ISSN 1979-0309 (Online) 2614-7920 (Print)
Jurnal Teknologi Hasil Pertanian . 16(1), 1-12 URL: https://jurnal.uns.ac.id/ilmupangan/article/view/62318 DOI: https://doi.org/10.20961/jthp.v16i1.62318

## Pengaruh Enzim Amilase Brevibacterium sp dan Glukoamilase Terhadap Kemampuan Penjerapanan Minyak Pada Pati Singkong
Effect of Brevibacterium sp and Glucoamylase Enzyme on the Oil Adsorption Degree of Cassava Starch
Fina Uzwatania 1) , Putri Ajeng Syahru Rahma 1) , Dwi Ajias Pramasari 2) *, Riska Surya Ningrum 2) , Dewi Sondari 2)
1) Program Studi Teknologi Industri Pertanian, Fakultas Ilmu Pangan Halal, Universitas Djuanda, Jalan Tol Ciawi 01, Kota Bogor, Jawa Barat, Indonesia 16720
2) Pusat Riset Biomassa dan Bioproduk, Badan Riset dan Inovasi Nasional, Kawasan Cibinong Science Center, Jl. Raya Bogor Km. 46, Cibinong, Jawa Barat, Indonesia 16911 email: dwi.ajias.pramasari@brin.go.id
Diserahkan [21 Juni 2022]; Diterima [26 Desember 2022]; Dipublikasi [14 April 2023]

## ABSTRACT
Improper  oil  waste  management  contributes  to  environmental  degradation,  notably  water  pollution. Because conventional methods for treating oil pollutants are costly and have limited removal efficacy, the use of natural adsorbents is recommended due to their dependability and affordability. The purpose of this study was to see how modified cassava starch affected oil adsorption using two types of enzymes: Brevibacterium sp amylase enzymes  derived  from  Indonesian  marine  bacteria  and  commercial  amylase  enzyme  (Dextrozyme®  GA).Oil- adsorbtion degree is applied to several types of oil, including palm oil and olive oil. The findings revealed that the properties of modified starch differed from those of native starch in both physical and chemical terms. The modified starch produced by hydrolysis of the glucoamylase enzyme (Dextrozyme ® GA) had a yield of 80.16 %, a  reducing  sugar  content  of  0.20  g/L  at  24  h,  and  a  particle  size  of  377  nm,  which  is  lower  than  the  starch hydrolyzed  by  Brevibacterium  sp.  In  contrast  with  the  degree  of  oil  adsorption  in  the  glucoamylase  enzyme (Dextrozyme ® GA) higher than Brevibacterium sp. Statistical analysis showed that the oil adsorption degree is affected by the type of enzyme, therefore, the modified starch from Brevibacterium sp still needs improvement to be competitive for oil adsorption compared with the modified starch from the glucoamylase enzyme (Dextrozyme ® GA).
Keywords: Brevibacterium sp ; glucoamylase; modified starch; oil-adsorbing

## ABSTRAK
Pengelolaan  limbah  minyak  yang  tidak  sesuai  berakibat  terhadap  degradasi  lingkungan,  terutama pencemaran  air.  Hal  ini  dikarenakan,  metode  konvensional  yang  digunakan  untuk  menangani  polutan  minyak berbiaya  mahal  dan  memiliki  kemampuan  yang  terbatas,  pemanfaatan  bahan  alami  yang  berkelanjutan menawarkan  alternatif  penjerapan  minyak  yang  tidak  beracun  dan  terbarukan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  pengaruh  pati  singkong  termodifikasi  terhadap  kemampuan  penjerapan  minyak  menggunakan  dua jenis enzim yaitu enzim Brevibacterium sp amilase yang berasal dari bakteri laut Indonesia, dan enzim amilase komersial  (Dextrozyme  ®  GA).  Tingkat  penjerapan  minyak  diaplikasikan  pada  beberapa  jenis  minyak  yaitu minyak sawit dan minyak zaitun. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sifat pati termodifikasi berbeda dari pati asli baik secara fisik maupun kimia. Pati termodifikasi hasil hidrolisis enzim glukoamilase (Dextrozyme ® GA) memiliki rendemen 80,16 % dan kadar gula  pereduksi 0,20 g/L pada 24 jam dan ukuran partikel 377 nm, lebih rendah dibandingkan pati hasil hidrolisis Brevibacterium sp. Sebaliknya tingkat penjerapan minyak pada enzim glukoamilase (Dextrozyme® GA) lebih tinggi dibandingkan Brevibacterium sp. Analisis statistik menunjukkan bahwa  tingkat  penjerapan  minyak  dipengaruhi  oleh  jenis  enzim,  oleh  karena  itu  pati  termodifikasi  dari Brevibacterium sp  masih  perlu  ditingkatkan  untuk  dapat  bersaing  dalam  kemampuan  penjerapan  minyak dibandingkan dengan pati termodifikasi dari enzim glukoamilase (Dextrozyme ® GA).
Kata Kunci: Brevibacterium sp; glukoamilase; pati termodifikasi; penjerapan minyak
Saran sitasi : Uzwatania, F., Rahma, P. A. S., Pramasari, D. A., Ningrum, R. S., & Sondari, D. 2022. Pengaruh Enzim Amilase Brevibacterium sp dan Glukoamilase Terhadap Kemampuan Penjerapanan Minyak Pada Pati Singkong. Jurnal Teknologi Hasil Pertanian, 15(2), 109-120. https://doi.org/10.20961/jthp.v15i2.62318

## PENDAHULUAN
Pencemaran  air  dapat  mengakibatkan kerusakan
lingkungan yang akan mempengaruhi  seluruh  makhluk  hidup  yang ada didalamnya. Minyak dan lemak memiliki sifat  beracun  bagi  beberapa  organisme akuatik.  Lapisan  minyak  juga  mencegah transfer oksigen dan mengakibatkan rendahnya  kadar  oksigen  terlarut  di  dalam air.  Salah  satu  untuk  mengatasi  krisis lingkungan  terutama  pencemaran  air  dari tumpahan  minyak  dan  limbah  industri  yaitu dengan  menggunakan  penjerapan  minyak (Hassan dan Puteh, 2007; Jasni et al., 2020). Bahan  penjerapan  minyak  alami  yang umumnya  menggunakan  kapas,  ampas  tebu, sekam padi, kapuk, dan limbah kayu (Jahi et al., 2015).
Pati  merupakan  salah  satu  biopolimer potensial  yang  dapat  digunakan  untuk penjerapanan  minyak  alami  dengan  berbiaya rendah. Kelemahan dalam menggunakan pati alami yaitu luas permukaan dan volume pori yang terbatas, sehingga diperlukan modifikasi  pati  untuk  menghasilkan  granula pati dengan permukaan yang lebih besar dan menjadi  lebih  berpori  untuk  dijadikan penjerapan  minyak alami. Salah  satu modifikasi  yang  dapat  dilakukan  yaitu dengan  menghidrolisis  pati  alami  pada  suhu di  bahwa  suhu  gelatinasi  menggunakan enzim  sehingga  dapat  menurunkan  biaya produksinya (Majzoobi et al., 2015; Pramasari  et  al.,  2020).  Robertson et  al ., (2006) menyatakan bahwa hidrolisis enzimatis  pada  pati  alami  dengan  tanpa pemanasan yang tinggi merupakan pemanfaatan yang efektif dari suatu biomassa sehingga  dapat  menghemat  energi  dan mengurangi biaya keselurahan proses modifikasi pati.
Enzim  amilase  merupakan  enzim  yang umum  digunakan  dalam  modifikasi  pati, dengan  cara  kerja  yang  mengkatalisis pemecahan glikosida ikatan pati menjadi gula
sederhana.  Enzim  ini  dapat  dihasilkan  dari tumbuhan,  hewan,  dan  mikroorganisme (Hashim, 2019), α-amilase dan glukoamilase merupakan jenis enzim amilase yang terbukti memiliki  kemampuan  yang  baik  dalam menghidrolisis  pati  (Wu et  al .,  2011). Penggunaan mikroorganisme dalam menghasilkan  enzim  amilase  dianggap  lebih prospektif  karena  mudah  tumbuh,  cepat, menghasilkan  produk,  kondisi  lingkungan dapat  dikendalikan,  menguntungkan  secara ekonomis  dan  memilki  siklus  hidup  pendek sehingga produktivitasnya dapat ditingkatkan. Namun, dipasaran komersial mikroorganisme yang  banyak  digunakan  berasal  dari  tanah, mikroorganisme yang berasal dari laut belum banyak  dimanfaatkan  padahal  karakteristik mikroorganisme  laut  sangat  unik  yaitu  tahan terhadap  kandungan  garam  yang  sangat tinggi (Rahmani et al ., 2011). Brevibacterium sp merupakan mikroorganisme
laut yang dapat menghasilkan  α-amilase  yang  berasal  dari perairan  Indonesia  (Purnawan  et  al.,  2015; Rahmani et  al .,  2011).  Pada  penelitian sebelumnya  yang  dilakukan  Pramasari et  al . (2020)  menunjukkan  pati  yang  dihidrolisis oleh Brevibacterium sp memiliki kemampuan  yang  setara  dengan  pati  hasil modifikasi  α-amilase  komersial  sehingga berpotensi  untuk  dijadikan  agen  penjerapan minyak..  Perbedaan  mendasar  penelitian  ini dibandingan  penelitian  sebelumnya  yaitu perbedaan  penggunaan  jenis  enzim,  aktivitas enzim  serta  kondisi  pada  proses  hidrolisis enzimatis.  Pada penelitian ini digunakan dua jenis  enzim  amilase  yang  berbeda  yaitu enzim  amilase Brevibacterium sp  yang merupakan  jenis  enzim  alfa  amilase  dan Dextrozyme ® GA merupakan gabungan dari enzim  amiloglukosidase  dan  pullulanase, sehingga tujuan penelitian ini untuk mengetahui  pengaruh  kedua  jenis  enzim tersebut terhadap karakteristik pati modifikasi  yang  dihasilkan  sebagai  bahan penjerapan  minyak  alami  dan  karakteristik lainnya dari modifikasi yang dihasilkan.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Bahan  baku  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah pati singkong komersial  dengan  merk  dagang  Tapioka Cap  Pak  Tani.  Jenis  enzim  amilase  yang digunakan  yaitu  amilase  yang  berasal  dari Brevibacterium sp.  dari  Pusat  Riset Mikrobiologi  Terapan,  BRIN  dan  enzim amilase  komersial  Dextrozyme  ®  GA (Novoezyme). Bahan kimia yang digunakan  akuades,  2  M  Asam  klorida (Merck),  larutan  20  mM  buffer  fosfat  pH 6,9  yang  terbuat  dari  di-natrium  hidrogen fosfat  (Merck),  natrium  dihidrogen  fosfat monohidrat  (Merck)  dan  natrium  klorida (Merck),  larutan  buffer  sitrat,  asam  2,3- dinitrosalisilat  –  DNS  (Sigma  Aldrich), etanol (Merck) 95%, etanol 50-70% teknis 1N Natrium Hidroksida (Merck), 1N Asam asetat  (Merck)  dan  larutan  iod.  Jenis minyak  yang  digunakan  minyak  sawit (Sunco) dan minyak zaitun (Casa di Oliva).

## Alat
Peralatan  yang  digunakan  dalam hidrolisis pati yaitu incubator shaker (Wise Cube), tabung sentrifuge 50 mL, pipet ukur dan bulb filler.
Peralatan untuk karakterisasi  yaitu  oven,  pH  meter,  vortex dan  spektrofotometer  UV-Vis  Shimadzu 1800.

## Tahapan Penelitian

## Uji Aktivitas Enzim Amilase
Sebelum  digunakan  dua  jenis  enzim amilase  pada  penelitian  ini,  dilakukan pengujian  aktivitas  enzim  amilase  dengan menambahkan  1  mL  enzim  (amilase  dari Brevibacterium sp.  atau  enzim  amilase komersial  Dextrozyme  ®  GA)  ke  dalam  1 mL  larutan  pati,  kemudian  dinkubasi selama  3  menit  pada  suhu  optimum  30°C. Penambahan  2  ml  DNS  ke  dalam  larutan enzim  pati  terserbut  dan  dipanaskan sampai  mendidih,  Kemudian  didinginkan dengan  cepat  pada  air  air  mengalir  dan ditambahkan  20  mL  akuades.  Aktivitas enzim diukur dengan spektofotometer pada panjang  gelombang  550  nm  sebagai  kurva
standar  menggunakan  maltosa  dengan beberapa konsentrasi (AOAC, 1995).

## Hidrolisis Enzimatis
Hidrolisis enzimatis pada penelitian ini merupakan modifikasi hidrolisis enzimatis yang dikembangkan oleh Kim et al .,  (2008),  Uthumporn et  al .,  (2010)  dan Pramasari et  al .,  (2020).  Sebanyak  1  g (berat kering) pati singkong ditimbang dan dimasukkan ke dalam tabung sentrifuge 50 mL. Kemudian ditambahkan enzim amilase ( Brevibacterium sp atau Dextrozyme ® GA)  dengan rasio  aktivitas enzim  dan  substrat  0,02  U/g,  dengan menambahkan larutan 20 mM buffer fosfat untuk mencapai rasio tersebut.
Larutan yang berisi pati singkong dan enzim  amilase  diinkubasi  menggunakan incubator  shaker (Wise  Cube)  dengan lama  waktu  proses  24  jam,  suhu  37°C dengan kecepatan 150 rpm. Setelah proses inkubasi selesai, terlebih dahulu pH sampel diukur, kemudian hasil hidrolisis enzimatis diinaktivasi  menggunakan  HCl  2  M sebanyak 2 mL agar pH mencapai 1,5-1,6. Larutan  pati  sampel  dilakukan  pencucian dengan akuades sampai pH 5 menggunakan  metode  sentrifugasi  dengan kecepatan  10.000  rpm  selama  10  menit. Residu  pati  yang  telah  dicuci  dan  pH  5 dikeringkan menggunakan oven pada suhu 60°C selama 24 jam.

## Analisis Kadar Air
Analisis  kadar  air  yang  dilakukan pada  penelitian  ini  menggunakan  alat Moisture Analyzers (Kern MLS-D). Sebanyak  0,1  g  sampel  (berat  kering) ditimbang  pada  plat  aluminium  yang  telah diketahui  bobot  kosongnya,  kemudian dikeringkan  dalam  alat  pada  suhu  105°C selama  2  menit  hingga  diperoleh  nilai kadar  air  yang  akan  ditampilkan  secara otomatis pada alat tersebut (Kern dan Sohn GmbH, 2013).

## Analisis  Kadar  Amilosa  dan  Kadar Amilopektin
Sebanyak  100  mg  sampel  pati ditambahkan  ke  dalam  1  mL  etanol  95% dan 9 mL larutan NaOH 1 N dan kemudian dipanaskan selama 30 menit pada suhu 80-
90°C  dan  ditambahkan  akuades  sampai 100 mL dan dikocok. Setelah itu, diambil 1 mL sampel ditambahkan 1 mL CH 3 COOH 1 N, 2 mL larutan iod, dan akuades sampai dengan  50  mL. Selanjutnya,  didiamkan selama 20 menit dan diukur absorbansinya dengan spektrofotometer
UV-Vis
Shimadzu  1800  pada  panjang  gelombang (λ=612  nm).  Kadar  amilopektin  dihitung sebagai pengurangan dari persentase kadar amilosa (IRRI ,1978).

## Analisis Gula Pereduksi
Analisis  gula  pereduksi  dilakukan dengan  mengambil  0,5  mL  sampel  pati  ke dalam tabung reaksi, kemudian ditambahkan  1  mL  buffer  sitrat  dan  3  mL reagen  DNS  pada  tiap  tabung  reaksi menggunakan  mikro  pipet.  Tabung  reaksi dipanaskan di dalam water bath pada suhu 100°C  selama  5  menit  agar  terjadi  reaksi antara  glukosa  dengan  DNS.  Sampel dilakukan  pada  waktu  hidrolisis  enzim  2, 4,  6  dan  24  jam.  Absorbansi  tiap  larutan diukur dengan panjang gelombang 540 nm. Nilai absorbansi yang diperoleh disesuaikan  pada  kurva  standar  glukosa yang digunakan (Miller, 1959).

## Analisis  Ukuran  Partikel  dan  Indeks Polidispersitas
Analisis  ukuran  partikel  pada  pati termodifikasi enzim dilakukan menggunakan  Particle  Size  Analyzer Anton Paar (Litesizer 500). Pati termodifikasi  didispersikan  dalam  aquades lalu dihomogenkan
menggunakan sonikator  selama  5  menit.  Setelah  itu, sampel  dimasukkan  ke  dalam  kuvet  dan kemudian  dimasukkan  ke  dalam  holder pada  alat  PSA.  Hasil  yang  diperoleh berupa intensitas untuk mengetahui ukuran partikel  pati  termodifikasi  dan  indeks polidispersitas  merupakan  lebar Gaussian bell yang  mencerminkan  distribusi  ukuran partikel  dalam  sampel  (Condés et  al ., 2015).
Analisis Kemampuan Penjerapan (Adsorpsi) Minyak Analisis kemampuan penjerapan (adsorpsi)  minyak  dengan  menggunakan minyak sawit, dan minyak zaitun sebanyak
1,25  mL  ditambahkan  dengan  0,25  g  pati kering hasil modifikasi hidrolisis enzimatis pada  wadah  berukuran  2  mL.  Kemudian larutan  tersebut  divortex  selama  5  menit dan didiamkan selama 20 menit. Pemisahan  dilakukan  dengan  metode sentrifugasi  dengan  kecepatan  1.000  rpm selama 5 menit untuk memisahkan minyak dan pati. Pati tersebut kemudaian ditimbang,  derajat  kemampuan  penjerapan (adsorpsi)  minyak  merupakan  persentase berat  minyak  yang  terjerap  pada  pati dikarenakan  terbentuknya  banyak  pori pada  pati  tersebut  (Majzoobi et  al .,  2015;
Wu et al ., 2011).
Daya Jerap Minyak = (𝑊𝐴−𝑊) 𝑊 𝑥 100%
W = Berat pati kering
WA = Berat pati dan minyak yang terjerap

## Rancangan  Penellitian  dan  Analisis Data
Rancangan percobaan yang digunakan adalah  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) faktor  tunggal  yaitu  perlakuan  enzim amilase ( Brevibacterium sp dan
Dextrozyme  ®  GA)  terhadap  respon perlakuan  yaitu  kadar  air,  rendemen  pati, kadar  amilosa,  kadar  amilopektin  dan kemampuan penjerapan minyak.
Kemudian,  dilakukan  analisa  varians (ANOVA)  satu  arah  dengan  alat  bantu  uji statistika yaitu Statistical Tool for Agricultural  Research  (STAR)  software version  2.0.1  International  Rice  Research Institute.  Apabila  terdapat  perbedaan nyata,  dilakuan  uji  lanjut  (post-hoc) Duncan’s  Multiple  Range  Test  (DMRT) pada  selang  kepercayaan  5%.  Data  hasil pengamatan lainnya dianalisa secara deskriptif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada  proses  hidrolisis  enzimatis dapat menghasilkan pati termodifikasi baik menggunakan  enzim  amilase  maupun glukoamilase. Kedua enzim tersebut terbukti  memiliki  kemampuan  yang  baik dalam  menghidrolisis  pati  (Wu et  al ., 2011).  Pengujian  aktivitas  enzim  yang dilakukan pada penelitian ini menghasilkan aktivitas  enzim  yang  digunakan  yaitu
amilase  dari Brevibacterium sp.  4x10 -3 U/mL, sedangkan enzim amilase komersial Dextrozyme  ®  GA  (Novoezyme)  0,48 U/mL.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  enzim Dextrozyme  ®  GA  memiliki  aktivitas enzim  yang  lebih  tinggi  dikarenakan Dextrozyme  ®  GA  merupakan  gabungan dari enzim amiloglukosidase dan pullulanase,  sedangkan  enzim  amilase Brevibacterium sp  merupakan  jenis  enzim alfa  amilase  yang  merupakan  endoenzim yang memutuskan ikatan α-1,4 secara acak pada  molekul  amilosa  dan  amilopektin (Winarno,  2010).  Penggunaan  enzim amilase  Brevibacterium  sp  telah  berhasil dilakukan  sebelumnya  menggunakan  pati Taka dengan aktivitas enzim Brevibacterium  sp  1,78  U/ml    untuk menghasilkan 34,45 gram bubuk maltooligosakarida (Rahmani et al., 2019). Selain  itu,  penelitian  yang  dilakukan  oleh Rahmani  et  al.,  (2015)  menggunakan  pati singkong  dan  enzim  Brevibacterium  sp dengan  aktivitas  2,3  U/mL  menghasilkan maltooligosakarida dengan konsentrasi gula pereduksi 13,36 ppm. Kedua aktivitas enzim  Brevibacterium  sp  pada  penelitian terdahulu  lebih  tinggi  dibandingkan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini.  Hal  ini dimungkinkan  karena  waktu  penyimpanan yang  lama  pada  enzim  Brevibacterium  sp yang  digunakan  pada  penelitian  ini, sehingga  mempengaruhi  aktivitas  enzim dan volume enzim yang ditambahkan pada saat hidrolisis enzimatis ditahapan selanjutnya. Karakteristik Pati Singkong

## Termodifikasi
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  kadar air pada pati singkong termodifikasi enzim
tidak  berbeda  signifikan,  sedangkan  kadar air  keduanya  lebih  rendah  dibandingkan dengan  yang  dilaporkan  oleh  Pramasari  et al.,  (2020)  yang  menggunakan  enzim amilase  Brevibacterium  sp  dan  amilase Lyquoenzyme. Perbedaan suhu pengeringan  (pada  penelitian  ini  60°C) setelah  proses  hidrolisis  enzimatis  yang kemungkinan menyebabkan nilai  kadar air pada  produk  pati  penelitian  ini  di  bawah 5%.  Bahanawan  et  al.,  (2019)  menyatakan bahwa  suatu  proses  pengeringan  pada suatu bahan akanmempengaruhi penurunan kadar  airnya.  Hal  ini  akibat  ikatan-ikatan molekul  air  (unsur  oksigen  dan  hidrogen) yang terpecah dengan adanya panas ketika pengeringan, sehingga hilangnya kandungan  air  pada  bahan  (Ega  dan Lopulalan,  2015).  Effendi  et  al.,  (2016) menjelaskan  bahwa  kemampuan  menjerap atau  mengikat  air  pada  amilosa  berkaitan dengan  kemampuan  pembentukan  ikatan hidrogen  yang  lebih  besar  pada  amilosa dibandingkan dengan amilopektin.Jika dihubungkan  antara  kadar  air  dan  kadar amilosa terlihat bahwa hubungan keduanya saling  berkebalikan  (Tabel  1),  dimana  pati hasil Brevibacterium sp memiliki kadar air yang  lebih  rendah,  namun  kadar  amilosa yang terkandung lebih tinggi dibandingkan dengan  pati  hasil  Dextrozyme  ®  GA. Sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan Harianies  et  al.,  (2009)  yang  menjelaskan kadar  amilosa  yang  tinggi  pada  pati cenderung  mengakibatkan  interaksi  yang kuat  antar  rantai  polimer  atau  membentuk ikatan  silang  sehingga  membuat  sifat hidrofilik  pati  menurun  dan  terhalangnya molekul air untuk masuk karena terbentuknya jaringan yang lebih teratur.
Tabel 1. Karakterstik Pati Singkong Termodifikasi Jenis Enzim Amilase Parameter (%) Kadar Air Rendemen Pati Kadar Amilosa Kadar Amilopektin Brevibacterium sp 4,08 ± 1,26 a 90,19 ± 0,48 a 25,19 ± 0,04 a 74,81 b Dextrozyme  ® GA 4,31 ± 0,22 a 80,16 ± 0,45 b 24,35 ± 0,21 b 75,65 a
Keterangan : Rerata yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata pada uji DMRT taraf 5%
dari  struktur  rantai  lurus  amilosa.  Hal  ini yang  mengakibatkan  kandungan  kadar  air pada pati singkong termodifikasi Brevibacterium sp lebih rendah dibandingkan dengan  pati  hasil  Dextrozyme  ®  GA.  Selain itu,  amilosa  merupakan  komponen  pati  yang larut  air  sedangkan  amilopektin  tidak  larut dalam  air  tetapi  larut  dalam  N-butanol (Sondari et al., 2020)
Rendemen pati yang dihasilkan menunjukkan  bahwa  pati  yang  terhidrolisis enzim Brevibacterium sp memiliki nilai lebih tinggi  dan  berbeda  signifikan  dibandingkan dengan enzim Dextrozyme ® GA ( Tabel  1 ). Rendemen  pada  pati  perlakuan  di  penelitian ini  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan penelitian  sebelumnya  oleh  Pramasari et  al ., (2020),  meskipun menggunakan enzim Brevibacterium sp  namun  rasio  aktivitas enzim  dan  substrat  yang  digunakan  pada penelitian  ini  jauh  lebih  rendah  yaitu  0,02 U/g.  Penggunaan  enzim  yang  lebih  sedikit, rendemen  pati  yang  dihasilkan  lebih  tinggi. Apabila dibandingkan dengan enzim komersial  Dextrozyme  ®  GA,  rendemen yang  dihasilkan  enzim Brevibacterium sp lebih  tinggi  dibandingkan  enzim  komersial Dextrozyme.  Enzim Brevibacterium sp merupakan  enzim  amilase  yang  berasal  dari mikroorganisme  laut  yang  dapat  memecah pati  menjadi  glukosa,  dekstrin  dan  ikatan lainnya.  Hasil  ini  berbeda  dengan  yang dilakukan  oleh  Le  Corre  (2012)  yang menunjukkan rendemen dari enzim α-amilase lebih  rendah  dibandingkan  dengan  enzim glukoamilase.  Hal  ini  dimungkinkan  karena cara  kerja  enzim  Dextrozyme  ®  GA merupakan enzim campuran antara amiloglukosidase  dan  pullulanase  sehingga lebih  efektif  ikatan  α-1,6  glikosidik  dengan cepat  dibandingkan  enzim  α-amilase  saja, sehingga hasil konversi pati menjadi glukosa lebih  tinggi  dan  membuat  rendemen  pati menjadi  lebih  rendah.  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Yunianta  et  al.,  (2010) menemukan  bahwa  penggunaan  enzim  alfa amilase  dan  pada  proses  likuifikasi  dan dilanjutkan  proses  sakarifikasi  menggunakan kombinasi enzim glukoamilase dan pullulanase  (dextrozyme)  pada  pati  garut menghasilkan  sirup  glukosa  dengan  nilai dekstrosa  ekivalen  (DE)  sebesar  92,14.
Selain  itu,  konsentrasi  enzim  dextrozyme dipengaruhi  secara  nyata  terhadap  afinitas enzim  dextrozyme  terhadap  substrat  amilosa dan  amilopektin.  Dimana  efektifitas  dari enzim  dextrozyme  bersinergi  dengan  proses sebelumnya (likuifikasi) menggunakan enzim alfa amilase yang mengalami proses hidrolisis  dari  bagian  dalam  rantai  molekul amilosa terutama amilopektin.
Kadar  amilosa  dan  amilopektin  dari hidrolisis  pati  dengan  kedua  jenis  enzim amilase  yang  digunakan  tidak  berbeda signifikan  ( Tabel  1 ),  namun  dari  analisa statistika memperlihatkan bahwa nilai tersebut berbeda nyata dan dapat disimpulkan bahwa  kadar  amilosa  dan  amilopektin dipengaruhi  secara  signifikan  oleh  enzim yang  digunakan  pada  proses  modifikasi  pati secara hidrolisis. Kadar amilosa dan amilopektin  awal  pati  singkong  yang digunakan  pada  penelitian  ini  berturut-turut adalah  24,13%  dan  75,87%.  Kadar  amilosa pada  penelitian  ini  sesuai  dengan  penelitian Vamadevan dan Bertoft, (2015) pada kisaran 17-33%. Perbedaan kandungan amilosa yang tidak  signifikan  antara  pati  awal  dan  pati perlakuan  enzim  sejalan  dengan  penelitian yang dilakukan oleh Zhai et al ., (2022) yang menggunakan  pati  gandum  dimana  pada penelitian  tersebut  menjelaskan  bahwa  tidak adanya perbedaan signifikan antara kandungan  amilosa  pada  pati  awal,  kontrol dan  pati  modifikasi  dengan maltogenic  α- amylase akibat  perlakuan maltogenic  α- amylase yang  dapat  mendegradasi  secara simultan  antara  amilosa  dan  amilopektin Secara  rasio  kandungan  antara  amilosa  dan amilopektin  yaitu  1:3,  hal  ini  berarti kandungan  amilopektin  pada  pati  singkong ini cukup tinggi dan akan mengakibatkan pati tidak  higroskopis  atau    tidak  terlalu menyerap  air  dan  lengket.  Selain  itu,  tingkat pengembangan  dan  penyerapan  air  pada  pati tergantung pada kandungan amilosa. (Romadona, 2012). Jika dilihat dari kandungan  air  pada  kedua  hasil  pati modifikasi ( Tabel 1 ), terlihat bahwa kandungan  air  pada Brevibacterium sp  lebih rendah dibandingikan dengan Dextrozyme ® GA,  namun  kandungan  amilosanya  lebih tinggi.  Hal  ini  berbeda  dengan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Effendi  et  al.,  (2016)
dan  Kustyawati  et al., (2013)  yang menyatakan  semakin  tinggi  kadar  amilosa akan  meningkatkan  kandungan  air  pada  pati karena amilosa memiliki sifat polar.
Pada  umumnya,  pati  awal  memiliki banyak  amilosa  yang  terdapat  pada  bagian amorf di cincin pertumbuhan dan amilopektin  merupakan  bagian  utama  dari daerah kristalin pada granula pati (Vamadevan  dan  Bertoft,  2015).  Dari persentase  yang  ditunjukkan  pada Tabel  1 terlihat  penggunaan  enzim  Dextrozyme  ® GA  menyebabkan  penurunan  persentase kadar  amilopektin,  hal  ini  sesuai  dengan literatur yang menyatakan bahwa penggunaan  enzim  pada  hidrolisis  pati  lebih mudah menyerang daerah kristalin (amilopektin),  sehingga  terjadi  peningkatan pada  persentase  daerah  amorf  atau  kadar amilosa (Zhai et al ., 2022).

## Kandungan Gula Pereduksi Pati Singkong Termodifikasi
Salah  satu  parameter  untuk  mengetahui keefektivitsan  hidrolisis  pati  yaitu  dengan menganalisa  kadar  gula  pereduksi  dimana dalam  proses  hidrolisis  pati  berkaitan  erat dengan proses pemutusan pati menjadi rantai glukan  dengan  ujung  pereduksi  ( reducing end )  (Faridah,  2011).  Selain  itu,  Parwiyanti et al ., (2011) menjelaskan bahwa terputusnya banyak  rantai  pati  akan  berakibat  banyak gugus  OH  yang  reaktif  dan  meningkatkan kandungan  gula  pereduksi  yang  dihasilkan. Gambar  1 menunjukan  bahwa  nilai  gula
pereduksi pati hasil hidrolisis enzim Brevibacterium sp  cenderung  memiliki  nilai yang  stabil,  berbeda  dengan  pati  hasil modifikasi Dextrozyme ® GA yang meningkat semakin lamanya waktu hidrolisis. Walaupun  sedikit  mengalami  penurunan pada waktu 24 jam. Jika dihubungkan dengan rendemen  pati  pada Tabel  1 ,  terlihat  bahwa pati  yang  terhidrolisis  enzim Brevibacterium sp  tidak  terlalu  banyak,  sehingga  nilai  gula pereduksinya cenderung stabil, hal ini diduga karena tidak banyak terjadi proses pemutusan rantai  glukan.  Menurut  Faridah,  (2011) menyatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi  gula  pereduksi  maka  semakin banyak  titik  percabangan  pada  ikatan glikosidik α-1,6 amilopektin yang terhidrolisis.  Hal  ini  yang  mengkonfirmasi bahwa  hidrolisis  enzimatis  pada  pati  dengan Dextrozyme ® GA menyebabkan peningkatan  nilai  gula  pereduksi. Ukuran Partikel  Pati  Singkong  Termodifikasi  dan Indeks Polidispersitas
Karakteristik diameter hidrodinamik atau  distribusi  partikel  dari  pati  singkong yang terhidrolisis dua enzim amilase berbeda pada  penelitian  ini  ( Gambar  2 ).  Diameter hidrodinamik  ini  adalah  ukuran  yang tergambar  ( apparent  size )  bukan  ukuran sebenarnya  ( actual  size )  dari  partikel  pati, walaupun  demikian  dapat  digunakan  untuk menjadi  acuan  untuk  menentukan  distribusi partikel  suatu  bahan  (Dai et  al .,  2018;  Le Corre , 2012). Dengan rasio aktivitas enzim
Gambar 1. Pengaruh waktu hidrolisis terhadap Gula Pereduksi pada Pati Modifikasi
0,25 0,23 0,25 0,20 3,01 3,28 3,68 3,52 0,00 1,00 2,00 3,00 4,00 2 4 6 24 G ula P er eduk si ( g/ L ) Waktu Hidrolisis Enzimatis (jam) Enzim Brevibacterium sp
Enzim Dextrozyme ® GA
Gambar 2. Ukuran Partikel dan Indeks Polidispersitas Pati Modifikasi Enzim
dan substrat yang sama, pati hasil modifikasi hidrolisis  enzim  amilase Brevibacterium sp memiliki ukuran partikel dua kali lebih besar dibandingkan  ukuran  partikel  dari  hasil enzim  Dextrozyme  ®  GA.  Menurut    Kim et al .,  (2015),  kadar  amilosa  pada  pati  akan mempengaruhi  ukuran  partikel  dari  pati tersebut,  hal  ini  juga  yang  diduga  membuat ukuran partikel dari enzim amilase Brevibacterium sp  lebih  besar,  karena kandungan amilosanya lebih besar dibandingkan  pati  yang  dihasilkan  enzim Dextrozyme  ®  GA  ( Tabel  1 ).  Dilain  sisi, ukuran  partikel  yang  dihasilkan  pada penelitian  ini  jauh  lebih  kecil  dibandingkan dengan  yang  dilakukan  Pramasari et  al ., (2020), pada penelitian ini terutama pati yang dihasilkan  oleh  enzim  Dextrozyme  ®  GA hampir  mendekati  ukuran  nanokristal  pati, yaitu  1-100  nm  (Silva et  al .,  2018).    Proses modifikasi  pati  dengan  menggunakan  enzim menyebabkan  granula  pati  menjadi  lebih banyak  pori,  porous  dan  meningkatkan  luas permukaan  dari  pati  modifikasi  tersebut  dan membuat  pati  cenderung  memiliki  kapasitas penjerapan  yang  baik  sehingga  dapat diaplikasikan  menjadi  adsorben.  Secara prinsip kerja enzim alfa amilase menghidrolisis  granula  pati  dari  bagian lapisan  terluar  dan  membuat  ukuran  granula menjadi  mengecil  dengan  terbentuknya sedikit  porositas  (Lecorre  et  al.,  2012; Pramasari et al., 2020).
Indeks polidispersitas ( Gambar 2 ) yang rendah  mengindikasikan  bahwa  sampel  pati
termodifikasi  memiliki  homogenitas  yang tinggi (Chen et al ., 2022; Zhang et al ., 2021). Hidrolisis  enzim  menggunakan  Dextrozyme ® GA menghasilkan nilai indeks polidispersitas  lebih  rendah  dibandingkan penggunaan  enzim  amilase Brevibacterium sp,  yang  diduga  akibat  adanya  dosis  dari campuran pullulanase pada enzim Dextrozyme  ®  GA.  Chen et  al .,  (2022) menjelaskan  bahwa  dengan  meningkatnya dosis  enzim  pullulanse  akan  mengakibatkan pati  memiliki  homogenitas  yang  baik  dan menghasilkan  partikel  pati  dengan  ukuran yang lebih kecil.
Kemampuan
Penjerapan (Adsorpsi)

## Minyak Pati Singkong Termodifikasi
Kemampuan  penjerapan  minyak  dari hasil  pati  termodifikasi  berhubungan  erat dengan terbentuknya beberapa pori pada pati yang  dinamakan  sebagai  pati  berpori. Dengan  adanya  beberapa  pori  ini  akan meningkatkan  luas  permukaan  pati  dan sebagai penghubung dari enzim untuk masuk lebih  mudah  ke  dalam  granula  pati  (Wu et al ., 2011). Gambar 3 menunjukan bahwa pati tanpa  perlakuan  enzim  atau  pati  singkong murni  memiliki  nilai  adsorpsi  yang  paling rendah  dibandingkan  dengan  pati  hasil modifikasi  enzim  yang  mengindikasikan bahwa  pori  pada  permukaan  pati  masih sedikit.  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian yang dilakukan oleh Le Corre, (2012), Lin et al ., (2022) dan Pramasari et al ., (2020) yang menunjukan  perlakuan  modifikasi  terhadap pati baik fisik, kimia ataupun enzimatis akan
738 377 39,85 30,53 0 200 400 600 800 Brevibacterium sp Dextrozyme ® GA Jenis Enzim Ukuran Partikel/ Diameter Hidrodinamik (nm)
Indeks Polidispersitas
Keterangan : Rerata yang diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata pada uji DMRT taraf 5%
Gambar 3. Kemampuan Adsorpsi Minyak Pati Modifikasi Enzim membuat  kemampuan  penjerapan  minyak pada  pati  akan  mengalami  peningkatan dibandingkan pati murni.
Adsorpsi pada pati singkong termodifikasi menggunakan enzim Brevibacterium sp  pada  penelitian  ini  lebih rendah  dibandingkan  dengan  penelitian sebelumnya  oleh  Pramasari et al .,  (2020), begitu  pula  hasil  enzimatis  Dextrozyme  ® GA  dibandingkan  dengan  Wu et  al .,  (2011). Hal  ini  diduga  karena  pebedaan  konsentrasi enzim amilase yang digunakan selama proses hidrolisis. Namun, perlu diperhatikan selama proses modifikasi enzim pati yaitu banyaknya  enzim  yang  ditambahkan,  jika berlebihan  akan  membuat  pati  semakin berpori  besar  dan  pecah  sehingga  berakibat pada  menurunnya  kemampuan  penjerapan miyak.  Secara  prinsip  penjerapan  minyak oleh  pati  akibat  banyaknya  pori  dan meningkatnya  luas  permukaan  dalam  pati yang  yang  berperan  sebagai  jembatan transportasi  sehingga  membuat  minyak terjerap pada rongga heliks dan fasa eksternal pada  sistem  pati  (Lin et  al .,  2022).  Analisa statistika  menunjukkan  bahwa  kemampuan penjerapan  minyak  dari  pati  yang  dihasilkan Dextrozyme  ®  GA  berbeda  nyata  dengan pati  yang  berasal  dari  enzim Brevibacterium sp dan pati alami. Namun jenis minyak yang digunakan  tidak  berbeda  secara  nyata
dimasing-masing  perlakuan,  hal  ini  diduga karena  berat  jenis  antara  minyak  sawit  dan minyak zaitun tidak berbeda secara signifikan.

## KESIMPULAN
Enzim amilase komersial dari Dextrozyme  ®  GA  memiliki  aktivitas  yang lebih  besar  dibandingkan  dengan  enzim amilase  dari Brevibacterium sp.  Hidrolisis pati singkong menggunakan enzim Dextrozyme  ®  GA  menghasilkan  gula pereduksi  yang  lebih  tinggi,  rendemen  pati termodifikasi  lebih  rendah,  karakteristik  pati termodifikasi  dengan  kandungan  amilosa lebih  rendah,  kadar  air  yang  lebih  tinggi, ukuran  partikel  yang  lebih  besar  dan  lebih homogen dibandingkan dengan proses hidrolisis  menggunakan Brevibacterium sp. Secara  stastistika,  rendemen  pati,  kadar amilosa,  kadar  amilopektin  dan  kemampuan adsorpsi  minyak  yang  dipengaruhi  oleh perbedaan  enzim  yang  digunakan.  Kedua jenis pati termodifikasi yang dihasilkan pada penelitian ini memiliki kemampuan mengadsorbsi  minyak  yang  lebih  rendah dibandingkan dengan penelitian sebelumnya, tetapi  tidak  menunjukkan  perbedaan  yang nyata.
72 c 80 b
94 a
72 b 77 b 88 a 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 Tanpa Enzim Brevibacterium sp Dextrozyme ® GA A dsor psi Mi ny ak ( % ) Jenis Enzim Minyak Sawit Minyak Zaitun

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih terhadap Laboratorium  Bioproduk  Terintegrasi  (iLaB) Pusat Riset Biomassa dan Bioproduk, Badan Riset  dan  Inovasi  Nasional.  Kementrian Riset,  Teknologi  dan  Pendidikan  Tinggi  atas bantuan  dana  penelitian  melalui  Program INSINAS Tahun Anggaran 2019.

## DAFTAR PUSTAKA
Bahanawan, A., Kusumah, S. S., Darmawan, T., Ismadi,  Masruchin,  N., Sudarmanto, Jayadi,  Pramasari,  D.  A.,  Triwibowo, D.,  Kusumaningrum,  W.  B.,  Wibowo, E.  S.,  Syamani,  F.  A.,  Krishanti,  N.  P. R.  A.,  Lestari,  E.,  Amin,  Y.,  Sufiandi, S., Syahrir, A., dan Dwianto, W. (2019).
Moisture  content,  color  quantification and  starch  content  of  oil  palm  trunk (Elaeis guineensis Jacq.). IOP Conference Series: Earth and Environmental Science , 374 (1). https://doi.org/10.1088/1755- 1315/374/1/012041
Chen,  X.,  Hu,  Z.,  Chen,  D.,  dan  Feng,  T.
(2022). Preparation and physiochemical properties  of  enzymatically  modified octenyl  succinate  starch. Journal  of
Food Science , March . https://doi.org/10.1111/1750-
3841.16122
Condés,  M.  C.,  Añón,  M.  C.,  Mauri,  A.  N., dan  Dufresne,  A.  (2015).  Amaranth protein  films  reinforced  with  maize starch nanocrystals. Food Hydrocolloids , 47 , 146–157. https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2015. 01.026
Dai,  L.,  Li,  C.,  Zhang,  J.,  dan  Cheng,  F.
(2018). Preparation and characterization of  starch  nanocrystals  combining  ball milling with acid hydrolysis.
Carbohydrate Polymers , 180 (September 2017), 122–127. https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2017.1 0.015 Effendi,  Z.,  Surawan,  F.  E.  D.,  dan  Sulastri,
Y.  (2016).  Sifat  Fisik  Mie  Basah Berbahan  Dasar  Tepung  Komposit
Kentang dan Tapioka.
Jurnal
Agroindustri , 6 (November), 57–64.
Ega,  L.,  dan  Lopulalan,  C.  G.  C.  (2015).
Modifikasi  Pati  Sagu  Dengan  Metode Heat Moisture Treatment. AGRITEKNO: Jurnal Teknologi Pertanian , 4 (2), 33–40. https://doi.org/10.30598/jagritekno.2015 .4.2.33 Faridah, D. N. (2011). Perubahan Karakteristik Kristalin Pati Garut (Maranta arundinaceae L.) dalam Pengembangan  Pati  Tesisten  Tipe  III.
Thesis , 1–184.
Harianies,  L.,  Yunianta,  dan  Argo,  B.  D.
(2009).  Pembuatan  pati  tinggi  amilosa secara  enzimatis  dari  pati  ubi  kayu (Manihot  esculenta)  dan  aplikasinya untuk  pembuatan  maltosa. El–Hayah ,
1 (1),
14–24. https://doi.org/10.18860/elha.v1i1.1683
Hashim,  S.  O.  (2019). Starch-Modifying Enzymes . https://doi.org/10.1007/10
Hassan,  M.  A.  A.,  dan  Puteh,  M.  H.  (2007). Pre-Treatment of Palm Oil Mill Effluent (POME):  A  Comparison  Study  Using Chitosan and Alum . 19 (2), 38–51.
International Rice Research Institution (IRRI).  (1978). Standard  Evaluation System for Rice . IRRI.
Jahi,  N.,  Ling,  E.  S.,  Othaman,  R.,  dan Ramli,  S.  (2015).  Modification  of  oil palm  plantation  wastes  as  oil  adsorbent for  palm  oil  mill  effluent  (POME).
Malaysian Journal of Analytical Sciences , 19 (1), 31–40.
Jasni,  J.,  Arisht,  S.  N.,  Mohd  Yasin,  N.  H., Abdul,  P.  M.,  Lin,  S.  K.,  Liu,  C.  M., Wu, S. Y., Jahim, J. M., dan Takriff, M. S.  (2020).  Comparative  toxicity  effect of  organic  and  inorganic  substances  in palm  oil  mill  effluent  (POME)  using native  microalgae  species. Journal  of Water Process Engineering , 34 (January), 101165. https://doi.org/10.1016/j.jwpe.2020.101
165
Kern  dan  Sohn  GmbH.  (2013). Operating
manual  Electronic  Moisture  Analyser KERN MLB _ C . 1–77.
Kim,  H.  Y.,  Park,  S.  S.,  dan  Lim,  S.  T.
(2015).  Preparation,  characterization and  utilization  of  starch  nanoparticles. Colloids  and  Surfaces  B:  Biointerfaces ,
126 , 607–620. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2014.1
1.011
Kim, J. Y., Park, D. J., dan Lim, S. T. (2008). Fragmentation  of  waxy  rice  starch granules  by  enzymatic  hydrolysis.
Cereal  Chemistry , 85 (2),  182–187. https://doi.org/10.1094/CCHEM-85-2- 0182
Kustyawati,  M.  E.,  Sari,  M.,  dan  Haryati,  T. (2013). Efek Fermentasi dengan Saccharomyces  cerevisiae  Terhadap Karakteristik Biokimia Tapioka. Agritech , 33 (3), 281–287.
Le  Corre,  D.  (2011). Starch  nanocrystals : Preparation  and  Application  to  bio- based  flexible  packaging .  Université  de Grenoble.
Lecorre, D., Vahanian, E., Dufresne, A., dan Bras, J. (2012). Enzymatic pretreatment for preparing starch nanocrystals. Biomacromolecules , 13 (1),  132–137. https://doi.org/10.1021/bm201333k
Lin,  Y.,  Liu,  L.,  Li,  L.,  Xu,  Y.,  Zhang,  Y., dan  Zeng,  H.  (2022).  Properties  and digestibility  of  a  novel  porous  starch from lotus seed prepared via synergistic enzymatic treatment. International
Journal  of  Biological  Macromolecules , 194 (November 2021), 144–152. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2021. 11.196
Majzoobi,  M.,  Hedayati,  S.,  dan  Farahnaky,
A.  (2015).  Functional  properties  of microporous  wheat  starch  produced  by α-amylase and sonication. Food Bioscience , 11 , 79–84. https://doi.org/10.1016/j.fbio.2015.05.0 01
Miller,  G.  L.  (1959).  Use  of  Dinitrosalicylic
Acid  Reagent  for  Determination  of
Reducing  Sugar. Analytical  Chemistry ,
426–428.
https://doi.org/10.1021/ac60147a030
Parwiyanti,  Pratama,  F.,  dan  Arnita,  R. (2011). Sifat Kimia dan Fisik Gula Cair dari  Pati  Umbi  Gadung  (Dioscorea hispida Dennts) [Chemical and Physical Properties  of  Liquid  Sugar  from  Yam (Dioscorea  hispida  Dennts)  Starch]. Hasil Penelitian J. Teknol. Dan Industri Pangan , XXII (2).
Pramasari,  D.  A.,  Sondari,  D.,  Adi,  D.  S., Widyaningrum,  B.  A.,  Fajar,  A.,  Putri, R.,  Restu,  W.  K.,  dan  Putri,  E.  H. (2020). Karakteristik Pati Berpori Mikro dari  Tapioka  Hasil  Perlakuan  Amilase sebagai  Agen  Penjerapan  Minyak. Jurnal  Teknologi  &  Industri  Hasil Pertanian , 25 (2), 71–80.
Purnawan,  A.,  Capriyanti,  Y.,  Kurniatin,  P., dan  Rahmani,  N.  (2015).  Optimasi produksi enzim amilase dari bakteri laut jakarta (Arthrobacter Arilaitensis).
Indonesian  Journal  of  Biology , 11 (2), 215–224.
Rahmani,  N.,  Andriani,  A.,  dan  Prima,  A. (2011).  Production  and  characterization of  amylase  enzyme  from  marine bacteria. Proceedings  of  the  2nd International  Seminar  on  Chemistry. November 2011. Jatinangor .
Rahmani,  N.,  Andriani,  A.,  Yopi,  Y.,  dan Hartati, S. (2015). Production of Malto- Oligosaccharides from Cassava Cultivar Kuning. Jurnal  Penelitian  Pascapanen Pertanian , 12 (3), 147–155.
Rahmani, N., Putri, F. H., Martin, A. F., dan Yopi. (2019). Enzymatic Hydrolysis  Of Hutan  Jati  Variety  Cultivar  Tacca (Tacca  leontopetaloides)  Starch  by  The Brevibacterium  sp.  α-Amylase  And  Its Potential for Production of Maltooligosaccharides. Biotropia , 26 (2), 104–114. https://doi.org/10.11598/btb.2019.26.2.8 90
Robertson,  G.  H.,  Wong,  D.  W.  S.,  Lee,  C. C.,  Wagschal,  K.,  Smith,  M.  R.,  dan Orts, W. J. (2006). Native or raw starch digestion: A key step in energy efficient biorefining of grain. Journal of
Agricultural  and  Food  Chemistry , 54 (2),
353–365. https://doi.org/10.1021/jf051883m Romadona,  D.  N.  (2012). Hidrolisis  pati palma menggunakan α -amilase (Skripsi) .  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
Silva, N. M. C. Da, Lima, F. F. de, Fialho, R. L.  L.,  Albuquerque,  E.  C.  d.  M.  C., Velasco,  J.  I.,  dan  Fakhouri,  F.  M. (2018). Production and Characterization of Starch Nanoparticles. Applications of
Modified Starches . https://doi.org/10.5772/intechopen.7436 2
Sondari, D., Kusumaningrum, W. B., Akbar, F., Putri, R., Fahmiati, S., Sampora, Y., dan Muawanah, A. (2020). Penambahan Fraksi  Amilosa  Terhadap  Sifat  Fisik Dan Mekanis Edible Film Pati Tapioka.
Jurnal  Kimia  Dan  Kemasan , 42 (2),  74. https://doi.org/10.24817/jkk.v42i2.6095
Uthumporn, U., Zaidul, I. S. M.,  dan Karim, A.  A.  (2010).  Hydrolysis  of  granular starch  at  sub-gelatinization  temperature using a mixture of amylolytic enzymes. Food  and  Bioproducts  Processing , 88 (1),
47–54. https://doi.org/10.1016/j.fbp.2009.10.00 1
Vamadevan,  V.,  dan  Bertoft,  E.  (2015).
Structure-function relationships of starch components. Starch/Staerke ,
67 (1–2), 55–68. https://doi.org/10.1002/star.201400188
Winarno,  F.  .  (2010). Enzim  Pangan (Edisi Revi). M-Brio Press.
Wu,  Y.,  Du,  X.,  Ge,  H.,  dan  Lv,  Z.  (2011).
Preparation  of  microporous  starch  by glucoamylase and ultrasound.
Starch/Staerke Journal , 63 (4), 217–225. https://doi.org/10.1002/star.201000036
Yunianta,  Sulistyo,  T.,  Estiasih,  T.,  dan
Wulan,  N.  (2010).  Hidrolisis  Secara Sinergis
Pati Garut (Marantha arundinaceae  L.)  Oleh  Enzim  Amylase, Glukoamilase  dan  Pullunase  Untuk Produksi Sirup Glukosa. Jurnal
Teknologi Pertanian , 11 , 78–86.
Zhai,  Y.,  Li,  X.,  Bai,  Y.,  Jin,  Z.,  dan Svensson,  B.  (2022).  Maltogenic  α- amylase  hydrolysis  of  wheat  starch granules:  Mechanism  and  relation  to starch
retrogradation.
Food Hydrocolloids , 124 (PA), 107256.
https://doi.org/10.1016/j.foodhyd.2021.
107256
Zhang,  D.,  Jiang,  F.,  Ling,  J.,  Ouyang,  X. kun, dan  Wang,  Y. G. (2021). Delivery of  curcumin  using  a  zein-xanthan  gum nanocomplex:
Fabrication,
characterization,  and  in  vitro  release properties. Colloids  and  Surfaces  B: Biointerfaces , 204 , 111827. https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2021.1
11827