Patent AR-084648-A1 (AR)
Title: Tratamiento de alta presion de interferones agregados
IPC: A61K38/21
Filed: 2011-12-29
Abstract: Métodos que pueden ser utilizados para realizar IFN-b no glicosilados más susceptibles al tratamiento en alta presión. Tales métodos incluyen, por ejemplo, el pre-tratamiento del IFN-b agregado que involucra solubilizar la proteína en una solución de bajo pH. Además se proveen composiciones farmacéuticas conteniendo interferones no glicosilados.Reivindicación 1: Un método de preparación de una composición de interferón no-glicosilado caracterizado porque comprende los pasos de: a) solubilizar el interferón agregado en un medio solubilizante con un pH menor que alrededor de 7; b) incorporar el interferón solubilizado en una mezcla de renaturalización; c) aplicar una cantidad de presión a la mezcla de renaturalización; y d) precipitar las impurezas de la mezcla de renaturalización utilizando precipitación ácida o por saturación de sales, en donde menos de alrededor del 5 por ciento del interferón no-glicosilado son agregados y no-monoméricos. Reivindicación 7: El método de la reivindicación 1 caracterizado porque el medio solubilizante además incluye al menos un químico caotrópico desnaturalizante de proteína. Reivindicación 8: El método de la reivindicación 7 caracterizado porque el químico caotrópico desnaturalizante de proteína comprende urea. Reivindicación 10: El método de la reivindicación 1 caracterizado porque la mezcla de renaturalización incluye al menos un agente oxidante/reductor que está adaptado para promover la formación de uniones disulfuro. Reivindicación 11: El método de la reivindicación 10 caracterizado porque el agente oxidante/reductor incluye un cisteína o un par cisteína/cistina. Reivindicación 20: Un método de preparación de una composición de interferón no-glicosilado, caracterizado porque comprende los paso de: a) solubilizar el interferón agregado en un medio solubilizante con un pH ácido y sustancialmente libre de un solvente orgánico y SDS; b) incorporar el interferón solubilizado en una mezcla de renaturalización; c) aplicar una cantidad de presión a la mezcla de renaturalización; d) precipitar impurezas dentro de la mezcla del paso c) utilizando precipitación ácida o por saturación de sales; e) remover dicho precipitado por medio de centrifugación y/o filtración; y f) purificar la proteína no precipitada; en donde menos que alrededor del 5 por ciento en peso de interferón no-glicosilado no eluye al mismo tiempo como IFN-b natural. Reivindicación 23: Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende: un interferón no glicosilado, en donde dicho interferón comprende menos que alrededor del 5 por ciento en peso de proteína agregada; uno o más tampones en una concentración de alrededor de 10 mM a alrededor de 50 mM proveyendo un pH de alrededor de 3.0 a alrededor de 5.0; y un agente modificador de tonicidad no iónica en una concentración de alrededor de 1% a alrededor de 15%. Reivindicación 29: La composición farmacéutica de la reivindicación 23, caracterizada porque dicho interferón es seleccionado del grupo que consiste de IFN-a, IFN-b, y IFN-g humanos o variantes de los mismos.