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'''맥삼-길버트 염기 서열 분석법'''(Maxam-Gilbert Sequencing)은 앨런 맥삼과 [[월터 길버트|윌터 길버트]]가 1976~1977년에 개발한 DNA 서열 분석법이다. 이 방법은 [[DNA]]의 [[핵염기]] 특이적 부분 화학적 변형과 변형된 [[뉴클레오타이드]]에 인접한 부위에서 DNA 골격의 후속 절단을 기반으로 한다.<ref name="Maxam77">{{저널 인용|제목=A new method for sequencing DNA|저널=Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.|성=Maxam AM, Gilbert W|날짜=February 1977|권=74|호=2|쪽=560–4|bibcode=1977PNAS...74..560M|doi=10.1073/pnas.74.2.560|pmc=392330|pmid=265521}}</ref>
[[파일:Maxam-Gilbert_sequencing_en.svg|섬네일|453x453픽셀| 맥삼-길버트 염기 서열 분석법의 예. 서로 다른 지점에서 동일한 태그가 지정된 DNA 절편을 절단하면 서로 다른 크기의 태그가 지정된 절편이 생성된다. 절편은 [[겔 전기 영동법|겔 전기 영동]]에 의해 분리된다.]]
맥삼-길버트 염기 서열 분석법은 최초로 널리 채택된 DNA 시퀀싱 [[생어 염기서열 분석|방법]]이며 [[생어 염기서열 분석|생어 염기 서열 분석법]]과 함께 1세대 DNA 시퀀싱 방법이다. 이 염기 서열 분석법은 더 이상 사용되지 않고, 대신 [[차세대 염기서열 분석|차세대 염기 서열 분석법]]을 사용한다.

== 역사 ==
맥삼과 길버트는 [[프레더릭 생어]]와 앨런 콜슨이 플러스 마이너스 염기 서열 분석에 관한 연구를 발표한 지 2년 후에 그들의 화학적 염기 서열 결정법을 발표했지만<ref name="Sanger75">{{저널 인용|제목=A rapid method for determining sequences in DNA by primed synthesis with DNA polymerase|저널=J. Mol. Biol.|성=Sanger F, Coulson AR|날짜=May 1975|권=94|호=3|쪽=441–8|doi=10.1016/0022-2836(75)90213-2|pmid=1100841}}</ref><ref>Sanger F. [http://nobelprize.org/nobel_prizes/chemistry/laureates/1980/sanger-lecture.pdf Determination of nucleotide sequences in DNA]. Nobel lecture, 8 December 1980.</ref>, 정제된 DNA가 직접 사용될 수 있기 때문에 맥삼-길버트 염기 서열 분석법은 빠르게 인기를 끌었고, 초기 생어법에서는 단일 가닥 DNA의 생산을 위해 각 읽기 시작을 복제해야했다. 단일 가닥 DNA의 그러나 체인 터미네이션 방법이 개선됨에 따라 맥삼-길버트 염기 서열 분석법은 표준 분자 생물학 키트 사용을 금지하는 기술적 복잡성, 광범위한 유해 화학 물질 사용 및 스케일 업의 어려움 때문에 선호되지 않게 되었다.<ref name="isbn0-471-39128-X">{{서적 인용|url=https://books.google.com/books?id=dXk0JvN2Y-IC&pg=PA133|제목=Handbook of comparative genomics: principles and methodology|성=Graziano Pesole; Cecilia Saccone|연도=2003|출판사=Wiley-Liss|위치=New York|쪽=133|doi=|isbn=0-471-39128-X}}</ref>

== 순서 ==
맥삼-길버트 염기 서열 분석법은 DNA 단편의 [[방향성 (분자생물학)|5' 말단]] 하나에 방사성 탐침이 필요하며 DNA 정제가 필요하다. 화학적 처리는 네 가지 반응(G, A + G, C, C + T) 각각에서 네 개의 뉴클레오타이드 염기 중 하나 또는 두 개의 작은 비율에서 파손을 생성한다. 예를 들어, [[퓨린]](A + G)은 [[폼산]]을 사용하여 정화되고, [[구아닌]] (또는 소량의 [[아데닌]])은 황산 다이메틸에 의해 메틸화되며 [[피리미딘]](C + T)은 [[하이드라진]]을 사용하여 가수분해한다. 하이드라진 반응에 염([[염화 나트륨]])을 첨가하면 C 단독 반응에 대한 티민의 반응이 억제된다. 변형된 [[DNA]]는 피페리딘에 의해 절단될 수 있다. 변형 화학 물질의 농도는 DNA 분자 당 평균 하나의 변형을 도입하도록 제어된다. 따라서 일련의 표지된 단편이 방사성 표지된 말단에서 각 분자의 첫 번째 절단부위까지 생성된다.

네 가지 반응의 단편은 크기 분리를 위해 변성 아크릴아미드 겔에서 나란히 [[겔 전기 영동법|전기 영동]]된다. 조각을 시각화하기 위해 젤을 엑스선 필름에 노출시켜 자동 방사법 촬영을 하여 동일한 방사성 표지 DNA 분자의 위치를 각각 보여주는 일련의 어두운 밴드를 생성한다. 특정 단편의 존재 및 부재로부터 서열이 유추될 수 있다.<ref name="Maxam77">{{저널 인용|제목=A new method for sequencing DNA|저널=Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.|성=Maxam AM, Gilbert W|날짜=February 1977|권=74|호=2|쪽=560–4|bibcode=1977PNAS...74..560M|doi=10.1073/pnas.74.2.560|pmc=392330|pmid=265521}}</ref><ref name="Cold Spring Harbor Protocol">{{웹 인용|url=http://cshprotocols.cshlp.org/cgi/content/full/2006/1/pdb.prot3804?ijkey=17dc0499c9e0aa3b22887d5332698df00217774f&keytype2=tf_ipsecsha|제목=Cold Spring Harbor Protocols - Chemical Sequencing|웹사이트=|형식=|확인날짜=}}</ref>

== 관련 방법 ==
이 방법은 [[DNA 결합 단백질]]에 대한 [[DNA 결합 단백질|DNA]] 결합 부위를 매핑하는 데 사용되는 메틸화 인터페이스 분석법으로 이어졌다.<ref>{{웹 인용|url=http://cshprotocols.cshlp.org/cgi/content/full/2007/12/pdb.prot4812|제목=Cold Spring Harbor Protocols - Methylation Interference Assay|웹사이트=|형식=|확인날짜=}}</ref>

== 각주 ==
{{각주}}

[[분류:분자생물학 기술]]
[[분류:DNA 시퀀싱]]