Uji Antipiretik Patch Ekstrak Etanol Bawang Merah ( Allium ascalonicum L . ) dengan Matriks Chitosan dan Enhancer Tween-80
Jennifer Rachel Willyanto (a)*, Iwan Sahrial Hamid (b), Teguh Widodo (a) (a) Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya, Indonesia (b) Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
Bawang  merah  adalah  rempah  multi  guna  yang  dapat  berfungsi  sebagai  obat  tradisional.  Kandungan  senyawa flavanoid yang terdapat pada bawang merah telah dikenal memiliki efek antipiretik yang bekerja sebagai inhibitor enzim cyclooxygenase (COX) yang berperan dalam pembentukan prostaglandin. Pada penelitian ini bawang merah diformulasikan ke dalam bentuk sediaan patch karena penggunaannya yang praktis dan dapat menghindari jalur lintas  pertama  metabolisme.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  pengaruh  penggunaan patch ekstrak etanol bawang merah ( Allium ascalonicum L.) terhadap penurunan temperatur tubuh dan jumlah monosit pada tikus  putih  yang  telah  diinduksi  vaksin  DPT.  Penelitian  ini  menggunakan  4  kelompok  perlakuan  yaitu  kontrol positif  yang  diberi  sirup  parasetamol,  kontrol  negatif  yang  diberi  blanko patch ,  kelompok  perlakuan  satu  yang diberi patch ekstrak  etanol  bawang  merah  tanpa enhancer dan  kelompok  perlakuan  kedua  yang  diberi patch ekstrak  etanol  bawang  merah  dengan enhancer. Tikus  diadaptasikan  selama  7  hari  lalu  dilakukan  pengukuran temperatur  dan  pengambilan  darah  dari  ekor  tikus  untuk  menghitung  jumlah  monosit.  Setelah  itu  dilakukan penyuntikan vaksin DPT 0,1 ml secara intraperitonial dan dilakukan pengamatan temperatur sebelum pemberian vaksin,  15,30,45,60,  75,  90,  105,120,  150,  dan180  menit  setelah  pemberian  vaksin  sedangkan  pengamatan monosit dilakukan sebelum pemberian vaksin dan setiap 15 menit selama 120 menit setelah pemberian vaksin. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  perbedaan  signifikan  pada  jumlah  monosit  kelompok perlakuan  dengan  kontrol  positif  namun  terdapat  perbedaan  signifikan  pada  suhu.  Penggunaan patch ekstrak etanol bawang merah dapat menurunkan temperatur dan jumlah monosit pada tikus putih yang telah diinduksi vaksin DPT.
Kata Kunci: Antipiretik, Ekstrak Etanol Bawang Merah, Monosit, Patch .
Antipyretic Effect of Ethanolic Extract of Onion ( Allium ascalonicum L .) Patch Using Chitosan as Matrix and Tween-80 as Enhancer
Onion is a traditional medicine that has a lot of pharmacological potential. Flavanoid compounds found in onions have  an  antipyretic  effect  that  acts  as  an  inhibitor  of  cyclooxygenase  (COX)  enzymes  that  play  a  role  in  the formation of prostaglandins. In this study red onion is formulated into a patch because of its practical use and can avoid  the  first  metabolic  pathway.  This  study  aims  to  analyze  the  effect  of  onion  ethanol  extract  patch  ( Allium ascalonicum L.) on the decrease of body temperature and the number of monocytes in white rats induced by DPT vaccine. This study used 4 treatment groups: positive controls administered paracetamol syrup, negative controls given placebo patch, treatment group 1 treated with red onion ethanol extract without enhancers and treatment group 2 treated with an red onion ethanol extract with enhancers. Rats adapted for 7 days before temperature being measured and the blood being collected from the rat tail in order to calculate the number of monocytes. The animal temperature was measured after injected with vaccine DPT at 15, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150, 180 minutes meanwhile number of monocyte were calculated every 15 minutes for 120 minutes. The results showed that there was no significant difference in monocyte count of treatment group with positive control but there were significant differences in temperature. The use of onion ethanol extract patch may decrease the temperature and number of monocytes in white mice induced by DPT vaccine.
Keywords: Antipyretic, Ethanolic Extract Onion, Monocyte, Patch.
*Corresponding  author:  Fakultas  Farmasi Universitas  Katolik  Widya  Mandala  Surabaya,  Jl.  Raya  Kalisari Selatan No. 1 Surabaya, e-mail: jenniferrachel96@gmail.com

## PENDAHULUAN
Pyrexia atau  demam  merupakan  dampak sekunder  dari  infeksi  atau  penyakit  lainnya. Biasanya,  jaringan  yang  terinfeksi  atau  jaringan yang  rusak  memulai  pembentukan  mediator proinflamasi  (sitokin,  seperti.  interleukin  1, interleukin  6  dan  TNF-  α),  yang  meningkatkan sintesis  prostaglandin  E2  (PgE2)  di  dekat  daerah hipotalamus yang kemudian memicu hipotalamus untuk  meningkatkan  suhu  tubuh  (Afsar et  al ., 2012).
Obat yang biasa digunakan untuk menurunkan  demam  adalah  obat  golongan NSAID ,  yang  paling  umum  digunakan  adalah paracetamol.  Mekanisme  kerja  obat  golongan  ini dengan  cara  menghambat  sistem  biosintesis prostagladin  (PG)  yang  menyebabkan  demam. Meskipun  relatif  aman,  parasetamol  dan  obat golongan NSAID lainnya  tetap  memiliki  efek samping  berupa  hepatotoksisitas  (terutama  pada pasien lanjut usia), induksi tukak lambung, tukak duodenum  yang  kadang  disertai  anemia  karena pendarahan  pada  saluran  cerna,  serta  gangguan ginjal (Wilmana dan Gan, 2012). Bawang merah adalah salah satu rempah multi guna yang didayagunakan  sebagai  bahan  bumbu  dapur sehari-  hari  dan  penyedap  berbagai  masakan. Kegunaan  lain  dari  umbi  bawang  merah  adalah sebagai  obat  tradisional  untuk  pelayanan kesehatan  masyarakat.  Senyawa  fitokimia  yang terdapat  dalam  bawang  merah  salah  satunya adalah flavanoid. Senyawa flavonoid telah dikenal memiliki  efek  antiinflamasi,  analgesik  dan  juga memiliki  efek  antipiretik  yang  bekerja  sebagai inhibitor  (menghambat  pembentukan)  enzim cyclooxygenase (COX)  yang  berfungsi  untuk memacu pembentukan prostaglandin.
Prostaglandin  berperan  dalam  proses  inflamasi dan peningkatan suhu tubuh (Riyady dkk, 2016).
Patch yang merupakan sistem penghantaran  obat  transdermal  yang  dapat memberikan  banyak  keunggulan  dibandingkan rute  oral  yaitu  dapat  meningkatkan  kepatuhan pasien,  mudah  digunakan,  langsung  masuk kedalam  pembuluh  darah,  mudah  dilepas  dari kulit,  dan  menghindari  yang  jalur  lintas  pertama metabolisme.  Hal  ini  dapat  menjadi  alternatif pilihan  untuk  menghindari  efek  samping  yang ditimbulkan dari penggunaan obat-obatan antipiretik  golongan NSAID (John and Kumar, 2014).
Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis pengaruh  penggunaan patch ekstrak  etanol bawang  merah  ( Allium ascalonicum L.)  terhadap penurunan  temperature  tubuh  dan  jumlah monosit  pada  tikus  putih  yang  telah  diinduksi vaksin DPT.
Vaksin  DPT  yang  digunakan  untuk menginduksi demam akan mengaktifkan monosit, makrofag dan sel-sel kupffer untuk menghasilkan berbagai  macam  sitokin  yang  bekerja  sebagai pirogen  endogen  seperti  IL-1B,  IL-6B,  β-IFN,  γ- IFN,  dan  TNF-α  yang  dapat  bekerja  secara
independen untuk menimbulkan demam (William dan Ganong, 2002).
Monosit    merupakan    salah    satu    dari   sel darah    putih    yang  berperan  dalam    sistem pertahanan    tubuh    utama    bersama    dengan neutrofil.  Setelah tikus  putih  diinduksi  dengan vaksin    DPT    dan    mengalami    demam    maka secara  otomatis  sistem  pertahanan  tubuh  atau imunitas    dari    tikus    putih  tersebut    akan meningkat.    Monosit    melakukan    sistem pertahanan    tubuh  dengan    cara    memfagositosis zat-zat    asing    yang    masuk    ke    dalam    tubuh, namun  sebelum  itu  monosit  harus  mengalami proses    pematangan    terlebih  dahulu.    Monosit dibentuk  di  dalam    sumsum  tulang  kemudian akan    masuk  ke    dalam    sirkulasi    darahdalam bentuk    imatur    dan    mengalami    proses pematangan  menjadi    makrofag  setelah  masuk ke    jaringan.    Monosit    hanya  akan  aktif  dan mengalami  pematangan  ketika  ada  zat  asing masuk ke dalam dan  menyerang  tubuh.  karena itulah  selain  suhu  parameter  lainnya  yang akan diukur    adalah    peningkatan    jumlah    monosit pada  tikus  putih  (Gordon and Taylor, 2005).

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  pada  penelitian  ini antara  lain  ektrak  etanol  bawang  merah  ( Allium ascalonicum L.)  yang  didapatkan  dari  Materia Medika Indonesia, Batu, Malang, Jawa Timur dan telah distandarisasi sebelumnya. Sirup parasetamol  (Sanmol,  Bandung).  Vaksin  DPT  0,1 ml (Pentabio, Bandung). Bahan-bahan kimia yang digunakan  yaitu chitosan ,  tween-80,  propilen glikol, asam asetat, akuadest, alkohol 70%, buffer Wright’s  Stain ,  pewarna Wright’s  Stain, minyak emersi, pakan dan minum untuk tikus.

## Alat
Alat  yang  digunakan  yaitu  timbangan digital,  mortir-stamper,  gelas  ukur,  gelas  piala, cawan  petri,  oven,  silet,  timbangan  tikus, termometer  telinga,  kapas,  pipet  tetes  dan  kaca objek.

## Hewan Percobaan
Hewan  percobaan  yang  digunakan  yaitu tikus  putih  jantan  galur  Wistar  ( Rattus norvegicus )  yang  berusia  1,5-2  bulan  dengan berat  rata-rata  150-250  gram,  hewan  yang  sehat (tidak cacat) dan berjumlah 20 ekor.

## Tahapan Penelitian

## Pembuatan Ekstrak Etanol Bawang Merah
Bagian  bawang  merah  yang  digunakan untuk  ekstraksi  yaitu  umbi  bawang  merah. Metode  ekstraksi  yang  digunakan  yaitu  maserasi dengan menggunakan etanol 70%.

## Pembuatan Sediaan Uji
Patch  dibuat  dengan  cara  menimbang chitosan sebanyak  0,75  g  lalu  memasukkannya  ke dalam  mortir  dan  memberi  1  ml  asam  asetat
kemudian menambahkan aquadest sebanyak 10 ml dan  mengaduk  perlahan  hingga chitosan larut. Kemudian  memasukkan Tween-80 sebanyak  0,1 ml,  propilen  glikol  sebanyak  0,6  ml  kemudian mengaduknya  perlahan  hingga  semua  bahan tercampur  rata.  Selanjutnya  memasukkan  ekstrak etanol  bawang  merah  kedalam  campuran  tersebut sebanyak  9  g  lalu  menambahkan  air  ad  25ml  dan mengaduknya hingga tercampur rata setelah selesai campuran  tersebut  dipindahkan  ke  dalam  cawan petri dan di diamkannya selama 24 jam pada suhu kamar  agar  etanol  menguap  sempurna.  (Cawan petri  yang  digunakan  sebelumnya  dikalibrasi  25 ml). Setelah itu memasukkan campuran tersebut ke dalam  oven  pada  suhu  30⁰C  selama  3  hari.  (Suhu oven harus dijaga agar lapisan film yang terbentuk tidak  rusak.  Film  yang  terbentuk  bila  belum digunakan  dapat  disimpan  terlebih  dahulu  pada desikator).  Untuk  komposisi  formulasi patch ekstrak  etanol  bawang  merah  dapat  dilihat  pada tabel 1.
Tabel 1. Komposisi formulasi patch ekstrak etanol bawang merah.
Nama bahan Konsentrasi K(-) K(+) P1 P2 Paracetamol 9 mg - - Ekstrak etanol Bawang merah - - 9 g 9 g Chitosan 0,75 g - 0,75 g 0,75 g Tween-80 - - - 0,1 ml Propilen glikol 0,6 ml - 0,6 ml 0,6 ml Aquadest ad. 25 ml - 25 ml 25 ml

## Uji Antipiretik
Pada  tikus  putih  dilakukan  pengukuran suhu  telinga  awal  satu  jam  sebelum  penyuntikan vaksin DPT kemudian disuntik vaksin DPT 0,1 ml secara  intraperitonial  pada  bagian  perut  untuk menginduksi terjadinya demam. Setelah satu jam maka  kembali  dilakukan  pengukuran  suhu  pada telinga  tikus  (suhu  demam  (≥1⁰C).  Setelah pengukuran  suhu  dilakukan  maka patch diaplikasikan  pada  punggung  tikus  yang  telah dicukur  bulunya  sesuai  dengan  kelompok perlakuan yaitu kelompok I kontrol negatif diberi patch kosong,  dan  kontrol  positif  diberi paracetamol  peroral  dengan  menggunakan  sonde dosis 9 mg/200 grBB tikus, kelompok II P1 diberi patch ekstrak  etanol  bawang  merah  sebesar  10% namun  tanpa enhancer ,  kelompok  IV  P2  diberi patch ekstrak  etanol  bawang  merah  sebesar  10% dan enhancer sebesar  0,1  ml.  Setelah  itu pengukuran  suhu  pada  telinga  tikus  kembali dilakukan setiap 15 menit pada 2 jam pertama lalu selanjutnya  pengukuran  dilakukan  setiap  30 menit hingga 3 jam.

## Pengamatan Jumlah Monosit
Untuk  pengambilan  sampel  darah  monosit diambil pada saat sebelum pemberian vaksin DPT lalu  setelah  pemberian  vaksin  DPT  pengambilan sampel  darah  kembali  dilakukan  setiap  15  menit selama  1  jam  dan  setelah  pemberian  paacetamol dan patch ekstrak  etanol  pengambilan  sampel kembali  dilakukan  setiap  15  menit  selama  1  jam. Pengambilan  sampel  darah  ini  dilakukan  dengan cara  menusuk  pembuluh  darah  tikus  lalu  darah diletakkan setetes pada kaca objek dan dilakukan pembuatan  sediaan  apus  darah  tepi,  lalu  sediaan apus  darah  tepi  ini  dikeringkan  dengan  suhu ruangan  dan  diberi  pewarnaan  dengan  pewarna wright’s  stein lalu  diamati  dengan  mikroskop binokuler perbesaran 1000x.

## Evaluasi Sediaan Patch
Evaluasi sediaan patch yaitu uji fisik patch . Uji fisik antara lain homogenitas warna, uji aerasi, kejernihan, tekstur  permukaan,  uji  daya  lipat,  uji keseragaman bobot, dan uji moisture content .

## Analisis Data
Data  perhitungan  jumlah  monosit  dan penurunan temperatur dianalisis dengan pengujian statistik. Uji statistik dilakukan dengan bantuan  perangkat  lunak  ( software )  SPSS  17.0. Data  penghitungan  dianalisis  dengan  metode statistik  parametrik  dengan  analisis  varian (ANOVA)  uji  perbandingan  jarak  berganda Duncan, dengan daya signifikasi 0,05 (p=0,05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada penelitian ini dilakukan uji antipiretik patch ekstrak  etanol  bawang  merah  ( Allium ascalonicum L.)  dan  evaluasi  fisik patch .  Hasil evaluasi fisik patch menunjukkan patch memenuhi  spesifikasi  yang  telah  ditentukan (Tabel 2-4).
Pada  pengujian  homogenitas  warna terdapat  perbedaan  warna  antara  kontrol  negatif yang    jernih  (tidak  berwarna)  dan patch yang mengandung  ekstrak  etanol  bawang  merah berwarna  coklat  kemerahan.  Pada  pengujian aerasi  tidak  terdapat  gelembung  udara  /  aerasi pada keseluruhan patch hal ini disebabkan karena kecepatan  pengadukan patch yang  diatur sedemikian  rupa  (tidak  boleh  terlalu  cepat) sehingga  dapat  meminimalis  kehadiran  udara yang terperangkap didalam patch . Pada pengujian kejernihan didapatkan hasil patch kontrol negatif jernih  (tidak  berwarna)  sedangkan patch dengan ekstrak etanol memberikan efek translucent. Pada pengujian  tekstur  permukaan  seluruh patch bertekstur  halus  dan  tanpa  kerutan.  Pada pengujian  daya  lipat  masing-masing patch memiliki  daya  lipat  yang  memenuhi  persyaratan yaitu  lebih  dari  200  kali  lipatan.  Pada  pengujian moisture  content didapatkan  hasil  bahwa moisture  content  patch >10%.  Pengujian  ini dilakukan untuk mengetahui stabilitas ketahanan  patch  terhadap      mikroba,      semakin
kecil      nilai      dari  moisture  content  maka  akan
semakin baik kestabilan sediaan patch tersebut.

## Tabel 2. Hasil Uji Fisik Patch
Tabel 3. Hasil Pengujian Moisture Content Patch Formula Moisture Content Kontrol negatif 11,82 ± 0,18 Patch Ekstrak  Etanol Tanpa Enhancer 12,01 ± 0,60 Patch Ekstrak  Etanol Dengan Enhancer 14,70 ± 0,50
Tabel  4. Hasil  Pengujian  Keseragaman  Bobot
Patch Kelompok Perlakuan Rata-Rata ± SD Kontrol Negatif 0,2344 ± 0,0001 Patch Ekstrak  Etanol  Tanpa Enhancer 0,2545 ± 0,0000 Patch Ekstrak Etanol Dengan Enhancer 0,4611 ± 0,0000 Enhancer merupakan zat
untuk memfasilitasi penetrasi melalui kulit dengan cara mengurangi  permeabilitas  kulit      agar      obat dapat   berpenetrasi   hingga   menembus   lapisan stratum  korneum  dan  menuju  ke  lokasi  target. Enhancer yang  digunakan  sebaiknya  tidak memiliki  efek  farmakologi,  tidak  toksik,  tidak menyebabkan  iritasi  atau  alergi,  bekerja  cepat, dan tidak berwarna. Pada penelitian ini enhancer yang    digunakan    adalah  Tween-80  yang merupakan      surfaktan    nonionik  penambah penetrasi   kulit   dan   meningkatkan   penetrasi ke      dalam      kulit  dengan    cara    meningkatkan fluiditas    lipid    epidermis,    mengekstraksi    dan melarutkan      komponen      lemak.      Selain      itu mekanisme      tambahan      untuk  peningkatan penetrasi kulit oleh Tween-80 adalah berpenetrasi melalui jalur interseluler  pada  kulit  yang  diikuti oleh    pengikatan    dan    interaksi    dengan  filamen keratin  sehingga  dapat  menyebabkan  gangguan pada korneosit yang merupakan sel penyusun dari stratum korneum (Pandey et al ., 2014).
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik  yang dapat  diamati  pada  Tabel  5  dapat  dilihat  bahwa pada menit ke 180 terdapat perbedaan bermakna antara  keempat  kelompok  perlakuan  hal  ini disebabkan karena pada kelompok kontrol positif suhu  turun  drastis  hingga  dibawah  suhu  normal sedangkan  kelompok  perlakuan  ekstrak  mampu menurunkan suhu hingga hampir mencapai suhu normal. Namun pada kelompok perlakuan dengan enhancer dapat menurunkan suhu  lebih
mendekati  suhu  normal  daripada  kelompok perlakuan  tanpa enhancer, berbeda  halnya dengan  kontrol  negatif  dimana  temperaturnya masih  tinggi  karena  tikus  hanya  diberikan  patch kosong  tanpa  adanya  bahan  aktif  antipiretik didalamnya, hal ini diperjelas dengan grafik yang terdapat pada Gambar 1.
Selain  suhu  parameter  lain  yang  diamati dalam    penelitian    ini  adalah    jumlah    monosit pada    darah    tikus    putih.    Monosit    merupakan salah satu  dari  sel  darah  putih  yang  berperan dalam  sistem  pertahanan  tubuh utama  bersama dengan  neutrofil.  Setelah  tikus  putih  diinduksi dengan vaksin   DPT   dan   mengalami   demam maka      secara      otomatis      sistem  pertahanan tubuh  atau  imunitas  dari  tikus  putih  tersebut akan    meningkat.  Monosit    melakukan    sistem pertahanan  tubuh  dengan  cara  memfagositosis zat-zat asing yang masuk ke dalam tubuh, namun sebelum  itu  monosit  harus  mengalami  proses pematangan  terlebih  dahulu.  Monosit  dibentuk di    dalam    sumsum    tulang    kemudian    akan masuk  ke  dalam  sirkulasi  darah  dalam bentuk imatur      dan      mengalami      proses    pematangan menjadi     makrofag setelah  masuk  ke  jaringan. Monosit    hanya    akan    aktif    dan mengalamipematangan    ketika    ada    zat    asing masuk  ke  dalam  dan  menyerang  tubuh. karena itulah    selain    suhu    parameter    lainnya      yang akan    diukur    adalah  peningkatan    jumlah monosit  pada  tikus  putih  (Gordon and Taylor, 2005).  Monosit    keluar    dengan    cepat    selama satu    jam    dan  berpindah    mengelilingi  jaringan dalam    bentuk    makrofag    ketika    terjadi kerusakan    pada    jaringan  seperti    iritasi    dan infeksi    peritonial    (Auffray,    Sieweke and Geissmann, 2009).
Berdasarkan  hasil  analisis  statistik  yang dapat  diamati  pada  Tabel  6  pada  menit  ke  120 kelompok  kontrol  positif  dan  kelompok patch dengan enhancer tidak  memiliki  perbedaan bermakna  hal  ini  menunjukkan  bahwa patch dengan enhancer memiliki  efek  yang  sama dengan  paracetamol  dalam  menurunkan  jumlah monosit  yang  juga  berkaitan  dengan  turunnya suhu  tubuh  tikus  hingga  mendekati  suhu  normal sedangkan  pada  kelompok  perlakuan  kontrol negatif  dan patch tanpa enhancer tidak  terdapat perbedaan  bermakna  namun  dapat  dilihat  dari rata-rata  ±  SD  bahwa  jumlah  monosit  kontrol
Parameter
Kelompok Perlakuan
Kontrol Negatif Patch Ekstrak Etanol Tanpa Enhancer Patch Ekstrak Etanol Dengan Enhancer Homogenitas Warna Jernih Coklat Kemerahan Coklat Kemerahan Aerasi Tidak ada Tidak ada Tidak ada Kejernihan Jernih Translucent Translucent Tekstur Permukaan Halus tanpa kerutan Halus tanpa kerutan Halus tanpa kerutan Daya Lipat >200 >200 >200
negatif  masih  sangat  tinggi  jauh  dari  jumlah monosit normal sedangkan pada kelompok patch tanpa enhancer memiliki  jumlah  monosit  yang masih  mendekati  jumlah  monosit  normal  hal  ini menunjukkan bahwa patch tanpa enhancer dapat
menurunkan jumlah monosit namun tidak sebaik patch dengan enhancer karena enhancer membantu penetrasi obat ke dalam kulit sehingga memiliki efek yang lebih baik.
Gambar 1. Grafik Rata – rata Temperatur pada Tikus Putih Wistar.
Tabel 5. Rata-rata temperatur tubuh tikus setelah diinduksi vaksin DPT kemudian dilakukan pemberian paracetamol dan patch ekstrak etanol bawang merah. Waktu (menit ke -) Temperatur Tubuh Tikus (⁰C) Kontrol Negatif Kontrol Positif Patch Ekstrak Etanol Tanpa Enhancer Patch Ekstrak Etanol Dengan Enhancer T0 36,42 ± 0,32 a 36,40 ± 0,21 a 36,50 ± 0,33 a 36,16 ± 0,15 a T15 36,72 ± 0,30 a 37,68 ± 0,57 b 36,98 ± 0,29 a 36,66 ± 0,11 a T30 37,20 ± 0,36 a 38,20 ± 0,45 b 37,60 ± 0,28 a 37,20 ± 0,22 a T45 37,70 ± 0.52 a 38,42  ± 0,69 b 38,14 ± 0,45 ab 38,00 ± 0.16 ab T60 38,20 ± 0,62 a 38,68 ± 1,03 a 38,64 ± 0,50 a 38,44 ± 0,09 a T75 38,12 ± 0,45 a 37,92 ± 0,60 a 38,26 ± 0,54 a 37,80 ± 0,12 a T90 37,92 ± 0,48 a 37,32 ± 0,68 a 37,84 ± 0,51 a 37,36 ± 0,20 a T105 37,70 ± 0,42 b 36,98 ± 0,54 a 37,52 ± 0,48 ab 37,08 ± 0,19 a T120 37,40 ± 0,52 c 36,30 ± 0,12 a 37,12 ± 0,24 bc 36,72 ± 0,13 b T150 37,18 ± 0,44 c 35,88 ± 0,16 a 36,86 ± 0,20 bc 36,52 ± 0,13 b T180 37,06 ± 0,36 d 35,30 ± 0,25 a 36,62 ± 0,23 c 36,20 ± 0,15 b Keterangan: Superskrip yang berbeda pada kolom menunjukan perbedaan signifikan antar kelompok perlakuan ( P < 0,05).
Gambar 2. Grafik rata – rata jumlah monosit pada Tikus Putih Wistar.
Tabel 6. Rata – rata Jumlah Monosit Tikus Putih Wistar.
Waktu (menit ke -) Rata-Rata Monosit Tikus Putih Kontrol Negatif Kontrol Positif Patch Ekstrak Etanol Tanpa Enhancer Patch Ekstrak Etanol Dengan Enhancer T0 28.64 ± 6.62 a 28.32 ± 3.92 a 30.48 ± 6.00 a 24.68 ± 3.00 a T15 35.12 ± 6.68 a 55.4 ± 11.19 b 40.64 ± 6.34 a 33.92 ± 2.33 a T30 45.92 ± 7.55 a 65.68 ± 9.83 b 52.96 ± 5.16 a 45.4 ± 4.10 a T45 55.36 ± 10.65 a 69.16 ± 13.59 a 63.64 ± 8.53 a 60.72 ± 2.68 a T60 64.16 ± 12.51 a 73.96 ± 20.91 a 72.96 ± 12.41 a 69.6 ± 1.64 a T75 63.0 ± 9.90 a 59.36 ± 11.51 a 65.68 ± 11.50 a 57.12 ± 2.08 a T90 59.2 ± 10.19 a 47.32 ± 14.56 a 58.28 ± 10.60 a 47.92 ± 4.23 a T105 55.24 ± 8.75 b 40.64 ± 10.95 a 51.36 ± 9.06 ab 42.68 ± 3.67 a T120 51.04 ± 10.75 b 27.52 ± 3.42 a 44.08 ± 4.77 b 35.6 ± 2.55 a
Keterangan: Superskrip yang berbeda pada kolom menunjukkan perbedaan signifikan antar kelompok perlakuan (p < 0,05).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat disimpulkan  bahwa  penggunaan patch ekstrak etanol  bawang  merah  ( Allium  ascalonicum L.)
dapat  menurunkan  temperatur  dan  jumlah monosit  pada  tikus  putih  yang  telah  diinduksi demam  dengan  menggunakan  vaksin  DPT
.

## Daftar Pustaka
Afsar,  S.K.,  Reddy,  V.P.,  Priyanka,  B.,  Srilakshmi,  A.,  Saran, S.S., and Ram, C.R. 2012, Pharmacological  Evaluation  of Antipyretic Activity of Ethanolic Fruit Extract of Terminalia Chebula in Wistar Rats, IJAPR, vol 3: 692.
Auffray,   C.,   Sieweke,   M.H.,   Geissmann.   F.   2009, Blood Monocyte: Development, Heterogeneity, and Relationship with Dendritic  Cells. Annual Review of Immunology , 27:669-692
Gordon, S.    and    Taylor,    P.R.    2005, Monocyte    and Macrophage    Heterogenity ,  Nature  Publishing  Group,  vol  5: 953-954.
John,  L.,  and  Kumar,  A.  2014,  Comparison  of  Amlodipine Transdermal Patches using HPMC and  Chitosan, Asian journal of Pharmaceutical and Clinical Research.
vol 7: 1-3.
Riyady, P.R., Aridya, L.R., Sari, H.R., Perdani, J.P., Ayu, P.D.,
Natasa, Z.A., Dian, F.D., Merta, S.D.A.E.C., Yadnya, S.D.A.D.C., Nurul, H.D.K., Dwi, P.D., Debby, I.R., Melinda, P., and Suhariyati. 2016, The Effect of Onion ( Allium ascalonicum L.) Compress  Toward  Body  Temperature  of    Children with   Hipertermia  in Bougenville
Room Dr.Hartoyo
Lumajang Hospital, Proceeding ICMHS, hal 253 .
Wilmana,  P.F.,  dan  Gan,  S.  2012, Farmakologi  dan  Terapi, Edisi  5. Departemen  Farmakologi  dan  Terapeutik  Fakultas Kedokteran UI. Jakarta, hal 230-239.
William,  F.,  dan  Ganong.  2002, Buku  Ajar  Fisiologi Kedokteran,  Edisi  20 .  EGC.  Jakarta,  hal  245-246.