Medika Kartika : Jurnal Kedokteran dan Kesehatan

## INFUSA KULIT BAWANG MERAH (Allium cepa L.) MEMPERBAIKI KERUSAKAN HATI TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI DIAZINON
(SHALLOT (Allium cepa L.) PEEL INFUSION IMPROVES DIAZINON-INDUCED LIVER DAMAGE IN WISTAR RATS)
Nada Qurrota Aini 1 , Rosita Dewi 2 , Pulong Wijang Pralampita 3 , Dina Helianti 2
1 Fakultas Kedokteran, Universitas Jember, Jember, Jawa Timur, Indonesia
2 Laboratorium Histologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jember, Jember, Jawa Timur, Indonesia
3 Laboratorium Patologi Klinik, Fakultas Kedokteran, Universitas Jember, Jember, Jawa Timur, Indonesia
Email korespondensi: rosita.fk@unej.ac.id

## ABSTRAK
Penggunaan  diazinon  dalam  membasmi  hama  tanaman  akan  meninggalkan  residu  pada tanaman sehingga jika dikonsumsi memberikan dampak buruk. Metabolisme diazinon di hati meningkatkan jumlah radikal bebas dan menurunkan  aktivitas enzim antioksidan yang akan mengakibatkan  kerusakan  sel  hati.  Kulit  bawang  merah  ( Allium  cepa L.)  mengandung kuersetin  yang  dapat  memperbaiki  kerusakan  jaringan  akibat  stres  oksidatif.  Penelitian  ini bertujuan mengetahui hubungan antara dosis infusa kulit bawang merah (IKBM) dan tingkat kerusakan hati tikus yang diinduksi diazinon dan menentukan dosis efektif maksimum IKBM. Tikus  dibagi  menjadi  kelompok  normal,  diazinon,  dan  IKBM.  Diazinon  diberikan  dengan dosis 40 mg/kgBB selama 7 hari dilanjutkan dengan IKBM dengan dosis 125, 250, 500, 1.000, dan 2.000 mg/kgBB selama 7 hari. Pengamatan mikroskopik dilakukan terhadap 100 sel hati dengan  pewarnaan hematoxylin-eosin (HE) berdasarkan  skor Manja  Roenigk .  Tingkat kerusakan  hati  antara  dua  kelompok  dianalisis  menggunakan  uji Mann-Whitney ,  sedangkan korelasi antara dosis IKBM dan tingkat kerusakan hati, dan dosis efektif maksimum IKBM ditentukan  dengan  uji  regresi.  Rerata  skor  histopatologi  hati  tertinggi  didapatkan  pada kelompok diazinon dan terendah pada kelompok normal (p<0,05). Uji regresi menunjukkan terdapat hubungan eksponensial antara dosis IKBM dan tingkat kerusakan hati (p<0,05), yaitu semakin  tinggi  dosis  IKBM,  semakin  rendah  skor  histopatologi  hati  dan  dosis  efektif maksimum  IKBM  adalah  1.347,28  mg/kgBB.  Sebagai  kesimpulan,  semakin  tinggi  dosis IKBM,  semakin  rendah  tingkat  kerusakan  hati  tikus  yang  diinduksi  diazinon.  Pemberian IKBM melebihi dosis 1.347,28 mg/kgBB akan meningkatkan kerusakan hati.
Kata kunci :  bawang merah, diazinon, hati, histopatologi
DOI:
DOI

## ARTIKEL PENELITIAN

## ABSTRACT
Diazinon usage in eradicating pests will leave residues on plants so that if consumed, it will have  bad  impacts.  Diazinon  metabolism  in  liver  incre5ses  free  radicals  and  decreases antioxidant  enzymes  activities  leading  to  liver  cell  damage.  Shallot  (Allium  cepa  L.)  peel contains quercetin which can ameliorate tissue damage caused by oxidative stress. This study aimed to determine correlation between shallot peel infusion (SPI) dose and liver damage level induced by diazinon in rats and the maximum effective dose of SPI. The rats were divided into normal, diazinon, and SPI groups. Diazinon was administered 40 mg/kgBW for 7 days, followed by  SPI  125,  250,  500,  1,000,  and  2,000  mg/kgBW  for  7  days.  Microscopic  observation  was carried out on 100 liver cells with hematoxylin-eosin (HE) staining based on the Manja Roenigk score. Liver damage level between two groups was analyzed using Mann-Whitney test, while the correlation between SPI dose and liver damage level, and the maximum effective dose of SPI were determined using regression test. The highest score was found in diazinon group and the lowest was in normal group (p<0,05). The regression test showed the correlation between SPI dose and the liver damage level (p<0.05) which meant that the higher the SPI dose, the lower the liver histopathological score and the maximum effective dose was 1,347.28 mg/kgBW. In conclusion, the higher the SPI dose, the lower the liver damage level induced by diazinon in rats. SPI administration over the dose of 1,347.28 mg/kgBW will increase the damage of liver.
Keywords: diazinon, histopathology, liver, shallot

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan negara agraris dengan  mayoritas  penduduk  bermata pencaharian  sebagai  petani.  Data  Badan Pusat  Statistik  tahun  2017  menunjukkan jumlah petani di Indonesia mencapai 39,68 juta orang. 1 Untuk meningkatkan produktivitas  hasil  pertanian,  aktivitas pertanian  tidak  lepas  dari  penggunaan pestisida yang bermanfaat dalam membasmi  hama  tanaman. Pestisida  yang banyak digunakan adalah pestisida golongan  organofosfat,  salah  satunya diazinon.  Penggunaan  diazinon  berisiko meninggalkan residu pada tanaman sehingga    jika    dikonsumsi   memberikan dampak  buruk  bagi  kesehatan  manusia. 2
Studi yang dilakukan oleh Himawan (2012) menyatakan  bahwa  kadar  residu  diazinon
pada  stroberi  dari  pasar  yang  tidak  dicuci dan dicuci air berturut-turut 2.462,05±23,46 mg/kg  dan  622,08±104,05  mg/kg.  Hasil penetapan  kadar  residu  diazinon  tersebut melampaui  Batas  Maksimum  Residu (BMR) yang diatur dalam Standar Nasional Indonesia (SNI), yaitu 0,1 mg/kg. 3
Metabolisme  diazinon  menghasilkan metabolit diazoxon yang akan menghambat enzim asetilkolinesterase (AchE). 4
Peningkatan kadar asetilkolin akan meningkatkan  influks  kalsium  sehingga jumlah  nitrit  oksida  (NO)  meningkat. 5
Selain  itu, diazoxon menurunkan  aktivitas enzim  antioksidan  seperti superoxide dismutase (SOD), glutathion  peroxidase (GPx) , dan catalase (CAT) 6–9 Metabolisme diazinon pada hati menyebabkan akumulasi metabolit diazoxon yang akan mengganggu
fungsi  dan  struktur  hati.  Pemberian diazinon  40  mg/kgBB  selama  lima  hari dapat  menimbulkan  penurunan  fungsi  hati yang  ditunjukkan  melalui  peningkatan kadar enzim transaminase secara signifikan dibandingkan  dengan  kelompok  normal. Selain  itu,  diazinon  juga  menimbulkan kerusakan histopatologi hati tikus Wistar. 10
Oleh karena itu, dibutuhkan suatu senyawa antioksidan  yang  berpotensi  memperbaiki kerusakan  hati  akibat  diazinon  dengan menstabilkan radikal bebas dan meningkatkan aktivitas enzim
antioksidan. 11–13
Bawang  merah  ( Allium  cepa  L. ) merupakan produk sayuran terbanyak yang dihasilkan  di  Indonesia  dan  mengandung antioksidan  kuersetin. 14,15 Proses  produksi makanan dengan bahan baku bawang merah menghasilkan  limbah  kulit  bawang  merah yang umumnya tidak dimanfaatkan kembali,  padahal  kulit  bawang  merah mengandung kuersetin tiga sampai lima kali lipat  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan umbinya.  Suatu  penelitian  menunjukkan kuersetin pada ekstrak etanol kulit bawang merah dosis 600 mg/kgBB dapat memperbaiki kerusakan hati yang diinduksi parasetamol. 14 Pada  penelitian  ini,  metode ekstraksi dilakukan dengan membuat infusa kulit  bawang  merah  yang  menerapkan prinsip like dissolve like . Kuersetin sebagai senyawa  polar  akan  mudah  larut  dalam pelarut  polar,  yaitu  akuades.  Selain  itu,
prosedur  pembuatan  infusa  juga  mudah diaplikasikan  oleh  masyarakat. 16,17 Belum ada  studi  yang  meneliti  efek  kulit  bawang merah  dalam  bentuk  infusa  (infusa  kulit bawang  merah;  IKBM)  secara  khusus terhadap  kerusakan  hati  yang  diinduksi diazinon. Dengan demikian, peneliti melakukan penelitian dengan tujuan mengetahui  hubungan  antara  dosis  IKBM dan  tingkat  kerusakan  hati  tikus  Wistar yang  diinduksi  diazinon  dan  menentukan dosis  efektif  maksimum  IKBM  dalam memperbaiki kerusakan hati tikus. Hipotesis  penelitian  ini  adalah  terdapat hubungan  antara  dosis  IKBM  dan  tingkat kerusakan hati tikus Wistar yang diinduksi diazinon.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Oktober-November tahun 2021 di Fakultas Kedokteran  Universitas  Jember.  Penelitian ini telah mendapatkan persetujuan etik dari Komisi Etik Penelitian, Fakultas Kedokteran  Universitas  Jember  dengan nomor 1476/H.25.1.11/KE/2021. Unit eksperimen  yang  digunakan  adalah  tikus putih  ( Rattus  norvegicus )  galur Wistar .
Sampel  penelitian  adalah  tikus  jantan, sehat, umur 8-10 minggu, dan bobot badan 150-220  g.  Kulit  bawang  merah  yang digunakan  berasal  dari  varietas  Biru Lancor,  spesies Allium  cepa L.  var. ascalonicum  Back .  Bahan  lain  yang digunakan  meliputi  pelet  pakan  tikus,
diazinon 600 g/L (PT. Citraguna Sarinatama), corn  oil ,  akuades, neutral formalin buffer 10%, xylol , paraffin ,  dan pewarna hematoxylin-eosin (HE).
Kulit bawang merah direndam menggunakan  air  garam  2%  lalu  dicuci menggunakan  air  mengalir.  Kulit  bawang merah  yang  telah  dicuci  dikeringkan  di bawah  sinar  matahari  pagi  dan  sore  hari kemudian  kulit  bawang  merah  kering dihaluskan menggunakan blender . Pembuatan IKBM dilakukan menggunakan dua  panci  yang  ditumpuk.  Panci  pertama diisi  dengan  air  lalu  dipanaskan,  panci kedua diletakkan di atas panci pertama dan digunakan  untuk  menempatkan  larutan infusa konsentrasi 20% (10 g simplisia kulit bawang  merah  dan  50  mL  akuades),  lalu dipanaskan  dengan  suhu  90 o C  selama  15 menit.  Hasil  IKBM  yang  masih  panas disaring  menggunakan  kain  flanel  dan ditambahkan  air  panas  hingga  mencapai volume 50 mL. 18
Hewan  coba  diaklimatisasi  selama tujuh  hari  dengan  pemberian  makan  dan minum  secara ad  libitum .  Tikus  dibagi menjadi  tujuh  kelompok  secara  random, yaitu kelompok normal, kelompok diazinon,  dan  kelompok  IKBM  1-5. Randomisasi dilakukan menggunakan aplikasi random  generator kemudian dilakukan uji komparasi untuk memastikan bahwa pembagian kelompok telah homogen berdasarkan  bobot  badan  tikus.  Pada  hari
ke-1  sampai  ke-7,  kelompok  normal disonde corn  oil sedangkan  kelompok diazinon  dan  IKBM  disonde  diazinon  40 mg/kgBB.  Pada  hari  ke  8-14,  kelompok normal  dan  diazinon  disonde  akuades  10 ml/kgBB  dan  kelompok  IKBM  disonde IKBM  dengan  dosis  125  mg/kgBB,  250 mg/kgBB, 500 mg/kgBB, 1.000 mg/kgBB, dan  2.000  mg/kgBB.  Setelah  hewan  coba diterminasi,  dilakukan  pengambilan  organ hati  lobus  kanan  kemudian  difiksasi menggunakan neutral formalin buffer 10%, dicetak menggunakan blok paraffin , dipotong  menggunakan  mikrotom  setebal 3-5  mikron,  dan  dilakukan  pewarnaan dengan HE. Preparat histopatologi hati tikus diamati menggunakan mikroskop binokular Leica DM500 oleh dua pengamat. Pengamatan  mikroskopis  hati  dilakukan pada lima lapang pandang, sejumlah 20 sel per  lapang  pandang.  Berdasarkan  skor histopatologi  hati  Manja  Roenigk  yang mencerminkan  tingkat  kerusakan  sel  hati, yaitu  skor  1:  normal,  skor  2:  degenerasi parenkim, skor 3: degenerasi hidropik, dan skor  4:  nekrosis. 19 Untuk  membedakan tingkat kerusakan hati antara dua kelompok, digunakan  uji Mann-Whitney ,  sedangkan untuk  mengetahui  hubungan  antara  dosis IKBM  dan  tingkat  kerusakan  hati  tikus Wistar  yang  diinduksi  diazinon  dan menentukan dosis efektif maksimum IKBM dalam  memperbaiki  kerusakan  hati  tikus, digunakan uji regresi.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Rerata  skor  histopatologi  hati  setiap kelompok dapat dilihat pada Tabel 1. Pada data  tersebut,  dapat  dilihat  kelompok normal  memiliki  skor  histopatologi  hati terendah  dan  kelompok  diazinon  memiliki skor  tertinggi.  Pada  kelompok  IKBM-1,
IKBM-2,  IKBM-3,  dan  IKBM-4,  terjadi penurunan skor secara berurutan tetapi pada kelompok IKBM-5 terjadi peningkatan skor dibandingkan  kelompok  IKBM-4.  Hasil pengamatan histopatologi hati dapat dilihat pada Gambar 1.

## Tabel 1 Rerata skor histopatologi hati
Kelompok Rerata skor histopatologi hati (Rerata ± standar deviasi) (n=4) Normal 156,50±14,28 ∆ Diazinon 329,38±3,86 □ IKBM-1 317,50±7,31 □ IKBM-2 292,13±9,56 □∆ IKBM-3 254,88±2,53 □∆ IKBM-4 222,75±8,80 □∆ IKBM-5 240,88±9,37 □∆
∆ Signifikan dibandingkan dengan kelompok diazinon (p<0,05)
□ Signifikan dibandingkan dengan kelompok normal (p<0,05)
Uji  normalitas  menunjukkan  bahwa data berdistribusi normal (p>0,05) dan hasil uji  homogenitas  menunjukkan  bahwa  data tidak  homogen  (p<0,05).  Oleh  karena  itu, uji  beda  tingkat  kerusakan  hati  antara  dua kelompok  dilakukan  dengan  uji Mann- Whitney. Kelompok    diazinon     berbeda signifikan dengan kelompok normal (p<0,05),  kelompok  IKBM-2,  IKBM-3, IKBM-4,  dan  IKBM-5  berbeda  signifikan dengan  kelompok  diazinon  (p>0,05),  dan seluruh kelompok IKBM berbeda signifikan dengan  kelompok  normal  (p<0,05)  (Tabel 1).
Rerata  skor  histopatologi  hati  pada
kelompok diazinon lebih tinggi dibandingkan kelompok normal dan
berbeda  signifikan  yang  menunjukkan bahwa diazinon bersifat hepatotoksik. Hasil ini  sesuai  dengan  penelitian  sebelumnya yang  menyatakan  bahwa  paparan  diazinon secara  oral  dengan  dosis  40  mg/kgBB selama  lima  hari  dapat  menimbulkan toksisitas  pada  hati  yang  ditandai  dengan gambaran  histopatologi  hati  tikus  Wistar berupa  degenerasi  parenkim,  degenerasi hidropik, dominasi sel nekrosis, dan dilatasi sinusoid. Perubahan gambaran histopatologi hati  terjadi  akibat  peningkatan reactive oxygen  species (ROS)  dan  penghambatan aktivitas enzim antioksidan. 10 Hasil penelitian  oleh  Ivanovic et  al .  (2020)  juga menunjukkan  bahwa  pemberian  diazinon secara  oral  dengan  dosis  55  mg/kgBB
selama  tujuh  hari  menyebabkan  perubahan mikroskopis hati tikus berupa hepatitis porta dan nekrosis multifokal. 20 Diazoxon merupakan hasil
metabolisme  diazinon  yang  menghambat AChE  lebih  kuat  dibandingkan  diazinon sehingga menimbulkan akumulasi asetilkolin. 4 Asetilkolin  berikatan  dengan reseptor caveolin pada  membran  sel  yang akan  meningkatkan  jumlah  ion  Ca 2+ intraselular. Selanjutnya ion Ca 2+ berikatan dengan kalmodulin (CaM) sehingga calmodulin-binding  domain of endothelial nitrit oxide synthase (eNOS) akan teraktivasi  dan  menghasilkan  NO. 5 NO berikatan dengan sitokrom C oksidase pada Complex  IV mitokondria  sel  hati  dan menghambat aktivitasnya secara irreversibel. Penghambatan aktivitas Complex  IV ini  memicu  terjadinya  deplesi adenosine  triphosphate (ATP). 6,8 Deplesi ATP menyebabkan gangguan pompa Na + K +
ATPase  dan  memicu  kerusakan  sel  hati,
yaitu  degenerasi  parenkim,  degenerasi hidropik, dan nekrosis. Degenerasi parenkim terkait dengan kegagalan transportasi  protein  yang  diproduksi  oleh ribosom. Protein akan mengendap di dalam sel  dan  menimbulkan  granulasi  pada  sel hati.  Degenerasi  hidropik  terkait  dengan gangguan  transpor  aktif  ion  Na + keluar  sel sehingga  jumlah  ion  Na + di  dalam  sel  hati meningkat. Peningkatan ion Na + intraseluler memicu influks air ke dalam sel sehingga sel membengkak. 21,22 Glikolisis anaerob merupakan  mekanisme  kompensasi  sel untuk  mempertahankan  energi  akibat deplesi  ATP  yang  menghasilkan  produk akhir piruvat dan laktat. Piruvat dan laktat menyebabkan  perubahan  pH  sel  sehingga memicu  nekrosis  sel  berupa  kondensasi kromatin menjadi  inti  padat  yang   disebut piknotik,  fragmentasi  inti  yang  disebut karioreksis, dan hilangnya inti yang disebut kariolisis. 21–23
Selain melalui
mekanisme penghambatan AChE, diazoxon merusak sel hati melalui mekanisme penurunan aktivitas enzim  antioksidan,  yaitu  SOD,  GPx,  dan CAT  yang  dapat  menstabilkan  radikal bebas.  SOD  berperan  dalam  mengonversi anion superoksida menjadi hidrogen peroksida  (H 2 O 2 )  yang  kemudian  akan dikonversi menjadi air (H 2 O)  dan   oksigen (O 2 )  oleh  CAT  dan  GPx.  Penurunan aktivitas enzim antioksidan mengakibatkan peningkatan  jumlah  ROS  yang  akan
memicu  stres  oksidatif  dan  peroksidasi lipid. 6,8
Perbaikan  gambaran  histopatologi hati  diduga  karena  efek  antioksidan kuersetin dalam IKBM. Kuersetin berperan  sebagai  donor  hidrogen  yang akan menstabilkan radikal bebas. 15
Penelitian  oleh  Bardos  dkk.  (2018) menyebutkan  kandungan  kuersetin  pada ekstrak  etanol  kulit  bawang  merah  dosis 600  mg/kgBB  mampu  menurunkan  stres oksidatif  dan  melindungi  sel  hati  dari kerusakan  yang  diinduksi  parasetamol. 14
Gambar 1 Gambaran histopatologi hati tikus kelompok normal, IKBM-1, IKBM-2, IKBM-3, IKBM-4, dan IKBM-5 dengan perbesaran 400X. Panah kuning menunjukkan sel hati normal, panah hijau menunjukkan degenasi parenkim sel hati, panah biru menunjukkan degenerasi hidropik sel hati, dan panah hitam menunjukkan nekrosis sel hati.
Kuersetin meningkatkan kapasitas antioksidan  dengan  cara  meningkatkan kadar gluthatione (GSH) dan meningkatkan aktivitas enzim antioksidan seperti  SOD,  CAT,  dan  GPx  yang mengkatalisasi ROS menjadi bentuk yang lebih  stabil  sehingga  dapat  mengurangi stres oksidatif dan kerusakan sel hati. 13
Dari  hasil  uji  linearitas,  didapatkan deviation  from  linearity 0,000  (p<0,05) yang berarti bahwa data tidak linear. Karena data  berdistribusi  normal  dan  tidak memenuhi  syarat  linearitas,  tidak  dapat dilakukan  uji  korelasi  Pearson.  Pada
estimasi  kurva  regresi, R  square tertinggi (0,966)  dan  signifikansi  0,000  (p<0,05) ditemukan  pada  kurva  kuadratik  seperti pada Gambar 2 dengan persamaan regresi y = 6,643 . 10 -5 x 2 –0,179x + 332,89. Terdapat hubungan eksponensial antara dosis IKBM dan  skor  histopatologi  hati  tikus  Wistar secara  eksponensial,  yaitu  semakin  tinggi dosis IKBM, semakin rendah skor histopatologi hati. Dosis efektif maksimum IKBM diperoleh dengan menentukan nilai x pada  turunan  persamaan  regresi  (y’=0), yaitu 1.347,28 mg/kgBB.
Gambar 2 Kurva Regresi (x: Dosis infusa, y: Skor Histopatologi Hati).
Pemberian  IKBM  melebihi  dosis efektif  maksimum  akan  meningkatkan kerusakan hati. Pada dosis 2.000 mg/kgBB, skor histopatologi hati mengalami kenaikan dibandingkan dengan dosis 1.000 mg/kgBB. Hal  ini  diduga  karena  kuersetin  dalam IKBM  di  atas  dosis  efektif  maksimum mengalami perubahan sifat dari antioksidan
menjadi prooksidan. 24 Berdasarkan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Choi  dkk. (2003),  pemberian  kuersetin  dengan  dosis 20  mg/hari  selama  4  minggu  pada  tikus menyebabkan pembentukan metabolit radikal  bebas  kuinoid  dan  kuinon.  Radikal bebas  ini  dinetralkan  oleh  GSH  sehingga kadar GSH menurun. 25 Selain itu, penelitian
lain  menyatakan  bahwa  ekstrak  etil  asetat kulit  bawang  merah  dosis  1.600  mg/kgBB dan  2.900  mg/kgBB  selama  14  hari menimbulkan kerusakan gambaran mikroskopis  hati  mencit  berupa  dilatasi sinusoid, perdarahan jaringan, dan agregrasi limfosit. 26
Saran  untuk  penelitian  selanjutnya terkait  dengan  keterbatasan  penelitian  ini adalah  perlu  dilakukan  pengukuran  kadar kuersetin di dalam IKBM, analisis struktur hati  dengan  metode  kuantitatif  stereologi, dan  uji  fungsi  hati.  Selain  itu,  perlu dilakukan  pengukuran malondialdehyde (MDA)  hati  sebagai  indikator  stres oksidatif.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian,  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  hubungan antara  dosis  IKBM  dan  tingkat  kerusakan hati  tikus  Wistar  yang  diinduksi  diazinon. Semakin tinggi dosis IKBM maka semakin rendah tingkat kerusakan hati. Dosis efektif maksimum  IKBM  dalam  memperbaiki kerusakan  hati  tikus  yang  diinduksi diazinon, yaitu 1.347,28 mg/kgBB.
Pemberian  IKBM  melebihi  dosis  1.347,28 mg/kgBB  akan  meningkatkan  kerusakan hati.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Pernyataan  penulis  bahwa  tidak terdapat  konflik  kepentingan  dalam  artikel ilmiah yang ditulis.

## DAFTAR PUSTAKA
1.   BPS. BPS: Jumlah Penduduk Bekerja Naik 6,13 Juta, Pengangguran Turun 0,28  Persen.  Badan  Pusat  Statistik 2022  [update  2  Nov  2019;  sitasi  23
Nov 2021]; Available from https://setkab.go.id/bps-jumlah- penduduk-bekerja-naik-613-juta- pengangguran-turun-028-persen/
2.   Ardiwinata AN, Ginoga LN,
Sulaeman  E,  Harsanti  ES.  Pesticide Residue Monitoring on Agriculture in Indonesia. Jurnal Sumberdaya Lahan 2018;12(2):133–144.
3.   Himawan H. Penetapan Kadar Residu
Diazinon Pada Buah Stroberi (Fragaria  Sp.) Setelah  Pencucian dengan  Metode  Gc-Ms.  [Skripsi]. Surakarta: Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta; 2012.
4.   Zhao  S,  Wesseling  S,  Spenkelink  B, Rietjens IMCM. Physiologically based kinetic modelling based prediction  of  in  vivo  rat  and  human acetylcholinesterase (AChE)
inhibition upon exposure to diazinon. Arch Toxicol 2021;95(5):1573–1593.
5.   Zhao Y, Vanhoutte PM, Leung SWS. Vascular nitric oxide: Beyond eNOS. J Pharmacol Sci. 2015;129(2):83–94.
6.   Jafari M, Salehi M, Ahmadi S, Asgari A, Abasnezhad M, Hajigholamali M. The  role  of  oxidative  stress  in
diazinon-induced  tissues  toxicity  in Wistar  and  Norway  rats.  Toxicol Mech Methods 2012;22(8):638–647.
7.   Mahmoud A, nashwa shalaby.
Evaluation of Hepatoprotective Effect of  Propolis  Against  Sub-Chronic Diazinon  Induced  Hepatotoxicity. The  Egyptian  Journal  of  Forensic Sciences  and  Applied  Toxicology 2018;18(4):59–77.
8.   Nili-Ahmadabadi  A,  Alibolandi  P,
Ranjbar  A,  et  al.  Thymoquinone attenuates hepatotoxicity and oxidative damage caused by diazinon:
an  in  vivo  study.  Res  Pharm  Sci
2018;13(6):500.
9.   Vahidirad M, Arab-Nozari M,
Mohammadi  H,  Zamani  E,  Shaki  F. Protective  effect  of  captopril  against diazinon  induced  nephrotoxicity  and neurotoxicity  via  inhibition  of  ROS- NO  pathway.  Drug  Chem  Toxicol 2018;41(3):287–293.
10.  Wisudanti  DD,  Herdiana  F,  Qodar TS. Diazinon Toxicity to Kidney and Liver of Wistar Male Rats in terms of Biochemical  and  Histopathological Parameters. Journal of Agromedicine and Medical Sciences 2019;5(2):51. 11.  Oliveira CR de, Ceolin J, Oliveira RR de, et al. Efecto de la quercetina sobre la  lesión  hepática  inducida  por bifenilos  policlorados  en  ratas.  Nutr Hosp 2014;29(5):1141–1148.
12.  Gelen V, Şengül E, Gedikli S, Gür C,
Özkanlar  S.  Therapeutic  effect  of quercetin on renal function and tissue damage  in  the  obesity  induced  rats. Biomedicine  &  Pharmacotherapy 2017;89:524–528.
13.  Xu D, Hu M-J, Wang Y-Q, Cui Y-L.
Antioxidant  Activities  of  Quercetin and  Its  Complexes  for  Medicinal Application. Molecules 2019;24(6):1123.
14.  Bardos J, Dalimunthe A, Harahap U. Aktivitas  Hepatoprotektor  Ekstrak Etanol  Kulit  Bawang  Merah  ( Allium cepa L.  Corium)  Terhadap  Mencit Jantan  Yang  Diinduksi  Parasetamol. Talenta  Conference  Series:  Tropical Medicine (TM) 2018;1(3):1–6.
15.  Nuri  N,  Puspitasari  E,  Hidayat  MA, Ningsih  IY,  Triatmoko  B,  Dianasari D. Pengaruh Metode Ekstraksi terhadap  Kadar  Fenol  dan  Flavonoid
Total,  Aktivitas  Antioksidan  serta Antilipase Daun Jati Belanda
(Guazuma  ulmifolia) .  Jurnal  Sains Farmasi & Klinis 2020;7(2):143.
16.  Brini E, Fennell CJ, Fernandez-Serra M, Hribar-Lee B, Lukšič M, Dill KA. How Water’s Properties Are Encoded in  Its  Molecular  Structure  and
Energies. Chem Rev 2017;117(19):12385–12414. 17.  Suryani  NC,  Permana,  Jambe  A. Pengaruh  Jenis  Pelarut  terhadap
Kandungan  Total  Flavonoid  dan Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun Matoa (Pometia pinnata) . Jurnal Ilmu dan  Teknologi  Pangan  (ITEPA) 2016;5(1):1-10.
18.  BPOM  RI.  Acuan  Sediaan  Herbal. Volume ke-8 Edisi I. Jakarta: BPOM RI,  2014.
19.  Januar R, Yusfiati, Fitmawati. Struktur  Mikroskopis  Hati  Tikus Putih (Rattus  novergicus) Akibat Pemberian Ekstrak Tanaman Tristaniopsis  whiteana Griff.  Jurnal Online Mahasiswa
Fakultas
Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam 2014;1(2):392–401.
20.  Ivanovic S, Borozan N, Jankovic R, et al. Functional and histological changes of the pancreas and the liver in the rats after the acute and subacute administration of diazinon.
Vojnosanit  Pregl  2021;78(9):955– 963.
21.  Jordao  AA,  Canale  A,  Brunaldi  M,
Zucoloto  S.  Hepatic  ballooning degeneration:  a new  feature  of  the refeeding syndrome in rats. Clin Exp Hepatol 2020;6(4):327–334.
22.  Ridho MR, Prasetyo A, Hairrudin H.
Hepatoprotector  Effect  of  Coconut
Water  ( Cocos  nucifera L.)  and  Folic Acid  to  the  Liver  Histopathological Desccription  of  Pregnant  Wistar Female  Rats (Rattus  norvegicus) Induced  by  Carbamate.  Journal  of Agromedicine  and  Medical  Sciences 2020;6(1):53.
23.  Kumari  A.  Sweet  Biochemistry.  1 st ed. Rohtak: Department of
Biochemistry Pandhit Bhagwat Dayal Sharma PGIMS, 2017.
24.  Mateus  PG,  Wolf  VG,  Borges  MS, Ximenes  VF.  Quercetin:  Prooxidant Effect  and  Apoptosis  in  Cancer. 2018;265–288.
25.  Choi  EJ,  Chee  K-M,  Lee  BH.  Anti- and  prooxidant  effects  of  chronic quercetin administration in rats. Eur J Pharmacol 2003;482(1–3):281–285.
26.  Dibal NI, Garba SH, Jacks TW. Acute
Toxicity  of  Quercetin  from  Onion Skin  in  Mice.  Pharmaceutical  and Biomedical Research 2021;6(4):269– 276.