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VERORDNUNG (EWG) Nr. 1822/86 DER KOMMISSION

vom 30. Mai 1986

zur Änderung der Verordnung (EWG) Nr. 1061/69 hinsichtlich der Analysemethoden zur Bestimmung des Stärkegehalts in Sojaproteinkonzentraten sowie in Waren, die solche Erzeugnisse enthalten

DIE KOMMISSION DER EUROPÄISCHEN

GEMEINSCHAFTEN -

gestützt auf den Vertrag zur Gründung der Europäischen Wirtschaftsgemeinschaft,

gestützt auf die Verordnung (EWG) Nr. 97/69 des Rates vom 16. Januar 1969 über die Maßnahmen zur einheitlichen Anwendung des Schemas des Gemeinsamen Zolltarifs (1), zuletzt geändert durch die Verordnung (EWG) Nr. 2055/84 (2), insbesondere auf Artikel 3,

in Erwägung nachstehender Gründe:

In Artikel 1 der Verordnung (EWG) Nr. 1061/69 der Kommission (3), zuletzt geändert durch die Verordnung (EWG) Nr. 419/77 (4), sind die Analysemethoden für die Zwecke der Verordnung (EWG) Nr. 3033/80 des Rates vom 11. November 1980 zur Festlegung der Handelsregelung für bestimmte aus landwirtschaftlichen Erzeugnissen hergestellte Waren (5) festgelegt.

Untersuchungen haben ergeben, daß die Analysemethode, die für die Bestimmung des Stärkegehalts von Sojaproteinkonzentraten sowie der Sojaproteinkonzentrate enthaltenden Waren vorgeschrieben ist, durch eine geeignetere Methode zu ersetzen ist.

Die im Anhang aufgeführte Methode ist zuverlässiger. Bestimmte chemische Bezeichnungen sind anzupassen.

Die in dieser Verordnung vorgesehenen Maßnahmen entsprechen der Stellungnahme des Ausschusses für das Schema des Gemeinsamen Zolltarifs -

HAT FOLGENDE VERORDNUNG ERLASSEN:

Artikel 1

Die Verordnung (EWG) Nr. 1061/69 wird wie folgt geändert:

1. Artikel 1 erhält folgende Fassung:

»Artikel 1

(1) Hängt es von dem gewichtsmässigen Gehalt an Stärke einer in Artikel 1 der Verordnung (EWG) Nr. 3033/80 aufgeführten Ware ab, zu welcher Tarifstelle des Gemeinsamen Zolltarifs diese Ware gehört, so wird dieser Gehalt nach der in dieser Ware enthaltenen Menge an wasserfreier Stärke ermittelt.

(2) Der gewichtsmässige Anteil an Stärke in Sojaproteinkonzentraten sowie in Waren, die Sojaproteinkonzentrate enthalten, wird nach der im Anhang V festgelegten enzymatischen Methode bestimmt.

(3) Der gewichtsmässige Gehalt an Stärke anderer als der in Absatz 2 genannten Waren wird nach dem abgewandelten EWERS-Verfahren bestimmt, das in der Anlage I Ziffer 1 zur Dritten Richtlinie 72/199/EWG der Kommission (1) beschrieben worden ist.

Enthält die betreffende Ware jedoch andere als native Stärken und enthält sie gleichzeitig weder Saccharose noch Invertzucker, so wird der Stärkegehalt in dieser Ware nach der in Anhang I der genannten Richtlinie beschriebenen Verzuckerungsmethode festgestellt.

Zur Anwendung der Bestimmungen dieses Absatzes gelten Dextrine als andere als native Stärke.

(1) ABl. Nr. L 123 vom 29. 5. 1972, S. 6."

2. Artikel 4 erhält folgende Fassung:

»Artikel 4

Das Verhältnis von D-Mannit in den Waren der Tarifstellen 29.04 C III und 38.19 T des Gemeinsamen Zolltarifs zu ihrem Gehalt an D-Glucitol (Sorbit) wird nach der in Anhang IV beschriebenen Methode festgestellt."

3. Anhang IV wird wie folgt geändert:

a) Der Titel erhält folgende Fassung:

»BESTIMMUNG VON D-MANNIT IN WAREN DER TARIFSTELLEN 29.04 C III UND 38.19 T DES GEMEINSAMEN ZOLLTARIFS, BEZOGEN AUF IHREN GEHALT AN D-GLUCITOL";

b) Absatz I erhält folgende Fassung:

»I. Prinzip

Zur Bestimmung des Gehalts an D-Mannit in Waren der Tarifstellen 29.04 C III und 38.19 T des Gemeinsamen Zolltarifs, bezogen auf ihren Gehalt an D-Glucitol, wird die gaschromatographische Analyse verwendet. Hierzu müssen die nichtfluechtigen Erzeugnisse zunächst in ihre Acetylderivate überführt werden.";

c) Absatz III Buchstabe b) erhält folgende Fassung:

»b) Durchführung der gaschromatographischen Analyse:

Einspritzblocktemperatur: 300 °C;

Säulentemperatur: 210 °C;

Strömungsgeschwindigkeit des Trägergases (z. B. Stickstoff): 25 ml/Minute;

Strömungsgeschwindigkeit des Wasserstoffs: 25 ml/Minute;

eingespritzte Menge: 1 Mikroliter.

Der D-Mannitpeak erscheint vor dem D-Glucitolpeak.

Um den Gehalt an D-Mannit in den analysierten Waren, bezogen auf ihren Gehalt an Sorbit, zu bestimmen, genügt es, das Verhältnis zwischen den Flächen der beiden entsprechenden Peaks zu berechnen.".

4. Der Anhang zu dieser Verordnung wird Anhang V.

Artikel 2

Diese Verordnung tritt am 21. Tag nach ihrer Veröffentlichung im Amtsblatt der Europäischen Gemeinschaften in Kraft.

Diese Verordnung ist in allen ihren Teilen verbindlich und gilt unmittelbar in jedem Mitgliedstaat.

Brüssel, den 30. Mai 1986

Für die Kommission

COCKFIELD

Vizepräsident

(1) ABl. Nr. L 14 vom 21. 1. 1969, S. 1.

(2) ABl. Nr. L 191 vom 19. 7. 1984, S. 1.

(3) ABl. Nr. L 141 vom 12. 6. 1969, S. 24.

(4) ABl. Nr. L 56 vom 1. 3. 1977, S. 46.

(5) ABl. Nr. L 323 vom 29. 11. 1980, S. 1.

ANHANG

»ANHANG V

1.2 // 1. // Zweck und Anwendungsbereich // // Die Methode ermöglicht die Bestimmung des Stärkegehalts in Sojaproteinkonzentraten und Erzeugnissen, die Sojaproteinkonzentrate enthalten. // 2. // Definition // // Als Stärkegehalt der in Ziffer 1 genannten Erzeugnisse wird der Wert T verstanden, wie er in Ziffer 7 der vorliegenden Methode errechnet wird. // 3. // Prinzip // // Die Probe wird mit wäßrigem Ethanol (40 % vol) gewaschen, um die Zucker und die unter diesen Bedingungen löslichen Stärkeabbauprodukte zu entfernen. Der Rückstand wird mit Natriumhydroxid aufgeschlossen und die Stärke mit Amyloglucosidase in Glukose gespalten. Die Glukose wird enzymatisch bestimmt. // 4. // Reagenzien // // Es ist bidestilliertes Wasser zu verwenden. // 4.1. // Wäßriges Ethanol 40 % vol. // 4.2. // Natriumhydroxid-Lösung, c = 0,5 mol/l. // 4.3. // Essigsäure (Eisessig), mindestens 96 % mas. // 4.4. // Enzymlösung: // // Unmittelbar vor Gebrauch ca. 10 mg Amyloglucosidase (EC 3.2.1.3) (6 U/mg) in 1 ml Wasser auflösen (1). // 4.5. // Triethanolaminpuffer: // // 14,0 g Triethanolaminhydrochlorid (Tris(2-hydroxyethyl)ammoniumchlorid) und 0,25 g Magnesiumsulfat (MgSO4;7H2O) in 80 ml Wasser lösen, ca. 5 ml NaOH (c = 5 mol/l) zusetzen und pH mit NaOH (c = 1 mol/l) auf 7,6 einstellen und mit Wasser auf 100 ml auffuellen. Der Puffer ist bei + 4° C mindestens 4 Wochen haltbar. // 4.6. // NADP (Nicotinamid-adenin-dinucleotidphosphat-dinatriumsalz)-Lösung // // 60 mg NADP in 6 ml Wasser lösen. Diese Lösung ist bei + 4 °C mindestens 4 Wochen haltbar. // 4.7. // ATP (Adenosin-5-triphosphat-dinatriumsalz)-Lösung: // // 300 mg ATP 3H2O und 300 mg Natriumhydrogencarbonat (NaHCO3) in 6 ml Wasser lösen. Diese Lösung ist bei + 4° C mindestens 4 Wochen haltbar. // 4.8. // HK/G6P-DH (HexokinaseEC 2.7.1.1)- und Glukose-6-phosphat-Dehydrogenase - (EC 1.1.1.49)-Suspension: // // 280 U HK und 140 U G6P-DH in 1 ml Ammoniumsulfatlösung (c = 3,2 mol/l) suspendieren. Diese Suspension ist bei + 4 °C mindestens ein Jahr haltbar. // 5. // Geräte // 5.1. // Zentrifuge mit mindestens 1 000 g (berechnet auf Mitte Zentrifugenrohr). // 5.2. // Zentrifugengläser, 100 ml. // 5.3. // Magnetrührer-Thermostat (60° C). // 5.4. // Magnetrührer. // 5.5. // UV-Spektrophotometer mit Kuevette von 1 cm Schichtdicke. // 5.6. // Pipetten für die Enzymaktivität.

// 6. // Verfahren // 6.1. // Waschen der Probe mit Ethanol, Aufschluß mit Natriumhydroxid und enzymatische Hydrolyse der Stärke: // 6.1.1. // Je nach dem erwarteten Stärkegehalt ist eine der nachstehenden Einwaagen zu wählen (der Stärkegehalt darf 0,4 g je Einwaage nicht überschreiten): 1.2.3.4 // // // // // Erwarteter Stärkegehalt des Erzeugnisses in g/100 g // Ungefähre Einwaage (p) in g // Inhalt des Meßkolbens in ml // Faktor (f) der Verdünnung zu einem Liter // // // // // > 70 // 0,35-0,4 // 500 // 2 // 20-70 // max. 0,5 // 500 // 2 // 5-20 // max. 1 // 250 // 4 // < 5 // max. 2 // 200 // 5 // // // // 1.2 // 6.1.2. // Probe in ein Zentrifugenglas (5.2) auf 0,1 mg genau einwägen und mit 50 ml Ethanol 40 % vol (4.1) versetzen. // 6.1.3. // 20 Minuten lang bei Raumtemperatur mit dem Magnetrührer rühren. // 6.1.4. // Magnetrührstab im Glas belassen und 5 Minuten lang zentrifugieren. // 6.1.5. // Überstand vorsichtig absaugen (Wasserstrahlpumpe oder Pasteurpipette). // 6.1.6. // Rückstand mit 25 ml Ethanol 40 % vol (4.1) durchrühren. // 6.1.7. // Zentrifugieren und Überstand vorsichtig absaugen. // 6.1.8. // Das Vorgehen nach den Ziffern 6.1.6. und 6.1.7. ist mindestens noch einmal zu wiederholen. // 6.1.9. // Rückstand mit 50 ml Natriumhydroxidlösung (c = 0,5 mol/l) (4.2) versetzen und 30 Minuten unter ständigem Rühren im Magnetrührer-Thermostaten (5.3) bei 60° C belassen. // 6.1.10 // Mit wenig Essigsäure (4.3) pH auf 4,6 bis 4,8 einstellen. // 6.1.11. // Zentrifugenglas in den Magnetrührer-Thermostaten (5.3) (60° C) stellen, 1 ml Enzymlösung (4.4) zusetzen und 30 Minuten unter Rühren inkubieren. // 6.1.12. // Nach dem Abkühlen quantitativ in einen geeichten Meßkolben überführen und mit Wasser bis zur Marke auffuellen. // 6.1.13. // Falls erforderlich, durch ein Faltenfilter filtrieren. // 6.2. // Bestimmung der Glukose: // 6.2.1. // Die Probelösung muß 100 bis 1 000 mg Glukose je Liter enthalten, was einem DE340 zwischen 0,1 und 1,0 entspricht. Die Extinktion (E340) einer Verdünnung von einem Teil Probelösung mit 30 Teilen Wasser darf, gegen Luft gemessen, 0,4 nicht überschreiten. // 6.2.2. // Pufferlösung (4.5) auf Raumtemperatur (20° C) bringen. // 6.2.3. // Die Temperatur der Reagenzien und der Probelösung muß im Zeitpunkt der Messung 20° C bis 25° C betragen. // 6.2.4. // Extinktion bei 340 nm gegen Luft messen (keine Kuevette im Referenzstrahl). // 6.2.5. // Durchführung der Messung nach dem folgenden Pipettierschema: 1.2.3 // // // // In die Kuevetten pipettieren // Leerwert (ml) // Probe (ml) // // // // Puffer (4.5) // 1,00 // 1,00 // NADP (4.6) // 0,10 // 0,10 // ATP (4.7) // 0,10 // 0,10 // Probelösung (6.1.12 oder 6.1.13) // - // 0,10 // Wasser // 2,00 // 1,90 // // // 1.2 // // Mischen. Nach ca. 3 Minuten Extinktion der Lösungen messen (E1). Auslösen der Reaktion durch Zugabe von: 1.2.3 // // // // HK/G6P-DH (4.8) // 0,02 // 0,02 // // // 1.2 // // Mischen. Ende der Reaktion abwarten (ca. 15 Minuten) und Extinktion der Lösungen messen (E2). Falls die Reaktion nach 15 Minuten nicht zum Stillstand gekommen ist, Extinktionen weiter in 5 Minuten-Abständen messen, bis eine konstante Extinktionszunahme in 5 Minuten erreicht ist. Wurden bei E2 konstante Extinktionszunahmen festgestellt, sind die Extinktionen auf den Zeitpunkt der Zugabe der Enzymsuspension (4.8) zu extrapolieren. // // // 6.2.6 // Für Reagentienleerwert und Probe berechnet man die Extinktionsdifferenz E2 E1. Die Extinktionsdifferenz des Leerwerts ist von derjenigen der Probe abzuziehen (= DE): // // DE340 = DE Probe DE Reagentienleerwert // // Daraus ergibt sich der Gehalt G der Probelösung an Glukose: // // Glukosegehalt G in g/l Probelösung 1.2.3.4 // // G = // 3,22 × 180,16 6,3 × 1 × 0,1 × 1 000 // × DE340 = 0,921 × D E340 1.2 // // (Molare Masse der Glukose 180,16 g/mol) // 6.2.7. // Wenn die Messung bei 365 nm oder 334 nm durchgeführt wird, ist statt des Werts 6,3 in der Formel der Ziffer 6.2.6. der Wert 3,5 bzw. 6,18 zu verwenden. // 7. // Berechnung des Stärkegehalts T // // Stärkegehalt T in g/100 g 1.2.3 // // T = // 100 × 0,9 × G p × f 1.2 // // In dieser Formel bedeuten: 1.2.3 // // G // = Glukosegehalt, in g/l (6.2.6), // // f // = Verdünnungsfaktor (6.1.1) // // p // = Einwaage in g, // // 0,9 // = Umrechnungsfaktor von Glukose in Stärke." enzymatische Analyse.

(1) U entspricht einer International Unit für die