Patent ES-2910476-T3 (ES)
Title: Síntesis quimioenzimática de heparinas de peso molecular ultra bajo estructuralmente homogéneas
Inventor: XU YONGMEI
IPC: C12N9/10
Filed: 2011-12-22
Granted: 2022-05-12
Abstract: Un procedimiento de síntesis de un compuesto de heparina, que comprende las siguientes etapas secuenciales: (a) proporcionar un sustrato de disacárido que tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** (b) alargar el sustrato de disacárido a un tetrasacárido usando las enzimas N-acetil glucosaminil transferasa y heparosán sintasa-2, y sustratos ácido glucurónico (GlcUA) y N-trifluoroacetil glucosamina (GlcNTFA), donde el tetrasacárido tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** donde R es **(Ver fórmula)** (c1) alargar el tetrasacárido a un heptasacárido usando las enzimas N-acetil glucosaminil transferasa y heparosán sintasa-2, y sustratos de ácido glucurónico (GlcUA), N-trifluoroacetil glucosamina (GlcNTFA), y N-acetil glucosamina (GlcNAc), donde el heptasacárido tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** donde R es **(Ver fórmula)** (d1) convertir los residuos de N-trifluoroacetil glucosamina (GlcNTFA) en el heptasacárido en residuos de N-sulfo glucosamina (GlcNS) utilizando N-sulfotransferasa (NST), 3'-fosfoadenosina 5'-fosfosulfato (PAPS), trietilamina, CH3OH y H2O: (e1) epimerizar el heptasacárido usando C5-epimerasa (C5-epi); (f1) sulfatar el heptasacárido usando 2-O-sulfotransferasa (2-OST) y 3'-fosfoadenosina 5' -fosfosulfato (PAPS); (g1) sulfatar el heptasacárido usando 6-O-sulfotransferasa (6-OST) y 3'-fosfoadenosina 5' -fosfosulfato (PAPS); y (h1) sulfatar el heptasacárido usando 3-O-sulfotransferasa (3-OST) y 3'-fosfoadenosina 5' -fosfosulfato (PAPS), donde se sintetiza un compuesto de heparina que tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** donde R es **(Ver fórmula)** o (c2) alargar el tetrasacárido a un hexasacárido usando las enzimas N-acetil glucosaminil transferasa y heparosán sintasa-2, y sustratos ácido glucurónico (GlcUA) y N-trifluoroacetil glucosamina (GlcNTFA), donde el hexasacárido tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** donde R es **(Ver fórmula)** (d2) convertir los residuos de N-trifluoroacetil glucosamina (GlcNTFA) en el hexasacárido en residuos de N-sulfo glucosamina (GlcNS) usando N-sulfotransferasa (NST), 3'-fosfoadenosina 5'-fosfosulfato (PAPS), trietilamina, CH3OH y H2O para dar un hexasacárido que tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** donde R es **(Ver fórmula)** (e2) alargar el hexasacárido a un heptasacárido usando la enzima N-acetil glucosaminil transferasa y el sustrato N-trifluoroacetil glucosamina (GlcNTFA); (f2) epimerizar el heptasacárido usando C5-epimerasa (C5-epi); (g2) sulfatar el heptasacárido usando 2-O-sulfotransferasa (2-OST) y 3'-fosfoadenosina 5'-fosfosulfato (PAPS) para dar un heptasacárido que tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** donde R es **(Ver fórmula)** (h2) convertir los residuos de N-trifluoroacetil glucosamina (GlcNTFA) en el heptasacárido en residuos de N-sulfo glucosamina (GlcNS) utilizando N-sulfotransferasa (NST), 3'-fosfoadenosina 5'-fosfosulfato (PAPS), trietilamina, CH3OH y H2O; (i2) sulfatar el heptasacárido usando 6-O-sulfotransferasa (6-OST) y 3'-fosfoadenosina 5' -fosfosulfato (PAPS); y (j2) sulfatar el heptasacárido usando 3-O-sulfotransferasa (3-OST) y 3'-fosfoadenosina 5' -fosfosulfato (PAPS); donde se sintetiza un compuesto de heparina que tiene la siguiente estructura: **(Ver fórmula)** donde R es **(Ver fórmula)**