Program Studi Pendidikan Kimia Universitas Sebelas Maret https://jurnal.uns.ac.id/jkpk

## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI SENYAWA
C-4-METOKSIFENILKALIKS[4]RESORSINARENA TERMODIFIKASI

## HEXADECYLTRIMETHYLAMMONIUM-BROMIDE TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus DAN Escherichia coli
Antibacterial Activity Test of the C-4-methoxyphenylcalix[4]resorcinarene Compound Modified by Hexadecyltrimethylammonium-Bromide against Staphylococcus aureus and Escherichia coli Bacteria

## Suryadi Budi Utomo*, Mita Fujiyanti, Warih Puji Lestari, dan Sri Mulyani
Program Studi Pendidikan Kimia, FKIP, Universitas Sebelas Maret Jl. Ir. Sutami No. 36A, Surakarta, Jawa Tengah 57126, Indonesia
* Untuk korespondensi: tel/fax 0271-648939, email: sbukim98@yahoo.com
Received: August 06, 2018
Accepted: December 19, 2018
Online Published: December 31, 2018
DOI : 10.20961/jkpk.v3i3.22742

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  senyawa  C-4-metoksi- fenilkaliks[4]resorsinarena  termodifikasi  Hexadecyltrimethylammonium -Bromide  (disingkat sebagai  Resorsinarena-HDTMA-Br)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan  bakteri Escherichia  coli .  Penelitian  dilakukan  dengan  uji  diameter  zona  hambat  dengan  metode  difusi cakram kertas. Variasi konsentrasi sampel  yang digunakan adalah 10%; 15%; 20%; 25%; dan 30%  b/v.  Dalam  penelitian  ini  digunakan  larutan  Dimethyl  sulfoxide  (DMSO)  (pelarut  sampel) sebagai kontrol negatif dan Kloramfenikol sebagai kontrol positif. Hasil penelitian menunjukkan bahwa Resorsinarene-HDTMA-Br memiliki aktivitas antibakteri  yang lebih tinggi dari pada  C-4- metoksifenilkaliks[4]resorsinarena  (CMFKR)  tak  termodifikasi  terhadap  bakteri S.  aureus .  Baik CMFKR maupun Resorsinarena-HDTMA-Br tidak aktif terhadap E. coli.
Kata Kunci: C-4-metoksifenilkaliks[4]resorsinarena, Resorsinarena-HDTMA-Br, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

## ABSTRACT
This  study  aims  to  determine  the  antibacterial  activity  of  C-4-methoxyphenylcalix- [4]resorcinarene  modified  by  Hexadecyltrimethylammonium-Bromide  (Resorcinarene-HDTMA- Br) against Staphylococcus aureus and Escherichia coli bacteria. The study was conducted by testing the inhibition zone diameter with paper disc diffusion method. Variations in the concentration of the sample  used  were  10%;  15%;  20%;  25%;  and 30%  b/v.  In this study,  Dimethyl  sulfoxide  (DMSO) (sampel solvent) was used as a negative control and Chloramphenicol as a positive control. It was found that Resorsinarene-HDTMA-Br  had  higher  antibacterial  activity  than  the  unmodified  C-4- methoxyphenylcalix[4]resorcinarene (CMFKR) against the S. aureus bacteria. Both CMFKR and Resorcinarene-HDTMA-Br are not active against E. coli .
Keywords: C-4-methoxyphenylcalix[4]resorcinarene, Resorcinarene-HDTMA-Br, Staphylococcus aureus, Escherichia coli

## PENDAHULUAN
Manusia  hidup  selalu  berinteraksi dengan  lingkungan.  Lingkungan  yang  tidak sehat dan gaya hidup yang buruk menyebabkan manusia selalu kontak dengan bakteri,  virus,  fungi,  dan  berbagai  bentuk kehidupan  parasit.  Hal  ini  juga  didukung dengan  keadaan  udara  yang  berdebu, temperatur yang hangat dan lembab sehingga memudahkan mikroba untuk berkembang secara pesat. Semakin banyak mikroba  berkembang,  maka  kemungkinan terjadinya  kontak  antara  manusia  dengan mikroba-mikroba  tersebut  akan  menjadi semakin  besar  yang  dapat  mengakibatkan terjadinya infeksi.
Penyakit  infeksi  merupakan  suatu penyakit  yang  disebabkan  karena  adanya mikroba  patogen  [1].  Salah  satu  penyebab penyakit infeksi adalah bakteri [2]. Staphylococcus aureus dan Escherichia coli adalah  bakteri  yang  sering  menyebabkan infeksi  pada  manusia  [3].  Infeksi  sering  kali membahayakan hidup manusia. Oleh sebab itu, berbagai cara dilakukan untuk mencegah maupun mengobati penyakit tersebut.
Pengobatan  infeksi  yang  disebabkan  oleh bakteri  dapat  diatasi  dengan  antibiotik/ antibakteri.  Antibakteri  adalah  senyawa  yang digunakan untuk mengendalikan pertumbuhan bakteri yang bersifat merugikan. Pengendalian pertumbuhan mikroorganisme bertujuan untuk mencegah  penyebaran  penyakit  dan  infeksi, membasmi  mikroorganisme  pada  inang  yang terinfeksi,  dan  mencegah  pembusukan  serta perusakan bahan oleh mikroorganisme [4].
Kimia  supramolekul  saat  ini  sedang berkembang pesat di dunia. Salah satu kajian yang menarik adalah senyawa Kaliksarena dan Kaliksresorsinarena  [5-9].  Bentuk  geometri yang  unik  dan  terdapatnya  gugus-gugus  aktif pada kaliksarena, memungkinkan senyawa ini dapat  digunakan  untuk  berbagai  keperluan seperti untuk ekstraksi, sensor, membran fasa diam  kromatografi,  surfaktan,  dan  katalis [5,7,10].
Dalam  bidang  medis  kaliksarena dimanfaatkan  sebagai  fasa  diam  HPLC, sebagai antidontum, serta pengemban senyawa  obat  [8].  Pada  bidang  yang  sama, Bosadiya  dkk.  (2013)  telah  berhasil  men- sintesis dan menguji aktivitas antibakteri dari senyawa  C-5-bromo-2-hidroksifenilkaliks[4]- 2-metilresorsinarena  terhadap  bakteri S. aureus [11].  Namun,  sejauh  ini  penelitian mengenai pemanfaatan kaliksarena sebagai agen  antibakteri  belum  terlalu  banyak dilakukan.  Mengingat  bahwa  kaliksarena memiliki 5 tipe [12], maka dalam penelitian ini akan  dilakukan  uji  aktivitas  antibakteri  dari kaliksarena  jenis  kaliksresorsinarena  yaitu senyawa  C-4-metoksifenilkaliks-[4]resorsinarena (CMFKR)  dan  turunannya  yaitu  C-4- metoksifenilkaliks[4]resorsinarena  termodifikasi Hexadecyl-trimethylammonium-Bromide (Resorsinarena-HDTMA-Br)  yang  disintesis dari  bahan  dasar  p-anisaldehida  dari  minyak adas.  Senyawa  tersebut  memiliki  beberapa keunggulan  diantaranya  memiliki  beberapa gugus  aktif  yang  diduga  mampu  berinteraksi dengan  dinding  sel  bakteri  sedemikian  hingga akan  mampu  merusak  dan  menghambat pertumbuhan bakteri.

## METODE PENELITIAN

## 1.  Alat dan Bahan
Peralatan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  meliputi  seperangkat  alat  refluks,  mikro pipet,  jangka  sorong,  dan  peralatan  gelas lainnya. Peralatan utama antara lain autoclave,    laminar  air    flow  dan    inkubator (Thermo  Fisher  Scientific).  Sedangakan bahan  penelitian  meliputi  p-anisaldehida, resorsinol,  etanol,  HCl,  DMSO,  heksadesil- trimetilammonium bromida (HDTMA-Br), kloramfenikol,  media  Mc.Conkey,  media  NA ( Nutrient  Agar ),  larutan  standar  Mc.  Farland,
NaCl fisiologis, bakteri S. aureus ATCC, bakteri E. coli ATCC, media MHA ( Muller Hinton Agar ), media BHI ( Brain Heart Infusion ), dan akuades.
2.  Prosedur Kerja
a.  Sintesis  CMFKR  dan  Resorsinarena-

## HDTMA-Br
Sintesis  senyawa  C-4-metoksifenil- kaliks[4]resorsinarena (disingkat dengan CMFKR)  dilakukan  sesuai  prosedur  yang telah  dilakukan  sebelumnya  [6].  Sedangkan Resorsinarena-HDTMA-Br  dibuat  dengan mengikuti prosedur Utomo, dkk. 2016 [9].

## b.  Pembuatan  Seri  Konsentrasi  Senyawa CMFKR dan Resorsinarena-HDTMA-Br
Dalam  penelitian  ini  digunakan  lima seri konsentrasi  yaitu 10%, 20%, 30%, 40% dan  50%  (b/v)  untuk  senyawa  CMFKR sedangkan  untuk  senyawa    Resorsinarena- HDTMA-Br  digunakan  variasi  konsentrasi 10%, 15%, 20%, 25% dan 30%. Seri larutan sampel  tersebut  dibuat  dengan  menggu- nakan  pelarut  DMSO  sebanyak  0,1  mL. Proses pelarutan disertai dengan
pengadukan  dan  pemanasan.  Setelah  larut sempurna  sampel  uji  didingankan  pada temperatur ruang.

## c.  Pembuatan Media
Media MHA ( Muller Hinton Agar ) dibuat dengan  menimbang  sejumlah  38  g  sesuai dengan  komposisi  pada  kemasan  (2g beef extract ;  17,5  g  casein  hydrolysate;  1,5  g starch ; 17 g agar) kemudian dilarutkan dalam 1  L  akuades,  bila  perlu  dengan  bantuan pemanasan.  Selanjutnya  media  disterilkan dengan autoklaf pada suhu 121ºC selama 20 menit.  Media  MHA  dituangkan  pada  cawan petri  steril,  didiamkan  pada  suhu  kamar hingga  memadat.  Kemudian  disimpan  pada suhu 4ºC (di dalam lemari es).
d.  Pembuatan Biakan
Strain  murni S.  aureus ATCC, E.  coli ATCC, disuspensikan pada media BHI ( Brain Heart  Infusion ),  lalu  media  diinkubasi  pada suhu  37°C  selama  24  jam.  Selanjutnya bakteri S.  aureus ditanam  pada  media  agar darah,  sedangkan  bakteri E.  coli ditanam pada media Mc.Conkey lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Larutan media NA ( Nutrient agar ) yang sudah siap dimasukkan ke  dalam  beberapa  tabung  reaksi  masing- masing sebanyak 5 mL kemudian disterilisasi menggunakan  autoklaf  selama  15  menit pada  tekanan  1  atm,  suhu  121°C.  Tabung reaksi  selanjutnya  dimiringkan  agar  media NA di dalamnya membeku berbentuk miring. Setiap  kultur  bakteri  diambil  1  ose  dan digoreskan  pada  tabung  reaksi  yang  berisi media  NA  miring.  Bakteri-bakteri  dalam media  NA  miring  kemudian  diinkubasi selama  12-18  jam  dalam  inkubator  pada
suhu 37ºC. Koloni yang terbentuk, menunjukkan  pertumbuhan  bakteri  dan  siap untuk digunakan uji selanjutnya.
e.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Senyawa
CMFKR dan Resorsinarena-HDTMA-Br terhadap S. aureus dan E. coli
Satu ose koloni bakteri dari media NA miring  diencerkan  menggunakan  larutan NaCl  0,9%  steril  hingga  memiliki  kekeruhan yang sesuai dengan standar Mc. Farland (10 7
- 10 8 CFU/ml). Kapas lidi steril dimasukkan ke dalam  tabung  yang  berisi  suspensi  bakteri, lalu  digoreskan  merata  pada  media  MHA. Sebanyak 20 µl larutan sampel (baik CMFKR maupun Resorsinarena-HDTMA-Br) diinjeksi pada  kertas disk  blank menggunakan mikropipet.  Setelah  larutan  dapat  terserap sempurna,    kertas  disk  yang  telah  berisi sampel  diletakkan  diatas  media  MHA  yang telah mengandung bakteri uji, lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam. Zona bening yang terbentuk di sekitar disk mengindikasikan sampel  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri dan dapat diketahui diameternya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji aktivitas antibakteri senyawa CMFKR dan Resorsinarena-HDTMA-Br dilakukan  dengan  menggunakan  metode difusi  agar.  Metode  difusi  agar  didasarkan pada  difusi  agen  antibakteri  pada  agar  yang diinokulasi mikroorganisme. Dalam penelitian ini,  metode  yang  digunakan  adalah  difusi disk/cakram. Seri konsentrasi yang digunakan adalah 10%, 20%, 30%, 40%, dan 50% (b/v) untuk senyawa CMFKR serta 10%, 15%, 20%, 25% dan 30% untuk Resorsinarena-HDTMA- Br.  Hal  ini  dilakukan  berdasarkan  kelarutan
dari  kedua  sampel  uji  dalam  pelarut.  Kontrol negatif  yang  digunakan  adalah  pelarut  dari sampel uji,  yaitu Dymethyl Sulfoxide (DMSO),
sedangkan
kontrol positifnya adalah
kloramfenikol.  Hasil  dari  uji  aktivitas  antibakteri senyawa CMFKR dan senyawa Resorsinarena-
HDTMA-Br  terhadap  bakteri S.  aureus dan E. coli dapat dilihat pada Gambar 1 dan 2.
Pengamatan  yang  diperoleh  dari Gambar  1  dan  2  adalah  ada  atau  tidaknya zona  hambat  (daerah  bening  yang  tidak memperlihatkan adanya pertumbuhan bakteri) yang akan terbentuk disekeliling zat antibakteri  pada  waktu  tertentu  setelah inkubasi.  Pemilihan  metode  ini  didasarkan karena  metode  difusi  merupakan  metode yang  cepat,  mudah  dan  sederhana  dalam pengerjaannya.  Disk  yang  berisi  senyawa antibakteri diletakkan pada media agar yang telah  ditanami  mikroorganisme  yang  akan berdifusi  pada  media  agar  tersebut.  Area jernih pada permukaan media agar mengindikasikan  adanya  hambatan  pertum- buhan mikroorganisme oleh senyawa antibakteri [13].
Uji  antibakteri  dilakukan  dalam  kondisi steril  baik  dari  media  yang  digunakan, peralatan  uji,  maupun  ruang  yang  digunakan untuk  uji.  Hal  tersebut  dilakukan  untuk menghindari  kontaminasi.  Bakteri  uji  yang digunakan adalah E. coli dan S. aureus biakan murni  atau  ATCC  (American  Type  Culture Collection), bukan bakteri uji yang berasal dari lingkungan  ataupun  pasien.  Hal  tersebut dikarenakan bakteri ATCC merupakan bakteri standar  yang  disarankan  untuk  digunakan sebagai bakteri uji dalam penelitian. Selain itu, bakteri  biakan  murni  ATCC  tidak  mudah terkontaminasi.  Bakteri  yang  berasal  dari
lingkungan  ataupun  pasien  sangat  rentan terkontaminasi,  sehingga  dalam  penelitian digunakan  bakteri  uji  ATCC.  Media  yang digunakan untuk uji zona hambat adalah Muller Hinton  Agar  (MHA)  dalam  cawan  petri.  MHA digunakan  karena  memiliki  kandungan  nutrisi
yang  baik  untuk  kultur  kebanyakan  bakteri. Selain  itu  MHA  juga  bersifat  netral,  sehingga tidak menimbulkan pengaruh terhadap prosedur uji antibakteri. Ketebalan media MHA dalam cawan petri juga diseragamkan dengan cara menyamakan volume yang digunakan.
A B
Gambar  1.  Uji  Aktivitas  pada  Bakteri E.  coli oleh  (A)  CMFKR  dengan  seri  konsentrasi  larutan 10%, 20%, 30%, 40%, dan 50% (b/v) dan (B). Resorsinarena-HDTMA-Br dengan seri konsentrasi larutan 10%, 15%, 20%, 25% dan 30% (b/v). C= kontrol positif (larutan kloramfenikol); DMSO = kontrol negatif.
A B
Gambar 2. Uji Aktivitas pada Bakteri S. aureus oleh (A) CMFKR dengan seri konsentrasi larutan 10%, 20%, 30%, 40%, dan 50% (b/v) dan (B). Resorsinarena-HDTMA-Br dengan seri konsentrasi larutan 10%, 15%, 20%, 25% dan 30% (b/v). C= kontrol positif (larutan kloramfenikol); DMSO = kontrol negatif.
Selanjutnya dari Gambar 1 dan 2 di atas ditentukan  besarnya  diameter  zona  bening dengan  pengukuran  menggunakan  jangka
sorong.  Secara  terperinci,  hasil  pengukuran diameter zona bening dapat dilihat pada Tabel 1 dan 2.
Tabel 1. Diameter Zona Hambat C-4-metoksifenilkaliks[4]resorsinarena terhadap S. aureus dan E. coli
Konsentrasi senyawa CMFKR (%) (b/v) Zona hambat (mm) S. aureus E. coli 10 9,0 0 20 9,5 0 30 10,0 0 40 10,0 0 50 10,5 0 Kloramfenikol (+) 25,0 28 DMSO (-) 0 0
Tabel  2.  Diameter  Zona  Hambat  Resorsinarena-HDTMA-Br Terhadap S.aureus dan E. coli Konsentrasi Resorsinarena- HDTMA-Br (%) (b/v) Zona hambat (mm) S. aureus E. coli 10 13,0 0 15 14,0 0 20 11,1 0 25 14,1 0 30 15,0 0 Kloramfenikol (+) 25,0 27,4 DMSO (-) 0 0
Dari Tabel 1 dan 2 tersebut terlihat bahwa zona  hambat  paling  besar  dimiliki  oleh kloramfenikol  sebagai  kontrol  positif  dan  zona hambat paling kecil (0) dimiliki oleh DMSO yang merupakan kontrol negatif. Pemilihan kloramfenikol sebagai kontrol positif dikarenakan kloramfenikol  merupakan antibakteri yang berspektrum luas, sehingga mampu membunuh bakteri  gram  positif  maupun  gram  negatif  [13].
Bakteri dikatakan resisten terhadap Kloramfenikol  apabila  diameter  hambat pertumbuhan  bakteri  yang  dihasilkan  <20  mm dan  sensitif  apabila  hasil  diameter  hambat  ≥ 20mm [14]. Dalam penelitian ini, dihasilkan zona hambat sekitar 27,4-28 mm untuk E. coli dan 25 mm  untuk S.  aureus .  Dari  zona  hambat  yang dihasilkan tersebut terlihat bahwa kloramfenikol mampu menghambat pertumbuhan E. coli dan S.  aureus dengan  diameter  hambat  >20  mm,
sehingga dapat disimpulkan bahwa baik bakteri E.  coli dan S.  aureus memiliki  sensitifitas terhadap  disk  kloramfenikol  yang  digunakan dalam penelitian ini.
Kontrol negatif yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  DMSO.  Natheer et  al [15] menyebutkan bahwa zat yang digunakan sebagai  kontrol  negatif  adalah  pelarut  yang digunakan sebagai pengencer dari senyawa yang  akan  diuji.  Dalam  penelitian  ini  pelarut yang  digunakan  untuk  melarutkan  kedua sampel  adalah  DMSO.  Sehingga  kontrol negatif  yang  digunakan  adalah  DMSO. Tujuannya  adalah  sebagai  pembanding bahwa  pelarut  yang  digunakan  sebagai pengencer  tidak  mempengaruhi  hasil  uji antibakteri  dari  senyawa  yang  akan  diuji. Hasil  zona  hambat  kontrol  negatif  terhadap E.  coli dan S.  aureus adalah  0  mm.  hal  ini
menunjukkan  bahwa  penggunaan  pelarut DMSO tidak mempengaruhi hasil uji antibakteri dari CMFKR dan Resorsinarena-HDTMA-Br.
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang telah dilakukan, dari Gambar 2 terlihat bahwa baik senyawa CMFKR maupun Resorsinarena- HDTMA-Br  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri S. aureus. Hal ini ditunjukkan dengan adanya  zona  bening  di  sekitar  disk  pada cawan  yang  berisi  bakeri S.  aureus , sedangkan pada Gambar 1 yang merupakan cawan  yang berisi E. coli tidak muncul zona bening  di  sekitar  disk.  Secara  kuantitatif diperjelas oleh data pada Tabel 1 dan 2 yang menunjukkan bahwa kedua senyawa
kaliksresorsinarena tersebut
mampu menghambat pertumbuhan bakteri S. aureus namun tidak terhadap bakteri E. coli .
E. coli merupakan bakteri gram negatif.
Natheer et al. [15] menjelaskan bahwa lapisan dinding  sel E.  coli lebih  kompleks  jika dibandingkan dengan S. aureus . Bakteri gram positif  ( S.  aureus )  dinding  selnya  hanya tersusun  oleh  peptidoglikan  dan  membran plasma  tunggal.  Sedangkan  bakteri  gram negatif  ( E.  coli )  tersusun  oleh  membran plasma  luar,  membran  plasma  dalam,  serta peptidoglikan.  Membran  plasma  luar  di bagian  dinding  sel  bisa  melindungi  bakteri tersebut dengan menghalangi masuknya zat antibiotik  dan  juga  sistem  dari  pertahanan inang.  Oleh  karena  itu, E.  coli memiliki ketahanan yang lebih kuat terhadap senyawa CMFKR  dan  Resorsinarena-HDTMA-Br  jika dibandingkan  dengan S.  aureus .  Struktur kedua  senyawa  kaliksresorsinarena  yang meruah  [7]  tersebut  juga  berpotensi  tidak dapat  menembus  membran  bakteri  gram negatif,  sehingga  bakteri E.  coli yang
merupakan gram negatif lebih tahan terhadapnya.
Permukaan  dinding  sel Escherichia coli lebih  bermuatan  negatif  dibandingkan dengan S. aureus (bakteri Gram positif). Hal
tersebut dapat terjadi karena adanya
lipopolisakarida dan peptidoglikan  yang mengandung  gugus  COO - pada E.  coli . Muatan  negatif  pada  permukaan  dinding  sel bakteri S. aureus yang cenderung lebih lemah membuat senyawa CMFKR dan Resorsinarena- HDTMA-Br  yang  memiliki  gugus –gugus  OH - menjadi  lebih  mudah  berinteraksi  dengan S. aureus jika dibanding E. coli .
Bakteri  gram  positif  seperti S.  aureus memiliki  asam  teikoat  pada  permukaan dinding  selnya.  Menurut  Brooks, et  al. [3], asam  teikoat  sendiri  merupakan  senyawa yang terdapat dalam dinding sel bakteri yang dapat  dicapai  oleh  senyawa  antibakteri. Asam  teikoat  berfungsi  dalam  proses pengaktifan  enzim  dimana  enzim  tersebut selanjutnya digunakan dalam proses sintesis protein bagi bakteri. Ion OH - yang melimpah pada  senyawa  CMFKR  akan  berinteraksi dengan  ion  H + pada  asam  teikoat.  Interaksi tersebut  akan  menghambat  asam  teikoat dalam mengaktifkan enzim, sehingga proses sintesis  protein  terhambat  yang  selanjutnya menyebabkan lisisnya bakteri.
Mekanisme kerja  kedua senyawa C-4- metoksifenilkaliks[4]resorsinarena sebagai penghambat  pertumbuhan E.  coli dan S. aureus tidak  dapat  ditentukan  secara  pasti.
Karena untuk melihat mekanisme penghambatan pertumbuhan  bakteri  ini  perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  secara  molekular. Penelitian tersebut diantaranya dapat dilakukan  dengan  menganalisis  kerusakan  sel
menggunakan Scanning  Electron  Microscope (SEM).
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa senyawa CMFKR memiliki aktivitas antibakteri terhadap S.  aureus pada  konsentrasi    10%;
20%;  30%;  40%;  dan  50%  dengan  zona hambat berturut-turut sebesar 9 mm; 9,5 mm; 10  mm;  10  mm;  dan  10,5  mm.  Sedangkan untuk  senyawa  Resorsinarena-HDTMA-Br pada konsentrasi 10%; 15%; 20%; 25%; dan 30%  memiliki  zona  hambat  berturut-turut sebesar 13 mm; 14,5 mm; 11,1 mm; 14,1 mm; dan 15 mm. Aktivitas antibakteri yang dimiliki semakin  meningkat  seiring  bertambahnya konsentrasi  larutan.  Konsentrasi  dari  suatu senyawa  antibakteri  merupakan  salah  satu faktor  penentu  besar  kecilnya  kemampuan senyawa tersebut dalam menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  diuji.  Meskipun demikian, pada konsentrasi tertentu kenaikan konsentrasi  tidak  selalu  diikuti  dengan peningkatan diameter zona hambat.
Kemungkinan hal ini terjadi karena perbedaan kecepatan  difusi  senyawa  antibakteri  pada media agar.
Menurut  Davis  dan  Stout  [16],  kriteria kekuatan  daya  antibakteri  adalah:  diameter zona hambat > 5 mm dikategorikan lemah, 5- 10  mm  dikategorikan  sedang,  11-29  mm dikategorikan kuat, dan > 20 mm dikategorikan sangat  kuat.  Hasil  uji  diatas  menunjukkan bahwa  senyawa  CMFKR  mempunyai  daya aktivitas  antibakteri  sedang  karena  diameter zona hambatnya antara 5-10 mm. Sedangkan senyawa Resorsinarena-HDTMA-Br merupakan agen  antibakteri  yang  kuat  dengan  diameter zona hambatnya 11-15 mm. Hal ini mengindikasikan  bahwa  adanya  modifikasi gugus  HDTMA-Br  meningkatkan  aktivitas
antibakterinya. Diduga kuat adanya dua gugus HDTMA-Br  menaikkan  kemampuan  difusi CMFKR  termodifikasi  sedemikian  hingga aktivitas antibakterinya meningkat.

## KESIMPULAN
Berdasarkan    penelitian    yang    telah dilakukan,  dapat  diambil  kesimpulan  bahwa senyawa    C-4-metoksifenilkaliks[4]resorsinarena (CMFKR)  dan  turunannya  yaitu  senyawa Resorsinarena-HDTMA-Br  memiliki  aktivitas antibakteri    terhadap    bakteri S.aureus . Senyawa  CMFKR  mempunyai  daya  aktivitas antibakteri  sedang  dengan  diameter  zona hambat 9,0 – 10,5 mm untuk konsentrasi 10%- 50%  b/v.  Sedangkan  senyawa Resorsinarena- HDTMA-Br  merupakan  agen  antibakteri  yang kuat  dengan  diameter  zona  hambatnya  13-15 mm untuk konsentrasi 10-30 % (b/v).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  menyampaikan  terimakasih pada  LPPM  UNS  melalui  pembiayaan  pada Penelitian Mandiri Aktif dengan Kontrak  No. 3312/UN27.21/PP/2018.

## DAFTAR RUJUKAN
[1]  Darmadi, Infeksi  Nosokomial:  Problematika dan  Pengendaliannya ,  Jakarta:  Salemba Medika. 2008.
[2]  M.  Radji, Buku  Ajar  Mikrobiologi Panduan  Mahasiswa  Farmasi  dan Kedokteran ,  Jakarta:  Buku  Kedokteran
EGC , 2011.
[3]  G. F. Brooks et al ., Jawetz,  Melnicks & Adelberg’s  Mikrobiologi  Kedokteran .
Edisi I. Jakarta: Salemba Medika , 2001.
[4]  Sulistyo, Farmakologi dan Terapi .
Yogyakarta: EKG , 1971.
[5]  S.  B.  Utomo,  Jumina,  and  T.  D. Wahyuningsih, “The Adsorption of Pb(II) and  Cr(III)  by  Polypropylcalix[4]arene Polymer, ” Indo. J.  Chem. ,  vol.  9, no. 3, pp. 437-444, 2009.
[6]  S.B. Utomo et al ., “Synthesis  of
Thiomethylated Calix[4]resorcinarene Based on Fennel Oil via Chloromethylation, ” Indo. J. Chem ., vol. 11, no. 1, pp. 1-8, 2011.
[7]  S.B.  Utomo et  al ., “Kinetics  and Equilibrium  Model  of  Pb(II)  and  Cd(II) Adsorption  onto  Tetrakis-Thiomethyl-C- 4-Methoxy phenylcalix[4]resorcinarene, ” Indo. J. Chem ., vol. 12, no. 1, pp. 49-56, 2012.
[8]  S. B. Utomo et al., “Synthesis of Tetrakis- N,N,N-trimethyl-ammonium methyl-C-3,4- dimethoxyphenylcalix[4]resorcinarene
Iodide  Based  Vanillin  and  Its  Antidote
Activity  for  Chromium  (VI)  Intoxication, ” Indo. J. Chem. , vol. 13, no. 2, pp. 158-165, 2013.
[9]  S.  B.  Utomo,  A.  N.  C.  Saputro,  and  Y. Rinanto, “Functionalization  of  C-4- methoxyphenylcalix[4]resorcinarene with  several  ammonium  compounds, ” IOP Conf. Series: Material Science and Engneering , vol. 107, 012042, 2016.
[10] S.  B.  Utomo,  “Rekayasa  Molekul Makrosiklis  untuk  Aplikasi  Lingkungan dan Medis, ” Proseeding Seminar Nasional Kimia dan Pendidikan Kimia VI (SNKPK VI) , P.Kimia PMIPA FKIP UNS,
Surakarta, 21 Juni 2014, pp. 4-15.
[11]  H.  M.  Abosadiya et  al ., “Synthesis, characterization,  X-ray  structure  and biological  activities  of  C-5-bromo-2- hydroxyphenylcalix[4]-2-methyl resorcinarene, ” Molecules ,  vol.  18,  no. 11, pp. 13369-13384, 2013.
[12]  Y. K. Agrawal, J. P. Pancholi, and J. M. Vyas,  “Design  and  Synthesis  of Calixarene ,” Journal  of  Scientific  & Industrial  Research .  vol.  68,  pp.  745- 768, 2009.
[13]  S.  T.  Pratiwi, Mikrobiologi  Farmasi. Yogyakarta: Erlangga, 2008.
[14]  J.  M.  Andrews  and  R.A.  Howe ,  “BSAC Standardized  Disc  Susceptibility  Testing Method (Version 10),” Journal Antimicrob Chemother ,  vol.  66,  pp.  2726 –2757, 2011.
[15] S.  E.  Nather et  al., “Evaluation  of
Antibacterial Activity of Morindacitrifolia, Vilextrifolia, and Chromolaenaadorata, ”
African  Journal  of  Pharmacy  and Pharmacology ,  vol.  6,  no.  11,  pp.  783- 788, 2012.
[16]  W. W. Davis and T. R. Stout, “Disc Plate Method  of  Microbiological  Antibiotic Assay, ” Applied  Microbiology ,  vol.  22, no. 4, pp. 659-665, 1971.