ISSN Cetak         : 2087-9423

## PERKEMBANGAN AKTIVITAS ENZIM PENCERNAAN LARVA RAJUNGAN Portunus pelagicus

## DEVELOPMENT OF ENZYME DIGESTIVE ACTIVITY OF BLUE CRAB Portunus pelagicus LARVAE
Andi Nikhlani* dan Komsanah Sukarti Staf Pengajar Jurusan Budidaya Perairan FPIK UNMUL, Samarinda *E-mail: andini.makmur@yahoo.com

## ABSTRACT
Seed production continuity of Portunus pelagicus larvae had been conducted but the results were still un-consistent. Digestive activity was known to be  associated with the type of feed consumed by larvae. Amylase, lipase, and trypsin enzymes were used as a biological indicators to measure the digestion of feed. The aim of this study was to  describe  the activity of digestive enzymes in blue  swimming crab larvae.  Digestive  enzyme  activity  data  obtained  was  presented  in  graphical  form  and  analyzed descriptively. Based on the results of the study, the enzyme activity of amylase, lipase and trypsin was detected at the 1 st day. The pattern of amylase enzyme activity showed an increased from the larvae of 1st day until the 17 th day then  decreased until the end of the study. The activity of trypsin enzyme was high on 1 st day, but decreased on the 3 rd and 5 th days, and increased again on the 7 th day until the last day of the study. The highest activity of amylase and trypsin during this time period occurred in the 11 th day.    Lipase  enzyme  activity  tended  to  be  stable  from  the  beginning  to  the  end  of  the  study.  In cultivation  applications,  artificial  feeding  with  carbohydrate,  protein  and  high  fat  content  should be performed when the larvae are 11 th days.
Keywords : digestive,  amylase, lypase, trypsin, blue swimming crab larva

## ABSTRAK
Keberlanjutan  produksi  larva  rajungan Portunus  pelagicus telah  dilakukan,  namun  sintasan  yang diperoleh  belum  stabil.  Aktivitas  pencernaan  diketahui  sangat  terkait  dengan  jenis  pakan  yang dikonsumsi larva sehingga berdampak terhadap pertumbuhan dan sintasannya. Enzim  amilase, lipase, pepsin dan tripsin merupakan indikator biologis yang dapat menunjukkan kesesuaian jenis pakan yang dikonsumsi  larva  melalui  kemampuannya  untuk  mencerna.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  aktivitas  enzim  pencernaan  pada  larva  rajungan.  Data  aktivitas  enzim  pencernaan  yang diperoleh  disajikan  dalam  bentuk  grafik  dan  dianalisa  secara  deskriptif.  Berdasarkan  hasil  penelitian, aktivitas  enzim  amilase,  lipase  dan  tripsin  mulai  terdeteksi  pada  larva  umur  satu  hari.  Pola  aktifitas enzim  amilase  menunjukkan  peningkatan  sejak  larva  berumur  satu  hari  hingga  hari  ketujuhbelas kemudian  cenderung  menurun  sampai  akhir  penelitian.  Aktivitas  enzim  tripsin    tinggi  pada  hari kesatu,  tapi  cenderung  menurun  pada  hari  ketiga  dan  kelima,  dan  meningkat  lagi  pada  hari  ketujuh sampai hari terakhir penelitian. Aktivitas amilase dan tripsin tertinggi selama periode waktu tersebut terjadi  pada  larva  umur  sebelas  hari,  sedangkan  aktivitas  enzim  lipase  cenderung  stabil  dari  awal sampai  akhir  penelitian.  Aplikasi  budidaya,  pemberian  pakan  buatan  dengan  kandungan  karbohidrat, protein dan lemak tinggi sebaiknya dilakukan saat larva berumur sebelas hari.
Kata kunci : pencernaan, enzim, amilase, lipase, tripsin, larva rajungan

## I. PENDAHULUAN
Upaya  produksi  benih  secara  ter- kontrol  telah  dilakukan  melalui  beberapa penelitian  yang  mengarah  pada  peningkatan
sintasan guna mendukung kontinuitas pasokan  benih.  Namun  kegagalan  produksi benih  masih  sering  dialami  terutama  pada stadia awal, sehingga tingkat kematian cukup tinggi.  Tingkat  kematian  yang  cukup  tinggi
ada  hubungannya  dengan  aktifitas  enzim pencernaan  dan  jenis  pakan  yang  diberikan (Aslianti  dan  Afifah,  2012).  Peningkatan aktivitas  enzim  pencernaan  akan  sejalan dengan  pertumbuhan  larva.  Aktivitas  enzim pada  sistem  pencernaan  larva  stadia  awal yang  umumnya  masih  sangat  sederhana, diduga  sangat  terkait  dengan  kemampuan larva  untuk  mencerna  pakan  yang  di- konsumsinya (Suryanti, 2002).
Pengetahuan  rinci  tentang  perkem- bangan  ontogenik  enzim-enzim  pencernaan pada  larva  ikan  merupakan  hal  yang  sangat penting  dalam  memahami  mekanisme  per- tumbuhan  dan  kelangsungan  hidup  pada larva,  karena  saluran  pencernaan  larva  pada umumnya mengalami perubahan yang sangat cepat,  baik  morfologi  maupun  fungsinya selama  ontogeni  sehingga  mempengaruhi kelangsungan  hidup  larva  selama  kondisi budidaya.  Perkembangan  ontogeni  enzim pencernaan  juga  merefleksikan  perkem- bangan  saluran  pencernaan  dan  kemampuan pencernaan  suatu  spesies  tersebut  sehingga dapat  digunakan  sebagai  indikator  pencerna- an  dan  status  nutrisi  pada  awal-awal  per- kembangan larva (Yulintine et al., 2012) Serrano  dan  Traifalgar  (2012)  me- nyatakan  bahwa  pembentukan  dan  aktivitas enzim  pencernaan  larva  kepiting  bakau Scylla  serrata berpengaruh  terhadap  kelang- sungan  hidup  larva.  Ong  dan  Johnston (2006), menyatakan bahwa pengetahuan me- ngenai  perkembangan  organ  pencernaan  dan aktivitas  enzim  pencernaan  sangat  penting diketahui untuk setiap spesies krustase dalam hubungannya  dengan  proses  pencernaan pakan.  Aktivitas  enzim  pencernaan  yang berkesinambungan  memaksimalkan  efisiensi pencernaan.  Menurut  Bakkara et  al. (2015) perubahan  yang  terjadi  pada  aktivitas  enzim pencernaan  dipengaruhi  oleh  perubahan  per- kembangan saluran pencernaan dan kuantitas atau  kualitas  komponen  pakan.  Walaupun perubahan pada aktivitas enzim dan asimilasi pakan  berkaitan  dengan  periode  kritis  larva, tapi  penelitian  mengenai  aktivitas  enzim
pencernaan  sangat  terbatas  untuk  larva krustase.
Penelitian  mengenai  aktivitas  enzim pencernaan larva berbagai macam organisme perairan  telah  banyak  dilakukan.  Perkem- bangan  enzim  pencernaan  amilase,  tripsin, leusin  aminopeptidase  pada  larva  kepiting bakau Scylla serrata (Serrano dan Traifalgar, 2012),  aktivitas  enzim  pencernaan  larva S. serrata ,  khususnya  enzim  amilase  dan protease (Serrano, 2012).   Perez et al . (2010) melakukan  penelitian  mengenai  aktivitas enzim  pencernaan  khususnya  enzim  lipase pada udang Penaeus vannamei . Wang (2007) untuk  enzim  amilase,  protease,  lipase  dan selulosa  pada  larva Penaeus  vannamei , Pavasovic et al. (2004) untuk enzim protease, amilase,  selulosa,  dan  silanase  pada  larva S. serrata .  Saborowski et  al .  (2006)  untuk enzim  proteinase,  tripsin,  chymotrypsin, alanin  aminopeptidase  pada  larva  Southern king  crab Lithodes  santolla ,  Johnston  dan Freeman  (2005)  untuk  enzim  protease,  trip- sin,    amilase,  glukosinase,  kitinase,  selulosa, dan  laminarinase  pada  beberapa  larva kepiting. Pavasovic et al . (2004) untuk enzim lipase,  protease,  dan  selulosa  pada  larva redclaw  crayfish Cherax  quadricarinatus. Hasil  penelitian  yang  didapatkan  menunjuk- kan  bahwa  perkembangan  organ  pencernaan dan  aktivitas  enzim  pencernaan  mempunyai waktu  yang  berbeda  untuk  setiap  larva organisme.
Tujuan  dari  penelitian    ini  adalah untuk  mengevaluasi  perkembangan  onto- genetik  dan  pola  utama  aktivitas  enzim- enzim  pencenaan  pada  larva  rajungan P. pelagicus sejak  awal  perkembangan  larva dengan  menggunakan  teknik-teknik  bio- kimia,  yang  bermanfaat  sebagai  kontribusi terhadap  formulasi  suatu  protokol  nutrisi yang  tepat  untuk  larva  rajungan,  Hasil  pe- nelitian  juga  diharapkan  dapat  mendukung peningkatan  produksi  benih  rajungan,  se- hingga  pada  usaha  budidaya  pembesaran hingga  ukuran  konsumsi  dapat  berkesinam- bungan.

## II. METODE PENELITIAN

## 2.1. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini    dilakukan  di  BBU Manggar  Balikpapan,  dimana  pada  pem- buatan  pakan  dan  analisis  beberapa  peubah dilakukan  di  Laboratorium  Nutrisi  dan Manajemen  Pakan,  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan,  Universitas  Mulawarman, dan  Laboratorium  Nutrisi  dan  Teknologi Pakan,  Balai  Penelitian  dan  Pengembangan Budidaya Air Payau, Maros.

## 2.2 Bahan dan Data 2.2.1.  Hewan Uji
Larva  yang  digunakan  berasal  dari induk  rajungan  yang  berukuran  173±8,5 g/individu dengan lebar dan panjang karapas berturut-turut  12,50±3,5  cm  dan  6,7±2,7cm. Larva  tersebut  diseleksi  dan  larva  yang berkualitas  baik  dengan  tanda-tanda  ukuran larva  >65  mm  dan  tertarik  pada  cahaya dipisahkan.

## 2.2.2.  Media dan Wadah Pemeliharaan
Air  yang  digunakan  dalam  pe- meliharaan larva berupa air laut. Salinitas air media  yang  digunakan  sebesar  29-33  ppt dengan suhu 26-33 o C, dan oksigen terlarut 5- 6  mg/L,  dan  dilengkapi  dengan  peralatan aerasi.  Sebelum  digunakan,  media,  wadah pemeliharaan  dan  peralatan  yang  digunakan terlebih  dahulu  disterilkan  dengan  meng- gunakan khlorin  150 ppm  kemudian dinetra- lisir dengan natrium thiosulfate (Na 2 S 2 O 3 ) 25 ppm dan diaerasi selama 24 jam. Pengukuran oksigen  terlarut  dan  pH  dilakukan  dua  hari sekali  masing-masing  dengan  menggunakan alat ukur DO meter dan pH meter sedangkan pengukuran  suhu  dan  salinitas  dilakukan setiap  hari  dengan  menggunakan  handre- fraktometer  (ketelitian  0,1  ppt)  dan  termo- meter batang (ketelitian 0,1 o C).

## 2.2.3.   Pakan yang Digunakan
Pakan  yang  digunakan  dalam  pe- nelitian  ini  adalah  pakan  alami  berupa Brachionus sp dan  nauplii Artemia ,  serta
pakan  buatan  komersil  yang  terdiri  dari  dua jenis  yaitu  Japonicus  1  (J1)  diberikan  untuk larva  stadia  zoea-3  dan  zoea-4  dan  Flake untuk stadia megalopa.

## 2.2.4.  Pemeliharaan Larva
Larva  rajungan  yang  baru  menetas dipelihara  pada  bak  berkapasitas  lima  ton berjumlah  dua  buah.  Pemberian  pakan  alami berupa Brachionus diberikan  pada  larva umur  2-10  hari  dengan  kepadatan  sepuluh individu/mL, kemudian ditingkatkan menjadi 20  individu/mL  pada  larva  umur  11-21  hari, sedangkan Artemia diberikan saat larva umur lima hari sampai akhir penelitian sebanyak 1- 5  individu/mL.  Pakan  buatan  diberikan setelah larva berumur 13 hari dengan metode pemberian  pakan  secara adlibitum (pe- ngenyangan).  Kepadatan Brachionus dan nauplii Artemia dikontrol  setiap  dua  kali sehari yaitu pada pukul 07.00 dan 17.00. Jika jumlah Brachionus dan  nauplii Artemia dalam  media  sudah  berkurang  maka  di- tambahkan  supaya  tetap  konstan  sepanjang percobaan.
Pengambilan  sampel  larva  dilakukan pada  pagi  hari  sebelum  pemberian  pakan dilakukan.  Pergantian  air  dalam  wadah pemeliharaan larva dimulai saat stadia zoea-2 sebanyak  10%  per  hari,  kemudian  dapat ditingkatkan  saat  megalopa  menjadi  20-50% per hari.

## 2.3. Analisis Data
Data  yang  diperoleh  disajikan  dalam bentuk grafik dan dianalisa secara deskriptif.

## 2.4. Pengamatan Parameter
Pengamatan  organ  pencernaan  secara kimiawi  dilakukan  dengan  cara  mengamati aktivitas  enzim  pencernaan,  yaitu  meliputi aktivitas enzim amylase, lipase, dan tripsin.

## 2.4.1.   Uji Aktivitas Enzim Pencernaan
Pengujian  aktivitas  enzim  α-amilase mengikuti  metode  Bernfield  (1955),  pe- ngukuran  aktivitas  lipase  mengikuti  metode Tietsz  dan  Friedreck  dalam  Borlongan
(1990), sedangkan pengukuran aktivitas  trip- sin mengikuti metode Walter (Walter, 1984).

## 2.4.2.   Perubahan Relatif Aktivitas Enzim
Perubahan relatif pada masing- masing  enzim  dapat  dihitung  dengan  meng- gunakan persamaan sebagai berikut:
PR(%) = [A t -(A t-1 )]/A t-1 x 100%  ............  (1) Keterangan:  PR  =  Perubahan  relatif,  A= Aktivitas enzim pada saat t, At-1=  Aktivitas enzim pada saat t-1 (aktivitas enzim sebelum t).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Aktivitas enzim dan perubahan relatif enzim  amilase,  lipase,  dan  tripsin  larva rajungan  hari  pertama  sampai  hari  ke  dua puluh satu disajikan pada Gambar 1. Gambar
1  dapat  diketahui  bahwa  aktifitas  enzim pencernaan  sudah  terdeteksi  sejak  larva rajungan  berumur  satu  hari.  Terdeteksinya aktifitas  enzim  pada  larva  umur  tersebut menunjukkan  telah  berlangsungnya  proses hidrolisis  pakan,  dalam  hal  ini  adalah  pakan endogen  yang  berupa  kuning  telur  dan butiran  minyak.  Kuning  telur  banyak mengandung protein sedangkan butir minyak banyak mengandung lemak.

## 3.1. Aktivitas Enzim Amilase
Pada  awal  kehidupan  larva,  aktivitas enzim  amilase  tampak  rendah.  Hal  ini  di- sebabkan walaupun pada umur tersebut organ penghasil enzim sudah terbentuk namun pada organ  tersebut  masih  sangat  sederhana,  dan larva  juga  belum  mengkonsumsi  pakan  dari luar.
Gambar 1. Aktivitas enzim amilase (a), lipase (b), tripsin (c), dan Perubahan relatif aktivitas enzim amilase (a 1 ), lipase (b 1 ), tripsin (c 1 ) larva rajungan.
0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14 0,16 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 Ak tivi tas E n zim Am il as e (U/M l/ M en it ) Umur Larva (Hari) a -50 -30 -10 10 30 50 70 90 110 130 150 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 P er u b ah an Re lat if ( %) Umur Larva (Hari) a1 0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14 0,16 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 Ak tivi tas E n zim L ip as e (U/M l/ M en it ) Umur Larva (Hari) b -1 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 61 63 65 67 69 71 73 75 77 79 81 83 85 87 89 91 93 95 97 99 101 103 105 107 109 111 113 115 117 119 121 123 125 127 129 131 133 135 137 139 141 143 145 147 149 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 P er uba ha n R ela tif (%) Umur Larva  (Hari) b1 0 0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,12 0,14 0,16 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 Ak tivi tas E n zim T rip sin (U/M l/ M en it ) Umur  Larva (Hari) c -50 -30 -10 10 30 50 70 90 110 130 150 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 P er u b ah an Re lat if ( %) Umur Larva (Hari) c 1
Aktivitas  enzim  amilase  pada  larva  rajungan hari  pertama    sebesar  0,021  µ/mL/menit dan memperlihatkan  peningkatan  sampai  hari kesebelas  setelah  menetas,  dan  cenderung mengalami  peningkatan  sampai  hari  ketujuh belas dan kemudian menurun secara bertahap sampai  akhir  penelitian.  Aktivitas  amilase yang  tinggi  diikuti  dengan  penurunan  juga telah  dilaporkan  untuk  spesies  lainnya (Serrano  dan  Traifalgar,  2012),  Serrano (2012).  Aktifitas  enzim  amilase    meningkat pada  hari  kesebelas  (0,079  µ/mL/menit) dengan perubahan aktifitas enzim pencernaan sebesar  146%  dan  cenderung  stabil  sampai hari keduapuluhsatu, diduga karena pada hari kesebelas,  organ  pencernaan  larva  sudah berada  pada  fase  definitif  sehingga  sudah mampu menghasilkan enzim pencernaan yang sangat  penting  untuk  mencerna  pakan  yang diberikan,  hal  ini  didukung  oleh  Nikhlani (2013)  yang  menyatakan  bahwa  lambung, usus, dan hepatopankreas larva rajungan hari kesembilan  dan  kesebelas  sudah  dapat  di- bedakan    dengan  jelas,  bagian  luar  lambung dikelilingi  oleh  hepatopankreas,  usus  juga mengalami  perkembangan  dengan  semakin jelasnya  vili  yang  memenuhi  seluruh  per- mukaan  bagian  dalam  usus  pada  hari kesebelas.
Meningkatnya aktifitas enzim amilase pada  hari  kesebelas  juga  diduga  disebabkan adanya  pengaruh  dari  pakan  eksogen  yang diberikan berupa Brachionus , juvenil Artemia dan  pakan  buatan  yang  dapat  me- micu  peningkatan  aktifitas  enzim  pencerna- an.  Hal  ini  didukung  oleh  Affandi et  al. (2009),  yang  menyatakan  bahwa  tinggi rendahnya  aktivitas  enzim  sangat  ditentukan oleh  organ  pencernaan  dan  ketersediaan substrat.  Aslianti  dan  Afifah  (2012)  juga menyatakan  bahwa  substrat  makanan  yang dikonsumsi  oleh  larva  memberikan  kon- tribusi  sebagai  enzim  eksogeneus  yang memicu  perkembangan  organ  pencernaan larva.  Nikhlani  (2013)  juga  menyatakan bahwa  aktivitas  enzim-enzim tersebut  sangat berkaitan  dengan  perkembangan  organ    pen- cernaan  yang  sudah  mulai  sempurna.
Bertambahnya  umur  larva,  maka  organ pencernaan akan berkembang sehingga mem- pengaruhi produksi enzim pencernaan karena enzim tersebut  diproduksi  oleh kelenjar pan- kreas,  lambung  dan  dinding  usus  (Suryanti, 2002;  Melianawati  dan  Pratiwi,  2011). Jantrarotai et  al. (2005)  menyatakan  bahwa hepatopankrea s, lambung,  dan  usus  pada larva  rajungan  berkembang  mulai  dari  tahap awal zoea sampai tahap-tahap selanjutnya.
Setelah  hari  ketujuhbelas,  aktivitas enzim  amilase  cenderung  mengalami  pe- nurunan  sampai  akhir  penelitian,  hal  ini menunjukkan  adanya  perubahan  kebiasaan makan  pada  larva  rajungan.  Pernyataan  ini didukung oleh Serrano dan Traifalgar (2012), menyatakan  bahwa  penurunan  oleh  aktivitas enzim  pada  stadia  tertentu  terjadi  untuk mendukung  perubahan  kebiasaan  makan larva.  Menurunnya  aktivitas  enzim  amilase pada  setelah  hari  ketujuhbelas  sampai  akhir penelitian  menandakan  bahwa  pada  tahap tersebut  larva  sudah  bersifat  karnivora.  Hal tersebut didukung oleh Bakkara et al. (2015) yang  menyatakan  bahwa  larva  rajungan bersifat  karnivora  sehingga  aktivitas  enzim protease  cenderung  lebih  tinggi  pada  akhir masa  larva.  Walaupun  pada  awal  kehidupan larva  rajungan  memiliki  kemampuan  untuk memanfaatkan  karbohidrat,  namun  tidak  ada- nya  karbohidrat  dalam  makanan  maka  akan menyebabkan  penurunan  sekresi  amilse (Yulintine et al ., 2012).

## 3.2. Aktifitas Enzim Lipase
Berbeda dengan aktivitas amilase yang rendah  pada  tahap  awal  kehidupan  larva, aktivitas  lipase  pada  umur  tersebut  cukup tinggi  dan  cenderung  stabil  sampai  akhir penelitian  (0,087  µ/mL/menit  -  0,101 µ/mL/menit)  dengan  perubahan  aktifitas enzim pencernaan yang juga cenderung stabil (0%  -  4,6%).  Aktivitas  enzim  lipase  ditemu- kan  tinggi  pada  hari  pertama  setelah  pe- netasan,  dan  sejak  hari  pertama  sampai  hari keduapuluhsatu  aktivitas  enzim  lipase  cen- derung  terus  menerus  mengalami  pening- katan.  Hal  ini  diduga  karena  tingginya
kandungan  lemak  atau  lipid  pada  kuning telur,  demikian  halnya  dengan  lemak  atau lipid  yang  terkandung  dalam  pakan  awal ( Brachionus dan Artemia )  yang  mempunyai peran  penting  dalam  proses  metabolisme sehingga  mendukung  organ  pencernaan untuk  berkembang  dan  menghasilkan  enzim pencernaan. Hal ini sesuai pendapat Melianawati dan Pratiwi (2011); Aslianti dan Afifah  (2012)  yang  menyatakan  bahwa nutrisi  yang  terkandung  dalam  kuning  telur dan pakan alami dapat memacu perkembang- an  organ  tubuh  sesuai  dengan  bertambahnya umur  larva  dan  mempengaruhi  produksi enzim. Menurut Serrano (2012), kemampuan larva krustase menghasilkan enzim berkaitan erat  dengan  perkembangan  organ  pencerna- an,  pengertian  tentang  morfologi  pembentu- kan dan perubahan fisiologi  organ pencerna- an  termasuk  kelenjar  pencernaan  adalah  hal yang  sangat  penting  untuk  diketahui. Kepiting  bakau Scylla  serrata ,  perubahan morfologi  larva  stadia  zoea-3  ke  zoea-4 ditandai  dengan  peningkatan  jumlah  segmen abdomen  dari  lima  menjadi  enam  yang berarti gastric  mill dari  sistem  pencernaan mulai  berkembang,  dan  hepatopankreas sudah mulai berfungsi.
Menurut  Affandi et  al. (2009),  sejak awal  fase  larva,  pemanfaatan  lemak  sebagai sumber  energi  telah  berlangsung,  terutama ketika  larva  belum  mengambil  pakan  dari luar.  Perez et  al .  (2010)  menyatakan  bahwa aktivitas  lipase  yang  tinggi  pada  awal  stadia larva  juga  terdeteksi  pada  udang  putih Penaeus vannamei .

## 3.3. Aktivitas Enzim Tripsin
Seperti  larva  krustase  lainnya,  akti- vitas enzim tripsin sudah terdeteksi pada larva rajungan hari pertama. Aktivitas enzim tripsin yang  tinggi  pada  saat  larva  baru  menetas, karena  enzim  penetasan  dari  kelenjar  pene- tasan  umumnya  tipe  tripsin  (Serrano,  2012). Pengamatan  aktivitas  enzim  pencernaan tripsin  larva  rajungan  pada  hari  pertama diperoleh sebesar 0,09 µ/mL/menit, dan cen- derung  menurun  sampai  hari  kelima  hingga
mencapai  0,03  u/mL/menit  dengan  per- ubahan  relatif  enzim  sebesar  -46,42%. Terjadinya  penurunan  aktifitas  enzim  tripsin diduga  disebabkan  pada  hari  ketiga  dan kelima,  pakan  alami  berupa Brachionus dan Artemia sudah  diberikan  kepada  larva, sehingga  menyebabkan  turunnya  aktifitas enzim  tersebut,  sesuai  pendapat  Melianawati dan  Pratiwi  (2011)  yang  menyatakan  bahwa pakan  eksogen  yang  diberikan  pada  larva memiliki struktur yang berbeda dengan  yang ada  pada  tubuh  larva  sehingga  proses hidrolisis berjalan lambat dan mengakibatkan aktifitas  enzim  yang  terdeteksi  rendah. Pada kepiting bakau Scylla serrata , aktivitas enzim tripsin  menurun  saat  pemberian  makanan pertama  dan  cenderung  menurun  pada  tahap berikutnya (Serrano dan Traifalgar, 2012).
Hari  ketujuh  aktivitas  enzim  tripsin meningkat  lagi  menjadi  0,035  u/ml/menit dengan  perubahan  relatif  enzim  sebesar 16,66%  hingga  mencapai  peningkatan  yang tinggi  pada hari kesembilan dengan aktivitas enzim sebesar 0,087 u/mL/menit, dan dengan perubahan relatif 148,57%. Perubahan relatif aktivitas  enzim  tripsin  terus  menerus  me- ngalami  peningkatan  hingga  mencapai  akti- vitas enzim sebesar 0,154 u/ml/menit dengan perubahan  relatif  1,31%  pada  hari  kedua- puluhsatu.  Kecenderungan  peningkatan  akti- vitas enzim dapat disebabkan karena pening- katan  umur  larva  dan  organ  pencernaan sudah  berada  pada  fase  definitif.  Hal  ini didukung  oleh  Melianawati  dan  Pratiwi (2012)  yang  menyatakan  bahwa  beberapa faktor  yang  menyebabkan  semakin  mening- katnya  aktifitas  enzim  pencernaan  pada organisme  adalah  semakin  besarnya  ukuran tubuh  larva  diikuti  dengan  semakin  mening- katnya  jumlah  jaringan  penyusun  tubuh, termasuk  didalamnya  adalah  jaringan  peng- hasil enzim. Selain itu dapat juga disebabkan semakin  besar  umur  larva  akan  semakin banyak  mengkonsumsi  pakan  eksogen  yang merupakan  substrat  bagi  enzim  sehingga akan menstimulir peningkatan aktifitas enzim.  Serrano  (2012)  juga  menyatakan bahwa  peningkatan  aktivitas  tripsin  sampai
stadia  crablet  mengasumsikan  perkembangan hepatopankreas yang semakin sempurna.
Tingginya aktivitas enzim tripsin pada larva  rajungan  hari  kesebelas  mempertegas bahwa larva tersebut mempunyai kemampuan yang tinggi untuk memanfaatkan protein pada stadia  larva.  Hal  ini  berhubungan  dengan kebiasaan  makan  selama  siklus  hidup  ra- jungan.  Menurut  Bakkara et  al. (2015), rajungan  bersifat  karnivora  pada  stadia  larva, perkembangan  enzim  pencernaan  menunjuk- kan  pentingnya  protein  tinggi  selama  periode pemberian makan  pada larva rajungan.
Kemampuan  larva  krustase  meng- hasilkan  enzim  pencernaan  berhubungan dengan  perkembangan  organ  pencernaan, genetik,  dan  pakan  yang  diberikan  (Serrano dan Traifalgar, 2012).  Level aktivitas enzim yang  tinggi  ditemukan  pada  larva  penaeid sesaat  setelah  menetas  (Zhou et  al., 2009) dan pada larva kepiting  bakau Scylla serrata terutama  aktivitas  amylase  dan  tripsin (Serrano  dan  Traifalgar,  2012)  selulosa  dan protease  ditemukan  bervariasi  pada  setiap tahap perkembangan (Pavasovic et al ., 2004). Serrano  dan  Traifalgar  (2012)  juga mengatakan  bahwa  efek  interaksi  antara tahap  perkembangan  larva  kepiting  bakau dan  tipe  pakan  sangat  berpengaruh  terhadap aktivitas enzim. Pemberian pakan alami pada larva  kepiting  bakau  menghasilkan  aktivitas enzim  yang  tinggi,  sehingga  pemberian pakan  alami  pada  stadia  awal  larva  sangat penting  sebagai  sumber  enzim  eksogeneus. Pada  umumnya,  aktivitas  enzim-enzim  ter- sebut  terus  meningkat  dengan  semakin meningkatnya  umur  larva.    Menurut  Serrano (2012),  peningkatan  aktivitas  enzim  tersebut disebabkan oleh dua faktor yaitu (1) semakin sempurnanya  organ  penghasil  enzim  dan  (2) meningkatnya  konsumsi  pakan  alami  yang merupakan  sumber  energi  eksogen  sejalan dengan  menyusutnya  kuning  telur  telah menyebabkan  peningkatan  konsumsi  pakan. Menurut  Perez  (2010),  pakan  alami  yang dikonsumsi  memberikan  kontribusi  terhadap peningkatan  aktivitas  enzim  tersebut  dalam saluran pencernaan.
Menurut    Serrano  (2012),  pada  stadia telur  dan  awal  larva,  dengan  organ  sekresi belum  berkembang  enzim  yang  berperan adalah  enzim  protein,  karbohidrat  dan  lipid pada  oosit  yang  masak  ditemukan  di  dalam telur dan kantong kuning telur dari larva yang baru  menetas.    Kuning  telur  merupakan  satu- satunya  sumber  energi  bagi  perkembangan embrio.  Karena  pada  umur  tersebut  organ masih  dalam  perkembangan,  setelah  fase tersebut  maka  dibutuhkan  enzim  dari  luar yang berasal dari pakan alami. Dikatakan juga bahwa  pada  umur  satu  sampai  tiga  hari, cadangan  lemak  yang  terdapat  pada  kantong kuning  telur  ( yolk  sac )  dihidrolisis  dengan bantuan  enzim  lipase  untuk  menghasilkan energi  bebas.  Stadia  embrionik  dimulai  dari akhir  fertilisasi  sampai  mulai  mengambil pakan dari luar.
Serrano (2012)  menyatakan  bahwa pakan  alami  (Rotifera)  yang  dikonsumsi  oleh larva  kepiting  bakau  memberikan  kontribusi yang  besar  terhadap  peningkatan  aktifitas protease  pada  larva  zoea-1  sebesar  84%  dan aktifitas amilase mencapai 28,8%. Peningkat- an  aktifitas  enzim  pencernaan  larva  rajungan pada  tahap  ini  juga  disebabkan  karena  enzim endogen  sudah  mulai  disekresikan.  Hal  ini sesuai  hasil  pengamatan  histologi  dimana pada  saat  larva  kepiting  bakau  berumur  tiga- belas  hari,  hepatopankreas,  salah  satu  organ yang  mensekresikan  enzim-enzim  tersebut sudah  berada  pada  tahap  definitif  (Jantrarorai et al ., 2005).
Peningkatan  aktivitas  enzim  yang cukup  tinggi  dapat  dijadikan  dasar  untuk menentukan  saat  pakan  buatan  mulai  dapat digunakan.  Hal ini sesuai pendapat Affandi et al. (2009) menyatakan bahwa aktivitas enzim pencernaan  adalah  suatu  indikator  yang  baik untuk  menentukan  kapasitas  pencernaan, ketika  aktivitas  tinggi  dapat  diindikasikan secara  fisiologis  larva  siap  untuk  memproses pakan dari luar.

## 3.4. Kualitas Air
Berdasarkan  hasil  penelitian,  kisaran suhu, salinitas, pH dan oksigen terlarut (DO)
media pemeliharaan adalah sebesar 26-33°C; 29-33  g/L,  8,16-8,24;  5,9-6,8  ppm.  Kualitas air ini diasumsikan masih dalam kisaran yang layak  untuk  pemeliharaan  larva  rajungan, karena  masih  dalam  batas-batas  toleransi yang  mendukung  pertumbuhan  dan  klang- sungan hidup  larva rajungan. Menurut acuan kualitas  air  untuk  media  pemeliharaan  larva rajungan Portunus  pelagicus dalam  hal  ini kualitas  air  pemeliharaan,  terlihat  masih terjaga  dan  cukup  mendukung  kehidupan larva hingga akhir penelitian.
Ikhwanuddin et  al. (2014)  menyata- kan  bahwa  suhu  merupakan  parameter lingkungan  yang  mempengaruhi  kelang- sungan  hidup  dan  perkembangan  larva organisme akuatik dan sangat berperan dalam mempercepat  metabolisme  suatu  organisme. Gunarto  dan  Widodo  (2012)  menyatakan bahwa  suhu  air  berpengaruh  pada  waktu yang  diperlukan  untuk  perkembangan  larva kepiting  bakau.  Azra  dan  Ikhwanuddin (2015)  mengkultur  larva  rajungan  pada  suhu 25‒30°C  pada  salinitas  30‒35  g/L  untuk mengoptimalkan pertumbuhan, kelangsungan hidup  dan  perkembangan  larva  rajungan. Ravi  and  Manisseri  (2012)  menyatakan bahwa  kelangsungan  hidup  larva  rajungan yang  dipelihara  pada  suhu  30°C  dapat mencapai 14,12%. Pada penelitian Trijuno et al. (2015),  kisaran  suhu  dan  salinitas  media pemeliharaan  adalah  sekitar  28°C  dan  32 g/L.  Fujaya et  al. (2014)  menyatakan  bahwa krustase  adalah  jenis  hewan  poikilotermik, artinya suhu tubuhnya dipengaruhi oleh suhu lingkungan disekitarnya.
Nilai  pH  air  selama  penelitian berkisar antara 8,16 – 8,24. Kisaran ini masih optimal  untuk  pertumbuhan  dan  tingkat kelangsungan hidup  larva rajungan. Menurut Syahidah  (2003),  pH  7,0-8,5  masih  dalam batas normal untuk kehidupan larva rajungan stadia  megalopa.  Menurut  Juwana  dan Romimohtarto  (2000),  pH  yang  baik  untuk megalopa  rajungan  adalah  7,5-8,5.  Juwana (2002)  menyatakan  bahwa  pada  pemelihara- an  larva  rajungan  menggunakan  pH  berkisar 8-8,5.  Peneliti  lain  berpendapat  bahwa  pH
yang  optimal  untuk  pemeliharaan  larva rajungan  adalah  8,18-9,29  (Oniam et  al., 2012), 7,5-8,0 (Soundarapandian dan Tamiz- hazhagan, 2009).
Oksigen  terlarut  merupakan  suatu parameter  pembatas  utama  karena  pengaruh oksigen  terlarut  sangat  penting  pada  kelang- sungan  hidup  dan  pertumbuhan.  Oksigen terlarut sangat diperlukan oleh larva rajungan dalam  proses  respirasi  dan  proses  meta- bolisme.  Pada  penelitian  ini,  kandungan oksigen  yang  terukur  berkisar  antara  5,9-6,8 mg/L.  Kisaran  kualitas  air  ini  dikategori-kan masih  layak  bagi  kehidupan  larva  rajungan. Menurut  Gunarto  dan  Widodo  (2012), kandungan  oksigen  terlarut  4  ppm  merupa- kan  standar  yang  tidak  boleh  kurang  untuk kelayakan  kehidupan  organisme  dalam  per- airan.  Kelarutan  oksigen  dipengaruhi  oleh beberapa  faktor  diantaranya  suhu,  salinitas, pH  dan  bahan  organik.  Jika  salinitas  tinggi, kelarutan  oksigen  semakin  rendah.    Oksigen terlarut di dalam air antara 4-6 ppm dianggap paling  ideal  untuk  tumbuh  dan  berkembang larva.

## IV. KESIMPULAN
Hasil  penelitian  uji  kimia  enzim pencernaan larva rajungan dapat ditarik suatu kesimpulan  bahwa  aktivitas  enzim  amilase, lipase dan tripsin mulai terdeteksi pada larva umur satu hari.
Pola  aktifitas  enzim  amilase  menun- jukkan  peningkatan  mulai  sejak  larva  ber- umur  satu  hari  hingga  hingga  hari  ketujuh- belas  kemudian  cenderung  menurun  sampai akhir penelitian.
Aktifitas  enzim  tripsin  tinggi  pada hari  pertama,  tapi  cenderung  menurun  pada hari  ketiga  dan  kelima,  dan  meningkat  lagi pada  hari  ketujuh  sampai  hari  terakhir  pe- nelitian.  Aktifitas  amilase  dan  tripsin  ter- tinggi  selama  periode  waktu  tersebut  terjadi pada larva umur sebelas hari.
Aktifitas  enzim  lipase  cenderung stabil  dari  awal  sampai  akhir  penelitian. Dalam  aplikasi  budidaya,  pemberian  pakan
buatan dengan kandungan karbohidrat, protein dan lemak tinggi sebaiknya dilakukan saat larva berumur sebelas hari.

## DAFTAR PUSTAKA
Affandi,  R.,  D.S.  Sjafei,  M.F.  Rahardjo,  dan Sulistiono.  2009.  Fisiologi  ikan,  pen- cernaan  dan  penyerapan  makanan. Institut Pertanian Bogor. 240hlm.
Aslianti,  T.  dan  Afifah.  2012.  Studi  aktifitas enzim  pencernaan  larva  ikan  kuwe Gnathanodon  speciosus yang  di- pelihara  dengan  jenis  pakan  awal berbeda. J. Riset Akuakultur , 7(1):49– 59.
Azra,  M.N.  dan  M.  Ikhwanuddin.  2015. Larval  culture  and  rearing  techniques of  commercially  important  crab Portunus pelagicus (Linnaeus, 1758): Present  status  and  future  prospects. Songklanakarin  J.  Science  Techno- logy , 37: 135–145.
Bakkara,  O.R.,  S.  Aslamyah,  dan  Y.  Fujaya. 2015.  Respon  perkembangan  larva rajungan Portunus  pelagicus pada percepatan pergantian pakan alami ke pakan  buatan  predigest. J.  Science and Teknologi , 15(1):74–83.
Bernfield,  P.  1955.  Method  in  enzymology. S.P.  Academic  Press.  Colowick, Kaplan, N.O. New York, USA. 150p.
Borlongan,  I.G.  1990.  Studies  on  digestive lipases  milkfish Chanos  chanos. Aquaculture, 89:315-325.
Effendi,  I.,  D.  Agustine,  dan  Widanarni. 2006. Perkembangan enzim pencerna- an  larva  ikan  patin Pangasius  hypo- phthalmus . J.  Akuakultur  Indonesia , 5(1):41-49.
Fujaya,  Y.,  D.D.  Trijuno,  A.  Nikhlani,  I. Cahyono,  dan  Hasnidar.  2014.  The use  of  mulberry Morus  alba exstract in  the  mass  production  of  blue swimming crab Portunus pelagicus L. larvae  to  overcome  the  mortality  rate due  to  molting  syndrome. Aquatic Science and Technology , 2:1‒14.
Gunarto  dan  A.F.  Widodo.  2012.  Pengaruh perbedaan  suhu  air  pada  perkem- bangan  larva  kepiting  bakau Scylla olivacea . Prosiding Indo Aqua-Forum Inovasi  Teknologi  Akuakultur.  Indo- nesia. Hlm.:281-288.
Ikhwanuddin,  M.,  A.N.  Liyana,  M.N.  Azra,
Z.  Bachok,  and  A.B.  Abol-Munafi. 2014. Natural diet of Blue Swimming Crab Portunus  pelagicus at  Strait  of
Tebran, Johor Malaysia. Sains Malaysiana, 43(1):37 - 44 Jantrarotai, P., N. Srakew, and A. Sawanyatiputi.  2005.  Histological study on the development of digestive system  in  zoeal  stage  of  mud  crab ( Scylla serrata ). Kasetsart J. National Sciences , 39:666-671.
Johnston,  P.T.  and  C.  Freeman.  2005.  The digestive  physiology  of  herbivorous, omnivorous,  and  carnivorous  crusta- cean  larvae.  A  review. Aquaculture,
155:285-295.
Juwana,  S.  dan  K.  Romimohtarto.  2000.
Rajungan  perikanan,  cara  budidaya dan  menu  Masakan.  Djambatan. Jakarta. 25hlm.
Juwana,  S.    2002.  Produksi  massal  benih rajungan Portunus  pelagicus IV.  Sis- tem  Budidaya. Dalam :  Goenarso et al. (eds.). Prosiding Seminar Nasional Biologi XVI. Hlm.:23 – 28.
Melianawati,  R.  dan  R.  Pratiwi.  2011.  Pola aktifitas  enzim  pencernaan  larva  ikan kerapu  macan Ephinephelus  fusco- guttatus Forsskal. J. Riset Akuakultur, 6(1):51–61.
Nikhlani,  A.  2013.  Penentuan  time  schedule pemberian  pakan  buatan  berfito- ekdisteroid untuk menanggulangi sin- drom  molting  pada  metamorphosis larva  rajungan Portunus  pelagicus . Disertasi.  Universitas  Hasanuddin.
Makassar. 202hlm.
Ong,  B.L.  and  D.  Johnston.  2006.  Influence of  feeding  on  hepatopancreas  struc- ture  and  digestive  enzyme  activity  in
Penaeus monodon . J. Shellfish Research , 25(11):113-121.
Oniam,  V.,  L.  Chuchit,  and  W.  Arkronrat.
2012.  Reproductive  performance  and larval  quality  of  blue  swimming  crab
( Portunus  pelagicus )  broodstock,  fed with  different  feeds. J.  Sci.  Technol., 34(4):381-386.
Pavasovic,  M.,  N.A.  Richardson,  A.J. Anderson, D. Mann, and P.B. Mather. 2004.  Effect  of  pH,  temperatur,  and diet  on Scylla  serrata . Aquaculture , 242:641-654.
Perez,  R.C.,  M.A.  Navarette,  and  G.C. Fernando.  2010.  Digestive  lipase activity  through  development  and after  fasting  and  refeeding  in  the whiteleg  shrimp Penaeus  vannamei.
Aquaculture, 30:163-168.
Ravi, R. and M.K. Manisseri. 2012. Survival rate  and  development  period  of  the larvae  of Portunus  pelagicus (Deca- poda,  Brachyura,  ortunidae)  in  rela- tion to  temperature and salinity. Fisheries and Aquaculture J. , 12:1‒8. Saborowski,  R.,  S.  Thaje,  J.A.  Calcagno, G.A.  Lovrich,  and  K.  Anger.  2006. Digestive enzymes in the ontogenetic stages  of  the  southern  king  crab Lithodes  santolla . Marine  Biology , 149:865-873.
Serrano, A.E. 2012. Ontogeny of the  endoge- neous  and  exogeneous  amylase  and total  protease  activities  in  mud  crab,
Scylla  serrata larvae  fed  live  food.
AACL Bioflux, 2(5):1578-1584. Serrano,  A.E.  and  R.F.  Traifalgar.  2012. Ontogeny  and  induction  of  digestive enzymes  in Scylla  serrata larvae  fed
live  or  artificial  feeds  or  their combination. AACL Bioflux, 5(3):101 -111.
Suryanti,  Y.  2002.  Perkembangan  aktifitas enzim  pencernaan  pada  larva/benih ikan  baung Mystus  nemurus C.V. J.
Penelitian Perikanan Indonesia , 8(3):15–18.
Syahidah,  D.  and  I.  Rusdi.  2003.  The  effect of  different  initial  feeding  time  of micro  diets  as  artificial  feed  to survival  rate  of  mud  crabs  larvae Scylla  paramamosain .  International Seminar  on  Marine  and  Fisheries  15- 16  December  2003.  Jakarta  Conven- tion Center. 20-22pp.
Trijuno,  D.D.,  Y.  Fujaya,  Agrivanti,  dan  S.
Marhama.  2015.  Quality  of  blue swimming  crab Portunus  pelagicus larvae from domesticated broodstock. Aquaculture Indonesiana , 16:22–28.
Walter,  H.E.  1984.  Methods  of  enzymatic analysis.  Wein-heim.  Verlag  Chemie. 277p.
Wang,  Y.B.  2007.  Effect  of  probiotics  on growth  performance  and  digestive enzyme  activity  of  the  shrimp Pennaeus  vannamei . Aquaculture,
269:259-264.
Yulintine,  E.  Harris,  D.  Jusadi,  R.  Affandi, dan  Alimuddin.  2012.  Perkembangan aktifitas  enzim  pada  saluran  pen- cernaan  larva  ikan  betok Anabas testudineus bloch. Bionatura  J.  Ilmu- ilmu Hayati dan Fisik , 14(1):59–67.
Zhou, X.X., Y.B. Wang, and W.F.  Li.  2009.
Effect  of  probiotic  on  larvae  shrimp Penaeus  vannamei based  on  water quality,  survival  rate  and  digestive enzyme  activities. Aquaculture, 287:
349-353.
Diterima : 6 Agustus 2016 Direview : 24 Oktober 2016 Disetujui : 2 November 2017