Induksi ovulasi dan pemijahan semi alami pada ikan patin siam, Pangasianodon hypopthalmus (Sauvage, 1878) menggunakan penghambat aromatase dan oksitosin
[Hormonal induction on artificial ovulation and spawning of striped catfish, Pangasianodon hypopthalmus (Sauvage, 1878) using aromatase inhibitor and oxytocin]
Mahdaliana 1  , , Agus Oman Sudrajat 2 , Dinar Tri Soelistyowati 2
1 Mayor Ilmu Akuakultur, Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor
2 Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Iilmu Kelautan IPB Jl. Agatis, Kampus IPB Dramaga, Bogor
Diterima: 26 Agustus 2014; Disetujui: 17 November 2015

## Abstrak
Pemijahan buatan pada ikan patin dilakukan dengan cara pengurutan karena tidak memiliki kemampuan untuk menge- luarkan  telur  secara  alami.  Teknik  pengurutan berdampak  stres  pada  induk,  kualitas  gamet  menurun,  dan  gonad menjadi  rusak.  Proses  pematangan  gonad  dan  pemijahan  tanpa  pengurutan  dapat  diinduksi  secara  hormonal  untuk membantu  ovulasi  ikan  yang  sulit  memijah  di  luar  habitatnya.  Penelitian  ini  bertujuan  mengevaluasi  penggunaan hormon  penghambat  aromatase  ( aromatase  inhibitor -  AI)  dan  oksitosin  serta  kombinasi  hormon  untuk  merangsang ovulasi  dan  pemijahan  pada  ikan  patin  tanpa  pengurutan(semi  alami).  Perlakuan  kombinasi  hormon  terdiri  atas P1(AI+Oksitosin), P2 (AI+Oksitosin+Ovaprim), P3 (AI + Oksitosin + Ovaprim + Pgf2α), P4 (ovaprim) sebagai kontrol positif, dan P5 (NaCl) sebagai kontrol negatif. Pada setiap perlakuan digunakan lima induk ikan patin jantan dan lima induk ikan patin betina sebagai ulangan individu dengan bobot berkisar 2-5 kg. Perlakuan diberikan  satu kali dengan cara penyuntikan hormon ke dalam jaringan pada bagian otot dibawah sirip punggung ( intramuscular) . Hasil penelitian menunjukkan perlakuan P3 berhasil  menginduksi ikan untuk ovulasi dan memijah tanpa pengurutan , sedangkan pada perlakuan  P4  ikan  memijah  dengan  cara  pengurutan, dan  pada  P5  ikan  tidak  ovulasi  dan  tidak    memijah.  Perlakuan kombinasi hormon menyebabkan konsentrasi estradiol-17β dan testosteron plasma  menurun yang menunjukkan tahap pematangan akhir. Lama  waktu ovulasi tidak berbeda nyata  yaitu berkisar antara 12,35±4,05 sampai  15,20±2,25 jam, sedangkan  jumlah  telur  yang  diovulasikan  tertinggi  adalah  145.865butir  pada perlakuan  kombinasi  hormon P3  (AI  + Oksitosin + Ovaprim + Pgf2α).
Kata penting: induksi ovulasi, oksitosin, Pangasianodon hypophthalmus , pemijahan semi alami, penghambat aromatase

## Abstract
Artificial spawning on stripe catfish has generally carried out by stripping because of the absence in reflex of spawning. Mechanical  stripping  usually  caused  stress,  decreased  quality  of  gametes  and  seeds  and  damage  on  gonad.  Induced spawning  without  stripping  could  be  used  for  the  process  of  gonad  maturation  to  stimulate  the  ovulation  of  the  fish which has the difficulties to spawn  in its non natural habitat.  Induced spawning without stripping by using hormones combi-nation  was  conducted  in  the  present  study.  This  research  proposed  to  evaluate  the  injection  of  hormones combination  between  aromatase  inhibitor  (AI)  and  oxytocin  association  with  ovaprim  and  PGF2α  for  stimulating ovulation and spawning without stripping. The completely randomized design of combined hormones consisted of five treatments such as P1(AI,oxytocin), P2 (AI, oxytocin,ovaprim), P3 (AI, oxytocin, ovaprim, PGF2α), P4 (ovaprim) as positive  control,  and  P5  (NaCl)  as  negative  control.  Each  treatment  was  performed  using  five  paires  of  males  and females  as  individual  replicate  of  about  2-6  kg  weight.  The  results  showed  that  the  combination of  P3  was  the  most effectively and successfully induced ovulation with naturally spawning without stripping, treatment P4 ovulation with stripping, while the treatment P5 there was not ovulation. The hormones combination caused decreasing of  estradiol- 17β  concentration  and  testosterone  (p<0.05)  as  the  sign  of  the  final  maturation.  The  average  time  of  ovulation  was 12.35±4.05  to  15.20±2.25  minutes.  The  highest  number  of  eggs  about  145.865  from  the  treatment  P3  (AI,  oxytocin, ovaprim, PGF2α).
Keywords: induced ovulation, oxytocin, Pangasianodon hypophthalmus , naturally spawning, aromatase inhibitors

## Pendahuluan
Ikan  patin, Pangasianodon  hypopthalmus merupakan ikan potensial bernilai ekonomis
tinggi. Perkembangan produksi ikan patin meng- alami  peningkatan  yang  signifikan  namun  fre- kuensi  pemijahannya  masih  rendah.  Ikan  patin siam  diintroduksi  dari  Thailand  dan  memiliki tampilan  mirip  dengan  ikan  patin  ( Pangasius
_____________________
 Penulis korespondensi
Surel: mahdaliana@ymail.com
pangasius ).  Legendre et  al .  (1998)  menyatakan bahwa  ikan  patin  siam  toleran  terhadap  kualitas air  yang  rendah  dan  memiliki  fekunditas  yang tinggi.
Sampai  saat ini masalah yang ditemui  da- lam pembenihan ikan patin adalah rendahnya fre- kuensi pemijahan. Waktu yang dibutuhkan untuk pematangan kembali gonad ikan patin berkisar 6- 8 bulan dan masa pemijahannya berlangsung ha- nya  pada  musim  penghujan  (Samara  2010).  Pe- mijahan buatan pada ikan patin budi daya umum- nya  dilakukan  dengan  cara  pengurutan  ( strip- ping )  karena  tidak  memiliki  refleks  pemijahan.
Teknik  pengurutan  yang  biasa  dilakukan  bisa menyebabkan ikan mengalami stres, menurunkan kualitas gamet, dan merusak gonad sehingga pro- duksi  benih  tidak  optimal.  Teknologi  reproduksi buatan  untuk  mempercepat proses ovulasi serta pemijahan buatan tanpa pengurutan dapat dilaku- kan  dengan  perangsangan  hormonal  pada  fase kematangan gonad akhir.
Hormon dan lingkungan saling bekerjasa- ma  dalam  memacu  proses  vitelogenesis,  ovulasi dan  pemijahan  pada  ikan.  Tahapan  reproduksi dikendalikan oleh kelenjar hipofisis dan estrogen yang dapat dipercepat prosesnya dengan penam- bahan  hormon-hormon  reproduksi  (Lam  1995, Fujaya  2004).  Rekayasa  hormonal  pada  umum- nya  memengaruhi  proses  vitelogenesis  sehingga mempercepat  pematangan  dan  pemijahan  pada ikan  yang  sulit  memijah  di  luar  habitatnya  (Ya- ron 1995). Menurut Alfonso et al. (1999), dalam proses  reproduksi  ikan  terdapat  hormon  peng- hambat  aromatase  ( aromatase  inhibitor -AI)  dan oksitosin  yang  secara  fisiologis  bekerjasama  un- tuk  memacu  terjadinya  ovulasi  dan  pemijahan. Aktivitas  hormon  oksitosin  meningkat  pada  saat ovulasi dan berperan penting dalam proses pemi- jahan (Haraldsen et al. 2001). Selain itu, hormon prostaglandin  (Pgf2α)  pada  ikan  berperan  me-
rangsang  terjadinya  pengeluaran  oosite  yang  te- lah  matang  dari  saluran  reproduksi.  Dalam  hal ini,  mekanisme  kerja  hormon  Pgf2α  dalam  pro- ses  ovulasi  bekerjasama  dengan luteinizing  hor- mone (LH  )  yaitu  meningkatkan  aktivitas  enzim proteolitik  di  folikel  sehingga  menstimulasi  inti sel telur bergerak dari tengah ke tepi sel dan se- lanjutnya  melebur  menuju  kutub  anima  hingga telur siap diovulasikan. Proses ovulasi dan pemi- jahan pada ikan dapat dipercepat dengan ovaprim yang  merupakan  kombinasi  dari analog  salmon gonadotropin  releasing hormone (sGnRH-a)  de- ngan  antidopamine.  GnRH  yang  terkandung  da- lam  ovaprim  berperan  merangsang  hipofisis  un- tuk melepaskan gonadotropin (Lam 1995).
Berdasarkan  pentingnya  peranan  AI  dan oksitosin dalam proses vitelogenesis, ovulasi dan pemijahan, maka gabungan hormon tersebut ser- ta  dikombinasikan  dengan  ovaprim  dan  Pgf2α diharapkan  dapat  menjadi  alternatif  dalam  pe- mijahan  semi  alami  tanpa  pengurutan pada  ikan yang  tidak  memiliki  refleks  memijah alami  di luar  habitatnya.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengevaluasi  respons  ovulasi  dan  pemijahan tanpa pengurutan pada ikan patin dengan induk- si beberapa hormon  yaitu  AI dan oksitosin serta kombinasi antara ovaprim dan Pgf2α.

## Bahan dan metode

## Waktu dan tempat penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  bulan  Januari sampai  Mei  2014  di  Balai  Pengembangan  Budi daya  Air  Tawar  (BPBAT)  Cijengkol,  Sukaman- di,  Subang.  Analisis  hormon  estradiol-17β  dan testosteron  dilakukan  di  Laboratorium  Hormon, Fakultas  Kedokteran  Hewan,  Institut  Pertanian Bogor.

## Persiapan ikan uji dan metode penelitian
Ikan  uji  yang  digunakan  terdiri  atas  ikan patin  ( P.  hypopthalmus )  jantan  dan  betina  yang
sudah  matang  gonad  dan  siap  memijah  berumur 1-2  tahun  dengan  bobot  berkisar  2-5  kg  (per ekor). Setiap perlakuan terdiri atas 5 ekor  jantan dan  5  ekor  betina  sebagai  ulangan  individu.  In- duksi ovulasi dan pemijahan secara hormonal di- berikan  melalui  penyuntikan  secara intramus- cular pada ikan uji betina dan jantan yang sudah matang  gonad.  Rancangan  perlakuan  kombinasi hormon  yang  terdiri  atas  (a)  perlakuan  1  (P1)  = AI +oksitosin, (b) perlakuan 2 (P2) = AI +oksito- sin+ ovaprim, (c) perlakuan 3 (P3) = AI +oksito- sin+ ovaprim+ Pgf2α, (d) perlakuan 4  (P4) kon- trol  positif  =  ovaprim,  dan  (e)  perlakuan  5  (P5) kontrol negatif = NaCl.

## Analisis data
Data  konsentrasi  hormon  estradiol  dan testosteron  plasma  sebelum  penyuntikan  dan  se- telah  pemijahan  dianalisis  secara  deskriptif,  se- dangkan lama waktu ovulasi,  jumlah telur diana- lisis dengan ANOVA dan uji lanjut Duncan mul- tiple range test (DMRT).

## Hasil

## Konsentrasi estradiol-17ß
Konsentrasi  hormon  estradiol-17β  plasma darah ikan patin betina pada perlakuan kombina- si hormon AI, oksitosin, ovaprim dan Pgf2α (P1, P2,  dan  P3)  sebelum  penyuntikan  dan  sesudah
ovulasi  mengalami  penurunan,  sebaliknya  pada perlakuan  kontrol  ovaprim  dan  NaCl  (P4,  P5) menunjukkan peningkatan (Gambar 1). Penurun- an  konsentrasi  estradiol  sesudah  ovulasi  menun- jukkan fase final oocyte maturation (FOM) yang akan segera diikuti dengan pemijahan. Pada per- lakuan kombinasi keempat hormon AI, oksitosin, ovaprim dan Pgf2α (P3)  menunjukkan penurun- an  konsentrasi  estradiol  sebelum  dan  sesudah ovulasi  yang  paling  tinggi  yaitu  dari  0,93  men- jadi 0,35 ng mL -1 .

## Tingkat Ovulasi
Perlakuan  kombinasi  hormon  AI  dan oksitosin  (P1),  serta  penambahan  ovaprim  dan Pgf2α  (P2,  P3)  maupun  perlakuan  ovaprim tunggal  (P4)  pada  ikan    patin  betina  meng- hasilkan  tingkat  ovulasi  100%,  sedangkan  pada perlakuan  kontrol  dengan  NaCl  (P5)    tidak  ter- jadi  ovulasi  (Tabel  1).  Ikan  betina  yang  diberi perlakuan  kombinasi  hormon  (P1,  P2,P3)  dapat memijah  secara  semi  alami  (tanpa  pengurutan), sedangkan  pada  perlakuan  ovaprim  (P4)  ikan memijah  dengan  pengurutan,  dan  pada  kontrol NaCl  ikan  tidak  memijah  selama  24  jam  penga- matan. Lama waktu ovulasi antar perlakuan tidak berbeda  nyata,  yaitu  berkisar  antara  12,35±4,05 jam sampai 15,20±2,25 jam.
Gambar  1.  Konsentrasi  testosteron  plasma  darah  ikan  patin  jantan  sebelum  induksi  hormon  dan  sesudah ovulasi.
Sebelum, P1, 17.41
Sebelum,  P2, 18.26 Sebelum,  P3, 17.90 Sebelum,  P4, 17.18 Sebelum,  P5, 12.97 Sesudah, P1, 1.20 Sesudah,  P2, 5.68 Sesudah,  P3, 3.77 Sesudah,  P4, 11.15 Sesudah,  P5, 10.81 K o n se n tr a si te sto ste ro n (n g .m l -1 )
Perlakuan Sebelum Sesudah

## Jumlah telur pada pemijahan ikan
Rata-rata  jumlah  telur  yang  berhasil  dipi- jahkan  induk  betina  ikan  patin  antar  perlakuan induksi  hormon  berbeda  nyata  (p<0,05).  Pada perlakuan  P3  yang  diinduksi  dengan  kombinasi hormon (AI, oksitosin, ovaprim, Pgf2α) dan me- mijah semi alami (tanpa pengurutan)  menghasil- kan  jumlah  telur  yang  tertinggi  (145.865  butir)
dibandingkan  dengan  perlakuan  P1  (aromatase inhibitor  dan  oksitosin)  dan  P4  (ovaprim)  yang memijah  dengan  pengurutan.  Pada  perlakuan  P2 (AI,  oksitosin,  ovaprim)  ikan  memijah  semi alami  menghasilkan  telur  yang  paling  rendah (108.421), dan pada kontrol NaCl (P5) tidak ter- jadi pemijahan (Gambar 2, 3).
Tabel 1. Tingkat  ovulasi  ikan patin siam ( P. hypopthalamus ) betina pada induksi ovulasi dan pemijahan semi alami secara hormonal
Perlakuan (n=5) Rata-rata bobot tubuh (Kg) Tingkat ovulasi (%) Rata rata waktu ovulasi (Jam) Pemijahan P1 4,24±0,96 100 15,20 ± 2,25 b Memijah semi alami P2 4,54±1,40 100 13,40 ± 2,63 b Memijah semi alami P3 4,14±1,09 100 12,35 ± 4,05 b Memijah semi alami P4 3,92±0,79 100 13,27 ± 0,65 b Dengan pengurutan P5 4,04±0,93 0 Tidak ovulasi* Tidak memijah
Keterangan: P1: AI+Oksitosin, P2: AI+Oksitosin+Ovaprim, P3: AI+Oksitosin+Ovaprim+Pgf2α, P4: Ovaprim, P5:
NaCl; *Pengamatan dilakuan 24 jam,  n= jumlah ikan
Gambar 2. Pemijahan semi alami pada ikan  patin  yang diberi perlakuan kombinasi hormon  AI, oksitosin, ovaprim  dan  Pgf2α.  Keterangan:  Anak  panah  menunjukkan  telur  yang  dipijahkan  oleh  ikan patin.
Gambar 3. Rata-rata jumlah telur ikan patin siam ( P. hypopthalmus ) yang dihasilkan pada induksi pemijah- an semi alami secara hormonal di dalam bak fiber (Huruf tika atas yang berbeda menunjukkan perbedaan nyata (p<0,05).
118647 bc
108421 b 145865 d 138947 cd 0 a Ju m lah T elu r (Bu ti r) Perlakuan

## Pembahasan
Hasil  pengamatan  yang  dilakukan  dari  li- ma  perlakuan  yang  diinduksi  secara  hormonal rataan  nilai  kadar  estradiol - 17ß  dari  semua  per- lakuan sangat bervariasi atau berfluktuasi (Gam- bar  1).  Pada  perlakuan  kombinasi  hormon  AI, oksitosin,  ovaprim,  dan  Pgf2α  (P1,  P2,  P3)  ter- jadi  penurunan  nilai  konsentrasi  estradiol  sebe- lum  dan  sesudah  ovulasi,  sedangkan  pada  perla- kuan ovaprim dan NaCl (P4, P5) tidak terjadi pe- nurunan.  Penurunan  nilai  konsentrasi  estradiol- 17β  yang  tinggi  menunjukkan  ikan  siap  untuk ovulasi dan menandakan ikan siap memijah. Me- nurut Mackenzie et al. (1989), proses pematang- an  gonad  diprediksi  melalui  kadar  testosteron dan  estradiol-17β  plasma  terhadap  perkembang- an oosit. Hal ini sesuai dengan pendapat Zairin et al . (1992) yang menjelaskan bahwa kadar steroid plasma  dapat  digunakan  sebagai  indikator  dari pematangan gonad.
Estradiol-17ß merangsang vitelogenesis di hati, dan dapat memberikan rangsangan balik ter- hadap  hipofisis  serta  hipotalamus  ikan  untuk menghasilkan  gonadotropin.  Rangsangan  terha- dap  hipotalamus  adalah  memacu  produksi GnRH. GnRH  yang dihasilkan ini bekerja untuk merangsang hipofisis untuk melepaskan gonado- tropin  dan  selanjutnya  berperan  dalam  proses biosintesis  estradiol-17ß  pada  lapisan  granulose. Menurut  Lee  &  Young  (2002),  perubahan  kon- sentrasi  estradiol-17β  dalam  darah  ikan  betina berhubungan  dengan  perkembangan  oosit  dan peningkatan  gonadosomatik  indeks.  Hormon  es- tradiol  pada  ikan  betina  berperan  merangsang hati untuk mensintesis vitelogenin yang selanjut- nya melalui aliran darah menuju gonad dan dise- rap  oleh  lapisan  folikel  oosit  sehingga  tumbuh membesar  kemudian  perkembangannya  berhenti apabila  oosit  telah  mencapai  ukuran  maksimum. Martin  (2004)  juga  menyatakan  hal  yang  sama
bahwa  konsentrasi  estradiol-17β  menurun  pada saat ikan betina siap ovulasi dan pemijahan.
Nagahama et  al .  (1995)  mengatakan  bah- wa aktivitas aromatase pada ikan meningkat dan mencapai  puncaknya  pada  pascavitelogenesis. Setelah  mencapai  pascavitelogenesis  produksi estradiol-17β  akan  menurun  drastis,  demikian juga  aktivitas  aromatase.  Menurunnya  produksi estradiol-17β  dan  aktivitas  aromatase,  ternyata diikuti  peningkatan  17α,20β-dihidroksi-4-preg- nen-3-one  (17α,20β-DP)  sehingga  oosit  menga- lami Germinal  Vesicle  Breakdown (GVBD)  dan berakhir pada ovulasi. Hal ini sesuai dengan hasil penelitian  Dhewantara  (2013)  dan  Farastuti (2014)  yang  menjelaskan  bahwa  mekanisme yang  terjadi  pada  ikan  betina  yang  diberi  perla- kuan  penghambat  aromatase  (AI)  menunjukkan terjadi  penurunan  plasma  estradiol  dan  konsen- trasi vitelogenin pada ikan patin dan Tor soro .
Perlakuan  kombinasi  hormon  AI,  oksito- sin, ovaprim, dan Pgf2α (P1, P2, P3) menunjuk- kan bahwa induk ikan patin betina yang diinduk- si dengan perlakuan ini dapat terjadi ovulasi dan pemijahan  semi  alami  (tanpa  pengurutan),  se- dangkan induk ikan patin betina yang hanya diin- duksi  dengan  hormon  tunggal  ovaprim  harus  di- pijahkan dengan melakukan pengurutan.
Testosteron dibutuhkan untuk  melengkapi proses spermatosit bersama dengan sekresi pitui- tari  dari  ICSH  ( Intestill  Cell  stimulating  Hor- mone )  1  fase  dan  sangat  berperan  dalam  proses pematangan  oosit  menuju  fase  GVBD.  Fase  ini merupakan  tahapan  menjelang  ovulasi  di  mana inti  sel  terlihat  berada  satu  tahap  lebih  dekat  ke korion telur. Basuki (2007) juga menyatakan  hal yang  sama  bahwa  testosteron  merupakan  steroid C19  yang  dapat  merangsang  terjadinya  GVBD pada konsentrasi yang tinggi.
Pada  perlakuan  kombinasi  hormon  AI, oksitosin,  ovaprim  dan  Pgf2α  (P1,  P2,  P3,  P4,
P5)  terlihat  adanya  penurunan  nilai  testosteron. Perlakuan AI dan oksitosin (P1), serta kombinasi dengan  ovaprim  dan  Pgf2α  (P2,  P3)  menunjuk- kan penurunan konsentrasi testosteron yang lebih besar  dibandingkan  kontrol  ovaprim  dan  NaCl (P4,  P5).  Menurut  Evans  (2000),  testosteron plasma  darah  meningkat  saat  pematangan  gonad lalu  menurun saat pemijahan. Demikian pula di- sampaikan oleh Rottmann et al. (2001) dan Yang et al . (2007) bahwa konsentrasi estradiol dan tes- tosteron pada ikan secara alami mengalami penu- runan  setelah  matang  gonad.  Hal  ini  didukung oleh Denning & Wathes (1994),  yang menyata- kan  bahwa  testosteron  plasma  darah  mulai  me- ningkat  mulai  matang  dan  berkembang  lalu  me- nurun  lagi  selama  dewasa,  pemijahan,  dan  ta- hapan menghabiskan. Hal ini sesuai dengan pen- dapat Nagahama et al. (1991), bahwa kadar kon- sentrasi  testosteron  relatif  lebih  rendah  selama spermatogenesis  kemudian  meningkat  tajam  pa- da waktu spermiation dan menjadi lemah setelah pemijahan dan selama periode dewasa. Ismail et al. (2011) juga menyatakan hal yang sama bahwa konsentrasi  estradiol  dan  testosteron  hormon lainnya  pada  ikan  mengalami  penurunan  setelah matang gonad.
Mekanisme  yang  terjadi  pada  ikan  betina maupun  jantan  yang  diberi  perlakuan  pengham- bat  aromatase  menunjukkan    terjadi  penurunan plasma  estradiol  dan  konsentrasi  vitelogenin  pa- da ikan betina (Casper & Mitwally 2006). Hal ini mengindikasikan  bahwa  perangsangan  perkem- bangan  sperma  tidak  terlepas  dari  peran  serta hormon  androgen,  yakni  testosteron  dan  penam- bahan  AI  sebagai  penghambat  enzim  aromatase dapat  membantu  meningkatkan  jumlah  testoste- ron  dalam  gonad  sehingga  terjadi  percepatan GVBD pada oosit.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  per- lakuan kombinasi hormon AI, oksitosin, ovaprim
dan  Pgf2α  (P1,  P2,  P3)  dan  perlakuan  kontrol ovaprim  (P4)  mampu  memberikan  rangsangan sehingga  terjadi  ovulasi  pada  ikan  patin  dengan tingkat  keberhasilan  hingga  100%  namun  pada perlakuan kontrol NaCl (P5) tidak terjadi ovulasi dan pemijahan.
Penghitungan  masa  laten  untuk  mengeta- hui  waktu  ovulasi  pada  penelitian  ini  yaitu  de- ngan cara menghitung jarak waktu dilakukannya induksi  hormon  sampai  terjadinya  ovulasi  yang dilihat  berdasarkan  pengamatan  adanya  telur yang keluar. Respon ikan setelah induksi hormon perlakuan  terhadap  kecepatan  masa  laten  dapat dilihat pada Tabel 1. Masa laten tercepat dipero- leh  pada  perlakuan  AI,  oksitosin,  ovaprim  dan Pgf2α (P3) yaitu 12,35 ± 4,05 jam. Pada perlaku- an  P1,  P2,  dan  P3  induk  betina  dan  jantan  yang diinduksi  dengan  perlakuan  kombinasi  hormon AI, oksitosin, ovaprim dan Pgf2α berhasil memi- jah secara semi alami sedangkan pada perlakuan ovaprim  (P4)  ikan  memijah  dengan  cara  dilaku- kan  pengurutan  pada  bagian  perut.  Berdasarkan hasil  uji  lanjut  diketahui  bahwa  perlakuan  P1, P2, P3 dan P4 berbeda nyata (p<0,05) dibanding- kan dengan perlakuan P5.
Proses  pematangan  oosit  terjadi  karena rangsangan leutinizing  hormone (LH)  pada  fo- likel,  kemudian terjadi proses pembentukan hor- mon  steroid,  pada  sel  teka  membentuk  17α-hi- droksi  progesteron  dan  pada  sel  granulose  ter- bentuk  17α,  20β  dihidroksi  dan  hormon  steroid (Chen & Fernald 2008), hal inilah yang mempu- nyai peranan sebagai mediator kematangan oosit lebih  lanjut.  Selanjutnya  FSH  akan  merangsang sekresi  estrogen  dari  folikel  yang  menyebabkan folikel  berkembang  dan  membesar  dalam  ovari. Nagahama et al . (1995)  juga menjelaskan bahwa bila kadar estrogen meningkat optimum, produk- si FSH akan menurun, dan produksi LH mening- kat  yang  menyebabkan  folikel  anti  klimaks  dan
terjadilah ovulasi. Hal ini didukung oleh Harald- sen et al . (2001),  yang  menyatakan bahwa pem- berian hormon oksitosin akan mengakibatkan ak- tivitas  hormon  meningkat  pada  saat  ovulasi  dan berperan penting dalam proses pemijahan.
Penghambat aromatase mampu mengham- bat  produksi  estrogen  dengan  menghambat  pro- ses  aromatase  pada  hipotalamus-hipofisis-gonad axis dari umpan balik negatif estrogen, sehingga menyebabkan  sekresi  FSH  meningkat  dan  me- nyebabkan  rangsangan  yang  menghasilkan  per- kembangan ovari hingga terjadinya ovulasi (Cas- per & Mitwally 2006). Basuki (2007)  juga men- jelaskan bahwa penambahan penghambat aroma- tase  (AI)  juga  memungkinkan  kerja  LH  dalam menurunkan enzim aromatase tadi akan diperku- at  oleh  AI,  sehingga  peranan  LH  dalam  proses ovulasi akan lebih efisien, dan  AI terbukti dapat digunakan  sebagai  induksi  ovulasi.  Pemberian hormon oksitosin dapat menyebabkan induk ikan patin  melakukan  pemijahan  secara  semi  alami karena  oksitosin  berperan  dalam  merangsang otot polos yang menyebabkan kontraksi dan ikan mampu memijah secara alami.
Ovulasi  merupakan  proses  keluarnya  sel telur folikel  ke dalam lumen  ovarium atau rong- ga  perut.  Nagahama  (1987)  menyatakan  bahwa proses  ovulasi  terdiri  atas  beberapa  tahapan.  Pa- da tahap awal lapisan folikel melepaskan diri da- ri  oosit,  pada  saat  akan  terjadi  ovulasi,  mikrofili pada  kedua  permukaan  tersebut  sedikit  demi  se- dikit terpisah, hal tersebut dimungkinkan dilaku- kan  oleh  enzim  proteolitik.  Dalam  setiap  per- kembangan  secara  biologis  termasuk  oosit  ikan, perkembangan antara satu fase ke fase yang ber- ikutnya  membutuhkan  waktu  tertentu.  Brooks et al .  (2003)  menjelaskan  bahwa  pada  oosit  yang telah  matang,  sitoplasma  akan  menjadi  bening, oil droplet bergabung menjadi satu dan berukur- an besar serta terjadi GVBD.
Dari hasil pengamatan pada pemijahan in- duksi kombinasi hormon AI, oksitosin, ovaprim, Pgf2α    (P1,  P2,  P3)  dan  dan  perlakuan  kontrol (P4) rata-rata jumlah telur yang berhasil  dipijah- kan  induk  betina  ikan  patin  antarperlakuan  ber- kisar 108.421 butir sampai dengan 145.865 butir. Pada  perlakuan  P3  yang  diinduksi  dengan  kom- binasi  hormon  (AI,  oksitosin,  ovaprim,  Pgf2α) dan  memijah  semi  alami  menghasilkan  jumlah telur yang tertinggi (145.865 butir) dibandingkan dengan  perlakuan  P1  (AI  dan  oksitosin)  dan  P4 (ovaprim)  yang  memijah  dengan  cara  dilakukan pengurutan.  Pada  perlakuan  P2  (AI,  oksitosin, ovaprim) ikan memijah semi alami menghasilkan telur yang paling rendah (108.421 butir), dan pa- da  kontrol  NaCl  (P5)  tidak  terjadi  pemijahan. Berdasarkan hasil uji lanjut diketahui bahwa per- lakuan P3 dan P4 berbeda nyata (p<0,05) diban- dingkan dengan perlakuan P1, P2, dan P5.
Pemberian  AI  dapat  mempercepat  dan memicu  terjadinya  ovulasi.  Hal  ini  dikarenakan, AI berperan dalam menurunkan aktivitas aroma- tase dalam gonad yang berakibat produksi estro- gen-17β  turun  dan  meningkatkan  produksi  tes- tosteron. Hal tersebut merupakan awal sinyal ba- lik  positif  terhadap  LH  sehingga  proses  pema- tangan  oosit  akan  berlangsung  lebih  cepat.  Dari hasil  penelitian  dapat  dilihat  pengaruh  induksi kombinasi  hormon  dalam  proses  akhir  ovulasi sangat  berperan.  Kombinasi  yang  diberikan  me- rangsang hipofisis untuk mensekresikan gonado- tropin  LH  membantu  memperlancar  sekresi  go- nadotropin  untuk  permatangan  oosit.  Pemberian AI  juga  mengakibatkan  kerja  enzim  aromatase terhambat,  akibatnya  sintesis  estrogen  dalam pengembangan  oosit  semakin  menurun.  Turun- nya produksi estrogen diikuti dengan meningkat- nya produksi testosteron sehingga terjadilah um- pan balik positif terhadap gonadotropin terutama LH.  Kerja  LH  dari  pituitari  ditambah  dengan
adanya  efek  penghambat  aromatase  pada  gonad yang juga menyebabkan terjadinya umpan positif pada  LH  akan  semakin  mempercepat  pematang- an oosit hingga nanti berakhir pada ovulasi.

## Simpulan
Kombinasi  hormon  penghambat  aromata- se , oksitosin, ovaprim, dan Pgf2α  mampu meng- induksi ovulasi ikan patin betina sehingga terjadi pemijahan  semi  alami  tanpa  pengurutan  dengan hasil  terbaik  yaitu  jumlah  telur  145.865  butir. Kombinasi  penghambat  aromatase  dan  oksitosin dapat  menjadi alternatif  menggantikan  ovaprim untuk induksi ovulasi dan pemijahan tanpa peng- urutan.

## Daftar pustaka
Alfonso  LOB,  Iwama  GK,  Smith  J,  Donaldson EM.  1999.  Effect  of  aromatase  inhibitor fadrozol on plasma on plasma sex steroid secretion and ovulation rate in female co- ho  salmon, Onchorhynchus  kisutch close to final maruration. General and Compar- ative Endocrinology 133(2): 221-229.
Basuki  F.  2007.  Optimalisasi  pematangan  oosit dan  ovulasi  pada  ikan  mas  koki  ( Caras- sius  auratus )  melalui  penggunaan  inhibi- tor  aromatase.  Disertasi.  Sekolah  Pasca- sarjana.  Institut  Pertanian  Bogor.  Bogor. 90 hlm.
Brooks S, Tyler CR, Sumpter JP. 1997. Egg qua- lity  in  fish:  what  makes  a  good  egg? Re- views in Fish Biology and Fisheries , 7(4): 387-416.
Casper RF, Mitwally MFM. 2006. Aromatase in- hibitors for ovulation induction. The Jour- nal of Clinical  Endocrinology  &  Metabo- lism , 91(3): 760-771.
Chen CC, Fernald D. 2008. GnRH and RnRH re- septors:  distribution,  function  and  evolu- tion. Journal of Fish Biology , 73(5): 1099 -1120.
Denning-Kendall  PA,  Wathes  DC.  1994.  Acute effects  of  prostaglandin  F2a,  luteinizing hormone,  and  estradiol  on  second  mes- senger  systems  and  on  the  secretion  of oxytocin and progesterone from granulosa and  early  luteal  cells  of  the  ewe. Journal Biology of Reproduction , 50(4): 765-773.
Dhewantara  L.  2013.  Induksi  ovulasi  dan  pemi- jahan  pada  ikan  patin  siam  ( Pangasiano- don  hypophthalmus )  dengan  manipulasi hormonal. Tesis .  Sekolah  Pascasarjana, Ins-titut Pertanian Bogor. Bogor. 40 hlm.
Farastuti ER. 2014. Induksi maturasi, ovulasi dan pemijahan  ikan  torsoro  ( Tor  soro )  meng- gunakan  kombinasi  hormon. Tesis .  Seko- lah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
35 hlm.
Fujaya Y.  2004. Fisiologi Ikan: Dasar Pengem- bangan  Teknik  Perikanan .  Penerbit  Rine- ka Jaya, Jakarta. 204 hlm.
Haraldsen L, Veronica SL, Goran E. 2001. Oxy- tocin  stimulates  cerebral  blood  flow  in rainbow  trout  ( Oncorhynchus  mykiss ) through  a  nitric  oxide  dependent  mecha nism. Nilsson Division of General Physio- logy,  Department  of  Biology,  University of  Oslo.  Norway. Brain  Research, 929 (1): 10-14.
Hazon N, Balment  RJ. 1998. Endocrinology, In : Evans  DH  (Editor). The  Physiology  of Fishes. CRC  Press,  Boca  Raton.  pp.  441- 463.
Ismail  MFS,  Siraj  SS,  Daud  SK,  Harmin  SA.
2011. Association of annual hormone pro- file  with  gonad  maturity  of  mahseer  ( Tor tambroides )  in  captivity. General  and Comparative Endocrinology , 170(1): 125- 130.
Lam  TJ.  1995.  Induced  spawning  in  fish.  Pro- ceedings  for  workshop  held  in  Tungkang Marine  Laboratory.  Taiwan.  April  22–24 1995.  Reproduction  in  Culture  of  Milk- fish. pp. 14-65.
Lee  WK,  Young  SW.  2002.  Relationship  bet- ween  ovarian  development  and  serum  le- vels of gonadal steroid hormones, and in- duction  of  oocyte  maturation  and  ovula- tion in the cultured female Korean spotted sea  bass Lateolabrax  moculatus (Jeom- nong-eo). Aquaculture , 207 (1): 169-183.
Legendre  M,  Slembrouck  J,  Subagja  J.  1998. First  results  on  growth  and  artifial  propa- gation of Pangasius djambal in Indonesia. In : The Biological Diversity and Aquacul- ture  of  Clariid  and  Pangasiid  Catfishes  in South  East  Asia.  Proceeding  of  the  Midt- em  Workshop  of  the  “Catfish  Asia  Pro- ject”. 11-15 May, 1998. Cantho. Vietnam.
pp. 97-101.
Mackenzie DS, Thomas P, Farrar SM.1989. Sea- sonal changes in thyroid and reproduction steroid  hormones  in  female  channel  cat-
fish  ( Ichtalurus  punctatus )  in  pond  cul- ture. Aquaculture , 78(1): 63-80.
Martin J. 2004. Hormonal and physiological pro- files of female Haplochromis  burtoni as it relate to affiliative behavior. Stanford Un- dergraduate Research Journal , 3: 55-61.
Nagahama Y. 1987. Mechanism of synthesis and action  of  17α,  20β-dyhidroxy-4-pregnen- 3-one: a teleost  maturation  inducing hor- mone. Fish  Physiology  and  Biochemistry . 7(1): 193-200.
Nagahama  Y,  Matsuhisa  A,  Iwamatsu  T,  Sakai N,  Fukada  S.  1991.  A  mechanism  for  the action of pregnant mare serum gonadotro- pin  on  aromatase  activity  in  the  ovarian follicle  of  the  medaka, Oryzias  latipes . Journal of Experimental Zoology, 259(1): 53-58.
Nagahama  Y,  Yoshikuni  M,  Yamashita  M,
Tokumoto  T,  Katsu  Y.  1995.  Regulation of  oocyte  growth  and  maturation  in  fish. Current Topics in Developmental Biology,
30(1): 103-145.
Rottmann  RW,  Shireman  JV,  Chapman  FA. 1991.  Hormonal  control  of  reproduction
in  fish  for  Induced  spawning. Southern Regional Aquaculture  Center. Publication No. 424. The United States Department of Agriculture.
Samara HS. 2010. Rekayasa rematurasi ikan pa- tin  siam  ( Pangasianodon  hypophthalmus ) dengan  penyuntikan  hormon  PMSG  dan hCG  serta  penambahan  vitamin  mix  300 mg/kg. Skripsi .  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu Kelautan, IPB. Bogor. 25 hlm.
Yang  JX, Chen XY, Chen YR. 2007. On the po- pulation status and migration of pangasiid catfishes  in  Lancangjiang  River  Basin. China. Zoological Research , 28(1): 63-67.
(dalam bahasa mandarin).
Yaron  Z.  1995.  Endocrine  control  of  gametoge- nesis  and  spawning  induction  in  the  carp. Aquaculture , 129 (1): 49-73.
Zairin  Jr,  Furukawa  K,  Aida  K  1992.  Induction of ovulation by HCG injection in tropical walking  catfish, Clarias  batrachus reared under 23-25 0 C. Nippon Suisan Gakkaishi, 58(9): 1681-1685.