## Reviewer
Mitra Bastari Dr. Arif Setya Budi, M.Si.,Apt (Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta) Dr. Moch. Saiful Bachri, S.Si., M.Si.,Apt (Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta) Evi Maryanti, M.Si (Universitas Bengkulu, Bengkulu) M. Adam Ramadhan, M.Sc.,Apt ((Universitas Mulawarman, Kalimantan Timur) Dr. Awal Isgiyanto, M.Kes (Universitas Bengkulu, Bengkulu)

## Penangung Jawab
Agung Giri Samudra, S.Farm.,M.Sc.,Apt

## Ketua Dewan Redaksi
Densi Selpia Sopianti, M.Farm.,Apt.

## Sekretaris Penyunting
Marsidi Amin,S.Kom

## Anggota Pelaksana
Yuska Novi Yanti, M.Farm.,Apt Elmitra,M.Farm.,Apt Fathnur Sani K,M.Farm.,Apt Nurfijrin Ramadhani,M.Sc.,Apt Setya Enti Rikomah, M.Farm.,Apt Elly Mulyani,M.Farm.,Apt Sari Yanti, M.Farm.,Apt Aina Fatkhil Haque,M.Farm.,Apt Dewi Winni Fauziah, M.Farm.,Apt

## PUSAT PENELITIAN DAN PENGABDIAN MASYARAKAT
AKADEMI FARMASI AL-FATAH BENGKULU
Jl.Indra Giri Gang 3 Serangkai Padang Harapan Bengkulu Telp/Fax : 0736-27508 Email : info@akfar-alfatah.ac.id/ lppmakfar_alfatah13@yahoo.com
Website : http://jurnal.akfar-alfatah.ac.id/ http://.akfar-alfatah.ac.id/ http:// pppm.akfar-alfatah.ac.id

## DAFTAR ISI
Gambaran Faktor Yang Berpengaruh Terhadap Ketepatan  Kode Diagnosa  Dokumen  Rekam  Medik  Pasien  Skizofrenia  Di  RSKJ Soeprapto Bengkulu 1 Nova Oktavia, 1` Ici Nur Azmi Akademi Kesehatan Sapta Bakti Bengkulu
Dentifikasi  Senyawa  Metabolit  Sekunder  Dari  Daun  Capo (Blumea    balsamifera L.  DC ) Dengan  Perbandingan  Metode

## Ekstraksi
Densi SelpiaSopianti, Devi Novia, Arief Setiawan
Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
Ekstraksi  Dan  Karakterisasi  Ekstrak  Zat  Warna  Rumput  Laut Merah Gracillaria salicornia Dari Perairan Pulau Enggano Dyah Fitriani, Santi Nurul Kamilah, Nori Wirahmi 1 Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Bengkulu
Formulasi  dan  Evaluasi  Mikrokapsul  Salut  Enterik  Asetosal Menggunakan  Penyalut  Acryl-Eze ® 930  Dengan  Metode  Ekstrusi Dan Sferonisasi
Rahmat Santoso, Rahma Ziska, Asri Dwinita Putra
Sekolah Tinggi Farmasi Bandung
Identifikasi Senyawa Tanin Dari Ekstrak Etanol Kulit Buah Jeruk Kalamansi ( Citrus x microcarpa Bunge ) Yuska Noviyanty 1 , Hepiyansori, Yuni Purwanti Ningsih 1 Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu 2 Akademi Analis Kesehatan Harapan Bengkulu
Analisa  Kadar  Vitamin  C  Pada  Beberapa  Varietas  Buah  Tomat Yang Dikonsumsi Masyarakat Bengkulu

## Nita Anggreani
Akademi Analis Kesehatan Harapan Bangsa Bengkulu
Uji  daya  Hambat  Ekstrak  Buah  Nanas  ( Ananas  comosus .  L) terhadap bakteri escherichia Coli Gina Lestari, Reschi Dwi Fitri Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
Analisis  Kadar  Natrium  Benzoat  Dalam  Saus  Sambal  Di  Pasar Panorama Bengkulu Dengan metode spektrofotometri Ultraviolet Nurfijrin Ramadhani, Rina Septi Pratiwi
Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
1-11 12-18 19-26 27-43 44-52 53-57 57-66 67-76
Identifikasi  Dan  Fraksinasi  Ekstrak  Akar  Tebu  Hitam ( Saccharum  officinarum L.)  Dengan  Metode  Kromatografi  Lapis Tipis
Devi Novia, Yuska Noviyanti, Yansi Noves Anggraini
Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
Hubungan  Pengetahuan  Dan  Sikap  Petugas  Laboratorium Kesehatan Terhadap Penggunaan Alat Pelindung Diri Hepiyansori, Iqbal Tamimi Akademi Analis Kesehatan Harapan Bangsa
Uji  Efektifitas    Ekstrak  Daun  Ciplukan  ( Physalis  angulata L.) Terhadap Larva Nyamuk Aedes Aegypti L.

## Rindahayeni, Inayah Hayati
Akademi Analis Kesehatan Harapan Bangsa Bengkulu
Potensi    Ekstrak    Polisakarida  Ganggang  Merah (Gracilaria verucosa) Kajian  In Vivo Pada Mencit Hiperkolesterol Fathnur Sani K, Agung Giri Samudra, Ella Triwahyuni Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
Uji  Kadar  Antosianin  Ekstrak  Buah  Jamblang ( Syzygium  cumini (L.) Skeels) Pada Formulasi Yoghurt Sebagai Antioksidan Tri Yanuarto, Nurkhasanah, Laela Hayu Nurani
1) Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta,
2) Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
Formulasi  Lotion  Ekstrak  Wortel (Daucus  carota l ) Metode Maserasi Betna Dewi 1 , Nori Wirahmi 2
1 Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu 2 Universitas Bengkulu
Formulasi  Dan  Uji  Efektivitas  Sediaan  Gel  Antiseptik  Ekstrak Daun Cabe Rawit ( Capsicumfrutescens L) Dengan Metode Replika Suci Muslikah Fatmawati, Iwan Setiawan, Dwi Saryanti 1 Unit Mikrobiologi Program Studi D3 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional 2 Unit Farmasetika dan Tekn. Farmasi Program Studi D3 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional
3 Unit Kimia Farmasi Program Studi D3 Farmasi Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional
Uji  Sifat  Fisik  Formulasi  Krim  Tipe  A/M  Dari  Ekstrak  Daun Singkong ( Manihot utilissima ) Elmitra Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
77-85 86-93 94-104 105-113 114-127 128-139 140-148 149-157
Formulasi Sampo Ekstrak Daun Manggga ( Mangifera indica L. ) Dewi Winni Fauziah, Galuh Karnia Yamaesa Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu
Uji  Efektivitas  Ekstrak  Etanol  Daun  Sawo (Manilkara  Zapota  L) Pada Luka Sayat Pada Kelinci Jantan ( Oryctolagus cuniculus ) Agung Giri Samudra, Fathnur Sani K,  Dara Permata Sari Akademi Farmasi Al - Fatah Bengkulu
Uji  Efektivitas  Antiinflamasi  Ekstrak  Kulit  Buah  Pisang  Kepok (Musa  acuminate  x  balbisiana’saga’) Pada  Mencit  Putih  Jantan (Mus musculus) Setya Enti Rikomah, Deah Marlena
Akademi Farmasi Al - Fatah Bengkulu
Tingkat  Pengetahuan  Masyarakat  Terhadap  Antibiotik  Di Puskesmas Beringin Raya Kota Bengkulu
Tri Damayanti, Sari Yanti, Hindi Amrullah Akademi Farmasi Al - Fatah Bengkulu 158-174 175-182 183-190 191-196

## IDENTIFIKASI DAN FRAKSINASI EKSTRAK AKAR TEBU HITAM
( Saccharum officinarum L.) DENGAN METODE

## KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS
Devi Novia, Yuska Noviyanti, Yansi Noves Anggraini
Akademi Farmasi Al-Fatah Bengkulu E-mail : devinoviaakfar@gmail.com

## ABSTRAK
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara  penghasil  tanaman  obat  yang potensial, dimana hasil alam yang paling banyak digunakan sebagai bahan baku obat adalah  tanaman.  Salah  satu  bahan  alam  yang  dikenal  masyarakat  yaitu  akar  tebu hitam (Saccharum  officinarum L. ). Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  akar    tebu  hitam (Saccharum officinarum  L.) . Metode  yang digunakan  yaitu maserasi  dengan pelarut etanol  96%.  Kemudian  dilakukan  fraksinasi  ekstrak  akar  tebu  hitam (Saccharum officinarum L .) dan  skrining  fitokimia  serta  uji  penegasan  dengan  menggunakan metode  kromatografi  lapis  tipis  (KLT).  Hasil  skrining  fitokimia  yang  didapatkan pada  fraksi  ekstrak  akar  tebu  hitam (Saccharum  officinarum L .) yaitu  mengandung senyawa  saponin.  Berdasarkan  hasil  uji  penegasan  menggunakan  metode kromatografi lapis tipis (KLT) didapatkan hasil positif senyawa saponin
Kata Kunci : Akar Tebu Hitam, Fraksinasi, Skrining Fitokimia, KLT

## PENDAHULUAN
Masyarakat  di  dunia  sering
memanfaatkan berbagai macam tanaman untuk kelangsungan hidupnya.  Salah  satu  jenis  tanaman obat  yang  belum  begitu  dikenal dikalangan  masyarakat  adalah  akar tebu  hitam (Saccharum  officinarum L. ).
Pengobatan tradisional akar tebu
hitam (Saccharum  officinarum L. ) di daerah  Kedurang  Bengkulu  selatan telah  digunakan  untuk  pengobatan penyakit  seperti  radang  tenggorokan,
sakit  pada  saat  buang  air  kecil  dan dismenorea.
Sebagai  langkah  awal,  potensi akar tebu hitam (Saccharum officinarum L. ) sebagai  obat  analgetik dan  antiinflamasi    tersebut  dapat ditelusuri  melalui  skrining  fitokimia. Adapun  komponen  fitokimia  yang akan diuji meliputi kandungan alkaloid,steroid,  flavonoid,  tanin  dan saponin.
Fraksinasi  terhadap  ekstrak etanol  akar  tebu  hitam (Saccharum officinarum L. ) dilakukan untuk
mendapatkan  senyawa  murni  dari ekstrak yang diperoleh. Secara berurutan,  ekstrak  dilarutkan  dengan pelarut  n-heksana,  etil  asetat,  dan aquadest.

## METODELOGI PENELITIAN Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah timbangan analitik,  pisau,  Botol  Kaca  Berwarna Gelap, Blender, Mesh 40, Lampu UV,
Kertas Saring, Seperangkat Alat Gelas,  Penguap  Putar  Vakum  ( rotary vacuum evaporator ), Seperangkat Alat Kromatografi Lapis Tipis.
Bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  akar  tebu  hitam
(Saccharum officinarum L. ) yang diambil  dari  lingkungan  rumah  warga
di Jl.Tanjung Besar Kedurang Kabupaten  Bengkulu  Selatan,    dalam keadaan  segar.    Etanol  96%,  Asam Klorida  pekat, n- heksana,  klorofom,
Natrium  Hidroksida,  saponin  murni, katekin,  artemisin,  quersetin,  piperin, alumunium  (III)  klorida,  n-butanol, asam  asetat,  anisaldehid  asam  sufat, metanol,  Serbuk  Magnesium,  pereaksi mayer, wagner, dragendorff , amoniak,
FeCl 3 ,  asam  asetat  anhidrat,  HCl pekat,  H 2 SO 4 2  N,  CHCl 3 ,  Silika  Gel
60,  Plat  KLT  Silika  Gel  GF254,  Etil Asetat, Aquades, H 2 SO 4 p.

## Ekstraksi Akar Tebu Hitam
Ekstraksi  dilakukan  dengan cara  maserasi  menggunakan  pelarut etanol  96%.  Sebanyak  500  mg simplisia keringakar tebu hitam (Saccharum  officinarum L. ) direndam dalam  botol  coklat  gelap  dengan etanol 96% sampai terendam selama 3 x  24  jam  dan  disaring  dengan menggunakan  kertas  saring  kemudian dilakukan  remaserasi  sampai  filtrat yang didapatkan berwarna bening, lalu filtrat tersebut digabungkan dan diuapkan dengan rotary evaporator .

## Fraksinasi  Ekstrak  Akar  Tebu Hitam
Ekstrak  kental  akar  tebu  hitam (Saccharum  officinarum L.)  sebanyak 10  gram  dilarutkan  dengan  aquadest sebanyak  100  ml  dan  dilarutkan dengan  pelarut  nonpolar  ( n- heksan) 100  ml  kemudian  masukan  kedalam corong  pisah  lalu  dikocok  selama  30 menit  hingga  terbentuk  dua  lapisan. Lapisan bawah (lapisan etanol-air) dan lapisan atas (lapisan n- heksan).
Lapisan  etanol-air  sisa  fraksinasi  n- heksan selanjutnya ditambahkan
pelarut  semi  polar  (etil  asetat)  100  ml kemudian  masukan  kedalam  corong pisah  lalu  dikocok  dan  diamkan hingga  terbentuk  dua  lapisan.  Lapisan bawah  (etanol-air)  dan  lapisan  atas (lapisan etil asetat). Selanjutnya ketiga fraksi  tersebut  dievaporasi  sehingga diperoleh  tiga  fraksi  yaitu  fraksi  n- heksan (F1), fraksi etil asetat (F2), dan fraksi etanol air (F3).
Pembuatan Reagen a. Larutan Pereaksi Mayer Sebanyak  5  gram  KI  (kalium iodida)  dalam  10  ml  aquadest kemudian ditambahkan larutan 1,36 gram  HgCl 2 (merkuri  (II)  klorida dalam  60  ml  aquadest.  Larutan dikocok  dan  ditambahkan  aquadest hingga 100 ml.
b. Larutan Pereaksi Wagner Ambil  sebanyak  6  gram  KI  dan  2 gram I2, kemudian larutkan KI dan I2  dalam  aquadest  sebanyak  100 ml.
c. Larutan Pereaksi Dregendrof
Bismut  (III)  nitral  8  gram dilarutkan  dalam  asam  nitrat  20  ml. Pada  wadah  lain  ditimbang  sebanyak 27,2  gram  KI  dilarutkan  dalam  50  ml aquadest, kemudian didiamkan sampai memisah  sempurna.  Larutan  yang
jernih diambil dan di encerkan dengan aquadest sampai 100 ml.
Skrining  Fitokimia  Fraksi  Akar Tebu Hitam
a. Alkaloid
Sampel  dilarutkan  dengan  5 mL  HCl  2N.  Larutan  yang  didapat kemudian  dibagi  3  tabung  reaksi. Sampel  ditambahkan  dengan  pereaksi Mayer,  Wagner  dan  Dragendroff sebanyak  3  tetes.  Hasil  positif  adanya alkaloid  bila  terbentuk  endapan  putih dengan  pereaksi  Mayer,  endapan coklat  dengan  pereaksi  Wagner  dan Jingga  dengan  pereaksi  Deragendorff. (Simaremare 2014).
b. Flavonoid
Uji flavonoid dilakukan dengan  cara  menambahkan  asam klorida  pekat  dan  logam  Mg  pada sampel.  Tes  positif  bila  terjadi  warna merah-jingga (Afriani, dkk., 2016).
c. Saponin
Uji  saponin  dilakukan  dengan mengocok  lapisan  air  dalam  tabung reaksi  bila  terbentuk  busa  yang  tahan selama lebih kurang 15 menit berarti positif  untuk  uji  saponin  (Afriani, dkk., 2016).
d. Steroid dan Terpenoid
Uji  steroid  dan  terpenoid dengan cara sampel ditambahkan asam
asetat  anhidrat  dan  asam  sulfat  pekat dimana  terbentuk  warna  biru-hijau untuk  positif  steroid  dan  berwarna merah  bila  psitif  Terpenoid(Afriani, dkk., 2016).
e. Tanin
Uji  tanin/polifenol  dilakukan dengan  menambahkan  larutan  FeCl 3 ke  dalam  sampel.  Hasil  positif tanin/polifenol  ditunjukkan  dengan terbentuknya  warna  hitam  kebiruan pada sampel uji (Afriani, dkk., 2016).
Analisis  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT)
a. Identifikasi Senyawa Golongan
Alkaloid (Harbone, 1996) Fase Gerak : Etil Asetat : Metanol : Air ( 6:4:2)
b. Identifikasi Senyawa Golongan
Flavonoid (Nirwana dkk., 2015) Fase  Gerak  :  n-Butanol  :  Asam asetat : Air ( 4:1:5)
c. Identifikasi Senyawa Terpenoid/steroid (Arundina, dkk., 2015)
Fase gerak  :  Toluen  :  Etil  asetat  : kloroform ( 5:1:4)
d. Identifikasi Senyawa Golongan Saponin (Pratama, dkk., 2012) Fase  Gerak  :  Klorofom  :  Metanol  :
Air ( 13:7:2)
e. Identifikasi senyawa tanin
Fase gerak  : n-Butanol: asam asetat: air (4:1:5)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Hasil evaluasi fraksi ekstrak akar tebu hitam
Telah  dilakukan  pemeriksaan spesifik  terhadap  fraksi  ekstrak  akar tebu  hitam (Saccharum  offinarum  L.) yang meliputi pemeriksaan organoleptis (warna, bau, konsistensi). Hasil dapat dilihat pada tabel I.
Tabel I. Hasil Uji Organolepris Fraksi Akar Tebu Hitam
Fraksi Organoleptis Warna Bau Konsistensi Fraksi n-heksan Bening sedikit pink Khas Cair Fraksi etil asetat Coklat Tua Khas Cair Fraksi Aquadest Coklat Tua Khas Cair 2. Hasil fraksinasi ekstrak akar tebu
hitam
Fraksinasi ditujukan untuk
mendapatkan    suatu  senyawa  yang
lebih  murni  dari  ekstrak  dengan menghilangkan senyawa -senyawa lain (Harbone,  1989).  Hasil  dapat  dilihat pada tabel II.

## Tabel 2. Hasil % Rendemen Fraksi Akar Tebu Hitam
Fraksi Berat Ekstrak Kental Jumlah Pelarut Berat Fraksi Kental % Rendemen Fraksi n-heksan 10 gr 100 ml 0,90gr 9,04% Fraksi etil asetat 100 ml 1,07gr 10,7% Fraksi Aquadest 100 ml 3,17gr 31,7 % 3. Hasil uji skrining fitokimia
Uji pendahuluan dilakukan untuk  mengetahui  kandungan  kimia
dari  fraksi  ekstrak  akar  tebu  hitam
(Saccharum offinarum L.) Hasil pemeriksaan dapat dilihat pada ( Tabel
3 ).
Tabel 3. Hasil Pemeriksaan Kandungan Kimia Fraksi Akar Tebu Hitam ( Saccharum officinarum L. )
N o Senyawa Pereaksi Warna Hasil Ket Positif/ Negatif F 1 F 2 F 3 F1 F2 F3 1 Alkaloid
HCL +
Mayer HCL + Wagner HCL + Dragendroff Endapan putih Endapan Coklat Jingga Putih Terbentuk 2 lapisan warna merah dan bening Coklat kekuningan Coklat Kemerahan Terbentuk 2 lapisan warna merah dan bening Coklat Kekuningan Coklat Kemerahan (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) (-) 2 Flavonoid Mg + HCL (p) Merah Jingga Endapan putih Coklat endapan putih Coklat endapan putih (-) (-) (-) 3 Saponin H2O Terbentuk Busa Tidak berbusa Terbentuk busa Terbentuk busa (-) (+) (+) 4 Tanin FeCl Hitam Kebiruan Jingga Hitam Hitam (-) (-) (-) 5 Steroid dan Terpenoid (CH 3 CO)2 O + H 2 SO 4 (P) Biru hijau dan merah Bening sedikit jingga Hitam kecoklatan Hitam kecoklatan (-) (-) (-)
Fraksinasi  pada  ekstrak  akar tebu  hitam yaitu  menggunakan metode  partisi  cair-cair  dengan pelarut  (n-heksan,  etil  asetat,  dan aquadest).Tahapan  fraksinasi  diawali dengan menimbang ekstrak sebanyak
10  gram  lalu  ditambahkan  dengan 100  ml  aquadest.  Fraksi  aquadest selanjutnya dilarutkan dengan pelarut semipolar  (etil  asetat)  sebanyak  100 ml,  sehingga  diperoleh  fraksi  etil asetat dan air. Fraksi n-heksan, fraksi
etil  asetat,  dan  fraksi  aqudest diuapkan  dengan waterbath sampai mengentaldan  dimasukan  kedalam botol vial.
Dalam pemeriksaan kandungan kimia  (skrining  fitokimia)  yang dilakukan  beberapa  kali  percobaan dan  mendapatkan  hasil  yang  positif hanya  saponin  pada  fraksi  etil  asetat dan  fraksi  aquadest,  sedangkan  pada fraksi  n-heksan  tidak  mengandung senyawa  metabolit  sekuder  apapun. Pada  pengujian  alkaloid  dilakukan penambahan  HCl  +  pereaksi mayer, wagner dan dragendroff. Pada pengujian  alkaloid  diperoleh  hasil negatif  untuk  ke  tiga  fraksi  karena tidak  terbentuk  endapan  putih  pada penambahan pereaksi mayer, endapan  coklat  pada  penambahan pereaksi  wagner  dan  jingga  pada penambahan  pereaksi  dragendroff dari  ketiga  fraksi  ini,  hal  ini dikarenakan  ke  tiga  fraksi  tidak memiliki atau sedikit memiliki
alkaloid (Simaremare, 2014).
Pengujian  steroid  didasarkan
pada  kemampuan  senyawa  untuk membentuk  warna  H 2 SO 4 pekat dalam  pelarut  asam  asetat  anhidridat
(Sangi  dkk.,  2013)  dimana  terbentuk warna biru-hijau untuk positif steroid.  Hasil  yang  diperoleh  pada pengujian  fraksi  n-heksan,  etil  asetat dan  aquadest  ini  meunjukan  hasil negatif  karna  tidak  terbentuk  warna biru  sampai  hijau  (Afrianidkk., 2016).
Pereaksi  besi  (III)  klorida digunakan secara luas untuk mengidentifikasi senyawa fenol/ polifenol/ tanin. Pengujian polifenol/ tanin  dilakukan  dengan  melakukan penambahan
FeCl 3 dengan terbentuknya  warna  hitam  kebiruan pada  sampel  uji.  Perubahan  warna tidak  terjadi  dengan  penambahan FeCl 3 karena  tidak  adanya  gugus hidroksil  yang  ada  pada  senyawa tannin (Sangi dkk., 2013; Artini dkk., 2013). Penambahan serbuk
magnesium  dan  asam  klorida  pada pengujian flavonoid
akan menyebabkan  tereduksinya  senyawa flavonoid yang ada sehingga menimbulkan  reaksi  warna  merah yang merupakan ciri adanya flavonoid (Jones dan Kinghorn, 2006 dalam  Simaremare,  2014).  Pada pengujian  flavonoid  mendapatkan
hasil negatif karena serbuk
magnesium  tidak  memberikan  reaksi reduksi  senyawa  flavonoid  sehingga larutan uji tidak memberikan perubahan warna (Simaremare,
2014). Pada uji saponin
menggunakan fraksi ditambah
dengan  air  lalu  dikocok  selama kurang lebih 15 detik, dan didapatkan  busa yang  bertahan
selama  kurang  lebih  15  menit  maka dapat  dikatakan  sampel  tersebut positif mengandung saponin. Timbulnya  busa  atau  buih  pada sampel  saat  uji  saponin  menunjukan adanya  glikosida  yang  mempunyai kemampuan  untuk  membentuk  buih dalam  air  yang  terhidrolisis  menjadi glukosa dan senyawa lainnya (Rusdi, 1990).
Gambar 1. Reaksi Saponin (Sopianti, 2018)
Uji Penegasan (Kromatografi Lapis Tipis ) Hasil  dari  uji  penegasan fraksi  ekstrak  akar  tebu  hitam ( Saccharum officinarum L.)
menggunakan  metode  kromatografi lapis  tipis  (KLT)  dapat  dilihat  pada ( tabel IV ).
Tabel 4. Hasil Uji Penegasan Fraksi Akar Tebu Hitam ( Saccharum officinarum L. ) Senyawa Kimia Fase Gerak Baku Pembanding (BP) Jarak Yang Ditempuh Pelarut Jarak Yang Ditempuh Noda RF Sampel RF BP Hasil F(2) F(3) F(2) F(3) Saponin Kloroform : Metanol : Air Saponin Murni 10 cm 6,2 cm 6,1 cm 0,62 0,61 0,69 (+)
Prosedur  uji  dengan  metode kromatografi  lapis  tipis  dilakukan
untuk  lebih  memastikan  hasil  yang didapat  dari  uji  pendahuluan.  Pada  uji
pendahuluan  fraksi  ekstrak  akar  tebu hitam (Saccharum  officinarum L .) positif mengandung saponin,
kemudian fraksi di lanjutkan pemisahan dengan menggunakan metode  kromatografi  lapis  tipis  dan dilihat  dibawah  disinar  UV  254.Hasil positif  saponin  dipisahkan  dengan metode kromatografi lapis tipis (KLT)
menggunakan fase geraknya Kloroform : Metanol : Air, dan dilihat dibawah sinar UV 254. Hasil KLT dari fraksi etil asetat diperoleh bercak noda berwarna  hijau  dengan  Rf  0,61  dan fraksi aquadest degan Rf 0,62 sedangkan Rf baku pembanding
saponin  murni  yang  didapat  saat penelitian  yaitu  0,69.  Jadi  hasil  dari saponin  menunjukan  positif  karena terdapat  busa  yang  bertahan  cukup lama  dan  nilai  Rf  sampel  dengan  Rf baku  pembanding  mempunyai  nilai yang  hampir sama  sehingga  fraksi  atil asetat dan fraksi  aquadest  dari ekstrak akar  tebu  hitam  bisa  dikatakan mengandung saponin.

## KESIMPULAN
Fraksi  ekstrak  akar  tebu  hitam (Saccharum officinarum L .)
mengandung  senyawa  kimia  yang sama  yaitu  pada  Skirining  Fitokimia positif  mengandung  senyawa  saponin dan  pada  uji  penegasan  (KLT)  juga positif mengandung saponin.

## DAFTAR PUSTAKA
Afriani,  N.,  Nora,  I.,  dan  Andi,  H.A. 2016.  Skrining  Fitokimia  Dan  Uji Toksisitas  Ekstrak  Akar  Mentawa ( Artocarpus Anisophyllus )
Terhadap  Larva Artemia  Salina. JKK. Vol. 5(1). 2016; 58-64
Artini,  P.E.U.D.,  Astuti,  K.W.,  dan Warditiani, N.K., 2013. Uji fitokimia ekstrak etil asetat rimpang bangle ( Zingiber purpureum Roxb.), Jurnal Farmasi Udayana .
Arundina, I., Theresia, I.B.S., Muhammad, L., dan Retno, I. 2015. Identifikasi  Kromatografi  Lapis Tipis Sudamala ( Artemisia vulgaris L.). Maj  Ked  Gi  Ind .  Desember 2015; 1(2): 167 – 17
Harborne  J.  1996. Metode  Fitokimia: Penuntun
Cara Modern Menganalisis  Tumbuhan .  Cetakan kedua.  Penerjemah:  Padmawinata, K.  dan  I.  Soediro.  Bandung:
Penerbit ITB.
Harborne, J.B. 1989. Methods in Plant
Biochemistry  I.  Plant  Phenolics. London: Academic Press.
Nirwana, A.P., 2015. Aktivitas antiproliferasi  ekstrak  etanol  daun benalu kersen (dendrophtoe pentandra  l.  Miq.) Terhadap kultur
sel  kanker  nasofaring  (raji  cell line). universitas  sebelas  maret  : Surakarta
Pratama,  M.A.,  Hosea  J.E.,  dan  Jovie M.D.  2012  Isolasi  Dan  Identifikasi Senyawa  Saponin  Dari  Ekstrak
Metanol  Batang  Pisang  Ambon (Musa  paradisiaca  var.  sapientum L.). Pharmacon .  Vol.  1  (2).  Hal.
86-92. E-Journal.
Rusdi.  1990. Tetumbuhan  Sebagai
Sumber  Bahan  Obat .  Padang  : Pusat Penelitian Universitas Andalas. Sangi,  M.S.,  Momuat,  L.I.  dan Kumaunang, M., 2013. Uji toksisitas  dan  skrining  fitokimia tepung gabah pelepah aren (Arange pinnata) . Manado:
Universitas Sam Ratulangi.
Simaremare,  E.S.  2014. Skrining Fitokimia  Ekstrak  Etanol  Daun Gatal .  Universitas  Cendrawasih,
Jayapura.
Sopianti,  D.S.,  Dede,  W.S.  2018. Skrining  Fitokimia  Dan  Profil  Klt
Metabolit  Sekunder  Dari  Daun
Ruku-Ruku (Ocimum  Tenulflorum
L.) Dan  Daun  Kemangi (Ocimum Sanctum  L) . SCIENTIA  Jurnal Farmasi  dan  Kesehatan. Vol.  8  No.
1, Februari 2018.