Patent AR-097132-A1 (AR)
Title: Plantas que tienen una mayor tolerancia a herbicidas
IPC: C12Q1/68
Filed: 2014-04-30
Abstract: Un método para controlar la vegetación no deseada en un sitio de cultivo vegetal; que comprende las etapas de proporcionar, en el sitio, una planta que comprende al menos un ácido nucleico que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una hidroxifenil piruvato dioxigenasa de tipo silvestre o una hidroxifenil piruvato dioxigenasa mutada (mut-HPPD) resistente o tolerante a un herbicida inhibidor de HPPD y/o una secuencia de nucleótidos que codifica una homogentisato solanesil transferasa de tipo silvestre o una homogentisato solanesil transferasa mutada (mut-HST), que es resistente o tolerante a un herbicida inhibidor de HPPD, y aplicar en el sitio una cantidad eficaz del herbicida. También plantas que comprenden mut-HPPD y métodos para obtener dichas plantas. Reivindicación 1: Un método para controlar la vegetación no deseada en un sitio de cultivo vegetal; el método comprende las siguientes etapas: a) proveer, en el sitio, una planta que comprende al menos un ácido nucleico que comprende (i) una secuencia de nucleótidos que codifica una hidroxifenil piruvato dioxigenasa de tipo silvestre o una hidroxifenil piruvato dioxigenasa mutada (mut-HPPD) que es resistente o tolerante a un herbicida de heteroaril- o piridilcarboxamida y/o (ii) una secuencia de nucleótidos que codifica una homogentisato solanesil transferasa de tipo silvestre o una homogentisato solanesil transferasa mutada (mut-HST) resistente o tolerante al herbicida de heteroaril- o piridilcarboxamida; b) aplicar al sitio una cantidad eficaz del herbicida; en donde la secuencia de nucleótidos de (i) comprende la secuencia de SEQ ID Nº 1, 51, 3, 4, 6, 7, 9, 10, 12, 13, 15, 16, 18, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 52, 54, 56, 68, 69, o una variante o un derivado de estas, y en donde la mut-HPPD comprende un polipéptido que difiere de una secuencia de aminoácidos de una HPPD de tipo silvestre en una o más posiciones correspondientes a las siguientes posiciones de SEQ ID Nº 2 o en dichas posiciones: el aminoácido que se encuentra en la posición 236 o que corresponde a ella no es alanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 411 o que corresponde a ella no es ácido glutámico; el aminoácido que se encuentra en la posición 320 o que corresponde a ella no es leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 403 o que corresponde a ella no es glicina; el aminoácido que se encuentra en la posición 334 o que corresponde a ella no es Leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 353 o que corresponde a ella no es Leucina; 4 el aminoácido que se encuentra en la posición 321 o que corresponde a ella no es prolina; el aminoácido que se encuentra en la posición 212 o que corresponde a ella no es valina; el aminoácido que se encuentra en la posición 407 o que corresponde a ella no es glicina; el aminoácido que se encuentra en la posición 377 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 412 o que corresponde a ella no es leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 278 o que corresponde a ella no es glutamina; el aminoácido que se encuentra en la posición 406 o que corresponde a ella no es lisina; el aminoácido que se encuentra en la posición 404 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 409 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 416 o que corresponde a ella no es isoleucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 250 o que corresponde a ella no es leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 267 o que corresponde a ella no es asparagina; el aminoácido que se encuentra en la posición 252 o que corresponde a ella no es serina; el aminoácido que se encuentra en la posición 265 o que corresponde a ella no es prolina; el aminoácido que se encuentra en la posición 371 o que corresponde a ella no es glicina; el aminoácido que se encuentra en la posición 375 o que corresponde a ella no es treonina; el aminoácido que se encuentra en la posición 309 o que corresponde a ella no es arginina; el aminoácido que se encuentra en la posición 279 o que corresponde a ella no es isoleucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 366 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 238 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 213 o que corresponde a ella no es valina; el aminoácido que se encuentra en la posición 215 o que corresponde a ella no es asparagina; el aminoácido que se encuentra en la posición 410 o que corresponde a ella no es serina; el aminoácido que se encuentra en la posición 254 o que corresponde a ella no es valina. Reivindicación 7: Un método para identificar una secuencia de nucleótidos que codifica una mut-HPPD que es resistente o tolerante a una heteroaril- o piridilcarboxamida; el método comprende: a) generar una colección de ácidos nucleicos que codifican mut-HPPD, b) cribar una población de los ácidos nucleicos que codifican mut-HPPD resultantes expresando cada uno de los ácidos nucleicos en una célula o planta y tratando la célula o planta con una heteroaril- o piridilcarboxamida, c) comparar los niveles de tolerancia a heteroaril- o piridilcarboxamida proporcionados por la población de ácidos nucleicos que codifican mut-HPPD con el nivel de tolerancia a heteroaril- o piridilcarboxamida proporcionado por un ácido nucleico de control que codifica HPPD; d) seleccionar al menos un ácido nucleico que codifica mut-HPPD que proporciona un nivel considerablemente mayor de tolerancia a heteroaril- o piridilcarboxamida en comparación con el proporcionado por el ácido nucleico de control que codifica HPPD. Reivindicación 10: Un ácido nucleico aislado que codifica la mut-HPPD, en donde la mut-HPPD comprende un polipéptido que difiere de la secuencia de aminoácidos de una HPPD de tipo silvestre en una o más posiciones correspondientes a las siguientes posiciones de SEQ ID Nº 2: el aminoácido que se encuentra en la posición 236 o que corresponde a ella no es alanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 411 o que corresponde a ella no es ácido glutámico; el aminoácido que se encuentra en la posición 320 o que corresponde a ella no es Leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 403 o que corresponde a ella no es glicina; el aminoácido que se encuentra en la posición 334 o que corresponde a ella no es Leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 353 o que corresponde a ella no es Leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 321 o que corresponde a ella no es prolina; el aminoácido que se encuentra en la posición 212 o que corresponde a ella no es valina; el aminoácido que se encuentra en la posición 407 o que corresponde a ella no es glicina; el aminoácido que se encuentra en la posición 377 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 412 o que corresponde a ella no es Leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 278 o que corresponde a ella no es glutamina; el aminoácido que se encuentra en la posición 406 o que corresponde a ella no es lisina; el aminoácido que se encuentra en la posición 404 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 409 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 416 o que corresponde a ella no es isoleucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 250 o que corresponde a ella no es Leucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 267 o que corresponde a ella no es asparagina; el aminoácido que se encuentra en la posición 252 o que corresponde a ella no es serina; el aminoácido que se encuentra en la posición 265 o que corresponde a ella no es prolina; el aminoácido que se encuentra en la posición 371 o que corresponde a ella no es glicina; el aminoácido que se encuentra en la posición 375 o que corresponde a ella no es treonina; el aminoácido que se encuentra en la posición 309 o que corresponde a ella no es arginina; el aminoácido que se encuentra en la posición 279 o que corresponde a ella no es isoleucina; el aminoácido que se encuentra en la posición 366 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 238 o que corresponde a ella no es fenilalanina; el aminoácido que se encuentra en la posición 213 o que corresponde a ella no es valina; el aminoácido que se encuentra en la posición 215 o que corresponde a ella no es asparagina; el aminoácido que se encuentra en la posición 410 o que corresponde a ella no es serina; el aminoácido que se encuentra en la posición 254 o que corresponde a ella no es valina. Reivindicación 12: Una célula vegetal transgénica transformada por un ácido nucleico HPPD de tipo silvestre o mut-HPPD, en donde la expresión del ácido nucleico en la célula vegetal da como resultado una mayor resistencia o tolerancia a un herbicida de heteroaril- o piridilcarboxamida, en comparación con una variedad de tipo silvestre de la célula vegetal; y en donde el ácido nucleico HPPD de tipo silvestre o mut-HPPD comprende una secuencia de polinucleótidos seleccionada del grupo que consiste en: a) un polinucleótido como se indica en SEQ ID Nº 1, 51, 3, 4, 6, 7, 9, 10, 12, 13, 15, 16, 18, 19, 21, 23, 25, 27, 29, 31, 33, 35, 37, 39, 41, 43, 45, 52, 54, 56, 68, 69, o una variante o un derivado de aquella; b) un polinucleótido como se muestra en SEQ ID Nº 47 ó 49, o una variante o un derivado de aquella; c) un polinucleótido que codifica un polipéptido como se indica en SEQ ID Nº 2, 5, 8, 11, 14, 17, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 53, 55, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 48, 50, o una variante o un derivado de aquel; d) un polinucleótido que comprende al menos 60 nucleótidos consecutivos de cualquiera de a) hasta c); y e) un polinucleótido complementari