Patent AR-082317-A1 (AR)
Title: Metodo de inmunodiagnostico magnetico y kit para la demostracion de complejos anticuerpo/antigeno en determinacion de grupo sanguineo y fenotipificacion de eritrocitos
IPC: G01N33/49
Filed: 2011-07-21
Abstract: Reivindicación 1: Un método para la demostración de un complejo específico formado haciendo reaccionar un anticuerpo anti-antígeno del grupo sanguíneo o fenotipo, presente en la solución, y un antígeno del grupo sanguíneo o fenotipo portado por un eritrocito, en donde dicho eritrocito está unido a una partícula magnética, donde la reacción se lleva a cabo en un reactor con la parte superior abierta y la base sellada, cuyo diámetro disminuye al menos en el área cercada a la base, de modo tal que forma una pared inclinada que está al menos parcialmente recubierta con una anti-inmunoglobulina o con cualquier otro compuesto capaz de unirse al anticuerpo de dicho complejo formado, donde dicho método consiste en varios pasos: a) antes del contacto entre la suspensión de partículas magnéticas que porta los eritrocitos y la solución que probablemente contenga anticuerpos anti-antígeno del grupo sanguíneo o fenotipo: llenar el reactor con una solución viscosa de modo de cubrir al menos parte de la pared inclinada del reactor, b) poner en contacto la solución viscosa contenida en el reactor de la solución que contiene o que probablemente contenga dicho anticuerpo con la suspensión de partículas magnéticas que porta los eritrocitos; c) incubar el reactor durante el tiempo necesario para la formación del complejo entre las partículas magnéticas que portan los eritrocitos y los anticuerpos anti-antígeno del grupo sanguíneo o fenotipo probablemente contenido en la solución y reconocer específicamente dichos antígenos del grupo sanguíneo o fenotipo portado por los eritrocitos; d) aplicar un campo magnético a dicho reactor y agitar el reactor, de modo tal que las partículas magnéticas sean atraídas hacia el fondo y/o la pared inclinada del reactor; y e) leer, a simple vista y/o con cualquier otro sistema de lectura apropiado, la imagen obtenida en el fondo del reactor y/o en la pared inclinada del reactor recubierta con dicha anti-inmunoglobulina o con cualquier otro compuesto capaz de unirse al anticuerpo, donde esta imagen obtenida hace posible demostrar la presencia o ausencia de la formación de un complejo anticuerpo/antígeno específico del grupo o fenotipo humano, caracterizado porque dichas partículas magnéticas que portan los eritrocitos son partículas magnéticas que han sido previamente recubiertas con un anticuerpo anti-glicoforina A (anti-GPA) y porque dicho eritrocito está unido a dicha partícula magnética por una interacción de tipo anticuerpo/antígeno.Reivindicación 24: Un método para la determinación de grupo sanguíneo y/o fenotipificación, en donde dicho método comprende los pasos de: a) preparar una suspensión de partículas magnéticas recubiertas con anti-GPA, donde dichas partículas magnéticas están en suspensión en un diluyente, o disponer de dicha suspensión ya preparada, b) i) poner en contacto la suspensión de dichas partículas magnéticas recubiertas con anti-GPA con una suspensión de eritrocitos de los que se desea determinar el grupo sanguíneo y/o el fenotipo, ii) poner en contacto, en un reactor, la suspensión de partículas magnéticas que portan los eritrocitos formados o en formación en el paso b) con una prueba sérica que contiene un anticuerpo de especificidad conocida, iii) agitar o revolver; c) incubar el reactor durante el tiempo necesario para la formación del complejo entre las partículas magnéticas que portan los eritrocitos y la prueba sérica; d) aplicar un campo magnético a dicho reactor y agitar el reactor, de modo tal que las partículas magnéticas sean atraídas hacia el fondo y/o la pared inclinada del reactor; y e) leer, a simple vista y/o con cualquier otro sistema de lectura apropiado, la imagen obtenida en el fondo del reactor y/o en la pared inclinada del reactor, donde esta imagen obtenida hace posible demostrar la presencia o ausencia de la formación de un complejo anticuerpo/antígeno específico del grupo o fenotipo humano. Reivindicación 51: Un kit para la demostración de un complejo específico formado por la reacción entre un anticuerpo anti-antígeno del grupo sanguíneo o fenotipo, presente en la solución, y un antígeno del grupo sanguíneo o fenotipo portado por un eritrocito, en particular para realizar una prueba IAT o de coincidencia cruzada o una prueba directa de Coombs, o para la determinación del grupo sanguíneo y/o fenotipificación, caracterizado porque incluye: un reactivo que contiene una suspensión de partículas magnéticas recubiertas con anti-GPA.