ISSN 2807-1697  Vol 2, No 1, 2022, 55-60
https://doi.org/10.35912/jimi.v2i1.1402
Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Duri  Landak  Laut  Api (Heterocentrotus Mamillatus) sebagai
Antimikroba (Phytochemical Screening of Fire Sea Urchin (Heterocentrotus Mamillatus) Thorn Extract as

## Antimicrobial)
Rosdarni Rosdarni Universitas Mandala Waluya Kendari, Sulawesi Tenggara rosdarni@gmail.com

## Riwayat Artikel
Diterima pada 21 September 2022 Revisi 1 pada 26 September 2022 Revisi 2 pada 19 Oktober 2022 Disetujui pada 1 November 2022

## Abstract
Purpose: To determine the content of secondary metabolites in the spines  of  the  fire  sea  urchin  ( Heterocentrotus  mammilatus )  as  an antimicrobial agent.
Method: This type of research is a quasi-laboratory experiment by  taking  samples  of  fire  sea  urchins,  conducting phytochemical screening methods to determine the content of chemical  compounds,  and  methods  of  extracting  fire  sea urchins  with  ethyl  acetate  solvent  and  testing  antimicrobial properties against Escherichia coli . Results: Screening phytochemicals found in the spines of the fire sea urchin are alkaloids, flavonoids and glycosides. Fire sea urchin thorn extract has antimicrobial activity against E.coli of 5.5 mm. Limitations: Further  research  needs  to  be  done  on the  content  of primary metabolites present in sea urchins and their gonads Contribution: To  avoid  the  level  of  extinction  of  the  sea  urchin species,  the  local  government,  especially  North  Buton  Regency, needs  to  monitor  the  use  that  is  not  controlled  by  the  local community.
Keywords: Fire sea urchin, spines, Heterocentrotus, screening How to cite: Rosdarni, R. (2022). Skrining Fitokimia Ekstrak Duri
Landak Laut Api (Heterocentrotus Mamillatus) sebagai Antimikroba. Jurnal Imu Medis Indonesia , 2(1),  55-60.

## 1. Pendahuluan
Landak  laut  merupakan  salah  satu  jenis  biota  perairan  laut  yang  berasal  dari  filum Echinodermata , penyebaran Landak laut terlihat hampir di seluruh zona perairan. Diadema setosum merupakan salah satu  jenis  Landak  laut  yang  penyebarannya  di  seluruh  zona  terumbu  karang  (Ida  et  al.,  2018). Masyarakat Indonesia secara umum menyebut sea urchin atau Echinoid sebagai landak laut atau bulu babi. Landak laut mudah dikenali dari bentuknya yang mirip bola berduri. Landak laut adalah kelompok hewan yang sering dijumpai di daerah pantai dan laut di Indonesia bahkan di seluruh dunia. landak laut dapat ditemukan mulai perairan laut tropis hingga laut di daerah kutub. Hewan ini juga dapat ditemukan mulai  daerah  pasang-surut  hingga  kedalaman  5.000  meter  dan  berdasarkan  catatan  fosil Echinoidea diperkirakan muncul padapertengahan jaman ordovian. Landak laut ( Echinoid ) tertua kira-kira berumur 450 juta tahun(Vimono Indra Banyu, 2007).
Duri landak laut memiliki kandungan senyawa aktif yang bersifat toksik. Kandungan dalam cangkang dan duri landak laut telah di ketahui sampai saat ini adalah polihidroksi dan apelasterosida A dan B (Angka & Magy, 2000). Duri dan cangkang landak laut memiliki potensi sebagai antimikroba karena memiliki  kandungan  senyawa  bioaktif  yang  bersifat  toksik,  senyawa  tersebut  antara  lain  histamin, serotoin, glikosida, steroid, bahan cholinergic, dan brandykinin-like substances (Dahl et al., 2010).
Salah satu jenis landak laut yang memiliki bentuk kemiripan dengan Diadema adalah Heterocentrotus mamillatus . Heterocentrotus mamilatus umumnya dikenal sebagai landak laut pensil atau landak laut
api, Landak laut api merah yang merupakan spesies landak laut tropis dari kawasan Indo-Pasifik (Ogden et  al.,  1989).    Variasi  lain  dari Heterocentrotus  mammillatus ,  seperti  yang  hidup  di  Kepulauan Ogasawara,  memiliki  duri  yang  lebih  ramping  daripada  karakteristik  spesies  yang  berduri  lebar  dan tebal (Fujino & Takeda, 1977).
Spesies dari Heterocentrotus adalah Heterocentrotus mamillatus atau biasa disebut sebagai Landak laut Api karena pada malam hari duri Landak laut api dapat menampilkan warna lebih cerah dan terang dari yang  dimiliki  oleh  tubuhnya.  Landak  laut  api  tersebar  di  kedalaman  laut  dalam  dan  hanya  dapat ditemukan pada malam hari (Ogden et al., 1989). Toksin yang dihasilkan oleh organisme, Landak laut dapat dimanfaatkan dalam bidang pengobatan yang berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai antibiotik tipe baru untuk dikembangkan dalam bidang farmasi karena mengandung senyawa bioaktif (Abubakar et al., 2012).  Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui kandungan fitokimia yang terdapat dalam duri landak laut api sebagai agent antimikroba.

## 2. Tinjauan Pustaka
Landak  laut  merupakan  biota  perairan  yang  berasal dari filum Echinodermata yang  tersebar  hampir diseluruh  perairan. Diadema  setosum merupakan  salah  satunya  yang  tersebar  di  perairan  terumbu meliputi zona berpasir dan zona pertumbuhan alga.  Landak laut ( Echinoidea ) juga merupakan salah satu  potensi  sumber  daya  perikanan  yang  mempunyai  manfaat  besar  bagi  kehidupan  manusia  yaitu mempunyai  nilai  ekonomis  sebagai  komoditas  ekspor  dan  bernilai  gizi  yang  cukup  tinggi  terutama gonadnya (Eko et al., 2019). Landak laut mengandung senyawa naftokuinon yang merupakan senyawa yang  memiliki  aktivitas  sebagai  antimikroba,  antifungal,  antiviral,  dan  antiparsitik.  Selain  itu, naftokuinon memiliki bioaktivitas sebagai antikanker dan antoksidan yang hanya terdapat didalam sel vakuola dalam bentuk glikosida (Babula et al., 2005).
Landak laut dikenal sebagai salah satu spesies yang memiliki racun pada durinya. Hidupnya ada yang soliter dan mengelompok dan banyak ditemukan pada daerah baren di sekitar ekosistem padang lamun dan ekosistem terumbu karang. Racun tersebut tidak mematikan, namun terasa cukup perih bila salah satu anggota badan kita tertusuk oleh durinya. Duri landak laut mudah patah karena tersusun dari zat kapur (kalsium karbonat), duri tersebut hanyalah sebagai alat pertahanan tubuh Diadema  setosum dari predator  dan  racunnya  tidak  mematikan  (Nane  La,  2021).  Duri  landak  laut  memiliki  kandungan senyawa  aktif  yang  bersifat  toksik.  Diperkirakan  racun  yang  ada  dalam  duri  tersebut  dapat  juga digunakan sebagai bahan obat. Duri landak laut api ini sangat rapuh dan seperti jarum, duri landak laut dengan mudah masuk dida lam daging dan cukup tantangan untuk mengekstraknya (Angka & Magy, 2000).
Duri Landak laut memiliki potensi sebagai antimikroba karena memiliki kandungan senyawa bioaktif yang  bersifat  toksik,  senyawa  tersebut  antara  lain  histamin,  serotoin,  glikosida,  steroid,  bahan cholinergic,  dan  brandykinin-like  substances  (Dahl  et  al.,  2010).  Histamin  adalah  zat  kimia  yang diproduksi oleh sel-sel darah putih di dalam tubuh ketika tubuh mengalami reaksi alergi atau infeksi. Namun, jika zat ini diproduksi secara berlebihan, dampaknya bisa menyebabkan masalah kesehatan dan mengganggu  beberapa  fungsi  tubuh. Selain  membantu  sistem  kekebalan  tubuh  melawan  infeksi, histaminjuga  berperan  dalam  mendukung  beberapa  fungsi  tubuh  ,  yaitu  sebagai  komponen  asam lambung untuk membantu proses pencernaan serta menjadi zat kimia yang berfungsi untuk menjalankan fungsiotak (neurotransmitter) (Adrian, 2021).
Serotonin  adalah  hormon  yang  bertugas  untuk  membawa  pesan  antar  sel  dalam  otak.  Hormon  ini berperan  penting  dalam  memperbaiki  suasana  hati  menjadi  lebih  baik,  sehingga  merasa  bahagia. Seseorang yang kekurangan hormon serotonin dapat membuat suasana hatinya menjadi buruk. Jika hal ini dibiarkan, tentunya lama-kelamaan kesehatan mental dapat terganggu. Oleh karena itu, setiap orang perlu  meningkatkan  kadar  hormon  serotonin  agar  mental  tetap  sehat  (Makarin,  2021).    Glikosida merupakan  salah  satu  senyawa  jenis  alkaloid.  Alkaloid  adalah  senyawa  metabolit  sekunder  pada jaringan tumbuhan dan hewan yang memiliki atom nitrogen. Glikosida terdiri atas gabungan dua bagian senyawa, yaitu gula yang disebut dengan gliko dan bukan gula biasa disebut aglikon. Glikosida yang
menghubungkan glikon dan aglikon ini sangat mudah terurai oleh pengaruh asam, basa, enzim, air, dan panas (Rijai, 2016)
Steroid  sebagai  antibakteri  berhubungan  dengan  membran  lipid  dan  sensitivitas  terhadap  komponen steroid  yang  menyebabkan  kebocoran  pada  liposom.  Steroid  dapat  berinteraksi  dengan  membran fosfolipid  sel  yang  bersifat  permeabel  terhadap  senyawa-senyawa  lipofilik  sehingga  menyebabkan integritas membran menurun serta morfologi membran sel berubah yang menyebabkan sel rapuh dan lisis (Sapara & Waworuntu, 2016).  Bradykinin (BK) adalah neuropeptida alami (protein plasma), yang merupakan  kinin  aktif  secara  farmakologi,  berperan  dalam  kardioprotektif  atau  agen  proinflamasi. Didalam tubuh, Bradykinin berperan sebagai Vasodilator yang menyebabkan pembuluh darah melebar, sehingga tekanan darah menurun (Aloysius, 2014).
Duri landak laut api memiliki warna yang berbeda dari tubuh. Duri memiliki cincin putih di batangnya dan memiliki cincin terang dan gelap bergantian. Duri dibulatkan menjadi segitiga di penampang dan meruncing  ke  arah  ujung.    Pada  malam  hari  duri  merah  berubah  menjadi  merah  muda  berkapur. Spesimen dari Hawai cenderung memiliki duri kekuningan atau coklat sedangkan spesimen dari bagian lain Pasifik mungkin duri kekuningan  atau coklat (Dahl et al., 2010)

## 2. Metode
Jenis penelitian yang digunakan adalah metode eksperimen laboratory semu dengan melakukan tahapan pengambilan sampel Landak Laut Api, pembuatan ekstrak landak laut api dengan pelarut etil asetat dan pengujian  sifat  antimikroba  terhadap Escherichia kemudian  dilakukan  skrining  fitokimianya. Pengujian  aktivitas  antimimroba  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  difusi,  sedangkan  skrining fitokimia dilakukan dengan mereaksikan ekstrak terhadap beberapa zat uji terkait keberadaan alkaloid, flavonoid, saponin, steroid, tannin dan glikosida.

## 3. Hasil dan Diskusi
Tabel 1. Identifikasi kandungan senyawa kimia ekstrak duri landak laut api ( Heterocentrotus Mamilatus )
No Nama Senayawa Nama Pereaski Hasil Keterangan 1 Alakloid HCL 2N + Dragenddruff + Terbentuk  endapan  putih  kekuning- kuningan 2 Fenol FeCl3 - Tidak terbentuk warna hijau kebiruuan atau biru gelap 3 Flavonoid Mg + HCL pekat + Terbentuk warna orange 4 Tannin FeCl3 1% - Tidak terbentuk warna kebiruan 5 Steroid Klororfom +Asam asetat anhidrat +H3S04 pekat - Tidak  terbentuk  cincin  kecoklatan atau violet 6 Saponin H2O - Tidak terbentuk buih
7 Glikosida Asam asetat anhidrat +H2SO4 pekat + Terbentuk warna hijau
Salah satu senyawa yang digunakan dalam proses reparasi sampel untuk mnghilangkan kadar garam yang terkandung pada duri landak laut api adalah dengan menggunakan aseton.  Aseton adalah salah satu pelarut polar yang dapat melarutkan kadar garam tinggi, mampu melarutkan cat, lilin, resin dan biasa  dipakai  untuk  menghapus  cat  kuteks  pada  kuku.    Selanjutnya,  dalam  proses  ekstraksi menggunakan  etil  asetat.    Etil  asetat  bersifat  semi  polar  sehingga  dapat  melarutkan  senyawa  polar maupun  non  polar,  memiliki  toksisitas  yang  rendah  dan  mudah  diuapkan.   Hal  ini  berkaitan  dengan penjelasan (Seidel, 2008) yang menjelaskan bahwa pemilihan pelarut ekstraksi umumnya mengunakan prinsip  like  dissolves  like.  Senyawa  yang  nonpolar  akan  larut  dalam  pelarut  nonpolar  sedangkan senyawa yang polar akan larut pada pelarut polar. Sedangkan di dapatkan nya hasil negatif karna di sebabkan pelarut yang di gunakan pada proses ekstraksi tidak dapat bereaksi pada reagen pereaksi yang di gunakan dala menguji senyawa kimia tersebut.
Uji skrining fitokimia ekstrak duri landak laut api ( Heterocentrotus Mamilatus ) didapatkan hasil positif pada senyawa flavonoid, saponin dan glikosida, dan hasil negatif pada senyawa fenol, tanin, alkaloid dan triterpenoid. Pada uji Alkaloid yang direaksikan dengan dragendroff didapatkan hasil positif dengan terbentuknya warna endapan putih kekuningan pada dasar tabung. Terbentuknya endapan warna putih kekuningan  pada  dasar  tabung  tersebut  disebabkan  karena  senyawa  alkaloid  melakukan  interaksi dengan  ion  tetraiodobismutat.    Penelitian  dari  (Marliana  &  Suryanti,  2005)  menjelaskan  bahwa  jika suatu  senyawa  yang  mengandung  alkaloid  direaksikan  dengan  reagen  Dragendorf  maka  akan menghasilkan endapan berwarna coklat orange ataupun jingga, putih kekuningan yang disebabkan oleh proses interaksi alkaloid dengan ion tetraiodobismutat.  Pada uji Fenol, tidak terdeteksi, dimana ekstrak duri Landak laut api tidak mengandung gugus fenol.  Hal ini disebabkan karena tidak adanya senyawa yang terbentuk dari Fe3 dengan fenol sehingga tidak menghasilkan perubahan warna hijau kebiruan maupun biru gelap.
Selain  fenol,  tannin,  steroid  dan  saponin  juga  tidak  terdeteksi  dalam  ekstrak  duri  Landak  laut  yang direaksikan terhafap FeCl3 1%, kloroform, + asam asetat anhidrat+ H3SO4 pekat dan H2O. sedangkan penelitian yang dilakukan oleh (Dahl et al., 2010) berhasil menemukan senyawa dalam landak laut jenis Diadena yaitu histamin, serotoin, glikosida, steroid, bahan cholinergic dan brandykinin-like substances. Pada  uji  flavonoid  yang  direaksikan  dengan  pereaksi  HCL  pekat  menunjukan  hasil  positif  dengan ditandai terbentuknya warna orange pada tabung ekstrak duri yang di campurkan dengan pereaksi HCL pekat.   Hal ini menandakan bahwa flavonoid mudah larut dalam pelarut polar. Penelitia  (Siahaan & Alimudin,  2015)  yang  menjelaskan  bahwa  Flavonoid  memiliki  ikatan  dengan  gugus  gula  yang menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air atau pelarut yang bersifat polar seperti HCL.
Pada  uji  Glikosida  yang  direaksikan  dengan  pereaksi  asam  asetat  anhidrat  di  dapatkan  hasil  positif dengan terbentuknya warna hijau pada campuran ekstrak duri landak laut api dan pereaksi yaitu asam asetat anhidrat, yang menandakan bahwa pereaksi asam asetat anhidrat dapat bereaksi dengan pelarut etil asetat. Pada pengujian efektivitas antibakteri menggunakan antibiotik Titracyline sebagai kontrol positif karena, pada penelitian ini menggunakan bakteri patogen yang tergolong gram positif dan gram negatif.  Hal  ini  merujuk  pada  pernyataan  (Putri  et  al.,  2015)  yang  menjelaskan  bahwa  Tetrasiklin merupakan antibiotik yang bekerja aktif terhadap kebanyakan bakteri gram positif dan  gram negatif. Ditimbang 0,05 gram tetracyline kemudian di simpan pada cawan petri bersih dan kering kemudian di larutkan menggunakan aquades steril setelah itu di masukan kertas saring kedalam cawan petri tersebut.
Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan tahapan pembuatan kosentrasi ekstrak duri landak laut menggunakan  konsentrasi  ekstrak  25%.50%.75%,  dan  100%.  Pada  konsentrasi  25%  adalah pencampuran ekstrak duri landak laut api ( Heterocentrotus Mamilatus ) 500 mikrolit dan 75 mikrolit aquades,  konsentrasi  50%  pencampuran  550  mikrolit  ekstrak  sampel  dan  75  mikrolit  aquades,  75% pencampuran  1200  mikrolit  ekstrak  sampel  dan  75  mikrolit  aquades,  dan  konsentrasi  100%
pencampuran  ekstrak  sampel 2000  mikrolit  dan  75  mikrolit  aquades.   Dalam  pengujian ekstrak  duri Landak  laut  api  terhadap Escherichia  coli dengan  menggunakan  metode  difusi  cakram  pada  media MHA.  Pemilihan media MHA pada pengujian ini karena berdasarkan penjelasan (Siregar et al., 2012) yang menjelaskan bahwa media MHA merupakan media selektif dan media diferensial, dan memiliki tingkat inhibitor sulfonamide trimethorprim, dan tetrcyline yang rendah selain itu MHA mendukung pertumbuhan bakteri non-fastidious yang patogen. Setelah di inkubasi maka di ukur zona hambat yang terbentuk dengan menggunakan penggaris atau jangka sorong. Menurut  (Lingga  et al., 2015) bahwa efektivitas suata zat antibakteri diklasifikasikan ada 4 kategori yaitu < 5 mm adalah kategori lemah, 5- 10 mm adalah kategori sedang, 10-20 kategori kuat, dan >20 mm adalah kategori sangat kuat.
Pada  pengujian  efektivitas  bakteri Escherichia  coli dengan  konsentrasi  ekstrak  25%  memiliki  zona hambat  3 mm, pada konsentrasi ekstrak 50% memiliki luas zona hambat 6 mm,pada konsentrasi ekstrak 75% memiliki zona hambat 15  mm , dan pada konsentrasi ekstrak 100% memiliki zona hambat 4 mm. Berdasarkan  hasil  tersebut  dapat  dinyatakan  bahwa  ekstrak  duri  landak  laut  api  ( Heterocentrotus mamilatus ) dapat bersifat menghambat bakteri atau bakteriostatik dan dapat juga membunuh bakteri atau bersifat bakteriosida  dalam kategori sedang  pada bakteri Escherichia coli .  Rata rata besaran daya hambat  yang  dihasilkan  oleh  ekstrak  duri  Landak  laut  api  terhadap E.coli adalah  5,5  mm  dan  daya hambat tersebut termasuk kategori sedang.

## 4. Kesimpulan
Beberapa senyawa yang terkandung dalam ekstrak duri landak laut api ( Heterocentrotus mamilatus ) ditemukan  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  dan  glikosida.  Kandungan  senyawa  tersebut  menjadikan ekstrak duri Landak laut api bersifat bakteriostatik terhadap E. coli .

## Limitasi dan studi lanjutan
Penelitian  lanjutan  sangat  diperlukan  untuk  mengetahui  kandungan  senyawa  metabolit  baik  primer maupun  sekunder  secara  mendetail  pada  setiap  spesies  yang  ditemukan  pada  semua  bagian  tubuh termasuk bagian gonadnya.

## Ucapan terima kasih
Ucapan  terimakasih  kepada  Pemerintah  Daerah  kabupaten  Buton  Utara  yang  telah  memberikan  izin untuk dapat melakukan ekspllorasi terhadap landak laut yang hidup di periaran Buton utara dan tim penyelam dari desa Linsowu yang sangat antusias dalam pencarian spesies Landak laut api pada malam hari.

## Referensi
Abubakar, L., Mwangi, C., Uku, J., & Ndirangu, S. (2012). Antimicrobial activity of various extracts of  the  sea  urchin  Tripneustes  gratilla  (Echinoidea). J.  Pharmacol.  Ther.  2012 ,  1(1),  19–23. http://www.uonbi.ac.ke/journals/kesobap/
Adrian, K. (2021). Pereda Alami Reaksi Histamin. Https://Www.Alodokter.Com/Pereda-Alami-Reaksi- Histamin .
Aloysius,  J.  (2014).  Analisi  Polimorfisme  Gen  Reseptor  Bradykinin  B2  Pada  Pasien  Hipertensi  di Rumah Sakit Dr.Saiful Anwar Malang. Biotropika , 2(2). Angka,  S.  .,  &  Magy,  T.  . (2000). Bioteknologi  Hasil  Laut.  Pusat  Kajian  Sumber  Daya  Pesisir  dan Lautan .
Babula, P., R, M., D, P., V, A., R., K., L., H., & Z., S. (2005). Simultaneous determination of 1, 4- naphtoquinone, lawsone, juglone and plumbagin by liquid chromatography25 with UV detection. Biomed, Paper , 149(1).
Dahl, W. J., Jebson, P., & Louis, D. S. (2010). Sea urchin injuries to the hand: a case report and review of the literature. The Iowa Orthopaedic Journal , 30, 153–156.
Eko,  C.,  F,  J.  J.,  Lelenoh,  B.  .,  &  Kota  N.  (2019).  Karakterisasi  Kalsium  Karbonat  (CaCO3)  Dari Cangkang Landak Laut (Diadema setosum). FishtecH , 8(1), 28.
Fujino, T., & Takeda, M. (1977). Associated with Slate-pencil Sea Urchin , Heterocentrotus Associated with Slate-pencil Sea Urchin , Heterocentrotus mammillatus ( LINNAEUS ), from the Ogasawara . 3(3).
Ida, I., Hidayat, R., & Rossiana, N. (2018). Aktivitas Antibakteri Dari Bulu Babi (Diadema Setosum)
Terhadap Escherichia Coli Dan Staphylococcus aureus. Biodjati , 2(3).
Lingga,  A.  R.,  Pato,  U.,  &  Rossi,  E.  (2015).  Uji  Antibakteri  Ekstrak  Batang  Kecombrang  (Nicolaia Speciosa Horan) Terhadap Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli. JOM Faperta , 2(2). Makarin, F.(2021). Empat Cara Tingkatkan Serotonin Untuk mental yang Sehat. Https://Www.Halodoc.Com/Artikel/4-Cara-Tingkatkan-Serotonin-Untuk-Mental-Yang-Sehat.
Marliana, S. D., & Suryanti. (2005). Marliana, S. D., & Suryanti, V. (2005). Skrining fitokimia dan analisis  kromatografi  lapis  tipis  komponen  kimia  buah  labu  siam  (Sechium  edule  Jacq.  Swartz.) dalam ekstrak etanol. Biofarmasi , 3(1), 26. Nane La. (2021). Pemanfaatan Telur Landak Laut Diadema setosum di Pulau Taliabu, Maluku Utara, Indonesia.
Ogden, N. B., Ogden, J. C., & Abbott, I. A. (1989). Distribution, abundance and food of sea urchins on a leeward Hawaiian reef. Bulletin of Marine Science , 45(2), 539–549.
Putri,  M.  A.,  Herawati,  D.,  &  Kurniaty,  N.  (2015).  Pengembangan  Metode  Analisis  Antibiotik Tetrasiklin  dalam  Hati  Ayam  Menggunakan  Kromatografi  Cair Kinerja Tinggi (Kckt). Prosiding Farmasi , 79–85.
Rijai, L. (2016). Senyawa Glikosida Sebagai Bahan Farmasi Potensial Secara Kinetik. Trop. Pharm. Chem. 2016. , 3(3). Sapara, T. U., & Waworuntu, O. (2016). Efektivitas Antibakteri Ekstrak Daun Pacar Air ( Impatiens Balsamina L .) Terhadap Pertumbuhan Porphyromonas gingivalis . 5(4), 10–17. Seidel, V. (2008). Initial and Bulk Extraction . 20, 27–47.
Siahaan,  M.  R.,  &  Alimudin,  A.  H.  (2015).  Identifikasi  Metabolit  Sekunder  Ekstrak  Landak  Laut (Diadema  setosum)  Dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Escherichia  coli  dan  Staphylococcus  aureus. Kimia Katulistiwa , 4(4).
Siregar, A. F., Sabdono, A., & Pringgenies, D. (2012). No Title. Potensi Antibakteri Ekstrak Rumput Laut Terhadap Bakteri Penyakit Kulit Pseudomonas Aeruginosa, Staphylococcus Epidermidis, Dan Micrococcus Luteus , 1(2).
Vimono Indra Banyu. (2007). Sekilas Mengenal landak laut. Oseana , 32(3), 15.