Patent AR-124513-A2 (AR)
Title: Proteínas de unión de tipo anticuerpo con región variable dual que tienen orientación de la región de unión con entrecruzamiento
Inventor: BAURIN NICOLAS
IPC: C12P21/02
Filed: 2021-12-23
Abstract: La invención proporciona proteínas de unión de tipo anticuerpo que comprenden cuatro cadenas polipeptídicas que forman cuatro sitios de unión al antígeno, donde cada par de polipéptidos que forman una proteína de unión de tipo anticuerpo posee dominios variables duales que tienen una orientación entrecruzada. La invención también proporciona métodos para elaborar tales proteínas de unión de tipo antígeno.  Reivindicación 1: Una proteína de unión de tipo anticuerpo caracterizada porque comprende cuatro cadenas polipeptídicas que forman cuatro sitios de unión al antígeno, donde dos cadenas polipeptídicas tienen una estructura representada por la fórmula: VL₁-L₁-VL₂-L₂-CL [I] y dos cadenas polipeptídicas comprenden una estructura representada por la fórmula: VH₂-L₃-VH₁-L₄-CH₁-Fc [II] donde: VL₁ es un primer dominio variable de la cadena ligera de la inmunoglobulina; VL₂ es un segundo dominio variable de la cadena ligera de la inmunoglobulina; VH₁ es un primer dominio variable de la cadena pesada de la inmunoglobulina; VH₂ es un segundo dominio variable de la cadena pesada de la inmunoglobulina; CL es un dominio constante de la cadena ligera de la inmunoglobulina; CH₁ es un dominio constante de la cadena pesada CH₁ de la inmunoglobulina; Fc es una región bisagra de inmunoglobulina y los dominios constantes de cadena pesada de inmunoglobulina CH₂ y CH₃ derivan de un dominio Fc; y L₁, L₂, L₃ y L₄ son conectores aminoacídicos, donde L₁, L₂, L₃ y L₄ tienen una longitud de aminoácidos de acuerdo con una de las siguientes combinaciones: L₁ = 0, L₂ = 2, L₃ = 2, L₄ = 4; L₁ = 0, L₂ = 2, L₃ = 4, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 1, L₃ = 2, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 0, L₄ = 0; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 0, L₄ = 2; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 0, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 1, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 12, L₄ = 12; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 15, L₄ = 15; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 2, L₄ = 2; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 2, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 2, L₄ = 7; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 4, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 4, L₄ = 7; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 6, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 6, L₄ = 7; L₁ = 1, L₂ = 2, L₃ = 9, L₄ = 12; L₁ = 1, L₂ = 3, L₃ = 2, L₄ = 4; L₁ = 1, L₂ = 4, L₃ = 2, L₄ = 4; L₁ = 2, L₂ = 2, L₃ = 2, L₄ = 4; L₁ = 5, L₂ = 5, L₃ = 1, L₄ = 2; L₁ = 7, L₂ = 3, L₃ = 1, L₄ = 2; L₁ = 7, L₂ = 5, L₃ = 1, L₄ = 2; L₁ = 10, L₂ = 3, L₃ = 1, L₄ = 2; L₁ = 10, L₂ = 5, L₃ = 1, L₄ = 2; L₁ = 7, L₂ = 5, L₃ = 2, L₄ = 0; L₁ = 5, L₂ = 5, L₃ = 2, L₄ = 2; L₁ = 7, L₂ = 5, L₃ = 2, L₄ = 2; L₁ = 10, L₂ = 3, L₃ = 2, L₄ = 2; L₁ = 10, L₂ = 5, L₃ = 2, L₄ = 2; L₁ = 10, L₂ = 6, L₃ = 6, L₄ = 0; L₁ = 12, L₂ = 6, L₃ = 6, L₄ = 0; L₁ = 10, L₂ = 8, L₃ = 8, L₄ = 0; L₁ = 12, L₂ = 6, L₃ = 8, L₄ = 0; L₁ = 12, L₂ = 8, L₃ = 8, L₄ = 0, o L₁ = 12, L₂ = 6, L₃ = 8, L₄ = 2; y donde los polipéptidos de fórmula [I] y los polipéptidos de fórmula [II] forman un par de cadena ligera-cadena pesada entrecruzadas. Reivindicación 4: La proteína de unión de tipo anticuerpo de la reivindicación 3, caracterizada porque las una o más dianas antigénicas se seleccionan del grupo que consiste en B7.1, B7.2, BAFF, BlyS, C3, C5, CCL11 (eotaxina), CCL15 (MIP-1d), CCL17 (TARC), CCL19 (MIP3b), CCL2 (MCP-1), CCL20 (MIP-3a), CCL21 (MIP-2), SLC, CCL24 (MPIF-2 / eotaxina 2), CCL25 (TECK), CCL26 (eotaxina 3), CCL3 (MIP-1a), CCL4 (MIP-1b), CCL5 (RANTES), CCL7 (MCP-3), CCL8 (mcp-2), CD3, CD19, CD20, CD24, CD40, CD40L, CD80, CD86, CDH1 (cadherina E), Quitinasa, CSF1 (M-CSF), CSF2 (GM-CSF), CSF3 (GCSF), CTLA4, CX3CL1 (SCYD1), CXCL12 (SDF1), CXCL13, EGFR, FCER1A, FCER2, HER2, IGF1R, IL-1, IL-12, IL13, IL15, IL17, IL18, IL1A, IL1B, IL1F10, IL2, IL4, IL6, IL7, IL8, IL9, IL12/23, IL22, IL23, IL25, IL27, IL35, ITGB4 (integrina b 4), LEP (leptina), MHC clase II, TLR2, TLR4, TLR5, TNF, TNFa, TNFSF4 (ligando OX40), TNFSF5 (ligando CD40), receptores de tipo Toll, TREM1, TSLP, TWEAK, XCR1 (GPR5 / CCXCR1), DNGR-1 (CLEC91) y HMGB1.