcastle 
en aves vacunadas y la detección de anticuerpos en aves no vacunadas 
1. Detección del virus de la enfermedad de Newcastle 
Se vienen empleando varias pruebas rápidas para detectar directamente los antigenos de la enfermedad 
de Newcastle en el diagnóstico de infecciones de aves vacunadas; las más extendidas por el momento 
son la prueba con anticuerpos fluorescentes en secciones longitudinales de la tráquea y la prueba con 
anticuerpos de la peroxidasa en el cerebro. No hay motivos para creer que no se pueden aplicar a las 
infecciones por el virus de la enfermedad de Newcastle otras pruebas de detección directa de antígenos, 
pero estas pruebas tienen el inconveniente de que no resulta factible examinar todos los posibles puntos 
de replicación del virus de la enfermedad de Newcastle en las aves vacunadas. Así, la ausencia de 
indicios del virus en la tráquea, por ejemplo, no excluye que éste se replique en el intestino. No se 
recomienda ningún método determinado de detección directa para su uso rutinario, si bien en determi­
nadas circunstancias pueden ser de utilidad. 
2. Detección de anticuerpos en aves no vacunadas 
La mayoría de los laboratorios que efectúan diagnósticos de la enfermedad de Newcastle conocen bien 
la prueba de inhibición de la hemaglutinación. Las recomendaciones que vienen a continuación se refie­
ren a esta prueba para la medición de anticuerpos del virus. No obstante, la prueba de inmunosorción 
con enzimas (ELISA) puede dar buenos resultados cuando se usa para detectar los anticuerpos del virus. 
Se aconseja que, cuando los laboratorios regionales deseen servirse de la prueba ELISA, ésta sea super­
visada por el laboratorio nacional enumerado en el Anexo II. 
a) Muestras 
Deberán tomarse muestras de sangre de todas las aves cuando la manada esté compuesta de menos 
de 20 animales y muestras de 20 aves cuando la manada sea mayor. (De este modo, la probabilidad 
de detectar al menos un suero positivo será > 99 % si el 25 % o más de la manada es positivo, 
independientemente del tamaño de ésta). Deberá dejarse que la sangre se coagule y se extraerá el 
suero para la prueba. 
b) Examen de los anticuerpos 
Se probará la capacidad de las muestras individuales de suero para inhibir el antígeno hemagluti-
nante del virus de la enfermedad de Newcastle en pruebas estándar de inhibición de la hemaglutina­
ción efectuadas de acuerdo con el capítulo 6. 
Como las opiniones difieren en cuanto a la utilización de 4 u 8 unidades de hemaglutinina en la 
prueba de inhibición de la hemaglutinación, y al parecer ambas dosis son válidas, la elección se deja 
al arbitrio de los laboratorios nacionales. 
Téngase en cuenta, sin embargo, que del antígeno utilizado dependerá el nivel en el que un suero 
sea considerado positivo: con 4 unidades de hemaglutinina un suero se considerará positivo cuando 
presente un título superior o igual a 2*; mientras que con 8 unidades el título deberá ser igual o 
superior a 25. 
N°C 146/22 Diario Oficial de las Comunidades Europeas 5.6.91 
CAPÍTULO 5 
Prueba de hemaglutinación (HA) 
1. Reactivos 
a) Solución salina isotónica amortiguadora de fosfato (0,05M) de pH 7,0 a 7,4. 
b) Hematíes extraídos de un mínimo de tres gallinas exentas de patógenos específicos (a falta de éstas, 
podrá utilizarse sangre de aves que hayan estado bajo control regular y que estén exentas de anti­
cuerpos del virus de la enfermedad de Newcastle), reunidos y mezclados a partes iguales con solu­
ción de Alsever. Antes de utilizarlos, los hematíes deberán lavarse tres veces en la solución salina 
isotónica amortiguadora de fosfato (SSIAF). Para la prueba, se recomienda una suspensión en SSIAF 
al 1 % (hematíes empaquetados v/v). 
c) Se recomienda la utilización como antígeno estándar de la cepa de virus de la enfermedad de New­
castle Ulster 2C. 
2. Procedimiento 
a) Distribuir 0,025 mi de SSIAF en cada uno de los pocilios de una placa de microtitulación (utilizar 
pocilios con fondo en V). 
b) Introducir 0,025 mi de suspensión de virus (es decir, fluido alantoideo) en el primer pocilio. 
c) Utilícese una micropipeta para hacer diluciones del virus a la mitad (de 1:2 a 1:4096) en toda la 
placa. 
d) Distribuir otros 0,025 mi de SSIAF en cada pocilio. 
e) Añadir 0,025 mi de una suspensión al 1 % de hematíes a cada pocilio. 
f) Homogeneizar golpeando ligeramente la placa y refrigerarla a 4 °C. 
g) Leer las placas después de 30 o 40 minutos cuando se hayan sedimentado los controles. La lectura se 
efectuará inclinando la placa y observando la presencia o ausencia de un movimiento de los hematíes 
en forma de lágrima. Los pocilios en los que no se haya producido la hemaglutinación deberán 
presentar un movimiento similar al de los pocilios de control que no contengan virus. 
h) El título de hemaglutinación será la mayor dilución que produzca la aglutinación de los hematíes. 
Puede considerarse que tal dilución contiene una unidad de hemaglutinación. Otro método más 
preciso para determinar el título de hemaglutinación consiste en realizar pruebas de hemaglutinación 
con virus en una gama de diluciones iniciales muy cercanas entre sí, por ejemplo, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 
etc. Este método se recomienda para preparar con gran precisión antígenos para las pruebas de 
inhibición de la hemaglutinación (capítulo 6). 
CAPÍTULO 6 
Prueba de inhibición de la hemaglutinación (IH) 
1. Reactivos (veáse capítulo 5) 
a) SSIAF. 
b) Fluido alantoideo que contenga el virus, diluido con SSIAF hasta que contenga 4 u 8 unidades de 
hemaglutinación por cada 0,025 mi. 
c) Suspensión de hematíes de gallina al 1 %. 
d) Suero de gallina de control negativo. 
e) Suero de control positivo. 
5. 6. 91 Diario Oficial de las Comunidades Europeas N° C 146/23 
2. Procedimiento 
a) Distribuir 0,025 mi de SSIAF en cada uno de los pocilios de una placa de microtitulación de plástico 
(utilizar pocilios con fondo en V). 
b) Introducir 0,025 mi de suero en el primer pocilio de la placa. 
c) Utilizar una micropipeta para hacer diluciones a la mitad del suero en toda la placa. 
d) Añadir 0,025 mi de fluido alantoideo diluido que contenga 4 u 8 unidades de hemaglutinación. 
e) Homogeneizar golpeando ligeramente la placa y refrigerarla a 4 °C al menos durante 60 minutos o 
dejarla a temperatura ambiente durante 30 minutos como mínimo. 
f) Añadir 0,025 mi de suspensión de hematíes al 1 % a todos los pocilios. 
g) Homogeneizar golpeando ligeramente las placas y refrigerarlas a 4 °C. 
h) Leer las placas después de 30 a 40 minutos cuando se hayan sedimentado los hematíes de control. La 
lectura se efectuará inclinando las placas y observando la presencia o ausencia de un movimento en 
forma de lágrima similar al de los pocilios de control que contengan hematíes (0,025 mi) y SSIAF 
(0,05 mi) solamente. 
i) El título de inhibición de la hemaglutinación será la mayor dilución del antisuero que produzca una 
inhibición completa de 4 u 8 unidades de virus (en todas las pruebas deberá incluirse una titulación 
de hemaglutinación para confirmar la presencia de las unidades de hemaglutinación necesarias). 
j) La validez de los resultados dependerá de la obtención de un título de menos de V para 4 unidades 
de hemaglutinación o de 22 para 8 unidades de hemaglutinación con el suero de control negativo y 
de un título que esté entre el doble y la mitad (un orden de dilución) del título conocido del suero de 
control positivo. 
CAPÍTULO 7 
Prueba del índice de patogenicidad intracerebral 
1. Diluir a 1:10 fluido alantoideo recién recogido e infeccioso (el título de hemaglutinación deberá ser 
superior a 24) en una solución salina isotónica esterilizada (no podrán utilizarse antibióticos). 
2. Inyectar en el cerebro de cada uno de 10 pollitos de un día de edad (es decir, >24 horas y <40 horas 
después de salir del huevo) 0,05 mi de virus diluido. Los pollitos deberán haber nacido de huevos proce­
dentes de una manada exenta de patógenos específicos. 
3. Examinar las aves cada 24 horas durante 8 días. 
4. Puntuar todas las aves en cada examen: 0 = normal, 1 = enferma y 2 = muerta. 
5. Calcular el índice del siguiente modo: 
Signos clínicos 
normal 
enferma 
muerta Días después de la inoculación 
número de aves 
1 
10 
0 
0 2 
4 
6 
0 3 
0 
10 
0 4 
0 
4 
6 5 
0 
0 
10 6 
0 
0 
10 7 
0 
0 
10 8 
0 
0 
10 Total 
14 @ 0 
20 @ 1 
46 @ 2 
TOTAL Puntuación 
- 0 
- 20 
- 92 
= 112 
El índice será la puntuación media por ave y por observación = 112/80 = 1,4. 
^ 
N° C 146/24 Diario Oficial de las Comunidades Europeas 5.6.91 
CAPÍTULO 8 
Evaluación de la capacidad de formación de placas 
1. Normalmente, lo más conveniente es utilizar una serie de diluciones del virus a fin de obtener un nú­
mero adecuado de placas en el cultivo. Bastará con diluciones decimales hasta llegar a una concentra­
ción de 10"7enSSIAF. 
2. Preparar capas monocelulares confluentes de células de embrión de gallina o una línea celular apropiada 
(por ejemplo, la línea de riñon de bovino de Madin—Darby) en placas de Petri de 5 cm de diámetro. 
3. Introducir 0,2 mi de cada dilución de virus en dos placas de Petri y esperar 30 minutos para que el virus 
se adsorba. 
4. Tras lavar tres veces con SSIAF las células infectadas, se cubrirán con un medio apropiado que contenga 
agar al 1 % p/v (también puede añadirse 0,01 mg/ml de tripsina). Es importante no añadir suero al 
medio de recubrimiento. 
5. Tras 72 horas de incubación a 37 °C las placas habrán alcanzado un tamaño adecuado. Para observar­
las, conviene retirar la capa de agar y teñir la capa monocelular con violeta cristal (0,5 % p/v) en etanol 
al 25 % (v/v). 
6. Todos los virus incubados con tripsina en el medio producirán placas claras. Por el contrario, a falta de 
tripsina, sólo producirán placas los virus que resulten virulentos para las gallinas. 
ANEXO II 
LISTA DE LABORATORIOS NACIONALES PARA EL DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD 
DE NEWCASTLE 
BÉLGICA 
DINAMARCA 
REPÚBLICA FEDERAL DE 
ALEMANIA 
FRANCIA 
GRECIA 
IRLANDA 
ITALIA 
LUXEMBURGO 
PAÍSES BAJOS Instituí national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, 
B-1180 Bruxelles 
National Veterinary Laboratory, Poultry Disease División, 
Hang0vej 2, DK-8200 Árhus N 
Institut für Kleintierzucht der Bundesforschungsanstak für 
Landwirtschaft, Braunschweig-Volkenrode, Postfach 2 80, 
D-W-3100 Celle 
Centre national d'études vétérinaires et alimentation — Labora-
toire central de recherches agricoles et porcine, boíte póstale 53, 
F-22440 Ploufragan 
Institut de maladies infectieuses et parasitaires d'Athénes, 25 rué 
Napoleos, 153 10, Agia Baraskevi, Attiki 
Veterinary Research Laboratory, Abbotstown, Castleknock, 
IRL-Dublin 15 
Istituto zooprofilattico sperimentale di Padova, via G. Orus n. 
2, 1-35100 Padova 
Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, 
B-1180 Bruxelles 
Centraal Diergeneeskundig Instituut, Vestiging Virologie, 
Hourtibweg 39, NL-8221 RA Lelystad 
5. 6. 91 Diario Oficial de las Comunidades Europeas N° C 146/25 
PORTUGAL Laboratorio Nacional de Investigacao Veterinaria (LNIV), Es­
trada de Benfica, 701, P-1500 Lisboa 
ESPAÑA Laboratorio de Sanidad y Producción Animal, Zona Franca, 
Circunvalación — Tramo 6, Esquina Calle 3, E-08004 Barce­
lona 
REINO UNIDO Central Veterinary Laboratory, New Haw, Weybridge, 
UK-Surrey KT15 3NB 
ANEXO III 
NOMBRE DEL LABORATORIO COMUNITARIO DE REFERENCIA PARA LA DETECCIÓN DE 
LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE 
Central Veterinary Laboratory 
New Haw 
Weybridge 
UK-Surrey KT15 3NB