## Journal of Nutrition College,
Volume 7, Nomor 4, Tahun 2018, Halaman 169
PENGARUH PEMBERIAN NASI BERAS MERAH (Oryza nivara) DAN NASI BERAS HITAM (Oryza sativa L.indica) TERHADAP KADAR hs CRP TIKUS WISTAR (Rattus norvegicus) DIABETES MELITUS TIPE 2
Golda Sharon Sitanggang 1 , Martha Ardiaria 1 , Ayu Rahadiyanti 1
1 Departemen Ilmu Gizi, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro Jln. Prof. H. Soedarto, SH., Semarang, Telp (024) 76402881, Email : gizifk@undip.ac.id

## ABSTRACT
Background: Diabetes mellitus (DM) is a chronic disease caused by insulin deficiency or insulin resistance characterized by  hiperglicemia  or  high  glucose  concentration  in  the  blood . hsCRP  is  the  most  sensitive  measurement  method  of inflammatory marker level.  Red rice and black rice are known as high level of anthocyanin and fiber  that potentially increase insulin sensitivity and decrease inflamation.
Objective: Determine the difference of hsCRP level between red rice and black rice intervensions in diabetic rats Methods: It  was  true  experimental  with  post  test  control  design  in  24  Rattus  norvegicus  male,  6  samples  maintained healthy in the negative control group (K-) and 18 samples were injected STZ (50 mg/kg body weight) and NA (110 mg/kg body  weight)  to  become  Type  2  DM.  Diabetic  samples  divided  into  3  groups:  positive  control  group  (K+),  red  rice intervention (P1), and black rice intervention (P2). The intervention was given for 28 days. After the intervention, hsCRP was measured. hsCRP levels analyzed using ELISA method. Statistical analysis using ANOVA and Duncan post hoc test. Result: There were significant differences in hsCRP levels (p=0.000). P1 group had hsCRP level 18.8±0.50 ng/ml and P2 group had hsCRP level 16.3±0.72 ng/ml Conclusion: Red rice and black rice show significant differences in hsCRP levels. hsCRP levels were lower in the rat group with black rice than others.
Keyword: Red rice, black rice, type 2 diabetes mellitus, hsCRP

## ABSTRAK
Latar belakang: Diabetes Melitus (DM) merupakan penyakit kronik yang disebabkan defisiensi atau resistensi insulin, yang  ditandai  tingginya  konsentrasi  glukosa  dalam  darah.  Kadar  hsCRP  dapat  digunakan  untuk  melihat  marker inflamasi yang paling sensitif pada diabetesi. Beras merah dan beras hitam diketahui kaya akan antosianin dan serat yang berpotensi meningkatkan sensitivitas insulin dan mengurangi inflamasi.
Tujuan: Mengetahui perbedaan pemberian nasi beras merah dan nasi beras hitam terhadap kadar  hsCRP pada tikus wistar DM Tipe 2 Metode: Jenis penelitian ini adalah true experimental dengan post test control group design. Besar sampel penelitian 24 ekor tikus wistar jantan, 6 ekor dikondisikan sehat yaitu kelompok K(-) dan 18 ekor tikus dikondisikan DM dengan injeksi STZ 50 mg/kg BB dan 110 NA mg/kg BB. Kemudian tikus DM dibagi menjadi 3 kelompok yaitu kelompok K(+), kelompok perlakuan nasi beras merah (P1) dan kelompok perlakuan nasi beras hitam (P2). Intervensi dilakukan selama 28 hari, kadar hsCRP diukur menggunakan metode ELISA. Analisis statistik menggunakan uji ANOVA dan dilanjutkan dengan uji post hoc Duncan.
Hasil: Terdapat  perbedaan  signifikan  kadar  hsCRP  antar  kelompok  (p=0,000).  Kelompok  P1  memiliki  kadar  hsCRP dengan nilai 18,8±0,50 ng/ml. Kelompok P2 memiliki kadar hsCRP dengan nilai 16,3±0,72 ng/ml.
Simpulan: Pemberian  nasi  beras  merah  dan  nasi  beras  hitam  menunjukkan  adanya  perbedaan  kadar  hsCRP  secara signifikan. Kadar hsCRP lebih rendah pada kelompok tikus dengan pemberian nasi beras hitam.
Kata kunci: Beras merah, beras hitam, diabetes melitus tipe 2, hsCRP

## PENDAHULUAN
Diabetes  Melitus  (DM)  merupakan  suatu penyakit kronik yang disebabkan defisiensi atau tidak diproduksinya  hormon  insulin  oleh  pankreas  atau resistensi insulin, sehingga menyebabkan meningkatnya konsentrasi glukosa dalam darah yang disertai  dengan  gangguan  metabolisme  lemak  dan protein.  Keadaan  hiperglikemia  pada  penderita  DM dapat  memicu  kerusakan  pada  sistem  dalam  tubuh khususnya pembuluh darah dan saraf. 1,2 Pasien yang
mengalami  DM  berisiko  tinggi  untuk  menderita berbagai  penyakit  seperti  aterosklerosis,  penyakit kardiovaskular, stroke, hipertensi, kebutaan, amputasi, penyakit periodontal dan penyakit ginjal. 3,4 Orang  dewasa  yang  memiliki  riwayat  diabetes memiliki resiko kematian yang lebih cepat sebanyak 2  hingga  4  kali  karena  penyakit  kardiovaskuler dibandingkan  dengan  orang  dewasa  yang  tidak memiliki  riwayat  DM. 4 Penyakit  kardiovaskuler merupakan penyebab utama morbiditas dan
Volume 7, Nomor 4, Tahun 2018, Halaman 169-176
Online di : http://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jnc/
mortalitas  pada  DM. 5 Hal  ini  disebabkan  keadaan hiperglikemia yang memicu Reactive Oxygen Species (ROS) dan Advance Glycation End Products (AGEs) 6 yang  menyebabkan  peningkatan  radikal  bebas sehingga menimbulkan stress oksidatif yaitu keadaan dimana  antioksidan  tubuh  tidak  dapat  menekan radikal  bebas  dan  memicu  inflamasi  di  dalam tubuh. 6,7,8
Beras merupakan bahan makanan yang paling banyak  dikonsumsi  di  Indonesia  dibandingkan dengan  bahan  pangan  lainnya.  Ada  beberapa  jenis beras  yang  terdapat  di  Indonesia  yaitu  beras  putih, beras  merah  dan  beras  hitam. 9 Warna  yang  terdapat pada  beras  merah  dan  beras  hitam  ini  disebabkan adanya  antosianin. 10,11 Antosianin  adalah  senyawa yang  menyebabkan  timbulnya  warna  merah,  biru, ungu pada padi, buah, sayur, dan produk hortikultura lainnya. 12 Kadar antosianin yang tinggi menyebabkan warna  menjadi  semakin  gelap  pada  suatu  bahan pangan. 13
Antosianin  termasuk  komponen  flavonoid, yaitu  turunan  polifenol  yang  memiliki  kemampuan antioksidan, antikanker, antiinflamasi, antiatherogenik  dan  antioksidan. 14,15 Antosianin sebagai antioksidan dinilai mampu sebagai treatment dan  baik  dalam  pencegahan  penyakit  dengan inflamasi  kronik.  Penelitian  menunjukkan  bahwa beras merah dan beras hitam efektif dalam melawan inflamasi. 16 Antosianin  di  dalam  beras  merah  dan beras  hitam  juga  dapat  mengurangi  inflamasi  dan menurunkan histamin yang berperan sebagai trigger inflamasi dan menurunkan kadar faktor inflamasi (IL- 6 dan TNF α) pemicu C-Reactive Protein (CRP). 16,17 Beras  merah  dan  beras  hitam  juga  memiliki nilai  serat  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  beras putih. 18 Konsumsi  serat  yang  cukup,  dapat menimbulkan  efek  hipoglikemik  karena  memiliki kemampuan  dalam  memperlambat  pengosongan lambung, mengubah peristaltik lambung, memperlambat  difusi  glukosa,  menurunkan  aktifitas amilase akibat meningkatnya viskositas isi usus, serta menurunkan  waktu  transit  yang  mengakibatkan pendeknya  absorbsi  glukosa  dan  berpengaruh terhadap peningkatan sekresi. 19
Karbohidrat  merupakan  salah  satu  zat  gizi makro yang berperan penting pada diabetesi, dimana jenis  karbohidrat  tersebut  mempengaruhi  perjalanan penyakit  DM. 20 Parameter  yang  dapat  digunakan untuk mengelompokkan pangan berdasarkan pengaruh  fisiologisnya  terhadap  respon  kadar glukosa  darah  setelah  pangan  dikonsumsi  adalah Indeks  Glikemik  (IG). 21 Semakin  tinggi  IG  pangan, semakin cepat pula kemampuannya untuk menaikkan kadar glukosa  darah. 22 Jenis beras merah dan beras hitam  memiliki  nilai  Indeks  Glikemik  (IG)  yang rendah  dibandingkan  dengan  beras  putih. Konsumsi
makanan  dengan  indeks  glikemik  rendah  dapat mengontrol  kadar  glukosa  darah  penderita  DM  dan meningkatkan  sensitivitas  insulin  dan  mengurangi resiko terjadinya komplikasi. 23
CRP merupakan senyawa yang berperan secara langsung  dalam  proses  inflamasi.  CRP  dapat digunakan  untuk  memeriksa  ada  atau  tidaknya inflamasi  dalam  tubuh. 24 Sesuai  namanya, High Sensitive  C-Reactive  Protein ( hs CRP)  memiliki sensitivitas  yang  lebih  tinggi  daripada  pengukuran CRP. 25
Penelitian mengenai pengaruh pemberian nasi beras  merah  dan  nasi  beras  hitam  terhadap  kadar hs CRP  belum  pernah  dilakukan  sebelumnya.  Maka perlu  dilakukan  penelitian  untuk  mengetahui efektivitas mengenai nasi beras merah dan nasi beras hitam secara in vivo terhadap kadar hs CRP pada tikus wistar diabetes melitus tipe 2.

## METODE
Jenis  penelitian  ini  adalah true  experimental dengan rancangan post test control group . Penelitian dan  pengumpulan  data  dilakukan  April  -  Mei  2018. Pembuatan  produk  nasi  beras  merah  maupun  nasi beras hitam,penelitian uji in vivo , serta analisis hasil kadar hs CRP  dilaksanakan  di  Laboratorium  Pusat Studi  Pangan  dan  Gizi  Universitas  Gadjah  Mada (UGM)  Yogyakarta.  Subjek  penelitian  yaitu  tikus jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus ).  Kriteria inklusi  yang  digunakan  adalah  tikus  wistar  jantan, berusia 2  bulan,  berat  badan  175-200  gram,  kondisi sehat (gerakan aktif dan tidak cacat). Kriteria eksklusi yaitu  tikus  tidak  bergerak  secara  aktif  saat  tidak sedang tidur, tikus mengalami penurunan berat badan hingga kurang dari 100 gram, mengalami perubahan perilaku (sakit dan kehilangan nafsu makan) dan tikus mati saat penelitian berlangsung.
Penentuan  besar  subjek  minimal  menurut World  Health  Organization (WHO)  yaitu  dengan jumlah sampel minimal 5 ekor hewan coba pada tiap kelompok  ditambah  1  ekor  dari  batas  minimal sehingga dibutuhkan 24 ekor tikus pada penelitian ini. Sejumlah 6 tikus dalam kondisi normal dikelompokkan menjadi kontrol negatif (K(-)) dan 18 tikus  dikondisikan  mengalami  Diabetes  Melitus (DM)  yang  selanjutnya  dikelompokkan  menjadi kelompok  kontrol  positif  (K(+)),  Perlakuan  1  (P1), Perlakuan 2 (P2) berdasarkan metode simple random sampling . Pengkondisian DM apabila kadar Glukosa Darah  Puasa  (GDP)  tikus  >  200  mg/dL.  Pada penelitian  kelompok  K(-)  dan  K(+)  tidak  diberikan intervensi,  sedangkan  kelompok  P1  diberikan  nasi beras  merah  dan  kelompok  P2  diberikan  nasi  beras hitam. Variabel bebas di dalam penelitian ini adalah pemberian  nasi  beras  merah  dan  nasi  beras  hitam. Variabel  terikat  dalam  penelitian  ini  adalah  kadar
hs CRP.  Variabel  terkontrol  yaitu  galur  tikus,  umur, jenis kelamin, pakan, kandang dan berat badan hewan coba.
Dosis  pemberian  didasarkan  pada  Angka Kecukupan  Gizi  yang  dianjurkan  bagi  orang Indonesia  bahwa  kebutuhan  serat  dan  karbohirat harian laki-laki dewasa dengan berat badan 60 kg dan aktifitas  sedang  adalah  25  g/hari  dan  375  g/hari. 26 Kebutuhan antosianin untuk membantu menurunkan dislipidemia,  resistensi  insulin  dan  meningkatkan aktivitas  antioksidan  di  dalam  tubuh  adalah  320 mg/hari. 27 Hasil  perhitungan  dosis  kemudian dikonversikan dengan dosis untuk tikus dengan berat badan 200 gram. Berdasarkan hasil perhitungan yang telah  dilakukan,  diketahui  bahwa  banyaknya  beras merah yang diperlukan untuk mencukupi kebutuhan antosianin,  serat  dan  karbohidrat  sebanyak  15,2 gram/hari,  sementara  hasil  perhitungan  untuk  beras hitam adalah 14,8 gram/hari.
Saat perlakuan, tikus diberikan pakan sebanyak 20 gram yaitu pada kelompok tikus P1 15,2 gram nasi beras  merah  ditambah  4,8  gram  pakan  standar, sedangkan  pada  kelompok  tikus  P2  diberikan  14,8 gram  nasi  beras  hitam  ditambah  5,2  gram  pakan standar, serta 20 gram pakan standar untuk kelompok K(-) dan K(+). Pakan standar yang digunakan adalah COMFEED AD  II. COMFEED AD  II  mengandung karbohidrat 51%, protein kasar 15%, lemak kasar 7% dan serat kasar 6%.
Penelitian  diawali  dengan  pembuatan  pakan untuk  kelompok  perlakuan  terlebih  dahulu.  Beras merah  dan  beras  hitam  terlebih  dahulu  dimasak hingga  menjadi  nasi.  Setelah  nasi  masak,  nasi kemudian  dicampur  dan  dihomogenkan  dengan pakan standar COMFEED AD II dengan jumlah nasi beras merah dan pakan standar sebesar 15,2 gram dan 4,8  gram  serta  jumlah  nasi  beras  hitam  dan  pakan standar  sebesar  14,8  gram  dan  5,2  gram.  Setelah dicampur,  pakan  kemudian  dicetak  hingga  menjadi pelet.  Proses  homogenisasi  dan  pencetakan  pakan menggunakan  mesin  ekstruder.  Pakan  kemudian
dikeringkan dengan suhu rendah ± 40 o C selama 8 jam menggunakan cabin dryer .
Tikus sebanyak 24 ekor diaklimatisasi selama 7  hari  dengan  diberi  pakan  standar  dan  minum aquades ad  libitum .  Pasca  adaptasi  7  hari,  sampel diinjeksi streptozotocin (STZ)  50  mg/kg  BB  dan nicotinamid (NA)  110  mg/kg  BB  untuk  kelompok kontrol  positif  dan  kelompok  perlakuan  untuk membuat  tikus  DM  sementara  kelompok  kontrol negatif tidak diinjeksi STZ dan NA. Hari ke 3 pasca injeksi  STZ-NA  dilakukan  pemeriksaan  glukosa darah  dan  tikus.  Tikus  dinyatakan  DM  jika  kadar glukosa  darah  200-300  mg/dl.  Setelah  tikus dinyatakan  DM,  diberikan  intervensi  nasi  beras merah pada kelompok P1 dan nasi beras hitam pada kelompok P2.
Data  yang  dikumpulkan  berupa  berat  badan tikus  yang  diukur  setiap  7  hari  sekali  dimulai  sejak sehari sebelum pemberian intervensi. Setelah 28 hari masa  intervensi,  selanjutnya  dilakukan  pemeriksaan kadar hs CRP  menggunakan  metode Enzym-Linked Immunosorbent  Assay (ELISA).  Penelitian  ini  telah memperoleh ethical  clearance dari  Komisi  Etik Penelitian  Kesehatan  (KEPK)  Fakultas  Kedokteran Universitas  Diponegoro/Rumah  Sakit  Umum  Pusat Dr.  Kariadi  No.15/EC/H/FK-RSDK/IV/2018.  Uji normalitas  data  menggunakan  uji  Saphiro  Wilks, kemudian  dianalisis  dengan  uji  ANOVA  dan dilanjutkan uji post hoc Duncan.

## HASIL Karakteristik Subjek
Berdasarkan  Tabel  1,  diketahui  bahwa kelompok  K(-)  memiliki  kadar  glukosa  darah  puasa pada  rentang  normal.  Pada  kelompok  K(+),  P1  dan P2, tikus telah mengalami DM. Berdasarkan uji post hoc Duncan  yang  telah  dilakukan,  tidak  terdapat perbedaan GDP yang signifikan antara kelompok P1 dan P2 namun terdapat perbedaan pada kelompok K(- )  dan  K(+).  Berat  badan  pada  kelompok  K  (-) memiliki  perbedaan  yang  signifikan  dibanding kelompok K(+), P1 dan P2.
Tabel 1. Tabel Karakteristik Subjek 3 Hari Pasca Injeksi STZ dan NA Kelompok GDP (mg/dl) Rerata ± SB Berat Badan (g) Rerata ± SB K(-) 68,7 ± 2,41 a 193,8 ± 2,93 a K(+) 259,8 ± 3,09 b 186,2 ± 5,15 b P1 268,4 ± 6,19 b,c 185,8 ± 3,49 b P2 264,1 ± 5,24 c 184,5 ± 3,02 b p* 0,000 0,001 * : uji One Way ANOVA a,b,c) : notasi yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang bermakna pada uji Duncan

## Rerata Berat Badan Tikus
Berdasarkan  tabel  2,  diketahui  terdapat peningkatan  berat  badan  secara  signifikan  pada
kelompok K(-), P1 dan P2 sementara pada kelompok K(+)  mengalami  penurunan  yang  signifikan. Perubahan  berat  badan  yang  terbesar  dialami  oleh
kelompok  K(-)  yaitu  terjadi  peningkatan  sebesar 14,81%.  Setelah  dilakukan  uji  ANOVA,  terdapat perbedaan  BB  yang  signifikan  antar  kelompok pre dan post intervensi serta pada delta perubahan berat badan. Perbedaan yang signifikan saat pre intervensi
terdapat  pada  kelompok  K(-),  sedangkan  pada  saat post intervensi  dan  delta  perubahan  berat  badan terdapat  perbedaan  yang  signifikan  pada  kelompok K(-) dan K(+).
Tabel 2. Rerata Perubahan Berat Badan Sebelum dan Sesudah Pemberian Intervensi
Kelompok Sebelum Sesudah p ** Δ perubahan % Rerata ± SB Rerata ± SB Rerata ± SB K(-) 193,8±2,93 a 222,5±2,88 a 0,000 28,7±2,93 a 14,81 K(+) 186,2±5,15 b 171,5±4,59 b 0,000 -14,7±1,21 b 7,89 P1 185,8±3,49 b 202,8±2,79 c 0,000 17,0±0,89 c 9,15 P2 184,5±3,02 b 201,3±2,50 c 0,000 16,8±0,75 c 9,11 p * 0,001 0,000 0,000 * : uji one way ANOVA; ** : uji paired t test; a,b,c) : notasi yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang bermakna pada uji Duncan
Kadar hs CRP Setelah Intervensi Pakan Berdasarkan  tabel  3,  diketahui  adanya perbedaan  yang  signifikan  terhadap  kadar hs CRP post antar  kelompok  tikus.  Kelompok  K(+) merupakan  kelompok  dengan  kadar hs CRP  yang paling tinggi dibanding kelompok lainnya. Kelompok K(-)  merupakan  kelompok  dengan  kadar hs CRP terendah.  Berdasarkan  uji  Duncan  yang  telah dilakukan, diketahui bahwa terdapat perbedaan yang signifikan antar semua kelompok.
Tabel 3. Tabel Kadar hs CRP Setelah Intervensi Pakan
Kelompok
Kadar hs CRP (ng/ml) Rerata ± SB p* K(-) 13,7±0,49 a 0,000 K(+) 24,3±0,84 b P1 18,8±0,50 c P2 16,3±0,72 d
*: Uji one  way  ANOVA; a,b,c,d) notasi  yang  berbeda  pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang bermakna pada uji Duncan

## PEMBAHASAN
Penelitian ini menggunakan tikus wistar yang telah dikondisikan mengalami DM dengan injeksi 50 mg/kgBB  STZ  dan  110  mg/kgBB  NA.  Kelompok tikus K(+), P1 dan P2 telah mengalami DM. Hal ini terjadi karena adanya reaksi akibat STZ dan NA yang menyebabkan  kerusakan  oksidatif  di  dalam  tubuh. 28 Penggunaan  STZ  mampu  mempertahankan  keadaan hiperglikemia  pada  tikus  dalam  waktu  yang  lama. Reaksi STZ terhadap sel-β pankreas disertai dengan perubahan  karakteristik  pada  insulin  darah  dan konsentrasi glukosa yang meyebabkan hiperglikemia dan  menurunnya  level  insulin  dalam  darah.  STZ mempengaruhi  oksidasi  glukosa  dan  menurunkan biosintesis  dan  sekresi  insulin.  STZ  masuk  ke  sel-β pankreas  melalui  transporter  glukosa Glucose Transporter 2 (GLUT2) dan menyebabkan menurunnya  ekskresi  dari  GLUT2.  Hal  ini
mengakibatkan  menurunnya  sensitifitas  reseptor insulin perifer sehingga berdampak pada meningkatnya  resistensi  insulin  dan  meningkatkan kadar  glukosa  darah. 29 Tikus  juga  diinjeksi  dengan NA  yang  mampu  melindungi  sel 𝛽 -pankreas  secara parsial  untuk  mencegah  kerusakan  sel 𝛽 -pankreas secara keseluruhan. 30
Berdasarkan  tabel  1,  setelah  dilakukan  uji ANOVA  dan post  hoc Duncan  terdapat  perbedaan yang  signifikan  pada  kadar  GDP  subjek.  Kelompok tikus  K(-)  memiliki  kadar  GDP  yang  paling  rendah karena pada kelompok tersebut subjek tidak diinjeksi STZ  dan  NA.  Kelompok  tikus  K(+)  menunjukkan perbedaan  yang  signifikan  secara  statistik,  namun tidak  memiliki  perbedaan  yang  signifikan  secara klinis karena tikus telah mengalami DM.
Berdasarkan tabel 2, terdapat perbedaan berat badan yang signifikan pada kelompok K(-) sebelum intervensi. Hal ini terjadi karena kelompok tikus K(-) tidak  dikondisikan  DM  sedangkan  kelompok  tikus K(+), P1 dan P2 mengalami resistensi insulin dimana tubuh  tidak  mampu  menyerap  glukosa  yang  ada  di dalam  darah.  Pada  penderita  DM,  glukosa  yang masuk ke tubuh tidak dapat dibentuk dan digunakan menjadi  energi  sehingga  ketidaksediaan  glukosa dalam  sel  mengakibatkan  terjadinya  glikogenolisis secara berlebihan. Glikogenolisis adalah pemecahan glikogen  yang  terdapat  pada  hati  dan  otot  untuk digunakan  menjadi  energi  sedangkan  glukosa  yang diasup kelompok DM dan berada di darah kemudian akan  terbuang  sebagian  melalui  urin.  Terjadinya glikogenolisis  yang  terus  menerus  menyebabkan terjadi  pengurangan  jumlah  jaringan  otot.  Penderita akan kehilangan berat tubuh namun terdapat polifagia dimana  terjadi  perangsangan  pusat  nafsu  makan  di hipotalamus akibat kurangnya pemakaian glukosa di sel, jaringan dan hati. 31 Disamping itu asupan kalori tetap normal. 32
Selain  glikogenolisis,  ketidaksediaan  glukosa akan
mengakibatkan
glukoneogenesis.
Glukoneogenesis  adalah  pembentukan  glukosa  dari senyawa lain yaitu lemak dan protein. Glukoneogenesis  akan  menggunakan  lemak  terlebih dahulu  daripada  protein.  Lipid  terpecah  menjadi komponen  penyusunnya  yaitu  asam  lemak  dan gliserol.  Asam  lemak  dimobilisasi  dari  cadangan jaringan  adiposa  dan  dioksidasi  dalam  hati  menjadi asetil-KoA.  Selanjutnya  asetil  KoA  masuk  dalam siklus  Krebs  dan  kemudian  akan  dibentuk  menjadi energi.  Sementara  itu  gliserol  masuk  dalam  jalur glikolisis. 31
Proses glukoneogenesis yang berlebihan  pada tikus DM menyebabkan sel-sel hati akan meningkatkan  produksi  glukosa  dari  substrat  selain lipid,  yaitu  dengan  merombak  protein.  Asam  amino hasil  perombakan  ditransaminasi  sehingga  dapat menghasilkan  substrat  dalam  pembentukan  glukosa. Peristiwa berlangsung secara terus menerus dikarenakan insulin yang membatasi glukoneogenesis  sangat  sedikit  atau  tidak  ada  sama sekali.  Glukosa  yang  dihasilkan  kemudian  akan terbuang  melalui  urin  dan  mengakibatkan  terjadi pengurangan  jumlah  jaringan  otot  dan  jaringan adiposa  secara  signifikan.  Hal  tersebut  memicu diabetesi kehilangan berat badan. 31
Berdasarkan  tabel  2,  berat  badan  kelompok tikus  setelah  intervensi  memiliki  perbedaan  yang signifikan. Tabel menunjukkan kelompok tikus K(+) mengalami  penurunan  berat  badan  yang  signifikan. Hal ini masih terkait dengan keadaan glikogenolisis dan  glukoneogenesis  yang  terjadi  secara  terus menerus  karena  glukosa  yang  diasup  tidak  dapat digunakan menjadi energi di dalam tubuh.
Setelah  dilakukan  intervensi  selama  28  hari, terdapat  perbedaan hs CRP  yang  signifikan  antar kelompok. Berdasarkan tabel 3, tikus kelompok K(-) menunjukkan  kadar hs CRP  yang  paling  rendah dibandingkan kelompok lain. Hal ini disebabkan tikus dalam  keadaan  sehat  dan  tidak  dikondisikan  DM, sehingga  tidak  terjadi  hiperglikemia  yang  memicu proses inflamasi di dalam tubuh kelompok tikus K(-).
Data  kelompok  tikus  K(+)  yang  dikondisikan DM,  menunjukkan  kadar hs CRP  yang  paling  tinggi daripada  kelompok  yang  lain.  Hal  ini  menunjukkan pengkondisian DM pada tikus memicu inflamasi dan menyebabkan meningkatnya kadar hs CRP.
Hiperglikemia dapat meningkatkan akumulasi ROS dengan merusak mikrovaskular. Kadar glukosa yang  tinggi  juga  menyebabkan  glukosa  dapat berinteraksi  secara  nonenzimatis  dengan  gugus amino protein sehingga membentuk produk Advance Glycation  End (AGE).  Adanya  AGE  tersebut menyebabkan pelepasan berbagai sitokin yang dapat mempengaruhi proliferasi dan fungsi sel vaskular dan
meningkatkan  akumulasi  ROS.  Peningkatan  ROS menyebabkan  sel  menjadi  rusak  karena  ROS mengambil  elektron  yang  terdapat  pada  sel.  Hal tersebut menyebabkan sel akan mengalami kerusakan dan  mengeluarkan  elektron  bebas  yang  reaktif  dan memicu  diproduksinya  sitokin  pro  inflamasi  seperti Tumor  Necrosis  Factors (TNF-α  dan  TNF-β), interleukin (IL 6) dan interferon-γ serta menimbulkan peningkatan kadar hs CRP yang menandakan adanya inflamasi di dalam tubuh. 24,33
Kelompok  P1  dan  P2  memiliki  kadar hs CRP yang  lebih  rendah  daripada  kelompok  K(+). Rendahnya kadar hs CRP pada kelompok tikus P1 dan P2  dibandingkan  kelompok  tikus  tanpa  perlakuan, menandakan terjadinya pengurangan peradangan dan penurunan  keparahan  penyakit  pada  penderita diabetes melitus.
Pakan  rendah  Indeks  Glikemik  (IG)  yang diberikan  pada  kelompok  tikus  P1  dan  P2 mengakibatkan  kenaikan  glukosa  terjadi  sangat lambat dan akan dicerna serta diubah menjadi glukosa secara perlahan-lahan. Proses yang lambat menyebabkan puncak kadar glukosa darah juga akan rendah  dan  fluktuasi  peningkatan  kadar  gula  relatif pendek. 34
Selain itu, pakan yang mengandung tinggi serat tidak  larut  hemiselulosa 35 juga  dapat  mencegah hiperglikemia dimana serat akan berubah menjadi gel dan  mengikat  serta  memperlambat  penyerapan glukosa. 34,36 Lambatnya penyerapan glukosa menyebabkan produksi asam lemak bebas menurun, rangsangan sekresi hormon kontrainsulin (glukagon, steroid, hormon pertumbuhan dan katekolamin) juga menurun,  sehingga  mengurangi  hiperglikemia. 37 Serat  juga  akan  mencegah  autooksidasi  glukosa  di dalam  darah  sehingga  dapat  mengurangi  produksi radikal  bebas  di  dalam  tubuh. 8,36,38 Hal  ini mempengaruhi kadar hs CRP pada kelompok P1 dan P2,  dimana  pakan  tinggi  serat  dapat  membantu mengontrol glukosa darah dan membantu mengurangi  autooksidasi  sehingga  tidak  terjadi hiperglikemia  yang  memicu  radikal  bebas  atau inflamasi. 8,31
Selain  IG  yang  rendah  dan  kandungan  serat yang  tinggi,  pakan  kelompok  tikus  P1  dan  P2  juga mengandung  antosianin  yang  berasal  dari  pigmen beras merah dan beras hitam. Kadar antosianin dalam pakan  intervensi  memiliki  peran  penting  terhadap penurunan kadar hs CRP. Antosianin diketahui dapat menekan  proses  inflamasi  di  dalam  tubuh  sehingga kadar hs CRP  pun  dapat  mengalami  penurunan. 17,39 ROS yang telah terbentuk akibat hiperglikemia dapat merusak membran sel yang menyebabkan inflamasi. Radikal  bebas  atau  ROS  menyerang  membran  dan merusak  sel  sehingga  dibutuhkan  sistem  kekebalan untuk  melindunginya.  Antosianin  yang  dikonsumsi
dapat  berfungsi  sebagai  sistem  kekebalan  atau antioksidan dimana akan bekerja dengan melindungi lipid  dari  proses  peroksidasi  oleh  radikal  bebas. 33 Cyanidin  3-glukosida  yang  terdapat  di  dalam antosianin  dapat  menangkap  ROS  dan  memutus rantai  serta  menghambat  terjadinya  reaksi  stress oksidatif akibat akumulasi ROS yang tinggi. 39
Data  menunjukkan  bahwa  kadar hs CRP  pada kelompok tikus P2 lebih rendah dibanding kelompok tikus P1. Hal ini terkait kadar  antosianin yang lebih tinggi pada kelompok tikus P2 dengan homogenisasi nasi beras hitam 40 dimana semakin gelap warna bahan pangan, maka semakin tinggi kandungan antosianin. 13 Asupan antosianin yang semakin tinggi menyebabkan  tingginya  aktifitas  antioksidan  dalam perlindungan sel agar tidak mengalami inflamasi. 41 Hasil  pengukuran  menunjukkan  kadar hs CRP yang  tergolong  rendah  pada  semua  kelompok dibandingkan  dengan cut  off  point untuk  resiko penyakit kardiovaskuler. Hal ini disebabkan inflamasi  yang  dialami  oleh  kelompok  tikus  masih bersifat  akut,  sementara  penyakit  kardiovaskuler bersifat  kronis.  Penelitian  menunjukkan  bahwa dengan  nilai hs CRP  >14,8  ng/dl  sudah  terdapat inflamasi  di  dalam  tubuh  tikus, 42 sehingga  ketiga kelompok  perlakuan  yang  dikondisikan  DM  sudah mulai mengalami inflamasi.
Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  tentang pemberian  suplementasi  pigmen  beras  hitam  pada tikus dengan defisiensi apolipoprotein E menunjukkan  hasil  bahwa  pigmen  beras  hitam menghambat  pembentukan plaque atherosklerosis, mengurangi  stres  oksidatif  dan  inflamasi,  dimana antosianin  memiliki  sifat  antiatherosklerosis  yang mampu  menurunkan  lipid  di  dalam  darah  dan berfungsi  sebagai  antioksidan. 43 Berdasarkan  hal tersebut, dapat dikatakan bahwa hasil dari penelitian sejalan dengan teori yang ada.

## SIMPULAN
Pemberian  nasi  beras  merah  dan  nasi  beras hitam menunjukkan adanya perbedaan kadar hs CRP secara  signifikan.  Kadar hs CRP  paling  rendah  pada kelompok tikus dengan pemberian nasi beras hitam.

## SARAN
Perlu  dilakukan  edukasi  bahwa  beras  hitam lebih  efektif  dalam  menurunkan  kadar hs CRP  pada diabetesi  dibandingkan  beras  merah  yang  dapat dikonsumsi dengan cara komplementasi beras hitam dengan  jenis  beras  lain,  serta  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  mengenai  asupan  antosianin pada  manusia  dari  berbagai  jenis  pangan  yang dikonsumsi  untuk  menekan  kejadian  inflamasi  pada diabetesi.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih peneliti sampaikan kepada pembimbing  dan  penguji  atas  bimbingan,  saran  dan evaluasinya  yang  membangun  dalam  penyusunan serta penulisan  karya  ilmiah  ini, serta  seluruh pihak yang telah berpartisipasi sehingga penelitian ini dapat terselesaikan.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   WHO. Diabetes Mellitus [Internet]. [cited 2017
Jun 13].
2.   Darmono. Pola Hidup Sehat Penderita Diabetes Melitus.  In:  Darmono,  Suhartono  T,  Temayun TGD,  Padmomartono  FS,  editors.  Diabetes Melitus Ditinjau Dari Berbagai Penyakit Dalam. Semarang: Badan Penerbit Universitas Diponegoro; 2007. p. 15–30.
3.   Franz  M.  Endocrine  Disease.  In:  Medical Nutrition  and  Disease:  a  case-based  approach. 5th ed. West Sussex: John Wiley & Sons; 2014. p. 332–74.
4.   Prasad KN. Micronutrients for the Prevention of Diabetes  and  Improvement  of  the  Standard Therapy.  In:  Micronutrients  in  Health  and Disease. USA: CRC Press; 2011. p. 79.
5.   Webb GP. Dietary Supplements and Functional Foods. United Kingdom: Blackwell Publishing; 2005. p. 107-119.
6.   Herminingsih  S,  Uddin  I,  Tanuwidjojo  S. Patogenesis  Penyakit  Kardiovaskuler  Pada Diabetes  Melitus.  In:  Darmono,  Suhartono  T, Temayun  TGD,  Padmomartono  FS,  editors. Diabetes  Melitus  Ditinjau  Dari  Berbagai Penyakit  Dalam.  Semarang:  Badan  Penerbit Universitas Diponegoro; 2007. p. 245–56.
7.   Yerizel  E,  Hendra  P,  Edward  Z,  Bachtiar  H. Pengaruh Hiperglikemia Terhadap hsCRP Pada Penderita  Diabetes  Melitus  Tipe 2.  Pros  Semin Ilm PBBMI. 2015;1–29.
8.   Putri NE, Zakaria FR, Prangdimurti E. Pengaruh Intervensi  Tahu  Kedelai  Hitam  Kaya  Serat Terhadap  Glukosa  Darah  Dan  Inflamasi Responden  Diabetes  Melitus  Tipe  2.  J  Agric Technol. 2016;1:87–90.
9.   Badan  Pusat  Statistik.  Sensus  Pertanian  dan Pertambangan-Produksi  Padi  Menurut  Provinsi (ton). 2015. p.1-10
10.   Aryana I. Kandungan dan hasil antosianin galur padi beras merah pada tiga lingkungan tumbuh berbeda. Agroteksos. 2007;17:167–62.
11.   Suliartini  N,  Sadimantara  G,  Muhidin  WT. Pengujian  Kadar  Antosianin  Padi  Gogo  Beras Merah  Hasil  Koleksi  Plasma  Nutfah  Sulawesi Tenggara. Crop Agro. 2011;4 (2):43–8.
12.   Suhartatik  N,  Karyantina  M,  Mustofa  A, Cahyanto MN, Raharjo S, Rahayu ES. Stabilitas
Ekstrak  Antosianin  Beras  Ketan  (Oryza  sativa var. glutinosa) Hitam Selama Proses Pemanasan dan  Penyimpanan.  Agritech.  2013;33  (4):384– 90.
13.   Maulida  R,  Guntarti  A.  Pengaruh  Ukuran Partikel Beras Hitam (Oryza sativa L.) terhadap Rendemen  Ekstrak  dan  Kandungan  Total Antosianin. Pharmaciana. 2015;5 (1):9–16.
14.   Indrasari  SD,  Wibowo  P,  Purwani  E.  Evaluasi Mutu  Fisik,  Mutu  Giling,  dan  Kandungan Antosianin  Kultivar  Beras  Merah.  J  Penelit Pertan Tanam Pangan. 2010;29 (1). 1-15
15.   Suhartatik N, Cahyanto MN, Raharjo S, Rahayu
ES.  Aktivitas  Antioksidan  Beras  Ketan  Hitam Selama  Fermentasi.  J  Teknol  dan  Ind  Pangan.
2013;24 (1):115–9. 16.   Craig
winston J. Health-Promoting Phytochemicals: Beyond the Traditional
Nutrients.  In:  Vegetarian  Nutrition.  United States of America: CRC Press; 2001. p. 340.
17.   Kushwaha  UK.  Black  Rice  Research,  History and  Development.  Nepal:  Springer;  2016.  p. 160-161.
18.   Fernando B. Rice as a Source of Fibre. Rice Res. 2013;1(2):1–4.
19.   Corwin  EJ.  Pankreas  dan Diabetes Melitus.  In: Buku Saku Patofisiologi. 3th ed. Jakarta: EGC; 2009. p. 633–42.
20.   Bantle J, Wylie-Rosett J, Albright A, Apovian C, Clark N, Franz M et all. Nutrition recommendations and interventions for diabetes: A position statement of the American Diabetes Association. Am Diabetes Assoc Diabetes Care. 2008;31.
21.   Queiroz K, Silva I, Alfenas R. Influence of the glycemic index and glycemic load of the diet in the  glycemic  control  of  diabetic  children  and teenagers. Nutr Hosp. 2012;27(2):510–5.
22.   Atkinson FF, Foster-Powell K, Brand-Miller JC.
Glycemic Load Values. Diabetes Care. 2008;31:2281–3.
23.   Buyken A, Toeller M, Heitkamp G, Karamanos B, Rottiers R, Muggeo M, et al. Glycemic index in  the  diet  of  European  outpatients  with  type 1 diabetes:  relations  to  glycated  hemoglobin  and serum lipids. Am J Clin Nutr. 2001;73(3):574– 81.
24.   Levine  TB,  Levine  AB.  Inflammation.  In: Metabolic Syndrome and Cardiovascular
Disease.  Second  Edi.  USA:  Wiley  Blackwell; 2013. p. 198.
25.   Zhu L, Zou Y, Wang Y, Luo X, Sun K, Wang H, et  al.  Prognostic  Signiﬁcance  of  Plasma  High- Sensitivity  C-Reactive  Protein in  Patients  With Hypertrophic  Cardiomyopathy.  J  Am  Hear Assoc. 2017;6:2–7.
26.   Menteri Kesehatan Republik Indonesia. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 75 Tahun 2013 tentang Angka Kecukupan  Gizi  yang  Dianjurkan  bagi  Bangsa Indonesia. Jakarta; 2013. p. 1-10.
27.   Li D, Zhang Y, Liu Y, Sun R, Xia M. Purified
Anthocyanin Supplementation Reduces
Dyslipidemia,  Enhances  Antioxidant  Capacity and  Prevents  Insulin  Resistance  in  Diabetic Patients. J Nutr Dis. 2015;145:742–8.
28.   Chikezie  P,  Ojiako  O,  Ogbuji  A.  Oxidative Stress  in  Diabetes  Mellitus.  Integr  Obes Diabetes. 2015;1(3):71–9.
29.   Firdaus,  Rimbawan,  Marliyati  SA,  Roosita  K. Model Tikus Diabetes Yang Diinduksi Streptozotocin  Suksrosa  Untuk  Pendekatan Penelitian  Diabetes  Melitus  Gestasional.  J MKMI. 2016;12(1):29–34.
30.   Ghasemi  A,  Khalifi  S  JS.  Streptozotocin- nicotinamide-induced  rat  model  of  type  2 diabetes (review). Acta Physiol Hung. 2014;101(4):408–20.
31.   Granner  DK.  Hormon  Pankreas  dan  Traktus Gastrointestinal.  In:  Murray  RK,  Granner  DK, Rodwell VW, editors. Biokimia Harper. 25th Ed. Jakarta: EGC; 2003. p. 582–93.
32.   Franz  MJ.  Medical  Nutrition  Therapy  for Diabetes  Mellitus  and  Hypoglycemia  of Nondiabetic  Origin.  In:  Mahan  LK,  Escott- Stump S RJ, editor. Krause’s Food and Nutrition Care Process. 13th Ed. Elsevier Saunders; 2012. p. 792–834.
33.   CLarkson  P, Thompson  H.  Antioxidants:  What Role They Play in Physical Activity and Health? Am J Clin Nutr. 2000;72:637S–46S.
34.   Istiqomah  A,  Rustanti  N.  Indeks  Glikemik, Beban  Glikemik,  Kadar  Protein,  Serat  dan Tingkat  Kesukaan  Kue  Kering  Tepung  Garut Dengan  Substitusi  Tepung  Kacang  Merah.  J Nutr Coll. 2015;4(2):620–7.
35.   Ettinger  S.  Macronutrients:  Carbohidrates, Proteins  and  Lipids.  In:  Mahan  LK,  Escott- Stump S, editors. Krause’s Food, Nutrition and Diet  Therapy.  11th  Ed.  United  States  of America: Elsevier Saunders; 2004. p. 37–73.
36.   Ma  Y,  Griffith  JA,  Chasan-Taber  L,  Olendzki BC, Jackson E, Stanek-III EJ, et al. Association between  Dietary  Fiber  and  Serum  C-Reactive Protein. J Clin Nutr. 2006;83(4):760–6.
37.   Darmono,  Suhartono  T,  Pemayun  TGD  et  all. Diabetes Melitus Ditinjau Dari Berbagai Aspek Penyakit  Dalam.  Semarang:  Badan  Penerbit Universitas Diponegoro; 2007. p. 15-16.
38.   Hernawan E, Meylani V. Analisis Karakteristik Fisikokimia Beras Putih, Beras Merah dan Beras Hitam. J Kesehat Bakti Tunas Husada. 2016;15
(1).
39.   Lee  Y-M,  Yoon  Y,  Haelim-Yoon,  Park  H-M, Song  S,  Yeum  K-J.  Dietary  Anthocyanins Against  Obesity  and  Inflammation.  Nutrients. 2017;9(10):1–15.
40.   Basito.  Kajian  Substitusi  Bekatul  Beras  Merah dan  Beras  Hitam  Terhadap  Sifat  Sensoris  dan Fisikokimia  Pada  Pembuatan  Roti  Tawar.  J Teknol Has Pertan. 2012;5(2):24–31.
41.   Khoo  HE,  Azlan  A,  Tang  ST,  Lim  SM. Anthocyanidins  and  Anthocyanins:  Colored Pigments  as  Food,  Pharmaceutical  Ingredients and  The  Potential  Health  Benefits.  Food  Nutr Res. 2017;61(1):1–21.
42.   Shrestha  K,  Motoki  H,  W.Troughton  R, G.Borowski A, L.Klein A, Tang W. W. Elevated Baseline  High-Sensitive  C-Reactive  Protein Predicts Progressive Decline in Left Ventricular Myocardial  Mechanics  and  Impaired  Filling Rather  Than  Structural  Remodeling  in  Chronic Systolic  Heart  Failure.  Cardiovasc  Psycology. 2013;19(8):S7.
43.   Xia M, Ling WH, Ma J, Kitts DD, Zawistorski J. Supplementation  of  Diets  with  the  Black  Rice Pigment  Fraction  Attenuates  Atherosclerotic Plaque Formation in Apolipoprotein E Deficient Mice. Am Soc Nutr Sci. 2003;133 (3):744–51.