p-ISSN 2354-6565 /e-ISSN 2502-3438 DOI: 10.26874/kjif.v6i1.134
Aktivitas antibakteri biji, kulit dan daun pepaya ( Carica papaya L.) terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus

## Asep Roni, Maesaroh, Lia Marliani
Sekolah Tinggi Farmasi Bandung, Jl. Soekarno Hatta No. 754 Corresponding author email: asep.roni@stfb.ac.id

## Abstrak
Penyakit  infeksi  merupakan  penyakit  dengan  prevalensi  paling  banyak  ditemukan  di Indonesia.  Resistensi  mikroba  terhadap  antibiotik  merupakan  permasalahan  dalam  dunia pengobatan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri dari ekstrak biji, kulit  dan  daun  pepaya  ( Carica  papaya L.),  dan  fraksi  aktif  ekstraknya  serta  menentukan golongan  senyawa  dari  fraksi  aktif  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli .  Proses  ekstraksi  dilakukan  menggunakan metode  maserasi  dengan  pelarut  etanol  96%  selama  3X24  jam.  Ekstrak  paling  aktif  di fraksinasi menggunakan pelarut metanol-air, etil asetat dan n-heksan. Uji aktivitas antibakteri terhadap S. aureus dan E.coli dengan metode difusi agar. Fraksi dengan zona hambat terbesar dilakukan  uji  bioautografi  untuk  mengetahui  golongan  senyawa  yang  aktif  sebagai antibakteri.  Ekstrak  biji,  kulit  dan  daun  pepaya  memiliki  konsentrasi  hambat  minimum (KHM) berturut-turut 20%, 30% dan 20% terhadap bakteri S.aureus , sedangkan KHM pada bakteri E.coli berturut-berturut 10%, 20% dan 20%. Fraksi biji metanol-air, etil asetat dan n- heksan memiliki KHM berturut-turut 5%, 5% dan 2,5% terhadap bakteri S.aureus, sedangkan KHM  pada  bakteri E.coli berturut-turut  5%,  2,5%  dan  1%.    Pengujian  KLT  bioautografi fraksi n-heksan diperoleh daerah hambatan pada Rf 0,65 dan 0,88 . Ekstrak etanol biji pepaya dan  fraksi  n-heksan  biji  pepaya  merupakan  ekstran  dan  fraksi  yang  paling  aktif  terhadap E.coli dengan  KHM  10%  dan  1%.  Hasil  uji  bioautografi  terhadap  fraksi  n-heksan  biji menunjukkan  bahwa  senyawa  yang  diduga  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap E,coli adalah golongan terpenoid.
Kata kunci : Antibakteri, Carica  papaya L., Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus, bioautografi kontak.

## Antibacterial activities of seed, cortex and leaves of papaya (Carica papaya L.) to Escherichia coli and Staphylococcus aureus bacteria

## Abstract
Infection desease has the high prevalence desease in Indonesia. Resistancy of some microbial organism is one of a problem in medicine. This research aims to determine the antibacterial activities  of  seed,  peel  and  leaves  of  papaya  (Carica  papaya  L.)  extracts,  fractions  extract and  the  active  compounds  from  the  active  fraction  that  can  inhibit  the  growth  of Staphylococcus  aureus  and  Escherichia  coli  bacterials.  Simplicia  was  extracted  by  ethanol 96 % with maceration method. And the most active extract was fractionated with methanol- water,  ethyl  acetate  and  n-hexsane  fractionation.  Antibacterial  activities  were  done  to Staphylococcus aureus and Escherichia coli with agar diffusion method.The fraction with the biggest inhibit zone will bee  continued to  bioautography assay  to  find the active  compound that  has  an  antibacterial  activities.  Seed,  peel  and  leaf  of    papaya  (Carica  papaya  L.) exstracts agarast to the Staphylococcus aureus  bacteries has the MIC consecutive 20%, 30% and 20%. And to Escherichia coli consecutive 10%,20% dan 20%. The MIC of Seed fraction
of  methanol-water,  ethyl  acetate  and    n-  hexsane  fractions  to  Staphylococcus  aureus consecutive  5%,5%  dan  2,5%,  and  to  Escherichia  consecutive  5%,2,5%  dan  1%. Bioautography assay of n- hexsane fraction found that the inhibition zone were at the Rf 0,65 and 0,88. Extract ethanol of seed and n-hexsane fraction were the most active to Escherichia coli  with  MIC  10%  and  1%.  From  the  bioautography  result  we  can  suggest  that  terpenoid have the activity to Escherichia coli bacterial.
Keywords : Antibacterial,  Carica  papaya  L., Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus, bioautografi test.

## Pendahuluan
Data    laporan  Nasional  Riskesdas  2013 menyebutkan bahwa cara penularan penyakit infeksi  menular  dapat  di  kelompokan menjadi tiga, yaitu 1) udara, 2) makanan dan air,  3)  vector.  Penyakit  infeksi  cara penularan  melalui  udara  diantaranya  Infeksi Saluran  Pernafasan  Akut  (ISPA)  sebesar 25.0%,  pneumonia  sebesar  4,5%,  dan  TB paru  sebesar  0,4%.  Penyakit  infeksi  cara penularan  melalui  makanan,  air  dan  lainnya yaitu  diantaranya  hepatitis  sebesar  1,2%, diare  sebesar  7,0%  untuk  kelompok  usia dewasa  dan  10,2%  untuk  kelompok  usia balita.  Penyakit  infeksi  cara  penularan melalui  vektor  (malaria)  sebesar  6,0%.  Dari data  tersebut  penyakit  infeksi  di  Indonesia memiliki  prevalensi  tinggi,  maka  perlu adanya perhatian khusus.
Salah  satu  cara  pengobatan  untuk  infeksi bakteri  adalah  dengan  pemberian  antibiotik (Hare,1993). Penggunaan  antibiotik  yang tidak tepat dapat menyebabkan perkembangan bakteri-bakteri kebal terhadap obat (Green, 2005).
Rifah  Hestyani  Arum  dan  kawan-kawan menyebutkan bahwa  getah dari buah pepaya ( Carica  papaya L.)  memiliki  aktivitas sebagai antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus  aureus. Masih  belum  ada penelitian  yang  menjelaskan  senyawa  aktif apa  yang  berperan  sebagai  antibakteri golongan  senyawa  yang  diperkirakan  aktif sebagai antibakteri. Berdasarkan data di atas, maka  perlu  dilakukan  penelitian  untuk membandingkan  aktivitas  antibakteri  dari tiga  bagian  tanaman  pepaya  yaitu  biji,  daun dan  kulit  buah  pepaya  terhadap  bakteri Escherichia coli dan S.aureus, menggunakan metode  cakram  kertas  dan  dilanjutkan
dengan bioautografi kontak, untuk mengetahui golongan senyawa yang diperkirakan aktif sebagai antibakteri.

## Metode
Penelitian yang dilakukan meliputi tahapan  penyiapan  bahan,  karakterisasi simplisia,  penapisan  fitokimia,  pembuatan ekstrak  dan  fraksi,  pembuatan  larutan  uji, pengujian antibakteri, dan uji bioautografi.
Penyiapan  bahan terdiri  dari  pengadaan daun,  biji  buah  dan  kulit  buah  pepaya  pada umur  empat  sampai  lima  bulan  dan  bakteri E.coli dan S.aureus. Bahan  tanaman  yang diperoleh  kemudian  dibuat  dalam  bentuk simplisia.
Penapisan
fitokimia
meliputi pemeriksaan  senyawa  golongan  alkaloid, saponin, flavonoid, kuinon, tanin, dan steroid / triterpenoid.
Ekstraksi terhadap  simplisia  ketiga bagian tanaman pepaya dilakukan menggunakan  metode  maserasi  dengan menggunakan pelarut etanol 96%.
Uji  aktivitas ekstrak  daun,  biji  buah  dan kulit buah  dibuat larutan uji dengan berbagai konsentrasi  yang  kemudian  di    uji  aktivitas antibakterinya  (KHM)  terhadap  bakteri E.coli dan S.aureus dengan  menggunakan metode difusi agar cakram kertas.

## Hasil  Dan Pembahasan
Karakterisasi simplisia meliputi pemeriksaan kadar abu total, kadar abu larut air,  kadar  abu  tidak  larut  asam,  kadar  sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar air dan susut pengeringan. Hasil karakterisasi simplisia dapat dilihat pada tabel 1.
Penapisan  fitokimia  yaitu  suatu  metode untuk mengetahui golongan senyawa
metabolit  sekunder  yang  terkandung  dalam sampel.  Skrining  fitokimia  terhadap  biji, kulit  buah  dan  daun  pepaya  meliputi pemeriksaan  senyawa  golongan  alkaloid, saponin, flavonoid, kuinon, tanin, dan steroid /  triterpenoid.  Hasil  Penapisan  Fitokimia dapat dilihat pada tabel 2
Tabel 1. Hasil karakterisasi simplisia Parameter Hasil (%) b/b Biji Kulit Daun Kadar abu total 13% 14,7% 12,7% Kadar abu larut air 6,5% 8,3% 6,6% Kadar  abu  tidak  larut asam 3,9% 3,7% 9,5% Kadar sari larut air 31,3% 38,7% 28,7% Kadar sari larut etanol 12,8% 12,3% 8,9% Kadar air (v/b) 16 % 8% 6% Susut pengeringan 12% 8% 7,8% Tabel 2. Hasil Penapisan Fitokimia Pemeriksaan senyawa Biji Kulit Daun Alkaloid + + + Flavonoid + + + Saponin _ + + Tanin _ _ + Kuinon _ _ + Steroid/triterpenoid + +
+ Keterangan : (+) = Mengandung senyawa yang diuji (-)  = Tidak mengandung senyawa yang diuji
Proses  ekstraksi  dilakukan  menggunakan metode maserasi sebanyak 350 gram masing- masing simplisia dari ketiga bagian tanaman di  ekstraksi  dengan  menggunakkan  pelarut etanol 96% selama 3X24 jam. Maserat  yang diperoleh kemudian dipekatkan menggunakkan rotary vaporator.
Tabel 3. Rendemen Ekstrak Sampel ekstrak  Rendemen % (b/b) Biji 11,7 Kulit 12,6 Daun 8,7
Dari data aktivitas antibakteri ekstrak biji, kulit  dan  daun,  dapat  dilihat  bahwa  Ekstrak biji  pepaya  memiliki  aktivitas  antibakteri terbesar  dibandingkan  dengan  ekstrak  kulit pepaya  dan  daun  pepaya  terhadap  bakteri E.coli dan S.aureus dengan  KHM  berturut-
turut  10%  dan  20%  dan  rata-rata  diameter zona  hambat  berturut-turut  12,3±0,6  dan 12,6±1,2 mm.
Tabel 4.   Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Biji,  Kulit  dan  Daun  Pepaya  Terhadap Bakteri S.aureus dan E.coli. Ekstrak  Biji Pepaya % S.aureus (mm) E. coli (mm) 30 17,3 ±1,5 16,6 ±0,6 20 12,6 ±1,2 14,3 ±1,5 10 11,3 ±0,6 12,3 ±0,6 Ekstrak Kulit Pepaya % S.aureus (mm) E. coli (mm) 30 12,6 ±0,6 14,0 ±1 20 11,3 ±1 12,3 ±0,6 10 10,6 ±0,6 11,3 ±0,6 Ekstrak Daun Pepaya % S.aureus (mm) E. coli (mm) 30 16,3 ±2 15,3 ±0,6 20 12,3 ±0,6 12,6 ±0,6 10 11,3 ±0,6 10,3 ±1,5 Kontrol (+) 12,6 ±1,8 12,7 ±1,0 Kontrol (-) 0 0 Sedangkan dari pengujian terhadap fraksi, Fraksi n-heksan biji pepaya pepaya memiliki aktivitas antibakteri paling besar dibandingkan  dengan  fraksi  etil  asetat  dan metanol-air  terhadap  bakteri E.coli dan S.aureus dengan KHM berturut-turut1% dan 2,5%  dan  rata-rata  diameter  zona  hambat berturut-turut 12,0±1 dan 12,0±1. Hasil dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5.   Hasil  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi Biji  Pepaya  Terhadap  Bakteri S.aureus dan E. coli. Fraksi metanol- air % E.coli (mm) S.aureus (mm) 5 12,3 ±0,6 12,0 ±0,6 2,5 11,0 ±1 11,3 ±0,6 1 8,3 ±1,2 9,3 ±0,6 Fraksi Etil asetat % E.coli (mm) S.aureus (mm) 5 13,0 ±1 12,6 ±1 2,5 12,3 ±0,6 11,6 ±0,6 1 10,6 ±0,6 10,6 ±0,6 Fraksi n-heksana a% E.coli (mm) S.aureus (mm) 5 14,3 ±0,6 15,3 ±1,2 2,5 13,0 ±1 12,0 ± 1 1 12,0 ±1 11,3 ±0,6 Kontrol (+) 12,7 ±0,8 12,2 ±0,8 Kontrol (-) 0 0
Uji  bioautografi dilakukan  terhadap fraksi  paling  aktif  yaitu  fraksi  n-heksan  dari biji  pepaya.  Uji  ini  dilakukan  dengan melakukan  KLT  pada  fraksi  n-heksan dengan  pengembang  yang  sesuai.  Fraksi  biji pepaya  mudian  di  elusi  dengan  di  totolkan pada  plat KLT kemudian di elusi dengan n- heksana–etil asetat (7:3).

## (a) (b)
Gambar 1.   Hasil  uji  bioautografi  fraksi  n- heksan  biji  buah  pepaya  (a), Sebelum  diinkubasi  (b)  Setelah  di inkubasi.
Gambar 2.   Hasil pemantauan ekstrak dan fraksi biji
Keterangan  : Ekstrak    (1),  biji  pepaya  (2),  Fraksi  metanol  biji pepaya (3), Fraksi Etil asetat biji pepaya (4), Fraksi n- heksana  biji  pepaya  (a),  Penampak  bercak  AlCl 3 5% dibawah  lampu  UV  λ  254  nm  (b),  Penampak  bercak AlCl 3 5%  dibawah  Lampu  UV  λ  365  nm  (c), Penampak  bercak  Liberman  bouchard  visual  (d), Penampak  bercak  vanilin  sulfatvisual  (e),  Penampak bercak FeCl 3 (f), Penampak bercak anisaldehid visual.
Bercak  yang  yang  muncul  dengan pereaksi  vanillin  sulfat,anisaldehid  dan liberman  bucharda  memiliki  nilai  Rf  yang sama  dengan  zona  bening  yang  dihasilkan pada  proses  bioautografi.  Nilai  Rf  yang diperoleh  dari  penampak  bercak  vanillin, anisaldehid  dan  liberman  buchard  adalah 0,65  dan  0,88.  Sehingga    diduga  senyawa aktif  biji  pepaya  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri E.coli adalah  golongan terpenoid

## Kesimpulan
Ekstrak  biji  pepaya  memiliki  aktivitas antibakteri  terbesar  dibandingkan  dengan ekstrak  kulit  pepaya  dan  daun  pepaya terhadap  bakteri E.coli dan S.aureus .  Fraksi n-heksan  biji  pepaya  pepaya  memiliki aktivitas antibakteri paling besar dibandingkan  dengan  fraksi  etil  asetat  dan metanol-air  terhadap  bakteri E.coli dan S.aureus .  Dari  hasil  bioautografi  diduga golongan  senyawa  aktif  yang  menghambat pertumbuhan  bakteri E.coli adalah  golongan senyawa terpenoid.

## Daftar Pustaka
Arum rifah H., Satiawihardja Budiatman., & Kusumaningrum  H,D.,  (2014): Aktivitas
Antibakteri Getah Pepaya Kering
Terhadap  Staphylococcus  aureus  Pada Dangke . Program Studi Ilmu Pangan Dan Departemen  Ilmu  Dan  Teknologi  Pangan Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Astuti,  S.D.(2009)  : Efek  Ekstrak  Etanol
70%  Daun  Pepaya  (Carica  papaya  Linn) Terhadap  Aktivitas  Ast  dan  Alt  Pada Tikus  Galur  Wistar  Setelah  Pemberian Obat Tuberculosis ( Isoniazid & Rifampicin  ). Skripsi,  Universitas  Setia Budi, 4, 69. Badan Penelitian dan pengembangan Kesehatan  Kementrian  Kesehatan  RI. Riset Kesehatan Dasar (2013).
Bauer A.W, dkk., (1966): Antibiotic susceptibility  testing  by  a  standardized single  disk  method .  Am  J  Clin  Pathol. Apr;45 (4) : 493-6.
Cronquist,A.  (1981):  An  Integrated  System of  Classification  of  Flowering  Plants, Columbia  Press,  New  York.  Pp.  Xiii- Xviii.
Dalimartha,  S.  (2009): Atlas  tumbuhan  obat indonesia jilid  Enam.  Pustaka  Bunda, Jakarta, 121-124
Depertemen  Kesehatan  Republik  Indonesia,
(1985): Cara Pembuatan Simplisia . Depertemen  Kesehatan  Republik  Indonesia, (1989). Materia  Medika  Indonesia Jilid Lima. Jakarta Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan.
Depertemen  Kesehatan  Republik  Indonesia, (2009). Farmakope  Herbal  Indonesia .
Edisi Pertama. Jakarta
Dian  ND.,Anggrahini.,  Rodesia,  M.,  Roza., Fitmawati,. Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Daun  Pepaya (Carica  papaya L.) Terhadap Escherichia coli Dan Salmonella  typhi. Fakultas  Matematika dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas Riau  Kampus  Bina  Widya  Pekanbaru, 28293, Indonesia Green  J,  (2005): Terapi  Herbal  Pengobatan
Alamai Mengatasi Bakteri . Prestasi
Pustaka Raya, Jakarta.10,78, 105, 119. Here R, (1993): Mikrobiologi dan Imunologi untuk  Perawat  dan  Dokter .  Yayasan essential Medica,130.
I  M,  Sukadana.,  Santi  Sri  Rahayu.,  &  N,  K, Juliarti. Aktivitas  Antibakteri  Senyawa golongan  Triterpenoid  Dari  Biji  Pepaya (Carica  papaya  L.). Jurusan  Kimia FMIPA  Universitas  Udayana,  Bukit Jimbaran.
Jawetz,  E.,  Melnick,  J.  L.,  Adelberg,  E.  A., (2001): Mikrobiologi  Kedokteran, Edisi
XXII. diterjemahkan oleh Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Universitas  Airlangga,  205-209,  Penerbit
Salemba Medika, Jakarta
Noer  Fauziah  S,  (2011): Pola  Bakteri  dan Resistensinya  Terhadap  Antibiotik  Yang Ditemukan  Pada  Air  Dan  Udara  Ruang Instalasi  Rawat  Khusus  RSUP  Dr.
Wahidin Sudirohusodo Makassar . Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas  Islam  Makassar  Universitas Islam Makassar.
Pelczar, (1998): Dasar-Dasar Mikrobiologi .
Jakarta Universitas Indonesia
Tietze HW, (2002): Terapi Pepaya : Sebuah Bentuk Terapi Makanan Yang Aman Dan Murah .  Cetakan  Pertama  PT  Prestasi Pustaka Raya, Jakarta. 10, 78, 105, 119. Warsa,  U.C.  (1994): Staphylococcus  Dalam Buku  Ajar  Mikrobiologi  Kedokteran.
Edisi  Revisi.  Jakarta  :  Penerbit  Binarupa Aksara. hal. 103-110
Warisno, (2003): Budidaya Pepaya . Kanisius.Yogyakarta.