## Skrining Aktivitas Antibakteri Dan Identifikasi Sponge Dari Teluk Kupang
Agus Trianto 1,2 *, Ni Komang Tri Utami 1 , Ocky Karna Radjasa 1,2 Isai Yusidharta 3 , Wiratno 3
1 Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH. Kampus UNDIP Tembalang, Semarang 50275
2 Laboratorium Marine Natural Product, UPT Lab terpadu, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Soedarto, SH. Kampus UNDIP Tembalang, Semarang 50275
3 BALAI BESAR KSDA Nusa Tenggara Timur Jl. Perintis Kemerdekaan, Kelapa Lima, Kota Kupang, Nusa Tenggara Timur Email:agustrianto.undip@gmail.com

## Abstract
Recently,  many  research  proved  that  bacteria  Escherichia  coli  and  Staphylococus aureus have resistant to antibiotics, called Multi Drug Resistance (MDR). The bacteria cause various diseases both in humans and animals. Exploration and development of new antibiotics is  needed,  one  which  is  derived  from  a  sea  sponge.  This  research  aims  to  determine  the potential  of  antibacterial  sponge  extracts  from  the  waters  of  Kupang,  East  Nusa  Tenggara against E. coli and S. aureus MDR, as well as being able to identify the sponge. Maceration method was employed on extraction of the sponges, then the extract were tested against E. coli and S. aureus.  The extracts content of sponge varied from  0.4% to 5,19%.  Anti bacterial test  showed that the sponge K14-52 has the highest inhibition zone of 10,43 ± 0,26 mm and 9,38 ± 0,57 mm and against the E. coli and S. Aureus, respectively, at a concentration of 500 ug/disk. Based  on  macroscopic  and  microscopic  anayses,  the  K14-52  sponge  is  identified    as Rhabdastrella globostellata.  a Demospongia sponge. The sponge has special characteristic i.e. globular shape with large oscula on the top of the sponge and ostia along the surface. The sponge  also  characterized  with  makrosclera  monoaxon  spikule  (hastate  oxea,  centrotylote oxea, oxea fusiform gyrus) and mikrosclera tertaxon oxyaster spikule.
Keywords: Antibacterial, Sponges, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

## Abstrak
Saat  ini  banyak  ditemukan  bakteri Escherichia  coli dan Staphylococus  aureus yang resisten terhadap antibiotik atau disebut Multi Drugs Resistance (MDR). Bakteri tersebut dapat menimbulkan  berbagai  penyakit  baik  pada  manusia  maupun  hewan.  Eksplorasi  dan pengembangan sumber antibiotik baru sangat diperlukan, salah satunya yang berasal dari sponge laut. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui potensi antibakteri ekstrak sponge dari Perairan  Kupang,  Nusa  Tenggara  Timur  terhadap  bakteri E.  coli dan S.  aureus MDR,  serta mampu  mengetahui  jenis  sponge.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  metoda  maserasi  kemudian ekstrak  diuji  terhadap  bakteri  patogen.  Uji  antibakteri  menunjukkan  bahwa  sponge  K14-52 memiliki  potensi  antibakteri  paling  tinggi  dengan  zona  hambat  sebesar  10,43±0,26  mm terhadap bakteri E. coli dan 9,38±0,57 mm terhadap bakteri S. aureus pada konsentrasi 500 µg/disk.  Sponge K14-52 diidentifikasi sebagai Rhabdastrella globostellata berdasarkan analisis secara  makroskopis  dan  mikroskopis.  Ciri  khas  sponge  tersebut  adalah  mempunyai  bentuk bulat dengan ostia yang tersebar pada permukaan dan satu Oskula besar pada bagian atas sponge.  Secara mikroskopis sponge tersebut memiliki makrosklera monoaxon spikula ( hastate oxea, centrotylote oxea, fusiform oxea ) dan mikrosklera tertaxon spikula Oxyaster .
Kata kunci: Antibakteri, Sponge, Identifikasi Sponge

## PENDAHULUAN
Saat  ini  banyak  ditemukan  bakteri Stapylococcus aureus dan Escherichia coli yang  resisten  terhadap  antibiotik  atau biasa disebut Multi Drugs Resistance (MDR) (Satari,  2012).    Bakteri S.  aureus dan E.coli menyebabkan  berbagai  penyakit  pada manusia  dan  hewan  ternak.  Berubahnya sifat
pathogen menjadi MDR menyebabkan obat yang biasa digunakan menjadi tidak efektif, sehingga tidak dapat menanggulangi
penyakit tersebut (Widagdo et al ., 2002).  Resistensi pathogen timbl akibat penggunaan obat yang tidak tepat,  naik  dosis  maupun  jenisnya  (Pastra et al. , 2012).  Pencarian obat baru dengan mode  of  action yang  baru  adalah  salah satu solusi untuk mengatasi permasalahan pathogen MDR. Banyak sumber daya laut dikembangkan  untuk  mencari  antibakteri alami dari sponge (Mehbub et al., 2016)
Sponge adalah salah satu biota laut yang  paling  potensial  sebagai  sumber senyawa  antibakteri.    Senyawa  bioaktif sponge dihasilkan oleh metabolit sekunder yang dimanfaatkan sebagai bahan obat- obatan,  misalnya  antibakteri,  antitumor, antikanker,  antijamur,  anti-inflamantori, sitotoksik, antimikroba, antivirus, antimalaria, antifauling, dan immunosupresif (Mayer et al., 2009). Tulisan ini  akan  membahas  eksplorasi  sponge sebagai sumber bahan antibakteri.

## MATERI DAN METODE

## Koleksi Spesimen Sponge
Sponge  yang  dikoleksi  dari  perairan Kupang,  Nusa  Tenggara  Timur  dengan metoda  SCUBA  Diving.  Sponge  disimpan dalam  coolbox  yang  diberi  es  hingga dibawa ke laboratorium untuk selanjutnya disimpan  dalam  freezer  hingga  proses ekstraksi (Trianto et al., 2011).

## Ekstraksi Sponge
Sebelum melakukan ekstraksi, sampel dibersihkan  dari  kotoran  yang  menempel, kemudian  dipotong  kecil-kecil.  Ekstraksi dilakukan  dengan  metode  maserasi menggunakan methanol. Proses
perendamanan  dilakukan  selama  24  jam dengan  tiga  kali  ulangan  pada  suhu ruangan.  Hasil  ekstraksi  disaring  dan selanjutnya  dipekatkan  menggunakan Rotary  Evaporator pada  suhu  37 o C. Ekstrak  yang  tertinggal  dalam  labu dipindahkan  kedalam  vial  dan  ditimbang (Trianto et al. , 2014).

## Kultur Bakteri Uji
Bakteri uji yaitu bakteri E. coli dan S. aureus dikultur  dalam  media  Zobell  2216E dalam  media  miring.  Bakteri  uji  dikultur kembali dalam media Zobell cair untuk uji antibakteri  terhadap  ekstrak  (Radjasa et al ., 2006).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan dalam  media  Zobell  padat  selama  2x24 jam. Uji antibakteri pada 11 sampel ekstrak kasar sponge terhadap bakteri E. coli dan
S. aureus pada konsentrasi 500 µg/disk, 250 µg/disk, 100 µg/disk, dan 50 µg/disk.  Ektsrak yang  diaplikasikan  sebanyak  10  µl/disk. Pengukuran zona hambat pada jam ke 24 (Radjasa, 2006).

## Identifikasi Sponge
Identifikasi  sponge  dilakukan  pada sponge yang memiliki aktivitas antibakteri. Identifikasi makroskopis berdasarkan morfologi dan tekstur sponge yang meliputi ukuran,  oskula,  konsistensi,  permukaan tubuh  dan  warna  sponge.  Sedangkan identifikasi mikroskopis meliputi bentuk dan jenis  spikula  sponge  (Hooper,  2003). Preparat  disiapkan  dengan  memotong sedikit  sampel  dan  dilarutkan  dengan sodium hypoklorit. Materi dibilas menggunakan  aquades  2-3  kali  untuk menghilangkan  sisa  kaporit,  selanjutnya spikula  diamati  dengan  mikroskop  pada perbesaran 100 x dan 400 x (Khoshkhoo et al., 2012).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi
Ekstraksi  berbagai  jenis  sampel sponge  menggunakan  metode  maserasi, yaitu  melakukan  perendaman  sampel
sponge dengan pelarut metanol selama 48 jam.  Berat  sampel  dan  ekstrak  yang dihasilkan ditampilkan pada Tabel 1.
Berdasarkan data tersebut, diketahui bahwa
sampel sponge
K14-52
menghasilkan  rendemen  ekstrak  tertinggi yaitu  5,19  %  dari  berat  basah,  sedangkan rendemen  terkecil  pada  sampel  sponge K14-35  yaitu  hanya  sebesar  0,48  %  dari berat basahnya.

## Uji Antibakteri Ekstrak Kasar
Ekstrak  kasar  sponge  kemudian  diuji bioaktvitasnya terhadap bakteri E. coli dan S.  aureus .  Hasil  uji  antibakteri  menunjukan
ekstrak  kasar  semua  jenis  sponge tersebut mampu menghambat pertumbuhan koloni bakteri uji. Hasil pengukuran diameter zona hambat  pada  pengamatan  ke-24  jam ditampilkan pada Ttabel 2 dan 3.
Hasil  uji  ekstrak  kasar  terhadap bakteri S.  aureus menunjukkan  bahwa sampel K14-52 menghasilkan zona hambat tertinggi  sebesar  9,38±0,12  mm  pada konsentrasi  500  µg/disk,  sedangkan  yang terendah  dihasilkan  oleh  sponge  K14-45 sebesar  0,72  ±  1,01  mm  pada  konsentrasi yang  sama.  Hasil  pengukuran  diameter zona  hambat  ekstrak  kasar  berbagai sponge  terhadap  bakteri E.  coli dan S. aureus .
Tabel 1. Berat Sampel dan Ektrak Kasar Sponge
No. Kode Sampel Sponge Berat Basah Sampel (gr) Berat Ekstrak Kasar (gr) Rendemen Ekstrak (%) 1. K-14-01 5.27 0.11 2.09 2. K-14-03 9.08 0.18 1.98 3. K-14-21 11.30 0.57 5.04 4. K-14-33 47.63 1.65 3.46 5. K-14-35 47.60 0.23 0.48 6. K-14-40 49.97 1.87 3.74 7. K-14-45 12.25 0.38 3.10 8. K-14-46 18.14 0.56 3.09 9. K-14-47 38.21 1.24 3.25 10. K-14-49 12.45 0.10 0.80 11. K-14-52 22.36 1.16 5.19 Tabel 2 . Diameter Zona Hambat Ekstrak Kasar Sponge terhadap Bakteri E. coli Kode Sampel Diameter Zona Hambatan E. coli (mm) 500 µg/disk 250 µg/disk 100 µg/disk 50 µg/disk K-14-01 2,22 ± 0,99 2,92 ± 0,07 1,37 ± 1,93 2,23 ± 0,38 K-14-03 2,73 ± 0,61 2,65 ± 0,12 2,67 ± 0,90 3,23 ± 0,38 K-14-21 1,97 ± 0,19 1,22 ± 1,72 1,00 ± 1,41 3,03 ± 0,05 K-14-33 2,70 ± 0,28 2,75 ± 0,31 2,27 ± 0,09 1,22 ± 1,72 K-14-35 5,28 ± 1,86 4,10 ± 0,05 2,60 ± 0,94 2,52 ± 0,97 K-14-40 2,83 ± 0,85 1,90 ± 0,09 0,68 ± 0,97 0,70 ± 0,99 K-14-45 2,88 ± 1,67 3,40 ± 0,94 2,22 ± 1,11 3,02 ± 0,87 K-14-46 2,68 ± 0,78 1,45 ± 2,05 1,30 ± 1,84 1,17 ± 1,65 K-14-47 3,43 ± 1,98 2,43 ± 0,42 2,83 ± 1,60 1,83 ± 0,24 K-14-49 1,37 ± 1,93 1,45 ± 2,05 2,38 ± 0,26 3,68 ± 1,11 K-14-52 10,43 ± 0,24 8,57 ± 0,19 6,32 ± 0,26 4,82 ± 0,07
Keterangan :  - Rata-rata ± Standar Deviasi
- Data tersebut telah dikurangi diameter paper disk sebesar 5 mm

## Identifikasi Sponge
Sponge    K14-52  berwarna  kuning- oranye,  bentuk  tubuh  globular  dengan permukaan  sponge  yang  kasar.  Ostia tampak  jelas  tersebur  tidak  beraturan pada permukaan.
Sponge
untuk mempunyai konsistensi yang keras (incompressible). Berdasarkan pengamatan
preparat  spikula,  ditemukan  dua  jenis spikula  yaitu  makroskelra  dan  mikroskelra. Jenis  makrosklera  yang  ditemukan  yaitu hastate  oxea,  centrotylote  oxea,  dan fusiform  oxea,  merupakan  monoaxon spikula berbentuk spikula memanjang dan ada yang agak melengkung dengan ujung runcing di kedua ujungnya. Sedangkan
Tabel 3 . Diameter Zona Hambat Ekstrak Kasar Sponge terhadap Bakteri S. aureus.
Kode Sampel Diameter Zona Hambatan S. aureus (mm) 500 µg/disk 250 µg/disk 100 µg/disk 50 µg/disk K-14-01 2,22 ± 0,92 2,92 ± 0,07 1,37 ± 2,23 2,23 ± 0,38 K-14-03 2,73 ± 0,61 2,65 ± 0,12 2,67 ± 0,90 3,23 ± 0,38 K-14-21 1,97 ± 0,19 1,22 ± 1,72 1,00 ± 1,41 3,03 ± 0,05 K-14-33 2,70 ± 0,28 2,75 ± 0,31 2,27 ± 0,09 1,22 ± 1,72 K-14-35 3,52 ± 0,08 4,75 ± 4,45 2,77 ± 1,41 1,68 ± 0,35 K-14-40 1,02 ± 1,44 2,47 ± 0,05 0,00 ± 0,00 0,00 ± 0,00 K-14-45 0,72 ± 1,01 0,98 ± 1,39 1,83 ± 0,01 3,00 ± 0,05 K-14-46 2,30 ± 0,71 2,70 ± 0,05 1,85 ± 2,62 2,57 ± 0,47 K-14-47 3,38 ± 0,73 2,57 ± 0,94 1,88 ± 0,16 2,07 ± 0,14 K-14-49 2,45 ± 0,12 2,53 ± 0,05 3,45 ± 0,78 4,78 ± 1,11 K-14-52 9,38 ± 0,12 7,73 ± 0,57 6,45 ± 0,07 4,57 ± 0,14 Keterangan:  -  Rata-rata ± Standar Deviasi - Data tersebut telah dikurangi diameter paper disk sebesar 5 mm
(a) (b) (c) (d) (e)
Gambar 1 . Foto sponge K14-52 (a), mikrosklerit (b) dan makroskerit (c-e). makrosklerit (c-e). b. Tetraxon ( Oxyasters ) c.  Monoaxon spikula Hastate oxea , d. Centrotylote oxea , e.
Fusiform oxea. Foto mikroskelarit diambil pada perbesaran 100x dan makrosklerit dengan perbesaran 40x.
yang  mikroskela  yang  ditemukan  yaitu oxyaster,  masuk  ke  dalam  jenis  tetraxon spikula berbentuk bulat dengan beberapa ujung runcing yang mengelilingi sisi-sisinya. Hasil  pengamatan  makrosklera,  dapat dilihat  pada  Gambar  10  dan  mikrosklera pada Gambar 11.
Spikula  penyusun  sponge  K14-52 mengandung  silikat  atau  seperti  kaca bukan kapur sehingga tidak mudah hancur pada  saat  dilarutkan  pada  larutan pemutih.
Ekstraksi  menggunakan  metanol menghasilkan prosentase rendemen ekstrak  yang  berbeda  pada  tiap  sampel. Rendemen ekstrak tertinggi dihasilkan oleh sampel sponge  K14-52 yaitu sebesar 5,19 % dari  berat  basah  sampel  sebesar  22,36 gram. Sedangkan yang rendemen ekstrak terendah  dihasilkan  oleh  sponge    K14-35 yaitu  sebesar  0,48  %  dari  berat  basah sampel sebesar 47,60 gram.
Hasil  pengamatan  zona  hambat setelah  24  jam  inkubasi  menunjukkan bahwa  seluruh  ekstrak  kasar  yaitu  11 sampel ekstrak kasar yang diuji mempunyai kemampuan  menghambat  pertumbuhan koloni bakteri dengan besar zona hambat yang berbeda-beda. Ekstrak kasar sampel sponge  K14-52 memiliki zona hambat yang paling  besar  dengan  diameter  zona hambat mencapai   10,43±0,26 mm pada konsentrasi  500  µg/disk  terhadap  bakteri E.coli ,  dan  semakin  mengecil  pada konsentrasi yang lebih rendah. Sedangkan uji terhadap bakteri S. aureus menghasilkan zona  hambat  dengan  diameter  9,38±0,57 mm.    Berdasarkan  hasil  tersebut  dapat diketahui  bahwa  sampel  sponge    K14-52 mempunyai zona hambat yang masuk ke dalam  kategori  kuat  dengan  membentuk daerah  hambatan  10-20  mm.  Menurut Tinambunan et  al. (2012),  antibakteri dikatakan mempunyai aktivitas yang tinggi terhadap  mikroba  apabila  konsentrasi hambat  minimumnya  rendah  tetapi mempunyai daya hambat yang besar.
Fraksinasi  dengan  etil  asetat  dan  air menghasilkan  pemisahan    senyawa  non- polar dan senyawa polar yang terkandung dalam  ekstrak  tersebut.  Air  merupakan
pelarut  polar  sehingga  akan  menarik senyawa  yang  bersifat  polar,  sedangkan etil  asetat  merupakan  pelarut  semi-polar sehingga  akan  mengikat  senyawa  yang tingkat  polaritasnya  rendah.  Pemisahan tersebut  juga  dapat  dikatakan  sempurna apabila kedua lapisan memiliki perbedaan warna yang jelas dan larutan tidak keruh. Pada  ekstrak  sampel  K14-52,  fraksi  air berwarna  kuning  pekat  sedangkan  fraksi etil  asetat  berwarna  kuning  bening.  Berat ekstrak  fraksi  etil  asetat  yaitu  330,6  mg sedangkan  berat  ekstrak  fraksi  air  adalah 732,6  mg.  Berat  ekstrak  fraksi  etil  asetat lebih  kecil  dibandingkan  dengan  fraksi  air menunjukkan  bahwa  ekstrak  sponge  K14- 52  lebih  banyak  larut  pada  pelarut  polar dibandingkan dengan pelarut semi-polar.
Berdasarkan hasil identifikasi morfologi  sponge,  yaitu  sponge    K14-52 berwarna  kuning-oranye,  bentuk  tubuh agak  membulat  dengan  permukaan sponge  yang  kasar.  Saluran  masuk  air  ke dalam tubuh sponge melalui pori-pori kecil (ostia)  terletak  tidak  beraturan  tampak lebih  jelas  karena  memiliki  ukuran  yang lebih besar dan berada pada bagian atas tubuh  sponge.  Saluran  air  keluar  melalui oskula  yang  terdapat  pada  ujung  atas sponge. Konsistensi sponge keras dan agak padat  (non-kompressible).      Menurut Hooper (2003) family Ancorinidae (SCHMIDT,  1870.)  dicirikan  dengan  bentuk pertumbuhan encrusting hingga masif atau lebih  spesifik  berbentuk  bulat  atau    pipa dengan  saluran  air  memanjang  dimana saluran  masuk  dan  keluar  pada  sisi  yang berlawanan.    Lebih  spesifik  genus Rhabdastrella    dalam  family  Ancorinidae yang  dicirikan  tidak  adanya  oskula  yang memanjang  pada  koloni  yang  berbentuk pipa panjang.
Makroskela  yang  ditemukan  yaitu monoaxon spikula ( hastate oxea , centrotylote  oxea ,  dan fusiform  oxea ). Hastate  oxea  merupakan  spikula  dengan bentuk  panjang  dan  ujung  tidak  terlalu runcing  di  kedua  bagian  ujungnya, centrotylote  oxea merupakan  spikula dengan bentuk memanjang dan runcing di kedua  bagaian  ujungnya  dan  memiliki bentuk bulatan pada bagian sentral atau tengah  spikula,  sedangkan fusiform  oxea
merupakan  spikula  memanjang  dan memiliki ujung runcing di kedua ujungnya. Pada  pengamatan  yang  dilakukan  pada sponge
K14-52
ditemukan
sedikit
mikrosklera tetraxon yaitu spikula berbentuk bulat  dengan  beberapa  ujung  runcing  di bagian sisinya yang berjumlah enam buah, disebut  dengan oxyasters .    Lebih    lanjut hooper menjelaskan bahwa family Ancorinidae dicirikan dengan megascleres long-shafted triaenes dan oxea megascleres;  microscleres  euasters  and microrhabds, tetapi tidak memiliki sterrasters  atau  amphiasters.    Pada  genus Rhabdastrella  tidak  ditemui  spikula  triene. Berdasarkan  hasil  identifikasi  tersebut, diduga  sponge  K14-52  termasuk  kelas Demospongia dan genus Rhabdastrella .
Beberapa  penelitian  membuktikan bahwa  sponge R.  globostelata adalah pengahasil  bahan  bioaktif  antikanker. Sponge R. globostelata dilaporkan mengandung senyawa globostellatic acid X methyl esters yang bersifat sebagai anti- angiogenic
dengan menghambat
pertumbuhan vascular  endothelial  growth factor (VEGF)  dan basic  fibroblast  growth factor ( bFGF ).  Selain itu senyawa tersebut juga  bersifat selective  anti-proliferative agents terhadap human  umbilical  vein endothelial  cells (HUVECs).    Dengan demikian globostellatic acid X methyl esters berpotensi  sebagai  senyawa  antikanker padat, karena  pertumbuhan kanker padat berkorelasi  dengan  pertumbuhan/proses vaskularisasi    (Aoki  et  al.,  2007).      Namun, sepanjang pengetahuan penulis, sejauh ini belum  ada  laporan  tentang  kandungan senyawa  antibakteri  pada  sponge R. globostellata .

## Kesimpulan
Ekstrak  sponge  yang  dikoleksi  dari Perairan  Kupang,  Nusa  Tenggara  Timur memiliki  potensi  antibakteri  terhadap bakteri
Escherichia
coli dan Staphyloccocus  aureus .  Berdasarkan  hasil identifikasi  makroskopis  dan  mikroskopis sampel  sponge  diketahui  bahwa  sponge K14-52 masuk ke dalam kelas Demospongia dengan spesies
Rhabdastrella  globostellata ,  dikarenakan
memiliki  makroskela  monoaxon  spikula ( Hastate  oxea , Centrotylote  oxea ,  dan Fusiform  oxea )  dan  mikrosklera  jenis tetraxon spikula (oxyastes).

## Daftar Pustaka
Aoki,  S.,  Sanagawa,  M.,  Watanabe,  Y., Setiawan, A., Arai, M., & Kobayashi, M. (2007). Novel isomarabarican triterpenes,  exhibiting  selective  anti- proliferative  activity  against  vascular endothelial  cells,  from  marine  sponge Rhabdastrella globostellata. Bioorganic  and  Medicinal  Chemistry ,
15 (14),  4818–4828.  http://doi.org/10.10 16/j.bmc.2007.04.070
Hooper, J.N.A. 2003. Sponguide : Guide to Sponge  Collection  and  Identification . Queensland Museum. South Brisbande, Australia Indrayanti, E., Maskulah, M., dan Trianto, A.. 2003. Skrining  pada  Beberapa  Jenis Sponge  sebagai  Upaya  Pencarian
Bahan Bioaktif Jamur . Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro, Semarang.
Khoshkhoo,  Z., M. Nazemi, A. Motalebi, M.
Mahdabi,  A.  Ashja  Ardalan,  and  R. Hemati  Matin.  2012. Fisrt  Record  of Siliceous  and  Calcareous  Sponges from  Larak  Island,  Persian  Gulf-Iran .
Middle-East J. Sci. Res. 11 (7) : 887-893. Aoki,  S.,  Sanagawa,  M.,  Watanabe,  Y., Setiawan, A., Arai, M., & Kobayashi, M. (2007). Novel isomarabarican triterpenes,  exhibiting  selective  anti- proliferative  activity  against  vascular endothelial  cells,  from  marine  sponge Rhabdastrella globostellata.
Bioorganic  and  Medicinal  Chemistry , 15 (14),  4818–4828.  http://doi.org/10.10 16/j.bmc.2007.04.070
Mayer, A. M. S., Rodríguez, A. D., Berlinck, R. G.  S.,  & Hamann,  M.  T.  (2009).  Marine pharmacology  in  2005-6:  Marine compounds with anthelmintic, antibacterial,  anticoagulant,  anti- fungal, anti-inflammatory, antimalarial, antiprotozoal,  antituberculosis,  and antiviral  activities;  affecting  the cardiovascular,  immune  and  nervous syste. Biochimica et Biophysica Acta - General  Subjects , 1790 (5),  283–308.
http://doi.org/10.1016/j.bbagen.2009. 03.011 Mehbub, M. F., Perkins, M. V., Zhang, W., & Franco,  C.  M.  M.  (2016).  New  marine natural products from sponges (Porifera)  of  the  order  Dictyoceratida (2001  to  2012);  a  promising  source  for drug discovery, exploration and future prospects. Biotechnology  Advances . http://doi.org/10.1016/j.biotechadv.20 15.12.008
Pastra,  D.A.,  Melki,  dan  Heron  S.  2012.
Penapisan  bakteri  yang  Bersimbiosis dengan  Sponge  Jenis  Aplysina  sp sebagai  Penghasil  Antibakteri  dari Perairan  Pulau  Tegal  Lampung . Maspari Journal, 4 (1) : 77 – 82
Radjasa, O.K., Sabdono A., Duhita S.K., Rory A.H., dan.Lestari E.S. 2007. Antibacterial Activity of Marine Bacteria Associated with  Sponge  Aoptos  sp.  Against  Multi Drugs  Resistant  (MDR)  Strains .  Jurnal Matematika dan Sains, 12 (4).
Satari,  M.  H.  2012. Multidrugs  Resistance (MDR)  Bakteri  Terhadap  Antibiotik . Prosiding  Temu  Ilmiah  Bandung. Bagian  Oral  Biologi/Mikrobiologi  FKG Universitas Padjadjaran.
Suriani, Hanapi U., dan Alyar A. 2012. Isolasi, Karakterisasi,  dan  Uji  Bioaktifitas Metabolit  Sekunder  dari  Sponge
Callyspongia  sp .  Marina  Cimica  Arta,
12
Tinambuan,  H.,  Melki  dan  Isnaini.  2012.
Efektifitas Ekstrak Bakteri yang
Berasosiasi  dengan  Sponge  dan Karang Lunak sebagai Antibakteri dari Perairan  Pulau  Tegal  Lampung. Maspari Journal, 4 (2) : 225 – 230 Trianto,  A.,  Hermawan  I.,  De  Voogd  N.J., and  Tanaka  J.,    2011,  Halioxepine,  A
New Meroditerpene From An
Indonesian Spons Haliclona sp. Chem. Pharm. Bull. . 59(10):1311-3.
Trianto, A., De Voodg N.J., and Tanaka J..
2014.  Two  new  compound  from  an Indonesian Sponge Dysea sp. J. Asian Natural Product Research. J. Asian Nat. Prod.  Res.,    16(2):163-168.  DOI: 10.1080/10286020.2013.844128.
Uriz, M. J., Turon X., Mikel A.B, and Agell G.
2003. Siliceous  Spicules  and  Skeleton Frameworks  in  Sponges  :  Origin, Diversity,  Ultrastructural  Patterns,  and Biological Functions . Microscopy Research and Technique. 62 : 279-299
Widagdo,  S.N.,  Haryadi  M.,  dan  Widya  A.
2002. Patogenesis  Isolat  Escherichia coli  Positif  Congo  Red  pada  Telur Ayam  Berembrio  Umur  12  Hari .  Jurnal Sain Veteriner, XX (1) :25-28