KOMMISSION DER EUROPÄISCHEN GEMEINSCHAFTEN 
K0M(91) 304 endg. 
Brüssel, den 30. Juli 1991 
Vorschlag für eine 
VERORDNUNG (EWG) DES RATES 
über Gemeinschaftsmaßnahmen zur 
Bekämpfung der Geflügelpest 
(von der Kommission vorgelegt) 
BEGRÜNDUNG _ n 
O -
Die Geflügelpest der hochkontaglösen Form ist eine ansteckende und gefährliche 
GeflügeIseuche. Erreger ist ein Virus mit möglicherweise stark variabler 
Pathogenität und Symptomatik bei empfänglichen Tieren. Die Seuche ist 
pandemisch, und das Virus kann durch Zugvögel, namentlich bestimmte Wasservögel, 
übertragen werden. 
Artikel 19 der Richtlinie 90/539/EWG vom 15. Oktober 1990 über die viehseuchen­
rechtlichen Bedingungen für den innergemeinschaftlichen Handel mit Geflügel und 
Bruteiern sowie für ihre Einfuhr aus Dritt«ändern*1) sieht vor, daß vor dem 
1. Juli 1991 Vorschriften zur Bekämpfung der Geflügelpest erlassen werden. 
Mit den vorgeschlagenen Maßnahmen soll die GeflügeIpest getilgt bzw. ihre 
Verschleppung verhütet werden. Dies wird erreicht durch Bestandskeulung mit oder 
ohne Impfung und durch strenge Verbringungskontrollen für Geflügel, Geflügeler­
zeugnisse, Fahrzeuge und andere Stoffe, die Träger des Newcastle-Virus sein 
könnten. Die Maßnahmen sind bei Seuchenverdacht sofort anzuwenden, damit die Be­
kämpfung zügig und wirksam erfolgen kann. 
Im Sinne der effizienten Seuchenbekämpfung wird vorgeschlagen, daß die Mitglied­
staaten unter anderem folgenden Anforderungen genügen: 
Sie veranlassen eine Untersuchung, um den Seuchenverdacht zu erhärten bzw. 
zu entkräften; 
Sie veranlassen bei Seuchenverdacht die Überwachung der Betriebe und 
verhängen für die Dauer der Überwachung eine Verbringungssperre; 
Sie veranlassen bei Seuchenbestätigung die Tötung und unschädliche Beseiti­
gung des infizierten Geflügels; 
sie veranlassen bei Seuchenverdacht und bei Seuchenbestätigung eine 
gründliche epizootiolog Ische Untersuchung; 
sie errichten Schutzzonen (3 km) und Überwachungszonen (10 km) um die 
Seuchenbetriebe; 
sie benennen Laboratorien, die für die zur sachgerechten Durchführung der 
Seuchenbekämpfungsmaßnahmen erforderliche technische Hilfe, Unterstützung 
gewähren; 
sie unterrichten die Kommission über Impfprogramme; 
sie erstellen einen Notstandsplan. 
CHART Wr i "^n^ wom xi m ioon ç A 
-I-
VORSCHLAG FÜR EINE 
Veron±-iung (EWG) des Rates 
v l i r 
vom 
über Gemeinschaftsmaßnahmen zur 
Bekämpfung der Geflügelpest 
DER RAT DER EUROPA ISCHEN GEMEINSCHAFTEN -
gestützt auf den Vertrag zur Gründung der Europäischen Wirtschaftsgemeinschaft, 
insbesondere auf Artikel 43, 
auf Vorschlag der Kommission, 
nach Stellungnahme des Europäischen Parlaments, 
nach Stellungnahme des Wirtschafts- und Sozialausschusses, 
in Erwägung nachstehender Gründe : 
Geflügel ist in der Liste in Anhang II des Vertrags aufgeführt und stellt für 
die landwirtschaftliche Erwerbsbevölkerung eine wichtige Einkommensquelle dar. 
Um die Entwicklung des GeflügeISektors zu gewährleisten und den Tiergesundheits­
schutz in der Gemeinschaft zu fördern, müssen auf Gemeinschaftsebene die Maßnah­
men festgelegt werden, die zur Bekämpfung der Geflügelpest in ihrer durch ein 
Influenza-Virus mit spezifischen Merkmalen hervorgerufenen hochkontaglösen Form 
nachstehend "GeflügeIpest" genannt, zu treffen sind. 
Die GeflügeIpest kann sehr schnell epizootische Ausmaße mit entsprechend hoher 
Mortalität annehmen und die Rentabilität der Geflügelhaltung generell nachhaltig 
beeinträchtigen. 
- 2 ^o -
Bei Seuchenverdacht sind sofort alle Vorkehrungen zu treffen, um die Krankheit 
nach ihrer Bestätigung wirksam bekämpfen zu können. 
Es ist erforderlich, eine We iterVerbreitung der Seuche durch strenge Kontrollen 
der T1erverbringungen und der Verwendung von Erzeugnissen, die möglicherweise 
Träger von Ansteckungsstoffen sind, sowie gegebenenfalls durch Impfungen zu ver­
hindern. 
Für die Krankheitsdiagnose sind die zuständigen Laboratorien verantwortlich, de­
ren Arbeit von einem gemeinschaftlichen Referenzlaboratorium koordiniert wird. 
Gemeinsame Maßnahmen zur Bekämpfung der GeflügeIpest bilden die Grundlage für 
eine einheitliche Tiergesundheitsnorm. 
Die Kommission sollte mit der Erarbeitung der erforderlichen Durchfüh­
rungsvorschriften betraut werden -
HAT FOLGENDE VERORDNUNG ERLASSEN : 
Artikel 1 
1. Diese Verordnung regelt die gemeinschaftlichen Bekämpfungsmaßnahmen, die bei 
Auftreten der Geflügelpest bei Geflügel unbeschadet der Rechtsvorschriften 
für den innergerneinschaftlichen Handel anzuwenden sind. 
2. Diese Verordnung gilt nicht bei Auftreten der GeflügeIpest bei sonstigen Vö­
geln, doch teilt der betreffende Mitgiiedstaat der Kommission alle etwaigen 
Schutzmaßnahmen mit. 
- 3 -
ArtiKel 2 
1. Im Sinne dieser Verordnung gelten erforderlichenfalls die Definitionen gemäß 
Artikel 2 der Richtlinie 90/539/EWG des Rates über die viehseuchenrechtlichen 
Bedingungen für den innergemeinschaftlichen Handel mit Geflügel und Bruteiern 
sowie für ihre Einfuhr aus Dr i tt landernC). 
Darüber hinaus gelten folgende Definitionen : 
a) "seuchenkrankes Geflüoel" : Geflügel, 
- bei dem die GeflügeIpest im Sinne von Anhang I nach Untersuchung in ei­
nem zugelassenen Labor offiziell bestätigt wurde, oder 
- bei dem - im Falle von Zweit- oder Folgeinfekten - klinische Symptome 
oder postmortale Läsionen vorliegen, die auf Geflügelpest schließen las­
sen; 
b) "seuchenverdächtiges Geflügel : Geflügel mit derartigen klinischen Sympto­
men oder postmortalen Läsionen, daß begründeter Verdacht auf Geflügelpest 
besteht, bzw. das Influenza-A-Virus des Subtyps H5 oder H7 nachgewiesen 
werden konnte; 
c) "ansteckungsverdächtIges Geflügel" : Geflügel, das möglicherweise direkt 
oder indirekt mit dem Seuchenvirus bzw. mit dem Influenza-A-Virus des 
Subtyps H5 oder H7 in Berührung gekommen ist; 
d) "Zuständige Behörde" : die von der Zentralverwaltung des betreffenden Lan­
des zu diesem Zweck bestimmte Veterinärbehörde, die der Zentralverwaltung 
direkt unterstellt und dieser verantwortlich ist. 
e) "Amt I Icher Tierarzt" : von der zuständigen Behörde eines Mitgliedstaats 
bezeichneter Tierarzt. 
(1) Abi. Nr. L 303 vom 31.10.1990, S.6 
- 4 -
Artikel 3 
Die Geflügelpest ist anzeigepflichtig; bei Seuchenverdacht ist unverzüglich die 
zuständige Behörde zu benachrichtigen. 
Artikel 4 
1. Ist Geflügel seuchen- oder ansteckungsverdächtig, so leitet der amtliche 
Tierarzt unverzüglich eine Untersuchung ein, um diesen Verdacht zu erhärten 
bzw. zu entkräften; insbesondere entnimmt bzw. veranlaßt er die Entnahme von 
Proben für die erforderlichen Laboruntersuchungen. 
2. Unmittelbar nach Anzeige des Seuchenverdachts stellt die zuständige Behörde 
den Betrieb unter Beobachtung und veranlaßt insbesondere folgendes : 
a) Anlage eines Registers über sämtliche GeflügeIkategorien im Betrieb mit 
Angabe der Zahl der verendeten Tiere sowie der Zahl der Tiere mit und ohne 
Symptome in jeder Kategorie. Diese Angaben sind auf dem neuesten Stand zu 
halten und auf Verlangen vorzulegen; sie können bei jedem KontrolIbesuch 
überprüft werden; 
b) Absonderung des gesamten GeflügeIbestands des Betriebs entweder in den 
normalen Stallungen oder an einem Ort, der eine gesonderte Aufstauung 
ohne Kontakt zu anderem Geflügel ermöglicht; 
c) Verbot der Verbringung von Geflügel aus dem und zum Seuchenbetrieb; 
d) Verbot des Verkehrs 
- von Personen und Fahrzeugen bzw. der Verbringung anderer Tiere aus dem 
und zum Seuchenbetrieb sowie 
- des Transports von Fleisch und Tierkörpern, Futtermitteln, Gegenständen, 
Abfällen, Einstreu oder sonstigen Materialien, die Träger von 
Ansteckungsstoffen sein könnten, aus dem und zum Seuchenbetrieb, es sei 
denn, es liegt eine ausdrückliche Genehmigung der zuständigen Behörde 
vor; 
- 5 -
e) Verbot der Verbringung von Eiern aus dem Seuchenbetrieb, ausgenommen 
Konsumeier, die zur Zufriedenheit des amtlichen Tierarztes desinfiziert 
wurden; 
f) Verwendung geeigneter Desinfektionsmittel an den Ein- und Ausgängen der 
Stallungen und Wirtschaftsgebäude; 
g) Durchführung einer epizootiologisehen Untersuchung gemäß Artikel 7. 
3. Bis die amtlichen Maßnahmen gemäß Absatz 2 getroffen sind, trifft der Besit­
zer bzw. Halter von seuchenverdächtigem Geflügel alle zumutbaren Vorkehrun­
gen, um den Vorschriften von Absatz 2 und insbesondere der Buchstaben b), c), 
d) und e), zu genügen. 
4. Die zuständige Behörde kann die Maßnahmen gemäß Absatz 2 auf andere Betriebe 
ausdehnen, wenn Lage, betriebliche Anordnung oder Kontakte mit dem seuchen­
verdächtigen Betrieb eine Ansteckung befürchten lassen. 
5. Die Maßnahmen gemäß den Absätzen 2, 3 und 4 werden erst aufgehoben, wenn der 
Seuchenverdacht vom amtlichen Tierarzt entkräftet wurde. 
Artikel 5 
1. Wird die Geflügelpest in einem Betrieb amtIicherseits bestätigt, so ordnet 
die zuständige Behörde über die Maßnahmen gemäß Artikel 4 Absatz 2 hinaus 
folgende Maßnahmen an : 
a) unverzügliche Tötung des gesamten Geflügels im Betrieb und unschädliche 
Beseitigung der verendeten und getöteten Tiere sowie Vernichtung aller 
vorhandenen Eier unter weitestgehender Vermeidung einer Weiterverbreitung 
des Seuchenvirus; 
- 6 -
b) nach Weisung des amtlichen Tierarztes Vernichtung bzw. entsprechende Be­
handlung aller Stoffe und Abfälle wie Futtermittel, Einstreu und Mist, die 
Träger von Ansteckungsstoffen sein könnten, wobei die Behandlung die Ge­
währ für die Abtötung etwa vorhandener Krankheitserreger bieten muß; 
c) so weit möglich Ermittlung und Vernichtung des gesamten, während der ver­
muteten Inkubationszeit erschlachteten, aus dem Seuchenbetrieb stammenden 
Geflügelfleisches; 
d) Ermittlung und Vernichtung der in der vermuteten Inkubationszeit im 
Seuchenbetrieb erzeugten und weitergelieferten Bruteier bzw. behördliche 
Überwachung der bereits aus diesen Bruteiern geschlüpften Küken; soweit 
möglich Ermittlung und Vernichtung der in der vermuteten Inkubationszeit 
im Seuchenbetrieb erzeugten und weitergelieferten Konsumeier; 
e) nach Ausführung der Maßnahmen gemäß Buchstabe a) Reinigung und Desinfekti­
on der Stallungen und ihrer unmittelbaren Umgebung, der Transportmittel 
sowie aller anderen Gegenstände und Materialien, die Träger von 
Ansteckungsstoffen sein könnten, gemäß Artikel 11; 
f) nach Ausführung der Maßnahmen gemäß Buchstabe e) Einhaltung einer Warte­
frist von mindestens 21 Tagen vor der Wiederaufstockung der Bestände; 
g) Durchführung einer epizootiologischen Untersuchung gemäß Artikel 7. 
2. Die zuständige Behörde kann die Maßnahmen gemäß Absatz 1 auf andere Betriebe 
ausdehnen, wenn Lage, betriebliche Anordnung oder Kontakte mit dem Seuchen­
betrieb eine Ansteckung befürchten lassen. 
- 7 -
Artikel g 
1. Für Seuchenbetriebe, in denen zwei oder mehrere Herden getrennt gehalten wer­
den, kann die zuständige Behörde in bezug auf die gesunden Herden Ausnahmen 
von den Anforderungen gemäß Artikel 5 Absatz 1 Buchstabe a) zulassen, sofern 
der amtliche Tierarzt bestätigt, daß diese Herden vollkommen abgesondert un­
tergebracht, gepflegt und gefüttert werden, so daß das Seuchenvirus nicht auf 
die anderen Herden übertragen werden kann. 
2. Die Kommission legt nach dem Verfahren des Artikels 21 die Kriterien für die 
Gewährung der Ausnahmen gemäß Absatz 1 fest. 
ArtiKel 7 
1. Die epizootiologische Untersuchung umfaßt: 
- die Bestimmung der mutmaßlichen Zeitspanne seit der Infektion des Betriebs; 
- die Ermittlung der mutmaßlichen Ansteckungsquelle sowie die Ermittlung weite­
rer Betriebe, deren Tierbestände sich ebenfalls aus dieser Quelle infiziert 
oder angesteckt haben könnten; 
- die Ermittlung von Personen und Fahrzeugen, Geflügel und sonstigen Tieren, Ei­
ern, Fleisch und Tierkörpern sowie Gegenständen und Materialien, durch die das 
Seuchenvirus zu oder aus den fraglichen Betrieben verschleppt worden sein 
könnte. 
2. Für die Durchführung der epizootiologischen Untersuchung und die umfassende 
Koordinierung aller zur schneiistmöglichen Seuchentilgung erforderlichen Maß­
nahmen, wird ein Krisenzentrum errichtet. 
- 8 -
Die allgemeinen Vorschriften für die nationalen Krisenzentren und ein entspre­
chendes Krisenzentrum auf Gemeinschaftsebene sind Gegenstand der Verordnung 
(EWG) Nr. ../.. des Rates. 
Artikel 8 
1. Hat der amtliche Tierarzt den begründeten Verdacht, daß sich der Geflügel­
bestand eines Betriebs durch Personen, Tiere, Fahrzeuge oder aus anderen 
Quellen infiziert hat, so wird der Betrieb unter amtliche Überwachung gemäß 
Absatz 2 gesteI It. 
2. Die amtliche Überwachung dient der unverzüglichen Abklärung des Seuchen­
verdachts, der Ermittlung und Kontrolle der GeflügeIverbringungen sowie gege­
benenfalls der Einleitung der Maßnahmen gemäß Absatz 3. 
3. Steht ein Betrieb unter amtlicher Überwachung gemäß Absatz 2, so verbietet 
die zuständige Behörde die Verbringung von Geflügel aus diesem Betrieb, es 
sei denn, die Tiere werden unter amtlicher Aufsicht zur sofortigen Schiach­
tung in einen Schlachthof befördert. Dieser Genehmigung muß eine klinische 
Untersuchung des Geflügels durch den amtlichen Tierarzt vorausgehen, durch 
die nachgewiesen wurde, daß der fragliche Betrieb frei von Geflügelpest ist. 
Die Verbringungssperre wird verhängt für 21 Tage ab dem letztmöglichen Tag 
der Ansteckung, zumindest jedoch für 7 Tage. 
4. Hält die zuständige Behörde die entsprechenden Voraussetzungen für gegeben, 
so kann sie die Maßnahmen dieses Artikels auf einen Teil des Betriebs und das 
darin enthaltene Geflügel beschränken, sofern die einzelnen Herden vollkommen 
abgesondert untergebracht und von nur für sie zuständigem Personal betreut 
und gefüttert wurden. 
- 9 -
Artikel 9 
1. Unmittelbar nach der amtlichen Bestätigung der Geflügelpest grenzt die zu­
ständige Behörde ein Sperrgebiet um den Seuchenbetrieb ab, das aus einer 
Schutzzone mit einem Mindest radius von 3 km und einer Überwachungszone mit 
einem Mindestradius von 10 km besteht. Bei der Abgrenzung dieser Zonen sind 
natürliche Hindernisse und der Seuchenverlauf zu berücksichtigen. 
2. In der Schutzzone werden folgende Maßnahmen angewandt : 
a) Ermittlung sämtlicher Geflugelhaltungsbetrlebe innerhalb der Zone; 
b) regelmäßige Kontro11besuche sämtlicher Geflugelhaltungsbetriebe, klinische 
Untersuchung des Geflügels und ggf. Entnahme von Proben für Labor­
untersuchungen sowie Protokollierung der KontroIIbesuche und -ergebnisse; 
c) Einsperrung des Geflügels in den Stallungen oder an einem anderen Ort, der 
eine Absonderung der Tiere ermöglicht; 
d) Verwendung geeigneter Desinfektionsmittel an den Zufahrtswegen zu den Be-
tr ieben; 
e) Regelung des Verkehrs von Personen, die mit Geflügel, Geflügelschlacht­
körpern und Eiern umgehen sowie des Verkehrs von Fahrzeugen, die Geflügel, 
GeflügeIschlachtkörper und Eier innerhalb des Sperrgebiets befördern; ge­
nerell ist der Geflügeltransport - ausgenommen für die Durchfuhr über gro­
ße Fernverkehrsstraßen und Eisenbahnstrecken - verboten; 
f) Verbot der Verbringung von Geflügel und Bruteiern aus dem Betrieb, es sei 
denn, die zuständige Behörde genehmigt 
- 10 -
i) die Verbringung des Geflügels zur unverzüglichen Schlachtung in ei­
nen tierärztlich überwachten, möglichst in dem Sperrgebiet gelege­
nen Schlachthof, bzw. in einen anderen von ihr benannten Schlacht­
hof außerhalb des Sperrgebiets. Das so erschlachtete Fleisch ist 
mit dem besonderen Genußtauglichkeitskennzeichen gemäß Artikel 6 
Absatz 1 der Verordnung (EWG) Nr. ../ über die Veterinärbe­
dingungen für den innergemeinschaftlichen Handel mit frischem 
Fleisch von Geflügel und Zuchtfederwild und für die Einfuhr dieses 
Fleisches aus Drittländern^1) zu versehen. 
li) die Verbringung von Eintagsküken oder angehendem Zuchtgeflügel in 
einen Betrieb im Sperrgebiet, in dem sich kein anderes Geflügel be­
findet. Dieser Betrieb ist unter amtliche Überwachung gemäß Arti­
kel 8 Absatz 2 zu stellen; 
Mi) den Transport von Bruteiern in eine Brüterei im Sperrgebiet bzw. in 
eine von der zuständigen Behörde benannte Brüterei außerhalb dieses 
Gebiets. Vor dem Versand sind Eier und Verpackungen zu desinfizie­
ren. 
Die Verbringungen gemäß Ziffern i), ii) und iii) müssen auf direktem Weg 
unter amtlicher Überwachung erfolgen. Sie dürfen erst nach einer 
veterinärhygienischen Kontrolle des Betriebs durch den amtlichen Tierarzt 
genehmigt werden. Die verwendeten Transportmittel sind vor und nach ihrer 
Verwendung zu reinigen und zu desinfizieren. 
g) Verbot der unbefugten Beförderung und Ausbringung von Stall- und Flüssig­
mist; 
h) Verbot des Betriebs von Ausstellungen, Märkten, Tierschauen und sonstiger 
Sammelstellen für Geflügel und andere Vögel; 
3. Die in der Schutzzone getroffenen Maßnahmen werden frühestens 21 Tage nach 
der ersten Reinigung und Desinfektion des Seuchenbetriebs gemäß Artikel 11 
aufgehoben. Danach wird die Schutzzone in die Überwachungszone eingeglie­
dert. 
(1) KOM(89)507 endg. 
- 11 -
4. In der Überwachungszone werden folgende Maßnahmen angewandt : 
a) Ermittlung sämtlicher Geflugelhaltungsbetrlebe innerhalb der Zone; 
b) Kontrolle der Geflügel- und Bruteierverbringungen innerhalb der 
Überwachungszone; 
c) innerhalb der ersten 15 Tage Verbot der Verbringung von Geflügel aus der 
Zone, es sei denn, das Geflügel wird auf direktem Weg zu einem von der zu­
ständigen Behörde benannten Schlachthof außerhalb der Überwachungszone be­
fördert. Das so erschlachtete Fleisch ist mit dem besonderen Genuß­
tauglichkeitskennzeichen gemäß Artikel 6 der Verordnung (EWG) Nr /.. 
über die Veterinärbedingungen für den innergemeinschaftlichen Handel mit 
frischem Fleisch von Geflügel und Zuchtfederwild und für die Einfuhr die­
ses Fleisches aus Drittländern zu versehen. 
d) Verbot der Verbringung von Bruteiern aus der Überwachungszone, es sei 
denn, sie werden an einen behördlich benannten Ort gebracht; vor dem Ver­
sand sind Eier und Verpackungen zu desinfizieren; 
e) Verbot der Verbringung von Stall- und Flüssigmist aus der Zone; 
f) Verbot des Betriebs von Ausstellungen, Märkten, Tierschauen und sonstigen 
Sammelstellen für Geflügel und andere Vögel; 
» 
g) unbeschadet der Bestimmungen der Buchstaben b) und c) Verbot des Trans­
ports von Geflügel innerhalb der Zone, außer zur Durchfuhr über große 
Fernverkehrsstraßen und Eisenbahnstrecken. 
5. Die in der Überwachungszone getroffenen Maßnahmen werden frühestens 30 Tage 
nach der ersten Reinigung und Desinfektion des Betriebs gemäß Artikel 11 auf­
gehoben. 
- 12 -
Artikel 10 
1. Die zuständige Behörde regelt das Verfahren, mit dessen Hilfe Verbringungen 
von Geflügel und Eiern aus dem Herkunftsbetrieb jederzeit feststellbar sind. 
2. Der Besitzer bzw. der Halter erteilt der zuständigen Behörde auf Verlangen 
Auskunft über die Zu- und Abgänge von Geflügel und Eiern in seinem Betrieb. 
3. Personen, die Geflügel- und Eiertransport oder -handel betreiben, müssen der 
zuständigen Behörde Auskunft über die Verbringung der beförderten bzw. gehan­
delten Tiere und Eier erteilen sowie entsprechende Belege beibringen können. 
Artikel 11 
1. Die zu verwendeten Desinfektionsmittel und ihre Konzentrationen müssen von 
der zuständigen Behörde festgelegt werden. 
2. Reinigungs- und Desinfektionsarbeiten finden unter behördlicher Aufsicht und 
nach amtstierärztlicher Weisung statt. 
Artikel 12 
Für die Probenahmen und Laboruntersuchungen zur Ermittlung des Virus der 
GeflügeIpest gelten die Bestimmungen des Anhangs I. 
Artikel 13 
1. Jeder Mitgliedstaat benennt 
a) ein oder mehrere Laboratorien, die technisch und personell in der Lage 
sind, die Pathogenität von Influenza-Virusisolaten (Anhang I Kapitel 7) zu 
bewerten und Influenza-A-Viren der Subtypen H5 und H7 zu identifizieren; 
- 13 -
b) ein oder mehrere Laboratorien, in denen Reagenzien zur Verwendung in re­
gionalen Laboratorien getestet werden; 
c) ein oder mehrere nationale Institute oder Laboratorien, in denen 
zugelassene Vakzinen geprüft werden dürfen, um die Übereinstimmung mit den 
Spezifikationen in der Vermarktungs-Zulassung zu bestätigen. 
2. Die in Anhang II aufgeführten nationalen Laboratorien sind für die 
Koordinierung der Standards und Diagnosemethoden, der Verwendung von 
Reagenzien und der Vakzinprüfungen zuständig. 
3. Die nationalen Laboratorien gemäß Absatz 2 sind zuständig für die 
Koordinierung der in den einzelnen staatlichen Diagnoselaboratorien für 
GeflügeIpest angewandten Standards und Diagnoseverfahren. Zu diesem Zweck 
a) können sie Diagnosereagenzien an regionale Laboratorien abgeben; 
b) kontrollieren sie die Qualität aller in dem betreffenden Mitgliedstaat 
verwendeten Diagnosereagenzien; 
c) veranlassen sie die regelmäßige Durchführung von Vergleichstests; 
d) halten sie Influenzavirus-lsolate aus bestätigten Seuchenfällen des be­
treffenden Mitgliedstaats vorrätig; 
e) bestätigen sie positive Ergebnisse der regionalen Diagnoselaboratorien. 
4. Die nationalen Laboratorien gemäß Anhang II stehen in Verbindung zum gemein­
schaftlichen Referenzlaboratorium gemäß Artikel 14. 
ArtlKel 14 
Das Gemeinschaftliche Referenzlaboratorium für GeflügeIpest ist in Anhang III 
aufgeführt. Die Aufgaben und Befugnisse dieses Laboratoriums werden nach dem 
Verfahren des Artikels 21 erlassen, sofern sie nicht bereits in Artikel 28 der 
Entscheidung 90/424/EWG des Rates über bestimmte Ausgaben im 
Veterinärbereich*1) geregelt sind. 
(1) ABI Nr. L 224 vom 18.08.1990, S. 19 
- 14 -
Artikel 15 
1. Impfungen gegen die GeflügeIpest mit amtlich zugelassenen Vakzinen können 
entweder prophylaktisch oder ergänzend zu den bei Ausbruch der Krankheit ge­
troffenen Bekämpfungsmaßnahmen durchgeführt werden. 
2. Den Beschluss, die Bekämpfungsmaßnahmen durch Impfungen zu ergänzen, trifft 
die Kommission in Zusammenarbeit mit dem betroffenen Mitgliedstaat nach dem 
Verfahren des Artikels 21. Sie berücksichtigt dabei 
- die Geflügelkonzentration im Seuchengebiet, 
- die Merkmale und die Zusammensetzung der zu verwendenden Impfstoffe, 
- die Verfahren der Überwachung der Abgabe, Lagerung und Verwendung der 
Impfstoffe, 
- die zu impfenden Geflügelarten und -kategorien, 
- die Impfgebiete. 
3. Wird ein Mitgliedstaat gemäß Artikel 2 ermächtigt, in einem begrenzten Teil 
seines Hoheitsgebiets Notimpfungen durchzuführen, so bleibt der Gesundheits­
status der anderen Landesteile davon unberührt, sofern nach abgeschlossener 
Impfung eine 3-monatige Verbringungssperre für die geimpften Tiere verhängt 
wird. 
ArtiKel 16 
1. Erweist sich die Geflügelpest in einer bestimmten Region als außergewöhnlich 
virulent und besteht die Gefahr einer Verschleppung, so trifft der betroffene 
Mitgliedstaat folgende Maßnahmen: 
- Er erklärt ein räumlich abgegrenztes Gebiet, das zumindest alle darin ge­
legenen Schutz- und Überwachungszonen umfaßt, zur "besonders gefährdeten 
Zone" (Gefahrenzone); 
- 15 -
- er ordnet in der "Gefahrenzone" die Maßnahmen gemäß Artikel 9 Absatz 3 an; 
- er verbietet die Verbringung von Lebendgeflügel und Bruteiern aus der 
"Gefahrenzone"; 
- er unterrichtet die Kommission und die anderen Mitgliedstaaten im Ständi­
gen Veterinärausschuß über die Seuchenlage und die getroffenen 
Bekämpfungsmaßnahmen. 
2. Die Abgrenzung der "Gefahrenzone" kann im Zuge der schrittweisen Aufhebung 
der Schutzzonen überprüft werden. Mit Aufhebung der letzten Überwachungszone 
werden die Vorschriften gemäß Absatz 1 aufgehoben. 
3. Bei Gefahr im Verzuge müssen die von dem Mitgliedstaat durchzuführenden 
Bekämpfungsmaßnahmen, insbesondere die Ausweisung der "Gefahrenzone" und die 
Anwendung der Vorschriften des Artikels 15, im Rahmen einer Entscheidung nach 
dem Verfahren des Artikels 21 beschlossen werden. 
Artikel 17 
1. Jeder Mitgliedstaat erstellt einen Notstandsplan mit Maßnahmen, die bei Aus­
bruch der Geflügelpest auf einzelstaatlicher Ebene zu treffen sind. 
Der Notstandsplan ermöglicht den Zugang zu Anlagen, Ausrüstungen, Personal 
und allen sonstigen Materialien, die für eine zügige und effiziente Seuchen­
tilgung erforderlich sind. Er enthält genaue Angaben über die impfstoffmen­
gen, die der betreffende Mitgliedstaat für eine etwaige Notimpfung für not­
wendig erachtet. 
- 16 -
2. Für die Aufstellung des Notstandsplans gelten sinngemäß die Kriterien der 
Entscheidung 91/42/EWG der Kommission vom 8. Januar 91(1) über die Kriterien 
für die Aufstellung der Notstandspläne zur Bekämpfung der Maul- und Klauen­
seuche gemäß Artikel 5 der Richtlinie 90/423/EWG des Rates. 
Die Kommission kann diese Kriterien unter Berücksichtigung der Besonderheiten 
der Geflügelpest nach dem Verfahren des Artikels 21 ändern oder ergänzen. 
3. Die nach den Kriterien gemäß Absatz 2 aufgestellten Pläne sind der Kommission 
binnen 12 Monate nach Inkrafttreten dieser Verordnung vorzulegen. 
4. Die Kommission prüft, ob die Pläne die Verwirklichung des gesteckten Ziels 
ermöglichen, und schlägt ggf. Abänderungen vor, um die einzelnen Pläne mit 
denen der anderen Mitgliedstaaten in Einklang zu bringen. 
Die Kommission genehmigt die Pläne, gegebenenfalls nach Abänderung, nach dem 
Verfahren des Artikels 21. 
Nach dem gleichen Verfahren können die Pläne zu einem späteren Zeitpunkt ge­
ändert oder ergänzt werden, um der Seuchenentwicklung Rechnung zu tragen. 
Artikel 18 
Tierärztliche Sachverständige der Kommission können in Zusammenarbeit mit den 
Behörden des betreffenden Mitgliedstaats Kontrollen vor Ort durchführen, inso­
weit dies für die einheitliche Anwendung dieser Verordnung erforderlich ist. Die 
Kommission unterrichtet die Mitgliedstaaten über die Ergebnisse dieser Kontrol­
len. 
(1) ABI Nr. L 23 vom 29.01.1991, S. 29 
- 17 -
Ein Mitgliedstaat, in dessen Gebiet eine Kontrolle durchgeführt wird, gewährt 
den Sachverständigen jede zur Erfüllung ihrer Aufgabe erforderliche Unterstüt­
zung . 
Die allgemeinen Durchführungsvorschriften zu diesem Artikel werden nach dem Ver­
fahren des Artikels 21 erlassen. 
Artikel 19 
Die Einzelheiten der finanziellen Beteiligung der Gemeinschaft an den sich aus 
dieser Verordnung ergebenden Maßnahmen sind in der Entscheidung 90/424/EWG des 
Rates über bestimmte Ausgaben im Veterinärbereich geregelt. 
Artikel 20 
Die Kommission kann die Anhänge dieser Verordnung nach dem Verfahren des Arti­
kels 21 ändern, um neuen Diagnoseverfahren Rechnung zu tragen. 
Artikel 21 
1. Die Kommission wird von dem durch Beschluß 68/361/EWG des RatestD einge­
setzten Ständigen Veterinärausschuß, im folgende "Ausschuß" genannt, unter­
stützt. 
2. Wird auf das Verfahren dieses Artikels Bezug genommen, so gelten folgende Be­
stimmungen: 
Der Vertreter der Kommission unterbreitet dem Ausschuß einen Entwurf der zu 
treffenden Maßnahmen. Der Ausschuß gibt seine Stellungnahme zu diesem Entwurf 
innerhalb einer Frist ab, die der Vorsitzende unter ßerücksichtigung der 
Dringlichkeit der betreffenden Frage - erforderlichenfalls durch eine Abstim­
mung - festsetzen kann. 
Die Stellungnahme wird in das Protokoll aufgenommen; darüber hinaus hat jeder 
Mitgliedstaat das Recht zu verlangen, daß seine Stellungnahme im Protokoll 
festgehalten wird. 
(1) ABl Nr. L 255 vom 18.10.1968, S. 23 
- 18 -
Die Kommission berücksichtigt so weit wie möglich die Stellungnahme des 
Ausschußes. Sie unterrichtet den Ausschuß darüber, inwieweit sie seine Stel­
lungnahme berücksichtigt hat. 
ArtiKel 22 
Diese Verordnung tritt am 1. Juli 1991 in Kraft. 
Diese Verordnung ist in allen ihren Teilen verbindlich und gilt unmittelbar in 
jedem Mitgliedstaat. 
Geschehen zu Brüssel am 
Im Namen des Rates 
-4$ -
ANHANG I 
VERFAHREN FÜR PIE BESTÄTIGUNG UNE 
DIE DIFFERENTIALPIAGNOSE PER GEFLÜGELPEST 
Die nachstehenden Verfahren zur Isolierung und Charakterisierung von ND-Viren 
sind Mindestrichtlinien für die Seuchendiagnose. 
Für die Verfahren zur Bestätigung und Differentialdiagnose der Geflügelpest gilt 
folgende Begriffsbestimmung: 
Die GeflügeIpest ist eine Infektionskrankheit, die von einem Influenza-A-Virus 
mit einem intravenösen Pathogenitatsindex in 6 Wochen alten Hühnern von 1,2 oder 
mehr verursacht wird, bzw. eine Influenza-A-Infekt ion der Virussubtypen H5 oder 
H7, bei der im Rahmen einer Nukleotid-Sequenzanalyse das Vorhandensein multipler 
basischer Aminosäuren im Spaltbereich des Hämagglutinins nachgewiesen wurde. 
KAPITEL 1 
ENTNAHME UNP BEHANDLUNG VON PROBENMATERIAL 
1. probenmateMal 
Kloakenabstriche (oder Fäzes) sowie Luftröhrenabstriche von erkrankten Vögeln; 
Fäzes oder Darminhalt, Hirngewebe, Luftröhre, Lungen, Leber, Milz sowie andere 
eindeutig infizierte Organe kürzlich verendeter Tiere. 
2. Behandlung des Probenmaterials 
Die vorgenannten Organe und Gewebe können gepoolt werden; nur Fäkalmaterial 
ist unbedingt gesondert zu behandeln. Abstriche sollten ganz in ein 
antibiotisches Medium getaucht, Fäkalproben und Organe in antibiotischem 
Medium (im geschlossenen Blender oder unter Verwendung von Stößel und Mörser 
und sterilem Sand) homogenisiert und zu 10 bis 20 % w/v suspendiert werden. 
Die Suspensionen sind für rund 2 Stunden bei Umgebungstemperatur (bei 4*C 
entsprechend länger) stehen zu lassen und danach durch Zentrifugieren zu klä­
ren (z.B. 800-1.000 x g für 10 Minuten). 
- 2P-
3. Antibiotisches Medium 
Verschiedene Laboratorien haben antibiotische Medien in unterschiedlicher Zu­
sammensetzung erfolgreich angewandt; für ein bestimmtes Land können die Labo­
ratorien gemäß Anhang II zu Rate gezogen werden. Für Fäkal proben sind Anti­
biotika in hoher Konzentration erforderlich; als typische Mischung gilt : 
10.000 Einheiten/ml Penicillin, 10 mg/ml Streptomycin, 0,25 mg/ml Gentamycin 
und 5.000 Einheiten/ml Mycostatin in phosphatgepufferter Kochsalzlösung. Für 
Gewebe und Luftröhrenabstriche können diese Mengen bis auf ein Fünftel ver­
ringert werden. Gegen ChIamvdienorqanismen können 50 mg/ml Oxytetracyclin zu­
gegeben werden. Bei der Herstellung des Mediums ist unbedingt der pH-Wert 
nach Zugabe der Antibiotika zu überprüfen und auf 7,0-7,4 zu korrigieren. 
KAPITEL 2 
Vi ms Isolierung 
Virusisolieruna in embrvonierten Hühnereiern 
Die AIlantoishöhlen von mindestens vier embryonierten Eiern, die 8-10 Tage 
vorbebrütet wurden, werden mit 0,1-0,2 ml des geklärten flüssigen Überstands 
beimpft. Im Idealfall sollten diese Eier aus einer spezifiziert pathogenfreien 
Herde stammen; ansonsten können auch Eier aus einer Herde verwendet werden, die 
nachweislich frei von GeflügeIpestvirus-Antikörpern ist. Die beimpften Eier wer­
den bei 37°C aufbewahrt und täglich durchleuchtet. Eier mit toten bzw. abster­
benden Embryonen sowie alle anderen Eier sind sechs Tage nach der Beimpfung auf 
4*C abzukühlen, und die AI I anto is-/Amnionflussigkeiten auf Hamagglutination zu 
untersuchen. Läßt sich keine Hamagglutination feststellen, so wird das vorge­
nannte Verfahren mit unverdünnter AI Iantois-/Amnionflussigkeit als Inokulum wie­
derholt. 
Wird Hämagglut(nation festgestellt, so ist im Kulturverfahren zu prüfen, ob eine 
Bakterienkontamination vorliegt. Sind Bakterien vorhanden, so können die Flüs­
sigkeiten durch einen 450nm-MembranfiI ter passiert und nach Zugabe weiterer An­
tibiotika in embryonierte Eier inokuliert werden. 
KAPITEL 3 
Different!aIdiaonose 
1. Vorläufige Differenzierung 
Da es wesentlich ist, zur Eindämmung der Virusverbreitung möglichst schnell 
Bekämpfungsmaßnahmen durchzuführen, sollten die regionalen Laboratorien in 
der Lage sein, zusätzlich zum NDV-Virus isolierte hamagglutinierende Viren 
als Influenza-Viren des Subtyps H5 bzw. H7 zu identifizieren. Die 
hamagglutinierenden Flüssigkeiten sollten einem Hamagglutinations-
Hemmungstest nach Kapitel 5 und 6 unterzogen werden. Eine positive Hemmung, 
d.h. 24 oder mehr, mit den für die Subtypen H5 oder H7 des Influenza-A­
Virus spezifischen polyklonalen Antiseren, deren Titer mindestens 29 be_ 
trägt, würde als vorläufiger Nachweis ausreichen und die Anordnung 
zwischenzeitlicher Bekämpfungsmaßnahmen rechtfertigen. 
2. Bestät i ounosnachwe i s 
Da es 13 Hamagglutinin-Subtypen und 9 Neuraminidase-Subtypen von Influenza-
Viren gibt, die ihrerseits variieren, ist es für die einzelnen nationalen 
Laboratorien weder praktikabel noch kostenwirksam, Antiseren vorrätig zu 
halten, die eine vollständige Antigen-Charakterisierung von Influenza-
Isolaten gestatten. Jedes nationale Laboratorium sollte jedoch 
(I) mittels Doppeldiffusion zum Nachweis des 
Gruppenantigens das Isolât als Influenza-A-Virus bestä­
tigen (Immunfluoreszenz- oder der EL ISA-Test können zum 
Nachweis von Gruppenantigenen verwendet werden, wenn 
das nationale Laboratorium diese Verfahren vorzieht); 
(ii) bestimmen, ob das Isolât vom Subtyp H5 bzw. H7 ist oder 
nicht; 
-Il-
(IM) einen intravenösen Pathogenitätstest gemäß Kapitel 7 
dieses Anhangs an 6 Wochen alten Hühnern durchführen. 
Ein Pathogenitatsindex von über 1,2 läßt auf das Vor­
liegen des Virus schließen, und die Bekämpfungs­
maßnahmen sind in vol lern Umfang durchzuführen (es wäre 
sinnvoll, wenn die nationalen Laboratorien durch 
Plaquetests gemäß Kapitel 8 die Fähigkeit eines 
Isolats, in Zellkulturen Plaques zu bilden, bestimmen 
würden). 
Die nationalen Laboratorien sollten dem gemeinschaftlichen Referenzlabor 
unverzüglich alle Geflügelpest- und alle H5- und H7-Isolate zur umfassenden 
Charakterisierung zuleiten. 
3. Weitere Tvpendifferenzieruna und Charakterisierung von Isolaten 
Alle von den nationalen Laboratorien erhaltenen hamagglutinierenden Viren 
werden im EG-ReferenzIaboratorium weiteren Antigen- und Genstudien unterzo­
gen, um den Aufgaben und Pflichten des Referenz labors entsprechend weitere 
Erkenntnisse über den Seuchenverlauf in der Europäischen Gemeinschaft zu 
gewinnen. 
Darüberhinaus obliegt dem gemeinschaftlichen Referenz labor die umfassende 
Antigentypisierung aller eingegangenen Influenza-Viren. Bei Viren des 
Subtyps H5 bzw. H7, deren intravenöser Pathogenitatsindex nicht über 1,2 
liegt, ist im Rahmen einer Nukleotid-Sequenzanalyse des Hamagglutiningens 
ferner zu bestimmen, ob im Spaltbereich des Hamagglutininproteins multiple 
basische Aminosäuren vorhanden sind. Viren, die trotz niedriger 
PathogenitätsIndizes keine multiplen basischen Aminosäuren im Spaltbereich 
vorweisen, erfordern umfassende Bekämpfungsmaßnahmen gegen die Geflugel­
pest. 
KAPITEL 4 
Serologische Untersuchungen auf GeflügeIpestvirus-Antikörper 
1. Im Rahmen von Tilgungsprogrammen, bei denen der Subtyp H des Seuchenvirus 
bereits bekannt ist, oder bei denen das holologe Virus als Antigen verwendet 
wird, kann die serologische Überwachung zur Infektionsermittlung im Wege von 
Hamagglutinations-Hemmungstest gemäß Kapitel 5 und 6 erfolgen. 
Ist der Hamagglutinln-Subtyp nicht bekannt, so kann eine Influenza-A-Virus-
lnfektion durch die Ermittlung von Antikörpern nachgewiesen werden, die ge­
gen die gruppenspezifischen Antigene gerichtet sind. Dazu können entweder 
die Doppeldiffusion (Kapitel 9 dieses Anhangs) oder der ELISA herangezogen 
werden (problematisch beim ELISA ist die Wirtsspezifitat des Tests, da 
Wirtsimmunoglobuline nachgewiesen werden müssen). Bei Wasservögeln fallen 
Doppel dlffusionstests selten positiv aus, und, sofern der Subtyp nicht be­
kannt ist, sollte man sich wahrscheinlich damit begnügen, Wasservögel auf 
Antikörper gegen die Subtypen H5 und H7 zu untersuchen. 
2. a) Probenmaterial 
Bei Beständen von weniger als 20 Vögeln sollten Blutproben von allen 
Tieren, bei größeren Beständen von 20 Tieren entnommen werden. (Sind 
mindestens 25 X des Bestands positiv, so wird auf diese Weise, ungeach­
tet der Bestandsgröße, mit über 99 %iger Wahrscheinlichkeit mindestens 
ein Positivserum ermittelt). Nach Gerinnung des Blutes wird das Serum 
zwecks Untersuchung entfernt. 
b) AntiKörperorufung 
Die einzelnen Serumproben werden im Rahmen der Standard-
Hämagglutinations-Hemmungstests nach Kapitel 6 auf ihre Fähigkeit ge­
prüft, die Hamagglutination durch Virusantigen zu hemmen. 
Es ist umstritten, ob 4 oder 8 Hamagglutinin-Einheiten (HAU) für den 
Hamagglutinations-Hemmungstest (HI-Test) verwendet werden sollen. Bei­
des dürfte vertretbar sein, so daß die Entscheidung den nationalen Labo­
ratorien überlassen werden sollte. Von dem verwendeten Antigen hängt je­
doch ab, ab wann ein bestimmtes Serum als positiv gilt : - Bei 4 HAU 
gilt jedes Serum mit einem Titer von 24 oder mehr-f bei 8 HAU jedes Se_ 
rum mit einem Titer von 23 oder mehr als positiv. 
KAPITEL 5 
HAMAGGLUTINATIONSTEST (HA-TEST) 
Reagenzien 
1. Isotonische Salzlösung, phosphatgepuffert (0,05M) auf einen pH-Wert von 
7,0-7,4. 
2. Rote Blutkörperchen, von mindestens drei spezifiziert pathogenfreien Hüh­
nern entnommen (ist dies nicht möglich, kann Blut von Vögeln entnommen wer­
den, die regelmäßig überwacht wurden und nachweislich frei von Geflügelpest 
-Antikörpern sind) und in gleicher Menge Alsever-Lösung gepoolt. Die 
Blutkörperchen sind vor ihrer Verwendung dreimal in gepufferter Kochsalz­
lösung zu reinigen. Für den Test wird eine 1 %-Suspension (Hämatokritwert 
v/v) in gepufferter Kochsalzlösung empfohlen. 
3. Als Standardantigene liefert bzw. empfiehlt das Gemeinschaftliche Referenz­
labor schwach virulente H5- und H7-Viren. 
Verfahren 
1. 0.025M gepufferte Salzlösung in alle (V-förmigen) Mulden eines Kunststoff-
Mikrotitrators träufeln. 
2. 0,025 ml Virussuspension (d.h. AIlantois-Flüssigkeit) in die erste Mulde 
geben. 
3. Mit einem MikrotI trationsverdunner über das Testtablett verteilt zweifache 
Virusverdünnungen (1:2 bis 1:4096) herstellen. 
4. Weitere 0.025 ml gepufferte Kochsalzlösung in jede Mulde einträufeln. 
5. 0,25 ml 1 %ig suspendierte rote Blutkörperchen in alle Mulden geben. 
15-
6. Durch Antippen mischen und bei 4CC aufbewahren. 
7. Tablett nach 30-40 Minuten, wenn sich die Kontrollen gesetzt haben, ablesen. 
Dazu Tablett leicht anheben und auf Vorliegen bzw. Fehlen einer 
tropfenförmigen Strömung der roten Blutkörperchen prüfen. Mulden ohne 
HamagglutinatIon sollten die gleiche Strömungsrate aufweisen wie die virus­
freien Kontrollzellen. 
8. Als Hamagglutinationstiter gilt die höchste Verdünnung, bei der die roten 
Blutkörperchen agglutinieren, wobei davon ausgegangen werden kann, daß diese 
Verdünnung 1 hamagglutinierende Einheit (HAU) enthält. Für eine genauere Be­
stimmung des Hamagglutinationstiters müssen Hamagglutinationstests mit 
Virusmaterial aus eng aufeinander folgenden Anfangsverdünnungsstufen (d.h. 
1:3, 1:4, 1:5, 1:6 usw.) durchgeführt werden. Dieses Verfahren empfiehlt 
sich zur akkuraten Bereitung von Antigenmaterial für Hamagglutinations-
Hemmungstests (Kapitel 6). 
KAPITEL 6 
HAMAGGLUTI NAT IONS-HEMMUNGSTEST f HI-TEST1 
Reagenzien (siehe Kapitel 5) 
1. Phosphatgepufferte Kochsalzlösung (PBS). 
2. Virushaltige AIlantois-Flussigkeit, mit gepufferter Kochsalzlösung auf 4 
bzw. 8 hamagglutinierende Einheiten (HAU) je 0,025 ml verdünnt. 
3. 1 %ig suspendierte rote Blutkörperchen (Hühner). 
4. Negatives Hühner-KontrolI serum. 
5. Positives KontroiIserum. 
Verfahren 
1. 0,025 ml gepufferte Kochsalzlösung in alle (V-förmige) Mulden eines 
Kunststoff-Mikrotitrators träufeln. 
2. 0,025 ml Serum In die erste Mulde geben. 
l$-
3. Mit einem Mikrotitrationsverdunner über das Testtablett verteilt zweifache 
Serumverdünnungen herstellen. 
4. 0,025 ml verdünnte AIlantois-Flüssigkeit mit 4 bzw. 8 HAU zugeben. 
5. Durch Antippen mischen und Tablett für mindestens 60 Minuten bei 4*C bzw. 
für mindestens 30 Minuten bei Raumtemperatur aufbewahren. 
6. 0,025 ml 1 %ig suspendierte rote Blutkörperchen in alle Mulden geben. 
7. Durch Antippen mischen und bei 4*C aufbewahren. 
8. Testtabletts nach 30-40 Minuten, wenn sich die Kontrollzellen gesetzt haben, 
ablesen. Dazu Tablett leicht anheben und auf Vorliegen bzw. Fehlen einen 
tropfenförmigen Strömung achten. Die Strömungsrate sollte der in den 
KontrolImulden entsprechen, die lediglich rote Blutkörperchen (0,025 ml) und 
gepufferte Kochsalzlösung (0,05 ml) enthalten. 
9. Als Hemmt iter gilt die höchste Antiserumverdünnung, die 4 bzw. 
8 Viruseinheiten vollständig hemmt (Jeder Test sollte zur Bestätigung der 
erforderlichen HAU eine Hamagglutinationstitrierung beinhalten). 
10. Die Zuverlässigkeit der Ergebnisse hängt ab von einem Titerergebnis von we­
niger als 23 bei 4 HAU bzw. 22 bei 8 HAU bei negativem KontrolI serum und 
von einem Titerergebnis, das innerhalb einer Verdünnung des bekannten 
Titerwertes des positiven KontrolI serums liegt. 
KAPITEL 7: INTRAVENÖSER PATHOGENITATSINDEX 
1. Infizierte AIlantois-Flüssigkeit der niedrigsten verfügbaren Passage, mög­
lichst aus erster Isolierung ohne Selektion, 10-1 jn steriler isotonischer 
Kochsalzlösung verdünnen. 
2. 0,1 ml verdünnte Virus intravenös in jeweils zehn 6 Wochen alte Hühner 
(spezifiziert pathogenfreie Tiere) injizieren. 
3. Die Tiere über einen Zeitraum von zehn Tagen in 24 Stunden-Abständen unter­
suchen. 
-n-
4. Dabei jeweils wie folgt bewerten: normal (0), krank (1), schwerkrank (2) 
bzw. tot (3). 
5. Nach folgendem Beispiel Ergebnisse aufzeichnen und Index berechnen: 
Klinische 
Symptome Tag nach der Beimpfung 
123456789 10 Insgesamt Bewertung 
Normal 
Krank 
Schwerkrank (*) 
Tot 10 200000000 12 X 0 - 0 
0420000000 6X1 - 6 
0222000000 6x2 - 12 
0 2 6 8 10 10 10 10 10 10 76 x 3 - 228 
INSGESAMT - 246 
Index - Durchschnittswert je Tier und Prüfung - 246 « 2,46 
100 
(*) Es handelt sich hier um einen subjektiven klinischen Befund, der bei den be­
troffenen Tieren in der Regel folgende Symptome voraussetzt: Atem­
beschwerden, Depressionen, Diarrhoe, Zyanose an bloßer Haut oder Kehl läppen, 
Ödeme an Gesicht und/oder Kopf, Nervosität. 
KAPITEL 8 
BEURTEILUNG DER PLAQUEBILDUNGSFXHIGKEIT (PLAQUE-TEST) 
1. Um eine optimale Plaquezahl auf dem Testtablett zu gewährleisten, empfiehlt 
es sich, eine Virusverdünnungsreihe zu verwenden. Zehnfache Verdünnungen bis 
10-7 in gepufferter Kochsalzlösung dürften ausreichen. 
2. In Petrischalen von 5 cm Durchmesser konfluierende Zellrasen 
(Kükenembryozellen) bzw. eine angemessene Zellinie (zum Beispiel Madin-Darby 
Rinderniere) bereiten. 
3. In jeweils zwei Petrischalen 0,2 ml einer jeden Virusverdünnung zugeben und 
das Virus 30 Minuten absorbieren lassen. 
4. Nach dreimaliger Reinigung mit gepufferter Salzlösung die infizierten Zeilen 
mit dem entsprechenden Medium überschichten, das 1 % w/v Agar und entweder 
0,01 mg/ml Trypsin oder kein Trypsin enthält. Es ist darauf zu achten, daß 
dem Kulturmedium kein Serum zugegeben wird. 
-ze-
5. Nach 72-stündiger Inkubation bei 37°C dürften die Plaques groß genug sein. 
Sie werden am besten erkennbar durch Entfernen des überschichteten Agar und 
durch kristallviolette Anfärbung (0,5 % w/v) des Zellrasens in 25 % v/v 
Äthanol. 
6. Bei Inkubation mit Trypsin im Kulturmedium sollten sämtliche Viren deutlich 
sichtbare Plaques bilden. Enthält die Überschichtung kein Trypsin, bilden 
nur hühnerInfizierende Viren Plaques. 
KAPITEL 9 
IMMUNPOPPELPIFFUSION 
Das Influenza-A-Virus wird vorzugsweise anhand der Nukleokapsid- oder Matrix-
Antigene nachgewiesen, die allen Influenza-A-Viren gemeinsam sind. Dazu werden 
generell Immundoppel diffusions-Tests herangezogen, die entweder konzentrierte 
Viruspräparate oder Extrakte von infizierter Chorioallantoismembran (CAM) vor­
aussetzen. 
Geeignete Viruspräparate können gewonnen werden durch einfache 
Hochgeschwindigkeits-Zentrifugierung infektiöser AIlantois-Flussigkeit und Auf­
spaltung des Virus, um die internen Nukleokapsid- und Matrix-Antigene durch Be­
handlung mit dem Detergens Natrium-Lauroyl-Sarkosinat freizusetzen zu können. 
Säurepräzipitat ion kann ebenfalls verwendet werden; dazu 1N HCl zur infektiösen 
AIlantois-Flüssigkeit geben, um einen endgültigen pH-Wert von 3,5 bis 4,0 zu er­
reichen, mindestens eine Stunde bei 0°C kühlen und 10 Minuten mit niedriger Ge­
schwindigkeit bei 1.000 g zentrifugieren. Der Überstand kann beseitigt und das 
virusenthaltende Präzipitat in einer Mindestmenge Glycin-Sarkosyl-Puffer (1% 
Natrium-Lauroyl-Sarkosinat, gepuffert auf einen pH-Wert von 0,9 mit 0.5M Glycin) 
resuspendiert werden. Beide Präparate enthalten Nukleokapsid- und Matrix-
Antigene. 
Beard (1970) erläuterte die Bereitung von Nukleokapsid-reiehern Antigen aus 
Chorioallantoismembran, die von infizierten Eiern entfernt wurde. Dieses Verfah­
ren beinhaltet folgende Schritte: Entfernung der Chorioallantoismembran von in­
fizierten Hamagglutinin-positiven Eiern; Vermählen oder Homogenisieren der Mem­
bran; dreimaliges Einfrieren und Auftauen mit anschließender ZentrIfugierung bei 
1.000 g für 10 Minuten. Das Pellet beseitigen, und den Überstand zur Verwendung 
als Antigen mit 0,1 X Formalin behandeln. 
-2S-
Jedes dieser beiden Antigene kann in Doppeldiffusionstests mit 1% Agarose oder 
Agargels mit 8,0% Natriumchlorid, auf 0,1M Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von 
7,2 gebracht, verwendet werden. Das Influenza-A-Virus wird bestätigt durch 
Präzipitationslinien, die dadurch entstehen, daß sich das Testantigen und das 
bekannte positive Antigen gegen ein bekanntes positives Antiserum richten und zu 
e i ner I dent i tätsIi n i e verschmeIzen. 
30-
ANHANG I 
VERZEICHNIS NATIONALER LABORATORIEN FÜR GEFLÜGELPEST 
Be I g i en 
Dänemark 
Deutschland 
Frankreich 
Griechenland 
Irland 
Italien 
Luxemburg 
Niederlande 
Portugal 
Spanien 
Vereinigtes Königreich Institut National de Recherches Vétérinaires, 
Groeselenberg 99, B - 1180 Bruxelles 
National Veterinary Laboratory, Poultry Disease 
Division, HangeWej 2, DK - 8200 Aarhus N. 
Institut für Kleintierzucht der Bundesforschungs­
anstalt für Landwirtschaft, Braunschweig-Völken­
rode, Postfach 280, D - 3100 Celle 
Centre National d'Etudes Vétérinaires et Alimenta­
tion-Laboratoire Central de Recherches Agricoles 
et Porcines, B.P. 53, F - 22440 Ploufragan 
Veterinary Research Laboratory, Abbotstown, 
Castleknock, Dublin 15 
Istituto Patolgie Aviaire, Facolta di Medicina 
Veterinaria, Universita di Napoli, Via Aniezzo 
Falcone 394, I 80127 Napoli F Delpino 1 
Institut National de Recherches Vétérinaires, 
Groeselenberg 99, B - 1180 Bruxelles 
Centraal Diergeneeskundig Instituut, Vestiging 
Virologie, Hourtibweg 39, NL - 8221 RA Lelystad 
Laboratôrio Nacional de Investigaçao Veterinaria 
(LNIV), Estrada de Benfica 701, 1500 Lisboa 
Central Veterinary Laboratory, New Haw, Weybridge, 
GB - Surrey KT15 3NB 
-?Y-
ANHANG III 
GEMEINSCHAFTLICHES REFERENZLABORATORIUM FÜR GEFLÜGELPEST 
Central Veterinary Laboratory 
New Haw 
Weybr i dge 
Surrey KT15 3NB 
United Kingdom 

ISSN 0254-1467 
KOM(91)304endg. 
DOKUMENTE 
DE 03 
Katalognummer : CB-CO-91-344-DE-C 
ISBN 92-77-74815-X 
Amt für amtliche Veröffentlichungen der Europäischen Gemeinschaften 
L-2985 Luxemburg