DAYA HAMBAT EKSTRAK ETANOL DAUN SURUHAN ( Peperomia pellucida L .) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI PENYEBAB JERAWAT ( Propionibacterium acnes ) DENGAN

## METODE SUMUR AGAR
Fadly Putrajaya, Nur Hasanah, Anis Kurlya Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kharisma Persada Tangerang Selatan, 15417, Indonesia E-mail : fadly.putrajaya@masda.ac.id

## ABSTRAK
Jerawat  atau acne  vulgaris adalah  penyakit  kulit  obstruktif  dan  inflamatif  kronik  pada  pilosebasea yang  sering  terjadi  di  kalangan  remaja.  Menurut  catatan  studi  dermatologi  kosmetika  Indonesia,  penderita acne vulgaris pada tahun 2006, 2007, dan 2009 berturut-turut sebanyak 60, 80, dan 90%. Prevalensi tertinggi pada wanita (14-17 tahun) berkisar 83-85% dan  pada pria (16-19 tahun)  berkisar 95-100%. Oleh  karena  itu, perlu adanya alternatif lain untuk meminimalisir terjadinya resistensi antibiotik dan mencegah terjadinya efek samping. Salah satu alternatifnya yaitu dengan menggunakan antibakteri yang berasal dari bahan alam. Salah satu  bahan  alam  yang  dapat  dimanfaatkan  adalah  daun  suruhan  ( Peperomia  pellucida  L. ).  Penelitian  ini bertujuan untuk mengetahui daya hambat ekstrak etanol daun suruhan terhadap pertumbuhan bakteri penyebab jerawat ( Propionibacterium acnes ). Penelitian  ini  merupakan penelitian eksperimental. Data yang digunakan dalam penelitian ini adalah diameter zona bening. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanol daun suruhan ( Peperomia pellucida L. ) memiliki kemampuan hambat  terhadap bakteri penyebab jerawat ( Propionibacterium  acnes )  pada  konsentrasi  25%  (6,65  mm),  (129,39  mm 2 )  maka  daya  hambat  tergolong sedang, konsentrasi 50% (8,2 mm), (130,98 mm 2 ) maka daya hambat tergolong sedang, konsentrasi 75% (13,7 mm),  (532,42  mm 2 )  maka  daya  hambat  tergolong  kuat,  konsentrasi  100%  (17,15  mm),  (539,1  mm 2 )  maka daya hambat tergolong kuat. Disarankan penelitian selanjutnya, perlu dilakukan fraksinasi ekstrak etanol daun suruhan  untuk  mengetahui  senyawa  aktif  yang  berperan  sebagai  antibakteri  dengan  menggunakan  pelarut polar dan pelarut non polar.
Kata kunci : Daya Hambat, Daun Suruhan ( Peperomia pellucida L. ), Propionibacterium acnes , Metode Sumur Agar

## ABSTRACT
Pimples  or  acne  vulgaris  are  obstructive  skin  diseases  and  chronic  inflamatif  in  pilosebaseas  that often occur among adolescents. According to the Indonesian Cosmetic Dermatology Study, sufferers of acne vulgaris in 2006, 2007 and 2009 in a row as much as 60, 80, and 90%. The highest prevalence in women (14- 17 years) ranges from 83-85% and in men (16-19 years) ranged from 95-100%. Therefore, there is a need for altervatives to minimize antibiotic  resistance and prevent  side effects from occurring. One alternative is the use of antibacterial that comes from natural ingredients. One of the natural ingredients that can be utilized is suruhan leaf (Peperomia pellucida L.). The study aims to find out the power of ethanol extract of the suruhan leaf against the growth of acne causing bacteria (Propionibacterium acnes). This research is an experimental study. The data used in this study is the diameter of the clear zone. The results of the study showed the ethanol extract  of  the  suruhan  leaf  (Peperomia  pellucida  L.)  has  a  barrier  to  acne  causing  bacteria (Propionibacterium acnes). At a concentration 25% (6,65 mm), (129,39 mm 2 ) then the resistance is medium, the concertration of  50% (8,2 mm), (130,98 mm 2 ) then the resistance is relatively medium, concentration 75% (13,7  mm),  (532,42  mm 2 )  then  the  resistance  is  relatively  strong,  the  concentration  of  100%  (17,15  mm),
(539,1  mm 2 )  then  the  power  is  relatively  strong.  Further  research  is  suggested,  fractionation  extract  of suruhan  leaf  ethanol  to  know  the  active  compounds  that  act  as  antibacterial  using  polar  solvents  and  non polar solvents.
Keywords : Power Barrier, Suruhan Leaf (Peperomia pellucida L.), Propionibacterium acnes, Well Method

## PENDAHULUAN
Jerawat  atau Acne vulgaris adalah penyakit  kulit  obstruktif  dan  inflamatif kronik  pada  pilosebasea  yang  sering terjadi di kalangan remaja (Movita, 2013). Menurut catatan studi dermatologi kosmetika  Indonesia,  penderita Acne vulgaris pada tahun 2006, 2007, dan 2009 berturut-turut  sebanyak  60,  80,  dan  90%. Prevelansi  tertinggi  pada  wanita  (14-17 tahun) berkisar 83-85% dan pada pria (16- 19  tahun)  berkisar  95-100%  (Afriyanti, 2015).
Pengobatan jerawat
dapat menggunakan obat dari golongan antibiotik.  Namun  pengobatan  dengan antibiotik  dapat  menyebabkan  kerugian seperti  terjadinya  efek samping,  dapat menyebabkan  resistensi  bakteri  dan  juga harganya  yang  mahal  (Febriyati,  2010). Oleh  karena  itu,  perlu  adanya  alternatif lain  untuk  meminimalisir  terjadinya resistensi antibiotik dan mencegah terjadinya efek samping. Salah satu bahan alam  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai antibakteri adalah daun suruhan ( Peperomia  pellucida  L. ).  Daun  suruhan secara lokal di daerah Sleman Yogyakarta dikenal  sebagai  suruhan  sedangkan  di daerah  Gowa  Sulawesi  Selatan  di  kenal sebagai  daun  kaca-kaca,  tanaman  ini
sering  digunakan  sebagai  ramuan  dalam pengobatan tradisional.
Daun  suruhan  secara  luas  sudah tersebar  luas  di  banyak  negara,  seperti Amerika  dan  Asia  Selatan  (Arrigoni- Blank  dalam  Dyan,  2014).  Tumbuhan suruhan  ini  sudah  lama  dikenal  oleh masyarakat  luas  yang  dapat  digunakan sebagai obat, bahkan telah diperdagangkan  dengan  nama  dagang suruhan.  Secara  empiris,  herba  suruhan dapat mengobati sakit kepala, nyeri perut, dan  membantu  mengatasi  timbulnya jerawat.  Suruhan  umumnya  dikonsumsi dengan cara diseduh, tetapi ada juga yang mengkonsumsinya  sebagai  lalapan  segar (Cao, 2011).
Pengujian  secara  ilmiah  mengenai khasiat daun suruhan ( Peperomia pellucida  L. )  yang  diekstraksi  dengan menggunakan  etanol  sebagai  antibakteri sejauh  ini  belum  pernah  dilaporkan. Untuk  membuktikan  secara  ilmiah  maka dilakukan  pengujian  antibakteri  pada bakteri Propionibacterium  acnes .  Tujuan penelitian  ini  yaitu  mengidentifikasi parameter standar mutu ekstrak berdasarkan parameter spesifik (determinasi tanaman, organoleptis ekstrak  dan  skrining  fitokimia)  dan parameter  non  spesifik  (uji  kadar  abu). Mengidentifikasi  daya  hambat  ekstrak
etanol  daun  suruhan  dengan  variasi konsentrasi  25%,  50%,  75%,  dan  100%
terhadap bakteri penyebab jerawat
( Propionibacterium
acnes ) dengan metode sumur agar.

## METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Maret-Juni  2019. Alat  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  antara  lain  :  oven ( Memmert ),  LAF  ( Laminar  Air  Flow ) (ABL-LAF100),  autoklaf  (GEA  Model YX-18LM), colony  counter ( Pupick Med ), water  bath (WB-1L4H), hot  plate (NESCO LAB), ayakan (MESH), timbangan analitik (UWE), gaspak
( AnaeroGen™
Compact ), batang pengaduk, batang L, cawan petri, erlenmeyer,  gelas  ukur,  jarum  ose,  tips, pipet  mikro,  jangka  sorong,  kertas perkamen,  spatel,  tali,  kertas,  kapas gulung,  tabung  reaksi, plastic  wrap , sarung tangan, dan masker.
Bahan  kimia  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  antara  lain  :  etanol  96%, nutrient  agar (NA), nutrient  broth (NB), spiritus, dan larutan NaCl 0,9%.
Bahan uji yang digunakan dalam penelitian  ini  antara  lain  : aquadest , clindamycin 150  mg,  kapsul  komersil, ekstrak  etanol  daun  suruhan  dengan variasi  konsentrasi  25%,  50%,  75%  dan 100%.
Hewan  uji  yang  digunakan dalam penelitian ini yaitu bakteri Propionibacterium acnes.

## Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Suruhan
Daun suruhan yang sudah diambil, dicuci bersih,  kemudian  dijemur  sampai  kering. Daun  suruhan  yang  didapat  ±  2  kg. Setelah daun menjadi kering, kemudian di haluskan hingga menjadi serbuk simplisia.  Serbuk  yang  sudah  dihaluskan kemudian  diayak  dengan  ayakan  nomor 12,  14,  16,  18  dan  20.  Serbuk  simplisia ditimbang  dan  didapat  ±  300  gram simplisia,    kemudian  dilakukan  maserasi menggunakan etanol 96% dengan perbandingan 1:10. Dilakukan selama 3 x 24  jam.  Kemudian,  disaring.  Filtrat  yang didapat  kemudian  di  evaporasi  dalam suhu  60ºC  sampai  didapatkan  ekstrak kental  dari  daun  suruhan.  Ekstrak  yang didapat  ±  25  gram.  Untuk  menetapkan rendemen  ekstrak,  sejumlah  tertentu ekstrak  kental  dalam  cawan  penguap ditimbang  kemudian  di  atas  penangas  air dengan temperatur 40-50 o C sampai bobot tetap.  Tentukan  berat  ekstrak  setelah penguapan dengan mengurangkan dengan bobot  cawan  kosong.  Kemudian  dihitung rendemen  ekstrak  (%  b/b)  sesuai  dengan rumus :

## Standarisasi Ekstrak Determinasi Tanaman
Determinasi  merupakan  suatu  kegiatan karakteristik  yang  dimiliki  oleh  sumber keragaman  genetik  tanaman.  Determinasi dilakukan  untuk  mencari  dan  mengenal ciri-ciri taksonomi individu yang beranekaragaman, determinasi berdasarkan  karakter  morfologi  sangat berguna  untuk  mengetahui  berbagai  jenis dan keragaman varietas (Mayr dkk., 1991 dalam Saraswati, 2015).

## Organoleptis Ekstrak
Ekstrak  yang  telah  diperoleh,  kemudian diidentifikasi secara organoleptis.
Pemeriksaan organoleptis meliputi bentuk,  warna,  bau,  dan  rasa  (Permawati, 2008 dalam Saraswati, 2015).

## Skrining Fitokimia

## Alkaloid
Metode  :  Ekstrak  di  tetesi  dengan larutan  HCl  2N  kemudian  dikocok. Sampel  dibagi  menjadi  3  tabung  dan diperlakukan sebagai berikut : Tabung 1 ditetesi dengan larutan pereaksi Mayer,  kemudian  diamati  ada  atau tidaknya endapan berwarna putih.
Tabung 2 ditetesi dengan larutan pereaksi Dragendroff,  kemudian  diamati  ada  atau tidaknya endapan jingga.
Tabung  3  digunakan  sebagai  blanko (Tiwari dkk., 2011).

## Flavonoid
Metode  :  Ekstrak  ditambahkan  10 mL  air  panas  kemudian  didinginkan  dan disaring.  Filtrat  diambil  dan  ditambahkan serbuk  magnesium.  Kemudian  ditetesi larutan  HCl  pekat  dan amil  alkohol.  Lalu kocok  kuat  sampai  memisah.  Kemudian diamati larutan menjadi berwarna orange, merah/kuning  atau  tidak  (Tiwari  dkk., 2011).

## Saponin
Metode  :  Ekstrak  ditambahkan  10 mL  air  panas  kemudian  didinginkan  dan dikocok  kuat  selama  10  detik.  Kemudian diamati ada atau tidaknya busa setinggi 1 cm  dan  busa  akan  stabil  apabila  ditetesi larutan HCl (Tiwari dkk., 2011).

## Fenolik dan Tanin
Metode  :  Ekstrak  ditambahkan  3 mL air hangat. Ekstrak diujikan dengan 1- 2 tetes FeCl 3 1% terbentuk warna biru tua atau hijau kehitaman menunjukkan adanya senyawa golongan fenol dan tanin (Markham, 1988 dalam Saraswati, 2015).

## Steroid dan Triterpenoid
Metode  :  Ekstrak  ditambahkan  1 mL  H2SO4  pekat  dan  1  mL  asam  asetat.
Hasil  positif  bila  terbentuknya  cincin kecokletan  atau  violet  menunjukkan adanya  triterpenoid.  Hasil  positif  bila terbentuknya warna biru kehijauan menunjukkan  adanya  golongan  steroid (Subagja, 2017).

## Glikosida
Metode : Ekstrak dilarutkan dalam pelarut  etanol,  diuapkan  di  atas  penangas air  lalu  dilarutkan  dalam  5  mL  asam asetat  anhidrida  kemudian  ditambah  10 tetes  asam  sulfat  pekat.  Terbentuknya warna  biru  atau  hijau  menunjukkan adanya glikosida (Depkes RI, 1995 dalam Susanti, 2014).
Kadar Abu
Metode : 2 gram ekstrak dimasukkan dalam kurs yang sudah ditara dan  dipijarkan  perlahan-lahan.  Kemudian suhu  dinaikkan  secara  bertahap  hingga 600±25ºC sampai bebas karbon, selanjutnya didinginkan dalam deksikator, serta  timbang  berat  abu  (Tiwari  dkk., 2011).
Penyiapan Bakteri Uji Sterilisasi Alat Alat disiapkan dan dicuci bersih.
Kemudian,  alat  yang  sudah  dicuci  maka dikeringkan  untuk  kemudian  dimasukkan ke  dalam  autoklaf  dalam  suhu  121ºC selama 15-20 menit (Tristiyanto, 2009). Peremajaan Bakteri

## Pembuatan Media Agar Miring
Sebanyak 5 gram Nutrient Agar disuspensikan  dalam  250mL  aquadest steril, kemudian dipanaskan hingga mendidih.  Dilakukan  pengadukan  dengan magnetic stirrer untuk memastikan media telah  tersuspensi  sempurna.  Kemudian, disterilkan  dengan  autoklaf  pada  suhu 121ºC selama 15 menit (Ngajow, 2013). Media  yang  sudah  steril,  kemudian dituang  dalam  tabung  reaksi  steril sebanyak  5  mL.  Media  dituang  dalam kondisi  hangat  (40ºC-45ºC).  Tabung reaksi  yang  berisi  media,  kemudian dimiringkan  dengan  kemiringan  sekitar 30º-45º.  Mulut  tabung  reaksi  disumbat dengan  kapas  kemudian  ditunggu  sampai media  memadat  (Hidayat,  1999  dalam Saraswati, 2015).

## Proses Peremajaan Bakteri
Pada  mikroorganisme  uji  yang  diperoleh dilakukan  perbanyakan  kultur  murni. Kultur  murni  diambil  menggunakan jarum  ose  kemudian  digoreskan  pada media agar miring secara aseptis.
Sebelum dilakukan inkubasi, ditambahkan  gaspak  disekitar  tabung reaksi  didalam  inkubator.  Setelah  itu dilakukan  inkubasi  selama  ±48  jam  pada suhu  37ºC  untuk Propionibacterium acnes . Sebelum digunakan untuk menguji potensi  daya  hambat  dari  ekstrak  etanol
daun  suruhan,  dilakukan  pengenceran bertingkat  pada  kultur  bakteri  untuk mengendalikan  populasi  bakteri  (Dyah Ayu, 2013).
Pembuatan Suspensi Bakteri Sebanyak  1,3  gram Nutrient  Broth disuspensikan  dalam  100  mL  aquadest steril, kemudian dipanaskan hingga mendidih.  Dilakukan  pengadukan  dengan magnetic stirrer untuk memastikan media telah  tersuspensi  sempurna.  Kemudian, disterilkan  dengan  autoklaf  pada  suhu 121º C selama 15 menit (Ngajow, 2013). Pembuatan  suspensi  bakteri  dilakukan dengan mengambil isolat yang merupakan koloni tunggal 1 ose kemudian
dimasukkan ke dalam NB
( Nutrient Broth )  cair  dalam  erlenmeyer.
Kemudian  ditambahkan  gaspak  disekitar erlenmeyer  yang  berisi  suspensi  bakteri. Setelah  itu  dilakukan  inkubasi  selama 2x24 jam  pada  suhu ruang  (Dyah  Ayu, 2013).

## Pengenceran Bakteri
Berikut  ini  langkah-langkah  pengenceran untuk  menentukan  jumlah  sel  bakteri Propionibacterium  acnes dengan  metode ALT (Velhner, M dan Milanov, D., 2015) :
Hasil  suspensi  bakteri  (10 0 )  sebanyak  1 mL dipindahkan menggunakan pipet steril ke  dalam  tabung  reaksi  berisi  9  mL
larutan  NaCl  0,85%  (untuk  mendapatkan pengenceran 10 -1 ).
Suspensi dari pengenceran 10 -1 dipindahkan sebanyak 1 mL dengan pipet steril  ke  dalam  tabung  reaksi  berisikan  9 mL larutan NaCl 0,85% (untuk mendapatkan pengenceran 10 -2 ).
Dibuat  pengenceran  10 -3 ,  10 -4 ,  10 -5 ,  10 -6 , 10 -7 , 10 -8 , 10 -9 dan 10 -10 dengan cara yang sama seperti pada poin (2).
Tahap  selanjutnya  pada  pengenceran  10 -9 diambil  sebanyak  1  mL,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  yang sudah  berisi  media  NA  padat,  kemudian diinkubasi dengan suhu 37ºC.
Hasil  perhitungan  pada  pengenceran yakni pada pengenceran 10 -9 terdapat 209 koloni  bakteri Propionibacterium  acnes sehingga  koloni  bakteri  yang  digunakan untuk  pengujian  adalah  pengenceran  10 -9 karena  memenuhi  syarat  dimana  jumlah bakteri yang harus tumbuh adalah 10-300 koloni.
Uji  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Suruhan ( Peperomia Pellucida.L )

## Pembuatan Media Uji
Sebanyak  5  gram  media Nutrient  Agar (NA)  dilarutkan  dalam  250  mL aquadest steril. Kemudian media dipanaskan dengan hot plate stirer untuk memastikan media  tersuspensi  sempurna.  Setelah media  tersuspensi  sempurna,  kemudian
dimasukkan  dalam  autoklaf  pada  suhu 121ºC  selama  15-20  menit,  lalu  ditunggu sampai  suhu  hangat  (40ºC-45ºC).  NA yang  sudah  siap,  dituangkan  kedalam cawan  petri  sebanyak  20  mL.  Media didiamkan  sampai  memadat  (Ngajow, 2013).

## Pembuatan Konsentrasi Larutan Uji
Sampel  yang  akan  digunakan  dalam penelitian  ini  dibagi  menjadi  kontrol
positif,  kontrol  negatif  dan  sampel ekstrak. Kontrol positif diantaranya clindamycin dan kapsul komersil. Kontrol negatif  diantaranya aquadest .  Sedangkan sampel  yang  akan  diuji  yaitu  ekstrak etanol  daun  suruhan  yang  dibagi  menjadi beberapa  konsentrasi  diantaranya  25%, 50%,  75%  dan  100%.  Berikut  jumlah masing-masing  sampel  yang  digunakan dalam penelitian:
Tabel 1. Larutan Uji

## Proses Uji Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode sumur agar dengan langkah-langkah  sebagai  berikut  (Dyah Ayu, 2013). Media yang sudah dituang ke cawan  petri  disiapkan.  Media Nutrient Agar (NA)  yang  sudah  dingin  dan memadat  selanjutnya  ditanami  bakteri Propionibacterium  acnes yang  diambil dari  suspensi  bakteri  (Aziz,  2010  dalam
Saraswati,  2015).  Kemudian  dibuat  4 lubang berukuran 6 mm dengan menggunakan  tips micro  pipet .  Pada masing-masing lubang sumuran dimasukkan kontrol positif, kontrol negatif,  dan  ekstrak  yang  diujikan. Inkubasikan  pada  suhu  37ºC  selama  24 jam.  Uji  dilakukan  dengan  dua  kali pengulangan.
Sampel Berat (b/v) Kontrol Negatif Aquadest 8 ml Kontrol Positif Clindamycin 0,5 gr Kapsul Herbal Komersil 1 gr Ekstrak 25% 0,25 gr 50% 0,50 gr 75% 0,75 gr 100% 1 gr

## Pengamatan  Dan  Pengukuran  Zona

## Hambat
Pengamatan  dan  pengukuran  diameter hambatan dilakukan setelah masa inkubasi  24  jam.  Zona  hambatan  yang terbentuk  diukur  dengan  menggunakan jangka sorong (Dyah Ayu, 2013) Berdasarkan  zona  hambat  yang  terbentuk maka aktivitas antibakteri dapat digolongkan  menjadi  beberapa  golongan yaitu  antibakteri  yang  tergolong  lemah (zona  hambat  <  5  mm),  sedang  (zona hambat  antara  5-10  mm),  kuat  (zona hambat  antara  10-20  mm),  dan  tergolong sangkat  kuat  (zona  hambat  >  20  mm) (Pradana, 2013).

## HASIL
Hasil  determinasi  tumbuhan  suruhan ( Peperomia Pellucida L .)
Determinasi dilakukan di Pusat Penelitian Konversasi  Tumbuhan  Dan  Kebun  Raya (LIPI).  Adapun  hasil  yang  didapat  dari
determinasi  tersebut bahwa  tumbuhan suruhan  merupakan  jenis Peperomia
pellucida (L.) Kunth, suku dari
Piperaceae
Hasil  organoleptis  ekstrak  etanol  daun suruhan ( Peperomia Pellucida L .) dapat dilihat sebagai berikut :
Gambar 1. Ekstrak Etanol Daun Suruhan
Tabel 2. Hasil Organoleptis Ekstrak Parameter Hasil Bentuk Kental Warna Hjau kehitaman Bau Khas Rasa Pahit
Berdasarkan  Tabel  2.  hasil  organoleptis ekstrak  etanol  daun  suruhan  ( Peperomia pellucida  L .)  yaitu  bentuk  ekstrak  yaitu kental, warna ekstrak yaitu hijau kehitaman,  bau  ekstrak  yaitu  khas,  dan rasa ekstrak yaitu pahit.
Hasil  skrining  fitokimia  ekstrak  etanol daun  suruhan  ( Peperomia  pellucida  L .) dapat dilihat sebagai berikut :

## Gambar 1. Skrining Fitokimia
Tabel 3. Hasil Uji Fitokimia Golongan Senyawa Hasil Alkaloid -
Saponin + Tanin + Fenolik + Flavonoid + Triterpenoid + Steroid + Glikosida +
Keterangan  :  (  +  )  :  Menunjukkan  reaksi
positif
( - )  : Menunjukkan reaksi negatif
Berdasarkan Tabel 3. ekstrak etanol daun suruhan  ( Peperomia  pellucida  L .)  positif mengandung  saponin,  tanin,  fenolik, flavonoid, triterpenoid, steroid, dan glikosida.
Hasil  rendemen  ekstrak  etanol  daun suruhan ( Peperomia pellucida L. ) dapat dilihat pada tabel sebagai berikut :
Tabel 4. Hasil Rendemen Ekstrak
Sampel Jumlah Berat Ekstrak 25 gr Berat Simplisia 300 gr Hasil 8,33%
Berdasarkan  Tabel  4.  hasil  rendemen ekstrak yang didapat yaitu 8,33%.
Hasil  uji  kadar  abu  ekstrak  etanol daun  suruhan  ( Peperomia  Pellucida  L .) dapat dilihat pada tabel berikut :
Tabel 5. Hasil Uji Kadar Abu
Parameter Ekstrak Etanol Jumlah 2 gram Kadar Abu 17,23 % Berdasarkan Tabel 5. ekstrak etanol daun suruhan ( Peperomia pellucida L. ) memiliki kadar abu yaitu 17,23%.
Hasil pengamatan daya hambat ekstrak etanol daun suruhan ( Peperomia  pellucida  L. )  terhadap
Propionibacterium  acnes berdasarkan diameter  dan  zona  bening  sebagai berikut :
Gambar 2. Diameter Zona Bening
Keterangan : a : aquadest ; b : konsentrasi 25% ; c : kapsul herbal komersil ; d : konsentrasi 50% ; e : konsentrasi 75% ; f : clindamycin 150 mg ; g : konsentrasi 100%
Tabel 6. Rata-rata Diameter Dan Luas Zona Hambat
Sampel Rata-rata diameter Rata-rata luas Kontrol Negatif ( Aquadest ) - -
Kontrol Positif ( Clindamycin ) 26,74 mm 813,72 mm 2 Kontrol Positif (Kapsul herbal komersil) 10,44 mm 188,85 mm 2 25% 6,65 mm 101,70 mm 2 50% 8,2 mm 130,98 mm2 75% 13,7  mm 299,28 mm2
a b c d e f g
100% 17,15 mm 395,13 mm2
Berdasarkan  Tabel  6.  diperoleh hasil  kontrol  positif clindamycin 150  mg memiliki diameter zona bening 26,74 mm dan  tergolong  dalam  kategori  daya hambat  sangat  kuat.  Kontrol  positif kapsul herbal komersil memiliki diameter zona  bening  10,44  mm  dan  tergolong dalam kategori daya hambat kuat. Ekstrak dengan konsentrasi 25% memiliki diameter  zona  bening  6,65  mm  dan tergolong  dalam  kategori  daya  hambat sedang.  Ekstrak  dengan  konsentrasi  50% memiliki  diameter  zona  bening  8,2  mm dan  tergolong  dalam  kategori  daya hambat sedang. Ekstrak dengan konsentrasi  75%  memiliki  diameter  zona bening  13,7%  dan  tergolong  dalam kategori  daya  hambat  kuat.  Ekstrak dengan konsentrasi 100% memiliki diameter  zona  bening  17,15  mm  dan tergolong  dalam  kategori  daya  hambat kuat.

## DISKUSI
Penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan ekstrak etanol daun suruhan  ( Peperomia  pellucida  L. ) untuk menghambat pertumbuhan bakteri penyebab  jerawat  ( Propionibacterium acnes ).  Daun  suruhan  diperoleh  dan dikeringkan  di  Kecamatan  Pasar  Kemis,
Kabupaten Tangerang, kemudian pembuatan ekstrak dilakukan di Laboratorium Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kharisma Persada, Pamulang.
Daun suruhan yang diambil adalah daun  suruhan  yang  masih  muda,  sehat, dan  segar.  Alasan  dipilihnya  daun  yang masih  muda,  sehat,  dan  segar  supaya kandungan senyawa didalamnya tidak ada yang  berkurang  dan  dapat  memberikan hasil  yang  akurat.  Sebelum  digunakan daun suruhan dicuci terlebih dahulu untuk menghilangkan kotoran yang ada. Kemudian  sampel  dikeringkan  dengan cara di angin-anginkan. Tujuan dilakukannya pengeringan yakni menghindari pembusukan dan pertumbuhan  jamur  pada  sampel  yang dapat merubah kandungan senyawa kimia yang ada didalamnya (Narulita, 2017).
Setelah  kering  sampel  dihaluskan sampai  benar-benar  halus  kemudian dilakukan  penyaringan  serbuk  simplisia dengan  menggunakan  ayakan  nomer  12, 14,  16,  18,  dan  20.  Dilakukannya penyerbukan karena supaya didapatkannya  sampel  dengan  ukuran partikel  yang  kecil,  karena  semakin  kecil ukuran  partikel  maka  semakin  besar interaksi  pelarut  dan  sampel  dan  proses
ekstraksi  akan  semakin  efektif  (Narulita, 2017).
Serbuk  daun  suruhan  yang  sudah halus kemudian ditimbang dan didapatkan 300 gram serbuk simplisia untuk selanjutnya dibuat ekstrak dengan menggunakan  metode  maserasi.  Alasan dipilihnya metode tersebut adalah praktisnya  pengerjaan  dan  alat  yang digunakan  sederhana  dan  mudah  didapat. Metode ini paling cocok digunakan untuk senyawa  yang  termolabil  (Saraswati, 2015).
Dalam  penelitian  ini  pelarut  yang digunakan  yaitu  etanol  96%  dan  air. Alasan digunakannya etanol  96% sebagai pelarut  karena  etanol  merupakan  pelarut yang  paling  maksimal  menarik  senyawa fenolik  dan  flavonoid  (Mardiyaningsih, 2014).
Proses  maserasi  dilakukan  dengan mencampurkan  simplisia  dengan  pelarut sebanyak  1:10.  Hal  ini  dilakukan  supaya dapat  terendam  seluruh  simplisia  dengan sempurna  kemudian  didiamkan  selama 3x24  jam.  Hal  ini  bertujuan  untuk memaksimalkan proses penarikan senyawa-senyawa  kimia  yang  terdapat pada  simplisia  daun  suruhan  tersebut (Narulita, 2017).
Selama proses perendaman, sampel  disimpan  dalam  wadah  tertutup
rapat  yang  bertujuan  agar  sampel  tidak terkontaminasi.  Setelah  itu  dilakukan penyaringan  dengan  menggunakan  kertas saring  untuk  memisahkan  antara  filtran dan  filtrat.  Kemudian  filtrat  akan  di evaporasi  untuk  mendapatkan  ekstrak yang diinginkan.
Pengujian  fitokimia  pada  ekstrak etanol  daun  suruhan  dilakukan  untuk mengetahui  golongan  metabolit  sekunder yang  terdapat  pada  ekstrak.  Berdasarkan Tabel  4.2  dan  Lampiran  9  hasil  yang didapat  dari  skrining  fitokimia  adalah adanya  senyawa  saponin,  tanin,  fenolik, flavonoid, triterpenoid, steroid dan glikosida  pada  ekstrak.  Hasil  tersebut diperkuat  dengan  berbagai  jurnal  yang telah melakukan skrining fitokimia terhadap suruhan.
Beberapa penelitian terkait dengan tanaman  suruhan  adalah  bahwa  ekstrak etanol  tanaman  suruhan  efektif  dalam pengobatan  luka  bakar  derajat  I  pada kelinci  (Subagja,  2017).  Ekstrak  etanol tanaman  suruhan  memiliki  efektifitas dalam  penyembuhan  luka  bakar  derajat  I dikarenakan  terdapat  senyawa  alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, dan steroid.
Dengan demikian tanaman suruhan  memiliki  kandungan  antibakteri yang  berasal  dari  senyawa  alkaloid. Senyawa flavonoid yang berfungsi
sebagai  antioksidan,  antibakteri,  dan antiinflamasi  pada  luka  bakar.  Senyawa tanin  yang  berfungsi  sebagai  antioksidan,
menghentikan
pendarahan dan mempercepat penyembuhan luka.
Kandungan saponin berpotensi membantu penyembuhan luka, sedangkan kandungan steroid berfungsi sebagai antibiotik diantaranya sebagai antibakteri dan antijamur.
Beberapa  penelitian  lain  terkait lainnya  dengan  suruhan  adalah  bahwa ekstrak  etanol  suruhan  efektif  dalam menghambat pertumbuhan bakteri
Staphylococcus  aureus secara  in  vitro.
Tumbuhan  suruhan  dapat  membunuh bakteri  berdasarkan  hasil  penelitian  yang ada dikarenakan terdapat senyawa flavonoid  dan  polifenol  didalamnya (Dandirwalu dkk., 2015).
Beberapa  penelitian  lain  terkait dengan  daun  suruhan  adalah  bahwa ekstrak  etanol  daun  suruhan  mempunyai aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Shigella dysentriae. Daun suruhan diperkirakan memiliki aktivitas antibakteri dikarenakan mengandung senyawa  tannin  dan  flavonid  (Majumder dkk., 2011).
Beberapa senyawa tersebut merupakan  antimikroba  atau  antibakteri yang  terdapat  dalam  daun  suruhan.
Antibakteri  merupakan  zat  yang  dapat menghambat  bakteri  penyebab  infeksi. Bakteri  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah Propionibacterium  acnes yang merupakan  bakteri  anaerob  yang  ikut berperan  dalam  pembentukan  jerawat. Penyebab terjadinya jerawat yaitu perubahan sistem hormonal yang merangsang peningkatan produksi kelenjar  minyak  dikulit.  Biasanya  terjadi pada saat seseorang mengalami menstruasi, kehamilan atau stress sehingga  memicu  timbulnya  jerawat (Narulita, 2017).
Selanjutnya dilakukannya uji kadar  abu  terhadap  ekstrak.  Berdasarkan Tabel  4.4  dan  Lampiran  8  hasil  uji  kadar abu yang didapat yakni 17,23%. Penentuan  kadar  abu  dilakukan  untuk memberikan gambaran kandungan mineral internal dan eksternal.
Berdasarkan buku monografi ekstrak  tumbuhan  obat  kadar  abu  total tidak  boleh  lebih  dari  16,6%.  Dengan demikian hasil tersebut melebihi parameter kadar abu ekstrak. Hal tersebut dapat  terjadi  karena  kemungkinan  masih adanya  bahan  pengotor  atau  kontaminan yang terkandung dalam ekstrak.
Uji  daya  hambat  terhadap  bakteri bertujuan  untuk  mengetahui  kemampuan dari  ekstrak  etanol  daun  suruhan  untuk
menghambat  pertumbuhan  bakteri  yang diujikan  yakni Propionibacterium  acnes.
Dalam  penelitian  ini,  menggunakan metode  sumur  agar  dengan  demikian dapat dilihat zona bening di sekitar lubang sumur. Alasan dipilihnya metode sumuran yaitu dengan menggunakan metode sumuran  dapat  menghasilkan  diameter zona  hambat  yang  besar  serta  pada metode sumuran terjadi proses osmolaritas  dari  konsentrasi  ekstrak  yang lebih  tinggi  dari  metode  difusi  cakram. Pada metode sumuran, setiap lubang diisi dengan konsentrasi ekstrak maka osmolaritas  terjadi  lebih  menyeluruh  dan lebih  homogen  serta  konsentrasi  ekstrak yang  dihasilkan  lebih  tinggi  dan  lebih kuat  untuk  menghambat  pertumbuhan bakteri (Prayoga, 2013).
Zona  bening  ini  menunjukan adanya kemampuan ekstrak dalam
menghambat pertumbuhan bakteri.
Sebelum melakukan uji antibakteri ini alat dan  bahan  yang  akan  digunakan  harus disterilkan  terlebih  dahulu  dengan  tujuan supaya  alat  dan  bahan  yang  digunakan tidak terkontaminasi dengan mikroorganisme lain. Bakteri Propionibacterium acnes yang digunakan, sebelumnya dilakukan peremajaan terlebih dahulu untuk meregenerasi  bakteri  agar  diperoleh
bakteri yang muda dan tidak terkontaminasi.
Bakteri Propionibacterium  acnes bersifat  anaerob  obligat  sehingga  pada saat  peremajaan  dan  pengujian  untuk menumbuhkan  bakteri  tersebut  perlu adanya penambahan gaspak ( AnaeroGen™ Compact ). Hal ini bertujuan  supaya  tidak  adanya  oksigen sehingga  bakteri  yang  digunakan  dalam penelitian  dapat  tumbuh  dan  dapat digunakan pengujian selanjutnya. Clindamycin digunakan  sebagai  kontrol positif  karena clindamycin utamanya digunakan dalam pengobatan infeksi yang disebabkan  oleh  bakteri  anaerob.  Pada penelitian  ini  digunakan clindamycin 150 mg.  Sedangkan  kontrol  positif  lainnya yang  digunakan  yakni  kapsul  herbal komersil. Kontrol negatif yang digunakan yaitu aquadest .
Pada  pengamatan  setelah  inkubasi selama  24  jam  didapatkan  hasil  pada Tabel 4.5 diperoleh bahwa ekstrak dengan konsentrasi  25%  yaitu  rata-rata  diameter 6,65  mm  dan  rata-rata  luas  101,70  mm 2 .
Hasil  dari  ekstrak  dengan  konsentrasi 50%  yaitu  rata-rata  diameter  8,2  mm  dan rata-rata  luas  130,98  mm 2. .  Hasil  dari ekstrak  dengan  konsentrasi  75%  yaitu rata-rata  diameter  13,7  mm  dan  rata-rata luas  299,28  mm 2 .  Hasil  dari  ekstrak
dengan  konsentrasi  100%  yaitu  rata-rata diameter  17,15  mm  dan  rata-rata  luas 395,13 mm 2 .
Jika dibandingkan dengan clindamycin sebagai kontrol positif dalam penelitian  ini  maka  kemampuan  ekstrak etanol  daun  suruhan  lebih  rendah  namun jika  dibandingkan  dengan  kontrol  positif kapsul  herbal  komersil,  ekstrak  etanol daun  suruhan  konsentrasi  75%  dan  100% memiliki daya hambat yang lebih besar. Berdasarkan parameter zona hambat yang dilihat  dari  kemampuan  daya  hambat berupa  diameter  zona  bening  maka diperoleh  bahwa  ekstrak  etanol  daun suruhan  dengan  konsentrasi  25%    dan 50%  memiliki  daya  hambat  yang  sedang. Ekstrak  etanol  daun  suruhan  dengan konsentrasi 75% dan 100% memiliki daya hambat yang kuat.
Hasil  penelitian  diperkuat  dengan penelitian  terkait  mengenai  Uji  Daya
Hambat Ekstrak Etanol Suruhan
( Piperomia pellucida L. ) Terhadap
Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Secara In-Vitro mendapat  hasil bahwa  pada  konsentrasi  25%  tidak memberikan  respon  hambat,  konsentrasi 50%  memiliki  respon  hambat  lemah,  dan konsentrasi  75%  memiliki  daya  hambat sedang (Dandirwalu dkk., 2015).
Dengan  demikian  hasil  yang diperoleh  dipengaruhi  oleh  konsentrasi ekstrak  yang  diujikan.  Semakin  tinggi konsentrasi  ekstrak  maka  semakin  besar pula daya hambat ekstrak dalam menghambat pertumbuhan bakteri. Banyak faktor yang mempengaruhi keberhasilan  dalam  uji  antibakteri  ini seperti konsentrasi ekstrak, waktu inkubasi, pemilihan pelarut dalam pembuatan  ekstrak  dan  keadaan  ruangan uji.
Pengerjaan dilakukan didalam Laminar  Air  Flow (LAF).  Seharusnya  di sterilkan  dengan  menggunakan  sinar  UV, dikarenakan  keterbatasan  alat  dengan demikian menggunakan 2 bunsen yang di letakkan  pada  kanan  dan  kiri  untuk menjaga  kestabilan  lingkungan  agar  tetap steril .

## SIMPULAN
Standarisasi  ekstrak  etanol  daun suruhan  ( Peperomia  pellucida L.)  secara organoleptis bentuk ekstrak adalah ekstrak kental, berwarna hijau kehitaman, rasa  pahit  dan  bau  khas.  Kadar  abu  di dapat  sebesar  17,23%.  Pada  skrining fitokimia  dari  ekstrak  menunjukkan adanya  senyawa  saponin,  tanin,  fenolik,
flavonoid, triterpenoid, steroid dan glikosida.
Ekstrak  etanol  daun  suruhan ( Peperomia pellucida L. ) memiliki kemampuan  hambat  terhadap  bakteri penyebab  jerawat  ( Propionibacterium acnes ).  Ekstrak  dengan  konsentrasi  25%
(6,65 mm) dan konsentrasi 50% (8,2 mm) memiliki  daya  hambat  sedang.  Ekstrak dengan  konsentrasi  75%  (13,7  mm)  dan konsentrasi  100%  (17,15  mm)  memiliki daya hambat kuat.

## DAFTAR PUSTAKA
Afriyanti,  R.  N.  2015,  ‘Acne  Vulgaris
Pada Remaja’. [ Jurnal
Majority ],  vol.  4,  no.  6,  hh.
102-109.
Dandirwalu,  E.,  Watuguly,  T.W.  2015,
‘Uji  Daya  Hambat  Ekstrak
Etanol Suruhan ( Piperumia pellucida L.H.B Kunth ) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri
Staphylococcus  aureus Secara
In  Vitro ’.  [ Jurnal  Biologi,
Pendidikan  dan  Terapan ].  Vol.
2. No. 1.
Dyah,  A.  2013 ,  ‘ Uji  Efektivitas  Sabun
Cair  dari  Ekstrak  Daun  Pepaya ( Carica  Papaya L.)  Terhadap
Staphylococcus aureus’ .
[ Skripsi ],  Makasar  :  Fakultas
Farmasi  Universitas  Indonesia Timur Makasar.
Febriyati.  2010,  ‘Analisis  Komp  onen Kimia  Fraksi  Minyak  Atsiri Daun  Sirih (Piper  bettle  Linn) dan Uji  Aktivitas  Antibakteri terhadap Beberapa Jenis Bakteri Gram Positif’. [ Skripsi ],  Jakarta  :  Fakultas Farmasi Universitas Islam
Negeri Syarif Hidayatullah.
Khan,  Z.Z..,  Assi  M.,  Moore,  T.A.  2009,
‘Recurent  Epidural  Abcess Caused  by Propionibacterium acnes’ .  [ Khansas  Journal  of Medicine ] , hh. 92-95.
Majumder,  P.,  Kumar,  K.V.,  Arun.  2011,
‘Establishment of Quality Parameters
and Pharmacognostic  Evaluation  of
Leaves  of Peperomia  pellucida (L.)’. [ Hbk. International
Journal  of  Pharmacy  and Pharmaceutical Sciences ].
Movita,  T.  2013,  ‘ Acne  Vulgaris’,
[ Continuing Medical Education ].  IDI.  CDK  203/vol.
40 no. 4, hh. 40.
Narulita,  W.  2017,  ‘Uji  Efektivitas
Ekstrak Daun Binahong
( Anredera Cordifolia )

## Dalam Menghambat
Pertumbuhan Bakteri Propionibacterium Acnes Secara In Vitro ’. [ Skripsi ],
Lampung : Fakultas Tarbiyah Dan Keguruan Universitas Islam Negeri Raden Intan Lampung
Ngajow,  M.,  Abidjulu,  J.  and  K.  V.  S. 2013,  ‘Pengaruh  Antibakteri Ekstrak  Kulit  Batang  Matoa
( Pometia  pinnata )  Terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus secara  In  Vitro.  [ Jurnal  MIPA
Unsrat  Online ].  Vol.  2.  No.  2. hh. 128-132.
Pradana.,  Dedi.  2013,  ‘Uji  Daya  Hambat Ekstrak Kulit Batang Rhizophora mucronata Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Aeromonas hydrophila,
Streptococcus  agalactiae Dan Jamur Saprolegnia  sp. Secara
In Vitro’. Medan  : Departemen Biologi, Fakultas MIPA
Universitas Sumatera Utara.
Saraswati,  F.N.  2015,  ‘Uji  Aktivitas
Antibakteri Ekstrak Etanol 96%
Limbah  Kulit  Pisang  Kepok Kuning (Musa balbisiana) Terhadap  Bakteri  Penyebab Jerawat
(Staphylococcus
epidermidis, Staphylococcus aureus, dan Propionibacterium acne) ’.  [ Skripsi ]  Jakarta : Fakultas  Farmasi  Universitas Islam Negeri Jakarta.
Subagja,  S.  2017,  ‘Uji  Ektefitivitas Sediaan  Salep  Ekstrak  Etanol Tanaman  Suruhan  ( Peperomia pellucida )  Sebagai  Pengobatan Luka  Bakar  Derajat  I  Pada Kulit Kelinci ( Oryctolagus cuniculus )’. [ Prosiding Seminar Nasional Tahunan Matematika, Sains, dan Teknologi ].
Tiwari.,  P.  Kumar.,  B.  Kaur.,  M.  Kaur., G.  Kaur.  2011,  ‘Phytochemical screening  and  Extraction:  A Review’.
[ Internationale Pharmaceutical  Sciencia ].  Vol. 1. Issue. 1.
Tristiyanto.  2009,  ‘Studi  Aktivitas Antibakteri  dan  Identifikasi Golongan Senyawa Eksrak Aktif Antibakteri Buah Gambas ( Luffa acutangula roxb. ).
[ Skripsi ]. Surakarta : Universitas Sebelas Maret.
United States Departement of Agriculture (USDA).  2011,  ‘ The  Plants Database ’.  USA  ;  National Plant Data Team.
Velhner,  M.,  &  Milanov,  D.  2015,
‘Resistance  to  Tetracycline  in
Escherichia coli and Staphylococcus  aureus ’.  [ Brief
Overview  on  Mechanism  of Resistance  and  Epidemioogy, Arhiv  Veterinarske  Medicine ]. Vol. 8. hh. 27-36.