## Uji Aktivitas Antioksidan Dan Inhibitor Tirosinase Ekstrak Etanol Daun Teh Hijau
Fitri Mellyna Cantika, Sani Ega Priani*
Prodi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Bandung, Indonesia

## A R T I C L E   I N F O
Article history : Received  : 11/11/2023 Revised : 22/12/2023 Published  : 24//12/2023
Creative Commons Attribution- NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.
Volume : 3 No.
: 2 Halaman  : 113-120 Terbitan  : Desember 2023

## A B S T R A K
Pati  adalah  karbohidrat  yang  merupakan  polimer  glukosa  yang  teridiri  dari amilosa dan amilopektin. Salah satu sumber pati yaitu dari tumbuhan sagu dan talas belitung. Pati di bidang farmasi dapat digunakan sebagai bahan pengikat, bahan  penghancur,  bahan  pengisi,  bahan  pelincir.  Sifat  fisikokimia  pati  bisa diperbaiki dengan cara modifikasi. Modifikasi pati dengan metode HMT (Heat Moisture Treatment) merupakan teknik modifikasi secara fisik yang melibatkan perlakuan  panas  pada  suhu  110°C  selama  4  jam.  Pati  alami  yang  belum termodifikasi  masih  memiliki  beberapa  keterbatasan  sifat  fisikokimia,  maka penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakterisasi sifat fisikokimia dari pati sagu dan Talas Belitung yang dimodifikasi dengan metode HMT (Heat Moisture Treatment).  Hasil  dari  karakteristik  sifat  fisikokimia  pati  yang  termodifikasi menggunakan metode HMT (Heat Moisture Treatment) dari pati sagu memiliki kadar  air  9%,  8,24%,  dan  8%,  swelling  power  91,13%,  105%,  dan  94,1% sedangkan pati talas belitung memiliki kadar air sebesar 1,56%, swelling power 8,16%.
Kata kunci: Ekstrak Etanol Daun Teh Hijau; Antioksidan; Inhibitor Tirosinase.

## A B S T R A C T
Skin is the outermost organ of the body that plays a role in the process of protection from UV radiation, which can cause the formation of free radicals and hyperpigmentation. Green tea leaves (Camellia sinensis (L) O. Kuntze) contain high polyphenol compounds, especially epigallocatechin gallate, which has potential as an antioxidant and tyrosinase inhibitor. This study aims to determine the antioxidant activity and tyrosinase inhibition in ethanol extract of green tea leaves. Ethanol extract of green tea leaves was obtained by reflux method using 96% ethanol solvent. Antioxidant activity test and tyrosinase inhibitor using DPPH method and dopachrome method based on enzymatic colorimetric testing. Antioxidant activity test results showed that green tea leaf extract has an IC50 value of 2.349 ppm, and has tyrosinase inhibitory activity with an IC50 value of 1000.422 ppm.
Keywords: Green Tea Leaf Ethanol Extract; Antioxidant; Tyrosinase Inhibitor.
@ 2023 Jurnal Riset Farmasi Unisba Press. All rights reserved.

## A. Pendahuluan
Kulit merupakan organ tubuh terluar, yang berperan penting dalam proses pelindungan (1). Oleh karena itu, penting untuk mencegah maupun mengatasi berbagai masalah pada kulit, salah satu masalah kulit ini dapat berkaitan dengan pembentukan radikal bebas atau disebut reactive oxygen spesies (ROS) pada sel, yang merupakan faktor utama kerusakan kulit pada lapisan basal epidermis (2, 3). Selain itu, terdapat pula hiperpigmentasi yang merupakan hasil penggelapan warna kulit yang disebabkan oleh proses peningkatan produksi melanin pada basal epidermis (4). Salah satu penyebab dari kedua masalah tersebut dapat disebabkan oleh radiasi sinar UV yang berlebih, dalam hal ini sinar yang dapat berpenetrasi masuk ke dalam basal epidermis adalah sinar UV A (320-400 nm) dan UV B (280-320 nm) (5, 6) . Hal ini berkaitan dengan letak geografis Indonesia yang mendapatkan penyinaran matahari sepanjang tahunnya (7).
Pada pembentukan reactive oxygen species (ROS) dapat  memicu terjadinya stress oksidatif pada sel, yaitu adanya peningkatan produksi radikal bebas secara berlebih (8). Maka, diperlukan senyawa antioksidan yang mampu menetralisir,  mencegah  ataupun  mengurangi  peningkatan  ROS  (9).  Selain  itu,  pembentukan  melanin  pada  proses melanogenesis dipengaruhi oleh enzim tirosinase yang dapat mengkatalis hidroksilasi L-tirosin menjadi L-DOPA dan oksidasi L-DOPA menjadi dopaquinone   (10, 11). Sehingga, target utama untuk mencegah  ataupun menggurangi hiperpigmentasi adalah dengan penggunaan senyawa aktif yang mampu menghambat enzim tirosinase (12). Senyawa aktif yang berperan sebagai antioksidan dan mampu menghambat enzim tirosinase dapat berasal dari senyawa sintetis maupun bahan alam. Untuk itu, salah satu alternatif pengembangan bahan alam adalah senyawa polifenol (13, 14).
Senyawa polifenol diketahui memiliki aktivitas sebagai antioksidan yang bekerja sebagai reaktan efisien spesies reaktif oksigen  (14). Selain itu juga, memiliki  aktivitas  inhibitor  tirosinase yang  secara kompetitif dapat berikatan dengan sisi aktif enzim tirosinase (15). Salah satu senyawa bahan alam yang memiliki kandungan polifenol tinggi, adalah teh hijau ( Camellia sinensis (L). O Kuntze) yang memiliki nilai IC50 sebesar 3,17 ppm sebagai antioksidan, serta IC50 sebesar 24,07 ± 2,66 ppm sebagai inhibitor tirosinase (16, 17). Senyawa polifenol utama yang terkandung dalam daun teh hijau adalah katekin, yang jumlahnya mencapai 61% (18, 19). Salah satu jenis katekin yang paling banyak ditemukan pada daun teh hijau adalah EGCG ( epigallocatechin 3-0-gallate ), yang mampu mengurangi stress oksidatif  serta  sebagai  inhibitor  tirosinase  yang  dapat  berikatan  kovalen  dengan  enzim  dan  menginaktivasi  enzim tirosinase, sehingga dapat menurunkan katalisis melanin pada kulit (20, 21).
Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, maka perumusan masalah dalam penelitian ini sebagai berikut: “Bagaimana aktivitas antioksidan dari ekstrak etanol daun teh hijau?; Bagaimana aktivitas inhibitor tirosinase ekstrak etanol daun teh hijau?”. Selanjutnya, tujuan dalam penelitian ini diuraikan dalam pokok-pokok sbb. Untuk mengetahui aktivitas  antioksidan  ekstrak  etanol daun teh hijau  ( Camellia  sinensis (L). O Kuntze). Untuk mengetahui  aktivitas inhibitor tirosinase ekstrak etanol daun teh hijau ( Camellia sinensis (L). O Kuntze).

## B. Metode Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  secara  eksperimental  di  Laboratorium  Universitas  Islam  bandung,  dengan melakukan  pengujian  aktivitas  antioksidan  dan  inhibitor  tirosinase  ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  ( Camellia sinensis (L). O Kuntze). Pada penelitian kali  ini diawali dengan pengumpulan dan penyiapan bahan berupa simplisia daun teh hijau, penetapan parameter standar simplisia daun teh hijau, penapisan fitokimia terhadap simplisia daun teh hijau dan ekstrak etanol daun teh hijau, serta uji aktivitas antioksidan dan inhibitor tirosinase ekstrak etanol daun teh hijau.

## Pengumpulan dan Penyiapan Simplisia Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Bahan berupa daun teh hijau ( Camellia sinensis (L). O Kuntze) yang diperoleh sudah dalam keadaan kering dan sudah dilakukan determinasi sebelumnya dari Pusat Penelitian Teh dan Kina (PPTK) Gambung, Ciwidey, Jawa Barat. Setelah itu, dilakukan proses preparasi sampel dengan cara menyerbukan simplisia daun teh hijau.
Penetapan Parameter Standar Simplisia Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze) Penetapan parameter standar dilakukan terhadap simplisia daun teh hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze) yang telah diserbukan, diantaranya dilakukan penetapan parameter spesifik meliputi kadar sari larut air dan kadar sari larut etanol serta kadar air serta penetapan parameter nonspesifik meliputi kadar abu total, kadar abu tidak larut asam dan susut pengeringan.

## Ekstraksi Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Proses ekstraksi pada simplisia daun teh hijau dilakukan dengan perbandingan 1:10 menggunakan metode refluks pada suhu 80℃ selama 60 menit dengan pelarut etanol 96% dan aquadest. Setelah itu, pelarut dan simplisia daun teh hijau direfluks menggunakan sistem kondensor kemudian  setelah dingin ekstrak etanol cair yang dihasilkan disaring dan dipekatkan menggunakan rotary vaccum evaporator pada suhu 50–60°C, dan dilanjutkan dengan water bath untuk memperoleh ekstrak etanol daun teh hijau yang kental.

## Penapisan Fitokimia Terhadap Simplisia Daun Teh Hijau dan Ekstrak Etanol Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Penapisan  fitokimia  dilakukan  terhadap  simplisia  dan  ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  meliputi pengujian  golongan  senyawa  alkaloid,  flavonoid,  saponin,  tanin,  polifenolat,  kuionon,  monosteroid  dan sesquiterpene, serta steroid dan triterpenoid.

## Uji Antioksidan Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Pengujian antioksidan ekstrak etanol daun teh hijau dilakukan menggunakan metode DPPH ( 2,2-diphenyl-1- picrilhidrazil )  dan  digunakan  vitamin  C  sebagai  pembanding.  Pengukuran  dilakukan  menggunakan spektrofotometri Uv−Vis dengan variasi konsentrasi 1, 2, 4, 8, dan 10 ppm.
Uji Inhibitor Tirosinase Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze) Pengujian  inhibitor  tirosinase  ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  dilakukan  menggunakan  metode  dopakrom berbasis  pengujian  kolorimetri  enzimatik  dan  digunakan  asam  kojat  sebagai  pembanding  serta  substrat berupa L-DOPA. Pengukuran dilakukan menggunakan microplate reader dengan variasi konsentrasi 5, 10, 20, 40, 80, 160, dan 320 ppm.

## C. Hasil dan Pembahasan
Pengumpulan dan Penyiapan Simplisia Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze) Simplisia daun teh hijau ( Camellia sinensis (L). O Kuntze) yang telah diperoleh dari Pusat Penelitian Teh dan Kina (PPTK) dilakukan proses determinasi, tujuan dilakukan determinasi terhadap bahan yang diperoleh adalah  untuk  mengetahui  kebenaran  tanaman  yang  akan  diteliti  dan  menghindari  kesalahan  dalam pengumpulan  bahan  serta  menghindari  kemungkinan  tercampurnya  tanaman  yang  akan  diteliti  dengan tanaman lain (22). Daun teh hijau kemudian dihaluskan dengan menggunakan blender hingga menjadi serbuk atau partikel dengan ukuran yang kecil. Pengecilan ukuran simplisia menggunakan blender bertujuan untuk membuat kontak antara permukaan padatan dan pelarut yang digunakan pada proses ekstraksi lebih optimal sehingga jumlah senyawa aktif yang dapat tertarik lebih optimum (23).

## Penetapan Parameter Standar Simplisia Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Penetapan parameter standar simplisia dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui terkait karakteristik dari bahan simplisia yang diteliti serta menjamin bahwa dari hasil penetapan parameter standar simplisia tersebut memenuhi persyaratan yang ditetapkan, sehingga dapat dijadikan sebagai suatu bahan yang berkualitas dan bermutu dalam penelitian ini (24).
Parameter standar simplisia dibagi menjadi dua, yaitu parameter spesifik meliputi kadar sari larut air dan kadar sari larut etanol, serta parameter non spesifik meliputi kadar air, kadar abu total, kadar abu tidak larut asam dan susut pengeringan.
Tabel 1 . Hasil pengujian parameter standar simplisia daun teh hijau
Parameter Standar Hasil (%) FHI (Depkes RI, 2017) Kadar sari larut air 26,97±0,12 Tidak kurang dari 8,4% Kadar sari larut etanol 36,97±0,08 Tidak kurang dari 4,5% Kadar air 4,3±0,29 Tidak lebih dari 10% Kadar abu total 4,7±0,01 Tidak lebih dari 5,6% Kadar abu tidak larut asam 0,4±0,01 Tidak lebih dari 0,6% Susut pengeringan 4,5±0,00 Tidak lebih dari 10%

## Sumber: Depkes RI, 2017 (25)
Berdasrkan  hasil  tabel  di  atas,  setelah  dilakukan  penetapan  parameter  spesifik  dan  nonspesifik
terhadap  simplisia  daun  teh  hijau  ( Camellia  sinensis (L).  O  Kuntze).  Pada  penetapan  parameter  spesifik, yaitu kadar sari larut air dan larut etanol simplisia yang digunakan lebih banyak senyawa kimia yang larut atau  tersari  dalam  etanol.  Hal  tersebut  menunjukan  bahwa  jumlah  senyawa-senyawa  yang  tersari  dalam etanol memiliki nilai yang lebih besar yaitu 36,97±0,08 dibandingkan dengan kadar sari larut air dengan nilai 26,97±0,12.  Penggunaan  dua  jenis  pelarut  ini  karena  keduanya  adalah  cairan  pelarut  yang  diperbolehkan serta  memenuhi  persyaratan  kefarmasian  ( pharmaceutical  grade )  (26).  Untuk  penetapan  parameter nonspesfik simplisia daun teh hijau  ( Camellia sinensis (L). O Kuntze) memenuhi persyaratan diantaranya yaitu kadar air, kadar abu total, kadar abi tidak larut asam, serta susut pengeringan (25).

## Ekstraksi Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Proses ekstraksi dilakukan menggunakan metode refluks, metode refluks ialah suatu metode ekstraksi yang dalam prosesnya dibantu oleh adanya pemanasan, dengan prinsip kerja metode refluks ini yaitu suatu pelarut akan menguap pada suhu tinggi lalu akan didinginkan oleh adanya kondensor. Sebanyak 600 gram simplisia daun teh hijau yang telah dilakukan pengecilan ukuran, dilakukan proses ekstraksi pada suhu 80℃ selama 60 menit dengan menggunakan pelarut berupa etanol 96% dengan perbandingan antara simplisia dan pelarut adalah  1:10  (27).  Dari  hasil  ekstraksi  tersebut  didapatkan  rendemen  sebesar  37,8674%,  perhitungan rendemen  tersebut  dilakukan  untuk  mengetahui  seberapa  banyak  kandungan  senyawa  yang  terbawa  oleh pelarut yang digunakan. Hasil  tersebut memenuhi nilai yang dipersyaratkan yaitu  tidak kurang dari 7,8%. Semakin tinggi rendemen maka semakin tinggi kandungan senyawa yang tertarik ada pada suatu bahan baku (28).

## Penapisan Fitokimia Terhadap Simplisia Daun Teh Hijau dan Ekstrak Etanol Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Penapisan  fitokimia  dilakukan  untuk  memberikan  gambaran  tentang  golongan  senyawa  yang  terkandung pada  tanaman yang akan digunakan  sebagai  bahan penelitian. Adapun hasil penapisan  fitokimia simplisia dan ekstrak etanol daun teh hijau sebagai berikut.
Tabel 2. Hasil penapisan fitokimia simplisia dan ekstrak etanol daun teh hijau.
Golongan Senyawa Hasil Penelitian Simplisia Ekstrak Alkaloid (mayer) + + Alkaloid (dragendroff) + + Flavonoid + + Saponin + + Tanin + + Polifenolat + + Kuinon + + Monoterpenoid dan Sesquiterpen + + Steroid dan Triterpenoid + +
Sumber: Anita,2015 (29).
Keterangan: (+) = Terdeteksi   (-) = Tidak terdeteksi

## Uji Antioksidan Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Pengujian aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol daun teh hijau dilakukan menggunakan metode DPPH (2,2−diphenyl−1−picrilhidrazil) .  Pemilihan  metode  ini  karena,  diketahui  dalam  suatu  penelitian menyatakan bahwa metode ini merupakan metode yang paling efektif, sensitif dan efisien diantara metode uji  yang  lain,  serta  pengujiannya  menggunakan  pelarut  organik,  hal  tersebut  sesuai  karena  pada  proses ekstraksi daun teh hijau menggunakan pelarut organik berupa etanol (30, 31).
Pada saat pengujiannya dilakukan penambahan larutan senyawa DPPH terhadap sampel uji (ekstrak etanol  daun  teh  hijau)  dan  pembanding  (vitamin  C)  dengan  variasi  konsentrasi  1,  2,  4,  8,  dan  10  ppm. Selanjutnya  dilakukan  pengukuran  absorbansi  menggunakan  instrumen  spektrofotometer  Uv-Vis  pada panjang  gelombang  517  nm.  Ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  diketahui  memiliki  aktivitas  antioksidan
dikarenakan  adanya  kandungan  senyawa  katekin  yang  memiliki  mekanisme  kerja  sebagai  reaktan  efisien spesies  reaktif  oksigen,  sehingga  stress  oksidatif  yang  dipicu  oleh  radikal  bebas  dapat  distabilkan  dan dinetralkan yang pada akhirnya dapat menurunkan risiko kerusakan pada sel (32). Penghambatan antioksidan terhadap radikal bebas tersebut ditandai dengan perubahan warna DPPH dari ungu ke kuning.
Berdasarkan penelitian yang telah didapatkan, diketahui ekstrak etanol daun teh hijau memiliki nilai IC 50 2,352 ± 0,019 ppm. Hasil tersebut menunjukan bahwa ekstrak etanol daun teh hijau memiliki aktivitas sebagai  antioksidan  yang  sangat  kuat  karena  memiliki  nilai  <  50  ppm.  Begitu  juga,  pada  hasil  pengujian vitamin  C  sebagai  pembanding  memiliki  nilai  IC 50 sebesar  3,530  ±  0,011  ppm  hasil  tersebut  menunjukan bahwa pembanding vitamin C memiliki aktivitas sebagai antioksidan yang sangat kuat karena berada pada rentang < 50 ppm.
Gambar 1 . Kurva uji antioksidan ekstrak etanol daun teh hijau
Tabel 3 . Hasil IC50 antioksidan ekstrak etanol daun teh hijau dan vitamin C
Sampel IC 50 (ppm) Ekstrak Daun Teh Hijau 2,352 ± 0,019 Vitamin C 3,530 ± 0,011
Uji Inhibitor Tirosinase Ekstrak Daun Teh Hijau (Camellia sinensis (L). O Kuntze)
Tirosinase  merupakan  enzim  yang  didistribusikan  secara  luas  pada  beberapa  organisme  dan  memainkan peran  penting  dalam  proses  melanogenesis,  pada  penelitian  kali  ini  dilakukan  suatu  pengujian  inhibitor tirosinase  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  adanya  aktivitas  pada  ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  sebagai penghambat  tirosinase.  Pada  metode  pengujian  tersebut,  terjadi  reaksi  antara  enzim  dengan  substrat  L - DOPA, selanjutnya enzim tersebut mengubah L-DOPA menjadi dopaquinone yang disebut dengan  reaksi difenolase.  Selanjutnya dopaquinone akan  berpolimerisasi  membentuk dopachrome, yang  nantinya  akan terukur pada serapan 510 nm yang dilakukan menggunakan alat spektrofotometri Uv -vis (33).
Pada  penelitian  ini,  menggunakan  pembanding  berupa  asam  kojat  karena  asam  kojat  merupakan metabolit  alami,  sangat  stabil  dan  memiliki  kemampuan  menghambat  aktivitas  tirosinase  dalam  proses sintesis melanin yang memiliki nilai IC 50 15.69 ppm, dengan nilai tersebut asam kojat termasuk bahan yang tergolong sangat kuat atau potensial memiliki aktivitas sebagai inhibitor tirosinase, sehingga pemilihan asam kojat sebagai pembanding dalam pengujian inhibitor tirosinase sangat disarankan (34, 35)
Ekstrak etanol daun teh hijau diketahui memiliki aktivitas sebagai inhibitor tirosinase dikarenakan adanya kandungan senyawa polifenol yang memiliki mekanisme secara kompetitif dapat berikatan dengan sisi  aktif  enzim  tirosinase,  sehingga  ketika  sampel  uji  (ekstrak  etanol)  tersebut  menempel  pada  sisi  aktif enzim tirosinase maka akan membuat dopachrome tidak tebentuk (36, 15). Berdasarkan penelitian yang telah didapatkan,  diketahui  ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  memiliki  nilai  IC 50 1000,422  ±  65,729  ppm  serta pengujian asam kojat sebagai pembanding memiliki nilai IC 50 sebesar 8,7570 ± 0,003 ppm. Hasil tersebut menunjukan  bahwa  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  sebagai  penghambat  tirosinase  memiliki  nilai yang  lemah  dibanding  nilai  IC 50 pada  asam  kojat,  yang  artinya  memiliki  daya  hambat  yang  lebih  rendah dibandingkan asam kojat.
Gambar 2 . Kurva uji inhibitor tirosinase ekstrak etanol daun teh hijau
Tabel 4. Hasil IC 50 inhibitor tirosinase ekstrak etanol daun teh hijau dan asam kojat
Sampel IC 50 (ppm) Ekstrak Daun Teh Hijau 1000,422 ± 65,729 Asam Kojat 8,7570 ± 0,003

## D. Kesimpulan
Berdasarkan pembahasan dalam penelitian ini, peneliti menyimpulkan beberapa hasil penelitian adalah ekstrak  etanol  daun  teh hijau  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat  dengan nilai  IC 50 peredaman radikal  bebas  DPPH  sebesar  2,352  ±  0,019  ppm.  Ekstrak  etanol  daun  teh  hijau  memiliki  aktivitas penghambatan tirosinase yang sangat lemah dengan nilai IC 50 inhibitor tirosinase sebesar 1000,422 ± 65,729 ppm.

## Daftar Pustaka
[1] R.T. Narendhirakannan, & M.A.C. Hannah, "Oxidative stress and skin cancer: An overview". Indian Journal of Clinical Biochemistry , 28 (2), 110–115. 2013. https://doi.org/10.1007/s12291-012-0278-8.
[2] F.  Liebel,  S.  Kaur, E.  Ruvolo,  N.  Kollias,    &  M.D.  Southall,  "Irradiation  of  skin  with  visible  light induces  reactive  oxygen  species  and  matrix-degrading  enzymes". Journal  of  Investigative Dermatology , 132 (7), 1901–1907. 2012. https://doi.org/10.1038/jid.2011.476.
[3] F. Papaccio, A. D’arino, S.Caputo, & B. Bellei, "Focus on the Contribution of Oxidative Stress in Skin Aging". Antioxidants , 11 (6). 2022. https://doi.org/10.3390/antiox11061121
[4] H. Rahmi,S. Supandi, N.S,  Radjab, & T. Julianti, "Tyrosinase Inhibition from Green Tea (Camellia sinensis (L.) Kuntze) gel" . Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology , 8 (2), 59. 2021. https://doi.org/10.24198/ijpst.v8i2.27145.
[5] M.E. Aulton, dan T. K. M. G. "Aulton’s Pharmaceutic: The Design and Manufacture of Medicines (7th ed)". Elsevier. 2020.
[6] A.C. Handel, L.D.B. Miot, & H.A. Miot, "Melasma: A clinical and epidemiological review". Anais Brasileiros de Dermatologia , 89 (5), 771–782. 2014. https://doi.org/10.1590/abd1806-4841.20143063
[7] R.A. Mukti, "Tabir Surya vs Iklim Tropis". FKIP Universitas PGRI Adi Buana Surabaya , 10 (18), 61– 66. 2014.
[8] K. Nakai, & D. Tsuruta, " What are reactive oxygen species, free radicals, and oxidative stress in skin diseases?" International
Journal
of Molecular Sciences , 22 (19). 2021.
https://doi.org/10.3390/ijms221910799
[9] N. Sylviana, "The Effect of Astaxanthin and Regular Training on Dynamic Pattern of Oxidative Stress on Male under Strenuous Exercise". Indonesian Journal of Clinical Pharmacy, 6(1), 46–54. , 755 (1). 2017. https://doi.org/10.1088/1742-6596/755/1/011001
[10] C.Y. Dissanayake, H.H. Moon, K.M. Yang,  Y. Lee, & C.H. Han, 'The effects of green tea (Camellia sinensis)  flower  extract  on  melanin  synthesis  in  B16-F10  melanoma  cells'. Korean  Journal  of
Veterinary Research , 58 (2), 66–72. 2018. https://doi.org/10.14405/kjvr.2018.58.2.65
[11] S. Zolghadri, A. Bahrami, M.T. Hassan Khan, J. Munoz-Munoz, F. Garcia-Molina, F. Garcia-Canovas, & A. A. A. Saboury, " comprehensive review on tyrosinase inhibitor"s. Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry , 34 (1), 279–309. 2019. https://doi.org/10.1080/14756366.2018.1545767
[12] A. Di Petrillo, A.M. González-Paramás, B. Era, R.  Medda, R., F. Pintus, C. Santos-Buelga, & A. Fais, "  Tyrosinase  inhibition  and  antioxidant  properties  of  Asphodelus  microcarpus  extracts". BMC Complementary  and  Alternative  Medicine , 16 (1),  1–9.  2016.    https://doi.org/10.1186/s12906-016- 1442-0
[13] Zuo,  A.  R.,  Dong,  H.  H.,  Yu,  Y.  Y.,  Shu,  Q.  L.,  Zheng,  L.  X.,  Yu,  X.  Y.,  &  Cao,  S.  W.The antityrosinase  and  antioxidant  activities  of  flavonoids  dominated  by  the  number  and  location  of phenolic  hydroxyl  groups. Chinese  Medicine  (United  Kingdom) , 13 (1),  1–12.  2018. https://doi.org/10.1186/s13020-018-0206-9
[14] D. J. De Lima Cherubim, C.V. Buzanello Martins, L. Oliveira Fariña, & R.A. da Silva de Lucca, " Polyphenols  as  natural  antioxidants  in  cosmetics  applications". Journal  of  Cosmetic  Dermatology , 19 (1), 33–37. 2020. https://doi.org/10.1111/jocd.13093
[15] H.X.  Nguyen, N.T.  Nguyen,  M.H.K. Le  Nguyen,  T.  H., Do,  T.  N.,  T.M.  Hung,  & M.T.T  Nguyen, "Tyrosinase  inhibitory  activity  of  flavonoids  from  Artocarpus  heterophyllous". Chemistry  Central Journal , 10 (1), 4–9. 2016. https://doi.org/10.1186/s13065-016-0150-7
[16] N.  Korkmaz,  S.O  Sener,  S.  Akkaya,  M.  Badem,  R.  Aliyazicioglu,  M.    Abudayyak,  E.  Oztas,  &  U. Ozgen, "Investigation of antioxidant, cytotoxic, tyrosinase inhibitory activities, and phenolic profiles of  green,  white,  and  black  teas". Turkish  Journal  of  Biochemistry , 44 (3),  278–288.  2019. https://doi.org/10.1515/tjb-2017-0345
[17] D. Nawangsari, "Formulasi Sediaan Masker Antioksidan Dari Ekstrak Teh Hijau (Camellia Sinensis)". Viva  Medika:  Jurnal  Kesehatan,  Kebidanan  Dan  Keperawatan , 10 (2),  109–118.  2018. https://doi.org/10.35960/vm.v10i2.451
[18] Z.  Khurshid,  M.S.  Zafar,  S.  Zohaib,  S.  Najeeb,  &  M.  Naseem,  "Green  Tea  (Camellia  Sinensis): Chemistry  and  Oral  Health". The  Open  Dentistry  Journal , 10 (1),  166–173.  2016. https://doi.org/10.2174/1874210601610010166
[19] O. Maslov, S.  Kolisnyk, M. Komisarenko, &  M. Golik, "Study of total antioxidant activity of green tea  leaves  (Camellia  sinensis  L.)". Herba  Polonica , 68 (1), 1–9. 2022.  https://doi.org/10.2478/hepo- 2022-0003
[20] R. Mustika, S. Hindun, & N. Auliasari, "Potensi Tanaman Sebagai Pencerah Wajah Alami". Jurnal Sains Dan Kesehatan , 2 (4), 558–562. 2020. https://doi.org/10.25026/jsk.v2i4.233
[21] G. Xu. Y. Tang, C. Zhang, N. Li. H. Wang, & Y. Feng, "Green tea and epigallocatechin gallate (Egcg) for  the  management  of  nonalcoholic  fatty  liver  diseases  (nafld):  Insights  into  the  role  of  oxidative stress and antioxidant mechanism". Antioxidants , 10 (7).2021. https://doi.org/10.3390/antiox10071076
[22] M.H.C.  Klau,  R.J.    &  Hesturini,"Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Etanol  Daun  Dandang  Gendis (Clinacanthus  nutans  (Burm  F)  Lindau)  Terhadap  Daya  Analgetik  Dan  Gambaran  Makroskopis Lambung Mencit". Jurnal Farmasi & Sains Indonesia , 4 (1), 6–12. 2021
https://doi.org/10.52216/jfsi.v4i1.59
[23] A.D. Soetadipura, F.  Lestari, F., & S. Hazar, "Skrining Fitokimia dan Karakterisasi Simplisia Buah Apel Hijau ( Malus sylvestris (L.) Mill)". Bandung Conference Series:Pharmacy , 2 , 1–6. 2022.
[24] M. Pandapotan Marpaung, & A. Septiyani, "Penentuan Parameter Spesifik Dan Nonspesifik Ekstrak Kental Etanol Batang Akar Kuning (Fibraurea chloroleuca Miers)". Penentuan Parameter Journal of Pharmacopolium , 3 (2), 58–67. 2020.
[25] Depkes RI. Farmakope Herbal Indonesia Edisi II . Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2017.
[26] N.  Latifa,  L.  Mulqie,  &  S.  Hazar,    "Penetapan  Kadar  Sari  Larut  Air  dan  Kadar  Sari  Larut  Etanol Simplisia  Buah  Tin  (Ficus  carica  L.)". Bandung  Conference  Series:  Pharmacy , 2 (2).  2022. https://doi.org/10.29313/bcsp.v2i2.4575
[27] F.U. Sineke, E. Suryanto, & S. Sudewi, "Penentuan Kandungan Fenolik Dan Sun Protection Factor (Spf) Dari Ekstrak Etanol Dari Beberapa Tongkol Jagung (Zea mays L.)". Pharmacon , 5 (1), 279–280.
2016.
[28] T.W. Senduk, L.A.D.Y Montolalu, & V. Dotulong, "The rendement of boiled water extract of mature leaves  of  mangrove  Sonneratia  alba". Jurnal  Perikanan  Dan  Kelautan  Tropis , 11 (1),  9.  2020. https://doi.org/10.35800/jpkt.11.1.2020.28659
[29] P. Anita, In, Balan, S.  Ethiraj, P. Madan Kumar, & S. Sivasamy, "In vitro antibacterial activity of Camellia  sinensis  extract  against  cariogenic  microorganisms". Journal  of  Basic  and  Clinical Pharmacy , 6 (1), 35. 2015. https://doi.org/10.4103/0976-0105.145777
[30] A.N. Wulansari, "Alternatif Cantigi Ungu (Vaccinium Varingiaefolium) Sebagai Antioksidan Alami : Review". Farmaka , 16 (2), 419–429. 2018.
[31] K. Maesaroh, D. Kurnia, & J. Al Anshori, "Perbandingan Metode Uji Aktivitas Antioksidan DPPH, FRAP dan FIC Terhadap Asam Askorbat, Asam Galat dan Kuersetin". Chimica et Natura Acta , 6 (2), 93. 2018. https://doi.org/10.24198/cna.v6.n2.19049
[32] Q.P. Arnanda, & R.F. Nuwarda, "Penggunaan Radiofarmaka Teknisium-99M Dari Senyawa Glutation dan Senyawa Flavonoid Sebagai Deteksi Dini Radikal Bebas Pemicu Kanker". Farmaka Suplemen , 14 (1), 1–15. 2019. https://jurnal.unpad.ac.id/farmaka/article/view/22071
[33] M. Sholikha, & L. Puspitasari, "Uji Aktivitas Penghambatan Enzim Tirosinase Oleh Ekstrak Etanol Daun  Keladi  Tikus  (  Typhonium  flagelliforme  (  Lodd  .)  Blume  )  Secara  In  Vitro". Jurnal  Ilmu Kefarmasian , 16 (1), 1–6. 2023.
[34] M.  Saeedi,  M.  Eslamifar,  &  K.  Khezri,  "Kojic  acid  applications  in  cosmetic  and  pharmaceutical preparations". Biomedicine  and  Pharmacotherapy , 110 (November  2018),  582–593.  2019. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.12.006
[35] M. Charissa, J.  Djajadisastra, & B. Elya, "Uji Aktivitas Antioksidan dan Penghambatan Tirosinase serta  Uji  Manfaat  Gel  Ekstrak  Kulit  Batang  Taya  (Nauclea  subdita)  terhadap  Kulit". Jurnal Kefarmasian Indonesia , 6 (2), 98–107. 2017. https://doi.org/10.22435/jki.v6i2.6224.98-107
[36] M. Furi, A. Alfatma, R.  Dona, A.  Fernando, F. Aryani, R. Utami, S. Muharni, W. Noviana Suhery, &  Octaviani. Uji  Inhibitor  Enzim  Tirosinase  Ekstrak  Dan  Fraksi  Daun  Kedabu  (Sonneratia  ovata Backer) Secara In-Vitro . 8 (2), 201–214. 2022.