## AKTIVITAS ANTIJAMUR KOMBINASI EKSTRAK ETANOL
DAUN MANGGA BACANG ( MANGIFERA FOETIDA L.) DAN DAUN BIDARA ( ZIZIPHUS MAURITIANA L.) TERHADAP

## CANDIDA ALBICANS
Submitted : 11 Oktober 2021
Edited : 6 Desember 2021 Accepted : 13 Desember 2021
Dini Mardhiyani, Kony Putriani
Prodi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi dan Ilmu Kesehatan, Universitas Abdurrab Email : dini.mardhiyani@univrab.ac.id

## ABSTRACT
Along  with  increasing  life  expectancy,  the  community  tries  to  find  solutions  to  health problems. One of the health problems that occur in humans is caused by fungi. Candida albicans is one of the fungi that can be found in humans. Candida albicans are normal flora in the vagina, digestive tract, and oral cavity. Nevertheless, it can change into a pathogen and cause changes in the host. Based on compound contained in leaf of mango bacang and leaf of bidara, they have antifungal effect. This study aims to determine the antifungal activity of single ethanol extract of mango bacang leaves and bidara leaves with a combination of bidara leaves ethanol extract and ethanol  extract  of  mango  bacang  leaves  against  Candida  albicans.  The  method  of  this  study begins with collecting mango bacang leaves and bidara leaves then extracted maceration with ethanol  solvents.  The antifungal  activity  is  tested  with  the  disk  diffusion  method  using  potato dextrose media. Based on the results of the hypothesis test obtained a significance value of 0.010 <0.05, there was a difference in the diameter of the inhibition zone against the growth of Candida albicans due to a single giving and variations in the combination of ethanol mango bacang leaves and bidara leaves ethanol extract. Extract single antifungal activity after combined experienced a minimum increase of 1.2%. The conclusion of this study shows that the combination of ethanol extract of bacang mango leaves with bidara leaves ethanol extract has a larger inhibiting zone than a single extract and shows the synergy effect. The use of bacang mango leaves as anti-fungal is recommended in combination with bidara leaves.
Keywords : Antifungal, Leaf Of Mango Bacang (Mangifera Foetida), Leaf Of Bidara (Ziziphus Mauritiana)

## PENDAHULUAN
Perkembangan zaman beriringan
dengan kemajuan farmakologi menimbulkan efek  pada  pola  pikir  dan  keputusan masyarakat  terhadap  penggunaan  obat. Keputusan  itu  berkaitan  dalam  penggunaan obat tradisional yang mulai ditinggalkan dan beralih  ke  penggunaan  obat  sintetis dikarenakan  kemasan  obat  sintetis  lebih praktis  dan  modern.  Obat  tradisional memiliki  kelebihan  dibandingkan  dengan
obat sintetis yaitu Obat tradisional memiliki kelebihan memiliki komponen yang terdapat dalam suatu ramuannya memiliki efek yang sinergis  atau  saling  mendukung  satu  sama lainnya,  lebih  sesuai  untuk  mengontrol penyakit-penyakit degeneratif dan metabolik, pada  satu  tanaman  bisa  memiliki  efek farmakologi lebih dari satu dan efek samping lebih rendah dibandingkan obat sintetis (1) .
Seiring    dengan    meningkatnya    usia harapan  hidup, masyarakat berusaha mencari
solusi  dalam  mengatasi  masalah  kesehatan. Salah  satu  masalah  kesehatan  yang  terjadi pada manusia disebabkan oleh jamur. Jamur merupakan  jenis  tumbuhan  tingkat  rendah, yang kelangsungan kehidupannya tergantung mikroorganisme  lain.  Jamur  dapat  bersifat parasit  jika  merugikan  hospesnya (2) .  Salah satu jamur yang terdapat pada manusia yaitu Candida  albicans . Candida  albicans adalah flora  normal  pada  saluran  pencernaan  dan rongga  mulut    dan  vagina (3) .  Namun  jika jamur Candida  albicans berubah  menjadi patogen dan menyebabkan perubahan dalam diri  penjamu,  hal  ini    menimbulkan  infeksi oportunisti pada manusia (4) . Daun mangga bacang ( Mangifera foetida L . ) dan  daun  bidara  ( Ziziphus  Mauritiana L.) merupakan  tanaman  yang  memiliki  banyak khasiat  dan  sudah  digunakan  untuk  obat herbal di beberapa Negara (5) . Senyawa yang terkandung  di  daun  mangga  bacang diantaranya  yaitu  beberapa  senyawa  seperti fenol,  flavanoid,  saponin,  steroid,  dan tritertepenoid.  Beberapa  kandungan  pada daun  mangga  bacang  memiliki  aktivitas antijamur Candida  albicans (6) .  Hal  ini diperkuat dengan salah satu penelitian yang dilakukan oleh Imani (7) , bahwa ekstrak etanol daun mangga bacang ( Mangifera foetida L . ) konsentrasi  125  mg/mL  memiliki  aktivitas antijamur Candida  albicans dengan  zona inhibisi 9,15 mm. Begitu juga halnya dengan daun  bidara,  kandungan  senyawa  alkaloid, glikosida  saponin,  serta  flavonoid  yang terdapat  di  daun  bidara  memiliki  aktivitas antijamur  dan  antibakteri.  Berdasarkan penelitian  Sivansakari (8) mengenai  aktivitas antimikroba  Bidara  Laut  menunjukkan  efek antifungi  pada  ekstrak  etanol  dan  metanol daun  bidara  laut  konsentrasi  60  µl/ml  dan memiliki efek antibakteri pada ekstrak etanol daun bidara laut konsentrasi 20 µl.
Berdasarkan senyawa yang terkandung di daun mangga bacang dan daun bidara serta kemampuan  dalam  memberikan  efek antijamur, maka peneliti melakukan
penelitian terhadap kombinasi ekstrak  daun mangga  bacang  dan  daun  bidara  dalam menghambat jamur Candida albicans .

## METODE PENELITIAN
Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian penelitian true experimental dengan rancangan post test only control group design yang dilakukan di laboratorium Mikrobiologi, Universitas Abdurrab menggunakan metode difusi cakram. Populasi  pada  penelitian  ini  adalah  jamur Candida  albicans yang  tersedia  di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Farmasi dan  Ilmu  Kesehatan  Universitas  Abdurrab dengan pengambilan sampel yang dilakukan pengulangan untuk setiap perlakuan masing- masing  3  kali.  Analisis  Data  Data  hasil penelitian dianalisis menggunakan SPSS. Uji normalitas  dilakukan  menggunakan  uji Shapiro Wilk (<30 sampel). Didapatkan data berdistribusi  normal  (a>0,05).  Selanjutnya data akan dianalisis menggunakan One-way ANOVA,  jika  data  tidak  normal  (a<0,05) selanjutnya  dianalisis  menggunakan  uji Kruskal  Wallis.  Jika  hasil  analisis  tingkat signifikansi a<0,05 maka analisis selanjutnya menggunakan  uji  Post  Hoc  Test  dengan Mann Whitney.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah alat-alat gelas (Pyrex®), cawan  petri (OneMed®), Rotary  evaporator (Heidolph®), jangka sorong (Tricle Brand®),  oven  (Memmert®),  mikropipet (FisherBrand  ®),  mikropipet  (FisherBrand ®), autoclav (AII American model 25X-2 ®), inkubator  (Memmert®),  timbangan  analitik (Acis Model AD 6001®), Laminar Air Flow (Enviro®), Vortex (Maxi Mix II®).
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  Daun  mangga  bacang, daun  bidara,  potato  dextrose  agar  (PDA) (Merck®),  DMSO  (dimethyl  sulfoxide),
Nistatin®,  biakan  jamur Candida  albicans , alkohol 70% dan 96%, akuades.

## Prosedur Penelitian Pembuatan ekstrak
Daun mangga bacang dan daun bidara yang  diambil  dari  daerah  Kotalama, Kecamatan  Kunto  Darussalam,  Kabupaten Rokan  Hulu.dilakukan  ekstraksi  dengan metode  maserasi.  Sebanyak  500  g  daun mangga  bacang  direndam  dengan  pelarut etanol 96% dan daun bidara direndam dengan pelarut  etanol  70%  selama  3x24  jam (9)(10) . Kemudian disaring menggunakan kain flanel dan diperas dan ampasnya direndam dengan pelarut  lagi  dan  dilakukan  penyaringan kembali. Maserat yang diperoleh dipekatkan dengan rotary  evaporator .  Ekstrak  kental ditimbang  dan  dilarutkan  dengan  larutan DMSO  1%  dan  dibuat  konsentrasi  sebesar 30%, 50% dan 70%.

## Pengujian Bahan Uji
Pengujian  ekstrak  daun  mangga bacang  dilakukan  dengan  metode  difusi cakram  kertas.  Sebagai  kontrol  positif digunakan  Kertas    cakram  nistatin  100 unit/mg  untuk  membandingkan  potensi ekstrak  etanol  daun  mangga  bacang  dan ekstrak  etanol  daun  bidara  dengan  senyawa sintetik. Cakram steril diletakkan menggunakan  pinset    steril  sesuai    jumlah perlakuan    pada    medium    yang diinokulasikan    suspensi    jamur Candida albicans Selanjutnya masing-masing larutan ekstrak    etanol      daun  mangga  bacang   dan daun bidara berbagai konsentrasi 30%, 50% dan 70% dan kombinasi ekstrak daun mangga bacang  dan  daun  bidara  30%:30%,
30%:50%, 50%:30% dan 50%:50% sebanyak 25  μl  diteteskan  menggunakan  pipet  mikro pada  kertas  cakram  kemudian  dibiarkan  1 jam  sampai  larutan  menyerap  di  kertas cakram.  Selanjutnya  medium  pertumbuhan Candida  albicans ditutup    dan  diinkubasi selama 24 jam pada  suhu  37°C Kemudian dilakukan  pengamatan  dengan  mengukur diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  di sekitar  kertas  cakram  menggunakan  jangka sorong.

## Pengamatan dan pengolahan data
Setelah  data  diperoleh  kemudian dianalisis  secara  deskriptif  dan  statistik. Analisis  deskriptif  dilakukan  mencari rerata dan  simpangan  baku  dari  setiap  kelompok perlakuan.  Analisis  statistik  dilakukan dengan dengan menggunakan Kruskal-Wallis Test dan diuji lanjut dengan Mann- Whitney Test dengan derajat bermakna 95% (α=0,05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji aktivitas antijamur
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas antijamur dari
kombinasi  daun  mangga  bacang  dan  daun bidara  terhadap Candida  albicans .  Kontrol negatif  yang  digunakan  pada  penelitian  ini adalah  DMSO  sebagai  larutan  pengencer ekstrak etanol daun mangga bacang dan daun bidara, sedangkan kontrol positif menggunakan  nistatin.  Data  hasil  rata-rata diameter  zona  jernih  ekstrak  etanol  daun mangga  bacang  dan  daun  bidara  serta kombinasinya  terhadap  jamur Candida albicans dapat  dilihat  pada  tabel  1  dan gambar 1.
Tabel 1. Hasil Pengukuran Diameter Zona hambat Replikasi Diameter Zona Hambat (mm) ± SD, (d cakram = 6 mm) K (+) K (-) P1 P2 P3 P4 P5 P6 1 14,4 0,0 0,0 1,1 3,0 2,5 5,0 6,5 2 15,1 0,0 1,0 2,4 3,4 4,6 4,3 5,3 3 16,2 0,0 0,0 1,1 4,0 4,6 4,2 5,1 Sub total 45,7 0,0 1,0 4,6 10,4 11,7 13,5 16,9 Rata-rata 15,23 ± 0,907 0,00 ± 0 0,33 ± 0,577 1,53 ± 0,750 3,47 ± 0,503 3,90 ± 1,212 4,50 ± 0,435 5,63 ± 0,757 Keterangan : K (+) : Perlakuan dengan nistatin K (-)  : Perlakuan dengan DMSO
P1 : Ekstrak daun mangga bacang 30%
P2 : Ekstrak daun bidara 30%
P3 : Kombinasi ekstrak daun mangga bacang dan daun bidara (30% : 30%) P4 : Kombinasi ekstrak daun mangga bacang dan daun bidara (30% : 50%) P5 : Kombinasi ekstrak daun mangga bacang dan daun bidara (50% : 30%) P6 : Kombinasi ekstrak daun mangga bacang dan daun bidara (50% : 50%) A. Ekstrak Tunggal B. Ekstrak Kombinasi Gambar 1. Hasil perlakuan

## Analisis data
Hasil  analisis  data  dengan  Kruskal- Wallis  Test  menunjukkan  bahwa  terdapat perbedaan  yang  bermakna  antar  delapan kelompok  perlakuan.  Hasil  analisis  uji  ini adalah nilai p (sig.) = 0,010. Oleh karena nilai p  <  0,050  maka  dapat  disimpulkan  bahwa terdapat  “perbedaan  efek  antijamur  yang
bermakna  di  antara  delapan  kelompok perlakuan.  Untuk  menilai  perbandingan seberapa  besar  perbedaan  pada  masing- masing  kelompok  perlakuan  dilanjutkan dengan  menggunakan  uji  Mann  Whitney. menunjukkan  bahwa  perlakuan  tunggal dengan  kombinasi  (P3,P4,P5,P6)  berbeda nyata  begitu  halnya  perlakuan  tunggal
ekstrak etanol daun bidara dengan kombinasi berbeda nyata.
Pembahasan Berdasarkan hasil menunjukkan
kombinasi  dari  kedua  ekstrak  terhadap Candida  albicans memiliki  daya  hambat yang  lebih  besar  dibandingkan  tanpa kombinasi ekstrak minimal sebesar minimal 1,2%  hal  tersebut  dapat  dilihat  dari  hasil diameter  daya  hambat  pada  ekstrak  etanol tunggal  daun  mangga  bacang  konsentrasi 30%  yaitu  0,33  mm  dan  ekstrak  etanol tunggal  daun  bidara  konsentrasi  30%  yaitu 1,53  mm  dapat  dibandingkan  dengan kombinasi ekstrak daun mangga bacang  dan daun bidara dengan masing-masing konsentrasi 30% memiliki zona hambat yang lebih  besar  dibandingkan  ekstrak  tunggal yaitu  sebesar  3,47  mm.  Kombinasi  ekstrak etanol daun mangga bacang dan daun bidara dengan  masing-masing  konsentrasi  50% menghasilkan diameter zona hambat terbesar yaitu sebesar 5,67 mm. Menurut Mulyani et al . (11) Semakin  besar  ekstrak  maka  semakin besar  zona  hambat  yang  terbentuk  hal  ini karena konsentrasi ekstrak dapat mempengaruhi aktivitasnya sebagai antimikroba.  Peningkatan  bahan  aktif berbanding  lurus  dengan  konsentrasi  yang semakin besar.
Berdasarkan skrinning fitokimia yang dilakukan  Khoirunnisak et  al. (12) senyawa yang  terdapat  pada  bidara  yaitu  Alkaloid, Flavonoid,  Saponin,  Tanin,  steroid  dan Terpenoid  dan  senyawa  yang  terdapat  pada daun  mangga  bacang  yaitu  flavonoid, saponin dan tanin (13) .
Senyawa alkaloid menghambat
respirasi sel jamur dan menghambat sintesis membran  fosfolipid,  asam  nukleat  dan protein (11) .  Senyawa  flavonoid  memiliki aktivitas sebagai antijamur melalui perusakan fungsi  membran  sel  jamur  karena  sifat lipofilik  yang  dimiliki  oleh  flavonoid  dan flavonoid  mampu  membentuk  kompleks
dengan  protein  ekstraseluler  dan  protein terlarut  serta  membentuk  kompleks  dengan dinding sel (14) . Antijamur  yang  dilakukan  oleh senyawa saponin melalui penurunan
tegangan  permukaan  membran  sterol  dari dinding  sel  jamur  sehingga  permeabilitas dinding  sel  jamur  meningkat  yang menyebabkan  cairan  intraseluler  yang  lebih bekat  pada  sel  tertarik  keluar  sel  yang menyebabkan  zat-zat  metabolisme,  protein, enzim dan nutrisi dapat keluar sel, kemudian jamur akan mengalami kematian (15) . Sifat toksik pada senyawa triterpenoid yang terserap jamur patogen mengakibatkan penghambatan  kerja  enzim  didalam  sel, kerusakan pada organel-organel sel, dan pada akhirnya akan terjadi gangguan pertumbuhan dan perkembangan spora jamur (14) . Subhisha ( 16 ) ,    memaparkan  bahwa    steroid dapat    menghambat  perkecambahan  spora dan  perbanyakan  miselium  pada  jamur dikarenakan sifat  lipofilik  pada steroid.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  bahwa terdapat perbedaan yang signifikan terhadap diameter zona hambat pertumbuhan Candida albicans karena  pemberian  tunggal  dan variasi  kombinasi  ekstrak  etanol  daun mangga  bacang  dan  ekstrak  etanol  daun bidara.  Kombinasi  ekstrak  etanol  daun mangga  bacang  dengan  ekstrak  etanol  daun bidara  memiliki  zona  hambat  lebih  besar dibandingkan ekstrak tunggal dan menunjukkan efek sinergi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Katno,  Pramono  S.,  2010, Tingkat Manfaat dan Keamanan Tanaman Obat dan  Obat  Tradisional .  Balai  Penelitian Obat  Tawangmangu,  Fakultas  Farmasi Universitas Gajah Mada [press release]. Yogyakarta: Fakultas Farmasi UGM
2. Khatimah, K., Mone, I., & Fa’al Santri, N., 2018, Identifikasi Jamur Candida Sp Pada Kuku Jari Tangan Dan Kuku Kaki Petani Dusun Panaikang Desa Bontolohe  Kecamatan  Rilau  Ale Kabupaten  Bulukumba. Jurnal  Media
Laboran , 8 (1), 39-43.
3. Samarayanake,  L.P.,  2002,  Essential Microbiology      for      Dentistry, Second Edition, Edinburgh     Et  Al.:     Churchill Livingstone: 142-147.
4. Cutler,  J.  E.,  1991,  Putative  virulence factors  of  Candida  albicans. Annual review of microbiology , 45 (1), 187-218.
5. Preeti  &  Tripathi,  S.  2014.  Ziziphus jujube.
A Phytopharmacological.Review. International  Journal  of  Research  and Development  in  Pharmacy  and  Life
Sciences. Vol. 3 (3): 959-966
6. Rijayanti,  R.  P.,  2014,  Uji  aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun mangga bacang (Mangifera Foetida L.) terhadap Staphylococcus  aureus  secara  in vitro. Jurnal  Mahasiswa  PSPD  FK Universitas Tanjungpura , 1 (1).
7. Imani,  A.  Z.,  2014,  Uji  Aktivitas Antijamur Ekstrak Etanol Daun Mangga Bacang (Mangifera foetida L.) Terhadap Candida albicans Secara In Vitro. Jurnal Mahasiswa  PSPD  FK  Universitas Tanjungpura , 3 (1).
8. Sivasankari, M., & Sankaravadivoo, A., 2015, Studies on Antimicrobial Activity of  Ziziphus  mauritania. International Journal  of  Ayurveda  and  Pharma Research , 3 (7), 52–55.
9. Putriani,  K.,  Ramadhani,  S.,  Fitry,  M.
A.,  Sony,  S.,  &  Wulansari,  A.  (2021). Phytochemical Screening Mango Bacang Leaf Extract (Mangifera foetida L)  and  Salam  Leaf  Extract  (Syzygium polyanthum). JPK:  Jurnal  Proteksi Kesehatan , 10 (1), 35-43.
10. Mardhiyani,  D.,  &  Afriani,  M.  (2021). Antibacterial  Activity  Test  Of  Leaves Bidara  (Ziziphus  mauritiana  Lam) Ethanolic Extracts Against Staphylococcus  aureus. JPK:  Jurnal Proteksi Kesehatan , 10 (1), 44-48.
11. Mulyani, S., Adriani, M., & Wirjatmadi, B.,  2021,  Antibacterial  Activity  of Extract Ethanol Bidara Leaves (Ziziphus spina-Christi  L)  on  Enteropathogenic coli. Indian  Journal  of  Forensic Medicine & Toxicology , 15 (1).
12. Khoirunnisak,  K.,  Ningrum,  W.  A., Wirasti,  W.,  &  Rahmatullah,  S.,  2020, Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun bidara (ziziphus mauritiana lamm) dalam  formulasi  sediaan  sabun  cair sebagai  antiseptik  terhadap  bakteri stapylococcus aureus ATCC 25923. Medical  Sains:  Jurnal  Ilmiah Kefarmasian , 5 (1), 89-98.
13. Putriani,  K.,  Ramadhani,  S.,  Fitry,  M.
A.,  Sony,  S.,  &  Wulansari,  A.  (2021). Phytochemical Screening Mango Bacang Leaf Extract (Mangifera foetida L)  and  Salam  Leaf  Extract  (Syzygium polyanthum). JPK: JURNAL PROTEKSI KESEHATAN , 10 (1), 35-43.
14. Alfiah, R. R., Khotimah, S., & Turnip, M.,  2015,  Efektivitas  ekstrak  metanol daun  sembung rambat (Mikania micrantha Kunth) terhadap pertumbuhan jamur Candida albicans. Protobiont , 4 (1).
15. Dixon, R.A., Dey, P.M. &  Lamb,  C.J., 1983,  Phy  Toalexins:  Enzymologi  and Molecular Biology, Adv. Enzymol. Rela. Areas Mol Biol., 55, 1-136 16. Septiadi, T., Pringgenies, D., & Radjasa, O. K., 2013, Uji fitokimia dan aktivitas antijamur  ekstrak  teripang  keling (Holoturia  atra)  dari  pantai  Bandengan Jepara terhadap jamur Candida albicans. Journal of Marine Research , 2 (2), 76-84.
17. Ismaini,  L.  2011.  Aktivitas  Antifungi Ekstrak  (Centella  asiatica  (L.)  Urban terhadap    Fungi  Patogen  pada  Daun Anggrek  (Bulbophyllum  flavidiflorum Carr). Jurnal Penelitian Sains, Volume No 14 No 1.
18. Subhisha,   S.   dan   A.   Subramoniam. 2005.   Antifungal   Activities   of   a Steroid      From  Pallavicinia    lyellii,    a Liverwort.    Tropical    Botanic    Garden and  Research  Institute, India.