Pengaruh Pemberian Monosodium Glutamat peroral terhadap Degenerasi Neuron Piramidal CA1 Hipokampus pada Tikus Wistar

## Halomoan Simon, Hexanto Muhartomo, Dwi Pudjonarko
Latar  belakang  : Monosodium  glutamat  (MSG)  adalah  garam sodium  dari  asam  amino  asam  glutamat  digunakan  luas  di masyarakat sebagai penyedap rasa. Pemakaian MSG dalam dosis tepat  relatif  aman.  Penggunaan  MSG  dalam  dosis  tinggi  dan berlangsung  lama  menyebabkan  gangguan  neuroendokrin  dan degenerasi neuron, sehingga muncul pertanyaan seberapa jauh MSG peroral berpengaruh terhadap degenerasi neuron piramidal di  regio  CA1  hipokampus.  Tujuan  penelitian  ini  adalah membuktikan  pengaruh  pemberian  MSG  peroral  terhadap degenerasi neuron piramidal di regio CA1 hipokampus pada tikus Wistar.
Metode: Penelitian  eksperimental  laboratorik  dengan  30  tikus Wistar jantan usia 8 minggu, berat 200 gram dibagi menjadi 5 kelompok (1 kelompok kontrol, 4 kelompok perlakuan) diberikan MSG secara oral dosis 5 mg/grBB/hr dan 10 mg/grBB/hr selama 4  minggu.  Setelah  2  minggu  dan  4  minggu  perlakuan  dilakukan pemeriksaan patologi anatomi di jaringan hipokampus dan rerata jumlah sel piramidal yang berdegenerasi pada CA1 hipokampus dianalisa dengan Uji ANOVA dilanjutkan Post Hoc , Kruskal Wallis Test dilanjutkan Mann-Whitney  Test ,  uji Paired  T-Test dan Wilcoxon Signed Ranks Test . Analisa data menggunakan program SPSS versi 17.0.
Hasil: Ada  perbedaan  bermakna  pada  rerata  jumlah  neuron piramidal  yang  berdegenerasi  di  regio  CA1  hipokampus  antara kelompok  penelitian setelah  2  minggu  dan  4  minggu  perlakuan ( p =0,0001).
Simpulan: Pemberian MSG per oral dosis 5 mg/grBB/hr dan 10 mg/grBB/hr  selama  2  minggu  dan  4  minggu  terbukti berpengaruh  terhadap  rerata  jumlah  neuron  piramidal  yang berdegenerasi di region CA1 hipokampus tikus Wistar.
Kata kunci: Monosodium glutamat , degenerasi neuron piramidal CA1 hipokampus.
Bagian/SMF Ilmu Saraf Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro/RSUP Dr. Kariadi Semarang

## Abstrak
Background  : Monosodium  glutamate  (MSG),  a  sodium  salt  of glutamic acid amino, is used widely in society as a flavor. The usage of MSG in proper dose is relatively safe, but long term usage of high dose  MSG  causes  neuroendocrine  disorders  and  neuron degenerations, leading to the question how far the oral MSG affect pyramidal  neuron  degeneration  in  the  CA1  region  of  the hippocampus. The purpose of the study was to prove the effect of oral  MSG  administration  to  pyramidal  neurons  degeneration  in CA1 region of the hippocampus in Wistar rats.
Methods : A Laboratory experimental study with 30 male Wistar rats aged 8 weeks, weighting 200 grams divided into 5 groups (1 control group, treatment groups 4) given orally MSG dose of 5 mg/gBW/day and 10 mg/gBW/day for 4 weeks. After 2 weeks and  4  weeks  of  exposure,  anatomic  pathology  examination  of hippocampal tissue and the mean number of pyramidal neurons degeneration in the CA1 hippocampal were analyzed by ANOVA test  followed  by  Post  Hoc,  Kruskal  Wallis  test  followed  by Mann–Whitney  Test,  Paired  T–Test  and  Wilcoxon  Signed  ranks Test. Data analysis using SPSS version 17.0
Results : There ware significant differences in the mean number of pyramidal  neurons  degeneration  in  the  CA1  region  of  the hippocampus between the study groups, after 2 weeks and 4 weeks of treatment ( p =0.0001).
Conclusion : Oral administration of MSG , dose of 5 mg/gBW/day and 10 mg/gBW/day in the treatment group for 2 weeks and 4 weeks of exposure is proven to affect the average number of pyramidal neurons degeneration in the hippocampal CA1 region of Wistar rats.
Keywords: Monosodium  glutamate,  degeneration  of hippocampal CA1 pyramidal neurons

## Abstract
Effect of Monosodium Glutamate Given Orally on Degeneration of Hippocampal CA1 Pyramidal Neurons in Wistar Rat

## Original Article
Med Hosp 2013; vol 1 (3) : 175-181

## Medica Hospitalia

## PENDAHULUAN
Monosodium  glutamat  (MSG)  adalah  salah  satu  bahan penyedap  masakan  dan  banyak  digunakan  untuk merangsang selera makan yang ditambahkan ke dalam masakan  baik  sebagai  garam  monosodium  murni  atau sebagai  komponen  dari  campuran  asam  amino  yang
1 dihasilkan dari proses hidrolisis enzimatik protein.  MSG merupakan  garam  natrium  dari  asam  glutamat  dan
2 merupakan  bentuk  dari  glutamat.   Penggunaannya tanpa peringatan apapun dalam setiap label dan tanpa
2 takaran  untuk  mendapatkan  cita  rasa  yang  lezat,   juga dipakai  untuk  jangka  waktu  yang  lama  dapat mengakibatkan  adanya  akumulasi  glutamat  sehingga menimbulkan  eksitotoksin  dan  menyebabkan eksitotoksisitas glutamat terutama pada area otak seperti korteks  serebri,  striatum,  hipokampus,  hipotalamus, thalamus,  otak  kecil,  sistem  penglihatan  dan  sistim
3 pendengaran. Excitotoxicity glutamat  juga  memicu terjadinya proses degenerasi sel yaitu suatu proses yang terkait  erat  dengan  fisiologi  mitokondria  dan  salah satunya  menunjukkan  gambaran  baik  apoptosis  dan nekrotik  sel  termasuk  pada  neuron  piramidal  di  CA1 1,3,4 hipokampus.
Glutamat  pada  kadar  yang  sesuai  merupakan neurotransmitter yang penting untuk proses komunikasi 5 antar sel-sel saraf (neuron) otak.  Glutamat dalam dosis tinggi  menyebabkan  gangguan  neuroendokrin  dan
6 degenerasi  Neuron.   Sejumlah  studi  menunjukkan pemberian MSG dosis tunggal secara subkutan antara 0,5–4 mg/gramBB pada tikus jenis albino swiss usia 2–9 hari menyebabkan kematian pada tikus tersebut dan dari pemeriksaan  histologis  ditemukan  adanya  kerusakan pada  nukleus  arkuata  hipotalamus,  edema  intraseluler dan  nekrosis  pada  jaringan  saraf.  Lesi  akut  juga ditemukan  di  otak  tikus  dewasa  yang  diberikan  MSG 7 dosis tinggi antara 5–7 mg/gramBB secara subkutan.
Hipokampus merupakan daerah pada otak yang terlibat atau berperan penting dalam proses belajar dan ingatan (learning and memory) . Hipokampus juga terlibat dalam  akuisisi  dan  retensi  infomasi  spasial.  Pada formatio  hipokampus  banyak  ditemukan  reseptor NMDA,  khususnya  pada  lempeng  CA1.  Kemampuan glutamat  untuk  membunuh  neuron  (bersifat eksitotoksin)  dihubungkan  secara  prinsip  oleh  adanya interaksi  dengan  reseptor  NMDA  yang  memicu 2+ terjadinya peningkatan Ca  intraseluler sehingga terjadi kerusakan membran sel saraf (neuron), sitoskeleton dan DNA  yang  akhirnya  mengakibatkan  kematian  neuron tersebut termasuk neuron piramidal. Neuron piramidal sendiri  ditemukan  pada  sebagian  besar  struktur  otak depan  mamalia,  termasuk  kortek  serebri,  hipokampus dan  amigdala.  Gangguan  pada  daerah  hipokampus termasuk  daerah  CA1  akan  menyebabkan  gangguan 11 pada  memori.   Gangguan  lebih  berat  terjadi  jika 7,8 melibatkan lesi pada nukleus amigdala.
Efek akumulasi glutamat karena pemakaian MSG untuk  jangka  waktu  lama  dan  penggunaannya  tanpa peringatan apapun dalam setiap labelnya dikhawatirkan dapat  menyebabkan Excitotoxicity glutamat  sehingga 2–4 memicu  terjadinya  proses  degenerasi  sel.   Studi  ini dilakukan  untuk  membuktikan  adanya  pengaruh pemberian  MSG  peroral  terhadap  degenerasi  neuron piramidal di CA1 hipokampus pada tikus Wistar.

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimental laboratorik  dengan  rancangan  acak  sederhana Control Group Design pada 5 kelompok hewan coba tikus Wistar jantan dan dilakukan pemberian MSG peroral dosis 5  mg/gramBB/hr  dan  10  mg/gramBB/hr  diselingi pemberian pakan standar BR-2 selama 2 minggu dan 4 minggu, kemudian dilakukan penilaian jumlah rerata neuron  piramidal  yang  mengalami  degenerasi  di  regio CA1  hipokampus  setelah  2  minggu  dan  4  minggu perlakuan.
Penelitian  berlangsung  pada  bulan  Juli–Agustus 2012.  Pemeliharaan  hewan  coba  dan  pemberian  MSG peroral  dilakukan  di  laboratorium  Jurusan  Biologi FMIPA  Universitas  Negeri  Semarang.  Pemeriksaan sediaan  histopatologis  jaringan  otak  (hipokampus)  di laboratorium  Patologi  Anatomi  FK UNDIP.  Kriteria Inklusi : tikus Wistar jantan usia 8 minggu dengan bobot badan 200 Gram   dan aktifitas dan tingkah laku normal. Kriteria  eksklusi:  tikus  Wistar  yang  mengalami  stress (mutisme, agresif). Kriteria drop out: tikus yang menderita sakit (diare) selama penelitian, bobot badan tikus yang menurun  hingga  kurang  dari  200  Gram,  tikus  mati selama masa penelitian.
Tikus  penelitian  dibagi  menjadi  5  kelompok, masing-masing  terdiri  dari  6  ekor  tikus  dimasukkan dalam  5  kandang  berbeda  hingga  penelitian  berakhir. Kelompok I   (P1) adalah tikus kontrol (tidak mendapat MSG),  kelompok  II  (P2)  adalah  tikus  yang  mendapat MSG oral dosis 5 mg/gramBB/hr selama 2 minggu dan kelompok III (P3) adalah tikus yang mendapat MSG dosis oral 10 mg/gramBB/hr selama 2 minggu, kelompok IV (P4) adalah tikus yang mendapat MSG oral dosis 5 mg/gramBB/hr selama 4 minggu dan  kelompok V (P5) a d a l a h   t i k u s   y a n g   m e n d a p a t   M S G   d o s i s   o r a l 10  mg/gramBB/hr  selama  4  minggu.  Kelompok  II–V diberikan  MSG  secara  peroral  satu  kali  sehari  selama perlakuan dan masing-masing tikus diselingi pemberian pakan standar BR–2. Setelah perlakuan (2 minggu dan 4  minggu)  dilakukan  pemeriksaan  patologi  anatomi jaringan hipokampusnya.
Penilaian  sampel  sediaan  jaringan  otak (hipokampus) berdasarkan perhitungan jumlah neuron piramidal  di  daerah  CA1  hipokampus  yang berdegenerasi  (inti  neuron  piramidal  yang  piknotik). Menggunakan  mikroskop  merek Olympus tipe CX  31
dengan  pembesaran  40x  dan  400x,  serta  menggunakan mikrometer  berskala  0,47  millimeter.  Pemeriksaan dilakukan  2  ahli  Patologi  Anatomi  Bagian  Patologi Anatomi  Laboratorium  sentral  Fakultas  Kedokteran 9–11 UNDIP serta dihitung agreement test nya. Analisis  statistik  menggunakan  Uji ANOVA dilanjutkan Post  Hoc,  Kruskal  Wallis  Test dilanjutkan Mann-Whitney Test , uji Paired T-Test dan Wilcoxon Signed Ranks  Test .  Analisa  data  menggunakan  program  SPSS versi  17.0.  Penelitian  mendapatkan  persetujuan  dari Komisi  Etik  Penelitian  Kedokteran  FK  UNDIP/RSDK nomer 267/EC/FK/RSDK/2012.

## HASIL PENELITIAN

## 1.  Penilaian  Patologi  Anatomi  terhadap  Jumlah Neuron  Piramidal  yang  Berdegenerasi  di  Regio CA1 Hipokampus.
Adanya degenerasi neuron piramidal CA1 hipokampus berupa inti neuron yang piknotik pada ketiga kelompok penelitian  merupakan  penilaian  pemeriksaan  patologi anatomi jaringan CA1 hipokampus tikus Wistar setelah 2  minggu  dan  4  minggu  perlakuan.  Degenerasi  yang
terjadi pada neuron piramidal didapatkan dalam jumlah yang  berbeda  dan  makin  meningkat  jumlahnya  sesuai dengan  besar  dosis  MSG  dan  lamanya  paparan  MSG terhadap  jaringan  CA1  hipokampus  tikus  Wistar tersebut.
2.  Jumlah  Neuron  Piramidal  yang  Berdegenerasi  di Regio  CA1  Hipokampus  Tikus  Wistar  pada berbagai dosis MSG
Hasil analisis statistik dengan One Anova Way terhadap jumlah  neuron  piramidal  CA1  hipokampus  yang degenerasi pada tiap kelompok penelitian menunjukkan perbedaan  bermakna  ( p <0,0001)  baik  selama  2  minggu dan 4 minggu perlakuan.
Hasil analisis post hoc test Bonferroni selama 2  minggu  perlakuan  didapatkan  perbedaan  bermakna pada jumlah neuron piramidal yang berdegenerasi baik antara kelompok kontrol dengan kelompok yang  diberi MSG dosis 5 mg/grBB/hr ( p =0,0001), kelompok kontrol dengan  kelompok  yang  diberi  MSG  dosis  10  mg/ grBB/hr  ( p =0,0001)  serta  antara  kelompok  pemberian MSG  dosis  5  mg/grBB/hr  dan  kelompok  dengan pemberian MSG dosis 10 mg/grBB/hr ( p =0,0001).
Gambar 1. Hasil PA jaringan CA1 hipokampus kelompok kontrol.
Gambar 2. Kelompok pemberian MSG dosis 5 mg/grBB/hr.
Pembesaran 40 x
Pembesaran 40 x
Pembesaran 400 x selama 2 minggu
Pembesaran 400 x selama 4 minggu
Medica Hospitalia | Vol. 1, No. 3, Mei 2013
Gambar 3. Kelompok pemberian MSG dosis 10 mg/grBB/hr.
Pembesaran 400 x selama 2 minggu
Pembesaran 400 x selama 4 minggu * Uji One Anova Way
* Signifikan p <0,05

## TABEL 1
Analisis rerata jumlah neuron piramidal yang berdegenerasi di regio CA1 hipokampus tiap kelompok penelitian selama 2 minggu.
Jumlah neuron piramidal CA1 hipokampus yang berdegenerasi Kontrol 9,8 ± 0,34 <0,0001* p* Rerata ± SB
MSG dosis
5 mg/kgBB/hr 11,9 ± 0,53
Rerata ± SB MSG dosis 10 mg/kgBB/hr 13,8 ± 0,75 Rerata ± SB
* Uji Kruskall Wallis * Signifikan p <0,05

## TABEL 2
Analisis rerata jumlah neuron piramidal yang berdegenerasi di regio CA1 hipokampus tiap kelompok penelitian selama 4 minggu.
Jumlah neuron piramidal CA1 hipokampus yang berdegenerasi Kontrol 9,8 ± 0,34 MSG dosis
5 mg/kgBB/hr
20,4 ± 3,19 <0,0001* p* Rerata ± SB Rerata ± SB
MSG dosis 10 mg/kgBB/hr 24,6 ± 2,32 Rerata ± SB Mann Whitney Test * Signifikan p <0,05

## TABEL 4
Hasil analisis uji beda jumlah neuron piramidal pada CA1 hipokampus yang mengalami degenerasi tiap kelompok perlakuan selama 4 minggu
MSG Dosis 5 mg/grBB/hari
Kontrol
Variabel MSG Dosis 5 mg/grBB/hr 0,004* – MSG Dosis 10 mg/grBB/hr 0,004* 0,025*
Post Hoc Test Bonferoni
* Signifikan p <0,05

## TABEL 3
Hasil analisis uji beda jumlah neuron piramidal pada CA1 hipokampus yang mengalami degenerasi tiap kelompok perlakuan selama 2 minggu.
MSG Dosis 5 mg/grBB/hari
Kontrol
Variabel MSG Dosis 5 mg/grBB/hr < 0,0001 – MSG Dosis 10 mg/grBB/hr < 0,0001 < 0,0001
Hasil analisis uji beda selama 4 minggu perlakuan juga  didapatkan  perbedaan  bermakna  pada  jumlah neuron  piramidal  yang  berdegenerasi,  baik  antara kelompok  kontrol  dengan  kelompok  yang  diberi  MSG dosis 5 mg/grBB/hr ( p =0,004), kelompok kontrol dengan kelompok  yang  diberi  MSG  dosis  10  mg/grBB/hr ( p =0,004) serta antara kelompok pemberian MSG dosis 5  mg/grBB/hr  dan  kelompok  dengan  pemberian  MSG dosis 10 mg/grBB/hr ( p =0,025).
Analisa statistik untuk menilai perbedaan rerata jumlah neuron piramidal yang berdegenerasi pada CA1 hipokampus   antara 2 minggu dan 4 minggu perlakuan pada kelompok yang diberi MSG, didapatkan hasil yang bermakna  yaitu  untuk  kelompok  dengan  pemberian MSG  dosis  5  mg/mgBB/hr  ( p =0,028)  dan  untuk kelompok  dengan  pemberian  MSG  dosis  10  mg/ mgBB/hr ( p <0,001).
Hasil  analisis  selisih  uji  beda (Delta) terhadap jumlah neuron piramidal yang mengalami degenerasi di regio CA1 hipokampus tikus Wistar antara 2 minggu dan 4  minggu  pada  masing-masing  kelompok  perlakuan didapatkan hasil yang bermakna secara statistik dengan ( p =0.037).
Hasil  analisis  test  kesesuaian (agreement  test) terhadap  2  ahli  patologi  anatomi  didapatkan  nilai koefisien  korelasi (Cronbach  Alpha) yang  konsisten  (uji kesesuaian/ agreement  test pemeriksaan  patologi anatomi) sebesar 88,4% dengan ( p =0,0001).

## PEMBAHASAN
Pemberian  dosis  MSG  yang  cukup  tinggi  dan  lamanya paparan  dikhawatirkan  dapat  menyebabkan  terjadi proses degenerasi pada neuron piramidal, khususnya di region  CA1  hipokampus  melalui  mekanisme 1,3,4 excitotoxicity  glutamate . Penulis  melakukan  penilaian di daerah CA1 hipokampus dikarenakan daerah tersebut merupakan salah satu daerah yang terbesar dan paling mudah diidentifikasi disamping CA3. Neuron utama di daerah  CA (Cornu  Ammonis) merupakan  neuron piramidal  dan  merupakan  90%  dari  semua  neuron  di
p a 0,028* b < 0,001* 4 minggu Rerata ± SB 20,4 ± 3,19 24,6 ±  2,32 2 minggu Rerata ± SB 11,8 ± 0,53 13,8 ±  0,75
* Signifikan p < 0,05 a Wilcoxon Signed Ranks Test b  Paired Samples Test

## TABEL 5
Perbedaan rerata jumlah neuron piramidal yang mengalami degenerasi pada CA1 hipokampus antara 2 minggu dan 4 minggu pada kelompok perlakuan
MSG 10 mg/grBB/hari MSG 5 mg/grBB/hari Variabel p 0,037* Rerata ± SB 8,5 ± 3,18
10,8 ± 1,81 * Signifikan p < 0,05 Mann Whitney Test

## TABEL 6
Hasil analisis selisih uji beda rerata jumlah neuron piramidal yang berdegenerasi di regio CA1 hipokampus antara 2 minggu dan 4 minggu pada masing-masing kelompok penelitian.
MSG Dosis 10 mg/grBB/hari
MSG Dosis 5 mg/grBB/hari
Variabel Kontrol 2 minggu 4 minggu 0 5 10 15 20 25 30 MSG 5 mg/grBB/hari MSG 10 mg/grBB/hari R er at a ju m la h n eu ro n p ir am id al y an g b er d eg en er as i d i r eg io C A 1 h ip o ka m p u s
Gambar 4. Perbedaan rerata jumlah  neuron piramidal yang berdegenerasi di CA1 hipokampus  antara 2 minggu dan 4 minggu pada kelompok perlakuan.
daerah  CA  formasio  hipokampal.  Neuron output dari hipokampus  adalah  neuron  piramidal  CA1  dan  akson 12 mereka merupakan glutamatergik.
Proses  degenerasi  tersebut  ditandai  dengan adanya  inti  neuron  yang  piknotik  (menyusut),  menjadi padat, batasnya tidak teratur dan berwarna gelap (pada pengecatan  hematoksilin  eosin  bersifat  lebih 13–15 eosinofilik). Sejumlah  faktor  dan  proses  yang berkontribusi  terhadap  proses  degenerasi  sel  saraf termasuk  peningkatan  stres  oksidatif,  kerusakan  sel akibat  radikal  bebas,  gangguan  fungsi  mitokondria,
Pengaruh Pemberian Monosodium Glutamat peroral terhadap Degenerasi Neuron Piramidal CA1 Hipokampus pada Tikus Wistar
excitotoxicity glutamate , faktor imunologi dan mekanisme 14,16,17 inflamasi.
Uji  statistik  terhadap  rerata  jumlah  neuron piramidal  yang  mengalami  proses  degenerasi  (proses apoptosis atau nekrosis) diregio CA1 hipokampus pada masing-masing  kelompok  penelitian  selama  2  minggu dan 4 minggu ditemukan ada perbedaan bermakna pada semua  kelompok  penelitian  dan  antara  kelompok penelitian.  Hasil  ini  menandakan  bahwa  telah  terjadi suatu  kondisi excitotoxicity  glutamate akibat  pemberian MSG peroral baik dosis 5 mg/grBB/hr maupun 10 mg/ grBB/hr  selama  2  minggu  dan  4  minggu  pada  neuron khususnya neuron piramidal di regio CA1 hipokampus yang mengakibatkan stimulasi yang berlebihan terhadap reseptor  NMDA. Over stimulasi  tersebut  dapat menyebabkan  perubahan  pada  gradien  ionik  yang menginduksi proses excitotoxicity sehingga terjadi proses degenerasi  neuronal  dan  memicu  berbagai  kaskade neurotoksik,  termasuk uncoupling transfer  elektron mitokondria  dari  sintesis  ATP  dan  overstimulasi  dari enzim  seperti phospholipase,  protease,  phosphatase dan endonuclease yang  pada  akhirnya  menghasilkan kerusakan membran sel, sitoskeleton dan DNA sehingga mengakibatkan  kematian  sel,  termasuk  kematian  sel 16–18 saraf otak.
Terdapat  hipotesis  mengenai  kematian  sel  saraf sebagai akibat dari mekanisme depolarisasi neurotoksik glutamat yang dikenal sebagai “Excitotoxic Hyphothesis Of Neuronal  Death” .  Penelitian  yang  dilakukan  mengenai pengaruh  eksogen  monosodium  glutamat  terhadap jaringan otak hipotalamus pada bayi tikus, bayi monyet, ditemukan proses pembengkakan (rapid swelling) dari sel neuronal  body  dan  dendrit  diikuti  dengan  perubahan degeneratif  organel  intraseluler  dan  kromatin 17,19,20 nukleus.
Uji  beda  antara  rerata  jumlah  neuron  piramidal yang mengalami proses degenerasi pada masing-masing kelompok  penelitian  pada  2  minggu  dan  4  minggu ditemukan  ada  perbedaan  bermakna.  Hasil  ini  sesuai dengan  pernyataan  yang  menyebutkan  bahwa  makin besar  dosis  MSG  dan  makin  lama  paparan  yang diberikan  maka  makin  besar  kemungkinan  neuron terekspos dengan glutamat (excitotoxicity glutamate) dan bersifat  kumulatif  maka  sel-sel  termasuk  neuron  di hipokampus  tersebut  akan  mudah  mengalami  proses 17,20–22 degenerasi. Neuron  utama  di daerah  CA  (Cornu Ammonis) adalah  neuron  piramidal  dan  terbanyak  di CA1  yang  aksonnya  bersifat  glutamatergik  sehingga
12 paling rentan terhadap efek eksitotoksik glutamat.
Adanya  proses  degenerasi  neuron  piramidal diregio CA1 hipokampus pada kelompok kontrol (tanpa pemberian MSG) dapat disebabkan karena adanya faktor stress  yang  berkaitan  dengan  perlakuan  fisik  saat pemberian  MSG  secara  personde,  saat  menimbang hewan  coba  untuk  melihat  kondisi  berat  badannya, mengangkat  hewan  coba  saat  hendak  diberi  MSG  dan interaksi  antara  hewan  coba  didalam  kandang  dimana dalam satu kandang ada 6 hewan coba.
Kondisi  Stres  kronik  dapat  menyebabkan penurunan  kecepatan  aliran  darah  dan  reaktifitas vasomotor,  sehingga  metabolisme  otak  terganggu  dan akan  mempengaruhi  neuron  otak  termasuk  neuron piramidal  di  region  CA1  hipokampus  melalui  kaskade 23–25 iskemik. Pada keadaan stress kelenjar adrenal secara cepat menghasilkan adrenalin dan melepaskan kortisol yang  sering  disebut  hormon  stress.  Kortisol  dalam jumlah  cukup  ternyata  memiliki  efek  yang  baik  pada tubuh  seperti  meningkatkan  letupan  energi, meningkatkan  fungsi  memori,  dan  meningkatkan imunitas.  Pada  kondisi  stres  yang  terjadi  secara  terus menerus  hormon  kortisol  akan  menetap  dalam  jumlah besar  dan  dapat  merusak  hipokampus.  Kondisi  stres kronik ini juga dapat dialami oleh tikus penelitian jenis Wistar sehingga  menyebabkan  terjadinya  proses degenerasi neuron otak khususnya neuron piramidal di hipokampus  dan  pada  akhirnya  menyebabkan 26,27 gangguan fungsi hipokampus dan memori.
Keterbatasan penelitian ini adalah penulis hanya meneliti proses degenerasi neuron piramidal di regio di CA1 hipokampus saja dan tidak melibatkan regio CA3 hipokampus  yang  juga  banyak  mengandung  neuron piramidal  dan  mudah  diidentifikasi  didalam  melihat pengaruh excitotoxicity glutamate akibat  pemberian MSG peroral  pada  tikus  Wistar  terhadap  terhadap  proses degenerasi  neuronal  tersebut,  meskipun  dalam kepustakaan ada disebutkan bahwa neuron output dari hipokampus  adalah  neuron  piramidal  CA1  dan  akson 12 mereka merupakan glutamatergik.
Medica Hospitalia | Vol. 1, No. 3, Mei 2013
-2.50 7.50 5.00 2.50 0.00 6 11 * MSG Dosis 10 mg/grBB/hari MSG Dosis 5 mg/grBB/hari Kelompok Se lis ih ju m la h n eu ro n y an g b er d eg en er as i
Gambar 5. Selisih uji beda rerata jumlah neuron piramidal yang  berdegenerasi  di  regio  CA1  hipokampus  pada  tiap kelompok perlakuan.

## SIMPULAN
Pemberian  monosodium  glutamat  peroral  dosis  5  mg/ grBB/hr dan 10 mg/grBB/hr selama 2 minggu dan 4 minggu terbukti berpengaruh terhadap jumlah neuron piramidal  CA1  hipokampus  yang  berdegenerasi  pada tikus Wistar.
Semakin  besar  dosis  dan  semakin  lama  paparan MSG  peroral  diberikan  terbukti  semakin  bertambah jumlah  neuron  piramidal  yang  berdegenerasi  di  regio CA1 hipokampus tikus Wistar.
Perlunya  penelitian  yang  lebih  lanjut  mencakup regio CA3 dan regio hipokampus lainnya untuk melihat pengaruh MSG peroral yang lebih luas terhadap proses degenerasi  neuron  piramidal  pada  hipokampus. Penelitian ini juga diharapkan dapat dijadikan referensi terhadap  penelitian  selanjutnya  yang  menggunakan MSG dan hubungannya dengan proses neurodegenerasi pada  neuron  piramidal  di  wilayah  hipokampus  atau bagian  otak  lainnya  serta  yang  berhubungan  dengan fungsi kognitif.
Mengingat  telah  terdapatnya  proses  degenerasi neuron  piramidal  di  regio  CA1  hipokampus  pada pemberian MSG peroral dengan dosis dan lama paparan yang  diteliti  penulis  maka  hasil  penelitian  ini  dapat dijadikan  bahan  pertimbangan  dalam  penggunaaan MSG  sehari-hari  terutama  dalam  jangka  waktu  yang lama  untuk  mencegah  efek  eksitotoksik  glutamat  dan mengingat hipokampus berperan penting dalam proses belajar dan ingatan (learning and memory) .

## DAFTAR PUSTAKA
1. Abass  MA,  Abd  El-Haleem  MR.  Evaluation  of  Monosodium Glutamate Induced Neurotoxicity and Nephrotoxicity in Adult Male Albino Rats. Journal AM Science. 2011;7(8): 264–276.
2. Administration,  U.S.Food  and  Drug  1995.  FDA  and Monosodium glutamate (MSG). FDA Back Gramounder.
3. Blaylock  R.L.  Excitotoxins,  Neurodegeneration  and Neurodevelopmental . The Medical Sentinel Journal 2000.
4. Olney,  JW  Glutamat-induced  neuronal  necrosis  in  the  infant mouse hypothalamus: An Electron Microscopic Study. Journal Neuropath  Exp Neur. 1971: 30 (1): 75–90.
5. Cekic S, Filipovic M, Pavlovic V, Ciric M,Nesic M, Jovic Z, et al. Histopathologic  changes  at  the  hypothalamic,adrenal  and thymic nucleus arcuatus in rats treated with monosodium. Acta MedicaMedianae 2005. 44: 35–42
6. Moreno  G,  Perello  M,  Gaillardand  RC  and  Spine  E  (2005): Orexin a stimulates hypothalamic- pituitv- adrenal ( HPA) axis function, but not food intake in the absence of full hypothalamic NPY- ergic activity.Endocrine, 26: 99–106.
7. Olney JW. Brain lesions, obesity, and other disturbances in mice treated  with  monosodium  glutamat.  Science1969; 164(880):719–721.
8. Sanyoto  DD,  Kamid  A,  Gunawan  A.  Pengaruh  pemberian monosodium  glutamat  (MSG)  subkutan  terhadap  memori spasial mencit mus musculus. JPB, 2003 Vol.5, No.3.
9. Budisulistiyo  T.  Hubungan  antara  aterosklerosis  yang dilatarbelakangi dislipidemia terhadap fungsi memori spasial tikus  wistar  [Tesis  PPDS].  Semarang:  Universitas
Diponegoro;2006.
10. Sastroasmoro  S,  Ismael  S.  Dasar-dasar  Metodologi  Penelitian Klinis. Jakarta CV. Sagung Seto;2008.
11. Kraemer  HC,  Periyakoil  VS,  Noda  A.  Kappa  coefficients  in medical research. Tutorial In Biostatistics [internet].2004 [cited 2 0 1 2   A u g u s t   3 ] ; 1 : 8 5 - 1 0 3 .   A v a i l a b l e   f r o m : http://media.johnwiley.com.au/product_data/excerpt/51/ 04700236 /0470021-1.pdf.
12. Sweatt  JD.  The  Hippocampus  Serves  a  Role  in  Multimodal Information  Processing,  and  Memory  Consolidation  in Mechanism Of Memory. California:  Academic Press ; 2003.
13. Fakunle PB, Ajibade AJ, Oyewo EB, Alumu OA, Daramola AK. Neurohistological  Degeneration  of  the  Hippocampal Formation Following Chronic Simultaneous Administration of Ethanol  and  Acetaminophen  in  Adult  Wistar  Rats  (Rattus norvegicus). J Pharmacol Toxicol.2011;6(8):701–9.
14. Alao OA, Ashaolu JO, Ghazal OK, Ukwenya VO. Histological and biochemical effects of monosodium glutamaton the frontal lobe of adult Wistar rats. International Journal of Biomedical and Health Sciences. 2010:4(4):197–203.
15. Santa-Cruz  LD,  Ramírez-Jarquín  UN,  Tapia  R.  Role  of Mitochondrial   Dysfunction in Motor Neuron Degeneration in ALS.  in  :  Maurer  M,  editor.  Amyotrophic  Lateral  Sclerosis. Croatia ; 2012. p.197–210.
16. Pagnussat  AdS,  Faccioni  MC,  Netto  CA,  Achaval  M.  An ultrastructural study of cell death in the CA1 pyramidal field of the hippocampus in rats submitted to transient global ischemia followed by reperfusion. J. Anat. 2007; 211: 589–99.
17. Mark  LP,  Prost  RW,  Ulmer  LJ,  Smith  MM,  Daniels  DL, Strottmann JM at al. Pictorial review of glutamat excitotoxicity: fundamental concepts for   neuroimaging. Am J Neuroradiol. 2001;22:1813–24.
18. Za´rate  CB,  Pe´rez-Vega  MI,  Gonza´lez-Burgos  I.  Neonatal Exposure  To  Monosodium  L-Glutamate  Induces  Loss  Of Neurons  And  Cytoarchitectural  Alterations  In  Hippocampal CA1 Pyramidal Neurons Of Adult Rats. Brain Research. 2002; 952: 275–81.
19. Pittenger C, Bloch MH, Williams K. Glutamate abnormalities in o b s e s s i v e   c o m p u l s i v e   d i s o r d e r :   N e u r o b i o l o g y , pathophysiology,  and  treatment.  Pharmacology  & Therapeutics on Sciverse Science Direct.2011; 123(3):314–32.
20. Olney JW. Brain lesions, obesity, and other disturbances in mice t r e a t e d   w i t h   m o n o s o d i u m     g l u t a m a t . Science1969;164(880):719–721.
21. Samuel  A.  Evidence  Of  Msg-Induced  Brain  Damage  And Endocrine Disorders, The Animal Studies 2009. Available from: h t t p : / / w w w . t r u t h i n l a b e l i n g . o r g / Proof_BrainLesions_CNS.html.
22. Blaylock  R.L.  Eksitotoksins:  The  Taste  That  Kills.  Health Press,Santa Fe,New Mexico, 1997.248–254.
23. McVeigh  C,  Passmore  P.  Vascular  dementia  prevention  and treatment.  Review  Clinical  Interventions  in  Aging.2006:1(3): 229–35.
24. De Jong GI, Stiensa CM, Plass JRM, Keijser JN, de Latore JC, Luiten PGM. Cerebral hypoperfusion yields capillary damage in  the  hippocampal  CA1  area  that's  correlates  with  spatial memory impairment. Neuroscirence. 1999; 91(1): 203–10.
25. Tiemeier  H,  Bekker  SLM,  Hofman  A,  Kaudstaal  PJ,  Breteler MMB, Cerebral Haemodynamics and depression in the aldery. J Neurol Neurosurg Psychiatry, 2002;73:34–9.
26. Sandi  C.  Stress,  Cognitive  impairment  and  cell  adhesion molecules. Neuroscience. 2004; 5:917–30.
27. McEwen  BS.  Stress  and  hippocampal  plasticity.  Annu  Rev. Neuroscience. 1999; 22: 105–22, 116.