## EKSTRAKSI DAN FRAKSINASI FOSFOLIPID DARI LIMBAH PENGOLAHAN MINYAK SAWIT
[Extraction and Fractionation of Phospholipids from the Waste of Palm Oil Processing]
Teti Estiasih 1) *, Kgs. Ahmadi 2) , Fithri Choirun Nisa 1) , dan Ahmad Diaul Khuluq 1)
1) Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Fakultas Teknologi Pertanian, Universitas Brawijaya
2) Jurusan Teknologi Industri Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Tribhuwana
Diterima 01 Februari 2010 / Disetujui  10 Desember 2010

## ABSTRACT
This  research  aimed  to  extract  and  fractionate  phospholipids  from  the  most  potential  source  of  phospholipids  of  the  waste  of  palm  oil processing  i.e.  palm  pressed  fiber,  sludge,  and  spent  bleaching  earth  (adsorbent).  The  extraction  process  was  performed  by  using  chloroform- methanol,  followed  by  polar  lipid  separation  by  solubilization  in  choloroform  (to  eliminate  neutral  lipid)  and  methanol  (to  extract  phospholipids). Fractionation was performed based on the solubility in ethanol and acetone. There were 5 phospholipd fractions obtained, i.e. crude phospholipids (without fractionation), ethanol soluble, ethanol insloluble, ethanol soluble-acetone soluble, and ethanol soluble-acetone insoluble fractions. Each fraction was characterized for phospholipid composition and fatty acid profile. The result showed that palm pressed fiber had the highest content of phospholipids  of  10,222.19  ppm.  Extraction  and  separation  of  phospholipids  from  palm  pressed  fiber  produced  phospholipids  with  a  purity  of 61.67%.  Phospholipids  found  in  palm  pressed  fiber  were  phosphatidylinositol  (PI),  phosphatidylcholine  (PC),  phosphatidyletanolamin  (PE), phosphatidylglycerol (PG), diphosphatidylglyerol (DPG), and phosphatidic acid (PA), while the impurities consisted of fatty acids and neutral lipids. Oleic acid is the most dominant fatty acid ini crude palm pressed fiber phospholipids. Fractionation increased the purity of phospholipids. Different phospholipids fractions showed different phospholipid composition and fatty acid profile. Ethanol soluble fraction had more PI, PC, PG, and PA, but less PE and DPG as compared to crude phospholipids. The ratio of PC to PE also increased after ethanol fractionation. The amount of more non polar phospholipids (PG, DPG, PA) were less in ethanol soluble-acetone insoluble fractions compared to ethanol soluble-acetone soluble fraction. The  solubilization  in  ethanol  increased  total  unsaturated  fatty  acids  in  ethanol  soluble  fractions,  meanwhile  the  distribution  of  unsaturated  and saturated fatty acid in ethanol soluble-acetone soluble and ethanol soluble-acetone insoluble was similar.
Key words : extraction, fractionation, sludge, palm pressed fiber, spent bleaching earth

## PENDAHULUAN
1
Permintaan  akan  berbagai  jenis  fosfolipid  saat  ini  terus mengalami peningkatan karena penggunaannya di industri terus meningkat.  Fosfolipid  digunakan  untuk  formula  obat,  produk pangan,  pelumas,  penstabil,  liposom,  campuran  misel, kosmetik,  serta  sebagai  pengemulsi  dan  bahan  farmasi. Fosfolipid  sintetik  dapat  digunakan  untuk  keperluan  kesehatan dan  nutrisi,  namun  dewasa  ini  minat  konsumen  beralih  ke fosfolipid yang berasal dari bahan alami.
Indonesia  mempunyai  sumber  fosfolipid  potensial  yang belum  dimanfaatkan  optimum,  yaitu  fosfolipid  sebagai  hasil samping  pengolahan  sawit.  Produksi minyak  sawit  Indonesia tahun  2007  mencapai  sekitar  17.664.000  ton  (Anonim,  2008) menghasilkan  jumlah  limbah  sawit  yang cukup  potensial  dan belum  dimanfaatkan  dan  diolah  sebagai  sumber  fosfolipid. Industri  kelapa  sawit  menghasilkan  limbah  seperti  bungkil  inti sawit,  serat  perasan  buah  sawit  ( palm  pressed  fiber ),  tandan buah  kosong,  dan  solid  (Utomo et  al. ,  1999).  Dari  693.015,64 hektar kebun kelapa sawit di Indonesia, dihasilkan tandan buah segar  sebesar  10,40  juta  ton  tiap  tahun  dan  akan  dihasilkan limbah  pabrik  pengolahan  sawit  berupa  lumpur  sawit  0,52  juta ton dan bungkil inti sawit sawit sebesar 0,24 juta ton dan serat
*  Korespondensi penulis : E-mail : teties@yahoo.co.id
buah  sebesar  1,25  juta  ton  tiap  tahun  (Mirwandhono  dan Siregar, 2004).
Sebagian besar fosfolipid masih berada dalam limbah serat sawit ( palm-pressed fiber ) dan lumpur sawit ( sludge ) (Goh et al ., 1982).  Choo et  al. (2004)  melaporkan  kadar  fosfolipid  dalam serat  sawit  yang  diekstrak  dengan  etanol  adalah  sebesar 46.800 ppm sedangkan yang diekstrak dengan heksana adalah sebesar  1.367  ppm.  Serat  sawit  mempunyai  porsi  15%  dari berat  tandan  buah  sawit  segar.  Pada  industri  pengolahan minyak  sawit  kasar  (CPO, crude  palm  oil ),  penghilangan fosfolipid  dari  minyak  sawit  kasar  dilakukan  dengan  proses degumming yang dilakukan simultan dengan proses pemucatan ( bleaching )  menggunakan spent  bleaching  earth (SBE  atau adsorben).  Menurut  Morad et  al. (2006),  SBE  dari  proses  ini mengandung fosfolipid 800-1000 ppm.
Pengkajian  fosfolipid  dari  hasil  samping  pengolahan  sawit penting  dilakukan.  Aplikasi  fosfolipid  kasar  yang  diperoleh  dari pemurnian  minyak  nabati  di  industri  seringkali  memerlukan proses purifikasi. Lesitin kasar dari minyak nabati mengandung lipid netral 30-40% terutama trigliserida. Sisanya terdiri dari lipid polar,  terutama  campuran  fosfolipid.  Untuk  mempermudah penanganan  lesitin  kasar  yang  sangat  kental  dan  untuk meningkatkan  dispersibilitas  dalam  air,  industri  biasanya melakukan proses penghilangan minyak dengan menggunakan aseton.
Trigliserida  larut  dalam  aseton,  akan  tetapi  senyawa  polar lesitin  tidak  larut.  Ekstraksi  aseton  menyebabkan  fosfolipid
menjadi  terkonsentrasi  sehingga  meningkatkan  kadarnya  dan mengurangi jumlah yang dibutuhkan untuk aplikasi (Vikbjerg et al., 2006).
Palacios  dan  Wang  (2005),  menyatakan  bahwa  fosfolipid kuning telur diekstrak dengan menggunakan etanol, dilanjutkan dengan ekstraksi aseton untuk menghilangkan lemak dari fraksi etanol. Pada penelitian ini dikaji metode ekstraksi dan fraksinasi fosfolipid dari limbah pengolahan sawit dengan beberapa jenis pelarut serta karakterisasi fraksi-fraksi fosfolipid yang dihasilkan. Proses  fraksinasi  dengan  etanol  dan  aseton  diduga  dapat meningkatkan  kemurnian  fosfolipid  dan  menghasilkan  fraksi- fraksi fosfolipid dengan  komposisi dan profil asam lemak yang berbeda.

## METODOLOGI

## Bahan dan alat
Bahan  baku  yang  digunakan  adalah  limbah  pengolahan sawit  berupa  serat  sawit  dan  lumpur  sawit  ( sludge )  dari  PT Surya Dumai Grup, Riau, serta dan spent bleaching earth (SBE) dari PT Bimoli,  Surabaya.  Bahan-bahan kimia yang digunakan adalah  standar  campuran  asam  lemak,  standar  C17:0  (Sigma Co.),  standar  fosfolipid  (fosfatidilkolin,  fosfatidiletanolamin, fosfatidilinositol,  asam  fosfatidat  (Sigma  Co.),  lisofosfatidilkolin, lisofasfatidiletanolamin, fosfatidilgliserol, difosfatidilgliserol
(Nacalai,  Jepang)),  BF 3 -metanol  14%  (Sigma  Co.), metilenklorida, NaOH, metanol, asam sulfat, plat TLC (silika gel G60  F254  sebagai  adsorben),  kloroform  (p.a.  dari  Merck), kloroform  (Mallincord  TJ  Beaker),  metanol  (teknis),  akuades, dan gas nitrogen.
Peralatan  yang  digunakan  adalah water  bath  shaker , kromatografi  gas  (Shimadzu), TLC  Scanner (Shimadzu), TLC development  tank ,  oven,  lampu  UV,  alat-alat  gelas,  pengaduk magnet, dan rotavapor (Buchi).
Penelitian  secara  garis  besar  meliputi  ekstraksi  total  lipid, separasi  fosfolpid  dari  total  lipid,  dan  fraksinasi  fosfolipid. Diagram  alir  penelitian  secara  lengkap  dapat  dilihat  pada Gambar 1.

## Penentuan kadar air dan minyak limbah pengolahan sawit
Limbah pengolahan sawit berupa serat sawit, lumpur sawit, dan spent bleaching  earth ditentukan  kadar  airnya  secara gravimetri  (AOAC,  1990)  dan  kadar  minyak  dengan  menggu- nakan metode soxhlet (AOAC, 1990).
Ekstraksi total lipid (metode modifikasi Yunoki et al., 2008) Sejumlah  100  g  limbah  pengolahan  sawit  diekstrak  2  kali dengan  100  ml  kloroform:metanol  (2:1  v/v)  dan  dilanjutkan dengan 100 ml kloroform:metanol (1:2 v/v) selama 1 jam pada suhu ruang kemudian disaring.
Gambar 1. Ekstraksi total lipid, separasi, dan fraksinasi fosfolipid
serat sawit Ekstraksi total lipid fraksi non lipid Total lipid Separasi fosfolipid Fraksi non fosfolipid Fosfolipid kasar sawit etanol fraksinasi Fraksi larut etanol fraksi tidak larut etanol fraksinasi fraksi larut aseton fraksi tidak larut aseton Karakterisasi: Kadar fosfolipid Jenis-jenis fosfolipid Komposisi asam lemak Komposisi asam lemak pada setiap fraksi fosfolipid
aseton
lumpur sawit
Pengujian fosfolipid Spent bleaching earth
Semua  ekstrak  kemudian  dicampur  dan  disentrifugasi. Setelah  sentrifugasi  pada  3000  rpm  selama  15  menit,  fase paling  bawah  dipekatkan  dengan  rotavapor.  Total  lipid  yang diperoleh kemudian digunakan untuk separasi fosfolipid kasar.

## Separasi  fosfolipid  kasar  dari  ekstrak  total  lipid  dengan pelarutan
Total  lipid  yang  diperoleh  dari  proses  ekstraksi  diekstrak dengan  menggunakan  kloroform  (Gambar  2).  Sebanyak  10  g total  lipid  diekstrak  dengan  40  ml  kloroform.  Fraksi  yang  larut kloroform  merupakan  lipid  non  polar  dan  dipisahkan  dengan sentrifugasi pada kecepatan 5000 rpm selama 10 menit. Fraksi yang  tidak  larut  merupakan  lipid  polar  dan  dipisahkan.  Fraksi yang  larut  kemudian  dikeringkan  dengan  menggunakan nitrogen/aerasi dan diekstrak kembali dengan 30 ml kloroform. Setelah itu dilakukan sentrifugasi untuk memisahkan fraksi larut dan tidak larut.
Fraksi  tidak  larut  merupakan  lipid  polar  dan  dicampur dengan  fraksi  tidak  larut  dari  hasil  ekstraksi  pertama. Selanjutnya  fraksi  tidak  larut  kloroform  diekstrak  dengan menggunakan  20  ml  metanol  untuk  melarutkan  fosfolipid/lipid polar. Fraksi larut dan tidak larut dipisahkan dengan sentrifugasi pada  5000  rpm  selama  10  menit.  Fraksi  yang  larut  kemudian dikeringkan  untuk  mengambil  padatan  yang  merupakan fosfolipid.

## Penentuan jenis limbah sawit sumber fosfolipid
Limbah  pengolahan  sawit  berupa  lumpur  sawit  ( sludge ), spent  bleaching  earth ,  dan  serat  sawit  diekstrak  total  lipidnya dengan  menggunakan  metode  Yunoki et  al. (2008)  yang dimodifikasi.  Fosfolipid  dipisahkan  dari  total  lipid  dengan pelarutan  seperti  tercantum  pada  Gambar  2.  Fosfolipid selanjutnya  dilarutkan  dalam  kloroform:metanol  95:5  pada konsentrasi  100  mg/ml.  Sebanyak  10  l  larutan  fosfolipid
dispotkan  pada  plat  TLC  dan  digunakan  larutan  pengembang kloroform:metanol:air (110:25:3 v/v/v) selama 45 menit.
Hasil  elusi  disemprot  dengan  larutan  H 2 SO 4 50%  dan dipanaskan  dalam  oven  suhu  140 C  selama  20  menit. Selanjutnya  dilakukan  kuantifikasi  dengan TLC  scanner dan identifikasi dengan membandingkan dengan fosfolipid standar.

## Fraksinasi fosfolipid
Fosfolipid  yang  diperoleh  dari  proses  separasi  dari  limbah pengolahan  sawit  dengan  kadar  fosfolpid  tertinggi  kemudian difraksinasi  berdasarkan  kelarutannya  dalam  berbagai  pelarut. Pelarut  yang  digunakan  terdiri  dari  etanol  dan  aseton. Fraksinasi  pertama  dilakukan  dengan  menggunakan  etanol. Fraksi larut etanol difraksinasi lebih lanjut dengan menggunakan aseton.
Proses  fraksinasi  dilakukan  sebagai  berikut:  5  g  fosfolipid kasar dilarutkan dalam 20 ml etanol kemudian diagitasi selama 60  menit.  Supernatan  dan  endapan  dipisahkan  dengan sentrifugasi pada 15000 g selama 10 menit. Residu diambil dan merupakan  fraksi  tidak  larut  etanol.  Fraksi  larut  etanol  diambil dengan  cara  menguapkan  etanol  dengan  menyemprotkan  gas nitrogen/udara.
Fraksi  larut  etanol  diambil  sebagian  untuk  dikarakterisasi dan  sebagian  lagi  difraksinasi  lebih  lanjut  dengan  melarutkan dalam  aseton  (1:4  b/v)  dan  diagitasi  selama  60  menit.  Fraksi tidak  larut  aseton  dipisahkan  dari  larutan  dengan  sentrifugasi selama 10 menit pada kecepatan 15000 g .
Fraksi  larut  aseton  diambil  dengan  cara  menguapkan aseton  dengan  gas  nitrogen/udara.  Hasil  fraksinasi  diperoleh empat  fraksi  fosfolipid  yaitu  fraksi  tidak  larut  etanol  ( ethanol insoluble ), fraksi larut etanol ( ethanol soluble ), fraksi larut etanol dan  aseton  ( acetone-ethanol  soluble ),  fraksi  larut  etanol  tidak larut  aseton  ( acetone  insoluble-ethanol  soluble ),  dan  fosfolipid tanpa  fraksinasi  atau  fosfolipid  sawit  kasar.  Fraksi-fraksi tersebut  kemudian  diidentifikasi  jenis-jenis  fosfolipid  dan  asam lemak penyusunnya.

## Identifikasi  dan  kuantifikasi  jenis  fosfolipid  pada  setiap fraksi
Pemisahan  jenis-jenis  fosfolipid  dengan  TLC  dilakukan seperti  pada  sampel  limbah  pengolahan  sawit  (lumpur  sawit, spent  bleaching  earth ,  dan  serat  sawit)  menggunakan  metode Nzai dan Proctor (1998) yang dimodifikasi.
Identifikasi  dilakukan  dengan  membandingkan  dengan standar  murni  fosfatidilkolin,  fosfatidiletanolamin,  fosfatidi- linositol,  fosfatidilgliserol,  asam  fosfatidat,  dan  asam  lemak bebas.  Kuantifikasi  dilakukan  dengan  menggunakan TLC scanner.

## Identifikasi  jenis  asam  lemak  pada  fosfolipid  kasar  dan setiap fraksi fosfolipid
Identifikasi  jenis  asam  lemak  dari  setiap  fraksi  fosfolipid dilakukan  dengan  kromatografi  gas.  Masing-masing  fraksi fosfolipid  dimetilasi  dengan  metode  Park  dan  Goin  (1994). Identifikasi  dilakukan  dengan  membandingkan  dengan  waktu retensi  standar  campuran  asam  lemak  yang  diinjeksikan terpisah. Kuantifikasi dilakukan berdasarkan persentase relatif.
- Separasi dg sentrifugasi 5000 rpm 10 menit Lipid polar/Fosfolipid Lipid netral Lipid nonpolar/ lipid netral Pengeringan (aerasi/N 2 )
Ektraksi metanol 20 ml Sentrifugasi 5000 rpm 10 menit - Pengeringan (aerasi/N 2 )
- Ektraksi kloroform 30 ml
- Sentrifugasi 5000 rpm 10 menit - Ektraksi kloroform 40 ml 10 g total lipid Ekstrak kloroform Fraksi terlarut Fraksi tidak larut Fraksi terlarut Fraksi tidak larut Fraksi tidak larut Fraksi terlarut
Gambar 2. Separasi fosfolipid dari total lipid dengan pelarut
Identifikasi  jenis  asam  lemak  pada  jenis-jenis  fosfolipid pada fosfolipid kasar
Identifikasi  jenis-jenis  asam  lemak  dalam  setiap  jenis fosfolipid  penyusun  fosfolipid  kasar  dilakukan  dengan memisahkan  jenis-jenis  fosfolipid  (fosfatidiletanolamin,  fosfa- tidilkolin,  fosfatidilinositol,  dan  lain-lain)  penyusunnya  dengan menggunakan kromatografi lapis tipis metode Nzai dan Proctor (1998) yang dimodifikasi.
Spot  masing-masing  jenis  fosfolipid  yang  sudah  terpisah kemudian dikerok dari plat TLC  dengan menggunakan metode Christie  (1982)  dan  dimetilasi  dengan  metode  Park  dan  Goin (1994) sebelum diinjeksikan pada kromatografi gas. Kuantifikasi didasarkan pada persentase relatif.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Fosfolipid limbah pengolahan minyak sawit
Pada  tahap  awal  dilakukan  penentuan  kadar  minyak  yang dapat  diekstrak  dari  masing-masing  limbah.  Tabel  1 menunjukkan  bahwa spent  bleaching  earth mengandung minyak  terekstrak  yang  terbanyak.  Jumlah  minyak  yang  dapat diekstrak  dari  serat  sawit  adalah  4,74%.  Choo et  al. (2004) melaporkan  bahwa  jumlah  minyak  yang  dapat  diekstrak  dari serat sawit dengan menggunakan pelarut etanol adalah 5,71%. Pada  penelitian  ini  ekstraksi  minyak  dilakukan  dengan menggunakan kloroform-metanol.
Etanol merupakan pelarut yang mempunyai indeks polaritas 5,2, sedangkan metanol 5,1, dan kloroform 4,1 (Anonim, tanpa tahun).  Hal  ini  berakibat  pada  perbedaan  jumlah  minyak  yang terekstrak.  Diduga  minyak  dalam  dalam  serat  sawit mengandung lipid polar juga sehingga ekstraksi dengan pelarut yang lebih polar menghasilkan ekstrak yang lebih banyak. Pada penelitian  ini,  penggunaan  kombinasi  kloroform  dan  metanol diharapkan dapat mengekstrak lipid polar dan non polar secara silmultan.
Tabel 1. Kadar air dan minyak limbah sawit
Jenis Limbah Kadar air (%) Kadar Minyak (% berat basah) Serat sawit 21,35 4,74 Lumpur sawit 95,85 2,46 Spent bleaching earth 1,45 18,67
Kadar  fosfolipid  tertinggi  terdapat  pada  limbah  serat  sawit sehingga limbah tersebut digunakan sebagai bahan baku untuk ekstraksi fosfolipid (Tabel 2).
Limbah spent bleaching earth walaupun mengandung kadar lemak  yang  tertinggi  tetapi  kadar  fosfolipid  terendah  karena pada  limbah  ini  minyak  yang  teradsorpsi  sudah  mengalami proses  pemucatan  yang  bertujuan  menghilangkan  fosfolipid. Menurut  Choo et  al .,  (2004),  minyak  sawit  kasar  mempunyai kadar  fosfolipid  yang  rendah  (5-130  ppm)  karena  proses pengepresan menurunkan kadar fosfolipid.
Sejumlah  besar  fosfolipid  terdapat  dalam  serat  sawit sebagai  limbah  proses  pengepresan.  Jumlah  serat  sawit sebagai limbah pengolahan minyak sawit adalah 15% dari berat buah tandan segar sawit.
Tabel 2. Kadar fosfolipid limbah pengolahan sawit
Jenis Limbah Sawit Kadar fosfolipid Dalam Total Lipid (ppm) Dalam Limbah (ppm) Serat sawit 215.658,07 10.222,19 Lumpur sawit 81.367,64 2.148,09 Spent bleaching earth 495.458,89 9.250,22
Ekstraksi  fosfolipid  dari  serat  sawit  dengan  menggunakan pelarut  heksana  dan  etanol  95%  yang  dilakukan  oleh  Choo et al .  (2004)  menghasilkan  fosfolipid  masing-masing  sejumlah 1.367 dan 46.800 ppm. Hasil penelitian ini menunjukkan kadar fosfolipid dalam ekstrak total lipid sebesar 215.658,07 ppm, jauh lebih  besar  dibandingkan  hasil  penelitian  Choo et  al .  (2004) tersebut.
Ekstraksi  dengan  heksana  cenderung  menghasilkan  lipid yang  bersifat  non  polar,  sedangkan  fosfolipid  termasuk  ke dalam  lipid  yang  bersifat  polar.  Diduga  kombinasi  kloroform- metanol menghasilkan polaritas  yang tepat untuk mengekstrak fosfolipid.  Nilai  indeks  polaritas  pelarut  untuk  klorofom  dan metanol  berada  di  antara  etanol  dan  heksana.  Penggunaan etanol mungkin bersifat terlalu polar sedangkan heksana terlalu non polar untuk mengekstrak fosfolipid dari serat sawit.
Jenis-jenis  fosfolipid  yang  terdapat  dalam  serat  sawit sebelum  dilakukan  proses  separasi  lipid  netral  dan  lipid  polar (fosfolipid)  adalah  fosfatidilinositol  (PI, phosphatidylinositol ), fosfatidilkolin  (PC, phosphatidylcholine ),  fosfatidiletanolamin (PE, phosphatidylethanolamine ), fosfatidilgliserol (PG, phosphatidylglycerol ),  dan  asam  fosfatidat  (PA, phosphatidyc acid ). Komposisi fosfolipid dan konsentrasi masing-masing jenis fosfolipid dalam total lipid serat sawit dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3.   Komposisi  (%)  dan  kadar  fosfolipid  (ppm)  dalam  total  lipis
serat  sawit  sebelum  separasi  lipid  netral  dan  lipid  polar (fosfolipid) Jenis Limbah Sawit Komposisi (%) Kadar (ppm) Fosfatidilinositol (PI) 11,78 30.019,86 Fosfatidiletanolamin (PE) 14,83 37.084,99 Fosfatidilkolin (PC) 20,26 32.726,73 Fosfatidilgliserol (PG) 24,08 38.895,42 Difosfatidilgliserol (DPG) 29,05 46.911,21
Fosfolipid  merupakan  lipid  polar  karena  mempunyai  gugus fosfat  yang  teresterifikasi  pada  posisi sn -3  dari  kerangka gliserol. Gugus fosfat tersebut berikatan dengan senyawa yang lain.  PE  mengandung  gugus  etanolamin  (-CH 2 CH 2 NH 3+ ),  PC mengandung gugus kolin (-CH 2 CH 2 N + (CH 3 ) 3 ), PG mengandung gliserol (-CH 2 CH(OH)CH 2 (OH)), PI mengandung gugus inositol, PA  mempunyai  gugus  fosfat  yang  tidak  berikatan  dengan senyawa  lain  (Vikjberg et  al., 2006),  dan  DPG  atau  kardiolipin merupakan  dua  molekul  asam  fosfatidat  yang  dihubungkan dengan satu molekul gliserol.
Molekul fosfolipid yang mempunyai gugus terikat fosfat yang bermuatan  (PE  dan  PC)  cenderung  bersifat  lebih  polar dibandingkan yang terikat dengan gugus yang tidak bermuatan. PI  mempunyai  gugus  inositol  yang  mempunyau  banyak  gugus OH  sehingga  bersifat  cenderung  polar.  PG  mempunyai  gugus gliserol yang tidak bermuatan tetapi mempunyai dua gugus OH bebas dan kemungkinan dua rantai asam lemak pada posisi sn -
1  dan sn -2  mendominasi  sehingga  cenderung  bersifat  non polar. Adapun PA mempunyai gugus fosfat yang tidak berikatan dengan gugus lain dan dua rantai asam lemak pada posisi sn -1 dan sn -2 diduga mendominasi sehingga cenderung bersifat non polar.  DPG  mempunyai  empat  rantai  asam  lemak  sehingga bersifat cenderung non polar.
Fosfolipid  penyusun  serat  sawit  hasil  penelitian  ini mengandung  DPG  yang  cenderung  bersifat  non  polar.  Hal  ini berbeda dengan hasil yang diperoleh Choo et al. (2004) bahwa jenis-jenis  fosfolipid  yang  terdapat  dalam  ekstrak  etanol  dari serat sawit terdiri dari PC, PE, PG, dan PA. Choo et al. (2004) melaporkan adanya PA pada fosfolipid serat sawit. Perbedaan komposisi  fosfolipid  serat  sawit  ini  dapat  dipahami  mengingat Choo et al. (2004) menggunakan etanol dalam ekstraksinya.

## Fosfolipid kasar serat sawit
Menurut  Singleton  (1999),  pemisahan  komponen berdasarkan  kelasnya  dapat  dilakukan  dengan  mudah menggunakan  pelarut  selektif  dengan  polaritas  yang  tepat. Ekstraksi  total  lipid  dari  serat  sawit  pertama  kali  dilakukan menggunakan  kloroform-metanol  sehingga  lipid  non  polar  dan polar  terekstrak.  Ekstraksi  dengan  kloroform  dilakukan  untuk menghilangkan  lipid  netral.  Fraksi  tidak  larut  kloroform  yang diduga merupakan lipid polar selanjutnya diektraksi lebih lanjut dengan metanol. Fraksi larut metanol ini yang dianggap sebagai lipid polar atau fosfolipid kasar serat sawit.
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  separasi  fosfolipid dengan  metode  pelarutan  kloroform  untuk  menghilangkan  lipid netral  dan  metanol  untuk  mengekstrak  lipid  polar  berhasil mendapatkan  ekstrak  fosfolipid  dengan  kadar  61,67%  atau 616.700  ppm  (b/b).  Hasil  ini  lebih  besar  dibandingkan  dengan hasil perolehan Choo et al. (2004) yang melakukan pemisahan lipid polar (fosfolipid) dan lipid netral menggunakan kromatografi kolom  dengan  adsorben  Florisil  yang  menghasilkan  fosfolipid 1.367  ppm  dari  ekstrak  heksana  dan  46.800  ppm  dari  ekstrak etanol.
Sebelumnya Palacios dan Wang (2005) melakukan ektraksi fosfolipid  dari  kuning  telur  ayam  dengan  menggunakan  etanol untuk  lesitin  yang  tidak  dihilangkan  minyaknya  ( undeoiled lecithin )  dan  aseton  untuk  ekstraksi  lesitin  yang  dihilangkan minyaknya  ( deoiled lecithin ).  Kemurnian  lesitin  yang  diperoleh pada  fraksi  kaya  fosfatidilkolin  adalah  34,9%  dan  36,4% masing-masing  untuk  kuning  telur  yang  dipanaskan  dan  tanpa pemanasan.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  separasi fosfolipid  dengan  pelarutan  dalam  kloroform  untuk menghilangkan lipid netral dan metanol untuk mengekstrak lipid polar  (fosfolipid)  dapat  menghasilkan  fosfolipid  dengan kemurnian lebih tinggi.
Profil  jenis-jenis  fosfolipid  penyusun  fosfolipid  kasar  serat sawit  dapat  dilihat  pada  Tabel  4.  Dari  Tabel  4  dapat  dilihat bahwa terdeteksi 6 jenis fosfolipid dalam fosfolipid kasar sawit. Asam lemak bebas merupakan komponen yang tidak diinginkan ( impurities )  yang  kadarnya  cukup  tinggi.  Asam  lemak  bebas diduga  larut  dalam  metanol  dan  tidak  hilang  pada  proses pencucian menggunakan kloroform.
Komposisi fosfolipid kasar serat sawit yang diperoleh pada penelitian ini mempunyai sedikit  perbedaan dibandingkan hasil penelitian  Choo et  al. (2004).  Choo et  al. (2004)  mendeteksi
adanya PC 763 ppm, PE 456 ppm, PG 147 ppm dalam ekstrak heksana dan tidak mendeteksi adanya PA, sedangkan di dalam ekstrak  etanol  terdapat  PC  20.886  ppm,  PE  12.486  ppm,  PI 6.077 ppm, dan komponen lain 7.355 ppm (Tabel 4).
Tabel 4. Komposisi fosfolipid penyusun fosfolipid kasar serat sawit
Jenis Fosfolipid Kadar (ppm) Ekstrak Etanol* (ppm) Ekstrak heksana* (ppm) Fosfatidilinositol (PI) 30,360 6,007 Fosfatidilkolin (PC) 60,650 20,886 763 Fosfatidiletanolamin (PE) 98,200 12,486 456 Fosfatidilgliserol (PG) 212,400 147 Asam Fosfatidat (PA) 192,400 Difosfatidilgliserol (DPG) 140,900 Asam Lemak Bebas (ALB) 181,700 Lipid Netral (LN) 73,400 Lain-lain 7,355 *Choo et al. (2004)
Pada penelitian ini, DPG mendominasi dan terdapat PG dan PA.  Campuran  kloroform-metanol  bersifat  lebih  non  polar dibandingkan  etanol  sehingga  DPG,  PG,  dan  PA  terdeteksi. Polaritas  fosfolipid  bersifat  kompleks  tidak  hanya  dilihat  dari jenis-jenis  molekul  yang  terikat  pada  gugus  fosfat  pada sn -3 kerangka gliserol, tetapi juga dari jenis-jenis asam lemak pada posisi sn -1 dan sn -2. Asam lemak yang lebih pendek dan lebih tidak  jenuh  cenderung  bersifat  lebih  polar  dibandingkan  asam lemak  dengan  rantai  lebih  panjang  dan  lebih  jenuh.  Semakin pendek rantai asam lemak, gugus karboksilat (-COOH) semakin mendominasi  sehingga  cenderung  lebih  polar.  Setiap  ikatan rangkap  mempunyai  akumulasi  elektron  yang  dapat menghasilkan  momen  dipol  ( )  negatif  sehingga  cenderung bersifat  polar  (McClements,  1999).  Komposisi  asam  lemak fosfolipid  serat  kasar  sawit  dapat  dilihat  pada  Tabel  5.  Asam lemak  yang  mendominasi  dalam  fosfolipid  kasar  serat  sawit adalah asam palmitat dan oleat. Kadar asam oleat lebih tinggi dari palmitat.
Komposisi asam lemak dalam minyak sawit menurut Choo et  al .  (2004)  adalah  asam  miristat  (1,0-1,5%),  asam  palmitat (41,0-45,0%),  asam  stearat  (3,7-5,1%),  asam  oleat  (38,6- 40,2%),  dan  asam  linoleat  (10,2-11,9%).  Pada  minyak  sawit, asam  palmitat  lebih  tinggi  kadarnya  dibandingkan  asam  oleat. Pada penelitian ini, kadar asam oleat pada fosfolipid kasar serat sawit  lebih  tinggi  dibandingkan  asam  palmitat.  Pada  fosfolipid, asam  lemak  menempati  posisi sn -1  dan sn -2  karena sn -3 ditempati oleh gugus fosfat. Pada trigliserida, asam lemak bisa menempati sn -1, sn -2,  dan sn -3.  Posisi sn -2  pada  trigliserida sawit  ditempati  oleh  asam  tidak  jenuh  oleat  atau  linoleat. Mengingat sn -3  diganti  oleh  gugus  fosfat  yang  biasanya ditempati  asam  lemak  jenuh,  maka  kadar  asam  lemak  tidak jenuh  dalam  fosfolipid  sawit  lebih  tinggi  dibandingkan trigliserida.
Ada perbedaan komposisi asam lemak fosfolipid serat sawit dari  hasil  penelitian  ini  dibandingkan  dengan  hasil  penelitian Choo et  al. (2004).  Semakin  polar  pelarut  yang  digunakan, fosfolipid yang mengandung asam lemak yang lebih tidak jenuh
lebih  mudah  terekstrak  dibandingkan  fosfolipid  yang mengandung  asam  lemak  jenuh  karena  asam  lemak  menjadi cenderung  bersifat  polar.  Hasil  penelitian  ini  (Tabel  5) menunjukkan  bahwa  asam  oleat  merupakan  asam  lemak dominan  (51,63%),  dan  palmitat  merupakan  asam  lemak dengan jumlah kedua terbesar. Asam lemak lainnya ada dalam jumlah  kecil,  akan  tetapi  asam  linoleat  tidak  terdeteksi.  Jika dibandingkan  dengan  fosfolipid  kedelai,  fosfolipid  serat  sawit mengandung  asam  lemak  yang  lebih  jenuh  dibandingkan fosfolipid kedelai. Fosfolipid kedelai mengandung asam palmitat 27,3%,  asam  stearat  1,6%,  asam  oleat  14,7%,  asam  linoleat 52,5%, asam asam linolenat 3,8%, dan asam lemak lain 0,1% (Das  dan  Bhattacharyya,  2006).  Komposisi  asam  lemak  yang lebih jenuh diduga akan berkaitan dengan stabilitas antioksidan yang lebih tinggi (Choo et al ., 2004).
Tabel 5. Komposisi asam lemak penyusun fosfolipid kasar serat sawit
Jenis Asam Lemak Kadar (%) Ekstrak etanol* (%) Ekstrak heksana* (%) Asam kaprilat (C8:0) tidak terdeteksi Asam kaprat (C10:0) 1,45 Asam laurat (C12:0) 3,34 Asam miristat (C14:0) 3,08 Asam palmitat (C16:0) 34,82 33,71 34,58 Asam palmitooleat (C16:1) 0,34 Asam stearat (C18:0) 3,93 2,41 1,03 Asam oleat (C18:1) 51,63 32,91 33,75 Asam linoleat tidak terdeteksi 30,76 30,05 Asam arakhidat (C20:0) 1,30 0,21 0,59 *Choo et al . (2004)
Komposisi  asam  lemak  pada  jenis-jenis  fosfolpid  dalam fosfolipid  kasar  serat  sawit  yang  diekstrak  pada  penelitian  ini dapat  dilihat  pada  Tabel  6.  Untuk  setiap  fraksi  fosfolipid  asam lemak dominan adalah asam palmitat (C16:0) dan oleat (C18:1). Asam  lemak  rantai  sedang  C8:0  dan  C10:0  tidak  terdeteksi untuk  semua  jenis  fosfolipid  karena  pada  fosfolipid  kasar  juga tidak terdeteksi (Tabel 6).
Asam  lemak  yang  mendominasi  untuk  PI,  PE,  PC  adalah asam oleat, sedangkan untuk PG, PA, dan DPG adalah asam palmitat.  Perbedaan  komposisi  asam  lemak  pada  masing- masing jenis fosfolipid dalam fosfolipid kasar serat sawit diduga akan  berpengaruh  terhadap  sifat  fungsional  fosfolipid  seperti kemampuan emulsifikasi.

## Fraksi-fraksi fosfolipid serat sawit
Fraksinasi  ditujukan  untuk  mendapatkan  fraksi-fraksi fosfolipid  dengan  sifat  fungsional  sesuai  dengan  yang diinginkan.  Nieuwenhuysen  dan  Tomas  (2008),  menyatakan bahwa  lesitin  mempunyai  kelarutan  yang  berbeda  sehingga penggunaan  pelarut  alkohol  saja  sebagai  pelarut  pemisah maupun  kombinasi  dengan  kromatografi  umumnya  dapat digunakan  dalam  separasi.  PC  mudah  dan  cepat  larut  dalam alkohol sehingga campuran fosfolipid dalam lesitin kasar kedelai biasa  difraksinasi  menjadi  fraksi  larut  alkohol  dan  fraksi  tidak larut alkohol. Fraksi larut etanol mempunyai rasio PC/PE yang tinggi, sedangkan fraksi yang tidak larut mempunyai rasio yang rendah.  Palacios  dan  Wang  (2005)  menyebutkan  bahwa berbagai  metode  telah  digunakan  untuk  fraksinasi  fosfolipid, yaitu  ekstraksi  etanol,  kristalisasi  pelarut  suhu  rendah  untuk menghilangkan  lipid  netral,  dan  ultrafiltrasi.  Boyd et  al. (1999) menyatakan  bahwa  lesitin  kedelai  komersial  diberi  perlakuan fraksinasi  alkohol  dengan  tujuan  untuk  mengubah  rasio  PC terhadap  PE  dan  sifat  fungsionalnya.  Fraksi-fraksi  fosfolipid pada  penelitian  ini  diperoleh  dari  hasil  fraksinasi  dengan menggunakan  etanol  dilanjutkan  dengan  aseton.  Menurut Palacios  dan  Wang  (2005)  aseton  biasa  digunakan  untuk menghilangkan minyak dari kuning telur.
Proses  fraksinasi  pertama  kali  dilakukan  berdasarkan kelarutan  dalam  etanol  sehingga  diperoleh  fraksi  larut  etanol dan  fraksi  tidak  larut  etanol.  Menurut  Selanjutnya,  fraksi  larut etanol  difraksinasi  lagi  berdasarkan  kelarutan  dalam  aseton, sehingga  diperoleh  fraksi  larut  etanol  larut  aseton,  dan  fraksi larut etanol tidak larut aseton. Eshratabadi (2008), aseton biasa digunakan  untuk  memurnikan  lesitin  karena  fraksi  non  polar seperti  asam  lemak  bebas  dan  trigliserida  larut  dalam  aseton. Fraksi larut etanol diharapkan menghasilkan fraksi dengan rasio PC/PE yang tinggi yang sesuai untuk emulsi minyak dalam air, sedangkan  fraksi  tidak  larut  etanol  menghasilkan  rasio  PC/PE yang  rendah  yang  sesuai  untuk  emulsi  air  dalam  minyak (Colbert, 1998).
Pemisahan  jenis-jenis  fosfolipid  dengan  kromatografi  lapis tipis  untuk  fraksi-fraksi  fosfolipid  yang  diperoleh  dapat  dilihat pada  Gambar  3.  Fosfolipid  kasar  serat  sawit  mempunyai kemurnian  61,67%  yang  diketahui  dari  analisis  kuantitatif menggunakan TLC scanner .
Tabel 6.  Komposisi asam lemak (%) penyusun jenis-jenis fosfolipid pada fosfolipid kasar serat sawit Jenis Asam Lemak PI (%) PC(%) PE(%) PG (%) PA(%) DPG(%) ALB(%) Asam kaprilat (C8:0) td td td td td td td Asam kaprat (C10:0 td td td td td td td Asam laurat (C12:0) td 2,81 0,91 5,77 3,65 1,77 6,92 Asam miristat (C14:0) td 32,00 4,08 12,88 3,77 3,19 5,06 Asam palmitat (C16:0) 28,32 22,57 31,22 32,02 30,25 23,55 25,61 Asam palmitooleat (C16:1) 18,58 8,25 1,49 td 1,96 2,25 td Asam stearat (C18:0) 15,93 12,65 15,75 23,23 15,39 14,40 17,50 Asam oleat (C18:1) 28,32 1,11 46,09 26,10 26,67 53,21 41,18 Asam linoleat (C18:2) 8,85 4,12 0,45 td 13,87 0,13 td Asam arakhidat (C20:0) td 0,29 td td 1,33 1,50 Td Asam behenat (C22:0) td 2,12 td td 3,12 td td Asam lignoserat (C24:0) td 14,09 td
td td td td
Keterangan:  td = tidak terdeteksi, PI = fosfatidilinositol, PC = fosfatidilkolin, PE = fosfatidiletanolamin, PG = fosfatidilgliserol, DPG = difosfatidilgliserol, PA = asam fosfatidat, ALB = asam lemak bebas.
Gambar 3.   Separasi  jenis-jenis  fosfolipid  pada  fraksi  fosfolipid  kasar serat  sawit  menggunakan  kromatografi  lapis  tipis. Keterangan  :A.  Fraksi  larut  etanol,  B.  Fraksi  tidak  larut etanol, C. Fraksi larut aseton-etanol, D. Fraksi tidak larut aseton-larut etanol, E. Fraksi fosfolipid kasar
Kemurnian  tersebut  menunjukkan  bahwa  fraksi  non fosfolipid  yang  terdapat  dalam  fosfolipid  kasar  serat  sawit adalah 38,23% yang terdiri dari trigliserida atau lipid netral dan asam  lemak  bebas.  Penelitian  Hruschka et  al. (2003)  dengan fraksinasi  menggunakan  etanol  konsentrasi  rendah  untuk memisahkan  minyak  dan  lipid  polar  menghasilkan  fraksi
fosfolipid dengan kemurnian 47%. Menurut Palacios dan Wang (2005),  tingkat  kemurnian  fosfolipid  hasil  separasi  total  lipid dengan  pelarut  etanol  dan  aseton  adalah  21,6%.  Hasil penelitian  ini  menunjukkan  kemurnian  fosfolipid  yang  lebih tinggi.
Jenis-jenis  fosfolipid  penyusun  masing-masing  fosfolipid kasar  dan  masing-masing  fraksi  fosfolipid  serat  sawit  dapat dilihat pada Tabel 7. Dibandingkan fosfolipid kasar serat sawit, fraksi  larut  etanol  mengalami  peningkatan  kadar  PI,  PC,  PG, dan  PA,  dan  mengalami  penurunan  PE  dan  DPG.  Proses fraksinasi  dengan  etanol  menghasilkan  peningkatan  rasio  PC terhadap PE dari 1,42 pada fosfolipid kasar serat sawit menjadi 5,75 pada fraksi larut etanol.
Menurut  Wu  dan  Wang  (2004),  ekstraksi  dengan  etanol menghasilkan  fraksi  kaya  PC.  Akan  tetapi  pada  penelitian  ini, pengayaan PC tidak terlalu tinggi (1,56 kali) karena proporsi PA meningkat  tajam.  Fosfolipid  dari  sumber  lain  seperti  whey, kuning  telur,  dan  kedelai  hampir  tidak  mengandung  PA sehingga fraksinasi dengan etanol menghasilkan fraksi kaya PC dengan tingkat pengayaan yang tinggi (Wu dan Wang, 2004).
Fraksinasi  dengan  alkohol  biasa  digunakan  paling  akhir untuk  meningkatkan  kemurnian  fosfolipid.  Fraksinasi  alkohol menghasilkan fraksi tidak larut alkohol dengam kadar PE yang meningkat. Akan tetapi, rasio PC terhadap PE tidak mengalami peningkatan  pada  fraksi  larut  alkohol  (Hayes,  2004).  Dari penelitian  ini  dapat  dilihat  bahwa  fraksi  tidak  larut  etanol mengalami  peningkatan  kadar  PE  yaitu  dari  8,60%  pada fosfolipid kasar menjadi 12,13% (Tabel 7).
Tabel 7.   Komponen penyusun (%) dan kemurnian (%) fosfolipid kasar dan fraksi fosfolipid serat sawit
Jenis Fosfolipid Komponen Penyusun (%) Fosfolipid Kasar Fraksi Larut Etanol Fraksi Tidak Larut Etanol Fraksi Larut etanol Larut Aseton Tidak Larut Aseton Asam Lemak Bebas (ALB) 21,79 11,28 7,75 23,30 12,11 Difosfatidilgliserol (DPG) 18,88 7,99 7,38 20,47 18,18 Asam fosfatidat (PA) 8,60 20,36 7,44 10,42 8,93 Fosfatidilgliserol (PG) 21,19 24,79 14,67 20,40 21,27 Fosfatidiletanolamin (PE) 8,60 3,31 12,13 7,65 11,03 Fosfatidilkolin (PC) 12,17 19,03 23,65 11,58 16,31 Fosfatidilinositol (PI) 8,76 13,23 33,78 6,19 12,17 Kemurnian (%) 61,67 65,78 71,44 67,06 68,49 Tabel 8.   Profil asam lemak (%) fosfolipid kasar dan fraksi fosfolipid serat sawit Jenis Asam Lemak Profil Asam Lemak (%) Fosfolipid Kasar Fraksi Larut Etanol Fraksi Tidak Larut Etanol Fraksi Larut Etanol Larut Aseton Tidak Larut Aseton Kaproat (C6:0) 0,10 0,97 td 7,38 td Kaprilat (C8:0) 1,45 0,30 td 33,61 td Kaprat (C10:0) 3,34 1,24 td 0,15 td Miristat (C14:0) 3,08 7,60 16,30 7,09 td Palmitat (C16:0) 34,82 21,64 37,23 2,26 16,11 Palmitooleat (C16:1) 0,34 7,63 12,72 4,24 3,74 Stearat (C18:0) 3,93 11,48 14,68 9,40 19,94 Oleat (C18:1) 51,63 48,90 19,08 34,72 38,46 Arakhidat (C20:0) 1,30 0,23 td 1,15 21,75 Total asam lemak jenuh 48,03 43,47 68,20 61,04 57,80 Total asam lemak tidak jenuh 51,97 56,53 31,80 38,96 42,20
Lipid netral ALB DPG PA PG
PE PC PI
A B C E
D
Tabel 7 terlihat bahwa fraksi tidak larut etanol mengandung PE dan  PI  yang  meningkat  dibandingkan  fosfolipid  kasar.  Akan tetapi, kadar PC juga mengalami peningkatan karena kadar PA, PG,  DPG,  dan  ALB  menurun.  Dilihat  dari  polaritas,  PA,  PG, DPG,  dan  ALB  lebih  non  polar  dibandingkan  PC  karena  PA tidak mempunyai gugus yang terikat pada gugus fosfat pada sn - 3, PG mempunyai gugus gliserol yang terikat gugus fosfat pada sn -3,  DPG  mempunyai  empat  rantai  asam  lemak  dalam strukturnya,  dan  ALB  tidak  mempunyai  gugus  fosfat  yang bersifat  polar.  Akibatnya,  PG,  DPG,  dan  ALB  cenderung  larut dalam etanol.
Fraksinasi  dengan  etanol  merupakan  metode  yang  biasa dilakukan untuk mendapatkan lesitin dengan kemurnian PC 80- 100%, dengan endapan kaya dengan PE dan PI (Hayes, 2004). Fraksi  larut  etanol  mempunyai  kemurnian  yang  lebih  rendah dibandingkan fraksi tidak larut etanol. Hal ini disebabkan asam lemak bebas sebagai pengotor lebih larut dalam etanol.
Fraksinasi  dengan  aseton  biasa  dilakukan  untuk menghilangkan  komponen  non  polar  dari  fosfolipid  (Eshra- tabadi,  2008).  Menurut  Colbert  (1998),  ketidaklarutan  dalam aseton  merupakan  parameter  yang  menunjukkan  kemurnian lesitin.  Dari  Tabel  7  terlihat  bahwa  fosfolipid  yang  lebih  non polar (DPG dan PA) mengalami penurunan jumlah pada fraksi tidak  larut  aseton  dibandingkan  fraksi  larut  aseton,  demikian pula untuk ALB yang merupakan pengotor pada fosfolipid.
Dari  Tabel  8  terlihat  bahwa  fraksi  fosfolipid  yang  berbeda mempunyai  komposisi  asam  lemak  yang  berbeda  pula.  Faktor yang mempengaruhi selain kelarutan jeni-jenis fosfolipid dalam pelarut,  juga  kelarutan  jenis  asam  lemak  penyusun  fosfolipid. Asam lemak yang mempunyai ikatan rangkap cenderung lebih polar  dibandingkan  asam  lemak  jenuh  sehingga  lebih  mudah larut dalam etanol.
Fraksi  larut  etanol  mempunyai  kadar  asam  lemak  tidak jenuh  (oleat  dan  palmitooleat)  yang  lebih  tinggi  dibandingkan fraksi tidak larut etanol. Aseton merupakan pelarut yang bersifat semipolar  sehingga  pelarutan  dengan  aseton  menghasilkan kadar  asam  lemak  jenuh  dan  asam  lemak  tidak  jenuh  yang hampir  sama  antara  fraksi  larut  aseton  dan  fraksi  tidak  larut aseton.

## KESIMPULAN
Kadar  fosfolipid  tertinggi  terdapat  pada  limbah  serat  sawit yaitu sejumlah 10.222,19 ppm. Ekstraksi dan separ a si fosfolipid dari  serat  sawit  menghasilkan  fosfolipid  dengan  kemurnian 61,67%.  Tahapan  ekstraksi  dan  separasi  yang  dilakukan meliputi  penghilangan  lipid  non  polar  dengan  kloroform dilanjutkan  dengan  ekstraksi  fosfolipid  dengan  metanol.  Jenis- jenis fosfolipid kasar serat sawit didominasi oleh fosfolipid yang cenderung bersifat non polar (PA, PG, DPG). Fraksinasi dengan etanol  dilanjutkan  dengan  aseton  menghasilkan  fraksi-fraksi fosfolipid  dengan  kemurnian  yang  lebih  tinggi  dibandingkan fosfolipid kasar.
Fraksi  larut  etanol  menghasilkan  kompsisi  fosfolipid  yang didominasi oleh fosfolipid yang bersifat non polar dengan asam lemak  yang  lebih  tidak  jenuh.  Fraksinasi  lebih  lanjut  dengan aseton  menghasilkan  fraksi  larut  aseton  yang  mempunyai
komposisi fosfolipid yang didominasi fosfolipid yang cenderung non polar serta fraksi tidak larut aseton yang cenderung bersifat polar dengan distribusi asam lemak yang hampir sama.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan  pada  Kementerian Negara Riset dan Teknologi atas dana penelitian Insentif Riset Dasar  No.  Kontrak  499/J10.2/PL/2009  tertanggal  30  Januari 2009.

## DAFTAR PUSTAKA
Anonim.  2008.  Produksi  Sawit  Indonesia  Lampaui  Malaysia. http://kompas.coead/xml/2008/02/12/22240973/produksi.sa wit.indonesia.lampaui.malaysia.  Tanggal  akses  19  agustus 2008 Jam 14.26.
Anonim. Tanpa tahun. Solvent miscibility table. http://www.erowid.org/archive/rhodium/pdf/solvent.miscibility .pdf. Tanggal akses 27 Februari 2011, pukul 16.28 WIB.
AOAC.  1990.  Official  Methods  of  Analysis.  15 th ed.  Vol  2. Virginia, USA.
Boyd  LC,  Drye  NC,  Hansen  AP.  1999.  Isolation  and characterization  of  whey  phospholipids.  J.  Dairy  Sci.  82: 2550–2557.
Christie  WW.  1982.  Lipid  Analysis.  2 nd ed  Pergamon  Press,
USA.
Choo  YM,  Bong  SC,  Ma  AN,  Chuah  CH.  2004.  Phospholipids from  palm-pressed  fiber.  J.  Amer.  Oil  Chem.  Soc.  81(5): 471-475.
Colbert LB. 1998. Lecithins tailored to your emulsification needs. INFORM 43(9): 686-688.
Das  S,  Bhattacharyya  DK.  2006.  Preparation  and  surface- active properties of hydroxy and epoxy fatty acid-containing soy  phospholipids.  J.  Amer.  Oil  Chem  Soc.  83(12):  1015- 1020.
Eshratabadi P. 2008. Effect of different parameters on removal and  quality  of  soybean  lecithin.  Research  Journal  of Biological Sciences 3(8): 874-879.
Goh  SH,  Khor  HT,  Gee  PT.  1982.  Phospholipids  in  palm  oil ( Elaeis guineensis ). J. Amer. Oil Chem. Soc. 59:296-299. Hayes  DG.  2004.  Enzyme-catalyzed  modification  of  oilseed materials  to  produce  eco-friendly  products.  J.  of  Amer.  Oil Chem. Soc. 81: 1077-1103
Hruschka SM, Kirchner S, Rassenhovel J, Witt W. 2003. Method for the Fractionation of Oil and Polar Lipid Containing Native Raw Material. U.S. Paten 20,030,054,084.
Mirwandhono  E,  Siregar  Z.  2004.  Pemanfaatan  Hidrolisat Tepung  Kepala  Udang  dan  Limbah  Kelapa  Sawit  yang Difermentasi  dengan Aspergillus niger,  Rizhopus oligosporus dan Thricoderma viridae dalam Ransum Ayam Pedaging. USU digital Library. Sumatera Utara.
Morad  NA,  Aziz  MKA,  Rohani.  2006.  Process  design  in degumming  and  bleaching  of  palm  oil.  Centre  of  Lipid Engineering  and  Applied  Research.  Universiti  Teknologi Malaysia.
McClements  DJ. 1999.  Food  Emulsions:  Principles,  Practice and Technique. CRC Press, USA
Nieuwenhuyzen  W,  Tomás  MC.  2008.  Update  on  vegetable lecithin  and  phospholipid  technologies.  Eur.  J.  Lipid  Sci. Technol. 110: 472–486.
Nzai  JM,  Proctor  A.  1998.  Phospholipids  determination  in vegetable  oil  by  thin  layer  chromatography  and  imaging densitometry. Food Chem. 63: 571-576.
Palacios  LE,  Wang  T.  2005. Extraction  of  egg-yolk  lecithin. J. Amer. Oil Chem. Soc. 82(8): 565-569.
Park PW and Goins RW. 1994. In situ preparation of fatty acids methyl ester for analysis of fatty acids composition in foods. J. Food Sci. 59: 1262-1266.
Singleton JA, Ruan M, Sanford JH, Haney CA, Stikeleather LF. 1999.  Separation  and  characterization  of  peanut phospholipids  molecular  species  using  high  performance liquid  chromatography  and  fast  bombardment  mass spectrometry. J. Amer. Oil Chem. Soc. 76: 49-56.
Singleton JA, Stikeleather LF. 1999. A solvent extractor system for  the  rapid  extraction  of  lipids  and  trace  bioactive micronutrients  in  oilseeds.  J.  Amer.  Oil  Chem.  Soc  76:
1461–1466. Utomo BN, Wijaya E. 2004. Limbah Padat Pengolahan Minyak Sawit  sebagai  Sumber  Nutrisi  Ternak  Ruminansia.  Balai Pengkajian Teknologi Pertanian Palangkaraya. Palangkaraya.
Vikbjerg  AF,  Rusig  JY,  Jonsson  G,  Mu  H,  Xu  X.  2006.
Comparative  evaluation  of  the  emulsifying  properties  of phosphatidylcholine  after  enzymatic  acyl  modification.  J. Agric. Food Chem. 54: 3310-3316
Vikbjerg  AF.  2006.  Enzyme  Catalyzed  Production  of Phospholipids  with  Modified  Fatty  Acid  Profile.PhD  Thesis. BioCentrum-DTU Technical University of Denmark.
Wu  Y,  Wang  T.  2004.  Fractionation  of  crude  soybean  lecithin with  aqueous  ethanol.  J.  Amer.  Oil  Chem.  Soc.  81:  697– 704.
Yunoki  K,  Kukino  O,  Nadachi  Y,  Fujino  T,  Ohnishi  M.  2008.
Separation  and  determination  of  functional  complex  lipids from chicken skin. J. Amer. Oil Chem. Soc. 85: 427-433.