## PERBEDAAN HASIL PEMERIKSAAN JUMLAH LEUKOSIT ANTARA METODE MANUAL IMPROVED NEUBAUER DENGAN METODE AUTOMATIC HEMATOLOGY ANALYZER
Satya Darmayani, Fonnie E. Hasan, Devi Ekafitria A Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Kendari

## ABSTRACT
Leucocytes are nucleated cells in the blood that can be divided into 5 types. Every cell can be calculated its percentage in the blood by doing types calculation and can be distinguished by the size of the core form, color of granules and cytoplasm inside. This study aimed to determine the results of the  difference  calculation  of  leukocytes  count  examination  between  Manual  Method  (Improved Neubauer)  and  Automatic  Hematology  Analyzer  Method  in  outpatients  at  the  General  Hospital  of Kendari. Samples of this study were 30 people taken by accidental sampling. The results of the study with  30  samples  using  manual  method  (Improved  Neubauer),  25  patients  (83.4%)  had  normal leukocyte  and  5  patients  (16.6%)  had  abnormal,  and  examination  using  Automatic  Hematology Analyzer    Method  showed  22  patients  (73.4%)  had  normal  leukocyte  and  8  patients  (26.6%)  had abnormal. Based on paired test  of samples obtained p value = 0, 000, so it can be concluded that there is  significant  difference  between  count  examination  of  leukocytes  using  Manual  Method  with Improved Neubauer and Automatic Hematology Analyzer Method .
Keyword: Leukocytes, Manual Improved Neubauer, Automatic Hematology Analyzer .

## PENDAHULUAN
Pemeriksaan darah rutin lengkap merupakan  pemeriksaan  yang  sering  diminta oleh klinisi karena dengan melakukan pemeriksaan darah lengkap rutin dapat terdiagnosis  beberapa  penyakit  kelainan  darah dan  dapat  ditentukan  arah  pemeriksaan  lebih lanjut  dari  penderita  tersebut.  Pemeriksaan darah  rutin  antara  lain  adalah  uji  kadar hemoglobin; jumlah eritrosit, leukosit, trombosit;  nilai  hematokrit,  laju  endap  darah disingkat LED dan menentukan indeks eritrosit (Verbrugge  &  Huisman  2015),  (Rabinovitch  et al. 2010), (Lima-oliveira et al. 2013).
Menghitung  sel-sel  darah  dari  ketiga jenis sel darah leukosit, eritrosit, dan trombosit dihitung  jumlahnya  persatuan  volume  darah. Upaya itu biasanya dilakukan dengan menggunakan alat hitung elektronik.Pada dasarnya  alat  semacam  itu  yang  lazimnya dipakai  bersama  alat  pengencer  otomatik memberi hasil yang sangat teliti dan tepat.Harga  alat  penghitung  elektronik  mahal dan mengharuskan pemakaian dan pemeliharaan  yang  sangat  cermat.  Selain  itu perlu  ada  upaya  untuk  menjamin  tepatnya  alat itu  bekerja  dalam  satu  program  jaminan  mutu (quality  control) .  Cara-cara  menghitung  sel darah secara manual dengan memakai pipet dan kamar  hitung  tetap  menjadi  upaya  dalam
laboratorium  (Ratwita  2007),  (Bureau  2012), (Ernst et al. 2008).
Pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit merupakan  pemeriksaan  darah  rutin  yang dilakukan  di  laboratorium  klinik.  Karena seringnya  permintaan  pemeriksaan  hitung jumlah  leukosit,  untuk  menghitung  leukosit secara  manual  akan  memakan  waktu  yang cukup  lama  dan  kurang  cepat,  maka  dilakukan pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit  secara automatik  yang  mana  alat  ini  menggunakan aliran listrik dengan prinsip impedansi. Walaupun harga mesin automatik cukup mahal, namun  alat  ini  mampu  memeriksa  dengan cepat,  tepat  dan  mudah  (Katrina  et  al.  2015), (Carraro et al. 2015).
Terutama  pada  Rumah  sakit  Umum Daerah  Kota  Kendari  tiap  bulan  mengalami peningkatan pemeriksaan hitung jumlah leukosit  pada  awal  tahun  2016  bulan  januari jumlah  pemeriksaan  sebanyak  200,  pada  bulan februari  sebanyak  1175,  sedangkan  pada  bulan maret 1521 pemeriksaan.
Dengan  metode  perhitungan  yang berbeda  (cara  manual  dan  cara  automatik) tentunya    akan  menimbulkan  variasi  hasil perhitungan  sel  leukosit.  Sebagai  contoh Hidayah  (2002)  mengemukakan  bahwa  dengan metode  manual  dan  automatik  diketahui kekurangan  dan  kelebihan  dari  kedua  metode
tersebut,  yang  tentunya  masing-masing  metode memiliki keterbatasan.
Dari  uraian  permasalahan  tersebut maka  perlu  dilakukan  penelitian  tentang perbedaan hasil perhitungan pemeriksaan hitung  jumlah  leukosit  cara  manual  metode kamar  hitung (Improved  neubauer) dengan menggunakan alat automatik hematologi analyzer .

## METODE Jenis Penelitian
Penelitian  ini  bersifat  analitik  yaitu  melakukan pemeriksaan hitung jumlah leukosit menggunakan kamar hitung ( Improved Neubauer )  dengan  alat Automatik  Hematologi Analyzer .

## Waktu dan Lokasi Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan  Juni tahun  2016  di  Laboratorium  Rumah  Sakit Umum Daerah (RSUD) Kota Kendari

## Populasi dan Sampel
Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  pasien rawat jalan yang datang melakukan pemeriksaan  darah  Rutin  di  Laboratorium RSUD  Kota  Kendari.  Sampel  dalam  penelitian ini  adalah  pasien  rawat  jalan  yang  melakukan pemeriksaan  leukosit  di  Laboratorium  RSUD Kota Kendari, yang diambil darahnya sebanyak 30 sampel secara Accidental Sampling.

## Teknik Pengumpulan Data
Pengumpulan  data  dilakukan  dengan  cara mencatat  hasil  pemeriksaan  hitung  jumlah leukosit  metode  manual improved  neubauer dengan  metode automatic hematology  analyzer di RSUD Kota Kendari.

## Analisa data
Hasil  penelitian  disajikan  dalam  bentuk  tabel. Untuk  melihat  ada  tidaknya  perbedaan,  maka dilakukan  pengujian  statistik Paired  Sample Correlation pada tingkat kepercayaan 95% (α= 0,05) dengan kriteria penerimaan dan penolakan:  Jika  Ho  diterima  dan  Ha  ditolak, maka  tidak  ada  perbedaan.  Sedangkan  Jika  Ho ditolak dan Ha diterima, maka ada perbedaan.

## Penyajian Data
Data  dalam  penelitian  ini diolah  dan  di sajikan dalam bentuk tabel dan diuraikan dalam bentuk narasi .

## HASIL PENELITIAN
Telah  dilakukan  penelitian  terhadap  30 sampel darah, pada perbedaan hasil pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit  antara metode  manual improved  neubauer dengan metode automatic  hematology  analyzer pada pasien  rawat  jalan  yang  telah  dilakukan  pada Juni 2016 di laboratorium Rumah Sakit Umum Daerah  Kota  Kendari,  diperoleh  hasil  sebagai berikut:
Tabel  1.    Distribusi  Hasil  Pemeriksaan  Hitung  Jumlah  Leukosit  antara Metode  Manual Improved  Neubauer dengan  Metode  A utomatic Hematology  Analyzer di  Rumah  Sakit  Umum  Daerah  Kota Kendari No Hasil penelitian Manual Automatic Jumlah n % n % N % 1 Normal 25 83,4 22 73,4 47 78,4 2 Tidak normal 5 16,6 8 26,6 13 21,6 Total 30 100 30 100 60 100
Berdasarkan  tabel  1,  hasil  penelitian secara manual dengan 30 sampel yang memiliki hitung  jumlah  leukosit  normal  sebanyak  25 pasien  (83,4%)  sedangkan  yang  tidak  normal sebanyak  5  pasien  (16,6%),  dan  penelitian secara automatic  hematology  analyzer yang memiliki  hitung  jumlah  leukosit  normal sebanyak  22  pasien  (73,4%)  sedangkan  yang tidak  normal  sebanyak  8  pasien  (26,6%).  Dan keseluruhan distribusi menujukkan bahwa hasil
hitung  jumlah  leukosit  yang  normal  sebanyak 47 (78,4 %) dan yang tidak normal sebanyak 13 (21,6 %).

## PEMBAHASAN
Dari  tabel  1  dapat  disimpulkan  bahwa dari  kedua  metode  tersebut,  metode automatic hematology  analyzer mampu menghitung jumlah leukosit lebih presisi dan akurat dimana dengan menggunakan metode atutomatic
hematology  analyzer tidak  terjadi  kesalahan sehingga  pasien  tidak  dirugikan  dengan kesalahan interprestasi hasil seperti positif palsu atau  negative  palsu.  Dari  pengujian  data menggunakan uji  paried  sampel didapatkan hasil,  nilai  p=0,000,  maka  dapat  disimpulkan bahwa  Ho  diterima  dan  Ha  ditolak,  jadi  ada perbedaan hasil hitung jumlah leukosit secaramanual improved  neubauer dengan automatic hematology analyzer .
Hasil penelitian ini sejalan dengan hasil penelitian yang dilakukan  oleh  (Hidayah 2002) yang menyatakan bahwa rata-rata hasil pemeriksaan  hitung  jumlah  leukosit  secara manual  dengan  menggunakan Haemositometer adalah  8604/mm³,  hasil  pemeriksaan  hitung jumlah  leukosit  cara  automatik  menggunakan alat BC-2600 Auto Hematology Analyzer adalah 7720/mm³  yang  menyatakan  bahwa  ada perbedaan  antara  hasil  pemeriksaan  hitung jumlah leukosit secara manual dan automatik.
Dari  hasil  penelitian  ini  dengan menggunakan uji paried sampel yang menunjukan  hasil  nilai  rata-rata  pada  alat automatic hematology analyzer sebesar 8070/mm³ sedangkan pada alat manual improved neubauer sebesar 7575/mm³.
Dalam  perhitungan  sel  leukosit  pada alat  manual improved  neubauer sangat  sulit untuk  mengontrol  atau  mendapat  akurasi  dan presisinya  (Cadena-herrera  et  al.  2015), disebabkan  sel  leukosit  bercampur  dengan kotoran  pada  objek  gelas  maka  pada  waktu pembacaan hitung jumlah leukosit memerlukan waktu  yang  cukup  lama  agar  diperoleh  hasil yang maksimal (Hansen et al. 2006).
Automatic hematology analyzer sebagai salah  satu  jalan  yang  bisa  ditempuh  untuk memaksimalkan  pemeriksaan  tanpa  tergantung pada tenaga ahli  diciptakan suata alat yang bisa dioprasikan  secara  sederhana  dengan  kata  lain automatic  hematology  analyzer dirancang untuk  tenaga  ahli  yang  tanpa  membutuhkan keterampilan khusus. Alat automatic hematology  analyzer ini  dirancang  sebagai  alat yang  memiliki  akurasi  hasil  yang  mudah dievaluasi  karena  akurasi  dan  presisinya  bisa dikontrol,  jumlah  sel  yang  dihitung  lebih banyak  dan  pembacaan  sampel  pemeriksaan hanya  memerlukan  waktu  yang  singkat  sampai pada hasil yang diinginkan .

## KESIMPULAN
1. Hasil  hitung  jumlah  leukosit  menggunakan metode manual improved neubauer
sebanyak 25 orang (83,4 %) pasien memiliki hitung jumlah leukosit normal dan sebanyak 5  orang  (16,6  %)  pasien  memiliki  hitung jumlah leukosit tidak normal.
2. Hasil  hitung  jumlah  leukosit  menggunakan metode  automatic  hematology  analyzer sebanyak 22 orang (73,4 %) pasien memiliki hitung jumlah leukosit normal dan sebanyak 8  orang  (26,6  %)  pasien  memiliki  hitung jumlah leukosit tidak normal.
3. Dari  dua  metode  perbedaan  pemeriksaan hitung  jumlah  leukosit  dengan  metode manual improved  neubauer dan  metode
automatic hematology analyzer menunjukkan  bahwa  ada  perbedaan  yang signifikan antara kedua metode.

## DAFTAR PUSTAKA
Bureau,  B.S.  (2012).  International  Standard quality and competence, Medical laboratories-Requirements  for  Quality and Competence.
Cadena-herrera,  D.  et  al.  (2015).  Validation  of Three  Viable-Cell  Counting  Methods :
Manual, Semi-Automated, and Automated. Biotechnology Reports . Available  at:  http://dx.doi.org/10.1016/ j.btre.2015.04.004.
Carraro, P. et al. (2015). Complete Blood Count at  the  ED:  Preanalytic  Variables  for Hemoglobin  and  Leukocytes. American
Journal of Emergency Medicine . Available  at:  http://dx.doi.org/10.1016/ j.ajem.2015.05.011.
Ernst,  D.J.  et  al.  (2008).  Procedures  and Devices  for  the  Collection  of  Diagnostic Capillary  Blood  Specimens;  Approved Standard-Sixth  Edition. Clinical  And Laboratory Standards Institute , 28(25).
Hansen,  C.  et  al.  (2006).  Comparison  of FACSCount  AF  System, Improved
Neubauer  Hemocytometer,  Corning  254 Photometer,  SpermVision,  UltiMate  and Nucleo Counter SP–100 for Determination of Sperm Concentration of Boar  Semen. Theriogenology ,  66,  pp. 2188–2194.
Hidayah, I. (2002). Perbedaan Hasil Pemeriksaan  Hitung  Jumlah  Leukosit Secara Manual dan Automatic . Muhammadiyah Semarang.
Katrina,  R.  et  al.  (2015).  A  Comparison  of Differential  Leucocyte  Counts  Measured by  Conventional  Automated  Venous Haematology  and  Darkfield  Microscopic
Examination  of  Fresh  Capillary  Blood.
Advances  in  Integrative  Medicine ,  pp.1–
5. Available at: http://dx.doi.org/ 10.1016/j.aimed.2015.05.001.
Lima-oliveira, G. et al. (2013). Original papers.
Biochemia Medica , 23(3), pp.308–315. Rabinovitch,  A.  et  al.  (2010).  Validation, Verification,  and  Quality  Assurance  of
Automated Hematology Analyzers; Approved Standard-Second Edition.
Clinical  And  Laboratory  Standards
Institute , 30 (June).
Ratwita,  G.  (2007). Penuntun  Laboratorium Klinik , Jakarta: Dian Rakjat.
Verbrugge,  S.E.  &  Huisman,  A.  (2015). Verification  and  Standardization  of Blood Cell Counters for Routine Clinical Laboratory  Tests. Clinics  in  Laboratory Medicine ,  35(1),  pp.183–196.  Available at:  http://dx.doi.org/10.1016/  j.cll.2014. 10.008.