Patent AR-076445-A1 (AR)
Title: Regeneracion de islotes pancreaticos y reversion de la diabetes por medio de la administracion in vivo de genes del factor de transcripcion de los islotes. composicion. metodo. vector. celula.
Inventor: GRAYBURN PAUL A
Filed: 2009-11-13
Abstract: Reivindicacion 1: Una composicion para la destruccion de microburbujas dirigida por ultrasonido en el páncreas, caracterizada porque comprende un complejo preensamblado de liposomas y ácidos nucleicos en microburbujas, donde el complejo preensamblado de liposomas y ácidos nucleicos comprende un gen NeuroD bajo el control de un promotor de insulina, que comprende uno o más genes reguladores que responden a la insulina, unidos operativamente a una region promotora de la insulina que comprende un fragmento genomico del promotor de la insulina que comprende una region no traducida 5', el exon 1, el intron 1 y el exon 2 del gen de la insulina, donde la destruccion de la microburbuja en un sitio blanco en el páncreas permite introducir el ácido nucleico en las células del páncreas en las que ha tenido lugar dicha destruccion dirigida por ultrasonido, donde las células en las que se ha incorporado el ácido nucleico expresan insulina en respuesta a los niveles elevados de glucosa en la sangre. Reivindicacion 3: La composicion de la reivindicacion 1, caracterizada porque también comprende uno o más genes seleccionados entre uno o más genes reguladores que responden a la insulina, unidos operativamente a una region promotora de la insulina seleccionada entre ngn3, GLP1, PDX1, Mafa, la betacelulina, Nkx2.2, Nkx6.1, PAX4, lsI1, la ciclina D2 (y otros miembros de la familia de la ciclina), CDK4 (y otros miembros de la familia de la quinasa dependiente de ciclina) y ARNpi contra inhibidores de la quinasa dependientes de ciclina, tales como p16 y otros miembros de la familia INK4 o p27 y otros miembros de la familia CIP/KIP. Reivindicacion 4: La composicion de la reivindicacion 1, caracterizada porque también comprende un agente que se co-administra con la composicion, donde el agente se selecciona entre un agente anti-apoptotico, un agente antiinflamatorio, un inhibidor de JNK, un GLP-1, un tacrolimus, un sirolimus, una anakinra, una poliamida de Dervin o combinaciones de éstos. Reivindicacion 5: Una composicion para regenerar células beta pancreáticas por medio de la destruccion de microburbujas dirigida por ultrasonido en el páncreas, caracterizada porque comprende microburbujas que comprenden NeuroD, donde las microburbujas comprenden lípidos que liberan NeuroD mediante la destruccion dirigida por ultrasonido en el páncreas. Reivindicacion 7: La composicion de la reivindicacion 5, caracterizada porque NeuroD comprende un gen NeuroD bajo el control de un promotor CUBI, RIP2.1, RIP3.1 o HIP3.1, y donde NeuroD se expresa en las células donde se desea la expresion por medio de la destruccion de microburbujas dirigida por ultrasonido. Reivindicacion 25: Un ácido nucleico aislado caracterizado porque comprende una region promotora de la insulina que comprende un fragmento genomico del promotor de la insulina que comprende una region no traducida 5', el exon 1, el intron 1 y el exon 2 del gen de la insulina, hacia el extremo 5' de uno o más genes que responden a al insulina. Reivindicacion 32: La composicion de la reivindicacion 26, caracterizada porque el complejo preensamblado de liposomas y ácidos nucleicos comprende 1,2- dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina y 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidiletanolamina glicerol en combinacion con un plásmido. Reivindicacion 35: Un vector caracterizado porque comprende un gen de hexoquinasa bajo el control de un promotor que comprende uno o más genes reguladores que responden a la insulina, unidos operativamente a una region promotora de la insulina que comprende un fragmento genomico del promotor de la insulina que comprende una region no traducida 5', el exon 1, el intron 1 y el exon 2 del gen de la insulina. Reivindicacion 41: Una célula caracterizada porque se le ha conferido la capacidad de responder a la insulina con un método que comprende inyectar en una célula un complejo preensamblado de liposomas y ácidos nucleicos en una microburbuja, donde el complejo preensamblado de liposomas y ácidos nucleicos comprende un gen NeuroD bajo el control de un promotor de insulina que comprende uno o más genes reguladores que responden a la insulina, unidos operativamente a una region promotora de la insulina que comprende un fragmento genomico del promotor de la insulina que comprende una region no traducida 5', el exon 1, el intron 1 y el exon 2 del gen de la insulina, donde la destruccion de la microburbuja en un sitio blanco en el páncreas permite introducir el ácido nucleico en las células del páncreas en las que ha tenido lugar dicha destruccion dirigida por ultrasonido, donde las células en las que se ha incorporado el ácido nucleico expresan insulina en respuesta a los niveles elevados de glucosa en la sangre.