## 1. Pendahuluan
Sebagian  besar  orang  menginginkan kepraktisan dalam melakukan pekerjaannya dengan  alasan  untuk  menghemat  waktu sehingga manusia akan semakin dimanjakan dan  menyebabkan  kemalasan  dalam melakukan  aktivitas  yang  nantinya  akan mempengaruhi  proses  metabolisme  tubuh. Saat  ini  sebagian  masyarakat  lebih  senang mengkonsumsi  makanan  cepat  saji  dimana makanan tersebut sering bernilai gizi rendah. Hal-hal  tersebut  dapat  menyebabkan menurunnya  kondisi  kesehatan  dan meningkatnya  penyakit  degeneratif  salah satunya  adalah  diabetes  mellitus  (Subroto, 2006).
Berdasar  data  WHO  total  penderita diabetes mellitus di Indonesia, saat ini sekitar 8  juta  jiwa,  dan  diperkirakan  jumlahnya melebihi 21 jiwa pada tahun 2025 mendatang (Ningharmanto,  2009).  Selama  ini pengobatan yang digunakan untuk penyakit d i a b e t e s   m e l l i t u s   a d a l a h   d e n g a n menggunakan  obat  hipoglikemik  oral, suntikan  insulin,  diet,  ataupun  gabungan ketiganya.
Berbagai  jenis  obat  antidiabetik  oral banyak  ditemukan  di  apotek,  tetapi  harga
obat-obat  ini  cukup  mahal  padahal  harus digunakan  secara  terus-menerus  sehingga pengobatan diabetes mellitus sulit diperoleh bagi  yang  tidak  mampu.  Oleh  karena  itu, perlu  dilakukan  eksplorasi  tanaman  obat penurun  kadar  glukosa  darah  yang  teruji secara  praklinis  dan  klinis  (Widowati, Dzulkarnain dan Sa'roni, 1997).
Phommart  dkk.  (2005)  melaporkan bahwa  flavonoid  dari  ekstrak  n-heksan  dan kloroform  daun M.  tanarius mempunyai aktivitas antioksidan terhadap 1,1- diphenyl - 2- pycrylhydrazyl (DPPH). Macarangioside A-C yang diisolasi dari ekstrak metanol M. tanarius menunjukkan  aktivitas  yang  poten terhadap  DPPH  (Matsunami  dkk.,  2006). Pada penelitian invivo menunjukkan bahwa ekstrak  metanol-air M.  tanarius (EMMT) mempunyai  efek  analgesik  pada  mencit betina  (Andini  dan  Hendra,  2011)  serta aktivitas  antiinflamasi  pada  mencit  jantan dan  aktivitas  hepatoprotektif  pada  tikus terinduksi  parasetamol  (Kurniawaty, Adrianto, Hendra, 2011).
Putri dan Kawabata (2010) melaporkan bahwa  hasil  isolasi  EMMT  mempunyai aktivitas  penghambatan  terhadap α - glukosidase  secara invitro ,  yang  berpotensi
JURNAL FARMASI SAINS DAN KOMUNITAS, Mei 2013, hlm. 37-42
Vol. 10 No. 1
ISSN : 1693-5683
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK METANOL-AIR DAUN Macaranga tanarius L. TERHADAP PENURUNAN KADAR GLUKOSA DARAH PADA TIKUS YANG TERBEBANI GLUKOSA
MARTINA TRI HANDAYANI, PHEBE HENDRA
Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta
Abstract: This research aim to find out the effect of M. tanarius leaf methanol-water extract (MTME) whether it can lowering blood glucose levels. This research was experimental study with one way-complete-random design using 25 male rats which divided into five groups. The rats in group I were given CMC 1% (negative control). The group II rats were given 0.45 g/kg BW dose of Glibenclamide (positive control).  In group III, IV and V, the rats were given 0.43; 1.28; 3.84 g/kg BW doses of MTME orally. The hypoglycemic effect of MTME was tested by using the Oral Glucose Tolerance Test (OGTT) method. The blood-glucose contents were measured at the 0-240 0, 15, 30, 60, 90, 180, and 240 after the OGTT and treatment. The AUC were statistically analyzed using one way ANOVA and Scheffe test with 95 % convidence level. The result show that MTME at dose 0.43; 1.28; and 3.84 g/kg BW was effective in improving oral glucose tolerance.
Keywords : Blood glucose, Methanol-water extract, Macaranga tanarius
u n t u k   d i k e m b a n g k a n   s e b a g a i   o b a t antidiabetes.  Hal  ini  berarti  EMMT mempunyai  peluang  digunakan  sebagai hipoglikemik,  namun  pengujian invivo belum dilakukan. Salah satu model pengujian i n v i v o u n t u k   m e n g e t a h u i   a k t i v i t a s hipoglikemik  adalah  pemberian  beban glukosa  oral  pada  tikus  dengan  metode  uji toleransi glukosa oral (UTGO). Berdasarkan hal  tersebut,  maka  muncul  permikiran apakah  EMMT  dapat  mempengaruhi  kadar glukosa  darah  pada  tikus  yang  terbebani glukosa.  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh EMMT  terhadap  kadar  glukosa  darah  pada tikus yang terbebani glukosa.

## 2. Bahan dan Metode
Bahan  yang  digunakan  meliputi  tikus putihBahan  yang digunakan pada penelitian ini  adalah:  Tikus  putih  jantan  galur  Wistar, umur 2 - 3 bulan, berat badan 200-300 gram yang  diperoleh  dari  Laboratorium  Hayati Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta, Daun M. tanarius yang diperoleh  dari  Sleman  Yogyakarta, kaplet Glibenklamida  produksi  PT.  IndoFarma, e n z i m   G l u c o s e   G O D   F S * ( D i a S y s , Germany),  glukosa  monohidrat,  CMC  1%, akuabides,  akuades,  metanol,  parafin  cair dari Laboratorium Farmakologi Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.  Peralatan  yang  digunakan  : Sentrifuge;  mikropipet; micro  vitalab (Microlab 200, Merck); alat timbang elektrik dan  analitik; vortex ,  maserator,  shaker, corong Buchner dan evaporator.
2.1. Pembuatan ekstrak metanol-air daun M. tanarius
Sebanyak  10  g  serbuk  kering  daun M. tanarius yang  sudah  diayak  menggunakan ayakan  nomor  50,  selanjutnya  diekstraksi secara  maserasi  dengan  melarutkan  serbuk dalam 100 ml pelarut metanol 50% pada suhu kamar selama 72 jam menggunakan shaker dengan  kecepatan  pengadukan  140  rpm. Hasil maserasi disaring menggunakan kertas saring melalui corong Buchner. Larutan hasil o penyaringan  dievaporasi  pada  suhu  50 C untuk  menguapkan  metanol,  kemudian dimasukkan dalam oven untuk menguapkan o air pada suhu 50 C hingga diperoleh ekstrak metano-air  daun M.  tanarius kental.  Dari percobaan  didapatkan  125  g  serbuk M. tanarius menghasilkan  ekstrak  kental sebesar  41,01  g  dengan  susut  pengeringan tetap  setelah  4-5  hari  sehingga  diperoleh rendemen sebesar 3,28% b/v.

## 2.2. Pengelompokan  dan  perlakuan  hewan uji
Penelitian  ini  mengikuti  jenis  dan rancangan  eksperimental  murni  acak  pola searah. Dua puluh lima ekor tikus dibagi acak menjadi  5  kelompok  tiap  kelompok  terdiri dari  5  ekor.  Masing-masing  kelompok dipuasakan  selama  18  jam  dengan  diberi minum,  dan  kemudian  diberi  perlakuan. Kelompok I (kontrol positif) diberi perlakuan glibenklamida 0,45 mg/kg BB. Kelompok II (kontrol negatif) diberi CMC 1 % 5 ml/ kg BB.  Kelompok  III-V  (perlakuan)  diberi
HANDAYANI, HENDRA 38

## Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas
Bahan Bahan Uji (mL) Larutan baku (mL) Blanko (mL) Supernatan 0,01 - - Larutan baku - 0,01 - Pereaksi GOD-PAP 1,0 1,0 1,0
Tabel I. Volume pengukuran kadar glukosa darah
EMMT sebesar 0,43; 1,28; dan 3,84 g/kg BB secara per oral.
Dari  hasil  orientasi  didapatkan  bahwa waktu  efektif  pemberian  glibenklamida adalah 30 menit sebelum UTGO, sedangkan waktu  efektif  pemberian  EMMT  adalah  0 menit  atau  pada  awal  UTGO.  Pada  UTGO semua  hewan  uji  mendapat  perlakuan glukosa oral dengan dosis 1,75 g/kg BB.

## 2. 3. Penetapan kadar glukosa darah
Kadar glukosa darah ditetapkan dengan metode  enzimatik glucose  oxidase - phenol aminophenazone (GOD-PAP).  Dari  tiap kelompok hewan uji diambil cuplikan darah sebanyak 0,5 ml melalui vena lateralis ekor dan  ditampung  dalam  tabung  eppendorf. Pengambilan  cuplikan  darah  dilakukan sesaat sebelum perlakuan sebagai menit ke-0 dan pada menit ke-15, 30, 45, 60, 90, 180, dan 240 setelah UTGO , kemudian cuplikan darah dipusingkan  3000  rpm  selama  10  menit. Selanjutnya  diambil  supernatan  sebanyak 0,01  mL,  kemudian  dilakukan  pengukuran kadar  glukosa  dengan  menggunakan pereaksi (Tabel I).
A l a t   y a n g   d i g u n a k a n   u n t u k menganalisis  kadar  glukosa  serum  adalah micro  vitalab .  Kadar  glukosa  dinyatakan dalam  mg/dL.  Pengukuran  kadar  glukosa d a r a h   d i l a k u k a n   d i   l a b o r a t o r i u m Farmakologi-Toksikologi  Fakultas  Farmasi USD,  Yogyakarta.  Setelah  kadar  glukosa darah didapatkan, maka dibuat kurva dengan mem- plot -kan  nilai  kadar  glukosa  darah terhadap waktu menit ke-0 sampai menit ke- 0-240 240  dengan  metode  trapezoid  (LDDK ) dan  rumus  yang  digunakan  (Eseyin  dkk., 2010) adalah sebagai berikut:
Keterangan:
t =  waktu (jam/menit) C =  konsentrasi zat dalam darah (mg/mL) to-tn
LDDK =  luas  daerah  di  bawah  kurva  dari  waktu ke-0 sampai ke-n
Keterangan:
0-240 P = LDDK tikus perlakuan
0-240
K = LDDK tikus kontrol glibenklamida
0 - 2 4 0
Dari  harga  LDDK glukosa  darah dilakukan  uji  distribusi  menggunakan  uji Kolmogorov  Smirnov kemudian  jika distribusinya  normal  dilanjutkan  dengan analisis One Way ANOVA dan Post Hoc Tests Scheffe dengan tingkat kepercayaan 95%.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Pada penelitian ini dilakukan penetapan kadar  glukosa  darah  pada  menit  ke  0-240 setelah  UTGO  kelompok  kontrol  negatif l a r u t a n   C M C   1 % ;   k o n t r o l   p o s i t i f glibenklamida dosis 0,45 mg/kgBB; dan tiga kelompok  perlakuan  EMMT.  Tabel  II menunjukkan  bahwa  terjadi  peningkatan kadar  glukosa  darah  pada  tikus  kelompok kontrol CMC menit ke-15 sampai menit ke- 60 akibat pemberian glukosa oral, kemudian terjadi  penurunan  kadar  glukosa  darah setelah menit ke-90 hingga menit ke-240. Hal ini  sesuai  dengan  teori  Mayes  dkk.  (2010) dimana  kadar  glukosa  darah  pada  individu normal  meningkat  dalam  satu  jam  setelah pemberian  glukosa  oral.  Absorpsi  glukosa menjadi normal kembali setelah dua sampai tiga  jam  setelah  pemberian  glukosa.  Ini berarti  bahwa  tubuh  hewan  uji  tersebut berada  dalam  keadaan  sehat  karena  masih dapat  mentoleransi  pembebanan  glukosa UTGO pada tingkat normal. Pada perlakuan kontrol positif glibenklamida, kadar glukosa darah  tikus  pada  menit  ke-60  sudah mengalami  penurunan  (Gambar  1). Penurunan drastis terlihat pada menit ke 90, 180  dan  240  sehingga  dapat  menyebabkan efek  hipoglikemik  pada  hewan  uji.  Pada perlakuan EMMT dosis 0,43; 1,28; 3,84 g/kg BB  menunjukkan  penurunan  kadar  glukosa darah  tikus  yang  lebih  gradual  (perlahan- lahan) dari menit ke-45 hingga menit ke-240 s e h i n g g a   t i d a k   m e n y e b a b k a n   e f e k hipoglikemik.
Pada kelompok kontrol negatif CMC 1% menunjukkan  kadar  glukosa  tikus  yang
HANDAYANI, HENDRA Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas 39
Kelompok perlakuan Kontrol (-) Kontrol (+) Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III Rerata kadar glukosa darah (mg/dL) - SE 0 109 - 11,3 82,8 - 6,9 56 - 4,2 83,4 - 10,5 81,8 - 9,1 15 144,4 - 15,6 108,8 - 8,3 94,6 - 2,3 116,6 - 3,8 93,2 - 4,6 30 182,4 - 15,3 117,4 - 11,3 109,6 - 3,5 133,2 - 5,7 102,2 - 5,7 45 168,2 - 13,5 122 - 2,6 101,8 - 5,9 112,6 - 5,8 101,2 - 6,6 60 141,2 - 8,8 93,8 - 4,2 109 - 5,7 109,8 - 4,2 103 - 3,0 90 120,6 - 10,3 60,2 - 11,4 88,6 - 3,2 100,8 - 3,9 97,4 - 3,6 180 103 - 9,5 49,6 - 4,4 84 - 4,8 90,4 - 1,9 103,6 - 1,6 240 86,6 - 9,9 49 - 4,6 72,6 - 5,3 74 - 6,0 102,8 - 2,3 LDDK 0-240 28978,5 16768,5 21257 23580 24078 HANDAYANI, HENDRA 40 Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas
Tabel II. Rerata kadar glukosa darah dan LDDK 0-240 setiap kelompok perlakuan
Gambar 1. Kurva hubungan antara waktu sampling dan kadar rerata glukosa darah tikus yang terbebani glukosa
Keterangan : Kontrol (-) : CMC 1% Kontrol (+) : Glibenklamida dosis 0,45 mg/kg BB Perlakuan I : EMMT dosis 0,43 g/kg BB Perlakuan II : EMMT dosis 1,28 g/kg BB Perlakuan III : EMMT dosis 3,84 g/kg BB Keterangan : Negatif : CMC 1% Positif : Glibenklamida dosis 0,45 mg/kg BB P I : EMMTdosis 0,43 g/kg BB P II : EMMTdosis 1,28 g/kg BB P III : EMMTdosis 3,84 g/kg BB
paling tinggi dibandingkan dengan perlakuan 0-240 yang  lain,  dengan  nilai  LDDK 28978,5 mg.menit/dL.  Ini  menunjukkan  pemberian CMC 1% pada tikus yang terbebani glukosa oral tidak dapat menurunkan kadar glukosa dalam  darah,  baik  oleh  kemampuan  tubuh tikus  itu  sendiri  tanpa  adanya  penambahan senyawa  hipoglikemik.  Penggunaan  CMC 1%  sebagai  kontrol  negatif  karena  pada semua  kelompok  perlakuan  tersebut menggunakan  larutan  CMC  1%.  Hasil  uji 0-240 post  Hoc  Scheffe LDDK glukosa  darah pada tabel III menunjukkan bahwa kelompok kontrol  negatif  CMC  1%  memberikan perbedaan bermakna terhadap kontrol positif glibenklamida  dan  semua  dosis  perlakuan EMMT. Hal ini berarti bahwa kontrol positif glibenklamida  dan  semua  dosis  perlakuan EMMT mempunyai efek hipoglikemik.
K o n t r o l   p o s i t i f   g l i b e n k l a m i d memberikan rerata kadar glukosa tikus yang 0-240 paling  rendah  (nilai  LDDK 16768,5 mg.menit/dL) di antara kelompok perlakuan lainnya.  Semua  kelompok  perlakuan  dosis EMMT  memberikan  perbedaan  yang b e r m a k n a   d e n g a n   k o n t r o l   p o s i t i f glibenklamida.  Hal  ini  berarti  walaupun EMMT  dosis  0,43;  1,28;  3,84  g/kg  BB mempunyai  efek  hipoglikemik  namun penurunan  yang  terjadi  tidak  setara  dengan glibenklamida dosis 0,45 mg/kg BB. Adapun daya hipoglikemik EMMT dosis 0,43; 1,28; 3,84 g/kg BB terhadap glibenklamida dosis 0,45  mg/kgBB  berturut-turut  sebesar  73,2; 59,4; 56,4 % (Tabel IV).
Pada  kelompok  perlakuan  EMMT terlihat bahwa kelompok perlakuan EMMT dosis 0,43 g/kgBB memberikan rerata kadar
HANDAYANI, HENDRA Jurnal Farmasi Sains dan Komunitas 41
1 2 3 4 5 1 --- BB BB BB BB 2 BB - BB BB BB 3 BB BB - BTB BTB 4 BB BB BTB - BTB 5 BB BB BTB BTB -
Kelompok perlakuan
N Mean LDDK 0-240 - SE (mg.menit/dL) Daya hipoglikemik terhadap kontrol positif Kontrol negatif 5 28978 - 1174,8 - Kontrol positif 5 16768 - 952,7 100 Perlakuan I 5 21256 - 442,0 73,2 Perlakuan II 5 23580 - 471,8 59,4 Perlakuan III 5 24078 - 455,8 56,4
Tabel III. Hasil uji Post Hoc Scheffe LDDK 0-240 glukosa darah tikus yang terbebani glukosa
Keterangan : 1= Kontrol negatif CMC 1% ; 2 = Kontrol positif glibenklamida dosis 0,45 mg/kg BB; 3: EMMT dosis 0,43 g/kg BB; 4= EMMT dosis 1,28 g/kg BB, 5 = EMMT dosis 3,84 g/kg BB; BB= Berbeda Bermakna ; BTB = Berbeda Tidak Bermakna
Tabel IV. Pengaruh praperlakuan ekstrak M. tanarius terhadap LDDK 0-240 kadar glukosa darah tikus dan daya hipoglikemik
Keterangan :
Kontrol negatif :CMC 1% Kontrol Positif :Glibenklamida dosis 0,45 mg/kg BB Perlakuan I :EMMT dosis 0,43 g/kg BB Perlakuan II :EMMT dosis 1,28 g/kg BB Perlakuan III :EMMT dosis 3,84 g/kg BB
glukosa  darah  paling  kecil  dibandingkan perlakuan  dengan  EMMT  lainnya.  Hal  ini 0-240 terlihat  dari  nilai  LDDK dan  daya hipoglikemiknya  berturut-turut  sebesar 21257  mg.menit/dL  dan  73%.  Nilai 0-240 LDDK dan  daya  hipoglikemik  EMMT dosis  1,28  dan  3,84  g/kg  BB  berturut-turut sebesar 23580; 24078 mg.menit/dL dan 59,4; 56,4%. Namun EMMT dosis 0,43 g/kg BB menunjukkan  perbedaan  yang  tidak bermakna  terhadap  EMMT  dosis  1,28  dan 3,84  g/kg  BB.  Hal  yang  sama  juga  terlihat pada  EMMT  dosis  1,28  g/kg  BB  terhadap EMMT  dosis  3,84  g/kg  BB  memberikan perbedaan  tidak  bermakna.  Hal  ini  berarti bahwa  EMMT  dosis  0,43;  1,28  maupun 3,84 g/kg BB memberikan efek hipoglikemik yang  sama  dalam  menurunkan  glukosa darah. Pemberian EMMT dosis 3,84 g/kgBB merupakan  dosis  maksimal  yang  diberikan pada hewan uji, sehingga pemberian di atas dosis  3,84  g/kgBB  tidak  dapat  dilakukan. Namun  penelitian  lanjutan  menggunakan dosis  yang  lebih  rendah  dari  0,43  g/kgBB dapat  dilakukan,  didukung  dengan  hasil  uji statistik dimana EMMT dosis 0,43 g/kg BB memberikan perbedaan yang tidak bermakna terhadap  EMMT  dosis  1,28  dan  3,84  g/kg BB. Berdasarkan hasil tersebut, maka perlu dilakukan  penelitian  lanjutan  pada  dosis EMMT yang lebih rendah dari 0,43 g/kg BB.
Pada  penelitian invitro dilaporkan EMMT  dapat  menghambat α -glukosidase. Adapun  senyawa  hasil  isolasi  EMMT  yang menghambat aktivitas α -glukosidase adalah corilagin  mallotinic  acid , chebulagic  acid dan  senyawa ellagitannin ( macatannin A) (Putri dan Kawabata, 2010). Diduga senyawa yang tersebut di atas yang bertanggung jawab terhadap  efek  hipoglikemik  pada  tikus terbebani  glukosa.  Namun  penelitian lanjutan masih diperlukan untuk menentukan senyawa aktif yang bertanggung jawab.

## 4. Kesimpulan dan Saran
Ekstrak  metanol-air Macaranga tanarius dosis 0,43; 1,28; 3,84 g/kg BB dapat menurunkan kadar glukosa darah pada tikus yang  terbebani  glukosa  dengan  daya
hipoglikemik  terhadap  glibenklamida  dosis 0,45  mg/kgBB  berturut-turut  sebesar  73,2; 59,4; 56,4 %.

## Daftar Pustaka
Andini  JB  dan  Hendra  P.  Efek  Analgesik  Ekstrak Metanol-Air  Daun Macaranga  tanarius L.  Pada
Mencit  Betina  Galur  Swiss.  Media  Farmasi Indonesia. 2011: 6(2). 56-63.
Eseyin O, Ebong, P, Eyong E, Awofisayo O, Agboke A. Effect of Telfairia occidentalis on oral glucose tolerance in rats. African Journal of Pharmacy and Pharmacology. 2010. 4 (6): 368-372
Kurniawaty AY, Adrianto E, Hendra P. Uji Praklinik Ekstrak  Metanol-Air  Daun Macaranga  tanarius
L..Kajian:  Aktivitas  Antiinflamasi  dan Hepatoprotektif  Pada  Tikus  Jantan  Terinduksi Parasetamol, Kongres Ilmiah IAI XIX dan Rapat Kerja Nasional IAI.2011.
Matsunami  K, Takamori  I,  Shinzato T, Aramoto  M,
Kondo  K,  Otsuka  H,  Takeda  Y.  Radical- Scavenging  Activities  of  New  Megastigmane Glucosides from Macaranga tanarius L. MÜLL.- ARG.  Chem.  Pharm.  Bull.  2006.  54(10):  1403- 1407.
Mayes  PA,  Murray  RK,  Granner  DK.  Harper's th Biochemistry, 25 , edition, New York : Mc Graw- Hill; 2000. pp. 7-10.
Ningharmanto.  2009.  Diambil  dari  URL;
http://www.ningharmanto.com/2009/04/indonesi a-peringkat-empat-dunia-pasien-diabetes/ diakses 10 Maret 2011.
Phommart  S,  Sutthivaiyakit  P,  Chimnoi  N,
Ruchirawat R dan Sutthivaiyakit S. Constituents of the Leaves of Macaranga tanarius . J. Nat. Prod.
2005. 68: 927-930.
Puteri  MG  dan  Kawabata  J.  Novel  a-glucosidase inhibitors from Macaranga tanarius leaves. Food Chemistry. 2010. 123: 384–389
Subroto.  Ramuan  Herbal  Untuk  Diabetes  Melitus,
Penebar Swadaya, Jakarta; 2006. pp.4-9.
Widowati  L,  Dzulkarnain  B  dan  Sa'roni.  Tanaman Obat  untuk  Diabetes  Mellitus.  Cermin  Dunia Kedokteran. 1997.116: 53-60.