2.

nach dem Eintrag für E 960c(i) werden folgende Einträge eingefügt: „E 960c(ii) REBAUDIOSID M HERGESTELLT DURCH ENZYMATISCHE KONVERSION VON HOCHREINEM REBAUDIOSID A AUS BLATTEXTRAKTEN DER STEVIAPFLANZE Synonyme Definition Rebaudiosid M hergestellt durch enzymatische Konversion von hochreinem Rebaudiosid A aus Blattextrakten der Steviapflanze ist ein Steviolglycosid, das überwiegend aus Rebaudiosid M und geringen Mengen anderer Steviolglycoside wie Rebaudiosid A und Rebaudiosid D besteht. Rebaudiosid M wird durch enzymatische Biokonversion von hochgereinigten Steviolglycosid- Rebaudiosid-A-Extrakten (95 % Steviolglycoside) der Pflanze Stevia rebaudiana Bertoni unter Verwendung von UDP-Glycosyltransferase-Enzymen und Saccharose-Synthase-Enzymen gewonnen, die aus den gentechnisch veränderten Stämmen von E. coli (pPM294, pFAF170 und pSK401) gewonnen werden, durch die der Transport von Glucose aus Saccharose und UDP-Glucose zu Steviolglycosiden über glycosidische Bindungen erleichtert wird. Nach Entfernen der Enzyme durch Fest-Flüssig-Trennung und Wärmebehandlung erfolgt die Reinigung durch Konzentration von Rebaudiosid M durch Harz-Adsorption, gefolgt von der Rekristallisation der Steviolglycoside mit einem Endprodukt, das mindestens 95 % Rebaudiosid M enthält. In dem Lebensmittelzusatzstoff dürfen keine lebensfähigen Zellen von E. coli (pPM294, pFAF170 und pSK401) oder deren DNA festgestellt werden. Chemische Bezeichnung Rebaudiosid M: 13-[(2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]-kaur-16-en-18-säure, 2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosylester Chemische Formel Trivialname Formel Konversionsfaktor Rebaudiosid M C56H90O33 0,25 Molmasse und CAS-Nr. Trivialname CAS-Nummer Molmasse (g/mol) Rebaudiosid M 1220616-44-3 1 291,29 Gehalt mindestens 95 % Rebaudiosid M, in der Trockenmasse Beschreibung weißes bis hellgelbes Pulver, etwa 150- bis 350-mal süßer als Saccharose (bei 5 % Sucroseäquivalent) Merkmale Löslichkeit mäßig bis gut löslich in Wasser pH-Wert 4,5–7,0 (Lösung 1 zu 100) Reinheit Asche insgesamt höchstens 1 % Trocknungsverlust höchstens 6 % (105 °C, 2 Stunden) Lösungsmittelreste höchstens 5 000 mg/kg Ethanol Arsen höchstens 0,015 mg/kg Blei höchstens 0,2 mg/kg Kadmium höchstens 0,015 mg/kg Quecksilber höchstens 0,07 mg/kg Restproteingehalt höchstens 5 mg/kg Partikelgröße mindestens 74 μm [bei einem 200-Mesh-Sieb mit einer Partikelgrößenobergrenze von 74 μm] E 960c(iii) REBAUDIOSID D HERGESTELLT DURCH ENZYMATISCHE KONVERSION VON HOCHREINEM REBAUDIOSID A AUS BLATTEXTRAKTEN DER STEVIAPFLANZE Synonyme Definition Rebaudiosid D hergestellt durch enzymatische Konversion von hochreinem Rebaudiosid A aus Blattextrakten der Steviapflanze ist ein Steviolglycosid, das überwiegend aus Rebaudiosid D und geringen Mengen anderer Steviolglycoside wie Rebaudiosid A und Rebaudiosid M besteht. Rebaudiosid D wird durch enzymatische Biokonversion von hochgereinigten Steviolglycosid- Rebaudiosid-A-Extrakten (95 % Steviolglycoside) der Pflanze Stevia rebaudiana Bertoni unter Verwendung von UDP-Glycosyltransferase-Enzymen und Saccharose-Synthase-Enzymen gewonnen, die aus den gentechnisch veränderten Stämmen von E. coli (pPM294, pFAF170 und pSK401) gewonnen werden, durch die der Transport von Glucose aus Saccharose und UDP-Glucose zu Steviolglycosiden über glycosidische Bindungen erleichtert wird. Nach Entfernen der Enzyme durch Fest-Flüssig-Trennung und Wärmebehandlung erfolgt die Reinigung durch Konzentration von Rebaudiosid D durch Harz-Adsorption, gefolgt von der Rekristallisation der Steviolglycoside mit einem Endprodukt, das mindestens 95 % Rebaudiosid D und Rebaudiosid A enthält. In dem Lebensmittelzusatzstoff dürfen keine lebensfähigen Zellen von E. coli (pPM294, pFAF170 und pSK401) oder deren DNA festgestellt werden. Chemische Bezeichnung Rebaudiosid D: 13-[(2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]-kaur-16-en-18-säure, 2-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosylester. Rebaudiosid A: 13-[(2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]-kaur-16-en-18-säure, β-D-glucopyranosylester Chemische Formel Trivialname Formel Konversionsfaktor Rebaudiosid D C50H80O28 0,29 Rebaudiosid A C44 H70 O23 0,33 Molmasse und CAS-Nr. Trivialname CAS-Nummer Molmasse (g/mol) Rebaudiosid D 63279-13-0 1 291,15 Rebaudiosid A 58543-16-1 967,01 Gehalt mindestens 95 % Rebaudiosid M, in der Trockenmasse. Beschreibung weißes bis hellgelbes Pulver, etwa 150- bis 350-mal süßer als Saccharose (bei 5 % Sucroseäquivalent) Merkmale Löslichkeit mäßig bis gut löslich in Wasser pH-Wert 4,5–7,0 (Lösung 1 zu 100) Reinheit Asche insgesamt höchstens 1 % Trocknungsverlust höchstens 6 % (105 °C, 2 Stunden) Lösungsmittelreste höchstens 5 000 mg/kg Ethanol Arsen höchstens 0,015 mg/kg Blei höchstens 0,2 mg/kg Kadmium höchstens 0,015 mg/kg Quecksilber höchstens 0,07 mg/kg Restproteingehalt höchstens 5 mg/kg Partikelgröße mindestens 74 μm [bei einem 200-Mesh-Sieb mit einer Partikelgrößenobergrenze von 74 μm] E 960c(iv) REBAUDIOSID AM HERGESTELLT DURCH ENZYMATISCHE KONVERSION VON HOCHREINEM STEVIOSID AUS BLATTEXTRAKTEN DER STEVIAPFLANZE Synonyme Definition Rebaudiosid AM hergestellt durch enzymatische Konversion von hochreinem Steviosid aus Blattextrakten der Steviapflanze ist ein Steviolglycosid, das überwiegend aus Rebaudiosid AM und geringen Mengen anderer Steviolglycoside wie Steviosid und Rebaudiosid E besteht. Rebaudiosid AM wird durch enzymatische Biokonversion von hochgereinigten Steviolglycosid- Steviosid-Extrakten (95 % Steviolglycoside) der Pflanze Stevia rebaudiana Bertoni unter Verwendung von UDP-Glycosyltransferase-Enzymen und Saccharose-Synthase-Enzymen gewonnen, die aus den gentechnisch veränderten Stämmen von E. coli (pPM294, pFAF170 und pSK401) gewonnen werden, durch die der Transport von Glucose aus Saccharose und UDP-Glucose zu Steviolglycosiden über glycosidische Bindungen erleichtert wird. Nach Entfernen der Enzyme durch Fest-Flüssig-Trennung und Wärmebehandlung erfolgt die Reinigung durch Konzentration von Rebaudiosid AM durch Harz-Adsorption, gefolgt von der Rekristallisation der Steviolglycoside mit einem Endprodukt, das mindestens 95 % Rebaudiosid AM enthält. In dem Lebensmittelzusatzstoff dürfen keine lebensfähigen Zellen von E. coli (pPM294, pFAF170 und pSK401) oder deren DNA festgestellt werden. Chemische Bezeichnung Rebaudiosid AM: 13-[(2-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]-kaur-16-en-18-säure, 2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosylester. Chemische Formel Trivialname Formel Konversionsfaktor Rebaudiosid AM C50H80O28 0,29 Molmasse und CAS-Nr. Trivialname CAS-Nummer Molmasse (g/mol) Rebaudiosid AM 2222580-26-7 1 291,15 Gehalt mindestens 95 % Rebaudiosid AM, in der Trockenmasse Beschreibung weißes bis hellgelbes Pulver, etwa 150- bis 350-mal süßer als Saccharose (bei 5 % Sucroseäquivalent) Merkmale Löslichkeit mäßig bis gut löslich in Wasser pH-Wert 4,5–7,0 (Lösung 1 zu 100) Reinheit Asche insgesamt höchstens 1 % Trocknungsverlust höchstens 6 % (105 °C, 2 Stunden) Lösungsmittelreste höchstens 5 000 mg/kg Ethanol Arsen höchstens 0,015 mg/kg Blei höchstens 0,2 mg/kg Kadmium höchstens 0,015 mg/kg Quecksilber höchstens 0,07 mg/kg Restproteingehalt höchstens 5 mg/kg Partikelgröße mindestens 74 μm [bei einem 200-Mesh-Sieb mit einer Partikelgrößenobergrenze von 74 μm]“