Patent ES-2565582-T3 (ES)
Title: Reparación y regeneración de cartílago y hueso utilizando células derivadas posparto
Inventor: KIHM ANTHONY
IPC: C12N5/074
Filed: 2004-06-25
Granted: 2016-04-05
Abstract: Un método ex vivo para inducir la diferenciación de células que se pueden obtener de tejido del cordón umbilical humano sustancialmente libre de sangre, en donde las células son capaces de autorrenovación y diferenciación, y en donde la expresión por dichas células de genes que codifican interleucina 8; reticulón 1; ligando 1 de quimiocina (motivo C-X-C); ligando 3 de quimiocina (motivo C-X-C); ligando 6 de quimiocina (motivo C-X-C) y proteína 3 inducida por el factor de necrosis tumoral alfa está aumentada en relación a una célula humana que es un fibroblasto, una célula madre mesenquimal o una célula madre ósea de cresta iliaca como se caracteriza en un conjunto de genes, a un fenotipo condrogénico que comprende exponer dichas células a uno o más agentes inductores de diferenciación condrogénica en donde dichas células comprenden además las siguientes características: (i) potencial de experimentar al menos 40 duplicaciones en el cultivo; (ii) unión y expansión en un recipiente de cultivo de tejido recubierto o sin recubrir, en donde el recipiente de cultivo de tejido recubierto comprende un recubrimiento de gelatina, laminina, colágeno, poliornitina, vitronectina o fibronectina; (iii) producción de vimentina y actina del músculo liso alfa; (iv) producción de cada uno de CD10, CD13, CD44, CD73, CD90, PDGFr-alfa y HLA-A,B,C, como se detectan por citometría de flujo; (v). falta de expresión de CD31, CD34, CD45, CD80, CD86, CD117, CD141, CD178, B7-H2, HLA-G y HLADR, DP,DQ como se detectan por citometría de flujo; (vi) secreción de MCP-1, IL-6, GCP-2, IL-8, TIMP1, TPO, KGF, HGF, FGF, HBEGF y BDNF como se detectan potr ensayo ELISA; (vii) falta de secreción de SDF-1 alfa, VEGF, TGF-beta2, ANG2 y PDGFbb como se detectan por ensayo ELISA; (viii). crecimiento en alrededor del 5% a alrededor del 20% de oxígeno (ix). requieren L-valina para el crecimiento; (x) expresión de PD-L2 y factor tisular como se miden por citometría de flujo; (xi) una disminución en la expresión de los siguientes genes en relación a una célula humana que es un fibroblasto, una célula madre mesenquimal, o una célula madre ósea de cresta iliaca como se caracteriza en un conjunto de genes: caja homeótica 2 de la baja estatura; proteína 2 de choque térmico de 27 kDa; ligando 12 de quimiocina (motivo C-X-C) (factor 1 derivado de células del estroma); elastina; ADNc DKFZp586M2022 (del clon DKFZp586M2022); caja homeótica 2 de mesénquima; homólogo 1 de caja homeótica de "sine oculis"; cristalina, alfa B; activador de morfogénesis 2 asociado a "dishevelled"; proteína DKFZP586B2420; similar a neuralin 1; tetranectina; dominio 3 de homología con src (SH3) y rico en cisteínas; gen 1 de translocación de linfocitos B, antiproliferativa; colesterol 25-hidroxilasa; factor de transcripción 3 relacionado con el enanismo; proteína hipotética FLJ23191; receptor de interleucina 11, alfa; potenciador de procolágeno C-endopeptidasa; homólogo 7 de "frizzled"; gen hipotético BC008967; colágeno, tipo VIII, alfa 1; tenascina C; proteína de caja homeótica iroquois 5; hefaestina; integrina, beta 8; glicoproteína 2 de vesícula sináptica; ADNc FLJ12280 fis, clon MAMMA1001744; factor 1 similar al receptor de citocinas; canal de potasio activado por calcio de conductancia intermedia/baja, subfamilia N, miembro 4; integrina, alfa 7; proteína DKFZP586L151; coactivador de la transcripción con motivo de unión a PDZ (TAZ); homólogo 2 de caja homeótica de "sine oculis"; proteína KIAA1034; respuesta de crecimiento precoz 3; caja homeótica de "distal less" 5; proteína hipotética FLJ20373; familia 1 de aldo-ceto reductasas, miembro C3 (3-alfa hidroxiesteroide deshidrogenasa, tipo II); biglicano; fibronectina 1; proencefalina; integrina, tipo beta 1 (con dominios de repetición similares a EGF); clon de ADNc EUROIMAGE 1968422; EphA3; proteína KIAA0367; receptor de péptido natriurético C/guanilato ciclasa C (receptor del péptido atrial natriurético C); proteína hipotética FLJ14054; ADNc DKFZp564B222 (del clon DKFZp564B222); proteína de membrana asociada a vesícula 5; proteína 1 de la matriz extracelular tipo fibulina que contiene EGF; similar a proteína 3 de interacción con BCL2/adenovirus E1B de 19 kDa; proteína 1 de unión a AE; polipéptido 1 de la subunidad VIIa de la citocromo c oxidasa (músculo); neuroblastoma, supresión de tumorigenicidad 1; y proteína 2 de unión al factor de crecimiento insulinoide, 36 kDa; y (xii) producción de GCP-2 y NOGO-A como se ensayan por inmunocitoquímica.