qas: question: ما هي خريطة الاقتطاع وما دورها في علم الأحياء الجزيئي؟

answers: answer_id: 1044514
question_id: 1138242
text: خريطة لمواقع الاقتطاع المعروفة ضمن تسلسل من الحمض النووي
answer_end: 74
is_impossible: no

question: ما هي الأدوات والتقنيات المستخدمة لتحضير خريطة الاقتطاع؟

answers: answer_id: 1044515
question_id: 1138243
text: يتطلب تعيين الاقتطاع استخدام إنزيمات الاقتطاع.
answer_end: 122
is_impossible: no

question: ما هو الهدف من تعيين مواقع الاقتطاع على الحمض النووي؟

answers: answer_id: 1044516
question_id: 1138244
text: كمرجع لهندسة البلازميدات أو غيرها من القطع القصيرة نسبياً من الحمض النووي
answer_end: 242
is_impossible: no

question: ما هي الخطوات الأساسية في إجراء تجربة تحديد مواقع الاقتطاع؟

answers: answer_id: 1044518
question_id: 1138246
text: مثل رسم الخرائط عن طريق التنبيغ
answer_end: 399
is_impossible: no

question: ما هو دور تقنية الهضم المفرد والمزدوج في تحديد مواقع الاقتطاع؟

answers: answer_id: 1044519
question_id: 1138247
text:  بناء على أحجام شظايا الحمض النووي الناتجة
answer_end: 785
is_impossible: no

question: ما هي المشكلات المحتملة التي يمكن أن تحدث خلال عملية تحديد مواقع الاقتطاع؟

answers: answer_id: 1044520
question_id: 1138248
text: قد تكون بعض الأجزاء الأصغر قد نفدت من نهاية الجل. يحدث هذا بشكل متكرر إذا شُغل الجل لفترة طويلة. المصدر الثاني المحتمل للخطأ هو أن الجل لم يكن كثيفاً بدرجة كافية 
answer_end: 1630
is_impossible: no

question: كيف يمكن استخدام معلومات مواقع الاقتطاع في هندسة البلازميدات والحمض النووي؟

answers: answer_id: 1044522
question_id: 1138250
text:  الحمض النووي الجيني ركيماً غير قابل للذوبان، وتترك البلازميدات فائقة الالتفاف في محلول.
answer_end: 2559
is_impossible: no
context: خريطة الاقتطاع هي خريطة لمواقع الاقتطاع المعروفة ضمن تسلسل من الحمض النووي. يتطلب تعيين الاقتطاع استخدام إنزيمات الاقتطاع. في علم الأحياء الجزيئي، تستخدم خرائط الاقتطاع كمرجع لهندسة البلازميدات أو غيرها من القطع القصيرة نسبياً من الحمض النووي، وأحياناً للحمض النووي الجينومي الأطول. هناك طرق أخرى لتعيين المعالم على الحمض النووي لجزيئات الحمض النووي ذات الطول الأطول، مثل رسم الخرائط عن طريق التنبيغ. تتمثل إحدى الطرق في بناء خريطة اقتطاع لجزيء الحمض النووي في تسلسل الجزيء بأكمله وتشغيل التسلسل من خلال برنامج كمبيوتر سيجد مواقع التعرف الموجودة لكل إنزيم اقتطاع معروف. قبل أتمتة التسلسل، كان من المكلف للغاية تسلسل شريط الحمض النووي بأكمله. للعثور على المواضع النسبية لمواقع الاقتطاع على البلازميد، تُستخدم تقنية تتضمن هضم اقتطاع مفرد ومزدوج. بناء على أحجام شظايا الحمض النووي الناتجة، يمكن استنتاج مواقع المواقع. يعد تعيين الاقتطاع تقنية مفيدة للغاية عند استخدامها لتحديد اتجاه الإدراج في متجه الاستنساخ، عن طريق تعيين موضع موقع اقتطاع خارج المركز في الإدخال. نهج. يتطلب الإجراء التجريبي أولاً حصة من الحمض النووي البلازميد المنقى (انظر الملحق) لكل هضم ليُشغل. ثم تُجرى عملية الهضم مع كل إنزيم (إنزيمات) مختار. تُشغل العينات الناتجة لاحقاً على هلام رحلان كهربائي، عادة على هلام الأغاروز. الخطوة الأولى بعد الانتهاء من الكهربائي هي إضافة أحجام الشظايا في كل حارة. يجب أن يكون مجموع الأجزاء الفردية مساوياً لحجم الجزء الأصلي، ويجب أيضا أن تكون أجزاء كل جزء من الملخص بنفس حجم بعضها البعض. إذا لم تُضاف أحجام الأجزاء بشكل صحيح، فهناك مشكلتان محتملتان. في إحدى الحالات، قد تكون بعض الأجزاء الأصغر قد نفدت من نهاية الجل. يحدث هذا بشكل متكرر إذا شُغل الجل لفترة طويلة. المصدر الثاني المحتمل للخطأ هو أن الجل لم يكن كثيفاً بدرجة كافية وبالتالي لم يكن قادراً على حل الشظايا القريبة من الحجم. هذا يؤدي إلى عدم وجود فصل للشظايا التي كانت قريبة الحجم. إذا كانت جميع عمليات الهضم تنتج شظايا تضيف واحدة، فقد يستنتج موقع مواقع اقتطاع النوكلياز عن طريق وضعها في بقع على جزء الحمض النووي الأصلي الذي من شأنه أن يلبي أحجام الأجزاء التي تنتجها جميع عمليات الهضم الثلاثة. تمسخ سريع وإعادة إنتاج تحضير الحمض النووي الخام عن طريق التحلل القلوي للخلايا والتحييد اللاحق. في هذه التقنية تُحلل الخلايا في الظروف القلوية. تُغيّر طبيعة الحمض النووي في الخليط (فصل الخيوط) عن طريق تعطيل الروابط الهيدروجينية بين الشريطين. يخضع الحمض النووي الجينومي الكبير للتشابك ويبقى مشوهاً عندما يُخفض الرقم الهيدروجيني أثناء التحييد. بعبارة أخرى، تعود الخيوط معاً بطريقة مضطربة، وتتزاوج بشكل عشوائي. ستبقى خيوط البلازميدات الدائرية فائقة الالتفاف محاذاة بشكل وثيق نسبياً وستعاد طبيعتها بشكل صحيح. ومن ثم، يكون الحمض النووي الجيني ركيماً غير قابل للذوبان، وتترك البلازميدات فائقة الالتفاف في محلول. ويمكن أن يتبع ذلك استخلاص الفينول لإزالة البروتينات والجزيئات الأخرى. ثم يمكن أن يتعرض الحمض النووي لترسيب الإيثانول لتركيز العينة.