## Aktivitas Antijamur dari Bakteri Sedimen Mangrove Terhadap Candida albicans dan Malassezia furfur
Wilis Ari Setyati * , Ananda Arifidyani, AB Susanto
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. H. Soedarto S.H, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia Email: wilisarisetyati@yahoo.co.id

## Abstract

## Antifungal Activity of Mangrove Sediment Associated Bacteria Against Candida albicans and Malassezia furfur
Candida  albicans  and  Malassezia  furfur  are  fungal  pathogens  that  can  cause  skin  infections.  This  disease  can  be  easily transmitted  from  one  individual  to  another.  The  use  of  antibiotic  drugs  can  cause  pathogenic  fungi  to  become  resistant. Therefore, there is a need for the development of new antifungal substances, one of which comes from mangrove sediment bacteria. This research was conducted with the aim of obtaining bacterial isolats from mangrove sediments that have the ability  to  fight  the  fungal  pathogens  Candida  albicans  and  Malassezia  furfur.  The  method  in  this  research  is  descriptive exploratory laboratory which includes isolation sampling and isolat purification, morphological characterization, screening, antifungal activity test and biochemical test. The results of this study were obtained 3 bacterial isolats that have antifungal activity against the fungal pathogens Candida albicans and Malassezia furfur. The results of the identification of biochemical tests showed that the isolat S.ISP2 was identified as the genus Pseudomonas; isolat S.ISP4 identified as Genus Moraxella; and isolat KJ.MA1 identified as Genus Vibrio
Keywords: antifungal, mangrove sediment, Candida albicans, Malassezia furfur, biochemical test

## Abstrak
Candida albicans dan Malassezia furfur merupakan patogen jamur yang dapat menyebabkan penyakit infeksi kulit. Penyakit ini dapat dengan mudah ditularkan dari satu individu ke individu lainnya. Penggunaan obat antibiotik dapat mengakibatkan jamur patogen  menjadi  resisten.  Oleh  karena itum eprlunya ada  pengembangan  zat  antijamur  baru  yang  salah satunya berasal  dari  bakteri  sedimen  mangrove.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  mendapatkan  bakteri  isolat  dari sedimen  mangrove  yang  memiliki  kemampuan  untuk  melawan  jamur  patogen  Candida  albicans  dan  Malassezia  furfur. Metode  pada  penelitian  ini  adalah  deskriptif  eksploratif  laboratory  yang  meliputi  sampling  isolasi  dan  purifikasi  isolat, karakterisasi morfologi, skrining, uji aktivitas antijamur dan uji biokimia. Hasil dari penelitian ini adalah didapatkan 3 bakteri isolat yang memiliki aktivitas antijamur terhadap jamur patogen Candida albicans dan Malassezia furfur. Hasil identifikasi uji biokimia  menunjukkan  bahwa  isolat  S.ISP2  teridentifikasi  sebagai  Genus  Pseudomonas;  isolat  S.ISP4  teridentifikasi  sebagai Genus Moraxella; dan isolat KJ.MA1 teridentifikasi sebagai Genus Vibrio.
Kata kunci : antijamur, sedimen mangrove, Candida albicans, Malassezia furfur, uji biokimia.

## PENDAHULUAN
Penyakit infeksi adalah salah satu masalah dalam bidang kesehatan karena penyakit ini dapat ditularkan dengan mudah dari satu individu ke individu lain baik itu manusia ke manusia, manusia ke hewan maupun hewan ke manusia (Rahman & Sumijan, 2021). Penyakit infeksi yang terjadi pada umumnya dapat disebabkan oleh mikroba patogen seperti jamur, bakteri dan parasit. Sebanyak 20 – 25%  populasi  manusia  di  dunia  mengalami  permasalahan  infeksi  yang  diakibatkan  oleh  jamur (Kühbacher et al ., 2017). Salah satu contoh penyakit yang paling banyak disebabkan oleh infeksi jamur  adalah  kandiasis.  Kandiasis  diperkirakan  terjadi  sebanyak  700.000  kasus  setiap  tahunnya (Mareković et al ., 2021).  Kandiasis merupakan penyakit yang disebabkan oleh Candida albicans yang ditandai dengan gejala munculnya ruam merah yang utamanya menyerang kulit, area yang paling  sering  terinfeksi  yaitu  daerah  lipatan  paha,  sela  jari  kaki  dan  ketiak  (Wibowo et  al. ,  2017). Contoh lain adalah penyakit infeksi kulit seperti  pitriasis versicolor yang disebabkan oleh jamur M.
furfur (Septiningrum et al. , 2018). Pengobatan yang paling umum untuk menyembuhkan infeksi ini adalah  dengan  menggunakan  antijamur  pada  daerah  yang  terinfeksi.  Antijamur  digunakan sebagai antibiotik yang umumnya merupakan produk alami ataupun sintesis yang memiliki potensi untuk  menghambat  pertumbuhan  dan  membunuh  mikroorganisme  yang  memiliki  sifat  patogen (Yang et al ., 2020). Namun, penggunaan obat antijamur yang berlebihan dan tidak sesuai prosedur akan menghasilkan resistensi  patogen terhadap antibiotik atau antijamur (Hay &  Olafsson, 2016). Meningkatnya  kasus  penyakit  infeksi  yang  disebabkan  oleh  jamur  diperlukannya  penelitian  lebih lanjut mengenai agen antijamur baru.
Hasil  sumberdaya  laut  dari  negara  kepulauan  memiliki  berbagai  macam  potensi  sebagai sumber  senyawa  bioaktif  baru  (Hanif et  al. ,  2019;  Wondal et  al ,  2019;  Kristiana et  al .,  2020). Pemanfaatan organisme laut seperti sponge dianggap menjadi salah satu organisme yang memiliki senyawa bioaktif baru sebagai sumber senyawa antimikroba (Hanif et al. , 2019). Selain organisme laut,  salah  satu  bahan  alami  lain  yang  dapat  digunakan  sebagai  alternatif  senyawa  antijamur adalah  sedimen  mangrove  (Wondal et  al ,  2019).  Sedimen  mangrove  dapat  berasosiasi  dengan bakteri  yang  dapat  menghasilkan  metabolit  sekunder  sebagai  sumber  senyawa  antijamur  yang baru.  Penelitian  sebelumnya  menemukan  bahwa  bakteri  dari  sedimen  mangrove  menghasilkan senyawa  antimikroba  dan  antikanker. Brevibacillus  brevis yang  berasal  dari  isolasi  sedimen mangrove berpotensi sebagai senyawa bioaktif terhadap patogen seperti I, E. coli, Bacillus subtilis, Candida albicans dan A. nigar . Bacillus sp. yang diisolasi dari sampel sedimen mangrove berpotensi untuk  menghambat  patogen Aermonas sp., Vibrio sp., Malassezia  globosa dan Malassezia  furfur (Arumugam et  al. ,  2017;  Sangkanu et  al .  (2017).  Oleh  karena  itu,  penelitian  ini  bertujuan  untuk memperoleh dan menentukan jenis bakteri dari sedimen mangrove yang memiliki aktivitas antijamur terhadap C. albicans dan M. furfur melalui uji biokimia.

## MATERI DAN METODE
Pengambilan sampel dilakukan dengan mengambil sampel sedimen di perairan tercemar di Tugurejo, Semarang, Jawa Tengah dan di perairan tidak tercemar di Karimunjawa, Jepara, Jawa Tengah.  Koordinat  lokasi  pengambilan  sampel  adalah  S  06 o 34'  36,8”  ;  E  110 o 40'  07.8"  (Tugurejo, Semarang) dan S 05 o 89' 05.1" ; E 110 o 42' 10.4” (Pulau Menjangan Besar, Karimunjawa) (Gambar 1). Sampel sedimen diambil dengan menggunakan sekop yang dibenamkan hingga kedalaman 10-15 cm. Sampel sedimen yang telah diambil didokumentasikan dan dipindahkan ke ziplock kemudian disimpan dalam cool box untuk tahap isolasi bakteri selanjutnya. Sampel di laboratorium disimpan pada suhu 4oC (Sofariyanti et al. , 2019).
Isolasi  bakteri  dilakukan  dengan  metode  spread  plate  dengan  pengenceran  bertingkat dengan mengencerkan 1 gram sampel sedimen dalam 9 mL air laut steril. Hasil pengenceran sampel sebelumnya diencerkan kembali dengan menambahkan 1 mL pengenceran pertama ke dalam 9 mL air laut steril, kemudian diulang hingga lima kali pengenceran. Setiap hasil pengenceran diambil sebanyak 50 l dan diratakan pada permukaan tiga jenis media yang berbeda, yaitu Marine Agar (Zobell), International Streptomyces Project 1 (ISP 1) (Li et al. , 2016), dan Humic Acid Vitamin Agar (HVA)  (Wahyudi et  al .,  2019).  Masing-masing  media  ditambahkan  antibiotik  Nystatin  (60  mg/L) kemudian  diinkubasi  pada  suhu  29 – 34 ℃ selama  1 – 7  hari  (Davies-Bolorunduro et  al. ,  2019). Karakterisasi morfologi bakteri dilakukan berdasarkan (Margarida et al. , 2015) secara makroskopis dengan mengamati bentuk, margin, elevasi, ukuran dan warna koloni pada bakteri pada media.
Skirining  dilakukan  dengan  metode agar  plug dan  uji  aktivitas  antijamur  dilakukan  dengan metode disk  diffusion .  Kultur  bakteri  yang  telah  tumbuh  selama  4  hari.  Patogen  yang  digunakan pada tahap ini adalah C. albicans dan M. furfur . Jamur patogen diremajakan pada media PDA selama 1x24  jam. Jamur patogen yang berumur 1x24  jam diinokulasikan ke dalam tabung reaksi yang berisi media potato dextrose broth kemudian disentrifugasi dan dicocokkan nilai kekeruhannya dengan  standar McFarland 0.5.  Jamur  patogen  kemudian  diinokulasi  menggunakan  kapas  steril secara merata pada media PDA. Untuk metode penapisan kultur, isolat bakteri yang telah diinkubasi
dipotong  berbentuk  silinder  (berdiameter  sekitar  8  mm)  menggunakan  ujung blue  tip dan ditempelkan pada permukaan media  yang sebelumnya telah diinokulasi dengan jamur patogen uji. Untuk metode uji antijamur, paper disk steril dimasukkan ke dalam media dan diinokulasi dengan 50 µl isolat murni yang telah diremajakan dalam PDB. Media uji kemudian diinkubasi selama 2x24 jam dan diamati setiap 1x24 jam. Hasil pengujian diamati dan dilihat adanya zona hambat di sekitar paper disk yang berisi isolat bakteri. Keberadaan zona bening didokumentasikan dan diameternya diukur (Kristiana et al., 2020; Messaoudi et al. , 2020).
(a)
(b)
Gambar 1. Lokasi Pengambilan Sampel (a) Menjangan Besar Island; (b) Tugurejo
Uji gram bakteri dilakukan dengan menggunakan pewarna kristal violet, iodin, decoloration gram dan safranin kemudian diamati menggunakan mikroskop  dengan perbesaran 100x.  Bakteri gram positif ditandai dengan warna biru dan bakteri gram negatif ditandai dengan warna merah (Sandle,  2017).  Uji  motilitas,  indol,  dan  H2S  dilakukan  dengan  menginokulasikan  isolat  ke  dalam tabung  reaksi  yang  berisi  media  Sulfida  Indole  Motilitas.  Uji  motilitas  positif  ditunjukkan  dengan pertumbuhan  yang  memanjang  dan  menyebar  dari  garis  inokulasi.  Uji  indol  dikatakan  positif  jika warna larutan Kovac berubah menjadi merah. Uji H2S positif ditunjukkan dengan perubahan warna medium menjadi hitam (Ayitso dan Onyango, 2016; Talaiekhozani et al. , 2015). Uji sitrat dilakukan dengan menginokulasi isolat ke dalam tabung reaksi yang berisi media miring Simmon Sitrat Agar. Uji sitrat positif ditunjukkan dengan perubahan warna medium dari hijau menjadi biru (Almas et al. , 2021). Uji fermentasi Glukosa, Laktosa, dan Sukrosa dilakukan dengan menggunakan jarum ose untuk menginokulasikan  isolat  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  media  miring  Triple  Sugar  Iron  Agar. Perubahan warna dasar agar dari merah menjadi kuning menunjukkan adanya fermentasi glukosa. Sementara  itu,  perubahan  warna  agar  miring  dari  merah  menjadi  kuning  menunjukkan  adanya fermentasi laktosa dan/atau sukrosa (Talaiekhozani et al. , 2015).
Uji MR/VR dilakukan dengan menambahkan indikator metil merah, sedangkan pada uji Voges Proskauer  ditambahkan  5%  naphtol  dan  40%  KOH.  Hasil  uji  MR/VR  dikatakan  positif  jika  media berubah warna menjadi merah. Uji urea dilakukan dengan menggunakan media urea broth yang telah dilarutkan dan disterilkan. Isolat yang akan diuji diambil dengan jarum ose dan diinokulasikan ke dalam media urea broth dan diinkubasi selama 24 jam. Hasil uji urea positif jika media urea broth berubah  warna  menjadi  merah  muda  (James et  al. ,  2019).  Uji  oksidasi  dilakukan  dengan menggunakan  oksidase  strip  kemudian  ditunggu  selama  1-2  menit.  Hasil  uji  oksidasi  dinyatakan positif jika oksidase strip berubah warna menjadi ungu kebiruan (Javid et al. , 2020).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolat bakteri dari sedimen mangrove diperoleh dari hasil isolasi sampel sedimen pada 3 jenis media  yaitu  HVA,  ISP  1  dan  Marine  Agar.  Penggunaan  3  media  dilakukan  untuk  mendapatkan berbagai isolat. Jumlah isolat yang diperoleh dari 3 jenis media adalah 33 isolat yang terbagi atas 9 isolat dari media HVA, 12 isolat dari media ISP dan 12 isolat dari media Marine Agar. Sebanyak 33 isolat hasil isolasi dan pemurnian sampel melalui tahap karakterisasi morfologi berdasarkan bentuk, warna, margin, elevasi  dan ukuran. Penamaan kode  sampel dan morfologi bakteri dari 33 isolat, yaitu 18 isolat dari sampel Pulau Menjangan Besar dan 15 isolat dari Tugurejo. Sampel disajikan pada Tabel 1.
Total  33  isolat  bakteri  kemudian  diuji  untuk  mengetahui  potensi  aktivitas  antijamur  yang dilakukan oleh isolat bakteri dari sedimen mangrove terhadap patogen C. albicans dan M. furfur . Hasil pengujian dikatakan positif yang ditunjukkan dengan terbentuknya daerah zona bening. Isolat lain  yang  tidak  memiliki  kemampuan  membentuk  zona  bening  dan  menghambat  pertumbuhan jamur diduga karena isolat tersebut tidak menghasilkan metabolit sekunder atau metabolit sekunder yang dihasilkan terlalu kecil sehingga tidak dapat menghambat  pertumbuhan Candida albicans dan Malassezia  furfur .  Kemungkinan  lain  diduga  karena  nutrisi  dari  media  yang  digunakan  tidak mendukung isolat untuk dapat menghasilkan metabolit sekunder (Al-Ansari et al. , 2020; Fang et al. , 2017). Hasil uji aktivitas antijamur ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2 menunjukkan kemampuan zona hambat sebanyak 7 isolat dari sampel sedimen Pulau Menjangan  Besar  yang aktif  dan  membentuk  zona  bening,  5 isolat  di  antaranya  aktif  pada  dua patogen yaitu C. albicans dan M. furfur . Pada sampel sedimen tugurejo juga terdapat 5 isolat yang aktif dan membentuk zona bening, 4 isolat diantaranya juga aktif pada dua patogen C. albicans dan M. furfur . Hasil uji aktivitas antijamur dipilih 3 isolat yang menghasilkan rata-rata  zona bening terluas  dan  aktif  terhadap  dua  patogen  uji C.  albicans dan M.  furfur .  Isolat  bakteri  sedimen mangrove terpilih dapat dilihat pada Tabel 3.

## Tabel 1. Hasil Isolasi dan Morfologi Bakteri Sedimen Mangrove
Lokasi Sampel Kode Sampel Bentuk Warna Margin Elevation Ukuran Menjangan Besar Island KJ. MA1 Circular Cream Entire Flat Moderate KJ. MA2 Circular Cream Entire Flat Small KJ. MA3 Irregular Putih Undulate Flat Small KJ. MA4 Circular Kuning Entire Flat Small KJ. MA5 Circular Putih Undulate Flat Punctiform KJ. MA6 Circular Kuning Undulate Flat Moderate KJ. ISP1 Rhizoid Cream Rhizoid Flat Moderate KJ. ISP2 Circular Cream Entire Flat Punctiform KJ. ISP3 Irregular Putih Lobate Flat Small KJ. ISP4 Circular Putih Entire Flat Small KJ. ISP5 Irregular Cream Undulate Flat Moderate KJ. ISP6 Circular Cream Entire Flat Moderate KJ. ISP7 Circular Orange Undulate Flat Moderate KJ .ISP8 Filamen Putih Filamen Flat Small KJ.HVA1 Circular Putih Entire Flat Small KJ.HVA2 Irregular Cream Lobate Flat Small KJ.HVA3 Filamen Coklat Rhizoid Flat Moderate KJ.HVA4 Filamen Coklat Rhizoid Flat Punctiform Tugurejo S. MA1 Circular Orange Filamen Entire Moderate S. MA2 Filamen Putih Filamen Flat Moderate S. MA3 Circular Putih Entire Flat Small S. MA4 Circular Kuning Entire Flat Punctiform S. MA5 Filamen Putih Rhizoid Flat Moderate S. MA6 Irregular Cream Undulate Flat Moderate S. ISP1 Circular Cream Entire Flat Moderate S. ISP2 Circular Cream Undulate Flat Moderate S. ISP3 Circular Putih Undulate Flat Punctiform S. ISP4 Circular Cream Entire Flat Small S. HVA1 Circular Putih Entire Flat Punctiform S. HVA2 Circular Cream Entire Flat Moderate S. HVA3 Circular Peach Entire Flat Moderate S. HVA4 Circular Merah Entire Flat Moderate S. HVA5 Circular Coklat Entire Flat Moderate
Keterangan: Punctiform ( pin-point ); Small (< 1 mm); Moderate (1 mm)
Tabel  3  menunjukkan  kemampuan  zona  hambat  yang  dimiliki  oleh  masing-masing  bakteri isolat. Aktivitas antijamur ditunjukkan dengan terbentuknya zona hambat pada pertumbuhan jamur C. albicans dan M. furfur . Isolat KJ. MA1 pada pengamatan 1x24 jam dihasilkan nilai rata-rata zona bening sebesar 10,55±0,07 pada patogen C. albicans dan 10,1±0,42 pada patogen M. furfur . Isolat Isolat S. ISP2 menghasilkan diameter zona bening sebesar 10,8±0,14 pada patogen C. albicans dan 10±0,28 pada patogen M. furfur . Isolat S.ISP4 dihasilkan rata-rata zona bening sebesar 11,5±0,14 pada patogen C.  albicans dan  12,5±0,14  pada  patogen M.  furfur .  Pengamatan  selanjutnya  dilakukan pada  2x24  jam  dihasilkan  nilai  rata-rata  zona  bening  sebesar  11,05±0,21  pada C.  albicans dan 10,45±0,49 pada M. furfur . Isolat S. ISP2 pada pengamatan 2x24 jam dihasilkan nilai rata-rata zona bening sebesar  11,3±0,14 pada C. albicans dan 10,65±0,35 pada patogen M. furfur . Isolat  S. ISP4 pada  pengamatan  2x24  jam  dihasilkan  nilai  rata-rata  zona  bening  sebesar  11,55±0,21  pada C.
albicans dan  12,7±0,14  pada M.  furfur .  Ketiga  isolat  tersebut  menunjukkan  hasil  yang  aktif  dan membentuk zona bening melawan ke dua patogen yaitu C. albicans dan M. furfur . Hasil uji antijamur dari tiga isolat bakteri sedimen terhadap jamur C. albicans dan M. furfur ditunjukkan pada Gambar 2.
Berdasarkan hasil uji antijamur, terdapat 3 isolat yang berasal dari Tugurejo, Semarang 2 isolat yaitu  isolat  S.  ISP2  dan  S.  ISP4,  sedangkan  1  isolat  lainnya  berasal  dari  Pulau  Menjangan  Besar, Karimunjawa yaitu isolat KJ. MA13. Hasil zona bening isolat bakteri dari sampel Semarang lebih besar
Tabel 2. Hasil Uji Aktivitas Antijamur Melawan Candida albicans dan Malassezia furfur
No Kode Sampel Diameter Zona Hambat (mm) Candida albicans Malassezia furfur 24 Jam 48 Jam 24 Jam 48 Jam 1 KJ. MA1 10.55±0.07 11.05±0.21 10.1±0.42 10.45±0.49 2 KJ. MA 2 - - - - 3 KJ. MA3 - - - - 4 KJ. MA4 - - - - 5 KJ. MA5 10.45±0.35 10.7±0.28 10.5±0.14 10.6±0.28 6 KJ. MA6 10.25±0.21 10.2±0.14 9.45±0.21 9.6±0.14 7 KJ. ISP1 - - - 8 KJ. ISP2 9.9±01.13 10.05±0.91 9.8±0.14 10±0.28 9 KJ. ISP3 - - 9.4±0.14 9.5±0.28 10 KJ. ISP4 9.5±0.42 9.45±0.49 - - 11 KJ. ISP5 9.9±0.13 10.05±0.91 9.8±0.14 10±0.28 12 KJ. ISP6 - - - - 13 KJ. ISP7 - - - - 14 KJ .ISP8 - - - - 15 KJ. HVA1 - - - - 16 KJ. HVA2 - - - - 17 KJ. HVA3 - - - - 18 KJ. HVA4 - - - - 19 S. MA1 - - - - 20 S. MA2 - - - - 21 S. MA3 - - - - 22 S. MA4 - - - - 23 S. MA5 - - - - 24 S. MA4 - - - - 25 S. ISP1 9.05±0.07 9.15±0.21 - - 26 S. ISP2 10.8±0.14 11.3±0.14 10±0.28 10.65±0.35 27 S. ISP3 11.05±0.21 11.4±0.14 6.2±8.76 6.3±8.9 28 S. ISP4 11.5±0.14 11.55±0.21 12.5±0.14 12.7±0.14 29 S. HVA1 - - - - 30 S. HVA2 - - - - 31 S. HVA3 11.65±0.35 11.4±0.28 12.1±0.28 11.65±0.35 32 S. HVA4 - - - - 33 S. HVA5 - - - -
Keterangan:  Rata-Rata  ±  Standar  Deviasi  (n  =  2);  Hasil  zona  hambat  sudah  dikurangi  dengan diameter paper disk 8 mm
dibandingkan  dengan  isolat  bakteri  dari  sampel  Karimunjawa.  Hal  ini  diduga  karena  kawasan Tugurejo, Semarang merupakan kawasan pesisir yang dikelilingi oleh industri. Limbah yang dihasilkan dari kegiatan industri dapat menyebabkan pencemaran dan perubahan kondisi  perairan pesisir, termasuk ekosistem mangrove. Perubahan kondisi perairan seperti perubahan salinitas, tekanan dan suhu  dapat  mempengaruhi  aktivitas  mikroorganisme.  Sedangkan  Pulau  Menjangan  Besar, Karimunjawa  masih  belum  banyak  dipengaruhi  oleh  aktivitas  industri  dan  juga  populasinya  lebih kecil  dari  Tugurejo,  Semarang.  Nurhalimah et  al. (2021),  menyatakan  bahwa  mikroorganisme merespon stres lingkungan dengan memproduksi metabolit sekunder. isolat bakteri S.ISP2; S.ISP4; dan KJ.MA1  kemudian  dianalisis  secara  biokimia  untuk  mengkonfirmasi  isolat  terisolasi  dengan  genus terkait.
Hasil uji biokimia yang terlihat pada Tabel 4 menunjukkan bahwa isolat S. ISP2 diidentifikasi sebagai  genus  Psedomonas.  Isolat  S.  ISP4  diidentifikasi  sebagai  genus  Moraxella  jika  dilihat berdasarkan  hasil  uji  biokimia.  Isolat  KJ.  MA1  diidentifikasi  sebagai  genus  Vibrio.  Ketiga  bakteri tersebut adalah bakteri Gram-negatif dengan batang dan koma (vibrio). Hasil  uji biokimia dapat dilihat pada Tabel 4.
Uji motilitas terhadap isolat S. ISP2; S.ISP4; dan KJ. MA1 tidak menunjukkan adanya pergerakan atau  pertumbuhan  yang  menyebar  sehingga  tergolong  bakteri  non-motil.  Bakteri  yang  termasuk golongan  nonmotil  biasanya  bergerak  dengan  cara  menggelinding  dan  biasanya  merupakan bakteri yang berasosiasi  dengan organisme lain (Dunn dan Pandya, 2013). Hasil uji H2S diperoleh pada isolat S. ISP2; S.ISP4; dan KJ. MA1 menunjukkan hasil negatif, artinya tidak ada bakteri hasil
Tabel 3. Hasil Seleksi Isolat Bakteri Sedimen Mangrove
Kode Sampel Diameter Zona Hambat (mm) Candida albicans Malassezia furfur 24 Jam 48 Jam 24 Jam 48 Jam S. ISP2 10.8±0.14 11.3±0.14 10±0.28 10.65±0.35 S. ISP4 11.5±0.14 11.55±0.21 12.5±0.14 12.7±0.14 KJ. MA1 10.55±0.07 11.05±0.21 10.1±0.42 10.45±0.49
Tabel 4. Hasil Uji Biokimia Uji Biokimia Kode Isolat S. ISP2 S. ISP4 KJ. MA1 Gram Negatif Negatif Negatif Shaped Batang Batang Batang Koma Motility - - - H 2 S - - - Indole - - + Citrate + + + Glucose + - + Lactose - - - Sucrose - - - Urea - - - VP - - + MR + - - Oxidase + + +
Keterangan: (+): Positive, (-): Negatif
(a) (b)
Gambar 2. Uji Aktivitas antijamur isolat sedimen mangrove terhadap (a) C. albicans ; (b) M. furfur isolasi  yang  mampu  menghasilkan  hidrogen  sulfida.  Uji  indol  pada  isolat  KJ.MA1  menunjukkan adanya perubahan warna (Ayitso dan Onyango., 2016). Hal ini menunjukkan produksi enzim indole dan  tritophanase  dari  isolat  KJ.  MA1.  Sedangkan  isolat  S.  ISP2  dan  S.ISP4  tidak  menunjukkan perubahan  warna  yang  berarti  hasil  menunjukkan  bahwa  kedua  isolat  tersebut  tidak  memiliki kemampuan untuk menghasilkan enzim tritophanase.
Uji sitrat dapat dikatakan positif jika warna media SCA berubah dari hijau menjadi biru. Hal ini disebabkan  adanya  alkali  karbonat  dan  bikarbonat  yang  terbentuk  sebagai  hasil  dari  proses katabolisme sitrat yang menaikkan pH di atas 7 (Effendi, 2020). Hasil yang diperoleh pada uji sitrat pada sampel bakteri isolat S.ISP2; S.ISP4 dan KJ. MA1 menunjukkan hasil positif karena perubahan warna yang terjadi pada media SCA yang menunjukkan bahwa 3 isolat bakteri membentuk basa karbonat dan bikarbonat. Uji fermentasi glukosa ditandai dengan perubahan warna pada media dari merah menjadi kuning menggunakan media TSIA. Hasil uji yang diperoleh dari uji isolat S. ISP4 memiliki  aktivitas  negatif  yang  ditandai  dengan  tidak  adanya  perubahan  warna  pada  media. Sedangkan hasil isolat S. ISP2 dan KJ. MA1 memiliki aktivitas positif akibat fermentasi glukosa yang ditunjukkan dengan perubahan warna media TSIA dari  merah menjadi kuning. Berdasarkan hasil tersebut,  dapat  diindikasikan  bahwa  isolat  S.  ISP2  dan  KJ.  MA1  memiliki  kemampuan  untuk mendegradasi gula.
Uji urea dilakukan untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam menghasilkan enzim urease yang mampu menghidrolisis urea menjadi karbondioksida dan urea (Mahmudah et al. , 2016). Hasil uji urea dilakukan pada isolat S. ISP2; S.ISP4 dan KJ. MA1 menunjukkan hasil negatif, sehingga dapat dikatakan ketiga isolat tidak menghasilkan enzim urease.  Uji MR/VP pada isolat S.ISP2 yang telah diisolasi  pada  media  MR  menunjukkan  hasil  positif.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tidak  terjadi fermentasi campuran pada isolat S. ISP2. Uji VP dilakukan untuk mengetahui kemampuan bakteri dalam memfermentasi karbohidrat (Mahmudah et al. , 2016). Hasil uji VP pada sampel sedimen yang telah diisolasi pada media MR menunjukkan isolat KJ. MA1 positif. Hal ini menunjukkan bahwa isolat KJ. MA1 dapat memfermentasi karbohidrat. Uji oksidase dilakukan pada isolat S. ISP2; S.ISP4 dan KJ. MA1 menunjukkan hasil positif yang ditunjukkan dengan berubahnya kertas strip oksidase menjadi warna  ungu  kebiruan.  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  ketiga  isolat  S.  ISP2;  S.ISP4  dan  KJ.  MA1 merupakan  bakteri  yang  memiliki  aktivitas  oksidase  dan  termasuk  dalam  kelompok  bakteri  gram negative.

## KESIMPULAN
Kesimpulan penelitian ini yaitu isolat sedimen mangrove memiliki kemampuan untuk melawan patogen jamur Candida albicans dan Malassezia furfur . Tiga isolat bakteri dari sedimen mangrove dapat menghasilkan zona hambat, isolat S.ISP2 dapat menghasilkan zona hambat sebesar 11.3±0.14 terhadap C.  albicans dan 10.65 ± 0.35 terhadap M.  furfur . Isolat S.ISP4  dapat menghasilkan zona
hambat sebesar 11.55 ± 0.21 terhadap C. albicans dan 12.7 ± 0.14 terhadap M. furfur . Isolat KJ. MA1 dapat  menghasilkan  zona  hambat  sebesar  11.0  ±  0.21  terhadap C.  albicans dan  10.45±0.49 terhadap M.  furfur .  Isolat  bakteri  S.ISP2  diidentifikasi  tergolong  Genus  Pseudomonas;  isolat  S.  ISP4 diidentifikasi  tergolong  dalam  Genus  Moraxella  dan  isolat  KJ.MA1  diidentifikasi  tergolong  dalam Genus Vibrio.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Ansari,  M.,  Kalaiyarasi,  M.,  Almalki,  M.A.,  &  Vijayaraghavan,  P.  (2020).  Optimization  of  medium components for the production of antimicrobial and anticancer secondary metabolites from Streptomyces sp.  AS11 isolatd from the marine environment. Journal  of King Saud University  - Science , 32(3), 1993 – 1998.
Almas, M., Tahir, U., Zameer, M., Shafiq, M.I., Farrukh, S.Y., Zahra, N., Mazhar, M., Gill, S.A., Hadi, F., Muhammad, T., Ali, Q., & Malik, A. (2021). Detection of INVA Gene and Cytotoxin of Salmonella entertidis  in  Food  Samples  Using  Molecular  Methods. Journal  of  Pharmaceutical  Research International , 33(12), 20 – 28. doi: 10.9734/jpri/2021/v33i1231249 Arumugam , T.,  Kumar,  P.S.,  Kameshwar,  R.,  &  Prapanchana,  K.  (2017).  Screening  of  novel actinobacteria and characterization of the potential isolats from mangrove sediment of outh coastal India. Microbial pathogenesis , 107, 225-233. doi: 10.1016/j.micpath.2017.03.035 Ayitso, A.S., & Onyango, D.M. (2016). Isolation and Identification by Morphological and Biochemical Methods of Antibiotic Producing Microorganisms from the gut of Macrotermes michaelseni in Maseno. Kenya , 4(1), 27 – 33. doi: 10.7324/JABB.2016.40105
Davies-Bolorunduro,  O.F., Isaac  A.A.,  Moshood O.A.,  & Peng G.W. (2019).  Anticancer Potential of Metabolic  Compounds  from  Marine  Actinomycetes  Isolated  from  Lagos  Lagoon  Sediment. Journal of Pharmaceutical Analysis , 9, 201-218.
Dunn, C.L., & Pandya, D.D. (2013). The Chemistry and Bacteriology of Public Health, Butterworth & Co, London
Effendi, I.I., (2020). Metode Identifikasi dan Klasifikasi Bakteri. Vol. 1, Oceanum, Pekanbaru. Fang, B.Z., Salam, N., Han, M.X., Jiao, J.Y., Cheng, J., Wei, D.Q., Xiao, M., & Li, W.J. (2017). Insights on the effects of heat pretreatment, pH, and calcium salts on isolation of rare Actinobacteria from Karstic Caves. Frontiers in Microbiology , Aug 3, doi: 10.3389/fmicb.2017.01535
Hanif, N., Murni, A., Tanaka, C., & Tanaka, J. (2019). Marine natural products from Indonesian waters. Marine Drugs , 17(6), 364. doi: 10.3390/md17060364
Hay, R. J., & Olafsson, J.H. (2016). Antibiotic and Antifungal Therapies in Dermatology. University of Icelend. London. pp. 345. doi: 10.1007/978-3-319-39424-4.
James, G., Cappucino, Chad, T. & Welsh. (2019). Microbiology: A Laboratory Manua, 12th Edition. Ed.12, Pearson Education Limited: Person, pp. 560
Javid, P., Shahabadi, Z., Amirkhani, H., Biuki, N.A. & Ranjbar, M.S. (2020). Isolation and Identification of  Halophilic  and  Halotolerant  Bacteria  from  the  Sediment  of  The  Qeshhm  Island  Mangrove Forest. Advances in Oceanography and Limmuology , 11(1), 1-10.
Kristiana,  R.,  Bedoux,  G.,  Pals,  G.,  Wayan  Mudianta,  I.,  Taupin,  L.,  Marty,  C.,  Asagabaldan,  M.  A., Ayuningrum, D., Trianto, A., Bourgougnon, N., Kühbacher, A., Burger-Kentischer, A., & Rupp, S. (2020). Bioactivity of compounds secreted by symbiont bacteria of Nudibranchs from Indonesia. PeerJ , 8, p.e8093. doi: 10.7717/peerj.8093
Kühbacher, A., Burger-Kentischer, A., & Rupp, S. (2017). Interaction of Candida species with the skin. Microorganisms , 54, 32. doi: 10.3390/microorganisms5020032
Li,  Q.,  Chen,  X.,  Jiang,  Y.  &  Jiang,  C.,  (2016).  Morphological  Identification  of  Actinobacteria. Actinobacteria - Basics and Biotechnological Applications, IntechOpen, London, p.59-86. doi: 10.5772/61461.
Mahmudah, R., Baharuddin, M., & Sappewali, S. (2016). Identifikasi Isolat Bakteri Termofilik dari Sumber Air Panas Lejja, Kabupaten Soppeng. Al-Kimia , 4(1), 31-42. doi: 10.24252/al-kimia.v4i1.1454
Mareković, I., Pleško, S., Rezo Vranješ, V., Herljević, Z., Kuliš, T., & Jandrlić, M. (2021). Epidemiology of candidemia: Three-year results from a croatian tertiary care hospital. Journal of Fungi , 7(4), 267. doi: 10.3390/jof7040267
Margarida, A., Olívia, M., & Lourenço, A. (2015). MorphoCol: An ontology-based knowledgebase for the  characterisation  of  clinically  significant  bacterial  colony  morphologies. Journal  Of Biomedical Informatics , 55, 55 – 63. doi: 10.1016/j.jbi.2015.03.007
Messaoudi, O., Wink, J., & Bendahou, M. (2020). Diversity of Actinobacteria Isolatd From Date Palms Rhizosphere and Saline Environments: Isolation, Identification and Biological Activity Evaluation. Microorganisms , 8, 1 – 19. doi: 10.3390/microorganisms8121853
Nurhalimah, S., Rahmawati, S. I., Hermanianto, J., Nurjanah, S., Izzati, F.N., Septiana, E., Rachman, F., Bustanussalam,  B.,  Hapsari,  Y.,  Simanjuntak,  P.,  &  Putra,  M.Y.  (2021).  Aktivitas  Antioksidan  Dari Metabolit Sekunder Kapang Endofit Mangrove Aegiceras corniculatum . Biopropal Industri , 12(1),
51-61. doi: 10.36974/jbi.v12i1.6539
Rahman,  S.A.,  &  Sumijan,  S.  (2021).  Sistem  Pakar  Menggunakan  Metode  Case  Based  Reasoning dalam Akurasi Penyakit Disebabkan oleh Bakteri Staphylococcus aureus . Jurnal Sistim Informasi dan Teknolog i, 3(1), 13-19. doi: 10.37034/jsisfotek.v3i1.38 Sandle,  T.  2017. Gram’s  Stain :  History  and  Explanation  of  the  Fundamental    Technique  of Determinative Bacteriology. March 2004.
Sangkanu,  S.,  Rukachaisirikul,  V.,  Suriyachadkun,  C.,  &  Phongpaichit,  S.  (2017).  Evaluation  of antibacterial potential of mangrove sediment-derived actinomycetes. Microbial Pathogenesis , 112, 303-312. doi: 10.1016/j.micpath.2017.10.010
Septiningrum, A., Muslimin, M., & Ciptaningtyas, V.R. (2018). Uji Beda Sensitivtas Jamur Malassezia sp. Terhadap Flukonazol dan Mikonazol Secara In Vitro, Diponegoro Medical Journal , 7(1), 49-61. Sofariyanti,  A.E.,  Sasongkowati,  R.,  &  Anggraini,  A.D.  (2019).  Aktivitas  Antibakteri  Aktinomisetes  di Hutan Mangrove Wonorejo Surabaya yang Antagonis Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus, Analisis Kesehatan Sains , 8(2), 1-11.
Talaiekhozani,  A.,  Alaee,  S.,  Mohanadoss,  P.,  &  Knowledge,  I.  (2015).  Guidelines  for      quick application   of   biochemical   tests   to   identify unknown bacteria. Accounts Biotechnology Research , 2(2), 64 – 82.
Wahyudi, A. T., Priyanto, J.A., Afrista,  R., Kurniati, D., Astuti, R.I., &  Akhdiya, A.  (2019). Plant growth promoting  activity  of  actinomycetes  isolatd  from Soybean  rhizosphere , Online  Journal  of Biological Sciences, 19, 1-8. doi: 10.3844/ojbsci.2019.1.8 Wibowo, S. A., Budiman, A., & Hartanti, D. (2017). Formulasi dan aktivitas anti jamur sediaan krim M/A ekstrak etanol buah takokak ( Solanum torvum Swartz ) terhadap Candida albicans , Jurnal Riset Sains dan Teknologi , 1(1), 15-21.
Wondal, B., Ginting, E. L., Warouw, V., Wullur, S., Tilaar, S.O., & Tilaar, F.F. (2019). Isolasi bakteri laut dari perairan Malalayang, Sulawesi Utara. Jurnal Pesisir dan Laut Tropis , 7(3), 183-189.
Yang, J., Yang, H., Xu, A., & He, L. (2020). A review of advancement on influencing factors of acne: an  emphasis  on  environmental  characteristics. Frontiers  in  Public  Health, 8,  450.  doi: 10.3389/fpubh.2020.00450