Journal Syifa Sciences and Clinical Research Volume 3 Nomor 2, September 2021
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187

## Uji Efektivitas Mukolitik Ekstrak Umbi Bawang Dayak

## ( Eleutherine bulbosa (Mill) Urb)
Robiatun Rambe 1* ,Zulmai Rani 2 ,Nur Ain Thomas 3 1 Department of Pharmacy, Universitas Haji Sumatra Utara, Sumatra Utara, Indonesia.
2 Department of Pharmacy, Universitas Muslim Nusantara Al Washiyah, Jalan Guru II Medan, Sumatra Utara, Indonesia.
3 Jurusan Farmasi, Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: zulmairani85@yahoo.com

## ABSTRAK
Bawang  dayak  merupakan  tanaman  khas  Kalimantan,  dimana  bawang  dayak  secara  turun temurun  sudah  dipergunakan  oleh  masyarakat  suku  dayak  sebagai  tanaman  obat.  Secara empiris,  umbinya  dapat  digunakan  sebagai  obat  batuk.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui efek mukolitik dari ekstrak umbi bawang dayak secara in vitro dan mengetahui kisaran  konsentrasi  yang  memberikan  efek  setara  dengan  efek  asetilsistein  0,1  %.  Proses ekstraksi menggunakan metode maserasi. Larutan uji dibuat dengan konsentrasi 0,5 %, 1 % dan 1,5 % dicampurkan dengan larutan mukus-dapar fosfat pH 7 20:80. Larutan uji diinkubasi selama 30 menit pada suhu 37 o C. Kontrol positif yang digunakan adalah obat asetilsistein 0,1 % dan kontrol negatifnya adalah larutan mukus tanpa ekstrak. Nilai viskositas yang diperoleh dianalisis menggunakan uji statistic Oneway Anova dengan taraf kepercayaan 99 % (α < 0.01). Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan menunjukkan bahwa ekstrak umbi bawang dayak  dengan  konsentrasi  0,5  %,  1  %  dan  1,5  %  menunjukkan  perbedaan  signifikan  yang bermakna dan konsentrasi 0,5% pada penelitian ini menunjukkan efektivitas mukolitik yang lebih baik dibandingkan dengan kontrol positif (asetilsistein).

## Kata Kunci:
Ekstrak umbi bawang dayak, mukolitik, mukus usus sapi.
Diterima: 15-7-2021 Disetujui: 04-11-2021 Online: 08-11-2021 Diterima: 15-7-2021 Disetujui: 04-11-2021 Online: 08-11-2021 Diterima: 15-7-2021 Disetujui: 04-11-2021 Online: 08-11-2021

## ABSTRACT
Dayak  Onions are  a  typical  Borneo plant  that  have  been  used  by  generations of  Dayaks  as herbal medicine. Empirically, tubers can be used as cough medicines. The purpose of this study was  to  determine  the  mucolytic  effect  of  Dayak  onion  tuber  extract  by  in  vitro  and  the concentration range which gaves an equivalent effect with the effect of 0.1% acetylcysteine. This  study  conducted  extraction  using  maceration.  The  test  solution  was  made  with  a concentration of 0.5%, 1%, and 1.5% mixed with a mucus-phosphate buffer pH 7 20:80. The test solution  was  incubated  for  30  minutes  at  37 o C.  Further,  positive  control  used  was  0.1% acetylcysteine  drug  and  the  negative  control  was mucus  solution  without  extract.  Viscosity values obtained were analyzed using the One-way Anova statistical test with a confidence level of 99% (α < 0.01). Based on the results, it was revealed that the extract of Dayak tuber with a concentration of 0.5%, 1%, and 1.5% showed a significant difference and a concentration of 0.5%.  Mucolytic effectiveness was better than positive controls (acetylcysteine).
Copyright © 2021 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Dayak onion tuber extract, mucolytic, cow intestinal mucus
Received: 2021-07-15 Accepted: 2021-11-04 Online: 2021-11-08

## 1. Pendahuluan
Keragaman hayati tinggi dan alam berlimpah dimiliki Indonesia. Berdasarkan empiris masyarakat Indonesia sejak lama telah menggunakan bahan alam sebagai obat- obatan. Obat-obatan dari bahan alam seperti akar, umbi, batang, daun, bunga, buah, biji tersebut dipercayai dapat mencegah dan mengurangi rasa sakit penyakit tertentu, serta dapat mengobati penyakit.
Salah  satu  penyakit  yang  menimpa  masyarakat  Indonesia  adalah  batuk. Menurut  Harvey  dan  Champe  (2009) [5] batuk  secara  reflektoris  membersihkan  dan melindungi saluran nafas dan sekret, benda asing dan  zat lain. Radang pada lapisan lendir saluran pernapasan, alergi terhadap debu, asap rokok, atau uap bahan kimia dan peralihan musim penyebab adanya batuk [16].
Keberadaan  mukus  pada  saluran  pernapasan  merupakan  satu  bentuk  respon batuk. Normalnya mukus dapat melindungi paru-paru dari masuknya patogen dalam tubuh.  Ketika  mukus  terjadi  peningkatan  dapat  mengganggu  kelancaran  saluran pernafasan.  Untuk  mengurangi  mukus  tersebut,  tubuh  membutuhkan  respon  batuk. Menurut Nugroho dan Kristanti (2011) [12] susah bernafas dapat disebabkan lelah, lemah dan sianosis merupakan dampak sulitnya pengeluaran dahak. Jenis batuk terbagi atas dua yakni, batuk produktif dan non produktif. Menurut Soegihardjo dan Sinaradi (2000) batuk produktif yaitu batang tenggorokan keluar zat-zat asing dan dahak, sedangkan batuk non produktif tidak ada pengeluaran dahak dan zat asing lainnya.
Antitusif, ekspektoran, dan mukolitik merupakan jenis obat batuk berdahak dan tidak. Menurut Martin (2007) [9] antitusif atau cough suppressant seperti dekstrometorfan merupakan obat batuk yang respirasinya ditekan dan diotak terjadi penurunan aktivitas pusat  batuk. Ekspektoran seperti ammonium klorida dan gliseril guaiakoiat merupakan obat yang dapat merangsang pengeluaran dahak dari saluran pernafasan (ekspektorasi). Obat  yang  mengencerkan  sekret  saluran  pernafasan  dengan  jalan  memecah  benang- benang  mukoprotein  dan  mukopolisakarida  dari  sputum  adalah  pengertian  dari mukolitik.  Mengubah  viskositas  sputum  melalui  aksi  kimia  langsung  pada  ikatan komponen  mukoprotein  fungsi  dari  agen  mukolitik.  Bromheksin,  ambroksol,  dan asetilsistein merupakan agen mukolitik dipasaran [2].
Penelitian yang dilakukan terhadap suatu tanaman yang kurang dimanfaatkan oleh masyarakat saat ini yaitu Bawang Dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb.). Menurut BPOM  RI  (2011) [1] manfaat  dari  bawang  dayak  yang  sudah  diketahui  secara  empiris dapat  menyembuhkan  beberapa  penyakit  contohnya  penyakit  kanker  usus  dan payudara, diabetes melitus, hipertensi, menurunkan kolesterol, obat bisul, stroke, serta sakit perut pasca melahirkan. Bagian dari bawang dayak dapat dimanfaatkan seperti daun yang berkhasiat bagi wanita yang nifas sebagai obat. Adapula umbinya, berkhasiat sebagai obat salah satunya sebagai obat batuk [4].
Berdasarkan hal diatas, maka perlu dilakukannya penelitian lebih lanjut untuk membuktikan  kebenaran  khasiat  umbi  bawang  dayak  sebagai  obat  tradisional  oleh masyarakat. Oleh karenanya, perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui efektivitas mukolitik ekstrak umbi bawang dayak menggunakan mukus sapi secara in vitro.
2.  Metode
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental  dengan  melakukan  uji aktivitas mukolitik dari ekstrak umbi bawang dayak ( Eleutherine Bulbosa (L) Merr.).

## Alat dan Bahan
Adapun  alat-alat  yang  digunakan  adalah  batang  pengaduk,  bejana  maserasi, cawan  porselin,  gelas  erlenmeyer,  gelas  kimia,  gelas  ukur,  magnetic  stirer,  neraca analitik,  oven,  penangas,  pipet  tetes,  penjepit  tabung,  pH  meter,  rak  tabung  reaksi, spatula, tabung reaksi, termometer, viskometer Brookfield. Bahan yang digunakan adalah Asetilsistein,  aquadestilata,  FeCl 3 ,  ekstrak  umbi  bawang  dayak  ( Eleutherine  bulbosa L. (Merr.),  etanol  70  %,  etanol  96  %,  HCl, KH 2 PO 4 ,  Magnesium,  NaOH,  Reagen  Mayer, Tween 80.

## Ekstraksi Sampel
Sebanyak 200 gram serbuk bawang dayak ( Eleutherine bulbosa Merr.) dimaserasi menggunakan  pelarut  etanol  96%  sebanyak  2L  selama  3  x  24  jam  dengan  sesekali digoyang-goyangkan. Setelah itu, disaring filtrate dan dilakukan kembali  remaserasi. Selanjutnya  filtrate  digabungkan  untuk  diuapkan  menggunakan rotatory  evaporator dengan suhu 40°C dilanjutkan dengan tangas air sehingga menghasilkan ekstrak kental.

## Skrining Fitokimia Identifikasi Alkaloid
Sebanyak  0,5  gram  ekstrak  ditambahkan  2  mL  etanol  96%  kemudian  diaduk, ditambahkan  5  mL  HCl  2  N,  dipanaskan  pada  penangas  air.  Setelah  dingin, ditambahkan  beberapa  tetes  reagen  Mayer.  Sampel  kemudian  diamati  hingga  keruh atau ada endapan [10].

## Identifikasi Flavonoid
Sebanyak  0,5  gram  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi,  lalu ditambahkan etanol 96% sebanyak 2 mL, lalu diaduk, kemudian ditambahkan serbuk magnesium sebanyak 0,5 gram dan 3 tetes HCl pekat. Sampel berubah warna menjadi jingga  sampai  merah  menunjukkan  adanya  flavon,  merah  padam  sampai  merah keunguan menunjukkan adanya flavanon, merah sampai merah padam menunjukkan adanya flavanol [10]

## Identifikasi Saponin
Sebanyak  0,5  gram  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi,  lalu ditambahkan etanol 96% sebanyak 2 mL, kemudian diaduk, lalu ditambahkan dengan 20  mL  aquabides  dan  dikocok  kemudian  didiamkan  selama  15-20  menit.  Jika  tidak terdapat busa menunjukkan bahwa sampel negatif saponin, jika busa lebih dari 1 cm menunjukkan  positif  lemah,  jika  terdapat  busa  dengan  tinggi  1,2  cm  menunjukkan positif saponin, dan jika busa lebih besar dari 2 cm menunjukkan positif kuat [10]

## Identifikasi Tanin
Sebanyak 0,5 gram ekstrak dimasukkan dalam tabung reaksi ditambahkan 2 mL etanol 96% kemudian diaduk, ditambahkan FeCl 3 sebanyak 3 tetes, menunjukkan adanya tannin apabila berubah warna menjadi hijau atau biru-hijau, biru karakteristik, biru-hitam dan endapan [10].

## Pembuatan larutan Uji
Dibuat  larutan  uji  dengan  berbagai  variasi  konsentrasi  0,5  %,  1  %  dan  1,5% kemudian dicampurkan dan dilarutkan dengan tween 80 (0,5%) dalam mukus dapar fosfat  20%  sampai  diperoleh  berat  50  gram.  Selanjutnya  campuran  tersebut  diaduk hingga homogen. Masing-masing larutan uji dilakukan replikasi 3 kali.

## Uji Efektivitas Mukolitik Secara In Vitro
Pengujian  efek  mukolitik  diuji  secara in  vitro dengan  menggunakan  alat viscometer Brookfield spindle  no.  6  dengan  kecepatan  50  rpm.  Sebelumnya,  sampel diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37 o C.  Pada  saat  pengukuran,  sampel  uji ditempatkan pada oven dan dijaga suhunya pada 37 ± 0,5 o C). Pengukuran dilakukan sebanyak  3  kali  untuk  masing-masing  sampel  uji  kemudian  hasil  pengukuran dibandingkan dengan hasil pada kontrol positif dan kontrol negatif.

## Analisis Data
Setelah  didapatkan  hasil  data,  selanjutnya  untuk  mengetahui  perbedaan bermakna  antara  kontrol  positif,  kontrol  negatif,  konsentrasi  0,5%,  1%  dan  1,5% digunakan uji statistik One way Anova  (α = 0,01) dengan taraf kepercayaan 99%.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Skrining Fitokimia
Tabel 1. Skrining Fitokimia Ekstrak Umbi Bawang Dayak Senyawa Pereaksi Hasil Alkaloid HCl + Pereaksi Mayer (+) Endapan hitam dan warna keruh Flavonoid Mg + HCl (+) Warna merah padam Saponin Aquadest (+) Adanya busa setinggi 1 cm Tanin FeCl 3 (+) Warna hijaun mendominasi hitam
Tabel 1. menunjukkan bahwa ekstrak umbi bawang dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill.) Urb) mengandung alkaloid, flavonoid, saponin dan tannin. Hal ini dapat dilihat pada tabel diatas ketika ekstrak tersebut direaksikan dengan beberapa pereaksi sampai hasilnya positif mengandung senyawa yang dituju.

## Uji Efektivitas Mukolitik Secara In Vitro
Tabel 2. Hasil Uji Efektivitas Mukolitik Umbi Bawang Dayak secara In Vitro
Sampel Uji Waktu Viskositas (Cps) Rata-rata Standar Deviasi I II III Kontrol Negatif Ƞ 0 2340  2220  2310 2290 ± 65, 57 Ƞ 30 1840  1800  1760 1800 Ƞ 30 - Ƞ 0 500 420 550 490 Kontrol Positif Ƞ 0 2340  2220  2310 2290
Ƞ 30 1140  1100  1080 1106 ± 56, 86 Ƞ 30 - Ƞ 0 1200  1120  1230 1183 Ekstrak 0,5 % Ƞ 0 2340  2220  2310 2290 ± 15, 27 Ƞ 30 1020  920 980 973 Ƞ 30 - Ƞ 0 1320  1300  1330 1316 Ekstrak 1 % Ƞ 0 2340  2220  2310 2290 ± 35, 11 Ƞ 30 980 900 920 933 Ƞ 30 - Ƞ 0 1360  1320  1390 1356 Ekstrak 1,5 % Ƞ 0 2340  2220  2310 2290 ± 50,00 Ƞ 30 960 940 980 960 Ƞ 30 - Ƞ 0 1380  1280  1330 1330 Keterangan : Ƞ 0 : Viskositas setiap sampel uji sebelum diberi perlakuan
Ƞ 30
: Viskositas setiap sampel uji setelah diberi perlakuan
Ƞ 30 - Ƞ 0 : Perubahan viskositas tiap sampel uji Kontrol Negatif   : Tanpa ekstrak umbi bawang dayak Kontrol positif : Menggunakan obat mukolitik asetilsistein 0,1 % 200 mg

## Pembahasan
Skrining Fitokimia
Sebanyak 200 gram sebuk umbi bawang dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill) Urb) diekstraksi menggunakan etanol 96 % sebanyak 2 Liter dengan menggunakan metode maserasi selama 3 x 24 jam. Menurut Heinrich (2004) [6] metode ini dipilih dikarenakan metode  maserasi  merupakan  salah  satu  ekstraksi  dingin  sehingga  memungkinkan banyak senyawa terekstraksi, meskipun beberapa senyawa memiliki kelarutan terbatas dalam pelarut ekstraksi suhu kamar. Disamping itu pula, metode maserasi ini dipilih karena  keuntungannya dari  segi  prosedur  dan peralatan  yang  digunakan  sederhana, serta tidak memerlukan pemanasan sehingga bahan alam tidak menjadi terurai. Pada penelitian  ini  menggunakan  pelarut  etanol  96  %  dikarenakan  menurut  Indradmojo (2016) [7] lebih  mudah  melarutkan  semua  zat  yang  bersifat  polar,  semipolar  dan    non polar karena gugus OH dalam etanol membantu melarutkan molekular polar dan ion- ion  dan  gugus  alkilnya  CH 3 CH 2 -  dapat  mengikat  bahan  non  polar,  sehingga  pelarut etanol dapat melarutkan senyawa-senyawa bioaktif. Selain itu, etanol juga merupakan pelarut yang cenderung aman, tidak beracun dan tidak berbahaya [11].
Skrining fitokimia ekstrak umbi bawang dayak meliputi uji alkaloid, flavonoid, saponin dan tannin (Tabel 1). Adapun tujuan dilakukannya uji tersebut karena menurur Gairola  et  al  (2010) [3] bahwa  senyawa  kimia  yang  diduga  memiliki  aktivitas  mukolitik adalah saponin, tannin, flavonoid dan alkaloid. Berdasarkan hasil pengujian menunjukkan bahwa  ekstrak  kental  umbi  bawang  dayak  ( Eleutherine  bulbosa (Mill)  Urb)  positif mengandung  alkaloid,  flavonoid,  tannin  dan  saponin  berdasarkan  pengujian  secara kualitatif.  Hal  ini  sudah  sesuai  dengan  literatur  menurut  Puspadewi  (2013) [13] dalam penelitiannya  hasil  skrining  fitokimia  umbi  bawang  dayak  menunjukkan  bahwa  umbi bawang  dayak  mengandung  alkaloid,  flavonoid,  kuinon,  polifenol,  steroid, monoterpenoid dan tannin.

## Uji Efektivitas Mukolitik Secara In Vitro
Dilakukan pengujian efek mukolitik secara in vitro dengan mengukur perubahan viskositas  mukus  usus  sapi.  Tujuan  dilakukanya  secara  in  vitro  menurut  Kurniati (2018) [8] untuk memantau secara cepat aktivitas tanaman uji sebagai mukolitik dan tidak menggunakan hewan uji. Hasil pengukuran dibandingkan dengan hasil pada kontrol positif dan kontrol negative (Tabel 2). Campuran mukus dibuat dalam larutan dapar fosfat  pH  7  dengan  perbandingan  20:80.  Pengukuran  dilakukan  dengan  menghitung efek mukolitik menggunakan alat viskometer Brookfield spindle no. 6 dengan kecepatan 50 rpm. Tujuan digunakannya viscometer Brookfield pada penelitian ini dikarenakan berdasarkan  sifat  aliran,  karena  mukus  memiliki  sifat  alir  non-newton  tipe pseudoplastis. Pseudoplastis adalah sifat alir yang berkebalikan dengan plastis dimana viskositasnya cenderung menurun tetapi stear streo dari fluida meningkat. Sebelumnya,  sampel  diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37 o C.  Pada  saat pengukuran, sampel uji ditempatkan pada oven dan dijaga suhunya pada 37 ± 0,5 o C). Menurut  Via  dkk  (2017) [17] dilakukannya  inkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37 o C menurut literatur agar didapat suatu kondisi reaksi antara larutan uji dengan mukus sesuai dengan kondisi fisiologis suhu tubuh manusia. Saat pengujian berlangsung suhu dijaga  agar  tetap  37°C  karena  kekentalan  akan  menurun  dengan  naiknya  suhu  atau sebaliknya, sehingga pengukuran menjadi kurang tepat. Karena itu suhu harus tetap dijaga  supaya  viskositas  mukus  tetap  stabil.  Selanjutnya  pengukuran  dilakukan sebanyak  3  kali  untuk  masing-masing  sampel  uji.  Replikasi  adalah  pengulangan kembali perlakuan yang sama pada eksperimen dengan kondisi eksperimen yang sama pula. Tujuan dilakukannya replikasi untuk mengurangi kesalahan dari eksperimen itu sendiri [16].
Setelah pengujian yang telah dilakukan, didapatkan hasil pengukuran masing- masing  sampel  uji  yang  telah  direplikasi.  Dimana  pada  kontrol  negatif  hasil  yang didapatkan (1840, 1800, dan 1760), kontrol positif (1140, 1100 dan 1080), konsentrasi 0,5% (1020,920, dan 980), konsentrasi 1% (980, 900 dan 920) dan konsentrasi 1,5% (960,940 dan 980).    Dari  hasil  tersebut,  konsentrasi  0,5%  mengalami  penurunan  viskositas  yang tergolong  rendah,  konsentrasi  1  %  mengalami  penurunan  viskositas  yang  tergolong kuat dan 1,5 % terjadi penurunan viskositas.tergolong sedang.
Berdasarkan  perubahan  nilai  viskositas  mukolitik  dari  masing-masing konsentrasi  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  umbi  bawang  dayak  memiliki kemampuan mukolitik yang lebih tinggi dengan komposisi ekstrak 1%. Hal ini sudah sesuai dengan literatur dimana menurut Setyawati (2004) [15] semakin besar konsentrasi dan  semakin  lama  waktu  uji  maka  semakin  kecil  viskositasnya,  yang  artinya  pada sampel tersebut dapat menurunkan tegangan permukaan sehingga adesi mukus pada bronkus  menurun  dan  semakin  kecil  nilai  viskositas  dari  senyawa  uji  tersebut  maka senyawa tersebut semakin efektif sebagai mukolitik.

## Analisis Data
Hasil uji analisis oneway anova dengan taraf kepercayaan 99% dengan nilai (α > 0,01) yang  didapat  menunjukkan  nilai  dari  uji  viskositas  didapatkan  bahwa  kontrol negatif berbeda nyata dengan sampel uji yang mengandung kontrol positif. Sedangkan kontrol positif hasilnya tidak berbeda nyata terhadap ekstrak 1 %, dan berbeda nyata dengan ekstrak 0,5% dan 1,5%. Dapat disimpulkan bahwa ketiga konsentrasi ekstrak memiliki  efektivitas  mukolitik,  tetapi  pada  konsentrasi  0,5%  memiliki  efek  mukolitik lebih baik dibandingkan dengan asetilsistein 0,1 %.

## 4.  Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  maka  dapat  disimpulkan bahwa ekstrak umbi bawang dayak ( Eleutherine bulbosa (Mill) Urb) memiliki efektivitas sebagai mukolitik. Konsentrasi  ekstrak umbi bawang dayak yang dapat memberikan efek mukolitik dari ketiga konsentrasi tersebut yang paling baik adalah 0,5%. Referensi
[1]     Badan Pom RI, 2011. Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia  Nomor  HK.03.1.23.08.11.07331  Tahun  2011  Tentang  Metode  Analisis Kosmetika. Jakarta : BPOM
[2]  Estuningtyas, A., Azalia Arif. 2008. Obat Lokal. In Farmakologi dan Terapi. Edisi V . Jakarta: Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia
[3]  Gairola  S,  Gupta  V,  Bansal  P,  Singh  R,  Mathani  M.  2010. Herbal  Antitusive  and Expectorant-a  review . International  Journal  Of  Pharmaceutical  Sciences  Review  and Research
[4]  Galingging, R. Y. 2009. Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia) Sebagai Tanaman Obat Multifungsi. Warta Penelitian dan Pengembangan Vol 15, No 3, Halaman 2-4.
[5]  Harvey,  R.  A.  dan  Champe,  P.C.,  2013 ,  Farmakologi  Ulasan  Bergambar,  Edisi  4,C. Ramadhani, Dian [et al], Tjahyanto, Adhi, Salim, ed., Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
[6]  Heinrich, M., Barnes, J., Gibbons, S., dan Williamson, E.M. 2004. Fundamentals of Pharmacognosy and phytotherapy. United Kingdom: Churchill Livingstone.
[7]  Indradmojo,  d.  2016. Perkembangan  Obat  Tradisional  Indonesia  Menjadi Fitofarmakaproblem dan Pengatasannya. Jakarta: Jamu Indonesia
[8]  Kurniati  N,  Deden  Winda,  Safira  Yuniati.  2018. Aktivitas  Mukolitik  Kombinasi Ekstrak    Etanol Daun Sirih Merah . Bandung: ITB
[9]    Martin. 2007. Out of thin air . Nature 445: 610–612.
[10]  Mojab, F., Kamalinejad, M., Ghadeni, N., dan Vahidipour, H. R. 2003. Phytocemical Screening  Of  Some  Species  Of  Iranian  Plants. Iranian  Journal  Of  Pharmaceutical Research.
[11]  Munawaroh,  S.  ,  Handayani,  Astuti  P.  2010. Ekstraksi  Minyak  Daun  Jeruk  Purut (Citrus hystrix D.C.) Dengan Pelarut Etanol dan N-Heksana . Jurnal Kompetensi Teknik.
[12]  Nugroho T, Kristanti. 2011. Asuhan Keperawatan Maternitas Anak, Bedah dan Penyakit dalam. Yogyakarta : Nuha Medika
[13]  Puspadewi, R., Putranti Adirestuti., Rizka Menawati. 2013. Khasiat Umbi Bawang Dayak  (Elelutherine  palmifolia  (L)  Merr.)  Sebagai  Herbal  Antimikroba  Kulit . Yogyakarta: Universitas Jenderal Achmad Yani
[14]  Setyawati, D.R. 2004. Uji Aktivitas Mukolitik Larut Air dan Larut Etanol 70% dan Identifikasi  Senyawa  Kulit  Akar  Senggugu  (Clerodendrum  serratum (L)  Monn). Yogyakarta: Skripsi Fakultas Farmasi UGM.
[15]  Soegihardjo  dan  Sinaradi.  2000. Mencegah  Penyakit  Lebih  Mudah  Dari  Pada Mengobati Penyakit. Yogyakarta: Universitas Sanata Dharma.
[16]  Triyanto, E. 2012. Strategi Pelayanan Keperawatan Bagi Penderita Aids. Yogyakarta: Graha Ilmu
[17]  Via  Fitria,  Rian  Ismail,  Daut  Nugraha.  2017. Uji  Aktivitas  Mukolitik  Infusa  Daun Karuk Pada Mukus Usus Sapi Secara In Vitro. Jawa Barat: STIKES Muhammadiyah Ciamis.