Patent AR-125459-A1 (AR)
Title: Transportadores abc quiméricos y métodos de rastreo
Inventor: PAYANDEH JIAN MEHR
IPC: A61K31/00
Filed: 2022-04-26
Abstract: La presente divulgación se refiere a proteínas transportadoras ABC quiméricas y métodos de cribado de moléculas que se unen a la cara periplasmática, extracelular y/o luminal de una proteína transportadora ABC mediante el uso de los transportadores ABC quiméricos. Por ejemplo, en algunas formas de realización, los métodos de cribado implican proporcionar un transportador ABC quimérico, en donde una o más regiones de la cara periplasmática, extracelular y/o luminal del transportador ABC se sustituyen por una o más regiones equivalentes de la cara periplasmática, extracelular y/o luminal de un transportador ABC diferente, y seleccionar moléculas que se unen al transportador ABC, pero que no se unen al transportador ABC quimérico. La divulgación también se refiere a moléculas que se unen a la cara periplasmática, extracelular y/o luminal de una proteína transportadora ABC, por ejemplo, identificada en tales cribados.  Reivindicación 1: Un método para determinar si una molécula de prueba se une a la cara periplasmática, extracelular y/o luminal de un transportador ABC parental, que comprende: a) proporcionar un transportador ABC quimérico, en donde una o más regiones de la cara periplasmática, extracelular y/o luminal del transportador ABC parental se sustituyen por una o más regiones equivalentes de la cara periplasmática, extracelular y/o luminal de un transportador ABC diferente; y b) poner en contacto el transportador ABC quimérico con una molécula que se une al transportador ABC parental en una conformación orientada hacia afuera, en donde se determina que la molécula de prueba se une a la cara periplasmática, extracelular y/o luminal del transportador ABC parental si la molécula de prueba no se une al transportador ABC quimérico. Reivindicación 27: Una molécula identificada mediante el método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 26, en donde la molécula se une al transportador ABC parental con una KD de 20 mM o menos. Reivindicación 44: Un péptido de macrociclo G1118 (SEQ ID Nº 1 o 2), G1119 (SEQ ID Nº 10) o G1122 (SEQ ID Nº 11). Reivindicación 46: Una molécula que compite con el macrociclo G1118, G1119 y/o G1122 por la unión a la cara periplasmática de un transportador ABC parental, cuando el transportador ABC parental queda atrapado en una conformación orientada hacia afuera mediante tratamiento con Mg²⁺, ATP y vanadato. Reivindicación 50: Un método para elaborar un transportador ABC quimérico, que comprende reemplazar al menos un bucle que mira hacia el espacio periplasmático, extracelular o luminal y hasta 50% de los segmentos transmembrana en cualquier lado del bucle de un transportador ABC parental por regiones equivalentes de un transportador ABC diferente. Reivindicación 65: Un transportador ABC quimérico, en donde al menos un bucle que mira hacia el espacio periplasmático, extracelular o luminal y hasta 50% de los segmentos transmembrana en cualquier lado del bucle de un transportador ABC parental se reemplazan por regiones equivalentes de un transportador ABC diferente. Reivindicación 110: Un péptido que comprende la siguiente secuencia de aminoácidos: ClacF-X¹-Y-Bph-MeF-X²-V-C (SEQ ID Nº 19), en donde: i. X¹ es V, S, Y, W, Dopa, L, V, A, R, K o D; y ii. X² es R, V, Dopa o Y; en donde ClacF es N-cloroacetil L-fenilalanina, Bph es ácido (S)-3-([1,1-bifenil]-4-il)-2-aminopropanoico, Dopa es L-3,4-dihidroxifenilalanina y MeF es N-metil-L-fenilalanina.