Jurnal Pharmascience, Vol 3, No. 1, Februari 2016, hal: 45 - 55 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.ppjpu.unlam.ac.id/

## Research Article

## Pengaruh Pemberian Fraksi Metanol Kulit Buah
Naga Merah ( Hylocerecus polyhizus ) Terhadap

## Kadar Malondialdehid Pada Tikus ( Rattus novergicus ) Wistar Yang Mengalami Stres Oksidatif
*Sri Wahdaningsih, Eka Kartika Untari
Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura, Pontianak email : wahdanie@gmail.com

## ABSTRAK
Produksi  radikal  bebas  berlebihan  dalam  tubuh  dapat  menyebabkan  stres oksidatif.  Salah  satu  indikator  stres  oksidatif  pada  manusia  adalah  kadar Malondialdehid  (MDA).  Kulit Hylocereus  polyrhizus berpotensi  sebagai  antioksidan eksogen  alami.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  efek  fraksi  metanol  kulit H. polyhizus terhadap kadar MDA dan mengetahui dosis fraksi metanol kulit H. polyhizus yang  dapat  menurunkan  kadar  MDA.  Kulit H.  polyhizus dimaserasi  menggunakan kloroform  p.a,  kemudian  difraksinasi  dengan  pelarut  metanol.  Kadar  MDA  diukur menggunakan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 532 nm. Tikus dibagi menjadi 7 kelompok yaitu kontrol normal, kontrol negatif, kontrol positif vitamin E(18 mg/  kgBB),  kontrol  positif  kuersetin  (4  mg/  200gBB),  dosis  I  (5  mg/  200gBB),  Dosis  II (10  mg/  200gBB)  dan  dosis  III  (20  mg/  200gBB).  Setiap  kelompok  terdiri  dari  4  ekor tikus  dan  diberikan  stres  oksidatif  berupa  perenangan  10  menit  perhari  dan  puasa pakan selama 5 hari.  Analisis data dilakukan dengan menggunakan One way ANOVA dan  uji  LSD  ( Least  Significant  Difference ) .  Hasil  analisis  data  kadar  rata-rata  MDA pada kelompok normal, negatif, vitamin E, kuersetin,  dosis I,II  dan III  berturut-turut adalah 0,042; 0,051; 0,034; 0,042; 0,037; 0,033; 0,030 µg/ml.  Dosis fraksi  metanol kulit H.  polyhizus berpotensi  sebagai  antioksidan  karena  dapat  menurunkan  kadar malondialdehid pada tikus yang mengalami stres oksidatif.
Kata  Kunci  :  Stres  oksidatif,  Malondialdehid,  Antioksidan, Hylocereus  polyrhizus , Metanol

## ABSTRACT
Excessive  free  radical  production  will  lead  to  oxidative  stress.  One  of  the indicators  used  to  determine  stress  oxidative  is  malondialdehyde  (MDA). Hylocereus polyhizus peel  is  potential  as  natural  exogenous  antioxidant.  The  aim  of  this  research was  to study the effect of methanol fraction of H. polyhizus peel on MDA level and  to determine that dose that could  reduce the MDA level. H. polyhizus peel was macerated with  chloroform,  fractionated  with  methanol.  Measurement  of  MDA  level  was  used Spectrophotometer  UV-Vis  in  532  nm.    Rats  were  divided  into  7  groups  :  normal,
negative,  positive  control  vitamin  E  (18  mg/  kgbw),  positive  control  quercetin  (4 mg/200gbw), H. polyhizus peel extract group treated with dose I (5 mg/200gbw), dose II (10 mg/200gbw) and dose III (20 mg/200gbw). Each group consist of 4 rats and induced with oxidative stress by 10 minute swimming each day and food restriction for 5 days. MDA  levels  were  analyzed  using  One  way  Anova  and  LSD  test.  The  data  shown  that MDA  level  at  normal,  negative,  vitamin  E,  kuarsetin,  dose  I,  II,  III  group  is  0.042; 0.051; 0.034; 0.042; 0.037; 0.033; 0,030 µg/ml. The methanol fraction of red dragon fruit peel was a potent antioxidant  because posessing the ability to lowering the MDA level on stress oxidative rats.
Key  Word  : Stress  Oxidative,  Malondialdehyde,  Antioxidant,  Hylocereus  polyrhizus, Methanol.

## I. PENDAHULUAN
Tuntutan terhadap pemenuhan kebutuhan hidup tidak lagi dapat dihindari sehingga  masyarakat  harus  bekerja  keras dan seringkali lupa untuk mengatur waktu makan  dan  istirahat.  Kerja  keras  tanpa istirahat  pada  akhirnya  akan  membebani semua  organ-organ  dalam  tubuh  serta memicu  radikal  bebas  (Jawi,  2006). Radikal bebas dapat terbentuk melalui dua cara  yaitu  secara  endogen  (sebagai  respon normal  proses  biokimia  intrasel  maupun ekstrasel) dan secara eksogen (berasal dari polusi,  makanan,  serta  injeksi  ataupun absorpsi  melalui  kulit).  Produksi  radikal bebas  dalam  tubuh  dapat  meningkatkan kondisi  stres  oksidatif.  Pada  keadaan normal  radikal  bebas  yang  diproduksi  di dalam tubuh akan dinetralisir oleh antioksidan yang ada di dalam tubuh. Bila kadar  radikal  bebas  terlalu  tinggi  maka kemampuan  dari  antioksidan  endogen tidak  memadai  untuk  menetralisir  radikal bebas sehingga terjadi  keadaan  yang tidak seimbang  antara  radikal  bebas  dengan
antioksidan  yang  disebut  stres  oksidatif (Winarsi  H,  2007)  .  Salah  satu  indikator yang  dipakai  untuk  menentukan  stres oksidatif pada manusia adalah kadar MDA (Malondialdehid)  yang  merupakan  hasil dari  peroksidasi  lipid  di  dalam  tubuh akibat radikal bebas (Rodriguez MC et al .,, 2003).  Stres  oksidatif  yang  diinduksi renang  dan  puasa  dapat  meningkatkan kadar  MDA  pada  hati  tikus (Suarsana et al .,,  2013),  sehingga  pada  kondisi  seperti ini  dibutuhkan  tambahan  antioksidan  dari luar 4 .  Berdasarkan  penelitian  kulit  Buah naga  merah  ( H.  polyhizus )  mengandung beta karoten dan betasianin yang memiliki aktivitas  antioksidan  (Wiset et  al .,,  2012 dan Jamilah et al .,, 2011). Ekstrak metanol kulit H.  polyhizus juga  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  lebih  tinggi  dari  ekstrak metanol  kulit H.  Undatus dan  ekstrak metanol  daging H.  polyhizus dengan  uji aktivitas antioksidan menggunakan metode DPPH  dan  metode radical  scavenging activity (Kim et a l.,, 2011 dan Nurlyana et al .,,  2010).  Hasil  dari  berbagai  penelitian
di  atas  menunjukan  bahwa  pengujian aktivitas  antioksidan  hanya  dilakukan secara in  vitro saja,  namun  kajian aktivitasnya secara in vivo belum terungkapkan.  Oleh  karena  itu  perlu dilakukan penelitian mengenai pengukuran kadar  MDA  pada  tikus  wistar  jantan  yang mengalami  stres  oksidatif  setelah  diberi fraksi metanol kulit H. polyhizus .

## II. BAHAN DAN METODE
A. Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian  ini  yaitu  kulit H.  polyhizus , vitamin  E,  kuarsetin,  kloroform,  metanol, aquades, Tiobarbiturat  acid (TBA),  Tetra Metoksi  Propana  (TMP), Phosphat  Buffer Saline (PBS),  HCl,  BHT,  Trikloroasetat (TCA).

## B. Pengambilian dan Pengolahan

## Sampel
Kulit H.  polyhizus yang  digunakan diperoleh  dari  Perkebunan  Petani  Mekar Sari  Kecamatan  Segedong,  Kabupaten Pontianak,  Provinsi  Kalimantan  Barat. Kulit  tersebut  dicuci  dengan  air  mengalir, kemudian  dirajang,  disortasi  basah  dan dikeringkan  kemudian    diblender  hingga menjadi simplisia.

## C. Ekstraksi dan Fraksinasi
Metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah maserasi. Ekstrak kloroform
kemudian  difraksinasi  cair-cair  dengan pelarut  metanol  p.a.  Fraksi  metanol
Hylocereus polyhizus
kemudian dipekatkan menggunakan rotary evaporator dan water bath .

## D. Persiapan Hewan Percobaan
Pengukuran  kadar  malondialdehid dilakukan  di  Laboratorium  Klinis  Farmasi FK  UNTAN.  28  tikus  dibagi  kedalam  7 kelompok  secara  acak.  Hewan  percobaan diadaptasikan terhadap lingkungan kandang  percobaan  selama  kurang  lebih  1 minggu.  Stres oksidatif  (SO) yang diberikan berupa puasa pakan tetapi diberi air  minum ad  libitum serta  perenangan selama  sepuluh  menit/hari  selama  lima hari.  Pemberian  vitamin  E,  kuersetin  dan fraksi  metanol  kulit Hylocereus  polyhizus dilakukan secara oral. Pembagian kelompok  hewan  uji  dapat  dilihat  pada tabel I.
Tabel I. Pembagian Kelompok Hewan Uji

## E. Pengambilan Hati Tikus
Setelah  5  hari  masa  perlakuan, tikus  wistar  diterminasi/dieuthanasi  secara dislocatio  os  cervical  ( cervical  dislocatio ) yang  dilakukan  dengan  steril  dan  cepat. Organ  hati  dilakukan  pencucian  dengan buffer  fosfat  sallin  (PBS).  Setelah  itu organ  hati  ditiriskan  dan  ditimbang beratnya (Puspawati, 2009)

## F. Persiapan Homogenat Hati
Hati  sebanyak  1,25  g  dicacah dalam  kondisi  dingin  dalam  5  ml  larutan PBS  yang  mengandung  11,5  g/L  KCL, kemudian  disentrifuse  pada  4000  rpm,  10 menit.  Sehingga  diperoleh  supernatan jernih  (homogenat).  Supernatan  jernih (homogenat)  ini  digunakan  untuk  analisis kadar MDA (Singh et al .,, 2002)

## G. Analisis Kadar Malondialdehid
Larutan  stok  pereaksi  1,1,3,3-tetra metoksi  propana  (TMP)  konsentrasi  6M diencerkan  menjadi  0,05;  0,06;  0,07;  0,0; 0,09;  0,10;  0,11;  0,12;  dan  0,13  ppm. Selanjutnya,  ditambah  2,0  ml  HCL  dingin (0,25  N)  yang  mengandung  15%  TCA,
0,38%  TBA  dan  0,5%  BHT.  Campuran dipanaskan 80ᵒC selama 1 jam, disentrifuse  pada  3500  rpm  selama  10 menit. Supernatan diambil diukur absorbansi  dengan  spektrofotometer  pada λ 532 nm.
Sebanyak  0,5  ml  supernatan  jernih (hati) ditambah 2,0 ml HCl dingin (0,25 N) yang mengandung 15% TCA, 0,38% TBA dan  0,5%  BHT.  Campuran  dipanaskan 80ᵒC  selama  1  jam.  Setelah  dingin, campuran  disentrifuse  pada  3500  rpm selama  10  menit.  Supernatan  diambil diukur absorbansi dengan spektrofotometer  pada  λ  532  nm.  Sebagai larutan  standar  digunakan  TMP  (tetra metoksi propana) (Singh et al .,, 2002).

## H. Analisis Data
Teknik  analisis  data  menggunakan One  way ANOVA  dan  Uji Least Significant Difference (LSD).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Metode  ekstraksi  yang  digunakan adalah maserasi untuk mencegah rusaknya senyawa yang tidak tahan panas. Simplisia dimaserasi menggunakan pelarut kloroform  p.a  selama  7  hari.  Ekstrak kloroform  yang  didapat  adalah  sebanyak 9,48 g atau dengan nilai rendemen sebesar 2,39  %  dari  396,97  g  simplisia.  Ekstrak kloroform  difraksinasi  cair-cair  dengan pelarut  metanol  p.a.  Fraksi  metanol kemudian dipekatkan menggunakan rotary evaporator . Fraksi metanol yang didapatkan  adalah  sebesar  5,21gr  dengan nilai rendemen sebesar 55,13% dari 9,48gr ekstrak kloroform.

## Prinsip  kerja  dari  pengukuran
MDA  adalah  reaksi  satu  molekul  MDA dengan  dua  molekul  asam  tiobarbiturat (TBA)  membentuk  warna  merah  muda yang diukur pada spektrofotometer panjang  gelombang  532  nm  (Yagi  K, 1994).  Reaksi  pembentukan  kompleks TBA-MDA ditunjukankan pada gambar 1.
Gambar 1. Reaksi Pembentukan Komplek MDA-TBA (Nawar B, 1985)
Standar  yang  digunakan  dalam perhitungan kadar MDA adalah tetrametoksipropana  (TMP).  Standar  TMP dalam  keadaan  asam  dapat  terhidrolisis menghasilkan  hemiasetal  dam  metanol, hemiasetal  yang  terbentuk  kemudian  akan terdekomposisi  menjadi  metanol  dan aldehid  yang  dapat  bereaksi  dengan  TBA (Wresdiyati et  al .,,  2002  dan  Prasetyawati et  al .,,  2003).    Persamaan  regresi  linier yang  dihasilkan  pada  pengukuran  kurva baku  yaitu  y  =  8,17993x  -  0,09969. Dengan  nilai  r  =  0,99268.  Grafik hubungan antara absorbansi dan konsentrasi  kurva  standar  TMP  terdapat pada gambar 2.
Gambar  2. Grafik  konsentrasi  dan absorbansi  kurva  standar tetra  metoksi  propana (TMP)
Data  diolah  dalam  bentuk  diagram untuk  melihat  gambaran  perbedaan  kadar MDA  rata-rata  antar  kelompok,  yang disajikan  pada  gambar  3.  Hasil  uji normalitas kadar MDA menunjukan sebaran data yang normal untuk pengujian menggunakan  uji  normal Shapiro-Wilk (p>0,05). Hasil  pengujian  statistik  dengan menggunakan ANOVA kemudian dilanjutkan dengan uji LSD.  Pada hasil uji LSD  pada  masing-masing  kelompok terlihat  bahwa  kelompok  negatif  memiliki kadar  MDA  yang  berbeda  signifikan  bila dibandingkan  dengan  semua  kelompok dengan nilai p<0,05. Kadar rata-rata MDA pada  kelompok  kontrol  negatif  adalah sebesar  0,051  µg/ml.  Terjadi  perbedaan yang signifikan  bila dibandingkan dengan kelompok  normal  yang  mempunyai  kadar rata-rata  MDA  sebesar  0,042  µg/ml.  Hal ini  menunjukan  bahwa  perenangan  10 menit  dan  puasa  makan  pada  tikus  wistar menyebabkan stres oksidatif karena terjadi peningkatan  MDA  lebih  tinggi  dari
keadaan  normalnya.  Suarsana  (2013)  dan Wresdiyati  (2002)  menyatakan  bahwa tikus yang diinduksi dengan menggunakan perenangan  dan  puasa  selama  5  hari memiliki  kadar  MDA  pada  kelompok negatif  yang  lebih  tinggi  dari  kelompok normal.  Hal  yang  sama  terjadi  pada penelitian  ini,  kadar  MDA  kelompok negatif  memiliki  kadar  yang  lebih  tinggi dari kelompok normal.
Gambar 3. Histogram Rata-Rata Kadar Malondialdehid  Tiap  Kelompok Perlakuan,  tanda  (*)  menunjukan adanya perbedaan signifikan antar kelompok negatif dan kelompok lain.
Pada kondisi puasa tubuh berusaha memenuhi kebutuhannya dengan memakai cadangan  makanan    yaitu  lemak  (Guyton, 1997). Lemak netral dikatabolisme menjadi  asam  lemak  dan  gliserol.  Asam lemak  merupakan  bahan  bakar  utama. Pada  keadaan  normal,  katabolisme  asam lemak  terjadi  di  dalam  mitokondria melalui  proses  yang  dikenal  sebagai  ß- oksidasi. Namun, dalam kondisi kelaparan terjadi peningkatan proses ß-oksidasi pada peroksisom  yang  pada  kondisi  normal merupakan  jalur  minor  proses  ß-oksidasi
(Orellana et al , 1992). Kondisi stres seperti puasa dapat meningkatkan jumlah peroksisom yang berdampak pada peningkatan oksidasi di peroksisom. Dengan  makin  meningkatnya  aktivitas  ß- oksidasi  di  dalam  peroksisom  jumlah radikal bebas juga meningkat sebagai salah satu  hasil  samping  dari  metabolisme (Wresdiyati et  al, 1995).  ß-oksidasi mungkin  dapat  berlangsung  pada  semua sel tubuh, tetapi terjadi  dengan cepat pada sel  hati  dibandingkan  dengan  yang  lain (Guyton, 1997). Perenangan yang dilakukan merupakan bentuk aktivitas fisik yang  dilakukan  terhadap  tikus.  Selama melakukan latihan fisik, konsumsi oksigen tubuh meningkat dengan cepat. Penggunaan  oksigen  oleh  otot  selama latihan  fisik  maksimal  dapat  meningkat sekitar  100–200  kali  dibandingkan  saat istirahat  (Chevion et  al ,  2003).  Saat fosforilasi  oksidatif  di  dalam  mitokondria, oksigen  direduksi  oleh  sistem  transport elektron  mitokondria  untuk  membentuk adenosin  trifosfat  (ATP)  dan  air.  Selama proses  fosforilasi  oksidatif  ini  sekitar  2% molekul  oksigen  dapat  berikatan  dengan elektron  tunggal  yang  bocor  dari  karier elektron  pada  rantai  pernafasan,  sehingga membentuk  radikal  superoksida  (O 2 ) (Singh,  1992).  Tingginya  jumlah  radikal bebas dalam kondisi stres tersebut terdeteksi  dengan  meningkatnya  kadar rata-rata  MDA  pada  kelompok  stres
dibandingkan  kelompok  kontrol  normal pada penelitian ini.
Hasil analisis data kelompok kontrol positif vitamin E juga menunjukan kadar  MDA  yang  berbeda  signifikan  bila dibandingkan  dengan  kelompok  negatif. Hal ini ditunjukan dengan nilai p<0,05 dan kadar  rata-rata  MDA  pada  kelompok kontrol  vitamin  E  adalah  0,034  µg/ml. Vitamin  E  bekerja  sebagai  antioksidan pemutus rantai ( chain breaking antioxidants )  yang  mencegah  terjadinya tahap  propagasi  dengan  cara  donor  satu ion  hidrogen    dari  grup  6-hidroksil  pada cincin  kroman  yang  mampu  merubah radikal  peroksil  (hasil  peroksidasi  lipid) menjadi  radikal  tokoferol  yang  kurang reaktif  sehingga  tidak  mampu  merusak rantai  asam  lemak  (Pokorny et  al ,  2001).
Tokoferol  menangkap  radikal  peroksil lebih  cepat  daripada  radikal  peroksil  yang akan  bereaksi  dengan  substrat  lipid. Tokoferol  akan  menjadi  radikal  bebas yang  stabil  ( tocopheroxyl  radical ).  Reaksi antara tocopheroxyl  radical dan  radikal peroksil  akan  menghasilkan  dua  produk yang bersifat stabil yaitu α – tocopherylquinone dan epoxyquinone) (O’dunel et  al ,  1997).  Penurunan  MDA pada kelompok kuersetin memiliki perbedaan yang signifikan bila di bandingkan  dengan  kelompok  negatif dengan  nilai  P<0,05.  Kelompok  kuersetin memiliki  kadar  MDA  sebesar  0,042  µg/
ml.  Kuersetin  memiliki  efek  antioksidan sehingga  dapat  menurunkan  kadar  MDA pada  tikus  stres  oksidatif.  Kuersetin  juga mampu  menurunkan  kadar  MDA  pada lambung  tikus  wistar  yang  diinduksi  oleh etanol  (Coskun  et  al.,,  2004)  .  Adapun mekanisme  antioksidan  dari  kuersetin sebagai Radical Scavenger . Kuersetin akan mendonasikan  sebuah  atom  hidrogen  (H) dari  gugus  hidroksil  (OH)  fenolik  saat bereaksi  dengan  radikal  bebas  (R*). Reaksi  ini  akan  menghasilkan  suatu radikal  fenoksil  kuersetin  (KO*)  yang kurang  reaktif  karena  (KO*)  dapat mengalami  perubahan  struktur  resonansi dengan  meredistribusi  elektron  yang  tidak berpasangan dalam struktur ikatan rangkap terkonjugasi  pada  cincin  aromatiknya. KO* akan bereaksi lebih lanjut membentuk  senyawa  yang  tidak  reaktif, yang kemungkinan melalui reaksi terminasi  radikal-radikal  (Kurniasari et al .,,  2014).  Melalui  reaksi  tersebut, kuersetin  dapat  menghambat  peroksidasi lipid  yang  diinisiasi  oleh  radikal  bebas. Vitamin  E  melindungi  asam  lemak  tidak jenuh pada membran fosfolipid.
Berdasarkan hasil uji LSD kelompok  dosis  I,  II  dan  III  memiliki penurunan  kadar  MDA  yang  berbeda signifikan  dengan    kelompok  kontrol negatif  (p<0,05).  Penurunan  MDA  yang terjadi pada dosis I,II dan III tidak berbeda nyata  dengan  kontrol  normal,  kontrol
positif  vitamin  E  dan  kuersetin  hal  ini menunjukan  bahwa  ketiga  dosis  fraksi metanol  kulit H.  polyhizus tersebut dikatakan  memiliki  efek  antioksidan. H. polyhizus memiliki  kandungan  metabolit sekunder berupa batakaroten dan betasianin. Penelitian Kim (2011) menyatakan  bahwa  ekstrak  metanol  kulit H.  polyhizus memiliki  kandungan metabolit  sekunder  berupa  polifenol,  dan flavonoid. Kandungan metabolit tersebutlah  yang  diduga  bertanggung jawab  terhadap  aktivitas  antioksidan. Berdasarkan  penelitian  kulit H.  polyhizus mengandung terpenoid golongan karatenoid yaitu betakaroten yang memiliki  aktivitas  antioksidan  (Wiset et al .,, 2012). Karatenoid adalah antioksidan pemutus radikal bebas. Karatenoid bereaksi  dengan  radikal  peroksil  (radikal peroksil  merupakan  hasil  dari  proses peroksidasi  lipid)  kemudian  menghasilkan radikal  antioksidan  yang  tidak  reaktif untuk  memulai  kembali  proses  propagasi radikal bebas. Pembentukan radikal antioksidan  dapat  terhenti  bila  bereaksi dengan  radikal  lain  dengan  membentuk produk yang stabil sehingga dapat memutus  rantai  radikal  bebas  (Burton  dan Ingold, 1984).
Salah  satu    senyawa  alkaloid  yang ada  pada  kulit H.  polyhizus adalah senyawa betasianin (Jamilah et al .,, 2011). Jang et  al .,  (2000)  menyatakan  bahwa
alkaloid  dari  tanaman Peumus  boldus Molina dapat menurunkan kadar malondialdehid pada tikus yang mengalami stres okdatif. Hal ini disebabkan karena alkaloid dapat meredam atau mengurangi produksi senyawa  radikal  bebas  seperti    anion superoksida,  hidrogen  peroksida  dan oksida nitrat. Hasil penelitian menunjukkan bahwa alkaloid dapat menghasilkan  efek  penghambatan  pada kerusakan oksidatif jaringan dan memulihkan  aktivitas  enzim  antioksidan endogen.
Polifenol  juga  bertanggung  jawab  sebagai senyawa antioksidan. Berdasarkan Nzaramba  (2008)  kompenen    fenolik merupakan  terminator  dari  radikal  bebas dan  sebagai  pengkelat  ion  logam  redoks aktif. Antioksidan fenolik ini menghalangi oksidasi  lipid  dan  molekul  lain  dengan cara  mendonasikan  atom  hidrogen  ke senyawa  radikal  membentuk  intermediet radikal  fenoksil.  Senyawa  intermediet radikal  fenoksil  relatif  stabil  sehingga tidak  mampu  lagi  menginisiasi  reaksi radikal  selanjutnya.  Aktivitas  biologis yang  tinggi  pada  senyawa  fenolik  ini terletak  pada  posisi  dan  jumlah  gugus hidroksil (-OH).  Selain itu flavonoid juga berperan  sebagai  antioksidan.  Flavonoid sebagai antioksidan secara langsung berfungsi  untuk  menetralisir  efek  toksik dari  radikal  bebas  seperti  ROS.  Flavonoid
akan  mendonasikan  atom  hydrogen  (H) dari  gugus  hidroksil  (OH)  kepada  radikal bebas  (R•)  sehingga  flavonoid  berubah menjadi  radikal  fenoksis  flavonoid  (FlO•) yaitu  (Fl-OH  +  R•  FlO•  +  RH).  Radikal fenoksis  flavonoid  (FlO•)  yang  terbentuk akan  diserang  kembali  oleh  radikal  bebas (R•) sehingga membentuk radikal fenoksis flavonoid  yang  kedua  (FlO•),  karena radikal  fenoksil  flavonoid  punya  ikatan rangkap yang terkonjugasi maka flavonoid mampu  menyeimbangkan  dengan  cara delokalisasi  elektron  sehingga  menjadi senyawa  kuinon.  yang  stabil  (Vermerris and  Ralph,  2006;  Meng et  al .,,  2010;
Batutihe, 2010). Flavonoid sebagai antioksidan  secara  tidak  langsung  yaitu dengan meningkatkan ekspresi gen antioksidan  endogen  melalui  beberapa mekanisme. Salah satu mekanisme peningkatan  ekspresi  gen  antioksidan adalah  melalui aktivation  nuclear  related factor 2 (Nrf2) sehingga terjadi peningkatan  gen  yang  berperan  dalam sintesis enzim antioksidan endogen seperti misalnya gen superoksida dismutase (SOD)  (Sumardika  dan  Jawi,  2012) Dengan  demikian,  fraksi  metanol  kulit Hylocereus  polyhizus diduga  memiliki aktivitas antioksidan. Namun, perlu dilakukan penelitian lebih lanjut penelusuran  mekanisme  aksi  antioksidan tiap-tiap senyawa aktif  yang menunjukkan aktivitas antioksidan.

## IV. KESIMPULAN
Fraksi  metanol  kulit Hylocereus polyhizus dapat  menurunkan  kadar  MDA pada  tikus  wistar  yang  mengalami  stres oksidatif  dan  dosis  fraksi  metanol kulit Hylocereus polyhizus yang dapat menurunkan  kadar  MDA  adalah  dosis  5, 10 dan 20 mg/ 200 gBB.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan terima kasih ini disampaikan  kepada  pihak  laboratorium Farmasi  Klinis,  Biologi  Farmasi  dan  Non Mikroskopik Fakultas Kedokteran Universitas  Tanjungpura  Pontianak  dan kepada semua pihak yang sudah membantu menyelesaikan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Batutihe, D.N. 2010. Efek Ektrak Rumput laut Coklat ( Sargassum duplicatum Bory )  Terhadap  Profil  Radikal Bebas  dan  protein  Kinase  C  Paru Tikus  ( Rattus norvegicus )  yang Dipapar Benzo(A)piren, Thesis , Malang, Universitas Brawijaya Malang.
Burton,  G.  W.,  And  Ingold,  K.  U.  1984. Beta  Carotene:  An  Unusual  Type Of Lipid Antioxidant. Science . 224,
569–573.
Chevion S, Moran DS, Heled Y, Shani Y,
Regev G, Abbou B, Berenshtein E, Stadtman  ER,  Epstein  Y.  2003. Plasma  antioxidant  status  and  cell injury after severe physical exercise. Proc Natl Acad Sci USA. 100: 5119–23
Coskun  Omer,  Mehmet  Kanter,  Ferah Armutcu,  Kurtulus  Cetin,  Betul
Kaybolmaz1,  Omer  Yazgan.  2004.
Protective  Effects  Of  Quercetin,  A Flavonoid Antioxidant, In Absolute Ethanol-Induced Acut Gastric
Ulcer. Eur J Gen Med . 1(3): 37-42 Guyton  CA.  1997. Buku  Teks  Fisiologi Kedokteran .  EGC  penerbit  buku kedokteran jakarta.
Jamilah,  B.,  Shu,  C.E.,  Kharidah,  M., Dzulkifly, M.A., dan Noranizan, A.
2011. Physico-chemical Characteristics of Red Pitaya ( Hylocereus  polyrhizus )  peel. Int. Food Res J . 18: 279-286.
Jawi  I,  Manuaba  I,  Sutirtayasa  I,  Muruti G.  2006.  Pemberian  Glutamin
Menurunkan Kadar Bilirubin Darah  serta  Mengurangi  Nekrosis Sel-Sel  Hati  setelah  Pemberian
Aktivitas  Fisik  Maksimal  dan
Parasetamol  pada    Mencit. Dexa Media . No. 4, vol 19 : 192-195.
Kim  H,  Choi  HK,  Moon  JY,  Kim  YS,
Mosaddik  A,  Cho  SK.  2011.
Comparative antioxidant and antiproliferative  activities  of  red and  white  pitayas and  their correlation  with  flavonoid  and polyphenol  content. J  Food  Sci . 76(1):C38-45.
Kurniasari B, Aulanni’am, Anna
Roosdiana.  2014.  Pengaruh  Herbal Spray  Berbasis  Bioaktif Spirulina Sp. Terhadap  Kadar  Mda  Pada
Luka Sayatan Tikus ( Rattus Norvegicus ) Dm T1. Kimia Student Journal . Vol. 1, No. 1, Pp. 126-132 Meng,  X.,  A.M.  Larissa,  L.F.  Anthony and  N.U.  Vladmir.  2009. Effect  of various Flavonoids  On  The  α- Synuclein fibrillation process . Department of Chemistry,
University  of  of  California.  Santa
Cruz. CA 95064. USA.
Nawar    W.  1985. Lipids .  Didalam  : fennema, O.R (ed). Food
Chemistry.  Marcel  Dekker  Inc  –
Basel. New York. Nurliyana,  R.,  Syed  Zahir,  I.,  Mustapha Suleiman,  K.,  Aisyah,  M.R.  and Kamarul Rahim, K. 2012. Antioxidant  study  of  pulps  and peels of dragon fruits: a comparative  study. International Food  Research  Journal. 17:  367- 375.
Nzaramba  MN.  2008.  Relationships Among  Antioxidants,  Phenolics, and  Specific  Gravity  in  Potato Cultivars,  and  Evaluation  of  Wild Potato  Species  for  Antioxidants, Glycoalkaloids,  and  Anti-Cancer Activity  on  Human  Prostate  and Colon  Cancer  Cells In  Vitro. Disertasi . Texas A&M University. Sumardika,  I.W.  dan  Jawi,  I.M.  2012.
Ekstrak  Air  Daun  Ubi  Jalar  Ungu Memperbaiki  Profil  Lipid  Dan Meningkatkan  Kadar  SOD  Darah
Tikus Yang Diberi Makanan Tinggi  Kolesterol. Medicina .  43  : 67-71.
Orellana  M,  Fuentes  O,  Rosenbluth  H,
Lara M, Valdes F. 1992. Modulatios of rats liver peroxisomal  and  microsomal  fatty acids  oxidation  by  starvation. FEBS . 310: 193-196.
Prasetyawati  RC.    2003.  Evaluasi  Daya
Antioksidatif Oleoresin Jahe (Zingiber officinale) Terhadap
Aktivitas  Superoksida  Dismutase (SOD) Hati Tikus yang Mengalami Perlakuan  Stres,  Skipsi,  Bogor,
Fakultas Teknologi Pertanian
Pokorny  J,  Yanishlieva  H,  Gordon  M.
2001. Antioxidant In Food: Practical  Application ,  Woodhead
Publising Ltd., Cambrige, England. Rodriguez  MC,  Rosenfeld  J,  Tarnopolsky MA. 2003. Plasma Malondialdehyde Increases Transiently Ischemic Forearm
Exercise. Med  Sci  Sports  Exercise . 35(11):1859-65.
Suarsana,  Wresditati  T  dan  Suprayogi.
2013.  Respon  Stres  Oksidatif  dan Pemberian Isoflavon terhadap
Aktivitas Enzim Superoksida Dismutase  dan  Peroksidasi  Lipid pada  Hati  Tikus. Jurnal  Univ. Udayana . 18(2): 416-152
Singh  RP,  Murthy  KNC,  Jayaprakasha GK.  2002.  Studies  on  Antioxidant Activity  of  Pomegranate  (Punica granatum)  Peel  and  Seed  Extract Using  in  vitro  Model. J  Agri  Food Chem; 50: 81-86.
Singh  VN.  1992.  A  Current  Perspective on  Nutrition  and  Exercise.  The Journal Of Nutrision . 0022-3166 Vermerris, W and Ralph Nicholson. 2006.
Phenolic
Compound Biochemistry .Springer.  Netherland. Pp : 24-25. Wiset,  N.  Poomsa-ad  and  V.  Srilaong. 2012.  Comparisons of Antioxidant Activity and Bioactive Compounds of  Dragon  Fruit  Peel  from  Various Drying  Methods. World  Academy
of Science, Engineering and Technology. Vol:6 2012-10-29 Wresdiyati, Made Astawan , Diini, I Ketut Ma, Savitri N, Dan Saptina Aryani. 2002. Pengaruh Α-Tokoferol Terhadap Profil Superoksida Dismutase  Dan  Malondialdehida Pada  Jaringan  Hati  Tikus  Di Bawah Kondisi Stres. Jurnal
Veteriner. 13;111
Wresdiyati T, Makita T. 1995. Remarkable increase of peroxisomes  in  the  renal  tubule cells  of  Japanese  monkeys  under fasting stress. Pathophysiol, 2:177- 182.
Yagi K. 1994. Free Radical in Diagnostic Medicine. Plenum Pr, New York. Jang  Yy, Song  Jh, Shin  Yk, Han  Es, Lee
Cs.  2000.  .Protective  Effect  Of Boldine On Oxidative Mitochondrial Damage In Streptozotocin-Induced Diabetic
Rats. Pharmacol  Res . 42(4):361- 71.