## PERAN EKSTRAK DAUN WUNGU (GRAPTOPHYLLUM PICTUM L. GRIFF) TERHADAP ADHESI STREPTOCOCCUS MUTANS PADA NEUTROFIL

## THE ROLE OF CARICATURE PLANT LEAVES (GRAPTOPHYLLUM PICTUM L. GRIFF) EXTRACT TOWARDS STREPTOCOCCUS MUTANS ADHESION TO NEUTROPHILS

## Atik Kurniawati, Sulistiyani, Arina Nur Rahmah
Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember Correspondence e-mail to: atik.fkg@unej.ac.id

## Abstrak
Streptococcus  mutans (S.  mutans) merupakan  bakteri  utama  penyebab  karies  gigi  yang  mampu mendemineralisasi email, menginvasi dentin yang dapat berlanjut menjadi inflamasi pulpa (pulpitis). Streptococcus  mutans menginvasi  inang  diawali  dengan  melakukan  adhesi  (perlekatan).  Proses  ini merupakan langkah awal dalam proses inflamasi. Oleh karena itu, adhesi Streptococcus. mutans pada sel  inang  perlu  dicegah  agar  tidak  terjadi  infeksi  oleh  bakteri.  Neutrofil  merupakan  sel  pertahanan pertama  yang  datang pada  proses  inflamasi.  Salah  satu  upaya  untuk  mencegah  terjadinya  adhesi tersebut bisa menggunakan bahan alami yang bersifat anti-inflamasi, salah satunya yaitu daun wungu. Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui pengaruh pemberian ekstrak daun wungu (EDW) terhadap adhesi    bakteri Streptococcus.  mutans pada  neutrofil  dan  perbedaan  indeks  adhesi  dalam  berbagai konsentrasi  dengan eksperimental  laboratoris  menggunakan the  post  test  only  control  group  design. Sampel terbagi menjadi 5 kelompok (klp): klp I/kontrol (tanpa inkubasi EDW), klp II (EDW 3,125%), klp  III  (EDW  6,25%),  klp  IV  (EDW  12,5%),  dan  klp  V  (EDW  25%).  Isolat  neutrofil  diinkubasi dengan EDW selama 3 jam, kemudian dipapar S. mutans selama 4 jam. Indeks adhesi dihitung berapa rata-rata  jumlah S.  mutans yang  menempel  pada  100  neutrofil. Simpulan penelitian  menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun wungu berpotensi menurunkan indeks adhesi Streptococcus mutans. Kata kunci: adhesi, S. mutans, neutrophil, daun wungu

## Abstract
Streptococcus  mutans (S.  mutans) is  the  main bacteria that  cause  dental  caries  which  demineralizes tooth  enamel  and  will  subsequently  invade  dentin  and  causing  pulp  inflammation  (pulpitis),  in advanced stages. S. mutans invasion begins with adhesion (attachment) to the host cells. This process is  the  beginnin g  in  the  inflammatory  process.  Therefore,  it’s  important  to  prevent  the  bacterial attachment in the first place. Caricature plant (Graptophylum pictum L Griff) can be used as a natural ingredient for this purpose. This study aimed to discover the effect of caricature leaf extract (EDW) on S.  mutans adhesion  to  neutrophils  and  differences  in  the  adhesion  index  among  various concentrations. Laboratory experiments were carried out using the post test only control group design. The  sample was  divided  into  5  groups:  Control group  (without  EDW  incubation),  second  group (EDW 3.125%), third group (EDW 6.25%), fourth group (EDW 12.5%), and fifth group (EDW 25%). Isolated neutrophils were incubated with EDW (caricature leaf extract) for 3 hours, then exposed to S. mutans for 4 hours. Adhesion index is calculated based on the average number of S. mutans attached to 100 neutrophils. The conclusions of study showed that ethanol extract of caricature plant leaf has the potential to inhibit the adhesion index of S. mutans.
Keyword: Adhesion, S. mutans, Neutrophils, wungu leaves

## PENDAHULUAN
Penyakit gigi dan mulut adalah penyakit yang sering dialami oleh masyarakat Indonesia.  Salah  satu  penyakit  gigi  dan  mulut yang  sering  dialami  masyarakat Indonesia adalah  karies.  Karies  merupakan  penyakit jaringan  keras  gigi  yaitu  email,  dentin  dan sementum,  yang  disebabkan  oleh  aktivitas suatu  jasad  renik.  Karies  ditandai  dengan adanya demineralisasi jaringan keras gigi yang kemudian  diikuti  oleh  kerusakan bahan organiknya.  Berdasarkan  RISKESDAS  pada tahun  2017  diperkirakan  bahwa  90%  anak sekolah  dan  sebagian  besar  orang  dewasa pernah menderita karies gigi. 1
Streptococcus  mutans adalah  bakteri yang  berperan  dalam  proses  terjdinya  karies. Ketika  lesi  karies berkembang,  bakteri  dapat mengadakan invasi ke jaringan gigi yang lebih dalam  seperti  dentin,  tubuli  dentin,  dan pulpa. 1,2 Awal  mula  terjadinya  karies,  karena adanya  kontak  langsung  antara  agen  bakteri dengan  sel host, yang  diawali  dengan  proses adhesi  (perlekatan).  Proses  ini  berperan penting  untuk  terjadinya  kolonisasi,  invasi sampai  timbulnya  suatu  infeksi  penyakit, termasuk karies. 3 Proses adhesi ini dipengaruhi oleh  faktor  lingkungan  (saliva)  yang  dapat mendukung  seperti fibrinectin (suatu  protein yang  bersifat  adhesif), fibrinogen,  vitronektin dan laktoferin.  Struktur  yang  bertanggung jawab  terhadap  sifat  adhesi  bakteri  adalah adhesin fimbriae, asam lipoteikoat dan protein adhesin. 4 S.  mutans yang  berhasil  melakukan invasi ke jaringan gigi yang lebih dalam, maka bakteri  dan  toksinnya  akan  menembus  tubuli dentin serta mencapai pulpa sehingga menyebabkan  reaksi  inflamasi.  Saat  bakteri masuk  ke  dalam  tubuh host,  terjadi  proses fagositosis yang bertujuan untuk mempertahankan  diri  dari  agen  infeksius. Salah satu  sel  leukosit  yang  memiliki  peran penting  dalam  sistem  pertahanan  tubuh  host dan  muncul  pertama  kali  saat  terjadi  invasi bakteri  adalah  neutrofil. 5 Neutrofil  berperan penting  pada  respons  radang  akut,  beberapa jam  setelah  dimulai  radang  akut,  terjadi peningkatan jumlah neutrofil dalam darah. Hal ini  disebabkan  karena  adanya  mediator keradangan seperti histamin, bradikinin, serotonin dan prostaglandin. 6 Penelitian yang telah dilakukan
Kurniawati 7 melalui  uji  skrining  fitokimia
dengan  metode  Kromatografi Lapis  Tipis (KLT)  ditemukan  zat  aktif  yang  terdapat dalam daun wungu adalah flavonoid, alkoloid, pectin,  saponin,  tanin,  dan  steroid. 7 Pada beberapa  penelitian  yang  telah  dilakukan,  zat aktif  yang  terkandung  dalam  daun  wungu seperti  flavonoid  mempunyai  kemampuan sebagai  antiinflamasi  dengan  menghambat perlekatan bakteri Eschecia coli (E. Coli) pada reseptor  membran  sel  neutrofil  dengan menurunkan fungsi hidrofoblastis membran sel pada  proses  perlekatan  melaiui  interaksi hidrofobik,  sehingga  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri S. mutans. 8-10
Daun  wungu  merupakan  salah  satu tanaman yang mengandung flavonoid, alkoloid, soponin, dan tanin sehingga kemungkinan  daun  wungu  dapat  digunakan untuk  menurunkan  indeks  adhesi S.  mutans pada  neutrofil  karena  efek  antiinfalamsi  yang dimiliki.  Berdasarkan  uraian  di  atas,  penulis ingin mengetahui pengaruh pemberian ekstrak daun wungu terhadap adhesi bakteri S. mutans pada  neutrofil  dan  perbedaan  indeks  adhesi dalam berbagai konsentrasi.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  menggunakan  sampel berupa isolat neutrofil yang diambil dari darah subyek  dengan  kriteria  laki-laki  dewasa,  tidak memiliki  riwayat  penyakit  penyakit  sistemik, kelainan  darah  dan  kebiasaan  merokok,  serta bersedia  mengisi informed  consent sebagai tanda  persetujuan  bahwa  darah  yang  diambil akan djadikan sampel penelitian.
Ekstrak  daun  wungu  dibuat  dari  daun wungu dengan keadaan segar, bebas kontaminasi hama. Daun wungu sebanyak 700 gram  dicuci  dengan  air  mengalir,  dipotong kecil-kecil,  dan  diangin-anginkan  selama  5 hari.  Daun  wungu  kering  lalu  diblender  dan diayak hingga diperoleh serbuk halus sebanyak  200  gram.  Serbuk  daun  wungu ditambahkan ethanol 96 % dengan perbandingan  1:7,5  kali  simplisia  yaitu  1500 ml  dan  dibiarkan  termaserasi  selama  24  jam dalam maserator 3 hari. Setelah 3 hari, maserat disaring  dari  ampasnya  dengan  menggunakan kertas  saring.  Maserat  kemudian  diuapkan dengan rotary  evaporator selama  45  menit dengan  suhu  45 o – 50 o C  sehingga  diperoleh sediaan  pekat  (konsentrasi  100  %).  Dari sediaan  pekat  tersebut  kemudian  diencerkan
dengan  aquades  hingga  diperoleh  konsentrasi 3,125%, 6,25%, dan 12,5%, dan 25%.
Cara  pembuatan  suspensi Streptococcus mutans adalah media BHI-B steril sebanyak 2 mL  dimasukkan  dalam  tabung  reaksi  dan ditambah  1  ose S.  mutans yang  dilewatkan  di atas  lampu  spiritus  menyala.  Tabung  reaksi dimasukkan  ke  dalam desicator dan  ditutup rapat. Desicator dimasukkan ke inkubator suhu 37 o C  selama  2 hari,  pertumbuhan S.  mutans ditandai  dengan  media  yang  tampak  keruh. Setelah dilakukan inkubasi, suspensi S. mutans diukur tingkat kekeruhan dengan menggunakan  Densiheck    hingga  didapatkan kekeruhan 0,5 Mc Farland.
Isolasi  neutrofil  dilakukan  melalui prosedur  berikut,  subyek  diambil  darahnya sebanyak  6  cc  dari  vena  perifer  dan  dicampur dengan  antikoagulan  (heparin)  dalam  tabung heparin.  Darah  tersebut  dibagi  menjadi  dua tabung  dengan  jumlah  masing-masing  3  cc. Menyiapkan  3  mL  larutan  histopaque  1119 dalam tabung  falcon,  lalu  ditambahkan  3  mL larutan Limphoprep 1077. Sentrifugasi dengan kecepatan 900 g selama 30 menit.
Lapisan PMN diambil dan ditambahkan HBSS  dengan  perbandingan  1:2.  Sentrifugasi dengan  kecepatan  600  g  selama  10  menit, sehingga  akan  terbentuk  6  lapisan  dalam tabung  falcon  yang  tersusun  dari  bagian  atas ke  bawah  adalah  plasma,  monosit,  larutan Ficoll,  granulosit,  larutan  Histopaque,  dan eritrosit.  Lapisan  granulosit  diambil  dan ditambahkan  1000  μl  HBSS.  Ditambahkan antijamur yaitu fungizone 5 µL dan antibakteri yaitu penicillin-streptomycin solution stabilised sebanyak  20  µL  untuk  1000  µL larutan  media  sel  agar  terhindar  dari kontaminasi mikroorganisme.
Uji adhesi. Coverslip sebanyak 20 buah yang  telah  disterilkan  diberikan  neutrofil sebanyak  1 00  μL  kemudian  diinkubasi  dalam shaker incubator selama 20 menit, 37 0 C untuk melekatkan  neutrofil  pada  coverslip.  Setelah itu  diresuspensi  dengan  1000  μL  RPMI  dan ditambahkan  20  μL penicillin-streptomycin dan  5  μL fungizone, kemudian  dilakukan pipetting. Neutrofil  diinkubasi  selama  30 menit  pada  suhu  37°C.  RPMI  diambil,  lalu digantikan  oleh media complete (M199) sebanyak  1000  μL.  Kemudian  larutan  RPMI diambil,  lalu  digantikan  dengan  media complete  (M199)  sebanyak  1000  µL,  apabila sudah  tidak  ada  kontaminasi ditambahkan
ekstrak  daun  wungu  denngan  konsentrasi 3,125%,  6,25%,  12,5%,  dan  25%  sebanyak 100 μL dan dilakukan pipetting sampai benar - benar  homogen  dan  diinkubasi  menggunakan shaker incubator selama 3 jam pada suhu 37 o C untuk  melihat  penyerapan  ekstrak  pada neutrofil.  Media  inkubasi  dibuang,  dan digantikan  dengan  M199  sebanyak  1000  μL. Semua well masing-masing  ditambahkan suspensi S.  mutans 100  μL,  diinkubasikan selama  4  jam  dalam  suhu  37 o C,  5%  CO 2 . Cucian  dengan  HBSS  selanjutnya  fiksasi menggunakan metanol absolut selama 3 menit.
Pengecatan  dilakukan  dengan  Giemsa dan  diamati  di  bawah  mikroskop inverted dengan  pembesaran  1000x  untuk  menghitung indeks  adhesi.  Penghitungan  dilakukan  pada semua  sampel  dengan  cara  menghitung  rata- rata  bakteri  yang  melekat  pada  setiap  100 neutrofil.

## HASIL
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa rata-rata  adhesi  neutrofil  terhadap S.  mutans pada  kelompok  5  K5  (diinkubasi  ekstrak wungu  25%)  paling  rendah  dibandingkan dengan kelompok K1 (Kontrol), K2 (diinkubasi  ekstrak  daun  wungu  3,125%),  K3 (diinkubasi  ekstrak  daun  wungu  6,25%),  K4 (diinkubasi  ekstrak  daun  wungu  12,5%). Gambar  diagram  rata-rata  indeks  adhesi S. mutans terhadap  neutrofil  dapat  dilihat  pada Gambar 1.

## Indeks Adhesi S. mutans Terhadap Neutrofil
Keterangan : K1 : Kontrol K2 : Ekstrak Daun Wungu 3,125% K3 : Ekstrak Daun Wungu 6,25% K4 : Ekstrak Daun Wungu 12,5% K5 : Ekstrak Daun Wungu 25% Gambar 1. Diagram batang indeks adhesi Streptococcus  mutans pada  neutrofil antar kelompok perlakuan
Hasil  analisis  dengan  uji Shapiro - Wilk menunjukkan bahwa data berdistribusi normal 2,14 1,94 1,83 1,01 0,615 K 1 K 2 K 3 K 4 K 5 0 0,5 1 1,5 2 2,5
(p>0,05). Pengolahan data kemudian dilanjutkan  dengan  uji  homogenitas Levene, didapatkan  bahwa  data  homogen  dengan  nilai signifikansi  sebesar  0,052  (p>0,05). Hasil analisis  data  menunjukkan  data  berdistribusi normal  dan  homogen,  oleh  karena  itu dilakukan  uji  parametrik  yaitu One  Way Anova. Hasil  analisis  statistik  menunjukkan bahwa  nilai  signifikansi  0,000 (p<0,05)  yang menunjukkan  perbedaan  indeks  adhesi  pada keempat  kelompok  penelitian.  Selanjutnya dilakukan uji Least Significant Different (LSD) untuk  mengetahui  perbedaan  bermakna  antar tiap  kelompok.  Dari  uji  LSD  diketahui  bahwa terdapat  perbedaan  yang  bermakna (p<0,05) antara kelompok K 1 dengan K 4, K 1 dengan K  5,  K  2  dengan  K  4,  K  2  dengan  K  5, K  3 dengan  K  4,  dan K  4  dengan  K 5.  Sedangkan antara kelompok K 1 dengan K 2, K 1 dengan K  3,  K  2  dengan  K  3,  dan  K  4  dengan  K  5 tidak  terdapat  perbedaan  yang  bermakna ditandai dengan nilai (p>0,05). Hasil penelitian  yang  berupa  adhesi S.  mutans pada neutrofil  untuk  setiap  kelompok  dapat  dilihat pada Gambar 2.
Gambar  2.  Pengamatan  adhesi Streptococcus mutans pada neutrofil (pengecatan
Giemsa,  pembesaran  1000x).  Tanda panah  menunjukkan  hasil  positif  (adhesi S. mutans pada neutrophil)

## PEMBAHASAN
Konsentrasi  ekstrak  daun  wungu  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  3,125%, 6,25%, 12,5% dan 25%. Konsentrasi ini dipilih
berdasarkan metode serial dilution, metode ini biasanya  digunakan  untuk  memperkirakan substansi konsentrasi dan minimum konsentrasi penghambatan, pemilihan konsentrasi dimulai dari konsentrasi tinggi lalu dibagi  2  secara  berulang. 11 Selain  itu, konsentrasi  ini  ditetapkan  berdasarkan  hasil dari  uji  viabilitas  yang  telah  penulis  lakukan sebagai  penelitian  pendahuluan dimana  pada konsentrasi  100%,  75%,  dan  50%  sel neutrophil mati karena diduga ekstrak  daun wungu terlalu  pekat  dan bersifat  toksik sehingga menyebabkan sel neutrophil lisis.
Hasil  analisis  data  pada  penelitian  uji parametrik  menggunakan  uji  LSD  (Least Significant  Difference)  untuk  mengetahui apakah ada perbedaan bermakna antar kelompok  penelitian  menunjukkan  terdapat perbedaan bermakna antar kelompok penelitian kelompok  K  1  dengan  K  4,  K  1 dengan K 5, K 2 dengan K 4, K 2 dengan K 5, K  3  dengan  K  4,  dan  K  4  dengan  K  5,  yang artinya  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak  daun  wungu  maka  semakin  semakin rendah indeks adhesi S. mutans pada neutrofil. Peningkatan konsentrasi ekstrak  menimbulkan perbedaan  yang  signifikan  terhadap  adhesi S. mutans pada  neutrofil.  Selain  itu  didapatkan hasil  pada  kelompok  K  I  dengan  kelompok  K II,  kelompok  K  I  dengan  kelompok  K  III, kelompok  K  II  dengan  kelompok  K  III,  dan kelompok  K  IV  dengan  kelompok  K  V didapatkan hasil terdapat pebedaan yang tidak bemakna.  Artinya  bahwa  kelompok  sampel konsentrasi  3,125%  dan  6,25%  mempunyai jumlah  kandungan  zat  aktif  yang  lebih  sedikit sehingga  kemampuan  untuk    menghambat adhesi  bakteri S.  mutans pada  neutrofil  lebih rendah  atau  hampir  setara  dengan  kelompok kontrol. Walaupun nilai tersebut tidak signifikan,  namun  pada  semua  kelompok menunjukkan  penurunan  indeks  adhesi S. mutans pada neutrofil.
Penelitian ini menunjukkan hasil bahwa terdapat  perbedaan  dalam  menghambat  adhesi S.  mutans pada  neutrofil  antara  ekstrak  daun wungu  konsentasi  3,125%,  6,25%,  12,5%  dan 25%.  Dari  hasil  tersebut  dapat  diamati  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  daun wungu yang diberikan semakin sedikit pula S. mutans yang  melekat  pada  sel  neutrofil  dan menyebabkan  terjadinya  penurunan  indeks adhesi  bakteri  pada  neutrofil  dibandingkan dengan  kelompok  perlakuan  yang  tidak
K 1 K 2 K K K
diberikan  ekstrak.  Hal  ini  sesuai  dengan pernyataan  Lucia 12 , bahwa  semakin  tinggi konsentrasi ekstrak, maka kadar zat aktif yang terisolasi juga  semakin  tinggi.  Tingginya  zat aktif  inilah  yang  diduga  berperan  dalam menghambat adhesi S. mutans pada neutrofil. 12 Pada kelompok perlakuan yang diinkubasi dengan ekstrak daun wungu terlihat neutrofil  pada  pengamatan  berukuran  lebih besar  dibandingkan dengan  kelompok  I (kontrol)  yang  tidak  diinkubasi  ekstrak  daun wungu.  Hal  ini  disebabkan  karena  ekstrak daun  wungu  melapisi  membran  neutrofil. Adanya  lapisan  tersebut  diduga  mengisolasi reseptor  neutrofil  sehingga  adhesin  bakteri atau  komponen  yang  berikatan  dengan reseptor  sel  host  tidak  dapat  berikatan  atau terhalang. Oleh karena itu dapat menyebabkan adhesi  bakteri S.  mutans terhadap  neutrofil menjadi  terhambat.  Kemampuan  tanin  diduga dapat  mengikat  reseptor  pada  neutrofil, sehingga  adhesin  pada  bakteri tidak  dapat melakukan  adhesi  pada  reseptor  neutrofil maka  adhesi  bakteri  pada  neutrofil  menjadi terhambat. 13,14
Kontak  langsung  antara S.  mutans dengan sel host diawali dengan proses adhesi. Adhesi  bakteri  pada  sel  atau  pada  permukaan jaringan membutuhkan  peranan  dari  dua faktor,  yaitu  reseptor  dan  adhesin.  Reseptor berupa residu peptida dan karbohidrat spesifik pada  permukaan  sel  host. 15,16 Sedangkan adhesin  bakteri  adalah  molekul  yang  terdapat pada  permukaan  sel  bakteri  yang  berfungsi untuk  melekatkan  diri  pada  permukaan  sel host. 17 Bakteri S. mutans mampu mendemineralisasi  enamel  dan  dentin  dan masuk ke dalam pulpa menyebabkan terjadinya inflamasi pada  pulpa.  Bakteri dapat masuk  ke  dalam  pulpa  dapat  melalui  tubuli dentin  yang  sudah  terbuka,  baik  dari  karies maupun  terbukanya  pulpa  karena  trauma, adanya kebocoran pada restorasi, dari perluasan  infeksi  pada  gingiva  atau  melalui peredaran darah. Bakteri yang masuk ke dalam pulpa  gigi  akan  direspons  tubuh  melalui inflamasi  dan  berkumpulnya  sel-sel radang pada daerah tersebut, terutama sel neutrofil. 18
Sel  neutrofil  akan  merespon  adanya bakteri S.  mutans yang  masuk  karena  sel neutrofil aktif pada awal reaksi inflamasi yang diawali  dengan  proses  perlekatan.  Proses pelekatan  ini  terjadi  karena  adanya  interaksi
antara  komponen  permukaan  bakteri  dan  sel inang. 19 Adhesi  dari  bakteri  pada  permukaan sel  dapat  dihambat  oleh  enzim  dan  bahan kimia  yang  secara  spesifik  merusak  atau mengisolasi  adhesin  bakteri  maupun  reseptor sel  host.  Enzim  dan  bahan  kimia  ini  diduga juga terkandung dalam ekstrak daun wungu. 15,16 Ekstrak  daun  wungu  mengandung beberapa senyawa kimia, antara lain: triterpenoid/steroid  bebas,  alkaloid,  flavonoid, glikosida, saponin, dan tanin. 20
Alkaloid, glikosida, dan flavonoid dapat mengakibatkan perubahan  struktur  tersier protein  pada  permukaan  bakteri.  Senyawa tersebut menyisip pada sisi hidrofobik protein, sehingga mengakibatkan penurunan hidrofobisitas  sel  bakteri  yang  berinteraksi dengan fimbriae dan mengakibatkan penggumpalan  protein  permukaan  bakteri. Akibatnya  protein  ini  kehilangan  struktur hidrofobiknya dan mengakibatkan hidrofobisitas  bakteri  menurun.  Penurunan hidrofobisitas  ini akan  mencegah  terjadinya interaksi hidrofobik dari komponen permukaan bakteri  dengan  sel  host sehingga  menghambat adhesi bakteri pada sel host. 21
Saponin  bekerja  dengan  menurunkan tegangan  permukaan  sehingga  mengakibatkan kematian  bakteri  karena  kebocoran  sel. 22 Mekanisme triterpenoid sebagai zat antibakteri yaitu bereaksi dengan porin (protein transmembran) pada membran luar dinding sel bakteri,  membentuk  ikatan  polimer  yang  kuat sehingga  mengakibatkan  rusaknya  porin. Rusaknya  porin  yang  merupakan  pintu  keluar masuknya senyawa akan mengurangi permeabilitas dinding sel bakteri dan mengakibatkan  sel  bakteri  akan  kekurangan nutrisi, sehingga pertumbuhan bakteri terhambat atau mati. 23
Tanin  sebagai  antimikroba  dapat  terjadi melalui beberapa mekanisme yaitu menghambat enzim antimikroba dan menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara bereaksi dengan membran sel dan menginaktivasi  enzim-enzim  esensial  atau materi  genetik.  Selanjutnya,  senyawa  tanin dapat  membentuk  komplek  dengan  protein melalui  interaksi  hidrofobik  sehingga  dengan adanya ikatan hidrofobik akan tejadi denaturasi  dan  akhinya  metabolisme  sel terganggu. 24

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  dapat  disimpulkan bahwa ekstrak daun wungu dapat menghambat adhesi bakteri Streptoccus  mutans pada  neutrofil  dimana konsentrasi ekstrak yang lebih tinggi mempunyai indeks adhesi yang lebih kecil.
Saran  penelitian  adalah  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengetahui  zat aktif  yang  terkandung  dalam  ekstrak  daun wungu  yang  berfungsi  untuk  menurunkan adhesi S. mutans pada neutrofil.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Iswandani  W.  Gambaran  Pengetahuan Anak  Usia  7  sampai  dengan  12  Tahun Tentang  Oral  Hygiene  Berdasarkan Karakteristik Di SDN Jalan Anyar Kota Bandung.  Bandung:  Program  Studi
Diploma  III  Keperawatan  Universitas Pendidikan Indonesia; 2015.
2. Kidd  EA,  Bechal  SJ. Dasar-Dasar
Karies Penyakit dan Penanggulangannya.  Jakarta:  Penerbit Buku Kedokteran EGC;  2013.
3. Giannasca,  PJ,  Neutra  MR.  Interaction of  microorganisms  with  intestinal  m cells: mucosal invasion and induction of secretory  imunity.  Infect  Agents.  1994;
2(1): 242-8.
4. Doyle  R. Microbial  Cell  Surface
Hidrophobicity. New York: SocMicrobial; 1990.
5. Purnamasari  IW,  Astuti  P,  Ermawati  T. Viabilitas  neutrofil  yang  diinkubasi dalam  ekstrak  rimpang  temulawak (Curcuma  Xanthorrhiza)  dan  dipapar dengan Streptococcus mutans. Jurnal
Dentofasial. 2014: 13(3): 135-40
6. Guyton  AC,  Hall  JE. Buku  Ajar
Fisiologi  Kedokteran. Edisi  11. Jakarta:
Penerbit Buku Kedokteran EGC; 2007.
7. Kurniawati  A.  Pengaruh  ekstrak  etanol daun  ungu  (EEDU) Graptophyllum pictum L.  Griff  terhadap  aktivitas fagositosis monosit yang dipapar Candida  albicans, Jurnal  Denta  FKG Hangtuah. 2018; 12(2): 126-33 .
8. Andiyani  R,  Yuniarni  U,  Mulyanti  D. Uji  Evektivitas  Ekstrak  Daun  Wungu (Graptophyllum pictum (L) Griff) sebagai  Penyembuh  Luka. Bandung: Program  Studi  Farmasi  Fakultas  MIPA Universitas Islam Bandung; 2015.
9. Riza  NF.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Daun  Wungu (Graptophyllum pictum (L) Griff) terhadap Pertumbuhan
Bakteri Escherichia coli. Skripsi. Jember: Fakultas Kedokteran Universitas Jember; 2010. 10. Kusumawati I. Pengaruh Ekstrak Etanol
Daun Graptophyllum  Pictum  (L).  Griff. Terhadap  Respon  Imun  Non  Spesifik.
Surabaya: Universitas Airlangga; 1997.
11. Pratiwi  R.  Perbedaan  Daya  Hambat Terhadap Streptococcus  Mutans Dari
Beberapa  Pasta  Gigi  yang  Mengandung Herbal.  Makasar:  Fakultas  Kedokteran Gigi Universitas Hasanuddin; 2004. 12. Lucia EW. Aksi Obat: Basis Farmakologi.  Klinis.  Surabaya:  Sandika Surabaya; 2011.
13. Sung  SH,  Kyoung  HK,  Byong  TJ,  Sun HC,  Jae  HP,  Dong,  H.  K., et al. Antibacterial  and  antioxidant  activities of  tannins  extracted  from  agricultural by-products. J  Medicin  Plants  Res. 2012; 6(15): 3072-9.
14. O’mahony R, Al -Khteeri H, Deepka W,
Fernando  N,  Vaiara  D,  Halton  J, et  al. Bactericidal  and  anti-adesive  propeties of  culinari  and  medical  plans  agains Helicobacter pylori. World J Gastroenterology.  2005; 11(47):  7499-
507.
15. Wilson  JW,  Schurr  MJ,  LeBlanc  CL, Ramamurthy  R,  Buchanan KL,  and Nickerson CA. Mechanisms of bacterial pathogenicity.  Postgraduate  Medical  J. 2002; 78: 216-24.
16. Mubarokah  SN,  I  Ketut  GM,  Sumarno. 49.4  Kda  outer  membrane  protein  of prophyromonas ginggivalis is hemaglutin  and  adhesin  protein  to neutrophil. Jurnal Kedokteran Brawijaya. 2009; 25(2): 48 – 59. 17. Kriswandidi LI, Sumarno, Ardani IGW. Karakterisasi adesin fimbriae
Streptococcus mutans lokal yang berperan  dalam  patogenesis  penyakit karies  gigi. Jurnal  Penelitian  Medika Eksakta. 2005; 6(1): 6-15.
18. Grossman  IL,  Oliet  S,  Rio  CED. Ilmu Endodontik  Dalam  Praktik.  ed.11. Jakarta: EGC; 1995.
19. Rakhmawati  NYI. Daya  adhesi Streptococcus  mutans pada neutrofil yang  diinkubasi  ekstrak  polifenol  biji
kakao (Theobroma  cacao  L). skripsi. Jember: Fakultas Kedokteran Universitas Jember; 2012. 20. Indriana  RA.  Uji  daya  hambat  ekstrak metanol  daun  ungu  (Graptophyllum pictum  (l.)  griff)  terhadap  pertumbuhan bakteri  saluran  akar  gigi. Skripsi. Jember: FKG Universitas Jember; 2017.
21. Parhusip A. pengaruh ekstrak andaliman terhadap  hidrofobisitas  bakteri Bacillus cereus,  Staphylococcus  aureus dan Salmonella  typhimurium. Jurnal  llmu dan Teknologi Pangan. 2004; 2: 2. 22. Irianto BW, Kurniawati A, Fatimatuzzahro  N.  Efek  berkumur seduhan  daun  wungu  (Graptophyllum
Pictum  (L)  Griff) terhadap  jumlah koloni  bakteri  saliva  pada  subyek dengan  skor  DMF-T  4-5. E-Jurnal Pustaka Kesehatan; 2016.
23. Santosaningsih  D.  Peranan  Protein Fimbriae dan  Lipopolisakarida terhadap Perlekatan  Bakteri Enterohemorrhagic
Escherichia  coli (EHEC)  0157  pada
Enterosit  Kelinci  secara  in  Vitro: Penelitian  Eksperimental  Laboratoris. Tidak  diterbitkan. Tesis.  Surabaya: Program Pascasarjana Universitas Airlangga; 2003.
24. Sya’haya S, Iyos RN. pengaruh pemberian ekstrak daun
ungu
Graptophylum  pictum  Griff)  terhadap penyembuhan hemoroid. Majority. 2016;5(5):155-60.