## Jurnal Pendidikan Biologi Undiksha
p-ISSN : 2599-1450 e-ISSN : 2599-1485 Volume 8 Nomor 2 Tahun 2021 Open Acces : https://ejournal.undiksha.ac.id/index.php/JJPB/index
Isolasi  dan  identifikasi  kapang Rhizopus  pada  tempe  kacang merah (Phaseulus vulgaris L)
Elmalinda Moensaku 1 , Yuni Sine 2,* , Lukas Pardosi 3
1 Mahasiswa Studi Biologi, Fakultas Pertanian, Universitas Timor, Kefamenanu,TTU
2,3 Dosen Fakultas Pertanian, Universitas Timor, Kefamenanu, TTU Correspondent Author: * sineyuni@gmail.com

## Abstract
Tempeh is an indonesian product that is fermented by Rhizopus oligosporus. Red beans (Phaseolus vulgaris L) have the potential to be processed into tempeh. The purpose of this study was to determine the macroscopic character of dilution of  red  bean  tempeh,  to  determine  the  morphological  characters  both  macroscopically  and  microscopically  in  red  bean tempe, to determine the potential of Rhizopus mold in inhibiting pathogens. This research was carried aut in January-March 2021  at  the  Agricultural  Laboratory  Of  The  University  Of  Timur.  Red  bean  tempeh  was  isolated  and  identified  using  the serial dilutiom method and spread plate. The results showed that there werw 3 isolates used for the identification process. Red  bean  tempeh  as  a  growth  substrate  for  Rhizopus  sp.  Tempe  mold  was  dominated  by  gray-white  mold  which  was identified  as  similar  to  Rhizopus  oligosporus.  Rhizopus  sp  was  antagonistic  against  the  test  bacteria,  which  produced  an inhibition zone of 20 mm against Escherichia coli, 27mm against Staphylococcus aureus. Based on these results, it can be concluded that the molds in red bean tempeh are fermented by Rhizopus oligosporus and Rhizopus are antagonistic against pathogenic bacteria. The results of this study strengthen the benefits of tempeh as a functional food.
Keywords : Fermentation, Red Bean, Tempeh, Rhizopus, Antibacteria Activity.

## Abstrak
Tempe merupakan produk Indonesia yang difermentasi oleh Rhizopus oligosporus . Kacang merah ( Phaseolus vulgaris L) berpotensi untuk diolah menjadi tempe. Tujuan dari penelitian ini mengetahui karakter makroskopis pengenceran tempe kacang merah, mengetahui karakter morfologi baik secara makroskopis dan mikroskopis tempe kacang merah, mengetahui potensi  kapang Rhizopus dalam  menghambat  patogen.  Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Januari-Maret  2021  di Laboratorium Pertanian Universitas Timor. Tempe kacang merah diisolasi dan diidentifikasi dengan menggunakan metode pengenceran  berseri  dan spread  plate. Hasil  penelitian  menunjukan  bahwa  terdapat  3  isolat  yang  digunakan  untuk  proses identifikasi.  Tempe  kacang  merah  sebagai  substrat  pertumbuhan Rhizopus sp .  Kapang  tempe  didominasi  oleh  kapang berwarna putih keabu-abuan yang diidentifikasi mirip dengan Rhizopus oligosporus . Rhizopus sp bersifat antagonis terhadap bakteri  uji,  yaitu  menghasilkan  zona  hambat  sebesar  20  mm  terhadap Escherichia  coli ,  27  mm  terhadap Staphylococcus aureus. Berdasarkan hasil penelitian tersebut dapat disimpulkan bahwa kapang pada tempe kacang merah difermentasi oleh Rhizopus  oligosporus dan Rhizopus bersifat  antagonis  terhadap  bakteri  patogen.  Hasil  penelitian  ini  menguatkan  manfaat tempe sebagai pangan fungsional.
Kata kunci: Fermentasi, Kacang Merah, Tempe, Rhizopus, Aktivitas Antibakteri.

## Pendahuluan
Tempe  adalah  salah  satu  produk  fermentasi  yang  umumnya  berbahan  baku  kedelai yang  difermentasi  dan  mempunyai  nilai  gizi  yang  baik.  Fermentasi  pada  pembuatan  tempe terjadi  karena  aktivitas  kapang Rhizopus  oligosporus .  Fermentasi  pada  tempe  dapat
menghilangkan  bau  langsung  dari  kedelai.  Kapang  yang  terlibat  dalam  fermentasi  tempe tidak  memproduksi  toksin,  bahkan  mampu  melindungi  tempe  dari  aflatoksin.  Tempe mengandung  senyawa  antibakteri  yang  diproduksi  oleh  kapang  selama  proses  fermentasi (Dewi,  2011).  Tempe  mengandung  nutrisi  yang  cukup  tinggi,  beberapa  penelitian menunjukkan  bahwa  zat  gizi  tempe  lebih  mudah  dicerna,  diserap,  dan  dimanfaatkan  oleh tubuh dibandingkan dengan zat gizi kedelai yang dikonsumsi secara langsung (Dwinaningsih, 2010).
Proses  fermentasi  tempe  mikrobia  strain-strain  anggota  spesies  Rhizopus  yang  terlibat adalah Rhizopus  oligosporus,  R.  oryzae,  R.  stolonifer (kapang  roti),  atau R.  arrhizus.  R. oligosporus dan R. oryzae adalah strain anggota spesies Rhizopus yang paling dominan dan merupakan komponen yang paling penting dalam fermentasi tempe ( Sine & Soetarto, 2018 ), hal  ini  karena R.oligosporus dan R.  oryzae mempunyai  karakteristik  yang  sangat  berperan dalam fermentasi tempe.
Indonesia merupakan negara produksi tempe terbesar didunia, konsumsi tempe rata-rata per  orang  per  tahun  di  Indonesia  semakin  meningkat,  namun  kedelai  bukanlah  sumber penghasilan  utama  bagi  sebagian  besar  petani  Indonesia.  Petani  Indonesia  lebih  banyak membudidayakan  kacang-kacang  lain  contohnya  kacang  merah.  Penelitian  ini  dilakukan untuk  mengetahui  bentuk  koloni  kapang Rhizopus pada  tempe  kacang  merah,  mengetahui karakter  morfologi  baik  secara  makroskopis  dan  mikroskopis  tempe  kacang  merah, mengetahui potensi kapang Rhizopus dalam menghambat patogen (Wiyono, 2012).

## Metode

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  erlenmeyer,  tabung  reaksi,  cawan  petri,  pipet tetes,  gelas  ukur,  timbangan  digital,  bunsen,  mortar  dan  alu,  rak  tabung,  tabung,  mikroskop cahaya,  spatula,  pipet  mikro,  inkubator,  oven,  penggaris,  dan  camera,  aluminium  foil,  kaca objek, kaca penutup, jangka sorong.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  :  Kacang  merah  ( Phaseolus  vulgaris L). Mikroba Rhizopus sp yang berasal dari kultur inokulum tempe. Potato Dextrose Agar (PDA), Mueller  Hinton  Agar (MHA),  tissu,  wrapping,  aquades,  methylenblue,  gliserol,  kapas  lidih, alkohol 70%.

## Isolasi Jamur Tempe
Untuk  mengidentifikasi  terlebih  dahulu  dilakukan  isolasi  pada  tempe  kacang  merah. Sebanyak  10  g  sampel  tempe  yang  telah  dihaluskan  dilarutkan  dalam  3  tabung  berisi  9  ml aquadest  steril  dan  divorteks  (diperoleh  pengenceran  10 -1 dari  masing-masing  perlakuan). Dari  masing-masing  perlakuan  tersebut  diambil  1  ml  dan  dilarutkan  dalam  9  ml  aquadest steril  pada  tabung  reaksi  sehingga  diperoleh  pengenceran  10 -2 dan  dilakukan  sampai pengenceran  10 -3 dan  divorteks  hingga  homogen.  Hasil  pengenceran  dari  masing-masing tabung diambil 0,1 ml diinokulasi ke dalam petridis yang berisi media PDA. Masing-masing petridis diinkubasi pada 30°C selama 24 jam.

## Pemurnian
Koloni yang tumbuh kemudian diambil untuk dipurifikasi hingga diperoleh kultur murni. Purifikasi kultur dilakukan dengan cara mengambil hifa atau spora dari koloni kapang yang dipilih  dengan  menggunakan  ose  yang  sebelumnya  telah  dipanaskan  terlebih  dahulu  hingga
pijar.  Melakukan  pemindahan  isolat  (pemurnian)  diulang  sehingga  menjadi  isolat  murni (Hocking & Pitt, 1984).

## Identifikasi Kapang Rhizopus
Biakan isolat yang telah murni kemudian diamati secara makroskopis dan mikroskopis untuk proses identifikasi. Pengamatan secara makroskopis dilakukan terhadap warna, bentuk, tepi,  elevasi,  ukuran  pada  petridis.  Pengamatan  secara  mikroskopis  dilakukan  dengan membuat preparat jamur. Disiapkan gelas benda, lalu diberi 1 tetes gliserol. Diambil hifa dan spora  dari  petridis  dengan  jarum  ose  dan  diletakkan  pada  tetesan  gliserol,  hifa  yang menggumpal  dipisahkan  dengan  jarum  ose.  Diberi  1  tetes  larutan  pewarna  methylenblue dicampur secara merata dengan gliserol, didiamkan selama beberapa menit, kemudian ditutup dengan gelas penutup. Pewarna yang keluar dari gelas penutup dihisap dengan kertas tissue. Pengamatan morfologi seluler kapang dilakukan di bawah mikroskop dengan perbesaran 10 x10.  Dengan  melakukan  pengamatan  terhadap  bentuk  konidia,  bentuk  spora  dan  jenis  hifa, bentuk kolumela, tekstur sporangiofor, warna konidia, rhizoid (Sine & Soetarto, 2018) .

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  uji  antagonisme  menggunakan  metode difusi  agar.  Disediakan  medium Mueller  Hinton  Agar (MHA)  diinokulasikan  bakteri  uji dengan  membentuk  goresan  padat  pada  agar.  Pada  isolat  jamur  tempe  yang  telah  tumbuh pada  media  PDA,  diambil  sedikit  bagian  agar  yang  telah  ditumbuhi  kapang  dengan menggunakan lingkaran tabung durham steril, kemudian bagian agar tersebut diletakkan pada bagian  tengah  medium Mueller  Hinton  Agar (MHA)  yang  telah  diinokulasikan  bakteri  uji. Inkubasi  dilakukan  selama  24  jam,  untuk  kemudian  diamati  diameter  zona  hambat  yang terbentuk (Virgianti, 2015).

## Hasil dan Pembahasan

## 1. Pengamatan makroskopis dan mikroskopis hasil isolasi tempe kacang merah.
Kapang  diisolasi  dari  tempe  kacang  merah  diperoleh  3  isolat  kapang  dengan  isolat berkonidia  putih  abu-abu  yang  diberi  kode  KMU1,  KMU2,  dan  KMU3.  Hasil  isolasi dikelompokan  berdasarkan  warna  konidia,  pertumbuahan  miselium  dan  konidia  pada media Potato Dextrose Agar (PDA).
Tabel 2. Pengamatan  karakter makroskopis kapang tempe kacang merah.
No. Kode isolat Gambar isolate
Warna konidia
Pengamatan pada media PDA Miselium Konidia 1. KMU1 Putih keabu-abuan +++ +++ 2. KMU2 Putih keabu-abuan +++ +++
3. KMU3
Putih keabu-abuan
+++ +++
Keterangan : +++ (Sangat lebat) menutupi media PDA.
Berdasarkan tabel  2 hasil isolasi pada penelitian ini  menunjukan warna isolat  kapang pada tempe kacang merah berwarna putih abu-abuan. Dari 3 isolat dipilih untuk dilakukan identifikasi  sampai  tingkat  spesies  untuk  diperoleh  isolat Rhizopus  Oligosporus .  Pada waktu  48  jam  inkubasi  setelah  lebih  dari  72  jam  koloni  mulai  berubah  menjadi  abu-abu kecoklatan.  Hal  ini  menunjukan  adanya  keterkaitan  antara  kapang  berkonidia  abu-abu kecoklatan  dengan  tempe.  Sine  &  Soetarto  (2018)  menjelaskan  bahwa Rhizopus oligosporus dan Rhizopus  oryzae memiliki  konidia  dengan  warna  abu-abu  kecoklatan. Stok isolat tersebut secara umum dikenal sebagai ragi tempe adalah Rhizopus oligosporus dan Rhizopus  oryzae .  Pertumbuhan  kapang  tempe  sangat  cepat  pada  waktu  ±  48  sudah tumbuhan  memenuhi  petridis.  Hernawati  &  Meylani  (2019)  menjelaskan  bahwa  kapang dari berbagai merk tempe menunjukan bahwa inokulum yang digunakan merupakan genus Rhizopus dengan  konidia  abu-abu  kecoklatan  seperti Rhizopus  oligosporus. Wipradnyadewi  dkk,  2010  juga  menjelaskan  bahwa  kapang  dengan  berkonidia  abu-abu kecoklatan  merupakan  kapang  yang  selalu  dijumpai  dari  setiap  merk  tempe.  Virgianti (2015)  menjelaskan  bahwa  ciri-ciri  koloninya  mempunyai  miselium  seperti  kapas, berwarna putih abu-abu menyebar menutupi cawan petri, warna koloni kapang bagian atas putih tetapi terjadi pemusatan ketebalan pada bagian tengah dan pinggir koloni lebih tipis. Warna bagian bawah koloni koloni kapang berwarna putih krem (Gambar 2).

## A
B
Gambar  1.  Morfologi  koloni  jamur  tempe  bagian  atas  (A)  dan  bagian  bawah  koloni kapang (B)
Hasil  pengamatan  makroskopis  kapang  pada  tempe  (gambar  3)  menunjukan  3  isolat memilik karakter mirip dengan Rhizopus oligosporus.
Tabel 3. Pengamatan makroskopik dan mikroskopik hasil isolasi tempe.
Karakter KMU1 KMU2 KMU3 R. oligosporus Warna konidia Hitam  keabu- abu Hitam  keabu- abu Hitam  keabu- abuan Hitam keabu- abuan*
Warna miselium Putih Putih Putih Putih* Tekstur sporangiofor Halus Halus Halus Halus * Bentuk kolumela Globose Globose Globose Globose * Bentuk konidia Globose Globose Globose Globose * Rhizoid Berlawanan arah  dengan sporangiofor dan pendek Berlawanan arah  dengan sporangiofor dan pendek Berlawanan arah  dengan sporangiofor dan pendek Berlawanan  arah dengan sporangiofor  dan pendek* Bentuk koloni Bulat Bulat Bulat Bulat * Jenis hifa Tidak bersekat Tidak bersekat Tidak bersekat Tidak bersekat * Bentuk  kepala spora Bulat Bulat Bulat Bulat * Teridentifikasi sebagai: R. oligosporus R. oligosporus R. Oligosporus
Sumber : Sine & Soetarto (2018)* A B
Gambar  2.  Pengamatan  makroskopis  kapang  tempe,  hifa,  stolon,  sporagiofor  dan rizoid (A), Sporangium dan spora (B).
Berdasarkan  tabel  3  hasil  pengamatan  kapang  menunjukan  mirip  dengan Rhizopus oligosporus yang  diduga  mirip  dengan  penelitian  Sine  &  Soetarto  (2018).  Kapang Rhizopus oligosporus berwarna putih abu-abu dan saat lebih dari 72 jam berwarna hitam abu-abu. Sporagium berbentuk bulat, sporagiofor tunggal muncul berlawanan arah dengan Rhizoid  yang  sangat  pendek,  tekstur  sporangiofor  halus,  kolumela  berbentuk  globose, bentuk hifa tidak bersekat dan bentuk kepala spora bulat.
Ciri  –ciri Rhizopus  oligosporus dan Rhizopus  oryzae dijelaskan  Sine  &  Soetarto (2018)  yaitu Rhizopus  oligosporus berwarna  putih  abu-abu.  Sporagiofor  tunggal  atau kelompok  berwarna  subhilialin  hingga  kecoklatan  muncul  berlawanan  arah  dengan
Rhizoid yang sangat pendek, berdinding halus atau agak kasar sporangia berbentuk bulat berwarna  hitam  kecoklatan  pada  saat  matang.  Kolumela  berbentuk  bulat  dengan  bentuk semi bulat. Sporagiospora berbentuk bulat, elips, atau tidak beraturan spesies ini memiliki suhu 30 o c-35 o c minimum 12 o c dan maksimal 42 o c. Sedangkan Rhizopus  oryzae koloni  berwarna  keputian  dan  menjadi  abu-abu kecoklatan dengan bertambah usia biakan stolon berdinding halus atau agak kasar hampir tidak  berwarna  hingga  coklat  kekuningan  Rhizoid  berwarna  kecoklatan  bercabang belawanan arah dengan sporangiofor atau muncul langsung dari stolon tanpa ada Rhizoid. Sporagiofor  dapat  tunggal  dan  berbentuk  struktur  seperti  garfu,  berdinding  halus. Sporangia  berbentuk  bulat  hingga  semi  bulat,  dinding  berduri  berwarna  coklat  gelap hingga  coklat  kehitaman.  Kolumela  berbentuk  bulat  tidak  beraturan.  Khamidiospora berbentuk bulat berbentuk elips dan silendras (Sine & Soetarto 2018). Para ahli bersepakat bahwa  fakta  membuktikan  bahwa  yang  utama  berperan  dalam  proses  fermentasi  adalah Rhizopus oligosphorus (Babu dkk, 2009).

## 2. Pengamatan antagonis kapang tempe (Rhizopus sp) terhadap bakteri patogen.
Hasil  pengujian  aktivitas  antagonis  antibakteri  kapang  tempe  yang  dilakukan dengan  metode  difusi  agar  diperoleh  hasil  bahwa  tempe  yang  diisolasi  menghasilkan zona hambat yang cukup kuat terhadap pertumbuhan bakteri uji Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .
Tabel    4.  Diameter  zona  hambat  uji  aktivitas  antagonis  antibakteri  kapang  tempe terhadap bakteri uji Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
Bakteri Uji Diameter Zona Hambat (mm) Rata-rata Ulangan 1 Ulangan 2 Escherichia coli 20 20 20 mm Staphylococcus aureus 25 29 27 mm
Berdasarkan tabel 4 zona hambat kapang yang terlihat dari zona bening yang terbentuk dari  kapang  tempe  terhadap  bakteri  patogen Escherichia  coli memiliki  zona  hambat  20 mm dan Staphylococcus aureus 27 mm maka besarnya zona hambat menunjukan bahwa isolat Rhizopus sp  tersebut  menghambat  suatu  senyawa  bioaktif  yang  bersifat  antibakteri terhadap bakteri uji (Gambar 4).
Gambar 4.  Diameter zona hambat yang dihasilkan oleh isolasi kapang tempe terhadap bakteri  uji Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus pada Mueller Hinton Agar dengan metode difusi agar.
Diameter  zona  hambat  terlihat  dari  zona  bening,  semakin  luas  zona  bening  maka semakin  besar  suatu  bahan  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri  (Rahmawati  dkk, 2011).  Virgianti,  (2015)  menjelaskan  bahwa  kemampuan Rhizopus  oligosporus dalam menghasilkan senyawa antibakteri mampu menghambat pertumbuhan beberapa bakteri.
Datta  dkk,  2019  Menyatakan  bahwa  diameter  zona  hambat  pada  masing-masing konsentrasi  dapat  diakibatkan  karena  adanya  perbedaan  besar  kecilnya  konsentrasi  atau banyak  sedikitnya  kandungan  zat  aktif  antibakteri  yang  terkandung  di  dalamnya  serta kecepatan  difusi  dari  senyawa  antibakteri.  Semakin  besar  konsentrasi  antimikroba,  maka semakin  cepat  terjadi  difusi,  sehingga  daya  antibakteri  akan  semakin  besar  dan  diameter zona hambat yang dihasilkan semakin luas.
Diameter zona hambat yang diperoleh pada pengujian relatif kuat karena mempunyai diameter yang cukup besar. Interpretasi zona hambat antibiotik terhadap bakteri uji dapat dikategorikan antara rentangan resisten, intermediet dan susceptible. Berdasarkan NCCLS (2020)  bahwa  untuk  bekteri  Enterobacteriaceae  dapat  dikatakan  susceptible  (rentan) apabila  zona  hambat  yang  dihasilkan  pada  pengujian  dengan  metode  difusi  agar  oleh antibiotik  ampicilin    ≥  17mm,  dengan  antibiotik  kloramfenikol    ≥  18  mm,  dengan antibiotik contrimoxazol  ≥ 16 mm, dengan antibiotik ciprofloxacin  ≥ 21 mm, dan dengan antibiotik nalidixic acid ≥ 19 mm.

## Penutup
Berdasarkan  permasalahan  yang  diangkat  dalam  penelitian  saya  yang  berjudul “Isolasi dan Identifikasi Kapang Rhizopus Pada Tempe Kacang Merah ( Phaseolus vulgaris
L. ) maka dapat  disimpulkan sebagai berikut:
1. Berdasarkan karakter morfologi baik  secara makroskopis dan mikroskopis diperoleh 3 isolat kapang berkonidia Hitam abu-abuan telah diidentifikasi termasuk dalam Rhizopus oligosporus .
2. Berdasarkan uji antagonis kapang tempe Rhizopus terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus diperoleh rata-rata diameter zona hambatyang cukup kuat pada bakteri Escherichia  coli 20  mm  dan Staphylococcus  aureus 27  mm  sehingga  kapang Rhizopus tersebut bersifat antagonis terhadap bakteri patogen.

## Saran
Saran yang dapat disampaikan dalam penelitian ini ialah sebagai berikut :
1. Untuk penelitian selanjutnya dapat menggunakan kacang-kacang lokal daerah.
2. Bagi penelitian selanjutnya dapat meneliti lanjut nilai gizi tempe kacang merah.
3. Bagi  penelitian  selanjutnya  Perlu  dilakukan  penelitian  lanjut  mengenai  kapang R. oligosporus pada pembuatan tempe secara spesifik.
4. Memberi  sumbangan  pemikiran  bagi  petani  dalam  berbagai  potensi  lokal  di  masing- masing daerah.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terimakasih  penulis  sampaikan  kepada  pembimbing  utama  :  Ibu  Yuni  Sine S.Si.,  M.Sc  dan  pembimbing  pendamping  :  Bapak  Lukas  Pardosi  S.Pd.,M.Si  yang  telah dengan sabar membimbing dan mengarahkan penulis sehingga artikel ini dapat terselesaikan.

## Daftar Pustaka
Babu  D,  Bhakyaraj  &  Vidhyalaksmi.2009.  Makanan  Bergizi  Berbiaya  rendah  “Tempe”.
Jurnal ilmu susu dan pangan .4(1): 22-27
Cappuccino, JG dan N Sherman. 2007. Analisis Mikrobiologi. Jurnal manajemen pemasaran petra . 1(2).
Datta, F.U, Angela, N.D, Benu. I, Detha, A.I.R, Feoh, N.D.F, & Ndaong N.A. Uji Aktivitas Antimikroba  Bakteri  Asam  Laktat  Cairan  Rumen  Terhadap  Pertumbuhan Salmonella enteritidis , Bacillus cereus , Esherichia coli Dan Staphylococcus aureus Menggunakan Metode  Difusi  Sumur  Agar. Prosiding  Seminar  Nasional  VII  Fakultas  Kedokteran Hewan Universitas Nusa Cendana Swiss Bel-Inn Kristal Kupang . 66-85
Dewi, R.S.& Aziz, S . 2011.Isolasi Rhizopus Oligosporus pada beberapa inokulum tempe di Kabupaten Banyumas. 6 (2) : 93-104.
Dwinaningsih,  EA.  2010.  Karakteristik  dan  sensori  tempe  dengan  variasi  bahan  baku kedelai/beras  dan  penambahan  angka  serta  variasi  lama  fermentasi  (skripsi). Jurusan Pertanian . Surakarta
Hernawati,  D.  &  Meylani.  2019.  Variasi  Inokulum Rhizopus  sp Pada  Pembuatan  Tempe Berbahan  Dasar  Kedelai  dan  Bangkil  Kacang  Tanah. Jurnal  Biologi  Makassar 4(1)  : 58-67.
Hocking, A.D. & Pitt, J.I. 1984. Food spoilage fungi 2. Heat-resistant fungi
NCCLS  [National  Committee  for  Clinical  Laboratory  Standards.  2002.  Performance Standardsfor Antimicrobial Susceptibility Testing;  Twelfth Informational  Supplement. NCCLS document M100-S12 [ISBN 1- 56238-454-6]. NCCLS 940 West Valley Road, Suite 1400,Wayne, PA 19087 USA.
Rahmawati,  N.  Sudjarwo,  E.  &  Widodo,  E.  2011.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Herbal Terhadap Bakteri Escherichia coli . Jurnal Ilmu-Ilmu Peternakan . 24(3) : 24-31
Rahmiati.  2018.  Karakteristik  morfologi  koloni  bakteri  dan  jamur  pada  pengolahan Asam Drien dari buah durian. [ Skripsi ]. Bandar Aceh : Universitas Islam Negeri Air.
Sine,  Y  &  Soetarto,  Endang,  S.  2018.  Isolasi  dan  identifikasi  kapang Rhizopus pada  tempe gude ( Cajanus cajan L.): Savana Cendana. Jurnal pertanian lahan kering . 3 (4): 67-68.
Suryanto,  D.  dan  Murni,  E.  Potensi  Pemanfaatan  Isolasi  Bakteri  Kitinolitik  Lokal  Untukn Pengendalian Hayati Jamur. Prosiding Seminar Hasil Penelitian USU Medan . Hal: 15- 25.
Virgianti,  DP.  2015.  Uji  Antagonis  Jamur  Tempe  ( Rhizopus  Sp )  terhadap  Bakteri  Patogen Enterik. 32 (3) : 162 – 168.
Wipradnyadewi,P.A.,  Rahayu,  E.S  &  Sri,  R.  2010.  Isolasi  dan  Identifikasi Rhizopus Oligoporus Pada Beberapa Inokolum Tempe.
Wiyono, Tuso. 2012. Teknik Budidaya Tanaman Kacang Merah. Universitas Tadulako , Palu,