Journal of Parasite Science Vol.3 No.1 Maret 2019
eISSN : 2656 ‐ 5331 , pISSN : 2599 ‐ 0993 The Anthelmintic Activity of Ethanol Extract of Bitter Leaf...
The Anthelmintic Activity of Ethanol Extract of Bitter Leaf ( Vernonia amygdalina ) Against ascaridia galli Worm in vitro
Uji Efektivitas Daya Antihelmintik Ekstrak Etanol Daun Afrika ( Vernonia amygdalina ) Terhadap Cacing ascaridia galli Secara in vitro 1) Amelia Dwita Safitri, 2) Iwan Sahrial Hamid, 3) Poedji Hastutiek, 3) Setiawan Koesdarto,
2) Rahmi Sugihartuti, 3) Endang Suprihati
1) Student, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga
2) Department of Basic Veterinary Medicine, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga
3) Department of Veterinary Parasitology, Faculty of Veterinary Medicine, Universitas Airlangga Received: 25 ‐ 02 ‐ 2019 , Accepted: 10 ‐ 03 ‐ 2019 , Published Online: 19 ‐ 03 ‐ 2019 Abstract The aims of this study is to know the anthelmintic activity of ethanol extract of bitter leaf ( Vernonia amygdalina ) against Ascaridia galli worm in vitro , as well as knowing effective concentration 50 (EC 50 ) and lethal time 50 (LT 50 ). Method that used in the research was completely randomized design. There were five treatments of physiological NaCl solution (K ‐ ), piperazine sitrate (K+), etanol extract of bitter leaf 0,35% (P1), etanol extract of bitter leaf
1,4% (P2), etanol extract of bitter leaf 4,2% (P3), and each treatment was done in four replications. This research used ten Ascaridia galli in each treatment for all replications. The observation and recording of dead Ascaridia galli was done at 2, 4, 6, 8, 10 and 12 hours. Ascaridia galli were declared dead if there was no movement when disturbed by anatomy tweezer and when dipped in slightly warm water (50°C). The obtained data was analyzed using ANAVA and continued with Duncan Multiple Range Test. The result of this research show that etanol extract of bitter leaf ( Vernonia amygdalina ) has anthelmintic effects against Ascaridia galli worm in vitro . In the extract with 4,2% concentration, there is anthelmintic property that almost the same as Piperazine sitrate 10 mg/ml. the higher the concentration of extract, the higher the property of anthelmintic. In probit analysis show that EC 50 achieved by concentration 2.093% with the low concentration of .002% and the highest concentration
of 3.632%. LT 50 of ethanol extract of bitter leaf was 0.35% at 10.323 hours, 1.4% at 9.800 hours, 4.2% at 7.864 hours and Piperazine sitrate 10 mg/ml at 9.013 hours.
Keywords : Vernonia amygdalina , piperazine sitrate, Ascaridia galli, anthelmintic
Pendahuluan Selera konsumen di Indonesia terhadap ayam buras sangat tinggi. Terlihat dari pertum ‐ buhan populasi dan permintaan ayam buras yang semakin meningkat dari tahun ke tahun (Bakrie et al ., 2003). Berkembangnya cacing A. galli dalam saluran pencernaan ayam buras dapat menim ‐ bulkan berbagai macam kerugian yaitu menu ‐ runkan performa pada ternak, terhambatnya waktu bertelur, produksi telur berkurang, menurunnya kondisi ternak sehingga memper ‐ mudah terinfeksi oleh penyakit lainnya, dan konversi pakan menjadi lebih besar sehingga menurunkan efisiensi pakan (Tabbu, 2002). Penggunaan antelmintik komersial dapat menimbulkan masalah resistensi cacing ter ‐ hadap antelmintik, selain itu harganya relatif
lebih mahal dan susah untuk didapatkan untuk masyarakat yang berada di pedesaan. Sedang ‐ kan penggunaan antelmintik yang bersumber dari bahan alam berpotensi sebagai pembasmi cacingan yang lebih aman dari ancaman resistensi, mudah didapatkan dan harganya lebih murah. Vernonia amygdalina banyak digunakan dalam mengobati parasit gastro ‐ intestinal pada manusia dan ternak (Nalule et al ., 2011). Peng ‐ gunaan ekstrak V. amygdalina juga telah diguna ‐ kan untuk anthelmintik, antimalaria, anti tumourigenik serta efek bakteriostatik dan bakterisida pada beberapa sifat bakteri (Abort and Raserika, 2003; Izevbigie et al ., 2004). Analisis kimia daun dan batang menemukan berbagai kelompok metabolit, seperti lakton seskuiterpen (vernolide, vernodalol, Vernolide
Available at : https://e ‐ journal.unair.ac.id/JoPS
The Anthelmintic Activity of Ethanol Extract of Bitter Leaf...
A), saponin, polifenol, dan flavonoid (Márcia et al ., 2013). Dalam penelitian yang dilakukan oleh
Molgaard, et al . (2001), daun, batang, akar dan kulit akar ekstrak air V. amygdalina secara efektif membunuh Cestodes hymenolepis setelah
24 jam pengobatan. Besaran umum dalam uji hayati yang biasa
digunakan untuk menyatakan kefektifan zat biokatif dalam menimbulkan respon pada sampel uji adalah effective dose 50 atau effective concentration 50 , yaitu dosis atau konsentrasi yang dapat menyebabkan respon pada 50% jumlah sampel (Zaridah, 2005). Berdasarkan latar belakang masalah tersebut, maka permasa ‐ lahan yang dapat dirumuskan adalah Apakah ekstrak etanol daun afrika ( Vernonia amygdalina ) memiliki efektivitas daya anthel ‐ mintik terhadap cacing Ascaridia galli secara in vitro .
Materi dan Metode Penelitian Pembuatan ekstrak daun afrika ( Vernonia amygdalina ) dilakukan di Laboratorium
Farmakologi Veteriner. Daun afrika yang dikumpulkan dijadikan simplisia lalu di ekstraksi dengan metode ekstraksi maserasi.
Hasil penyaringan didapatkan residu dan filtrat.
Filtrat kemudian diuapkan menggunakan vacum rotary evaporator pemanas water bath dengan suhu 50ºC. kecepatan 70rpm, hingga diperoleh ekstrak kental daun afrika sebanyak yang siap digunakan. Penelitian ini mengguna ‐ kan enam perlakuan yaitu K(+) Ascaridia galli yang direndam piperazin sitrat, K( ‐ ) Ascaridia galli yang direndam NaCl fisiologis, (P1) Ascaridia galli yang direndam ekstrak etanol daun afrika 0,35%, (P2) Ascaridia galli yang direndam ekstrak etanol daun afrika 1,4%, (P3) Ascaridia galli yang direndam ekstrak daun afrika 4,2%. Pada penelitian ini setiap perlakuan membutuhkan 10 ekor cacing dan empat kali pengulangan.
Pengamatan mortalitas cacing Ascaridia galli dilakukan selama 12 jam dan diamati setiap
2 jam. cacing A. galli dinyatakan mati jika tidak ada pergerakan saat disentuh dengan cara cacing diusik dengan batang pengaduk kaca.
Jika cacing diam, pindahkan kedalam air panas dengan suhu 50ºC. Jika cacing tidak lagi bergerak maka cacing dinyatakan mengalami kematian. Jika cacing bergerak kembali maka cacing dinyatakan paralisis (Ali et al ., 2012). Analisis Data Pada penelitian ini, data yang diperoleh dari hasil perhitungan berupa cacing Ascaridia galli yang mati kemudian dianalisis menggunakan Analisis Varian (ANAVA) dan untuk membandingkan antar perlakuan dilakukan uji jarak berganda Duncan. Setelah mengetahui perbandingan dari masing – masing perlakuan, kemudian dilakukan analisis probit untuk mengetahui EC 50 dan LT 50 ekstrak pada setiap jam pengamatan. Uji statistik meng ‐ gunakan bantuan Statistical Product and Service Solution (SPSS) versi 24.
Hasil dan Pembahasan Hasil penelitian yang telah dilakukan terhadap cacing A. galli dalam lima perlakuan perendaman yaitu perendaman dalam larutan NaCl fisiologis (K ‐ ), perendaman dalam larutan piperazine sitrat 10mg/ml (K+), perendaman dalam ekstrak etanol daun Afrika 0,35% (P1), perendaman dalam ekstrak etanol daun Afrika 1,4% (P2), perendaman dalam ekstrak etanol daun Afrika 4,2% (P3), didapatkan hasil
kumulatif kematian cacing tertinggi pada konsentrasi 4,2%. Berdasarkan hasil tersebut didapatkan rerata persentase jumlah kematian cacing A. galli pada semua perlakuan dalam waktu pengamatan 2 jam, 4 jam, 6 jam, 8 jam, 10 jam, dan 12 jam setelah perlakuan adalah seperti yang di sajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Rerata Persentase Cacing A. galli yang mati pada 2 jam, 4 jam, 6 jam, 8 jam, 10 jam, dan 12 jam setelah perlakuan Perlakuan 2 jam (%) 4 jam (%) 6 jam (%) 8 jam (%) 10 jam (%) 12 jam (%) Nacl fisiologis 0 0 0 0 0 12.5 Piperazine 10 mg/ml 0 2.5 7.5 32.5 55 92.5 EDA 0.35 % 0 0 5 25 45 65 EDA 1.4 % 0 2.5 7.5 25 52.5 72.5 EDA 4.2 % 0 5 15 52.5 72.5 95
Journal of Parasite Science Vol.3 No.1 Maret 2019
eISSN : 2656 ‐ 5331 , pISSN : 2599 ‐ 0993 The Anthelmintic Activity of Ethanol Extract of Bitter Leaf...
Rerata kematian dan simpangan baku
Ascaridia galli jam ke – 2 yang mati pada setiap perlakuan menunjukkan tidak ada perbedaan yang nyata. Rerata dan simpangan baku A. galli yang mati pada Jam ke – 4 diketahui bahwa tidak terdapat perbedaan yang nyata (p>0,05). Jumlah rerata terendah didapatkan pada perlakuan NaCl fisiologis yaitu sebesar 0.00 ± 0.00 dan
Jumlah rerata tertinggi pada perlakuan EDA 4,2% yaitu sebesar 0.50 ± 0.57. Rerata dan simpangan baku A. galli yang mati pada Jam ke – 6 dapat diketahui bahwa tidak terdapat perbedaan yang nyata (p>0,05). Jumlah rerata terendah didapatkan pada perlakuan NaCl fisiologis yaitu sebesar 0.00 ± 0.00 dan Jumlah rerata tertinggi pada perlakuan EDA 4,2% yaitu sebesar 1.5 ± 1.29. Rerata dan simpangan baku A. galli yang mati pada Jam ke ‐ 8 diketahui bahwa terdapat perbedaan yang nyata (p<0,05). Jumlah rerata terendah didapatkan pada perlakuan NaCl fisiologis yaitu sebesar 0.00 ± 0.00 yang berbeda nyata dengan semua perlakuan yang menggunakan Piperazine, EDA 0,35%, EDA 1,4%, EDA 4,2%. Jumlah rerata tertinggi pada perlakuan EDA 4,2% yaitu sebesar 5.25 c ± 0.95. Rerata dan simpangan baku A. galli yang mati pada Jam ke – 10 diketahui bahwa terdapat perbedaan yang nyata (p<0,05). jumlah rerata terendah didapatkan pada perlakuan NaCl fisiologis yaitu sebesar 0.00 ± 0.00 yang berbeda nyata dengan semua perlakuan yang meng ‐ gunakan Piperazine, EDA 0,35%, EDA 1,4%, EDA 4,2%. Jumlah rerata tertinggi pada perlakuan EDA 4,2% yaitu sebesar 7.25 ± 0.95. Rerata dan simpangan baku A. galli yang mati pada Jam ke – 12 diketahui bahwa terdapat perbedaan yang nyata (p<0,05). Jumlah rerata terendah didapat ‐ kan pada perlakuan NaCl fisiologis yaitu sebesar 1.25 ± 0.50 yang berbeda nyata dengan semua perlakuan yang menggunakan Piperazine, EDA 0,35%, EDA 1,4%, EDA 4,2%. Jumlah rerata tertinggi pada perlakuan EDA 4,2% yaitu sebesar 9.50 ± 0.57.
Tabel 2. Data Jumlah kematian Cacing Ascaridia galli pada jam ke – 10 untuk mencari nilai EC 50 Ekstrak Etanol V. amygdalina menggunakan analisis probit Konsentrasi ekstrak etanol daun afrika (%) Jumlah cacing (ekor) Prosentase kematian (%) EDA 0.35% 10 25 EDA 1.4% 10 25 EDA 4.2% 10 52.5
Dapat diketahui bahwa Nilai EC 50 yaitu sebesar 2.093%. Nilai tersebut dapat diartikan bahwa ekstrak etanol daun afrika efektif membunuh 50% populasi cacing A. galli pada konsentrasi 2.093%. Tingkat konsentrasi ekstrak etanol V. Amygdalina berpengaruh nyata
(p<0.05) terhadap kematian cacing A. galli . Semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol daun Afrika, maka kandungan bahan aktif ekstrak daun Afrika juga semakin tinggi dan meningkatkan keefektifan yang ditimbulkan terhadap kematian cacing A. galli .
Tabel 3. Nilai LT 50 Ekstrak Etanol V. amygdalina pada Berbagai Konsentrasi Perlakuan Konsentrasi (%) LT 50 (Jam) Piperazine sitrate 10mg/ml 9.013 Jam EDA 0.35% 10.281 Jam EDA 1.4% 9.810 Jam EDA 4.2% 7.913 Jam Nilai LT 50 pada Piperazine yaitu pada 9.013
Jam dan berbagai konsentrasi perlakuan yaitu konsentrasi 0,35% pada 10.281 Jam, konsentrasi 1,4% pada 9.810 Jam, dan konsentrasi 4,2% pada
7.913 Jam. Hal ini menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol daun Afrika, maka kandungan bahan aktif ekstrak daun Afrika juga semakin tinggi dan meningkatkan keefektifan waktu yang ditim ‐ bulkan terhadap kematian cacing A. galli . Tabel tersebut juga menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun Afrika dengan konsentrasi 4,2% mematikan 50% cacing Ascaridia galli lebih cepat dibandingkan kontrol positif yang diberi larutan piperazine sitrat.
Berdasarkan hasil penelitian menunjukkan perbedaan yang signifikan (p<0,05) diantara perlakuan pada pengamatan 8 jam, 10 jam, dan 12 jam. Perendaman cacing A. galli pada ekstrak etanol daun afrika konsentrasi 4,2% menye ‐ babkan mortalitas lebih tinggi dibandingkan larutan piperazine sitrat 10 mg/ml. Hal ini membuktikan bahwa ekstrak etanol daun afrika memiliki daya anthelmintik yang baik untuk cacing A. galli secara in ‐ vitro. Penelitian yang dilakukan oleh Sirama et al., (2015) Ekstrak akar Vernonia amygdalina memiliki mortalitas terhadap cacing tanah rata ‐ rata 20 ‐ 33,3% pada 6,25 mg / ml; 23,3 ‐ 46,7% pada 12,5 mg / ml dan 26,7 ‐ 56,7% pada 25 mg / ml setelah 6 jam perlakuan. Dalam penelitian lain yang dilakukan oleh Molgaard et al ., (2001), daun, batang, akar dan kulit akar ekstrak air V. amygdalina secara efektif membunuh Cestodes
Available at : https://e ‐ journal.unair.ac.id/JoPS
The Anthelmintic Activity of Ethanol Extract of Bitter Leaf...
hymenolepis setelah 24 jam pengobatan. Abdul et al ., (2000) menyarankan bahwa pelarutan ekstrak air V. amygdalina diperlukan potash (kalium karbonat) dalam kasus pengobatan cacing. Selain itu, ekstrak metanol Vernonia amygdalina memiliki median dosis efektif (ED 50 ) pada 3,5 mg / ml terhadap Ascaris suum . Ekstrak ini membunuh 50% Ascaris setelah 12 jam pada 6 mg / ml (Innocent and Deogracious, 2006).

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol Vernonia amygdalina memiliki efektivitas daya anthel ‐ mintik terhadap cacing Ascaridia galli secara in ‐ vitro . Konsentrasi 4,2% memberikan hasil terbaik dalam hal jumlah kematian cacing A. galli yaitu mencapai 95% dibandingkan dengan konsentrasi lainnya dan juga piperazin sitrat. Setelah dilakukan analisis probit didapatkan Nilai EC 50 ekstrak etanol Vernonia amygdalina yang efektif terhadap cacing Ascaridia galli secara in ‐ vitro yaitu sebesar 2.093%. Nilai tersebut menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun afrika efektif membunuh 50% populasi cacing A. galli pada konsentrasi 2.093% dan nilai LT 50 pada Piperazine yaitu pada 9.013 Jam, konsentrasi 0,35% pada 10.281 Jam, konsentrasi 1,4% pada 9.810 Jam, dan konsentrasi 4,2% pada 7.913 Jam. Daftar Pustaka
Abdul, P. A., Jagun, A. G., Gefu, J. O., Mohammed, A. K. Alawa, C. B. I., and Omokanye, A. T. 2000. A Survey of Etnoveterinary Practices of Agropas ‐ toralists in Nigeria. Nigeria. 25 – 37.
Abort, A. O. and Raserika, B. H. 2003. In vivo
antimalarial activity of Vernonia amygdalina. British J of Biomed Sci., 60: 89 ‐ 91.
Bakrie, B., D. Andayani., M. Yanis., dan D.
Zainuddin. 2003. Pengaruh Penambahan Jamu Ke Dalam Air Minum Terhadap Preferensi Konsumen dan Mutu Karkas Ayam Buras. Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner. Puslitbang
Peternakan, Bogor. 490 − 495.
Beriajaya, Martidah, E., dan Nurhayati, I. S.
2006. Masalah Ascariasis Pada Ayam.
Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner. Balai Besar Penelitian Veteriner Bogor. 194 ‐ 200.
Innocent, T., and Deogracious, O. 2006. The anthelmintic activity of selected indige ‐ nous medicinal plants used by the Banyan ‐ kole of Western Uganda. J. Anim. Vet. Adv.,
5: 712 ‐ 717.
Izevbigie, E. B., Bryant, J. L., and Walker A. 2004. A novel natural inhibitors of extracellular signal ‐ regulated kinases and human breast cancer cell growth, Experimental Bio Med.,
229: 163 ‐ 169.
Marcia, D. R. and Silva, A. G. 2013. Anatomical characters of the medicinal leaf and stem of Gymnanthemum amygdalinum (Delile) Sch.Bip. ex Walp. (Asteraceae). Brazilian J. of Pharm. Sciences. 49(4): 719 ‐ 727.
Molgaard, P., Nielsen, S. B., Rasmussen, D. E., Drummond, R. B., and Makaza, N.,
Andreassen, J. 2001. Anthelmintic screening of Zimbabwean plants tradition ‐ nally used against schistosomiasis. J. Ethnopharmacol., 74: 257 ‐ 264.
Nalule, A. S., Mbaria, J. M., Olila, D., and Kimenju, J. W. 2011. Ethnopharmacological practices in management of livestock helminthes by pastoral communities in the drylands of Uganda; Livestock Research for Rural Development, 23(2).
Sirama, V., Kokwaro, J., Owuor, B., Yusuf, A., and Kodhiambo, M. 2015. In ‐ vitro Anthelmintic Activity of Vernonia amygdalina Del. (asteraceae) Roots Using Adult Haemonchus contortus worm. Int. J.
Of Pharmacological Research. 5: 1 ‐ 7.
Tabbu, C. R. 2002. Penyakit Ayam dan Penanggulangannya. Kanisius. Yogyakarta.
2: 73 ‐ 76.
Zaridah, M. Z. 2005. Mosquitocidal Activities of Malaysian Plants. J. of Tropical Forest. 18(1):
74 – 80.