## POTENSI ANTIBAKTERI DARI EKSTRAK POLYCHAETA Namanereis sp.

## POTENCY ANTIBACTERIA FROM ECTRACT OF POLYCHAETA Namanereis sp.
Ni Putu Purba Nava Vidyadhari Putri, Widianingsih Widianingsih * , Suryono, Retno Hartati
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Jacub Rais, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia Email: widia2506@gmail.com

## ABSTRAK
Namanereis  sp .  diklasifikasikan  kedalam  Famili  Nereididae,  Kelas  Polychaeta.    Penelitian  tentang Polychaeta di Indonesia masih merupakan penelitian dasar yang meliputi taksonomi, ekologi serta struktur komunitas. Penelitian tentang kandungan nutrisi, pakan alami dan kandungan bahan aktif masih jarang dilakukan.  Pada  penelitian  ini,  dilakukan  upaya  penelitian  tentang  potensi  antibakteri  dari  ekstrak Namanereis  sp. dengan  pelarut Etil  Acetate .  Oleh  karena  itu  penelitian  ini  memiliki  tujuan  untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak Namanereis sp terhadap bakteri Aeromonas hydrophila, Vibrio parahaemolyticus ,  dan Vibrio  harveyi .    Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah experiment laboratorium . Perlakukan konsentrasi ekstraksi Namanereis sp. Pada ekstrasi dengan pelarut etil acetate dipergunakan  perbandingan  1:4.  Bakteri  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah A.  hydrophila,  V. parahaemolyticus, dan V. harveyi yang diperoleh dari BBPAP Jepara.  Berdasarkan hasil penelitian, zona hambatan  tertinggi  yang  terbentuk  untuk V.  harvei pada  konsentrasi  100%  adalah  sebesar    3.18  ± 0.33cm 2 , zona hambatan untuk A. hydrophila adalah 2,96 ± 0,45cm 2 dan zona hambatan yang terbentuk untuk bakteri V. parahaemolyticus adalah 2,7 ± 0.91cm 2 . Penelitian ini menunjukkan ekstrasi Namaneries sp dengan menggunakan pelarut etil acetate dapat membentuk zona hambatan untuk setiap perlakukan konsentrasi ekstrak Namanereis sp yang diberikan (6,25, 12,5. 25, 50 dan 100%).
Kata kunci :  Antibakteri,  Aeromonas hydrophila,Vibrio parahaemolyticus, Vibrio harveyi

## ABSTRACT
Namanereis sp. is classified into the Family Nereididae, class Polychaeta. The research on Polychaeta in Indonesia, is still basic research covering taxonomy, ecology and community structure. The research on nutritional  content,  natural  feed  and  active  ingredient  content  are  still  rarely  done.  This  research  was conducted  on  the  antibacterial  agent  of Namanereis sp  extract  with  Ethyl  Acetate  as  solvent  against Aeromonas hydrophila, Vibrio parahaemolyticus and Vibrio harveyi bacteria. Therefore, this study aimed to  determine  the  antibacterial  activity  of  the Namanereis sp  extract  against A.  hydrophila,  V. parahaemolyticus and V. harveyi bacteria. The method used in this research was laboratory experiment. The treatment was carried out by treating the extraction concentration of Namanereis sp. 100 grams of wet sample of Namanereis sp. was extracted with 400 mL of Ethyl Acetate as a solvent. The bacteria used in  this  study  were A.  hydropila , V.  parahaemolyticus and V.  harveyi which  were  obtained  from  BBPAP Jepara. Based on the results of the study, the inhibition zone formed for V. harveyi at a concentration of 100% was 3.18 ± 0.32 cm 2 , the inhibition zone for A. hydrophila was 2,96 ± 0,45 cm 2 and the inhibition zone  formed  for V.  parahaemolyticus was  2,7  ±  0.91  cm 2 .  It  can  be  concluded  that  the  extraction  of Namaneries sp . using ethyl acetate solvent can inhibit zones for each given concentration treatment (6,25, 12.5, 25, 50 and 100%).
Keywords : Aeromonas hydrophila, Antibacteria  Vibrio parahaemolyticus, Vibrio harveyi

## PENDAHULUAN
Polychaeta  (cacing  laut)  adalah  salah satu  sumberdaya  pesisir  yang  banyak melimpah  di  perairan  Indonesia.  Beberapa spesies  dari  genus  Namaneries  dapat  hidup pada air tawar seperti pada gua-gua kapur dan
pada  perairan  payau  (Glasby et  al .,  2014). Pemanfaatan  Polychaeta  masih  terbatas sebagai umpan ikan.  Pada ekosistem bentik, Polychaeta  memiliki  peranan  yang  penting baik  itu  sebagai  sumber  makanan  bagi organisme  yang  lebih  besar  juga  berperanan sebagai penstabil sedimen (Kohlenbach, et al .,
2023). Family  Nereididae adalah  salah  satu spesies  dari  Polychaeta  yang  banyak ditemukan  di  Perairan  Indonesia  baik  di perairan  dangkal  maupun  dalam  (Widianwari dan Widianingsih, 2011; Glasby et al ., 2014). Beberapa  genus  yang  termasuk  dalam Family
Nereididae memiliki mekasisme kemikal sensori yang mampu untuk mendeteksi
keberadaan mukus yang dikeluarkan  oleh  ikan  (Schaum et  al, 2015). Selanjutnya  jenis  Polychaeta  ( Perinereis sp) mampu  memberikan  efek  perangsangan    sel telur  dan  peningkatan  ovulasi  dari  udang Penaeus monodon (Meunpol et al ., 2007 dan Meunpol et  al .,  2010).  Hal  ini  menunjukkan bahwa  Famili  Nereididae  dapat  dimanfaatkan sebagai sumber pakan alami bagi pemeliharaan  udang Penaeus  monodon . Besarnya  kandungan  protein  pada  Perinereis sp  (Famili  Nereididae)  yang  memiliki  nilai  di atas 50%  menunjukkan bahwa Perinereis sp dapat dijadikan sumber pakan bagi pemeliharaan udang Penaeus (Meunpol et al ., 2005).  Kecuali  mengandung  nilai  gizi  yang tinggi  pada    beberapa  spesies  Polychaeta, beberapa spesies juga mampu dijadikan agen antibakteria (Coutinho et al , 2017). Bakteri  adalah  salah  satu  penyebab penyakit  pada  manusia,  hewan  khususnya udang.  Bakteri Aeromonas hydrophila, Vibrio parahaemolyticus dan Vibrio harveyi merupakan  bakteri  yang  merugikan  bagi budidaya udang, karena dapat menyebabkan kematian pada udang.   Upaya untuk mencari agen  antibakteri  dari  alam  terus  dilakukan untuk  menekan  dampak  kerugian  jika memakai antibiotik kimia (Mayer et al ., 2011). Polychaeta Eunice  siciliences mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri  pada konsentrasi  100  ug/ml  (Jekti et  al .,  2008). Selanjutnya  Pan  (2019)  mengemukakan bahwa Perinereis sp  mengandung  senyawa Perinerin  (senyawa  yang  tersusun  dari  51 residu  asam  amino  yang  bersifat  hidrobilik. Perinereis sp  mampu  menujukkan  aktivitas antibakteri terhadap bakteri gram positif dan gram negatif (Pan. 2019).
Secara  taksonomi, Namanereis ,  sp Perinereis sp . dan Nereis sp. termasuk dalam famili  yang  sama  yaitu  Nereididae,  oleh karena  itu  tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  adanya  aktivitas  antibakteri  dari ekstrak Namanereis sp  terhadap  ketiga bakteri  yang  menyebabkan  kematian  pada udang  seperti Aeromonas  hydropils,  Vibrio parahaemolyticus, dan Vibrio harveyi .

## METODE PENELITIAN
Cacing  laut Namanereis sp.  didapatkan dari perairan Demak, Jawa Tengah, Indonesia.
Cacing  laut  terpilih  diambil  untuk  diamati morfolologinya  di  bawah  mikroskop  stereo. Cacing  laut  diawetkan  dengan  formalin  10% yang  telah  dicampur  dengan  pewarna rose bengal 0,025%.  Sampel  kemudian  disimpan dalam  botol  sampel  berisi  alkohol  70% (Apriyanti dan Tumiran, 2018).

## Ekstrasi Sampel
Alat  dan  bahan  penelitian  disterilisasi menggunakan  autoklaf  merk  Hirayama  HVE 50  pada  suhu  121 o C  dengan  tekanan  1  atm selama 20 menit. Alat  dan bahan yang telah disterilkan  dapat  langsung  digunakan  atau disimpan  untuk  menghindari  terkontaminasi (Ramadhani dan Wahyuni, 2020).
Ekstraksi Namanereis sp. mengacu pada Erviani et  al. (2019)  dengan  modifikasi. Sebelum  ekstraksi  sampel  dicuci  dengan  air tawar secara mengalir. Setelah itu, 100 gram sampel  basah  Namanereis  direndam  dalam 400  ml  Larutan  Etil  Acetate.  Ekstraksi dilakukan selama 24 jam pada suhu ruangan. Larutan hasil ekstraksi dihomogenkan dengan bantuan orbital  shaker. Setelah  24  jam, rendaman  disaring  menggunakan  kertas saring. filtrat yang didapatkan dan dipisahkan pelarutnya  dengan rotary  evaporator. Hasil ekstrak  sebanyak  7  ml  di freeze  dry 24  jam dahulu,  untuk  memastikan  tidak  ada  pelarut yang tersisa.

## Pembuatan Media Kultur Bakteri
Media  NA  (Merck)  dalam  penelitian digunakan  sebagai  media  uji  antibakteri. Media  NA  untuk  bakteri  air  laut  ( V. parahaemolyticus dan V.  harveyi )  dibuat dengan melarutkan 22 gr NA ke dalam 1 L air laut  yang  telah  disterilkan,  sedangkan  untuk bakteri air tawar/payau ( Aeromonas hydrophilas) dibuat dengan melarutkan 22 gr NA ke dalam 1 L akuades. Erlenmeyer untuk pembuatan  media  ditutup  rapat  dengan kapas, kemudian dihomogenkan dan dipanaskan dengan magnetic stirrer. Media NA disterilkan  dengan  autoklaf  pada  suhu  121 o C dengan tekanan 1 atm selama 20 menit.
Media  TCBS  dibuat  dengan  melarutkan 88,8  g  TCBS  (Oxoid)  dalam  1  L  aquades. Erlenmeyer  untuk  pembuatan  media  ditutup rapat dengan kapas, kemudian dihomogenkan dan  dipanaskan  dengan magnetic  stirrer. Media  TCBS  selanjutnya  disterilkan  dengan autoklaf  pada  suhu  121 o C  dengan  tekanan  1 atm  selama  20  menit.(Chen  et  al.,  2012) Media TCBS dalam penelitian digunakan untuk regenerasi bakteri V . parahaemolyticus dan V . harveyi. Media  GSP  (Merck)  dibuat  dengan melarutkan  45,0  g  GSP  dalam  1  L  aquades.
Erlenmeyer  untuk  pembuatan  media  ditutup rapat dengan kapas, kemudian dihomogenkan dan  dipanaskan  dengan magnetic  stirrer. Media  GSP  selanjutnya  disterilkan  dengan autoklaf  pada  suhu  121 o C  dengan  tekanan  1 atm  selama  20  menit.  Media  GSP  dalam penelitian digunakan untuk regenerasi bakteri A. hydrophilas ( Chiang et al., 2010 ) . Larutan  pengenceran Trisalt dibuat dengan melarutkan KCl 0,75 g , MgSO 4 6,94 g,    dan  NaCl  23,2  g  dalam  1  L  aquades. (Kharisma  dan  Manan,  2012).  Erlenmeyer untuk pembuatan trisalt ditutup rapat dengan kapas, kemudian dihomogenkan dan dipanaskan dengan magnetic stirrer. Selanjutnya  larutan  dituangkan  sebanyak  10 ml per tabung reaksi bertutup. Tabung reaksi ditutup tidak terlalu rapat dimasukkan dalam plastik  dan  disterilkan  dengan  autoklaf  pada suhu 121 o C dengan tekanan 1 atm selama 20 menit.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji  aktivitas  antibakteri  dilakukan dengan  metode  Kirby-Bauer  teknik disc diffusion ,  mengacu  pada  Jekti et  al. (2008) dengan modifikasi:
Bakteri  uji  yang  akan  digunakan disiapkan dengan metode streak / penggoresan,  tujuannya  untuk  mendapatkan bentuk  biakan  murni  atau  koloni  terpisah. Isolat bakteri dari Lab MKHA BBPBAP Jepara, diambil 1 ose secara aseptis, di streak pola zig zag dari rapat hingga renggang, 3-4 kuadran di  cawan  petri.  Cawan  petri  yang  sudah di streak dimasukkan  dalam  plastik  dengan kondisi  terbalik  kemudian  diinkubasi  selama 1x24 jam. Bakteri V. parahaemolyticus dan V. harveyi disiapkan  di  media  selektif  TCBS, sedangkan untuk bakteri Aeromonas hydrophilas disiapkan di media selektif GSP. Setelah 24 jam, bakteri diencerkan pada larutan pengenceran trisalt (untuk bakteri air laut)  dan  aqades  (untuk  bakteri  air  tawar) dengan  menyamakan  kekeruhannya  dengan
standar Mc Farland 0,5 (10 7 /ml). Pengenceran dilakukan dengan mengambil 1 koloni bakteri dahulu, kemudian dimasukkan dalam larutan pengenceran dan di vortex atau dihomogenkan. Selanjutnya, dilakukan penambahan  koloni  kembali  hingga  sama kekeruhannya  dengan  standar  Mc  Farland. Terakhir, cotton  swab dapat  ditambahkan  ke larutan  pengenceran.    Konsentrasi    yang digunakan dalam penelitian ini adalah 100%, 50%,  25%,  12,5%  dan  6,25%.  Variabel konsentrasi  dibuat  di  dalam microtube yang kemudian ditambahkan paper dics . Perendaman paper disc selama 5 menit.
Suspensi  bakteri A.  hydrophila di swab merata pada media NA  dan ditunggu selama 3  menit.  Kemudian paper  dics yang  telah direndam ditambahkan ke cawan petri. Setiap petri,  1  konsentrasi  dengan  3  pengulangan. Cara di atas diulangi kembali untuk bakteri V . parahaemolyticus dan V . harveyi. Kontrol positif  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  enrofloxasin  5µg,  sedangkan  kontrol negatif  menggunakan  aquades.  Setelah inkubasi 1 x 24 jam, hasil uji diamati dengan mengukur  diameter  zona  bening  yang terbentuk di sekitar paper dics.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengamatan  morfologi  dilakukan  untuk mengetahui kenampakan morfologi hewan uji dan  melakukan  identifikasi  tingkat  genus. Bagian-bagian  yang  teramati  di  bawah mikroskop  diantaranya  sepasang  parapodia dengan  setae  di  setiap  segmen  tubuh,  2 pasang  mata  yang  berukuran  kecil,  2  palp. (Gambar 1.)
Berdasarkan data di atas, menunjukkan bahwa aktivitas
antibateri
ekstrak Namanereis sp  dengan  konsentrasi  100,  50 dan  25%  paling  efektif  untuk  mematikan V. harveyi , lalu A. hydrophila dan yang terkahir adalah V . parahaemolyticus. (Gambar 2).
a.
b.
Gambar 2. Zona  hambatan  (cm 2 )  yang  terbentuk  pada  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak Namanereis sp.
Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan bahwa  kosentrasi  100%  memiliki  zona hambatan  yang  lebih  besar  dibandingkan konsentrasi  6,25,  .12,50,  25,  dan  50%.    Hal ini  jelas  menunjukkan  bahwa  ekstrak Namenereis sp  memiliki  zat  antibakteri terhadap A. hydrophilas, V. parahaemolyticus dan V.  harveyi .    Selanjutnya,  ekstrak Namanereis sp  dengan  pelarut etil  acetate menunjukkan  zona  hambatan  untuk E.  coli sebesar  13  ±  3,05  mm  dan  zona  hambatan yang terbentuk untuk S. aureus sebesar 14 ± 3,04 mm (Pringgenies et al., 2021). Nilai zona hambatan  yang  terbentuk  pada  ekstrak Perinereis cultrifera dengan pelarut methanol menunjukkan  nilai  8,0  mm  bagi S.  aureus (Elayaraja et al., 2019). Ini juga membuktikan bahwa  pelarut  etil  acetate  mempunyai kemampuan  lebih  tinggi  dalam  ekstraksi Polychaeta  dibanding-kan  dengan    pelarut lainnya seperti methanol, air dan N-Hexane. Berdasarkan pengamatan pada konsentrasi 100%,  diameter zona hambatan yang  terbentuk  untuk  bakteri V.  harvey i adalah  21±1,04  mm,  untuk  bakteri V. parahaemolyticus sebesar 19,33 ± 3,06 mm, dan untuk biakan baketri A. hydrophila 20,33 ±  0,58  mm  (Tabel  1).    Diameter  zona hambatan  yang  terbentuk  untuk V.  harveyi lebih  besar  daripada A.  hidrophila dan V. parahaemolyticus untuk  semua  konsentrasi dari  ekstrak Namanereis sp  yang  diekstrasi dengan  pelarut  etil  acetate.    Hal  ini  sesuai dengan pengamatan Sutton et al. (2011) yang mengemukakan bahwa uji aktivitas antibakteri  dikatakan  sangat  kuat  apabila
rata-rata diameter zona hambat lebih dari 20 mm,  aktivitas  kuat  jika  zona  hambatnya antara  10-20  mm,  aktivitas  sedang  jika diameter  hambatnya  antara  5-10  mm,  dan aktivitas  lemah  jika  zona  hambatnya  kurang dari  5  mm.    Zona  hambatan  yang  terbentuk untuk  bakteri A.  hydrophila dan V. parahaemolyticus lebih  kecil,  namun  sudah menampakkan  adanya  aktivitas  antibakteri yang terbentuk dengan melihat diamter zona hambatan yang terbentuk (Tabel 1.).
Zona  hambatan  yang  terbentuk  tidak cukup  besar  pada  pada  konsentrasi  ekstrak Namanereis sp  sebesar 6,25% pada biakan V para haemolyticus dan V. harveyi (7,67 ± 0,58 mm  dan  6,67  ±  0,58  mm),    hal  ini  tetap menunjukkan  adanya  aktivitas  antibakteri pada ekstrak Namanereis sp.  Pada biakan A. hydrophila, pada konsentrasi ekstrak Namaneris  sp senesar  6,25%  menunjukkan diameter  zona  hambatan  11,00  ±  1,00  mm (Tabel  1).    Ekstrak Namanereis sp  dengan pelarut  etil  acetate  mampu    menghambat biakan bakteri
A hidrophila , V. parahaemolyticus dan V. harveyi .  Bakteri A. hydrophila adalah  bakteri  yang  menyerang hewan  air  atau  zoonosis.  Bakteri  ini  dapat hidup di air payau hingga air tawar. Bakteri ini banyak  dijumpai  pada  perairan  budidaya seperti ikan dan udang. A. hydrophila adalah bakteri pathogen yang tumbuh dan berkembang  dari  banyaknya  sisa  pakan  ikan dan  udang  yang  tertumpuk.  Bakteri A. hydrophila resisten terhadap berbagai kondisi lingkungan,  seperti  perubahan  suhu,  pH (tingkat keasaman) dan faktor yang  mempengaruhi
0,07 0,73 2,08 2,56 3,18 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 6.25 12.25 25 50 100 Zona H am b at an c m^ 2) Kosentrasi Ekstrak (%) A. hidropilas V. parahaemolyticus
V. harveyi
Tabel  1 .  Zona  hambatan  (mm)    yang  dihasilkan  dari  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak Namanereis sp  dengan konsentrasi yang berbeda terhadap bakteri A. hidrophila, V. parahaemolyticus dan V. harveyi
Jenis Bakteri Diameter zona hambatan yang terbentuk (mm) Ulangan 6,25%  12,50% 25% 50% 100% K+ Aeromonas hydrophila 1 12 18 15 17 21 33 2 11 15 15 18 20 3 13 18 16 19 20 Rata-rata 12 17 15,33 18 20,33 SD 1,00 1,73 0,58 1,00 0,58 V. parahaemolyticus 1 8 12 15 13 20 20 2 8 13 14 14 22 3 7 11 13 14 16 Rata-rata 7,67 12 14 13,67 19,33 SD 0,58 1,00 1,00 0,58 3,06 V. harveyi 1 7 11 18 19 22 24 2 7 11 17 20 20 3 6 12 17 18 21 Rata-rata 6,67 11,33 17,33 19 21 SD 0,58 0,58 0.58 1,00 1,04
kelangsungan  hidup  (Awan et  al .,  2018). Dengan  demikian  pemberian  pakan  alami dengan    cacing Namanereis sp  baik  untuk pertumbuhan udang dan ikan karena adanya ketahanan  tubuh  dari  serangan  bakteri A. hydrophila. banyak  ditemukan  pada  udang Penaeus  maupun  udang  Vannamei  (Ghenem et al ., 2017).  Jika jumlah koloni dari bakteri tersebut    melimpah  pada  tambnak  udang maka akan mengakibatkan pertumbuhan dan produksi  udang  menjadi  menurun  dan menyebabkan  kematian  udang  secara  masal (Ghenem et al ., 2017).
Bukan  hanya  serangan  dari  bakteri A. hydrophila namun  juga  serangan  dari V. parahaemolyticus dan V.  harveyi .  Bakteri V. parahaemolyticus dan V.  harveyi termasuk dalam
bakteri
Gram-Negatif.
V.
parahaemolyticus dan V. Harveyi.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dengan terbentuknya  zona  hambatan  maka  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak Namaneries sp dengan pelarut etil asetat mampu menghambatan  pertumbuhan  bakteri A. hydrophila,
V. harveyi
dan V. parahaemolyticus .

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian  ini  dapat  berjalan  dengan baik  berkat  bantuan  para  teknisi  dari
Laboratorium  Biologi  Laut    serta  dari  pihak teknisi    Laboratorium  Manajemen  Kesehatan Hewan Aquatik (MKHA) BBPBAP Jepara.

## REFERENSI
Apriyanti,  D.,  &  Tumiran.  2018.  Teknik
Identifikasi Polychaeta di Delta Mahakam,  Kalimantan  Timur. Buletin Teknik Litkayasa , 16(1): 49-50
Awan, F., Dong, Y., Wang, N., Liu, J., Ma, K.,
& Liu, Y. 2018. The fight for invincibility: environmental stress response mechanisms and Aeromonas hydrophila . Microbial pathogenesis , 116: 135-145. Chen, M.X., Zeng, S., Li, H., & Chen, B.  2012. Composition  and  distribution  of  TCBS bacteria  groups  from  sediments  of Jiulong River estuary . Acta Microbiologica Sinica, 52(5): 637 － 644.
Chiang,  B.Y.,  Chen,  T.C.,  Pai,  C.H.,  Chou, C.C.,  Chen,  H.H.,  Ko,  T.P.,  Hsu,  W.H., Chang,  C.Y.,  Wu,  W.F.,  Wang,  A.H.J.  &
Lin,  C.H.,  2010.  Protein  S-Thiolation  by Glutathionylspermidine (GSP) The role of Escherichia coli Gsp Synthetase/ Amidase  in  Redox  Regulation. The Journal of Biological Chemistry, 285(33): 25345-25353.
Coutinho, M.C.L., Valeria L.T. & Santos, C.S.G.
2017.  A  Review  of  “Polychaeta” Chemicals  and  thei  Possible  Ecological Role. Journal  of  Echemical  Ecology ,  44: 72-94, DOI : 10.1007/s10886-017-0915-z
Erviani,  A.E.,  Arif,  A.R.  &  Nurfahmiatunnisa. 2019.  Analisis  Rendemen  dan  Skrining
Fitokimia  Ekstrak  Cacing  Laut Eunice siciliensis .  Jurnal  Ilmu  Alam  dan Lingkungan, 10(1):1-7.
Elayaraja,  E.,  Murugesan,  P.,  Vijayalakshmi, S.,  &  Balusubramanian,  T.  2010. Antibacterial and Antifungal Activities of Polychaeta Perinereis  cultifera.  Indian Journal  of  Marine  Sciences, 39(2):267-
261.
Ghenem,  L.,  Elhadi,  N.,  Alzahrani,  F.,  & Nishibuchi, M. 2017. Vibrio parahaemolyticus : a review on distribution,  pathogenesis,  virulence determinants  and  epidemiology. Saudi Journal of Medicine & Medical Sciences , 5 (2): p.93.
Jekti,  D.S.D.,  Purwoko,  A.A.  &  Muttaqin,  Z.
2008. Nyale Cacing Laut Sebagai Bahan Antibakteri. Jurnal  Ilmu  Dasar ,  9(1): 120-126.
Kharisma, A. & Manan, A. 2012. Kelimpahan
Bakteri  Vibrio  sp.  pada  air  pembesaran udang Vannamei ( Litopenaeus vannamei ) sebagai dekteksi dini serangan  penyakit  vibriosis. Jurnal Ilmiah  Perikanan  dan  Kelautan ,  4(2): 129-134
Lapage,  S.P,  Shelton,  J.E.  &  Mitchell,  T.G. 1970.  Methods  in  microbiology.  Eds. Norris  J.R  and  Ribbpons  D.W.  Vol.  3A. Academic Press. London. P.116.
Mayer,  A.M.S.,  Rodriguez,  A.D.,  Berlinck, R.G.S.  &  Fusetani,  N.  2011.  Marine
Pharmacology in 2007-8: Marine Compound with Antibacterial, Anticoagulant, Antifungal, Anti- inflammatory, Antimalarial, Antiprotozoal, Antituberculosis, and Antviral Activities; Affecting the Immune and  Nervous  System  and  Other Miscellaneous  Mechanisms  of  Action.
Comparative biochemistry and
Physiology Part C, 153: 191 -222.
Meunpol,  O.,  Iam-Pai,  S.,  Suthikrai,  W.  & Piyatiratitivorakul, S. 2007. Identification
of Progesterone and 17alfa- hydroxyprogesterone in polychaeta ( Perinereis sp.)  and  the  effects  of hormone  extracts  on  penaeid  oocyte development in vitro. Aquaculture , 270 : 485 – 492.  DOI  :  10.1016/j.aquaculture. 2007.05.031.
Meunpol, O., Meejing, P., & Piyattiratitivorakul,  S.  2005.  Maturation Diet  Based  on  Fatty  Acid  Content  For Male Penaeus  monodon (fabricius)
Broodstock. Aquaculture  Research ,  36: 1216-1225.
Meunpol,  O.,  Duangjai,  E.,  Yoonpun,  R.  & Piyatiratitivorakul, S. 2010. Detection of Prostaglandin E 2 in Polychaete Perinereis sp.  and  its  Effect  on Penaeus  monodon Oocyte  Development  in  vitro. Fisheries Science, 76 : 281-286. DOI : 10.1007/s1
2562-009-0208-8
Pan, W.H. 2019. Two New Species of Nereidids (Annelida,  Polychaeta)  from  Taiwan. Zootaxa, 4652(3):  54-556.  DOI  : 10.11646/zootaxa4652.3.10
Pringgenies, D.,  Sari,  E., Widianingsih, W., &
Nateewathana,  A.  2021.  Exploitation  of Bioactive Compounds Potency of Extract Namanereis  sp.  (polychaeta:  Annalida) as  an  Antibacterial  Agent  Against Escherichia  coli and Staphyllococcus aureus . Ilmu  Kelautan:  Indonesian Journal of Marine Sciences . 26(3): 182- 188.
Ramadhani, I., & Wahyuni. 2020. Dasar-dasar Praktikum Mikrobiologi. CV Pena Persada, Purwokerto, 85 hlm.
Sutton,  S.  2011.  Measurement  of  Microbial Cells  by  Optical  Density. Journal  of Validantion Technology, 17 (1) : 46-49. Widianwari,  P.  &  Widianingsih.  2011.
Komunitas Cacing Laut Dalam (Polychaeta) Selat Flores, Lamakera dan Alor,  Nusa  Tenggara  Timur. Ilmu Kelautan:  Indonesian  Journal  of  Marine Sciences, 16(4):219-228.