Uji Antagonisme Trichoderma spp. terhadap Ganoderma sp. yang Menyerang .... Benyamin Dendang
UJI ANTAGONISME Trichoderma spp. TERHADAP Ganoderma sp. YANG

## MENYERANG TANAMAN SENGON SECARA
IN-VITRO
(In-Vitro Antagonism Experiment of Trichoderma spp. to Ganoderma sp. Which Attacks Sengon Trees)
Benyamin Dendang
Balai Penelitian Teknologi Agroforestry Jl. Raya Ciamis-Banjar KM. 4, Po. BOX. 5 Ciamis 46201 tlp. (0265) 771352, Fax. (0265) 775866 Jawa Barat, Indonesia
E-mail: beny_co76@yahoo.co.id
Diterima 8 Januari 2014; revisi terakhir 11 Agustus 2015; disetujui 21 Agustus 2015

## ABSTRAK
Ganoderma sp.  adalah  cendawan  patogen  yang  dapat  menyebabkan  penyakit  busuk  akar  pada  tanaman sengon (Falcataria mollucana) . Ganoderma sp. sulit dideteksi karena gejalanya mirip dengan gejala penyakit akar lainnya. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Fakultas Kehutanan IPB yang bertujuan untuk mengetahui laju pertumbuhan diameter koloni Ganoderma sp. dan Trichoderma spp. dan mempelajari kemampuan Trichoderma spp.  dalam  menghambat  pertumbuhan  koloni  isolat Ganoderma sp.  pada  media  PDA  dan  MEA  secara in vitro . Hasil penelitian menunjukkan bahwa  pertumbuhan diameter koloni isolat Ganoderma sp. pada media PDA (7,09 mm/hari) lebih  cepat  daripada  pertumbuhan  pada  media  MEA  (5,41  mm/hari).  Laju  pertumbuhan  diameter koloni  isolat Trichoderma spp.  pada  media  PDA  diperoleh  nilai  rata-rata  secara  berturut-turut  yaitu T.  viride (69,67  mm/hari), T.  harzianum (56,49  mm/hari),  dan T. pseudokoningii (42,04  mm/hari).  Sedangkan  pada media  MEA  diperoleh  nilai  rata-rata  tertinggi  dari  pertumbuhan  diameter  koloni  isolat  berturut-turut  untuk T. pseudokoningii (77,29  mm/hari), T. harzianum (66,50  mm/hari),  dan T. viride (59,67  mm/hari).  Persentase penghambatan Trichoderma spp.  tertinggi  ditunjukkan  oleh T.  harzianum (73,60%)  dibandingkan T. pseudokoningii (59,76%), dan T. viride (46,47%).
Kata kunci: Antagonisme, Ganoderma sp ., Sengon , Trichoderma spp ., in vitro

## ABSTRACT
Ganoderma  sp. is a pathogenic fungus that can cause root rot in  sengon  (Falcataria mollucana) plantation. Ganoderma  sp.  is  difficult  to  detect  because  the  symptoms  are  simillar  to  symptoms  of  other  root  diseases.  The experiment was conducted at the Laboratory of the Faculty of Forestry IPB with aims to determine in vitro growth rate of colony diameter of Ganoderma sp. and Trichoderma spp. and also to  obtain the ability of Trichoderma spp. in inhibiting the growth of colonies of isolates of Ganoderma sp. on PDA and MEA medium. The result shows that diameter of colony  isolat  Ganoderma  sp.  growth on PDA media (7,09 mm/day)  was  faster than the growth on MEA  media  (5,41  mm/day).  The  growth  rate  of  the  colony  diameter  of  Trichoderma  spp.  isolates  on  PDA  were 69,67  mm/day,  56.49  mm/day,  and  42,04  mm/dayfor  T.viride,  T.harzianum  and  T.pseudokoningii,  respectively. While, using the MEA media obtained an average value of growth of diameter colony isolates were 77,29 mm/day, 66,50  mm/day,  and  59,67  mm/day)  for  T.pseudokoningii,  T.harzianum  and  T.viride,  respectively.  The  highest percentage  of  inhibiting  barriers  of  Trichoderma  spp.  was  T.harzianum    than  T.pseudokoningii  (59,76%)  and T.viride (46,47%).
Keywords: Antagonism, Ganoderma sp., Sengon, Trichoderma spp., in vitro

## I. PENDAHULUAN
Sengon  merupakan  salah  satu  jenis tanaman hutan yang paling banyak dikembangkan  oleh  masyarakat  Indonesia dengan  sistem  agroforestry.    Jenis  ini  dipilih karena pertumbuhannya cepat, nilai ekonominya  tinggi  dan  pasar  yang  sudah  jelas. Secara  umum,  di  Jawa  terdapat  hutan  rakyat seluas  hampir  400.000  hektare  dan  mampu memasok  895.000  m 3 kayu  per  tahunnya.
Jumlah  tersebut  mewakili  10%  serapan  kayu dari  industri  kayu  di  pulau  Jawa  dan  dari kayu sengon sebesar 2,29% (Mile, 2003).
Penanaman  sengon  yang  semakin  luas dengan  pola  monokultur  dapat      menimbulkan permasalahan serius, antara lain dengan adanya serangan patogen Ganoderma sp. dengan gejala yang  sulit  dideteksi  di  lapangan  karena  mirip dengan  gejala  serangan  penyakit  akar  lainnya termasuk gejala kekeringan. Meskipun tanaman
©JPKW-2015. Permalink/DOI: http://dx.doi.org/10.18330/jwallacea.2015.vol4iss2pp147-156
eISSN: 2407-7860 pISSN: 2302-299X Vol.4. Issue 2 (2015) 147-156 Accreditation Number: 561/Akred/P2MI-LIPI/09/2013
sudah  menunjukkan  gejala  terserang  penyakit, namun  tubuh  buah Ganoderma sp.  kadang- kadang  belum  terbentuk.  Serangan Ganoderma sp.  pada  sengon  telah  banyak  dilaporkan menyerang  tanaman  kehutanan  di  Australia Utara pada akasia, sengon, flamboyan, cemara, dan  angsana  (Hennssy  and  Daly,  2007; Solomon et al .,  1993;  Widyastuti,  2007).  Lebih lanjut  dilaporkan Ganoderma sp.  juga ditemukan  menimbulkan  penyakit  busuk pangkal  batang  pada  tanaman  perkebunan mangga    di  Asia  Tenggara  dan  Asia  Selatan (Kandan et al., 2010). Infeksi Ganoderma sp . terjadi  melalui  luka dan  lentisel,  pada  tanaman  sering  ditemukan bagian  leher  akar  pecah,  dan  ini  merupakan tempat  yang  baik  bagi  infeksi  fungi.  Patogen kemudian ke bagian yang lebih dalam dari akar. Serangan  lebih  tinggi  akan  ditemukan  pada tanaman okulasi dibandingkan dengan tanaman yang  berasal  dari  biji.  Hal  ini  disebabkan  pada tanaman  okulasi  terdapat  bagian-bagian  luka, sehingga  memudahkan Ganoderma sp.  untuk melakukan  infeksi  (Sinulingga,  1989).  Infeksi atau  penularan  penyakit  ini  terjadi  melalui kontak  akar  tanaman  sehat  dengan  sumber infeksi  di  dalam  tanah  seperti  potongan  akar padat  dan  batang  yang  mengandung  koloni patogen (Haryono dan Widyastuti, 2001).
Pengendalian
Ganoderma sp. dapat dilakukan dengan cara pemanfaatan mikroorganisme  yang  bersifat  antagonis. Pengendalian  hayati  menggunakan  agen antagonis  dengan  satu  kali  pemakaian  dapat menekan  pertumbuhan  dan  perkembangan patogen  untuk  jangka  waktu  yang  relatif panjang  tanpa  menimbulkan  pencemaran lingkungan (Cook dan Baker, 1989). Trichoderma adalah salah satu jenis jamur yang sudah  umum  digunakan  sebagai  biokontrol penyakit  tanaman  (Rosa  dan  Herrera,  2009). Hal  ini  dikarenakan Trichoderma mempunyai sifat  antagonistik  terhadap  beberapa  patogen tanah dan benih tanaman (Lee et al. , 2008, 2011; Amin et al .,  2010;  dan  Perazzolli et al. ,  2011). Secara in-vitro T. harzianum menunjukkan efek antagonis  terhadap  pertumbuhan Fusarium circinatum yang  menyerang  semai  pinus (Alvares, 2011). Hasil penelitian yang dilakukan oleh  Achmad et  al. (2010)  yaitu
uji antagonisme dengan metode langsung menunjukkan bahwa T.harzianum menghambat pertumbuhan Fusarium oxysporum hingga  28,75%  dan  27,33% berturut-turut pada PDA dan MEA.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kemampuan
Trichoderma
spp . dalam
menghambat pertumbuhan Ganoderma sp. yang berasal dari tanaman sengon secara in-vitro .
II. METODE PENELITIAN
A. Tempat dan Waktu Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Patologi  Hutan,  Departemen
Silvikultur,  Fakultas  Kehutanan,  IPB  pada  bulan Juni 2012.  Pengambilan tubuh buah Ganoderma sp.  dilakukan  pada  tanaman  sengon  di  Desa Baregbeg,  Kecamatan  Baregbeg,  Kabupaten Ciamis (Jawa Barat).

## B. Bahan dan Alat Penelitian
Bahan  yang  digunakan  adalah  tiga  jenis biakan Trichoderma spp.  yaitu T.  harzianum (diperoleh  dari  Laboratorium  Bioteknologi Perkebunan,  Bogor), T.  viride (diperoleh  dari Laboratorium Mikologi, UGM) dan T. pseudokongii (diperoleh dari SEAMEO-BIOTROP) serta  tubuh  buah Ganoderma sp.  (diambil    dari tunggul  sengon  di  Desa  Baregbeg,  Kabupaten Ciamis),  aquades,  media  PDA  dan  MEA.  Alat yang digunakan adalah laminar air flow , otoklaf , oven,  cawan  petri,  kamera  digital,  penggaris, pinset, cutter , mikroskop, silt, bunsen, sundip.
C. Metode Penelitian
1. Uji Pertumbuhan Isolat Ganoderma sp. Tubuh  buah Ganoderma sp.  yang  diambil dari tunggul sengon yang masih hidup diisolasi (dengan  cara  memotong  secara  melintang tubuh  buah  menjadi  beberapa  bagian) kemudian  mengambil  daging  buah  (konteks) untuk  dikulturkan  pada  media  PDA  dan  MEA pada  cawan  petri.  Setiap  cawan  petri  ditanam tiga  potongan  konteks.  Setelah  isolat  tersebut tumbuh,  kemudian  dilanjutkan  dengan  proses pemurnian.  Isolat  hasil  pemurnian  di  isolasi pada media PDA dan MEA  dengan ulangan tiga kali.  Pengamatan  dilakukan  dengan  mengukur pertumbuhan diameter koloni isolat Ganoderma sp.  sampai  cawan  petri  terisi  penuh  dan dilakukan  setiap  hari.  Penelitian  dilakukan dengan menggunakan Rancangan Acak
Lengkap  (RAL)  dengan  perlakuan  isolat
Ganoderma sp. dan jenis media (PDA dan MEA).
Data  diolah  dengan  analisis  varian  dan  apabila terdapat perbedaan yang nyata, akan dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan.
Model linier yang digunakan adalah sbb:
Y ij = µ + M i + Ɛ ij
Uji Antagonisme Trichoderma spp. terhadap Ganoderma sp. yang Menyerang .... Benyamin Dendang
Keterangan: Y ij = Laju  pertumbuhan  isolat Ganoderma pada media ke-i, ulangan ke-j µ   = Nilai tengah pengamatan M i = Pengaruh jenis media ke-i Ɛ ij = Galat dari media ke-i, dan ulangan ke-j 2 . Uji  Pertumbuhan Koloni Trichoderma spp . Uji  pertumbuhan Trichoderma spp. dilakukan  untuk mengetahui laju  pertumbuhan dari  tiga  jenis Trichoderma ( T.harzianum,  T. viride,  dan  T.  pseudokoningii )  pada  media  PDA dan MEA. Pengujian dilakukan pada ketiga isolat Trichoderma dengan  meletakkan  koloni  isolat pada tengah cawan petri berisi media PDA dan MEA.  Biakan  tersebut  diinkubasi  pada  suhu ruangan.
Pengamatan  dilakukan  dengan  mengukur pertambahan  diameter  koloni  masing-masing Trichoderma sampai  cawan  petri  terisi  penuh dan dilakukan setiap hari. Penelitian ini disusun dengan menggunakan Rancangan
Acak Lengkap  (RAL)  dengan  jenis  Trichoderma  ( T. harzianum,  T.  viride,  T.  pseudokoningii )  dan jenis  media  (PDA  dan  MEA).  masing-masing perlakuan  diulang  sebanyak  tiga  kali.  Data diolah  dengan  analisis  dan  apabila  terdapat perbedaan yang nyata akan dilanjutkan dengan uji  jarak  berganda  Duncan.  Model  linier  yang digunakan adalah sbb.:
Y ijk = µ + T i + M j + TM ij + Ɛ ijk Keterangan: µ   = Nilai tengah pengamatan T i = Pengaruh jenis Trichoderma ke-i M j = Pengaruh jenis media ke-j TM ij =  Pengaruh  interaksi  jenis Trichoderma ke-i, media ke-j Ɛ ijk = Galat  dari  jenis Trichoderma ke-i,  jenis media ke-j, dan ulangan ke-k
3.  Uji  penghambatan Trichoderma spp. terhadap Pertumbuhan Diameter Koloni Ganoderma sp.
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  biakan ganda  (Coșkuntuna  dan  Özer  2007).    Uji penghambatan  dilakukan  pada  ketiga  jenis Trichoderma dengan  menggunakan  media  PDA dan  MEA.  Petri  diinokulasikan  dengan  biakan Ganoderma sp.  diameter  6  mm  usia  10  hari. Setelah  biakan Ganoderma sp.  berumur  5  hari, kemudian  masing-masing  biakan Trichoderma dengan ukuran yang sama dikulturkan dari arah yang  berlawanan  (Gambar  1).  Petri  disimpan dalam  inkubator  23 0 c.  Kontrol  yang  digunakan adalah isolat tanpa Trichoderma dengan ulangan
sebanyak 3 kali. Pengamatan  dilakukan  dengan  mengukur pertumbuhan  diameter  koloni Ganoderma sp. secara  radial.  Data  tersebut  akan  digunakan untuk  menghitung  perkembangan  miselium dan  persen  penghambat Trichoderma spp. terhadap Ganoderma sp. Uji  penghambatan  dilakukan  dengan menggunakan  rancangan  acak  lengkap  yang disusun  secara  faktorial  dengan  menggunakan dua  faktor  yaitu    jenis Trichoderma spp.  ( T. harzianum, T. viride, dan T. pseudokoningii )  dan jenis    media  (PDA  dan  MEA).  Data  diolah menggunakan  analisis  varian  dan  apabila terdapat  perbedaan  yang  nyata  dilanjutkan dengan uji jarak berganda Duncan. Model linear yang digunakan adalah sebagai berikut:
Y ijk = µ + T i +M j + TM ij + ε ijk Keterangan: µ   = Nilai tengah pengamatan T i = Pengaruh jenis Trichoderma ke- i M j = Pengaruh media ke-j TM ij = Pengaruh  interaksi  jenis Trichoderma ke- i pada media ke- j ε ijk = Galat  dari  jenis Trichoderma ke-i,  jenis media ke-j, dan ulangan ke-k
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Uji Pertumbuhan Isolat Ganoderma sp. Hasil  pengamatan  pada  agar  cawan menunjukkan  bahwa  pertumbuhan  diameter koloni  isolat Ganoderma sp.  pada  media  PDA lebih  cepat  dari  pada  media  MEA  (Gambar  1). Pertumbuhan    diameter  koloni Ganoderma sp. selama  12  hari  pada  media  PDA  dan  MEA berturut-berturut  sebesar  89,9  mm  dan  62,3 mm.  Secara  visual  miselium Ganoderma sp. pada  kedua  media  terlihat  sama,  baik  dari warna  (putih  kapas)  maupun  dari  teksturnya yang  halus.  Miselium  pada  media  PDA  lebih tebal  dan  merata  dibandingkan  dengan miselium pada MEA.
Pertumbuhan  tercepat  terhadap  koloni isolat Ganoderma sp. ditemukan pada perlakuan media  PDA  (hari  ke-12),  sedangkan  untuk perlakuan  MEA  pada  hari  ke-14  (Gambar  2). Hal  tersebut  diduga  karena  kandungan karbohirat  pada  media  PDA  lebih  tinggi dibanding  MEA. Ganoderma sp.  memiliki kandungan  karbohidrat,  khususnya  jenis polisakarida  tinggi  terutama  glukan  berkisar 6,95-9,29%  sehingga  membutuhkan  sumber energi  yang  banyak  untuk  pertumbuhannya (Djawanto dan Suprapti, 2010).
Gambar  1. A)  Koloni  isolat Ganoderma sp.  pada  media  PDA.  B).  Koloni  isolat Ganoderma sp. pada media MEA.
Picture 1. A). Colony isolates of Ganoderma sp . on PDA media) , B). Colony isolates of Ganoderma sp . on MEA media.
Gambar 2. Rata-rata pertumbuhan diameter koloni isolat Ganoderma sp. pada media PDA dan MEA. Figure 2. Average of colony diameter growth of isolates Ganoderma sp . on PDA and MEA media.
Hasil  analisis  varian  menunjukkan adanya  perbedaan  rata-rata  pertumbuhan diameter  koloni  isolat  pada  kedua  media.  Hal tersebut  disebabkan  oleh  ketersediaan  nutrisi untuk jamur pada kedua media berbeda. Kedua jenis media yang diuji  merupakan media yang
kaya  akan  nutrisi  esensial  yang  dibutuhkan Ganoderma sp.  untuk  pertumbuhannya.  Hasil analisis  varian  pertumbuhan  diameter  koloni isolat  pada  media  PDA  dan  media  MEA  di tampilkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Analisis varian pertumbuhan diameter koloni isolat Ganoderma sp. Table 1. Analysis of variance diameter growth colony isolates of Ganoderma sp.
Media  PDA  memiliki  kandungan  nutrisi karbohidrat,  protein,  glukosa  dan  agar. Komposisi PDA terdiri dari 200 g kentang, 15 g agar,  dan  20  g  dextrose.  Tingginya  komposisi nutrisi  pada  media  PDA  dapat  memenuhi
kebutuhan  nutrisi  untuk  pertumbuhan  koloni Ganoderma sp.  Chang  dan  Miles  (1989) melaporkan  bahwa jamur untuk dapat  tumbuh membutuhkan  beberapa  elemen  nutrisi  dalam jumlah  yang  spesifik  dalam  media  yang  sesuai
Sumber Keragaman (Source of varians) Derajat bebas ( Degrees of freedom ) Jumlah kuadrat ( Sum square ) Kuadrat tengah ( Mean square ) Nilai Probability (Pr>F) ( Probabability value ) Perlakuan 1 4,2504 4,2504 * 0,0139 Galat 4 0,9738 0,2434 Total 5 5,2242 A B
dengan spesies jamur tersebut.  Sebagian besar media  mengandung  ekstrak  bahan  alami berupa  karbohidrat  dan  hara  lain.  Pada umumnya, bahan alami yang terkandung dalam media berupa kentang, tepung jagung, dan malt.
ekstrak atau kecambah gandum (Agrios, 1997). Lebih  lanjut  dilaporkan  bahwa  perbedaan pertumbuhan diameter koloni tiap isolat diduga karena  pengaruh kecocokan  media  untuk setiap isolat (Achmad et al., 2009).
2 . Uji    Pertumbuhan  Koloni Trichoderma spp .
Hasil  pengamatan  pada  agar  cawan menunjukkan  bahwa  pertumbuhan  ketiga koloni  isolat Trichoderma spp.  pada  masing- masing  media  memiliki  perbedaan,  baik  dari laju  pertumbuhan  diameter  koloni  miselium, warna,  tekstur  maupun  ketebalan hifa.    Secara umum laju  pertumbuhan  diameter koloni yang tercepat pada T. viride adalah di hari kedua pada media  PDA,  sedangkan  pada T.pseudokoningii adalah  media  MEA  (Gambar  4) . Pengamatan secara
visual menunjukkan
bahwa pertumbuhan T . harzianum pada  media  PDA terlihat sirkuler, bagian tengah putih kehijauan dan  bagian  luar  hijau  tua  (Gambar  3). Pengamatan  visual  pertumbuhan T.harzianum pada  media  MEA  terlihat  sirkuler,  dan  terdiri dari lapisan warna yang berbeda, berturut-turut pada bagian dalam berwarna hijau tua,  lapisan
ke-2  agak  transparan,  lapisan  ke-3  berwarna hijau tua, lapisan ke-4 berwarna putih tipis dan lapisan paling luar berwarna hijau tua . Pertumbuhan koloni T.pseudokoningii pada media PDA tumbuh secara menyebar, berwarna hijau  muda  dan  berukuran  tipis.  Koloni T.pseudokoningii pada  media  MEA  terlihat menyebar, berwarna hijau muda, dan agak tebal. Koloni T.viride pada  media  PDA  berbentuk kapas tebal, bagian tengah berukuran tipis, dan berwarna  putih,  sedangkan  koloninya  pada media  MEA  membentuk  titik-titik  berwarna hijau  muda,  dan  tebal.  Koloni T.viride pada umumnya tumbuh di cawan petri seperti kapas ( floccose ), pipih, mula-mula berwarna putih, lalu berubah  menjadi  padat  seperti  wol  dengan warna  kuning  kehijauan  sampai  hijau  tua setelah berumur 9 hari dengan berkembangnya miselium  dan  konidia  (Yates et  al .,  1999). Bagian dasar ( reverse ) dari koloni putih sampai krem atau kecokelatan.
Gambar 3. Pertumbuhan diameter koloni isolat Trichoderma spp. A). Media PDA dan B). Media MEA. Figure 3. The growth of colony diameter of Trichoderma spp. A). isolates on PDA and B). MEA media.
Isolat T.pseudokoningii dan T.harzianum pada  media  PDA di  hari  pertama  memiliki pertumbuhan  diameter  yang  sama  yaitu sebesar 13,67 mm, namun untuk isolat T. viride pertumbuhan  diameter  koloninya  lebih  besar dari  kedua  isolat  yang  lain,  yaitu  29,50  mm. Pada  hari  ke-2  terjadi  penambahan  laju pertumbuhan diameter koloni pada ketiga isolat berturut-turut  untuk T.pseudokoningii sebesar 9,30  mm, T.harzianum sebesar  35,50  mm  dan T.viride sebesar  40,70  mm.  Hasil  tersebut
menunjukkan  bahwa  pertumbuhan  isolat T.viride pada hari ke-2 lebih cepat dibandingkan kedua isolat lainnya. Memasuki hari ke-3 terjadi penurunan laju pertumbuhan isolat T.harzianum sebesar  23,90  mm  dan T.viride sebesar 18,80 mm, sedangkan T.pseudokoningii meningkat dengan nilai 18,50 mm. Pertumbuhan ketiga jenis isolat memenuhi  cawan  petri  telihat  pada  hari  ke-4 . Pertumbuhan  diameter  koloni  isolat  pada  hari pertama  pada  media  MEA berturut-turut  untuk
T. harzianum
T. pseudokoningii
T. viride
A B
isolat T.viride sebesar  16,20  mm, T.harzianum sebesar  28  mm  dan T.pseudokoningii sebesar 39,2  mm.  Pada  hari  ke-2  terjadi  penambahan laju  pertumbuhan  diameter  koloni  pada  ketiga isolat  berturut-turut  untuk T.harzianum (29,70 mm), T.viride (34,20  mm)  dan T.pseudokoningii (50,80)  mm.  Hasil  tersebut  menunjukkan bahwa  pertumbuhan  isolat T.pseudokoningii pada  hari  ke-2  lebih  cepat  dibanding  kedua isolat lainnya.
Memasuki  hari  ke-3  dan  ke-4  terjadi penurunan
laju pertumbuhan isolat
T.pseudokoningii sampai  titik  nol  yang menghasilkan  ukuran  diameter  yang  tetap
sebesar  90  mm.  Isolat T.harzianum juga mengalami penurunan pada hari ke-3 dan ke-4, sedangkan T. viride mengalami penurunan pada hari  ke-4.  Rata-rata  petumbuhan  koloni  isolat Ganoderma  sp.  pada  media  PDA  lebih  tinggi sebesar  7.0933 a berbeda  nyata  dengan pertumbuhan  isolat  pada  media  MEA  sebesar 5.400 b .  Hasil  analisis  varian diperoleh  laju pertumbuhan diameter koloni Trichoderma spp. pada  media  PDA  dan  MEA  ditampilkan  pada Tabel  2,  sedangkan  untuk  hasil  uji  lanjut Duncan  pengaruh  interaksi  antara  media  dan jenis Trichoderma spp.  terhadap  pertumbuhan diameter koloni dapat dilihat pada Tabel 3.
Gambar 4. Rata-rata pertumbuhan Diameter koloni isolat Trichoderma spp. pada media PDA dan MEA. Figure 4. The Average colony diameter growth of Trichoderma spp . isolates on PDA and MEA.
Tabel 2. Analisis varian pertumbuhan diameter koloni Trichoderma spp Table 2. Analysis of variance isolates colony diameter growth of Trichoderma spp .
Sumber Keragaman (Source of varians) Derajat bebas ( Degrees of freedom ) Jumlah kuadrat ( Sum square ) Kuadrat tengah ( Mean square ) Nilai Probability (Pr>F) ( Probabability value ) Media 1 402,1448 402,1448 ** 0,0004 Trichoderma 2 501,7124 250,8562 ** 0,0006 Media * Trichoderma 2 571,3780 285,6890 ** 0,0004 Galat 12 207,8180 17,3181 Total koreksi 17 1683,0533 Tabel 3. Uji  Lanjut  Duncan  pengaruh  interaksi  antara  media  dan  jenis Trichoderma spp.  terhadap pertumbuhan diameter koloni Table  3. Duncan Multiple Range Test for  interaction between  mediums and Trichoderma  species for growth of colony diameter
Interaksi (Interaction) N Uji Duncan (Duncan test) MEA T. pseudokoningii 3 50,833 a MEA T. viride 3 28,333 b MEA T. harzianum 3 27,167 b PDA T. viride 3 27,083 b PDA T. pseudokoningii 3 25,447 b PDA T. harzianum 3 25,443 b
Keterangan: Huruf yang berbeda pada kolom yang sama, berbeda nyata pada taraf uji 5% menurut uji DMRT Remarks: Letter different in the same column, significanly different at 95% confidence level according to DMRT
A B T. harzianum T. pseudokoningii T. viride
3.   Uji  penghambatan Trichoderma spp. terhadap Pertumbuhan Diameter Koloni Ganoderma sp. Hasil pengamatan penghambatan
Trichoderma spp. terhadap pertumbuhan koloni isolat Ganoderma sp.  menunjukkan  bahwa ketiga  jenis Trichoderma dapat  menghambat Ganoderma sp.  Penghambatan  ketiga  jenis Trichoderma yang  digunakan  ditandai  dengan adanya  zona  penghambatan  (Gambar  5).
Trichoderma sp.  bersifat  sebagai  antagonisme secara in  vitro dengan  terbentuknya  zona penghambatan  yang  merupakan  indikasi  awal terlibatnya  antibiotik  dan  antagonisme  baik pada media PDA maupun MEA (Karthikeyan et al. ,  2007). Aktivitas Trichoderma untuk menghambat  pertumbuhan  patogen  sangat dipengaruhi  oleh  lingkungan  (Roatti et  al ., 2013).
Gambar 5. Penghambatan Trichoderma spp. terhadap Ganoderma sp. pada: A) Media PDA dan B) Media MEA. Figure 5. The inhibition of Trichoderma spp. against Ganoderma sp . on: A) PDA Medium and B) MEA Medium.
Persentase laju penghambatan
Trichoderma spp . terhadap Ganoderma sp. pada media  PDA  diperoleh  rata-rata  penghambatan tertinggi berturut-turut pada perlakuan T.harzianum , T.pseudokoningii,  dan  T.viride (Gambar  6).  Hasil  tersebut  sejalan  dengan penelitian  lain    bahwa  uji  antagonisme  dengan metode  langsung  pada  media  PDA  diperoleh hasil Tichoderma T38  mampu  menghambat pertumbuhan Ganoderma sp .  sebesar  37,2% dan Trichoderma T39 sebesar 48,8% (Herliyana et  al., 2011).  Persentase  penghambatan  pada media  MEA  diperoleh  rata-rata  penghambatan tertinggi  berturut-turut    untuk T.harzianum , T.pseudokoningii, dan T.viride .  Lambatnya pertumbuhan  diameter  koloni Ganoderma sp. pada  perlakuan  pemberian  fungi  antagonis Trichoderma sp.  diduga  adanya  senyawa  volatil yang  dihasilkan  oleh Trichoderma sp.  yang bersifat  fungistatik  terhadap Ganoderma sp. Mekanisme  antibiosis  dapat  melibatkan metabolit  beracun  (toksin)  atau  enzim ekstraseluler  yang  dihasilkan  oleh  fungi
antagonis (W ells,  1988  dalam  Achmad et  al., 2010).  Produksi  enzim  tersebut  sangat dipengaruhi  oleh  substrat ( López et al .,  2014). Enzim  hidrolitik  yang  dihasilkan  oleh Trichoderma spp.  yaitu  β-1,3-glukanase, kitinase,  selulase  dan  proteinase  (Kumar et al., 2012). T.viride ditemukan  dengan  produksi kitinase  tertinggi  sedangkan  T.harzianum menghasilkan  β-1,3-glukanase  tertinggi  dalam media pertumbuhan.
Hasil  penelitian  ini  diperoleh  persentase penghambatan T.harzianum
lebih tinggi dibanding  dengan  yang  lainnya,  karena
Trichoderma spp. dapat menghambat pertumbuhan G.  boninense (Abadi,  1987). Trichoderma mampu  memproduksi  sejumlah senyawa  antibiotik,  termasuk  di  dalamnya enzim  yang  mampu  mendegradasi  dinding  sel, dan  sejumlah  senyawa  sekunder  (Vinale et  al., 2008). Penghambatan yang dilakukan T.harzianum melalui  mekanisme  antagonistik (Denis and Webster, 1971).
Gambar  6. Persentase  penghambatan Trichoderma spp.  terhadap  pertumbuhan  diameter  koloni isolat Ganoderma sp. pada media PDA dan MEA Figure  6. The  percentage  inhibition  of  Trichoderma  spp.  on  the  growth  of  the  colony  diameter  of Ganoderma sp. isolates on PDA and MEA medium.
Hasil  analisis  varian  penghambatan Trichoderma spp.  terhadap  pertumbuhan diameter koloni Ganoderma sp. pada media PDA dan MEA ditampilkan pada Tabel 4. Penghambatan  pertumbuhan  diameter koloni  isolat Ganoderma sp.  diduga  disebabkan oleh  pertumbuhan  koloni Trichoderma spp. lebih  cepat  dan  kemampuan  kompetisi  lebih tinggi  dibanding  dengan  pertumbuhan  koloni Ganoderma sp. (Susanto et al., 2005; Izzati, dan Abdullah,  2008;  Schubert et  al. ,  2008;
Siddiquee et al. ,  2009).  Hasil  pengujian  secara in-vitro menunjukan  bahwa Trichoderma sp. berperan  sebagai  mikoparasit  dengan  cara membelit miselia
S. rolfsii, sehingga menyebabkan  degradasi  dinding  sel  hifa  dan lisis  miselium  patogen  (Supriati et  al .  2005; Rawat and Tewari, 2010). Hasil  uji  lanjut  Duncan  penghambatan Trichoderma spp.  terhadap  pertumbuhan diameter  koloni Ganoderma sp.  dapat  dilihat pada Tabel 5.
Tabel  4. Analisis  varian  penghambatan Trichoderma spp.  terhadap  pertumbuhan  koloni  isolat Ganoderma sp. Table 4. Analysis  of  variance  inhibiting  barriers  of  Trichoderma spp .  for  growth  of  Ganoderma sp. isolates colony
Sumber Keragaman
(Source of varians) Derajat bebas ( Degrees of freedom ) Jumlah kuadrat ( Sum square ) Kuadrat tengah ( Mean square ) Nilai Probability (Pr>F) ( Probabability value ) Media 1 48,9720 48,9720 ns 0,2072 Trichoderma 2 2207,2789 1103,6395 ** 0,0001 Media * Trichoderma 2 111,0861 55,5431 ns 0,1758 Galat 12 330,5637 27,5469 Total koreksi 17 2697,9009 Tabel 5. Uji Lanjut Duncan penghambatan Trichoderma spp.  terhadap  pertumbuhan  diameter koloni Ganoderma sp. Table 5. Duncan Multiple Range Test of Trichoderma spp .  inhibiting  barrier  against    growth  of  isolates colony diameter of Ganoderma sp . Jenis Trichoderma N Uji Duncan T. harzianum 6 73,595 a T. pseudokoningii 6 59,782 b T. viride 6 46,472 c
Keterangan: Huruf  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama, berbeda nyata pada taraf 95% menurut uji DMRT. Remarks: Letter  different  in  the  same  column  are significanly  different  at  95%  confidence  level  according  to DMRT)
Purwantisari dan Hastuti (2009) melaporkan bahwa Trichoderma sp.
merupakan  jenis  yang  potensial  untuk pengendalian  penyakit  secara  hayati.  Lebih lanjut  dilaporkan  bahwa Trichoderma sp. mempunyai  daya  antagonis  yang  tinggi  dan dapat  mengeluarkan  racun  (mycotoxin)  yaitu senyawa  yang  dapat  menghambat  bahkan dapat  mematikan  cendawan  lain  (Dennis  and Webster,  1971).  Senyawa  yang  dihasilkan  oleh Trichoderma sp. yaitu senyawa volatil dan non- volatil  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan dan  produksi  konidia  patogen  uji  (Shaikh  and Nasreen, 2013).
Uji Antagonisme Trichoderma spp. terhadap Ganoderma sp. yang Menyerang .... Benyamin Dendang

## IV. KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Trichoderma spp. efektif menghambat laju pertumbuhan koloni Ganoderma sp. pada cawan petri
secara
in-vitro . T.harzianum memperlihatkan daya hambat tertinggi  (74%) terhadap  pertumbuhan  koloni Ganoderma sp. dibandingkan
dengan
T.viride dan
T.pseudokoningii .  Proses  penghambatan  terjadi melalui  mekanisme  antagonis  yang  ditandai dengan adanya zona penghambatan.

## B. Saran
Trichoderma spp.  dapat  dipertimbangkan sebagai  agen  hayati  dalam  pengendalian Ganoderma sp.  pada  tanaman  sengon  untuk memprioritaskan
cara-cara perlindungan tanaman  non  kimiawi  agar  tidak  mengganggu kesehatan,  merusak  sumber  daya  alam  dan membunuh agens hayati.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan  Yang  Maha  Kuasa  atas  segala  karunia- Nya  sehingga  karya  ilmiah  ini  berhasil diselesaikan.  Terima  kasih  penulis  ucapkan kepada  Bapak  Dr.  Ir.  Achmad,  MS.,  Ibu  Dr.  Ir. Elis  Nina  Herliyana,  M.Si,  dan  Bapak  Dr.  Ir. Darmono  Taniwiryono,  M.Sc  yang  selalu membantu mengarahkan pelaksanaan penelitian  ini.  Semoga  karya  ilmiah  ini bermanfaat.

## DAFTAR PUSTAKA
Abadi, A.L. (1987). Biologi Ganoderma boninense Pat. Pada Kelapa Sawit (Elaesis guineensis Jacg.) dan Pengaruh beberapa Mikroba Tanah Antagonistik terhadap Pertumbuhannya .
(Disertasi). Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Achmad,  S.  Hadi,  S.  Harran,  E.S.  Gumbira, B.Satiawiharja  dan  M.K.  Kardin.  ( 2010).
Aktivitas Antagonisme In-Vitro Trichoderma harzianum dan Trichoderma  pseudokoningii
Terhadap  Patogen  Lodoh Pinus  merkusii.
Jurnal  Penelitian  Hutan  Tanaman,  7 (5),  233- 240.
Achmad,  E.N.  Herliyana,  O.A.F.  Yurti  dan  A.P. Hidayat.  (2009). Karakteristik  Fisiologi  Isolat Pleurotus spp. Jurnal Litri, 15, 46-51.
Agrios,  G.N.  (1997). Plant  Pathology. New  York: Academic Press.
Alvarez,  P.  (2011). Effect of  Trichoderma harzianum on  Monterey  pine  seedlings  infected  by Fusarium  circinatum. Sustainable  Forest Manajement  Research  Institute.  (Thesis).
University of Valladolid – INIA.
Amin, F. V.K. Razdan, F.A. Mohiddin, K.A. Bhat and S.
Banday.  (2010).  Potential  of Trichoderma species  as  biocontrol  agents  of  soil  borne fungal  propagules. Journal of Phytology , 2 (10),
38–41.
Chang,  S.T.  and  P.G.  Miles.  (1989). Edible  Mushrums and  their  cultivation .  Boca  Raton:  CRC Press.Inc. 345 pp.
Cook,  R.J.  and  K.F.  Baker.  (1989). The  Nature  on
Practice of Biological Control of Plant Pathogens . Minesota: ABS press, The American Phytopathological Society, St. Paul, 539 p Coșkuntuna,  A.  and  N.  Özer.  (2007).  Biological Control  of  Onion  Rot  Disease  Using
Trichoderma  harzianum and  Induction  of antifungal  Compounds  in  Onion  Set  Following Seed  Treatmen.  Departement  of  Plant Protection, Faculti of Agriculture, Namik Kemal University,  Tekirdağ  59030, Turkey,  27 ,  330- 336.
Haryono,      dan        S.M.      Widyastuti.      (2001). Antifungal  Activity  of  Purifieed  Endochitinase Produced  by  Biocontrol  Agent Trichoderma reesei Against Ganoderma philippiii.  Pakistan
Journal of Biological Sciences, 4 (10), 1232-1234.
Hennssy, C. and A. Daly. (2007). Ganoderma Diseases no.  167.  Plant  Pathology,    Darwin:  Diagnostic Services.
Herliyana,  E.N.  D.  Taniwiryono,  H.  Minarsih,  M.A. Firmansayah  dan    B.  Dendang.  (2011). Pengendalian  Serangan Ganoderma spp.  (60- 80%)  Pada  Tanaman  Sengon  Sebagai Pelindung  Tanaman  Kopi  dan  Kakao. Jurnal Ilmu Pertanian Indonesia, 16 (1), 14-27.
Izzati,  N.A.  and  F.  Abdullah.  (2008).  Disease supression  in Ganoderma - infected  oilk  palm seedlings treated with Trichoderma harzianum . Plant  Protection Science.  44 ,  101- 107.
Kandan, A. R. Bhaskaran and R. Samiyappan. (2010). Ganoderma -  a  basal  stem  rot  disease  of coconut  palm  in  South  Asia  and  Asia  Pacific regions. Archives  of  Phytopathology  and  Plant Protection, 43 , 1445 – 1449.
Karthikeyan, M, R. Bhaskaran, S. Mathiyazhagan and R.Velazhahan. (2007). Influence of phylloplane colonizing  biocontrol  agents  on  the  black  spot of rose caused by Diplocarpon rosae. Journal of Plant Interactions, 2 (4), 225-231.
Kumar,  K.,  N.  Amaresan,  S.  Bhagat,  K.  Madhuri  and
R.C.  Srivastava.  (2012).  Isolation  and Characterization  of Trichoderma spp.  for Antagonistic  Activity  Against  Root  Rot  and Foliar  Pathogens. Indian  Journal  Microbiology,
52 (2), 137–144.
Lee,  T.O.  Z.  Khan,  S.G.  Kim  and  Y.H.  Kim.  (2008). Amendment with peony ( Paeonia suffructicosa )
root  bark  powder  improves  the  biocontrol efficacy  of Trichoderma  harzianum against Rhizoctonia solani . Journal of Microbiology and Biotechnology, 18 , 1537-1543.
Lee,  H.M.  Z.  Khan,  S.G  Kim,  N.I.  Baek  and  Y.H.  Kim.
(2011).  Evaluation  of  biocontrol  potential  of some  medicinal  plant  materials  alone  and  in combination  with
Trichoderma  harzianum against Rhizoctonia  solani AG  2-1. Journal  of Plant Pathology, 27 , 68-77.
López,  C.G.  V.G.  Prieto,  S.  Lanzuise  and  S.  Lorito. (2014).    Enzyme  activity  of  extracellular protein induced in Trichoderma asperellum and T.  longibrachiatum by  substrates  based  on
Agaricus  bisporus and Phymatotrichopsis omnivora . Fungal Biology, 118 (2), 211-221.
Mile,  M.  (2003).  Tingkat  Produktivitas  dan
Kelestarian  Hutan  Rakyat. Prosiding  Seminar Sehari, 12 Desember 2003. Prospek Pengembangan  Hutan  Rakyat  di  era  Otonomi Daerah,  Loka  Litbang  Hutan  Monsoon. Badan Litbang Kehutanan. Departemen Kehutanan. Perazzolli, M. B. Roatti, E. Bozza and I. Pertot. (2011). Trichoderma harzianum T39 induces resistance  against  downy  mildew  by  priming for  defense  without  costs  for  grapevine. Biological Control, 58, 74-82.
Purwantisari,  S.  dan  R.B.  Hastuti.  (2009).  Uji
Antagonisme  Fungi  Patogen Phytophthora infestans Penyebab  Penyakit  Busuk  Daun  dan Umbi Tanaman Kentang dengan Menggunakan
Trichoderma sp.  Isolat  Lokal. Jurnal  Bioma, 11 (1), 24-32.
Rawat,  R.  and  L.  Tewari.  (2010).  Transmission electron  microscopic  study  of  the  cytological changes  in Sclerotium  rolfsii parasitized  by  a biocontrol  fungus Trichoderma sp. Mycology: An  International  Journal  on  Fungal  Biology , 1 (4), 237-241.
Roatti,  B.  M.  Perazzolli,  C.  Gessler,  and  I.  Pertot. (2013).  Abiotic  Stresses  Affect Trichoderma harzianum T39-Induced  Resistance  to  Downy Mildew in Grapevine. Phytopathology , 103 (12), 2013-1233.
Rosa,  D.R.  and  C.J.L.  Herrera.  (2009).  Evaluation  of Trichoderma spp. as biocontrol agents against avocado  white  root  rot. Biological  Control, 51 (1), 66–71.
Schubert,  M.S.  F.W.  Fink  and  M.R.  Schawarze. (2008).  Field  experiments  to  evaluate  the application of Trichoderma strain (T-15603.1) for  biological  control  of  wood  decay  fungi  in tress. Journal of Arboricultural, 31 , 249-268.
Shaikh,  F.T.  and  S.  Nasreen.  (2013).  In  Vitro Assessment of Antagonistic Activity of T. viride and T.  harzianum Against  Pathogenic  Fungi. Indian Journal of Applied Research, 3 (5), 57-59.
Siddiquee,  S.  U.K.  Yusuf,  K.  Hossain  and  S.  Jahan.
(2009). In-vitro studies  on  the  potential Trichoderma  harzianum for  antagonistic properties  against Ganoderma  boninense . Journal of  Food, Agriculture and Environment,
7 (3 and 4), 970-976.
Sinulingga,  W. (1989). Pengendalian Biologi Penyakit Cendawan  Akar  Putih  pada  Tanaman  Karet . Deli Serdang: Pusat Penelitian Perkebunan Sei. Putih, Galang. Hal. 1-7.
Solomon,  J.D.,  T.D.Leininger,  A.D.  Wilson,  R.L.
Anderson,  L.C.  Thompson,  and F.I.  McCracken.
(1993).  Ash  Pests: A  Guide  to  Major  Insect,
Diseases,  Air  Pollution  Injury  and  Chemical Injury . Gen. Tech. Rep. SO-96. NewOrleans, LA:
U.S. Department of Agriculture, Forest Service, SouthernForest Experiment Station. 45p. Sudadi.  (2005).  Interaksi  mineral  lempung  bahan organik  mikroba  tanah  pengaruh  terhadap antagonisme dan pemanfaatan dalam pengendalian  hayati  penyakit  tanaman  asal tanah. Jurnal  Ilmu  Tanah  dan  Lingkungan,
5 (1), 8-29.
Supriati, L. I.R. Sastrahidayat dan A.L. Abadi. (2005). Potensi  antagonis  indigenous  lahan  gambut dalam  mengendalikan  penyakit  rebah  semai ( Sclerotium  rolfsii Sacc.)  pada  tanaman kedelai. Jurnal Habitat 15 (4), 292-308.
Susanto,  A.  P.S.  Sudharto  and  R.Y.  Purba.  (2005). Enhancing biological control of basal stem rot disease  ( Ganoderma  boninense )  in  oil  palm plantations. Mycophatologia, 159 , 153-157.
Vinale,  F.  E.L.  Sivasithamparam,  R.  Ghisalberti,  S.L. Marra,  Woo  and  M.  Lorito.  (2008). Trichoderma–plant–pathogen  interactions . Soil Biology and Biochemistry, 40 , 1–10.
Dennis,  L.  and  J.  Webster.  (1971).  Antagonistic properties  of  species  groups  of Trichoderma .
Production of non-volatile antibiotics.
Transactions of the British  Mycological  Society, 57 , 25-39.
Yates, I.E. F. Meredith, W. Smart, C.W. Bacon and A.J. Jaworski. (1999). Trichoderma viride suppresses  fumonisin  B1  production  by Fusarium  moniliforme.  Journal  of  Food Protection, 62 (11), 1326 – 1332.
Widyastuti, S.M. 2007. Peran Trichoderma spp. dalam evitalisasi  Kehutanan  diIndonesia .  Yogyakarta: Gajah Mada University Press, 255p.