## AKTIVITAS HEPATOPROTEKTOR KOMBINASI RIMPANG TEMULAWAK
( Curcuma xanthorriza Roxb.) DENGAN BUAH LADA HITAM ( Piper nigri L.) PADA

## TIKUS WISTAR
Mochamad Herdi Nurzaman * , Adila Awaludin, Salsabila Adlina
Program Studi Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Perjuangan Tasikmalaya *Email: mochamadherdinurzaman@unper.ac.id
Received: 01/03/2023 , Accepted: 12/03/2024, Published: 13/03/2024

## ABSTRAK
Temulawak  ( Curcuma  xanthorriza Roxb.)  merupakan  tanaman  tradisional  dengan  kandungan utamanya  adalah  kurkuminoid  yang berkhasiat  hepatoprotektor.  Penyerapan  kurkuminoid  yang buruk  dapat  ditingkatkan  dengan  piperin.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  efek hepatoprotektor  kombinasi  rimpang  temulawak  dengan  buah  lada  hitam  dalam  bentuk  kapsul yang  terdiri  dari  temulawak/lada  hitam  (1520mg/40mg).  Efek  hepatoprotektor  diuji  pada  tikus Wistar  jantan  yang  diinduksi  kerusakan  hati  dengan  obat  TB  (isoniazid  dan  rifampisin).  Dua dosis kombinasi yang diuji yaitu ekivalen dengan 2 Kapsul temulawak/lada hitam (TLH1) dan 3 kapsul  temulawak/lada  hitam  (TLH2)  masing-masing  kombinasi  simplisia  uji  tersebut.  Hasil menunjukkan temulawak dan kombinasinya (TLH1 dan TLH2) mulai mencegah kerusakan hati pada  pemberian  hari  ke-14  yang  terlihat  dari  aktivitas  ALT.  Dilihat  dari  kadar  albumin, temulawak maupun kombinasinya dapat memperbaiki kerusakan hati mulai hari ke-7 pemberian. Secara umum kombinasi lebih berpotensi mencegah dan mengobati kerusakan hati dibandingkan tanpa kombinasi.
Kata kunci : Hepatoprotektor, Rifampisin, INH, Curcuma xanthorriza Roxb., Piper nigri L .

## ABSTRACT
Temulawak  (Curcuma  xanthorriza  Roxb.)  are  traditional  plants  with  the  main  content  is curcuminoids  which  known  have  hepatoprotective  property.  Poor  absorption  of  curcuminoids can be inhance by using together with piperine. This study aimed to determine hepatoprotective activity of the combination of temulawak with black pepper fruit in capsule form, consisting of temulawak/black  pepper  (1520mg/40mg).  Hepatoprotective  activity  was  determined  in  male Wistar  rats  with  TB  drugs  (isoniazid  and  rifampicin)  as  liver  damage  inducer.  Two  doses  of combination were used which is equivalent to 2 (KLH1) and 3 capsules (KLH2) of each of the combination. The  results  showed  that  the  samulawak  and  its  combination  (TLH1  and  TLH2) started preventing liver damage on the 14th day of administration that was visible from the ALT activity. In general, combinations are more likely to prevent and treat liver damage than without combinations. In general, combinations are more likely to prevent and treat liver damage than without combinations.
Keywords : Antibacterial activity, Ramania leaves (Bouea macrophylla Griffith), Staphylococcus aureus.
Nurzaman et al./Pharmacoscript, Volume 7, No, 1, Februari 2024, 52-59
Safitri.,et al./Pharmacoscript, Volume 1, No. 2, Februari 2019, 1-12
Nurzaman et al.;Aktivitas Hepatoprotektor…..Pharmacoscript Volume 7 No. 1, Februari 2024

## PENDAHULUAN
Kurkuminoid  merupakan  senyawa folifenol  utama  yang yang  terdiri  dari kurkumin, demetoksikurkumin dan bisdemetoksikurkumin.  Kurkumin banyak dimanfaatkan  dalam  pengobatan  karena mempunyai aktivitas antioksidan, antiinflamasi, antikanker, antimikroba (Llano  dkk.,  2019),  antituberkulosis  (R. Shivarkar dkk., 2021), antifungi, neuroprotektif dan hepatoprotektif (Sirisidthi dkk., 2016). Kurkumin
terkandung  dalam  temulawak  ( Curcuma xanthorriza Roxb.) yang mempunyai aktivitas  sebagai  hepatoprotektor  (Devaraj dkk., 2010). Meskipun k urkumin merupakan senyawa  yang  mempunyai  efek  antioksidan dan antiinflamasi yang kuat tetapi bioavabilitasnya  rendah  (Khan  dkk.,  2019), sehinggga  dibutuhkan  senyawa  lain  yang dapat meningkatkan bioavabilitasnya.
Berdasarkan penelitian (Bishnoi dkk., 2011) senyawa piperin dapat meningkatkan bioavabilitas dari kurkumin dalam penggunaan  secara  bersamaan,  senyawa piperin sendiri banyak diteliti dan diperoleh dari lada hitam ( Piper nigrum ).
Hepatoprotektor  merupakan  senyawa yang  dapat  mencegah  dan  memperbaiki  sel hati yang rusak akibat metabolisme senyawa toksik (Wiendarlina dkk., 2019). Penggunaan  obat-obatan  secara  oral  dalam
jangka waktu yang lama dapat menginduksi kerusakan  hati  seperti  penggunaan  obat antituberkulosis (OAT).
Penelitian  ini  menggunakan  model induksi  hepatotoksisitas  terhadap  tikus Wistar  jantan.  Obat  antituberkulosis  (OAT) lini  pertama  yang  digunakan  sebagai induktor  adalah  kombinasi  isoniazid  (INH) dan  rifampisin  (  Pal  dkk.,  2006  dan  Yue dkk., 2009 ).
Penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas  hepatoprotektor  dari  kombinasi rimpang temulawak dengan buah lada hitam yang diinduksi obat TB kombinasi INH dan Rimfampisin  pada  kerusakan  hati  tikus Wistar jantan.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  yaitu  Oven,  corong,  kaca  objek, mikroskop,  mikrotom,  spektrofotometer, Microlab,  tabung  mikrosentrifuga,  alat sentrifuga, mikropipet, syringe , jarum suntik,  gunting  bedah,  sonde  oral  tikus, gelas kimia, neraca analitik. Pada penelitian kali  ini  bahan  yang  digunakan  yaitu Temulawak,  lada  hitam,  etanol  96%, aquadest,  INH,  rifampisin,  kit  pereaksi alanin aminotransferase  (ALT),  kit  pereaksi aspartat aminotransferase (AST) kit perekasi albumin, tip, NaCl fisiologis, dapar
formalin,  kertas  timbang,  kertas  saring, asam  klorida  pekat,  kloroform,  pereaksi Dragondroff  (bismuth  subnitrat  dan  kalium iodide  dalam  asam  klorida  pekat  dan  air) pereaksi  Mayer  (raksa  (II)  klorida  dan kalium iodide dalam asam klorida pekat dan air),  serbuka  magnesium,  amil  alcohol, larutan  besi  (III)  klorida,  gelatin,  natrium asetat,  pereaksi  Stiasny  (formaldehid  30% dan asam klorida pekat dengan perbandingan  2:1),  natrium  hidroksida,  n- heksan, pereaksi Liebermann-Burchard (anhidrida asma asetat dan asam sulfat pekat dengan  perbandingan  2:1),  asam  asetat glacial,  hematoksilin,  eosin  Y,  etanol  70%, etanol 95% etanol absolute, xylen, NaHCO 3 ,
MgSO 4 ,  air  mineral,  pakan  tikus  standar, toluene.
Jalannya Penelitian

## 1. Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah tikus jantan galur Wistar ( Rattus novergicus )  dengan  berat  badan  200-350 g,  berumur  8-12  minggu,  dan  memiliki aktivitas  normal  yang  diperoleh  dari Litbangkes, Dept. Gizi, UI Jakarta.
2. Pengumpulan Bahan Uji dan Pembuatan Simplisia Temulawak  ( Curcuma  xanthorriza ) dan  lada  hitam  ( Piper  nigri )  diperoleh  dari Pasar  Baru,  Kota  Bandung,  Provinsi  Jawa Barat.  Pembuatan  serbuk  simplisia  bahan
segar  dicuci  hingga  bersih  kemudian dilakukan proses pengeringan selama 3 hari hingga kering kemudian dilakukan penggilingan  rimpang  kunyit,  temulawak dan lada hitam dengan menggunakan mesin penggiling  simplisia  hingga  menjadi  serbuk simplisia.  Kemudian  dibuat  kombinasi kunyit/lada hitam (750mg/40mg) dan temulawak/lada hitam (1520mg/40mg) sesuai  sediaan  kapsul  yang  digunakan dimasyarakat.

## 3. Skrining Fitokimia
Skrining  fitokimia  yang  dilakukan adalah penapisan alkaloid, flavonoid, saponin, tanin dan steroid/ triterpenoid.

## 4. Pengelompokan Hewan Uji
Kombinasi  temulawak  dengan  buah lada  hitam  dalam  bentuk  kapsul  yang masing-masing  terdiri  dari  temulawak/lada hitam  (1520mg/40mg)  pada  dosis  manusia. Hewan  uji  dikelompokan  ke  dalam  empat kelompok,  yaitu  kelompok  positif  (KP), kelompok  pembanding  silimarin  dosis  90 mg/kg bb, kombinasi temulawak/lada hitam dosis  ekivalen  2  dan  3  kapsul  (TLH1  dan TLH2).  Semua  kelompok  dinduksi  dengan induktor  yang  sesuai  dengan  percobaan. Perlakuan terhadap sampel dan pembanding diberikan sampel yang sesuai dan pembanding yang sesuai.

## 5. Pengujian Aktivitas Hepatprotektor
Pengujian  aktivitas  hepatoprotektor temulawak-lada  dilakukan  dengan  uji  in vivo yaitu uji pada tikus jantan Wistar yang diinduksi  INH  dosis  27  mg/kg  bb  serta rifampisin  dosis  54  mg/kg  bb  Induktor diberikan ke semua kelompok, dan kelompok  lain  diberikan  pembanding  serta simplisia  yang  sesuai  dengan  kelompoknya masing-masing. Pemberian induktor,
pembanding,  simplisia  dilakukan  satu  kali sehari  selama  14  hari.  Pada  hari  ke-0,  7 dan14  dilakukan  penentuan  ALT,  AST  dan albumin.

## 6. Penentuan  Parameter  Darah  (ALT,

## AST dan Albumin)
Pada hari ke-0, 7, dan 14 darah hewan diambil  sebanyak  0,5  mL  dalam  tabung mikrosentrifuga kemudian dipisahkan serumnya. Selanjutnya serum diambil untuk penentuan  ALT,  AST  dan  albumin  masing- masing  sebanyak  50  uL  untuk  ALT,  AST dan  albumin  sebanyak  10  uL.  Penentuan aktivitas  ALT,  AST  serta  kadar  albumin dilakukan  sesuai  dengan  prosedur  yang tertera pada brosur kit pereaksi.

## Analisis Data
Metode  analisis  data  yang  dilakukan pada  penelitian  ini  menggunakan oneway
ANOVA (SPSS 18).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Simplisia  serbuk  kunyit,  temulawak dan  lada  hitam  dikarakterisasi  sehingga didapatkan  kandungan  seperti  tabel  1. Parameter  untuk  serbuk  simplisia  telah memenuhi standar sesuai yang tertera dalam FHI dan semua serbuk simplisia mengandung  alkaloid,  flavonoid,  tannin, kuinon dan steroid/ triterpenoid.
Tabel 1. Skrining Fitokimia
Golongan Senyawa Hasil Temulawak Lada Hitam Alkaloid + + Flavonoid + + Saponin - - Tanin + + Steroid/ Triterpenoid + +
Keterangan: (+) Terdeteksi, (-) Tidak Terdeteksi
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 KP Silymarin Temulawak TLH 1 TLH 2 N ila i a kt iv it as AL T Kelompok Uji Aktivitas ALT (U/L) H7 H14
Gambar  1. Histogram  Aktivitas  ALT  pada  hari  ke-7  darn  ke-14.  Statistik pengujian:  a=p<0,1,  b=p<0,05,  c=p<0,01  dibandingkan  terhadap kelompok kontrol positif.
Berdasarkan  pengujian  kadar  ALT pada gambar 1 semua kelompok mengalami peningkatan kadar ALT pada hari ke-7 yang mengindikasikan  adannya  kerusakan  hati dan  kelompok  yang  diberi  silimarin  dan sampel dibandingkan kontrol positif menunjukan  penurunan  kadar  ALT  dengan inhibisi untuk silimarin (21,4%), Temulawak  (5,1%),  TLH1  (0,6%),  dan TLH2  (0,9%).  Semua  kelompok  pada  hari
ke-14  dibandingkan  dengan  kelompok positif  menunjukan  perbedaan  bermakna dan kadar ALT pada kontrol sakit.
Selanjutnya dilakukan dalam penelitian  ini  adalah  parameter  AST,  hasil dari pengujian AST selaras dengan pengujian  ALT  yaitu  semua  kelompok mengalami  peningkatan  kadar  AST  pada hari  ke-7  yang  mengindikasikan  kerusakan hati yang dapat dilihat pada gambar 2.
0 50 100 150 200 250 KP Silymarin Temulawak TLH 1 TLH 2 N ila i a kt iv it a s A ST Kelompok Uji Aktivitas AST (U/L) H7 H14
Gambar  2. Histogram  Aktivitas  ALT  pada  hari  ke-7  darn  ke-14.
Statistik pengujian: a=p<0,1, b=p<0,05, c=p<0,01 dibandingkan terhadap kelompok kontrol positif.
Semua  kelompok  pada  hari  ke-7 menunjukan  adanya  penurunan  kadar  AST dibandingkan dengan kontrol positif dengan inhibisi  untuksilimarin  (27,2%),  temulawak (10,0%),  TLH1  (16,1%),  dan  TLH2 (13,6%).
Kemudian  parameter  yang  dianalisis dalam  penelitian  ini  adalah  albumin. Albumin  disintesis  dihati  oleh  karena  itu, penurunan albumin serum dapat menandakan  adanya  kelainan  hati.  Profil kadar  albumin  selama  pengujian  dapat dilihat pada gambar 3.
Hasil  pemeriksaan  parameter  albumin menunjukan  hasil  yang  selaras  dengan pengukuran  aktivitas  ALT  dan  AST,  yaitu terjadinya  penurunan  kadar  albumin  pada hari ke-7 pada seluruh kelompok tikus yang mengindikasikan  adanya  kerusakan  hati. Pada  hari  ke-14  semua  kelompok  yang diberikan  sampel  maupun  pembanding mengalami  peningkatan  kadar  albumin  dan kelompok tersebut tidak menunjukan adanya  perbedaan  bermakna  dibandingkan dengan  kondisi  awal.  Hal  ini  menunjukan bahwa semua kelompok yang diberi sampel memiliki aktivitas hepatoprotektif.
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 KP silymarin Temulawak TLH 1 TLH 2 N ila i a kt iv it as Al bu m in Kelompok Uji Kadar Albumin (g/dL) H7 H14
Gambar  3. Histogram  kadar  Albumin  pada  hari  ke-7  darn  ke-14.  Statistik pengujian: a=p<0,1, b=p<0,05, c=p<0,01 dibandingkan terhadap kelompok kontrol positif.

## KESIMPULAN
Temulawak dan
kombinasi kunyit/lada  hitam  yang  ekivaeln  dengan  2 dan  3  kapsul  pemakaian  pada  manusia mencegah  kerusakan  hati  secara  bermakna (p<0,01) lebih cepat mulai hari ke-14. Pada penentuan  kadar  albumin menunjukan
temulawak dan kombinasinya dapat memperbaiki kerusakan hati mulai hari ke-7 pemberian. Sehingga, kombinasi temulawak dengan lada hitam secara umum lebih  berpotensi  untuk  mencegah  dan mengobati  kerusakan  hati  dibandingkan dengan simlplisia murninya.

## DAFTAR PUSTAKA
Bishnoi,  M.,  Chopra,  K.,  Rongzhu,  L.,  & Kulkarni,  S.  K.  (2011).  Protective effect of curcumin and its combination with piperine (bioavailability
enhancer) against haloperidol-
associated  neurotoxicity:  Cellular  and neurochemical
evidence.
Neurotoxicity  Research , 20 (3),  215– 225.  https://doi.org/10.1007/s12640- 010-9229-4
Devaraj,  S.,  Ismail,  S.,  Ramanathan,  S.,
Marimuthu,  S.,  &  Fei,  Y.  M.  (2010). Evaluation  of  the  hepatoprotective activity  of  standardized  ethanolic extract  of  Curcuma  xanthorrhiza Roxb. Journal  of  Medicinal  Plants Research , 4 (23), 2512–2517. https://doi.org/10.5897/jmpr10.453
Khan,  H.,  Ullah,  H.,  &  Nabavi,  S.  M.
(2019). Mechanistic insights of
hepatoprotective  effects  of  curcumin: Therapeutic updates and future prospects. Food and Chemical
Toxicology , 124 , 182–191.
https://doi.org/10.1016/j.fct.2018.12.0
02
Llano,  S.,  Gómez,  S.,  Londoño,  J.,  & Restrepo,  A.  (2019).  Antioxidant activity  of  curcuminoids. Physical Chemistry  Chemical  Physics , 21 (7),
3752–3760.
https://doi.org/10.1039/c8cp06708b Pal, R., Vaiphei, K., Sikander, A., Singh, K.,
& Rana, S. V. (2006). Effect of garlic on  isoniazid  and  rifampicin-induced hepatic  injury  in  rats. World  Journal of  Gastroenterology , 12 (4),  636–639. https://doi.org/10.3748/wjg.v12.i4.636 Shivarkar  R,  S.  Bhise,  M.  G.  (2021).
Antituberculor activity of
Curcuminoids  isolated  from  Curcuma longa Rhizomes . 13 (01), 5958.
https://doi.org/10.5958/0975- 4385.2021.00002.9
Sirisidthi,  K.,  Kosai,  P.,  Jiraungkoorskul, K.,  &  Jiraungkoorskul,  W.  (2016). Antithrombotic  activity  of  turmeric (Curcuma  longa):  A  review. Indian Journal  of  Agricultural  Research ,
50 (2),
101–106.
https://doi.org/10.18805/ijare.v50i2.95
86
Wiendarlina,  I.  Y.,  Rahminiwati,  M.,  & Gumelar,  F.  T.  (2019).  AKTIFITAS HEPATOPROTEKTOR  EKSTRAK AIR  HERBA  PEGAGAN  DAUN KECIL  (Centella  asiatica  L.  Urb.) TERHADAP TIKUS PUTIH JANTAN  Sprague  Dawley  L.  YANG DIINDUKSI DENGAN
PARASETAMOL. FITOFARMAKA: Jurnal  Ilmiah  Farmasi , 8 (1),  12–22. https://doi.org/10.33751/jf.v8i1.1167
Yue, J., Peng, R., Chen, J., Liu, Y., & Dong,
G.  (2009).  Effects  of  rifampin  on CYP2E1-dependent  hepatotoxicity  of isoniazid  in  rats. Pharmacological
Research , 59 (2), 112–119.
https://doi.org/10.1016/j.phrs.2008.10.
006