Jurnal Pharmascience, Vol .03, No.02, Oktober 2016, hal: 131 - 141 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article

## Efek Ekstrak Etanol 70% Akar Saluang Balum
( Lavanga sarmentosa , Blume kurz) Terhadap Spermatogenesis dan Gambaran Histopatologik Testis Mencit
*Yaumi Musfirah 1 , Moch Saiful Bachri 2 , Laila Hayu Nurani 2
1 Sekolah Tinggi Farmasi Borneo Lestari
2 Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta *Email : yaumi.musfirah@gmail.com

## ABSTRAK
Saluang Balum ( Lavanga sarmentosa , Blume  Kurz) sudah lama digunakan oleh masyarakat  suku  Dayak  Kalimantan  sebagai  afrodisiaka  yang  dapat  meningkatkan stamina,  gairah  seksual  dan  kesuburan  pria.  Umumnya  Saluang  Balum  dikonsumsi dengan  cara  meminum  air  rebusan  akarnya.  Tujuan  penelitian  adalah  untuk mengetahui  efek  ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang  Balum  terhadap  spermatogenesis dan gambaran histopatologik testis mencit. Penelitian ini menggunakan 25 ekor mencit jantan galur Swiss yang dibagi menjadi 5 kelompok, masing-masing berjumlah 5 ekor. Kelompok I adalah kelompok kontrol yang diberikan  CMC-Na 1%, dan kelompok II adalah kelompok  pembanding  yaitu  X-gra.  Kelompok  III,  IV  dan  V adalah kelompok perlakuan  ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang  Balum  (EEASB)  dengan  dosis  100;  200; 400  mg/Kg  BB.  Semua  kelompok  diberikan  perlakuan  secara  peroral  selama  14  hari satu  kali  sehari.  Pada  hari  ke-14,  mencit  didislokasi  kemudian  diambil  testisnya, diitimbang  bobotnya  kemudian  dibuat  sediaan  histopatologik.  Data  histopatologi dianalisis  secara  dekskriptif  kemudian  sel-sel  spermatogenik  di  dalamnya  dianalisis secara  kuantitatif.  Data  histopatologi  testis  tidak  menunjukkan  adanya  perubahan organ  pada  pemberian  ekstrak  tersebut.  Dari  pengamatan  terhadap  jumlah  sel-sel spermatogenik,  sel  spermatogonia  pada  semua  kelompok  dosis  pemberian  memiliki jumlah  yang  sama  (50,70;  58,50;  55,90  (sel)  berturut-turut  pada  dosis  100  mg/Kg  BB, 200 mg/Kg BB dan 400 mg/Kg BB) sedangkan jumlah sel spermatosid [(135,00 sel (100 mg/Kg BB); 138,90 sel (200 mg/Kg BB); 139,20 sel (400 mg/Kg BB)] dan sel spermatid [(122,20  sel  (100  mg/Kg  BB);  138,10  sel  (200  mg/Kg  BB);  132,50  sel  (400  mg/Kg  BB)] mengalami  peningkatan  secara  statistik.  Pengamatan  tersebut  menunjukkan  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  akar  Saluang  Balum    memiliki  efek  terhadap spermatogenesis dengan meningkatkan jumlah sel spermatosid dan sel spermatid tanpa mempengaruhi organ testis (normal) pada semua dosis.
Kata Kunci  :  Ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang  Balum,  spermatogenesis, histopatologik

## ABSTRACT
Lavanga sarmentosa, Blume kurz, has been used as aphrodisiac that can increase stamina,  sexual  desire  and  male  fertility    in  traditional  Borneo’s  Dayak  ethnic  medicine. The people usually consume by drinking water decoction of the roots. The present studied tried  to  investigate  effect  of  L.  sarmentosa  root  extract  on  spermatogenesis  and histopathology of mice sperm. This study used 25 Swiss male mice were randomly divided into five experimental groups of 5. The ethanolic extract of L. Sarmentosa (100, 200, 400 mg/kg b.w/days), control and Xgra were administered orally for 14 days. The animals were evaluated  for  spermatogenesis  and  testis  histopathology  at  14  days  treatment. Histopathologic  data  were  analyzed  descriptively  later  spermatogenic  cells  in  it  were analyzed  quantitatively.  The  testis  histopathology  results  that  administration  of l.sarmentosa  roots  extract  showed  not  any changes in the organ. The calculation results number  of  spermatogenic  cells, spermatogonia  cells  at  all  doses  had  the  same  number (50.70; 58.50; 55.90 ( cell ) at a dose of 100 mg / kg b.w, 200 mg/kg b.w and 400 mg/kg b.w respectively) whereas the spermatosid cells [(135,00 cells (100 mg/kg b.w; 138,90 cells (200 mg/kg b.w); 139.20 cells (400 mg/kg b.w)] and the spermatid cells [(122,20 cells (100 mg/kg b.w);  138,10  cells  (200  mg/kg  b.w);  132,50  cells  (400  mg/kg  b.w)] number  increased statistically. In  the  present  study  indicated that  the  L.sarmentosa  roots  extract  have spermatogenenesis effect by increasing calculation result number of spermatosid cells and spermatid cells without damaging the testes (normal).
Keyword : Lavanga sarmentosa root ethanolic extract, spermatogenesis, histopathology

## I. PENDAHULUAN
Afrodisiaka  adalah  substansi  yang dapat  meningkatkan  hasrat  seksual  atau libido. Afrodisiaka yang banyak digunakan biasanya berupa produk afrodisiaka sintetis,  namun,  produk  sintetis  ini  dapat menimbulkan efek samping negatif seperti sakit  kepala,  nyeri  otot  dan  penglihatan kabur serta memungkinkan adanya interaksi  dengan  obat  lainnya  (Sandroni, 2011). Adanya efek tersebut meningkatkan pencarian  dari  bahan  alam  yang  memiliki efek  sebagai  afrodisiaka  tanpa  memiliki efek  samping  negatif,  dan  juga  mampu mengobati  orang-orang  dengan  dorongan seksual yang rendah.
Suku  Dayak  Kalimantan  telah mengenal  akar  Saluang  Balum  ( Lavanga sarmentosa,  Blume  kurz)  sebagai  tanaman obat  tradisional  yang  memiliki  khasiat meningkatkan  stamina,  gairah  seksual  dan kesuburan pria. Saluang Balum dikonsumsi  dengan  cara  meminum  air rebusan akar tanaman tersebut (Saparita et al ., 2009).
Berangkat  dari  latar  belakang tersebut,  maka  dilakukan  penelitian  untuk mengetahui  bagaimana  efek  akar  Saluang Balum mampu meningkatkan spermatogenesis  tanpa  merusak  jaringan organ pengahasil sperma, yaitu testis.

## II. BAHAN DAN METODE

## A. Bahan
Bahan  yang digunakan adalah akar Saluang  Balum  ( Lavanga  sarmentosa,
Blume  kurz)  yang  diperoleh  dari  hutan Kalimantan  Tengah  (Palangkaraya)  yang diambil  pada  bulan  April  2014,  X-Gra kapsul  (Phapros),  larutan  CMC-Na  1%, etanol  70%  (Brataco),  larutan  NaCl  0,9% (Sanbe), larutan eosin-nigrosin.
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah dua  puluh  lima  ekor  mencit  jantan  galur Swiss yang berusia  2-3 bulan dengan berat 20-25 gram, pelet jenis BR-2.

## B. Pengolahan  Ekstrak  Etanol  70% Akar Saluang Balum
Akar  Saluang  balum  kering  diserbukkan, kemudian masing-masing serbuk ditimbang  sebanyak  100  gram,  lalu dimasukan dalam wadah kaca. Serbuk tadi kemudian  diisi  dengan  etanol  70% sebanyak  1L.  Masing-masing  wadah dengan  stirer  selama  1  jam  kemudian didiamkan  selama  24  jam.  Maserat disaring  setelah  24  jam  dan  ditaruh  dalam cawan  kemudian  diletakkan  di  atas waterbath untuk  menguapkan  pelarut hingga  terbentuk  ekstrak  kental.  Ekstrak kental  yang  terbentuk  ditimbang  untuk kemudian dihitung randemennya.

## C. Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan kimia yang terdapat  dalam  akar  Saluang  Balum. Dilakukan  dengan  uji  tabung  dan  atau  uji kualitatif secara Kromatografi Lapis Tipis.

## D. Pembagian Hewan Uji
Pada  percobaan  ini  digunakan mencit  jantan  galur Swiss dengan  bobot 20-25  g.  Hewan  uji  mencit  jantan  dibagi menjadi  lima  kelompok  yang  masing- masing terdiri dari 5 ekor. Kelompok dosis ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang  Balum (EEASB)  dibagi  menjadi  3,  yaitu  dosis 100  mg/  Kg  BB,  200  mg/Kg  BB  dan  400 mg/Kg  BB.  Kelompok  I  adalah  kelompok kontrol,  yaitu  kelompok  yang  diberikan suspensi  pelarut  berupa  CMC-Na  1%. Kelompok  II,  III  dan  IV adalah kelompok yang  diberikan  suspensi  EEASB  berturut- turut  dengan  dosis  100  mg/  Kg  BB,  200 mg/Kg  BB  dan  400  mg/  Kg  BB. Kelompok V adalah kelompok pembanding  yang  diberikan  suspensi  X- gra  dosis  61,75  mg/Kg  BB.  Pemilihan dosis  X-gra  adalah  berdasarkan  konversi dosis  pemakaian  manusia  ke  mencit. Masing-masing    kelompok  hewan  uji diberikan  perlakuan  selama  14  hari  secara per oral.
E. Pengamatan histopatologi dan perhitungan jumlah sel spermatogenik
Pada  hari  ke-14  semua  kelompok mencit  didislokasi  tulang  leher.    lalu dibedah  dengan  membuka  isi  perut, sehingga  nampak  testis, ductus  deferens , prostat  dan  vesika  seminalis.  Organ  testis sebelah kanan dipisahkan dari jaringan lain dan  ditimbang,  kemudian  difiksasi  dalam larutan  formalin  10%  v/v  (Krause,  2001). Setelah dua hari testis  yang telah difiksasi dalam  larutan  formalin  10%,  dipotong melintang pada tempat yang telah ditentukan,  kemudian  diproses  untuk dibuat sediaan histopatologi dengan pewarnaan hematoksilin (Meyer) eosin.
Proses pembuatan sediaan histopatologi  dilakukan  di  Laboratorium Patologi  Fakultas  Kedokteran  Hewan UGM.  Menurut  Jannah  (2009),  tahap pembuatan  sediaan  adalah  sebagai  berikut : 1. Tahap pertama coating , dimulai dengan  menandai  obyek  glass  yang akan  digunakan  dengan  kikir  kaca pada  area  tepi  lalu  direndam  dalam alkohol 70% minimal semalam, kemudian  obyek  glass  dikeringkan dengan tisu dandilakukan perendaman dalam larutan gelatin 0,5% selama 30- 40  detik  perslide  lalu  dikeringkan dengan  posisi  disandarkan  sehingga gelatin  yang  melapisi  kaca  dapat merata.
2. Tahap  kedua,  organ  testis  dan  hati yang  telah  disimpan  dalam  larutan
formalin  10%  dicuci  dengan  alkohol selama  2  jam  dilanjutkan  dengan pencucian  secara  bertingkat  dengan alkohol  yaitu  alkohol  90%,  95%, etanol  absolut  (3  kali),  xylol  (3  kali), masing-masing selama 20 menit.
3. Tahap  ketiga  adalah  proses infiltrasi yaitu dengan menambahkan paraffin 3 kali dalam 30 menit.
4. Tahap  keempat  adalah embedding yaitu bahan beserta parafin dituangkan dalam  kotak  karton  atau  wadah  yang sudah  disiapkan  dan  diatur  sehingga tidak  ada  udara  yang  terperangkap  di sekat  bahan.  Blok  parafin  disimpan selama  semalam  dalam  suhu  ruang kemudian  diinkubasi  dalam freezer sehingga benar-benar keras.
5. Tahap pemotongan dengan mikrotom, pengirisan  atau  penyatan  dimulai dengan  mengatur  ketebalan,  misal dipotong  dengan  ukuran  5  μm.  Pita hasil irisan diambil dengan menggunakan  kuas  dimasukkan  ke dalam  air  dingin  untuk  membuka lipatan kemudian masukkan dalam air hangat dan dilakukan pemilihan irisan yang  terbaik.  Irisan  yang  terpilih diambil  dengan obyek  glass yang sudah  dicoating  lalu  dikeringkan  di atas hot plate .
6. Tahap  deparafisasi  yakni  preparat dimasukkan dalam xylol sebanyak 2 x 5 menit.
7. Tahap  rehidrasi,  preparat  dimasukkan dalam  larutan  etanol  bertingkat  mulai dari  etanol  absolut  (2  kali)  etanol 95%,  90%,  80%  dan  70%  masing masing  selama  5  menit.  Kemudian preparat  direndam  dalam  aquades selama  10  menit.Tahap  pewarnaan preparat  ditetesi  dengan hematoxylen selama 3 menit atau sampai didapatkan  hasil  warna  yang  terbaik. Selanjutnya dicuci dengan air mengalir  selama  30  menit  dan  dibilas dengan  aquades  selama  5  menit. Preparat  dimasukkan  dalam  pewarna eosin  alkohol  selama  30  menit  dan dibilas  dengan  aquades  selama  5 menit.
8. Tahap  dehidrasi,  preparat  direndalam etanol  80%,  90%,  95%  dan  etanol absolut (2 kali) masing-masing selama 5 menit.
9. Tahap clearing dalam  larutan  xylol  2 kali selama 5 menit diangin-anginkan.
10. Mounting dengan  entellan  hasil  akhir diamati dengan mikroskop dan dipotret kemudian data dicatat.
Preparat  histopatologi  testis  yang  sudah jadi selain untuk digunakan untuk memeriksa gambaran testis akibat pemberian  ekstrak  etanol  70%  akar Saluang  Balum  juga  digunakan  untuk memeriksa  sel-sel  spermatogenik.  Cara pemeriksaannya secara random menggunakan mikroskop dengan
pembesaran  400x.  Sel  dihitung  dari  rata- rata  9  lapang  pandang,  yaitu  3  lapang pandang  bagian  atas,  3  lapang  pandang bagian  tengah  dan  3  lapang  pandang bagian  bawah  sediaan  histopatologi  testis (Gambar 1). Jumlah sel-sel spermatogenik, yaitu  spermatogonia,  spermatosid  dan spermatid  dihitung  dan  dirata-rata  untuk masing-masing kelompok.

## F. Analisis Data
Data berupa berat testis, dan sel-sel spermatogenik dianalisis dengan menggunakan  SPSS.  Untuk  menentukan data  tersebut  adalah  data  parametrik  atau non  parametrik,  sebelumnya  data  diuji normalitas dan homogenitasnya. Uji normalitas dilakukan dengan uji Kolmogrov-Smirnov ,  dilanjutkan  dengan uji  homogentitas  dengan  uji Levene untuk mengetahui  varian  data  homogen  atau tidak.  Apabila  data  menunjukkan  hasil yang  normal  dan  homogen  maka  analisa dilanjutkan  dengan  metode  parametrik yaitu  ANOVA.  Apabila  dari  hasil  uji keduanya  salah  satu  menunjukkan  data yang  tidak  normal  atau  tidak  homogen
Gambar  1. Pembagian  lapang  pandang  pada  sediaan histopatologi testis (Ayuchecaria, 2013)
maka  analisis  dilanjutkan  dengan  metode non-parametrik,  yakni  uji Kruskal-Wallis
dan Mann-Whitney . Data dikatakan terdistribusi  normal  dan  atau  homogen apabila  hasil  uji  menunjukkan  nilai signifikasi lebih dari 0,05.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak kental yang didapat berupa padatan berwarna cokelat kehijauan  dengan  konsistensi  lunak  dan lengket.  Dari  1250  gram  serbuk  simplisia diperoleh  ekstrak  sebanyak  55,60  gram. Rendemen ekstrak adalah sebesar 4,44 %.
Dari hasil skrining fitokimia dengan  kromatografi  lapis  tipis  (KLT) diketahui  bahwa  akar  Saluang  Balum positif  mengandung  senyawa  flavonoid dan  steroid.  Hasil  uji  KLT  dapat  dilihat pada Gambar 2 dan Gambar 3 di bawah.

## A. Hasil Pengamatan Histopatologi
Testis  dalam  proses  reproduksi mempunyai  dua  fungsi  utama,  yaitu memproduksi  hormon  dan  spermatozoa. Kedua  fungsi  tersebut  secara  anatomi berlangsung terpisah, yaitu hormon testosteron  dihasilkan  oleh  sel-sel  Leydig sedangkan sel spermatozoa dihasilkan oleh sel  epitel tubulus  seminiferus (Desak Nyoman, 2010).
Hasil  pengamatan  histopatologi organ  testis  yang  telah  diberikan  ekstrak etanol 70% akar Saluang Balum menunjukkan  bahwa  tidak  ada  perubahan yang  berarti  pada  sel-sel  di  dalam tubulus seminiferus baik  pada  kelompok  kontrol, pembanding  maupun  kelompok  yang diberikan ekstrak. memperlihatkan gambaran  mikroskopik  tubuli  seminiferi yang penuh dengan sel-sel spermatogonia, spermatid  dan  spermatozoa.  Gambar  ini mewakili  gambar  pada  semua  perlakuan hewan  uji,  bahwa  proses  spermatogenesis berlangsung  normal  dan  menunjukkan
Gambar 4. Gambaran Histopatologik tubulus seminiferus mencit.  Terlihat  :  1)
membran basalis, 2) kesal sel spermatozoid  yang  normal,  3)  kesal  sel spermatid, spermatosit dan spermatogonia yang normal. Pengecatan HE dan pembesaran 40x.
Gambar  2. Hasil  uji  KLT  senyawa  flavonoid.  P  =
Pembanding , Rutin; S = Sampel; Fase diam
:  Silika  gel  60  F254;  Fase  gerak  :  Butanol-
Asam  Asetat-Air  (3  :  1  :  1);  Deteksi  : Aluminium  Klorida;  Warna  spot  di  visibel  : Kuning
Rf : 0,80
Gambar  3 .  Hasil  uji  KLT  senyawa  steroid.  P  = Pembanding  :  β-sitosterol;  S  =  Sampel;
Fase  diam  :  Silika  gel  60  F254;  Fase gerak  :  Hexan-Etil  asetat  (65  :  35); Deteksi  :  Lieberman  Buchard;  Warna spot di visibel : Cokelat kemerahan
indikasi  bahwa  pemberian  EEASB  tidak mengganggu proses spermatogenesis mencit dan tidak merusak testis (normal).

## B. Hasil Perhitungan Sel-Sel Spermatogenik
Perhitungan  terhadap  jumlah  sel- sel  spermatogenik  digunakan  sebagai parameter  untuk  menilai  pengaruh  ekstrak etanol  70%  akar  Saluang  Balum  terhadap kemampuan spermatogenesis. Pada tubulus  seminiferus terdapat  kelompok  sel germinal yang menyusun beberapa lapisan, setiap  lapisan  menunjukkan  perbedaan generasi.  Bila  dilihat  dari lamina  basalis sampai lumen akan  terlihat  lapisan spermatogonia, spermatosid
dan
spermatid.
Rata-rata jumlah
sel spermatogonia  dapat  dilihat  pada  Gambar 5.
Data rata-rata jumlah sel spermatogonia diuji secara statistik menggunakan analisis parametrik ANOVA satu  arah  dan  dilanjutkan  dengan  uji Duncan .
Dari hasil analisis diketahui bahwa kelompok  EEASB  100  mg/Kg  BB,  200 mg/Kg  BB,  400  mg/Kg  BB  dan  kontrol tidak  memiliki  perbedaan  yang  signifikan antara masing masing kelompok (P 0,063). Semua kelompok tersebut berbeda signifikan  (P  0,05)  dengan  kelompok  X- gra.  Berdasarkan  hasil  tersebut  maka pemberian  ekstrak  etanol  70%  akar Saluang  Balum  tidak  mempengaruhi produksi sel spermatogonia
Dilihat dari histogram jumlah rata- rata sel spermatosid (Gambar 6) kelompok kontrol  memiliki  jumlah  sel  yang  paling rendah diantara kelompok lainnya. Penilaian terhadap sel spermatosid menggunakan  uji  statistik  non  parametrik Mann-whitney menunjukkan  bahwa  tidak ada  perbedaan  yang  signifikan  antara kelompok  X-gra  dengan  EEASB  100 mg/Kg  BB,  200  mg/Kg  BB  dan  400 mg/Kg  BB  (P  0,513;  P  0,513;  P  0,658). Kelompok  tersebut  berbeda  signifikan dengan  kelompok  kontrol  (P  0,05).  Dapat
50,9 50,7 58,5 55,9 70,1 0 10 20 30 40 50 60 70 80 Kontrol EEASB 100 mg/KgBB EEASB 200 mg/KgBB EEASB 400 mg/KgBB
X-gra J u m la h sel sp er m a to g o n ia d a ri 9 tu b u lu s sem in if eru s Kelompok
Gambar  5. Histogram  jumlah  spermatogonia  rata-rata akibat  pemberian  ekstrak  etanol  70%  akar
Saluang Balum
110,1 135  138,9  139,2  136,3 0 20 40 60 80 100 120 140 160 Kontrol EEASB 100
mg/KgBB EEASB 200 mg/KgBB EEASB 400 mg/KgBB X-gra J u m la h sel sp er m a to si t d a ri 9 tu b u lu s sem in if eru s Kelompok
Gambar  6. Histogram  jumlah  spermatosid  rata- rata  akibat  pemberian  ekstrak  etanol 70% akar Saluang Balum
disimpulkan bahwa pada pembentukan sel spermatosid pada kelompok yang diberikan  EEASB  100  mg/Kg  BB,  200 mg/Kg  BB  dan  400  mg/Kg  BB  memiliki hasil  yang  pembentukan  sel  spermatosid yang  sama  dengan  kelompok  yang diberikan  X-gra.  Dari  perhitungan  sel spermatosid  ini  maka  diketahui  bahwa pemberian  ekstrak  etanol  70%  akar Saluang  Balum  mampu  meningkatkan jumlah  sel  spermatosid.  Kemampuan ekstrak  ini  setara  dengan  kemampuan  X- gra.
Dari  Gambar  7,  histogram  jumlah spermatid  rata-rata  akibat  pemberian ekstrak  etanol  70%  tampak  bahwa kelompok  pembanding,  X-gra  memiliki jumlah  yang  tertinggi.  Data  tersebut  diuji secara  statistik  menggunakan  uji  ANOVA satu  arah  dilanjutkan  dengan Duncan didapatkan  hasil  bahwa  semua  kelompok dosis  EEASB  berbeda  signifikan  dengan kelompok  kontrol  (P  0,05)  dan  kelompok X-gra (P 0,05).
Kelompok EEASB 100 mg/Kg BB tidak berbeda signifikan dengan kelompok EEASB  400  mg/Kg  BB  (P  0,127)  tetapi berbeda  signifikan  dengan  kelompok EEASB 200 mg/Kg BB (0,05). Kelompok EEASB  200  mg/Kg  BB  tidak  berbeda signifikan  dengan  kelompok  EEASB  400 mg/Kg BB (P 0,275). Dari data jumlah sel- sel  spermatogenik  di  atas,  pemberian ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang  Balum dapat mempengaruhi jumlah sel-sel spermatogenik berupa sel spermatosid dan spermatid,  tetapi  tidak  pada  jumlah  sel spermatogonia.
Hasil  pengamatan  histopatologi organ  reproduksi  testis  menunjukkan bahwa  tidak  ada  perubahan  yang  terjadi pada  sel-sel  di  dalam  testis.  Gambaran histologi  terlihat  bahwa  di  dalam  sel tampak  penuh  oleh  sel-sel  spermatogenik. Sel-sel spermatogenik berupa sel spermatogonia,  sel  spermatosid  dan  sel spermatid  dihitung  dan  diketahui  bahwa terjadi peningkatan jumlah sel spermatosid dan sel spermatid. Hal ini mengindikasikan bahwa pemberian ekstrak etanol  70%  akar  saluang  Balum  mampu meningkatkan jumlah sel-sel spermatogenik  yang  berarti  meningkatkan produksi sperma.
Hasil uji KLT menunjukkan bahwa ekstrak  mengandung  senyawa  steroid  dan flavonoid.  Steroid  merupakan  salah  satu senyawa  penyusun  testosteron  yang  dapat
100,6 122,2 138,1  132,5 175,9 0 50 100 150 200 Kontrol EEASB 100 mg/KgBB
EEASB 200 mg/KgBB
EEASB
400 mg/KgBB X-gra J u m la h sel sp erm a ti d d a ri 9 tu b u lu s se m in iferu s Kelompok
Gambar  7. Histogram  jumlah  spermatid  rata-rata  akibat pemberian  ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang Balum.
mempengaruhi  proses  spermatogenesis sehingga  mampu  meningkatkan  jumlah sel-sel spermatogenik. Penelitian lain yang dilakukan  oleh  Rahmi  (2011),  kandungan steroid  pada  Gingseng  Jawa  mampu meningkatkan persentasi spermatozoa.
Steroid dari akar  Gingseng Jawa memiliki efek  androgenik  yang  berperan  dalam proses  spermatogenesis.  Spermatogenesis meliputi spermatositogenesis yaitu pembentukan  spermatosit  primer  dan sekunder dari spermatogonia yang dikendalikan oleh FSH, sedangkan spermiogenesis yaitu pembentukan spermatozoa dari spermatid yang berada di bawah  pengaruh  LH  dan  testosteron. Testosteron  yang  dihasilkan  oleh  sel Leydig bersama-sama dengan FSH bekerja pada  sel  Sertoli  menghasilkan  berbagai protein  yang  diperlukan  oleh  sel  germinal untuk proliferasi, diferensiasi dan metabolisme  sel  (Rahmi,  2011).  Pada tanaman  lain  dengan  potensi  afrodisiaka, menunjukkan  bahwa  adanya  peningkatan jumlah sel-sel spermatogenik akan meningkatkan  fertilitas  pria  (Siburian  dan Marlinza,  2009).  Kandungan  flavonoid sebagai  antioksidan  pada  ekstrk  etanol 70% akar Saluang Balum dapat meningkatkan  kualitas  sperma    berupa jumlah  sperma  dan  viabilitas  sperma. Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan oleh  Palupi  (2006),  adanya  kandungan flavonoid  sebagai  antioksidan  di  dalam
tomat  mampu  meningkatkan  viabilitas sperma  mencit  yang  terpapar  radikal sehingga  dapat  mencegah  infertilitas  pria. Flavonoid juga dapat meningkatkan jumlah  sperma  dengan  cara  mencegah adanya  kerusakan  membran  spermatozoa yang  menyebabkan  terganggunya  proses spermatogenesis.  Mekanisme  flavonoid sebagai  antioksidan  adalah  sengan  cara memberikan  suasana  asam  pada  medium, meregenerasi antioksidan utama, mendeaktifkan kontaminan logam peroksida,  menangkap  O2,  mengikat singlet  O2  dan  mengubah  menjadi  bentuk triplet O2 (Purnawati, 2006).
Akar Saluang Balum pada penelitian  ini  diketahui  mengandung senyawa steroid dan flavonoid. Berdasarkan beberapa penelitian, diketahui bahwa  kandungan  steroid  pada  tanaman berperan dalam peningkatan kadar hormon testosteron. Kandungan senyawa flavonoid sebagai  antioksidan  pada  akar  Saluang Balum juga diketahui mampu meningkatkan  kualitas  sperma  dengan mempertahankan  motilitas  sperma  dan mampu melindungi membran spermatozoa sehingga  meningkatkan  viabilitas  sperma serta  meningkatkan  jumlah  sperma.  Hasil pengamatan terhadap gambaran histopatologik testis mencit yang diberikan ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang  Balum selama  dua  minggu  juga  menunjukkan tidak ada perubahan yang berarti pada sel-
sel  di  dalam tubulus  seminiferus yang mengindikasikan  bahwa  ekstrak  tidak mengganggu  proses  spermatogenesis  dan aman  terhadap  organ  reproduksi  testis. Testis  yang  mengalami  kerusakan  atau atrofi sel-sel penyusun tubulus seminiferus menyebabkan  terjadinya  penurunan  bobot testis  (Hardiyono  dan  Soekanto,  2013). Kelainan  pada  testis  akan  mempengaruhi proses  spermatogenesis  sehingga  juga dapat  menurunkan  kualitas  spermatozoa yang terbentuk (Aziz, 2013).

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan  yang  dapat  diperoleh dari  penelitian  ini  adalah  gambaran  hasil histopatologi  organ  testis  yang  diberikan ekstrak  etanol  70%  akar  Saluang  Balum tidak  menunjukkan  adanya  perubahan organ  (normal).  Pengamatan  terhadap perkembangan sel-sel spermatogenik menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol 70% akar Saluang Balum mempengaruhi terbentuknya sel-sel spermatosid dan spermatid yang diindikasikan akan meningkatkan kesuburan pria.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  kepada  Universitas Ahmad  Dahlan  Yogyakarta  yang  turut membantu penyelesaian penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ayuchecaria, N., 2013, Uji Antispermatogenesis  ekstrak  etil asetat buah Oyong ( Luffa acutangula ,  Roxb)  dan  gambaran histopatologik  testis  dan  hepar tikus galur Wistar , skripsi , Fakultas
Farmasi Universitas Ahmad dahlan, Yogyakarta. Azis,  M.L.,  2013,  Efek  kstrak  etil  asetat buah  oyong  ( luffa  Acutangula roxb) terhadap kualitas spermatozoa tikus  jantan  galur Wistar , skripsi ,  Fakultas  Farmasi Universitas Ahmad dahlan, Yogyakarta. Desak Nyoman Dewi Indira Laksmi, 2010, Glutathion  meningkatkan  kualitas tubulus  seminiferus  pada  mencit yang menerima latihan fisik berlebih,
Buletin Veteriner Udayana , 11-19. Hardiyono  dan Soekanto,  A.,  2013, Pengaruh  pemberian royal  jelly peroral  terhadap  berat  testis  dan proporsi  berat  testis  terhadap  berat badan tikus putih (rattus norvegicus  strain  wistar) jantan, Jurnal Ilmiah Kedokteran , Fakultas Kedokteran  Universitas  Wijaya Kusuma, Surabaya.
Jannah,  A.,  2009,  Pengaruh  Pemberian
Ekstrak  Buah  Pare  (Momordica charantia) terhadap proses spermatogenesis  mencit, skripsi, Universitas Islam Negeri, Malang. Krause, W. J., 2001, The art of examining and interprenting histologic
preparations, A  student  handbook , Partheton Publishing group, UK, 9- 10.
Palupi,  H.  D.,  2006,  Pengaruh  pemberian jus  buah  Tomat  ( Lycopersicum esculentum mill ) terhadap viabilitas spermatozoa  mencit Balb/c jantan yang  diberi  paparan  asap  rokok, Artikel karta tulis ilmiah , Universitas Diponegoro, Semarang.
Purnawati,  D.,  2006,  Pengaruh  pemberian jus  buah  Tomat  ( Lycopersicum esculentum  mill )  terhadap  jumlah spermatozoa  mencit Balb/c jantan yang  diberi  paparan  asap  rokok, Artikel karta tulis ilmiah , Universitas Diponegoro, Semarang. Rahmi,  Eriani,  K.,  Widyasari,  Potency  of Java Gingseng ( Talinum paniculatum ,  Gaertn.)  Root  extract on  quality  and  viability  of  mice sperm, Jurnal natural , 11.
Sandroni,  P.,  2001,  Aphrodisiacs  past  and present:  A  historical  review. Clin. Auton. Res. , 11, 303−307.
Saparita,  R.,  Purwanto,  Y.,  Munawaroh,
E.,  2009, Indige    nous  knowledge
masyarakat suku Dayak di
Kabpaten Malinau Kalimantan Timur, Lokakarya Grassroot
Innovaton (GRI), LIPI.
Siburian,  J.  dan  Marlinza,  R.,  2009,  Efek Pemberian  Ekstrak  Akar  Pasak
Bumi  ( Eurycoma  Longifolia Jack) Pada  Tahap  Prakopulasi  Terhadap Fertilitas  Mencit  ( Mus  Musculus L.) Betina, Biospecies , 2,  24 – 3.