AKTIVITAS ANTIBAKTERI MINYAK NILAM ( Pogostemon cablin ) TERHADAP BEBERAPA SPESIES BAKTERI UJI
Retno Widowati 1* , Sri Handayani 2 , Iqba Lasdi 3
1* Program Studi Magister Biologi, Sekolah Pascasarjana, Universitas Nasional, Jakarta 2,3 Program Studi Biologi, Fakultas Biologi, Universitas Nasional, Jakarta *Corresponding author: retno.widowati@civitas.unas.ac.id

## Abstract
Patchouli (Pogostemon cablin) is a plant that has the potential as a medicinal ingredient. Patchouli  contained a lot of essential oils and called patchouli oil. Patchouli oil is commonly used as traditional medicine and aromatherapy. For industries, it is used in the manufacture of pharmaceutical and cosmetic products.  Patchouli oil was  the result of  traditionally  distillation  of  patchouli  leaves  in  Province  of  Jambi  and  Aceh.  This  study  aims  to  determine  the antibacterial activity of patchouli oil from Jambi and Aceh, against several pathogenic bacteria. Phytochemical test results  showed  that  the  both  of  patchouli  oils  contained  active  compounds,  in  the  form  of  alkaloids,  saponins, phenolics,  flavonoids,  triterpenoids,  and  glycosides.The  bacteria  used  in  this  study  were  Escherichia  coli  ATCC 8739, Salmonela typhi ATCC 14028, Staphylococcus aureus ATCC 6539, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, and Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. The methods used in this study were well diffusion and inhibition zones. The results showed that patchouli oil was able to inhibit two of the five bacteria i.e. S. aureus and P. aeruginosa. Jambi patchouli oil was better in inhibiting S. aureus and P. aeruginosa compared to Aceh patchouli oil. The six active compounds in patchouli oil have the potential to inhibit growth or kill bacteria.
Key words: Antibacterials, Phytochemical Compounds, Pogostemon cablin, Patchouli Oil

## PENDAHULUAN
Masyarakat  Indonesia  mengenal  dan menggunakan  tanaman  obat  sebagai  salah satu  upaya  dalam  penanggulangan  masalah kesehatan.  Sampai  saat  ini  tanaman  obat banyak  digunakan  baik  di  bidang  kosmetik maupun  obat-obatan.  Tanaman  obat  masih tetap  dipelajari  tidak  hanya  karena  tradisi, tetapi  terutama  karena  nilainya  di  bidang farmasi.  Salah  satu  tanaman  yang  sudah dikenal  dalam  masyarakat  dan  digunakan sebagai  obat  tradisional  adalah  nilam ( Pogostemon cablin )  (Pribadi, 2015).
Nilam  merupakan  salah  satu  tanaman yang  banyak  mengandung  minyak atsiri , minyak atsiri dari  tanaman  nilam  disebut minyak nilam. Minyak nilam telah digunakan sebagai  ramuan  penting  yang  memiliki
banyak  sifat  terapi  dan  banyak  digunakan dalam  industri  wewangian.  Dalam  praktik tradisional  minyak  nilam  digunakan  untuk mengobati luka, pencuci rambut, menghilangkan bau keringat, gigitan serangga dan ular. Dalam aromaterapi, minyak nilam digunakan untuk menghilangkan  depresi,  stres,  menenangkan saraf.  Minyak  nilam  adalah  minyak atsiri yang diperoleh dengan cara destilasi uap atau ekstraksi  tanaman  nilam,  yang  biasanya berupa daun segar. Sebagai komoditi ekspor, minyak nilam mempunyai prospek yang baik karena  dibutuhkan  secara  kontinyu  dalam industri  kosmetik,  farmasi,  parfum,  pemberi aroma pada pasta gigi, dan lain-lain (Dongare et  al. ,  2014;  Swamy  &  Sinniah,  2015).
Minyak atsiri merupakan senyawa yang pada  umumnya  berbentuk  cairan,  yang diperoleh  dari  bagian  tanaman,  akar,  batang, kulit,  buah,  daun,  maupun  biji  dengan  cara penyulingan.  Selain  itu  untuk  memperoleh minyak atsiri dapat  dilakukan  dengan menggunakan  cara  lain  seperti  ekstraksi menggunakan  pelarut  organik  (Amin,  2015; Ngaisah, 2010).
Komponen  kimia  penyusun  minyak nilam  terdiri  dari  dua  golongan  yaitu: golongan  hidrokarbon  yang  berupa  senyawa seskuiterpen  dan  golongan  hidrokarbon beroksigen berupa senyawa patchouli alkohol  yaitu  salah  satu  senyawa  yang menentukan bau minyak nilam dan merupakan komponen yang terbesar di dalam minyak  nilam.  Oleh  karena  itu patchouli alkohol  merupakan  indikator  penentuan kualitas  dari  tanaman  nilam  (Afdhaliah, 2017; Aisyah et al. , 2008).
Penelitian  sebelumnya  tentang  minyak nilam  menunjukkan  bahwa  minyak  nilam mempunyai  beberapa  aktivitas  farmakologi seperti sifat antibakteri. Antibakteri merupakan yang mempunyai aktivitas
menghambat
( bakteriostatik ) atau membunuh  bakteri  ( bakterisid ),  khususnya bakteri  yang  merugikan  manusia  (Fauzi, 2017). Dzakwan dan Budi (2012) membuktikan  minyak atsiri daun  nilam mempunyai  daya  antibakteri  terhadap S. aureus dan E.  coli. Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  minyak atsiri daun
nilam lebih efektif menghambat pertumbuhan S. aureus dibanding E. coli . Escherichia  coli merupakan  bakteri Gram negatif, tidak berkapsul dan merupakan  flora  normal  di  dalam  saluran pencernaan hewan dan  manusia  yang mudah mencemari air dan makanan, bakteri ini dapat bersifat patogen jika  berada  di  luar pencernaan. E.  coli dapat  masuk  kedalam tubuh seperti saluran kemih, saluran empedu, dan selaput otak (Melliawati, 2015; Satyaningsih dan Munandar, 2017).
Salmonella  typhi merupakan  bakteri Gram  negatif  yang  menyebabkan  demam tifoid,  yaitu  penyakit  pada  infeksi  sistemik dengan  gambaran  demam  yang  berlangsung lama,  ada  bakteria  disertai  inflamasi  yang dapat  merusak  usus  dan  organ  hati.  Tifoid dapat  menyebar  melalui  makanan  dan minuman yang terkontaminasi oleh feses atau urin yang terinfeksi bakteri S. typhi (Darwis,
2017; Sap Tanin gtyas et al. , 2015).
Staphylococcus aureus merupakan bakteri  Gram  positif  yang  menghasilkan pigmen kuning  yang bersifat aerob fakultatif tidak  membentuk  spora,  berbentuk  bulat, biasanya    tersusun  dalam    rangkaian    tidak beraturan  seperti  buah  anggur.  Beberapa diantaranya    tergolong    flora    normal    pada kulit    dan  selaput  mukosa  manusia, menyebabkan  abses,    berbagai    infeksi piogen dan    bahkan septikemia yang  fatal (Amalia et  al. ,  2016;  Wang et  al. ,  2019).
Staphylococcus epidermidis merupakan  salah  satu  spesies  dari  genus bakteri Staphylococcus yang  paling  sering ditemui dalam kepentingan klinis. Bakteri ini adalah  bakteri  gram  positif  dan  termasuk Staphylococcus dengan  koagulasi  negatif. Sebagian  besar  bakteri  ini  adalah  flora normal  pada  kulit  dan  membran  mukosa manusia  (Brooks,  2010).  Organisme  ini jarang mengakibatkan infeksi yang signifikan. Tetapi dengan peningkatan penggunaan implan kateter dan alat prostetik,
S. epidermidis menjadi agen penting penyebab    infeksi    nosokomial  (Nugraheni dan  Winarni,  2012).  Pengobatan  infeksi bakteri  ini    menjadi  semakin  sulit  karena meningkatnya  resistensi  terhadap  berbagai agen  antimikrobial  dan  kemampuannya membentuk biofilm (Flemming dan Wingender, 2010).
Pseudomonas  aeruginosa merupakan bakteri  Gram  negatif  berbentuk  batang, bergerak  dengan  flagella,  bersifat  aerob,  dan terlihat  sebagai  bentuk  tunggal,  ganda  dan kadang-kadang  dalam  rantai  pendek.  Bakteri P.  aeruginosa menjadi patogen ik  hanya  jika berada  pada  tempat  dengan  daya  tahan  tidak normal,  misalnya  di  selaput  lendir  dan  kulit yang  rusak  akibat  kerusakan  jaringan (Anggita et al. , 2018).
Berdasarkan  uraian  di  atas,  tujuan  dari penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui aktivitas  antibakteri  minyak  nilam  yang berasal  dari  Jambi  dan  Aceh  terhadap
beberapa  bakteri patogen yaitu Escherichia coli ATCC  8739 ,  Salmonela  typhi ATCC 14028 ,  Staphylococcus  aureus ATCC  6539, Staphylococcus  epidermidis ATCC  12228, dan Pseudomonas  aeruginosa ATCC  9027 . Untuk  itu  hipotesis  pada  penelitian  ini adalah:  (1)  terdapat  perbedaan  kemampuan antibakteri  minyak  nilam  Aceh  dan  minyak nilam Jambi terhadap bakteri uji; (2) terdapat perbedaan  pengaruh  antara  minyak  nilam Aceh  dan  minyak  nilam  Jambi  terhadap pertumbuhan bakteri uji.

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Desember  2018  sampai  Februari  2019. Tempat penelitian aktivitas antibakteri minyak  nilam  dilakukan  di  Laboratorium Mikrobiologi dan Genetika, serta Laboratorium  Riset  Universitas  Nasional yang  berlokasi  Jl.  Bambu  kuning,  Jati Padang, Pasar Minggu, Jakarta Selatan.

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian,  antara  lain: Laminar  Air  Flow , inkubator, autoklaf, oven, hot plate , timbangan  analitik,  pisau, erlenmeyer ,  labu ukur,  batang  pengaduk,  gelas  ukur,  pipet ukur,  labu  ukur,  tip  kuning  dan  biru,  tabung reaksi, cork  borer ,  cawan  Petri,  pinset, ose , sendok, bunsen , tutup tabung, jangka sorong, spidol,  objek  glass,  dan  alat  pelindung  diri (masker,  sarung  tangan,  dan  jas  lab).  Bahan yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah
minyak nilam dari hasil penyulingan tradisional masyarakat, Desa Bintah,
Kecamatan  Pasie  Raya,  Kabupaten  Aceh Jaya, Aceh dan Desa Purwoharjo Kecamatan Rimbo  Bujang,  Kabupaten  Tebo,  Jambi. Kultur  bakteri murni didapatkan  dari Laboratorium  Riset  Universitas  Nasional, akuades, antibiotik Ciprofloxacin, Mc Farland  0,5, Nutrient  Agar (NA), Mueller Hinton  Agar (MHA),  NaCl  0,9%,  alkohol 70%,  parafilm,  kertas  saring,  kassa,  lidi kapas  steril, Alumunium  foil, dan  minyak spritus.
Pengujian Fitokimia
a.  Pengujian flavonoid ,  Minyak  nilam dipipet 0,5 mL dimasukkan ke dalam tabung reaksi.  Kemudian  ditambahkan  1-2  butir logam  Mg  dan  3  tetes  HCl  pekat,  lalu ditambahkan amyl alkohol dan kocok dengan kuat,  dibiarkan  hingga  memisah.  Warna kuning kemerahan hingga merah menunjukan bahwa sampel positif mengandung senyawa flavonoid .
b. Pengujian alkaloid , minyak nilam dipipet 0,5  mL  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi ditambahkan  0,5  mL  HCl  2N  kemudian ditambahkan  1  –  2  tetes  reagen  dragendroff, apabila  menghasilkan  warna  jingga,  maka ekstrak positif mengandung alkaloid .
c. Pengujian saponin , minyak nilam  dipipet 0,5  mL  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi. Akuades yang sudah dihangatkan dimasukkan,  kemudian  dikocok  kuat-kuat dan diamkan selama 10 menit. Sampel positif
mengandung senyawa saponin apabila terbentuk busa dan tidak hilang selama waktu 15 menit setelah ditetesi HCl.
d.  Pengujian  tannin ,  minyak  nilam  dipipet sebanyak  0,5  mL  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi  kemudian  ditambahkan  1  –  2 mL air dan 2 tetes larutan FeCl 3 1%, apabila dihasilkan  warna  hijau  kebiruan,  maka ekstrak positif mengandung Tanin .
e.  Pengujian  polifenol , dengan  cara  minyak nilam  dipipet  0,5  mL  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi  ditambahkan  larutan  besi  (III) klorida,  apabila  terbentuk  warna  biru  hingga hitam maka disimpulkan ekstrak mengandung polifenol.
f.  Pengujian fenolik ,  dengan  cara  minyak nilam  dipipet  0,5  mL  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi  ditambahkan  pereaksi  FeCl 3 5% atau dikenal dengan uji fenol hidrokuinon. Hasil uji  positif dengan fenolik jika terbentuk warna hitam pada sampel. g . Pengujian triterpenoid / Steroid , minyak nilam  dipipet  0,5  mL  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi ditambahkan  satu tetes CH 3 COOH  anhidrat  dan  satu  tetes  H 2 SO 4 pekat. Terbentuknya warna biru sampai ungu menunjukkan  sampel  positif  mengandung senyawa Steroid sedangkan  warna  merah menunjukkan  sampel  positif  mengandung senyawa triterpenoid (Septiadi et al. , 2013).
Pengujian  aktivitas  antibakteri  metode difusi sumuran
a. Bagian  dasar  cawan  petri  dibagi menjadi  3  bagian  menggunakan  spidol
permanen  dan  penggaris,  lalu  masing- masing  cawan  petri  diberi  label  (jenis bakteri  -  asal  sampel  –  kontrol  positif  - pengulangan).
b. Suspensi bakteri digores dengan metode spread  plate menggunakan  lidi kapas  steril  keseluruh  permukaan  agar MHA.
c. Setiap  bagian  dari  cawan  petri  dibuat sumuran menggunakan cork borer steril.
d. Larutan  minyak atsiri nilam  dengan konsentrasi 100% dan Antibiotik Ciprofloxacin (kontrol  positif),  dipipet  50 µL  ke  dalam  masing-masing  lubang  pada MHA sesuai label pada cawan petri.
e. Tanpa  dibalik,  cawan  petri  dibungkus dengan  kertas  dan  diinkubasi  selama  24 jam pada suhu 37 ºC.
f. Pengamatan  dan  pengukuran  zona hambat  berupa  daerah  bening  yang terbentuk diamati dan dilakukan pengukuran menggunakan jangka sorong.
g. Hasilnya dicatat dalam satuan mm.

## Analisis hasil uji
Data  hasil  yang  didapatkan  dari  uji daya hambat minyak atsiri nilam selanjutnya diolah menggunakan software IBM SPSS 23 untuk dilakukan uji One-way ANOVA. Hasil uji One-way ANOVA,  bila  didapatkan  nilai signifikansi  p  <  0,05    dapat  disimpulkan bahwa minyak atsiri nilam memiliki pengaruh  terhadap  pertumbuhan  bakteri  uji. Dan  sebaliknya  bila  p  >  0,05  menunjukkan bahwa  minyak atsiri nilam  tidak  memiliki
pengaruh  terhadap  pertumbuhan  bakteri  uji. Uji aktivitas antibakteri kemudian
dilanjutkan dengan uji post-hoc menggunakan metode Tukey untuk mengetahui sampel minyak atsiri nilam yang memiliki perbedaan yang signifikan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Senyawa Fitokimia
Hasil pemeriksaan fitokimia menunjukkan  bahwa  minyak  nilam  asal Jambi  (“J”)  dan  minyak  nilam  asal  Aceh (“A”)  memiliki  senyawa  kimia  aktif  seperti yang ditunjukkan pada [tabel 1] berikut . Tabel 1. Hasil uji fitokimia minyak nilam “J” dan minyak nilam “A”
Keterangan: Positif   = terdapat senyawa aktif Negatif = tidak terdapat senyawa aktif
Kedua  minyak  nilam,  yaitu  minyak nilam “J”  dan  minyak  nilam  “A” mengandung senyawa  aktif, berupa alkaloid , saponin , fenolik , flavonoid , triterpenoid ,  dan glikosida namun  tidak  mengandung Tanin dan Steroid . Alkaloid merupakan  senyawa metabolit sekunder  yang  dapat  digunakan sebagai  antibakteri,  dan alkaloid merupakan senyawa  organik  terbanyak  ditemukan  di
No Senyawa aktif Hasil pengujian/Pemeriksaan minyak nilam “J” minyak nilam “A” 1 Alkaloid Positif Positif 2 Saponin Positif Positif 3 Tanin Negatif Negatif 4 Fenolik Positif Positif 5 Flavonoid Positif Positif 6 Triterpenoid Positif Positif 7 Steroid Negatif Negatif 8 Glikosida Positif Positif
alam.  Hampir  seluruh alkaloid berasal  dari daun-daun  dan  tersebar  luas  dalam  berbagai jenis  tumbuhan  (Evendi,  2017).  Kandungan senyawa alkaloid dapat  menghambat  kerja enzim  pada  sintesis  protein  bakteri.  Hal  ini dapat  mengakibatkan  metabolisme  bakteri terganggu. Alkaloid juga  dapat  merusak komponen   penyusun peptidoglikan pada sel      bakteri,  sehingga    lapisan  dinding    sel tidak    terbentuk    secara    utuh    dan menyebabkan  bakteri  mati (Sunawan et al. , 2018).
Saponin merupakan  senyawa metabolit sekunder  yang  bersifat  basa,  sehingga saponin berbentuk  buih  menyerupai  sabun yang  dapat  larut  pada  pelarut polar , mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri adalah  menurunkan  tegangan  permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas  atau  kebocoran  sel  dan mengakibatkan  senyawa intraseluler akan keluar  (Nuria  &  Faizatun,  2009).  Hal  ini dapat  menyebabkan sitoplasma bocor  keluar dari  sel  yang  mengakibatkan  kematian  sel. Agen  antimikroba  ini  yang  mengganggu membran sitoplasma bersifat  bakterisida (Ngajow et al. , 2013).
Kandungan fenolik bekerja  sebagai antibakteri  yaitu  dengan  mendenaturasi protein  sel.  Ikatan  hidrogen  yang  terbenttuk antara  fenol  dan  protein  mengakibatkan struktur  protein  menjadi  rusak.  Ikatan hidrogen tersebut akan mempengaruhi permeabilitas  dinding  sel  dan  membran
sitoplasma yang terganggu dapat menyebabkan ketidak seimbangan makromolekul  dan  ion  dalam  sel  sehingga menjadi lisis (Taufiq, 2015).
Kandungan flavonoid sebagai antibakteri karena mampu berinteraksi dengan  DNA  bakteri.  Hasil  interaksi  ini menyebabkan terjadinya kerusakan permeabilitas  dinding  sel  bakteri,  mikrosom, dan  lisosom. Flavonoid juga  melepaskan energi tranduksi terhadap membran sitoplasma bakteri dan menghambat motilitas dari bakteri (Sabir, 2003).
Mekanisme  kerja  senyawa triterpenoid sebagai  zat  antibakteri  diduga  melibatkan kerusakan  membran  oleh  senyawa  lipofilik. Triterpenoid dapat  bereaksi  dengan  porin (protein  transmembran)  pada  membran  luar dinding  sel  bakteri,  membentuk  ikatan polimer  yang  kuat  dan  merusak  porin, mengurangi permeabilitas dinding sel bakteri sehingga  sel  bakteri  kekurangan  nutrisi, pertumbuhan  bakteri  terhambat  atau  mati (Amalia et  al. ,  2014;  Haryati  dan  Saleh, 2016).
Kandungan glikosida berperan  dalam menghambat    pertumbuhan    bakteri  dengan cara  berpenetrasi  ke dalam  dinding  sel  dan merusak    komponen    dinding    sel    bakteri. Kandungan  senyawa glikosida akan  terikat pada    suatu    gula.    Mekanisme    kerja antibakteri  senyawa glikosida yaitu  dengan cara    menghambat    fungsi    membran    sel dengan    membentuk  senyawa    kompleks
dengan  protein  ekstraseluler sehingga dapat merusak    membran  sel  dan  diikuti  dengan keluarnya  senyawa intraseluler (Sunawan et al. , 2018; Supriatno dan Rini, 2018).

## B. Aktivitas antibakteri
Suatu zat dinyatakan memiliki aktivitas antibakterial  adalah  bila  zat  dimaksud  untuk membunuh  atau  mengurangi  efek  berbahaya dari  bakteri patogen khususnya.  Minyak
nilam  “J”  dan  “A”  menunjukkan  zona hambat  kepada  dua  dari  lima  bakteri  uji. Zona  hambat  yang  terdapat  pada  uji  minyak nilam “J” dan “A” terhadap bakteri S. aureus dan P. aeruginosa. ditunjukkan pada [gambar 1] dan [gambar 2].
Gambar 1. Zona hambat minyak nilam P. cablin terhadap bakteri S. aureus.
Gambar 2. Zona hambat minyak nilam P. cablin terhadap bakteri P. aeruginosa

## Gambar 3. Grafik rata-rata diameter Zona Hambatan Pertumbuhan Bakteri
Hasil  keseluruhan  aktivitas  antibakteri minyak nilam  “J” dan “A” terhadap E. coli,
S.  typhi,  S.  aureus,  S.  epidermidis ,  serta P. aeruginosa ,  terlihat  pada    rata-rata  zona hambat  yang  terbentuk  pada  cawan  petri seperti yang  tersaji pada [gambar 3].
Berdasarkan hasil pengukuran diameter  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri yang  didapat  [gambar  3],  didapatkan  hasil analisis  bahwa  pada E. coli , S. typhi, dan S. epidermidis tidak  membentuk  zona  hambat.
Adapun  pada  bakteri S.  aureus dan P. aeruginosa membentuk zona hambat. Rerata diameter  zona  hambat S.  aureus didapatkan hasil  pada  minyak  nilam  “J”  (24,55  mm) dan minyak nilam “A” (20,22 mm). Pada P. aeruginosa didapatkan  hasil  berupa  zona hambat pada minyak nilam  “J” (21,58 mm) dan minyak nilam “A” (18,77 mm). Minyak nilam “J” memiliki zona hambat yang lebih besar  dibandingkan  dengan  minyak  nilam
“A”.  Adapun  pada  bakteri E.  coli,  S.  typhi dan S.  epidermidis minyak  nilam  “J” maupun minyak nilam “A” tidak menghasilan zona hambat.
Pada  penelitian  ini,  kontrol  positif yang digunakan yaitu antibiotik Ciprofloxacin 5  µg  mampu  membentuk diameter  zona  hambat  dengan  rata-rata (33,73  mm)  pada bakteri  E.  coli ,  rata-rata (38,34  mm)  pada  bakteri S.  typhi ,  rata-rata (38,32) mm pada bakteri S. aureus , rata-rata (24,08 mm) pada bakteri S. epidermidis dan rata-rata  (34,55  mm)  pada P.  aeruginosa . Manfaat  adanya  kontrol  positif  adalah sebagai  pembanding  bahwa  bakteri  yang diuji merupakan bakteri yang dapat dihambat  atau  merupakan  bakteri  sensitif terhadap antibiotik yang diberikan.
Zona  hambat  yang  terbentuk  dalam penelitian  ini  dapat  dibandingkan  dengan zona  hambat  menurut  CLSI  (2016).  Jika

## BEBERAPA SPESIES BAKTERI UJI
zona hambat yang dibentuk ≤ 13 mm maka bakteri  dikatakan  resisten  terhadap  bahan uji,  jika  zona  hambat  yang  dibentuk  14-16 mm  maka  bakteri  dikatakan  intermediet terhadap  bahan  uji,  dan  jika  zona  hambat yang  dibentuk  ≥  17  mm  maka  bakteri dikatakan sensitif terhadap bahan uji.
Berdasarkan  kriteria  di  atas  zona hambat  yang  terbentuk  di  sekitar  sumuran yang berisi minyak nilam dapat dikategorikan  bahwa  bakteri S.  aureus dan P.  aeruginosa sensitif  terhadap  minyak nilam “J” dan “A”. Dengan kata lain minyak nilam  “J”  dan  “A”  menunjukkan  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap S.  aureus dan P. aeruginosa.
Pada prinsipnya, antibakteri dikelompokkan menjadi dua, yaitu bakteriostatik dan bakterisidal .  Prinsip bakteriostatik adalah  senyawa  antibakteri hanya  mampu  menghambat  pertumbuhan bakteri  jika  pemberian  senyawa  terus dilakukan,  tetapi  jika  dihentikan  atau  habis, maka pertumbuhan dan perbanyakan bakteri akan  kembali  aktif  yang  ditandai  dengan berkurangnya diameter zona hambat.
Adapun  prinsip  kerja  antibakteri  yang bekerja  secara bakterisidal adalah  jika diameter  zona  hambat  meningkat  yang disebabkan  karena  senyawa  antibakteri dapat membunuh dan menghentikan aktivitas fisiologis bakteri, walaupun pemberian  senyawa  antibakteri  dihentikan (Mamahit, 2016).
Adanya  perbedaan  diameter  dapat dipengaruhi  oleh  jenis  bakteri  uji  yang digunakan. Setiap bakteri memiliki kepekaan yang  berbeda-beda  terhadap sampel  dalam  hal  ini  senyawa  antibakteri dimana  suatu  bakteri  akan  membentuk resistensi  dalam  dirinya  yang  merupakan mekanisme alamiah dalam mempertahankan hidupnya (Nurhayati, 2011).
Data  hasil  yang  didapatkan  dari  uji daya hambat minyak atsiri nilam selanjutnya  diolah  menggunakan software IBM SPSS 23 untuk dilakukan uji One-way ANOVA.  Hasil  uji One-way ANOVA mengenai aktivitas antibakteri minyak atsiri nilam  didapatkan nilai signifikansi  p < 0,05 sehingga  berdasarkan  hasil  tersebut  dapat disimpulkan  bahwa  minyak atsiri nilam memiliki  pengaruh  terhadap  pertumbuhan bakteri E.  coli,  S.  typhi,  S.  aureus,  S. epidermidis dan P. aeruginosa.
Uji  aktivitas  antibakteri  kemudian dilanjutkan dengan uji post-hoc menggunakan metode Tukey untuk mengetahui sampel yang memiliki perbedaan  yang  signifikan.  Hasil  uji post- hoc dapat  dilihat  pada  tabel  2.  Hasil  uji aktivitas  antibakteri  minyak  nilam  terhadap pertumbuhan  bakteri  uji  menunjukkan perbedaan  antara  minyak  nilam  “J”  dan minyak nilam “A” berbeda nyata.
Tabel 2. Hasil uji Post-hoc metode Tukey diameter zona hambat pertumbuhan bakteri
Keterangan:  huruf  yang  berbeda  dibelakang  angka  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan  berdasarkan  uji post-hoc metode Tukey dengan  p <0,05. Huruf yang sama menunjukkan hasil tidak signifikan p >0,05 .
Berdasarkan  hasil  pada  tabel  2,  hasil uji minyak nilam “J” dan minyak nilam “A” terhadap E. coli, S. typhi dan S. epidermidis tidak  menghambat  bakteri dan  tidak berbeda.  Hasil  uji  minyak  nilam  “J”  dan minyak  nilam  “A”  terhadap S.  aureus menghambat  bakteri  namun  tidak  berbeda secara  signifikan.  Adapun  hasil  uji  minyak nilam “J” dan minyak nilam “A” terhadap P. aeruginosa menunjukkan menghambat bakteri dan berbeda secara signifikan.
Berdasarkan  senyawa fitokimia yang dimiliki oleh minyak nilam, maka kemampuan  antibakteri  terhadap S.  aureus dan P.  aeruginosa kemungkinan  berasal dari alkaloid , saponin , fenolik , flavonoid , triterpenoid ,  dan glikosida yang  terdapat pada  minyak  nilam.  Seperti  yang  telah dijelaskan  sebelumnya  bahwa  ke  enam senyawa tersebut dapat menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara menghambat  kerja    enzim  pada  sintesis protein;  merusak      komponen      penyusun peptidoglikan pada   sel   bakteri, sehingga lapisan dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh;    menurunkan  tegangan  permukaan sehingga mengakibatkan naiknya
permeabilitas  atau  kebocoran  sel  dan mengakibatkan  senyawa intraseluler akan keluar; mendenaturasi protein sel; mengganggu  permeabilitas  dinding  serta membran  sel  sehingga  sel  kekurangan nutrisi  atau  sel  menjadi  lisis;  berinteraksi dengan  DNA  bakteri  sehingga  proses ekspresi gen terganggu; menghambat motilitas bakteri.
Dari  lima  jenis  bakteri  yang  diuji, hanya  dua  bakteri  saja  yang  bisa  dihambat oleh  kedua  minyak  nilam,  yaitu S.  aureus dan P.  aeruginosa .  Kedua  jenis  bakteri  ini adalah  bakteri  yang  seringkali  berada  serta menginfeksi  kulit  dan  luka  terbuka,  dengan demikian akan lebih mudah mengaplikasikan  minyak  nilam  dengan  cara mengoleskan  langsung  pada  kulit  yang terinfeksi. Selain itu, pada masyarakat, tidak dikenal  adanya  minum  minyak  nilam.  Hal ini juga yang kemungkinan karena tidak ada efek  atau  pengaruh  minyak  nilam  terhadap bakteri yang berasal dari saluran pencernaan yaitu E. coli dan S. typhi .
Hasil  dalam  penelitian  ini,  aktivitas antibakteri  minyak  nilam  menunjukkan bahwa,  hasil  diameter  zona  hambat  dari
Sampel Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm) E. coli S. typhi S. aureus S. epidermidis P. aeruginosa Minyak  nilam “J” 6,00 a 6,00 a 24,55 a 6,00 a 21,58 a Minyak nilam „‟A” 6,00 a 6,00 a 20,22 a 6,00 a 18,77 b Kontrol + 33,73 b 38,34 b 38,32 b 24,08 b 34,55 c

## BEBERAPA SPESIES BAKTERI UJI
kedua  minyak  nilam  lebih  baik  dalam menghambat S.  aureus dan P.  aeruginosa dibandingkan E.  coli,  S.  typhi  dan  S. epidermidis .  Perbedaan  kepekaan  bakteri terhadap antibakteri dapat disebabkan karena  beberapa  hal,  perbedaan  zat  dan senyawa  penyusun  sel  bakteri,  struktur dinding  sel,  jumlah peptidoglikan ,  jumlah lipid,  dan  aktivitas  enzim  (Brooks,  2010; Poeloengan & Praptiwi, 2010).

## KESIMPULAN
Berdasarkan aktivitas antibakteri minyak nilam ( Pogostemon cablin ) terhadap beberapa bakteri patogen dapat disimpulkan bahwa:
1. Minyak nilam asal Jambi dan minyak nilam  asal  Aceh  menunjukkan  aktivitas antibakteri  terhadap S.  aureus, dan P.
aeruginosa, dan  tidak  terhadap E.  coli,
S. typhi, dan S. epidermidis.
2. Minyak nilam asal Jambi menunjukkan  hasil  lebih  baik  sebagai antibakteri  pada S.  aureus dan P. aeruginosa dibandingkan minyak nilam asal Aceh.

## Saran
1. Pada  penelitian  selanjutnya  perlu dilakukan  uji  dengan  metode  dilusi konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM) dan  Kosentrasi  Bunuh  Minimum  (KBM) minyak  nilam  asal  Jambi  dan  minyak nilam  asal  Aceh  terhadap  beberapa bakteri patogen lainnya.
2. Pada  penelitian  selanjutnya  agar dilakukan pengujian lebih lanjut aktivitas antibakteri  minyak  nilam  secara  in  vivo pada  hewan  percobaan  yang  diberi infeksi bakteri pada kulit.

## DAFTAR PUSTAKA
Afdhaliah  N.  2017.  Uji  aktivitas  minyak daun  nilam  ( Pogostemon  cablin Benth)  terhadap  penyembuhan  luka sayat  pada  mencit  ( Mus  musculus ).
Thesis .  Universitas  Islam  Negeri Alauddin Makassar.
Aisyah Y, Hastuti P, Sastrohamidjojo H, et al.  2008.  Komposisi  kimia  dan  sifat antibakteri minyak nilam ( Pogostemon cablin . Benth).
Majalah  Farmasi  Indonesia, 19: 151-6.
Amalia  A,  Dwiyanti  RD  &  Haitami  H.
2016.  Daya  hambat  NaCl  terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus .
Medical Laboratory Technology
Journal , 2: 42-5.
Amalia  S,  Wahdaningsih  S,  Untari  EK.
2014.  Uji  aktivitas  antibakteri  fraksi n-Heksan kulit  buah  naga  merah ( Hylocereus  polyrhizus  Britton  & Rose ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923. Jurnal Fitofarmaka Indonesia, 1.
Amin S. 2015. Analisis minyak atsiri umbi bawang putih ( Allium Sativum Linn.) menggunakan kromatografi gas spektrometer massa. Jurnal
Kesehatan  Bakti  Tunas  Husada, 11:
37-45.
Anggita A, Fakhrurrazi F, Harris A. 2018. Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak etanol  daun  putri  malu  ( Mimosa pudica ) terhadap bakteri Pseudomonas  aeruginosa . Jurnal Ilmiah Mahasiswa Veteriner, 2: 411-
8.
Brooks  GF.  2010. Jawetz,  Melnick,  &
Adelberg's
medical
microbiology/Geo.  F.  Brooks ...[et al.]:  New  York;  Chicago:  McGraw Hill Medical.
CLSI.  2016. Performance  Standards  for Antimicrobial  Susceptibility  Testing. 26th  ed .  Wayne:  Clinical  and
Laboratory  Standards  Institute.  32 pp.
Darwis  A.  2017.  Daya  hambat  ekstrak etanol  daun  sirih  hijau  ( Piper  betle Linn)  dan  daun  sirih  merah  ( Piper crocatum Ruiz  &  Pav)  terhadap pertumbuhan Salmonella typhi . Thesis. Universitas  Muhammadiyah Semarang.
Dongare P, Dhande S, & Kadam V. 2014.
A Review on Pogostemon  patchouli.
Research Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, 6: 41.
Dzakwan  M  &  Budi  US.  2012.  Uji aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri daun  nilam  ( Pogostemon  cablin , Benth) terhadap Staphylococcus aureus dan Eschericia  coli . Jurnal Biomedika 1.
Evendi  A.  2017.  Uji  fitokimia  dan  anti bakteri ekstrak daun salam ( Syzygium polyanthum ) terhadap bakteri Salmonella  typhi dan Escherichia coli secara in vitro. MMLTJ ( Mahakam Medical Laboratory Technology Journal ), 2: 1-9.
Fauzi  M.  2017.  Karakterisasi  dan  uji aktivitas  antimikroba  minyak  atsiri daun  dan  batang  nilam  ( Pogostemon cablin Benth). Jurnal  Ilmiah  Bakti Farmasi, 2: 41-8.
Flemming  H-C,  dan  Wingender  J.  2010. The  biofilm  matrix.  Nature  reviews microbiology 8: 623.
Haryati  NA  &  Saleh  C.  2016.  Uji toksisitas  dan  aktivitas  antibakteri ekstrak  daun  merah  tanaman  pucuk merah ( Syzygium Myrtifolium Walp.) terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia  coli.Jurnal Kimia Mulawarman, 13.
Mamahit P. 2016. Efektivitas ekstrak daun jambu  mawar  ( Syzigium  jambos L. alston)  menghambat  pertumbuhan Streptococcus Mutans secara in vitro. PHARMACON , 5
Melliawati  R.  2015.  Escherichia  coli dalam kehidupan manusia.
BioTrends , 4: 10-4.
Ngaisah  S.  2010.  Identifikasi  dan  uji aktivitas  antibakteri  minyak  atsiri daun  sirih  Merah  ( Piper  crocatum Ruiz & Pav.) asal Magelang. Skripsi . Universitas Sebelas Maret Surakarta. Ngajow M, Abidjulu J, & Kamu VS. 2013.
Pengaruh  antibakteri  ekstrak  kulit batang  matoa  ( Pometia  pinnata ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus secara  in  vitro. Jurnal  Mipa ,
2: 128-32.
Nugraheni  R  &  Winarni  S.  2012.  Infeksi nosokomial  di  RSUD  Setjonegoro Kabupaten Wonosobo. Media Kesehatan  Masyarakat  Indonesia , 11: 94-100.
Nurhayati N. 2011. Uji aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  ubi jalar  putih  ( Ipomoea  batatas L.) cultivar  umbi  putih  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa . Thesis. Universitas  Islam  Negeri  Alauddin Makassar.
Nuria  MC  &  Faizatun  A.  2009.  Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol daun  jarak  pagar  ( Jatropha  Curcas L)  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus ATCC  25923, Escherichia coli ATCC  25922,  dan Salmonella typhi ATCC 1408. Mediagro, 5.
Poeloengan  M  &  Praptiwi  P.  2010.  Uji aktivitas  antibakteri  ekstrak  kulit buah manggis ( Garcinia mangostana
Linn). Media Penelitian dan
Pengembangan Kesehatan 20.
Pribadi ER. 2015. Pasokan dan permintaan tanaman  obat  Indonesia  serta  arah penelitian  dan  pengembangannya.
Perspektif, 8: 52-64.
Sabir  A.  2003.  Pemanfaatan  flavonoid  di bidang  kedokteran  gigi. Majalah Kedokteran Gigi (Dent J) : 81-7.
SapTaningtyas  R,  Darmawati  S  &  Dewi SS. 2015. Haemagglutination activity of Salmonella typhi Flagellin Protein based  on  Abo  Blood  Group. LPPM
Universitas Muhammadiyah Semarang , 7: 38-44. Satyaningsih  A,  Munandar  S.  2017.
Gambaran higiene sanitasi dan keberadaan Escherichia  coli dalam jajanan  kue  basah  di  Pasar  Kota Kendari  Tahun  2016. Jurnal  Ilmiah Mahasiswa  Kesehatan  Masyaraka t,
2.
Septiadi  T,  Pringgenies  D  &  Radjasa  OK. 2013.  Uji  fitokimia  dan  aktivitas antijamur  ekstrak  teripang  keling
( Holoturia atra ) dari pantai Bandengan  Jepara  terhadap  jamur Candida albicans . Journal of Marine Research, 2: 76-84.
Sunawan  S,  Kurnia  T  &  Asari  H.  2018.
Pengaruh  ekstrak  etanol  biji  ganitri ( Elaecarpus sphaericus Schum.) terhadap pertumbuhan bakteri
penyebab  disentri  basiler  secara  in vitro. Jurnal Biosense, 1: 15-23.
Supriatno  S  &  Rini  AA.  2018.  Uji fitokimia  dan  antibakteri  ekstrak etanol buah kawista ( Limonia
acidissima L.) pada bakteri Escherichia coli . Presented at Prosiding Seminar Nasional Pendidikan Biologi. Swamy  M  &  Sinniah  U.  2015.  A comprehensive review on the phytochemical constituents and pharmacological activities of Pogostemon cablin Benth.: an aromatic medicinal plant of industrial importance. Molecules , 20: 8521-47. Taufiq  S.  2015.  Uji  aktivitas  antibakteri ekstrak  etanol  biji  buah  pepaya ( Carica papaya L.) terhadap Escherichia  coli dan Salmonella typhi . Jurnal  Ilmiah  Universitas Islam Bandung, 1: 8.
Wang  H,  Hecht  S,  Kline  D,  et  al.  2019.
Staphylococcus aureus and methicillin resistance detection directly from Pediatric samples using PCR  assays  with  differential  cycle threshold values for corroboration of methicillin  resistance. J  Microbiol Methods .
Wangkanusa  D.  2016.  Uji  aktivitas antibakteri dari ekstrak daun prasman ( Eupatorium triplinerve Vahl.)
terhadap
pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa . Jurnal Ilmiah  Farmasi  Universitas  Sam Ratulangi Manado, 5: 203-10.
Widiyastuti Y, Adi MBS, Widodo H, et al. 2011. 100  Top  Tanaman  Obat
Indonesia:  Kementerian  Kesehatan
RI  -  Balai  Besar  Litbang  Tanaman Obat Dan Obat Tradisional .