Kandungan senyawa polifenol , Sudirman et al.

## KANDUNGAN SENYAWA POLIFENOL DAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAUN TUMBUHAN APU-APU ( Pistia stratiotes ) DENGAN METODE PENGERINGAN YANG BERBEDA
Sabri Sudirman*, Erina Aprilia, Miftahul Janna
Program Studi Teknologi Hasil Perikanan, Jurusan Perikanan, Fakultas Pertanian, Universitas Sriwijaya Jalan Palembang-Prabumulih KM.32, Indralaya 30662, Sumatra Selatan, Indonesia
Diterima: 16 Juni 2022/Disetujui: 11 Juli 2022 *Korespondensi: sabrisudirman@unsri.ac.id
Cara sitasi (APA Style 7 th ) : Sudirman, S., Aprilia, E., & Janna, M. (2022). Kandungan Senyawa Polifenol dan Aktivitas Antioksidan Daun Tumbuhan Apu-apu ( Pistia stratiotes ) dengan Metode Pengeringan yang Berbeda. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 25 (2), 235-243. http://dx.doi.org/ 10.17844/jphpi. v25i2.41523

## Abstrak
Radikal bebas yang meningkat dapat menyebabkan kerusakan pada sel dan jaringan di dalam tubuh. Hal ini disebabkan oleh kurangnya kemampuan antioksidan dalam meredam paparan radikal bebas sehingga membutuhkan antioksidan di luar tubuh. Salah satu tumbuhan yang dapat digunakan sebagai sumber antioksidan yaitu tumbuhan apu-apu ( Pistia stratiotes ) karena memiliki golongan senyawa polifenol, namun senyawa polifenol bersifat termolabil sehingga proses pengeringan merupakan hal penting dalam proses preparasi dan ekstraksi. Penelitian ini bertujuan mengekstraksi senyawa polifenol dari daun tumbuhan apu-apu dengan metode pengeringan yang berbeda dan menguji aktivitas antioksidan senyawa tersebut. Pengeringan dilakukan dengan 3 metode yang berbeda, yaitu pengeringan matahari, oven pada suhu 40ºC, dan pengeringan beku ( freeze drying ) dengan 3 pengulangan. Data dianalisis menggunakan one-way analysis of variance (ANOVA) dengan uji lanjut Duncan dan disajikan dalam bentuk grafik. Ekstraksi menghasilkan nilai rendemen tertinggi pada pengeringan beku (15,64±1,19%) dan terendah pada pengeringan matahari (8,48±3,34%). Pengujian total polifenol dan flavonoid menghasilkan nilai tertinggi pada pengeringan beku, yaitu masing-masing sebesar 32,94±1,34 mg GAE/g sampel kering dan 146,80±5,29 mg QE/g sampel kering, sedangkan terendah pada pengeringan matahari. Adapun tingkat aktivitas antioksidan pada pengeringan beku dengan IC 50 sebesar 266,33±5,77 mg/mL dan pengeringan oven sebesar 305,67±22,85 mg/mL yang memiliki aktivitas yang lebih efektif dalam menghambat radikal bebas jika dibandingkan dengan metode pengeringan matahari dengan IC 50 sebesar 462,67±56,52 mg/mL). Pada peneilitian ini disimpulkan bahwa metode pengeringan beku dan oven dapat menjadi pilihan sebagai metode pengeringan yang tepat dalam mengekstrak senyawa polifenol dan flavonoid yang digunakan sebagai bahan antioksidan.
Kata kunci: antioksidan, apu-apu, pengeringan , Pistia stratiotes, polifenol

## Polyphenol Compounds and Antioxidant activity of Water Lettuce
( Pistia stratiotes ) Leaf Extract with Different Drying Methods

## Abstract
Increasing of free radicals cause damage to cells and tissues in the body. This is due to the lack of antioxidant ability in the body, therefore it requires external antioxidants. One of the plants that can be used as a source of antioxidants is water lettuce ( Pistia stratiotes ) because it contained polyphenol compounds. However, polyphenolic compounds are thermolabile, so the drying process is important in preparation and extraction. Thus, this study aimed to extract polyphenolic compounds from the leaves of the water lettuce ( Pistia stratiotes ) with different drying methods and to determine the antioxidant activity of these compounds. Drying was carried out by 3 different methods, namely sun drying, oven at 40ºC, and freeze drying and with 3 times repetition. The data were analyzed using a one-way analysis of variance (ANOVA)
Available online: journal.ipb.ac.id/index.php/jphpi

## PENDAHULUAN
Radikal bebas merupakan senyawa yang secara alami diproduksi dalam proses biologis yang terjadi di dalam tubuh. Dalam kondisi normal, tubuh memiliki sistem pertahanan antioksidan primer yang bersifat enzimatik.
Antioksidan ini dapat meredam paparan radikal bebas yang berlangsung di dalam tubuh (Phaniendra et al. , 2014). Radikal bebas juga dapat diakibatkan oleh adanya faktor eksternal atau dari lingkungan yang mengakibatkan tingginya akumulasi radikal bebas di dalam tubuh (Lobo et al. , 2010).
Radikal bebas yang tinggi tersebut dapat mengakibatkan kerusakan sel dan jaringan, gangguan metabolisme, penuaan dini, kanker, dan penyakit kardiovaskular (Marseglia et al. , 2014; Pizzino et al. , 2017; Liguori et al. , 2018). Hal ini menyebabkan tubuh memerlukan tambahan antioksidan yang bersumber dari luar tubuh atau antioksidan eksternal untuk mencegah proses oksidasi dan menghambat paparan radikal bebas tersebut. Antioksidan merupakan senyawa yang dapat mencegah terjadinya oksidasi atau menghambat paparan radikal bebas di dalam tubuh. Senyawa antioksidan dapat menyumbangkan atom Hidrogen atau salah satu elektronnya ke senyawa radikal bebas sehingga senyawa tersebut dapat bersifat stabil dan proses oksidasi dapat terhambat (Lee et al. , 2015). Antioksidan sintetik secara umum digunakan untuk mencegah proses oksidasi, akan tetapi adanya indikasi yang melaporkan bahwa senyawa tersebut berkaitan dengan timbul beberapa penyakit sehingga penggunaannya telah banyak mendapat perhatian di beberapa negara maju (Botterweck et al. , 2000; Kornienko et al. , 2019). Hal ini menyebabkan antioksidan alami terutama yang bersumber dari tumbuhan
menjadi salah satu alternatif sebagai senyawa antioksidan yang potensial karena bersifat lebih aman dan mudah diperoleh. Salah satu tumbuhan yang memiliki aktivitas antioksidan yaitu tumbuhan apu-apu ( Pistia stratiotes ). Tumbuhan apu-apu ( P. stratiotes ) merupakan tumbuhan yang hidup mengapung di permukaan perairan. Penelitian sebelumnya melaporkan bahwa ekstrak daun tumbuhan ini memiliki kandungan senyawa bioaktif, misalnya polifenol, flavonoid dan tanin dan memiliki aktivitas antioksidan (Sudirman et al. , 2017; Sudirman et al. , 2021).
Proses ekstraksi senyawa bioaktif terdapat beberapa hal yang perlu diperhatikan untuk memperoleh kualitas rendemen dan aktivitas fungsionalnya. Hasil penelitian sebelumnya melaporkan bahwa perbedaan pelarut yang digunakan (akuades dan etanol 70%) untuk mengekstrak daun tumbuhan apu- apu menghasilkan perbedaan kandungan senyawa  bioaktif  dan  aktivitas  antioksidan (Sudirman et al. , 2021). Faktor lain yang perlu diperhatikan dalam proses ekstraksi, yaitu metode pengeringan sampel, rasio antara sampel dan pelarut serta suhu ekstraksi (Chirinos et al. , 2007; Lee et al. , 2016). Metode pengeringan merupakan hal yang penting karena dapat mempengaruhi aktivitas senyawa antioksidan pada bahan yang diekstrak. Hal ini karena senyawa antioksidan merupakan senyawa yang sensitif terhadap suhu dan bersifat termolabil (Ledesma-Escobar et al. , 2016; Li et al. , 2017). Metode pengeringan dapat dilakukan secara alami dengan sinar bantuan matahari atau menggunakan alat pengering misalnya oven dan freeze dryer yang memiliki suhu dan mekanisme pengeringan yang berbeda (Kankara et al. , 2014).  Hasil penelitian sebelumnya melaporkan bahwa
with Duncan’s post-hoc test and presented in graphical form. The freeze-drying (15.64±1.19%) method showed high extraction yield when compared to oven-drying (13.54±1.83%) and sun-drying (8.48±3.34%). Total polyphenols and flavonoids were also high in the freeze-drying method (32.94±1.34 mg GAE/g dry sample and 146.80±5.29 mg QE/g dry sample, respectively). Whereas the antioxidant activity of freeze- drying (IC 50 266.33±5.77 mg/mL) and oven-drying (IC 50 305.67±22.85 mg/mL) had more effective in inhibiting free radicals when compared with sun-drying (IC 50 462.67±56.52 mg/mL). Therefore, freeze- drying and oven-drying can be an option as an appropriate drying method to extract polyphenol and flavonoid compounds which are used as antioxidants.
Keywords: antioxidants, bioactive compounds, drying temperature, Pistia stratiotes
Kandungan senyawa polifenol , Sudirman et al.
suhu pengeringan dapat memengaruhi kandungan senyawa bioaktif dan aktivitas antioksidan ekstrak daun Curcuma aeruginosa (Nasir et al. , 2021) dan Zingiber officinale (Gümüşay et al. , 2015) sehingga penulis berhipotesis bahwa perbedaan metode pengeringan juga dapat memberikan pengaruh terhadap kandungan senyawa polifenol dan antioksidan pada ekstrak daun tumbuhan apu-apu. Penelitian ini bertujuan mengekstrak senyawa polifenol dari daun tumbuhan apu-apu yang dikeringkan dengan metode pengeringan yang berbeda dan mengukur aktivitas antioksidan senyawa tersebut.

## BAHAN DAN METODE
Bahan dan Alat Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu tumbuhan apu-apu segar. Bahan yang digunakan dalam proses ekstraksi, yaitu akuades dan etanol. Bahan- bahan kimia lainnya, yaitu metanol, asam galat, aluminium klorida, sodium karbonat, pereaksi Folin-Ciocalteu’s, radikal bebas 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), dan kuersetin. Adapun alat-alat yang digunakan selama proses penelitian, yaitu timbangan analitik, penangas air kocok, pipet mikro, oven, rotary vacuum evaporator (Biobase RE-301, Shandong, China), freeze dryer (Biobase BK-FD10S, Shandong, China), dan spektrofotometer UV-Vis (Genesys 150 ThermoScientific, Massachusetts, USA).

## Metode Penelitian
Preparasi dan proses ekstraksi Daun tumbuhan apu-apu diperoleh dari perairan rawa di Desa Sukaraja, Indralaya, Sumatra Selatan. Daun tersebut kemudian dibersihkan dan dicuci untuk menghilang bahan pengotor. Daun tersebut kemudian dikeringkan menggunakan tiga metode pengeringan yang berbeda, yaitu pengeringan dengan sinar matahari langsung, oven pada suhu 40ºC, dan freeze dryer . Proses pengeringan dengan bantuan sinar matahari dilakukan selama 3 hari dan oven dilakukan selama 12 jam berdasarkan metode yang telah  dilakukan  oleh  peneliti  sebelumnya (Kankara et al. , 2014). Pengeringan dengan
freeze dryer dilakukan pada suhu -56 º C dengan tekanan vakum 10 kPa selama 48 jam.
Proses ekstraksi dengan metode maserasi yang mengacu pada penelitian sebelumnya (Chew et al. , 2011; Sudirman et al. , 2021). Sampel kering sebanyak 20 g dimasukkan ke dalam labu Erlenmeyer yang berisi 200 mL etanol 70% (etanol dalam air, v/v). campuran tersebut kemudian dimaserasi selama 3 jam pada suhu ruang dan diaduk menggunakan pengaduk magnet pada kecepatan 100 rpm. Setelah 3 jam, filtrat dan residu kemudian dipisahkan menggunakan kertas saring Whatman No. 42. Filtrat kemudian disimpan pada tabung pengoleksi, sedangkan residu diekstrak kembali dengan pelarut etanol 70% yang baru dengan kondisi sama seperti ekstraksi pertama. Total ekstrak dilakukan sebanyak 5 kali. Filtrat tersebut kemudian digabungkan dan dievaporasi menggunakan rotary vacuum evaporator . Filtrat hasil evaporasi kemudian dikering-bekukan dengan freeze dryer sehingga diperoleh ekstrak kering dalam bentuk serbuk. Rendemen masing-masing ekstrak berdasarkan metode pengeringan diperoleh melalui persamaan berikut:

## Analisis total polifenol dan flavonoid
Analisis total polifenol dianalisis menggunakan pereaksi fenol Folin-Ciocalteu’s dan dilakukan berdasarkan metode yang telah dipublikasikan oleh peneliti sebelumnya (Chandra et al. , 2014). Ekstrak sebanyak 100 mg dilarutkan dalam 10 mL akuades sehingga diperoleh konsentrasi ekstrak sebesar 10 mg/mL. Sebanyak 0,2 mL larutan ekstrak kemudian dicampurkan dengan pereaksi fenol Folin-Ciocalteu’s dalam tabung reaksi dan direaksikan selama 5 menit. Larutan sodium karbonat (8% dalam air, b/v) dimasukkan ke dalam tabung reaksi tersebut dan ditambahkan akuades hingga volume mencapai 3 mL. Campuran tersebut kemudian direaksikan dalam kondisi gelap pada suhu ruang selama 30 menit dan kemudian disetrifugasi pada kecepatan 3.000 rpm selama 30 menit. Supernatan yang diperoleh kemudian diukur absorbansi pada panjang gelombang 750 nm
menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Asam galat ( gallic acid ) digunakan sebagai standar untuk menentukan kadar polifenol dalam ekstrak sehingga total polifenol dinyatakan dalam mg gallic acid equivalent (GAE) per g sampel kering.
Analisis kandungan flavonoid dilakukan dengan metode aluminium chloride colorimetric berdasarkan metode yang telah dipublikasikan oleh peneliti sebelumnya (Chandra et al. , 2014). Secara singkat,
sebanyak 0,6 mL larutan ekstrak (10 mg/mL dalam akuades, b/v) direaksikan dengan 20% aluminium chloride (1:1, v/v) selama 60 menit pada suhu ruang. Absorbansi larutan diukur menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 420 nm. Kuersetin ( quercetin ) digunakan sebagai standar untuk menghitung kadar flavonoid yang terkandung di dalam ekstrak. Total flavonoid dinyatakan dalam mg quercetin equivalent (QE) per g sampel kering.
Analisis Aktivitas Antioksidan Pengukuran aktivitas antioksidan diukur berdasarkan metode 2,2-difenil- 1-pikrilhidrazil (DPPH) berdasarkan metode  yang  dipublikasikan  sebelumnya (Chew et al. , 2008). Ekstrak dilarutkan menggunakan metanol dalam berbagai konsentrasi (0 – 1.000 µg/mL). Larutan ekstrak (1 mL) dicampurkan dengan 0,2 mM larutan DPPH (1:1, v/v). Campuran tersebut kemudian diinkubasi dalam kondisi gelap pada suhu
37ºC selama 30 menit. Absorbansi kemudian diukur menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 517 nm.
Persentase (%) penghambatan radikal bebas diukur berdasarkan persamaan berikut ini:
Keterangan: Abs blanko = Absorbansi tanpa ekstrak pada 517 nm; Abs sampel = Absorbansi dengan penambahan ekstrak pada 517 nm.
Nilai half-maximum inhibitory concentration (IC 50 ) diperoleh dari persamaan garis linier y=(a)x+b . Dengan nilai y sebagai persentase penghambatan dan nilai x sebagai konsentrasi ekstrak.
Analisis Data Semua data dinyatakan dalam rata-rata ( mean )±standar deviasi (SD). Data tersebut dianalisis menggunakan one-way analysis of variance (ANOVA) dengan uji lanjut Duncan pada derajat signifikan 0,05 ( p <0,05) yang dilakukan menggunakan SPSS 22.0 (IBM Corporation, Armonk, NY, AS).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Rendemen Ekstrak
Metode pengeringan oven dan freeze dryer memiliki rendemen yang tidak berbeda secara signifikan ( p >0,05), namun nilai tersebut berbeda secara signifikan ( p <0,05) jika dibandingkan dengan pengeringan
Gambar 1 Rendemen ekstrak daun apu-apu yang dikeringkan dengan metode berbeda; matahari;   oven; freeze drying . Data dinyatakan dalam rata-rata ±standar deviasi (n=3). Huruf yang berbeda (a-b) menunjukkan perbedaan yang signifikan ( p >0,05). Ren dem en (%) Metode pengeringan
Kandungan senyawa polifenol , Sudirman et al.
matahari (Gambar 1). Nilai rendemen pengeringan dengan freeze dryer yaitu 15,64±1,19%; pengeringan dengan oven sebesar 13,54±1,83% dan pengeringan dengan matahari sebesar 8,48±3,34%. Ketiga metode pengeringan ini memiliki suhu pengeringan yang berbeda. Rata- rata suhu pengeringan matahari langsung yaitu sekitar 31,0±2,0ºC, suhu pengeringan oven yaitu 40ºC, dan pengeringan-beku menggunakan suhu -56ºC dengan tekanan rendah 10 kPa. Kadar air yang dihasilkan oleh ketiga metode pengeringan ini juga memiliki nilai yang berbeda. Kadar air pengeringan matahari memiliki nilai yang tertinggi, sedangkan pengeringan-beku ( freeze drying ) memiliki kadar air yang terendah (data tidak disajikan). Hasil penelitian sebelumnya melaporkan bahwa kadar air buah stroberi dan pir hasil pengeringan-beku kurang dari 0,5%, sedangkan hidrokoloid gel yang dikering- bekukan memiliki kadar air yang berkisar antara 1,4-4,0% (Nowak and Jakubczyk, 2020). Hasil penelitian lainnya menghasilkan bahwa daun Leptadenia hastata yang dikeringkan dengan oven memiliki kadar air sebesar 7,33% dan pengeringan matahari sebesar 10,16%
(Hassan et al. , 2007). Kadar air yang berbeda menyebabkan jumlah fase padat (padatan) pada masing-masing simplisia setelah proses pengeringan memiliki nilai yang berbeda. Hal ini juga mengakibatkan jumlah padatan yang diekstrak mengalami perbedaan sehingga menghasilkan rendemen ekstrak kasar yang juga berbeda. Hasil penelitian sebelumnya juga melaporkan bahwa tanaman Sauropus androgynus pengeringan oven memiliki
rendemen yang besar jika dibandingkan dengan pengeringan matahari (Wongklom & Moonsin, 2018).
Kadar Total Polifenol dan Flavonoid Kadar total polifenol tertinggi terdapat pada metode pengeringan dengan freeze dryer yaitu 32,94±1,34 mg GAE/g sampel kering (Gambar 2a. Hasil ini berbeda secara signifikan ( p <0,05) dengan pengeringan oven dan pengeringan matahari yang masing- masing memiliki nilai sebesar 18,33±2,80 mg GAE/g sampel kering dan 12,95±0,47 mg GAE/g sampel kering. Adapun kadar flavonoid tertinggi juga pada ekstrak daun tumbuhan apu-apu terdapat pada pengeringan dengan freeze dryer yaitu 146.80±5.29 mg QE/g sampel kering (Gambar 2b). Nilai tersebut berbeda secara signifikan ( p <0,05) jika dibandingkan dengan metode pengeringan oven dan matahari yang masing-masing memiliki kadar flavonoid sebesar 99,57±4,77 mg QE/g sampel kering dan 58,80±2,40 mg QE/g sampel kering.
Hasil ini sesuai dengan penelitian sebelumnya melaporkan bahwa pengeringan beku daun temu hitam ( Curcuma aeruginosa ) menghasilkan kadar polifenol yang lebih tinggi (33,06 mg GAE/g sampel kering) jika dibandingkan dengan pengeringan dengan oven pada suhu 40ºC yaitu 26,70 mg GAE/g sampel kering (Nasir et al. , 2021). Hasil penelitian lainnya juga melaporkan bahwa daun S. androgynus yang dikeringkan dengan metode pengeringan matahari memiliki kandungan senyawa polifenol yang lebih rendah jika dibandingkan dengan pengeringan
Gambar 2 Total polifenol (a) dan kadar flavonoid (b) ekstrak daun apu-apu yang dikeringkan dengan metode yang berbeda;   matahari;   oven; freeze drying . Data dinyatakan dalam rata-rata±standar deviasi (n=3). Huruf yang berbeda (a-c) menunjukkan perbedaan yang signifikan ( p >0,05). To ta l p olif en ol (m g GAE/g s am pe l k er in g)
Metode pengeringan
Ka da r fl av on oi d (m g Q E/g s am pe l k er in g) Metode pengeringan
oven, yaitu masing-masing sebesar 19,40 mg GAE/g sampel kering dan 23,37 mg GAE/g sampel kering (Wongklom & Moonsin, 2018).
Penelitian tersebut juga melaporkan bahwa pengeringan matahari (9,52 mg QE/g sampel kering) memiliki kandungan flavonoid yang lebih rendah jika dibandingkan dengan pengeringan oven (12,54 mg QE/g sampel kering).
Kadar polifenol dan flavonoid yang tinggi pada metode pengeringan beku dan oven dapat disebabkan oleh kestabilan suhu dalam proses pengeringan. Akan tetapi, suhu rendah digunakan selama proses pengeringan beku dapat menjaga kestabilan komponen bioaktif terutama yang sensitif terhadap suhu tinggi, misalnya polifenol dan flavonoid (Silva- Espinoza et al. , 2019). Penelitian sebelumnya melaporkan bahwa senyawa golongan polifenol merupakan senyawa yang bersifat termolabil  atau  mudah  rusak  akibat  suhu (Li et al. , 2017). Hal ini menyebabkan kandungan kedua senyawa tersebut lebih tinggi pada pengeringan beku jika dibandingkan dengan metode pengeringan oven dan matahari. Pengeringan dengan matahari berlangsung secara tidak konstan dan bergantung terhadap cuaca yang dapat menyebabkan rusaknya komponen polifenol. Hasil penelitian sebelumnya yang melaporkan bahwa penurunan kadar polifenol pada pengeringan matahari dan oven dapat disebabkan oleh enzim polifenol oxidase
(Gümüşay et al. , 2015). Enzim ini dapat
menyebabkan hilangnya kompleks fenolik dalam sampel (Bennett et al. , 2011). Hal ini juga terjadi pada senyawa flavonoid yang merupakan salah satu kelompok senyawa polifenol (Mutha et al. , 2021). Peneliti sebelumnya juga menyatakan bahwa flavonoid merupakan senyawa yang memiliki struktur dasar fenol yang sensitif terhadap panas dan mudah teroksidasi (Ledesma-Escobar et al. , 2016).

## Aktivitas Antioksidan
Aktivitas antioksidan ekstrak dengan pengeringan oven dan freeze dryer memiliki nilai yang tidak berbeda signifikan yaitu masing-masing dengan half-maximum inhibitory concentration (IC 50 ) sebesar 266,33±5,77 mg/mL dan 305,67±22,85 mg/mL (Figure 3). Nilai kedua metode pengeringan tersebut berbeda secara signifikan ( p <0,05) jika dibandingkan dengan metode pengeringan matahari yaitu dengan IC 50 sebesar 462,67±56,52 mg/mL. Penelitian ini sejalan dengan penelitian sebelumnya yang melaporkan bahwa pengeringan matahari memiliki aktivitas antioksidan lebih rendah jika dibandingkan pengeringan oven dan pengeringan beku (Gümüşay et al. , 2015). Nilai aktivitas antioksidan yang tinggi pada pengeringan beku dan oven jika dibandingkan dengan pengeringan matahari disebabkan oleh kandungan senyawa polifenol dan flavonoid yang juga tinggi. Hasil penelitian sebelumnya yang melaporkan
IC 50 (m g/mL) Metode pengeringan
Gambar 3 Aktivitas antioksidan ekstrak daun apu-apu yang dikeringkan dengan metode yang berbeda;   matahari;   oven; freeze drying . Data dinyatakan dalam rata- rata±standar deviasi (n=3). Huruf yang berbeda (a-c) menunjukkan perbedaan yang signifikan ( p >0,05).
Kandungan senyawa polifenol , Sudirman et al.
bahwa kandungan total polifenol yang tinggi pada ekstrak menghasilkan aktivitas antioksidan yang juga tinggi pada ekstrak tersebut (Yi & Wetzstein, 2011). Golongan polifenol dapat mendonorkan atom Hidrogen ke senyawa radikal bebas sehingga dapat berfungsi sebagai antioksidan (Matyas et al. , 2019). Selain itu juga, golongan senyawa ini juga dapat meredam reaksi oksidasi melalui mekanisme transfer elektron (Lee et al. , 2015).
KESIMPULAN
Metode pengeringan matahari, oven, dan pengeringan beku menghasilkan nilai rendemen, total polifenol, flavonoid dan antioksidan yang berbeda. Pengeringan dengan metode pengeringan beku menghasilkan kadar total polifenol dan flavonoid yang tinggi dibandingkan dengan metode pengeringan lainnya. Pengeringan oven dan pengeringan beku memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan pengeringan matahari. Metode pengeringan oven dan pengeringan beku dapat dijadikan pilihan yang tepat untuk mengekstrak senyawa golongan polifenol yang berperan sebagai antioksidan dari daun tumbuhan apu-apu.

## DAFTAR PUSTAKA
Bennett, L. E., Jegasothy, H., Konczak, I., Frank, D., Sudharmarajan, S., Clingeleffer, P. R. (2011). Total polyphenolics and anti- oxidant properties of selected dried fruits and relationships to drying conditions.
Journal of Functional Foods, 3, 115-124. Botterweck, A. A. M., Verhagen, H., Goldbohm, R. A., Kleinjans, J., van den Brandt, P. A., (2000). Intake of butylated hydroxyanisole and butylated hydroxytoluene and stomach cancer risk: results from analyses in the Netherlands Cohort Study. Food and Chemical Toxicology, 38, 599-605.
Chandra, S., Khan, S., Avula, B., Lata, H., Yang, M. H., Elsohly, M. A., Khan, I. A.
(2014). Assessment of total phenolic and flavonoid content, antioxidant properties, and yield of aeroponically and conventionally grown leafy vegetables and fruit crops: a comparative study.
Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 2014, 253875. Chew, K. K., Ng, S. Y., Thoo, Y. Y., Khoo, M. Z., Wan Aida, W. M., Ho, C. W. (2011). Effect of ethanol concentration, extraction time and extraction temperature on the recovery of phenolic compounds and antioxidant capacity of Centella asiatica extracts. International Food Research Journal, 18, 571-578. Chew, Y. L., Lim, Y. Y., Omar, M., Khoo, K.
S. (2008). Antioxidant Activity of Three Edible Seaweeds from Two Areas in South East Asia. LWT - Food Science and Technology, 41, 1067-1072.
Chirinos, R., Rogez, H., Campos, D.,
Pedreschi, R., Larondelle, Y. (2007).
Optimization of extraction conditions of antioxidant phenolic compounds from mashua ( Tropaeolum tuberosum Ruíz & Pavón) tubers. Separation and Purification Technology , 55, 217-225. Gümüşay, Ö. A., Borazan, A. A., Ercal, N.,
Demirkol, O. (2015). Drying effects on the antioxidant properties of tomatoes and ginger. Food Chem , 173, 156-162. Hassan, S. W., Umar, R. A., Matazu, I. K., Maishanu, H. M., Abbas, A Y., Sani, A. A. (2007). The Effect of Drying Method on the Nutrients and Non-Nutrients Composition of Leaves of Leptadenia hastata (Asclipiadaceae). Asian Journal of Biochemistry , 2, 188-192. Kankara, S., Mustafa, M., Ibrahim, M. H.,
Nulit, R., Go, R. (2014). Effect of Drying Methods, Solid-Solvent Ratio, Extraction Time and Extraction Temperature on Phenolic Antioxidants and Antioxidant Activity of Guiera senegalensis J.F. Gmel (Combretaceae) Leaves Water Extract. American Journal of Phytomedicine and Clinical Therapeutics , 2, 1378-1392.
Kornienko, J. S., Smirnova, I. S., Pugovkina, N.
A., Ivanova, J. S., Shilina, M. A., Grinchuk, T. M., Shatrova, A. N., Aksenov, N. D., Zenin, V. V., Nikolsky, N. N., Lyublinskaya, O. G. (2019). High doses of synthetic antioxidants induce premature senescence in cultivated mesenchymal stem cells. Scientific Reports , 9, 1296. Ledesma-Escobar, C. A., Priego-Capote,
F., Luque de Castro, M. D. (2016). Comparative Study of the Effect of Sample Pretreatment and Extraction on the Determination of Flavonoids from Lemon ( Citrus limon ). Plos One , 11, e0148056. Lee, C. Y., Nanah, C. N., Held, R. A., Clark, A. R., Huynh, U. G. T., Maraskine, M. C., Uzarski, R. L., McCracken, J., Sharma, A. (2015). Effect of electron donating groups on polyphenol-based antioxidant dendrimers. Biochimie , 111, 125-134. Lee, N. Y., Yunus, M. A. C., Idham, Z., Ruslan, M. S. H., Aziz, A. H. A., Irwansyah, N. (2016). Extraction and identification of bioactive compounds from agarwood leaves. IOP Conference Series: Materials Science and Engineering , 162, 012028. Li, Y., Li, S., Lin, S. J., Zhang, J. J., Zhao, C. N., Li, H. B. (2017). Microwave-Assisted Extraction of Natural Antioxidants from the Exotic Gordonia axillaris Fruit: Optimization and Identification of Phenolic Compounds. Molecules , 22, 1481. Liguori, I., Russo, G., Curcio, F., Bulli, G., Aran, L., Della-Morte, D., Gargiulo, G., Testa, G., Cacciatore, F., Bonaduce, D., Abete, P. (2018). Oxidative stress, aging, and diseases. Clinical Interventions in Aging , 13, 757-772. Lobo, V., Patil, A., Phatak, A., Chandra, N. (2010). Free radicals, antioxidants and functional foods: Impact on human health. Pharmacognosy Reviews , 4, 118- 126.
Marseglia, L., Manti, S., D’Angelo, G.,
Nicotera, A., Parisi, E., Di Rosa, G., Gitto, E., Arrigo, T. (2014). Oxidative Stress in Obesity: A Critical Component in
Human Diseases. International Journal of Molecular Sciences , 16, 378-400. Matyas, M., Hasmasanu, M. G., Zaharie, G. (2019). Antioxidant Capacity of Preterm Neonates Assessed by Hydrogen Donor Value. Medicina , 55, 720. Mutha, R. E., Tatiya, A. U., Surana, S. J. (2021). Flavonoids as natural phenolic compounds and their role in therapeutics: an overview. Future Journal of Pharmaceutical Sciences , 7, 25. Nasir, W. N. H. W., Ibrahim, N. N. A., Woon, K. H., Abu Bakar Sajak, A., Sofian-Seng, N. S., Wan Mustapha, W. A., Abdul Rahman, H. (2021). Effects of Different Drying Methods and Solvents on Biological Activities of Curcuma aeruginosa Leaves Extract. Sains Malaysiana , 50, 2207-2218. Nowak, D., Jakubczyk, E. (2020). The Freeze- Drying of Foods—The Characteristic of the Process Course and the Effect of Its Parameters on the Physical Properties of Food Materials. Foods , 9, 1488. Phaniendra, A., Jestadi, D. B., Periyasamy, L. (2014). Free Radicals: Properties, Sources, Targets, and Their Implication in Various Diseases. Indian Journal of Clinical Biochemistry , 30, 11-26. Pizzino, G., Irrera, N., Cucinotta, M., Pallio, G., Mannino, F., Arcoraci, V., Squadrito, F., Altavilla, D., Bitto, A. (2017). Oxidative Stress: Harms and Benefits for Human Health. Oxidative Medicine and Cellular Longevity , 2017, 1-13. Silva-Espinoza, M. A., Ayed, C., Foster, T., Camacho, M. d. M., Martínez-Navarrete, N. (2019). The Impact of Freeze-Drying Conditions on the Physico-Chemical Properties and Bioactive Compounds of a Freeze-Dried Orange Puree. Foods , 9, 32. Sudirman, S., Herpandi, Safitri, E., Apriani, E. F., Taqwa, F. H. (2022). Total polyphenol and flavonoid contents and antioxidant activities of water lettuce ( Pistia stratiotes ) leave extracts. Food Research , 6(4), 205- 210. Sudirman, S., Herpandi, H., Nopianti, R., Dwita L. S., Wasahla, W., Mareta, H., (2017). Phenolic Contents, Tannin, Vitamin C, and Vitamin E of Water Lettuce ( Pistia stratiotes ). Oriental Journal of Chemistry , 33, 3173-3176. Wongklom, A., Moonsin, P. (2018). Effect of drying methods on antioxidant capacity, total phenolic and flavonoid contents of Phakwan ( Sauropus androgynus (L.)
Merr.) powder. SNRU Journal of Science and Technology , 10, 96-103. Yi, W., Wetzstein, H. Y. (2011). Effects of Drying and Extraction Conditions on the
Biochemical Activity of Selected Herbs.
HortScience , 46, 70-73.
Kandungan senyawa polifenol , Sudirman et al.

## FIGURE AND TABLE TITLES
Figure 1 Yield of water lettuce leaf extract with different drying methods;    sun;   oven; freeze drying; Data was shown as mean±SD (n=3). Different letter (a-b) indicated significant difference at p <0.05.
Figure 2 Total polyphenol (a) and flavonoid content (b) of water lettuce leaf extract with different drying methods; sun;   oven;   freeze drying;
Data was shown as mean±SD (n=3). Different letter (a-c) indicated significant difference at p <0.05.
Figure 3 Antioxidant activity of water lettuce leaf extract with different drying methods; sun;   oven;   freeze drying;
Data was shown as mean ± SD (n=3). Different letter (a-c) indicated significant difference at p <0.05.