Uji aktivitas antioksidan dan sitotoksik ekstrak daun Jarak Pagar ( Jatropha curcas )
Antioxidant and cytotoxic activity test of Jarak

## Pagar leaves (Jatropha curcas)
Sudarman Rahman 1 *, Erwin Prasetya Toepak 2 , Stevin Carolius Angga 3 , Ysrafil 4

## Abstract
Background: antioxidants play an important role in preventing cell damage and generating inhibition of signalling pathways of cancer, aging and various diseases. Several extracts, oils, and herbal formulations were shown to be important  Antioxidant  agents  for  preventing  cell  damage.  Jarak  Pagar  (Jatropha  Curcas)  leaves.  were  a  common natural Antioxidant phytochemical screening of Jatropha leaves that contained flavonoids, where flavonoids acted as antioxidants.
Objectives :  this  study  aims  to  determine  the  Antioxidant  and  cytotoxic  activity  of  ethanol  extract  of  Jatropha leaves using the DPPH and shrimp larvae method, respectively.
Methods :  the  design  in  this  study  was  quasi-experimental,  using  various  concentrations  of  ethanol  extract  and vitamin C (comparison control) in inhibiting free radicals and each Concentration was repeated three repetitions. The  research  was  conducted  at  the  Laboratory  of  Chemistry  FMIPA  Palangka  Raya  University  and  Chemistry Education  FKIP  Halu  Oleo  University  in  2022.  The  ethanol  extract  of  Jatropha  leaves  weighing  60  grams  was extracted  using  the  Soxhletion  method  to  obtain  1.667  grams  of  thick  ethanol  extract.  Phytochemical characterization was further conducted by tube method, Antioxidant tests by DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) and cytotoxic test assessed by the Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) method. The data analysis used the One Way Anova statistical test and continued with post hoc Tamhane at 95% Cl.
Results :  the  results  showed  that  Jatropha  curcas  L.  leaves  contained  several  secondary  metabolites  such  as flavonoids,  saponins,  alkaloids,  polyphenols  and  tannins.  Furthermore,  the  Antioxidant  activity  test  of  ethanol extract of Jatropha curcas L leaves and control (vitamin C) provided IC50 of 32.83 ± 0.09 (μg/mL) and 8.78 ± 0.21 (μg/mL), respectively. Another finding found that ethanol extract of Jatropha leaves contained active compounds that were toxic to shrimp larvae with LC50 of 427 ppm. Based on the One Way Anova test, each Concentration had a significant difference in the percentage of radical scavenging (p= 0,05). The Concentration of 160 ppm is the most effective in radical scavenging.
Conclusion :  we  concluded  that  the  ethanol  extract  of  Jatropha  leaves  showed  strong  Antioxidant  activity  and potential as an anticancer agent

## Keywords
Jarak Pagar leaves, Antioxidant activity, cytotoxic

## Abstrak
1 Departemen Kimia Organik, Program Studi Kimia Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia. E-mail: sudarmanrahman@mipa.upr.ac.id
2 Departemen Biokimia, Program Studi Kimia Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia.   E-mail: toepakerwin@mipa.upr.ac.id
3 Departemen Kimia Analitik, Program Studi Kimia Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia. E-mail: stevin.carolius@mipa.upr.ac.id
4 Departemen Farmakoterapi, Program Studi Pendidikan Dokter, Universitas Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia. E-mail: ysrafil0155@gmail.com
Penulis Koresponding: Sudarman Rahman: Bagian Kimia Organik, Program Studi Kimia Universitas Palangka Raya. Kampus Universitas Palangka Raya Tunjung Nyaho Jalan  Yos  Sudarso,  Kecamatan  Jekan  Raya,  74874,  Palangka  Raya.  Kalimantan  Tengah,  Indonesia.  E-mail: sudarmanrahman@mipa.upr.ac.id
SAGO: Gizi dan Kesehatan
2023, Vol. 4(2) 237-246
© The Author(s) 2023
DOI: http://dx.doi.org/10.30867/gikes.v4i2.1175 https://ejournal.poltekkesaceh.ac.id/index.php/ gikes Poltekkes Kemenkes Aceh
Latar  belakang: antioksidan  berperan  penting dalam  pencegahan  kerusakan  sel  sehingga  menghambat  jalur  umum  untuk kanker,  penuaan  dan  berbagai  penyakit.Untuk  mencegah  kerusakan  sel,  beberapa  ekstrak,  minyak,  formulasi  herbal  telah terbukti sebagai agen antioksidan yang penting. Salah satu penggunaan antioksidan dari bahan alam adalah daun jarak pagar (Jatropha  curcas).  Skrining  fitokimia  daun  jarak  pagarmengandung  senyawa  metabolit  sekunder  sepertiflavonoid,  dimana flavonoid memiliki efek sebagai antioksidan.
Tujuan : penelitian ini bertujuan mengetahui aktivitas antioksidan dan sitotoksik terhadap larva udang dari ekstrak etanol daun jarak pagar.
Metode : rancangan dalam penelitian ini yaitu quasi eksperimental dengan menggunakan variasi konsentrasi ekstrak etanol dan vitamin C (kontrol pembanding) dalam menghambat radikal bebas dan setiap konsentrasi dilakukan tiga kali pengulangan. Penelitian dilakukan di Laboratorium Kimia FMIPA Universitas Palangka Raya dan Pendidikan Kimia FKIP Universitas Halu Oleo pada  tahun  2022.  Ekstrak  etanoldaun  jarak  pagar  dengan  berat  60  gram  diekstraksi  dengan  metode  sokhletasi  hingga diperoleh 1,667 gram ektsrak kental etanol, kemudian dilakukan uji fitokimia dengan metode tabung,uji antioksidan dengan metode DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazil) dan sitotoksik dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). Analisis data yang digunakan yakni uji statistik One Way Anova dan dilanjutkan dengan post hoc Tamhane pada CI 95%.
Hasil :  hasil  penelitian  menunjukkan  daun  jarak  pagar  (Jatropha  curcas)  mengandungsenyawa  metabolit  sekunder  berupa flavonoid,  saponin,  alkaloid,  polifenol dan tanin,  pada uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol daun jarak pagar dan kontrol pembanding  (vitamin  C)  dengan  IC50  (inhibitory  concentration)  berturut-turut  sebesar32,83±0,09(μg/mL)dan 8,78±0,21(μg/mL). Uji sitotoksik ekstrak etanoldaun jarak pagar mengandung senyawa aktif yang toksik terhadap larva udang dengan LC50 (lethal concentration 50%) sebesar 427 ppm.Berdasarkan uji One Way Anova, terdapat perbedaan yang signifikan pada  tiap  konsentrasi  terhadap  persentase  penangkap  radikal  bebas  (pvalue<0,05).  Konsentrasi  160  ppm  merupakan konsentrasi yang paling efektif dalam penangkapan radikal bebas.
Kesimpulan :  berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar  (Jatropha  curcas)  menunjukkan  aktivitas antioksidan sangat kuat dan menunjukkan potensi sebagai agen antikanker.

## Kata Kunci
Daun jarak pagar, aktivitas antioksidan, sitotoksik

## Pendahuluan
adikal  bebas  adalah  atom  atau  kelmpok atom dengan jumlah elektron ganjil (tidak berpasangan)  dan  dapat  terbentuk  ketika oksigen  bereaksi  dengan  molekul  tertentu (Papalia  et  al.,  2017).  Setelah  terbentuk  radikal yang  sangat  reaktif  sehingga  memulai  reaksi berantai.Bahaya  utama  radikal  bebas  adalah ketika  radikal  bebas  bereaksi  dengan  komponen selulerpenting  seperti  DNAatau  membran  sel (Asgary  et  al.,  2014).  Aktivitas  tinggi  dari  radikal bebas menyebabkan penyakit Parkinson, Alzheimer,  gangguan  kardiovaskular,  kanker  dan penyakit  saraf  (Zhao  et  al.,  2019).  Untuk mencegah  kerusakan  radikal  bebas  tubuh memiliki sistem pertahanan antioksidan (Huda et al.,  2009;Killicgun&  Dehen,  2009).Antioksidan berperan  penting  dalam  pencegahan  kerusakan sel  sehingga  menghambat  jalur  umum  untuk kanker,  penuaan  dan  berbagai  penyakit  (Finkel& Holbrook 2000;Buyukokuroglu et al., 2001).
Penggunaan antioksidan dapat menetralkan  atau  melawan  bahan  toksik  serta mengurangi terjadinya kerusakan sel pada tubuh yang  diakibatkan  proses  oksidasi  radikal  bebas (Vieira  et  al.,  2021).  Saat  ini  masyarakat  tertarik
dengan  penggunaaan  antioksidan  alami,  salah satu antioksidan alami yang memiliki kemampuan penangkapan radikal pada elektrofilik  dan  active  oxygen  species  adalah golongan fenolik (He et al., 2009).
Antioksidan  alami  dapat  diperoleh  dari isolasi  berbagai  macam  bagian  tanaman,  seperti rempah-rempah,  jamu,  minyak,  biji,  buah,  akar, dan  daun  (Spínola  et  al.,  2015).  Tanaman  jarak pagar  (Jatropha  curcas)  termasuk  dalam  famili euphorbiaceae.  Skrining  fitokimia  daun  jarak pagar  (Jatropha  curcas)  mengandung  senyawa metabolit sekunder seperti alkaloid, polifenol dan tanin,  flavanoid,  dan  saponin  (Rahman  et  al., 2022). Flavonoid pada tumbuhan herbal memiliki efek antiinflamasi, antialergi, antimikroba, antioksidan,  dan  efektif  untuk  beberapa golongan  jamur.  Sejalan  dengan  itu,  menurut Hodek  et  al.,  (2002),  ekstrak  kulit  batang  jarak pagar  mengandung  flavonoid  yang  mempunyai aktivitas  sebagai  anti  alergi,  antimikroba  dan antioksidan. Beberapa penelitian dilaporkan daun jarak pagar memiliki aktivitas sebagai, antioksidan, antimalaria dan nyeri otot. Penelitian  fraksietil  asetat  akar  dan  daun  jarak pagar  dilaporkan  memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap  Staphylococcus  aureus  dengan  zona
R
Uji Aktivitas Antioksidan....
14,3  mm  (Rahman  et  al.,  2021).  Penelitian terhadap  ekstrak  daun  Jatropha  multifida  L (Euphorbiceae) menggunakan metode DPPH dan FRAP  menghasilkan  aktivitas  antioksidan  (Anani et  al.,  2016).  Sejalan  dengan  itu  penelitian  oleh Setyaningsih  et  al.,  (2014)  ekstrak  kasar  daun jarak pagar dengan metode maserasi menunjukkan  aktivitas  antioksidan  dengan  nilai IC50 sebesar 7,019 μg/mL.  Kandungan metabolit sekundermenunjukkan hubungan antara struktur kimiawi  dengan  keterlibatannya  pada  aktivitas biologis yang berkaitan dengan mekanisme kerja senyawa  terhadap  reseptor  di  dalam  tubuh, aktivitas antioksidan memiliki keterkaitan dengan kandungan  fenolik  dan  flavonoidnya  (Arinadan Rohman,  2013).Senyawa  metabolit  sekunder dalam  suatu  sampel  memiliki  efek  sitotoksik, seperti senyawa flavonoid dapat bersifat sebagai sitotoksik.  Senyawa  tanin  dan  saponin  juga mampu  menghambat  proliferasi  sel  kanker (Marwati  et  al.,  2021).  Salah  satu  metode  awal untuk  pengujian  sitotoksik  yaitu  dengan  metode Brine ShrimpLethalityTest (BSLT) yang menggunakan larva udang (Artemiasalina) (Fadhli et  al.,  2019).  Penelitian  sebelumnya,  aktivitas antioksidan  daun  jarak  pagar  dilakukan  dengan metode maserasi dan dalam penelitian ini ekstrak etanol daun jarak pagar diperoleh menggunakan metode  sokhletasi.  Berdasarkan  uraian  diatas perlu  dilakukan  penelitian  tentang  uji  aktivitas antikoksidan  menggunakan  metode  DPPH  (1,1- diphenyl-2-picrylhidrazil)  dan  sitotoksik  dengan metode  Brine  Shrimp  Lethality  Test  (BSLT) menggunakan  larva  udang  ( Artemia  salina ) ekstrak etanoldaun jarak pagar ( Jatropha curcas ).

## Metode

## Rancangan Penelitian
Rancangan peneltian yang digunakan yaitu quasi  eksperimental  dengan  rancangan  acak lengkap,  penggunaan  rancangan  ini  bertujuan untuk  mengetahui  pengaruh  konsentrasi  ekstrak etanol  dan  vitamin  C  (kontrol  pembanding) sebagai  penangkap  radikal  bebas,  dimana  tiap- tiap konsentrasi dilakukan tiga kali pengulangan. Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Kimia FMIPA Universitas Palangka Raya dan Pendidikan Kimia  FKIP  Universitas  Halu  Oleo  pada  tahun 2022.
Data  primer  dan  sekunder  digunakan dalam  teknik  pengumpulan  data,  dimana  data
primer  diperoleh  berdasarkan  hasil  penelitian melalui  pencatatan  nilai  setap  konsentrasi ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar  dan  kontrol pembanding (vitamin C), selanjutnya penelusuran literatur  meliputi  jurnal  ilmiah,  buku,  dan  artikel dari internet yang berkaitan dengan penelitian ini merupakan sumber data sekunder.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  alat  instrumen  yaitu  spektrofotometer UV-VIS  (Shimadzu  UV  mini  tipe  1240);  neraca analitik  (Precisa®),  rotary  evaporator  (Buchi®), oven,water  bath  (Stuart®),  hot  plate  (Stuart®), blender (Philips®), pipet mikro (Pyrex®), serangkaian  alat  soxhlet  (Pyrex®),  alat  gelas (Pyrex®)  serta  alat-alat  penunjang  lainnya  yang terdiri  dari  filler,  spatula,  pipet  tetes,  botol timbang,  botol  semprot,  batang  pengaduk,  rak tabung  reaksi,  aquarium,  lampu  Philips  @11 watt, aerator, blender (Philips®), ayakan 70 mesh dan botol vial.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun jarak pagar, etanol 96% (OneMed®), etanol  p.a.  (EMSURE®),  DPPH  (1,1-diphenyl-2- picrylhidrazil)  diperoleh  dari  sigma.  Co,  larva udang, kertas saring, aluminium foil, air laut, dan aquades.

## Jalannya Penelitian Pembuatan Simplisia
Daun  jarak  pagar(Jatropha  curcas  Linn) digabungkan  dalam  satu  tempat,  dicuci  terlebih dahulu  dengan  air  mengalir  kemudian  dipotong kecil-kecil selanjutnya dikeringkan di dalam oven 48:C  selama  24  jam.  Setelah  itu  daun dihancurkan  menggunakan  blender  dengan ukuran  70  mesh,  lalu  diekstraksi  dengan menggunakan pelarut etanol 96%.
Metode  ekstraksi  yang  digunakan  adalah ekstraksi melalui pemanasan dengan menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Bahan  yang telah  dihaluskan  ditimbang  sebanyak  60  gram kemudian  disokhlet  selama  6  jam.  Alat  sokhlet disiapkan,  selongsong  yang  telah  berisi  bahan dimasukkan  ke  dalam  labu  sokhlet  dan  pelarut etanol  96%  sebanyak  250  mL  dimasukkan  ke dalam  labu  alas  bulat,  penangas  dinyalakan  dan suhu  yang  digunakan  yaitu  70:C.  Setelah  proses ekstraksi selesai, selanjutnya dilakukan pemekatan  ekstrak  dengan  rotary  evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental etanol.
Skrining  fitokimia  ekstrak  etanol  daun  jarak pagar Uji alkaloid
Ekstrak  etanol  0,1  g  ditimbang  dan dilarutkan kedalam kloroform amoniak sebannyak  10  mL.  Pada  tahap  ini  terbentuk lapisan kloroform, lapisan yang terbentuk diambil dan  ditambahkan  larutan  asam  sulfat  dengan konsentrasi  2  M.  Larutan  yang  terbentuk kemudian  dimasukakan  dalam  corong  pisah  dan dikocok, lalu didiamkan hingga larutan kloroform dan asam sulfat memisah.
Lapisan  asam  sulfat  yang  terbentuk, selanjutnya  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi, yang  disediakan  yaitu  sebanyak  3  tabung, kemudian setiap tabung diuji dengan:
 Pereaksi  Mayer,  positif  alkaloid  jika terdapat endapan putih.
 Pereaksi  Wagner,  positif  alkaloid  jika terdapat endapan coklat.
 Pereaksi Dragendorff, positif alkaloid jika terdapat  endapan  coklat  kemerahan (Hossain et al., 2013).

## Uji saponin
Ekstrak  etanol  0,1  g  dilarutkan  dengan aquades  dan  dipanaskan  sampai  mendidih. Larutan  dikocok  kuat  dan  jika  terbentuk  busa dengan kestabilan bertahan hingga ±7 menit, jika busa  stabil  dapat  dinyatakan  mengandung saponin(Hossain et al., 2013).

## Uji flavonoid
Ekstrak  etanol  0,1  g  ditimbang  dan diekstraksi  dengan  etanol  80%  sebanyak  10  mL. Kemudian  sebanyak  2,5  mg  logam  Magnesium ditambahkan  kedalam  sampel  dan  disiapkan  2 tabung. Sebanyak 0,5 mL HCl pekat ditambahkan pada tabung pertama. Flavonoid ditandai dengan warna  kuning  atau  jingga,  tabung  kedua berfungsi  sebagai  pembanding  (Hossain  et  al., 2013).

## Uji polifenol dan tanin
Ekstrak  etanol  0,1  g  ditimbang  dan sebanyak  10  mL  air  tambahkan  kedalam  ekstrak etanol  kemudian  dididihkan.  Larutan  yang terbentuk  dibagi  menjadi  dua  bagian.  Sebanyak 2-3  tetes  larutan  FeCl3  ditambahkan  kedalam bagian  pertama.  Adanya  polifenol/tanin  dalam sampel ditandai larutan menjadi biru tua(Hossain et al., 2013).

## Penentuan aktivitas antioksidan
Pembuatan  larutan  DPPH  0,3  mM dilakukan  dengan  cara  menimbang  0,03943  g serbuk  DPPH,  lalu  DPPH  tersebut  dimasukkan kedalam  gelas  kimia  untuk  dilarutkan  terlebih dahulu  dengan  pelarut  etanol  p.a  dan dimasukkan  kedalam  labu  ukur  100  mL. Kemudian  etanol  p.a  ditambahkan  hingga  tanda batas,  agar  larutan  homogen  dikocok  terlebih dahulu secara perlahan-lahan, sehingga diperoleh larutan DPPH yang memiliki konsentrasi 0,3 mm. Penentuan panjang gelombang maksimum  DPPH  dilakukan  dengan  cara sebanyak  1  mL  larutan  DPPH  0,3  mM  dipipet kedalam labu ukur 5 mL dan ditambahkan etanol p.a  sampai  tanda  batas  etanol.  Serapan  larutan diukur  dengan  Spektrofotometri  UV-Vis  pada panjang gelombang 400-800 nm.
Penentuan  operating  time  dilakukan dengan cara sebanyak 1 mL larutan DPPH 0,3 mM dipipet kedalam labu ukur 5 mL dan ditambahkan etanol p.a sampai tanda batas. Kemudian larutan tersebut ditentukan absorbansinya pada panjang gelombang  maksimum  yang  diperoleh  dengan interval  waktu  0-90  menit  sampai  diperoleh absorbansi yang stabil.
Pengukuran  aktivitas  peredaman  radikal bebas  DPPH  dengan  spektrofotometer  UV-Vis. Larutan  ekstrak  2000  ppm  dibuat  dengan  cara menimbang 200 mg ekstrak kemudian dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur  25  mL  dan dilarutkan dengan etanol p.a sampai tanda batas. Selanjutnya  dibuat  seri  konsentrasi  10  ppm,  20 ppm,  40  ppm,  80  ppm,  100  ppm,  dan  160  ppm. Sebanyak  1  mL  larutan  0,3  mM  DPPH ditambahkan  dengan  tiap-tiap konsentrasi larutan  sampel  sampai  tanda  batas.  Dilakukan juga  pengukuran  absorbansi  kontrol  yang  terdiri atas  1,0  mL  DPPH  0,3  mM  dan  4,0  mL  etanol. Larutan  didiamkan  di  tempat  gelap  selama operating  time  yang  telah  ditentukan.  Serapan diukur  dengan  Spektrofotometri  UV-Vis  pada panjang gelombang maksimum (515-517 nm).
Uji toksisitasmetode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)
Penetasan larva udang
Penyiapan larva Artemia salina L.dilakukan  dengan  menetaskan  telur  Artemia salina L.48 jam sebelum dilakukan uji. Penetasan dilakukan  dengan  cara  merendam  telur  tersebut
Uji Aktivitas Antioksidan....
dalam air laut di dalam wadah yang diberi suplai oksigen  dari  aerator  dan  diberi  penerangan dengan lampu.

## Preparasi larutan uji dan sitotoksik
Larutan  sampel  adalah  larutan  ekstrak etanoldaun  jarak  pagar.  Pembuatan  larutan  uji dilakukan  dengan  menimbang  200  mg  sampel kering  yang  akan  diuji  dan  dilarutkan  ke  dalam 100  mL  air  laut  sehingga  menghasilkan  larutan ekstrak  dengan  konsentrasi  2000  ppm.  Larutan ekstrak 2000 ppm lalu diencerkan dengan air laut menjadi  konsentrasi  1000  ppm,  500  ppm,  250 ppm,  125  ppm,  62,5  ppm  dan  31,25  ppm. Masing-masing  konsentrasi  dipipet  sebanyak  5 mL  dan  dimasukkan  ke  dalam  botol  uji.  Setiap pengerjaan  dilakukan  dengan  triplo  dengan menggunakan pipet mikro, diambil 10 ekor larva udang  lalu  dimasukkan  ke  dalam  botol  uji. Tabung  yang  telah  berisi  larva  tersebut diletakkan  dibawah  lampu  Philips  11  watt  pada jarak  ±15  cm.  Pengamatan  berlangsung  selama 24 jam.

## Analisis data
Perhitungan  rendemen  didasarkan  pada (Susanty dan Bachmid, 2016).
rendemen=berat  ekstrak  :  berat  sampel x100%
Aktivitas  antioksidan  dari  suatu  bahan atau sampel ditentukan menggunakan persamaan:

## %penangkap radikal bebas=
Persamaan  regresi  linier  yang  diperoleh dari  kisaran  konsentrasi  ekstrak  dengan  persen penangkap  radikal  bebas  digunakan  untuk menentukan  konsentrasi  ekstrak  yang  dapat menurunkan 50% DPPH.
Persen  larva  udang  yang  mati  dihitung menurut persamaan:
%kematian=jumlah  larva  mati  :  jumlah larva total awal x100%
Hubungan  kurva  persen  kematian  larva terhadap  konsentrasi  ekstrak  digunakan  untuk menentuka  nilai  LC50.  Nilai  LC50  didefiniskan sebagai konsentrasi ekstrak yang dapat
mengakibatkan 50% larva udang mati (McLaughlin et al., 1998).
Data  rerata  persentase  penghambatan ekstrak etanol daun jarak pagar sebanyak tiga kali ulangan diuji normalitas dan hasilnya menunjukkan  bahwa  data  berdistribusi  normal (pvalue>0,05),  selanjutnya  dianalisis  secara statistik menggunakan uji One Way Anova.
Analisis dilanjutkan dengan post hocTamhaneuntuk  melihat  perbedaan  efek persentase  penghambatan  ekstrak  dan  kontrol pembanding (vitamin C) pada tiap kelompokperlakuan.  Uji  statistik  ini  dilakukan menggunakan  program  SPSS  16.0  dengan  taraf kepercayaan 95%.

## Hasil
Setelah dilakukan proses ekstraksi dengan  metode  sokhletasi  diperoleh  berat ektsrak  kental  etanol  1,667  gram  dengan rendemen sebesar 2,78%. Ekstrak yang diperoleh dilakukan  uji  fitokimia  dengan  metode  tabung, hasil  uji  fitokimia  dapat  dilihat  pada  tabel  1, selanjutnya dilakukan pengujian aktivitas antioksidan  diperoleh  persentase  penangkap radikal  bebas ekstrak  etanol  dan vitamin  C  serta nilai  IC50,  hasil  pengujian  tersebut  dapat  dilihat pada  tabel  2.  Kemudian  dilakukan  uji  sitotoksik dengan metode BSLT (Brine Shrimp Letality Test) menggunakan larva udang (Artemia salina), hasil pengamatan  persentase  kematian  larva  udang setelah 24 jam disajikan pada gambar 1.
Tabel  1.  Kandungan  fitokimia  ekstrak  etanol daun jarak pagar (Jatropha curcas)
Jenis uji Perlakuan/pereaksi Keterangan Flavonoid HCl  pekat  +  logam Mg Positif, karena terjadi perubahan warna menjadi jingga Saponin Ekstrak  +  aquades (dipanaskan), larutan dikocok kuat Positif, karena adanya  busa yang stabil hingga ±7 menit Alkaloid Mayer Positif,
Januari - Juni 2023 karena terbentuk endapan putih Dragendorf Positif, karena terbentuk endapan coklat kemerahan Wagner Positif, karena terbentuk endapan coklat Polifenol dan Tanin FeCl 3 Positif, adanya perubahan warna biru kehijauan sampai hitam Hasil  penelitian  (Tabel  1)  yakni  uji fitokimia  dengan  metode  tabung  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar mengandung  senyawa  metabolit  sekunder seperti flavonoid, saponin, alkaloid, polifenol dan tanin.
Tabel  2.  Rerata  persentase  penangkap  radikal bebas  dan  Inhibitory  concentration  (IC50) ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar  dan  kontrol pembanding (vitamin C)
Konsentrasi (ppm) Penangkap Radikal Bebas±SD (%) Ekstral etanol Vitamin C 10 39,57±0,03 45,44±0,09 20 45,11±0,01 a 54,11±0,04 a 40 53,16±0,02 ab 61,22±0,30 ab 80 70,14±0,02 abc 76,35±0,07 abc 100 74,95±0,02 abcd 88,35±0,15 abcd 160 93,90±0,08 abcde 95,55±0,04 abcde
Ekstrak Etanol :
1. y = 0,360x +38,18 R 2 = 0,987 2. y = 0,364x + 38,05
R 2 = 0,991
3.
y = 0,355x + 38,41 R 2 = 0,991
Vitamin C : 1. y = 0,338x + 47,03
R 2 = 0,991 Ekstrak etanol 1. IC 50 = 32,65 2. IC 50 = 32,83
3. IC 50 = 32,81 rata-rata IC 50 ±SD (μg/mL) = 32,83±0,09
Vitamin C
1. IC 50 = 8,78
2. IC 50 = 8,99
2. y = 0,339x + 46,95 R 2 = 0,985
3. y = 0,337x + 47,11 R 2 = 0,982 3. IC 50
= 8,57
rata-rata IC 50 ±SD (μg/mL) = 8,78±0,21
Keterangan  :  huruf  yang  berbeda  pada  kolom menyatakan  perbedaan  yang  signifikan  (p<0,05). a:10  ppm  terhadap  20,  40,  80,  100,  160  ppm; b:20  ppm  terhadap  40,  80,  100,  160  ppm;  c:40 ppm terhadap 80, 100, 160 ppm; d:80 ppm 100, 160 ppm; e:100 ppm terhadap 160 ppm.
Hasil  penelitian  (Tabel  2)  masing-masing merupakan  rerata  persentase  penangkap  radikal bebas dan inhibitory concentration (IC50) ekstrak etanol daun jarak pagar dan kontrol pembanding (vitamin  C)  menggunakan  variasi  konsentrasi yakni  10;  20;  40;  80;  100;  dan  160  ppm. Berdasarkan  hasil  yang  diperoleh  peningkatan konsentrasi  dari  10  ppm  hingga  160  ppm menunjukkan peningkatan persentase penangkap  radikal  bebas,  pada  tiap  konsentrasi kontrol  pembanding  (vitamin  C)  menunjukkan peningkatan  persentase  yang  lebih  tinggi dibandingkan  ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar. Selanjutnya  dengan  menggunakan  persamaan regresi  linier  yang  diperoleh  antara  konsentrasi sampel  terhadap  persen  penangkap  radikal bebas.  Nilai  IC50  menunjukkan  nilai  yang  dapat menurunkan  50%  radikal  bebas  (DPPH).  Hasil penelitian  menunjukkan  nilai  IC50  kontrol pembanding (vitamin C) lebih rendah dibandingkan  ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar. Berdasarkan  hasil  uji  statistik  One  Way  Anova diperoleh  penggunaan  ekstrak  etanol  daun  jarak pagar  dan  vitamin  C  berpengaruh  terhadap aktivitas  penangkap  radikal  bebas,  sehingga analisis  dilanjutkan  post  hoc  Tamhane.  Analisis pos  hoc  ini  bertujuan  untuk  mengetahui perbedaan  secara  khusus  pengaruh  masing- masing  konsentrasi  pada  sampel  dan  kontrol pembanding  (vitamin  C).  Hasil  uji  post  hoc Tamhane  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang signifikan  pada  masing-masing  konsentrasi sampel  dan  vitamin  C  terhadap  aktivitas penangkap radikal bebas.
Uji Aktivitas Antioksidan....
Hasil  penelitian  (gambar  1)  merupakan persentase kematian larva udang (Artemia salina) menggunakan  metode  BSLT.  Pada  pengujian  ini mengunakan  variasi  konsentrasi  yakni  31,25; 62,5; 125; 250; 500; dan 1000 ppm. Peningkatan konsentrasi  menyebakan  persentase  kematian larva udang semakin meningkat.

## Pembahasan
Proses  ekstraksi merupakan suatu metode yang  digunakan  untuk  menghasilkan  kandungan komponen  kimia  yang  larut  pada  suatu  pelarut, ekstraksi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini yaitu  metode  ekstraksi  sokhletasi.  Peristiwa ekstraksi  sokhletasi  meliputi  tiga  tahapan  yaitu difusi  zat  warna  dari  dalam  padatan  ke permukaan  padatan,  kemudian  perpindahaan massa  zat  warna  dari  permukaan  padatan  ke cairan  dan  difusi  zat  warna  di  dalam  cairan (Riniati et al., 2019). Pemilihan metode ini karena waktu  yang  digunakan  lebih  singkat,  terjadi kontak  langsung  dengan  pelarut  secara  terus menerus,  dan  pelarut  yang  digunakan  lebih sedikit  sehingga  efektif  dan  efisien  (Sudaryanto et  al.,  2016).  Ekstrak  daun  jarak  pagar  diperoleh dengan mengekstraksi daun jarak pagar sebanyak 60  gram  menggunakan  etanol  96%  pada  suhu 70oC  selama  6  jam.  Sampel  hasil  ekstraksi selanjutnyadipekatkandengan  rotary  evaporator untuk  menghilangkan  pelarut  hingga  diperoleh ekstrak  kental  etanol  1,667  gram.  Sehingga diperoleh rendemen ekstrak sebesar 2,78%.
Uji fitokimia dilakukan sebagai uji pendahuluan  secara  kualitatif  untuk  mengetahui golongan senyawa metabolit sekunder yangterdapat  dalam  tumbuhan  atau  bagian tumbuhan dengan metode uji tabung. Kandungan  senyawa  fitokimia  yang  terdapat
dalam  ekstrak  etanol  daunjarak  pagar  (Jatropha curcas Linn.) adalah senyawa golongan flavonoid, saponin, alkaloid, polifenol dan tanin.
Uji aktivitas antioksidan DPPH pada sampel ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar  diukur  pada panjang  gelombang  516  nm  dan  operating  time adalah  30  menit  pada  suhu  kamar.  Pada operating  time  terjadi  serapan  optimal  yang ditandai  perubahan  warna  larutan  dari  ungu menjadi  kuning.  Pengujian  larutan  sampel  dan pembanding  (vitamin  C)  dilakukan  untuk mengetahui  kemampuan  antioksidan  yang diberikan oleh sampel dan pembanding berdasarkan  parameter  inhibitory  concentration (IC50).  Semakin  besar  nilai  persen  penangkapan radikal  DPPH  yang  diberikan  suatu  sampel  maka akan  menghasilkan  nilai  IC50  semakin  kecil (Aktumsek et al., 2013).
Berdasarkan  hasil  penelitian  (tabel  2  dan 3),  konsentrasi  terendah  10  ppm  menghasilkan penangkap  radikal  bebas  sebesar  39,57±0,03(%) untuk etanol dan 45,44±0,09(%) untuk vitamin C, sedangkan konsentrasi tertinggi 160 ppm sebesar 93,90±0,08(%)  untuk  etanol  dan  95,55±0,04(%) untuk  vitamin  C  sebagai  kontrol  pembanding. Peningkatan  konsentrasi  ekstrak  etanol  daun jarak  pagar menghasilkan persentase  penangkap radikal  bebas  yang  semakin  besar.  Akan  tetapi, jika  dibandingkan  dengan  kontrol  pembanding (vitamin  C)  dengan  konsentrasi  yang  sama  nilai persentase  penangkap radikal bebas masih lebih besar  yakni  95,55±0,04(%)  pada  konsentrasi tertinggi  160  ppm.  Selanjutnya  dilakukan perhitungan  inhibitory  concentration  (IC50), parameter  untuk  menginterpretasikan  hasil pengujian  DPPH  adalah  dengan  nilai  IC50 (Inhibitor Concentration). IC50 adalah konsentrasi  ekstrak,  fraksi,  senyawa  uji,  sampel uji yang memberikan persen aktivitas penangkapan radikal DPPH senilai 50% dibanding kontrol  melalui  suatu  persamaan  regresi  linier (ArinadanRohman,2013). Semakin kecil nilai IC50 berarti  semakin  kuat  aktivitas  antioksidan. Penelitian oleh (Boly et al., (2016) secara spesifik suatu  senyawa  dikatakan  sebagai  antioksidan sangat  kuat  jika  nilai  IC50  kurang  dari  50  ppm (IC50<50  ppm),  kuat  (50  ppm<IC50<100  ppm), sedang  (100  ppm  <IC50<150  ppm),  lemah  (150 ppm  <IC50<  200  ppm),  dan  sangat  lemah (IC50>200  ppm).  Nilai  IC50  vitamin  C  yang merupakan senyawa pembanding adalah 8,79±0,02ppm.  Berdasarkan  hasil  penelitian diperoleh  nilai  IC50  ekstrak  etanol  daun  jarak
Januari - Juni 2023
pagar  adalah  32,83±0,09  ppm  dan  termasuk kategori  antioksidan  sangat  kuat(IC50<50ppm), sedangkan  vitamin  C  juga  termasuk  kategori antioksidan  sangat  kuat,  karena  nilai  (IC50<50 ppm).Berdasarkan  hasil  uji  statistik  post  hoc Tamhane  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol daun  jarak  pagar  memiliki  aktivitas  antioksidan dan  setiap  konsentrasi  memiliki  pengaruh  yang signifikan dalam penangkap radikal bebas (pvalue < 0,05).
Kemampuan  ekstrak  etanol  daun  jarak pagarmemiliki  aktivitas  penangkap  radikal  bebas diduga  karena  senyawa  metabolit  sekunder. Senyawa flavonoid dan polifenol diduga merupakan  senyawa  yang  berperan  terhadap penangkap  radikal  bebas.  Aktivitas  antioksidan yang  terjadi  pada  senyawa  flavonoid  dan polifenoldikarenakan  senyawa  tersebut  adalah senyawa fenol, yaitu senyawa dengan gugus -OH yang  terikat  pada  karbon  cincin  aromatik. Senyawa fenol ini mempunyal kemampuan untuk menyumbangkan  atom  hidrogen,  sehingga radikal  DPPH  dapat  tereduksi  menjadi  bentuk yang  Iebih  stabil  (Fessenden  dan  Fessenden, 1994).
Pengujian  aktivitas  sitotoksik  dilakukan dengan metode BSLT ( Brine Shrimp Lethality Test ) menggunakan  larva  udang  (Artemia  salina). Berdasarkan  gambar  1  Peningkatan  konsentrasi ekstrak  nilai  persentase  kematian  pada  larva udang  (Artemia  salina)  juga  semakin  meningkat. Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan pengaruh  yang  dihasilkan  ekstrak  etanol  daun jarak pagar mampu menyebabkan kematian 50% Artemia  salina  dengan  nilai  LC50  sebesar  427 ppm,  hasil  tersebut  menunjukkan  ekstrak  etanol daun  jarak  pagar  memiliki  sifat  sitotoksik  pada konsentrasi  427  ppm.  Hal  ini  sesuai  dengan penelitianMeyer  et  al.,  (1982)  :  menyatakan bahwa  suatu  ekstrak  dapat  menyebabkan kematian 50% hewan uji pada konsentrasi <1000 ppm.  Ekstrak  tanaman  memberikan  aktivitas sitotoksik  diduga  karena  adanya  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam tanaman  tersebut,  dimana  pada  kadar  tertentu ekstrak  memiliki  potensi  sitotoksik  serta  dapat menyebabkan  kematian  larva  udang  (Artemia salina)  dengan  menghambat  reseptor  perasa pada  daerah  mulut  larva.  Hal  ini  mengakibatkan larva  gagal  mendapatkan  stimulus  rasa  yang membuat  tidak  mampu  mengenali  makanannya sehingga  larva  mati  kelaparan(Rahmi  et  al., 2022).
Berdasarkan hasil yang diperoleh, kekurangan  dalam  penelitian  adalah  sampel  uji yang  digunakan  masih  dalam  bentuk  ekstrak, sehingga  belum  diketahui  senyawa  khusus  daun jarak pagar yang mempunyai aktivitas antioksidan dan uji sitotoksik tidak menggunakan sel  kanker,  tetapi  menggunakan  metode Brine Shrimp  Lethality  Test (BSLT)  menggunakan  larva udang.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  penggunaaan ekstrak  etanol  daun  jarak  pagar  dengan  variasi konsentrasi  menunjukkan  aktivitas  antioksidan sangat  kuat  dan  menunjukkan  potensi  sebagai agen antikanker.
Saran,  perlu  dilakukan  penelitian  lanjutan terkait  fraksinasi  dan  isolasi  daun  jarak  pagar (Jatropha  curcas)  sehingga  dapat  diketahui senyawa  aktif  yang  berperan  dalam  aktivitas antioksidan  dan  pengujian  sitotoksik  dilakukan pada  sel  kanker  secara  in  vitro  maupun  in  vivo. Hasil penelitian yang diperoleh sangat memungkinkan dilakukan edukasi kepada masyarakat  untuk  memanfaatkan  jarak  pagar sebagai alternatif obat bahan alam

## Deklarasi Konflik Kepentingan
Tidak  ada  konflik  kepentingan  dalam penelitian ini.

## Ucapan Terima Kasih
Ucapan  terima  kasih  kami  ucapkan  kepada Kepala  Laboratorium  Pendidikan  Kimia  dan  FKIP Universitas  Halu  Oleo  dan  Program  Studi  Kimia FMIPA  Universitas  Palangka  Raya  yang  telah membantu dalam penelitian ini.

## Daftar Rujukan
Aktumsek,  A.,  Zengin,  G.,  Guler,  G.O.,  Cakmak, Y.S.,  &Duran,  A.  (2013).  Antioxidant potentials  and  anticholinesterase  activities of methanolic and aqueous extracts of three endemic  Centaurea  L.  species. Food  Chem . Toxicol , 55 , 290–
Uji Aktivitas Antioksidan....
296.https://doi.org/10.1016/j.fct.2013.01.01
8
Anani,  K.,  Adjrah,  Y.,  Ameyapoh,  Y.,  Karou,  S., Agbonon,  A.,  de  Souza,  C.,  &Gbeassor,  M. (2016). Antimicrobial, Anti-inflammatory and antioxidant activities of Jatropha multifida L. (Euphorbiaceae). Phcog . Res , 8 (2),  142-146. https://doi.org/10.4103/0974-8490.172657 Arina,  N.  B.,&  Rohman,  A.(2013).  The  phenolic contents and antiradical activity of
Indonesian Phyllantus urinaria L.
International  Food  Research  Journal,  20 (3), 1119-1124.
Asgary,  S.,  Sahebkar,  A.,  Afshani,  M.R.,  Keshvari,
M.,  Haghjooyjavanmard,  S.,  &Rafieian- Kopaei,  M.  (2014).  Clinical  Evaluation  of Blood Pressure Lowering, Endothelial Function Improving, Hypolipidemic and Anti- Inflammatory  Effects  of  Pomegranate  Juice in  Hypertensive  Subjects:  Beneficial  Effects Of  Pomegranate  Juice  In  Hypertensive Subjects. PhytotherapyResearch , 28 ,193– 199. https://doi.org/10.1002/ptr.4977 Boly,  R.,  Lamkami,  T.,  &Guissou,  I.  (2016).  DPPH free  radical  scavenging  activity  of  two extracts  from  agelanthus  dodoneifolius (Loranthaceae) leaves. Int J Toxicol
Pharmacol Research , 8 (1),29-34.
Buyukokuroglu,  M.  E.,  Gulcin,  I.,  Oktay,  M.,  & Kufrevioglu O. I. (2001). In vitro Antioxidant Properties Of Dantrolenen Sodium.
Pharmacological  Research , 44 (6),  491-494. https://doi.org/10.1006/phrs.2001.0890 Fadhli,  H.,  Nurdin,  A.N.,  &Octaviani,  M.  (2019). Potensi Antioksidan Dari Ekstrak Kulit Batang Bauhinia semibifida Roxb. Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 4 (1), 77– 78.https://doi.org/10.36387/jiis.v4i1.257 Fessenden, R. J., & Fessenden, J. S. (1994). Kimia Organik  Jilid  I  Edisi  ketiga.  Terjemahan Aloysius Hadyana Pudjaatmaka.
Jakarta:Penerbit Erlangga . Finkel,  T.,  &  Holbrook,  N.  J.  (2000).  Oxidant, oxidative  stress  and  the  biology  of  ageing.
nature, 408 (6809) , 239-247.
https://doi.org/10.1038/35041687
He, N., Wang, Z., Yang, C., Lu, Y., Sun, D., Wang, Y.,  Shao,  W.,  &Li,  Q.  (2009).  Isolation  and identification of polyphenolic  compounds in longan pericarp. Separation and Purification.
Technol ogy, 70 , 219–224. https://doi.org/10.1016/j.seppur.2009.09.01 9
Hodek,  P.,  Trefil,  P.,  &Stiborová,  M.  (2002).
Flavonoids-potent  and  versatile  biologically active compounds interacting with cytochromes P450. Chemico-biological interactions , 139 (1), 1– 21.https://doi.org/10.1016/S0009-
2797(01)00285-X
Hossain,  M.  A.,  AL-Raqmi,  K.  A.,  AL-Mijizy,  Z.  H., Weli, A. M., & Al-Riyami, Q. (2013). Study of total  phenol,  flavonoids  contents  and phytochemical  screening  of  various  leaves crude  extracts  of  locally  grown  Thymus vulgaris. Asian  Pacific  journal  of  tropical biomedicine, 3 (9), 705–710. https://doi.org/10.1016/S2221- 1691(13)60142-2 Huda, A. W .N., Munira, M. A. S., Fitrya, S. D., &
Salmah,  M.  (2009).  Antioxidant  activity  of aquilaria malaccensis (thymelaeaceae)
leaves. Pharmacognosy  Research,  1 (5),  270- 273.
Killicgun,  H.,  &  Dehen,  Altiner.  (2009).  In  vitro Antioxidant Effect of Rosa canina in Different Antioxidant  Test  Systems. Pharmacognosy Research, 1 (6), 417-420. https://www.phcogres.com/article/2009/1/ 6/nil-14 Marwati,  M.,  Anggriani,  A.,  Burhan,  A.,
Awaluddin,  A.,  Nur,  S.,  Dharmayanti,  R.,
Lilingan, E., Tiboyong, M.D. (2021).
Antioxidant Activity and Cytotoxicity Against WiDR Cell and Vero Cell of The Karamunting (Rhonomyrtus tomentosa L.) Leaves Ethanol Extract. Indonesian  Journal  Pharmaceutical Scienceand  Technology , 8 (3),  111-117. https://doi.org/10.24198/ijpst.v8i3.26769 McLaughlin,  J.L.,  &Rogers,  L.L.,  Anderson,  J.E. (1998).  The  Use  of  Biological  Assays  to
Evaluate  Botanicals.  Drug  Information Journal, 32 (2), 513–524. https://doi.org/10.1177/0092861598032002
23
Meyer,  B.,  Ferrigni,  N.,  Putnam,  J.,  Jacobsen,  L., Nichols,  D.,  &McLaughlin,  J.  (1982).  Brine Shrimp:  A  Convenient  General  Bioassay  for Active  Plant  Constituents. Journal  of Medicinal  Plant Research, 45 (1),  31–34. https://doi.org/10.1055/s-2007-971236
Papalia,  T.,  Barreca,  D.,  &Panuccio,  M.  (2017).
Assessment of Antioxidant
and
Cytoprotective Potential of Jatropha
(Jatropha  curcas)  Grown  in  Southern  Italy. International  Journalof  Molecular  Sciences ,
Januari - Juni 2023 18 (3), 660-674. https://doi.org/10.3390/ijms18030660
Rahman, S., Alfanaar, R., Fatiqin, A., Febrianto, Y.,
Thathit  S.,  &  Arsana,  M.P.  (2022).  Profil fitokimia  dan  aktivitas  antibakteri  fraksi  etil asetat  daun  jarak  pagar(Jatropha  curcas Linn.). Journal  of  Biotropical  Research  and Nature Technology, 1 (1), 37-44.
https://doi.org/10.36873/borneo.v1i1.8332
Rahman, S., Angga, S.C., Toepak, E.P., &Bachtiar, M.T.  (2021).  Profil  fitokimia  dan  aktivitas antibakteri fraksi etil asetat akar jarak pagar (Jatropha  curcas  Linn.). Sasambo  Journal  of Pharmacy , 2 (2), 73–79. https://doi.org/10.29303/sjp.v2i2.116
Rahmi,  A.,  Afriani,  T.,  &Aini,  A.  (2022).  Cytotoxic test  of  extract  and  fractions  from  Blumea balsamifera  leaves  using  Brine  Shrimp Lethality Test (BSLT). Jurnal Ilmiah Farmasi,18 (1), 26–33.
https://doi.org/10.20885/jif.vol18.iss1.art3
Riniati,  R.,  Sularasa,  A.,  Febrianto,  A.D.  (2019).
Ekstraksi  Kembang  sepatu  (Hibiscus  Rosa Sinensis  L)  Menggunakan  Pelarut  Metanol dengan  Metode  Sokletasi  untuk  Indikator Titrasi  Asam  Basa. Ind.  J.  Chem.  Anal,  2 (1), 33-40. https://doi.org/10.20885/ijca.vol2.iss1.art5 Setyaningsih,  D.,  Pandji,  C.,  &Perwatasari,  D.D. (2014).  Kajian  Aktivitas  Antioksidan  dan Antimikroba  Fraksi  dan  Ekstrak  dari  Daun dan Ranting Jarak Pagar (Jatropha Curcas L.)
Serta Pemanfaatannya Pada Produk Personal Hygiene, agriTECH,34 (2). https://doi.org/10.22146/agritech.9502
Spínola,  V.,  Pinto,  J.,  &Castilho,  P.C.  (2015).
Identification  and  quantification of  phenolic compounds  of  selected  fruits  from  Madeira Island  by  HPLC-DAD–ESI-MSn  and  screening for  their  Antioxidant  activity. Food  Chem ,
173 , 14–30. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2014.09
.163
Sudaryanto,  Herwanto,  T.,  Putri,  S.  H.  (2016).
Aktivitas Antioksidan Pada Minyak Biji Kelor (Moringa  Oleifera  L.)  dengan  Metode Sokletasi  Menggunakan  Pelarut  n-Heksan, Metanol  dan  Etanol. JurnalTeknotan , 10 (2), 16–21.
https://doi.org/10.24198/jt.vol10n2.3
Susanty,  S.,  &  Bachmid,  F.  (2016).  Perbandingan Metode  Ekstraksi  Maserasi  dan  Refluks Terhadap Kadar Fenolik dari Ekstrak Tongkol Jagung  (Zea  mays  L.). Jurnal  Konversi , 5 (2), 87.
https://doi.org/10.24853/konversi.5.2.87-92 Vieira, D.S., Oliveira, F.T. de, Suarez, J.A.G., Silva, D.P. da, Bernardo, T.H.L.,&Bastos, M.L. de A. (2021).  Biological  activities:  anti-infectious, Antioxidant  and  healing  of  the  vegetable species  Jatropha  multifida. Rev.  Bras.
Enferm,74 (2). e20200451 https://doi.org/10.1590/0034-7167-2020-
0451
Zhao,  X.,  Zhang,  M.,  Li,  C.,  Jiang,  X.,  Su,  Y., &Zhang,  Y.  (2019).  Benefits  of  Vitamins  in the  Treatment  of  Parkinson’s  Disease  : Review  Article. OxidativeMedicine  and Cellular Longevity , 2019 , 1–14. https://doi.org/10.1155/2019/9426867