Patent AR-095520-A1 (AR)
Title: ENSAYO DE POTENCIA DE ARNm BIOMARCADOR DE RESPUESTA A ACETATO DE GLATIRÁMERO
Inventor: PETER E LIPSKY
IPC: C12Q1/68
Filed: 2014-03-14
Abstract: Reivindicación 1: Un proceso para determinar la potencia de un lote de prueba del acetato de glatiramer (GA), comprendiendo el proceso: inmunizar un animal de prueba con una cantidad definida de un lote estándar de referencia de GA; cultivar células del nodo linfático removidas del animal de prueba inmunizado; incubar al menos una muestra que contiene un número predeterminado de las células del nodo linfático cultivadas en la presencia de una cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, y al menos una muestra que contiene un número predeterminado de las células del nodo linfático cultivadas en la presencia de una cantidad predeterminada de un lote de prueba de GA; medir la cantidad de la al menos una especie de biomarcador de ARNm de respuesta a GA en las células del nodo linfático incubadas con la cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, y la cantidad de la al menos una especie de biomarcador de ARNm de respuesta a GA en las células del nodo linfático incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA, y; comparar la cantidad de la al menos una especie de biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA con la cantidad de la al menos una especie de biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático incubadas con la cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA; determinando así .la potencia relativa del lote de prueba de GA. Reivindicación 15: Un proceso para preparar una composición farmacéutica que contiene GA, en donde durante el proceso un lote de prueba de GA se prueba para determinar si tiene una potencia deseada relativa a la potencia del lote estándar de referencia de GA, comprendiendo el proceso: determinar la potencia del lote de prueba de GA y compararla con la potencia del lote estándar de referencia, en donde las potencias del lote de prueba de GA y el lote estándar de referencia se determinan al medir la cantidad de la al menos una especie de biomarcador de ARNm de respuesta a GA producida en una célula de un cultivo de células del nodo linfático removidas de un mamífero de prueba que se ha inmunizado con una cantidad definida de un lote estándar de referencia de GA, en donde al menos una muestra que contiene un número predeterminado de las células del nodo linfático cultivadas se incuba en la presencia de una cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, en donde al menos una muestra que contiene un número predeterminado substancialmente idéntico de las células del nodo linfático cultivadas se incuba en la presencia de la misma cantidad predeterminada del lote de prueba de GA; e incorporar el lote de prueba de GA en la composición farmacéutica solamente si se determina que el lote de prueba de GA tiene la potencia deseada relativa a la potencia del lote estándar de referencia. Reivindicación 28: Un proceso para determinar la potencia y potencia cruzada de un lote de prueba de GA, comprendiendo el proceso: a) inmunizar un primer animal de prueba con una cantidad definida de un lote estándar de referencia de GA; b) inmunizar un segundo animal de prueba con una cantidad definida de un lote de prueba de GA; ó c) cultivar células del nodo linfático removidas del primer animal de prueba inmunizado, y cultivar por separado células del nodo linfático removidas del segundo animal de prueba inmunizado; d) incubar al menos una muestra que contiene un número predeterminado de las células del nodo linfático cultivadas del primer animal de prueba inmunizado en la presencia de una cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, y al menos una muestra que contiene un número predeterminado, de las células del nodo linfático cultivadas del primer animal de prueba inmunizado en la presencia de una cantidad predeterminada de un lote de prueba de GA; e) incubar al menos una muestra que contiene un número predeterminado de las células del nodo linfático cultivadas del segundo animal de prueba inmunizado en la presencia de una cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, y al menos una muestra que contiene un número predeterminado de las células del nodo linfático cultivadas del segundo animal de prueba inmunizado en la presencia de una cantidad predeterminada de un lote de prueba de GA; f) medir la cantidad de (i) al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA en las células del nodo linfático del primer animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, y (ii) el mismo al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA en las células del nodo linfático del primer animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA; g) medir la cantidad de (i) el al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA en las células del nodo linfático del segundo animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, y (ii) el al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA en las células del nodo linfático del segundo animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA; h) comparar la cantidad del al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático del primer animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA con la cantidad del al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático del primer animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote estándar de referencia de GA, determinando así la potencia relativa del lote de prueba de GA; i) comparar la cantidad de al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático del segundo animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA con la cantidad del al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático del segundo animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote estándar de. referencia de GA, determinando así la potencia relativa del lote estándar de referencia de GA; j) comparar la cantidad del al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático del primer animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA con la cantidad del al menos un biomarcador de ARNm de respuesta a GA medida en las células del nodo linfático del segundo animal de prueba inmunizado incubadas con la cantidad predeterminada del lote de prueba de GA; determinando así la potencia cruzada del lote de prueba de GA.