Patent AR-127015-A1 (AR)
Title: Procesos para la generación de productos de til utilizando atenuación génica de pd-1 mediante talen
Inventor: VEERAPATHRAN ANAND
IPC: C12N5/0781
Filed: 2022-09-08
Abstract: La presente invención proporciona métodos mejorados para expandir TIL y producir poblaciones terapéuticas de TIL, que incluyen métodos para editar genéticamente al menos una parte de los TIL para mejorar su eficacia terapéutica. Los métodos llevan a una mejor eficacia, mejor fenotipo y mayor salud metabólica de los TIL en un período de tiempo más breve, a la vez que permiten menor contaminación microbiana así como menores costos. Estos TIL son útiles en regímenes de tratamiento terapéutico. Reivindicación 1: Un método para preparar linfocitos infiltrantes del tumor (TIL) expandidos que comprende: (a) obtener y/o recibir una primera población de TIL de un tejido tumoral resecado de un sujeto o paciente; (b) cultivar la primera población de TIL en un primer medio de cultivo celular que comprende IL-2 durante aproximadamente 3 - 9 días para producir una segunda población de TIL; (c) activar la segunda población de TIL usando anticuerpos o microesferas agonistas anti-CD3, o anticuerpos o microesferas agonistas anti-CD3 y anti-CD28, durante 1 - 7 días, para producir una tercera población de TIL; (d) editar genéticamente al menos una parte de la tercera población de TIL, para producir una cuarta población de TIL; y (e) cultivar la cuarta población de TIL en un segundo medio de cultivo celular que comprende células presentadoras de antígeno (APC), OKT-3 e IL-2 durante aproximadamente 5 - 15 días, para producir un número ampliado de TIL. Reivindicación 4: Un método para expandir los linfocitos infiltrantes del tumor en una población terapéutica de TIL, donde el método comprende los pasos de: (a) obtener y/o recibir una primera población de TIL a partir de una muestra de tejido tumoral producido por resección quirúrgica, biopsia con aguja, biopsia con aguja gruesa, biopsia con aguja pequeña u otros medios para obtener tejido tumoral de un paciente o sujeto; (b) agregar el tejido tumoral en un sistema cerrado y realizar una primera expansión cultivando la primera población de TIL en un primer medio de cultivo celular que comprende IL-2 para producir una segunda población de TIL, en donde la primera expansión se realiza en un recipiente cerrado que proporciona una primera área de superficie permeable a los gases, en donde la primera expansión se realiza durante aproximadamente 3 - 9 días para obtener la segunda población de TIL; (c) activar la segunda población de TIL usando anticuerpos o microesferas agonistas CD3, o anticuerpos o microesferas agonistas CD3 y CD28, durante 1 - 7 días, para producir una tercera población de TIL; (d) editar genéticamente al menos una parte de la tercera población de TIL, para producir una cuarta población de TIL; (e) realizar una segunda expansión cultivando la cuarta población de TIL en un segundo medio de cultivo celular que comprende IL-2, OKT-3 y células presentadoras de antígeno (APC), para producir una quinta población de TIL, en donde la segunda expansión se realiza durante aproximadamente 5 - 15 días para obtener la quinta población de TIL, en donde la segunda expansión se realiza en un recipiente cerrado que proporciona una segunda área de superficie permeable a los gases, en donde la quinta población de TIL es una población terapéutica de TIL, y (f) extraer la población terapéutica de TIL obtenida en el paso (e), en donde cada uno de los pasos (b) a (f) se realiza en un sistema cerrado y estéril, y en donde la transición del paso (b) al paso (c), la transición del paso (c) al paso (d), la transición del paso (d) al paso (e) y/o la transición del paso (e) al paso (f) ocurre sin abrir el sistema. Reivindicación 167: Una población modificada genéticamente de linfocitos infiltrantes de tumores (TIL) que comprende una población expandida de TIL en donde la expresión de al menos una proteína se modula mediante un editor de genes transferido a al menos una parte de la población expandida de TIL.