1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 1
Το έγγραφο αυτό συνιστά βοήθηµα τεκµηρίωσης και δεν δεσµεύει τα κοινοτικά όργανα
►B Ο∆ΗΓΙΑ ΤΟΥ ΣΥΜΒΟΥΛΙΟΥ
της 26ης Ιουνίου 1990
σχετικά µε τους όρους υγειονοµικού ελέγχου που διέπουν τη διακίνηση των ιπποειδών και τις
εισαγωγές ιπποειδών προέλευσης τρίτων χωρών
(90/426/ ΕΟΚ)
(ΕΕL 224 της 18.8.1990,σ. 42)
Τροποποιείται από:
Επίσηµη Εφηµερίδα
αριθ. σελίδα ηµεροµηνία
►M1 Οδηγία 90 /425/ ΕΟΚ του Συµβουλίου της 26ης Ιουνίου 1990 L 224 29 18.8.1990
►M2 Οδηγία 91 /496/ ΕΟΚ του Συµβουλίου της 15ης Ιουλίου 1991 L 268 56 24.9.1991
►M3 Απόφαση 92 /130/ ΕΟΚ της Επιτροπής της 13ης Φεβρουαρίου 1992 L 47 26 22.2.1992
►M4 Οδηγία 92/36/ ΕΟΚ του Συµβουλίου της 29ης Απριλίου 1992 L 157 28 10.6.1992
►M5 Απόφαση 2001 /298/ ΕΚ της Επιτροπής της 30ής Μαρτίου 2001 L 102 63 12.4.2001
►M6 Απόφαση 2002 /160/ ΕΚ της Επιτροπής της 21ης Φεβρουαρίου 2002 L 53 37 23.2.2002
►M7 Κανονισµός (ΕΚ) αριθ. 806 /2003 του Συµβουλίου της 14ης Απρι-
λίου 2003L 122 1 16.5.2003
Τροποποιείται από:
►A1 Πράξη προσχώρησης της Αυστρίας,της Φινλανδίας και της Σουη-
δίαςC 241 21 29.8.1994
(όπως προσαρµόστηκε από την απόφαση 95 /1/ΕΚ,Ευρατόµ,ΕΚΑΧ
του Συµβουλίου)L 1 1 1.1.1995
∆ιορθώνεται από:
►C1 ∆ιορθωτικό ΕΕ L 296 της 27.10.1990,σ. 66 (90 /426/ ΕΟΚ)
▼B
Ο∆ΗΓΙΑ ΤΟΥ ΣΥΜΒΟΥΛΙΟΥ
της 26ης Ιουνίου 1990
σχετικά µε τους όρους υγειονοµικού ελέγχου που διέπουν τη
διακίνησητωνιπποειδώνκαιτιςεισαγωγέςιπποειδώνπροέλευσης
τρίτων χωρών
(90/426/ ΕΟΚ)
ΤΟ ΣΥΜΒΟΥΛΙΟ ΤΩΝ ΕΥΡΩΠΑΪΚΩΝ ΚΟΙΝΟΤΗΤΩΝ,
Έχοντας υπόψη:
τη συνθήκη για την ίδρυση της Ευρωπαϊκής Οικονοµικής
Κοινότητας,και ιδίως το άρθρο 43,
την πρόταση της Επιτροπής (1),
τη γνώµη του Ευρωπαϊκού Κοινοβουλίου (2),
τη γνώµη της Οικονοµικής και Κοινωνικής Επιτροπής (3),
Εκτιµώντας:ότι τα ιπποειδή,ως ζώα ζωντανά,περιλαµβάνονται στον
κατάλογο των προϊόντων που απαριθµούνται στο παράρτηµα II
της συνθήκης ·
ότι πρέπει,προκειµένου να εξασφαλισθεί µια ορθολογική
ανάπτυξη της παραγωγής των ιπποειδών και να αυξηθεί κατ '
αυτόν τον τρόπο η παραγωγικότητα του τοµέα αυτού,να καθορι-σθούν,σε κοινοτικό επίπεδο,κανόνες για τη διακίνηση των
ιπποειδών µεταξύ των κρατών µελών ·
ότι η εκτροφή ιπποειδών,ιδίως αλόγων,εντάσσεται γενικά στο
πλαίσιο των γεωργικών δραστηριοτήτων ·ότι αποτελεί πηγή
εσόδων για ένα µέρος του γεωργικού πληθυσµού ·
ότι θα πρέπει να εξαλειφθούν οι διαφορές που υπάρχουν στα
κράτη µέλη σε θέµατα υγειονοµικού ελέγχου προκειµένου να
ενθαρρυνθούν οι ενδοκοινοτικές συναλλαγές ιπποειδών ·
ότι,για να επιτραπεί η αρµονική ανάπτυξη των ενδοκοινοτικών
συναλλαγών,θα πρέπει να καθοριστεί ένα κοινοτικό καθεστώςπου να εφαρµόζεται στις εισαγωγές που προέρχονται από τρίτεςχωρες·
ότι θα πρέπει,όσον αφορά τα εγγεγραµµένα ιπποειδή που έχουν
έγγραφο αναγνώρισης,να θεσπιστούν κανόνες για τους όρουςδιακίνησής τους σε εθνικό επίπεδο ·
ότι,για να συµµετέχουν στις ενδοκοινοτικές συναλλαγές τα
ιπποειδή,πρέπει να πληρούν ορισµένους υγειονοµικούς όρουςπροκειµένου να αποφευχθεί η εξάπλωση µεταδοτικών ασθενειών ·
ότι κρίνεται ειδικότερα,σκόπιµο να προβλεφθεί η εφαρµογή
περιοριστικών µέτρων,ενδεχοµένως,κατά περιφέρειες ·
ότι,µε το ίδιο σκεπτικό,πρέπει επίσης να καθοριστούν οι όροι
σχετικά µε τη µεταφορά ·
ότι,προκειµένου να εξασφαλισθεί η τήρηση των προβλεπόµενων
όρων,κρίνεται σκόπιµο να προβλεφθεί η έκδοση ενός υγειονο-
µικού πιστοποιητικού από έναν επίσηµο κτηνίατρο,το οποίοπροορίζεται να συνοδεύει τα ιπποειδή µέχρι τον τόπο προορι-σµού·
ότι η οργάνωση και η συνέχεια που πρέπει να δίνεται στους
ελέγχους που θα πραγµατοποιήσει το κράτος µέλος προορισµούκαι τα µέτρα διασφάλισης που θα τεθούν σε εφαρµογή,πρέπεινα καθοριστούν στα πλαίσια των κανονιστικών διατάξεων που1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 2
(1)ΕΕ αριθ. C 327 της 30. 12. 1989,σ. 61 .
(2)ΕΕ αριθ. C 149 της 18. 6. 1990.
(3)ΕΕ αριθ. C6 2 της 12. 3. 1990,σ. 46 .
▼B
θα θεσπισθούν για τους κτηνιατρικούς ελέγχους κατά τις ενδο-
κοινοτικές συναλλαγές ζωντανών ζώων µε την προοπτική τηςπραγµατοποίησης της εσωτερικής αγοράς ·
ότι θα πρέπει να προβλεφθεί η δυνατότητα πραγµατοποίησης
ελέγχων από την Επιτροπή ·ότι αυτοί οι έλεγχοι πρέπει να
πραγµατοποιούνται σε συνεργασία µε τις αρµόδιες εθνικέςαρχές·
ότι ο καθορισµός ενός κοινοτικού καθεστώτος,εφαρµοζόµενου
στις εισαγωγές προέλευσης τρίτων χωρών,προϋποθέτει τη
σύνταξη καταλόγου των τρίτων χωρών ή των τµηµάτων τωντρίτων χωρών από τις οποίες µπορούν να εισάγονται τα ιπποειδή ·
ότι η επιλογή των χωρών αυτών πρέπει να βασίζεται σε κριτήρια
γενικής φύσεως,όπως η υγειονοµική κατάσταση των ζώων,ηοργάνωση και οι εξουσίες των κτηνιατρικών υπηρεσιών και η
ισχύουσα υγειονοµική νοµοθεσία ·
ότι,εξάλλου,θα πρέπει να µην επιτρέπονται οι εισαγωγές
ιπποειδών που προέρχονται από µολυσµένες χώρες ή από χώρεςπου έχουν απαλλαγεί εδώ και πολύ µικρό χρονικό διάστηµα απόµεταδοτικές ασθένειες ζώων οι οποίες παρουσιάζουν κίνδυνο γιατο ζωικό κεφάλαιο της Κοινότητας ·ότι το ίδιο ισχύει για τις
εισαγωγές που προέρχονται από τρίτες χώρες στις οποίες διενερ-
γούνται εµβολιασµοί κατά παρόµοιων ασθενειών ·
ότι οι γενικοί όροι που εφαρµόζονται στις εισαγωγές που προέρ-
χονται από τρίτες χώρες πρέπει να συµπληρωθούν µε ειδικούςόρους καθοριζόµενους σε συνάρτηση µε την υγειονοµική
κατάσταση καθεµίας απ 'αυτές·ότι ο τεχνικός χαρακτήρας και
οι διαφορές των κριτηρίων στα οποία πρέπει να βασίζονται οιιδιαίτεροι αυτοί όροι,απαιτούν,για τον καθορισµό τους,τηνπροσφυγή σε µια κοινοτική διαδικασία ευέλικτη και ταχείακατά την οποία θα συνεργάζονται στενά η Επιτροπή και τακράτη µέλη ·
ότι η παρουσίαση,κατά την εισαγωγή ιπποειδών,ενός πιστο-
ποιητικού σύµφωνα µε ένα κοινό υπόδειγµα αποτελεί ένα απότα πλέον αποτελεσµατικά µέσα για την εξακρίβωση της εφαρ-µογής της κοινοτικής ρύθµισης ·ότι η ρύθµιση αυτή δύναται να
περιλαµβάνει ιδιαίτερες διατάξεις που µπορεί να ποικίλλουνανάλογα µε τις τρίτες χώρες και ότι τα υποδείγµατα του πιστο-
ποιητικού πρέπει να συνταχθούν ανάλογα ·
ότι θα πρέπει να ανατεθεί στους πραγµατογνώµονες κτηνιάτρους
της Κοινότητας η εξακρίβωση ιδίως στις τρίτες χώρες,τηςτήρησης των απαιτήσεων της παρούσας οδηγίας ·
ότι ο έλεγχος κατά την εισαγωγή πρέπει να αφορά την καταγωγή
και την υγειονοµική κατάσταση των ιπποειδών ·
ότι οι γενικοί κανόνες για τους ελέγχους που πρέπει να πραγµα-
τοποιούνται κατά την εισαγωγή,πρέπει να καθορίζονται σε έναγενικό πλαίσιο ·
ότι κάθε κράτος µέλος πρέπει να διαθέτει τη δυνατότητα να
απαγορεύει αµέσως τις εισαγωγές από µια τρίτη χώρα,όταν
αυτές είναι δυνατόν να παρουσιάζουν κίνδυνο για την υγεία των
ζώων·ότι,σε µια τέτοια περίπτωση,θα πρέπει µε την επιφύλαξη
των ενδεχοµένων τροποποιήσεων του καταλόγου των χωρών πουεπιτρέπεται να εξάγουν προς την Κοινότητα,να εξασφαλίζεται,χωρίς καθυστέρηση,ο συντονισµός της στάσης των κρατώνµελών έναντι αυτής της τρίτης χώρας ·
ότι οι διατάξεις της παρούσας οδηγίας πρέπει να επανεξετασθούν
στο πλαίσιο της ολοκλήρωσης της εσωτερικής αγοράς ·
ότι θα πρέπει να προβλεφθεί µια διαδικασία που να θεσπίζει µια
στενή και αποτελεσµατική συνεργασία µεταξύ των κρατώνµελών και της Επιτροπής στο πλαίσιο της µόνιµης κτηνιατρικήςεπιτροπής,1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 3
▼B
ΕΞΕ∆ΩΣΕ ΤΗΝ ΠΑΡΟΥΣΑ Ο∆ΗΓΙΑ:
ΚΕΦΑΛΑΙΟ Ι
Γενικές διατάξεις
Άρθρο 1
Η παρούσα οδηγία καθορίζει τους όρους υγειονοµικού ελέγχου
που διέπουν τη διακίνηση ιπποειδών µεταξύ κρατών µελών και
τις εισαγωγές ιπποειδών από τρίτες χώρες.
Άρθρο 2
Για τους σκοπούς της παρούσας οδηγίας,νοούνται ως:
α) εκµετάλλευση: η γεωργική µονάδα,η µονάδα εκπαίδευσης,ο
στάβλος,ή γενικά,κάθε χώρος ή εγκατάσταση όπου συνήθως
διατηρούνται ή εκτρέφονται ιπποειδή,οποιαδήποτε και αν
είναι η χρήση τους ·
β) ιπποειδή: οι κατοικίδιοι ή άγριοι ίπποι —συµπεριλαµβανο-
µένης της ζέβρας —ή όνοι ή τα ζώα που προέρχονται από
τη διασταύρωσή τους ·
γ) εγγεγραµµένα ιπποειδή: τα παντός είδους εγγεγραµµένα
ιπποειδή,όπως ορίζονται στην οδηγία 90 /427/ ΕΟΚ(1),τα
οποία αναγνωρίζονται βάσει εγγράφου αναγνώρισης το οποίοεκδίδεται από την αρχή εκτροφής ή οποιαδήποτε άλλη
αρµόδια αρχή της χώρας καταγωγής του ιπποειδούς,η οποία
διαχειρίζεται το γενεαλογικό βιβλίο ή το µητρώο της φυλήςαυτού του ιπποειδούς,ή οποιοδήποτε διεθνή οργανισµό ήένωση που διαχειρίζεται αγωνιστικούς ίππους ή ίππους ιππο-δροµιών ·
δ) ιπποειδή σφαγής: τα ιπποειδή που προορίζονται να οδηγ-
ηθούν,είτε αµέσως,είτε µέσω αγοράς ή εγκεκριµένου
κέντρου συγκέντρωσης,στο σφαγείο για να σφαγούν ·
ε) ιπποειδή εκτροφής και εκµετάλλευσης: ιπποειδή που δεν
αναφέρονται στα στοιχεία γ) και δ) ·
στ) κράτος µέλος ή τρίτη χώρα απαλλαγµένη από την πανώλη
των ίππων: το κράτος µέλος ή η τρίτη χώρα στο έδαφος τωνοποίων καµία κλινική,ορολογική (σε ανεµβολίαστουςίππους),ή επιδηµιολογική ένδειξη δεν επέτρεψε να διαπιστ-ωθεί η παρουσία πανώλης των ίππων κατά τα δύο τελευταία
έτη και όπου δεν έγινε,κατά τους δώδεκα τελευταίους µήνες,
εµβολιασµός κατά της ασθενείας αυτής ·
ζ) ασθένειες που πρέπει να δηλώνονται υποχρεωτικά: οι ασθέ-
νειες που απαριθµούνται στο παράρτηµα Α ·
η) επίσηµος κτηνίατρος: ο κτηνίατρος που ορίζεται από την
αρµόδια κεντρική αρχή ενός κράτους µέλους ή µιας τρίτηςχώρας·
θ) προσωρινή αποδοχή: το καθεστώς που ισχύει για τα εγγε-
γραµµένα ιπποειδή τα οποία προέρχονται από τρίτη χώρα
και γίνονται δεκτά στο έδαφος της Κοινότητας για χρονικό
διάστηµα µικρότερο από 90 ηµέρες,που καθορίζεται απότην Επιτροπή µε τη διαδικασία του άρθρου 24 σε συνάρτησηµε την υγειονοµική κατάσταση της χώρας καταγωγής.
ΚΕΦΑΛΑΙΟ II
Κανόνες για τη διακίνηση ιπποειδών
Άρθρο 3
Τα κράτη µέλη επιτρέπουν τη διακίνηση εγγεγραµµένων
ιπποειδών στο έδαφός τους και αποστέλλουν στο έδαφος άλλων1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 4
(1)ΕΕ αριθ. L 224 της 18. 8. 1990,σ. 55 .
▼B
κρατών µελών µόνον τα ιπποειδή που πληρούν τις προϋποθέσεις
των άρθρων 4 και 5.
Ωστόσο,οι αρµόδιες αρχές των κρατών µελών προορισµού
µπορούν να παραχωρούν γενικές ή περιορισµένες παρεκκλίσειςγια τις διακινήσεις ιπποειδών,
—που χρησιµοποιούνται για ιππασία ή για να σύρουν άµαξες,
για αθλητικούς ή ψυχαγωγικούς σκοπούς,σε τόπους που
βρίσκονται πλησίον των εσωτερικών συνόρων τηςΚοινότητας,
—που συµµετέχουν σε πολιτιστικές ή άλλες παρόµοιες εκδηλώ-
σεις ή σε δραστηριότητες που οργανώνουν εξουσιοδοτηµένοιπρος τούτο τοπικοί οργανισµοί που βρίσκονται πλησίον τωνεσωτερικών συνόρων της Κοινότητας,
—που προορίζονται αποκλειστικά για προσωρινή βοσκή ή
εργασία πλησίον των εσωτερικών συνόρων της Κοινότητας.
Τα κράτη µέλη που κάνουν χρήση αυτής της ευχέρειας ενηµερώ-
νουν την Επιτροπή σχετικά µε το περιεχόµενο των παρεχόµενωνπαρεκκλίσεων.
Άρθρο 4
1. Τα ιπποειδή δεν πρέπει να παρουσιάζουν κανένα κλινικό
σύµπτωµα ασθένειας κατά την επιθεώρηση. Η επιθεώρηση
πρέπει να πραγµατοποιείται εντός των 48 ωρών που προηγούνταιτης επιβιβάσεως ή της φορτώσεως των ιπποειδών. Ωστόσο,όσοναφορά τα εγγεγραµµένα ιπποειδή,η επιθεώρηση αυτή απαιτείται—µε την επιφύλαξη του άρθρου 6 —µόνο για τις ενδοκοινοτικές
συναλλαγές.
2. Με την επιφύλαξη των απαιτήσεων που προβλέπονται στην
παράγραφο 5 για τις ασθένειες που πρέπει να δηλώνονται υποχ-ρεωτικά,ο επίσηµος κτηνίατρος πρέπει,κατά την επιθεώρηση,να βεβαιώνεται ότι δεν υπάρχει κανένα στοιχείο —ιδίως βάσει
των δηλώσεων του ιδιοκτήτη ή του εκτροφέα —που να οδηγεί
στο συµπέρασµα ότι τα ιπποειδή έχουν έλθει σε επαφή µε άλλα
ιπποειδή προσβεβληµένα από µόλυνση ή µεταδοτική ασθένειακατά τη διάρκεια των τελευταίων ηµερών πριν από τηνεπιθεώρηση.
3. Τα ιπποειδή δεν πρέπει να προορίζονται για θανάτωση στα
πλαίσια ενός προγράµµατος εξάλειψης µιας µεταδοτικής ασθέ-
νειας το οποίο εφαρµόζεται σε ένα κράτος µέλος.
4. Τα ιπποειδή πρέπει να αποτελούν αντικείµενο αναγνώρισης,
η οποία πρέπει να γίνεται:
i)για τους εγγεγραµµένους ίππους,µέσω εγγράφου αναγνώ-
ρισης,όπως προβλέπεται στην οδηγία 90 /427/ ΕΟΚ(
1),στο
οποίο πρέπει ιδίως να πιστοποιείται η τήρηση τωνπαραγράφων 5 και 6 του άρθρου 5. Η ισχύς του εγγράφουαυτού πρέπει να αναστέλλεται από τον επίσηµο κτηνίατρο
κατά τη διάρκεια των απαγορεύσεων που προβλέπονται στην
παράγραφο 5 ή στο άρθρο 5. Μετά τη σφαγή του εγγεγραµ-µένου ίππου,επιστρέφεται στην αρχή που το έχει εκδώσει.Οι λεπτοµέρειες εφαρµογής του παρόντος σηµείου θα θεσπι-στούν από την Επιτροπή σύµφωνα µε τη διαδικασία τουάρθρου 24,
ii)για τα ιπποειδή εκτροφής και εκµετάλλευσης,µε µια µέθοδο
αναγνώρισης που θα ορίσει η Επιτροπή,µε τη διαδικασία
του άρθρου 24.
Μέχρι να τεθεί σε εφαρµογή η µέθοδος αυτή,εξακολουθούν
να εφαρµόζονται οι επισήµως εγκεκριµένες εθνικές µέθοδοιαναγνώρισης,εφόσον έχουν κοινοποιηθεί στην Επιτροπή καιστα λοιπά κράτη µέλη,εντός τριών µηνών από τηνηµεροµηνία εκδόσεως της παρούσας οδηγίας.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 5
(1)ΕΕ αριθ. L 224 της 18. 8. 1990,σ. 55 .
▼B
5. Επιπλέον της απαιτήσεως που προβλέπεται στο άρθρο 5,τα
ιπποειδή δεν πρέπει να προέρχονται από εκµετάλλευση στηνοποία έχει επιβληθεί κάποιο από τα ακόλουθα απαγορευτικά
µέτρα:
α) εάν δεν έχουν σφαγεί ή θανατωθεί όλα τα ευρισκόµενα στην
εκµετάλλευση ζώα των ευαίσθητων στην ασθένεια ειδών,ηδιάρκεια της απαγόρευσης που ισχύει για την εκµετάλλευση
προελεύσεως πρέπει να είναι τουλάχιστον ίση:
—στην περίπτωση ιπποειδών για τα οποία υπάρχουν
υπόνοιες ότι έχουν προσβληθεί από δουρίνη,µε έξι µήνες
από την ηµέρα της τελευταίας επαφής ή της πιθανότητας
επαφής µε ασθενές ιπποειδές. Ωστόσο,εάν πρόκειται γιαεπιβήτορα,η απαγόρευση πρέπει να ισχύει µέχρι τονευνουχισµό του,
—στην περίπτωση µάλιος και εγκεφαλοµυελίτιδας των
ίππων,µε έξι µήνες από την ηµέρα κατά την οποία θανα-
τώθηκαν τα προσβληθέντα ιπποειδή,
—σε περίπτωση µολυσµατικής αναιµίας,µε το χρονικό
διάστηµα που είναι απαραίτητο ώστε,από την ηµεροµηνίακατά την οποία έχουν θανατωθεί τα προσβληθένταιπποειδή,τα υπόλοιπα ζώα να έχουν υποβληθεί καιαντιδράσει αρνητικά σε δύο δοκιµές Coggins µε τη
µεσολάβηση τριµήνου µεταξύ πρώτης και δεύτερης
δοκιµής,
—µε έξι µήνες από το τελευταίο κρούσµα φυσαλιδώδους
στοµατίτιδας,
—µε ένα µήνα από το τελευταίο διαπιστωθέν κρούσµα
λύσσας,
—µε 15 ηµέρες από το τελευταίο διαπιστωθέν κρούσµα
βακτηριακού άνθρακα ·
β) εάν όλα τα ευρισκόµενα στην εκµετάλλευση ζώα των ευαί-
σθητων στην ασθένεια ειδών έχουν σφαγεί ή θανατωθεί και
οι εγκαταστάσεις έχουν απολυµανθεί,η διάρκεια της απαγό-ρευσης είναι 30 ηµέρες από την ηµέρα κατά την οποίαθανατώθηκαν τα ζώα και απολυµάνθηκαν οι εγκαταστάσεις,εκτός από την περίπτωση του βακτηριακού άνθρακα για τον
οποίο η διάρκεια απαγόρευσης είναι 15 ηµέρες.
Οι αρµόδιες αρχές µπορούν να παρεκκλίνουν από αυτά τα µέτρα
απαγόρευσης όσον αφορά τα ιπποδρόµια και τους αγωνιστικούςχώρους και ενηµερώνουν την Επιτροπή για τη φύση των παρεκ-κλίσεων που εγκρίνουν.
6. Στην περίπτωση που κράτος µέλος θεσπίζει ή έχει θεσπίσει
προαιρετικό ή υποχρεωτικό πρόγραµµα καταπολέµησης µιαςασθένειας στην οποία είναι εκτεθειµένα τα ιπποειδή,µπορεί ναυποβάλει,εντός έξι µηνών από της κοινοποιήσεως της οδηγίας,στην Επιτροπή το πρόγραµµα αυτό,αναφέροντας ιδίως:
—την κατάσταση της ασθενείας στο έδαφός του,
—τους λόγους που δικαιολογούν το πρόγραµµα,λαµβανοµένης
υπόψη της σοβαρότητας της ασθενείας και των πλεο-
νεκτηµάτων του προγράµµατος όσον αφορά τη σχέση
κόστους /οφελών,
—τη γεωγραφική ζώνη στην οποία πρόκειται να εφαρµοσθεί το
πρόγραµµα,
—τα διάφορα καθεστώτα που εφαρµόζονται στις εγκαταστάσεις
και τις απαιτήσεις που πρέπει να πληροί κάθε είδος καθώς
και τις διαδικασίες που ακολουθούνται κατά τις δοκιµές,
—τις διαδικασίες ελέγχου του προγράµµατος,
—τις συνέπειες από την απώλεια του καθεστώτος της εκµετάλ-
λευσης για οποιονδήποτε λόγο,
—τα µέτρα που πρέπει να λαµβάνονται αν διαπιστωθούν θετικά
αποτελέσµατα κατά τη διάρκεια ελέγχων που διενεργούνταισύµφωνα µε το πρόγραµµα,1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 6
▼B
—την ίση µεταχείριση των συναλλαγών που πραγµατοποιούνται
στο έδαφος του ενδιαφερόµενου κράτους µέλους και τωνενδοκοινοτικών συναλλαγών.
Η Επιτροπή εξετάζει τα προγράµµατα που της κοινοποιούν τα
κράτη µέλη. Τα εγκρίνει,ενδεχοµένως,τηρώντας τα κριτήρια
που προβλέπονται στο πρώτο εδάφιο σύµφωνα µε τη διαδικασία
του άρθρου 24. Με την ίδια διαδικασία µπορούν να προσδιορι-σθούν οι γενικές ή περιορισµένες συµπληρωµατικές εγγυήσειςπου είναι δυνατό να απαιτηθούν στις ενδοκοινοτικές συναλλαγές.Οι εγγυήσεις αυτές δεν επιτρέπεται να υπερβαίνουν τις εγγυή-
σεις που απαιτεί το κράτος µέλος σε εθνικά πλαίσια.
Τα προγράµµατα που υποβάλλονται από τα κράτη µέλη µπορούν
να τροποποιηθούν ή να συµπληρωθούν µε τη διαδικασία που
προβλέπεται στο άρθρο 25. Με την ίδια διαδικασία µπορεί ναεγκριθεί τροποποίηση ή συµπλήρωση προγράµµατος το οποίοέχει ήδη εγκριθεί και εγγυήσεων που έχουν προσδιορισθείσύµφωνα µε το δεύτερο εδάφιο.
Άρθρο 5
1. Τα κράτη µέλη που δεν είναι απαλλαγµένα από την πανώλη
των ίππων,κατά την έννοια του άρθρου 2 στοιχείο στ),µπορούννα αποστέλλουν ιπποειδή από το τµήµα του εδάφους τους τοοποίο θεωρείται ως µολυσµένο κατά την έννοια της παραγράφου2 του παρόντος άρθρου µόνον υπό τους όρους που καθορίζονται
στην παράγραφο 3 του παρόντος άρθρου.
2.α) Ένα τµήµα του εδάφους κράτους µέλους θεωρείται µολυ-
σµένο από την πανώλη των ίππων εάν:
—κατά τη διάρκεια των δύο τελευταίων ετών διαπι-
στώθηκε πανώλη των ίππων βάσει κλινικών,ορολογικών (σε ανεµβολίαστα ζώα) ή /και επιδηµιολο-
γικών ενδείξεων ή
—διενεργείται εµβολιασµός κατά της πανώλης των ίππων
κατά τους δώδεκα τελευταίους µήνες ·
β) το τµήµα του εδάφους το οποίο θεωρείται µολυσµένο από
την πανώλη των ίππων πρέπει να αποτελείται τουλάχιστον:
—από µία ζώνη προστασίας,ακτίνας τουλάχιστον 100
χιλιοµέτρων γύρω από κάθε εστία,
—από µία ζώνη επιήρησης η οποία εκτείνεται σε βάθος
τουλάχιστον 50 χιλιοµέτρων πέρα από τα όρια τηςζώνης προστασίας και στην οποία δεν έχει διενεργηθείκανένας εµβολιασµός κατά τη διάρκεια του τελευταίουδωδεκαµήνου ·
γ) οι κανόνες ελέγχου των µέτρων καταπολέµησης στα εδάφη
και ζώνες που αναφέρονται στα στοιχεία α) και β) καθώς
και οι σχετικές παρεκκλίσεις,ορίζονται στην οδηγία 92 /
35/ΕΟΚ(
1)·
δ) κάθε ιπποειδές που βρίσκεται στη ζώνη προστασίας πρέπει
να εγγράφεται και να προσδιορίζεται η ταυτότητά του,
σύµφωνα µε το άρθρο 6 παράγραφος 1 της οδηγίας 92 /35/
ΕΟΚ.
Στο έγγραφο αναγνώρισης ή /και το υγειονοµικό πιστοποιη-
τικό πρέπει να γίνεται σαφής µνεία του εν λόγωεµβολιασµού.
3. Ένα κράτος µέλος µπορεί να αποστέλλει από το έδαφος που
αναφέρεται στο στοιχείο β) της παραγράφου 2 µόνον τα ιπποειδήπου πληρούν τις ακόλουθες απαιτήσεις:
α) αποστέλλονται µόνον κατά τη διάρκεια ορισµένων περιόδων
του έτους,ανάλογα µε τη δραστηριότητα των εντόµων -1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 7
(1)ΕΕ αριθ. L 157 της 10. 6. 1992,σ. 19 .▼M4
▼M4
φορέων. Η περίοδος αυτή ορίζεται µε τη διαδικασία του
άρθρου 25 ·
β) δεν παρουσιάζουν κανένα κλινικό σύµπτωµα πανώλης των
ίππων κατά την ηµέρα της επιθεώρησης που αναφέρεται στο
άρθρο 4 παράγραφος 1 ·
γ)—εάν δεν έχουν εµβολιασθεί κατά της πανώλης των ίππων,
πρέπει να έχουν εµφανίσει αρνητική αντίδραση σε δύοδοκιµές σύνδεσης του συµπληρώµατος για την πανώλητων ίππων όπως περιγράφεται στο παράρτηµα ∆,οι οποίεςδιενεργούνται σε διάστηµα 21 έως 30 ηµερών και εκ τωνοποίων η δεύτερη έχει διενεργηθεί δέκα το πολύ ηµέρες
πριν από την αποστολή,
—αν έχουν εµβολιασθεί,αυτό δεν πρέπει να έχει συµβεί
κατά το τελευταίο δίµηνο,και πρέπει να έχουν υποβληθείστη δοκιµή σύνδεσης που περιγράφεται στο παράρτηµα ∆,στα πραναφερόµενα διαστήµατα,χωρίς να διαπιστωθεί
αύξηση των αντισωµάτων. Η Επιτροπή µπορεί να αναγνω-
ρίσει και άλλες µεθόδους ελέγχου,µε τη διαδικασία πουπροβλέπεται στο άρθρο 24 και αφού λάβει τη γνώµη τηςκτηνιατρικής επιστηµονικής επιτροπής ·
δ) έχουν διατηρηθεί σε σταθµό αποµόνωσης επί 40 τουλάχιστον
ηµέρες πριν από την αποστολή ·
ε) ήταν προστατευµένα από τα έντοµα -φορείς κατά την περίοδο
της αποµόνωσης και κατά τη µεταφορά από το σταθµό
αποµόνωσης προς τον τόπο αποστολής.
Άρθρο 6
Τα κράτη µέλη που εφαρµόζουν εναλλακτικό καθεστώς ελέγχου
το οποίο προσφέρει εναλλακτικές εγγυήσεις ισοδύναµες προς τιςπροβλεπόµενες στο άρθρο 4 σηµείο 5 για τη διακίνηση
ιπποειδών και εγγεγραµµένων ιπποειδών στο έδαφός τους,ιδίως
µέσω του εγγράφου ταυτότητας,µπορούν να χορηγούν,υπό τονορο της αµοιβαιότητας,παρέκκλιση από το άρθρο 4 παράγραφος1 δεύτερη φράση και από το άρθρο 8 παράγραφος 1 δεύτερηπερίπτωση.
Ενηµερώνουν σχετικά την Επιτροπή.
Άρθρο 7
1. Τα ιπποειδή πρέπει να οδηγούνται,το συντοµότερον
δυνατόν,από την εκµετάλλευση προελεύσεως είτε κατευθείανείτε µέσω εγκεκριµένης αγοράς ή κέντρου συγκέντρωσης,όπωςορίζεται στο άρθρο 3 παράγραφος 6 της οδηγίας 64 /432/ ΕΟΚ,
στον τόπο προορισµού,µε µέσα µεταφοράς και προσδέσεως τα
οποία καθαρίζονται και απολυµαίνονται τακτικά µε απολυµαντικόκαι µε συχνότητα που καθορίζεται από το κράτος µέλοςαποστολής. Τα µεταφορικά οχήµατα πρέπει να είναι διαρρυθµι-σµένα κατά τρόπο ώστε η κόπρος,η στρωµνή ή η χορτονοµήτων ιπποειδών να µην είναι δυνατόν να χυθεί ή να πέσει εκτός
του οχήµατος κατά τη µεταφορά. Η µεταφορά πρέπει να πραγµα-
τοποιείται κατά τρόπο ώστε να εξασφαλίζεται αποτελεσµατικά ηυγειονοµική προστασία και η ευζωία των ιπποειδών.
2. Το κράτος µέλος προορισµού µπορεί,κατά γενικό ή περιο-
ρισµένο τρόπο,να χορηγεί παρέκκλιση από ορισµένεςαπαιτήσεις του άρθρου 4 παράγραφος 5,µόνον εφόσον το ζώοείναι εφοδιασµένο µε ειδικό σήµα µε το οποίο διευκρινίζεταιότι προορίζεται για σφαγή και εφόσον το υγειονοµικό πιστο-ποιητικό περιέχει µνεία της παρέκκλισης αυτής.
Στην περίπτωση αυτή,τα ιπποειδή σφαγής πρέπει να οδηγούνται
απευθείας στο οριζόµενο σφαγείο προκειµένου να σφαγούν εντόςχρονικού διαστήµατος που δεν υπερβαίνει τις πέντε ηµέρες απότην άφιξη στο σφαγείο.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 8
▼B
▼B
3. Ο επίσηµος κτηνίατρος µπορεί να καταχωρεί σε µητρωο τον
αριθµό ταυτότητας ή τον αριθµό του εγγράφου αναγνώρισης τουσφαζόµενου ιπποειδούς και να διαβιβάζει στην αρµόδια αρχή του
τόπου αποστολής,εφόσον το ζητήσει,µια βεβαίωση µε την
οποία πιστοποιείται η σφαγή του συγκεκριµένου ιπποειδούς.
Άρθρο 8
1. Τα κράτη µέλη µεριµνούν ώστε:
—όταν εξέρχονται από την εκµετάλλευση,τα εγγεγραµµένα
ιπποειδή πρέπει να συνοδεύονται από το έγγραφο αναγνώ-
ρισης που προβλέπεται στο άρθρο 4 παράγραφος 4,και,εάνπροορίζονται για τις ενδοκοινοτικές ανταλλαγές,από τοδιαβατήριο αυτό,µαζί µε τη βεβαίωση που προβλέπεται στοπαράρτηµα Β,
—τα ιπποειδή εκτροφής,εκµετάλλευσης και σφαγής να συνο-
δεύονται κατά τη µεταφορά τους από υγειονοµικόπιστοποιητικό σύµφωνο µε το παράρτηµα Γ της παρούσας
οδηγίας.
Το πιστοποιητικό ή,στην περίπτωση διαβατηρίου,το φύλλο στο
οποίο περιέχονται οι υγειονοµικές πληροφορίες,πρέπει µε τηνεπιφύλαξη του άρθρου 6 να έχουν συνταχθεί,48 ώρες ή,το αργό-τερο,την τελευταία εργάσιµη ηµέρα πριν από τη φόρτωση,στηνή στις επίσηµες γλώσσες του κράτους µέλους αποστολής και
προορισµού. Η διάρκεια ισχύος του πιστοποιητικού είναι δέκα
ηµέρες. Το πιστοποιητικό αυτό πρέπει να αποτελείται από έναµόνο φύλλο.
2. Αντί του ατοµικού πιστοποιητικού που αναφέρεται στη
παράγραφο 1 δεύτερη περίπτωση,οι εισαγωγές ιπποειδών,πληντων εγγεγραµµένων,µπορούν να πραγµατοποιούνται υπό την
κάλυψη ενός µόνον υγειονοµικού πιστοποιητικού ανά παρτίδα.
Άρθρο 9
Οι κανόνες οι προβλεπόµενοι από την οδηγία 90 /425/ ΕΟΚ του
Συµβουλίου της 26ης Ιουνίου 1990 σχετικά µε τους κτηνιατρικούςελέγχους που εφαρµόζονται στο ενδοκοινοτικό εµπόριοορισµένων ζώντων ζώων και προϊόντων µε προοπτική την
υλοποίηση της εσωτερικής αγοράς (
1),εφαρµόζονται,ιδίως,
όσον αφορά τους ελέγχους στον τόπο καταγωγής,τη διοργάνωσηκαι τις συνέπειες των ελέγχων που πρέπει να πραγµατοποιεί ηχώρα προορισµού καθώς και τα ληπτέα µέτρα διασφάλισης.
Άρθρο 10
Οι πραγµατογνώµονες κτηνίατροι της Επιτροπής µπορούν,
εφόσον αυτό είναι απαραίτητο για την ενιαία εφαρµογή της
παρούσας οδηγίας και σε συνεργασία µε τις αρµόδιες εθνικέςαρχές,να πραγµατοποιούν ελέγχους επιτόπου. Η Επιτροπήπληροφορεί τα κράτη µέλη για τα αποτελέσµατα των ελέγχωνπου πραγµατοποιούνται.
Το κράτος µέλος στο έδαφος του οποίου πραγµατοποιείται
έλεγχος προσφέρει κάθε δυνατή βοήθεια στους πραγµατογνώ-
µονες για την εκπλήρωση της αποστολής τους.
Οι λεπτοµέρειες εφαρµογής του παρόντος άρθρου καθορίζονται
µε τη διαδικασία του άρθρου 24. Με την ίδια διαδικασία καταρτί-ζεται ένας κώδικας των κανόνων που πρέπει να ακολουθούνταικατά την επιθεώρηση που προβλέπεται στο παρόν άρθρο.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 9
(1)ΕΕ αριθ. L 224 της 18. 8. 1990,σ. 29 .▼M1
▼B
▼B
ΚΕΦΑΛΑΙΟ III
Κανόνες για τις εισαγωγές από τρίτες χώρες
Άρθρο 11
1. Τα ιπποειδή που εισάγονται στην Κοινότητα πρέπει να
πληρούν τους όρους που αναφέρονται στα άρθρα 12 έως 16.
2. Μέχρι την ηµεροµηνία ενάρξεως ισχύος των σχετικών
αποφάσεων που εκδίδονται κατ 'εφαρµογή των άρθρων 12 έως
16,τα κράτη µέλη εφαρµόζουν στις εισαγωγές ιπποειδών απότρίτες χώρες όρους τουλάχιστον αντίστοιχους προς εκείνουςπου προκύπτουν από την εφαρµογή του κεφαλαίου II.
Άρθρο 12
1. Για να µπορούν να εισαχθούν τα ιπποειδή πρέπει να προέρ-
χονται από τρίτες χώρες ή τµήµατα τρίτων χωρών πουπεριλαµβάνονται σε κατάλογο που θα περιληφθεί σε ειδική
στήλη η οποία θα προστεθεί στον κατάλογο που θα καταρτιστεί
σύµφωνα µε το άρθρο 3 της οδηγίας 72 /462/ ΕΟΚ.
2. Για τον κατάλογο που ισχύει για τις εισαγωγές ιπποειδών
εφαρµόζονται οι διαδικασίες και τα κριτήρια για την κατάρτιση,την τροποποίηση και τη δηµοσίευση του καταλόγου των τρίτων
χωρών ή τµηµάτων τρίτων χωρών που προβλέπονται στο άρθρο
3 της οδηγίας 72 /462/ ΕΟΚ.
Άρθρο 13
1. Τα ιπποειδή πρέπει να προέρχονται από τρίτη χώρα:
α) απαλλαγµένη από την πανώλη των ίππων ·
β) απαλλαγµένη,επί διετία,από τη βενεζουελανή εγκεφαλοµυε-
λίτιδα των ίππων ( VEE)·
γ) απαλλαγµένη,επί εξάµηνο,από τη δουρίνη και τη µάλι των
ίππων.
2. Η Επιτροπή µπορεί,µε τη διαδικασία του άρθρου 24:
α) να αποφασίζει ότι η παράγραφος 1 εφαρµόζεται µόνον σε ένα
τµήµα του εδάφους τρίτης χώρας.
Σε περίπτωση διαφοροποίησης των απαιτήσεων για την
πανώλη των ίππων ανά περιοχή,πρέπει τουλάχιστον να
τηρούνται τα µέτρα που προβλέπονται στο άρθρο 5παράγραφοι 2 και 3 ·
β) να απαιτεί πρόσθετες εγγυήσεις για τις εξωτικές ασθένειες
στην Κοινότητα.
Άρθρο 14
Πριν από την ηµέρα της φόρτωσής τους,ενόψει της αποστολής
τους προς το κράτος µέλος προορισµού,τα ιπποειδή πρέπει,ναέχουν παραµείνει χωρίς διακοπή στο έδαφος ή τµήµα τουεδάφους τρίτης χώρας ή,σε περίπτωση διαφοροποίησης τωναπαιτήσεων ανά περιοχή,στο τµήµα του εδάφους που ορίζεταικατ'εφαρµογή του άρθρου 13 παράγραφος 2 στοιχείο α),επί µια
περίοδο που θα καθορισθεί κατά την έγκριση των αποφάσεων
που θα θεσπισθούν κατ 'εφαρµογή του άρθρου 15.
Πρέπει να προέρχονται από περιοχή που έχει υπαχθεί σε υγειο-
νοµικό έλεγχο.
Άρθρο 15
1. Η εισαγωγή ιπποειδών από το έδαφος τρίτης χώρας ή από
τµήµα εδάφους τρίτης χώρας,οριζόµενο κατ 'εφαρµογή του
άρθρου 13 παράγραφος 2 στοιχείο α) που περιλαµβάνεται στονκατάλογο ο οποίος καταρτίζεται σύµφωνα µε το άρθρο 121990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 10
▼B
παράγραφος 1,επιτρέπεται µόνον εφόσον τα ιπποειδή,πέραν των
απαιτήσεων που προβλέπονται στο άρθρο 13:
α) πληρούν και τους υγειονοµικούς όρους που θεσπίζονται,µε τη
διαδικασία του άρθρου 24,για τις εισαγωγές ιπποειδών από τηχώρα αυτή σε συνάρτηση µε το συγκεκριµένο είδος και τιςκατηγορίες ιπποειδών.
Βάση αναφοράς για τον καθορισµό των όρων υγειονοµικού
ελέγχου,σύµφωνα µε το πρώτο εδάφιο,αποτελούν οι κανόνες
των άρθρων 4 και 5 και
β) όταν πρόκειται για τρίτες χώρες µη απαλλαγµένες τουλάχι-
στον επί εξάµηνο από τη φυσαλιδώδη στοµατίτιδα ή την
ιογενή αρτηρίτιδα,τα ιπποειδή πληρούν τις ακόλουθες απαι-τήσεις:
i)τα ιπποειδή πρέπει να προέρχονται από εκµετάλλευση
απαλλαγµένη τουλάχιστον επί εξάµηνο από τη φυσαλιδώδηστοµατίτιδα και να έχουν αντιδράσει αρνητικά στηνορολογική ανίχνευση πριν από την αποστολή τους,
ii)για τον ιό των αρτηριών,τα αρσενικά ιπποειδή πρέπει —
ανεξάρτητα από το άρθρο 19 σηµείο ii)— να έχουν
αντιδράσει αρνητικά στην ορολογική ανίχνευση ή σε ιόαποµόνωσης ή σε οποιαδήποτε άλλη δοκιµασία σύµφωναµε τη διαδικασία του άρθρου 24 η οποία εγγυάται ότι το
ζώο είναι απαλλαγµένο από την ασθένεια αυτή.
Η Επιτροπή,σύµφωνα µε τη διαδικασία του άρθρου 24 και
έπειτα από γνωµοδότηση της επιστηµονικής κτηνιατρικήςεπιτροπής,µπορεί να περιορίζει τις κατηγορίες αρσενικώνιπποειδών στις οποίες θα εφαρµόζεται η απαίτηση αυτή.
Άρθρο 16
1. Τα ιπποειδή πρέπει να αναγνωρίζονται σύµφωνα µε το
άρθρο 4 παράγραφος 4 και να συνοδεύονται από πιστοποιητικόπου έχει συνταχθεί από έναν επίσηµο κτηνίατρο της τρίτης
χώρας εξαγωγής. Το πιστοποιητικό πρέπει:
α) να εκδίδεται την ηµέρα της φορτώσεως των ιπποειδών
ενόψει της αποστολής τους προς το κράτος µέλος προορι-σµού ή,όταν πρόκειται για εγγεγραµµένους ίππους,την
τελευταία εργάσιµη ηµέρα πριν από την επιβίβαση ·
β) να συντάσσεται τουλάχιστον σε µία από τις επίσηµες
γλώσσες του κράτους µέλους προορισµού και σε µια επίσηµηγλώσσα του κράτους µέλους στο οποίο διενεργείται οέλεγχος κατά την εισαγωγή ·
γ) να συνοδεύει τα ιπποειδή στο πρωτότυπο ·
δ) να βεβαιώνει ότι τα ιπποειδή πληρούν τους όρους που
προβλέπονται από την παρούσα οδηγία και τους όρους πουκαθορίζονται κατ 'εφαρµογή της για την εισαγωγή από την
τρίτη χώρα ·
ε) να αποτελείται από ένα µόνο φύλλο ·
στ) να προορίζεται για ένα µόνο παραλήπτη ή,στην περίπτωση
ιπποειδών σφαγής,να αφορά µια παρτίδα η οποία πρέπει ναφέρει κατάλληλο σήµα και κατάλληλα αναγνωριστικά
σήµατα.
Τα κράτη µέλη ενηµερώνουν την Επιτροπή όταν κάνουν
χρήση αυτής της δυνατότητας.
2. Το πιστοποιητικό αυτό συντάσσεται επί εντύπου συµφώνου
προς υπόδειγµα που καταρτίζεται µε τη διαδικασία του άρθρου24.
Άρθρο 17
Έλεγχοι διενεργούνται επιτόπου από πραγµατογνώµονες κτηνιά-
τρους των κρατών µελών και της Επιτροπής,για να εξακριβωθεί1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 11
▼B
αν οι διατάξεις της οδηγίας αυτής,και ιδίως εκείνες του άρθρου
12 παράγραφος 2 εφαρµόζονται αποτελεσµατικά.
Εάν κατά τη διενέργεια ενός ελέγχου δυνάµει του παρόντος
άρθρου,αποκαλυφθούν σοβαρά στοιχεία σε βάρος µιας εκµετάλ-
λευσης,η Επιτροπή ενηµερώνει αµέσως τα κράτη µέλη σχετικά
και εκδίδει αµέσως απόφαση για την προσωρινή αναστολή τηςέγκρισης. Τελική απόφαση λαµβάνεται σύµφωνα µε τη διαδι-κασία του άρθρου 25.
Οι πραγµατογνώµονες των κρατών µελών που επιφορτίζονται µε
τους ελέγχους αυτούς ορίζονται από την Επιτροπή µετά απόπρόταση των κρατών µελών.
Οι έλεγχοι αυτοί διενεργούνται για λογαριασµό της Κοινότητας,
η οποία αναλαµβάνει τα αντίστοιχα έξοδα.
Η περιοδικότητα και οι λεπτοµέρειες των ελέγχων αυτών καθο-
ρίζονται σύµφωνα µε τη διαδικασία που αναφέρεται στο άρθρο24.
Άρθρο 18
1. Αµέσως µετά την άφιξή τους στο κράτος µέλος προορισµού,
τα ιπποειδή σφαγής πρέπει να οδηγούνται σε σφαγείο είτεαπευθείας,είτε αφού περάσουν από αγορά ή κέντρο
συγκέντρωσης και,σύµφωνα µε τις απαιτήσεις του υγειονοµικού
ελέγχου,να σφάζονται εντός προθεσµίας που θα καθορισθεί κατάτην έγκριση των αποφάσεων που θα θεσπισθούν κατ 'εφαρµογή
του άρθρου 15.
2. Με την επιφύλαξη των ειδικών όρων που ενδεχοµένως
καθορίζονται µε την διαδικασία του άρθρου 24,η αρµόδια αρχήτου κράτους µέλους προορισµού δύναται,λόγω των απαιτήσεωντου υγειονοµικού ελέγχου,να ορίζει το σφαγείο στο οποίο
πρέπει να µεταφέρονται τα ιπποειδή αυτά.
Άρθρο 19
Με τη διαδικασία του άρθρου 24,η Επιτροπή:
i)µπορεί να περιορίσει τις εισαγωγές από τρίτη χώρα ή τµήµα
τρίτης χώρας σε συγκεκριµένα είδη ή συγκεκριµένες κατηγο-
ρίες ιπποειδών,
ii)κατά παρέκκλιση του άρθρου 15,καθορίζει τους ειδικούς
όρους υπό τους οποίους µπορεί να πραγµατοποιείται η
προσωρινή εισαγωγή στο έδαφος της Κοινότητας ή η επανει-σαγωγή,στο εν λόγω έδαφος,µετά από προσωρινή εξαγωγήεγγεγραµµένων ιπποειδών ή ιπποειδών που προορίζονται γιαειδικές χρήσεις,
iii)καθορίζει τους όρους υπό τους οποίους µπορεί µια προσωρινή
εισαγωγή να µετατραπεί σε οριστική.
ΚΕΦΑΛΑΙΟ IV
Τελικές διατάξεις
Άρθρο 22
Οι διατάξεις της παρούσας οδηγίας και ιδίως οι διατάξεις του
άρθρου 4 παράγραφος 1 δεύτερη φράση και των άρθρων 6 και 8θα επανεξεταστούν πριν από την 1η Ιανουαρίου 1993 στα πλαίσιαπροτάσεων για την εξασφάλιση της ολοκλήρωσης της εσωτε-ρικής αγοράς,επί των οποίων το Συµβούλιο θα αποφασίσει µεειδική πλειοψηφία.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 12
▼M2
▼B
▼B
Άρθρο 23
Τα παραρτήµατα της παρούσας οδηγίας τροποποιούνται από την
Επιτροπή µε τη διαδικασία του άρθρου 25.
Άρθρο 24
1. Η Επιτροπή επικουρείται από τη µόνιµη επιτροπή για την
τροφική αλυσίδα και την υγεία των ζώων που ιδρύθηκε από το
άρθρο 58του κανονισµού (ΕΚ) αριθ. 178/2002 (1).
2. Στις περιπτώσεις που γίνεται µνεία του παρόντος άρθρου,
εφαρµόζονται τα άρθρα 5και7της απόφασης 1999 /468/ ΕΚ(2).
Η περίοδος που προβλέπεται στο άρθρο 5παράγραφος 6της
απόφασης 1999 /468/ ΕΚ ορίζεται σε τρεις µήνες.
3. Η επιτροπή θεσπίζει τον εσωτερικό κανονισµό της.
Άρθρο 25
1. Η Επιτροπή επικουρείται από τη µόνιµη επιτροπή για την
τροφική αλυσίδα και την υγεία των ζώων.
2. Στις περιπτώσεις που γίνεται µνεία του παρόντος άρθρου,
εφαρµόζονται τα άρθρα 5και 7 της απόφασης 1999 /468/ ΕΚ.
Η περίοδος που προβλέπεται στο άρθρο 5παράγραφος 6της
απόφασης 1999 /468/ ΕΚ ορίζεται σε δεκαπέντε ηµέρες.
Άρθρο 26
Το άρθρο 34 της οδηγίας 72 /462/ ΕΟΚ εφαρµόζεται και στις απαι-
τήσεις που προβλέπονται στο κεφάλαιο IIIτης παρούσας
οδηγίας.
Άρθρο 27
Τα κράτη µέλη θεσπίζουν τις αναγκαίες νοµοθετικές,κανονι-
στικές και διοικητικές διατάξεις για να συµµορφωθούν µε τηνπαρούσα οδηγία το αργότερο την 1η Ιανουαρίου 1992 και ενηµε-ρώνουν την Επιτροπή περί αυτού.
Άρθρο 28
Η παρούσα οδηγία απευθύνεται στα κράτη µέλη.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 13
(1)ΕΕL3 1 της 1.2.2002,σ. 1 .
(2)ΕΕL 184 της 17.7.1999,σ. 23 .▼M7
▼B
▼B
ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ Α
ΑΣΘΕΝΕΙΕΣ ΠΟΥ ΠΡΕΠΕΙ ΝΑ ∆ΗΛΩΝΟΝΤΑΙ ΥΠΟΧΡΕΩΤΙΚΑ
Οι ακόλουθες ασθένειες πρέπει να δηλώνονται υποχρεωτικά:
—∆ουρίνη,
—Μάλις των ίππων,
—Εγκεφαλοµυελίτις των ίππων (σε όλες της τις µορφές,συµπεριλαµβα-
νοµένης της VEE),
—Μολυσµατική αναιµία,
—Λύσσα,
—Βακτηριακός άνθρακας,
—Πανώλη των ίππων,
—Φυσαλιδώδης στοµατίτιδα.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 14
▼M3
ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ Β
►(1)M51990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 15
▼M3
ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ Γ
1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 16
▼M3
►(1)A1
►(2)M51990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 17
▼M6
ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ ∆
ΑΦΡΙΚΑΝΙΚΗ ΠΑΝΩΛΗ ΤΩΝ ΙΠΠΟΕΙ∆ΩΝ
∆ΙΑΓΝΩΣΗ
Τα αντιδραστήρια για τις ενζυµικές δοκιµές ανοσοπροσρόφησης ( ELISA),
που περιγράφονται κατωτέρω,µπορούν να ληφθούν από το εργαστήριο
αναφοράς της Ευρωπαϊκής Κοινότητας ή από τα εργαστήρια αναφοράς
για την αφρικανική πανώλη των ιπποειδών,του ∆ιεθνούς Γραφείου
Επιζωοτιών (ΟΙΕ).
1.ΑΝΤΑΓΩΝΙΣΤΙΚΗ ∆ΟΚΙΜΗ ELISA ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ
ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΚΑΤΑ ΤΟΥ ΙΟΥ ΤΗΣ ΑΦΡΙΚΑΝΙΚΗΣ
ΠΑΝΩΛΗΣ ΤΩΝ ΙΠΠΟΕΙ∆ΩΝ ( AHSV) ( ΥΠΟΧΡΕΩΤΙΚΗ ∆ΟΚΙΜΗ)
Η ανταγωνιστική δοκιµή ELISA χρησιµοποιείται για την ανίχνευση
ειδικών αντισωµάτων κατά του AHSV, σε ορούς κάθε είδους
ιπποειδών. Ο ευρέ oς φάσµατος,πολυκλωνικός,ορός ανοσοποιηµένου
έναντι του AHSV ινδικού χοιριδίου (αποκαλούµενος στη συνέχεια
«αντιορός ινδικού χοιριδίου »),είναι εξειδικευµένος κατά οροοµάδα
και ικανός να ανιχνεύει όλους τους γνωστούς οροτύπους του ιού της
αφρικανικής πανώλης των ιπποειδών.
Η αρχή αυτής της µεθόδου δοκιµής συνίσταται στη διακοπή,από το
δείγµα ορού δοκιµής,της αντίδρασης µεταξύ του αντιγόνου του AHSV
και ενός αντιορού ινδικού χοιριδίου. Τα αντισώµατα AHSV που περιέ-
χονται στο δείγµα ορού δοκιµής,ανταγωνίζονται εκείνα του αντιορού
ινδικού χοιριδίου,µε αποτέλεσµα την εξασθένηση του αναµενόµενου
χρώµατος (µετά την προσθήκη σηµασµένων µε ένζυµο αντισωµάτων
αντιορού ινδικού χοιριδίου και υποστρώµατος). Οι οροί µπορούν να
υποβληθούν σε δοκιµή µετά από µία µόνον αραίωση 1 προς 5 (µέθοδος
δοκιµής της κηλίδας) ή να τιτλοδοτηθούν (µέθοδος της τιτλοδότησης
του ορού),ώστε να ληφθούν τελικά σηµεία αραίωσης. Οι τιµές
αναστολής που είναι υψηλότερες από 50 %µπορούν να θεωρηθούν
θετικές.
Το πρωτόκολλο δοκιµής που περιγράφεται κατωτέρω χρησιµοποιείται
στο Περιφερειακό Εργαστήριο Αναφοράς για την αφρικανική πανώλη
των ιπποειδών,στο Pirbright του Ηνωµένου Βασιλείου.
1.1.∆ιαδικασία δοκιµής
1.1.1.Παρασκευή των πλακών
1.1.1.1. Επιστρώνονται οι πλάκες ELISA µε αντιγόνο AHSV που
έχει εξαχθεί από µολυσµένες κυτταροκαλλιέργειες µε
AHSV, αραιωµένο σε ρυθµιστικό διάλυµα ανθρακικών -
διτανθρακικών ιόντων, pH 9,6. Οι πλάκες επωάζονται επί
µία νύκτα στους 4 ºC.
1.1.1.2. Οι πλάκες εκπλύνονται τρεις φορές µε υπερχείλιση και
εκκένωση των κοιλοτήτων µε τη βοήθεια φυσιολογικού
ορού στον οποίο έχει προστεθεί ρυθµιστικό διάλυµα
φωσφορικών ιόντων ( PBS), pH 7,2 έως 7,4, και ακολουθεί
ξήρανση µε στράγγιση σε απορροφητικό χαρτί.
1.1.2.Κοιλότητες µάρτυρες
1.1.2.1. Στη στήλη 1 τιτλοδοτούνται οι θετικοί οροί µάρτυρες σε
σειρά αραιώσεων στο διπλάσιο,από 1 προς 5 έως 1 προς
640,σε παρεµποδιστικό ρυθµιστικό διάλυµα [ PBS που
περιέχει Tween-20 σε αναλογία 0,05 % (v/v), αποκορυφω-
µένο γάλα σε αναλογία 5 % (Cadbury'sMarvelTM) (w/v)
και ορό ενήλικου βοοειδούς σε αναλογία 1 % (v/v)] ώστε
να ληφθεί τελικός όγκος 50 µ lανά κοιλότητα.
1.1.2.2. Στις κοιλότητες AκαιBτης στήλης 2 προστίθενται 50 µ l
αρνητικού ορού µάρτυρα,αραιωµένου 1 προς 5 (10 µ lορού
+4 0 µlπαρεµποδιστικού ρυθµιστικού διαλύµατος).
1.1.2.3. Στις κοιλότητες CκαιDτης στήλης 2,προστίθενται 100
µlπαρεµποδιστικού ρυθµιστικού διαλύµατος (ΤΥΦΛΟ).
1.1.2.4. Στις κοιλότητες E, F, G καιHτης στήλης 2 προστίθενται
50 µlπαρεµποδιστικού ρυθµιστικού διαλύµατος (µάρτυρας
ινδικού χοιριδίου).1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 18
▼M6
1.1.3.Μέθοδος της δοκιµής κηλίδας
1.1.3.1. Σε διπλή σειρά κοιλοτήτων των στηλών 3 έως 12
προστίθενται 50 µ lαπό κάθε ορό δοκιµής αραιωµένο 1
προς 5 µε παρεµποδιστικό ρυθµιστικό διάλυµα (10 µ l
ορού+4 0 µlπαρεµποδιστικού ρυθµιστικού διαλύµατος).
ή
1.1.4.Μέθοδος της τιτλοδότησης ορού
1.1.4.1. Από κάθε δείγµα δοκιµής παρασκευάζεται σειρά αραιώ-
σεων στο διπλάσιο (1 προς 5 έως 1 προς 640) µε
παρεµποδιστικό ρυθµιστικό διάλυµα,µέσα σε οκτώ
κοιλότητες χωριστών στηλών (3 έως 12).
και στη συνέχεια
1.1.5. Σε όλες τις κοιλότητες της πλάκας ELISA, πλην εκείνων
που περιέχουν το ΤΥΦΛΟ διάλυµα,προστίθενται 50 µ l
αντιορού ινδικού χοιριδίου που έχει προηγουµένως αραι-
ωθεί σε παρεµποδιστικό ρυθµιστικό διάλυµα (κάθε
κοιλότητα περιέχει πλέον τελικό όγκο 100 µ l).
1.1.5.1. Οι πλάκες επωάζονται επί µία ώρα σε θερµοκρασία 37 ºC
σε περιστρεφόµενο αναδευτήρα.
1.1.5.2. Οι πλάκες εκπλύνονται 3 φορές και ακολουθεί ξήρανση
όπως στο σηµείο 1.1.1.
1.1.5.3. Σε κάθε κοιλότητα προστίθενται 50 µ lαντιορού κουνελιού
έναντι του ορού του ινδικού χοιριδίου συζευγµένου µε
υπεροξειδάση ( HRP), αφού προηγουµένως αραιωθεί σε
παρεµποδιστικό ρυθµιστικό διάλυµα.
1.1.5.4. Οι πλάκες επωάζονται επί µία ώρα σε θερµοκρασία 37 ºC
σε περιστρεφόµενο αναδευτήρα.
1.1.5.5. Οι πλάκες εκπλύνονται 3 φορές και ακολουθεί ξήρανση
όπως προηγουµένως.
1.1.6.Χρωµογόνο
Παρασκευάζεται το διάλυµα χρωµογόνου OPD (OPD =
ορθο-φαινυλοδιαµίνη) σύµφωνα µε τις οδηγίες του κατα-
σκευαστή (0,4 mg/ml σε αποστειρωµένο απεσταγµένο
νερό) αµέσως πριν χρησιµοποιηθεί. Προστίθεται
υπόστρωµα (υπεροξείδιο του υδρογόνου =Η2Ο2)µέχρι να
ληφθεί τελική συγκέντρωση 0,05 % (v/v) (1 µέρος προς
2000 µέρη διαλύµατος 30 %H2O2).Κατόπιν προστίθενται
σε κάθε κοιλότητα 50 µ lτου διαλύµατος OPD και οι
πλάκες αφήνονται στον πάγκο επί δέκα λεπτά σε θερµο-
κρασία περιβάλλοντος. ∆ιακόπτεται η αντίδραση µε την
προσθήκη,σε κάθε κοιλότητα,50 µ lθειικού οξέος
(Η2SO4) 1M.
1.1.7.Ανάγνωση των αποτελεσµάτων
Φασµατοφωτοµετρική ανάγνωση σε µήκος κύµατος 492 nm.
1.2.Έκφραση των αποτελεσµάτων
1.2.1. Με τη βοήθεια κάποιου λογισµικού,εκτυπώνονται οι τιµές
οπτικής πυκνότητας ( OD), καθώς και το επί τοις εκατό
ποσοστό αναστολής ( PI)για τους ορούς δοκιµής και τους
ορούς µάρτυρες,µε βάση τη µέση τιµή που έχει καταγραφεί
για τις τέσσερις κοιλότητες που αντιστοιχούν στους
µάρτυρες ινδικού χοιριδίου. Τα εκφραζόµενα σε τιµές OD
καιPIδεδοµένα χρησιµοποιούνται για να προσδιοριστεί αν
τα αποτελέσµατα της δοκιµής περικλείονται εντός αποδε-κτών ορίων. Τα ανώτατα όρια ελέγχου ( UCL) και τα
κατώτατα όρια µάρτυρα ( LCL) για το µάρτυρα ινδικού χοιρι-
δίου βρίσκονται µεταξύ των τιµών OD 1,4 and 0,4
αντίστοιχα. Το τελικό σηµείο της τιτλοδότησης του θετικού
ορού µάρτυρα,µε βάση PI 50 %, θα πρέπει να είναι 1 προς
240 (εντός πεδίου τιµών 1 προς 120 έως 1 προς 480). Οποι-
αδήποτε πλάκα δεν πληροί τα κριτήρια αυτά,πρέπει να
απορρίπτεται. Ωστόσο,εάν ο τίτλος του θετικού ορού
µάρτυρα υπερβαίνει το 1 προς 480,αλλά τα δείγµατα
δοκιµής είναι αρνητικά,τα τελευταία µπορούν να γίνουν
δεκτά.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 19
▼M6
Οι δύο κοιλότητες που περιέχουν αρνητικό ορό µάρτυρα
και οι δύο κοιλότητες που περιέχουν το τυφλό διάλυµα,θα
πρέπει να δίδουν τιµές PIµεταξύ +2 5% και–25 % και
µεταξύ +9 5 και+ 105 %, αντίστοιχα. Η λήψη τιµών εκτός
αυτών των ορίων δεν ακυρώνει την πλάκα,αλλά αποτελεί
ένδειξη ανάπτυξης προϋπάρχοντος χρώµατος.
1.2.2. Το όριο διάγνωσης (διαχωριστικές τιµές) για τους ορούς
δοκιµής είναι 50 % (PI 50 %). Τα δείγµατα που εµφανίζουν
τιµές PIάνω του 50 %καταγράφονται ως θετικά. Τα
δείγµατα που εµφανίζουν τιµές PIκάτω του 50 %καταγρά-
φονται ως αρνητικά.
Τα δείγµατα που εµφανίζουν τιµές PIµεγαλύτερες ή µικρό-
τερες από το όριο για τις διπλές κοιλότητες,θεωρούνται
αµφίβολα. Τα εν λόγω δείγµατα µπορούν να υποβάλλονται
σε νέα δοκιµή κηλίδας και δοκιµή τιτλοδότησης. Τα θετικά
δείγµατα µπορούν επίσης να τιτλοδοτηθούν,για να παράσ-
χουν µια ένδειξη του βαθµού θετικότητας.
∆ιάταξη της δοκιµής κηλίδας
1 2 3456789 1 0 1 1 1 2
+µαρτ. Όροι δοκιµής
A 1:5 – µαρτ. 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40
B 1:10 – µαρτ. 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40
C 1:20 ΤΥΦΛΟ
D 1:40 ΤΥΦΛΟ
E 1:80 ΙΧ µαρτ.
F 1:160 ΙΧ µαρτ.
G 1:320 ΙΧ µαρτ. 123456789 1 0
H 1:640 ΙΧ µαρτ. 123456789 1 0
–µαρτ. =αρνητικός ορός µάρτυρας.
+µαρτ. =θειτκός ορός µάρτυρας
ΙΧ µαρτ. =µάρτυρας ινδικού χοιριδίου.
∆ιάταξη της τιτλοδότησης ορού
1 2 3 456789 1 0 1 11 2
+µαρτ. Όροι δοκιµής
A 1:5 – µαρτ. 1:5 1:5
B 1:10 – µαρτ. 1:10 1:10
C 1:20 ΤΥΦΛΟ 1:20 1:20
D 1:40 ΤΥΦΛΟ 1:40 1:40
E 1:80 ΙΧ µαρτ. 1:80 1:80
F 1:160 ΙΧ µαρτ. 1:160 1:160
G 1:320 ΙΧ µαρτ. 1:320 1:3201990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 20
▼M6
1 2 3 456789 1 0 1 11 2
+µαρτ. Όροι δοκιµής
H 1:640 ΙΧ µαρτ. 1:640 1:640
–µαρτ. =αρνητικός ορός µάρτυρας.
+µαρτ. =θετικός ορός µάρτυρας.
ΙΧ µαρτ. =µάρτυρας ινδικού χοιριδίου.
2.ΕΜΜΕΣΗ ∆ΟΚΙΜΗ ELISA ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΑΝΤΙΣΩ-
ΜΑΤΩΝ ΚΑΤΑ ΤΟΥ ΙΟΥ ΤΗΣ ΑΦΡΙΚΑΝΙΚΗΣ ΠΑΝΩΛΗΣ ΤΩΝ
ΙΠΠΟΕΙ∆ΩΝ ( AHSV) ( ΥΠΟΧΡΕΩΤΙΚΗ ∆ΟΚΙΜΗ)
Η δοκιµή που περιγράφεται κατωτέρω συµφωνεί µε την περιγραφή
δοκιµής που περιλαµβάνεται στο κεφάλαιο 2.1.11 του εγχειριδίου
προτύπων για διαγνωστικές δοκιµές και εµβόλια,του ∆ιεθνούς
Γραφείου Επιζωοτιών ( OIE), τέταρτη έκδοση,2000.
Η ανασυνδυασµένη πρωτείνη VP7 έχει χρησιµοποιηθεί ως αντιγόνο
για τον προσδιορισµό αντισωµάτων κατά του ιού AHS, µε υψηλό
δείκτη ευαισθησίας και εξειδίκευσης. Άλλα πλεονεκτήµατα είναι ότι
είναι σταθερή και δεν είναι λοιµογόνος.
2.1.∆ιαδικασία δοκιµής
2.1.1.Στερεά φάση
2.1.1.1. Επιστρώνονται οι πλάκες ELISA µε ανασυνδυασµένη
πρωτεΐνη VP7 απόAHSV-4, αραιωµένη µε ρυθµιστικό
διάλυµα ανθρακικών -διτανθρακικών ιόντων, pH 9,6. Οι
πλάκες επωάζονται επί µία νύκτα σε θερµοκρασία 4 ºC.
2.1.1.2. Οι πλάκες εκπλύνονται πέντε φορές µε απεσταγµένο νερό
που περιέχει Tween 20 σε αναλογία 0,01 % (v/v) ( διάλυµα
έκπλυσης) και κτυπώνται ελαφρά σε απορροφητικό υλικό
για να αποµακρυνθούν τυχόν υπολείµµατα του διαλύµατος
έκπλυσης.
2.1.1.3. Οι πλάκες παρεµποδίζονται (µπλοκάρονται ),µε την
προσθήκη,σε κάθε κοιλότητα,200 µ lφυσιολογικού ορού
µε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικών ιόντων ( PBS) +
αποκορυφωµένο γάλα (ξηράς µορφής αποκορυφωµένο
γάλαNestléTM)σε αναλογία 5 % (w/v), επί µία ώρα σε
θερµοκρασία 37 ºC.
2.1.1.4. Αποµακρύνεται το παρεµποδιστικό διάλυµα και οι πλάκες
κτυπώνται ελαφρά σε απορροφητικό υλικό.
2.1.2.∆είγµατα δοκιµής
2.1.2.1. Τα δείγµατα ορού που πρόκειται να ελεγχθούν,καθώς και
οι θετικοί και αρνητικοί οροί µάρτυρες,αραιώνονται σε 1
προς 25 µε PBS + αποκορυφωµένο γάλα σε αναλογία 5 %
(w/v) + Tween 20 σε αναλογία 0,05 % (v/v), 100 µlανά
κοιλότητα. Επωάζονται επί µία ώρα σε θερµοκρασία 37 ºC.
Για την τιτλοδότηση,δηµιουργούνται σειρές αραιώσεων
στο διπλάσιο,αρχίζοντας από 1 προς 25 (100 µ l/
κοιλότητα),ένας ορός ανά στήλη πλάκας,και επανα-
λαµβάνεται η ίδια διαδικασία µε τους θετικούς και τους
αρνητικούς µάρτυρες. Ακολουθεί επώαση επί µία ώρα σε
θερµοκρασία 37 ºC.
2.1.2.2. Οι πλάκες εκπλύνονται όπως περιγράφεται στο σηµείο
2.1.1.2.
2.1.3.Προϊόν σύζευξης
2.1.3.1. ∆ιανέµονται 100 µ l/κοιλότητα γ -σφαιρίνης αντιορού
αλόγου,συζευγµένης µε υπεροξειδάση ( HPR), αφού
προηγουµένως αραιωθεί µε PBS + γάλα σε αναλογία 5 %
+ Tween 20 σε αναλογία 0,05 %, pH 7,2. Ακολουθεί
επώαση επί µία ώρα σε θερµοκρασία 37 ºC.
2.1.3.2. Οι πλάκες εκπλύνονται όπως περιγράφεται στο σηµείο
2.1.1.2.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 21
▼M6
2.1.4.Χρωµογόνο /υπόστρωµα
2.1.4.1. Προστίθενται 200 µ l/κοιλότητα διαλύµατος χρωµογόνου /
υποστρώµατος [10 mlαπό 80,6 mM DMAB ( διµεθυλοαµινο-
βενζαλδεΰδη) +1 0m l από 1,56 mM MBTH (3- µεθυλο -2
βενζο-θειαζολινοϋδραζονοϋδροχλωρίδιο) +5µlH2O2].
Μετά από 5 -10λεπτά περίπου (πριν αρχίζει να χρωµατί-
ζεται ο αρνητικός µάρτυρας),διακόπτεται η ανάπτυξη του
χρώµατος µε την προσθήκη 50 µ lH2SO43N.
Επίσης είναι δυνατόν να χρησιµοποιηθούν και άλλα
χρωµογόνα,όπως ABTS (2,2 ′-αζινο-δισ-[3-εθυλοβενζοθεια-
ζολινο -6-σουλφονικό οξύ]), TMB ( τετραµεθυλοβενζυδίνη)
ήOPD ( ορθο-φαινυλοδιαµίνη).
2.1.4.2. Ανάγνωση των αποτελεσµάτων σε µήκος κύµατος 600 nm
(ή 620nm).
2.2.Ερµηνεία των αποτελεσµάτων
2.2.1. Υπολογίζεται η διαχωριστική τιµή,προσθέτοντας τον
αριθµό 0,6 στην τιµή που αντιστοιχεί στον αρνητικό
µάρτυρα (0,6 είναι η τυπική απόκλιση που προκύπτει από
οµάδα 30 αρνητικών ορών).
2.2.2. Τα δείγµατα δοκιµής που δίνουν τιµές απορρόφησης χαµη-
λότερες από τη διαχωριστική τιµή θεωρούνται αρνητικά.
2.2.3. Τα δείγµατα της δοκιµής που δίνουν τιµές απορρόφησης
υψηλότερες από τη διαχωριστική τιµή + 0,15 θεωρούνται
θετικά.
2.2.4. Τα δείγµατα δοκιµής που δίνουν ενδιάµεσες τιµές απορ-
ρόφησης θεωρούνται αµφίβολα και πρέπει να
χρησιµοποιείται δεύτερη µέθοδος για την επιβεβαίωση των
αποτελεσµάτων.
3.ΠΑΡΕΜΠΟ∆ΙΣΤΙΚΗ ∆ΟΚΙΜΗ ELISA ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ
ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΚΑΤΑ ΤΟΥ ΙΟΥ ΤΗΣ ΑΦΡΙΚΑΝΙΚΗΣ
ΠΑΝΩΛΗΣ ΤΩΝ ΙΠΠΟΕΙ∆ΩΝ ( AHSV) ( ΥΠΟΧΡΕΩΤΙΚΗ ∆ΟΚΙΜΗ)
Η παρεµποδιστική δοκιµή ELISA έχει σχεδιασθεί για την ανίχνευση
ειδικών αντισωµάτων κατά του AHSV σε ορούς από οποιαδήποτε
ευπαθή είδη. Η VP7 είναι η κύρια αντιγονική πρωτενη ιού που
περιέχει ο AHSV και διατηρείται στους εννέα ορότυπους. ∆εδοµένου
ότι και το µονοκλωνικό αντίσωµα ( Mab) κατευθύνεται προς τη VP7, η
δοκιµασία χαρακτηρίζεται από υψηλό βαθµό ευαισθησίας και εξειδί-
κευσης. Επιπλέον,το ανασυνδυασµένο αντιγόνο VP7 είναι τελείως
αβλαβές,µε αποτέλεσµα να παρέχει µεγάλη ασφάλεια.
Η αρχή αυτής της µεθόδου δοκιµής συνίσταται στη διακοπή της αντί-
δρασης µεταξύ της ανασυνδυασµένης πρωτεΐνης VP7 — το αντιγόνο
που συνδέεται στην πλάκα ELISA— και του ειδικού για την εν λόγω
πρωτεΐνη συζευγµένου µονοκλωνικού αντισώµατος ( Mab). Το αντίσωµα
που περιέχει ο ορός δοκιµής θα παρεµποδίσει την αντίδραση αντι-
γόνου-Mab, προκαλώντας εξασθένηση του χρώµατος.
Η δοκιµή που περιγράφεται κατωτέρω,διεξάγεται στο Εργαστήριο
Αναφοράς της Ευρωπαϊκής Κοινότητας για την αφρικανική πανώλη
των ιπποειδών στο Algete της Ισπανίας.
3.1.∆ιαδικασία δοκιµής
3.1.1.Πλάκες ELISA
3.1.1.1. Επιστρώνονται οι πλάκες µε ανασυνδυασµένη πρωτεΐνη
VP7 απόAHSV-4, αραιωµένη σε ρυθµιστικό διάλυµα
ανθρακικών -διτανθρακικών ιόντων, pH 9,6. Επωάζονται
επί µία νύκτα σε θερµοκρασία 4 ºC.
3.1.1.2. Οι πλάκες εκπλύνονται πέντε φορές µε φυσιολογικό ορό
µε ρυθµιστικό διάλυµα φωσφορικών ιόντων ( PBS) που
περιέχει Tween 20 σε αναλογία 0,05 % (v/v) (PBST).
3.1.1.3. Οι πλάκες σταθεροποιούνται µε κατεργασία µε σταθερο-
ποιητικό διάλυµα (ώστε να µπορούν να αποθηκευθούν επί
µεγάλο χρονικό διάστηµα σε θερµοκρασία 4 ºCχωρίς
µείωση της δραστικότητάς τους),και ξηραίνονται σε
απορροφητικό υλικό.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 22
▼M6
3.1.2.∆είγµατα δοκιµής και µάρτυρες
3.1.2.1. Για µαζικό διαγνωστικό έλεγχο: Οι οροί δοκιµής και οι
µάρτυρες αραιώνονται
κατευθείαν στην
πλάκα σε αναλογία 1
προς 10 µε PBST, έτσι
ώστε να ληφθεί
τελικός όγκος 100 µ l/
κοιλότητα. Ακολουθεί
επώαση επί µία ώρα
σε θερµοκρασία 37 ºC.
3.1.2.2. Για τιτλοδότηση: Σε οκτώ κοιλότητες παρασκευά-
ζονται σειρές αραιώσεων στο
διπλάσιο από τους ορούς δοκιµής
και τους θετικούς ορούς µάρτυρες
(100 µ l/κοιλότητα) από 1 προς 10
έως 1 προς 1 280. Ο αρνητικός
µάρτυρας ελέγχεται σε αραίωση 1
προς 10.
3.1.3.Προϊόν σύζευξης
Σε κάθε κοιλότητα προστίθενται 50 µ lυπεροξειδάσης
(HRP), συζευγµένης µε Mab ( µονοκλωνικά αντισώµατα
ειδικά για την πρωτεΐνη VP7) που έχουν προηγουµένως
αραιωθεί και το σύνολο αναµειγνύεται ήπια για να οµοιο-
γενοποιηθεί. Ακολουθεί επώαση για 30 λεπτά σε
θερµοκρασία 37 ºC.
3.1.4. Οι πλάκες εκπλύνονται πέντε φορές µε PBST και στεγνώ-
νονται όπως παραπάνω.
3.1.5.Χρωµογόνο /υπόστρωµα
Προστίθενται 100 µ l/κοιλότητα διαλύµατος χρωµογόνου /
υποστρώµατος [1 ml ABTS (2,2 ′-αζινο-δισ-[3-εθυλοβεν-
ζοθειαζολινο -6-σουλφονικό οξύ]) συγκεντρώσεως 5 mg/ml
+9m l ρυθµιστικού διαλύµατος υποστρώµατος (ρυθµιστικό
διάλυµα φωσφορικών -κιτρικών ιόντων 0,1 MµεpH 4 που
περιέχει H2O2σε αναλογία 0,03 %)]και ακολουθεί επώαση
επί δέκα λεπτά σε θερµοκρασία περιβάλλοντος. Η
ανάπτυξη του χρώµατος διακόπτεται µε την προσθήκη,σε
κάθε κοιλότητα,100 µ l SDS ( θειικό νάτριο -δωδεκύλιο)
συγκεντρώσεως 2 % (w/v).
3.1.6.Ανάγνωση των αποτελεσµάτων
Ανάγνωση των αποτελεσµάτων σε µήκος κύµατος 405 nm
µε συσκευή ανάγνωσης ELISA.
3.2.Ερµηνεία των αποτελεσµάτων
3.2.1.Έλεγχος καταλληλότητας της δοκιµασίας
Η δοκιµή είναι κατάλληλη,εφόσον η οπτική πυκνότητα
(OD) του αρνητικού µάρτυρα ( NC) είναι µεγαλύτερη από
1,0 και η ODτου θετικού µάρτυρα ( PC)µικρότερη από 0,2.
3.2.2.Υπολογισµός των διαχωριστικών τιµών
Θετική διαχωριστική τιµή NC - [(NC -PC) × 0,3]
Αρνητική διαχωριστική τιµή NC - [(NC -PC) × 0,2]
όπουNCείναι η ODτου αρνητικού µάρτυρα και PCηOD
του θετικού.
3.2.3.Ερµηνείατων α ποτελεσµάτων
Τα δείγµατα των οποίων η OD είναι µικρότερη από τη
θετική διαχωριστική τιµή θεωρούνται θετικά ως προς τα
αντισώµατα κατά του AHSV.
Τα δείγµατα των οποίων η ODείναι µεγαλύτερη από την
αρνητική διαχωριστική τιµή θεωρούνται αρνητικά ως προς
τα αντισώµατα κατά του AHSV.
Τα δείγµατα των οποίων η OD κυµαίνεται µεταξύ των
ανωτέρω δύο τιµών θεωρούνται αµφίβολα και τα ζώα από
τα οποία προέρχονται θα πρέπει να υποβάλλονται σε νέα
δειγµατοληψία µετά από δύο έως τρεις εβδοµάδες.1990L0426 — EL — 05.06.2003 — 008.001 — 23