Patent AR-046809-A1 (AR)
Title: Antibiotico 107891, sus factores a1 y a2, sales y composiciones farmceuticamente aceptables, y su uso
Inventor: LAZZARINI AMERIGA
IPC: A23K20/195
Filed: 2004-07-19
Abstract: Sustancia antibiótica de origen microbiano, denominada arbitrariamente antibiótico 107891 que es producida por Fermentación de Microbispora sp. ATCC PTA-5024, sales farmacéuticamente aceptables y composiciones de la misma, y su uso como un agente antibacteriano que tiene actividad inhibidora contra microbios susceptibles. El antibiótico 107891, que es un complejo que comprende dos factores, denominados Factores A1 y A2, tiene una estructura de péptido que contiene lantionina y metillantionina como constituyentes, que son características típicas de los antibióticos del grupo de los lantibióticos. El antibiótico 107891 y sus Factores A1 y A2 presentan una buena actividad antibacteriana contra bacterias Gram-positivas, incluyendo las cepas resistentes a meticilina y resistentes a vancomicina, y es activo también contra bacterias Gram-negativas tales como M. catharralis, Neisseria species y H. influenzae y micobacterias. Reivindicación 1: Complejo antibiótico 107891 que comprende el Factor A1 y el Factor A2, que es un polvo blanco que tiene las siguientes características: A) Espectro de masas registrado de una solución 0,2 mg/ml en metanol: agua 80/20 (v/v) con ácido trifluoroacético al 0,1 % (Figs. 1A y 1B) en un instrumento Thermofinnigan LCQ deca equipado con una fuente de electrospray, usando una mezcla de calibración Thermofinnigan bajo las siguientes condiciones de electrospray; voltaje del spray: 4,7 kV; temperatura capilar: 220° C; voltaje capilar: 3 V; modo de infusión 10 mu1/min, mostrando dos iones doblemente protonados en m/z 1124 y m/z 1116, correspondientemente a la composición de isótopos más baja de los Factores A1 y A2, respectivamente. B) Espectro infrarrojo (Fig. 2) registrado en KBr con un espectrofotómero Bruker FT-IR modelo IFS 48 que presenta un máximo de absorción a (cm-1): 3263; 2929; 1661; 1533; 1402; 1114; 1026. C) Espectro U.V.(Fig. 3) realizado en metanol/H2O 80:20 (v/v) con un espectrofotómero Perkin- Elmer Lambda 16, que presenta dos hombros a 226 y 267 nm. D) Espectro 1H-NMR (Fig. 4) registrado a 600 MHz en la mezcla metanol-d4:H2O (pH 4,3 HCl) 40:10 (v/v) a 40° C en un espectrómetro Bruker AMX 600 aplicando una secuencia de supresión de agua usando como estándar interno la senal residual de metanol-d4 a 3,31 ppm, que presenta las siguientes senales [delta = ppm, multiplicidad; (atribución)]: 0,93 d (CH3), 0,98 d (CH3), 1,07 t (CH3 superpuestos), 1,18 t (CH3 superpuestos), 1,26 s (CH3), 1,30 t (CH3 superpuestos), 1,62-1,74 m (CH2), 1,78 d (CH3), 1,80 d (CH3), 2,03 m (CH2), 2,24 m (CH), 2,36 (CH2), 2,72-3,8 m (CH alfa peptídicos), 3,8-5,2 m (CH alfa peptídicos), 5,53-6,08 s (CH2), 5,62 d (doble enlace CH), 6,42 m (CH), 6,92 d (doble enlace CH), 7,0-7,55 m (CH aromáticos), 7,62-10,4 d y m (NH aromáticos y peptídicos). E) Espectro 13C-NMR (Fig. 5) registrado en la mezcla metanol-d4:H2O (pH 4,3 HCl) 40:10 (v/v) a 40° C en un espectrómetro Bruker AMX 600 usando como estándar interno la senal residual de metanol-d4 a 49,15 ppm, que presenta las siguientes senales: [delta = ppm; (atribución)]: 13,6-23,2 (CH3 alifáticos), 26,16-73 (CH2 alifáticos y CH alfa peptídicos), 105-136 (CH aromáticos y doble enlace y carbonos cuaternarios), 164,3-176,3 (carbonilos peptídicos). F) El hidrolizado ácido en HCl 6N (105° C, 24 hs) que muestra la presencia de los siguientes aminoácidos junto con otros picos no identificados, después de derivación con 6-aminoquinolil-N- hidroxisuccinimidil carbamato: lantionina, metillantionina, glicina, prolina, valina, ácido aspártico (producto de hidrólisis de asparagina), fenilalanina y leucina. G) El hidrolizado ácido en ácido metanosulfónico 4N que contiene 0,2 % (p/v) de 3- (2-aminoetil)indol como catalizador (115° C, 16 hs) que muestra la presencia de 5-clorotriptófano. H) Una función ionizable básica detectada por titulación ácido/base realizada con hidróxido de potasio 0,01 N en 2-metoxietanol (MCS): H2O 12:3 (v/v) que contiene un exceso molar de ácido clorhídrico 0,01 N.