Patent AR-114138-A1 (AR)
Title: Composiciones de vacuna estables que comprenden inter alia un flavivirus recombinante atenuado vivo y proceso para la preparación de las mismas
Inventor: BARASKAR SANDEEP DINKAR
IPC: C12N7/00
Filed: 2018-10-12
Abstract: Composiciones inmunogénicas liofilizadas estables que comprenden, entre otros, flavivirus vivos atenuados recombinantes, más preferiblemente virus del dengue recombinantes vivos atenuados, al menos un hidrato de carbono, al menos un aminoácido, y que son particularmente susceptibles de tratamientos de liofilización rápida en los que la composición conserva las características deseadas de un virus, incluyendo la viabilidad, inmunogenicidad y estabilidad del virus. Dicha composición inmunogénica está libre de conservantes, polímeros y tensioactivos. Los métodos para fabricar dichas composiciones inmunogénicas liofilizadas estables. Reivindicación 1: Una composición inmunogénica que comprende: a) uno o más flavivirus atenuados vivos; b) uno o más carbohidratos de aproximadamente 3 a 6% (p/v); c) uno o más aminoácidos de aproximadamente 3 a 6% (p/v); en donde, la composición es susceptible de tratamientos de liofilización y la composición reconstituida conserva las características deseadas de un virus, incluyendo la viabilidad, la inmunogenicidad y la estabilidad del virus. Reivindicación 4: La composición inmunogénica según la reivindicación 1, en donde uno o más flavivirus vivos atenuados comprenden el virus del dengue (DEN), y opcionalmente comprenden una pluralidad de virus del dengue vivo atenuado (DEN) de diferentes serotipos seleccionados del grupo de DEN-1, DEN-2, DEN-3 y DEN-4. Reivindicación 10: La composición inmunogénica según la reivindicación 9, en donde al menos uno de los carbohidratos es sucrosa. Reivindicación 11: La composición inmunogénica según la reivindicación 1, en donde uno o más aminoácidos se selecciona del grupo que consiste en leucina, iso-leucina, histidina, glicina, glutamina, arginina, lisina, alanina o una combinación de las mismas. Reivindicación 29: Un método para fabricar una composición inmunogénica que comprende: a) realizar la recolección múltiple de sobrenadante que comprende al menos un serotipo de virus del dengue en MEM con solución de sal de Hanks que contiene además dextrosa, L-glutamina y bicarbonato de sodio; b) filtrar la recolección viral mediante filtración de flujo directo (DFF) a través de al menos un filtro de clarificación que tiene un tamaño de poro de entre aproximadamente 6 mm a aproximadamente 0,45 mm; c) tratar la recolección viral con una endonucleasa no especifica a 34 ± 1ºC durante al menos 2 horas; d) concentrar la recolección viral mediante filtración de flujo tangencial (TFF) utilizando una membrana con un corte de peso molecular (MWCO) de 100 kDa; e) estabilizar la recolección viral con un agente estabilizador que comprende sucrosa y glicina para formar una recolección viral estabilizada; f) esterilizar la recolección viral estabilizada por DFF a través de al menos un filtro de clarificación que tiene un tamaño de poro de entre aproximadamente 0,8 mm a aproximadamente 0,2 mm para formar una recolección viral esterilizada de virus purificado; en donde la recuperación total de virus purificados es al menos del 50%; g) opcionalmente liofilizar la recolección viral esterilizada.