Patent ES-2396236-T3 (ES)
Title: Procedimiento de multicuantificación del colesterol de lipoproteína de baja densidad
Inventor: MATSUMOTO KEIKO
IPC: C12Q1/26
Filed: 2005-03-30
Granted: 2013-02-20
Abstract: Procedimiento para cuantificar in vitro el colesterol en la lipoproteína de baja densidad y el colesterol total enuna muestra biológica mediante una única medición que incluye una serie de tratamientos continuos hasta quese obtiene una serie de valores de medición, y que comprende: un primer paso de tratamiento de las lipoproteínas distintas de lipoproteínas de baja densidad en la muestrabiológica, en el que se permite que la esterasa de colesterol y la oxidasa de colesterol actúen sobrelipoproteínas distintas a la lipoproteína de baja densidad de la muestra biológica en presencia de unsurfactante derivado del óxido de polialquileno con un valor HLB de un mínimo de 13 y un máximo de 15,que actúa sobre lipoproteínas distintas de lipoproteína de baja densidad para generar peróxido dehidrógeno que no se convierte en un colorante de quinona en el primer paso y se retiene hasta un segundopaso; y un segundo paso para convertir el peróxido de hidrógeno obtenido en el primer paso en un colorante dequinona y tratar la lipoproteína de baja densidad restante con el uso de un surfactante derivado del óxido depolialquileno, que actúa al menos sobre la lipoproteína de baja densidad y no se utiliza en el primer paso, yconvertir el peróxido de hidrógeno generado en un colorante de quinona, caracterizado porque se permite que la esterasa de colesterol y la oxidasa de colesterol actúen sobre lalipoproteína de baja densidad de la muestra biológica en presencia de un surfactante derivado del óxido depolialquileno que actúa al menos sobre la lipoproteína de baja densidad y no se utiliza en el primer pasopara generar peróxido de hidrógeno, midiéndose el peróxido de hidrógeno generado, y caracterizado porque se miden simultáneamente las cantidades de colesterol presentes en la lipoproteínade baja densidad y el colesterol total presentes en la muestra biológica basándose en dos valores en losque la cantidad total de cambio en la absorbancia en el segundo paso sirve como valor de medición querefleja la cantidad de colesterol total presente y la cantidad de cambio de absorbancia en relación con lacantidad de peróxido de hidrógeno generado en el segundo paso, sirve como valor de medición que reflejala cantidad de colesterol presente en la lipoproteína de baja densidad, en el que un primer reactivo utilizado para el primer paso contiene 4-aminoantipirina o un compuestodonante de hidrógeno fenólico o anilínico, que es un compuesto reactivo que participa en la formación delcolorante de quinona, y un segundo reactivo utilizado para el segundo paso, que tiene compuestosreactivos no contenidos en el primer reactivo entre la 4-amonioantipirona, el compuesto donante dehidrógeno fenólico o anilínico y la peroxidasa, de modo que el colorante de quinona no se forma en elprimer paso, y se cuantifica el colesterol en la lipoproteína de baja densidad y el colesterol total a partir de lacantidad de colorante de quinona formado en el segundo paso, mediante una única medición que incluyeuna serie de tratamientos continuos hasta que se obtiene una serie de valores de medición.