ISSN: 1907-9931 (print), 2476-9991 (online)

## BIOAKTIVITAS ANTIBAKTERI DARI EKSTRAK DAUN MANGROVE AVICENNIA SP. ANTIBACTERIAL BIOACTIVITY OF MANGROVE LEAF EXTRACTS AVICENNIA SP.
Zakinah A. Alhaddad 1 , Deddy Wahyudi 1 , dan Wendy Alexander Tanod 1,2, *
1 Sekolah Tinggi Perikanan dan Kelautan (STPL) Palu Jalan Soekarno Hatta KM. 6 Kampus Madani Kota Palu, Sulawesi Tengah
2 Program Pascasarjana Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Brawijaya Malang Jalan Veteran Kota Malang Jawa Timur *Corresponding author e-mail: wendytanod@stplpalu.ac.id
Submitted: 29 Desember 2018 / Revised: 27 Mei 2019 / Accepted: 26 Juni 2019
http://doi.org/10.21107/jk.v12i1.4752

## ABSTRACT
Mangrove Avicennia sp. an important mangrove species, because it used as traditional medicine. This research aimed to obtain a fraction of mangrove leaves extract Avicennia sp. which has antibacterial bioactivity  against  S.  aureus  and  E.  coli.  Mangrove  leaves  collected  from  the  coast  in  the  village  of Kabonga  Besar,  Donggala  District,  Central  Sulawesi.  Antibacterial  activity  assayed  using  the  agar diffusion well method. The results showed the presence of steroid, triterpenoids, flavonoids, alkaloids and polyphenols compounds. Antibacterial activity showed by ethyl acetate fraction (S. aureus 16.97 ± 1.15 mm and E. coli 14.40 ± 0.46 mm) and ethanol (S. aureus 12.20 ± 2.12 mm and E. coli 8.13 ± 0.42  mm)  at  1,000  mg/mL.  This  study  has  explored  the  antibacterial  ability  of  Avicennia  sp.  leaves extract  in  n-hexane,  ethyl  acetate,  and  ethanol.  Phytochemical  analysis  of  various  solvent  extracts shows  that  flavonoids  and  tannins  are  common  in  all  plant  extracts  with  antibacterial  properties. Avicennia  sp.  leaves  extract  can  be  used  to  find  new  bioactive  natural  products  and  can  use  as  a potential source that can control pathogenic bacteria.
Key Words : Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bioactive, Donggala, Central Sulawesi

## ABSTRAK
Mangrove Avicennia sp. merupakan spesies mangrove yang penting, karena telah digunakan sebagai obat tradisional. Tujuan penelitian ini, yaitu mendapatkan fraksi ekstrak daun mangrove Avicennia sp. yang  memiliki  bioaktivitas  antibakteri  terhadap  S.  aureus  dan  E.  coli.  Sampel  daun  mangrove dikoleksi  dari  pesisir  pantai  di  Kelurahan  Kabonga  Besar  Kabupaten  Donggala  Sulawesi  Tengah. Metode  Pengujian  antibakteri  menggunakan  difusi  sumur  agar.  Hasil  penelitian  menunjukkan kehadiran  senyawa  steroid,  triterpenoid,  flavonoid,  alkaloid  dan  polifenol.  Aktivitas  antibakteri ditunjukkan fraksi etil asetat (S. aureus 16.97 ± 1.15 mm dan E. coli 14.40 ± 0.46 mm) dan etanol (S. aureus  12.20  ±  2.12  mm  dan  E.  coli  8.13  ±  0.42  mm)  pada  1,000  mg/mL.  Penelitian  ini  telah mengeksplorasi  kemampuan  antibakteri  ekstrak  daun  Avicennia  sp.  dalam  pelarut  n-heksan,  etil asetat dan etanol. Analisis fitokimia dari berbagai ekstrak pelarut menunjukkan bahwa flavonoid dan tanin  adalah umum dalam  semua ekstrak  tanaman dengan sifat antibakteri. Ekstrak daun  Avicennia sp.  dapat  digunakan  untuk  menemukan  produk  alami  bioaktif  baru  dan  dapat  digunakan  sebagai sumber potensial yang dapat mengendalikan bakteri patogen.
Kata Kunci: Escherichia coli , Staphylococcus aureus , Bioaktif, Donggala, Sulawesi Tengah

## PENDAHULUAN
Mangrove  merupakan  tumbuhan  hutan  tropis yang  mudah  tumbuh  dan  belum  banyak dimanfaatkan  subtansi  bioaktifnya.  Tumbuhan mangrove  memiliki  banyak  manfaat  bagi kehidupan  manusia,  mulai  dari  manfaat
ekologi  hingga  manfaat  sebagai  sumber makanan  dan  obat-obatan  (Nurjanah et  al. , 2015).  Alasan  petingnya  studi  substansi bioaktif  tumbuhan  mangrove,  yaitu  mangrove merupakan  salah  satu  vegetasi  hutan  tropis yang  mudah  berkembang  dan  belum  banyak termanfaatkan  dan  potensi  substansi  bioaktif
mangrove  bernilai  medis  (Latief,  Nazarudin,  & Nelson, 2015).
Mangrove  dari  genus Avicennia merupakan salah  satu  jenis  tumbuhan  yang  banyak tersebar  di  Indonesia,  diantaranya  ditemukan tumbuh  di  pesisir  perairan  pantai  di  Sulawesi Tengah. Berbagai penelitian telah mengungkap  potensi  bioaktivitas  antibakteri mangrove  genus Avicennia secara  in  vitro terhadap  berbagai  bakteri  patogen  (Ulmursida et  al. ,  2017,  Ananthavalli  &  Karpagam,  2017, Johannes et  al. ,  2017,  Mangrio et  al. ,  2016, Manilal et  al. ,  2016,  Sabiladiyni et  al., 2016, Tariq et al. , 2015, A. Sheela Devi et al., 2015, Danata  &  Yamindago,  2014,  Mohammed et al., 2014,  Nayak et  al., 2014,  Al-Maqtari  & Nagi, 2014, Sharief Md & V, 2014, Hingkua et al. ,  2013,  Oktavianus,  2013,  Dhayanithi et  al., 2012,  Prabhu  &  Guruvayoorappan,  2012, Bachtiar,  2011,  Prihanto et  al., 2011  dan  Sari et al. , 2008).
Tumbuhan  termasuk  mangrove  menunjukkan respons antimikroba karena adanya fotokonstituen  seperti  alkaloid,  minyak  atsiri, asam fenolik, flavonoid, kuinin, tannin, terpenoid dan lain-lain (Ravikumar et al., 2010 dan Edeoga, Okwu, & Mbaebie, 2005). Prabhu & Guruvayoorappan (2012) melaporkan ekstrak dari tumbuhan mangrove dan asosiasinya telah digunakan luas untuk tujuan medis, dan telah tercatat sekitar 349 metabolit merupakan  turunan  dari  steroid,  diterpen, triterpen,  saponin,  flavonoid,  alkaloid  dan tannin.
Mangrove Avicennia sp.  merupakan  spesies mangrove  yang penting  (Mahera et al. , 2011), karena  kulit,  daun  dan  buat  telah  digunakan sebagai  obat  tradisional  untuk  penyembuhan penyakit  kulit  (Fauvel et  al. ,  1993),  reumatik, cacar,  bisul  dan  pakan  ternak  (Oktavianus, 2013  dan  Fauvel et  al., 1995).  Selain  itu, mangrove Avicennia merupakan  sumber  dari alkohol,  asam  amino,  karbohidrat,  asam lemak,  hidrokarbon,  garam  inorganic,  mineral, fitoaleksin,  asam  karboksilat,  steroid,  tanin, triterpen dan vitamin, iridoid glukosida (Ananthavalli  &  Karpagam,  2017,  Mangrio et al., 2016, Edeoga et al. , 2005, Bandaranayake,  2002,  dan  Fauvel et  al. , 1995). Haque et al., (2006) dan Bell & Duewell
(1961) melaporkan bahwa mangrove Avicennia mengandung  triterpenoid  (asam betulik  0,3%,  taraxerol  0,06%  dan  taraxeron 0,05%),  dan  senyawa  hidrokarbon  lainnya telah diisolasi dari berbagai bagian Avicennia.
Antibakteri  adalah  senyawa  yang  digunakan untuk  mengendalikan  pertumbuhan  bakteri yang bersifat merugikan. Mekanisme penghambatan  terhadap  pertumbuhan  bakteri oleh  senyawa  antibakteri  dapat  berupa perusakan dinding sel dengan cara menghambat pembentukannya atau mengubahnya setelah selesai terbentuk, perubahan  membran  sitoplasma  sehingga menyebabkan keluarnya bahan inti dari dalam sel,  perubahan  molekul  protein  dan  asam nukleat,  penghambatan  kerja  enzim,  dan penghambatan  sintesis  asam  nukleat  dan protein  (WHO,  2014).  Substansi  antibakteri dapat bekerja secara bakteriostatik, bakteriosidal,  dan  bakteriolitik  berdasarkan sifat  toksisitas  selektifnya  (Parekh  &  Chanda, 2007).
Levy & Marshall (2004) melaporkan munculnya  strain  bakteri  dengan  ketahanan terhadap  substansi  antimikroba  yang  ada. Resistensi obat menunjukkan ancaman kesehatan  masyarakat  global  yang  terus meningkat  yang  melibatkan  semua  patogen mikroba dan obat antimikroba. Melihat potensi besar  dari  mangrove Avicennia dan  ancaman resistensi  bakteri , maka  pada  penelitian  ini akan  mengkaji  potensi  bioaktivitas  antibakteri mangrove Avicennia sp.  yang  diisolasi  dari pesisir  perairan  Sulawesi  Tengah.  Tujuan penelitian ini, yaitu mendapatkan fraksi ekstrak daun  mangrove Avicennia sp.  yang  memiliki bioaktivitas  antibakteri  terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .

## MATERIAL DAN METODE Tempat dan Waktu
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Laboratorium Teknologi  Hasil  Perikanan,  Sekolah  Tinggi Perikanan  dan  Kelautan  Palu.  Penelitian dilaksanakan mulai dari Bulan April- September  2016  mulai  dari  tahap  sampling, ekstraksi substansi bioaktif, pengujian fitokimia dan pengujian aktivitas antibakteri.

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan:  Daun  mangrove Avicennia sp.,  nutrient  agar  (Merck),  agar bakteriologikal  (Hi-Media),  Akuades,  n-heksan (Merck),  etil  asetat  (Merck),  etanol  (Merck), DMSO (Merck), kloramfenikol, ampisilin (Generik),  isolat  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus (dari  Laboratorium Mikrobiologi,  Fakultas  Kedokteran  Universitas
Brawijaya).  Alat  yang  digunakan: Laminar  air flow , autoklaf, timbangan analitik, cawan petri, tabung  reaksi,  Erlenmeyer,  inkubator,  oven, jarum ose, Bunsen, mikropipet, tabung sumur, rotary  vacuum  evaporator (EYELA  N-1100) dan standar Mc Farland (Hi-media).
Sampling  dan  Ekstraksi  Daun  Mangrove Avicennia sp. (Sharief Md & V, 2014)
Sampel  daun  mangrove  dikoleksi  dari  pesisir pantai di Kelurahan Kabonga
Besar
Kabupaten Donggala
Sulawesi Tengah, kemudian  dibersihkan  dan  dikering-anginkan pada  suhu  ruangan  sampai  kering  (5-6 minggu). Daun mangrove yang kering ukurannya  diperkecil,  kemudian    dihaluskan. Ekstraksi  dilakukan  menggunakan  metode maserasi  bertingkat  dengan  menggunakan tiga  jenis  pelarut  berdasarkan  polaritas. Sebanyak  100  g  tepung  daun  mangrove Avicennia sp.  dimaserasi  bertingkat  dengan menggunakan  pelarut  n-heksan,  etil  asetat dan  etanol  (1:2  v/v),  kemudian  didiamkan selama semalam (sambil sesekali diaduk), dan kemudian  disaring.  Selanjutnya,  pelarutnya diuapkan  dengan Rotary  Vaccum  Evaporator . Tahapan ekstraksi ini diulang sebanyak 3 kali. Kemudian,  ekstrak  hasil  maserasi  pertama sampai  ketiga  ditimbang  dan  dijumlahkan berat  ekstraknya.  Lalu,  dihitung  persentase dari  rendemen  ekstrak  dari  tiap  fraksi  dengan persamaan  (1).  Selanjutnya  ekstrak  dari  tiap pelarut dibuat seri pengenceran dari konsentrasi  100.000,  10.000,  1.000  dan  100 mg/L.
Rendemen Ekstrak (%) =
× 100%
Pengujian Fitokimia (Harborne, 1998)
Uji fitokimia adalah uji kualitatif yang bertujuan untuk  menentukan  komponen  bioaktif  yang terkandung  dalam  suatu  bahan.  Uji  fitokimia meliputi  pemeriksaan  senyawa  flavonoid, saponin, tanin, fenolik, triterpenoid, dan steroid dari ekstrak kasar daun mangrove .

## Uji Flavonoid
Sebanyak  1,0  mL  larutan  sampel  alkoholik dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  kemudian ditambahkan  sedikit  serbuk  magnesium  dan beberapa  tetes  HCL  pekat  (pereaksi  shinoda) bila  bereaksi  positif,  akan  menghasilkan larutan  berwarna  jingga,  merah  muda  atau merah.

## Uji Saponin
Sebanyak  2,0  mL  larutan  sampel  dimasukkan kedalam  tabung  reaksi  kemudian  dikocok
beberapa  menit,  bila  bereaksi  positif  akan terbentuk busa yang stabil selama 15 menit.

## Uji Polifenol (Tannin)
Sebanyak  1,0  mL  sampel  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi  kemudian  ditambah dengan  beberapa  tetes  pereaksi  larutan  feri klorida  5%  (FeCl 3 )  bila  bereaksi  positif  akan menghasilkan endapan coklat.

## Uji Alkaloid
Sebanyak  1,0  mL  sampel  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi  kemudian  ditambah dengan  2-3  tetes  pereaksi  Dragendorf,  bila bereaksi  positif  akan  menghasilkan  endapan jingga.

## Uji Steroid dan Triterpenoid
1 mL ekstrak ditambahkan 3,5 tetes kloroform, kemudian  ditambahkan  3-5  tetes  anhidrida asam  asetat  dan  10  tetes  asam  sulfat  pekat. Uji  positif  Steroid  dengan  perubahan  warna larutan  menjadi  biru  atau  hijau.  Uji  positif Triterpenoid  dengan  perubahan  warna  larutan menjadi coklat sampai coklat kemerahan.

## Pembuatan Pengenceran Kontrol Positif
Pada  penelitian  ini  digunakan  ampisilin  dan kloramfenikol  sebagai  kontrol  positif.    Kontrol positif  dibuat  seri  pengenceran  dengan konsentrasi  100,  10,  1  mg/L.  Ampisillin  dan kloramfenikol  merupakan  kelompok  yang berspektrum  luas  yang  dapat  menghambat bakteri gram positif dan gram negatif.

## Penyiapan Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  digunakan  yaitu Escherichia coli dan Staphylococcus aureus yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas  Kedokteran  Universitas  Brawijaya Malang.  Bakteri  uji  dikultur  pada  media  NA dan  diinkubasi  pada  suhu  37ºC  selama  24 jam. Setelah itu bakteri dipanen dan ditambahkan  dalam  larutan  fisiologis  (NaCl 0,9%).  Kemudian  diatur  tingkat  kepadatan menjadi  1×10 9 (disesuaikan  dengan  larutan standar  Hi-Media  McFarland  No.4).  Setelah itu,  dibuat  sebuah  seri  pengenceran  sampai 1×10 7 .
Pengujian Antibakteri dengan Metode Difusi Sumur Agar (Tanod et al. , 2018)
Media Dasar
Media  nutrien  agar  ditimbang  sebanyak    2  g, dan  ditambahkan  2  g  agar  bakteorologikal, dilarutkan  dalam    aquades  100  ml,  dan dihomogenkan  lalu  disterilkan  dalam  autoklaf selama 15 menit pada suhu 121 0 C. Setelah itu dituang  dalam  cawan  petri  steril  sebanyak  ± 15 ml dan dibiarkan sampai mengeras.

## Media Pembenihan
Lapisan  pembenihan  dibuat  dengan  cara mengambil  nutrien  agar  sebanyak  0,8  g kemudian  dilarutkan  dalam  100    ml  aquades, dipanaskan  sampai  homogen.  Setelah  itu dimasukkan  dalam  tabung  reaksi  masing- masing    sebanyak  9  ml  kemudian  disterilkan dalam  autoklaf  pada  suhu  121 0 C  selama  15 menit.

## Pengujian Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  menggunakan metode  difusi  sumur  agar.  Pertama  media dasar  dituang  ke  cawan  petri,  lalu    dibiarkan hingga  mengeras.  Setelah  itu,  diatas  media dasar  ditambahkan  media  pembenihan  yang sebelumnya  telah  diberi  1  ml  isolat  bakteri  uji dengan  kepadatan  10 7 sel/ml.  Kemudian dibuat  sumur-sumur  dengan  jarak  yang teratur.  Selanjutnya  ke  dalam  tiap-tiap  sumur
diberi  ekstrak  uji  sebanyak  50  µl.  Kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam. Setelah  itu  diamati  dan  diukur  zona  hambat yang  terbentuk  berupa  daerah  bening  di sekeliling sumur.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  karakteristik  daun  dan  akar, sampel  mangrove  yang  digunakan  dalam penelitian ini, sampel daun mengrove terindentifikasi Avicennia sp. Identifikasi sampel morfologi mangrove dilakukan dengan mengamati jenis akar, bentuk dan ujung daun. Genus Avicennia umumnya  memiliki  sistem akar  horizontal  dan  pernapasan  akar;  bentuk daun bulat, bulat memanjang, elips; dan ujung daun  meruncing  menjadi  bulat.  Prosedur identifikasi  sampel  daun  mangrove  mengikuti instruksi Noor et  al., (2006).  Gambar  1 menunjukkan sampel daun mangrove Avicennia sp.
Gambar 1. Daun Mangrove Avicennia sp.
Proses ekstraksi bertujuan untuk memisahkan substansi  bioaktif  dari  bahan  yang  kompleks. Untuk mendapatkan rendemen bahan bioaktif, sampel perlu dikurangi ukurannya dan dikeringkan  (D.  K.  Sari,  2008).  Rendemen ekstrak  merupakan  rasio  berat  ekstrak  yang diperoleh  dari  berat  awal  sampel  yang
digunakan.  Rendemen  ekstrak  menunjukkan efektivitas  pelarut  untuk  memisahkan  dan menarik bahan bioaktif selama proses ekstraksi, tetapi tidak menunjukkan bioaktivitas  dari  ekstrak  (Putri et  al., 2016). Rendemen ekstrak dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Rendemen Ekstrak Daun Mangrove A. marina Pelarut Rendemen Ekstrak (%) n-heksan 2.78 Etil Asetat 6.31 Etanol 11.07
Hasil Tabel 1. diatas sesuai dengan penelitian yang  dilakukan  Imra et  al., (2016)  yang menyatakan  bahwa  rendemen  ekstrak  dari fraksi polar lebih tinggi daripada fraksi lainnya. Jenis  pelarut  yang  digunakan  mempengarui rendemen ekstrak (Hardiningtyas et al., 2014). (Dewanto et  al ,  2018)  melaporkan  rendemen
ekstrak dari daun kering Avicennia sp sebesar 10.63%  (Etanol),  5.56%  (Etil  asetat)  dan 2.85% (n-heksan). (Hardiningtyas et al., 2014) juga  melaporkan  rendemen  ekstrak  daun Avicennia  marina sebesar  9,61%  (metanol), 1,28%  (etil  asetat)  dan  0,62%  (n-heksana). Variasi  dalam  hasil  ekstrak  dapat  sangat
dipengaruhi  oleh  kadar  air  dan  komponen lainnya  (Podungge et  al. ,  2015). Selain  itu rendemen yang dihasilkan dari proses maserasi  memiliki  nilai  rendemen  yang bervariasi  pada  habitat  dan  lokasi  yang berbeda  terhadap  lingkungannya  (Nopiyanti  &
Agustriani, 2016).
Substansi  bioaktif  merupakan  respons  dari organisme dalam menghadapi interaksi dengan  lingkungan.  Bioaktif  yang  diproduksi berperan  sebagai  mekanisme  pertahanan. Hasil uji fitokimia ketiga fraksi  daun mangrove Avicennia sp . dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Fitokimia Ekstrak Daun Mangrove Avicennia sp.
Fraksi Saponin Polifenol (Tanin) Steroid Alkaloid Flavonoid Triterpenoid Etanol - + + - + - Etil asetat - + - + + + n-Heksan - - - - + +
Hasil  pengujian  pada  Tabel  2  menunjukkan kehadiran senyawa steroid, triterpenoid, flavonoid, alkaloid dan polifenol. Hal ini sesuai dengan  penelitian  Dhayanithi et  al., (2012) bahwa  ekstrak  daun  mangrove  menunjukkan kehadiran  fitokimia konstituen  seperti  alkaloid, tannin,  flavonoid  dan  gula  yang  biasa  umum diperoleh  pada  ekstrak  tanaman.  Begitu  juga dengan  hasil  penelitian  Parekh  &  Chanda (2007) bahwa flavonoid dan alkaloid merupakan  kelompok  senyawa  yang  umum terdapat  pada  ekstrak  daun  tumbuhan. Srikanth et  al., (2015)  melaporkan  ekstrak hidroalkoholik  dari  daun Avicennia  marina mengandung  komponen  fitosterol,  flavonoid, tannin  dan  fenol.  Fraksi  methanol  dari  daun Avicennia officinalis dilaporkan juga mengandung  komponen  aktif  steroid,  tannin dan  flavonoid  (Ganesh  &  Vennila,  2011). F lavonoid  merupakan  struktur  fenolik  yang mengandung  satu  gugus  karbonil  kompleks dengan protein larut dan ekstraseluler dengan dinding  sel  bakteri  (Ravikumar et  al., 2010).
senyawa triterpenoid pada tumbuhan berperan sebagai  pelindung  untuk  menolak  serangga dan  serangan  mikroba  (Riyanto,  Widowati,  & Sabdono, 2013). Steroid merupakan komponen  yang  umum  terdapat  pada  hewan, tetapi (Harborne,  1998)  juga  menemukannya pada  tumbuhan.  Steroid  umumnya  digunakan sebagai agen antibakteri.
Aktivitas antibakteri dapat digolongkan berdasarkan  besarnya  zona  hambat  yang terbentuk.  Berdasarkan  kategori  zona  hambat oleh  Paudel  (Paudel et  al. ,  2014),  terdapat  4 kategori  aktivitas  antibakterial,  yaitu  sangat kuat  (zona  hambat  ≥  20  mm),  kuat  (zona hambat 15 - 20 mm), sedang (zona hambat 10 - 15  mm)  dan  lemah  (zona  hambat  ≤10  mm). Ketiga  fraksi  daun  mangrove  menunjukkan potensi  antibakteri  yang  beragam  terhadap bakteri S.  aureus dan E.  coli .  Hasil  pengujian antibakteri  ketiga  fraksi  daun  mangrove Avicennia sp.  terhadap  bakteri S.  aureus dan E. coli dapat dilihat pada Tabel 3 dan Gambar 2.
Tabel 3. Diameter Zona Hambat Ekstrak Daun Mangrove Avicennia sp. Bakteri Uji Konsentrasi (mg/L) Diameter Zona Hambat (mm) ± SD (n=3) Fraksi Etanol Fraksi Etil Asetat Fraksi n-heksan S. aureus 100,000 12.20 ± 2.12 16.97 ± 1.15 4.13 ± 0.45 10,000 9.27 ± 2.52 12.63 ± 0.91 3.67 ± 0.42 1,000 4.77 ± 0.80 8.30 ± 0.89 2.97 ± 2.15 100 0 6.20 ± 2.01 2.23 ± 0.40 E. coli 100,000 8.13 ± 0.42 14.40 ± 0.46 TA 10,000 5.53 ± 0.50 13.07 ± 0.50 TA 1,000 4.27 ± 0.31 9.30 ± 0.89 TA 100 TA 4.50 ± 0.17 TA
TA = Tidak menunjukkan Zona Hambat
Gambar  2  menunjukkan  fraksi  etil  asetat tergolong  antibakteri  yang  kuat,  fraksi  etanol tergolong  antibakteri  yang  sedang,  dan  fraksi n-heksan  tergolong  antibakteri  yang  lemah. Hasil penelitian ini didukung oleh (Al-Maqtari & Nagi  2014)  dan  (Bakshi  &  Chaudhuri  2014) yang  juga  melaporkan  antibakteri  dari  tiga
fraksi  etil  asetat  ekstrak  daun  mangrove Avicennia  marina,  A.  officinalis,  A.  Alba berpotensi sedang. Sedangkan hasil penelitian Tariq et  al., (2015)  melaporkan  fraksi  etanol dan  etil  asetat  ekstrak  daun Avicennia sp. menunjukkan aktivitas antibakteri yang sedang sampai sangat kuat.
Gambar 2. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Avicennia sp.
Hasil  penelitian  sebelumya  telah  melaporkan aktivitas  antibakteri  dari  daun  mangrove Avicennia , yaitu  daun A vicennia. schaueriana pada  217  µg/mL  mampu  menghambat S. aureus , E. coli dan P. aeruginosa (Machado et al., 2017).  Fraksi  etanol,  metanol  dan  etil asetat  daun  mengrove A.  marina mampu menghambat  pertumbuhan E.  coli,  Klebsiella pneumoniae , P. aeruginosa , Citrobacter diversus dan Proteus  mirabilis (Tariq et  al., 2015).  Ekstrak  metanol  dari  mangrove A. marina dilaporkan dapat menghambat dengan kekuatan  sedang  sampai  sangat  kuat  bakteri B.  subtilis , E.  coli , P.  aeruginosa dan S. aureus (Sugga et  al., 2015).  Danata  & Yamindago (2014) melaporkan ekstrak metanol  daun A.  marina menunjukkan  zona hambat 4.43-5.79 mm terhadap S. aureus dan 4.25-5.48  mm  terhadap Vibrio  alginolyticus . Tiga ekstrak daun mangrove Indian A. alba , A. marina dan A. officinalis menunjukkan penghambatan terhadap E. coli, Agrobacterium  tumefaciens,  Streptococcus mutans,  S.  aureus,  Tricophyton  rubrum dan Aspergillus flavus (Bakshi & Chaudhuri, 2014).
Nayak et  al., (2014)  melaporkan  fraksi  etil alkohol daun A. marina menunjukkan kemampuan  menghambat P.  aeruginosa dan B. subtilis . Daun mangrove A. marina dan A. alba juga  dilaporkan  menunjukkan  aktivitas antibakteri  terhadap Bacillus  subtilis , Bacillus coagulans , E. coli , Enterobacter sakazakii dan Acinetobacter baumannii (Gupta & Roy, 2012). Ekstrak  gliserol  daun A.  marina menunjukkan aktivitas  antibakteri  yang  lemah  terhadap bakteri E.  coli (Amirkaveei  &  Behbahani, 2011).
Bakteri  gram  negatif  seperti E.  coli umumnya mempunyai  lapisan  tambahan  dalam  struktur dinding sel, sebagai membrane luar. Membran luar terdiri atas  lipopolisakarida (LPS), matriks porin,  dan  lipoprotein.  Membran  luar  ini  dapat menjadi  perantara  difusi  pasif  senyawa hidrofilik.  Senyawa  hidrofilik  dapat  lebih mudah melewati  LPS  daripada  senyawa  yang hidrofobik  (Tanod et  al., 2018).  Bakteri  gram negatif sensitive terhadap senyawa polar yang memiliki  ujung  hidrofilik,  misalnya  karboksil,
asam amino dan hidroksil (Madigan, Martinko, & Parker, 2000)
Pada  penelitian  ini  juga  menguji  kloramfenikol dan  ampisilin  sebagai  pembanding  (kontrol positif).  Kloramfenikol  merupakan  senyawa antibakteri yang stabil dan dapat berdifusi baik dalam media agar (Rahal & Simberkoff, 1979). Ampisilin  merupakan  senyawa  semi-sintetis
yang  masuk  dalam  kelompok  penisilin  dan telah terbukti efektif menghambat bakteri gram positif  dan  beberapa  gram  negatif.  Ampisilin bekerja  dengan  menghambat  sintesis  dinding sel  bakteri,  sehingga  menyebabkan  lisis  sel (Ashnagar  &  Naseri,  2007).  Hasil  pengujian antibakteri  kontrol  positif  dan  negatif  terhadap bakteri S. aureus dan E. coli dapat dilihat pada Tabel 4 dan Gambar 3.
Tabel 4. Diameter Zona Hambat Kontrol Positif dan Negatif
Bakteri Uji Konsentrasi (mg/L) Diameter Zona Hambat (mm) ± SD (n=3) Kloramfenikol Ampisilin S. aureus 100 37.73 ± 0.51 23.83 ± 0.40 10 26.20 ± 1.06 20.27 ± 1.53 1 23.63 ± 0.35 15.53 ± 1.08 E. coli 100 37.60 ± 1.00 21.40 ± 0.72 10 28.87 ± 0.98 18.40 ± 1.06 1 20.87 ± 0.51 12.97 ± 0.35
Gambar 3. Aktivitas Antibakteri Kontrol Positif dan Negatif
Mangrove  hidup  pada  habitat  pasang  surut, mengalami  variasi  harian  tekanan  lingkungan sehingga dapat mempengaruhi proses morfologi,  fisiologis,  biokimia  dan  molekuler (Dasgupta,  Nandy,  Sengupta,  &  Das,  2012). Sebagai akibat dari variasi tekanan lingkungan ini, mangrove memproduksi metabolit sekunder (Bandaranayake, 2002) yang memiliki  bioaktivitas  yang  beragam  dan bermanfaat bagi manusia dalam apikasi medis
dan  pangan  (Latief et  al., 2015  dan  Nurjanah et al., , 2015).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Penelitian ini telah mengeksplorasi kemampuan antibakteri ekstrak daun
Avicennia sp.  dalam  pelarut  n-heksan,  etil asetat  dan  etanol.  Analisis  fitokimia  dari berbagai  ekstrak  pelarut  dengan  penelitian
sebelumnya  menunjukkan  bahwa  flavonoid dan tanin adalah umum dalam semua ekstrak dengan sifat antibakteri. Ekstrak daun Avicennia sp. dapat digunakan untuk menemukan  produk  alami  bioaktif  baru  dan dapat  digunakan  sebagai  sumber  potensial yang  dapat  mengendalikan  bakteri  patogen. Oleh  karena  itu,  ada  perlu  untuk  penelitiani lebih lanjut dalam mengisolasi, mengidentifikasi, mengkarakterisasi dan menjelaskan  struktur  senyawa  bioaktif  yang memiliki aktivitas antibakteri.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Ketua Sekolah Tinggi Perikanan dan Kelautan Palu, dan Kepala Laboratorium Kimia Penelitian  Universitas  Tadulako  yang  telah menyediakan  fasilitas,  sehingga  penelitian dapat  dilaksanakan.  Secara  khusus  kepada Prof.  Dr.  Ir.  Asriani  Hasanuddin,  MS  yang telah  banyak  memberikan  petunjuk  selama penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Maqtari,  M.  A.,  &  Nagi,  H.  M.  (2014).
Screening  of  salt-stress,  antioxidant enzyme,  and  antimicrobial  activity  of leave  extracts  of  mangroves Avicennia marina L.  from  Hodaidah,  Yemen. Journal of Stress Physiology &
Biochemistry , 10 (2), 190 –199. Amirkaveei,  S.,  &  Behbahani,  B.  A.  (2011). Antimicrobial  effect  of  mangrove  extract on Escherichia  coli and Penicillium digitatum . In International Conference on Food  Engineering  and  Biotechnology (Vol. 9, pp. 185 –188). Ananthavalli,  M.,  &  Karpagam,  S.  (2017). Antibacterial  activity  and  phytochemical content  of Avicennia  marina collected from polluted and unpolluted site. Journal of Medicinal Plants Studies , 5 (3), 47 –49. Ashnagar,  a., & Naseri, N. G. (2007). Analysis of  Three  Penicillin  Antibiotics  (Ampicillin, Amoxicillin  and  Cloxacillin)  of  Several Iranian  Pharmaceutical  Companies  by HPLC. E-Journal  of  Chemistry , 4 (4), 536 –545.
Bachtiar, E. (2011). Isolasi Senyawa Flavonoid Dari  Daun  Mangrove Avicennia sp. Sebagai  Sumber  Senyawa  Antibakteri Aeromonas  hydrophila Pada  Ikan  Mas (Cyprinus  Carpio  L.).  Laporan  Hasi Penelitian. Retrieved
from
http://drpmi.unpad.ac.id/archives/2346.
Diakses Tanggal 27 Agustus 2018.
Bakshi, M., & Chaudhuri, P. (2014).
Antimicrobial  potential  of  leaf  extracts  of ten  mangrove  species  from  Indian Sundarban. International  Journal  of Pharma  and  Bio  Sciences , 5 (1),  294 – 304.
Bandaranayake,  W.  M.  (2002).  Bioactivities, bioactive compounds and chemical constituents of mangrove plants. Wetlands  Ecology  and  Management ,
10 (6), 421 –452.
Bell,  K.  .,  &  Duewell,  H.  (1961). Triterpenoids From  The  Bark  of  Avicennia  Marina . Tighe’s Hill, New South Wales.
Danata,  R.  H.,  &  Yamindago,  A.  (2014). Analisis  Aktivitas  Antibakteri  EKstrak Daun  Mangrove Avicennia  marina Dari Kabupaten  Trenggalek  dan  Kabupaten
Pasuruan Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Vibrio alginolyticus. Jurnal  Kelautan , 7 (1),  12 – 19.
Dasgupta, N., Nandy, P., Sengupta, C., & Das,
S. (2012). Protein and enzymes regulations  towards  salt  tolerance  of some  Indian  mangroves  in  relation  to adaptation. Trees - Structure and Function , 26 (2), 377 –391. Dewanto,  D.  K.,  Tanod,  W.  A.,  Finarti,  & Renol.  (2018).  Screening  of  Antiradical Activity  from  Some  Central  Sulawesi Mangroves. Pharmaciana , 8 (1),  155 – 168.
Dhayanithi,  N.  B.,  Kumar,  T. T.  A.,  Murthy,  R. G.,  &  Kathiresan,  K.  (2012).  Isolation  of antibacterials from the mangrove, Avicennia  marina and  their  activity against multi drug resistant Staphylococcus  aureu s. Asian  Pacific Journal  of  Tropical  Biomedicine , 2 (3),
S1892 –S1895.
Edeoga, H. O., Okwu, D. E., & Mbaebie, B. O. (2005).  Phytochemical  constituents  of some  Nigerian  medicinal  plants. African Journal of Biotechnology , 4 (7), 685 –688. Fauvel, M. T., Bousquet-Melou, A., Moulis, C., Gleye, J., & Jensen, S. R. (1995). Iridoid glucosides  from Avicennia  germinans . Phytochemistry , 38 (4), 893 –894.
Fauvel,  M.  T.,  Taoubi,  K.,  Gleye,  J.,  & Fouraste,  I.  (1993).  Phenylpropanoid Glycosides from Avicennia marina . Planta Medica , 59 (4), 387.
Ganesh,  S.,  &  Vennila,  J.  J.  (2011). Phyochemical  Analysis  of Acanthus ilicifolius and Avicennia officinalis by GC- MS.
Research Journal of Phytochemistry , 5 (1), 60 –65.
Gupta,  V.,  &  Roy,  A.  (2012).  Comparative
study  of  antimicrobial  activities  of  some mangrove plants from Sundarban Estuarine  Regions  of  India. Journal  of
Medicinal Plants Research , 6 (42), 5480 – 5488.
Haque,  E.,  Shekhar,  H.  U.,  Mohamad,  A.  U., Rahman,  H.,  Islam,    a  K.  M.  M.,  & Hossain, M. S. (2006). Triterpenoids from the  Stem  Bark  of Avicennia  officinalis . Journal  of  Pharmaceutical  Sciences , 5 (1 –2), 53–57. Harborne, J. B. (1998). Phytochemical Methods; A Guide to Modern Techniques of  Plant  Analysis . Published  in  the  USA by Chapman and Hall in association with Methuen, Inc. (Vol. 3). London New York: Chapman and Hall.
Hardiningtyas,  S.  D.,  Purwaningsih,  S.,  & Handharyani, E. (2014). Aktivitas Antioksidan  Dan  Efek  Hepatoprotektif Daun  Bakau  Api-Api  Putih. Jurnal Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia , 17 (1), 80 –91.
Hingkua,  S.  S.,  Julaeha,  E.,  &  Kurnia,  D. (2013). Senyawa Triterpenoid Dari Batang  Tumbuhan  Mangrove Avicennia marina Yang  Beraktivitas  Antibakteri.  In Seminar  Nasional  Sains  dan  Teknologi Nuklir (pp. 226 –230).
Imra, Tarman,  K.,  &  Desniar.  (2016).  Aktivitas Antioksidan  dan  Antibakteri  Ekstrak Nipah  ( Nypa  fruticans )  Terhadap Vibrio sp  .  Isolat  Kepiting  Bakau  ( Scylla sp.). Jurnal Pengolahan  Hasil Perikanan
Indonesia , 19 (3), 241 –250.
Johannes,  E.,  Suhadiyah,  S.,  &  Latunra,  A.  I.
(2017). Bioaktivitas Ekstrak Daun Avicenia  marina Terhadap  Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  aureus . Jurnal Ilmu  Alam  Dan  Lingkungan , 8 (15),  38 – 41.
Latief,  M.,  Nazarudin,  &  Nelson.  (2015).
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun  Dan Buah  Prepat  ( Sonneratia  alba )  Asal
Tanjung Jabung Timur Propinsi Jambi. In SEMIRATA 2015 bidang MIPA BKS-PTN
Barat Universitas Tanjungpura, Pontianak (pp. 171 –179).
Levy, S. B., & Marshall, B. (2004). Antibacterial resistance worldwide:
causes,  challenges and  responses. Nature Medicine , 10 (12), S122 –S129. Machado, K. N., Kaneko, T. M.,  Young, M. C. M., Murakami, C., Cordeiro, I., & Moreno, P.  R.  H.  (2017).  Chemical  Composition, Antimicrobial and Antioxidant Activities of Essential  Oils  from  Two Avicennia schaueriana Stapf  &amp;  Leechm.  Ex Moldenke  (Acanthaceae)  Populations.
Medicines , 4 (26), 1 –9.
Madigan,  M.  .,  Martinko,  J.  .,  &  Parker,  J.
(2000). Brock  Biology  of Microorganisms (9th ed.). New Jersey: Prentice-Hall Inc. Mahera, S. A., Ahmad, V. U., Saifullah, S. M., Mohammad, F. V, & Ambreen, K. (2011). Steroids  and  Triperpenoids  from  Grey Mangrove Avicennia  Marina . Pakistan Journal of Botany , 43 (2), 1417 –1422. Mangrio, A. ., Rafiq, M., Naqvi, S. H. ., Junejo, S.  .,  Mangrio,  S.  .,  &  Rind,  N.  .  (2016).
Evaluation of Phytochemical
Constituents  and  Antibacterial  Potential of Avicennia  marina and Rhizopora mucronata from  Indus  Delta  of  Pakistan. Pakistan  Journal  of  Biotecnology , 13 (4), 259 –265.
Manilal,  A.,  Tsalla,  T.,  Zerdo,  Z.,  Ameya,  G., Merdekios,  B.,  &  John,  S.  E.  (2016). Evaluating the antibacterial and anticandidal potency of mangrove, Avicennia  marina . Asian  Pacific  Journal of Tropical Disease , 6 (2), 136 –140.
Mohammed,  N.,  Srinivasulu,  A.,  Satya  Veni,
P., & Rao, V. U. (2014). Quntifications Of Phytochemicals and Antibacterial Activity Of  Fruit  Extracts  Of Avicennia  officinalis . Asian  Journal  of  Pharmacuetical  And Clinical Research , 7 (2), 10 –13.
Nayak,  B.  K.,  Janaki,  T.,  &  Ganesan,  T.
(2014). Antimicrobial activity of Avicennia marina (Forsk)  Vierh  from  Back  water area  of  Puducherry,  India. International Journal  of  ChemTech  Research , 6 (11),
4667 –4670.
Noor, Y. R., Khazali, M., & Suryadiputra, I. N. . (2006). Panduan  Pengenalam  Mangrove di  Indonesia (Kedua).  Bogor:  Wetlands International Indonesia Programme.
Nopiyanti,  H.  T.,  &  Agustriani,  F.  (2016). Skrining
Nypa
fruticans sebagai
Antibakteri Bacillus subtilis , Escherichia coli dan Staphylococcus aureu s. Maspari Journal , 8 (June 2014), 83 –90.
Nurjanah,  N.,  Jacoeb,  A.  M.,  Hidayat,  T.,  & Shylina, A. (2015). Bioactive Compounds and  Antioxidant  Activity  of  Lindur  Stem Bark ( Bruguiera gymnorrhiza ). International  Journal  of  Plant  Research ,
1 (5), 182 –189.
Oktavianus,  S.  (2013). Uji  Daya  Hambat
Ekstrak  Daun  Mangrove  Jenis  Avicennia marina
Terhadap Bakteri Vibrio parahaemolyticus . Universitas Hasanuddin, Makassar.
Parekh, J.,  &  Chanda,  S. (2007). Antibacterial and  phytochemical  studies  on  twelve species  of  Indian  medicinal  plants. African  Journal  of  Biomedical  Research ,
10 (May), 175 –181.
Paudel, B., Bhattarai, H. D., Kim, I. C., Lee, H., Sofronov,  R .,  Ivanova,  L.,  …  Yim,  J.  H.
(2014). Estimation of antioxidant, antimicrobial  activity  and  brine  shrimp toxicity of plants collected from Oymyakon  region  of  the  republic  of Sakha (Yakutia), Russia. Biological
Research , 47 (1), 1 –6.
Podungge,  F.,  Purwaningsih,  S.,  &  Nurhayati, T.  (2015).  The  Characteristic  of  Black
Bakau  Fruit  as  Extract  of  Antioxidant Source. Jurnal
Pengolahan Hasil
Perikanan Indonesia , 18 (2), 140 –149. Prabhu, V. V., & Guruvayoorappan, C. (2012). Phytochemical  screening  of  methanolic extract  of  mangrove Avicennia  marina (Forssk.) Vierh. Pelagia Research Library Des Phamacia Sinica , 3 (1), 64 –70. Prihanto,  A.  A.,  Muhamad,  F.,  &  Nurdiani,  R. (2011). Penapisan Antibakteri Dan Fitokimia  Ekstrak  Metanol  Tanaman Mangrove  ( Avicennia  mucronata )  Dari Muara  Sungai  Porong.  Retrieved  from https://permimalang.wordpress.com/2011 /12/21/penapisan-antibakteri-dan- fitokimia-ekstrak-metanol-tanaman- mangrove-avicennia-mucronata-dari- muara-sungai-porong/.  Diakses  tanggal 27 Agustus 2018
Putri, R. R., Hasanah, R., & Kusimaningrum, I. (2016).  Uji  Aktivitas  Antibakteri  dan  Uji
Fitokimia Ekstrak Daun Mangrove Sonneratia  alba . Aquawarman  Jurnal Sains  Dan  Teknologi  Akuakultur , 2 (1), 43 –50.
Rahal,  J.  J.,  &  Simberkoff,  M.  S.  (1979). Bactericidal  and  bacteriostatic  action  of chloramphenicol against meningeal pathogens. Antimicrobial  Agents  and Chemotherapy , 16 (1), 13 –18.
Ravikumar,  S.,  Gnanadesigan,  M.,  Suganthi,
P., & Ramalakshmi, A. (2010).
Antibacterial potential of chosen mangrove  plants  against  isolated  urinary tract  infectious  bacterial  pathogens. International  Journal  of  Medicine  and
Medical Sciences , 2 (3), 94 –99. Riyanto,  E.  I.,  Widowati,  I.,  &  Sabdono,  A. (2013). Skrining Aktifitas Antibakteri pada Ekstrak Sargassum polysistum Terhadap
Bakteri Vibrio  harveyi dan Micrococcus luteus di  Pulau  Panjang  Jepara. Jounal of Marine Research , (August), 115 –121. Sabiladiyni,  H.  A.,  Bahry,  M.  S.,  Feska, S.,  P, R. D., & Trianto, A. (2016). EKstrak Daun Mengrove  ( Avicennia  marina )  Sebagai Bahan Antibakteri Untuk Penanggulangan  Bakteri Pathogen  Pada
Budidaya Udang Windu ( Penaeus monodon ). In Seminal Nasional Tahunan ke-V  Hasil-Hasil  Penelitian  Perikanan dan Kelautan (pp. 245 –249). Sari,  D.  K.  (2008). Penapisan  Antibakteri  Dan Inhibitor Topoisomerase I Dari
Xylocarpus  granatum .  Institut  Pertanian
Bogor.
Sari,  R.  P.,  Muhaemin,  M.,  &  Wardiyanto.
(2008). Efektivitas Ekstrak Daun
Mangrove  Api  Api  (Avicennia  alba)
Sebagai  Senyawa  Antibakteri  Vibrio  sp. dan Aeromonas sp. Pada Media Berbeda Secara in vitro . Laporan Hasil Penelitian.Program Studi Budidaya Perairan Universitas Lampung.
Sharief  Md,  N.,  &  V,  U.  M.  R.  (2014). Antibacterial  and  Antioxidant  Activity  of Avicennia  marina Leaf. Journal  of Chemical  and  Pharmaceutical Research , 6 (10), 252 –256. Sheela,  D.  A.,  Joseph,  J.,  &  Rajkumarb,  J. (2015). In silico approach of antibacterial compounds  from  mangrove  - Avicennia marina
through docking analysis. Retrieved from
http://www.alliedacademies.org/articles/in -silico-approach-of-antibacterial- compounds-from-mangrove--avicennia- marina-through-docking-analysis.html.
Biomedical  Research. Diakses  Tanggal 27 Agustus 2018.
Srikanth,  M.,  Rao,  B.  G.,  Talluri,  M.  R.,  & Swamy,  T.  R.  (2015).  Abortifacient  and Antioxidant Activities of Avicennia marina . International  Letters  of  Natural Sciences , 33 , 12 –26. Sugga,  A.,  Elageed,  S.,  Rajakhan,  O.,  & Bashair, A. (2015). Phytochemial screening  and  anti-microbial  activity  of Mangrove Gum against some Pathogens. Retrieved from http://www.oceandocs.org/bitstream/han dle/1834/6800/Phytochemial screening and anti-microbial.pdf?sequence=1. OceanDocs . Diakses Tanggal 27 Agustus 2018.
Tanod, W. A., Aristawati, A. T., Putra, M. Y., & Muliadin.  (2018).  Soft  Coral  ( Sinularia sp.)  Extracts  with  Antibacterial  Activity.
Omni-Akuatika , 14 (1), 108 –117.
Tariq, M., Lopez, M., Gore, M., & K, A. (2015).
Antibacterial  and  Synergistic  Activity  of Mangrove ( Avicennia marina ) Extracts on ESBL and
MBL
Producing
Uropathogens. Journal of Global
Biosciences , 4 (7), 2730 –2737.
Ulmursida,  A.,  Ambariyanto,  A.,  &  Trianto,  A.
(2017). Antibacterial Activity of Mangrove
Avicennia marina Leaves Extract Against Virgibacillus marismortui and Micrococcus luteus Bacteria. Aquaculture,  Aquarium,  Conservation  &
Legislation  (AACL)  Bioflux , 10 (2),  372 – 380. WHO. (2014). Antimicrobial resistance. Bulletin of the World Health Organization (Vol. 61).