Patent ES-2321827-T3 (ES)
Title: Gen de streptomyces avermitilis que rige la relacion de avermectinas b2-b1.
Inventor: STUTZMAN-ENGWALL KIM J
IPC: C12N1/21
Filed: 2003-01-31
Granted: 2009-06-12
Abstract: Una molécula de polinucleótido que comprende una secuencia de nucleótidos que, por lo demás, es la misma que el alelo aveC de Streptomyces avermitilis, la secuencia del plásmido pSE186 (ATCC 209604) codificadora del producto génico AveC de S. avermitilis o la secuencia de nucleótidos del marco de lectura abierta (ORF) aveC de S. avermitilis según se presenta en la Figura 1 (SEQ ID Nº:1) o una variante de la misma, que incluye uno o más cambios silenciosos a la secuencia de nucleótidos según la degeneración del código genético, pero secuencia de nucleótidos que comprende, adicionalmente, mutaciones que codifican una combinación de sustituciones de aminoácidos en los residuos aminoácido a las posiciones de aminoácidos de SEQ ID Nº:2, de modo que células de la cepa ATCC 53692 de S. avermitilis, en las que el alelo aveC de tipo salvaje ha sido inactivado y que expresan la molécula de polinucleótidos que comprende la secuencia de nucleótidos mutada son capaces de producir una relación de clase 2:1 de avermectinas que está reducida en comparación con la relación producida por células de la cepa ATCC 53692 de S. avermitilis que, en su lugar, expresan únicamente el alelo aveC de tipo salvaje, en donde, cuando las avermectinas de clase 2:1 son avermectinas ciclohexilo B2:ciclohexilo B1, la relación de avermectinas de clase 2:1 es 0,2:1 o menor, y donde las combinaciones de sustituciones de aminoácidos comprenden sustituciones en ambos D48 y G179, y donde la combinación de sustituciones de aminoácidos comprende una combinación seleccionada del grupo que consiste en: (da) S41G, D48E, A61T, R71L, A89T, L136M, S138T, A139T, T149S, G179S, V196A, E238D, F278L, P289L; (db) S41G, D48E, A61T, R71L, A89T, L136M, S138T, A139T, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, P289L; (dc) D48E, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, E238D, I280V; (dd) D48E, A61T, R71L, W110L, T149S, G179S, V196A, L206M, E238D, V271A, I280V; (de) D48E, A61T, R71L, A89T, L136M, S138T, A139T, T149S, G179S, V196A, E238D, H279Q, P289L; (df) D48E, A61T, R71L, A89T, L136M, S138T, A139T, T149S, G179S, V196A, E238D, G287E, P289Q; (dg) D48E, A61T, R71L, A89T, L136M, S138T, A139T, T149S, G179S, V196A, E238D, P289L; (dh) D48E, A61T, R71L, A89T, A139T, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, V285G, P289L; (di) Q38R, D48E, A61T, R71L, L87V, A89T, L136M, S138T, A139T, T149S, G179S, V196A, E238D, P289L; (dj) D48E, A61T, L87V, A89T, W110L, S138T, A139T, T149S, G179S, V196A, E238D, P289L; (dk) D48E, A61T, R71L, A89T, L136M, S138T, A139T, T149S, G179S, V196A, E238D, P289L; (dl) D48E, A89T, L136P, K154E, G179S, S231L, E238D; (ea) D48E, A61T, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V; (eb) D48E, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, E238D, I280V; (ec) Q36P, D48E, A61T, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V; (ed) D48E, A61T, R71L, A89T, A139T, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V; (ee) V2M, D48E, A61T, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V; (ef) D48E, A61T, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V, A302T; (eg) D48E, R71 L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, E238D, P289L; (eh) D48E, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, E238D, A302T; (ei) D48E, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V; (ej) D48E, A61T, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D; (ek) V2M, D48E, R71L, A89T, L136P, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V; (el) D48E, A61T, R71L, A89T, L136P, T149S, R162H, F176C, G179S, V196A, E238D, I280V; (em) D48E, R71L, A89T, V120A, L136P, T149S, K154E, G179S, S231L, E238D; (en) D48E, R71L, A89T, V120A, L136P, T149S, F176C, G179S, S231L, E238D, I280V; (eo) D48E, A61T, R71L, L87V, A89T, A139T, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, V285G, P289L; (ep) D48E, A61T, R71L, L87V, A89T, S90N, A139T, T149S, F176C, G179S, V196A, E238D, V285G, P289L; (eq) D48E, R71L, A89T, L136P, K154E, G179S, S231L, E238D; (er) D48E, R71L, A89T, V120A, L136P, K154E, F176C, G179S, S231L, E238D; y (es) D48E, R71L, A89T, V120A, L136P, T149S, K154E, F176C, G179S, S231L, E238D.