Patent KR-20050021001-A (KR)
IPC: C07K16/28
Filed: 2003-06-12
Abstract: 본 발명의 목적은 인슐린-유사 성장인자-I 수용체에 특이적으로 결합하고, 수용체를 길항함으로써 수용체의 세포활성을 억제하고, 또한 수용체에 대해서는 효능적 활성이 실질적으로 없는 항체, 항체 단편들 및 항체 유도물들을 제공하는데 있다. 
     그리하여, 제 1 실시예에서, 경쇄 가변영역 및 중쇄 가변영역 둘 다의 아미노산 서열, 경쇄 및 중쇄 가변영역을 위한 유전자의 cDNA 서열, CDR(상보성을 결정하는 영역)의 동일성, 표면 아미노산의 동일성, 그리고 유전자재조합형에서의 발현 수단을 고려하여 여기서 완전히 특징지어진 설치류 항체 EM164가 제공된다. 
     제2실시예에서, 항체 EM164의 재표면화 또는 인체에 적합화된 이형체가 제공된다. 항체 EM164에서 표면이 노출된 항체 잔기 또는 항체단편들은 경쇄 및 중쇄 둘 다에서 대체되어 공지의 인간 항체표면에 더욱 유사하게 된다. 이러한 인체에 적합화된 항체들은, 설치류 EM164에 비하여, 치료제 또는 진단제로서 유용성이 증가될 수 있다. 항체 EM164의 인체에 적합화된 이형체는 또한 여기서, 경쇄 및 중쇄 가변영역 둘 다의 그들 각각의 아미노산 서열, 경쇄 및 중쇄 가변영역에 대한 유전자의 DNA 서열, CDR의 동일성, CDR 표면 아미노산의 동일성, 그리고 유전자 재조합형에서 그것들의 발현수단에 대한 설명을 고려하여 완전히 특징지어진다. 
     제3실시예에서, 예를들어, 혈청, 인슐린 유사 성장인자-I과 인슐린 유사 성장인자-II와 같은 성장 자극제의 존재하에서 약 80% 이상 암세포의 성장을 억제할 수 있는 항체가 제공된다. 
     제4실시예에서, SEQ ID NOS: 1-3 각각에 의해 발현되는 아미노산 서열을 갖는 CDR을 포함하는 중쇄를 갖는 항체 또는 항체 단편이 제공되고: 
     SYWMH             (SEQ ID NO:1),  
     EINPSNGRTNYNEKFKR       (SEQ ID NO:2), 
     GRPDYYGSSKWYFDV         (SEQ ID NO:3); 
     SEQ ID NOS: 4-6에 의해 발현되는 아미노산 서열을 갖는 CDR을 포함하는 경쇄를 갖는 항체 또는 항체 단편이 제공된다: 
      RSSQSIVHSNVNTYLE       (SEQ ID NO:4); 
      KVSNRFT                (SEQ ID NO:5); 
      FQGSHVPPT              (SEQ ID NO:6). 
     제5실시예에서, SEQ ID NO:7에 의해 발현되는 아미노산 서열과 적어도 90% 서열 상동성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 중쇄를 가지는 항체가 제공된다: 
     QVQLQQSGAELVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEINPSNGRTNYNEKFKRKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYFARGRPDYYGSSKWYFDVWGAGTTVTVSS (SEQ ID NO:7). 
     이와 유사하게, SEQ ID NO:8에 의해 발현되는 아미노산 서열과 적어도 90% 서열 상동성을 공유하는 아미노산 서열을 갖는 경쇄을 갖는 항체가 제공된다: 
     DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR (SEQ ID NO:8). 
     제6실시예에서, SEQ ID NOS:- 9-12 중 하나와 대응하는 아미노산 서열을 갖는 인체에 적합화된 또는 재표면화된 경쇄 가변영역을 갖는 항체가 제공된다. 
     DVVMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPRLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR (SEQ ID NO:9); 
     DVLMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRESGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR (SEQ ID NO:10) ; 
     DVLMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPRLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR (SEQ ID NO:11); 또는 
     DVVMTQTPLSLPVSLGDPASISCRSSQSIVHSNVNTYLEWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLRISRVEAEDLGIYYCFQGSHVPPTFGGGTKLEIKR (SEQ ID NO:12). 
     위와 유사하게, SEQ ID NO:13에 대응하는 아미노산 서열을 갖는 인체에 적합화된 또는 재표면화된 중쇄 가변영역을 갖는 항체가 제공된다:  
     QVQLVQSGAEVVKPGASVKLSCKASGYTFTSYWMHWVKQRPGQGLEWIGEINPSNGRTNYNQKFQGKATLTVDKSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYFARGRPDYYGSSKWYFDVWGQGTTVTVSS  (SEQ ID NO:13). 
     제7실시예에서, 본 발명에 의해 향상된 특성을 갖는 항체 또는 항체 단편들이 제공된다. 예를 들어, IGF-I 수용체에 대해 향상된 친화성을 갖는 항체 또는 항체 단편들이 본 발명에 의한 항체 또는 항체 단편들의 친화성 성숙에 의해 제공된다. 
     또한 본 발명은 상기 항체들의 접합체를 제공하는데 있어, 세포독성인자가 본 발명의 항체에 혹은 에피토프에 결합된 항체단편에 직접 또는 쪼갤 수 있거나 또는 쪼갤 수 없는 링크를 경유하여 공유적으로 결합된다. 더욱 바람직하게는, 세포독성인자는 탁솔(taxol), 마이탄시노이드(maytansinoid), CC-1065 또는 CC-1065 유사체이다. 
     또한 본 발명은 연구 또는 진단 관련 응용에서 사용하기 위해 라벨이 붙여진 항체와 그들의 단편을 제공한다. 더욱 바람직하게는, 표지는 방사성동위원소표지(radiolabel), 형광표지(flurophore), 흡광표지(chromophore),영상인자 또는 금속이온이다. 
     상기 표지된 항체 또는 단편들이 암을 지닌 것으로 보이는 대상에게 투여되고, 대상 체내에서 표지의 분포가 측정되거나 관찰되는 진단방법이 제공된다. 
     제8실시예에서, 본 발명은 본 발명에서의 항체, 항체단편 또는 항체 접합체를 다른 세포독성인자 또는 치료 인자와 함께 또는 단독적으로 투여함으로써 암을 가지고 있는 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 암은 유방암, 결장암, 난소암, 악성뼈종양,자궁경부암, 전립선암,폐암,윤활막암종,췌장암, 또는 IGF-I 수용체 표지가 여전히 높게 측정되는 다른 암들의 하나 또는 다수가 될 수 있다.