http://jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindo/index
Aktivitas Antibakteri Isolat Bakteri Endofit Tanaman Kunyit ( Curcuma longa
L.) Terhadap Pertumbuhan

## Staphylococcus aureus
Saskya Maulidya Astari 1 , Ambar Rialita 2 , Mahyarudin 3*
1 Program Studi Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura Pontianak
2 Departemen Dermatologi, Program Studi Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura Pontianak 3 Departemen Mikrobiologi, Program Studi Kedokteran, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura Pontianak
Article info Abstract History
Submission : 27-11-2020
Review : 15-04-2021 Accepted : 23-07-2021
* Email: mahyarudin@medical.untan.ac.id
DOI: 10.33096/jffi.v8i2.644

## Keywords:
Endophytic bacteria; Tumeric; Staphylococcus aureus Staphylococcus  aureus  is  a  commensal  bacterial  of  the  body  that  can become  pathogen  at  any  time.  Along  with  the  increase  of  antibacterial resistant cases, it is necessary to explore the new potential metabolites as antibacterial.  Endophytic  bacteria that live  on turmeric  (Curcuma longa
L. ) are thought to be able to produce secondary metabolites that are similar and even more varied than their host plants.To determine the antibacterial effect of secondary metabolite compounds of turmeric (Curcuma longa L .) endophytic  bacteria  on  Staphylococcus  aureus.  Endophytic  bacterial isolates  were  subcultured  on  NA  media  with  a  streak  plate  method. Antibacterial activity test useds disk diffusion method. Potential endophytic bacterial  isolates  were  characterized  based  on  colony  morphology,  cell morphology  and  biochemical  properties  and  secondary  metabolite compounds  produced  are  identified  with  a  ciulei  method. A  total  of  17 endophytic bacterial isolates were successfully subcultured. All endophytic bacterial isolates had antibacterial activity range from 7.4-13.76 mm. One of the most potential isolates was M8 isolate which had similarity with a genus Pseudomonas. The secondary metabolites that was produced bt M8 isolates  were  alkaloids,  terpenoids  and  saponins. The  most  potential endophytic bacteria as antibacterial belong to the genus Pseudomonas and had alkaloids, terpenoids and saponins.

## I. Pendahuluan
Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri Gram  positif  yang  dapat  hidup  sebagai  organisme komensal  pada  kulit  dan  selaput  lendir  manusia (Ryu et al. , 2014). Bakteri ini dapat menjadi patogen dalam keadaan tertentu karena dapat menimbulkan berbagai infeksi supuratif dengan tingkat keparahan yang bervariasi pada jaringan lunak, jaringan tulang, organ pernafasan, serta jaringan endovaskular yang menimbulkan manifestasi seperti furunkel, impetigo, osteomielitis, tonsillitis, bronkitis, pneumonia, endokarditis, meningoensefalitis hingga sepsis  dan  sering  dikaitkan  dengan  infeksi nosokomial.  Bakteri  ini  merupakan  spesies  yang paling invasif dan memiliki berbagai faktor virulensi seperti enzim-enzim yang menguraikan protein serta toksin yang merusak sel penjamu (Kurniawati AFS, Satyabakti  P,  2015;  Tong et  al. ,  2015;  Erikawati, Santosaningsih and Santoso, 2016; Husna, 2018).
Infeksi  yang  disebabkan  oleh Staphylococcus aureus ini  dapat  dilakukan  pengobatan  dengan penggunaan  antibiotik  seperti  golongan  penicillin,
tetapi  pada  beberapa  kasus  telah  dilaporkan beberapa strain  Staphylococcus  aureus yang resisten  terhadap  antibiotik  seperti Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Bahaya resistensi  antibiotik  menjadi  masalah  yang  serius baik di negara maju maupun di negara berkembang (Kemenkes RI, 2011; Takajian S, 2014). Chen dan Huang  dalam  penelitiannya  pada  tahun  2010 menyatakan  bahwa  MRSA  sekitar  28%  terjadi  di Hongkong  dan  Indonesia  serta  >70%  terjadi  di Korea  (Chen  CJ  and  Huang  YC,  2014).  Indonesia sendiri  khususnya  pasien  di  Rumah  Sakit  Dr. Seotomo  Surabaya  diperoleh  kasus  MRSA  sekitar 8,2%.  Penelitian  lain  yang  dilakukan  oleh  Phey Liana  di  Rumah  Sakit  Dr.  Cipto  Mangunkusumo (RSCM)  pada  tahun  2010  diperoleh  hasil  sekitar 32% isolat merupakan MRSA (Liana P, 2014). Dewi Erikawati, dkk juga melakukan penelitian mengenai prevalensi MRSA di RS Dr. Saiful Anwar Malang pada  tahun  2012  sebesar  45,3%  (Erikawati, Santosaningsih and Santoso, 2016).
Upaya  alternatif  pengobatan  yang  berpotensi sebagai  antibakteri  untuk  mengobati  infeksi Staphylococcus aureus dapat menggunakan tanaman  obat  seperti  tanaman  kunyit.  Kunyit termasuk  tanaman  yang  mudah  didapatkan  serta murah.  Tanaman  kunyit  memiliki  fungsi  sebagai antibakteri karena mengandung senyawa aktif yang dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri,  baik bakteri Gram positif ataupun bakteri Gram negatif, seperti Escherichia coli dan Staphylococcus aureus . Kandungan  senyawa  aktif  tersebut  kemungkinan besar  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang  juga dihasilkan  oleh  bakteri  endofit  yang  hidup  pada tanaman kunyit. Bakteri endofit dari tanaman kunyit dapat  menghasilkan  suatu  senyawa  yang  disebut metabolit  sekunder.  Mikroorganisme  endofit  dapat hidup  dan  berkembang  pada  berbagai  jaringan tanaman  tetapi  tidak  menyebabkan  penyakit  pada tanaman inangnya (Widowati Tiwit, 2016; Yuliati, 2016; Zulkifli et al. , 2016). Mikroorganisme endofit telah  berhasil  diisolasi  dan  menunjukkan  adanya aktivitas  antibakteri,  Indrawati,  dkk  dalam penelitiannya pada tahun 2018 menunjukkan bahwa bakteri  endofit  yang  diisolasi  dari  temulawak, temuireng  dan  temuputih  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  MRSA  dan Klebsiella pneumoniae yang ditunjukkan dengan pembentukan zona  hambat  yang  dihasilkan  bakteri  endofit temulawak  terhadap  MRSA  sebesar  16  mm sedangkan terhadap Klebsiella pneumoniae sebesar 8 mm sedangkan bakteri endofit temuputih terhadap bakteri Klebsiella  pneumoniae zona  hambat  yang terbentuk  sebesar  7  mm  (Indrawati,  Rossiana  and Diresna, 2018).
Mikroorganisme  endofit  mempunyai  arti ekonomis karena merupakan mikroorganisme yang mudah  ditumbuhkan,  memiliki  siklus  hidup  yang pendek  daripada  tanaman  inangnya  dan  dapat menghasilkan senyawa bioaktif dalam jumlah besar yang  kemungkinan  dapat  lebih  berpotensi  sebagai antibakteri  dibandingkan  tanaman  inang  sehingga dapat  dikembangkan  sebagai  obat.  Upaya  dalam pengembangan dan pemanfaatan potensi mikroorganisme  endofit  yang  dapat  memproduksi metabolit  sekunder  dari  tanaman  inangnya merupakan  sebuah  peluang  besar  di  masa mendatang  sebagai  alternatif  untuk  membantu mengatasi  masalah  infeksi  yang  disebabkan  oleh Staphylococcus  aureus .  Jadi  berdasarkan  uraian diatas peneliti tertarik untuk mengeksplorasi potensi antibakteri bakteri endofit tanaman kunyit terhadap bakteri Staphylococcus aureus yang merupakan satu di antara patogen penyebab infeksi.
II. Metode Penelitian

## II.1 Peremajaan Bakteri Endofit
Bakteri  endofit  yang  digunakan  didapat dari  penelitian  sebelumnya.  Sebelum  diujikan dengan  bakteri Staphylococcus  aureus ,  bakteri endofit harus dilakukan peremajaan terlebih dahulu menggunakan media NA diinokulasi bakteri endofit
melalui  metode  cawan  gores  dan  kemudian diinkubasi  pada  suhu  37 ° C  selama  24-48  jam (Rizaldi, 2018; Yuanita, 2018) .

## II.2 Produksi Metabolit Antibakteri dari Bakteri Endofit
Kultur  isolat  bakteri  pada  media  NA diambil menggunakan ose dan kemudian dimasukan pada medium cair 10 mL NB steril yang bertujuan untuk memproduksi metabolit sekunder dari bekteri endofit. Setelah itu diinkubasi selama 2-3 hari pada suhu  37 ° C  dalam  kondisi  stationer,  kemudian homogenasi menggunakan vortex . Hasil metabolit di sentrifugasi  dengan  kecepatan  13.000  rpm  selama 15 menit. Setelah itu dilanjutkan dengan uji terhadap bakteri patogen menggunakan metode difusi cakram (Adityawarman, 2017).

## II.3  Skrining  Bakteri  Endofit  yang  Berpotensi
Sebagai  Antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus
Kultur  isolat  bakteri  endofit  yang  telah diproduksi  dilakukan  uji  potensi  antibakterinya dengan  menggunakan  metode  kertas  cakram  ( disc diffusion Kirby Bauer ). Suspensi bakteri uji disebar sebanyak  150μL  pada  permukaan  media  MHA dengan menggunakan metode swab . Kertas cakram kosong dengan diameter 6 mm dicelupkan kedalam supernatan  hasil  sentrifugasi  kemudian  ditiriskan. . Selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu  37 ° C  selama  72 jam (Muharni et al. , 2014).

## II.4 Pengamatan dan Pengukuran Zona Hambat
Pengamatan  dilakukan  setelah  diinkubasi selama 24 jam. Zona hambat yang terbentuk diukur diameternya  dengan  menggunakan  jangka  sorong dalam  satuan  milimeter  (mm).  Diameter  zona hambat  yang  terbentuk  dikategorikan  tingkat responnya  berdasarkan  Tabel  1  (Tchaou  and  dkk, 1996).
Tabel  1. Klasifikasi  Zona  Hambatan  Pertumbuhan (Tchaou and dkk, 1996)
Diameter zona hambatan Respon hambatan pertumbuhan ≥26,8 mm Sangat kuat 10,4-26,8 mm Kuat 6,3-10,3 mm Sedang 1,4-6,2 mm Lemah 0 mm Tidak memiliki efek

## II.5 Identifikasi Bakteri Endofit Potensial
Bakteri  yang  memiliki  efek  aktivitas antibakteri tertinggi kemudian diidentifikasi secara biokimia  dengan    mengacu  kepada Bergey’s  of Determinative  Bacteriology ,  pengamatan  meliputi morfologi  koloni  bakteri,  morfologi  sel  dan biokimia  bakteri  serta  dilakukan  uji  kandungan metabolit  sekunder  menggunakan  metode  ciulei (Holt et al. , 2000).
III. Hasil dan Pembahasan III.1 Hasil Penelitian III.1.1 Peremajaan Bakteri Endofit Sebanyak  17  isolat  berhasil  diremajakan dari 21 isolat sebelumnya. Isolat bakteri endofit tiap cawan  petri  memiliki  karakteristik  morfologi  yang berbeda.  Isolat  bakteri  endofit  yang  berhasil diremajakan sebanyak 12 isolat  merupakan bakteri
Gram negatif dan 5 isolat lainnya merupakan bakteri Gram positif. Hasil peremajaan isolat bakteri endofit berdasarkan  pengamatan  morfologi  koloni  dan morfologi sel dapat dilihat pada Tabel 2.

## Tabel 2. Hasil Peremajaan Bakteri Endofit
No Nama Isolat Morfologi Koloni Morfologi Sel Bentuk  Permukaan Tepi Warna 1. M2 Irregular Datar Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram negatif 2. M3 Bulat Cembung Bergerigi Putih kekuningan Basil, Gram negatif 3. M4 Irregular Datar Bergerigi Putih kekuningan Basil, Gram negatif 4. M5 Irregular Datar Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram negatif 5. M6 Irregular Datar Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram negatif 6. M7 Irregular Timbul Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram negatif 7. M8 Irregular Timbul Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram negatif 8. M9 Irregular Timbul Bergerigi Putih kekuningan Basil, Gram negatif 9. M10 Irregular Datar Bergerigi Putih kekuningan Basil, Gram negatif 10. M11 Irregular Timbul Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram negatif 11. M13 Irregular Timbul Bergerigi Putih kekuningan Basil, Gram negatif 12. M14 Irregular Datar Bergelombang Putih Kekuningan Basil, Gram negatif 13. H1 Irregular Datar Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram positif 14. H2 Irregular Datar Bergelombang Putih kekuningan Coccus, Gram positif 15. H4 Irregular Datar Bergerigi Putih kekuningan Coccus, Gram positif 16. H5 Irregular Datar Bergelombang Putih kekuningan Basil, Gram positif 17. H6 Irregular Datar Datar Putih kekuningan Basil, Gram positif III.1.2 Skrining Bakteri Endofit yang Berpotensi sebagai  Antibakteri  terhadap Stapylococcus aureus
Hasil  pengujian  bakteri  endofit  sebagai antibakteri  yang  menggunakan  metode  difusi cakram menunjukkan bahwa semua isolat memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus
aureus .  Zona  hambat  yang  terbentuk  berkisar  7,4- 13,76  mm.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  dapat dilihat  pada  Tabel  3.  Gambar  pembentukan  zona hambat dapat dilihat pada Gambar 1.
Tabel 3. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Bakteri Endofit
No  Nama Isolat  Zona Hambat (mm) Interpretasi 1 Isolat H1 9,62 Sedang 2 Isolat H2 9,5 Sedang 3 Isolat H4 11,2 Kuat 4 Isolat H5 9,6 Sedang 5 Isolat H6 11,6 Kuat 6 Isolat M2 8,66 Sedang 7 Isolat M3 10,72 Kuat 8 Isolat M4 8,86 Sedang 9 Isolat M5 10,82 Kuat 10 Isolat M6 10,2 Sedang 11 Isolat M7 10,6 Kuat 12 Isolat M8 13,76 Kuat 13 Isolat M9 10,4 Kuat 14 Isolat M10 10,82 Kuat 15 Isolat M11 9,44 Sedang 16 Isolat M13 7,4 Sedang 17 Isolat M14 8,86 Sedang 18. Kontrol + 27,6 Sensitif 19. Kontrol - 0 Tidak memiliki aktivitas
Isolat  yang  memiliki  zona  hambat  terbesar  yaitu  sebesar  13,76  mm  merupakan  isolat  M8.  Isolat  M8 memiliki ciri koloni berbentuk irregular, permukaan timbul, tepi bergelombang dan berwarna putih kekuningan. Morfologi sel isolat ini berbentuk basil dan merupakan bakteri Gram negatif.
Gambar 1. Karakteristik isolat yang memiliki zona hambat terbesar yaitu isolat M8 Keterangan: (A) Morfologi koloni dari Isolat M8; (B) Morfologi sel bakteri isolat M8 pada perbesaran 1000x; (C) Zona hambat yang terbentuk
III.1.3 Hasil Uji Biokimia Bakteri Endofit yang Potensial sebagai Antibakteri
Pengujian biokimia yang dilakukan terhadap  isolat  potensial  atau  isolat  M8  yaitu  uji kebutuhan  oksigen,  uji  motilitas,  uji  glukosa,  uji laktosa,  uji  manitol,  uji  maltosa,  uji  sakarosa,  uji indol, uji simon sitrat, uji oksidase dan uji katalase. Hasil uji menunjukkan bahwa isolat M8 merupakan bakteri  aerob,  motilitas  positif,  glukosa  positif, laktosa  negatif,  manitol  positif,  maltosa  positif, sakarosa  positif,  indol  negatif,  urea  negatif,  simon sitrat  negatif, oksidase negatif dan  katalase positif. Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang  dilakukan diperoleh  hasil  bahwa  isolat  bakteri  endofit  yang memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus yaitu  isolat  M8  memiliki kemiripan dengan genus Pseudomonas .
III.1.4 Hasil  Uji  Metabolit  Sekunder  Bakteri Endofit yang Potensial sebagai Antibakteri Uji metabolit sekunder dilakukan terhadap supernatan bakteri endofit yang potensial yaitu isolat M8.  Uji  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  adanya senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan bakteri endofit  pada  tanaman  kunyit.  Senyawa  metabolit sekunder yang terdapat pada isolat M8 dapat dilihat pada Tabel 4.
A B C
Tabel 4. Hasil Uji Senyawa Metabolit Sekunder
Golongan Senyawa Metabolit Sekunder Isolat M8 Media NB Alkaloid Positif (+) Negatif (-) Flavonoid Negatif (-) Negatif (-) Fenol Negatif (-) Negatif (-) Saponin Positif (+) Negatif (-) Terpenoid Positif (+) Negatif (-) Steroid Negatif (-) Negatif (-)

## III.2 Pembahasan
Isolat  bakteri  endofit  yang  berjumlah  17 isolat dilakukan pengujian terhadap bakteri uji yaitu Staphylococcus  aureus untuk  mengetahui  isolat yang  berpotensi  sebagai  antibakteri.  Isolat  bakteri endofit dan bakteri uji sebelum dilakukan pengujian, dilakukan  peremajaan  terlebih  dahulu.  Peremajaan ini  bertujuan  untuk  memperbarui  biakan  bakteri yang telah lama disimpan dilemari pendingin untuk mendapatkan bakteri yang aktif. Peremajaan bakteri uji dilakukan pada media MSA ( Mannitol salt agar ) dan  didapatkan  hasil  koloni  yang  berwarna  putih kekuningan  serta  media  berubah  menjadi  kuning disebabkan  karena  kemampuan  Staphylococcus aureus  memfermentasikan  manitol  menghasilkan asam.  Produk  asam  yang  dihasilkan  inilah  yang mengubah  indikator  pH  media  MSA  dari  yang berwarna merah menjadi kuning (Machmud, 2001; Dewi, 2013; Rahmi et al., 2015).
Isolat bakteri endofit dilakukan peremajaan pada  media  NA  terlebih  dahulu.  Isolat  yang  telah diremajakan kemudian diinokulasikan ke media NB. Media  NB  ini  merupakan  media  yang  berbentuk cair. Pada  media  yang  berbentuk  cair  bakteri  akan lebih  mudah  dan  bebas  mendapatkan  nutrisi  yang yang  ada  pada  media  tersebut.  Penggunaan  media cair  bertujuan  untuk  mempercepat  proses pertumbuhan bakteri karena semakin mudah bakteri mendapatkan  nutrisi  maka  semakin  cepat pertumbuhan  bakteri  tersebut  dan  waktu  yang diperlukan  untuk  sampai  ke  fase  stasioner  juga semakin  singkat.  Penggunaan  media  cair  juga mempermudah  proses  pemisahan  media  dengan senyawa metabolit sekunder yang dihasilkan bakteri pada saat proses sentrifugasi (Almeida et al., 2017; Pinu and Boas, 2017).
Proses  produksi  metabolit  sekunder  ini dilakukan  selama  tiga  hari  pada  suhu  37°C dikarenakan  pada  waktu  tersebut  akan  didapatkan suspensi  senyawa  metabolit  sekunder  bakteri  pada fase  stasioner.  Fase  ini  merupakan  fase  ketika jumlah  sel  bakteri  konstan  yang  artinya  jumlah bakteri  yang  tumbuh  sama  dengan  jumlah  bakteri yang  mati,  terjadi  kompetisi  antar  bakteri  untuk mepertahankan diri dengan mekanisme menghasilkan senyawa metabolit sekunder. Terjadi ketidakseimbangan ini karena adanya pengurangan derajat  pembelahan  sel  yang  dipengaruhi  oleh
berkurangnya jumlah nutrisi pada media dan terjadi akumulasi  produk  toksik  sehingga  menghambat pembelahan sel. Metabolit sekunder yang dihasilkan pada fase ini sangat berperan penting dalam proses pembentukan  zona  hambat  karena  bakteri  akan mensekresikan  metabolit  yang  berpotensi  sebagai antibakteri.  Peningkatan  nilai  absorbansi  ini menandakan  terjadi  peningkatan  pertumbuhan bakteri dan produksi metabolit sekunder juga akan meningkat.  Suspensi  metabolit sekunder kemudian disentrifugasi pada kecepatan 13.000 rpm pada suhu 4°C  selama  15  menit  tujuannya  agar  sel  bakteri terpisah  dari  supernatan  dan  penggunaan  suhu rendah  pada  saat  sentrifugasi  bertujuan  agar metabolit  sekunder  yang  dihasilkan  tidak  rusak (Triana, Sarjono and Mulyani, 2017) . Skrinning  potensi  antibakteri  bakteri endofit  menggunakan  metode  difusi  cakram. Metode  ini  dilakukan  dengan  meletakkan  kertas cakram  yang  telah  diserapkan  supernatan  bakteri endofit.  Kertas  cakram  yang  telah  diserapkan supernatan  diletakkan  pada  media  MHA  yang sebelumnya sudah inokulasi bakteri uji Staphylococcus  aureus dengan  metode  swab. Penggunaan  media  MHA  pada  proses  ini dikarenakan  media  ini  merupakan  media  yang direkomendasikan untuk pengujian agen antimikroba  karena  mengandung  pati  yang berfungsi untuk menyerap toksin yang dikeluarkan bakteri  patogen  sehingga  tidak  mengganggu  kerja senyawa  metabolit  sekunder  yang  diujikan  dan media ini rendah inhibitor sulfonamide, trimethoprim  dan  tetracycline  sehingga  ketika pengujian  agen  antimikroba  tidak  mengganggu kinerja antimikroba dalam menghambat pertumbuhan  mikroorganisme  patogen.  Media diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam agar dapat diamati  zona  hambat  yang  terbentuk  hambat  yang terbentuk.  Hasil  yang  didapatkan  semua  isolat menunjukan  adanya  aktivitas  antibakteri  ditandai dengan terbentuknya zona bening disekitar cakram dan isolat yang paling berpotensi yaitu M8 dengan diameter zona hambat yang terbentuk sebesar 13,76 mm.  Angka  ini  jika  disamakan  dengan  respon hambatan  menurut  Tchaou  dkk  termasuk  kedalam respon  hambatan  kategori  kuat.  Hal  ini  sesuai dengan literatur sebelumnya  bahwa bakteri endofit tanaman kunyit dapat memproduksi substansi yang
berpotensi  sebagai  antibiotic  (Tchaou  and  dkk, 1996; Hudzicki, 2009; Sulistiyani et al., 2014).
Identifikasi  isolat  bakteri  endofit  yang memiliki aktivitas
antibakteri
terhadap Staphylococcus aureus setelah dilakukan pengamatan morfologi koloni, morfologi sel dan uji biokimia, didapatkan hasil yaitu isolat M8 memiliki karakteristik yang mirip dengan genus Pseudomonas menurut  buku  kunci  determinasi  dari  Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology.
Bakteri ini memiliki ciri berbentuk batang berukuran  0,5-1,0  x  1,5-5,0  μm.  Pewarnaan  sel Gram  negatif,  hampir  seluruh  spesiesnya  bersifat motil,  aerob,  oksidase  dapat  positif  atau  negatif, katalase positif. Bakteri ini tersebar luas di alam. Hal ini  sesuai  dengan  literatur  sebelumnya  bahwa terdapat tiga genus yang paling umum diisolasi dari bakteri  endofit  dan  berpotensi  menghasilkan senyawa  metabolit  yaitu  Pseudomonas,  Bacillus, Burkholderia  (Holt  et  al.,  2000;  Sulistiyani  et  al., 2014). Penelitian yang dilakukan oleh Kumar dkk, pada tanaman kunyit genus Pseudomonas termasuk satu  diantara  tiga  genus  yang  teridentifikasi bersamaan dengan Bacillus dan Clavibacter (Kumar et  al.,  2016).  Penelitian  lain  yang  dilakukan  oleh Pratiwi,  dkk    pada  bakteri  endofit  tanaman Neesia altissima (Malvaceae)  dinyatakan  bahwa  bakteri endofit  tanaman  tersebut  termasuk  kedalam  genus Pseudomonas dan dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus (Pratiwi et al., 2011). Metabolit  sekunder  dapat  dihasilkan  baik oleh  tanaman  ataupun  mikroba  yang  ada  pada tanaman tersebut. Mikroba endofit dapat menghasilkan  senyawa  metabolit  yang  berbeda- beda seperti alkaloid, terpenoid, flavonoid, steroid, peptide, quinolone dan fenol. Senyawa metabolit ini memiliki  potensi  untuk  dikembangkan  menjadi obat-obatan seperti antibakteri. Bakteri endofit juga dapat memodulasi senyawa metabolit sekunder dari tanaman  inangnya.  Literatur  sebelumnya  juga menyatakan bahwa bakteri endofit yang berasal dari famili  Zingiberaceae  dapat  memproduksi  senyawa metabolit  sekunder  yang  berpotensi  sebagai antibakteri (Chakraborty, Kundu and Ghosh, 2019).
Isolat  M8  setelah  dilakukan  pengujian senyawa metabolit sekunder didapatkan hasil bahwa isolat  M8  menghasilkan  senyawa  metabolit sekunder golongan alkaloid, saponin dan terpenoid. Hal  ini  sama  dengan  penelitian  sebelumnya  yang dilakukan  oleh  Halim,  dkk  pada  bakteri  endofit tanaman  dahlia  ( Dahlia  variabilis )  bahwa  bakteri endofit yang termasuk kedalam genus Pseudomonas juga  dapat  menghasilkan  senyawa  metabolit sekunder  golongan  saponin  dan  terpenoid  (Halim, Jasril  and  Saryono,  2014).  Saponin  sebagai antibakteri  memiliki  mekanisme  mengganggu permeabilitas  membran  sel.  Saponin  bereaksi dengan  lipopolisakarida  sehingga  menurunkan tegangan permukaan membran, yang akhirnya akan menyebabkan  kehancuran  sel.  Terpenoid  sebagai
antibakteri menyebabkan kerusakan pada membran sel oleh senyawa lipofilik. Terpenoid dapat bereaksi dengan  porin  (protein  transmembran)  pada membran  luar  dinding  sel  bakteri  sehingga membentuk ikatan polimer yang kuat dan merusak porin  berakibat  mengurangi  permeabilitas  dinding sel bakteri sehingga sel bakteri kekurangan nutrisi, pertumbuhan bakteri terhambat atau mati. Senyawa alkaloid bersifat antibakteri, dengan cara mengganggu  komponen  penyusun  peptidoglikan pada  sel bakteri sehingga  lapisan dinding sel  tidak terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian sel (Omejate et al., 2014; Haryati, Saleh and Erwin, 2015). Literatur  sebelumnya  menyatakan  bahwa beberapa spesies Pseudomonas dapat menghasilkan senyawa yang berpotensi sebagai antibakteri (Singh et  al.,  2017).  Strain  dari  Pseudomonas  aeruginosa yang merupakan satu diantara bakteri endofit yang dapat  menghasilkan  senyawa  metabolit  sekunder (alkaloid)  berupa  phenazine  alkaloid  yang  dapat melawan bakteri Gram positif seperti Staphylococcus  aureus , Bacillus  cereus dan Micrococcus luteus (Jayatilake et al., 1996).
Pseudomonas  stutzeri  dapat  menghasilkan senyawa  metabolit  sekunder  yaitu  zafrin.  Zafrin yang  memiliki  kemampuan  melawan  bakteri patogen  pada  manusia  seperti Staphylococcus aureus dan Salmonella  typhi .  Zafrin  memiliki mekanisme kerja melisiskan sel bakteri (Uzair et al., 2008).
Pseudomonas  stuzeri dilaporkan  juga menghasilkan  senyawa  metabolit  sekunder  yaitu bushrin  yang  dapat  melawan  bakteri  patogen manusia seperti Staphylococcus aureus , Staphylococcus  epidermidis , Salmonella  typhi , Proteus  mirabilis dan Escherichia  coli .  Bushrin memiliki  mekanisme  kerja  dengan cara  melisiskan sel bakteri (Ahmed et al., 2008).
IV. Kesimpulan
Bakteri  endofit  tanaman  kunyit  ( Curcuma longa L.)  memiliki  potensi  sebagai  antibakteri terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus .  Sebanyak 17 isolat bakteri endofit tanaman kunyit ( Curcuma longa L.)  yang  berhasil  diremajakan  memiliki potensi  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dengan  diameter  zona hambat  yang  terbentuk  berkisar  7,4  –  13,76  mm. Identifikasi karakter bakteri endofit  yang  memiliki potensi  sebagai  antibakteri  paling  potensial  yaitu isolat M8, berdasarkan morfologi koloni, morfologi sel  dan  uji  biokimia  memiliki  kemiripan  dengan genus Pseudomonas . Identifikasi senyawa metabolit yang dapat dihasilkan bakteri endofit yaitu senyawa golongan alkaloid, terpenoid dan saponin

## Daftar Pustaka
Adityawarman  (2017)  ‘Isolasi,  identifikasi  dan aktivitas  antibakteri  bakteri  endofit  daun pegagan  (Centella  asiatica  L.)  terhadap
Escherichia coli’, SKRIPSI . Ahmed,  N. et  al. (2008)  ‘Antibiotic  Bushrin’, US Patent  Publication  No  US  2008/0090900 A1 .
Almeida,  C. et  al. (2017)  ‘Time-dependent production  of  the  bioactive  peptides endolides  A  and  B  and  the  polyketide mariline  A  from  the  Sponge-derived Fungus  Stachylidium  bicolor  293K04’, Fermentation , 3(45), pp. 1–12.
Chakraborty,  A.,  Kundu,  S.  and  Ghosh,  B.  (2019)
Endophytism in Zingiberaceae:
Elucidation of beneficial  impact . Springer Nature Switzerland.
Chen CJ and Huang YC (2014) ‘New epidemiology of  Staphylococcus  aureus  infection  in Asia’, Clinical  Microbiology  Infection , 20(7), pp. 605–606.
Dewi,  A.  (2013)  ‘Isolasi,  identifikasi  dan  uji sensitivitas
Staphylococcus aureus terhadap  Amoxillin  dari  sampel  susu kambing, peranakan ettawa (PE) penderita mastitis di wilayah Grimulyo,
Kulomprogo,  Yogyakarta’, Jurnal  Sain Veteriner , 31(2), pp. 138–150.
Erikawati,  D.,  Santosaningsih,  D.  and  Santoso,  S.
(2016) ‘Tingginya prevalensi MRSA pada isolat  klinik  periode  2010-2014  di  RSUD Dr.  Saiful  Anwar  Malang,  Indonesia’, Jurnal  Kedokteran  Brawijaya ,  29(2),  pp.
149–156.
Halim,  Jasril  and  Saryono  (2014)  ‘Optimalisasi produksi senyawa  metabolit sekunder dari Pseudomonas  sp.  endofit  tanaman  dahlia (Dahlia variabilis)’, Ind.Che.Acta , 5(1), pp. 8–14.
Haryati,  N.,  Saleh,  C.  and  Erwin  (2015)  ‘Uji toksisitas  dan  aktivitas  antibakteri  ekstrak daun  merah  tanaman  pucuk  merah (Syzygium  myrtifolium  walp.)  terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli’, Jurnal Kimia Mulawarman , 13(1), pp. 35–40.
Holt,  J. et  al. (2000) Bergey’s  of  determinative bacteriology .  9th  edn.  USA:  A  Wolters Kluwer Company Philadelphia. Hudzicki,  J.  (2009) Kirby-Bauer  Disk  Diffysion Susceptibility  Test  Protocol , American Society for Microbiology .
Husna, C. (2018) ‘Peran protein adhesi ekstraselular dalam  patogenitas  bakteri  Staphylococcus aureus’, Jurnal Averrous , 4(2), pp. 1–12. Indrawati,  I.,  Rossiana,  N.  and  Diresna,  D.  (2018)
‘Bioprospecting  of  bacterial  endophytes from  Curcuma  aeruginosa,  Curcuma xanthorrhiza  and  Curcuma  zedoariaas antibacterial  against  pathogenic  bacteria’, IOP Conf. Series: Earth and Environmental Science 197 , pp. 1–7. Jayatilake,  G. et  al. (1996)  ‘Metabolites  from  an
Antarctic  sponge-associated  bacterium, Pseudomonas  aeruginosa’, Journal  of
Natural Products , 59(3), pp. 293–296. Kemenkes RI (2011) ‘Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 2406/Menkes/PER/XII/2011 tentang
Pedoman umum penggunaan antibiotik’.
Kumar,  A. et  al. (2016)  ‘Isolation  and characterization of bacterial endophytes of Curcuma longa L.’, Biotech , 6(60), pp. 1–
8.
Kurniawati  AFS,  Satyabakti  P,  A.  N.  (2015) ‘Perbedaan  risiko  multidrug  resistance organism (MDROS) menurut faktor risiko dan  kepatuhan  hand  hygiene’, Jurnal Berkala Epidemiologi , 3(3), pp. 277–289. Liana  P  (2014)  ‘Gambaran  kuman  Methicillin- Resistant  Staphylococcus  aureus  (MRSA) di Laboratorium Mikrobiologi Departemen Patologi  Klinik  Rumah  Sakit  Dr.  Cipto Mangunkusumo  (RSCM)  periode  januari- desember 2010’, MKS , 46(3), pp. 171–175. Machmud,  M.  (2001)  ‘Teknik  Penyimpanan  dan Pemeliharaan  Mikroba’, Balai  Penelitian Bioteknologi  Tanaman  Pangan ,  4(1),  pp.
24–32.
Muharni et al. (2014) ‘Antibacterial and antioxidant activity  testing  of  pyranon  derivated compound from endophytic fungi penicillium  sp  of  kunyit  putih  (  Curcuma zedoaria ( Berg ) Roscoe )’, Trad. Med. J. , 19(3), pp. 107–112. Omejate,  G. et  al. (2014)  ‘Mechanisms  of antimicrobial  actions  of  phytochemicals against  enteric  pathogens  –  A  Review’, Journal of Pharmaceutical, Chemical and Biological Sciences , 2(2), pp. 77–85. Pinu, F. and Boas, S. (2017) ‘Extracellular microbial metabolomics:  The  state  of  the  art’,
Metabolites , 7(43), pp. 1–15. Pratiwi,  R. et  al. (2011)  ‘Identification  and characterization  of  three  endophytic bacteria from Neesia altissima(Malvaceae) antagonistic  to  diarrhea-causing  bacteria’, Malaysian Journal of Microbiology , 12(4), pp. 300–307.
Rahmi,  Y. et  al. (2015)  ‘Identifikasi  bakteri Staphylococcus aureus pada preputium dan vagina  kuda  (Equus  caballus)’, Jurnal Medika Veterinaria , 9(2), pp. 154–158. Rizaldi,  H.  (2018)  ‘Karakterisasi  bakteri  Gram positif  endofit  tanaman  kunyit  (Curcuma longa) yang memiliki kemampuan quorom quenching’, SKRIPSI . Ryu, S. et al. (2014) ‘Colonization and infection of the  skin  by  S.  aureus:  immune  system evasion  and  the  response  to  cationic antimicrobial peptides’, International Journal  of  Molecular  Sciences ,  15,  pp.
8754–8772.
Singh, M. et al. (2017) ‘Endophytic bacteria: a new source  of  bioactive  compounds’, Biotech , 7(315), pp. 1–14. Sulistiyani, R. et al. (2014) ‘Population and diversity of  endophytic  bacteria  associated  with medicinal  plant  Curcuma  zedoaria’, Microbiology Indonesia , 8(2), pp. 65–72. Takajian  S  (2014)  ‘New  epidemiology  of Staphylococcus  aureus  infection  in  the middle  east’, Clinical  Microbiology  and Infection (CMI) , 20(7), pp. 624–628.
Tchaou,  W.  and  dkk  (1996)  ‘Inhibition  of  pure cultures of oral bacteria by root canal filling materials’, Pediatric  Dentistry ,  18(7),  pp. 444–449.
Tong, S. Y. C. et al. (2015) ‘Staphylococcus aureus infections: Epidemiology,
pathophysiology,  clinical  manifestations, and  management’, Clinical  Microbiology Reviews ,  28(3),  pp.  603–661.  doi: 10.1128/CMR.00134-14. Triana,  O.,  Sarjono,  P.  and  Mulyani,  N.  (2017) ‘Isolasi bakteri endofit pada  rimpang jahe merah  (Zingiber  officinale  Linn.  Var Rubrum)  penghasil  senyawa  antioksidan’, Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi , 20(1), pp. 25–29. Uzair, B. et al. (2008) ‘The isolation, puriWcation and  biological  activity  of  a  novel antibacterial  compound  produced  by Pseudomonas  stutzeri’, FEMS  Microbiol Lett , 279, pp. 243–250. Widowati Tiwit, D. (2016) ‘Isolasi dan Identifikasi Kapang  Endofit  dari  Tanaman  Kunyit sebagai Penghasil Antioksidan’, Biopropal Industri , 7(1), pp. 9–16. Yuanita, M. (2018) ‘Eksplorasi bakteri gram negatif endofit tanaman kunyit (Curcuma longa L.) yang  memiliki  kemampuan  quorum quenching’, SKRIPSI . Yuliati (2016) ‘Uji efektivitas ekstrak kunyit sebagai antibakteri dalam pertumbuhan Bacillus sp dan  Shigella  dysentriae  secara  in  vitro’,
Jurnal Profesi Medika , 10(1), pp. 25–32. Zulkifli, L. et al. (2016) ‘Isolasi bakteri endofit dari sea  grass  yang  tumbuh  di  kawasan  pantai pulau  lombok  dan  potensinya  sebagai sumber  antimokroba  terhadap  bakteri patogen’, Jurnal Biologi Tropis , 16(2), pp. 80–93.