## Jurnal Sains dan Teknologi
Volume 11 Number 1, Tahun 2022, pp. 85-92 P-ISSN: 2303-3142 E-ISSN: 2548-8570 Open Access: https://dx.doi.org/10.23887/jst-undiksha.v11i1

## Isolasi Bakteri Endofit dari Tanaman Laban (Vitex Pubescens Vahl) sebagai Antibakteri
Zulfarina 1* , Yuni Rosiana 2 , Deya Ayudia 3 , Darmawati 4
1,2,3,4 Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan, Universitas Riau, Pekanbaru, Indonesia

## A B S T R A K
Pemanfaatan  bakteri  endofit  sebagai  penghasil  senyawa  metabolit  sekunder sangat menguntungkan. Kandungan metabolit sekunder yang terdapat di dalam jaringan  tumbuhan  serta  dalam  bakteri  merupakan  potensi  yang  memberikan banyak  manfaat  dalam  bidang  pertanian.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengisolasi  bakteri  endofit  dari  daun  dan  kulit  batang  tanaman  Laban  ( Vitex pubescens Vahl)  dan  uji  antibakteri.  Bakteri  diisolasi  menggunakan  media  HVA. Karakteristik  bakteri  endofit    diamati  secara  makroskopis,  mikroskopis,  dan melakukan uji katalase serta untuk uji antibakteri menggunakan bakteri patogen Erwini a carotrova . Jumlah isolat endofit yang berhasil diisolasi berjumlah delapan isolat  (empat  isolat  dari  daun  laban  dan  empat  isolat  dari  kulit  batang  laban). Karakterisasi dilakukan pada delapan isolat endofit yang dihasilkan bahwa isolat memiliki ciri-ciri yang berbeda baik secara makroskopis, mikroskopis, dan semua isolat  endofit  dari  tanaman  laban  menghasilkan  enzim  katalase  (uji  +).  Hasil aktivitas antibakteri menunjukkan tujuh isolat bakteri endofit memiliki aktivitas antibakteri terhadap erwinia carotrovora. Tanaman laban kaya akan keragaman bakteri endofit. Isolate bakteri endofit terisolasi 8 spesies yang berbeda (DA45, DA46, DB15, DB16, KBC1, KBC2, KBC3 dan KBC4). Bakteri endofit yang berasosiasi dengan tanaman berperan penting dalam kesehatan tanaman.

## A B S T R A C T
The objective of this study was to isolate of endophytic bacteria from the leaves and bark of Laban plant (Vitex pubescens vahl)  and  antibacteria  test.  Bacteria  were  isolated  using  HVA  media.  The  characteristics  of  endophytic  bacteria  were observed macroscopically, microscopically and carried out the catalase test and for antibacterial tests using the pathogenic bacterium Erwinia carotrova. Total isolated  endophytic was 8 isolates (4 isolates from Laban leaves and 4 isolates from Laban stem bark). Characterization was carried out on 8 endophytic isolates which resulted that the isolates had different characteristics  both  macroscopically,  microscopically,  and  all  endophytic  isolates  from  the  Laban  plant  produced  the catalase enzyme (+ test). Test of endophytic bacteria against pathogenic bacteria obtained 7 isolates having inhibitory power against the Erwinia carotrova bacteria..

## 1. PENDAHULUAN
Endofit adalah mikroorganisme  yang hidup di dalam jaringan tanaman hidup setidaknya selama sebagian hidupnya tanpa menimbulkan gejala penyakit yang nyata pada inangnya (Santoyo, 2016). Endofit diperlakukan sebagai endosimbion. Kemampuan untuk masuk dan berkembang dalam jaringan tanaman membuat endofit unik, menunjukkan interaksi multidimensi di dalam tanaman inang. Beberapa aktivitas vital  tanaman  inang  diketahui  dipengaruhi  oleh  keberadaan  endofit.  Endofit  masuk  ke  dalam  tanaman terutama melalui akar dan bagian udara tanaman, seperti daun, bunga, batang dan kotiledon (Kobayashy & Palumbo, 2000) . Endofit terlokalisasi pada titik masuk dan dapat menyebar di seluruh tubuh tanaman inang (Khare et al., 2018) . Setelah memasuki inang, mereka tinggal di dalam sel atau ruang antar sel atau di sistem vaskular (jaringan) (Kumar et al., 2016; H. Liu et al., 2017) . Setelah mendapatkan tempat tinggal di jaringan tanaman,  endofit  diketahui  menghasilkan  beragam  produk  alami  yang  bisa  menjadi  sumber  obat  yang konsisten dan sukses. Oleh karena itu, produk alam dari mikroba endofit memang memiliki potensi yang besar tidak hanya dalam industri farmasi tetapi juga industri agrokimia dan bioteknologi (Astuti et al., 2018; Eljounaidi et al., 2016; Romero-Arguelles et al., 2022) .
Saat ini sedang berkembang usaha pemanfaatan bakteri endofit sebagai agen pengendali hayati (J. M. Liu et al., 2020; Zulkifli et al., 2018) . Selain itu, pemanfaatan bakteri Endofit sebagai penghasil senyawa metabolit sekunder sangat menguntungkan karena kandungan metabolit sekunder yang terdapat di dalam jaringan  tumbuhan  serta  dalam  bakteri  merupakan  potensi  yang  memberikan  banyak  manfaat  dalam bidang  pertanian (G  et  al.,  2018) .  Tanaman  obat  telah  digunakan  sepanjang  sejarah  karena  sifat

## A R T I C L E   I N F O
Article history: Received December 27, 2021 Revised December 29, 2021 Accepted April 14, 2022 Available online April 25, 2022
Kata Kunci: Bakteri Endofit, Tanaman Laban, Isolasi
Keywords: Endophytic Bacteria, Laban Plant, Isolation
This is an open access article under the CC BY-SA license.
Copyright © 2022  by Author. Published by Universitas Pendidikan Ganesha.
terapeutiknya. Endofit bersifat sinergis dengan inangnya, sehingga dapat menjadi pilihan yang baik untuk penelitian keberadaan bakteri endofit (Linda et al., 2022) . Tanaman laban ( Vitex pubescens vahl) adalah salah satu tanaman obat yang dapat dijadikan sebagai sumber bakteri endofit. Tanaman  laban memiliki sejarah dalam bidang etnobotani dan sering digunakan sebagai obat tradisional. Tanaman laban berfungsi sebagai  antimikroba  meliputi  anticendawan  dan  antibakteri.  Senyawa  antimikroba  yang  berasal  dari tanaman  Laban  dihasilkan  oleh  bakteri  endofit.  Kemampuan  suatu  tumbuhan  menghasilkan  senyawa antimikroba  akan  menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme  lain  serta  menjadi  resisten  terhadap serangan jamur atau  mikroorganisme lainnya  dan  berpotensi sebagai antibakteri, antifungi, antikanker (Fajri & Agustien, A., 2015; Khan et al., 2020) . Kandungan metabolit sekunder pada daun tanaman Laban mengandung  senyawa  flavonoid,  terpenoid,  dan  fenolik (Larasati  et  al.,  2013) .  Kandungan  metabolit sekunder  pada  kulit  batang  tanaman  Laban  yang  menunjukkan  bahwa  kulit  batang  tanaman  laban mengandung  alkaloid,  flavonoid,  terpenoid,  saponin,  dan  tanin (Hermansah  et  al.,  2015) .  Dari  hasil penelitian tersebut diperkirakan bahwa kulit batang dan daun tanaman laban dapat menghasilkan bakteri endofit yang merupakan produsen penghasil metabolit sekunder yang dapat digunakan sebagai antibakteri.
Hasil  penelitian  terdahulu  mendapatkan  bahwa  bakteri  endofit  yang  diisolasi  dari  beberapa tanaman menghasilkan berbagai senyawa metabolit dengan efek antimikroba dan pemicu pertumbuhan tanaman (Jasim et al., 2014; Q. Liu et al., 2020; Martinez-Klimova et al., 2017; Zulkifli et al., 2018) . Isolat bakteri endofit Bacillus sp terbukti sangat efektif sebagai antimikrob dan pupuk hayati dan agen biokontrol (Purwaningsih & Wulandari, 2021; Sadikin et al., 2021; Zulkifli et al., 2018) . Jamur endofit diisolasi dari cabang dan daun sesbania grandiflora (L.) Pers (Kurniawan et al., 2021) . Bioaktivitas terhadap bakteri gram positif dan gram negatif (Sidauruk et al., 2021) . Beberapa strain bacillus telah diisolasi dan dikarakterisasi untuk pertumbuhan tanaman dan produksi metabolit antijamur (Omomowo & Babalola, 2019; Shurigin et al.,  2021) .  Karena  sifat-sifat  ini,  beberapa  strain  bacillus  telah  digunakan  di  bidang  pertanian  sebagai pemacu  pertumbuhan  tanaman  dan  agen  kontrol  biologis (Sebola  et  al.,  2019) .  Penelitian  ini  bertujuan untuk mendapatkan isolate bakteri endofit dari tanaman Laban dan menguji isolate bakteri yang diperoleh terhadap bakteri pathogen tanaman Erwinia carotrovora .

## 2. METODE
Bakteri  endofit  diisolasi  dari  bagian  kulit  batang  dan  daun  tanaman  laban  yang  diperoleh  dari kebun biologi kampus Universitas Riau. Bakteri pathogen e rwinia carotrovora dari koleksi laboratorium penyakit  tanaman  Fakultas  Pertanian  Universitas  Riau.  Tahapan  penelitian  yaitu  isolasi  bakteri  endofit, metode yang digunakan untuk isolasi bakteri endofit adalah berdasarkan sterilisasi permukaan. Sampel kulit batang dan daun tanaman laban dicuci dengan air mengalir sampai bersih. Sampel dipotong-potong berukuran sekitar 1 cm × 1 cm , lalu direndam dalam larutan alkohol (70%) selama 1 menit dan dicuci dua kali  dengan  aquades.  Selanjutnya  direndam  dalam  larutan  sodium  hipoklorida  (4%)  selama  5  menit, kemudian dibilas dengan air steril (Zulkifli et al., 2018) . Permukaan sampel jaringan tumbuhan yang telah steril dimaserasi dengan menggunakan mortal dan pistil steril sampai halus kemudian tambahkan sekital 2 ml aquades steril. Hasil penggerusan, diambil 0,1 mL dan di plating pada cawan petri yang berisi media HVA.  Setiap  media dilengkapi dengan asam nalidiks at (25 mg·L−1),  nistatin (50 mg·L−1) dan  diinkubasi dalam incubator pada suhu kamar selama 2-4 hari.  Koloni yang tumbuh pada media isolasi ini diseleksi dan dimurnikan  dengan  penggoresan  berulang  pada  media  NA.  Kultur  murni  diawetkan  sebagai  suspensi gliserol (20%, v/v) pada -80 °C. Identifikasi morfologi, isolat bakteri yang telah didapatkan dikarakterisasi berdasarkan  pengamatan  morfologi  koloni,  bentuk  sel,  pola  pertumbuhan,  uji  pewarnaan  gram  dan  uji katalase.
Aktivitas antibakteri, uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan menggunakan metode difusi sumur agar  (Holder  &  Boyce,  1994)  terhadap  bakteri  patogen erwinia  carotrovora  pada  medium  NA. Bakteri endofit yang berasal dari stok agar miring diinokulasikan ke media NA, kemudian diinkubasi selama 24 jam. Kultur bakteri patogen e rwinia carotrovora ditumbuhkan di dalam 50 mL media NB dan diinkubasi di atas shaker dengan suhu 37 o C. Sebanyak 1 mL kultur bakteri pathogen dituangkan kedalam 20 mL media NA yang bersuhu 35-40 o C kemudian dituang ke dalam cawan petri sebanyak ± 20 mL lalu didinginkan. Diambil 1  potongan  (θ1cm)  isolat  endofit  diletakkan  diatas  media  NA  yang  telah  mengandung  kultur  bakteri patogen . Pengamatan  dilakukan  setelah  diinkubasi  selama  24  jam.  Zona  bening  yang  terbentuk  yang menunjukkan  aktivitas  antibakteri.  Pengamatan  zona  bening  dilakukan  dengan  mengukur  zona  bening yang terbentuk menggunakan rumus zona hambat (Lv) = Lav – Ld dengan Lav, diameter zona bening yang terbentuk dan Ld. diameter koloni/kertas cakram.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Isolat bakteri endofit dari tanaman laban ( Vitex pubescens vahl). Hasil isolasi bakteri endofit dari kulit batang dan daun laban ( Vitex pubescens Vahl)  diperoleh delapan isolat yang terdiri dari empat isolat dari daun dan empat isolat dari kulit batang. Hasil purifikasi isolat bakteri endofit dari kulit batang dan daun tanaman laban disajikan pada Gambar 1.
. (a)
(b)
(c)
Gambar 1. (a) Isolat Murni Bakteri Endofit Daun B15 dan Daun B16; (b) Isolat Murni Bakteri Endofit Daun A45 dan Daun A46; (c) Isolat Murni Bakteri Endofit KBC1, KBC2, KBC3, KBC4
Karakterisasi secara makroskopis meliputi  bentuk koloni tunggal, tepian koloni tunggal, elevasi koloni (ketinggian permukaan koloni), serta pigmen koloni tunggal bakteri endofit. Bakteri endofit yang telah  diisolasi  dari  daun  dan  kulit  batang  tanaman  laban  memiliki  keberagaman  dari  segi  morfologi sehingga diyakini bahwa 8 isolat bakteri endofit tersebut memiliki jenis yang berbeda. Morfologi koloni bakteri endofit berupa bentuk, tepian, elevasi dan pigmen koloni disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Karakterisasi Isolat Bakteri Endofit pada Daun dan Kulit Batang Tanaman Laban (Vitex Pubescens Vahl) Secara Makroskopis
Kode Isolat Morfologi Koloni Bentuk Tepian Elevasi Pigmen Daun A46 Irreguler Bergerigi Naik Putih Daun A45 Rhizoid Berlekuk Umbonate Putih kekuningan Daun B15 Sirkuler Rata Datar Kuning Daun B16 Irregular Bergerigi Datar Putih kekuningan KB C1 Sirkuler Rata Convex Bening KB C2 Sirkuler Rata Datar Putih kekuningan KB C3 Sirkuler Rata Datar Putih kekuningan KB C4 Irregular Rata Datar Kuning Karakterisasi bakteri endofit secara mikroskopis dari kulit batang dan daun tanaman laban yang dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Karakterisasi Secara Mikroskopis Isolat Bakteri Endofit pada Daun dan Kulit Batang Tanaman Laban (Vitex Pubescen Vahl) Isolat (Makroskopis) Mikroskopis (4 x 100) Pewarnaan Gram Bentuk Uji Katalase DA45
DA45
+
Streptococcus +
Daun B16 Daun B15 Daun A45 Daun A46 KB C2 KB C4 KB C3 KB C1
Isolat (Makroskopis) Mikroskopis (4 x 100) Pewarnaan Gram Bentuk Uji Katalase DA46 DA46 + Streptococcus + DB15 DB15
+
Streptococcus
+ DB16
DB16
+ Streptococcus + KB C1
KB C1
+ Streptobacillus + KB C2 KB C2
- Streptobacillus +
KB C3
KB C3 + Streptobacillus
+
KB C4
KB C4
- Streptobacillus +
Berdasarkan  Tabel  2  dapat  dilihat  bahwa  4  isolat  bakteri  endofit  dari  daun  tanaman  laban umumnya merupakan bakteri gram positif yang berbentuk streptococcus, sedangkan isolat bakteri endofit dari kulit batang tanaman lebih beranekaragam karena dari 4 isolat bakteri endofit yang berhasil diisolasi, terdiri atas 2 isolat bakteri endofit gram positif, dan 2 isolat bakteri gram negatif.  Pada umumnya ,semua isolat endofit dari kulit batang tanaman laban berbentuk streptobacillus. Isolat bakteri endofit dengan kode DA45,  DA46,  DB15,  DB16,  KBC1  dan  KBC3  merupakan  bakteri  gram  positif  karena  berwarna  ungu disebabkan oleh zat warna kristal violet, dan isolat bakteri endofit dengan kode KBC2 dan KBC4 merupakan bakteri  gram  negatif  karena  berwarna  merah  yang  disebabkan  oleh  zat  warna  safranin.  Mekanisme pewarnaan gram pada bakteri ini didasarkan pada struktur dan komposisi dinding sel bakteri. bakteri gram positif memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal pada dinding selnya yang mampu  mengikat zat warna, sedangkan bakteri gram negatif umumnya memiliki lapisan peptidoglikan yang tipis pada dinding selnya. Selain itu, bakteri gram negatif mengandung lipid lebih banyak dibandingkan bakteri gram positif, sehingga pada  proses  pewarnaan  saat  perlakuan  dengan  pemberian  alkohol  apabila  bakteri  tersebut  merupakan bakteri  gram  negatif  maka  akan  menyebabkan  terjadinya  reaksi  antara  lipid  dan  alkohol,  sehingga memperbesar daya rembes atau permeabilitas dinding sel bakteri gram negatif. Jadi, zat warna kristal violet yang terlebih dahulu diteteskan pada bakteri daripada alkohol dalam proses pewarnaan dapat diekstraksi dan kehilangan warna tersebut.
Uji  antibakteri  bakteri  endofit,  penapisan  isolat  bakteri  endofit  tersebut  dilakukan  untuk memperoleh  isolat  yang  mampu  menghasilkan  produk  metabolit  yang  bersifat  antibakteri  patogen. Pengujian secara in vitro menunjukkan bahwa produk  metabolit sekunder yang dihasilkan oleh  bakteri endofit  menghasilkan  zona  hambat  Tabel  3.  Penapisan  aktivitas  antibakteri  isolat  bakteri  endofit  kode DA46,  DA45,  DB15,  DB16,  KBC1,  KBC2,  KBC3  dan  KBC4  dilakukan  terhadap  bakteri  uji  yaitu Erwinia carotrovora . Hasil pengujian aktivitas antibakteri isolat bakteri endofite  e rwinia carotrovora dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel  3. Hasil  Pengukuran  Aktivitas  Antimikrob  Isolat  Endofit  terhadap  Bakteri  Patogen Erwinia Carotrovora
Kode Isolat Erwinia Carotrovora Zona Hambat DA 46 + 1 mm DA 45 + 3 mm DB 15 + 2 mm DB 16 + 1 mm KB C1 + 2 mm KB C2 - - KB C3 + 6 mm KB C4 + 1 mm
Hasil  penapisan  menunjukkan  bahwa  isolat  bakteri  endofit  yang  mampu  menghambat pertumbuhan bakteri patogen yaitu sebanyak 7 isolat bakteri endofit mampu menghambat pertumbuhan E.  carotrovora. Menurut  Ambarwati  (2007)  daerah  hambatan  ditentukan  tingkat  hambatannya  sesuai dengan kriteria aktivitas penghambatan berdasarkan ukuran, yaitu zona hambat dengan ukuran ≤ 5mm termasuk golongan aktivitas lemah, 5-9 mm memiliki kemampuan sedang, 10-20 mm memiliki kemampuan kuat dan ≥20 mm memiliki kemampuan yang sangat kuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri target. Berdasarkan tabel 3 pada isolat endofit terhadap E.carotrovora isolat KB C3 termasuk kategori sedang dan 6 isolat lainnya termasuk kategori lemah.

## Pembahasan
Tanaman laban kaya akan keragaman bakteri endofit, isolate bakteri endofit terisolasi 8 spesies yang berbeda (DA45, DA46, DB15, DB16, KBC1, KBC2, KBC3 dan KBC4). Bakteri endofit yang berasosiasi dengan tanaman berperan penting dalam kesehatan tanaman. Bakteri ini menghasilkan berbagai metabolit yang bermanfaat dan dengan demikian telah dianggap sebagai sumber senyawa biologis aktif (Castronovo et al., 2021; Erjaee et al., 2019) . Beberapa bakteri endofit menunjukkan aktivitas antagonis terhadap bakteri patogen  tanaman erwinia  carotrovora ..  Ratusan  spesies  bakteri  endofit  dapat  diisolasi  dari  satu  jenis tanaman, dan kondisi lingkungan tempat tumbuh tanaman inang, jenis tanaman dan umur tanaman akan berpengaruh  terhadap  populasi  dan  profil  dari  mikrob  endofit  di  dalamnya (Rosenblueth  &  Martínez- Romero, 2006) . Tanaman dengan jenis atau spesies yang sama memiliki bakteri endofit yang tidak selalu sama (Salo  &  Novero,  2020) .  Bakteri  endofit  dapat  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  yang  sama  dan menghasilkan  metabolit  seperti  inangnya.  Senyawa  biologis  aktif  tanaman  obat  dapat  memengaruhi
mikroba endofit yang hidup di dalam jaringan tanaman dan fungsi fisiologisnya (Salam et al., 2017; Shurigin et  al.,  2021) .  Endofit  yang  berasosiasi  dengan  laban,  yang  menunjukkan  aktivitas  antagonis  terhadap e rwinia  carotrovora membuktikan  potensi  biokontrol.  Beberapa  mekanisme  dasar  yang  mendasari  efek menguntungkan  tanaman  dilaporkan  dalam  literatur,  termasuk  produksi  fitohormon,  enzim  perusak dinding sel mikroba, produksi hidrogen sianida (HCN) dan ACC-deaminase (Eljounaidi et al., 2016; Kandel et al., 2017) . Selain itu, bakteri endofit mempunyai peranan menigkatkan pertumbuhan tanaman inangnya (Santoyo et al., 2016) .
Pada  umumnya,  bakteri  dapat  menghasilkan  berbagai  macam  komponen  salah  satunya  adalah hidrogen  peroksida  (H 2 O 2 ).  Hidrogen  peroksida  dapat  bersifat  racun  atau  merusak  sistem  metabolisme bakteri  apabila  bakteri  tidak  dapat  memecah  hidrogen  peroksida  menjadi  senyawa  lain  yang  tidak berbahaya,  pemecahan  tersebut  dapat  dilakukan  apabila  terdapat  enzim  katalase  pada  bakteri.  Enzim katalase dapat mengubah  hidrogen peroksida menjadi  air dan oksigen sehingga  bakteri dapat bertahan hidup.  Hal  tersebut  dapat  dilihat  pada  koloni  bakteri  yang  ditetesi  hirogen  peroksida    (H 2 O 2 ) akan mengasilkan  gelembung,  dan  hal  ini  menunjukkan  bahwa  bakteri  endofit  tergolong  bakteri  aerob  yaitu bakteri yang membutuhkan oksigen untuk hidupnya karena pada umumnya semua organisme yang hidup secara aerob menghasilkan enzim katalase (H. Liu et al., 2017) . Mekanisme enzim katalase memecah H 2 O 2 adalah saat bakteri melakukan respirasi, enzim katalase yang merupakan bagian dari enzim peroksidase akan membentuk suatu pertahanan dengan mengkatalisis hidrogen peroksida (H 2 O 2 ) menjadi H 2 O dan gas O 2, sehingga sifat toksik dari hidrogen peroksida pun menghilang (Santoyo et al., 2016) .
Terbentuknya  zona  bening  menandakan  bahwa  bakteri  endofit  tersebut  memiliki  kemampuan untuk  memproduksi  senyawa  ekstraseluler  yang  bersifat  antibakteri.  Perbedaan  diameter  zona  bening yang terbentuk kemungkinan disebabkan perbedaan jenis senyawa antibakteri yang dihasilkan tiap isolat bakteri  endofit.  Hasil  tersebut  juga  menandakan  bahwa  kemungkinan  besar  senyawa  antibakteri  yang dihasilkan oleh bakteri endofit tersebut memiliki spektrum yang luas. Strain terisolasi dinilai untuk potensi aktivitas  antibakteri  patogen erwinia  carotrovora dan  itu  menunjukkan  aktivitas  antimikroba.    Dalam penelitian ini isolate KBC3 telah menunjukkan zona penghambatan dan menunjukkan sifat antibakteri yang kuat  di  antara  semua  isolate.  Temuan  kami  menunjukkan  bahwa  semua  isolat  bakteri  memiliki karakteristik antibakteri terhadap patogen di atas kecuali strain KBC2 yang tidak menunjukkan aktivitas bakteriastatik terhadap Erwinia carotrovora.

## 4. SIMPULAN
Bakteri endofit yang diisolasi dari kulit batang dan daun tanaman  laban (Vitex pubescens vahl) sebanyak  delapan  isolat.  Bakteri  endofit  yang  diisolasi  dari  tanaman  laban  memiliki  karakteristik  yang beragam,  baik  secara  makroskopis  maupun  mikroskopis.  Hasil  aktivitas  antibakteri  menunjukkan  tujuh Isolat bakteri endofit memiliki aktivitas antibakteri terhadap erwinia carotrovora

## 5. DAFTAR PUSTAKA
Astuti, F., Cahyono, E., Supartono, S., Van, N., & Duong, N. (2018). Effectiveness Of Elements Periodic Table Interactive  Multimedia  in  Nguyen  Tat  Thanh  High  School. International  Journal  of  Indonesian Education and Teaching , 2 (1), 1 – 10. https://doi.org/10.24071/ijiet.2018.020101.
Castronovo, L. M., Vassallo, A., Mengoni, A., Miceli, E., Bogani, P., Firenzuoli, F., Fani, R., & Maggini, V. (2021).
Medicinal  Plants  and  Their  Bacterial  Microbiota:  A  Review  on  Antimicrobial  Compounds Production  for  Plant  and  Human  Health. Pathogens  (Basel,  Switzerland) , 10 (2),  106. https://doi.org/10.3390/pathogens10020106.
Eljounaidi, K., K, L. S., & H, B. (2016). Bacterial Endophytes as Potential Biocontrol Agents of Vascular wilt
Diseases-Review and Future
Prospects. Biological Control , 103 ,
62 – 68. https://doi.org/10.1016/j.biocontrol.2016.07.013. Erjaee, Z., Shekarforoush, S. S., & Hosseinzadeh, S. (2019). Identification of Endophytic Bacteria in Medicinal Plants  and  Their  Antifungal  Activities  Against  Food  Spoilage  Fungi. Journal  of  Food  Science  and Technology , 56 (12), 5262 – 5270. https://doi.org/10.1007/s13197-019-03995-0. Fajri, M. ., & Agustien, A., & P. (2015). Isolasi, Karakterisasi dan Potensi Bakteri Endofitik dari Tanaman Zodia (Evodia suaveolens Scheff) sebagai Penghasil Antibiotika. Jurnal Biologi Universitas Andalas , 4 (2), 100 – 106. https://doi.org/10.29303/jbt.v22i1.3104.
G, S., A, D., N, P. L., & O, R. S. (2018). Genomic Insights into Nematicidal Activity of A Bacterial Endophyte, Raoultella Ornithinolytica MG Against Pine wilt Nematode. The Plant Pathology Journal , 34 (3), 250 – 255. https://doi.org/10.5423/PPJ.OA.10.2017.0217.
Hermansah, A., Harlia, & Zahara, T. . (2015). Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit
Batang Laban (Vitex pubescens Vahl). JKK , 4 (2), 67 – 71. https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jkkmipa/article/view/11735.
Jasim, B., A, J. A., J, J. C., J, M., & K., R. E. (2014). Isolation and Characterization of Plant Growth Promoting Endophytic  Bacteria  from  The  Rhizome  of  Zingiber  Officinale. Biotech , 4 (2),  197 – 204. https://doi.org/10.1007/s13205-013-0143-3.
Kandel, S. L., Joubert, P. M., & Doty, S. L. (2017). Bacterial Endophyte Colonization and Distribution within Plants. Microorganisms , 5 (4), 77. https://doi.org/10.3390/microorganisms5040077.
Khan,  M.,  Gao,  J.,  Chen,  X.,  Zhang,  M.,  Yang,  F.,  Du,  Y.,  Moe,  T.,  Munir,  I.,  Xue,  J.,  &  Zhang,  X.  (2020).  The Endophytic  Bacteria  Bacillus  Velezensis  Lle-9,  Isolated  from  Lilium  Leucanthum,  Harbors Antifungal  Activity  and  Plant  Growth-Promoting  Effects. Biotechnol , 30 ,  668 – 680. https://doi.org/10.4014/jmb.1910.10021.
Khare,  E.,  Mishra,  J.,  &  Arora,  N.  K.  (2018).  Multifaceted  Interactions  Between  Endophytes  and  Plant:
Developments and Prospects. Frontiers in
Microbiology , 9 (2732). https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.02732. Kobayashy, D., & Palumbo, J. (2000). Bacterial Endophytes and Their Effects on Plants and Uses in Agriculture.
(M. D. Inc (ed.)). Microbial endophytes. http://www.sciepub.com/reference/169761.
Kumar, A., Singh, R., Yadav, A., Giri, D. D., Singh, P. K., & Pandey, K. D. (2016). Isolation and Characterization of Bacterial Endophytes of Curcuma Longa L. 3 Biotech , 6 (1), 60. https://doi.org/10.1007/s13205- 016-0393-y.
Kurniawan, S. E., Mahyarudin, M.,  & Rialita, A. (2021).  Aktivitas  Antibakteri  Isolat  Bakteri  Endofit  Daun Pegagan (Centella Asiatica) terhadap Staphylococcus Aureus. Bioma: Jurnal Ilmiah Biologi , 10 (1), 14 – 29. https://doi.org/10.26877/bioma.v10i1.7140.
Larasati, R. ., Kartika, I. R., & Dewi, F. . (2013). Profil Fitokimia dan Uji Aktivitas Antifungi Ekstrak Metanol Daun  Laban  (Vitex  Pinnata  L.)  serta  Fraksi-Fraksinya. JRSKT , 3 (1),  271 – 279. http://journal.unj.ac.id/unj/index.php/jrskt/article/view/74. Linda, T. M., Berlyansah, A., Fibriarti, B. L., Sofiyanti, N., & Devi, S. (2022). Isolation and Analysis of Bioactive Compounds Endophytic Bacteria of Sea Fern (Acrtostichum aureum L.) from Bengkalis Island, Riau. Jurnal Biologi Tropis , 22 (1), 46 – 54. https://doi.org/10.29303/jbt.v22i1.3104.
Liu, H., Carvalhais, L. C., Crawford, M., Singh, E., Dennis, P. G., Pieterse, C., & Schenk, P. M. (2017). Inner Plant Values: Diversity, Colonization and Benefits from Endophytic Bacteria. Frontiers in Microbiology , 8 , 2552. https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.02552.
Liu, J. M., Wang, S. S., Zheng, X., Jin, N., Lu, J., Huang, Y. T., Fan, B., & Wang, F. Z. (2020). Antimicrobial Activity Against Phytopathogens and Inhibitory Activity on Solanine in Potatoes of the Endophytic Bacteria Isolated From Potato Tubers.
Frontiers
in Microbiology , 11 , 570926. https://doi.org/10.3389/fmicb.2020.570926.
Liu, Q., Huang, J., & Zhou, Z. (2020). Self-expansion via Smartphone and Smartphone Addiction Tendency Among Adolescents: A Moderated Mediation Model. Children and Youth Services Review , 119 (June), 105590. https://doi.org/10.1016/j.childyouth.2020.105590.
Martinez-Klimova,  E.,  Rodríguez-Peña,  K.,  &  Sánchez,  S.  (2017).  Endophytes  as  Sources  of  Antibiotics. Biochemical Pharmacology , 134 , 1 – 17. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2016.10.010.
Omomowo,  O. I., & Babalola, O.  O. (2019). Bacterial and Fungal Endophytes: Tiny Giants  with Immense Beneficial Potential for Plant Growth and Sustainable Agricultural Productivity. Microorganisms ,
7 (11), 481. https://doi.org/10.3390/microorganisms7110481. Purwaningsih, D., & Wulandari, D. (2021). Uji Aktivitas Antibakteri Hasil Fermentasi Bakteri Endofit Umbi Talas  (Colocasia  esculenta  L)  terhadap  Bakteri  Pseudomonas  A eruginosa :  Potent ial  of Antibacterial  Compound  Fermentation  of  Endophytic  Bacteria  from  Taro  Tuber  (Colocasia esculenta
L.) againt. Jurnal Sains Dan Kesehatan , 3 (5), 750 – 759. https://doi.org/10.25026/jsk.v3i5.622.
Romero-Arguelles,  R.,  Romo-Sáenz,  C.  I.,  Morán-Santibáñez,  K.,  Tamez-Guerra,  P.,  Quintanilla-Licea,  R., Orozco-Flores, A. A. Ramírez-Villalobos, J. M., Tamez-Guerra, R., Rodríguez-Padilla, C., & Gomez- Flores, R. (2022). Activity of Endophytic and Rhizosphere Gram-Positive Bacteria from Ibervillea sonorae  (S.  Watson)  Greene  against  L5178Y-R  Lymphoma  Cells. International  Journal  of Environmental Research and Public Health , 19 (2), 894. https://doi.org/10.3390/ijerph19020894. Rosenblueth, M., & Martínez-Romero, E. (2006). Bacterial Endophytes and Their Interactions with Hosts.
Molecular Plant-Microbe Interactions , 18 (8), 827 – 837. https://doi.org/10.1094/MPMI-19-0827.
Sadikin, N. A. N., Bintari, S. H., Widiatningrum, T., & Dewi, P. (2021). Isolasi, Karakterisasi, dan Uji Aktivitas Antibakteri  dari  Bakteri  Endofit  Daun  Kelor  (Moringa  oleifera). Life  Science , 10 (2),  109 – 119. https://doi.org/10.15294/lifesci.v10i2.54441.
Salam, N., Khieu, T. ., Liu, M. ., Vu, T. ., Chu-Ky, S., Quach, N. ., Phi, Q. ., Narsing, R. M. ., Fontana, A., & Sarter, S.
(2017). Endophytic  Actinobacteria  Associated  with  Dracaena  Cochinchinensis  Lour.:  Isolation,
Diversity, and Their Cytotoxic Activities. Biomed. 1308563.
https://doi.org/10.1155/2017/1308563.
Salo, E. N., & Novero, A. (2020). Identification and Characterisation of Endophytic Bacteria from Coconut (Cocos  Nucifera)  Tissue  Culture. Tropical  Life  Sciences  Research , 31 (1),  57 – 68. https://doi.org/10.21315/tlsr2020.31.1.4.
Santoyo, G., Moreno-Hagelsieb, G., del Carmen Orozco-Mosqueda, M., & Glick, B. R. (2016). Plant Growth- Promoting Bacterial Endophytes. Microbiological Research , 183 , 92 – 99. https://doi.org/10.1016/j.micres.2015.11.008.
Sebola, T. E., Okereafor, N. C. U., Tapfuma, K. I., Mekuto, L., Green, E., & Mavumengwana, V. (2019). Evaluating Antibacterial  and  Anticancer  Activity  of  Crude  Extracts  of  Bacterial  Endophytes  from  Crinum Macowanii Baker Bulbs. MicrobiologyOpen , 8 (12), 1 – 10. https://doi.org/10.1002/mbo3.914.e914. Shurigin,  V.,  Alaylar,  B.,  Davranov,  K.,  Wirth,  S.,  Bellingrath-Kimura,  S.  D.,  &  Egamberdieva,  D.  (2021).
Diversity  and  Biological  Activity  of  Culturable  Endophytic  Bacteria  Associated  with  Marigold (Calendula Officinalis L.). AIMS Microbiology , 7 (3), 336 – 353.
https://doi.org/10.3934/microbiol.2021021.
Sidauruk,  S.  W.,  Sari,  N.  I.,  Diharmi,  A.,  &  Arif,  I.  (2021).  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Sargassum Plagyophyllum  terhadap  Bakteri  Listeria  Monocytogenes  dan  Pseudomonas  Aeruginosa. Jurnal Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia , 24 (1), 27 – 37. https://doi.org/10.17844/jphpi.v24i1.33417..
Zulkifli,  L.,  Soelistya,  D.,  &  Bahri,  S.  (2018).  Isolasi,  Karakterisasi,  dan  Identifikasi  Bakteri  Endofit  Kulit Batang  Srikaya  (Annona  Squamosa)  dan  Potensinya  sebagai  Antibakteri. Jurnal  Penelitian Pendidikan IPA , 4 (1), 21 – 29. https://doi.org/10.29303/jppipa.v4i1.98.