Patent ES-2267825-T3 (ES)
Title: Metodo y sistema para analizar celulas.
Inventor: STEINER GEORG
IPC: G01N15/10
Filed: 2001-10-23
Granted: 2007-03-16
Abstract: Un procedimiento para el examen, en especial la identificación, de células que se presentan preferiblemente en formaciones celulares densas o cerradas, en especial de células aisladas en tejidos, En la que una preparación tisular plana, en particular un corte congelado o en parafina, frotis celular, citospin o similar, se somete a uno o a un número de diferentes colorante(s) de identificación del núcleo, en particular completos, preferiblemente planos, en particular todos los núcleos, en el que por lo menos uno de las tinciones de identificación de diferentes tinciones de estructuras diana de objetos celulares, en especial del citoplasma y/o membrana celular y/o núcleo y/u otros parámetros citológicos, se hacen de la preparación tisular, en la que se graban imágenes digitales, en particular imágenes en color o en gama de grises, de la preparación tisular coloreada, mediante un equipo de grabación de imagen electrónica, por ejemplo microscopio de barrido láser, cámara CCD, cámara de vídeo odigital, escáner fotográfico o similar, y en el que se representa al menos una imagen de una subzona de la preparación tisular en por lo menos una coloración y/o en una combinación de coloraciones seleccionables, caracterizado por el hecho, que se limita por lo menos a un parámetro, por ejemplo tonalidad de color, superficie, forma, contorno, intensidad de la tinción, patrón de coloración o similar, que hace reconocibles núcleos en la imagen de esa subzona mediante tinción de identificación y por lo menos un parámetro, por ejemplo tonalidad de color, superficie, forma, contorno, intensidad de la tinción, patrón de coloración o similar, que hace reconocibles en la imagen de una subzona mediante tinción de estructuras diana objetos celulares de un intervalo de valor dado o bien seleccionable, que bajo aplicación de algoritmos de proceso de imagen a la imagen de esa subzona de núcleos y objetos celulares, sus parámetros se corresponden al o a los respectivos intervalos de parámetros determinados y eventualmente representados, que eventualmente se representan determinados parámetros bajo aplicación de algoritmos de proceso de imagen a los núcleos y objetos celulares en la imagen de la subzona en forma de histogramas y gráficos de dispersión en mutua dependencia y eventualmente -dependiendo de los resultados de medición- se especifican nuevos intervalos de parámetros, que para la investigación de células individuales existentes el contenido de la imagen determinado para los núcleos en por lo menos una, preferiblemente en todas, las imágenes, se correlaciona con el contenido de la imagen determinado para los objetos celulares de estructuras diana coloreadas, por lo menos en una, preferiblemente en todas, las imágenes, en donde eventualmente teniendo en cuenta por lo menos en una por el citoplasma y/o la tinción de la o las estructuras diana consideradas de las membranas celulares en la extensión de la superficie determinada de los objetos celulares, partiendo de los núcleos identificados se inicia con un algoritmo informático prefijado un crecimiento celular o ampliación celular para la reconstrucción de células individuales, preferiblemente teniendo en cuenta los valores máximos y mínimos de los parámetros celulares, sobre todo para el tamaño celular o diámetro celular alrededor de los núcleos celulares de una superficie celular, y más concretamente considerando el criterio de que las superficies celulares vecinas, igualmente crecientes, no se mezclan entre sí y se descarta un contacto de las superficies celulares o paredes celulares o membrana celular, y que se puede determinar el número, la superficie y/o intensidad de la tinción en referencia a al menos una de las coloraciones efectuadas y/u otro parámetro de las células individuales reconstruidas y/o las células individuales, dependiendo eventualmente de su intensidad de la tinción y/u otro parámetro seleccionado, pueden ser clasificadas en poblaciones y a lo sumo ser representadas y posteriormente examinadas oanalizadas.