## Perbedaan Kadar Trigliserida pada Sampel Plasma dan Serum Darah  dengan Metode GPO PAP
The Differences of Triglyceride Levels in Plasma and Blood Serum Samples with the GPO-PAP Method
Tri Minarsih Universitas Ngudi Waluyo, Ungaran triminarsih064062@gmail.com
Abstract: Triglycerides are very important for the human body because in the human body triglycerides are  useful  as  a  source  of  energy  for  the  body  in  addition  to  other  nutrients  such  as  carbohydrates, protein, vitamins and minerals, but high triglyceride values are associated with the onset of heart attack, stroke and diabetes. To determine the level of triglycerides in the blood can use a sample, either serum or blood plasma. The use of serum samples can provide more appropriate results because they are not contaminated with the presence of anticoagulants used in plasma samples. The aim of this study was to determine  whether  there  were  differences  in  triglyceride  levels  in  samples  using  serum  and  blood plasma. This research is a laboratory observational study, using a sample of 30 samples aged 19-25 years and using the GPO PAP method to determine the Triglyceride levels in the sample, then the data is analyzed using the t test to see whether or not there are differences in Triglyceride levels in serum and plasma samples. The results of this study were obtained that the average Triglyceride level in the plasma sample was 162.94 mg / dl, while in the serum sample was 228.50 mg / dL. Based on the t-test statistic, there is a significant difference between triglyceride levels using plasma and serum samples. Keywords: Triglycerides, Plasma, serum  GPO PAP Methods
Abstrak :  Trigliserida  sangat  penting  bagi  tubuh  manusia  karena  di  dalam  tubuh  manusia  trigliserida bermanfaat sebagai salah satu sumber energi tubuh disamping zat gizi lain seperti karbohidrat, protein, vitamin dan mineral, akan tetapi nilai trigliserida yang tinggi memiliki kaitan dengan timbulnya penyakit serangan  jantung,  stroke  dan  diabetes.Untuk  menetapkan  kadar  Trigliserida  dalam  darah  bisa menggunakan  sampel,  baik  serum  ataupun  plasma  darah.  Penggunaan  sampel  serum  dapat memberikan hasil yang lebih sesuai karena tidak tercemar adanya antikoagulan yang digunakan pada sampel plasmaTujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan kadar trigliserida pada  sampel  yang  menggunakan  plasma  dan  serum  darah.  Penelitian  ini  merupakan  penelitian observasi  laboratorium,  mengggunakan  sampel  sebanyak  30  sampel  dengan  usia  19-25  tahun  dan menggunakan metode GPO PAP untuk menetapkan kadar Trigliserida dalam sampel, selanjutnya data dianalisis menggunakan Uji t test untuk melihat ada atau tidaknya perbedaan kadar Trigliserida dalam sampel plasma.dan serum. Hasil dari penelitian ini adalah didapatkan Kadar  Trigiserida rata-rata dalam sampel  plasma  sebesar  162,94  mg/dl  sedangkan  didalam  sampel  serum  sebesar  228,5  mg/dl. Berdasarkan  uji  statistic  t-test  terdapat  perbedaan  yang  signifikan  antara  kadar  trigliserida menggunakan sampel serum dan plasma . Kata Kunci : Trigliserida, Plasma,Serum, Metode GPO PAP

## I.  PENDAHULUAN
Trigliserida  merupakan  jenis  lemak  yang terdapat dalam darah dan memiliki tiga macam asam  lemak  yang  kemudian  menyatu  menjadi satu  molekul  yang  disebut  dengan  molekul trigliserida.Trigliserida  sangat  penting  bagi tubuh manusia karena di dalam tubuh manusia trigliserida  bermanfaat  sebagai  salah  satu sumber  energi  tubuh  disamping  zat  gizi  lain seperti karbohidrat, protein, vitamin dan mineral ( Poedjiadi,  2006)  Nilai  trigliserida  yang  tinggi memiliki  kaitan  dengan  timbulnya  penyakit serangan  jantung,  stroke  dan  diabetes.  Orang dengan trigliserida tinggi biasanya memiliki nilai LDL Kolesterol jahat tinggi, Nilai HDL kolesterol baik rendah dan nilai kolesterol total tinggi, oleh sebab  itu  pentingnya  melakukan  pemeriksaan kadar trigliserida di dalam tubuh agar trigliserida
didalam  tubuh  dapat  dideteksi  sejak  awal dipantau  melalui pemeriksaan  darah di laboratorium.(Soeharto 2001)
Plasma  dan  serum  merupakan  bagian darah yang berwarna kekuningan dimana akan terlihat  jelas  saat  sel-sel  darah  mengendap  di dasar  tabung  Komponen  lemak  utama  yang dapat  dijumpai  pada  plasma  salah  satunya adalah trigliserida. Menentukan kadar trigliserida menggunakan sampel plasma dapat ditambahkan antikoagulan EDTA untuk mencegah  pembekuan  darah,  penggunaan sampel  plasma  EDTA  relatif  cepat  untuk pemeriksaan  trigliserida  karena  sampel  dapat langsung  dicentrifuge.Serum lebih  sering digunakan  sebagai  bahan  untuk  pemeriksaan kadar  trigliserida  daripada  plasma  karena
dalam  plasma  terdapat  antikoagulan  yang dapat  mencemari  spesimen  sehingga  dapat menimbulkan perbedaan dengan kadar trigliserid serum (Joyce, 2007)
Penelitian  yang  pernah  dilakukan  tentang penepan  kadar  trigliserida  dilakukan  oleh Hardisari dan Khoiriyah  (2017) maupun Adi et al (2019), perbedaan pada penelitian ini adalah sampel yang digunakan. Metode analisis GPO PAP  banyak  digunakan  untuk  menetapkan kadar    trigliserida    yaitu  metode  Enzimatis kolorimetri (GPO-PAP), prinsip dari  metode ini adalah  trigliserida  akan  dihidrolisa  dengan enzimatis  menjadi  gliserol  dan  asam  bebas. dengan  lipase  khusus  akan  membentuk kompleks  warna  yang  dapat  diukur  kadarnya mengunakan spektrofotometer (reagen human No.10163). Tujuan penelitian ini  adalah  untuk mengetahui  apakah  ada  perbedaan  hasil penetapan  kadar  Trigliserida  pada  sampel plasma dan serum darah.
Metode
spektrofotometri  banyak  digunakan  karena mempunyai tingkat kesalahan yang lebih kecil.
Pemeriksaan trigliserida
metode spektrofotometri  dapat  dikontrol,  digunakan menggunakan  serum  kontrol.  Oleh  karena  itu pemeriksaaan  menggunakan  spektrofotometri mempunyai  tingkat  keesalahan  lebih  kecil (Baron, 2010).

## II. METODE PENELITIAN
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian bersifat  observasi  laboratorik  yang  bertujuan untuk  mengetahui  perbedaan  trigliserida  dari sampel yang menggunakan Serum dan plasma darah.  Sampel  yang  digunakan  adalah  30 remaja  yang  berusia  19-26  tahun.    Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Centrifuge, Spektrofotometer, tabung serologis, tourniquet, mikropipet, spuit, blue tip dan yellow tip.  Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah  Sampel  darah  pasien  yang  terdiri  dari Serum  dan  Plasma,  Reagen  Trigliserida, Reagen standard an Blanko
Pembuatan  sampel  serum  denga  cara memasukkan  sampel  darah    kedalam  tabung kemudian  di  centrifuge  dengan  kecepatan 3000rpm  selama  15  menit.  serum  dipisahkan dari  endapan  sel  darah  merah,  kemudian dimasukkan  kedalam  tabung  lain  dan  serum siap digunakan untuk pemeriksaan. Pembuatan sampel  plasma  dengan  cara  memasukan sampel  darah  kedalam  tabung  vacutainer berwarna  ungu  dengan  antikoagulan  EDTA kemudian  di  centrifuge  dengan  kecepatan 3000rpm  selama  15  menit.  Plasma  siap digunakan  untuk  pemeriksaan.  Penetapan kadar  Trigliserida  dilakukan  dengan  cara disiapkan  3  tabung  untuk  blanko,  standar  dan sampel, Tabung I (Blanko) Berisi reagen blanko
sebanyak  1000µlTabung  II  (Sampel)  :  Berisi 10µl Serum sampel dan 1000µ  reagen blanko dan Tabung III (Standar) : Berisi 10µ standard an 1000µl reagen blanko . Campur dengan baik dan ukurlah setelah 10menit pada temperature lebih  kurang  37 o C  terhadap  blanko  reagen (RB).  dan  dibaca  Absorbannya  dengan Fotometer  pada  panjang  gelombang  550  nm. Analisis  data  untuk  mengetahui  perbedaan kadar trigliserida pada sampel serum dan darah menggunakkan  Uji  SPSS  Uji  t  test  (Gunawan dan Imam, 2016)

## III. HASIL PENELITIAN
Penelitian  dilakukan  terhadap  30  sampel dengan kriteria sampel terdapat pada gambar 1 menunjukkan kriteria sampel berdasarkan jenis Kelamin, yaitu Laki-laki sebanyak 11 orang dan perempuan  sebanyak  19  orang,  sedangkan Gambar  2  menunjukkan  kriteria  sampel berdasarkan Umurnya, yaitu dari 19 sampai 26 tahun.

## Gambar 1 karakteristik sampel berdasarkan Jenis Kelamin

## Gambar 2 Karakteristik sampel berdasarkan umur
Hasil penetapan kadar Trigliserida pada 30 sampel    dapat  dilihat  pada  gambar  3 menunjukkan  kadar  trigliserida  pada  sampel plasma,  serta  gambar  4  menunjukkan  kadar trigliserida dalam sampel serum darah.
0 5 10 15 20 Laki-laki Perempuan J u m lah s a m p e l Jenis Kelamin Karakteristik sampel berdasarkan jenis kelamin 0 5 10 15 19-20 21-22 23-24 25-26 J u m lah s a m p e l Umur (Thn) Karakteristik Sampel berdasarkan Umur
Gambar 1, Kadar Trigliserida pada sampel plasma
Gambar 2 Kadar Trigliserida pada sampel serum
Tabel  1  menunjukkan  hasil  uji  statistic, yang memperlihatkan hasil rata-rata penetapan kadar trigliserida pada sampel plasma mempunyai rata-rata 162 mg/dl, dengan SD 38, 07 sedangkan pada sampel serum mempunyai rata-rata 228,50 mg/dl dengan SD 89,37
Tabel 2 Uji statistik deskriptif kadar
Trigliserida N Mean Std Deviasion Std Error Mean Sampel plasma 30 162,94 38,07 6,95 Sampel serum 30 228,50 89,37 16,31 Setelah diketahuii rata-rata kadar trigliserida  pada  sampel  serum  dan  plasma, maka  untuk  selanjutnya  adalah  melakukan  uji statistic  uji    Normalitas  data.  Dikarenakan jumlah  sampel  <30,  maka  uji  normalitas  data yang digunakan adalah uji normalitas data yang tepat  yaitu  dengan  menggunakan  teknik Kolmogorov-Smirnov.  Uji  Normalitas  Data dengan  Kolmogorov  Smirnov  menunjukkan p value .  untuk  kadar  Trigiserida  menggunakan plasma  sebesar  0,30  dan p  value untuk  kadar Trigiserida menggunakan serum sebesar 0,89. Karena  hasil  serum  diperoleh p <0,05  dan plasma  EDTA  diperoleh  p>0,05  maka  dapat disimpulkan bahwa kedua data tidak
berdistribusi  normal,  perlu  diperlukan  uji  non parametric  menggunakan  uji Mann  Whitney . untuk  melihat  apakah  ada  perbedaan  kadar trigliserida pada sampel plasma dan serum.Dari hasil  uji  statistic  yang  dilakukan  ternyata  H 0 ditolak dan H A diterima maka dapat disimpulkan adanya  perbedaan  yang  signifikan  kadar trigliserida pada sampel plasma dan serum

## IV PEMBAHASAN
Penelitian ini menggunakan sampel  yang berusia  19-26,  hal  ini  dilakukan  untuk meminimalisasi  perbedaan  hasil  pemeriksaan, karena  salah  satu  factor  yang  mempengaruhi kadar  Trigliserida  adalah  umur,  sehingga dengan  umur  yang  sama  diharapkan  kadar trigliserida juga tidak akan berbeda jauh antara sampel  satu  dan  yang  lainnya,  tetapi  hasil penelitian ini masih diperoleh kadar Trigliserida dengan  rentang  kadar  yang  besar,  hal  ini dikarenakan ada faktor lain yang mempengaruhi  kadar  trigliserida,  antara  lain: genetic,  jenis  kelamin,  dan  aktivitas(Kartika, 2013)
Pemeriksaan  trigliserida  dapat  dilakukan dengan sampel serum maupun plasma dengan mengunakan  metode  enzimatik  merupakan metode penetapan kadar yang prinsip pemeriksaan adalah Glyserol yang merupakan hasil  hidrolisis  dari  trigliserida  oleh  Lipoprotein Lipase  (LPL)  ditransformasikan  oleh  Gyserol Kinase  (GK)  menjadi  glycerol-3-phosphate. Dengan  adanya  Peroxidase  (POD)  bereaksi dengan  ethyl-sulfopropyl-toluidine  (ESPT)  dan 4-aminophenazone  membentuk  warna  merah. Intensitas  warna  yang  terbentuk  diukur  dan proporsional  dengan  konsentrasi  glucose dalam sampel.(Anonim, 2016)
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  adanya perbedaan  signifikan  antara  sampel  dalam plasma dan serum, dan  berbeda dengan  hasil penelitian  dari  Hardisari  dan  Koiriyah    (2017). Dimana  penelitian  tersebut  menunjukkan  hasil yang  sama  antara  sampel  serum  dan plasma.Pemakaian  plasma  untuk  menentukan kadar  trigliserida  sangat  rentan  tercampur dengan  eritrosit  karena  adanya  partikel antikoagulan EDTA yang akan bereaksi dengan enzim peroksidase membentuk natrium peroksidase  sehingga  dapat  menurunkan kinerja  enzim  peroksidase  dan  inilah  yang dapat mengakibatkan penurunna kadar trigliserida. Pengukuran kadar trigliserida menggunakan  serum  dapat  memberikan  hasil sesuai  dengan  keadaan  yang  sebenarnya karena serum tidak tercemar oleh antikoagulan EDTA. (Sacher et al,  2004)
Selain  itu  proses  pra  analitik  sangat berpengaruh  terhadap  pemeriksaan  kadar
0 5 10 15 20 <150 150-199 200-499 J u m lah s a m p e l Kadar Trigliseriga (mg/dl) Kadar Trigliserida pada sampel plasma 0 5 10 15 20 <150 150-199 200-499 J u m lah s a m p e l Kadar Trigliserida (mg/dl) kadar Trigliserida pada sampel serum
lemak,  seperti  pemeriksaan  kolesterol  dan trigliserida (Adi Nur Et al,2019)

## V. SIMPULAN
Kadar  Trigiserida rata-rata dalam sampel plasma  adalah  162.94  mg/dL,  sedangkan dalam  sampel    serum    adalah  228.50 mg/dL.Berdasarkan    uji  statii  sample  t-test terdapat    perbedaan  yang  signifikan  antara kadar trigliserida menggunakan sampel plasma dan serum

## DAFTAR PUSTAKA
Adi Nur, Jangga dan Isma FD 2019, Perbedaan Kadar Kolesterol dan Trigliserida Serum dari  darah  yang  dibekukan  sebelum disentrifus dan yang langsung disentrifus, Jurnal Media Analis Kesehatan , 10 (2):171-178 Baron,D.N.2010. 1995. Kapita Selekta Patologi klinik, edisi 10,Jakarta : EGC
Gunawan dan Imam,2016 Pengantar Statistika Inferensial , Jakarta: Rajawali Pers,
Hardisari  R  dan  Koiriyah  B, 2017  “Gambaran
Kadar  Trigliserida  menggunakan  Serum
dan  Plasma  EDTA” Jurnal  Teknologi Laboratorium Poltekkes Kemenkes Yogyakarta. 5:27-31 Joyce LeFever Kee. 2007. Pedoman Pemeriksaan Laboratorium & Diagnostik . Jakarta: EGC.
Kartika,  A.  2013. Pola  Dislipidemia  Dan Hubungannya  Dengan  Jenis  Kelamin Pada Penderita Diabetes  Melitus Tipe  2 Di Rsup Dr. Kariadi Semarang . Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang.
Poedjiadi,  A.  2006. Dasar-Dasar  Biokimia .  UI- Press. Jakarta
Sacher, Ronald A, Richard A. Mc Pherson,alih bahasa : Brahm U,Pendit, Dewi Wulandari,  2004. Tinjauan  Klinis  Hasil Pemeriksaan  Laboratorium Edisi  11 , Jakarta.
Soeharto I. 2001. Kolesterol dan Lemak Jahat, Koleterol  dan  Lemak  Baik  dan  Proses Terjadinya Serangan Jantung dan
Stroke .  PT.  Gramedia  Pustaka  Utama. Jakarta.