The effect of a combination of kepok banana peel (musa acuminata  balbisiana  colla)  and  bay  leaf  (syzygium polyanthum)  extracts  on  bleeding  time  in  wistar  rats (rattus norvegicus)
Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kulit Pisang Kepok (Musa acuminata balbisiana Colla) dan Daun Salam (Syzygium polyanthum)  terhadap  Waktu  Henti  Perdarahan  pada Tikus Wistar (Rattus Norvegicus)
Deliza Dhiakhalda Sarinastiti 1* , Tantri Analisawati Sudarsono 2 , Kurnia Ritma Dhanti 3 , Linda Wijayanti 4 , Nur An-Nuha Muniroh 5 , Winda Rahma Cahyaningrum 6 , Respatiningtyas Amadea Danfi Putranti 7 , Noha Hanifa 8
*1,2,3,5,6,7,8 Universitas Muhammadiyah Purwokerto, Jl. KH. Ahmad Dahlan, Dusun III, Kembaran, Banyumas, Jawa Tengah, Indonesia. email: dlzdhiakhalda2305@gmail.com
4 RSUD BANYUMAS, Jl. Rumah Sakit No.1, Karangpucung, Banyumas,
Banyumas, Jawa Tengah , Indonesia.

## I N F O  A R T I K E L

## A B S T R A C T

## ARTICLE HISTORY:
Artikel diterima: 30 Maret 2024 Artikel direvisi: 19 April 2024 Artikel disetujui: 25 April 2024

## KORESPONDEN
Tantri Analisawati Sudarsono Email: tan3analisa89@gmail.com

## ORIGINAL ARTICLE
Halaman: 58 - 68 DOI: https://doi.org/10.30989/mik.v13i1.1342
Penerbit: Universitas Jenderal Achmad Yani Yogyakarta, Indonesia. Artikel terbuka yang berlisensi CC-BY- SA .
Background: The body injured potential for bleeding. Hemostatic drugs used to stop bleeding have many side effects. Kepok banana peels and bay leaves contain flavonoids and tannins which can stop bleeding.
Objective: This  study  aims  to  determine  the  effect  of  a  combination  of kepok banana peel extract and bay leaves on bleeding time in Wistar rats. Methods: T rue experimental research type with posttest only with control group  design.  20  rats  were  divided  into  5  groups,  group  K-  was  given aquadest, group K+: epinephrine 1mg/1ml, group F1: kepok banana peel extract  and  bay  leaves  25%:75%,  group  F2  was  given  extract  50:50%, and group F3 was given 75%:25% extract.
Results: One Way ANOVA test obtained a value of p=0,002 showing that there  was  a  significant  difference  in  the  time  to  stop  bleeding  for  each treatment  group,  followed  by  the  Post  Hoc  Games  Howell  test. Conclusion: The F3 group with a combination of 75% kepok banana peel extract  and  25%  bay  leaf  extract  was  the  most  effective  group  in accelerating bleeding time in Wistar rats .
Keywords: banana  kepok  peel,  bay  leaves  bleeding  time,  hemostasis, wistar rats

## A B S T R A K
Latar  Belakang: Permukaan  tubuh  terluka  berpotensi  mengalami perdarahan.  Obat  hemostatik  yang  beredar  memiliki  banyak  efek samping. Kulit pisang kepok dan daun salam mengandung flavonoid dan tanin yang dapat menghentikan perdarahan.
Tujuan: Untuk  mengetahui  pengaruh  kombinasi  ekstrak  kulit  pisang kepok dan daun salam terhadap waktu henti perdarahan tikus Wistar. Metode: Jenis  penelitian true  experimental dengan rancangan  posttest only  with  control  group  design .  20  ekor  tikus  dibagi  dalam  5  kelompok, kelompok K-: aquadest , kelompok K+: epinefrin 1mg/1ml, kelompok F1: kulit pisang kepok dan daun salam perbandingan 25%:75%, kelompok F2 diberikan ekstrak 50:50%, dan kelompok F3 diberikan ekstrak 75%:25%. Hasil: Hasil uji One Way ANOVA diperoleh nilai p=0,002 menunjukan ada perbedaan  signifikan  waktu  henti  perdarahan  dari  setiap  kelompok dilanjutkan dengan uji Pos Hoct Games Howell . Kesimpulan: Kelompok F3 dengan kombinasi esktrak kulit pisang kepok 75  %  dan  daun  salam  25%  merupakan  kelompok  yang  paling  efektif dalam mempercepat waktu perdarahan pada tikus Wistar.
Kata  kunci: daun  salam,  hemostasis,  kulit  pisang  kepok,  tikus  wistar, waktu perdarahan

## PENDAHULUAN
Luka  merupakan  suatu  kondisi  yang bisa  terjadi  secara  sengaja  maupun  tidak sengaja saat manusia sedang beraktivitas dan tingkat keparahannya bervariasi. Luka didefinisikan  sebagai  bagian  dari  kerusakan tubuh  yang  terlihat  pada  kulit  dan  ditandai dengan adanya robek, rusak atau cederanya jaringan kulit karena berbagai sebab (misalnya  trauma  benda  tajam,  benturan bahan kimia, luka bakar, sengatan listrik, dan gigitan hewan). 1 Data Riset Kesehatan Dasar (Riskesdas)  tahun  2018  menunjukkan  angka prevalensi  cedera  nasional  sebesar  8,2%. Proporsi  cedera  tertinggi  yang  dialami penduduk Indonesia adalah lecet (64%), luka sayat  (20%),  terkilir  (32%),  patah  tulang (5,5%),  dan  luka  putusnya  anggota  badan (0,5%). 2
Ketika bagian permukaan tubuh terluka maka seseorang berpotensi mengalami  perdarahan. 3 Perdarahan  adalah suatu kondisi patologis yang disebabkan oleh robeknya  sebagian  epidermis  kulit  sehingga darah  keluar  dari  kapiler.  Darah  yang  hilang dapat menyebabkan pembuluh darah menyempit sehingga mengurangi aliran darah ke  area  luka. 4 Waktu  perdarahan (bleeding time )  adalah  jangka  waktu  antara  ketika perdarahan dimulai hingga perdarahan berhenti karena pembentukan sumbat trombosit  sementara.  Tujuan  pengukuran waktu  perdarahan  adalah  untuk  mengetahui respon  vaskular  terhadap  hemostasis  atau kemampuan pembuluh darah untuk kontraksi
dan retraksi serta peran sumbatan fibrin pada daerah luka. 5 Tubuh manusia menyediakan kemampuan  alami  untuk  menghentikan perdarahan yang disebut hemostasis. Hemostasis  atau  haemostasis  berasal  dari Bahasa  Yunani aimóstasis yang  terdiri  dari dua kata yaitu aíma yang berarti “darah" dan stásis yang  berarti  "stagnasi". 6 Hemostasis adalah  suatu  mekanisme  lokal  tubuh  yang timbul  secara  spontan  yang  bertujuan  untuk mempertahankan  sistem  sirkulasi  darah, fluiditas  darah  sehingga  darah  tetap  berada dalam  sistem  pembuluh  darah  dan  tetap melakukan fungsinya di dalam tubuh. 7
Penggunaan obat antiinflamasi nonsteroid,  obat  antitrombotik,  dan  pasien trombositopenia dapat menghambat mekanisme  hemostatik  tubuh,  sehingga mengakibatkan perdarahan berkepanjangan. 8 Proses  hemostatis  yang  terhambat  dapat diatasi  dengan  penggunaan  obat  hemostatik yang  mekanisme  kerjanya  memicu  agregasi trombosit  membentuk  trombus  dan  berperan sebagai agen antifibrinolitik sehingga membantu menghentikan perdarahan. 9
Obat  hemostatik  adalah  obat  yang digunakan untuk mengobati perdarahan yang tidak  normal.  Terdapat  dua  kategori  obat hemostatik  yaitu  sistemik  dan  lokal. 10 Obat hemostatik yang biasa digunakan antara lain epinefrin, asam traneksamat, helistat, surgicel,  avitin  dan  obat  hemostatik  lainnya. Efek  samping  yang  umum  terjadi  akibat penggunaan  epinefrin  adalah  takikardia, hipertensi, sakit kepala, kecemasan,
Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kulit Pisang Kepok (Musa acuminata balbisian Colla) dan Daun Salam ( Syzygium polyanthum ) terhadap Waktu Henti Perdarahan pada Tikus Wistar ( Rattus Norvegicus ) Deliza Dhiakhalda Sarinastiti 1 , Tantri Analisawati Sudarsono 2 , Kurnia Ritma Dhanti 3
diaforesis,  mual  dan  muntah. 11 Pada  pasien penderita gagal ginjal epinefrin mengakibatkan penyempitan pembuluh darah ginjal dan dapat menurunkan gangguan urin. 12
Sementara itu, secara umum obat hemostatik berpotensi  menyebabkan  peradangan  dan nekrosis  jaringan  di  sekitarnya,  terjadinya abses, memicu pertumbuhan bakteri, mempengaruhi sirkulasi sistemik, dan menyebabkan  kejadian  oklusi  pembuluh darah seperti penyakit jantung, stroke, emboli paru dan trombosis vena. 9,13
Riset  terhadap  tanaman  sebagai alternatif  pengobatan  dapat  dikembangkan untuk  meningkatkan  taraf  kesehatan  di Indonesia. Penggunaan bahan alami dengan dosis yang sesuai diharapkan dapat meminimalisir efek  samping  dari  obat hemostatik  yang  telah  beredar.  Daun  salam adalah  salah  satu  tanaman  rempah  yang sering digunakan oleh masyarakat Indonesia. Selain digunakan sebagai rempah pelengkap pada  masakan,  daun  salam  juga  berperan sebagai  obat  untuk  beberapa  penyakit. 14
Kandungan  senyawa  yang  ada  pada  daun salam yaitu flavonoid dan tanin. 15
Bahan alami lain yang juga mengandung  flavonoid  dan  tanin  yaitu  kulit pisang  kepok.  Kulit  pisang  kepok  memiliki kandungan  flavonoid  yang  lebih  tinggi  dari bagian pisang lainnya. 16 Salah satu zat yang berperan  penting  dalam  proses  hemostatik adalah flavonoid. Flavonoid menekan prostasiklin  yang  merupakan  vasodilator dalam  menghambat  agregasi  trombosit. Penghambatan  prostasiklin  menyebabkan
pembentukan lebih banyak agregat trombosit, sehingga mempersingkat waktu perdarahan. 17
Sementara  itu,  tanin  adalah  salah  satu  zat yang memiliki kemampuan untuk mengendapkan  protein  darah,  khususnya thrombin yang penting untuk proses hemostasis  selama  tahap  pembentukan bekuan darah. 18
Penelitian  Pauran et  al .  (2019) menunjukkan bahwa ekstrak daun tembelekan  yang  mengandung  senyawa flavonoid  berpengaruh  dalam  mempercepat waktu  perdarahan  pada  tikus  galur  Wistar. 3 Penelitian  Sidratullah  (2021)  menunjukkan bahwa pemberian ekstrak tanaman Ageratum conyzoides L.  efektif  dalam  mempercepat penghentian  perdarahan  pada  mencit  jantan ( Mus musculus ) yang terlihat dari berkurangnya  waktu  perdarahan  setelah perlakuan.  Hal  ini  terjadi  karena  ekstrak tersebut mengandung senyawa flavonoid dan tanin  yang  punya  peran  besar  dalam  proses hemostasis. 19
Berdasarkan  uraian  tersebut,  tujuan penelitian  ini  untuk  mengetahui  pengaruh kombinasi  ekstrak  kulit  pisang  kepok  ( Musa acuminata  balbisian Colla)  dan  daun  salam ( Syzygium polyanthum ) menggunakan konsentrasi 25%:75%, 50%;50% dan 75%:25%  terhadap  waktu  henti  perdarahan ( bleeding  time )  pada  tikus  wistar  ( Rattus Norvegicus ).

## BAHAN DAN CARA PENELITIAN
Jenis  penelitian true  experimental dengan  rancangan posttest  only  with  control
Media Ilmu Kesehatan Vol. 13, No. 1, April 2024 https://doi.org/10.30989/mik.v13i1.1342
group design . Penelitian ini dilakukan setelah mendapatkan  izin  etik  penelitian  dari  Komisi Etik Penelitian Kesehatan Universitas Muhammadiyah  Purwokerto  dengan  Nomor Registrasi: KEPK/UMP/64/VIII/2023. Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Biologi Farmasi
dan Laboratorium
Farmakologi  Fakultas  Farmasi  Universitas Muhammadiyah  Purwokerto  dari  bulan  Juli hingga September 2023.
Sampel  penelitian  tikus  Wistar  jantan ( Rattus  norvegicus )  dengan  berat  150 – 200gram  yang  dipilih  secara simple  random sampling .  Besar  sampel  setiap  kelompok diperoleh  dari  rumus  perhitungan Federer yang  menunjukan  hasil  minimal  4  ekor  tikus perkelompok  (5  kelompok),  maka  dari  itu jumlah  keseluruhan  sampel  yang  digunakan sebanyak  20  ekor  tikus  Wistar  jantan.  5 kelompok  tersebut  terdiri  atas  kelompok kontrol  negatif  (K-)  diberikan  aquades  steril, kelompok  kontrol  positif  (K+)  diberikan  obat epinefrin 1:1000, kelompok perlakuan pertama  (F1)  kombinasi  ekstrak  25%:75%, kelompok  perlakuan  kedua  (F2)  kombinasi ekstrak  50%:50%  dan  kelompok  perlakuan ketiga (F3) kombinasi ekstrak 75%:25%.
Alat-alat yang dipakai dalam melaksanakan penelitian yaitu blender (Cosmos),  oven,  corong,  timbangan  analitik (Shimadzu), rotary  evaporator (Heidolph) , waterbath ,  Alat Fourier  Transform  Infrared (FTIR), gunting bedah (Onemed), stop watch , jangka  sorong  digital  (Sigmat  Sketmat)  dan spidol permanen.
Bahan  penelitian  yaitu  ekstrak  kulit pisang  kepok (Musa  acuminata  balbisian Colla) dan daun salam ( Syzygium polyanthum ),  kain  flanel,  epinefrin,  alkohol 70%,  kapas,  aquades  steril,  kertas  serap, pakan standar D2 dan air mineral.
1.  Pembuatan  Ekstrak  Kulit  Pisang  dan Daun Salam
Bahan utama dikeringkan
menggunakan oven  dengan suhu  40 o C-60 o C untuk  mereduksi  kadar  air.  Bahan  ditimbang sebagai berat kering, lalu dihaluskan menggunakan  blender.  Ditimbang  serbuk sampel, masing-masing sebanyak 500 gram, direndam dalam toples kaca dengan 3.750 mL etanol 96%, didiamkan selama 3 hari dengan pengadukan  konstan  dan  terlindungi  dari cahaya.  Setelah  3  hari  kemudian  disaring menggunakan  corong  dan  kain  flanel  dan ampasnya  direndam  kembali  dengan  1.250 mL pelarut dan didiamkan selama 1 x 24 jam. Filtrat  yang  diperoleh  dikentalkan  dengan rotary evaporator suhu 50 o C sampai diperoleh ekstrak  kulit  pisang  dan  daun  salam  pekat. Diuapkan  lagi  dengan waterbath sampai ekstrak  benar-benar  kental. 20 Ekstrak  kulit pisang dan daun salam yang sudah kental lalu dikombinasikan.
2.  Identifikasi  Senyawa  menggunakan

## Fourier Transform Infrared (FTIR)
Sebanyak  1  tetes  esktrak  diletakan ditengah plat kristal Attenuated Total Reflektance (ATR) yang telah dipasang pada alat  FTIR,  kemudian  alat  tersebut  akan mengidentifkasi  gugus  fungsional  yang  ada pada  ekstrak  kulit  pisang  kepok  dan  daun
Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kulit Pisang Kepok (Musa acuminata balbisian Colla) dan Daun Salam ( Syzygium polyanthum ) terhadap Waktu Henti Perdarahan pada Tikus Wistar ( Rattus Norvegicus ) Deliza Dhiakhalda Sarinastiti 1 , Tantri Analisawati Sudarsono 2 , Kurnia Ritma Dhanti 3 P-ISSN 2252-3413, E-ISSN 2548-6268
salam. Mekanisme kerja alat ini yaitu sumber sinar  yang  berasal  dari  bawah  akan dipancarkan sesuai dengan sudut sinar krirtis ke arah plat kristal melewati sampel kemudian dipantulkan  ke  detektor.  Sinar  yang  telah melewati detektor akan menghasilkan panjang gelombang dan spektra IR yang akan terlihat pada monitor dalam bentuk grafik. 21

## 3. Penyiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  dipilih  adalah  tikus galur  wistar  yang  sehat  dan  tidak  terdapat kelainan  anatomi  yang  terlihat. 22 Tikus  galur
Wistar berkelamin Jantan dipilih karena tidak terjadinya  menstruasi  maupun  kehamilan sehingga  dapat  memberikan  hasil  penelitian yang lebih stabil dan mampu menggambarkan secara  ilmiah  yang  mungkin  terjadi  pada manusia. 23 Hewan uji diadaptasikan selama 2 minggu  (14  hari)  di  lingkungan  laboratorium Farmakologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.  Tikus  diberi  pakan  standar  D2 dan  air  minum  dan  kandangnya  dibersihkan setiap 3 kali sehari.
4. Perhitungan
Waktu Perdarahan (Bleeding Time) Metode Duke
Sebelum perlukaan, ekor tikus dibersihkan  terlebih  dahulu  dengan  alkohol 70%,  kemudian  dilakukan  pemotongan  ekor sepanjang  3  cm  dari  ujung  ekor  tikus menggunakan gunting bedah. Ekor dicelupkan sesuai dengan kelompok perlakuan selama 5 detik. Stopwatch dinyalakan  saat  darah  pertama  kali  muncul hingga darah tidak terlihat pada kertas saring dan  dicatat  sebagai  waktu  perdarahan ( bleeding  time ). 3,24 Anestesi  lokal  tidak
dilakukan supaya hasil penelitian tidak rancu. 7
Setelah perlakuan, ekor tikus ditetesi povidone  iodine dan  ditutup  kain  kassa  dan plester.

## 5. Analisis Data
Data  waktu  perdarahan  (detik)  yang telah  dihitung  dianalisis  secara  statistik meliputi  uji  normalitas  (Shapiro-Wilk),  uji homogenitas  ( Levene  Test ),  uji  parametrik One  Way ANOVA  dan  uji  lanjut Games- Howell.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1. Hasil Ekstraksi
Diperoleh  sebanyak  98gram  ekstrak pekat  daun  salam  dan  sebanyak  75gram esktrak  pekat  kulit  pisang.  Kedua  esktrak tersebut  dikombinasikan  sesuai  dengan perbandingan  yang  telah  ditentukan,  yaitu kelompok  F1  kombinasi  esktrak  kulit  pisang kepok 25% dengan 75% ekstrak daun salam, F2 kombinasi ekstrak kulit pisang kepok 50% dengan  ekstrak  daun  salam  50%  dan  F3 kombinasi  75%  kulit  pisang  kepok  dengan 25% ekstrak daun salam.
2. Hasil Analisis Fourier Transform Infrared (FTIR)
Analisis FTIR dilakukan untuk melihat spektrum  serapan  masing-  masing  ekstrak dimana  data  serapan  yang  terdeteksi  pada bilangan gelombang 4000 – 400 cm -1 . 25 Hasil analisis  spektrum  ekstrak  kulit  pisang  kepok dan daun salam dapat dilihat pada Gambar 1 dan Gambar 2.
Gambar 1. Spektrum FTIR Kulit Pisang Kepok
Gambar 2. Spektrum FTIR Daun Salam
Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa spektrum  FTIR  ekstrak  kulit  pisang  kepok ( Musa  acuminata  balbisian Colla)  dan  daun salam ( Syzygium polyanthum ) terdapat gugus fungsi  senyawa  yang  ditargetkan  yaitu flavonoid dan tanin, disajikan dalam Tabel 1.
Tabel 1. Analisis FTIR Kulit Pisang Kepok dan Daun Salam
Senyawa Turunan Senyawa Tanin -OH  (fenol),  C-H  (aromatik), dan C=O (karbonil) Flavonoid C=O  ( keton/karbonil ),  C-H,
C=C  ( cincin  aromatik ),  O-H ( fenol ),  -OH  ( hidroksil ),  - OCH3 ( metoksil)

## 3. Analisis Data
Uji  normalitas  dan  homogenitas  data dilakukan  untuk  mengetahui  terpenuhi  atau tidaknya  persyaratan  uji  ANOVA.  Hasil  uji normalitas menunjukan bahwa data terdisribusi  normal  p=  0,071  (p  >0,05)  tetapi dari  uji  homogenitas  menunjukan  data  tidak homogen  p  =  0,025  (p  <0,05)  sehingga dilakukan  uji  parametrik One  Way ANOVA. Diperoleh  p value sebesar  0,002  (p<0,05).
Dilanjutkan dengan Post Hoc Games-Howell Tabel 2. Hasil Uji One Way ANOVA kelompok N Rerata (detik) ± SD P value K- 4 274,50 ± 53,000 0,002 K+ 4 50,25 ± 22,897 F1 4 234,50 ± 134,661 F2 4 144,25 ± 37,810 F3 4 112,00 ± 7,616
Keterangan  :  N  (jumlah),  kelompok  K-  (kontrol negatif) dengan aquades steril, K+ (kontrol positif) dengan  epinefrin,  F1  ekstrak  kulit  pisang  kepok dan  daun  salam  25%  :  75  %,  F2  ekstrak  kulit pisang kepok dan daun salam  50% : 50% dan F3 ekstrak kulit pisang kepok dan daun salam 75% : 25%.
Hasil  analisis  statistik One  Way ANOVA  (Tabel  2)  menunjukan  bahwa, diperoleh nilai p= 0,002 (p<0,05) yang berarti terdapat  pengaruh  kombinasi  ekstrak  kulit pisang kepok dan daun salam terhadap waktu henti perdarahan pada tikus Wistar, sehingga diketahui bahwa H a diterima dan H o ditolak.
Dilakukan uji Post Hoc Games-Howell untuk  mengetahui  antar  kelompok  yang berbeda  signifikan.  Uji  ini  dapat  digunakan ketika varian data tidak homogen namun data terdistribusi normal. Hasil uji Post Hoc Games- Howell disajikan pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji Post Hoct Games- Howell Kelompok Beda Rerata ± SD p Value K- vs K+ -224,250 ± 28,867 0,006* K- vs F1 40,000 ± 72,358 0,976 K- vs F2 130,250 ± 32,552 0,045* K- vs F3 162,50 ± 26,772 0,032* K+ vs F1 -184.250 ± 68.297 0,244 K+ vs F2 -94.000 ± 22.101 0,041* K+ vs F3 -61.750 ± 12.065 0,038* F1 vs F2 90.250 ± 69.934 0,714 F1 vs F3 122,500 ± 67.438 0,493 F2 vs F3 32,250 ±19,285 0,545 Keterangan  :  *  (terdapat  beda  nyata signifikan, p<0,05)
Pengukuran bleeding time merupakan pemeriksaan  laboratorium  yang  dirancang untuk  mengetahui  sejauh  mana  trombosit berinteraksi  dengan  dinding  pembuluh  darah
membentuk sumbat hemostatik. 26
Pengukuran waktu perdarahan yang digunakan adalah metode Duke , dengan nilai normal  1-3  menit  (60-180  detik).  Pada manusia normal, diperlukan waktu sekitar 60 detik  agar  untaian  fibrin  diantara  luka  mulai terbentuk, sehingga sumbat trombosit terbentuk sempurna setelah beberapa menit. Selain  itu,  tingkat  keparahan  perdarahan bergantung  pada  jumlah  faktor  pembekuan dalam  darah.  Jika  jumlah  faktor  pembekuan hanya  sedikit,  perdarahan  akan  lebih  sukar dihentikan, begitu pula sebaliknya. 24
Tabel 2 menunjukan bahwa kelompok K-  memperoleh  rerata  waktu  perdarahan paling  lama  dibandingkan  dengan  kelompok lain. Hal ini disebabkan karena pada kelompok K-,  ekor  tikus  yang  diberi  perlukaan  hanya diberikan  aquades.  Aquades  bersifat  netral tidak memiliki zat-zat yang bersifat hemostatik yang dapat mempercepat waktu perdarahan. Hal  tersebut  sejalan  dengan  penelitian
Winiswara et  al .  (2021)  bahwa  pemberian aquades pada luka potong  ekor mencit strain Balb-c tidak mempercepat waktu perdarahan dengan rerata waktu yang diperoleh sebesar 472 detik (7 menit 52 detik). 10
Berdasarkan Tabel 3. Hasil Uji Lanjut Games-Howell , kelompok K- memiliki perbedaan  rerata  signifikan  (p<0,05)  dengan kelompok F2 dan F3 yang berarti kelompok F2 yang dan F3 lebih efektif dalam mempercepat waktu  perdarahan  dibandingkan  dengan kelompok  K-.  Senyawa  flavonoid  dan  tanin yang ada pada kombinasi esktrak kulit pisang kepok dan daun salam bekerja secara sinergi dalam  mempersingkat  waktu  perdarahan. 17
Sementara  itu,  kelompok  perlakuan  K-  tidak berbeda  nyata  dengan  kelompok  perlakuan F1  (75%  daun  salam  dan  25%  kulit  pisang kepok)  yang  berarti  kemampuannya  dalam menghentikan  perdarahan  sama  secara statistik.  Hal  ini  diduga  karena  kandungan flavonoid  atau  tanin  yang  ada  pada  daun salam  tidak  mencukupi  untuk  membantu proses hemostasis pada saat terjadi perdarahan.
Kelompok  K+  memperoleh  rerata waktu perdarahan yang paling singkat (Tabel 2).  Kelompok  K+  juga  berbeda  signifikan (p<0,05)  dengan  kelompok  K-,  F2  dan  F3, yang berarti kemampuan kelompok K-, F2 dan F3  dalam  mempersingkat  waktu  perdarahan tidak  sebanding  secara  statistik  dengan kelompok K+. Hal tersebut akibat penggunaan epinefrin secara topikal pada ekor tikus yang diberi  perlukaan.  Epinefrin  adalah  golongan obat  hemostatik  lokal  yang  berperan  utama
Media Ilmu Kesehatan Vol. 13, No. 1, April 2024 https://doi.org/10.30989/mik.v13i1.1342
pada  reseptor  α-andregenik,  berfungsi sebagai vasokonstrikor kuat sehingga menyebabkan  penghentian  perdarahan. 19,27
Hasil  ini  juga  sesuai  dengan  penelitian Sidrotullah  (2021)  dimana  mencit  yang dipotong  ekornya  sepanjang  2  cm  lalu diberikan epinefrin secara topikal memperoleh rerata  waktu  perdarahan yang  paling  singkat diantara kelompok perlakuan lainnya yaitu 77 detik. 19
Uji Post Hoc Games-Howell kelompok K+ dengan kelompok perlakuan F1 (25% kulit pisang kepok:75% daun salam) tidak terdapat perbedaan  bermakna  (p>0,05)  yang  berarti kemampuan  dua  kelompok  tersebut  dalam menghentikan  perdarahan  sebanding  secara statistik.  Tetapi  jika  dilihat  dari  Tabel  2, terdapat perbedaan rerata waktu perdarahan yang sangat jauh yaitu K+ = 50,25 sedangkan F1=  234,50  sehingga  disimpulkan  bahwa pada realita hasil penelitian kelompok F1 tidak memiliki kemampuan yang sebanding dengan K+ dalam menghentikan perdarahan.
Antar kelompok perlakuan F1, F2 dan F3 tidak terdapat perbedaan rerata signifikan (p<0,05)  yang  berarti  kemampuan  kelompok F1,  F2  dan  F3  dalam  menghentikan perdarahan sebanding secara statistik. Meskipun  begitu,  jika  dilihat  hanya  dari  nilai rerata  waktu  perdarahannya  saja,  kelompok perlakuan  F3  yang  berisi  kombinasi  ekstrak kulit pisang kepok 75% dan daun salam 25% merupakan  kelompok  dengan  rerata  waktu yang paling cepat dibandingkan kelompok F2 dan  F1.  Hasil  tersebut  berkaitan  dengan penelitian  Yuwono et  al. (2023)  menunjukan
bahwa  pemberian  esktrak  kulit  pisang  kepok secara oral kepada mencit dengan dosis 1.55 mg/g  dapat  mempercepat  waktu  henti perdarahan  ( bleeding  time ). 28 Kelompok perlakuan  F3  yang  konsentrasi  kulit  pisang kepoknya  lebih  besar  yaitu  75%  dan konsentrasi daun salamnya hanya 25% lebih efektif mempercepat waktu perdarahan karena  kadar  flavonoid  yang  terkandung dalam  ekstrak  kulit  pisang  kepok  lebih  tinggi dibandingkan dengan daun salam. Penelitian Ariani et  al .  (2023)  menunjukan  kadar flavonoid  total  ekstrak  etanol  96%  pada  kulit pisang kepok sebesar 8,54 mg QE/g ± 0,94. 29
Sementara  itu,  hasil  penelitan  Hastuti  & Mulangsri (2021) menunjukan kadar flavonoid total pada ekstrak daun salam dengan pelarut etanol 96% sebesar 5,028 mg QE/g ± 0,018. 30
Terdapat  tiga  jenis  hemostasis  yang masing-masing  memiliki  fase  yang  berbeda. Jenis hemostasis antara lain primer, sekunder dan tersier. Fase yang ada pada hemostasis primer  ialah  penyempitan  pembuluh  darah (vasokonstriksi)  dan  pembentukan  sumbatan trombosit sementara. 31 Flavonoid aktif bekerja pada  fase  vasokonstriksi  dalam  hemostasis primer, senyawa ini memicu  agregasi trombosit  kemudian    terbentuk  sumbat trombosit  sehingga  mempersingkat  waktu perdarahan. Selain itu, flavonoid yang masuk ke  dalam  tubuh  memiliki  efek  hemostatik dengan  mendorong  peningkatan  jumlah trombosit. 32 Flavonoid juga bertindak sebagai osmoprotektan, meningkatkan resistensi kapiler, dan bekerja pada endotel
Pengaruh Kombinasi Ekstrak Kulit Pisang Kepok (Musa acuminata balbisian Colla) dan Daun Salam ( Syzygium polyanthum ) terhadap Waktu Henti Perdarahan pada Tikus Wistar ( Rattus Norvegicus ) Deliza Dhiakhalda Sarinastiti 1 , Tantri Analisawati Sudarsono 2 , Kurnia Ritma Dhanti 3
mikrovaskuler untuk meminimalkan terjadinya hiperpermeabilitas dan edema. 33
Senyawa  tanin  juga  aktif  bekerja sebagai  pada  fase  vasokonstriksi  dalam hemostasis primer karena sifat astringennya. 34
Tanin mempercepat keluarnya  protein  dan  mengendapkannya pada  sel,  sehingga  mendorong  sintesis tromboksan A2 yang memudahkan trombosit mengeluarkan Adenosin Difosfat. Hal tersebut membuat  peningkatan  agregasi  trombosit kemudian membentuk sumbat trombosit pada pembuluh darah yang rusak (terluka) sehingga  akan  terjadi  pemendekan  waktu perdarahan. 13,35
Keterbatasan  dari  penelitian  ini  yaitu banyak  variabel  yang  dapat  mempengaruhi pengukuran bleeding  time pada  hewan  uji seperti jenis kelamin, usia, berat badan tikus, ketajaman  pisau  untuk  memotong  ekor, anestesi yang diberikan, suhu tubuh, tekanan darah,  dan  variasi  pembuluh  darah  serta pengalaman dari peneliti itu sendiri.
Variabilitas faktor-faktor ini dapat menyebabkan  hasil  yang  berbeda  dan menyulitkan  perbandingan  temuan  antar laboratorium  penelitian. Hal  ini  terutama disebabkan  oleh  tidak  adanya  standarisasi dalam  pengukuran  waktu  perdarahan  pada hewan uji, dan akibatnya setiap laboratorium penelitian menggunakan protokol yang berbeda-beda. 36

## KESIMPULAN
Kombinasi  esktrak  kulit  pisang  kepok dan  daun  salam  dapat  mempercepat  waktu
perdarahan  pada  tikus  Wistar  (Rattus norvegicus). Kelompok perlakuan F3 dengan kombinasi  75%  kulit  pisang  kepok  dan  25% daun  salam  merupakan  konsentrasi  paling efektif karena diperoleh rerata waktu perdarahan paling cepat dibandingkan dengan  kelompok  perlakuan  lain  tetapi  tidak lebih  efektif  dari  kelompok  K+  yang  berisi eprinefrin.
Diperlukan  penelitian  lebih  lanjut mengenai  konsentrasi  lain  dari  ekstrak  kulit pisang kepok yang kemampuannya sebanding dengan epinefrin dalam menghentikan perdarahan.

## TERIMA KASIH
Ucapan terimakasih kepada Direktorat Jendral  Pembelajaran  dan  Kemahasiswaan Kementrian Pendidikan Kebudayaan Republik Indonesia yang  telah  mendanai  penelitian  ini melalui  Program  Kreativitas  Mahasiswa Tahun 2023.

## KEPUSTAKAAN
1. Fauzi  R,  Cahaya N,  Hidayaturrahmah. Pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol daun  gaharu  (Aquilaria  Microcarpa Baill.) terhadap waktu perdarahan pada tikus  putih  jantan  galur  Wistar.  J  Ilm Ibnu Sina. 2017;2(September 2017):169 –75. 2. Riskesdas. Laporan Nasional Riskesdas 2018. Kementrian Kesehatan RI. Jakarta; 2018. 3. Pauran M, Karauwan F, Kanter J. Efek Hemostatis Ekstrak Daun Tembelekan Lantana camara  L. Luka  Potong  Pada Tikus  Putih  Rattus  norvegicus.  Trop  J
Biopharm. 2019;2(2):158 –69.
4. Gunawan R, Aisyah R, Sutrisna E. Efek ekstrak  etanol  70%  daun  kembang
Media Ilmu Kesehatan Vol. 13, No. 1, April 2024 https://doi.org/10.30989/mik.v13i1.1342
sepatu  (Hibiscus  rosa-sinensis  L.)
dalam
memperpendek waktu
perdarahan  dan  waktu  pembekuan pada  mencit  jantan  galur  Swiss. Biomedika. 2016; 5. Wardani IGAAK, Udayani NNW.
Pengaruh  pemberian  ekstrak  etanol daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.)  terhadap  waktu  perdarahan  dan waktu  koagulasi  pada  mencit  jantan (Mus  musculus  L.).  J  Ilm  Medicam.
2017;3(2):104 –9.
6. Duracim  A,  Astuti  D.  Hemostasis. Jakarta:  Pusat  Pendidikan  Sumber Daya Manusia Kesehatan; 2018.
7. Kainde A, Pangemanan D, Hutagalung B. Uji efektivitas ekstrak daun sendok (
Plantago  major  L  .)  terhadap  waktu perdarahan  pada  tikus  Wistar  jantan  (
Rattus norvegicus ). J e-GiGi. 2016;4(2).
8. Hijrineli  H,  Harahap  MS,  Soenarjo  S.
Pengaruh  Asam  Traneksamat  pada Profil Koagulasi Pasien yang Mendapatkan  Ketorolak.  JAI  (Jurnal Anestesiol Indones. 2013;5(3):183 –92.
9. Mani A, Anarthe R, Kale P, Maniyar S, Anuraga  S.  Hemostatic  Agents  in Dentistry.  Galore  Int  J  Heal  Sci  Res. 2021;3(4).
10. Winiswara MW, Yuwono B, Adriatmoko W.  Pengaruh  ekstrak  biji  alpukat  ( Persea  americana  Mill  .)  terhadap waktu  perdarahan  pada  luka  potong ekor  mencit  strain  Balb-c.  mericana Mill) terhadap Waktu Perdarahan pada Luka Pot. 2021;5(2):0 –5.
11. Bellamy D, Nuthall G, Dalziel S, Skinner JR.  Catecholaminergic  Polymorphic Ventricular  Tachycardia:  The  Cardiac Arrest Where Epinephrine Is Contraindicated. Pediatr Crit Care Med. 2019;20(3). 12. Rezk  NA,  Zidan  HE,  Elnaggar  YA,
Ghorab A. Renalase gene polymorphism and epinephrine level in chronic  kidney  disease.  Appl  Biochem
Biotechnol. 2015;4(175).
13. Cholid Z, Prasetya RC, Sukamto BRP. Efektivitas  ekstrak  daun  cocor  bebek (Kalanchoe  pinnata)  terhadap  waktu perdarahan  (bleeding  time)  pada  ekor mencit  strain  balb-c.  Padjadjaran  J Dent Res Students. 2022;6(2):144.
14. Khoiriyah  YN.  Profil  Fitokimia  Ekstrak Daun Salam (Eugenia polyantha Wight):  Metode  Infundasi,  Dekoktasi,
Maserasi  dan  Soxhletasi.  J  Inov  Farm
Indones. 2023;4(2):111 –23. 15. Agustina  R,  Indrawati  DT,  Masruhin MA.  Aktivitas  ekstrak  daun  salam (Eugenia polyantha) sebagai antiinflamasi  pada  tikus  putih  (Rattus norvegicus). J Trop Pharm Chem 2015. 2015;3(3):120 –3.
16. Nyoman  N,  Udayani  NNW,  Yanti NLPFD,  Dewi  NLKAA.  Uji  aktivitas kombinasi  krim  ekstrak  kulit  pisang kepok ( Musa paradisiaca L .) dan kulit buah  naga  merah  (  Hylocereus polyrhizus ) sebagai penyembuhan luka bakar derajat II pada tikus putih ( Rattus norvegicus ). 2023;131 –8. 17. Kusumastuti DM, Cholid Z, Adriatmoko W. Pengaruh Ekstrak Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus Polyrhizus) terhadap Waktu  Perdarahan (Bleeding
Time) Pada Mencit Strain Balb-C (The Effect of Red Dragon Fruit (Hylocereus Polyrhizus)  Peel  Extract  on  Bleeding Time in Balb-C Strain Mice). J Kesehat Gigi. 2021;18(2):61 –4.
18. Sutopo  T,  Bestari  RS,  Sintowati  R.  Uji ekstrak  etanol  70%  daun  sirih  (Piper betle  L.)  terhadap  bleeding  time  pada mencit  jantan  galur  Swiss  Webster. Biomedika. 2017;8(2).
19. Sidrotullah. Efek waktu henti pendarahan  (bleeding  time)  daun bandotan  (Ageratum  conyzoides  L.) pada  mencit  (Mus  musculus).  J  Syifa Sci Clin Res. 2021;3(1):37 –44. 20. Pebrian RF, Marini, Partiwi S. Pengaruh Perbedaan Metode Maserasi Dan  Remaserasi  Kulit  Pisang  Nangka (Musa paradisiacaL.) terhadap Penapisan Fitokimia. J Herbs
Farmacol. 2021;3(2):89 –95.
21. Arsista  D,  Eriwati  YK.  Penggunaan  A TR  -  F  TIR  (  Attenuated  Total Reflection-Fourier  Transform  Infrared
Spec- troscopy ) pada Kedokteran Gigi.
J Mater Kedokt Gigi. 2021;10(2):57 –66.
22. Apriani  I,  Susanti  R,  Purwanti  NU.  Uji toksisitas  akut  ekstrak  etanol  daun melinjo ( Gnetum gnemon L .) terhadap tikus putih betina ( Rattus norvegicus ) galur  Wistar.  J  Kesehat  Khatulistiwa.
2022;8(2):8 –14.
23. Rinawati,  Budiarti  IT,  Aulia  D,  Putri  E, Kurniaty  I.  Pengaruh  sediaan  gel ekstrak  kental  daun  kanyere  (  Bridelia Monoica  (  L  .)  Merr  .)  terhadap penyembuhan luka bakar pada punggung  tikus  galur  Wistar.  Semin Nas Penelit LPPM UMJ. 2021;
24. Putri  TS,  Khasanah  HR,  Irnameria  D, Farizal J. Uji efektifivitas ekstrak etanol daun rambutan ( Nephelium lappaceum )  sebagai  hemostasis  terhadap  luka potong pada mencit jantan galur Swiss- webster. 2022;1(2):95 –105.
25. Puspitasari  L,  Mareta  S,  Thalib  A. Karakterisasi  Senyawa  Kimia  Daun Mint  (  Mentha  sp  .)  dengan  Metode
FTIR  dan  Kemometrik.  2021;14(1):5 – 11.
26. Aisyafina  AR,  Rosida,  Azizah  SN.  Uji aktivitas  antiplatelet  ekstrak  daun pepaya  (  Carica  papaya  L  )  terhadap mencit  jantan.  J  Ilm  Farm  Akad  Farm. 2023;6(1):22 –8.
27. Hasanah IF, Nina M, Eem H, Nurhayati B.  Suhu  penyimpanan  dan  variasi konsentrasi epinefrin berkaitan dengan nilai agregasi trombosit metode Velaskar. J Ris Kesehat POLTEKKES. 2019;11(2):252 –60.
28. Yuwono B, Salsabila Satiwi R, Indriana T, Nurul Amin M, Sulistiyani S, Setyorini D,  et  al.  Effect  of  Kepok  Banana  Peel
Extract (Musa Paradisca L.) on Leading Time  in  Balb-C  Strain  Mice.  Int  J  Med
Sci Clin Res Stud. 2023;03(09):1966 –9. 29. Ariani  N,  Prihandiwati  E,  Rahim  A, Milasari  N,  Fatimah  N.  Analisis  kadar fenolik total dan flavonoid total ekstrak etanol  kulit  pisang  kepok  (Musa pradisiaca  L).  J  Insa  Farm  Indones.
2023;6(2):263 –9.
30. Hastuti  YD,  Kunti  Mulangsri  DA. Perbadaan kadar flavonoid total ekstrak daun  salam  (Syzygium  polyanthum)
dengan  metode  refluks  dari  beberapa jenis pelarut dan aktivitas antibakteri. J
Ilmu Farm dan Farm Klin. 2022;18(2):85. 31. Periayah  MH,  Halim  AS,  Zaharil  A, Saad M. Mechanism Action of Platelets and Crucial Blood Coagulation Pathways in Hemostasis. Int J Hematol Stem Cell Res. 2017;11(4).
32. Gaib  LA,  Rahayu  M,  Sukeksi  A. Pengaruh  Ekstrak  Daun  Gedi  Kering  ( Abelmoschus  manihot  L  .  Medik  ) terhadap  Waktu  Pembekuan  Darah secara  In  Vitro  Menggunakan.  Pros Mhs  Semin  Nas  Unimus.  2019;2:238 – 41.
33. Kurniawati  A,  Cholid  Z,  Pertiwi  MH.
Efektivitas Ekstrak Biji Kakao (
Theobroma  Cacao  L  .)  terhadap Penyembuhan  Luka  Pencabutan  Gigi pada Sel Makrofag ( The effectiveness of  Cacao  bean  extract  toward  tooth extraction  healing  on  macrophages  ). Dent J Kedokt Gigi. 2019;13(2):49 –57. 34. Noviyanty  Y,  Hepiyansori,  Agustian  Y. Identifikasi dan penetapan kadar senyawa tanin pada ekstrak daun biduri ( Calotropis gigantea ) metode spektrofotometri uv-vis. J Ilm
Manuntung. 2020;6(1):57 –64.
35. Ihsaniyah  M,  Yuwono  B,  Budirahardjo R. Pengaruh ekstrak bagian dalam kulit durian  terhadap  waktu  perdarahan pada  luka  potong  ekor  mencit :  studi eksperimental  Effect  of  durian  skin extract on bleeding time in mice tail. J
Kedokt Gigi Univ Padjadjaran. 2023;35(1):179 –83.
36. Melike Ö, Totuk G, Güzel ŞE, Ekici H, Kumandaş  A,  Aydıngöz  SE,  et  al. Effects  of  Algan  Hemostatic  Agent  on bleeding  time  in  a  rat  tail  hemorrhage model. Ulus Travma Acil Cerrahi Derg.
2021;26(6):853 –8.