## PENDAHULUAN
Pneumonia  merupakan  penyakit  berbahaya  yang dapat  disebabkan  oleh  virus  atau  bakteri,  salah satunya  adalah  bakteri Staphylococcus  aureus . Pneumonia merupakan infeksi akut pada parenkim paru, bronkiolus respiratorius dan alveoli, menimbulkan  konsolidasi  jaringan  paru  sehingga
dapat  mengganggu  pertukaran  oksigen  dan karbon dioksida di paru-paru (IDI, 2014).
Menurut World  Health  Organization (WHO)  pada tahun  2014,  kematian  pneumonia  di  Indonesia pada tahun 2013 berada pada urutan ke-8, dengan skor  sebesar  22.000.  Menurut  hasil  Riset Kesehatan  Dasar  (Riskesdas)  tahun  2013,  lima
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN KALANDUYUNG ( Guazuma ulmifolia Lam.) TERHADAP PERTUMBUHAN STAPHYLOCOCCUS AUREUS DENGAN METODE DIFUSI CAKRAM (KIRBY-BAUER)
Antibacterial Activity Test of Ethanol Extract from Kalanduyung Leaf ( Guazuma ulmifolia Lam.) on Staphylococcus aureus Growth with Difussion Method (Kirby-Bauer)
*Adelgrit Trisia, Regina Philyria, & Angeline Novia Toemon
Medical Study Program, Universitas Palangka Raya, Yos Sudarso Kampus Tunjung Nyaho St., Palangka Raya, Indonesia
*e-mail : adelgrit_trisia@yahoo.com

## ABSTRAK
Pneumonia merupakan infeksi akut pada parenkim paru, bronkiolus respiratorius dan alveoli , yang dapat disebabkan oleh bakteri Staphylococcus aureus . Kalanduyung ( Guazuma ulmifolia Lam.) merupakan tumbuhan herbal Kalimantan Tengah yang  dipercaya  masyarakat  memiliki  banyak  khasiat  salah  satunya  untuk  pneumonia. Mengetahui  adanya  aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun Kalanduyung terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus . Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan rancangan Post test-only control group design . Ekstrak etanol daun Kalanduyung pada konsentrasi  20%,  40%,  60%,  dan  80%  diuji  aktivitas  antibakterinya  terhadap  pertumbuhan Staphylococcus  aureus menggunakan metode difusi cakram Kirby - Bauer dengan Amoksisilin sebagai kontrol positif dan dimetil sulfoksida 10% sebagai kontrol negatif. Data penelitian dianalisis secara statistik menggunakan uji One Way Anova . Ekstrak etanol daun Kalanduyung  pada  konsentrasi  20%,  40%,  60%,  dan  80%  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dengan  rata-rata  zona  hambat masing-masing  yaitu  6,875  mm, 8,5  mm,  10,175 mm,  dan  14,925  mm.  Ekstrak etanol daun Kalanduyung dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
Kata kunci: Staphylococcus aureus, daun Kalanduyung (Guazuma ulmifolia Lam .), Cakram Kirby-Bauer

## ABSTRACT
Pneumonia  is  an  infectious  of  lung  parenchyma,  respiratory  bronchioles,  and  alveolus,  caused  by Staphylococcus aureus. Kalanduyung (Guazuma ulmifolia Lam.) is  an  herb  plant  from  Central Borneo  which people believe  has  many  benefits,  which  one  is  curing  pneumonia.  To  identify  the  antibacterial  activity  from  ethanol  extract of Kalanduyung leaves  to  the  Staphylococcus aureus growth.  This  research  was  an  experimental  with  post  test-only control group design. Ethanol extract of Kalanduyung leaves in 20%, 40%, 60%, and 80% concentrations was tested for antibacterial  capability  against  Staphylococcus aureus with  Kirby  Bauer  disc  diffusion  method, with  Amoxicillin  as the positive  control  and  10% Dimethyl Sulfoxide. This data was  statistically  analyzed  with  One  Way Anova.  Ethanol extract of Kalanduyung leaves can inhibit Staphylococcus aureus with each inhibition zone diameter was 6.875 mm, 8.5 mm, 10.175 mm, and 14.925 mm. The ethanol extract of Kalanduyung leaves can inhibit the growth of  Staphylococcus aureus bacteria.
Keywords: Staphylococcus aureus, Kalanduyung leaf (Guazuma ulmifolia Lam.), Kirby-Bauer disk
provinsi  yang  mempunyai  insiden  pneumonia balita  tertinggi  adalah  Nusa  Tenggara  Timur (38,5%), Aceh (35,6%), Bangka Belitung (34,8%), Sulawesi  Barat  (34,8%),  dan  Kalimantan  Tengah (32,7%).  Insiden  tertinggi  pneumonia  balita terdapat pada kelompok umur 12-23 bulan (21,7%) (BPPK  Kemenkes  RI,  2013). Hasil  tersebut membuktikan  bahwa  kecenderungan  penyakit yang  disebabkan  bakteri  masih  dialami  oleh penduduk Indonesia. Salah satunya adalah karena infeksi Staphylococcus  aureus ,  yaitu  penyebab penyakit pneumonia.
Staphylococcus  aureus adalah  spesies  yang sering  menginfeksi  karena  dapat  ditemukan  di udara  dan  lingkungan  sekitar  (Kenneth,  2011). SENTRY Antimicrobial  Surveillance  Program dari tahun 1997 sampai 2001 menyatakan
Staphylococcus  aureus adalah  patogen  yang paling  umum  diisolasi  di  Amerika  Serikat  dan  di Eropa,  serta  organisme  paling  umum  kedua  di Amerika Latin (Tong et al ., 2015). Pada penelitian di  Bali,  ditemukan  pertumbuhan  beberapa  jenis mikroorganisme, salah satunya adalah Staphylococcus aureus (1,4%), pada biakan darah subjek pneumonia (Purniti et al ., 2011).
Staphylococcus  aureus merupakan  flora  normal pada saluran nafas atas, namun dapat menyebabkan  infeksi  jika  jumlahnya  melebihi jumlah  normal  (>110  CFU/ml)  (Rondhianto et  al .,
2016). Namun, Staphylococcus  aureus menjadi masalah  yang  sangat  serius  karena  terjadinya peningkatan  resistensi  bakteri  ini  terhadap berbagai jenis antibiotik, dikarenakan penggunaannya  yang  tidak  sesuai.  Maka  banyak penelitian-penelitian terkait tanaman-tanaman yang  memiliki  potensi  antibakteri.  Salah  satu tanaman yang memiliki potensi antibakteri tersebut
adalah  Kalanduyung  ( Guazuma  ulmifolia Lam.) atau  sering  disebut  dengan  Jati  Belanda. Penelitian  yang dilakukan Rahmawati pada tahun 2014  menyatakan  bahwa  daun  Jati  Belanda memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri gram positif, yaitu Bacillus cereus dan Escherichia coli . Tumbuhan  Kalanduyung  ( Guazuma  ulmifolia Lam.)  merupakan  tanaman  kelas Dicotyledoneae dan dapat dijumpai di Kalimantan Tengah, karena sifatnya  yang  dapat  tumbuh  di  daerah  tropis. Berdasarkan  studi  pendahuluan  yaitu  dalam bentuk kuisioner, Kalanduyung digunakan beberapa masyarakat sebagai pengobatan infeksi saluran  pernafasan.  Berdasarkan  hasil  fitokimia yang  telah  dilakukan,  daun  dari  tanaman Kalanduyung  mengandung senyawa-senyawa kimia  seperti  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin, dan  steroid.  Adanya  kandungan  senyawa  yang dapat bekerja sebagai antimikroba atau antibakteri membuat  daun  Kalanduyung  berpotensi  menjadi antibakteri bagi bakteri Staphylococcus aureus .
Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan uji aktivitas antibakteri daun Kalanduyung ( Guazuma ulmifolia Lam.) terhadap Staphylococcus aureus
dalam rangka membuktikan  adanya  kandungan  antibakteri dalam daun Kalanduyung. Penelitian ini dilakukan secara in vitro dengan metode difusi cakram Kirby Bauer,  kemudian  daya  hambat  diukur  dengan menggunakan jangka sorong terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus.

## METODOLOGI

## Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian true experimental design . Rancangan penelitian menggunakan post test-only control group design .

## Sampel dan Teknik Pengambilan Sampel
Pengambilan  sampel  dilakukan  dengan  teknik randomisasi,  yaitu  koloni  Staphylococcus  aureus yang  tumbuh  pada  media  secara  acak.  Sampel diambil menggunakan jarum inokulasi (ose) (Mpila et al ., 2012).
Perhitungan besar sampel untuk setiap perlakuan ditentukan dengan menggunakan rumus Federer, yaitu  :    (t-1)(n-1)  15  dimana,  t  =  banyaknya perlakuan  yang  dicoba,  n  =  banyaknya  sampel (Sukandar et  al .,  2009).  Jadi,  jumlah    perlakuan ada  4,  yaitu  perlakuan  pada  konsentrasi  20%, 40%,  60%,  dan  80%,  ditambah  dengan  1 perlakuan  untuk  kontrol  positif  dan  1  perlakuan untuk  kontrol  negatif,  dengan  pengulangan sebanyak 6 kali. Jadi didapatkan total sebanyak 24 kali perlakuan.

## Prosedur

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tumbuhan  Kalanduyung  yang  diambil  dari  Jalan Yos Sudarso XVII, Palangka Raya diuji fitokimia di
Laboratorium  Fakultas  Kedokteran  Bagian  Kimia- Biokimia Universitas Lambung Mangkurat. Hasil uji fitokimia  dari  laboratorium  tersebut  menyatakan bahwa daun tumbuhan tersebut memiliki kandungan sebagai berikut:
Tabel I. Hasil Uji Fitokimia Kandungan Kadar Saponin 9,010 ± 0,257 Alkaloid 47,192 ± 0,447 Flavonoid 2,852 ± 0,055 Steroid 43,164 ± 0,276 Tanin 16,138 ± 0,0405 Dari hasil uji fitokimia yang didapatkan menunjukkan  bahwa  kandungan  terbanyak  yang terdapat pada daun Kalanduyung adalah alkaloid. Daun  Kalanduyung  ( Guazuma  ulmifolia Lam.) yang  diteliti  adalah  daun  yang  memenuhi  kriteria yang telah ditetapkan sebelumnya yaitu daun yang masih  melekat  dengan  batang  dengan  kriteria masih berwarna hijau secara keseluruhan dibagian atasnya  dan  tidak  ada  bagian  daunnya  yang terpotong  atau  dimakan  hewan.  Kemudian  daun diekstraksi dengan metode maserasi dengan hasil seperti yang tercantum Tabel II.
Tabel II. Hasil Pengukuran berbagai Tahap Ekstraksi Bobot Daun Kalanduyung segar (kg) Bobot Simplisia (g) Volume filtrat (mL) Bobot Ekstrak Kental (g) 4 600 6134 147,6376
Hasil  dari  ekstrak  etanol  daun  Kalanduyung ( Guazuma  ulmifolia Lam.)  yang  dibentuk  dalam berbagai konsentrasi, baik konsentrasi 20%, 40%, 60%,  dan  80%,  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus yang  ditumbuhkan  pada media Mueller  Hinton  Agar mampu  membentuk diameter zona hambat dalam pertumbuhan bakteri tersebut.  Hal  ini  dapat  terlihat  dari  hasil  yang tercantum pada Tabel III dibawah ini.
Menentukan tempat dan waktu penelitian
Mengajukan izin melakukan penelitian kepada
Laboratorium Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Muhammadiyah Palangka Raya Pembuatan ekstrak daun Kalanduyung Uji aktivitas antibakteri
Pengukuran diameter zona hambat yang terbentuk
Mengolah dan menganalisis data
Tabel III. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat yang terbentuk pada Media Mueller Hinton Agar
Diameter Zona Hambat (mm) Kontrol Negatif (mm) Kontrol Positif (mm) Diameter Zona Hambat tiap Konsentrasi Ekstrak (mm) 20% 40% 60% 80% I 0 25,9 7,7 8,9 11,9 12,8 II 0 24,2 5,1 7,8 10,3 16,7 III 0 25,8 6,8 8,6 8,7 15,3 IV 0 30,5 7,9 8,7 9,8 14,9 Rata-rata 0 26,6 6,9 8,5 10,2 14,9
Gambar 1. Rata-rata Diameter Zona Hambat Pertumbuhan
Staphylococcus aureus oleh Ekstrak Etanol Daun Kalanduyung
Dari  Tabel  III  dan  Gambar  1  di  atas  dapat  dilihat bahwa masing-masing konsentrasi dapat membentuk  zona  hambat  pada  media Mueller Hinton  Agar yang  telah  ditumbuhkan  bakteri Staphylococcus  aureus ,  yaitu  konsentrasi  20% dengan  rata-rata  ukuran  zona  hambat  yang terbentuk sebesar 6,9 mm, 40% sebesar 8,5 mm, 60% sebesar 10,2 mm, dan 80% sebesar 14,9 mm. Dari  keempat  konsentrasi  tersebut  terlihat  bahwa pada  konsentrasi  80%  zona  hambat  yang terbentuk adalah  zona hambat  yang terbesar,  hal ini  dapat  terlihat  dari  rata-rata  zona  hambat  yang terbentuk yaitu 14,9 mm.
Data penelitian yang didapat dilakukan uji statistic berupa uji One Way Anova , sebelum dilakukan uji tersebut maka harus dilakukan uji normalitas untuk memastikan  data  berdistribusi  normal  dan  uji varians karena data harus homogen.
Tabel IV. Uji Normalitas Saphiro-Wilk
Uji saphiro-wilk Sig Zona hambatan oleh ekstrak daun Kalanduyung 0,162
Tabel  IV  merupakan  hasil  uji  normalitas saphiro- wilk yang menunjukkan bahwa data memiliki nilai p >  0,05  berarti  data  tersebut  terdistribusi  normal. Data  yang  berdistribusi  normal merupakan  syarat dari  data  parametrik  sehingga  dapat  dilakukan analisis homogenitas dan One Way Anova .
Tabel V. Uji Varians Data Uji Varians Sig Zona hambatan oleh ekstrak daun Kalanduyung 0,553
Tabel V menunjukkan bahwa nilai p  >  0,05,  yang artinya data yang ada dalam penelitian ini memiliki varian  yang  sama  sehingga  dapat  dilakukan pengujian dengan menggunakan One Way Anova.
Tabel VI. Uji One Way Anova
Uji One Way Anova Sig Kelompok perlakuan ekstrak daun Kalanduyung 0,000
Tabel  VI  menunjukkan  bahwa  hasil  uji One  Way Anova terhadap  kelompok  perlakuan  ekstrak etanol daun Kalanduyung memiliki nilai p = 0,000. Karena  nilai  p  <  0,05,  maka  nilai  rata-rata  antar kelompok perlakuan ekstrak etanol daun Kalanduyung  adalah  berbeda  bermakna.  Untuk mengetahui  kelompok  perlakuan  yang  memiliki perbedaan  bermakna  tersebut,  maka  selanjutnya dilakukan analisis post-hoc.
7 8.5 10.2 14.9 0 3 6 9 12 15 20 40 60 80 D iam et er Z o na H am ba t (m m )
Konsentrasi Ekstrak (%)
Tabel VII. Uji Analisis Post-Hoc 20% 40% 60% 80% Kontrol Positif Kontrol Negatif 20% - 0,144 0,006* 0,000* 0,000* 0,000* 40% 0,144 - 0,133 0,000* 0,000* 0,000* 60% 0,006* 0,133 - 0,000* 0,000* 0,000* 80% 0,000* 0,000* 0,000* - 0,000* 0,000* Kontrol Positif 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* - 0,000* Kontrol Negatif 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* 0,000* -
Keterangan: *: menyatakan terdapat perbedaan bermakna (p<0,05)
Tabel  VII  merupakan  hasil  uji Post-Hoc yang menunjukkan  jika  data  memiliki  nilai  p  <  0,05 berarti  data  tersebut  signifikan  atau  berbeda bermakna dengan konsentrasi lain. Jika p > 0,05, maka  data  tersebut  tidak  signifikan  atau  tidak berbeda  bermakna  dengan  konsentrasi  lain.  Uji Post-Hoc menunjukkan  diameter  zona  hambat bakteri Staphylococcus  aureus untuk  konsentrasi ekstrak  20%  tidak  memiliki  perbedaan  bermakna dengan konsentrasi 40%, tetapi terdapat perbedaan bermakna pada konsentrasi 60%, 80%, kontrol  positif,  dan  kontrol  negatif.  Untuk konsentrasi  40%,  tidak  memiliki  perbedaan bermakna  dengan  konsentrasi  20%  dan  60%, tetapi  berbeda  bermakna  dengan  konsentrasi 60%,  80%,  kontrol  positif,  dan  kontrol  negatif. Konsentrasi  60%  tidak  memiliki  perbedaan bermakna  dengan  konsentrasi  40%,  namun berbeda bermakna dengan konsentrasi 20%, 80%, dan  seluruh  kontrol.  Sedangkan  konsentrasi  80% berbeda  bermakna  dengan  semua  konsentrasi, baik 20%, 40%, 60%, dan seluruh kontrol. Pada hasil Tabel VII terlihat bahwa masing-masing kelompok  konsentrasi  ekstrak  etanol  dari  daun tumbuhan  Kalanduyung  dapat  membentuk  zona hambat. Konsentrasi 20% dapat membentuk zona hambat  dengan  rata-rata  ukuran  zona  hambat yang terbentuk sebesar 6,9 mm. Konsentrasi 40%
dapat  membentuk  zona  hambat  dengan  rata-rata sebesar  8,5  mm.  Konsentrasi  60%  dapat membentuk  zona  hambat  dengan  rata-rata sebesar  10,2  mm.  Konsentrasi  80%  dapat membentuk  zona  hambat  dengan  rata-rata sebesar 14,9 mm. Pada kontrol positif didapatkan zona  hambat  dengan  rata-rata  26,6  mm. sedangkan  pada  kontrol  negatif  yang  berupa dimethyl sulfoxide (DMSO) tidak membentuk zona hambat pada medium yang ditumbuhi Staphylococcus  aureus .  Hal  ini  membuktikan bahwa  kandungan  ekstrak  daun  Kalanduyung dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus .
Daun Kalanduyung memiliki kandungan saponin, tanin, alkaloid, flavonoid, dan steroid yang merupakan  senyawa  antibakteri.  Hal  ini  didukung oleh  penelitian  Supomo  tahun  2015,  yang menyatakan  bahwa  kulit  buah  manggis  yang memiliki  kandungan  saponin,  tanin,  alkaloid, flavonoid, dan steroid, memiliki potensi antibakteri. Mekanisme  kerja  saponin  sebagai  antibakteri adalah menurunkan tegangan permukaan sehingga  mengakibatkan  naiknya  permeabilitas atau  kebocoran  sel  dan  mengakibatkan  senyawa intraseluler  akan  keluar.  Tanin  memiliki  aktifitas antibakteri yang berhubungan dengan kemampuannya untuk menginaktifkan adhesin sel mikroba juga menginaktifkan enzim, dan mengganggu transport protein pada lapisan dalam sel (Ngajow et al., 2013). Mekanisme kerja alkaloid sebagai antibakteri diprediksi
melalui penghambatan  sintesis  dinding  sel  yang  akan menyebabkan  lisis  pada  sel  sehingga  sel  akan mati (Nikham, 2012). Flavonoid diketahui memiliki sifat  antibakteri  dimana  mekanisme  kerjanya adalah  membentuk  senyawa  kompleks  dengan
protein  ekstraseluler  dan  terlarut  sehingga  dapat merusak  membran  sel  bakteri  dan  diikuti  dengan keluarnya  senyawa  intraseluler  (Darmawati et al ., 2015). Mekanisme kerja steroid dalam
menghambat mikroba  adalah  dengan  merusak membran plasma sel mikroba, sehingga menyebabkan bocornya  sitoplasma  keluar  sel yang  selanjutnya menyebabkan  kematian  sel
(Wiyanto, 2010). Berdasarkan mekanisme kerjanya,
antibakteri dibedakan menjadi
bakteriostatik dan bakterisidal. Antibakteri bakteriostatik adalah zat yang bekerja menghambat  pertumbuhan  bakteri,  sedangkan antibakteri  bakterisida  adalah  zat  yang  bekerja mematikan bakteri.
Pada tabel III menunjukkan diameter zona hambat Staphylococcus  aureus untuk  kontrol  negatif, terlihat  adanya  perbedaan  yang  bermakna terhadap  kontrol  positif  dan  berbagai  konsentrasi ekstrak etanol daun Kalanduyung, yaitu 20%, 40%, 60%,  dan  80%.  Kontrol  negatif  yang  digunakan adalah  DMSO  yang  menunjukkan  tidak  adanya zona  hambat.  Pelarut  DMSO  merupakan  pelarut organik  dan  tidak  bersifat  bakterisidal  (Assidqi et al ., 2012). Hal ini menandakan bahwa DMSO tidak memiliki  aktivitas  anti  bakteri,  sehingga  dapat dipastikan  aktivitas  antibakteri  yang  dihasilkan tidak  dipengaruhi  secara  langsung  oleh  DMSO (Amalia et  al .,  2016).  Selain  itu,  DMSO  juga merupakan pelarut yang dapat melarutkan hampir semua senyawa polar maupun non polar. Kontrol  positif  menunjukkan  perbedaan  yang bermakna  dengan  kontrol  negatif  dan  berbagai konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  Kalanduyung, karena menghasilkan  aktivitas  antibakteri  dengan diameter  zona  hambat  paling  besar  terhadap bakteri  uji,  yaitu  26,6  mm.  Antibiotik  yang
digunakan sebagai kontrol positif adalah amoksisilin  yang  memiliki  spektrum  luas.  Zona hambat dari perlakuan amoksisilin pada penelitian ini  adalah  sebesar  26,6  mm  yang  menunjukan bahwa  ampisilin  yang  diuji  adalah  sensitif berdasarkan standart CLSI.  Mekanisme kerja dari amoksisilin adalah dengan menghambat biosintesis  dari  mukopeptida  dinding  sel  bakteri saat  bakteri  bermultiplikasi  (Kaur et  al .,  2011).
Amoksisilin,  memiliki  senyawa-senyawa  kimia yang lebih kuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dibandingkan dengan ekstrak daun Kalanduyung.
Berdasarkan  hasil  pengukuran  diameter  zona hambat  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun Kalanduyung  memiliki  daya  hambat  yang  sedang sampai  kuat  terhadap Staphylococcus  aureus . Konsentrasi  20%  dan  40% memiliki  daya  hambat sedang,  sedangkan  konsentrasi  60%  dan  80% memiliki  daya  hambat  yang  kuat.  Penentuan kriteria  ini  berdasarkan  Davis  dan  Stout  (1971) yang melaporkan bahwa ketentuan kekuatan daya antibakteri sebagai berikut: daerah hambatan ≥ 20 mm  termasuk  sangat  kuat,  daerah  hambatan  10- 20 mm kategori kuat, daerah  hambatan  5-10 mm kategori sedang, dan daerah hambatan 5 mm atau kurang  termasuk  kategori  lemah  (Mpila et  al ., 2012).
Pada tabel III terlihat bahwa diameter zona hambat yang terbesar dan yang paling mendekati diameter zona  hambat  yang  dibentuk kontrol  positif  dimiliki oleh  konsentrasi  80%  sebesar  14,9  mm  dan terkecil yaitu konsentrasi 20% sebesar 6,9 mm. Hal tersebut  membuktikan  bahwa  semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  daun  Kalanduyung,  maka semakin  baik  untuk  menghambat  pertumbuhan Staphylococcus  aureus .  Menurut  penelitian  yang
dilakukan  Rastina et  al pada  tahun  2015, konsentrasi  efektif  adalah  konsentrasi  yang  daya antibakterinya dikategorikan kuat untuk membentuk  zona  hambat  terbesar.  Maka  dapat disimpulkan, maka konsentrasi 80% ekstrak etanol daun Kalanduyung merupakan konsentrasi efektif dalam menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus ,  terlihat  dari  besarnya  diameter  zona hambat yang terbentuk. Hal tersebut didukung oleh Pelczar dan Chan (1988) yang menyatakan bahwa salah  satu  faktor  yang  mempengaruhi  akivitas bahan  antimikroba,  yaitu  konsentrasi  bahan antimikroba.  Daya  hambat  yang  dihasilkan  oleh bahan  antimikroba  akan  semakin  tinggi  apabila konsentrasinya  juga  tinggi  (Amrie et  al .,  2014).
Namun,  sebaiknya  untuk  mengetahui  konsentrasi efektif dari suatu zat antimikroba perlu dilakukan uji aktivitas antibakteri dengan metode dilusi, sehingga didapatkan konsentrasi hambat minimum dari ekstrak tersebut (Soleha, 2015).
Hasil  analisis  data  diameter  zona  hambat  yang terbentuk  dengan One  Way  Anova menunjukkan nilai signifikansi 0,000, yang berarti p < 0,05. Nilai p  <  0,05  menunjukkan  adanya  perbedaan bermakna  rata-rata  antar  kelompok  konsentrasi pada penelitian ini. Setelah dilakukan uji Post-Hoc , ditemukan  bahwa  untuk  konsentrasi  ekstrak  20% tidak  memiliki  perbedaan  bermakna  dengan konsentrasi  40%,  tetapi  terdapat  perbedaan bermakna pada konsentrasi 60% dan 80%. Untuk konsentrasi  40%,  tidak  memiliki  perbedaan bermakna  dengan  konsentrasi  20%  dan  60%, tetapi  berbeda  bermakna  dengan  konsentrasi 80%.  Konsentrasi  60%  tidak  memiliki  perbedaan bermakna  dengan  konsentrasi  40%,  namun berbeda  bermakna  dengan  konsentrasi  20%  dan 80%.  Sedangkan  konsentrasi  80%  berbeda
bermakna  dengan  semua  konsentrasi,  baik  20%, 40%, dan 60%.
Secara keseluruhan pada penelitian ini pengulangan dalam berbagai konsentrasi menunjukkan aktivitas antibakteri dengan terbentuknya  zona  hambat.  Hal  ini  membuktikan hipotesis dalam penelitian ini bahwa ekstrak etanol daun  Kalanduyung  ( Guazuma  ulmifolia Lam. ) menghambat pertumbuhan
Staphylococcus
aureus dengan metode Kirby-Bauer.

## KESIMPULAN
Berdasarkan uji fitokimia yang dilakukan, kandungan  terbanyak  pada  daun  Kalanduyung ( Guazuma ulmifolia Lam . ) adalah alkaloid. Ekstrak etanol  daun  Kalanduyung  ( Guazuma  ulmifolia Lam . )  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi uji 20%, 40%,  60%  dan  80%.  Konsentrasi  paling  efektif ekstrak  etanol  daun  Kalanduyung  ( Guazuma ulmifolia Lam . )  yang  memiliki  diameter  zona hambat  terbesar  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus adalah  konsentrasi  80% dengan  rata-rata  diameter  zona  hambat  yang terbentuk sebesar 14,9 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
Ikatan  Dokter  Indonesia.  Panduan  Praktik  Klinis Bagi Dokter di Fasilitas Pelayanan
Kesehatan Primer. Jakarta. 2014:381. Badan  Penelitian  dan  Pengembangan  Kesehatan Kementerian Kesehatan RI. Riset Kesehatan Dasar 2013. Jakarta. 2013. Kenneth DS. Rangkuman Kasus Klinik Mikrobiologi  dan  Penyakit  Infeksi.  Jakarta:
Karisma Publishing Group. 2011.
Tong SYC, Davis JS, Eichenberger E, Holland TL,
Fowler VG. Staphylococcus aureus
Infections:  Epidemiology,  Pathophysiology, Clinical  Manifestations,  and  Management. Journal ASM. 2015.
Purniti  PS,  Subanada  IB,  Kari  IK,  Arhana  BNP,
Iswari IS, Tarini NMA. Surveilan Pneumokokus  dan  Dampak  Pneumonia pada Anak Balita. Sari Pediatri.
2011;12(5):359-364.
Rondhianto,  Kurniawati  D,  Vidiany  AK.  Batuk Efektif dan Napas Dalam untuk Menurunkan Kolonisasi Staphylococcus  aureus dalam Sekret  Pasien  Pasca  Operasi  dengan Anastesi  Umum  di  RSD  Dr.  Soebandi Jember. NurseLine  Journal. 2016;1(1):151-
158.
Rahmawati. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun  Jati  Belanda  ( Guazuma  ulmifolia Lamk)  terhadap  Bakteri  Penyebab  Diare ( Bacillus  cereus dan Escherichia  coli ) [Skripsi].  Bandung:  Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Islam Bandung. 2014.
Mpila  DA,  Fatimawali,  Wiyono  WI.  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Mayana ( Coleus  atropurpureus  [L]  Benth )  terhadap Staphylococcus  aureus , Escherichia  coli dan Pseudomonas  aeruginosa secara  In- Vitro.  Manado:  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas  Sam Ratulangi.  2012;1(1):13-21.
Sukandar  EY,  Elfahmi,  Nurdewi.  Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Air  Daun  Jati  Belanda ( Guazuma Ulmifolia Lamk.) terhadap Kadar
Lipid  Darah  pada  Tikus  Jantan.  Bandung:
Institut Teknologi Bandung . JKM.
2009;8(2):102-112.
Supomo, Syamsul ES, Rukmana. Uji Aktivitas Anti Bakteri  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah  Manggis ( Garcinia  mangostana L.)  terhadap  Bakteri
Staphylococcus  epidermidis ATCC  49461 . Jurnal Ilmu Kesehatan. 2015;3(2).
Ngajow  M,  Abidjulu  J,  Kamu  VS.  Pengaruh Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Batang  Matoa ( Pometia pinnata ) terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus secara  In  vitro. Jurnal MIPA UNSRAT Online. 2013;2(2):182-132.
Nikham, Basjir TE. Uji Bahan Baku Antibakteri dari Buah Mahkota Dewa ( Phaleria  Macrocarpa
(Scheff)  Boerl. ) Hasil  Iradiasi  Gamma  dan Antibiotik terhadap Bakteri Patogen.
Serpong:  Prosiding  Pertemuan  Ilmiah  Ilmu Pengetahuan dan Teknologi Bahan. 2012. Darmawati  AASK,  Bawa  IGAG,  Suirta  IW.  Isolasi dan Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid  pada  Daun  Nangka  ( Artocarpus heterophyllus Lmk ) dan Aktivitas Antibakteri terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus . Jurnal Kimia. 2015;9(2):203-210.
Wiyanto  DB.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Rumput  Laut Kappaphycus  alvarezii dan Eucheuma  denticullatum terhadap  Bakteri Aeromonas  hydrophila dan Vibrio  harveyii . Jurnal Kelautan. 2010;3(1):1-17.
Assidqi  K,  Tjahjaningsih  W,  Sigit  S.  Potensi Ekstrak  Daun  Patikan  Kebo  ( Euphorbia hirta ) sebagai Antibakteri terhadap Aeromonas  hydrophila secara In  Vitro.
Journal  of  Marine  and  Coastal  Science . 2012;1(2):113 – 124.
Amalia S, Wahdaningsih S, Untari EK. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n-Heksan Kulit Buah Naga Merah  ( Hylocereus  polyrhizus  Britton  & Rose )  terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus ATCC  25923.  Pontianak:  Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura. Jurnal Fitofarmaka Indonesia. 2016;1(2):61-64.
Kaur  SP,  Rao  R,  Nanda  S. Amoxicillin:  A  Broad Spectrum Antibiotic . India. 2011;3(3):30-37.
Rastina,  Sudarwanto  M,  Wientarsih  I.  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Kari  ( Murraya koenigii )  terhadap Staphylococcus  aureus , Escherichia  coli ,  dan Pseudomonas  sp . Jurnal  Kedokteran  Hewan.  2015;9(2):185- 188.
Amrie  AGA,  Ivan,  Anam  S,  Ramadhanil.  Uji Efektifitas Ekstrak Daun dan Akar Harrisonia perforata Merr.  terhadap  Pertumbuhan Bakteri Vibrio  cholerae.  Online  Jurnal  of Natural Science. 2014; 3(3):331-340.
Soleha  TU.  Uji  Kepekaan  terhadap  Antibiotik. Fakultas  Kedokteran  Universitas  Lampung. 2015;5(9):119-123.