Patent AR-126031-A1 (AR)
Title: Vectores auxiliares adenovirales del serotipo 35
Inventor: ROY SOUMITRA
IPC: C12N7/00
Filed: 2021-12-22
Abstract: La presente divulgación proporciona, entre otras cosas, genomas auxiliares Ad35 y vectores útiles en la terapia génica, por ejemplo, para la producción de vectores donantes Ad35 dependientes de los auxiliares. Los genomas auxiliares de la presente divulgación incluyen una secuencia de empaquetamiento condicionalmente defectuosa.  Reivindicación 1: Un genoma auxiliar adenoviral recombinante que comprende: una repetición de terminal invertida (ITR) Ad35 5; una ITR Ad35 3; y repeticiones directas de recombinasa que flanquean una secuencia de empaquetamiento de Ad35, donde las repeticiones directas de recombinasa comprenden una primera repetición directa de recombinasa entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 155 y 171, 161 y 181, 185 y 205 o 214 y 234 del nº de registro de GenBank AY128640 y una segunda repetición directa de recombinasa entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 377 y 504 o 3175 y 3225 del nº de registro de GenBank AY128640. Reivindicación 16: Un sistema de producción de vectores adenovirales recombinantes que comprende: (i) el genoma auxiliar Ad35 de cualquiera de las reivindicaciones 1 - 14 o el vector auxiliar de la reivindicación 15, y (ii) un genoma donante HDAd35, el genoma donante HDAd35 que comprende: una repetición de terminal invertida (ITR) Ad35 5; una ITR Ad35 3; una secuencia de empaquetamiento de Ad35; y una secuencia de ácido nucleico que codifica al menos un producto de expresión heterólogo. Reivindicación 25: Un genoma auxiliar adenoviral recombinante que comprende: una repetición de terminal invertida (ITR) Ad35 5; una ITR Ad35 3; y repeticiones directas de recombinasa que flanquean una secuencia de empaquetamiento de Ad35, donde las repeticiones directas de recombinasa comprenden una primera repetición directa de recombinasa entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 136 y 249 del nº de registro de GenBank AY128640 y una segunda repetición directa de recombinasa entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 377 y 504 o 3175 y 3225 del nº de registro de GenBank AY128640 donde el genoma auxiliar Ad35 comprende una secuencia de empaquetamiento invertida. Reivindicación 32: Un sistema de producción de vectores adenovirales recombinantes que comprende: (i) el genoma auxiliar Ad35 de cualquiera de las reivindicaciones 25 - 30 o el vector auxiliar de la reivindicación 31, y (ii) un genoma donante HDAd35, el genoma donante HDAd35 que comprende: una repetición de terminal invertida (ITR) Ad35 5; una ITR Ad35 3; una secuencia de empaquetamiento de Ad35; y una secuencia de ácido nucleico que codifica al menos un producto de expresión heterólogo. Reivindicación 33: Un método para producir un vector donante adenoviral dependiente de los auxiliares recombinante, el método que comprende aislar el vector donante Ad35 dependiente de auxiliares recombinante de un cultivo de células, donde las células comprenden: el genoma auxiliar Ad35 recombinante de cualquiera de las reivindicaciones 25 - 30 o un vector auxiliar adenoviral recombinante de la reivindicación 31; y un genoma donante de Ad35 dependiente de auxiliares recombinante que comprende: una repetición de terminal invertida (ITR) Ad35 5; una ITR Ad35 3; una secuencia de empaquetamiento de Ad35; y una secuencia de ácido nucleico que codifica al menos un producto de expresión heterólogo. Reivindicación 47: Una secuencia de empaquetamiento adenoviral de serotipo 35 (Ad35) flanqueada por un sitio recombinasa recombinante, donde las repeticiones directas de recombinasa flanquean una secuencia de empaquetamiento de Ad35, donde la secuencia de empaquetamiento de Ad35 corresponde a un fragmento del nº de registro de GenBank AY128640 que tiene un primer punto final entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 136 y 249 del número de registro de GenBank AY128640 y un segundo punto final entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 377 y 504 o 3175 y 3225 del número de registro de GenBank AY128640. Reivindicación 60: Un genoma auxiliar adenoviral recombinante que comprende: una repetición de terminal invertida (ITR) Ad35 5; una ITR Ad35 3; y una secuencia invertida que comprende una secuencia de empaquetamiento de Ad35, donde la secuencia invertida comprende, o comprende un primer punto final en, una posición de nucleótidos entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 119 y 169 de AY128640 o 134 y 154 de AY128640, opcionalmente donde la secuencia invertida comprende, o comprende un primer punto final en, una posición de nucleótidos correspondiente a la posición 144 de AY128640, y donde (i) la secuencia invertida comprende, o comprende un segundo punto final en, una posición de nucleótidos entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 3175 y 3225 de AY128640 o 3190 y 3210 de AY128640, opcionalmente donde la secuencia invertida comprende, o comprende un segundo punto final en, una posición de nucleótidos correspondiente a la posición 3200 de AY128640, o (ii) la secuencia invertida comprende, o comprende un segundo punto final en, una posición de nucleótidos entre las posiciones de nucleótidos correspondientes a 455 y 505 de AY128640 o 470 y 490 de AY128640, opcionalmente donde la secuencia invertida comprende, o comprende un segundo punto final en, una posición de nucleótidos correspondiente a la posición 480 de AY128640.