## p
ANTIMICROBIAL AND ANTIOXIDAN ACTIVITIES OF ETHANOL EXTRACT OF ROOTS AND AGARWOOD BRANCH ( Aquilaria Moluccensis Oken.)
Shendi Suryana, Riska Prasetiawati
Fakultas MIPA-Universitas Garut, Jl. Jati No.42B, Tarogong, Garut
Korespondensi: Shendi Suryana(shendi@uniga.ac.id)
ARTICLE HISTORY
Received: 14 November 2016            Revised: 5 Desember 2016         Accepted: 8 Januari 2017

## Abstract
Agarwood    is  a  plant  with  a variety  of  benefits.  Some  parts  of  the plant  like  the  roots and branch have activity as antimicrobial and antioxidants. The objectives of this study were  to  find  out  antimicrobial  and  antioxidant  aktivity  of  ethanol  extract  of  roots  and agarwood  branch  and  to  know  the  content  of  the  compounds.  Root  and  agarwood branch  were  extracted  by  maceration  method  using  96%  ethanol.  An  antibacterial activity  test  was  used  in  10  series  of  concentrations  for  the  extract  of  1000  mg  /  mL; 500 mg / mL; 250 mg / mL; 125 mg / mL; 62.5 mg / mL; 31.25 mg / mL; 15.62 mg / mL; 7.81 mg / mL; 3.90 mg / mL; 1.95 mg / mL. The results of antimicrobial activity of root ethanol  extract  and  agarwood  branches  showed  activity  as  antimicrobial  against Stapylococcus  aureus,  Escherichia  coli,  Klebsiella  pneumonia,  Pseudomonas aeruginosa and fungi  Aspergillus .  While  on  antioxidant  activity  test  of  root  ethanol extract  and  agarwood branch have  activity  as  antioxidant.  From  the  screening  results showed  samples  of  roots  and  branch  of  gaharu  containing  flavonoids,  saponins  and tannins.
Key words: Agarwood, Antimicrobial, Antioxidant, DPPH Methode, Agar Diffusion Methode
AKTIVITAS ANTIMIKROBA DAN ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL AKAR DAN RANTING GAHARU (Aquilaria moluccensis Oken. )

## Abstrak
Tanaman  gaharu  merupakan  salah  satu  tanaman  yang  memiliki  berbagai  manfaat. Beberapa  bagian  tanaman  yaitu  akar  dan  rantingnya  memiliki  aktivitas  sebagai antimikroba  dan  antioksidan.  Tujuan  dalam  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui aktivitas  antimikroba  dan  antioksidan  ekstrak  etanol  akar  dan  ranting  gaharu  serta mengetahui  kandungan  senyawa  yang  ada  didalamnya.  Akar  dan  ranting  gaharu diekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan  etanol  96%.  Uji  aktivitas antibakteri digunakan 10 seri konsentrasi untuk ekstrak yaitu 1000 mg/mL; 500 mg/mL; 250 mg/mL;  125 mg/mL; 62,5 mg/mL;  31,25 mg/mL; 15,62 mg/mL;  7,81 mg/mL;  3,90 mg/mL;  1,95  mg/mL.  Hasil  uji  aktivitas  antimikroba  ekstrak  etanol  akar  dan  ranting gaharu  menunjukkan  aktivitas  sebagai  antimikroba  terhadap  bakteri Stapylococcus aureus,  Escherichia  coli,  Klebsiella  pneumonia,  Pseudomonas  aeruginosa, dan  fungi
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Aspergillus  niger. Sedangkan  pada  uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol  akar  dan ranting  gaharu  memiliki  aktivitas  sebagai  antioksidan.  Dari  hasil  penapisan menunjukkan  sampel  akar  dan  ranting  gaharu  mengandung  flavonoid,  saponin  dan tanin.
Kata kunci: Akar Gaharu, Antimikroba, Antioksidan, Metode Difusi Agar, Metode DPPH

## Pendahuluan
Penyakit  infeksi  merupakan  salah  satu  masalah  kesehatan  yang  paling  utama  di Indonesia  maupun  di  negara-negara  berkembang  lainnya.  Menurut  laporan  WHO (World  Health  Organisation)  (2015),  Asia  Tenggara  memiliki  angka  tertinggi  dalam kasus  resistensi  antibiotik (1) .  Salah  satu  upaya  untuk  mengatasi  masalah  resistensi, perlu  dilakukan  pengawasan  dan  pembelajaran  tentang  penggunaan  antibiotik,  agar masyarakat mengerti  tentang penggunaan obat antibiotik yang tepat. Salah satu jenis tanaman yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai obat adalah gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) (2) .
Gaharu  merupakan  tanaman  hasil  hutan  Indonesia  yang  memiliki  potensi  besar sebagai  bahan  obat.  Secara  tradisional,  tanaman  gaharu  digunakan  sebagai antioksidan  dan  untuk  mempercepat  penyembuhan  luka  bakar  oleh  masyarakat Kalimantan  Timur (2) .  Daun  gaharu  diduga  memiliki  senyawa  kimia  dari  golongan flavonoid  yaitu  flavon,  sehingga  dimanfaatkan  sebagai  minuman  yang  berperan sebagai  antioksidan (2) .  Hasil  penelitian  Hadi,  dkk  (2016)  menyatakan  bahwa  ekstrak metanol daun tua gaharu ( Aquilaria malaccensis Lamk . ) memiliki aktivitas antioksidan tertinggi,  sedangkan  ekstrak  kloroform  daun  tua  gaharu  menunjukkan  aktivitas antibakteri  pada  bakteri Escerichia  coli dan Staphylococcus  aureus. Berdasarkan penelitian  Putri,  dkk  (2015)  melaporkan  bahwa  daun  gaharu  mengandung  metabolit sekunder alkaloid, flavonoid, glikosida, tanin, dan terpenoid yang merupakan senyawa aktif antioksidan.
Pada  penelitian  ini,  dilakukan  pengujian  aktivitas  antimikroba  dari  ekstrak  etanol akar  dan  ranting  gaharu  secara  in  vitro  terhadap Escerichia  coli,  Staphylococcus aureus,  Candida  albican,  Aspergillus  niger,  Pseudomonas  aeruginosa, dan Klebsiella pneumonia serta pengujian aktivitas akar dan ranting gaharu sebagai antioksidan.Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  apakah  ekstrak  etanol  akar  dan ranting  gaharu  memiliki  aktivitas  sebagai  antimikroba  dan  antioksidan.  Diharapkan penelitian  ini  dapat  memberikan  informasi  penggunaan  tanaman  gaharu  sebagai antioksidan  dan  antimikroba,  serta  dapat  dijadikan  dasar  ilmu  dalam  pengembangan menjadi sediaan obat alternatif antibiotik dan antioksidan.

## Metode

## Alat
Tabung reaksi, rak tabung reaksi, beaker glass , labu erlenmeyer, mikropipet, paper disk , pembakar bunsen, corong, autoklaf, batang pengaduk, labu ukur, jangka sorong, alumunium foil, evaporator, vial, kapas, kassa steril, spektrofotometri Uv-visibel, kuvet, timbangan  digital,  gelas  kimia,  gelas  ukur,  cawan  petri,  inkubator,  spatel,    kertas saring,  pipet  tetes,  vial  dengan  warna  gelap,  pisau stainless  steel ,  bejana  maserasi dengan warna gelap, dan botol dengan warna gelap .
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20

## Bahan
Bagian  tumbuhan  akar  dan  ranting  gaharu,  etanol  96%,  aquades  steril,  NaCl, Nutrien  Agar (NA), Nutrien  Broth (NB), Laktosa  Broth (LB) Soboroud  Dextrose  Agar (SDA) Mueller  Hinton  Agar (MHA),  amoniak  25%,  magnesium,  dragendroff,  pereaksi mayer, FeCl 3 1%, asam asetat anhidrat, eter, kloroform, N-heksan, asam klorida pekat, serbuk magnesium, H 2 SO 4 , asam askorbat (vitamin C), etanol pro analysis, DPPH .

## Prosedur Rinci
4. 1  Penyiapan Bahan
Penyiapan bahan dimulai dari pengumpulan bahan, determinasi tanaman gaharu, dan pengolahan bahan menjadi simplisia.
4.1.1   Pengumpulan Bahan
Pengumpulan  bahan  penelitian  yaitu  berupa  akar  dan  ranting  gaharu. Lokasi pengumpulan tumbuhan ini di daerah Kebun Raya Samarinda, Kalimantan Timur. 4.1.2   Determinasi Bahan
Determinasi  dilakukan  dengan  maksud  memastikan  identitas  tumbuhan yang  diuji.  Determinasi  dilakukan  di  Laboratorium  Anatomi  Tumbuhan,  Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Mulawarman Samarinda.
4.1.3   Pembuatan Simplisia
Pembuatan  simplisia  meliputi  sortasi  basah,  pencucian,  penirisan, perajangan,  proses  pengeringan,  sortasi  kering,  penyimpanan,  dan  pembuatan serbuk simplisia.
4.2  Karakteristik Simplisia
Standarisasi  ekstrak  yang  dilakukan  melalui  parameter  spesifik  dan  non-spesifik. Parameter  spesifik  meliputi  uji  organoleptis  berupa  identifikasi  ekstrak  secara  fisik menggunakan  panca  indera  dan  uji  senyawa  terlarut  dalam  pelarut  air  dan  etanol. Sedangkan  parameter  non-spesifik  meliputi  uji  kadar  air,  kadar  abu  total,  kadar  abu larut  air,  kadar  abu  tidak  larut  asam,  susut  pengeringan,  kadar  sari  larut  etanol,  dan kadar sari larut air.
4.3  Penapisan Fitokimia
Penapisan fitokimia bertujuan untuk mendeteksi keberadaan senyawa kimia yang terdapat pada suatu bahan alam. Uji fitokimia yang dilakukan terdiri dari   uji senyawa alkaloid, flavonoid, kuinon, saponin, tannin, dan steroid.
4.4  Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Akar  dan  Ranting  Gaharu  ( Aquilaria  Moluccensis
Oken.)
Pembuatan  ekstrak  etanol  akar  dan  ranting  gaharu  dilakukan  dengan  metode maserasi. Sebanyak 100 gram simplisia daun gaharu dimaserasi  dengan etanol 96% sebanyak  1  L  selama  72  jam.  Pada  proses  maserasi  sesekali  simplisia  diaduk  untuk memaksimalkan  penyarian.  Untuk  memperoleh  ekstrak  dilakukan  penyarian  dengan menggunakan  kertas  saring,  sehingga  diperoleh  ekstrak  yang  bebas  partikel  besar. Setelah disaring, ekstrak dipekatkan dengan menggunakan rotary evaporator sehingga didapat ekstrak etanol daun gaharu yang kental.
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20

## 4.5  Tahap Persiapan dan Uji Aktivitas Antimikroba
Persiapan  uji  aktivitas  antimikroba  dengan  pembuatan  media Nutrien  Agar (NA), Nutrien  Broth (NB), Mueller  Hinton  Agar (MHA), Lactose  Broth (LB),  dan Sabauroud Dextrose Agar (SDA), peremajaan mikroba serta pembuatan suspensi mikroba meliputi suspensi  bakteri,  suspensi  ragi,  suspensi  lapuk.  Pada  suspensi  bakteri  diambil  1  lop ose sel bakteri dari biakan agar miring, disuspensikan ke dalam medium NB, suspensi ragi  dan  suspensi  lapuk  dalam  medium  LB,  diinkubasi  selama  18-24  jam  pada  suhu 37°C. Diukur dengan mengunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 625  nm  untuk  suspensi  bakteri  dan  panjang  gelombang  530  nm  untuk  suspensi  ragi dan  lapuk.  Suspensi  bakteri  dan  suspensi  ragi  diperoleh  hasil  absorbans  dengan rentang  diantara  0,08-0,10  setara  dengan  standar  kekeruhan  0,5 McFarland yang mengandung  bakteri    sebanyak  10 8 CFU  ( Colony  Forming  Unit )/mL.  suspensi  lapuk diperoleh  hasil  transmitan  (%T)  yang  sesuai  yaitu  80-82%T  untuk  fungi Aspergillus niger (27) .  Penentuan  KHM  dilakukan  dengan metode  cakram  kertas.  Ekstrak akar  dan ranting  gaharu  dilarutkan  dalam  DMSO  ( Dimetil  Sulfoksida )  sehingga  diperoleh konsentrasi  1000  mg/mL;  500  mg/mL;  250  mg/mL;  125  mg/mL;  62,5  mg/mL;  31,25 mg/mL; 15,62 mg/mL; 7,81 mg/mL; 3,90 mg/mL; 1,95 mg/mL. Diamati adanya diameter hambatan.
4.6  Pengujian Aktivitas Antioksidan
Uji  dilakukan  dengan  pembuatan  Larutan  DPPH  100  ppm,  penentuan  panjang gelombang  maksimum  DPPH,  pembuatan  larutan  stok  vitamin  C  1000  ppm, pembuatan larutan uji ekstrak etanol akar dan ranting gaharu.

## 4.7  Penentuan Nilai IC 50
Penentuan  Nilai  IC 50 Ekstrak  Etanol  Akar  dan  Ranting  Gaharu.  Sebanyak  1  mL ekstrak etanol daun gaharu dari berbagai seri konsentrasi ditambahkan ke dalam 1 mL larutan  DPPH,  kemudian  dihomogenkan  menggunakan vortex dan  diinkubasi  pada suhu  kamar  selama  30  menit  ditempat  gelap.  Kemudian  diukur  absorbansinya  pada panjang gelombang 517 nm. Dilakukan pengerjaan yang sama terhadap konsentrasi 5 µg/mL, 10 µg/mL, 15 µg/mL, 20 µg/mL, dan 25 µg/mL. dilakukan hal yang sama dalam penentuan nilai IC 50 vitamin C. DPPH sebagai blanko diukur serapannya pada panjang gelombang  maksimum  larutan  DPPH.  Setelah  diperoleh  nilai  absorban  blanko kemudian dihitung % inhibisi menggunakan rumus sebagai berikut (26) :
% Inhibisi = Absorbansi blanko-Absorbansi sampel Absorbansi blanko × 100%
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20

## Hasil
Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Karakteristik Simplisia Akar dan Ranting Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Jenis pemeriksaan Sampel Berat simplisia (gram) Hasil (%) Penetapan kadar air Akar 5,0 8,02 Ranting 5,0 6,52 Penetapan kadar abu total Akar 2,0 2,4 Ranting 2,0 1,46 Penetapan kadar abu larut air Akar 2,0 0,08 Ranting 2,0 0,25 Penetapan kadar abu tidak larut asam Akar 2,0 5,36 Ranting 2,0 5,08 Penetapan kadar sari larut air Akar 2,0 3,40 Ranting 5,0 3,00 Penetapan kadar sari larut etanol Akar 5,0 8 Ranting 5,0 6 Susut pengeringan Akar 2,0 12,5 Ranting 2,0 7,4
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Akar dan Ranting Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.)
Keterangan: (+) Berarti terdapat senyawa tersebut

## (−) Berarti tidak terdapat senyawa tersebut
Tabel 3. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Akar Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Stapylococcus aureus No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Stapylococcus aureus Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata R10 100% 1,93 1,91 1,92 R9 50% 1,52 1,55 1,53 R8 25% 0,94 0,95 0,94 R7 12,5% 0,75 0,73 0,74 R6 6,25% - - - Golongan Senyawa Akar Ranting Alkaloid − − Flavonoid + + Saponin - + Tannin + + Steroid/terpenoid - -
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
R5 3,1% - - - R4 1,5% - - - R3 0,78% - - - R2 0,39% - - - R1 0,19% - - -
Replikasi 1                                                 Replikasi 2
Gambar 1. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar gaharu terhadap bakteri Stapylococcus aureus

## Replikasi 1                                                 Replikasi 2
Gambar 2. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol ranting gaharu terhadap bakteri Stapylococcus aureus No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Stapylococcus aureus Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata A10 100% 1,98 1,97 1,97 A9 50% 1,59 1,60 1,59 A8 25% 1,28 1,11 1,19 A7 12,5% 0,89 0,78 0,83 A6 6,25% 0,63 0,62 0,62 A5 3,1% - - -
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
A4 1,5% - - - A3 0,78% - - - A2 0,39% - - - A1 0,19% - - -
Tabel 5. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Akar Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Escherichia coli No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Escherichia coli Replikasi 1 Replikasi 2 Rata- rata R10 100% 1,75 1,73 1,74 R9 50% 1,23 1,26 1,24 R8 25% 0,89 0,87 0,88 R7 12,5% - - - R6 6,25% - - - R5 3,1% - - - R4 1,5% - - - R3 0,78% - - - R2 0,39% - - - R1 0,19% - - -
Replikasi 1                                                Replikasi 2
Gambar 3. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar gaharu terhadap bakteri Escherichia coli
Tabel 6. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Ranting Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Escherichia coli No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Escherichia coli Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata A10 100% 2,11 2,10 2,10 A9 50% 1,65 1,63 1,64 A8 25% 1,23 1,22 1,22
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
A7 12,5% 0,77 0,75 0,76 A6 6,25% - - - A5 3,1% - - - A4 1,5% - - - A3 0,78% - - - A2 0,39% - - - A1 0,19% - - -
Replikasi 1                                                Replikasi 2 Gambar 4. hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol ranting gaharu terhadap bakteri Escherichia coli
Tabel 7. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Akar Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Klebsiella pneumonia No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Klebsiella pneumonia Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata R10 100% 1,68 1,66 1,67 R9 50% 1,34 1,35 1,34 R8 25% 0,76 0,77 0,76 R7 12,5% - - - R6 6,25% - - - R5 3,1% - - - R4 1,5% - - - R3 0,78% - - - R2 0,39% - - - R1 0,19% - - -
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Replikasi 1                                                Replikasi 2 Gambar 5. hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar gaharu terhadap bakteri Klebsiella pneumonia
Tabel 8. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Ranting Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Klebsiella pneumonia No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Klebsiella pneumonia Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata A10 100% 1,72 1,69 1,70 A9 50% 1,41 1,43 1,42 A8 25% 0,83 0,81 0,82 A7 12,5% - - - A6 6,25% - - - A5 3,1% - - - A4 1,5% - - - A3 0,78% - - - A2 0,39% - - - A1 0,19% - - -
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Replikasi 1                                                Replikasi 2 Gambar 6. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol ranting gaharu terhadap bakteri Klebsiella pneumonia
Tabel 9. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Akar Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Pseudomonas aeruginosa No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Pseudomonas aeruginosa Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata A10 100% 1,11 1,12 1,11 A9 50% - - - A8 25% - - - A7 12,5% - - - A6 6,25% - - - A5 3,1% - - - A4 1,5% - - - A3 0,78% - - - A2 0,39% - - - A1 0,19% - - -
Replikasi 1                                                Replikasi 2
Gambar 7. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar gaharu terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Tabel 10. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Ranting Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Pseudomonas aeruginosa No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Pseudomonas aeruginosa Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata R10 100% 1,96 1,97 1,96 R9 50% 1,54 1,53 1,53 R8 25% 1,12 1,11 1,11 R7 12,5% 0,77 0,76 0,76 R6 6,25% - - - R5 3,1% - - - R4 1,5% - - - R3 0,78% - - - R2 0,39% - - - R1 0,19% - - -
Replikasi 1                                                Replikasi 2
Gambar 8. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol ranting gaharu terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
Tabel 11. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Akar Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Aspergillus niger No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Aspergillus niger Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata A10 100% - - - A9 50% - - - A8 25% - - - A7 12,5% - - - A6 6,25% - - - A5 3,1% - - - A4 1,5% - - - A3 0,78% - - - A2 0,39% - - - A1 0,19% - - -
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Replikasi 1                                                Replikasi 2 Gambar 9. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar gaharu terhadap bakteri Aspergillus niger
Tabel 12. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Ranting Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Aspergillus niger No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Aspergillus niger Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata R10 100% - - - R9 50% - - - R8 25% - - - R7 12,5% - - - R6 6,25% - - - R5 3,1% - - - R4 1,5% - - - R3 0,78% - - - R2 0,39% - - - R1 0,19% - - -
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Replikasi 1                                                Replikasi 2
Gambar 10. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol ranting gaharu terhadap bakteri A. niger
Tabel 13. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Akar Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Candida albicans No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Candida albicans Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata R10 100% - - - R9 50% - - - R8 25% - - - R7 12,5% - - - R6 6,25% - - - R5 3,1% - - - R4 1,5% - - - R3 0,78% - - - R2 0,39% - - - R1 0,19% - - -
Replikasi 1                                                Replikasi 2
Gambar 11. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol akar gaharu terhadap bakteri Candida albicans
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Tabel 14. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Etanol Ranting Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Terhadap Bakteri Candida albicans No. Konsentrasi (%) Diameter Hambat (cm) Candida albicans Replikasi 1 Replikasi 2 Rata-rata R10 100% 1,32 1,31 1,31 R9 50% 0,95 0,93 0,94 R8 25% - - - R7 12,5% - - - R6 6,25% - - - R5 3,1% - - - R4 1,5% - - - R3 0,78% - - - R2 0,39% - - - R1 0,19% - - -
Replikasi 1                                                Replikasi 2
Gambar 12 Hasil pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol ranting gaharu terhadap bakteri Candida albicans
Table 15. Hasil Pengujian Antioksidan Ekstrak Etanol Akar Gaharu ( Aquilaria moluccensis Oken.) Absorban Kontrrol Konsentrasi (ppm) Abs %inhibisi IC50 0,547
90 0,420
23,217
160,82 ppm 110 0,378 30,895 130 0,329 39,853 150 0,297 45,703 170 0,257 53,016
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Gambar 13. Grafik persamaan regresi linier hubungan konsentrasi (ppm) terhadap % inhibisi ekstak akar gaharu
Tabel 15. Hasil Pengujian Antioksidan Ekstrak Etanol Ranting Gaharu
Absorban Kontrrol Konsentrasi (ppm) Abs %inhibisi IC50 0,547 10 0,457
16,453 80,544 ppm
30 0,415 24,131 50 0,366 33,089 70 0,301 44,975 90 0,259
55,650
y = 0.372x - 9.8271 R² = 0.996 0 10 20 30 40 50 60 0 20 40 60
80 100 120 140 160 180 % In h ib is i
Konsentrasi (ppm)
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
Gambar 14. Grafik persamaan regresi linier hubungan konsentrasi (ppm) terhadap % inhibisi ekstak ranting gaharu
Tabel 17. Hasil Pengujian Antioksidan Vitamin C
Absorban Kontrol Konsentrasi (ppm) abs %inhibisi IC50 0,635 1 0,517
18,711 5,3780 ppm
2 0,463 27,201 3 0,431 32,233 4 0,378 40,566 5 0,335 47,327 6 0,290 54,403
Gambar 15. Grafik persamaan regresi linier hubungan konsentrasi (ppm) terhadap % inhibisi vitamin c
y = 0.4962x + 10.05 R² = 0.9932 0 10 20 30 40 50 60 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 % In h ib is i Konsentrasi (ppm) y = 7.062x + 12.023 R² = 0.9974 0 10 20 30 40 50 60 0 1 2 3
4 5 6 7 % I n h ib is i Konsentrasi
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20

## Pembahasan
Pengujian ini dilakukan dengan penetapan kadar air yang diperoleh adalah 8% untuk sampel akar dan 6% untuk sampel ranting. Hasil  ini menunjukkan bahwa kadar air dalam sampel masih memenuhi persyaratan yaitu  < 10%. Hasil kadar air di bawah 10%  dapat  mencegah  terjadinya  reaksi  hidrolisis  dan  pertumbuhan  mikroba  pada serbuk simplisia.  Penetapan kadar  abu meliputi  kadar abu  total,  kadar abu  tidak  larut asam  dan  kadar  abu  yang  larut  dalam  air.  Kadar  abu  yang  diperoleh  adalah  2,4% untuk sampel akar  dan 1,46% untuk sampel ranting. Hasil penetapan kadar abu larut air menunjukkan adanya garam alkali dan alkali tanah, pada pemeriksaan ini diperoleh hasil  0,08%  untuk  sampel  akar  dan  0,25%  untuk  sampel  ranting.  Hasil  penetapan kadar  abu  tidak  larut  asam  menunjukkan  adanya  senyawa  silika  yang  berasal  dari pasir.  Senyawa  silika  ini  tidak  larut  asam  sehingga  merupakan  komponen  penyusun abu  tidak  larut  asam,  pada  pemeriksaan  ini  diperoleh  hasil  5,36%  untuk  sampel  akar dan 5,08% untuk sampel ranting (29,30) . Penetapan kadar sari larut etanol dan kadar sari larut  air  yang  diperoleh  adalah  8%  untuk  sampel  akar  dan  6%  untuk  sampel  ranting. Sedangkan untuk pemeriksaan kadar sari larut air diperoleh hasil 3,40% untuk sampel akar dan 3% untuk sampel ranting (31) .
Menurut  pustaka  daun  gaharu  diduga  memiliki  senyawa  kimia  dari  golongan flavonoid yaitu flavon, flavonol dan isoflavon sehingga dimanfaatkan daunnya sebagai minuman  seduh  yang  berperan  sebagai  antioksidan.  Penelitian  Mega  dan  Swastini (2010)  menjelaskan  bahwa  senyawa  metabolit  sekunder  flavonoid,  terpenoid  dan senyawa  fenol  mempunyai  aktivitas  antiradikal  bebas (4) .  Antioksidan alami  tersebar  di beberapa  bagian  tanaman  seperti  pada  kayu,  kulit  kayu,  akar,  buah,  bunga,  biji,  dan daun (3) .  Senyawa  flavonoid  merupakan  senyawa  yang  memiliki  efek  farmakologi sebagai  antibakteri.  Flavonoid  dengan  kemampuannya membentuk  kompleks  dengan protein  dan  merusak  membran  sel  dengan  cara  mendenaturasi  ikatan  protein  pada membran  sel,  sehingga  membran  sel  menjadi  lisis  dan  senyawa  tersebut  menembus kedalam inti sel yang menyebabkan bakteri tidak berkembang (32) .
Pengujian  konsentrasi  hambat  minimum  ekstrak  akar  dan  ranting  gaharu memiliki  konsentrasi  hambat  minimum  yang  lebih  kuat  dibandingkan  dengan  sampel ekstrak  etanol  akar  gaharu.  Hal  ini  dapat  dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor  seperti kandungan  zat  aktif  dari  sampel  dan  kemampuan  zat  aktif  yang  terkandung  pada masing-masing  sampel  dalam  menghambat  mikroba.  Penghambatan  pertumbuhan bakteri disebabkan oleh senyawa kimia yang terkandung pada ekstrak etanol akar dan ranting gaharu. Akar dan ranting gaharu mengandung zat aktif berupa flavonoid, tanin dan saponin. Hasil pengujian aktivitas antibakteri ditandai dengan adanya zona bening disekitar kertas cakram ekstrak uji (3) .
DPPH  (2,2  diphenyl-1-pikrilhidrazin)  merupakan  senyawa  radikal  bebas  yang relatif  stabil.  Dengan  berat  molekul  394.33,  rumus  molekul  C 18 H 12 N 5 O 6 .    Besarnya aktivitas  antioksidan  dihitung  dengan  menggunakan  persamaan  regresi  linier  antara konsentrasi  terhadap  persen  peredaman  sehingga  diperoleh  nilai  IC 50 .  IC 50 ini menunjukkan besarnya konsentrasi senyawa uji yang dapat menangkap radikal bebas sebesar  50%.  Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  menunjukkan  bahwa  semakin  tinggi konsentrasi  sampel  uji  maka  semakin  besar  pula  kemampuan  sampel  dalam menangkap  radikal  bebas  dan  dapat  ditandai  dengan  nilai  absorban  yang  semakin kecil. Hasil aktivitas antioksidan pada masing-masing sampel akar dan ranting gaharu dengan perhitungan persentase peredaman DPPH. Pada sampel akar gaharu didapat nila  IC 50 sebesar  160,82  mg/mL  dan  pada  sampel  ranting  diperoleh  hasil  nilai    IC 50 80,544  mg/mL.  Berdasarkan  hasil  pemeriksaan  tersebut  dapat  dilihat  bahwa  pada ranting gaharu memberikan aktivitas antioksidan yang lebih kuat dibandingkan dengan akar gaharu karena memiliki nilai IC 50 yang lebih kecil.
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20

## Kesimpulan
Dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan  bahwa  ekstrak  etanol  akar  dan  ranting gaharu memiliki aktivitas sebagai antimikroba terhadap bakteri Stapylococcus aureus, Escherichia  coli,  Klebsiella  pneumonia,  Pseudomonas  aeruginosa, dan  fungi Candida albicans. Daya  aktivitas  antimikroba  pada  ekstrak  etanol  ranting  gaharu  lebih  kuat dibandingkan dengan ekstrak etanol akar gaharu terhadap semua mikroba uji. Ekstrak etanol  akar  dan  ranting  gaharu  memiliki  aktivitas  sebagai  antioksidan.  Daya antioksidan  pada  sampel  ranting  menunjukkan  hasil  yang  lebih  kuat  dibandingkan dengan sampel akar gaharu.

## Daftar Pustaka
1.  Junairiah, Hanik Faizah, and salamun, 2013, Antibacterial and Antifungal Activities of  Dumortiera  hirsuta  Active  Fractions, Journal  of  Basic  and  Applied  Scientific Research ISSN, 3(1), 4-6.
2.  Agung,  E.N,  2012,  Obat-obat  Penting  Dalam  Pembelajaran  Ilmu  Farmasi  dan Dunia Kesehatan, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, 191.
3.  Mega, I M., dan D.A Swastini, 2010, Screening Fitokimia dan Aktivitas  Antiradikal Bebas  Ekstrak  Metanol  Daun  Gaharu  ( Gyrinop  sversteegii ),  Jurnal  Kimia,  4(2), 187-192.
4.  Khadijah,  H., Rizki,  Ridwanti,  B.,  dan  Surjanto,  2015, Uji  Antioksidan  Daun  Muda dan  Daun  Tua  Gaharu  ( Aquilaria  Malaccensis  Lamk )  Berdasarkan  Perbedaan Tempat Tumbuh Pohon, Peronema Forestry Science Journal , 4(4), 72-87.
5.  Hendra,  2015, Identifikasi  Golongan  Snyawa  Antioksidan  dan  Antibakteri  Ekstrak daun  Gaharu (Aquilaria  malaccensis Lamk) , Jurnal  Fakultas  Biologi  Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
6.  Gusmaliana,  Wiyono,  B.,  dan  Waluyo,  T.,  2010,  Fisibilitas  Penerapan  Metode Penetrasi  Untuk  Peningkatan  Kualitas  IGW (Inoculated  Gaharu  Wood), Laporan Hasil  Penelitian  Program  Insentif  Riset  Terapan  Badan  penelitian  dan Pengembangan Kehutanan Departemen Kehutanan Republik Indonesia.
7.  Chung,  R.C.K.  &  Purwaningsih,  1999, Aquilaria  malaccensis Lamk,  Plants Resources  of  South-East  Asia  no  19  Essential-oil  plants, Backhuys  Publishers , Leiden the Netherlands, 64-67.
8.  Chakrabarty,  K.,  Kumar,  A.  and  Menon, V.  (1994).  Trade  in  Agarwood. TRAFFIC India and WWF-India , New Delhi.
9.  Mega, I M., dan D.A Swastini. 2010. Screening Fitokimia dan Aktivitas Antiradikal Bebas Ekstrak Metanol Daun Gaharu ( Gyrinop sversteegii ). Jurnal Kimia . 4(2): hal. 187-192.
10.  Pelczar,  M.J.,  1986,  Dasar-Dasar  Mikrobiologi,  Edisi  I,  Terjemahan  Hadioetomo R.S., Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta, Hal. 34, 46-47.
11.  Fardiaz, S., 1992. Mikrobiologi Pangan I, Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
12.  Prescott, et al. (2008). Microbiology 7th edition, McGraw-Hill Book Company, USA.
13.  Todar, 2008. Todar`s online texbook of Bacteriology, Todar’s Online Text Book Of Bacteriology ( http://textbookofbacteriology.net/staph.html ,  Diakses  pada  19 Februari 2018.
14.  Jawetz,  Melnick  and  Adelberg,  s.,  2001,  Mikrobiologi  Kedokteran    Edisi  I, Salemba Medika, EGC, Jakarta.
15.  Jawetz, Melnick and Adelberg, s., 2005, Mikrobiologi Kedokteran, EGC, Jakarta.
16.  Majid, 2009, Senyawa Antibakteri dan Mekanisme Kerjanya,
http://majidundip.blogspot.com/2009/08/senyawa-antibakteri  danmekanisme.html. Diakses pada 13 October 2017.
17.  Mudihardi  E,  Kuntaman  Wasito  E.B.,  2005,  Mikrobiologi  Kedokteran  Salemba Medika, Jakarta, 317-27.
18.  Brunton, L.,  K.  Parker,  D.  Blumenthal,  L.  Buxton,  2008,  Manual  of  Pharmacology and Therapeutic, McGrawHill,  NewYork.
19.  Rohmatus  solihat,  2009,  Antioksidan  Penyelamat  Sel-sel  Tubuh  Manusia,  Jurnal BioTrends, 4(1).
20.  Padayatty, S. J, 2003, Vitamin C as an antioxidant: evaluation of its role in disease prevention, Journal of American College of Nutrition , Maryland.
21.  Prakash,  A.,  et  all,  2001),  Antioxidant  Activity, Medallion  Laboratories  Analitical Progress , 19(2).
22.  Winarsih,H,  2007,  Antioksidan  Alami  dan  Radikal  Bebas,  Penerbit  Kanisius, Yogyakarta.
23.  Kang  sing  dan  Pramita,  2017,  Uji  Aktivitas  Antioksidan  Vitamin  A,  C,  E  dengan metode  DPPH,  Departemen  Farmakologi  dan  Farmasi  Klinik,  Fakultas  Farmasi, Universitas Padjadjaran, Vol 15, no 1.
24.  Harbone,  JB.,  1987,  Metode  Fitokimia:  Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan  Edisi  II,  Penerjemah  Padmawinata  K  dan  Soediro  J,  Niksolihin editor,ITB, Bandung.
25.  Brooks, dkk., 2008, Mikrobiologi Kedokteran. Ed. 23, EGC, Jakarta.
26.  Gupte, Satish, 1990, Mikrobiologi Dasar, Bina Rupa Aksara, Jakarta.
27.  Molyneux,  P.,  2004,  The  Use  of  the  Stable  Free  Radical  Diphenylpicryl  Hydrazyl (DPPH)  for  Estimating  Antioxidant  Activity,  Journal  Science  and Technology , Songklanakarin.
28.  CLSI, 2008, Reference method for broth dilution antifungal  susceptibility testing of yeasts,  approved  standard-third  edition,  CLSI  document  M27-A3 ,  Clinical  and Laboratory Standards Institute , Wayne.
Vol. 8 ; No. 1 ; Januari  2017 Halaman 1-20
29.  Depkes  RI,  2000, “Parameter  Standar  Umum  Pembuatan  Ekstrak  Tumbuhan Obat”, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, Hlm. 14-17.
30. Dirjen POM Depkes RI, 1989, “Materia Medika Indonesia”, Jilid IV, Departemen Kesehatan RI, Jakarta, Hlm. 153.
31.  BPOM, 2009, “Farmakope Herbal Indonesia”, Jilid IV, BPOM, Jakarta.
32. Syarifah,  N.,  2011,  “Aktivitas  Antibakteri  Etanol  Dari  Lima  Tanaman  Terhadap Bakteri Staphylococcus  Aureus Dengan  Metode  Mikrodilusi  M7- A6  CLSI”,  Tugas Akhir  Sarjana  Farmasi,  Jurusan  Farmasi,  FMIPA,  Universitas  Garut,  Garut,  Hlm. 20, 31-34.
33. Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1995, “Farmakope Indonesia”, ed. IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, Hlm. 779, 95.