## Formulasi Sediaan Saleb Ekstrak Pliek U...

## FORMULASI SEDIAAN SALEP EKSTRAK ETANOL PLIEK U SEBAGAI ANTIBAKTERI

## (Formulation of ointment of ethanol extract of Pliek U as antibacterial)
Rita Novita 1 * , Munira 2 , Rima Hayati 3
1,2,3 Jurusan Farmasi, Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh, Jl. Soekarno Hatta, Kampus Terpadu Poltekkes Kemenkes RI Aceh Lampeneurut, Aceh Besar. Email: ritanovi0208@gmail.com
Received: 9/7/2017                       Accepted: 29/9/2017                       Published online: 8/11/2017

## ABSTRAK
Infeksi  merupakan  penyakit  yang  dapat  ditularkan  dari satu  orang  ke  orang  lain  atau  dari  hewan  ke  manusia. Penyebab infeksi disebabkan oleh bakteri atau mikroorganisme  yang    patogen,  salah  satunya  adalah Staphylococus  aureus.  Berdasar  penelitian  sebelumnya Pliek U memiliki aktivitas antibakteri karena mengandung bakteriosin pada konsentrasi 5 mg/mL. Salep merupakan sediaan  setengah padat  yang ditujukan untuk pemakaian topikal  pada  kulit  atau  selaput  lendir.  Penelitian  ini bersifat ekperimental laboratorium. Rancangan percobaan yang akan digunakan adalah rancangan acak lengkap  (RAL)  dengan  3  perlakuan  dan  3  kali pengulangan yang terdiri dari P0 : Formulasi basis salep, P1 ekstrak  Pliek U  dengan kosentrasi  5 mg/mL, dan P2: formulasi sediaan salep ekstrak Pliek U dengan kosentrasi 5 mg/mL. Salep yang digunakan dievaluasi organoleptis, homogenitas, daya sebar, pH dan uji mikrobiologi. Hasil uji sediaan salep dengan konsentrasi 5 mg/mL memenuhi hasil uji evaluasi  organoleptik, homogenitas, daya sebar dan  pH.  Hasil  uji  mikrobiologi  formulasi  sediaan  salep ekstrak  Pliek  U  5  mg/mL  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
Kata kunci:   Pliek U, Staphylococus aureus, Antibakteri,
Salep.

## ABSTRACT
Infection  is  a  disease  that  can  be  transmitted  from  one person to another or from animal to human. The cause of infection  is  caused  by  bacteria  or  pathogenic microorganisms,  one  of  which  is  Staphylococus  aureus. Based  on  previous  research  Pliek  U  has  antibacterial activity because it contains bacteriocin at a concentration of  5  mg  /  mL.  Ointment  is  a  semi-solid  preparation intended  for  topical  application  of  the  skin  or  mucous membranes. This research is experimental laboratory. The experimental  design  to  be  used  was  a  complete randomized  design  (CRD)  with  3  treatments  and  3 repetitions  consisting  of  P0:  Formulation  of  the  base  of ointment,  P1  of  Pliek  U  extract  with  5  mg  /  mL concentration, and P2: ointment  of  ethanol  extract  of
* Penulis untuk korespondensi: ritanovi0208@gmail.com
Pliek  U with concentration 5 mg / mL. Salep used in the evaluation  of  organoleptic,  homogeneity,  spreading power, pH and microbiological test. The results of the test of ointment preparation with concentration of 5 mg / mL adequate  of  organoleptic  evaluation  test,  homogeneity, spreading  and  pH.  The  result  of  microbiology  test  of ointment of ethanol  extract of  Pliek U 5 mg / mL has antibacterial  activity  to  Staphylococcus  aureus  bacteria growth.
Keywords:   Pliek U, Staphylococus aureus, Antibacterial, Ointment.

## PENDAHULUAN
Penyakit infeksi merupakan penyakit yang dapat  ditularkan  dari  satu  orang  ke  orang  lain atau  dari  hewan  ke  manusia.  Penyebab  infeksi disebabkan  oleh  bakteri  atau  mikroorganisme yang  patogen, mikroba masuk ke dalam jaringan tubuh  dan  berkembang  biak  di  dalam  jaringan. Di  antara  bakteri  yang  dapat  menyebabkan infeksi  adalah Staphylococcus  aureus . 1 Infeksi oleh Staphylococcus  aureus banyak  ditandai dengan  rusaknya  jaringan  pada  tubuh  berupa abses  bernanah  dan  infeksi  yang  lebih  berat dapat  menyebabkan  pneumonia,  meningitis, empiema,  endokarditis  atau  sepsis  dengan supurasi di tiap organ. 2
Pemakaian  bahan  alami  sebagai  upaya penanggulangan masalah kesehatan telah banyak diterapkan masyarakat ditengah-tengah kemajuan  teknologi  dan  ilmu  pengetahuan  saat ini.  Terlebih  lagi  keadaan  perekonomian Indonesia  saat  ini  yang  mengakibatkan  harga obat-obatan  relatif  mahal.  Berdasarkan  hasil penelitian  Nurmalina 3 , Pliek  U memiliki aktivitas  sebagai  antibakteri.  Salah  satu  upaya yang dilakukan untuk mempermudah
Jurnal AcTion: Aceh Nutrition Journal, November 2017; 2(2): 103-108
penggunaan Pliek  U adalah  dengan  dibuat menjadi suatu sediaan topikal berupa salep.
Salep  merupakan  sediaan  setengah  padat yang  ditujukan  untuk  pemakaian  topikal  pada kulit  atau  selaput  lendir.  Formulasi  salep dibutuhkan  adanyasuatu  basis  salep,basis  salep sendiri  merupakan  zat  pembawa  yang  bersifat inaktif dari sediaan topikal dapat berupa bentuk cair atau padat yang membawa bahan aktif untuk berkontak  dengan  kulit. 4 Pemilihan  basis  salep merupakan salah satu hal yang harus diperhatikan dalam pembuatan salep. Basis salep yang  digunakan  dalam  sebuah  formulasi  obat harus  bersifat  inert  dengan  kata  lain  tidak merusak  ataupun  mengurangi  efek  terapi  dari obat yang dikandungnya. 5
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan oleh  Nurmalina  dkk 6 diketahui  bahwa Pliek  U memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri gram  positif  karena  mengandung  bakteriosin. Aktivitas antibakteri Pliek U terhadap Staphylocosus aureus dengan konsentrasi 5mg/mL. Berdasarkan penelitian adanya aktivitas  antibakteri  tersebut  peneliti  tertarik untuk  melakukan  pengujian  tentang  formulasi sediaan  salep  ekstrak  etanol Pliek  U sebagai antibakteri”.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilakukan dengan pendekatan
eksperimental laboratorium dengan  menggunakan  metode  sumur  yang dilaksanakan  pada  bulan  Agustus  2017  di Laboratorium  Falkultas  Pertanian  Universitas Syiah  Kuala  dan  Laboratorium  Mikrobiologi Jurusan Farmasi Politeknik Kesehatan Kemenkes Aceh.
Alat  yang  telah  digunakan  untuk membuat ekstrak Pliek U dan formulasi salep yaitu  bejana  maserasi,  blender,  beaker  glass 1000 mL, gelas ukur 1000 mL, pengaduk kayu, vacum rotary evaporator, timbang digital, kaca arloji,  pengangas  air,  cawan  porselen,  mortir, stamper, spatula, sudip, autoklaf, cawan petri, ose  bulat,  kain  flanel,  kain  kasa,  kaca  objek, beaker glass 50 mL, dangelas ukur 10 mL.
Bahan  yang  telah  digunakan adalah Pliek U ,  etanol  96%,  aquadest,  adeps  lanae,  vaselin
album,  bakteri Staphylococcus  aureus ,  media Nutrien agar (NA),  NaCl fisiologis.

## Pembuatan Ekstrak
Pembuatan ekstrak Pliek U yaitu ditimbang  sebanyak  300  g Pliek  U kemudian ditambahkan  3000  mL  Etanol  didiamkan  ±  24 jam,  dipisahkan  maserat  dengan  cara  disaring. Kemudian  dilakukan  pengulangan  dengan pelarut yang sama. Dikumpulkan semua maserat dan  dilakukan  penguapan  dengan  penguap vacuum rotary evaporator .

## Pembuatan salep ekstrak Pliek U
Salep  ekstrak Pliek  U yang  akan  dibuat yaitu  pada  konsentrasi  5  mg/mL  dengan  bobot salep 30 g.
a. Formulasi basis salep untuk 30 g
R/ Adeps lanae  4.5 g Vaselin album 25.5 g m.f. salep 30       g
b. Formulasi salep ekstrak Pliek U 5mg/mL R/ Ekstrak Pliek U 0.15  g Adeps lanae 4,478 g
Vaselin album 25,373 g m.f. salep 30       g
Dicampurkan  dalam  lumpang  hingga  kedua formulasi tersebut menjadi homogen.

## Evaluasi Sediaan Salep
a. Uji Organoleptis
Pemeriksaan organoleptis meliputi bentuk, warna  dan  bau  dari  salep  ekstrak Pliek  U . Parameter kualitas salep yang baik adalah bentuk sediaan  setengah  padat,  salap  berbau  khas ekstrak  yang  digunakan  dan  berwarna  seperti ekstrak. 5
b. Uji Homogenitas
Uji  homogenitas  sediaan  dilakuan  denga cara  salep  dioleskan  pada  sekeping  kaca  atau bahan  transparan  lain  yang  cocok  harus menunjukkan  susunan  yang  homogen.  Salep yang homogen ditandai dengan tidak terdapatnya  gumpalan  pada  hasil  pengolesan, struktur  yang  rata  dan  memiliki  warna  yang seragam dari titik awal pengolesan sampai titik
akhir pengolesan. bagian atas, tengah dan bawah dari wadah salep. 7
c. Uji daya sebar
Sebanyak 0,5 gram salep diletakkan diatas kaca  bulat  yang  berdiameter  15  cm,  kaca lainnya  diletakkan  diatasnya  dan  dibiarkan selama  1  menit.  Diameter  sebar  salep  diukur. Setelahnya,  ditambahkan  100  gram  beban tambahan  dan  didiamkan  selama  1  menit  lalu diukur diameter yang konstan. 8
d. Uji pH
Uji  pH  menggunakan  alat  bantu  stik  pH universal yang dicelupkan ke dalam  dilakukan dengan cara ditimbang 0,5 g salep ekstrak Pliek U yang  telah  diencerkan  5mL  aquadest.  Nilai pH  salep  yang  baik  adalah  4,5-6,5  atau  sesuai dengan nilai pH kulit manusia. 9

## Sterilisasi Alat
Alat yang terbuat dari kaca seperti beaker glass,  erlenmeyer,  petri  disk,  pipet  ukur, tabung  reaksi,  labu  ukur,  corong  kaca,  serta alat-alat  yang  terbuat  dari  logam  seperti pingset dibungkus dengan kertas buram. Alat – alat tersebut disterilkan didalam autoklaf pada suhu  121ºC  selama  15-30  menit.  Batang bengkok  disterilkan    dengan  cara  dilewatkan pada  nyala  bunsen.  Ose  bulat  disterikan dengan cara melewatkannya pada nyala bunsen hingga pijar.

## Suspensi Standar 0,5 Mc.Farland
Larutan  asam  sulfat  1  %  sebanyak  9.5 mL  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi. Ditambahkan  larutan  barium  klorida  1% sebanyak  0,5  mL.  Dikocok  hingga  homogen. Kekeruhan  suspensi  bakteri  uji  disesuaikan dengan  kekeruhan  suspensi  standar  Mc. Farland sehingga mempunyai kekeruhan  yang sama.

## Pembuatan Lobang/ Sumur
Pembuatan sumur dilakukan dengan cara, media NA yang telah padat dilubangkan dengan diameter ± 6 mm yang telah diinokulasi bakteri. Lubang  yang  telah  dibuat,  dimasukkan  sediaan dengan kosentrasi berbeda-beda.

## Uji Mikrobiologi
Suspensi bakteri S. aureus dimasukkan ke dalam  cawan  petri  sebanyak  1  mL,  kemudian dituangkan media agar NA sebanyak 15-20 mL ke  dalam  masing-masing  tiga  cawan  petri, kemudian  digoyangkan  pelan-pelan  hingga tercampur  dan  didiamkan  hingga  mengeras. Masing-masing  media  dibagi  menjadi  3  daerah (P0,  P1,  dan  P2),  Daerah  sumur  pertama diletakkan P0 berisi basis salep (kontrol negatif), daerah  sumur  kedua  diletakkan  P1  yang  berisi ekstrak  etanol Pliek  U dengan  kosentrasi 5mg/mL, dan daerah sumur ketiga diletakkan P2 yang  berisi  formulasi  sediaan  salep  ekstrak etanol Pliek  U dengan  konsentrasi  5mg/mL. Semua petri disk kemudian diinkubasi pada suhu 37ºC  selama  24-48  jam.  Diamati  pertumbuhan bakteri  pada  setiap  konsentrasi  dan  diukur diameter zona hambat.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil Ekstrak Pliek U 5mg/mL
Serbuk Pliek U ditimbang sebanyak 300 g, kemudian  serbuk  di  maserasi  menggunakan pelarut  etanol  96%  sebanyak  1500  mL.  Lalu disaring  hingga  terpisah  dari  ampasnya, kemudian  ampas  tersebut  direndam  kembali dengan  pelarut  yang  sama  sebanyak  1500  mL. Kemudian  filtrat  I  dan  filtrat  II  dicampur  dan disaring  dan  dipekatkan  dengan vacum  rotary evaporator. Ekstrak  yang  diperoleh  sebanyak 27.81  g  dengan  berwarna  coklat  pekat  dan berbau khas ekstrak Pliek U .

## Hasil Uji Evaluasi
a. Hasil Uji Organoleptis

## Tabel 1. Hasil uji organoleptis
Jenis Salep Bentuk Bau Warna Basis Salep Setengah padat Bau basis salep Putih kekuning- kuningan Salep Ekstrak Pliek U 5mg/mL Setengah padat Bau khas dari Pliek U Putih kecoklatan
Uji  organoleptis  dilakukan  dengan mengamati bentuk, warna dan bau dari sediaan salep.  Sediaan  salep  yang  baik  adalah  dengan bentuk  setengah  padat,  warna  seperti  ekstrak, dan  bau  khas  dari  sampel.  Berdasarkan evaluasi sediaan, hasil yang didapatkan dari uji organoleptis  dapat  dilihat  sebagaimana  yang disajikan pada Tabel 1.
Berdasarkan evaluasi yang telah dilakukan  uji  organoleptis  bentuk  sediaan salep  dan  basis  salep  yaitu  memiliki  bentuk setengah  padat.  Uji  organoleptis  warna  dari sediaan  salep  ekstrak Pliek  U 5mg/mL  dan basis  salep  memiliki  perbedaan  warna.  Basis salep  sebagai  kontrol  memiliki  warna  putih kekuning-kuningan  sedangkan  sediaan  salep ekstrak Pliek U 5mg/mL memiliki warna putih kecoklatan.
b. Hasil Homogenitas
Hasil  uji  homogenitas  pada  sediaan  salep yang diperoleh menunjukkan bahwa bahan aktif dan  bahan  tambahan  lainnya  tercampur  merata pada saat salep dioleskan pada kaca objek. Hasil uji homogenitas sediaan salep dapat dilihat pada Tabel 2.

## Tabel 2. Hasil uji homogenitas
Jenis Salep Homogenitas Basis salep Homogen Salep Ekstrak Pliek U 5mg/mL Homogen
Uji  homegenitas  yang  bertujuan  untuk mengetahui  salep  yang  dibuat  homogen  atau tercampur  merata  antara  zat  aktif  dengan  basis salep.  Salep  harus  homogen  dan  ditentukan dengan cara dioleskan pada sekeping kaca atau bahan  transparan  lain  yang  cocok,  harus menunjukan  susunan  yang  homogen. 5 Hasil  uji homogenitas pada sediaan salep yang diperoleh menunjukan  bahwa  sediaan  salep  tercampur merata  pada  saat  sediaan  salep  dioleskan  pada kaca objek.
c. Hasil Uji Daya Sebar
Hasil  penelitian  tentang  uji  daya  sebar terhadap basis salep dan salep ekstrak Pliek U 5 mg/mL dapat dilihat sebagaimana pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil uji daya sebar
Jenis Salep Daya Sebar (cm) Basis salep 5 Salep Ekstrak Pliek U 5mg/mL 5.6
Uji  daya  sebar  yang  dilakukan  untuk melihat daya penyebaran salep pada kulit, dimana suatu basis salep sebaiknya memiliki daya sebar yang baik untuk menjamin pemberian obat yang memuaskan.  Perbedaan  daya  sebar  sangat berpengaruh  terhadap  kecepatan  difusi  zat  aktif dalam  melewati  membran.  Semakin  luas membran  tempat  sediaan  menyebar  maka koefisien difusi makin besar yang mengakibatkan difusi  obat  pun  semakin  meningkat,  sehingga semakin  besar  daya  sebar  suatu  sediaan  maka semakin  baik. 10 Hasil  uji  daya  sebar  yang  telah dilakukan  menunjukan  bahwa  sediaan  salep memenuhi parameter daya sebar dimana diameter daya sebar yang baik adalah 5-7 cm. 11
d. Hasil Uji pH
Uji  pH  yang  dilakukan  bertujuan  untuk mengetahui  sifat  dari  salep  dalam  mengiritasi kulit.  Hasil  pengamatan  pH  dapat  dilihat  pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil uji pH Jenis Salep Ph Basis salep 5 Salep Ekstrak Pliek U 5mg/mL 4.5
Uji  pH  dilakukan  dengan    menggunakan kertas  pH..  Kulit  normal  berkisar  antara  pH  4,5- 6,5.  Nilai  pH  yang  melampaui  7  dikhawatirkan dapat menyebabkan iritasi kulit. 12 Hasil menunjukan  bahwa  telah  memenuhi  persyaratan pH untuk suatu sediaan topikal. Jadi bisa dikatakan bahwa  salep  ekstrak Pliek  U tidak  menyebabkan iritasi jika diaplikasikan pada kulit.

## Hasil Uji Mikrobiologi
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan  mengenai  formulasi  salep  ekstrak Pliek  U dan  ekstrak Pliek  U terhadap pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus
dengan menggunakan metode sumur, kemudian dilakukan uji daya hambat antibakteri setelah diinkubasi selama 2×24 jam pada suhu 37ºC. Hasil uji ini dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Hasil Uji rata-rata diameter zona hambat (mm) ekstrak Pliek U dan formulasi salep ekstrak Pliek U terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus.
Perlakuan Rerata diameter zona hambat (mm) Kategori Basis salep (P0) 0 Lemah Ekstrak Pliek U 5mg/mL (P1) 26 Sangat kuat Salep ekstrak Pliek U 5mg/mL (P2) 15 Kuat
Berdasarkan Tabel 5 dapat dilihat bahwa ekstrak Pliek  U 5mg/mL  (P1)  dan  salep ekstrak Pliek  U 5mg/mL  (P2)  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus adapun penyebab terbentuk diameter hambatan bakteri  dikarenakan  mengandung  zat  aktif. Zat aktif yang terkandung di dalamnya berupa asam  laurat  yang  sangat  berperan  penting sebagai antibakteri. Asam laurat adalah asam lemak  jenuh  rantai  sedang  (C12)  yang fungsinya sangat penting karena dapat diubah menjadi monolaurat dalam tubuh manusia dan hewan.  Monolaurat  bersifat  antibakteri, antivirus dan antiprotozoa. Monolaurat adalah monogliserida,  paling  aktif  dibandingkan dengan  asam  laurat  itu  sendiri,  yang digunakan  untuk  menghancurkan  mikrob patogen.
Menurut  Wang et  al 13 kandungan  asam lemak  jenuh  rantai  pendek  dan  rantai  sedang yang  sangat  tinggi  di  dalam  pliek  u menyebabkan  substrat  ini  penting  untuk sintesis  monogliserida  sebagai  antibakteri. Secara umum kerja asam lemak jenuh sebagai antibakteri  adalah  langsung  beraksi  ke  target membran sel sehingga menyebabkan
kerusakan  membran,  walaupun  secara  rinci mekanisme selanjutnya belum dapat dijelaskan. 14
Basis  salep  (P0)  yang  digunakan sebagai  kontrol  negatif  tidak  memiliki diameter  aktivitas  antibakteri  dikarenakan basis salep hanya memberikan efek melembabkan  yang  dimiliki  oleh  vaselin album  sedangkan  untuk  adeps  lanae  dapat menyerap  cairan  dari  dalam  infeksi.  Artinya basis salep belum memberikan efek penyembuhan  yang  berarti  karena  tidak mengandung  zat  aktif  yang  memiliki  fungsi sebagai penutupan luka infeksi. 15

## KESIMPULAN
Formulasi  sediaan  salep  ekstrak  Etanol Pliek  U 5mg/mL  memenuhi  persyaratan  uji evaluasi  dan  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus. Disarankan  berdasarkan  hasil  penelitian, bahwa  untuk  antisipasi  peyebarluasan  bakteri dapat  digunakan  saleb  ekstrak  etanol  yang terbuat  dari Pliek  U ,  karena  mempunyai  daya hambat bakteri yang kuat.

## KESIMPULAN
1.   Jawetz  E,  Melnick  JL,  Adelberg  EA. Mikrobiologi  Kedokteran  Edisi  XXII, Diterjemahkan  Oleh  Bagian  Mikrobiologi Fakultas Kedokteran
Universitas Airlangga .  Jakarta:  Penerbit  Salemba Medika; 2001. 2.   Sherris JC, Ryan KJ. Medical
Microbiology: An Introduction to Infectious Diseases .  3rd  ed.  Connecticut  Appleton  & Lange: Elsevier Publishing Company; 1984. 3.   Sudarwanto M, Sudirman LI, Sanjaya AW. Prospek Makanan Tradisional Aceh Sebagai Makanan Kesehatan: Deteksi Awal Aktivitas  Antimikrob Minyak Pliek U Dan Ekstrak Kasar Dari Pliek U. 2009.
4.   Depkes RI. Farmakope Indonesia Edisi IV . Jakarta; 1995.
5.   Anief  M. Ilmu  Meracik  Obat:  Teori  Dan Praktik .  ke  16.  Yogyakarta:  Gadjah  Mada University Press; 2013.
6.   Rabfiani S, Hanafiah M. Karakterisasi Awal Bakteriosin  Produksi  Bakteri  Asam  Laktat yang  di  Isolasi  dari  Pliek  U. Jurnal  Sain
Veteriner . 2002;20(1):30-34.
7.   Depkes RI. Farmakope Indonesia Edisi III . Jakarta; 1979.
8.   Naibaho  OH,  Yamlean  PVY,  Wiyono  W. Pengaruh  basis  salep  terhadap  formulasi sediaan  salep  ekstrak  daun  kemangi (Ocimum sanctum L.) pada kulit punggung kelinci  yang  dibuat  infeksi  Staphylococcus aureus. Jurnal  Ilmiah  Farmasi-UNSRAT . 2013;2(2):27-34.
9.   Tranggono  R,  Latifah  F. Buku  Pegangan Ilmu  Pengetahuan  Kosmetika .  Jakarta:  PT. Gramedia; 2007.
10.  Hasyim  N,  Pare  I,  Junaid  A,  Kurniati. Formulasi  dan  uji  Efektivitas  Gel  Luka
Bakar Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoepinnata L.) pada Kelinci
(Oryctolagus  cuniculus). Majalah  Farmasi dan Farmakologi . 2012;16(2):89-94.
11.  Garg  A,  Aggarwal  D,  Garg  S,  Singla  AK. Spreading  of  semisolid  formulations:  an update. Pharmaceutical technology . 2002;26(9):84-105.
12.  Gozali  D,  Abdassah  M,  Subghan  A, Lathiefah  SA.  Formulasi  Krim  Pelembab Wajah  yang  Mengandung  Tabir  Surya Nanopartikel  Zink  Oksida  Salut  Silikon. Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran,
Bandung . 2009.
13.  Wang  LL,  Yang  BK,  Parkin  KL,  Johnson EA.  Inhibition  of  Listeria  monocytogenes by  monoacylglycerols  synthesized  from coconut oil and milkfat by lipase-catalyzed glycerolysis. Journal  of  agricultural  and food chemistry . 1993;41(6):1000-1005.
14.  Kabara  J.  Health  oils  from  the  tree  of  life (nutritional  and  health  aspects  of  coconut oil): Sustainable Coconut Industry in the 21 st  Century.  In: Proceeding  of  the  XXXVII
Cocotech  Meeting/ICC  2000 .  Chennai: APCC Asian and Pacific Coconut
Community; 2000:101-109.
15.  Taylor C, Lilis C, LeMone P. Fundamental Of  Nursing :  The  Art  And  Science  Of
Nursing  Care .  Philadelphia:  Lippinott- Raven Publishers; 1997