https://doi.org/10.22487/kovalen.2022.v8.i3.15825
Aktivitas Afrodisiak Ekstrak Etanol Daun Tumbuhan Bungkus ( Smilax rotundifolia L.) terhadap Fertilitas Tikus Putih Jantan ( Rattus norvegicus )
[The Aphrodisiac Activity of Ethanol Extract of Bungkus Leaf ( Smilax rotundifolia L . ) on The Fertility of White Male Rats ( Rattus norvegicus )]
Ayu Wulandari 1  , Recky Patala 2 , Kiki Rizki Handayani 2 , Monica Sandra Makatang 2
1 Program Studi D3 Farmasi, STIFA Pelita Mas Palu, Jl. Wolter Monginsidi No. 106 A, Palu 94112
2 Program Studi S1 Farmasi, STIFA Pelita Mas Palu, Jl. Wolter Monginsidi No. 106 A, Palu 94112
Abstract . Aphrodisiac is a substance that can increase stamina, libido (sexual desire), and male fertility. This study aims to determine the secondary metabolites contained in the leaves of the Bungkus plant ( Smilax rotundifolia L.), to determine the aphrodisiac activity of the leaf extract of the Bungkus plant on the fertility parameters of male white rats ( Rattus norvegicus ). This study used an experimental method with a modified post-test randomized controlled group design using 15 male white rats and 30 female white rats which were divided into 3 treatment groups, namely pairing each male  rat with 2 female white rats (1 : 2). Each group consisted of 5 male rats and 10 female rats, namely the normal control group (NaCMC 0.5%), the positive control group (X-Gra 51.37 mg/kgBW), the control group  the  leaf  extract  test  sample  of  the Bungkus plant  ( S.  rotundifolia L.)  with  a  dose  of  200  mg/kgBW.  The research  data  were  analyzed  using  the  SPSS  25  statistical  test.  The  results  of  this  study  indicate  that  the  leaf extract  of  the Bungkus plant  contains  secondary  metabolites  flavonoids,  saponins,  alkaloids  and  tannins.  The administration of Bungkus leaf extract at a dose of 200 mg/kgBW showed a difference in the percentage value of the pregnancy index and a significant effect on the fertility index value.
Keywords: Aphrodisiac, Smilax rotundifolia, fertility, male rats
Abstrak. Afrodisiak merupakan zat yang dapat meningkatkan stamina, libido (hasrat seksual) serta fertilitas atau kesuburan pria. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam daun  tumbuhan  Bungkus  ( Smilax  rotundifolia  L. ) , mengetahui aktivitas  afrodisiak  pada  pemberian  ekstrak daun tumbuhan Bungkus terhadap parameter fertilitas tikus putih jantan ( Rattus norvegicus ). Penelitian ini menggunakan metode  eksperimental  dengan  rancangan  modifikasi post  test  randomized  controlled  group  design dengan menggunakan 15 ekor tikus putih jantan dan 30 ekor tikus putih betina yang dibagi dalam 3 kelompok perlakuan yakni memasangkan setiap tikus jantan dengan 2 ekor tikus putih betina (1 : 2), tiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus jantan dan 10 ekor betina yaitu kelompok kontrol normal (NaCMC 0,5 %), kelompok kontrol positif (X-Gra 51,37  mg/kgBB),  kelompok  kontrol    sampel  uji  ekstrak  daun  tumbuhan  Bungkus  dengan  dosis  pemberian  200 mg/kgBB. Data penelitian dianalisis menggunakan uji statistik statistik SPSS 25. Hasil penelitian ini menunjukan bahwa ekstrak daun tumbuhan  Bungkus mengandung senyawa metabolit sekunder flavonoid, saponin, alkaloid dan tanin. Pemberian ekstrak daun Bungkus dengan dosis 200 mg/kgBB menunjukan perbedaan nilai persentase indeks kehamilan dan pengaruh yang signifikan pada nilai indeks kesuburan.
Kata kunci : Afrodisiak, Smilax rotundifolia, fertilitas, tikus jantan
Diterima:  10 Maret 2022, Disetujui: 18 November 2022
Sitasi:   Wulandari, A., Patala,  R.,  Handayani, K.R., dan Makatang, M.S. (2022).  Aktivitas  Afrodisiak Ekstrak  Etanol  Daun  Tumbuhan Bungkus ( Smilax rotundifolia L.) terhadap Fertilitas Tikus Putih Jantan ( Rattus norvegicus ). KOVALEN: Jurnal Riset Kimia , 8(3): 215-221.
https://bestjournal.untad.ac.id/index.php/kovalen
 Corresponding author E-mail : ayusuha8@gmail.com

## Wulandari et al.

## LATAR BELAKANG
Afrodisiak  merupakan  zat  atau  bahan alami,  obat,  suplemen  herbal  yang  dapat meningkatkan  gairah  seksual  (Sulistiawan, 2017).  Afrodisiak  dapat  meningkatkan  libido dan berpengaruh pada kelangsungan aktivitas reproduksi,  mengembalikan  fungsi  jaringan yang  rusak  serta  membantu  pengaturan neuroendokrin  sehingga  meningkatkan  hasrat seksual yang dipengaruhi oleh pikiran (Damayanti et  al .,  2011;  Hilmi et  al .,  2013).
Ketidakseimbangan  hormonal  atau  saraf, gangguan jaringan reproduksi dapat berpengaruh terhadap fertilitas atau kesuburan pria (Dutta & Sengupta, 2018).
Fertilitas  berasal  dari  kata fertile yang memiliki  arti  subur.  Fertilitas  pria  diartikan sebagai  kemampuan  untuk  dapat  membuat pasangannya  memilki  keturunan.    Masalah infertilitas  memiliki  dampak  buruk  yang  bisa menimbulkan hilangnya keharmonisan pasangan  suami-istri,  umumnya  masyarakat menganggap  infertilitas  hanya  pada  wanita. Namun,  sekitar  7%  pria  di  usia  produktif mengalami infertilititas (Khaira dkk., 2020).
Tumbuhan  bungkus  ( S.  rotundifolia L.)  di Indonesia dipercaya masyarakat Papua secara turun-temurun sebagai obat kejantanan (Firawati  &  Pratama,  2018).  Literatur  tentang tumbuhan  bungkus  ( S.  rotundifolia L . )  masih kurang  dan  terbatas.  Beberapa  penelitian sebelumnya  menyimpulkan  tumbuhan  dengan genus Smilax, seperti S.  myosotiflora mengandung  saponin  dan  flavonoid  yang memiliki potensi sebagai afrodisiak yang dapat mempengaruhi  parameter  fertilitas  tikus  putih jantan  (Hilmi et  al. ,  2013;  Wan et  al. ,  2016;
Nwafor & Oniyide, 2017 ). Berdasarkan literatur tersebut, penelitian tentang aktivitas afrodisiak yang  mempengaruhi  parameter  fertilitas  pada
ekstrak  etanol  daun  tumbuhan  bungkus  ( S. rotundifolia L.)  pada  tikus  putih  jantan    perlu dilakukan  agar    mengevaluasi  kemungkinan bahwa  ekstrak  tumbuhan  ini  memiliki  aktivitas afrodisiak  yang  mempengaruhi  parameter fertilitas tikus putih jantan seperti indeks kawin, indeks  kesuburan,  indeks  libido,  indeks kehamilan dan indeks janin hidup (Dasuki et al ., 2012).

## METODE PENELITIAN

## Bahan dan Peralatan
Air  suling , alumunium  foil,  ammonia (Merck),  benang  godam,  benang  kain,  bisturi (no.10, 23 dan 15), dragendorff LP, etanol 96%
(Merck) , FeCl 3 (Merck), handscoen ,  HCl  2  N
(Merck),  HCl  pekat  (Merck),  H 2 SO 4 pekat (Merck),  kapas,  kertas  label,  Chloroform (Merck),  magnesium  P,  masker,  metilen  blue, NaCMC 0,5 %, NaCl 10% (Merck), plastik wrap , serbuk simplisia daun bungkus ( S. rotundifolia L.), sterofoam , tikus putih jantan 15 ekor dan 30 ekor  tikus  putih  betina, tissue ,  vaselin  dan  X- gra.
Ayakan  40  mesh,  batang  pengaduk, blender, cawan porselin, corong kaca, erlenmeyer (250 ml, 100 ml, 50 ml), gelas kimia (250 ml, 50 ml)  , gelas ukur (100 ml, 10 ml, 5 ml), gegep kayu, gunting, gunting bedah, kaca arloji, kamera (alat perekam), kandang  hewan uji,  kandang  pengamatan  kaca  40  x  40  cm, kertas saring, kompor listrik, labu ukur (250 ml, 100 ml), labu alas bulat (500 ml), lampu infrared 75  watt,  mikroskop,  mortir  dan  stamper, penangas  air  ( waterbath) ,  papan  bedah,  pipet tetes,  pinset  bedah, rotary  vacum  evaporator , sendok tanduk, sonde oral 3 ml, spoit injeksi 3 ml,  tabung  reaksi,  termometer  air,  timbangan analitik dan wadah (toples).

## Wulandari et al.

## Prosedur Penelitian
Penyiapan bahan uji
Sampel  daun  bungkus  ( S.  rotundifolia L.) diperoleh dari Gunung Mungker, Desa Terong Kec.  Dlingo  Kab.  Bantul,  DIY,  daun  bungkus dikumpulkan kemudian disortasi basah, kemudian membersihkan sampel dari kotoran. Langkah  selanjutnya  dilakukan  perajangan yaitu  bahan  di  potong  menjadi  bagian-bagian kemudian dilakukan pengeringan tanpa menggunakan sinar matahari (diangin- anginkan)  hingga  sampel  mengering.  Daun yang  telah  kering,  disortasi  kering  dan  digiling hingga menjadi serbuk halus.

## Pembuatan ekstrak etanol daun bungkus
Serbuk simplisia daun ditimbang sebanyak  800  mg.  Kemudian  masing-masing simplisia  diekstraksi  dengan  metode  maserasi yakni cara merendam simpilisia dengan pelarut etanol 96%. Pelarut dan simplisia dipersiapkan sesuai  dengan  perbandingan  1  :  5  (b/v). Perendaman  dilakukan  selama    3  x  24  jam. Hasil  kemudian  disaring  untuk  mendapatkan filtrat.  Filtrat  di rotary  evaporator pada  suhu (40 ˚C)  dipekatkan,  ekstrak  kental  ditimbang kemudian dihitung rendemennya (Warganegara dkk., 2019).

## Uji penapisan fitokimia
Skrining  fitokimia  berfungsi  untuk  melihat ada  tidaknya  golongan  metabolit  sekunder untuk  menentukan  golongan  senyawa  aktif biologis  pada  tumbuhan  baik  berupa  simplisia
maupun  ekstrak.  Senyawa  alkaloid,  flavonoid, saponin,  dan  tanin  diuji  dan  diproses  secara kualitatif melalui reaksi warna atau pengendapan.

## Pengujian fertilitas
Tikus  putih  jantan  sebanyak  15  ekor dan  tikus  putih  betina  sebanyak  30  ekor diadaptasikan secara terpisah selama 7 hari di Laboratorium  dan  diberikan  pakan  standar serta minum dan dilakukan penimbangan bobot tikus.  Pemberian  sediaan  uji  dan  pembanding selama 30 hari (Hilmi et al ., 2013). Pemberian larutan  uji  dan  pembanding  satu  kali  sehari selama  30  hari.  Setelah  30  hari  pemberian ekstrak,  dilakukan  penentuan  siklus  estrus pada tikus putih betina dengan cara melakukan ulas  vagina.  Setelah  dipastikan  tikus  putih betina telah memasuki fase estrus, maka tikus putih  betina  siap  dikawinkan.    Setelah  itu, masing-masing  tikus  jantan  dipindahkan  di kandang yang terpisah, kemudian memasangkan  setiap  tikus  jantan  dengan  2 ekor tikus putih betina (1:2), setiap 3 jam sehari selama  14  hari.  Apusan  sperma  pada  vagina tikus betina dilakukan setelah waktu tes 3 jam. Hari  sperma  terdeteksi  di  apusan  vagina  tikus betina  dianggap  sebagai  hari  ke-0  kehamilan. Dilakukan  pembedahan  tikus  betina  pada  hari ke-21  pasca  pembuahan.  Pengujian  fertilitas tikus  putih  jantan  dapat  diamati  dari  beberapa parameter yakni:
Indeks Kawin = jumlah tikus jantan yang betinanya positif sperma dalam 14 hari jumlah total tikus jantan yang terlibat perkawinan
x 100 ………………. (1)
Indeks Kesuburan = Jumlah hari yang dibutuhkan tikus jantan hingga membuahi tikus betina ……. (2)
Indeks Libido = jumlah ikus betina yang positif sperma jumlah total tikus betina yang terlibat perkawinan x 100
………………………………… (3)
Indeks Kehamilan = jumlah tikus betina hamil jumlah total tikus betina positif sperma x 100 ………………………………… (4) Indeks Janin Hidup = Jumlah Janin Hidup Jumlah Janin selama Pembedahan x 100 ………………………………… (5)

## Wulandari et al.

## Analisis data
Data yang diperoleh selanjutnya dianalisis secara  statistic  menggunakan  SPSS  25 meliputi uji normalitas, homogenitas, parametrik (O ne-Way ANOVA)  dan  non  parametrik ( Kruskal Wallis ) .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  meninjau aktivitas  afrodisiak  pada  pemberian  ekstrak etanol  daun  bungkus  terhadap  fertilitas  tikus putih  jantan  dengan  dosis  200  mg/kgbb. Identifikasi  dilakukan  pada  tumbuhan  yang digunakan  dalam  penelitian  agar  terbukti bahwa  benar  tumbuhan  yang  digunakan tersebut  adalah  spesies  daun  bungkus  ( S. rotundifolia L.).
Ekstrak  kental  dari  daun  bungkus didapatkan  dari  hasil  ekstraksi  menggunakan metode  maserasi  selama  3x24  jam  dengan pelarut etanol 96% memiliki massa 106,8 gram
dan  rendemen  10,68%.  Metode  maserasi dipilih  karena  dapat  menghambat  terjadi rusaknya  zat  dalam  ekstrak  daun  bungkus. Skrining fitokimia dilakukan pada ekstrak untuk melihat  adanya  senyawa  pada  ekstrak  etanol daun  bungkus.  Hasil  uji  skrining  fitokimia ekstrak  etanol  daun  bungkus  mengandung senyawa, flavonoid, saponin, tanin dan alkaloid (Tabel  1).  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian Dasuki et al . (2012) bahwa tumbuhan dengan genus Smilax seperti S. myosotiflora mengandung  alkaloid,  saponin,  flavonoid, tanin,  dan  kumarin.    Penelitian  ini  memakai tikus  putih  jantan  ( R.  norvegicus )  sebagai hewan  uji  dikarenakan  jenis  tikus  ini  umum digunakan  untuk  penelitian  dan  lebih  stabil atau  tidak  dipengaruhi  oleh  adanya  siklus estrus dan kehamilan seperti pada tikus betina. Penggunaan  tikus  sebagai  hewan  uji  karena memiliki kemiripan genetik, karakteristik biologi yang mirip dengan manusia.
Tabel 1. Hasil uji fitokimia Pengujian Pereaksi Pengamatan Hasil Uji Alkaloid Dragendolf LP Terbentuknya endapan kuning orange merah bata + Uji Flavonoid HCl pekat dan logam Mg Terjadinya warna kuning jingga + Uji saponin Dikocok + HCl N Terjadi buih + Uji Tanin Larutan NaCl 10% + FeCl 3 Terbentuknya warna biru kehitaman +
Tabel 2. Hasil pengujian fertilitas
Parameter
Kelompok Kontrol
Kelompok Perlakuan Nilai P Normal Positif Daun (200 mg/kgBB) (n=5) Na CMC 0.5% (n=5) X-gra® (51.37 mg/kg BB) (n=5) (y) Indeks Kawin (%) 100 100 100 - (z) Indeks Kesuburan (hari) 3,22±1,09 1,6 ±0,54 2,33 ±0,81 0,008 < 0.05 (y) Indeks Libido (%) 50 50 50 - (y) Indeks Kehamilan (%) 60 80 100 - (y) Indeks Janin Hidup (%) 100 100 100 -

## Wulandari et al.
Penggunaan  hewan  uji  dimaksudkan untuk  mengetahui  aktivitas  afrodisiak  pada pemberian  ekstrak  daun  tumbuhan  bungkus terhadap fertilitas tikus putih jantan yang dapat diamati  pada  beberapa  parameter,  seperti indeks kawin, indeks kesuburan, indeks libido, indeks kehamilan dan indeks janin hidup. Hasil uji  normalitas  dan  homogenitas  menunjukan bahwa data pada parameter indeks kesuburan tidak  terdistribusi  normal  dan  tidak  homogen, maka  dianalisis  menggunakan  uji kruskal wallis ,  sedangkan  pada  parameter  indeks kawin,  indeks  libido,  indeks  kehamilan  dan indeks  janin  hidup  dianalis  secara  deskriptif. Hasil analisis data secara deskriptif didapatkan bahwa  pada  parameter  indeks  kawin,  indeks libido, dan indeks janin hidup tidak menunjukan perbedaan  yang  signifikan,  sedangkan  pada parameter  indeks  kehamilan  dan  indeks kesuburan menunjukan perbedaan yang signifikan.
Indeks kehamilan merupakan jumlah tikus betina  yang  hamil  jika  dibandingkan  dengan jumlah tikus betina yang positif sperma. Positif sperma adalah jumlah hari berlalu hingga pada vagina  tikus  putih  betina  terdeteksi  sperma (Hilmi et  al. ,  2013).  Pada  penelitian  ini,  data hasil perhitungan diolah secara deskriptif yang dapat  dilihat  pada  Tabel  2.  Hasil  yang didapatkan,  yaitu  tikus  putih  jantan  yang diberikan ekstrak daun tumbuhan bungkus ( S. rotundifolia L . )  dengan  dosis  200  mg/kgbb menunjukan  perbedaan  jika  dibandingkan dengan kontrol normal dan kontrol positif. Nilai persentase pada kontrol ekstrak daun sebesar 100% dan kontrol normal 60% maka pemberian ekstrak  daun  bungkus  dapat  mempengaruhi indeks  kehamilan  1,6x  (100/60),  sedangkan pada  kontrol  positif  sebesar  80%  maka pemberian  X-gra  dapat  mempengaruhi  indeks
kehamilan  1,3x  (80/60)  jika  dibandingkan dengan kontrol normal (NaCMC).  Hal tersebut menunjukan  bahwa  ekstrak  daun  bungkus memiliki aktvitas afrodisiak yang mempengaruhi  fertilitas  tikus  putih  jantan. Apabila dibandingkan dengan penelitian sebelumnnya, ekstrak etanol daun bungkus ( S. rotundifolia L.)  dengan  dosis  200  mg/kgbb dengan  persentase  indeks  kehamilan  100% lebih  baik  daripada  ekstrak  metanol  umbi S. myosotiflora yang hanya memiliki nilai persentase 50% (Hilmi et al. , 2013).
Indeks kesuburan merupakan kemampuan  seksual  tikus  yang  meningkat yang  dapat  dilihat  dari  semakin  cepat  tikus jantan  dapat  membuat  tikus  betina  positif sperma  jika  dibandingkan  dengan  kontrol normal  (Hilmi et  al. ,  2013).    Hasil  yang didapatkan  yaitu  tikus  putih  jantan  yang diberikan ekstrak  daun tumbuhan bungkus ( S. rotundifolia L.)  dengan  dosis  200  mg/kgbb menunjukan penurunan nilai jika dibandingkan dengan kontrol normal dan kontrol positif (Tabel 2). Pemberian ekstrak daun tumbuhan bungkus ( S.  rotundifolia L.)  dengan  dosis  200  mg/kgbb secara  statistik  menunjukan  perbedaan  yang signifikan yang ditandai dengan nilai sig. 0,008
(p<  0,05),  sehingga  pada  parameter  indeks kesuburan menunjukan adanya aktivitas afrodisiak  yang  dapat  mempengaruhi  fertilitas tikus  putih  jantan.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitian sebelumnya tentang ekstrak metanol umbi S. myosotiflora yang menunjukan bahwa terjadi penurunan nilai pada indeks kesuburan (Hilmi et al. , 2013).
Peningkatan  aktivitas  afrodisiak  yang ditimbulkan  dari  pemberian  ekstrak  dapat dipengaruhi oleh meningkatnya gairah/rangsangan  seksual  hingga  mencapai ejakulasi  pada  tikus  putih  jantan  ditinjau  dari

## Wulandari et al.
banyaknya  jumlah  tikus  betina  yang  positif sperma.  Kegagalan  melakukan  perkawinan bisa  dikaitkan  dengan  berkurangnya  gairah seksual karena adanya gangguan fungsi ereksi dan  ejakulasi  pada  tikus  jantan  (Carro  & Rodriguez,  2004).  Aktivitas  afrodisiak  yang mempengaruhi fertilitas pada indeks kesuburan ini dapat dikaitkan dengan sifat-sifat antioksidan yang dimiliki oleh ekstrak tumbuhan (Dasuki et al. , 2012).
Antioksidan dapat meningkatkan spermatogenesis  dan  sintesis  hormon  steroid seperti  glukortiroid,  androgen,  dan  estrogen sehingga  dapat  meningkatkan  kinerja  kawin pada  tikus  jantan  (Brinkhaus et  al. .,  2000).
Daun  tumbuhan  bungkus  ( S.  rotundifolia L.) mengandung  senyawa  flavonoid.    Kandungan flavonoid sebagai antioksidan dapat menambah  daya  tahan  sperma  yang  terpapar radikal  bebas  untuk mencegah  infertilitas  pria. Flavonoid  berperan  meningkatkan  jumlah sperma dengan mencegah kerusakan membran sperma yang menyebabkan terganggunya proses spermatogenik (Musfirah dkk, 2016).
Selain  sifat-sifat  antioksidan,  aktivitas afrodisiak terhadap fertilitas dapat dipengaruhi oleh  hormon  testoteron.  Hormon  testoteron berfungsi  untuk  merangsang  perkembangan aktivitas  organ  reproduksi.  Hormon  testoteron bekerja  sama  dengan Follicle  Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing Hormone (LH) berpengaruh  dalam  proses  spermatogenesis, maturase sperma serta meningkatkan ekskresi fruktosa  oleh  vesika  seminalis  sebagai  nutrisi utama  dari  spermatozoa.  Beberapa  senyawa metabolit sekunder yang dapat mempengaruhi kerja  hormon  testoteron,  yaitu  senyawa flavonoid,  saponin  dan  steroid  (Sulistiawan, 2017).

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  tumbuhan  bungkus ( S.rotundifolia L.) mengandung senyawa metabolit  sekunder  yakni  flavonoid,  saponin, alkaloid,  dan  tanin  serta  memiliki  aktivitas afrodisiak  yang  mempengaruhi  fertilitas  yang ditandai dengan terjadinya perbedaan persentase  indeks  kehamilan  dan  nilai  pada indeks kesuburan yang berbeda signifikan.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terimakasih  disampaikan  kepada Yayasan Pelita Mas Palu yang telah mendanai penelitian ini hingga selesai.

## DAFTAR PUSTAKA
Brinkhaus, B., Lindner, M., Schuppan, D., and
Hahn,
E. (2000). Chemical, pharmacological and clinical profile of the
East  Asian  medical  plant  Centella asiatica. Phytomedicine ,  7(5),  427-448. https://doi.org/10.1016/s0944-
7113(00)80065-3
Carro-Juárez,  M.,  Cervantes,  E.,  Cervantes- Méndez,  M.,  and Rodrıguez-Manzo,  G.
(2004). Aphrodisiac properties of
Montanoa  tomentosa  aqueous  crude extract  in  male  rats .  Pharmacology Biochemistry  and  Behavior ,  78(1),  129- 134.
https://doi.org/10.1016/j.pbb.2004.03.001
Damayanti, D., Azman MAB., Aminuddin AHK., Hamid A., and Nwe KHH. (2011). Effects of Smilax myosotiflora on testicular 11 β- hydroxysteroid  dehydro-genase  oxidative activity  and  plasma  hormone  levels  in rats. Biomedical  Research ,  22(2),  188- 193.
Dasuki, M. S., Khaizil Emylia, Z., Noor Izani, N. J., and Mohsin, S. S. J. (2012). Evaluation of antioxidant and antiproliferative activities  on  methanolic  extract  of  smilax myosotiflora  tuber. International  Medical Journal , 19 (3), 188 –192.
Dutta, S., and Sengupta, P. (2018). Medicinal herbs  in  the  management  of  male infertility. Journal  of  Pregnancy  and Reproduction , 2(1). https://doi.org/10.15761/jpr.1000128
Wulandari et al.
Firawati dan Pratama, M. I. (2018). Isolasi dan
Identifikasi  Senyawa  Saponin  Daun Bungkus (Smilax rotundifolia ) menggunakan  Metode  Spektrofotometri
Ultraviolet. Jf Fik Uinam , 6 (2), 115 –121.
Hilmi,  W.  M.,  Norliza,  A.,  and  Sul,  M.  (2013).
Aphrodisiac  Properties  of  Methanolic Extract  of Smilax  myosotiflora Tubers  in Male  Rats. International  Journal  of Medical Sciences and Biotechnology , I(II),
41 –50.
Khaira,  U.,  Syarief,  N.,  and  Hayati,  I.  (2020). Prediksi  Tingkat  Fertilitas  Pria  dengan
Algoritma  Pohon  Keputusan  Cart. Jurnal Ilmiah  Umum  Dan  Kesehatan  Aisyiyah , 5 (1), 35 –42.
Musfirah,  Y.,  Bachri,  M.  S.,  and  Nurani,  L.  H. (2016).  Efek  Ekstrak  Etanol  70%  Akar Saluang  Balum  ( Lavanga  sarmentosa , Blume  kurz)  Terhadap  Spermatogenesis dan  Gambaran  Histopatologik  Testis Mencit. Jurnal Pharmascience , 3(2).
Nwafor,  P.  A.,  and  Oniyide,  V.  K.  (2017). Aphrodisiac effects of methanol extract of Smilax  Kraussiana root  in  experimental rats. African  Journal  of  Biomedical Research , 20 (1), 67 –75.
Sulistiawan,  W.  D.  (2017).  Uji  Aktivitas Afrodisiak Ekstrak Etanol Kelopak Rosella Merah  ( Hibiscus  sabdariffa L.)  Terhadap Tikus  Jantan  Galur  Wistar.  ( Skripsi). Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta.
Wan,  MH.,  Ahmad,  N.,  Sul’ain  MD.  (2016). Evaluations  of  Cytotoxicity  of Smilax myosotiflora and  Its  Effects  on  Sexual Hormone Levels and Testicular Histology in  Male  Rats. Asian  Pacific  Journal  of Tropical  Biomedicine ,  6(3),  246-250. https://doi.org/10.1016/j.apjtb.2015.12.01 3
Warganegara,  E.,  Mutiara,  H.,  &  Zettira,  O.Z. (2019).  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak
Bekatul Beras Merah Terhadap Perubahan Diameter Lumen Arteri
Koronaria Tikus Putih ( Rattus norvegicus ) Jantan galur Sprague-Dawley yang Diinduksi  Paparan  Asap  Rokok  Kretek. Medical  Journal  of  Lampung  University , 8(2), 167-172.