Patent ES-2893866-T3 (ES)
Title: Composición de lactobacillus que permite favorecer el crecimiento juvenil humano y animal en caso de malnutrición
Inventor: LEULIER FRANÇOIS
IPC: A61K35/744
Filed: 2015-05-15
Granted: 2022-02-10
Abstract: Composición que comprende por lo menos una cepa de Lactobacillus con tropismo intestinal seleccionada de entre las especies Lactobacillus plantarum o Lactobacillus fermentum, para una utilización que tiene por objetivo favorecer el crecimiento juvenil en el tratamiento de la malnutrición de mamíferos, en la que la cepa de Lactobacillus responde positivamente a por lo menos una de las pruebas A), B), C) y D) siguientes: Prueba A) - se dispone de un lote de embriones de padres Drosophila melanogaster axénicos; - el D1: se distribuyen estos embriones en por lo menos 2 grupos (40 embriones, realizado por triplicado, es decir 120 embriones por grupo) en un medio nutritivo que comprende harina de maíz, agar y agua, deficiente en levadura, uno de los grupos de embriones es inoculado además por una suspensión de aproximadamente 108 UFC de la bacteria a probar en un tampón salino, lo cual forma el grupo monoxénico, siendo el otro grupo el grupo axénico, se realiza la crianza de los dos grupos a aproximadamente 25ºC hasta el D7; - el D7: se recuperan como mínimo 60 larvas de drosophilas de cada grupo, se les aplica un choque térmico; - se determina la media de la longitud de las larvas de cada uno de los grupos, y se comparan las medias obtenidas; - se considera que la cepa de bacteria probada responde positivamente a la prueba si la media de la longitud de las larvas del grupo monoxénico es superior a la media de la longitud de las larvas del grupo axénico con un valor de p inferior o igual a 0,001, preferentemente inferior o igual a 0,0001 en la prueba estadística de Mann-Whitney, realizada en el conjunto de datos de los tamaños de las larvas de los dos grupos. Prueba B) - a partir de una misma línea de ratones, se establece una línea de ratones parentales axénicos y una línea de ratones parentales monoxénicos (asociados a la bacteria a probar), y se producen unos juveniles que se crían con los padres en medio nutritivo convencional hasta su destete (D21); - el D21: se dispone de 8 juveniles destetados procedentes de cada una de estas dos líneas, que forman el grupo monoxénico y el grupo axénico, y son criados con dieta nutritiva deficiente en proteínas (8%) y en lípidos (2,5%); - el D56: se determina la media de los tamaños de los ratones para cada grupo considerado mediante la medición desde el extremo del hocico a la base de la cola de cada individuo, o se extraen los fémures de los individuos de cada grupo y se miden estos últimos, - considerándose que la cepa de bacteria láctica responde positivamente a la prueba si el tamaño medio de los individuos o de los fémures del grupo monoxénico es superior al tamaño medio de los individuos o de los fémures, del grupo axénico, con un valor de p inferior o igual a 0,05 en la prueba estadística de Tukey. Prueba C) - a partir de una misma línea de ratones axénicos, se establece una línea de ratones parentales axénicos y una línea de ratones parentales monoxénicos (asociados a la bacteria a probar), y se producen unos juveniles que se crían con los padres en medio nutritivo convencional hasta su destete (D21); - el D21: se dispone de 8 juveniles destetados procedentes de cada una de estas dos líneas, que forman el grupo monoxénico y el grupo axénico, y son criados con dieta nutritiva deficiente en proteínas (8%) y en lípidos (2,5%); - el D56: se extrae sangre de los juveniles de cada grupo y se determina la tasa sérica media de IGF-1 para cada grupo; - considerándose que la cepa de bacteria láctica responde positivamente a la prueba si la tasa sérica media de IGF-1 del grupo monoxénico es superior a la tasa sérica media del grupo axénico con un valor de p inferior o igual a 0,05 en la prueba estadística de Tukey. Prueba D) - se dispone de un lote de embriones de padres Drosophila melanogaster axénicos; - el D1: se distribuyen estos embriones en por lo menos 2 grupos (40 embriones, realizado por triplicado, es decir 120 embriones por grupo) en un medio nutritivo que comprende harina de maíz, agar y agua, deficiente en levadura, uno de los grupos de embriones es inoculado por una suspensión de aproximadamente 108 UFC de dicha bacteria en un tampón salino, lo cual forma el grupo monoxénico de prueba, siendo el otro grupo inoculado por una suspensión de aproximadamente 108 UFC de bacteria de referencia L. plantarum WJL o L. fermentum ATCC 9338, en un tampón salino, formando el grupo monoxénico de referencia, se realiza la crianza de los dos grupos a aproximadamente 25ºC hasta el D7; - el D7: se recuperan como mínimo 60 larvas de drosophilas de cada grupo, se les aplica un choque térmico; - se determina la media de la longitud de las larvas de cada uno de los grupos, y se comparan las medias obtenidas; - teniendo dicha cepa de bacteria, con respecto a la bacteria de referencia, un efecto fuerte con una media de la longitud de las larvas del grupo monoxénico de prueba con esta cepa de bacteria significativamente superior a la media para el grupo monoxénico con la cepa de referencia, con un valor de p inferior o igual a 0,001, preferentemente a 0,0001 en la prueba estadística de Mann-Whitney, realizada en el conjunto de datos de los tamaños de las larvas de los dos grupos.