## Uji Aktivitas Antikolesterol Kombinasi Ekstrak Teh Oolong, Buncis Dan Kayu Manis

## Anticholesterol Activity of Oolong Tea, Green Bean and Cinnamon Extract Combination
Ahmad Fauzi * , Tanti Azizah Sujono, Azis Saifudin, Arifah Sri Wahyuni Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta, Jl. A. Yani Tromol Pos 1, Pabelan, Sukoharjo, Indonesia *E-mail: af585@ums.ac.id
Received: 28 April 2022; Accepted: 25 Juni 2022; Published: 27 Juni 2022

## Abstrak
Hiperlipidemia mempunyai peranan penting pada terjadinya penyakit kardiovaskular, serebrovaskular, dan vaskular perifer. Kadar kolesterol dan LDL yang tinggi dalam darah berisiko menyebabkan berbagai macam penyakit seperti aterosklerotis, disfungsi pankreas dan gangguan ginjal. Sedangkan kadar trigliserida yang tinggi dapat menyebabkan gangguan fungsi hati, pankreas dan ginjal.  Buncis,  teh oolong  dan  kayu manis adalah  tanaman  yang  bisa  menurunkan  kadar  kolesterol.  Teh  oolong  mengandung  katekin,  buncis mengandung  fitosterol  dan  kayu  manis  mengandung  sinamaldehid.  Penetapan  kadar  metabolit  sekunder ekstrak dilakukan dengan menggunakan metode Liquid Chromatography – Mass Spectroscopy (LC-MS). Uji aktivitas dilakukan dengan 30 ekor tikus putih galur Wistar yang dibagi menjadi 6 kelompok uji. Kelompok kontrol normal diberi pelakuan CMC-Na tanpa induksi pakan hiperkolesterol, kelompok kontrol positif diberi perlakuan dengan simvastatin 0,4 mg/KgBB, kelompok kontrol negatif diberi perlakuan dengan CMC-Na, kelompok uji 1, 2 dan 3 diberi perlakuan ekstrak kayu manis, teh oolong dan buncis berurut-turut (150:50:50 mg/KgBB), (50:150:50 mg/KgBB) dan (50:50:150 mg/KgBB). Kandungan metabolit yang terdeteksi yaitu sinamaldehid  pada  kayu  manis  sampai  10%,  katekin  pada  teh  oolong  sampai  12%  dan  stigmasterol  pada buncis sebanyak 3,4%. Hasil yang diperoleh kelompok uji 1 dan kelompok uji 2 dapat menurunkan kadar kolesterol dan trigliserida (p<0.05). Semua kelompok uji tidak berpengaruh signifikan terhadap kadar HDL dan LDL.
Kata Kunci : Teh oolong, buncis, kayu manis, kolesterol, LC-MS

## Abstract
Hyperlipidemia has an important role in the occurrence of cardiovascular, cerebrovascular, and peripheral vascular diseases. High cholesterol and LDL levels in the blood are at risk of causing various diseases such as  atherosclerosis,  pancreatic  dysfunction  and  kidney  disorders.  Meanwhile,  high  triglyceride  levels  can cause impaired liver, pancreas and kidney function. Green bean, oolong tea and cinnamon are plants that can lower cholesterol levels. Oolong tea contains catechins, Green Bean contain phytosterols and cinnamon contains cinnamaldehyde. Determination of secondary metabolite levels of extracts was carried out using the Liquid  Chromatography  –  Mass  Spectroscopy (LC-MS) method.  The  activity test  was  carried out  with 30 Wistar white rats which were divided into 6 test groups. The normal control group was treated with CMC- Na  without  feeding  hypercholesterolemia,  the  positive  control  group  was  treated  with  simvastatin  0.4 mg/KgBW, the negative control group was treated with CMC-Na, the test groups 1, 2 and 3 were treated with cinnamon extract, oolong tea and green bean, respectively (150:50:50 mg/KgBW), (50:150:50 mg/KgBW) and (50:50:150 mg/KgBW). The detected metabolite content was cinnamaldehyde in cinnamon up to 10%, catechins in oolong tea up to 12% and stigmasterol in beans as much as 3.4%.The results obtained by test group  1  and  test  group  2  can  reduce  cholesterol  and  triglyceride  levels  (p<0.05).  All  test  groups  had  no significant effect on HDL and LDL levels.
Keywords: Oolong tea, green beans, cinnamon, cholesterol, LC-MS

## PENDAHULUAN
Hiperlipidemia mempunyai peranan penting pada terjadinya penyakit kardiovaskular, serebrovaskular, dan vaskular perifer.  Menurut  laporan American  Heart Association menunjukkan prevalensi
hiperkolesterol  di  seluruh  dunia  mencapai 28,9 juta jiwa (Al-Zahrani et al., 2021). Lipid beredar  sebagai  lipoprotein,  terdiri  dari kolesterol, trigliserida, low density lipoprotein (LDL), dan high density lipoprotein  (HDL).  (Zhyvotovska  et  al., 2019).  Lipoprotein  berfungsi  mengangkut kolesterol dan trigliserida ke tempat jaringan dan  organ  yang  membutuhkan  (Jiang  et  al., 2019; Kim et al., 2016). Kadar kolesterol dan low  density  lipoprotein  (LDL)  dalam  serum yang  tinggi  disebut  sebagai  hiperlipidemia, hal  ini  menyebabkan  risiko  mengalami penyakit kardiovaskular seperti aterosklerotis, disfungsi pankreas dan gangguan  ginjal  (Lee  and  Siddiqui,  2019). Sedangkan  kadar  trigliserida  yang  tinggi dapat  menyebabkan  gangguan  fungsi  hati, pankreas dan ginjal (Laufs et al., 2020).
Buncis  adalah  salah  satu  jenis  kacang yang  secara  in  vivo  terbukti  menurunkan kadar  kolesterol  (Wahjuni  et  al.,  2016; Idacahyati et al., 2021; Rodríguez et al., 2022; Alam et al., 2016), Metabolit aktif dari buncis (Phaseolus vulgaris) salah satunya stigmasterol  dan  mampu  menurunkan  kadar kolesterol hewan uji hingga 35% (Wahjuni et al., 2016; Kim et al., 2016; Jiang et al., 2019; Chávez-Santoscoy et al., 2014). Sinamaldehid  yang  terkandung  dalam  kayu manis  (Cinnamomum  zeylanicum)  mampu menurunkan kadar kolesterol hingga 2 mmol (Li  et  al.,  2012;  Pishdad  et  al.,  2018; Abdelgadir et al., 2020). Katekin pada ekstrak teh  (Camellia  sinensis)  mampu  menurunkan kolesterol pada wanita hingga 4,1% (Samavat et al., 2016; Deng et al., 2021; Tilokwattanothai et al., 2017; Sae-tan, 2016). Teh  oolong,  buncis  dan  kayu  manis mempunyai  kandungan  metabolit  sekunder yang  berbeda  akan  tetapi  mempunyai  efek yang  sama.  Kombinasi  ekstrak  the  oolong, buncis  dan  kayu  manis  dapat  memberikan efek  sinergisme  dalam  menurunkan  kadar kolesterol total.

## METODE PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  spektrofotometer  klinis  ( Stardust MC15,  USA ),  UPLC-MS  ( Waters,  USA ), kolom Waters  CSH-C18 1.7 µm  2,1x50mm, rotary  evaporator  ( IKA  RV10 ),  timbangan analitik ( OHAUS Pioneer ) dengan sensitivitas 0,0001 g, pipet mikro ( Socorex ) ukuran 50 – 1000 µl, sentrifuge ( Effendorf Minispin ),  pipa hematokrit, glassware .
Bahan  yang  digunakan  adalah  buncis, kayu  manis  dan  teh  oolong  yang  didapatkan dari Pasar Gede, Surakarta. tikus jantan galur Wistar diperoleh  dari  Fakultas  Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta, minyak  jelantah,  pakan  pellet  standar,  air, etanol  96%  teknis  yang  digunakan  sebagai cairan  penyari.  asetonitril,  metanol,  asam format  dan  aquadest  pro  LC-MS,  reagen  kit kolesterol DSi, reagen kit trigliserida DSi, dan reagen HDL presipitant DSi.

## Pembuatan Ekstrak
Teh  oolong,  buncis  dan  kayu  manis kering  masing-masing  ditimbang  sebanyak 500  gram  dimaserasi  selama  5  hari menggunakan etanol 96% sebanyak 3,75 liter. Filtrat  yang  didapat  diuapkan  dengan menggunakan rotary evaporator dengan suhu 70°C  sampai  kurang  lebih  volume  tersisa seperempatnya.  Filtrat  dituang  dalam  cawan porselein dan dilanjutkan pemanasan dengan waterbath suhu  70°C  sampai  terbentuk ekstrak kental.

## Penetapan Kadar Metabolit Ekstrak
Penentuan kurva baku sinamaldehid dan stigmasterol dilakukan dengan membuat seri konsentrasi  dari  3,125  µg/mL  sampai  500 µg/mL.  Untuk  standar  katekin  dibuat  seri konsentrasi  katekin  0,1  µg/mL  sampai  0,5 µg/mL. Penetapan kadar sinamaldehid dalam ekstrak kayu manis, dibuat larutan uji dengan konsentrasi  0,5  µg/mL  dimasukkan  dalam reservoir  sampel  vial  dan  diukur  kadar sinamaldehid  menggunakan  LC-MS  metode ESI  ( Electrospray  Ion) positif  dengan parameter cone voltage 13 mV dan capillary voltage 3,50 kV. Fase gerak yang digunakan adalah  metanol:air  (80:20). Parents  ion dari sinamaldehid 138 m/z (Haddouchi, 2013).
Penetapan  kadar  katekin  dalam  ekstrak teh oolong konsentrasi larutan uji 5,0 µg/mL ditetapkan  kadarnya  dengan  LC-MS  metode ESI Positif dengan parameter cone voltage 20 mV, capillary  voltage 3,50  mV.  Fase  gerak yang  digunakan  adalah  metanol:air  (80:20). Parents ion dari katekin yaitu 291,9 m/z (Zhu et al. , 2012).
Pengujian
selanjutnya adalah kuantifikasi  fitosterol  dalam  percobaan  ini adalah  stigmasterol  pada  ekstrak  buncis. Mode  ionisasi  yang  digunakan  adalah  ESI Negatif, cone  voltage 25  mV, capillary voltage 4,50 kV. Fase gerak yang digunakan adalah  metanol:air  (80:20). Parents  ion dari stigmasterol diketahui 385,3 m/z (Jiang et al. , 2019).

## Uji Aktivitas Antikolesterol
Tiga  puluh  (30)  ekor  tikus  putih  jantan bobot  160–180  gram,  umur  2-3  bulan  yang diperoleh  dari  Laboratorium  Farmakologi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Tikus diaklimatisasikan  selama  seminggu  dengan diberikan pakan standard yang seimbang dan minum ad libitum , dipelihara dalam kendang yang  diatur  suhu  (25±1°C)  dengan  siklus pencahayaan  gelap/terang  12  jam  gelap/12 jam  terang.  Prosedur  telah  mendapat persetujuan  dari  komisi  etik  penelitian kesehatan  (KEPK)  FK  UMS  dengan  nomor surat KEPK (No. 750/C.1/KEPK- FKUMS/X/2017).
Tikus dibagi dalam 6 kelompok berturut- turut  sebagai  berikut  kelompok  kontrol normal  diberi  pelakuan  CMC-Na,  kontrol positif  diberi  simvastatin  0,4  mg/kgBB, kontrol negatif diberi CMC-Na, kelompok uji 1, kelompok uji 2 dan kelompok uji 3 diberi perlakuan ekstrak kayu manis, teh oolong dan buncis  masing-masing  dengan  perbandingan (150:50:50 mg/kgBB), (50:150:50 mg/kgBB) dan (50:50:150 mg/KgBB). Perlakuan diberikan mulai hari ke-41 selama 14 hari.
Pembuatan  model  tikus  hiperkolesterol diinduksi dengan pakan tinggi lemak  (Tabel 1) dan minyak jelantah 2 mL per tikus selama 40  hari.  Kadar  kolesterol  total,  HDL,  LDL
dan trigliserida ditetapkan pada awal sebelum induksi ( baseline ), induksi hari ke-40 dan 14
hari setelah perlakuan. Sampel darah diambil melalui vena plexus retroorbitalis . Penetapan kadar  tersebut  dengan  metode  enzimatik kolorimetri.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Penetapan kadar metabolit sekunder
Penetapan  kadar  metabolit  sekunder dilakukan dengan metode Liquid Chromatography-Mass  Spectroscopy  (LC- MS) .  Metabolit  sekunder  yang  ditetapkan adalah  sinamaldehid  pada  ekstrak  kayu manis,  katekin  pada  ekstrak  teh  oolong,  dan stigmasterol  pada  ekstrak  buncis.  Pengujian menggunakan  mode Single  Ion  Reaction (SIR)  dengan  membandingkan mass-to- charge  ratio (m/z)  ekstrak  dengan  m/z  dari baku metabolit. Pengkondisian LC-MS untuk kuantifikasi  sinamaldehid  pada  ekstrak  kayu manis  adalah  mode  ionisasi Electrospray Positive, cone  voltage 13  mV, capillary voltage 3,50 mV. Fase gerak yang digunakan adalah  metanol:air  (80:20). Parents  ion dari sinamaldehid 138 m/z.
Katekin  yang  terkandung  pada  ekstrak teh oolong ditetapkan dengan pengkondisian mode  ionisasi Electrospray  Positive , cone voltage 20  mV, capillary  voltage 3,50  mV. Fase  gerak  yang  digunakan  secara  isocratic dengan  metanol:air (80:20), Parents ion dari katekin didapatkan 291,9 m/z.
Kuantifikasi  fitosterol  dalam  percobaan ini  adalah  stigmasterol  pada  ektrak  buncis. Mode  ionisasi  yang  digunakan  adalah Electrospray Positive , Cone Voltage 45 mV, Capillary  voltage 4,50  kV.  Fase  gerak  yang digunakan adalah metanol:air (80:20).
Tabel 1. Komposisi pakan hiperkolesterol No Bahan Jumlah 1 Pakan Standar Pellet 500 gram 2 Minyak jelantah 100 mL 3 Mentega Curah 50 gram
Parents ion dari stigmasterol didapatkan 411 m/z.
Hasil  pengukuran  baku  sinamaldehid, katekin dan stigmasterol mempunyai linieritas  yang  cukup  baik.  Namun,  hasil pengukuran  ekstrak  didapatkan  puncak  yang masih melebar. Kondisi ini disebabkan karena pengukuran  belum  pada  kondisi  optimal. Pengukuran  dengan  mode  SIR  hanya  dapat mengukur  m/z  ion  induk  dari  senyawa. Sebaiknya untuk pengukuran senyawa menggunakan mode Multi Reaction Monitoring  (MRM) dengan  memperhatikan ion  induk  dan  fragmen  ion  dari  senyawa target.  Selain  itu,  pada  fase  gerak  perlu dioptimasi  kembali  dengan  metode  gradien agar  didapatkan  pemisahan  yang  baik  dan meminimalisir  terjadinya  pelebaran  puncak. Penetapan  kadar  metabolit  diperoleh  ekstrak teh oolong mengandung katekin 12%. ekstrak kayu  manis  mengandung  sinamaldehid  10% dan ekstrak buncis mengandung stigmasterol 3,4%.

## Uji Aktivitas Antikolesterol
Komposisi diet tinggi lemak yang terdiri dari  100  gram  minyak  jelantah  dan  mentega curah merupakan sumber asam lemak bebas. Minyak  jelantah  yaitu  minyak  yang  sudah digunakan  untuk  penggorengan  berulang- ulang,  minyak  goreng  jenis  ini  mengandung asam  lemak  jenuh  ( saturated  fatty  acid )  dan asam  lemak  tak  jenuh  dalam  bentuk  ikatan tunggal  maupun  majemuk.  Berdasarkan penelitian yang dilakukan sebelumnya (Fauziah et  al. 2019)  minyak  jelantah mengandung  asam  lemak  bebas  tak  jenuh yang  tinggi.  Sedangkan  mentega  curah merupakan  lemak  hewani  yang  banyak mengandung lemak jenuh dan tak jenuh serta kolesterol  (Górska-Warsewicz et  al. ,  2019). Diet  tinggi  lemak  dimaksudkan  untuk meningkatkan  kadar  kolesterol  tikus,  lemak yang diberikan akan diabsorbsi melalui usus. Pemberian diet tinggi lemak akan meningkatkan  konsentrasi  kilomikron  dalam plasma  sebesar  1-2  persen  dari  total  plasma, yang  nantinya  mengangkut  lipid  yang terbentuk  dari  proses  pencernaan  dan
penyerapan  menuju  ke  hati.  Jika  terjadi peningkatan  kolesterol  total  maka  kadar trigliserida  dan  LDL  juga  akan  meningkat. dan  kemungkinan  kadar  HDL  akan  turun (Kaur, 2014; Khan et al. , 2019).
Pengambilan  sampel  darah  dilakukan dengan  mengambil  darah  melalui  vena  mata ( plexus  retroorbitalis )  (Van  Herck et  al. , 2001). Pengambilan darah dengan metode ini mempunyai  keunggulan  volume  darah  yang didapatkan lebih banyak dan waktu pengambilan  darah  yang  lebih  singkat dibandingkan  dengan  pengambilan  darah melalui  vena  ekor.  Untuk  pengukuran kolesterol  total,  trigliserida  dan  HDL dibutuhkan kurang lebih 300 µl. Darah yang diperoleh  didiamkan  terlebih  dahulu  selama 10  menit  agar  serum  darah  memisah kemudian disentrifugasi 6000 rpm selama 15 menit  untuk  memisahkan  serum  darah. Pengukuran LDL dilakukan dengan perhitungan menggunakan rumus Friedewald (Sonsok et al. , 2020; Friedewald et al. , 1972). Persamaan rumus Friedelwald adalah sebagai berikut :
LDL=  Kolesterol  Total  –  HDL  -
𝑇𝑟𝑖𝑔𝑙𝑖𝑠𝑒𝑟𝑖𝑑𝑎 5 ……(1)
Hasil  pengukuran baseline rata-rata kadar kolesterol didapatkan 77,8 ± 9,2 mg/dL. Rata-rata kadar awal trigliserida sebesar 61,2 ± 15 mg/dL. Kadar HDL awal sebesar 22,3 ± 2,6  mg/dL.  Kemudian  dengan  perhitungan rumus  friedelwald  dihitung  kadar  LDL sebesar 37 ± 5,5 mg/dL (Gambar 1).
Setelah perlakuan selama 40 hari dengan pakan  yang  dicampur  minyak  jelantah  dan mentega terjadi peningkatan kadar kolesterol sampai  dengan  221,8%,  kadar  trigliserida naik sampai dengan 307,8%, kadar HDL naik sampai 165,7% dan LDL naik sampai dengan 240% (p<0,05).
Setelah  14  hari,  diukur  kembali  kadar kolesterol,  trigliserida,  HDL  dan  LDL  nya. Hasil  uji  kadar  kolesterol  pada  hewan  uji terdapat  pada  Gambar  1.  Kelompok  kontrol positif mengalami penurunan kadar kolesterol yang paling besar dengan 45,6 %. Kelompok
kontrol normal mengalami sedikit peningkatan  kadar  kolesterol  dengan  0,2%. Kelompok kontrol negatif mengalami kenaikan  sebesar  28,7  %,  kelompok  uji  1 mengalami penurunan 27,4 %, kelompok uji 2  mengalami  penurunan  20,7  %  dan kelompok uji 3 mengalami penurunan sebesar 6,3 %. Distribusi data kadar kolesterol setelah perlakuan  ditemukan  tidak  normal  dengan signifikansi  <0,05  maka  dari  itu  digunakan statistik  non  parametrik.  Untuk  uji  variasi antar  sampel  digunakan  uji Kruskall-Wallis dan  uji  perbedaan  antara  sampel  dengan sampel  menggunakan  uji Mann-Whitney . Pada  uji Kruskall-Wallis antara  sampel mempunyai  perbedaan  yang  bermakna. Kemudian  pada  uji Mann-Whitney yang mempunyai  perbedaan  bermakna  dalam menurunkan kadar kolesterol adalah Kelompok kontrol positif, kelompok uji 1 dan kelompok uji 2.
Selanjutnya  pada  uji  normalitas  data kadar  trigliserida  akhir  didapatkan  data terdistribusi  normal.  Analisis  data  untuk kadar  trigliserida  menggunakan ANOVA dilanjutkan post-hoc  test  Tukey .  Kelompok kontrol normal dan kontrol negatif mengalami kenaikan kadar trigliserida masing-masing 4,9 % dan 12,1 %. Kelompok kontrol  positif  terjadi  penurunan  kadar trigliserida  42,2  %,  Kelompok  uji  1 mengalami penurunan kadar triglisrida paling besar  dengan  52,7  %,  Kelompok  uji  2 mengalami penurunan 27,6 % dan kelompok uji 3 mengalami penurunan kadar trigliserida 36,8%.  Hasil  uji  parameter  trigliserida terdapat pada Gambar 2. Dari hasil pengujian statistik,  kelompok  uji  1  yang  memberikan perbedaan bermakna terhadap kadar trigliserida.  Hal  ini  disebabkan  karena kandungan  sinamaldehid  yang  tinggi  dalam ekstrak  kayu  manis  juga  berpengaruh terhadap  kadar  trigliserida.  Sinamaldehid menurunkan kadar trigliserida dengan mekanisme meningkatkan uptake trigliserida dan  asam  lemak  tak  jenuh  pada  jaringan adipose  (Goldberg et  al. ,  2009;  Neto et  al. , 2020).
Hasil  pengukuran  kadar  HDL  dan  LDL sebelum  dan  sesudah  perlakuan  tercantum pada Gambar 3 dan Gambar 4. Kelompok uji 3  mempunyai  efektifitas  peningkatan  HDL terbesar  sebanyak  60%,  kelompok  kontrol negatif  juga  mengalami  kenaikan  sampai dengan  21,1  %,  kontrol  positif  mengalami sampai  dengan  31,0  %,  Kelompok  uji  1 mengalami kenaikan sampai dengan 15.3 %, Kelompok uji 2 mengalami kenaikan sampai dengan 21,0 %. Pada uji normalitas data, data kadar  HDL  akhir  terdistribusi  normal sehingga bisa dilanjutkan dengan uji one way ANOVA.  Hasil  dari  uji one  way ANOVA didapatkan harga p>0,05 yang diartikan tidak ada perbedaan bermakna antar kelompok uji. Jadi tidak ada perbedaan antara kelompok uji dengan kelompok kontrol.
Untuk data perubahan LDL yang tertera pada  Gambar  4,  kelompok  kontrol  negatif mengalami kenaikan LDL sebanyak 40,6 %. Kelompok kontrol positif mengalami penurunan kadar LDL terbesar dengan 80,0%, kelompok  uji  1  mengalami  penurunan  LDL sampai  dengan  37,3  %,  kelompok  uji  2 mengalami penurunan sampai dengan 35,5 % dan  kelompok  uji  3  mengalami  penurunan sampai dengan 14,5 %. Setelah dilakukan uji statistik  didapatkan  tidak  ada  perbedaan bermakna antara kelompok uji dan kelompok kontrol.
Kombinasi  ekstrak  teh  oolong,  buncis dan  kayu  manis  secara  sinergis  mampu menurunkan  kadar  kolesterol  total  dan trigliserida  pada  kelompok  uji  1,  dan kolesterol  total  pada  kelompok  uji  2. Kombinasi  3  ekstrak  ini  tidak  berpengaruh terhadap kadar LDL dan HDL dari hewan uji. Penurunan  kadar  kolesterol  diduga  karena adanya kandungan sinamaldehid pada ekstrak kayu manis,  seperti yang dilaporkan oleh (Li et al. , 2012). Sinamaldehid dapat menurunkan kadar  kolesterol  pada  pasien  hiperlipidemia. Sinamaldehid  menurunkan  kadar  kolesterol dengan  mekanisme  menghambat  enzim HMG-CoA.  Pada  penelitian  sebelumnya, hasil  isolat  sinamaldehid  dari  ekstrak  kayu manis  dapat  menghambat  enzim  HMG-CoA
Reduktase dengan IC 50 153,07 ± 8,38 µg/mL reduktase (Abeysekera et al. , 2017). Penurunan  kolesterol  juga  dipengaruhi  oleh katekin  yang  terkandung  dalam  ekstrak  the oolong. Kandungan katekin dalam teh oolong memberikan  hambatan  pada  enzim  HMG- CoA  Reduktase  (Adelina,  2018).  Katekin menghambat  HMG-CoA  reduktase  dengan IC 50 2,4 µg/mL (Nanang et al. , 2021). HMG- CoA Reduktase adalah enzim yang mengubah HMG-CoA  menjadi  asam  mevalonat  yang menginisiasi  sintesis  kolesterol  (Cherng, 2017).  Dengan  penghambatan  enzim  HMG- CoA  reduktase  maka  sintesis  kolesterol dihambat  yang  berakibat  menurunnya  kadar kolesterol.  Selain  sinamaldehid  dan  katekin,
stigmasterol  pada  ekstrak  buncis  juga  dapat menurunkan kadar kolesterol dengan mekanisme aksi meningkatkan uptake fitosterol dan menurunkan absorbsi kolesterol (Batta et al. , 2006).

## KESIMPULAN
Kombinasi  ekstrak  kelompok  uji  1 dengan  dosis  kayu  manis  150  mg/kgBB,  teh oolong 50 mg/kgBB dan buncis 50 mg/kgBB memberikan  efek  penurunan  kolesterol  dan trigliserida  yang  paling  optimal.  Kandungan metabolit  sinamaldehid  pada  kayu  manis adalah 10%, katekin pada teh oolong sebesar 12%  dan  stigmasterol  pada  buncis  sebanyak 3,4%.

## Daftar Pustaka
Abdelgadir  A.,  Hassan  H.,  Eltaher  A.,  Mohammed  GA  K.,  Mohammed  AA  L.,  TB  H.,  TH Aboalbashar, TH Aalim, AM A. dan AK M., 2020, Hypolipidemic Effect of Cinnamon (Cinnamomum  zeylanicum)  Bark  Ethanolic  Extract  on  Triton  X-100  induced Hyperlipidemia in Albino Rats, Medicinal & Aromatic Plants, 9 (3), 531-537.
Abeysekera  W.P.K.M.,  Arachchige  S.P.G.  dan  Ratnasooriya  W.D.,  2017,  Bark  Extracts  of Ceylon  Cinnamon  Possess  Antilipidemic  Activities  and  Bind  Bile  Acids  In  Vitro,
Gambar 1. Kadar Kolesterol sebelum dan sesudah perlakuan Gambar 2.Kadar Trigliserida sebelum dan sesudah perlakuan Gambar 3.Kadar HDL sebelum dan sesudah perlakuan Gambar 4.Kadar LDL sebelum dan sesudah perlakuan
Evidence-based Complementary and Alternative Medicine, 2017 (3), 139–148.
Adelina R., 2018, Mekanisme Katekin Sebagai Obat Antidislipidemia (Uji In Silico), Buletin Penelitian Kesehatan, 46 (3), 147–154.
Al-Zahrani  J.,  Shubair  M.M.,  Al-Ghamdi  S.,  Alrasheed  A.A.,  Alduraywish  A.A.,  Alreshidi F.S., Alshahrani S.M., Alsalamah M., Al-Khateeb B.F., Ashathri A.I., El-Metwally A. dan Aldossari K.K., 2021, The prevalence of hypercholesterolemia and associated risk factors in  Al-Kharj  population,  Saudi  Arabia:  a  cross-sectional  survey,  BMC  Cardiovascular Disorders, 21 (1), 1–8.
Alam S., Siddiq A. dan Mohtashhemul Hasan M., 2016, Hypolipidemic Effect of Phaseolus Vulgaris  L  .  At  Various  Doses  and  Its  Impact  on  Cardiovascluar,  World  Journal  of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 5 (11), 163–174.
Batta A.K., Xu G., Honda A., Miyazaki T. dan Salen G., 2006, Stigmasterol reduces plasma cholesterol  levels  and  inhibits  hepatic  synthesis  and  intestinal  absorption  in  the  rat, Metabolism: Clinical and Experimental, 55 (3), 292–299.
Chávez-Santoscoy R.A., Tovar A.R., Serna-Saldivar S.O., Torres N. dan Gutiérrez-Uribe J.A., 2014, Conjugated and free sterols from black bean (Phaseolus vulgaris L.) seed coats as cholesterol  micelle  disruptors  and  their  effect  on  lipid  metabolism  and  cholesterol transport in rat primary hepatocytes, Genes and Nutrition, 9 (1), 367.
Cherng  S.,  2017,  HMG-CoA  reductase  (  3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA  reductase  )( HMGR ), The Journal of American Science, 4(3), January 2008, 1–4.
Deng X., Hou Y., Zhou H., Li Y., Xue Z., Xue X., Huang G., Huang K., He X. dan Xu W., 2021, Hypolipidemic, anti-inflammatory, and anti-atherosclerotic effects of tea before and after microbial fermentation, Food Science and Nutrition, 9 (2), 1160–1170.
Fauziah S., Syech R. dan Sugianto, 2019, Pengujian Kualitas Minyak Goreng Kemasan, Curah yang Beredar di Daerah Panam Pekanbaru dan Minyak Goreng Jelantah Berdasarkan Sifat Fisika, Universitas Riau, 53 (9), 1–6.
Friedewald  W.T., Levy  R.I. dan Fredrickson D.S., 1972, Estimation  of the concentration of low-density  lipoprotein  cholesterol  in  plasma,  without  use  of  the  preparative ultracentrifuge., Clinical chemistry, 18 (6), 499–502.
Goldberg I.J., Eckel R.H. dan Abumrad N.A., 2009, Regulation of fatty acid uptake into tissues: Lipoprotein lipase- And CD36-mediated pathways, Journal of Lipid Research, 50 (Suppl.)
Górska-Warsewicz H., Rejman K., Laskowski W. dan Czeczotko M., 2019, Butter, margarine, vegetable oils, and olive oil in the average polish diet, Nutrients, 11 (12), 1–15.
Haddouchi F., 2013, Chemical composition and antimicrobial activity of the essential oils from Ruta species growing in Algeria, Journal Food Chemistry, 141 (October), 253–258.
Van Herck H., Baumans V., Brandt C.J.W.M., Boere H.A.G., Hesp A.P.M., Van Lith H.A., Schurink M. dan Beynen A.C., 2001, Blood sampling from the retro-orbital plexus, the
saphenous vein and the tail vein in rats: Comparative effects on selected behavioural and blood variables, Laboratory Animals, 35 (2), 131–139.
Idacahyati K., Sukmawan Y.P., Yanti N., Wulandari W.T., Gustaman F. dan Indra, 2021, In vivo activity of phaseolus vulgaris as an anti-hypercholesterolemic, Pharmacy Education, 21 (2), 184–188.
Jiang  K.,  Gachumi  G.,  Poudel  A.,  Shurmer  B.,  Bashi  Z.  dan  El-Aneed  A.,  2019,  The Establishment  of  Tandem  Mass  Spectrometric  Fingerprints  of  Phytosterols  and Tocopherols  and  the  Development  of  Targeted  Profiling  Strategies  in  Vegetable  Oils, Journal of the American Society for Mass Spectrometry, 30 (9), 1700–1712.
Kaur  J.,  2014,  Use  of  friedewald  equation  for  dyslipidemia  in  metabolic  syndrome,
International Journal of Medicine, 2 (1), 36.
Khan S.H., Niazi N.K., Sobia F., Fazal N., Manzoor S.M. dan Nadeem A., 2019, Friedewald’s equation for calculating LDL-cholesterol: Is it the time to say “goodbye” and adopt direct LDL cholesterol methods?, Pakistan Journal of Medical Sciences, 35 (2), 388–393.
Kim D., Park J.B., Choi W.K., Lee S.J., Lim I. dan Bae S.K., 2016, Simultaneous determination of β-sitosterol, campesterol, and stigmasterol in rat plasma by using LC–APCI-MS/MS: Application in a pharmacokinetic study of a titrated extract of the unsaponifiable fraction of Zea mays L., Journal of Separation Science, 39 (21), 4060–4070.
Laufs  U.,  Parhofer  K.G.,  Ginsberg  H.N.  dan  Hegele  R.A.,  2020,  Clinical  review  on triglycerides, European Heart Journal, 41 (1), 99–109.
Li J., Liu T., Wang L., Guo X., Xu T., Wu L., Qin L. dan Sun W., 2012, Antihyperglycemic and  antihyperlipidemic  action  of  cinnamaldehyde  in  C57blks/j  Db/db  mice,  Journal  of Traditional Chinese Medicine, 32 (3), 446–452.
Nanang Y., Sulistyowati I., Finolawati A., Elya B. dan Rani S., 2021, HMG-CoA Reductase Inhibitory Activity Of Extract And Catechin Isolate From Uncaria Gambir As A Treatment For Hypercholesterolemia, Journal Of Southwest Jiaotong University, 56 (6), 37–41.
Neto J.G.O., Boechat S.K., Romão J.S., Pazos-Moura C.C. dan Oliveira K.J., 2020, Treatment with  cinnamaldehyde  reduces  the  visceral  adiposity  and  regulates  lipid  metabolism, autophagy and endoplasmic reticulum stress in the liver of a rat model of early obesity, The Journal of nutritional biochemistry, 77, 108
Pishdad S., Nadjarzadeh A., Abargouei A.S., Nazari E.K. dan Papoli M., 2018, Effect of cumin and cinnamon on lipid profile in middle-aged women with dyslipidemia: A double blind, randomized controlled clinical trial, Progress in Nutrition, 20 (8), 232–237.
Rodríguez L., Mendez D., Montecino H., Carrasco B., Arevalo B., Palomo I. dan Fuentes E., 2022,  Role  of  Phaseolus  vulgaris  L.  in  the  Prevention  of  Cardiovascular  Diseases- Cardioprotective Potential of Bioactive Compounds, Plants, 11 (2),186.
Sae-tan  S.,  2016,  Systematic  Review:  Hypolipidemic  Activity  of  Oolong  Tea  Polymerized Polyphenols, Journal of Health Research, 30 (6), 451–459.
Samavat H., Newman A., Wang R., Yuan J.-M., Wu A.H. dan Kurzer M.S., 2016, Effect of green  tea  cathecin  extract  on  serum  lipid  in  post-menepousal  woman,  Am  J  Clin  Nutr 2016;104,1671–82.
Sonsok  S.,  Sarakarn  P.  and  Sanchaisuriya  P.,  2020,  Comparison  of  three  equations  for estimating low-density lipoprotein-cholesterol in the rural northeastern region of Thailand, Journal of Clinical Laboratory Analysis, 34 (10),1-8.
Tilokwattanothai A., Saenphet  K.  dan Saenphet  S., 2017, Hypoglycemic and hypolipidemic properties of herbal tea on Wistar rat, Chiang Mai Veterinary Journal 2017; 15(1,25-35
Wahjuni  S.,  Rustini  N.  dan  Yuliantari  P.,  2016,  Pemberian  ekstrak  etanol  buah  buncis (Phaseolus vulgaris L.) untuk menurunkan kolesterol total, low density lipoprotein (LDL) dan meningkatkan high density, Jurnal Kimia 10 (1), 2016, 103-109
Zhu Z., Li J., Gao X., Amponsem E., Kang L., Hu L., Zhang B. dan Chang Y., 2012, Journal of  Pharmaceutical  and  Biomedical  Analysis  Simultaneous  determination  of  stilbenes  , phenolic acids , flavonoids and anthraquinones in Radix polygoni multiflori by LC – MS / MS, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 62, 162–166.
Zhyvotovska A., Yusupov D. dan I. McFarlane S., 2019, Introductory Chapter: Overview of Lipoprotein Metabolism, Dyslipidemia, 40(8), 0–7.