## UJI AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK DAN FRAKSI JAHE MERAH (ZINGIBER
OFFICINALE ROSCOE VAR. RUBRUM) TERHADAP SEL HELA SECARA  IN VITRO
Maya Fadlilah
Prodi DIII Keperawatan STIKes Muhammadiyah Palembang mayastikes@gmail.com

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  Uji  Aktifitas  Sitotoksik  Ekstrak  dan  Fraksi  Jahe  Merah (Zingiber officinale Roscoe var . rubrum) terhadap sel HeLa secara In vitro . Penelitian ini dilaksanakan pada  bulan  Juli    2012  sampai  dengan  Agustus  2012  bertempat  di  Laboratorium Pascasarjana  Universitas  Sriwijaya  dalam  hal  pelaksanaan  ekstraksi  dan  fraksinasi  jahe merah  ( Zingiber  officinale Roscoe  var. rubrum) dilanjutkan  uji  sitotoksisitas  ekstrak  dan fraksi  jahe  merah (Zingiber  officinale Roscoe  var. rubrum) yang  dilaksanakan  di Laboratorium  Parasitologi Universitas Gajah Mada Yogyakarta. Tujuan penelitian ini adalah untuk  menentukan  aktivitas  sitotoksik    ekstrak  dan  fraksi  jahe  merah  ( Zingiber  officinale Rosc. Var .  rubrum )  terhadap  sel  HeLa  menggunakan  metode  MTT  dengan  parameter sitotoksisitas  yaitu  IC50  (Median  Inhibition  Concentration)  yang  merupakan  parameter sitotoksik  untuk  mengetahui  ketoksikan  suatu  senyawa  dan  membandingkan  aktifitas sitotoksik ekstrak dan fraksi jahe merah ( Zingiber officinale Rosc.Var. rubrum )  dengan obat anti  kanker  doksorubisin  serta  menentukan  golongan  senyawa  kimia  yang  berperan  dalam menghambat pertumbuhan sel HeLa.Isolasi senyawa antikanker dilakukan melalui 2 tahapan yaitu  ekstraksi  dan  fraksinasi  dengan  metode  fraksi  cair-cair  (FCC)  selanjutnya  untuk mengetahui  golongan  senyawa  yang  terkandung  dalam  jahe  merah  dilakukan  metode Kromatografi Lapis Tipis   (KLT). Pengujian  aktifitas sitotoksik   terhadap sel HeLa dilakukan dengan  metode  MTT,  sel  uji  yang  digunakan  adalah  sel  HeLa.  Uji  kesetaraan  dilakukan dengan membandingkan  nilai IC50 antara senyawa antikanker  yang diperoleh dari rimpang jahe merah ( Zingiber officinale Rosc. Var . rubrum ) dengan doksorubisin. Hasil penelitian ini diperoleh  bahwa  ekstrak  jahe  merah,  fraksi  etil  asetat,  fraksi  n-heksan  memilliki  efek sitotoksik  terhadap  sel  HeLa.  Fraksi  n-heksan  jahe  merah  adalah  fraksi  yang  mempunyai efek sitotoksik paling tinggi  dengan nilai IC50 20,350, sedangkan fraksi etilasetat diperoleh nilai  IC50  27,000  dan  ekstrak  jahe  merah  memiliki  nilai  IC50  35,350.  Hasil  Uji  kesetaraan antara ekstrak jahe merah, fraksi etilasetat  jahe merah memiliki nilai IC
Kata Kunci : Toksisitas, ekstrak, fraksi, sel HeLa

## PENDAHULUAN
Secara  tradisional  jahe  digunakan sebagai  peluruh  dahak  atau  obat  batuk, peluruh  keringat,  peluruh  kentut,  peluruh haid,  pencegah  mual,  dan  penambah nafsu  makan  (Sudarsono  dkk.,  1996). Ekstrak  etanol  rimpang  jahe (Zingiber officinale Rosc. ) mempunyai  aktivitas antioksidan dan  antikarsinogenik terhadap
hamster  yang  diinduksi  DMBA  dengan jalan  modulasi  peroksidasi  lipid  (Blessy et al ., 2009).
Senyawa  oleoresin  dan  shogaol yang  terdapat  pada  jahe  berkhasiat sebagai antioksidan dan dapat meningkatkan sistem imun tubuh (Tejasari dan Zakaria, 2000 cit Tejasari et al ., 2002; Tejasari et  al .,  2002).  Senyawa  gingerol
dalam  jahe  memiliki  aktivitas  antioksidan, antibakteri,  antiinflamasi,  antikarsinogenik, antimutagenik, antitumor, mempunyai aktivitas  menekan    pertumbuhan  sel kanker HCT116. Penelitian lain menyebutkan bahwa 6-gingerol dilaporkan dapat menghambat adhesi, invasi, motilitas,  dan  aktivitas  sel  MMP-2  dan MMP-9  di cell  line MDA-MB-231  kanker payudara pada manusia (Lee et al ., 1998).
Kanker  merupakan  pertumbuhan sel  yang  tidak  terkontrol  diikuti  dengan proses  invasi  ke  jaringan  sekitarnya  dan penyebaran (metastasis) ke  bagian  tubuh yang  lain    (King,  2000).  Penyebab  kanker (karsinogen)  dapat  digolongkan  menjadi beberapa faktor antara lain senyawa kimia (zat  karsinogen)  misalnya  benzen,  toluen, fenol  dan  aflatoksin;  hormon;  pengaruh fisika  misalnya  radiasi;  dan  virus  seperti Rous  Sarcoma  Virus (RSV)  dan Mork Disease Virus (MDV) (Sukardja, 2004).
Menurut  Hanahan  dan  Weinberg (2000),  sel  kanker  memiliki  6  karakteristik yaitu mampu mencukupi kebutuhan sinyal pertumbuhannya  sendiri,  tidak  sensitif terhadap sinyal anti pertumbuhan, mampu menghindar  dari  mekanisme  apoptosis, memiliki  potensi  tidak  terbatas  untuk
mengadakan
replikasi, mampu
menginduksi angiogenesis untuk mencukupi  kebutuhannya  akan  oksigen dan nutrisi serta mampu bermetastatis dan menginvasi jaringan sekitarnya.
Sel  normal  memerlukan  beberapa sinyal pertumbuhan sebelum mengadakan
proliferasi.  Sinyal  pertumbuhan  itu  antara lain faktor penentu pertumbuhan, komponen  matrik  ekstraseluler  dan  adesi atau interaksi antara molekul sel. Beberapa  onkogen  mempengaruhi  sel normal dengan cara meniru sinyal pertumbuhan  (Gambar  1)  (Hanahan  dan Weinberg, 2000).
Kanker  serviks  atau  kanker  leher rahim  merupakan  penyebab  kematian akibat kanker yang terbesar bagi wanita di negara-negara berkembang. Secara global  terdapat  600.000  kasus  baru  dan 300.000  kematian  setiap  tahunnya,  yang hampir 80% terjadi di negara berkembang. Fakta-fakta  tersebut  membuat  kanker leher  rahim  menempati  posisi  kedua kanker  terbanyak  pada  perempuan  di dunia,  dan  menempati  urutan  pertama  di negara berkembang. Saat ini, kanker leher rahim  menjadi  kanker  terbanyak  pada wanita  Indonesia  yaitu  sekitar  34%  dari seluruh  kanker  pada  perempuan  dan sekarang  48  juta  perempuan  Indonesia dalam risiko mendapat kanker leher rahim. Kanker  leher  rahim  adalah  kanker  yang terjadi pada  area leher rahim yaitu bagian rahim yang menghubungkan rahim bagian atas dengan vagina.
Berdasarkan Penelitian yang terkait    mengenai Pengaruh  Antioksidan Ekstrak  Jahe (Zingiber  officinale var . Sunti) Terhadap  Poliferasi  Sel  Leukimia (THP-1)  Pembuatan  kurva  pertumbuhan sel THP-1 rnenghasilkan  kurva  dengan nilai sebesar 0.9797. Uji toksisitas dengan
menggunakan MTT memperlihatkan terjadinya kecenderungan penurunan
pertumbuhan sel kanker setelah ditambahkan ekstrak jahe merah dibandingkan dengan kontrol tanpa pemberian  ekstrak.  Aktivitas  proliperasi terendah  diperlihatkan  oleh  ekstrak  jahe merah  dengan  konsentrasi  ekstrak  I5 mg/ml  pada  waktu  inkubasi  72  jam,  yaitu sebesar  0.577  pada  ekstrak  pelarut methanol,  0.614  pada  ekstrak  pelarut  air, 0.685  pada  ekstrak  etil  asetat,  dun  0.749 pada  ekstrak  n-heksana.  Secara  umum, konsentrasi  ekstrak  dun  waktu  inkubasi ekstrak  akan  berbanding  lurus  terhadap aktivitas penghambatan sel target THP-1.

## Tujuan Penelitian.
a. Untuk  menentukan  aktivitas  sitotoksik ekstrak dan fraksi jahe merah (Zingiber officinale  Rosc.  Var.  rubrum)  terhadap sel  hela  menggunakan  metode  MTT dengan  parameter  sitotoksisitas  yaitu IC50 (Median Inhibition Concentration) yang  merupakan  parameter  sitotoksik untuk  mengetahui  ketoksikan  suatu senyawa.
b. Membandingkan aktifitas sitotoksik
ekstrak dan fraksi jahe merah (Zingiber officinale  Rosc.Var.  rubrum)    dengan obat anti kanker doksorubisin.
c. Menentukan  golongan  senyawa  kimia yang  berperan  dalam  menghambat pertumbuhan sel hela.

## METODE PENELITIAN

## Bagan 1.  Kerangka Konsep
Uji Aktivitas Sitotoksik Ekstrak Dan Fraksi Jahe Merah (Zingiber Officinale Roscoe Var . Rubrum) Terhadap Sel Hela Secara

## In Vitro
Penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimental  dengan  menggunakan  sel HeLa  sebagai  sel  uji  yang  diberi  ekstrak dan  fraksi  jahe  merah (Zingiber  officinale Roscoe var. Rubrum) , selanjutnya aktivitas  ekstrak  dan  fraksi  dibandingkan dengan obat kanker doksorubisin.
Simplisia Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe var. Rubrum )

## Ekstrak Rimpang Jahe
Merah (Zingiber officinale Roscoe var. rubrum)

## Fraksi Rimpang Jahe
Merah (Zingiber officinale
Roscoe var. rubrum)
Uji Aktifitas Anti Kanker Fraksi Aktif IC 50
Adapun variable dari penelitian ini sebagai berikut: 1. Variabel Independen a. Untuk ekstraksi etanol
1)  Kelompok I     : Konsentrasi jahe merah 200 µg/ml
2)  Kelompok II   : Konsentrasi jahe
merah 100 µg/ml
3)  Kelompok III  : Konsentrasi jahe
merah 50 µg/ml 4)  Kelompok IV  : Konsentrasi jahe merah 25 µg/ml
5)  Kelompok V   : Konsentrasi jahe merah 12,5 µg/ml
b. Untuk  fraksinasi n.heksan, etil
asetat, dan metanol air
1)  Kelompok I     : Konsentrasi jahe
merah 200 µg/ml
2)  Kelompok II   : Konsentrasi jahe merah 100 µg/ml
3)  Kelompok III  : Konsentrasi jahe merah 50 µg/ml
4)  Kelompok IV  : Konsentrasi jahe merah 25µg/ml
5)  Kelompok V   : Konsentrasi jahe
merah 12,5 µg/ml
c. Untuk kontrol positif (Doksorubisin)
1)  Kelompok I   :  Konsentrasi
Doksorubisin 50 µg/ml
2)   Kelompok II   : Konsentrasi
Doksorubisin 25 µg/ml
3)  Kelompok III  : Konsentrasi
Doksorubisin 12,5µg/ml
4)  Kelompok IV  : Konsentrasi
Doksorubisin 6,25 µg/ml
5)  Kelompok V   : Konsentrasi
Doksorubisin 3,125 µg/ml 2. Varibel dependen
Variabel  dependen  dalam  penelitian ini adalah : Parameter nilai IC50 Tahapan  dari  pelaksanaan  penelitian  ini sebagai berikut:
1.  Persiapan Bahan Uji
a. Ekstraksi
b. Fraksinasi
2.  Perencanaan Dosis 3.  Pembuatan Media Biakan Sel HeLa
4. Pembuatan  PBS (Phosfat  Buffered Saline)
5.  Propogasi Sel Hela
a. Pengaktifan Sel HeLa
b. Pengembangan Sel HeLa
c. Pemanenan dan Perhitungan Sel
HeLa
6.  Uji Sitotoksisitas Sediaan Uji terhadap Sel Hela

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi  dan  Uji  Sitotoksik  Ekstrak Jahe  Merah  (Zingiber  officinale  var. rubrum)
Gambar 1. Morfologi sel HeLa setelah pemberian ekstrak jahe merah   dengan konsentrasi 12,5 µg/ml, sel HeLa  hidup (panah biru), sel HeLa  mati (panah merah).(pembesaran 100x)
Pada  gambar  di  bawah  terlihat bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak jahe merah  yang  diberikan maka semakin banyak  sel  HeLa    yang  mati.  Penilaian aktivitas sitotoksik  ekstrak dan fraksi jahe merah  ( Zingiber  officinale  var.  rubrum) dilakukan  dengan  pemberian  bahan  uji tersebut  pada  kultur  sel  HeLa  yang  telah diinkubasi selama 24 jam untuk
memperoleh nilai penghambatan pertumbuhan sel kanker.
Gambar 2. Morfologi sel HeLa setelah pemberian fraksi n-heksan jahe merah dengan  konsentrasi 12,5 µg/ml, sel HeLa hidup (panah  biru), sel HeLa  mati (panah merah).(pembesaran 100x)
Gambar 3. Morfologi sel HeLa setelah pemberian fraksi etilasetat  dengan konsentrasi 12,5 µg/ml, sel HeLa  hidup (panah biru), sel HeLa  mati (panah merah) (pembesaran 100x)
Pada gambar diatas terlihat bahwa semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  jahe merah  yang  diberikan  maka  semakin banyak  sel  HeLa    yang  mati.  Penilaian aktivitas sitotoksik  ekstrak dan fraksi jahe merah  ( Zingiber  officinale  var.  rubrum) dilakukan  dengan  pemberian  bahan  uji tersebut  pada  kultur  sel  HeLa  yang  telah diinkubasi selama 24 jam untuk memperoleh nilai penghambatan pertumbuhan  sel  kanker.  Sel  yang  hidup ada perlakuan dengan bahan uji kemudian dibandingkan dengan sel yang hidup pada kelompok tanpa perlakuan untuk mendapatkan persentase penghambatan.
Nilai rerata jumlah sel kanker hidup dan persentase penghambatan sel kanker hela  setelah  perlakuan  dengan  bahan  uji dan dilakukan dengan metode MTT essay setelah  diinkubasi  24  jam  ditunjukkan pada tabel dibawah ini.
Uji Bioautografi dan Penentuan Golongan Senyawa Anti Kanker Serviks HeLa
Uji  bioautografi    dilakukan  untuk mengetahui golongan senyawa dan harga Retordansi  faktor  (Rf)  senyawa  aktif  anti kanker serviks HeLa dengan
menggunakan  Kromatografi  Lapis  Tipis  ( KLT)  plat  silica  gel  GF  254  dengan menggunakan  perbandingan  eluen  yang sesuai    sebagai  fase  gerak  dan  H2SO4 10%  untuk  penampak  bercak  yang memilki aktivitas anti kanker serviks HeLa (Pratiwi,2008).  Metode  KLT  cocok  untuk analisis  di  laboratorium  karena  hanya
membutuhkan investasi kecil untuk kelengkapan,  menggunakan  waktu  yang singkat  untuk    menyelesaikan  analisis  (15 sampai dengan 60 menit) dan memerlukan  jumlah cuplikan  yang sangat sedikit (kira-kira 0,1 gram) (Stat, 1985).
Tabel 1. Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dilakukan untuk mengetahui golongan senyawa berdasarkan warna bercak yang
timbul pada plat silica gel. NO Ekstrak  dan Fraksi Warna Bercak Golongan senyawa 1 Ekstrak Jahe merah Ungu Terpenoid 2 Fraksi n- heksan Ungu Terpenoid 3 Fraksi etil asetat Kuning Flavonoid 4 Fraksi etanol  Orange Alkaloid
Pada  tabel  di  atas  menunjukkan bahwa  ekstrak  jahe  merah  dan  fraksi  n- heksan mengandung 1 golongan senyawa yang  sama  yaitu  terpenoid,  dikarenakan menghasilkan  warna  bercak  yang  sama yaitu  warna  ungu  sedangkan  pada  fraksi etilasetat  mengandung  senyawa  flavonoid dengan  warna  kuning  dan  fraksi  etanol menghasilkan  bercak  warna  orange  yang berarti senyawa alkaloid.
Gambar 4. Hasil uji
bioautografiKeterangan : warna dan lokasi tanda menunjukkan golongan senyawa Terpenoid merupakan suatu golongan hidrokarbon yang memiliki rumus  dasar  (C5H8)n.  Terpenoid  banyak dihasilkan  tumbuhan  sebagai  metabolit sekunder  dan  terutama  terkandung  pada getah dan vakuola selnya. Contoh senyawa terpenoid adalah steroid, karoten dan  retinol  serta  menyusun  banyak minyak  atsiri  misalnya  eugenol.  Senyawa terpenoid  adalah  senyawa  hidrokarbon isometric yang juga terdapat pada lemak/minyak  esensial  ( essential  oils ), yaitu  sejenis  lemak  yang  sangat  penting bagi  tubuh.  Zat-zat  terpenoid  membantu tubuh  dalam  proses  sintesa  organik  dan pemulihan  sel-sel  tubuh  serta  bersifat sebagai  antimikroba  (Yuharmen et  al .,
2002). Flavonoid termasuk senyawa
fenolik  alam  yang  potensial  sebagai antioksidan  dan  mempunyai  bioaktifitas sebagai  obat,  flavonoid  dalam  tubuh manusia  berfungsi  sebagai  antioksidan sehingga  sangat  baik  untuk  pencegahan kanker  (Waji,  2009).  Senyawa  flavonoid
dapat  menghambat  proliferasi  melalui inhibisi  proses  oksidatif  yang  dapat menyebabkan  inisiasi  kanker,  mekanisme ini  diperantarai  penurunan  enzim  xanthin oksidase, siklo oksigenase (COX) dan lipo oksigenase  (LOX)  yang  diperlukan  dalam proses  pro  oksidase  sehingga  menunda siklus sel (Ren et al ., 2003). Kelangsungan  hidup  sel  kanker  dapat ditekan melalui penghambatan angiogenesis oleh flavonoid, melalui penghambatan  angiogenesis,  sel  kanker akan  mengalami  kematian  karena  tidak
mendapat  suplai  nutrisi  dan  oksigen (Mater, 2001).
Sedangkan Alkaloid dihasilkan oleh banyak organisme, mulai dari bakteria,  fungi  (jamur),  tumbuhan,  dan hewan.  Alkaloid  adalah  sebuah  golongan senyawa basa bernitrogen yang kebanyakan  heterosiklik  dan  terdapat banyak  tumbuhan.  Asam  amino,  peptida, protein,  nukleotid,  asam  nukleik,  gula amino  dan  antibiotik  biasanya  tidak digolongkan  sebagai  alkaloid  (Thomas 2007).
Tabel 2. Rerata persentase viabilitas pertumbuhan sel  HeLa  dan nilai IC50 ekstrak jahe merah ( Zingiber officinale var. rubrum) . Kadar ekstrak jahe merah % Viabilitas Rerata % IC 50 1 2 3 35,530 200 µg/ml 14,667 4,381 6,667 8,571 100 µg/ml 16,667 6,095 10,638 11,133 50 µg/ml 39,810 28,667 33,524 34,000 25 µg/ml 68,667 78,381 75,238 74,095 12,5 µg/ml 69,524 87,524 78,667 78,571
Dari  tabel  di  atas  menunjukkan  bahwa secara  umum  peningkatan  konsentrasi bahan  uji  akan  menyebabkan  penurunan persentase  pertumbuhan  sel  kanker  yang hidup  .  Pada  konsentrasi  tertinggi  200 µg/ml ekstrak jahe merah dapat
menyebabkan  persentase  pertumbuhan sel  kanker    yang  hidup    rata-rata  8,571%, sedangkan  pada  konsentrasi  terendah ekstrak  jahe  merah  dapat  menyebabkan terjadinya  peningkatan    pertumbuhan  sel HeLa yang hidup rata-rata 78,571%.
Tabel 3. Rerata persentase penghambatan pertumbuhan sel kanker serviks HeLa setelah perlakuan dengan senyawa uji selama 24 jam menggunakan metode MTT essay
No Fraksi Kadar % Viabilitas Rerata % IC 50 1 2 3 20.105 1 N-heksan 200 5.238 5.810 5.524 5.524 100 5.238 6.952 6.095 6.095 50 37.810 38.381 41.810 39.333 25 40.095 50.095 54.667 48.286 12,5 48.952 57.524 59.524 55.333
2 Etilasetat Etanol 200 6.095 6.381 5.810 6.095 27.688 100 11.238 10.095 6.667 9.333 50 36.095 36.667 39.524 37.429 25 47.524 50.952 51.524 50.000 12,5 79.524 72.381 74.095 75.333 200 101.238 100.667 101.810 101.238 100 106.667 101.810 102.667 103.714 3 50 108.667 102.381 104.381 105.143 25 115.524 105.238 104.667 108.476 12,5 116.952 110.667 106.095 111.238 Berdasarkan tabel di atas menunjukkan bahwa secara umum peningkatan  konsentrasi  bahan  uji  akan menyebabkan penurunan persentase pertumbuhan sel kanker yang hidup. Pada konsentrasi  tertinggi  200  µg/ml  fraksi etilasetat jahe merah  dapat menyebabkan persentase  pertumbuhan  sel  HeLa    yang hidup    rerata  5.524%,  sedangkan  pada konsentrasi  terendah  fraksi  etilasetat  jahe merah  dapat  menyebabkan  terjadinya peningkatan  pertumbuhan sel HeLa  yang hidup rata-rata 55.333%, sedangkan pada fraksi n-heksan jahe merah pada konsentrasi  200  µg/ml  sel  HeLa  yang hidup  rerata  6.095%  dan  konsentrasi terendah  12,5  µg/ml  sel  Hela  yang hidup75.333%.
Berdasarkan  analisa  probit  yang didapatkan  diperoleh  nilai  IC50  sel  HeLa setelah  diinkubasi  dengan  fraksi  etilasetat jahe  merah,  fraksi  n-heksan  jahe  merah dan  fraksi  etanol    jahe  merah  selama  24 jam,  terlihat  bahwa  fraksi  n-heksan mempunyai  efek  sitotoksik  paling  kuat dengan  nilai  IC50  20.105  µg/ml  serta fraksi    etilasetat  mempunyai      nilai  IC  50
yaitu 27.688 µg/ml hal ini mengindikasikan bahwa  keberadaan  senyawa  aktif  yang mempunyai efek sitotoksik ada pada fraksi n-heksan,  dan  etilasetat  sedangkan  fraksi etanol  tidak  muncul  nilai  IC50  hal  ini berarti fraksi etanol tidak bersifat sitotoksik terhadap  sel  HeLa.  Nilai  IC50  fraksi  etil asetat  jahe  merah  ( Zingiber  officinale  var. rubrum) ini  lebih besar  jika dibandingkan dengan    penelitian  Wibowo  (2011)  yang menyatakan  bahwa  fraksi  daun aglaia elliptica  Blume memiliki  nilai  sitotoksik terhadap  sel  HeLa  yang  dinyatakan dengan  nilai  IC50  yaitu  16,03  µg/ml, sedangkan  fraksi  n-heksan  jahe  merah memiliki  nilai  IC50  lebih  rendah  jika dibandingkan    penelitian  Aryanti at.all (2005)  mengenai aktifitas sitotoksik fraksi n-heksan  akar  berambut arthemisia  Cina terhadap pertumbuhan kanker mulut rahim,  dengan  nilai  IC50  28,12  µg/ml, Walaupun  terdapat  perbedaan  nilai  IC50 dari ketiga tumbuhan tersebut namun nilai IC50 dari ketiga tumbuhan ini menunjukkan memiliki senyawa aktif  yang mempunyai  efek  sitotoksik  terhadap  sel HeLa.
Untuk mengetahui apakah
persentase  viabilitas  sel  HeLa  terdapat perbedaan  antara  sebelum  dan  sesudah perlakuan maka dilakukan uji t
berpasangan dan untuk mengetahui
terdapat  perbedaan  persentase  viabilitas sel HeLa pada setiap perlakuan  dilakukan uji  t  tidak  berpasangan  seperti  terlihat pada tabel berikut ini.
Tabel 4. Hasil uji t terhadap persentase viabilitas sel HeLa
No Perlakuan Kadar (µg/ml) % Viabilitas P* P** Sebelum Perlakuan Sesudah Perlakuan 1 Fraksi etilasetat 200 100 6,095  0,008 0,039 100 100 9,333 50 100 37,429 25 100 50,000 12,5 100 75,333 2 Fraksi n-heksan 200 100 5,524  0,003 0,043 100 100 6,095 50 100 39,333 25 100 48,286 12,5 100 55,333 3 Fraksi etanol 200 100 101,238  0,018 0,000 50 100 103,714 25 100 105,143 12,5 100 108,476
Dari  tabel  di  atas  terlihat  nilai persentase  viabilitas  sel  HeLa  pada  uji  t berpasangan  (P*),  terdapat  perbedaan bermakna  antara  sebelum  dan  sesudah perlakuan  fraksi  etilasetat  dan  n-heksan dengan  nilai  probabilitas  <  0,050  yaitu 0,008  untuk  fraksi  etilasetat  dan  0,003 untuk  fraksi  n-heksan  serta  0,018  untuk fraksi  etanol,  sedangkan  pada  uji  t  tidak berpasangan (P**), didapat nilai probabilitas  <  0,050  pada  fraksi  etilasetat 0,039  sedangkan  pada  fraksi  n-heksan 0,043, dan fraksi etanol 0,000 yang berarti terdapat perbedaan yang bermakna antara  berbagai  konsentrasi  pada  setiap perlakuan.  Dari  data  diatas  menunjukkan probabilitas  pada  baris  variance  assumed
<  0.05  yaitu  0.015,  maka  dapat  dikatakan hasil analisis Ha diterima  yang berarti ada perbedaan yang bermakna antara konsentrasi  Ekstrak  Jahe  Merah  terhadap persentase kehidupan sel HeLa. Berdasarkan  uji post  hoc (lampiran5) menunjukkan bahwa pada data test Tukey HSD dan Bonfferoni pada baris doksorubisin  terhadap  fraksi  etil  asetat jahe  merah  dan  fraksi  n-heksan  jahe merah  menunjukkan  probabilitas  <  0,05 yaitu    0,000  sedangkan  fraksi  n-heksan nilai  probabilitas  0,020  yang  berarti  ada perbedaan  yang  bermakna  dan  nyata antara  IC50  doksorubisin  dengan  IC50 dari  fraksi  etil  asetat  jahe  merah  maupun fraksi n-heksan jahe merah.

## SIMPULAN
1.  Ekstrak  jahe  merah  memiliki  aktifitas
sitotoksik  terhadap  sel  HeLa  dengan nilai IC50  sebesar 35,350 µg/ml
2.  Fraksi  n-heksan    memiliki  aktifitas sitotoksik  terhadap  sel  HeLa  dengan nilai  IC50  sebesar  0,750  dan  fraksi etilasetat  nilai  IC50  sebesar  27.754 µg/ml  sedangkan  fraksi  etanol  jahe merah tidak memiliki aktifitas ditotoksik.
3.  Ekstrak  jahe  merah,  fraksi  n-heksan jahe  merah  mengandung  senyawa terpenoid  dan          sedangkan  fraksi
etilasetat mengandung senyawa flavonoid  yang  ditandai  warna  kuning, sedangkan  fraksi  etanol    memiliki senyawa alkaloid yang ditandai dengan bercak warna orange. 4. Hasil uji kesetaraan antara ekstrak jahe merah, fraksi n-heksan, fraksi etilasetat dengan      doksorubisin  didapat  nilai kesetaraan 1 µg/ml doksorubisin setara dengan  2,8  µg            ekstrak  jahe  merah dan 2,4 µg fraksi n-heksan serta 2,1 µg etilasetat.

## SARAN
1.  Perlu  dilakukan  lebih  lanjut    uji  aktifitas sitotoksik fraksi etil asetat  dan fraksi n- heksan          jahe  merah    terhadap  sel Vero  sehingga  terlihat  selektivitasnya terhadap sel normal.
2.  Perlu  dilakukan  penelitian  mengenai
senyawa murni yang terkandung dalam fraksi  etilasetat  dan  fraksi  n-heksan jahe merah yang bersifat sitotoksik.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,M.,  Cahya,A.,  dan  Gustiar,  H.,
2008, Pengaruh Antioksidan Ekstrak  Jahe  Merah (Zingiber officinale Roscoe var. sunti) trhadap  poliferasi  Sel  Leukimia (THP-1),  Penulisan  Ilmiah,  IPB
(Bogor Agricultural University),
Bogor. Alam, G., dan Tayeb, R., 2003, Fraksinasi dan  uji  Toksisitas  Ekstrak  Metanol Bintang Laut (Protoreaster nodusus W.) Terhadap Larva
Artemia  salina  Leach,  Pharmacon,
4 (2), 48-52.
American  Cancer  Society,  2006,  Cancer Facts  and  Figures  2006,  American Cancer Society Inc. Atlanta
Anggrianti, P., 2008, Uji Sitotoksis Ekstrak Etanol  70%  Buah  Kemukus  ( Piper cubeba L.)  terhadap  sel  hela,
Skripsi, Universitas Muhammadiyah urakarta, Surakarta.
Aziz F, Nugroho K, dan Ratna S S., 1985, Karsinoma serviks Uterus, Bagian / SMF Obstetri dan Ginekologi Fakultas  Kedokteran  UI –  RS  dr. Ciptomangunkusumo Jakarta.
Aryanti at. all ,.2005,Isolasi Senyawa
Antikanker  Dari  Akar  Berambut Artthemisia  Cina  dan  Aktifitas Inhibisinya  Terhadap  Sel  Kanker Mulut Rahim. (http:www.Jurnal Farmasi Indonesia/index, diakses 9 September 2012).
Betina,  V.,  (1973),    Bioautography      in paper      and    thin    layer chromatography    and    its  scope  in the  antibiotic  field, J.  Chromatogr.,
(78), 41-51.
Blessy,  D.,  Suresh,K.,  Manoharan,  S., Vijayaanand,
A.M., and Sugunadevi,G.,  2009,  Evaluation of  Chemopreventive  Potensial  of
Zingiber officinale Roscoe Ethanolic  Root  Extract  on  7,  12- dimethyl  Benzanthracene  Induced Oral  Carcinogenesis, Research Journal of Agriculture and Biological Sciences, 5 (5), 775-781.
Buhler  DR,  Miranda  C,  2000.  Antioxidat Activities  of  Flavonoids.  Http:  //Ipi. Oregonstate.edu/f.wOO/flavonoid.
CCRC,  2011.  Laboratorium  Universitas Gajah Mada, Yokyakarta. Darwis.D. 2000 Teknik Dasar Laboratorium Dalam Penelitian Senyawa  Bahan  Alami  Hayati. Workshop Pengembangan Sumber Daya Manusia Dalam Bidang Kimia Organik Bahan Alami Hayati. FMIPA Universitas Andalas Padang.
Depkes  RI.  2000.  Parameter  Standar
Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat.
Depkes  RI,      Direktorat  Jendral POM, Direktorat POM.
Dey,  P.M.  and  J.  B.  Harborne.1991. Methods  in  Plant  Biochemistry. Sixth  Edition.  Academic  Press.
London.
Doyle,  A., and Griffiths,  J.  B.,  2000, Cell and  Tissue  Culture  for  Medical research ,  John  Willey  and  Sons.
Ltd., New York.
Efek  sitotoksik  ekstrak  tanaman  keladi tikus  (Typhonium  divaricatum  (L) terhadap  sel  hela.  Muhammad Da’i,  anis  Fiveri,  Edy  Meiyanto.
Jurnal  Farmasi  Indonesia  Vol.  3 No.4  Juli  2007:  163-167.  Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Hanahan,  D., and Weinberg,  R.  A.,  2000, The Halmarks of Cancer, Cell , 100,
57-70
Handoko et  al .,  2011.  Aktivitas  Sitotoksik Ekstrak  Etanolik  Rimpang  Temu Kunci (Boesenbergia  pandurata) Terhadap Sel Kanker Serviks HeLa
dan  Sel  Kanker  Kolon  WiDr. (http:www.Artikel Penelitian.com/index,  diakses  11 September 2012).
Harmanto, N. 2001, Sehat dengan ramuan Tradisional Mahkotadewa. Cetakan Pertama, Tanggerang, PT. Agromedia Pustaka, 31-35. Hartati,  M.S.W.,  Wahyuono,  S.,  Artama, W.T.  efek  sitotoksisitas  Okandrin,
senyawa  bioaktif  Hasil  Isolasi  dari Daun Nerium indicum Mill terhadap
Sel  Micloma,  Yogyakarta,  Berkala Ilmu  Kedokteran  Vol.  32.  No.  $. Desembar 2000.
Koswara,  S.  1995,  Jahe  dan  Hasil Olahannya, Pustaka Sinar Harapan,
Jakarta.
King,  R.  J.  B.,  2000, Cancer  Biology , Second  Edition,  Person  Education Limited, London.
Lee, E., and Surh, Y. J., 1998 Induction of Apoptosis  in  HL-60  Cells  by Pungent  Vinilloid,  6-Gingerol  and 6-Paradol, Cancer  Letters ,  134,
163-168.
Maryati  dan  Sutrisna,  E.  M.,  Potensi
Sitotoksik Tanaman Ceplukan
( Phyliasis  angulata L.)  Terhadap
Sel Hela, Pharmacon , 8(1), 1-5.
Mater,  A.J,  2001,  Tumor  Angiogenesis  as a  Therapeutik  Target,  DTT,  Vol.6
No. 19. Hal. 1005-1020.
Melannisa,  R.,  2004,  Pengaruh  PGV-1
pada  Sel  Kanker  Payudara  T47D yang diinduksi 17β-Estradiol: Kajian  Antiproliferase,  Pemacuan
Apoptosis  dan  Antiangiogenesis, Tesis ,  Program  Pasca  Sarjana Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Paimin,  FB.  1999.  Budidaya,  Pengolahan, Perdagangan Jahe Merah, Penebar Swadaya, Jakarta.
Ren,  W.,  Qiao,  Z,  Wang,  H.,  Zhu,  L.,
Zhang, L., 2003, Flavonoid: Promising Anticancer Agent, Medicinal Research Review, 23 (4) : 519-834. Ritiasa, K & Muhibat, R.2000. Parameter
Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Departemen Kesehatan RI. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan. Jakarta.
Salni.  2003.  Karakteristik  dan  Uji  Aktivitas Tropikal  Senyawa  Antibakteri  dari Daun  Karamunting  ( Rhodomyrtus tomentosa Ait  Hassk).  Disertasi. ITB. Bandung.
Sudariyanto,  2010,  Kanker  Payudara (online), (http://dinkes- sulsel.go.id/new/index.php?option=
com_content&task=view&id=175, diakses 17 Januari 2012)
Sudarsono,  Pudjorinto,  A.,  Gunawan,  D., Wahyuono, S., Donatus, I.A.,
Dradjad,  M.,  Wibowo,  S.,  dan Ngatidjan,  1996,  Tumbuhan  Obat, PPOT,  Universitas  Gadjah  Mada, Yogyakarta, 150-155.
Sukardja, I. G. D., 2004, Onkologi, Edisi 2, 113,  Airlangga  University  Press,
Surabaya.
Teguh  Hartono,  2009.  Saponin:  http  :  // farmasi.dikti.net/tag/saponin/
Tejasari  dan  Zakaria,  F.  R.,  2000,  Sifat Fingsional  Jahe:  Fraksi  1dan  2 senyawa Bioaktif Oleoresin Rimpang Jahe ( Zingiberis officinale Roscoe) menurunkan  Peroxidasi
Lipid Membran Sel Limposit
Secara In  Vitro , Prosiding  Seminar Nasional Industri Pangan , 2,
PAPTI, Bogor.
Wattimena  JR,  Sugiarso  NC,  Widianto MB,  Sukandar  EY,  Soemardji  AA, Setiadi  AR.  1991. Farmakologi  dan Terapi Antibiotik . Gadjah Mada
University Press : Yogyakarta. Waji,  2009,  Artikel  Kesehatan  Kimia Organik  Bahan  Kimia  Flavonoid (Quercetin), Universitas Hasanuddin.
Wibowo,  2010,  Aktifitas  Sitotoksik  Ekstrak Etanol Daun Aglaia Elliptica Blume
Terhadap Galur Sel Kanker Serviks (HeLa).  (http:www.Jurnal  Farmasi Indonesia.com/index,  diakses  11
September 2012).
Yoganingrum, 1999. Paket Informasi
Teknologi Budidaya dan Pasca Panen,  Pusat  Dokumentasi  dan
Informasi Ilmiah-LIPI, Jakarta. Yuharmen, 2002. Uji Aktivitas Anti Mikroba Minyak  Atsiri  dan  Ekstrak  Metanol Lengkuas (Lenguas galanga ) Jurusan  Kimia,  FMIPA,  Universitas Riau.