## AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DAN KOMPONEN BIOAKTIF PADA  SELADA AIR ( Nasturtium officinale L . R. Br)
Antioxidant Activity and Bioactive Compounds of Watercress (Nasturtium officinale L. R. Br)
Ella Salamah*, Sri Purwaningsih, Ellis Permatasari
Departemen Teknologi Hasil Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor
*Korespondensi: Jalan Lingkar Akademik, Kampus IPB Dramaga 16680, Telp. 0251 8622915 Fax. 0251 8622916

## Abstract
Watercress ( Nasturtium officinale L. R. Br) is aquatic plant that grown across mainland Europe and Asia. Beside  as  food  watercress  also  as  help  detoxify  the  liver,  purify  the  blood  and  improve  digestion.  Research about properties of watercress for human health is still not fully elucidated. This research was aimed to measure rendement, chemical content of watercress, bioactive compounds, antioxidant activity and peroxide number of watercress and its parts (leaves and stems). The yield of leaves and stems were 23.43% and 59.38%, respectively. Water, protein, lipid, ash, acid insoluble ash and carbohydrate contents obtained from proximate analysis were 94.64%, 2.11%, 0.22%, 1.14%, 0.29% and 1.90%, respectively. Based on phytochemical test, watercress contained alkaloids, steroids/triterpenoids, phenols hydroquinone, carbohydrates and free amino acids. Test of antioxidant activity using DPPH method resulting IC 50 of the extract of intact watercress, leaves and stems were 337.32 ppm, 331.39 ppm and 439.10 ppm, respectively. The leaves extract has been shown to reduce the peroxide number of 0,8mg eq /kg bulok.
Keywords: antioxidant, bioactives compounds, peroxide number, proximate, watercress.

## Abstrak
Selada air ( Nasturtium officinale L. R. Br) merupakan tanaman air yang tumbuh di seluruh daratan Eropa dan Asia. Selain dimanfaatkan oleh masyarakat sebagai bahan pangan, selada air juga bermanfaat untuk membantu detoksifikasi  pada  liver,  memurnikan  darah  dan  melancarkan  pencernaan.  Penelitian  mengenai  karakteristik selada air untuk kesehatan penting untuk dilakukan seperti uji aktivitas antioksidan dan uji kualitatif komponen bioaktif.  Penelitian  ini  meliputi  pengukuran  rendemen,  kandungan  kimia  selada  air,  komponen  bioaktif,  uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH dan uji bilangan peroksida. Penelitian dilakukan terhadap selada air dan bagian-bagiannya (daun dan batang). Rendemen daun dan batang selada air sebesar 23,43% dan 59,38%. Hasil uji proksimat didapatkan kandungan air, protein, lemak, abu, abu tidak larut asam dan karbohidrat secara berurutan yaitu sebesar 94,64%, 2,11%, 0,22%, 1,14%, 0,29% dan 1,90%. Berdasarkan hasil uji fitokimia, terdeteksi alkaloid, steroid/triterpenoid, fenol hidrokuinon, karbohidrat dan asam amino bebas. Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH, didapatkan nilai IC 50 dari ekstrak selada air utuh, daun dan batang secara berurutan sebesar 337,32 ppm, 331,39 ppm dan 439,10 ppm. Ekstrak daun terbukti dapat menurunkan bilangan peroksida 0,8mg eq /kg bahan.
Kata kunci: antioksidan, bilangan peroksida, komponen bioaktif, proksimat, selada air.

## PENDAHULUAN
Radikal  bebas  dapat  didefinisikan  sebagai molekul  yang  memiliki  satu  atau  lebih  elektron yang  tidak  berpasangan  di  kulit  atom  atau orbital molekul terluarnya. Adanya radikal bebas yang  berlebihan  dapat  mengakibatkan  penyakit degeneratif  seperti  jantung,  stroke,  dan  kanker (Sen et al. 2010).  Radikal bebas ini dapat diatasi dengan  suatu  senyawa  penangkal  yang  disebut antioksidan.
Antioksidan pada dasarnya dibedakan menjadi dua  kategori  dasar  yaitu  antioksidan  alami  dan antioksidan  sintetik.  Antioksidan  sintetik  yang umum digunakan seperti butylated hydroxytoluene (BHT) dan butylated hydroxyanisole (BHA) yang dikonsumsi  manusia  karena  berbahaya  untuk kesehatan (Nadheesha et al. 2007; Wu et al. 2009), hal  tersebut  menyebabkan  senyawa  antioksidan alami sangat diharapkan dan dibutuhkan.
Salah  satu  harapan  sumber  alternatif
antioksidan  alami  yang  berasal  dari  tumbuhan dan dapat ditemui di Indonesia adalah selada air ( Nasturtium  officinale L.R.Br).  Selada  air merupakan  salah  satu  sayuran  yang  mempunyai efek antikanker (Rajalakshmi dan Agalyaa 2010). Selada  air  mempunyai  manfaat  yang  sangat baik  untuk  kesehatan  tetapi  informasi  mengenai komposisi kimia di dalam selada air masih kurang. Penelitian mengenai senyawa kimia pada tanaman ini khususnya kandungan antioksidan diharapkan dapat memberikan informasi yang lengkap untuk pemanfaatannya  dalam  bidang  farmasi,  pangan, industri, dan lain-lain.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk menentukan  rendemen,  kandungan  zat  gizi, aktivitas  antioksidan,  komponen  bioaktif  yang terkandung dalam selada air dari daerah Sindang Barang, Bogor, Jawa Barat serta mengaplikasikan ekstrak selada air terbaik pada emulsi minyak.

## MATERIAL DAN METODE

## Bahan dan Alat
Bahan utama yang dibutuhkan untuk penelitian ini adalah selada air ( Nasturtium officinale L. R. Br). Proses ekstraksi dan evaporasi menggunakan pelarut  etanol  p.a.  dan  es  batu.  Uji  aktivitas antioksidan  diperlukan  ekstrak  selada  air untuk  daun,  batang,  utuh,  kristal  1,1- difenil -2- pikrilhidrazil (DPPH),  metanol  p.a,  antioksidan sintetik Butylated Hydroxytoluena (BHT) sebagai pembanding dan es. Pengujian bilangan peroksida diperlukan larutan asam asetat glacial, kloroform, minyak  kelapa,  kalium  iodida,  natrium  tiosulfat dan indikator pati. Bahan-bahan yang dibutuhkan untuk  uji  fitokimia  meliputi  pereaksi  Wagner, pereaksi  Meyer,  pereaksi  Dragendroff  (uji alkaloid), kloroform, anhidrat asetat, asam sulfat pekat  (uji  steroid),    serbuk    magnesium,  amil alkohol (uji flavonoid), air panas, larutan  HCl   2 N (uji saponin),  etanol 70%,  larutan FeCl 3 5% (uji  fenol  hidrokuinon),  peraksi  Molisch,  asam sulfat pekat (uji Molisch), pereaksi Benedict (uji Benedict), pereaksi Biuret (uji Biuret) dan larutan Ninhidrin 0,10% (uji Ninhidrin).
Alat-alat  yang  diperlukan  dalam  penelitian ini meliputi oven, tanur pengabuan, kertas saring Whatman 42 bebas abu, kapas bebas lemak, labu
lemak,  kondensator,  tabung  soxhlet,  destilator, blender , orbital shaker , rotary vacuum evaporator , inkubator, vortex dan  spektrofotometer  UV-Vis Hitachi U-2800 .

## Metode

## Pengambilan bahan baku
Bahan  baku  selada  air  diambil  dari  daerah Sindang  Barang,  Desa  Pasir  Eurih,  Kecamatan Tamansari, Bogor. Sebanyak 30 sampel tanaman digunakan untuk perhitungan rendemen.

## Analisis proksimat
Analisis proksimat dilakukan untuk mengetahui kandungan kimia yang terdapat dalam selada air. Analisis proksimat yang dilakukan antara lain uji kadar air, lemak, protein, abu (AOAC 1995), abu tidak  larut  asam  (BSN  2000)  serta  karbohidrat yang diukur secara by difference .

## Analisis antioksidan dengan metode DPPH Ekstraksi bahan aktif (Quinn 1988)
Tahap  ekstraksi  terdiri  dari  persiapan  sampel dan  ekstraksi  bahan  aktif.  Pada  tahap  persiapan sampel, selada air dan bagian-bagiannya (batang dan  daun)  dikeringkan  dengan  panas  matahari selama  5  hari.  Selada  air  yang  telah  kering kemudian  dihancurkan  dengan blender sehingga didapat tekstur yang halus. Metode ekstraksi yang digunakan adalah metode ekstraksi tunggal.
Sampel  yang  telah  dihancurkan  ditimbang sebanyak 25 gram dan dimaserasi dengan pelarut etanol p.a sebanyak 150 mL selama 24 jam. Hasil maserasi yang berupa larutan kemudian disaring dengan  kertas  saring  Whattman  42.  Filtrat  yang diperoleh  dievaporasi  menggunakan rotary vacuum evaporator pada suhu 50 o C. Berdasarkan proses  ini  diperoleh  ekstrak  etanol  daun,  batang dan selada air utuh.

## Uji aktivitas antioksidan (DPPH) (Blois 1958)
Ekstrak kasar selada air dan bagian-bagiannya dari  hasil  ekstraksi  tunggal  dilarutkan  dalam metanol dengan konsentrasi 200, 400, 600 dan 800 ppm. Antioksidan sintetik BHT digunakan sebagai pembanding  dan  kontrol  positif  dibuat  dengan cara  dilarutkan  dalam  pelarut  metanol  dengan
konsentrasi   2, 4, 6 dan 8 ppm.  Larutan DPPH dibuat dalam kondisi suhu rendah dan terlindung dari cahaya matahari, dengan menggunakan kristal DPPH dalam pelarut metanol dengan konsentrasi 1 mM.
Larutan  ekstrak  dan  larutan  antioksidan pembanding  BHT  yang  telah  dibuat,  masing- masing  diambil  4,5  mL  dan  direaksikan  dengan 500 µL larutan DPPH 1 mM.  Campuran tersebut kemudian diinkubasi pada suhu 37 o C selama 30 menit  dan  diukur  absorbansinya  menggunakan spektrofotometer  pada  panjang  gelombang  517 nm.  Absorbansi larutan blanko juga diukur untuk melakukan persen inhibisi. Larutan blanko dibuat dengan  mereaksikan  4,5  mL  pelarut  metanol dengan 500 µL larutan DPPH 1 mM dalam tabung reaksi, setelah itu aktivitas antioksidan dari masing- masing sampel dan antioksidan pembanding BHT dinyatakan dengan persen inhibisi yang dihitung dengan rumus berikut:
Nilai  konsentrasi  sampel  (ekstrak  maupun antioksidan  BHT)  dan  persen  inhibisinya diplot masing-masing pada sumbu x dan y pada persamaan  regresi  linear.  Persamaan  regresi linear  yang  diperoleh  dalam  bentuk  persamaan y  =  a  +  bx  digunakan  untuk  mencari  nilai  IC 50 ( inhibitor concentration 50%) dari masing-masing sampel dengan menyatakan nilai y sebesar 50 dan nilai x yang akan diperoleh sebagai IC 50 .
Evaluasi aktivitas antioksidan (penentuan bilangan peroksida)
Pembuatan minyak kelapa dan sistem emulsinya (Santoso et al. 2004)
Minyak  dibuat  dari  parutan  kelapa  yang diperas  untuk  diambil  santan  kentalnya.  Santan kental  dipanaskan  dengan  cara  direbus  untuk memisahkan komponen minyak yang terkandung di  dalamnya,  kemudian  dilakukan  penyaringan untuk  memisahkan  minyak  dan  ampas  parutan kelapa.  Filtrat  kemudian  disaring  lagi  dengan kertas whatman agar  diperoleh  minyak  kelapa yang bening. Sistem emulsi minyak dibuat dengan mengacu pada metode Santoso et al. (2004) yang
dimodifikasi,  yaitu  dengan  menghomogenkan 3% minyak kelapa dan 97% air yang mengandung 0,3% Tween 20.

## Penentuan bilangan peroksida
Sistem  emulsi  lemak  ditambahkan  ekstrak selada air terbaik dari tahap sebelumnya sebanyak 0  ppm,  200  ppm,  400  ppm,  600  ppm  dan  800 ppm  yang  selanjutnya  disebut  sampel  minyak. Sampel  minyak  selanjutnya  disimpan  selama tujuh hari dalam inkubator bersuhu 37 o C. Sampel minyak kemudian ditimbang sebanyak 5 gram di dalam  labu  Erlenmeyer  kemudian  ditambahkan 30 mL pelarut yang terdiri dari 60% asam asetat glasial  dan  40%  kloroform.  Minyak  yang  telah larut  ditambahkan  0,5  mL  larutan  KI  jenuh  dan didiamkan  15  menit  dalam  ruang  gelap  sambil dikocok.  Iod  yang  terbentuk  dititrasi  dengan larutan Na 2 S 2 O 3 0,01 N dengan indikator pati 1%. Titrasi  dihentikan  saat  larutan  sampel  menjadi tidak  berwarna.  Cara  yang  sama  dibuat  juga untuk penerapan blanko. Nilai bilangan peroksida dinyatakan dengan miliequivalen per 1 kg minyak yang dihitung dengan rumus:
Keterangan: a  = jumlah mL larutan Na 2 S 2 O 3 untuk titrasi sampel b  = jumlah mL larutan Na 2 S 2 O 3 untuk titrasi blanko N = normalitas larutan Na 2 S 2 O 3 G = berat sampel (g)

## Uji fitokimia (Harborne 1984)

## a. Alkaloid
Sejumlah  sampel  dilarutkan  dalam  beberapa tetes asam sulfat 2 N kemudian diuji dengan tiga pereaksi  alkaloid,  yaitu  pereaksi  Dragendorff, pereaksi  Meyer  dan  pereaksi  Wagner.  Hasil  uji dinyatakan  positif  bila  dengan  pereaksi  Meyer terbentuk  endapan  putih  kekuningan,  endapan coklat dengan pereaksi Wagner dan endapan merah hingga jingga dengan pereaksi Dragendorff.
b.  Steroid/triterpenoid
Sejumlah  sampel  dilarutkan  dalam  2  mL
kloroform,  setelah  itu  ditambahkan  10  tetes anhidratt  asetat  dan  3  tetes  asam  sulfat  pekat. Reaksi  positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya larutan  berwarna  merah  untuk  pertama  kali kemudian berubah menjadi biru dan hijau.

## c. Flavonoid
Sejumlah sampel ditambahkan 0,1 mg serbuk magnesium  dan  0,4  mL  amil  alkohol  dan  4  mL alkohol  kemudian  campuran  dikocok.  Adanya flavonoid ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah,  kuning  atau  jingga  pada  lapisan  amil alkohol.

## d. Saponin (uji busa)
Saponin  dideteksi  dengan  uji  busa  dalam  air panas.    Busa  yang  stabil  selama  30  menit  dan tidak  hilang  pada  penambahan  1  tetes  HCl  2  N menunjukkan adanya saponin.
e. Fenol hidrokuinon (pereaksi FeCl 3 )
Sampel sebanyak 1 gram diekstrak dengan 20 mL etanol 70%.  Larutan yang dihasilkan diambil sebanyak  1  mL  kemudian  ditambahkan  2  tetes larutan FeCl 3 5%.  Adanya senyawa fenol dalam bahan  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna hijau atau hijau biru.

## e. Uji Molisch
Larutan  sampel  sebanyak  1  mL  diberi  2 tetes  pereaksi  Molisch  dan  1  mL  asam  sulfat pekat  melalui  dinding  tabung.    Uji  positif  yang menunjukkan adanya karbohidrat ditandai dengan terbentuknya  kompleks  warna  ungu  diantara  2 lapisan cairan.

## f. Uji Benedict
Larutan sampel sebanyak 8 tetes dimasukkan ke  dalam  5  mL  pereaksi  Benedict.    Campuran dikocok dan dididihkan selama 5 menit.  Adanya gula pereduksi ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau, kuning atau endapan merah bata.

## g. Uji Biuret
Sebanyak  1  mL  larutan  sampel  ditambahkan 4 mL pereaksi Biuret. Campuran dikocok dengan seksama.  Hasil  uji  positif  adanya  senyawa peptida ditunjukkan dengan terbentuknya larutan berwarna ungu.

## h. Uji Ninhidrin
Larutan  sampel  sebanyak  2  mL  ditambah beberapa tetes larutan ninhidrin 0,1%.  Campuran dipanaskan dalam penangas air selama 10 menit. Reaksi positif terhadap adanya gugus asam amino ditunjukkan dengan larutan berwarna biru.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen
Rendemen merupakan  presentase perbandingan antara berat bagian bahan yang dapat dimanfaatkan dengan berat total bahan (Kusumawati et al. 2008). Rendemen daun selada air tidak terlalu besar yaitu 23,43%, hal ini disebabkan ukuran daun selada air yang kecil dan tipis sehingga bobot daun jauh lebih kecil daripada bobot batang yang berakibat pada rendemen daun yang kecil. Hasil penelitian Özen (2009)  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  selada air  dapat  melawan  dan  mengurangi  peroksidasi lipid pada hati, otak dan ginjal. Rendemen batang selada air mencapai lebih dari setengah dari berat keseluruhan selada air utuh, yaitu 59,38%.

## Komposisi Kimia
Hasil analisis proksimat menunjukkan selada air memiliki kadar air sebesar 94,64%, kadar protein 2,11%, kadar lemak 0,22% dan kadar abu 1,14%. Kadar karbohidrat yang didapatkan sebesar 1,90% dilakukan  dengan  metode by  difference .  Hasil penelitian  Shahrokhi et  al. (2009)  menunjukkan bahwa ekstrak selada air dengan dosis 75 mg/dL yang diberikan kepada tikus selama  8 minggu dapat menurunkan kolesterol High Density Lipoprotein (HDL) sebesar hampir 10%.  Hasil penelitian Gill et al. (2007) menunjukkan bahwa orang dewasa yang mengonsumsi selada air sebanyak 85 gram sehari  selama  8  minggu  mengalami  penurunan kadar  lemak  sekitar  10%  dan  peningkatan  total protein  sebesar  4%  dibandingkan  yang  tidak mengonsumsinya.
Hasil  pengujian  kadar  abu  tidak  larut  asam menunjukkan  bahwa  selada  air  mengandung residu  abu  tak  larut  asam  sebesar  0,29%.  Kadar abu  yang  diperoleh  pada  penelitian  ini  masih  di bawah  1%,  seperti  yang  disyaratkan  oleh Food Chemical  Codex (1992)  untuk  produk  kappa- karaginan food grade .
Salamah E, Purwaningsih S, Permatasari E

## Ekstrak Kasar dan Komponen Bioaktif
Selada  air  yang  kering  dihancurkan  menjadi bentuk  yang  lebih  kecil  (serbuk)  sebelum dilakukan proses ekstraksi. Hasil penelitian Gião et al. (2009) menunjukkan bahwa pada ekstraksi daun Agrimonia  eupatoria ,  ternyata  daya antioksidan  ekstrak  meningkat  dengan  semakin kecilnya ukuran partikel.
Proses  ekstraksi  (maserasi)  pada  penelitian ini dilakukan selama 1 hari saja. Hasil penelitian Salamah et al. (2008) menunjukkan bahwa lamanya waktu  ekstraksi  (maserasi)  pada  biota  kijing Taiwan selama 1, 2 dan 3 hari tidak memberikan pengaruh  yang  berbeda  nyata  terhadap  jumlah rendemen ekstrak yang dihasilkan . Hasil ekstraksi komponen  bioaktif  selada  air  disajikan  pada Gambar 1.
Ekstrak  selada  air  utuh  memiliki  persentase rendemen  ekstrak  terkecil  yaitu  11,09%, sedangkan  ekstrak  batang  selada  air  merupakan ekstrak  yang  memiliki  rendemen  terbesar  yaitu 14,04%.  Besarnya  rendemen  ekstrak  dari  suatu pelarut  dipengaruhi  juga  oleh  sifat  kepolaran dari  pelarut,  suhu,  waktu  ekstraksi  serta  tingkat kepolaran dari jumlah bahan yang diekstrak yang memiliki polaritas yang sama (Row dan Jin 2005; Yim et al. 2009).

## Uji fitokimia
Hasil uji fitokimia dari ekstrak kasar selada air (utuh, daun, batang) menunjukkan bahwa selada air mengandung 5 dari 9 komponen bioaktif yang diuji  dengan  metode  fitokimia  Harborne  (1984), komponen bioaktif disajikan pada Tabel 1.
Komponen-komponen bioaktif yang terkandung pada ekstrak kasar selada air dari uji fitokimia antara lain alkaloid, steroid/triterpenoid, fenol  hidrokuinon,  karbohidrat  dan  asam  amino. Alkaloid  pada  ekstrak  selada  air  ini  diduga memiliki  sifat  antioksidan,  sama  seperti  jenis alkaloid yang ditemukan oleh  Cheng et al. (2005) pada  tanaman Sinomenium  acutum ,  tanaman yang  digunakan  dalam  pengobatan  tradisional Cina.  Ekstrak  daun  dan  selada  air  utuh  yang menunjukkan  adanya  fenol  diduga  mempunyai aktivitas  antioksidan.  Hasil  penelitian  Escudero et  al. (2008)  menunjukkan  komponen  polifenol yang diisolasi dari daun Piper aduncum L. yang diekstraksi  dengan  etanol  memiliki  aktivitas antioksidan dan menurunkan kandungan hidrogen peroksida. Hasil penelitian Kiessoun et al. (2010) juga  menunjukkan  adanya  komponen  polifenol, aktivitas antioksidan dan anti-inflamasi yang tinggi pada  tanaman  Malvaceae  spesies Cienfuegosia digitata dan Sida alba .

## Aktivitas Antioksidan
Pengujian  aktivitas  antioksidan  dilakukan dengan  metode  1,1- difenil -2 pikrilhidrazil (DPPH).  Senyawa  DPPH  merupakan  radikal bebas yang relatif stabil (Chourasiya et al. 2010; Hanani et al. 2005; Rakesh et al. 2010), uji tersebut berdasarkan teori bahwa pendonor hidrogen adalah antioksidan  (Raghu et  al. 2010).  Antioksidan BHT digunakan sebagai pembanding dan kontrol positif.  Parameter  yang  umum  digunakan  untuk menginterpretasikan hasil pengujian DPPH adalah nilai IC 50 . Semakin kecil nilai IC 50 berarti aktivitas antioksidannya semakin tinggi (Mohammedi dan Atik  2011;  Molyneux  2004).  Hasil  uji  aktivitas antioksidan  BHT  dan  masing-masing  ekstrak
Tabel 1  Hasil uji fitokimia ekstrak kasar selada air
Uji Fitokimia Ekstrak Daun Batang Utuh Alkaloid: Dragendorff Meyer Wagner + - - + - - + - + Steroid/triterpenoid + + + Flavonoid - - - Saponin - - - Fenol Hidrokuinon + - + Molisch + + + Benedict + - + Biuret - - - Ninhidrin + + +
Shahrokhi  N,  Hadad  MK,  Keshavarzi  Z,  Shabani  M.  2009.  Effects  of  aqueous extract  of  water  cress  on  glucose  and  lipid  plasma  in  streptozotocin induced diabetic rats. Journal of Physiology 5(2):6-10.
Wu N, Fu K, Fu YJ, Zu YG, Chang FR, Chen YH, Liu XL, Kong Y, Liu W, Gu CB.  2009.  Antioxidant  activities  of  extracts  and  main  components  of Pigeonpea [ Cajanus cajan (L.) Millsp.] leaves. Molecules 14:1032-1043.
Yim HS, Chye FY,  Ho SK, Ho CW. 2009.  Phenolic profiles of selected edible wild mushrooms as affected by extraction solvent, time and temperature.
Asian Journal of Food and Agro-Industry 2(3):392-401.
Gambar 1  Rendemen ekstrak kasar selada air
Tabel 1  Hasil uji fitokimia ekstrak kasar selada air Uji Fitokimia Ekstrak Daun Batang Utuh Alkaloid: a. Dragendorff b. Meyer c. Wagner + - - + - - + - + Steroid/triterpenoid + + + Flavonoid - - - Saponin - - - Fenol Hidrokuinon + - + Molisch + + + Benedict + - + Biuret - - - Gambar 1  Rendemen ekstrak kasar selada air.
Salamah E, Purwaningsih S, Permatasari E
kasar selada air disajikan pada Tabel 2.
Persen inhibisi tertinggi selalu dihasilkan oleh larutan  yang  mengandung  konsentrasi  ekstrak kasar  yang  terbanyak,  yaitu  larutan  dengan konsentrasi  800 ppm pada masing-masing ekstrak kasar.  Persen  inhibisi  terendah  selalu  dihasilkan oleh larutan yang mengandung konsentrasi ekstrak kasar terkecil yaitu larutan dengan konsentrasi 200 ppm (pada masing-masing ekstrak kasar), hal ini menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak  kasar  selada  air  yang  ditambahkan, maka  semakin  tinggi  pula  persen  inhibisi  yang dihasilkan,  hal  tersebut  sesuai  dengan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Hanani et  al. (2005)  yaitu bahwa persentase penghambatan ekstrak terhadap aktivitas  radikal  bebas  meningkat  dengan meningkatnya  konsentrasi  ekstrak.  Mollyneux (2004)  mengklasifikasikan  ketiga  ekstrak  kasar selada  air  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang sangat lemah karena nilai IC 50 -nya lebih besar dari 0,20 mg/mL atau 200 ppm, hal ini jauh berbeda dengan aktivitas antioksidan BHT.

## Hasil Aplikasi Ekstrak Terpilih dalam Menghambat Oksidasi
Aktivitas  antioksidan  diukur  dengan  cara menghitung  nilai  bilangan  peroksida  emulsi minyak  yang  diinkubasi  37 o C  selama  7  hari. Ekstrak  daun  selada  air  yang  ditambahkan diharapkan  akan  menghambat  oksidasi  lemak sehingga nilai bilangan peroksida emulsi minyak akan  lebih  kecil.  Nilai  bilangan  peroksida  pada emulsi minyak dengan peyimpanan selama 7 hari disajikan pada Gambar 2.
Ekstrak  daun  selada  air  terbukti  mampu menghambat  pembentukan  bilangan  peroksida. Emulsi  minyak  dengan  penambahan  ekstrak sebesar 800 ppm merupakan penambahan ekstrak dengan  konsentrasi  terbaik  karena  mampu
menghambat  pembentukan  peroksida  paling tinggi  dengan  nilai  bilangan  peroksida  sebesar 0,80 Meq/kg bahan.

## KESIMPULAN
Ekstrak  kasar  selada  air  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  sangat  lemah.  Ekstrak  kasar selada  air  mengandung  lima  komponen  bioaktif yang  terdeteksi  melalui  uji  fitokimia,  yaitu komponen  alkaloid,  steroid,  fenol  hidrokuinon, karbohidrat dan asam amino. Ekstrak daun selada air  terbukti  mampu  menghambat  pembentukan bilangan peroksida.

## DAFTAR PUSTAKA
[AOAC]  Association  of  Official  Analytical  Chemist. 1995. Official Method of Analysis of The Association of  Official Analytical  of  Chemist .   Arlington: The Association of Official Analytical Chemist, Inc.
Blois MS. 1958. Antioxidant determinations by the use of a stable free radical. Nature 181:1199-1200. [BSN] Badan Standardisasi Nasional. 2000. Teh Kering dalam Kemasan . SNI 01-3836-2000. Jakarta: Badan Standardisasi Nasional.
Cheng  WM,  Qiu  F,  Wu  LJ,  Yao  XS.  2005.  A  new alkaloid  from Sinomenium  acutum . Chinese Chemical Letters 16(11):1481-1483. Chourasiya  RK,  Jain  PK,  Jain  SK,  Nayak  SK, Agrawal RK. 2010. In-vitro antioxidant activity of Clerodendron inerme (I.) Gaertn leaves. Research
Tabel 2  Hasil uji aktivitas antioksidan Sampel % Inhibisi IC 50 (ppm) BHT 2 ppm 4 ppm 6 ppm 8 ppm 4,96 24,32 46,80 62,85 67,28 200 ppm 400 ppm 600 ppm 800 ppm Ekstrak daun 42,24 53,34 67,32 81,64 331,39 Ekstrak batang 23,85 48,92 68,52 82,54 439,10 Ekstrak utuh 36,93 59,92 67,96 74,28 337,32 Ninhidrin + + + Tabel 2  Hasil uji aktivitas antioksidan Sampel % Inhibisi IC 50 (ppm) BHT 2 ppm 4 ppm 6 ppm 8 ppm 4,96 24,32 46,80 62,85 67,28 200 ppm 400 ppm 600 ppm 800 ppm Ekstrak daun 42,24 53,34 67,32 81,64 331,39 Ekstrak batang 23,85 48,92 68,52 82,54 439,10 Ekstrak utuh 36,93 59,92 67,96 74,28 337,32
Keterangan:  Angka-angka pada diagram batang yang diikuti huruf berbeda pada konsentrasi ekstrak yang digunakan menunjukkan beda nyata (p<0,05)
Gambar 2 Bilangan peroksida pada emulsi  minyak dengan penambahan ekstrak daun selada air
Gambar  2  Bilangan  peroksida  pada  emulsi  minyak dengan  penambahan  ekstrak  daun  selada air
Journal  of  Pharmaceutical,  Biological  and
Chemical Sciences 1(1):119-123. Escudero MR, Escudero FR, Remsberg CM, Takemoto JK, Davies NM, Yanes JA. 2008. Identification of polyphenols  and  anti-oxidant  capacity  of Piper aduncum L. The  Open  Bioactive  Compounds Journal 1:18-21.
Food  Chemical  Codex.  1992. Carrageenan .
Washington: National Academy Press. Gião  MS,  Pereira  CI,  Fonseca  SC,  Pintado  ME, Malcata FX. 2009. Effect of particle size upon the extent of extraction of antioxidant power from the plants Agrimonia eupatoria , Salvia sp. and Satureja Montana . Food Chemistry 117:412-416.
Gill CI, Haldar S, Boyd LA, Bennet R, Whiteford J,
Butler M, Pearson JR,   Bradbury I, Rowland IR. 2007. Watercress supplementation in diet resources lymphocyte  DNA  damage  and  alters  blood antioxidant status in healthy adults. The American
Journal of Clinical Nutrition 85:504-510. Hanani  E,  Mun’im A,  Sekarini  R.  2005.  Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons Callyspongia sp. dari Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian 2(3):127-133. Harborne JB. 1984. Phytochemical Methods . Ed ke-2. New York: Chapman and Hall.
Kiessoun  K,  Souza  A,  Meda  NTR,  Coulibaly AY,  Kiendrebeogo  M,  Meda  AL,  Lamidi  M, Rasolodimby JM, Nacoulma OG. 2010. Polyphenol contents,  antioxidant  and  anti  inflammatory activities  of  six  malvaceae  spesies  traditionally used to treat hepatitis B in Burkina Faso. European Journal of Scientific Research 44(4):570-580.
Kusumawati  R,  Tazwir,  Wawasto A.  2008.  Pengaruh perendaman dalam asam klorida terhadap kualitas gelatin  tulang  kakap  merah  ( Lutjanus sp.). Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan 3(1):1-6.
Mohammedi  Z,  Atik  F.  2011.  Impact  of  solvent extraction  type  of  total  polyphenols  content  and biological activity from Tamarix aphylla (L.) Karst. International Journal of Pharma and Bio Sciences 2(1):609-615.
Molyneux  P.  2004.  The  use  of  stable  free  radical diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for  estimating antioksidan  activity. Songklanakarin  Journal  of Science and Technology 26(2):211-219.
Nadheesha  MKF,  Bamunuarachchi  A,  Edirisinghe
EMRKBM,  Weerasinghe  WMSK.  2007.  Studies on  antioxidant  activity  of  Indian  gooseberry  fruit and  seed. Journal  of  Science  of  the  University  of
Kelaniya Sri Lanka 3:83-92.
Özen T. 2009. Investigation of antioxidant properties of Nasturtium officinale (watercress) leaf extracts.
Drug Research 66(2):187-193. Quinn  RJ.  1988. Chemistry  of  Aqueous  Marine Extracts:  Isolation  Techniques  in  Bioorganic Marine Chemistry , Vol. 2. Verlag Berlin Heidelberg: Springer.
Raghu  KL,  Ramesh  CK,  Srinivasa  TR,  Jamuna  KS. 2010.  DPPH  scavenging  and  reducing  power properties in common vegetables. Research Journal of  Pharmaceutical,  Biological  and  Chemical Sciences 1(4):399-406.
Rajalakshmi PA, Agalyaa S. 2010. Docking analysis of phenethyl isothiocyanate (PEITC) from Nasturtium officinale (watercress),  on  4-(methylnitrosamino)- 1-(3-pyridyl)-1-butanone  (NNK),  carcinogenic action  in  oral  cancer. International  Journal  of Pharma and Bio Sciences 1(4):67-74. Rakesh SU, Patil PR, Salunkhe VR. 2010. Free radical scavenging  activity  of  hydroalcoholic  extracts of  dried  flowers  of Nymphaea  stellata Willd. International Journal of Pharma and Bio Sciences 1(2):1-9.
Row KH, Jin Y. 2005. Recovery of catechin compounds from Korean tea by solvent extraction. Journal of Bioresource Technology 97:790-793. Salamah  E,  Ayuningrat  E,  Purwaningsih  S.  2008. Penapisan  awal  komponen  bioaktif  dari  kijing taiwan ( Anadonta woodiana Lea.) sebagai senyawa antioksidan. Buletin  Teknologi  Hasil  Perikanan 11(2):119-132.
Santoso J, Yoshie Y, Suzuki T. 2004. Antioxidant activity of methanol extract from Indonesian seaweeds in an oil emulsion model. Fisheries Science 70:183-188. Sen  S,  Chakraborty  R,  Sridhar  C,  Reddy  YSR,  De B.  2010.  Free  radicals,  antioxidants,  diseases  and phytomedicines: current status and future prospect. International  Journal  of  Pharmaceutical  Sciences Review and Research 3(1):91-100. Shahrokhi  N,  Hadad  MK,  Keshavarzi  Z,  Shabani  M.
2009. Effects of aqueous extract of water cress on glucose and lipid plasma in streptozotocin induced diabetic rats. Journal of Physiology 5(2):6-10.
Wu N, Fu K, Fu YJ, Zu YG, Chang FR, Chen YH, Liu XL,  Kong  Y,  Liu  W,  Gu  CB.  2009.  Antioxidant activities  of  extracts  and  main  components  of Pigeonpea  [ Cajanus  cajan (L.)  Millsp.]  leaves.
Molecules 14:1032-1043.
Yim  HS,  Chye  FY,  Ho  SK,  Ho  CW.  2009.  Phenolic profiles  of  selected  edible  wild  mushrooms  as affected by extraction solvent, time and temperature. Asian Journal of Food and Agro-Industry 2(3):392- 401.