How to cite: Helmiady  (2022)  Pengembangan  Dan  Validasi  Metode  Spektrometri  Serapan  Atom  Untuk  Penentuan Logam  Berat  Merkuri  (Hg)  Dan  Ion Kromatografi  Untuk  Penentuan  Krom  Heksavalen  (Cr6+)  Dalam Barang  Bukti  Di  Duga  Limbah  B3  Dari  Beberapa  Kegiatan  Industri,  Syntax  Literate:  Jurnal  Ilmiah Indonesia, (7) 10 ,
E-ISSN: 2548-1398 Published by: Ridwan Institute
Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia p–ISSN: 2541-0849 e- ISSN: 2548-1398 Vol. 7, No. 10, Oktober 2022
PENGEMBANGAN  DAN  VALIDASI  METODE  SPEKTROMETRI  SERAPAN ATOM  UNTUK  PENENTUAN  LOGAM  BERAT  MERKURI  (Hg)  DAN  ION KROMATOGRAFI UNTUK PENENTUAN KROM HEKSAVALEN (Cr 6+ ) DALAM BARANG  BUKTI  DI  DUGA  LIMBAH  B3  DARI  BEBERAPA  KEGIATAN INDUSTRI

## Helmiady
Pemeriksa Toksikologi dan Lingkungan Hidup Forensik, Puslabfor Bareskrim Polri Email: helmiady@sci.ui.ac.id

## Abstrak
Teknik Bejana Uap Dingin Spektrometri Serapan Atom untuk penentuan merkuri (Hg) dan Ion kromatografi untuk kuantifikasi Krom heksavalen (Cr 6+ ) dalam barang bukti diduga  Limbah  Bahan  Berbahaya  dan  Beracun  (Limbah  B3)  dikembangkan  dan divalidasi. Metode ini divalidasi untuk linearitas, presisi, akurasi, batas deteksi (LOD) dan batas kuantifikasi (LOQ). Kurva standar linier pada konsentrasi 1 – 11 µg/L (Hg) dan  0,5  –  5  mg/L  (Cr 6+ )  dengan  koefisien  korelasi  (r)  >  0,995.  Batas  deteksi  yang diperoleh adalah 0,0028 µg/kg barang bukti (Hg) dan 0,234 mg/kg barang bukti (Cr 6+ ). Nilai batas kuantifikasi yang diperoleh adalah 0,0067 µg/kg barang bukti (Hg) dan 0,709 mg/kg barang bukti (Cr 6+ ). Nilai standar deviasi relatif (RSD) 0,4917 % untuk presisi (Hg) dan 0,0556% untuk presisi (Cr 6+ ). Nilai RSD ini lebih rendah dari yang disyaratkan menurut RSD Horwitz. Nilai recovery rata-rata adalah 103,056 % (Hg) dan 101,543 % (Cr 6+ ).  Metode  yang  divalidasi  ini  berhasil  digunakan  untuk  penentuan  Hg  dan  Cr 6+ dalam  limbah  diduga  Limbah  B3  dari  beberapa  kegiatan  industri  di  Indonesia.  Hasil penentuan logam berat Hg dan Cr 6+ dari 10 barang bukti yang diperiksa tidak melebihi baku mutu yang dipersyaratkan dalam PP RI Nomor 22 Tahun 2021 Lampiran XI.
Kata Kunci: validasi , merkuri, krom heksavalen, CV-AAS, ion kromatografi, limbah.

## Abstract
Cold Steam Vessel Engineering Atomic Absorption Spectrometry for the determination of mercury (Hg) and Chromatographic ions for quantification of hexavalent Chrome (Cr 6+ ) in evidence of suspected Hazardous and Toxic Waste (B3 Waste) was developed and validated. This method is validated for linearity, precision, accuracy, detection limit (LOD) and quantification limit (LOQ). Standard linear curve at concentrations of 1 – 11 μg/L (Hg) and 0.5 – 5 mg/L (Cr 6+ ) with a correlation coefficient (r) > 0.995. The detection limit obtained was 0.0028 μg/kg of evidence (Hg) and 0.234 mg/kg of evidence
(Cr 6+ ). The quantification limit values obtained were 0.0067 μg/kg of evidence (Hg) and 0.709 mg/kg of evidence (Cr 6+ ). The relative standard deviation value (RSD) is 0.4917% for  precision  (Hg)  and  0.0556%  for  precision  (Cr 6+ ).  This  RSD  value  is  lower  than required according to Horwitz RSD. The  average recovery  value was 103.056 % (Hg) and  101.543  %  (Cr 6+ ).  This  validated  method  was  successfully  used  for  the determination of Hg and Cr 6+ in  suspected B3 waste from several industrial activities in Indonesia. The results of determining heavy metals Hg and Cr 6 + from 10 evidence examined did not exceed the quality standards required in PP RI Number 22 of 2021 Appendix XI.
Keywords: validation, mercury, hexavalent chrome, CV-AAS, ion chromatography, waste.

## Pendahuluan
Tanah adalah sumber alami yang penting dan merupakan bagian dari lingkungan. Tanah juga merupakan bagian dari siklus logam berat pembuangan limbah, apabila tanah melebihi kemampuan dalam mengurai limbah maka akan mengakibatkan pencemaran tanah. Beberapa faktor dapat mempengaruhi kontaminasi tanah salah satunya adalah logam berat. Efek fisiologis logam berat pada makhluk hidup dalam konsentrasi rendah merupakan aspek yang sangat penting. Berdasarkan sifat toksisitas, stabilitas, dan bioagregasinya, logam berat adalah kontaminan lingkungan yang serius dan berbahaya (Kakha et al . 2017). Logam berat memiliki potensi untuk mencemari tanah dan air dan dapat tersebar dan dikumpulkan pada tanaman dan hewan (Wcislo et al. 2002). Selain itu, logam berat juga dapat meningkatkan toksisitas kronis dan intensif dari rantai makanan dengan bioagregasi (Ahmad et al . 2011). Metode ekstraksi sekuensial adalah salah satu metode untuk memahami nilai logam berat di tanah dan sedimen (Kahkha et al. 2017).
Merkuri dan Krom heksavalen merupakan salah satu logam berat yang berbahaya bagi  lingkungan  dikarenakan  memiliki  daya  toksisitas  yang  tinggi.  Merkuri  mengalami transformasi  yang  sangat  spesifik  dalam  ekosistem  yang  berbeda.  Sangat  penting  untuk mengamati  kandungan  berbagai  bentuk  logam  tersebut  dalam  tanah.  Hal  ini  berkorelasi dengan  berbagai  struktur  dan  komposisi  dan  dinamika  sistem  tanah  yang  menghasilkan genesis tanah yang berbeda, serta variabilitas kondisi lingkungan dan aktivitas manusia, baik secara spasial dan temporal (Różański et al. 2016). Merkuri adalah elemen yang ada dalam berbagai bentuk di lingkungan, termasuk unsur (Hg 0 ), mercurous (Hg 2 2+ ), mercuric (Hg 2+ ), dan  senyawa  merkuri  teralkilasi  (metil  merkuri,  CH 3 Hg + )  (Grigal  2002).  Penentuan  Hg penting untuk memahami mobilitas, ketersediaan hayati dalam tanah, sedimen dan biota dan potensi toksisitas pada kesehatan manusia dan lingkungan. Hg 2+ adalah bentuk dominan di tanah  dan  perairan.  Hg 0 adalah  spesies  utama  di  atmosfer,  sementara  CH 3 Hg + ada  pada sebagian besar biota dan rantai makanan. Bentuk merkuri ini juga melarang kelarutan dan toksisitas  yang  berbeda.  Elemental  Hg  dan mercurous  chloride (Hg 2 Cl 2 )  masing-masing
memiliki kelarutan air 5,6 x10 -5 gL -1 dan 2,0 x 10 -3 gL -1 pada 25 o C. Senyawa merkuri, yaitu HgO dan HgCl 2 , lebih larut dalam air yang kelarutannya 0,051 gL -1 pada 25 o C dan 69 gL -1 pada  20 o C.  Sebaliknya,  metil  merkuri  klorida  (CH 3 HgCl)  dianggap  larut  dalam  lemak karena  lebih  rendah  kelarutannya  dalam  air  (0,10  g  L -1 pada  21 o C)  (Toxicol.  Eff. Methylmercury 2000) dan (He et al. 2015). Merkuri yang masuk ke dalam tubuh bersifat akumulatif (utamanya pada ginjal) dan menyebabkan penyakit degeneratif pada kesehatan manusia (Barr et al., 1973; Berlin, 1979; Bourgeois et al., 1986).
Krom juda dapat di hasilkan dari proses isolasi dilabolatorium, karena krom begitu mudah tersedia secara komersial. Seperti telah disebutkan sebelumnya, bahwa sumber yang paling berguna dari komersial krom adalah bijih kromit, FeCr 2 O 4. Oksidasi bijih ini melalui udara  dalam  cairan  alkali  memberikan  natrium  kromat,  Na 2 CrO 4 di  mana  krom  dalam oksidasi 6 negara. Ini dikonversi menjadi Cr (III) oksida, Cr 2 O 3 dengan ekstraksi ke dalam air,  curah  hujan,  dan  reduksi  dengan  karbon.  Oksida  kemudian  dikurangi  lagi  dengan aluminium  atau  silikon  untuk  membentuk  logam  krom.  Isolasi  jenis  lain  yang  dapat digunakan untuk menghasilkan krom adalah dengan proses elektroplating. Ini melibatkan penguraian  Cr 2 O 3 dalam  asam  sulfat  untuk  memberikan  suatu  elektrolit  yang  digunakan untuk elektroplating krom.
Krom (Cr) di alam berada pada valensi 3 (Cr 3+ ) dan valensi 6 (Cr 6+ ). Cr 6+ lebih toksik dibandingkan  dengan  Cr 3+ ,  karena  sifatnya  yang  berdaya  larut  dan  mobilitas  tinggi  di lingkungan.  Melalui  rantai  makanan  krom  dapat  terdeposit  pada  bagian  tubuh  makhluk hidup yang pada suatu ukuran tertentu dapat menyebabkan racun. Apabila masuk ke dalam sel, dapat menyebabkan kerusakan struktur DNA hingga terjadi mutasi.
Krom heksavalen (Cr 6+ ) yang masuk ke dalam makhluk hidup (ikan) dapat melalui insang dapat mudah menembus membran sel karena insang langsung bersentuhan dengan air,  hal  ini  terkait  dengan  sifat  dari  senyawa  Cr 6+ yang  mudah  menembus  membran  sel melalui  sistem  transportasi  anion  dan  memiliki  kemampuan  meminjam  atau  mengurangi elektron  pada  Cr 3+ .  Cr 6+ lebih  aktif  1000  kali  dibanding  dengan  Cr 3+ dalam  menembus membran sel, sehingga sel tersebut akan rusak (Dhal et al. 2013).
Logam  Cr 6+ akan  menembus  membran  sel  epitel  insang,  masuk  ke  dalam  kapiler darah, kemudian dibawah oleh cairan darah menuju organ tertentu (seperti hati dan ginjal). Pada daerah yang berdekatan dengan organ tertentu (seperti hati dan ginjal) tersebut, logam Cr 6+ akan menembus endothelium darah sehingga logam Cr 6+ akan masuk ke dalam organ tersebut. Pada organ tertentu (seperti hati dan ginjal) logam Cr 6+ akan difiksasi oleh protein yang berperan sebagai enzim, sehingga akan menghambat kerja enzim tersebut, dan pada akhirnya akan mengganggu metabolisme sel.
Boss  &  Fredeen  (1993)  memaparkan  prinsip  pengukuran  AAS  berdasarkan  pada jumlah sinar pada panjang gelombang resonansi yang diserap ketika dilewatkan pada unsur. Ketika  jumlah  unsur  meningkat,  maka  jumlah  sinar  yang  diserap  juga  akan  meningkat. Berdasarkan pada pengukuran sinar yang diserap, maka penentuan kuantitatif jumlah elemen
analit juga dapat dianalisis.
Karena uap atom bebas untuk sebagian besar logam tidak dapat ada pada suhu kamar, kalor  harus  diterapkan  pada  sampel  untuk  dapat  memutuskan  ikatan  molekul  dan  untuk mendapatkan atom dalam bentuk uap yang diperlukan untuk pengukuran AAS. Pengecualian penting untuk fakta umum ini di alam adalah merkuri: Atom merkuri bebas yang menguap dapat ada pada suhu kamar dan, karenanya, merkuri dapat diukur dengan AAS tanpa perlu absorbance cell yang dipanaskan (López-García and Hernández-Córdoba 2015).
Cold Vapor (CV) untuk penentuan merkuri pertama kali dijelaskan pada 1960-an, setelah  itu  menjadi  metode  utama  untuk  penentuan  merkuri.  Pertama,  zat  pereduksi ditambahkan untuk mendapatkan bentuk unsur unsur dan kemudian atom ditransfer oleh gas pembawa (biasanya argon) ke atomizer :
Hg 2+ + 2e à Hg 0
Zat pereduksi dapat berupa timah (II) klorida atau natrium tetrahidroborat. Reaksi dengan agen terakhir lebih cepat meskipun gas atom yang dihasilkan dicampur dengan hidrogen. Meskipun tidak ada spectral interference dalam penentuan ini, beberapa gangguan kimia karena matriks kimia dapat muncul:
Hg 2+ + 2BH 4 + 2H + à Hg 0 + 2H 2 + B 2 H 6
Meskipun tidak ada interference spektral dalam penentuan ini, beberapa interference karena matriks kimia dapat muncul. Jadi, beberapa spesies dapat bereaksi dengan larutan pereduksi,  mengurangi  konsentrasinya,  sementara  yang  lain  dapat  bergabung  dengan merkuri,  menghambat  transportasi  oleh  gas  pembawa.  Dalam  kasus  apa  pun,  interferensi tidak  banyak  dan,  dengan  pengecualian  yang  diajukan  oleh  perak,  dapat  diatasi  dengan mengganti satu agen pereduksi dengan yang lainnya. Masalah paling parah yang muncul adalah  sensitivitas  teknik  yang  tinggi.  Tindakan  pencegahan  ekstrim  dianjurkan  untuk menghindari  kontaminasi  oleh  reagen  dan  peralatan  gelas  yang  digunakan  serta  oleh atmosfer laboratorium kimia.
Analit  mencapai absorbance  cell yang  sudah  dalam  bentuk  atomik,  sehingga  tidak diperlukan langkah atomisasi tambahan. Namun, biasanya disarankan untuk memanaskan cell ,  untuk  menghindari  serapan  pada background dari  uap  air  yang  diangkut  oleh  gas pembawa,  yang  pada  suhu  kamar  dapat  mengembun  sebagai  tetesan  kecil  dalam  sel penyerapan.  Baik  timah  klorida  atau  natrium  tetrahidroborat  digunakan  sebagai  reduktor merkuri. Keuntungan yang dihasilkan oleh penggunaan timah klorida adalah hidrogen tidak berevolusi (Sanz-Medel and Pereiro 2014) .
Cold  Vapor Merkuri  didasarkan  pada  reduksi  ion  merkuri  dengan  reduktor  untuk menghasilkan merkuri unsur. Karena tekanan uap merkuri unsur cukup tinggi, Hg 0 dapat dengan  mudah  dipisahkan  dari  matriks  berair  dengan  gas  pembawa  (mis.  Argon)  dan kemudian  diangkut dan dimasukkan ke dalam sel absorbansi. Seperti yang ditunjukkan di
atas,  analit  mencapai  sel  absorbansi  yang  sudah  dalam  bentuk  atomik,  sehingga  tidak diperlukan langkah atomisasi tambahan. Namun, biasanya disarankan untuk memanaskan sel,  untuk  menghindari  penyerapan  latar  belakang  dari  uap  air  yang  diangkut  oleh  gas pembawa,  yang  pada  suhu  kamar  dapat  mengembun  sebagai  tetesan  kecil  dalam  sel penyerapan.  Baik  timah  klorida  atau  natrium  tetrahidroborat  digunakan  sebagai  reduktor merkuri. Keuntungan yang dihasilkan oleh penggunaan timah klorida adalah hidrogen tidak berevolusi (de la Guardia and Garrigues 2015).

## Gambar 1. Skema Bejana Uap Dingin Spektroskopi Serapan Atom
Kromatografi adalah teknik pemisahan fisik suatu campuran zat-zat kimia (analit) yang berdasarkan pada perbedaan migrasi/ distribusi masing-masing komponen campuran yang terpisah pada fase diam (stationary phase) dibawah pengaruh fase gerak (mobile phase) , fase gerak  dapat  berupa  gas  atau  zat  cair  dan  fasa  diam  dapat  berupa  zat  cair  atau  zat  padat. Kromatografi  cair  pertama  kali  diperkenalkan  oleh  Tswett  pada  tahun  1903  yang menggunakan kolom kapur untuk memisahkan pigmen dari daun-daun hijau. Pita-pita warna yang dihasilkan pada adsorben menginspirasi istilah kromatografi untuk menggambarkan proses pemisahan yang berasal dari kata Jerman Chromos berarti warna dan grafe berarti menulis.
Berbagai  prinsip  pemisahan  pada  kromatografi  cair  kinerja  tinggi  (HPLC) memungkinkan pemanfaatan metoda ini dalam berbagai analisis. Bahan-bahan dengan bobot molekul  lebih  dari  10.000  biasanya  dipisahkan  dengan  kromatografi  ekslusi,  sedangkan untuk senyawa ionik dengan bobot molekul rendah kromatografi penukar ion lebih sering digunakan.Sejak  diperkenalkan  pada  tahun  1975  oleh,  kromatografi  ion  telah  muncul sebagai  metode  analitik  yang  penuh  kemampuan  untuk  menentukan  kadar  sejumlah  ion (kation  dan  anion)  di  berbagai  tipe  sampel,  terutama  sampel  cair.  Kromatografi  ion menawarkan sejumlah keunggulan dibandingkan dengan metode determinasi lainnya, dalam hal  kecepatan  analisis,  sensitivitas,  selektivitas,  serta  stabilitas  dalam  analisisnya  (Weiss, 1995; Amin et al., 2008).

## Gambar 2. Skema Ion Kromatografi dalam Pemeriksaan Krom heksavalen
Validasi  metode  merupakan  aspek  penting  dalam  analisis  kuantitatif.  Menurut ISO/IEC  17025:  2017,  validasi  metode  dimaksudkan  untuk  menjamin  bahwa  metode tersebut memenuhi kriteria yang dapat diterima. Tujuan dari karya tulis ilmiah ini adalah untuk  pengembangan  metode  validasi  Spektroskopi  Serapan  Atom  –  Teknik  Bejana  Uap Dingin  untuk  penentuan  merkuri  (Hg)  dan  Ion  Kromatografi  untuk  analisis  Cr 6+ dalam barang bukti diduga Limbah B3 yang berasal dari beberapa kegiatan industri di Indonesia.

## Metode Penelitian Bahan
Sampel tanah / limbah sebanyak 5 gram yang telah dilakukan proses TCLP (Penentuan Cr 6+ ), Sampel tanah / limbah sebanyak 0,5 gram (Penentuan Hg), air suling ultrapure, 250 mM Ammonium sulfat (NH 4 ) 2 SO 4 ; 10 mM Ammonium hidroksida NH 4 OH; 0,25 gram 1,5- diphenylcarbazide,  50  ml  methanol,  14  ml  asam  sulfat  terkonsentrasi, aqua  regia 50  ml, larutan KMnO 4 0,1 N, larutan hydroxylamine, kertas saring 0,22 µm, kertas saring 0,45 µm, Larutan standar Cr 6+ dibuat dari padatan K 2 CrO 4 dengan variasi konsentrasi 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 mg/L dan Larutan standar /CRM merkuri dengan variasi konsentrasi 1,0; 3,0; 5,0; 7,0; 9,0; 11,0; 13,0 µg/l.
Prosedur Digestion
a. Penentuan Merkuri (Hg)
Sebanyak 0,5 gram sampel tanah, dilarutkan aquades dan aqua regia, kemudian dilakukan digestion . Setelah itu ditambahkan KMnO 4 dan larutan hydroxylamine (US EPA Method 7471B).
b. Penentuan Krom heksavalen (Cr 6+ )
Sebanyak  5  gram  sampel  ditentukan  pH,  kemudian  ditambahkan  buffer  asetat  lalu  di kocok hingga 18 jam dan disaring. (SNI 8808:2019).

## Penentuan Merkuri
Penentuan  merkuri  menggunakan  instrumen  Spektroskopi  Serapan  Atom  teknik Bejana Uap Dingin ( Cold Vapor – AAS) VGA 77 AA 200 Series AA (Agilent Technologies, USA)  dioperasikan  dengan  method  Hg  (vapor).  Reduktan:  SnCl 2 10%  dan  HCl  10  %. Tekanan  keluaran  Argon  dioperasikan  pada  50  Psi,  Background  Correction:  ON; wavelength: 253,7 mm; slit width: 0.5R nm, Lamp current: 4.0 mA dan burner height: 16.0mm.

## Penentuan Krom heksavalen
Penentuan  krom  heksavalen  menggunakan  instrumen  Ion  Kromatografi  (Waters, USA),Kolom  HPLC  IC-PAK  Anion  HC  4,6  x  150  mm  (Waters,  USA)  eluen:  25  mM (NH 4 ) 2 SO 4 / 10 mM NH 4 OH; Pump: ACTION Analyzer; Data: 860 Data System; Flow rate: 1,5 ml/min; Injection: 100 µl of standard; Detection: Post-column Derivatization; Detector: 490 UV/Vis at 530 nm; Post-column Reagent: 2 mM Diphenylcarbazide/ 10 % Methanol/ 0,5 M H 2 SO 4 ; RDM Flow: 0,5 ml/min; Reaction  Coil: RXN-1000; Back Press: 1150 psi (US EPA Method 281.6)

## Validasi Metode
Validasi  metode  dilakukan  dengan  menilai  beberapa  figur  analitis  merit  menurut International  Conference  on  Harmonization (ICH,  1994),  yaitu  linearitas  dan  jangkauan, presisi, batas deteksi (LOD) dan batas kuantifikasi (LOQ) dan akurasi.

## Hasil Dan Pembahasan
Dalam metode validasi penentuan kuantitatif logam berat Hg dan Cr 6+ dalam sampel tanah/sludge  diduga  limbah  B3,  yaitu  rentang  linieritas,  nilai  R2,  standar  deviasi,  batas deteksi  minimum  (LOD),  batas  minimum  kuantitasi  (LOQ),  akurasi,  dan  presisi.  Kajian linieritas ditunjukkan dengan menganalisis enam konsentrasi merkuri (1,0; 3,0; 5,0; 7,0; 9,0; 11,0 dan 15,0µg/L) dan enam konsentrasi krom heksavalen yang berbeda (0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0;  5,0  mg/L).  Persamaan  kurva  regresi  linier  bersesuaian  yang  diperoleh  memiliki koefisien korelasi sebesar 0,9979 (Hg) dan 0,9978 (Cr 6+ ). Kedua persamaan regresi pada rentang konsentrasi bersifat linier karena nilai koefisien korelasi yang diperoleh lebih besar dari 0,995 (Eurachem, 1998). Parameter linieritas dan range untuk Hg dan Cr 6+ disusun pada Tabel 1.
Tabel 1. Data Regresi linier untuk kurva kalibrasi Hg dan Cr 6+ Parameter Hg Cr6+ Rentang linieritas 1 – 11 µg/L 0,5 – 5 mg/L Koefisien korelasi (R2) 0,9979 0,9978 Standar Deviasi 0,005 1,744
Batas deteksi minimum (LOD) 0,0028 µg/kg 0,234 mg/kg Batas minimum kuantitasi (LOQ) 0,0067 µg/kg 0,709 mg/kg
Sensitivitas CV-AAS dan Ion Kromatografi dinilai dengan menentukan batas deteksi minimum (LOD) dan batas minimum kuantitasi (LOQ). Nilai LOD merupakan konsentrasi terendah dari analit dalam sampel yang dapat terdeteksi, akan tetapi tidak perlu terkuantisasi, dibawah kondisi pengujian yang disepakati. Sedangkan nilai LOQ didefinisikan konsentrasi terendah dari analit dalam contoh yang dapat ditentukan dengan tingkat presisi dan akurasi yang  dapat  diterima,  di  bawah  kondisi  pengujian  yang  disepakati.  Nilai  LOD  dan  LOQ ditentukan  dari  sepuluh  sampel  kosong  yang  telah  diukur,  LOD  dihitung  sebagai  3  kali standar deviasi dibagi slope (kemiringan kurva kalibrasi) dan LOQ masing-masing dihitung sebagai 10 kali standar deviasi dibagi slope . Hasil perhitungan diperoleh nilai LOD dan LOQ masing-masing diperoleh 0,0028 µg/kg dan 0,0067 µg/kg pada penentuan kadar Merkuri dengan Spektrofotometri Serapan Atom – Bejana Uap Dingin, serta masing-masing 0,234 mg/kg dan 0,709 mg/kg (untuk Krom heksavalen dengan Ion Kromatografi).
Presisi biasanya diukur sebagai standar deviasi relatif (RSD) dari sekumpulan data (konsentrasi  dalam  penelitian  ini).  Ketepatan  Hg  dan  Cr 6+ dianalisis  untuk  menunjukkan apakah  adanya  respons  pada  instrumen  pengukuran  (CV-AAS  dan  Ion  Kromatografi) terhadap  larutan  standar  selalu  dapat  direproduksi  (sama  pada  parameter  yang  berbeda). Parameter ini hanya memperhitungkan kesalahan yang berasal dari sistem operasi dan bukan kesalahan yang disebabkan oleh penanganan dan persiapan sampel (Ertasa dan Tezel, 2004). Dari %RSD yang didapat adalah masing-  masing  0,4917 untuk Hg dan 0,0556 untuk Cr 6+ ,  dimana    %RSD    yang  didapatkan  <2%.  Jadi,  Presisi  yang  didapat  dari  data  di  atas menunjukan bahwa metode ini memiliki tingkat presisi yang baik, sehingga metode ini valid dan dapat digunakan dalam analisis Hg dan Cr 6+ di laboratorium.
Tabel 2. Studi data akurasi dari penentuan Hg dan Cr 6+ Analit Konsentasi awal Konsentrasi Persen temu balik (% sebenarnya Recovery) 3,0 µg/L 2,691 µg/L 111,49 Hg 5,0 µg/L 5,077 µg/L 98,47 7,0 µg/L 7,055 µg/L 99, 21 1,0 mg/L 1,036 mg/L 96,49 Cr 6+ 2,0 mg/L 1,875 mg/L 106,66 3,0 mg/L 2,956 mg/L 101,48
Keakuratan  dalam  validasi  metode  analisis  dapat  ditentukan  dengan  menghitung perolehan kembali Hg dan Cr 6+ . Dalam memberi keyakinan untuk keakuratan dalam metode analisis yang digunakan, penentuan nilai akurasi dilakukan dengan menambahkan sejumlah analit  yang  telah  diketahui.  Hal  ini  dilakukan  untuk  memeriksa  dan  mengkonfirmasi seberapa  banyak  hilangnya  Hg  dan  Cr 6+ maupun  adanya  kontaminasi  selama  persiapan sampel serta gangguan matriks lain selama proses analisis yang dilakukan (Ertasa dan Tezel, 2004). Semua langkah analisis dilakukan dalam tiga ulangan dengan tiga tingkat konsentrasi yang  berbeda.  Nilai  perolehan  kembali  untuk  studi  akurasi  sampel  limbah  industri  yang diduga limbah B3 dengan kadar Hg dan Cr 6+ yang berbeda ditunjukkan pada Tabel 3. Untuk tingkat analit sekitar 1 g/mL, kisaran pemulihan 80-110% dapat diterima (Taveniers et al. , 2004).  Oleh  karena  itu,  metode  yang  dikembangkan  memiliki  akurasi  yang  baik  untuk kuantifikasi Hg dan Cr 6+ dalam semua barang bukti.
Tabel 3. Hasil analisis Hg dan Cr 6+ dari beberapa barang bukti Kode barang bukti Hg (µg/kg) Cr 6+ (mg/kg) BB 1 1,134 < LOD BB 2 1,142 < LOD BB 3 1,144 < LOD BB 4 1,564 0,673 BB 5 4,152 < LOD BB 6 1,543 < LOD BB 7 11,217 0,758 BB 8 2,548 < LOD BB 9 1,486 < LOD BB 10 2,873 < LOD
Metode  yang  dikembangkan  selanjutnya  digunakan  untuk  penentuan  Hg  dan  Cr 6+ dalam barang bukti di duga limbah B3 dari beberapa jenis industri. Sampling dilakukan di perusahaan  pencucian  jeans  Kab.  Bogor,  industri  plastik  di  Kab  Tangerang,  industri, kawasan  industri  di  Kab  Bekasi  dan  industri  nikel  di  Kab.  Konawe,  Sulawesi  Tenggara. Kadar Hg dan Cr 6+ yang ditentukan oleh CV-AAS dan Ion Kromatografi disusun pada Tabel 4  menurut  Peraturan  Pemerintah  Republik  Indonesia  Nomor  22  tahun  2021  tentang Penyelenggaraan dan Perlindungan Lingkungan Hidup Lampiran XI. Dari Tabel 4 diketahui bahwa kadar Hg dan Cr 6+ lebih rendah dari yang dipersyaratkan oleh regulator/ pemerintah.

## Kesimpulan
a. Sistem  Bejana  Uap  Dingin  –  Spektroskopi  Serapan  Atom  ( Cold  Vapor  –  Atomic Absorption Spectroscopy)  dalam  analisa  merkuri  dan  Ion  Kromatografi  dalam  analisa krom  heksavalen  masing-masing  berhasil  digunakan  untuk  analisis  kuantitatif  Hg  dan Cr 6+ dalam barang bukti diduga limbah bahan berbahaya dan beracun dari beberapa jenis industri. Metode yang dikembangkan memenuhi kriteria penerimaan parameter validasi.
b. Barang bukti yang diperiksa memiliki nilai dibawah baku mutu Merkuri (Hg) dan Krom heksavalen  (Cr 6+ )  menurut  Peraturan  Pemerintah  Republik  Indonesia  Nomor  22  tahun 2021 tentang Penyelenggaraan dan Perlindungan Lingkungan Hidup Lampiran XI.

## BIBLIOGRAFI
Amin, M., Lim, L.W., and Takeuchi, T., 2008. Determination of Common Inorganic Anions and Cations by Non-suppressed Ion Chromatography with Column Switching. Journal of Chromatography A 1182,169-175. doi: 10.1016/j.chroma.2008.01.007.
Barr, R. D., B. M. Woodger, and P. H. Rees, 1973. Levels of mercury in urine correlated with the use of skin lightening creams. Am. J. Clin. Pathol., 59: 36-40.
Berlin,  M.,  1979.  Mercury.  In:  Friberg,  F,  Nordberg,  G.  F.  and  Vouk,  V.L.  (Editors) Handbook in toxicology of metals , pp 503-530. Amsterdam: Elsevier/North-Holland.
Boss, C. B., and K. J. Fredeen. 1997. “Concepts, Instrumentation and Techniques in Atomic Absorption Spectrophotometry.” North .
Bourgeosis, M., A. Dooms-Goossens, D. Knockaert, D. Sprenger, M. Vsan Boven, and T. Van  tittelboom,  1986.  Mercury  intoxication  after  topical  application  of  a  metallic mercury ointment. Dermatologica 172 : 48-51.
De la Guardia, Miguel de, and Salvador Garrigues. 2015. Handbook of Mineral Elements in Food . Handbook of Mineral Elements in Food . https://doi.org/10.1002/9781118654316.
Dhal,  B.,  Thatoi,  H.  N.,  Das,  N.  N.,  &  Pandey,  B.  D.  (2013).  Chemical  and  microbial remediation of hexavalent chromium from contaminated soil and mining/metallurgical solid  waste:  a  review. Journal  of  Hazardous  Materials , 250 – 251 ,  272–291. https://doi.org/10.1016/j.jhazmat.2013.01.048
Ertasa,  O.S  and  H.  Tezel,  2005.  A  validated  cold  vapour-AAS  method  for  determining cadmium in human red blood cells. J. Pharm. Biomed. Anal., 36: 893–897.
Eurachem, 1998. The fitness for purpose of analytical method: A laboratory guide to method validation  and  related  topics,  accessed  from: http://www.eurachem.org/guides/pdf., 18/ 04/2011 .
Grigal,  D.  F.  2002.  “Inputs  and  Outputs  of  Mercury  from  Terrestrial  Watersheds:  A Review.” Environmental Reviews . https://doi.org/10.1139/a01-013.
He, Feng, Jie Gao, Eric Pierce, P. J. Strong, Hailong Wang, and Liyuan Liang. 2015. “In Situ  Remediation  Technologies  for  Mercury-Contaminated  Soil.” Environmental Science and Pollution Research . https://doi.org/10.1007/s11356-015-4316-y.
Kahkha,  Mohammad  Reza  Rezaei,  Somaye  Bagheri,  Roghayeh  Noori,  Jamshid  Piri,  and Safoura Javan. 2017. “Examining Total Concentration and Sequential Extraction of Heavy  Metals  in  Agricultural  Soil  and  Wheat.” Polish  Journal  of  Environmental
Dalam Barang Bukti Di Duga Limbah B3 Dari Beberapa Kegiatan Industri
Studies . https://doi.org/10.15244/pjoes/67658.
López-García,  Ignacio,  and  Manuel  Hernández-Córdoba.  2015.  “Atomic  Absorption
Spectrometry.” In Handbook of Mineral Elements in Food . https://doi.org/10.1002/9781118654316.ch10.
Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 22 Tahun 2021 tentang Penyelenggaraan Perlindungan Lingkungan Hidup.
Różański,  Szymon  Łucjan,  Jose  Matias  Peñas  Castejón,  and  Gregorio  García  Fernández. 2016.  “Bioavailability  and  Mobility  of  Mercury  in  Selected  Soil  Profiles.” Environmental Earth Sciences . https://doi.org/10.1007/s12665-016-5863-3.
Sanz-Medel, Alfredo,   and  Rosario  Pereiro.  2014. “Atomic  Absorption  Spectrometry : An Introduction, 2nd Edition.” In Atomic Absorption Spectrometry : An Introduction .
Taverniers, I., M. De Loose, and E. Van Bockstaele, 2004. Trends in quality in the analytical laboratory: Analytical method validation and quality assurance. Trends Anal. Chem., 23: 535 – 552.
Toxicological  Effects  of  Methylmercury .  2000. Toxicological  Effects  of  Methylmercury . https://doi.org/10.17226/9899.
U.S. EPA. 2007. “Method 7471B Mercury in Solid or Semisolid Wastes (Manual Cold- Vapor Technique) .”
U.S.  EPA.  2014.  “Method  218.6  Determination  of  Dissolved  Hexavalent  Chromium  in Drinking  Water,  Groundwater  and  Industrial  Wastewater  Effluents  by  Ion Chromatography.”
Weiss,
J.,1995. Ion Chromatography . 2nded., VCH, Weinheim. doi:
10.1002/jhrc.1240190411.
Copyright holder: Helmiady (2022)
First publication right: Syntax Literate: Jurnal Ilmiah Indonesia
This article is licensed under: