1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—1
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Gewähr übernehmen
►B RICHTLINIE DES RATES
vom 21. Dezember 1976
über die Untersuchung von frischem Schweinefleisch auf Trichinen bei der Einfuhr aus Drittlän-
dern
(77/96/EWG)
(ABl.L26vom31.1.1977,S.67)
Geändert durch:
Amtsblatt
Nr. Seite Datum
►M1Richtlinie 81/476/EWGdesRatesvom24.Juni1981 L186 20 8.7.1981
►M2Richtlinie 83/91/EWGdesRatesvom7.Februar1983 L59 34 5.3.1983
►M3Richtlinie 84/319/EWGderKommissionvom7.Juni1984 L167 34 27.6.1984
►M4Verordnung(EWG)Nr.3768/85desRatesvom20.Dezember 1985 L362 8 31.12.1985
►M5Richtlinie 89/321/EWGderKommissionvom27.April1989 L133 33 17.5.1989
Geändert durch:
►A1Beitrittsakte Griechenlands L291 17 19.11.1979
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RICHTLINIE DES RATES
vom 21. Dezember 1976
über die Untersuchung von frischem Schweinefleisch auf Trichinen
bei der Einfuhr aus Drittländern
(77/96/EWG)
DERRATDEREUROPÄISCHENGEMEINSCHAFTEN—
gestütztaufdenVertragzurGründungderEuropäischenWirtschaftsge-
meinschaft,
gestützt auf die Richtlinie 72/462/EWG des Rates vom 12. Dezember
1972zurRegelungviehseuchenrechtlicher undgesundheitlicher Fragenbei der Einfuhr von Rindern und Schweinen und frischem Fleisch aus
Drittländern(
1), zuletzt geändert durch die Richtlinie 75/379/EWG(2),
undinsbesondere aufArtikel 21,
aufVorschlagderKommission,
inErwägungnachstehenderGründe:
In der Richtlinie 72/462/EWG hat der Rat in Artikel 21 die Ausarbei-
tung einer Methode zum Nachweis von Trichinen in frischemSchweinefleisch und der erforderlichen Durchführungsbestimmungenvorgesehen.
Die Anwendung der Richtlinie 72/462/EWG kann nicht die erwartete
Wirkung haben, solange zwischen den Mitgliedstaaten ungleichartigeBestimmungen hinsichtlich der Garantien bestehen, die in bezug aufden Nachweis von Trichinen bei der Einfuhr von frischem Fleisch aus
Drittländern verlangt werden. Daher muß auf diesem Gebiet eine
Gemeinschaftsregelung eingeführt werden.
Zum Schutz der Gesundheit des Verbrauchers ist frisches Schweine-
fleisch systematisch einer Untersuchung mit anerkannt wirksamenMethoden zu unterziehen, um Trichinen enthaltendes Fleisch auszu-
scheiden.
WirddieUntersuchungimversendendenDrittlanddurchgeführt,sohat
dies in Schlachthöfen zu geschehen, die bestimmte Voraussetzungenerfüllen und insbesondere über ein mit geeigneten Untersuchungs-
geräten ausgestattetes Untersuchungslaboratorium verfügen.
Um zwischen untersuchtem und nicht untersuchtem Fleisch unter-
scheiden zu können, ist der Aufdruck eines besonderen Stempels aufFleisch,dasmit negativem Ergebnisuntersuchtwurde,vorzusehen.
Durch ein Verfahren enger und wirksamer Zusammenarbeit zwischen
der Kommission und den einzelnen Mitgliedstaaten ist zu beschließen,ob bestimmte in Drittländern vorhandene Einrichtungen zur Durchfüh-rung der erwähnten Untersuchungen bzw. zur Behandlung desuntersuchten Fleisches zuzulassen sind und wie die technischen
Bestimmungen, die insbesondere die Untersuchungsmethoden, die an
die Untersuchungslaboratorien zu stellenden Anforderungen sowie dieArt der Kennzeichnung von untersuchtem Fleisch betreffen, jeweils andie technische Weiterentwicklung und an gewonnene Erfahrungenanzupassen sind.
Es ist zweckmäßig, den Mitgliedstaaten zu gestatten, frisches Fleisch,
das im versendenden Drittland nicht auf Trichinen untersucht wordenist, zuzulassen, sofern es im versendenden Drittland oder im Bestim-mungsmitgliedstaat einer Kältebehandlung unterzogen wird, diegewährleistet, daß etwa vorhandene Trichinen inaktiviert werden. Eine
solche Behandlung ist allerdings nach bestimmten, genau festzule-
genden Regeln und in Einrichtungen, die bestimmte Voraussetzungenerfüllen, vorzunehmen —1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—2
(1) ABl.Nr.L302vom31.12.1972,S.28.
(2) ABl.Nr.L172vom3.7.1975,S.17.
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HATFOLGENDERICHTLINIEERLASSEN:
Artikel 1
Für diese Richtlinie gelten die Definitionen der Richtlinie 72/462/
EWG.
Fernergelten als
a) frischesFleisch:frischesFleischvonHausschweinen,
b) Untersuchung: die Untersuchung auf das Vorhandensein von
Trichinen infrischem Fleisch.
Artikel 2
(1) Damit frisches Fleisch aus Drittländern, das Skelettmuskulatur
(quergestreifte Muskulatur) enthält, zum innergemeinschaftlichen
Verkehr zugelassen werden kann, muß es unter Verantwortung und
Aufsichteines amtlichen Tierarztes untersucht wordensein.
(2) DieUntersuchung muß nach einer der in AnhangIaufgeführten
Methodenvorgenommenwerden,undzwaramganzenTierkörperoderandernfalls an jeder Hälfte, jedem Viertel oder jedem Teilstück, dasindie Gemeinschaft eingeführt werdensoll.
(3) DieUntersuchung istineinem Schlachthof vorzunehmen, derin
dem Versandland gemäß Artikel 4 der Richtlinie 72/462/EWG aner-
kannt und nach Artikel 4 der vorliegenden Richtlinie zurDurchführungdieserUntersuchungzugelassen ist.
(4) DieUntersuchungmußvorderinAnhangBKapitelXderRich-
tlinie 72/462/EWG vorgesehenen Kennzeichnung derGenußtauglichkeit vorgenommen werden.
(5) Kann die Untersuchung nicht im Versandland durchgeführt
werden, so darf der Bestimmungsmitgliedstaat die Einfuhr vonfrischem Fleisch zulassen, sofern die Untersuchung bei der Kontrolleder Genußtauglichkeit nach Artikel 24 Absatz 2 der Richtlinie 72/462/EWG in einer Einfuhruntersuchungsstelle im Sinne des Artikels 27Absatz 1 Buchstabe b) derselben Richtlinie in seinem Hoheitsgebiet
vorgenommen wird.
(6) a) Ist das Untersuchungsergebnis negativ, so muß das frische
Fleisch unmittelbar nach Beendigung der Untersuchung gemäßAnhangIIIgekennzeichnet werden.
b) Für die Kennzeichnung mit einem Farbstempel ist ein Farbstoff
gemäß Artikel 17 Absatz 3 der Richtlinie 72/462/EWG zubenutzen.
Artikel 3
(1) Abweichend von Artikel 2 kann der Bestimmungsmitgliedstaat
beschließen, daßfrischesFleisch ausbestimmten Drittländern oderausTeilen solcher Länder nicht untersucht zu werden braucht, unter derBedingung, daß es einer Kältebehandlung gemäß Anhang IVunter-
zogenwird.
(2) Diese Behandlung erfolgt in einem unter Artikel 4 Absatz 1
fallenden Betrieb aufdemGebietdesversendenden Drittlandes.
Die Durchführung der Kältebehandlung im versendenden Drittland ist
in den das Fleisch begleitenden Genußtauglichkeitsbescheinigungennach Artikel 22 Absatz 3 der Richtlinie 72/462/EWG vom amtlichen
Tierarzt besonderszubestätigen.
(3) Fallsdiese Behandlung nicht im versendenden Drittland vorgen-
ommen worden ist, muß sie von einer Einfuhruntersuchungsstelle imSinnevonArtikel2Absatz5vorgenommen werden.
Die DurchführungderKältebehandlung im Mitgliedstaat istin dendas
Fleisch begleitenden Bescheinigungen nach Artikel 25 der Richtlinie72/462/EWG vomamtlichen Tierarzt besonderszubestätigen.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—3
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Artikel 4
(1) DieZulassungeinesSchlachthofszurUntersuchung,einesZerle-
gungsbetriebszurZerlegungoderEntbeinungvonuntersuchtemFleischundeinesBetriebszurDurchführungderKältebehandlungnachArtikel3wirdnachdemVerfahrendesArtikels9beschlossen,wennnebender
Einhaltung desArtikels4derRichtlinie 72/462/EWGgewährleistetist,
daß dabei den Bestimmungen der vorliegenden Richtlinie nachge-kommen wird. Insbesondere ist in bezug auf die Schlachthöfe zubeachten:
a) dasVorhandenseinderfürdieUntersuchungbenötigten Räumeund
Geräte,
b) die Befähigung des Personals, das die Untersuchungen durchzu-
führenhat.
Die Zulassung eines Schlachthofs oder Zerlegungsbetriebs kann nur
erfolgen, wenn die zuständigen Stellen des Drittlandes amtlich aner-kannt haben, daß der betreffende Betrieb die Bedingungen des
Artikels 5 und des Anhangs III erfüllen kann und daß der Schlachthof
über ein den Bedingungen des Anhangs II Kapitel I entsprechendesLaboratorium verfügt, das den Bestimmungen der übrigen Kapitel desAnhangsIIsowiedenendesAnhangsIgenügenkann.
Die Zulassung eines Betriebs zur Durchführung der Kältebehandlung
kann nur erfolgen, wenn die zuständigen Stellen des Drittlandesamtlich anerkannt haben, daß dieser Betrieb die Bedingungen desAnhangsIVerfüllen kann.
(2) Die Namen der gemäß Absatz 1 zugelassenen Betriebe sind in
der Liste bzw.den Listen gemäß Artikel 4 Absatz 4der Richtlinie 72/
462/EWGbesonderszuvermerken.
Artikel 5
(1) In den gemäß Artikel 4 zugelassenen Schlachthöfen ist die
Schlachtung von Schweinen, deren Fleisch für die Gemeinschaftbestimmt ist, räumlich oder, sofern dies nicht möglich ist, zeitlichgetrennt von der Schlachtung der Schweine vorzunehmen, deren
Fleisch nicht für die Gemeinschaft bestimmt ist, außer wenn das
Fleisch dieser letztgenannten Schweine nach denselben Bedingungenuntersucht wird.
(2) Die Zerlegung oder Entbeinung von Fleisch, bei dem die Unter-
suchungnegativausgefallenistunddasfürdieGemeinschaftbestimmtist,hat ineinem Zerlegungsbetrieb gemäßArtikel 4zuerfolgen.
In diesem Zerlegungsbetrieb ist die Zerlegung oder Entbeinung des
besagtenFleischesräumlichoder,soferndiesnichtmöglichist,zeitlichgetrenntvonderZerlegungoderEntbeinungvonFleischvorzunehmen,das nicht für die Gemeinschaft bestimmt ist, außer wenn das letztge-
nannte Fleischnachdenselben Bedingungen untersucht wurde.
Artikel 6
Die in Artikel 5 der Richtlinie 72/462/EWG vorgesehenen Kontrollen
in den Drittländern dienen auch der Feststellung, ob die vorliegendeRichtlinie ordnungsgemäßangewandt wird.
Artikel 7
Die Mitgliedstaaten übermitteln der Kommission eine von ihnen anzu-
fertigende Liste der in Artikel 2 Absatz 5 erwähntenEinfuhruntersuchungsstellen, indenen
— dieUntersuchung,
— dieinArtikel3erwähnte Kältebehandlung
durchgeführt werdenkann.
Sie sorgen dafür, daß die Einfuhruntersuchungsstellen über die erfor-
derliche Ausstattung zur Durchführung der betreffenden Maßnahmenverfügen.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—4
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Artikel 8
Um der technologischen Entwicklung Rechnung zu tragen, können
nach dem Verfahren des Artikels 9 Anpassungen und Ergänzungen
der Anhänge beschlossen werden; die diesbezüglichen Beschlüsse
müssen gewährleisten, daß die gesundheitlichen Garantien auf ihremderzeitigen Standerhalten bleiben.
Artikel 9
(1) Wird auf das in diesem Artikel festgelegte Verfahren Bezug
genommen,sobefaßtderVorsitzendeunverzüglichdendurchBeschlußdes Rates vom 15. Oktober 1968 eingesetzten Ständigen Veterinäraus-schuß — im folgenden „Ausschuß“ genannt — entweder von sich aus
oderaufAntrageines Mitgliedstaats.
(2) In dem Ausschußwerden die Stimmen der Mitgliedstaaten nach
Artikel 148 Absatz 2 des Vertrages gewogen. Der Vorsitzende nimmtanderAbstimmungnicht teil.
(3) DerVertreterderKommissionunterbreiteteinenEntwurffürdie
zu treffenden Maßnahmen. Der Ausschuß nimmt zu diesem Entwurfinnerhalb einer Frist Stellung, die der Vorsitzende entsprechend der
Dringlichkeit der zu prüfenden Fragen bestimmen kann. Die Stellung-
nahme kommt mit einer Mehrheit von ►
M4vierundfünfzig ◄
Stimmen zustande.
(4) Die Kommission trifft die Maßnahmen und sieht sofort deren
Anwendungvor,wennsiederStellungnahmedesAusschussesentspre-chen. Entsprechen sie der Stellungnahme des Ausschusses nicht oderist keine Stellungnahme ergangen, so schlägt die Kommission dem
Ratalsbalddie zutreffenden Maßnahmenvor.
DerRaterläßt dieMaßnahmen mit qualifizierter Mehrheit.HatderRatnachAblaufeinerFristvon3MonatennachUnterbreitung
des Vorschlags keine Maßnahmen erlassen, so trifft die Kommissiondie vorgeschlagenen Maßnahmen und sieht sofort deren Anwendungvor, es sei denn, der Rat hat sich mit einfacher Mehrheit gegen diegenannten Maßnahmenausgesprochen.
Artikel 11
DieMitgliedstaaten setzenspätestensam1.Januar1979dieerforderli-
chen Rechts- und Verwaltungsvorschriften in Kraft, um dieserRichtlinie nachzukommen. Sie unterrichten davon unverzüglich dieKommission.
Artikel 12
DieseRichtlinie istandieMitgliedstaatengerichtet.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—5
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ANHANG I
METHODEN ZUR UNTERSUCHUNG AUF TRICHINEN
I. TRICHINOSKOPISCHEUNTERSUCHUNG
a)Geräte
Glühlampentrichinoskop mit 50facher sowie 80- bis 100facher
Vergrößerungsmöglichkeit.
Kompressorium (Quetschgläser), bestehend aus zwei gegeneinander
drückbaren Glasplatten, von denen das eine in gleiche Felder geteilt
ist, eine kleine krumme Schere, Pinzette, ein Messer zum Probenaus-
schneiden, numerierte kleine Behältnisse zur getrennten Aufnahme der
Proben,eineTropfpipette,jeeinGläschenmitEssigsäureundKalilauge
zum Aufhellen von etwaigen Verkalkungen bzw. Erweichen eingetroc-
kneten Fleisches.
b)Probeentnahme
Bei ganzen Tierkörpern je eine mindestens haselnußgroße Probe aus
beiden Zwerchfellpfeilern am Übergang vom muskulösen in den
sehnigen Teil. Ist nur ein Zwerchfellpfeiler vorhanden, ist aus diesem
eine doppelthaselnußgroße Probe zu nehmen. Beim Fehlen beider
Zwerchfellpfeiler sindzweica. haselnußgroße ProbenausdemRippen-
oderBrustbeinteildesZwerchfellsbzw.ausderZungen-oderKaumus-
kulatur oderausdenBauchmuskelnzuentnehmen.
BeiFleischteilenvonjedemTeildreimöglichsthaselnußgroße,fettarme
Skelettmuskelproben, die an verschiedenen Stellen möglichst in der
NähevonKnochenoderSehnenentnommen sind.
c)Untersuchungsgang
VonjederdervorstehendbezeichnetenProbenhatderTrichinenschauer
beiganzenTierkörpernbeimVorhandenseinbeiderZwerchfellpfeiler 7,
mithin im ganzen 14,beim Vorhandensein nur eines Zwerchfellpfeilers
14 haferkorngroße Stückchen aus verschiedenen Stellen möglichst am
Übergang vom muskulösen in den sehnigen Teil auszuschneiden und
zwischen den Gläsern des Quetschglases so zu quetschen, daß durch
die Präparate gewöhnliche Druckschrift deutlich gelesen werden kann.
Ist das Fleisch der zu untersuchenden Stücke trocken und alt, so sind
die Präparate vor dem Quetschen 10 bis 20 Minuten mit Kalilauge zu
erweichen, diemit etwaderdoppelten MengeWasserverdünntist.
Müssen bei ganzen Tierkörpern der Rippen- oder Brustbeinteil des
Zwerchfells, Zungen- oder Kaumuskulatur oder die Bauchmuskeln zur
Probeentnahme verwendet werden, so sind aus jeder Probe 14, mithin
imganzen28haferkorngroße Stückchenauszuschneiden.
Aus jeder von Fleischteilen entnommenen Probe hat der Trichinen-
schauer je 4 haferkorngroße Stückchen, also insgesamt 12,
herauszuschneiden.
DieUntersuchungmitdemTrichinoskophatsozugeschehen,daßjedes
Präparat langsam und sorgfältig durchmustert wird. Ergeben sich bei
der Untersuchung mit dem Trichinoskop verdächtige Stellen, deren
NaturauchmitHilfederstarkenVergrößerungdesTrichinoskopsnicht
sicherfestzustellen ist,sosindsiemit demMikroskopnachzuprüfen.
Die mikroskopische Untersuchung hat so zu erfolgen, daß jedes
Präparat bei 30- bis 40facher Vergrößerung langsam und sorgfältig
durchmustert wird.
Bei zweifelhaftem Befund ist die Untersuchung an einer weiteren Zahl
von Fleischproben und Präparaten nötigenfalls mit Hilfe stärkerer
Vergrößerungen bis zur völligen Aufklärung fortzusetzen. Für die
trichinoskopische Untersuchung sind mindestens 3 Minuten zu
verwenden.
Bei der Benutzung von Ersatzproben aus dem Rippen- oder Brustbein-
teil des Zwerchfells, der Zungen- oder Kaumuskulatur oder aus den
Bauchmuskeln sind auf die trichinoskopische Untersuchung mindestens
6Minutenzuverwenden.
Die Mindestuntersuchungszeiten schließen nicht die für die Probeent-
nahme undAnfertigungderPräparate erforderliche Zeit ein.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—6
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Mit dem Trichinoskop sollten von einem Untersucher im allgemeinen
an einem Tag nicht mehr als 840 Stückchen, ausnahmsweise jedoch
bis1050Stückchen,untersuchtwerden.
II. METHODEDERKÜNSTLICHENVERDAUUNG
a)Geräte und Material
— MesserzurProbeentnahme,
— kleine verschließbare numerierte Behältnisse zur Aufbewahrung der
Proben,auchfürevtl. Wiederholung derUntersuchung,
— Inkubator,— 2 bis 3 l fassende Glastrichter, Ständer für Glastrichter, Verbin-
dungsschlauch, Klammern zum Abklemmen des
Verbindungsschlauchs,
— Plastiksiebe(Durchmesserca.18cm,Maschenweite ca.1.mm),
— Mull,
— Spitzröhrchen,— Blockschälchen,
— Fleischwolf,
— Stereomikroskop (für 15 bis 40fache Vergrößerung) mit ausrei-
chenderBeleuchtung,
— Verdauungsflüssigkeit folgender Zusammensetzung: 10 g Pepsin
(80 E/g FIP: Fédération Internationale de Pharmacie), 5 ml HCl
(mindestens37%),mit Leitungswasserauf1Liter auffüllen.
b)Probeentnahme
1. BeiganzenTierkörpern einemindest 20gschwereProbeauseinem
Zwerchfellpfeiler am Übergang vom muskulösen in den sehnigen
Teil entnehmen, bei Nichtvorhandensein der Zwerchfellpfeiler eine
gleichgroße Probe aus dem Rippen- oder Brustbeinteil des Zwerch-
fells oder aus der Zunge bzw. Kaumuskulatur oder aus der
Bauchmuskulatur.
2. BeiFleischteilen isteine mindestens20gschwere,fettarme Skelett-
muskelprobe, möglichst in der Nähe von Knochen oder Sehnen, zu
entnehmen.
c)Methodik
Für die Untersuchung einer Sammelprobe von 10 Schweinen wird von
jederEinzelprobe(20g)eineProbeimGewichtvon10ggefertigt.Die
restlichen 10 g verbleiben für eine evtl. erforderliche Einzeluntersu-
chung. Zehn Proben zu je 10 g werden zu einer Sammelprobe
vereinigt,imFleischwolf(ScheibemitLochdurchmesser2mm)zerklei-
nert und locker in das mit einer Lage Mull ausgelegte Sieb gegeben.
Das Sieb wird darauf in einen über ein Stück Gummischlauch mit
einem Spitzröhrchen verbundenen Trichter gesetzt, der vom Rande her
mit der Verdauungsflüssigkeit bis zum vollständigen Bedecken des
Untersuchungsguts aufgefüllt wird. Das Verhältnis Untersuchungsgut
zu Verdauungsflüssigkeit soll ca. 1:20 bis 1:30 betragen. Nach 18- bis
20stündiger Inkubation bei 37 bis 39 ºC wird das Spitzröhrchen abge-
klemmt und entnommen. Das in der Spitze des Röhrchens befindliche
Sediment wird nach vorsichtigem Absaugen des Überstandes sorgfältig
ineinBlockschälchengespültundmitdemStereomikroskopbei20-bis
40facher Vergrößerung auf das Vorhandensein von Trichinellen unter-
sucht.
Bei positivem oder zweifelhaftem Ausfall der Untersuchung einer
Sammelprobe sind die entsprechenden restlichen Einzelproben,
vermehrt um weitere 20 g aus jedem Schwein, oder, falls es sich um
Fleischteile handelt, jeweils vermehrt um 20 g aus jedem Fleischteil,
einzeln zu untersuchen, in Übereinstimmung mit den Regeln wie oben
unterb)erwähnt.
III. METHODE DER KÜNSTLICHEN VERDAUUNG VON SAMMEL-
PROBEN
a)Geräte und Reagenzien
— MesserundPinzette zurProbeentnahme;1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—7
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▼M3
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— Fleischwolf,möglichst mit 2-bis3-mm-Lochscheibe;
— 3-Liter-Erlenmeyerkolben mit einem Gummi-oderWattestopfen;— konischerScheidetrichter, miteinem Rauminhalt von2000ml;— gewöhnliches Tischstativ mit einem A-Fuß, etwa 28 cm lang, mit
einerStangevon80cm;
— Stativring von etwa 10 bis 11 cm Durchmesser zum Aufsetzen auf
dasStativ;
— StativklemmemitrundenBacken(23×40mm),diemitHilfeeiner
Doppelmuffeaufgesetzt wird;
— Sieb (Maschenweite 177 Mikron) von 11 cm Außendurchmesser,
mit einem DrahtbodenausMessingoderrostfreiem Stahl;
— Plastiktrichter mit mindestens12cminnerem Durchmesser;— 100-ml-Glasmeßbecher;— ein Stereomikroskop (für 15 bis 40fache Vergrößerung) mit ausrei-
chender Beleuchtung, oder Trichinoskop mit waagerechtem Tisch
fürdasQuetschglasmit ausreichender Beleuchtung;
— bei Verwendung des Trichinoskops wird ein Larvenzählbecken
verwendet,dasfolgendermaßen konstruiertist:
Das Larvenzählbecken besteht aus 3 mm starken Acrylplatten und
istwiefolgtzusammengesetzt:
i) DerBodendesBeckensbeträgt180×40mmundistinvierek-
kigeFeldereingeteilt,
ii) dieSeiten betragen230×20mm,
iii) dieEndstückebetragen 40×20mm.
Boden und Endstücke sind so zwischen die Seiten zu kleben, daß
einBeckenmit zweischmalen GriffenanbeidenSeiten entsteht.
Die Oberseite des Bodens soll 7 bis 9 mm über den unteren Rand
des aus den beiden Seiten und Enden gebildeten Rahmens ange-
hoben werden. Die Teile sind mit materialgerechtem Klebstoff zu
befestigen;
— beiVerwendungeinesStereomikroskopswerdeneinigePetrischalen
mit 9cmDurchmesserbenötigt,derenUnterseite miteinem spitzen
Gegenstand in quadratische Untersuchungsfelder mit je 10 mm
Seitenlänge eingeteilt ist;
— einige 10-Liter-Abfalleimer zur Verwendung bei der späteren
Behandlung der Geräte mit dekontaminierenden Mitteln wie z. B.
Formol und für die überschüssige Verdauungsflüssigkeit im Falle
vonpositivem Befund;
— konzentrierte Salzsäure (37%);— Pepsin,Stärke1:10000NF(USNational Formulary),
entsprechend 1: 12500 PB (British Pharmacopoea/Pharmacopoea
desVereinigten Königreichs),
entsprechend 2000 FIP (Fédération Internationale de Pharmacie/
internationale pharmazeutische Föderation);
— mit50Quadratenmarkierte TablettszurAufnahmevonProbenvon
jeca.2gFleischproMarkierung;
— eine Waage mit einerWägegenauigkeit von0,1g.
b)Probeentnahme
1. Bei ganzen Tierkörpern eine etwa 2 g schwere Probe aus einem
Zwerchfellpfeiler am Übergang vom muskulösen in den sehnigen
Teil entnehmen, bei Nichtvorhandensein der Zwerchfellpfeiler einegleichgroße Probe aus dem Rippen- oder Brustbeinteil des Zwerch-
fells oder aus der Zunge bzw. Kaumuskulatur oder aus der
Bauchmuskulatur.
2. Bei Fleischteilen ist eine etwa 2 g schwere, fettarme Skelettmuskel-
probe, möglichst in der Nähe von Knochen oder Sehnen, zu
entnehmen.
c)Methode
1. i)Vollständige Ansätze (gleichzeitigeUntersuchungvon
100Proben)
EineProbevonetwa1gwirdvonjederder100Schweineproben
genommen. Die gemeinsame Probe wird einmal im Fleischwolf
zerkleinert.
Man gibt das zerkleinerte Fleisch in den 3-Liter-Erlenmeyer-
kolben zusammen mit 7 g Pepsin, etwa 2 Liter plus 40 bis 41ºC1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—8
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warmemLeitungswasserund25mlkonzentrierter Salzsäure.Die
Mischungwirdgeschüttelt, damitsichdasPepsinauflöst.
DerpH-WertderLösungbeträgt etwa1,5bis2.
— Zur Verdauung wird der Erlenmeyerkolben etwa 4 Stunden
auf plus 40 bis 41ºC im Brutschrank gehalten. Während des
Erwärmens wird der Kolben regelmäßig geschüttelt, und
zwarmindestenszweimalproStunde.
— DieverdauteLösungwirddurchdasSiebindenkonischen2-
Liter-Scheidetrichter gefiltert und mindestens eine Stunde
langunberührtindemStativgelassen.
— Insgesamt werden etwa 45 ml in einen Meßzylinder abge-
lassen und gleichmäßig in drei Petrischalen verteilt, deren
BodeninQuadrate eingeteilt ist,d.h.jePetrischale 15ml.
— Jede Petrischale wird unter dem Stereomikroskop sorgfältig
nachLarvenuntersucht.
— Bei Verwendung von Larvenzählbecken werden die 45 cm3
Sediment auf 2 Larvenzählbecken verteilt und unter dem
Trichinoskopuntersucht.
Die Larven zeigen sich im Bodensatz als uhrenfederartig
zusammengerollte Organismen. Sie sind leicht erkennbar und
wickeln sich im lauwarmen Wasser oft spiralenförmig auf
undab.
— Die Sedimente sollten untersucht werden, sobald sie vorbe-
reitet sind. Die Untersuchung sollte unter keinen Umständen
aufdennächstenTagverschobenwerden.
Sind die Sedimente trübe oder werden nicht innerhalb 30
Minuten nach Vorbereitung untersucht, so sind sie wie folgt zu
klären: Die verbleibende Sedimentprobe von 45 ml in einen
Meßzylindergießenund10Minutenruhenlassen.Danach30ml
des Überstands absaugen und die restlichen 15 ml mit Leitungs-
wasser auf 45 ml auffüllen. Nach einer weiteren Absetzzeit von
10Minutenwerden30mldesÜberstandsabgesaugtunddierest-
lichen 15 ml zur Untersuchung in eine Petrischale oder ein
Larvenzählbecken gegossen. Den Meßzylinder mit 10 ml
Leitungswasser spülen und dieses Spülwasser ebenfalls der in
der Petrischale bzw. im Larvenzälbecken befindlichen Probe
hinzufügenunduntersuchen.
ii)Ansätze mit weniger als 100 Proben
ImBedarfsfallkönnenbiszu15ProbeneinemNormalansatzvon
100 Proben hinzugefügt und gemeinsam untersucht werden. Bei
Ansätzen mit mehr als 15 und weniger als 100 Proben wird die
Verdauungsflüssigkeit entsprechend der Anzahl der Proben redu-
ziert.
2. Bei positivem oder zweifelhaftem Ausfall der Untersuchung einer
Sammelprobe ist von jedem Schwein gemäß Buchstabe b) eine
weitere Probe von je 20 g zu entnehmen. Die jeweils 20-Gramm-
ProbenvonfünfSchweinenzusammenfassenundnachobenangege-
benem Verfahren untersuchen. Aufdiese Weise werden20 Gruppen
zuje 5Schweinenuntersucht. Werden ineinerGruppenprobevon5
SchweinenTrichinennachgewiesen,soistvonjedemSchweindieser
Gruppe eine weitere Probe von 20 g zu entnehmen und nach oben
angegebenem Verfahreneinzeln zuuntersuchen.
IV. DIE MECHANISCH UNTERSTÜTZTE METHODE DER KÜNSTLI-
CHEN VERDAUUNG VON SAMMELPROBEN/
SEDIMENTATIONSTECHNIK
a)Geräte und Reagenzien
— MesseroderScherezurProbeentnahme;
— Mit50Quadratenmarkierte TablettszurAufbewahrungvonProben
vonje ca.2gFleischproMarkierung;
— Stomacher Lab-blender 3500Thermo-Modell;— Plastiktüten fürStomacher Lab-blender;— 2 Liter fassende Scheidetrichter, möglichst mit Teflonstopfen
(Sicherheitsverschluß);
— Stative mitRingenundBefestigungen;— Siebe, Maschenweite 177 Mikron, Außendurchmesser 11 cm mit
Maschenaufrostfreiem Stahl;1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—9
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— Trichter mit mindestens 12 cm Innendurchmesser zum Einhängen
derSiebe;
— 100-ml-Glasmeßbecher;— ein25-ml-Ausgabegerät;— 3Liter fassendeBecher,— Löffel oder Glasstab für das Umrühren der Verdauungsflüssigkeit
imBecher;
— eine Plastikspritze mitRohrfürdasAbsaugen;— einMeßlöffelfür6g;— einThermometer, dasimBereich1-100ºCauf±0,5ºCgenauist;— einVibrator,z.B.einElektrorasierer ohneKopf;— einElektrorelais, dasjede Minutean-bzw.ausschaltet;— Trichinoskop mit Horizontaltisch oder Stereomikroskop mit ausrei-
chenderBeleuchtung;
— einLarvenzählbecken (beiVerwendungdesTrichinoskops).
DasLarvenzählbeckenbestehtaus3mmdickenAcrylplattenundist
wiefolgtzusammengesetzt:
i) DerBodendesGefäßesbeträgt180×40mmundistinvierek-
kigeFeldereingeteilt,
ii) dieSeiten betragen230×20mm,
iii) dieEndstückebetragen 40×20mm.
Boden und Enden sind so zwischen die Seiten zu kleben, daß ein
Becken mit je zwei schmalen Griffen an beiden Seiten entsteht.
Die Oberseite des Bodens soll 7 bis 9 mm über den unteren Rand
des aus den beiden Seiten und Enden gebildeten Rahmens ange-
hoben werden. Die Teile sind mit materialgerechtem Klebstoff zu
befestigen;
— einige Petrischalen mit 9 cm Durchmesser (bei Verwendung des
Stereomikroskops), deren Boden mit einem spitzen Gegenstand in
Vierecke von10×10mmeingeteilt sind;
— 17,5%igeHCl;— Pepsin,Stärke1:10000NF(USNational Formulary),
entsprechend 1: 12500 PB (British Pharmacopoea/Pharmacopoea
desVereinigten Königreichs),
entsprechend 2000 FIP (Fédération Internationale de Pharmacie/
internationale pharmazeutische Föderation)
— eine Reihe von 10-Liter-Gefäßen, die bei Behandlung des Geräts
mit dekontaminierenden Mitteln wie z. B. Formol und für die
verbleibenden Verdauungssäfte im Falle positiver Ergebnisse
verwendet werden;
— eine auf0,1ggenaueWaage.
b)Probeentnahme
1. Bei ganzen Tierkörpern eine etwa 2 g schwere Probe aus einem
Zwerchfellpfeiler am Übergang vom muskulösen in den sehnigen
Teil entnehmen, bei Nichtvorhandensein der Zwerchfellpfeiler eine
gleichgroße Probe aus dem Rippen- oder Brustbeinteil des Zwerch-
fells oder aus der Zunge bzw. Kaumuskulatur oder aus der
Bauchmuskulatur.
2. Bei Fleischteilen ist eine etwa 2 g schwere, fettarme Skelettmuskel-
probe, möglichst in der Nähe von Knochen oder Sehnen, zu
entnehmen.
c)Verfahren
1.Verdauungsverfahren
i)Vollständige Ansätze (gleichzeitigeUntersuchungvon
100Proben)
— Inden Stomacher Lab-blender 3500werdenzwei ineinander-
gesteckte Plastiktüten eingesetzt und der Temperaturanzeiger
auf40bis41ºCeingestellt.
— 1½Literaufplus32bis35ºCvorgewärmtesWasserwerden
in den inneren Plastikbeutel gegossen und das Wasser auf
plus40bis41ºCerhitzt.
— 25 ml einer 17,5%igen Salzsäurelösung werden dem Wasser
imStomacher hinzugefügt.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—10
▼M3
— Von jeder Einzelprobe gemäß Buchstabe b) wird je eine
Probevonca.1ggefertigtundzuje100Stückzusammenge-
faßthinzugefügt.
— Schließlichwerdennoch6gPepsinhinzugefügt.DieReihen-
folge des Zusatzes ist streng einzuhalten, um die Zersetzung
desPepsinszuvermeiden.
— Der Stomacher bearbeitet anschließend 25 Minuten lang den
InhaltdesBeutels.
— DannwirddiePlastiktütedemStomacherentnommenunddie
VerdauungsflüssigkeitdurchdasSiebineinen3-Liter-Kolben
abgefiltert.
— die Plastiktüte wird mit rund 100 ml Wasser ausgewaschen,
mit denen anschließend das Sieb gespült wird, und die
schließlich demFiltratimKolbenhinzugefügt werden.
Bis zu 15 Einzelproben können einer Sammelprobe von 100
Probenhinzugefügtundzusammenmitdiesenuntersuchtwerden.
ii)Ansätze mit weniger als 100 Proben
— Inden Stomacher Lab-blender 3500werdenzwei ineinander-
gesteckte Plastiktüten eingesetzt und der Temperaturanzeiger
auf40bis41ºCeingestellt.
— DieVerdauungsflüssigkeitwirddurchMischenvon1½Liter
Wasser und 25 ml 17,5 %iger Salzsäure hergestellt. Dann
werden 6 g Pepsin hinzugefügt und das Ganze bei 40 bis
41 ºC durchgemischt. Die Reihenfolge ist streng einzuhalten,
umdieZersetzung desPepsinzuvermeiden.
— Von der Verdauungsflüssigkeit wird eine Menge, die jeweils
15mlproEinzelprobeentspricht(z.B.für30Probenwerden
30 × 15 ml oder 450 ml benötigt) abgemessen und in den
inneren der beiden Plastikbeutel gegeben zusammen mit der
vorhandenen Anzahl von Fleischproben von je ca. 1 g (bei
25 bis 30 ºC), die jeder der einzelnen Proben gemäß Buch-
stabeb)entnommen wurden.
— Wasser von ca. 41 ºC wird in den äußeren Beutel gegossen,
bis in den beiden Beuteln ein Volumen von zusammen 1 ½
Litern erreicht ist.
— Der Stomacher bearbeitet dann 25 Minuten lang den Inhalt
desBeutels.
— Dann wird der Plastikbeutel dem Stomacher entnommen und
die Verdauungsflüssigkeit durch das Sieb in einen 3-Liter-
Kolbenabgefiltert.
— Der Plastikbeutel wird mit rund 100 ml Wasser ausgewa-
schen, mit denen anschließend das Sieb gespült wird und die
dabeidemFiltratimKolbenhinzugefügt werden.
2.Isolierungder Larven durch Sedimentation
— Eis (300 bis 400 g Eisflocken, Eispulver oder gemahlenes Eis),
wird der Verdauungsflüssigkeit zugesetzt, bis ein Volumen von
rund 2 l erreicht ist. Die Verdauungsflüssigkeit solang rühren,
bisdasEisgeschmolzen ist.
Bei kleineren Probengruppen (vgl.Punkt1.ii)) istdie Eismenge
entsprechend herabzusetzen.
— Die gekühlte Verdauungsflüssigkeit wird in einen 2-Liter-Schei-
detrichter, der mit einem an separater Klemme befestigten
Vibratorversehen ist,abgefüllt.
— Der Scheidetrichter wird 30 Minuten lang zur Sedimentation
stehengelassen, wobei 1 Minute Vibration und 1 Minute Pause
abwechseln.
— Nach 30 Minuten wird eine Probe von 60 ml des Sediments
schnell in einen 100 ml-Meßzylinder auslaufen gelassen. (Der
Trichter wirdnachVerwendungmitSeifenlösunggespült.)
— Die 60-ml-Probe wird mindestens 10 Minuten lang stehenge-
lassen, danach wird der Überstand durch Absaugen entfernt, bis
ein Volumen von 15 ml verbleibt, das auf Vorhandensein von
Larvenuntersuchtwird.
— Für das Absaugen wird eine Plastikspritze, die mit einem
Plastikröhrchen versehenist,verwendet.
Das Röhrchen soll so lang sein, daß 15 ml im Meßzylinder
verbleiben, wenn beim Absaugen die Spritze auf den Zylinder-
standgesetztwird.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—11
▼M3
— Die verbleibenden 15 ml werden in ein Larvenzählbecken oder
zwei Petrischalen gegossen und mit dem Trichinoskop bzw.
demStereomikroskopuntersucht.
— Die Sedimente sollten untersucht werden, sobald sie vorbereitet
sind. Die Untersuchung sollte unter keinen Umständen auf den
nächsten Tagverschobenwerden.
Sind die Sedimente trübe oder werden nicht innerhalb 30
Minuten nach Vorbereitung untersucht, so sind sie wie folgt zuklären: Die verbleibende Sedimentprobe von 60 ml in einen
Meßzylindergießenund10Minutenruhenlassen.Danach45ml
des Überstands absaugen und die restlichen 15 ml mit Leitungs-
wasser auf 45 ml auffüllen. Nach einer weiteren Absetzzeit von
10Minutenwerden30mldesÜberstandsabgesaugtunddierest-
lichen 15 ml zur Untersuchung in eine Petrischale oder ein
Larvenzählbecken gegossen. Den Meßzylinder mit 10 ml
Leitungswasser spülen und dieses Spülwasser ebenfalls der in
der Petrischale bzw. im Larvenzählbecken befindlichen Probe
hinzufügenunduntersuchen.
3. Bei positivem oder zweifelhaftem Ausfall der Untersuchung einer
Sammelprobe ist von jedem Schwein gemäß Buchstabe b) eine
weitere Probe von je 20 g zu entnehmen. Die jeweils 20-Gramm-
ProbenvonfünfSchweinenzusammenfassenundnachobenangege-
benem Verfahren untersuchen. Aufdiese Weise werden20 Gruppen
zuje 5Schweinenuntersucht. Werden ineinerGruppenprobevon5
SchweinenTrichinennachgewiesen,soistvonjedemSchweindieser
Gruppe eine weitere Probe von 20 g zu entnehmen und nach oben
angegebenem Verfahreneinzeln zuuntersuchen.
V. DIE MECHANISCH UNTERSTÜTZTE METHODE DER KÜNSTLI-
CHEN VERDAUUNG VON SAMMELPROBEN „ON FILTER
ISOLATION“-TECHNIK
a)Geräte und Reagenzien
SieheVerfahrenIVBuchstabea)
Zusätzliche Geräte:
— 1-Liter-Gelman-Trichter mitFilterhalter (Durchmesser45mm);
— Filterscheiben. Die runden Filterscheiben bestehen aus rostfreiem
Stahlmaschendraht, Weite 35Mikron;derDurchmesserderScheibe
beträgt 45 mm. Herstellung: zwei Gummiringe aus 1 mm starkem
Gummimit äußerem Durchmesservon 45mmundinnerem Durch-
messervon38mm.DasDrahtgewebeistzwischendiebeidenRinge
einzusetzen und mit einem Zweistufenklebstoff zu befestigen, der
fürbeideMaterialien geeignet ist;
— 3-Liter-Erlenmeyerkolben mit seitlichem RohrzumAbsaugen;— Filterpumpe;— 80-ml-Plastikbeutel;— Schweißgerät fürPlastikbeutel;— Rennilase, 1:150000Soxhlet/Einheiten jeg.
b)Probeentnahme
SieheVerfahrenIVBuchstabeb).
c)Verfahren:
1.Verdauungsverfahren
i)Vollständige Ansätze (gleichzeitige Untersuchung von 100
Proben)
SieheVerfahrenIVBuchstabec)Punkt1.i);
ii)Ansätze mit weniger als 100 Proben
SieheVerfahrenIVBuchstabec)Punkt1.ii).
2.Isolierungder Larven durch Filtern
— Eis (300 bis 400 g Eisflocken, Eispulver oder gemahlenes Eis)
wird der Verdauungsflüssigkeit zugesetzt, bis ein Volumen von
rund2Liter erreicht ist.
Bei kleineren Sammelproben ist die Eismenge entsprechend
herabzusetzen.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—12
▼M3
— Die Verdauungsflüssigkeit solange rühren, bis das Eis
geschmolzen ist. Die gekühlte Verdauungsflüssigkeit mindestens
3Minutenstehenlassen,damitdieLarvensicheinrollenkönnen.
— DerGelman-Trichter mitFilterhalterwirdmiteinerFilterscheibe
auf einen Erlenmeyerkolben montiert, der an eine Filterpumpe
angeschlossenist.
— DieVerdauungsflüssigkeitwirdindenGelman-Trichtergegossen
und gefiltert. Gegen Ende des Filterungsvorgangs kann der
Durchgang der Verdauungslösung durch den Filter mit Hilfe der
Filterpumpeunterstütztwerden.DasAbsaugensollteunmittelbar,
bevor der Filter trocken wird, d. h. wenn noch 2 bis 5 ml im
Trichter verbleiben, eingestellt werden.
— Wenn die gesamte Verdauungsflüssigkeit gefiltert ist, wird die
Filterscheibe entfernt, in einen 80 ml Plastikbeutel gegeben, in
den15bis20mlRennilase-Lösunggegossenwerden.DieRenni-
lase-Lösungbestehtaus2gRennilasein100mlLeitungswasser.
— DerPlastikbeutelwirdzweifachverschweißtundineinenStoma-
cherzwischendeninnerenunddenäußerenBeutelgegeben.
— Der Stomacher bearbeitet dann 3 Minuten lang den Inhalt des
Beutels,z.B.währenderaneinervollständigenoderunvollstän-
digenProbengruppearbeitet.
— Nach 3 Minuten wird der Plastikbeutel zusammen mit Filter-
scheibe und Rennilase-Lösung aus dem Stomacher entfernt und
mit einer Schere geöffnet. Die Flüßigkeit wird in ein Larven-
zählbecken oder eine Petrischale gegossen. Der Beutel wird mit
5 bis 10 ml Wasser ausgewaschen, das ebenfalls in das Larven-
zählbecken zur trichinoskopischen Prüfung oder in eine
Petrischale zur stereomikroskopischen Untersuchung gegossen
wird.
— Die Sedimente sollten untersucht werden, sobald sie vorbereitet
sind. Die Untersuchung sollte unter keinen Umständen auf den
nächsten Tagverschobenwerden.
Bemerkung:Die Filterscheiben dürfen nie verwendet werden, wenn sie nicht
vollständigsaubersind.DieFilterscheibendürfennieinunsauberem
Zustandtrocknen.
Zum Säubern können sie über Nacht in Rennilase-Lösung gelegt
werden. Vor erneuter Verwendung sollten sie im Stomacher in
Rennilase-Lösunggereinigtwerden.
3. Bei positivem oder zweifelhaftem Ausfall der Untersuchung einer
Sammelprobe ist von jedem Schwein gemäß Buchstabe b) eine
weitere Probe von je 20 g zu entnehmen. Die jeweils 20-Gramm-
ProbenvonfünfSchweinenzusammenfassenundnachobenangege-benem Verfahren untersuchen. Aufdiese Weise werden20 Gruppen
zuje 5Schweinenuntersucht. Werden ineinerGruppenprobevon5
SchweinenTrichinennachgewiesen,soistvonjedemSchweindieser
Gruppe eine weitere Probe von 20 g zu entnehmen und nach oben
angegebenem Verfahreneinzeln zuuntersuchen.
VI. DAS MAGNETRÜHRVERFAHREN FÜR DIE KÜNSTLICHE VERD-
AUUNGVONSAMMELPROBEN
a)Geräte und Reagenzien
— MesserundPinzetten zurProbeentnahme;
— Mit50Quadratenmarkierte TablettszurAufbewahrungvonProben
vonje ca.2gFleisch,
— Moulinette-Schneidegerät;— Magnetrührer mit temperaturgeregelter Heizplatte und teflonbe-
schichtetem Rührstabvonungefähr 5cmLänge;
— 2-Liter-Scheidetrichter;— Stative mit Ringen und Klammern zum Befestigen des Scheide-
trichter;
— Siebe, Maschenweite 177 Mikron, Außendurchmesser 11 cm mit
Maschenausrostfreiem Stahl;
— Plastiktrichter mit mindestens 12 cm Innendurchmesser zum
Einhängen derSiebe;
— 3Liter fassendeBecher;— Meßzylinderfürca.50mlInhaltoderZentrifugierröhrchen;— Trichinoskop mit Horizontaltisch oder Stereomikroskop mit ausrei-
chenderBeleuchtung;1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—13
▼M3
— einLarvenzählbecken (beiVerwendungdesTrichinoskops).
DasLarvenzählbeckenbestehtaus3mmdickenAcrylplattenundist
wiefolgtzusammengesetzt:
i) DerBodendesGefässesbeträgt180×40mmundistinvierek-
kigeFeldereingeteilt,
ii) dieSeiten betragen230×20mm,
iii) dieEndstückebetragen 40×20mm.
Boden und Enden sind so zwischen die Seiten zu kleben, daß ein
Becken mit zwei schmalen Griffen an beiden Seiten entsteht. Die
Oberseite des Bodens soll 7 bis 9 mm über den unteren Rand des
aus den beiden Seiten und Enden gebildeten Rahmens angehoben
werden. Die Teile sind mit materialgerechtem Klebstoff zu befe-
stigen;
— einige Petrischalen mit 9 cm Durchmesser (bei Verwendung des
Stereomikroskops), deren Boden mit einem spitzen Gegenstand in
Vierecke von10×10mmeingeteilt sind;
— Aluminiumfolie;— 25%igeSalzsäure;— Pepsin,Stärke1:10000NF(USNational Formulary),
entsprechend 1: 12500 FB (British Pharmacopoea / Pharmacopoea
desVereinigten Königreichs)
entsprechend 2000 FIP (Fédération Internationale de Pharmacie /
internationale pharmazeutische Föderation);
— Leitungswasser,auf46bis48ºCerhitzt;— einige10-Liter-Gefäße,diebeiBehandlungdesGerätsmitdekonta-
minierenden Mitteln wie z. B. Formol und für die verbleibenden
VerdauungssäfteimFallepositiverErgebnisseverwendet werden;
— eine auf0,1ggenaueWaage.
b)Probeentnahme
1. Bei ganzen Tierkörpern eine etwa 2 g schwere Probe aus einem
Zwerchfellpfeiler am Übergang vom muskulösen in den sehnigen
Teil entnehmen, bei Nichtvorhandensein der Zerchfellpfeiler eine
gleichgroße Probe aus dem Rippen- oder Brustbeinteil des Zwerch-
fells oder aus der Zunge bzw. Kaumuskulatur oder aus der
Bauchmuskulatur.
2. Bei Fleischteilen ist eine etwa 2 g schwere, fettarme Skelettmuskel-
probe, möglichst in der Nähe von Knochen oder Sehnen, zu
entnehmen.
c)Verfahren
1. i)Vollständige Ansätze (gleichzeitigeUntersuchungvon
100Proben)
— Von den gemäß Buchstabe b) gewonnenen Proben werden
pro Tier 1-Gramm-Proben hergestellt, die zu einer Sammel-
probe von 100 Einzelproben vereinigt und in einem
Moulinette-Schneidegerät zerkleinert werden. Das Gerät ist
dabeidrei-bisviermal jeca.1Sekundelangzubetätigen.
— DaszerkleinerteFleischineinen3-Liter-Bechergebenundes
mit10gPepsinbestreuen.DenBechermit2LiterLeistungs-
wasser, das zuvor auf 46 bis 48º C erhitzt wurde, auffüllen
und16mlSalzsäurehinzugeben.
— Das Schneidewerk der Moulinette mehrfach in die Verdau-
ungsflüssigkeit des Bechers eintauchen, um das noch
anhängendeTestmaterialindieVerdauungslösungzubringen.
— Den Rührstab in den Becher geben und diesen mit Alumi-
niumfolie abdecken.
— Den Becher auf die vorgewärmte Heizplatte des Magnetrüh-
rers setzen und den Rührvorgang beginnen. Vor Beginn des
Rührvorgangs ist der Magnetrührer so einzustellen, daß er
währenddesgesamtenRührvorgangsständigeineTemperatur
von 44 bis 46 ºC hält. Während des Rührvorgangs sollte die
Verdauungsflüssigkeit so schnell drehen, daß ein tiefer
zentraler Wirbel entsteht;Spritzen istzuvermeiden.
— Die Verdauungsflüssigkeit wird 30 Minuten lang gerührt,
danach wird das Rührgerät abgeschaltet, die Verdauungsflüs-
sigkeit durch das Sieb in den Scheidetrichter zur
Sedimentation gegossen.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—14
▼M3
— Die Verdauungsflüssigkeit soll im Trichter 30 Minuten lang
stehenbleiben.
— Nach 30 Minuten werden 40 ml der Verdauungsflüssigkeit
schnell in einem Meßzylinder oder in ein Zentrifugierröhr-
chenabgelassen.
— Die 40-ml-Probe wird 10 Minuten stehen gelassen, danach
werden 30 ml des Überstands durch Absaugen entfernt, so
daßeinVolumenvon10mlverbleibt.
— Diese restlichen 10 ml der abgesetzten Probe werden in ein
Larvenzählbecken oderineine Petrischale gegossen.
— DannwirdderMeßzylinderoderdasZentrifugierröhrchenmit
ca.10mlLeitungswassergespültunddieseFlüssigkeitderim
Larvenzählbecken oder in der Petrischale befindlichen Probe
hinzugefügt. Danach wird die Probe mittels Trichinoskop
oderStereomikroskopuntersucht.
— Die Sedimente sollten untersucht werden, sobald sie vorbe-
reitet sind. Die Untersuchung sollte unter keinen Umständen
aufdennächstenTagverschobenwerden.
Werden die Sedimente nicht innerhalb 30 Minuten nach
Vorbereitung untersucht, so sind sie wie folgt zu klären: Die
abgelassene Sedimentprobe von 40 ml in einen Meßzylinder
gießen und 10 Minuten ruhen lassen. Danach 30 ml des
Überstands absaugen und die restlichen 10 ml mit Leitungs-
wasser auf 40 ml auffüllen. Nach einer weiteren Absetzzeit
von10Minutenwerden30mldesÜberstandsabgesaugtund
die restlichen 10 ml zur Untersuchung in eine Petrischale
oder ein Larvenzählbecken gegossen. Den Meßzylinder mit10mlLeitungswasserspülenunddiesesSpülwasserebenfalls
derinderPetrischalebzw.imLarvenzählbeckenbefindlichen
Probehinzufügenunduntersuchen.
Wird das Sediment erst bei der Untersuchung als trübe
erkannt, so wird die Probe erneut in einen Meßzylinder
gegossen, auf 40 ml mit Leitungswasser aufgefüllt und
anschließend wieobenweiterbehandelt.
ii)Ansätze mit weniger als 100 Proben
Einem Normalansatz von 100 Proben können im Bedarfsfall bis
zu 15 Einzelproben zu je 1 g hinzugefügt und zusammen gemäß
Buchstabe c) Punkt 1.i) untersucht werden. Mehr als 15 Einzel-
proben sind als vollständige Sammelprobe zu behandeln, wobei
bei Ansätzen mit bis zu 50 Proben die Verdauungsflüssigkeit
aufeinenLiter reduziert werdenkann.
2. Bei positivem oder zweifelhaftem Ausfall der Untersuchung einer
Sammelprobe ist von jedem Schwein gemäß Buchstabe b) eine
weitere Probe von je 20 g zu entnehmen. Die jeweils 20-Gramm-
ProbenvonfünfSchweinenzusammenfassenundnachobenangege-
benem Verfahren untersuchen. Aufdiese Weise werden20 Gruppen
zuje 5Schweinenuntersucht. Werden ineinerGruppenprobevon5
SchweinenTrichinennachgewiesen,soistvonjedemSchweindieser
Gruppe eine weitere Probe von 20 g zu entnehmen und nach oben
angegebenem Verfahreneinzeln zuuntersuchen.
VII. AUTOMATISCHE DIGESTION VON SAMMELPROBEN BIS ZU 35
GRAMM
a)Geräte und Reagenzien
— MesseroderScherezumZerschneiden desUntersuchungsmaterials,
— Schalen mit 50 Feldern für die Aufnahme von Fleischproben zu je
etwa2g,
— Digestor„Trichomat 35“mit Filtereinsatz,— HCl-Lösung,8,5Gewichtsprozent,±0,5%,
— durchsichtige Polycarbonatmembran-Filter mit 50 mm Durchmesser
und14µPorendurchmesser,
— Pepsin in einer Konzentration von 1: 10000 NF (U.S. National
Formulary),
entspricht 1:12500BP(BritishPharmacopoea),
entspricht 2000FIP(Fédération Internationale dePharmacie),
— Waage miteinerWiegegenauigkeit von0,1g,
— Pinzetten mit flacher Spitze,1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—15
▼M5
▼M5
— Satz Objektträger mit einer Seitenlänge von mindestens 5 cm oder
Satz Petri-Schalen mit mindestens 6 cm Durchmesser, deren Unter-
seite mit einem spitzen Gegenstand in quadratische Felder von
10×10mmeingeteilt ist,
— (Stereo-)Mikroskop mit Durchlicht (15 - 60fache Vergrößerung)
oderTrichinoskopmit horizontalem Objekttisch,
— Auffangbehälter fürAbwasser,
— mehrere 10-l-Behälter für die Entseuchung (z. B. Formolbehand-
lung) der Geräte sowie zur Aufnahme der überschüssigen
Digestionsflüssigkeit beipositivem Befund.
b)Probenahme
1. AusunzerlegtenTierkörperneineetwa2gschwereProbeauseinem
Zwerchfellpfeiler am Übergang vom muskulösen in den sehnigen
Teil bzw. bei fehlendem Zwerchfellpfeiler eine gleichgroße Probe
aus dem Rippen- oder Brustbeinteil des Zwerchfells oder aus der
Kau-oderderBauchmuskulatur entnehmen.
2. Aus Teilstücken eine etwa 2 g schwere Skelettmuskelprobe, mit
wenig Fett und möglichst aus der Nähe von Knochen oder Sehnen,
entnehmen.
c)Verfahren
1.Digestionsverfahren
— Digestor mit Filtereinsatz aufstellen, Abwasserrohr aufstecken
undandenAuffangbehälter anschließen.
— NachEinschalten desDigestorsheizt sichdasGerätauf.
— Vor dem Einschalten des Geräts ist das Bodenventil unter der
Reaktionskammer einmal zuöffnenundzuschließen.
— Von jeder Einzelprobe gemäß Buchstabe b) eine etwa 1 g
schwere Probe (bei 25 ºC bis 30 ºC) entnehmen, zu einer
Sammelprobe von höchstens 35 Einzelproben zusammenfassen
und in das Gerät einfüllen. Größere Sehnenstücke sind zu
entfernen, dasiedasMembranfilter verstopfenkönnen.
— Die eine dem Digestor aufgeschaltete Flüssigkeitszelle bis zum
Randmit Wasserfüllen (etwa400ml).
— Diekleinereaufgeschaltete Flüssigkeitszellemitetwa30mlHCl
(8,5%)füllen.
— Membranfilter unter den Grobfilter in die Halterung des Filte-
reinsatzes einsetzen.
— Anschließend5gPepsinzugeben.DieReihenfolgederReagenz-
zugabeiststrengeinzuhalten,damitkeinPepsinabbaustattfindet.
— DeckelderReaktions-undderFlüssigkeitszellen schließen.— Digestionszeiteinstellen.KurzeDigestionszeit(fünfMinuten)für
Proben von schlachtreifen Schweinen und verlängerte Dige-
stionszeit (achtMinuten)fürandere Proben.
— Sobald die Start-Taste des Digestors betätigt wird, beginnt die
automatische Beschickung mit automatischer Digestion und
anschließender Filtration. Nach 10-13 Minuten ist der Vorgang
beendet, unddasGerätschaltet sichautomatisch ab.
— Deckel der Reaktionszelle öffnen, sobald die Zelle leer ist. Sind
noch Schaum oder Digestionsreste in der Zelle vorhanden,
VerfahrengemäßBuchstabec)Ziffer4wiederholen.
2.Auszählen der Larven
— Filterhalter herausnehmen und Membranfilter auf einen
Objektträger odereine Petri-Schale legen.
— Membranfilter unter dem Mikroskop oder Trichinoskop untersu-
chen.
3.Gerätereinigung
— BeipositivemBefundReaktionszelledesDigestorszuzweiDrit-
teln mit kochendem Wasser füllen. In die aufgeschaltete
Flüssigkeitszelle gewöhnliches Leitungswasser füllen, bis der
untere Flüssigkeitsstand-Fühler bedeckt ist. Anschließend auto-
matisches Reinigungsprogramm durchführen. Filtereinsatz und
restliche Gerätschaften entseuchen,zumBeispiel mitFormol.
— Vor Feierabend Flüssigkeitszelle der Mischpumpe mit Wasser
füllenundStandardprogramm durchführen.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—16
▼M5
4.Verfahren bei verhinderter Filtration wegen unvollständiger Diges-
tion
Nach Ablauf des automatischen Verfahrens gemäß Buchstabe c)
Ziffer 1 Deckel der Reaktionszelle öffnen und auf verbleibende
Schaum- und Flüssigkeitsreste prüfen. Befinden sich Reste in der
Zelle,soistwiefolgtzuverfahren:
— Bodenventil unterderReaktionszelle schließen.
— Filterhalter herausnehmen und Membranfilter auf einen
Objektträger odereine Petri-Schale legen.
— Neues Membranfilter in die Halterung setzen und Filterhalter
einbauen.
— Flüssigkeitszelle des Digestors mit Wasser füllen, bis der untere
Flüssigkeitsstand-Fühlerbedeckt ist.
— Automatisches Reinigungsprogramm durchführen.— Nach Ablauf des Reinigungsprogramms Deckel der Reaktions-
zelle öffnenunddieseaufFlüssigkeitsrückständeprüfen.
— Bei leerer Zelle Filtereinsatz herausnehmen und Membranfilter
mit einer Pinzette auf einen Objektträger oder eine Petri-Schale
legen.
— Die beiden Membranfilter gemäß Buchstabe c) Ziffer 2 untersu-
chen.SinddiebeidenFilterfürdieUntersuchungnichtgeeignet,
DigestionsverfahrenmitverlängerterDigestionszeitgemäßBuch-
stabec)Ziffer1wiederholen.
5. Bei positivem oder zweifelhaftem Befund als Ergebnis der Untersu-
chungeinerSammelprobeistvonjedemSchweineine weitere20-g-
Probe gemäß Buchstabe b) zu entnehmen. Diese Proben werden
separatnachvorstehendem Verfahrenuntersucht.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—17
▼B
ANHANG II
KAPITELI
BEDINGUNGEN FÜR DIE ZULASSUNG VON TRICHINEN-LABORA-
TORIEN
1. Trichinen-Laboratorien müssen in unmittelbarer Nähe der Schlachträume für
Schweineliegen undmindestensüberfolgendesverfügen:
a) einen ausreichend eingerichteten verschließbaren Vorbereitungsraum zur
Anfertigung der Präparate; der Raum muß glatte Wände haben, die bis
zu einer Höhe von 2 m mit einem hellen, abwaschfesten Belag oder
Anstrich versehen sind. Werden mehrere Untersuchungsverfahren ange-
wandt, so müssen entsprechend mehr Vorbereitungsräume vorhanden
sein;
b) einen ausreichend eingerichteten, verschließbaren und abdunkelbaren
Untersuchungsraum,wennmiteinem Trichinoskopuntersuchtwird;
c) ausreichende Vorrichtungen zur Be- und Entlüftung; falls erforderlich,
eine Klimaanlage, die gewährleistet, daß die Raumtemperatur nicht über
+25ºCansteigt;
d) ausreichendenatürlicheoderkünstlicheBeleuchtung,diedieFarbennicht
verändert; starkeSonneneinstrahlungistzuvermeiden;
e) ausreichende Einrichtungen zur Reinigung und Desinfektion der Hände
imVorbereitungsraum;
►M3f)◄falls erforderlich, eine Kühleinrichtung zur Aufbewahrung von
Fleischproben;
g) einenSpülraumzurReinigungundDesinfektionvonUntersuchungsgerät
(z.B.Probenbehälter, Kompressorien,Messer,Scheren)mit:
— Fußböden aus wasserundurchlässigem, leicht zu reinigendem und zu
desinfizierendem, nichtfaulendem Material,
— glattenWänden,diebiszueinerHöhevonmindestens2mmiteinem
hellen, abwaschfesten BelagoderAnstrichversehen sind.
DieseVorkehrungistnicht erforderlich, wenndieinAnhangIunterden
Punkten II, III, IV, V, VI angegebenen Verfahren angewandt werden,
sofern die Laboratorien mit einem weiten, fachgerecht installierten
Ausgußversehensind;
►M3h)◄Umkleide-, Wasch- und Aufenthaltsräume sowie Toiletten mit
Wasserspülung;
►M3i)◄Waschgelegenheiten mit fließendem kaltem und warmem
Wasser, das Trinkwassereigenschaften besitzt, mit Reinigungs- und
Desinfektionsmitteln,sowiemitnureinmalzubenutzendenHandtüchern;
►M3j)◄wasserdichte,korrosionsfesteBehältnissemithermetischschlie-
ßendem Deckel, aus denen eine unbefugte Entnahme des Inhalts
unmöglich ist,fürdieAufnahmevonProbenresten;
►M3k)◄Wasserversorgungsanlage,diekaltesundheißesTrinkwasserin
ausreichender Mengeliefert;
►M3l)◄Abwasserableitungsanlage entsprechend den Vorschriften für
dieZulassungvonSchlachtbetrieben;
►M3m)◄geeignete Vorrichtungen zum Schutz gegen Ungeziefer
(Insekten,Nagetiere usw.).
KAPITELII
VORSCHRIFTEN FÜR PERSONAL, RÄUME, EINRICHTUNGSGE-
GENSTÄNDE UND ARBEITSGERÄTE IN TRICHINEN-
LABORATORIEN
2. Das Untersuchungspersonal hat sich ständig äußerst reinlich zu halten;
Räume, Einrichtungsgegenstände und Arbeitsgeräte müssen stets peinlich
saubersein.
a) DasPersonalhatinsbesonderesaubereArbeitskleidungzutragenundsich
mehrmals im Laufe eines Arbeitstages sowie vor jeder Wiederaufnahme
derArbeitdieHändezureinigen;1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—18
▼M3
▼B
▼M3
▼B
▼M3
▼B
▼B
b) Tiere sindinTrichinen-Laboratorien nichtzugelassen;
c) Einrichtungsgegenstände und Arbeitsgeräte sind in einwandfreiem
Zustandundsauber zuhalten; siesindmehrmals imLaufe eines Arbeits-
tagssowienachArbeitsschlußsorgfältigzureinigenundzudesinfizieren.
3. Fürsämtliche Verwendungszwecke istTrinkwasserzubenutzen.
4. HinsichtlichdesGesundheitszustandsunterliegtdasPersonal,dasdieFleisch-
proben für die Untersuchung zu entnehmen hat, den Vorschriften des
AnhangsBKapitelIVNummern11und12derRichtlinie 72/462/EWG.
5. Die für die Untersuchungen benötigten Fleischproben sind sofort nach dem
Schlachten zu entnehmen und unverzüglich im Trichinen-Laboratorium des
Schlachtbetriebs zuuntersuchen.
Die Untersuchungendürfen nicht außerhalb desSchlachtbetriebs, indem die
betreffenden Tiere geschlachtet wurden,vorgenommen werden.
6. Zur Vermeidung von Ermüdungserscheinungen sind dem Untersuchungsper-
sonalkurzeArbeitsunterbrechungen zugewähren.
KAPITELIII
ZULASSUNG VON TRICHINOSKOPEN
KonstruktionundAusführungvonTrichinoskopenmüssenmindestensfolgenden
Anforderungengenügen:
1. Einfache Bedienung2. HoheLichtstärke
— AuchinnichtvollständigabgedunkeltenRäumenmüssensichereUnter-
suchungsergebnisseerzielt werdenkönnen,
— als Lichtquelle ist eine Projektionslampe von 100 W (12 V) zu
verwenden.
3. AusreichendeVergrößerung
— Arbeitsvergrößerung50fach,
— stärkere Vergrößerung 80- bis 100fach für die sichere Beurteilung von
in der Arbeitsvergrößerung nicht eindeutig zu identifizierenden
Objekten.
4. Auflösungsvermögen
— Bei jeder Vergrößerungsstärke muß ein helles, farbreines scharfes Bild
entstehen.
5. Umschaltmechanismus
— BeieinemWechselderVergrößerungsbereichemußdurchautomatische
Regelung dieSchirmbildhelligkeit ausgeglichen werden.
6. Kontrastverstärkung
— DasKondensorsystemmuß mit einer Kontrast-Irisblende für die Durch-
musterungschwierigerObjekteausgestattet sein,
— die Irisblende muß leicht zu bedienen sein (z. B. Bedienungshebel an
derPultplatte desTrichinoskops).
7. MüheloseObjektiveinstellung
— Grobeinstellung durchRändelring,
— Feineinstellung durchBedienungshebel.
8. Spannungsregelung
— Zur Einstellung der gewünschten Helligkeit entsprechend den örtlichen
Gegebenheiten.
9. EinwegführungdesKompressoriums
— Eine automatische Sperrvorrichtung muß den Einwegdurchgang des
Kompressoriumssichern,umunbeabsichtigteVerschiebungenzuverhin-
dern.
10. FreieSichtaufdieProjektionsfläche11. Projektionsfläche
— mindestens54cmDurchmesser,
— hohesReflektionsvermögen,
— dauerhaft,1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—19
▼B
— abnehmbar,
— leicht zureinigen.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—20
▼B
ANHANG III
KENNZEICHNUNG DES AUF TRICHINEN UNTERSUCHTEN FLEI-
SCHES
1. Für die Kennzeichnung ist der amtliche Tierarzt verantwortlich. Zu diesem
Zweckbesitzt undverwahrter:
— die für die Kennzeichnung bestimmten Geräte, die er dem Hilfspersonal
erst zum Zeitpunkt der Kennzeichnung und nur für die hierfür erforder-
liche Zeit übergeben darf;
— dieunterNummer5genanntenStempelplaketten.DieseStempelplaketten
werden dem Hilfspersonal zu dem Zeitpunkt, zu dem sie anzubringen
sind,ineinerdemBedarfentsprechendenAnzahl übergeben.
2. Die Kennzeichnung ist mit einem runden Stempel mit einem Durchmesser
von 2,5 cm vorzunehmen. Der Stempel muß folgende deutlich lesbare
Angabenenthalten:
— ungefähr in der Mitte befindet sich ein großes T aus 1 cm langen und
0,2cmbreitenBalken;
— unter dem Buchstaben T eine der folgenden Abkürzungen: EWG, EEG,
CEE,EØF,EEC ►A1,EOK◄.
DieBuchstabenmüssen0,4cmhochsein.
3. TierkörperwerdenmiteinemFarb-oderBrennstempelaufderInnenseiteder
Keulengemäß Nummer2gekennzeichnet.
4. Köpfe werden mit einem Farb- oder Brennstempel, der den Bestimmungen
der Nummer 2 entspricht, gekennzeichnet. In Zerlegungsbetrieben von
ordnungsgemäß gekennzeichneten Tierkörpern gewonnene Teilstücke sind
— mit Ausnahme solcher Stücke, die auf Grund der Nummer 43 in Anhang
BKapitelXderRichtlinie72/462/EWGnichtalsgenußtauglichabgestempelt
wurden —, falls sie keinen Stempelabdruck tragen, zu kennzeichnen, und
zwar entsprechend Nummer 2 und vor Anbringung des Genußtauglichkeits-
stempels.
Das in der erwähnten Nummer 43, Absatz 2, vorgesehene Etikett muß den
nachstehend unterNummer6genannten Bedingungen entsprechen.
5. DieKennzeichnungkannauchmittelseinerrundenStempelplaketteerfolgen.
Diese an jedem Teilstück bzw. an jedem Tierkörper anzubringende Plakette
muß derart beschaffen sein, daß ihre Wiederverwendung unmöglich ist. Sie
muß aus widerstandsfähigem Material bestehen und sämtlichen Hygienean-
forderungenentsprechen.
DieStempelplakette mußfolgende deutliche lesbareAngabenenthalten:
— etwainderMitteeingroßesT;
— unter dem Buchstaben T eine der folgenden Abkürzungen: EWG, EEG,
CEE,EØF,EEC ►A1,EOK◄.
DieBuchstabenmüssen0,2cmhochsein.
6. Auf dem Etikett gemäß Nummer 44 in Anhang B Kapitel X der unter
Nummer 4 erwähnten Richtlinie muß außer der Genußtauglichkeitskenn-
zeichnung gut leserlich eine Nachbildung der unter Nummer 2
beschriebenen Kennzeichnung angebracht werden.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—21
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ANHANG IV
KÄLTEBEHANDLUNG
1. In gefrorenem Zustand eingeführtes Fleisch ist in diesem Zustand zu
bewahren.
2. Die technische Einrichtung und die Beschickung des Gefrierraums müssen
sicherstellen, daß in allen Teilen des Gefrierraums und des Fleisches die
unter Nummer 6 genannte Temperatur in kürzester Zeit erreicht und einge-
halten wird.
3. Isolierende Verpackung ist vor dem Einfrieren zu entfernen, außer bei
Fleisch, das beim Einbringen in den Gefrierraum bereits die unter Nummer
6genannte Temperatur inallen Teilen erreicht hat.
4. Die Sendungen sind im Gefrierraum getrennt unter Verschluß aufzube-
wahren.
5. An jeder Sendung sind Tag und Stunde des Einbringens in den Gefrierraum
zuvermerken.
6. Die Temperatur im Gefrierraum muß mindestens −25 ºC betragen, sie ist
thermoelektrisch mit geeichten Geräten zu messen und fortlaufend zu regi-
strieren. Sie darf nicht direkt im Kälteluftstrom gemessen werden. Die
Geräte sind unter Verschluß zu halten. Die Diagramme sind mit den zuge-
hörigen Nummern des Tagebuchs für die Einfuhruntersuchung sowie Tag
und Stunde des Beginns und Ende des Gefrierens zu versehen und ein Jahr
langaufzubewahren.
7. Fleisch mit einem Durchmesser oder einer Schichtdicke bis zu 25 cm ist
mindestens für die Dauer von 240 Stunden, mit einem Durchmesser oder
einer Schichtdecke von mehr als 25 cm bis 50 cm mindestens für die Dauer
von 480 Stunden ununterbrochen zu frieren. Fleisch mit einem größeren
Durchmesser oder einer größeren Schichtdicke darf diesem Gefrierverfahren
nichtunterworfenwerden.DieGefrierdauerrechnetvomErreichenderunter
Nummer6genannten Temperatur desGefrierraumsan.1977L0096—DE—28.04.1989—006.001—22