## PENGARUH DOSIS RADIASI 125 I TERHADAP REHABILITASI SEL DARAH MERAH MENCIT ( MUS MUSCULUS )
I Nyoman Suratma Departemen Kedokteran Dasar Veteriner, Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Wijaya Kusuma Surabaya

## ABSTRACT
This  research  used  the  dosage  of  radio  active 125 I  of  5  ci  and  10  ci,  and  used  32  two- month-old  male  white  mice.  The  white  mice  were  divided  into  four  groups randomly. This  research applied Split-plot Design. After being treated based on the  gruping time, the data were obtained, then analyzed with the  following result . Group of 16 day t- test of the control erythrocyte ( c-1 ) and the erythrocyte after the break of the treatment of 5  ci of radio-active 125 I dosage showed significant ( p< 0,05 )unreversible. Group of 32 days t- test of the control erythrocyte ( c-2 )and the erythrocyte after the break of the treatment of 10  ci of radio-active 125 I dosage showed non significant difference (p>0,05)  reversible
Key words : Male mice, erythrocyte, radio-active 125 I.

## PENDAHULUAN
Menurut Becquerel (1896) yang dikutip  oleh  Gabriel,  (  2005  )  menemukan senyawa  Uranium  yang  memancarkan  sinar tak tampak yang dapat menembus bahan  yang tidak  tembus  cahaya  serta  mempengaruhi emulsi  fotografi.  Dia  juga  menunjukkan bahwa  inti  uranium  dan  banyak  unsur  lain bersifat  memancarkan  salah  satu  partikel  alfa, beta  atau  gamma.Unsur  inti  atom  yang mempunyai  sifat  memancarkan  sinar-sinar tersebut disebut inti Radioaktif. Pada penyinaran  akan  terjadi  pemindahan  atau penyerapan  energi  radiasi  ke  dalam  materi  / jaringan  tubuh  yang  disinari.  Kirsch  dkk; 2010; berdasarkan energy radiasi yang diserap maka  dibagi  dalam  3  proses  absorpsi  radiasi yaitu :1) efek fotolistrik,  2) efek komptom, 3) pembentukan sepasang electron (pair production).
Efek  fotolistrik,  energi  radiasi  akan diserap  seluruhnya  ,  yang  digunakan  untuk mengeluarkan  electron  dar  ikatan  inti.  Efek komptom,  energi  radiasi  hanya  sebagian  saja diserap untuk mengeluarkan electron dari atom sedangkan  sisa  energy  akan  terpencar  sebagai “scattered  radiation”  /  hamburan  radiasi dengan  energy  yang  lebih  rendah  dari  pada energy semula. Pembentukan sepasang
electron ( pair production ), yaitu suatu proses pembentukan  positron  dan  electron  melalui energy  radiasi  sinar  gamma  yang  melebihi 1,02  MeV  yaitu  energy  massa  positron    + electron.
Fungsi  utama  sel  darah  merah  adalah untuk  mentransport  hemoglobin  ,  yang selanjutnya  membawa  oksigen  dari  paru  ke jaringan.  Pada  beberapa  binatang  tingkat rendah,  hemoglobin  beredar  sebagai  protein bebas  dalam  plasma,  tidak  terbatas  dalam  sel darah merah. Oleh karena itu, bila hemoglobin terdapat  bebas  dalam  plasma  manusia,  kira- kira  3  persen  hemoglobin  akan  menerobos melalui  membrane  kapiler  masuk  ke  dalam ruang  jaringan  atau  melalui  membrane glomerulus    ginjal,  masuk  ke  dalan  kapsula Bowman  setiap  kali  darah  melalui  kapiler  ( Arthur, 2005 ).

## MATERI DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Reproduksi  Hewan  (Lab  . Kebidanan  )  FKH  Unair  Surabaya.  Penelitian ini  memakai  32  ekor  mencit  jantan  umur  2 bulan  yang  diperoleh  dari  Pusat  Veterinaria Farma  (PusVetma)  di  Jalan  Achmad  Yani Surabaya.  Rancangan  yang  dipakai  dalam
penelitian ini adalah rancangan petak terbagi ( Split-plot Design) ( Stee and Torrie, 1980 ).
Mencit  dibagi  menjadi  empat  kotak plastic  besar,  yang  berpenampang  30  cm sehingga  tiap  kotak  berisi  8  ekor  mencit jantan. Dua kotak untuk control dan dua kotak untuk perlakuan. Keempat kotak itu dilengkapi dengan  tutup  yang  terbuat  dari  kawat,  tempat makan  dan minum.Khusus  pada  kotak perlakuan  tutupnya  dilengkapi  dengan  tempat radioaktif.  Radio-nukleotida 125 I  sebanyak  15  ci  yang  diperoleh  dari  Diagnostic  Product Corporation  Amerika  Serikat  (  DPC  USA ).Bahan radioaktif ini dibagi menjadi dua dosis yaitu  :  1)  Dosis  5  ci  lama  radiasi  16  hari, kemudian  diistirahatkan  selama  16  hari  ;  dan 2) Dosis 10  ci lama radiasi 32 hari, kemudian diistirahatkan selama 32 hari.
Masing-masing takaran –takaran radioaktif  ini  ditaruh  di  tengah-tengah  tutup kotak  mencit  dengan  posisi  tegak  lurus  dasar kotak,  dan  dicatat  mulai  penempatan  bahan radioaktif. Untuk pemeriksaan darah diperlukan  :  Counting  Chamber  ,  pipet eritrosit, antikoagulan EDTA, micro- haematocrite  tube  (  Brand  ),  mikroskop cahaya,  larutan  Hayem,  coverglass,  tabung reaksi .
Tabel 1. Rancangan Percobaan

## Keterangan:
Kotak  1(a1D1):  terdiri  dari  8  ekor  mencit  jantan  umur  2  bulan diradiasi dengan radioaktif 125 I dosis 5  ci selama 16 hari ( post 1  ),  kemudian  diistirahatkan  selama  16  hari  (  IS  );  Kotak  2  ( a2D2 ) : terdiri dar 8 ekor mencit jantan umur 2 bulan diradiasi
dengan  radioaktif 125 I  dosis  10  ci  selama  32  hari  (  Post  2  ), kemudian diistirahatkan selama 32 hari ( IS );  Kotak 3 ( a1Do ): terdiri  dari  8  ekor  mencit  jantan  umur  2  bulan  tidak  diradiasi, control selama 16 hari ( K1 ); dan kotak 4 ( a2Do ): terdiri dari 8 ekor mencit jantan umur 2 bulan tidak diradiasi , control selama 32 hari ( K2 ).
Cara  mengambil  sampel  darah  mencit adalah  sebagai  berikut:  Kotak  1  (  a1D1  )  ; terdiri dari 8 ekor mencit jantan diradiasi dosis 5  ci  selama  16  hari  .  Setelah  mencapai  16 hari darahnya diambil dengan microhaematocrite  tube  (  Brand  )  melalui sudut  mata  medial,  darahnya  ditampung  pada tabung  kecil  yang  sudah  diberi  antikoagulan  ( EDTA  ).  Kedelapan  mencit  itu  diambil darahnya  dengan  cara  yang  sama  setelah diradiasi selama 16 hari. Tabung kecil-kecil itu diisi  nomor,  dosis,  lamanya  radiasi,  dari tabung  satu  sampai  delapan.  Setelah  diambil darahnya,  semua  mencit  pada  kelompok perlakuan diistirahatkan dari radiasi selama 16 hari, dengan tetap diberi makan dan minum.Setelah istirahat 16 hari mencit diambil darahnya lagi dari mencit satu sampai delapan. Cara pengambilannya sama dengan sebelumnya.
Cara menghitung sel darah merah ( eritrosit ).
Dengan  memakai  pipet  eritrosit  yaitu pipet  berskala  0,5  ml  dan  skala  101  ml  di ujungnya.  Mula-mula  darahdiisap  sampai skala  0,5  ml  kemudian  isap  larutan  Hayem sampai  skala  101  ml  kemudian  pipet  dibulak- balik  agar  tercampur  merata.  Setelah  dibuang empat  tetes,  maka  tetesan  berikutnya  siap diteteskan pada Counting Chamber  yang telah ditutupdengan  cover  glass  kemudian  siap dilihat di bawah mikroskop, untuk dihitung sel darah merah ( eritrosit ). Yang dihitung adalah pada  kotak-kotak  diagonal  sebanyak  lima kotak,  lalu  jumlah  tersebut  dikalikan  10.000. Dengan    cara  yang  sama  darah  diencerkan untuk tabung nomor dua sampai tabung nomor delapan.
Untuk  kotak  nomor  2  (a2D2);  terdiri dari  8  ekor  mencit  diradiasi  dosis  10  ci selama  32  hari,  kemudian  diistirahatkan  dari radiasi selama 32 hari. Cara mengambil  darah
Waktu Radiasi (hari) Dosis 1 (D1) (post 1) Dosis 2 (D2) (Pos 2) Waktu istirahat (hari) IS=R Kontrol (DO) =K 5  ci 10  ci 16 (a1) 8 (a1D1) 16 8 3=K (a1Do) 32 (a2) 8 (a1D1) 32 8 (a2D) 4 = K 2 8 8 16
setelah  diradiasi  selama  32  hari  (  Post  )  dan setelah istirahat selama 32 hari ( IS =R ) sama dengan  sebelumnya.    Untuk  kotak  3  dan  4 adalah  kotak  selama  16  hari  dan  32  hari  cara mengambil  darah  dan  menhitungnya  sama dengan sebelumnya. Parameter yang diamati dan  dianalisis adalah jumlah sel  darah merah  (  eritrosit  )  setelah  diradiasi  dalam waktu  tertentu  (  Post  )dan  setelah  istirahat dalam  waktu  tertentu  (  IS  )tiap  perlakuan, semuanya ini   datanya disajikan dalam bentuk deskriptif. Sedangkan untuk menguji perbedaan-perbedaan pengamatan antara kontrol  (  K  ),  setelah  diradiasi  (  Post  )  dan setelah istirahat ( IS ) dari masing-masing data dipakai  rancangan  petak  terbagi  (Split  –plot Design  dari  Steel  and  Torrie,  1980  ). Sedangkan untuk menguji perbedaan pengamatan antara dosis, setelah  diradiasi  dan istirahat ( Posis ) dan interaksi posis dan dosis (  Posis  *  dosis  )  secara  keseluruhan  diuji dengan uji Fischer  ( F )  kemudian  dilanjutkan dengan  uji  t  antara  harga  rata-rata  setelah diradiasi (Post) dengan harga rata-rata istirahat (  IS  )  dengan  alfa  =  0,05.  Untuk  mengetahui reversibel  radioaktif 125 I  perlu  diadakan  uji  t antara  rata-rata  variabel  control  (  K  )  yang bersangkutan dengan rata-rata variabel istirahat ( IS ) yang bersangkutan. Bila t hitung
dengan p  lebih besar dari alfa ( 0,05 )-> ( p > 0,05  )tidak  bermakna,  reversibel.  Istirahat selama  waktu  tertentu  dari  radiasi  sel  bisa kembali baik.

## Hasil dan Pembahasan
Dari  tabel  analisis  varian  didapat bahwa  dengan  alfa  =  0,05  maka  kelompok dosis tidak bermakna dimana p > 0,05. Sedang kelompok  setelah  diradiasi  dengan  kelompok setelah istirahat (Posis). Jika tidak bermakna di mana p > 0,05. Interaksi antara Posis dan dosis juga  tidak  bermakna  dimana  p  >  0,05.  Uji  t antara  harga  post  radiasi  dan  istirahat  untuk dosis  5  ci  tidak  bermakna  dimana  p  >  0,05 . Uji  t  antara  harga  post  radiasi  dan  istirahat untuk dosis 10  ci tidak bermakna dimana p > 0,05.  Untuk  mengetahui  reversibel  perlu  ada uji  t  untuk  rata-rata  eritrosit  kontrol  dengan rata-rata  eritrosit  istirahat.  Untuk  waktu  16 hari  ;  bermakna  dimana  p  <  0,05;  tidak reversibel.  Sel  belum  sembuh  setelah  istirahat selama  16  hari.  Untuk  waktu  32  hari,  tidak bermakna  dimana  p  >  0,05  ;  reversibel.  Sel bisa  sembuh  kembali  setelah  mengalami radiasi  radioaktif 125 I  dan  istirahat  selama  32 hari.  Jadi  istirahat  selama  16  hari  sel  belum bisa kembali baik  dan  istirahat selama 32  hari sel baru bisa kembali  baik.
Tabel 2. Rata-rata jumlah eritrosit control ( K ), setelah diradiasi ( Post ) dan setelah istirahat ( IS ) selama 16 hari
_________________________________________________________________________________ Kontrol ( K ) Setelah diradiasi ( Post ) Setelah istirahat ( IS ) ____________________________________________________________________________________ 9976250.000a1 ± 447818,123       102475E x 10 8 b1 ± 549330,762b1   105263 x10 8 c1 ±245178,506 100625E x 10 8 a2 ±294363,720     103338Ex10 8 b2 +-467361,515        101875E x10 8 c2 ± 274941,552 __________________________________________________________________________________ Dalam satu kolom dan baris berbeda nyata  ( p < 0,05 ).
Efek biologis yang timbul oleh radiasi pengion  adalah  Radio-terapi  dengan  partikel isotope  radioaktif  pada  hakekatnya  tergantung dari  pada  energy  yang  diabsorpsi  baik  secara efek  fotoelektris  maupun  efek  kompton  yang menimbulkan  ionisasi  pada  jaringan.  Sebagai akibat  ionisasi  ini  terjadi  kelainan  atau
kerusakan  pada  jaringan,  akibat  dari  radiasi pengion,  ini  dinamakan  efek  biologis  ( Gabriel,  2005  ).  Efek  biologis  dibagi  atas  2 bagian  yaitu  :  1).  Efek  somatic,  2).  Efek genetis.  Pembagian  ini  berdasarkan  atas kerusakan sel jarigan yang ditimbulkan radiasi pengion  tersebut.  Di  dalam  sel  akan  terjadi  2
efek  kerusakan  sel  yaitu  :  efek  ionisasi  dan efek  biokimia.  Efek  ionisasi,  pada  sel  yang terionisasi  akan  memancarkan  electron  pada struktur ikatan kimia dengan akibat terpecahnya molekul-molekul dari sel sehingga terjadi kerusakan sel.
Efek biokimia ; Jaringan sebagian besar terdiri dari  air  sehingga  radiasi  pengion  akan menyebabkan  molekul  air  terpecah  menjadi H+ dan OH- serta atom-atom netral H dan OH ( Frace radikal ),  yang sangat bereaksi  kimia . Molekul-molekul  jaringan  yang  terpecah  ini akan mengakibatkan terjadinya kerusakan sel / jaringan  ( Roger, 2010 ). Kaplan  dkk;( 1972 ) yang  dikutip  oleh  Vilpo,  dkk;  (2008  ) mengadakan  pengobatan  Hodgkin  disease terhadap 56 penderita, dengan cara penyinaran radioaktif 99mTc dosis 35-45 Gy ( 3500-4500 rad  )  selama  4-7  minggu.  Dari  hasil pemeriksaan  itu  jumlah  sel  darah  merah  ( eritrosit)  sebelum  disinari  4.3  –  5.6 x  1012  /  l sedangkan  jumlah  sel  darah  merah  setelah disinari menjadi 4.6 +- 0,6 x 1012 /l.
Berikut  ini  gambar  hasil  pengukuran eritrosit:
Gambar.1 Jumlah eritrosit pra dan pasca perlakuan  radiasi

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan sebagai berikut :
Kelompok  waktu  16  hari  tidak  terjadi reversibel  karena  istirahat  selama  16  hari  sel belum  cukup  untuk  kembali  baik.  Kelompok waktu  32  hari  terjadi  reversibel,  karena istirahat selama 32 hari sel sudah cukup untuk kembali baik.Oleh karena itu dalam hal ini sel- sel  yang  membentuk  sel  darah  merah memerlukan waktu lebih lama untuk mencapai kesembuhan dari penyinaran radioaktif. Disarankan  paramedis,  petugas  laboratorium yang  bekerja  berhubungan  dengan  radioaktif perlu  perlindungan  khusus.Penelitian  ini  perlu dikembangkan  lagi  mengenai  efek  genetik, mutagenik, teratogenik, karsinogenik.

## DAFTAR PUSTAKA
Arthur,  C.G.  2005.  Tex  boox  of  medical physiology.W.D.  Saunders  Company  Phi ladelphia. London  Toronto. P. 85 – 96.
Gabriel  ,  J.F;  2005.  Fisika  Kedokteran  . Departemen Fisika Unud.
Kirsch, W.M; Schulz, D; Fuchs, E. and Na Kane, P, 2010. Effect of Ionizing radiation On Nuclear energy
Trans  duction  in  Normal  and  Neoplastic  glia. J. Radiation biology. 11 : 349 – 359.
Roger, J.G. 2010; Radiation Ionizing  and Non Ionizing  in  Enviromental  Health.  Purdom  – P.W. Academic
Press.  New-York-London  Toronto-Sydney- San-Fransisco P: 394 – 429.
Steel, R.G.D. and Torrie, J.H. 1980. Principles and  procedures  of  Statistics  .  A.  Biometrical Aproach  2  nd      ED.  Mc.  Graw  Hill  Inc  Book Co. P: 336 – 347; 581 – 583.
Vilpo,  J.A.  and  Nordman,  E.M.  2008. Hematologic  Evaluation After  Radiation Therapy  in  Hodgkin’s  Disease.  J.  Radiation
Biology. 17 (16 ): 209 – 216.