## Studi aktivitas ekstrak etanol dan sediaan gel daun melinjo (Gnetum gnemon L) sebagai antibakteri terhadap Staphylococcus Aureus
Afidatul Muadifah 1 , Tri Kurnia Astutik 2 , Helda Wika Amini 3 , Indra Lasmana Tarigan 4 * 1,2,3,4 Program Studi Farmasi, STIKes Karya Putra Bangsa, Tulungagung 3 Program Studi Teknik Kimia, Universitas Jember
4 Program Studi Kimia, Fakultas Sains dan Teknologi, Universias Jambi, Jambi. Jl. Jambi-Ma. Bulian KM 15 Mendalo Indah, Jambi, 36361 e-mail: * indratarigan@unja.ac.id
Diterima: 16 September 2019 / Disetujui: 23 Desember 2019 / Dipublikasi online: 31 Desember 2019 DOI: https://doi.org/10.22437/chp.v4i2.7631

## ABSTRAK
Melinjo  (Gnetum  gnemon  L)  merupakan  spesies  tanaman  yang  berasal  dari semenanjung Malaysia dan Indonesia, diketahui memiliki senyawa bioaktif yang dapat  dimanfaatkan  dibidang  kesehatan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji aktivitas  ekstrak  dan  sediaan  gel  dau  melinjo  (Gnetum  gnemon  L)  sebagai antibakteri terhadap S. aureus. Metode yang digunakan untuk mengekstrak daun melinjo adalah metode maserasi dengan menggunakan pelarut etanol 70% selama 4  hari.  Analisis  kualitatif  senyawa  bioaktif  daun  melinjo  menggunakan  skrining fitokimia  dan  pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  menggunakan metode  difusi  cakram  Kirby-Bauer.  Konsentrasi  ekstrak  etanol  daun  melinjo  10- 30%  tidak  memberikan  aktivitas  antibakteri  yang  baik,  sehingga  interval konsentrasi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  50%-80%.  Ekstrak dengan  konsentrasi  optimum  diformulasikan  dalam  bentuk  gel  dan  dilakukan evaluasi  mutu fisik sediaan gel  meliputi organoleptis, uji homogenitas, uji pH, uji daya  lekat  dan  uji  daya  sebar  selama  28  hari.  Hasil  analisis  menunjukkan senyawa  bioaktif  daun  melinjo  meliputi  tanin,  saponin,  alkaloid,  flavonoid,  dan triterpenoid. Ekstrak 80% daun melinjo memberikan efek antibakteri dengan zona hambat  terbesar  13,08  mm.  Hasil  formulasi  gel  ekstrak  80%  daun  melinjo memenuhi  kriteria  standar,  dan  memberikan  efek  antibakteri  dengan  kategori sedang dengan diameter zona hambat sebesar 16,91mm.

## Kata kunci: daun melinjo, antibacteri, Staphylococcus aureus

## ABSTRACT
Melinjo (Gnetum gnemon L) is a plant species  that originating from Malaysia  and Indonesia peninsulas, known to have bioactive compounds that can be utilized in the health sector. The specific aim of this study  was  to examine  the antibacterial activity of extracts and gel preparations and gnetum gnemon L (Gnetum gnemon L) against  S.  aureus.  The  method  used  to  extract  melinjo  leaves  is  the  maceration method  using  70%  ethanol,  3  days.  The  qualitative  of  Melinjo  leaf  bioactive compound  was  analyzed  used  phytochemical  screening  and  the  antibacterial activity  was  carried  out  using  the  Kirby-Bauer  disk  diffusion  method  against Staphylococcus  aureus.  The  concentration  of  ethanol  extract  of  Melinjo  leaves  at 10-30%  did  not  provide  a  good  antibacterial  activity,  by  that  the  concentration interval  we  used  in  this  study  starting  at  50%  to  80%. The  extract  with  optimum concentration was formulated in gel form and evaluated on the physical properties of the gel preparation  including organoleptic, homogeneity  test, pH  test,  adhesion
test  and  dispersion  test  for  28  days.  The  results  of  the  analysis  showed  that melinjo  leaf  bioactive  compounds  including  tannins,  saponins,  alkaloids, flavonoids,  and  triterpenoids.  80%  extract  of  melinjo  leaves  provides  an antibacterial  effect  with  the  largest  inhibition  zone  of  13.08  mm.  The  gel  from melinjo leaf extract 80% gives an antibacterial effect with a medium category with an inhibition zone diameter of 16.91 mm.

## Keywords: melinjo leaf, antibacterial, Staphylococcus aureus

## PENDAHULUAN
Melinjo merupakan salah satu tanaman famili Gnetaceae yang berasal dari daerah tropis. Masyarakat umumnya mengkonsumsi daunya yang masih muda sebagai  sayuran  untuk  makanan  sehari-hari  dan  bijinya  sebagai  bahan pengolahan  emping  melinjo.  Hasil  penelitian  sebelumnya  menyebutkan kandungan  senyawa  aktif  daun  melinjo  seperti  alkaloid,  saponin,  steroid  dan tannin  (Kato  et  al.,  2011).  Senyawa  aktif  tersebut  ternyata  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  Pseudomonas  aeruginosa  dan  bakteri  penyebab  timbulnya karies  yaitu  Streptococcus  mutans  (Taroreh  et  al.,  2016).  Melinjo  (Gnetum gnemon L.) pada umumnya memiliki kandungan flavonoid berkisar antara 0,85- 3,14  quercetin  equivalent  (QE)  dalam  mg/g  sampel.  Aktivitas  penangkapan radikal bebas tertinggi terdapat pada akar yaitu 37,27 mg vitamin C  equivalent antioxidant  capacity  (VCEAC)  g -1 sampel.  Senyawa  flavonoid  ekstrak  daun melinjo juga memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi setara dengan vitamin C (Kato, 2009).
Aktivitas senyawa antibakteri memiliki jalur mekanisme yang berbeda-beda terhadap  target  reseptornya,  baik  berupa  ribosomal  (Dersch  et  al,  2017),  non- ribosomal  (Liu,  2019)  ataupun  sintesis  protein  pada  housekeeping  enzim (Tarigan,  2019).  Kemampuannya  sebagai  senyawa  antibakteri  dan  antimikroba dari  protein  ekstrak  daun  melinjo  menjadikan  ekstrak  ini  dapat  digunakan sebagai  pengawet  alami  makanan  (Santoso  et  al,  2010).  Kato  et  al,  (2011) mengisolasi  Peptida  Gg-AMP  dari  biji  melinjo  dan  menemukan  kemampuan antibakteri  terhadap  jenis  bakteri  Gram  positif  dan  Gram  negatif.  Secara tradisional,  melinjo  merupakan  tanaman  yang  sering  dimanfaatkan  sebagai obat,  untuk  mengobati  berbagai  jenis  penyakit  seperti  buang  air  kecil,  digigit anjing,  penyakit  mata,  anemia,  dan  busung  lapar  (Hariana,  2008).  Melinjo memiliki  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  berperan  sebagai senyawa  bioaktif  seperti  alkaloid,  flavonoid,  steroid,  dan.  Senyawa  seperti
flavonoid  dan  tanin  merupakan  senyawa  yang  dapat  berperan  sebagai antibakteri (Noor dan Apriasari, 2014).
Analisis aktivitas antibakteri daun melinjo terutama pada bakteri penyebab infeksi salah satunya adalah S. aureus perlu dilakukan untuk mengetahui daya hambat  dalam  bentuk  total  ekstrak  daun  melinjo  dan  gel  sediaannya.  Sediaan farmasi  senyawa  antibakteri  bertujuan  untuk  mempermudah  penggunaannya, salah  satunya  bentuk  gel.  Gel  merupakan  sediaan  setengah  padat  yang  terdiri dari  suspensi  yang  dibuat  dari  partikel  anorganik  kecil  atau  molekul  organik yang  besar,  terpenetrasi  oleh  suatu  cairan  (Widodo,  2013).  Salah  satu keuntungan gel adalah mudah mengering, membentuk lapisan film yang mudah dicuci  (Panjaitan,  2012)  dan  memberikan  rasa  dingin  di  kulit  dengan penggunaan  Natrium  Karboksimetil  Selulosa  (CMC-Na)  sebagai  basis  gel (Tambunan  dan  Sulaiman,  2018).    Penelitian  ini  bertujuan  skrining  fitokimia senyawa metabolit sekunder ekstrak daun melinjo, kemudian menguji aktivitas antibakteri dari ekstrak daun melinjo terhadap bakteri S. aureus. Disamping itu juga  akan  dilakukan  pengujian  optimalisasi  ekstrak  daun  melinjo  sebagai antibakteri dalam bentuk formulasi gel.

## METODOLOGI PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  adalah  blender  (Toshiba),  sendok tanduk,  maserator,  timbangan    analitik    (Mettler    Toledo    AL204®),  sendok stainless,  oven  (Memmert  UP400),  LAF  cabinet,  Autoclave  (HL  36Ae),  krusibel potselen, pinset, kertas saring, jarum ose, pinset, pH meter, mikropipet (Rainin E1019705K),  pembakar  Bunsen,  dan  alat  kaca  umum  (Pyrex).  Bahan  uji  yang digunakan adalah ekstrak daun melinjo, H 2 O, Et-OH 70% (Sigma Aldrich), asam asetat  glasial,  HCl  (p),  Mg,  FeCl 3 1%,  H 2 SO 4 (p),  CHCl 3 ,  Met-OH,  Reagen Dragendroff, Reagen Mayer, nutrient agar (NA), nutrient broth (NB), klindamisin (MERCK),  aluminium  foil,  cakram  uji,  bakteri  S.  aureus,  CMC-Na,  gliserin, propilenglikol, metilparaben, fenolftalein, parafin cair dan KOH (Sigma Aldrich). Sampel  daun  melinjo  diambil  dari  kebun  milik  warga  daerah  Gampengrejo, Kediri  dan  dilakukan  determinasi  untuk  memastikan  identitas  daun  melinjo tersebut dilakukan uji taksonomi. Uji Determinasi tanaman melinjo dilakukan di UPT Materia Medica Kota Batu Malang, Jawa Timur.

## Determinasi Daun Melinjo dan Pembuatan Simplisia
Determinasi  dilakukan  dengan  mencocokkan  ciri-ciri  morfologi  tanaman yang ada pada tanaman daun melinjo terhadap kepustakaan. Pada penelitian ini determinasi dilakukan di UPT Materia Medica Kota Batu, Malang. Daun melinjo diubah  menjadi  ukuran  kecil,  dikeringkan,  dihaluskan  dan  diayak  dengan ayakan  mesh60  (Poeloengan,  2010).  Uji  kadar  air  serbuk  simplisia  dilakukan dengan  menimbang  10  g  dimasukkan  kedalam  botol  timbang  bertutup  yang sebelumnya telah ditara. Dimasukkan kedalam oven pada suhu 105 0 C selama 5 jam sehingga diperoleh bobot yang relatif tetap (Depkes RI, 2012).

## Ekstraksi Daun Melinjo dan Uji Fitokimia
Metode  ekstraksi  yang  dilakukan  adalah  metode  maserasi,  sebanyak  500 gram  simplisia  daun  melinjo  diekstrak  menggunakan  etanol  70%,  dengan perbandingan  1:4,  kemudian  dihomogenasi  selama  4  hari  (Hendrawan,  2015). Hasil filtrat disaring, dan dipekatkan menggunakan oven pada suhu 60 0 C hingga diperoleh  ekstrak  kental  (Praptiwi,  2010).  Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk mengetahui  kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  ekstrak  daun  melinjo seperti; alkaloid, steroid, flavonoid, tanin, saponin, triterpenoid dan hidroquinon (Tiwari et al) (2011) dan uji bebas etanol ekstrak (Depkes RI, 2010).

## Formulasi dan Evaluasi Sediaan Gel
Formulasi  sediaan  gel  dilakukan  dengan  menambahkan  Na-CMC  sebagai basis sel sebanyak 3%, ditambah 10% gliserin, 15% propilenglikol, 10% gliserin, 0,25 metilparaben, dan aquades, sedikit dimodifikasi dari penelitian sebelumnya oleh  Sayuti  (2015).  Sediaan  gel  yang  telah  diformulasi,  kemudian  di  evaluasi kualitasnya, meliputi uji organoleptik (Ida et al., 2012), uji homogenitas (Mappa et  al.,  2013),  uji  pH  (Mappa  et  al.,  2013;  Helal  et  al,  2012),  uji  daya  sebar,  uji daya lekat (Ida, 2012), uji daya proteksi (Panjaitan et al, 2012).

## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Melinjo
Studi  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  melinjo  dan  sediaan  gelnya dilakukan dengan menggunakan metode difusi (disk diffusion). Suspensi OD 0.6 bakteri  S.  aureus  yang  telah  dikultur,  digoreskan  pada  media  nutrient  agar. Selanjutnya  cakram  uji  dicelupkan  didalam  masing-masing  stok  konsentrasi ekstrak  daun  melinjo,  konsentrasi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah 50%,  60%,  70%,  dan  80%  diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  dengan  lama  waktu  24 jam (Ismiati dan Trilestari, 2014). Konsentrasi tersebut digunakan berdasarkan
studi  sebelumnya,  bahwa  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  melinjo  pada konsentrasi  30%  sangat  rendah,  sehingga  digunakan  50%  sebagai  konsentrasi awal.

## Analisis Hasil
Untuk mengetahui apakah aktivitas antibakteri ekstrak daun melinjo pada Staphylococcus  aureus  berbeda  nyata  tau  tidak  dilakukan  analisis  secara statistik  untuk  menguji  normalitas  data  menggunakan  program  SPSS  16 Kolmogorov-Smirnov  (Yamin    dan  Kurniawan,  2014).  Data  dikatakan berdistribusi normal jika nilai P > 0,05, sedangkan jika P < 0,05 maka data tidak berdistribusi  normal.  Jika  data  terdistribusi  normal,  maka  selanjutnya dilakukan analisis menggunakan One-Way ANOVA. Hipotesis diterima jika  nilai uji P > 0,05 sedangkan jika P < 0,05 maka hipotesis ditolak (Dahlan, 2008).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi tanaman menunjukkan bahwa sampel yang digunakan adalah tanaman  daun  melinjo  dengan  kunci  kode  determinasi  1b-2b-3b-4b-6b-7b-9b- 10b-11b-12b-13b-14b-16a-239b-243b-244b-248-b249a-1 dengan nama simplisia Gnetii gnemonii Folium.

## Uji Kadar Air Serbuk Simplisia Daun Melinjo
Proses  ekstraksi  diperoleh  ekstrak  kering  sebanyak  69,13  g  dengan rendemen  ekstrak  13,826%  yang  dipengaruhi  oleh  jenis  pelarut,  konsentrasi pelarut, ukuran simplisia dan lamanya waktu ekstraksi (Suryanto, 2009).  Kadar air  merupakan  salah  satu  parameter  kontrol  kualitas  serbuk  simplisia  dengan syarat  kurang  dari  10%,  untuk  mencegah  pertumbuhan  mikroba  yang dimungkinkan  dapat  menguraikan  kandungan  bahan  organik  dalam  simplisia. Hasil uji kadar air disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Kadar Air dan Hasil Pengeringan Daun Melinjo
Sampel B1 (g) B2 (g) % Kadar air Kering (g) Basah (g) Hasil (%) Randemen (%) Daun melinjo/Serbuk 9,94  9,03 9,15 1,18 5 23,6 13,82
Keterangan: B1= Bobot sebelum oven/ B2 = Bobot sesudah oven

## Analisis Kualitatif Senyawa Bioaktif
Ekstrak daun melinjo yang diperoleh adalah 3,82% dan dilakukan analisis kualitatif senyawa bioaktif (metabolit sekunder) melalui skrining fitokimia. Hasil
skrining  fitokimia  menunjukkan  beberapa  senyawa  bioaktif  yang  terkandung dalam ekstrak daun melinjo adalah, alkaloid, flavonoid, triterpenoid, tanin, dan saponin  (tabel  2).  Reaksi  esterifikasi  etanol  dilakukan  untuk  mengidentifikasi apakah  ekstrak  masih  mengandungan  alkohol  atau  tidak.  Hasilnya menunjukkan bahwa dalam ekstrak daun melinjo tidak terdapat senyawa ester, disebabkan  tidak  terdapat  gugus  –OH  (dari  asam  asetat)  yang  dapat  mengikat atom  H  dari  etanol  sehingga  tidak  menghasilkan  aroma  ester,  maka  dapat dinyatakan ekstrak daun melinjo bebas etanol (tabel 3).

## Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Daun Melinjo
Golongan Senyawa Pereaksi Hasil Alkaloid  Reagen Mayer HCl 2%+ Reagen Mayer -  Reagen Dragendroff HCl 2%+ Reagen Dragendroff + Flavonoid Etanol 70%+ logam Mg+ HCl + Triterpenoid Anhidrida asetat+ H 2 SO 4 pekat + Tanin Metanol+ FeCl 3 1% + Saponin Ekstrak+ aquadest + Keterangan: (+) Mengandung senyawa bioaktif dan (-) Tidak mengandung senyawa bioaktif

## Tabel 3. Hasil Uji bebas etanol ekstrak Daun Melinjo
Sampel Perlakuan Hasil Ekstrak daun melinjo Asam asetat, asam sulfat (dipanaskan) +
Keterangan: (+) Tidak tercium bau ester dan (-) Tercium bau ester

## Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Melinjo
Senyawa  bioaktif  ekstrak  daun  melinjo  (tabel  4)  menunjukkan  bahwa terdapat beberapa senyawa bioaktif yang potensial sebagai senyawa antibakteri, seperti  alkaloid,  tanin,  flavanoid  dan  triterpenoid  (Yasni  et  al,  2009).  Dengan merujuk pada penelitian sebelumnya, dilakukan analisis antibakteri ekstrak 50- 80%  daun  melinjo  dan  hasilnya  dianalisis  melalui  diameter  zona  hambat  (mm) pada tabel 4. Diameter zona hambat pada senyawa antibakteri merupakan zona bening  yang  ditumbuhi  bakteri  disekitar  kertas  cakram  karena  aktivitas antibakteri  dari  senyawa  bioaktif  seperti,  Alkaloid  (Mustika  dan  Ariyani,  2010), Flavanoid  (Padmasari  et  al,  2013),  dan  senyawa  lainnya  (Purwanto,  2015). Senyawa  bioaktif  pada  kertas  cakram  berdifusi  dengan  nutrient  agar  dan memberikan  zona  hambat  (zona  bening)  yang  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri.
Tabel 4. Diameter Zona Hambat Ekstrak Daun Melinjo Terhadap Bakteri S. aureus
Konsentrasi Ekstrak Diameter Zona Hambat (mm)±SD 50% 11,5±0,10 60% 12,0±0,28 70% 12,3±0,76 80% 13,1±0,28 C+ 27,8±0,56 C- 0,00±0,28
Keterangan: Kontrol (+) Klindamisin gel 10% /Kontrol (-) Aquadest
Untuk mengetahui apakah zona hambat senyawa antibakteri berbeda nyata (bermakna)  atau  tidak,  maka  dilakukan  uji  secara  statistic  antara  kelompok variasi konsentrasi dengan One–Way ANOVA menggunakan aplikasi (SPSS) 16.0. Hasil  uji  normalitas  pada  sediaan  gel  daun  melinjo  menggunakan  metode Kolomogorov-Sminorv  diperoleh  nilai  Sig  0,897,  nilai  Sig  >  α  =  0,05  yang menunjukkan  bahwa  data  terdistribusi  dengan  normal.  Selanjutnya  dilakukan uji  homogenitas  menggunakan  Levene  statistic,  dan  diperoleh  nilai  Sig  0,039, yang  berarti  Sig  <  α  =  0,05,  menunjukkan  bahwa  data  tidak  homogen.  Hasil analisis One Way Anova sig. 0,01> <α= 0,05, maka tidak signifikan berbeda daya hambat dengan pengaruh konsentrasi.

## Tabel 5. Analisis Statistik Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Melinjo
Analisis Data Metode Signifikasi Uji Normalitas Kolmogorov-Smirnov Test 0,897* Uji Homogenitas Levene Statistic 0,039* Analisa Hasil One Way Anova 0,010*

## Evaluasi Gel Ekstrak Daun Melinjo
Studi  awal  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  melinjo  80%  memiliki aktivitas  antibakteri  terbesar  13,1±0,28  mm  (tabel  4)  dan  menjadi  acuan konsentrasi  yang  digunakan  sebagai  penyusun  gel  dengan  memodifikasi prosedur formulasi dari penelitian sebelumnya (Sayuti, 2015). Hasil formulasi gel dianalisis  karakteristiknya  (Tabel  6).  Sediaan  farmasi  disebut  stabil  apabila karakteristik dan sifat sediaan gel relatif sama antara gel awal dibuat dengan gel yang  telah  disimpan  selama  periode  waktu  penyimpanan  (Djajadisastra,  2004). Hasil penelitian sediaan gel 80% dievaluasi parameter fisika (Tabel 6).
Hasil  pengamatan  organoleptis  menunjukkan  bahwa  sediaan  gel  80% ekstrak daun melijo berbentuk setengah padat dengan aroma khas ekstrak daun melinjo  dan  berwarna  coklat  tua.  Warna  coklat  tua  yang  dihasilkan  oleh  gel ekstrak  melinjo  dapat  disebabkan  karena  konsentrasinya  ekstrak  yang  tinggi (Helal et al., 2012). Pengujian nilai pH gel diperoleh 5, berarti nilai pH tersebut
masih  memenuhi  persyaratan  pH  sediaan  topikal  yaitu  dalam  interval  4,5-6,5, homogen, daya sebar 5 cm, daya lekat 01,23 s yang masih dalam nilai standar (Mappa  et  al  .,  2013).  Gel  terjadi  penurunan  daya  lekat  diakibatkan  oleh konsentrasi  basis  yang  relatif  rendah  sehingga  memiliki  kandungan  air  yang lebih banyak jika dibandingkan dengan konsentrasi basis yang lebih tinggi, yang mampu  mengurangi  kadar  air  serta  meningkatkan  viskositas  gel  (Panjaitan, 2013).  Daya  lekat  yang  lama  akan  memberikan  daya  lengket  pada  kulit meningkat,  sehingga  memberikan  efek  yang  lebih  tinggi  dan  semakin  besar, karena  gel  yang  baik  memiliki  daya  lekat  yang  besar  pada  daerah  kulit  yang diobati untuk memberikan efek yang baik (Helal et al., 2012).

## Tabel 6. Evaluasi Sediaan Gel Ekstrak Daun Melinjo
Karakteristik Hasil Evaluasi Gel Standar * Minggu I Minggu II Minggu III Minggu IV Uji pH pH 6 pH 5 pH 5 pH 5 4,5-6,5 Organoleptis -Bentuk -Warna -Bau Sediaan
-Kental -Coklat tua -Bau khas daun melinjo
-Kental -Coklat tua -Bau khas daun melinjo -Kental -Coklat tua -Bau khas daun melinjo -Kental -Coklat tua - Bau khas daun melinjo -Kental -Kuning pucat- kuning kecoklat- coklatan - Bau khas Homogen Sediaan homogen Sediaan homogen Sediaan homogen Sediaan homogen Sediaan Homogen Daya Sebar (cm) 5 5,2 5,7 5,9 5,54-6,08 Daya Lekat 1,23 detik 1,08 detik 0,58 detik 0,50 detik 4 detik Daya Proteksi  Tidak timbul warna kemerahan Tidak timbul warna kemerahan Tidak timbul warna kemerahan Tidak timbul warna kemerahan Tidak timbul warna kemerahan Keterangan: * (Yati et al, 2018)

## Aktivitas Antibakteri Gel Daun Melinjo terhadap S. aureus
Untuk  mengukur  aktivitas  antibakteri  sediaan  gel  daun  melinjo, selanjutnya digunakan metode disc-diffusion terhadap S. aureus. Diameter zona hambat gel (Tabel 7) menunjukkan ada peningkatan dibandingkan ekstrak total, 13.1mm menjadi 16.91 mm. Gel daun melinjo memiliki daya hambat rata-rata 3 mm lebih tinggi dari daya hambat ekstrak daun melinjo. Senyawa bioaktif dapat berperan sebagai senyawa antibakteri dikarenakan beberapa diantaranya dapat mengganggu  stabilitas  membrane  sel  yang  berakibat  membrane  tidak  selektif sebagai  pengatur  keluar  masuknya  molekul  ke  dalam  sel,  sehingga  akan
merusak membran sel, berakibat pada keluarnya komponen penting sel seperti asam nukleat, ataupun nukleotida (Praptiwi, 2010).
Tabel 7. Analisis Aktivitas Antibakteri Gel Daun Melinjo 80%
Sampel Replikasi (mm) Kategori 1 2 3 Rata-rata Gel Ekstrak Daun Melinjo 17,25 17 16,5 16,91 Sedang Klindamisin 28,5 28 27 27,83 Sangat Kuat Aquadest 0 0 0 0 Tidak ada
Gambar  2.  Diameter  Hambat  (A)  Ekstrak  Melinjo,  50%,  60%,  70%  dan  80% terhadap  S.  aureus.  (B)  Kontrol  negative  dan  Postif,  (C).  Sediaan  Gel  80% terhadap S. aureus
Formulasi  ekstrak  tanaman  dapat  digunakan  untuk  memudahkan mempengaruhi aktivitas antibakteri disebabkan oleh beberapa faktor, terutama faktor  interkasi  dengan  senyawa  lain  dapat  meningkatkan  efektivitasnya (Widodo, 2013). Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa diameter zona hambat ektrak daun melinjo dan formulasi gelnya terhadap bakteri S. aureus masih lebih rendah  jika  dibandingkan  kontrol  positif,  sehingga  kurang  efektif  untuk digunakan  sebagai  kandidat  senyawa  antibakteri  dari  tanaman,  yang disebabkan oleh senyawa metabolit sekunder dari ekstrak daun melinjo memiliki aktivitas  yang  rendah,  dikarenakan  oleh  perbedaan  struktur  senyawa molekulnya (Dersh et al., 2017), perbedaan kereaktifannya (Liu et al., 2019) dan perbedaan  sifat  kimia  lainnya  (Kato  et  al.,  2011).  Penelitian  ini  masih  sampai pada  taraf  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  daun  melinjo  dan  perlu  dilakukan studi  mekanisme  senyawa  antibakteri  menghambat  pertumbuhan  bakteri  pada penelitian selanjutnya.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  melinjo  (Gnetum  gnemon  L)  mengandung  alkaloid, tanin,  saponin,  flavonoid  dan  triterpenoid.  Variasi  konsentrasi  ekstrak  daun melinjo  pada  konsentrasi  50%,  60%,  70%  dan  80%  dengan  hasil  pengukuran diameter zona hambat 11,5 mm, 12 mm, 12,3 mm dan 13,08 mm berpengaruh dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri  Staphylococus  aureus.  Ekstrak etanolik daun melinjo yang memiliki daya hambat tertinggi  adalah konsentrasi 80%.  Aktivitas  antibakteri  terhadap  gel  ekstrak  daun  melinjo  konsentrasi  80% memberikan  hambatan  dalam  kategori  sedang  dengan  diameter  zona  hambat sebesar  16,91  mm  sedangkan,  kontrol  positif  klindamisin  gel  mempunyai kategori  sangat  kuat  dalam  menghambat  bakteri  Staphylococcus  aureus  yaitu sebesar 27,83 mm.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terima  kasih  kami  ucapkan  kepada  Kementerian  Riset  dan  Teknologi Perguruan  Tinggi  atas  skema  pendanaan  penelitian  dosen  pemula  (PDP)  DIKTI 2019  juga  kepada  LPPM STIKes  Karya  Putra  Bangsa  atas  supportnya  terhadap penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Dahlan,  S.  2008.  Statistik  Untuk  Kedokteran  dan  Kesehatan,  Salemba  Medika,
Jakarta.
Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Dirjen POM Direktorat Pengawasan Obat Tradisional. Jakarta.
Depkes  RI.  2012.  Permenkes  RI  Nomor  006  Tahun  2012  tentang  Industri  dan Usaha Obat Tradisional. Departemen Kesehatan RI. Jakarta
Dersch,  P.,  Khan,  M.A.,  Mühlen,  S.  and  Görke,  B.  2017.  Roles  of  Regulatory RNAs  for  Antibiotic  Resistance  in  Bacteria  and  Their  Potential  Value  as Novel Drug Targets. Frontiers in Microbiology. 17(8):1-12.
Hariana,  H.A.  2008.  Tumbuhan  Obat  dan  Khasiatnya  Seri  2.  Penebar Swadaya. Jakarta.
Helal,  D.A.,  El-Rahman,  D.A.,  Abdel-Halim,  S.H.,  El-Nabarawi,  M.A.  2012. Formulation  and  Evaluation  of  Floconazole  Tropical  Gel.  Int.  Journal  of Pharm. And Pharmaceutical Sci. 4(5):176-183.
Hendrawan,  I.  Zuraida,  B.F.  Pamungkas.  2015.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Metanol  Xylocarpus  granatum  dari  Pesisir  Muara  Badak.  Jurnal  Ilmu Perikanan Tropis. 20(2):15-22
Ida N, SF Noer. 2012. Uji Stabilitas Fisik Gel Ekstrak Lidah Buaya (Aloe vera L.). Majalah Farmasi dan Farmakologi 16(2). 79-84.
Ismiati,  N  dan  Trilestari.  2014.  Pengembangan  Formulasi  Masker  Ekstrak  Air Daun  Alpukat  (Persea  americana  mill)  sebagai  Antibakteri  Staphylococcus aureus untuk Pengobatan Jerawat. Pharmaciana. 4(1):45-52.
Kato,  E.,  Y.  Tokunaga,  F.  Sakan.  2009.  Stilbenoids  isolated  from  the  seeds  of melinjo (Gnetum Gnemon L.) and their biological activity. J Agric Food Chem. 57(6):2544-2549.
Kato,  H.,  M.  Samizo,  R.  Kawabata,  F.  Takano,  T.  Ohta.  2011.  Stilbenoids  from the  melinjo  (Gnetum  Gnemon  L.)  fruit  modulate  cytokine  production  in murine peyer's patch cells ex vivo.Planta Med. 77(10):1027-1034.
Kusumaningsih,  T.,  N.J.  Asrilya,  S.  Wulandari,  D.R.  T.  Wardani,  K.  Fatikhin. 2015.  Pengurangan  Kadar  Tanin  Pada  Ekstrak  Stevia  Rebaudiana  dengan Menggunakan Karbon Aktif. ALCHEMY Jurnal Penelitian Kimia. 1(1):81-89.
Liu, Y., S. Ding, J. Shen and K. Zhu. 2019. Non-ribosomal Antibacterial Peptides That Target Multidrug-Risistant Bacteria. Nat. Prod. Rep.36(4):551–692
Mappa T, J.E. Hosea, K. Novel. 2013. Formulasi Gel Ekstrak Daun Sasaladahan (Peperomia  pellucid  L)  dan  Uji  Efektivitasnya  terhadap  Luka  Bakar  pada Kelinci (Oryctolagus Cuniculus). J. Pharmacon. 2(2): 49-55.
Mustika,  K  dan  D.  Ariyani.  2010.  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Metanol  Biji Kalangkala (Litsea angulate). J. Sains dan Terapan Kimia. 4(2): 131-136
Noor,  M.A.,  dan  M.L.  Apriasari.  2004.  Efektivitas  Antibakteri  Ekstrak  Metanol Batang  Pisang  Mauli  (Musa  acumuminata)  dan  Povidone  Iodine  10% Terhadap Streptococcus mutans. Jurna; PDGI.  63(2):78-83.
Padmasari, P D., K.W. Astuti, N.K. Warditiani. 2013. Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol  70%  Rimpang  Bangle  (Zingiber  purpureum  Roxb).  Jurnal  Farmasi Udayana. 2(4):1-4.
Panjaitan,  EN.,  A.W.  Saragih  dan  D.  Purba.  2012.  Formulasi  gel  dari  ekstrak rimpang  jahe  merah  (Zingiber  officinale  Roscoe).  Journal  of  Pharmaceutics and Pharmacology. 1(1):19-20
Poeloengan, M dan Praptiwi. 2010. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Manggis (Gardnia mangostana Linn). Media LitbangKes. 20(2): 65-69
Purwanto, S. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Aktif Ekstrak Daun Senggani (Melastoma malabathricum L) terhadap Escherichia coli. Jurnal Keperawatan Sriwijaya, 2 (2): 84-92
Santoso, M., Y. Naka, C. Angkawidjaja, T. Yamaguchi, T. Matoba, H. Takamura. 2010. Antioxidant and DNA damage prevention activities of the edible parts of  Genetum  gnemon  and  their  changes  upon  heat  treatment.  Food SciTechnol Res. 16(6):549-556.
Sayuti, N.A. 2015. Formulasi dan Uji Stabilitas Fisik Sediaan Gel Ekstrak Daun Ketepeng Cina (Cassia alata L.). Jurnal Kefarmasian Indonesia. (5): 74-82
Suryanto,  E.,  Wehantouw,  F.  2009.  Aktivitas  Penangkal  Radikal  Bebas  dari Ekstrak  Fenolik  Daun  Sukun  (Artocarpus  altilis  F.).  Chemistry  Progress. 2(1):1-7
Tambunan, S., dan Sulaiman, T. N. S. 2018. Formulasi Gel Minyak Atsiri Sereh dengan Basis HPMC dan Karbopol. (14): 87-95
Tarigan, I.L dan C.C.Wang. 2019. Functional Substitution of an Indirect Pathway for Trna Glutaminylation with a Direct Pathway by  T. thermophiles  GlnRS. IOP Conf. Ser.: Earth Environ. Sci. 276 012012:1-11.
Taroreh,  N.C,  J.F.  Rumampuk,  K.V.  Siagian.  2016.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak Daun  Melinjo  (Gnetum  gnemon  L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus mutans. Jurnal Ilmiah Farmasi. 5(3):160-166
Tiwari, P., B. Kumar, M. Kaur, G. Kaur, H. Kaur. 2011. Phytochemical Screening and  Extraction:  A  Review.  Internationale  Pharmaceutica  Sciencia.  1(1):  98- 106
Widodo, H. 2013. Ilmu Meracik Obat untuk Apoteker. D-Medika. Yogyakarta. Yamin,  S.,  &  Kurniawan,  H.  2014.  SPSS  Complete  Teknik  Analisis  Terlengkap dengan Software SPSS. Salemba Infotek. Jakarta.
Yasni,  S.,  E.  Syamsir  dan  E.  H.  Direja.  2009.  Antimicrobial  Activity  of  Black Cumin  Extract  (Nigella  sativa)  Against  Food  Pathogenic  and  Spoilage Bacteria. Microbiology Indonesia. 3(3): 146-150.
Yati,  K.,  M.  Jufri,  M.Gozan,  Mardiastuti,  L.P.  Dwita.  2018.  Pengaruh  Variasi Konsentrasi  Hidroxy  Propyl  Methyl  Cellulose  (HPMC)  terhadap  Stabilitas Fisik  Gel  Ekstrak  Tembakau  (Nicotiana  tabaccum  L.)  dan  Aktivitasnya terhadap  Streptococcus  mutans.  Pharmaceutical  Sciences  and  Research (PSR). 5(3): 133-141.