1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 1
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►B VERORDNUNG (EWG) Nr. 2676/90 DER KOMMISSION
vom 17. September 1990
zur Festlegung gemeinsamer Analysemethoden für den Weinsektor
(ABl. L 272 vom 3.10.1990, S. 1)
Geändert durch:
Amtsblatt
Nr. Seite Datum
►M1Verordnung (EWG) Nr. 2645/92 der Kommission vom 11. September
1992L 266 10 12.9.1992
►M2Verordnung (EG) Nr. 60/95 der Kommission vom 16. Januar 1995 L 11 19 17.1.1995
►M3Verordnung (EG) Nr. 69/96 der Kommission vom 18. Januar 1996 L 14 13 19.1.1996
►M4Verordnung (EG) Nr. 822/97 der Kommission vom 6. Mai 1997 L 117 10 7.5.1997
►M5Verordnung (EWG) Nr. 2348/91 der Kommission vom 29. Juli 1991 L 214 39 2.8.1991
►M6geändert durch die Verordnung (EG) Nr. 1932/97 der Kommission
vom 3. Oktober 1997L 272 10 4.10.1997
►M7Verordnung (EG) Nr. 761/1999 der Kommission vom 12. April 1999 L 99 4 14.4.1999
►M8Verordnung (EG) Nr. 440/2003 der Kommission vom 10. März 2003 L 66 15 11.3.2003
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VERORDNUNG (EWG) Nr. 2676/90 DER KOMMISSION
vom 17. September 1990
zur Festlegung gemeinsamer Analysemethoden für den Weinsektor
DIE KOMMISSION DER EUROPÄISCHEN GEMEINSCHAFTEN —
gestützt auf den Vertrag zur Gründung der Europäischen Wirtschaftsge-
meinschaft,
gestützt auf die Verordnung (EWG) Nr. 822/87 des Rates vom 16.
März 1987 über die gemeinsame Marktorganisation für Wein (1),
zuletzt geändert durch die Verordnung (EWG) Nr. 1325/90 (2), insbe-
sondere auf Artikel 74,
in Erwägung nachstehender Gründe:
Gemäß Artikel 74 Absatz 1 der Verordnung (EWG) Nr. 822/87 ist die
Einführung von Analysemethoden zur Feststellung der Zusammenset-zung der Erzeugnisse nach Artikel 1 der Verordnung sowie vonVerfahren vorgesehen, die Auskunft darüber geben können, ob diese
Erzeugnisse nicht zugelassenen önologischen Verfahren unterworfen
worden sind.
Soweit die Gemeinschaft die Grenzwerte der für die Anwendung
bestimmter önologischer Verfahren charakteristischen Bestandteile undTabellen zum Vergleich der analytischen Daten nicht erlassen hat,
sollten die Mitgliedstaaten ermächtigt werden, diese Grenzwerte festzu-
setzen.
Artikel 13 Absatz 1 der Verordnung (EWG) Nr. 822/87 sieht eine
analytische Prüfung vor, die sich mindestens auf die Grenzwerte derje-
nigen charakteristischen Bestandteile des betreffenden Qualitätsweines
b.A. erstreckt, die im Anhang der genannten Verordnung aufgeführtsind.
Die Überwachung der Angaben in den Dokumenten über die betref-
fenden Erzeugnisse macht die Einführung einheitlicher
Analysemethoden notwendig, um präzise und vergleichbare Daten zu
erhalten. Diese Methoden müssen demnach für alle Handelsgeschäfteund Kontrollmaßnahmen verbindlich sein. In Anbetracht der Erforde-rnisse der Kontrolle und der begrenzten Möglichkeiten des Handels istes jedoch angebracht, eine beschränkte Anzahl gebräuchlicherVerfahren zuzulassen, die eine schnelle und ausreichend sichere
Bestimmung der gesuchten Bestandteile des Weines ermöglichen.
Es sind nun so weit wie möglich Methoden festzulegen, die allgemein
anerkannt sind, wie die im Rahmen der internationalen Konvention zurVereinheitlichung der Analysen und Bewertungsmethoden für Weinevon 1954 entwickelten Methoden, die vom Internationalen Weinamt in
dem „Recueil des méthodes internationales d'analyse des vins“ (Samm-
lung der internationalen Analysemethoden für Wein) veröffentlichtwurden.
Die auf dem Weinsektor geltenden gemeinschaftlichen Analysever-
fahren sind durch die Verordnung (EWG) Nr. 1108/82 der
Kommission (
3) erlassen worden. Mit Rücksicht auf den wissenschaftli-
chen Fortschritt hat es sich als notwendig erwiesen, einige Verfahrendurch geeignetere Verfahren zu ersetzen, andere Verfahren zu ändernund wieder andere neu einzuführen, insbesondere wenn diese inzwi-schen vom Internationalen Weinamt verabschiedet wurden. Angesichts
der großen Anzahl und der Vielfalt dieser Anpassungen ist es
zweckmäßig, alle Analyseverfahren in einer neuen Verordnung zusam-menzufassen und die Verordnung (EWG) Nr. 1108/82 aufzuheben.
Um die Ergebnisse der Anwendung der in Artikel 74 der Verordnung
(EWG) Nr. 822/87 angeführten Analysemethoden vergleichen zu1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 2
(1) ABl. Nr. L 84 vom 27. 3. 1987, S. 1.
(2) ABl. Nr. L 132 vom 23. 5. 1990, S. 19.
(3) ABl. Nr. L 133 vom 14. 5. 1982, S. 1.
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können, gelten für Wiederholbarkeit und Vergleichbarkeit der Erge-
bnisse die Definitionen, die vom Internationalen Amt für Rebe undWein festgelegt worden sind.
Zur Berücksichtigung des wissenschaftlichen Fortschritts sowie der
verbesserten technischen Ausstattung der amtlichen Laboratorien undin der Absicht, die Arbeit dieser Laboratorien leistungsfähiger undrationeller zu gestalten, sollte die Anwendung automatisierter Analyse-methoden unter bestimmten Voraussetzungen zugelassen werden. Es
muß darauf hingewiesen werden, daß in Streitfällen Referenzverfahren
und gebräuchliche Verfahren nicht durch automatisierte Methodenersetzt werden dürfen.
Die Ergebnisse der Messung der Dichte mit dem auf das Prinzip des
Biegeschwingers gestützten automatisierten Verfahren sind hinsichtlich
Genauigkeit, Wiederholbarkeit und Vergleichbarkeit mindestens gleich-
wertig gegenüber den Ergebnissen, die mit den im Anhang dieserVerordnung unter Punkt 1 aufgeführten Methoden zur Messung derVolumenmasse und der relativen Dichte gewonnen worden sind. NachArtikel 74 Absatz 3 der Verordnung (EWG) Nr. 822/87 sollte diesesautomatisierte Verfahren daher als gleichwertig mit den im Anhang
dieser Verordnung genannten Methoden angesehen werden.
Die in Kapitel 25 Ziffer 2.2.3.3.2 des Anhangs dieser Verordnung
beschriebene Methode zur Bestimmung des Gesamtschwefeldioxidge-haltes der Weine und Moste mit einem vermuteten Gehalt unter50 mg/l führt zu einer besseren Freisetzung des Schwefeldioxids als
die in Kapitel 13 Ziffer 13.4 im Anhang der Verordnung (EWG)
Nr. 1108/82 beschriebene Bestimmungsmethode. Daraus ergeben sichbei den analysierten Erzeugnissen höhere Gesamtschwefeldioxidge-halte, die — insbesondere bei einigen Traubensäften — dievorgeschriebenen Grenzwerte überschreiten können. Zur Vermeidung
von Schwierigkeiten für den Absatz von Traubensäften, die beim
Inkrafttreten dieser Verordnung bereits hergestellt waren, und in Erwar-tung, daß bei der Herstellung auf eine bessere Entschwefelung derstummgemachten Moste geachtet wird, erscheint es notwendig,während einer Übergangszeit die Anwendung der in der vorgenanntenVerordnung beschriebenen Bestimmungsmethode weiter zu gestatten.
Die in dieser Verordnung vorgesehenen Maßnahmen entsprechen der
Stellungnahme des Verwaltungsausschusses für Wein —
HAT FOLGENDE VERORDNUNG ERLASSEN:
Artikel 1
(1) Im Anhang dieser Verordnung sind die gemeinschaftlichen
Verfahren angegeben, mit denen für Handelsgeschäfte und für alle
Kontrollmaßnahmen:
— die Zusammensetzung der Erzeugnisse nach Artikel 1 der Verord-
nung (EWG) Nr. 822/87 bestimmt und
— festgestellt werden kann, ob diese Erzeugnisse nicht zugelassenen
önologischen Verfahren unterzogen worden sind.
(2) Für die Parameter, für die Referenzmethoden und gebräuchliche
Methoden festgelegt sind, haben die mit den Referenzverfahren gewon-nenen Ergebnisse Vorrang.
Artikel 2
Im Sinne dieser Verordnung gelten als:
a)Wiederholbarkeit derjenige Wert, unterhalb dessen man die absolute
Differenz zwischen zwei einzelnen Prüfergebnissen, die man mit1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 3
Anmerkung: Die Tabellen und Diagramme sowie ein Teil der Abbildungen im
Anhang wurden der Kommission der Europäischen Gemein-
schaften vom Office International de la Vigne et du Vin in Paris
zur Verfügung gestellt.
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demselben Verfahren an identischem Prüfmaterial und unter dens-
elben Bedingungen (derselbe Bearbeiter, dasselbe Gerät, dasselbeLabor, kurze Zeitspanne) erhalten hat, mit einer vorgegebenen
Wahrscheinlichkeit erwarten darf; wenn nichts anderes angegeben
ist, so ist diese Wahrscheinlichkeit 95 %.
b)Vergleichbarkeit ist derjenige Wert, unterhalb dessen man die abso-
lute Differenz zwischen zwei einzelnen Prüfergebnissen, die man an
identischem Material aber unter verschiedenen Bedingungen
(verschiedene Bearbeiter, verschiedene Geräte, verschiedene Laborsund/oder zu verschiedenen Zeiten) erhalten hat, mit einer vorgege-benen Wahrscheinlichkeit erwarten darf; wenn nichts anderesangegeben ist, so ist diese Wahrscheinlichkeit 95 %.
Unter einem „einzelnen Prüfergebnis“ versteht man denjenigen Wert,
den man erhalten hat, indem man ein genormtes Prüfverfahren zur
Gänze auf eine einzelne Probe angewandt hat.
Artikel 3
(1) Es ist zulässig, daß unter der Verantwortung des Leiters eines
Laboratoriums automatisierte Analysemethoden angewandt werden,sofern die Genauigkeit, Wiederholbarkeit und Vergleichbarkeit derErgebnisse mindestens gleichwertig gegenüber den Ergebnissen sind,die mit den im Anhang dieser Verordnung genannten Analysemethodengewonnen worden sind.
Bei Streitfällen dürfen die im Anhang aufgeführten Analysemethoden
nicht durch die automatisierten Analysemethoden ersetzt werden.
(2) Das automatisierte Verfahren zur Bestimmung der Dichte mit
dem Biegeschwinger gilt als gleichwertig mit den unter Ziffer 1 dieserVerordnung aufgeführten Methoden.
Artikel 4
Wo Wasser für Lösungen, Verdünnungen oder zum Auswaschen vorge-
sehen ist, handelt es sich immer um destilliertes oder gleichwertigesentmineralisiertes Wasser. Soweit nicht anderweitig angegeben, müssenalle chemischen Reagenzien analysenreine Qualität besitzen.
Artikel 5
Die Verordnung (EWG) Nr. 1108/82 wird aufgehoben.Artikel 1 Absatz 4 dieser Verordnung gilt jedoch bis zum 31.
Dezember 1990.
Artikel 6
Diese Verordnung tritt am Tag ihrer Veröffentlichung im Amtsblatt der
Europäischen Gemeinschaften in Kraft.
Siegilt mit Wirkung vom 1. Oktobe r 1990.
Diese Verordnung ist in allen ihren Teilen verbindlich und gilt unmit-
telbar in jedem Mitgliedstaat.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 4
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ANHANG
1.VOLUMENMASSE UND RELATIVE DICHTE BEI 20 ºC
1. DEFINITION
Volumenmasse ist der Quotient aus der Masse eines bestimmten
Volumens Wein oder Most bei 20 ºC und seinem Volumen, ausge-
drückt in g/ml, Symbol ρ2 0ºC.
Relative Dichte bei 20 ºC oder Dichte d 20 ºC/20 ºC ist das in Dezi-
malen ausgedrückte Verhältnis der Masse eines bestimmten
Volumens Wein oder Most bei 20 ºC zur Masse des gleichen Volu-
mens bei 20 ºC. Symbol: d20 ºC20 ºC.
2. PRINZIP DER METHODEN
Die Volumenmasse und die relative Dichte bei 20 ºC einer Probe
werden wie folgt bestimmt:
Referenzmethode: Bestimmung mit dem Pyknometer, gebräuchliche
Methoden: Bestimmung mit dem Aräometer oder Bestimmung mit
der hydrostatischen Waage.
Bemerkung:Für sehr genaue Bestimmungen muß die Volumenmasse um den
Gehalt an Schwefeldioxid korrigiert werden.
ρ
20 ºC=ρ′20 ºC− 0,0006 · s
ρ20 ºC= korrigierte Volumenmasse
ρ′20 ºC= festgestellte Volumenmasse
S = Gesamtschwefeldioxid in g/l.
3. VORBEREITUNG DER PROBE
Enthält der Wein oder der Most merkliche Mengen Kohlendioxid,
muß dieses zum größten Teil vorher entfernt werden, indem man
250 ml Wein in einem 1 000-ml-Gefäß schüttelt oder unter leichtem
Vakuum durch 2 g Wattefiltrie rt.
4. REFERENZMETHODE
4.1. Gerätschaften
Übliches Labormaterial, insbesondere:
4.1.1. Pyknometer (1) aus Pyrexglas von etwa 100 ml Fassungsvermögen
mit einem eingeschliffenen beweglichen Thermometer mit 1/10
Gradeinteilung von 10 ºC bis 30 ºC. Dieses Thermometer muß
geprüft sein (Abbildung 1).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 5
(1) Jedes gleichwertige Pyknometer kann verwundet werden.
▼B
Abbildung 1
Pyknometer mit Taragefäß
Das Pyknometer besitzt seitlich ein 25 mm langes Rohr von
maximal 1 mm Innendurchmesser, dessen Ende konisch geschliffen
ist. Dieses seitliche Rohr kann mit einem „Auffangstöpsel“
verschlossen werden, der aus einem konisch geschliffenen Rohr mit
ausgezogener Spitze besteht. Dieser Stöpsel dient als „Ausdehnungs-
kammer“.
Die beiden Schliffe des Pyknometers müssen sehr sorgfältig ausge-
führt sein.
4.1.2. Als Tara verwendet man ein Gefäß von gleicher äußerer Form (< 1 ml
genau) wie das beschriebene Pyknometer und von gleicher Masse
wie die Masse des mit einer Flüssigkeit der Dichte 1,01 gefüllten
Pyknometers; Natriumchloridlösung, 2 % (g/v).
Hitzebeständiger Mantel, der sich genau an die Form des Pyknome-
ters anpaßt.
4.1.3. Zweiarmige Waage mit einer Belastbarkeit bis zu 300 g und einer
Empfindlichkeit von 0,1 mg genau
oder
einarmige Waage mit einer Belastbarkeit bis zu 200 g und einer
Empfindlichkeit von 0,1 mg genau.
4.2. Eichung des Pyknometers
Die Eichung des Pyknometers umfaßt die Bestimmung folgender
Merkmale:
— Leergewicht;
— Volumen bei 20 ºC;
— Masse des Wassers bei 20 ºC.
4.2.1. Verwendung einer zweiarmigen Waage
Das Taragefäß wird auf die linke Schale der Waage und das saubere
und trockne Pyknometer mit seinem „Auffangstöpsel“ auf die rechte
Schale der Waage gestellt; das Gleichgewicht wird mit Hilfe von mit
„p“-Gramm bezeichneten Gewichten hergestellt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 6
▼B
Das Pyknometer wird sorgfältig mit destilliertem Wasser bei Raum-
temperatur gefüllt und das Thermometer angebracht. Das
Pyknometer wird gut abgetrocknet und in den hitzebeständigen
Mantel gegeben. Man mischt durch Hin- und Herdrehen, bis die auf
dem Thermometer abgelesene Temperatur konstant bleibt. Man stellt
sodann genau auf den oberen Rand des Seitenrohrs ein. Dieses
Seitenrohr wird getrocknet, der Auffangstöpsel eingesetzt, die
Temperatur t ºC sorgfältig abgelesen und gegebenenfalls um die
Ungenauigkeit des Thermometers korrigiert. Das mit Wasser gefüllte
Pyknomter wird gewogen; p'= Masse in Gramm, die zur Herstellung
des Gleichgewichtes dient.
Berechnung (1)
Gewicht des leeren Pyknometers:Leergewicht = p + mm = Masse der im Pyknometer enthaltenen Luft
m = 0,0012 (p − p').
Volumen bei 20 ºC:V
20 ºC= (p + m − p') · Ft
Ft= Faktor aus Tabelle I für die Temperatur t ºC
V20 ºCwird auf ± 0,001 ml genau berechnet.
Masse des Wassers bei 20 ºC:M
20 ºC=V20 ºC· 0,998203
0,998203 = Volumenmasse des Wassers bei 20 ºC.
4.2.2. Verwendung einer einarmigen Waage
Zu bestimmen sind:
— die Masse des sauberen und trocknen Pyknometers: P
— die Masse des mit Wasser gefüllten Pyknometers bei t ºC: P1gemäß den Angaben unter 4.2.1
— die Masse des Taragefäßes To.
Berechnung (1):
Gewicht des leeren Pyknometers:Leergewicht: P − mm = Masse der im Pyknometer enthaltenen Luft
m = 0,0012 (P
1−P )
Volumen bei 20 ºC
V20 ºC=[ P1− (P − m)] · Ft
Ft= Faktor aus Tabelle I für die Temperatur t ºC
Das Volumen bei 20 ºC wird auf ± 0,001 ml genau berechnet.Masse des Wassers bei 20 ºC:M
20 ºC=V20 ºC· 0,998203
0,998203 = Volumenmasse des Wassers bei 20 ºC.
4.3. Durchführung der Bestimmung (1)
4.3.1. Verwendung einer zweiarmigen Waage
Das mit der für die Bestimmung vorbereiteten Probe gefüllte Pykno-
meter wird nach der Beschreibung unter 4.2.1 gewogen. Dabei ist p“
die Masse in Gramm, die zur Herstellung des Gleichgewichtes bei t
ºC dient.
Masse der im Pyknometer enthaltenen Flüssigkeit = p + m − p“.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 7
(1) Ein Zahlenbeispiel wird in Abschnitt 6 dieses Kapitels gegeben.
▼B
Scheinbare Volumenmasse bei t ºC:
ρtº C¼pþm/C0p00
V20 ºC
Die Volumenmasse bei 20 ºC wird mit Hilfe einer der nachste-
henden Korrekturtabellen je nach Art der untersuchten Flüssigkeit
berechnet: trockner Wein (Tabelle II), natürlicher oder konzentrierter
Most (Tabelle III), Süßweine (Tabelle IV).
Man erhält die Dichte 20 ºC/20 ºC des Weines durch Division der
Volumenmasse bei 20 ºC durch 0,998203.
4.3.2. Verwendung einer einarmigen Waage
Man wägt das Taragefäß = T1.
Berechnung dT = T1−To.
Die Masse des leeren Pyknometers zum Zeitpunkt der Messung = P
−m+d T .
Das mit der für die Bestimmung vorbereiteten Probe gefüllte Pykno-
meter wird nach den Angaben unter 4.2.1 gewogen. P2ist dieMasse
bei t ºC.
Masse der im Pyknometer enthaltenen Flüssigkeit bei t ºC = P2−( P
− m + dT).
Scheinbare Volumenmasse bei t ºC:
ρtº C¼P2/C0P/C0mþdT ðÞ
V20 ºC
Die Volumenmasse bei 20 ºC der untersuchten Flüssigkeit —
trockner Wein, natürlicher Most und konzentrierter Most, Süßwein
— wird gemäß 4.3.1 berechnet.
Man erhält die Dichte 20 ºC/20 ºC durch Division der Volumen-
masse20 ºC durch 0,998203.
4.3.3. Wiederholbarkeit für trockne und liebliche Weine: r = 0,00010, für
Süßweine: r = 0,00018.
4.3.4. Vergleichbarkeit für trockne und liebliche Weine: R = 0,00037, für
Süßweine: R = 0,00045.
5. GEBRÄUCHLICHE VERFAHREN5.1. Bestimmung mit dem Aräometer
5.1.1. Gerätschaften
5.1.1.1. Aräometer
Die Aräometer müssen hinsichtlich ihrer Ausmaße und Gradeintei-
lungen den Vorschriften der ISO entsprechen.
Sie müssen einen zylindrischen Schwimmer mit einem Rohr von
mindestens 3 mm Durchmesser besitzen. Für trockne Weine muß
die Skala eine Gradeinteilung von 1/1000 und 5/1000 zwischen
0,983 bis 1,003 aufweisen. Der Abstand zwischen den Tausendstel-
Markierungen muß mindestens 5 mm betragen. Zur Bestimmung der
Dichte der entalkoholisierten Weine sowie von Süßweinen und
Mosten ist ein Satz von 5 Aräometern mit folgenden Skalenberei-
chen zu verwenden: 1,000—1,030; 1,030—1,060; 1,060—1,090;
1,090—1,120; 1,120—1,150. Auf den Skalen dieser Geräte muß die
Volumenmasse bei 20 ºC mindestens in Tausendsteln und halben
Tausendsteln abzulesen sein, wobei der Abstand zwischen den
Tausendstel-Markierungen mindestens 3 mm betragen muß.
Diese Aräometer müssen so graduiert sein, daß die Ablesung am
unteren Meniskus erfolgt. Auf die Angabe der Gradeinteilung in
Volumenmasse bei 20 ºC oder relative Dichte bei 20 ºC und die
Art der Ablesung am Meniskus muß entweder durch einen Vermerk
an der Skala oder durch einen im Schwimmer eingeschlossenen
Zettel hingewiesen werden.
Die Geräte müssen von einer amtlichen Stelle geprüft sein.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 8
▼B
5.1.1.2. Geeichtes Thermometer mit mindestens 0,5 ºC Gradeinteilung.
5.1.1.3. Glaszylinder; 36 mm Innendurchmesser und 320 mm Höhe, der mit
Hilfe eines Stativs befestigt wird.
5.1.2. Durchführung der Bestimmung
5.1.2.1. Messung
In einen Glaszylinder (5.1.1.3) werden 250 ml der nach 3 vorberei-
teten Probe eingefüllt und das Aräometer sowie das Thermometer
eingebracht. Man schüttelt, um den Temperaturausgleich herzu-
stellen, und liest nach 1 Minute das Thermometer ab. Das
Thermometer wird herausgenommen und die scheinbare Volumen-
masse bei t ºC am Schwimmer des Aräometers nach 1 Minute
abgelesen.
Die bei t ºC abgelesene scheinbare Volumenmasse wird mit Hilfe
der Tabellen für trockne Weine (Tabelle V), Moste (Tabelle VI)
und Weine mit Restzucker (Tabelle VII) korrigiert.
Die Dichte 20 ºC/20 ºC erhält man durch Division der Volumen-
massebe i 20 ºC durch 0,998203.
5.2. Bestimmung mit der hydrostatischen Waage
5.2.1. Gerätschaften
5.2.1.1. HydrostatischeWaage
Hydrostatische Waage mit einer Belastbarkeit bis zu 100 g,
Empfindlichkeit: 0,1 mg.
Unter jeder Waagschale befindet sich ein Schwimmer aus Pyrexglas
mit einem Volumen von mindestens 20 ml. Diese beiden identischen
Schwimmer hängen an einem Draht von höchstens 0,1 mm Durch-
messer.
Der unter der rechten Waagschale befestige Schwimmer taucht in
einen Glaszylinder, der mit einer Marke versehen ist, ein. Der Innen-
durchmesser des Glaszylinders muß mindestens 6 mm mehr betragen
als der Durchmesser des Schwimmers. Dur Schwimmer muß
vollständig in die im Glaszylinder befindliche Flüssigkeit eintau-
chen, so daß die Flüssigkeit den Faden berührt. Die Temperatur der
im Glaszylinder enthaltenen Flüssigkeit wird mittels eines Thermo-
meters mit 1/5-Grad-Skala gemessen.
Eine einarmige hydrostatische Waage kann auch verwendet werden.
5.2.2. Durchführung der Bestimmung
5.2.2.1. Eichung der hydrostatischen Waage
Das Gleichgewicht wird, während die Schwimmer in der Luft
hängen, auf der rechten Waagschale mit den Gewichten p eingestellt.
Man füllt den Glaszylinder bis zur Marke mit Wasser, liest 2 oder 3
Minuten nach dem Schütteln die Temperatur t ºC ab und stellt das
Gleichgewicht auf der rechten Waagschale mit den Gewichten p'
wieder ein.
Volumen des Schwimmers bei 20 ºC:
V20 ºC= (p' − p) (F + 0,0012)
F = Faktor gemäß Tabelle I für die Temperatur t ºCp und V
20 ºCsind die Merkmale des Schwimmers.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 9
▼B
5.2.2.2. Messung
Der rechte Schwimmer taucht in den mit Wein oder Most bis zur
Marke gefüllten Glaszylinder ein. Man liest die Temperatur t ºC
des Weines (oder des Mostes) ab,
p“ = Gewichte, die zur Wiederherstellung des Gleichgewichtes
aufgelegt wurden,
ρt ºC = scheinbare Volumenmasse:
ρtº C¼p00/C0p ðÞ
Vþ0;0012 :
Diese Volumenmasse wird auf 20 ºC mittels der Tabellen II, III oder
IV umgerechnet.
6. BEISPIEL FÜR DIE BERECHNUNG DER VOLUMENMASSE
BEI 20 ºC UND DER DICHTE 20 ºC/20 ºC (REFERENZME-
THODE)
6.1. Verwendung einer zweiarmigen Waage
6.1.1. Aufstellung der Pyknometerkonstanten
1. Wägung des sauberen und trocknen Pyknometers:
Gewicht = Pyknometer + p
p = 104,9454 g.
2. Wägung des mit Wasser gefüllten Pyknometers bei der Tempe-
ratur t ºC:
Gewicht = Pyknometer + Wasser + p ′
p′ = 1,2396 g für t = 20,5 ºC.
3. Berechnung der Masse der im Pyknometer enthaltenen Luft:
m = 0,0012 (p − p ′)
m = 0,0012 (104,9454 − 1,2396)m = 0,1244 g.
4. KonstanteMe rkmale
Gewicht des leeren Pyknometers p + m:p + m = 104,9454 + 0,1244
p + m = 105,0698 g
Volumen bei 20 ºC = (p + m − p ′)·F
tº C
F20,50 ºC= 1,001900
V20 ºC= (105,0698 − 1,2396) · 1,001900
V20 ºC= 104,0276 ml
Masse des Wassers bei 20 ºC = V20 ºC· 0,998203
M20 ºC= 103,8405 g.
6.1.2. Bestimmung der Volumenmasse bei 20º C und der Dichte 20º C/20º
C eines trocknen Weins:
ρ″= 1,2622 bei 17,80 ºC
ρ17;80 ºC¼105;0698 /C01;2622
104;0275
ρ17,80 ºC= 0,99788 g/ml
Tabelle II erlaubt die Berechnung von ρ20 ºCaus ρtº Cmittels der
Gleichung:
ρ20 ºC¼ρtº C±c
10001990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 10
▼B
Bei t = 17,80 ºC und einem Alkoholgehalt von 11 % vol beträgt c
= 0,54.
ρ20 ºC¼0;99788 /C00;54
1000
ρ20 ºC= 0,99734 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99734
0;998203¼0;99913
6.2. Verwendung einer einarmigen Waage
6.2.1. Aufstellung der Pyknometerkonstanten
1. Wägung des sauberen und trocknen Pyknometers
P = 67,7913 g.
2. Wägung des mit Wasser gefüllten Pyknometers bei der Tempe-
ratur t ºC:
P1= 169,2715 bei 21,65 ºC.
3. Berechnung der Masse der im Pyknometer enthaltenen Luft:
m = 0,0012 (P1−P )
m = 0,0012 × 101,4802m = 0,1218 g.
4. Konstante Merkmale:
Gewicht des leeren Pyknometers: P − m
P − m = 67,7913 − 0,1218
P − m = 67,6695 g
Volumen bei 20 ºC = [P
1− (P − m)] Ftº C
F21,65 ºC= 1,002140
V20 ºC= (169,2715 − 67,6695) · 1,002140
101,8194 ml
Masse des Wassers bei 20 ºC = V20 ºC· 0,998203
M20 ºC= 101,6364 g
Masse des Taragefäßes: To
To= 171,9160 g.
6.2.2. Bestimmung der Volumenmasse bei 20º C und der Dichte 20º C/20º
C eines trocknen Weines
T1= 171,9178 g
dT = 171,9178 − 171,9160 = + 0,0018 g
P − m + dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 g
P2= 169,2799 bei 18 ºC
ρ18 ºC¼169;2799 /C067;6713
101;8194
ρ18 ºC= 0,99793 g/ml.
Tabelle II erlaubt die Berechnung von ρ20 ºCaus ρtº Cmittels der
Gleichung:
ρ20 ºC¼ρtº C±c
1000:1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 11
▼B
Bei t = 18 ºC und einem Alkoholgehalt von 11 % vol beträgt c
= 0,49
ρ20 ºC¼0;99793 /C00;49
1000
ρ20 ºC= 0,99744 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99744
0;998203¼0;99923 :1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 12
▼B
TABELLE I
Faktor F
Mit diesen Faktoren muß die Masse des Wassers, die im Pyknometer aus Pyrexglas bei t ºC
enthalten ist, multipliziert werden, um das Volumen des Pyknometers bei 20 ºC zu erhalten
tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F
10,0 1,000398 13,0 1,000691 16,0 1,001097 19,0 1,001608 22,0 1,002215 25,0 1,002916 28,0 1,003704
,1 1,000406 ,1 1,000703 ,1 1,001113 ,1 1,001627 ,1 1,002238 ,1 1,002941 ,1 1,003731
,2 1,000414 ,2 1,000714 ,2 1,001128 ,2 1,001646 ,2 1,002260 ,2 1,002966 ,2 1,003759
,3 1,000422 ,3 1,000726 ,3 1,001144 ,3 1,001665 ,3 1,002282 ,3 1,002990 ,3 1,003787
,4 1,000430 ,4 1,000738 ,4 1,001159 ,4 1,001684 ,4 1,002304 ,4 1,003015 ,4 1,003815
10,5 1,000439 13,5 1,000752 16,5 1,001175 19,5 1,001703 22,5 1,002326 25,5 1,003041 28,5 1,003843
,6 1,000447 ,6 1,000764 ,6 1,001191 ,6 1,001722 ,6 1,002349 ,6 1,003066 ,6 1,003871
,7 1,000456 ,7 1,000777 ,7 1,001207 ,7 1,001741 ,7 1,002372 ,7 1,003092 ,7 1,003899
,8 1,000465 ,8 1,000789 ,8 1,001223 ,8 1,001761 ,8 1,002394 ,8 1,003117 ,8 1,003928
,9 1,000474 ,9 1,000803 ,9 1,001239 ,9 1,001780 ,9 1,002417 ,9 1,003143 ,9 1,003956
11,0 1,000483 14,0 1,000816 17,0 1,001257 20,0 1,001800 23,0 1,002439 26,0 1,003168 29,0 1,003984
,1 1,000492 ,1 1,000829 ,1 1,001273 ,1 1,001819 ,1 1,002462 ,1 1,003194 ,1 1,004013
,2 1,000501 ,2 1,000842 ,2 1,001290 ,2 1,001839 ,2 1,002485 ,2 1,003222 ,2 1,004042
,3 1,000511 ,3 1,000855 ,3 1,001306 ,3 1,001859 ,3 1,002508 ,3 1,003247 ,3 1,004071
,4 1,000520 ,4 1,000868 ,4 1,001323 ,4 1,001880 ,4 1,002531 ,4 1,003273 ,4 1,004099
11,5 1,000530 14,5 1,000882 17,5 1,001340 20,5 1,001900 23,5 1,002555 26,5 1,003299 29,5 1,004128
,6 1,000540 ,6 1,000895 ,6 1,001357 ,6 1,001920 ,6 1,002578 ,6 1,003326 ,6 1,004158
,7 1,000550 ,7 1,000909 ,7 1,001374 ,7 1,001941 ,7 1,002602 ,7 1,003352 ,7 1,004187
,8 1,000560 ,8 1,000923 ,8 1,001391 ,8 1,001961 ,8 1,002625 ,8 1,003379 ,8 1,004216
,9 1,000570 ,9 1,000937 ,9 1,001409 ,9 1,001982 ,9 1,002649 ,9 1,003405 ,9 1,004245
12,0 1,000580 15,0 1,000951 18,0 1,001427 21,0 1,002002 24,0 1,002672 27,0 1,003432 30,0 1,004275
,1 1,000591 ,1 1,000965 ,1 1,001445 ,1 1,002023 ,1 1,002696 ,1 1,003458
,2 1,000601 ,2 1,000979 ,2 1,001462 ,2 1,002044 ,2 1,002720 ,2 1,003485
,3 1,000612 ,3 1,000993 ,3 1,001480 ,3 1,002065 ,3 1,002745 ,3 1,003513
,4 1,000623 ,4 1,001008 ,4 1,001498 ,4 1,002086 ,4 1,002769 ,4 1,003540
12,5 1,000634 15,5 1,001022 18,5 1,001516 21,5 1,002107 24,5 1,002793 27,5 1,003567
,6 1,000645 ,6 1,001037 ,6 1,001534 ,6 1,002129 ,6 1,002817 ,6 1,003594
,7 1,000656 ,7 1,001052 ,7 1,001552 ,7 1,002151 ,7 1,002842 ,7 1,003621
,8 1,000668 ,8 1,001067 ,8 1,001570 ,8 1,002172 ,8 1,002866 ,8 1,003649
,9 1,000679 ,9 1,001082 ,9 1,001589 ,9 1,002194 ,9 1,002891 ,9 1,0036761990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 13
▼B
TABELLE II
Korrekturtabelle zur Umrechnung der Volumenmasse von trocknen Weinen und entalkoholisierten trocknen
Weinen, gemessen bei t º, bezogen auf 20 ºC. Bestimmung mit dem Pyknometer aus Pyrexglas.
ρ20¼ρt±C
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− wenn tº < 20 ºC
+ wenn tº > 20 ºC
Alkoholgehalt in % Vol.
056789 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 2 6 2 7Temperatur in ºC10 1,59 1,64 1,67 1,71 1,77 1,84 1,91 2,01 2,11 2,22 2,34 2,46 2,60 2,73 2,88 3,03 3,19 3,35 3,52 3,70 3,87 4,06 4,25 4,44
11 1,48 1,53 1,56 1,60 1,64 1,70 1,77 1,86 1,95 2,05 2,16 2,27 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,06 3,21 3,36 3,53 3,69 3,86 4,03
12 1,36 1,40 1,43 1,46 1,50 1,56 1,62 1,69 1,78 1,86 1,96 2,05 2,16 2,27 2,38 2,50 2,62 2,75 2,88 3,02 3,16 3,31 3,46 3,61
13 1,22 1,26 1,28 1,32 1,35 1,40 1,45 1,52 1,59 1,67 1,75 1,83 1,92 2,01 2,11 2,22 2,32 2,44 2,55 2,67 2,79 2,92 3,05 3,18
14 1,08 1,11 1,13 1,16 1,19 1,23 1,27 1,33 1,39 1,46 1,52 1,60 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,11 2,21 2,31 2,42 2,52 2,63 2,74
15 0,92 0,96 0,97 0,99 1,02 1,05 1,09 1,13 1,19 1,24 1,30 1,36 1,42 1,48 1,55 1,63 1,70 1,78 1,86 1,95 2,03 2,12 2,21 2,3016 0,76 0,79 0,80 0,81 0,84 0,86 0,89 0,93 0,97 1,01 1,06 1,10 1,16 1,21 1,26 1,32 1,38 1,44 1,51 1,57 1,64 1,71 1,78 1,85
17 0,59 0,61 0,62 0,63 0,65 0,67 0,69 0,72 0,75 0,78 0,81 0,85 0,88 0,95 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,25 1,30 1,35 1,40
18 0,40 0,42 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,49 0,51 0,53 0,55 0,57 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,74 0,77 0,81 0,84 0,87 0,91 0,94
19 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47
20
21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54 0,56 0,59 0,61 0,63 0,66 0,69 0,71 0,74 0,77 0,80 0,83 0,87 0,90 0,93 0,97
23 0,68 0,70 0,71 0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,83 0,86 0,90 0,93 0,96 1,00 1,03 1,08 1,13 1,17 1,22 1,26 1,31 1,37 1,41 1,46
24 0,93 0,96 0,97 0,99 1,01 1,03 1,06 1,10 1,13 1,18 1,22 1,26 1,31 1,36 1,41 1,47 1,52 1,58 1,64 1,71 1,77 1,84 1,90 1,97
25 1,19 1,23 1,25 1,27 1,29 1,32 1,36 1,40 1,45 1,50 1,55 1,61 1,67 1,73 1,80 1,86 1,93 2,00 2,08 2,16 2,24 2,32 2,40 2,4826 1,47 1,51 1,53 1,56 1,59 1,62 1,67 1,72 1,77 1,83 1,90 1,96 2,03 2,11 2,19 2,27 2,35 2,44 2,53 2,62 2,72 2,81 2,91 3,01
27 1,75 1,80 1,82 1,85 1,89 1,93 1,98 2,04 2,11 2,18 2,25 2,33 2,41 2,50 2,59 2,68 2,78 2,88 2,98 3,09 3,20 3,31 3,42 3,53
28 2,04 2,10 2,13 2,16 2,20 2,25 2,31 2,38 2,45 2,53 2,62 2,70 2,80 2,89 3,00 3,10 3,21 3,32 3,45 3,57 3,69 3,82 3,94 4,07
29 2,34 2,41 2,44 2,48 2,53 2,58 2,65 2,72 2,81 2,89 2,99 3,09 3,19 3,30 3,42 3,53 3,65 3,78 3,92 4,05 4,19 4,33 4,47 4,61
30 2,66 2,73 2,77 2,81 2,86 2,92 3,00 3,08 3,17 3,27 3,37 3,48 3,59 3,72 3,84 3,97 4,11 4,25 4,40 4,55 4,70 4,85 4,92 5,17
Anmerkung: Diese Tabelle kann auch zur Umrechnung der Dichte d20tin Dichte 20/20 verwendet werden.
TABELLE III
Korrekturtabelle zur Umrechnung der Volumenmasse von nicht angereicherten Mosten und Mostkonzentraten,
gemessen bei t º, bezogen auf 20 ºC. Bestimmung mit dem Pyknometer aus Pyrexglas.
ρ20¼ρt±C
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− wenn tº < 20 ºC
+ wenn tº > 20 ºC
Volumenmasse
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Temperatur in ºC10º 2,31 2,48 2,66 2,82 2,99 3,13 3,30 3,44 3,59 3,73 3,88 4,01 4,28 4,52 4,76 4,98 5,18 5,42 5,56 5,73 5,90 6,05
11º 2,12 2,28 2,42 2,57 2,72 2,86 2,99 3,12 3,25 3,37 3,50 3,62 3,85 4,08 4,29 4,48 4,67 4,84 5,00 5,16 5,31 5,45
12º 1,92 2,06 2,19 2,32 2,45 2,58 2,70 2,82 2,94 3,04 3,15 3,26 3,47 3,67 3,85 4,03 4,20 4,36 4,51 4,65 4,78 4,91
13º 1,72 1,84 1,95 2,06 2,17 2,27 2,38 2,48 2,58 2,69 2,78 2,88 3,05 3,22 3,39 3,55 3,65 3,84 3,98 4,11 4,24 4,36
14º 1,52 1,62 1,72 1,81 1,90 2,00 2,09 2,17 2,26 2,34 2,43 2,51 2,66 2,82 2,96 3,09 3,22 3,34 3,45 3,56 3,67 3,76
15º 1,28 1,36 1,44 1,52 1,60 1,67 1,75 1,82 1,89 1,96 2,04 2,11 2,24 2,36 2,48 2,59 2,69 2,79 2,88 2,97 3,03 3,10
16º 1,05 1,12 1,18 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,55 1,60 1,66 1,71 1,81 1,90 2,00 2,08 2,16 2,24 2,30 2,37 2,43 2,49
17º 0,80 0,86 0,90 0,95 1,00 1,04 1,09 1,13 1,18 1,22 1,26 1,30 1,37 1,44 1,51 1,57 1,62 1,68 1,72 1,76 1,80 1,84
18º 0,56 0,59 0,62 0,66 0,68 0,72 0,75 0,77 0,80 0,83 0,85 0,88 0,93 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,16 1,19 1,21 1,24
19º 0,29 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
20º21º 0,29 0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,58 0,59 0,60 0,61 0,62 0,62
22º 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,79 0,81 0,84 0,87 0,90 0,96 1,00 1,05 1,09 1,12 1,15 1,18 1,20 1,22 1,23
23º 0,89 0,94 0,99 1,03 1,08 1,12 1,16 1,20 1,25 1,29 1,33 1,37 1,44 1,51 1,57 1,63 1,67 1,73 1,77 1,80 1,82 1,84
24º 1,20 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,66 1,71 1,77 1,82 1,92 2,01 2,10 2,17 2,24 2,30 2,36 2,40 2,42 2,44
25º 1,51 1,59 1,66 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,23 2,30 2,42 2,53 2,63 2,72 2,82 2,89 2,95 2,99 3,01 3,0526º 1,84 1,92 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,42 2,50 2,58 2,65 2,73 2,87 3,00 3,13 3,25 3,36 3,47 3,57 3,65 3,72 3,79
27º 2,17 2,26 2,36 2,46 2,56 2,66 2,75 2,84 2,93 3,01 3,10 3,18 3,35 3,50 3,66 3,80 3,93 4,06 4,16 4,26 4,35 4,42
28º 2,50 2,62 2,74 2,85 2,96 3,07 3,18 3,28 3,40 3,50 3,60 3,69 3,87 4,04 4,21 4,36 4,50 4,64 4,75 4,86 4,94 5,00
29º 2,86 2,98 3,10 3,22 3,35 3,47 3,59 3,70 3,82 3,93 4,03 4,14 4,34 4,53 4,72 4,89 5,05 5,20 5,34 5,46 5,56 5,64
30º 3,20 3,35 3,49 3,64 3,77 3,91 4,05 4,17 4,30 4,43 4,55 4,67 4,90 5,12 5,39 5,51 5,68 5,84 5,96 6,08 6,16 6,22
Anmerkung: Diese Tabelle kann auch für die Umrechnung der Dichte d20tin Dichte 20/20 verwendet werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 14
▼B
TABELLE IV
Korrekturtabelle zur Umrechnung der Volumenmasse von süßen Weinen mit einem Alkoholgehalt von 13 %
Vol. oder mehr, gemessen bei t º, bezogen auf 20 ºC. Bestimmung mit dem Pyknometer aus Pyrexglas.
ρ20¼ρt±C
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− wenn tº < 20 ºC
+ wenn tº > 20 ºC
Weine mit 13 % Vol. Weine mit 15 % Vol. Weine mit 17 % Vol.
Volumenmasse Volumenmasse Volumenmasse
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatur in ºC10º 2,36 2,71 3,06 3,42 3,72 3,96 4,32 2,64 2,99 3,36 3,68 3,99 4,30 4,59 2,94 3,29 3,64 3,98 4,29 4,60 4,89
11º 2,17 2,49 2,80 2,99 3,39 3,65 3,90 2,42 2,73 3,05 3,34 3,63 3,89 4,15 2,69 3,00 3,32 3,61 3,90 4,16 4,41
12º 1,97 2,25 2,53 2,79 3,05 3,29 3,52 2,19 2,47 2,75 3,01 3,27 3,51 3,73 2,42 2,70 2,98 3,24 3,50 3,74 3,96
13º 1,78 2,02 2,25 2,47 2,69 2,89 3,09 1,97 2,21 2,44 2,66 2,87 3,08 3,29 2,18 2,42 2,64 2,87 3,08 3,29 3,49
14º 1,57 1,78 1,98 2,16 2,35 2,53 2,70 1,74 1,94 2,14 2,32 2,52 2,69 2,86 1,91 2,11 2,31 2,50 2,69 2,86 3,03
15º 1,32 1,49 1,66 1,82 1,97 2,12 2,26 1,46 1,63 1,79 1,95 2,10 2,25 2,39 1,60 1,77 1,93 2,09 2,24 2,39 2,5316º 1,08 1,22 1,36 1,48 1,61 1,73 1,84 1,18 1,32 1,46 1,59 1,71 1,83 1,94 1,30 1,44 1,58 1,71 1,83 1,95 2,06
17º 0,83 0,94 1,04 1,13 1,22 1,31 1,40 0,91 1,02 1,12 1,21 1,30 1,39 1,48 1,00 1,10 1,20 1,30 1,39 1,48 1,56
18º 0,58 0,64 0,71 0,78 0,84 0,89 0,95 0,63 0,69 0,76 0,83 0,89 0,94 1,00 0,69 0,75 0,82 0,89 0,95 1,00 1,06
19º 0,30 0,34 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,52 0,36 0,39 0,42 0,46 0,49 0,52 0,54
20º21º 0,30 0,33 0,36 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,36 0,39 0,43 0,46 0,49 0,51 0,35 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54
22º 0,60 0,67 0,73 0,80 0,85 0,91 0,98 0,65 0,72 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 0,71 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 1,07
23º 0,93 1,02 1,12 1,22 1,30 1,39 1,49 1,01 1,10 1,20 1,29 1,38 1,46 1,55 1,10 1,19 1,29 1,38 1,46 1,55 1,63
24º 1,27 1,39 1,50 1,61 1,74 1,84 1,95 1,37 1,49 1,59 1,72 1,84 1,95 2,06 1,48 1,60 1,71 1,83 1,95 2,06 2,17
25º 1,61 1,75 1,90 2,05 2,19 2,33 2,47 1,73 1,87 2,02 2,17 2,31 2,45 2,59 1,87 2,01 2,16 2,31 2,45 2,59 2,73
26º 1,94 2,12 2,29 2,47 2,63 2,79 2,95 2,09 2,27 2,44 2,62 2,78 2,94 3,10 2,26 2,44 2,61 2,79 2,95 3,11 3,26
27º 2,30 2,51 2,70 2,90 3,09 3,27 3,44 2,48 2,68 2,87 3,07 3,27 3,45 3,62 2,67 2,88 3,07 3,27 3,46 3,64 3,81
28º 2,66 2,90 3,13 3,35 3,57 3,86 4,00 2,86 3,10 3,23 3,55 3,77 3,99 4,20 3,08 3,31 3,55 3,76 3,99 4,21 4,41
29º 3,05 3,31 3,56 3,79 4,04 4,27 4,49 3,28 3,53 3,77 4,02 4,26 4,49 4,71 3,52 3,77 4,01 4,26 4,50 4,73 4,95
30º 3,44 3,70 3,99 4,28 4,54 4,80 5,06 3,68 3,94 4,23 4,52 4,79 5,05 5,30 3,95 4,22 4,51 4,79 5,07 5,32 5,57
Weine mit 19 % Vol. Weine mit 21 % Vol.
Volumenmasse Volumenmasse
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatur in ºC10º 3,27 3,62 3,97 4,30 4,62 4,92 5,21 3,62 3,97 4,32 4,66 4,97 5,27 5,56
11º 2,99 3,30 3,61 3,90 4,19 4,45 4,70 3,28 3,61 3,92 4,22 4,50 4,76 5,01
12º 2,68 2,96 3,24 3,50 3,76 4,00 4,21 2,96 3,24 3,52 3,78 4,03 4,27 4,49
13º 2,40 2,64 2,87 3,09 3,30 3,51 3,71 2,64 2,88 3,11 3,33 3,54 3,74 3,95
14º 2,11 2,31 2,51 2,69 2,88 3,05 3,22 2,31 2,51 2,71 2,89 3,08 3,25 3,43
15º 1,76 1,93 2,09 2,25 2,40 2,55 2,69 1,93 2,10 2,26 2,42 2,57 2,72 2,8616º 1,43 1,57 1,70 1,83 1,95 2,08 2,18 1,56 1,70 1,84 1,97 2,09 2,21 2,32
17º 1,09 1,20 1,30 1,39 1,48 1,57 1,65 1,20 1,31 1,41 1,50 1,59 1,68 1,77
18º 0,76 0,82 0,88 0,95 1,01 1,06 1,12 0,82 0,88 0,95 1,01 1,08 1,13 1,18
19º 0,39 0,42 0,45 0,49 0,52 0,55 0,57 0,42 0,46 0,49 0,52 0,55 0,58 0,61
20º
21º 0,38 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,41 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,60
22º 0,78 0,84 0,90 0,96 1,02 1,07 1,13 0,84 0,90 0,96 1,02 1,08 1,14 1,19
23º 1,19 1,28 1,38 1,47 1,55 1,64 1,72 1,29 1,39 1,48 1,57 1,65 1,74 1,82
24º 1,60 1,72 1,83 1,95 2,06 2,18 2,29 1,73 1,85 1,96 2,08 2,19 2,31 2,42
25º 2,02 2,16 2,31 2,46 2,60 2,74 2,88 2,18 2,32 2,47 2,62 2,76 2,90 3,0426º 2,44 2,62 2,79 2,96 3,12 3,28 3,43 2,53 2,81 2,97 3,15 3,31 3,47 3,62
27º 2,88 3,08 3,27 3,42 3,66 3,84 4,01 3,10 3,30 3,47 3,69 3,88 4,06 4,23
28º 3,31 3,54 3,78 4,00 4,22 4,44 4,64 3,56 3,79 4,03 4,25 4,47 4,69 4,89
29º 3,78 4,03 4,27 4,52 4,76 4,99 5,21 4,06 4,31 4,55 4,80 5,04 5,27 5,48
30º 4,24 4,51 4,80 5,08 5,36 5,61 5,86 4,54 4,82 5,11 5,39 5,66 5,91 6,161990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 15
▼B
TABELLE V
Korrekturtabelle zur Umrechnung der Volumenmasse von trocknen Weinen und entalkoholisierten, trocknen
Weinen, gemessen bei t º, bezogen auf 20 ºC. Bestimmung mit dem Pyknometer oder dem Aräometer aus
gewöhnlichem Glas.
ρ20¼ρt±C
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− wenn tº < 20 ºC
+ wenn tº > 20 ºC
Alkoholgehalt in % Vol.
0 5 6 7 8 9 1 01 11 21 31 41 51 61 71 81 92 02 12 22 32 42 52 62 7Temperatur in ºC10º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,31
11º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,15 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,90
12º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,94 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,49
13º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,73 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,07
14º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66
15º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,2316º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,96 0,99 1,05 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,80
17º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36
18º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,91
19º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46
20º21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,96
23º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,91 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,45
24º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95
25º 1,16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,4526º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,92 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,96
27º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,72 2,82 2,93 3,04 3,14 3,25 3,37 3,48
28º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,63 2,73 2,83 2,93 3,03 3,14 3,26 3,38 3,50 3,62 3,75 3,85 4,00
29º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54
30º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38 3,50 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07
Anmerkung: Diese Tabelle kann auch für die Umrechnung der Dichte d20tin Dichted2020verwendet werden.
TABELLE VI
Korrekturtabelle zur Umrechnung der Volumenmasse von nicht angereicherten Mosten und Mostkonzentraten,
gemessen bei t º, bezogen auf 20 ºC. Bestimmung mit dem Pyknometer oder dem Aräometer aus gewöhnlichem
Glas.
ρ20¼ρt±C
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− wenn tº < 20 ºC
+ wenn tº > 20 ºC
Volumenmasse
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Temperatur in ºC10º 2,17 2,34 2,52 2,68 2,85 2,99 3,16 3,29 3,44 3,58 3,73 3,86 4,13 4,36 4,60 4,82 5,02 5,25 5,39 5,56 5,73 5,87
11º 2,00 2,16 2,29 2,44 2,59 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,37 3,48 3,71 3,94 4,15 4,33 4,52 4,69 4,85 5,01 5,15 5,29
12º 1,81 1,95 2,08 2,21 2,34 2,47 2,58 2,70 2,82 2,92 3,03 3,14 3,35 3,55 3,72 3,90 4,07 4,23 4,37 4,52 4,64 4,77
13º 1,62 1,74 1,85 1,96 2,07 2,17 2,28 2,38 2,48 2,59 2,68 2,77 2,94 3,11 3,28 3,44 3,54 3,72 3,86 3,99 4,12 4,24
14º 1,44 1,54 1,64 1,73 1,82 1,92 2,00 2,08 2,17 2,25 2,34 2,42 2,57 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,35 3,46 3,57 3,65
15º 1,21 1,29 1,37 1,45 1,53 1,60 1,68 1,75 1,82 1,89 1,97 2,03 2,16 2,28 2,40 2,51 2,61 2,71 2,80 2,89 2,94 3,01
16º 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,65 1,75 1,84 1,94 2,02 2,09 2,17 2,23 2,30 2,36 2,42
17º 0,76 0,82 0,86 0,91 0,96 1,00 1,05 1,09 1,14 1,18 1,22 1,25 1,32 1,39 1,46 1,52 1,57 1,63 1,67 1,71 1,75 1,79
18º 0,53 0,56 0,59 0,63 0,65 0,69 0,72 0,74 0,77 0,80 0,82 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,13 1,16 1,18 1,20
19º 0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,43 0,43 0,46 0,48 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
20º21º 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,51 0,54 0,56 0,57 0,58 0,59 0,60 0,60
22º 0,55 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,93 0,97 1,02 1,06 1,09 1,12 1,15 1,17 1,19 1,19
23º 0,85 0,90 0,95 0,99 1,04 1,08 1,12 1,16 1,21 1,25 1,29 1,32 1,39 1,46 1,52 1,58 1,62 1,68 1,72 1,75 1,77 1,79
24º 1,15 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,48 1,54 1,60 1,65 1,71 1,76 1,86 1,95 2,04 2,11 2,17 2,23 2,29 2,33 2,35 2,37
25º 1,44 1,52 1,59 1,67 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,22 2,34 2,45 2,55 2,64 2,74 2,81 2,87 2,90 2,92 2,9626º 1,76 1,84 1,93 2,02 2,10 2,18 2,25 2,33 2,41 2,49 2,56 2,64 2,78 2,91 3,03 3,15 3,26 3,37 3,47 3,55 3,62 3,60
27º 2,07 2,16 2,26 2,36 2,46 2,56 2,65 2,74 2,83 2,91 3,00 3,07 3,24 3,39 3,55 3,69 3,82 3,94 4,04 4,14 4,23 4,30
28º 2,39 2,51 2,63 2,74 2,85 2,96 3,06 3,16 3,28 3,38 3,48 3,57 3,75 3,92 4,08 4,23 4,37 4,51 4,62 4,73 4,80 4,86
29º 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22 3,34 3,46 3,57 3,69 3,80 3,90 4,00 4,20 4,39 4,58 4,74 4,90 5,05 5,19 5,31 5,40 5,48
30º 3,06 3,21 3,35 3,50 3,63 3,77 3,91 4,02 4,15 4,28 4,40 4,52 4,75 4,96 5,16 5,35 5,52 5,67 5,79 5,91 5,99 6,04
Anmerkung: Diese Tabelle kann auch für die Umrechnung der Dichte d20tin Dichted2020verwendet werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 16
▼B
TABELLE VII
Korrekturtabelle zur Umrechnung der Volumenmasse von Weinen mit einem Restzuckergehalt bei einem Alko-
holgehalt von 13 % Vol. oder mehr, gemessen bei t º, bezogen auf 20 ºC. Bestimmung mit dem Aräometer oder
mit dem Pyknometer aus gewöhnlichem Glas.
ρ20¼ρt±C
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− wenn tº < 20 ºC
+ wenn tº > 20 ºC
Weine mit 13 % Vol. Weine mit 15 % Weine mit 17 % Vol.
Volumenmasse Vol. Volumenmasse Volumenmasse
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatur in ºC10º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18 2,51 2,85 3,20 3,54 3,85 4,02 4,46 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74
11º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,78 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,02 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,28
12º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,40 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,61 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,84
13º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,00 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,19 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,39
14º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94
15º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,47
16º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,78 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,88 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,00
17º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,36 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,44 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,52
18º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,92 0,60 0,66 0,73 0,80 0,85 0,91 0,97 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,03
19º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53
20º21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,47 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,50 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53
22º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,93 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,98 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04
23º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,43 0,97 1,06 1,16 1,25 1,34 1,42 1,51 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,59
24º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90 1,32 1,44 1,54 1,66 1,78 1,89 2,00 1,43 1,56 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11
25º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,6626º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,87 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,01 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,17
27º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,35 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,52 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,71
28º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,89 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,07 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,30
29º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82
30º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42
Weine mit 19 % Vol. Weine mit 21 % Vol.
Volumenmasse Volumenmasse
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatur in ºC10º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41
11º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,57 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,88
12º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,10 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,37
13º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,61 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,85
14º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33
15º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,8016º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,13 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,26
17º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,62 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,71
18º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,09 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,15
19º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
20º21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
22º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,10 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,17
23º 1,15 1,30 1,34 1,43 1,51 1,60 1,68 1,25 1,34 1,44 1,63 1,61 1,70 1,78
24º 1,55 1,67 1,77 1,89 2,00 2,11 2,23 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36
25º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,9726º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,35 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,54
27º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,92 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,13
28º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,53 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,77
29º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36
30º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,021990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 17
▼B
2.BESTIMMUNG DES ZUCKERGEHALTES VON MOST, KONZEN-
TRIERTEM MOST UND REKTIFIZIERTEM TRAUBENMOSTKON-
ZENTRAT (RTK) NACH DEM REFRAKTOMETRISCHEN
VERFAHREN
1. PRINZIP DER METHODE
Bestimmung der Refraktion bei 20 ºC, ausgedrückt als Brechungs-
index oder als Massenprozente Saccharose, und Ermittlung des
Zuckergehaltes in g/l und g/kg aus einer entsprechenden Tabelle für
Most, konzentrierten Most und rektifiziertes Traubenmostkonzentrat.
2. GERÄTSCHAFTEN2.1. Abbé-Refraktometer
Abbé-Refraktometer mit Skaleneinteilung entweder:
— in Massenprozent Saccharose (auf 0,1 % genau) oder
— in Brechungsindex mit 4 Dezimalen.
Das Refraktometer muß ausgerüstet sein mit einem Thermometer
(15—25 ºC) und einer Temperiereinrichtung zur Messung bei 20 ºC
± 5 ºC.
Die Gebrauchsanweisung für das Gerät muß genau befolgt werden,
vor allem hinsichtlich der Eichung und der Lichtquelle.
3. VORBEREITUNG DER PROBE
3.1. Most und konzentrierter Most
Der Most wird gegebenenfalls durch eine trockene, gefaltete Gaze
filtriert. Nachdem die ersten Tropfen des Filtrats verworfen wurden,
wird die Bestimmung mit der filtrierten Probe durchgeführt.
3.2. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat
Je nach Konzentration verwendet man entweder das RTK direkt oder
eine Verdünnung, die durch Auffüllen von 200 g genau gewogenem
RTK mit destilliertem Wasser auf 500 g hergestellt wird.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
Die Probe wird auf eine Temperatur von etwa 20 ºC gebracht.
Einige Tropfen werden auf das Prisma des Refraktometers gegeben,
so daß sich die Probe beim Aufeinanderpressen der beiden Prismen
gleichmäßig auf der Oberfläche verteilt. Die Messung wird entspre-
chend der Arbeitsanleitung für das verwendete Gerät durchgeführt.
Man liest entweder die Massenprozent Saccharose auf 0,1 % genau
oder den Brechungsindex mit 4 Dezimalen ab.
Es werden mindestens 2 Bestimmungen an derselben Probe durchge-
führt. Man stellt die Temperatur t ºC fest.
5. BERECHNUNG5.1. Temperaturkorrektur
5.1.1. Skaleneinteilung in Massenprozent Saccharose: Zur Temperaturkor-
rektur wird Tabelle I verwendet.
5.1.2. Skaleneinteilung in Brechungsindex: der dem bei t ºC abgelesenen
Brechungsindex entsprechende Saccharosegehalt in % (g/g) wird
Tabelle II entnommen (Spalte 1). Dieser Wert wird unter Verwen-
dung von Tabelle I auf 20 ºC korrigiert.
5.2. Invertzuckergehalt von Most und konzentriertem Most
Der den Massenprozent Saccharose bei 20 ºC entsprechende Inver-
tzuckergehalt, ausgedrückt in g/l und g/kg, wird Tabelle II
entnommen. Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 18
▼B
5.3. Invertzuckergehalt von rektifiziertem Traubenmostkonzentrat
(RTK)
Der den Massenprozent Saccharose bei 20 ºC entsprechende Inver-
tzuckergehalt, ausgedrückt in g/l und g/kg, wird Tabelle III
entnommen. Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.
Wurde die Messung mit verdünntem RTK durchgeführt, so ist das
Ergebnis mit dem Verdünnungsfaktor zu multiplizieren.
5.4. Brechungsindex von Most, konzentriertem Most und rektifi-
ziertem Traubenmostkonzentrat
Der Brechungsindex bei 20 ºC wird entsprechend den Massenprozent
Saccharose bei 20 ºC Tabelle II entnommen. Die Angabe erfolgt mit
5 Dezimalen.
TABELLE I
Korrektur für die Bestimmung der Saccharose bei einer anderen Temperatur als 20 ºC
Temperatur
CSaccharosein Gramm je100 g de r Probe
5 1 01 52 03 04 05 06 07 07 5
Abziehen
15 0,25 0,27 0,31 0,31 0,34 0,35 0,36 0,37 0,36 0,36
16 0,21 0,23 0,27 0,27 0,29 0,31 0,31 0,32 0,31 0,2317 0,16 0,18 0,20 0,20 0,22 0,23 0,23 0,23 0,20 0,1718 0,11 0,12 0,14 0,15 0,16 0,16 0,15 0,12 0,12 0,09
19 0,06 0,07 0,08 0,08 0,08 0,09 0,09 0,08 0,07 0,05
Hinzuzählen
21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
22 0,12 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,1423 0,18 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,2224 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,2925 0,30 0,32 0,32 0,34 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37
Die Temperaturschwankungen gegenüber 20 ºC dürfen 5 ºC nicht
überschreiten.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 19
▼B
TABELLE II
Zuckergehalt (1)von Most und konzentriertem Most in Gramm je Liter und in Gramm je Kilo-
gramm, bestimmt mittels Refraktometrie, abgelesen bei 20 ºC als Massenprozent Saccharose
oder als Brechungsindex. Die Volumenmasse bei 20 ºC ist ebenfalls angegeben.
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
10.0 1.34781 1.0390 82.3 79.2 4,89
10.1 1.34798 1.0394 83.4 80.2 4,95
10.2 1.34814 1.0398 84.5 81.3 5,02
10.3 1.34830 1.0402 85.6 82.2 5,09
10.4 1.34845 1.0406 86.6 83.2 5,14
10.5 1.34860 1.0410 87.6 84.1 5,20
10.6 1.34875 1.0414 88.6 85.1 5,26
10.7 1.34890 1.0419 89.7 86.1 5,33
10.8 1.34906 1.0423 90.8 87.1 5,39
10.9 1.34921 1.0427 91.8 88.1 5,45
11.0 1.34936 1.0431 92.9 89.1 5,52
11.1 1.34952 1.0435 94.0 90.0 5,58
11.2 1.34968 1.0439 95.0 91.0 5,64
11.3 1.34984 1.0443 96.1 92.0 5,71
11.4 1.34999 1.0447 97.1 92.9 5,77
11.5 1.35015 1.0452 98.2 94.0 5,83
11.6 1.35031 1.0456 99.3 95.0 5,90
11.7 1.35046 1.0460 100.3 95.9 5,96
11.8 1.35062 1.0464 101.4 96.9 6,02
11.9 1.35077 1.0468 102.5 97.9 6,09
12.0 1.35092 1.0473 103.6 98.9 6,15
12.1 1.35108 1.0477 104.7 99.9 6,22
12.2 1.35124 1.0481 105.7 100.8 6,28
12.3 1.35140 1.0485 106.8 101.9 6,35
12.4 1.35156 1.0489 107.9 102.9 6,41
12.5 1.35172 1.0494 109.0 103.8 6,47
12.6 1.35187 1.0498 110.0 104.8 6,53
12.7 1.35203 1.0502 111.1 105.8 6,60
12.8 1.35219 1.0506 112.2 106.8 6,66
12.9 1.35234 1.0510 113.2 107.8 6,73
13.0 1.35249 1.0514 114.3 108.7 6,79
13.1 1.35266 1.0519 115.4 109.7 6,86
13.2 1.35282 1.0523 116.5 110.7 6,92
13.3 1.35298 1.0527 117.6 111.7 6,99
13.4 1.35313 1.0531 118.6 112.6 7,05
13.5 1.35329 1.0536 119.7 113.6 7,11
13.6 1.35345 1.0540 120.8 114.6 7,18
13.7 1.35360 1.0544 121.8 115.6 7,24
13.8 1.35376 1.0548 122.9 116.5 7,30
13.9 1.35391 1.0552 124.0 117.5 7,37
14.0 1.35407 1.0557 125.1 118.5 7,43
14.1 1.35424 1.0561 126.2 119.5 7,50
14.2 1.35440 1.0565 127.3 120.5 7,56
14.3 1.35456 1.0569 128.4 121.5 7,63
14.4 1.35472 1.0574 129.5 122.5 7,69
14.5 1.35488 1.0578 130.6 123.4 7,76
14.6 1.35503 1.0582 131.6 124.4 7,82
14.7 1.35519 1.0586 132.7 125.4 7,88
14.8 1.35535 1.0591 133.8 126.3 7,95
14.9 1.35551 1.0595 134.9 127.3 8,011990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 20
(1) Der Zuckergehalt wird in Invertzucker ausgedrückt.
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
15.0 1.35567 1.0599 136.0 128.3 8,08
15.1 1.35583 1.0603 137.1 129.3 8,15
15.2 1.35599 1.0608 138.2 130.3 8,21
15.3 1.35615 1.0612 139.3 131.3 8,27
15.4 1.35631 1.0616 140.4 132.3 8,34
15.5 1.35648 1.0621 141.5 133.2 8,41
15.6 1.35664 1.0625 142.6 134.2 8,47
15.7 1.35680 1.0629 143.7 135.2 8,54
15.8 1.35696 1.0633 144.8 136.2 8,60
15.9 1.35712 1.0638 145.9 137.2 8,67
16.0 1.35728 1.0642 147.0 138.1 8,73
16.1 1.35744 1.0646 148.1 139.1 8,80
16.2 1.35760 1.0651 149.2 140.1 8,86
16.3 1.35776 1.0655 150.3 141.1 8,93
16.4 1.35793 1.0660 151.5 142.1 9,00
16.5 1.35809 1.0664 152.6 143.1 9,06
16.6 1.35825 1.0668 153.7 144.1 9,13
16.7 1.35842 1.0672 154.8 145.0 9,20
16.8 1.35858 1.0677 155.9 146.0 9,26
16.9 1.35874 1.0681 157.0 147.0 9,33
17.0 1.35890 1.0685 158.1 148.0 9,39
17.1 1.35907 1.0690 159.3 149.0 9,46
17.2 1.35923 1.0694 160.4 150.0 9,53
17.3 1.35939 1.0699 161.5 151.0 9,59
17.4 1.35955 1.0703 162.6 151.9 9,66
17.5 1.35972 1.0707 163.7 152.9 9,73
17.6 1.35988 1.0711 164.8 153.9 9,79
17.7 1.36004 1.0716 165.9 154.8 9,86
17.8 1.36020 1.0720 167.0 155.8 9,92
17.9 1.36036 1.0724 168.1 156.8 9,99
18.0 1.36053 1.0729 169.3 157.8 10,06
18.1 1.36070 1.0733 170.4 158.8 10,12
18.2 1.36086 1.0738 171.5 159.7 10,19
18.3 1.36102 1.0742 172.6 160.7 10,25
18.4 1.36119 1.0746 173.7 161.6 10,32
18.5 1.36136 1.0751 174.9 162.6 10,39
18.6 1.36152 1.0755 176.0 163.6 10,46
18.7 1.36169 1.0760 177.2 164.6 10,53
18.8 1.36185 1.0764 178.3 165.6 10,59
18.9 1.36201 1.0768 179.4 166.6 10,66
19.0 1.36217 1.0773 180.5 167.6 10,72
19.1 1.36234 1.0777 181.7 168.6 10,80
19.2 1.36251 1.0782 182.8 169.5 10,86
19.3 1.36267 1.0786 183.9 170.5 10,93
19.4 1.36284 1.0791 185.1 171.5 11,00
19.5 1.36301 1.0795 186.3 172.5 11,07
19.6 1.36318 1.0800 187.4 173.5 11,13
19.7 1.36335 1.0804 188.6 174.5 11,21
19.8 1.36351 1.0809 189.7 175.5 11,27
19.9 1.36367 1.0813 190.8 176.5 11,341990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 21
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
20.0 1.36383 1.0817 191.9 177.4 11,40
20.1 1.36400 1.0822 193.1 178.4 11,47
20.2 1.36417 1.0826 194.2 179.4 11,54
20.3 1.36434 1.0831 195.3 180.4 11,60
20.4 1.36451 1.0835 196.5 181.4 11,67
20.5 1.36468 1.0840 197.7 182.3 11,75
20.6 1.36484 1.0844 198.8 183.3 11,81
20.7 1.36501 1.0849 200.0 184.3 11,88
20.8 1.36518 1.0853 201.1 185.3 11,96
20.9 1.36534 1.0857 202.2 186.2 12,01
21.0 1.36550 1.0862 203.3 187.2 12,08
21.1 1.36568 1.0866 204.5 188.2 12,15
21.2 1.36585 1.0871 205.7 189.2 12,22
21.3 1.36601 1.0875 206.8 190.2 12,29
21.4 1.36618 1.0880 207.9 191.1 12,35
21.5 1.36635 1.0884 209.1 192.1 12,42
21.6 1.36652 1.0889 210.3 193.1 12,49
21.7 1.36669 1.0893 211.4 194.1 12,56
21.8 1.36685 1.0897 212.5 195.0 12,63
21.9 1.36702 1.0902 213.6 196.0 12,69
22.0 1.36719 1.0906 214.8 196.9 12,76
22.1 1.36736 1.0911 216.0 198.0 12,83
22.2 1.36753 1.0916 217.2 199.0 12,90
22.3 1.36770 1.0920 218.3 199.9 12,97
22.4 1.36787 1.0925 219.5 200.9 13,04
22.5 1.36804 1.0929 220.6 201.8 13,11
22.6 1.36820 1.0933 221.7 202.8 13,17
22.7 1.36837 1.0938 222.9 203.8 13,24
22.8 1.36854 1.0943 224.1 204.8 13,31
22.9 1.36871 1.0947 225.2 205.8 13,38
23.0 1.36888 1.0952 226.4 206.7 13,45
23.1 1.36905 1.0956 227.6 207.7 13,52
23.2 1.36922 1.0961 228.7 208.7 13,59
23.3 1.36939 1.0965 229.9 209.7 13,66
23.4 1.36956 1.0970 231.1 210.7 13,73
23.5 1.36973 1.0975 232.3 211.6 13,80
23.6 1.36991 1.0979 233.4 212.6 13,87
23.7 1.37008 1.0984 234.6 213.6 13,94
23.8 1.37025 1.0988 235.8 214.6 14,01
23.9 1.37042 1.0993 237.0 215.6 14,08
24.0 1.37059 1.0998 238.2 216.6 14,15
24.1 1.37076 1.1007 239.3 217.4 14,22
24.2 1.37093 1.1011 240.3 218.2 14,28
24.3 1.37110 1.1016 241.6 219.4 14,35
24.4 1.37128 1.1022 243.0 220.5 14,44
24.5 1.37145 1.1026 244.0 221.3 14,50
24.6 1.37162 1.1030 245.0 222.1 14,56
24.7 1.37180 1.1035 246.4 223.2 14,64
24.8 1.37197 1.1041 247.7 224.4 14,72
24.9 1.37214 1.1045 248.7 225.2 14,781990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 22
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
25.0 1.37232 1.1049 249.7 226.0 14,84
25.1 1.37249 1.1053 250.7 226.8 14,90
25.2 1.37266 1.1057 251.7 227.6 14,96
25.3 1.37283 1.1062 253.0 228.7 15,03
25.4 1.37300 1.1068 254.4 229.9 15,11
25.5 1.37317 1.1072 255.4 230.7 15,17
25.6 1.37335 1.1076 256.4 231.5 15,23
25.7 1.37353 1.1081 257.8 232.6 15,32
25.8 1.37370 1.1087 259.1 233.7 15,39
25.9 1.37387 1.1091 260.1 234.5 15,45
26.0 1.37405 1.1095 261.1 235.3 15,51
26.1 1.37423 1.1100 262.5 236.4 15,60
26.2 1.37440 1.1106 263.8 237.5 15,67
26.3 1.37457 1.1110 264.8 238.3 15,73
26.4 1.37475 1.1114 265.8 239.2 15,79
26.5 1.37493 1.1119 267.2 240.3 15,88
26.6 1.37510 1.1125 268.5 241.4 15,95
26.7 1.37528 1.1129 269.5 242.2 16,01
26.8 1.37545 1.1133 270.5 243.0 16,07
26.9 1.37562 1.1138 271.8 244.1 16,15
27.0 1.37580 1.1144 273.2 245.2 16,23
27.1 1.37598 1.1148 274.2 246.0 16,29
27.2 1.37615 1.1152 275.2 246.8 16,35
27.3 1.37632 1.1157 276.5 247.9 16,43
27.4 1.37650 1.1163 277.9 249.0 16,51
27.5 1.37667 1.1167 278.9 249.8 16,57
27.6 1.37685 1.1171 279.9 250.6 16,63
27.7 1.37703 1.1176 281.3 251.6 16,71
27.8 1.37721 1.1182 282.6 252.7 16,79
27.9 1.37739 1.1186 283.6 253.5 16,85
28.0 1.37757 1.1190 284.6 254.3 16,91
28.1 1.37775 1.1195 286.0 255.4 16,99
28.2 1.37793 1.1201 287.3 256.5 17,07
28.3 1.37810 1.1205 288.3 257.3 17,13
28.4 1.37828 1.1209 289.3 258.1 17,19
28.5 1.37846 1.1214 290.7 259.2 17,27
28.6 1.37863 1.1220 292.0 260.3 17,35
28.7 1.37881 1.1224 293.0 261.0 17,41
28.8 1.37899 1.1228 294.0 261.8 17,47
28.9 1.37917 1.1233 295.3 262.9 17,55
29.0 1.37935 1.1239 296.7 264.0 17,63
29.1 1.37953 1.1244 298.1 265.1 17,71
29.2 1.37971 1.1250 299.4 266.1 17,79
29.3 1.37988 1.1254 300.4 266.9 17,85
29.4 1.38006 1.1258 301.4 267.7 17,91
29.5 1.38024 1.1263 302.8 268.8 17,99
29.6 1.38042 1.1269 304.1 269.9 18,07
29.7 1.38060 1.1273 305.1 270.6 18,13
29.8 1.38078 1.1277 306.1 271.4 18,19
29.9 1.38096 1.1282 307.4 272.5 18,261990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 23
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
30.0 1.38114 1.1288 308.8 273.6 18,35
30.1 1.38132 1.1293 310.0 274.5 18,42
30.2 1.38150 1.1298 311.2 275.5 18,49
30.3 1.38168 1.1302 312.4 276.4 18,56
30.4 1.38186 1.1307 313.6 277.3 18,63
30.5 1.38204 1.1312 314.8 278.3 18,70
30.6 1.38222 1.1317 316.0 279.2 18,77
30.7 1.38240 1.1322 317.2 280.2 18,85
30.8 1.38258 1.1327 318.4 281.1 18,92
30.9 1.38276 1.1332 319.6 282.0 18,99
31.0 1.38294 1.1336 320.8 283.0 19,06
31.1 1.38312 1.1341 322.0 283.9 19,13
31.2 1.38330 1.1346 323.2 284.9 19,20
31.3 1.38349 1.1351 324.4 285.8 19,27
31.4 1.38367 1.1356 325.6 286.8 19,35
31.5 1.38385 1.1361 326.8 287.7 19,42
31.6 1.38403 1.1366 328.1 288.6 19,49
31.7 1.38421 1.1371 329.3 289.6 19,56
31.8 1.38440 1.1376 330.5 290.5 19,64
31.9 1.38458 1.1380 331.7 291.5 19,71
32.0 1.38476 1.1385 332.9 292.4 19,78
32.1 1.38494 1.1391 334.2 293.4 19,86
32.2 1.38513 1.1396 335.5 294.4 19,93
32.3 1.38531 1.1401 336.7 295.4 20,00
32.4 1.38550 1.1406 338.0 296.4 20,08
32.5 1.38568 1.1411 339.3 297.3 20,16
32.6 1.38586 1.1416 340.6 298.3 20,24
32.7 1.38605 1.1422 341.9 299.3 20,31
32.8 1.38623 1.1427 343.1 300.3 20,38
32.9 1.38642 1.1432 344.4 301.3 20,46
33.0 1.38660 1.1437 345.7 302.3 20,54
33.1 1.38678 1.1442 346.9 303.2 20,61
33.2 1.38697 1.1447 348.1 304.1 20,68
33.3 1.38715 1.1452 349.3 305.0 20,75
33.4 1.38734 1.1457 350.5 305.9 20,82
33.5 1.38753 1.1461 351.7 306.9 20,90
33.6 1.38771 1.1466 352.9 307.8 20,97
33.7 1.38790 1.1471 354.1 308.7 21,04
33.8 1.38808 1.1476 355.3 309.6 21,11
33.9 1.38827 1.1481 356.5 310.5 21,18
34.0 1.38845 1.1486 357.7 311.4 21,25
34.1 1.38864 1.1491 359.0 312.4 21,33
34.2 1.38882 1.1496 360.3 313.4 21,41
34.3 1.38901 1.1501 361.5 314.3 21,48
34.4 1.38919 1.1506 362.8 315.3 21,55
34.5 1.38938 1.1512 364.1 316.3 21,63
34.6 1.38957 1.1517 365.4 317.3 21,71
34.7 1.38975 1.1522 366.7 318.2 21,79
34.8 1.38994 1.1527 367.9 319.2 21,86
34.9 1.39012 1.1532 369.2 320.2 21,941990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 24
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
35.0 1.39031 1.1537 370.5 321.1 22,01
35.1 1.39050 1.1543 371.8 322.1 22,09
35.2 1.39069 1.1548 373.0 323.0 22,16
35.3 1.39087 1.1553 374.3 324.0 22,24
35.4 1.39106 1.1558 375.6 325.0 22,32
35.5 1.39125 1.1563 376,9 325.9 22,39
35.6 1.39144 1.1568 378.1 326.9 22,45
35.7 1.39163 1.1573 379.4 327.8 22,54
35.8 1.39181 1.1579 380.7 328.8 22,62
35.9 1.39200 1.1584 381.9 329.7 22,69
36.0 1.39219 1.1589 383.2 330.7 22,77
36.1 1.39238 1.1594 384.5 331.6 22,85
36.2 1.39257 1.1599 385.8 332.6 22,92
36.3 1.39276 1.1604 387.0 333.5 22,99
36.4 1.39295 1.1610 388.3 334.5 23,07
36.5 1.39314 1.1615 389.6 335.4 23,15
36.6 1.39332 1.1620 390.9 336.4 23,22
36.7 1.39351 1.1625 392.2 337.3 23,30
36.8 1.39370 1.1630 393.4 338.3 23,37
36.9 1.39389 1.1635 394.7 339.2 23,45
37.0 1.39408 1.1641 396.0 340.2 23,53
37.1 1.39427 1.1646 397.3 341.1 23,60
37.2 1.39446 1.1651 398.6 342.1 23,68
37.3 1.39465 1.1656 399.8 343.0 23,75
37.4 1.39484 1.1661 401.1 344.0 23,83
37.5 1.39504 1.1666 402.4 344.9 23,91
37.6 1.39523 1.1672 403.7 345.9 23,99
37.7 1.39542 1.1677 405.0 346.8 24,06
37.8 1.39561 1.1682 406.2 347.7 24,13
37.9 1.39580 1.1687 407.5 348.7 24,21
38.0 1.39599 1.1692 408.8 349.6 24,29
38.1 1.39618 1.1698 410.1 350.6 24,37
38.2 1.39637 1.1703 411.3 351.5 24,44
38.3 1.39657 1.1708 412.6 352.4 24,51
38.4 1.39676 1.1713 413.9 353.4 24,59
38.5 1.39695 1.1718 415.2 354.3 24,67
38.6 1.39714 1.1723 416.4 355.2 24,74
38.7 1.39733 1.1728 417.7 356.1 24,82
38.8 1.39753 1.1733 419.0 357.1 24,90
38.9 1.39772 1.1739 420.2 358.0 24,97
39.0 1.39791 1.1744 421.5 358.9 25,04
39.1 1.39810 1.1749 422.8 359.8 25,12
39.2 1.39830 1.1754 424.1 360.8 25,20
39.3 1.39849 1.1759 425.3 361.7 25,27
39.4 1.39869 1.1764 426.6 362.6 25,35
39.5 1.39888 1.1770 427.9 363.6 25,42
39.6 1.39907 1.1775 429.2 364.5 25,50
39.7 1.39927 1.1780 430.5 365.4 25,58
39.8 1.39946 1.1785 431.7 366.3 25,65
39.9 1.39966 1.1790 433.0 367.3 25,731990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 25
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
40.0 1.39985 1.1796 434.3 368.2 25,80
40.1 1.40004 1.1801 435.6 369.2 25,88
40.2 1.40024 1.1806 437.0 370.1 25,96
40.3 1.40043 1.1812 438.3 371.1 26,04
40.4 1.40063 1.1817 439.7 372.1 26,12
40.5 1.40083 1.1823 441.0 373.0 26,20
40.6 1.40102 1.1828 442.3 374.0 26,28
40.7 1.40122 1.1833 443.7 374.9 26,36
40.8 1.40141 1.1839 445.0 375.9 26,44
40.9 1.40161 1.1844 446.4 376.9 26,52
41.0 1.40180 1.1850 447.7 377.8 26,60
41.1 1.40200 1.1855 449.0 378.7 26,68
41.2 1.40219 1.1860 450.2 379.6 26,75
41.3 1.40239 1.1865 451.5 380.5 26,83
41.4 1.40259 1.1870 452.8 381.4 26,90
41.5 1.40279 1.1875 454.1 382.3 26,98
41.6 1.40298 1.1881 455.3 383.2 27,05
41.7 1.40318 1.1886 456.6 384.2 27,13
41.8 1.40338 1.1891 457.9 385.1 27,21
41.9 1.40357 1.1896 459.1 386.0 27,28
42.0 1.40377 1.1901 460.4 386.9 27,35
42.1 1.40397 1.1907 461.7 387.8 27,43
42.2 1.40417 1.1912 463.1 388.8 27,52
42.3 1.40436 1.1917 464.4 389.7 27,59
42.4 1.40456 1.1923 465.8 390.7 27,68
42.5 1.40476 1.1928 467.2 391.6 27,76
42.6 1.40496 1.1934 468.5 392.6 27,84
42.7 1.40516 1.1939 469.9 393.5 27,92
42.8 1.40535 1.1945 471.2 394.5 28,00
42.9 1.40555 1.1950 472.6 395.4 28,08
43.0 1.40575 1.1956 473.9 396.4 28,16
43.1 1.40595 1.1961 475.2 397.3 28,23
43.2 1.40615 1.1967 476.6 398.3 28,32
43.3 1.40635 1.1972 477.9 399.2 28,40
43.4 1.40655 1.1977 479.3 400.1 28,48
43.5 1.40675 1.1983 480.6 401.1 28,56
43.6 1.40695 1.1988 481.9 402.0 28,63
43.7 1.40715 1.1994 483.3 402.9 28,72
43.8 1.40735 1.1999 484.6 403.9 28,79
43.9 1.40755 1.2005 486.0 404.8 28,88
44.0 1.40775 1.2010 487.3 405.7 28,95
44.1 1.40795 1.2015 488.6 406.7 29,03
44.2 1.40815 1.2021 490.0 407.6 29,11
44.3 1.40836 1.2026 491.3 408.5 29,19
44.4 1.40856 1.2032 492.7 409.5 29,27
44.5 1.40876 1.2037 494.0 410.4 29,35
44.6 1.40896 1.2042 495.3 411.3 29,43
44.7 1.40916 1.2048 496.7 412.3 29,51
44.8 1.40937 1.2053 498.0 413.2 29,59
44.9 1.40957 1.2059 499.4 414.1 29,671990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 26
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
45.0 1.40977 1.2064 500.7 415.0 29,75
45.1 1.40997 1.2070 502.1 416.0 29,83
45.2 1.41018 1.2076 503.5 417.0 29,92
45.3 1.41038 1.2081 504.9 417.9 30,00
45.4 1.41058 1.2087 506.3 418.9 30,08
45.5 1.41079 1.2093 507.8 419.9 30,17
45.6 1.41099 1.2098 509.2 420.9 30,25
45.7 1.41119 1.2104 510.6 421.8 30,34
45.8 1.41139 1.2110 512.0 422.8 30,42
45.9 1.41160 1.2115 513.4 423.7 30,50
46.0 1.41180 1.2121 514.8 424.7 30,59
46.1 1.41200 1.2127 516.1 425.6 30,66
46.2 1.41221 1.2132 517.5 426.5 30,75
46.3 1.41241 1.2137 518.8 427.5 30,82
46.4 1.41262 1.2143 520.2 428.4 30,91
46.5 1.41282 1.2148 521.5 429.3 30,99
46.6 1.41302 1.2154 522.8 430.2 31,06
46.7 1.41323 1.2159 524.2 431.1 31,15
46.8 1.41343 1.2165 525.5 432.0 31,22
46.9 1.41364 1.2170 526.9 432.9 31,31
47.0 1.41384 1.2175 528.2 433.8 31,38
47.1 1.41405 1.2181 529.6 434.8 31,47
47.2 1.41425 1.2187 531.0 435.7 31,55
47.3 1.41446 1.2192 532.4 436.7 31,63
47.4 1.41466 1.2198 533.8 437.6 31,72
47.5 1.41487 1.2204 535.3 438.6 31,81
47.6 1.41508 1.2210 536.7 439.5 31,89
47.7 1.41528 1.2215 538.1 440.5 31,97
47.8 1.41549 1.2221 539.5 441.4 32,05
47.9 1.41569 1.2227 540.9 442.4 32,14
48.0 1.41590 1.2232 542.3 443.3 32,22
48.1 1.41611 1.2238 543.6 444.2 32,30
48.2 1.41632 1.2243 545.0 445.1 32,38
48.3 1.41652 1.2249 546.3 446.0 32,46
48.4 1.41673 1.2254 547.7 446.9 32,59
48.5 1.41694 1.2260 549.1 447.8 32,63
48.6 1.41715 1.2265 550.4 448.7 32,70
48.7 1.41736 1.2271 551.8 449.7 32,79
48.8 1.41756 1.2276 553.1 450.6 32,86
48.9 1.41777 1.2282 554.5 451.4 32,95
49.0 1.41798 1.2287 555.8 452.3 33,02
49.1 1.41819 1.2293 557.2 453.3 33,11
49.2 1.41840 1.2298 558.6 454.2 33,19
49.3 1.41861 1.2304 560.0 455.1 33,27
49.4 1.41882 1.2310 561.4 456.1 33,36
49.5 1.41903 1.2315 562.8 457.0 33,44
49.6 1.41924 1.2321 564.2 457.9 33,52
49.7 1.41945 1.2327 565.6 458.8 33,61
49.8 1.41966 1.2332 567.0 459.8 33,69
49.9 1.41987 1.2338 568.4 460.7 33,771990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 27
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
50.0 1.42008 1.2344 569.8 461.6 33,86
50.1 1.42029 1.2349 571.2 462.5 33,94
50.2 1.42050 1.2355 572.6 463.5 34,02
50.3 1.42071 1.2361 574.0 464.4 34,10
50.4 1.42092 1.2366 575.4 465.3 34,19
50.5 1.42114 1.2372 576.9 466.2 34,28
50.6 1.42135 1.2378 578.3 467.2 34,36
50.7 1.42156 1.2384 579.7 468.1 34,44
50.8 1.42177 1.2389 581.1 469.0 34,53
50.9 1.42198 1.2395 582.5 469.9 34,61
51.0 1.42219 1.2401 583.9 470.9 34,69
51.1 1.42240 1.2407 585.4 471.8 34,78
51.2 1.42261 1.2413 586.9 472.8 34,87
51.3 1.42283 1.2419 588.3 473.8 34,95
51.4 1.42304 1.2425 589.8 474.7 35,04
51.5 1.42325 1.2431 591.3 475.7 35,13
51.6 1.42346 1.2437 592.8 476.6 35,22
51.7 1.42367 1.2443 594.3 477.6 35,31
51.8 1.42389 1.2449 595.7 478.6 35,39
51.9 1.42410 1.2455 597.2 479.5 35,48
52.0 1.42431 1.2461 598.7 480.5 35,57
52.1 1.42452 1.2466 600.1 481.4 35,65
52.2 1.42474 1.2472 601.5 482.3 35,74
52.3 1.42495 1.2478 602.9 483.2 35,82
52.4 1.42517 1.2483 604.3 484.1 35,91
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52.7 1.42581 1.2500 608.6 486.8 36,16
52.8 1.42602 1.2506 610.0 487.7 36,24
52.9 1.42624 1.2512 611.4 488.6 36,33
53.0 1.42645 1.2518 612.8 489.6 36,41
53.1 1.42666 1.2524 614.3 490.5 36,50
53.2 1.42686 1.2530 615.8 491.4 36,59
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53.7 1.42789 1.2560 623.2 496.2 37,03
53.8 1.42810 1.2566 624.6 497.1 37,11
53.9 1.42830 1.2571 626.1 498.0 37,20
54.0 1.42851 1.2577 627.6 499.0 37,29
54.1 1.42874 1.2583 629.0 499.9 37,37
54.2 1.42897 1.2589 630.4 500.8 37,45
54.3 1.42919 1.2595 631.8 501.7 37,54
54.4 1.42942 1.2600 633.2 502.6 37,62
54.5 1.42965 1.2606 634.7 503.5 37,71
54.6 1.42988 1.2612 636.1 504.3 37,79
54.7 1.43011 1.2617 637.5 505.2 37,88
54.8 1.43033 1.2623 638.9 506.1 37,96
54.9 1.43056 1.2629 640.3 507.0 38,041990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 28
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
60.0 1.44192 1.2938 716.8 554.0 42,59
60.1 1.44215 1.2944 718.3 554.9 42,68
60.2 1.44237 1.2950 719.8 555.8 42,77
60.3 1.44260 1.2956 721.2 556.7 42,85
60.4 1.44283 1.2962 722.7 557.6 42,94
60.5 1.44306 1.2968 724.2 558.4 43,03
60.6 1.44328 1.2974 725.7 559.3 43,12
60.7 1.44351 1.2980 727.2 560.2 43,21
60.8 1.44374 1.2986 728.6 561.1 43,29
60.9 1.44396 1.2992 730.1 562.0 43,38
61.0 1.44419 1.2998 731.6 562.8 43,47
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61.6 1.44556 1.3036 740.9 568.4 44,02
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61.8 1.44602 1.3048 744.0 570.2 44,21
61.9 1.44625 1.3055 745.6 571.1 44,30
62.0 1.44648 1.3061 747.1 572.0 44,39
62.1 1.44671 1.3067 748.6 572.9 44,48
62.2 1.44694 1.3073 750.2 573.8 44,57
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62.5 1.44764 1.3092 754.8 576.5 44,85
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62.8 1.44833 1.3111 759.4 579.2 45,12
62.9 1.44856 1.3117 761.0 580.1 45,21
63.0 1.44879 1.3123 762.5 581.0 45,31
63.1 1.44902 1.3130 764.1 582.0 45,40
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63.9 1.45089 1.3182 777.0 589.4 46,17
64.0 1.45112 1.3188 778.6 590.4 46,26
64.1 1.45135 1.3195 780.1 591.3 46,35
64.2 1.45159 1.3201 781.7 592.1 46,45
64.3 1.45183 1.3207 783.2 593.0 46,53
64.4 1.45206 1.3213 784.8 593.9 46,63
64.5 1.45230 1.3219 786.3 594.8 46,72
64.6 1.45253 1.3226 787.8 595.7 46,81
64.7 1.45276 1.3232 789.4 596.6 46,90
64.8 1.45300 1.3238 790.9 597.5 46,99
64.9 1.45324 1.3244 792.5 598.3 47,091990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 29
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
55.0 1.43079 1.2635 641.7 507.9 38,11
55.1 1.43101 1.2640 643.2 508.8 38,22
55.2 1.43123 1.2646 644.6 509.7 38,30
55.3 1.43145 1.2652 646.1 510.7 38,39
55.4 1.43167 1.2658 647.6 511.6 38,48
55.5 1.43189 1.2664 649.1 512.5 38,57
55.6 1.43210 1.2670 650.5 513.4 38,65
55.7 1.43232 1.2676 652.0 514.3 38,74
55.8 1.43254 1.2682 653.5 515.3 38,83
55.9 1.43276 1.2688 654.9 516.2 38,91
56.0 1.43298 1.2694 656.4 517.1 39,00
56.1 1.43320 1.2700 657.9 518.0 39,09
56.2 1.43342 1.2706 659.4 518.9 39,18
56.3 1.43364 1.2712 660.8 519.9 39,26
56.4 1.43386 1.2718 662.3 520.8 39,35
56.5 1.43409 1.2724 663.8 521.7 39,44
56.6 1.43431 1.2730 665.3 522.6 39,53
56.7 1.43453 1.2736 666.8 523.5 39,62
56.8 1.43475 1.2742 668.2 524.4 39,70
56.9 1.43497 1.2748 669.7 525.4 39,79
57.0 1.43519 1.2754 671.2 526.3 39,88
57.1 1.43541 1.2760 672.7 527.2 39,97
57.2 1.43563 1.2766 674.3 528.2 40,06
57.3 1.43586 1.2773 675.8 529.1 40,15
57.4 1.43608 1.2779 677.4 530.1 40,25
57.5 1.43630 1.2785 678.9 531.0 40,34
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57.7 1.43674 1.2797 682.0 532.9 40,52
57.8 1.43697 1.2804 683.5 533.8 40,61
57.9 1.43719 1.2810 685.1 534.8 40,70
58.0 1.43741 1.2816 686.6 535.7 40,80
58.1 1.43763 1.2822 688.1 536.6 40,88
58.2 1.43786 1.2828 689.6 537.5 40,97
58.3 1.43808 1.2834 691.0 538.4 41,06
58.4 1.43831 1.2840 692.5 539.3 41,14
58.5 1.43854 1.2846 694.0 540.2 41,23
58.6 1.43876 1.2852 695.5 541.1 41,32
58.7 1.43899 1.2858 697.0 542.0 41,41
58.8 1.43921 1.2864 698.4 542.9 41,50
58.9 1.43944 1.2870 699.9 543.8 41,58
59.0 1.43966 1.2876 701.4 544.7 41,67
59.1 1.43989 1.2882 702.9 545.7 41,76
59.2 1.44011 1.2888 704.5 546.6 41,86
59.3 1.44034 1.2895 706.0 547.5 41,95
59.4 1.44056 1.2901 707.6 548.5 42,04
59.5 1.44079 1.2907 709.1 549.4 42,13
59.6 1.44102 1.2913 710.6 550.3 42,22
59.7 1.44124 1.2920 712.2 551.2 42,32
59.8 1.44147 1.2926 713.7 552.2 42,41
59.9 1.44169 1.2932 715.3 553.1 42,501990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 30
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
65.0 1.45347 1.3251 794.0 599.2 47,18
65.1 1.45371 1.3257 795.6 600.1 47,27
65.2 1.45394 1.3264 797.2 601.1 47,37
65.3 1.45418 1.3270 798.8 602.0 47,46
65.4 1.45441 1.3277 800.4 602.9 47,56
65.5 1.45465 1.3283 802.1 603.8 47,66
65.6 1.45489 1.3290 803.7 604.7 47,75
65.7 1.45512 1.3296 805.3 605.6 47,85
65.8 1.45536 1.3303 806.9 606.6 47,94
65.9 1.45559 1.3309 808.5 607.5 48,04
66.0 1.45583 1.3316 810.1 608.4 48,13
66.1 1.45607 1.3322 811.6 609.3 48,22
66.2 1.45630 1.3328 813.2 610.1 48,32
66.3 1.45654 1.3335 814.8 611.0 48,41
66.4 1.45678 1.3341 816.3 611.9 48,50
66.5 1.45702 1.3347 817.9 612.8 48,60
66.6 1.45725 1.3353 819.4 613.6 48,69
66.7 1.45749 1.3360 820.9 614.5 48,77
66.8 1.45773 1.3366 822.5 615.4 48,87
66.9 1.45796 1.3372 824.1 616.2 48,97
67.0 1.45820 1.3378 825.6 617.1 49,05
67.1 1.45844 1.3385 827.2 618.0 49,15
67.2 1.45868 1.3391 828.8 618.9 49,24
67.3 1.45892 1.3398 830.4 619.8 49,34
67.4 1.45916 1.3404 832.0 620.7 49,43
67.5 1.45940 1.3411 833.7 621.6 49,53
67.6 1.45964 1.3418 835.3 622.5 49,63
67.7 1.45988 1.3424 836.9 623.4 49,73
67.8 1.46012 1.3431 838.5 624.3 49,82
67.9 1.46036 1.3437 840.1 625.2 49,92
68.0 1.46060 1.3444 841.7 626.1 50,01
68.1 1.46084 1.3450 843.4 627.0 50,11
68.2 1.46108 1.3457 845.1 628.0 50,21
68.3 1.46132 1.3464 846.7 628.9 50,31
68.4 1.46156 1.3471 848.4 629.8 50,41
68.5 1.46181 1.3478 850.1 630.8 50,51
68.6 1.46205 1.3484 851.8 631.7 50,61
68.7 1.46229 1.3491 853.5 632.6 50,71
68.8 1.46253 1.3498 855.1 633.5 50,81
68.9 1.46277 1.3505 856.8 634.5 50,91
69.0 1.46301 1.3512 858.5 635.4 51,01
69.1 1.46325 1.3518 860.1 636.3 51,10
69.2 1.46350 1.3525 861.7 637.2 51,20
69.3 1.46374 1.3531 863.3 638.0 51,29
69.4 1.46398 1.3538 864.9 638.9 51,39
69.5 1.46423 1.3544 866.6 639.8 51,49
69.6 1.46447 1.3551 868.2 640.7 51,58
69.7 1.46471 1.3557 869.8 641.6 51,68
69.8 1.46495 1.3564 871.4 642.4 51,78
69.9 1.46520 1.3570 873.0 643.3 51,871990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 31
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
70.0 1.46544 1.3577 874.6 644.2 51,97
70.1 1.46568 1.3583 876.2 645.1 52,06
70.2 1.46593 1.3590 877.8 645.9 52,15
70.3 1.46618 1.3596 879.4 646.8 52,25
70.4 1.46642 1.3603 881.0 647.7 52,35
70.5 1.46667 1.3609 882.7 648.6 52,45
70.6 1.46691 1.3616 884.3 649.4 52,54
70.7 1.46715 1.2622 885.9 650.3 52,64
70.8 1.46740 1.3629 887.5 651.2 52,73
70.9 1.46765 1.3635 889.1 652.1 52,83
71.0 1.46789 1.3642 890.7 652.9 52,92
71.1 1.46814 1.3649 892.4 653.8 53,02
71.2 1.46838 1.3655 894.1 654.7 53,12
71.3 1.46863 1.3662 895.7 655.6 53,22
71.4 1.46888 1.3669 897.4 656.5 53,32
71.5 1.46913 1.3676 899.1 657.4 53,42
71.6 1.46937 1.3683 900.8 658.3 53,52
71.7 1.46962 1.3689 902.5 659.2 53,62
71.8 1.46987 1.3696 904.1 660.1 53,72
71.9 1.47011 1.3703 905.8 661.0 53,82
72.0 1.47036 1.3710 907.5 661.9 53,92
72.1 1.47061 1.3717 909.2 662.8 54,02
72.2 1.47086 1.3723 910.8 663.7 54,12
72.3 1.47110 1.3730 912.5 664.6 54,22
72.4 1.47135 1.3737 914.2 665.5 54,32
72.5 1.47160 1.3744 915.9 666.4 54,42
72.6 1.47185 1.3750 917.5 667.3 54,51
72.7 1.47210 1.3757 919.2 668.2 54,62
72.8 1.47234 1.3764 920.9 669.0 54,72
72.9 1.47259 1.3771 922.5 669.9 54,81
73.0 1.47284 1.3777 924.2 670.8 54,91
73.1 1.47309 1.3784 925.9 671.7 55,01
73.2 1.47334 1.3791 927.6 672.6 55,11
73.3 1.47359 1.3798 929.2 673.5 55,21
73.4 1.47384 1.3804 930.9 674.4 55,31
73.5 1.47409 1.3811 932.6 675.2 55,41
73.6 1.47434 1.3818 934.3 676.1 55,51
73.7 1.47459 1.3825 936.0 677.0 55,61
73.8 1.47484 1.3832 937.6 677.9 55,71
73.9 1.47509 1.3838 939.3 678.8 55,81
74.0 1.47534 1.3845 941.0 679.7 55,91
74.1 1.47559 1.3852 942.7 680.5 56,01
74.2 1.47584 1.3859 944.4 681.4 56,11
74.3 1.47609 1.3866 946.0 682.3 56,21
74.4 1.47634 1.3872 947.7 683.2 56,31
74.5 1.47660 1.3879 949.4 684.0 56,41
74.6 1.47685 1.3886 951.1 684.9 56,51
74.7 1.47710 1.3893 952.8 685.8 56,61
74.8 1.47735 1.3900 954.4 686.7 56,71
74.9 1.47760 1.3906 956.1 687.5 56,811990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 32
▼B
TABELLE III
Zuckergehalt (1)von rektifiziertem Traubenmost in Gramm je Liter und in Gramm je Kilo-
gramm, bestimmt mittels Refraktometrie, abgelesen bei 20 ºC als Massenprozent Saccharose
oder als Brechungsindex. Die Volumenmasse bei 20 ºC ist ebenfalls angegeben.
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
50.0 1.42008 1.2342 627.6 508.5 37,28
50.1 1.42029 1.2348 629.3 509.6 37,38
50.2 1.42050 1.2355 630.9 510.6 37,48
50.3 1.42071 1.2362 632.4 511.6 37,56
50.4 1.42092 1.2367 634.1 512.7 37,66
50.5 1.42113 1.2374 635.7 513.7 37,76
50.6 1.42135 1.2381 637.3 514.7 37,85
50.7 1.42156 1.2386 638.7 515.7 37,94
50.8 1.42177 1.2391 640.4 516.8 38,04
50.9 1.42198 1.2396 641.9 517.8 38,13
51.0 1.42219 1.2401 643.4 518.8 38,22
51.1 1.42240 1.2406 645.0 519.9 38,31
51.2 1.42261 1.2411 646.5 520.9 38,40
51.3 1.42282 1.2416 648.1 522.0 38,50
51.4 1.42304 1.2421 649.6 523.0 38,59
51.5 1.42325 1.2427 651.2 524.0 38,68
51.6 1.42347 1.2434 652.9 525.1 38,78
51.7 1.42368 1.2441 654.5 526.1 38,88
51.8 1.42389 1.2447 656.1 527.1 38,97
51.9 1.42410 1.2454 657.8 528.2 39,07
52.0 1.42432 1.2461 659.4 529.2 39,17
52.1 1.42453 1.2466 661.0 530.2 39,26
52.2 1.42475 1.2470 662.5 531.3 39,35
52.3 1.42496 1.2475 664.1 532.3 39,45
52.4 1.42517 1.2480 665.6 533.3 39,54
52.5 1.42538 1.2486 667.2 534.4 39,63
52.6 1.42560 1.2493 668.9 535.4 39,73
52.7 1.42581 1.2500 670.5 536.4 39,83
52.8 1.42603 1.2506 672.2 537.5 39,93
52.9 1.42624 1.2513 673.8 538.5 40,02
53.0 1.42645 1.2520 675.5 539.5 40,12
53.1 1.42667 1.2525 677.1 540.6 40,22
53.2 1.42689 1.2530 678.5 541.5 40,30
53.3 1.42711 1.2535 680.2 542.6 40,40
53.4 1.42733 1.2540 681.8 543.7 40,50
53.5 1.42754 1.2546 683.4 544.7 40,59
53.6 1.42776 1.2553 685.1 545.8 40,69
53.7 1.42797 1.2560 686.7 546.7 40,79
53.8 1.42819 1.2566 688.4 547.8 40,89
53.9 1.42840 1.2573 690.1 548.9 40,99
54.0 1.42861 1.2580 691.7 549.8 41,09
54.1 1.42884 1.2585 693.3 550.9 41,18
54.2 1.42906 1.2590 694.9 551.9 41,28
54.3 1.42927 1.2595 696.5 553.0 41,37
54.4 1.42949 1.2600 698.1 554.0 41,47
54.5 1.42971 1.2606 699.7 555.1 41,56
54.6 1.42993 1.2613 701.4 556.1 41,66
54.7 1.43014 1.2620 703.1 557.1 41,76
54.8 1.43036 1.2625 704.7 558.2 41,86
54.9 1.43058 1.2630 706.2 559.1 41,951990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 33
(1) Der Zuckergehalt wird in Invertzucker ausgedrückt.
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
55.0 1.43079 1.2635 707.8 560.2 42,04
55.1 1.43102 1.2639 709.4 561.3 42,14
55.2 1.43124 1.2645 711.0 562.3 42,23
55.3 1.43146 1.2652 712.7 563.3 42,33
55.4 1.43168 1.2659 714.4 564.3 42,44
55.5 1.43189 1.2665 716.1 565.4 42,54
55.6 1.43211 1.2672 717.8 566.4 42,64
55.7 1.43233 1.2679 719.5 567.5 42,74
55.8 1.43255 1.2685 721.1 568.5 42,83
55.9 1.43277 1.2692 722.8 569.5 42,93
56.0 1.43298 1.2699 724.5 570.5 43,04
56.1 1.43321 1.2703 726.1 571.6 43,13
56.2 1.43343 1.2708 727.7 572.6 43,23
56.3 1.43365 1.2713 729.3 573.7 43,32
56.4 1.43387 1.2718 730.9 574.7 43,42
56.5 1.43409 1.2724 732.6 575.8 43,52
56.6 1.43431 1.2731 734.3 576.8 43,62
56.7 1.43454 1.2738 736.0 577.8 43,72
56.8 1.43476 1.2744 737.6 578.8 43,81
56.9 1.43498 1.2751 739.4 579.9 43,92
57.0 1.43519 1.2758 741.1 580.9 44,02
57.1 1.43542 1.2763 742.8 582.0 44,12
57.2 1.43564 1.2768 744.4 583.0 44,22
57.3 1.43586 1.2773 745.9 584.0 44,31
57.4 1.43609 1.2778 747.6 585.1 44,41
57.5 1.43631 1.2784 749.3 586.1 44,51
57.6 1.43653 1.2791 751.0 587.1 44,61
57.7 1.43675 1.2798 752.7 588.1 44,71
57.8 1.43698 1.2804 754.4 589.2 44,81
57.9 1.43720 1.2810 756.1 590.2 44,91
58.0 1.43741 1.2818 757.8 591.2 45,01
58.1 1.43764 1.2822 759.5 592.3 45,11
58.2 1.43784 1.2827 761.1 593.4 45,21
58.3 1.43809 1.2832 762.6 594.3 45,30
58.4 1.43832 1.2837 764.3 595.4 45,40
58.5 1.43854 1.2843 766.0 596.4 45,50
58.6 1.43877 1.2850 767.8 597.5 45,61
58.7 1.43899 1.2857 769.5 598.5 45,71
58.8 1.43922 1.2863 771.1 599.5 45,80
58.9 1.43944 1.2869 772.9 600.6 45,91
59.0 1.43966 1.2876 774.6 601.6 46,01
59.1 1.43988 1.2882 776.3 602.6 46,11
59.2 1.44011 1.2889 778.1 603.7 46,22
59.3 1.44034 1.2896 779.8 604.7 46,32
59.4 1.44057 1.2902 781.6 605.8 46,43
59.5 1.44079 1.2909 783.3 606.8 46,53
59.6 1.44102 1.2916 785.2 607.9 46,64
59.7 1.44124 1.2921 786.8 608.9 46,74
59.8 1.44147 1.2926 788.4 609.9 46,83
59.9 1.44169 1.2931 790.0 610.9 46,931990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 34
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
60.0 1.44192 1.2936 791.7 612.0 47,03
60.1 1.44215 1.2942 793.3 613.0 47,12
60.2 1.44238 1.2949 795.2 614.1 47,23
60.3 1.44260 1.2956 796.9 615.1 47,34
60.4 1.44283 1.2962 798.6 616.1 47,44
60.5 1.44305 1.2969 800.5 617.2 47,55
60.6 1.44328 1.2976 802.2 618.2 47,65
60.7 1.44351 1.2981 803.9 619.3 47,75
60.8 1.44374 1.2986 805.5 620.3 47,85
60.9 1.44397 1.2991 807.1 621.3 47,94
61.0 1.44419 1.2996 808.7 622.3 48,04
61.1 1.44442 1.3002 810.5 623.4 48,14
61.2 1.44465 1.3009 812.3 624.4 48,25
61.3 1.44488 1.3016 814.2 625.5 48,36
61.4 1.44511 1.3022 815.8 626.5 48,46
61.5 1.44534 1.3029 817.7 627.6 48,57
61.6 1.44557 1.3036 819.4 628.6 48,67
61.7 1.44580 1.3042 821.3 629.7 48,79
61.8 1.44603 1.3049 823.0 630.7 48,89
61.9 1.44626 1.3056 824.8 631.7 48,99
62.0 1.44648 1.3062 826.6 632.8 49,10
62.1 1.44672 1.3068 828.3 633.8 49,20
62.2 1.44695 1.3075 830.0 634.8 49,30
62.3 1.44718 1.3080 831.8 635.9 49,40
62.4 1.44741 1.3085 833.4 636.9 49,50
62.5 1.44764 1.3090 835.1 638.0 49,60
62.6 1.44787 1.3095 836.8 639.0 49,71
62.7 1.44810 1.3101 838.5 640.0 49,81
62.8 1.44833 1.3108 840.2 641.0 49,91
62.9 1.44856 1.3115 842.1 642.1 50,02
63.0 1.44879 1.3121 843.8 643.1 50,12
63.1 1.44902 1.3128 845.7 644.2 50,23
63.2 1.44926 1.3135 847.5 645.2 50,34
63.3 1.44949 1.3141 849.3 646.3 50,45
63.4 1.44972 1.3148 851.1 647.3 50,56
63.5 1.44995 1.3155 853.0 648.4 50,67
63.6 1.45019 1.3161 854.7 649.4 50,77
63.7 1.45042 1.3168 856.5 650.4 50,88
63.8 1.45065 1.3175 858.4 651.5 50,99
63.9 1.45088 1.3180 860.0 652.5 51,08
64.0 1.45112 1.3185 861.6 653.5 51,18
64.1 1.45135 1.3190 863.4 654.6 51,29
64.2 1.45158 1.3195 865.1 655.6 51,39
64.3 1.45181 1.3201 866.9 656.7 51,49
64.4 1.45205 1.3208 868.7 657.7 51,60
64.5 1.45228 1.3215 870.6 658.8 51,71
64.6 1.45252 1.3221 872.3 659.8 51,81
64.7 1.45275 1.3228 874.1 660.8 51,92
64.8 1.45299 1.3235 876.0 661.9 52,03
64.9 1.45322 1.3241 877.8 662.9 52,141990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 35
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
65.0 1.45347 1.3248 879.7 664.0 52,25
65.1 1.45369 1.3255 881.5 665.0 52,36
65.2 1.45393 1.3261 883.2 666.0 52,46
65.3 1.45416 1.3268 885.0 667.0 52,57
65.4 1.45440 1.3275 886.9 668.1 52,68
65.5 1.45463 1.3281 888.8 669.2 52,79
65.6 1.45487 1.3288 890.6 670.2 52,90
65.7 1.45510 1.3295 892.4 671.2 53,01
65.8 1.45534 1.3301 894.2 672.3 53,12
65.9 1.45557 1.3308 896.0 673.3 53,22
66.0 1.45583 1.3315 898.0 674.4 53,34
66.1 1.45605 1.3320 899.6 675.4 53,44
66.2 1.45629 1.3325 901.3 676.4 53,54
66.3 1.45652 1.3330 903.1 677.5 53,64
66.4 1.45676 1.3335 904.8 678.5 53,75
66.5 1.45700 1.3341 906.7 679.6 53,86
66.6 1.45724 1.3348 908.5 680.6 53,96
66.7 1.45747 1.3355 910.4 681.7 54,08
66.8 1.45771 1.3361 912.2 682.7 54,18
66.9 1.45795 1.3367 913.9 683.7 54,29
67.0 1.45820 1.3374 915.9 684.8 54,40
67.1 1.45843 1.3380 917.6 685.8 54,51
67.2 1.45867 1.3387 919.6 686.9 54,62
67.3 1.45890 1.3395 921.4 687.9 54,73
67.4 1.45914 1.3400 923.1 688.9 54,83
67.5 1.45938 1.3407 925.1 690.0 54,95
67.6 1.45962 1.3415 927.0 691.0 55,06
67.7 1.45986 1.3420 928.8 692.1 55,17
67.8 1.46010 1.3427 930.6 693.1 55,28
67.9 1.46034 1.3434 932.6 694.2 55,40
68.0 1.46060 1.3440 934.4 695.2 55,50
68.1 1.46082 1.3447 936.2 696.2 55,61
68.2 1.46106 1.3454 938.0 697.2 55,72
68.3 1.46130 1.3460 939.9 698.3 55,83
68.4 1.46154 1.3466 941.8 699.4 55,94
68.5 1.46178 1.3473 943.7 700.4 56,06
68.6 1.46202 1.3479 945.4 701.4 56,16
68.7 1.46226 1.3486 947.4 702.5 56,28
68.8 1.46251 1.3493 949.2 703.5 56,38
68.9 1.46275 1.3499 951.1 704.6 56,50
69.0 1.46301 1.3506 953.0 705.6 56,61
69.1 1.46323 1.3513 954.8 706.6 56,72
69.2 1.46347 1.3519 956.7 707.7 56,83
69.3 1.46371 1.3526 958.6 708.7 56,94
69.4 1.46396 1.3533 960.6 709.8 57,06
69.5 1.46420 1.3539 962.4 710.8 57,17
69.6 1.46444 1.3546 964.3 711.9 57,28
69.7 1.46468 1.3553 966.2 712.9 57,39
69.8 1.46493 1.3560 968.2 714.0 57,51
69.9 1.46517 1.3566 970.0 715.0 57,621990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 36
▼B
Saccharose
% (g/g)Brechungsindex
bei 20 ºCVolumenmasse
bei 20 ºCInvertzucker g/lInvertzucker g/
kgAlkohol
% vol. 20 ºC
70.0 1.46544 1.3573 971.8 716.0 57,72
70.1 1.46565 1.3579 973.8 717.1 57,84
70.2 1.46590 1.3586 975.6 718.1 57,95
70.3 1.46614 1.3593 977.6 719.2 58,07
70.4 1.46639 1.3599 979.4 720.2 58,18
70.5 1.46663 1.3606 981.3 721.2 58,29
70.6 1.46688 1.3613 983.3 722.3 58,41
70.7 1.46712 1.3619 985.2 723.4 58,52
70.8 1.46737 1.3626 987.1 724.4 58,63
70.9 1.46761 1.3633 988.9 725.4 58,74
71.0 1.46789 1.3639 990.9 726.5 58,86
71.1 1.46810 1.3646 992.8 727.5 58,97
71.2 1.46835 1.3653 994.8 728.6 59,09
71.3 1.46859 1.3659 996.6 729.6 59,20
71.4 1.46884 1.3665 998.5 730.7 59,31
71.5 1.46908 1.3672 1 000.4 731.7 59,42
71.6 1.46933 1.3678 1 002.2 732.7 59,53
71.7 1.46957 1.3685 1 004.2 733.8 59,65
71.8 1.46982 1.3692 1 006.1 734.8 59,76
71.9 1.47007 1.3698 1 008.0 735.9 59,88
72.0 1.47036 1.3705 1 009.9 736.9 59,99
72.1 1.47056 1.3712 1 012.0 738.0 60,11
72.2 1.47081 1.3718 1 013.8 739.0 60,22
72.3 1.47106 1.3725 1 015.7 740.0 60,33
72.4 1.47131 1.3732 1 017.7 741.1 60,45
72.5 1.47155 1.3738 1 019.5 742.1 60,56
72.6 1.47180 1.3745 1 021.5 743.2 60,68
72.7 1.47205 1.3752 1 023.4 744.2 60,79
72.8 1.47230 1.3758 1 025.4 745.3 60,91
72.9 1.47254 1.3765 1 027.3 746.3 61,02
73.0 1.47284 1.3772 1 029.3 747.4 61,14
73.1 1.47304 1.3778 1 031.2 748.4 61,25
73.2 1.47329 1.3785 1 033.2 749.5 61,37
73.3 1.47354 1.3792 1 035.1 750.5 61,48
73.4 1.47379 1.3798 1 037.1 751.6 61,60
73.5 1.47404 1.3805 1 039.0 752.6 61,72
73.6 1.47429 1.3812 1 040.9 753.6 61,83
73.7 1.47454 1.3818 1 042.8 754.7 61,94
73.8 1.47479 1.3825 1 044.8 755.7 62,06
73.9 1.47504 1.3832 1 046.8 756.8 62,18
74.0 1.47534 1.3838 1 048.6 757.8 62,28
74.1 1.47554 1.3845 1 050.7 758.9 62,41
74.2 1.47579 1.3852 1 052.6 759.9 62,52
74.3 1.47604 1.3858 1 054.6 761.0 62,64
74.4 1.47629 1.3865 1 056.5 762.0 62,76
74.5 1.47654 1.3871 1 058.5 763.1 62,87
74.6 1.47679 1.3878 1 060.4 764.1 62,99
74.7 1.47704 1.3885 1 062.3 765.1 63,10
74.8 1.47730 1.3892 1 064.4 766.2 63,23
74.9 1.47755 1.3898 1 066.3 767.2 63,33
75.0 1.47785 1.3905 1 068.3 768.3 63,461990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 37
▼B
3.ALKOHOLGEHALT
1. DEFINITION
Der in Volumenprozent ausgedrückte Alkholgehalt ist gleich der
Anzahl Liter Ethanol, die in 100 l Wein enthalten sind. Beide Volu-
mina werden bei 20 ºC gemessen. Symbol: „% vol“.
Bemerkung:
Die Homologen des Ethanols sowie der Ethanol und die Homologen
des Ethanols der Ester sind im Alkoholgehalt enthalten, da sie in das
Destillat übergehen.
2. PRINZIP DER METHODEN
2.1. Destillation des durch Calciumhydroxid alkalisierten Weines und
Bestimmung des Alkoholgehaltes im Destillat
2.2. Referenzmethode: Pyknometrische Bestimmung der Volumen-
masse des Destillates
2.3. Gebräuchliche Methoden
2.3.1. Bestimmung des Alkoholgehaltes des Destillates mit dem Aräometer
2.3.2. Bestimmung des Alkoholgehaltes des Destillates durch Messung der
Volumenmasse mittels hydrostatischer Waage
2.3.3. Bestimmung des Alkoholgehaltes des Destillates mit dem Refrakto-
meter
Anmerkung:
Der Alkoholgehalt entsprechend der Volumenmasse des Destillates
kann den Tabellen I, II und III im Anhang dieses Kapitels
entnommen werden. Diese sind aufgrund der internationalen Alko-
holtabelle berechnet worden, die von der internationalen
Organisation für das gesetzliche Meßwesen im Jahr 1972 in ihrer
Empfehlung Nr. 22 veröffentlicht und vom „internationalen
Weinamt“ (Office international de la Vigne et du Vin) auf der
Generalversammlung 1974 angenommen wurde.
Die allgemeine Gleichung zur Berechnung des Alkoholgehaltes in %
Vol. aus der Volumenmasse einer wäßrig-alkoholischen Lösung
unter Berücksichtigung der Temperatur ist im Anhang dieses Kapi-
tels angegeben.
3. GEWINNUNG DES DESTILLATES
3.1. Gerätschaften
3.1.1. Destillationsapparatur bestehend aus:
— einem 1-Liter-Normalschliffkolben;
— einer Rektifizierkolonne von etwa 20 cm Länge oder einer
anderen Einrichtung zur Verhinderung eines Überschäumens;
— einer Wärmequelle: jegliches Anbrennen der Extraktstoffe ist
durch die Verwendung eines entsprechenden Gerätes zu
vermeiden;
— einem in ein dünnes Rohr auslaufenden Kühler, durch das das
Destillat bis zum Boden des Vorlagegefäßes, das einige Milliliter
Wasser enthält, geführt wird.
3.1.2. Wasserdampfdestillationsapparatur bestehend aus:
1. einem Wasserdampfentwickler;
2. einem Destillierkolben;3. einer Rektifizierkolonne;4. einem Kühler.
Es kann jede Art von Destillations- oder Wasserdampfdestillations-
apparatur verwendet werden, wenn sie den folgenden Bedingungen
entspricht: Eine wäßrig-alkoholischeMischung von 10 % Vol.
Alkohol wird fünfmal hintereinander destilliert. Nach der fünften
Destillation muß das Destillat einen Alkoholgehalt von mindestens
9,9 % Vol. aufweisen, d. h. der Alkoholverlust während einer Destil-
lation darf nicht mehr als 0,02 % Vol. betragen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 38
▼B
3.2. Reagenzien
3.2.1. Calciumhydroxidsuspension (Ca(OH)2), 2M
Diese wird so hergestellt, daß 1 l heißes Wasser (60—70 ºC)
vorsichtig auf 120 g ungelöschten Kalk (CaO) gegossen wird.
3.3. Vorbereitung der Probe
Bei Jungweinen oder Schaumweinen muß vorher die Hauptmenge an
Kohlendioxid entfernt werden. Hierzu werden 250 bis 300 ml Wein
in einen 500-ml-Kolben gegeben und geschüttelt.
3.4. Durchführung der Bestimmung
In einem 200-ml-Meßkolben wird der Wein abgemessen und die
Temperatur festgestellt.
Der Wein wird in den Destillierkolben der Destillations- bzw.
Wasserdampfdestillationsapparatur umgefüllt. Der Meßkolben wird
viermal mit 5 ml Wasser nachgespült und das Wasser ebenfalls in
den Kolben gegeben. Sodann fügt man 10 ml Calciumhydroxidlö-
sung (3.2.1) und im Fall der Destillation einige Siedesteine aus
porösem inerten Material (Bimsstein) hinzu.
Das Destillat wird in demselben 200-ml-Meßkolben aufgefangen, der
zur Abmessung des Weines gedient hat.
Bei der Destillation müssen drei Viertel des Ausgangsvolumens, bei
der Wasserdampfdestillation 198 bis 199 ml überdestilliert werden.
Man füllt mit destilliertem Wasser auf 200 ml auf. Die Temperatur
des Destillates soll nicht mehr als ± 2 ºC von der Ausgangstempe-
ratur abweichen.
Man mischt vorsichtig mit kreisförmigen Bewegungen.
Bemerkung:
Bei Weinen, die besonders reich an Ammoniumionen sind, wird das
Destillat gegebenenfalls unter den obengenannten Bedingungen
erneut destilliert, wobei die Calciumhydroxidsuspension durch 1 ml
10 %ige (v/v) Schwefelsäure ersetzt wird.
4. REFERENZMETHODE
Bestimmung des Alkoholgehaltes des Destillates mit dem Pykno-
meter.
4.1. Gerätschaften
4.1.1. Geeichte Pyknometer, siehe „Bestimmung der Volumenmasse“.
4.2. Durchführung der Bestimmung
Die Bestimmung der scheinbaren Volumenmasse bei t ºC des Destil-
lates (3.4) wird, wie in Kapitel 1 „Volumenmasse“ unter 4.3.1 und
4.3.2 angegeben, durchgeführt. ρt= scheinbare Volumenmasse bei t
ºC.
4.3. Angabe der Ergebnisse
4.3.1. Berechnung
Der Alkoholgehalt bei 20 ºC wird der Tabelle I entnommen. Hierzu
sucht man entlang der Zelle, die dem ganzzahligen Anteil T ºC der
gemessenen Temperatur t ºC entspricht, denzu ρtnächst höheren
Volumenmassenwert. Mit der darunterstehenden Tabellendifferenz
wird dieVolume nmasse ρbei der Temperatur T ºC berechnet.
Nun sucht man, wiederum entlang der Zeile der Temperatur T ºC,
den zu der berechneten Volumenmasse ρnächsthöheren Wert ρ′.
Man berechnet die Differenz beider Volumenmassen ( ρ′−ρ)und
dividiert durch die rechts neben ρ′stehende Tabellendifferenz. Der
Quotient gibt die Alkoholvolumenprozente in Dezimalen an, deren
ganze Zahlen oberhalb der Spalte, in der sich der Volumenmasse-
wert ρ′befindet, angegeben sind. Ein Beispiel für die Berechnung
des Alkholgehaltes ist in Abschnitt 6 dieses Kapitels angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 39
▼B
Anmerkung:
Diese Temperaturkorrektur ist programmiert worden und kann gege-
benfalls automatisch erfolgen.
4.3.2. Wiederholbarkeit (r):
r = 0,10 % Vol.
4.3.3. Vergleichbarkeit (R):
R = 0,19 % Vol.
5. GEBRÄUCHLICHE METHODEN
5.1. Aräometrie
5.1.1. Gerätschaften
5.1.1.1. Alkoholmeter
Das Alkoholmeter muß den Definitionen für die Geräte der Klasse I
oder II gemäß der Internationalen Empfehlung Nr. 44 „Alkoholmeter
und Aräometer für Alkohol“ der IOML (Internationale Organisation
für das gesetzliche Meßwesen) entsprechen.
5.1.1.2. Thermometer von 0—40 ºC, Einteilung in 1/10 Grad, auf 1/20 Grad
genau geprüft.
5.1.1.3. Glaszylinder, 36 mm Innendurchmesser und 320 mm Höhe, der mit
Hilfe eines Stativs befestigt wird.
5.1.2. Durchführung des Bestimmung
Das Destillat (3.4) wird in den Glaszylinder gefüllt, und das Ther-
mometer und das Alkoholmeter werden hineingebracht. Das
Ablesen des Thermometers erfolgt eine Minute nach dem Schütteln,
um einen Temperaturausgleich zwischen dem Glaszylinder, dem
Thermometer, dem Alkoholmeter und dem Destillat zu gewährlei-
sten. Das Thermometer wird herausgenommen und der scheinbare
Alkoholgehalt nach einer Minute abgelesen. Es wird mindestens
dreimal mit Hilfe einer Lupe abgelesen. Die Temperaturkorrektur
des scheinbaren Alkoholgehaltes gemessen bei t ºC wird mit Hilfe
von Tabelle II vorgenommen.
Die Temperatur der Flüssigkeit soll nur gering von der der Raum-
temperatur abweichen (höchstens 5 ºC Unterschied).
5.2. Bestimmung der Volumenmasse mit der hydrostatischen Waage
5.2.1. Gerätschaften
5.2.1.1. Hydrostatische Waage, siehe Kapitel 1 „Volumenmasse“.
5.2.2. Durchführung der Bestimmung
Die Bestimmung der scheinbaren Volumenmasse bei t ºC des Destil-
lates wird, wie in Kapitel 1 „Volumenmasse“ unter 5.2.2
beschrieben, durchgeführt.
5.2.3. Angabe der Ergebnisse
Der Alkoholgehalt bei 20 ºC wird gemäß den unter 4.3.1 gegebenen
Anweisungen der Tabelle I entnommen, sofern der Schwimmer aus
Pyrexglas besteht und gemäß der Tabelle III, sofern der Schwimmer
aus gewöhnlichem Glas besteht.
5.3. Refraktometrie
5.3.1. Gerätschaften
5.3.1.1. Refraktometer, das die Messung der Brechungsindizes zwischen
1,330 und 1,346 ermöglicht.
Je nach Art des Gerätes werden folgende Messungen durchgeführt:
— bei 20 ºC, mit Hilfe einer geeigneten Einrichtung;
— bei Raumtemperatur t ºC, gemessen mittels eines Thermometers
(Genauigkeit 0,05 ºC). Eine Korrekturtabelle für die Temperatur
wird mit dem Gerät geliefert.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 40
▼B
5.3.2. Durchführung der Bestimmung
Die Messung des Brechungsindexes des Weindestillates (3.4) erfolgt
gemäß der für den verwendeten Gerätetyp beschriebenen Arbeits-
weise.
5.3.3. Angabe der Ergebnisse
Der dem Brechungsindex bei 20 ºC entsprechende Alkoholgehalt ist
der Tabelle IV zu entnehmen.
Anmerkung:Tabelle IV gibt die Beziehung zwischen den Brechungsindizes für
reine wäßrig-alkoholische Lösungen und Weindestillaten an. Bei
Weindestillaten werden Verunreinigungen des Destillates
(hauptsächlich höhere Alkohole) berücksichtigt. Das Vorhandensein
von Methanol ist durch eine Verringerung des Brechungsindexes,
somit also des Alkoholgehaltes, zu erkennen.
6. BEISPIEL FÜR DIE BERECHNUNG DES ALKOHOLGEHALTES
EINES WEINES
(Referenzmethode)
6.1. Verwendung einer zweiarmigen Waage
6.1.1. Die Pyknometerkonstanten sind, wie in Kapitel 1 „Volumenmasse
und relative Dichte“ unter 6.1.1 angegeben, bestimmt und berechnet
worden.
6.1.2. Wägung des mit Destillat gefüllten Pyknometers:
Zahlenbeispiel
Gewicht = Pyknometer + Destillat bei t ºC + p ″/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146t ºC = 18,90 ºC
t ºC korrigiert = 18,70 ºC
p″ = 2,8074 g
p+m−p ″= Masse des Destillats bei t ºC : 105,0698 − 2,8074 = 102,2624 g
Scheinbare Volumenmasse bei t ºC:
ρ
t¼pþm/C0p00
Volumen des Pyknometers bei 20 ºC/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C146ρ
18;70 ºC¼102;2624
104;0229¼0;983076
6.1.3. Berechnung des Alkoholgehaltes:
Man bezieht sich auf die Tabelle der
scheinbaren Volumenmassen von wäßrig-
alkoholischen Lösungen bei verschie-
denen Temperaturen (siehe 4.3.1)./C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Auf der Zeile 18 ºC der Tabelle der
scheinbaren Volumenmasse ist die zu der
gemessenen Volumenmasse 0,983076
nächsthöhere Volumenmasse 0,98398 in
der Spalte 11 % Vol.
Volumenmasse bei 18 ºC:
(98307,6 + 0,7 × 22) 10
−5= 0,98323
0,98398 − 0,98323 = 0,00075
Dezimalstellen der Alkoholvolumenpro-
zente = 75/114 = 0,65
Der Alkoholgehalt beträgt somit 11,65 %
Vol.
6.2. Verwendung einer einarmigen Waage
6.2.1 Die Pyknometerkonstanten sind, wie in Kapitel 1 „Volumenmasse
und relative Dichte“ unter 6.2.1 angegeben, bestimmt und berechnet
worden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 41
▼B
6.2.2. Wägung des mit Destillat gefüllten Pyknometers:
Gewicht des Taragefäßes zum
Zeitpunkt der Bestimmung in
Gramm: T1= 171,9178
Mit Destillat gefülltes
Pyknometer bei 20,50 ºC in Gramm: P2= 167,8438
Änderung des Luftdrucks: dT = 171,9178 − 171,9160
= + 0,0018
Masse des Destillates bei 20,50 ºC: Lt= 167,8438 − (67,6695 + 0,0018)
= 100,1725
Scheinbare Volumenmasse des Destil-
lates: ρ20;5º C¼100;1725
101;8194¼0;983825
6.2.3. Berechnung des Alkoholgehaltes
Man bezieht sich auf die Tabelle der
scheinbaren Volumenmassen von wäßrig-
alkoholischen Lösungen bei verschie-
denen Temperaturen (siehe 4.3.1)./C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Auf der Zeile 20 ºC der Tabelle der
scheinbaren Volumenmassen ist die zu
der gemessenen Volumenmasse 0,983825
nächsthöhere Volumenmasse 0,98471 in
der Spalte 10 % Vol.
Volumenmasse bei 20 ºC:
(98382,5 + 0,50 × 24) 10
−5= 0,983945
0,98471 − 0,983945 = 0,000765
Dezimalstellen der Alkoholvolumenpro-
zente = 76,5/119 = 0,64
Der Alkoholgehalt beträgt somit 10,64 %
Vol.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 42
▼B
FORMEL ZUR BERECHNUNG DER ALKOHOLTABELLEN FÜR
MISCHUNGEN AUS ETHYLALKOHOL UND WASSER
DieVolume nmasse„ ρ“, ausgedrückt als Kilogramm je Kubikmeter (kg/m3),
einer Mischung aus Ethylalkohol und Wasser bei der Temperatur t, ausgedrückt
in Grad Celsius, ist durch folgende Formel in Abhängigkeit von
— dem Massengehalt p, ausgedrückt durch eine Dezimalzahl (1),
— der Temperatur t, ausgedrückt in Grad Celsius (E. I. P. T. 68),
— den nachstehenden numerischen Koeffizienten
gegeben.
Die Formel gilt für Temperaturen zwischen − 20 ºC und + 40 ºC.
Numerische Koeffizienten der Formel
kAk
kg/m3Bk
1 9,982 012 300 · 102− 2,061 851 3 · 10−1kg/(m3· ºC)
2 − 1,929 769 495 · 102− 5,268 254 2 · 10−3kg/(m3·º C2)
3 3,891 238 958 · 1023,613 001 3 · 10−5kg/(m3·º C3)
4 − 1,668 103 923 · 103− 3,895 770 2 · 10−7kg/(m3·º C4)
5 1,352 215 441 · 1047,169 354 0 · 10−9kg/(m3·º C5)
6 − 8,829 278 388 · 104− 9,973 9231 · 10−11kg/(m3·º C6)
7 3,062 874 042 · 105
8 − 6,138 381 234 · 105
9 7,470172 998 · 105
10 − 5,478 461 354 · 105
11 2,234 460 334 · 105
12 − 3,903 285 426 · 104
kC1,k
kg/(m3· ºC)C2,k
kg/(m3·º C2)
1 1,693 443 461 530 087 · 10−1− 1,193 013 005 057 010 · 10−2
2 − 1,046 914 743 455 169 · 1012,517 399 633 803 461 · 10−1
3 7,196 353 469 546 523 · 101− 2,170 575 700 536 993
4 − 7,047 478 054 272 792 · 1021,353 034 988 843 029 · 101
5 3,924 090 430 035 045 · 103− 5,029 988 758 547 014 · 101
6 − 1,210 164 659 068 747 · 1041,096 355 666 577 570 · 102
7 2,248 646 550 400 788 · 104− 1,422 753 946 421 155 · 102
8 − 2,605 562 982 188 164 · 1041,080 435 942 856 230 · 102
9 1,852 373 922 069 467 · 104− 4,414 153 236 817 392 · 101
10 − 7,420 201 433 430 137 · 1037,442 971 530 188 783
11 1,285 617 841 998 974 · 103
kC3,k
kg/(m3·º C3)C4,k
kg/(m3·º C4)C5,k
kg/(m3·º C5)
1 − 6,802 995 733 503 803 · 10−44,075 376 675 622 027 · 10−6− 2,788 074 354 782 409 · 10−8
2 1,876 837 790 289 664 · 10−2− 8,763 058 573 471 110 · 10−61,345 612 883 493 354 · 10−8
3 − 2,002 561 813 734 156 · 10−16,515 031 360 099 368 · 10−6
4 1,022 992 966 719 220 − 1,515 784 836 987 210 · 10−6
5 − 2,895 696 483 903 638
6 4,810 060 584 300 675
7 − 4,672 147 440 794 683
8 2,458 043 105 903 4611990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 43
(1) Beispiel: Für einen Massegehalt von 12 %: p = 0,12.
▼B
kC3,k
kg/(m3·º C3)C4,k
kg/(m3·º C4)C5,k
kg/(m3·º C5)
9 − 5,411 227 621 436 812 · 10−11990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 44
▼B
TABELLE I
INTERNATIONALE ALKOHOLVOLUMENPROZENTE — BEI 20 ºC
Tabelle der scheinbaren Volumenmassen von wäßrig-alkoholischen Mischungen
— Pyknometer aus Pyrex-Glas —
Volumen bei tº mit Luftdruckkorrektur
tºAlkoholgehalt in % vol
01234567891 0 1 1
0º 999,64 1,50 998,14 1,44 996,70 1,40 995,30 1,35 993,95 1,30 992,65 1,24 991,41 1,19 990,22 1,14 989,08 1,10 987,98 1,05 986,93 1,00 985,93 0,95
−0,07 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,01
1º 999,71 1,51 998,20 1,44 996,76 1,40 995,36 1,35 994,01 1,30 992,71 1,24 991,47 1,20 990,27 1,15 989,12 1,11 988,01 1,06 986,95 1,01 985,94 0,97
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01 0,00
2º 999,76 1,51 998,25 1,45 996,80 1,40 995,40 1,35 994,05 1,30 992,75 1,25 991,50 1,20 990,30 1,16 989,14 1,11 988,03 1,07 986,96 1,02 985,94 0,98
−0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,01 0,02
3º 999,79 1,51 998,28 1,45 996,83 1,41 995,42 1,35 994,07 1,30 992,77 1,25 991,52 1,21 990,31 1,16 989,15 1,12 988,03 1,08 986,95 1,03 985,92 1,00
−0,02 −0,02 −0,01 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04
4º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,36 994,08 1,30 992,78 1,26 991,52 1,21 990,31 1,17 989,14 1,13 988,01 1,09 986,92 1,04 985,88 1,00
0,00 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05
5º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,37 994,07 1,31 992,76 1,26 991,50 1,21 990,29 1,17 989,12 1,14 987,98 1,10 986,88 1,05 985,83 1,01
0,01 0,01 0,01 0,02 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,05 0,05 0,06
6º 999,80 1,51 998,29 1,46 996,83 1,41 995,42 1,36 994,06 1,32 992,74 1,27 991,47 1,22 990,25 1,18 989,07 1,14 987,93 1,10 986,83 1,06 985,77 1,03
0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09
7º 999,77 1,51 998,26 1,46 996,80 1,41 995,39 1,37 994,02 1,32 992,70 1,27 991,43 1,23 990,20 1,19 989,01 1,15 987,86 1,11 986,75 1,07 985,68 1,03
0,05 0,04 0,04 0,05 0,05 0,05 0,05 0,06 0,06 0,07 0,08 0,09
8º 999,72 1,50 998,22 1,46 996,76 1,42 995,34 1,37 993,97 1,32 992,65 1,27 991,38 1,24 990,14 1,19 988,95 1,16 987,79 1,12 986,67 1,08 985,59 1,05
0,05 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
9º 999,67 1,51 998,16 1,46 996,70 1,42 995,28 1,37 993,91 1,32 992,59 1,28 991,31 1,24 990,07 1,20 988,87 1,17 987,70 1,13 986,57 1,09 985,48 1,06
0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,09 0,09 0,10 0,11 0,12
10º 999,60 1,51 998,09 1,46 996,63 1,42 995,21 1,37 993,84 1,33 992,51 1,28 991,23 1,25 989,98 1,20 988,78 1,17 987,60 1,14 986,46 1,10 985,36 1,06
0,09 0,09 0,09 0,08 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,12 0,13
11º 999,51 1,51 998,00 1,46 996,54 1,41 995,13 1,38 993,75 1,33 992,42 1,29 991,13 1,25 989,88 1,21 988,67 1,18 987,49 1,15 986,34 1,11 985,23 1,07
0,10 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13 0,13 0,14
12º 999,41 1,50 997,91 1,46 996,45 1,42 995,03 1,38 993,65 1,34 992,31 1,29 991,02 1,25 989,77 1,22 988,55 1,19 987,36 1,15 986,21 1,12 985,09 1,09
0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,14 0,15 0,16
13º 999,30 1,50 997,80 1,46 996,34 1,42 994,92 1,38 993,54 1,34 992,20 1,30 990,90 1,25 989,65 1,23 988,42 1,20 987,22 1,16 986,06 1,13 984,93 1,09
0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16
14º 999,18 1,50 997,68 1,46 996,22 1,43 994,79 1,38 993,41 1,34 992,07 1,30 990,77 1,26 989,51 1,23 988,28 1,21 987,07 1,17 985,90 1,13 984,77 1,11
0,13 0,14 0,14 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16 0,17 0,18
15º 999,05 1,51 997,54 1,46 996,08 1,42 994,66 1,38 993,28 1,35 991,93 1,30 990,63 1,27 989,36 1,24 988,12 1,21 986,91 1,18 985,73 1,14 984,59 1,12
0,15 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,19
16º 998,90 1,50 997,40 1,46 995,94 1,43 994,51 1,38 993,13 1,35 991,78 1,31 990,47 1,27 989,20 1,25 987,95 1,21 986,74 1,19 985,55 1,15 984,40 1,13
0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19 0,20
17º 998,74 1,50 997,24 1,46 995,78 1,43 994,35 1,38 992,97 1,36 991,61 1,31 990,30 1,28 989,02 1,25 987,77 1,22 986,55 1,19 985,36 1,16 984,20 1,14
0,17 0,17 0,17 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22
18º 998,57 1,50 997,07 1,46 995,61 1,42 994,19 1,39 992,80 1,36 991,44 1,32 990,12 1,28 988,84 1,26 987,58 1,23 986,35 1,20 985,15 1,17 983,98 1,14
0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,22
19º 998,39 1,50 996,89 1,46 995,43 1,43 994,00 1,39 992,61 1,36 991,25 1,32 989,93 1,29 988,64 1,26 987,38 1,23 986,15 1,21 984,94 1,10 983,76 1,16
0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24
20º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
tºAlkoholgehalt in % vol
01234567891 0 1 1
20º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
0,20 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24
21º 998,00 1,50 996,50 1,46 995,04 1,43 993,61 1,40 992,21 1,36 990,85 1,33 989,52 1,30 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,23 984,47 1,19 983,28 1,18
0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,24 0,26
22º 997,79 1,50 996,29 1,46 994,83 1,43 993,40 1,40 992,00 1,37 990,63 1,33 989,30 1,31 987,99 1,28 986,71 1,25 985,46 1,23 984,23 1,21 983,02 1,18
0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,25
23º 997,57 1,50 996,07 1,47 994,60 1,43 993,17 1,40 991,77 1,37 990,40 1,34 989,06 1,31 987,75 1,28 986,47 1,26 985,21 1,24 983,97 1,20 982,77 1,20
0,24 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,26 0,27 0,29
24º 997,33 1,49 995,84 1,47 994,37 1,43 992,94 1,41 991,53 1,37 990,16 1,34 988,82 1,32 987,50 1,29 986,21 1,26 984,95 1,25 983,70 1,22 982,48 1,20
0,24 0,25 0,24 0,25 0,24 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28
25º 997,09 1,50 995,59 1,46 994,13 1,44 992,69 1,40 991,29 1,38 989,91 1,35 988,56 1,32 987,24 1,29 985,95 1,27 984,68 1,26 983,42 1,22 982,20 1,21
0,25 0,25 0,26 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,28 0,28 0,28 0,30
26º 996,84 1,50 995,34 1,47 993,87 1,43 992,44 1,41 991,03 1,38 989,65 1,35 988,30 1,32 986,98 1,31 985,67 1,27 984,40 1,26 983,14 1,24 981,90 1,22
0,26 0,26 0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,30
27º 996,58 1,50 995,08 1,47 993,61 1,44 992,17 1,41 990,76 1,38 989,38 1,35 988,03 1,33 986,70 1,31 985,39 1,28 984,11 1,27 982,84 1,24 981,60 1,23
0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32
28º 996,31 1,50 994,81 1,47 993,34 1,44 991,90 1,42 990,48 1,38 989,10 1,36 987,74 1,33 986,41 1,31 985,10 1,29 983,81 1,28 982,53 1,25 981,28 1,23
0,28 0,28 0,28 0,29 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32
29º 996,03 1,50 994,53 1,47 993,06 1,45 991,61 1,41 990,20 1,39 988,81 1,36 987,45 1,34 986,11 1,32 984,79 1,29 983,50 1,28 982,22 1,26 980,96 1,24
0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,32 0,33
30º 995,75 1,51 994,24 1,47 992,77 1,45 991,32 1,42 989,90 1,39 988,51 1,37 987,14 1,34 985,80 1,32 984,48 1,30 983,18 1,28 981,90 1,27 980,63 1,25
0,30 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34 0,34
31º 995,45 1,51 993,94 1,47 992,47 1,45 991,02 1,43 989,59 1,39 988,20 1,37 986,83 1,34 985,49 1,33 984,16 1,31 982,85 1,29 981,56 1,27 980,29 1,26
0,31 0,31 0,31 0,32 0,31 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,36
32º 995,14 1,51 993,63 1,47 992,16 1,46 990,70 1,42 989,28 1,40 987,88 1,37 986,51 1,35 985,16 1,33 983,83 1,32 982,51 1,30 981,21 1,28 979,93 1,26
0,31 0,31 0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35
33º 994,83 1,51 993,32 1,48 991,84 1,46 990,38 1,42 988,96 1,41 987,55 1,37 986,18 1,36 984,82 1,34 983,48 1,32 982,16 1,30 980,86 1,28 979,58 1,28
0,32 0,33 0,33 0,33 0,35 0,34 0,35 0,35 0,34 0,35 0,36 0,37
34º 994,51 1,52 992,99 1,48 991,51 1,46 990,05 1,44 988,61 1,40 987,21 1,38 985,83 1,36 984,47 1,33 983,14 1,33 981,81 1,31 980,50 1,29 979,21 1,28
0,33 0,33 0,34 0,35 0,34 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37
35º 994,18 1,52 992,66 1,49 991,17 1,47 989,70 1,43 988,27 1,41 986,86 1,38 985,48 1,36 984,12 1,34 982,78 1,33 981,45 1,31 980,14 1,30 978,84 1,29
0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38
36º 993,84 1,53 992,31 1,49 990,82 1,47 989,35 1,43 987,92 1,41 986,51 1,38 985,13 1,37 983,76 1,34 982,42 1,34 981,08 1,31 979,77 1,31 978,46 1,29
0,35 0,35 0,36 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38 0,37 0,39 0,39
37º 993,49 1,53 991,96 1,50 990,46 1,46 989,00 1,44 987,56 1,41 986,15 1,39 984,76 1,37 983,39 1,35 982,04 1,33 980,71 1,33 979,38 1,31 978,07 1,30
0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39
38º 993,13 1,53 991,60 1,50 990,10 1,47 988,63 1,44 987,19 1,41 985,78 1,39 984,39 1,37 983,02 1,36 981,66 1,34 980,32 1,32 979,00 1,32 977,68 1,31
0,36 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,38 0,39 0,38 0,39 0,40 0,40
39º 992,77 1,54 991,23 1,50 989,73 1,47 988,26 1,45 986,81 1,41 985,40 1,39 984,01 1,38 982,63 1,35 981,28 1,35 979,93 1,33 978,60 1,32 977,28 1,32
0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39 0,39 0,39 0,40 0,39 0,40 0,41
40º 992,40 1,54 990,86 1,51 989,35 1,48 987,87 1,44 986,43 1,42 985,01 1,39 983,62 1,38 982,24 1,36 980,88 1,34 979,54 1,34 978,20 1,33 976,87 1,321990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 45
▼B
tºAlkoholgehalt in % vol
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
0 986,93 1,00 985,93 0,95 984,98 0,92 984,06 0,88 983,18 0,84 982,34 0,80 981,54 0,78 980,76 0,75 980,01 0,73 979,28 0,72 978,56 0,70 977,86 0,70
−0,02 −0,01 0,01 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17
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−0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
2 986,96 1,02 985,94 0,98 984,96 0,94 984,02 0,91 983,11 0,88 982,23 0,84 981,39 0,81 980,58 0,79 979,79 0,77 979,02 0,76 978,26 0,75 977,51 0,74
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5 986,88 1,05 985,83 1,01 984,82 0,98 983,84 0,95 982,89 0,92 981,97 0,89 981,08 0,87 980,21 0,84 979,37 0,83 978,54 0,82 977,72 0,82 976,90 0,80
0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,13 0,14 0,17 0,19 0,21 0,22
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10 986,46 1,10 985,36 1,06 984,30 1,04 983,26 1,02 982,24 0,99 981,25 0,96 980,29 0,95 979,34 0,92 978,42 0,92 977,50 0,91 976,59 0,91 975,68 0,91
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0,15 0,16 0,16 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28 0,30
13 986,06 1,13 984,93 1,09 983,84 1,08 982,76 1,05 981,71 1,02 980,69 1,01 979,68 0,99 978,69 0,98 977,71 0,97 976,74 0,97 975,77 0,96 974,81 0,96
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0,18 0,19 0,20 0,22 0,22 0,24 0,24 0,27 0,28 0,30 0,31 0,32
16 985,55 1,15 984,40 1,13 983,27 1,11 982,16 1,08 981,08 1,07 980,01 1,04 978,97 1,04 977,93 1,02 976,91 1,02 975,89 1,01 974,88 1,01 973,87 1,02
0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,33
17 985,36 1,16 984,20 1,14 983,06 1,12 981,94 1,09 980,85 1,08 979,77 1,06 978,71 1,05 977,66 1,04 976,62 1,03 975,59 1,03 974,56 1,02 973,54 1,04
0,21 0,22 0,22 0,23 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,35
18 985,15 1,17 983,98 1,14 982,84 1,13 981,71 1,11 980,60 1,09 979,51 1,07 978,44 1,06 977,38 1,05 976,33 1,05 975,28 1,04 974,24 1,05 973,19 1,05
0,21 0,22 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35
19 984,94 1,18 983,76 1,16 982,60 1,13 981,47 1,12 980,35 1,10 979,25 1,09 978,16 1,07 977,09 1,07 976,02 1,06 974,96 1,06 973,90 1,06 972,84 1,06
0,23 0,24 0,24 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,36
20 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºAlkoholgehalt in % vol
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,24 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37
21º 984,47 1,19 983,28 1,18 982,10 1,15 980,95 1,14 978,81 1,12 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,10 975,38 1,09 974,29 1,09 973,20 1,09 972,11 1,09
0,24 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,35 0,36 0,37
22º 984,23 1,21 983,02 1,18 981,84 1,17 980,67 1,15 979,52 1,13 978,39 1,12 977,27 1,12 976,15 1,10 975,05 1,11 973,94 1,10 972,84 1,10 971,74 1,12
0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,35 0,37 0,39
23º 983,97 1,20 982,77 1,20 981,57 1,18 980,39 1,16 979,23 1,15 978,08 1,13 976,95 1,13 975,82 1,12 974,70 1,11 973,59 1,12 972,47 1,12 972,47 1,12
0,27 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40
24º 983,70 1,22 982,48 1,20 981,28 1,18 980,10 1,17 978,93 1,16 977,77 1,15 976,62 1,13 975,49 1,14 974,35 1,13 973,22 1,13 972,09 1,14 970,95 1,14
0,28 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40
25º 983,42 1,22 982,20 1,21 980,99 1,20 979,79 1,18 978,61 1,17 977,44 1,15 976,29 1,15 975,14 1,15 973,99 1,14 972,85 1,15 971,70 1,15 970,55 1,16
0,28 0,30 0,31 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41
26º 983,14 1,24 981,90 1,22 980,68 1,20 979,48 1,19 978,29 1,18 977,11 1,17 975,94 1,16 974,78 1,16 973,62 1,16 972,46 1,16 971,30 1,16 970,14 1,17
0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,42
27º 982,84 1,24 981,60 1,23 980,37 1,21 979,16 1,20 977,96 1,19 976,77 1,18 975,59 1,17 974,42 1,18 973,24 1,17 972,07 1,17 970,90 1,18 969,72 1,18
0,31 0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,38 0,40 0,41 0,43
28º 982,53 1,25 981,28 1,23 980,05 1,22 978,83 1,21 977,62 1,20 976,42 1,19 975,23 1,19 974,04 1,18 972,86 1,19 971,67 1,18 970,49 1,20 969,29 1,20
0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,42 0,43
29º 982,22 1,26 980,96 1,24 979,72 1,23 978,49 1,22 977,27 1,21 976,06 1,20 974,86 1,20 973,66 1,20 972,46 1,19 971,27 1,20 970,07 1,21 968,86 1,22
0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45
30º 981,90 1,27 980,63 1,25 979,38 1,24 978,14 1,23 976,91 1,22 975,69 1,21 974,48 1,22 973,26 1,21 972,05 1,21 970,84 1,21 969,63 1,22 968,41 1,23
0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45
31º 981,56 1,27 980,29 1,26 979,03 1,25 977,78 1,24 976,54 1,23 975,31 1,23 974,08 1,22 972,86 1,22 971,64 1,22 970,42 1,23 969,19 1,23 967,96 1,24
0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,46
32º 981,21 1,28 979,93 1,26 978,67 1,26 977,41 1,25 976,16 1,24 974,92 1,23 973,69 1,23 972,46 1,24 971,22 1,23 969,99 1,24 968,75 1,25 967,50 1,25
0,35 0,35 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,45 0,46
33º 980,86 1,28 979,58 1,28 978,30 1,26 977,04 1,26 975,78 1,25 974,53 1,24 973,29 1,25 972,04 1,24 970,80 1,25 969,55 1,25 968,30 1,26 967,04 1,27
0,36 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47
34º 980,50 1,29 979,21 1,28 977,93 1,27 976,66 1,27 975,39 1,26 974,13 1,25 972,88 1,26 971,62 1,25 970,37 1,26 969,11 1,27 967,84 1,27 966,57 1,29
0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,46 0,46 0,48
35º 980,14 1,30 978,84 1,29 977,55 1,28 976,27 1,27 975,00 1,27 973,73 1,27 972,46 1,26 971,20 1,27 969,93 1,28 968,65 1,27 967,38 1,29 966,09 1,30
0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,45 0,47 0,48
36º 979,77 1,31 978,46 1,29 977,17 1,29 975,88 1,28 974,60 1,28 973,32 1,28 972,04 1,28 970,76 1,28 969,48 1,28 968,20 1,29 966,91 1,30 965,61 1,32
0,39 0,39 0,40 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49
37º 978,38 1,31 978,07 1,30 976,77 1,29 975,48 1,29 974,19 1,29 972,90 1,29 971,61 1,29 970,32 1,29 969,03 1,30 967,73 1,30 966,43 1,31 965,12 1,33
0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50
38º 979,00 1,32 977,68 1,31 976,37 1,30 975,07 1,30 973,77 1,30 972,47 1,30 971,17 1,30 969,87 1,30 968,57 1,31 967,26 1,32 965,94 1,32 964,62 1,34
0,40 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
39º 978,60 1,32 977,28 1,32 975,96 1,31 974,65 1,30 973,35 1,31 972,04 1,31 970,73 1,31 969,42 1,32 968,10 1,32 966,78 1,33 965,45 1,33 964,12 1,36
0,40 0,41 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51
40º 978,20 1,33 976,87 1,32 975,55 1,32 974,23 1,31 972,92 1,32 971,60 1,32 970,28 1,32 968,96 1,33 967,63 1,33 966,30 1,34 964,96 1,35 963,61 1,371990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 46
▼B
tºAlkoholgehalt in % vol
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
0 978,56 0,70 977,86 0,70 977,16 0,69 976,47 0,71 975,76 0,71 975,05 0,72 974,33 0,75 973,58 0,77 972,81 0,80 972,01 0,83 971,18 0,87 970,31 0,90
0,14 0,17 0,19 0,22 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,39 0,41
1 978,42 0,73 977,69 0,72 976,97 0,72 976,25 0,73 975,52 0,73 974,79 0,75 974,04 0,77 973,27 0,80 972,47 0,82 971,65 0,86 970,79 0,89 969,90 0,92
0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,37 0,39 0,41
2 978,26 0,75 977,51 0,74 976,77 0,75 976,02 0,75 975,27 0,76 974,51 0,77 973,74 0,79 972,95 0,82 972,13 0,85 971,28 0,88 970,40 0,91 969,49 0,95
0,17 0,19 0,22 0,23 0,26 0,28 0,31 0,33 0,36 0,38 0,40 0,42
3 978,09 0,77 977,32 0,77 976,55 0,76 975,79 0,78 975,01 0,78 974,23 0,80 973,43 0,81 972,62 0,85 971,77 0,87 970,90 0,90 970,00 0,93 969,07 0,98
0,18 0,20 0,22 0,25 0,27 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,40 0,43
4 977,91 0,79 977,12 0,79 976,33 0,79 975,54 0,80 974,94 0,80 973,94 0,82 973,12 0,84 972,28 0,87 971,41 0,89 970,52 0,92 969,60 0,96 968,64 1,00
0,19 0,22 0,23 0,26 0,27 0,30 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44
5 977,72 0,82 976,90 0,80 976,10 0,82 975,28 0,81 974,47 0,83 973,64 0,85 972,79 0,86 971,93 0,89 971,04 0,91 970,13 0,95 969,18 0,98 968,20 1,01
0,21 0,22 0,25 0,26 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44
6 977,51 0,83 976,68 0,83 975,85 0,83 975,02 0,84 974,18 0,85 973,33 0,87 972,46 0,86 971,58 0,91 970,67 0,94 969,73 0,97 968,76 1,00 967,76 1,03
0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44
7 977,30 0,85 976,45 0,85 975,60 0,86 974,74 0,86 973,88 0,87 973,01 0,89 972,12 0,90 971,22 0,93 970,29 0,96 969,33 0,99 968,34 1,02 967,32 1,06
0,23 0,25 0,27 0,28 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,43 0,46
8 977,07 0,87 976,20 0,87 975,33 0,87 974,46 0,89 973,57 0,89 972,68 0,91 971,77 0,92 970,85 0,96 969,89 0,98 968,91 1,00 967,91 1,05 966,86 1,07
0,24 0,26 0,28 0,30 0,31 0,34 0,35 0,38 0,39 0,41 0,44 0,46
9 976,83 0,89 975,94 0,89 975,05 0,89 974,16 0,90 973,26 0,92 972,34 0,92 971,42 0,95 970,47 0,97 969,50 1,00 968,50 1,03 967,47 1,07 966,40 1,09
0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46
10 976,59 0,91 975,68 0,91 974,77 0,91 973,86 0,93 972,93 0,93 972,00 0,95 971,05 0,97 970,08 0,99 969,09 1,02 968,07 1,05 967,02 1,08 965,94 1,12
0,27 0,29 0,30 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47
11 976,32 0,93 975,39 0,92 974,47 0,94 973,53 0,94 972,59 0,95 971,64 0,97 970,67 0,99 969,68 1,01 968,67 1,04 967,63 1,07 966,56 1,09 965,47 1,13
0,27 0,28 0,31 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48
12 976,05 0,94 975,11 0,95 974,16 0,95 973,21 0,96 972,25 0,97 971,28 0,99 970,29 1,01 969,28 1,03 968,25 1,06 967,19 1,08 966,11 1,12 964,99 1,15
0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
13 975,77 0,96 974,81 0,96 973,85 0,97 972,88 0,98 971,90 0,99 970,91 1,01 969,90 1,03 968,87 1,05 967,82 1,08 966,74 1,10 965,64 1,14 964,50 1,17
0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
14 975,49 0,98 974,51 0,98 973,53 0,99 972,54 1,00 971,54 1,01 970,53 1,03 969,50 1,04 968,46 1,07 967,39 1,10 966,29 1,12 965,17 1,16 964,01 1,19
0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49
15 975,19 1,00 974,19 1,00 973,19 1,00 972,19 1,02 971,17 1,03 970,14 1,04 969,10 1,06 968,04 1,09 966,95 1,12 965,83 1,14 964,69 1,17 963,52 1,21
0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46 0,48 0,51
16 974,88 1,01 973,87 1,02 972,85 1,02 971,83 1,03 970,80 1,05 969,75 1,06 968,69 1,08 967,61 1,11 966,50 1,13 965,37 1,16 964,21 1,20 963,01 1,22
0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48 0,50 0,50
17 974,56 1,02 973,54 1,04 972,50 1,04 971,46 1,05 970,41 1,06 969,35 1,08 968,27 1,10 967,17 1,12 966,05 1,16 964,89 1,18 963,71 1,20 962,51 1,24
0,32 0,35 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,52
18 974,24 1,05 973,19 1,05 972,14 1,05 971,09 1,07 970,02 1,08 968,94 1,10 967,84 1,12 966,72 1,14 965,58 1,17 964,41 1,19 963,22 1,23 961,99 1,25
0,34 0,35 0,36 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,52
19 973,90 1,06 972,84 1,06 971,78 1,08 970,70 1,08 969,62 1,10 968,52 1,11 967,41 1,14 966,27 1,16 965,11 1,18 963,93 1,21 962,72 1,25 961,47 1,27
0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,45 0,46 0,47 0,49 0,51 0,52
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºAlkoholgehalt in % vol
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,36 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,49 0,50 0,52 0,53
21 973,20 1,09 972,11 1,09 971,02 1,11 969,91 1,12 968,79 1,13 967,66 1,15 966,51 1,16 965,35 1,20 964,15 1,21 962,94 1,25 961,69 1,27 960,42 1,31
0,36 0,37 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54
22 972,84 1,10 971,74 1,12 970,62 1,12 969,50 1,13 968,37 1,15 967,22 1,16 966,06 1,19 964,87 1,21 963,66 1,23 962,43 1,26 961,17 1,29 959,88 1,32
0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,55
23 972,47 1,12 971,35 1,13 970,22 1,14 969,08 1,14 967,94 1,17 966,77 1,18 965,59 1,20 964,39 1,22 963,17 1,25 961,92 1,28 960,64 1,31 959,33 1,33
0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,54 0,55
24 972,09 1,14 970,95 1,14 969,81 1,15 968,66 1,16 967,50 1,18 966,32 1,20 965,12 1,22 963,90 1,24 962,66 1,26 961,40 1,30 960,10 1,32 958,78 1,35
0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55
25 971,70 1,15 970,55 1,16 969,39 1,16 968,23 1,18 967,05 1,20 965,85 1,21 964,64 1,23 963,41 1,26 962,15 1,28 960,87 1,31 959,56 1,33 958,23 1,37
0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,57
26 971,30 1,16 970,14 1,17 968,97 1,18 967,79 1,20 966,59 1,21 965,38 1,23 964,15 1,24 962,91 1,27 961,64 1,30 960,34 1,32 959,02 1,36 957,66 1,38
0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56
27 970,90 1,18 969,72 1,18 968,54 1,20 967,34 1,21 966,13 1,23 964,90 1,24 963,66 1,26 962,40 1,29 961,11 1,31 959,80 1,34 958,46 1,36 957,10 1,40
0,41 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59
28 970,49 1,20 969,29 1,20 968,09 1,21 966,88 1,22 965,66 1,24 964,42 1,26 963,16 1,28 961,88 1,31 960,57 1,33 959,24 1,35 957,89 1,38 956,51 1,41
0,42 0,43 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52 0,53 0,53 0,55 0,56 0,58
29 970,07 1,21 968,86 1,22 967,64 1,23 966,41 1,24 965,17 1,25 963,92 1,28 962,64 1,29 961,35 1,31 960,04 1,35 958,69 1,36 957,33 1,40 955,93 1,42
0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,55 0,55 0,58 0,58
30 969,63 1,22 968,41 1,23 967,18 1,24 965,94 1,26 964,68 1,26 963,42 1,29 962,13 1,31 960,82 1,33 959,49 1,35 958,14 1,39 956,75 1,40 955,35 1,44
0,44 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,57 0,58 0,60
31 969,19 1,23 967,96 1,24 966,72 1,26 965,46 1,27 964,19 1,28 962,91 1,30 961,61 1,32 960,29 1,35 958,94 1,37 957,57 1,40 956,17 1,42 954,75 1,44
0,44 0,46 0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59
32 968,75 1,25 967,50 1,25 966,25 1,27 964,98 1,29 963,69 1,29 962,40 1,32 961,08 1,33 959,75 1,36 958,39 1,39 957,00 1,41 955,59 1,43 954,16 1,46
0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,57 0,57 0,59 0,61
33 968,30 1,26 967,04 1,27 965,77 1,28 964,49 1,30 963,19 1,31 961,88 1,33 960,55 1,35 959,20 1,38 957,82 1,39 956,43 1,43 955,00 1,45 953,55 1,47
0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56 0,59 0,59 0,60
34 967,84 1,27 966,57 1,29 965,28 1,29 963,99 1,31 962,68 1,33 961,35 1,34 960,01 1,37 958,64 1,38 957,26 1,42 955,84 1,43 954,41 1,46 952,95 1,49
0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58 0,58 0,60 0,62
35 967,38 1,29 966,09 1,30 964,79 1,31 963,48 1,32 962,16 1,34 960,82 1,36 959,46 1,38 958,08 1,40 956,68 1,42 955,26 1,45 953,81 1,48 952,33 1,50
0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
36 966,91 1,30 965,61 1,32 964,29 1,32 962,97 1,34 961,63 1,35 960,28 1,37 958,91 1,40 957,51 1,41 956,10 1,44 954,66 1,46 953,20 1,49 951,71 1,51
0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
37 966,43 1,31 965,12 1,33 963,79 1,34 962,45 1,35 961,10 1,37 959,73 1,38 958,35 1,41 956,94 1,43 955,51 1,45 954,06 1,47 952,59 1,50 951,09 1,53
0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63
38 965,94 1,32 964,62 1,34 963,28 1,35 961,93 1,37 960,56 1,38 959,18 1,40 957,78 1,42 956,36 1,44 954,92 1,46 953,46 1,49 951,97 1,51 950,46 1,54
0,49 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
39 965,45 1,33 964,12 1,36 962,76 1,36 961,40 1,38 960,02 1,40 958,62 1,41 957,21 1,43 955,78 1,46 954,32 1,47 952,85 1,50 951,35 1,53 949,82 1,55
0,49 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63 0,64
40 964,96 1,35 963,61 1,37 962,24 1,38 960,86 1,39 959,47 1,41 958,06 1,43 956,63 1,44 955,19 1,47 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54 949,18 1,571990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 47
▼B
TABELLE II
INTERNATIONALE ALKOHOLVOLUMENPROZENTE — BEI 20 ºC
Tabelle für die Temperaturkorrektur der scheinbaren Alkoholvolumenprozente
Die unten angegebenen Korrekturwerte sind zu den scheinbaren Alkoholvolumenprozenten bei t º (Alkoholmeter aus
gewöhnlichem Glas) hinzuzufügen oder abzuziehen.
Scheinbarer Alkoholgehalt bei t ºC
01234567891 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Temperatur0º
hinzufügen0,76 0,77 0,82 0,87 0,95 1,04 1,16 1,31 1,49 1,70 1,95 2,26 2,62 3,03 3,49 4,02 4,56
1º 0,81 0,83 0,87 0,92 1,00 1,09 1,20 1,35 1,52 1,73 1,97 2,26 2,59 2,97 3,40 3,87 4,36
2º 0,85 0,87 0,92 0,97 1,04 1,13 1,24 1,38 1,54 1,74 1,97 2,24 2,54 2,89 3,29 3,72 4,173º 0,88 0,91 0,95 1,00 1,07 1,15 1,26 1,39 1,55 1,73 1,95 2,20 2,48 2,80 3,16 3,55 3,954º 0,90 0,92 0,97 1,02 1,09 1,17 1,27 1,40 1,55 1,72 1,92 2,15 2,41 2,71 3,03 3,38 3,75
5º 0,91 0,93 0,98 1,03 1,10 1,17 1,27 1,39 1,53 1,69 1,87 2,08 2,33 2,60 2,89 3,21 3,54
6º 0,92 0,94 0,98 1,02 1,09 1,16 1,25 1,37 1,50 1,65 1,82 2,01 2,23 2,47 2,74 3,02 3,32
7º 0,91 0,93 0,97 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,45 1,59 1,75 1,92 2,12 2,34 2,58 2,83 3,10
8º 0,89 0,91 0,94 0,98 1,04 1,11 1,19 1,28 1,39 1,52 1,66 1,82 2,00 2,20 2,42 2,65 2,889º 0,86 0,88 0,91 0,95 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,44 1,57 1,71 1,87 2,05 2,24 2,44 2,65
10º 0,82 0,84 0,87 0,91 0,96 1,01 1,08 1,16 1,25 1,35 1,47 1,60 1,74 1,89 2,06 2,24 2,43
11º 0,78 0,79 0,82 0,86 0,90 0,95 1,01 1,08 1,16 1,25 1,36 1,47 1,60 1,73 1,88 2,03 2,20
12º 0,72 0,74 0,76 0,79 0,83 0,88 0,93 0,99 1,07 1,15 1,24 1,34 1,44 1,56 1,69 1,82 1,96
13º 0,66 0,67 0,69 0,72 0,76 0,80 0,84 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,38 1,49 1,61 1,73
14º 0,59 0,60 0,62 0,64 0,67 0,71 0,74 0,79 0,85 0,91 0,97 1,04 1,12 1,20 1,29 1,39 1,49
15º 0,51 0,52 0,53 0,55 0,58 0,61 0,64 0,68 0,73 0,77 0,83 0,89 0,95 1,02 1,09 1,16 1,24
16º 0,42 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,60 0,63 0,67 0,72 0,77 0,82 0,88 0,94 1,00
17º 0,33 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,46 0,48 0,51 0,55 0,59 0,62 0,67 0,71 0,7518º 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,45 0,48 0,5119º 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25
Scheinbarer Alkoholgehalt bei t ºC
01234567891 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Temperatur21º
abziehen0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,19 0,20 0,22 0,23 0,25 0,26
22º 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,44 0,47 0,49 0,5223º 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,54 0,57 0,60 0,63 0,66 0,70 0,74 0,7824º 0,55 0,56 0,58 0,60 0,62 0,64 0,67 0,70 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04
25º 0,69 0,71 0,73 0,76 0,79 0,82 0,85 0,89 0,93 0,97 1,02 1,07 1,13 1,19 1,25 1,3126º 0,85 0,87 0,90 0,93 0,96 1,00 1,04 1,08 1,13 1,18 1,24 1,30 1,36 1,43 1,50 1,57
27º 1,03 1,07 1,11 1,15 1,19 1,23 1,28 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,8428º 1,21 1,25 1,29 1,33 1,38 1,43 1,49 1,55 1,62 1,69 1,77 1,85 1,93 2,02 2,1129º 1,39 1,43 1,47 1,52 1,58 1,63 1,70 1,76 1,84 1,92 2,01 2,10 2,19 2,29 2,39
30º 1,57 1,61 1,66 1,72 1,78 1,84 1,91 1,98 2,07 2,15 2,25 2,35 2,45 2,56 2,67
31º 1,75 1,80 1,86 1,92 1,98 2,05 2,13 2,21 2,30 2,39 2,49 2,60 2,71 2,83 2,94
32º 1,94 2,00 2,06 2,13 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22
33º 2,20 2,27 2,34 2,42 2,50 2,58 2,67 2,77 2,88 2,99 3,12 3,24 3,37 3,51
34º 2,41 2,48 2,56 2,64 2,72 2,81 2,91 3,02 3,13 3,25 3,38 3,51 3,65 3,79
35º 2,62 2,70 2,78 2,86 2,95 3,05 3,16 3,27 3,39 3,51 3,64 3,78 3,93 4,08
36º 2,83 2,91 3,00 3,09 3,19 3,29 3,41 3,53 3,65 3,78 3,91 4,05 4,21 4,37
37º 3,13 3,23 3,33 3,43 3,54 3,65 3,78 3,91 4,04 4,18 4,33 4,49 4,6538º 3,36 3,47 3,57 3,68 3,79 3,91 4,03 4,17 4,31 4,46 4,61 4,77 4,94
39º 3,59 3,70 3,81 3,93 4,05 4,17 4,30 4,44 4,58 4,74 4,90 5,06 5,23
40º 3,82 3,94 4,06 4,18 4,31 4,44 4,57 4,71 4,86 5,02 5,19 5,36 5,531990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 48
▼B
Scheinbarer Alkoholgehalt bei t ºC
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Temperatur0º
hinzufügen3,49 4,02 4,56 5,11 5,65 6,16 6,63 7,05 7,39 7,67 7,91 8,07 8,20 8,30 8,36 8,39 8,40
1º 3,40 3,87 4,36 4,86 5,35 5,82 6,26 6,64 6,96 7,23 7,45 7,62 7,75 7,85 7,91 7,95 7,96
2º 3,29 3,72 4,17 4,61 5,05 5,49 5,89 6,25 6,55 6,81 7,02 7,18 7,31 7,40 7,47 7,51 7,533º 3,16 3,55 3,95 4,36 4,77 5,17 5,53 5,85 6,14 6,39 6,59 6,74 6,86 6,97 7,03 7,07 7,094º 3,03 3,38 3,75 4,11 4,48 4,84 5,17 5,48 5,74 5,97 6,16 6,31 6,43 6,53 6,59 6,63 6,66
5º 2,89 3,21 3,54 3,86 4,20 4,52 4,83 5,11 5,35 5,56 5,74 5,89 6,00 6,10 6,16 6,20 6,236º 2,74 3,02 3,32 3,61 3,91 4,21 4,49 4,74 4,96 5,16 5,33 5,47 5,58 5,67 5,73 5,77 5,80
7º 2,58 2,83 3,10 3,36 3,63 3,90 4,15 4,38 4,58 4,77 4,92 5,05 5,15 5,24 5,30 5,34 5,378º 2,42 2,65 2,88 3,11 3,35 3,59 3,81 4,02 4,21 4,38 4,52 4,64 4,74 4,81 4,87 4,92 4,959º 2,24 2,44 2,65 2,86 3,07 3,28 3,48 3,67 3,84 3,99 4,12 4,23 4,32 4,39 4,45 4,50 4,53
10º 2,06 2,24 2,43 2,61 2,80 2,98 3,16 3,33 3,48 3,61 3,73 3,83 3,91 3,98 4,03 4,08 4,11
11º 1,88 2,03 2,20 2,36 2,52 2,68 2,83 2,98 3,12 3,24 3,34 3,43 3,50 3,57 3,62 3,66 3,69
12º 1,69 1,82 1,96 2,10 2,24 2,38 2,51 2,64 2,76 2,87 2,96 3,04 3,10 3,16 3,21 3,25 3,27
13º 1,49 1,61 1,73 1,84 1,96 2,08 2,20 2,31 2,41 2,50 2,58 2,65 2,71 2,76 2,80 2,83 2,8514º 1,29 1,39 1,49 1,58 1,68 1,78 1,88 1,97 2,06 2,13 2,20 2,26 2,31 2,36 2,39 2,42 2,44
15º 1,09 1,16 1,24 1,32 1,40 1,48 1,56 1,64 1,71 1,77 1,83 1,88 1,92 1,96 1,98 2,01 2,03
16º 0,88 0,94 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,36 1,41 1,46 1,50 1,53 1,56 1,58 1,60 1,62
17º 0,67 0,71 0,75 0,80 0,84 0,89 0,94 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,14 1,17 1,18 1,20 1,2118º 0,45 0,48 0,51 0,53 0,56 0,59 0,62 0,65 0,68 0,70 0,72 0,74 0,76 0,78 0,79 0,80 0,81
19º 0,23 0,24 0,25 0,27 0,28 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,40 0,41
Scheinbarer Alkoholgehalt bei t ºC
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Temperatur21º
abziehen0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,35 0,37 0,38 0,38 0,39 0,39 0,40
22º 0,47 0,49 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,72 0,74 0,75 0,76 0,78 0,79 0,8023º 0,70 0,74 0,78 0,82 0,86 0,90 0,93 0,97 1,01 1,04 1,07 1,10 1,12 1,15 1,17 1,18 1,1924º 0,94 0,99 1,04 1,10 1,15 1,20 1,25 1,29 1,34 1,39 1,43 1,46 1,50 1,53 1,55 1,57 1,59
25º 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,56 1,62 1,68 1,73 1,78 1,83 1,87 1,90 1,94 1,97 1,99
26º 1,43 1,50 1,57 1,65 1,73 1,80 1,87 1,94 2,01 2,07 2,13 2,19 2,24 2,28 2,32 2,35 2,38
27º 1,68 1,76 1,84 1,93 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,41 2,48 2,55 2,61 2,66 2,70 2,74 2,77
28º 1,93 2,02 2,11 2,21 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,76 2,83 2,90 2,98 3,03 3,08 3,13 3,1729º 2,19 2,29 2,39 2,50 2,60 2,70 2,81 2,91 3,00 3,09 3,18 3,26 3,34 3,40 3,46 3,51 3,55
30º 2,45 2,56 2,67 2,78 2,90 3,01 3,12 3,23 3,34 3,44 3,53 3,62 3,70 3,77 3,84 3,90 3,95
31º 2,71 2,83 2,94 3,07 3,19 3,31 3,43 3,55 3,67 3,78 3,88 3,98 4,07 4,15 4,22 4,28 4,33
32º 2,97 3,09 3,22 3,36 3,49 3,62 3,74 3,87 4,00 4,11 4,22 4,33 4,43 4,51 4,59 4,66 4,72
33º 3,24 3,37 3,51 3,65 3,79 3,92 4,06 4,20 4,33 4,45 4,57 4,68 4,79 4,88 4,97 5,04 5,10
34º 3,51 3,65 3,79 3,94 4,09 4,23 4,37 4,52 4,66 4,79 4,91 5,03 5,15 5,25 5,34 5,42 5,49
35º 3,78 3,93 4,08 4,23 4,38 4,53 4,69 4,84 4,98 5,12 5,26 5,38 5,50 5,61 5,71 5,80 5,87
36º 4,05 4,21 4,37 4,52 4,68 4,84 5,00 5,16 5,31 5,46 5,60 5,73 5,86 5,97 6,08 6,17 6,25
37º 4,33 4,49 4,65 4,82 4,98 5,15 5,31 5,48 5,64 5,80 5,95 6,09 6,22 6,33 6,44 6,54 6,6338º 4,61 4,77 4,94 5,12 5,29 5,46 5,63 5,80 5,97 6,13 6,29 6,43 6,57 6,69 6,81 6,92 7,01
39º 4,90 5,06 5,23 5,41 5,59 5,77 5,94 6,12 6,30 6,47 6,63 6,78 6,93 7,06 7,18 7,29 7,39
40º 5,19 5,36 5,53 5,71 5,90 6,08 6,26 6,44 6,62 6,80 6,97 7,13 7,28 7,41 7,54 7,66 7,761990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 49
▼B
TABELLE III
INTERNATIONALE ALKOHOLVOLUMENPROZENTE — BEI 20 ºC
Tabelle der scheinbaren Volumenmassen von wäßrig-alkoholischen Mischungen
— Geräte aus gewöhnlichem Glas —
Volumenmasse bei tº, mit Luftdruckkorrektur
tºAlkoholgehalt in % Vol.
01234567891 0 1 1
0 999,34 1,52 997,82 1,45 996,37 1,39 994,98 1,35 993,63 1,29 992,34 1,24 991,10 1,18 989,92 1,15 988,77 1,09 987,68 1,05 986,63 1,00 985,63 0,96
−0,09 −0,09 −0,09 −0,08 −0,08 −0,08 −0,07 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02
1 999,43 1,52 997,91 1,45 996,46 1,40 995,06 1,35 993,71 1,29 992,42 1,25 991,17 1,20 989,97 1,15 988,82 1,10 987,72 1,06 986,66 1,01 985,65 0,97
−0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01
2 999,49 1,52 997,97 1,40 996,52 1,40 995,12 1,35 993,77 1,30 992,47 1,25 991,22 1,21 990,01 1,16 988,85 1,11 987,74 1,06 986,68 1,02 985,66 0,98
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 0,00 0,01
3 999,54 1,52 998,02 1,46 996,56 1,40 995,16 1,35 993,81 1,30 992,51 1,26 991,25 1,21 990,04 1,16 988,88 1,12 987,76 1,08 986,68 1,03 985,65 0,99
−0,03 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 0,00 0,01 0,01 0,02
4 999,57 1,52 998,05 1,46 996,59 1,40 995,19 1,36 993,83 1,30 992,53 1,26 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,13 987,75 1,08 986,67 1,04 985,63 1,00
−0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03
5 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,40 995,21 1,36 993,85 1,31 992,54 1,27 991,27 1,22 990,05 1,17 988,88 1,14 987,74 1,09 986,65 1,05 985,60 1,02
0,00 0,00 0,00 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,03 0,03 0,04 0,06
6 999,59 1,52 998,07 1,46 996,61 1,41 995,20 1,36 993,84 1,31 992,53 1,27 991,26 1,23 990,03 1,18 988,85 1,14 987,71 1,10 986,61 1,07 985,54 1,02
0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06
7 999,58 1,52 998,06 1,46 996,60 1,41 995,19 1,36 993,83 1,32 992,51 1,27 991,24 1,23 990,01 1,19 988,82 1,15 987,67 1,11 986,56 1,08 985,48 1,04
0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,05 0,05 0,06 0,07 0,07 0,08
8 999,55 1,52 998,03 1,46 996,57 1,41 995,16 1,37 993,79 1,32 992,47 1,28 991,19 1,23 989,96 1,20 988,76 1,16 987,60 1,11 986,49 1,09 985,40 1,05
0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,06 0,06 0,08 0,08
9 999,51 1,52 997,99 1,46 996,53 1,41 995,12 1,37 993,75 1,32 992,43 1,29 991,14 1,24 989,90 1,20 988,70 1,16 987,54 1,13 986,41 1,09 985,32 1,06
0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
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0,07 0,06 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,10 0,11
11 999,38 1,51 997,87 1,46 996,41 1,42 994,99 1,37 993,62 1,33 992,29 1,29 991,00 1,25 989,75 1,22 988,53 1,18 987,35 1,14 986,21 1,11 985,10 1,08
0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13
12 999,29 1,51 997,78 1,46 996,32 1,42 994,90 1,37 993,53 1,33 992,20 1,30 990,90 1,26 989,64 1,22 988,42 1,18 987,24 1,15 986,09 1,12 984,97 1,09
0,09 0,09 0,09 0,09 0,10 0,10 0,10 0,10 0,11 0,12 0,13 0,14
13 999,20 1,51 997,69 1,46 996,23 1,42 994,81 1,38 993,43 1,33 992,10 1,30 990,80 1,26 989,54 1,23 988,31 1,19 987,12 1,16 985,96 1,13 984,83 1,10
0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16
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0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16
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0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,14 0,15 0,15 0,17 0,17 0,18
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0,18 0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,20 0,21 0,22 0,22 0,23
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tºAlkoholgehalt in % Vol.
01234567891 0 1 1
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▼B
tºAlkoholgehalt in % Vol.
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5 986,65 1,05 985,60 1,02 984,58 0,98 983,60 0,95 982,65 0,91 981,74 0,89 980,85 0,87 979,98 0,84 979,14 0,83 978,31 0,82 977,49 0,81 976,68 0,81
0,04 0,06 0,06 0,07 0,08 0,10 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19 0,21
6 986,61 1,07 985,54 1,02 984,52 0,99 983,53 0,96 982,57 0,93 981,64 0,90 980,74 0,89 979,85 0,86 978,99 0,85 978,14 0,84 977,30 0,83 976,47 0,83
0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,20 0,22
7 986,56 1,08 985,48 1,04 984,44 1,00 983,44 0,97 982,47 0,95 981,52 0,92 980,60 0,90 979,70 0,88 978,82 0,87 977,95 0,85 977,10 0,85 976,25 0,85
0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23
8 986,49 1,09 985,40 1,05 984,35 1,01 983,34 0,98 982,36 0,96 981,40 0,94 980,46 0,92 979,54 0,90 978,64 0,88 977,76 0,87 976,89 0,87 976,02 0,87
0,08 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,15 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24
9 986,41 1,09 985,32 1,06 984,26 1,03 983,23 1,00 982,23 0,97 981,26 0,95 980,31 0,93 979,38 0,92 978,48 0,90 977,56 0,89 976,67 0,89 975,78 0,89
0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 0,16 0,17 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25
10 986,31 1,10 985,21 1,07 984,14 1,04 983,10 1,01 982,09 0,99 981,10 0,96 980,14 0,94 979,20 0,93 978,27 0,92 977,35 0,91 976,44 0,91 975,53 0,91
0,10 0,11 0,12 0,13 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,23 0,25 0,27
11 986,21 1,11 985,10 1,08 984,02 1,05 982,97 1,03 981,94 1,00 980,94 0,97 979,97 0,96 979,01 0,95 978,06 0,94 977,12 0,93 976,19 0,93 975,26 0,92
0,12 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26 0,27
12 986,09 1,12 984,97 1,09 983,88 1,06 982,82 1,04 981,78 1,01 980,77 0,99 979,78 0,98 978,80 0,96 977,84 0,96 976,88 0,95 975,93 0,94 974,99 0,94
0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
13 985,96 1,13 984,83 1,10 983,73 1,07 982,66 1,05 981,61 1,03 980,58 1,00 979,58 0,99 978,59 0,98 977,61 0,97 976,64 0,97 975,67 0,96 974,71 0,96
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29
14 985,81 1,14 984,67 1,11 983,56 1,08 982,48 1,06 981,42 1,04 980,38 1,02 979,36 1,00 978,36 0,99 977,37 0,99 976,38 0,98 975,40 0,98 974,42 0,98
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30
15 985,66 1,15 984,51 1,12 983,39 1,09 982,30 1,07 981,23 1,05 980,18 1,04 979,14 1,02 978,12 1,01 977,11 1,00 976,11 0,99 975,12 1,00 974,12 1,00
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,25 0,26 0,28 0,30 0,31
16 985,49 1,16 984,33 1,13 983,20 1,10 982,10 1,08 981,02 1,06 979,96 1,05 978,91 1,04 977,87 1,02 976,85 1,02 975,83 1,01 974,82 1,01 973,81 1,02
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25 0,27 0,29 0,30 0,31
17 985,32 1,17 984,15 1,14 983,01 1,11 981,90 1,09 980,81 1,08 979,73 1,06 978,67 1,05 977,62 1,04 976,58 1,04 975,54 1,02 974,52 1,02 973,50 1,04
0,19 0,19 0,20 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33
18 985,13 1,17 983,96 1,15 982,81 1,13 981,68 1,11 980,57 1,09 979,48 1,07 978,41 1,06 977,35 1,05 976,30 1,05 975,25 1,04 974,21 1,04 973,17 1,05
0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,34
19 984,93 1,18 983,75 1,16 982,59 1,14 981,45 1,12 980,33 1,10 979,23 1,08 978,15 1,07 977,08 1,07 976,01 1,06 974,94 1,05 973,89 1,06 972,83 1,06
0,22 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,35
20 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºAlkoholgehalt in % Vol.
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,23 0,23 0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
21º 984,48 1,19 983,29 1,17 982,12 1,16 980,96 1,14 979,82 1,13 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,09 975,39 1,09 974,30 1,09 973,21 1,09 972,12 1,09
0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
22 984,25 1,20 983,05 1,18 981,97 1,17 980,70 1,15 979,55 1,14 978,41 1,12 977,29 1,12 976,17 1,10 975,07 1,10 973,97 1,10 972,86 1,10 971,76 1,11
0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37
23 984,01 1,21 982,80 1,19 981,61 1,18 980,43 1,16 979,27 1,15 978,12 1,13 976,99 1,13 975,86 1,12 974,74 1,11 973,63 1,12 972,51 1,12 971,39 1,13
0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38
24 983,76 1,22 982,54 1,20 981,34 1,19 980,15 1,17 978,98 1,16 977,82 1,14 976,68 1,14 975,54 1,13 974,41 1,13 973,28 1,13 972,15 1,14 971,01 1,14
0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39
25 983,50 1,23 982,27 1,21 981,06 1,20 979,86 1,18 978,68 1,17 977,51 1,16 976,36 1,15 975,21 1,15 974,06 1,14 972,92 1,15 971,77 1,15 970,62 1,15
0,27 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39
26 983,23 1,24 981,99 1,22 980,77 1,20 979,57 1,19 978,38 1,18 977,20 1,17 976,03 1,16 974,87 1,16 973,71 1,16 972,55 1,16 971,39 1,16 970,23 1,17
0,29 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,38 0,39 0,41
27 982,94 1,24 981,70 1,23 980,47 1,21 979,26 1,20 978,06 1,19 976,87 1,18 975,69 1,18 974,51 1,17 973,34 1,17 972,17 1,17 921,00 1,18 969,82 1,18
0,29 0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,41
28 982,65 1,25 981,40 1,23 980,17 1,22 978,95 1,21 977,74 1,20 976,54 1,20 975,34 1,19 974,15 1,19 972,96 1,18 971,78 1,18 970,60 1,19 969,41 1,20
0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42
29 982,35 1,26 981,09 1,24 979,85 1,23 978,62 1,22 977,40 1,21 976,19 1,21 974,98 1,20 973,78 1,20 972,58 1,19 971,39 1,19 970,20 1,21 968,99 1,21
0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,38 0,40 0,42 0,43
30 982,04 1,27 980,77 1,25 979,52 1,24 978,28 1,23 977,05 1,22 975,83 1,21 974,62 1,21 973,41 1,21 972,20 1,21 970,99 1,21 969,78 1,22 968,56 1,23
0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43
31 981,72 1,27 980,45 1,26 979,19 1,25 977,94 1,24 976,70 1,23 975,47 1,22 974,25 1,22 973,03 1,22 971,81 1,22 970,59 1,23 969,36 1,23 968,13 1,24
0,33 0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45
32 981,39 1,28 980,11 1,26 978,85 1,26 977,59 1,25 976,34 1,24 975,10 1,23 973,87 1,23 972,64 1,23 971,41 1,24 970,17 1,24 968,93 1,25 967,68 1,26
0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45
33 981,05 1,28 979,77 1,27 978,50 1,26 977,24 1,26 975,78 1,25 974,73 1,25 973,48 1,24 972,24 1,24 971,00 1,25 969,75 1,25 968,50 1,27 967,23 1,27
0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45 0,45
34 980,71 1,29 979,42 1,28 978,14 1,27 976,87 1,27 975,60 1,26 974,34 1,26 973,08 1,25 971,83 1,25 970,58 1,26 969,32 1,27 968,05 1,27 966,78 1,29
0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45 0,47
35 980,37 1,30 979,07 1,29 977,78 1,28 976,50 1,28 975,22 1,27 973,95 1,27 972,68 1,26 971,42 1,27 970,15 1,27 968,88 1,28 967,60 1,29 966,31 1,30
0,36 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47
36 980,01 1,31 978,70 1,29 977,41 1,29 976,12 1,28 974,84 1,28 973,56 1,28 972,28 1,28 971,00 1,28 969,72 1,28 968,44 1,29 967,15 1,31 965,84 1,31
0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47
37 979,65 1,32 978,33 1,30 977,03 1,30 975,73 1,29 974,44 1,29 973,15 1,29 971,86 1,29 970,57 1,29 969,28 1,29 967,99 1,30 966,69 1,32 965,37 1,32
0,38 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,48
38 979,27 1,32 977,95 1,31 976,64 1,30 975,34 1,30 974,04 1,30 972,74 1,30 971,44 1,30 970,14 1,30 968,84 1,31 967,53 1,31 966,22 1,33 964,89 1,34
0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,48 0,49
39 978,89 1,33 977,56 1,31 976,25 1,31 974,94 1,31 973,63 1,31 972,32 1,31 971,01 1,31 969,70 1,31 968,39 1,32 967,07 1,33 965,74 1,34 964,40 1,36
0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
40 978,50 1,33 977,17 1,32 975,85 1,32 974,53 1,32 973,21 1,31 971,90 1,32 970,58 1,33 969,25 1,33 967,92 1,33 966,59 1,34 965,25 1,35 963,90 1,371990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 51
▼B
tºAlkoholgehalt in % Vol.
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
0 978,26 0,70 977,56 0,70 976,86 0,69 976,17 0,70 975,47 0,72 974,75 0,72 974,03 0,74 973,29 0,77 972,52 0,80 971,72 0,83 970,89 0,87 970,02 0,90
0,13 0,15 0,17 0,20 0,22 0,24 0,27 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39
1 978,13 0,72 977,41 0,72 976,69 0,72 975,97 0,72 975,25 0,74 974,51 0,75 973,76 0,77 972,99 0,79 972,20 0,83 971,37 0,85 970,52 0,89 969,63 0,93
0,14 0,17 0,19 0,21 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,38 0,41
2 977,99 0,75 977,24 0,74 976,50 0,74 975,76 0,75 975,01 0,76 974,25 0,78 973,47 0,79 972,68 0,82 971,86 0,85 971,01 0,87 970,14 0,92 960,22 0,96
0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40
3 977,83 0,77 977,06 0,76 976,30 0,77 975,53 0,77 974,76 0,78 973,98 0,80 973,18 0,82 972,36 0,84 971,52 0,87 970,65 0,89 969,76 0,94 968,82 0,98
0,16 0,18 0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,42
4 977,67 0,79 976,88 0,79 976,09 0,79 975,30 0,79 974,51 0,81 973,70 0,82 972,88 0,84 972,04 0,86 971,18 0,89 970,29 0,92 969,37 0,96 968,40 1,00
0,18 0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,35 0,38 0,40 0,41
5 977,49 0,81 976,68 0,81 975,87 0,81 975,06 0,81 974,25 0,83 973,42 0,84 972,58 0,86 971,71 0,88 970,83 0,92 969,91 0,94 968,97 0,98 967,99 1,02
0,19 0,21 0,23 0,25 0,27 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43
6 977,30 0,83 976,47 0,83 975,64 0,83 974,81 0,84 973,97 0,85 973,12 0,87 972,25 0,88 971,37 0,91 970,46 0,94 969,52 0,96 968,56 1,00 967,56 1,04
0,20 0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43
7 976,10 0,85 976,25 0,85 975,40 0,85 974,55 0,86 973,69 0,87 972,82 0,89 971,93 0,91 971,02 0,93 970,09 0,96 969,13 0,98 968,15 1,02 967,13 1,06
0,21 0,23 0,25 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44
8 976,89 0,87 976,02 0,87 975,15 0,87 974,28 0,88 973,40 0,89 972,51 0,91 971,60 0,93 970,67 0,95 969,72 0,98 968,74 1,01 967,73 1,04 966,69 1,08
0,22 0,24 0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,39 0,41 0,43 0,45
9 976,67 0,89 975,78 0,89 974,89 0,89 974,00 0,90 973,10 0,91 972,19 0,93 971,26 0,95 970,31 0,98 969,33 1,00 968,33 1,03 967,30 1,06 966,24 1,09
0,23 0,25 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45
10 976,44 0,91 975,53 0,91 974,62 0,91 973,71 0,92 972,79 0,93 971,86 0,95 970,91 0,97 969,94 1,00 968,94 1,02 967,92 1,05 966,87 1,08 965,79 1,11
0,25 0,27 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45
11 976,11 0,93 975,26 0,92 974,34 0,93 973,41 0,94 972,47 0,95 971,52 0,97 970,55 0,99 969,56 1,02 968,54 1,04 967,50 1,07 966,43 1,09 965,34 1,13
0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46
12 975,93 0,94 974,99 0,94 974,05 0,95 973,10 0,96 972,14 0,97 971,17 0,99 970,18 1,01 969,17 1,03 968,14 1,06 967,08 1,09 965,99 1,11 964,88 1,15
0,26 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47
13 975,67 0,96 974,71 0,96 973,75 0,97 972,78 0,98 971,80 0,99 970,81 1,01 969,80 1,02 968,78 1,05 967,73 1,08 966,65 1,11 965,54 1,13 964,41 1,17
0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47
14 975,40 0,98 974,42 0,98 973,44 0,99 972,45 1,00 971,45 1,01 970,44 1,02 969,42 1,04 968,38 1,07 967,31 1,10 966,21 1,12 965,09 1,15 963,94 1,19
0,28 0,30 0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
15 975,12 1,00 974,12 1,00 973,12 1,00 972,12 1,02 971,10 1,03 970,07 1,04 969,03 1,06 967,97 1,09 966,88 1,12 965,76 1,14 964,62 1,17 963,45 1,20
0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49
16 974,82 1,01 973,81 1,02 972,79 1,02 971,77 1,03 970,74 1,05 969,69 1,06 968,63 1,08 967,55 1,11 966,44 1,13 965,31 1,16 964,15 1,19 962,96 1,22
0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,49
17 974,52 1,02 973,50 1,04 972,46 1,04 971,42 1,05 970,37 1,06 969,31 1,08 968,23 1,10 967,13 1,12 966,01 1,15 964,86 1,18 963,68 1,21 962,47 1,24
0,31 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50
18 974,21 1,04 973,17 1,05 972,12 1,06 971,06 1,07 969,99 1,08 968,91 1,10 967,81 1,11 966,70 1,14 965,56 1,17 964,39 1,19 963,20 1,23 961,97 1,26
0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50
19 973,89 1,06 972,83 1,06 971,77 1,07 970,70 1,09 969,61 1,10 968,51 1,11 967,39 1,13 966,26 1,16 965,10 1,18 963,92 1,21 962,71 1,24 961,47 1,28
0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,14 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºAlkoholgehalt in % Vol.
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20º 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,16 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52
21º 973,21 1,09 972,12 1,09 971,03 1,11 969,92 1,11 968,81 1,13 967,68 1,15 966,53 1,17 965,36 1,19 964,17 1,22 962,95 1,24 961,71 1,28 960,43 1,31
0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52
22 972,86 1,10 971,76 1,11 970,65 1,12 969,53 1,13 968,40 1,15 967,25 1,16 966,09 1,19 964,90 1,21 963,69 1,23 962,46 1,26 961,20 1,29 959,91 1,32
0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,50 0,52 0,53
23 972,51 1,12 971,39 1,13 970,26 1,13 969,13 1,15 967,98 1,16 966,82 1,18 965,64 1,20 964,44 1,23 963,21 1,25 961,96 1,28 960,68 1,30 959,38 1,33
0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54
24 972,15 1,14 971,01 1,14 969,87 1,15 968,72 1,16 967,56 1,18 966,38 1,20 965,18 1,22 963,96 1,24 962,72 1,27 961,45 1,29 960,16 1,32 958,84 1,34
0,38 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54
25 971,77 1,15 970,62 1,15 969,47 1,17 968,30 1,18 967,12 1,19 965,93 1,21 964,72 1,24 963,48 1,26 962,22 1,28 960,94 1,31 959,63 1,33 958,30 1,36
0,38 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55
26 971,39 1,16 970,23 1,17 969,06 1,18 967,88 1,20 966,68 1,21 965,47 1,23 964,24 1,25 962,99 1,27 961,72 1,30 960,42 1,32 959,10 1,35 957,75 1,38
0,39 0,41 0,42 0,44 0,45 0,46 0,48 0,50 0,51 0,52 0,53 0,55
27 971,00 1,18 969,82 1,18 968,64 1,20 967,44 1,21 966,23 1,22 965,01 1,25 963,76 1,27 962,49 1,28 961,21 1,31 959,90 1,33 958,57 1,37 957,20 1,40
0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56
28 970,60 1,19 969,41 1,20 968,21 1,21 967,00 1,23 965,77 1,24 964,53 1,26 963,27 1,28 961,99 1,30 960,69 1,32 959,37 1,35 958,02 1,38 956,64 1,41
0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,56
29 970,20 1,21 968,99 1,21 967,78 1,23 966,55 1,24 965,31 1,26 964,05 1,27 962,78 1,29 961,49 1,32 960,17 1,34 958,83 1,36 957,47 1,39 956,08 1,43
0,42 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,58
30 969,78 1,22 968,56 1,23 967,33 1,24 966,09 1,25 964,84 1,27 963,57 1,29 962,28 1,31 960,97 1,33 959,64 1,35 958,29 1,38 956,91 1,41 955,50 1,44
0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58
31 969,36 1,23 968,13 1,24 966,89 1,25 965,64 1,27 964,37 1,29 963,08 1,31 961,77 1,32 960,45 1,34 959,11 1,37 957,74 1,39 956,35 1,43 954,92 1,45
0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,56 0,57 0,58
32 968,93 1,25 967,68 1,25 966,43 1,27 965,16 1,28 963,88 1,30 962,58 1,32 961,26 1,33 959,93 1,36 958,57 1,39 957,18 1,40 955,78 1,44 954,34 1,47
0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59
33 968,50 1,27 967,23 1,27 965,96 1,28 964,68 1,30 963,38 1,31 962,07 1,33 960,74 1,35 959,39 1,37 958,02 1,40 956,62 1,42 955,20 1,45 953,75 1,48
0,45 0,45 0,47 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60
34 968,05 1,27 966,78 1,29 965,49 1,30 964,19 1,31 962,88 1,32 961,56 1,34 960,22 1,37 958,85 1,38 957,47 1,41 956,06 1,44 954,62 1,47 953,15 1,49
0,45 0,47 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
35 967,60 1,29 996,31 1,30 965,01 1,31 963,70 1,32 962,38 1,34 961,04 1,36 959,68 1,38 958,30 1,40 956,90 1,42 955,48 1,45 954,03 1,48 952,55 1,50
0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,59 0,60 0,61
36 967,15 1,31 965,84 1,31 964,53 1,32 963,21 1,34 961,87 1,36 960,51 1,37 959,14 1,39 957,75 1,42 956,33 1,44 954,89 1,46 953,43 1,49 951,94 1,51
0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61
37 966,69 1,32 965,37 1,32 964,05 1,34 962,71 1,36 961,35 1,37 959,98 1,39 958,59 1,40 957,19 1,43 955,76 1,45 954,31 1,48 952,83 1,50 951,33 1,52
0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,61
38 966,22 1,33 964,89 1,34 963,55 1,35 962,20 1,37 960,83 1,39 959,44 1,40 958,04 1,42 956,62 1,44 955,18 1,46 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54
0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
39 965,74 1,34 964,40 1,36 963,04 1,36 961,68 1,38 960,30 1,40 958,90 1,42 957,48 1,43 956,05 1,45 954,60 1,48 953,12 1,50 951,62 1,52 950,10 1,55
0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
40 965,25 1,35 963,90 1,37 962,53 1,38 961,15 1,39 959,76 1,41 958,35 1,43 956,92 1,45 955,47 1,47 954,00 1,49 952,51 1,51 951,00 1,54 949,49 1,561990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 52
▼B
TABELLE IV
Beziehung zwischen dem Brechungsindex bei 20 ºC und dem Alkoholgehalt bei 20 ºC von reinen wäßrig-alko-
holischen Mischungen und Destillaten
1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 53
▼B
4.GESAMT-TROCKENEXTRAKT
Gesamt-Trockensubstanz
1. DEFINITION
Der Gesamt-Trockenextrakt oder die Gesamt-Trockensubstanz stellt
die Gesamtmenge aller Weinsubstanzen dar, die sich unter
bestimmten physikalischen Bedingungen nicht verflüchtigen. Diese
Bedingungen müssen in der Weise festgelegt werden, daß die den
Extrakt bildenden Stoffe nur möglichst geringe Veränderungen
erfahren.
Der reduktionsfreie Extrakt ist der Gesamt-Trockenextrakt abzüglich
des Gesamtzuckers.
Der reduzierte Extrakt ist der Gesamt-Trockenextrakt, vermindert
um den 1 g/l übersteigenden Gesamtzucker, um das 1 g/l überstei-
gende Kaliumsulfat, um Mannit (soweit vorhanden) sowie abzüglich
aller gegebenenfalls dem Wein zugesetzter Substanzen.
Der Extraktrest ist der reduktionsfreie Extrakt abzüglich der als
Weinsäure berechneten nichtflüchtigen Säuren.
Der Extrakt wird in g/l ausgedrückt und muß mit einer Genauigkeit
von 0,5 g bestimmt werden.
2. PRINZIP DER METHODEN
Einzige Methode: densimetrische Bestimmung.
Der Gesamt-Trockenextrakt wird indirekt aus der Dichte des Mostes
bzw. aus der Dichte des entalkoholisierten Weines berechnet.
Der Trockenextrakt wird durch die Menge Saccharose ausgedrückt,
die in 1 Liter wäßriger Lösung die gleiche Dichte wie der Most
bzw. der entalkoholisierte Wein aufweist. Die Werte sind der
Tabelle I zu entnehmen.
3. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
Diere lativeDichted2020des „entalkoholisierten Weines“ (dr) wird
mit Hilfe der Formel berechnet:
dr=dw−dA+ 1,000
dw= relative Dichte des Weines bei 20 ºC (korrigiert um den
Anteil der flüchtigen Säure) (1);
dA= relative Dichte bei 20 ºC einer wäßrig-alkoholischen Lösung
mit dem gleichen Alkoholgehalt wie der Wein.
Man kann drauch aus der Volumenmasse bei 20 ºC ρwdes Weines
und ρAder wäßrig-alkoholischen Mischung von gleichem Alkohol-
gehalt berechnen durch die Formel:
dr= 1,0018 ( ρw−ρA) + 1,000,
wobei der Faktor 1,0018 in den Fällen, in denen ρwkleiner als 1,05
ist, d. h. in den meisten Fällen, durch 1 ersetzt werden kann.
4. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der Gesamt-Trockenextrakt in g/l wird entsprechend der Dichte dr2020
des entalkoholisierten Weines bzw. d2020des Mostes der Tabelle I
entnommen.
Der Gesamt-Trockenextrakt wird mit 1 Dezimale angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 54
(1) Vor dieser Berechnung muß die, wie oben angegeben, gemessene relative Dichte bzw.
Volumenmasse des Weines um den von der flüchtigen Säure verursachten Fehler nachder folgenden Formel korrigiert werden:d
w=d2020− 0,0000086 a oder ρw=ρ20− 0,0000086 a;
a = flüchtige Säure in Milliäquivalenten je 1 Liter.
▼B
TABELLE I
Berechnung des Gehaltes am Gesamt-Trockenextrakt (g/l)
Relative Dichte
mit 2 Dezimalen3. Dezimale der relativen Dichte
0123456789
Extrakt in g/l
1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2
1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,1
1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2
1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3
1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,5
1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,81,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4
1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8
1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,2
1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9
1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6
1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,4
1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,2
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1
1,20 527,8 —————————
Ergänzungstabelle
4. Dezimale der
relativen DichteExtrakt in
g/l4. Dezimale der
relativen DichteExtrakt in
g/l4. Dezimale der
relativen DichteExtrakt in
g/l
1 0,3 4 1,0 7 1,8
2 0,5 5 1,3 8 2,1
3 0,8 6 1,6 9 2,31990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 55
▼B
5.REDUZIERENDE ZUCKER
1. DEFINITION
Die reduzierenden Zucker, die sich aus den Gesamtzuckern mit einer
Keto- oder Aldehydgruppe zusammensetzen, werden durch Reduzie-
rung einer alkalischen Kupfersalzlösung bestimmt.
2. PRINZIP DER METHODEN
2.1. Klärung
2.1.1. Referenzmethode: Behandlung des neutralisierten und vom Alkohol
befreiten Weines über eine Anionenaustauschersäule, wobei dessen
Anionen gegen Acetationen ausgetauscht werden, und anschließende
Klärung mit neutralem Bleiacetat.
2.1.2. Gebräuchliche Methoden: Behandlung des Weines mit einem der
folgenden Reagenzien:
2.1.2.1. Neutrales Bleiacetat2.1.2.2. Zinkhexacynoferrat II
2.2. Bestimmung
2.2.1. Einzige Methode: Nachdem der geklärte Wein oder Most mit einer
bestimmten Menge Kupfersulfat reagiert hat, wird der Überschuß
an Kupferionen iodometrisch bestimmt.
3. KLÄRUNG
Die Lösung, in der die Zuckerbestimmung erfolgt, soll einen Zucker-
gehalt zwischen 0,5 und 5 g/l aufweisen.
Handelt es sich um einen trockenen Wein, so ist während der
Klärung eine Verdünnung zu vermeiden. Bei zuckerreichen Weinen
soll bei der Klärung eine Verdünnung in der Weise vorgenommen
werden, daß der Zuckergehalt zwischen den in der nachfolgenden
Tabelle angegebenen Grenzwerten liegt.
BezeichnungZuckergehalt liegt
zwischen (g/l)Volumenmasse 20 ºC
zwischenVorzunehmende
Verdünnung (%)
Moste und Mistellen > 125 > 1,038 1
Süße Weine mit oder
ohneAlkoholzusatz25 und 125 1,005 und 1,038 4
Liebliche Weine 5 und 25 0,997 und 1,005 20
Trockne Weine < 5 < 0,997 keine Verdünnung
3.1. Referenzmethode
3.1.1. Reagenzien
3.1.1.1. Salzsäure(HCl), 1 M
3.1.1.2. Natronlauge(NaOH), 1 M
3.1.1.3. Essigsäure(CH3COOH), 4 M
3.1.1.4. Natronlauge(NaOH), 2 M
3.1.1.5. Anionenaustauscherharz (Typ Dowex 3 (20—50 mesh) oder gleich-
wertiges Harz).
Vorbereitung der Austauschersäule. In eine 50-ml-Bürette, deren
unteres Ende mit einem Glaswollepfropfen verschlossen ist, werden
15 ml Anionenaustauscherharz (3.1.1.5) eingebracht.
Vor der Verwendung des Harzes wird dieses in zwei vollständigen
Arbeitsgängen regeneriert, wobei abwechselnd eine 1-M-Salzsäurelö-
sung (3.1.1.1) und eine 1-M-Natronlauge (3.1.1.2) verwendetwerden. Nach dem Nachwaschen mit 50 ml destilliertem Wasser
wird das Harz in ein Becherglas gegeben, 50 ml einer 4-M-Essigsäu-
relösung (3.1.1.3) hinzugefügt, 5 Minuten lang geschüttelt und in die
Bürette zurückgefüllt. Danach werden 100 ml 4-M-Essigsäurelösung
(3.1.1.3) über die Säule gegeben. (Es ist zweckmäßig, das Harz unter1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 56
▼B
4-M-Essigsäure (3.1.1.3) aufzubewahren.) Die Säule wird mit destil-
liertem Wasser gewaschen, bis die ablaufende Flüssigkeit neutral
reagiert.
Regenerierung des Harzes. Man läßt 150 ml einer 2-M-Natronlauge
(3.1.1.4) durch die Säule laufen, um die Säuren und einen großen
Teil der am Harz haftenden Farbstoffe zu entfernen und wäscht mit
100 ml Wasser nach. Dann läßt man 100 ml 4-M-Essigsäurelösung
(3.1.1.3) durchlaufen und wäscht nach bis die ablaufende Flüssigkeit
neutral reagiert.
3.1.1.6. Neutrale Bleiacetatlösung (annähernd gesättigt):
250 g neutrales Bleiacetat (CH3COO)2Pb · 3 H2O) werden mit sehr
heißem Wasser auf 500 ml gebracht und bis zur Lösung geschüttelt.
3.1.1.7. Calciumcarbonat (Ca CO3)
3.1.2. Durchführung der Bestimmung
3.1.2.1. TrockneWe ine
50 ml Wein werden in einer Schale (Durchmesser 10—12 cm) mit
0,5 (n−0,5) ml 1-M-Natronlauge (3.1.1.2) versetzt (n = ml 0,1 M-
Natronlauge, die zur Bestimmung der Gesamtsäure von 10 ml Wein
verbraucht wurden) und auf einem siedenden Wasserbad mit Hilfe
eines heißen Luftstroms auf etwa 20 ml eingeengt.
Diese Lösung läßt man durch die Anionenaustauschersäule in
Acetatform (3.1.1.5) mit einer Geschwindigkeit von 3 ml in 2
Minuten durchlaufen. Das Eluat wird in einem 100-ml-Meßkolben
aufgefangen. Die Schale und die Säule werden insgesamt 6 × mit je
10 ml destilliertem Wasser gewaschen, sodann fügt man dem
Meßkolben 1 ml der gesättigten Bleiacetatlösung (3.1.1.6) und 0,5 g
Calciumcarbonat (3.1.1.7) hinzu, schüttelt mehrfach um und läßt
mindestens 15 Minuten stehen; danach füllt man mit Wasser zur
Markeauf und filtrie rt.
1 ml dieses Filtrats entspricht 0,5 ml Wein.
3.1.2.2. Moste, Mistellen, Süßweine und liebliche Weine
Nachstehende Verdünnungen werden als Beispiele angegeben.1.Moste und Mistellen
Die zu untersuchende Flüssigkeit wird 10 zu 100 verdünnt, 10 ml
dieser Verdünnung werden zur Bestimmung verwendet.
2.Süßweine mit oder ohne Alkoholzusatz , mit einer Volumenmasse
20 ºC zwischen 1,005 und 1,038. Die zu untersuchende Flüssig-
keit wird 20 zu 100 verdünnt, 20 ml dieser Verdünnung werden
zur Bestimmung verwendet.
3.Liebliche Weine , deren Volumenmasse 20 ºC zwischen 0,997
und 1,005 liegt. 20 ml des unverdünnten Weines werden zur
Bestimmung verwendet.
Durch die Austauschersäule in Acetatform (3.1.1.5) wird die
oben angegebene Menge des Weines gegeben und mit einer
Geschwindigkeit von 3 ml in 2 Minuten durch die Säule durch-
laufengelassen. Das Eluat wird in einem 100-ml-Meßkolben
aufgefangen. Die Säule wird so lange mit Wasser gewaschen,
bis die Flüssigkeitsmenge im Kölbchen 90 ml beträgt. Sodann
gibt man 0,5 g Calciumcarbonat (3.1.1.7) und 1 ml der
gesättigten Bleiacetatlösung (3.1.1.6) zu, schüttelt um und läßt
15 Minuten unter zeitweiligem Umschütteln stehen. Man füllt
mit Wasser zur Marke auf und filtriert.
Im Fall:1. 1 ml Filtrat entspricht 0,01 ml Most oder Mistelle.
2. 1 ml Filtrat entspricht 0,04 ml Süßwein.3. 1 ml Filtrat entspricht 0,20 ml lieblichem Wein.
3.2. Gebräuchliche Methoden
3.2.1. Klärung mit neutralem Bleiacetat
3.2.1.1. Reagenzien
Neutrale Bleiacetatlösung (annähernd gesättigt) (siehe 3.1.1.6).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 57
▼B
Calciumcarbonat.
3.2.1.2. Durchführung der Bestimmung
3.2.1.2.1. Trockne Weine
50 ml eines trocknen Weines werden in einem 100-ml-Meßkolben
mit 0,5 (n−0,5) ml 1-M-Natronlauge (3.1.1.2) versetzt (n = ml 0,1-
M-Natronlauge, die zur Bestimmung der Gesamtsäure von 10 ml
Wein verbraucht wurden). Unter Schütteln werden 2,5 ml der
gesättigten Bleiacetatlösung (3.1.1.6) und 0,5 g Calciumcarbonat
(3.1.1.7) hinzugefügt. Man schüttelt mehrmals um und läßt
mindestens 15 Minuten stehen. Dann wird mit Wasser zur Marke
aufgefüllt und filtriert.
1 ml Filtrat entspricht 0,5 ml Wein.
3.2.1.2.2. Moste, Mistellen, Süßweine und liebliche Weine
In einem 100-ml-Meßkolben wird eine entsprechende Menge Wein
(oder Most oder Mistelle) gegeben, wobei die nachstehend aufge-
führten Verdünnungen als Beispiel dienen:
1.Moste und Mistellen.
Die zu untersuchende Flüssigkeit wird 10 zu 100 verdünnt, 10 ml
dieser Verdünnung werden zur Bestimmung verwendet.
2.Süßweine, mit oder ohne Alkoholzusatz , mit einer Volumen-
masse zwischen 1,005 und 1,038. Die zu untersuchende
Flüssigkeit wird 20 zu 100 verdünnt, 20 ml dieser Verdünnung
werden zur Bestimmung verwendet.
3.Liebliche Weine , mit einer Volumenmasse zwischen 0,997 und
1,005. 20 ml des unverdünnten Weines werden zur Bestimmung
verwendet.
Zu der entsprechenden Flüssigkeitsmenge fügt man 0,5 g
Calciumcarbonat, etwa 60 ml Wasser und 0,5 bzw. 1 oder 2 ml
der gesättigten Bleiacetatlösung hinzu, schüttelt um, läßt
mindestens 15 Minuten stehen (von Zeit zu Zeit umschütteln),
füllt zur Marke mit Wasser auf und filtriert.
Im Fall:
1. 1 ml Filtrat entspricht 0,01 ml Most oder Mistelle.
2. 1 ml Filtrat entspricht 0,04 ml Süßwein.3. 1 ml Filtrat entspricht 0,20 ml lieblichem Wein.
3.2.2. Klärung mit Zinkhexacyanoferrat (II)
Dieses Verfahren soll nur für Weißweine, hellfarbige Süßweine und
Moste verwandt werden.
3.2.2.1. Reagenzien
3.2.2.1.1. Lösung I (Kaliumhexacyanoferrat (II)-Lösung)
Kaliumhexacyanoferrat (II) (K
4Fe(CN)6·3 H2O) 150 g
mit Wasser auf 1 000 ml.
3.2.2.1.2. Lösung II (Zinksulfatlösung):
Zinksulfat (Zn SO4·7H2O) 300 g
mit Wasser auf 1 000 ml.
3.2.2.2. Durchführung der Bestimmung
In einen 100-ml-Meßkolben wird eine entsprechende Menge Wein
(oder Most oder Mistelle) gegeben, wobei die nachstehend aufge-
führten Verdünnungen als Beispiel dienen:
1.Moste und Mistellen.
Die zu untersuchende Flüssigkeit wird 10 zu 100 verdünnt, 10 ml
dieser Verdünnung werden zur Bestimmung verwendet.
2.Süßweine, mit oder ohne Alkoholzusatz , mit einer Volumen-
masse 20 ºC zwischen 1,005 und 1,038. Die zu untersuchende1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 58
▼B
Flüssigkeit wird 20 zu 100 verdünnt, 20 ml dieser Verdünnung
werden zur Bestimmung verwendet.
3.Liebliche Weine , mit einer Volumenmasse 20 ºC zwischen 0,997
und 1,005. 20 ml des unverdünnten Weines werden zur Bestim-
mung verwendet.
4.Trockne Weine . 50 ml des unverdünnten Weines werden zur
Bestimmung verwendet.
Zu der entsprechenden Flüssigkeitsmenge werden 5 ml Kalium-
hexacyanoferrat (II)-Lösung (3.2.2.1.1) und 5 ml
Zinksulfatlösung (3.2.2.1.2) hinzugefügt, gemischt, mit Wasser
zur Marke aufgefüllt, 10 Minuten stehengelassen und filtriert.
Im Fall:
1. 1 ml Filtrat entspricht 0,01 ml Most oder Mistelle.
2. 1 ml Filtrat entspricht 0,04 ml Süßwein.
3. 1 ml Filtrat entspricht 0,20 ml lieblichem Wein.
4. 1 ml Filtrat entspricht 0,50 ml trocknem Wein.
4. BESTIMMUNG4.1. Reagenzien
4.1.1. Alkalische Kupfersalzlösung:
Kupfersulfat, p.a. (CuSO
4·5H2O) 25 g
Citronensäure p.a. (C6H8O7·H2O) 50 g
kristallisiertes Natriumcarbonat (Na2CO3·1 0
H2O) 388 g
mit Wasser auf 1 000 ml.
Man löst das Kupfersulfat in 100 ml Wasser, die Citronensäure in
300 ml Wasser und das Natriumcarbonat in 300 bis 400 ml heißem
Wasser. Zunächst werden die Citronensäurelösung und die Natrium-
carbonatlösung gemischt, sodann die Kupfersulfatlösung hinzugefügt
und auf 1 l aufgefüllt.
4.1.2. 30%ige Kaliumjodidlösung:
Kaliumjodid (K) 30 g
mit Wasser auf 100 ml.
In dunkler Glasflasche aufbewahren.
4.1.3. 25%ige Schwefelsäure:
Schwefelsäure p.a. (H2SO4)ρ20= 1,84 g/ml 25 g
mit Wasser auf 1 000 ml.
Man gibt die Schwefelsäure zum Wasser, läßt abkühlen und füllt auf
100 ml auf.
4.1.4. Stärkelösung 5 g/l:
5 g Stärke werden in etwa 500 ml Wasser gelöst, unter Rühren zum
Kochen gebracht und 10 Minuten im Sieden gehalten. Man fügt
200 g Natriumchlorid (NaCl) zu und füllt nach dem Abkühlen auf
1 l auf.
4.1.5. Natriumthiosulfatlösung (Na2S2O3) 0,1 M
4.1.6. Invertzuckerlösung 5 g/l:
Diese Lösung ist zur Überprüfung der Bestimmungstechnik zu
verwenden.
In einen 200 ml Meßkolben gibt man
Saccharosep.a. (C12H22O11) 4,75 g
Wasser, etwa 100 ml
Salzsäurep.a. (HCl), ρ20= 1,16−1,19 g/ml 5 ml1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 59
▼B
In einem Wasserbad von 60 ºC wird die Lösung auf 50 ºC erwärmt
und 15 Minuten bei dieser Temperatur gehalten. Man läßt 30
Minuten bei Raumtemperatur und anschließend in einem kalten
Wasserbad abkühlen. Die Lösung wird in einen 1 000-ml-Meßkolben
übergeführt und zur Marke aufgefüllt. Diese Lösung ist etwa 1
Monat haltbar.
Vor Gebrauch wird die Lösung mit Natronlauge neutralisiert
(Acidität der Lösung etwa 0,06 M).
4.2. Durchführung der Bestimmung
In einen 300-ml-Erlenmeyer-Kolben gibt man 25 ml alkalische
Kupfersalzlösung, 15 ml Wasser und 10 ml der geklärten Flüssigkeit.
Die Lösung darf nicht mehr als 60 mg Invertzucker enthalten.
Man fügt einige Körnchen Bimsstein hinzu, bringt die Lösung am
Rückfluß innerhalb von 2 Minuten zum Sieden und hält genau 10
Minuten lang im Sieden.
Es wird sofort unter fließendem Wasser abgekühlt. Nach voll-
ständigem Abkühlen werden 10 ml 30%ige Kaliumjodidlösung
(4.1.2), 25 ml 25%ige Schwefelsäure (4.1.3) und 2 ml Stärkelösung
(4.1.4) zugegeben.
Man titriert mit 0,1 M-Natriumthiosulfatlösung (4.1.5).
n = ml verbrauchte Natriumthiosulfatlösung des Hauptversuches.Außerdem wird ein Blindwert ermittelt, bei dem die 10 ml Probe-
lösung durch 10 ml destilliertes Wasser ersetzt werden.
n′= ml verbrauchte Natriumthiosulfatlösung des Blindversuches.
4.3. Angabe der Ergebnisse
4.3.1. Berechnung
Der in der untersuchten Lösung enthaltene Zuckergehalt, ausge-
drückt als Invertzucker, ist in Abhängigkeit von n ′−n ml
verbrauchter 0,1 M-Natriumthiosulfatlösung nachstehender Tabelle
zu entnehmen.
Der Zuckergehalt des Weines wird in Gramm Invertzucker je Liter
mit einer Dezimalstelle angegeben, wobei die während der Klärung
durchgeführten Verdünnungen und das Probevolumen zu berücksich-
tigen sind.
4.3.2. Wiederholbarkeit
r = 0,015 x
i
xi= Konzentration des Invertzuckers in g/l der Probe.
4.3.3. Vergleichbarkeit
R = 0,058 xi
xi= Konzentration des Invertzuckers in g/l der Probe.
Umrechnungstabelle: ml 0,1 M-Natriumthiosulfatlösung (n ′− n) ml und reduzierende Zucker in mg
Na2S2O3(ml 0,1 M)Reduzierende Zucker
(mg)Diff.Na2S2O3(ml 0,1 M)Reduzierende Zucker
(mg)Diff.
1 2,4 2,4 13 33,0 2,7
2 4,8 2,4 14 35,7 2,8
3 7,2 2,5 15 38,5 2,8
4 9,7 2,5 16 41,3 2,9
5 12,2 2,5 17 44,2 2,9
6 14,7 2,6 18 47,2 2,9
7 17,2 2,6 19 50,0 3,0
8 19,8 2,6 20 53,0 3,0
9 22,4 2,6 21 56,0 3,1
10 25,0 2,6 22 59,1 3,1
11 27,6 2,7 23 62,2
12 30,3 2,71990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 60
▼B
6.SACCHAROSE
1. PRINZIP DER METHODEN
I. Qualitativer Nachweis mittels Dünnschichtchromatographie. Die
Saccharose wird dünnschichtchromatographisch auf Cellulose-
platten von den anderen Zuckern getrennt und mit dem Reagenz
Harnstoff-Salzsäure bei 105 ºC nachgewiesen.
II. Nachweis und Bestimmung durch Hochdruckflüssigkeitschroma-
tographie, Trennung der Saccharose über eine aminomodifizierte
Kieselgelsäule, Detektion mittels Refraktometrie und Quantifizie-
rung über einen externen Standard.
Anmerkungen:Der Nachweis eines Zusatzes von Saccharose zum Most rektifi-
zierten Traubenmostkonzentrat oder Wein kann durch die
Kernresonanzmagnetische Messung des Deuteriums geführt
werden.
Für den Nachweis und die Bestimmung von Saccharose kann
auch die Gaschromatographie, wie in Kapitel 42 unter f)
beschrieben, angewandt werden.
2. DÜNNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE METHODE2.1. Gerätschaften
2.1.1. Cellulose-Fertigplatten
2.1.2. Chromatographiekammer
2.1.3. Mikroliterspritze oder Mikropipette
2.1.4. Trockenschrank, einstellbar auf 105 ± 2º C
2.2. Reagenzien
2.2.1. Aktivkohle
2.2.2. Fließmittel: Dichlormethan — Essigsäure ( ρ
20= 1,05 g/ml) —
Ethanol — Methanol — Wasser (50:25:9:6:10).
2.2.3. Sprühreagenz:
Harnstoff 5 g
Salzsäure, 2 M 20 ml
Ethanol 100 ml.
2.2.4. Vergleichslösung:
Glucose35 g
Fructose35 g
Saccharose0,5 g
Wasser zu 1 000 ml.
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Vorbereitung der Probe
Stark gefärbte Moste und Weine werden mit Aktivkohle entfärbt.Bei rektifiziertem Traubenmostkonzentrat verwendet man eine
Lösung, die 25 % (g/g) Zucker enthält (25 º Brix), siehe Kapitel
„pH-Wert des Weines und des Mostes“ unter 4.1.2, und verdünnt
diese 1:4 (25 ml/100 ml) mit Wasser.
2.3.2. Chromatographie
2,5 cm vom unteren Plattenrand entfernt werden
— 10 µl der Probelösung,
— 10 µl der Vergleichslösung
aufgetragen.Man chromatographiert bei Kammersättigung bis etwa 1 cm unter-
halb des oberen Plattenrandes. Sodann wird die Platte in einem
warmen Luftstrom getrocknet und die Chromatographie noch1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 61
▼B
zweimal wiederholt, wobei die Platte jedes Mal getrocknet wird.
Danach besprüht man mit 15 ml des Sprühreagenzes und erhitzt 5
Minuten bei 105 ºC im Trockenschrank.
2.4. Ergebnis
Saccharose und Fructose erscheinen als dunkelblaue Flecken auf
weißem Grund, Glucose als weniger intensiver grünlicher Fleck.
3. NACHWEIS UND BESTIMMUNG DURCH HPLC
Die chromatographischen Bedingungen sind lediglich beispielhaft
angegeben.
3.1. Gerätschaften
3.1.1. Hochdruckflüssigkeitschromatograph ausgerüstet mit:
1. einem Injektor mit Probenschleife, 10 µl;
2. einem Detektor, Differential-Refraktometer oder Interferometer;
3. einer Trennsäule, Länge 250 mm, innerer Durchmesser 4 mm,
stationäre Phase aminodifiziertes (NH2) Kieselgel;
4. einer Vorsäule, gefüllt mit derselben Phase;
5. einer Einrichtung zum Temperieren der Vor- und Trennsäule auf
30 ºC;
6. einem Schreiber, evtl. Integrator;
7. Fließgeschwindigkeit der mobilen Phase: 1 ml/Min.
3.1.2. Membranfiltration (0,45 µm)
3.2. Reagenzien
3.2.1. Bidestilliertes Wasser
3.2.2. Acetonitril (CH3CN) HPLC-Qualität
3.2.3. Mobile Phase: Acetonitril-Wasser (80—20 (v/v)), filtriert über eine
Membrane (0,45 µm).
Das Fließmittel wird vor Gebrauch entgast.
3.2.4. Eichlösung: Wäßrige Saccharoselösung, 1,2 g/l, filtriert über eine
Membrane (0,45 µm).
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Vorbereitung der Probe
— Wein und Most: Man filtriert die Proben über eine Membrane
(0,45 µm).
— Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK): Man verwendet
eine verdünnte Lösung des RTK (40 %, g/v), siehe „Gesamt-
säure“ unter 5.1.2 und filtriert diese über eine Membrane
(0,45 µm).
3.3.2. Chromatographie
Man injiziert jeweils 10 µl der Eichlösung und der nach 3.3.1 vorbe-
reiteten Probenlösung und nimmt die Chromatogramme auf. Die
Einspritzungen werden wiederholt.
Die Retentionszeit der Saccharose beträgt etwa 10 Minuten.
3.4. Berechnung
Zur Berechnung nimmt man die Mittelwerte aus jeweils 2 Einsprit-
zungen der Eichlösung und der Probelösung.
3.4.1. Wein und Most
Der Gehalt wird in g/l berechnet.
3.4.2. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK)
Der Saccharosegehalt in g/kg RTK beträgt 2,5 × C.
C = Saccharosegehalt in g/l der 40%igen (g/v) RTK-Lösung.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 62
▼B
3.5. Angabe der Ergebnisse
Der Saccharosegehalt des Weines, des Mostes und des RTK wird in
g/l (Wein und Most) bzw. g/kg RTK mit 1 Dezimalstelle angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 63
▼B
7.GLUCOSE UND FRUCTOSE
1. DEFINITION
Glucose und Fructose werden enzymatisch bestimmt. Diese Bestim-
mung wird nur zur Berechnung des Verhältnisses Glucose/Fructose
herangezogen.
2. PRINZIP
Glucose und Fructose werden mit Adenosin-5 ′-triphosphat (ATP)
während einer durch das Enzym Hexokinase (HK) katalysierten
Reaktion phosphoriliert und bilden Glucose-6-phosphat (G6P) und
Fructose-6-phosphat (F6P):
Glucose+ ATP
 G6P + ADP
Fructose+ ATP
 F6P + ADP
Zunächst wird Glucose-6-phosphat durch Nicotinamid-adenin-dinu-
cleotid-phosphat (NADP) in Gegenwart des Enzyms Glucose-6-
phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) zu Gluconat-6-phosphat oxidiert.
Die reduzierte Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat-Menge
(NADPH), die während der Reaktion gebildet wird, entspricht der
Menge Glucose-6-phosphat, somit also der Glucosemenge.
G6P + NADP+
Gluconat-6-phosphat + NADPH +
H+
Das reduzierte Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat (NADPH)
ist Meßgröße und wird aufgrund seiner Absorption bei 340 nm
bestimmt.
Nach Ablauf dieser Reaktion wird Fructose-6-phosphat durch Phos-
phoglucose-Isomerase (PGI) in Glucose-6-phosphat überführt.
F6P
 G6P
Glucose-6-phosphat reagiert erneut mit Nicotinamid-adenin-dinu-
cleotid-phosphat und bildet dabei Gluconat-6-phosphat und
reduziertes Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat (NADPH);
dieses wird wiederum bestimmt.
3. GERÄTSCHAFTEN
— Spektralphotometer zur Durchführung der Messung bei 340 nm,
dem Absorptionsmaximum von NADPH. Da es sich um absolute
Messungen handelt (Berechnung nicht über eine Eichkurve,
sondern über den molaren Extinktionskoeffizienten von
NADPH), müssen die Richtigkeit der Wellenlänge und die
Linearität der Extinktionen gewährleistet sein.
Gegebenenfalls kann auch ein Spektrallinienphotometer
verwendet werden, das Messungen bei 334 nm oder 365 nm
erlaubt.
— Glas- oder Einwegküvetten, Schichtdicke 1 cm.
— Enzymtestpipetten, 0,02 — 0,05 — 0,1 — 0,2 ml.
4. REAGENZIEN
4.1. Lösung 1: Puffer (Triethanolamin 0,3 M; pH = 7,6; 4 · 10−3M
Mg2+): 11,2 g Triethanolaminhydrochlorid (C2H5)3N · HCl) und 0,2 g
Mg SO4·7H2O werden in 150 ml bidestilliertem Wasser gelöst,
4 ml 5 M Natronlauge (NaOH) hinzugefügt, um einen pH = 7,6 zu
erreichen, und auf 200 ml aufgefüllt.
Diese Pufferlösung kann vier Wochen lang bei + 4 ºC aufbewahrt
werden.
4.2. Lösung 2: Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phosphat (ungefähr
11,5.10−3M): 50 mg Dinatrium-Nicotinamid-adenin-dinucleotid-phos-
phat werden in 5 ml bidestilliertem Wasser gelöst.
Diese Lösung kann vier Wochen lang bei + 4 ºC aufbewahrt werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 64
▼B
4.3. Lösung 3: Adenosin-5 ′-triphosphat (ungefähr 81 10−3M): 250 mg
Dinatrium-adenosin-5 ′-triphosphat und 250 mg Natriumhydrogencar-
bonat (NaHCO3) werden in 5 ml bidestilliertem Wasser gelöst.
Diese Lösung kann vier Wochen lang bei + 4 ºC aufbewahrt werden.
4.4. Lösung 4: Hexokinase/Glucose-6-phosphat-Dehydrogenase: 0,5 ml
Hexikonase (2 mg Protein/ml, d. h. 280 U/ml) und 0,5 ml Glucose-
6-phosphat-Dehydrogenase (1 mg Protein/ml) werden gemischt.
Die Mischung kann ein Jahr lang bei ungefähr + 4 ºC aufbewahrt
werden.
4.5. Lösung 5: Phosphoglucose-Isomerase (2 mg Protein/ml, d. h. 700 U/
ml). Die Suspension wird unverdünnt verwendet.
Aufbewahrung: 1 Jahr bei ungefähr + 4 ºC.Anmerkung:Die für diese Bestimmung notwendigen Reagenzien sind im Handel
erhältlich.
5. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
5.1. Vorbereitung der Probe
Nach Maßgabe der geschätzten Glucose- und Fructosemenge je Liter
werden folgende Verdünnungen hergestellt:
Messung bei 340 und 334 nm 365 nmVerdünnung mit
WasserVerdünnungsfaktor
F
Bis 0,4 g/l 0,8 g/l — —
Bis 4,0 g/l 8,0 g/l 1 + 9 10Bis 10,0 g/l 20,0 g/l 1 + 24 25Bis 20,0 g/l 40,0 g/l 1 + 49 50Bis 40,0 g/l 80,0 g/l 1 + 99 100Über 40,0 g/l 80,0 g/l 1 + 999 1 000
5.2. Messung
Das Spektralphotometer wird auf die Wellenlänge 340 nm einge-
stellt, die Messungen werden gegen Luft (keine Küvette im
Strahlengang) oder gegen Wasser durchgeführt.
Temperatur 20 bis 25 ºC.In 2 Küvetten, Schichtdecke 1 cm, pipettiert man:
Leerwert Probe
Lösung 1 (4.1) (Temperatur auf
20 ºC)2,50 ml 2,50 ml
Lösung 2 (4.2) 0,10 ml 0,10 ml
Lösung 3 (4.3) 0,10 ml 0,10 ml
Probe0,20 ml
Destilliertes Wasser 0,20 ml
Man mischt und mißt nach ungefähr 3 Minuten die Extinktion der
Lösungen (E
1). Die Reaktion wird gestartet durch die Zugabe von
Lösung 4 (4.4) 0,02 ml 0,02 ml.
Man mischt, wartet 15 Minuten und mißt die Extinktion der
Lösungen. Der Stillstand der Reaktion wird nach 2 Minuten über-
prüft (E2).
Anschließend fügt man:
Lösung 5 (4.5) 0,02 ml 0,02 ml
hinzu und mischt. Nach 10 Minuten wird die Extinktion gemessen
und über Stillstand der Reaktion nach 2 Minuten überprüft (E3).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 65
▼B
Man berechnet die Extinktionsdifferenzen ( ∆E) für den Leerwert und
dieProbe :
E2−E1entspricht Glucose;
E3−E2entspricht Fructose.
Die Extinktionsdifferenz des Leerwertes ( ∆EL) wird von der Extink-
tionsdifferenz der Probe ( ∆Eρ) abgezogen, man erhält
für Glucose: ∆EG=∆Ep−∆EL
für Fructose: ∆EF=∆Ep−∆EL.
Bemerkung:
Die für die Reaktion der Enzyme erforderliche Zeit kann sich von
einer Charge zur anderen ändern; sie wird hier nur als Beispiel ange-
geben. Es wird empfohlen, diese für jede Charge zu bestimmen.
5.3. Angabe der Ergebnisse
5.3.1. Berechnung
Die allgemeine Formel für die Berechnung der Konzentration lautet:
C¼V/C1MG
ε/C1d/C1v/C11000∆Eg =lðÞ
V = Testvolumen (ml)
v = Probevolumen (ml)
MG = Molekulargewicht der zu bestimmenden Substanzd = Schichtdicke der Küvette (cm)ε= Extinktionskoeffizient von NADPH bei 340 nm = 6,3
(mmol
−1·l·c m−1)
V = 2,92 ml für die Bestimmung der GlucoseV = 2,94 ml für die Bestimmung der Fructose
v = 0,20 ml
MG = 180d= 1 .
Man erhält:für Glucose: Cg/l = 0,417 · ∆E
G
für Fructose: Cg/l = 0,420 · ∆EF.
Ist bei der Vorbereitung der Probe eine Verdünnung vorgenommen
worden, so wird das Ergebnis mit dem entsprechenden Verdün-
nungsfaktor F multipliziert.
Anmerkung:
Wurde die Messung bei den Wellenlängen 334 oder 365 nm, durch-
geführt, so ergibt sich für die
— Messung bei 334 nm ε= 6,2 (mmol−1·l·c m−1)
für Glucose: Cg/l = 0,425 · ∆EG
für Fructose: Cg/l = 0,428 · ∆EF;
— Messung bei 365 nm ε= 3,4 (mmol−1·l·c m−1)
für Glucose: Cg/l = 0,773 · ∆EG
für Fructose: Cg/l = 0,778 · ∆EF.
5.3.2. Wiederholbarkeit (r)
r = 0,056 xi.
5.3.3. Vergleichbarkeit (R)
R = 0,12 + 0,076 xi
xi= Glucose- bzw. Fructosegehalt in g/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 66
▼B
8.NACHWEIS DER ANREICHERUNG VON TRAUBENMOST,
TRAUBENMOSTKONZENTRAT, REKTIFIZIERTEM TRAUBENMOST-
KONZENTRAT UND WEIN DURCH KERNRESONANZMAGNETISCHE
MESSUNG DES DEUTERIUMGEHALTES
(RMN — FINS / SNIF — NMR)
1. DEFINITION
Die im Zucker und im Wasser des Traubenmostes enthaltenen
Deuteriumatome sind nach der Gärung in den Molekülen I, II, III
und IV des Weines wie folgt verteilt:
CH2DC H2OH CH3CHD OH
II I
CH3CH2OD HOD
III IV
Die Zugabe von Zucker (Trockenzuckerung) vor der Gärung des
Mostes wirkt sich auf die Verteilung der Deuteriumatome aus.
Im Vergleich zu den Werten der entsprechenden Parameter eines
natürlichen Weines aus dem gleichen Weinanbaugebiet hat die Trok-
kenzuckerung folgende Änderungen zur Folge:
Parameter
Wein(D/H)I(D/H)II(D/H)WQR
— ohne Anreicherung
— angereichertmit
— Rübenzucker
— Rohrzucker
/C148/C147/C147/C147/C149/C147/C147/C147/C150
— Maiszucker
(D/H)I: Isotopenverhältnis im Molekül I
(D/H)II: Isotopenverhältnis im Molekül II
(D/H)WQ: Isotopenverhältnis im Wasser des Weines.
R = 2(D/H)II/(D/H)Igibt die relative Verteilung des Deuteriums in
den Molekülen I und II wieder: R wird direkt gemäß den
Signalintensitäten h gemessen und beträgt R = 3hII/hI.
(D/H)Ikennzeichnet vor allem die Pflanzenart, die den Zucker
synthetisiert hat und in geringem Maße die geographische Lage des
Anbauortes (Art des bei der Photosynthese assimilierten Wassers).
(D/H)IIgibt Aufschluß über die klimatischen Verhältnisse des
Anbauortes der Trauben (Art des Regenwassers und meteorologische
Bedingungen) und in geringem Maße über die anfängliche Zucker-
konzentration des Mostes.
(D/H)WQbeschreibt die klimatischen Verhältnisse des Anbauortes
und den Zuckergehalt des Ausgangsmostes.
2. PRINZIP
Die Bestimmung der oben definierten Parameter R, (D/H)Iund (D/
H)IIerfolgt durch NMR-Messung des Deuteriums an dem aus Wein
oder Produkten der Gärung von Most, Mostkonzentrat oder rektifi-
ziertem Mostkonzentrat unter bestimmten Bedingungen extrahierten
Ethanol; sie wird gegebenenfalls durch die Bestimmung des Isoto-
penverhältnisses des aus dem Wein extrahierten Wassers (D/H)WQ
und des Isotopenverhältnisses 13C/12Cim Ethanol ergänzt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 67
▼M5
▼B
3. VORBEREITUNG DER PROBE
3.1. Gewinn von Ethanol und Wasser aus dem Wein
Anmerkung:Jede andere Apparatur zur Gewinnung des Ethanols kann verwendet
werden, wenn 98—98,5 % des vorhandenen Weinalkohols gewonnen
werden und das Endprodukt 92—93 % (g/g) Alkohol (95 % Vol.)
enthält.
3.1.1. Gerätschaften und Reagenzien
— Apparatur zur Gewinnung von Ethanol (Abbildung 1), bestehend
aus:
— Pilzheizhaube mit Spannungsregler;
— Schliffkolben, Inhalt 1 Liter;
— Drehbandkolonne mit Teflon-Spirale;— 125 ml Erlenmeyerkolben mit Schliff;
— 125 und 60 ml Flaschen mit Kunststoffstopfen.
— Karl-Fischer-Reagenzien zur Bestimmung des Wassers (zum
Beispiel Merck 9241 und 9243).
3.1.2. Durchführung der Bestimmung
3.1.2.1. Der Alkoholgehalt des Weines wird auf mindestens 0,05 % Vol.
genau bestimmt (t
v).
3.1.2.2. Gewinnung des Ethanols
500 ml gut gemischter Wein mit einem Alkoholgehalt von tvwerden
in den Kolben der Destillationsapparatur, die mit einem konstanten
Rückflußverhältnis von etwa 0,9 arbeitet, gegeben. Das Destillat
wird in einem zuvor gewogenen 125-ml-Schlifferlenmeyerkolben
aufgefangen. 40 bis 60 ml der im Temperaturbereich 78,0 bis
78,2 ºC siedenden Flüssigkeit werden aufgefangen. Übersteigt die
Temperatur 78,5 ºC, so wird die Entnahme 5 Minuten lang unterbro-
chen.
Nach Abkühlen auf 78 ºC wird wiederum Destillat entnommen, bis
die Temperatur erneut 78,5 ºC erreicht; dieser Vorgang wird wieder-
holt, bis die Temperatur nach Unterbrechung der Entnahme und bei
Betrieb im geschlossenen Kreislauf nicht mehr abnimmt. Die voll-
ständige Destillation dauert rund 5 Stunden. Auf diese Weise
können 98 bis 98,5 % des Gesamtalkoholgehaltes des Weines über-
destilliert werden. Man erhält so ein Destillat von 92 bis 93
Gewichtsprozent (95 % Vol.) Alkohol, ein Alkoholgehalt, auf den
sich die in Kapitel 4 beschriebenen Meßbedingungen beziehen.
Das so erhaltene Ethanol wird gewogen.60 ml der homogenen Destillationsrückstände werden in einem 60-
ml-Fläschchen aufbewahrt. Dies entspricht dem Wasser des Weines,
dessen Isotopenverhältnis eventuell bestimmt wird.
Anmerkung:
Steht ein Spektrometer mit einem Probenkopf von 10 mm zur Verfü-
gung (siehe Kapital 4), so ist die Entnahme einer homogenen Probe
von 300 ml Wein ausreichend.
3.1.2.3. Bestimmung des Al koholgehaltes des gewonnenen Etha-
noldestillates
An einer Probe von etwa 0,5 ml Ethanol mit genau bekannter Masse
p in g wird der Wassergehalt (p ′) nach dem Karl-Fischer-Verfahren
bestimmt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 68
▼B
Abbildung 1: Einrichtung für dieExtraktion von Ethanol
Die Massenprozente Ethanol werden nach folgender Formel
berechnet:
tD
m¼p/C0p0
p/C2100
3.2. Vergärung des Mostes, Mostkonzentrates und rektifizierten
Mostkonzentrates
3.2.1. Gerätschaften und Reagenzien
— Weinsäure;
— Bacto Yeast Nitrogen (Base ohne Aminosäuren) DIFCO;
— Trockenhefe (Saccharomyces cerevisae).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 69
▼B
Wenn das Isotopenverhältnis des Wassers aus dem Most bekannt ist,
so können die Hefen vor der Zugabe 15 Minuten lang in wenig
lauwarmem, nicht destilliertem Wasser, dessen Isotopenverhältnis
nahe bei dem des Wassers des Mostes liegt, reaktiviert werden (1 g/
50 ml).
Kennt man das Isotopenverhältnis des Wassers aus dem Most nicht,
so ist es vorteilhaft, die Hefen direkt zu verwenden. 1 g Trockenhefe
(etwa 1010Zellen) werden 1 Liter Most zugesetzt.
Gärbehälter, Inhalt 1,5 l, mit Gäraufsatz, um die Alkoholdämpfe zu
kondensieren. Ein Verlust an Alkohol während der Gärung ist unbe-
dingt zu vermeiden. Der vorhandene Zucker muß zu mehr als 98 %
vergoren werden.
3.2.2. Durchführung der Vergärung
3.2.2.1. Most
— Frischer Most
1 Liter Most, dessen Gehalt an vergärbaren Zuckern vorher
bestimmt wurde, wird in den Gärbehälter gegeben und mit 1 g
reaktivierter Trockenhefe versetzt. Der Gärbehälter wird mit
einem Gäraufsatz (Vergärung unter Luftabschluß) versehen. Die
Gärung wird bei etwa 20 ºC bis zur vollständigen Vergärung der
Zucker durchgeführt. Nach der Bestimmung des Alkoholgehaltes
und der Berechnung der Alkoholausbeute, wird der vergorene
Most zentrifugiert und zur Gewinnung des Ethanols destilliert.
— Mit Schwefeldioxid stummgemachter Most
Etwas mehr als 1 Liter Most (1,2 l) werden entschwefelt, indem
durch den auf einem Wasserbad von 70—80 ºC unter Rückfluß
erhitzten Most ein Stickstoffstrom geleitet wird, bis der Gehalt
an Schwefeldioxid weniger als 200 mg/l beträgt. Eine Konzen-
trierung des Mostes durch Verdampfen von Wasser ist
unbedingt zu vermeiden (Verwendung eines geeigneten Kühlsy-
stems).
Man gibt 1 Liter des entschwefelten Mostes in den Gärbehälter
und verfährt weiter wie unter „frischer Most“ beschrieben.
Anmerkung:
Ist zur Stummschwefelung Kaliummetabisulfit verwendet
worden, so müssen vor der Entschwefelung 0,25 ml konzentrierte
Schwefelsäure ( ρ20= 1,84 g/ml) je Gramm Metabisulfit pro Liter
Most zugegeben werden.
3.2.2.2. Most konzentrat
V ml Mostkonzentrat mit einem Zuckergehalt von etwa 170 g
werden in den Gärbehälter gegeben und das Volumen mit (1 000 −
V ml) Wasser, dessen Isotopenverhältnis gleich dem des authenti-
schen Vergleichsmostes ist, auf 1 Liter ergänzt. Man fügt, wie unter
3.2.1 beschrieben, Trockenhefe und zusätzlich 3 g Bacto Yeast
Nitrogen (ohne Aminosäuren) DIFCO zu, mischt und verfährt weiterwie oben beschrieben.
3.2.2.3. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat
Man verfährt wie unter 3.2.2.2 beschrieben, wobei zu 1 Liter mit
1 000 − V ml Wasser, in dem zuvor 3 g Weinsäure gelöst wurden,
ergänzt wird. Das Isotopenverhältnis des verwendeten Wassers muß
gleich dem des Wassers des authentischen Vergleichsmostes sein.
Anmerkung:Je 50 ml Most, entschwefelter Most, Mostkonzentrat oder rektifi-
ziertes Traubenmostkonzentrat werden zur evtl. Gewinnung des
Wassers und zur Bestimmung seines Isotopenverhältnisses (D/H)
WQ
aufbewahrt. Das Wasser kann aus dem Most durch azeotrope Destil-
lation mit Toluol sehr leicht extrahiert werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 70
▼B
3.3. Vorbereitung der Alkoholprobe für die NMR-Messung
3.3.1. Reagenzien
N,N-Tetramethylharnstoff (TMU); man verwendet eine TMU-Refe-
renzprobe mit bekanntem und kontrolliertem Isotopenverhältnis (D/
H). Diese Probe wird geliefert von der:
Generaldirektion Wissenschaft, Forschung und Entwicklung der
Kommission der EG,Referenzbüro der Gemeinschaft (BCR),
Ruedela Loi 200,
B — 1049 Brüssel.
3.3.2. Durchführung der Bestimmung
— NMR-Probenkopf mit 15 mm Durchmesser:
In ein zuvor gewogenes Fläschchen werden 7 ml des nach 3.1.2
erhaltenen Alkohols gegeben und auf 0,1 mg genau gewogen
(m
A). Nach Zugabe von 3 ml des internen Standards (TMU)
wird wieder auf 0,1 mg genau gewogen (mStund gut durchge-
mischt.
— NMR-Probenkopf mit 10 mm Durchmesser:
Es genügen 3,2 ml Alkohol und 1,3 ml TMU.Entsprechend dem Spektrometertyp und des verwendeten
Probenkopfes (siehe Kapitel 4) wird eine ausreichende Menge
an Hexafluorbenzol (C
6F6) zur Stabilisierung der Feldfrequenz
(Locksubstanz) hinzugefügt.
SpektrometerProbenkopf
10 mm 15 mm
7,05 T 150 µl 200 µl
9 , 4T 3 5µ l 5 0µ l
3.4. Vorbereitung der Wasserprobe für die NMR-Messung im
Hinblick auf eine eventuelle Bestimmung des Isotopenver-
hältnisses.
3.4.1. Reagenzien
N,N-Tetramethylharnstoff (TMU): Siehe 3.3.1.
3.4.2. Durchführung der Bestimmung
In ein zuvor gewogenes Fläschchen werden 3 ml des nach 3.1.2 bzw.
3.2 (Anmerkung) erhaltenen Wassers gegeben und auf 0,1 mg genau
gewogen (m ′E). Nach Zugabe von 4 ml des internen Standards
(TMU) wird wiederum auf 0,1 mg genau gewogen und gut durch-
mischt (m ′st).
Anmerkung:
Wenn das Laboratorium über ein Massenspektrometer zur Isotopen-
analyse verfügt, so kann zur Entlastung des NMR-Gerätes die
Messung auch mit diesem Gerät durchgeführt werden, denn es ist
notwendig, für jede Serie der zu untersuchenden Weine das
Verhältnis TIV(5.2) zu bestimmen.
4. AUFNAHME DES2H-NMR-SPEKTRUMS VON ALKOHOL UND
WASSER
Bestimmung der Isotopenverhältnisse.
4.1. Gerätschaften
— Kernresonanzspektrometer, ausgerüstet mit einem selektiven
Deuterium-Probenkopf, der bei gegebener Feldstärke optimal
auf die Resonanzfrequenz des Deuteriumisotops abstimmbar ist
(z. B. für Bo= 7,05 T beträgt Vo= 46,05 MHzund für Bo= 9,4 T
beträgt Vo= 61,4 MHz), sowie einem Protonenentkopplungskanal
und einem 19-F-Locksystem.
Die Auflösung, ausgedrückt durch die Halbwertsbreite des
Methyl-, Methylensignals des Alkohols und des Methylsignals
von TMU (Tetramethylharnstoff) wird wie folgt bestimmt: Expo-1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 71
▼B
nentielle Multiplikation mit LB = 0 (Abbildung 2b; d. h. ohne
Window-Funktion) und Ausmessen der Linienbreite auf halber
Höhe des Signals von Tetramethylharnstoff. Die Halbwertsbreite
sollte kleiner als 0,5 Hz sein. Die Empfindlichkeit sollte
mindestens ein Signal-Rauschverhältnis von 150: 1 erreichen,
gemessen am Methylsignal von Ethanol bei 95 % Vol. (93,5 %
g/g) und berechnet mit einer exponentiellen Multiplikation von
LB = 2 (Abbildung 2a).
Unter diesen Bedingungen sollte die Standardabweichung der
Messung kleiner als 0,35 % sein, bezogen auf die Höhe der
Signale bei 10 Wiederholungen und 97,5 %iger statistischer
Sicherheit.
— Automatischer Probenwechsler (eventuell).— Zugehöriges Auswerteprogramm.
— 15 mm oder 10 mm Probenröhrchen je nach Ausrüstung des
Spektrometers.
4.2. Einstellung und Überprüfung des NMR-Spektrometers
4.2.1. Einstellung
Die Homogenität und Empfindlichkeit werden wie üblich gemäß den
Anweisungen des Herstellers eingestellt.
4.2.2. Überprüfung der Einstellung
Man verwendet Referenzalkohole mit unterschiedlichen, aber genau
bestimmten Isotopengehalten, bezeichnet mit den Buchstaben C
(Alkohol aus Rohrzucker oder Maiszukker), V (Weinalkohol) und B
(Alkohol aus Zuckerrüben). Diese Proben werden von der unter
Ziffer 3.3.1 angegebenen Adresse geliefert.
Man bestimmt die Isotopenwerte dieser Alkohole wie unter 4.3
beschrieben und bezeichnet diese als C
mes,Vmesund Bmes(siehe 5.3).
Man vergleicht diese Werte mit den entsprechenden Referenzwerten
Cst,Vstund Bst(siehe 5.3).
Abbildung 2a
2H-NMR-Spektrum von Ethanol aus Wein mit einem internen
Standard (TMU: N,N Tetramethylharnstoff)1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 72
▼B
Abbildung 2b
2H-Spektrum von Ethanol, gleiche Bedingungen wie in Abbildung
2a, aber ohne exponentielle Multiplikation (LB = 0)
Die Wiederholstandardabweichung aus 10 Messungen für jedes
Spektrum muß für den R-Wert weniger als 0,01 und für die
Verhältnisse (D/H)Iund (D/H)IIweniger als 0,3 ppm betragen.
Die Mittelwerte der so bestimmten Isotopenwerte (R, (D/H)I, (D/H)II)
müssen innerhalb der Wiederholbarkeit, die vom Referenzbüro der
Gemeinschaft für diese Parameter für die 3 Referenzalkohole ange-
geben wird, liegen. Wenn nicht, so muß die Einstellung wiederholt
werden.
4.3. Aufnahme der NMR-Spektren
Die nach 3.3 aufbereitete Alkoholprobe (oder nach 3.4 aufbereitete
Wasserprobe) wird in ein 15- oder 10-mm-Proberöhrchen einge-
bracht und in das Gerät eingesetzt.
Die Bedingungen zur Aufnahme der Spektren sind folgende:
— Die Temperatur des Gerätes (z. B. 302 K) muß konstant gehalten
werden.
— Aufnahmezeit (Acquisition time) (ACS) mindestens 6,8 s bei
einer Spektralbreite (Sween-width) (SW) von 1 200 Hz und einer
Größe (Size) (SI) von 16 K, d. h. ungefähr 20 ppm bei 61,4 MHz
oder 27 ppm bei 46,1 MHz.
— Pulswinkel: 90º.
— Verzögerung der Aufnahme: dieser Wert muß etwa in der
gleichen Größenordnung liegen wie die Zeit des Probedurchlaufs
(dwell time).
— Quadratur-Detektion: Offset 01 (Einstrahlfrequenz zur Anregung
der Deuteriumspinsysteme) zwischen die Referenzsignale OD
und CHD für den Alkohol und zwischen die Referenzsignale
HOD und TMU für das Wasser einstellen.
— Offset 02 (Einstrahlfrequenz des Entkopplers) anhand eines
Protonenspektrums der aktuellen Probe bestimmen. Eine gute
Entkopplung ist erreicht, wenn sich 02 in der Mitte des
Frequenzabstandes zwischen den CH3- und CH2-Gruppen
befindet. Es sollte das Breitbandentkopplungsverfahren ange-
wendet werden.
Für jedes Spektrum ist eine genügende Anzahl Akkumulationen NS
(number of scans) durchzuführen, um das unter 4.1 angegebene
Signal-Rauschverhältnis zu erhalten. Man wiederholt dieses für jede
Probe 10mal. Die NS-Werte hängen vom verwendeten Spektrome-
tertyp und Probenkopf ab (siehe 4). Es empfiehlt sich beispielsweise:1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 73
▼B
SpektrometerProbenkopf
10 mm 15 mm
7,05 T NS = 304 NS = 200
9,04 T NS = 200 NS = 128
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
5.1. Ethanol
Für jedes dieser zehn Spektren ist folgendes zu bestimmen (siehe
NMR-Spektrum des Ethanols, Abbildung 2a):
—R¼3hII
hI¼3/C1H¨ohede s Signals II CH 3CHD OH ðÞ
H¨ohede s Signals I CH 2DC H 2OH ðÞ
—D=HðÞI¼1;5866 /C1T1/C1mst
mA/C1D=HðÞst
tD
m
—D=HðÞII¼2;3799 /C1TII/C1mst
mA/C1D=HðÞst
tD
m
mit
—TI¼H¨ohede s Signals I CH 2DC H 2OH ðÞ
H¨ohe des Signals des internen Standards TMU ðÞ
—TII¼H¨ohede s Signals II CH 3CHD OH ðÞ
H¨ohe des Signals des internen Standards TMU ðÞ
—C H3CHD OH mStund mAsiehe 3.3.2
—tmDsiehe 3.1.2.3
— (D/H)St= Isotopenverhältnis des internen Standards (TMU), laut
Angabe auf der Flasche, die vom Referenzbüro der Gemeinschaft
(BCR) bezogen wurde.
Anstelle der Signalflächen kann man durchaus die Höhen der
Signale zur Berechnung heranziehen, vorausgesetzt die Breiten in
halber Höhe sind gleich (Abb. 2 b).
5.2. Wasser
Wird das Isotopenverhältnis des Wassers mittels NMR aus dem
Gemisch Wasser-TMU ermittelt, so wird folgende Gleichung ange-
wendet:
—D=HðÞQ
W¼0;9306 /C1TIV/C1m0
st
m0E/C1D=HðÞst
mit
—TIV¼Fl¨achede s Signals HOD ðÞdes aus dem Wein extrahierten Wassers
Fl¨ache des Signals des internen Standards TMU ðÞ
—m′stund m′Esiehe 3.4.2
— (D/H)St= Isotopenverhältnis des internen Standards (TMU) laut
Angabe auf der Flasche, die vom Referenzbüro der Gemeinschaft
(BCR) gezogen wurde.
5.3. Für jeden Isotopenparameter wird der Mittelwert der 10 Bestim-
mungen und die Standardabweichung berechnet.
Mit einer mit dem Rechner des Spektrometers kompatiblen Software
(z. B. SNIF-NMR) können diese Werte „on line“ berechnet werden.
Anmerkung:
Wenn nach Einstellen des Spektrometers systematische Abweich-
ungen zwischen den nach 4.2.2 erhaltenen Mittelwerten für die
Isotopen-Parameter der Referenzalkohole und den vom Referenzbüro
der Gemeinschaft angegebenen Werten auftreten, so kann folgende
Korrektur angewendet werden, um für eine Probe X den wahren
Wert zu erhalten.
Die Interpolation wird mit den Werten der Referenzproben, die die
Probe X einschließen, durchgeführt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 74
▼B
Wenn (D/H)iX
mesder gemessene Wert und (D/H)iX
corrder korrigierte
Wert ist, so erhält man:
(D/H)iX
corr= (D/H)iB
st+α[ (D/H)iX
mes− (D/H)iB
mes]
mitα¼D=HðÞVst
i/C0D=HðÞBst
i
D=HðÞVmes
i/C0D=HðÞBmes
i
Beispiel:
Referenzprobe, geliefert und gemessen vom Referenzbüro der Euro-
päischen Gemeinschaften:
(D/H)IV
St= 102,0 ppm (D/H)IB
St= 91,95 ppm.
Referenzprobe, gemessen im Laboratorium:
(D/H)IV
mes= 102,8 ppm (D/H)IB
mes= 93,0 ppm.
Verdächtige Probe, nicht korrigiert:(D/H)
IX
mes= 100,2 ppm.
Man berechnet also α= 1,0255 und (D/H)IX
corr= 99,3 ppm.
6. INTERPRETATION DER ERGEBNISSE
Man vergleicht den für das Verhältnis R des verdächtigen Weines
erhaltenen Wert RXmit den für die Vergleichsweine erhaltenen
Werten RT. Weicht RXum mehr als das Doppelte vom Vertrauensbe-
reich des von dem für die Vergleichsweine erhaltenen Mittelwertes
RTab, besteht Verdacht auf Verfälschung.
6.1. Anreicherung mit Rüben-, Rohr- oder Maiszucker
6.1.1. Wein
RXgrößer als RT: Verdacht auf Zusatz von Rübenzucker.
RXkleiner als RT: Verdacht auf Zusatz von Rohr- oder Maiszucker.
(D/H)IIXund (D/H)WQXsind erhöht.
Man prüft (D/H)IXbei Verdacht auf:
— Anreicherung mit Rübenzucker:
(D/H)IXder verdächtigen Probe ist kleiner als (D/H)IT, Mittelwert
der Vergleichsproben. Die Differenz ist größer als eine Standar-
dabweichung.
— Anreicherung mit Rohrzucker oder Maiszucker:
(D/H)IXist größer als (D/H)IT. Die Differenz ist größer als eine
Standardabweichung.
— Berechnung der Anreicherung, E, ausgedrückt in % Vol.
Ethanol:
— Anreicherung mit Rübenzucker:
E % Vol :¼tVD=HðÞT
I/C0D=HðÞX
I
D=HðÞT
I/C0D=HðÞB
I
(D/H)IB= Isotopenverhältnis für die Methylgruppe des
Alkohols aus Rübenzukker: (D/H)IB= 92,5 (1).
tV= Alkoholgehalt (% Vol.) des zu untersuchenden
Weines (X).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 75
(1) Diese Werte werden von der zu erwartenden Datenbank der Gemeinschaft angegeben.
▼B
— Anreicherung mit Rohr- oder Maiszucker:
E % Vol :¼tVD=HðÞX
I/C0D=HðÞT
I
D=HðÞC
I/C0D=HðÞT
I
(D/H)IC= Isotopenverhältnis für die Methylgruppe des
Alkohols aus Rohr- oder Maiszucker: (D/H)IC
= 110,5 (1).
tV= Alkoholgehalt (% Vol.) des zu untersuchenden
Weines (X).
6.1.2. Most, Mostkonzentrat, rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK)
Die Werte der Isotopenparameter des Alkohols, der nach 3.1 und 3.2
aus dem Most, Mostkonzentrat oder rektifizierten Traubenmostkon-
zentrat erhalten worden ist, werden nach 6.1.1 „Interpretation der
Ergebnisse“ geprüft und den Werten des Alkohols gegenübergestellt,
der aus den entsprechenden authentischen Mosten erhalten wurde.
Die Anreicherung E % Vol. bezieht sich auf das vergorene
Erzeugnis. Unter Berücksichtigung einer evtl. vor der Vergärung
vorgenommenen Verdünnung (Mostkonzentrat und RTK) und der
Tatsache, daß 16,83 g Zucker 1 % Vol. Alkohol ergeben, berechnet
man die Massenkonzentration an Zucker, die 1 l Most, Mostkon-
zentrat oder RTK zugesetzt wurde.
6.2. Anreicherung mit einer Mischung aus Rübenzucker mit Rohr-
oder Maiszucker
Die Isotopenverhältnisse (D/H)Iund R sind weniger verändert, als
wenn nur mit einer Zuckerart angereichert wird.
(D/H)IIist ebenso wie (D/H)WQerhöht.
Ein solcher Zusatz kann durch die massenspektrometrische Bestim-
mung des Verhältnisses13C/12C im Alkohol bestätigt werden; in
diesem Fall ist das Verhältnis erhöht.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 76
(1) Diese Werte werden von der zu erwartenden Datenbank der Gemeinschaft angegeben.
▼B
9.ASCHE
1. DEFINITION
Als Asche bezeichnet man die Gesamtheit der Stoffe, die durch
Veraschung des Abdampfrückstandes des Weines erhalten werden.
Die Veraschung wird in der Weise durchgeführt, daß die Gesamtheit
der Kationen (außer Ammonium) in der Carbonatform oder anderen
wasserfreien Mineralsalzen vorliegt.
2. PRINZIP DER METHODE
Die Veraschung des Weinextraktes wird bis zur vollständigen
Verbrennung des Kohlenstoffs bei 500º bis 550 ºC durchgeführt.
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Wasserbad 100 ºC.
3.2. Analysenwaage, auf 0,1 mg genau.
3.3. Heizplatte oder Infrarotstrahler.3.4. Muffelofen mit Temperaturregelung.
3.5. Exsikkator.
3.6. Platinschale, 70 mm Durchmesser und 25 mm Höhe mit flachem
Boden.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
20 ml Wein werden in eine gewogene Platinschale (P
og) gegeben
und auf dem Wasserbad bei 100 ºC zur Trockne eingeengt. Der
Rückstand wird auf einer Heizplatte bei 200 ºC oder unter dem
Infrarotstrahler abgeraucht. Gibt der Rückstand keinen Rauch mehr
ab, so wird die Schale in den Muffelofen (Temperatur 525 ºC
± 25 ºC) gestellt. Nach 15 Minuten Veraschung wird die Schale aus
dem Muffelofen genommen und 5 ml destilliertes Wasser hinzuge-
fügt. Anschließend wird auf dem Wasserbad oder unter dem
Infrarotstrahler eingeengt und erneut bei 525 ºC etwa 10 Minuten
verascht.
Ist die Veraschung nicht vollständig, so wiederholt man den oben
beschriebenen Vorgang (Aufnehmen mit Wasser, Einengen, Vera-
schen).
Für zuckerreiche Weine ist der Zusatz von wenigen Tropfen reinen
Pflanzenöls vor der ersten Veraschung empfehlenswert, um das
Überschäumen des Inhalts zu vermeiden.
Nach dem Abkühlen im Exsikkator wird die Schale gewogen (P1g).
Die dem eingesetzten Probevolumen (20 ml) entsprechenden Gramm
Asche betragen p = (P1−Po)g .
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
5.1. Berechnung
Der Aschegehalt P, ausgedrückt in Gramm je Liter mit 2 Dezimal-
stellen beträgt:
P = 50.p.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 77
▼B
10.ALKALITÄT DER ASCHE
1. DEFINITION
Als Alkalität der Asche bezeichnet man die Summe der Kationen
(außer Ammonium), die an die organischen Säuren des Weines
gebunden sind.
2. PRINZIP DER METHODE
Die Asche wird in einer gemessenen, überschüssigen Menge Säure
in der Wärme gelöst und der Überschuß an Säure in Gegenwart
von Methylorange zurücktitriert.
3. REAGENZIEN UND GERÄTSCHAFTEN
3.1. 0,05 M Schwefelsäure (H2SO4).
3.2. 0,1 M Natronlauge(NaOH).3.3. 0,1 %ige (g/v) wäßrige Methylorangelösung.
3.4. Wasserbad 100 ºC.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
In die Platinschale mit der Asche von 20 ml Wein werden 10 ml
0,05 M Schwefelsäurelösung (3.1) gegeben; die Schale wird dann
15 Minuten lang auf dem Wasserbad von 100 ºC erhitzt und der
Rückstand zur Beschleunigung der Auflösung mit einem Glasstab
umgerührt. Anschließend fügt man 2 Tropfen Methylorangelösung
hinzu und titriert den Schwefelsäureüberschuß mit 0,1 M Natron-
lauge (3.2) bis zum Farbumschlag des Indikators nach gelb.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
Berechnung
Die Alkalität der Asche, ausgedrückt in Milliäquivalent je Liter mit
1 Dezimale, beträgt:
A = 5 (10−n)n = ml 0,1 M Natronlauge.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 78
▼B
11.CHLORIDE
1. PRINZIP DER METHODE
Direkte Bestimmung der Chloride im Wein durch potentiometrische
Titration mit einer Ag/AgCl-Elektrode.
2. GERÄTE
2.1. pH-Millivoltmeter mit mindestens 2 mV-Einstellung.
2.2. Magnetrührer.2.3. Ag/AgCl-Elektrode mit gesättigter Kaliumnitratlösung als Elektro-
denflüssigkeit.
2.4. Feinbürette mit 0,01 ml Einstellung.2.5. Stoppuhr.
3. REAGENZIEN
3.1. Chlorid-Standardlösung: 2,1027 g Kaliumchlorid (max. 0,005 % Br)
z. A. (K Cl), das vor Gebrauch einige Tage im Exsikkator getrocknet
wurde, werden mit bidestilliertem Wasser zu 1 Liter gelöst. 1 ml
dieser Lösung enthält 1 mg Cl
−.
3.2. Silbernitrat-Maßlösung; 4,7912 g Silbernitrat z. A. (AgNO3) werden
in einer 10%igen ethanolischen Lösung zu 1 Liter gelöst. 1 ml dieser
Lösung entspricht 1 mg Cl−.
3.3. Salpetersäure mind. 65 % ( ρ20= 1,40 g/ml).
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG:
4.1. 5,0 ml Chlorid-Standardlösung werden in ein 150-ml-Becherglas
pipettiert, mit destilliertem Wasser auf etwa 100 ml ergänzt und
1,0 ml Salpetersäure mind. 65 % hinzugefügt. Nach Eintauchen der
Elektrode bis über das Diaphragma wird unter langsamem Rühren
(Magnetrührer) mit der Silbernitrat-Maßlösung aus einer Feinbürette
titriert. Zunächst wird in Schritten von 1,00 ml bis zu einem
Verbrauch von 4,00 ml titriert und der jeweils angezeigte mV-Wert
abgelesen. Dann wird in Teilschritten von 0,20 ml weitertitriert, bis
nochmals 2,00 ml zugegeben sind. Schließlich wird wieder in 1,00 ml
Schritten titriert, bis insgesamt 10,00 ml zugegeben sind. Nach
jedem Zusatz wird etwa 30 Sekunden bis zum Ablesen des mV-
Wertes gewartet. Die erhaltenen Werte trägt man auf Millimeterpa-
pier gegen die zugehörigen Milliliter Maßlösung auf und bestimmt
das Umschlagspotential aus dem Wendepunkt der sich ergebenden
Kurve.
4.2. 5 ml Chlorid-Standardlösung werden in ein 150 ml-Becherglas pipet-
tiert und 95 ml destilliertes Wasser sowie 1,0 ml Salpetersäure mind.
65 % zugefügt. Nach Eintauchen der Elektrode titriert man unter
Rühren bis zu dem vorher bestimmten Äquivalenzpotential. Diese
Bestimmung wird solange wiederholt, bis eine gute Übereinstim-
mung der Ergebnisse erzielt wird. Die Festlegung des
Äquivalenzpotentials muß vor jeder Bestimmungsserie erneut durch-
geführt werden.
4.3. 50 ml der zu untersuchenden Flüssigkeit werden in ein 150 ml-
Becherglas pipettiert. Man fügt 50 ml destilliertes Wasser und
1,0 ml Salpetersäure mind. 65 % hinzu und titriert wie unter 4.2
beschrieben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 79
▼B
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
5.1. Berechnung
Wurden n ml Silbernitrat-Maßlösung verbraucht, so errechnet sich
der Chloridgehalt der untersuchten Flüssigkeit nach der Formel:
20 n = Milligramm Cl/Liter
0,5633 n = Milliäquivalente/Liter32,9 n = Milligramm Natriumchlorid/Liter.
5.2. Wiederholbarkeit
r = 1,2 mg/l Cl
r = 0,03 Milliäquivalente/lr = 2,0 mg NaCl/l.
5.3. Vergleichbarkeit
R = 4,1 mg/l Cl
R = 0,12 Milliäquivalente/l
R = 6,8 mg NaCl/l.
6. Anmerkung:
Für besonders genaue Bestimmungen kann die vollständige Titrati-
onskurve durch Titration der untersuchten Flüssigkeit mit
Silbernitrat-Maßlösung aufgenommen werden und aus dem Äquiva-
lenzpunkt der Endpunkt der Titration zeichnerisch, oder genauer
rechnerisch, ermittelt werden.
a) 50 ml der zu untersuchenden Flüssigkeit werden in einem 150 ml
Becherglas mit 50 ml destilliertem Wasser versetzt und 1 ml
Salpetersäure (65%ig) zugefügt. Man titriert mit der Silbernitrat-
Standardlösung durch Zugabe von jeweils 0,5 ml und Messung
des entsprechenden Potentials in Millivolt. Aus dieser ersten
Titration wird das benötigte Titrationsvolumen annähernd ermit-
telt.
b) Man wiederholt die Bestimmung unter den gleichen Bedin-
gungen. Man titriert zunächst in Teilschritten von 0,5 ml und
reduziert diese 1,5 bis 2 ml vor dem zu erwartenden Endpunktauf 0,2 ml; danach setzt man weiter 0,2 ml zu und erhöht
wiederum auf 0,5 ml.
Zur Berechnung des Titrationsendpunktes dient die folgende Formel:
V¼V
0þ∆Vi∆∆E1
∆∆E1þ∆∆E2
Es bedeuten:
V = Volumen Maßlösung am Äquivalenzpunkt
V′= Volumen Maßlösung vor dem Potentialsprung
∆Vi= Konstantes Volumen der zugefügten Maßlösung, z. B.
0,2 ml
∆∆E1= Zweite Potentialdifferenz vor dem größten Potential-
sprung
∆∆E2= Zweite Potentialdifferenz nach dem größten Potential-
sprung.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 80
▼B
Beispiel:
Volumen der AgNO3-
MaßlösungPotentiale in
mVDifferenz ESekundär-
Differenz E
0 204
4
0,2 208 0
4
0,4 212 2
6
0,6 218 0
6
0,8 224 0
6
1,0 230 2
8
1,2 238 4
12
1,4 250 10
22
1,6 272 22
44
1,8 316 10
34
2,0 350 8
26
2,2 376 6
20
2,4 396
In diesem Beispiel liegt der Titrationsendpunkt zwischen 1,6 und
1,8 ml, denn hier tritt der größte Potentialsprung auf ( ∆E= 44 mV).
Das bis zu diesem Titrationsendpunkt verbrauchte Volumen an
Silbernitrat beträgt:
V¼1;6þ0;222
22þ10¼1;74 ml1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 81
▼B
12.SULFATE
1. PRINZIP DER METHODEN1.1. Referenzmethode:
Fällung als Bariumsulfat, das gravimetrisch gestimmt wird. Das
unter den gleichen Bedingungen gefällte Bariumphosphat wird durch
Waschen des Niederschlags mit Salzsäure entfernt.
Im Fall von Mosten und Weinen, die größere Mengen an schwefliger
Säure enthalten, wird diese durch vorheriges Erhitzen unter Luftab-
schluß entfernt.
1.2. Schnellmethode:
Eingruppierung der Weine in verschiedene Kategorien, nach der
sogenannten Grenzwertmethode, deren Prinzip in der Fällung des
Sulfats als Bariumsulfat mit einer Bariumchloridlösung bekannten
Gehaltes beruht.
2. REFERENZMETHODE2.1. Reagenzien.
2.1.1. Salzsäure2 M.2.1.2. Bariumchloridlösung: 200 g BaCl
2×2 H2O werden mit Wasser zu 1
Liter gelöst.
2.2. Durchführung der Bestimmung.
2.2.1. 40 ml der zu untersuchenden Flüssigkeit werden in einem 50-ml-
Zentrifugenglas mit 2 ml Salzsäure (2.1.1) und 2 ml Bariumchlo-
ridlösung (2.1.2) versetzt, mit einem Glasstab umgerührt, und der
Glasstab wird abgespült. Man läßt 5 Minuten stehen und zentrifug-
iert weitere 5 Minuten. Die überstehende Flüssigkeit wird vorsichtig
in ein Becherglas dekantiert. Nun wäscht man den Bariumsulfatnie-
derschlag in dem Zentrifugenglas wie folgt aus: Man fügt 10 ml
Salzsäure 2 M (2.1.1) hinzu, rührt den Niederschlag auf und zentri-
fugiert 5 Minuten. Die überstehende Flüssigkeit wird vorsichtigt
entfernt. Man wiederholt das Auswaschen 2 mal unter den gleichen
Bedingungen mit jeweils 15 ml destilliertem Wasser.
Der Niederschlag wird nun mit destilliertem Wasser aus dem Zentri-
fugenglas quantitativ in eine gewogene Platinschale gebracht und auf
dem Wasserbad zur Trockne eingedampft. Der getrocknete Nieder-
schlag wird durch mehrmaliges kurzes Glühen über offener Flamme
weiß geglüht, im Exsikkator abgekühlt und gewogen.
Menge des gewogenen Bariumsulfats: m mg (Bariumsulfat).
2.2.2. Im Fall von Mosten und Weinen mit höheren Gehalten an SO2.
In einen 500 ml-Erlenmeyerkolben, der mit einem Tropfhahn und
einem Steigrohr verbunden ist, gibt man 25 ml destilliertes Wasser,
1 ml konzentrierte Salzsäure ( ρ20= 1,15 — 1,18 g/ml) und erhitzt
zum Sieden, um die Luft zu entfernen. Sodann läßt man durch den
Tropftrichter 100 ml der Probe zufließen, wobei darauf zu achten ist,
daß das Sieden nicht unterbrochen wird. Das Sieden wird solange
fortgesetzt, bis die Flüssigkeit auf etwa 75 ml reduziert ist. Nach
dem Abkühlen überführt man die Flüssigkeit quantitativ in ein
100 ml-Meßkölbchen und füllt mit Wasser zur Marke auf. Die
Sulfatbestimmung in 40 ml Probelösung wird dann wie unter 2.2.1
beschrieben durchgeführt.
2.3. Angabe der Ergebnisse
2.3.1. Berechnungen
Der Sulfatgehalt in Milligramm pro Liter als Kaliumsulfat berechnet
beträgt:
18,67 × m.Der Sulfatgehalt des Mostes oder des Weines wird in Milligramm
pro Liter (mg/l) Kaliumsulfat ohne Dezimale angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 82
▼B
2.3.2. Wiederholbarkeit
bis 1 000 mg/l: r = 27 mg/l
ungefähr 1 500 mg/l: r = 41 mg/l.
2.3.3. Vergleichbarkeit
bis 1 000 mg/l: R = 51 mg/l
ungefähr 1 500 mg/l: R = 81 mg/l.
3. SCHNELLMETHODE3.1. Reagenzien
3.1.1. Bariumchlorid-Standardlösung:
2,804 g Bariumchlorid BaCl
2×2 H2O und 10 ml Salzsäure( ρ20= 1,15 — 1,18 g/ml) werden mit destilliertem Wasser zu 1 Liter
gelöst. 1 ml dieser Lösung fällt 2 Milligram Kaliumsulfat.
3.1.2. 10 %ige Schwefelsäure (g/v) ( ρ20= 1,84 g/ml).
3.2. Durchführung der Bestimmung
In 3 Reagenzgläser gibt man 10 ml Most oder Wein und fügt dann
dem 1. Glas 3,5 ml, dem 2. Glas 5 ml und dem 3. Glas 10 ml der
Bariumchloridlösung hinzu. Nach dem Schütteln erhitzt man zum
Sieden und läßt 1 bis 2 Stunden stehen. Die Flüssigkeit in jedem
der drei Reagenzgläser wird dekantiert, filtriert und in 2 Hälften
geteilt. Eine Hälfte wird mit einigen Tropfen verdünnter Schwe-
felsäure, die andere Hälfte mit einigen Tropfen
Bariumchloridlösung versetzt. Die Klarheit oder die entstandene
Trübung in den Gläsern wird nach folgender Tabelle ausgewertet:
Wein BaCl2Wein filtriert +
Verdünnte
SchwefelsäureBaCl2
1.Probe(ml) (ml) trübeklar
10 3,5(weniger als 0,7 g K2SO4/l)
klar trübe
(mehr als 0,7 g K2SO4/l)
2.Probe 10 5trübeklar
(weniger als 1 g K2SO4/l)
klar trübe
(mehr als 1 g K2SO4/l)
3.Probe 10 10trübeklar
(weniger als 2 g K2SO4/l)
klar trübe
(mehr als 2 g K2SO4/l)1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 83
▼B
13.GESAMTSÄURE
1. DEFINITION
Die Gesamtsäure stellt die Summe aller titrierbaren Säuren dar. Die
Titration erfolgt mit einer alkalischen Maßlösung bis zum pH 7,0.
Kohlensäure ist in der Gesamtsäure nicht einbegriffen.
2. PRINZIP DER METHODE
Potentiometrische Titration oder Titration in Anwesenheit von
Bromthylmolblau als Indikator gegen eine Farbvergleichslösung.
3. REAGENZIEN
3.1. Pufferlösung pH 7,0:
prim. Kaliumphosphat KH2PO4: 107,3 g
1 M Natronlauge(NaOH): 500 mlmit Wasser auf 1 000 ml auffüllen.
Handelsübliche Pufferlösungen können ebenfalls verwendet werden.
3.2. 0,1 M Natronlauge(NaOH).3.3. Bromthymolblaulösung 4 g/l.
Bromthymolblau (C
27H28Br2O5S)… ................. 4g
Neutraler Alkohol 96 % Vol. … .................... 200ml
Nach dem Auflösen werden hinzugefügt:
Kohlendioxidfreies Wasser …...................... 200 ml1 M Natronlaugebis zum Farbumschlag
nach blaugrün (pH 7) etwa … ...................... 7,5 ml
Wasser auf …..................................... 1 000 ml
4. GERÄTSCHAFTEN
4.1. Wasserstrahlpumpe.4.2. Saugflasche, 500 ml.
4.3. pH-Meter und Elektroden. Die Glaselektrode muß in destilliertem
Wasser, die Kalomelgesättigte Kaliumchlorid-Elektrode in einer
gesättigten Kaliumchloridlösung aufbewahrt werden. Meist wird
eine kombinierte Elektrode gebraucht; sie ist in destilliertem Wasser
aufzubewahren.
4.4. Bechergläser mit 50 ml Inhalt (bei Wein) und 100 ml Inhalt (bei
rektifiziertem Traubenmostkonzentrat).
5. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
5.1. Vorbereitung der Probe
5.1.1. Wein
Zur Entfernung des Kohlendioxids werden ungefähr 50 ml Wein in
eine 500 ml-Saugflasche gegeben und 1 — 2 Minuten an der
Wasserstrahlpumpe geschüttelt.
5.1.2. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK)
200 g RTK werden genau in einen 500 ml-Meßkolben eingewogen,
mit Wasser zur Marke aufgefüllt und gemischt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 84
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5.2. Potentiometrische Titration
5.2.1. Eichung des pH-Meters
Die Eichung erfolgt gemäß der Betriebsanleitung des verwendeten
pH-Meters mit der Pufferlösung pH 7,0 bei 20 ºC.
5.2.2. Messung
In ein Becherglas (4.4) werden 10 ml des nach 5.1 vorbereiteten
Weines bzw. 50 ml der RTK-Lösung gegeben, 10 ml destilliertes
Wasser hinzugefügt und mit 0,1 M Natronlauge (3.3) bis pH 7,0
(20 ºC) titriert. Der Zusatz der Natronlauge muß langsam erfolgen
und die Lösung ständig gerührt werden.
n = ml der verbrauchten 0,1 M Natronlauge.
5.3. Titration mit Indikator (Bromthylmolblau)
5.3.1. Vorversuch: Herstellung der Farbvergleichslösung
In ein Becherglas (4.4) werden 25 ml ausgekochtes destilliertes
Wasser, 1 ml Bromthylmolblaulösung (3.3) und 10 ml des nach 5.1
vorbereiteten Weines bzw. 50 ml der RTK-Lösung gegeben. Man
fügt 0,1 M Natronlauge(3.2) bis zum Farbumschlag nach blaugrün
und anschließend 5 ml der Pufferlösung pH 7,0 (3.1) hinzu.
5.3.2. Bestimmung
In ein Becherglas (4.4) werden 30 ml ausgekochtes destilliertes
Wasser, 1 ml der Bromthylmolblaulösung (3.3) und 10 ml des nach
5.1 vorbereiteten Weines bzw. 50 ml der RTK-Lösung gegeben.
Man titriert mit 0,1 M Natronlauge (3.2) auf den im Vorversuch
(5.3.1) ermittelten Farbton.
n = ml verbrauchte 0,1 M Natronlauge.
6. ANGABE DER ERGEBNISSE
6.1. Berechnung
6.1.1. Wein
Die Gesamtsäure, ausgedrückt als Milliäquivalent (mval) je Liter,
beträgt:
A = 10 n.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimalstelle.
Die Gesamtsäure, ausgedrückt als Gramm Weinsäure je Liter,
beträgt:
A′= 0,075 · A.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimalstelle.
6.1.2. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK)
— Die Gesamtsäure, ausgedrückt als Milliäquivalent (mval) je Kilo-
gramm RTK, beträgt: a = 5 · n.
— Die Gesamtsäure, ausgedrückt als Milliäquivalent (mval) je Kilo-
gramm Gesamtzukker, beträgt:
A¼500/C1n
P
P = Gesamtzuckergehalt in % (g/g).
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimalstelle.
6.2. Wiederholbarkeit (r): Für die Titration mit Indikator (5.3)
r = 0,9 mval/l
r = 0,07 g/l Weinsäure
für Weiß-, Rosé- und Rotweine.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 85
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6.3. Vergleichbarkeit (R): Für die Titration mit Indikator (5.3)
Für Weiß- und Roséweine:
R = 3,6 mval/l
R = 0,3 g/l Weinsäure.
Für Rotweine:R = 5,1 mval/l
R = 0,4 g/l Weinsäure.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 86
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14.FLÜCHTIGE SÄUREN
1. DEFINITION
Die flüchtigen Säuren setzen sich aus den Homologen der Essigsäure
zusammen, die im Wein in freier oder gebundener Form enthalten
sind.
2. PRINZIP DER METHODE
Titration der durch Wasserdampfdestillation abgetrennten flüchtigen
Säuren.
Der Wein wird zuvor von Kohlendioxid befreit.Die freie und gebundene schweflige Säure, die unter diesen Bedin-
gungen auch überdestilliert, wird von den flüchtigen Säuren
abgezogen.
Eventuell dem Wein zugesetzte Sorbinsäure wird ebenfalls abge-
zogen.
Anmerkung:
Die in einigen Ländern zur Stabilisierung der Weine vor der Analyse
verwendete Salicylsäure geht zum Teil in das Destillat über. Sie muß
bestimmt und von den flüchtigen Säuren abgezogen werden (Bestim-
mungsmethode siehe unter Ziffer 7 dieses Kapitels).
3. REAGENZIEN
3.1. Weinsäure (C
4H6O6).
3.2. 0,1 M Natronlauge(NaOH).
3.3. Phenolphtaleinlösung 1 %ig in 96 Vol. %igem neutralen Ethanol.
3.4. Salzsäure(HCZ, ρ20= 1,18 bis 1,19 g/ml), 1:4 verdünnt (v/v).
3.5. 0,005 M Jodlösung (J2).
3.6. Kaliumjodid (KJ).
3.7. Stärkelösung, 5 g/l:
5 g Stärke werden in etwa 500 ml Wasser gelöst, unter Rühren zum
Sieden gebracht und 10 Minuten im Sieden gehalten. Sodann fügt
man 200 g Natriumchlorid hinzu. Nach dem Abkühlen füllt man
auf 1 Liter auf.
3.8. Gesättigte Natriumboratlösung (Na2B4O7·1 0H2O): etwa 55 g/l bei
20 ºC.
4. GERÄTSCHAFTEN
4.1. Wasserdampfdestillationsapparatur bestehend aus:
1. einem Wasserdampfentwickler, der erzeugte Wasserdampf muß
frei von Kohlendioxid sein;
2. einem Destillierkolben;3. einer Rektifizierkolonne;4. einem Kühler.
Diese Apparatur muß folgenden Bedingungen genügen:
a) In den Destillierkolben werden 20 ml ausgekochtes Wasser
gegeben. Man destilliert 250 ml über und fügt dem Destillat
0,1 ml der 0,1 M Natronlauge (3.2) und 2 Tropfen der
Phenolphtaleinlösung (3.3) zu; die Rosafärbung muß
mindestens 10 Sekunden lang bestehen bleiben (Wasserdampf
frei von Kohlendioxid).
b) In den Destillierkolben werden 20 ml einer 0,1 M Essigsäu-
relösung gegeben. Man destilliert 250 ml über und titriert das
Destillat mit 0,1 M Natronlauge (3.2).
Es müssen mindestens 19,9 ml titriert werden (überdestillierte
Essigsäure ≥99,5 %).
c) In den Destillierkolben werden 20 ml einer 1 M Milchsäurelö-
sung gegeben. Man destilliert 250 ml über und titriert das
Destillat mit 0,1 M Natronlauge (3.2).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 87
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Es dürfen nicht mehr als 1,0 ml titriert werden (überdestillierte
Milchsäure ≤0,5 %).
Jede Apparatur und jede Verfahrensweise, die den obenge-
nannten Anforderungen entspricht, gilt als international
amtlich.
4.2. Wasserstrahlpumpe.
4.3. Saugflasche.
5. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
5.1. Vorbereitung der Probe: Entfernung des Kohlendioxids.
Etwa 50 ml Wein werden 1 bis 2 Minuten an der Wasserstrahlpumpe
geschüttelt.
5.2. Wasserdampfdestillation
20 ml des nach 5.1 entcarbonisierten Weines werden in den Destil-
lierkolben gegeben und 0,5 g Weinsäure (3.1) zugefügt. Es werden
mindestens 250 ml überdestilliert.
5.3. Titration
Man titriert mit 0,1 M Natronlauge (3.2) im Gegenwert von 2
Tropfen Phenolphtaleinlösung (3.3) (= n ml).
Danach fügt man 4 Tropfen verdünnte Salzsäure (3.4), 2 ml
Stärkelösung (3.7) und einige Kaliumjodidkristalle (3.6) hinzu.
Das freie Schwefeldioxid wird mit 0,005 M Jodlösung (3.5) titriert
(= n′ml).
Nun setzt man bis zum Farbumschlag nach rosa, gesättigte Natrium-
boratlösung (3.8) zu und titriert das gebundene Schwefeldioxid mit
0,005 M Jodlösung (3.5) (= n ″ml).
6. ANGABE DER ERGEBNISSE
6.1. Berechnung
Der Gehalt an flüchtigen Säuren, ausgedrückt in Milliäquivalent/l
mit (mval/l) 1 Dezimalstelle, beträgt:
Fl.S. = 5 (n − 0,1 n ′− 0,05 n ″)
Der Gehalt an flüchtigen Säuren, ausgedrückt in Gramm Essigsäure
im Liter mit 2 Dezimalstellen, beträgt:
0,300 (n − 0,1 n ′− 0,05 n ″)
6.2. Wiederholbarkeit (r)
r = 0,7 mval/l
r = 0,04 g Essigsäure/l.
6.3. Vergleichbarkeit (R)
R = 1,3 mval/l
R = 0,08 g Essigsäure/l.
6.4. Weine mit Sorbinsäurezusatz
Da die Sorbinsäure bei einem Destillationsvolumen von 250 ml zu
etwa 96 % in das Destillat übergeht, muß sie von den flüchtigen
Säuren abgezogen werden. 100 Milligramm Sorbinsäure entsprechen
0,89 mval oder 0,053 g Essigsäure. Der Gehalt an Sorbinsäure (mg/l)
wird wie unter Nummer 18 beschrieben bestimmt.
7. BESTIMMUNG DER SALICYLSÄURE IM DESTILLAT DER
FLÜCHTIGEN SÄUREN
7.1. Prinzip
Nach der Bestimmung der flüchtigen Säuren und der Korrektur des
Schwefeldioxids wird die Salicylsäure nach Ansäuern und Zusatz1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 88
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eines Eisen-III-Salzes aufgrund der entstehenden violetten Farbe
nachgewiesen.
Die Bestimmung der in das Destillat der flüchtigen Säuren überge-
gangenen Salicylsäure erfolgt in einem zweiten Destillat von
gleichem Volumen. In diesem Destillat wird die Salicylsäure mit
einer Farbvergleichsmethode bestimmt. Die so ermittelte Menge an
Salicylsäure wird vom Gehalt an flüchtigen Säuren abgezogen.
7.2. Reagenzien
7.2.1. Salzsäure(HCl) ( ρ20= 1,18 — 1,19 g/ml).
7.2.2. Natriumthiosulfat (Na2S2O3·5H2O), 0,1 M.
7.2.3. Ammoniumeisen III-Sulfat (Fe2(SO4)3· (NH4)2SO4·2 4H2O) 10 %ig
(g/v).
7.2.4. Natriumsalicylat, 0,01 M.
DieLösung e nthält 1,60 g/l Natriumsalicylat (Na C7H5O3).
7.3. Durchführung der Bestimmung
7.3.1. Nachweis der Salicylsäure im Destillat der flüchtigen Säuren
Unmittelbar nach der Bestimmung der flüchtigen Säuren und der
Korrektur des Schwefeldioxids gibt man in den Erlenmeyerkolben
0,5 ml Salzsäure(7.2.1), 3 ml 0,1 M Natriumthiosulfatlösung
(7.2.2) und 1 ml Ammoniumeisen(III)-sulfatlösung (7.2.3).
Bei Anwesenheit von Salicylsäure entsteht eine violette Färbung.
7.3.2. Bestimmung der Salicylsäure
Die nach 7.3.1 verwendete Destillatmenge wird an dem Erlenmeyer-
kolben markiert; der Kolben wird entleert und ausgewaschen.
Nun werden erneut 20 ml Wein der Wasserdampfdestillation unter-
worfen. Es wird bis zur Markierung in denselben Erlenmeyerkolben
überdestilliert. Man fügt 0,3 ml rauchende Salzsäure (7.2.1) und 1 ml
Ammoniumeisen(III)-sulfatlösung (7.2.3) hinzu. Es entsteht eine
violette Färbung.
In einen gleichen Erlenmeyerkolben gibt man soviel destilliertes
Wasser wie der obengenannten verwendeten Destillatmenge
entspricht. Man fügt 0,3 ml der rauchenden Salzsäure (7.2.1) und
1 ml Ammoniumeisen(III)-sulfatlösung (7.2.3) hinzu und titriert mit
0,01 M Natriumsalicylatlösung (7.2.4), bis die Intensität der entste-
henden violetten Färbung der des Destillates entspricht (= n /tripleprimeml).
7.4. Korrektur der flüchtigen Säure
0,1 n/tripleprimeml werden von den n ml 0,1 M Natronlauge, die zur Titration
des Destillates der flüchtigen Säuren verbraucht wurden, abgezogen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 89
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15.NICHTFLÜCHTIGE SÄUREN
1. PRINZIP
Die nichtflüchtigen Säuren ergeben sich aus der Differenz zwischen
„Gesamtsäure“ und „flüchtigen Säuren“.
2. ANGABE DER ERGEBNISSE
Die nichtflüchtigen Säuren werden angegeben in:
— Milliäquivalent je Liter;
— Gramm Weinsäure je Liter.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 90
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16.WEINSÄURE
1. PRINZIP DER METHODEN1.1. Referenzmethode
Die Weinsäure wird in Form des Calciumracemats gefällt und gravi-
metrisch bestimmt. Diese Bestimmung kann zum Vergleich durch
eine maßanalytische Bestimmung ergänzt werden. Die Fällungsbe-
dingungen (pH, Gesamtvolumen der Ausgangslösung, Konzentration
der Fällungsionen) sind so beschaffen, daß die Ausfällung des
Calciumracemats vollständig ist, das Calcium-D(−)tartrat aber in
Lösung verbleibt.
Sofern dem Wein Metaweinsäure zugefügt wurde, ist diese vorher zu
hydrolysieren, da sonst die Ausfällung des Calciumracemats nicht
vollständig verläuft.
1.2. Gebräuchliche Methode
Die über eine Anionenaustauschersäule isolierte Weinsäure wird im
Eluat durch Messung der mit Vanadinsäure entstehenden Rotfärbung
photometrisch bestimmt. Die außerdem im Eluat vorhandene Milch-
säure und Äpfelsäure stören die Reaktion nicht.
2. REFERENZMETHODE
2.1. Gravimetrische Methode
2.1.1. Reagenzien
2.1.1.1. Calciumacetatlösung (10 g Calcium/Liter):
Calciumcarbonat (Ca CO
3)… ......................... 25 g
Eisessig (CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml) …............. 40 ml
Wasser zu …......................................... 1 000 ml
2.1.1.2. Calciumracemat (CaC4O6H4·4 H2O):
In einem 400 ml-Becherglas werden 20 ml L(+)Weinsäurelösung
(5 g/l), 20 ml Ammonium-D(−)tartratlösung (6,126 g/l) und 6 ml
Calciumacetatlösung (10 g Calcium/Liter) (2.1.1.1) gemischt.
Nach 2 Stunden filtriert man den Niederschlag über einen Filter-
tiegel ab (Porosität 4), wäscht dreimal mit etwa 30 ml destilliertem
Wasser nach und trocknet im Trockenschrank bei 70 ºC bis zur
Gewichtskonstanz. Mit den oben angegebenen Reagenzienmengen
erhält man etwa 340 mg kristallisiertes Calciumracemat, das man in
einem verschlossenen Gefäß aufbewahrt.
2.1.1.3. Fällungslösung (pH 4,75):
— D(−)Weinsäure ….............................. 122 mg
— Ammoniak, 25 % ( ρ20= 0,97 g/ml) … .......... 0,3 ml
— Calciumacetatlösung zu 10 g Calcium/Liter
(2.1.1.1) … ..................................... 8,8ml
Wasser …......................................... 1 000 ml
Die D(−)Weinsäure löst man unter Zusatz des Ammoniaks in 900 ml
Wasser, fügt 8,8 ml Calciumacetatlösung (2.1.1.1) hinzu, füllt auf
1 000 ml auf und stellt mit Essigsäure auf einen pH-Wert von 4,75
ein.
Das Calciumracemat ist in dieser Lösung etwas löslich; es ist daher
zweckmäßig, 5 mg Calciumracemat zuzusetzen, 12 Stunden zu
schütteln und dann zu filtrieren.
2.1.2. Durchführung der Bestimmung
2.1.2.1. Wein ohne Zusatz von Metaweinsäure
In ein 600 ml-Becherglas gibt man unter Rühren mit einem Glasstab
und Reiben des Glasstabes an der Becherwand zum Auslösen der1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 91
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Fällung 500 ml der Fällungslösung und 10 ml Wein. Man läßt den
Niederschlag 12 Stunden (über Nacht) absetzen.
Dann filtriert man quantitativ durch einen gewogenen Filtertiegel
(Porosität 4).
Man trocknet den Niederschlag bei 70 ºC bis zur Gewichtskonstanz
und wägt, p = Gewicht des Calciumracemats (CaC4O6H4·4 H2O).
2.1.2.2. Wein mit Zusatz von Metaweinsäure
Für den Fall, daß Metaweinsäure zugefügt wurde oder man einen
solchen Zusatz annimmt, wird wie folgt verfahren:
In ein 50 ml-Erlenmeyerkölbchen mit Schliff gibt man 10 ml Wein
und 0,4 ml Eisessig (CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml). Man verschließt
das Kölbchen, bringt den Kolbeninhalt zum Sieden und beläßt 30
Minuten im Sieden. Nach dem Abkühlen gießt man die Lösung in
ein Becherglas, wäscht das Erlenmeyerkölbchen zweimal mit 5 ml
Wasser nach und verfährt wie oben angegeben.
Die Metaweinsäure geht als Weinsäure berechnet in das Ergebnis
der Bestimmung ein.
2.1.3. Angabe der Ergebnisse
1 Molekül Calciumracemat entspricht ½ Molekül L(+)Weinsäure des
Weines.
Der Gehalt an Weinsäure je Liter Wein, ausgedrückt in Milliäquiva-
lenten (mval), beträgt 384,5 p.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.Der Gehalt an Weinsäure je Liter Wein, ausgedrückt in Gramm
Weinsäure, beträgt 28,84 p.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.Der Gehalt an Weinsäure je Liter Wein, ausgedrückt als Kaliumhy-
drogentartrat, beträgt 36,15 p.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.
2.2. Maßanalytische Vergleichsbestimmung
2.2.1. Reagenzien
2.2.1.1. Verdünnte Salzsäure (HCl, ρ
20= 1,18 — 1,19 g/ml), 1: 5 verdünnt
2.2.1.2. 0,05 M EDTA-Lösung: 18,61 g EDTA Dinatriumsalz der Ethylendi-
nitrilotetraessigsäure (C10H14N2O8Na2·2 H2O) werden mit
destilliertem Wasser zu 1 000 ml gelöst.
2.2.1.3. 40%igeNatriumhydroxidlösung (g/v): 40 g Natriumhydroxid
(NaOH) werden mit destilliertem Wasser zu 100 ml gelöst.
2.2.1.4. Komplexometrischer Indikator, z. B. Calconcarbonsäure 1 % (g/g):
1 g Calconcarbonsäure(2-Hydroxy-1-2-hydroxy-4-sulfonaphtyl-1-
azo)-naphthalin-3-carbonsäure, (C21H14N2O7S·3 H2O) wird mit 100 g
Natriumsulfat (Na2SO4) wasserfrei verrieben.
2.2.2. Durchführung der Bestimmung
Der in dem Filtertiegel enthaltene Calciumracematniederschlag wird
nach dem Wägen in 10 ml Salzsäure (2.2.1.1) gelöst und der Filter-
tiegel mit 50 ml destilliertem Wasser ausgewaschen.
Man fügt 5 ml der 40%igen Natriumhydroxidlösung (2.2.1.3) und
etwa 30 mg Indikator (2.2.1.4) zu und titriert mit 0,05 M EDTA-
Lösung (2.2.1.2), n = verbrauchte ml.
2.2.3. Angabe der Ergebnisse
Der Weinsäuregehalt je Liter Wein, ausgedrückt in Milliäquivalenten
(mval), beträgt 5 n.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.Der Weinsäuregehalt je Liter Wein, ausgedrückt in g Weinsäure,
beträgt 0,375 · n.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.Der Weinsäuregehalt je Liter Wein, ausgedrückt in g Kaliumhydro-
gentartrat, beträgt 0,470 · n.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 92
▼B
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.
3. GEBRÄUCHLICHE METHODE
3.1. Reagenzien
3.1.1. Für die Vorbehandlung des Weines
3.1.1.1. Essigsäure(CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml), 30/100 (v/v) verdünnt.
3.1.1.2. Stark basischer Anionenaustauscher (z. B. Merck III 20 — 50 mesh)
in Acetatform. Man stellt eine Suspension von etwa 100 g Anionen-
austauscher in 200 ml 30%iger Essigsäure(3.1.1.1) her und läßt vor
Gebrauch mindestens 24 Stunden stehen. Der Anionenaustauscher
wird unter 30%iger Essigsäure aufbewahrt.
3.1.1.3. Essigsäure(CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml), 0,5/100 (v/v) verdünnt.
3.1.1.4. Natriumsulfatlösung, 7,1 % (g/v) (0,5 M).
71 g wasserfreies Natriumsulfat (Na2SO4) werden in destilliertem
Wasser gelöst und mit destilliertem Wasser zu 1 000 ml aufgefüllt.
3.1.2. Für die Bestimmung der Weinsäure
3.1.2.1. Natriumacetatlösung (Na CH3COO), 27%ig (g/v).
270 g Natriumacetat (Na CH3COO) werden in destilliertem Wasser
gelöst und mit destilliertem Wasser zu 1 000 ml aufgefüllt.
3.1.2.2. Vanadinreagenz.
10 g Ammoniummetavanadat (NH4VO3) werden in 150 ml 1 M
Natronlauge (3.1.2.10) gelöst und in einen 500 ml-Meßkolben über-geführt. Nach Zugabe von 200 ml 27%iger Natriumacetatlösung
(3.1.2.1) füllt man mit destilliertem Wasser zur Marke auf.
3.1.2.3. Schwefelsäure (H
2SO4)1M .
3.1.2.4. Schwefelsäure (H2SO4) 0,5 M.
3.1.2.5. Schwefelsäure (H2SO4) 0,05 M.
3.1.2.6. Perjodsäurelösung, 0,05 M:
10,696 g Natriumperjodat (NaIO4) werden in einem 1 000 ml-
Meßkolben mit 50 ml 0,5 M Schwefelsäure (3.1.2.4) versetzt und
mit destilliertem Wasser zur Marke aufgefüllt.
3.1.2.7 Glycerinlösung, 10 % (g/v):
10 g Glycerin (C3H8O3) werden mit destilliertem Wasser auf 100 ml
aufgefüllt.
3.1.2.8. Natriumsulfatlösung, 7,1 % (siehe 3.1.1.4).
3.1.2.9. Weinsäurelösung, 1 g/l:
In einen 500 ml-Meßkolben gibt man 0,50 g Weinsäure und 6,66 ml
1 M Natronlauge(3.1.2.10) und füllt mit 7,1%ige r Natriumsulfatlö-
sung (3.1.1.4) zur Markeauf.
3.1.2.10 Natronlauge(NaOH), 1 M.
3.2. Gerätschaften
3.2.1. Glassäule mit Hahn, Länge etwa 300 mm, innerer Durchmesser 10
—1 1m m .
3.2.2. Spektralphotometer zur Messung bei 490 nm in 1 cm Küvetten.
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Vorbereitung der Anionenaustauschersäule
Der Auslauf der Glassäule (3.2.1) wird mit angefeuchteter Glaswolle
abgedeckt, die Säule mit etwa 10 ml der Anionenaustauscher-
Suspension in Acetatform (3.1.1.2) beschickt undmit angefeuchteter
Glaswolle abgedeckt (um das Aufwirbeln des Austauschers während
der nachfolgenden Arbeitsgänge zu vermeiden).
Der Austauscher sollte nur einmal verwendet werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 93
▼B
3.3.2. Isolierung der organischen Säuren
Bei vollgeöffnetem Hahn läßt man die Essigsäure bis etwa 2 —
3 mm über dem Glaswollepfropfen ablaufen.
Nun gibt man 10 ml 0,5%igeEssigsäure(3.1.1.3) auf de n Austau-
scher und läßt wiederum bis 2 — 3 mm über dem
Glaswollepfropfen ablaufen. Man wiederholt diesen Waschvorgang
noch viermal.
Nach dem letzten Auswaschen schließt man den Hahn und bringt auf
den Austauscher 10 ml Wein oder Most. Man läßt den Wein mit
einer Geschwindigkeit von etwa 1 Tropfen pro Sekunde bis kurz
über den Austauscher durchlaufen. Nun gibt man 10 ml der 0,5%-
igen Essigsäure (3.1.1.3) auf den Austauscher und verfährt wie
oben beschrieben. Man wiederholt diesen Vorgang noch 7 mal mit
jeweils 10 ml destilliertem Wasser. Nach dem letzten Auswaschen
schließt man den Hahn, wenn die Flüssigkeit kurz über dem oberen
Glaswollepfropfen steht.
Man eluiert die am Austauscher gebundenen Säuren mit 100 ml der
7,1%igen Natriumsulfatlösung (3.1.1.4) und fängt das Eluat in einem
100 ml-Meßkolben auf.
3.3.3. Bestimmung der Weinsäure
3.3.3.1. Wein ohne Zusatz von Metaweinsäure
In 2 Erlenmeyerkolben aundbpipettiert man je 20 ml des Eluates.
Der Kolben adient zur Messung, der Kolben b, in dem die Wein-
säure durch Perjodsäure zerstört wird, als Leerwert.
In den Kolben apipettiert man:
— 2 ml 1 M Schwefelsäure (3.1.2.3),
— 5 ml 0,05 M Schwefelsäure (3.1.2.5),
— 1 ml 10%igeGlyce rinlösung (3.1.2.7).
In den Kolben bpipettiert man:
— 2 ml 1 M Schwefelsäure (3.1.2.3),
— 5 ml 0,05 M Perjodsäurelösung (3.1.2.6).
Man wartet 15 Minuten und fügt:
— 1 ml 10%ige Glycerinlösung (3.1.2.7) zur Zerstörung der Perjod-
säurezu.
Man wartet 2 Minuten und gibt unter Umschütteln zunächst in den
Kolbenb, dann in Kolben a je 5 ml des Vanadinreagenzes
(3.1.2.2), stellt sofort eine Stoppuhr und füllt die Lösungen in die
Küvetten. Nach genau 1 Minute und 30 Sekunden mißt man bei
490 nm die Extinktion der Lösung aus dem Kolben a(Meßlösung)
gegen die Lösung aus dem Kolben b(Leerwert).
Ist der Weinsäuregehalt des Eluates zu hoch, d. h. man erhält eine zu
hohe Extinktion, so verdünnt man das Eluat mit der 7,1%igen
Natriumsulfatlösung und führt die Messung mit dieser verdünnten
Lösung durch.
3.3.3.2. Weine mit Zusatz von Metaweinsäure
Wenn dem Wein Metaweinsäure zugesetzt wurde oder dieser Zusatz
angenommen wird, wird die Hydrolyse, wie bei der Referenzme-
thode beschrieben, durchgeführt.
Nach dem Abkühlen gibt man den gesamten Inhalt des Erlenmeyer-
kolbens sowie das Waschwasser (2 × 5 ml) auf die
Austauschersäule. Man verfährt wie oben beschrieben.
Die Metaweinsäure geht als Weinsäure berechnet in das Ergebnis
ein.
3.3.4. Aufstellen der Eichkurve
Man pipettiert 10, 20, 30, 40 und 50 ml der Weinsäurelösung
(3.1.2.9) in je ein 100 ml-Meßkölbchen und füllt mit 7,1%iger
Natriumsulfatlösung (3.1.1.4) zur Markeauf. Man e rhält so
Lösungen, die Eluaten mit 1,2,3,4 und 5 g Weinsäure im Liter
Wein entsprechen.
In 2 Erlenmeyerkolben aundbpipettiert man je 20 ml dieser
Eichlösungen und verfährt wie oben beschrieben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 94
▼B
Die Extinktionen dieser Lösungen aufgetragen gegen den Gehalt an
Weinsäure in g/l Wein ergeben eine Gerade, die gegen den Null-
punkt hin leicht gekrümmt ist. Wenn erforderlich, muß dieser
Bereich unterhalb 1,0 g/l bestimmt werden.
3.3.5. Angabe der Ergebnisse
Der Gehalt an Weinsäure, ausgedrückt in g/l, wird der Eichkurve
entnommen.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 95
▼B
17.CITRONENSÄURE
1. PRINZIP DER METHODE
Citronensäure wird in der durch Citrat-Lyase (CL) katalysierten
Reaktion umgewandelt:
Citrat
 Oxalacetat + Acetat
In Anwesenheit von Malat-Dehydrogenase (MDH) und Lactat-Dehy-
drogenase (LDH) werden Oxalacetat und dessen
Decarboxilierungsprodukt Pyruvat durch reduziertes Nicotinamid-
adenin-dinucleotid (NADH) zu L-Malat und L-Lactat reduziert.
Oxalacetat + NADH + H+
L-Malat + NAD+
Pyruvat + NADH + H+
L-Lactat + NAD+
Die in diesen Reaktionen zu NAD+oxidierte NADH-Menge ist
proportional dem vorhandenen Citronensäuregehalt. Die Oxidation
des NADH wird durch die Abnahme der Extinktion bei der
Wellenlänge 340 nm gemessen.
2. REAGENZIEN
2.1. Puffer ph 7,8
(Glycylglycin 0,51 M; pH = 7,8; Zn2+: 0,6 · 10−3M):
7,13 g Glycylglycin werden in ca. 70 ml bidestilliertem Wasser
gelöst, mit ca. 13 ml 5 M Natronlauge wird der pH-Wert auf 7,8
eingestellt, 10 ml Zinkchloridlösung (ZnCl2, 80 mg/100 ml) hinzuge-
fügt und mit bidestilliertem Wasser auf 100 ml aufgefüllt.
Die Lösung ist mindestens 4 Wochen bei +4 ºC haltbar.
2.2. Lösung von reduziertem Nicotinamid-adenin-dinucleotid (NADH),
(ca. 6 · 10−3M): 30 mg NADH und 60 mg NaHCO3werden mit
6 ml bidestilliertem Wasser gelöst.
2.3. Lösung von Malat-Dehydrogenase/Lactat-Dehydrogenase (MDH/
LDH) (0,5 mg MDH/ml); 2,5 mg LDH/ml): Man stellt eine
Mischung von 0,1 ml MDH (5 mg MDH/ml), 0,4 ml Ammonium-
sulfat-Lösung (3,2 M) und 0,5 ml LDH (5 mg/ml) her.
Die Suspension ist mindestens ein Jahr bei +4 ºC haltbar.
2.4. Citrat-Lyase CL (5 mg Protein/ml): 168 mg Lyophilisat werden in
1 ml Eiswasser gelöst. Die Lösung ist mindestens eine Woche bei
+4 ºC und mindestens vier Wochen tiefgefroren haltbar.
Es wird empfohlen, vor der Bestimmung die Enzymaktivität zu über-
prüfen.
2.5. Polyvinylpolypyrrolidon (PVPP)
Anmerkung:Alle für diese Bestimmung nötigen Reagenzien können im Handel
erworben werden.
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Spektralphotometer zur Durchführung der Messungen bei 340 nm,
Absorptionsmaximum von NADH oder Spektrallinien-Photometer
zur Durchführung der Messungen bei 334 nm oder 365 nm. Da es
sich um absolute Messungen handelt (Berechnung nicht über eine
Eichkurve, sondern über den molaren Extinktionskoeffizienten von
NADH), müssen die Richtigkeit der Wellenlänge und die Linearität
der Extinktionen gewährleistet sein.
3.2. Glas- oder Einwegküvetten, Schichtdicke 1 cm.3.3. Mikropipetten von 0,02 bis 2 ml.
4. VORBEREITUNG DER PROBE
Die Bestimmung der Citronensäure erfolgt im allgemeinen direkt aus
dem Wein ohne vorherige Entfärbung und ohne Verdünnung, sofern1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 96
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der Citronensäuregehalt unter 400 mg/l liegt. Anderenfalls ist der
Wein so zu verdünnen, daß der Citronensäuregehalt zwischen 20
und 400 mg/l (im Meßansatz zwischen 5 µg und 80 µg) liegt.
Bei an Phenolverbindungen reichen Rotweinen wird empfohlen,
zuvor eine Behandlung mit PVPP vorzunehmen:
Man stellt eine Suspension von ca. 0,2 g PVPP in Wasser her, läßt
15 Minuten stehen und filtriert über einen Faltenfilter.
10 ml Wein werden in ein 50 ml Erlenmeyerkölbchen gegeben, das
feuchte PVPP zugefügt, 2 — 3 Minuten geschüttelt und filtriert.
5. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
Das Spektralphotometer wird auf 340 nm eingestellt. Die Messung
erfolgt in 1 cm Küvetten gegen Luft (keine Küvette im Strahlen-
gang). In die 1 cm-Küvetten pipettiert man:
Leerwert Probe
Lösung 2.1 1,00 ml 1,00 ml
Lösung 2.2 0,10 ml 0,10 ml
Probe— 0,20 ml
bidestilliertes Wasser 2,00 ml 1,80 ml
Lösung 2.3 0,02 ml 0,02 ml
Man mischt und liest nach ca. 5 Minuten die Extinktion des Leer-
wertes und der Probe ab (E1).
Dann fügt man:
Lösung 2.4 0,02 ml 0,02 ml
hinzu und mischt. Man wartet das Ende der Reaktion (ca. 5
Minuten) ab und liest die Extinktion des Leerwertes und der Probe
ab (E2).
Für Leerwert und Probe wird die Extinktionsdifferenz (E1−E2)
berechnet.
Die Extinktionsdifferenz des Leerwertes wird von der der Probe
abgezogen:
∆E= ∆EP−∆EL
Anmerkung:
Die für die Reaktion der Enzyme erforderliche Zeit kann von einer
Charge zur anderen schwanken, sie wird hier nur als Beispiel ange-
geben. Es wird empfohlen, diese für jede Charge zu bestimmen.
6. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der Citronensäuregehalt wird in Milligramm je Liter (mg/l) ohne
Dezimalstelle angegeben.
6.1. Berechnung
Die Konzentration in Milligramm je Liter ist durch folgende allge-
meine Formel gegeben:
C¼V/C1PM
ε/C1d/C1v/C1∆E
V = Testvolumen in ml (hier 3,14 ml)
v = Probevolumen in ml (hier 0,2 ml)
MG = Molekulargewicht der zu bestimmenden Substanz (hier:
Citronensäure, wasserfrei = 192,1)
d = Schichtdickein cm (hie r 1 cm)
ε= Extinktionskoeffizient von NADH bei 340 nm:
ε= 6,3 mmol × l−1×c m−1).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 97
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Somit ist:
C = 479 × ∆E.
Wurde bei der Vorbereitung der Probe eine Verdünnung vorgen-
ommen, so ist das Ergebnis mit dem Verdünnungsfaktor zu
multiplizieren.
Anmerkung:
Bei 334 nm: C = 488 × ∆E(ε= 6,2 mmol−1·l·c m−1)
bei 365 nm: C = 887 × ∆E(ε= 3,4 mmol−1·l·c m−1).
6.2. Wiederholbarkeit (r):
Citronensäuregehalt unter 400 mg/l: r = 14 mg/l.
Citronensäuregehalt über 400 mg/l: r = 28 mg/l.
6.3. Vergleichbarkeit (R):
Citronensäuregehalt unter 400 mg/l: R = 39 mg/l.
Citronensäuregehalt über 400 mg/l: R = 65 mg/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 98
▼B
18.MILCHSÄURE
1. PRINZIP DER METHODEN1.1. Referenzmethode
In Gegenwart von Nicotinamid-adenin-dinucleotid (NAD) wird die
gesamte Milchsäure (L-Lactat und D-Lactat) in einer durch L-
Lactat-Dehydrogenase (L-LDH) und D-Lactat-Dehydrogenase (D-
LDH) katalysierten Reaktion zu Pyruvat oxidiert.
Das Gleichgewicht der Reaktion liegt auf der Seite von Lactat.
Durch Entfernung des Pyruvats aus dem Reaktionsgemisch verändert
sich das Gleichgewicht der Reaktion zugunsten der Bildung von
Pyruvat.
In Anwesenheit von L-Glutamat wird Pyruvat in einer durch
Glutamat-Pyruvat-Transaminase (GPT) katalysierten Reaktion zu
Alanin umgeformt.
(1)L-Lactat + NAD
+
Pyruvat + NADH + H+
(2)D-Lactat + NAD+
Pyruvat + NADH + H+
(3)Pyruvat + L-Glutamat
 L-Alanin + α-Ketoglutarat
Die Bildung von NADH, gemessen durch die Zunahme der Extink-
tion bei 340 nm, ist proportional dem vorhandenen Milchsäuregehalt.
Anmerkung:
L-Milchsäure kann einzeln gemäß den Reaktionen (1) und (3)
bestimmt werden.
D-Milchsäure kann einzeln gemäß den Reaktionen (2) und (3)
bestimmt werden.
1.2. Gebräuchliche Methode
Die über einen Anionenaustauscher isolierte Milchsäure wird zu
Acetaldehyd oxidiert und nach Reaktion mit Nitroprussid-Natrium
und Piperidin photometrisch bestimmt.
2. REFERENZMETHODE2.1. Reagenzien
2.1.1. Pufferlösung pH-Wert 10 (Glycylglycin 0,6 M; L-Glutamat 0,1 M):
4,75 g Glycylglycin und 0,88 g L-Glutaminsäure werden in ca. 50 ml
bidestilliertem Wasser gelöst, der pH-Wert mit einigen ml Natron-
lauge (10 M) auf 10 eingestellt und mit bidestilliertem Wasser auf
60 ml aufgefüllt.
Die Lösung ist mindestens 12 Wochen bei +4 ºC haltbar.
2.1.2. Lösung von Nicotinamid-adenin-dinucleotid (NAD) (ca. 40 · 10
−3
M); 900 mg NAD werden in 30 ml bidestilliertem Wasser gelöst.
Die Lösung ist mindestens vier Wochen bei +4 ºC haltbar.
2.1.3. Suspension von Glutamat-Pyruvat-Transaminase, (GPT) (20 mg/ml).
Die Suspension ist mindestens ein Jahr bei +4 ºC haltbar.
2.1.4. Suspension von L-Lactat-Dehydrogenase (L-LDH), (5 mg/ml). Die
Suspension ist mindestens ein Jahr bei +4 ºC haltbar.
2.1.5. Suspension von D-Lactat-Dehydrogenase (D-LDH), (5 mg/ml). Die
Suspension ist mindestens ein Jahr bei +4 ºC haltbar.
Es wird empfohlen, vor der Bestimmung die Enzymaktivitäten zu
überprüfen.
Anmerkung:Alle für diese Methode notwendigen Reagenzien können im Handel
erworben werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 99
▼B
2.2. Gerätschaften
2.2.1. Spektralphotometer zur Durchführung der Messungen bei 340 nm,
Absorptionsmaximum von NADH oder
Spektrallinien-Photometer zur Durchführung der Messungen bei
334 nm oder 365 nm.
Da es sich um absolute Messungen handelt (Berechnung nicht über
eine Eichkurve, sondern über den molaren Extinktionskoeffizienten
von NADH), müssen die Richtigkeit der Wellenlänge und die Linea-
rität der Extinktionen gewährleistet sein.
2.2.2. Glas- oder Einwegküvetten, Schichtdicke 1 cm.
2.2.3. Mikropipetten von 0,02 bis 2 ml.
2.3. Vorbereitung der Probe
Es ist darauf zu achten, daß die mit der Meßlösung in Kontakt
kommenden Gerätschaften nicht mit den Fingern berührt werden,
um eine Übertragung von L-Milchsäure und somit eine Verfälschung
des Resultats zu vermeiden.
Die Milchsäurebestimmung erfolgt im allgemeinen direkt aus dem
Wein ohne vorherige Entfärbung und Verdünnung, falls die Konzen-
tration weniger als 100 mg/l beträgt. Liegt die
Milchsäurekonzentration des Weines zwischen
100 mg/l und 1 g/l, so ist mit bidestilliertem Wasser 1:10 zu
verdünnen;
1 g/l und 2,5 g/l, so ist mit bidestilliertem Wasser 1:25 zu
verdünnen;
2,5 g/l und 5 g/l, so ist mit bidestilliertem Wasser 1:50 zu
verdünnen.
2.4. Durchführung der Bestimmung
2.4.1. Bestimmung der Gesamtmilchsäure
Die Pufferlösung muß vor der Bestimmung auf 20 — 25 ºC tempe-
riert werden.
Das Spektralphotometer wird auf 340 nm eingestellt. Die Messung
wird in 1 cm-Küvette gegen Luft (keine Küvette im Strahlengang)
oder gegen Wasser durchgeführt.
In die 1 cm-Küvetten werden gegeben:
Leerwert Probe
Lösung 2.1.1 1,00 ml 1,00 ml
Lösung 2.1.2 0,20 ml 0,20 ml
bidestilliertes Wasser 1,00 ml 0,80 ml
Suspension 2.1.3 0,02 ml 0,02 ml
Probe— 0,20 ml
Mit einem Glas- oder Kunststoffstab mit abgeflachtem Ende wird
gemischt und nach ca. 5 Minuten die Extinktion des Leerwertes
und der Probe gemessen (E1).
Man fügt 0,02 ml der Lösung 2.1.4 und 0,05 ml der Lösung 2.1.5
hinzu, mischt und mißt nach Ablauf der Reaktion (ca. 30 Minuten)
die Extinktion des Leerwertes und der Probe (E2).
Man berechnet die Extinktionsdifferenz (E2−E1) für Leerwert und
Probe.
Die Extinktionsdifferenz des Leerwertes wird von der der Probe
abgezogen:
∆E= ∆EP−∆EL
2.4.2. Bestimmung der L-Milchsäure und der D-Milchsäure
Die Bestimmung der L-Milchsäure und der D-Milchsäure kann
einzeln nach der für die Gesamtmilchsäure angegebenen Arbeits-1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 100
▼B
weise erfolgen, wobei nach der Messung E1wie folgt verfahren
wird:
Man fügt 0,02 ml der Lösung 2.1.4 hinzu, mischt und mißt nach
Ablauf der Reaktion (ca. 20 Minuten) die Extinktion des Leerwertes
und der Probe (E2).
Man fügt 0,05 ml der Lösung 2.1.5 hinzu, mischt und mißt nach
Ablauf der Reaktion (ca. 30 Minuten) die Extinktion des Leerwertes
und der Probe (E3).
Man berechnet die Extinktionsdifferenz (E2−E1) für dieL-Milch-
säureund (E3−E2) für die D-Milchsäure für Leerwert und Probe.
Die Extinktionsdifferenz des Leerwertes wird von der der Probe
abgezogen:
∆E= ∆EP−∆EL.
Anmerkung:
Die für die Reaktion der Enzyme erforderliche Zeit kann von einer
Charge zur anderen schwanken, sie wird hier nur als Beispiel ange-
geben. Es wird empfohlen, diese für jede Charge zu bestimmen.
2.5. Angabe der Ergebnisse
Der Milchsäuregehalt wird in Gramm je Liter (g/l) mit 1 Dezimale
angegeben.
2.5.1. Berechnung
Die Konzentration in Gramm je Liter ist durch folgende allgemeine
Formel gegeben:
C¼V/C1MG
ε/C1d/C1v/C11000/C1∆E
V = Testvolumen in ml (V = 2,24 ml für L-Milchsäure, V
= 2,29 ml für D-Milchsäure und Gesamtmilchsäure)
v = Volumen der Probe in ml (hier 0,2 ml)MG = Molekulargewicht der zu bestimmenden Substanz (hier DL-
Milchsäure= 90,08)
d = Schichtdicke der Küvette in cm (hier 1 cm)
ε= Absorptionskoeffizient von NADH bei 340 nm
ε= 6,3 (mmol × l
−1×c m−1).
2.5.1.1. Gesamtmilchsäure und D-Milchsäure
C = 164 × ∆E.
Wurde bei der Vorbereitung der Probe eine Verdünnung vorgen-
ommen, so ist das Ergebnis mit dem Verdünnungsfaktor zu
multiplizieren.
Anmerkung:
Messung bei 334 nm: C = 0,167 × ∆E(ε= 6,2 mmol−1×l×c m−1).
Messung bei 365 nm: C = 0,303 × ∆E(ε= 3,4 mmol−1×l×c m−1).
2.5.1.2. L-Milchsäure
C = 160 × ∆E
Wurde bei der Vorbereitung der Probe eine Verdünnung vorgen-
ommen, so ist das Ergebnis mit dem Verdünnungsfaktor zu
multiplizieren.
Anmerkung:
Messung bei 334 nm: C = 0,163 × ∆E(ε= 6,2 mmol−1×l×c m−1).
Messung bei 365 nm: C = 0,297 × ∆E(ε= 3,4 mmol−1×l×c m−1).
2.5.2. Wiederholbarkeit (r) für L-Milchsäure
r = 0,02 + 0,07 xig/l
xi= Konzentration an L-Milchsäure in der Probe in g/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 101
▼B
2.5.3. Vergleichbarkeit (R) für L-Milchsäure
R = 0,05 + 0,125 xig/l
xi= Konzentration an L-Milchsäure in der Probe in g/l.
3. GEBRÄUCHLICHE METHODE3.1. Reagenzien
3.1.1. Für die Vorbereitung des Weines:
Siehe Kapitel „Weinsäure“, gebräuchliche Methode unter 3.1.1.
3.1.2. Für die Bestimmung der Milchsäure
3.1.2.1. Cer(IV)-sulfatlösung, 0,1 M in 0,35 M Schwefelsäure
40,431 g Cer(IV)-sulfat-Tetrahydrat Ce(SO
4)2·4 H2O) werden in
350 ml 1 M Schwefelsäure (3.1.2.4) gelöst und mit Wasser auf
1 000 ml aufgefüllt.
3.1.2.2. Natronlauge(NaOH), 2,5 M.3.1.2.3. Natriumacetatlösung, 270 g/l (hergestellt aus wasserfreiem Natriu-
macetat, Na CH
3COO).
3.1.2.4. Schwefelsäure (H2SO4)1M .
3.1.2.5. Nitroprussid-Natriumlösung [Na2(Fe(CN)5NO) × 2H2O]: 2%ig (g/
v).
Die Lösung ist gut verschlossen im Dunkeln aufzubewahren.Haltbarkeit: 8 Tage.
3.1.2.6. Piperidinlösung (C
5H11N), 10%ig (v/v).
3.1.2.7. Milchsäurelösung, 1 M.
100 ml Milchsäure(C3H6O3) werden mit 400 ml Wasser gemischt
und in einer Schale 4 Stunden auf dem siedenden Wasserbad erhitzt
(von Zeit zu Zeit muß das Volumen mit Wasser aufgefüllt werden).
Nach dem Abkühlen füllt man auf 1 Liter auf. In 10 ml dieser
Lösung titriert man die Milchsäure mit 1 M Natronlauge (3.1.2.8)
und stellt die Lösung auf eine genau 1 M Milchsäurelösung ein
(90 g Milchsäure/l).
3.1.2.8. Natronlauge(NaOH), 1 M.
3.2. Gerätschaften
3.2.1. Glassäule mit Hahn, Länge etwa 300 mm, Durchmesser etwa 10 —
11 mm.
3.2.2. Wasserbad, 65 ºC.
3.2.3. Spektralphotometer zur Messung bei 570 nm in 1 cm Küvetten.
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Vorbereitung der Austauschersäule
Siehe Kapitel „Weinsäure“, gebräuchliche Methode unter 3.3.1.
3.3.2. Isolierung der Organischen Säuren
Siehe Kapitel „Weinsäure“, gebräuchliche Methode unter 3.3.2.
3.3.3. Bestimmung der Milchsäure
10 ml Eluat werden in ein weites Reagenzglas mit Glasschliffstopfen
(Fassungsvermögen 50 ml) gegeben, 10 ml Cer(IV)-sulfatlösung
(3.1.2.1) zugefügt, gemischt und genau 10 Minuten in ein Wasserbad
von 65 ºC gestellt. Nach dem Einstellen lüftet man für einige
Sekunden den Glasstopfen, um den Druck auszugleichen, der durch
die Erhitzung entsteht. Man verschließt gut, um einen Verlust des
sich bildenden Acetaldehyds zu vermeiden. Nach dem Abkühlen
unter fließendem Wasser auf 20 ºC fügt man 5 ml 2,5 M Natron-
lauge(3.1.2.2) zu, mischt gut durch und filtrie rt.
15 ml des Filtrats werden in einen 50 ml fassenden Standzylinder
mit Schliffstopfen, der 5 ml 27%ige Natriumacetatlösung (3.1.2.3)
und 2 ml 1 M Schwefelsäure (3.1.2.4) enthält, gegeben. Man fügt
5 ml Nitoprussid-Natriumlösung (3.1.2.5) zu, mischt und versetzt1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 102
▼B
sofort mit 5 ml Piperidinlösung (3.1.2.6), schüttelt schnell um und
gibt die Lösung sofort in die Küvette. Die entstehende Färbung, die
von grün bis violett schwankt, wird bei 570 nm gegen Luft (keine
Küvette im Strahlengang) gemessen. Die Farbintensität steigt
zunächst an und nimmt dann sehr schnell ab.
Man verfolgt den Anstieg der Extinktion und liest den Höchstwert
als Meßwert ab.
Enthält das Eluat größere Mengen an Milchsäure, so daß die Extink-
tion zu hoch ist, verdünnt man das Eluat mit der 7,1%igen
Natriumsulfatlösung (siehe unten 3.1.1) und führt mit dieser
verdünnten Lösung die Messung durch.
3.3.4. Aufstellen der Eichkurve
10 ml der 1 M Milchsäurelösung (3.1.2.7) und 10 ml 1 M Natron-
lauge (3.1.2.8) werden in einen 1 000 ml-Meßkolben gegeben und
mit 7,1%iger Natriumsulfatlösung (siehe unten 3.1.1) zur Marke
aufgefüllt. Von dieser Lösung werden jeweils 5, 10, 15, 20 und
25 ml in ein 100 ml-Meßkölbchen gegeben und mit 7,1%iger
Natriumsulfatlösung (siehe unten 3.1.1) zur Marke aufgefüllt. Mit je
10 ml dieser Lösungen wird die Messung, wie unter (3.3.3)
beschrieben, durchgeführt.
Diese Lösungen entsprechen Eluaten von Weinen, die 0,45 — 0,9 —
1,35 — 1,80 und 2,25 g/l Milchsäure enthalten.
Die Extinktionen dieser Lösungen gegen den Milchsäuregehalt
aufgetragen, ergeben eine Gerade.
3.4. Angabe der Ergebnisse
Der Milchsäuregehalt des Weines, ausgedrückt in g/l, wird der Eich-
kurve entnommen.
Die Angabe erfolgt mit 1 Dezimale.Anmerkung:
Weine, die mehr als 250 mg/l gesamtschweflige Säure enthalten,
können einen Gehalt an acetaldehydschwefliger Säure aufweisen,
der als Milchsäure berechnet wird. In diesem Fall muß das Ergebnis
der Bestimmung folgendermaßen korrigiert werden:
15 ml Eluat werden in einem Standschliffzylinder mit 5 ml 27%iger
Natriumacetatlösung (3.1.2.3), 2 ml 0,775 M Schwefelsäure (77,5 ml
1 M Schwefelsäure werden mit destilliertem Wasser zu 100 ml
verdünnt) gemischt. Dann fügt man, wie bei der Bestimmung der
Milchsäure, 5 ml Nitroprussid-Natriumlösung (3.1.2.5) und 5 ml
10%ige Piperidinlösung (3.1.2.6) zu; nach dem Durchmischen mißt
man die entstandene Färbung unter den oben angegebenen Bedin-
gungen und berechnet aus der erhaltenen Extinktion den durch
acetaldehydschweflige Säure vorgetäuschten Milchsäuregehalt B in
g/l. Bezeichnet man den nach 3.3.3 ermittelten scheinbaren Gehaltan Milchsäure mit M', dann ergibt sich der tatsächliche Gehalt an
MilchsäureM zu
M = M' − B · 0,4 (g/l).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 103
▼B
19.L-ÄPFELSÄURE
1. PRINZIP DER METHODE
In Gegenwart von Nicotinamid-adenin-dinucleotid (NAD) wird L-
Äpfelsäure (L-Malat) in einer durch das Enzym L-Malat-Dehydro-
genase (L-MDH) katalysierten Reaktion zu Oxalacetat oxidiert.
Das Gleichgewicht der Reaktion liegt auf der Seite von Malat. Die
Entfernung des Oxalacetats aus dem Reaktionsgemisch verändert
das Gleichgewicht der Reaktion zugunsten der Bildung von Oxala-
cetat. In Gegenwart von L-Glutamat wird Oxalacetat in einer durch
Glutamat-Oxalacetat-Transaminase (GOT) katalysierten Reaktion in
L-Aspartat überführt.
(1)L-Malat + NAD+
Oxalacetat + NADH + H+
(2)Oxalacetat + L-Glutamat
 L-Aspartat + αKeto-
glutarat
Die Bildung von NADH, gemessen durch die Zunahme der Extink-
tion bei 340 nm, ist proportional der vorhandenen Menge an L-
Äpfelsäure.
2. REAGENZIEN
1.2. Pufferlösung pH-Wert 10
(Glycylglycin 0,60 M, L-Glutamat 0,1 M).4,75 g Glycylglycin und 0,88 g L-Glutaminsäure werden in ca. 50 ml
bidestilliertem Wasser gelöst, der pH-Wert wird mit ca. 4,6 ml
Natronlauge (10 M) auf 10 eingestellt und mit bidestiliertem Wasser
auf 60 ml aufgefüllt.
Die Lösung ist mindestens 12 Wochen bei +4 ºC haltbar.
2.2. Lösung von Nicotinamid-adenin-dinucleotid (NAD), (etwa 47 · 10
−3
M): 420 mg NAD werden in 12 ml bidestilliertem Wasser gelöst.
Die Lösung ist mindestens 4 Wochen bei +4 ºC haltbar.
2.3. Suspension von Glutamat-Oxalacetat-Transaminase, (GOT) 2 mg/ml.
Die Suspension ist mindestens ein Jahr bei +4 ºC haltbar.
2.4. Lösung von L-Malat-Dehydrogenase (L-MDH), 5 mg/ml. Die
Lösung ist mindestens ein Jahr bei +4 ºC haltbar.
Anmerkung:Alle für diese Methode notwendigen Reagenzien können im Handel
erworben werden.
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Spektralphotometer zur Durchführung der Messungen bei 340 nm,
Absorptionsmaximum von NADH oder
Spektrallinien-Photometer zur Durchführung der Messungen bei
334 nm oder 365 nm.
Da es sich um absolute Messungen handelt (Berechnung nicht über
eine Eichkurve, sondern über den molaren Extinktionskoeffizienten
von NADH), müssen die Richtigkeit der Wellenlänge und die Linea-
rität der Extinktion gewährleistet sein.
3.2. Glas- oder Einwegküvetten, Schichtdicke 1 cm.3.3. Mikropipetten von 0,01 bis 2 ml.
4. VORBEREITUNG DER PROBE
Die Bestimmung der L-Äpfelsäure erfolgt im allgemeinen direkt aus
dem Wein ohne vorherige Entfärbung und ohne Verdünnung, sofern
der Gehalt unter 350 mg/l (Messung bei365 nm) liegt. Andernfalls
ist eine Verdünnung des Weines mit bidestilliertem Wasser vorzu-
nehmen, so daß die Konzentration zwischen 30 und 350 mg/l
beträgt (in der Meßlösung zwischen 3 und 35 µg).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 104
▼B
Enthält der Wein weniger als 30 mg/l L-Äpfelsäure, so kann das
Probevolumen bis zu 1 ml erhöht werden. In diesem Fall ist die
zuzusetzende Wassermenge zu verringern, damit das Gesamtvo-
lumen in beiden Küvetten übereinstimmt.
5. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
Das Spektralphotometer wird auf 340 nm eingestellt. Die Messung
wird in 1 cm-Küvetten gegen Luft (keine Küvette im Strahlengang)
oder gegen Wasser durchgeführt.
In die 1 cm-Küvetten werden gegeben:
Leerwert Probe
Lösung 2.1 1,00 ml 1,00 ml
Lösung 2.2 0,20 ml 0,20 ml
bidestilliertes Wasser 1,00 ml 0,90 ml
Suspension 2.3 0,01 ml 0,01 ml
Probe— 0,10 ml
Man mischt und mißt nach ca. 3 Minuten die Extinktion des Leer-
wertes und der Probe (E1).
Man fügt:
Lösung 2.4 0,01 ml 0,01 ml
hinzu und mischt; man wartet das Ende der Reaktion (ca. 5 — 10
Minuten) ab und mißt die Extinktion des Leerwertes und der Probe
(E2).
Man berechnet die Extinktionsdifferenzen (E2−E1) für Leerwert und
Probe.
Die Extinktionsdifferenz des Leerwertes wird von der der Probe
abgezogen:
∆E= ∆Ep−∆EL
Anmerkung:
Die für die Reaktion der Enzyme erforderliche Zeit kann von einer
Charge zur anderen schwanken, sie wird hier nur als Beispiel ange-
geben. Es wird empfohlen, sie für jede Charge zu bestimmen.
6. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der Gehalt an L-Äpfelsäure wird in Gramm je Liter (g/l) mit 1 Dezi-
malstelle angegeben.
6.1. Berechnung
Die Konzentration in Gramm je Liter ist durch folgende allgemeine
Formel gegeben:
C¼V/C1MG
ε/C1d/C1v/C11000/C1∆E
V = Testvolumen in ml (hier 2,22 ml)
v = Volumen der Probe in ml (hier 0,1 ml)
MG = Molekulargewicht der zu bestimmenden Substanz (hier L-
Äpfelsäure = 134,09)
d = Schichtdicke der Küvette in cm (hier 1 cm)
ε= Absorptionskoeffizient von NADH bei 340 nm;
ε= 6,3 (mmol−1×l×c m−1).
Somit ergibt sich für L-Äpfelsäure:C = 0,473 · ∆E g/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 105
▼B
Wurde bei der Vorbereitung der Probe eine Verdünnung vorgen-
ommen, so ist das Ergebnis mit dem Verdünnungsfaktor zu
multiplizieren.
Anmerkung:
Messung bei 334 nm: C = 0,482 × ∆E.
Messung bei 365 nm: C = 0,876 × ∆E.
6.2. Wiederholbarkeit (r)
r = 0,03 + 0,034 xi
xi= Äpfelsäuregehalt der Probe in g/l.
6.3. Vergleichbarkeit (R)
R = 0,05 + 0,071 xi
xi= Äpfelsäuregehalt der Probe in g/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 106
▼M7
20.D-APFELSÄURE
EnzymatischeBe stimmung
1. PRINZIP
D-Apfelsäure (D-Malat) wird in Gegenwart von D-Malat-Dehydro-
genase (D-MDH) durch Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid (NAD) zu
Oxalacetat oxidiert. Das anfallende Oxalacetat wird zu Pyruvat und
Kohlenstoffdioxid umgewandelt.
D-Malat þNADþ/harpoonleftrightD-MDHPyruvate þCO2þNADH þHþ
Die durch die Zunahme der Extinktion bei einer Wellenlänge von
334, 340 bzw. 365 nm gemessene NADH-Bildung ist proportional
zur vorhandenen Menge D-Malat.
2. REAGENZIEN
Im Handel sind folgende für etwa 30 Bestimmungen ausreichenden
Reagenzienkits erhältlich:
a) Fläschchen 1 mit etwa 30 ml einer Lösung, die aus HEPES-
Pufferlösung [4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinethan-sulfonsäure],
pH = 9,0 und Stabilisatoren besteht;
b) Fläschchen 2 mit etwa 210 mg NAD-Lyophilisat;
c) Fläschchen 3 (drei Stück) mit D-MDH-Lyophilisat, jede etwa 8
Einheiten.
Ansetzen der Lösungen
1. Den Inhalt des Fläschchens 1 unverdünnt verwenden. Die
Lösung vor Gebrauch auf 20—25 ºC temperieren.
2. Inhalt des Fläschchens 2 in 4 ml bidestillierten Wassers lösen.3. Inhalt eines der Fläschchen 3 in 0,6 ml bidestillierten Wassers
lösen. Die Lösung vor Gebrauch auf 20—25 ºC temperieren.
Haltbarkeit der Lösungen
Der Inhalt des Fläschchens 1 ist bei + 4 ºC mindestens ein Jahr
haltbar; Lösung 2 ist bei + 4 ºC etwa drei Wochen und bei − 20 ºC
etwa 2 Monate haltbar; Lösung 3 ist bei + 4 ºC fünf Tage haltbar.
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Spektralphotometer zur Durchführung der Messungen bei 340 nm,
NADH-Extinktionsmaximum, oder Spektrallinienphotometer zur
Durchführung der Messungen bei 334 nm oder 365 nm. Da es sich
um absolute Messungen handelt (keine Eichreihe, sondern im
Verhältnis zum molaren Extinktionskoeffizienten von NADH)
müssen die Richtigkeit der Wellenlänge und die Linearität der
Extinktion gewährleistet sein.
3.2. Glas- oder Einwegküvetten, Schichtdicke 1 cm.3.3. Mikropipetten von 0,01 und 2 ml.
4. VORBEREITUNG DER PROBE
Die Bestimmung von D-Malat erfolgt im allgemeinen direkt aus
Wein ohne vorherige Entfärbung.
Da dieKüve tte2 µg bis 50 µg D-Malat enthalten muß, sollte der
Wein so verdünnt werden, daß die D-Malatkonzentration zwischen
0,02 und 0,5 g/l (Messung bei 365 nm) oder 0,02 und 0,3 g/l
(Messung bei 340, 334 nm) liegt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 107
▼M7
Verdünnungstafel:
Geschätzte Menge an D-Malat/Liter
Verdünnung mit
WasserVerdünnungs-
faktor FMessung bei:
340 oder 334 nm 365 nm
< 0,3 g < 0,5 g — 1
0,3—3,0 g 0,5—5,0 g 1 + 9 10
5. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
Das Spektralphotometer wird auf 340 nm eingestellt. die Extinkti-
onsmessungen werden in 1-cm-Küvetten durchgeführt, wobei die
Extinktion Null gegenüber Luft (kein Gefäß im Strahlengang) oder
gegenüber Wasser eingestellt wird.
Die 1-cm-Küvetten werden beschickt mit:
Leerwert Probe
Lösung 1 1,00 ml 1,00 ml
Lösung 2 0,10 ml 0,10 ml
Bidestilliertes
Wasser1,80 ml 1,70 ml
Probe— 0,10 ml
Mischen und nach ca. 6 Minuten die Extinktion des Leerwerts und
der Probe (E1) messen.
Zugabevon:
Leerwert Probe
Lösung 3 0,05 ml 0,05 ml
Mischen, Ende der Reaktion abwarten (ca. 20 Min.) und die Extink-
tion des Leerwerts und der Probe messen (E2).
Die Extinktionsdifferenzen (E2−E1) des Leerwerts ( ∆ET) und der
Probe( ∆EE) werden bestimmt. Die Extinktionsdifferenz des Leer-
werts wird von der der Probe abgezogen: ∆E= ∆EE−∆ET.
Hinweis:
Die für die Reaktion der Enzyme erforderliche Zeit kann von einer
Charge zur anderen schwanken, sie wird hier nur als Beispiel ange-
geben. Es wird empfohlen, sie für jede Charge zu bestimmen.
D-Apfelsäure reagiert rasch. Eine zusätzliche Aktivität des Enzyms
setzt auch Weinsäure um, wenn auch weniger rasch, so daß es
mitunter zu einer schwachen Störreaktion kommt, die durch Extrapo-
lierung (vgl. Anlage A) korrigiert werden kann.
6. BERECHNUNG
Die Konzentration in Milligramm je Liter wird nach folgender allge-
meinen Formel berechnet:
C¼V/C2MG
ε/C2d/C2ν/C2∆E
V = Testvolumen in ml (hier 2,95 ml)
v = Probenvolumen in ml (hier 0,1 ml)
MG = Molekulargewicht der zu bestimmenden Substanz (hier D-
Apfelsäure = 134,09)
d = Schichtdicke der Küvette in cm (hier 1 cm)1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 108
▼M7
ε= Extinktionskoeffizient von NADH:
bei 340 nm = 6,3 (1 mmol−1cm−1)
bei 365 nm = 3,4 (1 mmol−1cm−1)
bei 334 nm = 6,18 (1 mmol−1cm−1).
Wurde bei der Vorbereitung der Probe eine Verdünnung vorgen-
ommen, so ist das Ergebnis mit dem Verdünnungsfaktor zu
multiplizieren.
Die D-Apfelsäurekonzentration wird in Milligramm je Liter (mg/l)
ohne Dezimale angegeben.
7. ZUVERLÄSSIGKEITSBEDINGUNGEN
Die im Ringversuch ermittelten Präzisionsdaten sind in Anlage B
zusammengefaßt. Die aus dem Ringversuch abgeleiteten Werte sind
auf die Analytkonzentrationen und Matrizen anderer als der in
Anlage B genannten mitunter nicht anwendbar.
7.1. Wiederholgrenze (r)
Die absolute Differenz zwischen zwei einzelnen Ergebnissen, die an
identischem Untersuchungsmaterial von einem Bearbeiter mit dens-
elben Geräten innerhalb der kürzesten möglichen Zeitspanne erhält,
wird die Wiederholgrenze r nicht häufiger als in 5 % der Fälle über-
schritten.
Die Wiederholbarkeit beträgt:r = 11 mg/l.
7.2. Vergleichgrenze (R)
Die absolute Differenz zwischen zwei einzelnen Ergebnissen, die für
identisches Untersuchungsmaterial von zwei Laboratorien berichtet
werden, wird die Vergleichgrenze R nicht häufiger als in 5 % der
Fälle überschritten.
Die Vergleichbarkeit beträgt:R = 20 mg/l.
8. BESTIMMUNG VON D-ÄPFELSÄURE (D(+)-MALAT) IN WEIN
MIT GERINGEM GEHALT
8.1. Anwendungsbereich
Die beschriebene Methode ist für die enzymatische Bestimmung von
D-Äpfelsäure in Wein mit Gehalten von weniger als 50 mg/l anzu-
wenden.
8.2. Prinzip
Das Prinzip der Methode ist unter Punkt 1 beschrieben. Die durch
die Zunahme der Extinktion bei einer Wellenlänge von 340 nm
gemessene NADH-Bildung ist proportional zur vorhandenen D-
Malat-Menge, nach Zugabe einer 50 mg/l äquivalenten Menge an
D-Äpfelsäure in die Messküvette.
8.3. Reagenzien
D-Äpfelsäure-Lösung in der Konzentration von 0,199 g/l, zusätzlich
zu den unter Punkt 2 genannten Reagenzien.
8.4. Gerätschaften
Die Gerätschaften sind unter Punkt 3 beschrieben.
8.5. Vorbereitung der Probe
Die Vorbereitung der Probe ist unter Punkt 4 beschrieben.
8.6. Durchführung der Bestimmung
Die Durchführung der Bestimmung ist unter Punkt 5 beschrieben,
wobei jedoch die Messküvette mit einer Menge D-Äpfelsäure1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 109
▼M8
▼M8
äquivalent zu 50 mg/l beschickt wird (Zugabe von 0,025 ml einer
Lösung von D-Äpfelsäure in einer Konzentration von 0,199 g/l unter
Ersetzung des äquivalenten Volumens von Wasser); die erhaltenen
Werte werden um 50 mg/l verringert.
8.7. Interne Validierung
Die nachstehende Tabelle gibt eine Zusammenfassung der internen
Validierung der Methode zur Bestimmung von D-Äpfelsäure nach
vorheriger Zugabe von 50 mg/l dieses Isomers.
Arbeitsbereich 0 mg bis 70 mg D-Äpfelsäure/l
Innerhalb dieser Grenzen ist die Methode linear mit einem
Korrelationskoeffizienten zwischen 0,990 und 0,994
Bestimmungsgrenze 24,4 mg/l
Nachweisgrenze 8,3 mg/l
Empfindlichkeit 0,0015 abs/mg/lWiederfindungsrate 87,5 % bis 115,0 % für Weißwein und 75 % bis 105 % für
Rotwein
Wiederholbarkeit = 12,4 mg/l für Weißwein (nach der OIV-Methode =12,5
mg/l)
= 12,6 mg/l für Rotwein (nach der OIV-Methode = 12,7 mg/
l)
Variationskoeffizient 4,2 % bis 7,6 % (Weißwein und Rotwein)
Laborinterne Standardab-
weichungCV = 7,4% (s = 4,4 mg/l; Durchschnitt = 59,3 mg/l)1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 110
▼M7
Anlage A
Informationen über den Umgang mit Schleich-Reaktionen
„Schleich“-Reaktionen gehen zumeist zurück auf Sekundärreaktionen des
Enzyms in Gegenwart anderer in der Probenmatrix enthaltener Enzyme oder
auf die Wechselwirkung mit einem oder mehreren Matrixelementen mit einem
Kofaktor der Enzymreaktion.
Bei der normalen Reaktion erreicht die Extinktion nach einer bestimmten Zeit,
die von der Reaktionsgeschwindigkeit des spezifischen Enzyms abhängt — in
der Regel nach zehn bis zwanzig Minuten — einen konstanten Wert. Treten
jedoch Sekundärreaktionen auf, so erreicht die Extinktion keinen konstanten
Wert, sondern nimmt stetig zu; diesen Prozeß nennt man „Schleich“-Reaktion.
Wenn dieses Problem auftritt, empfiehlt es sich, nach der für die Standardlösung
bis zum Erreichen ihrer endügltigen Extinktion erforderlichen Zeit die Extink-
tion der Lösung in regelmäßigen Abständen (alle 2 bis 5 Minuten) zu messen.
Wenn eine konstante Extinktionszunahme erreicht ist, so sind 5 bis 6 Messungen
und anschließend eine graphische oder rechnerische Extrapolierung durchzu-
führen, um die Extinktion zu bestimmen, die die Lösung zum Zeitpunkt des
Zusetzens des letzten Enzyms hätte erreichen müssen (T0). Die extrapolierte
Extinktionsdifferenz (Ef− Ei) wird zur Berechnung der Substratkonzentration
verwendet.
Abbildung 1: „Schleich“-Reaktion1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 111
▼M7
Anlage B
Statistische Ergebnisse des Ringversuchs
Jahr des Ringversuchs: 1995
Anzahl der Laboratorien: 8
Anzahl der Proben: 5 mit Zusatz von D-Apfelsäure
Probe ABCDE
Anzahl der nach Eliminieren der Ausreißer verblie-
benen Laboratorien 7 8 7 8 7
Anzahl der Ausreißer (Laboratorien) 1 — 1 — 1
Anzahl der anerkannten Ergebnisse 35 41 35 41 36
Mittelwert ( χ-) (mg/l) 161,7 65,9 33,1 106,9 111,0
Wiederhol-Standardabweichung (sr) (mg/l) 4,53 4,24 1,93 4,36 4,47
Relative Wiederhol-Standardabweichung (RSDr) (%) 2,8 6,4 5,8 4,1 4,00
Wiederholgrenze (r) (mg/l) 12,7 11,9 5,4 12,2 12,5Vergleich-Standardabweichung (s
R) (mg/l) 9,26 7,24 5,89 6,36 6,08
Relative Vergleich-Standardabweichung (RSDR) (%) 5,7 11 17,8 5,9 5,5
Vergleichsgrenze (R) (mg/l) 25,9 20,3 16,5 17,8 17,0
Art der Proben:
A: Rotwein; B: Rotwein; C: Weißwein; D: Weißwein; E: Weißwein.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 112
▼B
21.BESTIMMUNG DER GESAMT-ÄPFELSÄURE
1. PRINZIP DER METHODE
Die über eine Anionenaustauschersäule isolierte DL-Äpfelsäure wird
im Eluat photometrisch aufgrund der mit 96%iger Schwefelsäure
und Chromotropsäure entstehenden Gelbfärbung bestimmt. Die im
Eluat vorhandenen Äpfelsäure vortäuschenden Substanzen reagieren
im Gegensatz zu Äpfelsäure bereits mit 86%iger Schwefelsäure und
Chromotropsäure. Durch Subtraktion der mit 96%iger und 86%iger
Schwefelsäure erhaltenen Extinktionswerte voneinander erhält man
den tatsächlichen Gehalt an DL-Äpfelsäure.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Glassäule mit Hahn, Länge etwa 250 mm, innerer Durchmesser etwa
35 mm.
2.2. Glassäule mit Hahn, Länge etwa 300 mm, innerer Durchmesser etwa
10—11 mm.
2.3. Wasserbad von 100 ºC.
2.4. Spektralphotometer zur Messung bei 420 nm in 10 mm Küvetten.
3. REAGENZIEN
3.1. Stark basischer Anionenaustauscher (z. B. Merck III).3.2. Natronlauge(NaOH), 5%ig (g/v).3.3. Essigsäure(CH
3COOH), 30%ig (g/v).
3.4. Essigsäure(CH3COOH), 0,5%ig (g/v).
3.5. Natriumsulfatlösung (Na2SO4), 10%ig (g/v).
3.6. Konzentrierte Schwefelsäure (H2SO4), 95—97 % (g/g).
3.7. Schwefelsäure (H2SO4), 86%ig (g/g).
3.8. Chromotropsäurelösung, 5%ig:
500 mg chromotropsaures Natrium (C10H6Na2O8S2·2 H2O) werden in
10 ml destilliertem Wasser gelöst. Die Lösung wird vor jeder
Bestimmung frisch hergestellt.
3.9. DL-Äpfelsäurelösung, 0,5 g/l:
250 mg DL-Äpfelsäure (C4H6O5) werden mit 10%iger Natriumsul-
fatlösung (3.5) zu 500 ml gelöst.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Vorbereitung des Austauschers
Der Auslauf der Glassäule (35 × 250 mm) wird mit angefeuchteter
Glaswolle abgedeckt und die Säule mit soviel in Wasser ange-
rührtem Austauscher luftblasenfrei beschickt, daßoberhalb ein Raum
von ca. 50 mm Höhe verbleibt. Man füllt die Säule randvoll mit
destilliertem Wasser, läßt bei voll geöffnetem Hahn bis zur
Oberfläche des Austauschers in ein 1 000-ml-Becherglas ablaufen
und wiederholt den Vorgang so lange, bis 1 000 ml aufgefangen
wurden. Danach wird die Säule randvoll mit 5%iger Natronlauge
gefüllt, diese wiederum bis zur Oberfläche des Austauschers abge-
lassen, der Vorgang wird 2mal wiederholt und 1 Stunde unter
Natronlauge stehen gelassen. Die Säule wird dann mit etwa 1 Liter
destilliertem Wasser wie oben beschrieben ausgewaschen. Man füllt
die Säule nunmehr randvoll mit 30%iger Essigsäure, läßt wiederum
bis kurz über die Oberfläche des Austauschers ablaufen, wiederholt
den Vorgang 2mal und läßt vor Gebrauch mindestens 24 Stunden
stehen. Der Austauscher wird in 30%iger Essigsäure aufbewahrt.
4.2. Vorbereitung der Austauschersäule
Der Auslauf der Glassäule (11 × 300 mm) wird mit angefeuchteter
Glaswolle abgedeckt und der, wie unter 4.1 beschrieben, vorbereitete
Austauscher 10 cm hoch eingefüllt. Bei vollgeöffnetem Hahn läßt
man die 30%ige Essigsäure bis kurz über die Austauscheroberfläche
ablaufen und wäscht die Säule mit etwa 50 ml 0,5%iger Essigsäure
nach.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 113
▼B
4.3. Isolierung der DL-Äpfelsäure
10 ml Wein oder Most werden auf den nach 4.2 vorbereiteten
Austauscher gebracht und mit einer Geschwindigkeit von 1 Tropfen
pro Sekunde bis kurz über die Austauscheroberfläche durchlaufen
gelassen. Dann wird mit der gleichen Geschwindigkeit erst mit
etwa 50 ml 0,5%iger Essigsäure, dann mit etwa 50 ml destilliertem
Wasser nachgewaschen.
Man eluiert in der gleichen Geschwindigkeit (1 Tropfen/Sekunde)
die am Austauscher gebundenen Säuren mit 100 ml 10%iger
Natriumsulfatlösung und fängt das Eluat in einem 100-ml-
Meßkolben auf.
Der Austauscher kann, wie unter 4.1 beschrieben, regeneriert
werden.
4.4. Photometrische Bestimmung
In 2 mit A und B gekennzeichnete weite, etwa 30 ml fassende
Reagenzgläser pipettiert man jeweils 1,0 ml Eluat und 1,0 ml der
5%igen Chromotropsäurelösung. In Reagenzglas A gibt man 10 ml
der 85%igen Schwefelsäure (Leerwert) und in Reagenzglas B 10 ml
der 96%igen Schwefelsäure (Meßwert). Man verschließt die Gläser
und mischt zu einer homogenen Flüssigkeit, ohne den Glasstopfen
zu benetzen. Die Reagenzgläser werden genau 10 Minuten in ein
lebhaft siedendes Wasserbad gestellt und sodann im Dunkeln auf
20 ºC abgekühlt. 90 Minuten nach dem Beginn des Abkühlens wird
die Extinktion der im Reagenzglas B entstandenen Färbung gegen
den Leerwert (Reagenzglas A) bei 420 nm in 10 mm Küvetten
gemessen.
4.5. Aufstellen der Eichkurve
Man pipettiert 5,0, 10,0, 15,0 und 20 ml der Äpfelsäurelösung (0,5 g/
l) jeweils in 50 ml Meßkölbchen und füllt mit 10%iger Natriumsul-
fatlösung zur Markeauf.
Die so erhaltenen Lösungen entsprechen Eluaten von Weinen, die
0,5 - 1,0 - 1,5 und 2,0 g/l DL-Äpfelsäure enthalten.
Man verfährt weiter, wie unter 4.4 beschrieben.
Die erhaltenen Extinktionswerte werden gegen die entsprechenden
Äpfelsäuregehalte aufgetragen und ergeben eine Gerade, die durch
den Nullpunkt geht.
Da die Intensität der Färbung der Meßlösung stark von der Konzen-
tration der Schwefelsäure abhängt, muß die Eichkurve in jeder
Meßserie in mindestens einem Punkt überprüft werden, um eine
Änderung in der Konzentration der Schwefelsäure feststellen zu
können.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der Gehalt an DL-Äpfelsäure wird der Eichkurve entnommen. Die
Angabe erfolgt in g/l mit 1 Dezimale
Wiederholbarkeit
Gehalt < 2 g/l: r = 0,1 g/l
Gehalt > 2 g/l: r = 0,2 g/l.
Vergleichbarkeit
R = 0,3 g/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 114
▼B
22.SORBINSÄURE
1. PRINZIP DER METHODEN
1.1. Spektralphotometrische Messung im UV
Die Sorbinsäure (2,4 Hexadiensäure) wird mittels Wasserdampfdes-
tillation abgetrennt und im Destillat durch spektralphotometrische
Messung im UV bestimmt. Zur Entfernung der die Messung im UV
störenden Substanzen wird ein Teil des Destillates mit Calciumhy-
droxid schwach alkalisch gemacht und zur Trockne eingeengt.
Gehalte unter 20 mg/l müssen dünnschichtchromatographisch abge-
sichert werden (Empfindlichkeit: 1 mg/l).
1.2. Gaschromatographische Methode
Die Sorbinsäure wird mit Diethylether ausgeschüttelt und gaschro-
matographisch in Gegenwart eines internen Standards bestimmt.
1.3. Dünnschichtchromatographische Methode zum Nachweis sehr
kleiner Mengen an Sorbinsäure
Die Sorbinsäure wird mit Diethylether ausgeschüttelt und dünn-
schichtchromatographiert. Der Gehalt wird halbquantitativ
abgeschätzt.
2. SPEKTRALPHOTOMETRISCHE MESSUNG IM UV
2.1. Reagenzien
2.1.1. Weinsäure, C4H6O6kristallisiert.
2.1.2. Calciumhydroxidlösung, Ca (OH)2etwa 0,02 M.
2.1.3. Sorbinsäure-Standardlösung, 20 mg/l:
20 mg Sorbinsäure(C6H8O2) werden in etwa 2 ml 0,1 M Natronlauge
gelöst, in einen 1 000-ml-Meßkolben überführt und mit destilliertem
Wasser zur Marke aufgefüllt. Man kann auch 26,8 mg Kaliumsorbat
(C6H7KO2) in destilliertem Wasser lösen und auf 1 000 ml auffüllen.
2.2. Gerätschaften
2.2.1. Wasserdampfdestillation (siehe „flüchtige Säuren“).
2.2.2. Wasserbad, 100 ºC.
2.2.3. Spektralphotometer zur Messung bei 256 nm in 1 cm Quarzküvetten.
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Destillation
10 ml Wein werden in den Destillationskolben der Wasserdampfdes-
tillationsapparatur gegeben und 1-2 g Weinsäure (2.1.1) zugesetzt.
Man destilliert 250 ml über.
2.3.2. Eichkurve
Aus der Sorbinsäure-Standardlösung (2.1.4) werden 4 Verdünnungen
hergestellt, die 0,5 - 1 - 2,5 und 5 mg/l Sorbinsäure enthalten. Man
mißt die Extinktion bei 256 nm gegenWasser. Die gemessenen
Extinktionen, gegen die entsprechenden Konzentrationen aufge-
tragen, ergeben eine Gerade.
2.3.3. Bestimmung
In eine Abdampfschale (Durchmesser 55 mm) gibt man 5 ml
Destillat, 1 ml Calciumhydroxidlösung (2.1.2) und dampft auf dem
siedenden Wasserbad zur Trockne ein.
Der Rückstand wird in wenig Wasser gelöst, quantitativ in ein 20-
ml-Meßkölbchen überführt und zur Marke aufgefüllt. Für den Leer-
wert werden 1 ml Calciumhydroxidlösung (2.1.2) mit Wasser auf
20 ml aufgefüllt. Die Messung erfolgt bei 256 nm gegen den Leer-
wert.
Der der gemessenen Extinktion entsprechende Sorbinsäuregehalt
wird der Eichkurve entnommen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 115
▼B
Anmerkung:
In der Routineuntersuchung kann das Eindampfen zur Trockne
vernachlässigt werden. Man führt die UV-Messung direkt im 1:4
mit Wasser verdünnten Destillat durch.
2.4. Angabe der Ergebnisse
2.4.1. Berechnung
Der Sorbinsäuregehalt des Weines, ausgedrückt in mg/l, beträgt:100 · CC = mg/l Sorbinsäure in der Meßlösung.
3. GASCHROMATOGRAPHISCHE METHODE
3.1. Reagenzien
3.1.1. Diethylether (C
2H5)2O, unmittelbar vor Gebrauch destilliert.
3.1.2. Interner Standard: 1 g Udecansäure (C11H22O2)/ Ethanol (95 % Vol.).
3.1.3. Schwefelsäure (H2SO4)(ρ20= 1,84 g/ml) mit Wasser 1:3 verdünnt (v/
v).
3.2. Gerätschaften
3.2.1. Gaschromatograph mit Flammenionisationsdetektor und Edelstahl-
säure(4 m × ⅓″), vorher behandelt mit Dimethyldichlorsilan
(DMDCS), belegt mit einer Mischung von Diethylenglykolsuccinat
(5 %) und Phosphorsäure(1 %) (DEGS— H3PO4) oder mit einer
Mischung von Diethylenglykoladipat (7 %) und Phosphorsäure
(1 %) (DEGA — H3PO4) auf Gaschrom Q, 80—100 mesh.
Behandlung mit Dimethyldichlorsilan (DMDCS): man läßt eine
Lösung von 2—3 g DMDCS in Toluol durch die Säule fließen und
wäscht sofort mit Methanol nach. Anschließend wird ein Stickstoff-
strom durchgeleitet, dann Hexan und wiederum Stickstoff. Danach
wird dieSäulege füllt.
Ofentemperatur: 175 ºC.Temperatur des Injektors und Detektors: 230 ºCTrägergas: Stickstoff (20 ml/Min.).
3.2.2. Mikroliterspritze, 10 µl mit 0,1 µl-Einteilung.
Anmerkung:
Mit anderen Säulen kann ebenfalls eine gute Trennung erreicht
werden, vor allem mit Kapillarsäulen (z. B. FFAP).
Die unten beschriebene Durchführung der Bestimmung ist nur
beispielhaft angegeben.
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Vorbereitung der Probe
In ein geeignetes Glasgefäß mit Schliff (Inhalt etwa 40 ml) gibt man
20 ml Wein, 2 ml des internen Standards (3.1.2) und 1 ml verdünnte
Schwefelsäure (3.1.3).
Nach kräftigem Umschütteln fügt man 10 ml Diethylether (3.1.1)
hinzu und extrahiert die Sorbinsäure durch 5minütiges Schütteln in
die organische Phase. Man läßt absitzen.
3.3.2. Vorbereitung der Eichlösung
Einem Wein, dessen Etherextrakt im Chromatogramm keinen Peak
auf der Höhe der Sorbinsäure aufweist, werden 100 mg/l Sorbinsäure
zugesetzt. 20 ml dieser Probe werden, wie unter 3.3.1 beschrieben,
behandelt.
3.3.3. Chromatographie
Man injiziert je 2 µl der nach 3.3.2 und 3.3.1 erhaltenen Etherex-
trakte. Man nimmt die entsprechenden Chromatogramme auf,
identifiziert die Sorbinsäure und den internen Standard anhand der
Retentionszeiten und mißt die Höhe (oder Fläche) der registrierten
Peaks.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 116
▼B
3.4. Angabe der Ergebnisse
3.4.1. Berechnung
Der Sorbinsäuregehalt des zu untersuchenden Weines, ausgedrückt
in mg/l, beträgt:
100/C1h
H/C1I
i
H = Höhe des Sorbinsäurepeaks der Eichlösung
h = Höhe des Sorbinsäurepeaks des zu untersuchenden Weines
I = Höhe des Peaks des internen Standards der Eichlösungi = Höhe des Peaks des internen Standards des zu untersuchenden
Weines.
Anmerkung:Der Sorbinsäuregehalt kann in gleicher Weise mit den Flächen der
Peaks berechnet werden.
4. DÜNNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE METHODE ZUM
NACHWEIS SEHR KLEINER MENGEN SORBINSÄURE
4.1. Reagenzien
4.1.1. Diethylether (C
2H5)2O).
4.1.2. Schwefelsäure (H2SO4)(ρ20= 1,84 g/ml) mit Wasser 1:3 verdünnt (v/
v).
4.1.3. Sorbinsäure-Eichlösung, 20 mg/l in Ethanol (10 % Vol.).4.1.4. Fließmittel: Hexan-Pentan-Eisessig (20:20:3)
(C
6H14—C5H12—C H3COOH, ρ20= 1,05 g/ml).
4.2. Gerätschaften
4.2.1. Polyamid-Fertigplatten mit Fluoreszenzindikator, 20 × 20 cm
Schichtdicke0,15 mm.
4.2.2. DC-Kammer.
4.2.3. Mikropipette oder Mikroliterspritze zum Auftragen von 5 µl ± 0,1 µl
genau.
4.2.4. UV-Lampe(254 nm).
4.3. Durchführung der Bestimmung
4.3.1. Vorbereitung der Probe
In einen Scheidetrichter mit Schliff (Inhalt etwa 25 ml) gibt man
10 ml Wein, 1 ml verdünnte Schwefelsäure (4.1.2) und 5 ml Diethy-
lether (4.1.1). Man schüttelt aus und läßt absitzen.
4.3.2. Herstellung der verdünnten Eichlösungen
Durch Verdünnen der Eichlösung (4.1.3) stellt man 5 Lösungen her,
die 2 - 4 - 6 - 8 und 10 mg/l Sorbinsäure enthalten.
4.3.3. Chromatographie
2 cm vom unteren Rand entfernt trägt man mit einer Mikropipette
oder Mikroliterspritze 5 µl des nach 4.3.1 erhaltenen Etherextraktes
und je 5 µl der verdünnten Eichlösungen (4.3.2) in 2-cm-Abständen
auf.
Man chromatographiert nach Kammersättigung etwa 12—15 cm
hoch (etwa 30 Minuten). Die Platte wird unter einem kalten Luft-
strom getrocknet. Man betrachtet das Chromatogramm unter der
UV-Lampebe i 254 nm.
Sorbinsäure erscheint als dunkelvioletter Fleck auf gelb fluoreszie-
rendem Untergrund.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 117
▼B
4.4. Angabe der Ergebnisse
Durch Farbvergleich des Fleckes der zu untersuchenden Probe mit
den Flecken der Eichlösungen können Sorbinsäuregehalte zwischen
2 und 10 mg/l halbquantitativ abgeschätzt werden. 1 mg/l kann
bestimmt werden, indem man 10 µl der zu untersuchenden Probe
aufträgt. Beträgt der Gehalt an Sorbinsäure mehr als 10 mg/l, so
werden weniger als 5 µl der zu untersuchenden Probe aufgetragen
(Mikroliterspritze).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 118
▼B
23.L-ASCORBINSÄURE
1. PRINZIP DER METHODEN
Die nachstehend beschriebenen Verfahren erlauben die Bestimmung
der L-Ascorbinsäure und der Dehydroascorbinsäure in Weinen und
Mosten.
1.1. Referenzmethode (fluorimetrisch)
L-Ascorbinsäurewird durch Aktivkohlezu De hydroascorbinsäure
oxidiert. Diese Verbindung reagiert mit ortho-Phenylendiamin zu
einer fluoreszierenden Verbindung. In einem Blindversuch in Anwe-
senheit von Borsäure (Bildung eines Borsäure-
Dehydroascorbinsäurekomplexes) wird die Nebenfluoreszenz ermit-
telt und von der fluorimetrischen Bestimmung abgezogen.
1.2. Gebräuchliche Methode (photometrisch)
Die L-Ascorbinsäure wird mit Jod zu Dehydroascorbinsäure oxidiert
und diese mit 2,4-Dinitrophenylhydrazin zu rotgefärbtem bis (2,4-
Dinitrophenylhydrazon) der Diketogulonsäure umgesetzt, dessen
Farbintensität nach dünnschichtchromatographischer Trennung bei
500 nm im Spektralphotometer gemessen wird.
2. REFERENZMETHODE (fluorimetrische Methode)2.1. Reagenzien
2.1.1. 0,02%ige Lösung von ortho-Phenylendiamindihydrochlorid
(C
6H10Cl2N2) (g/v). Jeweils frisch herzustellen.
2.1.2. Natriumacetat-Trihydrat (CH3COONa 3H2O): 500 g/l.
2.1.3. Lösung von Borsäureund Natriumace tat
3 g Borsäure(H3BO3) werden in 100 ml Natriumacetatlösung (2.1.2)
gelöst. Diese Lösung ist jeweils frisch herzustellen.
2.1.4. Essigsäure(CH3COOH) 56 % (v/v), pH =1,2; hergestellt aus Essig-
säure( ρ20= 1,05 g/ml).
2.1.5. L-Ascorbinsäure-Standardlösung, 1 g/l.
Unmittelbar vor der Verwendung werden 50 mg L-Ascorbinsäure
(C6H8O6), die vorher im Exsikkator unter Luft- und Lichtabschluß
getrocknet worden sind, in 50 ml der Essigsäurelösung (2.1.4) gelöst.
2.1.6 Aktivkohlere inst z.A. (1)
In einen 2-Liter-Erlenmeyerkolben gibt man 100 g Aktivkohle unf
fügt 500 ml einer 10%igen Salzsäure (HCl) ( ρ20= 1,19 g/ml) 10/
100 (v/v) verdünnt hinzu. Man bringt zum Sieden und filtriert
sodann über eine Glasfritte (Porosität 3). Man bringt die so behan-
delte Kohle in einen 2-Liter-Erlenmeyerkolben, fügt 1 Liter Wasser
hinzu, schüttelt und filtriert über eine Glasfritte (Porosität 3). Man
wiederholt diesen Vorgang 2mal. Der Rückstand wird im Trocken-
schrank bei 115 ± 5 ºC während 12 Stunden getrocknet (z. B. über
Nacht).
2.2. Gerätschaften
2.2.1. Fluoreszenz-Spektrometer mit Kontinuum-Strahler.
Die optimalen Wellenlängen für die Anregung und Emission sind
von dem verwendeten Gerät abhängig und werden vorher bestimmt.
Für die Anregung liegt diese bei etwa 350 nm, für die Emmission
etwa bei 430 nm.
Küvetten mit 1 cm Schichtdicke.
2.2.2. Glasfritte(Porisität 3).
2.2.3. Reagenzgläser (Durchmesser /asymptequal10 mm).
2.2.4. Schüttelmaschine für Reagenzgläser.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 119
(1) Einer der handelsüblichen Namen ist „Norit“.
▼B
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Vorbereitung des Weines oder Mostes
Ein entsprechendes Volumen Wein oder Most wird in einem 100-ml-
Meßkolben mit der 56%igen Essigsäurelösung (2.1.4) zur Marke
aufgefüllt, so daß der L-Ascorbinsäuregehalt der Lösung weniger
als 60 mg/l beträgt. Man schüttelt gut um. Sodann fügt man 2 g
Aktivkohle (2.1.6) hinzu und läßt unter zeitweiligem Schütteln 15
Minuten stehen. Man filtriert über ein normales Filter und verwirft
die ersten Milliliter.
In zwei 100-ml-Meßkölbchen gibt man je 5 ml des Filtrats und fügt
5 ml der Borsäure-Acetatmischung (2.1.3) (Leerwert) bzw. 5 ml der
Natriumacetatlösung (2.1.2) (Meßwert) hinzu. Man läßt 15 Minuten
unter zeitweiligem Schütteln stehen und füllt dann zur Marke auf.
Jeweils 2 ml dieser Lösungen werden mit 5 ml des ortho-Phenylen-
diaminreagenzes (2.1.1) versetzt. Nach dem Schütteln läßt man 30
Minuten im Dunkeln stehen und mißt dann die Fluoreszenz.
2.3.2. Eichkurve
In drei 100-ml-Meßkölbchen werden 2 - 4 und 6 ml der L-Ascorbin-
säure-Standardlösung (2.1.5) gegeben und mit der Essigsäure (2.1.4)
zur Marke aufgefüllt. Die so hergestellten Lösungen enthalten 2 - 4
und 6 mg/100 ml. Man fügt 2 g Aktivkohle(2.1.6) hinzu und läßt
unter zeitweiligem Schütteln 15 Minuten stehen. Man filtriert über
ein normales Filter und verwirft die ersten Milliliter. Je 5 ml der
erhaltenen Filtrate werden in drei 100-ml-Meßkölbchen gegeben (1.
Serie), in weitere drei 100-ml-Meßkölbchen gibt man ebenfalls
jeweils 5 ml der erhaltenen Filtrate (2. Serie). In die Meßkölbchen
der 1. Serie (Leerwert) gibt man 5 ml der Borsäureacetatmischung
(2.1.3) und in die Meßkölbchen der 2. Serie (Meßwert) jeweils 5 ml
Natriumacetatlösung (2.1.2).
Man läßt unter zeitweiligem Schütteln 15 Minuten stehen und füllt
dann zur Marke mit destilliertem Wasser auf. Jeweils 2 ml werden
in einem Reagenzglas mit 5 ml des ortho-Phenylendiaminreagenzes
(2.1.1) versetzt. Nach dem Schütteln läßt man 30 Minuten im
Dunkeln stehen und mißt dann die Fluoreszenz.
2.3.3. Fluorimetrische Bestimmung
Man mißt die Eich- bzw. Probelösungen gegen den zugehörigen
Leerwert. Die Eichkurve ist eine Gerade, die durch den Nullpunkt
geht. Der Gehalt C an L-Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure
wird der Eichkurve entnommen.
2.3.4. Angabe der Ergebnisse
Der Gehalt an L-Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure im Wein,
ausgedrückt in mg/l, beträgt:
C·F
F = Verdünnungsfaktor.
3. GEBRÄUCHLICHE METHODE (photometrisch)
3.1. Reagenzien
3.1.1. 30%ige meta-Phosphorsäurelösung (g/v)
Man zerreibt einige Stücke meta-Phosphorsäure (HPO3)nin einem
Mörser (aus Porzellan) und wägt davon 30 Gramm ab. Durch
schnelles Übergießen mit destilliertem Wasser und kurzes Schütteln
wird gewaschen, das Waschwasser wird verworfen. Die gewaschene
meta-Phosphorsäure wird unter Schütteln in einem 100-ml-
Meßkolben in destilliertem Wasser gelöst und auf 100 ml ergänzt.
3.1.2. 3%ige meta-Phosphorsäurelösung (g/v)
Die Lösung wird unmittelbar vor Gebrauch durch Verdünnen der
Lösung 3.1.1 (1:10) hergestellt.
3.1.3. 1%ige meta-Phosphorsäurelösung (g/v)
Die Lösung wird unmittelbar vor Gebrauch durch Verdünnen der
Lösung 3.1.1 (1:30) hergestellt.
3.1.4. Polyamidsuspension1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 120
▼B
10 g Polyamidpulver zur Chromatographie läßt man in 60 ml destil-
liertem Wasser 2 Stunden quellen (diese Menge ist für 4
Bestimmungen ausreichend).
3.1.5. Thioharnstoff (H2NCSNH2).
3.1.6. 0,05 M Jodlösung (I2).
3.1.7. 6%ige2,4-Dinitrophe nylhydrazinlösung (g/v),
6,0 g 2,4-Dinitrophenylhydrazin (C6H6N4O4) werden zunächst in
50 ml Eisessig ( ρ20= 1,05 g/ml) suspendiert und danach durch
Zugabe von 50 ml Schwefelsäure (H2SO4,ρ20= 1,84 g/ml) durch
Schütteln in Lösung gebracht.
3.1.8. Ethylacetat: Zur Herstellung der Lösung wird das Ethylacetat
(C4H8O2) mit 2 % (v/v) Eisessig (3.1.12) versetzt.
3.1.9. Chloroform (CHCl3).
3.1.10. 0,5%igeStärke lösung (g/v).3.1.11. Fließmittel:
Ethylacetat … ............................................. 50 Vol.
Chloroform …............................................ 60 Vol.
Eisessig … ................................................ 5 Vol.
Das Fließmittel wird 12 Stunden vor Gebrauch hergestellt.
3.1.12. Eisessig (CH
3COOH) ( ρ20= 1,05 g/ml).
3.1.13. Ascorbinsäurelösung: 0,1 g/100 ml 1%ige meta-Phosphorsäurelösung
(3.1.3).
3.2. Gerätschaften
3.2.1. Laborzentrifuge und Zentrifugengläser (50 ml) mit eingeschliffenem
Stopfen.
3.2.2. Wasserbad (thermostatisiert zwischen 5 und 10 ºC).3.2.3. Wasserbad (thermostatisiert auf 20 ºC).3.2.4. Kieselgel-Fertigplatten, 20 × 20 cm, Schichtdicke 0,25 oder 0,3 mm.3.2.5. DC-Kammer.3.2.6. Mikropipetten 0,2 ml.3.2.7. Spektralphotometer für die Messung bei 500 nm in 1 cm Küvetten.
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Oxidation der L-Ascorbinsäure zu Dehydroascorbinsäure
In einem 100-ml-Meßkolben werden 50 ml der zu untersuchenden
Flüssigkeit mit 15 ml Polyamidsuspension (3.1.4) versetzt und mit
3%iger meta-Phosphorsäurelösung (3.1.2) zur Marke aufgefüllt.
Man läßt 60 Minuten unter häufigem Umschütteln stehen und filt-
riert sodann durch ein Faltenfilter. 20 ml des Filtrats werden in ein
50 ml Zentrifugenglas mit Schliffstopfen pipettiert. Man fügt 1 ml
0,05 M Jodlösung (3.1.6) hinzu, mischt durch und entfernt nach 1
Minute den Jodüberschuß durch Zugabe von etwa 25 mg Thioharn-
stoff (3.1.6).
3.3.2. Bildung und Extraktion des bis-(2,4-Dinitrophenylhydrazons) der
Diketogulonsäure
Das Zentrifugenglas wird in ein Wasserbad von 5 bis 10 ºC gestellt
und 4 ml 2,4-Dinitrophenylhydrazinlösung (3.1.7) hinzugefügt. Nach
gründlichem Durchmischen, wobei der Schliff nicht benetzt werden
darf, bleibt das Glas gut verschlossen etwa 16 Stunden (über Nacht)
bei 20 ºC (Thermostat) stehen.
Danach pipettiert man 15 ml Ethylacetat (3.1.8) in das Zentrifug-
englas, verschließt mit dem Schliffstopfen, schüttelt 30 Sekunden
kräftig und zentrifugiert zur Trennung der Schichten 5 Minuten mit
350—400 g. Von der Ethylacetatphase werden 10 ml in ein
Reagenzglas mit Schliff pipettiert. Zur Reaktionslösung im Zentri-
fugenglas fügt man 5 ml Ethylacetat (3.1.8), schüttelt wiederum 301990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 121
▼B
Sekunden kräftig und zentrifugiert 5 Minuten mit 350—400 g. 5 ml
der Ethylacetatphase werden abpipettiert, zu den 10 ml des im
Reagenzglas befindlichen ersten Extraktes gegeben und gemischt.
3.3.3. Chromatographische Trennung des bis-(2,4-Dinitrophenylhydra-
zons): (innerhalb 2 Stunden nach der Extraktion (3.3.2)
durchzuführen)
0,2 ml des Ethylacetatextraktes werden über die ganze Startlinie
einer Kiesel-G-Platte aufgetragen (Abstand vom unteren und seitli-
chen Rand: 2 cm). Das Fließmittel wird 1 cm hoch in die Kammer
gegeben. Man chromatographiert mit dem unter 3.1.11 angegebenen
Fließmittel in kammergesättigter Atmosphäre bis zum oberen Plat-
tenrand. Die Platten werden aus der Kammer herausgenommen und
60 Minuten unter dem Abzug getrocknet. Die rotgefärbte Zone des
bis-(2,4-Dinitrophenylhydrazons) der Diketogulonsäure wird mit
Hilfe eines plangeschliffenen Spatels (die Platte wird zweckmäßig
hierzu senkrecht auf ein glattes Papier gestellt) in ein Reagenzglas
mit Schliff gebracht, mit 4 ml Eisessig (3.1.12) versetzt,
verschlossen und unter häufigem Durchmischen 30 Minuten stehen-
gelassen. Die Suspension wird durch ein kleines Faltenfilter
unmittelbar in die Küvette (3.2.7) filtriert.
Das blanke Filtrat wird gegen Eisessig (3.1.12) als Leerwert im
Spektralphotometer bei 500 nm gemessen.
3.3.4. Eichkurve
In drei 100-ml-Meßkölbchen werden 5 - 10 und 15 ml der L-Ascor-
binsäurelösung (3.1.13) gegeben und mit 1%iger meta-
Phosphorsäurelösung (3.1.3) zur Marke aufgefüllt. Man erhält so
Lösungen, die jeweils 50, 100 und 150 mg Ascorbinsäure in 1 Liter
enthalten. Mit je 50 ml dieser Lösungen wird wie oben beschrieben
(3.3.1, 3.3.2 und 3.3.3) die Reaktion durchgeführt.
Die L-Ascorbinsäurewerte gegen die zugehörigen Extinktionen
aufgetragen, liegen auf einer Geraden, die durch den Nullpunkt geht.
3.3.5. Angabe der Ergebnisse
Der Gehalt an L-Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure wird in
mg je Liter angegeben.
3.3.5.1. Berec hnung
Der Gehalt an L-Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure wird
entsprechend der nach (3.3.3) erhaltenen Extinktion der Eichkurve
entnommen.
Anmerkung:
Liegt der Gehalt an L-Ascorbinsäure und Dehydroascorbinsäure über
150 mg/l, verringert man das Ausgangsvolumen auf 25, 20 oder
10 ml Wein und multipliziert das erhaltene Ergebnis mit dem
entsprechenden Verdünnungsfaktor F.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 122
▼B
24.pH-WERT
1. PRINZIP DER METHODE
Die Potentialdifferenz zwischen 2 Elektroden, die in die zu untersu-
chende Flüssigkeit tauchen, wird gemessen. Eine der Elektroden
besitzt ein Potential, das eine bestimmte Funktion des pH-Wertes
dieser Lösung darstellt, die andere Elektrode ist die Referenzelek-
trode mit einem festen und bekannten Potential.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Geeichtes pH-Meter (erforderliche Genauigkeit mindestens ± 0,05
pH-Einheiten).
2.2. Elektroden:
2.2.1. Glaselektrode, Aufbewahrung in destilliertem Wasser.2.2.2. Referenzelektrode (Kalomel-gesättigte Kaliumchlorid-Elektrode),
Aufbewahrung in gesättigter Kaliumchloridlösung.
2.2.3. Kombinierte Elektrode (Aufbewahrung in destilliertem Wasser).
3. REAGENZIEN
3.1. Pufferlösungen:3.1.1. Gesättigte Lösung von Kaliumhydrogentartrat. Die Lösung enthält
mindestens 5,7 Kaliumhydrogentartrat (C
4H5KO6) im Liter bei 20 ºC.
Diese mit Thymol (0,1 g/200 ml) konservierte Lösung ist bis zu 2
Monaten haltbar.
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,57 bei 20 ºC
3,56 bei 25 ºC
3,55 bei 30 ºC
3.1.2. 0,05 M Kaliumhydrogenphthalatlösung. Die Lösung enthält genau
10,211 g/l Kalumhydrogenphthalat wasserfrei (C
8H5KO4) in 1 Liter
bei 20 ºC (Haltbarkeit max. 2 Monate).
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,999 bei 15 ºC
4,003 bei 20 ºC
4,008 bei 25 ºC
4,015 bei 30 ºC
3.1.3. Lösung von:
Kaliumdihydrogenphosphat, KH
2PO4…................. 3,402 g
di-Kaliumhydrogenphosphat, K2HP O4…................ 4,354 g
Wasser zu …............................................ 1 l
(Haltbarkeit: max. 2 Monate)
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1466,90 bei 15 ºC
6,88 bei 20 ºC
6,86 bei 25 ºC
6,85 bei 30 ºC
Anmerkung:
Die handelsüblichen Pufferlösungen können ebenfalls verwendet
werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 123
▼B
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Vorbereitung der Probe
4.1.1. Most und Wein
Die Messung wird direkt im Most oder Wein durchgeführt.
4.1.2. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK)
Das RTK wird mit Wasser auf 25 ± 0,5 % (g/g) Gesamtzucker
verdünnt (25 ºBrix).
Wenn P der Gesamtzuckergehalt des RTK, ausgedrückt in % (g/g),
ist, so werden
2500
P
g-RTK eingewogen und mit destilliertem Wasser auf 100 g ergänzt.
Das Wasser muß eine Leitfähigkeit unter 2 Mikrosiemens je cm
aufweisen.
4.2. Nullpunkteinstellung
Vor jeder Messung ist der Nullpunkt des Gerätes, entsprechend der
für das Gerät angegebenen Anleitung, einzustellen.
4.3. Eichung des pH-Meters
Mit den Pufferlösungen pH = 6,88 und pH = 3,57 wird das pH-
Meter gemäß der für das Gerät angegebenen Anleitung bei 20 ºC
geeicht.
Man überprüft die Eichung mit der Pufferlösung pH = 4,00 bei 20 ºC.
4.4. Messung
Man taucht die Elektrode bei einer Temperatur zwischen 20 und
25 ºC, wobei diese möglichst nahe bei 20 ºC liegen soll, in die zu
untersuchende Lösung ein und liest den pH-Wert direkt ab.
Es müssen mindestens 2 Bestimmungen durchgeführt werden. Das
Ergebnis ist das arithmetische Mittel beider Bestimmungen.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der pH-Wert des Mostes, des Weines oder der RTK-Lösung
(25 ºBrix) wird mit 2 Dezimalen angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 124
▼B
25.SCHWEFELDIOXID
1. DEFINITION
Als Schwefeldioxid bezeichnet man das Schwefeldioxid, das in
nachstehenden Formen im Most oder Wein vorhanden ist: H2SO3,H
SO3−das Gleichgewicht hängt vom pH-Wert und der Temperatur ab:
H2SO3
H++ HSO3−
H2SO3stellt das molekulare Schwefeldioxid dar.
Als Gesamtschwefeldioxid bezeichnet man sämtliche Formen des
Schwefeldioxids, die im Wein in freiem oder gebundenem Zustand
vorhanden sind.
2. FREIES UND GESAMTES SCHWEFELDIOXID2.1. Prinzipder Methoden
2.1.1. Referenzmethode
2.1.1.1. Wein und Most
Schwefeldioxid wird durch einen Luft- oder Stickstoffstrom in eine
Vorlage, die eine verdünnte, neutralisierte Wasserstoffperoxid-
Lösung enthält, übergetrieben und oxidiert.
Die gebildete Schwefelsäure wird mit Natronlauge titriert.Das freie Schwefeldioxid wird in der Kälte übergetrieben (10 ºC).
Das Gesamtschwefeldioxid wird in der Hitze (ca. 100 ºC) überge-
trieben.
2.1.1.2. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat
Aus dem vorher verdünnten RTK wird das Gesamtschwefeldioxid in
der Hitze (etwa 100 ºC) übergetrieben.
2.1.2. Schnellmethode (für Wein und Most)
Das freie Schwefeldioxid wird direkt jodometrisch bestimmt.
Das gebundene Schwefeldioxid wird anschließend nach alkalischer
Hydrolyse durch jodometrische Titration bestimmt. Addiert man das
freie Schwefeldioxid dazu, so erhält man das Gesamtschwefeldioxid.
2.2. Referenzmethode
2.2.1. Gerätschaften
2.2.1.1. Die verwendete Apparatur muß, insbesondere den Kühler betreffend,
der Abbildung entsprechen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 125
▼B
Abbildung 1:
Die Maße sind in mm angegeben. Die inneren Durchmesser der 4
konzentrischen Kühlrohre, aus denen der Kühler besteht,
betragen 45, 34, 27 und 10 mm.
Das Gaseinleitungsrohr der Vorlage B endet in einer kleinen Kugel
von 1 cm Durchmesser, die 20 kreisförmig (horizontal) angeordnete
Löcher von 0,2 mm Durchmesser aufweist. Man kann das Einlei-
tungsrohr ebenso auch mit einer Glasfritte verschließen, die die
Bildung vieler kleiner Glasblasen bewirkt, um eine intensive Berüh-
rung der Gasphase mit der flüssigen Phase zu gewährleisten.
Durch die Apparatur sollen etwa 40 l/Stunde Gas strömen. Mit der
Druckreglerflasche auf der rechten Seite der Apparatur wird der
durch die Wasserstrahlpumpe erzeugte Unterdruck auf 20—30 cm
Wassersäule begrenzt. Um den Unterdruck genau einstellen zu
können, ist es zweckmäßig, zwischen das Absorptionsgefäß und die
Druckreglerflasche einen Strömungsmesser mit halbkapillarem Rohrzu schalten.
2.2.1.2. Mikrobürette.2.2.2. Reagenzien
2.2.2.1. 85%igePhosphorsäure(H
3PO4,(ρ20= 1,71 g/ml).
2.2.2.2. Wasserstoffperoxidlösung, 9,1 g H2O2/Liter (3 Volumen).
2.2.2.3. Indikatorlösung:
Methylrot …............................................. 100 mg
Methylenblau …......................................... 50 mgAlkohol (50 % Vol.) ….................................. 100 ml
2.2.2.4. Natronlauge(NaOH), 0,01 M.
2.2.3. Durchführung der Bestimmung
2.2.3.1. Bestimmung des freien Schwefeldioxids
Der Wein muß vor der Bestimmung 2 Tage bei 20 ºC in einer vollen
und gut verschlossenen Flasche gelagert werden.
— In das Absorptionsgefäß B gibt man 2—3 ml der Wasserstoffpe-
roxidlösung (2.2.2.2) sowie2 Tropfe n Indikator (2.2.2.3) und
neutralisiert mit 0,01 M Natronlauge (2.2.2.4).
Das Absorptionsgefäß wird an die Apparatur angeschlossen.
— In den 250-ml-Kolben A werden 50 ml der Probe und 15 ml
Phosphorsäure (2.2.2.1) gegeben und der Kolben angeschlossen.
Nunmehr wird 15 Minuten lang ein Luft- oder Stickstoffstrom
durch die Apparatur geleitet, dabei wird das freie Schwefeldioxid1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 126
▼B
übergetrieben und zu Schwefelsäure oxidiert. Nach dieser Zeit
wird das Absorptionsgefäß von der Apparatur genommen und
die gebildete Schwefelsäure mit 0,01 M Natronlauge (2.2.2.4)
titriert.
n = verbrauchte ml 0,01 M Natronlauge.
2.2.3.2. Angabe der Ergebnisse
Das freie Schwefeldioxid wird in Milligramm pro Liter (mg/mg/l)
ohne Dezimalstelle angegeben.
2.2.3.2.1. Berechnung
Freies Schwefeldioxid in mg/l: 6,4 · n.
2.2.3.3. Bestimmung des gesamten Schwefeldioxids2.2.3.3.1. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK)
Man verwendet eine 40%ige (g/v) Lösung, die, wie in Kapitel
„Gesamtsäure“ unter 5.1.2. beschrieben, hergestellt wird. In den
250-ml-Kolben A werden 50 ml dieser Lösung und 5 ml Phosphor-
säure (2.2.2.1) gegeben, und der Kolben wird an die Apparatur
angeschlossen.
2.2.3.3.2. Wein und Most
Vermuteter Gehalt der Probe ≤50 mg/l Gesamt-SO
2: In den 250-
ml-Kolben A werden 50 ml der Probe und 15 ml Phosphorsäure
(2.2.2.1) gegeben, und der Kolben wird angeschlossen.
Spätestens bis zum ►M331. August 1996 ◄ist es jedoch
zulässig, bei der Analyse des Gesamtschwefeldioxidgehaltes der
Traubensäfte 5 ml Phosphorsäure (2.2.2.1) in 25%iger Verdünnung
(g/v) zu verwenden.
Vermuteter Gehalt der Probe > 50 mg/l Gesamt-SO2. In den 100-ml-
Kolben A werden 20 ml der Probe und 5 ml Phosphorsäure (2.2.2.1)
gegeben und der Kolben angeschlossen.
In das Absorptionsgefäß B gibt man 2—3 ml der Wasserstoffpero-
xidlösung (2.2.2.2), die, wie oben beschrieben, neutralisiert wurde
und bringt den Wein in Kolben A mit einer kleinen Flamme von
4—5 cm Höhe, die den Boden des Kolbens unmittelbar berührt,
zum Sieden. Der Kolben soll nicht auf ein Drahtnetz, sondern auf
eine Platte mit einem Loch von 30 mm Durchmesser gestellt
werden, um das Anbrennen der Extraktstoffe an der Kolbenwand zu
vermeiden.
Während der Luft- oder Stickstoffstrom durch die Apparatur geleitet
wird, muß der Wein im Sieden gehalten werden. Nach 15 Minuten
ist das gesamte Schwefeldioxid übergetrieben und oxidiert. Die
gebildete Schwefelsäure wird mit 0,01 M Natronlauge (2.2.2.4)
titriert.
n = verbrauchte ml 0,01 M Natronlauge.
2.2.3.4. Angabe der Ergebnisse
Das Gesamtschwefeldioxid wird in Milligramm pro Liter (mg/l)
bzw. Milligramm pro Kilogramm (mg/kg) Gesamtzucker ohne Dezi-
malstelle angegeben.
2.2.3.4.1. Berechnung
Wein und Most
Gesamtschwefeldioxid in mg/l
— schwefeldioxidarme Proben (Probevolumen 50 ml) 6,4 · n
— andere Proben (Probevolumen 20 ml) 16 · n.
Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat (RTK)
Gesamtschwefeldioxid in mg/kg Gesamtzucker (Probevolumen 50 ml
der verdünnten Lösung):
1600 /C1n
P
P = Gesamtzuckergehalt in % (g/g).
2.2.3.4.2. Wiederholbarkeit (r)
Gehalt≤50 mg/l (Probevolumen 50 ml), r = 1 mg/l1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 127
▼B
Gehalt > 50 mg/l (Probevolumen 20 ml), r = 6 mg/l.
2.2.3.4.3. Vergleichbarkeit (R)
Gehalt≤50 mg/l (Probevolumen 50 ml), R = 9 mg/l
Gehalt > 50 mg/l (Probevolumen 20 ml), R = 15 mg/l.
2.3. Schnellmethode
2.3.1. Reagenzien
2.3.1.1. EDTA (Komplexon III): Dinatriumsalz der Ethylendinitrilo-tetraes-
sigsäure(C10H14N2Na2O8·2 H2O).
2.3.1.2. Natronlauge(NaOH) 4 M (160 g/l).2.3.1.3. Schwefelsäure (H
2SO4,(ρ20= 1,84 g/ml) 10 % (v/v).
2.3.1.4. Stärkelösung, 5 g/l:
5 g Stärke in etwa 500 ml Wasser lösen, unter Rühren zum Sieden
bringen, 10 Minuten im Sieden halten, 200 g Natriumchlorid (NaCl)
hinzufügen und nach dem Erkalten auf 1 Liter auffüllen.
2.3.1.5. 0,025 M Jodlösung (I2).
2.3.2. Gerätschaften
2.3.2.1. Erlenmeyerkolben, 500 ml.
2.3.2.2. Bürette.
2.3.2.3. Pipetten: 1, 2, 5 und 50 ml.
2.3.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.3.1. Freies Schwefeldioxid
In einen 500-ml-Erlenmeyerkolben gibt man:
— 50 ml Wein
— 5 ml Stärkelösung (2.3.1.4)
— 30 mg EDTA (2.3.1.1)
— 3 ml H2SO4, 10 % (v/v) (2.3.1.3).
Man titriert sofort mit 0,025 M Jodlösung (2.3.1.5), bis die Blau-
färbung 10—15 Sekunden lang bestehen bleibt.
n = verbrauchte ml 0,025 M Jodlösung.
2.3.3.2. Gesamtschwefeldioxid
Man fügt 8 ml 4 M Natronlauge (2.3.1.2) zu, schüttelt einmal um
und wartet 5 Minuten. Danach fügt man unter kräftigem Schütteln
in einem Guß 10 ml der 10%igen Schwefelsäurelösung (2.3.1.3) zu
und titriert sofort mit 0,025 M Jodlösung (2.3.1.5).
n′= verbrauchte ml 0,025 M Jodlösung.
Nun fügt man 20 ml 4 M Natronlauge(2.3.1.2) hinzu, schütte lt
einmal um und wartet 5 Minuten. Man verdünnt mit 200 ml sehr
kaltem Wasser.
Anschließend werden unter kräftigem Schütteln in einem Guß 10 ml
10%ige Schwefelsäurelösung (2.3.1.3) zugegeben, und das freige-
setzte Schwefeldioxid wird mit 0,025 M Jodlösung (2.3.1.5) titriert.
n″= verbrauchte ml 0,025 M Jodlösung.
2.3.4. Angabe der Ergebnisse
2.3.4.1. Berec hnung
Freies Schwefeldioxid in mg/l: 32 n.
Gesamtschwefeldioxid mg/l: 32 · (n + n ′+n″).
Anmerkungen:1. Bei Rotweinen, die wenig SO
2enthalten, empfiehlt es sich, mit
einer stärker verdünnten Jodlösung, z. B. 0,01 M, zu arbeiten.
Bei der Berechnung wird dann der Faktor 32 durch 12,8 ersetzt.
2. Bei der Titration von Rotweinen ist es zweckmäßig, den Wein
von unten mit gelbem Licht anzustrahlen, indem man entweder
mit einer üblichen Glühbirne und einem Kaliumchromatfilter
oder mit einer Natriumdampflampe arbeitet. In einem verdun-1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 128
▼B
kelten Raum kann man dann beobachten, wie der ursprünglich
transparente Wein beim Farbumschlag der Stärkelösung lichtun-
durchlässig wird.
3. Liegt die gefundene Schwefeldioxidmenge bei oder über dem
gesetzlichen Grenzwert, so ist es zweckmäßig, das Gesamtschwe-
feldioxid nach der Referenzmethode zu bestimmen.
4. Für eine sehr genaue Bestimmung des Schwefeldioxids wird diese
üblicherweise an einer Probe durchgeführt, die vor der Analyse
zwei Tage unter Luftabschluß bei einer Temperatur von 20 ºC
aufbewahrt wurde; die Analyse wird ebenfalls bei dieser Tempe-
ratur durchgeführt.
5. Da bestimmte Stoffe durch Jod in saurem Milieu oxidiert werden,
ist es für sehr genaue Bestimmungen notwendig, die hierfür
verbrauchte Jodmenge zu ermitteln. Zu diesem Zweck wird das
freie Schwefeldioxid vor der Titration an Acet- oder Propional-
dehyd gebunden: In einen 300 ml Erlenmeyerkolben gibt man
50 ml Wein und 5 ml einer Acetaldehydlösung (C2H4O, 7 g/l)
oder 5 ml Propionaldehydlösung (C3H6O, 10 g/l).
Man verschließt den Kolben und läßt mindestens 30 Minuten
stehen. Nach Zugabe von 3 ml 10%iger Schwefelsäurelösung
(2.3.1.3) titriert man mit 0,025 M Jodlösung (2.3.1.5) bis zum
Farbumschlag.
n/tripleprime= verbrauchte ml 0,025 M Jodlösung. Dieser Wert muß von n
(freies Schwefeldioxid) und n + n ′+n″(Gesamtschwefeldioxid)
abgezogen werden.
Der Wert n /tripleprimeist in der Regel niedrig: 0,2 bis 0,3 ml 0,025 M
Jodlösung. Wurde dem Wein Ascorbinsäure zugesetzt, ist der
Wert von n /tripleprimehöher und ermöglicht so eine zumindest annähernde
Bestimmung der zugesetzten Menge (1 ml 0,025 M Jodlösung
oxidiert 4,4 mg Ascorbinsäure). Durch Bestimmung von n /tripleprime
lassen sich so unschwer Weine nachweisen, denen Ascorbinsäure
in Mengen über 20 mg/l zugesetzt wurde und die noch keine
Oxidationsprodukte gebildet haben.
3. MOLEKULARES SCHWEFELDIOXID
3.1. Prinzipder Methode
Der Anteil an molekularem Schwefeldioxid H2SO3in freiem Schwe-
feldioxid wird in Abhängigkeit vom pH-Wert, dem Alkoholgehalt
und der Temperatur berechnet.
Für eine gegebene Temperatur und einen gegebenen Alkoholgehalt
lautet die Formel:
H2SO3
H++ HSO3−
(1) H2SO3¼L
10pH/C0pkM ðÞþ1
mit
pKM=p KT/C0Aﬃﬃ
Ip
1þBﬃﬃ
Ip
L= [ H2SO3] + [HSO3−]
I = Ionenstärke.A und B = Koeffizienten, die mit der Temperatur und dem Alko-
holgehalt variieren.
K
T= thermodynamische Dissoziationskonstante; der Wert
pKTist in Tabelle 1 in Abhängigkeit vom Alkoholge-
halt und der Temperatur angegeben.
KM= gemischte Dissoziationskonstante.
Nimmt man als Ionenstärke I den Durchschnittswert 0,038 an, so
gibt Tabelle 2 die Werte pKMin Abhängigkeit von der Temperatur
und dem Alkoholgehalt an.
Der Gehalt an molekularem Schwefeldioxid, berechnet nach
Gleichung (1), ist in Tabelle 3 in Abhängigkeit vom pH-Wert, der
Temperatur und dem Alkoholgehalt angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 129
▼B
3.2. Berechnung
Sind der pH-Wert des Weines und sein Alkoholgehalt bekannt, so
wird der Anteil an molekularem Schwefeldioxid in Tabelle 3 für
die Temperatur t ºC abgelesen; X = % molekulares Schwefeldioxid
gemäß Tabelle 3.
Gehalt an molekularem Schwefeldioxid in mg/l:
X·C
C = Gehalt an freiem Schwefeldioxid in mg/l.
TABELLE 1
Werte für die termodynamische Konstante pKT
Alkohol % Vol.Temperatur ºC
20 25 30 35 40
0 1,798 2,000 2,219 2,334 2,493
5 1,897 2,098 2,299 2,397 2,527
10 1,997 2,198 2,394 2,488 2,606
15 2,099 2,301 2,503 2,607 2,728
20 2,203 2,406 2,628 2,754 2,895
TABELLE 2
Werte für die gemischte Konstante pKMI = 0,038
Alkohol % Vol.Temperatur ºC
20 25 30 35 40
0 1,723 1,925 2,143 2,257 2,416
5 1,819 2,020 2,220 2,317 2,446
10 1,916 2,116 2,311 2,405 2,522
15 2,014 2,216 2,417 2,520 2,640
20 2,114 2,317 2,538 2,663 2,863
TABELLE 3
Molekulares SchwefeldioxidinProzent desfreien Schwefeldioxids(I=0,038)
pHT = 20 ºC
Alkohol % Vol.
0 5 10 15 20
2,8 7,73 9,46 11,55 14,07 17,09
2,9 6,24 7,66 9,40 11,51 14,07
3,0 5,02 6,18 7,61 9,36 11,51
3,1 4,03 4,98 6,14 7,58 9,36
3,2 3,22 3,99 4,94 6,12 7,58
3,3 2,58 3,20 3,98 4,92 6,12
3,4 2,06 2,56 3,18 3,95 4,92
3,5 1,64 2,04 2,54 3,16 3,95
3,6 1,31 1,63 2,03 2,53 3,16
3,7 1,04 1,30 1,62 2,02 2,53
3,8 0,83 1,03 1,29 1,61 2,02
T = 25 ºC
2,8 11,47 14,23 17,15 20,67 24,752,9 9,58 11,65 14,12 17,15 22,71
3,0 7,76 9,48 11,55 14,12 17,18
3,1 6,27 7,68 9,40 11,55 14,15
3,2 5,04 6,20 7,61 9,40 11,58
3,3 4,05 4,99 6,14 7,61 9,42
3,4 3,24 4,00 4,94 6,14 7,63
3,5 2,60 3,20 3,97 4,94 6,16
3,6 2,07 2,56 3,18 3,97 4,55
3,7 1,65 2,05 2,54 3,18 3,98
3,8 1,32 1,63 2,03 2,54 3,181990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 130
▼B
pHT = 20 ºC
Alkohol % Vol.
0 5 10 15 20
T = 30 ºC
2,8 18,05 20,83 24,49 29,28 35,36
2,9 14,89 17,28 20,48 24,75 30,29
3,0 12,20 14,23 16,98 20,71 25,66
3,1 9,94 11,65 13,98 17,18 21,52
3,2 8,06 9,48 11,44 14,15 17,88
3,3 6,51 7,68 9,30 11,58 14,75
3,4 5,24 6,20 7,53 9,42 12,08
3,5 4,21 4,99 6,08 7,63 9,84
3,6 3,37 4,00 4,89 6,16 7,98
3,7 2,69 3,21 3,92 4,95 6,44
3,8 2,16 2,56 3,14 3,98 5,19
T = 35 ºC
2,8 22,27 24,75 28,71 34,42 42,18
2,9 18,53 20,71 24,24 29,42 36,69
3,0 15,31 17,18 20,26 24,88 31,52
3,1 12,55 14,15 16,79 20,83 26,77
3,2 10,24 11,58 13,82 17,28 22,51
3,3 8,31 9,42 11,30 14,23 18,74
3,4 6,71 7,63 9,19 11,65 15,49
3,5 5,44 6,16 7,44 9,48 12,71
3,6 4,34 4,95 6,00 7,68 10,36
3,7 3,48 3,98 4,88 6,20 8,41
3,8 2,78 3,18 3,87 4,99 6,80
T = 40 ºC
2,8 29,23 30,68 34,52 40,89 50,142,9 24,70 26,01 29,52 35,47 44,74
3,0 20,67 21,83 24,96 30,39 38,85
3,1 17,15 18,16 20,90 25,75 33,54
3,2 14,12 14,98 17,35 21,60 28,62
3,3 11,55 12,28 14,29 17,96 24,15
3,4 9,40 10,00 11,70 14,81 20,19
3,5 7,61 8,11 9,52 12,13 16,73
3,6 6,14 6,56 7,71 9,88 13,77
3,7 4,94 5,28 6,22 8,01 11,25
3,8 3,97 4,24 5,01 6,47 9,151990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 131
▼B
26.NATRIUM
1. PRINZIP DER METHODEN1.1. Referenzmethode: Atomabsorptionsspektrometrie
Natrium wird nach Zusatz eines Puffers (Cäsiumchlorid) zur Unter-
drückung der Ionisation direkt aus dem Wein mittels
Atomabsorptionsspektrometrie bestimmt.
1.2. Gebräuchliches Verfahren: Flammenphotometrie.
Natrium wird direkt in dem mindestens 1:10 verdünnten Wein
mittels Flammenphotometrie bestimmt.
2. REFERENZMETHODE2.1. Reagenzien
2.1.1. Natriumlösung 1 g/l:
Es wird eine handelsübliche Natriumstandardlösung verwendet.
Diese Lösung kann auch hergestellt werden, indem 2,542 g getroc-
knetes Natriumchlorid (NaCl) in destilliertem Wasser gelöst und
auf 1 Liter aufgefüllt werden.
Diese Lösung wird in einer Polyethylenflasche aufbewahrt.
2.1.2. Vergleichslösung:
Citronensäure (C
6H8O7,H2O)… ...................... 3,5 g
Saccharose(C12H22O11)… ............................ 1,5 g
Glycerin (C3H8O3…................................. 5,0 g
Calciumchlorid (wasserfrei) (Ca Cl2)….............. 50 mg
Magnesiumchlorid (wasserfrei) (Mg Cl2)….......... 50 mg
Alkohol abs. (C2H5OH)…........................... 50 ml
Destilliertes Wasser zu … ............................ 500 ml
2.1.3. Cäsiumchloridlösung, 5 % Cäsium:
6,33 g Cäsiumchlorid (CsCl) werden in 100 ml destilliertem Wasser
gelöst.
2.2. Gerätschaften
2.2.1. Atomabsorptionsspektrometer mit Brennerkopf für Luft/Acetylen.2.2.2. Hohlkathodenlampe für Natrium.
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Vorbereitung der Probe
2,5 ml Wein werden in einem 50 ml-Meßkölbchen nach Zusatz von
1 ml Cäsiumchloridlösung (2.1.3) mit destilliertem Wasser zur
Markeaufge füllt.
2.3.2. Herstellung der Eichlösungen
In fünf 100-ml-Meßkölbchen gibt man 0 - 2,5 - 5 - 7,5 bzw. 10 ml
der 1:100 verdünnten Natrium-Standardlösung (2.1.1), fügt jeweils
5,0 ml Vergleichslösung (2.1.2) und 2 ml der Cäsiumchloridlösung
(2.1.3) hinzu und füllt mit destilliertem Wasser zur Marke auf.
Die so hergestellten Eichlösungen entsprechen 0 - 0,25 - 0,50 - 0,75
- 1,00 mg Natrium je Liter und enthalten 1 g/l Cäsium. Die Eichlö-
sungen werden in Polyethylenflaschen aufbewahrt.
2.3.3. Bestimmung
Die Messung erfolgt bei 589,0 nm. Der Nullpunkt wird mit der
Vergleichslösung, die 1 g/l Cäsium enthält (2.3.2), eingestellt. Der
verdünnte Wein und die Eichlösungen (2.3.2) werden nacheinander
gemessen. Die Bestimmungen werden doppelt ausgeführt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 132
▼B
2.4. Angabe der Ergebnisse
2.4.1. Berechnung
Mit den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Natriumgehalt C des verdünnten Weines, ausgedrückt in mg/l,
wird der Eichkurve entnommen (Mittelwert aus 2 Bestimmungen).
Der Natriumgehalt, ausgedrückt in Milligramm pro Liter Wein ohne
Dezimalstelle, beträgt:
20 · C
2.4.2. Wiederholbarkeit (r):
r = 1 + 0,024 ximg/l
xi= Natriumgehalt der Probe in mg/l.
2.4.3. Vergleichbarkeit (R):
R = 2,5 + 0,05 ximg/l
xi= Natriumgehalt der Probe in mg/l.
3. GEBRÄUCHLICHE METHODE
3.1. Reagenzien
3.1.1. Natrium-Eichlösung: 20 mg/l
Alkohol abs. (C2H5OH)…......................... 10 ml
Citronensäure (C6H8O7,H2O)… ..................... 700 mg
Saccharose(C12H22O11)… .......................... 300 mg
Glycerin (C3H8O3)…............................... 1000 mg
Kaliumhydrogentartrat (C4H5KO6) …............... 481,3 mg
Calciumchlorid (wasserfrei) (Ca Cl2)…............ 10 mg
Magnesiumchlorid (wasserfrei) (Mg Cl2)…........ 10 mg
Natriumchlorid, getrocknet (NaCl) ….............. 50,84 mg
Destilliertes Wasser ….............................
1Lit-
er
3.1.2. Verdünnungslösung
Alkohol abs. (C2H5OH)…......................... 10 ml
Citronensäure (C6H8O7,H2O)… ..................... 700 mg
Saccharose(C12H22O11)… .......................... 300 mg
Glycerin (C3H8O3)…............................... 1000 mg
Kaliumhydrogentartrat (C4H5KO6) …............... 481,3 mg
Calciumchlorid (wasserfrei) (Ca Cl2)…............ 10 mg
Magnesiumchlorid (wasserfrei) (Mg Cl2)…........ 10 mg
Destilliertes Wasser ….............................
1Lit-
er
Bei der Herstellung der Lösungen 3.1.1 und 3.1.2 wird das Kalium-
hydrogentartrat in etwa 500 ml heißem, destilliertem Wasser gelöst,
mit den anderen zuvor in etwa 400 ml destilliertem Wasser gelösten
Bestandteilen gemischt und auf 1 Liter aufgefüllt.
Die Lösungen werden unter Zusatz von 2 Tropfen Allylisothiocyarat
in Polyethylenflaschen aufbewahrt.
3.2. Gerätschaften
3.2.1. Flammenphotometer: mit Brennerkopf für Luft/Butan.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 133
▼B
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Herstellung der Eichlösungen
In fünf 100-ml-Meßkölbchen gibt man jeweils 5 - 10 - 15 - 20 und
25 ml der Natrium-Eichlösung - 20 mg/l (3.1.1) und füllt mit der
Verdünnungslösung (3.1.2) zur Marke auf. Man erhält Lösungenmit 1 - 2 - 3 - 4 und 5 mg Natrium jeLite r.
3.3.2. Bestimmung
Die Messungen werden bei 589,0 nm durchgeführt. Mit destilliertem
Wasser werden 100 % Transmission eingestellt. Die Eichlösungen
(3.3.1) und die 1:10 mit destilliertem Wasser verdünnten Probe-
lösungen werden nacheinander gemessen und die
Transmissionswerte (%) abgelesen. Wenn es notwendig ist, wird
der bereits 1:10 verdünnte Wein mit der Verdünnungslösung (3.1.2)
weiter verdünnt.
3.4. Angabe der Ergebnisse
3.4.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird die Eichkurve aufgestellt.
Der Natriumgehalt C des verdünnten Weines wird der Eichkurve
entnommen.
Der Natriumgehalt in Milligramm je Liter ohne Dezimalstelle
beträgt:
C·FF = Verdünnungsfaktor.
3.4.2. Wiederholbarkeit (r):
außer Likörwein r = 1,4 mg/l
Likörwein r = 2,0 mg/l.
3.4.3. Vergleichbarkeit (R):
R = 4,7 + 0,08 x
img/l
xi= Natriumgehalt der Probe in mg/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 134
▼B
27.KALIUM
1. PRINZIP DER METHODEN1.1. Referenzmethode: Atomabsorptionsspektrometrie
Kalium wird nach Zusatz eines Puffers (Cäsiumchlorid) zur Unter-
drückung der Ionisation direkt aus dem Wein mittels
Atomabsorptionsspektrometrie bestimmt.
1.2. Gebräuchliches Verfahren: Flammenphotometrie
Kalium wird direkt in dem verdünnten Wein mittels Flammenphoto-
metrie bestimmt.
2. REFERENZMETHODE
2.1. Reagenzien
2.1.1. Kalium-Eichlösung, 1 g/l
Es wird eine handelsübliche Kaliumstandardlösung verwendet. Diese
Lösung kann auch hergestellt werden, indem man 4,813 g Kaliumhy-
drogentartrat (C
4H5KO6) in destilliertem Wasser löst und auf 1 Liter
auffüllt.
2.1.2. Vergleichslösung
Citronensäure (C6H8O7,H2O)… ...................... 3,5 g
Saccharose(C12H22O11)… ............................ 1,5 g
Glycerin (C3H8O3)…................................. 5,0 g
Calciumchlorid (wasserfrei) (Ca Cl2)….............. 50 mg
Magnesiumchlorid (wasserfrei) (Mg Cl2)….......... 50 mg
Alkohol abs. (C2H5OH)…........................... 50 ml
Destilliertes Wasser …............................... 500 ml
2.1.3. Cäsiumchloridlösung, 5 % Cäsium
6,330 g Cäsiumchlorid (CsCl) werden in 100 ml destilliertem
Wasser gelöst.
2.2. Gerätschaften
2.2.1. Atomabsorptionsspektrometer mit Brennerkopf für Luft/Acetylen.2.2.2. Hohlkathodenlampe für Kalium.
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Vorbereitung der Probe
2,5 ml Wein (1:10 verdünnt) werden in einem 50-ml-Meßkölbchen
nach Zusatz von 1 ml Cäsiumchlorid (2.1.3) mit destilliertem Wasser
zur Markeaufge füllt.
2.3.2. Herstellung der Eichlösung
In fünf 100-ml-Meßkolben gibt man 0 - 2,0 - 4,0 - 6,0 und 8,0 ml
der 1:10 verdünnten Kalium-Eichlösung, 1 g/l (2.1.1), fügt jeweils
5 ml der Vergleichslösung (2.1.2) und 2 mlder Cäsiumchloridlösung
(2.1.3) zu und füllt mit destilliertem Wasser zur Marke auf. Die so
hergestellten Eichlösungen entsprechen 0 - 2 - 4 - 6 und 8 mg
Kalium je Liter und enthalten 1 g/l Cäsium. Die Eichlösungen
werden in Polyethylenflaschen aufbewahrt.
2.3.3. Bestimmung
Die Messung erfolgt bei 769,9 nm. Der Nullpunkt wird mit der
Vergleichslösung, die 1 g/l Cäsium enthält (2.3.2), eingestellt. Der
verdünnte Wein (2.3.1) und die Eichlösungen (2.3.2) werden nach-
einander gemessen. Die Messung wird wiederholt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 135
▼B
2.4. Angabe der Ergebnisse
2.4.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Kaliumgehalt C des verdünnten Weines in mg/l wird der Eich-
kurve entnommen (Mittelwert aus 2 Bestimmungen).
Der Kaliumgehalt, ausgedrückt in Milligramm pro Liter ohne Dezi-
malstelle, beträgt:
F·C
F = Verdünnungsfaktor (hier 200).
2.4.2. Wiederholbarkeit (r):
r = 35 mg/l.
2.4.3. Vergleichbarkeit (R):
R = 66 mg/l.
2.4.4. Sonstige Angabe der Ergebnisse
— in Milliäquivalenten je Liter: 0,0256 · F · C
— in Milligramm Kaliumhydrogentartrat je Liter: 4,813 · F · C.
3. GEBRÄUCHLICHE METHODE: FLAMMENPHOTOMETRIE
3.1. Reagenzien
3.1.1. Kalium-Eichlösung: 100 mg/l
Alkohol abs. (C2H5OH)…......................... 10 ml
Citronensäure (C6H8O7,H2O)… .................... 700 mg
Saccharose(C12H22O11)… .......................... 300 mg
Glycerin (C3H8O3)…............................... 1000 mg
Natriumchlorid (NaCl) ….......................... 50,8 mg
Calciumchlorid (wasserfrei) (Ca Cl2)…............ 10 mg
Magnesiumchlorid (wasserfrei) (Mg Cl2)…........ 10 mg
Kaliumhydrogentartrat (C4H5KO6) …............... 481,3 mg
Destilliertes Wasser zu … .......................... 1 000 l
Das Kaliumhydrogentartrat wird in etwa 500 ml heißem, destil-
liertem Wasser gelöst, mit den anderen zuvor in etwa 400 ml
destilliertem Wasser gelösten Bestandteilen gemischt und auf 1 Liter
aufgefüllt.
3.1.2. Verdünnungslösung
Alkohol abs. (C2H5OH)…......................... 10 ml
Citronensäure (C6H8O7,H2O)… .................... 700 mg
Saccharose(C12H22O11)… .......................... 300 mg
Glycerin (C3H8O3)…............................... 1000 mg
Natriumchlorid (NaCl) ….......................... 50,8 mg
Calciumchlorid (wasserfrei) (Ca Cl2)…............ 10 mg
Magnesiumchlorid (wasserfrei) (Mg Cl2)…........ 10 mg
Weinsäure (C4H6O6)…............................. 383 mg
Destilliertes Wasser zu … .......................... 1 000 l
Die Lösungen werden unter Zusatz von 2 Tropfen Allylisothiocyanat
in Polyethylenflaschen aufbewahrt.
3.2. Gerätschaften
3.2.1. Flammenphotometer, mit Brennerkopf für Luft/Butan.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 136
▼B
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Herstellung der Eichlösungen
In vier 100-ml-Meßkolben gibt man 25 - 50 - 75 und 100 ml der
Eichlösung (3.1.1) und füllt mit der Verdünnungslösung (3.1.2) zur
Marke auf. Die so hergestellten Eichlösungen enthalten 25 - 50 -75 und 100 mg/l Kalium.
3.3.2. Bestimmung
Die Messungen werden bei 766 nm durchgeführt. Mit destilliertem
Wasser werden 100 % Transmission eingestellt. Die Eichlösungen
(3.3.1) und der mit destilliertem Wasser 1:10 verdünnte Wein
werden nacheinander gemessen und die Transmission (%) abgelesen.
Falls erforderlich, wird der bereits 1:10 verdünnte Wein mit der
Verdünnungslösung (3.1.2) weiter verdünnt.
3.4. Angabe der Ergebnisse
3.4.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Kaliumgehalt C des verdünnten Weines wird der Eichkurve
entnommen.
Der Kaliumgehalt in Milligramm je Liter ohne Dezimalstelle beträgt:
C·FF = Verdünnungsfaktor.
3.4.2. Wiederholbarkeit (r):
r = 17 mg/l.
3.4.3. Vergleichbarkeit (R):
R = 66 mg/l.
3.4.4. Andere Angabe der Ergebnisse:
— als Milliäquivalente je Liter: 0,0256 · F · C
— als Milligramm Kaliumhydrogentartrat je Liter: 4,813 · F · C.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 137
▼B
28.MAGNESIUM
1. PRINZIP
Magnesium wird direkt aus dem entsprechend verdünnten Wein
mittels Atomabsorptionsspektrometrie bestimmt.
2. REAGENZIEN
2.1. Konzentrierte Magnesium-Eichlösung, 1 g/l
Es wird eine handelsübliche Magnesium-Standardlösung verwendet.
Diese Lösung kann auch hergestellt werden, indem 8,3646 g Magne-
siumchlorid (MgCl2·6H2O) in destilliertem Wasser gelöst und auf
1 Liter aufgefüllt werden.
2.2. Verdünnte Eichlösung, 5 mg/l Magnesium
Anmerkung:
Die Eichlösungen sind in Polyethylenflaschen aufzubewahren.
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Atomabsorptionsspektrometer mit einem Brennerkopf für Luft/
Acetylen.
3.2. Hohlkathodenlampe für Magnesium.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG4.1. Vorbereitung der Probe
Der Wein wird 1:100 mit destilliertem Wasser verdünnt.
4.2. Herstellung der Eichlösungen
In vier 100 ml-Meßkolben werden 5 — 10 — 15 und 20 ml der
Lösung 2.2 gegeben und mit destilliertem Wasser zur Marke aufge-
füllt. Diese Lösungen enthalten 0,25 — 0,50 — 0,75 und 1 mg
Magnesium je Liter. Die Lösungen werden in Polyethylenflaschen
aufbewahrt.
4.3. Bestimmung
Die Messung erfolgt bei 285 nm. Der Nullpunkt wird mit destil-
liertem Wasser eingestellt. Der verdünnte Wein und die nach 4.2
hergestellten Eichlösungen werden nacheinander gemessen, die
Messungen werden doppelt durchgeführt.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE5.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Magnesiumgehalt C des verdünnten Weines wird der Eichkurve
entnommen (Mittelwert aus 2 Messungen).
Der Magnesiumgehalt des Weines, ausgedrückt in Milligramm pro
Liter ohne Dezimalstelle, beträgt:
100 · C
5.2. Wiederholbarkeit (r):
r = 3 mg/l.
5.3. Vergleichbarkeit (R):
R = 8 mg/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 138
▼B
29.CALCIUM
1. PRINZIP
Calcium wird direkt aus dem entsprechend verdünnten Wein mittels
Atomabsorptionsspektrometrie nach Zusatz eines Spektralpuffers
bestimmt.
2. REAGENZIEN
2.1. Konzentrierte Calcium-Eichlösung: 1 g/l
Es wird eine handelsübliche Calcium-Standardlösung verwendet.
Diese Lösung kann auch hergestellt werden, indem 2,5 g Calcium-
carbonat (Ca CO3) in einer ausreichenden Menge verdünnter
Salzsäure (10 %, v/v) gelöst und mit destilliertem Wasser auf 1 Liter
aufgefüllt werden.
2.2. Verdünnte Eichlösung, 50 mg/l Calcium
Anmerkung:Die Eichlösungen werden in Polyethylenflaschen aufbewahrt.
2.3. Lanthanchloridlösung, 50 g/l Lanthan
13,369 g Lanthanchlorid (La Cl
3·7H2O) werden in destilliertem
Wasser gelöst; man fügt 1 ml Salzsäure (10 %, v/v) hinzu und füllt
auf 100 ml auf.
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Atomabsorptionsspektrometer mit einem Brennerkopf für Luft/
Acetylen.
3.2. Hohlkathodenlampe für Calcium.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG4.1. Vorbereitung der Probe
In ein 20 ml-Meßkölbchen gibt man 1 ml Wein, 2 ml der Lösung 2.3
und füllt mit destilliertem Wasser zur Marke auf. Der 1:20 verdünnte
Wein enhält 5 g Lanthan je Liter.
Anmerkung:
Für süße Weine ist die Konzentration von 5 g Lanthan je Liter nur
ausreichend, wenn der Zuckergehalt in der Meßlösung (4.1) nicht
mehr als 2,5 g/l beträgt. Für höhere Zuckerkonzentrationen muß der
Lanthangehalt auf 10 g je Liter erhöht werden.
4.2. Herstellung der Eichlösungen
In fünf 100 ml-Meßkolben werden 0 — 5 — 10 — 15 und 20 ml der
Lösung 2.2 gegeben, man fügt jeweils 10 ml der Lösung 2.3 hinzu
und füllt mit destilliertem Wasser zur Marke auf. Die so herge-
stellten Eichlösungen enthalten 0 — 2,5 — 5 — 7,5 bzw. 10 mg/l
Calcium und 5 g/l Lanthan. Die Lösungen werden in Polyethylenfla-
schen aufbewahrt.
4.3. Bestimmung
Die Messung erfolgt bei 422,7 nm. Der Nullpunkt wird mit der 5 g/l
Lanthan enthaltenden Lösung (4.2) eingestellt. Der verdünnte Wein
und die nach 4.2 hergestellten Eichlösungen werden nacheinander
gemessen; es werden jeweils 2 Messungen durchgeführt.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE5.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.Der Calciumgehalt C des verdünnten Weines wird der Eichkurve
entnommen (Mittelwert aus 2 Messungen).
Der Calciumgehalt des Weines, ausgedrückt in Milligramm pro Liter
ohne Dezimale, beträgt: 20 · C1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 139
▼B
5.2. Wiederholbarkeit (r):
< 60 mg/l: r = 2,7 mg/l
> 60 mg/l: r = 4 mg/l.
5.3. Vergleichbarkeit (R):
R = 0,114 xi− 0,5
xi= Konzentration der Probe in mg/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 140
▼B
30.EISEN
1. PRINZIP DER METHODEN
1.1. Referenzmethode
Eisen wird nach Entfernung des Alkohols und geeigneter Verdün-
nung direkt mittels Atomabsorptionsspektrometrie bestimmt.
1.2. Gebräuchliches Verfahren
Nach Aufschluß des Weines mit Wasserstoffperoxid wird das nun
als Eisen (III) vorliegende Gesamteisen zu Eisen (II) reduziert und
die durch Reaktion mit 1,10 Phenanthrolin entstehende Rotfärbung
gemessen.
2. REFERENZMETHODE
2.1. Reagenzien
2.1.1. Konzentrierte Eisen(III)-Eichlösung, 1 g/l.
Es wird eine handelsübliche Standardlösung verwendet. Diese
Lösung kann auch hergestellt werden, indem 8,6341 g Ammoniu-
meisen(III)-sulfat, NH4Fe(SO4)2·1 2H2O, in mit 1 M Salzsäure
schwach angesäuertem, destilliertem Wasser gelöst und auf 1 Liter
aufgefüllt werden.
2.1.2. Verdünnte Eisen(III)-Eichlösung, 100 mg/l.
2.2. Gerätschaften
2.2.1. Rotationsverdampfer
2.2.2. Atomabsorptionsspektrometer mit Brennerkopf für Luft/Acetylen.
2.2.3. Hohlkathodenlampe für Eisen.
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Vorbereitung der Probe
Zur Entfernung des Alkohols wird der Wein am Rotationsver-
dampfer (50 — 60 ºC) auf die Hälfte eingeengt und mit
destilliertem Wasser auf das ursprüngliche Volumen aufgefüllt.
Falls erforderlich, wird vor der Bestimmung eine Verdünnung
vorgenommen.
2.3.2. Herstellung der Eichlösungen
In fünf 100 ml-Meßkolben werden 1 — 2 — 3 — 4 und 5 ml der
Eichlösung mit 100 mg/l Eisen (2.1.2) gegeben und mit destilliertem
Wasser auf 100 ml aufgefüllt. Die so hergestellten Lösungen
enthalten 1 — 2 — 3 — 4 und 5 mg Eisen je Liter.
Diese Lösungen werden in Polyethylenflaschen aufbewahrt.
2.3.3. Bestimmung
Die Messung erfolgt bei 248,3 nm. Der Nullpunkt wird mit destil-
liertem Wasser eingestellt. Die gegebenenfalls verdünnte Probe und
die nach 2.3.2 hergestellten Eichlösungen werden nacheinander
gemessen; die Messungen werden jeweils doppelt ausgeführt.
2.4. Angabe der Ergebnisse
2.4.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Eisengehalt der gegebenenfalls verdünnten Probe wird der Eich-
kurve entnommen (Mittelwert aus 2 Messungen).
Der Eisengehalt des Weines, ausgedrückt in Milligramm pro Liter
ohne Dezimale, beträgt:
C·F
F = Verdünnungsfaktor.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 141
▼B
3. GEBRÄUCHLICHES VERFAHREN
3.1. Reagenzien
3.1.1. Wasserstoffperoxid, (H2O2) 30 % (g/v), eisenfrei.
3.1.2. Salzsäure, eisenfrei, 1 M.
3.1.3. Ammoniaklösung, ( ρ20= 0,92 g/ml).
3.1.4. Bimsstein, mit kochender, verdünnter Salzsäure (1/2) behandelt und
mit destilliertem Wasser gewaschen.
3.1.5. 2,5%igeHydrochinonlösung (C6H6O2), angesäuert mit 1 ml konzen-
trierter Schwefelsäure ( ρ20= 1,84 g/ml) je100 ml Lösung. Die se
Lösung wird im Kühlschrank in einer dunklen Flasche aufbewahrt
und beim geringsten Anzeichen einer Bräunung verworfen.
3.1.6. 20%igeNatriumsulfitlösung (Na2SO3), hergestellt aus neutralem,
wasserfreiem Sulfit.
3.1.7. 0,5%igeLösung von 1,10-Phe nanthrolin (C12H8N2·H2O) in Alkohol
96 % Vol.
3.1.8. 20%igeAmmoniumace tatlösung, (CH3COONH4).
3.1.9. Eisen(III)-Lösung, 1 g/l. Es wird eine handelsübliche Standardlösung
verwendet. Man kann diese Lösung auch herstellen, indem 8,6341 g
Ammoniumeisen(III)-sulfat (NH4Fe(SO4)2·1 2H2O) in 100 ml 1 M
Salzsäure (3.1.2) gelöst und mit der Salzsäure (3.1.2) auf 1 000 ml
aufgefüllt werden.
3.1.10 Verdünnte Eisen-Eichlösung, 100 ml/l.
3.2. Gerätschaften
3.2.1. 100 ml Kjeldahlkolben.3.2.2. Spektralphotometer zur Messung bei 508 nm.
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Aufschluß
3.3.1.1. Weine mit einem Zuckergehalt von < 50 g/l
In einen 100 ml Kjeldahlkolben gibt man einige Bimssteinkörnchen
(3.1.4), 25 ml Wein, 10 ml Wasserstoffperoxidlösung (3.1.1) und
engt auf 2—3 ml ein.
Nach dem Abkühlen gibt man zum Rückstand Ammoniaklösung
(3.1.3) in der zur Alkalisierung und Ausfällung der Hydroxide erfor-
derlichen Menge, ohne dabei die Kolbenwand zu benetzen.
Nach dem Erkalten wird die alkalische Lösung mit so viel 1 M Salz-
säure (3.1.2) versetzt, bis sich der Hydroxidniederschlag gelöst hat.
Die Lösung wird dann unter Nachwaschen des Kolbens mit 1 M
Salzsäure (3.1.2.) in einen 100 ml-Meßkolben überführt und mit
1 M Salzsäure(3.1.2) zur Markeaufge füllt.
3.3.1.2. Moste und Wein mit einem Zuckergehalt > 50 g/l
3.3.1.2.1. Zuckergehalt zwischen 50 und 200 g/l:
25 ml Most oder Wein werden mit 20 ml Wasserstoffperoxidlösung
(3.1.1) behandelt.
Man verfährt weiter wie unter 3.3.1.1 beschrieben.
3.3.1.2.2. Zuckergehalt > 200 g/l:
Die Most- und Weinproben werden zuvor auf die Hälfte oder ein
Viertel verdünnt und nach 3.3.1.2.1 weiter behandelt.
3.3.2. Leerwert
Mit destilliertem Wasser und der gleichen Menge Wasserstoffpero-
xidlösung (3.1.1), wie sie für den Aufschluß verwendet wurde, wird
nach dem in 3.3.1.1 beschriebenen Verfahren ein Leerwert angesetzt.
3.3.3. Bestimmung
In zwei 50 ml-Meßkölbchen gibt man je 20 ml der salzsauren
Lösung der Probe (3.3.1) und des Leerwertes (3.3.2) und fügt jeweils
2 ml der Hydrochinonlösung (3.1.5), 2 ml der Sulfitlösung (3.1.6)1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 142
▼B
und 1 ml der 1,10-Phenanthrolinlösung (3.1.7) hinzu. Man läßt 15
Minuten stehen, um die Reduktion des Fe III zu Fe II ablaufen zu
lassen. Nun setzt man 10 ml der Ammoniumacetatlösung (3.1.8)
hinzu, füllt mit destilliertem Wasser auf 50 ml auf und schüttelt
um. Die Extinktion der zu untersuchenden Lösung wird bei 508 nm
gegen den Leerwert gemessen.
3.3.4. Eichung
In vier 50 ml-Meßkölbchen werden 0,5 — 1 — 1,5 und 2 ml der
Eichlösung mit 100 mg/l Eisen (3.1.10) und 20 ml destilliertes
Wasser gegeben; man verfährt weiter wie unter 3.3.3 beschrieben.
Diese Eichlösungen entsprechen 50 — 100 — 150 und 200 µg Eisen
in der Meßlösung.
3.4. Angabe der Ergebnisse
3.4.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Eisengehalt C in mg/l der Meßlösung, entsprechend 20 ml der
salzsauren Aufschlußlösung bzw. 5 ml der zu untersuchenden Probe,
wird der Eichkurve entnommen.
Der Eisengehalt des Weines, ausgedrückt in mg/l mit einer Dezi-
male, beträgt:
200 · CBei verdünnten Weinen (oder Mosten) beträgt der in mg/l Wein
(oder Most) mit einer Dezimalstelle ausgedrückte Eisengehalt:
2 0 0·C·FF = Verdünnungsfaktor.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 143
▼B
31.KUPFER
1. PRINZIP DER METHODE
Atomabsorptionsspektrometrie.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Platinschale.2.2. Atomabsorptionsspektrometer.2.3. Hohlkathodenlampe für Kupfer.2.4. Betriebsgase: Luft/Acetylen oder Stickstoffmonoxid/Acetylen.
3. REAGENZIEN
3.1. Kupfermetall.3.2. Salpetersäure, 65 % (HNO
3,ρ20= 1,38 g/ml).
3.3. Verdünnte Salpetersäure, 1/2 (v/v).
3.4. Kupferlösung, 1 g/l
Es wird eine handelsübliche Kupfer-Standardlösung verwendet.
Diese Lösung kann auch hergestellt werden, indem 1,000 g Kupfer-
metall genau gewogen und in einem 1-Liter-Meßkolben mit der zur
Lösung erforderlichen Menge verdünnter Salpetersäure (3.3) gelöst
werden, man fügt sodann 10 ml Salpetersäure 65 % (3.2) zu und
füllt mit bidestilliertem Wasser zur Marke auf.
3.5. Kupferlösung, 100 mg/l
10 ml der Lösung (3.4) werden in einem 100 ml-Meßkolben mit
bidestilliertem Wasser zur Marke aufgefüllt.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Vorbereitung der Probe
Falls erforderlich, wird eine geeignete Verdünnung mit bidestil-
liertem Wasser hergestellt.
4.2. Herstellung der Eichlösungen
0,5 — 1 bzw. 2 ml der Lösung 3.5 (100 mg/l Cu) werden jeweils in
100 ml-Meßkolben pipettiert und mit bidestilliertem Wasser zur
Marke aufgefüllt. Die Lösungen enthalten 0,5 — 1 bzw. 2 mg/l
Kupfer.
4.3. Bestimmung
Die Messung wird bei 324,8 nm durchgeführt. Der Nullpunkt wird
mit bidestilliertem Wasser eingestellt. Die gegebenenfalls verdünnte
Probe und die nach 4.2 hergestellten Eichlösungen werden nachein-
ander gemessen. Die Messungen werden jeweils doppelt ausgeführt.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
5.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.Der Kupfergehalt C in mg/l wird entsprechend der Extinktion der
Eichkurve entnommen (Mittelwert aus 2 Messungen).
Der Kupfergehalt des Weines, ausgedrückt in Milligramm pro Liter
mit zwei Dezimalen, beträgt:
C·F
F = Verdünnungsfaktor.
Anmerkung:
a) Die Eichlösungen und die Verdünnung der Probe sind entspre-
chend der Empfindlichkeit des verwendeten Gerätes und der
Konzentration des Kupfers in der zu untersuchenden Probe zu
wählen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 144
▼B
b) Bei sehr niedrigen Kupferkonzentrationen in der zu untersu-
chenden Probe ist wie folgt zu verfahren: 100 ml der zu
untersuchenden Probe werden in einer Platinschale auf dem
Wasserbad bis zur sirupösen Konsistenz eingedampft und trop-
fenweise mit 2,5 ml konzentrierter Salpetersäure (3.2) versetzt,
wobei möglichst der Boden der Schale bedeckt sein muß. Der
Rückstand wird vorsichtig auf einer elektrischen Heizplatte oder
auf einer kleinen Flamme verascht und die Platinschale für etwa
1 Stunde bei 500 ºC (± 25 ºC) in den Muffelofen gestellt. Nach
dem Abkühlen wird die Asche mit 1 ml konzentrierter Salpeter-
säure (3.2) befeuchtet, mit einem Glasstab zu einem Brei verrührt
und erneut unter den oben angegebenen Bedingungen einge-
dampft und verascht. Die Platinschale wird wiederum für 15
Minuten in den Muffelofen gestellt und die Behandlung mit
konzentrierter Salpetersäure mindestens 3 mal wiederholt.
Danach wird die Asche in 1 ml konzentrierter Salpetersäure
(3.2) und 2 ml bidestilliertem Wasser gelöst und in ein 10 ml-
Meßkölbchen gebracht. Die Platinschale wird 3 mal mit je 2 ml
bidestilliertem Wasser nachgewaschen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 145
▼B
32.CADMIUM
1. PRINZIP DER METHODE
Das Cadmium wird direkt im Wein mittels flammenloser Atomab-
sorptionsspektrometrie bestimmt.
2. GERÄTSCHAFTEN
Die verwendeten Glasgeräte müssen vorher mit heißer (70 — 80 ºC),
konzentrierter Salpetersäure gewaschen und mit bidestilliertem
Wasser nachgespült sein.
2.1. Atomabsorptionsspektrometer, ausgerüstet mit einem Graphitrohr,
einem Untergrundkompensator und einem Kompensationsschreiber.
2.2. Hohlkathodenlampe für Cadmium.2.3. Mikroliterpipette für die Atomabsorptionsmessung, 5 µl.
3. REAGENZIEN
Das verwendete Wasser sollte bidestilliertes Wasser aus einer Boro-
silikatglasapparatur oder Wasser der gleichen Qualität sein. Alle
Reagenzien müssen Analysenqualität haben und vor allem cadmium-
frei sein.
3.1. o-Phosphorsäure85%ig ( ρ
20= 1,71 g/ml).
3.2. Verdünnte Phosphorsäurelösung: 8 ml o-Phosphorsäure (2.1) werden
mit Wasser auf 100 ml aufgefüllt.
3.3. Lösung des Dinatriumsalzes der Ethylendinitrilotetraessigsäure
0,02 M EDTA.
3.4. Pufferlösung pH 9: 5,4 g Ammoniumchlorid werden in einem
100 ml-Meßkölbchen in einigen Milliliter Wasser gelöst; man fügt
35 ml einer Lösung von Ammoniumhydroxid ( ρ20= 0,92 g/ml),
25%ig (v/v), hinzu und füllt mit Wasser zur Marke auf.
3.5. Eriochromschwarz T: 1 % (g/g) in Natriumchlorid.
3.6. Cadmiumsulfat (3CdSO4,8 H2O)
Gehaltsbestimmung:Man wägt genau 102,6 mg Cadmiumsulfat ab und bringt dieses
quantitativ mit Wasser in einen Erlenmeyerkolben und schüttelt bis
zur Lösung. Sodann fügt man 5 ml der Pufferlösung (2.4) und etwa
20 mg Eriochromschwarz T hinzu und titriert mit 0,02 M EDTA-
Lösung (2.3) bis zum Farbumschlag nach blau.
Verbrauchte ml EDTA = 20 ml. Weicht das Volumen etwas ab,
korrigiert man entsprechend die Cadmiumsulfatmenge für die
Herstellung der Referenzlösung.
3.7. Cadmiumstandardlösung 1 g/l
Es wird eine handelsübliche Standardlösung verwendet. Diese
Lösung kann auch hergestellt werden, indem 2,2820 g Cadmium-
sulfat mit Wasser zu 1 Liter gelöst werden. Die Lösung wird in
einer Borosilikatglasflasche mit Schliffstopfen aufbewahrt.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Vorbereitung der Probe
Der Wein wird mit der Phosphorsäurelösung (2.2) im Verhältnis 1:2
verdünnt.
4.2. Durch sukzessives Verdünnen der Cadmiumstandardlösung (3.7)
werden Eichlösungen hergestellt, die 2,5—5—10 und 15 Mikro-
gramm Cadmium pro Liter (µg/l) enthalten.
4.3. Bestimmung
4.3.1. Ofen-Programm (die Parameter sind beispielhaft angegeben)
Trocknung bei 100 ºC: 30 Sek.
Veraschung bei 900 ºC: 20 Sek.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 146
▼B
Atomisierung bei 2 250 ºC: 2 — 3 Sek.
Strömungsgeschwindigkeit des Stickstoffs: 6 l/Min.
Anmerkung:Zum Ausheizen des Ofens wird nach Beendigung des Programms
auf 2 700 ºC aufgeheizt.
4.3.2. Messung
Die Messung erfolgt bei 228,8 nm. Der Nullpunkt wird mit bidestil-
liertem Wasser eingestellt. Der verdünnte Wein und die nach 4.2
hergestellten Eichlösungen (5 µl) werden nacheinander injiziert und
gemessen. Es werden jeweils 3 Injektionen durchgeführt. Aus den 3
Injektionen wird der Mittelwert berechnet.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
5.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Cadmiumgehalt C des verdünnten Weines (Mittelwert aus 3
Injektionen) wird der Eichkurve entnommen. Der Cadmiumgehalt
des Weines, ausgedrückt in Mikrogramm pro Liter (µg/l), beträgt 2 C.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 147
▼B
33.SILBER
1. PRINZIP DER METHODE
Atomabsorptionsspektrometrie nach Veraschung der Probe.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Platinschale.2.2. Wasserbad, 100 ºC.
2.3. Muffelofen, 500—525 ºC.
2.4. Atomabsorptionsspektrometer.2.5. Hohlkathodenlampe für Silber.2.6. Betriebsgase: Luft/Acetylen.
3. REAGENZIEN
3.1. Silbernitrat (AgNO
3).
3.2. Salpetersäure (HNO3,ρ20= 1,38 g/ml).
3.3. Verdünnte Salpetersäure, 1:10 (v/v).
3.4. Silberlösung, 1 g/l
Es wird eine handelsübliche Silber-Standardlösung verwendet.Diese Lösung kann auch hergestellt werden, indem 1,5750 g Silbe-
rnitrat (AgNO
3) in einem 1-Liter-Meßkolben mit verdünnter
Salpetersäure gelöst und mit dieser zur Marke aufgefüllt werden.
3.5. Silberlösung, 10 mg/l
10 ml der Lösung (3.4) werden in einem 1-Liter-Meßkolben mit
verdünnter Salpetersäure (3.3) zur Marke aufgefüllt.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Vorbereitung der Probe
20 ml der zu untersuchenden Probe werden in einer Platinschale auf
dem siedenden Wasserbad zur Trockne eingedampft und im Muffel-
ofen bei 500 bis 525 ºC verascht. Die weiße Asche wird in 1 ml
konzentrierter Salpetersäure (3.2) aufgenommen und auf dem
Wasserbad zur Trockne gebracht; dieser Vorgang wird nochmals
wiederholt. Sodann wird die Asche mit 5 ml verdünnter Salpeter-
säure (3.3) unter leichtem Erwärmen gelöst.
4.2. Herstellung der Eichlösungen
2 - 4 - 6 - 8 - 10 und 20 ml der Lösung (3.5) werden jeweils in 100-
ml-Meßkolben mit verdünnter Salpetersäure (3.3) zur Marke aufge-
füllt. Diese Lösungen enthalten 0,20 - 0,40 - 0,60 - 0,80 - 1,0 und
2,0 mg/l Silber.
4.3. Bestimmung
Die Messung wird bei 328,1 nm durchgeführt. Der Nullpunkt wird
mit der verdünnten Salpetersäure (3.3) eingestellt. Die nach 4.1
erhaltene Lösung und die Eichlösungen werden nacheinander
gemessen. Die Messungen werden jeweils doppelt ausgeführt.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
5.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.Der Silbergehalt C in mg/l der nach 4.1 erhaltenen Lösung wird
entsprechend der gemessenen Extinktion der Eichkurve entnommen.
Der Silbergehalt des Weines, ausgedrückt in Milligramm pro Liter
mit 2 Dezimalstellen, beträgt: 0,25 C.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 148
▼B
Anmerkung:
Die Eichlösungen, das Probevolumen und das Endvolumen der
Meßlösung sind entsprechend der Empfindlichkeit des verwendeten
Gerätes zu wählen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 149
▼B
34.ZINK
1. PRINZIP
Zink wird nach Entfernung des Alkohols direkt aus dem Wein
mittels Atomabsorptionsspektrometrie bestimmt.
2. REAGENZIEN
Das hier verwendete Wasser muß ein in einem Borosilicatglas
(Duranglas) bidestilliertes Wasser oder Wasser gleicher Reinheit
sein.
2.1. Zink-Standardlösung, 1 g/l.
Es wird eine handelsübliche Zink-Standardlösung verwendet.
Diese Lösung kann auch hergestellt werden, indem 4,3975 g Zink-
sulfat (Zn SO4·7H2O) in Wasser gelöst und auf 1 Liter aufgefüllt
werden.
2.2. Verdünnte Zink-Standardlösung, 100 mg/l.
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Rotationsverdampfer.
3.2. Atomabsorptionsspektrometer mit einem Brennerkopf für Luft/
Acetylen.
3.3. Hohlkathodenlampe für Zink.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG4.1. Vorbereitung der Probe
Zur Entfernung des Alkohols werden 100 ml Wein am Rotationsver-
dampfer (50—60 ºC) auf die Hälfte eingeengt und mit
bidestilliertem Wasser auf das Ausgangsvolumen von 100 ml wieder
aufgefüllt.
4.2. Herstellung der Eichlösungen
In vier 100-ml-Meßkolben werden 0,5 - 1 - 1,5 und 2 ml Zink-
Standardlösung (2.2) (100 mg/l) gegeben und zur Marke mit bides-
tilliertem Wasser aufgefüllt. Der Zinkgehalt dieser Lösungen
entspricht 0,5 - 1 - 1,5 und 2 mg/l.
4.3. Bestimmung
Die Messung wird bei 213,9 nm durchgeführt. Der Nullpunkt wird
mit bidestilliertem Wasser eingestellt. Der Wein und die Eichlö-
sungen werden nacheinander gemessen. Die Messungen werden
jeweils doppelt durchgeführt.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE5.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Zinkgehalt des Weines wird der Eichkurve entnommen (Mittel-
wert aus 2 Messungen). Die Angabe erfolgt in mg/l mit 1 Dezimale.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 150
▼B
35.BLEI
1. PRINZIP
Das Blei wird direkt im Wein mittels flammenloser Atomabsorpti-
onsspektrometrie bestimmt.
2. GERÄTSCHAFTEN
Die verwendeten Glasgeräte müssen vorher mit heißer (70—80 ºC),
konzentrierter Salpetersäure gewaschen und mit didestilliertem
Wasser nachgespült sein.
2.1. Atomabsorptionsspektrometer ausgerüstet mit einem Graphitrohr,
einem Untergrundkompensator und einem Kompensationsschreiber.
2.2. Hohlkathodenlampe für Blei.
2.3. Mikroliterpipette für die Atomabsorptionsmessung, 5 µl.
3. REAGENZIEN
Alle Reagenzien müssen Analysenqualität haben und vor allem blei-
frei sein. Das verwendete Wasser sollte bidestilliertes Wasser oder
Wasser der gleichen Qualität sein.
3.1. o-Phosphorsäure, 85 %ig ( ρ20= 1,71 g/ml).
3.2. Verdünnte Phosphorsäurelösung: 8 ml o-Phosphorsäure (2.1) werden
mit Wasser auf 100 ml aufgefüllt.
3.3. Salpetersäure, 65 %ig, ( ρ20= 1,38 g/ml).
3.4. Bleistandardlösung, 1 g/l.
Es wird eine handelsübliche Standardlösung verwendet. Diese
Lösung kann auch hergestellt werden, indem 1,6000 g Blei-II-nitrat
Pb(NO3)2in verdünnter Salpetersäure, 1 % (v/v), gelöst und auf 1
Liter aufgefüllt werden. Die Lösung wird in einer Glasflasche mit
Schliffstopfen aufbewahrt.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Vorbereitung der Probe
Der Wein wird entsprechend dem vermuteten Bleigehalt mit der
Phosphorsäurelösung (2.2) verdünnt (1:2 oder 1:3).
4.2. Durch sukzessives Verdünnen der Bleistandardlösung (2.4) mit
bidestilliertem Wasser werden Eichlösungen hergestellt, die 25 - 50
- 100 und 150 µg Blei pro Liter enthalten.
4.3. Bestimmung
4.3.1. Ofen-Programm (die Parameter sind nur beispielhaft angegeben)
Trocknung bei 100 ºC: 30 Sek.Veraschung bei 900 ºC: 20 Sek.
Atomisierung bei 2 250 ºC: 2—3 Sek.
Strömungsgeschwindigkeit des Stickstoffs: 6 l/Min.Anmerkung:Zum Ausheizen des Ofens wird nach Beendigung des Programms
auf 2 700 ºC aufgeheizt.
4.3.2. Messung
Die Messung erfolgt bei 217 nm. Der Nullpunkt wird mit bidestil-
liertem Wasser eingestellt. Der verdünnte Wein und die nach 4.2
hergestellten Eichlösungen werden nacheinander injiziert und
gemessen. Es werden jeweils 3 Injektionen durchgeführt.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
5.1. Berechnung
Aus den Werten der Eichlösungen wird eine Eichkurve aufgestellt.
Der Bleigehalt C des verdünnten Weines wird der Eichkurve1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 151
▼B
entnommen (Mittelwert aus 3 Injektionen). Der Bleigehalt des
Weines, ausgedrückt in Mikrogramm pro Liter (µg/l), beträgt:
C×F .
F = Verdünnungsfaktor.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 152
▼B
36.FLUORID
1. PRINZIP
Der Fluoridgehalt des Weines wird, nach Zusatz einer Pufferlösung,
mit einer ionensensitiven Festkörpermembranelektrode bestimmt.
Das gemessene Potential ist proportional dem Logarithmus der Fluo-
rionenaktivität in der Meßlösung gemäß Funktion
E=Eo± S log aF
E = gemessenes Potential der ionensensitiven Elektrode gegen
die Bezugselektrode in der Meßlösung.
Eo= Standardpotential der Meßkette.
S = Steigung der ionensensitiven Elektrode (Nernstfaktor). Die
theoretische Steigung beträgt bei 25 ºC 59,2 mV je Aktivi-
tätsdekade.
aF= Aktivität der Fluorionen in der Meßlösung.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Fluorsensitive Festkörpermembranelektrode.2.2. Referenzelektrode (Kalomel oder Ag/AgCl).
2.3. Millivoltmeter (pH-Meter mit spreizbarem Millivoltbereich oder
Ionometer). Genauigkeit 0,1 mV.
2.4. Magnetrührer mit Isolierauflage zur Abschirmung der Probe vor
Motorwärme. Rührstäbchen, kunststoffbeschichtet (Polyethylen oder
gleichwertiges Material).
2.5. Kunststoffbecher, 30 bzw. 50 ml, sowie Kunststoffflaschen (Poly-
ethylen oder gleichwertiges Material).
2.6. Präzisionspipetten (Mikroliterpipetten oder gleichwertige andere
Pipetten).
3. REAGENZIEN
3.1. Fluorid-Stammlösung 1 000 mg/l.
Es wird eine handelsübliche Standardlösung verwendet. Man kann
diese Lösung auch wie folgt herstellen: 2,210 g Natriumfluorid z.
A. (drei bis vier Stunden bei 105 ºC getrocknet) werden in destil-
liertem Wasser gelöst. Anschließend wird mit destilliertem Wasser
auf 1 000,0 ml aufgefüllt. Die Lösung wird in einer Kunststofffla-
scheaufbe wahrt.
3.2. Fluorid-Standardlösungen geeigneter Konzentration werden durch
Verdünnen der Stammlösung mit destilliertem Wasser bereitet und
in Kunststoffflaschen aufbewahrt. Standardlösungen mit Gehalten
im ppm-Bereich sollten unmittelbar vor Gebrauch bereitet werden.
3.3. Citrat-Puffer pH 5.5.
10 g 1.2-Cyclohexylendinitrilotetraessigsäure (CDTA) z. A. werden
in destilliertem Wasser aufgeschlämmt und einer Lösung von 58 g
Natriumchlorid z. A. und 29,4 g tri-Natriumcitrat 2H
2Oz .A .i n
700 ml destilliertem Wasser zugesetzt. Durch Zugabe von 32%iger
Natronlauge(ca. 6 ml) wird CDTA ge löst.
Anschließend setzt man 57 ml Eisessig ( ρ20= 1,05 g/ml) zu und
stellt mit 32 %iger Natronlauge (ca. 45 ml) auf pH 5.5 ein. Nach
dem Abkühlen wird mit destilliertem Wasser auf 1 Liter aufgefüllt.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
Vorbemerkung:
Es ist darauf zu achten, daß alle Lösungen während der Messung bei
einer Temperatur von 25 ± 1 ºC gehalten werden. (Eine Abweichung
um ± 1 ºC bewirkt eine Änderung der theoretischen Steigung um ca.
± 0,2 mV).
4.1. Direkte Bestimmung
In einen Kunststoffbecher wird eine definierte Menge Wein gegeben
und mit dem gleichen Volumen Pufferlösung 3.3 versetzt. Während1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 153
▼B
des anschließenden Meßvorganges wird die Lösung mit gleichblei-
bender mäßiger Geschwindigkeit gerührt.
Es wird bis zur Anzeigenkonstanz im Abstand von 3 Minuten der
Potentialwert in mV abgelesen. Als Anzeigenkonstanz wird eine
Änderung von höchstens 0,2—0,3 mV/3 Min. betrachtet.
4.2. Bestimmung mit dem Standardadditionsverfahren
Ohne das Rühren zu unterbrechen, wird der Meßlösung 4.1 mit einer
Präzisionspipette ein bestimmtes Volumen einer Fluorid-Standar-
dlösung zugesetzt und bei Anzeigenkonstanz der Potentialwert in
mV abgelesen.
Die Konzentration der addierten Standardlösung ist so zu wählen,
daß
a) die Fluoridkonzentration der Meßlösung 4.1 auf etwa das
Doppelte bzw. Dreifache erhöht wird und
b) die Volumenerhöhung der Meßlösung durch die Standardzugabe
praktisch vernachlässigbar bleibt (< 1 %).
(Die Bedingung b) vereinfacht die Berechnung, siehe 5)
Die ungefähre Konzentration der Meßlösung 4.1 wird einer Eich-
kurve entnommen, die mit den 0,1 - 0,2 - 0,5 - 1,0 - 2,0 mg/l
Fluorid enthaltenden Standardlösungen nach 4.1 aufgestellt wird.
Die Eichkurve wird auf halblogarithmischem Papier aufgetragen.
Anmerkung:Liegt die ungefähre Konzentration der Meßlösung oberhalb des
Eichbereiches, ist die Probe entsprechend zu verdünnen.
Beispiel:
Der ungefähre Gehalt der Meßlösung 4.1 (Volumen 20 ml) sei
0,25 mg/l F
−. Die Konzentration wird um 0,25 mg/l erhöht. Dazu
werden der Lösung beispielsweise 0,20 ml (= 1 %) einer 25 mg/l
F−enthaltenden oder 0,050 ml einer 100 mg/l F−enthaltenden Stand-
ardlösung mit jeweils geeigneten Präzisionspipetten zugefügt.
5. BERECHNUNG
Der Fluoridgehalt der Meßlösung in mg/l ergibt sich aus folgender
allgemeiner Formel:
CF¼Va/C2Ca
Vo/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
CF= gesuchte Fluoridkonzentration der Meßlösung (mg/l).
Ca= Konzentration der addierten Standardlösung (mg/l) (Va).
Vo= ursprüngliches Volumen der Meßlösung vor Addition (ml).
Va= Volumen der addierten Standardlösung (ml).
∆E = Differenz der nach 4.1 und 4.2 erhaltenen Potentialwerte E1und E2(mV).
S = Steigung der Elektrode in der Meßlösung.
Ist Vagegen Vovernachlässigbar klein (siehe 4.2), gilt die verein-
fachteForme l
CF¼Ca/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
Der erhaltene Wert ist mit dem durch den Pufferzusatz (4.1) gege-
benen Verdünnungsfaktor zu multiplizieren.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 154
▼B
37.KOHLENDIOXID
1. PRINZIP DER METHODEN1.1. Referenzmethode
1.1.1. Stillweine (Überdruck CO
2< 0,5 · 105Pa) (1)
Einem aliquoten Teil der auf etwa 0 ºC gekühlten Probe wird so viel
Lauge zugesetzt, daß ein pH-Wert von 10—11 erreicht wird. Man
titriert mit einer Säure in Gegenwart von Carbo-Anhydrase. Der
Gehalt an Kohlendioxid errechnet sich aus der zur Titration von pH
8,6 (Bicarbonat) auf pH 4,0 (Kohlensäure) benötigten Menge an
Säure unter Berücksichtigung des Leerwertes (von Kohlendioxid
befreiter Wein).
1.1.2. Perlweine und Schaumweine
Die Probe wird bis etwa zum Gefrierpunkt gekühlt. Nach Entnahme
einer bestimmten Menge für den Blindwert bindet man in der
übrigen Probe die Kohlensäure durch Alkalisieren in Form von
Natriumcarbonat. Man titriert mit einer Säure in Gegenwart von
Carbo-Anhydrase. Der Gehalt an Kohlendioxid errechnet sich aus
der zur Titration von pH 8,6 (Bicarbonat) auf pH 4,0 (Kohlensäure)
benötigten Menge an Säure unter Berücksichtigung des Leerwertes
(von Kohlendioxid befreiter Wein).
1.2. Gebräuchliche Methode: Perlweine und Schaumweine
Druckmessung: direkte Messung des Überdrucks in der Flasche mit
einem Aphrometer.
2. REFERENZMETHODE
2.1. Stillweine (Überdruck < 0,5 · 105Pa).
2.1.1. Gerätschaften
2.1.1.1. Magnetrührer.2.1.1.2. pH-Meßgerät.
2.1.2. Reagenzien
2.1.2.1. Natronlauge(NaOH), 0,1 M.2.1.2.2. Schwefelsäure (H
2SO4), 0,05 M.
2.1.2.3. Carbo-Anhydrase, 1 g/l.2.1.3. Durchführung der Bestimmung
Probe und 10 ml-Pipette werden auf 0 ºC gekühlt.In ein 100 ml-Becherglas werden 25 ml Natronlauge (2.1.2.1)
gegeben; man fügt 2 Tropfen der wäßrigen Carbo-Anhydrase-Lösung
(2.1.2.3) zu. In die Lauge gibt man 10 ml des auf 0 ºC gekühlten
Weines unter Verwendung der ebenfalls auf 0 ºC gekühlten Pipette.
Sodann gibt man ein Magnetstäbchen in das Becherglas, stellt dieses
auf einen Magnetrührer und hängt die Elektrode ein.
Unter mäßigem Rühren wartet man, bis der Inhalt die umgebende
Temperatur angenommen hat und fügt dann langsam 0,05 M Schwe-
felsäure (2.1.2.2) bis zum pH 8,6 zu.
Danach gibt man weiter 0,05 M Schwefelsäure (2.1.2.2) bis zum pH
4,0 zu. n = verbrauchte ml 0,05 M Schwefelsäure zwischen pH 8,6
und 4,0.
Leerwert: 50 ml Wein werden durch etwa 3minütiges Schütteln an
der Wasserstrahlpumpe auf dem Wasserbad bei 25 ºC von Kohlen-
säure befreit. 10 ml der so entcarbonisierten Probe werden wie
oben beschrieben behandelt.
n′= verbrauchte ml 0,05 M Schwefelsäure zwischen pH 8,6 und 4,0.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 155
(1)1 05Pascal (Pa) = 1 bar.
▼B
2.1.4. Angabe der Ergebnisse
1 ml 0,05 M Schwefelsäure = 4,4 mg CO2.
Die Menge an Kohlendioxid in g/l Wein ist 0,44 (n − n ′).
Sie wird mit 2 Dezimalstellen angegeben.Anmerkung:
Beträgt der Gehalt an Kohlendioxid weniger als 1 g/l, ist die Zugabe
von Carbo-Anhydrase nicht erforderlich.
2.2. Perlweine und Schaumweine
2.2.1. Gerätschaften
2.2.1.1. Magnetrührer.2.2.1.2. pH-Meßgerät.2.2.2. Reagenzien
2.2.2.1. Natronlauge(NaOH), 50 % (g/g).2.2.2.2. Schwefelsäure (H
2SO4), 0,05 M.
2.2.2.3. Carbo-Anhydrase, 1 g/l.
2.2.3. Durchführung der Bestimmung
An der Flasche mit dem zu analysierenden Wein wird die Füllhöhe
markiert und dann bis zum Beginn des Gefrierens gekühlt.
Man läßt die Flasche unter Schütteln bis zum Verschwinden der
Eiskristalle sich langsam erwärmen, entkorkt schnell und gibt in
einen graduierten Meßzylinder 45 bis 50 ml Wein (zur Bestimmung
des Leerwertes). Das exakte Volumen „v“ stellt man durch Ablesen
am Meßzylinder fest, nachdem die Probe Zimmertemperatur erreicht
hat.
Sobald die Probenahme für den Leerwert stattgefunden hat, gibt man
zum Flascheninhalt (750 ml) 20 ml der 50 %igen Natronlauge
(2.2.2.1).
Man wartet, bis die Probe Zimmertemperatur angenommen hat.
In ein 100 ml-Becherglas gibt man 30 ml ausgekochtes, destilliertes
Wasser, 2 Tropfen Carbo-Anhydrase-Lösung (2.2.2.3) sowie 10 ml
des alkalisierten Weines.
Sodann gibt man ein Magnetstäbchen in das Becherglas, stellt dieses
auf einen Magnetrührer und hängt die Elektrode ein.
Unter Rühren fügt man langsam 0,05 M Schwefelsäure (2.2.2.2) bis
zum pH 8,6 zu.
Danach gibt man weiter 0,05 M Schwefelsäure (2.2.2.2) bis zum pH
4,0 zu. n = verbrauchte ml 0,05 M Schwefelsäure zwischen pH 8,6
und 4,0.
Leerwert: Zur Entfernung der Kohlensäure werden die obenge-
nannten „v“ ml Wein wie unter 2.1.3 beschrieben behandelt. 10 ml
der so entcarbonisierten Probe werden in 30 ml ausgekochtes, destil-
liertes Wasser gegeben, und 2 bis 3 Tropfen Natronlauge (2.2.2.1)
werden zugefügt, um die Lösung auf einen pH von 10—11 zu
bringen. Dann verfährt man weiter wie oben beschrieben. n ′=
verbrauchte ml 0,05 M Schwefelsäure zwischen pH 8,6 und 4,0.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 156
▼B
2.2.4. Angabe der Ergebnisse
1 ml 0,05 M Schwefelsäure = 4,4 mg CO2.
Man bestimmt das Ausgangsvolumen (auf 1 ml genau), indem man
die Flasche leert und mit Wasser bis zur Markierung füllt: = V ml.
g=lC O2¼0;44 n /C0n0ðÞ /C1V/C0vþ20
V/C0v
Der Gehalt an CO2wird mit 2 Dezimalen angegeben.
2.3. Berechnung des Überdruckes
Der Überdruck bei 20 ºC Paph20ausgedruckt in Pascal, ist gegeben
durch dieForme l:
Paph20¼Q
1;951/C210/C050;86/C00;01 A ðÞ 1/C00;00144 Z ðÞ/C0Patm
mit:
Q: CO2-Gehalt des Weines in g/l.
A: Alkoholgehalt des Weines in % Vol.
Z: Zuckergehalt des Weines in g/l.
Patm: Atmosphärendruck, ausgedrückt in Pascal.
3. GEBRÄUCHLICHE METHODE (FÜR PERL- UND SCHAU-
MWEINE)
3.1. Gerätschaften
3.1.1. Aphrometer
Das Spezialmanometer, mit dem bei Perl- und Schaumweinen der
Überdruck in der Flasche gemessen wird, bezeichnet man als Aphro-
meter.
Je nach Art der Flaschenverschlüsse (Metallkapsel, Kronenkorken,
Natur- oder Kunststoffkorken) werden unterschiedliche Aphrometer
verwendet (Abbildungen 1 und 2).
Das Manometer muß eine Einteilung in Pascal (Pa) (1) aufweisen.
Zweckmäßigerweise wird eine Einteilung in 105Pa oder Kilo-Pascal
(kPa) gewählt.
Es gibt verschiedene Güteklassen. Für genaue Messungen wird die
Güteklasse 1 empfohlen. Die Güteklasse ist ausgedrückt in Prozent
der Genauigkeit mit der die Skala abgelesen werden kann (Beispiel:
Manometer 1 000 kPa, Güteklasse 1, d. h. Maximaldruck = 1 000 kPa,
Ablesegenauigkeit ± 10 kPa).
Die Manometer müssen regelmäßig überprüft werden (mindestens 1
mal pro Jahr).
3.2. Durchführung der Bestimmung
Die Messung wird nach Einstellung der Temperatur (mindestens 24
Stunden) durchgeführt. Nach dem Durchstechen der Kapsel oder des
Korkens mit dem Aphrometer wird die Flasche kräftig geschüttelt,
bis der Druck konstant ist, danach wird die Ablesung vorgenommen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 157
(1) 1 Pascal (Pa) = 1 N/m2=1 0−5bar.
▼B
Abb. 1: Aphrometer für Metallver-
schlüsse
Abb. 2: Aphrometer für Kork- und Kunst-
stoffstopfen
3.3. Angabe der Ergebnisse
Der Überdruck bei 20 ºC (Paph20) wird in Pascal (Pa) oder in Kilo-
pascal (kPa) angegeben.
Die Angabe muß in Übereinstimmung mit der Genauigkeit des
Manometers erfolgen (z. B. 6,3 · 105Pa oder 630 kPa, nicht aber
6,33 · 105Pa oder 633 kPa für ein Manometer 1 000 kPa der Güte-
klasse1).
Weicht die Meßtemperatur von 20 ºC ab, wird der gemessene Druck
mit dem in Tabelle 1 angegebenen Koeffizienten
Paph20
Papht
multipliziert, um ihn auf 20 ºC umzurechnen.
4. BEZIEHUNG ZWISCHEN DEM DRUCK UND DEM GEHALT
AN CO2IN PERL- ODER SCHAUMWEINEN (1)
Ausgehend von dem Überdruck bei 20 ºC (Paph20) berechnet man
den absoluten Druck bei 20 ºC (Pabs20):
Pabs20= Patm + Paph20
Patm = Atmosphärendruck in Pascal.Der Gehalt an CO
2im Wein ist durch folgende Beziehung gegeben:
— Liter CO2/Liter Wein:
0,987 · 10−5Pabs20(0,86 − 0,01 A) (1 − 0,00144 Z)
—gC O2/Liter Wein:
1,951 · 10−5Pabs20(0,86 − 0,01 A) (1 − 0,00144 Z).
A = Alkohol des Weines bei 20 ºC in % Vol.
Z = Zuckergehalt des Weines in g/l.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 158
(1) Es ist nicht erforderlich, die anderen Gase (O2,N2usw.), die nur in kleinen Mengen
vorhanden sind und keinen Einfluß auf den Überdruck haben, zu berücksichtigen.
▼B
Tabelle 1
Verhältnis des Überdrucks Paph20eines Perl- oder Schaumweines bei 20 ºC
zum Überdruck Paphtbei einer Temperatur t ºC
0 1,85 13 1,24
1 1,80 14 1,20
2 1,74 15 1,16
3 1,68 16 1,13
4 1,64 17 1,09
5 1,59 18 1,06
6 1,54 19 1,03
7 1,50 20 1,00
8 1,45 21 0,97
9 1,40 22 0,95
10 1,36 23 0,93
11 1,32 24 0,91
12 1,28 25 0,881990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 159
▼M7
38.CYANVERBINDUNGEN
(Achtung: Sicherheitsbestimmungen für den Umgang mit Chemikalien für Chlo-
ramin T, Pyridin, Kaliumcyanid, Salzsäure und Phosphorsäure beachten.
Verbrauchte Mittel nach den jeweils geltenden Umweltschutzvorschriften
entsorgen. Vorsicht mit bei der Destillation von angesäuertem Wein freigewor-
denem Kaliumcyanid.)
1. PRINZIP
Die gesamte Blausäure des Weins wird durch Säurehydrolyse freige-
setzt und durch Destillation abgetrennt. Nach Reaktion mit
Chloramin T und Pyridin wird der entstandene Glutacondialdehyd
mit Hilfe der Blaufärbung, die sich bei Reaktion mit 1,3-Dimethyl-
barbitursäure zeigt, kolorimetrisch bestimmt.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Destillationsapparatur
Das gleiche Destillationsgerät wie zur Bestimmung von Weinalkohol
verwenden.
2.2. Normalschliffkolben, 500 ml2.3. Wasserbad, thermostatgesteuert, 20 ºC2.4. Spektralphotometer zur Messung der Extinktion bei 590 nm
Wellenlänge
2.5. Glas- oder Einwegküvetten, 20 mm Schichtdicke.
3. REAGENZIEN
3.1. Phosphorsäure(H
3PO4), 25%ig (m/v)
3.2. Chloramin-T-Lösung (C7H7ClNNa O2S·3 H2O), 3%ig (m/v)
3.3. 1,3-Dimethylbarbitursäurelösung: 3,658 g 1,3-Dimethylbarbitursäure
(C6H8N2O3) werden in 15 ml Pyridin und 3 ml Salzsäure ( ρ20= 1,19 g/ml) gelöst und mit destilliertem Wasser auf 50 ml aufgefüllt
3.4. Kaliumcyanid (KCN)3.5. Kaliumiodidlösung (KI) 10%ig (m/v)3.6. Silbernitratlösung (AgNO
3), 0,1 M
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Destillation
Der 500-ml-Kolben (2.2) wird mit 25 ml Wein, 50 ml destilliertem
Wasser, 1 ml Phosphorsäure (3.l) und einigen Glasperlen beschickt.
Danach wird der Kolben sofort an die Destillationsapparatur ange-
schlossen. Über ein ausgezogenes Verlängerungsrohr wird das
Destillat direkt in eine mit 10 ml Wasser beschickte 50-ml-Meßvor-
lage übergeführt. Die Vorlage wird in Eiswasser gestellt. Es werden
30—35 ml Destillat überdestilliert bis in der Vorlage also ein Flüs-
sigkeitsstand von ungefähr 45 ml erreicht ist.
Das ausgezogene Verlängerungsrohr des Kühlers wird mit einigen
Millilitern destilliertem Wasser ausgespült, das Destillat wird auf
20 ºC temperiert und die Vorlage bis zur Marke mit destilliertem
Wasser aufgefüllt.
4.2. Messung
25 ml Destillat werden in einen 50-ml-Kolben mit Schliffstopfen
überführt, mit 1 ml Chloramin-T-Lösung (3.2) versetzt und luftdicht
verschlossen. Nach genau 60 Sekunden werden 3 ml 1,3-Dimethyl-
barbitursäure (3.3) zugefügt, der Kolben luftdicht verschlossen und
10 Minuten stehengelassen. Danach wird die Extinktion im
Vergleich zum Standard (25 ml destilliertes Wasser anstelle vom
25 ml Destillat) bei einer Wellenlänge von 590 nm in Küvetten mit
20 mm Schichtdicke gemessen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 160
▼M7
5. AUFSTELLEN DER EICHKURVE
5.1. Argentometrische Titration von Kaliumcyanid
Etwa 0,2 g KCN (3.4) werden genau eingewogen und in einem 300-
ml-Erlenmeyerkolben mit 100 ml destilliertem Wasser gelöst.
Anschließend werden 0,2 ml Kaliumiodidlösung (3.5) zugefügt und
mit 0,1 M Silbernitratlösung (3.6) bis zum Eintreten einer stabilen
Gelbfärbung titriert.
Da 1 ml der 0,l-M-Silbernitratlösung 13,2 mg KCN entsprechen,
kann der KCN-Gehalt der Probe berechnet werden.
5.2. Eichkurve
5.2.1. Vorbereitung der Eichlösungen
Mit KCN stellt man entsprechend des nach 5.1 bestimmten Gehalts
eine Lösung her, die 30 mg/l HCN enthält (30 mg HCN entsprechen
72,3 mg KCN). Diese Lösung wird 1:10 verdünnt.
Der 100-ml-Meßkolben wird jeweils mit 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 und 5,0 ml
der verdünnten Eichlösung beschickt und bis zur Marke mit destil-
liertem Wasser aufgefüllt. Die angesetzten Lösungen enthalten 30,
60, 90, 120 bzw. 150 µg/l Blausäure.
5.2.2. Messung
25 ml der angesetzten Lösungen entnehmen und gemäß Nummer 4.1
und 4.2 fortfahren.
Die mit diesen Eichlösungen gewonnenen Extinktionswerte werden
in Beziehung zu den entsprechenden Blausäuregehalten als Gerade
dargestellt, die durch den Nullpunkt verläuft.
6. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der Blausäuregehalt wird in Mikrogramm je Liter ( µg/l) ohneDe zi-
male angegeben.
6.1. Berechnung
Der Gehalt an Blausäure wird auf der Eichkurve abgelesen.
Falls verdünnt wurde, muß das Ergebnis mit dem Verdünnungsfaktor
multipliziert werden.
Wiederholbarkeit (r) und Vergleichbarkeit (R)
Weißwein = r = 3,1 µg/l, d. h. ungefähr 6 % bei xi= 48,4 µg/l
HCN
R= 12 µg/l, d. h. ungefähr 25 % bei xi= 48,4 µg/l
HCN
Rotwein = r = 6,4 µg/l, d. h. ungefähr 8 % bei xi= 80,5 µg/l
HCN
R= 23 µg/l, d. h. ungefähr 29 % bei xi= 80,5 µg/l
HCN.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 161
▼B
39.ALLYLISOTHIOCYANAT
1. PRINZIP DER METHODE
Gaschromatographischer Nachweis des Allylisothiocyanats nach
destillativer Anreicherung.
2. REAGENZIEN
2.1. Ethanol, absolut.
2.2. Standard-Lösung: alkoholischeLösung von Allylisothiocyanat
(C4H5NS), 15 mg/l abs. Ethanol.
2.3. Kühlmischung: Ethanol und Trockeneis (Temperatur −60 ºC).
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Apparatur zur Destillation unter Stickstoff (siehe Abbildung).
3.2. Heizhaube mit Temperaturregelung.3.3. Durchflußmesser.
3.4. Gaschromatograph mit ECD für Schwefelverbindungen (= 394 nm)
oder jeder andere geeignete Detektor.
3.5. Edelstahlsäule (innerer Durchmesser: 3 mm, Länge 3 m), gefüllt mit
10 % CARBOWAX 20 M auf CHROMOSORB WHP, 80—100
mesh.
3.6. Mikroliterspritze 10 µl.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
2 l Wein werden in den Destillierkolben gegeben.
Man gibt einige Milliliter Ethanol (2.1) in die beiden Vorlagen, so
daß das poröse Ende für die Gasverteilung der Überleitungsrohre
vollständig eintaucht. Die beiden Vorlagen werden durch die Kühl-
mischung äußerlich gekühlt. Der Destillierkolben wird an die
Vorlagen angeschlossen, und durch die Apparatur wird ein Stick-
stoffstrom (3 Liter/Stunde) geleitet. Der Wein wird dann durch
entsprechende Einstellung der Temperatur an der regulierbaren Heiz-
haube auf 80 ºC erhitzt, und anschließend werden 45 bis 50 ml
Destillat aufgefangen.
Gaschromatographische Bedingungen:
— Temperatur des Einspritzblocks: 200 ºC
— Temperatur der Säule: 130 ºC— Heliumdurchfluß: 20 ml/Minute.
Mit Hilfe der Mikroliterspritze wird von der Standardlösung eine
solche Menge eingespritzt, daß ein deutlicher Peak von Allylisothio-
cyanat auftritt.
Sodann spritzt man eine entsprechende Menge des Destillats ein und
vergleicht aufgrund der Retentionszeiten den aus dem Destillat
erhaltenen Peak mit dem der Standardlösung.
Unter den oben angegebenen Bedingungen treten normalerweise
keine Störungen von anderen Substanzen des Weines auf, die der
Retentionszeit des Allylisothiocyanats entsprechen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 162
▼B
1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 163
▼B
40.FARBCHARAKTERISTIKA
1. WEIN UND MOST1.1. Definition
Die Farbcharakteristika eines Weines sind seine Helligkeit und
Farbigkeit.
Die Helligkeit entspricht der Transmission. Sie ändert sich im umge-
kehrten Verhältnis zur Farbintensität eines Weines.
Die Farbigkeit entspricht der dominierenden Wellenlänge (die den
Farbton kennzeichnet) und der Reinheit.
Übereinkommensgemäß und aus Gründen der Zweckmäßigkeit
werden die Farbcharakteristika von Rot- und Roséweinen durch die
Farbintensität und den Farbton nach einer als „Gebräuchliches
Verfahren“ vereinbarten Methode angegeben.
1.2. Prinzipder Methoden
1.2.1. Referenzmethode
Spektralphotometrisches Verfahren, das die Berechnung der Tristi-
mulus-Werte und der erforderlichen Dreifarbenkoeffizienten zur
Kennzeichnung der Farbe nach den Begriffen der „internationalen
Kommission für Beleuchtung“ (C.I.E.) gestattet.
1.2.2. Gebräuchliche Methode (für Rot- und Roséweine)
Spektralphotometrisches Verfahren, nach dem die Farbcharakteri-
stika vereinbarungsgemäß wie folgt ausgedrückt werden:
Die Farbintensität wird durch die Summe der Extinktionen für 1 cm
Schichtdicke bei den Wellenlängen 420, 520 und 620 nm angegeben.
Die Farbnuance wird durch das Verhältnis der Extinktionen bei
420 nm und 520 nm ausgedrückt.
1.3. Referenzmethode
1.3.1. Gerätschaften
1.3.1.1. Spektralphotometer für Messungen zwischen 300 und 700 nm.1.3.1.2. Glasküvette mit einer Schichtdicke (b) von 0,1 bzw. 0,2, 0,5, 1, 2
und 4 cm.
1.3.2. Durchführung der Bestimmung
1.3.2.1. Vorbereitung der Probe
Ist der Wein trübe, so muß er durch Zentrifugieren oder Filtrieren
über eine Membran geklärt werden.
Bei Jung- oder Schaumweinen muß der größte Teil des Kohlendio-
xids durch Schütteln unter Vakuum entfernt werden.
1.3.2.2. Messung
Die Schichtdicke b der verwendeten Küvetten muß so gewählt
werden, daß die gemessene Extinktion zwischen 0,3 und 0,7 liegt.
Es wird empfohlen, Küvetten mit einer Schichtdicke von 2 cm (oder
4 cm) für Weißweine, von 1 cm für Roséweine und 0,1 cm (oder
0,2 cm) für Rotweine zu verwenden.
Die spektralphotometrische Messung wird bei den Wellenlängen
445, 495, 550 und 625 nm gegen Wasser als Leerwert durchgeführt.
Die für den Wein bei der Schichtdicke b abgelesenen Extinktionen
(mit 3 Dezimalen) sind: E
445,E495,E550und E625.
1.3.3. Berechnung
Die den Extinktionen bei b cm Schichtdicke entsprechenden Trans-
missionswerte (T %) werden Tabelle 1 entnommen: T445,T495,T550und T625.
— Man berechnet die Tristimuluswerte X, Y und Z, ausgedrückt in
Dezimalen:
X = 0,42 · T625+ 0,35 · T550+ 0,21 · T445
Y = 0,20 · T625+ 0,63 · T550+ 0,17 · T4951990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 164
▼B
Z = 0,24 · T495+ 0,94 · T445
— Man berechnet die Farbkoordination x und y wie folgt:
x¼X
XþYþZy¼Y
XþYþZ
1.3.4. Angabe der Ergebnisse
1.3.4.1. Die relative Helligkeit wird durch den Wert y, ausgedrückt in %,
gegeben (schwarz: y = 0 %, farblos: y = 100 %).
1.3.4.2. Die Farbigkeit wird durch die dominierende Wellenlänge und die
Reinheit ausgedrückt.
Für die Bestimmung wird ein Farbdiagramm verwendet (siehe
Abbildung 1). Der Punkt 0 entspricht hierbei der verwendeten
weißen Lichtquelle, dargestellt durch einen Leuchtstandard C mit
den Koordinaten xo= 0,3101 und yo= 0,3163 (dem normalen Tages-
licht entsprechend).
— Dominante Wellenlänge
Der Schnittpunkt C der Koordinaten x und y wird in das
Diagramm eingetragen. Liegt C außerhalb des Dreiecks AOB,
so werden die Punkte O und C durch eine Gerade verbunden,
die im Punkt S die Linie der Spektraloberfläche schneidet. S
entspricht der dominanten Wellenlänge.
Liegt C innerhalb des Dreiecks AOB, so zieht man die Gerade
von C nach O. Diese schneidet die Linie der Spektraloberfläche
an einem Punkt, der der Wellenlänge der Komplementärfarbe des
Weines entspricht. Diese Wellenlänge wird mit dem Index C
gekennzeichnet.
— Reinheit
Liegt der Punkt C außerhalb des Dreiecks AOB, so wird die
Reinheit, ausgedrückt in %, wie folgt berechnet:
100/C2Entfernung von Punkt C nach Punkt O
Entfernung von Punkt O nach Punkt S
Liegt Punkt C innerhalb des Dreiecks AOB, so wird die Rein-
heit, ausgedrückt in %, wie folgt berechnet:
100 ×Entfernung von Punkt C nach Punkt O (1)
Entfernung von Punkt O nach Punkt P
P ist der Punkt, in dem die Gerade OC den Purpurbereich
schneidet.
Aus den Werten für x und y kann die Reinheit unmittelbar aus
den Farbdiagrammen abgelesen werden (Abbildungen 2, 3, 4, 5
und 6).
1.3.4.3. Ergebnis
Die Helligkeit, die Farbigkeit (ausgedrückt als dominante
Wellenlänge) und die Reinheit beschreiben vollständig die Farbe
des Weines.
Im Analysezeugnis muß die zur Messung verwendete Schichtdicke
mitangegeben werden.
1.4. Gebräuchliche Methode
1.4.1. Gerätschaften
1.4.1.1. Spektralphotometer für Messungen zwischen 300 und 700 nm.
1.4.1.2. Glasküvetten mit einer Schichtdicke b entsprechend 0,1 — 0,2 —
0,5 und 1 cm.
1.4.2. Vorbereitung der Probe
Ist der Wein trübe, so muß er durch Zentrifugieren geklärt werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 165
(1) Dieser Abstand ist im Sinn von OC zu berechnen.
▼B
Bei Jung- und Schaumweinen muß der größte Teil des Kohlendio-
xids durch Schütteln unter Vakuum entfernt werden.
1.4.3. Durchführung der Bestimmung
Die Schichtdicke b der Küvette ist so zu wählen, daß die Extinktion
E zwischen 0,3 und 0,7 liegt.
Die spektralphotometrische Messung wird bei den Wellenlängen
420, 520 und 620 nm gegen Wasser als Leerwert durchgeführt.
1.4.4. Angabe der Ergebnisse
1.4.4.1. Berec hnung
Man rechnet die bei den Wellenlängen abgelesenen Extinktionen auf
1 cm Schichtdicke um, indem man diese jeweils durch b, ausge-
drückt in cm, dividiert. Die so erhaltenen Extinktionen werden mit
E420,E520und E620bezeichnet.
Die Intensität wird vereinbarungsgemäß wie folgt ausgedrückt:
I=E420+E520+E620
Sie wird mit 3 Dezimalen angegeben.
Die Farbnuance wird vereinbarungsgemäß wie folgt ausgedrückt:
N¼E420
E520
Sie wird mit 3 Dezimalen angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 166
▼B
TABELLE I
Umrechnung der Extinktionen in Transmission
Gebrauchsanleitung:Die 1. senkrechte Spalte gibt die 1. Dezimalstelle der Extinktion und
die 1. waagrechte Spalte die 2. Dezimalstelle an.
Um die entsprechenden Transmissionswerte zu erhalten, muß der im
Schnittpunkt beider Spalten abgelesene Wert dividiert werden: durch
10, wenn die Extinktion unter 1, durch 100, wenn die Extinktion
zwischen 1 und 2 und durch 1 000, wenn die Extinktion zwischen 2
und 3 liegt.
Anmerkung:
Die jeweils in den einzelnen Spalten oben rechts angegebenen
Ziffern dienen der Interpolation der dritten Dezimalstelle der Extink-
tion.
0123456789
0 1000
23977229552293321912218912087120851198321981319
1 79418776187591774117724167081669216676156611564615
2 63114617146031458914575135621354913537125251251312
3 50111490114791146811457104479436942710417104079
4 3989389938093718363835583478339833173248
5 3167309730272957288628272756269626362576
6 2516245524062345229522452195214520952045
7 1994195519041864182417841744170416641624
8 1583155415131484144414131383135313231293
9 1263123312031172115311221103107210531022
Beispiel:
Extinktion 0,47 1,47 2,47 3,47
T % 33,9 % 3,4 % 0,3 % 0 %
Die Transmissionswerte T % werden auf 0,1 % genau angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 167
▼B
Abbildung 1:
Diagramm der Farbigkeit; es gibt den Wert aller Farben des
Spektrums wieder1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 168
▼B
Abbildung 2:
Diagramm der Farbigkeit für helle und ziegelfarbige Rotweine1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 169
▼B
Abbildung 3:
Diagramm der Farbigkeit für helle und ziegelfarbige Rotweine1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 170
▼B
Abbildung 4:
Diagramm oder Farbigkeit für helle und purpurfarbene
Rotweine1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 171
▼B
Abbidlung 5:
Diagramm der Farbigkeit für helle und purpurfarbene Rotweine1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 172
▼B
Abbildung 6:
Diagramm der Farbigkeit für ziegelfarbene und purpurfarbene
Rotweine1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 173
▼B
2. REKTIFIZIERTES TRAUBENMOSTKONZENTRAT
2.1. Prinzip
In einer Verdünnung des RTK auf 25 º Brix (Zuckergehalt = 25 %
(g/g)) wird die Extinktion bei 425 nm und einer Schichtdicke von
1 cm gemessen.
2.2. Gerätschaften
2.2.1. Spektralphotometer für Messungen zwischen 300 und 700 nm.
2.2.2. Glasküvetten, Schichtdicke 1 cm.
2.2.3. Membranfilter 0,45 µm.
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Vorbereitung der Probe
Man verwendet eine Lösung von 25 º Brix (Zuckergehalt = 25 % (g/
g)) siehe „pH-Bestimmung“ unter 4.1.2. Man filtriert über eine
Membrane (0,45 µm).
2.3.2. Messung
Die spektralphotometrische Messung der nach 2.3.1 vorbereiteten
Probe wird bei 425 nm in 1 cm Küvetten gegen Wasser als Leerwert
durchgeführt.
2.4. Angabe der Ergebnisse
Die Extinktion bei 425 nm der RTK-Lösung von 25 º Brix wird mit
2 Dezimalstellen angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 174
▼B
41.FOLIN-CIOCALTEU-INDEX
1. DEFINITION
Der Folin-Ciocalteu-Index ist das bei Anwendung nachstehend
beschriebener Methode erzielte Ergebnis.
2. PRINZIP
Die phenolischen Bestandteile des Weines werden durch das Folin-
Ciocalteu-Reagenz oxidiert. Letzteres besteht aus einer Mischung
von Phosphorwolframsäure(H3PW12O40) und Phosphormolybdän-
säure(H3PMo12O40), die bei der Oxidation der phenolischen
Bestandteile zu blauem Wolfram-(W8O23) und Molybdän-
(Mo8O23)oxid reduziert werden.
Das Absorptionsmaximum der entstandenen blauen Farbe liegt bei
750 nm. Sie ist proportional dem Gehalt an phenolischen Bestand-
teilen.
3. REAGENZIEN
Die Reagenzien müssen Analysenqualität aufweisen. Als Wasser ist
destilliertes Wasser oder Wasser gleichwertiger Reinheit zu
verwenden.
3.1. Folin-Ciocalteu-Reagenz
Dieses Reagenz wird im Handel gebrauchsfertig angeboten. Es kann
wie folgt hergestellt werden: 100 g Natriumwolframat (Na2WO4·2 H2O) und 25 g Natriummolybdat (Na2MoO4,2 H2O) werden in
700 ml destilliertem Wasser gelöst; man fügt 50 ml Phosphorsäure
85 % ( ρ20= 1,71 g/ml) und 100 ml konzentrierte Salzsäure ( ρ20= 1,19 g/ml) hinzu. Man läßt am Rückfluß 10 Stunden lang sieden,
fügt danach 150 g Lithiumsulfat (Li2SO4·H2O) und einige Tropfen
Brom hinzu und läßt erneut 15 Minuten lang sieden. Nach dem
Abkühlen wird mit destilliertem Wasser auf 1 Liter aufgefüllt.
3.2. Natriumcarbonat (Na2CO3, wasserfrei) 20%ig (g/v).
4. GERÄTSCHAFTEN
Gebräuchliches Labormaterial, insbesondere:
4.1. 100-ml-Meßkolben.4.2. Spektralphotometer für die Messung bei 750 nm.
5. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG5.1. Rotweine
In einen 100-ml-Meßkolben (4.1) werden in nachstehender Reihen-
folge gegeben:
1 ml Wein, 1: 5 verdünnt
50 ml destilliertes Wasser
5 ml Folin-Ciocalteu-Reagenz (3.1)
20 ml Natriumcarbonatlösung (3.2).
Mit destilliertem Wasser wird auf 100 ml aufgefüllt.
Man mischt und läßt 30 Minuten lang stehen, um die Reaktion
ablaufen zu lassen. Die Extinktion wird bei 750 nm und einer
Schichtdicke von 1 cm gegen einen Leerwert, der anstelle des
Weines destilliertes Wasser enthält, gemessen.
Liegt die abgelesene Extinktion nicht bei ungefähr 0,3, so sollte eine
geeignetere Verdünnung gewählt werden.
5.2. Weißwein
Die Bestimmung wird unter den gleichen Bedingungen mit 1 ml des
unverdünnten Weines durchgeführt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 175
▼B
5.3. Rektifiziertes Traubenmostkonzentrat
5.3.1. Vorbereitung der Probe
Man verwendet eine RTK-Lösung, deren Zuckergehalt 25 % (g/g)
beträgt (25 º Brix), die, wie in Kapitel „pH-Wert“ unter 4.1.2
beschrieben, hergestellt wird.
5.3.2. Messung
Die Messung wird, wie unter (5.1) für Rotweine beschrieben, mit
5 ml der nach (5.3.1) erhaltenen Probelösung durchgeführt. Es wird
gegen einen Leerwert gemessen, der mit 5 ml einer 25%igen (g/g)
Invertzuckerlösung (25 º Brix) hergestellt wurde.
6. ANGABE DER ERGEBNISSE6.1. Berechnung
Das Ergebnis wird in Form eines Index ausgedrückt, der durch
Multiplizieren der Extinktion mit 100 bei 1: 5 verdünnten Rotweinen
(bzw. mit dem entsprechenden Verdünnungsfaktor) und mit 20 bei
Weißweinen erhalten wird. Bei rektifiziertem Traubenmostkon-
zentrat wird die Extinktion mit 16 multipliziert.
6.2. Wiederholbarkeit
Die Differenz zwischen den Ergebnissen von zwei gleichzeitig oder
schnell hintereinander vom gleichen Analytiker durchgeführten
Bestimmungen darf nicht größer als 1 sein.
Eine gute Wiederholbarkeit der Ergebnisse hängt von der Verwen-
dung sehr sauberer Geräte (Meßkolben und Küvetten) ab.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 176
▼B
42.SPEZIELLE METHODEN FÜR REKTIFIZIERTES TRAUBEN-
MOSTKONZENTRAT (RTK)
a) GESAMTKATIONEN
1. PRINZIP
Die zu untersuchende Probe wird mit einem stark sauren Kationen-
austauscher behandelt. Die Kationen werden gegen H+ausgetauscht.
Die Differenz zwischen dem Gesamtsäuregehalt des Eluates und
dem der Probe ergibt den Gehalt an Gesamtkationen.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Glassäule mit Hahn, Länge etwa 300 mm, innerer Durchmesser 10
—1 1m m .
2.2. pH-Meter (erforderliche Genauigkeit 1/10 pH-Einheiten).
2.3. Elektroden:
— Glaselektrode; Aufbewahrung in destilliertem Wasser
— als Referenzelektrode Kalomel-Kaliumchloridelektrode; Aufbe-
wahrung in gesättigter Kaliumchloridlösung, oder
— kombinierte Elektrode; Aufbewahrung in destilliertem Wasser.
3. REAGENZIEN
3.1. Stark saurer Kationenaustauscher in H+-Form. Vor Gebrauch ist der
Ionenaustauscher mit Wasser über Nacht aufzuquellen.
3.2. Natronlauge(NaOH), 0,1 M.
3.3. pH-Papier.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Vorbereitung der Probe
Man stellt eine 40%ige (g/v) Lösung her (siehe „Gesamtsäure“ unter
5.1.2).
4.2. Vorbereitung der Austauschersäule
Man gibt etwa 10 ml zuvor aufgequollenen Ionenaustauscher in H+-
Form in die Glassäule und wäscht mit destilliertem Wasser säurefrei
(pH-Papier).
4.3. Ionenaustausch
100 ml der nach 4.1 verdünnten Probe werden mit einer Geschwin-
digkeit von 1 Tropfen/Sekunde über die Säule gegeben. Die
ablaufende Flüssigkeit wird in einem Becherglas aufgefangen; man
wäscht mit 50 ml destilliertem Wasser nach. Man titriert das
gesamte Eluat mit 0,1 M Natronlauge bis pH 7,0 bei 20 ºC. Der
Zusatz der Natronlauge muß langsam erfolgen und die Lösung
ständig gerührt werden.
Verbrauchte ml = n.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
Die Gesamtkationen werden in Milliäquivalenten je Kilogramm
Gesamtzucker (mval/kg) mit 1 Dezimalstelle angegeben.
5.1. Berechnung
— Säuregehalt des Eluates, ausgedrückt in mval/kg RTK = n · 2,5
— Gesamtsäuregehalt des RTK, ausgedrückt in mval/kg (siehe
„Gesamtsäure“, unter 6.1.2) = a
— Gesamtkationen, ausgedrückt in mval/kg Gesamtzucker:
2;5n/C0a
P/C1100
P = Gesamtzucker in % (g/g).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 177
▼B
b) LEITFÄHIGKEIT
1. PRINZIP
Die elektrische Leitfähigkeit einer Flüssigkeit wird mit Hilfe von 2
parallel angeordneten Platinelektroden (Wheatstonebrücke)
bestimmt.
Die Leitfähigkeit ist temperaturabhängig. Sie wird bei 20 ºC ange-
geben.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Leitfähigkeitsmeßgerät mit einem Meßbereich zwischen 1 und 1 000
Mikrosiemens je cm.
2.2. Wasserbad zur Temperierung der zu untersuchenden Probe auf etwa
20 ºC (20 ± 2 ºC).
3. REAGENZIEN
3.1. Entmineralisiertes Wasser; die spezifische Leitfähigkeit bei 20 ºC
muß unter 2 Mikrosiemens je cm liegen.
3.2. Kaliumchlorid-Eichlösung.
0,581 g Kaliumchlorid (KCl), das vorher bei 105 ºC bis zur
Gewichtskonstanz getrocknet wurde, werden in entmineralisiertem
Wasser (3.1) gelöst und mit diesem Wasser (3.1) zu 1 Liter aufge-
füllt. Diese Lösung hat eine Leitfähigkeit von 1 000 Mikrosiemens
je cm bei 20 ºC. Haltbarkeit: 3 Monate.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG4.1. Vorbereitung der Probe
Man stellt eine Lösung von 25º Brix (Gesamtzuckergehalt 25 % g/g)
her (siehe „pH-Wert“ unter 4.1.2).
4.2. Bestimmung der Leitfähigkeit
Die zu untersuchende Probe wird im Wasserbad auf etwa 20 ºC
temperiert und die Temperatur auf 0,1 ºC genau abgelesen.
Die Meßzelle des Leitfähigkeitsmeßgerätes wird 2 mal mit der zu
untersuchenden Probe gespült.
Man mißt die Leitfähigkeit in Mikrosiemens je cm.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
Die Leitfähigkeit wird ausgedrückt in Mikrosiemens je cm (µS cm
−1)
bei 20 ºC für eine Lösung von 25º Brix des RTK.
5.1. Berechnung
Wenn das Gerät keine Temperaturkompensation hat, ist die geme-
ssene Leitfähigkeit anhand von Tabelle I zu korrigieren. Liegt die
Temperatur unter 20 ºC, so ist der Korrekturwert hinzuzurechnen,
liegt die Temperatur über 20 ºC, so ist der Korrekturwert abzu-
ziehen.
TABELLE I
Temperaturkorrektur der Leitfähigkeit in Mikrosiemens cm−1
Leitfähig-
keitTemperatur
20,2
19,820,4
19,620,6
19,420,8
19,221,0
19,021,2
18,821,4
18,621,6
18,421,8
18,222,0 (1)
18,0 (2)
0 000 000000 0
5 0 001 111122 2
1 0 0 011 223334 41 5 0 112 334556 72 0 0 123 345678 92 5 0 123 46789 1 01 11990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 178
▼B
Leitfähig-
keitTemperatur
20,2
19,820,4
19,620,6
19,420,8
19,221,0
19,021,2
18,821,4
18,621,6
18,421,8
18,222,0 (1)
18,0 (2)
3 0 0 134 5789 1 1 1 21 3
350 1 3 5 6 8 9 11 12 14 15400 2 3 5 7 9 11 12 14 16 18
4 5 0 2 3 6 81 01 21 41 61 8 2 0
5 0 0 2 4 7 91 11 31 51 82 0 2 2550 2 5 7 10 12 14 17 19 22 24600 3 5 8 11 13 16 18 21 24 26
(1) Korrekturwert abziehen.
(2) Korrekturwert zuzählen.
c) HYDROXYMETHYLFURFUROL (HMF)
1. PRINZIP DER METHODEN
1.1. Photometrische Methode
Die Aldehyde der Furangruppe, deren Hauptvertreter das HMF ist,
reagieren mit Barbitursäure und p-Toluidin zu einer rotgefärbten
Verbindung, deren Intensität bei 550 nm gemessen wird.
1.2. Hochdruckflüssigkeitschromatographische Methode
Trennung über eine Reversed-Phase-Säule und Bestimmung im UV
bei 280 nm.
2. PHOTOMETRISCHE METHODE
2.1. Gerätschaften
2.1.1. Spektralphotometer zur Durchführung der Messungen zwischen 300
und 700 nm.
2.1.2. Glasküvetten, Schichtdicke 1 cm.
2.2. Reagenzien
2.2.1. Barbitursäurelösung 0,5 % (g/v):
500 mg Barbitursäure(C4O3N2H4) werden unter leichtem Erwärmen
auf einem Wasserbad (100 ºC) in destilliertem Wasser gelöst und auf
100 ml mit destilliertem Wasser aufgefüllt. Haltbarkeit: etwa 1
Woche.
2.2.2. p-Toluidinlösung 10 % (g/v):
10 g p-Toluidin (4-C6H4(CH3)N H2) werden in einem 100-ml-
Meßkölbchen mit 50 ml 2-Propanol (CH3CH(OH)CH3) und 10 ml
Eisessig (CH3COOH, ρ2 0º = 1,05 g/ml) gelöst und mit 2-Propanol
zur Marke aufgefüllt. Die Lösung ist täglich frisch herzustellen.
2.2.3. Wäßrige Acetaldehydlösung (CH3CHO), 1 % (g/v); frisch herzu-
stellen.
2.2.4. WäßrigeLösung von Hydroxyme thylfurfural (C6O3H6), 1 g/l
(Stammlösung).
Aus dieser Lösung werden Lösungen mit 5 — 10 — 20 — 30 und
40 mg/l HMF hergestellt.
Diese Lösungen (Stammlösung und Verdünnungen) sind jeweils
frisch herzustellen.
2.3. Durchführung der Bestimmung
2.3.1. Vorbereitung der Probe
Man verwendet eine verdünnte Lösung des RTK (40 %, g/v); siehe
„Gesamtsäure“ unter 5.1.2. 2 ml dieser Lösung werden zur Bestim-
mung verwendet.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 179
▼B
2.3.2. Photometrische Bestimmung
In zwei 25-ml-Erlenmeyerkölbchen mit Schliff a und b pipettiert
man 2 ml der vorbereiteten Probe (2.3.1), fügt jeweils 5 ml p-Tolui-
dinlösung (2.2.2) hinzu und mischt. Sodann gibt man in Kölbchen b
(Leerwert) 1 ml destilliertes Wasser und in Kölbchen a (Meßwert)
1 ml Barbitursäurelösung (2.2.1). Man gibt die Lösungen in die
1 cm Glasküvetten und mißt gegen den Leerwert bei 550 nm das
Maximum der Färbung zwischen 2 und 5 Minuten.
Proben mit Gehalten über 30 mg/l HMF müssen vorher verdünnt
werden.
2.3.3. Eichkurve
In zwei 25-ml-Erlenmeyerkölbchen mit Schliff a und b gibt man 2 ml
der unter 2.2.4 hergestellten Verdünnungen, die 5 — 10 — 20 — 30
und 40 mg/l HMF enthalten und verfährt weiter wie unter 2.3.2
angegeben.
Die erhaltene Eichkurve ist eine Gerade, die durch den Nullpunkt
geht.
2.4. Angabe der Ergebnisse
Der Gehalt an HMF im RTK wird in Milligramm je Kilogramm
(mg/kg) Gesamtzucker angegeben.
2.4.1. Berechnung
Der Gehalt „C“ in mg HMF/l der untersuchten Probelösung wird der
Eichkurve entnommen.
Der Gehalt an HMF in mg/kg Gesamtzucker beträgt:
250/C1C
P
P = Gehalt an Gesamtzucker % (g/g) des RTK.
3. HOCHDRUCKFLÜSSIGKEITSSCHROMATOGRAPHISCHE
METHODE
3.1. Gerätschaften
3.1.1. Hochdruckflüssigkeitschromatograph, ausgerüstet mit
— einem Injektor mit Probenschleife 5 oder 10 µl;
— einem UV-Detektor zur Messung bei 280 nm;— einer Trennsäule, Reversed Phase C
18(z. B. Bondapak C18-
Corasil, Waters Ass.);
— einem Schreiber, eventuell einem Integrator;
Fließgeschwindigkeit der mobilen Phase: 1,5 ml/Min.
3.1.2. Membranfiltration (0,45 µm)
3.2. Reagenzien
3.2.1. Bidestilliertes Wasser.3.2.2. Methanol (CH
3OH) destilliert oder HPLC-Qualität.
3.2.3. Essigsäure(CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml).
3.2.4. Mobile Phase: Wasser-Methanol(3.2.2)-Eisessig (3.2.3), filtriert über
eine Membrane (0,45 µm), (40—9—1 v/v).
Das Fließmittel wird täglich frisch hergestellt und vor Gebrauch
entgast.
3.2.5. HMF-Eichlösung, 25 mg/l (g/v)
25 mg HMF (C6H3O6) werden in einem 100-ml-Meßkölbchen in
Methanol (3.2.2) gelöst und zur Marke aufgefüllt. Diese Lösung
wird mit Methanol (3.2.2) 1: 10 verdünnt und über eine Membrane
(0,45 µm) filtriert.
Diese Lösung ist im Kühlschrank in dunkler Flasche, fest
verschlossen, etwa 2 bis 3 Monate haltbar.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 180
▼B
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Vorbereitung der Probe
Man verwendet eine verdünnte Lösung des RTK (40 %, g/v), siehe
„Gesamtsäure“ unter 5.1.2 und filtriert diese über eine Membrane
(0,45 µm).
3.3.2. Chromatographie
5 (oder 10 µl) der nach 3.3.1 vorbereiteten Probe und der Eichlösung
(3.2.5) werden in den Chromatographen eingespritzt und die Chro-
matogramme aufgenommen.
Die Retentionszeit des HMF beträgt etwa 6 bis 7 Minuten.
3.4. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der HMF-Gehalt des RTK wird in Milligramm je Kilogramm (mg/
kg) Gesamtzucker angegeben.
3.4.1. Berechnung
C = HMF-Gehalt in mg/l der 40%igen RTK-Lösung
Der HMF-Gehalt des RTK, ausgedrückt in mg/kg Gesamtzucker
beträgt:
250/C1C
P
P = Gesamtzucker in % (g/g) des RTK.
d) SCHWERMETALLE1. PRINZIP
I. Schnellmethode zur Abschätzung des Gehaltes an Schwerme-
tallen:
Die Schwermetalle werden in einer geeigneten Verdünnung des RTK
durch die Färbung ihrer Sulfide nachgewiesen. Als Vergleich dient
eine Bleilösung, die den zulässigen Höchstwert an Blei enthält.
II. Bestimmung des Bleigehaltes mittels Atomabsorptionsspektrome-
trie:
Blei bildet mit Ammoniumpyrrolidindithiocarbamat ein Chelat. Nach
Extraktion mit Isobutylmethylketon wird dieses bei 283,3 nmgemessen. Der Gehalt an Blei wird nach dem Additionsverfahren
bestimmt.
2. SCHNELLMETHODE2.1. Reagenzien
2.1.1. Verdünnte Salzsäure, 70%ig (g/v):
70 g Salzsäure(HCl) ( ρ
20= 1,16 — 1,19 g/ml) werden mit Wasser
zu 100 ml ergänzt.
2.1.2. Verdünnte Salzsäure, 20%ig (g/v):
20 g Salzsäure(HCl) ( ρ20= 1,16 — 1,19 g/ml) werden mit Wasser
zu 100 ml ergänzt.
2.1.3. Verdünntes Ammoniak:
14 g Ammoniak (NH3)(ρ20= 0,931 — 0,934 g/ml) werden mit
Wasser zu 100 ml ergänzt.
2.1.4. Pufferlösung pH 3,5:
25 g Ammoniumacetat (CH3COONH4) werden in 25 ml Wasser
gelöst, und 38 ml verdünnte Salzsäure werden (2.1.1) hinzugefügt.
Falls erforderlich wird der pH-Wert mit verdünnter Salzsäure
(2.1.2) oder verdünntem Ammoniak (2.1.3) eingestellt und sodann
mit Wasser auf 100 ml ergänzt.
2.1.5. Thioacetamidlösung (C2H5NS), 4%ig (g/v).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 181
▼B
2.1.6. Glycerinlösung (C3H8O3), 85%ig (g/v).
nD20 ºC= 1,449 — 1,455
2.1.7. Thioacetamidreagenz:
Zu 0,2 ml der Thioacetamidlösung (2.1.5) fügt man 1 ml einer
Mischung von 5 ml Wasser, 15 ml Natronlauge, 1 M und 20 ml
Glycerinlösung (2.1.6) hinzu. Man erhitzt 20 Sekunden in einem
Wasserbad von 100 ºC. Das Reagenz ist unmittelbar vor Gebrauch
herzustellen.
2.1.8. Bleilösung, 0,002 g/l:
Man stellt eine Bleilösung von 1 g/l Blei her, indem man 0,400 g
Bleinitrat Pb (NO3)2in Wasser löst und mit Wasser zu 250 ml
ergänzt. Bei Gebrauch wird die Lösung 2: 1 000 (v/v) mit Wasser
verdünnt.
2.2. Durchführung der Bestimmung
10 g RTK werden in 10 ml Wasser gelöst. Man fügt 2 ml der
Pufferlösung pH 3,5 (2.1.4) hinzu und mischt. Man gibt 1,2 ml des
Thioacetamidreagenzes (2.1.7) zu und mischt sofort. Unter gleichen
Bedingungen wird eine Vergleichslösung hergestellt, die 10 ml der
Bleilösung 0,002 g/l (2.1.8) enthält.
Nach 2 Minuten darf die eventuell in der RTK-Lösung auftretende
Braunfärbung nicht stärker als die der Bleivergleichslösung sein.
2.3. Berechnung
Die Vergleichslösung entspricht, unter den obengenannten Durch-
führungsbedingungen, einem maximal zulässigen Gehalt an
Schwermetallen, ausgedrückt als Blei, von 2 mg/kg RTK.
3. BESTIMMUNG DES BLEIGEHALTES DURCH ATOMABSORP-
TIONSSPEKTROMETRIE
3.1. Gerätschaften
3.1.1. Atomabsorptionsspektrometer mit einem Brennerkopf für Luft/
Acetylen.
3.1.2. Hohlkathodenlampe für Blei.
3.2. Reagenzien
3.2.1. Verdünnte Essigsäure:
12 g Eisessig ( ρ20= 1,05 g/ml) werden mit Wasser auf 100 ml
aufgefüllt.
3.2.2. Ammoniumpyrrolidindithiocarbamat (C5H12N2S2), 1%ig (g/v).
3.2.3. Isobutylmethylketon (CH3)2CHCH2COCH3).
3.2.4. Bleilösung, 0,010 g/l Blei:
Die Bleilösung 1 g/l (2.1.8) wird 1: 100 (v/v) verdünnt.
3.3. Durchführung der Bestimmung
3.3.1. Probelösung
10 g RTK werden in einer Mischung aus gleichen Teilen der
verdünnten Essigsäurelösung (3.2.1) und Wasser gelöst und mit
dieser Mischung auf 100 ml aufgefüllt.
Man fügt 2 ml der Ammoniumpyrrolidindithiocarbamatlösung
(3.2.2) und 10 ml Isobutylmethylketon (3.2.3) hinzu. Man schüttelt
während 30 Sekunden (geschützt vor starker Lichteinstrahlung), läßt
die Schichten sich trennen und verwendet die Isobutylmethylketon-
phase.
3.3.2. Eichlösungen
Man stellt 3 Eichlösungen her, die zusätzlich zu den 10 g RTK noch
1 — 2 und 3 ml der Bleilösung 0,010 g/l (3.2.4) enthalten. Diese
Lösungen werden, wie unter 3.3.1 beschrieben, behandelt.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 182
▼B
3.3.3. Leerwert
Man stellt einen Leerwert, wie unter 3.3.1 beschrieben, aber ohne
Zusatz von RTK, her.
3.3.4. Bestimmung
Die Messung wird bei 283,3 nm durchgeführt.Der Nullpunkt wird mit der Isobutylmethylketonphase des Leer-
wertes eingestellt.
Die organischen Phasen der zu untersuchenden Lösung und der
Eichlösungen werden nacheinander gemessen.
3.4. Angabe der Ergebnisse
Der Bleigehalt wird in mg/kg RTK mit 1 Dezimale angegeben.
3.4.1. Berechnung
Man stellt eine Eichkurve auf, indem man die gemessenen Extink-
tionen gegen die entsprechenden den Eichlösungen zugesetzten
Konzentrationen Blei aufträgt. Die Extinktion der Probelösung wird
als Konzentration Null eingetragen. Die durch die Meßpunkte gezo-
gene Gerade gibt im Schnittpunkt mit der negativen Seite der
Konzentrationsachse den Bleigehalt der Probelösung an.
e) CHEMISCHE ALKOHOLBESTIMMUNG
Diese Bestimmungsmethode ist für Flüssigkeiten mit niedrigem
Alkoholgehalt wie Most, Mostkonzentrat und RTK geeignet.
1. PRINZIP
Einfache Destillation, Oxidation des Ethanols im Destillat durch
Kaliumdichromat und Titration des Überschusses an Kaliumdi-
chromat mit einer Fe-II-Salzlösung.
2. GERÄTSCHAFTEN
2.1. Destillationsapparatur wie in Kapitel „Alkoholgehalt“ unter 3.2
beschrieben.
3. REAGENZIEN
3.1. Kaliumdichromatlösung:
33,600 g Kaliumdichromat (K
2Cr2O7) werden in Wasser gelöst und
auf 1 000 ml aufgefüllt.
1 ml dieser Lösung oxidiert 7,8924 mg Alkohol.
3.2. Ammoniumeisen(II)-sulfatlösung:
135 g Ammoniumeisen(II)-sulfat ((NH4)2Fe(SO4)2.6H2O) werden in
Wasser gelöst, man fügt 20 ml Schwefelsäure ( ρ20= 1,84 g/ml) zu
und füllt auf 1 000 ml auf. Frisch hergestellt entspricht 1 ml dieser
Lösung 0,5 ml der Kaliumdichromatlösung. Die Lösung wird
allmählich oxidiert.
3.3. Kaliumpermanganatlösung:
1,088 g Kaliumpermanganat (KMnO4) werden in Wasser gelöst und
auf 1 000 ml aufgefüllt.
3.4. Schwefelsäure, 1 + 1 verdünnt:
Zu 500 ml Wasser gibt man nach und nach unter Schütteln 500 ml
Schwefelsäure (H2SO4,ρ20= 1,84 g/ml).
3.5. 1,10-Phenanthrolinreagenz, eisenhaltig:
Man löst 0,695 g Eisen-II-sulfat (FeSO4·7H2O) in 100 ml Wasser
und fügt 1,485 g 1,10-Phenanthrolin-Monohydrat (C12H8N2·H2O)
hinzu. Zur besseren Lösung wird erwärmt. Die kräftig rote Lösung
ist gut haltbar.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 183
▼B
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
4.1. Destillation
In den Destillierkolben gibt man 100 g RTK und 100 ml Wasser.
Das Destillat wird in einem 100-ml-Meßkölbchen aufgefangen und
mit Wasser zur Marke aufgefüllt.
4.2. Oxidation
In einen 300-ml-Erlenmeyerkolben mit eingeschliffenem Glasstopfen
(der Kolbenhals besitzt einen erweiterten Rand, um den Stopfen
beim Öffnen des Kolbens ohne Verlust abspülen zu können) werden
20 ml der Kaliumdichromatlösung (3.3), 20 ml der verdünnten
Schwefelsäure (3.4) gegeben und geschüttelt. Man fügt 20 ml
Destillat zu. Der Kolben wird verschlossen, geschüttelt und
mindestens 30 Minuten unter zeitweiligem Schütteln stehen gelassen
(Probelösung).
In gleicher Weise wird ein Leerwert angesetzt, der anstelle des
Destillats 20 ml destilliertes Wasser enthält.
4.3. Titration
Man gibt 4 Tropfen des 1,10-Phenanthrolinreagenzes (3.5) in die
„Probelösung“. Der Kaliumdichromatüberschuß wird mit Ammoniu-
meisen(II)-sulfatlösung (3.2) bis zum Umschlag von blau-grün nach
kastanienbraun. Um den Umschlagspunkt genau zu erfassen, titriert
man mit der Kaliumpermanganatlösung (3.3) von kastanienbraun
nach blau-grün zurück. 1/10 der titrierten ml dieser Lösung wird
von den verbrauchten Millilitern Ammoniumeisen(II)-sulfatlösung
abgezogen, n = tatsächlich verbrauchte Milliliter Ammoniumei-
sen(II)-sulfatlösung.
Der Leerwert wird in gleicher Weise titriert, n ′= verbrauchte Milli-
liter Ammoniumeisen(II)-sulfatlösung.
5. ANGABE DER ERGEBNISSE
Der Ethanolgehalt wird in g/kg Gesamtzucker mit 1 Dezimalstelle
angegeben.
5.1. Berechnung
n′ml Eisen(II)-Salzlösung reduzieren 20 ml Kaliumdichromatlösung,
die 157,85 mg Ethanol oxidieren.
Folglich entspricht 1 ml Eisen(II)-Salzlösung:
157;85
n0mg Ethanol
n′− n ml Eisen(II)-Salzlösung entsprechen demnach:
157;85/C1n0/C0n
n0mg Ethanol
Ethanol in g/kg RTK:
7;892/C1n0/C0n
n0
Ethanol in g/kg Gesamtzucker:
789;2/C1n0/C0n
n0/C1P
P = Gesamtzucker in % (g/g).
f) MESOINOSIT, SCYLLOINOSIT UND SACCHAROSE1. PRINZIP
Gaschromatographische Bestimmung nach Derivatisierung.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 184
▼B
2. REAGENZIEN
2.1. Interner Standard: Xylit, 10 g/l (wäßrige Lösung, konserviert mit
einer Spatelspitze Natriumazid).
2.2. Bis-(trimethylsilyl)-trifluoroacetamid-BST FA-(C8H18F3NOSi2).
2.3. Chlortrimethylsilan (C3H9ClSi).
2.4. Pyridin p.a. (C5H5N).
2.5. meso-Inosit (C6H12O6).
3. GERÄTSCHAFTEN
3.1. Gaschromatograph.3.2. Fused silica Quarzkapillarsäule: 25 m × 0,3 mm, OV-1, Filmdicke
0,15 µm.
Gaschromatographische Bedingungen:
— Trägergas: Wasserstoff oder Helium mit 2 ml/Min.
— Injektor/Detektor-Temperatur: 300 ºC— Temperaturprogramm: 1 Min. bei 160 º, 4 ºC/Min. auf 260 ºC,
15 Min. isotherm bei 260 ºC
— Split: 1: 20.
3.3. Integrator.3.4. Mikroliterspritze 10 µl.
3.5. Mikroliterpipetten: 50, 100 und 200 µl.
3.6. Derivatisierungskölbchen mit Teflonstopfen, 2 ml.3.7. Trockenschrank.
4. DURCHFÜHRUNG DER BESTIMMUNG
Etwa 5 g rektifiziertes Traubenmostkonzentrat werden in ein 50-ml-
Meßkölbchen eingewogen und mit 1 ml des internen Standards (2.1)
versetzt. Man füllt mit Wasser zur Marke auf und mischt. 100 µl
dieser Lösung werden in einem 2 ml Derivatisierungskölbchen (3.7)
mittels eines schwachen Luftstromes zur Trockne gebracht. Um das
Eindampfen zu erleichtern, können vorher 100 µl absoluter Alkohol
zugesetzt werden. Der Rückstand wird in 100 µl Pyridin (2.4)
aufgenommen. Man fügt dann 100 µl BSTFA (2.2) und 10 µl Chlor-
trimethylsilan (2.3) hinzu. Das Kölbchen wird mit dem
Teflonstopfen verschlossen und 1 Stunde bei 60 ºC im Trocken-
schrank erhitzt. 0,5 µl der Lösung werden mittels Heißnadel-
Injektionstechnik bei dem oben angegebenen Splitverhältnis einge-
spritzt.
5. BERECHNUNG5.1. Ermittlung der Responsefaktoren
Man stellt eine Standardlösung mit 60 g/l Glucose, 60 g/l Fructose,
1 g/l meso-Inosit und 1 g/l Saccharose her.
5 g dieser Lösung werden eingewogen und wie unter Punkt 4
beschrieben weiterbehandelt.
Aus dem erhaltenen Chromatogramm werden die Responsefaktoren
für meso-Inosit und Saccharose berechnet.
Scyllo-Inosit, das nicht im Handel erhältlich ist, hat eine Retentions-
zeit die zwischen der des letzten Peaks der Glucoseanomere und der
des meso-Inosits liegt (siehe Abbildung). Zur Berechnung verwendet
man den Responsefaktor des meso-Inosits.
6. ANGABE DER ERGEBNISSE
6.1. Meso-Inosit und Scyllo-Inosit werden in mg/kg Gesamtzucker und
Saccharose in g/kg RTK mit 1 Dezimale angegeben.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 185
▼B
Abbildung: GC-Chromatogramm von Meso-Inosit, Scyllo-Inosit und Saccharose1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 186
▼M4
43.BESTIMMUNG DES VERHÄLTNISSES DER ISOTOPE18O/16OI M
WASSER DES WEINS
I. BESCHREIBUNG DER METHODE
1. Zweck der Methode
Mit dieser Methode soll das Verhältnis der Isotope18O/16O in Wasser
unterschiedlichen Ursprungs gemessen werden. Das Verhältnis der
Isotope18O/16O kann als Abweichung δ‰ gegenüber dem Wert des
Isotopenverhältnisses des internationalen Standards V.SMOW ausge-
drückt werden:
δiè0½/C138 ¼Ri
RSMOW/C01/C20/C21
/C21000 :
2. Prinzip
Das Verhältnis der Isotope18O/16O wird durch Massenspektrometrie
des Isotopenverhältnisses (SMRI) aus den Ionenströmen m/z 46
(12C16O18O) und m/z 44 (12C16O2) bestimmt, die durch Kohlendioxid
produziert werden, das nach Austausch mit dem Wasser des Weins
nach folgender Reaktion gewonnen wird:
C16O2+H218O↔C16O18O+H216O.
Das Kohlendioxid der Gasphase wird für die Analyse verwendet.
3. Reagenzien:
— Kohlendioxid für die Analyse,
— SMOW (Standard Mean Ocean Water),
— GISP (Greenland Ice Sheet Precipitation),— SLAP (Standard Light Arctic Precipitation),
— Standardwasser, das dem Labor eigen ist und gegenüber den
Standardproben der Internationalen Atomenergie-Organisation in
Wien (IAEO) genauestens geeicht wurde.
4. Laborausrüstung
— Massenspektrometer für Isotopenverhältnisse mit einer internen
Wiederholbarkeit von 0,05 ‰,
— dreifacher Kollektor für die gleichzeitige Aufzeichnung der
Ionen m/z 44, 45 und 46 oder, falls nicht vorhanden, doppelter
Kollektor zum Messen der Ionen m/z 44 und 46,
— thermostatisch geregeltes System (± 0,5 ºC) zur Durchführung
der Äqulibrierung zwischen CO
2und dem Wasser des Weins,
— Vakuumpumpe, die einen Innendruck von 0,13 Pa erreichen
kann,
— Probenphiolen mit einem Volumen von 15 ml und einem dazu-
gehörenden Kapillarröhrchen mit einem Innendurchmesser von
0,015 mm,
— Eppendorf-Pipette mit Wegwerf-Trichter aus Plastik.
5. Experimentelle Messungen
5.1. Manuelle Methode
Verfahren bei der Äquilibrierungsmethode
Einführung der Probe
— Auf die Eppendorf-Pipette mit festem Volumen von 1,5 ml wird
ein Trichter gesetzt, und die zu analysierende Flüssigkeit wird
anhand der Pipette in einen Kolben gegeben. Anschließend wird
der Kolbenhals mit Silikonfett eingerieben und der Kolben am
Ventil befestigt, wobei überprüft werden muß, daß dieses
ordnungsgemäß geschlossen ist.
— Der Vorhang wird bei jedem Kolben der Arbeitsplattform
wiederholt, wobei das Standardwasser des Labors in einen der
Kolben eingefüllt wird.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 187
▼M4
Entgasen der Plattform
Die beiden Plattformen werden mit Flüssigstickstoff gekühlt;
anschließend wird das gesamte System bis zu 0,1 mm Hg gespült,
indem die Ventile geöffnet werden.
Danach werden die Ventile wieder geschlossen und läßt man die
Vorrichtung sich wieder erwärmen. Der Entgasungszyklus wird
wiederholt, bis keine Druckschwankungen mehr auftreten.
Äquilibrierung des Wassers und des CO2
Die Arbeitsplattform wird auf − 70 ºC gekühlt (Mischung von Flüs-
sigstickstoff und Alkohol), um das Wasser zu gefrieren; dann wird
ein Vakuum um die Vorrichtung gebildet. Nach Stabilisierung des
Vakuums wird die Plattform anhand des Ventils isoliert und wird
das Einleitungssystem des CO2gespült. Das gasförmige CO2wird
in die Arbeitsplattform eingeleitet, und nachdem sie vom Rest des
Systems isoliert wurde, wird die Plattform 12 Stunden lang (eine
Nacht) in das thermostatisch auf 25 ºC (± 0,5 ºC) geregelte Bad
eingetaucht. Um die für die Äquilibrierung erforderliche Zeit zu
optimisieren, wird geraten, die Proben am Ende des Tages vorzube-
reiten und die Nacht für die Einstellung des Gleichgewichts zu
nutzen.
Übertragung des ausgetauschten CO2in die Meßzellen
Ein Probenhalter, der soviel Meßzellen wie ausgetauschtes CO2enthaltende Kolben trägt, wird an das Vakuumsystem neben der
Arbeitsplattform angesetzt. Die leeren Zellen werden sorgfältig
gespült und die in den Kolben enthaltenen ausgetauschten Gase
werden hintereinander in die mit Flüssigstickstoff gekühlten
Meßzellen übertragen. Anschließend läßt man die Meßzellen sich
wieder auf Raumtemperatur erwärmen.
5.2. Verwendung eines automatischen Austauschapparats
Zur Durchführung der Äqulibrierung werden die Probephiolen
entweder mit 2 ml Wein oder 2 ml Wasser (Arbeitsreferenz desLabors) gefüllt und auf − 18 ºC gekühlt. Die Probenhalter, die die
gefrorenen Erzeugnisse enthalten, werden an das Äquilibrierungssy-
stem angepaßt, und nachdem im System ein Vakuum gebildet
wurde, wird das Kohlendioxid mit einem Druck von 800 hPa einge-
leitet.
Das Gleichgewicht wird erreicht bei einer Temperatur von 22 ± 0,5 ºC
nach einer Mindestdauer von 5 Stunden und bei gemäßigtem Schüt-
teln. Da die Äqulibrierungsdauer von der Geometrie der Phiole
abhängt, muß zunächst die Optimaldauer für das verwendete System
festgestellt werden.
Das in den Phiolen enthaltene Kohlendioxid wird anschließend
anhand eines Kapillarröhrchens in die Einbringungskammer des
Massenspektrometers eingeführt, und die Messung erfolgt nach
einem für jeden Apparattyp eigenen Protokoll.
6. Berechnung und Angabe der Ergebnisse
Die relative Differenz δ′des Intensitätsverhältnisses der Ionen m/z
46 und 44 (I
46/I44) zwischen der Stichprobe und dem Standard wird
ausgedrückt in ‰ anhand folgender Relation:
δ0Probe ¼I46=I44 ðÞ Probe
I46=I44 ðÞ Referenz/C01/C20/C21
/C21000
Der Gehalt der Stichprobe an18O im Verhältnis zum Standard
V.SMOW auf der Skala V.SMOW-SLAP wird durch folgende Rela-
tion ausgedrückt:
δ018O ¼δ0Probe /C0δ0SMOW
δ0SMOW /C0δ0SLAP/C20/C21
/C255;5
Der akzeptierte Wert für das Wasser des SLAP beträgt − 55,5 ‰
gegenüber dem V.SMOW. Das Isotopenverhältnis des Standards1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 188
▼M4
muß nach jeder Reihe von zehn Messungen bei unbekannten Stich-
proben festgelegt werden.
7. Verläßlichkeit:
— Die Wiederholbarkeit (r) beträgt 0,24 ‰
— Die Vergleichbarkeit (R) beträgt 0,50 ‰.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 189
▼M7
44.BESTIMMUNG VON ETHYLCARBAMAT IN WEIN: SELEKTIVE,
GASCHROMATOGRAPHISCHE/MASSENSPEKTROMETRISCHE
BESTIMMUNG
(für die Bestimmung von Ethylcarbamat bei Konzentrationen zwischen 10 und
200 µg/l)
(Achtung: Sicherheitsbestimmungen für den Umgang mit Chemikalien für
Ethanol, Aceton und karzinogene Stoffe (Ethylcarbamat und Dichlormethan)
beachten. Verbrauchtes Lösungsmittel nach Maßgabe der jeweils geltenden
Umweltschutzvorschriften entsorgen.)
A.Prinzipder Methode
Propylcarbamat wird einer Probe als innerer Standard zugesetzt, die Lösung
wird mit Wasser verdünnt und in eine 50-ml-Feststoffextraktionssäule über-
geführt. Ethylcarbamat und Propylcarbamat werden mit Dichlormethan
eluiert.
Das Eluat wird in einem Vakuumrotationsverdampfer eingeengt. Das
Konzentrat wird gaschromatographisch (GC) analysiert; die Bestimmung
erfolgt massenspektrometrisch in fragmentometrischer SIM-Technik
(Selected Ions Monitoring)
B.Gerätschaften und Chromatographiebedingungen (als Beispiel)
a) Gaschromatograph/Massenspektrometer (GC/MS) und eventuell ein
Probengeber und ein Datenauswertungssystem oder Ähnliches.
Kieselgelsäule 30 m (1) × 0,25 mm ∅int., 0,25 µm Belegung vom Typ
Carbowax 20M.
Durchführung der Bestimmung: Einspritzblock 180 ºC, Trägergas Helium
1 ml/min Vordruck bei 25 ºC, Einspritzung nach dem Verfahren,
„splitlos/split“.
Temperaturführung: 40 ºC, 0,75 min, dann mit 10 ºC/min auf 60 ºC, dann
mit 3 ºC/min auf 150 ºC (2), dann auf 220 ºC, dann 4,25 min auf 220 ºC.
Die spezifische Retentionszeit von Ethylcarbamat beträgt 23—27 min,
dievon Propylcarbamat 27—31 min.
Gaschromatograph/Spektrometer-lnterface (GC/MS): Transferlinie 220 ºC.
Massenspektrometer-Parameter manuell mit Perfluorotributylamin einge-
stellt und für eine niedrigere Massenempfindlichkeit optimiert, SlM-
Technik, Lösungsmittel-Einwirkungszeit und Beginn der Aufnahme 22
min, Ionlebensdauer 100 ms.
b) Vakuumrotationsverdampfer oder Kuderna-Danish-Evaporator
(Hinweis: Die Ethylcarbamat-Wiederfindungsrate der Testprobe C(g)
muß während des Verfahrens 90—110 % betragen.)
c) 300-ml-Kölbchen, birnenförmig, Einheits-Schliffstopfen
d) Eindickröhrchen — 4 ml, mit Teilung, mit teflonbeschichtetem Dichtring
und Stopfen.
C.Reagenzien
a) Aceton — LC-Qualität
Hinweis: Vor Gebrauch jede Partie mittels GC/MS auf Fehlen eines
Signals für Ionen m/e 62, 74 und 89 prüfen.
b) Dichloromethan
Hinweis: Vor Gebrauch jede Partie mittels GC/MS nach 200maligem
Einengen auf Fehlen eines Signals für Ionen m/e 62, 74 und 89 prüfen.
c) Ethanol — wasserfrei
d) Ethylcarbamat (EC); Standardlösungen
1. Stammlösung — 1,00 mg/ml. 100 mg EC ( ≥99 % Reinheit) in ein
volumetrisches 100-ml-Fläschchen einwiegen und mit Aceton
verdünnen
2. Standard-Arbeitslösung — 10,0 µg/ml. Von der EC-Stammlösung 1 ml
in ein 100-ml-Fläschchen überführen und bis zum Eichstrich mit
Aceton verdünnen.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 190
(1) Für bestimmte, besonders alkoholreiche Weine empfiehlt es sich mitunter, eine Kapil-
larsäule mit einer Länge von 50 m zu verwenden.
(2) Für bestimmte, besonders alkoholreiche Weine empfiehlt es sich mitunter, eine Tempe-
ratursteuerung von 2 ºC pro Minute zu verwenden.
▼M7
e) Propylcarbamat (PC), Standardlösungen
1. Stammlösung — 1,00 mg/ml. 100 mg PC (Reagenzqualität) in ein
volumetrisches 100-ml-Fläschchen einwiegen und mit Aceton bis
zum Eichstrich verdünnen.
2. Standard-Arbeitslösung — 10,0 µg/ml. 1 ml der PC-Stammlösung in
ein volumetrisches 100-ml-Fläschchen überführen und mit Aceton bis
zum Eichstrich verdünnen.
3. Innere PC-Standardlösung — 400 ng/ml. 4 ml der PC-Standard-
Arbeitslösung in ein volumetrisches 100-ml-Fläschchen überführen
und mit Wasser bis zum Eichstrich verdünnen.
f) Geeichte EC-PC-Standardlösungen
Die EC- und PC-Standard-Arbeitslösungen d) 2 und e) 2 mit Dichlorme-
than wie folgt verdünnen:
1. (100 ng EC und 400 ng PC)/ml,
2. (200 ng EC und 400 ng PC)/ml,3. (400 ng EC und 400 ng PC)/ml,
4. (800 ng EC und 400 ng PC)/ml,
5. (1 600 ng EC und 400 ng PC)/ml.
g) Testprobe — 100 ng EC/ml in 40 % Ethanol.
1 ml der EC-Standard-Arbeitslösungen d) 2 in ein volumetrisches 100-
ml-Fläschchen überführen mit 40 % Ethanol bis zum Eichstrich
verdünnen.
h) Feststoffextraktionssäule — Einwegmaterial, mit Kieselgur vorgepackt,
Fassungsvermögen 50 ml
Hinweis: Vor der Analyse jede Partie EC/PC-Extraktionssäulen auf
Fehlen eines Signals für Ionen m/e 62, 74 und 89 prüfen. Von der Test-
probe (g) 100 ng EC/ml vorbereiten. 5,00 ml der Testprobe wie unter D
a), E und F beschrieben analysieren. Eine Wiederfindung von 90—110
ng EC/ml ist zufriedenstellend. Absorptionsmittel mit unregelmäßigem
Teilchendurchmesser können sehr langsame Fließgeschwindigkeiten zur
Folge haben, die die EC- und PC-Wiederfindung beeinträchtigen. Wenn
nach mehreren Versuchen 90—110 % des Wertes der Testprobe nicht
erreicht wird, ist zur EC-Bestimmung die Säule zu wechseln oder eine
Eichkurve mit korrigierter Wiederfindung zu verwenden. Zur Erstellung
der korrigierten Eichkurve sind Standardlösungen, wie unter f)
beschrieben, mit 40 % Ethanol anstatt Dichlormethan anzusetzen.
Von der Standard-Eichlösung wird 1 ml wie unter D, E und F
beschrieben analysiert.
Unter Verwendung des EC/PC-Verhältnisses der ausgezogenen Standards
wird eine neue Eichkurve erstellt.
D.Vorbereitung der Testprobe
Von dem Testmaterial werden folgende Mengen in zwei gesonderte 100-ml-
Bechergläser übergeführt:
a) Wein mit mehr als 14 % vol. Alkohol: 5,00 ± 0,01 ml.
b) Wein mit höchstens 14 % vol. Alkohol: 20,00 ± 0,01 ml.
Jedes Becherglas wird mit 1 ml innerer PC-Standardlösung C(e) (3) und
soviel Wasser beschickt, daß ein Gesamtvolumen von 40 ml (bzw. 40 g)
erreicht wird.
E.Auszug
Auszug unter Extraktionslüfter mit geeigneter Entlüftungsleistung durch-
führen.
Die Extraktionssäule wird mit der gemäß D angesetzten Probe beschickt.Das Becherglas wird mit 10 ml Wasser gespült und das Spülwasser der
Säule aufgegeben.
Die Flüssigkeit vier Minuten lang in die Säule einsickern lassen. Mit 2 ×
80 ml Dichlormethan eluieren. Eluat in einem konischen 300-ml-Fläschchen
auffangen.
Eluat bis auf 2 bis 3 ml mit Hilfe eines Umlaufverdampfers auf dem
Wasserbad (30 ºC) eindampfen ( Hinweis: nicht bis zur Trockene
eindampfen).1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 191
▼M7
Den eingeengten Rückstand mittels Pasteur-Pipette in ein 4-ml-Röhrchen mit
Meßteilung überführen.
Das Fläschchen mit 1 ml Dichlormethan spülen, Spülflüssigkeit in das
Röhrchen überführen. Die Probe wird unter schwachem Stickstoffstrom bis
auf 1 ml eingeengt.
Das Konzentrat eventuell in ein Fläschchen des Probengebers zwecks GC/
MS-Analyse überführen.
F.GC/MS-Analyse
a) Eichkurve
Von jeder Standard-Eichlösung C f) wird jeweils 1 µl in den GC/MS
eingespritzt. Zur graphischen Bestimmungen wird das EC-PC-Flächen-
verhältnisses als Massensignal auf das Ion m/e 62 auf der Ordinate und
die EC-Menge in ng/ml (also 100, 200, 400, 800, 1 600 ng/ml) auf der
Abszisse abgetragen.
b) QuantitativeEC-Be stimmung
Von dem E-Konzentrat wird 1 µl in das GC/MS-System eingespritzt und
das EC/PC-Flächenverhältnis für das Ion m/e 62 berechnet. Die EC-
Konzentration (ng/ml) im Extrakt wird anhand der Eichkurve des inneren
Standards bestimmt. Die EC-Konzentration in der Testprobe (ng/ml) erre-
chnet sich durch Division der EC-Menge (ng) im Extrakt durch das
Volumen der Testprobe (ml).
c) Prüfung der EC-Reinheit
Prüfen, ob die Massensignale für die Ionen m/e 62, 74 und 89 zum Zeit-
punkt der EC-Retention auftreten. Diese Signale sind jeweils typisch für
die wichtigsten Fragmente (M - C2H2)+und (M - CH3)+und für das Mole-
külion (M). Das Vorhandensein von EC wird bestätigt, wenn die
Verhältnisse dieser Ionen nicht größer ist als 20 % der Verhältnisse für
den EC-Standard. Der Extrakt muß mitunter wieder eingeengt werden,
um für das Ion m/e 89 ein ausreichendes Massensignal zu erzielen.
G.Ringversuch
Die Tabelle 1 zeigt die Einzelergebnisse für die Schlepp-Probe für die
beiden Weinarten.
Die Anwendung des Cochran-Tests hat zur Eliminierung eines einzigen
Ergebnispaares geführt, sowohl für Wein mit einem, Alkoholgehalt von
über 14 % vol, als auch für Wein mit einem Alkoholgehalt von höchstens
14 % vol, die jeweils aus einem anderen Labor stammen.
Mit zunehmender Ethylcarbamatkonzentration nimmt die relative Vergleich-
barkeit (RSDR) tendenziell ab.
Leistung des Verfahrens zur GC/MS-Bestimmung von Ethylcarbamat EC in alkoholischen
Getränken
ProbeVorgefun-
dener EC-
Durch-
schnitt
(ng/ml)Wiederfin-
dung von
zuge-
setztem
EC
(%)SrSRRSDr(%)RSDR(%)
Wein mit über 14 %
vol40 1,59 4,77 4,01 12,02
80 89 3,32 7,00 4,14 8,74
162 90 8,20 11,11 5,05 6,84
Wein mit weniger als
14 % vol11 0,43 2,03 3,94 18,47
25 93 1,67 2,67 6,73 10,73
48 93 1,97 4,25 4,10 8,861990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 192
▼M8
45.BESTIMMUNG DES ISOTOPENVERHÄLTNISSES13C/12C DURCH
ISOTOPENVERHÄLTNIS-MASSENSPEKTROMETRIE (IR-MS)
VON WEINETHANOL ODER ETHANOL AUS DER VERGÄRUNG
VON TRAUBENMOST, KONZENTRIERTEM TRAUBENMOST
UND REKTIFIZIERTEM TRAUBENMOSTKONZENTRAT
1. ANWENDUNGSBEREICH
Die Methode ermöglicht die Messung des Isotopenverhältnisses13C/12C
von Weinethanol und Ethanol aus der Vergärung von Weinerzeugnissen
(Traubenmost, konzentrierter Traubenmost, rektifiziertes Traubenmost-
konzentrat).
2. NORMATIVE REFERENZEN
ISO: 5725: 1994 „Präzision von Messver-
fahren; Ermittlung der Wiederhol- und
Vergleichspräzision von festgelegten
Messverfahren durch Ringversuche“
V-PDB: Vienna-Pee-Dee Belemnit
(RPDB= 0,0112372).
Methode 8 des Anhangs der vorliegenden Verordnung: „Nachweis der Anreicherung von Trau-
benmost, Traubenmostkonzentrat,
rektifiziertem Traubenmostkonzentrat
und Wein durch kernresonanzmagneti-sche Messung des Deuteriumgehaltes
(SNIF-NMR)“.
3. DEFINITIONEN
13C/12C: Verhältnis der Isotopen von Kohlenstoff 13 (13C) und
Kohlenstoff 12 (12C) für eine gegebene Probe
δ13C: Der δ-Wert ist die in pro mille (‰) angegebene Abwei-
chung des Isotopenverhältnisses einer Probe relativ zu
einem internationalen Standard.
SNIF-NMR: Stellungsspezifische natürliche Isotopenfraktionierung,
gemessen durch kernmagnetische Resonanzspektroskopie
V-PDB: Vienna Pee Dee Belemnit. PDB ist die Hauptreferenz für
die Messung natürlicher Variationen des Kohlenstoff—13-
Isotopengehalts. Es handelt sich dabei um ein Kalziumkar-
bonat aus einem Cretaceischen Belemnit der Pee-Dee
Formation in South Carolina (USA). Sein Isotopen-
verhältnis13C/12C oder RPDBbeträgt RPDB= 0,0112372. Die
PDB-Reserven sind seit langem erschöpft, es bleibt jedoch
die Hauptreferenz für die Darstellung natürlicher Varia-
tionen des Kohlenstoff 13-Isotopengehalts und dient zur
Kalibrierung von Referenzmaterialien, die von der Interna-
tionalen Atomenergiebehörde (IAEA) in Wien (Österreich)
erhältlich sind. Die Isotopenbestimmung für natürlich
vorkommenden Kohlenstoff 13 werden daher gewöhnlich
im Verhältnis zu V-PDB ausgedrückt.
m/z: Masse-zur-Ladung-Verhältnis.
4. PRINZIP
Bei der Fotosynthese erfolgt die Assimilation des Kohlendioxidgases
durch die Pflanzen auf der Grundlage von zwei hauptsächlichen Metabo-
lismusarten, des C3-Metabolismus (Calvin-Zyklus) und des C4-
Metabolismus (Hatch und Slack). Diese zwei Arten der Fotosynthese
weisen eine unterschiedliche Isotopenfraktionierung auf. Erzeugnisse, die
von C4-Pflanzen stammen, wie z. B. Zucker und durch Gärung gewon-
nener Alkohol, weisen einen höheren13C-Gehalt auf, als ähnliche
Erzeugnisse von Pflanzen der C3-Gruppe. Die Mehrzahl der Pflanzen
wie beispielsweise Reben und Rüben gehören der C3-Gruppean. Rohr-
zucker und Mais gehören zur C4-Gruppe. Die Messung des13C-Gehaltes
ermöglicht so den Nachweis und die Quantifizierung von C4-Zuckern
(Rohrzucker oder Maisisoglukose), die Traubenerzeugnissen (Trauben-
most, Wein etc.) zugesetzt wurden. Die Kombination des13C-Gehaltes
und des Ergebnisses der SNIF-NMR-Messung ermöglicht außerdem die
Quantifizierung des Zusatzes von Mischungen von Zuckern oder Alko-
holen von C3-und C4-Pflanzen.
Der13C-Gehalt wird bestimmt mithilfe des bei der kompletten Verbren-
nung der Probe entstehenden Kohlendioxids. Die Häufigkeit der
wichtigsten Massenisotopomeren 44 (12C16O2), 45 (13C16O2und12C17O16O)1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 193
▼M8
und 46 (12C16O18O), die sich aus den verschiedenen möglichen Kombina-
tionen der Isotope18O,17O,16O,13C und12C ergeben, werden mithilfe von
Ionenströmen auf drei verschiedenen Kollektoren eines Isotopen-
verhältnis-Massenspektrometers gemessen. Die Anteile der Isotopomere
13C17O16O und12C17O2sind aufgrund ihres geringen Vorkommens vernach-
lässigbar. Der Ionenstrom für m/z = 45 wird um den Anteil an12C17O16O
korrigiert, der unter Berücksichtigung der relativen Häufigkeit von18O
und17O anhand der Intensität des Stroms bei m/z = 46 berechnet wird
(Craig-Korrektur). Der Vergleich mit einer an der internationalen Refe-
renz V-PDB kalibrierten Referenz ermöglicht die Berechnung des δ13C-
Wertes auf einer relativen Skala.
5. REAGENZIEN
Die Reagenzien und Verbrauchsmaterialien hängen von den vom Labora-
torium verwendeten Gerätschaften (6) ab. Die gewöhnlich verwendeten
Systeme beruhen auf dem Prinzip des Elementaranalysators. Dieser kann
für die Einführung von Proben in versiegelten Metallkapseln oder für die
Injektion flüssiger Proben durch einen Septumverschluss mittels einer
Spritze ausgerüstet sein.
Je nach Art der verwendeten Instrumente können folgende Referenzmate-
rialien, Reagenzien und Verbrauchsmaterialien verwendet werden:
— Referenzmaterialien
— verfügbar von der IAEA:
NameMate rial δ13C gegenüber V-PDB (9)
— IAEA-CH-6 Saccharose- 10,4 ‰
— IAEA-CH-7 Polyethylen - 31,8 ‰
— NBS22 Öl - 29,7 ‰
— USGS24 Graphit - 16,1 ‰
— verfügbar vom Institut für Referenzmaterialien und -messungen
(IRMM) in Geel, Belgien:
NameMate rial δ13C gegenüber V-PDB (9)
— CRM/BCR 656 Weinalkohol - 26,93 ‰
— CRM/BCR 657 Glukose- 10,75 ‰
— CRM/BCR 660 wässrigealkoholische
Lösung (TAV 12 %)- 26,72 ‰
— Arbeitsstandard mit einem bekannten13C/12C-Verhältnis, kalibriert an
den internationalen Referenzmaterialien.
— Die nachstehende Liste der Verbrauchsmaterialien wurde für die
Durchflusssysteme erstellt:
— Helium für die Analyse (CAS 07440-59-7),
— Sauerstoff für die Analyse (CAS 07782-44-7),
— Kohlendioxid für die Analyse, verwendet als sekundäres Refe-
renzgas für die Bestimmung des13C/12C--Verhältnisses (CAS
00124-38-9),
— Oxydationsreagens für den Ofen des Verbrennungssystems, z. B.
Kupfer(II)-Oxid für die Elementaranalyse (CAS 1317-38-0),
— Trockenmittel zur Eliminierung des bei der Verbrennung entste-
henden Wassers, z. B. Anhydron für die Elementaranalyse
(Magnesiumperchlorat) (CAS 10034-81-8). (Nicht erforderlich für
die Geräte, die mit einem Wasserentfernungssystem mit Kühlfalle
oder selektiv durchlässigem Kapillarrohr ausgestattet sind).
6. GERÄTSCHAFTEN UND MATERIAL
6.1.Isotopenverhältnis-Massenspektrometer (IR-MS)
Die Isotopenverhältnis-Massenspektrometrie ermöglicht die Bestimmung
des relativen Gehalts von13C in natürlich vorkommendem CO2mit einer
internen Genauigkeit von 0,05 ‰ oder mehr, ausgedrückt als relativer
Wert (9). Die interne Genauigkeit wird definiert als Differenz zwischen
zwei Messungen an derselben CO2-Probe. Das Massenspektrometer dient1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 194
▼M8
zur Messung des Isotopenverhältnisses und ist im Normalfall mit einem
Dreifachkollektor ausgestattet, um gleichzeitig die Stärke für das
Verhältnis m/z = 44, 45 und 46 zu messen. Das Massenspektrometer für
die Isotopenmessung muss daher entweder mit einem doppelten Einlass-
system ausgestattet sein, um abwechselnd die unbekannte Probe und eine
Referenzprobe messen zu können, oder aber über ein integriertes System
verfügen, das eine quantitative Verbrennung ausführt und das Kohlen-
dioxid vor der Messung im Massenspektrometer von den anderen
Verbrennungserzeugnissen trennt.
6.2.Verbrennungsapparatur
Verbrennungsapparatur zur quantitativen Umwandlung von Ethanol in
Kohlendioxid mit Eliminierung aller anderen Verbrennungsprodukte
einschließlich des Wassers ohne Isotopenfraktionierung. Die Apparatur
kann entweder aus einem in das Massenspektrometer integrierten Durch-
flusssystem (6.2.1) oder einem externen Verbrennungssystem (6.2.2)
bestehen. Die Apparatur muss eine Präzision ermöglichen, die mindestens
der unter (11) angegebenen entspricht.
6.2.1.Durchflusssysteme
Diese bestehen entweder aus einem Elementaranalysator oder einem
Gaschromatografen mit angeschlossenem Verbrennungssystem.
Für die Systeme mit Einführung der Proben in Metallkapseln wird
folgendes Labormaterial verwendet:
— Volumen-Mikrospritze oder -Mikropipette mit geeignetem Trichter,
— Waage mit einer Genauigkeit von 1 µg oder mehr,
— Zangefür dieEinkapse lung,
— Zinnkapseln für flüssige Proben,
— Zinnkapseln für feste Proben.
Anmerkung:Um das Risiko des Verdampfens der Ethanolproben zu begrenzen, ist es
möglich, in die Kapseln ein absorbierendes Material (z. B. Chromosorb
W 45-60 mesh) einzubringen, wobei vorher durch Messung geprüft
werden muss, dass dieses keine signifikante Menge an Kohlenstoff
enthält, die die Messung verfälschen könnte.
Bei Verwendung eines Elementaranalysators mit Flüssigkeitsinjektion
oder eines Probevorbereitungssystems für die Gaschromatografie mit
anschließender Verbrennung wird folgendes Labormaterial verwendet:
— Spritze für Flüssigkeiten,
— verschließbare Glasfläschchen mit inerten Septumverschlüssen.
Die o. g. Labormaterialien dienen als Beispiele und können je nach von
dem jeweiligen Laboratorium verwendeter Verbrennungsapparatur und
Massenspektrometer durch andere Materialien mit gleichwertiger Funk-
tion ersetzt werden.
6.2.2.Externe Vorbereitung der Probe
In diesem Fall werden die Kohlendioxidproben, die sich aus der Verbren-
nung der zu analysierenden Proben ergeben, sowie die Referenzprobe in
Glaskolben aufgefangen und anschließend für die Isotopenanalyse an das
Doppeleinlasssystem des Spektrometers angeschlossen. Dabei können
verschiedene in der einschlägigen Literatur beschriebene Verbrennungs-
apparaturen verwendet werden:
— geschlossenes Verbrennungssystem mit Sauerstoffgaszirkulation;
— Elementaranalysator mit Helium- und Sauerstoffdurchfluss;
— versiegelter Glaskolben mit Kupfer(II)-Oxid als Oxidationsmittel.
7. VORBEREITUNG DER PROBEN
Vor der Isotopenbestimmung muss das Ethanol aus dem Wein extrahiert
werden. Dies geschieht durch Destillation des Weins wie beschrieben
unter Absatz 3.1 der Methode Nr. 8 (SNIF-NMR).
Im Fall von Traubenmost, Traubenmostkonzentrat oder rektifiziertem
Traubenmostkonzentrat müssen die Zucker zunächst wie unter Absatz
3.2 der Methode 8 beschrieben zu Ethanol fermentiert werden.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 195
▼M8
8. DURCHFÜHRUNG
Alle Vorbereitungsschritte sind ohne signifikanten Ethanolverlust durch
Verdampfen durchzuführen, welcher die Isotopenzusammensetzung der
Probe verändern kann.
Die nachstehende Beschreibung bezieht sich auf die üblicherweise ange-
wandten Verfahren für die Verbrennung von Ethanolproben bei der
Nutzung handelsüblicher automatischer Verbrennungssysteme. Jedes
andere Verfahren, das die quantitative Umwandlung der Ethanolprobe in
Kohlendioxid ohne Verdampfungsverluste gewährleistet, kann für die
Vorbereitung des Kohlendioxids für die Isotopenanalyse verwendet
werden.
Durchführung des Versuchs bei Verwendung eines Elementaranalysators:
a) Einkapselung der Proben:
— es sind saubere Kapseln, Zange und Arbeitsplatte zu verwenden;
— eine Kapsel geeigneter Größe ist mithilfe der Zange zu entnehmen;— mithilfe der Mikropipette wird die notwendige Menge Flüssigkeit
in die Kapsel eingeführt;
—Anmerkung:
3,84 mg reines Ethanol oder 4,17 mg Destillat mit einem Alkohol-
gehalt von 92 % m/m sind notwendig, um 2 mg Kohlenstoff zu
erhalten. Die geeignete Destillatmenge ist auf dieselbe Weise je
nach der erforderlichen Kohlenstoffmenge bzw. der Empfindlich-
keit des Massenspektrometers zu berechnen;
— die Kapsel wird mithilfe der Zange verschlossen;— jede Kapsel muss vollkommen dicht verschlossen sein. Ist dies
nicht der Fall, ist sie auszusondern und es muss eine neue Kapsel
vorbereitet werden;
— für jede Probe sind zwei Kapseln vorzubereiten;
— die Kapseln werden an geeigneter Stelle im automatischen Proben-
wechsler des Elementaranalysators angeordnet. Jede Kapsel ist
sorgfältig mit einer Ordnungsnummer zu versehen;
— die Kapseln mit dem Arbeitsstandard werden systematisch an den
Anfang und an das Ende der Probenreihe gesetzt;
— es sind regelmäßig Kontrollproben in die Probenreihe einzu-
bringen.
b) Kontrolle und Einstellung des Elementaranalysators und des Massen-
spektrometers
— Einstellung der Ofentemperaturen des Elementaranalysators und
des Helium- und Sauerstoffflusses für eine optimale Verbrennung
der Probe;
— Prüfung auf eventuelle Lecks im Elementaranalyse- und Massen-
spektrometriesystem (z. B. durch Kontrolle des Ionenstroms für
m/z = 28, was N
2entspricht);
— Einstellung des Massenspektrometers für die Messung von
Ionenströmen bei m/z = 44, 45 und 46;
— Überprüfung des Systems mithilfe von bekannten Kontrollproben
vor Beginn der Messungen an den Proben.
c) Durchführung einer Reihe von Messungen
Die im automatischen Probenwechsler des Elementaranalysators (oder
des Chromatografen) angeordneten Proben werden nacheinander bear-
beitet. Das Kohlendioxid jeder Probenverbrennung wird zum
Massenspektrometer überführt, das die Ionenströme misst. Der mit
den Geräten verbundene Computer registriert die Stärke der
Ionenströme und berechnet die δ-Werte für jede Probe (9).
9. BERECHNUNG
Ziel der Methode ist es, das Isotopenverhältnis13C/12C von Ethanol aus
Wein oder Traubenerzeugnissen nach der Fermetierung zu messen. Das
Isotopenverhältnis13C/12C kann durch seine Abweichung von einem Refe-
renzwert ausgedrückt werden. Die isotopische Abweichung für
Kohlenstoff 13 ( δ13C) wird also auf einer Skala von Delta pro Tausend
(δ/1 000) berechnet, indem die Ergebnisse der Messprobe mit denen
dem zuvor an der internationalen Referenz (V-PDB) kalibrierten Arbeits-
standard verglichen werden. Die δ13C-Werte der Probe (pr) im Verhältnis
zu dem Arbeitsstandard (ref) werden wie folgt ausgedrückt:
δ13Cpr/ref‰ = 1 000 × (Rpr-Rref)/Rref,1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 196
▼M8
wobei Rprund Rrefjeweils für das Isotopenverhältnis13C/12C des Kohlen-
dioxids der Probe und des Arbeitsstandards stehen.
Dieδ13C-Werte der Probe (pr) werden also im Verhältnis zu der V-PDB-
Referenz wie folgt ausgedrückt:
δ13Cpr/V-PDB‰= δ13Cpr/ref+δ13Cref/V-PDB+(δ13Cpr/ref×δ13Cref/V-PDB)/1 000,
wobei δ13Cref/V-PDBdie vorher berechnete Abweichung des Arbeiststandards
gegen die V-PDB-Referenz darstellt.
Während der Messungen können leichte Abweichungen aufgrund der
unterschiedlichen Messbedingungen auftreten. In diesem Fall müssen die
δ13C-Werte der Proben gemäß der Differenz zwischen dem für die
Kontrollprobe gemessenen δ13C-Wert und deren wirklichen Wert korri-
giert werden, der zuvor an der internationalen V-PDB-Referenz
kalibriert wurde. Zwischen zwei Messungen der Kontrollprobe kann die
Messabweichung und damit die an den Messergebnissen der Proben
durchzuführende Korrektur als linear angenommen werden. Die Kontroll-
probe ist wenigstens zu Beginn und am Ende jeder Messreihe zu
bestimmen. Danach kann mittels einer linearen Interpolation die Berichti-
gung für jede Probe berechnet werden.
10. QUALITÄTSSICHERUNG UND KONTROLLE
Es ist zu kontrollieren, dass der13C-Wert für die Kontrollprobe um nicht
mehr als 0,5 ‰ von dem zulässigen Wert abweicht. Ist die Abweichung
größer, ist die Einstellung des Spektrometers zu kontrollieren und gege-
benenfalls anzupassen.
Für jede Probe ist sicherzustellen, dass die Differenz zwischen den beiden
nacheinander gemessenen Kapseln weniger als 0,3 ‰ beträgt. Das Ender-
gebnis für eine bestimmte Probe ist somit der Mittelwert der Ergebnisse
der beiden Kapseln. Liegt die Abweichung über 0,3 ‰, ist die Messung
zu wiederholen.
Eine korrekte Durchführung der Messung kann anhand der Stärke des
Ionenstroms für m/z = 44 kontrolliert werden, der proportional zu der
Menge des in den Elementaranalysator injizierten Kohlenstoffs ist. Unter
Standardbedingungen müsste die Stärke dieses Ionenstroms für die analy-
sierten Proben praktisch konstant sein. Eine signifikante Abweichung
deutet auf eine Verdampfung des Ethanols (z. B. durch eine unzureichend
verschlossene Kapsel) oder eine Instabilität des Elementaranalysators
oder des Massenspektrometers hin.
11. LEISTUNGSMERKMALE DER METHODE (Genauigkeit)
Ein erster Labor-Ringversuch (11.1) wurde an Destillaten aus Alkohol
aus Wein, Rohrzucker und Rüben sowie verschiedenen Mischungen
dieser drei Ausgangserzeugnisse durchgeführt. Da bei diesen Analysen
der Destillationsschritt nicht mit einbezogen wurde, wurden zusätzliche
Informationen aus anderen Ringversuchen an Wein (11.2) und insbeson-
dere Eignungstestreihen (11.3) für Isotopenmessungen berücksichtigt. Die
Ergebnisse zeigen, dass die verschiedenen Destillationssysteme und
insbesondere die für die SNIF-NMR verwendeten Systeme bei Verwen-
dung unter angemessenen Bedingungen keine signifikante Abweichung
bei den Bestimmungen von δ13C von Weinalkohol aufweisen. Die im
Ringversuch (11.1) an Destillaten ermittelten Präzisionsparameter sind
praktisch identisch mit denen für Wein.
11.1.Ringversuche an den Destillaten
Jahr der Ringversuche: 1996
Anzahl der Laboratorien: 20
Anzahl der Proben: 6 Proben im Doppel-BlindvergleichAnalyt: δ
13C von Ethanol
Code der Proben Alkohol aus Wein Alkohol aus Rüben Alkohol aus Rohrzucker
A&G 8 0% 1 0% 1 0%
B & C 90 % 10 % 0 %D & F 0 % 100 % 0 %
E & I 90 % 0 % 10 %1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 197
▼M8
Code der Proben Alkohol aus Wein Alkohol aus Rüben Alkohol aus Rohrzucker
H & K 100 % 0 % 0 %
J & L 0 % 0 % 100 %
Proben A/G B/C D/F E/I H/K J/L
Anzahl der Laborato-
rien nach Beseitigung
der herausfallenden
Ergebnisse19 18 17 19 19 19
Anzahl der akzep-
tierten Ergebnisse38 36 34 38 38 38
Mittelwert ( δ13C) ‰ - 25,32 - 26,75 - 27,79 - 25,26 - 26,63 - 12,54
Sr20,0064 0,0077 0,0031 0,0127 0,0069 0,0041
Wiederholstandardab-
weichung (Sr) ‰0,08 0,09 0,06 0,11 0,08 0,06
Wiederholgrenze r
(2,8 × Sr)‰0,22 0,25 0,16 0,32 0,23 0,18
SR20,0389 0,0309 0,0382 0,0459 0,0316 0,0584
Vergleichstandardab-
weichung (SR)0,20 0,18 0,20 0,21 0,18 0,24
Vergleichsgrenze R
(2,8 × SR)‰0,55 0,49 0,55 0,60 0,50 0,68
11.2.Ringversuche anhand von zwei Weinen und einem Alkohol
Jahr des Ringversuchs: 1996
Anzahl der Laboratorien: 14 für die Destillation der Weine, davon 7
zugleich für die Messung von δ13C des Weine-
thanols
8 für dieMe ssung von δ13C der Alkoholprobe
Anzahl der Proben: 3 (Weißwein 9,3 % vol., Weißwein 9,6 % vol.
und Alkohol 93 % m/m)
Analyt: δ13C von Ethanol
Proben Rotwein Weißwein Alkohol
Anzahl der Laborato-
rien778
Anzahl der akzep-
tierten Ergebnisse778
Mittelwert ( δ13C) ‰ - 26,20 - 26,20 - 25,08
Varianz der
Vergleichbarkeit SR20,0525 0,0740 0,0962
Vergleichstandardab-
weichung (SR)‰0,23 0,27 0,31
Vergleichsgrenze R
(2,8 × SR)0,64 0,76 0,871990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 198
▼M8
Die teilnehmenden Laboratorien haben unterschiedliche Destillationssy-
steme verwendet. Die in einem einzelnen Laboratorium durchgeführten
Isotopenbestimmungen δ13C zeigen bei allen Destillaten des Ringversuchs
weder Ausreißer noch signifikante Abweichungen von den Mittelwerten.
Die Varianz der Ergebnisse (S2= 0,0059) ist vergleichbar mit der Varianz
der Wiederholbarkeit Sr2des Ringversuchs an den Destillaten (11.1).
11.3.Ergebnisse der Eignungsprüfungen für die Isotopenbestimmung
Seit Dezember 1994 wurden regelmäßig internationale Eignungsprü-
fungen für die Isotopenbestimmung von Weinen und Alkoholen
(Destillate mit 96 % vol.) durchgeführt. Die Ergebnisse ermöglichen den
teilnehmenden Laboratorien, die Qualität ihrer Analysen zu überprüfen.
Die statistische Auswertung der Ergebnisse ermöglicht die Erfassung der
Abweichung der Bestimmungen unter Wiederholbedingungen und damit
die Schätzung der Varianz und der Vergleichsgrenze. Die nachstehende
Tabelle fasst die Ergebnisse für die δ13C-Bestimmung von Ethanol in
Weinen und Destillaten zusammen:
DatumWein Destillate
NSRS2
RRNSRS2
RR
Dezember 1994 6 0,210 0,044 0,59 6 0,151 0,023 0,42
Juni 1995 8 0,133 0,018 0,37 8 0,147 0,021 0,41
Dezember 1995 7 0,075 0,006 0,21 8 0,115 0,013 0,32
März 1996 9 0,249 0,062 0,70 11 0,278 0,077 0,78
Juni 1996 8 0,127 0,016 0,36 8 0,189 0,036 0,53
September 1996 10 0,147 0,022 0,41 11 0,224 0,050 0,63
Dezember 1996 10 0,330 0,109 0,92 9 0,057 0,003 0,16
März 1997 10 0,069 0,005 0,19 8 0,059 0,003 0,16
Juni 1997 11 0,280 0,079 0,78 11 0,175 0,031 0,49
September 1997 12 0,237 0,056 0,66 11 0,203 0,041 0,57
Dezember 1997 11 0,127 0,016 0,36 12 0,156 0,024 0,44
März 1998 12 0,285 0,081 0,80 13 0,245 0,060 0,69
Juni 1998 12 0,182 0,033 0,51 12 0,263 0,069 0,74
September 1998 11 0,264 0,070 0,74 12 0,327 0,107 0,91
Gewichteter Durch-
schnitt0,215 0,046 0,60 0,209 0,044 0,59
N: Anzahl der teilnehmenden Laboratorien
11.4.Wiederhol- und Vergleichsgrenzen
Die in den vorstehenden Tabellen aufgeführten Daten der verschiedenen
Labor-Ringversuche ermöglichen so für die vorliegende Methode die
Bestimmung der Wiederhol- und Vergleichsgrenzen unter Einbeziehung
des Destillationsschrittes:
Wiederholgrenze r: 0,24
Vergleichsgrenze R: 0,6.1990R2676 — DE — 18.03.2003 — 007.001 — 199