Patent ES-2728118-T3 (ES)
Title: Determinación de constantes de unión por desplazamiento del equilibrio
Inventor: BORISS HINNERK
IPC: G01N33/92
Filed: 2015-10-15
Granted: 2019-10-22
Abstract: Procedimiento para determinar constantes de unión de una sustancia o de una mezcla de sustancias con referencia a una diana disuelta y una diana inmovilizada, que comprende las etapas de - incubación de una primera muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con una diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un primer recipiente de muestras, que contiene una solución tampón y una diana disuelta, - incubación de una segunda muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con la diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un segundo recipiente de muestras, que contiene solución tampón y diana disuelta, - incubación de una tercera muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con la diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un tercer recipiente de muestras, que contiene solución tampón y diana disuelta, - incubación de una cuarta muestra de la sustancia o de la mezcla de sustancias con la diana inmovilizada en un vehículo sólido, preferentemente de partículas, en un cuarto recipiente de muestras, que contiene solución tampón y diana disuelta, en el que la primera y la segunda muestra de la sustancia se incuban con cantidades de material diferentes de la diana inmovilizada y la misma cantidad de material de la diana disuelta, la tercera y la cuarta muestra de la sustancia se incuban con las cantidades de material de la diana inmovilizada como la primera y la segunda muestra de la sustancia y con una cantidad de material idéntica de la diana disuelta, en el que la cantidad de material de la diana disuelta en los recipientes de muestra tres y cuatro difiere de la cantidad de material de la diana disuelta en los recipientes de muestra uno y dos y los recipientes de muestra en la incubación contienen el mismo volumen de fase líquida, que consiste en solución tampón, diana disuelta y muestra de sustancia, comprendiendo además las etapas de - separación del vehículo sólido, preferentemente de partículas, de los lotes de incubación respectivos, - medida de la concentración de la sustancia que no está unida a la diana inmovilizada o de la mezcla de sustancias que no está unida a la diana inmovilizada (concentración APA) en el sobrenadante del lote de incubación respectivo, - determinación de una constante de unión de la sustancia o de la mezcla de sustancias a la diana inmovilizada y de una constante de unión de la sustancia o de la mezcla de sustancias a la diana disuelta con la ayuda de las concentraciones APA medidas, - en el que las constantes de unión son constantes de disociación y la determinación de las constantes de disociación se consigue con la ayuda de la ecuación I**Fórmula** en el que APA denota la concentración de la sustancia que no está unida a la diana inmovilizada, es decir, sustancia libre y sustancia unida a la diana disuelta, **Fórmula** denota la constante de disociación a partir de la diana inmovilizada, **Fórmula** la constante de disociación a partir de la diana disuelta, c0 la concentración de sustancia añadida constantemente total, [inmoT] la concentración de la diana inmovilizada y [P] la concentración de la diana disuelta.