Patent AR-126573-A1 (AR)
Title: Métodos y composiciones que se relacionan con líneas mantenedoras para la androesterilidad
Inventor: MILNER MATTHEW JOHN KEELING ANTHONY GORDON
IPC: C12N5/10
Filed: 2022-07-26
Abstract: Los métodos y composiciones descriptos en la presente se relacionan con líneas mantenedoras (por ejemplo, líneas de androfertilidad) para fertilizar plantas androestériles y, debido a su polen no contienen genes de androfertilidad expresados, permitiendo la producción o propagación de plantas con un fenotipo androestéril mantenido.  Reivindicación 1: Una planta mantenedora de androfertilidad para una planta poliploide de androesterilidad que comprende: un primer genoma que comprende: un primer cromosoma de un par de cromosomas homólogos, en un lugar diana único, al menos un alelo ectópico funcional de gen MF y al menos un alelo ectópico funcional de un gen de color de la semilla (por ejemplo, cobertura de la semilla y/o gen de endoesperma de la semilla) (o al menos un alelo ectópico funcional de cada miembro de un conjunto de genes de color de la semilla); en un segundo cromosoma del par de cromosomas homólogos, en un lugar diana que corresponde al lugar diana del primer cromosoma del par de cromosomas homólogos, al menos un alelo ectópico funcional del gen PV; alelos de pérdida de función de genes MF endógenos en los lugares del gen MF nativo de alelos de pérdida de función de los genes endógenos PV en los lugares de gen de PV nativos. Reivindicación 8: Una planta mantenedora de androfertilidad para una planta poliploide de androesterilidad que comprende: un primer genoma que comprende: en un primer cromosoma de un par de cromosomas homólogos, al menos un alelo funcional de un gen MF en el locus del gen MF y al menos un alelo de un gen de color de la semilla (por ejemplo, cobertura de la semilla y/o gen de endospermo de la semilla) (o al menos un alelo ectópico funcional de cada miembro de un conjunto de genes de color de la semilla); en un segundo cromosoma del par de cromosomas homólogos, un alelo de pérdida de función del gen MF en el locus del gen MF y al menos un alelo funcional ectópico de un gen PV; y alelos de pérdida de función del gen PV en los loci de genes PV nativos; y al menos un genoma adicional, en donde cada uno de los genomas adicionales comprende alelos de pérdida de función del gen MF en los loci de genes MF nativos y alelos de pérdida de función del gen PV en los loci de genes PV nativos. Reivindicación 50: Un método de preparación de una planta mantenedora de androfertilidad para una planta poliploide de androesterilidad, en donde el método comprende manipular por ingeniería una planta para que comprenda: en un primer genoma: en un primer cromosoma de un par de cromosomas homólogos, en un locus diana simple, al menos un alelo ectópico funcional de un gen MF y al menos un alelo ectópico funcional de un gen de color de la semilla (por ejemplo, cobertura de la semilla y/o gen de endospermo de la semilla) (o al menos un alelo ectópico funcional de cada miembro de un conjunto de genes de color de la semilla); en un segundo cromosoma del par de cromosomas homólogos, en el locus diana correspondientes al locus diana del primer cromosoma del par de cromosomas homólogos, al menos un alelo ectópico funcional de un gen PV; y alelos de pérdida de función de los genes MF endógenos en los loci de genes MF nativos y alelos de pérdida de función de los genes PV endógenos en los loci de genes PV nativos. Reivindicación 51: Un método de preparación de una planta mantenedora de androfertilidad para una planta poliploide de androesterilidad, en donde el método comprende, simultánea o secuencialmente: insertar, en un primer cromosoma de un par de cromosomas homólogos en un primer genoma, en un locus diana simple, un constructo que comprende al menos un alelo ectópico funcional de un gen MF y al menos un alelo ectópico funcional de un gen de color de la semilla (por ejemplo, cobertura de la semilla y/o gen de endospermo de la semilla) (o al menos un alelo ectópico funcional de cada miembro de un conjunto de genes de color de la semilla), opcionalmente en donde la inserción comprende la escisión de nucleasa del locus diana (por ejemplo, escisión de nucleasa de dedos de zinc o nucleasa CRISPR) y recombinación o unión terminal del constructo; insertar, en un segundo cromosoma del par de cromosomas homólogos en el primer genoma, en el locus diana correspondientes al locus diana del primer cromosoma del par de cromosomas homólogos, un constructo que comprende al menos un alelo ectópico funcional de un gen PV, opcionalmente en donde la inserción comprende la escisión de nucleasa del locus diana (por ejemplo, escisión de nucleasa de dedos de zinc o nucleasa CRISPR) y/o recombinación o unión terminal del constructo; y mutar los genes MF endógenos en los loci de genes MF nativos y los genes PV endógenos en los loci de genes PV nativos para crear alelos de pérdida de función, opcionalmente en donde los alelos de pérdida de función son causados al poner en contacto el genoma con una nucleasa guiada específica de sitio (por ejemplo, CRISPR) y una o más secuencias de ARN guía o constructos multiguía.