## MODULASI NEUROTRANSMITTER PADA GANGGUAN KOGNITIF HEWAN COBA DENGAN NANOEMULSI EKSTRAK IPOMOEA AQUATICA FORSK
Neurotransmitter Modulation In Disorders Animal Cognitive Test With Nanoemulsion Ipomoea Aquatica Forsk Extract
Nadiatul Istiqamah Suaka 1*
Salma Ersyara Putri Nugraha 2
Rizka Arum Pratiwi 3
Rahmadia Nurafifah 4
Endang Darmawan 5
*1,2,3,4,5 Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Kota Yogyakarta,
Daerah Istimewa Yogyakarta, Indonesia
*email:
Endang.darmawan@pharm.uad.ac.id

## Abstrak
Background. Alzheimer  merupakan  jenis  demensia  yang  ditandai  dengan terjadinya  penurunan  fungsi  kognitif    yang  progresif,  mencakup  semua  fungsi intelektual,  sehingga  menyebabkan    seseorang  mengalami  kesulitan  dalam melakukan  aktivitas  sehari-hari. Ipomoea  aquatica forsk  adalah  tanaman  yang memiliki kandungan antioksidan yang tinggi yang mampu meningkatkan perilaku kognitif, memori dan meningkatkan neurotransmitter.
Tujuan. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efek  modulasi neurotransmitter  nanoemulsi  ekstrak Ipomoea  aquatica Forsk  pada gangguan kognitif hewan coba.
Metode. Penelitian  ini  menggunakan  5  kelompok  mencit  yang  terdiri kelompok  kontrol  normal,  kelompok  kontrol  sakit,  kelompok  kontrol  obat sebanyak  dua  tingkat  dosis  yaitu  nanoemulsi  ekstrak Ipomoea  aquatica Forsk 200  mg/kgBB  dan  400  mg/kgBB  dan  kelompok  pembanding,  masing  masing kelompok  terdiri  dari  5  mencit.    Seluruh  kelompok  diinduksi  Trimethyltin (TMT) kecuali kelompok normal. Gambaran memori diperoleh dari uji morris water maze yang dianalisis dengan one-way repeated measure ANOVA. Hasil . Nanoemulsi Ekstrak Ipomoea aquatica forsk dengan dosis 200 mg/kgBB mampu memperbaiki fungsi kognitif hewan coba yang ditandai dengan nilai hasil uji esktrak Ipomoea aquatica forsk menunjukkan hasil MWM yang hampir sama dengan mencit yang diberi donepezil.

## Kata Kunci:
Ipomoea aquatica Forsk Nanoemulsi Neurotransmitter
Keywords : Ipomoea aquatica Forsk Nanoemulsion
Neurotransmitter

## Abstract
Backgrounds .  Alzheimer's  is  a  type  of  dementia  characterized  by  a  progressive decline  in  cognitive  function,  including  all  intellectual  functions,  causing  a  person  to experience  difficulties  in  carrying  out  daily  activities.  Ipomoea  aquatica  forsk  is  a plant  that  has  a  high  antioxidant  content  that  can  improve  cognitive  behavior, memory and increase neurotransmitters.
Aim. The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the  modulating  effect  of  the neurotransmitter  nanoemulsion  extract  of  Ipomoea  aquatica  Forsk  on  cognitive impairment in experimental animals.
Method. This study used 5 groups of mice consisting of a normal control group, a sick control group, a drug control group with two dose levels, namely nanoemulsion extract  of  Ipomoea  aquatica  Forsk  200  mg/kgBW  and  400  mg/kgBW  and  a comparison  group,  each  group  consisted  of  5  mice.  All  groups  were  induced  by Trimethyltin (TMT) except the normal group. The memory image was obtained from the  Morris  Water  Maze  test  which  was  analyzed  by  one-way  repeated  measure ANOVA.
Results .  The  Ipomoea  aquatica  forsk  extract  nanoemulsion  with  a  dose  of  200 mg/kgBW was able to improve the cognitive function of experimental animals, which was indicated by the Ipomoea aquatica forsk extract test results showing almost the same MWM results as mice given donepezil.
©  year  The  Authors.  Published  by  Institute  for  Research  and  Community  Services  Universitas  Muhammadiyah Palangkaraya.  This  is  Open  Access  article  under  the  CC-BY-SA  License  (http://creativecommons.org/licenses/by- sa/4.0/). DOI: https://doi.org/10.33084/jsm.vxix.xxx .

## PENDAHULUAN
Kognitif  merupakan  salah  satu  fungsi  tingkat  tinggi otak  manusia  (Wibowo  dan  Karema,  2015).  Fungsi kognitif  sangat  berpengaruh  terhadap  kehidupan seseorang  baik  secara  sosial  maupun  secara  psikis. Penurunan  fungsi  kognitif  dapat  menyebabkan seseorang  mengalami  kesulitan  dalam  melakukan aktivitas  sehari-hari  (Ramadian  et  al.,  2012). Gangguan  fungsi  otak  pada  tahap  lanjut  dapat menimbulkan  penyakit  tertentu  seperti  demensia (Alzheimer,  gangguan  vaskuler),  jejas  pada  otak (traumatik dan stroke) dan  gangguan kognitif lainnya (Asiah, 2013).
Alzheimer  merupakan  jenis  demensia  yang  ditandai dengan  terjadinya  penurunan  fungsi  kognitif    yang progresif,  mencakup  semua  fungsi  intelektual  (Purba, 2020).
Patologi alzeimer yaitu adanya plak amyloid dan (NFT) yang mengakibatkan kematian neuron di otak terutama di area hippocampus. Kematian ini akan menyebabkan gangguan  kognitif.  Kematian  neuron  mengakibatkan acetylcholine  (ACh)  menuju  cortex  terganggu  dan menyebabkan kematian neuron penghasil neurotransmiter  ACh  di  nucleus  basalis  of  Meynert (NBM)  sehingga  akan  mengakibatkan  gangguan memori. Acetylcholinesterase inhibitor dapat diberikan guna  menghambat  pemecahan  ACh  menjadi  substitusi sementara (Purba, 2020).
Salah satu tanaman yang memiliki efek Acetylcholinesterase  inhibitor  yaitu Ipomoea  aquatica forsk. Ipomoea  aquatica Forsk  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  tinggi. Ipomoea  aquatica Forsk memiliki  banyak  kandungan    nutrisi  dan  antioksidan seperti  terpenoid,  fenolik,  flavonoid,  alkaloid,  poliol, asam  organik,  sterol  dan  asam  amino  (Rosli,  2019). Ipomoea  aquatica Forsk  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  tinggi  karena  mengandung  tiga  karotenoid; violaxanthin, lutein dan karoten (Fu et al., 2011).
Ipomoea  aquatica Forsk  memiliki  kemampuan  untuk menghasilkan  obat  baru  untuk  pengobatan  gangguan
neurodegeneratif (Dhanasekaran et al., 2015). Ipomoea aquatica Forsk mampu meningkatkan perilaku kognitif, memori dan meningkatkan neurotransmitter (Sivaraman  et  al.,  2016). Ipomoea  aquatica dalam ekstrak hidroalkolat memiliki aktivitas
antikolinesterase  yang  signifikan  (Dhanasekaran et  al , 2015). Ipomoea  aquatica Forsk  mampu  menurunkan kadar  AChE  di  otak  dan  memediasi  gangguan  kognitif dan memori (Sivaraman et al ., 2016).
Aplikasi nanoteknologi untuk pangan dan obat-obatan menunjukkan  kecenderungan  yang  terus  meningkat. Teknologi  ini  menawarkan  keunggulan  dalam meningkatkan bioavailabilitas bahan aktif, pengendalian pelepasan bahan aktif serta memperbaiki  sifat  sensoris  (Jusnita  dan  Tridharma, 2019).  Nanoemulsi  dapat  meningkatkan  absorpsi, membantu melarutkan obat yang bersifat lipofilik, dan dapat  meningkatkan  bioavailabilitas  obat  yang berdampak  pada  meningkatnya  absorbsi  ekstrak Ipomoea  aquatica Forsk  pada  saluran  gastrointestinal yang  mempengaruhi  onset  kerja  ekstrak Ipomoea aquatica Forsk  sebagai  nutrisi  otak  (Sukmawati, 2011).
Demensia  tipe  Alzheimer  pada  hewan  coba  dapat diinduksi  dengan  Trimethyltin  (TMT)  karena  TMT dapat  menyebabkan  gangguan  proses  memori  dan menyebabkan  kematian  saraf  pada  otak  hewan  coba yaitu  dengan  mekanisme  stres  oksidatif.  TMT menyebabkan penurunan fungsi kognitif dengan adanya neuro-degenerasi  pada  hipokampus  (Yuliani  & Aspamufita, 2013).
Uji Morris Water Maze dapat menggambarkan memori pada  hewan  coba.    Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui efek modulasi neurotransmitter nanoemulsi  ekstrak Ipomoea  aquatica Forsk  pada gangguan kognitif hewan coba.

## METODOLOGI
Alat dan Bahan
Alat:  ayakan  60  mesh , timbangan  analitik,  blender, kandang hewan,  spuit  injeksi  1  ml,  spuit  oral  1  ml, beaker  glass, gelas  ukur, pipet tetes, cawan poerselin, stopwatch, spektrofotometer, mikropipet, homogenizer,  pipet  ukur,  pipet  volume,  oven,  alat Soxhlet,  rotary  eveporator, waterbath ,  batang pengaduk, yellow  tip,  blue  tip, tabung  reaksi,  kolam morris  water  maze, kamera  video,  handuk,  dan hair dryer .
Bahan:  Daun Ipomoea  aquatica Forsk  (kangkung  air),
Trimethyltin  chloride (TMT),  Aquades,  Ethanol  96%,
Tween  80,  Buffer  Fosfat,  Santan,  Donepezil,  dan NaCl 0,9%.
Metode pelaksanaan Pembuatan Ekstrak Ipomoea aquatica Forsk Daun Ipomoea  aquatica Forsk  diperoleh  dari Parangtritis  KM.21  Yogyakarta  sebanyak  10  kg dikumpulkan,  dicuci  dengan  air  mengalir, dikeringkan pada  suhu  ruangan  selama  2  hari,  kemudian  dilanjut pengeringan  menggunakan  oven  selama  1-2  hari, selanjutnya  daun  kering  diserbuk  menggunakan blender,  dan  diperoleh  serbuk  simplisia Ipomoea aquatica Forsk sebanyak 1 kg.
Simplisia  Daun Ipomoea  aquatica Forsk  kemudian diekstraksi  menggunakan  metode  soxhletasi.  Pelarut yang  digunakan  yaitu campuran  aquadest:ethanol  96% (4:6). Ekstrak cair yang diperoleh kemudian dipekatkan menggunakan rotary    evaporator pada  suhu  70 o C kemudian  dipanaskan  dengan waterbath guna menguapkan  sisa-sisa  pelarut  dalam  ekstrak  sehingga diperoleh ekstrak kental.
Pembuatan  Nanoemulsi  Ekstrak Ipomoea aquatica Forsk Ekstrak  kental Ipomoea  aquatica Forsk  sebanyak  2 gram dilarutkan dalam 10 ml etanol 96% (fase minyak). Larutan dicampurkan dengan Tween 80 dan dilarutkan dalam  larutan  buffer  phospat  PH  7  (fase  air).  Fase minyak  dan  fase  air  dicampur  menggunakan homogenizer dengan kecepatan 30.000 rpm selama 20 menit.
Formulasi  Nanoemulsi  Ekstrak Ipomoea aquatica Forsk
Tabel  1. Formula  Nanoemulsi  Ekstrak Ipomoea aquatica Forsk

## Persiapan Hewan Uji
Hewan  uji  diaklimatisasi  dengan  kondisi  laboratorium selama  dua  minggu,  semua  hewan  ditempatkan  di kandang  menggunakan  alas sekam  kayu.  Hewan  diberi pakan pelet standar dan minum disediakan ad libitum .

## Perlakuan Terhadap Hewan Uji
Hewan  uji  dibagi  menjadi  5  kelompok  secara  acak, terdiri  dari  kelompok  kontrol  sehat,  kontrol  sakit, kontrol  pembanding,  dan  kelompok  uji  sebanyak  2 tingkatan  dosis.  Pada  hari  ke  1-7  setelah  aklimatisasi, dilakukan  pemberian  buffer  phospat  ke  kelompok  1,
nanoemulsi  ekstrak Ipomoea  acuatica Forsk  200 mg/kgBB ke kelompok 3, nanoemulsi ekstrak Ipomoea acuatica Forsk  400  mg/kgBB  ke  kelompok  4,  dan donepezil  5  mg/kgBB  ke  kelompok  5  menggunakan spuit  oral  1  ml.  Donepezil  dibuat  dengan  cara dilarutkan kedalam NaCl 0,9%. Kemudian di hari ke 8 mencit  diinduksi  Trimetiltin  (TMT)  dengan  dosis  11,2 mg/kgBB  secara  intraperitoneal  menggunakan  spuit injeksi  untuk semua  kelompok  (kecuali  kontrol  sehat). Kemudian  dilanjutkan  dengan  pemberian  perlakuan sesuai kelompoknya masing-masing selama 21 hari, dan pada  hari  ke-15  sampai  hari  ke-21  dilakukan  uji Moris Water Maze pada mencit.

## Uji Moris Water Maze
Uji Morris  Water  Maze terdiri  dari  3  tahapan  yaitu acquisition  trial , probe  trial dan  uji  kemampuan sensorimotoris.  Kolam  dibagi  menjadi  empat  kuadran secara imaginer.
Bahan Formula Ekstrak Ipomoea aquatica Forsk + etanol 96 % 20 ml Tween 80 2 g Buffer fosfat 78 ml
Acquisition  trial dilakukan  selama  5  hari.  Mencit dilatih menemukan  platform  yang  terletak  2  cm  di bawah  permukaan  air  pada  salah  satu  kuadran sebanyak  empat  kali  per  hari.  Mencit  dimasukan pada salah  satu  kuadran  secara  random.  Waktu  diakhiri jika  mencit  telah  mencapai  platform  atau  setelah berenang  selama  60  detik  tetapi  belum  mencapai platform.  Jika  mencit  tidak  berhasil  menemukan platform  selama  60  detik  maka  mencit  dibimbing untuk  menemukan platform  dan  ditempatkan  di  atas platform  selama  15  detik  sebelum latihan berikutnya. Waktu dan jarak tempuh mencapai platform dicatat.
Probe trial, m encit dibiarkan berenang selama 60  detik tanpa  platform.  Kemudian  dilakukan  pencatatan terhadap  waktu  lamanya  mencit  berada  di  kuadran letak  platform  dan  berapa  kali  mencit  melintasi kuadran letak platform, hal ini juga dilakukan  sebanyak empat kali tiap mencit.
Uji  kemampuan  sensori-motoris  platform  terletak  2 cm  di  bawah  air  yang  sudah  diberi  santan.  Letak platform  diubah-ubah  pada kuadran yang berbeda tiap latihan.  Mencit  dimasukan  pada  salah  satu  kuadran kecuali  pada  kuadran  yang  ditempati  platform.  Tiap mencit  dilatih  empat  kali,  jika  selama  60  detik  mencit tidak  dapat  mencapai  platform  maka  mencit  akan dibimbing  untuk  menemukan  platform.  Waktu mencit menemukan platform dicatat (Safwan et al. , 2014).
Analisis Data Uji Moris Water Maze
Hasil  dicatat  sebagai  waktu  latensi  dan  jarak  pada acquisition  trial,  berapa  kali  dan  berapa  lama  waktu mencit  berada  dikuadran  platform  pada  probe  trial, dan  normal  atau  tidaknya  aktivitas  sensorimotoris. Data kemudian dianalisis secara statistik, uji normalitas dilakukan  dengan  menggunakan  uji  Kolmogorov- Smirnov (jika data lebih lebih dari 50) atau uji Saphiro- Wilk  (jika  data  kurang  dari  50)  dan  uji  homogenitas dilakukan  dengan  uji  Levene.  Data  waktu  latensi  dan panjang  lintasan  ditransformasi  menjadi  data  log10 sehingga  data  terdistribusi  normal  dan  homogen kemudian dianalisis statistik dengan one way repeated
measure  ANOVA  dan  dilanjutkan  dengan  uji  posthoc Tukey  HSD.  Data  hasil  uji  probe  trial  dan sensorimotor,  jika  data  terdistribusi  normal  dan homogen  diuji  dengan  one  way  ANOVA  dilanjutkan dengan uji posthoc Tukey HSD.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak Ipomoea aquatica forsk
Metode  ekstraksi Ipomoea  aquatica forsk  yang digunakan  adalah  soxhletasi.  Dasar  pemilihan  metode ini  karena  pada  metode  soxhletasi  serbuk  simplisia disari  oleh  cairan  penyari  yang  murni  sehingga  dapat menyari zat aktif lebih banyak.
Ekstrak  kental Ipomoea  aquatica forsk  diperoleh sebanyak  10  gram.  Karakteristik  ekstrak  kental Ipomoea  aquatica forsk  hasil  ekstraksi  yaitu  berwarna hijau kecoklatan, kental, dan berbau khas.
Nanoemulsi Ekstrak Ipomoea aquatica Forsk Nanoemulsi  Ekstrak Ipomoea  aquatica forsk  yang diformulasikan  termasuk  kedalam  kategori  emulsi minyak  dalam  air.  Fase  terdispersi  yaitu  fase  minyak (campuran  ekstrak Ipomoea  aquatica forsk  dan  etanol 96%) dan fase pendispersi yaitu fase air (buffer phospat pH 7).
Hasil sediaan nanoemulsi ekstrak Ipomoea aqutica forsk yang  diperoleh  memiliki  karakteristik  cair,  berwarna hijau tua, dan berbau khas.

## Efek TMT pada hewan coba
Trimetiltin  digunakan  untuk  menginduksi  terjadinya demensia  model  alzheimer.  Trimetiltin  diberikan  pada hari  ke  8  setelah  pemberian  perlakuan  pada  masing masing  kelompok  hewan  uji,  tujuannya  adalah  agar hewan  uji  mendapat  zat  aktif  dari  sediaan  nanoemulsi ekstrak Ipomoea aquatica forsk dan ataupun donepezil di  dalam  darah  sebelum  dipaparkan  TMT.  Paparan TMT  dapat  menyebabkan  disorentasi,  agresif,  dan kejang  kejang  pada  hewan  uji.  Berdasarkan  hasil pengamatan  mencit  yang  diinduksi  TMT  mengalami
penurunan  berat  badan,  tingkah  lakunya  lebih  agresif, bulu-bulunya menjadi mudah rontok dan kusam.

## Hasil Uji Morris Water Maze
Tabel I. Uji Aquisition Trial Hari ke-2
No  Kelompok  Panjang
Lintasan P value Waktu Latensi P value 1. Normal 0,526 ± 0,119 0,012 1,311 ± 0,074 0,010 2. TMT 0,668 ± 0,172 - 1,548 ± 0,079 - 3. TMT + NE 200 mg/kgBB 0,206 ± 0,102 0,001 1,074 ± 0,104 0,001 4. TMT + NE 400 mg/kgBB 0,496 ± 0,106 0,024 1,428 ± 0,160 0,359 5. TMT + Donepezil 0,426 ± 0,099 0,002 1,384 ± 0,041 0,115

## Tabel II. Uji Aquisition Trial Hari ke-3
No  Kelompok  Panjang Lintasan P value Waktu Latensi P value 1. Normal 0,412 ± 0,134 0,012 1,291 ± 0,204 0,015 2. TMT 0,662 ± 0,119 - 1,612 ± 0,130 - 3. TMT + NE 200 mg/kgBB 0,254 ± 0,045 0,001 1,102 ± 0,131 0,001 4. TMT + NE 400 mg/kgBB 0,506 ± 0,143 0,192 1,370 ± 0,134 0,090 5. TMT + Donepezil 0,362 ± 0,055 0,002 1,318 ± 0,082 0,028

## Tabel III. Uji Aquisition Trial Hari ke-4
No  Kelompok  Panjang Lintasan P value  Waktu Latensi P value 1. Normal 0,462 ± 0,086 0,015 1,239 ± 0,777 0,001 2. TMT 0,602 ± 0,104 - 1,540 ± 0,033 -
3. TMT + NE 200 mg/kgBB 0,108 ± 0,036 0,001 1,019 ± 0,106 0,001 4. TMT + NE 400 mg/kgBB 0,438 ± 0,101 0,072 1,209 ± 0,130 0,001 5. TMT + Donepezil 0,406 ± 0,111 0,023 1,358 ± 0,102 0,050

## Tabel III. Uji Aquisition Trial Hari ke-5
No  Kelompok Panjang Lintasan P value Waktu Latensi P value 1. Normal 0,474 ± 0,164 0,013 1,313 ± 0,221 0,003 2. TMT 0,730 ± 0,056 - 1,675 ± 0,081 - 3. TMT + NE 200 mg/kgBB 0,108 ± 0,069 0,001 0,912 ± 0,074 0,001 4. TMT + NE 400 mg/kgBB 0,432 ± 0,151 0,003 1,434 ± 0,152 0,065 5. TMT + Donepezil 0,500 ± 0,651 0,029 1,361 ± 0,063 0,010
Data  waktu  panjang  lintasan  dan  waktu  latensi menunjukan  data  yang  homogen  dan  terdistribusi normal.  Hasil  uji  menunjukkan  bahwa  data terdistribusi  normal  dan  homogen  (sig  >  0,05) sehingga  kemudian  dilakukan  uji  one  way  ANOVA. Hasil  uji  one  way  ANOVA  menunjukkan  nilai  sig  < 0,05 dari hari ke 2 hingga hari ke 4 sehingga memberi kesimpulan  bahwa  ada  kelompok-kelompok  yang berbeda  signifikan.  Analisis  selanjutnya  menggunakan uji  posthoc  Tukey  HSD.  Kemudian  dilakukan perbandingan  antar  kelompok  perlakuan  dengan kelompok sakit (TMT). Dari hari ke 2 hingga hari ke 4 terdapat  perbedaan  bermakna  (p  value  (sig)  <  0,05) antara  kelompok  sakit  dan  seluruh  kelompok
perlakuan  kecuali  kelompok  uji  Nanoemulsi  400 mg/kgBB.
Probe Trial Tabel IV. Uji Probe Trial N o Kelomp ok Frekuen si Berada di Kuadra n Target P valu e Presenta se (%) Lama Waktu di Kuadran Target P
valu e 1. Normal 4,00 ± 1,225 0,04 4 0,267 ± 0,057 0,03 9 2. TMT 1,60 ± 0,894 - 0,139 ± 0,038 - 3. TMT + NE 200 mg/kgBB 4,80 ± 1,304 0,00 5 0,270 ± 0,106 0,03 4 4. TMT + NE 400 mg/kgBB 3,00 ± 0,707 0,41 0 0,256 ± 0,056 0,06 7 5.   TMT + Donepe zil 4,20 ± 1,789 0,02 6 0,276 ± 0,044 0,02 4
Data  frekuensi  mencit  berada  di  kuadran  target  dan presentase  lama  waktu  dan  kuadran  target  uji menunjukan  data  yang  homogen  dan  terdistribusi normal  (sig  >  0,05)  sehingga  kemudian  dilakukan  uji one  way  ANOVA.  Hasil  uji  one  way  ANOVA menunjukkan  nilai  sig  <  0,05  sehingga  memberi kesimpulan  bahwa  ada  kelompok-kelompok  yang berbeda  signifikan.  Analisis  selanjutnya  menggunakan uji  posthoc  Tukey  HSD.  Kemudian  dilakukan perbandingan  antar  kelompok  perlakuan  dengan kelompok  sakit  (TMT).  Antara  kelompok  sakit  dan seluruh  kelompok  perlakuan  kecuali  kelompok  uji Nanoemulsi  400  mg/kgBB  terdapat  perbedaan bermakna (sig <0,05).
Sensori Motoris Tabel V. Uji Kemampuan Sensori Motoris
No  Kelompok Sensori Motoris P value 1. Normal 1,335 ± 0,301 0,906 2. TMT 1,441 ± 0,117 - 3. TMT + NE 200 mg/kgBB 1,234 ± 0,215 0,464 4. TMT + NE 400 mg/kgBB 1,410 ± 0,158 0,999 5.   TMT + Donepezil  1,297 ± 0,103 0,763
Data hasil uji sensorimotor menunjukkan bahwa data terdistribusi  normal  dan  homogen  (sig  >  0,05). Analisis  selanjutnya  menggunakan  uji  one  way ANOVA. Hasil uji one way ANOVA menunjukan nilai sig  >  0,05.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tidak  ada perbedaan  yang  signifikan  sensori  motoris  di  antar kelompok,  sehingga  kemampuan  memori  tikus  tidak disebabkan  karena  adanya  gangguan  sensori,  motor dan motivasi dari hewan uji.
Salah satu tanda terjadinya alzeimer  yaitu mengingkatnya  aktivitas  asetil  kolinesterase  (AChE), enzim  ini  bertanggung  jawab  untuk  menghindrolisis asetilkolin,  baik  dari  neuron  kolinergik  maupun  non kolinergik  ( Dhanasekaran  et  al.,  2015) .  Meningkatnya enzim  AChE  menyebabkan  penurunan  asetilkolin terutama  di  daerah  hipocampus  yang  menjadi  area melakukan  tugas  memori  utama  sehingga  hal  ini menyebabkan penurunan fungsi neurotransmitter pada penderita  alzeimer.  Asetilkolin  sendiri  memainkan peran sentral dalam transmisi saraf dasar, konsentrasi, memori  dan  pembelajaran  ( Sivaraman  &  Muralidaran, 2010).
Studi menunjukkan bahwa nanoemulsi Ekstrak Ipomoea aquatica forsk  dengan  dosis  200  mg/kgBB  mampu memperbaiki fungsi kognitif hewan coba yang ditandai dengan  nilai  hasil  uji  esktrak Ipomoea  aquatica forsk menunjukkan  hasil  MWM  yang  hampir  sama  dengan mencit yang diberi donepezil.
Nanoemulsi  ekstrak Ipomoea  aquatica Forsk  mampu menghambat  AChE  sehingga  kandungan  Ach  di hipokampus  semakin  meningkat  dan  berefek  pada peningkatan  fungsi  kognitif  hewan  coba.  Hal  ini  dapat disebabkan karena aktivitas antioksidan dari nanoemulsi  ekstrak Ipomoea  aquatica Forsk  yang berperan  sebagai  antikolinesterase.  Antioksidan  dapat meredam  radikal  bebas  pada  hewan  coba  yang diinduksi TMT.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disumpulkan bahwa Nanoemulsi  ekstrak Ipomoea  aquatica Forsk  dapat memodulasi neurotransmitter Ach pada mencit

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terimakasih kepada kementerian Pendidikan,
Kebudayaan, Riset dan Teknologi yang telah mendanai penelitian ini.
Terimakasih  kepada  Universitas  Ahmad  Dahlan  yang telah memfasilitasi penelitian ini.

## REFERENSI
1. Wibowo, M. M., dan Karema, W. 2015. Gambaran Fungsi  Kognitif  Dengan  INA-MoCA  dan  MMSE Pada  Penderita  Post-Stroke  di  Poliklinik    Saraf BLU RSUP Kandou Manado November-Desember 2014. Jurnal e-CliniC . 3 (3):754-757.
2. Ramadian,  D.,  Maja,  J.,  dan  Runtuwene  T.  2012. Gambaran  Fungsi  Kognitif  pada  Lansia  di  Tiga Yayasan  Manula  di  Kecamatan  Kawangkoan. Universitas Sam Ratulangi. Manado.
3. Asiah, N. 2013. Air dan Gangguan Fungsi Kognitif. Majalah Kesehatan Pharmamedika . 5 (1).
4. Purba, J. S. 2020. Inflamasi dalam Patologi Penyakit Alzheimer. Medicinus, 33 (3):65-71.
5. Rosli,  N.  H.  S.  B.  M.  2019. Antioxidant  and anticholinesterase  activities  of Ipomoea  aquatica Forssk.  And Ipomoea  reptans Poir. Disertasi .
Faculty  of  Science  University  of  Malaya,  Kuala Lumpur.
6. Fu, H., Xie, B., Ma, S., Zhu, X., Fan, G., dan Pan, S. 2011.  Evaluation  of  antioxidant  activities  of principal  carotenoids  available  in  water  spinach ( Ipomoea aquatica ). Journal of Food Composition and Analysis. 24 (2):288-297.
7. Dhanasekaran,  S.,  Perumal,  P.,  dan  Palayan,  M. 2015.  In-vitro  Screening  for  acetylcholinesterase enzyme  inhibition  potential  and  antioxidant activity  of  extracts  of Ipomoea  aquatica Forsk: therapeutic lead for Alzheimer’s disease. Journal of Applied Pharmaceutical Science . 5 (02):012-016.
8. Sivaraman,
D., Panneerselvam, P., dan Muralidharan,  P.  2016.  Memory  and  Brain Neurotransmitter Restoring Potential of Hydroalcoholic Extract of Ipomoea aquatica Forsk on  Amyloid  Beta  A  beta  (25-35)  Induced Cognitive Deficits in Alzheimer’s Mice. International Journal of Pharmacology . 12 (2):52-65.
9. Jusnita,  N.,  dan  Tridharma,  W.  S.  2019. Karakterisasi  nanoemulsi  ekstrak  daun  kelor (Moringa  oleifera  Lamk.). Jurnal  Sains  Farmasi  dan Klinis . 6 (1):16-24.
10. Sukmawati,  D.  D.  2011.  Formulasi  Mikroemulsi Ekstrak  Herba  Pegagan  ( Centella  asiatica L  Urb) dengan  Variasi  Kadar  Tween  80. Skripsi . Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta.
11. Yuliani,  S.  2016. Efek  Ekstrak  Rimpang  Kunyit (Curcuma Longa Linn) Terstandar Kurkumin Pada Tikus Model Demensia Yang Diinduksi Trimetiltin. Disertasi. Universitas Gadjah Mada.
12. Aspamufita,  N.,  &  Yuliani,  S.  (2013).  Efek  ekstrak etanol rimpang temulawak (curcuma xanthorrhiza roxb)  terhadap  memori  spasial  tikus  model demensia yang diinduksi trimethyltin. Pharmaciana , 3 (2).