## ABSTRAK
Biji dan kulit petai mengandung flavonoid yang berfungsi sebagai antioksidan. Tujuan penelitian yaitu mengetahui potensi antioksidan ekstrak etil asetat pada biji dan kulit petai yang dinyatakan dengan Inhibitor  Consentration  50  (IC 50 ).  Pengujian  aktivitas  antioksidan  menggunakan  metode  DPPH (1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil) secara spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 518 nm. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etil asetat biji petai mempunyai potensi aktivitas antioksidan lemah dengan nilai IC 50 sebesar 274,702 ppm sedangkan ekstrak etil asetat kulit petai aktivitas antioksidannya tidak aktif dengan nilai IC 50 sebesar 685, 857 ppm. Aktivitas antioksidan pada biji petai disebabkan adanya antioksidan enzimatis sehingga tidak dapat terdeteksi dengan metode DPPH dan kandungan utamanya protein, karbohidrat, mineral,asam amino yang cukup tinggi. Aktivitas antioksidan ekstrak etil asetat kulit petai menunjukkan tidak aktif, karena senyawa aktif yang berfungsi sebagai antioksidan tidak  larut  dalam  pelarut  etil  asetat.  Aktivitas  antioksidan  yang  tidak  terdapat  pada  kulit  petai disebabkan kandungan utamanya yaitu pati dan serat. Kesimpulan penelitian adalah ekstrak etil asetat biji petai memiliki aktivitas antioksidan, sedangkan ekstrak etil asetat kulit petai tidak memiliki aktivitas antioksidan.
Kata kunci : biji petai, kulit petai, antioksidan, DPPH, IC 50

## ABSTRACT
Petai seeds and petai shell are contain flavonoids that act as antioxidants. The purpose of research is to know the potential of the ethyl acetate extract antioxidant in seeds and petaishell expressed by Inhibitor consentration 50 (IC50). Testing of antioxidant activity using DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) UV-Vis spectrophotometry at a wavelength of 518 nm. The results showed the ethyl acetate extract petai seeds have potential antioxidant activity weak with IC50 value of 274.702 ppm while the ethyl acetate extract of petai shell antioxidant activity is not active with IC50 values of 685, 857 ppm. Antioxidant activity in seeds due to their antioxidant enzymatic petai so it can not be detected by DPPH and the main content of protein, carbohydrates, minerals, amino acids are quite high. The antioxidant activity of ethyl acetate extracts of petai shell showed inactive , because the active compounds that function as antioxidants are not soluble in ethyl acetate solvent. The antioxidant activity which is not present in petai shell due to the content of its main substance are starch and fiber. Conclusion of the study is the ethyl acetate extract petai beans have antioxidant activity, while the ethyl acetate extract of petai shell does not have antioxidant activity.
Keywords: petai seeds, petai shell, antioxidant, DPPH, IC50

## POTENSI ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETIL ASETAT BIJI DAN KULIT PETAI ( Parkia speciosa Hassk.)
Arum Setyaningtyas 1 , Indri Kusuma Dewi 2 , Agus Winarso 3
1,2,3 ) Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Surakarta Program Studi Diploma III Jamu arumsetyaningtyas@yahoo.co.id
Indonesia  yang  memiliki  aktivitas  antioksidan adalah petai ( Parkia speciosa Hassk.).
Salah  satu  uji  untuk  menentukan  aktivitas antioksidan  penangkap  radikal  adalah  metode DPPH  (1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil).  Metode DPPH  merupakan  uji  untuk  menentukan aktivitas  antioksidan  dalam  sampel  yang  akan diujikan  dengan  melihat  kemampuannya  dalam menangkap radikal bebas DPPH. Sumber radikal bebas dari metode ini adalah senyawa 1,1-Difenil- 2-Pikrilhidrazil (DPPH). Prinsip dari uji ini adalah adanya donasi atom hidrogen dari substansi yang diujikan kepada radikal DPPH menjadi senyawa non  radikal  difenil  pikrilhidrazin  (Molyneux, 2004). Parameter untuk menginterpretasikan hasil pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan  metode DPPH adalah IC 50 ( inhibition concentration ). IC 50 adalah  bilangan  yang  menunjukkan  konsentrasi ekstrak  yang  mampu  menghambat  aktivitas DPPH  sebesar  50%  (Kurniawati  dalam Wahyu, 2014)
Tujuan  penelitian  untuk  mengetahui potensi aktivitas antioksidan biji dan kulit petai yang  dibuat  dalam  bentuk  ekstrak  etil  asetat menggunakan  metode  DPPH  (1,1  Difenil- 2-Pikrilhidrazil).

## 2.  PELAKSANAAN
a.  Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Jurusan  Jamu  Politeknik  Kesehataan  Sura- karta.  Waktu  penelitian  dilaksanakan  pada bulan Januari sampai Juni 2015.
b.  Populasi  pada  penelitian  ini  adalah  ekstrak etil  asetat  pada  biji  dan  kulit  petai  yang dibuat di Laboratorium Jurusan Jamu Poli- teknik Kesehatan Surakarta. Biji  dan  kulit  petai  diperoleh  dari  Desa Kwadungan Kerjo Karanganyar.
c.  Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak etil asetat pada biji dan kulit petai masing-masing sebanyak 100 mg.
d.  Definisi Operasional

## 1.  PENDAHULUAN
Pemakaian  obat  tradisional  dalam  bentuk jamu  maupun  tanaman  obat  masih  berlangsung sampai sekarang bahkan mengalami peningkatan. Pencemaran udara di sekeliling kita yang banyak mengandung radikal bebas, tanpa disadari radikal bebas akan masuk kedalam tubuh menyebabkan timbulnya penyakit degeneratif. Tubuh melawan radikal  bebas  dengan  membentuk  antioksidan alami  sehingga  terjadi  kesetimbangan  antara radikal bebas dengan antioksidan. Radikal bebas adalah atom atau molekul yang memiliki elektron tidak  berpasangan  ( unpaired  electron ).  Adanya elektron  yang  tidak  berpasangan  menyebabkan senyawa  tersebut  sangat  reaktif  mencari pasangan, dengan cara menyerang dan mengikat elektron  molekul  yang  berada  di  sekitarnya. Radikal bebas yang merusak tubuh ini dinetralisir oleh senyawa antioksidan (Winarsi, 2007).
Antioksidan  dapat  berupa  enzim,  vitamin (misalnya  vitamin  E,  C,  A),  dan  senyawa  lain seperti  flavonoid,  karoten,  albumin,  dan  lain- lain  (Winarsi,  2007).  Antioksidan  diperlukan oleh  tubuh  untuk  menetralisir  radikal  bebas dan  mencegah  kerusakan  yang  ditimbulkan oleh  radikal  bebas  terhadap  sel  normal  protein dan  lemak.  Senyawa  ini  melindungi  tubuh  dari serangan radikal bebas dengan cara melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas dan  menghambat  terjadinya  reaksi  berantai dari  pembentukan  radikal  bebas.  Antioksidan dapat mencegah terjadinya penyakit degeneratif seperti  jantung  koroner, diabetes  mellitus , aterosklerosis,  gagal  ginjal,  insomnia,  rematik dan kanker maupun menghambat proses penuaan dini (Setyowati dkk , 2013).
Beberapa  penelitian  menunjukkan  bahwa beberapa  tanaman  terbukti  bermanfaat  dalam melindungi  tubuh  dari  bahaya  radikal  bebas, hal  ini  dikarenakan  terdapatnya  senyawa  yang berpotensi  sebagai  antioksidan.  Suatu  tanaman dapat  memiliki  aktivitas  antioksidan  apabila mengandung  senyawa  yang  mampu  menangkal radikal bebas seperti fenol dan flavonoid (Niken dalam Syamsiyah, 2011). Salah satu tanaman di

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017
Variabel Definisi Operasional Cara Pengukuran Hasil Pengukuran Skala Uji aktivitas anti oksidan dengan metode DPPH Uji aktivitas anti oksidan dengan metode DPPH adalah uji untuk mengetahui apakah terdapat aktivitas antioksidan pada ekstrak etil asetat pada biji dan kulit petai menggunakan radikal bebas yang stabil DPPH dalam larutan metanol, dan untuk mengetahui biji dan kulit petai apakah berpotensi menangkap radikal bebas DPPH. Mengamati nilai absorbansi yang terbaca dalam spektro-fotometri
UV-Vis kemudian menghitungnilai
IC 50 Nilai IC 50 Ordinal

## 3. METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian  kuantitatif  non  eksperimental  dengan studi  korelasional  yaitu  suatu  desain  yang digunakan  untuk  mengkaji  pengaruh  antara variabel.

## Tahap pelaksanaan penelitian
a.  Pembuatan simplisia biji dan kulit petai Hasil berat simplisia biji dan kulit petai pada tabel 1 :

## Tabel 1. Hasil Berat Simplisia Biji dan Kulit
Petai Simplisia Berat Bahan Basah (gram) Berat Bahan Kering (gram) Berat Serbuk Sampel (gram) Biji Petai 1000 252 100 Kulit Petai 1000 260 100 Berdasarkan  tabel  1  dapat  diketahui berat  basah  biji  petai  sebesar  1000  gram menghasilkan  berat  simplisia  sebesar  252 gram.  Berat  basah  kulit  petai  sebesar  1000 gram  menghasilkan  berat  simplisia  sebesar 260 gram. Hasil simplisia biji dan kulit petai kemudian digunakan sebagai sampel serbuk simplisia masing-masing sebesar 100 gram.
b.  Pengukuran  kadar  air  serbuk  simplisia  biji dan kulit petai Cawan  porselin  dipanaskan  dalam  oven dengan  suhu  100-105 o C  selama  1  jam, kemudian cawan proselin dimasukkan dalam desikator  selama  15  menit,  lalu  ditimbang. Sampel  1-2  gram  (W1)  ditimbang  dalam
cawan  porselin  yang  sudah  diketahui beratnya.  Sampel  dikeringkan  dalam  oven pada  suhu  100-105 o C  selama  4-6  jam. Setelah  masuk  oven  dididinginkan  dalam desikator  selama  15  menit  dan  dilanjutkan penimbangan  (W2).  Perlakuan  di  ulangi hingga berat konstan (Legowo dkk, 2007). Kadar air dihitung berdasarkan bobot kering ( dry basis ) dengan rumus:

## 3. METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian  kuantitatif  non  eksperimental dengan  studi  korelasional  yaitu  suatu desain  yang  digunakan  untuk  mengkaji pengaruh antara variabel.

## Tahap pelaksanaan penelitian
a. Pembuatan simplisia biji dan kulit petai
Hasil  berat  simplisia  biji  dan  kulit  petai pada tabel 1 :
Tabel 1.  Hasil Berat Simplisia Biji dan Kulit Petai Simplisia Berat Bahan Basah (gram) Berat Bahan Kering (gram) Berat Serbuk Sampel (gram) Biji Petai 1000 252 100 Kulit Petai 1000 260 100 Berdasarkan  tabel  1  dapat  diketahui  berat basah  biji  petai  sebesar  1000  gram menghasilkan  berat  simplisia  sebesar  252 gram. Berat basah kulit petai sebesar 1000 gram menghasilkan berat simplisia sebesar
260  gram.  Hasil  simplisia  biji  dan  kulit petai  kemudian  digunakan  sebagai  sampel serbuk  simplisia  masing-masing  sebesar 100 gram. b. Pengukuran  kadar  air  serbuk  simplisia  biji dan kulit petai
Cawan  porselin  dipanaskan  dalam  oven dengan  suhu  100-105 o C  selama  1  jam, kemudian  cawan  proselin  dimasukkan dalam  desikator  selama  15  menit,  lalu ditimbang.  Sampel  1-2  gram  (W1) ditimbang  dalam  cawan  porselin  yang sudah diketahui beratnya. Sampel dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu  100- 105 o C selama 4-6 jam. Setelah masuk oven dididinginkan  dalam  desikator  selama  15 menit  dan  dilanjutkan  penimbangan  (W2). Perlakuan  di  ulangi  hingga  berat  konstan (Legowo dkk, 2007). Kadar  air  dihitung  berdasarkan  bobot kering ( dry basis ) dengan rumus: Tabel  2.  Hasil  Pengukuran  Kadar  Air  Serbuk Simplisia Biji dan Kulit Petai
Berdasarkan    tabel  2,    dapat    diketahui kadar  air  serbuk simplisia biji petai yang diperoleh  sebesar  4,373  %  dan  kadar  air serbuk  simplisia  kulit  petai  sebesar  5,203
%, dari  data  di  atas menunjukkan  bahwa kadar    air    biji  dan  kulit  petai  sudah memenuhi standar <10 %.
c. Ekstraksi biji dan kulit petai secara maserasi Biji  dan  kulit  petai  setelah  kering dihaluskan dengan cara diblender kemudian  di  ayak,  hingga  didapatkan serbuk  halus.  Serbuk  biji  dan  kulit  petai masing–masing  100  gram  diekstraksi dengan  pelarut  etil  asetat  sebanyak  7,5 kalinya  sampai  semua  serbuk  terendam selama  5  hari  sambil  sesekali  diaduk. Setelah  5  hari  dilakukan  penyaringan sehingga  diperoleh  maserat.  Maserat pertama  ditampung,    dan  dilakukan remeserasi  terhadap  ampas  dengan  pelarut etil  asetat  sebanyak  2,5  kalinya  serbuk selama  2  hari.    Setelah  2    hari  dilakukan penyaringan  sehingga  diperoleh  maserat kedua.  Maserat  pertama  dan  kedua diuapkan sehingga diperoleh ekstrak kental kemudian  ditimbang.  Hasil  akhir  ekstraksi diperoleh  ekstrak  etil  asetat  biji  petai berbentuk  kental  berwarna  hijau  muda ketuaan  yang  memiliki  aroma  khas  biji petai,  sedangkan  ekstrak  etil  asetat  kulit petai  berbentuk  seperti  serbuk  berwarna putih kecoklatan yang memiliki aroma khas seperti  kulit  petai.  Ekstrak  etil  asetat  biji petai  yang  dihasilkan  seberat  42,42  gram dan  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai  yang dihasilkan seberat 12,87 gram. d. Pengukuran rendemen ekstrak Pengukuran  rendemen  ekstrak    diperoleh dari  hasil  proses  maserasi  merupakan perbandingan  jumlah  ekstrak  yang dihasilkan  dibagi  dengan  jumlah  bahan Tabel 2. Hasil Pengukuran Kadar Air Serbuk Simplisia Biji dan Kulit Petai 3. METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  yang  digunakan  adalah penelitian  kuantitatif  non  eksperimental dengan  studi  korelasional  yaitu  suatu desain  yang  digunakan  untuk  mengkaji pengaruh antara variabel.

## Tahap pelaksanaan penelitian
a. Pembuatan simplisia biji dan kulit petai Hasil  berat  simplisia  biji  dan  kulit  petai pada tabel 1 :
Tabel 1.  Hasil Berat Simplisia Biji dan Kulit Petai
Simplisia Berat Bahan Basah (gram) Berat Bahan Kering (gram) Berat Serbuk Sampel (gram) Biji Petai 1000 252 100 Kulit Petai 1000 260 100
Berdasarkan  tabel  1  dapat  diketahui  berat basah  biji  petai  sebesar  1000  gram menghasilkan  berat  simplisia  sebesar  252 gram. Berat basah kulit petai sebesar 1000 gram menghasilkan berat simplisia sebesar 260  gram.  Hasil  simplisia  biji  dan  kulit petai  kemudian  digunakan  sebagai  sampel serbuk  simplisia  masing-masing  sebesar 100 gram.
b. Pengukuran  kadar  air  serbuk  simplisia  biji dan kulit petai Cawan  porselin  dipanaskan  dalam  oven dengan  suhu  100-105 o C  selama  1  jam, kemudian  cawan  proselin  dimasukkan dalam  desikator  selama  15  menit,  lalu ditimbang.  Sampel  1-2  gram  (W1) ditimbang  dalam  cawan  porselin  yang sudah diketahui beratnya. Sampel dikeringkan  dalam  oven  pada  suhu  100-
105 o C selama 4-6 jam. Setelah masuk oven dididinginkan  dalam  desikator  selama  15 menit  dan  dilanjutkan  penimbangan  (W2). Perlakuan  di  ulangi  hingga  berat  konstan (Legowo dkk, 2007). Kadar  air  dihitung  berdasarkan  bobot kering ( dry basis ) dengan rumus:
Tabel  2.  Hasil  Pengukuran  Kadar  Air  Serbuk Simplisia Biji dan Kulit Petai
Berdasarkan    tabel  2,    dapat    diketahui kadar  air  serbuk simplisia biji petai yang diperoleh  sebesar  4,373  %  dan  kadar  air serbuk  simplisia  kulit  petai  sebesar  5,203 %, dari  data  di  atas menunjukkan  bahwa kadar    air    biji  dan  kulit  petai  sudah memenuhi standar <10 %.
c. Ekstraksi biji dan kulit petai secara maserasi Biji  dan  kulit  petai  setelah  kering dihaluskan dengan cara diblender kemudian  di  ayak,  hingga  didapatkan serbuk  halus.  Serbuk  biji  dan  kulit  petai masing–masing  100  gram  diekstraksi dengan  pelarut  etil  asetat  sebanyak  7,5 kalinya  sampai  semua  serbuk  terendam selama  5  hari  sambil  sesekali  diaduk. Setelah  5  hari  dilakukan  penyaringan sehingga  diperoleh  maserat.  Maserat pertama  ditampung,    dan  dilakukan remeserasi  terhadap  ampas  dengan  pelarut etil  asetat  sebanyak  2,5  kalinya  serbuk selama  2  hari.    Setelah  2    hari  dilakukan penyaringan  sehingga  diperoleh  maserat kedua.  Maserat  pertama  dan  kedua diuapkan sehingga diperoleh ekstrak kental kemudian  ditimbang.  Hasil  akhir  ekstraksi diperoleh  ekstrak  etil  asetat  biji  petai berbentuk  kental  berwarna  hijau  muda ketuaan  yang  memiliki  aroma  khas  biji petai,  sedangkan  ekstrak  etil  asetat  kulit petai  berbentuk  seperti  serbuk  berwarna putih kecoklatan yang memiliki aroma khas seperti  kulit  petai.  Ekstrak  etil  asetat  biji petai  yang  dihasilkan  seberat  42,42  gram dan  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai  yang dihasilkan seberat 12,87 gram.
d. Pengukuran rendemen ekstrak Pengukuran  rendemen  ekstrak    diperoleh dari  hasil  proses  maserasi  merupakan perbandingan  jumlah  ekstrak  yang dihasilkan  dibagi  dengan  jumlah  bahan
Berdasarkan  tabel  2,  dapat  diketahui  kadar air serbuk simplisia biji petai yang diperoleh sebesar  4,373  %  dan  kadar  air  serbuk simplisia  kulit  petai  sebesar  5,203  %,  dari data  di  atas  menunjukkan  bahwa  kadar  air biji dan kulit petai sudah memenuhi standar <10 %.
c.   Ekstraksi biji dan kulit petai secara maserasi Biji dan kulit petai setelah kering dihaluskan dengan  cara  diblender  kemudian  di  ayak, hingga  didapatkan  serbuk  halus.  Serbuk biji  dan  kulit  petai  masing-masing  100 gram  diekstraksi  dengan  pelarut  etil asetat  sebanyak  7,5  kalinya  sampai  semua serbuk  terendam  selama  5  hari  sambil sesekali  diaduk.  Setelah  5  hari  dilakukan penyaringan  sehingga  diperoleh  maserat. Maserat pertama ditampung, dan dilakukan remeserasi  terhadap  ampas  dengan  pelarut etil  asetat  sebanyak  2,5  kalinya  serbuk selama  2  hari.  Setelah  2  hari  dilakukan penyaringan  sehingga  diperoleh  maserat
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017
kedua. Maserat pertama dan kedua diuapkan sehingga diperoleh ekstrak kental kemudian ditimbang.  Hasil  akhir  ekstraksi  diperoleh ekstrak etil asetat biji petai berbentuk kental berwarna hijau muda ketuaan yang memiliki aroma khas biji petai, sedangkan ekstrak etil asetat  kulit  petai  berbentuk  seperti  serbuk berwarna  putih  kecoklatan  yang  memiliki aroma  khas  seperti  kulit  petai.  Ekstrak  etil asetat  biji  petai  yang  dihasilkan  seberat 42,42 gram dan ekstrak etil asetat kulit petai yang dihasilkan seberat 12,87 gram.
d.   Pengukuran rendemen ekstrak Pengukuran  rendemen  ekstrak  diperoleh dari  hasil  proses  maserasi  merupakan perbandingan jumlah ekstrak yang dihasilkan dibagi  dengan  jumlah  bahan  sebelum dimaserasi dikali 100% (Depkes RI, 2000).
Persentase  rendemen  ekstrak  dihitung berdasarkan rumus :
sebelum  dimaserasi  dikali    100%  (Depkes
RI, 2000).
Persentase  rendemen  ekstrak  dihitung berdasarkan rumus :
e.  Pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan metode  DPPH  (1,1  –  Difenil  –  2  – Pikrilhidrazil)
1.  Pembuatan larutan baku DPPH 100 ppm Pembuatan larutan baku DPPH 100 ppm dengan cara ditimbang sebanyak 10 mg DPPH  kemudian  dilarutkan  dengan metanol  dalam  labu  ukur  ad  100  ml, sehingga  didapatkan  larutan  dengan konsentrasi  100  ppm.  Larutan  dijaga dari cahaya untuk segera digunakan.
2. Penentuan Operating Time Larutan  DPPH  100  ppm  diukur absorbansinya  pada  rentang  panjang gelombang  maksimum  teoritis  517  nm dengan  interval  1  menit,  dimulai  dari menit  ke-0  hingga  diperoleh  serapan yang stabil.
3.  Penentuan  panjang  gelombang  mak- simum larutan baku DPPH 100 ppm Larutan DPPH 100 ppm dalam  metanol diukur  absorbansinya  dengan  spektro fotometri UV-Vis pada rentang panjang gelombang  450-550  nm lalu  ditentukan panjang gelombang maksimum.
4.  Penyiapan  sampel  kerja  untuk  peng- ukuran  aktivitas  antioksidan  berupa larutan  kontrol  negatif  (DPPH),  larutan kontrol  positif  (Vitamin  C),  larutan ekstrak etil asetat biji petai,  dan larutan ekstrak etil asetat kulit petai.
a.  Pembuatan  dan  pengukuran  sampel kerja larutan kontrol negatif Dipipet 3 ml metanol, ditambahkan 1 ml  larutan  DPPH  100  ppm, campuran  dimasukkan  dalam  kuvet, diukur  absorbansinya  pada  panjang gelombang maksimum.
b.  Pembuatan sampel kerja pada ekstrak etil  asetat  biji  petai  dan  pengukuran aktivitas antioksidan Ditimbang  ekstrak  etil  asetat  biji petai  sebanyak  100  mg  kemudian larutkan  dengan  100  ml  metanol, hingga  diperoleh  konsentrasi  1000
ppm.  Lalu    dilakukan  pengenceran sehingga  diperoleh  larutan  sampel dengan beberapa konsentrasi (40, 60, 80, 100, 120 ppm) . Untuk penentuan aktivitas  antioksidan  masing-masing konsen-trasi  dipipet  3  ml  larutan sampel  kemudian  tambahkan  1  ml larutan  DPPH  100  ppm,  campuran dimasukkan  dalam  kuvet,  diukur absorbansinya pada panjang gelombang  maksimum.  Nilai  IC 50 dihitung  menggunakan  persamaan regresi  linier  hubungan  antara konsentrasi dan persen inhibisi.
c.  Pembuatan sampel kerja ekstrak etil asetat  kulit  petai  dan  pengukuran aktivitas antioksidan Ditimbang  ekstrak  etil  asetat  kulit petai  sebanyak  100  mg  kemudian dilarutkan  dengan  100  ml  metanol, hingga  diperoleh  konsentrasi  1000 ppm,  lalu  dilakukan  pengenceran sehingga  diperoleh  larutan  sampel dengan beberapa konsentrasi (40, 60, 80, 100, 120 ppm) . Untuk penentuan aktivitas antioksidan  masing–masing konsentrasi  dipipet  3  ml    larutan sampel  kemudian  ditambahkan  1  ml larutan  DPPH  100  ppm,    campuran dimasukkan  dalam  kuvet,  diukur absorbansinya  pada panjang gelom- bang maksimum. Nilai  IC 50 dihitung menggunakan  persamaan  regresi linier    hubungan  antara  konsentrasi dan persen inhibisi.
d.  Pembuatan  sampel  kerja  larutan vitamin  C  dan  pengukuran  aktivitas antioksidan Ditimbang  10  mg    vitamin  C dilarutkan  dengan  100  ml  metanol, hingga  diperoleh  konsentrasi  100 ppm,  lalu  dilakukan  pengenceran sehingga  diperoleh  larutan    vitamin C  dengan  beberapa  konsentrasi  (15, 20,25, 30, 35 ppm). Untuk penentuan aktivitas  antioksidan  masing-masing konsen-trasi  dipipet  3  ml  larutan vitamin  C  lalu  tambahkan  1  ml larutan  DPPH  100  ppm,  campuran dima-sukkan  dalam  kuvet,    diukur absorbansinya  pada  panjang  gelom- bang maksimum. Nilai  IC 50 dihitung menggunakan  persamaan  regresi linier  hubungan  antara  konsentrasi dan persen inhibisi.
e.   Pengujian  aktivitas  antioksidan  dengan metode DPPH (1,1 – Difenil – 2 – Pikrilhi- drazil) 1.   Pembuatan larutan baku DPPH 100 ppm Pembuatan  larutan  baku  DPPH  100 ppm  dengan  cara  ditimbang  sebanyak 10  mg  DPPH  kemudian  dilarutkan dengan metanol dalam labu ukur ad 100 ml, sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi  100  ppm.  Larutan  dijaga dari cahaya untuk segera digunakan.
2.   Penentuan Operating Time
Larutan  DPPH  100  ppm  diukur absorbansinya  pada  rentang  panjang gelombang  maksimum  teoritis  517  nm dengan  interval  1  menit,  dimulai  dari menit  ke-0  hingga  diperoleh  serapan yang stabil.
3.   Penentuan  panjang  gelombang  mak-si- mum larutan baku DPPH 100 ppm Larutan DPPH 100 ppm dalam metanol diukur  absorbansinya  dengan  spektro fotometri UV-Vis pada rentang panjang
gelombang 450-550 nm lalu ditentukan panjang gelombang maksimum.
4.   Penyiapan  sampel  kerja  untuk  peng- ukuran  aktivitas  antioksidan  berupa larutan kontrol negatif (DPPH), la rutan kontrol  positif  (Vitamin  C),  larutan ekstrak etil asetat biji petai, dan larutan ekstrak etil asetat kulit petai. a.   Pembuatan dan pengukuran sampel kerja larutan kontrol negatif Dipipet 3 ml metanol, ditambahkan 1  ml  larutan  DPPH  100  ppm, campuran  dimasukkan  dalam kuvet,  diukur  absorbansinya  pada panjang gelombang maksimum.
b.   Pembuatan  sampel  kerja  pada ekstrak etil asetat biji petai dan pe- ngukuran aktivitas antioksidan Ditimbang  ekstrak  etil  asetat  biji petai  sebanyak  100  mg  kemudian larutkan  dengan  100  ml  metanol, hingga diperoleh konsentrasi 1000 ppm.  Lalu  dilakukan  pengenceran sehingga  diperoleh  larutan  sampel dengan  beberapa  konsentrasi  (40, 60,  80,  100,  120  ppm)  .  Untuk penentuan  aktivitas  antioksidan masing-masing konsen-trasi dipipet 3  ml  larutan  sampel  kemudian tambahkan 1 ml larutan DPPH 100 ppm, campuran dimasukkan dalam kuvet,  diukur  absorbansinya  pada panjang  gelombang  maksimum. Nilai  IC 50 dihitung  menggunakan persamaan regresi linier hubungan antara  konsentrasi  dan  persen inhibisi.
c.   Pembuatan  sampel  kerja  ekstrak etil asetat kulit petai dan pengukur- an aktivitas antioksidan Ditimbang  ekstrak  etil  asetat  kulit petai  sebanyak  100  mg  kemudian dilarutkan dengan 100 ml metanol, hingga diperoleh konsentrasi 1000 ppm,  lalu  dilakukan  pengenceran sehingga  diperoleh  larutan  sam- pel  dengan  beberapa  konsentrasi (40, 60, 80, 100, 120 ppm). Untuk

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada
- Januari 2017
penentuan  aktivitas  antioksidan masing-masing konsentrasi dipipet 3  ml  larutan  sampel  kemudian  di- tambahkan 1 ml larutan DPPH 100 ppm, campuran dimasukkan dalam kuvet,  diukur  absorbansinya  pada panjang  gelom-bang  maksimum. Nilai  IC 50 dihitung  menggunakan persamaan regresi linier hubungan antara konsentrasi dan persen inhi- bisi. d.   Pembuatan sampel kerja larutan vi- tamin  C  dan  pengukuran  aktivitas antioksidan Ditimbang  10  mg  vitamin  C  di- larutkan  dengan  100  ml  metanol, hingga  diperoleh  konsentrasi  100 ppm,  lalu  dilakukan  pengenceran sehingga diperoleh larutan vitamin C dengan beberapa konsentrasi (15, 20, 25, 30, 35 ppm). Untuk penen- tuan  aktivitas  antioksidan  masing- masing  konsen-trasi  dipipet  3  ml larutan  vitamin  C  lalu  tambahkan 1 ml larutan DPPH 100 ppm, cam- puran  dima-sukkan  dalam  kuvet, diukur absorbansinya pada panjang gelom-bang maksimum. Nilai IC 50 dihitung  menggunakan  persamaan regresi linier hubungan antara kon- sentrasi dan persen inhibisi.

## Analisis data
a)  Hasil pengukuran absorbansi dengan meng- gunakan  spektrofotometri  UV-Vis  untuk menghitung persentase penangkapan radikal bebas  DPPH.  Dihitung  menggunakan  ru- mus:
Analisis data a) Hasil  pengukuran  absorbansi  dengan menggunakan  spektrofotometri    UV-Vis untuk menghitung  persentase penangkapan radikal  bebas  DPPH.    Dihitung menggunakan rumus :
Keterangan :
%  inhibisi    :  persentase  penangkapan radikal bebas DPPH Abs kontrol    : absorbansi DPPH Abs Sampel     : absorbansi sampel + DPPH
b) Persen  inhibisi  yang  dihasilkan  diploting dengan konsentrasi sampel dalam persamaan  regresi  linier  untuk  mendapat slope dan intercept .
Rumus regresi linear: y = Bx + A
Untuk  memperoleh  IC 50 dilakukan  dengan memasukkan % inhibisi pada sumbu y=50, maka x (IC 50 ) = (Sudirman, 2011). Keterangan : x: Konsentrasi  sampel  mampu  menghambat aktivitas DPPH sebesar 50% y  :Persen inhibisi A : Intercept B : Slope
4. HASIL DAN PEMBAHASAN
a.  Pengukuran Rendemen Ekstrak Hasil  rendemen  ekstrak  etil  asetat  biji  dan kulit petai pada tabel 4.1 sebagai berikut:
Berdasarkan  tabel  4.1,  dapat  diketahui rendemen  ekstrak  etil  asetat  biji  petai sebesar  41,95  %  sedangkan  rendemen ekstrak  etil  asetat  kulit  petai  sebesar 12,72%.
Rendemen  ekstrak  yang  diperoleh berdasarkan  perbandingan  berat  ekstrak yang  dihasilkan  dengan  berat  serbuk simplisia  dikali  100%  (Depkes  RI,  2000). Berat  sampel  serbuk  simplisia  masing- masing  100  gram.  Rendemen  ekstrak  etil asetat  biji  petai  yang  dihasilkan  adalah 41,95%  sedangkan  rendemen  ekstrak  etil asetat  kulit  petai  adalah  12,72%  . Banyaknya  senyawa  aktif  yang  tersari dalam  pelarut  berpengaruh  terhadap rendemen  yang  dihasilkan.  Pada  ekstrak etil  asetat  kulit  petai  rendemennya  lebih rendah  dari  ekstrak  etil  asetat  biji  petai diduga  lebih  banyak  senyawa  aktif  yang ada dalam ekstrak etil asetat biji petai dari pada  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai.  Hal  ini sesuai  dengan  dengan  penelitian  Sudirman (2011) tentang senyawa aktif kangkung air diduga  lebih  banyak  yang  bersifat semipolar  yang  ditunjukkan  oleh  besarnya rendemen  ekstrak  kasar  pada  pelarut  etil asetat  dibandingkan  dengan  yang  bersifat polar maupun non polar. Nilai  rendemen  ekstrak  dibutuhkan dalam  proses  ekstraksi  karena  dapat digunakan  sebagai  acuan  berapa  banyak ekstrak  yang  dapat  dihasilkan  dari  suatu sampel.    Hal  ini  berkaitan  dengan  berapa banyak  kandungan  senyawa  aktif  yang dikandungnya,  karena  semakin  besar rendemen  dapat  diasumsikan  banyaknya kandungan  senyawa  aktif yang  terdapat pada  sampel  tersebut  (Romansyah,2011) . Hal ini senada dengan yang dilaporkan oleh Nurhayati et  al .  (2009)  dalam  Romansyah (2011)  bahwa  nilai  rendemen  yang  tinggi menunjukkan banyaknya komponen senyawa  kimia  yang  terkandung  di dalamnya.

## b.  Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Pengujian  aktivitas  antioksidan  dari sampel ekstrak etil asetat biji petai, ekstrak etil  asetat  kulit  petai,  dan  vitamin  C  pada panjang  gelombang  518  nm  yang  sudah dilakukan scanning panjang  gelombang sebelumnya dan pada operating time ke-0. Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  biji  petai  dapat  dilihat pada tabel 4.2 sebagai berikut :
Ekstrak etil asetat biji petai dibuat menjadi lima  seri  konsentrasi,  yaitu  40  ppm,  60 ppm, 80 ppm, 100 ppm, dan 120 ppm.
Keterangan : % inhibisi  :  persentase penangkapan radikal bebas DPPH
Abs kontrol  :  absorbansi DPPH
Abs Sampel :  absorbansi sampel + DPPH
b)  Persen  inhibisi  yang  dihasilkan  diploting dengan  konsentrasi  sampel  dalam  persa- maan  regresi  linier  untuk  mendapat slope dan intercept . Rumus regresi linear: y = Bx + A Untuk  memperoleh  IC 50 dilakukan  dengan memasukkan % inhibisi pada sumbu y=50, maka x (IC 50 ) = B A y  (Sudirman, 2011). Keterangan : x  :  Konsentrasi sampel mampu menghambat aktivitas DPPH sebesar 50% y  :  Persen inhibisi A  : Intercept B   : Slope

## 4.  HASIL DAN PEMBAHASAN
a.   Pengukuran Rendemen Ekstrak Hasil rendemen ekstrak etil asetat biji dan kulit petai pada tabel 4.1 sebagai berikut: Tabel 4.1 Hasil Rendemen Ekstrak Biji dan Kulit Petai Analisis data a) Hasil  pengukuran  absorbansi  dengan menggunakan  spektrofotometri    UV-Vis untuk menghitung  persentase penangkapan radikal  bebas  DPPH.    Dihitung menggunakan rumus : Keterangan : %  inhibisi    :  persentase  penangkapan radikal bebas DPPH Abs kontrol    : absorbansi DPPH Abs Sampel     : absorbansi sampel + DPPH b) Persen  inhibisi  yang  dihasilkan  diploting dengan konsentrasi sampel dalam persamaan  regresi  linier  untuk  mendapat slope dan intercept . Rumus regresi linear: y = Bx + A Untuk  memperoleh  IC 50 dilakukan  dengan memasukkan % inhibisi pada sumbu y=50, maka x (IC 50 ) = (Sudirman, 2011). Keterangan : x: Konsentrasi  sampel  mampu  menghambat aktivitas DPPH sebesar 50% y  :Persen inhibisi A : Intercept B : Slope 4. HASIL DAN PEMBAHASAN a.  Pengukuran Rendemen Ekstrak Hasil  rendemen  ekstrak  etil  asetat  biji  dan kulit petai pada tabel 4.1 sebagai berikut: Berdasarkan  tabel  4.1,  dapat  diketahui rendemen  ekstrak  etil  asetat  biji  petai sebesar  41,95  %  sedangkan  rendemen ekstrak  etil  asetat  kulit  petai  sebesar 12,72%.
Rendemen  ekstrak  yang  diperoleh berdasarkan  perbandingan  berat  ekstrak yang  dihasilkan  dengan  berat  serbuk simplisia  dikali  100%  (Depkes  RI,  2000).
Berat  sampel  serbuk  simplisia  masing- masing  100  gram.  Rendemen  ekstrak  etil asetat  biji  petai  yang  dihasilkan  adalah 41,95%  sedangkan  rendemen  ekstrak  etil asetat  kulit  petai  adalah  12,72%  . Banyaknya  senyawa  aktif  yang  tersari dalam  pelarut  berpengaruh  terhadap rendemen  yang  dihasilkan.  Pada  ekstrak etil  asetat  kulit  petai  rendemennya  lebih rendah  dari  ekstrak  etil  asetat  biji  petai diduga  lebih  banyak  senyawa  aktif  yang ada dalam ekstrak etil asetat biji petai dari pada  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai.  Hal  ini sesuai  dengan  dengan  penelitian  Sudirman (2011) tentang senyawa aktif kangkung air diduga  lebih  banyak  yang  bersifat semipolar  yang  ditunjukkan  oleh  besarnya rendemen  ekstrak  kasar  pada  pelarut  etil asetat  dibandingkan  dengan  yang  bersifat polar maupun non polar. Nilai  rendemen  ekstrak  dibutuhkan dalam  proses  ekstraksi  karena  dapat digunakan  sebagai  acuan  berapa  banyak ekstrak  yang  dapat  dihasilkan  dari  suatu sampel.    Hal  ini  berkaitan  dengan  berapa banyak  kandungan  senyawa  aktif  yang dikandungnya,  karena  semakin  besar rendemen  dapat  diasumsikan  banyaknya kandungan  senyawa  aktif yang  terdapat pada  sampel  tersebut  (Romansyah,2011) . Hal ini senada dengan yang dilaporkan oleh Nurhayati et  al .  (2009)  dalam  Romansyah (2011)  bahwa  nilai  rendemen  yang  tinggi menunjukkan banyaknya komponen senyawa  kimia  yang  terkandung  di dalamnya.

## b.  Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Pengujian  aktivitas  antioksidan  dari sampel ekstrak etil asetat biji petai, ekstrak etil  asetat  kulit  petai,  dan  vitamin  C  pada panjang  gelombang  518  nm  yang  sudah dilakukan scanning panjang  gelombang sebelumnya dan pada operating time ke-0. Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  biji  petai  dapat  dilihat pada tabel 4.2 sebagai berikut : Ekstrak etil asetat biji petai dibuat menjadi lima  seri  konsentrasi,  yaitu  40  ppm,  60 ppm, 80 ppm, 100 ppm, dan 120 ppm. Berdasarkan tabel 4.1, dapat diketahui rendemen ekstrak  etil  asetat  biji  petai  sebesar  41,95  % sedangkan rendemen ekstrak etil asetat kulit petai sebesar 12,72%. Rendemen ekstrak yang diperoleh berdasarkan  perbandingan  berat  ekstrak  yang dihasilkan  dengan  berat  serbuk  simplisia  dikali 100%  (Depkes  RI,  2000).  Berat  sampel  serbuk simplisia  masing-masing  100  gram.  Rendemen ekstrak etil asetat biji petai yang dihasilkan adalah 41,95% sedangkan rendemen ekstrak etil asetat kulit  petai  adalah  12,72%.  Banyaknya  senyawa aktif  yang  tersari  dalam  pelarut  berpengaruh terhadap rendemen yang dihasilkan. Pada ekstrak etil asetat kulit petai rendemennya lebih rendah dari  ekstrak  etil  asetat  biji  petai  diduga  lebih
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017
banyak senyawa aktif yang ada dalam ekstrak etil asetat biji petai dari pada ekstrak etil asetat kulit petai.  Hal  ini  sesuai  dengan  dengan  penelitian Sudirman  (2011)  tentang  senyawa  aktif kangkung air diduga lebih banyak yang bersifat semipolar  yang  ditunjukkan  oleh  besarnya rendemen  ekstrak  kasar  pada  pelarut  etil  asetat dibandingkan dengan yang bersifat polar maupun non polar.
Nilai  rendemen  ekstrak  dibutuhkan  dalam proses ekstraksi karena dapat digunakan sebagai acuan berapa banyak ekstrak yang dapat dihasil- kan dari suatu sampel. Hal ini berkaitan dengan berapa  banyak  kandungan  senyawa  aktif  yang dikandungnya,  karena  semakin  besar  rendemen dapat  diasumsikan  banyaknya  kandungan  se- nyawa aktif yang terdapat pada sampel tersebut (Romansyah,2011). Hal ini senada dengan yang dilaporkan  oleh  Nurhayati et  al .  (2009)  dalam Romansyah  (2011)  bahwa  nilai  rendemen  yang tinggi  menunjukkan  banyaknya  komponen  se- nyawa kimia yang terkandung di dalamnya.

## b.   Pengujian  Aktivitas  Antioksidan  dengan Metode DPPH
Pengujian aktivitas antioksidan dari sampel ekstrak etil asetat biji petai, ekstrak etil asetat kulit petai,  dan  vitamin  C  pada  panjang  gelombang 518 nm yang sudah dilakukan scanning panjang gelombang sebelumnya dan pada operating time ke-0.  Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  biji  petai  dapat  dilihat  pada tabel 4.2 sebagai berikut :
Ekstrak etil asetat biji petai dibuat menjadi lima seri konsentrasi, yaitu 40 ppm, 60 ppm, 80 ppm, 100 ppm, dan 120 ppm.
Grafik hubungan antara konsentrasi ekstrak etil asetat biji petai dengan persen inhibisi dapat dilihat pada gambar 4.1.

## Tabel 4.2 Hasil Perhitungan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etil Asetat Biji Petai
Grafik  hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak etil  asetat  biji  petai  dengan  persen  inhibisi dapat dilihat pada gambar 4.1 sebagai berikut

## Gambar 4.1 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat biji petai dengan persen inhibisi
Berdasarkan  hasil  perhitungan  persen peredaman  radikal  bebas  dapat  dibuat  grafik hubungan  antara  konsentrasi  dengan  persen inhibisi seperti pada gambar 4.2 dan diperoleh persamaan regresi linier ekstrak etil asetat biji petai  y  =  0.205x  -  6.314.  Sehingga  dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat biji petai sebesar 274,702 ppm.
Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  kulit  Petai  dapat  dilihat pada tabel 4.3 sebagai berikut:
Hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etil  asetat kulit petai dapat dilihat pada tabel 4.3. Ekstrak etil asetat kulit petai dibuat menjadi lima seri konsentrasi,  yaitu  40  ppm,  60  ppm,  80  ppm, 100  ppm,  dan  120  ppm.  Grafik  hubungan antara konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan  persen  inhibisi  dapat  dilihat  pada gambar 4.2 sebagai berikut : Gambar 4.2 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan persen inhibisi Berdasarkan grafik hubungan antara konsentrasi  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai dengan  persen  inhibisi  diperoleh  persamaan regresi linier ekstrak etil asetat kulit petai y = - 0.070x + 98.01. Sehingga dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat kulit petai sebesar 685,857 ppm.
Grafik  hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak etil  asetat  biji  petai  dengan  persen  inhibisi dapat dilihat pada gambar 4.1 sebagai berikut

## Gambar 4.1 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat biji petai dengan persen inhibisi
Berdasarkan  hasil  perhitungan  persen peredaman  radikal  bebas  dapat  dibuat  grafik hubungan  antara  konsentrasi  dengan  persen inhibisi seperti pada gambar 4.2 dan diperoleh persamaan regresi linier ekstrak etil asetat biji petai  y  =  0.205x  -  6.314.  Sehingga  dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat biji petai sebesar 274,702 ppm. Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  kulit  Petai  dapat  dilihat pada tabel 4.3 sebagai berikut:
Hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etil  asetat kulit petai dapat dilihat pada tabel 4.3. Ekstrak etil asetat kulit petai dibuat menjadi lima seri konsentrasi,  yaitu  40  ppm,  60  ppm,  80  ppm, 100  ppm,  dan  120  ppm.  Grafik  hubungan antara konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan  persen  inhibisi  dapat  dilihat  pada gambar 4.2 sebagai berikut : Gambar 4.2 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan persen inhibisi Berdasarkan grafik hubungan antara konsentrasi  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai dengan  persen  inhibisi  diperoleh  persamaan regresi linier ekstrak etil asetat kulit petai y = - 0.070x + 98.01. Sehingga dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat kulit petai sebesar 685,857 ppm.
Gambar 4.1 Hubungan konsentrasi ekstrak etil
asetat biji petai dengan persen inhibisi
Berdasarkan  hasil  perhitungan  persen peredaman  radikal  bebas  dapat  dibuat  grafik hubungan  antara  konsentrasi  dengan  persen inhibisi  seperti  pada  gambar  4.2  dan  diperoleh persamaan  regresi  linier  ekstrak  etil  asetat  biji petai y = 0.205x - 6.314. Sehingga dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat biji petai sebesar 274,702 ppm. Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  kulit  Petai  dapat  dilihat  pada tabel 4.3.

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017

## Tabel 4.3 Hasil Perhitungan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etil Asetat Kulit Petai
Grafik  hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak etil  asetat  biji  petai  dengan  persen  inhibisi dapat dilihat pada gambar 4.1 sebagai berikut Gambar 4.1 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat biji petai dengan persen inhibisi
Berdasarkan  hasil  perhitungan  persen peredaman  radikal  bebas  dapat  dibuat  grafik hubungan  antara  konsentrasi  dengan  persen inhibisi seperti pada gambar 4.2 dan diperoleh persamaan regresi linier ekstrak etil asetat biji petai  y  =  0.205x  -  6.314.  Sehingga  dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat biji petai sebesar 274,702 ppm.
Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  kulit  Petai  dapat  dilihat pada tabel 4.3 sebagai berikut:
Hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etil  asetat kulit petai dapat dilihat pada tabel 4.3. Ekstrak etil asetat kulit petai dibuat menjadi lima seri konsentrasi,  yaitu  40  ppm,  60  ppm,  80  ppm, 100  ppm,  dan  120  ppm.  Grafik  hubungan antara konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan  persen  inhibisi  dapat  dilihat  pada gambar 4.2 sebagai berikut : Gambar 4.2 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan persen inhibisi Berdasarkan grafik hubungan antara konsentrasi  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai dengan  persen  inhibisi  diperoleh  persamaan regresi linier ekstrak etil asetat kulit petai y = - 0.070x + 98.01. Sehingga dapat diketahui nilai
IC 50 pada ekstrak etil asetat kulit petai sebesar 685,857 ppm. Hasil aktivitas antioksidan ekstrak etil asetat kulit  petai  dapat  dilihat  pada  tabel  4.3.  Ekstrak etil  asetat  kulit  petai  dibuat  menjadi  lima  seri konsentrasi,  yaitu  40  ppm,  60  ppm,  80  ppm, 100 ppm, dan 120 ppm. Grafik hubungan antara konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan persen  inhibisi  dapat  dilihat  pada  gambar  4.2 sebagai berikut : Grafik  hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak etil  asetat  biji  petai  dengan  persen  inhibisi dapat dilihat pada gambar 4.1 sebagai berikut Gambar 4.1 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat biji petai dengan persen inhibisi
Berdasarkan  hasil  perhitungan  persen peredaman  radikal  bebas  dapat  dibuat  grafik hubungan  antara  konsentrasi  dengan  persen inhibisi seperti pada gambar 4.2 dan diperoleh persamaan regresi linier ekstrak etil asetat biji petai  y  =  0.205x  -  6.314.  Sehingga  dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat biji petai sebesar 274,702 ppm.
Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  kulit  Petai  dapat  dilihat pada tabel 4.3 sebagai berikut:
Hasil  aktivitas  antioksidan  ekstrak  etil  asetat kulit petai dapat dilihat pada tabel 4.3. Ekstrak etil asetat kulit petai dibuat menjadi lima seri konsentrasi,  yaitu  40  ppm,  60  ppm,  80  ppm, 100  ppm,  dan  120  ppm.  Grafik  hubungan antara konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan  persen  inhibisi  dapat  dilihat  pada gambar 4.2 sebagai berikut : Gambar 4.2 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan persen inhibisi Berdasarkan grafik hubungan antara konsentrasi  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai dengan  persen  inhibisi  diperoleh  persamaan regresi linier ekstrak etil asetat kulit petai y = - 0.070x + 98.01. Sehingga dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat kulit petai sebesar 685,857 ppm. Gambar 4.2 Hubungan konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan persen inhibisi Berdasarkan  grafik  hubungan  antara konsentrasi ekstrak etil asetat kulit petai dengan persen inhibisi diperoleh persamaan regresi linier ekstrak etil asetat kulit petai y = -0.070x + 98.01. Sehingga dapat diketahui nilai IC 50 pada ekstrak etil asetat kulit petai sebesar 685,857 ppm.
Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan vitamin  C  sebagai  kontrol  positif  dapat  dilihat pada tabel 4.4 sebagai berikut : Tabel 4.4 Tabel Perhitungan Aktivitas Antioksidan Vitamin C sebagai kontrol positif Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan vitamin C sebagai kontrol positif dapat dilihat pada tabel 4.4 sebagai berikut : Hasil  aktivitas  antioksidan  vitamin  C  dapat dilihat  pada  tabel  4.4.  Vitamin  C  dibuat menjadi lima konsentrasi yaitu 15, 20, 25, 30, dan  35  Grafik  hubungan  antara  konsentrasi vitamin  C  sebagai  kontrol  positif  dengan persen  inhibisi  dapat  dilihat  pada  gambar  4.3 sebagai berikut : Gambar 4.3 Hubungan konsentrasi vitamin C dengan persen inhibisi Berdasarkan grafik hubungan antara konsentrasi  vitamin  C  dengan  persen  inhibisi diperoleh  persamaan  regresi  linier  vitamin  C y=  1.197x  +  12.41,  sehingga  dapat  diketahui nilai IC 50 vitamin C sebesar 31,403 ppm. Hasil uji aktivitas antioksidan pada ekstrak etil asetat  biji  petai  memiliki  nilai  IC 50 sebesar 274,702 ppm, sedangkan aktivitas antioksidan
ekstrak  etil  asetat  kulit  petai  memiliki  nilai IC 50 sebesar  685,857  ppm.  Berdasarkan tingkat  kekuatan  antioksidan  dengan  metode DPPH  dari  Kurniawati  dalam  Wahyu  (2014) senyawa  dikatakan  memiliki  aktivitas antioksidan  sangat  kuat  bila  nilai  IC 50 <  50 ppm, kuat 50-100 ppm, sedang 101-250 ppm, lemah  250-500  ppm  dan  tidak  aktif  nilai IC 50 nya  >  500  ppm.  Hasil  uji  aktivitas antioksidan  pada  ekstrak  etil  asetat  biji  petai termasuk  dalam  kategori  antioksidan  lemah sedangkan  pada  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai termasuk  dalam  kategori  antioksidan  tidak aktif.  Nilai  IC 50 adalah  salah  satu  parameter yang  digunakan  untuk  mengetahui  aktivitas antioksidan.  Nilai  IC 50 merupakan  bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak mampu menghambat  aktivitas  radikal  sebesar  50% dengan menggunakan persamaan regresi linier y= A+Bx hubungan antara konsentrasi ekstrak etil  asetat  biji  petai,  ekstrak  etil  asetat  kulit petai,  vitamin  C  dengan  persen  inhibisi  yaitu dengan  mengganti  nilai  y  dengan  50 (Sudirman,  2011).  Semakin  kecil  nilai  IC 50 yang  dihasilkan  maka  memiliki  keefektifan sebagi  penangkal  radikal  bebas  yang  lebih baik, dan sebaliknya (Syamsiyah, 2011). Vitamin  C  digunakan  sebagai  kontrol positif  yang  berfungsi  untuk  memastikan bahwa  metode  yang  digunakan  dalam  uji aktivitas  antioksidan  cukup  baik  dan digunakan  untuk  membandingkan  aktivitas antioksidan  dengan  sampel  yang  di  uji.  Bila dibandingkan  dengan  kontrol  positif  vitamin C,  Vitamin  C  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  sangat  kuat  karena  memiliki  IC 50 <50 ppm  yaitu  31,403  ppm.  Vitamin  C  memiliki aktivitas  antioksidan  lebih  kuat  dibandingkan dengan  ekstrak  etil  asetat  biji  petai  maupun ekstrak  etil  asetat  kulit  petai,  hal  ini  dapat dilihat dari  nilai IC 50 vitamin C paling rendah dibandingkan  dengan  nilai  IC 50 ekstrak  etil asetat biji dan kulit petai. Vitamin C mempunyai 2 tempat abstraksi hidrogen  yang  terhubung  secara  internal, sehingga  ada  abstraksi  lanjutan  setelah abstraksi  hidrogen  pertama  oleh  radikal DPPH,  hal  ini  menyebabkan  perbandingan stoikiometrinya  2:1,  artinya  2  molekul  DPPH ditangkap  atau  direduksi  oleh  1  molekul vitamin C (Wahyu, 2014). Vitamin C dengan nilai  IC 50 31,403  ppm  menandakan  sudah mampu  menghambat  50%  radikal  bebas  dari DPPH. Hasil aktivitas antioksidan vitamin C dapat dilihat pada tabel 4.4. Vitamin C dibuat menjadi lima  konsentrasi  yaitu  15,  20,  25,  30,  dan  35 Grafik  hubungan  antara  konsentrasi  vitamin  C sebagai  kontrol  positif  dengan  persen  inhibisi dapat dilihat pada gambar 4.3 sebagai berikut : Hasil  perhitungan  aktivitas  antioksidan vitamin C sebagai kontrol positif dapat dilihat pada tabel 4.4 sebagai berikut : Hasil  aktivitas  antioksidan  vitamin  C  dapat dilihat  pada  tabel  4.4.  Vitamin  C  dibuat menjadi lima konsentrasi yaitu 15, 20, 25, 30, dan  35  Grafik  hubungan  antara  konsentrasi vitamin  C  sebagai  kontrol  positif  dengan persen  inhibisi  dapat  dilihat  pada  gambar  4.3 sebagai berikut : Gambar 4.3 Hubungan konsentrasi vitamin C dengan persen inhibisi Berdasarkan grafik hubungan antara konsentrasi  vitamin  C  dengan  persen  inhibisi diperoleh  persamaan  regresi  linier  vitamin  C y=  1.197x  +  12.41,  sehingga  dapat  diketahui nilai IC 50 vitamin C sebesar 31,403 ppm. Hasil uji aktivitas antioksidan pada ekstrak etil asetat  biji  petai  memiliki  nilai  IC 50 sebesar 274,702 ppm, sedangkan aktivitas antioksidan
ekstrak  etil  asetat  kulit  petai  memiliki  nilai IC 50 sebesar  685,857  ppm.  Berdasarkan tingkat  kekuatan  antioksidan  dengan  metode DPPH  dari  Kurniawati  dalam  Wahyu  (2014) senyawa  dikatakan  memiliki  aktivitas antioksidan  sangat  kuat  bila  nilai  IC 50 <  50 ppm, kuat 50-100 ppm, sedang 101-250 ppm, lemah  250-500  ppm  dan  tidak  aktif  nilai IC 50 nya  >  500  ppm.  Hasil  uji  aktivitas antioksidan  pada  ekstrak  etil  asetat  biji  petai termasuk  dalam  kategori  antioksidan  lemah sedangkan  pada  ekstrak  etil  asetat  kulit  petai termasuk  dalam  kategori  antioksidan  tidak aktif.  Nilai  IC 50 adalah  salah  satu  parameter yang  digunakan  untuk  mengetahui  aktivitas antioksidan.  Nilai  IC 50 merupakan  bilangan yang menunjukkan konsentrasi ekstrak mampu menghambat  aktivitas  radikal  sebesar  50% dengan menggunakan persamaan regresi linier y= A+Bx hubungan antara konsentrasi ekstrak etil  asetat  biji  petai,  ekstrak  etil  asetat  kulit petai,  vitamin  C  dengan  persen  inhibisi  yaitu dengan  mengganti  nilai  y  dengan  50 (Sudirman,  2011).  Semakin  kecil  nilai  IC 50 yang  dihasilkan  maka  memiliki  keefektifan sebagi  penangkal  radikal  bebas  yang  lebih baik, dan sebaliknya (Syamsiyah, 2011). Vitamin  C  digunakan  sebagai  kontrol positif  yang  berfungsi  untuk  memastikan bahwa  metode  yang  digunakan  dalam  uji aktivitas  antioksidan  cukup  baik  dan digunakan  untuk  membandingkan  aktivitas antioksidan  dengan  sampel  yang  di  uji.  Bila dibandingkan  dengan  kontrol  positif  vitamin C,  Vitamin  C  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  sangat  kuat  karena  memiliki  IC 50 <50 ppm  yaitu  31,403  ppm.  Vitamin  C  memiliki aktivitas  antioksidan  lebih  kuat  dibandingkan dengan  ekstrak  etil  asetat  biji  petai  maupun ekstrak  etil  asetat  kulit  petai,  hal  ini  dapat dilihat dari  nilai IC 50 vitamin C paling rendah dibandingkan  dengan  nilai  IC 50 ekstrak  etil asetat biji dan kulit petai. Vitamin C mempunyai 2 tempat abstraksi hidrogen  yang  terhubung  secara  internal, sehingga  ada  abstraksi  lanjutan  setelah abstraksi  hidrogen  pertama  oleh  radikal DPPH,  hal  ini  menyebabkan  perbandingan stoikiometrinya  2:1,  artinya  2  molekul  DPPH ditangkap  atau  direduksi  oleh  1  molekul vitamin C (Wahyu, 2014). Vitamin C dengan nilai  IC 50 31,403  ppm  menandakan  sudah mampu  menghambat  50%  radikal  bebas  dari DPPH. Gambar 4.3 Hubungan konsentrasi vitamin C dengan persen inhibisi Berdasarkan  grafik  hubungan  antara konsentrasi  vitamin  C  dengan  persen  inhibisi diperoleh  persamaan  regresi  linier  vitamin  C y= 1.197x + 12.41, sehingga dapat diketahui nilai IC 50 vitamin C sebesar 31,403 ppm.
Hasil uji aktivitas antioksidan pada ekstrak etil  asetat  biji  petai  memiliki  nilai  IC 50 sebesar 274,702  ppm,  sedangkan  aktivitas  antioksidan ekstrak  etil  asetat  kulit  petai  memiliki  nilai IC 50 sebesar  685,857  ppm.  Berdasarkan  tingkat kekuatan  antioksidan  dengan  metode  DPPH dari  Kurniawati  dalam  Wahyu  (2014)  senyawa dikatakan  memiliki  aktivitas  antioksidan  sangat kuat bila nilai IC 50 < 50 ppm, kuat 50-100 ppm, sedang  101-250  ppm,  lemah  250-500  ppm  dan tidak  aktif  nilai  IC 50 nya  >  500  ppm.  Hasil  uji aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak  etil  asetat biji  petai  termasuk  dalam  kategori  antioksidan lemah  sedangkan  pada  ekstrak  etil  asetat  kulit petai termasuk dalam kategori antioksidan tidak aktif.  Nilai  IC 50 adalah  salah  satu  parameter yang  digunakan  untuk  mengetahui  aktivitas antioksidan.  Nilai  IC 50 merupakan  bilangan yang  menunjukkan  konsentrasi  ekstrak  mampu menghambat  aktivitas  radikal  sebesar  50% dengan  menggunakan  persamaan  regresi  linier y=  A+Bx  hubungan  antara  konsentrasi  ekstrak etil  asetat  biji  petai,  ekstrak  etil  asetat  kulit petai,  vitamin  C  dengan  persen  inhibisi  yaitu dengan mengganti nilai y dengan 50 (Sudirman, 2011). Semakin kecil nilai IC 50 yang dihasilkan maka  memiliki  keefektifan  sebagi  penangkal radikal  bebas  yang  lebih  baik,  dan  sebaliknya (Syamsiyah, 2011).
Vitamin C digunakan sebagai kontrol positif yang berfungsi untuk memastikan bahwa metode yang  digunakan  dalam  uji  aktivitas  antioksidan cukup baik dan digunakan untuk membandingkan aktivitas antioksidan dengan sampel yang di uji. Bila dibandingkan dengan kontrol positif vitamin C,  Vitamin  C  memiliki  aktivitas  antioksidan yang sangat kuat karena memiliki IC 50 <50 ppm yaitu 31,403 ppm. Vitamin C memiliki aktivitas antioksidan  lebih  kuat  dibandingkan  dengan ekstrak etil asetat biji petai maupun ekstrak etil asetat kulit petai, hal ini dapat dilihat dari nilai IC 50 vitamin  C  paling  rendah  dibandingkan dengan nilai IC 50 ekstrak etil asetat biji dan kulit petai.
Vitamin C mempunyai 2 tempat abstraksi hidrogen  yang  terhubung  secara  internal, sehingga ada abstraksi lanjutan setelah abstraksi hidrogen  pertama  oleh  radikal  DPPH,  hal  ini
menyebabkan  perbandingan  stoikiometrinya 2:1,  artinya  2  molekul  DPPH  ditangkap  atau direduksi  oleh  1  molekul  vitamin  C  (Wahyu, 2014). Vitamin C dengan nilai IC 50 31,403 ppm menandakan  sudah  mampu  menghambat  50% radikal bebas dari DPPH.
Pada penelitian ini uji aktivitas antioksidan dilakukan  pada  ekstrak  etil  asetat  biji  dan  kulit petai  yang  menggunakan  etil  asetat  sebagai pelarut yang hanya dapat menyari senyawa yang bersifat  semi  polar.  Sedangkan  pada  penelitian sebelumnya  uji  aktivitas  antioksidan  pada  biji dan  kulit  petai  yang  dilakukan  menggunakan pelarut  etanol  30%  yang  merupakan  pelarut dengan  kepolaran  lebih  tinggi  daripada  pelarut kloroform  yang  merupakan  pelarut  non  polar (Amarnath,  2004).  Hasil  penelitian  Amarnath (2004)  menggunakan  ekstrak  etanol  30%,  uji aktivitas  antioksidan  pada  biji  dan  kulit  petai senyawa  antioksidan  dalam  biji  dan  kulit  petai cenderung bersifat polar.
Aktivitas antioksidan yang terdapatkan pada ekstrak  etil  asetat  biji  petai  disebabkan  karena adanya  kandungan  flavonoid,  asam  askorbat, fenol  dan  turunannya  (Mohammed et  al dalam Amarnath,  2004).  Aktivitas  antioksidan  yang terdapat  pada  biji  petai  juga  dapat  disebabkan oleh adanya antioksidan yang bersifat enzimatis yang tidak dapat terdeteksi dengan metode DPPH, yaitu superoksida dismutase (SOD). Jenis SOD tersebut, yaitu Fe-SOD dan Zn-SOD yang terdapat pada kloroplas serta Mn-SOD yang terdapat pada mitokondria  dan  peroksisom  (Winarsi  2007). Menurut  Suvachittanant  dan  Pothirakit  (1988) dan  Mohamed  etal  (1987)  dalam  Amarnath (2004)  pada  biji  petai  kandungan  utamanya adalah  zat  protein,  karbohidrat,  mineral,asam amino yang cukup tinggi sehingga menghasilkan kadar antioksidan yang tidak cukup tinggi .
Dari  studi  literatur  menunjukkan  bahwa tanaman  petai  mengandung  senyawa  fenolik yang  berpotensi  sebagai  antioksidan  alami (Amarnath,  2004).  Biasanya  senyawa-senyawa yang  memiliki  aktivitas  antioksidan  adalah senyawa fenol karena mempunyai gugus hidroksi yang terdistribusi pada pada posisi ortho dan para terhadap gugus -OH dan -OR. Perubahan warna DPPH terjadi karena adanya senyawa yang dapat

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada
- Januari 2017
memberikan  radikal  hidrogen  kepada  radikal
DPPH  sehingga  tereduksi  menjadi  DPPH-H (1,2-difenil-2-pikrilhidrazin)
(Purwaningsih, 2012).
Pada ekstrak etil asetat kulit petai aktivitas antioksidannya tidak aktif, karena senyawa aktif yang  berfungsi  sebagai  antioksidan  tidak  larut dalam pelarut etil asetat yang digunakan sehingga tidak mampu mendonorkan atom H pada DPPH. Tidak adanya aktivitas antioksidan yang terdapat pada  kulit  petai  juga  dapat  disebabkan  oleh kandungan utamanya yaitu pati dan serat. Hal ini sesuai  dengan  penelitian  Gan  dan  Latiff  (2011) yang menunjukkan bahwa kulit petai terdiri dari pati dan serat . Hasil penelitian Amarnath (2004) menunjukkan vitamin C yang berfungsi sebagai antioksidan tidak ditemukan pada di kulit petai.

## 5.  KESIMPULAN
a.  Rendemen ekstrak etil asetat biji petai sebe- sar 41,95% sedangkan ekstrak etil asetat ku- lit petai sebesar 12,72% .
b.  Ekstrak etil asetat biji petai memiliki aktivi- tas  antioksidan  dan  ekstrak  etil  asetat  kulit petai tidak memiliki aktivitas antioksidan.
c.  Ekstrak etil asetat biji petai lebih berpotensi sebagai antioksidan lemah, dengan nilai IC 50 sebesar 274,702 ppm dibandingkan ekstrak etil asetat kulit petai yang antioksidannya ti- dak aktif dengan nilai IC 50 sebesar 685,857 ppm.

## SARAN
a.  Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut men- genai  ekstrak  biji  dan  kulit  petai  dengan fraksinasi pelarut dari polar, semipolar, dan nonpolar untuk mengetahui aktivitas antiok- sidan dari biji dan kulit petai agar diperoleh nilai IC 50 yang maksimal.
b.  Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut men- genai identifikasi kandungan kimia misalnya alkaloid,  flavonoid,  tanin  dan  saponin  dari ekstrak etil asetat biji dan kulit petai untuk mengembangkan penelitian pada ekstrak etil asetat biji dan kulit petai.

## 6.  REFERENSI
______.  1979. Farmakope  Indonesia .Edisi  III. Jakarta: Departemen Kesehatan RI
______.  1995. Farmakope  Indonesia .Edisi  IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
______.  2001. Inventaris  Tanaman  Obat Indonesia  (I) .  Jilid  2.  Jakarta  Departemen Kesehatan RI
______. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Departemen Kesehatan RI
______.  2012. Pedoman  Teknologi  Formulasi Sediaan Berbasis Ekstrak. Volume 1. Jakarta :  Badan  Pengawas  obat  dan  Makanan Republik Indonesia
Agoes, A. 2010. Tanaman Obat Indonesia . Buku ke-2. Jakarta: Salemba Medika
Amarnath,  B.,  2004. A  Study  On  Antioxidant Nature of Petai (Parkia speciosa). [Thesis]. National University Of Singapore. Singapore Arikunto, Suharsimi. 2006. Prosedur Penelitian Suatu  Pendekatan  Praktik .  Jakarta.  Rineka Cipta
Bernasconi, G. Gerster, H. Hauser, H. Stauble, H. Schneiter, E. 1995. Teknologi Kimia Bagian 2. Edisi  pertama.  Jakarta:  PT.  Pradaya Paramita Dewi I,K dan Rusita Y,D. 2014. Buku Petunjuk Praktikum  Analisis  Instrumen .  Surakarta: Politeknik Kesehatan Kementrian Kesehatan Surakarta Ernawati,  A.  2013. Uji  Aktivitas  Antioksidan Kombinasi Ekstrak Sarang Semut (Myrmecodiapendens  Merr.  &  Perry)  dan Ekstrak  Daun  Sirsak  (Anonnamuricata Linn.) dengan Metode DPPH (2,2-Diphenyl- 1-Picrilhidrazyl). [Karya  Tulis  Ilmiah]. Akademi Farmasi Nasional. Surakarta Fairus,  B.  Dara,  A.  Firmansyah,  H.,  2013.
Pengaruh Pemberian Ekstrak Petai (Parkias speciosa) Sebagai Antioksidan Alami untuk Meningkatkan  Kualitas  Karkas  Ayam Broiler. [Laporan Akhir].  Institut  Pertanian Bogor. Bogor
Jurnal Kesehatan Kusuma Husada - Januari 2017
Karadag, A. Ozcelik B. Saner, S. 2009. Review of  Methods  to  Determine  Antioxidant Capacities , Food  Analytical  Methods . Vol.2:41-60 Kusuma,  N.D.  2010. Aktivitas  Antioksidan
Fraksi-Fraksi  Ekstrak  Metanolik  Daun Ceremai  (Phyllanthusacidus  (L.)  Skeels) terhadap  Radikal  Bebas  1,1-Difenil-2- Pikrihidrazil (DPPH). [Skripsi]. Universitas Setia Budi. Surakarta
Legowo,  A.  Nurwantoro.  Sutaryo.  2007. Buku  Ajar  Analisis  Pangan .  Semarang  : Universitas Diponegoro Marliana, Eva. 2012. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Andong (Cordylinefruticosa (L) A. Cheval. [Jurnal]. Mulawarman Scientifie Vol  11  (1).  Universitas  Mulawarman. Samarinda
Molyneux, P. 2004. The Use of The Stable Free Radical  Diphenylpicryl-hydrazyl  (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Journal of Science and Technology Vol. 26 (2): 211- 219
Muchtadi, D. 2013. Antioksidan dan Kiat Sehat di Usia Produktif . Bandung : Alfabeta
Notoatmojo,  S.  1993. Metodologi  Penelitian Kesehatan . Jakarta: Rineka Cipta. Notoatmojo,  S.  2012. Metodologi  Penelitian
Kesehatan . Cetakan Kedua. Jakarta: Rineka Cipta Purwaningsih,  S.  2012. Aktivitas  Antioksidan dan Komposisi Kimia Keong Matah Merah (Cerithidea obtusa). [Jurnal]. Ilmu Kelautan Vol. 17 (1) 39-48. Institut Pertanian Bogor. Bogor Putri,  W.S.  2013. Skrining  Fitokimia  Ekstrak Etil  Asetat  Kulit  Buah  Manggis  (Garcinia mangaostana  L.). [Junal].  Universitas Udayana. Bali Romansyah,  Y.,  2011. Kandungan  Senyawa Bioaktif  Antioksidan  Karang  Lunak Sarcophyton  Sp.  Alami  dan  Transplantasi di  Perairan  Pulau  Pramuka,  Kepulauan Seribu .  [Skripsi].  Institut  Pertanian  Bogor. Bogor
Soewoto,  H.  2001. Biokimia  Eksperimen Laboratorium . Jakarta: Universitas Indonesia Setyowati,  W.  A.  E.  Ariani,  S.  R.D.,  Ashadi., Mulyani,  B.,  2013. Analisis  Fitokimia, Uji  Aktivitas  Antioksidan  dan  Anti infertilitas  Kontrasepsi  Kulit  Buah  Durian (Duriozibethinus  Murr.)  Varietas  Petruk. [Laporan Akhir]. Universitas Sebelas Maret. Surakarta
Sudirman,  S.  2011. Aktivitas  Antioksidan  dan Komponen Bioaktif Kangkung Air (Ipomoea aquatic Forsk.). [Skripsi]. Jurusan perikanan dan ilmu kelautan. Institut Pertanian Bogor. Bogor
Sugiyono,  2010. Metode  Penelitian  Pendidikan Pendekatan  Kuantitatif,  Kualitatif,  dan R&D . Bandung: Alfabeta
Sugiyono,  2012. Metode  Penelitian  Kuantitatif, Kualitatif, dan R&D . Bandung: Alfabeta Sunanto,  H.  1995. Budidaya  Petai  dan  Aspek Ekonominya. Cetakan  Ketiga.  Jakarta:
Kanisius
Syamsiyah,  I.  N.  2011. Penentuan  Aktivitas Antioksidan dari Herba Tempuyung (Sonchus arvensis  L.)  dengan  Metode  1,1-Difenil-2- Pikrihidrazil (DPPH). [Karya Tulis Ilmiah]. Akademi Farmasi Nasional. Surakarta Tobing,  Tetty.  VWL.  2013. Studi  Pemanfaatan Ekstrak  Kulit  Petai  (Parkia  speciosa) sebagai  Antioksidan  Alami. [Thesis]. Universitas Negeri Medan. Medan Wahyu, I. 2014. Uji Aktivitas Antioksidan Daun Jambu  Mete  (  Anacardium  Occidentale L.)  dengan  Metode  DPPH  (1,1-Difenil- 2-Pikrilhidrazil). [Karya  Tulis  Ilmiah]. Akademi Farmasi Nasional. Surakarta Winahyu,  I.  P.,  2007. Uji  Aktivitas  Antioksidan dari  Ekstrak  Etanol  Biji  Petai  (Parkia speciosa  Hassk)  secara  In-Vitro. [Skripsi]. Universitas Negeri Yogyakarta. Yogyakarta Winarsi, H., 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas . Yogyakarta : Kanisius

## Jurnal Kesehatan Kusuma Husada
- Januari 2017