## DOI: 10.30644/rik.v8i2.240
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang darah  (Anadara granosa) dan  kerang hijau (Mytilus viridis) pada kulit tikus putih (Rattus novergicus) jantan
Ariyanti * , Eni Masruriati, Sulistyani Mardaning Tyas, Khilya Aulia Nur Khasanah Program Studi Sarjana Farmasi STIKES Kendal, Indonesia *Email korespondensi : riri99.cettaazzahra@gmail.com
Accepted: 06 September 2019; revision: 25 September 2019; published: 31 Desember 2019

## Abstrak
Latar Belakang : Pemanfaatan hasil laut di Kendal sudah maksimal, tetapi pemanfaatan limbah belum maksimal untuk kebutuhan penghasilan sehari-hari. Masyarakat pesisir hanya mengkonsumsi daging kerangnya  dan  tidak  memanfaatkan  limbah  dari  cangkang  kerang.    Kandungan  didalam  cangkang kerang  berupa  Ca + 98,7%,  Mg  0,0476%,  Na  0,9192%,  P  0,0183%,  K  0,0398%  dan  lebih  dari  71% protein kulit adalah kolagen. Tujuan penelitian ini adalah membandingkan cangkang kerang darah dan cangkang kerang hijau dengan penelitian yang berjudul perbandingan uji fisik krim kolagen cangkang kerang darah  ( Anadara granosa )  dengan  cangkang  kerang  hijau (Mytilus  viridis) terhadap  kulit  tikus putih ( Ratus novergicus ) jantan. Metode :  Penelitian  eksperimental  laboratorik  menggunakan  rancangan  penelitian post-test  control design berupa post only design yang terbagi menjadi 5 kelompok perlakuan dengan masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan. Kelompok kontrol negatif dengan pemberian  basis  krim.  Kelompok  uji  dengan  diberi  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah  ( Anadara granosa ) dengan cangkang kerang hijau (Mytilus viridis) masing-masing konsentrasi 1%, 5%, 10% dan 15%. Parameter yang pengujian kelembaban diamati adalah tingkat kelembaban kulit tikus putih. Hasil :  Hasil  analisa  statistik  menggunakan  uji  ANOVA  didapatkan  hasil  tidak  ada  perbedaan  yang signifikan ( p>0,05 ) untuk kelompok uji konsentrasi 10% dan 15%. Krim kolagen cangkang kerang darah ( Anadara  granosa )  dan  cangkang  kerang  hijau (Mytilus  viridis) dapat  memberikan  efek  sebagai pelembab pada kulit tikus pada konsentrasi 15%.
Kesimpulan : Konsentrasi yang paling optimal sebagai efek pelembab pada kulit tikus yaitu konsentrasi 15%
Kata kunci: kolagen, cangkang kerang darah, cangkang kerang hijau, kulit tikus putih

## Abstract
Background: Utilization of marine products in Kendal has been maximized, but the utilization of waste has not been maximized for daily income needs. Coastal communities only consume clam meat and do not utilize waste from shellfish. The content in the shells in the form of Ca+ 98.7%, Mg 0.0476%, Na 0.9192%, P 0.0183%, K 0.0398% and more than 71% of skin protein are collagen. The purpose of this study was to compare blood clam shells and green clam shells with a study entitled the comparison of physical tests of collagen cream blood clam shells (Anadara granosa) with green shells (Mytilus viridis) against the skin of male white rats (Rat novergicus).
Method: An experimental laboratory study performed by a post-test control design research design in the form of a post only design that was divided into 5 treatment groups with each group consisting of 5 male white rats (Rattus novergicus). The control group was negative by giving a cream base. The test group  was  given  a  blood  clam  shell  collagen  cream  Anadara  granosa  with  Mytilus  viridis  with concentrations of 1%, 5%, 10% and 15%. The parameter for which humidity testing was observed was the moisture level of the skin of white rats.
Results: The parameter observed was skin moisture level. The results of statistical analysis using the ANOVA  test  showed  that  there  were  no  significant  differences  (p>  0.05)  for  the  10%  and  15% concentration  test  groups.  Collagen  cream  Anadara  granosa  and  Mytilus  viridis  can  provide  a moisturizing effect on the skin of rats at a concentration of 15%.
Conclusion: The most optimal concentration as a moisturizing effect on rat skin is a concentration of 15%
Key words: collagen, blood shells, green shells, white rat skin
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan

## PENDAHULUAN
Indonesia  dikenal  sebagai  wilayah yang memiliki tingkat keanekaragaman flora dan  fauna  yang  tinggi  sehingga  disebut negara mega-biodiversity .  Indonesia  terbagi atas berbagai wilayah kelautan seperti utara, selatan  dan  timur.  Jawa  Tengah  memiliki ekosistem  laut  dan  terumbu  karang  seluas 987,62  hektar  (1)  dari  keseluruhan  di Indonesia.  Wilayah  Jawa  Tengah  bagian utara  Kendal  memiliki  kawasan  terumbu karang  seluas  11,7  hektar  diperairan  utara Kendal (1). Masyarakat kota Kendal sebagian besar bermata pencaharian sebagai  nelayan  dan  laut  menjadi  sumber penghasilan  utama.  Sumber  penghasilan utama dari laut adalah ikan, selain ikan yang dihasilkan  dari  laut  ada  juga  berbagai  jenis kerang  seperti  kerang  darah  ( Anadara granosa ),  kerang  bulu  ( Anadara  antiquata ) dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis ).  Kerang darah  dan  kerang  hijau  paling  banyak diminati  oleh  masyarakat,  selain  bernilai ekonomis,  merupakan  sumber  protein  yang penting bagi tubuh.
Pemanfaatan hasil laut di Kendal sudah maksimal, tetapi pemanfaatan limbah belum maksimal  untuk  kebutuhan  penghasilan sehari-hari. Masyarakat pesisir hanya mengkonsumsi  daging  kerangnya  dan  tidak memanfaatkan limbah dari cangkang kerang. Cangkang dari kerang sebagian besar hanya menjadi limbah dan belum ada pemanfaatan atau sebagai bentuk kerajinan (2). Faktanya daging  dan  cangkang  kerang  dapat  diolah menjadi  produk  kecantikan  dan  sumber vitamin  bagi  tubuh.  Daging  kerang  darah mengandung gizi dan mineral seperti vitamin B1,  zat  besi,  seng,  selenium  serta  sebagai sumber protein. Kandungan didalam cangkang  kerang  berupa  Ca + 98,7%,  Mg 0,0476%,  Na  0,9192%,  P  0,0183%,  K 0,0398%  dan  lebih  dari  71%  protein  kulit adalah  kolagen  (3)  dan  (4).  Kolagen  dapat digunakan  dalam  bidang  industri  seperti produk  perawatan  wajah,  rambut,  tubuh seperti  sampo,  kondisioner,  sabun  dan kosmetik lainnya. Kolagen sebagai perawatan  tubuh  terutama  pada  kulit bermanfaat sebagai pengenyal dan menjadikan  kulit  terlihat  lebih  kencang, proses  untuk  mendapatkan  kolagen  harus melalui ekstraksi (5). Penelitian sebelumnya,
ekstraksi  dilakukan  untuk  mendapatkan kolagen.  Hasil  rendemen  kolagen  yang dihasilkan sebesar 2,03% dengan konsentrasi asam asetat 0,75 M. Perendaman  kolagen  dipengaruhi  oleh konsentrasi  asam  asetat.  Semakin  tinggi konsentrasi  asam  assetat  maka  akan memberikan  hasil  rendemen  kolagen  yang cukup  besar  (6).  Kolagen  dapat  menembus komponen utama lapisan kulit dermis (bagian bawah  epidermis)  yang  dibuat  oleh  sel fibroblast.  Berdasarkan  hasil  penelitian sebelumnya  menurut  (6),  jenis  cangkang kerang  darah dan hijau  memiliki  kandungan kolagen setelah dihilangkan gugus asetilnya dari bentuk kitosan. Sehingga kolagen yang dihasilkan  akan  di  buat  menjadi  bentuk sediaan  agar  dapat  dimanfaatkan  menjadi lebih baik.
Berdasarkan  uraian  diatas  peneliti tertarik  penelitian  tentang  dua  cangkang kerang  ini.  Tujuan  penelitian  ini  adalah mengetahui  konsentrasi  efektif  masing- masing cangkang kerang darah dan cangkang  kerang  hijau  pada  uji  fisik  krim kolagen  terhadap  kulit  tikus  putih  ( Ratus novergicus ) jantan.

## METODE

## Penghilangan protein non kolagen
Cangkang  kerang  dibersihkan  dan diserbukkan.  Sampel  kemudian  ditimbang dengan perbandingan 1:20 (b/v) lalu direndam dalam larutan NaOH 0,1 M selama 24  jam.  Sampel  disaring  memakai  kertas saring,  lalu  dicuci  dengan  aquadest  hingga pH sampel mendekati atau mencapai pH 7.

## Proses ekstraksi kolagen
Ekstraksi  kolagen  dilakukan  dengan perendaman  dalam  asam  asetat.  Sampel ditimbang  dua  kali,  dengan  perbandingan bobot sampel dan volume larutan 1:10 (b/v), kemudian  diberi  kode  perlakuan  A(7). Perlakuan  A  dimaserasi  dalam  asam  asetat 0,75  M  dimaserasi  selama  3  hari.  Hasil ekstraksi  perlakuan  A  disaring  kemudian  di presipitasi  secara  salting  out  dengan menambahkan  NaCl  0,9  M  (8).  Selanjutnya disentrifugasi  selama  10  menit  dengan kecepatan 10.000 rpm untuk mengendapkan serat-serat  residu  kolagen  basah.  Hasil
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan
pemisahan  kemudian  disaring  dan  dioven dengan  suhu  60 o C  selama  satu  hari  untuk mendapatkan kolagen kering. Kolagen kering tersebut kemudian ditimbang untuk menghitung  jumlah  rendemen  yang  didapat (9) .

## Rendemen kolagen
Kolagen kering yang diperoleh disiapkan,  kemudian  ditimbang  dan  dicatat hasilnya. Perhitungan rendemen dapat dilhat pada rumus persamaan 1 (10)(4).
Rendemen% = bobot kolagen kering bobot  awal serbuk 𝑥 100% ... 1.

## Pembuatan sediaan krim
Formulasi sediaan krim kolagen cangkang kerang darah dibuat empat sediaan, masing- masing  30 g  dengan variasi  jumlah kolagen (zat  aktif).  Literatur  dari  Formularium Indonesia  (11)  dengan  formulasi  sebagai berikut:
Prosedur  kerja  :  Semua  alat  dan  bahan disiapkan  untuk  praktikum.  Bahan  yang dibutuhkan  krmudian  ditimbang.  Bagian  A (cera alba, asam stearat dan vaselin album) dipanaskan  diatas  waterbath  pada  suhu 700C  hingga  meleleh,  sedangkan  bagian  B (trietanolamin,  air  dan  nipagin)  dilarutkan dalam air hangat pada suhu 700C. Bagian B dituang ke dalam bagian A. Serbuk kolagen cangkang kerang darah ditambahkan, diaduk hingga  terbentuk  sediaan  krim.  Aquadest diadkan  hingga  30  .  Analisa  dan  evaluasi hasil dilakukan.

## Evaluasi sediaan krim
Evaluasi krim dilakukan pada awal pembuatan dan setelah satu bulan penyimpanan,  sediaan  krim  yang  diamati meliputi : uji organoleptis, yaitu sediaan yang telah dibuat dilakukan pengamatan terhadap penampilan sediaan meliputi bau, warna dan konsistensi  sediaan.  Diulangi  pengujian organoleptis  pada  setiap  formula  masing- masing lima kali. Uji homogenitas, dilakukan dengan cara krim ditimbang ±0,1 g kemudian diletakkan pada objek glass dan ditutup objek glass lainnya, selanjutnya sediaan krim diberi beban  1  kg  selama  5  menit,  setelah  itu dilakukan pengamatan dengan kaca
pembesar.  Diulangi  pengujian  homogenitas pada  setiap  formulasi  masing-masing  lima kali.  Uji  daya  sebar,  dilakukan  dengan meletakkan ±0,5 g krim pada lempeng kaca berskala  dan  diatasnya  ditutup  kaca  yang sama,  kemudian  diberi  beban  dengan  berat 50 g dan 100 g selama 2 menit, selanjutnya diukur  besarnya  diameter  penyebaran  yang terbentuk  (cm).  Pengujian  daya  sebar diulangi pada setiap formula masing-masing lima kali (10).

## Pengujian tipe krim
Pemeriksaan tipe krim dilakukan dengan  cara  memberikan  satu  tetes  larutan metilen  biru  pada  0,1  g  krim,  kemudian diamati  penyebaran  warna  metilen  biru dalam  sediaan  di  bawah  mikroskop.  Jika warna  menyebar  secara  merata  pada sediaan krim, berarti tipe krim adalah minyak dalam  air  (M/A),  tetapi  jika  warna  hanya berupa bintik-bintik berarti tipe krim adalah air dalam minyak (A/M).

## Pengujian pH krim
Pemeriksaan dilakukan dengan menggunakan  alat  pH  meter.  Pemeriksaan pH dilakukan dengan mencelupkan elektroda ke dalam 1 g sediaan krim yang diencerkan dengan air suling hingga 10 mL.

## Penyiapan kulit tikus
Tikus  yang  digunakan  merupakan tikus jantan umur kurang lebih 2 bulan, berat 200-400 g. Penyiapan mulai dari tikus dicukur di  bagian  punggung  menggunakan  alat pencukur.  Tikus  yang  telah  dicukur,  diukur diameternya 2,8 cm. Kulit yang sudah dicukur dilakukan  orientasi  terlebih  dahulu.  Siapkan tikus  yang  sudah  dicukur  kemudian  diolesi basis  krim  sebagai  orientasi  kontrol  negatif. Krim kolagen dioles ke kulit tikus yang telah dicukur  sebanyak  50  mg  pada  masing- masing sampel sampai kulit tertutup dengan lapisan krim kolagen.
Setelah itu diamati antara kulit dengan basis krim  dan  kulit  yang  sudah  diolesi  krim kolagen,  dalam  waktu  dan  menit  keberapa terjadi  perubahan  bentuk,  warna,  bau  dan kelembaban kulit catat hasilnya.
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan

## Evaluasi kulit
Pemeriksaan organoleptis, Pemeriksaan organoleptis meliputi
pengamatan  bentuk,  warna,  bau  dari  kulit yang dihasilkan. Kelembaban kulit,
Pengukuran
kelembaban yaitu menggunakan  alat  pengukur  kelembaban kulit  ( skin  mouisture  meter )  sebelum  di  beri krim dan sesudah di beri krim kolagen.

## HASIL

## Kadar Rendemen Kolagen
Hasil rendemen dari ekstraksi sampel cangkang kerang darah yang menggunakan konsentrasi 0,75 M dapat dilihat pada tabel 1. Dari  tabel  1.  menunjukan  bahwa  hasil
persentase  rendemen  kolagen  cangkang kerang  hijau  1,287%  sementara  kerang darah  1,257%  artinya  konsentrasi  asam asetat  paling  baik  yang  digunakan  0,75  M berdasar  dari  penelitian  sebelumnya  . Konsentrasi larutan asam asetat yang tinggi dapat  menyebabkan  (6)  penurunan  kadar protein karena asam asetat akan menghidrolisis  ikatan  peptida  lebih  kuat sehingga akan terjadi kehilangan protein (3).

## Hasil Uji FTIR
Hasil FTIR Kolagen Cangkang
Kerang  Darah  dapat  dilihat  pada  gambar  1.
Gambar  2,  merupakan  hasil  FTIR  Kolagen Cangkang Kerang Hijau(7).

## Tabel 1. Kadar Rendemen Kolagen
Sampel Berat awal Kolagen kering Rendemen Cangkang Kerang Hijau 800,0005 g 10,3023 g 1,287% Cangkang Kerang Darah 800,007 g 10,2003 g 1,257%
Tabel 2. Hasil Pengujian Evaluasi Krim Kolagen Cangkang Kerang Darah
Formula Warna Bau Bentuk sediaan Homogenitas  Daya sebar pH Tipe krim Kerang Darah F1 Putih Khas Padat Tidak ada butiran kasar 3,45 cm 6,53 M/A F2 Putih tulang Khas Padat Tidak ada butiran kasar 3,55 cm 6,51 M/A F3 Putih kekuningan Khas Padat berminyak Tidak ada butiran kasar 3,67 cm 6,46 M/A F4 Kekuningan Khas Padat berminyak Tidak ada butiran kasar 3,97 cm 6,41 M/A Basis Putih Tidak berbau Padat Tidak ada butiran kasar 3,47 cm 6,56 M/A Kerang Hijau F1 Putih Khas Agak kental Homogen 3,45 cm 6,5 M/A F2 Putih tulang Khas Agak kental Homogen 3,56 cm 6,53 M/A F3 Putih kekuningan Khas Agak lembek Homogen 3,67 cm 6,41 M/A F4 Kekuningan Khas Agak lembek Homogen 3,98 cm 6,5 M/A Basis Putih Khas Kental Homogen 3,55 cm 6,5 M/A Keterangan: Basis = Basis Krim
F1 = Formulasi  Konsentrasi kolagen 1% F2 = Formulasi Konsentrasi kolagen 5% F3 = Formulasi Konsentrasi kolagen 10% F4 = Formulasi Konsentrasi kolagen 15%
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan
Tabel 3.Hasil Pengujian Kelembaban Krim Kolagen Terhadap Kulit Tikus
Keterangan : Basis = Basis Krim ±SD    = Standar Deviasi F1       = Formulasi  Konsentrasi kolagen 1% F2       = Formulasi Konsentrasi kolagen 5% F3       = Formulasi Konsentrasi kolagen 10% F4       = Formulasi Konsentrasi kolagen 15%
Gambar 1. Hasil FTIR Kolagen Cangkang Kerang Darah
Gambar 2. Hasil FTIR Kolagen Cangkang Kerang Hijau
Hari Mean ± SD Basis (%) ± SD F1 (%) ± SD F2 (%) ± SD F3 (%) ± SD F4 (%) ± SD Kerang Darah 1 10.5 0.907 10.83 0.208 11.66 0.651 13.3 0.361 15.96 0.907 2 10.3 0.651 13.0 0.436 13.1 0.600 15.53 0.529 17.66 0.755 3 10.3 0.252 14.13 0.513 14.26 0.379 17.1 0.529 19.46 0.700 4 10.05 0.569 14.4 0.500 15.26 0.493 18.16 0.503 20.16 0.404 5 10.01 0.300 13.8 0.100 14.63 0.306 16.86 0.153 18.9 0.208 6 10.0 0.200 13.4 0.265 13.23 0.153 15.96 0.503 18.3 0.252 7 10.1 0.416 12.2 1.082 12.36 0.200 14.86 0.153 17.46 0.416 Kerang Hijau 1 10.6 0.907 11.3 0.200 11.8 0.872 14.50 0.656 16.3 0.819 2 10.3 0.651 13.0 0.513 13.16 0.884 15.83 0.603 17.63 0.404 3 10.2 0.252 14.3 0.503 14.36 0.608 17.1 0.579 19.46 0.525 4 10.05 0.569 14.36 0.529 15.90 0.651 18.16 0.416 20.16 0.569 5 10.00 0.300 13.40 0.436 14.66 0.803 16.76 0.531 18.90 0.569 6 10.04 0.200 13.46 0.306 13.3 0.834 15.96 0.500 18.46 0.453 7 10.02 0.416 12.30 0.385 12.30 0.734 14.9 0.872 17.46 0.686
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan

## Hasil  Pengujian  Evaluasi  Krim  Kolagen Cangkang Kerang Darah
Uji  evaluasi  krim  merupakan  unsur penting dalam menentukan kualitas sediaan. Evaluasi krim dapat diukur pada sediaan krim kolagen  cangkang  kerang  darah  meliputi organoleptis,  homogenitas,  daya  sebar,  uji pH dan tipe krim. Hasil pengujian karakteristik  dapat  dilihat  pada  tabel  2. Pengujian  organoleptis  hasil  evaluasi  krim kolagen  dilakukan  dengan  pengamatan secara visual meliputi warna, bau dan bentuk sediaan.  Hasil  pengujian  organoleptis  krim kolagen cangkang kerang darah pada tabel 2 menunjukkan  bahwa  formula  1  berwarna putih,  formula  2  berwarna  putih  tulang, formula  3  berwarna  putih  kekuningan, formula 4 berwarna kekuningan dan formula 5  dengan  basis  berwarna  putih.  Bentuk sediaan  krim  dari  formula  1,  2  dan  5 berbentuk padat sedangkan formula 3 dan 4 berbentuk padat berminyak.
Sedangkan  pada  kerang  hijau,  hasil pengujian organoleptis krim kolagen cangkang  kerang  hijau  pada  tabel  2 menunjukkan bahwa formula 1 dan formula 2 berwarna  putih  dan  putih  tulang,  bau  khas dan  konsistensi  agak  kental.  Formula  3 berwarna  putih  kekuningan,  bau  khas  dan konsistensi agak lembek. Formula 4 berwarna  kekuningan,  bau  khas  dan konsistensi agak lembek. Hasil uji organoleptis  menunjukkan  bahwa  formulasi krim  kolagen  cangkang  kerang  hijau  tidak adanya  perbedaan  pada  bau  tetapi  adanya perbedaan pada warna krim dan bentuknya.
Daya  sebar  krim  cangkang  kerang darah dari ke 5 formulasi menunjukkan hasil yang baik yaitu 3,45 sampai 3,97. Sedangkan cangkang kerang hijau, Daya sebar krim dari ke 5 formulasi menunjukkan hasil yang baik yaitu pada basis yaitu (3,55 cm) , F1 yaitu(3, 45  cm)  F2  yaitu  (3,56  cm),  F3  (3,67cm), F4(3,98cm).
Pada  krim  cangkang  kerang  darah, hasil  pengujian  pH  dari  ke  5  formulasi menunjukkan  bahwa  pH  yang  didapatkan berkisar antara 6,41-6,56.  Sedangkan pada krim  cangkang  kerang  hijau,  hasil  uji  pH masing-masing  sediaan  krim  adalah  antara
basisi,  F1  sampai  F4  berkisar  antara  6,5- 6,51.
Hasil Pengujian Kelembaban Krim Kolagen Terhadap Kulit Tikus Hasil Uji kulit tikus di ukur kelembabannya sebelum diolesi dengan krim kolagen  menggunakan  alat  uji  kelembaban ( moisture meter ).  Hasil uji kelembaban bisa dilihat  di  Tabel  3.  Hasil  kelembaban  dari masing-masing  kulit  tikus  sebelum  dioles dengan krim kolagen direplikasi selama 5 kali pengujian,  namun  data  yang  digunakan  3 pengujian dilihat dari hasil yang terbaik. Hasil rata-rata per- hari kelembaban kulit tikus awal dengan basis krim didapatkan hasil yaitu  hari ke  1  (10,5%),  hari  ke  2  (10,2%),  hari  ke  3 (10,1%),  hari  ke  4  (10,03)%,  hari  ke  5 (10,0%),  hari  ke  6  (10,0%),  dan  hari  ke  7 (10,0%).  Proses  penurunan  kelembaban pada kulit tikus disebabkan karena basis krim akan  bereaksi  pada  awal  pengolesan  saja karena perlakuan pada penelitian ini dilakukan hanya dengan satu kali pengolesan basis ke kulit dan perlakuaannya dilihat dari hari ke 1 sampai hari ke 7. Ketika awal pengolesan kulit tikus akan tinggi kadar kelembabannya  dibandingkan  dengan  hari ke  7  karena  basis  krim  sudah  tidak terabsorbsi ke dalam kulit tikus.
Pengujian efek krim kolagen cangkang kerang dilakukan dengan perlakuan  yang  sama.  Tikus  diolesi  dengan krim  kolagen  sebanyak  50  gram  krim, dioleskan  pada  punggung  tikus  yang  sudah dicukur kemudian pengolesan harus merata.
Sedangkan  pada  krim  cangkang kerang hijau, pengukuran pada formulasi 1% yaitu hari 1 meperoleh rata-rata (10,9%), hari ke  2  (13,0),  hari  ke  3  (14,3%),  hari  ke 4(14,36%),  hari  ke  5  (13,40%),  hari  ke  6 (13,46%) dan hari ke 7(12,30%). Pengukuran  pada  formulasi  5%  yaitu  hari  1 meperoleh  rata-rata  (11,8%),  hari  ke  2 (13,16%),  hari  ke  3  (14,36%),  hari  ke  4 (15,9%),  hari  ke  5(14,66%),  hari  ke  6 (13,30%) dan hari ke 7(12,30%). Pengukuran pada formulasi 10% yaitu hari 1 meperoleh  rata-rata  (14,50%),  hari  ke  2 (15,83), hari ke 3 (17,1%), hari ke 4(18.16%), hari  ke  5(16,76%),  hari  ke  6  (15,96%)  dan
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan
hari  ke  7(14,90%).    Pengukuran  pada formulasi  15%  yaitu  hari  1  meperoleh  rata- rata  (16,50%),  hari  ke  2  (17,63),  hari  ke  3 (19,46%),  hari  ke  4  (20,16%),  hari  ke 5(18,90%), hari ke 6 (18,46%) dan hari ke 7 (17,46%).

## Hasil analisis data menggunakan software SPSS
Analisa  statistik  uji  mann  whitney bertujuan  untuk  mengetahui  perbedaan signifikan  antar  kadar  kelembabapan.  Hasil uji mann  whitney diketahui  bahwa  nilai Asymp.  Sig.  (2-tailed )  sebesar  0,000  atau p<0,05  artinya  konsentrasi  berpengaruh terhadap kelembapan.

## PEMBAHASAN

## Kadar Rendemen Kolagen
Hasil  persentase  rendemen  kolagen cangkang  kerang  hijau  1,287%  sementara kerang  darah  1,257%  artinya  konsentrasi asam asetat paling baik yang digunakan 0,75 M  berdasar  dari  penelitian  sebelumnya  (6). Konsentrasi larutan asam asetat yang tinggi dapat menyebabkan penurunan kadar protein karena asam asetat akan menghidrolisis  ikatan  peptida  lebih  kuat sehingga akan terjadi kehilangan protein (3). Selain  itu,  konsentrasi  kolagen  cangkang kerang  hijau  lebih  besar  karena  ukuran cangkang kerang hijau lebih besar dibangdingkan  cangkang  kerang  darah.  Ini dapat  dilihat  sebelum  menjadi  kolagen kitosan  cangkang  kerang  hijau  lebih  besar. Namun  untuk  warna  dari  cangkang  kerang tidak  mempengaruhi  banyak  sedikitnya kolagen yang dihasilkan.

## Hasil Uji FTIR
Kolagen  yang  diperoleh  kemudian dilakukan  uji  FTIR (Fourier  Trasform  Infra Red) untuk  menganalisis  stuktur  kolagen. Sampel  ditambah  KBr  (1:100),  kemudian dihaluskan  dan  dihomogenkan.  Kemudian dibaca serapannya. Hasil ini mempresentasikan  gugus  gugus  yang  ada pada  kolagen  cangkang  kerang  darah adalah,  gugus  amida  I  (16553  cm -1 )  pada
wilayah serapan
1600-1700 cm -1 menunjukan adanya C-0 stretch (12) , amida II 1556,81 (1480-1575 cm -1 ) menunjukan C- N stretching dan NH bending (13), dan amida III pada 3445 (3400-3445 cm -1 ) menunjukan NH  stretch  (12).Pada  kerang  hijau  daerah amida I adalah di 1610,78 (1600-1700 cm-1) menunjukan adanya C-0 stretch (12), amida II pada 1557,937 (1480-1575 cm -1 ) menunjukan C-N stretching dan NH bending (13),  dan  amida  III  pada  3413    (3400-3445 cm -1 )  menunjukan  NH  stretch  (12).  Gambar 3. Sruktur  kolagen.
Gambar 3. Stuktur Kolagen
Formulasi Krim Kolagen Cangkang

## Kerang Darah
Ekstrak  kolagen  yang  telah  di hasilkan  dari  proses  ekstraksi  kemudian dijadikan  bahan  untuk  pembuatan  krim. Sediaan  krim  yang  dihasilkan  sangat  baik, tidak  lengket  dan  homogen.  Sediaan  krim berupa  padat  kental  berwarna  putih  agak kekuningan  dan  mudah  diaplikasikan  pada obyek yang dituju.

## Hasil Pengujian Evaluasi Krim Kolagen Cangkang Kerang Darah
Uji  evaluasi  krim  merupakan  unsur penting dalam menentukan kualitas sediaan. Evaluasi krim dapat diukur pada sediaan krim kolagen  cangkang  kerang  darah  meliputi organoleptis,  homogenitas,  daya  sebar,  uji pH dan tipe krim.
Pengujian organoleptis hasil evaluasi krim kolagen dilakukan dengan pengamatan secara visual meliputi warna, bau dan bentuk sediaan.  Hasil  pengujian  organoleptis  krim kolagen  cangkang  kerang  darah  dan  hijau pada Tabel 2. menunjukkan bahwa formula 1 berwarna  putih,  formula  2  berwarna  putih tulang, formula 3 berwarna putih kekuningan, formula 4 berwarna kekuningan dan formula
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan
5  dengan  basis  berwarna  putih.  Bentuk sediaan  krim  cangkang  kerang  darah  dari formula  1,  2  dan  5  berbentuk  padat sedangkan formula 3 dan 4 berbentuk padat berminyak  sementara  pada  cangkag  keran hijau formula 1 dan 2 agak kental, formula 3 dan  4  agak  lembek.  Adanya  perbedaan bentuk  sediaan  pada  krim  dikarenakan semakin  banyak  zat  aktif  (kolagen)  yang digunakan semakin banyak maka kandungan minyak  yang  terdapat  dalam  krim  akan semakin  lembab.  Konsentrasi  kolagen  10% dan 15% lebih melembabkan pada basis krim dari penelitian sebelumnya dengan konsentrasi kolagen 5% (14).
Hasil  pengujian  daya  sebar  dapat dilihat pada  tTabel 2. Uji daya sebar adalah kemampuan  menyebar krim pada kulit yang digunakan  untuk  mengetahui  saat  krim diaplikasikan. Krim yang baik harus tersebar merata  saat  digunakan  dikulit.  Daya  sebar krim  dari  ke  5  formulasi  menunjukkan  hasil yang  baik  yaitu  3,45  sampai  3,97  untuk sediaan  dari  cangkang  kerang  darah sementara  3,45  sampai  3,55  untuk  sediaan dari cangkang kerang hijau. Perbedaan daya sebar terjadi karena apabila ada penambahan  zat  lain  di  dalam  krim  yang sifatnya  berminyak  maka  daya  sebar  akan semakin lama atau lebih luas diameter yang dihasilkan.
Uji  homogenitas  sangat  diperlukan dalam  pembuatan  suatu  krim.    Keuntungan dari  uji  homogenitas untuk  mengetahui  krim yang dibuat homogen dan ketika pemakaian dapat  merata  pada  permukaan  kulit  tanpa ada  butiran  kasar.  Hasil  pengujian  dari  5 formulasi dari 2 sampel tersebut menunjukkan hasil yang baik yaitu tidak ada butiran kasar.
Penetapan  pH  hal  ini  diuji  untuk mengetahui    pH  dari  sediaan  yang  dibuat. Hasil pengujian pH dari ke 5 formulasi dari 2 sampel  tersebut  menunjukkan    bahwa  pH yang  didapatkan  berkisar  antara  6,41-6,56. Dari hasil uji pH krim sesuai dengan rentang pH  krim  berkisar  antara  4,5-6,5  (10). Semakin tinggi konsentrasi kolagen didalam krim  pada  semakin  tinggi  nilai  pH  yang dihasilkan.
Hasil Pengujian Kelembaban Krim Kolagen Terhadap Kulit Tikus Hasil Uji kulit tikus di ukur kelembabannya sebelum diolesi dengan krim kolagen  menggunakan  alat  uji  kelembaban ( moisture meter ).  Pengujian ini dimaksudkan untuk  melihat  kolagen  yang  dihasilkan  dari cangkang  kerang  darah  dan  hijau  dapat melembabkan  kulit  tikus  atau  tidak  dari kandungan  beberapa  gugus  amida  pada struktur kolagen hasil dari FTIR.
Kelembaban  krim  merupakan  cara untuk memastikan agar sediaan yang dibuat dapat  memberikan  efek  sebagai  pelembab sehingga aman digunakan. Uji krim kolagen pada penelitian ini dilakukan dengan metode oles  langsung  pada  hewan  uji  tikus  putih jantan.  Penggunaan  tikus  jantan  dipilih karena  agar  saat  penelitian  zat  aktif  yang terabsorbsi pada permukaan kulit tikus tidak memperngaruhi pada hormon tikus tersebut.
Jumlah  tikus  jantan  yang  digunakan untuk  uji  krim  kolagen  adalah  sebanyak  25 ekor tikus usia 3 bulan dengan berat badan 160-200 gram. Pemilihan tikus ini dimaksudkan  agar  terdapat  keseragaman dalam penelitian. Jumlah tikus yang digunakan  untuk  uji  krim  kolagen  sebagai pelembab berkisar antara 10-30 tikus jantan (15).  Tikus  jantan  yang  dibagi  menjadi  5 kelompok  yaitu  kelompok  kontrol  negatif dengan basis krim dan 4 kelompok uji dengan krim kolagen dari konsentrasi 1%, 5%, 10% dan  15%.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  berapa  konsentrasi  kolagen yang  digunakan  agar  dapat  melembabkan pada kulit tikus.
Perlakuan  awal  punggung  tikus dicukur  terlebih  dahulu  agar  rambut-rambut dari tikus tidak mengganggu saat pengolesan krim  kolagen.  Punggung  tikus  dicukur dengan  diameter  sekitar  2,8  cm  pada masing-masing  tikus  yang  akan  digunakan untuk  uji  coba.  Selanjutnya  masing-masing tikus di ukur kelembabannya sebelum diolesi dengan  krim  kolagen  menggunakan  alat  uji kelembaban ( skin mouisture meter ).
Hasil kelembaban dari masing- masing  kulit  tikus  sebelum  dioles  dengan krim  kolagen  direplikasi  selama  5  kali pengujian,  namun  data  yang  digunakan  3
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan
pengujian dilihat dari hasil yang terbaik. Hasil rata-rata per-hari kelembaban kulit tikus awal dengan basis krim didapatkan hasil yaitu hari ke  1  (10,5%),  hari  ke  2  (10,3%),  hari  ke  3 (10,1%),  hari  ke  4  (10,03%),  hari  ke  5 (10,01%),  hari  ke  6  (10,0%),  dan  hari  ke  7 (10,0%)  untuk  sampel  cangkang  kerang darah  sementara  hasil  sampel  cangkang kerang hijau yaitu hari ke 1 (10,6%), hari ke 2 (10,2%),  hari  ke  3  (10,1%),  hari  ke  4 (10,04%),  hari  ke  5  (10,01%),  hari  ke  6 (10,0%),  dan  hari  ke  7  (10,0%)    .  Proses penurunan  kelembaban  pada  kulit  tikus disebabkan karena basis krim akan bereaksi pada awal pengolesan saja karena perlakuan pada  penelitian  ini  dilakukan  hanya  dengan satu  kali  pengolesan  basis  ke  kulit  dan perlakuaannya  dilihat  dari  hari  ke  1  sampai hari ke 7. Ketika awal pengolesan kulit tikus akan tinggi kadar kelembabannya dibandingkan dengan hari ke 7 karena basis krim  sudah  tidak  terabsorbsi  ke  dalam  kulit tikus.
Pengujian efek krim kolagen cangkang kerang dilakukan dengan perlakuan  yang  sama.  Tikus  diolesi  dengan krim  kolagen  sebanyak  50  gram  krim, dioleskan  pada  punggung  tikus  yang  sudah dicukur kemudian pengolesan harus merata. Pengujian  krim  kolagen  dilakukan  selama  7 hari, kemudian hasil data di rata –rata dari tiap formulasi.  Hasil  data  pengujian  kelembaban dapat dilihat pada tabel 5.
Kelembaban  yang  didapatkan  dari  4 konsentrasi  menunjukkan  hasil  bahwa  krim kolagen  pada  awal  pengolesan  dikulit  tikus mengalami kelembaban dari rendah kemudian  meningkat  pada  hari  senin, kemudian  setelah  itu  terjadi  penurunan kelembaban  dari  hari  selasa  sampai  kamis. Hal ini terjadi karena proses absorbsi zat aktif berupa  kolagen  pada  awal  pengolesan terlihat  mengalami  kenaikan  dari  hari  sabtu sampai hari minggu namun puncak kenaikan kelembaban  kulit  terjadi  pada  hari  senin. Proses peningkatan kelembaban dikarenakan  suatu  krim  yang  terdapat kolagen mengalami absorbsi yang sempurna selama  kurang  lebih  pada  pemakaian  awal selama  4  hari.  Semakin  lama  krim  kolagen yang  menempel  pada  kulit  punggung  tikus
maka  kolagen  tidak  akan  bereaksi  karena pengolesan krim kolagen pada percobaan ini dilakukan hanya sekali oles dan perubahannya dilihat dari hari ke 1 dan hari ke 7.
Manfaat  kolagen  didalam  suatu  krim sebagai zat aktif yang berfungsi sebagai efek pelembab apabila dilakukan pengujian pada punggung  kulit  tikus.  Pemberian  krim  pada kulit merupakan cara memberikan obat pada kulit  dengan  mengoleskan  yang  bertujuan untuk mempertahankan kulit dari hidrasi atau kekeringan, melindungi permukaan kulit dan merawat  kelembaban  pada  kulit.  Semakin tinggi kolagen yang dioleskan pada kulit tikus maka  akan  menghasilkan  kulit  yang  lebih kenyal. Dari uji percobaan selama 7 hari dari 4  konsentrasi  kolagen  didapatkan  hasil bahwa kulit dengan basis krim terlihat bahwa kulit masih tipis dan berwarna merah muda, setelah  dioleskan  dengan  krim  kolagen konsentrasi 1% terjadi perubahan warna kulit mulai berubah dan tekstur kulit mulai kenyal. Pada  konsentrasi  5%,  10%  dan  15% perubahan semakin menonjol dengan warna kulit semakin pekat dari awal dan tekstur kulit semakin  kenyal  sesuai  dengan  tingginya konsentrasi kolagen yang dipakai pada krim tersebut.
Pengujian  krim  kolagen  dilakukan pada bagian kulit  punggung tikus. Pemilihan punggung  sebagai  bagian  tikus  yang digunakan  untuk  percobaan  karena  struktur penyusun  kulit  terdiri  dari  edipermis,  dermis dan hipodermis. Dari situ dapat  disimpulkan bahwa  proses  penyerapan  zat  aktif  kolagen yang terjadi pada kulit dari jaringan-jaringan struktural  dikulit  terjadi  secara  baik  karena metode  yang  digunakan  adalah  metode langsung  ke  pusat  yang  dituju  yaitu  krim terhadap  kulit  tikus.  Krim  kolagen  mulai menyerap  ke  dalam  jaringan  kulit  tikus sehingga terjadi perubahan kelembaban kulit dari  jenis  kulit  yang  tidak  begitu  lembab menjadi  lebih  lembab  dan  tekstur  kulit  lebih kenyal.  Proses  penyerapan  krim  kolagen tidak  terjadi  secara  langsung  namun  dilihat dulu  selama  1  hari  dalam  waktu  yang berbeda,  dari  situ  dapat  dilihat  bahwa kelembaban  kulit  tikus  dari  jam  1  dan seterusnya  terjadi  perubahan.  Perubahan
Uji  kelembapan  krim  kolagen  cangkang  kerang  darah ( Anadara  granosa )  dan  kerang  hijau  ( Mytilus  viridis )  pada kulit tikus putih ( Rattus novergicus ) jantan
yang  terjadi  karena  zat  aktif  kolagen mempunyai  efek  sebagai  pelembab  pada kulit  tikus  sehingga  penelitian  ini  berhasil (Setiadi, 2007).

## KESIMPULAN
Krim kolagen cangkang kerang darah ( Anadara  granosa )  dan  cangkang  kerang hijau (Mytilus viridis) dapat memberikan efek sebagai pelembab pada kulit tikus setelah 7 hari pemakaian pada kulit tikus. Konsentrasi yang  paling  optimal  sebagai  efek  pelembab pada kulit tikus yaitu konsentrasi 15%

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kepada pemberi dana hibah PDP
Kementerian
Riset,
Teknologi, dan
Pendidikan Tinggi.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Kementerian Kelautan dan Perikanan. Pusat  Data,  Statistika  dan  Informasi: Perkembangan Produksi Udang Indonesia Tahun 2009-2014. Kementerian Kelautan dan Perikanan. Jakarta.; 2015. 2. Wahyuningtias. Analisis Biologi Reproduksi Kerang Darah (A.granosa) di Perairan Bojonegara, Teluk Banten, Banten. 2010. 3. Tridhar  NA.  Perbandingan  Produksi Kolagen  dari  Sisik  dan  Tulang  Ikan
Gurami (Osphronemus gouramy) Secara  Kimia  dan  Enzimatis.  Skripsi. Fakultas Teknik Universitas Pasundan, Bandung; 2016. 4. Nurjanah, Zulhamsyah K. Kandungan
Mineral  dan  Proksimat  Kerang  Darah (Anadara granosa) Yang Diambil Dari Kabupaten  Boalemo,  Gorontalo.  Bul Teknol  Has  Perikanan,  Fak  Perikan dan  Ilmu  Kelaut  Inst  Pertan  Bogor, Bogor. 2005;
5. Latifah. Karakteristik Morfologi Kerang Darah. Dep Teknol Has Perairan, Fak
Perikan dan Ilmu Kelautan, Inst Pertan
Bogor, Bogor. 2011;
6. Ariyanti  A,  Dewi  M,  Hapsari  AP, Mashadi S, Farmasi PS, Farmasi PS, et al. Comparison Collagen Content Of The Shell Of A Clam Blood ( Anadara
Granosa ) Andshell Of Clam Greens ( Mytilus Viridis ) In Bandengan , Kendal
,. 2017;1(1):1 –6. 7. Fawzya  YN,  Chasanah  E,  Poernomo A, Khirzin MH. Isolasi Dan Karakterisasi  Parsial  Kolagen  Dari Teripang Gamma ( Stichopus variegatus  )  Isolation  and  Partial Characterization  of  Collagen  from Gamma  Sea  Cucumber  (  Stichopus variegatus  ).  2016;(September):91 – 100.
8. Kasim  S.  Pengaruh  variasi  Jenis Pelarut Asam Pada Ekstraksi Kolagen Dari Ikan Pari (Himantura gerrardi) dan Ikan Tuna (Thunnus sp). Maj Farm dan Farmakol Fak Farm Univ Hasanuddin, Makassar. 2013;
9. Muyonga.  Characterisation  of  acids soluble  collagen  from  skins  of  young and adult  Nile  perch  (Lates  niloticus). Food Chemistry 85 : 81-89; 2004.
10. Nurhayati,  Tazwir  M.  Ekstraksi  dan Karakterisasi Kolagen Larut Asam Dari Kulit Ikan Nila (Oreochromis niloticus). JPB  Kelaut  dan  Perikanan,  Balai Besar Penelit dan Pengemb Pengolah Prod  dan  Bioteknol  Kelaut  dan Perikanan, Jakarta. 2013;
11. RI  D.  Farmakope  Indonesia.  Edisi  IV. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.; 1978. 12. Singh,  P.,  Benjakul,  S.,  Maqsood,  S., & Kishimura H. Isolation and characterization  of  collagen  extracted from  the  skin  of  striped  catfish (Pangasianodon Hypophthalmus).
2011. Food chemistry, 124, 97-105.
13. Kong,  J.,  &  Yu  S.  Fourier  transform infrared  spectroscopic  analysis  of protein  secondary  structures.  Acta bioch bioch sin, 39(8), 549-559. 2007;
14. Roroningtyas.  Formulasi  Sediaan  Gel Lidah Buaya. Skripsi. Fakultas Farmasi. 2012. 15. Krinke GJ. The Handbook of Experimental Animals: The Laboratory
Rat. London: Academic Press; 2000.