Patent KR-20120120965-A (KR)
IPC: A61K39/36
Filed: 2011-02-15
Abstract: 본 발명자들은 자작나무종 꽃가루의 주요 알레르기항원으로부터 파생된 어떤 펩티드 조각이 이들 알레르기항원에 대하여 개인을 탈감각화시키는 것에 유용하다는 것을 발견했다. 자작나무의 Bet v2, Bet v1, Bet v3, Bet v4, Bet v6, Bet v7(속명:  Betulaceae )로부터 파생된 펩티드 조각은 특히 유용하다. 
  본 발명의 펩티드는 펩티드-주 조직적합 복합체 상호작용(peptide-MHC interactions)과 주 조직적합 복합체 클래스Ⅱ 결합분석시험 (MHC class-Ⅱ binding assays)을 예측하기위해  인실리코 분석을 통하여 주 조직적합 복합체 클래스Ⅱ-결합 T세포 항원결정부위로서 선택되었다. 추가적인 항원결정부위는 상동관계로 확인되었다. 
  펩티드 면역에 근거한 탈감각화 시도에 관련되는 어려움은 알레르기항원의 적절한 크기와 구역을 어떻게 선택하는가에 놓여있다. 펩티드 크기의 선택은 중요하다. 펩티드가 너무 작으면 백신은 면역반응을 이끌어내는데 효과적이지 못할 것이다. 펩티드가 너무 크거나 항원 전체가 개인에게 도입된다면 초과민반응 같은 역반응을 유발할 위험성이 있고 이것은 치명적일 수 있다. 
 본 발명의 폴리펩티드는 그것으로 하여금 분자 전체에서 면역글로블린E 결합 항원결정부위의 구조를 유지하게 하는 중요한 4차구조를 소유하지 않을 정도로 작으면서 T세포 특이성을 유지하기 위해 선택되었다. 그러므로 본 발명의 폴리펩티드는 비만세포와 호염구 같은 세포에 인접한 특이적 면역글로블린E 분자의 중요한 교차결합을 유도하지 않고 따라서 중요한 히스타민 방출을 유도하지 않는다. 
 본 발명의 이점은 주 조직적합 복합체(MHC)분자를 포괄적으로 공격할 수 있는 펩티드의 능력이다. T 세포 수용체는 특이성 면에서 매우 가변적이다. 가변성은 세포 내 유전자 재조합을 통해 항체분자와 함께 발생된다. T 세포 수용체(TCRs)는 주조직적합 복합체(MHC)유전자에 의해 암호화된 분자에 결합하는 짧은 펩티드 형태의 항원을 인지한다. 이 유전자 산물들은 이식에서 사용되는“조직형(tissure type)”이 생기게 하는 같은 분자이고, 또한 통용되는 용어인 인간 백혈구 항원 분자(Human Leukocyte Antigen molecule;HLAs)로 나타낸다. 각 주 조직적합 복합체분자는 그것의 모양과 전하 때문에 오직 제한된 펩티드 그룹에 결합할 수 있는 펩티드 결합 홈을 가진다. 하나의 주 조직적합 복합체분자에 결합하는 펩티드는 다른 주 조직적합 복합체분자들에 결합할 필요가 없다. 
항원이나 알레르기항원 같은 단백질 분자가 B 림프구, 수지상세포, 단핵구 그리고 대식세포 같은 항원제시세포에 의해 잡아먹힐 때, 분자는 세포 내에서 효소로 분해된다. 분해과정은 적절한 크기와 전하, 모양이라면 어떤 주 조직적합 복합체분자의 펩티드 결합 홈 안에 결합하고 그 뒤에 항원제시세포 표면에 펩티드 조각을 내보인다. 펩티드/MHC 복합체가 항원제시세포 표면에 충분히 제시된다면 그것은 적절한 펩티드/MHC-특이적인 T 세포 수용체를 가지고 있는 T 세포를 활성화시킨다. 
주 조직적합 복합체(MHC)의 다형성 성질 때문에 인간처럼 이종교배된 인구에서는 개개인이 세포표면에 다양한 조합의 주 조직적합 복합체(MHC) 분자를 발현한다. 다양한 주 조직적합 복합체(MHC) 분자들은 펩티드의 크기, 전하 그리고 모양을 근거로 한 같은 분자로부터 다양한 펩티드에 결합할 수 있기 때문에 다양한 개개인은 주 조직적합 복합체(MHC)분자에 결합하는 다양한 목록의 펩티드를 전시할 수 있을 것이다. 인간 같은 이종교배 인구에서 보편적인 주 조직적합 복합체(MHC)결합 펩티드 항원결정부위의 확인은 동종교배한 동물(실험실 쥐의 가계(strains)처럼)보다 더욱 어렵다. 펩티드 결합과 제시에서 개인과 내재된 차이 사이의 주 조직적합 복합체(MHC)발현의 차이에 근거하여 인간의 탈감각화 치료에 이용될 단일 펩티드가 확인될 것 같지 않다. 
그러나 본 발명의 펩티드는 다수의 다양한 주 조직적합 복합체(MHC)분자를 공격함으로써 인류에게 넓은 범위의 효능을 제공한다. 그러므로 본 발명의 펩티드로 만들어낸 백신은 넓은 유용성을 가진다. 그래서 본 발명은 면역관용의 유도를 포함함으로써 자작나무 꽃가루에 대한 알레르기를 예방하거나 치료하는데 이용하는데 적합한 조성물을 제공한다.  
ⅰ)폴리펩티드 SEQ ID NO: 74 (BIR12B;AKYMVIQGEPGRVIRGK), SEQ ID NO: 72 (BIR11; FPQFKPQEITGIMK), SEQ ID NO: 71 (BIR10; GSVWAQSSSFPQFK), SEQ ID NO: 73 (BIR12A;PTGMFVAGAKYMVIQGR), SEQ ID NO: 75 (BIR13;IKYMVIQGEAGAVIRGK), SEQ ID NO: 76 (BIR14;EAGAVIRGKKGSGGIT)중에서 적어도 1개 또는 그의 변종, 그리고 
ⅱ)폴리펩티드 SEQ ID NO: 53 (Bir02J;PAARMFKAFILEGDKLVPK), SEQ ID NO: 48 (Bir01I; FNYETETTSVIPAARK),SEQ ID NO: 54 (Bir04;PGTIKKISFPEGFPFKYV), SEQ ID NO: 67 (Bir09;ETLLRAVESYLLAHSDAY), SEQ ID NO: 60 (BIR07;SNEIKIVATPDGGSILK)，SEQ ID NO: 63 (Bir07C;SNEIKIVATPEGGSILK)중에서 적어도 1개 또는 그의 변종, 
여기에서 말한 변종이란: 
	Ⅰ）(ⅰ)또는(ⅱ)에 특이적인 폴리펩티드에 상응하는 염기서열을 포함하는 30개 아미노산의 긴 폴리펩티드. 
	Ⅱ）(ⅰ)또는(ⅱ)에 특이적인 폴리펩티드에 상응하는 염기서열에 적어도 65%의상동관계를 가진 염기서열을 포함하는 9~30개 아미노산의 폴리펩티드, 이 염기서열은 상기에 언급된 상응하는 폴리펩티드에 면역관용을 유도할 수 있다. 
	Ⅲ）(ⅰ)또는(ⅱ)에 특이적인 폴리펩티드에 상응하는 염기서열에 적어도 65%의 상동관계를 가지고 적어도 9개의 인접한 아미노산의 염기서열을 포함하는 9~30개 아미노산 길이의 폴리펩티드, 이 염기서열의 적어도 9개의 인접한 아미노산이나 상동관계의 염기서열은 상기에 언급된 상응하는 폴리펩티드에 면역관용을 유도할 수 있다. 
    또한 적어도 3개의 다른 폴리펩티드를 포함함으로써 자작나무 꽃가루의 알레르기를 예방하거나 치료하는데 유용한 조성물을 제공한다. 
    (a) Bir12B(AKYMVIQGEPGRVlRGK), 또는 그의 변종; 
    (b) Bir02J(PAARMFKAFILEGDKLVPK), 또는 그의 변종; 
    (c) BirO1I(FNYETETTSVIPAARK) 또는 그의 변종; 
    (d) Bir04(PGTIKKISFPEGFPFKYV) 또는 그의 변종; 
    (e) Bir09(ETLLRAVESYLLAHSDAY)또는 그의 변종; 
    (f) Bir16A(AERERIFKRFDANGEGK) 또는 그의 변종; 
    (g) Bir07(SNEIKIVATPDGGSILK) 또는 그의 변종; 
    (h) Bir07C(SNEIKIVATPEGGSILK) 또는 그의 변종; 
    (i) BirOl1(FPQFKPQEITGIMK) 또는 그의 변종; 
    (j) Bir15(SLNTLRLRRIFDLFDK) 또는 그의 변종; 
여기에서 말한 변종이란: 
      Ⅰ）(a)내지(j)에 특이적인 폴리펩티드에 상응하는 염기서열을 포함하는 30개 아미노산의 긴 폴리펩티드. 
	Ⅱ）(a)내지(j)에 특이적인 폴리펩티드에 상응하는 염기서열에 적어도 65%의 상동관계를 가진 염기서열을 포함하는 9~30개 아미노산의 폴리펩티드, 이 염기서열은 상기에 언급된 상응하는 폴리펩티드에 면역관용을 유도할 수 있다. 
	Ⅲ）(a)내지(j)에 특이적인 폴리펩티드에 상응하는 염기서열에 적어도 65%의 상동관계를 가지고 적어도 9개의 인접한 아미노산의 염기서열을 포함하는 9~30개 아미노산 길이의 폴리펩티드, 이 염기서열의 적어도 9개의 인접한 아미노산이나 상동관계의 염기서열은 상기에 언급된 상응하는 폴리펩티드에 면역관용을 유도할 수 있다.