Patent WO-2020171786-A1 (WO)
Inventor: BULUNUZ PALAZ ESRA
IPC: C05G3/00
Filed: 2019-12-17
Abstract: L'invention se rapporte aux sciences agricoles, à la biotechnologie, à la culture tissulaire et à un milieu nutritif, ainsi qu'à un nouveau milieu nutritif et à un procédé permettant la multiplication, notamment, de plantes tubéreuses à l'aide de la culture tissulaire et permettant la multiplication d'orchidées d'Anatolie. L'invention est caractérisée en ce qu'elle est constituée d'étapes de traitement comprenant le séchage des capsules sèches et brunies contenant des graines d'espèces de plante du type orchidées d'Anatolie dans la pénombre pendant une semaine ; l'obtention des graines par tremblement puis tamisage des capsules fendues à l'aide d'un tamis à maille 60 (10) ; après un passage dans un mélangeur et l'ajout de 15 g/l de sucrose, de 1,5 g/l de charbon actif, de 50 ml/l de jus d'ananas fraîchement pressé et de 100 g/l de pomme de terre fraîche à des produits chimiques contenant 120 mg/l de NH4NO3, 75 mg/l de MgS04.7H20, 80 mg/l de KH2PO4, 85 mg/l de Ca(N03)2.4H20, 30 mg/l de FeS04.4H20, le maintien de la valeur de pH à 5,7 avec du NaOH 1 N ou du HCI 1 N, l'ajout de 6,5 g/l d'agar, la stérilisation en autoclave à 121°C sous pression atmosphérique de 1,2 pendant 15 minutes et l'obtention du milieu nutritif (20) ; après le conditionnement des graines obtenues par 2 mg dans un papier filtre dégrossisseur, leur séjour dans une solution de javel industrielle à 25 % avec 1 à 2 gouttes de Tween 20 afin de préserver la stérilisation superficielle des graines emballées (30) ; le rinçage des graines à 3 reprises pendant 5 minutes avec de l'eau claire stérile (40) ; le placement des graines en boîtes de Pétris en vue de leur pré-séchage au sein d'une cabine stérile, des papiers filtres dégrossisseurs stériles étant placés dans les boîtes de Pétris et l'obtention de graines stérilisées (50) ; l'ouverture des emballages contenant des graines stérilisées au moyen d'un dispositif de perçage et d'une pince stériles et l'ensemencement des graines contenues dans les emballages dans le milieu nutritif (60) ; le placement des graines d'orchidées d'Anatolie en culture in vitro et leur incubation sous lumière blanche fluorescente 40 pE/m^s1 avec une durée d'éclairement 18/6 (jour/nuit) en chambre climatisée à 22±2 °C (70) ; la mesure de valeurs de germination, de protocormes et de croissance de plante des graines des espèces d'orchidées d'Anatolie (80) ; le placement des protocormes obtenus en nouvelle sous-culture avec le même milieu nutritif afin de les transformer en plantes (90) ; afin de garantir la formation de racines et de tubercules chez les protocormes obtenus transformés en plantes et de limiter au minimum la mort des plantes pendant le transfert en environnements extérieurs, le placement des semis en sous-culture finale pour leur permettre de pousser suffisamment pour qu'ils puissent être transférés en environnements extérieurs (100) ; l'extraction des semis enracinés de leur milieu nutritif et le lavage de leurs racines à l'eau du robinet afin de les nettoyer de leur milieu nutritif à l'agar (110) ; le transfert des semis avec leurs racines lavées en godets contenant de la terre de jardin, de la tourbe et des fibres de coco selon des rapports de 1:1:1 (120) ; la conservation des jeunes plants d'orchidées en serres d'acclimatation où ils seront multipliés afin de préserver leur humidité relative (130) ; le maintien de l'humidité intérieure de la serre entre 80-90 % (140) ; le maintien de la température intérieure de la serre à 21-22 °C (150) ; le maintien de la durée d'éclairement à 16/8 (jour/nuit) les jours où l'ensoleillement laisse à désirer (160) ; environ 10 à 12 jours après que les jeunes plants d'orchidées ont atteint leur maturité, la diminution du processus de multiplication et la baisse de l'humidité relative à 70 %, dans un premier temps, puis à 50 % (170) ; la sortie de tous les godets des serres d'acclimatation au bout de trois semaines et l'achèvement du processus de transfert (180).