Patent AU-2022204865-A1 (AU)
Title: Improved methods of cell culture for adoptive cell therapy
Inventor: VERA JUAN F
IPC: C12M3/06
Filed: 2022-07-06
Abstract: Ci (N 
0 
U 
. 3s
1- 
>r! -J) 
C) I-u 
>
C < 0 
o~ 
0 
04 C0 
C) C) C 
C; C) C 
0: 
0~j~NOISNVdX3 
Gl10= 
CdiV 
SCj3II3OdSrIiN 
< Noiiv-flnIiS N3IiNV 11=V SAVG
2/40 
00 o 
r z- Z! 0<0 
00oo r--C. N m~ 
C) 
z 
F(NJ 
z 
0 
-J 
0 'CN 
0 
z 
0 
Co 0 0 0 0 
a- Z Z z Z 
uJ uJ u J u J .  
00 
0U- 0 
D u U 0 W0 , 0J 
-/J UJ U UJ< UJ 
c)wO0 0 0
3/40 
CDX~ E 
CD0 
x 
C), 
go vX LJ 
lo 0 
00V 
C) II ) CD0)C -c 
0 ICO 
0~ (N 
S±NO (____10__1 -JO-E 
0001±-8 
F0 LO C0l) 
~cq C 
tOLXL 
0 0 
80 83NOISNVdX3 
< co~a (110=1 iOA93
4/40 
z 
0 ) 
u (/ 
0 
M~~ ~' M '-0LO 
-J4 0000 (0 C14~ 
+ C) IC) IC) 0) C- C) 0 (N (0 
(N NND C C) LO N ( N 
N- N l O w L ~ 
0 0M 
0 
04 04 04 04 0404 04 04 04 
IC) CDC)~ C) CD~ C) t N (D 
04 CN CN C N NNCD N N- ND 
-J
E- 0qc -00 0 -N0~)
5/40 
0171uF 
E Lo Lou, 
-5E LO 04T
0j LCO CD LOC)LO 
ZIZ
6/40 
CD0 
C0 
C1
7/40 
C)CN 
uJw 
~r 
0 ~ 
C-), 
CV) 
Lu 0 
.... O C)N ...," .j f 
0 
>< 0 
<.J 
4 3d dNIX3NV L 
o- w 
r-j 
0W/I3 iJ JUJ > 
<J 
0 ~C~N06 ~ i~ 
_ _ _ _ CN
8/40 
CN 
U)) 
C0 LC) 
- Q 
</ 0) 
C/U 0 
<0< 
NCD) 
'N 
___ __ ___ __ ___ __ ( 
C) C) C)C )C)C )C 
C- C- C)C C-) )C 
AiISN3G 3vdi~js13 imCO S31ddOO 0N 
co
9/40 
C) 
0 
0 
(D + 
C) 
0 
0~>
F-c, + 
W C) CD~~1 
(0+ I+ 
< ) a ) 
uJLo L 
X U) 0) 
04C) 
<- C) + 
00 a) 
Q-Lo 
CU) 
IC) 
I I I I I I I I+ 
o 0 0 0 0 0 0O 
IC) 0) C) 0) C) 0) C) 0) 0) 0 
LO C) CO C) NO N) LO C- 0C 
(2WO/sTI-13) kiISN3G 3ov-d nfli-lv
~N0V~10/40 UJXWj> 
-J 0000 
0 X 0 00dA j 
00 n 0 Ii( 
~~JJ 
31 zd1 
w III) 
LVN4 UJ 
0-H H)C )C DC DL 
(00 t- (DL0cM0 
CD C) w ISAI01=103dS=10 
11~ 0U1J 
C1 
0 
0 CN w 7N 
0  803 
H 0 
W~ D 
a H1 it 0  0 co90 
0ZW Z 0 
W 3 U ) _ 
0 t O~0 T 1290 
(N00
Tl- C) CD CD 
+ + + + + cC: 
' - '- '- '
<19v I8Alioi 0N0ISSEI dXEIdO0%
11/40 
NHN 
UJN 
CE 
0 LO) 
NN 
Ha N 
0 
NH 
- - -- - - - -- - - E 
<0< <0 
H0  I 0 
w ~z> 
C C 
(EWO,'S-1-13 9 kilSN~33vd ls
12/40 
- - - - - - - - - - - - -
0 
r 
<0 
z> 
0 0 C 
C)) CD CD 0D L 
(WO/sii-1309 Ok)AJSN~33v-d ls
13/40 
Ul) 
0 
0 0 
Cl) UJ 
0 10 
F-I 00 
xx 
0 
LZN 
00 
< 0 
00 
oz 
< El 
)C) C) 0OC) L 
(ZWO/sii-1309 00)AiJSN~33v-d lns
14/40 
<0 
00 
oz 
z -- -- - - -- --0-0-0 -
Woc ~ ( 
> wsio~LAJN~~V~l
15/40 
LO t- LO) t N M 
C)~ 
M 0 N 
CN LO T) 
z 
0 
z M~ N -M m C- C ) O (0 C)0 
w CN (0 CN 4 rN- CD ICO m 
z l 
o 0N 
N1 t-- I~t (0 C14 N - 0 04C LO lLO (0 0l M" 
co 0 C') CD") 
CD 0 
004 
L 
N N4 
W~u 
z zJ 
10) C 
N < 
0> 0Cl < E 
> < C) L <H LL 
z w < D z-w 
1 01)l) 01 0 1 ) IC/) E:01
16/40 
iOt) - LO t ~- N M 
or) (N 
1N- 00 (0 '- N (N 
(N LO T) 
z 
0 
z M~ N - C 00 m- C) C) 0 0 q 
j CN (0 CN tj- -- O C) 
00 
C)(f 
oo -JC 
(N - rl- (t - N (NO O wI (D 0D w" 
0D Ic) 
LL 
(N ( 
0 W~ 
W5 uJ 
z 0  0z 
<- < 
> - o JC>)<U- - o 
0-fl << <>~l ~ 
>-D HZ <j D 
1 1~1) 0 1 0101 C I C/) I Q
17/40 
C C C0 C0 (C C) 0) C0 0') 0 o 0 - ~ 0 0,. 0 
+ + N1 + + 
<CV) CO 0D CV) 
0 04N NN 
C)C) C) C) . O c000 
Co 0D 0D 0 ( C) LO 00 C) CO 
0o 0C) ~ I) C 
>-Ol + + '- + + 
0') 0') 0) 0) 
~C) C) C) CD D L 14 0 00 
CD 0) 0) 0 04 C NCC C C) 
C)+ + ' + 0D + 
Co 0C 0 C) IC) 0~ 0 0 D CD 
0)C + + N1 + 0D + 
C) 
+ 
C 
0)0 
C)l 
0 
CN0 
E 
CN UJ H 
E q c 
0 _< 0 0 
U.. ~E w w 
75 Z.- - C) -z 
0 E 0 75 
* C/) 0 ~- > 
Co m HN z Z mO Or 
>- U E 0 - H 
0 0 3 N -_ z W uZ 
00 D>o Hn 0-D 
~z z E<0 
>- LL -n z 
H 0 uJ E E H _) L j C) 
Cl) < C/)0 l - J 
Z LU D Hw z z Z W LU UJ 
LU El -JJj H 0 00w o ) 5 
o0< 0 2<0 0D o 5 000 w 0 
uw w >u..ujwuw w z LU LU L 
o~~ ~ o ooI0 UCl l 
C) C) 0 
D UD LU D -j 0J 0 0w 
C/) C/) flo C)~ 71c/) L)0 0 0 1~ m >HI Z 
0 - N M~ t IC CD N-- 0O 0 0'-
18/40 
C ) C0 C0 (0 LO) C0 C) 0 0 o 0 - ~ 0 0,. 0 
'+ + +N 
-w w w w 
CV) m ~ 0) C0 
LO) LO N V 
C) C0C ) C 0 L . t 0 00 
o o o o o r> ) CD CDo o 0 - - 0 0 ' ( 0 0 
+ + ' + 0 + 
< w - Jw 
(D C.0 N (.0 
o _ o6 co o coo 0o 00 00 000 N 
0) 0D C C .0 0 04) 0 00 0 
+ + ' ' + 0 + 
w w w w 
to cm Cn mo 
o 0 0 0 
+ + + o + 
o 0 0 0 0 
CD) C) 0 ICD L6 L6 o 6 
LOO 
Ct) 
E0oO 
oa + C -D4 
0 
C)l 
0 
E 
N w o 
0< 0 - 0 0o 
- . E w- w 
Cl 0E E 
o < oH2 N ro o a w 
o- o >- - z - H> 
C o Z O 0o 
>< 75 DoZ W W Z 
o o 0 ] 
Z ~ ~ E H) E 0/ 0 (D > =H- - M D <L 
H0 w 7;E E ) LU -i 
Cl)t/ W < - 0 ~ < <U z~J Z w Z Z J uw 
UJ Or .... UOr- T- H 0 0 0L 
o0< o02<0 0 o 5 0) 00C u0 
uJ u >u.u U- wU w wU LU LU o oo 0 UC/) C/) H D < 00 ou 0 
U- _ O -Uj 0 0 0 <0 
0 0 0 -j D D UJ FmH 
D D U<L D UJ -J -J 0 < ow 
C/) C/) 0f C)~ C) (D (9 0 > H 
0 ct NO CCD r t ( - 00 0) 0 04N
19/40 
o o 0 0 o- o 0 o o~ o y- 0 C C 0 0 C C 0) 0 
C 0 + + N + o + 
w w w w 
< 04 04 CDN 
0 0 0 0 ( LC) CD N CD 
) 0 C C .0 O0 0 4 0 0 0 
0 + + + o + 
w w w 
<~~~ m oC 
0LO) LO L 
E o 0 OD C) m C) CO C) 
o< 0o-~ ' 
C)+ + - - + 0 + 
w- E w w 
uJo oJ-uJ '->uJ 
0 0 0 CD N 
C) Cy) Io - C) 
S o 0 0 0 If - 0 0 0 a 
o o 0 > - 0- 0 0 
C C0 + + N + 0D + 
z~~~ w w -z -w uJ w u- uJ o-ou 
< <D o4) 0 ao 
Cf) 
+ 
0N 
0 
w1 w > mwwz > 
E 0 00 
0~ z 
1 D E E 
m0 H UJ E 0 - .> CD 0N 3N _ z C 
~w E~0 o~ < 
o Dl H cn 0 
>- U- E - z z0 uJL E U) ) UJ D 
w, < 2 CO U) 0 CO-) ~ 
Z j D Hw z>ZZ u uu 
LU O -. JjI uj H 0 0 0 
o0< 0 2<0 D o w 0 00 o uwO 
ui i >u~ LL u w z Lu Wu L 
o ~ooIL 0 LL OC D< < -<< E- 0 
C, 0~ 0  w <J D-- D J 
w W D w 0J- w 
CO CO O COO r- 0 0 C) >H4
20/40 
CD ) CD CD (. LO No C1 ')0 
o+ + N1 + + 
00 0) 00 
o 0~-~- 0 0 00 0 
C)CD CD CD C.0 L ' 00 
oC 00) CD C) CD C) CD CD 
0o 0CD~ 1.C 
'- 0+ + '+ 0D + 
<t IOt) V) V 
~~CD CD CD CD (0 U) (0 I 00 
CN N)C ) - c C) C NC 
O - 0+ + N+ 0) + 
O N N1 0 N1 
< t NO L )L 
C)l 
040 
LL U)~ 
E-E 
oN w H -~ 
>- 0 LUE o
o0 0 ]N_ 
En E H w 
75 z z< 
0- u- 
Hw 0 oU w ) L 
><) 2 0 Z 0 C/ -JZ 
00 0o 5 0 0n0 mi 
o O oo 0 Lu Ca) 0/ 
0 > < <0 0 n 0 
O - NLz 
0 <- N C" < ( D o - C/5 0 w
21/40 
C0 CD C) C . N0 00 00 
C0 0D C- CD 00 0O CD CD 0 
CD + + '+ o + 
m C 
oD 00 0( 0 
Co 0D C- CD .0 O 04 0) 00 0 
0coC + + C4 + CD + 
04 04 0' 004 c 
0) 0D C- CD 0 0t C) 0 0 0 0
CD + + N + 04 
o C0 0 CD 0C0 D CD 
C) + + C4 + 0D + 
04 C4 0D 04 
I) N C 
NO 
C14 
-0 0 
75 z 
C~D N9 E 
0 0l 0m
z- H UJ 5 00 
o0 w U) a) w W 
< N <0 OD w w 
0- D <0 
oH 0 WD <) LC0U)00 
Z W >O H-w z w Z W UJU 
W o oJ~ 0- Hj 0 0 
U<- 0; ( 0 < 0 0 c < 
o~~ ~0 0WOOH D << W 00 < 0 
0 - N m" Nt U' C0 N- co 04
22/40 
Fig. 18 
75
70
65
60
55
z 50
O 45-3 
c/) 
z 40
35
u 30
25- 2 
o 20
15
10
5-- ---- ---------------------------------
0* 1 -- -1I- - I 
1 0.5 0.25 0.125 0.0625 
INITIAL STATIC CULTURE SURFACE DENSITY (1E+06 cells/cm 2)
23/40 
00 0) CD.j ~ c C0 0D 00O' 0)..00C D C C D D0)0- , 
00cc C CD 0-0 C-N 0 0 CD. CD0DC0C)LOT0OC 0C 
'-+ + 04+ + D +04C' +m 
< oo N o- o< LOLO 0o LOC 
w w w w w w w w 
O coo o 04 00 00 
00 O O D © 0 00  0 00 CD C C O O ©O '- co 00  0 
) o + + Co C-0 + + + 5 + 
w w w wg w w w w 
©©oo © o o 
O O Co) Lo 00 co co co co oo o ooo go o00 o o o- r roo os 
o1 o1 c * o C1o o oO LO L a o Oo 
C C++ '4 +0+ ++ +C+ 
LO ) 0 LO) Cr)C) C) r) 
o O: 0 O: CD 
CDN CD CIC C C 
+Cz< + + +O - +0+ 
O NN 0s-1 N NN1- N 
w<29~o w fl-4Ooo 0o '- oo-- 0 oo~
ON C14©~ g O © s o 
0 0 
C'4 N
S0 E0 
EE E 
CM>- 0 
u.E.0 - o 0< W 0 fow 
0< 5 0 ZW< :5 -L ZW 
D D9 )EN 0D 0 Oo DC1 n 0 
z ~~c 0 E. a)- :5 rO L 
<-0 <~ 22 0 / 
ZWD O HZ>-ZZUJ w ZWDOWj-Z>-Zz w 
W O _j W mW -0 0 0 0 w o j w mI -000L 
0<02<90woo) w 0<02<0w~ooo w 
w w> LLW W w Z w w w WW>U.WWWZWW±> 
00200MOWOOHLJ 00 0-~)CI...  
DDWO<D2DW J...Jfl o D D w<DW Wi n <0 
0 10N (D a- N-Co )IU0NC 2 0 I)101
24/40 
Fig. 19B 
12E+06 - 240 mg/dL 
1OE+06 - 475 mg/dL -.
8E+06 
E 
6E+06 
C0 
C 4E+06 
2E+06 
0
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY 11 
TIME IN CULTURE
25/40 
Fig. 19 C 
Z 500- 240 mg/dL o 
400 - 475 mg/dL 
z 
w 300 -
0 E 2000
Ul) o 100
()0 
(D 
DAYO0 DAY 4 DAY 8 DAYl11 
TIME IN CULTURE 
Fig. 19D 
zA250 - ___ 240 mg/dL 
0 
200- 475 mg/dL
010 
Cl)~ 150 
0-04) 
QE 100 / 
0 50 
(D 
0
DAYO0 DAY 4 DAY 8 DAYl11 
TIME IN CULTURE
26/40 
Fig. 19E 
12E+06 - COUNTED CELL NUMBER 
10E+06- --- PREDICTED CELL NUMBER 
Lloie 
z 8E+06 
8 6E+06 - 240 mg/dL CULTURE 
wL 4E+06 
2E+06 
0
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY 11 
TIME IN CULTURE 
Fig. 19F 
12E+06 --- COUNTED CELL NUMBER 
10 6- PREDICTED CELL NUMBER 
10E+06---
COE 
w - 8E+06 
) 0475 mg/dL CULTURE 
6E+06 
4E+06 
2E+06 
0
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY 11 
TIME IN CULTURE
27/40 
N1 
HE 
N1 CN N CN -J 
E EE E 00 
E E E E 
LO C) q 0 
t
MCI) 
---------- 0 
I I II I I0 
(.0 c) ( (.0 (0 Q 
C) C) C) C) C) C 
w w w w w 
C14 CD 0o (.0 Co Co 
0ZOSG 0 903 0 0iSNC 0o- n
28/40 
M t-LO CD~ N MC DC O O -O CD T- M M 
-++ T-+ CD + N + z 
o NN N 
z LO o w0L COD 
x+Z- .N +O E. '--+ o 
C- N~ CN ON'
o CO O c o O (.0 ) 00 N 00 00 0- DC DLOC : 
:0 0i'CI 
0 C:' t-- 000~ C1 DCHC 
z 0 0.. 0- 0O 
-o w w0 w< 
_0o c.. 0 O m 0 
O wo ww 
LO zL6 
z 0 
z 0 H 
0 
z 0 ~0 0 
<O z 
x 8 og 0 E o z z14 QU O z 0 
00 EO E <o 
HoO ooooE0 D-~ 
z Z u 0 
-4 U) -j O -- Eo a
0 EJ L) HJ 0 
H~~< ZU), - Cl 0 
aDoo Ow f-s 00
0 O!.-z0ou 
0/ C/)0 0 
D 0-.j Z -a-0 0 H 
0j00 0 o 0O W O W C/ aD 
wo Dog >wzmoWwH 
j z zz I u 
-J W 0 UH 
U) 004--0D 000 w a- - zoO OO C14 w w- O 
. 0 W DW .  
0 w 0 <uJ<z flwfl000CI5 OO wwH~H 0 z CU P > 
M j
a-WZW00D(DWW _j J0 )W __WD.H-0Q 00 .. HD.
29/40 
Fig. 22A 
1010 
1004 
1000 1012 
1014 Fig. 22B 
1010 
1004 
1006 u 
1002 
10181 1008Tr14 
1014 
1000 
1022 
1020 
1016-_ 
- 1002 
1018 
100 
1018 1008 
10
30/40 
Fig. 22C 
1010 
1000 
1008 1024 
1016
31/40 
Fig. 22D 
1004 
1000 
1026 1024 
1016 
1002
32/40 
0D C ) DC ---' 0 t -t C D DC 0 C 
+ C)0 + + + C 
0)(0(0 C 0 . 't r
0 CN N C\J ' 
CD 0 ) C)C )1 0( DMC 
00 CD ) C C CDCDCD ) D C C + C0 + + ~+ r-+ + 00 
0) 00 0 00 00 C 
+ C-o + + -~+ + + N 
uJ uwu w W w w~ 
V) 0o LoC DC )L t-. )C )-C 
00 )C)C ) ) C 0) 000 -)-0C + +~ ++4 + 
N 16 r- CNN N C 
E D 
-L) 0 
E ( 
U) < 
0 0 
UI
LL < 0- Nl O N 0 0 
0 < E cND E 0 
U- U- 0-)E C/) - ) w 
00 U) ,(Im Zj 
N) ~w E 
E E 0 2 0 z 
00) C 0<C 0 (n 0 C 
<D 0 j D_ 70o 
00 0Co 0 OU) E>. w 
00 Z: Z H HCOz Or_0- 0 
z z oC/)or -j U- O H Co 0
<Co w <2  0Co-wDj C)C)Z Z 
<ZZOQJDE5HZ>-ZZW w wOO 
000<0l<0200WH00 0 WWCO< 
FUJWQDW>U-EWZWWW _>(-d 
>DD< J<20w-5-J00020< 
-U-o - -o l C0 00 wHHu 
N ' w WDw- 10 O-O0-NC0 <0 0 <
33/40 
C)C0C)C)C00L : 000 0 
C-0 + + -+ +0C + 
w wuw wJ w 
00C)C 0(D (D 
< LIt ItN NtT- l 
C) + + -+ +0C 
uwuJ w w~ 
00-~0 0000 
C) + + -+ +0C 
uwuJ w w~ 
LO L C C)C)CDLOO IONC t-C 
CD 0C  Z 0D00D C0CD C 00 0 + + C0 + +N C4 + 0) 
w~u 0 wj w- uju u 
<06 Z C) 00 0)C 
E D 
-0 0 
ca E 
< uJ 
IN <5 
uJ 0 
U- U 
LLN < N 0 0 
0 < E N D E 0 
o-u o~ U) ~ 
E E ) L 00 u -D 00 z 
00 C < 0 CO) 0 0 C/) 
C) D z~l w 
0 0C/o 0 0 C)E E >- U 
>- >- 0 H Lu wU o~> H 
< < > :7> <00 HUJ 
0 0 H 0  D 0H0 o o < 
zzmCO Z - C)0 0
0- E> O,<HDM <U- 0 
H~0 ouj> 0 ~ _CoCoZ 
C/) 00w < 2D C/)0 0 L) c) -)C/) 
o00< <oj000n Oooz 
>DD<0DW<WDUJ-000 W W 0< UJCOCO H/)~fl~C/)0D>Hu 
0' N -wwz d
34/40 
0) C )N NL )( 0( 0 0 0 'oN - C) o) C ) )C 00 C) 0 C )0 0) C 
+1. -N+ + + C)+ 
0) 00 0 00 00 CN .~ 
+ '-N + + 04+ + + 0 
w w 
0R 00 0R ON I 
0) C)(f C) C D DmC D0 
+ +- + N+ + +N0 
uJ uwu uJ w w~ 
0 00 0 ON
0O LO(f LoC)C , o-tc )C D C 
CD CD C C DC) CDoNCDC00 C) C 
0+ + + ++N -+ 0) 
< C) 0) ) C01 C) C 
N LO Nl- NN4 
N4 Z 
E D 
-0 0 
C.) E 
uJ <5 
uJ 0 
U- C/) 0 
N a- C' N 0 0 
0<EN c E 0 u- u- 0 E C) - ~ D w 
00 E10~ N 
E E 00 L) 00 c cn 0 mz 
0 0< 0 C//= 
0)0 0~E - Lu U) 0 EE < 
>- 0 H iu WU 0J> H 
0 o D (D~0 LuE >< 
U- z 2z 0 
c, O 2Eu w UUD. 00Z Z 
00 w 2 D -0 o J 00 U) _jC/o) 
0 0 < C/) C/ z 
>DD0 < j w 000 U) U)00< 
UJC/)C/)HC/)0Q/000 w w W < 
0' N -wzwwwa
35/40 
Fig. 23D 
3.OOE+09 
0 
z 2.50E+09 - A 
O -- - B 
U)0 2.OOE+09 
< C 
_jUJ 
- 0 1.50E+09 w-_j 
0 < 
w D 1.OOE+09 
5.OOE+08 -- 
0I- 0.OOE+00 
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY11 
DAYS IN CULTURE 
Fig. 23E-1 
90% 
0 80% 
70% 
u 60% 
>< 50% DDY 
40% 1 
30% DAY11 
u- 20% 
S 10% -
A B C
36/40 
Fig. 23E-2 
DAYO0 
40% 
Fig. 23E-3 
DAY 9 
80%40% 80% 
A B C
37/40 
Fig. 23F 
120
o 100- A 
U
Z 
80 - ------ C w Fn 
oz 
>'- 60 
40
0 
20
0
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY 11 
DAYS IN CULTURE 
Fig. 23G 
3.OOE+09 - TOTAL LIVE CELLS AS DETERMINED BY 
HEMOCYTOMETER COUNT 
PREDICTED CELL NUMBER BY 
2.50E+09 - USE OF GLUCOSE 
2.OOE+09 
_ 1.50E+09 
1.OOE+09 
|
5.OOE+08 
0.OOE+00 
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY11 
DAYS IN CULTURE
38/40 
Fig. 23H 
100% 
z 80%- A 
60%
0 B 
40%
u
0 
20% 
20% 
Du145 CAPAN1 293T 
PSCA (+)TUMORS PSCA(-) 
Fig. 24A 
DAY 0 DAY 10 
25 MILLION CONVENTIONAL G-REX 
o T-CELLS CULTUREWARE (+50MILLIONAPCs) 
DONOR1 250 2460 
o DONOR2 246 2200 
DONOR3 240 2300 
Fig. 24B 
DAY 0 DAY 10 
25 MILLION CONVENTIONAL G-REX 
T-CELLS CULTUREWARE (+50MILLIONAPCs) 
DONOR1 236 2120 
DONOR2 240 2260 
DONOR3 225 1980
39/40 
3000_ Fig. 24C 
2500_ -- CONDITION A 
CONVENTIONAL 
200 2000 - CULTURE WARE 
w 1500
0 
u
0 1000
500 ...... - ' 
0
0 10 14 19 23 
DAYS IN CULTURE 
2500 Fig. 24D 
-*-- CONDITION A 
2000
CONVENTIONAL 
X - CULTURE WARE 
1500
LL 
o 1000
500- .. --- - - -.  
0-1 
0 10 14 19 23 
DAYS IN CULTURE
40/40 
Fig. 24E 
) a1.OOE+10 
Lz , / 1.0 E 0 . -
coO0 1.OOE+09 - - - - SERIESi1 
<.. - - - SERIES 2 
-0 -- SERIES 3 > z 1.OOE+07 
w-_j 
0 < 
o 1.OOE+06 
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY 11 
DAYS IN CULTURE 
Fig. 24F 
1.20E+07 
>- 1.OOE+07 
c/ .0E06- SERIES 1 z 4 8.OOE+06 
w E E- - - - SERIES 2 
w U 6.OOE+06 SERIES 3 
<0 
u.. 4.OOE+06 
co 2.OOE+06 , 
1.OOE+00 
DAY 0 DAY 4 DAY 8 DAY 11 
DAYS IN CULTURE