Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 1: 155-166, March 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i1.1559

## Ekspresi Gen PR-1 Melalui Induksi Ketahanan Tanaman Padi terhadap Xanthomonas
oryzae pv. oryzae Menggunakan Lysinibacillus sphaericus dan Asam Salisilat

## PR-1 Gene Expression Through Induction Resistance of Rice Plant to
Xanthomonas oryzae pv. oryzae Using Lysinibacillus sphaericus and Salicylic Acid
Christoffol Leiwakabessy 1 ♥ , Giyanto 2 , Kikin Hamzah Muttaqin 2 , Trikoesoemaningtyas 3 , Abraham Talahaturuson 1
1 Agrotechnology Study Program, Universitas Pattimura, Ambon, Indonesia
2 Plant Protection Department, IPB University, Bogor, Indonesia
3 Department of Agronomy and Horticulture, IPB University, Bogor, Indonesia
♥ Corresponding author email: chr.leiwakabessy@faperta.unpatti.ac.id
Article history: submitted: October 22, 2023; accepted: February 23, 2024; available online: March 30, 2024 Abstract. Xanthomonas oryzae pv.oryzae is one of the pathogenic bacteria that attacks rice plants. Control of this disease  has  been  widely  practiced  and  one  of  the  control  action  techniques  developed  today  is  through  plant resistance induction technology that expresses the PR-1 gene.  Our study to describe PR-1 gene expression in IR64 rice varieties induced resistance by association between endophytic bacteria and salicylic acid. The PR-1 gene was analyzed molecularly and its expression showed that rice plants induced by resistance alone or in combination with these two agents showed PR-1 protein expression. The expression of this protein is triggered by the activity of both inducing agents that work simultaneously to form proteins capable of suppressing the development of this disease. PR-1 works according to the mechanism of each plant resistance-inducing agent. IR64 varieties that are known to be susceptible to bacterial blight have been shown to increase their resistance to moderate. Using plant resistance  induction  through  the  activity  of  the  two  inducing  agents  that  form  the  PR-1  protein  needs  to  be continued with innovative formulations of control techniques given simultaneously as an alternative strategy for controlling  bacterial  blight  and  other  diseases  in  the  future  with  an  environmentally  friendly  and  sustainable approach.
Keywords: bacterial leaf blight; systemic acquired resistance (SAR) and induced systemic resistance (ISR); rice variety IR64.
Abstrak. Xanthomonas oryzae pv. oryzae merupakan salah satu bakteri patogen yang menyerang tanaman padi. Pengendalian terhadap penyakit ini telah banyak dilakukan dan salah satu teknik pengendalian yang dikembangkan saat  ini  melalui  teknologi  induksi  ketahanan  tanaman  yang  mengekspresikan  gen  PR-1.  Penelitian  kami  untuk mendeskripsikan  ekspresi  gen  PR-1  pada  varietas  padi  IR64  yang  terinduksi  resistensinya  oleh  asosiasi  antara bakteri endofit dan asam salisilat. Gen PR-1 dianalisis secara molekuler dan ekspresinya menunjukkan tanaman padi yang terinduksi resistensinya secara tunggal maupun kombinasi oleh kedua agens ini memperlihatkan adanya ekspresi  protein  PR-1.  Ekspresi  protein  ini  dipicu  oleh  aktivitas  kedua  agens  penginduksi  yang  bekerja  secara simultan untuk membentuk protein yang mampu menekan perkembangan penyakit ini. PR-1 bekerja sesuai dengan mekanisme  dari  masing-masing  agens  penginduksi  resistensi  tanaman.  Varietas  IR64  yang  diketahui  rentan terhadap penyakit hawar daun bakteri terbukti dapat ditingkatkan ketahanannya menjadi moderat.  Pemanfaatan induksi  ketahanan  tanaman  melalui  aktivitas  kedua  agens  pengimbas  yang  membentuk  protein  PR-1  perlu dilanjutkan  dengan  inovasi  formulasi  teknik  pengendalian  yang  diberikan  secara  simultan  sebagai  alternatif strategi pengendalian hawar daun bakteri maupun penyakit lainnya ke depan dengan pendekatan ramah lingkungan dan berkelanjutan.
Kata kunci: ISR dan SAR; penyakit hawar daun bakteri; varietas padi IR64

## PENDAHULUAN
Kerusakan  tanaman  padi  oleh  penyakit “hawar daun bakteri” (HDB) terus meningkat secara  signifikan  akibat  dari  penggunaan input  pupuk  nitrogen  secara  besar-besaran yang  dilakukan  di  negara-negara  Asia termasuk  India,  Filipina,  Nepal,  Indonesia, dan Sri Lanka. Kejadian penyakit HDB telah
dilaporkan di Australia, Amerika, dan Afrika Barat.  Sampai  saat  ini,  penyebaran  HDB secara  luas  telah  mencakup  hampir  semua negara penghasil padi di dunia (Jyufuku et al., 2009;CABI, 2023).  Di Indonesia penyebaran HDB  hampir  meliputi  semua  wilayah Sumatera  (Muflihayati  &  Maulina,  2021; Safrizal et al., 2020), Jawa (Sudir & Yuliani,
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 1: 155-166, March 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i1.1559
2016;  Sari,  2019);  Roza  et  al.,  2019), Kalimantan (Sopialena et al., 2020), Sulawesi (Herawati, 2017), Bali (Suastika et al., 2021), Nusa  Tenggara  Timur  (Eryah  et  al.,  2022) maupun daerah lainnya di Indonesia.
Penyakit  ini  menyerang  tanaman  padi dapat  menyebabkan kerusakan berat  sebesar 70%  dan  bibit  padi  yang  terinfeksi  akan menunjukkan gejala hawar daun bakteri serta dapat  merusak  pertanaman  (Mew,  1991; (Salzberg  et  al.,  2008).    Patogenesis  dari patogen  ini  dengan  melibatkan  beberapa faktor virulensi seperti enzim ekso- polisakarida,  enzim  ekstraseluler,  adhesin, sekresi  Tipe-3,  dan  motilitas  (Xue  et  al., 2018;  Tang  et  al.,  1996;  Das  et  al., 2009;Furutani et al., 2009).
Berbagai  upaya  pengendalian  penyakit HDB  sudah  banyak  dilakukan  diantaranya penggunaan Pseudomonas spp (Saylendra et al.,  2017);  pupuk  organik  cair  dan  asap  cair (Rusli et al., 2017); aktinobakteri (Fadil et al., (2023); maupun tanaman tagetes (Chandra et al., 2022), pemanfaatan bakteriofage sebagai agens  biokontrol Xanthomonas  oryzae pv. oryzae (X. oryzae pv. oryzae) (Widiyatmoko et  al.,  2022),  namun  dirasakan  bahwa pengendalian  terhadap  penyakit  ini  belum optimal  sehingga  perlu  dicari  alternatif pengendalian  lain  yang  lebih  menekankan pada peningkatan imunitas tanaman.
Salah  satu  cara  untuk  meningkatkan ketahanan  tanaman  terhadap  patogen  adalah dengan menginduksi resistensi sistemik yang dipicu  dengan  penerapan  gen  promotor tertentu  (gen  resistensi  yang  didapat  secara sistemik/gen  SAR)  atau  resistensi  sistemik terinduksi/ISR  berupa  akumulasi  senyawa tertentu  seperti  senyawa  asam  salisilat  dan jasmonat.      Penggunaan    ekstrak  tumbuhan dapat  mengaktifkan  gen  pertahanan  dan komponen  biokimia  tanaman  penyebab ketahanan  penyakit  pada  jagung tahan ( Hoerussalam & Khaeruni, 2013) . Disamping  itu,  senyawa  kitosan  dapat meningkatkan  kandungan  capsaicin  pada tanaman cabai sehingga dapat meningkatkan kemampuan tanaman dalam melawan patogen (Fitri, 2016) . Namun, tidak
ditemukan  informasi  spesifik  mengenai dampak  ekspresi  gen  PR-1  pada  ketahanan tanaman terhadap penyakit.
Menurut  Chandrashekar  et  al.,  (2018), peningkatan  resistensi  tanaman  terhadap cekaman  biotik  (penyakit  tanaman)  terjadi melalui  induksi  overekspresi  gen  PR-1 ( pathogenesis-related protein ) yang memodulasi  tingkat  spesies  oksigen  reaktif terhadap serangan patogen.  Respons dimulai melalui  pengenalan  patogen  oleh  tumbuhan, selanjutnya  tumbuhan  mengeluarkan  sinyal- sinyal  ke  seluruh  bagian  tanaman  untuk melepaskan  enzim-enzim  yang  bertindak sebagai  sinyal  perlawanan  bagi  patogen. Selanjutnya sel-sel tumbuhan akan mengeluarkan  protein  PR-1  yang  berperan dalam  proteksi  tanaman  terhadap  serangan patogen.  Gen-gen  ini  memainkan  peran penting dalam berkomunikasi antara patogen dengan jaringan sel tanaman dalam menghambat  pergerakan  patogen  ke  dalam jaringan  dinding  sel  tanaman  (Santén  et  al., 2005).  Adanya  peran  dari  gen CmPR1 terbukti  sangat  efektif  dalam  meningkatkan resistensi  labu  ( Cucurbita  muscata Dusch) terhadap penyakit embun tepung (Guo et al., 2022).
PR-1 adalah protein yang paling banyak diproduksi selama respons pertahanan terhadap banyak cekaman biotik dan abiotik. Adanya  peran  ekspresi  gen  MaPR-1  yang terseleksi  pada  tanaman pisang dapat mengatasi  cekaman  biotik  maupun  abiotik termasuk  ketahanan  terhadap  penyakit  layu fusarium (Anuradha  et  al.,  2022). Hormon tumbuhan, asam absisat (ABA), tidak hanya penting  untuk  mendorong  respons  stres abiotik tetapi juga berperan dalam ketahanan tanaman.
Selain  itu,  gen  NPR1  yang  bertindak sebagai  pengatur  gen  positif  yang  responsif terhadap  ABA,  sedangkan  HOS15  mampu mendorong degradasi NPR1 pada proteasome (Shen  et  al.,  2020) .  Menurut Murniati et al., (2022) , endofit rhizosfer yang diisolasi  dari  perakaran  padi  mampu meningkatkan  hormon  tanaman  ini  dalam menghambat pertumbuhan patogen.
Ketahanan perolehan sistemik ( Systemic
Acquired Resistance /SAR) maupun
ketahanan  sistemik  terinduksi  ( Induced Resistance  Systemics/ISR ) adalah  salah  satu mekanisme ketahanan tanaman terimbas dan memiliki spektrum yang spesifikasi lebih luas saat  terjadinya  infeksi  awal.  Pembentukan sinyal  seluler  ini  akan  mengaktifkan  SAR, dimana terjadi akumulasi hormon pertahanan asam  salisilat  dan  menghasilkan  PR-protein yang bersifat antimikroba sehingga mengakibatkan terjadi kematian sel terprogram secara lokal (Fu & Dong, 2013). Mekanisme  hipersensitif  disebabkan  oleh penggunaan bahan kimia penginduksi eksogen,  seperti  asam  salisilat  (SA),  asam 2,6-dikloro  isonikotinat  (INA),  atau  asam metil acibenzolar-metil (Fu dan Dong, 2013). Menurut Fang et al., (2019), ekspresi MuPR1 menunjukkan peningkatan resistensi terhadap Botrytis  cinerea dan  Pst.  DC3000  terlihat melalui  indikator  asam  jasmonat,  asam salisilat  dan  giberelin  3.  Selain  itu,  peptida yang berasal dari protein C-terminus MuPR1 dengan motif PxGNxxxxxPY diduga berperan  dalam  mengaktifkan  ketahanan tanaman.
Lesio  nekrotik  yang  diakibatkan  oleh fenomena  SAR,  merupakan  bagian  dari reaksi  hipersensitif  akibat  respons  yang  non kompatibel  atau  sebagai  tanda  penyakit dalam interaksi yang kompatibel (Ryals et al., 1997).  SAR  disebabkan  oleh  penggunaan senyawa penginduksi eksogen secara kimiawi,  seperti  asam  salisilat  (SA),  asam 2,6-dichloro  isonicotinic  (INA),  atau  asam metilasi  acibenzolar-methyl  (Fu  &  Dong, 2013). Salah satu sifat utama dari SAR adalah adanya  akumulasi  PR-Protein  yang  sangat cepat pada tanaman yang terinduksi dibandingkan  dengan  reaksi  kompatibel (Figueroa  et  al.,  2018).  Tanaman  seperti tembakau  dan  Arabidopsis,  menghasilkan SAR  yang  berkaitan  erat  dengan  ekspresi protein  PR  (Zhang  &  Li,  2019).  Menurut (Rockenbach  et  al.,  2018),  ketahanan  dari persilangan  varietas  rentan  dengan  tahan menunjukkan ada peningkatan pada gen PR- 10  tetapi  sebaliknya  gen  PR-1  tidak
mengalami peningkatan.  Hal ini disebabkan oleh hanya satu jenis enzim yaitu glutathione reductase  yang  memengaruhi  ketahanan tanaman apel terhadap patogen Colletotrichum fructicola dibandingkan dengan enzim-enzim lainnya. Enzim glutathione reductase sangat berperan dalam memicu  reaktif  oksigen  spesies.  Aktivitas dari gen PR-1 perlu dideteksi  pada berbagai tanaman  termasuk  padi  yang  terinduksi ketahanannya  akibat  dipicu  oleh  kombinasi bakteri endofit dan asam salisilat. Diharapkan hasil  kajian  ini  menjadi  pertimbangan  bagi para  pemulia  tanaman  maupun  pihak  terkait lainnya  dalam  menciptakan  atau  merakit varietas-varietas  padi  yang  tahan  maupun toleran terhadap patogen tanaman.

## METODE
Penelitian ini berlangsung di rumah kaca dan Laboratorium Bakteri Patogen Tumbuhan,  Departemen  Proteksi  Tanaman dan Centre for Life Sciences and Biotechnology IPB,  Bogor  dimulai  pada Januari  sampai  Maret , 2016.  Bahan-bahan yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  di- antaranya varietas padi IR64 (rentan terhadap X. oryzae pv. oryzae patotipe III dan  IV)  ), bakteri  endofit  ( Lysinibacillus sphaericus / L. sphaericus ), asam salisilat dengan konsentrasi  10  mM  (Leiwakabessy,  2016), tanah  steril  dan  kompos  (1:1),  air  steril, alkohol maupun alat tulis menulis.

## Persiapan Tanam dan Aplikasi Endofit
Benih  padi    disterilkan  dengan  natrium hipoklorit  selama  2  menit  dan  dicuci  3  kali dengan air steril. Selanjutnya benih disterilkan di oven pada suhu 55°C selama 20 menit.    Selanjutnya  benih  direndam    ( seed coating )  dalam  suspensi  bakteri  endofit selama 16 jam (semalaman).  Benih ditanam pada  wadah  plastik  berisi  campuran  tanah steril  dan  kompos,  serta  disiram  dengan  air steril. Ketika tanaman berumur 14 hari (hari setelah  tanam/HST),  dipindahkan  ke  ember plastik berisi campuran tanah steril dan pupuk kandang  (1:1)  dan  dilanjutkan  menyiram
suspensi  endofit  sebanyak  50  mL -1 tanaman dengan konsentrasi 10 8 cfu untuk menginduksi  ketahanan  tanaman  padi  pada setiap  perlakuan  uji.  Isolat  endofit L. sphaericus ditumbuhkan menggunakan media biakan tryptic soy Agar (TSA) selama 24  jam  dan  perbanyakannya  dengan  media nutrien agar (NA).
Aplikasi Asam Salisilat (SA) dan

## Inokulasi Xanthomonas oryzae pv. oryzae
Aplikasi SA maupun endofit baik secara tunggal maupun kombinasi bertujuan menginduksi ketahanan tanaman padi
dilakukan melalui penyemprotan SA dengan konsentrasi  10  mM  sebanyak  20 mL _1 dan tanpa  SA  (kontrol).  Aplikasi  ini  dilakukan pagi  hari  pada  tanaman  berumur  40  hari setelah  tanam  (HST).  Dilanjutkan  dengan inokulasi X. oryzae pv. oryzae (patotipe  IV) (Gambar  1)  saat  tanaman  berumur  43  HST dengan  teknik  menggunting  daun  ( clip method ). Mula-mula gunting steril dicelupkan  ke  dalam  suspensi  patogen (konsentrasi 10 7 cfu) dan bagian ujung daun dipotong, serta tanaman disungkup selama 3- 4 hari dengan plastik transparan.
Gambar 1. Pertumbuhan X. oryzae pv. oryzae (patotipe IV) pada media Wakimoto berumur 7 hari (Leiwakabessy, 2016)
Kombinasi  Bakteri  Endofit  L.  sphaericus dan  SA  dalam  Mengimbas  Ketahanan Tanaman  Padi  terhadap  Xanthomonas oryzae pv. oryzae
Pemberian  kedua  agens  pengimbas ketahanan tanaman padi yaitu SA dan endofit L.  sphaericus diberikan  pada  umur  tanaman yang  sama  40  HST.  Jumlah  konsentrasi  SA yang  diberikan  10  mM  sebanyak  20  mL -1 , sedangkan    bakteri  endofit  10 8 CFU, dilanjutkan  dengan  inokulasi  menggunakan X.  oryzae  pv.  oryzae patotipe  IV  saat  umur tanaman  43  HST  dan  dilanjutkan  dengan analisis Gen PR-1.
Ekspresi Gen Protein Terkait Patogenesis (PR-1) Melalui Ketahanan Terimbas pada Tanaman  padi  dengan  Lysinibacillus sphaericus dan Asam Salisilat
Analisis  ekspresi  gen  PR-1  digunakan metode  RT-PCR  (Verso  Hot  Start  kit
Thermoscientific ). RNA total tanaman diekstraksi  setiap  sampel  perlakuan L. sphaericus sebelum  dan  setelah  diinokulasi X. oryzae pv. oryzae menggunakan prosedur GeneJet Plant DNA Purification Mini kit dari Thermoscientific .
Sampel daun padi sebanyak 0.1g digerus dengan  nitrogen  cair  di  dalam  mortar, selanjutnya  ditambahkan  500  µl  RNA  lysis buffer  dan  DTT  10  µl  2M.  Kemudian dihomogenkan  dengan  jalan  di  vorteks selama 10–20 kali.  Larutan ini dimasukan ke dalam tabung mikro dan diinkubasi pada suhu 56 o C  selama  3  menit.  Disentrifus  selama  5 menit  pada  kecepatan  20000  g  selama  1 menit.  Larutan  jadi  dimasukkan  ke  tabung mikro  volume  2  mL  yang  sudah  dipasang DNA removing column . Selanjutnya ditambahkan  250  µl  etanol  90%  dan dicampur  hingga  merata  dengan  pipet. Pisahkan  campuran  ini  ke  dalam removing column  tube ,  disentrifus  selama  1  menit
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 1: 155-166, March 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i1.1559
dengan  kecepatan  10000  g.  Larutannya dibuang dan diganti dengan column tube yang baru.  Tambahkan  larutan  wash  buffer  1 sebanyak  700  µl,  disentrifus  kurang  lebih  1 menit  dengan  kecepatan  10000  g.    Larutan column tube dibuang  dan  ditukar  dengan column  tube yang  baru  untuk  pemurnian. Larutan wash buffer 2 dimasukkan ke dalam column  tube ,  disentrifus  selama  1  menit. Larutan  ini  dibuang  dan  digantikan  dengan removing column tube yang baru.  Kemudian disentrifus  kurang  lebih  1  menit  dengan kecepatan  10000  g.    RNAse  free  water ditambahkan  sebanyak  50  µL  ke  bagian tengah  column,  disentrifus  selama  1  menit dengan  kecepatan  10000  g.  Tahap    final adalah disentrifugasi selama 1 menit dengan kecepatan 10000 g.
Amplifikasi  gen  PR-1 memakai  primer forward
(5’- TAACTATGGAGGTATCCAAGCTGCC- 3’) dan primer
reverse (5’- CCAGTACGTACGCCCGTGTGTATAA- 3’) dengan target amplikon berukuran ± 523 bp  (Kurnianingsih,  2008).    Digunakan metode  RT-PCR  yang  mengacu  pada prosedur
Verso
Hot Start kit, Thermoscientific pada  temperatur  50ºC selama  20  menit,  pre  denaturasi  suhu  94ºC selama  5  menit,  denaturasi  pada  suhu  94ºC selama  30  detik, annealing pada  suhu  55ºC (30 detik), dan suhu ekstensi 72 ºC (1 menit), siklus  denaturasi-ekstensi  diulang  sebanyak 39 kali, pasca PCR suhu 72ºC selama 7 menit dan  pendinginan  pada  suhu  25ºC  (4  menit). Hasil  PCR  diseparasi  pada  gel  agarosa  1% (b/v)  di  dalam  larutan  penyangga  TAE  1x [(4.84  g  Tris  base,  1.142  mL  asam  asetat glasial  dan  2  mL  0.5  M  EDTA  (pH  8.0)]. Selanjutnya diamati dibawah sinar UV.

## Pengamatan
Pengamatan  hasil  amplifikasi  PCR maupun  ekspresi  gen  PR-1  terhadap  sampel daun padi varietas IR64 berumur 40 (kontrol) dan 43 HST yang telah terimbas ketahanannya  baik  secara  tunggal  dengan endofit L.  sphaericus, asam  salisilat  10 mM maupun  kombinasi L.  sphaericus vs  SA  10
mM  dilakukan sebelum dan setelah inokulasi dengan bakteri patogen X. oryzae pv. oryzae .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  pengamatan  pertumbuhan  bakteri endofit  pada  media  nutrien  agar  yang teridentifikasi  dengan  metode  PCR  yaitu Lysinibacillus  sphaericus disajikan  pada Gambar 2.
Bakteri  patogen  X.  oryzae  pv.  oryzae memunculkan  gejala  mula-mula  terlihat adanya  bercak-bercak  pada  sisi  daun  yang kemudian meluas dan bercorak hijau keabu- abuan menyebabkan seluruh daun luruh dan menjadi  layu  seperti  tersiram  air  panas.  Hal ini  mengakibatkan  reaksi  setiap  tanaman berbeda  ketika  terimbas  ketahanannya  oleh kedua agens penginduksi. Tingkat kompetisi yang terjadi antara bakteri patogen dan inang yang menyebabkan adanya perbedaan interaksi  dari setiap varietas. Disamping itu, semakin  besarnya  gejala  kerusakan  yang ditimbulkan oleh patogen ini sangat dipengaruhi  oleh  interaksi  patogen  dengan lingkungan.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa tanaman  padi  varietas  IR64  yang  terinduksi ketahanannya  yang  semula  bersifat  rentan, namun mengalami perubahan tingkat ketahanan¬nya setelah terinduksi ketahanannya  menjadi  moderat  oleh  kedua agens  penginduksi  ini  (Gambar  3).    Hal  ini menunjukkan bahwa ada peran dari senyawa- senyawa pertahanan tanaman yang mengatur aktivitas perlawanan terhadap patogen ini.
Berdasarkan  Gambar  3,  terlihat  bahwa agens  penginduksi  SA  10  mM  maupun endofit L.  sphaericus yang  diberikan  ke tanaman secara tunggal mampu meningkatkan  ketahanan  tanaman  terhadap penyakit  ini.  Hal  yang  sama  juga  terjadi demikian, jika kedua agens ini diaplikasikan secara  bersama-sama.  Namun  kombinasi pemberian  SA  10  mM  dan  endofit  ini  yang terbaik. Kombinasi asam salisilat 10 mM dan endofit L.  sphaericus ternyata  mampu meningkatkan  ketahanan  varietas  IR64  dari rentan  menjadi  moderat  dan  Ciherang  dari moderat menjadi tahan (Leiwakabessy et al.,
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 1: 155-166, March 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i1.1559
2018).  SAR  dan  ISR  mampu  merangsang pertumbuhan  hormon  tanaman  yang  dapat mengatasi  serangan  patogen  (Vlot  et  al., 2021).  Hal  ini  disebabkan  oleh  peran  dari asam salisilat maupun endofit jika diaplikasikan  secara  bersama-sama  akan mengaktifkan pertahanan tumbuhan sistemik
terhadap patogen tanpa menimbulkan kerusakan  pada  jaringan  tumbuhan.    SAR lebih  dominan  dalam  memicu  respons pertahanan di daerah-daerah lain, sedangkan ISR  mampu  merangsang  pertumbuhan endofit sehingga mampu mengatasi serangan patogen.
Gambar 2. 2a. Pertumbuhan koloni endofit Lysinibacillus sphaericus pada media nutrien agar (NA), 2b.  Hasil  PCR  bakteri  endofit L.  sphaericus yang  teramplifikasi  pada  500  bp (Leiwakabessy, 2016) .
Gambar 3. Reaksi varietas padi IR64 (daun) yang terinduksi ketahanannya melalui aplikasi bakteri (a) kontrol, (b)  endofit L. sphaericus (LS), (c) asam salisilat (SA 10 mM), dan (d) Ls. vs SA 10 mM (hasil penelitian)
2a
2b
Menurut Leiwakabessy et al., (2017), SA sebagai agens penginduksi resistensi mampu memicu peningkatan resistensi tanaman padi terhadap  penyakit  HDB.  Hal  ini  disebabkan oleh  aktivitas  beberapa  enzim  pertahanan tanaman seperti peroksidase, polifenoloksidase, dan β-1,3 glukanase yang mengalami peningkatkan pada varietas IR64 dan Ciherang.  Menurut Hunjan et al., (2021), ekspresi beberapa enzim pertahanan tanaman pada  varietas  IRBB4  dan  IRBB7  mampu meningkatkan  aktivitas  enzim  peroksidase, polifenoloksidase,  dan  fenilalanin  ammonia liase.  Hal  menunjukkan  bahwa  beberapa galur  padi  yang  tahan  mampu  mengaktivasi enzim-enzim  pertahanan  tanaman  terhadap penyakit ini.
Aplikasi  dari  kedua  agens  ini  secara simultan antara keduanya dapat meningkatkan hormon  tanaman  sehingga  memacu  proses pertumbuhan  dan  perkembangan  tanaman. Molekul  sinyal  tanaman  SA  dan  JA memainkan peran penting dalam jalur induksi resistensi  terhadap  penyakit. Cross-talk ini bergantung  pada  lintasan  SA  dan  JA  yang mengakibatkan penghambatan respons pertahanan yang dimediasi oleh JA. SAR dan ISR  efektif  terhadap  spektrum  patogen  yang luas  seperti Pseudomonas  syringae  pv. tomat (Pseudomonas).  Tanaman  mampu  meng- ekspresikan respons pertahanan yang bergantung  pada  SA,  JA,  dan  etilen  ketika diaplikasikan  secara  tunggal  tanpa  efek antagonis,  tetapi  jika  diaplikasikan  bersama akan  menimbulkan  perlindungan  yang  tinggi terhadap serangan patogen. Ekspresi gen PR-1 varietas  padi  IR64  menunjukkan  pengaruh yang  signifikan  ketika  diberi  perlakuan induksi  biotik  (endofit)  dan  abiotik  (SA) secara simultan (Gambar 4a dan 4b).
Penampilan  ekspresi  gen  PR-1  pada varietas IR64 diduga bahwa varietas ini telah terinduksi  resistensinya  dengan  senyawa kimia SA yang selanjutnya akan mengaktivasi  senyawa-senyawa  pertahanan tanaman  padi.  Menurut  Nakashita  et  al., (2002),  ekspresi  gen  Ncyanomethyl-2- chloroisonicotinamide (NCI) mampu mengimbas  ketahanan  terhadap  beberapa
jenis patogen seperti Magnaporthe grisea, X. oryzae pv. oryzae, virus TMV, Pseudomonas  syringae pv. tabaci, dan Oidium lycopersici. Respons induksi ketahanan  tanaman  oleh  endofit  dan  asam jasmonat menunjukkan bahwa ada sinergisme antara asam salisilat, etilen, dan asam  jasmonat  dalam  menekan  penyakit HDB.    Respons  ini  dikendalikan  oleh seperangkat  gen-gen  pertahanan  tanaman yang membentuk gen PR-1. Mitsuhara et al., (2008),  gen  OsPR1  berperan  sebagai penginduksi  ketahanan  padi  ketika  dipapar oleh X. oryzae pv. oryzae dapat memediasi sinergisme  antara  asam  salisilat  dan  asam jasmonat, etilen, dan asam jasmonat maupun salisilat dan etilen.
Hubungan antara patogen dan lingkungan  dalam  proses  patogenesis  yang terjadi  secara  global  sebagian  besar    diatur oleh  zat  pengatur  tumbuh  melalui  berbagai jalur  sinyal.    Interaksi  ini  dapat  bersifat sinergis  atau  antagonistik.    Hasil  penelitian menunjukkan bahwa kedua agens penginduksi baik bakteri endofit L. sphaericus vs  SA  10  mM  mempunyai  efek sinergis dalam mengaktifkan ekspresi gen PR- 1.  Varietas  IR64  bersifat  rentan  yang digunakan dalam penelitian ini terbukti terjadi pengimbasan resistensi melalui kedua induser tersebut  dimana  terlihat  pada  ketahanan varietas  ini  dari  rentan  meningkat  menjadi moderat.
Perlakuan  tunggal  dengan  bakteri nonpatogenik L. sphaericus tidak menunjukkan  ekspresi  gen  ini,  sedangkan agens pengimbas dengan konsentrasi 10 mM SA  ternyata  mampu  mengaktivasi  ekspresi gen tersebut.  Hal ini memungkinkan bahwa kedua  penginduksi  ini    bekerja  sama  untuk memicu aktivasi gen PR-1 untuk menghambat perkembangan penyakit HDB. Jika  keduanya  digabungkan  dalam  strategi pengendalian  penyakit  HDB,  maka  agens pengimbas ini akan mempunyai efek ganda dengan  bertindak  secara  sinergis  dan berpotensi  menimbulkan  resistensi  pada tanaman  padi  terhadap  penyakit  ini  dan penyakit lainnya.
Gambar 4a. Ekspresi  gen  PR-1  pada  varietas  padi  IR64  yang  diimbas  ketahanannya  oleh L. sphaericus , SA, dan L. sphaericus vs SA sebelum inokulasi X. oryzae pv. oryzae ( M= marker 1 kb, A= kontrol SA, B= 5 mM SA, C=10 mM SA, D=15 mM SA, E = kontrol ED, F=EA2 154, G=EB4451, H=ED163, I  =kontrol, J= 10 mM SA, K= L. sphaericus, L= L. sphaericus dan 10 mM SA) (Leiwakabessy, 2016).
Gambar 4b. Ekspresi gen PR-1  pada  varietas  padi  IR64  yang  diimbas  ketahanannya  oleh L. sphaericus ,  SA,  dan L. sphaericus vs  SA  sesudah inokulasi X.  oryzae pv. oryzae  ( M= marker 1 kb, A= kontrol SA, B= 5 mM SA, C=10 mM SA, D=15 mM SA, E = kontrol ED, F=EA2 154, G=EB4451, H=ED163; I  =kontrol, J= 10 mM SA, K= L. sphaericus, L= L. sphaericus dan 10 mM SA (anak panah) (Leiwakabessy, 2016).
Berdasarkan  penampilan  hasil  analisis ekspresi gen PR-1 (Gambar 4a dan 4b) maka pemberian  perlakuan  isolat  endofit L. sphaericus dan SA 10 mM dalam penelitian ini  terbukti  mampu  mengimbas  ketahanan varietas  padi  terhadap  penyakit  HDB. Keuntungan  penggunaan  kedua  agens penginduksi ini adalah pendekatan pengendalian OPT berbasis ramah lingkungan  karena  di  dalam  pemberiannya menggunakan  mikroba  yang  berasal  dari perakaran  tanaman  padi  dan  SA  dalam konsentrasi yang rendah. Aplikasi pemberian endofit saat seed coating, pindah tanam  berumur 14  HST  dan pemberian SA pada  umur  40  HST  memberikan  kontribusi dalam  meningkatkan  ketahanan  tanaman padi. Prospek dalam pengendalian penyakit tanaman  ketika  diberikan  secara  simultan akan meningkatkan hormon tanaman
melalui  aktivasi  etilen  dan  asam  jasmonat dalam menekan perkembangan penyakit ini. Masih  perlu  dikaji  lebih  lanjut  ekspresi induksi resistensi tanaman dengan menggunakan  bakterisida  sebagai  kontrol positif  dan  pembuatan  formulasi  agens pengendali  hayati  yang  menggabungkan kedua  agens  penginduksi  ini  untuk  diuji  di lapangan.  Aplikasi  teknologi  ini  bisa  diuji lebih lanjut dengan agens hayati lain melalui uji  kompatibilitas  sehingga  dapat  dijadikan sebagai  alternatif  pengendalian  penyakit tanaman pangan, hortikultura, dan perkebunan.  Ke  depan  teknologi  induksi ketahanan tanaman yang mengombinasikan agens  penginduksi  ketahanan  tanaman secara biotik maupun abiotik merupakan hal menarik  yang  perlu  dikaji  pada  berbagai patogen tanaman.
500 bp

## SIMPULAN
Aplikasi  pemberian  bakteri  endofit L. sphaericus dan asam salisilat 10 mM melalui induksi  ketahanan  tanaman  secara  simultan dapat memicu ekspresi gen PR-1 baik secara tunggal  maupun  kombinasi.  Varietas  padi IR64 terbukti dapat ditingkatkan ketahanannya  dari  rentan  menjadi  moderat yang dicirikan oleh penampilan ekspresi gen PR-1.  Diharapkan  aplikasi  kedua  agens penginduksi ketahanan tanaman dapat digunakan  dalam  pengendalian  patogen  ini yang berimplikasi pada peningkatan produktivitas  tanaman  pangan,  hortikultura, dan perkebunan.

## DAFTAR PUSTAKA
Anuradha, C., Chandrasekar, A., Backiyarani, S.,  &  ...  (2022).  Genome-wide analysis of pathogenesis-related protein  1  (PR-1)  gene  family  from Musa  spp.  and  its  role  in  defense response during stresses. Gene . https://www.sciencedirect.com/scienc e/article/pii/S0378111922001536
CABI.  (2023). Xanthomonas  oryzae  pv. oryzae  (rice  leaf  blight) .  Technical
Fact Sheet. https://plantwiseplusknowledgebank. org/doi/full/10.1079/pwkb.species.56 956?src=getftr
Chandra, S., Noer, Z., & Suswati, &. (2022).
Uji  Toksisitas  Ekstrak  Methanol Tagetes erecta L
Terhadap Xanthomonas  oryzae  pv.  oryzae Penyebab  Penyakit  Hawar  Daun Bakteri  Pada  Tanaman  Padi  Sawah (Oryza  sativa  L  )  Secara  In-Vitro. Jurnal  Ilmiah  Magister  Agribisnis , 4 (2).
Chandrashekar,  N.,  Ali,  S.,  &  Grover,  A. (2018). Exploring expression patterns of PR-1, PR-2, PR-3, and PR-12 like genes  in  Arabidopsis  thaliana  upon Alternaria  brassicae  inoculation. 3
Biotech .
https://doi.org/10.1007/s13205-018- 1259-2
Das, A., Rangaraj, N., & Sonti, R. V. (2009). Multiple  adhesin-like  functions  of Xanthomonas  oryzae  pv.  oryzae  are involved in promoting leaf attachment,  entry,  and  virulence  on rice. Molecular Plant-Microbe Interactions , 22 (1). https://doi.org/10.1094/MPMI-22-1- 0073
Eryah, H. P., Telnoni, S. P., & Costa, Y. Da.
(2022). Isolasi Dan Identifikasi Bakteri Penyakit Hawar Daun Di Desa Naibonat  Kecamatan  Kupang  Timur, Kabupaten  Kupang  Nusa  Tenggara Timur. Flobamora Biological , 1 (2).
Fadil,  M.,  Yanti,  Y.,  &  Khairul,  U.  (2023). Penapisan  aktinobakteria  rhizosfer padi  sebagai  agens  pengendali  hayati Xanthomonas  oryzae  pv.  oryzae pathogen  penyebab  penyakit  hawar daun  bakteri. Jurnal  AGRO , 10 (1). https://doi.org/10.15575/19798
Fang,  L.-J.,  Qin,  R.-L.,  Liu,  Z.,  Liu,  C.-R., Gai,  Y.-P.,  &  Ji,  X.-L.  (2019). Expression and functional analysis of a  PR-1  Gene,  MuPR1,  involved  in disease resistance response in mulberry (Morus multicaulis). Journal  of  Plant  Interactions , 14 (1), 376–385.
https://doi.org/10.1080/17429145.201 9.1640295
Figueroa, M., Hammond‐Kosack, K. E., & ... (2018). A review of wheat diseases— a  field  perspective. Molecular  Plant
… . https://doi.org/10.1111/mpp.12618
FITRI,  D.  (2016).  Uji  ketahanan  tanaman cabai keriting (Capsicum annuum L.) hasil  induksi  mutasi  dengan  ethyl methane  sulphonate  (EMS)  pada generasi kedua terhadap penyakit ….
Sainstek: Jurnal Sains Dan Teknologi . http://ojs.iainbatusangkar.ac.id/ojs/in dex.php/sainstek/article/view/2
Fu,  Z.  Q.,  &  Dong,  X.  (2013).  Systemic acquired  resistance:  Turning  local infection  into  global  defense.  In
Annual  Review  of  Plant  Biology . https://doi.org/10.1146/annurev- arplant-042811-105606
Furutani,  A.,  Takaoka,  M.,  Sanada,  H., Noguchi,  Y.,  Oku,  T.,  Tsuno,  K., Ochiai,  H.,  &  Tsuge,  S.  (2009). Identification  of  novel  type  III secretion  effectors  in  Xanthomonas oryzae  pv.  oryzae. Molecular  Plant- Microbe
Interactions , 22 (1).
https://doi.org/10.1094/MPMI-22-1-
0096
Guo, W. L., Yang, H. L., Zhao, J. P., Bian, S.
J., Li, Q. F., Guo, Y. Y., & ... (2022).
A  Pathogenesis-Related  Protein  1  of Cucurbita  moschata  responds  to powdery
mildew infection .
researchsquare.com.
https://www.researchsquare.com/artic le/rs-1782621/latest
Herawati, A. (2017). Isolasi dan Karakterisasi Penyebab  Penyakit  Hawar  Daun Bakteri  (Xanthomonas  oryzae  pv. oryzae  L.)  pada  Tanaman  Padi  di Wilayah  Sulawesi  Selatan. Perbal: Jurnal Pertanian Berkelanjutan , 4 (3).
Hoerussalam, A. P., &  Khaeruni, A.  (2013). Induksi  ketahanan  tanaman  jagung (Zea mays L.) terhadap penyakit bulai melalui seed treatment serta pewarisannya  pada  generasi  S1. Ilmu Pertanian (Agricultural … . https://journal.ugm.ac.id/jip/article/vi ew/2532
Hunjan, M. S., Kamboj, I., Lore, J. S., Bhatia, G.,  &  Pannu,  P.  P.  S.  (2021). Expression of defense related enzymes  in  rice  near  isogenic  lines IRBB4  and  IRBB7  challenged  with
Xanthomonas  oryzae  pv.  oryzae  at elevated temperature. Indian Phytopathology , 74 (1).
https://doi.org/10.1007/s42360-020-
00304-0
Jyufuku,  S.,  Furuya,  N.,  Goto,  T.,  Tsuchiya,
K., & Yoshimura, A. (2009). Pathogenic  and  genetic  diversity  in asian  strains  of  Xanthomonas  oryzae
pv.  oryzae. Journal  of  the  Faculty  of Agriculture, Kyushu University ,
54 (1). https://doi.org/10.5109/14031
Kurnianingsih, R. (2008). Ekspresi Gen PR-1 dan PBZ1 yang terlibat dalam Sistem Toleransi  Tanaman  Padi  terhadap Penyakit  Blas  (isolat  173) [Tesis]. Institut Pertanian Bogor.
Leiwakabessy,  C.  (2016). Potensi  Bakteri Endofit  dan  Asam  Salisilat  Sebagai Agens Penginduksi Ketahanan Tanaman Padi Terhadap
Xanthomonas  oryzae  pv.  oryzae [Disertasi]. Institut Pertanian Bogor.
Leiwakabessy,  C.,  Sinaga,  M.  S.,  Mutaqien, K.  H.,  Trikoesoemaningtyas,  & Giyanto.  (2018).  The  endophytic bacteria,  salicylic  acid,  and  their combination  as  inducers  of  rice resistance against Xanthomonas oryzae  Pv.  Oryzae. Agrivita , 40 (1),
25–35. https://doi.org/10.17503/agrivita.v40i
1.1029
Leiwakabessy, C., Sinaga, M. S., Mutaqin, K.
H.,  Trikoesoemaningtyas,  T.,  &
Giyanto,  G.  (2018).  Asam  Salisilat sebagai Penginduksi Ketahanan Tanaman  Padi  terhadap  Penyakit Hawar Daun Bakteri. Jurnal Fitopatologi  Indonesia , 13 (6),  207. https://doi.org/10.14692/jfi.13.6.207
Mew,  T.  W.  (1991).  Rice  Diseases.  In Rice
(pp. 187–236). Springer US. https://doi.org/10.1007/978-1-4899-
3754-4_5
Mitsuhara, I., Iwai, T., Seo, S., Yanagawa, Y., Kawahigasi,  H.,  Hirose,  S.,  Ohkawa, Y., & Ohashi, Y. (2008).
Characteristic  expression  of  twelve rice  PR1  family  genes  in  response  to pathogen  infection,  wounding,  and defense-related  signal  compounds (121/180). Molecular  Genetics  and Genomics , 279 (4). https://doi.org/10.1007/s00438-008-
0322-9
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 1: 155-166, March 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i1.1559
Muflihayati,  M.,  &  Maulina,  F.  (2021). Inventarisasi  Penyakit  Tanaman  Padi Di Sekitar Politeknik Pertanian Negeri
Payakumbuh. LUMBUNG , 20 (2).
https://doi.org/10.32530/lumbung.v2
0i2.377
Murniati,  A.,  Tahir,  D.,  &  Tahir,  R.  (2022).
Identifikasi Mikroba Rizosfer Penghasil Hormon Pertumbuhan pada Tanaman Padi (Oryza sativa L.). Agro Bali :  Agricultural  Journal , 5 (3). https://doi.org/10.37637/ab.v5i3.1040
Nakashita,  H.,  Yoshioka,  K.,  Yasuda,  M., Nitta,  T.,  &  ...  (2002).  Probenazole induces  systemic  acquired  resistance in  tobacco  through  salicylic  acid accumulation. … and Molecular Plant
… . https://www.sciencedirect.com/scienc e/article/pii/S0885576502904261
Rockenbach, M. F., Velho, A. C., Alaniz, S. M.,  &  Stadnik,  M.  J.  (2018). Resistance of apple leaves to infection by  Colletotrichum  fructicola  acts independently of hypersensitive reaction  and  PR-1  and  PR-10  gene expression. Tropical Plant Pathology , 43 (4), 360–370.
https://doi.org/10.1007/s40858-018-
0217-1
Roza, C., Usyati, N., & Gunarsih, C. (2019). Keragaman  Ketahanan  Padi  Lokal Jawa, Sumatra, dan Sulawesi terhadap Patogen Hawar Daun Bakteri Patotipe
III,  IV,  dan  VIII. Buletin  Plasma
Nutfah , 25 (2). https://doi.org/10.21082/blpn.v25n2.2
019.p37-46
Rusli, I. K., Soesanto, L., & Rahayuniati, R. F.  (2017).  Pengaruh  Pupuk  Organik
Cair Dan Asap Cair Dalam Pengendalian  Xanthomonas  Oryzae Pv.  Oryzae  Dan  Pyricularia  Grisea Pada Padi Gogo Galur G136 Potency Of  Liquid  Organic  Fertilizer  And Liquid Smoke To
Control ( Xanthomonas  oryzae  pv.  oryzae and Pyricularia  grisea In  Upland  Rice
G136  LINE). Jurnal  Perlindungan Tanaman Indonesia , 20 (2). https://doi.org/10.22146/jpti.17690
Ryals, J. A., Friedrich, L. B., Uknes, S. J., & Ward,  E.  R.  (1997).  Chemically inducible  promoter  of  a  plant  PR-1 gene. US Patent 5,689,044 .
https://patents.google.com/patent/US
5689044A/en
Safrizal, Lisnawita, Lubis, K., Maathuis, F. J. M.,  &  Safni,  I.  (2020).  Mapping bacterial  leaf  blight  disease  of  rice (Xanthomonas  oryzae  pv  oryzae)  in North  Sumatra. IOP  Conference
Series:  Earth  and  Environmental Science , 454 (1).
https://doi.org/10.1088/1755- 1315/454/1/012160
Salzberg,  S.  L.,  Sommer,  D.  D.,  Schatz,  M. C.,  Phillippy,  A.  M.,  Rabinowicz,  P. D., Tsuge, S., Furutani, A., Ochiai, H., Delcher,  A.  L.,  Kelley,  D.,  Madupu, R.,  Puiu,  D.,  Radune,  D.,  Shumway, M., Trapnell, C., Aparna, G., Jha, G., Pandey,  A.,  Patil,  P.  B.,  … Bogdanove,  A.  J.  (2008).  Genome sequence  and  rapid  evolution  of  the rice  pathogen  Xanthomonas  oryzae pv. oryzae PXO99A. BMC Genomics ,
9 .  https://doi.org/10.1186/1471-2164- 9-204
Santén,  K.,  Marttila,  S.,  Liljeroth,  E.,  &  ... (2005). Immunocytochemical localization  of  the  pathogenesis- related  PR-1  protein  in  barley  leaves after infection by Bipolaris sorokiniana. …  and  Molecular  Plant
… . https://www.sciencedirect.com/scienc e/article/pii/S0885576505000780
Sari,  W.  (2019).  Inventarisasi  Penyakit Tanaman  Padi  Pandanwangi  (Oryza Sativa  Var.  Aromatic)  Di  Beberapa Sentra Penanaman Padi Pandanwangi Kabupaten  Cianjur. AGROSCIENCE (AGSCI) , 9 (2). https://doi.org/10.35194/agsci.v9i2.7
Agro Bali : Agricultural Journal                                                                                     e-ISSN 2655-853X Vol. 7 No. 1: 155-166, March 2024 https://doi.org/10.37637/ab.v7i1.1559
Saylendra, A., Nurmayulis, N., & Ahdiani, P.
(2017).  Potensi  Pseudomonas  sp. untuk Mengendalikan Penyakit Hawar Daun  Bakteri  (Xanthomonas  oryzae pv. Oryzae) Secara In Vitro. AGROSAINSTEK:  Jurnal  Ilmu  Dan Teknologi Pertanian , 1 (1). https://doi.org/10.33019/agrosainstek. v1i1.5
Shen, M., Lim, C. J., Park, J., Kim, J. E., & ... (2020).  HOS15  is  a  transcriptional corepressor  of  NPR1-mediated  gene activation of plant immunity. Proceedings of the … . https://doi.org/10.1073/pnas.2016049
117
Sopialena, S., SOFIAN,  S., & NURDIANA,
J. (2020). Diversity of diseases of rice (Oryza  sativa)  in  Kutai  Kartanegara,
Indonesia. Asian Journal of Agriculture , 3 (2). https://doi.org/10.13057/asianjagric/g 030204
Suastika, I. B. K., Yasa, I. M. R., Kamandalu, Darmawati,  I.  A.  P.,  Sutami,  N.  P., Aryawati, & Sunanjaya, I. W. (2021).
Keragaan  Agronomi  dan  Ketahanan
Beberapa  Varietas  Unggul  Padi (Oryza Sativa L .) terhadap Serangan
Penyakit Hawar Daun Bakteri (Xanthomonas oryzae pv . oryzae) di Bali. Jurnal Agroekoteknologi Tropika , 10 (4).
Sudir, S., & Yuliani, D. (2016). Composition and  distribution  of  Xanthomonas oryzae  pv.  oryzae  pathotypes,  the pathogen of rice bacterial leaf blight in Indonesia. AGRIVITA,  Journal  of
Agricultural Science . https://agrivita.ub.ac.id/index.php/agr ivita/article/view/588
Tang, J. L., Feng, J. X., Li, Q. Q., Wen, H. X., Zhou, D. L., Wilson, T. J. G., Dow, J.
M.,  Ma,  Q.  S.,  &  Daniels,  M.  J. (1996).  Cloning  and  characterization of  the  rpfC  gene  of  Xanthomonas oryzae  pv.  oryzae:  Involvement  in exopolysaccharide  production  and virulence  to  rice. Molecular  Plant-
Microbe Interactions , 9 (7). https://doi.org/10.1094/MPMI-9-
0664
Vlot, A. C., Sales, J. H., Lenk, M., Bauer, K., Brambilla, A., Sommer, A., Chen, Y., Wenig,  M.,  &  Nayem,  S.  (2021). Systemic propagation of immunity in plants. In New Phytologist (Vol. 229, Issue 3). https://doi.org/10.1111/nph.16953 Widiyatmoko,  E.  W.,  Setiawan,  A.  W.,  & Handoko,  Y.  A.  (2022).  Evaluasi
Kestabilan Xanthomonas oryzae phages Hasil Isolasi dari Lahan Sawah Kelurahan Pulutan Kecamatan
Sidorejo  Salatiga  pada  Berbagai Kondisi  pH. Agro  Bali :  Agricultural Journal , 5 (2).
https://doi.org/10.37637/ab.v5i2.952
Xue, D., Tian, F., Yang, F., Chen, H., Yuan, X.,  &  ...  (2018).  Phosphodiesterase EdpX1 promotes Xanthomonas oryzae pv. oryzae virulence, exopolysaccharide  production,  and biofilm  formation. Applied  and  … . https://doi.org/10.1128/AEM.01717-
18
Zhang,  Y.,  &  Li,  X.  (2019). Salicylic acid: biosynthesis,
perception, and
contributions to plant immunity. Current Opinion in Plant Biology . https://www.sciencedirect.c om/science/article/pii/S136
952661830116X