Uji Potensi Ekstrak Daun Binahong ( Anredera cordifolia (Ten.)

## Steenis) Terhadap Peningkatan Ketebalan Jaringan Granulasi dan Waktu Penyembuhan Luka Bakar Tikus
Dea Betriksia (a)* , Iwan Syahrial Hamid (b) , Liliek Suyatmiatun Hermanu (a)
(a) Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala, Surabaya, Indonesia
(b) Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga, Surabaya, Indonesia
Luka bakar adalah rusaknya jaringan kulit yang disebabkan karena adanya kontak dengan suhu tinggi. Kejadian luka bakar paling sering terjadi di lingkungan rumah tangga dan luka bakar derajat II memiliki prevalensi tertinggi. Proses  penyembuhan  luka  dapat  dipercepat  dengan  menggunakan  obat  tradisional,  salah  satunya  adalah Binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis).  Binahong  memiliki  banyak  kandungan  seperti  saponin,  flavonoid, alkaloid,  tanin  dan  steroid  yang  pada  berbagai  penelitian  menunjukkan  kemampuan  untuk  mempercepat penyembuhan luka. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menganalisis potensi ekstrak daun binahong terhadap peningkatan  ketebalan  jaringan  granulasi  dan  waktu  penyembuhan  luka  bakar.  Penelitian  ini  merupakan penelitian  eksperimental.  Subjek  penelitian  menggunakan  hewan  coba  tikus  Wistar  yang  dibagi  kedalam  4 kelompok yaitu K(-), K(+), dan kelompok perlakuan yaitu ekstrak daun binahong konsentrasi 20% (P1) dan 40% (P2). Luka bakar dibuat dengan menempelkan plat besi bersuhu 95°C selama 30 detik pada bagian punggung tikus sehingga terbentuk luka bakar derajat II. Ekstrak daun binahong yang digunakan pada penelitian ini dibuat dalam  bentuk  sediaan  salep  dan  diberikan  dua  kali  sehari  selama  7  hari  kemudian  diamati  peningkatan ketebalan jaringan granulasi dan waktu penyembuhan luka bakar pada hari ke-3 dan hari ke-7. Hasil penelitian menunjukkan peningkatan rerata tebal jaringan granulasi dan waktu penyembuhan yang lebih baik adalah pada kelompok  percobaan  yang  diberi  ekstrak  daun  binahong  dengan  konsentrasi  40%  (P2)  dimana  ekstrak  daun binahong  40%  (P2)  memiliki  potensi  dalam  mempercepat  peningkatan  ketebalan  jaringan  granulasi  dan  waktu penyembuhan luka bakar yang lebih baik dari ekstrak daun binahong konsentrasi 20% (P1).
Kata  Kunci:  Binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Steenis),  Luka  Bakar,  Jaringan  Granulasi, Waktu Penyembuhan.
Potential Test of Madeira Vine ( Anredera cordifolia (Ten.)

## Steenis) Leaves Extract on the Increased Thickness of Granulation Tissues and Healing Time of Burn Wound in Rats
Burns are skin damage caused by high-temperature which contact to the skin. Second-degree burns are the most common accident at home. The process of wound healing can be accelerated using traditional medicines, one of which is Binahong (Anredera cordifolia (Ten.) Steenis). Binahong contains saponins, flavonoids, alkaloids, tannins, and  steroids  which  have  been  shown  to  accelerate  the  wound  healing  process  in  previous  experiments.  The purpose of this study was to analyze the potential of binahong leaf extract to increase granulation tissue thickness and reduce healing time of burns. This study uses an experimental method. Wistar rats were used in this study, which were divided into 4 groups, namely K (-), K (+), and treatment groups namely the concentration of binahong leaf  extract  20%  (P1)  and  40%  (P2).  Burns  are  made  using  an  iron  plate  that  has  been  heated  to  95°  C  and pasted for 30 seconds on the lower back of the mouse to cause second-degree burns. The binahong leaf extract used in this study was made in the form of an ointment and given twice a day for 7 days. Increased granulation tissue thickness and wound healing time were observed on day 3 and day 7. The results showed an increase in granulation tissue thickness and shorter healing time in the experimental group given binahong leaf extract with a concentration  of  40%  (P2)  compared  to  the  experimental  group  that  was  given  binahong  leaf  extract  with  a concentration of 20% (P1).
Keywords: Madeira vine ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis), Burn Wound, Granulation
Tissue, Healing Time.
*Corresponding  author:  Fakultas  Farmasi Universitas  Katolik  Widya  Mandala  Surabaya , Jl.  Raya  Kalisari Selatan No. 1 Surabaya, e-mail: deabetriksia@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Binahong memiliki penyebaran yang cukup luas  di  Indonesia  dan  masyarakat  juga  sering menggunakan  tumbuhan  daun  Binahong  sebagai obat  tradisional  untuk  penyembuhan  luka. Binahong memiliki zat aktif, antara lain: flavonoid yang berkhasiat sebagi antibakteri, asam oleanolat yang  berkhasiat  sebagai  antiinflamasi  dan mengurangi  nyeri  pada  luka  bakar,  dan  ancordin yang berkhasiat untuk menstimulasi pembentukan antibodi dan menstimulasi pembentukan  nitrit  oksida.  Nitrit  oksida  dapat meningkatkan  sirkulasi  darah  yang  membawa nutrien  ke  sel,  merangsang  produksi  hormon pertumbuhan,  dan  mengganti  sel  yang  rusak dengan sel yang baru (Astuti et al ., 2011).
Luka  bakar  adalah  luka  yang  disebabkan oleh  kontak  langsung  dengan  suhu  tinggi  seperti api,  air  panas,  listrik,  bahan  kimia,  dan  radiasi. Luka bakar mengakibatkan tidak hanya kerusakan pada  kulit,  tetapi  juga  mempengaruhi  seluruh sistem  tubuh.  Pasien  dengan  luka  bakar  luas (mayor)  akan  menyebabkan  ketidakmampuan tubuh  dalam  mengompensasi  dan  menyebabkan berbagai macam komplikasi sehingga memerlukan  penanganan  khusus  (Moenadjat, 2003).  Kulit  dengan  luka  bakar  akan  mengalami kerusakan  pada  epidermis,  dermis,  maupun subkutan,  tergantung  faktor  penyebab  dan  lama kulit  kontak  dengan  sumber  panas.  Kedalaman luka  bakar  ditentukan  oleh  tingginya  suhu  dan lamanya  paparan  pada  kulit  (Syamsuhidajat  dan Wim, 2005).
Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Rahma  (2014)  didapatkan  hasil  bahwa  tingkat kesembuhan  luka  bakar  derajat  II  dengan pemberian ekstrak daun binahong pada konsentrasi  20%  dan  40%  memiliki  pengaruh terhadap  peningkatan  ketebalan  lapisan  re- epitelisasi  pada  proses  penyembuhan  luka. Penelitian lain yang dilakukan oleh Paju, Yamlean dan  Kojong  (2013)  didapatkan  hasil  bahwa ekstrak  daun  binahong  memiliki  efektivitas  pada penyembuhan  luka  dan  terdapat  perbedaan efektivitas  pada  setiap  konsentrasi.  Konsentrasi ekstrak  daun  binahong  10%  telah  memberikan efek  penyembuhan,  sedangkan  pada  konsentrasi 20%  dan  40%  memberikan  efek  penyembuhan yang  lebih  efektif  dapat  dilihat  pada  presentase penutupan  panjang  luka  insisi  yang  terinfeksi Staphylococcus aureus .
Berdasarkan  uraian  diatas  maka  dilakukan penelitian lebih lanjut. Pada penelitian ini dipilih luka bakar derajat II, karena luka bakar derajat II paling sering terjadi dan paling banyak ditemukan di  Indonesia  khususnya  di  lingkungan  rumah tangga  (Nurdiana,  Hariyanto  dan  Musrifah, 2008). Pada penelitian ini ekstrak daun binahong yang digunakan dibuat dalam bentuk salep karena memiliki beberapa  kelebihan  seperti  stabil dalam penggunaan  dan  penyimpanan,  mudah  dipakai, mudah  terdistribusi  merata,  dan  dapat  langsung diaplikasikan  pada  area  luka  sehingga  akan
memberikan  efek  yang  diinginkan  (Ansel,  1985). Konsentrasi  ekstrak  daun  binahong  yang digunakan pada penelitian ini yaitu 20% dan 40% yang  diharapkan  dapat  meningkatkan  ketebalan jaringan  granulasi  dan  mempercepat  waktu penyembuhan  luka  bakar  derajat  II  dengan  lama paparan luka bakar 30 detik dengan menggunakan plat besi.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Alat-alat  gelas,  timbangan  tikus  (ks-1 kitchen  scale  2  kg,  Indonesia),  batangan  besi berukuran  2  x  2  cm,  penangas  air,  oven (Memmert),  timbangan  analitik  (Shimadzu Electronic  Balance  Ex-200A,  Japan),  jangka sorong,  mikroskop  cahaya Nikkon  H600L yang dilengkapi  digital  camera  DS  Fi2  300  megapixel dan software pengolah  gambar Nikkon  Image System .

## Bahan
Simplisia  kering  daun  binahong,  etanol 96%,  serbuk  Mg,  amil  alkohol,  FeCl 3 ,  larutan gelatin,  eter,  asam  asetat  anhidrat,  asam  sulfat pekat,  NaOH  1  N,  Na  asetat,  etanol  70%, kloroform,  aquades,  kuersetin,  adeps  lanae, vaseline  album,  formaldehide  10%,  hematoksilin- eosin,  n-butanol,  asam  asetat,  silika  gel  60  F 254 , Bioplacenton ® ,  hewan  percobaan  tikus  putih jantan  galur  wistar  ( Rattus  norvegicus )  yang berusia 2-3 bulan dengan berat rata-rata 100-150 gram,  sehat,  memiliki  aktivitas  normal  dan  tidak tampak kelainan atau cacat tubuh.

## Tahapan Penelitian
Simplisia  daun  binahong  yang  digunakan dalam  penelitian  ini  diperoleh  dari  Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat (Balittro), Bogor  dan  penelitian  dilakukan  pada  bulan September-November  2017  di  Fakultas  Farmasi Universitas Kayolik Widya Mandala Surabaya.
Determinasi Tanaman dan Standarisasi Simplisia Daun Binahong
Tanaman diperoleh dan dideterminasi oleh Balai  Penelitian  Tanaman  Rempah  dan  Obat (Balittro),  Bogor.  Standarisasi  simplisia  yang dilakukan  meliputi  identitas,  organoleptis  dan pengamatan  mikroskopik,  kadar  air  dan  kadar abu.

## Pembuatan Ekstrak Daun Binahong
Simplisia  kering  daun  binahong  yang diperoleh,  dimaserasi  dengan  menggunakan pelarut  etanol  96%.  Maserasi  dilakukan  dengan cara  serbuk  simplisia  daun  binahong  ditimbang sebanyak  500  gram  lalu  dimasukkan  ke  dalam wadah  dan  dimaserasi  selama  satu  hari menggunakan pelarut etanol 96% sebanyak 2500 ml, kemudian disaring sehingga didapat maserat. Ampas diremaserasi dengan etanol 96% menggunakan  prosedur  yang  sama.  Maserasi
dilakukan  sampai  diperoleh  maserat  yang  jernih. Semua maserat etanol digabungkan dan diuapkan dengan  menggunakan  penangas  air  sampai diperoleh  ekstrak  etanol  kental  daun  binahong lalu dihitung rendemennya (Voigt, 1995).

## Standarisasi Ekstrak Daun Binahong
Ekstrak  yang  sudah  didapatkan  dilakukan pemeriksaan  identitas,  organoleptis,  kadar  air, kadar abu, skrining fitokimia dan penetapan profil kromatogram  secara  Kromatografi  Lapis  Tipis (KLT).

## Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT)  pada  Ekstrak Daun Binahong
Pada  plat  silika  F 254 ditotolkan  larutan  uji konsentrasi 1% sebanyak 10 μl. Kemudian dieluasi dengan  pelarut  butanol:asam  asetat:air  (4:1:5) dan diamati pada UV λ 254 dan 366 nm.

## Pembuatan  Ekstrak  Daun  Binahong  dalam Bentuk Sediaan Salep
Lumpang dan alu dipanaskan didalam oven dengan  suhu  50°C  kemudian  adeps  lanae dimasukkan  terlebih  dahulu  ke  dalam  lumpang yang  telah  panas  dan  diaduk  hingga  melebur kemudian memasukkan vaselin album dan diaduk dengan  kecepatan  konstan  hingga  homogen sampai membentuk basis salep lalu ditambahkan dengan  ekstrak  daun  binahong  yang  disesuaikan dengan masing – masing konsentrasi seperti pada (Tabel 1) dan diaduk hingga homogen.
TABEL  1. Sediaan  Ekstrak  Daun  Binahong ( Anredera cordifolia (Ten.) Steenis)
Bahan Konsentrasi Ekstrak daun Binahong 20% Konsentrasi Ekstrak Daun Binahong 40% Ekstrak Daun Binahong Basis Salep 6 g 24 g 12 g 18 g Perlakuan Hewan Percobaan Hewan percobaan
terlebih dahulu diadaptasi  selama  1  minggu.  Setelah  masa adaptasi, hewan coba dibagi menjadi 4 kelompok besar  yaitu  :  Kelompok  Kontrol  (-)  tidak  diberi pengobatan,  Kelompok  Kontrol  (+)  diberikan Bioplacenton ® ,  Kelompok  Perlakuan  1  diberikan ekstrak  daun  binahong  (20%)  dan  Kelompok Perlakuan  2  diberikan  ekstrak  daun  binahong (40%),  kemudian  dibuat  luka  bakar  dengan batangan panas berukuran 2 x 2 cm 2 (suhu 95°C) selama  30  detik.  Tikus  diberikan  perlakuan selama  7  hari.  Pengamatan  dilakukan  pada  hari ke-3  dan  ke-7,  dilakukan  pengukuran  ketebalan jaringan  granulasi  secara  mikroskopik  dan pengamatan waktu penyembuhan secara makroskopik.

## Pengukuran Ketebalan Jaringan Granulasi pada Luka Bakar Tikus
Pengambilan data untuk variabel ketebalan jaringan  granulasi  diukur  pada  tempat  yang menunjukkan  adanya  pembentukan  jaringan  ikat dan  pembuluh  darah  baru  di  bagian  bawah  luka (daerah  granulasi)  (Kumar,  Cotran  and  Robbins, 2007).  Data  diperoleh  dengan  cara  mengukur rerata tebal granulasi yang teramati pada 5 (lima) lapangan pandang (LP) berbeda dengan menggunakan  mikrometer  yang  telah  dikalibrasi pada  pembesaran  100x.  Pemeriksaan  ini menggunakan  mikroskop  cahaya  biasa  merk Nikkon H600L yang dilengkapi digital camera DS Fi2 300 megapixel dan software pengolah gambar Nikkon  Image  System .  Pengukuran  ketebalan jaringan  granulasi  dilakukan  pada  hari  ke-3  dan hari  ke-7.  Kemudian  hasil  pengukuran  ketebalan jaringan  granulasi  dianalisis  menggunakan  uji statistik One  Way  ANOVA yang  dilanjutkan dengan Duncan Test.

## Pengamatan  Waktu  Penyembuhan  pada  Luka Bakar Tikus
Pengamatan  tanda  klinis  kulit  tikus  pada penelitian  ini  meliputi  perubahan  warna  pada kulit  tikus,  diameter  luka,  edema  dan  adanya keropeng. Pengamatan waktu penyembuhan kulit tikus  secara  makroskopik  dilakukan  setiap  hari dengan  cara  pengamatan  secara  visual  dengan mengunakan  kaca  pembesar  dan  jangka  sorong dimana  kulit  tikus  diamati  mulai  dari  diameter luka, warna kulit, edema, pembentukan keropeng (cairan kulit yang mengering dipermukaan luka), basah serta keringnya kulit tikus (Zulhilmi, 2015). Pengukuran  diameter  luka  dilakukan  dengan menggunakan  jangka  sorong  (Einbill).  Cara pengukuran  diameter  luka  seperti  pada  (Gambar 1).
Gambar  1. Cara  pengukuran  diameter  luka (Suratman, Sumiwi, dan Gozali, 1996). Keterangan : dx(a)  : Diameter luka ke-a dx(b)  : Diameter luka ke-b dx(c) : Diameter luka ke-c dx(d)  : Diameter luka ke-d
Diameter  luka  bakar  diukur  seperti  pada persamaan berikut:
dx : diameter luka pada hari ke-x dx(a)  : Diameter luka ke-a
dx(b)  : Diameter luka ke-b dx(c)  : Diameter luka ke-c dx(d)  : Diameter luka ke-d
Presentase  penyembuhan  luka  bakar  dihitung dengan persamaan berikut :
Keterangan: WC : Presentase penyembuhan hari (%) Do : Diameter luka hari pertama (cm) Dt
: Diameter luka hari ke-x (cm)
Lama penyembuhan luka merupakan waktu yang diperlukan  untuk  mencapai  100%  penyembuhan (WC).

## Analisis Data
Data yang diperoleh dari hasil pengamatan mikroskopik  ketebalan  jaringan  granulasi  dam makroskopik  diameter luka bakar tikus dianalisis dengan One-Way ANOVA. Jika terdapat perbedaan  yang  nyata  dilanjutkan  uji  jarak berganda Duncan dengan taraf kepercayaan 95%. Analisis statistik dilakukan menggunakan bantuan  perangkat  lunak  program  SPSS  for windows  versi  17.  Data  hasil  pemeriksaan ketebalan  jaringan  granulasi  dan  diameter  luka bakar dilakukan uji hipotesis dengan menggunakan One-Way  ANOVA .  Batas  derajat kemaknaan  adalah  apabila  p  ≤  0,05  dengan  95% interval kepercayaan. Untuk mengetahui kelompok  mana  yang  paling  berbeda  signifikan maka dilakukan uji perbandingan berganda ( Post Hoc Test ) menggunakan uji Duncan Test.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
pengamatan makroskopik menunjukkan  bahwa  tanaman  segar  daun binahong ( Anredera cordifolia ) memiliki panjang 6,3  –  10,6  cm,  diameter  5,1  –  8,9  cm,  ujung runcing,  pangkal  berlekuk,  tepi  rata,  memiliki permukaan  yang  licin,  tulang  daun  menyirip, berwarna  hijau  tua  pada  permukaan  atas  daun dan  hijau  muda  pada  permukaan  bawah  daun. Hasil dari pemeriksaan mikroskopik menunjukkan  anatomi  daun  binahong  tersusun dari  epidermis,  jaringan  palisade,  jaringan parenkim,  xylem,  floem,  kristal  Ca-Oksalat bentuk roset dan stomata tipe parasitik.
Simplisia daun binahong dilakukan penentuan parameter kualitas dengan standarisasi yang meliputi standarisasi parameter spesifik dan parameter non spesifik. Standarisasi parameter spesifik meliputi identitas, organoleptis  dan  pengamatan  mikroskopik. Standarisasi  parameter  non  spesifik  meliputi kadar air dan kadar abu total.
Hasil  standarisasi  spesifik  simplisia  daun binahong  secara  organoleptis  berupa  serbuk kasar, berwarna coklat dan berbau khas aromatis. Hasil  dari  pengamatan  mikroskopik  didapatkan fragmen  pengenal  serbuk  simplisia  daun binahong  yaitu  fragmen  kristal  Ca-Oksalat
berbentuk  roset,  fragmen  stomata  tipe  parasitik, fragmen  berkas  pembuluh  dan  fragmen  rambut penutup. Hasil standarisasi non spesifik simplisia daun  binahong  ( Anredera  cordifolia )  pada parameter  kadar  air  adalah  10,22%  yang  sesuai dengan  pustaka  (<11%)  (Paskartini,  2017).  Kadar abu  total  simplisia  daun  binahong  diperoleh 13,86%  yang  sesuai  dengan  pustaka  (<19%) (Paskartini,  2017).  Hasil  dari  ekstraksi  ekstrak kental  sebesar  56,70  gram  dengan  rendemennya 6,3%.
Ekstrak yang sudah didapatkan standarisasi parameter  spesifik  dan  non  spesifik.  Hasil standarisasi  spesifik  ekstrak  daun  binahong ( Anredera  cordifolia )  secara  organoleptis  berupa ekstrak  kental,  berwarna  coklat  kehitaman  dan berbau  khas  aromatis.  Hasil  dari  skrining fitokimia  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun binahong  memiliki  senyawa  metabolit  sekunder alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin  dan  steroid. Hasil  profil  kromatogram  ekstrak  daun  binahong setelah disemprot AlCl 3 memberikan 3 noda pada UV  254  dan  5  noda  pada  UV  366  mengalami fluoresensi  menjadi  kuning  pada  Rf  0,54;  0,64; 0,74  dan  0,81.  Fluoresensi  kuning  pada  UV  366 nm  yang  teramati  mengindikasikan  adanya senyawa  golongan  flavonoid  pada  ekstrak  daun binahong.  Hasil  standarisasi  non  spesifik  ekstrak daun  binahong  ( Anredera  cordifolia )  pada parameter  kadar  air  adalah  7,44%  sesuai  dengan pustaka (<8%) (Paskartini, 2017). Kadar abu total ekstrak  daun  binahong  diperoleh  12,87%  sesuai dengan pustaka (<14%) (Paskartini, 2017).
Ekstrak  daun  binahong  yang  diperoleh dibuat  dalam  bentuk  sediaan  salep  dengan konsentrasi  20%  dan  40%  kemudian  dilakukan evaluasi yang mencakup pemeriksaan organoleptis,  uji  homogenitas  dan  uji  pH.  Hasil pengamatannya  memenuhi  persyaratan  yaitu berwarna  hijau  tua  kehitaman,  berbentuk  salep, berbau  khas  daun  binahong,  homogen,  dan memiliki  nilai  pH  yang  memenuhi  kriteria  pH kulit  yang  berada  dalam  interval  4,5-6,5  yaitu sebesar 5,7 (Paju, Yamlean dan Kojong, 2013).
Pengamatan  makroskopik  pada  luka  bakar yaitu  dengan  pengukuran  diameter  luka  bakar kemudian  dilakukan  analisis  statistik  One  Way ANOVA  menunjukkan  penurunan  diameter  luka pada  kelompok  tikus  pemberian  ekstrak  daun binahong  40%  kemudian  kelompok  pemberian ekstrak  daun  binahong  20%,  Bioplacenton  dan kelompok  tikus  tanpa  pengobatan.  Hasil  ini berlaku  untuk  kelompok  tikus  yang  dikorbankan hari  ke-3  dan  hari  ke-7.  Melalui  perhitungan statistik  untuk  kelompok  tikus  yang  dikorbankan hari  ke-3  menunjukkan  hasil  terdapat  perbedaan bermakna  (p<0,05)  pada  penurunan  diameter luka  antara  kelompok  tikus  pemberian  ekstrak daun  binahong  20%  dan  40%  dengan  kelompok tanpa  pengobatan  sedangkan  kelompok  tikus pemberian  salep  Bioplacenton  tidak  berbeda bermakna (p>0,05) dengan kelompok tikus tanpa pengobatan,  kelompok  tikus  pemberian  ekstrak
daun  binahong  20%  dan  40%.  Pada  kelompok tikus  yang  dikorbankan  hari  ke-7,  hasil menunjukkan  terdapat  perbedaan  bermakna (p<0,05) antara kelompok tikus tanpa pengobatan dengan  kelompok  tikus  pemberian  Bioplacenton, ekstrak daun binahong 20% dan 40% tetapi tidak ada  perbedaan  yang  bermakna  (p>0,05)  antara kelompok  tikus  pemberian  Bioplacenton  dengan ekstrak  daun  binahong  20%  dan  40%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  binahong konsentrasi  20%  dan  40%  dapat  mempercepat proses  penyembuhan  luka  bakar  hampir  sama dengan kontrol positif yaitu Bioplacenton.
Berdasarkan grafik presentase penyembuhan  luka  bakar  pengorbanan  hari  ke-3 dan  ke-7  seperti  pada  (Gambar  2  dan Gambar  3) didapatkan hasil yaitu pada pengorbanan hari ke- 3  semua  kelompok  perlakuan  mengalami peningkatan  presentase  penyembuhan  luka  dan kelompok perlakuan yang memberikan presentase penyembuhan  luka  yang  paling  tinggi  adalah kelompok pemberian ekstrak daun binahong 40% (P2).  Pada  pengorbanan  hari  ke-7  didapatkan hasil  yaitu  kelompok  pemberian  Bioplacenton (K+),  ekstrak  daun  binahong  20%  (P1)  dan  40% (P2) mengalami peningkatan presentase penyembuhan  luka  setiap  harinya  tetapi  pada kelompok  tanpa  pengobatan  (K-)  mengalami penurunan  penyembuhan  luka  pada  hari  ke-3 kemudian  mengalami  peningkatan  kembali  pada hari ke-4 hingga hari ke-7.
0 20 40 1 2 3 (% ) P re se nt as e
P en ye m b uh an L u ka Hari Pengorbanan Hari Ke-3 K(-) K(+) P1 (20%)
P2 (40%)
Gambar  2. Grafik  Presentase  Penyembuhan Luka Bakar Pengorbanan Hari Ke-3.
Pengamatan  mikroskopik  selanjutnya  dilakukan dengan  pengukuran  terhadap  tebal  jaringan granulasi. Berdasarkan hasil mikroskopik ketebalan  jaringan  granulasi  (dapat  dilihat  pada Gambar  4)  bahwa  tebal  jaringan  granulasi  pada kelompok tikus pemberian ekstrak daun binahong 40%  (P2)  memberikan  hasil  yang  paling  tebal yaitu sebesar 1218,18 µm dibandingkan kelompok lainnya  kemudian  diikuti  oleh  kelompok  tikus pemberian  ekstrak  daun  binahong  20%  (P1) sebesar  816,35  µm,  kelompok  tikus  pemberian Bioplacenton  (K+)  sebesar  703,53  µm  dan kelompok  tikus  tanpa  pengobatan  (K-)  sebesar 594,52 µm.
Pada data statistik uji One Way Anova pada pengamatan  hari  ke-3  menunjukkan  perbedaan bermakna  (p<0,05)  antara  kelompok  tikus pemberian  ekstrak  daun  binahong  40%  dengan
kelompok  tikus  tanpa  pengobatan,  pemberian Bioplacenton  dan  ekstrak  daun  binahong  20%. Kelompok  tikus  pemberian  Bioplacenton  dan ekstrak  daun  binahong  20%  tidak  memberikan perbedaan  yang  bermakna  (p>0,05).  Urutan rerata  tebal  jaringan  granulasi  dari  yang  terbesar adalah  kelompok  tikus  pemberian  ekstrak  daun binahong  40%,  salep  Bioplacenton,  ekstrak  daun binahong 20% dan kelompok tanpa pengobatan.
0 10 20 30 40 1 2 3 4 5 6 7 (% ) P re se n ta se P en ye m b u h an L u k a Hari Pengorbanan Hari Ke-7 K(-) K(+) P1 (20%) P2 (40%)
Gambar  3. Grafik  Presentase  Penyembuhan Luka Bakar Pengorbanan Hari Ke-7.
Pada  hari  ke-7  menunjukkan  bahwa  ada perbedaan  bermakna  (p<0,05)  antara  kelompok tikus  pemberian  ekstrak  daun  binahong  40% dengan  kelompok  tikus  tanpa  pengobatan, pemberian  Bioplacenton  dan  ekstrak  daun binahong  20%.  Kelompok  tikus  pemberian Bioplacenton  dan  ekstrak  daun  binahong  20% tidak  memberikan  perbedaan  yang  bermakna (p>0,05).  Urutan  rerata  tebal  jaringan  granulasi dari  yang  terbesar  adalah  kelompok  tikus pemberian  ekstrak  daun  binahong  40%,  salep Bioplacenton,  ekstrak  daun  binahong  20%  dan kelompok  tikus  tanpa  pengobatan.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  binahong konsentrasi  40%  memiliki  daya  pembentukan jaringan granulasi yang lebih besar dibandingkan dengan  ekstrak  daun  binahong  20%  dan Bioplacenton.
Ekstrak daun binahong 40% memiliki daya penyembuhan luka yang lebih cepat dibandingkan dengan  ekstrak  daun  binahong  20%  karena kandungan zat aktifnya lebih banyak dan zat yang terkandung didalamnya berupa alkaloid, flavonoid,  saponin,  tanin  dan  steroid.  Saponin mempunyai  kemampuan  sebagai  pembersih  dan antiseptik  yang  berfungsi  membunuh  atau mencegah  pertumbuhan  dari  mikroorganisme yang  timbul  pada  luka  sehingga  luka  tidak mengalami infeksi yang berat (Fisher, Marsh and Lazova, 2003).
Flavonoid mempunyai kemampuan sebagai antioksidan  yang  mampu  mengurangi  atau mengubah  radikal  bebas.  Radikal  bebas  dapat menghambat terjadinya proliferasi sel, menghambat  reaksi  inflamasi,  serta menghambat kontraksi  dari  jaringan  kolagen  yang  terbentuk, yang keseluruhannya dapat menyebabkan terhambatnya  proses  penyembuhan  luka  (Paju, Yamlean  dan  Kojong,  2013).  Antioksidan  akan berikatan  dengan  radikal  bebas  yang  dapat
menyebabkan  kerusakan  membran  sel  sehingga sel tidak bisa berfungsi secara sempurna. Dengan adanya  ikatan  ini,  maka  kerusakan  membran  sel dapat  berkurang  sehingga  fase  proliferasi  dapat terjadi  (Ardiana,  Kusuma  dan  Firdausy,  2015). Alkaloid  diduga  memiliki  kemampuan  sebagai antibakteri  dengan  mekanisme  mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada  sel bakteri,  sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan kematian sel tersebut (Robinson, 1995).
Steroid yang merupakan sumber antioksidan  pada  tanaman  binahong  karena kandungan  senyawa  didalamnya  yaitu  asam oleanolik.  Sistem  perlindungan  oleh  asam oleanolik  adalah  dengan  mencegah  racun  yang masuk  ke  dalam  sel  dengan  cara  meningkatkan sistem  pertahanan  sel.  Asam  oleanolik  juga bersifat  sebagai  antiinfalamasi.  Kandungan  nitrit oksida  di  asam  oleanolik  merupakan  antioksidan kuat  yang  bersifat  racun  pada  bakteri  yang merugikan,  yang  dapat  berfungsi  sebagai  toksin yang  kuat  untuk  membunuh  bakteri.  Dengan demikian, asam oleanolik akan memperkuat daya tahan sel terhadap infeksi sekaligus memperbaiki sel rusak (Mardiana, 2012).
Pada kelompok tikus pemberian
Bioplacenton (K+) juga memiliki daya penyembuhan  yang  selaras  dengan  ekstrak  daun binahong  20%  karena  Bioplacenton  mengandung ekstrak plasenta yang bekerja memicu pembentukan jaringan baru pada luka bakar yang mekanisme  kerjanya  terkait  dengan  peningkatan faktor pertumbuhan beta (TGF-β) pada fase awal penyembuhan  luka  dan  peningkatan  faktor pertumbuhan  endotel  vaskular  (VEGF)  pada  fase akhir  dan  neomisin  sulfat  untuk  mencegah  atau mengatasi  infeksi  bakteri  gram  negatif  yang bekerja  dengan  cara  mengikat  secara  reversibel terhadap  sub  unit  30s  dari  ribosom  bakteri sehingga  menghambat  sintesa  protein  yang  pada akhirnya  menghambat  pertumbuhan  bakteri tersebut.  Sedangkan  pada  kelompok  tikus  tanpa pengobatan  memiliki  daya  penyembuhan  yang paling rendah karena tidak diberikan pengobatan tetapi  tetap  memiliki  daya  penyembuhan  dilihat dari pengecilan diameter luka karena pada tubuh yang  sehat  mempunyai  kemampuan  alami  untuk melindungi dan memulihkan dirinya (Taylor, Lilis and Lemone., 1997).
K- K+ P1 P2
Gambar 4. Mikroskopik Ketebalan Jaringan Granulasi Kulit disetiap Kelompok Perlakuan ( Pewarnaan HE, Pembesaran 100x ) Keterangan : Garis Kuning Menunjukkan Ketebalan Jaringan Granulasi (µm)

## KESIMPULAN
Ekstrak  daun  binahong  konsentrasi  20% dan  40%  memiliki  potensi  meningkatkan ketebalan jaringan granulasi dan waktu penyembuhan  pada  luka  bakar  tikus.  Terdapat perbedaan  potensi  pada  setiap  konsentrasi
ekstrak  daun  binahong  dimana  pada  konsentrasi 20%  telah  memberikan  efek  penyembuhan, sedangkan  pada  konsentrasi  40%  memberikan efek penyembuhan yang lebih efektif dapat dilihat pada presentase penyembuhan luka bakar.

## DAFTAR PUSTAKA
Ansel, H.C. 1985, Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi , 4 th ed., Diterjemahkan  dari  Bahasa  Inggris  oleh  Farida,  UI  Press, Jakarta.
Ardiana,  T.,  Kusuma,  A.R.P.  dan  Firdausy,  M.D.  2015, Efektivitas Pemberian Gel Binahong ( Anredera cordifolia ) 5%
terhadap  Jumlah  Sel  Fibroblas  pada  Soket  Pasca  Pencabutan Gigi Marmut ( Cavia cobaya ), Odonto Dent J , 2: 64-70.
Astuti,  S.M.,  Sakinah,  M.,  Andayani,  R.  and  Risch,  A.  2011, Determination of saponin compound from Anredera cordifolia (Ten.)  Steenis  plant  (Binahong)  to  potential  treatment  for several diseases, Journal of Agriculture Science , 3(4): 224-32.
Fisher,  N.M.,  Marsh,  E.  and  Lazova,  R.  2003,  Scarlocalized Argyria Secondary to Silver Sulfadiazine Cream, Journal of the American Academy of Dermatology , 49(4): 730-2.
Kumar,  V.,  Cotran,  R.S.  and  Robbins,  S.L.  2007, Buku  Ajar Patologi , 7 th ed.,  Diterjemahkan dari Bahasa Inggris oleh Awal Prasetyo, Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 1: 75-84.
Mardiana,  L.  2012, Daun  Ajaib  Tumpas  Penyakit ,  Penebar Swadaya, Jakarta.
Moenadjat, Y. 2003, Luka Bakar : Masalah dan Tatalaksana , 4 th ed., Balai Penerbit FKUI, Jakarta.
Nurdiana,  Hariyanto  dan  Musrifah.  2008,  ‘Perbedaan kecepatan  penyembuhan  luka  bakar  derajat  II  antara perawatan  luka  menggunakan  virgin  coconut  oil  ( Cocos nucifera )  dan  normal  salin  pada  tikus  putih  ( Rattus novergicus )  Strain  Wistar’, Skripsi ,  Sarjana  Kedokteran, Universitas Brawijaya, Malang.
Paju, N., Yamlean, P.V.Y. dan Kojong, N. 2013, Uji efektivitas ekstrak  daun  Bonahong  ( Anredera  cordifolia (Ten)  Steenis) pada  kelinci  ( Oryctolagus  cuniculus )  yang  terinfeksi  bakteri Staphylococcus  aureus , Jurnal  Ilmiah  Farmasi  – UNSRAT, 2(1): 51-61.
Paskartini,  T.G.  2017,  ‘Parameter  Standarisasi  dari  Tanaman Segar,  Simplisia  dan  Ekstrak  Etanol  Daun  Binahong ( Anredera  cordifolia )  dari  Tiga  Daerah  Berbeda’, Skripsi ,
Sarjana  Farmasi,  Universitas  Katolik  Widya  Mandala, Surabaya.
Rahma,  F.N.  2014,  ‘Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Daun Binahong  ( Anredera  cordifolia (Tenore)  Steenis)  Terhadap Re-epitelisasi  Pada  Luka  Bakar  Tikus Sprague  dawley ’, Skripsi ,  Sarjana  Kedokteran,  Universitas  Islam  Negeri  Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Robinson,  T.  1995, Kandungan  Organik  Tumbuhan  Tinggi , Diterjemahkan  dari  Bahasa  Inggris  oleh  Padmawinata, Penerbit ITB, Bandung.
Suratman,  S.A.,  Sumiwi.,  dan  Gozali,  D.  1996,  Pengaruh ekstrak  antanan  dalam  bentuk  salep,  krim  dan  jelly  terhadap penyembuhan luka bakar, Cermin Dunia Kedokteran , 108: 31- 36.
Syamsuhidajat,  R.  dan  Wim,  D.J.  2005, Buku  Ajar  Ilmu Bedah , Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Taylor,  C.,  Lilis,  C.  and  LeMone,  P.  1997, Fundamental  of Nursing : The  Art  And  Science  Of  Nursing  Care ,  Lippincott- Raven, Philadelphia.
Voigt,  R.  1995, Buku  Pelajaran  Teknologi  Farmasi Edisi  V. Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, hal. 570, 580-582.
Zulhilmi.  2015,  ‘Gambaran  Makroskopik  dan  Mikroskopik Penyembuhan  Luka  Bakar  Derajat  IIB  Menggunakan  Pasta Gigi  Pada  Tikus  ( Rattus  norvegicus )’, Skripsi ,  Sarjana Kedokteran Hewan, Universitas Syiah Kuala, Banda Aceh.