KARAKTER FENOTIP TANAMAN KEDELAI ( Glycine max (L.) Merr)

## HASIL MUTASI GENETIK DENGAN EKSTRAK ETANOLIK DAUN
TAPAK DARA ( Catharanthus roseus (L.) D. Don)
PHENOTYPE CHARACTER OF SOYBEAN PLANT (Glycine max (L.) Merr) GENETIC MUTATION RESULTS WITH ETANOLIC EXTRACT TAPAK
DARA LEAF (Catharanthus roseus (L.) D. Don)
Eni Kusnuriyanti, Safitri Fatikasari, Intan Fitriasari, Muh. Shofi 1 Info Artikel Abstrak Sejarah Artikel: Diterima: 02 November 2017 Disetujui 15 Desember 2017 Dipublikasikan 16 Desember 2017
Latar belakang: Kedelai ( Glycine max (L.) Merr) merupakan salah satu komoditas pangan  penting  selain  padi  dan  jagung.  Namun  Indonesia  masih  belum  mampu mencukupi  kebutuhan  kedelai  nasionalsehingga  terus  bergantung  pada  impor kedelai.  Permasalahan  ini  dapat  diatasi  dengan  meningkatkan  kualitasdan produktivitas varietas kedelai unggul yang sudah ada melalui teknik poliploidisasi dengan  mutagen  alami  yaitu  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara. Tujuan: Untuk mengetahui  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  terhadap  fenotip  tanaman kedelai. Metode: Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimen  dengan Rancangan  Acak  Kelompok  dengan  konsentrasi  ekstrak  etanolik  tapak  dara  0%, 0,01%,  0,05%,  dan  0,1%  dengan  lama  perendaman  6  jam.  Setiap  perlakuan diulang  sebanyak  3  kali.parameter  yang  diamati  yaitu  jumlah  kromosom  dan karakter fenotipe.Data dianalisis menggunakan analisis sidik ragam dan uji DMRT dengan taraf signifikansi 5%. Hasil: Ekstrak etanolik daun tapak dara berpengaruh pada  jumlah  kromosom  dan  fenotip  tanaman  kedelai  varietas  Anjasmoro. Konsentrasi yang paling untuk menginduksi ploidisasi yaitu 0,1 %. Simpulan dan saran: Konsentrsi  etanolik  daun  tapak  dara  berpengaruh  pada  jumlah  kromosom dan  fenotip  tanaman  kedelai  varietas  Anjasmoro.Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  untuk  mengetahui  konsentrasi  senyawa  vinkristin  dan  vinblastin  dalam ekstrak etanolik daun tapak dara serta pemurnian ekstrak etanolik daun tapak dara untuk mendapatkan senyawa vinkristin dan vinblastin murni.
Kata Kunci:
Kedelai, poliploidisasi, ekstrak etanolik daun tapak dara, fenotip

## Keywords:
Soybean,
polyploidization, ethanolic extract of tapak dara leaf, phenotype

## Abstract
Background: Soybean  (Glycine  max  (L.)  Merr)  is  one  of  the  important  food commodities besides  rice and corn. However, Indonesia  is  still unable to  meet the national  soybean demand, so it continues to  rely on soybean imports. This problem  can  be  solved  by  improving  the  quality  and  productivity  of  existing superior  soybean  varieties  through  polyploidization  technique  with  natural mutagen  that  is  ethanolic  extract  of  tapak  dara  leaf. Objectives :To  know  the ethanolic extract of tapak dara leaves against soybean plant phenotype. Methods: This  research  is  an  experimental  research  with Randomized  Block  Design  with  ethanolic  extract  concentration  of  0%,  0,01%, 0,05% and 0,1% with 6 hours immersion time. Each treatment was repeated 3 times.  Parameters  observed  were  chromosome  number  and  phenotype character. Data were analyzed using variance analysis (F test) and DMRT test with significance level of 5% . Results: The ethanolic extract of tapak dara leaves influenced  on  the  number  of  chromosomes  and  phenotypes  of  Anjasmoro varieties of soybean crops. The most concentration to induce polyploidization is 0.1%. Conclusions  and  suggestions: The  ethanolic  concentration  of  tapak  dara leaves influences on the number of chromosomes and phenotypes of Anjasmoro varieties  of  soybean  crops.  Further  research  is  needed  to  find  out  the concentration  of  vincristine  and  vinblastin  compounds  in  ethanolic  extract  of tapak dara leaf as well as purification of ethanolic extract of tapak dara leaves to obtain pure vinristin and vinblastin compounds.
Eni Kusnuriyanti | Karakter Fenotip Tanaman Kedelai ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 2 Tahun 2017

## PENDAHULUAN
Tanaman  kedelai  ( Glycine  max (L.)  Merr)  merupakan  salah  satu  komoditas  pangan strategis  selain  padi  dan  jagung.  Kebutuhan  kedelai  dalam  negeri  terus  meningkat  sejalan peningkatanjumlahpenduduk dan berkembangnya industripangan berbahanbaku kedelai,sepertiindustritahu  tempe,  susukedelai,  industrikripik  tempe(Murtiati,  Anwar,  and Sutrisno 2010). Produk ini banyak dikonsumsi oleh sebagian besar masyarakat Indonesia. Rata- rata  kebutuhan  kedelai  di  Indonesia  per  tahun  yaitu  sekitar  2,2  juta  ton.  Ironisnya  pemenuhan kebutuhan  kedelai  sebanyak  67,99%  harus  diimpor  dari  luar  negeri.  Hal  ini  terjadi  karena produksi  dalam  negeri  tidak  mampu  mencukupi  permintaan  masyarakat  akan  biji kedelai(Riniarsi 2016).
Salah satu usaha pemuliaan tanaman untuk menghasilkan tanaman kedelai unggul yaitu menggunakan  teknik  poliploidisasi  dengan  zat  mutagenik.  Salah  satu  agen  mutagenik  yaitu vinca alkaloids dari tanaman tapak dara ( Catharanthus roseus (L.) D. Don) mempunyai potensi yang  besar  untuk  dijadikan  sebagai  alternatif  pengganti  kolkisin  dalam  menggandakan kromosom  karena  tanaman  tapak  dara  ini  hidup  sepanjang  tahun  di  daerah  tropis  dan  tumbuh subur di Indonesia.
Data  ilmiah  yang  tersedia  tentang  keberhasilan  pemberian  ekstrak  tapak  dara  dalam poliploidisasi  tanaman  baru  sebatas  pada  bawang  merah  yaitu    ekstrak  tapak  dara  mampu menginduksi  poliploidisasi  bawang  merah  diploid  (2n=16)  menjadi  autotetraploid  (4n=32). Induksi  poliploidisasi  bawang  merah  dengan  ekstrak  etanolik  daun  tapak  daraefektif  pada konsentrasi  0,1%  dengan  perendaman  6,  12,  18,  dan  24  jam(Listiawan et  al .  2009).  Ekstrak etanolik  daun  tapak  dara  ( Catharanthus  roseus (L.)  G.  Don.)  memiliki  potensi  untuk melipatgandakan  kromosom Eucalyptus  pellita F.  Muell(Daryono,  Koeswardani,  and  Sunarti 2012).Kemudian dari hasil penelitian lainnya ekstrak etanolik daun tapak dara pada konsentrasi 0,05%  dengan  lama  perendaman  8  jam  menghasilkan  konsentrasi  optimal  yang  dapat menginduksi poliploidisasi pada tanaman melon kultivar Melodi Gama-1(Indraningsih 2008).
Kedelai  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  kedelai  varietas  anjasmoro. Tanaman tersebut merupakan varietas kedelai unggul berbiji besar dan tahan rebah di Indonesia yang  dilepaspada  tahun  2001  oleh  Balai  Penelitian  Tanaman  Aneka  Kacang  dan  Umbi Kendalpayak  Malang(Suhartina  2005).  Biji  kedelai  Anjasmoro  yang  memiliki  berat  14,8-15,3 g/100  bijiini  sering  digunakan  oleh  produsen  tempe  di  Indonesia(Nofitahesti  and  Daryono 2016). Berdasarkan hal tersebut, kedelai Anjasmorosangat berpotensi untuk diinduksi poliploid dengan ekstrak etanolik daun tapak yang bertujuan untuk meningkatkanproduktivitas kedelai.
Berdasarkan latar belakang tersebut, kedelai merupakan tanaman budidaya memerlukan perhatian  khusus.  Untuk  mendapatkan  hasil  panen  yang  maksimal  pada  penanaman  kedelai, maka  perlu  adanya  perbaikan  varietas  unggul.  Tujuan  penelitian  ini  yaitu  untuk  mengetahui ekstrak etanolik daun tapak dara terhadap fenotip tanaman kedelai.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  eksperimen  dengan Rancangan  Acak Kelompokdengan konsentrasi ekstrak etanolik tapak dara 0%, 0,01%, 0,05%, dan 0,1% dengan lama perendaman 6 jam. Setiap perlakuan diulang sebanyak 3 kali.
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  biji  kacang  kedelai  varietas anjasmoro  yang  diperoleh  dari  Balai  Penelitian  Tanaman  Aneka  Kacang  dan  Umbi
Eni Kusnuriyanti | Karakter Fenotip Tanaman Kedelai ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 2 Tahun 2017
Kendalpayak  Malang  sebanyak  4  biji  setiap  perlakuan.  Ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara diperoleh dari ekstrak pekat yang diencerkan dengan akuades sesuai dengan konsentrasi.

## Pemberian Perlakuan Ekstrak Etanolik Daun Tapak Dara
Biji  kedelai  Anjasmoro  direndam  dalam  larutan  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara konsentrasi 0%, 0,01%, 0,05%, dan 0,1% dengan lama perendaman 12 jam.

## Penanaman
Penanaman  biji  kedelai  dilakukan  di greenhouse Dinas  Pertanian  Kabupaten  Kediri. Biji kedelai perlakuan yang sudah direndam dalam ekstrak etanolik daun tapak dara, kemudian ditanam  di  polybag  dengan  pupuk  kandang  dan  sekam  dengan  perbandingan  2:1.  Media  yang sudah  dicampur  dimasukkan  ke  dalam  polibag  yang  berukuran  40  x  50  cm  sebanyak  1,5  kg. Selanjutnya, dilakukan pengaturan polibag di lahan dengan jarak antar polibag 10 cm.

## Pemeliharaan
Pemeliharaan tanaman kedelai dilakukan dengan cara menyiram secara teratur dua hari satu  kali,pemberian  pupuk  NPK,  penanggulangan  hama  tanaman  dengan  pestisida, sertapenyiangan gulma.

## Pemanenan
Tanaman  kedelai  mulai  dipanen  apabila  polong  sudah  berubah  warna  kecoklatan. Carapanen  yang  digunakan  yaitu  dengan  memotong  batang  tanaman  kedelai  sedekat  mungkin denganpermukaan  tanah  menggunakan  sabit  bergerigi  tajam.  Karakter  fenotip  kedelai  yang diamati  adalahtinggi  tanaman  pada  akhir  pertumbuhan,  jumlah  daun,  jumlah  polong  per tanaman, jumlah bunga, dan jumlah biji dalam setiap polong.

## Pengamatan Sitologi
Pengamatan  kromosom  yaitu  dengan  mengambil  ujung  akar  kurang  lebih  ±  1  cm  dari ujung  akar,  lalu  direndam  dalam  larutan  HCl  1N  selama  20  menit.  Setelah  perendaman  dalam HCl 1N, akar kemudian diangkat dan ditiriskan, lalu diletakkan diatas kaca arloji atau palet dan ditetesi aceto-orcein 2% dan dibiarkan selama 15 – 20 menit. Ujung akar lalu diletakkan di atas kaca objek dan dipotong 1 – 2 mm dari ujung akar. Aceto-orcein diteteskan sebanyak 2 tetes di atas akar, lalu ditutup dengan gelas penutup. Preparat yang sudah jadi dilewatkan di api bunsen sebanyak  2  –  3  kali,  baru  kemudian  diketuk  menggunakan  ujung  pensil  berpenghapus. Selanjutnya  gelas  penutup  ditekan  halus  dengan  jempol  dan  bagian  pinggir  direkat  dengan  cat kuku tak berwarna dan siap diamati di bawah mikroskop. Setelah terlihat penyebaran kromosom dilakukan  penghitungan  jumlah  kromosom  dan  dibuat  dokumentasinya.  Sampel  yang  diamati jumlah kromosomnya adalah sebanyak 3 sampel per perlakuan.

## TeknikAnalisis Data
Variabel  yang  diamati  berupa  karakter  pertumbuhan  dan  jumlah  kromosom  pada  tiap perlakuan.  Data  yang  bersifat  kuantitatif  kemudian  dianalisis  secara  statistik  menggunakan analisis sidik ragam (uji F) dengan taraf signifikansi 5%. Bila F hitung lebih besar dari pada F tabel  dilanjutkan  dengan  uji Duncan’s  Multiple  Range  Test (DMRT)  taraf  signifikansi  5%,  uji ini digunakan untuk menentukan perlakuan yang optimal.
Eni Kusnuriyanti | Karakter Fenotip Tanaman Kedelai ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 2 Tahun 2017

## HASIL PENELITIAN
Berdasarkan  hasil uji perlakuan  ekstrak etanolik daun  tapak  dara terhadap biji kedelai varietas  Anjasmoro  dapat  diketahui  bahwa  konsentrasi  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  tidak berpengaruh  nyata  pada  jumlah  kromosom  (tabel  1).  Konsentrasi  ekstrak  etanolik  daun  tapak dara  berpengaruh  pada  persentase  biji  yang  berkecambah.  Hal  tersebut  dibuktikan  dengan semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara,  jumlah  biji  yang  berkecambah semakin menurun (tabel 1).
Tabel  1.  Jumlah  Kromosom  dan  Persentase  Biji  Kedelai  yang  Berkecambah  Setelah
Diberi Perlakuan Ekstrak Etanolik Daun Tapak Dara Konsentrasi (%) Jumlah Kromosom Persentase Biji yang Berkecambah 0 49 100 b 0,01 43 83 a 0,05 78 75 a 0,1 64 67 a
Kerangan:  Angka  yang  diikuti  oleh  huruf  yang  berbeda  pada  kolom  yang  sama  menunjukkan
berpengaruh nyata (P>0,05) pada uji DMRT taraf 5%, n=3
Gambar 1 a) Perbandingan Daun dan Polong Kedelai dan b) Perbandingan Biji Setelah Panen
Tabel  2.  Karakter  Fenotip  Biji  Kedelai  yang  Berkecambah  Setelah  Diberi  Perlakuan Ekstrak Etanolik Daun Tapak Dara
Karakter Fenotip Konsentrasi Ekstrak Etanolik Daun Tapak Dara (%) 0 0.01 0.05 0.1 Tinggi tanaman (cm) 81,3 a 90.3 a 92 b 99,6 b Jumlah daun (helai) 18 b 20 b 19 b 11,0 a Jumlah bunga/tanaman (buah) 10,0 a 11, 0 a 15 b 16 b Jumlah polong/tanaman (buah) 9 10 9 11 Jumlah biji/tanaman (buah) 24 27 27 30
Keterangan: Angka yang diikuti oleh huruf yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan berpengaruh nyata (P>0,05) pada uji DMRT taraf 5%, n=3
a b
Eni Kusnuriyanti | Karakter Fenotip Tanaman Kedelai ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 2 Tahun 2017
Gambar  1  dan  Tabel  2  di  atas  menunjukkan  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  sangat berpengaruh pada tinggi tanaman, jumlah daun, dan jumlah bunga tetapi tidak berpengaruh pada jumlah  polong  dan  jumlah  biji  kacang  kedelai  setelah  diberi  perlakuan.  Berdasarkan  tabel tersebut  diketahui  bahwa  konsentrasi  yang  memberi  efek  nyata  pada  karakter  fenotip  tanaman kedelai setelah diberi perlakuan  ekstraketanolik daun tapak dara yaitu konsentrasi 0, 1 %.

## PEMBAHASAN
Tapak  dara  atau  yang  dikenal  dengan  nama  ilmiah Catharanthus  roseus (L.)  G.  Don. merupakan tanaman semak tahunan yang banyak dibudidayakan sebagai tanaman hias dan obat. Daun tapak dara diidentifikasi mengandung  sebanyak 130 bahan bioaktif yang dikenal dengan nama  Terpenoid  Indole  Alkaloids  atau  disingkat  dengan  TIAs.  Beberapa  dari  bahan  ini  telah diketahui  dapat  digunakan  sebagai  bahan  baku  obat-obatan  seperti  bahan  aktif  yang  disebut catharantine, vinblastine, vincristine, vindoline dan Catharoseumine. Vinblastine dan vincristine telah  diketahui  dapat  digunakan  sebagai  obat  kanker  yang  diekstrak  dari  daun  tanaman  tapak dara yang mengandung alkaloid bisindol(Aslam et al. 2010; Chung et al. 2011; Man et al. 2012; Verma et al. 2012; Syamsiah, Sulyo, and Yusmiati 2013; Mardianti 2014). Kandungan tersebut ternyata  juga  dapat  digunakan  sebagai  mutagen  alami  penganti  kolkisin  (Daryono, Koeswardani, and Sunarti 2012).
Berdasarkan hasil penelitian bahwa ekstrak etanolik daun  tapak dara tidak berpengaruh pada  jumlah  kromosom.  Namun  jumlah  kromosom  pada  konsentrasi  0,1  %  memiliki  jumlah kromosom  paling  banyak  bila  dibandingkan  dengan  yang  lainnya.  Jumlah  kromosom  pada kedelai  normal  yaitu  diploid  (2n=40)  (Shi et  al. 1996).  Berdasarkan  tabel  1  diketahui  bahwa tanaman  kedelai  memilki  64  buah  (1,5  X  dari  normal).  Adanya  hal  tersebut  dapat  dikatakan bahwa tanaman kedelai sudah mengalami peningkatkan jumlah kromosom setelah diberi ekstrak etanolik  daun  tapak  dara  walaupun  tidak  signifikan.  Kandungan  vinkristin  dan  vinblastin padaekstrak  tapak  dara  memacu  pembentukankelompokan  parakristalin  dari  tubulin  sel- selbawang  merah(Listiawan et  al. 2009).Pembentukan  kelompokan  parakristalindari  tubulin, maka  terjadi  depolimerisasimikrotubulus.  Depolimerisasi  mikrotubulusmenyebabkan  benang spindel tidak terbentuk  sehingga kromosom tidak dapat memisah  saatanafase.interfase terdapat faseS  dimana  terjadi  replikasi  DNA,  kemudian  saatprofase  dalam  mitosis  terjadi  duplikasi kromosom.Kromosom  yang  telah  melipat  ganda  tersebut  tidak  dapat  memisah  saat  anafase akibat  tidak  terbentuknya  benang  spindel.  Oleh  sebab  itu  kromosom dari  kedelai  mengamlami pengandaan.
Perlakuan  dengan  perendaman  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  sangat  berpengaruh pada  perkecambahan  biji  kedelai.  Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara tingkat  perkecambahan  biji  semakin  menurun.  Sebab  adanya  ekstrak  apat  menyebabkan toksisitas pada sel-sel tanaman yangberujung pada kerusakan dan kematian sel. Sehingga proses perkecambahan akan terganggu, akan tetapi bila konsentrasi tersebut tepat maka dapat memicu terjadinya perkecambahan.
Pada  karakter  fenotip  tinggi  tanaman  dan  jumlah  daun  yang  diukur  setelah  tanaman mencapai  keadaan  paling  maksimal  (sudah  berbuah),  diketahui  bahwa  kedelai  varietas Anjasmoro perlakuan baik padakonsentrasi  kolkisin 0,1% memiliki rerata tinggi tanaman yang lebih  tinggi  (99,6  cm)  dan  jumlah  daun  pada  konsentrasi  0,01  %  (20  helai)  jika  dibandingkan dengan  kedelai  varietas  Anjasmoro  kontrol  maupun  konsentrasi  yang  lainnya.  Hal  tersebut sesuai dengan penelitian yang sudah dilakukan bahwa ekstrak etanolik daun tapak dara mampu
Eni Kusnuriyanti | Karakter Fenotip Tanaman Kedelai ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 2 Tahun 2017
meningkatkan  ploidisasi  yang  menyebabkan  meningkatnya  tinggi  tanaman  melon  (Mardianti 2014).  Adanya  penambahan  jumlah  kromosom  tersebut  menyebabkan  ukuran  sel bertambahbesar  dan  berakibat  pada  peningkatan  ukuran  organ  vegetatif  seperti  akar,  batang, daun,  bunga,  dan  buah(Burns  1972).  Hal  tersebut  sesuai  dengan  hasil  penelitian  seperti  pada tabel  2  di  atas  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  mempengaruhi  karakter  fenotip  dari  kedelai varietas Anjasmoro.
Pengaruh  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  juga  mempengaruhi    produktivitas  dari tanaman  kedelai  varietas  Anjasmoro.  Berdasarkan  tabel  2  di  atas  semakin  tinggi  konsentrasi ekstrak etanolik daun tapak dara mempengaruhi jumlah bunga, jumlah polong, dan jumlah biji. Hal tersebut disebabkan adanya penambahan jumlah kromosom sehingga mempengaruhi bunga dan  buah  dari  tanaman  kedelai.  Berdasarkan  penelitian  Mardianti  (2014)  dan  Arief  (2013) bahwa  ekstrak  daun  tapak  dara  mampu  meningkatkan  karakter  fenotip  tanaman  melon diantaranya tinggi tanaman, jumlah daun dan diameter vertikal. Penambahan jumlah kromosom juga mengakibatkan semakin banyaknya jumlah kloroplas dalam sel. Peningkatan ukuran organ akar,  daun,  dan  jumlahkloroplas  secara  tidak  langsung  menyebabkan  peningkatan  laju fotosintesis.  Laju  fotosintesis  yangmeningkat  dapat  menghasilkan  fotosintat  (hasil  fotosintesis) dalam jumlah yang lebih banyak,sehingga dapat dihasilkan umbi atau buah yang lebih besar dan banyak sebagai tempat penyimpananfotosintat. Hal tersebut sesuai dengan hasil penelitian yang telah  dilakukan  bahwa  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  mampu  meningkatkan  ploidisasi  yang berakibat pada menikatnya karakter fenotip dari tanaman kedelai varietas Anjasmoro.

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulakan  bahwa  konsentrasi  ekstrak  etanolik tanaman  tapak  dara  berpengaruh  pada  jumlah  kromosom,  persentase  perkecambahan  biji,  dan beberapa  karakter  fenotip  tanaman  kadelai.  Konsentarasi  terbaik  yang  dapat  menginduksi adanya ploidisasi yaitu 0,1 %.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui konsentrasi senyawavinkristin dan  vinblastin  dalam  ekstrak  etanolik  daun  tapak  dara  serta  pemurnian  ekstraketanolik  daun tapak dara untuk mendapatkan senyawa vinkristin dan vinblastin murni.

## REFERENSI
Aslam, J., Khan, SH., Siddiqui, ZH., Fatima, Z., Maqsood, M., Bhat, MA., Nasim, SA., Ilah, A., Ahmad,  IZ.,  Khan,  SA.,  Ahmad,  S.,  Mujib,  A.,  Sharma,  MP.  2010. Catharanthus roseus (L.)  G.  Don.  an  Important  Drug:  It’s  Applications  and  Production. Int  J Compr Pharm . 1(4):1-16.
Burns  GW.  1972. The  Science  of  Genetics,  an  Introduction  to  Heredity .  Second  edition.  New York: The Macamillan Company.
Chung, IM., Kim, EH., Li, M., Peebles, CAM., Jung, WS., Song, HK., Ahn JK., San, KY. 2011. Screening  64  Cultivars Catharanthus  roseus for  the  Production  of  Vindoline, Catharanthine, and Serpentine. Biotechnol Prog . 27(4): 937-943.
Eni Kusnuriyanti | Karakter Fenotip Tanaman Kedelai ….. Jurnal Wiyata, Vol. 4 No. 2 Tahun 2017
Daryono  BS,  Koeswardani  CA,  Sunarti  S.  2012.  Karakter  Kromosom  Ekaliptus  ( Eucalyptus pellita F. Muell.) Hasil  Induksi Ekstrak Etanolik Daun Tapak Dara ( Catharanthus roseus (L.) G. Don.). Prosiding Seminar Nasional Agroforestri III :195-199.
Indraningsih  E.  2008. Analisis  Fenotipe  dan  Ploidi  Tanaman  Melon  (Cucumis  melo  L.)  Hasil Perlakuan Ekstrak Etanolik Daun Tapak Dara (Catharanthus roseus [L] G. Don . Makalah Seminar. Yogyakarta : Jurusan Biologi Universitas Gadjah Mada
Listiawan  DA,  Indraningsih  E,  Septantri  AN,  Wibowo  AT,  Darojat  UWJ,  Daryono  BS.  2009. Potensi  Ekstrak  Etanolik  Daun  Tapak  dara  ( Catharanthus  roseus (L.)  D.  Don) Sebagai  Alternatif  Pengganti  Kolkhisin  Poliploidisasi  Tanaman. J  Biol Indones 5(4):423-430.
Man S, Gao W, Wei C, Liu C. 2012. Anticancer drugs from traditional toxic Chinese medicines. Phyther Res. 26(10):1449-1465.
Mardianti R. 2014. Ekstrak Etanolik Umbi Kembang Sungsang dan Daun Tapak Dara sebagai Subsitusi  Kolkisin  dalam  Meningkatkan  Pertumbuhan  dan  Kualitas  Buah  Melon . Skripsi.Bengkulu  :  Program  Studi  Agroekoteknologi  Jurusan  Budidaya  Pertanian Fakultas Pertanian Universitas Bengkulu.
Muammar  A.  2013. Analisis  Fenotip  Dan  Ploidi  Tanaman  Melon  (Cucumis  melo  L.)  Kultivar Hikadi Hasil Perendaman Ekstrak Daun Tapak Dara (Catharanthus roseus [L] G.
Don.) . Skripsi. Yogyakarta : Jurusan Biologi Universitas Gadjah Mada.
Murtiati  S,  Anwar  H,  Sutrisno  I.  2016.  Introduksi  Varietas  Kedelai  Mendukung  Program Peningkatan  Produksi  Menuju  Swasembada  Kedelai  di  Jawa  Tengah. Prosiding Seminar Hasil Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi :243-247.
Nofitahesti  I,  Daryono  BS.  2016.  Karakter  Fenotip  Kedelai  ( Glycine  max (L.)  Merr.)  Hasil Poliploidisasi dengan Kolkisin. Sci Educ. 5(2):90-98.
Riniarsi D. 2016. Outlook Komoditas Pertanian Tanaman Pangan Kedelai . Jakarta: Pusat  Data dan Sistem Informasi Pertanian Kementerian Pertanian
Shi  L,  Zhu  T,  Morgante  M,  Rafalski  JA,  Keim  P.  1996.  Soybean  Chromosome  Painting:  a Strategy for Somatic Cytogenetics. J Hered. 84(4):308-313.
Suhartina.  2005. Deskripsi  Varietas  Unggul  Kacang-Kacangan  dan  Umbi-Umbian .  Malang: Balai Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi.
Syamsiah  M,  Sulyo  Y,  Yusmiati  L.  2013.  Ketahanan  Sistemik  Tanaman  Tapak  Dara ( Catharanthus  roseus (L.)  G.  Don.)  terhadap  Serangan  Cucumber  Mosaic  Virus Menggunakan Asam Salisilat. J Agroscience 5(5):73-80.
Verma P, Mathur AK, Srivastava A, Mathur A. 2012. Emerging Trends in Research on Spatial and  Temporal  Organization  of  Terpenoid  Indole  Alkaloid  Pathway  in Catharanthus roseus : A Literature Update. Protoplasma 249(2):255-268.