## Jurnal Agrotek Tropika
Journal homepage: https://jurnal.fp.unila.ac.id/index.php/JA
Binucleate Rhizoctonia SEBAGAI PENGHAMBAT Peronosclerospora maydis PENYEBAB PENYAKIT BULAI PADA TANAMAN JAGUNG ( Zea mays L.)
Binucleate  Rhizoctonia  AS  INHIBITOR  OF  Peronosclerospora  maydis  THE CAUSE OF DOWNY MILDEW DISEASE ON CORN (Zea mays L.)
Nur Ayu Aisyah Ali 1 , dan Rina Sri Kasiamdari 2*
1 Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada, Indonesia
* Corresponding Author. E-mail address: rkasiamdari@ugm.ac.id

## PERKEMBANGAN ARTIKEL:
Diterima: 2 November 2023 Direvisi: 15 November 2023 Disetujui: 30 Januari 2024

## KEYWORDS:
Control , corn, Peronosclerospora maydis, Binucleate Rhizoctonia (BNR), Downy mildew.

## KATA KUNCI:
Binucleate Rhizoctonia (BNR), bulai, jagung, Peronosclespora maydis, pengendalian
© 2024 The Author(s). Published by Department of Agrotechnology, Faculty of Agriculture, University of Lampung.

## ABSTRACT
One of the largest agricultural commodities in Indonesia is corn (Zea mays L.). The corn produced is quite significant, but in the process of planting there are obstacles. One of which is the attack of downy mildew caused by the fungus Peronosclespora maydis. Biological control that can be done  is  to  use  Binucleate  Rhizoctonia  (BNR)  as  an  inhibitor  of  the  growth  of  downy  mildew disease.  One of the diseases that infect corn is downy mildew caused by P. maydis. The study aims to investigate the effect and inhibition of BNR as biological control agents against downy mildew fungi  on  corn.  The  research  was  conducted  in  a  randomized  block  design  (RBD)  with  four treatments dan four replications. The treatments consisted of Control (P0), BNR isolate (P1), P. maydis isolate (P2) and BNR + P. maydis (P3) as well as Pertiwi and Pioneer-21 varieties. The results  showed  that  endophytic  fungi  used  as  inhibitors  of  downy  mildew  were  Binucleate Rhizoctonia  and  downy  mildew  fungus  found  to  be  Peronosclerospora  maydis.  BNR  has  the potential  to  inhibit  the  growth  of  P.  maydis  fungi  in  vivo  in  the  Pertiwi  variety  by  72%  and Pioneer-21 by 67% and can increase the growth of corn plants.

## ABSTRAK
Salah satu komoditas pertanian terbesar di Indonesia adalah jagung ( Zea mays L.). Produksi jagung yang dihasilkan cukup signifikan tetapi dalam proses penanaman terdapat kendala. Salah  satunya  akibat  penyakit  bulai  yang  disebabkan  oleh  infeksi  jamur Peronosclespora maydis . Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui potensi BNR dalam menghambat jamur penyebab  penyakit  bulai  secara in  vivo .  Penelitian  ini  dilakukan  dalam  Rancangan  Acak Kelompok (RAK) dengan empat perlakuan dan empat ulangan. Perlakuan terdiri dari Kontrol (P0), BNR (P1), P. maydis (P2) dan BNR + P. maydis (P3) serta penggunaan varietas Pertiwi dan Pioneer-21. Hasil penelitian menunjukan bahwa jamur endofit yang digunakan sebagai penghambat  jamur  penyebab  penyakit  bulai  adalah Binucleate  Rhizoctonia dan  jamur penyebab  bulai  yang  ditemukan  adalah Peronosclerospora  maydis .  BNR  berpotensi menghambat pertumbuhan jamur P. maydis secara in vivo pada varietas Pertiwi sebesar 72% dan Pioneer-21 sebesar 67% serta dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman jagung.

## 1. PENDAHULUAN
Jagung  ( Zea  mays L.)  adalah  komoditas  pertanian  utama  terbesar  kedua  yang  ditanam  di Indonesia. Jagung merupakan tanaman tahunan dan banyak dimanfaatkan sebagai bahan pangan, pakan ternak dan industri. Rata-rata produksi tanaman jagung di Indonesia pada tahun 2016–2020 mencapai 23 juta ton. Dalam proses penanaman jagung terdapat beberapa kendala, yaitu serangan hama dan penyebab penyakit (Komalasari, 2021). Salah satu penyakit yang dapat menurunkan hasil panen jagung adalah penyakit bulai yang disebabkan oleh Peronosclerospora maydis. Penyakit bulai dapat menyebabkan penurunan hasil pada jagung hingga 90-100% (Kalqutny et al., 2020).
P. maydis bersifat parasit obligat yaitu tumbuh pada inang yang masih hidup. Terdapat tiga spesies jamur patogen yang umum menyerang jagung di Indonesia yaitu P. maydis, P. philippinensis dan P.  sorghi (Hikmahwati et  al., 2018) . Jamur  penyebab  penyakit  bulai  menginfeksi  daun  pada tanaman  jagung  sehingga  menampakan  gejala  yang  khas  garis  putih  atau  kekuningan  yang memanjang sejajar dengan tulang daun. Saat pagi hari akan terlihat serbuk seperti tepung (konidia) pada permukaan atas dan bawah daun. Konidia ini mudah tersebar dan menyebabkan tanaman sehat lain menjadi terinfeksi (Putri et al. , 2022).
Penyakit  yang  disebabkan  oleh  jamur  patogen  dapat  dicegah  dan  dihambat  dengan  cara melakukan pengendalian secara kimiawi menggunakan fungisida, namun hal ini dapat berdampak buruk  bagi  lingkungan  seperti  pencemaran  lingkungan,  pH  tanah  menjadi  tidak  stabil,  muncul resintensi,  dan  meninggalkan  residu  pada  bagian  tumbuhan  sehingga  berbahaya  jika  dikonsumsi oleh organisme non target (Pakki et al., 2019; Erper et al., 2013).
Salah satu upaya yang dapat dilakukan untuk mengendalikan jamur penyebab penyakit bulai pada tanaman jagung adalah pemanfaatan agens pengendali hayati yang efektif untuk menghambat pertumbuhan  jamur  patogen  dan  ramah  terhadap  lingkungan  (Putri et  al., 2022).  Jamur  yang mempunyai  potensi  sebagai  agens  pengendali  hayati  adalah  jamur  genus Rhizoctonia yaitu Binucleate Rhizoctonia (BNR) (Erper et al., 2013). Jamur ini dapat diisolasi dari perakaran anggek epifit  maupun  terestrik  dengan  karakteristrik  mempunyai  percabangan  hifa  tegak  atau  90°,  inti berjumlah dua pada hifa vegetatif muda yang bersekat dan terdapat sel moniliod (Mahfut, 2021). BNR dapat dibedakan secara morfologi melalui pengamatan mikroskopis dan pewarnaan.
Merujuk  dari  penelitian  sebelumnya,  BNR  dapat  menekan  dan  menghambat  pertumbuhan penyakit yang menyerang suatu tanaman. BNR efektif menghambat pertumbuhan R. solani penyebab penyakit busuk pelepah atau Banded Leaf and Sheath Blight (BLSB) pada jagung (Pascual et al., 2000). BNR dapat mengurangi keparahan penyakit rebah semai dan busuk akar pada tanaman timun yang disebabkan oleh jamur patogen Fusarium oxysporum, Pythium ultimum dan Rhizoctonia solani (Erper et  al., 2013).  BNR  dapat  meningkatkan  ketahanan  penyakit  terhadap  penyakit  rebah  semai  yang disebabkan  oleh R.  solani dan  bercak  daun  yang  disebabkan  oleh Alternaria  macrospora pada tanaman  kapas.  Hal  ini  menunjukan  bahwa  BNR  dapat  melindungi  tanaman  kapas  dari  infeksi patogen baik pada akar maupun daun (Hare & Neate, 2005).
Potensi BNR sebagai agens pengendali hayati untuk penyakit bulai pada tanaman jagung belum pernah  dilaporkan  sehingga  tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  potensi  BNR  dalam menghambat pertumbuhan jamur penyebab penyakit bulai pada tanaman jagung.

## 2. BAHAN DAN METODE
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan  November  2022  hingga  Maret  2023.  Isolasi  dan pengamatan jamur Binucleate Rhizoctonia dan Peronosclerospora maydis dilakukan di Laboratorium Sistematika Tumbuhan, Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada dan Uji Potensi BNR pada tanaman jagung secara in vivo dilakukan di Kebun Sawitsari Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu cawan petri, Erlenmeyer, LAF, Autoclave, jarum ose, object  glass , cover  glass , cork  borer 5  mm,  mikroskop,  optilab,  timbangan  analitik,  penggaris, polybag , kertas label, plastik ziplock , sekop, sprayer , gunting, selotip dan kuteks.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah akar anggrek sehat, BNR, jamur P. maydis dari daun jagung yang bergejala bulai, benih jagung hibrida varietas Pertiwi dan Pioneer-21, media tanam,  insektisida,  PDA,  methylen  blue  2%,  safranin,  KOH  1%,  natrium  hipoklorit  5%,  Gliserol, akuades steril, chloramphenicol dan spritus.
Pengujian menggunakan Rancangan Acak Kelompok (RAK) dengan 4 perlakuan dan 4 ulangan. Perlakuan terdiri dari Kontrol (P0), BNR (P1), P. maydis (P2) dan BNR + P. maydis (P3), varietas Pertiwi (A) dan Varietas Pioneer-21 (B) dengan total tanam 32 individu.

## 2.1 Pelaksanaan penelitian

## 2.1.1  Isolasi dan identifikasi Binucleate Rhizoctonia
BNR diambil dari akar anggrek Phalaenopsis amabilis yang sehat Akar anggrek dipotong sekitar 2-4  cm  kemudian  disterilkan  dengan  natrium  hipoklorit  5%  selama  2  menit,  dibilas  dalam  tiga pengulangan dengan akuades steril, dan diinkubasi selama 3-6 hari pada medium PDA di cawan petri. Setelah  itu  koloni  dengan  karakteristik  miselium  BNR  dipindahkan  ke  medium  PDA  lain  untuk dimurnikan dan diidentifikasi.
Kultur murni jamur diambil menggunakan jarum ose kemudian ditempatkan pada object glass . Isolat diberi setetes gliserol. Dalam proses pewarnaan, dilakukan dengan meneteskan safranin dan larutan  KOH  3%  pada  isolat.  Kemudian  ditutup  menggunakan cover  glass .  Pada  bagian  tepi  kaca penutup  dioleskan  kuteks  (Bandoni,  2018).  Pengamatan  mikroskopis  jamur  dilakukan  dengan mikroskop  dan  optilab.  Karakter  mikroskopis  BNR  yang  diamati  meliputi  warna  koloni,  sudut percabangan hifa (90°), jumlah inti sel, ukuran hifa, sekat pada hifa, dan keberadaan sel monilioid. Identifikasi BNR merujuk pada Sneh et al. (1996) dan Athipuyakom et al. ( 2004) serta dibandingkan dengan penelitian yang telah dilakukan sebelumnya (Mahfut, 2021; Katherine, 2011).

## 2.1.2  Pengambilan spora dan identifikasi jamur penyebab penyakit bulai
Daun  tanaman  jagung  yang  menunjukan  gejala  bulai  diambil  dari  kebun  jagung  di  Desa Tirtoadi, Sleman, Yogyakarta pada titik koordinat 7°44'29.0"S 110°19'40.1"E. Daun yang bergejala dipotong  kemudian  disimpan  dalam  plastik ziplock. Lapisan  konidia  yang  berwarna  putih dipermukaan  bawah  daun  diambil  secara  hati-hati  menggunakan  selotip  bening  kemudian ditempelkan  pada  gelas  objek  yang  sudah  ditetesi  dengan  pewarna methylene  blue. Setelah  itu ditutup  dengan cover  glass dan  kuteks.  Pengamatan  menggunakan  mikroskop  dan  optilab  serta diidentifikasi (Adhi et al., 2019).
Karakter  mikroskopis  yang  diamati  pada  jamur  penyebab  penyakit  bulai  meliputi  jumlah percabangan konidiofor, panjang konidiofor, bentuk hifa, bentuk dan diameter konidia. Identifikasi jamur  penyebab  bulai  dilakukan  dengan  merujuk  buku  identifikasi Fungi  Ilustrated  Dictionary  of Mycology edisi  pertama  (Ulloa  &  Hanlin  2000)  serta  dibandingkan  dengan  penelitian  yang  telah dilakukan sebelumnya (Rustiani et al., 2015; Widiantini et al., 2015).

## 2.1.3  Penanaman benih jagung
Penanaman diawali dengan persiapan greenhouse yaitu penyemprotan insektisida berbahan aktif carbofuran. Pada penelitian ini menggunakan dua varietas jagung yaitu Pertiwi dan Pioneer-21. Biji ditanam dalam Polybag ukuran 25 x 25cm dengan media tanam.
Tabel 1. Skala keparahan penyakit yang terserang bulai menurut (Khoiri et al., 2021) Skala keparahan Deskripsi gejala 0 Tidak ada gejala 1 Luas gejala pada daun 1 – 25% 2 Luas gejala pada daun 26 – 50% 3 Luas gejala pada daun 51 – 75% 4 Luas gejala pada daun 76 – 100% Tabel 2. Kategori ketahanan penyakit bulai menurut Daryono et al. , (2018)
Intensitas serangan (%) Kategori ketahanan bulai 0 Sangat tahan 0 < x ≤ 25 Tahan 25 < x ≤ 50 Agak tahan 50 < x ≤ 75 Tidak tahan x > 75 Sangat tidak tahan

## 2.1.4  Inokulasi jamur penyebab bulai
Inokulum disiapkan dari daun yang bergejala bulai dengan karakteristrik daun klorotik dan terdapat  lapisan  tepung  halus  putih  yang  berada  dibawah  dan  atas  permukaan  daun  jagung Pengambilan dilakukan pada 05.15 WIB. Daun dicuci dengan air mengalir kemudian dipotong kecil- kecil dan dimasukkan kedalam sprayer yang telah berisi 100 mL air. Spraye r digojog agar konidia yang menempel pada daun rontok dan tercampur dengan air. Inokulum disemprotkan pada tanaman jagung yang akan diberi perlakuan masing-masing sebesar 5 semprotan merata ke seluruh bagian tanaman. Inokulasi konidia dilakukan pada tanaman jagung yang berumur 10 hari setelah tanam (HST) (Adhi et al., 2019).

## 2.1.5  Aplikasi Binucleate Rhizoctonia
Koloni BNR yang berumur 7 hari pada medium PDA diambil dari bagian tepi menggunakan cork  borer 5  mm.  Pada  penelitian  ini  aplikasi  BNR  dilakukan  dengan  menggali  tanah  disekitar perakaran jagung lalu cetakan BNR diinokulasikan dekat akar tanaman jagung dan ditutup kembali dengan  tanah.  Pemberian  perlakuan  BNR  pada  akar  jagung  dilakukan  saat  umur  21  hari  setelah tanam (HST) saat daun jagung menunjukan bergejala bulai (Kasiamdari et al. 2002).

## 2.1.6  Pengamatan dan pengumpulan data
Pengamatan dilakukan selama 35 HST atau lima minggu setelah tanam. Variabel yang diamati adalah kejadian penyakit, keparahan penyakit, tinggi tanaman, jumlah daun, berat basah dan berat kering. Kejadian penyakit diamati setiap minggu dan dihitung menggunakan rumus berikut:
KiP = 𝒏 𝑵 x 100% (1)
Keterangan: KiP = kejadian penyakit (%), n = Jumlah tanaman terserang, N = total tanaman yang diamati (Khoiri et al. 2021). Keparahan penyakit diamati setiap minggu dan dihitung dengan lima kategori skala penyakit (Tabel 1). Keparahan penyakit dihitung menggunakan rumus berikut:
r = ∑(𝐧𝐢 𝐱 𝐯𝐢) 𝐍 𝐱 𝐕 x 100% (2)
Keterangan: r = Keparahan penyakit, ni = jumlah daun yang terserang, vi= nilai skala keparahan,
N= total jumlah daun yang diamati, V= nilai skala keparahan tertinggi (Khoiri et al. 2021).
Variabel  tinggi  tanaman  diukur  dari  pangkal  batang  hingga  daun  terpanjang  menggunakan penggaris setiap minggu. Jumlah daun diukur dengan cara menghitung jumlah daun tanaman jagung setiap minggu. Variabel berat basah dan berat kering dilakukan di akhir pengamatan atau 35 HST. Penimbangan  dilakukan  dengan  timbangan  analitik.  Tanaman  dicabut  dari polybag kemudian dibersihkan dari kotoran dengan air mengalir. Berat kering dilakukan setelah penimbangan berat basah selesai. Tanaman dikeringkan dengan oven selama 2x24 jam pada suhu 80°C (Putri et al. 2022). Data yang diperoleh dianalisis secara statistik menggunakan analisis sidik ragam Oneway ANOVA kemudian dilanjutkan dengan uji Duncan pada taraf signifikan 5%.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1  Karakteristik Binucleate Rhizoctonia
Berdasarkan  hasil  inokulasi  dan  pengamatan  morfologi  diketahui  bahwa  isolat  BNR  pada medium  PDA  berumur  7  hari  berwarna  putih.  Secara  mikroskopis  isolat  mempunyai  inti  sel berjumlah  dua.  Sel  hifa  bersekat  dengan  ukuran  diameter  4–6  μm.  Hifa  hialin  membentuk percabangan dengan sudut 90° dan terdapat sekat didekat percabangan. Pada isolat ini ditemukan sel monilioid berbentuk memanjang atau ellipsoidal dengan ukuran 5-7 x 20,1-μm (Gambar 1).
Berdasarkan  ciri  morfologi,  isolat  ini  serupa  dengan  ciri  jamur  genus Rhizoctonia. Menurut Sneh et al. (1996) Genus Rhizoctonia mempunyai ciri khas berupa sekat disetiap percabangan hifa. Percabangan hifa tegak dengan sudut 90°. Pada penelitian ini ditemukan bahwa setiap sekat hifa berinti dua yang merupakan karakteristik dari Binucleate Rhizoctonia . Karakteristrik ini juga sesuai dengan  penelitian  yang  pernah  dilakukan  sebelumnya  oleh  Athipunyakom et  al. (2004)  dan Khaterine et al. (2011).
Gambar 1.  Koloni BNR (A) dan struktur mikroskopis BNR yaitu sudut percabangan 90° (B), Hifa berinti dua (C), dan sel monilioid (D)
A B B C D
Gambar 2.  A. Daun tanaman jagung yang bergejala bulai dan B. struktur mikroskopis Peronosclerospora maydis yaitu konidia (a) dan konidiofor (b).

## 3.2 Karakteristik Peronosclerospora maydis
Tanaman  jagung  yang  terserang  penyakit  bulai  di  Desa  Tirtoadi  mengalami  gejala  klorotik sistemik yang ditandai dengan adanya gejala klorotik diseluruh bagian daun dan ditemukan konidia bulai  berwarna  putih  pada  permukaan  bawah  daun  (Gambar  2a).  Oleh  karena  itu  daun  klorotik terjadi  karena  jaringan  daun  terserang  oleh  jamur  patogen  sehingga  proses  fotosintesis  yang berlangsung kurang optimal (Kalqutqy, 2021).
Berdasarkan  hasil  inokulasi  dan  pengamatan  morfologi  jamur  penyebab  penyakit  bulai diketahui bahwa bentuk konidiofor meruncing ke arah basal. Konidiofor bercabang secara dikotomis tiga  sampai  empat  kali.  Panjang  konidiofor  sekitar  128,03-329,6  μm  dengan  hifa  hialin  dan  tidak bersekat. Konidia berbentuk bulat hingga membulat dengan ukuran diameter 15,3-20,6 x 26,1-30,9 μm (Gambar 2b). Hal ini sesuai dengan penelitian sebelumnya Rustiani et al. (2015) yaitu karakter morfologi  jamur  penyebab  penyakit  bulai P. maydis adalah  konidiofor  bercabang  3-4  kali  dengan Panjang 111-410 μm. Bentuk konidia spherical hingga subpherical dengan ukuran 12-23 μm dengan dinding tipis.

## 3.3 Kejadian Penyakit Bulai
Kejadian  penyakit  merupakan  parameter  pengamatan  yang  menunjukan  tingkat  serangan penyakit  bulai  terhadap  tanaman  jagung  (Ulhaq  &  Masnilah  2019).  Gejala  penyakit  bulai  pada tanaman jagung baik pada varietas Pertiwi maupun Pioneer-21 terlihat saat tanaman berumur 21 HST.  Berdasarkan  hasil  pengamatan  selama  35  HST  (Tabel  2)  diketahui  bahwa  varietas  Pertiwi memiliki persentase kejadian penyakit yang lebih tinggi yaitu sebesar 75% dibandingkan dengan varietas Pioneer-21 sebesar 41,67%. Pada perlakuan pemberian BNR dapat menurunkan kejadian penyakit  secara  signifikan  pada  varietas  Pertiwi  sebesar  50%,  pada  varietas  Pioneer-21  tidak signifikan sebesar 33,3%.

## 3.4 Keparahan Penyakit Bulai
Keparahan  penyakit  merupakan  parameter  untuk  mengetahui  pengaruh  pemanfaatan  BNR sebagai penghambat pertumbuhan jamur penyebab bulai. Keparahan penyakit dihitung berdasarkan skoring pada setiap daun tanaman (Ulhaq & Masnilah 2019). Berdasarkan hasil pengamatan selama 35 HST (Tabel 3) Persentase kejadian penyakit tertinggi adalah varietas Pertiwi dengan perlakuan
A B
Tabel  3.  Pengaruh  pemberian  BNR  terhadap  Kejadian  dan  keparahan  penyakit  bulai  terhadap varietas Pertiwi dan Pioneer-21 pada 35 HST
Varietas Perlakuan Rerata pengamatan ± Std. Deviasi Pengurangan keparahan penyakit (%) Kejadian penyakit (%)  Keparahan penyakit (%) Pertiwi Kontrol 0,00 ± 0,00 a 0,00 ± 0,00 a - BNR 0,00 ± 0,00 a 0,00 ± 0,00 a - P. maydis 75,00 ± 25,00 c 28,1 ± 19,1 b - BNR + P. maydis 50,00 ± 25,00 b 7,81 ± 5,98 a 72 Pioneer- 21 Kontrol 0,00 ± 0,00 a 0,00 ± 0,00 a - BNR 0,00 ± 0,00 a 0,00 ± 0,00 a - P. maydis 41,67 ± 14,43 b 14,1 ± 12,8 ab - BNR + P. maydis 33,33 ± 14,43 b 4,69 ± 5,98 a 67
Keterangan: Angka-angka yang diikuti dengan huruf yang sama pada tiap kolom menunjukkan tidak berbeda nyata berdasarkan uji Duncan’s pada P < 0.05.
P. maydis sebesar 28,1% disusul dengan varietas Pioneer-21 dengan perlakuan P. maydis sebesar 14,1%.  Perlakuan  pemberian  BNR  dapat  menurunkan  keparahan  penyakit  secara  signifikan  pada varietas Pertiwi sebesar 72%, pada varietas Pioneer-21 tidak signifikan sebesar 67%. Perbedaan ini berkaitan dengan persentase intensitas penyakit yang berpengaruh terhadap ketahanan penyakit. Menurut  Daryono et  al. (2018)  Berdasarkan  skala  ketahanan  penyakit  (Tabel  2)  varietas  Pertiwi termasuk  varietas  agak  tahan  sedangkan  Pioneer-21  termasuk  varietas  tahan.  Selain  itu  hal  ini dikarenakan pada perlakuan P. maydis + BNR pada tanaman jagung diberi perlakuan inokulasi P. maydis kemudian diberi perlakuan BNR ketika tanaman sudah mengalami gejala bulai. Binucleate Rhizoctonia merupakan jamur Rhizoctonia yang memiliki jumlah inti sel dua dan termasuk jamur non patogen.  Dalam  beberapa  penelitian  sebelumnya,  BNR  dapat  menekan  dan  menghambat pertumbuhan patogen yang menyerang suatu tanaman inang. Menurut Hare and Neate (2005) non patogen  BNR  secara  signifikan  dapat  mereduksi  daun  bergejala  yang  disebabkan  oleh Alternaria macrospora dibandingkan  dengan  perlakuan Benzothiadiazole sehingga  BNR  bisa  melindungi tanaman  kapas  dari  infeksi  jamur  patogen  baik  pada  akar  maupun  daun.  Menurut  Pascual et  al. (2000)  hipovirulen  BNR  dapat  menghambat  keparahan  penyakit  BLSB  secara  efektif  dari  infeksi Rhizoctonia  solani dengan  mekanisme  hipovirulensi.  Adanya  kolonisasi  BNR  pada  akar  tanaman diketahui  dapat  meningkatkan  ketahanan  penyakit  pada  tanaman  inang  sehingga  menghambat perkembangan penyakit (Muslim et al. 2003).

## 3.3  Tinggi tanaman jagung
Pertumbuhan tanaman diamati setiap seminggu sekali. Berdasarkan hasil pengamatan selama 35 HST (Tabel 4) dapat diketahui bahwa pemberian BNR mempengaruhi tinggi tanaman walaupun secara  tidak  signifikan  yaitu  tidak  menurunkan  tinggi  tanaman  dan  tidak  berbeda  nyata  dengan perlakuan kontrol. Hal ini serupa dengan penelitian Muslim et al. (2003) bahwa BNR bersifat non- patogen terhadap tanaman kedelai. Pada perlakuan pemberian P. maydis baik pada varietas Pertiwi maupun  Pioneer-21  tinggi  tanaman  berpengaruh  secara  signifikan  dapat  menurunkan  tinggi tanaman. Hal ini menjelaskan bahwa P. maydis merupakan jamur patogen yang menyerang daun pada tanaman  jagung  sehingga  menyebabkan  daun  kehilangan  klorofil  (klorotik).  Oleh  sebab  itu  daun sedikit demi sedikit berubah menjadi putih pucat. Akibatnya tanaman tidak bisa melakukan proses fotosintesis  secara  optimal  dan  mempengaruhi  tinggi  tanaman  (Kalqutqy  2021).  Hal  ini  serupa dengan  penelitian  Putri  et  al.  (2022)  yaitu  pemberian  isolat Trichoderma spp.  tidak  berpengaruh nyata terhadap tinggi tanaman jagung
Tabel 4.  Pertumbuhan tanaman jagung pada varietas Pertiwi dan Pioneer-21 pada 35 HST yang di inokulasikan P. maydis dan BNR Varietas Perlakuan Rerata pengamatan ± Std. Deviasi Tinggi tanaman Jumlah daun Berat basah Berat kering Pertiwi Kontrol 63,0 ± 5,94 cd 4,75 ± 0,50 bc 4,70 ± 1,36 bcd 0,50 ± 0,18 c BNR 57,0 ± 2,16 bc 4,75 ± 0,50 bc 4,42 ± 0,81 bcd 0,45 ± 0,05 bc P. maydis 36,75 ± 12,3 a 2,75 ± 1,25 a 2,40 ± 1,43 a 0,22 ± 0,09 a BNR + P. maydis 43,50 ± 8,06 a 3,50 ± 1,00 abc 2,92 ± 0,96 abc 0,30 ± 0,08 ab Pioneer- 21 Kontrol 73,75 ± 8,22 d 5,00 ± 0,82 c 5,12 ± 1,93 d 0,52 ± 0,15 c BNR 66,00 ± 7,07 cd 4,75 ± 0,50 bc 4,85 ± 0,40 cd 0,47 ± 0,05 bc P. maydis 39,00 ± 7,25 a 3,25 ± 1,50 ab 2,82 ± 1,23 ab 0,25 ± 0,10 a BNR + P. maydis 45,50 ± 9,88 ab 3,75 ± 1,25 abc 3,2 ± 0,84 abcd 0,37 ± 0,15 abc
Keterangan: Angka-angka yang diikuti dengan huruf yang sama pada tiap kolom menunjukkan tidak berbeda nyata berdasarkan uji Duncan’s pada P < 0.05.

## 3.4  Jumlah daun, berat basah dan berat kering tanaman jagung
Berdasarkan hasil pengamatan selama 35 HST (Tabel 4) dapat diketahui bahwa jumlah daun dengan  perlakuan  pemberian  BNR  tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  kontrol.  Namun pemberian  BNR  pada  perlakuan  BNR +  P.  maydis ,  BNR  mampu  meningkatkan  jumlah  daun  jika dibandingkan  dengan  perlakuan P.  maydis walaupun  tidak  secara  signifikan.  Perlakuan P.  maydis mempunyai  nilai  rata-rata  terendah  dibandingkan  dengan  perlakuan  lainnya  yang  menunjukkan bahwa infeksi P. maydis menurunkan jumlah daun jagung secara signifikan.
Pada  variabel  berat  basah  dan  berat  kering  perlakuan  BNR  tidak  berbeda  nyata  dengan perlakuan  kontrol  Namun  pemberian  BNR  pada  perlakuan  BNR +  P.  maydis ,  BNR  mampu meningkatkan berat basah maupun kering jika dibandingkan dengan perlakuan P. maydis walaupun tidak  secara  signifikan.  Hasil  pengukuran  berat  basah  dan  berat  kering  berbanding  lurus  dengan pengukuran tinggi tanaman dan jumlah daun. Menurut Agustamia et al., (2017) dan Djaenudin et al. (2020)  menyebutkan  bahwa  semakin  tinggi  persentase  intensitas  penyakit  bulai,  maka pertumbuhan tanaman jagung semakin tidak optimal sehingga ditunjukan melalui hasil pengukuran berat basah dan berat kering yang semakin rendah.
Bulai  merupakan  penyakit  pada  tanaman  jagung  yang  disebabkan  oleh  jamur Peronosclerospora  maydis .  Penyakit  ini  umumnya  menyerang  tanaman  muda  pada  fase  vegetatif. Gejala awal berupa bercak klorotik kecil yang kemudian berkembang menjadi garis memanjang yang sejajar dengan pertulangan daun. Selain itu terdapat lapisan tepung putih halus yang merupakan konidia patogen dan menandakan gejala menjadi sistemik. Konidia ini akan terlihat lebih banyak ketika pagi hari (Ulhaq & Masnilah 2019; Putri et al. 2022).
Hasil penelitian ini sama dengan penelitian sebelumnya yang menggunakan BNR sebagai agens pengendali hayati pada tanaman lainnya. Menurut Kasiamdari et al. (2002) pemberian BNR tidak  menurunkan  pertumbuhan  tanaman  kedelai.  Menurut  Erper et  al. (2013)  penggunaan  BNR sebagai  biokontrol  penyakit  rebah  semai  pada  timun  terdapat  perbedaan  signifikan  antara  besar panjang  akar  dan  berat  basah  antara  perlakuan  patogen  dan  perlakuan  patogen  +  BNR  dalam pertumbuhan timun. Menurut Muslim et al. (2003) BNR dapat meningkatkan pertumbuhan tanaman yaitu berat basah tomat, namun untuk mekanisme belum dijelaskan. Efek peningkatan pertumbuhan tanaman  dan  efek  penekanan  penyakit  menunjukkan  bahwa  isolat  BNR  berpotensi  sebagai  agen biokontrol.  Penelitian  lainnya  yang  menggunakan  agens  pengendali  hayati  sebagai  biokontrol penyakit bulai yaitu Putri et al. (2022) isolat Trichoderma spp. dapat menekan keterjadian penyakit dan meningkatkan pertumbuhan tanaman pada bobot basah akar.

## 4. KESIMPULAN
BNR mampu mengurangi kejadian dan keparahan penyakit pada tanaman jagung sebesar 72% pada varietas Pertiwi dan 67% pada varietas Pioneer-21, dan mampu meningkatkan pertumbuhan tanaman yang terinfeksi P. maydis pada 35 Hari Setelah Tanam.

## 5. UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis mengucapkan terima kasih kepada staff laboratorium Sistematika Tumbuhan Fakultas Biologi UGM, Staff Kebun Sawitsari dan petani di Desa Tirtoadi, Yogyakarta yang turut membantu dalam penelitian ini.

## 6. DAFTAR PUSTAKA
Adhi,  S.  R.,  F.  Widiantini,  &  E.  Yulia.  2019.  Metode  Inokulasi  Buatan  untuk  Menguji  Infeksi Peronosclerospora maydis Penyebab Penyakit Bulai Tanaman Jagung. Jurnal Agro . 6(1): 77–84.
Athipunyakom, P., L. Manoch, C. Piluek. 2004. Isolation and Identification of Mycorrhizal Fungi from Eleven Terrestrial Orchids. Kasetsart Journal (Natural  Science) . 38: 216–228. Bandoni, R.J. 2018. Safranin o as a rapid nuclear stain for fungi. Mycologia. 71: 873–874. Daryono, B.S., A. Parazulfa, & P. Purnomo. 2018. Uji Ketahanan Tujuh Kultivar Jagung ( Zea mays L.) terhadap Penyakit Bulai ( Peronosclerospora spp.). Biogenesis: Jurnal Ilmiah Biologi . 6(1):11–17. Djaenudin, N., Syafruddin, B. Patandjengi, & T. Kuswinanti. 2020. Short Communication: Potential Tests  of  Plant  Growth  Bacteria  for  the  Control  of Peronosclerospora  philipinensis in  Corn. Biodiversitas . 21(8): 3887–3898.
Erper,  I.,  G.H.  Karaca,  I.  Ozkoc,  &  M.  Turkkan.  2013.  Binucleate Rhizoctoni  repens Bernard  as  a Biocontrol  Agent  against  Damping-off  Disease  of  cucumber  Plants. The  European  Journal  of Plant Science and Biotechnology . 7(1): 58–61.
Hare,  S.  J  &  S.M.  Neate.  2005.  Nonpathogenic Binucleate  Rhizoctonia spp.  And  Benzothiadiazole Protect Cotton Seedlings Against Rhizoctonia Damping-Off and Alternaria Leaf Spot in Cotton. Biological Control . 95(9): 1030–1035.
Hikmahwati, H., T. Kuswinanti, & M. Melina. 2018. Karakterisasi Molekuler Isolat-Isolat Penyebab Bulai ( Peronosclerospora spp.) pada Tanaman Jagung Berbasis Simple Sequence Repeat (SSR). Agrovital. 3(1): 1–7.
Kalqutny, S.H., S. Pakki, A. Muis. 2020. Potensi Pemanfaatan Teknik Molekuler Berbasis DNA dalam Penelitian Penyakit Bulai pada Jagung. Agrosainstek . 4(1): 17–27.
Kasiamdari, R. S., S.E. Smith, F.A. Smith & E.S. Scott. 2002. Influence of the mycorrhizal fungus, Glomus coronatum , and soil phosphorus on infection and disease cause Rhizoctonia solani on mung bean ( Vigna radiata ). Plant and Soil . 238 (2): 235–244.
Katherine,  N.  Situmorang,  &  R.S.  Kasiamdari.  2011.  Isolation  and  Identification  of Rhizoctonia Associated with Phalaenopsis amabilis (L.) Blume Roots. Proceeding ICBB (The International Conference on Bioscience and Biotechnology ). 1(1): 39–44.
Khoiri, S., Abdiatun, K. Muhlisa, A. Amzeri, & D. Megasari. 2021. Insidensi dan Keparahan Penyakit Bulai  pada  Tanaman  Jagung  Lokal  Madura  di  Kabupaten  Sumenep,  Jawa  Timur,  Indonesia. Agrologia . 10(1): 17–24. Komalasari, W. B. 2021. Analisis Perdagangan Jagung Volume 10 Nomor 1B. Pusat Data dan Sistem Informasi Pertanian Sekretariat Jenderal Kementerian Pertanian. Jakarta. Hal. 17–18.
Mahfut.  2021.  Morphological  Identification  of  Mycorrhizal  Fungi  Isolated  from  Native  Orchid  in Indonesia. Jordan Journal of Biological Science . 14: 1031–1034.
Muslim, A., H. Horinouchi, & M. Hyakumachi. 2003. Biological control of Fusarium wilt of tomato with in greenhouse conditions. Mycoscience . 44:77–84.
Pakki, S., S. Saenong, & A. Muis. 2019. Pengaruh Kombinasi Varietas Tahan dan Fungisida Metalaksil terhadap  Insidensi  Penyakit  Bulai Peronosclerospora  philippinensis pada  Jagung. Penelitian Pertanian Tanaman Pangan . 3 (2): 91–99.
Pascual,  C.  B.,  A.D.  Raymundo,  &  M.  Hyakumachi.  2000.  Efficacy  of  Hypovirulent Binucleate Rhizoctonia sp.  to  Control  Banded  Leaf  and  Sheath  Blight  in  Corn. Journal  of  General    Plant Pathology . 66: 95–102.
Putri, R., J. Prasetyo, T. Maryono, & S.R. Dirmawati. 2022. Pengaruh Empat Isolat Trichoderma spp. terhadap  Penyakit  Bulai  dan  Pertumbuhan  Tanaman  Jagung  ( Zea  mays L.). Jurnal  Agrotek Tropika . 10(2): 177–185.
Rustiani, U. S., M.S. Sinaga, S.H. Hidayat, & S. Wiyono. 2015. Tiga Spesies Peronosclerospora Penyebab Penyakit Bulai Jagung di Indonesia. Berita Biologi . 14(1): 29–37. Sneh,  B.,  S.J.  Hare,  S.  Neate,  &  G.  Dijst.  1996. Rhizoctonia  Species:  Taxonomy,  Molecular  Biology, Ecology, Pathology and Disease Control . Kluwer Academic Publishers. London. pp. 50–52. Ulhaq, M. A. & R. Masnilah. 2019. Pengaruh Penggunaan Beberapa Varietas dan Aplikasi Pseudomonas fluorescens untuk Mengendalikan Penyakit Bulai ( Peronosclerospora maydis ) pada Tanaman Jagung ( Zea mays L.). Jurnal Pengendalian Hayati . 2(1): 1–9.
Widiantini, F., E. Yulia, & T. Purnama. 2015. Morphological Variation of Peronosclerospora maydis , the Causal Agent of Maize Downy Mildew from Different Locations in Java-Indonesia. Journal of Agricultural Engineering and Biotechnology . 3(2): 23–28.