. ~
Uji Aktivitas Antibakteri dan Antikuorum Sensing Fraksi dari Ekstrak Etanol Daun Salam (Eugenia poZyantha Wight.)
Y onas Bianityo Ardani (a)", Lisa Soegianto (a), Sumi Wijaya (a)
(I) Faculty of Pharmacy, Widya  Mandala Catholic  University Surabaya, Indonesia
Salam  (Eugenia  polyantha  Wight)  merupakan  tanaman  yang  telah  digunakan  oleh  masya ra kat i sebagai bahan  berkhasiat dalam  pengobatan  karena  mempunyai  efek antiseptik,  antelmintik,  anestetiK, k~ratolitik dan  dapat bekerja  mengendapkan  protein  sel  bakteri.  Pada  penelitian  sebelumnya  telah  dibuktikan  bahwa
" I
ekstrak  etanol  daun  salam  memiliki  aktivitas  antibakteri  sehingga  pada  penelitian  ini  akan  dibuktikan aktivitas  antibakteri  dan  antikuorum  sensing  dari  fraksi-fraksi  ekstrak  etanol  daun  salam. Ekstr~k daun salam  diperoleh dengan  proses maserasi dengan  pelarut etanol 96% kemudian  difraksinasi secara ~ertahap dengan  pelarut  n-heksana  (non  polar),  etil  asetat  (semipolar)  dan  air  (polar).  Fraksi  aktif  aMtibakteri dltentukan  dengan  metode  bioautografi.  Penentuan  daerah  hambatan  pertumbuhan  (DHP)  dari fr~ksi aktif menggunakan  metode difusi  sumuran.  Kadar hambat dan  bunuh  minimum diperoleh dengan  metdde dilusi padat.  Daya  antikuorum  sensing  diperoleh  melalui  metode  dlfusi  sumuran  dan  uji  mot/lltas. Fr~ksi aktif sebagai  antibakteri  adalah  fraksi  etil  asetat dengan  konsentrasi  fraksi  aktif 25% menghasilkan  DHP  paling besar yaitu  11,48 mm  pada  Staphylococcus  aureus  dan  9,03  mm  pada  Pseudomonas  aeruglnosb.  Kadar hambat  minimym  (KHM)  yang  diperoleh  yaitu  1,56%  pada  S.  aureus  dan  12,5%  pada  P. a~rug;nosa sedangkan  kadar  bunuh  minimum  (KBM)  yang diperoleh yaitu  3,13% pada  S.  aureus dan >12,5~ pada  P. aeruginosa. Hasil  dari  metode pigmentasi  dan  uji  motilitas  menunjukkan  fraksi  etil  asetat memili~i patensi sebagai  senyawa  a"ntikuorum  sensing  dengan  konsentrasi  2,5%.  Dimana  konsentrasi  fraksi i sebagai antikuorumsensing  lebih  rendah  daripada  konsentrasi  fraksi  sebagai  antibakteri.  Fraksi  etil  asbtat dari ekstrak etanol daun salam  memiliki aktivitas sebagai antibakteri dan antikuorum sensing.
Kata  kunci: fraksi daun salam, antibakteri, antikuorum sensing KHM,  KBM.
Antibacterial and Antiquorum Sensing Activity of Fraction of Ethanol Extract  of Eugenia Folium (Eugenia poZyantha Wight.)
Eugenia po/yantha is  being used as empirical plant for antiseptiC,  antelmitic,  anesthetic,  keratolitic and also has properties protein  in  bacterial cells.  The  antibacterial activity of extract of Eugenia  po/yantha  has been proved  in  previous  study,  therefore  this  research was conducted to know the antibacterial and antiquorum sensing from  fractions of ethanolic extract of Eugenia polyantha.  The extraction was prepared by maceration and  fraction was prepared  by  liquid-liquid  fractination  method  with  n-hexane  (non  polar),  ethyl  acetate (semipolar)  and  water  (polar).  Bioautography  method  with  thin  layer  chromatography  and  chloroform as mobile phase was conducted to  determine the active fraction. The diameter of inhibition zone was measured or  determined  by  diffusion  method,  while  concentration of minimum  inhibition  (MIC)  and  bactericidal concentration (MBC)  were determined using broth and agar dilution methods. Antiquorum sensing activity for P.  aeruginosa was  carried on,  using pigment survey and motility method~ The  antibacterial activities showed that ethyl  acetate  fraction 2596 gave  diameter of growth  inhibition  zone  greater  than  others, 1:1.48 mm against S. aureus and 9.03 mm against P.  aeruginosa. The  MIC of ethyl acetate fraction gave value of :1.56% against S. aureus and 12.5% against P.  Aeruginosa,  meanwhile the MBC was 3.1396 against S. aureus and more  than 12.5% against  P.  aeruginosa.  The  result  showed  that  ethyl  acetate  fraction  has  potential antiquorum  sensing activity  on  concentration of 2.5 %. The  active  fraction of ethanolic extract of Eugenia polyantha which has antibacterial and antiquorum sensing activity was ethyl acetate fraction.
Keywords: Eugenia leaves fraction,  antibacterial, antiquorum sensing, MIG,  MBC.
*Corresponding  author:  Faculty  of Pharmacy,  Widya  Mandala  Catholic  University  Surabaya, JI. Dinoyo  42-44, Surabaya, Indonesia, Phone/fax number: (+62-31}S678478 ext.260/(+62-31}S630139, E-mail: ybianityo@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Indonesia  sebagai  negara  tropis  memiliki beraneka  ragam  jenis  tanaman  yang  dapat menunjang kehidupan  masyarakat, salah satunya adalah  sebagai  bahan  untuk  pengobatan.  Salah satu dari berbagai jenis tanaman berkhasiat yang dapat dipergunakan sebagai obat adalah tanaman salam (Eugenia polyantha). Daun salam memiliki kandungan  kimia  minyak  atsiri  yang  terdiri  dari sitral dan eugenol, tanin, dan flavonoid (Depkes, 1980).
Pada  penelitian  sebelumnya,  ekstrak  metanol daun  salam  mampu  menghambat  pertumbuhan vegetatif Fusarium  oxysporum sebesar  57,16% pada  konsentrasi  5%.  Selain  itu  ekstrak  metanol daun salam mampu menghambat perkecambahan konidia Fusarium  oxysporum dengan  persentase penghambatan sebesar 84,67% pada konsentrasi 3% (Noveriza dan Miftakhurohmah, 2010). Selain  itu, ekstrak  etanol  daun  salam  mampu  menghambat pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli,  Vibrio cholera, dan Salmonella  sp., tetapi  resisten terhadap Enterobacter sp. (Warman, 1990). Penelitian illl merupakan penelitian lanjutan  dari  penggunaan  ekstrak  kasar  daun salam  untuk  selanjutnya  dilakukan  proses fraksinasi dengan menggunakan metode ekstraksi cair-cair  untuk  mengetahui  fraksi  yang  paling aktif  sebagai  antibakteri.  Sistem  pelarut  yang digunakan adalah pelarut yang mewakili sifat non polar,  semipolar  dan  polar.  Untuk  uji  daya antibakteri  pada  penelitian  ini  digunakan  dua bakteri  mewakili  golongan  bakteri  Gram  positif dan  Gram  negatif yang  merupakan  anggota  flora normal  manusia,  yaitu Staphylococcus  aureus dan PseudolllOnas  aeruginosa. Dari  penelitian terhadap daya antibakteri juga dilakukan pengamatan terhadap  kemampuan  daya  antikuorum  sensing paling aktif dari beberapa fraksi yang ada, dimana aktivitas kuorum sensing terdapat pada konsentrasi fraksi  yang  lebih  rendah  karena  aktivitas  ini mengendalikan patogenitas sel bakteri tidak dengan membunuh  bakteri.  Kuorum  sensing  merupakan mekanisme komunikasi interseluler aktif berbagai spesies bakteri (Popham dan Stevens, 2006).
Dalam  kaitannya  dengan  uji  antikuorum sensing,  bakteri P.  aeroginosa memiliki  senyawa yang  memediasi  aktivitas kuorum sensing, yaitu N- asH homoserin lakton (AHL) (Hentzer et al., 2002).
Bakteri Pseudomonas  aW1tgmosa memiliki  salah satu sifat sebagai parameter pengamatan yaitu pigmen yang  berfluoresensi.  Pigmen  yang  berfluoresensi
1111 merupakan penanda adanya aktivitas komunikasi bakteri sehingga dapat  menimbulkan patogenitas dari bakteri. P. aeruginosa memiliki 2 sistem  aktivator  transkripsi  protein  dalam aktivitas kuorum sensing, yaitu las dan rhl (Pesci et al., 1997). Pengamatan  pig men berfluoresensi, pengamatan juga dilakukan berdasarkan motilitas dari bakteri P.  aeruginosa. Kedua sistem kuorum sensing  ini  mempengaruhi  aktivitas  motil  dari bakteri  pada  produksi  4  tipe  filia  yang  menjadi sistem  alat  gerak  dari  bakteri  (Glessner et  al., 1999)·
Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui adanya  aktivitas  daya  antibakteri  terhadap  S. aureus dan P.  aeruginosa serta daya  antikuorum sensing  terhadap P.  aeroginosa dari  fraksi  n- heksana  (non  polar),  etil  asetat  (semi  polar)  dan air  (polar)  dari  daun  salam.  Parameter  uji  daya antibakteri adalah hasil diameter  hambat minimum  (DHP),  kadar  hambat  minimum (KHM),  dan  kadar  bunuh  minimum  (KBM) sedangkan  untuk parameter uji  daya  antikuorum sensing  diamati  pada tidak  adanya  pig men  yang berfluoresensi  yang  dihasilkan  bakteri  dan penghambatan motilitas bakteri sehingga dianggap  tidak  teIjadi  suatu  sistem  komunikasi interseluler pada bakteri.

## METODE PENELITIAN

## A/at
Alat  yang  dipergunakan  dalam  penelitian  ini adalah  rotary  evaporator  (BUCHI,  Germany), autoklaf (All American Model  No 25x, USA),  oven (Memmert,  Germany),  inkubator  (Memmert, Germany),  Laminar  Air  Flow  (Type  V-130, Indonesia), timbangan  analitis  (Sartorius TE 214 S,  Germany),  plat  Silika  Gel  60 F254 (Merck, Germany),  pencetak  lubang  0  6  mm,  tabung reaksi dan cawan petri.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  meliputi  serbuk simplisia kering  daun salam (UPT Materia  Medika  Batu  - Malang),  pelarut  etanol  teknis,  n-heksan  teknis, etil  asetat  teknis,  aquades,  kloroform  (Merck, Germany), metano} p.a. (Merck, Germany), kultur bakteri Staphylococcus  aureus ATCC 25923 dan Pseudomonas  aeroginosa ATCC 27853, media agar Trypticase Soy Agar (Scharlau, Spain), media cair Trypticase  Soy  Broth  (Merck,  Germany)  dan media agar Cetrimide (Merck, Germany).
.'

## __
___

## _____ _ __ I
TABE l1 . Ha s il  Fr aksi na s i Ek strak Daun Salam
Fr aksi
n- Hek san EIII Aselal Air HasH  Fraksinasi Bcrat (gram) 24.45 16.80 37.44 Rendemcn 23.51  % 16.15% 36% TABEL 2. Ha s il Standarisasi Ek s trak Daun Salam No . Param e t e r u J I
P c rsy aratan
HasH Uji 5irnp li sia Daun Sa lam 1 Kadar  abu s5% 5.69.0,09 2 Kadar sal! laru! elanol .8% 11,55.0,03 3 Kadar san  tarut all 2: 12 % 545.024 Organoleptls 4 Warna Coklallua eaklallua Rasa Kelal Kel al Sau Khas  temah Khas te mah
GAM BA R  1. Hasil  UJI  bloautografi ( I ) ekslrak total , ( a ) fraksi n- heksan . (b) traks ! elil  aselat , (c) fraks i air , lerhadap  bakteri S . aure us (kiri) dan P  aeruginosa ( kanan ).

## Tahapan Penelitian
Ekstr aksi Simplisia Serbuk Daun Salam S im p li s i a se rbllk da lln sa la m dimaserasi dalam pe l aJ'ut e tan o l 96% kellludian  dipe kat ka n denga n rotary eva / x)m(or. Sete lah itll  di l a kukan pr oses s tand ari s a s i m e li puti kadar abu  tota l, kadar s ari l a rut e t a n o l , kada r sa r i larut ai l' dan o r ga nol e ptis. Fraksinasi Simplisia Serbuk Daun Salam Ekstrak  k e n tal lotal y an g didapat  difraks in asi dengan 3 p e larut berurutan ya itu  n-h e ksana, e til asetat dan ail' d e n g an  m e nggunakan eoro ng pisa h hin gga se lllu a se n yawa  terta rik da ri ekst r ak k e mudi a n dip e k at kan dengan m e n g u a pk a n p e l a ru t m e n ggunakan I'Ota ry ev apomtor sam pai se mu a p e larut m e n guap . Penen tuan Fraksi Aktif Ketiga  fr aksi t e r se but dan e kstrak to t a l dilakukan uji bioaut og r afi un tuk  mendapatkan fraks i aktif ter h adap bakt e ri S. ( l/fr C Ii S dan P. ael'lIgillosa (setal'll d e n g an 0,5 Me Fa rl and I) de n ga n menggunaka n fa se diam Silika Gel 60 F ,.,. dan fase gerak kl olofo rl11.
Penentuan Konsentrasi  Fraksi Aktif Fraks i a k tif  ya n g te l a h  dik e tahui kel11udian dit e ntukan  k o ns e ntra s i aktifnya b e rda sa rk an 3 kon se ntl'a s i y a i t u 50%, 25% d a n  1 2 , 5% dengan pelar ut ak u ades s t e ril mengg unakan metode difusi s umuran dan pa r amete r u ji D HP,
Penentuan Kadar Hambat dan Bunuh Minimum Pen e ntuan  kadar  hambat  dan bunuh mini mu m m e n gg unak an m e tod e dilu s i eair  dan  padat d e n ga n  k o n se ntl'a s i ya n g d i g un a kan b e rda sa rkan ha s iluji penent u an k o n se ntra s i frak s i akt if. Uji  Daya Antikuorum Sensing
Kada r h ambat minimum ya ng d i p e l'Oleh se lanjutn ya d i g unakan untll k m e n e ntllk a n k o n se ntr asi lUi a ntiku o l1lm se n s ing l11 e n gg un akan m e tode pe n ga m a t a n pi g m e n dan  mOli lit a s t e rh adap bakt e ri P. aerllgillosa.

## HASIL DAN  PEMBAHASAN
Hasi l r e nd e m e n e k st r ak dan fraks i dari s impli s i a se rbuk  k e rin g daun sa l am  diperoleh e k s trak  daun sa l am se banyak 141 , 3 gram ( 14 , 1 3% ), frak s i II - h e k s ana 24,45 g r a m (23 , 51%) , f r aksi e til asetat 16 , 80 gra m ( 16 , 15 %) d an fraksi a ir 37,44 g ram (36%). Hasil f rak s ina s i d i sa jik a n pad a Tabel1 dan h asi l sta ndari sas i eks trak  pad a Tabel 2. Hasil uji fraksi  aktif  (G ambar 1) d e n ga n m e t ode b i oa ut ografi te r hadap S . Oilr e l lS m e nllnjukkan  bahwa daerah hambatan pe rtllmbuhan pad a e k s tr a k t ota l di Rf; 0,08, frak s i e ti l asetat di Rf; 0 , 1 3 dan  p ada t e mpat  penoto l an, frak s i n- h e k s an di Rf; 0, 1.
Berdasarkan h as il ya ng  didapat  dapat dis impulk a n  bal", ' a  frak s i e til asetat palin g akt if se b aga i antibakteri dibanding ekst rak  total  dan frak s i l ainnya pad a k o n se ntra s i ya n g sa ma. Pad a ha s iluji bioauto g rafi  t e rhadap P . ael'lIgillo s (I t i dak m e nunjukkan adanya da e rah  h a mb at kar e na e k s trak dan f " ak s i dari  d a un sa lam  tidak  mampll m e n g hamba t p e rtumbllhan  bakt e ri . H a l 1111 m un gk in dapat  t e ljadi  kar e na s if a t dinding se l bakte ri go l o n ga n G r a m n ega tif s uli t untuk d i t e mbu s se n y a",a a n t ib a kt e ri (imp e rm ea b e l) o l e h kar e na  itll sa l a h sa tll y ang  res i s t e n ter h adap antibakte ri a d a l a h p , aer ll g in osa (Franklin , 1 977) .
Pad a p e n g uji an un t uk m e n e ntukan k o n se n t r a s i f r aksi  aktif sebaga i antibakteri denga n m e t ode difusi s umur a n di g un aka n kon se ntr as i fraks i et il a se t at 50%, 25% dan 12,5 % se d a n gka n kon se ntr asi ba kter i ya n g digunakan adala h se tara d e n g an 1, 5 x 1 0 7 CFU/ ml ya ng di sa jikan pada Tabe l 3 , Gambar 2 , dan Gambar 3 ·
Uji Akt i vi l as An t ibakteri dan Ant i kuerum Sensing Fraksi dari  Ekstrak Elane l Daun Salam (Eugenia p o lyanth a Wight.)
_ _ _ _ _ _
_ _ _ _ 1
lABEL 3. H asil Uji Antibakteri lerhadap Bakteri S. aureus dan P. aeruginosa
Jeni s B3kt c rl
Konsc n trasi ReE!likasi  {mm)
Rata ·ra ta ± SO 1 50% 11 , 20 S aureus 25% 11 ,05 1250% 9,50 Kontrol (+) Telraslkhn 3585
Konlrol (.) °
° 50% 9,15 P aeruginosa 25% 9.25 12,50% 8,95 Kontrol (+) Telraslkhn 8,65 Kon tr ol H ° °
lABEL 4. H asi l Kadar  Hambat Minimum (K H M) dan  Kada r Bunuh M in imum  (KBM)  dari Bakteri S. a ur e u s dan P . aerugino sa
Jcnis B akter! S . aureus P . Derugi nosD
Konsentrasi
J um lah Bakteri 12,50% ° 6,6 x I ()I CFUlml 6 ,2 5% ° TBUD 3,13% ° TBUD 156% 42 x I()J CFUlml TBUD 0.78% TBUD TBUD 0,39% TBUD TBUD 020% TBUD TBUD 0,10'. TBUD TBUD Tel1as lklm ° °
Kontlol H ° °
Konlrol  (+) TBUD TBUD
lABEL 5 . Diam ete r Antikuorum Se nsing pad a Konsentrasi Fr aksi 2,5 % Diam ete r Antikuorum Sensing Konse ntra si 2 ,5% (mm)
Fra ksi
Ek s.To t a l n·heksana Elil A scl al RephkaSi  I 11 ,8 ° 10,8 RephkaSi 2 12 ,2 ° 11 ,6 Rala . rala.SD 12.02 ° 11 , 2.0,4 Air 9.2 10 , 2 9,7.0 , 5
GAM BAR 2. Hasi!  uji  antibakteri  dengan  fraksi  aktif  elil  asetal (a)konsentrasi 50% , (b}konsent ras i 25%,  (c}konsent ras i 12 , 5% , (d)kontrol ant ibakteri tetrasiklin ,  ( e )k ontrol  neg at if metanal . terhadap bakteri S. aureus (kiri) dan P. aeruginosa (kanan).
o DHPVS Konsentrasi ; , - _ _ _   liS. ClUrt'UJ t::~~ 7 . P . Cltrugluoso 12JO" Tetr uik/il1 !\ontrol (.) Ko n se lltr a.si ( ')r(,)
GAMBAR 3. Diagra m batang hasil  uji  antibakter i d ari 3 kansent r asi f r aks! aktif eti l asetat konsentrasi  50% , konsentrasi 25%, konsentrasi 12 , 5% terhadap bakter! S. aureus dan P aeruginosa.
2 3 10,60 10 ,50 10.17.0 ,3 1 11 , 25 12 , 15 11 , 48.0,49 955 935 947.0 , 08 35 , 60 36,50 35 , 98.0 , 38
° °
° 853 9 , 10 893.0 , 28 9,65 8 ,20 903.0 , 61 9,10 8 ,50 885.0 , 26 8,60 8,65 8 , 63.0,02
° ° °
ko n se ntr as i bakteli ya n g digunakan  ada l a h se tar a d e n ga n  1 ,5  x 10 - CFU / ml ya n g di s aj ik an  pada Tabel3 , Gambar 2 d a n Ga mbar 3.
Pada pe n g ujian untuk m ene ntukan k o n se ntra s i frak s i aktif se b ag ai  antibakt e ri  d e ngan m etod e difu s i S Ull1ur an digunakan kon se n tras i frak s i e til ase tat 50% , 25% dan 12 , 5% sed angkan ko n se ntrasi bakt e Ii ya n g digunakan ada l a h setara  de n ga n 1 ,5 x 10 ' CFU/ ml ya n g di s ajikan pa da Tabel 3 , Gambar 2 d a n Gambar 3 . Ha s il DHPyan g didapatt e rhadapbakt e li uji S. alll'etl s b e lturut- t urut pada k o n se ntra s i 50%, 2,5% dan 12,5% ada lah 1O ,77 ±0 ,3 1 mm , 11,48±0 ,49 mm , 9A7±0,08 mm , ko ntrol T e tra s iklin 35,9 8±0, 3 8  mm. T e rhadap bakt e ri  uji P. o e l'IIgil/ 050 belturut - turut pada  k o n se ntr as i 50% , 25% dan  12 , 5% ada l ah 8,93±O,28 mm,  9,03±O ,6 1 mm, 8,8S±O , 26 mm , kontrol Tet r asikl in 8 , 63±0,02 m m. Konsentrasi fr a k s i ya n g be s a r (50%) tidak m e mb e rikan diam e t e r  halllbatan p e l t ull1buh an se m a kin be s ar di se babk a n se m a kin  tinggi  k o n se ntr as i atau se m a kin p e kat s u at u s u s p e n si se n y awa  a ntibakt er i dapat m e n g h a m bat proses difusi s u spens i se n ),a ,,"a antibakt e li t e r seb ut pad a media p e ltumbuhan  kar e n a la j u difu s i dari se n ya wa a ntib ak t e ri b e rgantun g pada s if at  ke l a rutan da ri se n yawa a ntibakt er i t e rhadap med i a se rta ukuran mol e kuln ya , Se l a in i tu lu a s diam e t e r h ambat p e rtumbuhan dari bakt e ri p , a e rll gil/osa j a uh  l e bih k ec il dari S. allr e ll s . H a l ini m em buktik a n bakteri p.  oerugil105aleb ih r es i s t e n ter h adap se n )'awa antibakter i dalam  frak s i e til ase tat  daun sa lam  dibandin g d e n gan bakt e ri S . allr e ll s dan fraks i e ti l ase tat daun s alalil m e m punyai akt i v it as ant ib akte ri y ang l e bih  tingg i te rh adap P . oe l'II g il1 050 dibandin g kan T e tra s i klin (30 , u g/2 0~ 11).
Ha s il u j i Kadar Hambat  dan Bun uh Minimum (Ta be14 ) m e nunjukkan  bah,,"a  bakteri S . ollr e u s m e m iliki K H M pada k onse ntra s i 1 ,56% se dan g kan untuk KBM p a d a h as iluji ya n g didapat bahwa  kadar 3, 1 3% m e n g ha s il kan p e l tu m buha n bakt e ri se ban y ak ° CFU/ ml se hin gg a  Ill e lll e nuhi p e r k iraan j umlah bakt e ri un tuk  kada r bunuh
. '
GAMBAR 4. Ha sil uji  anlikuorum sensing dengan  metode sumuran konsentrasi 2 , 5%  ya i tu ( a ) fraks i n-heksana , (b) fraksi eli I asetat , (c) f raksi  a i r , ( d ) eks t rak  tota l.
GAM BAR 5. Hasil uji  antikuorum sensing dengan  metode molil i tas pengamatan pada UV 366 yaitu (t)eks t r ak total , (a) frak si n-heksana,
(b) fraksi etil  asetat , (c)fraksi  air , (kp)kont r ol positif.
minimum ya itu 1 ,2 x 10' CFU/ m!.  Pad a  bakteri P . aerllgino sa m e miliki KHM  pada k o n se ntra s i 12 ,5% dan  KBM  pad a konse ntr as i > 12 ,5% . Ha s il uji antikor um se nsin g p a d a k o n se ntra s i di  bawah KHM (dipilih  konse n tra s i 2 , 5%) (Gambar 4  dan Tabel 5) ha s il ya n g didapat terlihat bahwa frak si  et il asetat Ill ellliliki day a  a ntikorum se nsin g de n gan adan ya daerah  p e rtumbuhan tetapi tidak be r fluor ese n s i (ditunjukkan o l e h an ak pana h ). U j i
ant iku or ulll se ns i ng  juga  dilakukan dengan uji m oti li tas dad  bak1e r i pad a k onse ntra si 2 , 5% ya n g d i saji kan pad a Gambar 5.  Dad h as il  uj i moti!it as bakt e ri  pad a  p e n ga m atan UV 366 balm ' a ekstrak total , fraksi  n- h eksa na , fraks i et i! asetat dan fraksi a ir  m a mpu meng h ambat m oti!itas  bakter i P. ael'llgillosa dengan ke m ampuan p e nghambatan m ot ili tas t e rb esa r o l e h e k strak total dapat dil ih at dad pe n ye baran pe l tumbuhan terk eci !.  Ha l ini di seba bkan e k s trak to ta l mengandung se nyawa- se n yaw a yang Ill e lllpun ya i akt i v ita s a ntikuol'lllll se n s in g ya ng  t e rdap at  pada  fraks i et il asetat  dan frak s i l ain n y a  se hin gga  aktiv it as p e n g h a mb atan motilita s m e njadi  lebih  b esa r. S e lain  itu  ada p e rb e daan dari  ha s il uji pembentukan pi g men dan  uji m otilitas , ya itu  pad a uji p e mbentuka n pi gme n  b e rflu orese n s i  menunjukkan fraksi  air memilik i akti\ ' itas antik u orum se n s in g se dangkan fr aks i n-h e k s ana  tidak  menllnj ll kkall  adall y a akti v ita s, tetap i pada  uji m otilita s frak s i 1/ - h e k s ana  menunjukka n akt iyit as  penghambatan motilitas  l e bih b esa r d ib and in g frak s i air .  H a l  in i di se babkan pembenhlkan  pigme n dan  aktivitas mot ili tas m e mili k i perb e daan m eka ni s m e. Pemben tu kan p i g m e n  bak ter i P. ael'llgi n osa b e ra s a l da ri s i s t e m ant i k u o rulll se n s ing la s me l a lui e k s p r es i ge n La sR  yang diduga l e bih ban y ak dih ambat  o l e h senyawa y ang t e rdap at  di frak s i  a ir (se n ya" ' a  JXlla r) se dangkan aktiv i tas motilitas  b e rasa l dari s i s t e m I'hl m e l al ui eksp r es i ge n Rh l R ya ng diduga lebih b a n y ak dihambat o l e h senyawa  ya n g  terdapat di  fraks i n-h e k san a (senyawa non po l ar) (Ca mar a, 2005) .

## KE SlMPULAN
Frak s i ya n g paling akt if se ba ga i a ntibakt e ri dari e k strak  e t anol dau n sa lam ada l ah  fraksi eti l asetat d i band in g kan e k s trak tota l , fraks i n - h eksa n a dan fraksi  air. Kad ar h ambat min imu m da d f r aks i e til asetat daun sa l am terhadap Staph!Jlococcu s alll'ellS 1 ,56% dan  kadar  bunuh minimum 3,13%, seda n gkan t e rhadap Pseudomona s aerllgino s a kadar hamb at minimum 1 2,5% dan  k a dar  bunuh mllllmum > 1 2,5% . Frak s i ya ng  paling akt if m e mi liki d aya  anti ku o ru m se n s in g adalah  frak s i et il aseta t d e ngan konsentras i 2 , 5% be rd asarkan uji m ot ilitas dan ada t i daknya  p i g men  b e rfluor ese n s i ya n g d ih as il ka n bakt e r i.
r_ I I . f I I

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih  kepada  Dr.  Lannie  Hadisoewignyo,  Apt.  yang  telah  membantu dalam hal dana selama proses penelitian ini hingga selesai.

## DAFTAR PUSTAKA
Depa~emen Kesehatan  Republik  Indonesia,  1980, Materia Medika Indonesia jilid IV,  Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta, 109-113.
Noveriza  R dan  Miftakhurohmah,  2010,  Efektivitas  ekstrak metanol  daun  salam (Eugenia  polyantha)  dan  daun  jeruk purut (Cytrus hystrix) sebagai antijamur pada pertumbuhan Fusarium oxysporum, Jurnal Littri, 16 (1), p 6-11.
Wannan  B,  1990,  Uji  mikrobiologi  ekstrak Eugenia polyantha folium  terhadap bakteri penyebab diare secara in vivo,  JF  FMIPA  UNAND,  dalam  :  Penelitian  Tanaman Obat 'di  Beberapa  Perguruan  Tinggi  di  Indonesia VII,  Pusat  Penelitian  dan  Pengembangan  Farmasi, Departeman Kesehatan Republik IndoneSia, Jakarta, p 133.
Popham  DL  and  Stevens  AM,  2006,  Bacterial  quorum sensing  and  bioluminescence,  in  :  Tested  Studies  for Laboratory Teaching,  volume  27,  M. A O'Do!1nell  (Ed), Proceedings  of  The  27th  Workshop  /  Conference  of  The Association  for  Biology  Laboratory Education  (ABLE),  USA, P 201-215·
Hentzer M,  Riedel K, Rasmussen TB,  Heydorn A,  Andersen JB, Parsek MR,  Rice SA,  Eberl L, Molin S,  H0iby N,  Kjellberg S,  and  Givskov  M,  2002,  Inhibition  of quorum  sensing  in Pseudomonas aeruginosa biofilm  bacteria by a  halogenated furanone compound, Microbiology, 148, p 87-102.
Pesci  EC,  Pearson  JP,  Seed  PC,  and  Iglewski  BH,  1997, Regulation  of las and rhl quorum sensing ini Pseudomonas aeruginosa,  Journal  of Bacteriology,  179(10),  p  3127- 3132.
Glessner A,  Smith  RS,  Iglewski  BH,  and Robinson JB,  1999, Roles  of Pseudomonas  aeruginosa  las  and  rhl  quorum . sensing system in control of twitching motility, Journal of Bacteriology, 181 (5), p 1623-1629.
Franklin  TJ,  1977,  Bacterial  Resistance  to  Antibiotics,  in  : Pharmaceutical Microbiology, Hugo WB and AD Russell (Eds.), lilt edition, Blackwell Science, United Kingdom, p 137. camara  M,  2005,  Quorum  Sensing  :  A  Cell  - Cell
Signalling Mechanism Used to Coordinate behavioural  Changes  in  Bacterial.  Population, University of Nottingham, United Kingdom.