## IN VITRO ANTIBACTERIAL ACTIVITY

## OF LIME FRUIT JUICE ( CITRUS AURENTIFOLIA ) ON STAPHYLOCOCCUS AEREUS BACTERIA
Weni Puspita, Hairunnisa, Putri Dwi Awaliah
Akademi Farmasi YARSI Jl. Panglima Aim No. 2, Dalam Bugis, Pontianak, Kalimantan Barat
Corresponding author: Weni Puspita ( weni.puspita.apt@gmail.com )

## ARTICLE HISTORY
Received: 2 December 2019 Revised: 17 January 2020               Accepted: 28 January 2020

## Abstract
Lime  ( Citrus  aurantifolia )  contains  several  active  compounds  including  alkaloids, flavonoids,  steroids,  triterpenoids,  saponins,  tannins  and  phenolics  that  can  inhibit bacterial  growth.  The  purpose  of  this  study  was  to  aimed  evaluate  the  antibacterial effectiveness of lime juice in syrup preparations against Staphylococcus aureus bacteria in vitro with agar diffusion method . Testing the antibacterial effectiveness of lime syrup was determined to Staphylococcus aureus with 3 concentrations, 25%, 50%, 75%, and lime  juice  with  100%  concentration  and  marketed  lime  syrup  as  a  comparison.  The results  showed  that  the  juice  of  lime  ( Citrus  aurantifolia )  with  concentrations  of  25%, 50%,  and  75%  could  inhibit  the  growth  of Staphylococcus  aureus .  Lemon  juice formulated  into  syrup  preparations  can  improve  the  ability  of  lime  as  an  antibacterial, where  the  higher  the  concentrate  of  lime  syrup  and  the  longer  the  contact  with Staphylococcus aureus bacteria, the better the inhibitory power. The average inhibition zone  of  the  concentration  of  lime  syrup  that  is  effective  for  inhibiting Staphylococcus aureus bacteria at a concentration of 75% with a inhibition zone of 13,5 mm with a strong category and showed an insignificant difference (p>0,05) compared to lime juice 100% concentration and marketed lime syrup with inhibition zone 14,167 mm and 14,0 mm. So that the formulation of lime syrup at a concentration of 75% is an effective formulation in inhibiting the growth of Staphylococcus aureus .
Key words : Citrus aurantifolia , Staphylococcus aureus , syrup

## EFEKTIVITAS ANTIBAKTERI SEDIAAN SIRUP AIR PERASAN
BUAH JERUK NIPIS ( CITRUS AURENTIFOLIA ) TERHADAP BAKTERI STAPHYLOCOCCUS AEREUS SECARA IN VITRO

## Abstrak
Jeruk  nipis  ( Citrus  aurantifolia )  mengandung  beberapa  senyawa  aktif  yaitu  alkaloid, flavonoid,  steroid,  triterpenoid,  saponin,  tanin  dan  fenolik  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  efektivitas antibakteri  air  perasan  buah  jeruk  nipis  dalam  sediaan  sirup  terhadap  pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus secara in  vitro dengan  metode  difusi  agar.  Pengujian
Vol.11 ; No.1 ; Januari 2020 Halaman 38-45
efektivitas antibakteri sirup buah jeruk nipis diujikan pada bakteri Staphylococcus aureus dengan 3 konsentrasi yaitu 25%, 50%, 75% serta air perasan buah jeruk nipis dengan konsentrasi 100% dan sirup jeruk nipis yang beredar di pasaran sebagai pembanding. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  sirup  air  perasan  buah  jeruk  nipis  ( Citrus aurantifolia ) dengan konsentrasi 25%, 50%, dan 75% dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus  aureus .  Air  perasan  buah  jeruk  nipis  yang  diformulasikan  menjadi sediaan sirup dapat meningkatkan kemampuan jeruk nipis sebagai antibakteri, dimana semakin  tinggi  konsentrasi  sirup  buah  jeruk  nipis  dan  semakin  lama  kontak  dengan bakteri Staphylococcus  aureus maka  daya  hambatnya  semakin  baik.  Rata-rata  zona hambat  konsentrasi  sirup  buah  jeruk  nipis  yang  efektif  untuk  menghambat  bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi 75% dengan zona hambat 13,5 mm dengan kategori kuat dan menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan (p>0,05) dibandingkan air  perasan  buah  jeruk  nipis  konsentrasi  100%  dan  sirup  jeruk  nipis  yang  beredar  di pasaran dengan zona hambat 14,167 mm dan 14,0 mm. Sehingga formulasi sirup buah jeruk nipis pada konsentrasi 75% merupakan formulasi yang efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
Kata Kunci : Citrus aurantifolia , Staphylococcus aureus , sirup

## Pendahuluan
Jeruk Nipis ( Citrus aurantifolia ) adalah salah satu tanaman herbal yang banyak mengandung vitamin C, dimana sebagai obat herbal alami jeruk nipis berkhasiat untuk menghilangkan  obat  batuk,  peluruh  dahak  (mukolitik),  peluruh  kencing  (diuretik)  dan keringat,  membantu  proses  pencernaan,  serta  sebagai  antipiretik  dan  antibakteri. 1 Bagian  tanaman  yang  sering  dipakai  sebagai  antibakteri  adalah  ekstrak  kulit  buah, ekstrak  daun,  ekstrak  biji  serta  air  perasannya. 2,3 Secara  empiris,  masyarakat menggunakan  buah  jeruk  nipis  sebagai  obat  herbal  untuk  mengatasi  radang tenggorokan  dengan  cara  tiga  buah  jeruk  nipis  yang  sudah  dicuci,  lalu  dibelah  dan diperas, kemudian air perasannya diseduh dengan setengah cangkir air panas. 4
Pemanfaatan  jeruk  nipis  sebagai  obat  herbal  karena  terdapat  senyawa  kimia antara  lain  alkaloid,  flavonoid,  tanin,  fenol  dan  saponin  yang  bersifat  antimikroba. 5 Menurut Ashok et al 6 tanin merupakan salah satu senyawa kimia yang bersifat antibakteri terdapat  disetiap  tumbuhan  hijau,  dimana  tanin  merupakan  senyawa  polifenol  yang memiliki mekanisme mengikat dan menyusutkan protein, menghambat sintesis dinding sel  bakteri  dan sintesis  protein  sel  bakteri  gram positif  dan  gram negatif  dengan cara mengendapkan gelatin dari larutan, bersifat toksik untuk bakteri, jamur berfilamen dan juga ragi. Selain  itu  terdapat senyawa kimia yang sama pada akar, batang, daun dan kulit buahnya, disertai minyak atsiri, asam sitrat, kalsium, fosfor, besi, vitamin A, B1, dan C. 7,8
Berdasarkan penelitian abdul razak et al 9 konsentrasi air perasan buah jeruk nipis pada  konsentrasi  100%  menghasilkan  daya  hambat  yang  paling  efektif  terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dibandingkan dengan konsentrasi 25%, 50% dan 75%.  Staphylococcus  aureus  merupakan  bakteri  gram  positif  yang  ditemukan  pada saluran pernapasan atas, muka, tangan, rambut dan vagina berkisar 20-75%. 10 Infeksi bakteri ini pada saluran pernafasan atas dapat menimbulkan penyakit tonsillitis (radang amandel),  pada  kondisi  amandel,  sel-sel  darah  putih  dari  sistem  kekebalan  tubuh melancarkan  sebuah  serangan  yang  membantu  menghancurkan  virus  atau  bakteri, sehingga menyebabkan infeksi di tenggorokan dan demam. 4
Secara empiris penggunaan buah jeruk nipis di masyarakat yaitu dengan cara di peras, akan tetapi cara ini masih memiliki kelemahan, karena rasa alami dari buah jeruk
Vol.11 ; No.1 ; Januari 2020 Halaman 38-45
nipis yang berasa asam dan masa simpan yang pendek, sehingga sediaan sirup dipilih karena  sirup  merupakan  larutan  oral  yang  mengandung  sukrosa  atau  gula  lain  yang berkadar tinggi. Sirup mengandung sukrosa berkisar 64%-66% yang dapat memberikan rasa manis dan memperpanjang masa simpan. 11 Sehingga penelitian ini bertujuan untuk memformulasikan sediaan sirup ekstrak perasan buah jeruk nipis dan mengukur daya hambatnya terhadap pertumbuhan Streptococcus aereus secara in vitro.

## Metode
Alat
Alat-alat  pada  penelitian  ini  antara  lain  :  Inkubator  (Memmert ® )  dari  Jerman, Neraca Analitik ( Ohauss ® ) , Oven (Memmert ® ) dari Jerman, Autoklaf (Hirayama ® ) dari Jepang,  Cawan  Petri,  Jarum  Ose,  Batang  Pengaduk,  Tabung  Reaksi  ( Pyrex ®), Erlenmeyer ( Pyrex ®) , Gelas Ukur ( Pyrex ®), Beaker Glass ( Pyrex ®), Mikropipet, Pisau Stainless , Pinset, Pemeras Jeruk dan Lampu Spiritus.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  adalah aquadest steril,  NaCl  0,9%,  Gula,  buah  Jeruk Nipis ( Citrus aurantifolia ), sirup buah jeruk nipis yang beredar di pasaran,  kultur murni bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923, Nutrient Agar (Oxoid®).
Prosedur Rinci 1.  Rancangan Penelitian Penelitian tentang Uji efektivitas antibakteri Sediaan Sirup buah  Jeruk Nipis ( Citrus aurantifolia )  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Akademi  Farmasi  YARSI Pontianak. Penelitian ini bersifat eksperimental dengan desain Postest Only Control Group Design . Variabel adalah sirup air  perasan buah jeruk nipis dengan berbagai konsentrasi yaitu 25%, 50%, 75%, air perasan buah jeruk nipis 100% dan sirup buah jeruk nipis yang beredar dipasaran sebagai pembanding, serta bakteri Staphylococus aureus .  Data  yang  diperoleh  kemudian  dianalisis  secara  statistik  menggunakan analisis Analysis  of  Variance (ANOVA)  dengan  derajat  kepercayaan  95%  (=0,05). Formula pembuatan sirup buah jeruk nipis dapat dilihat pada tabel I.
Tabel I. Rancangan Formula Pembuatan Sirup Buah Jeruk Nipis
Bahan Formula I 25% II 50% III 75% IV 100% Sari Jeruk Nipis 15 ml 30 ml 45 ml 60 ml Sirup Simplek 45 ml 30 ml 15 ml - Dibuat 60 ml 60 ml 60 ml 60 ml
Ket : sirup simplek (65 bagian gula dalam 100 bagian air) untuk tiap formula, pembanding yang digunakan sari jeruk nipis 100% dan sirup jeruk nipis yang beredar di pasaran

## 2.  Determinasi Tanaman
Bagian  tanaman  yang  digunakan  sebagai  sampel  yaitu  buah  jeruk  nipis  ( Citrus aurantifolia ) yang masih segar diperoleh di Pontianak, Kalimantan Barat. Determinasi dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Fakultas  Pertanian  Laboratorium  Biologi Universitas Tanjungpura Pontianak. Hasil determinasi dapat dilihat pada lampiran 1.
Vol.11 ; No.1 ; Januari 2020 Halaman 38-45

## 3.  Metode Pembuatan Sirup Buah Jeruk Nipis
Formulasi konsentrasi 25%, 50%, dan 75%  dibuat dengan cara diperas buah jeruk nipis, kemudian ditambahkan dengan sirup simplek (dilarutkan 65 bagian gula dalam 100 bagian air) aduk  homogen, setelah itu dimasukkan kedalam wadah bersih. Untuk formulasi  dengan  konsentrasi    100%  dibuat  dengan  cara  diperas  buah  jeruk  nipis setelah itu di masukkan kedalam wadah bersih dan formulasi sirup jeruk nipis yang beredar di pasaran sebagai pembanding.
4.  Pembuatan Medium Pembenihan
Cara pembuatan medium nutrient agar (NA) instan adalah dengan melarutkan 11,5 gr nutrient agar (NA) instant ke dalam 500 ml aquadest. Kemudian dipanaskan hingga larut dan disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 15 menit.
5.  Peremajaan Bakteri
Peremajaan  kultur  murni  bakteri  uji Staphylococcus  aureus sebanyak  1  ose  steril pada medium Agar miring (NA) instant dalam tabung reaksi dengan cara digoreskan zig  zag  secara aseptik.  Kemudian  diinkubasikan ke  dalam  inkubator  selama  18-24 jam pada suhu 35 0 C - 37 0 C.
6.  Pembuatan Suspensi Kultur Murni Bakteri Uji
Bakteri  uji Staphylococcus  aureus hasil  peremajaan  disuspensikan  dengan  larutan NaCl steril dengan cara diambil 1 ose yang disterilkan. Bakteri yang telah diremajakan dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi yang telah berisi 10 ml NaCl steril. Sampel sejumlah  3  cawan  petri  yang  akan  dijadikan  media  pertumbuhan Staphylococcus aureus berdasarkan standar 0,5 McFarland dengan perkiraan densitas sel sebesar 1,5x10 8 cfu/ml, sehingga jumlah seluruh sampel 1,5x10 8 cfu/ml x 3 = 4,5x10 8 cfu/ml. 7.  Pengujian Efektivitas Antibakteri
Pengujian efektivitas antibakteri sirup buah jeruk nipis ( Citrus aurantifolia ) dilakukan dengan metode difusi menggunakan cakram disc. Disiapkan medium NA instant yang telah dipanaskan dan didinginkan hingga suhu mencapai 40 0 C - 45 0 C, dimasukkan 1 ml suspensi biakkan bakteri Staphylococcus aureus secara aseptik ke dalam cawan petri, kemudian masukkan sebanyak 10 ml medium NA instant dan digoyang-goyang hingga  tercampur  homogen,  lalu  dibiarkan  sampai  membeku.  Kertas  cakram  yang telah direndam dalam sirup jeruk nipis ( Citrus aurantifolia ) selama 15 menit dengan masing-masing  konsentrasi  25%,  50%,  75%,  100%,  dan  sirup  jeruk  nipis  yang beredar dipasaran,  kemudian kertas cakram diletakkan di atas permukaan medium Agar NA instant yang telah berisi uji Staphylococcus aureus , kemudian diinkubasikan ke dalam inkubator pada suhu 37 0 C selama 24 - 48 jam dengan meletakkan cawan petri secara terbalik. Zona bening yang terbentuk di sekitar cakram disk diukur dengan jangka sorong lalu dicatat. 9
Vol.11 ; No.1 ; Januari 2020 Halaman 38-45

## Hasil
Tabel II. Diameter rata-rata zona hambat sirup buah jeruk nipis ( Citrus aurantifolia )
terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus Perlakuan Replikasi Jumlah (mm) Rata-rata (mm) I II III Sirup buah jeruk nipis 25 % 8 8,5 8 24,5 8,167±0,03 Sirup buah jeruk nipis 50% 10,5 10,5 10 31 10,33±0,15 Sirup buah jeruk nipis 75% 13,5 13,0 14,0 40,5 13,5±0,12 Perasan buah jeruk nipis 100% (pembanding 1) 14,5 13,5 14,5 42,5 14,167±0,13 Sirup buah jeruk nipis di pasaran (pembanding 2) 13,5 14,5 14,0 42 14,0±0,15
Gambar 1. Hasil uji diameter daya hambat sirup buah jeruk nipis terhadap pertumbuhan Staphylococcus  aureus
Vol.11 ; No.1 ; Januari 2020 Halaman 38-45
Tabel III. Data stasitik diameter zona hambat sirup buah jeruk  nipis  ( Citrus aurantifolia ) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dengan Mann Whitney Test
Variabel Konsentrasi Konsentrasi lainnya P Konsentrasi sirup buah jeruk nipis 25% 50% 0,015 75% 0,012 100% 0,006 Sirup buah jeruk nipis di pasaran 0,012 50% 75% 0,015 100% 0,012 Sirup buah jeruk nipis di pasaran 0,006 75% 100% 0,105 Sirup buah jeruk nipis di pasaran 0,072

## Pembahasan
Penelitian ini bertujuan mengetahui  efektivitas antibakteri sirup buah jeruk nipis ( Citrus  aurantifolia )  dengan  mengukur  daya  hambatnya  terhadap Staphylococcus aereus secara in  vitro dengan  metode  difusi  agar.  Daya  hambat  adalah  kemampuan suatu  substansi  atau  zat  untuk  menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme,  dimana dalam penelitian ini digunakan sampel bakteri Staphylococcus aereus . Staphylococcus aereus adalah bakteri yang dapat menyebabkan infeksi pada saluran pernafasan atas, dimana  dapat menimbulkan penyakit tonsillitis (radang  amandel),  dengan mekanisme kerja  sel-sel  darah  putih  dari  sistem  kekebalan  tubuh  melancarkan  sebuah  serangan yang membantu menghancurkan virus atau bakteri, dan juga menyebabkan peradangan di tenggorokan dan demam. 10 Penelitian efektivitas antibakteri sediaan sirup air perasan buah  jeruk  nipis  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus ini  dilakukan  menggunakan metode disc diffusion (tes Kirby-Bauer), dimana kelebihan dari metode ini adalah mudah dilakukan, tidak memerlukan peralatan khusus dan relatif murah. 12
Berdasarkan penelitian Abdul Razak 9 menyatakan bahwa air perasan buah jeruk nipis dengan konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus secara in vitro . 9 Selain itu, menurut Cut Nurkalimah menyatakan bahwa  air  perasan jeruk  nipis  memiliki  efek  antibakteri  terhadap  pertumbuhan  bakteri S.aureus dan E.coli dengan metode difusi cakram. 13 Berdasarkan uji fitokimia yang telah dilakukan, terdapat beberapa senyawa kimia metabolit sekunder yang bersifat sebagai antibakteri  pada  air  perasan  buah  jeruk  nipis  yaitu  alkaloid,  flavonoid,  steroid, triterpenoid, saponin, tanin dan fenolik. 2
Mekanisme  antibakteri  pada  senyawa  kimia  tanaman  dipengaruhi  oleh keberadaan metabolit sekunder yang terkandung didalamnya, dimana mekanisme kerja tanin  sebagai  antibakteri  adalah  menghambat  enzim  reverse  transkriptase  dan  DNA topoisomerase sehingga sel bakteri tidak dapat terbentuk. Selain itu, tanin mempunyai target pada polipeptida dinding sel sehingga pembentukan dinding sel menjadi kurang sempurna yang menyebabkan sel bakteri menjadi lisis karena tekanan osmotik maupun fisik  sehingga  sel  bakteri  akan  mati.  Aktivitas  antibakteri  flavonoid  yaitu  membentuk senyawa kompleks dengan protein ekstraseluler dan terlarut sehingga dapat merusak membran  sel  bakteri  dan  diikuti  dengan  keluarnya  senyawa  intraseluler.  Aktivitas antibakteri  saponin  yaitu  menurunkan  tegangan  permukaan  sehingga  mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan mengakibatkan senyawa intraseluler akan
Vol.11 ; No.1 ; Januari 2020 Halaman 38-45
keluar.  Mekanisme  terpenoid  sebagai  antibakteri  yaitu  melalui  proses  pemecahan membran oleh komponen-komponen lipofilik sehingga merusak membran sel bakteri .2
Hasil  pengujian  sediaan  sirup  buah  jeruk  nipis  dapat  dilihat  pada  Tabel  II. Berdasarkan tabel didapatkan bahwa formulasi sirup dari air perasan buah jeruk nipis dengan  konsentrasi  berbeda  memiliki  daya  hambat  yang  berbeda  pula  terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus . Data diameter rata-rata zona hambat sirup buah  jeruk  nipis  terlebih  dahulu  dilakukan  uji  distribusi  normal  dengan Kolmogorof- Smirnov dan dilanjutkan dengan uji homogenitas dengan melakukan uji Levene . Hasil menunjukkan bahwa data terdistribusi normal (p>0,05) tetapi tidak homogen (p<0,05). Analisa  statistik  dilanjutkan  dengan  statistik  non-parametrik  menggunakan Kruskal Wallis dilanjutkan dengan Mann Whitney untuk mengetahui perbedaan masing-masing perlakuan.  Hasil  uji Kruskal  Wallis diketahui  bahwa  terdapat  perbedaan  signifikan (p≤0,05) pada kelima perlakuan yaitu sirup buah jeruk nipis konsentrasi 25%, 50%, 75%, serta  100%  air  perasan  buah  jeruk  nipis  dan  sirup  buah  jeruk  nipis  yang  beredar  di pasaran sebagai pembanding.
Hasil penelitian menunjukkan diameter rata-rata zona hambat sirup buah jeruk nipis terendah adalah pada konsentrasi 25% (8,167 mm), sedangkan diameter rata-rata zona  hambat  tertinggi  terlihat  pada  konsentrasi  75%  (13,5  mm).  Hal  ini  disebabkan karena  adanya  perbedaan  kadar  zat  antibakteri    yang  memiliki  perbedaan  bermakna antara  tiap  konsentrasi,  tetapi  pada  tabel  3,  terdapat  perbedaan  yang  tidak  signifikan (p>0,05) antara diameter rata-rata zona hambat sirup buah jeruk nipis konsentrasi 75% (13,5 mm) dengan konsentrasi 100% air perasan jeruk nipis dan sirup buah jeruk nipis yang beredar di pasaran sebagai pembanding. Hal ini disebabkan adanya penambahan sukrosa  atau  gula  pada  sirup  jeruk  nipis  yang  dapat  memberikan  rasa  manis  dapat berpengaruh pada hasil karena menurut Buckle, dkk mengatakan bahwa daya larut yang tinggi dari gula dan daya mengikatnya air merupakan sifat-sifat yang menyebabkan gula sering digunakan dalam pengawetan bahan pangan. Konsentrasi gula yang cukup tinggi pada olahan pangan dapat mencegah pertumbuhan mikrobia, sehingga  meningkatkan kemampuan antibakteri  dan  dapat  berperan  sebagai  pengawet  serta  memperpanjang masa simpan. 14
Berdasarkan hasil pengujian, semakin besar konsentrasi air perasan buah jeruk nipis  pada  sediaan  sirup  dan  semakin  lama  kontaknya  dengan  kuman,  maka  daya hambat  sirup  air  perasan  buah  jeruk  nipis  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus semakin baik. Menurut Abdul Razak, dkk dalam penelitiannya menyatakan bahwa rata- rata zona hambat pada  air perasan buah jeruk nipis konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% adalah 5,167; 6,167; 7,5; dan 10,5 mm. 9 Sedangkan hasil pengujian pada tabel II, diameter rata-rata zona hambat sirup buah jeruk nipis pada konsentrasi 25%, 50% dan 75%  meningkat  menjadi  8,167;  10,33;,  dan  13,5  mm,  dimana  sirup  jeruk  nipis  pada konsentrasi  75%  memberikan  diameter  daya  hambat  tertinggi  yaitu  13,5  mm  yang dikategorikan sampel tersebut memiliki  kekuatan antibakteri yang bersifat kuat karena daerah  hambatan  berkisar  10-20  mm. 15 Sehingga  formulasi  air  perasan  jeruk  nipis menjadi sediaan sirup dapat meningkatkan kemampuan jeruk nipis sebagai antibakteri bahkan dapat memperpanjang masa simpan yang dapat menghasilkan sediaan dengan penggunaan dan penyimpanannya menjadi lebih praktis.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  sirup  air  perasan  buah jeruk  nipis  ( Citrus  aurantifolia )  dengan  konsentrasi  25%,  50%,  dan  75%  dapat menghambat pertumbuhan Staphylococcus aureus secara in vitro dengan metode difusi agar.  Air  perasan  buah  jeruk  nipis  yang  diformulasikan  menjadi  sediaan  sirup  dapat meningkatkan  kemampuan  jeruk  nipis  sebagai  antibakteri,  dimana  semakin  tinggi konsentrasi  sirup  buah  jeruk  nipis  dan  semakin  lama  kontak  dengan  bakteri
Vol.11 ; No.1 ; Januari 2020 Halaman 38-45
Staphylococcus  aureus maka  daya  hambatnya  semakin  baik.  Rata-rata  zona  hambat konsentrasi  sirup  buah  jeruk  nipis  yang  efektif  untuk  menghambat  bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi 75% dengan zona hambat 13,5 mm dengan kategori kuat dan menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan (p>0,05) dibandingkan air perasan buah jeruk nipis konsentrasi 100% dan sirup buah jeruk nipis yang beredar di pasaran dengan zona hambat 14,167 mm dan 14,0 mm.

## Daftar Pustaka
1.  Fajriani,  Mahrum.  Effectiveness  of  lime  ( Citrus  Aurantifolia )  extract  solution  in inhibiting  bacteria Streptococcus  Mutans case  of  early  childhood  caries.  Donnish Journal of Dentistry and Oral Hygiene. Donnish J Dent Oral Hyg. 2015;1(4):16-20.
2.  Oikeh  EI,  Oriakhi  K,  Omoregie  ES,  Oviasogje  FE,  Oriakhi  K.  Phytochemical, antimicrobial, and antioxidant activities of different citrus juice concentrates. Food Sci Nutr. 2014;4(1):103-9. DOI: 10.1002/fsn3.268.
3.  Camacho-Corona  MR,  at  al.  Activity  against  drug  resistant-tuberculosis  strains  of plants used in Mexican traditional medicine to treat tuberculosis and other respiratory diseases. Phytother Res. 2008 22(1): 82 –5. DOI :10.1002/ptr.2269 17.
4.  Sarwono, B. Khasiat & manfaat jeruk nipis. Jakarta: Agro Media Pustaka; 2001.
5.  Okwu  DE.  Citrus  fruits:  a  rich  source  of  phytochemicals  and  their  roles  in  human health. Int J Chem Sci. 2008:6(2); 451-71.
6.  Ashok PK, Upadhyaya K. Tannins are Astringent. J Pharmacog and Phytochem [internet]. 2012;1(4). Available from: http://www.phytojournal.com/archives/2012/vol1issue3/PartA/8.1.pdf.
7.  Astarini at al. Minyak atsiri dari kulit buah Citrus grandis , Citrus aurantium (L.) dan Citrus  aurantifolia (Rutaceae)  sebagai  senyawa  antibakteri  dan  insektisida.  In: Prosiding Kimia FMIPA. Surabaya: ITS; 2010.
8.  Okwu DE et al. Phythochemical composition and in vitro antifungal activity screening of  extracts  from  citrus  plants  against  fusarium  oxysporum  of  okra  plant  ( Hibiscus esculentus ). Pest Technol
[internet]. 2007:1(2). Available from: http://www.globalsciencebooks.info/Online/GSBOnline/images/0712/PT_1(2)/PT_1(
2)145-148o.pdf.
9.  Razak A, Djamal A, Revilla G. Uji daya hambat air perasan buah jeruk nipis ( Citrus aurantifolia s.) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus secara in vitro. J Kesehat Andalas. 2013; 2(1).
10. Usman-Chatib  Warsa.  Kokos  positif  gram.  In:  Buku  ajar  mikrobiologi kedokteran.revisi. Jakarta: Bina Rupa  Aksara; 1993. p103-11.
11. Syamsuni H.A. Ilmu resep. Jakarta: EGC; 2006.
12. Pratiwi ST. Mikrobiologi farmasi. Yogyakarta: Erlangga; 2008.
13. Nurkalimah  C.  Daya  antibakteri  air  jeruk  nipis  ( Citrus  aurantifolia )  terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli yang diuji secara in vitro [Skripsi]. Sumatera Utara:USU; 2011.
14. Buckle K. A. Ilmu pangan. Jakarta: Universitas Indonesia; 2007.
15. Pathan  RK,  Gali  PR,  Pathan  P,  Gowtham  T,  Pasupuleti  S.  In  vitro  antimicrobial activity of Citrus aurantifolia and its phytochemical screening. Asian Pacific J Trop Dis. 2010;2(1):328-31.