Jurnal Pharmascience, Vol. 9, No. 1, Februari 2022, hal: 96-105 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Standarisasi dan Aktivitas Tabir Surya Ekstrak Etanol Daun Kakao (Theobroma cacao L.)
Maria Ulfah*, Sri Mulyati, Nurma Yunita
Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim, Semarang, Jawa Tengah, Indonesia Email: mariau_astra@yahoo.com

## ABSTRAK
Senyawa  kimia  dalam  tanaman  tidak  dapat  dijamin  selalu  konstan  dan  aman, sehingga  diperlukan  standarisasi,  selain  itu  senyawa  flavonoid  dan  fenolik  diduga berpotensi  sebagai  tabir  surya  melindungi  kulit  dari  radiasi  sinar  UV.  Penelitian  ini bertujuan  menetapkan  standarisasi  dan  aktivitas  tabir  surya  ekstrak  etanol  daun kakao.  Daun  kakao  diekstraksi  menggunakan  Microwave  Assisted  Extraction d engan etanol  70%.  Hasil  ekstrak  diuji  parameter  spesifik  meliputi  identitas,  organoleptik, kadar  senyawa  larut  air  dan  etanol,  skrining  fitokimia,  kadar  flavonoid  dan  fenolik total,  serta  diuji  parameter  non  spesifik  meliputi  susut  pengeringan,  kadar  air,  kadar abu  total  dan  abu  tak  larut  asam  serta  cemaran  logam.  Hasil  dianalisis  deskriptif dibandingkan  dengan  standar.  Aktivitas  tabir  surya  diuji  dengan  spektrofotometri  λ 290-320 nm, nilai SPF dihitung dengan persamaan Mansur. Hasil organoleptic ekstrak kental  berwarna  coklat,  rasa  pahit,  berbau  coklat  mengandung  alkaloid,  flavonoid, saponin,  fenolik  serta  memiliki  kadar  flavonoid  total  9,777±0,170  mgRE/gr  ekstrak, fenolik  total  45,321±1,220  mgGAE/gr  ekstrak  dan  memenuhi  parameter  spesifik  dan non  spesifik  meliputi  senyawa  larut  air  21,024±0,574%,  larut  etanol  18,316±1,593%, susut  pengeringan  15,08±0,148%,  kadar  air  17,16±0,261%,  kadar  abu  total 2,342±0,015%,  abu  tak  larut  asam  0,789±0,036%,  logam  Pb  <0,622  mg/kg,  Cd  <0,022 mg/kg,  As  0,025  mg/kg  serta  memiliki  nilai  SPF  konsentrasi  700  µg/mL  sebesar 17,95±0,084 yang termasuk dalam kategori proteksi ultra.
Kata Kunci: Parameter Spesifik, Parameter Non Spesifik, SPF

## ABSTRACT
Chemical  compounds  in  plants  cannot  be  guaranteed  to  always  be  constant  and safe,  so  standardization  is  needed,  besides  flavonoid  and  phenolic  compounds  are suspected to  have the potential as  sunscreens to protect  the skin from UV radiation. This study  aims  to  establish  the  standardization  and  activity  of  cocoa  leaf  ethanol  extract sunscreens.  Cocoa  leaves  are  extracted  using  Microwave  Assisted  Extraction  with  70% ethanol.  The  results  of  the  extract  were  tested  for  specific  parameters  including  identity,
organoleptic,  levels  of  water  soluble  compounds  and  ethanol,  phytochemical  screening, total  flavonoid  and  phenolic  levels,  as  well  as  tested  nonspecific  parameters  including drying  shrinkage,  moisture  content,  total  ash  content  and  acid  insoluble  ash  and  metal spruce.  The  results  were  analyzed  descriptively  compared  to  the  standard.  The  activity  of the  sunscreen  is  tested  with  a  spectrophototometry  of  λ  290-320  nm,  the  SPF  value  is calculated by the Mansur equation. Organoleptic results of brown thick extract, bitter taste, smelling  of  chocolate  contains  alkaloids,  flavonoids,  saponins,  phenolics  and  has  a  total flavonoid  content  of  9,777±0.170  mgRE/gr  extract,  phenolics  total  45,321±1,220 mgGAE/gr extract and meet specific and non-specific parameters including water soluble compounds 21,024±0.574%, ethanol soluble 18,316±1,593%, drying shrink 15.08±0.148%, water  content  17.16±0.261%,  total  ash  content  2,342±0.015%,  acid  insoluble  ash 0.789±0.036%,  Pb  metal  <0.622  mg/kg,  Cd  <0.022  mg/kg,  As  0.025  mg/kg  and  has  a concentration  value  of  700  μg/mL  of  17.95±0.084  which  belongs  to  the  category  of  ultra protection.
Keywords: Specific Prameters, Non-Specific Parameters, SPF

## I. PENDAHULUAN
Kakao  ( Theobroma  cacao L.) banyak dibudidayakan di Indonesia.
Mamfaat dari daun kakao sebagai antifungi  (Masro’atun et  al .,  2017), antibakteri (Lidrawati, 2017) dan antioksidan  serta  miliki  kandungan  kimia seperti  alkaloid,  saponin,  flavonoid  jenis flavonol yaitu rutin, polifenol seperti asam galat,  epigalo  katekin,  epi  katekin  galat, epigalo  katekin  galat,  dan  epi  katekin (Hasanah et al ., 2017). Menurut Prasiddha et  al .  (2016)  menyatakan  bahwa,  senyawa flavonoid  dan  fenolik  diduga  dapat berpotensi  sebagai  tabir  surya  yang  dapat melindungi kulit terhadap radiasi sinar UV. Selain itu kandungan senyawa aktif dalam tanaman  tidak  dapat  dijamin  selalu  stabil, ia  dapat  dipengaruhi  oleh  faktor-faktor seperti  tempat  tumbuh  tanaman,  pasca panen,  penyimpanan  dan  cemaran  logam
berbahaya  bagi  kesehatan  (Saifudin et  al .,
2011). Sehingga perlu distandarisasi.

## II. METODE

## A. Preparasi Ekstrak etanol daun kakao
Simplisia  daun  kakao  sebanyak  50 gr  dilarutkan  dengan  etanol  70%  500  mL dan  diekstraksi  menggunakan Microwave Assisted  Extraction (MAE),  kemudian diuapkan dengan rotary evaporator dengan  suhu  40˚C  sampai  diperoleh ekstrak kental (Endarini, 2016).

## B. Uji Parameter Spesifik
Uji parameter spesifik (Depkes RI, 2000) meliputi:
1. Identitas  ekstrak  meliputi  nama  latin tanaman,  bagian  tanaman  serta  nama Indonesia dari tanaman yang digunakan.
2. Organoleptik  meliputi  bentuk,  warna, bau dan rasa.
3. Kadar  senyawa  yang  terlarut  dalam  air yaitu 5 gr ekstrak dilarutkan dalam 100 mL  kloroform  LP,  setelah  6  jam digojok  dan  didiamkan  18  jam  lalu disaring.  Filtrat  diambil  20  mL  dan diuapkan  sampai  tersisa  residu,  dan panaskan  pada  suhu  105˚C  selama  15 menit. Lakukan secara berulang sampai bobot tetap.
4. Kadar  senyawa  terlarut  dalam  etanol yaitu  5 gr ekstrak dilarutkan etanol 100 mL,  setelah  6  jam  digojok,  dan didiamkan  18  jam  lalu  disaring.  Filtrat diambil  20  mL  dan  diuapkan  hingga diperoleh  residu,  lalu  panaskan  15 menit  suhu  105˚C.  Lakukan  secara berulang hingga berat konstan.
5. Parameter skrining fitokimia (Harborne, 1987).
a. Alkaloid dengan cara 100 mg ekstrak ad etanol  70%  10  ml,  lalu  diambil  2  mL masukkan ke tabung reaksi satu dan dua, dan  tambahkan  masing-masing  10  tetes HCl  2N.  Tabung  ke-1  ditambah pereaksi  dragendorff,  hasil  positif  jika terbentuk  endapan  merah.  Pada  tabung ke-2  ditambah  pereaksi  mayer,  hasil positif jika endapan berwarna putih. b. Flavonoid  dengan  cara  100  mg  ekstrak ad etanol 70% 10 ml, lalu diambil 5 mL masukkan ke tabung reaksi dan
tambahkan  0,2  mg  serbuk  logam  Mg dan  3  tetes  HCl.  Hasil  positif  jika berwarna merah kehitaman, kuning atau jingga.
c. Saponin  dengan  cara  100  mg  ekstrak dilarutkan  10  mL  air  panas,  lalu didinginkan dan dikocok 10 detik. Hasil positif  jika  terbentuk  buih  yang  stabil, lalu ditambah 1 tetes HCl 2N buih tidak hilang.
d. Fenolik dengan cara 100 mg ekstrak ad etanol  70%  10  mL  dan  ambil  2  mL masukkan  ke  tabung  reaksi  ad  3  tetes FeCl 3 1%.  Hasil  positif  jika  berwarna merah, biru dan hijau kehitaman.
6. Penetapan kadar flavonoid  total  dengan cara  0,5  mL  larutan  ekstrak  (10000 μg/mL),  ad  1,5  mL  metanol    p.a,  dan tambahkan 0,1 mL AlCl 3 10% serta 0,1 mL kalium asetat 1 M, dan ad aquadest 5 mL dan diamkan 30 menit dan diukur pada λ 417 nm (Wahyulianingsih et al .,
2016).
7. Penetapan  kadar  fenolik  total  dengan cara 1 ml larutan ekstrak (10000 μg/mL) ad  10  mL  etanol  p.a  dan  diambil  1  mL dan tambahkan pereaksi Folin-ciocalteu 0,4  mL,  digojog  dan  diamkan  8  menit, dan  tambahkan  4  mL  larutan  Na 2 CO 3 7%, ad aquadest dan diamkan 2 jam lalu
diukur pada λ 730,80 nm (Ahmad et al ., 2015).

## C. Uji Parameter Non Spesifik
Uji parameter non spesifik terdiri:
1. Kadar  air  dengan  cara  2  gr  ekstrak dimasukan  ke  botol  timbang  yang diketahui  bobotnya  lalu  dikeringkan  3 jam  suhu  105˚C,  kemudian  ekstrak ditimbang  dan  dikeringkan  kembali  1 jam sampai bobot tetap, uji direplikasi 3 kali (BSN, 1992).
2. Parameter  susut  pengeringan  dengan cara  1  gr  ekstrak  dimasukkan  ke  botol timbang yang sudah ditara dan dipanaskan  30  menit  suhu  105˚C. Ekstrak  dikeringkan  5  jam  lalu  botol ditimbang  ulang  dan  keringkan  1  jam, proses  ini  sampai  bobot  botol  timbang tetap.
3. Kadar  abu  total  dengan  cara  1  gr ekstrak  dimasukkan  dalam  krus  yang telah dipijar dan ditimbang, lalu ekstrak dalam  krus  dipijar  dengan  tanur  dan suhu  dinaikkan  600˚C  selama  5  jam sampai arang habis dan keringkan 1 jam suhu  105˚C  dan  didinginkan  15  menit dalam  desikator.  Lakukan  menimbang sampai bobotnya tetap.
4. Kadar abu tak larut asam dengan cara 1 gr  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam  krus
yang  telah  dipijar  dan  ditimbang, ekstrak  dalam  krus  dipijar  5  jam  dan suhu  dinaikkan  600˚C  sampai  arang habis,  lalu  dikeringkan  1  jam  suhu 105˚C dan didinginkan 15 menit dalam desikator,  lakukan  menimbang  sampai bobotnya tetap (Depkes RI, 2000).
5. Cemaran logam menurut Saifudin et al .
(2011)
a. Preparasi sampel ekstrak  dengan  cara  1 gr  ekstrak  dimasukkan  beker  gelas ditambah  10  mL  asam  nitrat  pekat panaskan dengan heating mantel sampai kental atau kering dan didinginkan, lalu ad  10  mL  aquades  dan  5  mL  asam perkolat, panaskan hingga kental, didinginkan dan disaring. Filtrat dimasukkan  ke  labu  takar  50  mL,  ad aquades.  Sampel  logam  Pb,  Cd,  As direplikasi 3 kali.
b. Pembuatan larutan induk 1000 ppm (Pb, Cd,  dan  As)  dengan  serbuk Pb(NO 3 ) 2 , Serbuk  Cd(NO 3 ) 2 ,  dan  serbuk  As 2 O 3 , masing-masing  100  mg  dimasukkan  ke labu  takar  100  ml,  ad  aquades,  aduk hingga homogen.
c. Pembuatan  larutan  baku  10  ppm  (Pb, Cd,  dan  As)  dengan  cara  1  ml  larutan induk  1000  ppm  (Pb,  Cd,  As)  masing- masing masukkan ke labu takar 100 mL, lalu ad aquades.
d. Pembuatan  seri  konsentrasi  (Pb,  Cd, dan  As)  dengan  cara  larutan  baku  Pb
(NO 3 ) 2 10  ppm  yang  telah  dibuat diambil  1,0;  2,0;  3,0;  4,0  dan  5,0  mL, masing-masing  dimasukkan  labu  takar 10 mL ad aquades.
e. Pengukuran  kadar  (Pb,  Cd,  dan  As)
dengan  cara  larutan  sampel  ekstrak diukur pada λ 217 nm untuk Pb, λ 228,8 nm untuk Cd dan λ 193,7 nm untuk As dengan alat AAS (Gandjar dan Rohman, 2007). Hasil kadar dibandingkan dengan  batas  maksimal  untuk  setiap logam adalah Pb<10 mg/Kg ekstrak, Cd 0,3  mg/Kg  ekstrak  dan  As<5  mg/kg ekstrak (BPOM, 2014)

## D. Aktivitas tabir surya
Aktivitas  tabir  surya  dilakukan dengan cara mengambil sebanyak 3, 4, 5, 6, dan 7 mL dari larutan induk ekstrak (1000 µg/mL)  masing-masing  dimasukkan  ke dalam labu takar 10 mL, ad etanol p.a lalu diukur  serapan  dengan  Spektrofotometri
UV-Vis pada λ 290-320 nm dan dianalisis dengan  persamaan  mansur  (Dutra et  al., 2004) yaitu:
SPF = CF × × I (λ) × abs (λ).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Preparasi Ekstrak Daun Kakao
Simplisia  daun  kakao  diekstraksi metode  MAE  dengan  pelarut  etanol  70%, karena  waktu  ekstraksi  singkat,  energi serta  pelarut  yang  dibutuhkan  sedikit (Endarini,  2016)  serta  etanol  70%  dapat menyari  senyawa  yang  bersifat  polar hingga  non  polar  (Saifudin et  al .,  2011).
Hasil ekstrak diperoleh 336,1 gram dengan rendemen  33,61%  dari  serbuk  simplisia 1000 gram.

## B. Uji Parameter Spesifik
Hasil  parameter  spesifik  ekstrak etanol daun kakao pada Tabel I.
Tabel I. Hasil Uji standarisasi parameter spesifik ekstrak etanol daun kakao Parameter Hasil Identitas Nama  ekstrak:  ekstrak  etanol  daun  kakao);  nama  latin: Theobroma cacao L.; bagian tanaman: daun Organoleptic Kental, rasa pahit, bau coklat, warna coklat kehitaman senyawa larut air 21,024 ± 0,574% Senyawa larut etanol 18,316 ± 1,593% Skrining fitokimia Alkaloid, flavonoid, saponin, dan fenolik Kadar fenolik total Kadar flavonoid total 43,389 ± 1,114 mgGAE/gram ekstrak 9,777±0,170 mgRE/gr ekstrak
Pada  Tabel  I  menunjukkan  bahwa, hasil  identitas  ekstrak  bernama  ekstrak etanol  daun  kakao  dengan  nama  latin
Theobroma  cacao L.  dengan  bahan  dari daun.  Organoleptik  ekstrak  berbentuk kental,  rasa  pahit,  bau  coklat  dan  warna
coklat  kehitaman.  Hasil  ini  sama  dengan penelitian  Yopi  (2019)  juga  diperoleh ekstrak  etanol  daun  kakao  berbentuk kental,  rasa  pahit,  bau  coklat  dan  warna coklat kehitaman.
Parameter  senyawa  terlarut  air  dan etanol bertujuan untuk menetapkan jumlah ekstrak  lebih  banyak  terlarut  dalam  air (polar)  atau  terlarut  dalam  etanol  (polar- non  polar).  Kadar  senyawa  ekstrak  yang terlarut  air  sebesar  21,024  ±  0,574%  dan kadar  senyawa  ekstrak  terlarut  etanol sebesar  18,316  ±  1,593%.  Hasilnya menunjukkan  lebih  banyak  terlarut  dalam etanol  daripada  air,  karena  daun  kakao memiliki  senyawa  polifenol  terbesar  dan senyawa tersebut bersifat polar (Markham, 1988).  Hasil  senyawa  larut  air  dan  etanol memenuhi  persyaratan  mutu  dengan  SD 0,574%  dan  1,593%,  dimana  kedua  hasil tersebut < 25% (Saifudin et al ., 2011).
Parameter skrining fitokimia bertujuan untuk mengidentifikasi kandungan  senyawa yang  berkhasiat terhadap aktivitas farmakologi (Depkes RI, 2000).  Hasilnya  terdiri  senyawa  alkaloid, flavonoid,  saponin  dan  fenol  dan  menurut Hasanah (2017) juga menyatakan memiliki kandungan yang sama.
Penetapan  kadar  flavonoid  dengan pereaksi  AlCl 3 dan  pembanding  rutin (Chang et  al .,  2002).  Metode  ini berdasarkan reaksi kompleks yang konstan gugus  keto  C-4,  dengan  gugus  hidroksil C3  dan  C5  gugus  hidroksil  pada  flavon dan  flavonol.  Gugus  ortohidroksil  pada cincin A atau B kompleks konstan dengan penambahan AlCl 3 . Reaksi senyawa kompleks  rutin-AlCl 3 (Stankovic et  al ., 2019) Gambar 1.
Gambar 1. Pembentukkan senyawa kompleks rutin-AlCl 3
Berdasarkan hasil penentuan kurva baku  rutin  diperoleh  persamaan  regresi linear  y=  0,005x  +  0,113  (x=kadar
flavonoid total dalam µg/mL, y=absorbansi)  dengan  nilai  koefesien korelasi  r=0,998.  Kadar  flavonoid  total
ekstrak  diperoleh  sebesar  9,777  ±  0,170 mgRE/gr ekstrak.
Penetapan  kadar  fenolik  total  ekstrak dengan  reagen Folin-ciocalteu ,  Na 2 CO 3 7%, aquadest dan pembanding asam galat. Pereaksi Folin-ciocalteu merupakan pereaksi  berwarna  kuning  yang  akan mengoksidasi  fenolik  dalam  sampel  oleh
molibdat  tungstat untuk  menghasilkan warna  biru.  Larutan  Na 2 CO 3 7%  sebagai pemberi  suasana  basa  dan  aquadest ditambahkan agar reaksi yang terjadi dapat berjalan sempurna. Reaksi senyawa kompleks molybdenum-tungsten (Nunes et al ., 2012) Gambar 2.
Gambar 2. Reaksi senyawa kompleks molybdenum-tungsten
Berdasarkan hasil penentuan kurva baku quersetin diperoleh persamaan regresi  linear  y=  0,010x  +  0,110  dengan nilai  koefesien  korelasi  r=  0,998.  Kadar fenolik  total  ekstrak  diperoleh  sebesar 45,321 ± 1,220 mgGAE/gr ekstrak.

## C. Uji Parameter Non Spesifik

## Hasil parameter non spesifik Table II.
Pada  Tabel  II  menunjukkan  bahwa,  kadar air  dari  ekstrak  kental  sebesar  17,16  ± 0,261%. Kadar tersebut memenuhi persyaratan  mutu  yaitu  5-30%.  Uji  kadar air  simplisia  bertujuan  sebagai  batasan maksimal  besarnya  kandungan  air  dalam ekstrak,  hal  ini  penting  karena  semakin tinggi  kadar  air  maka  bahan  rentan ditumbuhi  bakteri  dan  jamur  sehingga
simplisia  tidak  dapat  disimpan  dalam waktu lama (Saifudin et al ., 2011).
Tabel II. Hasil parameter non spesifik ekstrak etanol daun kakao Parameter Hasil Kadar Air 17,16 ± 0,261% Susut Pengeringan 15,08 ± 0,148 % Kadar Abu Total 2,342  ± 0,015% Kadar Abu Tak larut Asam 0,789 ± 0,036% Timbal (Pb) 0,622 mg/kg Cadmium (Cd) 0,022 mg/kg Arsen (As) 0,025 mg/kg
Hasil  susut  pengeringan  ekstrak etanol  daun  kakao  menunjukkan  nilai sebesar  15,08  ±  0,148  %.  Nilai  ini memenuhi  syarat  mutu ekstrak  yaitu batas kadar  air  pada  ekstrak  kental  5-30% (Saifudin et  al .,  2011.  Susut  pengeringan ekstrak bertujuan sebagai batasan
maksimum terhadap jumlah senyawa yang hilang  selama  proses  pengeringan  dan kontaminasi  dari  ekstrak  (Depkes  RI, 2000).
Penentuan  kadar  abu  total  ekstrak dilakukan  berfungsi  untuk  mengetahui kandungan  mineral  internal  dan  eksternal pada  proses  awal  hingga  akhir  pada ekstrak  etanol.  Semakin  tinggi  kadar  abu total  semakin  tinggi  kandungan  mineral ekstrak.  Hasil  kadar  abu  total  sebesar 2,342 ± 0,015% memenuhi standar mutu.
Penentuan kadar abu tak larut asam pada  ekstrak  berfungsi  untuk  mengetahui proses  pencucian  pada  bahan  tanaman tidak bersih karena mengandung pasir atau kotoran  lain  yang  tertinggal  bila  tinggi kadarnya  (Sudarmadji et  al .,  1989).  Hasil kadar  abu  tak  larut  asam  pada  ekstrak sebesar 0,789 ± 0,036% memenuhi standar mutu.
Penetapan  kadar  logam  dapat menjamin atau memastikan bahwa ekstrak bebas  dari  kandungan  logam  berbahaya dari  kondisi tanah  yang  ditumbuhi tanaman,  pupuk  pestisida  untuk  tanaman serta  asap  kendaraan  bermotor  menempel pada  tanaman  yang  akhirnya  logam  dapat siserap oleh tanaman (Adhani dan Husnaini,  2017).  Hasil  kadar  logam  Pb diperoleh sebesar 0,622%, cadmium 0,022 dan  arsen  0,025  memenuhi  standar  mutu dengan  batas  logam  Pb  <10mg/kg,  Cd  <
0,3mg/kg,  dan  As  <5mg/kg  ekstrak (BPOM, 2014).

## D. Aktivitas Tabir Surya
Prinsip  uji  tabir  surya  adalah adanya  gugus  kromofor  (sistem  aromatik terkonjugasi)  yang  dapat  menyerap  sinar UV  seperti  pada  senyawa  flavonoid  dan fenolik  (Parasiddha et  al .,  2016),  pada  λ 290-320  untuk  mendapatkan  nilai  SPF. Nilai SPF menunjukan berapa lama produk tabir  surya  dapat  melindungi  kulit  dari paparan sinar matahari (Stanfiled, 2003).
Senyawa  flavonoid  dan  fenolik yang terkandung dalam daun kakao diduga dapat  berpotensi  sebagai  tabir  surya menurut Prasiddha et al ., (2016) menyatakan  bahwa,  kandungan  senyawa bioaktif  flavonoid  dan  fenolik  dalam rambut  jagung  diduga  berpotensi  sebagai tabir surya karena memiliki gugus kromofor.  Gugus  kromofor  merupakan gugus  aromatik  yang  memiliki  ikatan rangkap terkonjugasi yang mampu menyerap  sinar  UV-A  dan  UV-B,  untuk mengurangi  intensitasnya  pada  kulit. Hasil  pengujian  aktivitas  tabir  surya terhadap UV-B terdapat pada Tabel III.
Pada Tabel III menunjukkan bahwa, hasil yang diperoleh ekstrak pada konsentrasi 300 µg/mL diperoleh nilai SPF 6,07 ± 0,025 yang berada dalam rentang 6- 8  termasuk  kategori  proteksi  ekstra. Konsentrasi 400, 500, 600 µg/mL
diperoleh  nilai  SPF  8,26  ±  0,190;  11,44  ± 0,074;  14,62  ±  0,075  yang  berada  dalam rentang  8-15  termasuk  kategori  proteksi maksimal, sedangkan pada konsentrasi 700 µg/mL diperoleh nilai  SPF 17,95 ±  0,084. Nilai  SPF  tertinggi  ekstrak  etanol  daun kakao  yaitu  pada  konsentrasi  700  µg/mL sebesar  17,95  ±  0,084  yang  termasuk
kategori proteksi ultra. Nilai SPF tertinggi ekstrak  etanol  daun  kakao  yaitu  pada konsentrasi  700  µg/mL  sebesar  17,95  ± 0,084  yang  termasuk  kategori  proteksi ultra.  Hasil  menunjukkan  semakin  tinggi konsentrasi maka aktivitas tabir surya juga semakin besar.
Tabel III. Hasil perhitungan rata-rata nilai SPF ekstrak etanol daun kakao Konsentrasi (µg/mL) Rata-rata SPF ± SD Kategori 300 6,07 ± 0,025 Proteksi ekstra 400 8,26 ± 0,190 Proteksi maksimal 500 11,44 ± 0,074 Proteksi maksimal 600 14,62 ± 0,075 Proteksi maksimal 700 17,95 ± 0,084 Proteksi ultra IV. KESIMPULAN
Ekstrak etanol daun kakao memenuhi  parameter  spesifik  dan  non spesifik serta memiliki aktivitas tabir surya dalam kategori proteksi ultra.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih kepada Fakultas
Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang untuk fasilitas laboratorium dan semua  pihak  yang  telah  membantu melakukan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Adhani,  R.,  Husaini.  (2017). Logam Berat  Sekitar  Manusia .  Lambung Mangkurat  University  Press,  17-
19.
Ahmad,  A.R.,  Juwita,  Ratulangi,  S.A.D.,
Malik,  A.  (2015),  Penetapan kadar  Fenolik  dan  Flavonoid
Total  Ekstrak  Metanol  Buah  dan Daun  Patikala  (Etlingera  elatior (Jock) R.M.SM). Pharm Sci  Res ., 2(1), 1-10. BPOM  RI.  (2014). Peraturan  Kepala
Badan Pengawas Obat dan Makananan  Republik  Indonesia Nomor  12  tentang  Persyaratan
Mutu  Obat  Tradisional .  Badan Pengawas  Obat  dan  Makanan Republik Indonesia, 9-10. BSN.  (1992). Cara  Uji  Makanan  Dan Minuman , Badan Standarisasi Nasional, 4.
Chang, C., Yang, M., Wen, H., Chern, J.
(2002). Estimation of Total Flavonoid  Content  in  Propolis  by Two Complementary Colorimetric  Methods. Jurnal  of food  and  Drug  Analysis ,  10(3), 178-182.
Depkes  RI.  (2000). Parameter  Standar Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat . Direktorat  Jenderal  Pengawasan Obat  dan  Makanan,  Direktorat Pengawasan  Obat  Tradisional,  1, 27-35.
Dutra,  E.A.,  Oliveira,  D.A.G.D.C.E., Kedor-Hackmann, E.R.M., Santoro, M.I.R.M. (2004). Determination  of  Sun  Protection Factor  (SPF)  of  Sunscreens  by Ultraviolet Spectrophotometry. Brazilian Journal of Pharmaceutical  Sciences, 40(3), 381-385.
Endarini,  L.H.  (2016). Farmakognosi  dan Fitokimia. Kementerian  Kesehatan Republik Indonesia. 153.
Gandjar,  I.G.,  Rohman  A.  (2007). Kimia Farmasi  Analisis .  Pustaka  Pelajar, 298-302.
Harborne,  J.B.  (1987). Metode  Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis  Tumbuhan .  Institut Tekhnologi Bandung, 47-59.
Hasanah, M., Amaliani, S., Rikmasari, Y.
(2017).  Analisis  Antioksidan  dari Berbagai  Fraksi  Daun  Cokelat ( Theobroma  cacao L.). Jurnal Ilmiah  Bakti  Farmasi ,  2(1),  33- 40.
Lidrawati, R.W. (2017). Efektivitas Antibakteri  Ekstrak  Daun  Kakao ( Theobroma ca L.) terhadap
Pertumbuhan Bakteri Streptococcus mutans secara In  Vitro. Universitas Andalas, 2-3.
Markham, K.R. (1988). Cara
Mengidentifikasi Flavonoid . Institut Tekhnologi Bandung, 15.
Masro’atun,  Sari,  D.N.R.,  Hasanah,  H.U.
(2017).  Efektivitas  Ekstrak  Daun
Kakao Terhadap Phytopthora
palmivora. Jurnal  Biologi  dan
Pembelajaran Biologi , 2(1), 1-11. Nunes,  X.P., Silva,  F.S.,  Almeida, J.R.G.S.,  Lima,  J.T.,  Ribeiro, L.A.A.,  Junior,  L.J.Q.,  Filho, J.M.B. (2012). Biological Oxidations and Antioxidant
Activity  of  Natural  Products, Dalam Phytochemicals as
Nutraceuticals-Global  Approaches to  Their  Role  in  Nutrition  and
Health. Venketeshwer  Rao  (Ed.) InTech, 15.
Prasiddha, I.J., Laeliocattleya, R.A.,
Estiasih,  T.,  Maligan,  J.M.  (2016). Potensi  Senyawa  Bioaktif  Rambut Jagung  ( Zea  mays L.)  untuk  Tabir Surya  Alami  :  Kajian  Pustaka.
Jurnal  Pangan  dan  Agroindustri ,
4(1), 40-45.
Saifudin,  A.,  Rahayu,  V.,  Teruna,  H.Y.
(2011). Standarisasi  Bahan  Obat Alam . Graha Ilmu, 1-10.
Stanfiled,  J.W.  (2003). Sun  protectans:
Enhacing  Product  Functionality  in sunscreen, in Schueller , R. Romanowski, P., (eds), Multifunctional Cosmetics. Marchel Dekker, Inc., 836-900.
Stankovic, M., Jakovljevic, D., Stojadinov, M., Stevanovic, Z.D. (2019).
Halophyte  Species  as  a  Source  of Secondary Metabolites with Antioxidant Activity. Springer
Nature Singapore , 289-312. Sudarmaji,  S.,  Haryono,  B.,  Suhardi. (1989). Analisa Bahan Makanan dan Pertanian . Liberty, 13-14.
Wahyulianingsih.,  Handayani,  S.,  Malik,
A. (2016). Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Daun Cengkeh ( Syzygium aromaticum (L.) Merr  &  Perry). Jurnal  Fitofarmaka Indonesia , 3(2), 188-193.
Yopi,  R.E.  (2019)  Pengaruh  Kombinasi Ekstrak  Etanol  Biji  Pala  ( Myristica fragrans Houtt.)  dan  Daun  Kakao ( Theobroma  cacao L.)  terhadap Aktivitas  Sistem  Saraf  Pusat  pada Mencit  Putih  Jantan.  Universitas Andalas, 39-42.