## KONTAMINASI ESCHERICHIA COLI PADA AIR MINUM ISI ULANG DI WILAYAH CIANGSANA MENGGUNAKAN UJI MOST PROBABLE NUMBER
(MPN)
Escherichia coli Contamination in Drinking Water Refills at Ciangsana Region using Most Probable Number Test
Mohammad Maulana Fajar 1
Muhammad Rizki Kurniawan 2
Dian Rachma Wijayanti 3*
1Universitas Binawan, Jakarta Timur, Indonesia
2 Politeknik Kesehatan Genesis Medicare, Depok, Indonesia
*3 Universitas Binawan,
Jakarta Timur, Indonesia
*email: dianrachma@binawan.ac.id

## Abstrak
Air  merupakan  kebutuhan  mendasar  bagi  manusia.  Kehidupan  manusia  tidak terlepas dari air, terutama kebutuhan akan air minum. Kebutuhan akan air selama ini bersumber dari air tanah, air sungai, air hujan, air pegunungan, dan air laut yang  telah  diolah.  Air  yang  dibutuhkan  manusia  meliputi  air  layak  pakai  yang bersih dan sehat, untuk keperluan memasak, mencuci, dan mandi serta air yang layak konsumsi untuk keperluan minum. Penggunaan air yang utama dan sangat vital bagi kehidupan adalah penggunaan air minum. Air minum yang di dapatkan dari  perusahan  depot  air  minum  isi  ulang  merupakan  usaha  industri  yang mengolah  air  baku  menjadi  air  siap  minum  oleh  konsumen.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  keberadaan  kontaminasi Escherichia  coli pada  air minum yang dijual oleh depot air minum isi ulang di wilayah Ciangsana. Hasil dari analisis mikrobiologis didapatkan coliform fecal, bakteri Escherichia coli pada dua sampel dari 10 sampel yang diperiksa.

## Kata Kunci:
Air, Depot Air Minum Isi Ulang, Escherichia coli Keywords : Water, Refill Drinking Water, Escherichia coli

## Abstract
Water  is  a  basic  need  for  humans.  Human  life  cannot  be  separated  from  water, especially  the  need  for  drinking  water.  The  need  for  water  has  been  sourced  from groundwater, river water, rainwater, mountain water, and treated seawater. Water that humans  need  includes  clean  and  healthy  useable  water,  for  cooking,  washing,  and bathing as well as water that is fit for consumption for drinking purposes. The main use of water and very vital for life is the use of drinking water. Drinking water from depot companies for drinking water refills is an industrial business that processes raw water into ready-to-drink water by consumers. This study aims to determine the presence of Escherichia coli contamination in drinking water sold by refill drinking water depots in the Ciangsana region. The results of the microbiological analysis showed two out of ten samples were positive for coliform fecal, Escherichia coli.

## PENDAHULUAN
Air  merupakan  materi  yang  sangat  penting  dalam kehidupan, baik tanaman, hewan, maupun manusia. Kehidupan manusia sangat tergantung kepada air bersih, terutama air yang layak untuk dikonsumsi. Kebutuhan hidup manusia tidak lepas dari air bersih terutama air minum. Kebutuhan akan air selama ini berasal dari air tanah, air sungai, air hujan, air pegunungan, dan air laut yang telah diolah sebagai bahan baku air (Radji et al., 2012)
Air  yang  dimanfaatkan  oleh  manusia  diantaranya  untuk memenuhi kebutuhan hidup sehari-hari. Kebutuhan air untuk keperluan  hidup  sehari-hari  jumlahnya  berbeda-beda
tergantung tempat serta aktifitas nya. Semakin tinggi taraf kehidupan,  maka  semakin  tinggi  pula  kebutuhan  akan  air. Pemakaian air sangat luas, sehingga harus diupayakan agar tetap tersedia dan memenuhi persyaratan baik fisik, biologi, dan kimia (Alwi & Maulina, 2015).
Industri  penyedia  air  minum  merupakan  solusi  untuk memenuhi kebutuhan air bagi masyarakat. Adanya sumber air pegunungan dibeberapa daerah juga mendukung industri penyedia  layanan  air  minum  didaerah-daerah.  Air  minum dalam kemasan (AMDK) menjadi alternatif sebagai sumber air  minum,  tetapi  nilai  jual  AMDK  relatif  cukup  mahal. Sehingga muncul alternatif lain yaitu air minum dari depot
air  minum  isi  ulang  dengan  harga  yang  lebih  ekonomis (Bambang et al., 2014).
Depot air minum isi ulang (DAMIU) adalah usaha industri dalam bidang air minum yang melakukan proses pengolahan air baku menjadi air minum yang layak dikonsumsi dan dapat dijual langsung kepada konsumen. Air minum isi ulang dapat diperoleh pada depot air minum isi ulang dengan harga yang murah dari harga air minum dalam kemasan yang mempunyai merek.  Hal  ini  merupakan  salah  satu  penyebab  banyak  nya depot air minum isi ulang (Natalia et al., 2014).
Permasalahan  air  minum  yang  layak  untuk  dikonsumsi sangat  berpengaruh  bagi  manusia.  Menurut World  Health Organization (WHO) sebanyak dua miliar orang menggunakan sumber air minum yang terkontaminasi oleh tinja. Air minum yang terkontaminasi dapat menularkan penyakit seperti diare, kolera,  disentri,  tipus  dan  polio.  Air  minum  yang terkontaminasi  menyebabkan  485.000  kematian  yang disebabkan  oleh  diare  setiap  tahunnya  (World  Health Organization,  2022).  Menurut  Profil  Kesehatan  Dinas Kesehatan  Provinsi  Jawa  Barat  2020,  kasus  diare  tertinggi ditemukan pada tahun 2018 sebanyak 14.701 kasus. Sedangkan angka kesakitan diare sebesar 270/1000 penduduk, angka ini masih cukup tinggi. Kasus kematian post neonatal akibat diare di  tahun  2020  menempati  urutan  kedua  setelah  pneumonia sebesar 10,24% (Dinkes Jawa Barat, 2020).
Kasus  diare  di  Kabupaten  Bogor  termasuk  cukup  tinggi yaitu  sejumlah  67,79%.  Menurut  laporan  dari  puskesmas Tahun 2019 jumlah kasus diare yang ditemukan di puskesmas sebanyak  162.062  orang  yang  terdiri  dari  penderita  semua umur sebanyak 112.256 orang dan penderita balita sebanyak 49.806 orang, jumlah kasus diare yang diperkirakan ditemukan di  Kabupaten  Bogor  sejumlah  239.049  kasus  (Dinkes Kabupaten Bogor, 2020).
Persyaratan  air  minum  yang  layak  untuk  dikonsumsi menurut  Peraturan  Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia No.492/MENKES/PER/IV/2010 pasal 3 ayat 1 yang berbunyi air minum  yang  aman  bagi  kesehatan  apabila  memenuhi persyaratan  fisika,  mikrobiologis,  kimiawi,  dan  radioaktif. Syarat  air  minum  yang    boleh  dikonsumsi  tidak  boleh mengandung bakteri Coliform dan Escherichia coli dalam 100 ml air. Untuk mengetahui ada atau tidak bakteri Escherichia coli
maka  perlu  adanya  dilakukan test laboratorium (Kementerian  Kesehatan  RI,  2010).  Berdasarkan  latar belakang  yang  telah  dibuat  di  atas,  maka  penulis  tertarik untuk melakukan penelitian tentang Higiene sanitasi depot air minum isi ulang pada kualitas air minum isi ulang.

## METODE PENELITIAN

## Lokasi Penelitian dan Pengumpulan Data
Penelitian  ini  dilakukan  di  Pusat  Penelitian  Bioteknologi dan  Bioindustri  Kota  Bogor,  penelitian  ini  menggunakan pendekatan  deskriptif  dengan  desain cross-sectional . Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kualitas air minum isi ulang di Wilayah Ciangsana dengan menggunakan metode mikrobiologis. Data dikumpulkan dari hasil depot air minum isi  ulang  di  wilayah  Ciangsana.  Data  dianalisis  secara univariat.  Analisis  univariat  dilakukan  untuk  mendapatkan hasil  menyeluruh  tentang  kontaminasi  bakteri Escherichia coli .

## Uji Most Probable Number (MPN)
Uji  MPN  terdiri  dari  uji  penduga,  uji  penegas  dan  uji pelengkap.  Semua  uji  ini  dilakukan  di  Pusat  Penelitian Bioteknologi  dan  Bioindustri  Kota  Bogor.  Uji  MPN  yang dilakukan  merujuk  ke Microbiology  a  Laboratory  Manual Eleventh Edition (Cappuccino & Welsh, 2017). Air yang akan diuji dikumpulkan ke dalam container silinder steril. Selama pengumpulan, sampel air disimpan didalam ice box container pada  suhu  18-20 ᵒ C  selama  ±  24  jam.  Sampel  yang terkumpul  kemudian  dibawa  ke  laboratorium  untuk  diuji dengan serangkaian uji MPN.
Uji  penduga  dilakukan  dengan  menggunakan  media Lactose Broth (LB). Tabung yang berisi media LB sudah berisi tabung Durham. Sebanyak Sembilan tabung berisi 10 ml LB disiapkan. Tiga tabung pertama diinokulasikan 10 ml sampel ke dalamnya. Tiga tabung kedua diinokulasikan 1 ml sampel. Tiga  tabung  terakhir  diinokulasikan  0.1  ml  sampel. Setelahnya tabung LB diinkubasi pada suhu 37 ᵒ C selama 24 jam. Pertumbuhan positif ditandai dengan adanya kekeruhan dan terbentuknya gas.
Uji penegas dilakukan dengan media Brilliant Green Lactose Bile Broth (BGLBB). Media ini sudah memiliki tabung Durham didalamnya. Sebanyak Sembilan tabung berisi 10 ml BGLBB
Mohammad  Maulana  F., Muhammad  Rizki  K.,  Dian  R.  W.,, 2023. Escherichia  coli  Contamination  in  Drinking  Water  Refills  at Ciangsana Region using Most Probable Number Test
disiapkan. Setiap tabung diinokulasikan 1 ml biakan bakteri dari tabung sebelumnya di uji penduga. Setelahnya tabung BGLBB diinkubasi pada suhu 37 ᵒ C selama 24 jam.
Uji pelengkap dilakukan dengan menggunakan media Eosin methylene  blue  agar-leavin (EMBA)  dan  teknik  cawan gores  kuadran.  Koloni  dari  BGLBB  dipindahkan  ke EMBA.  Media  diinkubasi  pada  suhu  37 ᵒ C  selama  24  jam Hasil  positif  ditunjukkan  dengan  pertumbuhan  koloni bakteri berwarna hijau metalik.

## HASIL
Hasil penelitian menunjukkan beberapa sampel terdekteksi positif  terkontaminasi Escherichia coli  dan  beberapa  sampel lainnya  tidak.  Berdasarkan  hasil  dari  Tabel  1.  Dapat  dilihat bahwa  sampel  pada  kode  M01  positif  bakteri Coliform lebih dari 1100 MPN/100mL sampel, dan pada sampel dengan kode M02  juga  positif  bakteri Coliform 23  MPN/100mL  sampel.
Sampel yang positif kemudian dilanjutkan dengan uji penegasan dengan menggunakan media BGLBB.
Tabel 1. Hasil Uji Penduga Pada Media Lactose Broth
Kode Sampel Jumlah Indeks Kuman MPN/100mL Sampel 3x10 mL  3x1 mL  3x0,1 mL M01 3 3 3 >1100 M02 3 0 0 23 M04 0 0 0 <3 M05 0 0 0 <3 M06 0 0 0 <3 M07 0 0 0 <3 M08 0 0 0 <3 M09 0 0 0 <3 M10 0 0 0 <3
Berdasarkan hasil dari Tabel 2. Dapat dilihat bahwa sampel M01  positif  mengandung  bakteri Coliform lebih  dari  1100 MPN/100  mL  sampel.  Kemudian  sampel  dengan  kode  M02 positif mengandung bakteri Coliform 23 MPN/100 mL sampel.
Sampel yang positif pada uji penegasan kemudian dilanjutkan ke uji selanjutnya yaitu uji kepastian pada media agar cawan petri EMBA (leavin) .
Tabel 2. Hasil Uji Penegasan Pada Media Brillian Green
Lactose Bile Broth (BGLBB) Kode Sampel Jumlah Indeks Kuman MPN/100 mL Sampel 3x10 mL  3x1 mL 3x0,1 mL M01 Keruh /gas Keruh /gas Keruh /gas >1100 M02 Keruh /gas Keruh Keruh 23
Dari  Gambar  1  dapat dilihat  sampel  dari  uji penegasan yang ditanam pada media EMBA (leavin) dinyatakan positif bakteri Escherichia  coli karena  pada  media  tumbuh  koloni berwarna hijau metalik.
Gambar 1. Hasil Uji pelengkap pada Media Eosin Methylen Blue Agar (terlihat hasil positif ada pertumbuhan Bakteri Escherichia coli) .

## PEMBAHASAN
Hasil penelitian menunjukkan dua dari sepuluh sampel air minum isi ulang yang didapatkan dari depot air minum isi ulang  mengandung  bakteri Escherichia  coli. Dua  sampel tersebut  tidak  memenuhi  persyaratan  sebagai  air  layak konsumsi  menurut  Peraturan  Mentri  Kesehatan  No.492 tahun 2010 (Kementerian Kesehatan RI, 2010)
Hasil uji penegasan sampel M01 dan M02 terlihat adanya gas dan kekeruhan, maka dapat disimpulkan bahwa sampel air minum isi ulang mengandung bakteri Coliform . Hasil dari uji penegasan dilanjutkan dengan uji pelengkap apakah yang terkandung  dalam  sampel  tersebut  bakteri Escherichia  coli atau bakteri lain. Indikator air yang tercemar feses adalah adanya  keberadaan  bakteri coliform  fecal Escherichia  coli dalam air.
Pada penelitian ini dua dari sepuluh sampel menunjukkan hasil  positif.  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian  sebelumnya
yang menggunakan metode MPN dalam pemeriksaan kualitas air minum dengan uji mikrobiologis (Askrening & Yunus, 2017; Hilmarni et al., 2018; Natalia et al., 2014).
Natalia et. al. (2014) melaporkan penelitian serupa.  Sampel yang  digunakan  adalah  25  depo  air  minum  isi  ulang  yang berlokasi  di  setiap  kecamatan,  di  Kabupaten  Blora.  Uji bakteriologis air minum isi ulang menggunakan metode MPN. Hasil  uji  MPN  menunjukkan  24  sampel  air  minum  isi  ulang tidak terkontaminasi bakteri coliform , sedangkan 1 sampel air minum isi ulang terkontaminasi bakteri coliform .
Penelitian oleh Askrening & Yunus, (2017) pada depot air minum isi ulang di wilayah Poasia Kota Kendari menunjukkan hasil  serupa.  Penelitian  tersebut  bersifat  deskriptif  dengan pendekatan  analitik  menggunakan  metode  MPN.  Sampel penelitian berjumlah 10 sampel. Hasil penelitian menunjukan bahwa  sampel  positif  di  dapatkan  sebanyak  6  sampel  (60%) melewati  batas  cemaran  dan  sampel  negatif  di  dapatkan sebanyak 4 sampel (40%). Sehingga dapat disimpulkan bahwa dari  10  sampel,  telah  teridentifikasi  6  sampel  air  minum  isi ulang  terkontaminasi  bakteri  coliform  dan  melewati  batas cemaran mikroba menurut PERMENKES
No.492/MENKES/Per/IV.2010.
Penelitian  serupa  lainnya  dilakukan  pada  tahun  2018 memberikan  hasil  positif  coliform  namun  tidak  terdapat bakteri Escherichia  coli .  Hilmarni  et  al.  (2018)  melaporkan bahwa hasil pemeriksaan laboratorium dari air pada depot air mnium isi ulang di Kelurahan Tarok Dipo Bukittingi. Sampel berjumlah  delapan  diperiksa  dengan  uji  mikrobiologis,  uji MPN.  Hasil  penelitian  menunjukkan  sebanyak  50%  sampel positif  mengandung  bakteri coliform  non  fecal .  Dengan demikian, maka air minum tersebut tidak layak minum karena tidak  memenuhi persyaratan  minimum  secara  mikrobiologis yang telah ditetapkan oleh Permenkes
No.492/MENKES/Per/IV/2010.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat disimpulkan  bahwa  2  dari  10  depot  air  minum  isi  ulang mengandung  bakteri Escherichia  coli. Kedua  sampel  tersebut tidak  layak  minum  karena  tidak  memenuhi  persyaratan Peraturan Pemerintah No.492 tahun 2010.

## DAFTAR PUSTAKA
Alwi,  M.,  &  Maulina,  S.  (2015).  Pengujian  Bakteri Coliform dan Escherichia Coli Pada Beberapa Depot Air Minum Isi Ulang di Kecamatan Palu Timur Kota Palu. Biocelebes, 6(1), 1978 – 6417. http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/Bioce lebes/article/view/3889
Askrening,  A.,  &  Yunus,  R.  (2017).  Analisis  Bakteri Coliform Pada Air Minum Isi Ulang Di Wilayah Poasia  Kota  Kendari.  Jurnal  Teknologi Kesehatan  (Journal  of  Health  Technology),
13(2), 71 – 76.
https://doi.org/10.29238/jtk.v13i2.9
Bambang, A. G., Fatimawali, & Kojong, N. S. (2014).
Analisis  Cemaran  Bakteri  Coliform  Dan Identifikasi Escherichia Coli Pada Air Isi Ulang Dari Depot Di Kota Manado. PHARMACON,
3(3).
https://doi.org/10.35799/PHA.3.2014.5450
Cappuccino, J. G., & Welsh, C. (2017). Microbiology,
A  Laboratory  Manual.  In  Pearson  Education
Limited.
Dinkes  Jawa  Barat.  (2020).  Profil  Kesehatan  Jawa
Barat  Tahun  2020.  Dinas  Kesehatan  Provinsi Jawa Barat, 103 – 111.
https://diskes.jabarprov.go.id/assets/unduhan/ Profil Kesehatan Jawa Barat Tahun 2020.pdf Dinkes  Kabupaten  Bogor.  (2020).  Buku  Profil Kesehatan Kabupaten Bogor 2019. In Report. https://diskes.jabarprov.go.id/assets/unduhan/1
. Profil Kesehatan Kabupaten Bogor 2019.pdf Hilmarni,  Ningsih,  Z.,  &  Ranova,  R.  (2018).  Uji Cemaran Bakteri Coliform pada Air Minum Isi Ulang  dari  Depot  di  Kelurahan  Tarok  Dipo Bukittinggi.  Prosiding  Seminar  Kesehatan Perintis, 1(1), 1 – 6.
Kementerian  Kesehatan  RI.  (2010).  Peraturan
Menteri  Kesehatan  Republik  Indonesia No.492/MENKES/PER/IV/2010 - Pokja AMPL : Air  Minum  dan  Penyehatan  Lingkungan.
Mohammad  Maulana  F., Muhammad  Rizki  K.,  Dian  R.  W.,, 2023. Escherichia  coli  Contamination  in  Drinking  Water  Refills  at Ciangsana Region using Most Probable Number Test
Peraturan Menteri.
http://www.ampl.or.id/digilib/read/24-peraturan- menteri-kesehatan-republik-indonesia-no-492- menkes-per-iv-2010/50471
Natalia,  L.  A.,  Bintari,  S.  H.,  &  Mustikaningtyas,  D.
(2014). Kajian Kualitas Bakteriologis Air Minum Isi Ulang Di Kabupaten Blora. Life Science,3(1). https://journal.unnes.ac.id/sju/index.php/UnnesJL ifeSci/article/view/2980
Radji, M., Oktavia, H., Suryadi, H., Radji, M., Oktavia, H.,
& Suryadi, H. (2012). Pemeriksaan Bakteriologis
Air  Minum  Isi  Ulang  Di  Beberapa  Depo  Air
Minum Isi Ulang Di Daerah Lenteng Agung Dan Srengseng Sawah Jakarta Selatan. Pharmaceutical Sciences  and  Research  (PSR),  5(2),  101 – 109. https://doi.org/10.7454/PSR.V5I2.3424
World  Health  Organization.  (2022).  Drinking-water.
Fact-Sheets. https://www.who.int/news- room/fact-sheets/detail/drinking-water/