PENGARUH GEL EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav) TERHADAP PENYEMBUHAN LUKA BAKAR PADA KELINCI ( Oryctolagus cuniculus ).
THE EFFECT OF RED BETEL LEAF EXTRACT GEL ( Piper crocatum Ruiz & Pav) FOR HEALING BURNS IN RABBITS ( Oryctolagus cuniculus ).
Fina Ulviani 1* , Yusriadi 1 , Khildah Khaerati 1
1 Jurusan Farmasi, Fakultas MIPA,UniversitasTadulako, Palu, Indonesia
Received 12 Agustus 2016, Accepted 18 September 2016

## ABSTRAK
Telah dilakukan penelitian  mengenai  formulasi  sediaan gel ekstrak daun sirih  merah ( Piper crocatum Ruiz & Pav) untuk pengobatan luka bakar pada kelinci ( Oryctolagus cuniculus ).Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh variasi konsentrasi ekstrak daun sirih merah dalam gel terhadap pengobatan luka bakar pada  kelinci  yang  diinduksikan  logam  panas.  Pada  penelitian  ini  ekstrak  kental  sirih  merah  diformulasi menjadi sediaan gel dengan konsentrasi 1%, 2% dan 3%. Pengujian mutu fisik gel yang dilakukan meliputi uji organoleptik, pH,homogenitas dan daya sebar pada penyimpanan hari ke-0sampai hari ke-28. Uji aktivitas gel dilakukan  pada  5  ekor  kelinci  yang  dibagi  dalam  5  kelompok  perlakuan.  Setiap  kelinci  dibuat  luka  bakar menggunakan  lempeng  logam  panas  berdiameter  20  mm.  Masing-masing  kelompok  diberi  lima  luka  yang terdiri atas kontrol negatif, formula ekstrak 1%, formula ekstrak 2%, formula ekstrak 3% dan kontrol positif. Pengukuran diameter luka dilakukan pada hari ke-1, ke-3, ke-5, ke-7, ke-9 hingga hari ke-21.Data persentase penyembuhan  luka  bakar  di  analisis  secara  statistik  dengan  metode Two-Way ANOVA.Hasil  penelitian menunjukkan bahwa variasi konsentrasi ekstrak memberikan pengaruh terhadap kecepatan penyembuhan luka. Gel dengan  konsentrasi ekstrak daun sirih  merah 3% memiliki efek penyembuhan  yang paling  besar dengan persentase penyembuhan 85,81%dibandingkan dengan gel ekstrak 1%dan 2% dengan persentase 65,32% dan 76,58%.
Kata kunci : Gel, Sirih Merah ( Piper crocatum Ruiz & Pav), Luka Bakar, Oryctolagus cuniculus .

## ABSTRACT
Research on Gel Formulation of red betel leaf extract ( Piper crocatum Ruiz & Pav) for the treatment of  burn  wounds  in  rabbits  ( Oryctolagus  cuniculus )  has  been  conducted.  This  study  aimed  to  determine variation’s effect of concentration in gel of red betel leaf extract for the treatment of burn wounds in rabbits which  had  been  wounded  using  hot  metal.  In  this  study,  the  viscous  extract  was  formulated  into  gel  with concentrations  of  1%,  2%  and  3%.  The  Gel’s  Physical  quality  evaluation  included  organoleptic,  pH, homogeneity and dispersive ability tests on day 0 until day 28. The gel activity test was performed on 5 rabbits divided into five treatment groups. Each rabbit was burn-wounded using hot metal plate at diameter of 20 mm. Each  group  was  given  five  wounds  consisting  of  a  negative  control,  1%,  2%,  3%  of  extract  formula  and  a positive control. The diameter measurement of the wounds was done on the 1st, 3rd, 5th, 7th, 9th and the 21st day. Data of wound healing percentage was statistically analyzed with Two-Way ANOVA. The results showed that the gel with 3% of red betel leaf extract of which percentage of healing as much as 85.81% compared to gel extract 1% and 2% with percentage 65,32% dan 76,58%.
Keywords: Gel, Red Betel ( Piper crocatum Ruiz & Pav), Burn wound, Oryctolagus cuniculus .
*Corresponding author : Fina Ulviani, finaulviani@yahoo.com (ph : +62-853-4246-7117)

## PENDAHULUAN
Salah  satu  cara  penanganan  pada penderita  luka  bakar  yaitu  mengobati  luka dengan menggunakan sediaan topikal (Inriani,  2012).  Pemberian  sediaan  topikal yang  tepat  dan  efektif  diharapkan  dapat mengurangi dan mencegah infeksi pada luka (Rismana  E,  2013).Bentuk  sediaan  topikal yang  dapat  dengan  mudah  digunakan  untuk pengobatan  pada  luka  bakar  salah  satunya adalah  sediaan  gel.Sediaan  gel  merupakan sediaan  yang  memiliki  daya  sebar  yang  baik diantara  sediaan  topikal  lainnya  sehingga lebih mudah untuk dioleskan pada luka.Selain itu sediaan gel memiliki komponen penyusun yang sebagian besarnya adalah  air,  sehingga  memudahkan  pelepasan zat  aktif  dari  sediaan  gel  ke  dalam  luka sehingga  dapat  membantu  mempercepat penyembuhan luka.
Tanaman sirih merah ( Piper crocatum Ruiz & Pav) merupakan salah satu tanaman  obat  yang  daunnya  telah  lama dikenal  mempunyai  khasiat  obat  untuk menyembuhkan  berbagai  penyakit,  secara turun  temurun  telah  digunakan  dan  dapat menyembuhkan  berbagai  jenis  penyakit, salah satunya yaitu digunakan untuk mengobati luka.Daun sirih merah mengandung  senyawa  aktif  seperti  minyak atsiri, alkaloid, saponin, tanin, dan flavonoid (Indri  W,  2008).Dengan  adanya  saponin memacu pembentukan kolagen yang berperan  dalam  proses  penyembuhan  luka (Abdassah,  2009).  Selain  itu  kandungan minyak  atsiri  yang  terdapat  dalam  sirih merah  mempunyai  aktivitas  antibakteri  yang dapat membantu mencegah terjadinya infeksi pada luka bakar dan kandungan flavonoidnya juga  efektif  sebagai  antiinflamasi.  Hal  ini didukung  dengan  penelitian  yang  telah dilakukan  bahwa  minyak  atsiri  daun  sirih merah memiliki KHM terhadap bakteri gram positif Bacillus  cereus , Staphylococcus aureus dan Staphylococcus  epidermidis secara  berurutan  1%,  0,25%  dan  0,5% (Soerya Dewi, 2013). Serta penelitian ekstrak daun  sirih  merah  memberikan  aktivitas antiinflamasi  paling  baik  dengan  dosis  50 mg/kgBB  yang  mampu  menurunkan  radang sebesar 85,61% (Atik, 2011). Karena adanya senyawa kimia yang dapat berkhasiat sebagai antiinflamasi  dan  antibakteri  maka  ada kemungkinan  daun  sirih  merah  juga  dapat berkhasiat sebagai obat untuk luka bakar.
Berdasarkan  hal  tersebut  peneliti tertarik  untuk  melakukan    formulasi  gel ekstrak  daun  sirih  merah  dengan  variasi konsentrasi  ekstrak  daun  sirih  merah  untuk pengobatan  luka  bakar  pada  kelinci  yang diinduksi logam panas.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  yaitu  daun  sirih  merah  ( Piper crocatum Ruiz  dan  Pav),  aluminium  foil, akuades,  etanol  96%  (teknis),  triethanolamin (teknis),  metil  paraben,  carbopol,  gliserin,  gel Bioplacenton dan ketamin.

## Metode Pengambilan sampel
Daun sirih merah diambil di KelurahanPengawu,  Kecamatan  Palu  Barat, Sulawesi  Tengah.  Daun  yang  diambil  adalah daun  segar,  tidak  cacat  dan  dipetik  secara manual  (tangan)  dan  disortasi  basah  untuk ekstraksi.

## Ekstraksi Daun Sirih Merah
Pembuatan  ekstrak  etanol  daun  sirih merah dilakukan dengan cara ekstraksi dengan metode maserasi dengan menggunakan  etanol 96%.  Daun  sirih  merah  yang  sudah  kering diblender  hingga  halus.Kemudian  dimasukkan serbuk  ke  dalam  wadah  maserasi  dan ditambahkan  etanol  96%  hingga  serbuk terendam.  Diaduk  dan  didiamkan  selama  3  x 24 jam lalu disaring untuk mendapatkan filtrat. Lalu  filtrat  yang  diperoleh  dipekatkan  dengan rotary  evaporator hingga  didapatkan  ekstrak kental  dan  ditimbang  untuk  menghitung rendemennya.

## Formulasi gel ekstrak daun sirih merah
Formulasi  gel  ekstrak  daun  sirih merah dapat dilihat pada tabel dibawah ini :
Tabel 1. Formula Gel
No Nama bahan Formulasi dan komposisi (%b/v) F1 F2 F3 F4 1. Ekstrak daun sirih merah - 1 2 3
2. Carbopol 2 2 2 2 3. Triethanola min 2 2 2 2 4. Gliserin 10 10 10 10
5. Metil paraben 0,2 0,2 0,2 0,2 6. Air ad 100 100 100 100

## Cara Pembuatan Gel Ekstrak Daun Sirih Merah
Sediaan gel yang dibuat sebanyak 100 gram. Carbopol dikembangkan dalam akuades hingga mengembang kemudian diaduk menggunakan  stirer  sambil  ditambahkan triethanolamin  sedikit  demi  sedikit  hingga terbentuk massa gel. Selanjutnya ditambahkan gliserin  dan  Sejumlah  ekstrak  yang  telah dilarutkan  ditambahkan  kedalam  massa  gel sambil  terus  diaduk.  Metil  paraben  yang  telah dilarutkan  dalam  air  panas,  ditambahkan kedalam  massa  gel  dan  terus  diaduk  sampai homogen, lalu dimasukkan kedalam wadah.

## Pengujian Stabilitas Fisik Krim
1. Pengamatan Organoleptik sediaan Evaluasi  organoleptis  secara  visual mulai dari tekstur, warna dan bau dari gel.
2. Pengujian homogenitas sediaan Gel  dioleskan  pada  kaca  transparan dimana sediaan diambil 3 bagian yaitu atas, tengah dan bawah. Homogenitas ditunjukkan  dengan  tidak  adanya  butiran kasar.
3. Pengukuran pH sediaan gel pH sediaan gel diukur dengan menggunakan  alat  pengukuran  pH  yang dilakukan dengan cara mencelupkan katoda pH meter ke dalam sediaan gel, pH sediaan akan tertera pada monitor.
4. Pengukuran Daya Sebar Ditimbang  gel  ekstrak  daun  sirih
merah sebanyak 0,5 g, kemudian diletakkan dengan  hati-hati  di  atas  lempeng  kaca berukuran 20 x 20 cm. Selanjutnya  ditutupi dengan  lempeng  kaca  yang  lain  dan digunakan  pemberat  diatasnya  hingga bobot  mencapai  125  g  dan  diukur diameternya setelah 1 menit.

## Pemilihan hewan uji
Dalam pengujian ini hewan coba yang digunakan adalah kelinci ( Oryctolagus cuniculus )yang  sehat,dengan  berat  badan  1,0- 1,9  kg.Hewan  coba  dibagi  secara  acak  ke dalam 5 kelompok perlakuan.
Pengujian  efek  gel  ekstrak  daun  sirih merah terhadap luka bakar
Sebelum dilakukan proses penginduksian  luka  bakar,  bulu  di  sekitar punggung dicukur, kemudian kelinci dianastesi  dengan  injeksi  ketamin  yang disuntikan  di  pembuluh  darah  pada  telinga. Luka  bakar  dibuat  menggunakan  solder  listrik yang  terhubung  logam  yang  berdiameter  20 mm  dengan  suhu  65 0 C.  Solder  dipanaskan selama  5  menit  kemudian  ditempelkan  pada kulit  punggung  kelinci  selama  7  detik  sampai terbentuk  luka  bakar.  Kemudian,  pada  kulit yang  melepuh  atau  mengalami  luka  bakar tersebut  dioleskan  200  mg  sediaan  gel  secara merata  pada  permukaan  luka  dengan  interval pengolesan 1 kali sehari selama 21 hari.Pengamatan  dilakukan  secara  visual dengan  memperhatikan  perubahan  diameter luka.Pengukuran  diameter  luka  dilakukan dengan menggunakan jangka sorong.

## Analisis Data
Data  yang  dianalisis  yaitu  persentase penyembuhan  luka  bakar  yang  diperoleh melalui  pengukuran  rata-rata  diameter  luka bakar.Pengukuran  dilakukan  pada  hari  1,  3, 5, 7,  9,  11,  13,  15,  17,  19  dan  21.Data  hasil pengujian  efek  sediaan  gel  ekstrak  daun  sirih merah terhadap perubahan diameter luka bakar kemudian  dianalisis  dengan  menggunakan metode Two-way Anova peningkatan penyembuhan  luka  bakar  pada  setiap  dan untuk  melihat  apakah  ada  perbedaan  yang signifikan  di  setiap  perlakuan . Selanjutnya untuk  mutu  fisik  sediaan  seperti  pHdan  daya sebar dianalisis menggunakan uji t-student.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil
Hasil  rendemen  yang  diperoleh  dari proses  ekstraksisebesar  6,14%.  Hasil  rata-rata penyembuhan  luka  bakar  dari  dasar  gel,  gel ekstrak daun sirih merah 1%, gel ekstrak daun sirih  merah  2%,  gel  ekstrak  daun  sirih  merah 3% dan Bioplacenton dapat dilihat pada Tabel 2,  sedangkan  untuk  hasil  mutu  fisik  sediaan yang  meliputi,  organoleptik,  homogenitas,  pH dan daya sebar dapat dilihat pada Tabel 3, 4, 5, dan 6 berikut ini.
Tabel 2. Pengukuran  rata-rata  persentase penutupan luka selama penyimpanan Kelompok perlakuan Persentase penutupan luka (%)
Hari ke- 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 FI (K-) 6,1 4 10, 47 14, 49 19, 61 23, 61 28, 90 35, 62 41, 02 47, 61 55, 14
F2 (E 1%) 6,3 5 14, 16 15, 52 23. 55 31, 17 36, 61 43, 57 48, 75 58, 40 65, 32 F3 (E2%) 8,2 1 10, 47 20, 76 23, 36 30, 24 38, 35 45, 93 55, 65 64, 90 76, 58
F4 (E 3%) 10, 97 17, 62 21 29, 82 37, 34 47, 63 55, 89 63, 38 72,
50 85, 81 F5 (K+) 11, 60 20 26, 97 35, 27 45, 31 55, 47 63, 71 72, 39 82, 13 92, 32

## Tabel 3.  Pengamatan organoleptik selama penyimpanan
Pengamatan Sediaan Pengamatan hari ke-
0 7 14 21 28 Tekstur F1(K-) AK AK AK AK AK F2 (E 1%) K K K K K F3 (E 2%) K
K K
K K F4 (E 3%) K
K
K K K Warna F1 (K-)
B B B B B F2 (E 1%) H H H
H H F3 (E2%) HP HP HP HP HP F4 (E 3%) HK HK HK HK HK Bau F1 (K-) E
E E
E E
F2 (E 1%) BK BK BK BK BK F3 (E 2%) BK BK BK BK BK F4 (E 3%) BK BK BK BK BK
Keterangan: K  = kental AK = agak kental BK = bau khas ekstrak daun sirih merah E   = bau khas basis H   = warna hijau
HP = warna hijau pekat
HK = warna hijau kehitaman B   = bening

## Tabel 4. Data Homogenitas
No. Formula Hasil 1 F1 (K-) H 2 F2 (E 1%) H 3 F3 (E 2%) H 4 F4 (E 3%) H Keterangan: H= Homogen
Tabel  5  Rata-rata  pengukuran  pH  sediaan selama peyimpanan Sediaan pH hari ke- 0 7 14 21 28 F1 (K-) 6,58 5,35* 5,67* 5,63* 5,5* F2 (E 1%) 6,75 5,39* 5.6* 5,4* 5,29* F3 (E 2%) 6,82 5,35* 5,42* 5,28* 5,13* F4 (E 3%) 6,83 5,58* 5,48* 5,32* 5,46*
Keterangan:  *  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan dibandingkan hari ke-0
Tabel  6.  Rata-rata  pengukuran  daya  sebar sediaan selama penyimpanan Sediaan Daya sebar hari ke- (cm) 0 7 14 21 28 F1 (K-) 3,71 3,62* 3,49* 3,45* 3,42* F2 (E 1%) 3,72 3,56* 3,46* 3,41* 3,41* F3 (E 2%) 3,78 3,56* 3,53* 3,45* 3,39* F4 (E 3%) 3,92 3,79* 3,65* 3,59* 3,45*
Keterangan:  *  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan dibandingkan hari ke-0

## Pembahasan
Penelitian  ini  menggunakan  ekstrak daun sirih merah Piper crocatum Ruiz & Pav). Tanaman  yang  dijadikan  ekstrak  telah  di identifikasi  di  UPT  Sumber  Daya  Hayati Sulawesi, Universitas Tadulako untuk memastikan  bahwa  tanaman  yang  digunakan merupakan benar  sirih merah ( Piper crocatum Ruiz  &  Pav)    famili    Piperaceae.    Pembuatan simplisia kering dengan cara daun sirih merah ( Piper  crocatum Ruiz  &  Pav)  yang  telah dipetik  dikeringkan  dengan  cara  diangin- anginkan  pada  suhu  kamar,  dirajang  dan diblender  hingga  diperoleh  serbuk  simplisia kering.  Serbuk  simplisia  tersebut  kemudian diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%  selama  3 hari  dan  disaring  untuk  memisahkan  ekstrak dengan filtrat.Ekstrak cair tersebut dikentalkan dengan  menggunakan rotary  evaporator. Pemilihan metode maserasi karena  merupakan cara ekstraksi yang paling sederhana dan tidak memerlukan  banyak  biaya,  cairan  penyari akan  menembus  dinding  sel  dan  masuk  ke dalam    rongga    sel    yang  mengandung    zat aktif,    zat    aktif    akan    larut    karena    adanya perbedaan  konsentrasi  antara  larutan  zat  aktif di dalam sel dan di luar sel maka larutan yang terpekat didesak ke luar.  Cairan penyari yang digunakan  adalah  etanol  96%  yang  mana efektif dalam menghasilkan jumlah bahan aktif yang  optimal  (Voight,  1994)  juga  mudah berpenetrasi  ke  dalam  sel  serta  bersifat universal  yang  mampu  menarik  semua  jenis zat  aktif,  baik  bersifat  polar,  semi  polar  dan non  polar  juga  kadar  toksisitasnya  rendah (Ditjen POM, 1986).
Sediaan  yang  dibuat  dalam  penelitian ini  yaitu  sediaan  gel.  Gel  dipilih  karena memiliki  kandungan  air  yang  tinggi  dan memiliki  daya  sebar  yang  baik  dibandingkan dengan  sediaan  topikal  lainnya.  Carbopol digunakan  sebagai  bahan  pembentuk  gel  atau
gelling  agent karena  dapat  membentuk  gel pada  konsentrasi  rendah  yaitu  0,5%.  Carbopol menghasilkan  basis  yang  bening  transparan dengan  tekstur  lebih  baik  dibandingkan dengan NaCMC dan natrium alginate (Djajadisastra, 2009).
Trietanolamin
ditambahkan  sebagai  bahan  penetral  untuk karbopol  yang  bersifat  asam,  triethanolamin akan meningkatkan viskositas dari sediaan gel. Selanjutnya gliserin digunakan sebagai humektan yang akan mempertahankan kandungan  air  dalam  sediaan  sehingga  sifat fisik dan stabilitas sediaan selama penyimpanan  dapat  dipertahankan  (Allen, 2002).  Dalam  formula  ini  digunakan  metil paraben  sebagai  bahan  pengawet  karena bersifat sebagai antimikroba yang  efektif pada kisaran  pH  yang  luas  dan  memiliki  aktivitas antimikroba  yang  kuat  (Rowe,  2002).Air digunakan sebagai medium pendispersinya.
Sebelum dilakukan pembuatan sediaan gel  dengan  variasi  konsentrasi  ekstrak  daun sirih merah, terlebih dahulu dilakukan orientasi basis gel carbopol untuk menentukan konsentrasi  carbopol  yang  baik  bila  akan dicampurkan dengan ekstrak daun sirih merah. Hasil  orientasi  basis  gel  pada  menunjukkan bahwa  formula  3  memiliki  tekstur  yang  agak kental  dibandingkan  dengan  formula  1  dan  2, dimana pada formula 1 dan 2 memiliki tekstur yang encer.
Pemeriksaan  organoleptis  dilakukan secara  visual  pada  suhu  kamar  dengan mengamati  sediaan  gel  berdasarkan  bentuk, warna  dan  bau  dapat  dilihat  pada  (Tabel  3) hasil  pengamatan  organoleptis  sediaan  gel ekstrak  daun  sirih  merah  menunjukkan  bahwa pada  F2  (gel  ekstrak  1%)  berwarna  hijau,  F3 (gel  ekstrak  2%)  hijau  pekat,  dan  F4  (gel ekstrak 3%) hijau kehitaman. Selama penyimpanan  semua  gel  yang  mengandung ekstrak  tetap  memiliki  bau  khas  ekstrak  daun sirih  merah.  Sedangkan  F1  (gel  tanpa  ekstrak daun  sirih  merah)  memiliki  jernih,  transparan dan  bau  khas  dari  basis.  Tekstur  disetiap formula  berbeda-beda,  pada  F1  memiliki konsistensi  yang  agak  kental,  hal  ini disebabkan  karena  pada  F1  hanya  terdiri  dari basis  gel,  sementara  pada  formula  yang mengandung ekstrak 1%, 2% dan 3% memiliki konsistensi  yang  kental,  hal  ini  dikarenakan karena  adanya  penambahan  ekstrak  daun  sirih merah  yang  mengakibatkan  gel  semakin kental.  Sehingga  pada  saat  dimasukkan  ke dalam basis gel mengakibatkan konsistensinya
berubah . Hal  ini  dapat  diketahui  bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  daun  sirih merah  dalam  formula  maka  akan  semakin menambah konsistensi dari gel tersebut.
Uji  pH  dilakukan  pada  setiap  formula sediaan gel.Berdasarkan hasil analisis menggunakan metode t-student , terlihat perbedaan yang signifikan pada setiap formula (Tabel  5).Untuk  F1  terjadi  perbedaan  yang signifikan  dari  hari  ke-0  sampai  hari  ke-28. Untuk  F2,  F3  dan  F4  dari  hari  ke-0  sampai dengan hari ke-28 juga terjadi perbedaan yang signifikan.  Perbedaan  ini  menunjukkan  bahwa pH dari sediaan tidak stabil selama penyimpanan, ketidakstabilan ini dapat disebabkan  suhu  ruangan  dan  penyimpanan yang  kurang  baik  (Young  et,  2002).  Namun, kisaran pH yang dihasilkan oleh sediaan masih berada  dikisaran  pH  kulit  yaitu  4,5-6,5 sehingga  sediaan  gel  ekstrak  daun  sirih  merah aman untuk digunakan, karena pH yang terlalu asam  dapat  mengiritasi  kulit  dan  pH  yang terlalu  basa  dapat  membuat  kulit  bersisik (Olivia, 2013).
Pengujian homogenitas sediaan dilakukan  dengan  cara  mengoleskan  sejumlah tertentu  sediaan  pada  sebuah  kaca  objek kemudian  dilihat  berdasarkan  ada  atau tidaknya gumpalan maupun butiran kasar pada sediaan  gel.  Berdasarkan  hasil  pengujian menunjukkan  bahwa  semua  sediaan  gel  baik basis gel, gel dengan ekstrak daun sirih merah 1%, 2% dan 3% homogeny (Tabel 4).
Pengujian  daya  sebar  untuk  setiap sediaan  dilakukan  untuk  melihat  kemampuan menyebar pada  kulit,  hasil pengujian t-student daya sebar menunjukkan bahwa setiap formula terdapat  perbedaan  yang  signifikan  (Tabel  6), dimana FI, F2, F3 dan F4 selama penyimpanan dari hari ke-0 sampai dengan hari ke-28 terjadi perbedaan yang signifikan. Hal ini menunjukkan  bahwa  daya  sebar  dari  setiap formula  tidak  stabil  selama  penyimpanan. Daya  sebar  yang  dihasilkan  dari  sediaan  tidak memenuhi kriteria daya sebar yang baik untuk sediaan gel yaitu antara 5-7 cm (Martin, 1990) dimana  daya  sebar  yang  dihasilkan  yaitu antara  3-4  cm,  hal  ini  disebabkan  karena konsistensi  dari  sediaan  yang  terlalu  kental sehingga daya sebarnya menjadi lebih kecil.Perbedaan daya sebar sangat berpengaruh  pada  kecepatan  difusi  zat  aktif dalam melewati membran.Semakin tinggi daya sebar  suatu  sediaan  maka  luas  permukaannya semakin  besar,  mengakibatkan  kecepatan
difusi  suatu  obatpun  semakin  meningkat (Hasyim, 2012).
Uji aktivitas sediaan dilakukan terhadap  hewan  uji  kelinci  ( Oryctolagus cuniculus ).Sebelum induksi luka bakar, bulu di sekitar punggung dicukur dan kelinci dianastesi dengan injeksi ketamin.Jalur pemberian  obat  anastesi  ketamin  diberikan melalui intravena pada telinga kelinci.Ketamin dipilih  sebagai  obat  anastesi  karena  jalur pemberiannya melalui intravena yang mempunyai  mula  kerja  yang  cepat  dan  masa kerja  yang  singkat,  serta  digunakan  untuk pembedahan jangka singkat (Kee, 1996).
Induksi luka bakar pada kulit punggung  kelinci  menggunakan  solder  listrik yang  telah  dimodifikasi.  Pada  kulit  yang melepuh atau mengalami luka bakar dilakukan pengamatan  secara  visual  dari  kulit  kelinci, yang  mana  terdapat  kerusakan  pada  jaringan epidermis  dan  sedikit  dermis  dengan  ciri-ciri: kulit  mengalami  pelepuhan,  kulit  kering,  dan dasar  luka  berwarna  merah  pucat  (Moenadjat, 2003).  Dari  hasil  pengamatan    tersebut  dapat dikatakan  bahwa  hewan  uji  mengalami  luka bakar derajat  II dangkal dengan diameter rata- rata  luka  bakar  yaitu  20,61  mm.  Sediaan  gel dioleskan  200  mg  secara  merata  pada permukaan  luka  dengan  interval  pengolesan  1 kali  sehari  selama  21  hari.  Pengamatan  luka bakar yang diberikan pada kelinci menunjukkan  perubahan  yang  sangat  berarti, dimana  luka  tertutupi  dahulu  pada  bagian atasnya  oleh  darah  yang  membeku  yang membentuk lapisan kerak atau scab.
Proses penyembuhan luka bakar terdiri dari  3  fase  untuk  menggantikan  jaringan  yang rusak.  Proses  pertama  yaitu  fase  inflamasi, fase  ini  berlangsung  sejak  terjadinya  luka sampai  hari  kelima,  dimana  pembuluh  darah yang  terputus  pada  luka  yang  menyebabkan pendarahan dan tubuh akan berusaha menghentikannya  dengan  cara  vasokontriksi, pengerutan  ujung  pembuluh  darah  yang terputus.  Selanjutnya  fase  proliferasi,  fase  ini berlangsung  sampai  minggu  ketiga.dimana pada  fase  proliferasi  luka  dipenuhi  dengan  sel radang,  fibroplasia  dan  kolagen,  membentuk jaringan berwarna kemerahan dengan permukaan  yang  berbenjol  halus  yang  disebut granulasi  (Rismana,  2010).  Fase  akhir  dari proses penyembuhan luka yaitu fase penyudahan, dimana terjadi penyerapan kembali  jaringan  yang  berlebih  dan  perupaan kembali jaringan yang terbentuk, fase ini dapat
berlangsung selama berbulan-bulan dan berakhir tanda radang sudah hilang (Syamsuhidayat, 1997). Hasil pengujian Twoway Anova terhadap  persentase  penyembuhan  luka  bakar menunjukkan hasil penyembuhan yang berbeda signifikan dari setiap formula. Dengan bertambahnya  waktu  akan  terjadi  peningkatan terhadap penyembuhan luka. Persentase penyebuhan  luka  bakar  dari  setiap  formula yaitu  F1  (kontrol  negatif)  sebesar  55,14%,  F2 (gel ekstrak 1%) 66,71%, F3 (gel  ekstrak 2%) 76,75%,  F4  (gel  ekstrak  3%)  85,81%  dan  F5 (Kontrol  positif)  92,91%.  Dari  semua  formula gel  ekstrak  daun  sirih  merah  memiliki  efek terhadap  penyembuhan  luka  bakar,  semakin tinggi  konsentrasi  ekstrak  daun  sirih  merah maka  semakin  besar  persentase  penyembuhan luka  bakarnya,  tetapi  untuk  penyembuhannya, kontrol positif Bioplacenton memiliki persentase penyembuhan luka yang lebih besar dibandingkan dengan formula yang mengandung ekstrak daun sirih merah.

## Gambar 1. Grafik hubungan antara diameter luka vs hari
Adanya  aktivitas  antiinflamasi  dan antibakteri  dari  daun  sirih  merah  diduga karena  adanya  aktivitas  senyawa-senyawa metabolit  sekunder  yang  terdapat  dalam  sirih merah  yaitu  minyak  atsiri,  saponin,  tanin  dan flavonoid.Hal ini dibuktikan melalui penapisan fitokimia  yang  dilakukan  yang  menunjukkan bahwa  ekstrak  daun  sirih  merah  positif mengandung  senyawa  flavonoid,  alkaloid, tanin  dan  polifenol.Aktivitas  antiinflamasi ekstrak daun sirih merah diduga karena adanya senyawa  golongan  flavonoid  saponin  dan tanin. Mekanisme flavonoid dalam menghambat proses terjadinya inflamasi melalui  dua  cara,  yaitu  dengan  menghambat
0 5 10 15 20 25 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 D iam e te r lu k a (mm) Hari kontrol negatif formula ekstrak 1% formula ekstrak 2% formula ekstrak 3% kontrol positif
permeabilitas kapiler dan menghambat metabolisme asam arakidonat sehingga produksi  prostaglandin  berkurang.  Flavonoid juga  menghambat  sekresi  enzim  lisosom  yang merupakan  mediator  inflamasi.  Penghambatan mediator  inflamasi  ini  dapat  menghambat proliferasi  dari  proses  radang  (Robinson, 1995).  Sedangkan  mekanisme  antiinflamasi saponin  adalah  dengan  menghambat  kenaikan permeabilitas vaskular (Atik, 2011).
Selain flavonoid, tanin
juga
mempunyai aktivitas antiinflamasi.Tanin mempunyai  aktivitas  antioksidan.  Antioksidan berperan sebagai antiinflamasi dengan berbagai  cara  yaitu  (1)  menghambat  produksi oksidan  (O 2 )  oleh  neutrofil,  monosit  dan makrofag.  Penghambatan  produksi  oksidan O 2 akan  mengurangi  pembentukan  H 2 O 2 yang mengakibatkan  produksi  asam  hipoklorid (HOCl) dan OH ikut terhambat. (2) menghambat  langsung  oksidan  reaktif  seperti radikal  hidroksi  (OH)  dan  asam  hipoklorid (Robinson,  1995).  Senyawa-senyawa  aktif yang terkandung dalam daun sirih merah inilah yang  diduga  mampu  untuk  membantu  dalam proses penyembuhan luka bakar.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa variasi konsentrasi ekstrak memberikan pengaruh  terhadap  kecepatan  penyembuhan luka.  Gel  dengan  konsentrasi  ekstrak  daun sirih  merah  3%  memiliki  efek  penyembuhan yang paling besar dengan persentase penyembuhan  85,81%dibandingkan  dengan gel  ekstrak  1%dan  2%  dengan  persentase 65,32%  dan  76,58%.  Berdasarkan  hasil tersebut  perlu  dilakukan  uji  tentang  isolasi golongan  senyawa  dalam  sirih  merah  yang memiliki efektifitas sebagai antiinflamasi, juga perlu  dilakukan  formulasi  sediaan  topikal lainnya dengan penambahan konsentrasi ekstrak,  karena  semakin  besar  konsentrasi ekstrak daun sirih merah makan akan semakin besar penyembuhan luka bakar.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdassah,  M.,  Sumiwi,  S.A.,  Hendrayana,  J.
(2009).  Formulasi  Ekstrak  Daun  Sukun (Artocarpus  Altilis  (Parkins.)  Fosberg)
Dengan Basis Gel Sebagai Antiinflamasi . Jurnal Farmasi Indonesia, 4 (4), 199 -209.
Allen.  (2002). The  Art,  Science,  and Technology of Pharmaceutical Compounding. 2 nd Ed . American Pharmaceutical Association Washington,D.C. Atik.  (2011). Uji  Antiinflamasi  Ekstrak Metanol  Daun  Sirih  Merah ( Piper crocatum Ruiz  &  Pav),  Fakultas Farmasi, Universitas Jember, 8.
Ditjen  POM.  (1986), Sediaan  Galenik , Departemen Kesehatan
Republik
Indonesia, Jakarta, 12, 26.
Djajadisastra.,  J.,  Munim,  A.,  &  Dessy,  N.P.
(2009).  Formulasi  Gel  Topikal  dari Ekstrak  Nerii  Folium  dalam  Sediaan Anti Jerawat, Jurnal Farmasi
Indonesia , 4(4).
Hasyim, N., Pare K. L., Junaid I., Kurniati, A.
(2012).  Formulasi  Dan  Uji  Efektivitas Gel  Luka  Bakar  Ekstrak  Daun  Cocor Bebek  ( Kalanchoe  pinnata L.)  Pada
Kelinci ( Oryctolagus cuniculus ).
Majalah  Farmasi  dan  Farmakologi ,
16(2), 89-94.
Indri, W.W., Anthoni, M.S.S.,& Setyorini,  W.
(2008). Sirih  Merah ,  Balai  Kajian
Teknologi Pertanian Yogyakarta:
Yogyakarta. Hal 1-4.
Inriani,  M.  M. R., dkk.  (2012).  Formulasi  dan uji krim ekstrak umbi singkong ( Manihot esculenta ) terhadap luka bakar pada  kelinci  ( Oryctolagus  cuniculus ), FMIPA-UNSRAT, Manado.
Kee,  J,L.  (1995).  Buku  Saku  Pemeriksaan Laboratorium  dan  Diagnostik  Dengan Implikasi  Keperawatan.,  Penerbit  Buku Kedokteran EGC., Jakarta.
Martin,  A.J.,  Swarbrick,  &  Cammarata,  A.
(1993). Farmasi  Fisik:  Dasar-dasar Farmasi  Fisik  dalam  Ilmu  Farmasetik.
Edisi  Ketiga ,  Penerjemah:  Yoshita,  UI-
Press: Jakarta, 1176-1182.
Olivia,  H.  (2013), Pengaruh  Basis  Salep
Terhadap  Formulasi  Sediaan  Salep Ekstrak Daun Kemangi ( Ocinum sanctum L) Pada  Kulit  Punggung
Kelinci Yang Dibuat Infeksi Staphylococcus aureus , FMIPA- UNSRAT, Manado.
Rismana,
E. (2010). Pengembangan
Formulasi  Sediaan  Topikal  Wound Healing  Menggunakan  Bahan  Aktif
Kitosan  dan  Ekstrak  Pegagan ,  Pusat Teknologi  Farmasi  Dan  Medika  – Deputi Bidang TAB – BPPT,
Jakarta.Hal 7.
Robinson,  T.  (1995), Kandugan  Organik
Tumbuhan  Tingkat  Tinggi ,  Penerbit ITB, Bandung.
Rowe,  (2009). Handbook  Of  Pharmaceutical Excipients, Sixth Edition . Pharmaceutical  Press  And  American Pharmacists  Association,  Washington.
139, 312, 470, 783.
Soerya  Dewi.  (2013). Aktivitas  Antibakteri Minyak  Atsiri  Daun  Sirih  Merah (Piper crocatum  ruiz  &  pav.),  Jurusan  Kimia,
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universtas SebelasMaret, Kentingan Surakarta. 7. Syamsuhidayat, R.& Jong, W.D. (1997). Buku Ajar Ilmu Bedah: Luka Bakar .
Erlangga: Jakarta.
Voight,  R.  (1994). Buku  Pelajaran  Teknologi Farmasi  Edisi  V ,  diterjemahkan  oleh DR.  Soedani  Neorono,  Gadjah  Mada University Press, Yogyakarta. 336-337.
Young, A. (2002), Practical Cosmetic Science ,
Mills  and  Boon  Limited,  London,  39- 40.