Patent ES-2903003-T3 (ES)
Title: Medios para generar vectores adenovirales para clonar grandes ácidos nucleicos
Inventor: THIRION CHRISTIAN
IPC: C12N15/861
Filed: 2011-12-30
Granted: 2022-03-30
Abstract: Una combinación de una molécula de ácido nucleico, que también se denomina como tercera molécula de ácido nucleico, y una molécula de ácido nucleico, que también se denomina como segunda molécula de ácido nucleico, en la que la tercera molécula de ácido nucleico comprende (1) una molécula de ácido nucleico que comprende los siguientes elementos: (a) una primera parte de un genoma de un adenovirus, en el que la primera parte de un genoma de un adenovirus comprende exactamente una repetición terminal invertida de un adenovirus; (b) una secuencia de nucleótidos, preferiblemente una secuencia de nucleótidos genómica, o una unidad de transcripción; (c) una secuencia reguladora de ácido nucleico que tiene actividad reguladora en un procariota; (d) exactamente un sitio de recombinación específico de sitio que se recombina en presencia de una recombinasa correspondiente; (e) una secuencia de nucleótidos que proporciona un marcador de selección negativa; (f) una unidad de secuencia de nucleótidos bacteriana que comprende (i) secuencias de nucleótidos bacterianas para la replicación condicional y (ii) una secuencia de nucleótidos que proporciona un marcador de selección positiva; y (g) un primer sitio de restricción; o (2) una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos según SEQ ID NO: 6; o (3) una molécula heteróloga de ácido nucleico que comprende una tercera molécula de ácido nucleico como se define en (1) contenida en el organismo depositado en la DSMZ bajo el tratado de Budapest con el número de acceso DSM 23754; y en el que la segunda molécula de ácido nucleico comprende (1) una molécula de ácido nucleico que comprende los siguientes elementos: (a) una unidad de secuencia de nucleótidos bacteriana que comprende (i) secuencias de nucleótidos bacterianas para la replicación de una sola copia, y (ii) una secuencia de nucleótidos que proporciona un marcador de selección; (b) exactamente un sitio de recombinación específico de sitio que se recombina en presencia de una recombinasa correspondiente; (c) una segunda parte de un genoma de un adenovirus, en la que la segunda parte de un genoma de un adenovirus comprende exactamente una repetición terminal invertida de un adenovirus; y (d) un sitio de restricción que se denomina como segundo sitio de restricción; o (2) una molécula de ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos según SEQ ID NO: 2 y/o SEQ ID NO: 13 y/o SEQ ID NO: 14; o (3) una molécula heteróloga de ácido nucleico que comprende una segunda molécula de ácido nucleico como se define en (1) contenida en el organismo depositado en la DSMZ bajo el tratado de Budapest con el número de acceso DSM 24298 y/o DSM 24299; en el que la segunda molécula de ácido nucleico y la tercera molécula de ácido nucleico son cada una e independientemente una molécula lineal o una molécula circular, preferiblemente la segunda molécula de ácido nucleico es una molécula circular y la tercera molécula de ácido nucleico es una molécula circular; en el que la segunda molécula de ácido nucleico y la tercera molécula de ácido nucleico se complementan entre sí para formar un genoma viral completo; y en el que la recombinasa que recombina el sitio de recombinación de la tercera molécula de ácido nucleico es la misma que la recombinasa que recombina el sitio de recombinación de la segunda molécula de ácido nucleico.