## SINTESIS DAN UJI BIOAKTIVITAS SENYAWA ANALOG UK-3A

## 6-HIDROKSI-N-OKTILNIKOTINAMIDA
1 Dadan Ridwanuloh
2 Herry Cahyana
3 Muhammad Hanafi
1 Jurusan Farmasi Fakultas Tekhnik dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( dadan.ridwanuloh@ubpkarawang.ac.id )
2 Departemen Kimia, FMIPA UI, Kampus UI Depok 16424 ( herrykim@makara.cso.ui.ac.id )
3 Pusat Penelitian Kimia – Lembaga Ilmi Pengetahuan Indonesia ( muhammad.hanafi@lipi.go.id )

## UNIVERSITAS BUANA PERJUANGAN,  KARAWANG
Jl. HS Ronggowaluyo, Telukjambe Timur, Karawang

## Abstrak
Senyawa UK-3A telah diketahui merupakan senyawa aktif untuk anti kanker dan anti jamur. Senyawa  UK-3A  telah  diisolasi  sebagai  komponen  minor  dari  miselium  Streptomyces  sp. 512-02  dan  mempunyai  gugus  aktif  hidroksil,  amida,  dan  dilakton  cincin  sembilan  yang terbukti aktif menghambat pertumbuhan bakteri dan sel kanker. Untuk mensintesis senyawa tersebut  membutuhkan  proses  sintesis  yang  rumit  dan  waktu  yang  cukup  lama.  Pada Penelitian  ini    disintesis  senyawa  analog  UK-3A  yaitu  6-hidroksi-N-oktilnikotinamida berdasarkan modifikasi gugus aktif senyawa UK-3A. Modifikasi gugus aktif dalam senyawa UK-3A  dimungkinkan  untuk  mendapatkan  senyawa  analog  yang  mempunyai  bioaktivitas yang  sama  atau  lebih  aktif  dari  senyawa  UK-3A  induk  dan  dengn  reaksi  yang  sederhana. Kedua senyawa hasil sintesis tersebut diidentifikasi menggunakan KLT, 1H-NMR, dan 13C- NMR.  Hasil  uji  bioaktivitas  metode  brine  shrimp  lethality  test  (BSLT)  terhadap  kedua senyawa diperoleh nilai LC50 sebesar 41,14 μg/mL.

## Abstract
Compound  UK-3A  is  a  known  active  compounds  for  anti-cancer  and  anti-fungal.  UK-3A compound was isolated as a minor component of the mycelium of Streptomyces sp . 512-02 and  have  active  groups  hydroxyl,  amide,  and  dilakton  nine  rings  were  shown  to  actively inhibit  the  growth  of  bacteria  and  cancer  cells  .  To  synthesize  these  compounds  require complicated  synthesis  process  and  longer  periods  of  time.  In  this  study  synthesized compound  UK-3A  analogue  that  is  6-hydroxy-N-octylnicotinamide  modifications  based active group of compounds UK-3A . Modification of active groups in the compound UK-3A analogue is possible to obtain compounds that have the same bioactivity or more active than the  parent  compound  UK-3A  and  simple  with  less  reaction  .  Both  compounds  synthesized were  identified  by  TLC,  FTIR,  1H-NMR,  and  13C-NMR  .  Test  results  of  brine  shrimp lethality  bioactivity  test  method  (BSLT)  of  the  two  compounds  obtained  LC50  values  of 41,14 mg / mL.
Keywords: UK-3A, anti-cancer, Streptomyces sp.

## 1. PENDAHULUAN
Salah  satu  yang  menjadi  kajian  bagi  para  peneliti  di  bidang  kimia  farmasi  adalah eksplorasi suatu senyawa kimia aktif, baik dari alam maupun hasil sintesis.  Senyawa aktif ini digunakan untuk mengatasi penyakit-penyakit yang biasa terjangkit pada manusia yang belum didapatkan  obat  yang  tepat  untuk  mengatasinya.  Diantara  penyakit  yang  saat  ini  menjadi kajian  populer  adalah  penyakait  kanker.    Selain    Penyakit  kanker  merupakan  salah  satu penyakit  dengan  jumlah  korban  jiwa  yang  sangat  besar  di  dunia,  juga  penyebarannyapun merata di seluruh negara, baik negara berkembang maupun negara maju.
Pada  tahun  1995  Ueki telah  berhasil mengisolasi  dan  mengelusidasi  struktur  senyawa UK-2A dan UK-3A dari miselium Streptomyces sp. 517-02 (Hanafi et.al.1996). dari hasi uji bioaktivitasnya  UK-3A  diketahui  memiliki  aktifitas  yang  cukup  baik  sabegai  antikanker, antifungal  dan antijamur.  Akan  tetapi,  selain  karena  senyawa  UK-3A  merupakan komponen minor juga randemen isolatnya yang kecil serta rute atau tahapan isolasinya yang panjang dan tidak ekonomis. Oleh karena itu, berkembang riset yang mensintesis senyawa analog UK-3A dengan cara memodifikasi struktur dilaktonnya.
Gambar 1. Struktur molekul senyawa UK-2A (Hanafi, 1997).
Tabel 1. Hasil Uji Hambatan Pertumbuhan Sel Kanker Senyawa UK-2A, UK-3A dan Antimicyn A3 (IC 50 μg/mL) (Hanafi, 1995)
Sel Kanker Senyawa UK-2A Senyawa UK-3A Antimycin A3 P-388 100 38 0,015 B-16 100 18 0,02 KB 17 20 0,063 COLO-201 35 45 0,018 3T3 100 100 15
Pada  penelitian  ini  dilakukan  sintesis  dan  uji  bioaktivitas  senyawa  analog  UK-3A dengan struktur yang lebih sederhana yaitu 6-hidroksi-N-oktilnikotinamida.  Dengan struktur dan tahapan reaksi yang lebih sederhana, tetapi memiliki aktivitas yang sama dengan UK-3A bahkan bias lebih baik lagi.

## METODE PENELITIAN

## Bahana
Bahan-bahan  yang  akan  digunakan  antara  lain  asam  3-hidroksi  pikolinat  (Aldrich 15,230-7  p.a),    oktil  amin  (p.a),  disikloheksilkarbodimida  (DCC,  sigma  D3128  p.a),  dimetil amino  piridin  (DMAP,  sigma  D5640  p.a),    pelarut  organik  (metanol,  hexan,  etil  asetat), aquades, air laut, dimetil sulfoksida (DMSO), kertas saring, silika gel, dan plat kromatografi lapis tipis (KLT).

## Alat
Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kromatografi kolom, labu distilasi, hot  plate , rotary  evaporator ,  penangas  air,  lampu  UV,  Spektroskopi  IR  (FT-IR)  dan spektrometer 1 H-NMR dan 13 C-NMR,  serta peralatan gelas kimia lainnya.

## Sintesis 6-hidroksi-N-oktilnikotinamida
Senyawa  6-hidroksi- N -oktilnikotinamida  disintesis  dengan  menyediakan  labu  dasar bulat, kemudian diisi dengan 1 mmol asam 3-hidroksipikolinik, 1,2 mmol oktil amin, 1 mmol aktivator  DCC,  dan  0,1  mmol  DMAP.  Ke  dalam  labu  ditambahkan  5  ml  pelarut kloroform. Kemudian  reaksi  dilakukan  selama  24  jam  dalam  suhu  kamar.  Setelah  reaksi  berlangsung, larutan diperiksa secara kualitatif menggunakan kromatografi lempeng tipis  dengan eluen n- hexan: etil asetat 3:4 untuk mengetahui apakah rekasi sudah terbentuk atau belum.

## Uji bioaktivitas
Brine  shrimp  lethality  test (BSLT)  merupakan  uji  toksisitas  pendahuluan  yang  paling banyak  digunakan  terhadap  suatu  senyawa  bioaktif.  Keuntungan  metode  BSLT  ini  karena murah, mudah diperoleh, dapat bertahan hidup beberapa tahun dalam keadaan kering, mudah dan cepat dalam pelaksanaannya, serta hanya menggunakan peralatan yang cukup sederhana.
Larva A. salina diperoleh dengan cara menetaskan telurnya dalam air laut atau air laut buatan  selama  48  jam  (Meyer,  1992)  dengan  suhu  penetasan  antara  20-35  °C.  Pada  uji toksisitas  digunakan  larva A.  salina berumur  24 jam  sebanyak  10-15  ekor  yang  dimasukkan ke dalam vial berisi sample dengan beberapa konsentrasi berbeda, dan dibiarkan pada tempat dengan udara dan sinar yang cukup. Persentase kematian larva A. salina dihitung setelah 24 jam  pemberian  terhitung  sejak  larva  dimasukkan  ke  dalam  vial  berisi  sample  uji,  untuk kemudian  dihitung  nilai  LC 50 -nya  (konsentrasi  senyawa  uji  dalam  ppm  yang  dapat menyebabkan  kematian  sebanyak  50%  larva A.  salina di  bawah  kondisi  yang  telah ditetapkan/sesuai (Rosalina, 1996).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Sintesis 6-hidroksi-N-oktilnikotinamida
Dari hasil reaksi asam 6-hidroksi- N -nikotinat dengan oktil amin selama 24 jam setelah diperiksa  dengan  KLT  menggunakan  eluen  n-hexan  :  etil  asetat  (3:4)  sebagai  fasa  diam diperoleh 4 spot.
Karena spot 4 adalah spot yang lebih dominan dibandingkan dengan spot lainya  yang berbeda  dengan  spot  bahan  bakunya,  spot  inilah  yang  terlebih  dahulu  diisolasi.  Dari  hasil analisis, spot 4 dengan Rf=0,725 diduga sebagai senyawa target yaitu senyawa 6-hidroksi- N - oktilnikotinamida hal ini disimpulkan setalah hasil karakterisasi.
Spot 1dengan Rf=0 merupakan spot bahan baku yang masih tersisa. Hal ini ditunjukan dengan posisi spot yang sama dengan bahan baku yaitu asam 6-hidroksi- N -nikotinat. Adanya
spot  1  ini  juga  menyatakan  bahwa  reaksi  belum    sempurna.  Sedangkan  spot  2  dan3  dengan Rf=0,45  dan  Rf=0,425  merupakan  produk  samping  reaksi.  Produk  samping  reaksi  dapat terjadi karena adanya reaksi yang tidak spesifik, sehingga terjadi reaksi pada gugus aktif lain yang tidak diinginkan.
Reaksi  sintesis  6-hidroksi- N -oktilnikitinamida  ini  merupakan  reaksi  amidasi  yang diajukan mengikuti mekanisme seperti pada gambar berikut:

## Gambar 2. Usulan Mekanisme Reaksi 6-hidroksi-N-oktilnikotinamida

## Karakterisasi

## Analisis FT-IR
Analisis  sintesis  senyawa  6-hidroksi- N -oktilnikotinamida  menggunakan  FT-IR. Dibuktikan  bahwa  sintesis  senyawa  analog  UK-3A  6-hidroksi- N -oktilnikotinamida  dan  3- hidroksi-N-oktilpikolinamida sudah terbentuk. Hal ini ditunjukkan dengan adanya munculnya beberapa pita serapan yang menandakan gugus fungsi-gugus fungsi dari senyawa hasil reaksi.
Asam 6- hidroksi nikotinat D M A P D C U D M A P P 6-hidroksi- oktilnikotina mida D C C +
500 750 1000 1250 1500 1750 2000 2500 3000 3500 4000 1/cm 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 %T 37 34 .1 9 36 70 .5 4 32 63 .5 6 30 76 .4 6 29 26 .0 1 28 54 .6 5 26 69 .4 8 25 34 .4 6 21 52 .5 6 19 09 .5 3 16 20 .2 1 15 60 .4 1 14 56 .2 6 13 69 .4 6 13 09 .6 7 12 49 .8 7 11 53 .4 3 10 99 .4 3 98 1. 77 89 1. 11 72 1. 38 68 2. 80 65 0. 01 60 1. 79 54 5. 85 44 5. 56
Pada  sintesis  6-hidroksi- N -oktilnikotinamida,  menunjukan      adanya  pita  serapan  pada 1620 cm -1 merupakan vibrasi ulur karbonil (C=O) dari amida. Serapan tunggal pada 3264 cm - 1 merupakan  vibrasi  ulur  NH  dari  amida  sekunder.  Adanya  gugus  C-H  alifatik  juga ditunjukkan  pada  2926-2855  cm -1 .  Informasi  adanya    (C=C)    aromatis  ditunjukkan  dengan pita serapan pada 3077 cm -1 .

## Analisis NMR
Pembentukan  amida  pada  hasil  reaksi  sintesis  senyawa  6-hidroksi-N-nikotilamida ditunjukkan oleh adanya pergeseran kimia pada spektrum H-NMR yaitu pada pada pergeseran δ 8,22 (d, CONH ) yang menunjukan proton pada gugus amida. Gugus aromatik pada cincin nikotinik ditunjukkan pada sinyal δ 7,68; 6,49; dan 5, 78.
Spektrum  C-NMR  yang  mendukung  data  terbentuknya  gugus  amida  pada  produk senyawa  6-hidroksi-N-oktilnikotinamida  antara  lain  sinyal  pada  pergeseran  kimia  δ  164,9 ppm yang merupakan pergeseran kimia untuk karbon CONH. Sedangkan gugus aromatis pada cincin nikotiniknya terdapat pada pergeseran δ 106-149 ppm.
Adanya gugus oktil ditunjukkan dengan adanya puncak pada δ 0,88 ppm (t, 3H, -CH 3 ) yang menunjukkan adanya pergeseran kimia dari 3 buah proton gugus metil yang bertetangga dengan gugus metilen (-CH 2 ) pada posisi C8’, sedangkan puncak pada δ 1,58 (abroad, 10H, (- CH 2 -) 5 ) menunjukkan adanya pergeseran kimia dari 10 buah proton yang berasal dari 5 buah gugus  metilen  (C  =  3’,  4’,  5’,  6’  dan  7’).  Puncak  pada  δ  2,9  ppm  (multiplet,  2H,  -CH 2 -) merupakan  puncak  dari  gugus  metilen  pada  posisi  C-2’  yang  bertetangga  dengan  2  buah gugus  metilen  lainnya,  sedangkan  puncak  pada  δ  3,41  ppm  (t,  2H,  -CH 2 )  menunjukkan adanya  gugus  metilen  (C-1’)  yang downfield karena  berikatan  langsung  dengan  gugus elektronegatif yaitu oksigen.
Gambar 6. Struktur 6-hidroksi-N-oktilnikotinamida

## Uji Bioaktivitas
Uji Toksisitas dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test ( BSLT)
Uji aktivitas senyawa analog UK-3A, yaitu senyawa analog UK-3A yaitu 6-hidroksi-N- oktilnikotinamida dan 3-hidroksi– N -oktilpikolinamida diawali dengan uji pendahuluan untuk mengetahui efek toksisitas (LC 50 ) senyawa melalui metode brine shrimp lethality test (BSLT).
Uji  BSLT  dilakukan  terhadap  senyawa  analog  UK-3A  yaitu  6-hidroksi-N-oktilnikotinamida dan  3-hidroksi– N -oktilpikolinamida  menggunakan  konsentrasi  10,  100,  500  dan  1000  ppm dalam  media  air  laut  dan  dilakukan  dengan  3  kali  ulangan  (triplo)  dan  menggunakan  larva udang Artemia salina Leach. Masing-masing sebanyak 30 ekor/konsentrasi. Proses penetasan telur Artemia  salina Leach.  sampai  dengan  menjadi  larva  membutuhkan  waktu  48  jam,  dan mulai  dari  penambahan  sampel  uji  terhadap  larva  udang  sampai  dengan  proses  perhitungan membutuhkan  waktu  24  jam.  Jumlah  larva  udang  yang  mati  dan  hidup  dihitung,  untuk kemudian  ditentukan  persentase  kematian  dengan  cara  membagi  larva  udang  yang  mati dengan  jumlah  larva  udang  hidup  dikurangi  kontrol.  Nilai  LC 50 diperoleh  melalui  analisis regresi linear. Rata-rata hasil uji toksisitas senyawa senyawa analog UK-3A yaitu 6-hidroksi- N-oktilnikotinamida  dan  3-hidroksi– N -oktilpikolinamida  pada  berbagai  konsentrasi  dapat dilihat pada Lampiran.
Dari  hasil  tersebut  diketahui  bahwa  kedua  senyawa  senyawa  analog  UK-3A  yaitu  6- hidroksi-N-oktilnikotinamida  mempunyai  tingkat  toksisitas  yang  cukup  tinggi  yaitu  41,14 ppm,  jika  digunakan  dasar  yang  diambil  dari  Meyer  (1992)  yang  menyatakan  bahwa  suatu senyawa mempunyai efek toksisitas yang signifikan (tinggi) jika mempunyai nilai LC 50 ≤ 50 ppm.  Uji  pendahuluan  ini  dengan  menggunakan  BSLT  membuktikan  bahwa  senyawa  hasil reaksi    senyawa  analog  UK-3A,  yaitu  senyawa  analog  UK-3A  yaitu  6-hidroksi-N- oktilnikotinamida memiliki toksisitas yang cukup signifikan.

## 4.  KESIMPULAN
Hasil  identifikasi  lebih  lanjut  menggunakan  KLT,  FT-IR, 1 H-NMR  dan 13 C-NMR membuktikan  bahwa  senyawa  analog  UK-3A  yaitu  6-hidroksi-N-oktilnikotinamida  berhasil disintesis.  Sedangkan  hasil  uji  toksisitas  pendahuluan  disimpulkan  bahwa  senyawa    6- hidroksi-N-oktilnikotinamida  dan  dan  berpotensi  sebagai  antikanker  hal  ini  ditunjukkan dengan  adanya  aktivitas  yang  cukup  signifikan  dengan  nilai  LC 50 masing-masing  sebesar 41,14 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
1) Ardinata, E., 2007. “ Sintesis Senyawa Analog UK-3A : 3-Hidroksipikolinil-dioktil
Glutamat dan 2-Hidroksinikotinildioktil Glutamat dan Uji Sitotoksisitas terhadap Sel Kanker Murine Leukemia P-388” , Tesis, Magister Sains Ilmu Kimia, Program Pascasarjana U.I, Depok.
2) Budi, G.S., 2006.  “ Identifikasi Senyawa Bioaktif Ekstrak Kulit Batang Tanjang (Bruguiera gymnorhiza) dalam Etanol dan Uji Sitotoksisitasnya terhadap Sel HeLa ”, Skripsi, Program Sarjana, MIPA UNSOED, Purwokerto.
3) Carey,  F.A.,  Sunberg,  R.J.,  1991.  “ Advanced  Organic  Chemistry” ,  3 rd ed.,  Part  B  :
Reaction and Synthesis, Plenum Press, New York.
4) Darmawan, A ., 2008. “ Sintesis  dan  uji  bioaktivitas  senyawa  analog  UK-3A Pikolinil serin  oktil  ester  dan  pikolinil  serin  oktil  oktanoil  ester, Tesis,  Magister  Sains  Ilmu Kimia, Program Pascasarjana U.I, Depok.
5) Firmansyah, F., 2003. “ Optimasi Sintesis Senyawa 2-Hidroksi-N-Fenil Benzamida” . Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila, Jakarta.
6) Griffer, R.J., Bobbitt, J.M., Schwarting, A.E., 1991. “ Pengantar Kromatografi” , Edisi kedua, ITB Press, Bandung.
7) Hanafi, M., 1995.  “ Studies of Novel Antibiotics Metabolites from Streptomyces sp. 517- 02”, Thesis, Departement of Chemistry Faculty of Science, Osaka City University, Osaka.
8) Hanafi, M., Shibata, K., Ueki, M., Taniguchi, M. 1996., “ UK-2A, B, C, and D: a Novel Antifungal Antibiotics from Streptomyces sp. 517-02 : II.  Structural Elucidation” , J. Antibiotics, 49 ( 12 ): 1226-1226.
9) Hanafi, M., Ueki, M., Kusumoto, A., Shibata, K., Tanaka, T., Taniguchi, M., 1997.
“ UK-3A, a Novel Antifungal from Streptomyces sp. 517-02 : Fermentation, Isolation, Structural Elucidation, and Biological Properties” , J. Antibiotics, 50 ( 7 ): 551-555. 10) Hanafi, M., Trisnamurti, R.H., Saefudin, E., Thelma, A.B., Ngadiman., 1997a.
“ Sintesis dan uji aktivitas biologi senyawa analog UK-3, 3-hidroksipikolinil serin metil ester dan turunannya ”, Prosiding Seminar Nasional Kimia II; Yogyakarta 13
Desember 1997, Jurusan Kimia Fakultas MIPA UGM. ISSN: 1410-8313, Yogyakarta.
11) Hanafi, M., Trisnamurti, R.H., Thelma, A.B., Herlina., 1997b. “ Optimasi pembentukan senyawa analog antibiotik UK-3, 3-hidroksipikolinil serin metil ester ”, Prosiding Seminar Nasional 24-27 November 1997, Himpunan Kimia Indonesia Bandung Cabang Jawa Barat, p. 69-74.
12) Hanafi, M., Thelma A.B., 1998. ” Sintesis Senyawa Analog Antibiotika UK-3 ,
Pengaruh Gugus Hidroksi terhadap Aktivitas Biologi”, Prosiding Seminar Nasional II Kimia dalam Pembangunan Holiday Inn., Yogyakarta.
13) Hanafi, M., 1998. “ Sintesis Senyawa Analog dengan Antibiotik UK-3 ”. Laporan Riset Unggulan Terpadu V 1997/1998”, Kantor Menteri Negara Riset dan Teknologi Dewan Riset Nasional.
14) Hanafi, M.,  Anita,Y., Putra, A.M.J., 2008. ” SintesisPengaruh Lipofilisitas Pada Analog UK-3A terhadap Aktivitas Antikanker Leukemia P-388” , Seminar IPT, LIPI, Serpong.
15) Harbone, J.B., Dey, P.M., 1991. “ Method in Plant Biochemistry” , 6, Assay for Bioactivity, Academic Press, London.
16) Hendayana, S., Karohman, A., Sumarna, A.A., Supriatna, A., Buchari, 1994. “ Kimia Analitik Instrumen” , IKIP, Semarang Press, Semarang.
17) Husniati,. 2008. “Sintesis Senyawa Analog Uk-3A : 3-Hidroksi– N -oktilpikolinamida, 2-Hidroksi- N -fenilbenzamida,  3-Hidroksi- N -fenilpikolinamida,  dan  2-Hidroksi- N - oktilbenzamida,  dan  Uji    Bioaktivitas  Secara In  Vitro terhadap  Sel  Kanker Murine Leukemia P-388 ” ,  Tesis,  Magister  Sains  Ilmu  Kimia,  Program  Pascasarjana  U.I, Depok.
18) Kurnia, A., 2007. “ Sintesis dan Uji Aktivitas Biologi Senyawa Analog Antibiotika UK- 3 : Diamilnikotinil Glutamat Ester dan Diheksil nikotinil Glutamat Ester”, Tesis, Magister Sains Ilmu Kimia, Program Pascasarjana U.I, Depok.
19) March, J., 1992. “ Advenced Organic Chemistry, reaction, mechanism and structure” , 4 th ed., A Wiley Interscience, New York.
20) Martin, G.S., 1999. “ Normal cell and cancer cells : In Bioshop”, Weinberg, R.A., Ed., Molecular oncology, Scientific American, New York, p.13-40.
21) Murray, R.K., Dearyl, K. G., Mayes, P.A., Rodwell, V.W., 2003. “ Biokimia” , Andry Hartono, Ed., Edisi ke-25, EGC, Jakarta.
22) Patrick, G., 2001. “ Instant notes in medicinal chemistry” , BIOS Scientific Publisher.
23) Pine, S.H., Hendrickson, J.B., Crom, D.C., 1998. “ Kimia Orgnik 2”, Peterjemah: Roehyati, J., Susanti, W.B., Penerbit ITB, Bandung.
24) Rahmawati, N.,  2004. “ Uji Sitotoksisitas Ekstrak Etanolik Daun Bandotan (Ageratum conyzoides L) terhadap Sel HeLa dan Profil Kromatografi Lapis Tipisnya ”, Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
25) Rosalina, L., 1999. “ Sintesis dan Uji Aktivitas Biologi Senyawa Analog Antibiotika UK-3A : 3-Hidroksipikolinil Dialkil Glutamat Ester dan 2-hidroksinikotinil Dialkil Glutamat Ester ”, Tesis, Magister Sains Ilmu Kimia, Program Pascasarjana UI, Depok.
26) Sastrohamidjoyo, H., 1992. “ Spektroskopi Infra Merah” . UGM, Yogyakarta.
27) Shiomi, K., Hatae, K., Hatano, H., Matsumono, A., Takahashi, Y., Lin Jiang, C., Tomoda, H., Kobayashi, S., Tanaka, H., Omura, S., 2005. “ A New Antibiotic, Antimycin A9, Produced by Streptomyces sp. K01-0031” , J.Antibiotic, 58( 1 ): 74-78.
28) Shimano, M., Kamei, N., Shibata, T., Inoguchi, K., Itoh, N., Ikari, T., Senda, H., 1998. “ Total Synthesis of the Antifungal Dilactones UK-2A and UK3A : The Determination of their Relative and Absolute Configurations”. Tetrahedron Lett., 39 : 4363-4366.
29) Siswandono, B., Soekardjo, 2000. “ Kimia Medisinal”, Jilid 1, Airlangga, University Press., Surabaya.
30) Shi, Y., Cidlowski, J., Scott, D., Wu, J., Shi, Y.B., 2003. “ Molecular Mechanisms of Programmed Cell Death” . Kluwer Academic/Plenum, New York
31) Taniguchi, M., Shibata, K., Abe. K., Kodama, R., Uotani, K., 1995. Jpn. Pattent, 7- 233165.
32) Taniguchi, M., 2005. “ Semisynthesis and Biological Evaluation of Analogues of UK- 3A, a Novel Antifungal Antibiotics from Streptomyces sp. 517-02” , Bioorg. Med. Chem. Lett. 15: 2011-2014.