EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr

## Potensi Bakteri Simbion Endofit Mangrove Avicennia marina Sebagai Antifouling
Nor Sa’adah* dan Alifia Rizky Novitasari
Departemen Oseanografi, Fakultas Teknik dan Ilmu Kelautan, Universitas Hang Tuah Jl. Arief Rahman Hakim No. 150, Keputih, Sukolilo, Surabaya, Jawa Timur 60111 Indonesia *Corresponding author: saadah1809@gmail.com
ABSTRAK: Biofouling  merupakan  organisme  mikro  dan  makrofouling  yang  menempel  pada substrat  terendam.  Pencegahan  terhadap  organisme biofouling disebut antifouling . Antifouling menggunakan campuran cat Tributyltin organotin. Cat antifouling mengandung bahan beracun dan tidak  ramah  lingkungan.  Bakteri  simbion  memiliki  kandungan  metabolit  sekunder,  seperti  tanin, steroid dan triterpenoid. Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh bakteri antifouling melalui proses isolasi bakteri yang diperoleh dari akar mangrove Avicennia marina dan menganalisis zona hambat bakteri  simbion  mangrove Avicennia  marina sebagai antifouling .  Metode  yang  digunakan  diawali dengan  isolasi  bakteri  akar  mangrove Avicennia  marina ,  identifikasi  bakteri,  dan  uji  aktivitas antifouling . Hasil yang diperoleh dari isolasi bakteri, yaitu 21 bakteri simbion endofit dan sampel akar bagian  luar  diperoleh  15  bakteri  epifit.  Uji  zona  hambat  bakteri  endofit  yang  berpotensi  sebagai antifouling dari tumbuhan mangrove Avicennia marina yaitu memiliki ukuran zona hambat kategori kuat karena >10 mm.
Kata kunci ; Biofouling, Antifouling, Avicennia marina, bakteri simbion
Potential of Avicennia marina Endophytic Symbiont Bacteria as Antifouling
ABSTRACT: Biofouling is micro-organism and makrofouling attached to the submerged substrate. Prevention  of  biofouling  organism  called  antifouling.Tributyltin  organotin  was  using  to  mixture antifouling  paint.  Antifouling  paints  containing  toxic  and  environmentally  unfriendly.  Symbiotic bacteria have secondary metabolites, there are tanin, steroid, and triterpenoid. This research aimed to  obtain  antifouling  bacteria  through  isolation  process  of  bacteria  obtained  from  the  roots  of mangrove  Avicennia  marina,  and  analyze  the  bacterial  symbiont  inhibitory  zone  of  mangrove Avicennia marina  as antifouling. The method was beginning with the isolation of bacteria roots of mangrove  Avicennia  marina,  identification  of  symbiotic  bacteria,  and  the  antifouling  activity  test. Results obtained from the isolation of bacteria, there are 21 symbiotic endophytic on a sample of the inner  root, and 15 epiphytic bacteria on a sample of the outer root. Endophytic bacteria inhibition zone test potential as antifouling from mangrove Avicennia marina that was from the root part that inhibitory zone size strong category for> 10 mm.

## Keywords: Biofouling, Antifouling, Avicennia marina, bacterial symbionts

## PENDAHULUAN
Pencemaran lingkungan dapat diakibatkan oleh beberapa faktor, salah satunya adalah yang berasal dari bahan kimia, seperti senyawa Tributyltin organotin yang merupakan bahan aditif yang digunakan  sebagai  cat antifouling .  Efek  akumulasi Tributyltin  organotin yang  paling  berbahaya adalah  kegagalan  pada  sistem  reproduksi  biota  laut,  karena  akan  mengakibatkan  penurunan populasi  yang  diikuti  kepunahan  spesies  dan  berujung  pada  gangguan  ekosistem  keseluruhan (Mnsen et al ., 2016).
Mangrove dikenal sebagai penghasil senyawa metabolit alami dengan aktivitas biologi, antara lain  antibakteri, antiviral atau antivirus ,  antidiare, antifeedant , insectidal , cytotoxic ,  dan  lain sebagainya.  Mangrove Avicennia  marina yang  berada  di  India  terbukti  dapat  mencegah perkembangan organisme biofouling (Manilal et al ., 2009).
Journal of Marine Research Vol 11, No.1 Februari 2022, pp. 1-8
Biofouling merupakan  organisme  mikro  dan  makrofouling  yang  menempel  pada  substrat terendam  yang  berada  di  ekosistem  perairan,  seperti  pada  lambung  kapal,  dan  dermaga (Ramasubburayan et al ., 2017). Penumpukan biofouling sering terjadi pada moda transportasi laut yaitu  kapal  laut,  hal  ini  dapat  menyebabkan  kecepatan  kapal  berkurang  hingga  40%  sehingga konsumsi  bahan  bakar  meningkat  sampai  dengan  30%.  Berkurangnya  kecepatan  kapal mengakibatkan tertundanya waktu berlayar (Syahputra dan Almuqaramah, 2019). Antifouling adalah  pencegahan  terhadap  organisme biofouling . Antifouling biasanya menggunakan bahan Tributyltin organotin sebagai campuran cat yang digunakan untuk membasmi organisme biofouling (Prabhakaran et  al .,  2012). Tributyltin  organotin terbukti  ampuh  untuk mencegah biofouling namun tidak ramah bagi lingkungan. Tahun 2008 Tributyltin organotin resmi dilarang oleh International Maritime Organization (Cahyaningtyas et al ., 2017). Bagian  dari  mangrove  yang  bisa  digunakan  sebagai antifouling adalah  akar  mangrove A.marina, akar  sebagai  penyerap  air  dan  hara  mineral.  Menurut  Syahputra  dan Almuqaramah , (2019)  kandungan  senyawa  tanin  yang  terdapat  pada  sampel  akar  terbukti  dapat  menghambat biofouling .  Bakteri  simbion  endofit  diisolasi  dari  sampel  akar,  karena  adanya  keterlibatan  bakteri simbion  endofit  dengan  tumbuhan  inangnya  dalam  proses  metabolisme.  Sehingga  kandungan metabolit sekunder hampir sama dengan inangnya, kandungan metabolit sekunder antara lain tanin, steroid, dan triterpenoid (Marhaeni et al . 2011). Penelitian mengenai potensi mangrove A. marina sebagai antifouling sudah pernah dilakukan sebelumnya  menggunakan  ekstrak  kulit  batang  mangrove A.  marina terbukti  dapat  mencegah perkembangan  organisme Patella  vulgate (Manilal et  al .,  2009).  Cahyaningtyas et  al .  (2017) melakukan penelitian dengan organisme uji kerang hijau menggunakan ekstrak daun A. marina tidak memberikan pengaruh nyata terhadap pelekatan organisme Perna viridis . Penelitian yang dilakukan oleh  Zhang et  al .  (2018)  menggunakan  isolasi  fungi  atau  jamur  yang  diperoleh  dari  sedimen mangrove menghasilkan 17 jamur yang berpotensi sebagai antifouling . Berdasarkan uraian di atas tujuan  penelitian  ini  adalah  menganalisis  bakteri  yang  berpotensi  sebagai antifouling dan menganalisis kategori zona hambat bakteri simbion mangrove A. marina sebagai antifouling. Bakteri dipilih  karena  bakteri  dapat  dikultur,  sehingga  tidak  mengambil  secara  berlebihan  atau mengeksploitasi mangrove A. marina .

## MATERI DAN METODE
Penelitian dilaksanakan pada September 2019 hingga Januari 2020 di Kawasan Konservasi Mangrove Pamurbaya, Surabaya dengan 3 stasiun (Tabel. 1). Isolasi bakteri simbion mangrove A. marina dan uji aktivitas antifouling dilakukan di Laboratorium  Mikrobiologi Universitas Hang Tuah Surabaya.
Alat dan bahan yang digunakan untuk pengambilan sampel, isolasi, purifikasi, dan identifikasi morfologi  merupakan  alat  dan  bahan  steril.  Alat-alat  yang  terbuat  dari  kaca  sebelum  digunakan dicuci  dan  dikeringkan.  Alat-alat  tersebut  kemudian  dibungkus  dengan  kertas  dan  disterilisasi menggunakan autoclave pada  suhu  121 o C  selama  20  menit  kemudian  dikeringkan  dengan  oven (Radjasa et al., 2007).
Pembuatan  media zobell menggunakan  bahan yeast,  peptone ,  dan  agar.  Bahan-bahan pembuatan  media  zobell  ditimbang  sesuai  dengan  kebutuhan  yang  akan  digunakan  dan dihomogenkan dengan air laut steril kemudian media disterilisasi pada suhu 121 o C selama 15 menit (Radjasa et al., 2007).
Tabel 1. Lokasi Pengambilan Sampel Mangrove A. marina
Stasiun Koordinat Keterangan 1. 7°18'25.30" LS - 112°49'16.56" BT  dekat dengan daratan atau jogging track .
2. 7°18'29.36" LS - 112°49'41.75" BT  dekat  muara  sungai  atau jogging  track muara sungai.
3. 7°18'19.80" LS - 112°50'40.72" BT  di daerah muara sungai.
Journal of Marine Research Vol 11, No.1 Februari 2022, pp. 1-8
Pengambilan  sampel  dilakukan  dengan  metode purposive  sampling yaitu  suatu  metode pengambilan sampel yang dilakukan dengan mengambil subjek bukan berdasarkan strata, random atau daerah tetapi berdasarkan atas adanya tujuan tertentu (Arikunto, 1993 dalam Pratama et al , 2014). Sampel kulit akar mangrove A. marina yang diperoleh kemudian dimasukkan ke dalam plastik ziplock dan diberi label (stasiun, waktu dan tanggal pengambilan). Sampel kemudian ditempatkan pada cool box dan dibawa menuju laboratorium mikrobiologi Universitas Hang Tuah Surabaya. Sampel  kulit  akar  mangrove  dibersihkan  dengan  cara  disemprot  air  laut  steril  untuk membersihkan  bakteri  perairan  yang menempel pada  permukaan  sampel.  Isolasi  bakteri simbion endofit dilakukan dengan cara mengambil sampel kulit akar bagian dalam, sedangkan isolasi bakteri epifit  dilakukan  dengan  cara  mengambil  sampel  kulit  akar  bagian  luar.  Sampel  tersebut  dipisah bagian luar dan bagian dalam. Selanjutnya, dihaluskan kemudian ditimbang sebanyak 1 gr (Wiguna et al ., 2016). Masing-masing sampel dilakukan pengenceran dengan cara memasukkan 1 gr sampel kedalam tabung reaksi berisi 9 mL air laut steril sehingga diperoleh pengenceran sampel sebesar 10 mL yang disebut pengenceran 10 -0 . Dari pengenceran 10 -0 tersebut diambil 1 mL sampel dengan pipet  steril  dan  dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  9  mL  air  laut  steril  maka  akan diperoleh  pengenceran  10 -1 .  Demikian  selanjutnya  sehingga  diperoleh  pengenceran  sampel  10 -2 , 10 -3 , 10 -4 dan 10 -5 (Radjasa et al., 2007). Seri pengenceran 10 -1 , 10 -3 dan 10 -5 dari sampel kulit akar bagian luar dan sampel kulit akar bagian dalam masing-masing diambil 1 mL dan disebarkan ke dalam cawan petri steril yang sudah diberi media agar zobell dengan menggunakan spreader ( Nandhini dan Ravathi, 2016). Kemudian cawan petri ditutup dan dibungkus dengan plastik wrap untuk menghindari kontaminasi. Cawan petri tersebut selanjutnya diinkubasi pada suhu 27 o C-30 o C selama 3x24 jam, untuk mendapatkan bakteri simbion  endofit  dan  bakteri  epifit.  Koloni  bakteri  yang  tumbuh  diamati  atau  diidentifikasi  bentuk koloni, warna dan tekstur koloninya dengan acuan buku mikrobiologi umum (Waluyo, 2018).
Purifikasi bakteri dilakukan dengan metode goresan ( streak method ). Koloni bakteri dipisahkan dengan jarum ose berdasarkan perbedaan warna dan bentuk koloni pada media zobell dalam cawan petri baru. Isolat murni yang diperoleh kemudian disimpan pada media agar miring di tabung reaksi (Radjasa dan Sabdono, 2003).
Uji  aktivitas antifouling dilakukan  menggunakan  metode overlay .  Bakteri  simbion  endofit dilawankan  dengan  bakteri  epifit.  Bakteri  simbion  endofit  sebagai antifouling dan  bakteri  epifit sebagai biofouling . Isolat bakteri endofit mangrove diambil satu ose dan ditanam pada media zobell dicawan  petri  dan  dibentuk  menjadi  bulatan kecil.  Selanjutnya,  media zobell soft agar  yang telah diberi bakteri epifit dari media cair sebanyak 1 ml dituang di atas media zobell yang berisi bakteri endofit. Cawan petri dibungkus dengan plastik wrap dan diinkubasi pada suhu kamar selama 3x24 jam.  Pembentukan  zona  hambat  di  sekeliling  isolat  bakteri  menunjukkan  isolat  bakteri  tersebut mempunyai aktifitas antifouling . Zona hambat yang terbentuk diukur menggunakan jangka sorong. dengan ketelitian 0.05 mm (Pratama et al ., 2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Isolat bakteri yang diperoleh dalam penelitian ini sebanyak 21 bakteri endofit dan 15 bakteri epifit.  Isolat  bakteri  tersebut  diidentifikasi  secara  morfologi  berdasarkan  warna,  ukuran,  bentuk, margin  dan  elevasi  pada  masing-masing  koloni  yang  tumbuh  di  media zobell .  Berikut  hasil identifikasi secara morfologi koloni bakteri simbion endofit dan epifit pada sampel akar mangrove A. marina (Tabel 2 dan Tabel. 3).
Kelimpahan bakteri simbion endofit maupun epifit dapat dipengaruhi oleh faktor lingkungan. Hal  ini  sesuai  pernyataan  Yulma et  al .,  (2017)  bahwa  bertambahnya  salinitas  memberikan  efek negatif  terhadap  kelimpahan  dan  keanekaragaman  bakteri.  Tingginya  tingkat  salinitas  mampu menghambat  pertumbuhan  koloni  bakteri  sehingga  menyebabkan  tingkat  aktivitas  bakteri  sangat rendah dan terjadi shock osmotic atau toksik. Suhu juga dapat berpengaruh terhadap kelimpahan mikroorganisme  bakteri  yang  berada  di  mangrove,  semakin  tinggi  suhu  maka  dapat  mematikan mikroorganisme bakteri yang berada di mangrove.
Kemampuan bakteri simbion endofit dalam menghambat bakteri epifit diperlihatkan pada zona hambat atau zona bening disekeliling bakteri simbion endofit. Kemampuan bakteri simbion endofit
Journal of Marine Research Vol 11, No.1 Februari 2022, pp. 1-8
dilihat  berdasarkan  besar  zona  hambat  yang  memperlihatkan  besarnya  potensi  bakteri  endofit tersebut dalam melakukan penghambatan terhadap bakteri epifit. Hal ini sesuai dengan pernyataan Marhaeni et  al .,  (2011)  bahwa,  kemampuan  yang  dimiliki  bakteri  simbion  endofit  tersebut kemungkinan  karena  koevolusi  terjadinya  transfer  genetik  dari  tumbuhan  inangnya  ke  bakteri simbion endofit.

## Tabel 2. Identifikasi morfologi koloni bakteri endofit sampel akar
K. Isolat No. Bakteri Warna Ukuran Bentuk Margin Elevasi AVAD.1.1. 1 Kuning Kecil Circular Entire Flat 2 Kuning Titik Circular Entire Flat 3 Putih Sedang Irregular Serrate Flat AVAD.1.3. 1 Kuning Kecil Circular Entire Flat 2 Kuning Sedang Irregular Lobate Flat AVAD.1.5. 1 Putih Sedang Irregular Serrate Flat 2 Putih Sedang Irregular Serrate Flat 3 Kuning Kecil Spindle Serrate Flat 4 Putih Kecil Spindle Serrate Flat AVAD.2.1. 1 Putih Sedang Circular Entire Flat 2 Kuning Sedang Circular Entire Flat AVAD.2.3. 1 Putih Besar Irregular Lobate Flat 2 Kuning Sedang Irregular Serrate Flat 3 Putih Sedang Irregular Serrate Flat 4 Putih Kecil Circular Serrate Flat 5 Putih Kecil Irregular Lobate Flat AVAD.3.1. 1 Putih Kecil Spindle Lobate Flat AVAD.3.3. 1 Putih Titik Circular Entire Flat 2 Transparan  Besar Irregular Lobate Flat AVAD.3.5. 1 Kuning Besar Irregular Lobate Flat 2 Putih Kecil Irregular Lobate Flat
Keterangan:  AVAD  ( A.  marina akar  dalam),  angka  pertama  yaitu  stasiun,  angka  kedua  yaitu pengenceran.

## Tabel 3. Identifikasi morfologi koloni bakteri epifit sampel akar
K. Isolat No. Bakteri Warna Ukuran Bentuk Margin Elevasi AVAL.1.1. 1 Pink Kecil Circular Entire Flat 2 Putih Kecil Circular Entire Flat AVAL.1.3. 1 Putih Kecil Circular Entire Flat 2 Kuning Kecil Irregular Entire Raised AVAL.1.5. 1 Putih Sedang Circular Entire Flat AVAL.2.1. 1 Putih Sedang Circular Entire Flat 2 Kuning Sedang Circular Entire Flat AVAL.2.3. 1 Putih Kecil Irregular Lobate Flat 2 Kuning Kecil Irregular Lobate Flat AVAL.2.5. 1 Kuning Kecil Circular Entire Flat AVAL.3.1. 1 Kuning Titik Circular Entire Flat AVAL.3.3. 1 Kuning Sedang Irregular Lobate Flat 2 Putih Kecil Circular Entire Flat AVAL.3.5. 1 Kuning Sedang Irregular Lobate Flat 2 Kuning Kecil Circular Entire Flat Keterangan: AVAL ( A. marina akar luar), angka pertama yaitu stasiun pertama, angka kedua yaitu pengenceran.
Journal of Marine Research Vol 11, No.1 Februari 2022, pp. 1-8
Penelitian  ini  memperlihatkan  zona  hambat  dari  bagian  akar  memiliki  ukuran  zona  hambat kategori kuat karena >10 mm. Hal ini sesuai pendapat Kusmawarti e t al., (2008) bahwa, ukuran zona hambat dikategorikan lemah jika zona hambatnya <5mm, sedang jika berukuran 5-10mm, kategori kuat 10-20mm dan dikategorikan sangat kuat jika zona hambat berukuran 20-30mm. Kategori zona hambat kuat pada penelitian ini, karena keterlibatan bakteri endofit dalam jaringan inangnya dalam hal metabolisme yang saling menguntungkan. Bakteri endofit memperoleh nutrisi untuk melengkapi siklus  hidupnya  dari  tumbuhan  inangnya  dan  tumbuhan  inang  memperoleh  proteksi  atau keuntungan lain dari hasil kerjasama metabolisme (Marhaeni et al , 2011). Aktivitas antifouling yang  ditunjukkan  kode  isolat  AVA.2.1.2.  yang  dilawankan  dengan AVAL.2.3.2. menunjukkan adanya zona hambat dengan diameter 19 mm. Aktivitas antifouling pada kode  isolat  AVAD.3.3.1 yang  dilawankan  dengan  AVAL.3.3.1  menunjukkan adanya  zona  hambat dengan diameter 20 mm. Aktivitas antifouling pada kode isolat AVAD.3.3.1. yang dilawankan dengan AVAL.3.5.2 menunjukkan adanya zona hambat dengan diameter 16 mm.
Gambar 1. Uji aktivitas antifouling pada kode isolat AVAD.2.1.2. dilawankan dengan AVAL.2.3.2.
Gambar 2. Uji aktivitas antifouling pada kode isolas AVAD.3.3.1. dilawankan dengan AVAL.3.3.1
Journal of Marine Research Vol 11, No.1 Februari 2022, pp. 1-8
Aktivitas antifouling pada  kode  isolat  AVAD.3.3.1.  yang  dilawankan  dengan  AVAL.3.5.1. menunjukkan adanya zona hambat dengan diameter 18 mm. Aktivitas antifouling pada kode isolat AVAD.3.1.1.  yang  dilawankan  dengan  AVAL.3.5.1.  menunjukkan  adanya  zona  hambat  dengan diameter 18 mm, dan AVAD.3.3.1 yang dilawankan dengan AVAL.3.5.1 menunjukkan adanya zona hambat dengan diameter 18 mm.
Gambar 4. Uji aktivitas antifouling pada kode isolat AVAD.3.3.1. dilawankan dengan AVAL.3.5.1.
Gambar 5. Uji aktivitas antifouling pada kode isolat AVAD.3.1.1., AVAD.3.3.1  dilawankan dengan AVAL.3.5.1.
Tabel 4. Hasil ukuran zona hambat pada sampel akar yang telah diuji untuk mengetahui    aktivitas antifouling
No. Bakteri Simbion Endofit ( Antifouling Bacteria ) Bakteri Epifit (Bakteri Uji) Ukuran Zona Hambat (mm) 1. AVAD.2.1.2. AVAL.2.3.2. 18±0.1 2. AVAD.3.1.1. AVAL.3.3.1. 20±0.06 3. AVAD.3.1.1. AVAL.3.5.1. 18±0.06 4. AVAD.3.3.1. AVAL.3.5.1. 18±0.06 5. AVAD.3.1.1. AVAL.3.5.2. 16±0.06
Keterangan: AVAD ( Avicennia marina akar dalam), angka pertama yaitu stasiun, angka kedua yaitu pengenceran, dan angka ketiga yaitu bakteri yang diidentifikasi. AVAL ( Avicennia marina akar luar), angka pertama yaitu stasiun, angka kedua yaitu pengenceran, dan angka ketiga yaitu bakteri yang diidentifikasi.
Journal of Marine Research Vol 11, No.1 Februari 2022, pp. 1-8
Tabel 5. Parameter lingkungan pengambilan sampel
Parameter Stasiun 1 Stasiun 2 Stasiun 3 Referensi Salinitas 30 ppt 29 ppt 30 ppt 28 – 30 ppt (Yulma et al ., 2017) Suhu 31.5 o C 31 o C 31.4 o C 27 –  31
o C  (Hadiputra dan  Damayanti, 2013) pH 7 6.8 7.27 6.8 – 8 (Sari et al ., 2017)
Perkembangan zona hambat disekitar bakteri simbion endofit juga dipengaruhi pengambilan sampel pada musim kemarau, karena pada saat musim kemarau terjadi surut terendah di daerah Wonorejo  yang  menyebabkan  mangrove  tidak  ada  masukan  air  dan  mempengaruhi  faktor-faktor oseanografi fisika maupun kimia (Tabel. 5), sehingga bakteri yang berada di mangrove tidak begitu melimpah. Hal ini sesuai dengan penelitian Yulma et al ., (2017) bahwa bertambahnya salinitas akan memberikan  efek  negatif  terhadap  kelimpahan  dan  keanekaragaman  bakteri.  Tingginya  tingkat salinitas mampu menghambat pertumbuhan koloni bakteri sehingga menyebabkan tingkat aktivitas bakteri  sangat  rendah  akibatnya  terjadi shock  osmotic atau  toksik.  Suhu juga  dapat  berpengaruh terhadap kelimpahan mikroorganisme bakteri yang berada di mangrove, semakin tinggi suhu maka dapat mematikan mikroorganisme bakteri yang berada di mangrove. Hasil penelitian dari Sinatryani et al ., (2014) pH juga dapat mempengaruhi kehidupan bakteri, pada umumnya pH tumbuhan tingkat tinggi sesuai dengan mikroba tanah. Aktivitas mikroba tanah akan menurun dengan menurunnya pH tanah, hal ini yang mempengaruhi kelimpahan bakteri yang berada di mangrove.
Sampel  akar  terbukti  menunjukkan  bahwa  bakteri  simbion  endofit  ada  zona  hambat  yang dapat menghambat bakteri epifit yang diduga mengandung senyawa metabolit sekunder tanin yang dapat menghambat biofouling . Hal ini sesuai penelitian Syahputra dan Almuqaramah (2019) yang menyatakan bahwa kandungan metabolit sekunder berperan penting dalam menghambat biofouling terutama pada senyawa tanin.

## KESIMPULAN
Hasil  dari  penelitian  menunjukkan  adanya  bakteri  pada  sampel  akar  mangrove A.  marina berjumlah 21 bakteri simbion endofit dan 15 bakteri epifit. Bakteri simbion endofit yang menunjukkan adanya  aktivitas antifouling ditunjukkan  dengan  adanya  zona  hambat  disekitar  bakteri  simbion endofit.  Analisis  zona  hambat  menunjukkan  bahwa  bakteri  endofit  yang  berpotensi  sebagai antifouling pada bagian akar memiliki ukuran zona hambat kategori kuat yaitu >10 mm..

## DAFTAR PUSTAKA
Cahyaningtyas, G.A., Feni, I., & Dewi, C.S.U. 2017. Aktivitas Antifouling Avicennia marina Terhadap Macrofouler Perna viridis . Journal of Fisheries and Marine Science , 1(1):1-5 Hadiputra,  M.A.,  &  Damayanti,  A.  2013.  Kajian  Potensi  Makrozoobentos  sebagai  Bioindikator Pencemaran Logam Berat Tembaga (Cu) di Kawasan Ekosistem Mangrove Wonorejo Pantai Timur Surabaya. Prosiding Seminar Nasional Manajemen Teknologi XVIII , D14-1 – D14-8. Kusmarwati, Arifah, & Indriati, N. 2008. Daya Hambat Ekstrak Bahan Aktif Biji Picung (Pangiun edule Reinw)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Penghasil  Histamin. Jurnal  Pascapanen  dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, 3(1):29-35.
Nandhini, S., & Ravathi, K. 2016. Antifouling Activity of Extracts from Mangroves Against Biofouling Bacteria Isoolated from Boats in Royapuram, Chennai, India. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences, 5(8):324-335.
Manilal, A., Sujith, A., Kiran, G.S., Selvin., J. & Shakir, C. 2009. Biopotentials of Mangroves Collected from the Southwest Coast of India. Global Journal of Biotechnology and Biochemistry, 4(1):59- 65.
Journal of Marine Research Vol 11, No.1 Februari 2022, pp. 1-8
Marhaeni,  B.,  Radjasa,  O.K.,  Khoeri,  M.M.,  Sabdono,  A.,  Bengen,  D.G.,  &  Sudoyo,  H.  2011. Antifouling  Activity  of  Bacterial  Symbionts  of  Seagrasses  against  Marine  Biofilm-Forming Bacteria. Journal of Environmental Protection, 2(9):1245 – 1249.
Mnsen,  F.S.,  Rumampuk,  N.,  &  Lasut,  M.  2016.  Deteksi  Polutan  Tributiltin  dalam  Jaringan Gastropoda Di Perairan Pelabuhan Manado dan Bitung. Jurnal Pesisir dan Laut Tropis , 1(1):9- 14.
Prabhakaran, S., Rajaram, R., Balasubramanian, V. & Mathivanan, K. 2012. Antifouling Potential of Extracts from Seaweed, Segrasses and Mangroves Against Primary Biofilm Forming Bacteria. Asian Pasific Journal of Tropical Biomedicine, 2(1): S316-S322.
Pratama, B., Endang, K., Agung, S., Anto, B., & Susanto, A.B.. 2014. Eksplorasi dan Karakterisasi Bakteri  Potensial  Penghasil  Senyawa  Antifouling  yang  Berasosiasi  dengan  Alga  Coklat ( Phaeophyta ) di Perairan Kepulauan KarimunJawa Jepara. Jurnal Biologi , 3(3):39-48. Radjasa, O.K. & Sabdono, A. 2003. Keanekaragaman Genetik Bakteri Laut Penghasil Senyawa Anti Bakteri dalam Pengendalian Penyakit pada Udang.  Laporan Kegiatan Proyek Penelitian Ilmu Pengetahuan  Dasar,  Pusat  Kajian  Pesisir  dan  Laut  Tropis  Lembaga  Penelitian  Universitas Diponegoro.
Radjasa,  O.K.,  Sabdono,  A.,  Junaidi  &  Zoochi,  E.  2007.  Richness  of  Secondary  Metabolite Producing  Marine  Bacteria  Assosiated  with  Sponge Haliclone sp. Journal  of  Pharmaca ,  3(3): 275 – 279.
Ramasubburayan,  R.,  Prakash,  S.,  Iyapparaj,  P.,  Sumathi,  S.,  Titus,  S.,  Immanueldan,  G.  & Palavesam,  A.  2017.  Isolation,  Screening  and  Evaluation  of  Antifouling  Activity  of  Mangrove Associated Bacterium, Bacillus subtilis subsp. subtilis RG. Prociding The National Academy of Science, India , 87(3): 1015-1024.
Sari, S.H.J., Kirana, J.F.A. & Guntur. 2017. Analisis Kandungan Logam Berat Hg dan Cu Terlarut di Perairan Pesisir Wonorejo, Pantai Timur Surabaya. Jurnal Pendidikan Geografi , 22(1): 1-9.
Sinatryani, D., M.A. Alamsjah., Sudarno., & Pursetyo, K.T. 2014. Kelimpahan Bakteri Selulolitik Di Muara Sungai Gunung Anyar Surabaya dan Bancaran Bangkalan. Jurnal Ilmiah Perikanan dan Kelautan , 6(2):143 –148.
Syahputra, F., & Almuqaramah, T.M.H. 2019. Penambahan Ekstrak Larutan Kulit Mangrove pada Cat Minyak Sebagai Antifouling . Aquatic Science Journal, 6(1):37-40. Waluyo, Lud. 2018. Mikrobiologi Umum. Universitas Muhammadiyah Malang. Wiguna,  A.S.,  Kusmita,  L.&  Radjasa,  O.K.  2016.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Pigmen  Karotenoid  dari Isolat  Bakteri  Simbion  Karang  Lunak Sarcophyton sp.  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Staphylococcus aereus ATCC 25923. Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi Indonesia, 3(3):92 – 98.
Yulma, Ihsan, B., Sunarti, Malasari, E., Wahyuni, N., & Mursyban, M. 2017. Identifikasi Bakteri pada Serasah  Daun  Mangrove  yang  Terdekomposisi  di  Kawasan  Konservasi  Mangrove  dan Bekantan (KKMB) Kota Tarakan. Journal of Tropical Biodiversity  and Biotechnology , 2(1):28- 33.
Zhang, X.Y., Fu, W., Chen, X., Yan, M.T., Huang, X.D., & J. Bao. 2018. Phylogenetic Analysis and Antifouling  Potentials  of  Culturabel  Fungi  in  Mangrove  Sediments  from  Techeng  Isle,  China. World Journal of Microbiologi and Biotechnology , 34(90): 1-11.