Published by: IOCSCIENCE

## Fruitset Sains : Jurnal Pertanian Agroteknologi
Journal homepage: www.iocscience.org/ejournal/index.php/Fruitset
PENGARUH LAMA PENGERINGAN DAN LAMA PERENDAMAN DALAM KRIOPROTEKTAN TERHADAP VIABILITAS BENIH ROSELLA (Hibiscus Sabdariffa L.) SECARA KRIOPRESERVASI

## Iqbal Koyoto
Program Studi Agroteknologi Fakultas Pertanian, Universitas Sumatera Utara, Medan 2016, Indonesia
iqbalkoyoto@gmail.com

## Abstract
Cryopreservation  technique  is  a  potential  technique  for  long-term  storage,  which  stores the plant into liquid nitrogen with a temperature -196ºC. Drying is a process for reducing the  water  content  of  seeds  that  can  improve  the  viability  of  the  seeds.  This  research  was conducted  at  the  Laboratory  of  Seed  Technology,  Agriculture  Faculty,  North  Sumatera University,  Medan,  from  March  to  April  2016,  using  a  randomized  block  design  with  2 factors.  The first factor is  length ofdrying with 5 levels: 0 hours; 24 hours; 48 hours; 72 hours;  96  hours  and  the  second  factor  is  the  length  of  soaking  in  cryoprotectants  with  5 levels:  0  minutes;  30  minutes;  60  minutes;  90  minutes;  120  minutes.  The  observation parameter is the moisture content (%), the rate of germination (days), the normal sprouts (%),  the  abnormal  sprouts  (%),  the  seed  dies  (%),  the  vigor  index,  the  fresh  weight  of sprouts  (g),  the  dry  weight  of  sprouts  (g).  The  Results  showed  drying  duration  treatment significantly  affect  parameters  of  water  content  of  seeds  (%),  the  rate  of  germination (days),  the  normal  sprouts  (%),  the  abnormal  sprouts  (%),  the  seed  dies  (%),the  vigor index,  the  fresh  weight  of  sprouts  (g)  and  the  dry  weight  of  sprouts  (g).  The  duration  of soaking  treatment  in  cryoprotectants  significantly  affected  the  abnormal  sprouts observation  parameters  (%),  the  fresh  weight  of  sprouts  (g)  and  and  the  dry  weight  of sprouts  (g).  The  interaction  between  drying  time  and  duration  of  soaking  in  the measurement has the effect on decreasing water content of seeds up to 11,81%, accelerate the germination rate to 6,44 days deacrease abnormal sprouts 6,00%.

## Abstrak
Teknik  kriopreservasi  merupakan  teknik  yang  potensial  untuk  penyimpanan  jangka panjang,  yaitu  menyimpan  tanaman  ke  dalam  nitrogen  cair  yang  bersuhu  -196ºC. Pengeringan  merupakan  proses  penurunan  kadar  air  benih  yang  dapat  meningkatkan viabilitas  benih.  Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  Teknologi  Benih  Fakultas Pertanian  Universitas  Sumatera  Utara  Medan,dari  bulan  Maret  sampai  April  2016, menggunakan rancangan acak kelompok dengan 2 faktor perlakuan. Faktor pertama adalah lama pengeringan dengan 5 taraf  yaitu 0 jam; 24 jam; 48 jam; 72 jam; 96 jam dan faktor kedua  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  dengan  5  taraf  yaitu  0  menit;  30  menit;  60 menit;  90  menit;  120  menit.  Parameter  pengamatan  adalah  kadar  air  (%),  laju perkecambahan  (hari),kecambah  normal  (%),  kecambah  abnormal  (%),  benih  mati  (%), indeks  vigor,  bobot  basah  kecambah  (g),  bobot  kering  kecambah  (g).  Hasil  penelitian menunjukkan perlakuan lama pengeringan berpengaruh nyata terhadap parameter air benih
66
(%),  laju  perkecambahan  (hari),  kecambah  normal  (%),  kecambah  abnormal  (%),  benih mati  (%),  indeks  vigor,  bobot  segar  kecambah  (g)  dan  bobot  kering  kecambah  (g). Perlakuan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  berpengaruh  nyata  terhadap  parameter pengamatan  kecambah  abnormal  (%),  bobot  segar  kecambah  (g)  dan  bobot  kering kecambah  (g).  Interaksi  lama  pengeringan  dan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan berpengaruh nyata terhadap penurunan kadar air benih  hingga 11,81%, mempercepat  laju perkecambahan menjadi 6,44 hari dan menurunkan kecambah abnormal 6,00 %.
Kata kunci : lama pengeringan, lama perendaman, kriopreservasi, benih rosella

## 1. Pendahuluan
Rosella  (Hibiscus  sabdariffa  L.)  adalah  tanaman  yang  sudah  banyak  dikenal  dan dimanfaatkan  di  berbagai  negara  termasuk  di  Indonesia.  Bagian  yang  dimanfaaatkan  dari tanaman  ini  adalah  bunganya  yang  berwarna  merah.  Pemanfaatan  bunga  rosella  sebagai bahan pangan sangat beragam, antara lain sebagai teh herbal, selai, jus, penyedap rasa dan lain-lain.  Berbagai  kandungan  anti  oksidan  yang  terdapat  dalam  kelopak  rosella menjadikan  teh  yang  berrasal  dari  rosella  memiliki  banyak  manfaat.  Melalui  berbagai penelitian  telah  menunjukkan  bahwa  bunga  rosella  mampu  menurunkan  tekanan  darah, kreatinin, dan asam urat sehingga bunga rosella ini mempunyai nilai ekonomis yang tinggi (Marwati, 2010).
Produksi  suatu  tanaman  sangat  ditentukan  oleh  benih  yang  bermutu  tinggi,benih  yang bermutu  tinggi  dihasilkan dari benih  yang telah  masak fisiologis  pada saat  benih  tersebut dipanen.  Untuk  mempertahankan  keberadaan  benih  yang  dalam  kondisi  masak  fisiologis agar tetap selalu ada, perlu dilakukan penyimpanan agar benih tersebut dapat ditanam pada musim  berikutnya, selain itu peyimpanan juga dimaksudkan untuk  pelestarian suatu  jenis tanaman  agar  bahan  tanaman  dari  jenis  tanamanan  tersebut  tetap  selalu  ada  dan  tersedia. Penyimpanan  benih  dapat  dilakukan dalam waktu beberapa hari, setahun, beberapa tahun bahkan  bisa  dilakukan  sampai  berpuluh  tahun  apabila  penyimpanan  tersebut  ditujukan untuk pelestarian jenis suatu tanaman (pelestarian plasma nutfah).
Pelestarian plasma nutfah dapat dilakukan secara in situ (di dalam habitat) dan ex situ (di luar habitat) yang dapat berupa kebun raya, kebun koleksi, ruang atau penyimpanan benih, dan pelestarian secara in vitro (Wattimena et al., 1992). Plasma nutfah tanaman merupakan modal  dasar  dalam  perakitan  varietas  unggul.  Oleh  karena  itu,  plasma  nutfah  perlu disimpan dan dilestarikan (Roostika dan Mariska, 2003).
Teknik  kriopreservasi  merupakan  teknik  yang  potensial  untuk  penyimpanan  jangka panjang,  yaitu  menyimpan  tanaman  ke  dalam  nitrogen  cair  yang  bersuhu  -196ºC. Penyimpanan  dengan  cara  tersebut  tidak  memerlukan  tindakan  subkultur  yang  berulang- ulang  sehingga  lebih  efisien  dari  segi  biaya,  waktu,  ruang  penyimpanan,  dan  tenaga. Keberhasilan  teknik  kriopreservasi  tidak  hanya  ditunjukkan  dengan  kemampuan  hidup regenerasi  bahan  tanaman  pascakriopreservasi,  namun  juga  ditentukan  oleh  tingkat stabilitas genetiknya (Roostika dan Mariska, 2003).
Pada  suhu  tersebut,  bahan  tanaman  hampir  sama  sekali  tidak  mengalami  proses metabolisme sehingga masa penyimpanan menjadi tidak terbatas dapat mencapai 20 tahun. Penambahan  krioprotektan  dapat  memelihara  keutuhan  membran  dan  meningkatkan potensial osmotik media sehingga cairan di dalam sel mengalir keluar dan terjadi dehidrasi. (Hardaningsih et al., 2012).
Hasil  penelitian  Harahap  et  al  (2015)  penggunaan  kriprotektan  PVS1,  PVS2,  PVS3,  dan PVS4 dalam penyimpanan benih rosella di dalam nitrogen cair menunjukkan bahwa jenis krioprotektan  yang  terbaik  diperoleh  dari  PVS4  dengan  jumlah  kecambah  normal  dan indeks  vigor  tertinggi.  Benih  dalam  kondisi  masak  fisiologis  memiliki  kadar  air  yang tinggi,  apabila  langsung  disimpan  di  dalam  nitrogen  cair  maka  benih  tersebut  akan  rusak dan  dapat  menyebabkan  kematian  akibat  suhu  yang  sangat  dingin.  Benih  yang  akan  di simpan  di  dalam  nitrogen  cair  harus  mencapai  kadar  air  yang  optimal  serta  perlu  diberi kriprotektan  agar  tidak  terjadi  kerusakan.  Penurunan  kadar  air  dapat  dilakukan  dengan berbagai  cara  salah  satunya  adalah  dengan  pengeringan.  Belum  adanya  informasi  yang rinci  tentang  lama  pengeringan  yang  tepat  untuk  mendapatkan  kadar  air  yang  optimal dalam  penyimpanan  benih  rosella  di  dalam  nitrogen  cair,  mendorong  penulis  untuk mengetahui  pengaruh  lama  pengeringan  dan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan terhadap viablitas benih rosella (Hibiscus sabdariffa L.) secara krioprerservasi.

## 2. Bahan  dan Metode
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium  Teknologi  Benih  Fakultas  Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan dilaksanakan bulan Maret-April 2016.
Bahan  yang digunakan dalam penelitian ini meliputi benih  rosella, nitrogen cair, gliserol, etilen  glikol,  sukrosa,  pasir  steril,  aquades  dan  bahan  yang  mendukung  pelaksanaan penelitian  ini.  Alat  yang  digunakan  meliputi  termos  air  panas  volume  2  liter,  bak kecambah, cawan petri,  meteran, cawan almunium, botol plastik (diameter 3 cm, tinggi 2 cm), solder, spidol permanen, wadah plastik, timbangan analitik, beaker glass, gelas ukur, batang pengaduk, mortar dan penumbuk, pinset, oven, handsprayer, gunting, label, ember, pisau, alat tulis dan kalkulator serta alat yang mendukung pelaksanaan penelitian ini.
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) dengan 2 faktor. ata hasil penelitian pada perlakuan yang berpengaruh nyata dilanjutkan dengan uji beda rataan yaitu uji Jarak Berganda Duncan dengan taraf 5 % (Sastrosupadi, 2000).

## 3. Hasil dan Pembahasan

## Hasil
Berdasarkan hasil sidik ragam, diketahui bahwa perlakuan lama pengeringan berpengaruh nyata  terhadap  penurunan  kadar  air  benih  (%),    mempercepat  laju  perkecambahan  (hari), meningkatkan  kecambah  normal  (%),  menurunkan  kecambah  abnormal  (%),  benih  mati (%),  meningkatkan  indeks  vigor,  bobot  segar  kecambah  (g)  dan  bobot  kering  kecambah
68
(g).  Perlakuan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  mampu  menurunkan  jumlah kecambah  abnormal  (%)  dan  meningkatkan  bobot  segar  kecambah  (g)  serta  bobot  kering kecambah  (g).  Interaksi  lama  pengeringan  dan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan berpengaruh  nyata  terhadap  penurunan  kadar  air  benih  (%),  mempercepat  laju perkecambahan (hari) dan menurunkan kecambah abnormal (%).

## Kadar Air Benih
Dari hasil pengamatan diperoleh kadar air benih sebelum diberi perlakuan adalah 41,76%. Data hasil pengamatan dan sidik ragam kadar air benih dapat dilihat pada Lampiran 4 dan 5. Hasil sidik ragam menunjukkan bahwa perlakuan lama pengeringan berpengaruh nyata dalam menurunkan kadar air benih, tetapi perlakuan lama perendaman dalam krioprotektan tidak berpengaruh dalam menurunkan kadar air benih. Interaksi lama pengeringan dengan lama  perendaman  dalam  krioprotektan  berpengaruh  nyata  dalam  menurunkan  kadar  air benih.
Tabel 1 . Kadar air benih pada perlakuan lama pengeringan dengan lama perendaman dalam krioprotektan
Lama Perendaman Lama Pengeringan Rataan P0 P1 P2 P3 P4 (0 jam) (24 jam) (48 jam) (72 jam) (96 jam) …………...%............. L0 (0 menit) 41,76 a 19,73 efgh 15,51 hi 13,88 hi 10,54 i 20,29 L1 (30 menit) 29,95 bcd 22,84 efg 17,46 fghi 14,74 hi 15,95 ghi 20,19 L2 (60 menit) 30,82 bc 25,98 cde 19,59 efgh 14,37 hi 17,87 fgh 21,73 L3 (90 menit) 30,01 bcd 30,42 bc 16,04 ghi 17,20 f-i 16,43 ghi 22,02 L4 (120 menit) 35,03 b 23,79 def 19,98 efgh 16,33 ghi 13,61 hi 21,75 Rataan 33,51 24,55 17,72 15,3 14,88 21,19
Keterangan : Angka-angka yang diikuti notasi yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf α = 5%
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  kombinasi  lama  pengeringan  dengan  pemberian krioprotektan  dapat  menurunkan  kadar  air  benih  hanya  pada  pengeringan  0  jam  (tanpa pengeringan)  sedangkan  pada  lama  pengeringan  24,  48,  72  dan  96  jam  pemberian krioprotektan dapat menaikkan kadar air benih. Kadar air tertinggi terdapat pada kombinasi perlakuan  P0L0  sebesar  41,76  %  yang  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  lainnya.  Rataan kadar air terendah terdapat pada kombinasi perlakuan P4L0 sebesar 10,54 %.

## Laju Perkecambahan
Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  bahwa  lama  pengeringan  berpengaruh  nyata  terhadap kecepatan  laju  perkecambahan,  tetapi  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  kecepatan  laju  perkecambahan.  Interaksi  lama  pengeringan dengan lama perendaman dalam krioprotektan berpengaruh nyata terhadap kecepatan laju perkecambahan.
Tabel 2 . Laju perkecambahan pada perlakuan lama pengeringan dan lama perendaman dalam krioprotektan
Lama Perendaman Lama Pengeringan Rataan P0 (0 Jam) P1 (24 Jam) P2 (48 Jam) P3 (72 Jam) P4 (96 Jam) …....Hari...... L0 (0 menit) 0,00 d 12,00 a 6,95 abc 6,87 abc 7,82 abc 6,73 L1 (30 menit) 0,00 d 4,33 c 8,13 abc 7,09 abc 7,49 abc 5,41 L2 (60 menit) 0,00 d 1,33 d 7,29 abc 7,07 abc 7,25 abc 4,59 L3 (90 menit) 0,00 d 8,00 abc 7,86 abc 8,18 abc 7,57 abc 6,32 L4 (120 menit) 0,00 d 9,17 ab 7,39 abc 6,44 abc 7,48 abc 6,09 Rataan 0 6,97 7,52 7,13 7,52 5,83
Keterangan : Angka-angka yang diikuti notasi yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf α = 5%.
Tabel 2 menunjukkan bahwa pemberian krioprotektan pada pengeringan benih 48, 72, dan 96 jam menghasilkan laju yang berbeda tidak nyata, sedangkan pada pengeringan 24 jam menghasilkam  laju  perkecambahan  yang  berbeda  dengan  beberapa  lama  waktu perendaman  krioprotektan,  laju  perkecambahan  tercepat  pada  kombinasi  perlakuan  P1L2 sebesar 1,33 hari. Rataan laju perkecambahan terlama terdapat  pada kombinasi  perlakuan P1L0 sebesar 12 hari.

## Kecambah Normal
Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  bahwa  perlakuan  lama  pengeringan  berpengaruh  nyata meningkatkan  kecambah  normal,  tetapi  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  dan interaksi  lama  pengeringan  dengan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  tidak berpengaruh nyata meningkatkankecambah normal.
Tabel 3 . Kecambah normal pada perlakuan lama pengeringan dan lama  perendaman dalam krioprotektan
Lama Perendaman Lama Pengeringan Rataan P0 (0 Jam) P1 (24 Jam) P2 (48 Jam) P3 (72 Jam) P4 (96 Jam) …………..%........... L0 (0 menit) 0 0 10,67 24,67 33,33 13,73 L1 (30 menit) 0 0,67 18,67 32,67 42,67 18,93 L2 (60 menit) 0 0 20 33,33 37,33 18,13 L3 (90 menit) 0 0,67 14 34 36 16,93 L4 (120 menit) 0 2 18,67 39,33 31,33 18,27 Rataan 0,00 c 0,67 c 16,40 b 32,80 a 36,13 a 17,2
Keterangan : Angka-angka yang diikuti notasi yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf α = 5%.
Tabel  3  menunjukkan  bahwa  kecambah  normal  tertinggi  lama  pengeringan  terdapat  pada perlakuan  P4  sebesar  36,13  %  yang  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P2  (16,40%),  P1 (0,67%)  dan  P0  (0,00%)  namun  berbeda  tidak  nyata  dengan  perlakuan  P3  (32,80%). Rataan  kecambah  normal  terendah  terdapat  pada  perlakuan  P0  sebesar  0,00  %  (tidak  ada benih yang berkecambah).
70

## Kecambah Abnormal
asil  sidik  ragam  menunjukkan  bahwa  perlakuan  lama  pengeringan,  lama  perendaman dalam  krioprotektan  serta  interaksi  antara  keduanya  berpengaruh  nyata  terhadap munculnya jumlah kecambah abnormal.
Tabel 4. Kecambah abnormal pada perlakuan lama pengeringan dan lama perendaman dalam krioprotektan
Lama Perendaman Lama Pengeringan Rataan P0 (0 Jam) P1 (24 Jam) P2 (48 Jam) P3 (72 Jam) P4 (96 Jam) ……....%............ L0 (0 menit) 0,00 g 0,67 g 12,00 cdef 27,33 a 28,67 a 13,73 L1 (30 menit) 0,00 g 0,67 g 12,00 cdef 15,33 bcd 10,67 def 7,73 L2 (60 menit) 0,00 g 0,67 g 8,00 def 21,33 abc 11,33 cdef 8,27 L3 (90 menit) 0,00 g 0,67 g 7,33 def 11,33 cdef 22,00 ab 8,27 L4 (120 menit) 0,00 g 0,67 g 4,67 fg 13,33 bcde 6,00 ef 4,93 Rataan 0 0,67 8,8 17,73 15,73 8,59
Keterangan : Angka-angka yang diikuti notasi yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf α = 5%.
Tabel  4  menunjukkan  kecambah  abnormal  tertinggi  terdapat  pada  kombinasi  perlakuan P4L0 sebesar 28,67 % yang berbeda tidak nyata dengan perlakuan P4L3, P3L0 dan P3L2 namun  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  lainnya.  Rataan  kecambah  abnormal  terendah terdapat pada kombinasi perlakuan P1L0, P1L1, P1L2, P1L3, dan P1L4 sebesar 0,00 %.

## Benih Mati
Hasil  sidik  ragam  menunujukkan  bahwa  perlakuan  lama  perendaman  berpengaruh  nyata menurunkan  jumlah  benih  mati,  tetapi  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  serta interaksi  lama  pengeringan  dengan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  tidak berpengaruh nyata menurunkan jumlahbenih mati.
Tabel 5. Benih mati pada perlakuan lama pengeringan dan lama perendaman dalam krioprotektan
Lama Perendaman Lama Pengeringan Rataan P0 (0 Jam) P1 (24 Jam) P2 (48 Jam) P3 (72 Jam) P4 (96 Jam) ……...%......... L0 (0 menit) 100 99,33 77,33 48 38 72,53 L1 (30 menit) 100 98,67 69,33 52 46,67 73,33 L2 (60 menit) 100 99,33 72 45,33 51,33 73,6 L3 (90 menit) 100 98,67 78,67 54,67 42 74,8 L4 (120 menit) 100 97,33 76,67 47,33 62,67 76,8 Rataan 100,00 a 98,67 a 74,80 b 49,47 c 48,13 c 74,21
Keterangan : Angka-angka yang diikuti notasi yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf α = 5%.
abel  5  menunjukkan  benih  mati  tertinggi  lama  pengeringan  terdapat  pada  perlakuan  P0 sebesar  100,00  %  yang  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P2,  P3  dan  P4  namun  berbeda tidak nyata dengan perlakuan P1. Rataan benih  mati terendah terdapat pada perlakuan P4 sebesar 48,13 %.

## Indeks Vigor
Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  bahwa  perlakuan  lama  pengeringan  berpengaruh  nyata meningkatkan  indeks  vigor,  tetapi  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  dan  interaksi lama pengeringan dengan lama perendaman dalam  krioprotektan  tidak berpengaruh nyata terhadap peningkatan indeks vigor.
Tabel 6. Indeks vigor pada lama pengeringan dan lama perendaman dalam krioprotektan
Lama Perendaman Lama Pengeringan P0 (0 Jam) P1 (24 Jam) P2 (48 Jam) P3 (72 Jam) P4 (96 Jam)  Rataan L0 (0 menit) 0 0,08 1,78 4,59 4,73 2,24 L1 (30 menit) 0 0,1 2,2 4,5 4,59 2,28 L2 (60 menit) 0 0,08 2,58 4,87 4,27 2,36 L3 (90 menit) 0 0,07 1,64 3,46 4,92 2,02 L4 (120 menit) 0 0,24 1,85 5,35 2,99 2,09 Rataan 0,00 c 0,12 c 2,01 b 4,55 a 4,30 a 2,2
Keterangan : Angka-angka yang diikuti notasi yang sama menunjukkan berbeda tidak nyata menurut Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf α = 5%
Tabel 6 menunjukkan indeks vigor tertinggi lama pengeringan terdapat pada perlakuan P3 sebesar  4,55  yang  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P0,  P1  dan  P2  namun  berbeda  tidak nyata  dengan  perlakuan  P4.  Rataan  indeks  vigor  terendahterdapat  pada  perlakuan  P0 sebesar 0,00 .

## Pembahasan
Pengaruh lama pengeringan terhadap viabilitas benih rosella (Hibiscus sabdariffa L.) secara kriopreservasi
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  perlakuan  lama  pengeringan  berpengaruh  nyata menurunkan kadar  air benih  (%), mempercepat  laju  perkecambahan (hari), meningkatkan indeks vigor dan kecambah normal (%),menurunkan kecambah abnormal (%) dan jumlah benih mati (%), dan meningkatkan bobot segar kecambah (g) serta bobot kering kecambah (g). Dari  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  perlakuan  lama  pengeringan  berpengaruh nyata terhadap penurunan kadar air. Hal ini dapat dilihat dari persentase kadar air tertinggi (33,51%)  pada  perlakuan  tanpa  pengeringan  yangberbeda  nyata  dengan  perlakuan perlakuan  P1  (24,55%),  P2  (17,72%),  P3(15,30%),  dan  P4  (14,88%),  sedangkan  rataan terendah (14,88%) pada pengeringan 96 jam (Tabel 1). Kadar air benih sangat berpengaruh terhadap kehidupan benih, penyimpanan benih dan proses perkecambahan benih.
72
Pengaruh  lama  perendaman  dalam  krioprotektan  terhadap  viabilitas  benih  rosella ( Hibiscus sabdariffa L .) secara kriopreservasi
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  perlakuan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan berpengaruh  nyata  terhadap  munculnya  kecambah  abnormal  (%),  bobot  segar  kecambah (g)  dan  bobot  kering  kecambah  (g). Lama  perendaman  benih  di  dalam  krioprotektan berpengaruh  nyata  terhadap  jumlah  kecambah  abnormal.  Dimana  kecambah  abnormal tertinggi  (13,73  %  )  terdapat  pada  perlakuan  tanpa  perendaman  sedangkan  persentase terendah  (4,93  %)  pada  perlakuan  perendaman  120  menit  (Tabel  4).  Pemberian krioprotektan  dapat  menurunkan  kecambah  abnormal.  Hal  ini  dikarenakan  pemberian larutan krioprotektan dapat melindungi benih dari kerusakan karena suhu dingin, sehingga pada  perlakuan  tanpa  krioprotektan  memiliki  persentase  kecambah  abnormal  yang  lebih tinggi  dari  pada  perlakuan  yang  diberi  krioprotektan.  Priadi  (2006)  menyatakan  sebelum dikrioprservasi  di  dalamnitrogen  cair,  benih  harus  mencapai  kadar  air  yang  oprimum dengan cara diturunkan kadar airnya atau diperlakukan dengan larutan krioprotektan untuk mencegah terhadap kerusakan akibat suhu yang sangat rendah (freezing injury).
Pengaruh  interaksi  lama  pengeringan  dan  lama  perendaman  dalam  krioprotektan secara kriopreservasi terhadap viabilitas benih rosella (Hibiscus sabdariffa L.)
Berdasarkan  hasil  pengamatan  diperoleh  bahwa  interaksi  lama  pengeringan  dan  lama perendaman  dalam  krioprotektan  berpengaruh  nyata  terhadap  penurunan  kadar  air  benih (%), mempercepat laju perkecambahan (hari) dan menurunkan kecambah abnormal (%)ada pengamatan  kadar  air  benih  diproleh  kadar  air  tertinggi  (41,76  %  )pada  kombinasi perlakuan  tanpa  pengeringan  dengan  tanpa  perendaman  dalam  krioprotektan.  Sedangkan penurunan  kadar  air  benih  terendah  (10,54  %  )  terdapat  pada  kombinasi  perlakuan  lama pengeringan  selama  120  jam  dengan  tanpa  pengeringan  (Tabel  1).  Benih  yang  tidak dikeringkan  yang  memiliki  kadar  air41,76%  kemudian  direndam  di  dalam  krioprotektan mampu  menurunkan  kadar  air  hingga  mencapai  29,95  %  namun  benih  yang  dikeringkan selama 24, 48, 72 dan 96 jam cenderung meningkatkan kembali kadar air setelah direndam di  dalam  krioprotektan.  Penurunan  kadar  air  benih  pada  perlakuan  ini  dikarenakan  benih rosella paling lama dikeringkan yaitu selama 96 jam dan tanpa diberi krioprotektan. Benih rosella termasuk ke dalam golongan benih ortodoks, dimana karakterisitik benih ortodoks antara lain mempunyai kadar air yang rendah dan suhu penyimpanan yang sesuai adalah - 15°C s/d -20 °C.

## 4. Simpulan
Lama  pengeringan  berpengaruh  nyata  terhadap  semua  parameter  pengamatan,  lama pengeringan  96  jam  relatif  lebih  baik  karena  memperoleh  jumlah  kecambah  normal tertinggi  36,13 %,  benih mati  terendah 48,13 %, bobot  segar dan bobot  kering kecambah tertinggi  sebesar  15,17  g  dan  1,13  g,  serta  penurunan  kadar  air  hingga  14,88  %.  Lama perendaman  dalam  krioprotektan  berpengaruh  nyata  terhadap  parameter  kecambah abnormal,  bobot  segar  serta  bobot  kering  kecambah,  perendaman  120  menit  relatif  lebih baik karena memperoleh kecambah abnormal 4,93 %,bobot segar kecambah sebesar 8,26 g dan bobot kering kecambah sebesar 0,59 g.
Interaksi  perlakuan  tanpa  pengeringan  dengan  perendaman  30  menit  dapat  menurunkan kadar air 11, 81 %, pengeringan 72 jam dengan perendaman 120 menit mempercepat laju perkecambahan  menjadi  6,44  hari,  pengeringan  96  jam  dengan  perendaman  120  menit menurunkan  jumlah  kecambah  abnormal  6,00  %.  Viabilitas  benih  rosella  untuk penyimpanan  plasma  nuftah  secara  kriopreservasi  belum  optimal  dengan  beberapa  lama pengeringan dan lama perendaman yang bervariasi.

## 5. Referensi
Marwati, S. 2010. Pengolahan Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa Linn) Sebagai Minuman Kesehatan, Bul. Jurusan Pendidikan Kimia FMIPA UNY
Wattimena,  G.A.,  L.W.  Gunawan,  N.A.  Matjik,  E.  Syamsudin,  N.M.A.  Wiendi,  dan  A. Ernawati. 1992. Bioteknologi tanaman. PAU IPB. Bogor. 306 hal.
Roostika,  I.,  Darwati,  I.,  dan  Meiga,  R.  2007.  Kriopreservasi  Tanaman  Purwoceng (Pimpinella pruatjan Molk.) dengan Teknik Kriopreservasi. Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian. Bogor.
Hardaningsih,  W.,  Muzzakir,  dan  I.  Suliansyah.  2012.  Kriopreservasi  Sebagai  Upaya Konservasi Plasma Nutfah Jangka Panjang Secara in Vitro Beberapa Genotipe Pisang (Musa spp L.). J. Embrio. 5(2): 69-75
Harahap,  A.  A.,  Haryati,  dan  L.  A.  M.  Siregar.  2015.  Pengaruh  Jenis  dan  Lama Perendaman Krioprotektan Terhadap Viabilitas Benih Rosella (Hibiscus sabdariffa L.) Secara Kriopreservasi. J. Online
Sakai, A., S. Kobayashi, dan I. Oiyama. 1990. Cryopreservation of Nucellar cells of Navel Orange  (Citrus  sinensis  Osb.  Var  Brasiliensis  Tanaka)  by  vitrification.  Plant  Cell Report 9:30-33.