Abstrak — Jeruk  JC (Japansche  Citroen) merupakan  salah  satu jenis  jeruk  yang  sering  digunakan  sebagai  stok  batang  bawah. Batang  bawah  harus  mampu  tumbuh  dan  beradaptasi  pada kondisi  lingkungan  yang  kurang  baik,  salah  satunya  terhadap cekaman salinitas. Tujuan penelitian ini yaitu untuk mengetahui pengaruh  media  dengan  konsentrasi  NaCl  yang  berbeda terhadap  pertumbuhan  kalus  jeruk  JC (Japansche  Citroen) secara in  vitro . Eksplan  berupa  kalus  jeruk  JC  diinokulasikan pada  media  MS  cair  dengan  penambahan  NaCl  konsentrasi  0 mM,  50  mM,  100  mM,  dan  150  mM.  Parameter  pengamatan yang  digunakan  yaitu  berat  basah  kalus.  Data  dianalisis menggunakan  ANOVA One  Way dan  dilanjutkan  dengan  uji Tukey  pada  taraf  kepercayaan  95%.  Berdasarkan  hasil penelitian  ini  konsentrasi  NaCl  berpengaruh  nyata  terhadap pertumbuhan  kalus  jeruk  JC.  Pada  konsentrasi  150  mM  kalus jeruk JC dapat bertahan hidup terhadap kondisi salinitas tinggi. Berat basah kalus tertinggi yaitu pada perlakuan kontrol sebesar 0,876  g,  sedangkan  berat  basah  terendah  yaitu  sebesar  0,573  g pada perlakuan NaCl konsentrasi 150 mM.
Kata  Kunci — Japansche  Citroen,  Kalus  batang  bawah,  NaCl, Pertumbuhan kalus.

## I. PENDAHULUAN
ERUK  merupakan  salah  satu  komoditas  hortikultura  yang penting,  karena  kandungan  nutrisi  dan  fungsionalnya. Konsumsi  segar  dan  olahan  dari  buah  jeruk  yang  tinggi, menyebabkan  nilai  komersialnya  menjadi  daya  tarik  petani dan  pedagang.  Oleh  karena  itu  konsumsi  dan  perdagangan jeruk  selalu  meningkat  setiap  tahunnya.  Hal  ini  ditandai dengan  semakin  meningkatnya  konsumsi  jeruk  di  Indonesia dari  tahun  ke  tahun.  Konsumsi  jeruk  pada  tahun  1995-2004 mengalami  peningkatan  sebesar  12,15  %  per  tahun  [1].  Total konsumsi  buah  jeruk  di  Indonesia  pada  tahun  2004  mencapai 2161,90  ribu  ton,  sedangkan  produksi  jeruk  dalam  negeri hanya 2071,08 ribu ton [2].
Produktivitas jeruk  nasional beberapa tahun belakangan ini cenderung  mengalami  penurunan.  Pada  tahun  2011  produksi jeruk sebesar 1.721.880 ton menjadi 1.498.394 ton pada tahun 2012,  tahun  2014  produksi  jeruk  sebesar  1.785.256  ton menjadi  1.744.330  ton  pada  tahun  2015  [3].  Menurunnya produktivitas jeruk tersebut antara lain disebabkan oleh  hama dan  penyakit,  terutama  CPVD (Citrus  Vein  Phloem Degeneration )  yang  disebabkan  oleh  bakteri  patogen  [4],  dan berkurangnya  areal  pertanaman  yang  subur  akibat  peralihan fungsi  keluar  sektor  pertanian  [5].  Penggunaan  batang  bawah
pada  budidaya  (okulasi)  tanaman  jeruk  yang  kurang  sesuai dengan  batang  atas  dapat  menjadi  penghambat  produksi tanaman [6].
Berbagai langkah dilakukan untuk meningkatkan produktivitas  jeruk,  antara  lain  perbaikan  genetik  batang bawah  jeruk.  Peran  batang  bawah  dalam  produktivitas tanaman jeruk sangat penting untuk mendukung pertumbuhan serta  adaptasi  pada  kondisi  lingkungan  yang  kurang  baik. Batang  bawah  tanaman  jeruk  berperan  dalam  mencegah serangan  penyakit  pada  akar,  karena  batang  atas  pada umumnya  sangat  peka  terhadap  penyakit  tersebut.  Batang bawah tanaman jeruk harus mempunyai kompatibilitas genetik yang  tinggi  dengan  batang  atas (scion) ,  serta  mempunyai sistem perakaran yang baik [7][8].
Jeruk  JC (Japansche  Citroen) ( Citrus  limonia Osbeck.) merupakan  salah  satu  jenis  jeruk  yang  sering  digunakan sebagai  batang  bawah.  Genotipe  ini  memiliki  keunggulan jeruk  tipe  batang  bawah  yaitu  tingkat  kompatibilitasnya  yang tinggi dengan batang atas dan sistem perakaran yang baik [9].
Pemuliaan batang bawah jeruk untuk ketahanan dan toleran terhadap  cekaman  abiotik  di  lahan  marginal  merupakan  salah satu  prioritas.  Lahan  marginal  adalah  lahan  yang  mempunyai potensi  rendah  sampai  sangat  rendah  yang  masih  dapat dimanfaatkan  sebagai  lahan  pertanian,  misalnya  lahan  pasang surut,  lahan  salin,  gambut,  dan  lahan  yang  berada  di  dekat areal pertambangan [7]. Salinitas merupakan cekaman abiotik yaitu  kondisi  tanah  yang  ditandai  dengan  konsentrasi  garam terlarut  yang  tinggi  [10].  Salinitas  menjadi  salah  satu  faktor pembatas yang mampu menyebabkan menurunnya pertumbuhan dan produktivitas tanaman, serta pada konsentrasi  tertentu  dapat  mengakibatkan  kematian  tanaman [11][12].
Berbagai  metode  digunakan  untuk  mendapatkan  tanaman dengan ketahanan/toleransi terhadap cekaman abiotik. Metode secara in  vitro digunakan  untuk  mengetahui  respon  kalus terhadap  cekaman  salinitas.  Metode  ini  mudah  dimodifikasi untuk pertumbuhan eksplan pada kondisi kadar garam dengan konsentrasi tertentu yang diharapkan dapat menimbulkan stres pada  eksplan.  Kondisi  tersebut  akan  merubah  pola metabolisme  sel  kalus  sehingga sel  mampu berproliferasi  dan bertahan pada kondisi dibawah tekanan kadar garam [13].
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  media dengan konsentrasi NaCl yang berbeda terhadap pertumbuhan kalus jeruk JC ( Japansche Citroen ) secara in vitro.

## Pertumbuhan Kalus Jeruk JC ( Japansche Citroen ) pada Media Murashige and Skoog dengan Berbagai Konsentrasi NaCl
Ika Dian Puspitasari, Wirdhatul Muslihatin, dan Dita Agisimanto Departemen Biologi, Fakultas Ilmu Alam, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
Balai Penelitian Tanaman Jeruk dan Buah Subtropika (Balitjestro)
e-mail : agisimanto@gmail.com
J

## II. METODOLOGI

## A. Pembuatan Media
Media  MS  dimasukkan  ke  dalam  gelas  beker,  diikuti dengan  10  ml  vitamin  dan  100  mg/L  myo  inositol.  Sumber karbon yang digunakan adalah sukrosa dengan konsentrasi 30 g/L.  Media  dibagi  dalam  4  gelas  beker  dengan  volume  yang sama.  Setiap  media  ditambahkan  NaCl  dengan  kombinasi konsentrasi  0  (Cl 1 ),  50  (Cl 2 ),  100  (Cl 3 )  dan  150  mM  (Cl 4 ). Medium  direbus  hingga  mendidih  selama  5-10  menit,  dan ditambahkan  aquades  sampai  volume  250  mL  setiap  jenis media.  Medium  dihomogenkan  menggunakan magnetic  stirer kemudian  diikuti  dengan  penetapan  pH  pada  kisaran  5.7-5.8 dengan penambahan NaOH atau HCl. Medium dengan volume 25  mL  dimasukkan  ke  dalam  erlenmeyer,  ditutup  dengan alumnium  foil  dan  plastik  wrap.  Semua  medium  dimasukkan ke  dalam  autoklaf  untuk  disterilisasi  selama  10  menit  pada suhu 121 0 C.

## B. Inokulasi Kalus Pada Media
Eksplan berupa kalus jeruk JC ditimbang sebanyak 125 mg dan  dimasukkan  ke  dalam  setiap  erlenmeyer  pada  media dengan konsentrasi NaCl yang berbeda, media Cl 1 (0 mM) , Cl 2 (50 mM), Cl 3 (100 mM), dan Cl 4 (150 mM). Media yang telah berisi  kalus  di  letakkan  pada rotary  shaker dengan  kecepatan 50-75 rpm.

## C. Peremajaan Media
Peremajaan media dilakukan setiap 2 minggu sekali setelah dilakukannya  pengamatan  kalus  jeruk  JC.  Media  cair  dalam erlenmeyer dibuang dan diganti media baru dengan komposisi media yang sama dengan media awal.

## D. Pengamatan Pertumbuhan Kalus
Pengamatan  pertumbuhan  kalus  dilakukan  pada  awal inokulasi  dan  setiap  2  minggu  hingga  12  minggu.  Variabel yang  diamati  adalah  berat  basah  kalus.  Berat  basah  kalus dihitung  dengan  cara  menimbang  berat  segar  kalus  akhir (Final growth).

## E. Rancangan Penelitian dan Analisis Data
Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  satu  faktor  yaitu  konsentrasi NaCl  pada  media  dan  dilakukan  pengulangan  sebanyak  10 kali.
Data  yang  diperoleh  dari  hasil  pengamatan  akan  dianalisis menggunakan ANOVA One Way untuk mengetahui pengaruh konsentrasi  NaCl  yang  berbeda  pada  media  terhadap pertumbuhan kalus jeruk JC (Japansche Citroen) . Hipotesis yang digunakan sebagai berikut: H 0 : Konsentrasi NaCl tidak berpengaruh terhadap pertumbuhan kalus jeruk JC (Japansche Citroen) . H 1 : Konsentrasi NaCl berpengaruh terhadap pertumbuhan kalus jeruk JC (Japansche Citroen) . Jika  H 0 ditolak  atau  konsentrasi  NaCl  yang  berbeda memberi  pengaruh  terhadap  pertumbuhan  kalus  jeruk  JC (Japansche  Citroen) ,  maka  dilakukan  uji  Tukey  pada  taraf keperca yaan  95%  (α= 0,05)  untuk  mengetahui  besarnya perbedaan tiap perlakuan terhadap kontrol.

## III. PEMBAHASAN
Perbedaan konsentrasi NaCl pada media tumbuh berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  kalus  jeruk  JC,  hal  ini dapat  dilihat  dari  berat  basah  kalus  (Gambar  1).  Penambahan NaCl  pada  media  merupakan  perlakuan  cekaman  salinitas. Gambar 1 menunjukkan kalus jeruk JC pada semua perlakuan mengalami  peningkatan  berat  basah  dalam  setiap  minggunya sampai  pada  akhir  pengamatan.  Berat  basah  kalus  tertinggi terjadi  pada  perlakuan  kontrol  yaitu  sebesar  0,876  g, sedangkan  berat  basah  terendah  yaitu  sebesar  0,573  g  pada perlakuan NaCl dengan konsentrasi 150 mM (Tabel 1).
Kalus  jeruk  JC  mampu  bertahan  hidup  pada  media  dengan konsentrasi  NaCl  tinggi  (150  mM),  meskipun  mengalami reduksi  pertumbuhan  pada  perlakuan  NaCl  dibandingkan kontrol.  [14],  menyatakan  bahwa  adanya  NaCl  pada  media menyebabkan  cekaman  salinitas  serta  dalam  konsentrasi tertentu dapat menyebabkan penyerapan hara dan pengambilan air terhalang, sehingga menyebabkan pertumbuhan lambat.
Penambahan  NaCl  pada  media  menyebabkan  sel-sel  pada tanaman  melakukan regulasi  dalam  metabolismenya sehingga mampu bertahan hidup dalam kondisi cekaman  salinitas [13]. Mekanisme  adaptasi  yang  dilakukan  oleh  sel  saat  tercekam NaCl  adalah  dengan  mengakumulasi  ion-ion  organik  seperti betain, asam amino bebas, karbohidrat terlarut dan prolin atau senyawa  dengan  berat  molekul  yang  rendah  [15].  Senyawa- senyawa  tersebut  memberikan  perlindungan  pada  tanaman dari dampak cekaman melalui mekanisme yang berbeda, yakni keseimbangan  osmotik  seluler,  detoksifikasi Reactive  Oxygen Species , menjaga integritas membran dan menstabilkan enzim atau  protein  [16].  Sehingga  kalus  tetap  dapat  tumbuh  pada kondisi cekaman salinitas.
Berdasarkan hasil analisis  ANOVA One Way yaitu p value sebesar 0,000 (p value < 0,05), menunjukkan bahwa perlakuan konsentrasi  NaCl  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  kalus jeruk  JC  dengan  indikator  berat  basah  kalus.  Selanjutnya, dilakukan  uji  Tukey  untuk  mengetahui  perbedaan  nyata  antar perlakuan  terhadap  berat  basah  dengan  hasil  analisis menunjukkan  terdapat  perbedaan  nyata  antar  perlakuan.  Pada tabel  1  terdapat  perbedaan  berat  basah  kalus  antara  media tanpa  NaCl  (kontrol)  dan  media  dengan  NaCl.  Penambahan NaCl ke dalam media tumbuh dengan konsentrasi 50 mM, 100 mM,  dan  150  mM  menyebabkan  pertumbuhan  kalus  lebih rendah dibandingkan kontrol. Meskipun demikian berat basah kalus  pada  konsentrasi  50  mM,  100  mM,  dan  150  mM  tidak menunjukkan perbedaan berat basah yang signifikan.
Pertumbuhan  kalus  yang  menurun  pada  tiap  perlakuan diyakini  merupakan  pengaruh  langsung  cekaman  salinitas karena adanya NaCl pada media. Penurunan berat basah kalus pada konsentrasi NaCl yang semakin tinggi dikarenakan kalus mengalami  cekaman  salinitas,  sehingga  menginduksi  stres osmotik,  yang  berdampak  pada  pertumbuhan  sel  [17]. Pertumbuhan  kalus  jeruk  JC  mengalami  reduksi  dengan penambahan konsentrasi NaCl pada media. Kondisi ini umum terjadi  pada  berbagai  peristiwa  cekaman  salinitas.  Berbagai penyebab  penurunan  pertumbuhan  dijelaskan  dalam  berbagai laporan [18][19][20] dan [21].
Gambar 1. Grafik berat basah kalus jeruk JC.
Tabel 1. Pengaruh NaCl terhadap berat basah kalus Perlakuan Berat basah kalus (g) 0 mM 0,876 a 50 mM 0,640 b 100 mM 0,610 b 150 mM 0,573 b
Keterangan: Huruf yang sama menunjukkan tidak berbeda nyata berdasarkan uji Tukey dengan tingkat kepercayaan 95% (α=0,05%).
Pada  kondisi  cekaman  salinitas  terjadi  penghambatan metabolisme akibat gangguan ketidakseimbangan ion dan efek osmotik,  sehingga  sel  membutuhkan  energi  lebih  untuk melakukan metabolisme dan berpengaruh terhadap penurunan pertumbuhannya  [22]  dibandingkan  tanpa  cekaman  salinitas [17][19].  Energi  yang  dihasilkan  lebih  banyak  digunakan untuk  mengatur  penyesuaian  osmotik  dan  berdampak  pada penurunan  berat  basah  kalus  [23],  selain  itu  adanya  cekaman salinitas  dengan  konsentrasi  tertentu  dapat  menyebabkan pertumbuhan abnormal atau lambat [24].
Berlebihnya  kandungan  Na + dan  Cl - dapat  menghambat asimilasi  Nitrogen  yakni  penyerapan  nitrat  (NO 3 - )  dimana penting  untuk  pertumbuhan  tanaman  [25].  Cekaman  salinitas juga  dapat  menurunkan  tingkat  K + dan  Ca 2+ ,  dimana  ion  Na + mengalami peningkatan. Telah dilaporkan oleh [26] bahwa ion K + dan  Ca 2+ berperan  penting  dalam  mempertahankan keseimbangan  osmotik.  Menurut  [14],  tingginya  kandungan ion  Na + dalam  sel  menghambat  pengambilan  K + yang menyebabkan  peningkatan  rasio  ion  Na + /K + ,  sehingga keseimbangan  ion  pada  sel  akan  terganggu  dan  akan berdampak pada terganggunya hingga kerusakan struktur serta fungsi  integritas  membran.  Pada  kondisi  tersebut,  sel  akan melakukan  mekanisme  untuk  tetap  berada  dalam  kondisi normal yaitu dengan mempertahankan rendahnya kadar garam pada  sitoplasma  [27][28].  Hal  ini  dilakukan  dengan mentransferkan  ion  Na + ke  dalam  vakuola  [29][30][13][31] dan  [32],  dimana  vakuola  merupakan  tempat  utama penyimpanan  garam  pada  tanaman  terhadap  kondisi  salinitas [33].

## IV. KESIMPULAN
Kesimpulan  penelitian  ini  adalah  konsentrasi  NaCl berpengaruh nyata terhadap pertumbuhan kalus jeruk JC. Pada konsentrasi  150  mM  kalus  jeruk  JC  dapat  bertahan  hidup terhadap  kondisi  salinitas  tinggi.  Berat  basah  kalus  tertinggi yaitu pada perlakuan kontrol sebesar 0,876 g, sedangkan berat basah  terendah  yaitu  sebesar  0,573  g  pada  perlakuan  NaCl dengan konsentrasi 150 mM.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  B.  Hutabarat  and  A.  Setyanto, “ Komoditas  Jeruk  Indonesia  di Persimpangan  Jalan  Pasar  Domestik  dan  Internasional, ” in Prosiding Seminar Nasional Jeruk , 2007.
[2]  Departemen  Pertanian, “ Prospek  dan  Arah  Pengembangan  Agribisnis Jeruk Tahun 2004, ” 2009. .
[3]  [BPS]  Badan  Pusat  Statistika, “ Data  Luas  panen,  Produksi,  dan Produktivitas Jeruk, ” 2015.
[4]  M.  Garnier,  S.  Jagoueix,  L.  P.  R.  Cronje,  H.  F.  Roux,  and  J.  M.  Bove,
“ Genomic  Characterization  of  a  Litobacter  Present  in  an  Ornamental Rutaceus Tree. Clodendrum Capense, in Western Cape Province of South Africa. Proposal a Candidatus Liberobacter africanum Subsp. Capensis, ” Int. J. Syst. Evol. Microbiol. , vol. 50, pp. 2119 – 2125, 2000.
[5]  Martias, “ Respon  Pertumbuhan  Bibit  Jeruk  JC  terhadap  Pemberian CaCO3 dan  Pupuk  P  Pada  Tanah  Ultisol, ” J.  Hortik. ,  vol.  14,  no. 1, pp. 33 – 40, 2004.
[6]  Karmanah, “ Peningkatan  Ketahanan  Batang  Bawah  Jeruk  Pada  Lahan Masam Melalui Kultur In Vitro, ” Institut Pertanian Bogor, 2009. [7]  M.  Kosmiatin,  A.  Husni,  R.  Yunita,  and  C.  Martasari, “ Peningkatan Keragaman  Genetik  Pada  Jeruk  Batang  Bawah  untuk  Ketahananan terhadap  Lahan  Masam  (Genetic  Diversity  Improvement  of  Citrus Rootstock for Resistance on Acid Soil), ” in Prosiding Seminar Nasional Jeruk , 2007, pp. 219 – 227.
[8]  N.  F.  Devy,  A.  Sugiyanto,  and  F.  Yulianti, “ Daya  Tumbuh  Tanaman Jeruk  Kalamondin  Hasil  Perbanyakan  via  Somatik  Embriogenesis  In Vitro  pada  Batang  Bawah  JC, ” J.  Hortik. ,  vol.  21,  no.  3,  pp.  214 – 224, 2011.
[9]  R. Triatminingsih and Karsinah, “ Perbanyakan Bibit Jeruk Citromelo dan JC secara In Vitro, ” J. Hortik. , vol. 14, no. 4, pp. 238 – 245, 2004.
[10] R.  Munns  and  M.  Tester, “ Mechanisms  of  Salinity  Tolerance, ” Annu. Rev. Plant Biol , vol. 59, pp. 651 – 681, 2008.
[11] J. T. Flowers, “ Improving Crop Salt Tolerance, ” J. Exp. Bot , vol. 396, no. 55, pp. 307 – 319, 2004.
[12] M.  R.  Foolad, “ Recent  Advances  in  Genetics  of  Salt  Tolerance  in Tomato, ” Plant Cell. Tissue Organ Cult. , vol. 76, pp. 101 – 119, 2004.
[13] S.  Yokoi,  A.  B.  Ray,  and  M.  H.  Paul., “ Salt  Stress  Tolerance  of  Plant. JIRCAS  Working  Report  Center  of  Environmental  Stress  Physiology, ” Japan, 2002.
[14] J.  Summart,  P.  Thanonkeo,  S.  Panichajakul,  P.  Prathepha,  and  M. Mcmanus, “ Effect  of  Salt  Stress  on  Growth,  Inorganic  Ion  and  Proline Accumulation  in  Thai  Aromatic  Rice,  Khao  Dawk  Mali  105,  Callus Culture, ” African J. Biotechnol , vol. 9, pp. 145 – 152, 2010.
[15] W. Al-Shorafa, A. Mahadeen, and K. Al-Absi, “ Evaluation for Salt Stress Tolerance  in  Two  Strawberry  Cultivars, ” Am.  J.  Agric.  Biol.  Sci ,  vol.  9, no. 3, pp. 334 – 341, 2014.
[16] E.  Ramezani,  M.  G.  Sepanlou,  and  H.  A.  B.  Naghdi, “ The  Effect  of Salinity  on  The  Growth,  Morphology  and  Physiology  of  Echium amoenum Fisch. & Mey, ” African J. Biotechnol , vol. 10, no. 4, pp. 8765 – 8773, 2011.
[17] C. Ghoulam, A. Foursy, and K. Fares, “ Effects of Salt Stress on Growth, Inorganic  Ions  and  Proline  Accumulation  in  Relation  to  Osmotic Adjustment in Five Sugar Beet Cultivars, ” Environ. Exp. Bot , vol. 47, no. 1, pp. 39 – 50, 2002.
[18] H.  H.  Khuder  and  Y.  I.  H.  Al-Taei, “ Effect  of  Salt  Stress  On  Some Growth Indicators and Cellular Components of Wheat (Triticum aestivum L.) Callus, ” Int. J. Appl. Agric. Sci , vol. 1, no. 4, pp. 91 – 94, 2015.
[19] R.  Yunita,  N.  Khumaida,  D.  Sopandie,  and  I.  Mariska., “ Growth  and Regeneration  of  Rice  (Oryza  sativa  L.)  Callus  in  Salt  Medium, ” Biosci. Res , vol. 11, no. 1, pp. 04 – 09, 2014.
[20] Z. N. Al Hattab, M. S. Hamdalla, and A. M. Mohammed, “ Salinity Effect on Wheat Triticum aestivum L. Callus Growth and Development, ” Int. J. Multidiscip. Curr. Res , vol. 3, pp. 1185 – 1188, 2015.
[21] V.  Y.  Patade,  P.  Suprasanna, and  V. A.  Bapat, “ Effects  of  Salt  Stress in Relation  to  Osmotic  Adjustment  on  Sugarcane  (Saccharum  officinarum L.) Callus Cultures, ” Plant Growth Regul , vol. 55, pp. 169 – 173, 2008.
[22] I. W. A. Ubudiyah and T. Nurhidayati, “ Respon Kalus Beberapa Varietas Padi  (Oriza  sativa  L.)  pada  Kondis  Cekaman  Salinitas  (NaCl)  secara  in Vitro, ” J. Sains dan Seni Pomits , vol. 2, no. 2, pp. 138 – 143, 2013.
[23] S.  Babu,  A.  Sheeba,  P.  Yogameenakshi,  J.  Anbumalarmathi,  and  P. Rangasamy, “ Effect  of  Salt  Stress  in  The  Selection  of  Salt  Tolerant Hybrids in Rice Under In vitro and In vivo condition, ” Asian J. Plant. Sci , vol. 6, no. 1, pp. 137 – 142, 2007.
[24] M.  Pessarakli, “ Dry  Matter  Yield,  Nitrogen-15  Absorption,  and  Water Uptake by Green Bean under Sodium Chloride Stress, ” Crop. Sci , vol. 31, pp. 1633 – 1640, 1991.
[25] R.  Yuniati, “ Penapisan  Galur  Kedelai  Glycine  max  (L.)  Merrill  Toleran terhadap  NaCl  untuk  Penanaman di Lahan  Salin, ” Makara Sains ,  vol.  8, no. 1, pp. 21 – 24, 2004.
[26] D.  D.  Hirschi, “ The  Calcium  Conundrum,  Both  Versatile  Nutrient  and Specific Signal, ” Plant Physiol , vol. 136, pp. 2438 – 2442, 2014.
[27] D.  Schachtman  and  W.  Liu, “ Molecular  Pieces  To  The  Puzzle  of  The Interaction  Between  Potassium  and  Sodium  Uptake  in  Plants, ” Trends Plant Sci , vol. 4, pp. 281 – 287, 1999.
[28] P.  M.  Hasegawa,  R.  A.  Bressan,  K.  J.  Zhu,  and  J.  H.  Bohnert, “ Plant
Cellular  and  Molecular  Responces  to  High  Salinity, ” Ann.  Rev.  Plant Physiol , vol. 51, pp. 463 – 499, 2000.
[29] E. Blumwald, G. S. Aharon, and M. P. Apse, “ Sodium Transport in Plant Cells, ” Biochim. Biophys. Acta , vol. 1465, pp. 140 – 151, 2000.
[30] B. S. Wang, U. Luttge, and R. Ratajczak, “ Effects of Salt Treatment and Osmotic  Stress  on  V-ATPase  and  V-PPase  in  Leaves  of  The  Halophyte Suaeda Salsa, ” J. Exp. Bot , vol. 52, no. 365, pp. 2355 – 2365, 2001. [31] J.  K.  Zhu, “ Regulation  of  Ion  Homeostasis  Under  Salt  Stress, ” Curr. Opin. Plant Biol , vol. 6, pp. 441 – 445, 2003.
[32] Q. S. Qiu, 0Y. Guo, F. J. Quintero, K. S. S. J. M. Pardo, and J. K. Zhu.,
“ Regulation  of  Vacuolar  Na+/H+  Exchange  in  Arabidopsis  thaliana  by The  Salt  Overly  Sensitive  (SOS)  Pathway, ” J.  Biol. Chem ,  vol.  279, pp. 207 – 215, 2004.
[33] I.  Nemati,  F.  Moradi,  S.  Gholizadeh,  E.  S.  Mortazavi,  and  M.  Omidi,
“ Vacuolar  Compartmentation  of  Solutes  in  Meristematic  Cells  and Protoplasts of Salt Sensitive and Tolerant Cultivars of Rice (Oryza sativa L.) Determined by Vacuolar Volume Changes, ” Intl. J. Agric. Crop. Sci , vol. 4, no. 6, pp. 310 – 316, 2012.