## Metode Pengusangan Cepat dengan Larutan Etanol untuk Pengujian Vigor Daya Simpan Benih Caisin
( Brassica rapa L. cv. grup Caisin)
Accelerated Aging Methods with Liquid Ethanol for Vigor Related to Storability Testing of Caisin Seed (Brassica rapa L. cv. grup Caisin)
Aisa Amanah 1 , Maryati Sari 2* , dan Abdul Qadir 2
Diterima 9 Oktober 2015/Disetujui 26 Oktober 2016

## ABSTRACT
The objective of this study was to obtain effective duration in accelerated aging method with soaking the seed in 20% liquid ethanol which could estimate vigor related to storability of caisin seed during 3 and 6 months storage. There were five commercial caisin seed lots used in this study. The lots have different initial vigor.  This  research  was  conducted  in  two  separate  experiments.  The  first  experiment  was  conducted  to study deterioration of caisin seeds stored in aluminum foil pouches for 3 and 6 months at ambient room. The second experiment was conducted to study the effect of chemical aging duration, i.e 30, 60, 90, 120, 150, and 180 minutes moistened (12 hours imbibed) seed soaking in liquid ethanol 20%. Both of experiments were arranged in completely nested design. Germination of seeds after soaking in 20% liquid ethanol for 90 minutes was positively correlated with germination of seeds after storage for 3 and 6 months with coefficient of  corellation  =  0.87  and  0.88.  Both  coefficient  of  corellations  were  close  to  1  which  showed  that  the germination of seeds after accelerated ageing with soaking in 20% liquid ethanol could estimate seed vigor related  to  storability. Vigor related  to  storability of caisin  seed after 3 months  could  be  predicted by  the equation  y  =  56.04+0.36x  with  the  coefficient  of  determination  77.00%.  While  after  6  months  it  can  be predicted  by  the  equation  y  =  62.72+0.38x  with  the  coefficient  of  determination  74.90%.  Y  variable indicates germination of caisin seed after storage while the x variable indicates germination of caisin seed after soaking in 20% liquid ethanol for 90 minutes.
Key words: deterioration, devigoration, longevity, seed storage, viability

## ABSTRAK
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mendapatkan  waktu  perendaman  ke  dalam  etanol  20%  yang tepat  pada  metode  pengusangan  cepat  kimia  yang  dapat  menduga  vigor  daya  simpan  benih  caisin setelah  penyimpanan  3  dan  6  bulan.  Benih  yang  digunakan  berasal  dari  lima  lot  benih  komersial dengan  vigor  awal  yang  berbeda.  Penelitian  terdiri  atas  2  percobaan  terpisah.  Percobaan  1  adalah penyimpanan  benih  caisin  dalam  kemasan  aluminium  foil  selama  3  dan  6  bulan  pada  ruang  suhu kamar.  Percobaan  2  yaitu  pengusangan  cepat  kimia  dengan  merendam  benih  caisin  yang  telah dilembabkan  selama  12  jam  ke  dalam  larutan  etanol  20%  selama  30,  60,  90,  120,  150,  dan  180 menit. Kedua percobaan menggunakan rancangan acak lengkap tersarang. Daya berkecambah benih setelah  pengusangan  melalui  perendaman  etanol  20%  selama  90  menit  berkorelasi  positif  dengan daya berkecambah benih setelah penyimpanan selama 3 dan 6 bulan. Nilai koefisien korelasi pada 3 dan  6  bulan  setelah  simpan  adalah  0.87  dan  0.88.  Kedua  koefisien  korelasi  tersebut  mendekati  1 yang menunjukkan bahwa daya berkecambah benih setelah pengusangan cepat dengan etanol 20% dapat  menduga  vigor  daya  simpan.  Vigor  daya  simpan  benih  caisin  setelah  3  bulan  simpan  dapat diduga  dengan  persamaan  y  =  62.72+0.38x  dengan  nilai  koefisien  determinasi  sebesar  77.00%, sementara  setelah 6 bulan dapat diduga dengan persamaan y  =  56.04+0.36x dengan nilai koefisien determinasi  sebesar  74.90%.  Peubah  y  menunjukkan  daya  berkecambah  setelah  penyimpanan
1 Mahasiswa Program Sarjana Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor
2 Staf Pengajar Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor (Bogor Agricultural University) Jl. Meranti, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680, Indonesia Telp.& Faks. 62-251-8629353 Email: maryatisari@yahoo.com (*penulis korespondensi)
sedangkan x menunjukkan daya berkecambah setelah pengusangan melalui perendaman etanol 20% selama 90 menit.
Kata kunci: daya simpan, deteriorasi, devigorasi, penyimpanan benih, viabilitas

## PENDAHULUAN
Caisin  ( Brassica  rapa L.  cv.  grup Caisin)  merupakan  salah  satu  komoditas hortikultura  yang  memiliki  nilai  komersial tinggi. Penggunaan benih  yang bermutu dengan vigor  tinggi  merupakan  salah  satu  upaya  untuk meningkatkan  produktivitas.  Benih  bermutu dengan  vigor  tinggi  dapat  diperoleh  dari produsen  yang  telah  melakukan  proses sertifikasi  benih.  Salah  satu  informasi  yang tercantum pada label kemasan benih bersertifikat  adalah  nilai  daya  berkecambah benih.  Ketidaksesuaian  nilai  viabilitas  benih dengan  informasi  yang  tercantum  pada  label dapat  terjadi  apabila  viabilitas  benih  menurun dengan  cepat  sehingga  mendahului  batas minimum  daya  berkecambah  sebelum  habis masa  edarnya  (masa  kadaluarsa).  Kondisi  ini dapat terjadi bila pengujiam daya berkecambah dilakukan pada benih yang telah mendekati periode kritis dalam masa hidupnya atau  memiliki  vigor  yang  rendah  akibat penanganan  sebelum  dan  setelah  panen, maupun  selama  penyimpanan  yang  tidak sesuai.  Benih  tersebut  saat  diuji  mungkin memiliki  daya  berkecambah  yang  tinggi namun tidak dapat disimpan lebih lama lagi.
Vigor  daya  simpan  (V DS )  adalah  suatu parameter  vigor  benih  yang  ditunjukkan dengan  kemampuan  benih  untuk  dapat disimpan dalam keadaan sub-optimum. Keadaan  sub-optimum  merupakan  kondisi lingkungan  (suhu  dan  kelembaban)  tidak diatur  atau  kondisi  ruang  simpan  terbuka. Vigor  daya  simpan  dapat  diuji  menggunakan metode pengusangan cepat. Metode pengusangan cepat  dapat  berupa  perlakuan  fisik  dengan pemberian  suhu  dan  RH  atau  kadar  air  benih yang  tinggi,  maupun  perlakuan  kimia.  Hasil Penelitian  Rosida et  al .  (2015)  hasil  perlakuan pengusangan cepat melalui perendaman etanol pada 6 lot benih kubis dengan vigor awal yang berbeda  menghasilkan  korelasi  yang  erat dengan  vigor  daya  simpan.  Addai  dan Kantankan  (2006)  melakukan  perendaman benih  kedelai  dalam  etanol  20%  dan  metanol 20%  selama  dua  jam.  Hasilnya  menunjukkan
bahwa  perendaman  dalam  cairan  etanol memberikan indikasi yang lebih baik terhadap perbedaan  vigor  daya  simpan  beberapa genotipe kedelai dibandingkan cairan metanol. Sementara  itu,  Ekowahyuni et  al. (2012) mengemukakan  bahwa  pengusangan  cepat menggunakan metanol 20% merupakan metode  terbaik  untuk  menduga  vigor  daya simpan  benih  cabe,  lebih  baik  dibanding penggunaan etanol 20%. Larutan etanol maupun metanol  keduanya  dapat  digunakan  untuk mempercepat laju kemunduran benih. Ketika laju kemunduran  dipercepat  maka  dengan  mudah dapat dibedakan antara benih dengan vigor daya simpan yang tinggi dan yang rendah.
Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan  waktu  perendaman  dan  tolok ukur  yang  efektif  pada  metode  pengusangan cepat  secara  kimia  dengan  perendaman  ke dalam  etanol  20%  untuk  menduga  vigor  daya simpan 5 lot benih caisin  yang disimpan pada suhu kamar selama 3 dan 6 bulan.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium  Ilmu  dan  Teknologi  Benih, Departemen  Agronomi  dan  Hortikultura, Fakultas  Pertanian,  Institut  Pertanian  Bogor. Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Januari sampai  Juli  2014.  Bahan  percobaan  yang digunakan  adalah  lima  lot  benih  caisin komersial  yang  diperoleh  dari  kios  pertanian dengan  akhir  masa  edar  (tanggal  kadaluarsa) masing-masing  pada  kemasan  yaitu  DRA (Januari  2016),  GLR  (Desember  2014),  STJ (April  2014),  KML  (April  2014),  dan  TSK (April 2014) dan etanol.
Penelitian ini terdiri atas dua percobaan. Percobaan  1  menggunakan  rancangan  acak lengkap  tersarang.  Lot  benih  tersarang  dalam periode  simpan.  Faktor  pertama  adalah  lot benih  caisin  yang  terdiri  atas  5  taraf  yaitu DRA, KML, TSK, GLR, dan STJ. Faktor kedua adalah  periode  simpan  dengan  tiga  taraf  yaitu 0, 3, dan 6 bulan. Percobaan dilakukan sebanyak 4 ulangan. Setiap satuan percobaan terdiri atas
2.5  g  benih  yang  disimpan  dalam  kemasan aluminium  foil.  Penyimpanan  dilakukan  pada ruang  simpan  selama  0,  3,  dan  6  bulan.  Suhu ruang  simpan  berkisar  23.3-29.9 0 C  dan  RH berkisar  61-85%.  Pengamatan  dilakukan terhadap  kadar  air,  daya  berkecambah  (DB), indeks vigor (IV) dan kecepatan tumbuh (Kct) benih  setelah  disimpan  selama  0,  3,  dan  6 bulan. Pengukuran kadar air simpan dilakukan dengan  sampel  sebanyak  2  g  pada  setiap ulangan. Metode pengujian kadar air dilakukan menggunakan  oven  suhu  rendah  (105±2 0 C)
selama 17±1 jam. Metode pengujian perkecambahan yang digunakan pada pengamatan  adalah  metode  uji  di  atas  kertas (UDK)  dengan  substrat  kertas  CD.  Setiap satuan  pengamatan  terdiri  atas  50  butir  benih. Pengecambahan dilakukan dengan alat pengecambah  benih  ( ecogerminator )  tipe  IPB 73-2A  (suhu kamar  23.3-29.9 0 C ) ,  periode pengecambahan dilakukan selama 7 hari dengan pengamatan hitungan pertama pada 5 hari setelah tanam (hst) dan hitungan kedua pada 7 hst. Percobaan  2  adalah  pengusangan  cepat berupa  perendaman  benih  dalam  etanol  20%. Percobaan  disusun  dengan  rancangan  acak lengkap  tersarang.  Lot  benih  tersarang  dalam waktu  perendaman.  Faktor  pertama  adalah  lot benih  caisin  yang  terdiri  atas  5  taraf,  yaitu DRA, KML, TSK, GLR, dan STJ. Benih yang digunakan  berasal  dari  lot  yang  sama  dengan benih  pada  Percobaan  1. Percobaan  dilakukan bersamaan dengan dimulainya penyimpanan 0 bulan  pada  Percobaan  1.  Faktor  kedua  adalah waktu  perendaman  dalam  etanol  20%  yang terdiri atas 6 taraf,  yaitu 30, 60, 90, 120, 150, dan 180 menit. Percobaan dilakukan sebanyak 4  ulangan.  Pengamatan  setiap  tolok  ukur dalam  tiap  satuan  percobaan  terdiri  atas  50 butir  benih.  Tahap  awal  dari  pelaksanaan Percobaan  2  yaitu  meningkatkan  kadar  air benih,  setiap  ulangan  sebanyak  2  g  benih. Peningkatan  kadar  air  dilakukan  dengan melembabkan  benih  pada  kertas  CD  yang lembab  selama  12  jam  di  dalam refrigerator suhu  5 0 C  sehingga  kadar  air  meningkat menjadi ±30% secara merata. Benih yang telah mengalami  peningkatan  kadar  air  secara merata  selanjutnnya  dikembalikan  untuk menyesuaikan  diri  pada  suhu  ruang  dan mengaktifkan  proses  metabolismenya.  Benih kemudian  direndam  ke  dalam  25  ml  etanol 20%.  Benih  yang  telah  direndam  kemudian ditiriskan  lalu  dikecambahkan  menggunakan
metode uji di atas kertas (UDK) di dalam alat pengecambah  benih  tipe  IPB  73-2A.  Pada setiap  ulangan  sebanyak  50  butir  benih  caisin dikecambahkan  untuk  pengamatan  vigor  daya simpan  pada  tolok  ukur  daya  berkecambah (V etanol(DB) ),  indeks  vigor  (V etanol(IV) ),  dan kecepatan  tumbuh  (V etanol(Kct) ).  Pengecambahan dilakukan selama 7 hari.
Data  hasil  kedua  percobaan  yang diperoleh  diuji  dengan  analisis  ragam.  Uji lanjut  dengan Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT)  pada  taraf  α=  5%  dilakukan  ketika analisis  ragam  menunjukkan  pengaruh  nyata. Hubungan  antara  kedua  percobaan  dianalisis menggunakan  analisis  korelasi  dan  regresi linier  sederhana.  Analisis  korelasi  digunakan untuk melihat keeratan antara daya berkecambah benih setelah penyimpanan pada Percobaan  1  dengan  penduga  vigor  daya simpan  yang  diperoleh  pada  pengusangan cepat  dengan  perendaman  dalam  etanol  20% pada tolok ukut daya berkecambah (V etanol(DB) ), indeks vigor (V etanol(IV) ), dan kecepatan tumbuh (V etanol(Kct) ).  Analisis  regresi  linier  sederhana dilakukan  untuk  mengetahui  hubungan  antara V etanol(DB) ,  V etanol(IV) ,  dan  V etanol(Kct) pada perlakuan  yang  memberikan  nilai  korelasi yang  erat  terhadap  daya  berkecambah  benih setelah disimpan. Berdasarkan analisis tersebut ditentukan  model  persamaan  yang  dapat menduga vigor daya simpan benih caisin.
Verifikasi model secara kualitatif diantaranya  dengan  menggunakan grafik  yang dapat memvisualisasikan output model.
Berdasarkan  hasil  verifikasi  kualitatif,  nilai dugaan  dinyatakan  berkesesuaian  jika  nilai hasil  dugaan  (simulasi)  berada  dalam  selang standar  deviasi  dari  hasil  aktual.  Verifikasi model  secara  kuantitatif  menggunakan  uji statistik,  dilakukan  dengan  membandingkan secara  berpasangan  (uji-t)  hasil  simulasi dengan hasil aktual pada periode simpan yang sama.  Berdasarkan  verifikasi  kuantitatif,  hasil simulasi  dinyatakan  sesuai  atau  tidak  berbeda dengan  hasil  aktual  jika  p -value lebih  besar dari α (0.05).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Kondisi Umum
Suhu  ruang  simpan  selama  percobaan berkisar  23.3-29.9 0 C  dan  RH  berkisar  61-
85%.  Nilai  daya  berkecambah  yang  tertera pada  kemasan  benih  yang  digunakan  berkisar 80-85% dan persentase kemurnian fisik ≥98%. Persentase  kadar  air  pada  kemasan  tidak tercantum.  Berdasarkan  pengujian  selama penyimpanan kelima lot benih caisin memiliki kadar  air  berkisar  4.27-6.81%.  Nilai  kadar  air tersebut  memenuhi  syarat  untuk  perdagangan benih  caisin  yang  ditetapkan  oleh  Dirbenhorti (2012),  yaitu  maksimum  8%.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  kemasan  dan  kondisi ruang simpan yang digunakan untuk penyimpanan  benih  caisin  selama  percobaan relatif aman. Sisa masa edar benih berdasarkan tanggal kadaluarsa dan pengujian 0 bulan pada percobaan ini adalah: DRA 24 bulan, GLR 11 bulan, STJ, KML, dan TSK 3 bulan (Tabel 1).

## Kemunduran Benih Selama Penyimpanan
Percobaan  1  benih  yang  disimpan  pasti mengalami kemunduran atau proses deteriorasi yang  akan  menyebabkan  turunnya  kualitas benih yaitu viabilitas dan vigor benih menjadi rendah.  Laju  kemunduran  benih  caisin  selama periode  simpan  0,  3,  dan  6  bulan  dapat ditunjukkan  dengan  nilai  daya  berkecambah, indeks  vigor  dan  kecepatan  tumbuh  yang semakin berkurang seiring bertambah lamanya waktu penyimpanan.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang disajikan  pada  Tabel  1,  secara  umum  kondisi pada  awal  penyimpanan  kelima  lot  benih masih  memenuhi  syarat  untuk  diedarkan. Persyaratan  teknis  minimal  untuk  nilai  DB benih  caisin  layak  edar  adalah  ≥85% (Dirbenhorti,  2012).  Laju  deteriorasi  pada setiap  lot  benih  dapat  berbeda  meskipun  pada awal  penyimpanan  memiliki  nilai  DB  yang tidak berbeda nyata. Diantara lot DRA, KML, STJ,  dan  GLR  yang  di  awal  penyimpanan memiliki  DB  tidak  berbeda  nyata,  ternyata setelah 6 bulan disimpan hanya lot DRA yang memiliki  DB  >85%.  Saat  3  bulan  setelah simpan  terdapat  2  lot  dengan  nilai  DB  <85% (lot STJ 80.67% dan GLR 81.33%). Lot GLR pada  3  bulan  setelah  simpan  DB  sudah  turun hingga  81.33%  dan  pada  6  bulan  setelah simpan  hanya  72.00%,  padahal  pada  kemasan tercantum masa berlaku label hingga Desember  2014  (11  bulan  sejak  awal percobaan). Sangat dikhawatirkan bahwa pada 5  bulan  berikutnya  daya  berkecambah  akan menjadi  terlalu  rendah  dan  benih  tidak  layak
untuk  ditanam  kembali.  Laju  penurunan  nilai DB  lot  GLR  yang  lebih  cepat  dari  batas kadaluarsanya  menunjukkan  bahwa  nilai  DB yang  tercantum  pada  kemasan  (>85%)  hanya berlaku saat dilakukan pengujian saja, sehingga  dapat  terjadi  ketidaksesuaian  pada penetapan  batas  kadaluarsa  benih.  Kondisi tersebut  memungkinkan  benih  masih  beredar padahal  nilai  DB  kurang  dari  standar  layak edar.  Hal  ini  dapat  menyebabkan  kerugian, baik  bagi  konsumen  maupun  produsen. Sementara  itu,  lot  TSK  mencantum  masa berlaku label hingga April 2014 (3 bulan sejak awal  percobaan),  padahal  hingga  6  bulan setelah  simpan  masih  memiliki  DB  86.67% (Tabel  1).  Oleh  karena  itu,  pendugaan  vigor daya  simpan  benih  sangat  diperlukan  dalam pengujian  benih  untuk  menetapkan  masa berlaku label.
Perbedaan  laju  deteriorasi  dipengaruhi oleh  berbagai  faktor,  baik  faktor  internal maupun  eksternal.  Faktor  internal  mencakup sifat  genetik,  vigor  awal,  kondisi  kulit  benih serta  kadar  air  benih  awal,  sedangkan  faktor eksternal  mencakup  kemasan,  komposisi  gas, suhu,  dan  kelembaban  ruang  simpan,  serta mikroorganisme.  Daya  berkecambah  yang tinggi  di  awal  penyimpanan  tidak  selalu menjamin  benih  memiliki  daya  simpan  lebih lama dibanding lot benih lainnya. Oleh karena itu,  diperlukan  pengembangan  metoda  yang dapat  membedakan  potensi  daya  simpan diantara lot benih (Shaban, 2013a).
Perbedaan laju penurunan daya berkecambah  dapat  disebabkan  oleh pebedaan vigor  awal  yang  dimiliki  oleh  masing-masing benih.  Vigor  benih  dapat  ditunjukkan  oleh nilai  indeks  vigor  (IV)  dan  kecepatan  tumbuh (K CT ). Tabel 1 menunjukkan bahwa sejak awal penyimpanan, lot GLR dan STJ memiliki nilai indeks  vigor  paling  rendah  dibanding  ketiga lot lainnya.
Selama  proses  deteriorasi,  penurunan vigor  mendahului penurunan  daya berkecambah benih  itu  sendiri  (Shabah,  2013b),  sehingga pengujian  vigor  dapat  digunakan  dalam pendugaan  daya  berkecambah  benih  setelah disimpan.  Apabila  perbedaan  vigor  tidak terdeteksi  di  awal  penyimpanan,  baik  melalui pengamatan  indeks  vigor  maupun  kecepatan tumbuh,  proses  devigorasi  (penguasangan cepat)  dapat  dilakukan,  sebagaimana  yang dilakukan pada Percobaan 2 dalam tulisan ini.
Tabel 1. Daya berkecambah, indeks vigor, dan kecepatan tumbuh benih caisin setelah penyimpanan
Lot Benih Sisa Masa Kadaluarsa (bulan) Periode Simpan (bulan) 0 3 6 ……………………………. DB (%)  ……………………………. DRA 24 90.7 Ab 92.7 Aa 86.0 Bab KML 3 88.7 Ab 91.3 Aa 81.0 Bbc TSK 3 96.7 Aa 94.7 Ba 86.7 Ba STJ 3 87.3 Ab 80.7 Bb 76.0 Ccd GLR 11 86.0 Ab 81.3 Bb 72.0 Bd ……………………………. IV (%)  ……………………………. DRA 24 86.7 a 84.7 a 83.3 a KML 3 82.0 Ab 76.7 Bb 76.0 Babc TSK 3 86.7 a 82.0 a 80.7 ab STJ 3 77.0 c 75.3 b 73.3 bc GLR 11 76.0 Ac 75.3 Ab 68.7 Bc …………………………. K CT (% etmal -1 ) ……………………… DRA 24 25.7 Aa 24.6 Aa 22.2 Ba KML 3 23.6 Ab 21.7 Bb 19.7 Cb TSK 3 25.5 Aa 22.0 Bb 18.9 Cb STJ 3 23.5 Ab 20.0 Bc 18.4 Bb GLR 11 23.3 Ab 19.8 Bc 16.3 Cc
Keteragnan:  Angka-angka  sebaris  yang  diikuti huruf  besar  yang  sama  dan  angka-angka  sekolom  yang  diikuti huruf kecil  yang  sama  tidak  berbeda  nyata  pada  taraf  nyata  uji  5%  (uji  selang  berganda  Duncan);  KK: koefisien keragaman hasil uji-F; periode 0, bulan Januari 2014; periode 3, bulan April 2014; periode 6, bulan Juli 2014.

## Devigorasi dengan Perendaman Benih Caisin ke Dalam Larutan Etanol 20%
Percobaan  2  devigorasi  adalah  laju kemunduran  benih  akibat  perlakuan  buatan seperti  pengusangan  cepat.  Devigorasi  pada percobaan  ini  dilakukan  dengan  pengusangan secara  kimia  melalui  perendaman  benih  ke dalam  etanol  20%.  Laju  kemunduran  secara buatan  (devigorasi)  dapat  dilihat  dengan mengamati  nilai  vigor  setelah  pengusangan dengan  pengamatan  daya  berkecambah  benih setelah  diusangkan  (V etanol(DB) ),  indeks  vigor benih  setelah  dingusangkan  (V etanol(IV) ),  dan kecepatan  tumbuh  benih  setelah  diusangkan (V etanol(Kct) ).  Hasil  penelitian  Salehi et  al . (2008)  menunjukkan  bahwa  pada  benih rumput  yang  direndam  dalam  etanol  10% selama 4 jam dapat mengalami laju kemunduran  yang  sangat  berbeda  meskipun viabilitas  awalnya  tidak  terlalu  berbeda. Rumput  marga Lolium yang  direndam  dalam etanol  10%  mengalami  penurunan  daya berkecambah  dari  89.5%  (0  jam  perendaman) menjadi 5.75% (4 jam perendaman), sedangkan  marga Festuca dari  87%  (0  jam perendaman) menjadi 6% (4 jam perendaman).
Kelima lot yang diuji, masih memenuhi persyaratan  daya  berkecambah  >85%.  Empat lot  diantaranya  tidak  berbeda  nyata,  hanya  lot TSK  yang  nyata  memiliki  DB  lebih  tinggi dibanding  lot  lainnya  (Tabel  1).  Viabilitas semakin  turun  seiring  dengan  bertambahnya waktu  perendaman.  Semakin  lama  waktu perendaman benih caisin ke dalam etanol 20% maka  vigor  benih  caisin  semakin  menurun yang  ditunjukkan  pada  tolok  ukur  V etanol(DB) ), (V etanol(IV) ),  maupun  (V etanol(Kct) )  (Tabel  2). Deteriorasi benih caisin mengalami penurunan dipercepat  pada  semua  tolok  ukur,  diduga karena  benih  yang  telah  direndam  ke  dalam etanol mengalami kerusakan pada protein yang merupakan komponen penting pada benih.
Apabila  benih  direndam  dalam  larutan etanol  maka  etanol  dapat  berpenetrasi  ke dalam  komponen  lipida  dari  membran  setelah membran sel rusak, memutuskan ikatan lipida, bahkan  dapat  membuang  fosfolipida  dari membran. Ketika etanol masuk ke dalam benih, etanol dapat menyebabkan teracaknya konfigurasi  protein  yang  berasosiasi  dengan membran (Priestley dan Leopold, 1980).
Tabel 2. Kemunduran mutu benih caisin setelah pengusangan dengan perendaman ke dalam etanol 20%
Lot Benih Waktu Perendaman (menit) 30 60 90 120 150 180 b …….……………………………. V etanol (DB) (%) ………….………………………… DRA 92.0 a 86.0 a 84.7 a 82.7 a 81.3 a 56.8 a KML 92.0 a 81.3 ab 74.7 c 60.7 c 52.0 b 41.6 b TSK 84.0 b 78.7 b 78.7 b 68.0 b 45.3 c 40.4 b STJ 83.3 b 63.3 c 50.0 d 46.7 d 30.7 e 29.8 d GLR 70.0 c 55.3 d 50.0 d 48.7 d 40.7 d 36.1 c ..…….……………………………. V etanol (IV) (%) …….……………………………… DRA 86.0 a 85.3 a 82.7 a 75.3 a 62.7 a 52.0 a KML 88.7 a 73.3 b 72.7 b 60.0 b 44.0 b 29.9 b TSK 78.0 b 72.7 b 68.7 b 63.3 b 40.0 c 32.4 b STJ 78.0 b 53.3 c 46.7 c 35.3 c 24.7 d 24.6 c GLR 66.7 c 46.7 d 46.0 c 41.3 c 37.3 c 34.0 b
.……………………………. V etanol (KCT) (% etmal -1 ) …….………………………… DRA 21.8 b 21.0 a 20.6 a 19.4 a 17.4 a 15.2 a KML 22.3 a 19.0 b 17.6 b 13.8 c 11.6 b 9.3 b TSK 19.4 c 18.5 b 17.8 b 16.0 b 10.9 b 8.6 b STJ 19.7 c 14.1 c 11.7 c 10.0 d 6.8 d 5.0 c GLR 16.5 d 12.3 d 11.6 c 10.9 d 9.6 c 8.1 b
Keterangan: Angka pada kolom yang sama, diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji 5% (uji  selang  berganda  Duncan); b Hasil  transformasi  arcsin  pada  tolok  ukur  V etanol  (IV) selama perendaman 180 menit; KK: koefisien keragaman hasil uji-F.
Pada  penyimpanan  benih  secara  alami, hilangnya integritas membran juga merupakan salah satu penyebab utama hilangnya viabilitas.  Pada  kondisi  penyimpanan  yang tidak kondusif, hilangnya permeabilitas membran  meningkatkan  kebocoran  elektrolit yang berakibat hilangnya viabilitas. Penurunan daya  berkecambah,  daya  tumbuh  di  lapangan dan  vigor  benih  berasosiasi  dengan  semakin tingginya kebocoran elektrolit benih (Jyoti dan Malik,  2013).  Etanol  merupakan  salah  satu senyawa volatil  yang diproduksi benih selama deteriorasi  (Shaban,  2013b).  Woodstock  dan Taylorson  (1981)  mengemukakan  pula  bahwa etanol  mengalami  peningkatan  selama  proses imbibisi,  dan  menjadi  penyebab  hilangnya integritas  membran,  peningkatan  etanol  pada benih  bervigor  tinggi  lebih  lambat  dibanding peningkatannya pada benih bervigor rendah.
Hubungan Daya Berkecambah Benih
Setelah Disimpan dengan Devigorasi dalam
Etanol 20%
Daya berkecambah benih setelah disimpan  menunjukkan  adanya  variasi  lebih tinggi dibandingkan daya berkecambah diawal
penyimpanan  (Tabel  1),  demikian  pula  laju kemunduran benih akibat pengusangan dengan perendaman dalam etanol (Tabel 2).
Uji  korelasi  dilakukan  untuk  melihat hubungan  antara  (V etanol(DB) ),  (V etanol(IV) ),  dan (V etanol(Kct) )  setelah  benih  didera  dalam  etanol 20%  dengan  daya  berkecambah  benih  setelah disimpan  (Tabel  3).  Hasil  analisis  korelasi pada  Tabel  3  menunjukkan  adanya  korelasi positif antara vigor benih setelah pengusangan cepat  dengan  etanol  20%  pada  tolok  ukur V etanol  (DB) ,  V etanol  (IV) ,  maupun  V etanol  (KCT) dengan  daya  berkecambah  benih  setelah disimpan selama 3 dan 6 bulan. Semua waktu deraan  menunjukkan  korelasi  yang  nyata kecuali  pada  waktu  deraan  180  menit  pada tolok  ukur  V etanol  (IV) Berdasarkan  Tabel  3, nilai  koefisien  korelasi  tertinggi  terdapat  pada waktu  perendaman  90  menit  pada  tolok  ukur V etanol(DB) dengan  koefisien  korelasi  sebesar 0.88  setelah  penyimpanan  3  bulan  dan  0.87 setelah  penyimpanan  6  bulan.  Tolok  ukur V etanol(DB) pada  perendaman  selama  90  menit dipilih karena memiliki korelasi erat, koefisien korelasi  mendekati  1  secara  konsisten  baik terhadap daya berkecambah 3 maupun 6 bulan setelah  penyimpanan.  Koefisien  korelasi  yang
positif  menunjukkan  bahwa  semakin  kecil nilai  V etanol  (DB) maka  semakin  kecil  pula  nilai daya  berkecambah  benih  setelah  disimpan. Setelah analisis korelasi menunjukkan hubungan  yang  erat  maka  dilakukan  analisis regresi linier sederhana.

## Pendugaan Vigor Daya Simpan Benih Caisin
Analisis  regresi  linier  sederhana  yang menghubungkan  antara  daya  berkecambah setelah  disimpan  dengan  tolok  ukur  vigor setelah  benih  diusangkan  selama  90  menit dalam  etanol  20%  disajikan  pada  Tabel  4. Vigor  daya  simpan  benih  caisin  selama  3 bulan  dapat  diduga  dengan  persamaanya  = 62.72+0.38x,  dengan  x  adalah  V etanol(DB) pada pengusangan  selama  90  menit  dan  y  adalah daya  berkecambah  setelah  disimpan  3  bulan. Nilai  koefisien  korelasi  sebesar  0.88  dan  nilai koefisien  determinasi  sebesar  77.00%.  Nilai
koefisien determinasi sebesar 77.00%
menunjukkan bahwa sebesar 77.00%
keragaman daya berkecambah setelah disimpan  3  bulan  dapat  diterangkan  oleh V etanol(DB) pada  pengusangan  selama  90  menit, sedangkan  23.00%  sisanya  diterangkan  oleh faktor  lain  di  luar  percobaan.  Sementara  itu, vigor  daya  simpan  benih  caisin  yang  telah disimpan  selama  6  bulan  dapat  diduga melaluipersamaan  y  =  56.04+0.36x,  dengan  x adalah V etanol (DB) pada pengusangan selama 90 menit  dan  y  adalah  DB  setelah  disimpan  6 bulan.  Nilai  koefisien  korelasi  sebesar  0.87 dan  nilai  koefisien  determinasi  sebesar 74.90%.  Nilai  koefisien  determinasi  sebesar 74.90%  menunjukkan  bahwa  sebesar  74.90% keragaman DB setelah disimpan 6 bulan dapat diterangkan  oleh  V etanol(DB) pada  pengusangan selama  90  menit,  sedangkan  25.10%  sisanya diterangkan oleh faktor lain diluar percobaan.
Tabel  3.  Rekapitulasi  hasil  analisis  korelasi  antara  vigor  daya  simpan  setelah  deteriorasi  dengan devigorasi
Waktu Perendaman DB vs V etanol (DB) DB vs V etanol (IV) DB vs V etanol (KCT) r P -value r P -value r P -value Periode Simpan 3 Bulan 30 0.60 * 0.018 0.60 * 0.018 0.56 * 0.029 60 0.82 ** 0.000 0.83 ** 0.000 0.84 ** 0.000 90 0.88 ** 0.000 0.83 ** 0.000 0.88 ** 0.000 120 0.80 ** 0.000 0.88 ** 0.000 0.83 ** 0.000 150 0.61 * 0.011 0.63 * 0.017 0.62 * 0.014 180 0.67 ** 0.006 0.32 tn 0.188 0.60 * 0.017 Periode Simpan 6 Bulan 30 0.69 * 0.016 0.61 ** 0.005 0.61 * 0.017 60 0.86 ** 0.000 0.83 ** 0.000 0.86 ** 0.000 90 0.87 ** 0.000 0.80 ** 0.000 0.85 ** 0.000 120 0.77 ** 0.000 0.80 ** 0.001 0.79 ** 0.000 150 0.60 * 0.021 0.59 * 0.018 0.60 * 0.019 180 0.63 * 0.012 0.45 tn 0.067 0.59 * 0.020
Keterangan:  r  :  koefisien  korelasi; ** :  sangat  nyata; * :  nyata; tn :  tidak  nyata  berdasarkan  nilai pearson  correlation pada taraf 5%; DB: daya berkecambah setelah penyimpanan;  V etanol (DB) : vigor benih nerdasarkan tolok ukur  daya  berkecambah  setelah  pengusangan  dengan  perendaman  dalam  etanol  20%,  V etanol  (IV) :  vigor benih berdasarkan tolok ukur indeks vigor setelah pengusangan dengan perendaman dalam etanol 20%; V etanol  (KCT) :  vigor  benih  berdasarkan  tolok  ukur  kecepatan  tumbuh  setelah  pengusangan  dengan perendaman dalam etanol 20%.

## Verifikasi  Model  Persamaan  Pendugaan Vigor Daya Simpan
Verifikasi  model  dimaksudkan  sebagai tahapan  kegiatan  pemodelan  yang  bertujuan untuk  menilai  kesesuaian  hasil  simulasi dengan hasil aktual (Qadir, 2012). Hasil aktual diperoleh  dari  hasil  pengujian  Percobaan  1 yaitu  deteriorasi  selama  penyimpanan  pada tolok  ukur  daya  berkecambah  selama  3  dan  6 bulan simpan. Hasil simulasi diperoleh dengan mensubstitusikan hasil pengujian pada Percobaan  2  yaitu  nilai  V etanol  (DB) pada pengusangan  selama  90  menit  (peubah  x)  ke dalam  model  persamaan  hasil  analisis  regresi (Tabel  4)  sehingga  diperoleh  nilai  daya berkecambah  setelah  penyimpanan  selama  3 dan  6  bulan  (peubah  y)  untuk  dijadikan sebagai  DB  (3  bulan)  simulasi  dan  DB  (6 bulan) simulasi.
Berdasarkan  Tabel  5  verifikasi  data secara  kuantitatif  menunjukkan  model  tidak dapat menduga secara tepat DB (3 bulan) pada lot  benih  DRA  karena  data  hasil  simulasi keluar  dari  selang  standar  deviasi.  Namun
demikian,  secara  umum  hasil  verifikasi  DB aktual  dan  DB  simulasi  menggunakan  uji-t pada  Tabel  5  menunjukkan  nilai  p -value sebesar  0.93  pada  penyimpanan  3  bulan  dan 0.76 pada penyimpanan 6 bulan. Nilai p -value lebih  besar  dari  α  (0.05)  pada  uji-t,  berarti hasil simulasi tidak berbeda nyata dengan hasil aktual.  Kesesuaian  antara  DB  aktual  dengan DB  simulasi  pada  verifikasi  secara  kuantitatif menunjukkan bahwa model persamaan pendugaan  vigor  daya  simpan  pada  Tabel  4 dapat  digunakan  untuk  menduga  vigor  daya simpan  benih  caisin  setelah  penyimpanan selama 3 bulan maupun 6 bulan.
Verifikasi  secara  kualitatif  (Gambar  1) mendukung  adanya  kesesuaian  antara  DB  (3 bulan)  hasil  aktual  dengan  DB  (3  bulan)  hasil simulasi untuk lot benih GLR, STJ, KML, dan TSK yang didasarkan pada data hasil simulasi yang berada dalam selang standar deviasi dari hasil  aktual.  Sementara  itu,  Gambar  2 mendukung  adanya  kesesuaian  antara  DB  (6 bulan)  hasil  aktual  dengan  DB  (6  bulan)  hasil simulasi untuk semua lot benih yang diuji.
Tabel 4. Rekapitulasi hasil analisis regresi antara tolok ukur V etanol(DB) pada pengusangan selama 90 menit dengan tolok ukur DB setelah penyimpanan 3 dan 6 bulan
Periode Simpan Model R² r 3 Bulan y = 62.72+0.38x 77.00% 0.88 6 Bulan y = 56.04+0.36x 74.90% 0.87
Keterangan: y : daya berkecambah setelah penyimpanan 3 bulan atau 6 bulan; x: V etanol (DB) pada pengusangan selama 90  menit  (vigor  benih  pada  tolok  ukur  daya  berkecambah  setelah  perendaman  dalam  etanol  20%;  R 2 : koefisien determinasi; r: koefisien korelasi.
Tabel 5. Hasil uji-t antara daya berkecambah aktual (DB aktual) dengan daya berkecambah simulasi (DB simulasi) setelah 3 dan 6 bulan simpan
Lot Benih V etanol (DB) (%) DB Aktual 3 Bulan (%) DB Simulasi 3 Bulan (%) Sd DB Aktual 6 Bulan (%) DB Simulasi 6 Bulan (%) Sd DRA 84.67 92.67 94.89 1.15 86.00 86.52 2.00 KML 74.67 91.33 91.09 4.16 87.00 82.92 3.00 TSK 78.67 94.67 92.61 3.06 86.67 84.36 4.62 STJ 50.00 80.67 81.72 1.15 76.00 74.04 2.00 GLR 50.00 81.33 81.72 3.06 72.00 74.04 2.00 Uji-t P -value = 0.95 tn
P -value = 0.76 tn
Keterangan: DB aktual adalah daya berkecambah benih setelah disimpan dalam kemasan aluminium foil pada suhu 23.3-29.9 0 C  dan  RH  61-85%;  DB :  daya  berkecambah  benih  dugaan  berdasarkan  persamaan regresi  hubungan  daya  berkecambah  benih  setelah  disimpan  dengan  daya  berkecambah  benih  setelah pengusangan dengan perendaman dalam etanol 20% selama 90 menit; V etanol (DB) (%): daya berkecambah setelah pengusangan dengan perendaman dalam etanol 20% selama 90 menit; Sd: standar deviasi.
Gambar 1. Vigor daya simpan benih caisin pada periode simpan 3 bulan hasil simulasi dan aktual. Garis  vertikal  di  atas  tiap  titik  data  menunjukkan  nilai  standar  deviasi  dari  data  aktual, DB menunjukkan daya berkecambah setelah penyimpanan selama 3 bulan, dan V etanol(DB) menunjukkan  penduga  vigor  daya  simpan  pada  tolok  ukur  daya  berkecambah  setelah pengusangan dengan perendaman ke dalam etanol 20% selama 90 menit.
Gambar 2. Vigor daya simpan benih caisin pada periode simpan 6 bulan hasil simulasi dan aktual. Garis vertikal di atas tiap titik data menunjukkan nilai standar deviasi dari data aktual DB menunjukkan  daya  berkecambah  setelah  penyimpanan  selama  6  bulan,  dan  V etanol(DB) menunjukkan  penduga  vigor  daya  simpan  pada  tolok  ukur  daya  berkecambah  setelah pengusangan dengan perendaman etanol 20% selama 90 menit.
Pendugaan  vigor  daya  simpan  benih setelah  penyimpanan  selama  3  dan  6  bulan ditetapkan  mengacu  pada  nilai  DB  minimum benih  caisin  layak  edar  yaitu  85%.  Nilai  DB 85%  disubstitusikan  ke  dalam  peubah  y  pada
model  persamaan  Tabel  4  sehingga  diperoleh nilai V etanol(DB) minimum  yang dapat dijadikan sebagai  pendugaan  lot  benih  caisin  masih layak edar (DB > 85%) dalam jangka waktu 3 dan 6 bulan setelah pengujian (Tabel 6).
y = 56.04 + 0.36x R 2 = 74.90% V etanol (DB) (%) DB (%) y = 62.72 + 0.38x R 2 = 77.00% V etanol (DB) (%) DB (%)
Tabel  6.  Nilai  minimum  V etanol(DB) (%)  untuk mendapatkan  DB  ≥  85%  setelah penyimpanan  benih  caisin  selama  3 dan 6 bulan. Tolok ukur Periode Simpan (bulan) 3 6 V etanol(DB) (%) 58.63 80.44 R 2 (%) 77.00 74.90 Sd 3.72 3.58 Keterangan:  V etanol(DB) :  daya  berkecambah  setelah pengusangan melalui perendaman etanol 20%  selama  90  menit;  R 2 :  koefisien determinasi; Sd: standar deviasi
Berdasarkan Tabel 6, benih caisin masih layak  edar  apabila  setelah  pengujian  vigor dengan perendaman dalam etanol 20% selama 90  menit,  memiliki  nilai  V etanol(DB) >(58.63  ± 3.72)%  untuk  3  bulan  setelah  pengujian,  dan >(80.44  ±  3.58)%  untuk  masa  edar  hingga  6 bulan setelah pengujian.

## KESIMPULAN
Metode pengusangan cepat kimia dengan  perendaman  benih  ke  dalam  larutan etanol  20%  merupakan  metode  yang  dapat digunakan  dalam  pendugaan  vigor  daya simpan benih caisin. Vigor daya simpan benih setelah  3  dan  6  bulan  simpan  dapat  diduga berdasarkan  tolok  ukur  V etanol(DB) ,  dengan waktu  perendaman  efektif  ke  dalam  etanol 20%  yaitu  90  menit.  Model  persamaan  yang dapat  digunakan  sebagai  pendugaan  vigor daya  simpan  benih  caisin  setelah  3  bulan simpan adalah y = 62.72+0.38x. Nilai koefisien korelasi  adalah  0.87  dan  nilai  koefisien determinasi sebesar 77.00%. Model persamaan yang  dapat  digunakan  sebagai  pendugaan vigor daya simpan benih caisin setelah 6 bulan simpan adalah y = 56.04+0.36x. Nilai koefisien korelasi  adalah  0.88  dan  nilai  koefisien determinasi  sebesar  74.90%,  dengan  x  adalah V etanol(DB) dan  y  adalah  daya  berkecambah setelah benih disimpan.

## SARAN
Metode  pengusangan  cepat  dengan perendaman  benih  ke  dalam  larutan  etanol 20% selama 90 menit dapat digunakan sebagai pelengkap  uji  mutu  benih  caisin.  Tolok  ukur
yang  digunakan  adalah  V etanol(DB) (daya berkecambah  benih  setelah  pengusangan dalam etanol). Nilai daya berkecambah sebesar 85%  pada  kondisi  ruang  simpan  dengan  suhu 23.3-29.9 0 C  dan  RH  61-85%  dalam  kemasan aluminium  foil  setelah  penyimpanan  3  dan  6 bulan  dapat  diperoleh  pada  nilai  V etanol(DB) masing-masing  minimum  ≥(58.63  ±  3.72)% dan ≥(80.44 ± 3.58)%. Penyempurnaan model pendugaan vigor daya simpan dapat dilakukan dengan  menggunakan  jumlah  sampel  yang lebih banyak. Percobaan dapat dilakukan pada komoditas  lain  sehingga  pengujian  daya berkecambah  dan  penetapan  masa  edar  benih dapat  diberikan  tanpa  tergantung  pada  umur maupun kondisi simpan benih sebelumnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Addai,  L.K.,  O.S.  Kantanka. 2006. Evaluation of  screening  methods  for  improved storability of soybean seed international. J. Botany . 2(2): 152-155.
Budiman,  D.F.  2012.  Uji  pengusangan  cepat terkontrol (PCT) untuk menduga viabilitas  benih  cabai  merah  ( Capsicum annum L.) setelah penyimpanan
[Skripsi].  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor.
[Dirbenhorti] Direktorat Perbenihan Hortikultura.
2013. Pedoman Teknis Sertifikasi Benih Tanaman Hortikultura. Direktorat Jenderal Hortikultura,  Kementerian  Pertanian. Jakarta.
Ekowahyuni, L.P., S.H. Sutjahjo, S. Sujiprihati, M.R. Suhartanto, M. Syukur.  2012.  Metode  pengusangan cepat  untuk  pengujian  vigor  daya simpan  benih  cabai  ( Capsicum annuum L.). J. Agron. Indonesia. 40(2): 132-138.
Jyoti,  C.P.  Malik.  2013.  Seed  deterioration:  a review. Int. J. LifeSc. Bt & Pharm. Res. 2(3): 374-385.
Priestley,  D.A.,  AC.  Leopold.  1980.  Alcohol stress  on  soya  bean  seeds.  Ann.  Bot. 45(1): 39-45.
Qadir,  A.  2012.  Pemodelan  pertumbuhan tanaman  kedelai  ( Glycine  max L. Merrill)  di  bawah  cekaman  naungan. [Disertasi].  Institut  Pertanian  Bogor.
Bogor.
Rosida,  A.,  M.  Sari,  A.  Qadir.  2015. Pendugaan  vigor  daya  simpan  benih kubis  ( Brassica  oleracea L.  var.
capitata) menggunakan metode pengusangan  cepat  dengan  etanol.  J. Hort. Indonesia. 6(3): 152-160.
Sadjad,  S.,  E.  Murniati,  S.  Ilyas.  1999. Parameter  Pengujian  Vigor  Benih  dari Komparatif  ke  Simulatif.  Grasindo Persada. Jakarta.
Salehi, M.R., F. Ashiri, H. Salehi. 2008. Effect of  different  ethanol  concentrations  on seed  germination  of  three  turfgrass genera. Nat. Appl. Sci. 2(1): 6-9.
Shaban,  M.  2013a.  Review  on  physiological aspects  of  seed  deterioration.  Intl.  J. Agri. Crop. Sci. 6(11): 627-631.
Shaban, M. 2013b. Aging in orthodox seeds is a  problem.  Intl  J.  Advanced  Biol. Biomed. Res. 1(11): 1296-1301.
Woodstock,  L.W.,  R.B.  Taylorson.  1981. Ethanol  and  acetaldehyde  in  imbibing soybean seeds in relation to deterioration. Plant Physiol. 67: 424-428.