Patent AR-123948-A1 (AR)
Title: ANTICUERPOS ANTI-TNF-a VECTORIZADOS PARA INDICACIONES OCULARES
Inventor: WANG XU
IPC: C07K16/24
Filed: 2021-10-28
Abstract: Se describen composiciones y métodos para el suministro de un anticuerpo monoclonal terapéutico modificado de manera postraducción completamente humano, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une a TNF-a, IL6 o IL6-R, a un sujeto humano para el tratamiento de una indicación ocular, en particular, la uveítis no infecciosa. La secuencia de nucleótidos que codifica el anticuerpo se suministra en un vector de rAAV que se dirige a las células del tejido ocular para la expresión del transgén.  Reivindicación 1: Una composición farmacéutica para el tratamiento de uveítis no infecciosa en un sujeto humano que lo necesita, que comprende un vector de virus adenoasociado (AAV) que tiene: (c) una cápside viral que tiene un tropismo para células de tejido ocular; y (d) un genoma artificial que comprende un casete de expresión flanqueado por repeticiones terminales invertidas (ITR) de AAV, en donde el casete de expresión comprende un transgén que codifica una cadena pesada y una cadena ligera de un mAb anti-TNFa, mAb anti-IL6, o mAb anti-IL6R sustancialmente de longitud completa o de longitud completa, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, operativamente unido a una o más secuencias reguladoras que promueven la expresión del transgén en células de tejido ocular humano; en donde dicho vector AAV se formula para la administración subretinal, intravítrea, intranasal, intracameral, supracoroidea, o sistémica a dicho sujeto humano. Reivindicación 22: Una composición que comprende un vector de virus adenoasociado (AAV) que tiene: a. una cápside de AAV viral, que es opcionalmente por lo menos 95% idéntica a la secuencia de aminoácidos de AAV serotipo 1 (AAV1), serotipo 2 (AAV2), serotipo 3 (AAV3), serotipo 3B (AAV3B), serotipo 4 (AAV4), serotipo 5 (AAV5), serotipo 6 (AAV6), serotipo 7 (AAV7), serotipo 8 (AAV8), serotipo rh8 (AAVrh8), serotipo 9 (AAV9), serotipo 9e (AAV9e), serotipo rh10 (AAVrh10), serotipo rh20 (AAVrh20), serotipo rh39 (AAVrh39), serotipo hu.37 (AAVhu.37), serotipo rh73 (AAVrh73), o serotipo rh74 (AAVrh74), serotipo hu51 (AAV.hu51), serotipo hu21 (AAV.hu21), serotipo hu12 (AAV.hu12), o serotipo hu26 (AAV.hu26); y b. un genoma artificial que comprende un casete de expresión flanqueado por repeticiones terminales invertidas (ITR) de AAV, en donde el casete de expresión comprende un transgén que codifica una cadena pesada y una ligera de un mAb anti-TNFa, anticuerpo anti-IL6 o anticuerpo anti-IL6R sustancialmente de longitud completa o de longitud completa, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, operativamente unido a una o más secuencias reguladoras que promueven la expresión del transgén en células de tejido ocular humano; c. en donde el transgén codifica una secuencia de señal en el extremo N-terminal de la cadena pesada y la cadena ligera de dicho mAb que dirige la secreción y modificación postraducción de dicho mAb en células de tejido ocular. Reivindicación 64: Un método para producir AAv recombinantes que comprende: (c) cultivar una célula huésped que contiene: (i) un genoma artificial que comprende un casete de expresión cis flanqueado por ITR de AAV, en donde el casete de expresión cis comprende que comprende un transgén que codifica un mAb anti-TNFa, anti-IL6, o anti-IL6R sustancialmente de longitud completa o de longitud completa o su fragmento de unión a antígeno, operativamente unido a una o más secuencias reguladoras que promueven la expresión del transgén en células de tejido ocular humano; (ii) un casete de expresión trans que carece de ITR de AAV, en donde el casete de expresión trans codifica una proteína de rep de AAV y una proteína de cápside de AAV operativamente unidas a elementos de control de expresión que dirigen la expresión de la proteína de rep de AAV y la proteína de cápside de AAV en la célula huésped en cultivo y suministran la proteína de rep de AAV y de cápside de AAV en trans, en donde la cápside tiene tropismo de célula de tejido ocular; (iii) suficientes funciones auxiliares de adenovirus para permitir la replicación y el empaque del genoma artificial por la proteína de cápside de AAV; y (d) recuperar AAV recombinante que encapsida el genoma artificial, del cultivo celular. Reivindicación 67: Una célula huésped que contiene: d. un genoma artificial que comprende un casete de expresión cis flanqueado por ITR de AAV, en donde el casete de expresión cis comprende que comprende un transgén que codifica un mAb anti-TNFa, mAb anti-IL6 o mAb anti-IL6R sustancialmente de longitud completa o de longitud completa, o su fragmento de unión a antígeno, operativamente unido a una o más secuencias reguladoras que promueven la expresión del transgén en células de tejido ocular humano; d. un casete de expresión trans que carece de ITR de AAV, en donde el casete de expresión trans codifica una proteína de rep de AAV y una proteína de cápside de AAV operativamente unidas a elementos de control de expresión que dirigen la expresión de la proteína de rep de AAV y la proteína de cápside de AAV en la célula huésped en cultivo y suministran la proteína de rep de AAV y de cápside de AAV en trans, en donde la cápside tiene tropismo de célula de tejido ocular; f. suficientes funciones auxiliares de adenovirus para permitir la replicación y el empaque del genoma artificial por la proteína de cápside de AAV.