## FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KRIM EKSTRAK
ETANOL DAUN MURBEI ( Morus alba L.) MENGGUNAKAN METODE DPPH ( 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl )

## FORMULATION AND ANTIOXIDANT ACTIVITY TEST OF MULBERRY LEAF
(Morus alba L. ) ETHANOL EXTRACT CREAM USING DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl) METHOD
Eklesia Pogaga 1) , Paulina V.Y Yamlean 1) , Julianri Sari Lebang 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *eklesiapgaga@gmail.com

## ABSTRACT
Mulberry  is  one  of  the  plants  growing  in  Indonesian  and  widely  used  as  traditional  medicine.  The  active compounds  found  in  Mulberry  leaves  are  known  have  an  antioxidant  activity.  The  aim  of  this  study  is  to formulate  cream  preparations  from  ethanol  extracts  of  Mulberry  leaves  and  to  determine  its  antioxidant activities. Mulberry leaves was macerated using ethanol 96%. Antioxidant activity of mulberry leaves cream then  evaluated  against  DPPH  as  free  radical  and  measured  at  517  nm  wavelength  using  a  UV-Vis spectrophotometer.  The  results  showed that  the cream  of ethanol  extract from  Mulberry leaves  had  a  very strong antioxidant activity with IC 50 values in a row that is 1.7831 ppm, 0.8215 ppm and 0.7668 ppm. This can be compared with a Vitamin C solution, which has a very strong antioxidant activity with IC 50 value was 1.1113  ppm.  This  study  concludes  that  the  cream  from  Mulberry  leaves  ethanol  extract  has  a  very  strong antioxidant activity.
Keywords : Mulberry leaves, Cream, Antioxidant, DPPH

## ABSTRAK
Murbei merupakan salah satu tanaman yang tumbuh di Indonesia dan  banyak digunakan dalam pengobatan secara tradisional. Kandungan  senyawa  aktif  yang  terdapat pada daun Murbei  dikenal  mempunyai  peranan sebagai  antioksidan. Tujuan  dari penelitian  ini  ialah  untuk  membuat  sediaan  krim  dari  ekstrak  etanol  daun Murbei  dan  untuk  menguji  apakah  adanya  aktivitas  antioksidan.  Daun  murbei  diekstraksi  dengan  metode maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96%.  Sediaan  krim  diuji  terhadap  DPPH  sebagai  radikal  bebas  dan diukur  pada panjang  gelombang  517  nm    dengan  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  krim  ekstrak  etanol  daun  Murbei  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat dengan  nilai IC 50 berturut-turut yaitu 1,7831 ppm, 0,8215 ppm dan 0,7668 ppm. Hal ini dapat dibandingkan dengan  larutan  Vitamin  C  yang  mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang  sangat  kuat,  yaitu  1.1113  ppm. Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  krim  dari  ekstrak  etanol  daun  Murbei  memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.
Kata Kunci : Daun Murbei, Krim, Antioksidan, DPPH

## PENDAHULUAN
Radikal bebas sering kita jumpai, baik di luar tubuh  maupun  di  dalam  tubuh.  Sumber  radikal bebas  endogen  (dari  dalam  tubuh)  yaitu autoksidasi,  oksidasi  enzimatik  dan respyratori burst. Sedangkan  sumber  radikal  bebas  eksogen (dari luar tubuh) seperti polusi udara, radiasi UV, sinar-X, asap rokok dan makanan yang mengandung pestisida.
Radikal bebas dibutuhkan tubuh dalam jumlah normal  untuk  kesehatan,  sementara  dalam jumlah berlebih  akan  menyebabkan  stress  oksidatif. Keadaan  tersebut  dapat  menyebabkan  kerusakan oksidatif mulai dari sel, jaringan, hingga ke organ tubuh  yang  mempercepat  terjadinya  proses penuaan  dan  munculnya  berbagai  penyakit.  Oleh sebab  itu,  antioksidan  dibutuhkan  untuk  dapat menunda  atau  menghambat  reaksi  oksidasi  oleh radikal bebas (Widiastuti, 2010).
Salah  satu  tanaman  yang  memiliki  aktivitas antioksidan  ialah  tanaman  Murbei  ( Morus  alba L). Secara empiris, masyarakat telah memanfaatkan  tanaman  Murbei  sebagai  obat tradisional  untuk  masalah  kesehatan  seperti  flu, malaria,  hipertensi,  asma,  diabetes,  insomnia, vertigo  dan  anemia.  Kandungan  senyawa  aktif yang  terdapat  pada  daun  Murbei  yaitu  alkaloid, flavonoid, polifenol dan terpenoid yang mempunyai  peranan  sebagai  antioksidan  (Jurian, 2016).  Daun  Murbei  juga  memiliki  kandungan kimia  yang  tinggi  akan  antosianin,  fenolik  dan komponen asam lemak. Pada penelitian sebelumnya  juga  menunjukkan  bahwa  daun Murbei  memiliki  efek  sebagai  antioksidan, antibakteri, antivirus, anti inflamasi dan antimikroba (Salem, 2013).
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan oleh Megawati, et al. (2019) menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  Murbei yang  diuji  aktivitas  antioksidannya  menggunakan metode  DPPH  memiliki  aktivitas  antioksidan yang sangat kuat dengan nilai IC 50 8,35 ppm.
Manfaat dari daun Murbei sebagai antioksidan perlu  dikembangkan  dalam  bentuk  sediaan  yang cocok.  Sediaan  krim  dipilih  karena  menurut Sharon, et  al ., (2013),  krim  memiliki  beberapa keuntungan diantaranya
lebih mudah
diaplikasikan,  lebih  nyaman  digunakan,  tidak lengket, dan mudah dicuci dengan air dibandingkan dengan sediaan salep atau pasta.
Berdasarkan  uraian  di  atas,  maka  peneliti tertarik untuk membuat formulasi dan uji aktivitas antioksidan  krim  tipe  M/A  dari  ekstrak  etanol daun Murbei dengan diambilnya konsentrasi awal
sebagai  acuan,  yaitu  sebesar  0,75%.  Hal  ini didasarkan melalui penelitian yang dilakukan oleh Radhia, et.  al. (2017),  yang  menyatakan  bahwa formula  krim  pemutih  ekstrak  daun  Murbei dengan  konsentrasi  0,75%  dapat  diformulasikan sebagai sediaan krim.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Januari 2019  –  April  2020.  Tempat  penelitian  dilakukan di Laboratorium Farmasi Lanjut Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi.

## Bentuk Penelitian
Jenis  penelitian  ini  ialah  Deskriptif  Analitik dengan  menggunakan  perlakuan  tiga  variasi konsentrasi,  evaluasi  sediaan  dan  uji  aktivitas antioksidan krim terhadap DPPH (1,1-diphenyl-2- picrylhidrazyl) .
Alat dan Bahan

## Alat
Alat-alat  yang  digunakan  ialah  alat-alat  gelas
, timbangan
analitik
(
),  lumpang  dan  alu,  spektrofotometer UV-Vis,  kertas  saring,  pipet  tetes,  pipet  mikro, beban  pemberat,  lemari  pendingin,  oven  (Ecocell MMM  Group), blender ( ), hot  plate ( Lab), pH meter (Elmeiron), sudip, cawan petri,  batang  pengaduk,  vortex  (Mixer  Hwashin), ayakan 100 mesh, wadah tempat krim, penggaris, stopwatch dan alluminium foil .

## Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan,  yaitu  daun Murbei,  DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhidrazyl) , Vitamin C, etanol 96%, asam stearat, TEA, adeps lanae, paraffin cair, nipagin, nipasol dan aquades.

## Bentuk Penelitian
Jenis  penelitian  ini  ialah  Deskriptif  Analitik dengan  menggunakan  perlakuan  tiga  variasi konsentrasi,  evaluasi  sediaan  dan  uji  aktivitas antioksidan krim terhadap DPPH (1,1-diphenyl-2- picrylhidrazyl) . Prosedur Penelitian

## Penyiapan dan Pengambilan Sampel
Sampel  yang  digunakan  pada  penelitian  ini ialah daun Murbei yang diambil di sekitaran Desa Poniki,  Kecamatan  Pasan,  Kabupaten  Minahasa Tenggara,  Provinsi  Sulawesi  Utara.  Sampel dikumpulkan  sebanyak  3  kg,  kemudian  dicuci dengan air mengalir agar sampel terbebas dari sisa kotoran.  Setelah  bersih,  daun  ditiriskan  dan
diangin-anginkan  dalam  suhu  ruangan  selama  5 hari.  Selanjutnya,  sampel  yang  telah  kering dihaluskan menggunakan blender hingga  menjadi serbuk simplisia.

## Ekstrasi Sampel
Metode  yang  digunakan  dalam  proses ekstraksi,  yaitu  metode  maserasi  dengan menggunakan  etanol  96%.  Sebanyak  500  g serbuk simplisia dimasukkan ke dalam etanol 96%  sebanyak  2500  ml  hingga  terendam
semua sambil diaduk-aduk, kemudian disimpan  atau  didiamkan  selama  5  x  24  jam di  tempat  yang  sejuk  tanpa  adanya  paparan sinar  matahari  sambil  sesekali  dilakukan pengadukan. Selanjutnya, simplisia yang telah terendam  disaring  dan  dipisahkan  (antara residu dan filtrat). Setelah itu, filtrat diuapkan menggunakan  oven  pada  suhu  40 ° C  hingga diperoleh ekstrak kental.
Formulasi Sediaan Krim Ekstrak Etanol Daun Murbei
Tabel 1. Formula krim ekstrak daun Murbei
Bahan                              Kegunaan Konsentrasi FI                     FII               FIII 0,75%              3,75%         6,75% Ekstrak daun Murbei Zat aktif 0,75 3,75             6,75 Asam stearate Penstabil 16,5 16,5             16,5 TEA Emulgator                          2,5 2,5              2,5 Adeps lanae Basis 3 3 3 Paraffin cair Pembentuk massa 25 25               25 Nipagin Pengawet 0,1 0,1              0,1 Nipasol Pengawet 0,05                 0,05 0,05 Aquades Pelarut 52,1 49,1            46,1

## Pembuatan Krim Ekstrak Etanol Daun Murbei
Sediaan krim dibuat dalam 3 formulasi ekstrak daun  Murbei  dengan  masing-masing  konsentrasi, yaitu  FI  0,75%,  FII  3,75%  dan  FIII  6,75%. Masing-masing  bahan  ditimbang  dan  dipisahkan. Pembuatan  krim  diawali  dengan  pemisahan  fase, yaitu  fase  minyak  (asam  stearat,  paraffin  cair, adeps  lanae  dan  nipasol)  dimasukkan  ke  dalam beaker  glass sambil  dipanaskan  pada  suhu dipertahankan  70°C  dengan  menggunakan hot plate. Hal  yang  sama  dilakukan  untuk  fase  air (aquades,  nipagin  dan  TEA).  Fase  minyak  yang telah  melebur  dituang  ke  dalam  lumpang  yang telah  dipanaskan,  sambil  diaduk  hingga  homogen. Kemudian,  ditambahkan  fase  air  sedikit  demi sedikit  sambil  diaduk  perlahan-lahan  hingga terbentuk  massa  krim,  lalu  dimasukkan  ekstrak kental  daun  Murbei  ke  dalam  massa  krim  sedikit demi sedikit dan diaduk sampai homogen.

## Evaluasi Fisik Sediaan Krim Uji Organoleptik
Uji  organoleptik  sediaan  krim  dilakukan dengan  mengamati  warna,  bau,  dan  bentuk  krim (Sharon, et  al .,  2013).  Sediaan  krim  yang dihasilkan  sebaiknya  memiliki  tekstur  atau  bentuk yang  lunak,  bau  yang  menyenangkan  dan  warna yang menarik.

## Uji Homogenitas
Pengujian homogenitas dilakukan dengan cara, yaitu  mengoleskan  sediaan  pada  sekeping  kaca atau  bahan  transparan  lain  dan  diratakan,  sediaan krim  yang  baik  harus  menunjukkan  susunan  yang homogen  dan  tidak  terlihat  adanya  butiran  kasar (Depkes RI, 1979).
Uji pH Pengukuran pH dilakukan dengan menggunakan  pH  meter.  Caranya  yaitu  dengan menimbang 1 gram krim dan dilarutkan dengan 10 ml  aquades.  Kemudian,  gunakan  pH-  meter  yang bagian  sensornya  dan  dibaca  pH  pada  bagian monitor.  pH  sediaan  yang  memenuhi  kriteria  pH kulit yaitu sekitar 4,5 – 6,5 (Tranggono dan Latifa, 2007).

## Uji Daya Sebar
Masing-masing  krim  ditimbang  sebanyak  1  g, lalu  diletakan  di  atas  sepasang  cawan  petri  dan dibiarkan  selama  1  menit,  kemudian  diletakan beban  sebesar  50  g,  beban  didiamkan  selama  1 menit  lalu  diukur  diameter  sebarnya  (Rahmawati, et al., 2010).

## Uji Daya Lekat
Ditimbang  0,5  gram  krim  dan  dioleskan  pada plat kaca. Kedua plat kaca ditempelkan hingga plat menyatu, diberikan beban seberat 250 gram selama 5  menit  setelah  itu  dilepaskan,  lalu  diberi  beban
pelepasan. Waktu dicatat sampai kedua plat saling lepas.  Berdasarkan  persyaratan  daya  lekat  krim yang  baik  yaitu  lebih  dari  4  detik  (Wasiaatmadja, 1997).
Uji Cycling
Sediaan  disimpan  pada  suhu  4ºC  selama  24 jam  dan  dilanjutkan  dengan  menyimpan  sediaan pada  suhu  40ºC  selama  24  jam.  Kedua  perlakuan tersebut  merupakan  sikus  pertama.  Pengujian dilakukan sebanyak 6 siklus dan diamati terjadinya perubahan  fisik  dari  sediaan  krim  pada  awal  dan akhir  pengujian  yang  meliputi  organoleptik, homogenitas, pH, daya sebar dan daya lekat.

## Uji Aktivitas Antioksidan Sediaan Krim Pembuatan Larutan Induk DPPH
Ditimbang  DPPH (1,1-difenil-2-picrylhidrazil) sebanyak  10  mg,  kemudian  dilarutkan  dalam etanol 96% hingga tanda batas dengan menggunakan  labu  ukur  100  ml,  lalu  tempatkan dalam botol kaca berwarna gelap.

## Pembuatan Larutan Blanko DPPH
Larutan  Induk  DPPH  sebanyak  50  ml dimasukkan ke dalam labu ukur 100 ml, kemudian dilarutkan  dengan  etanol  96%  hingga  tanda  batas dan  dihomogenkan.  Didiamkan  selama  30  menit dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm.

## Uji Aktivitas Antioksidan Larutan Uji
Sampel  krim  sebanyak  10  mg  dilarutkan  ke dalam  etanol  96%  10  ml  dan  dicukupkan  hingga tanda  batas.  Larutan  sampel  krim  dibuat  dengan masing-masing konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm,  200  ppm  dan  250  ppm.  Masing-masing dipipet dan ditambahkan etanol 96% ke dalam labu ukur  10  ml  hingga  tanda  batas.  Dipipet  larutan
sampel  krim  sebanyak  2  ml  dan  ditambahkan  ke dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  larutan  DPPH sebanyak  2  ml,  kemudian  ditutup  menggunakan aluminium foil . Selanjutnya divortex dan didiamkan  selama  30  menit,    kemudian  diukur serapannya  menggunakan  spektrofotometer  UV- Vis  dengan  panjang  gelombang  517  nm  dan dihitung presentase inhibisinya.

## Pembuatan Larutan Pembanding
Sebanyak  10  mg  vitamin  C  dilarutkan  ke dalam  etanol  96%  10  ml  dan  dicukupkan  hingga tanda  batas.  Larutan  vitamin  C  dibuat  dengan masing-masing  konsentrasi  5  ppm,  10  ppm,  15 ppm, 20 ppm dan 25 ppm.  Masing-masing dipipet dan ditambahkan etanol 96% ke dalam labu ukur 5 ml  hingga  tanda  batas.  Dipipet  larutan  vitamin  C sebanyak  1  ml  dan  ditambahkan  ke  dalam  tabung reaksi  yang  berisi  larutan  DPPH  sebanyak  2  ml, kemudian  ditutup  menggunakan aluminium  foil . Selanjutnya  divortex  dan  didiamkan  selama  30 menit,  kemudian  diukur  absorbansinya  dengan menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis  pada panjang  gelombang  517  nm  dan  dihitung presentase inhibisinya.
% Inhibisi =
x 100%

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Serbuk  simplisia  diekstraksi  dengan  metode maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96% sebanyak  2500  mL  selama  5  x  24  jam  yang menghasilkan  ekstrak  kental  daun  Murbei  seberat 31,77  g.  Berdasarkan  perhitungan  dengan  rumus, diperoleh nilai rendemen sebesar 6,35%.
Evaluasi Fisik Sediaan Krim
Uji Organoleptik Tabel 2. Hasil uji organoleptik (siklus 0-6) Sediaan Pengamatan Bentuk Bau Warna FI (0,75%) FII (3,75%) FIII (6,75%) Semi solid Semi solid Semi solid Khas adeps lanae Khas adeps lanae Khas adeps lanae Hijau muda Hijau muda Hijau muda
Sifat-sifat  fisik  sediaan  krim  seperti  bentuk, bau  dan  warna  akan  berhubungan  dengan penerimaan  dan  kenyamanan  pengguna,  di  mana sediaan  krim  yang  dihasilkan  sebaiknya  memiliki tekstur  yang  lunak,  bau  yang  menyenangkan  dan warna yang menarik. Hasil pengamatan
organoleptis  krim  Formula  I,  Formula  II  dan Formula III dari siklus ke-0 hingga siklus ke-6, menunjukkan  bahwa  krim  memiliki  warna  yang berbeda-beda dari tiap konsentrasi. Dengan adanya perubahan warna dari tiap konsentrasi, menunjukkan  bahwa  penambahan  ekstrak  daun Murbei dalam basis krim mempengaruhi warna
dari sediaan krim, yaitu semakin besar konsentrasi ekstrak  yang  terkandung  di  dalam  krim,  maka semakin  pekat  pula  warna  yang  dihasilkan  oleh krim.
Stabilitas krim dapat dilihat melalui perlakuan dari siklus ke-0 hingga siklus ke-6. Ketiga formula krim tidak mengalami perubahan baik dari segi
warna,  bentuk,  maupun  bau  setelah  dilakukan penyimpanan  selama  12  hari.  Hal  tersebut  dapat dikatakan  bahwa  ketiga  formula  krim  dengan berbagai  konsentrasi  tetap  stabil  selama  proses penyimpanan.
Tabel 3. Hasil uji homogenitas
Siklus Pengamatan Konsentrasi 0,75%                     Konsentrasi 3,75%                    Konsentrasi 6,75% 0 1 2 3 4 5 6 Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal
Homogen,tidak menggumpal
Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal
Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal
Homogen, tidak menggumpal
Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal Homogen, tidak menggumpal
Pengujian  homogenitas  sediaan  krim  ekstrak etanol  daun  Murbei  dari  siklus  ke-0  hingga  siklus ke-6,  menunjukkan  bahwa  ketiga  konsentrasi sediaan  krim  memiliki  sifat  fisik  yang  homogen dan  tidak  terdapat  gumpalan  atau  butiran-butiran kasar.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  semua  bahan krim  telah  tercampur  dengan  baik.  Pernyataan tersebut  sesuai  dengan  syarat  uji  homogenitas sediaan  krim,  bahwa  krim  harus  menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya
butiran-butiran kasar (Depkes, 1979). Sifat tersebut akan  memungkinkan  krim  mudah  digunakan  dan terdistribusi merata pada permukaan kulit.
Berdasarkan hasil pengamatan dari siklus ke-0 hingga  siklus  ke-6,  ketiga  formula  krim  tidak mengalami  perubahan  fisik  selama  penyimpanan (12 hari) pada suhu 4°C maupun  pada suhu 40°C. Dengan  demikian,  krim  yang  dihasilkan  dapat dinyatakan memiliki stabilitas yang baik.

## Tabel 4. Hasil uji pH
Siklus Nilai rata-rata pH Konsentrasi 0,75% Konsentrasi 3,75% Konsentrasi 6,75% 0 1 2 3 4 5 6 5,90 5,56 5,39 5,30 5,88 6,00 5,97 5,25 5,30 5,00 5,07 5,90 5,71 5,91 5,16 5,95 5,76 5,12 5,72 5,95 5,86
Pengujian  pH  sediaan  krim  harus  sesuai dengan  pH  kulit  supaya  tidak  terjadi  iritasi  atau reaksi lainnya pada kulit. Menurut Tranggono dan Latifah,  (2007)  kriteria  pH  kulit  yang  baik  yaitu berada  dalam  interval  4,5  –  6,5.  Hasil  dari  ketiga sediaan  krim  dengan  konsentrasi  yang  berbeda pada  siklus  ke-0  hingga  siklus  ke-6  memiliki  pH interval yang tidak kurang ataupun tidak lebih dari kriteria  pH  kulit  pada  umumnya.  Sehingga  dapat
dikatakan  formula  krim  dari  konsentrasi  0,75%  ; 3,75%  ;  6,75%  memiliki  pH  yang  sesuai  dengan pH  kulit  atau  dapat  dikatakan  aman  apabila diaplikasikan pada kulit.
Kestabilan  pH  dalam  suatu  sediaan  juga  perlu perhatikan  apabila  terjadinya  perubahan  pH  yang tidak  signifikan.  Dengan  ini,  maka  dilakukan pengujian  statistika  menggunakan Independent  T- test untuk mengetahui apakah adanya
perbandingan  bermakna  suatu  pH  krim  dari  siklus ke-0  hingga  siklus  ke-6.  Hasil  data  statistika  dari sediaan krim dengan konsentrasi 0,75%, diperoleh nilai  signifikansi  sebesar  0,716  (sig  >0,05).  Pada sediaan  krim  dengan  konsentrasi  3,75%,  memiliki nilai  signifikansi  sebesar  0,109  (sig  >0,05).  Hal yang sama juga terdapat pada sediaan krim dengan konsentrasi 6,75% dengan perolehan nilai
signifikan  sebesar  0,159  (sig  >0,05%),  artinya tidak ada perbedaan nilai pH yang bermakna pada ketiga krim dari siklus ke-0 hingga siklus ke-6. Hal ini  menunjukkan  bahwa  nilai  pH  sediaan  krim ekstrak  etanol  daun  Murbei  memiliki  pH  yang stabil  selama  proses  penyimpanan  pada  suhu tertentu.

## Tabel 5. Hasil uji daya sebar
Siklus Nilai rata-rata daya sebar (cm) Konsentrasi 0,75% Konsentrasi 3,75% Konsentrasi 6,75% 0 1 2 3 4 5
6 5 5,07 5,13 5,03 5,20 5,13 5,07 6,1 5,73 5,47 5,6 5,77 5,87 5,57 6,37 5,90 6,03 6,37 6,20 5,67 5,97
Pengujian daya sebar pada ketiga sediaan krim ekstrak etanol daun Murbei dari siklus ke-0 hingga siklus  ke-6,  memiliki  nilai  rerata  yang  berbeda- beda. Adanya perubahan diameter daya sebar pada sediaan krim dengan berbagai konsentrasi menunjukkan bahwa penambahan variasi konsentrasi  ekstrak,  berpengaruh  terhadap  luas penyebaran  sediaan  krim.  Sediaan  krim  dengan diameter daya sebar yang besar akan memudahkan krim  menyebar  pada  permukaan  kulit,  sehingga absorbsi  senyawa  antioksidan  yang  terkandung dalam krim akan semakin meningkat.
Berdasarkan hasil data statistika uji daya sebar dari  sediaan  krim  dengan  konsentrasi  0,75%, diperoleh  nilai  signifikansi  sebesar  0,374  (sig >0,05).  Pada  sediaan  krim  dengan  konsentrasi 3,75%,  memiliki  nilai  signifikansi  sebesar  0,011 (sig  >0,05).  Hal  yang  sama  juga  terdapat  pada sediaan  krim  dengan  konsentrasi  6,75%  dengan perolehan  nilai  signifikan  sebesar  0,033  (sig >0,05%),  artinya  tidak  ada  perbedaan  luas  daya sebar  yang  bermakna  pada  ketiga  krim  dari  siklus ke-0  hingga  siklus  ke-6.  Hal  ini  menunjukkan bahwa luas daya sebar sediaan krim ekstrak etanol daun  Murbei  memiliki  nilai  yang  cukup  stabil selama proses cycling test.
Tabel 6. Hasil uji daya lekat
Siklus Nilai rata-rata daya lekat (menit) Konsentrasi 0,75% Konsentrasi 3,75% Konsentrasi 6,75% 0 1 2 3 4 5 6 0.98 1.54 0.94 1.06 1.23 0.98 1.29 1.26 0.80 0.62 0.62 1.06 0.93 0.83 1.16 1.30 0.86 0.90 0.46 0.64 0.79
Kemampuan sediaan krim untuk melekat pada tempat  aplikasi  sangat  penting.  Daya  lekat merupakan salah satu karakteristik yang bertanggung  jawab  terhadap  keefektifan  sediaan dalam  memberikan  efek  farmakologis.  Semakin lama daya lekat suatu sediaan pada tempat aplikasi,
maka  efek  farmakologis  yang  dihasilkan  akan semakin  besar.  Pada  saat  pemberian  beban pelepasan,  terjadi  pelepasan  antara  kedua  plat, maka  waktu  tersebut  merupakan  lama  waktu kontak  krim  dengan  kulit  hingga  efek  terapi  yang diinginkan dapat tercapai.
Berdasarkan hasil pengujian daya lekat sediaan krim  dengan  berbagai  konsentrasi  dari  siklus  ke-0 hingga  siklus  ke-6  terdapat  nilai  yang  tidak konsisten,  meski  telah  dilakukan  tiga  kali pengulangan. Pengulangan uji daya lekat bertujuan untuk mendapatkan nilai yang lebih akurat. Hal ini diasumsikan karena alat pengujian yang digunakan masih  dilakukan  secara  manual,  sehingga  hasil yang diperoleh masih kurang akurat.
Selain itu, pengujian daya lekat juga dilakukan pengujian statistika, yaitu mengunakan Independent  T-test untuk  mengetahui  apakah adanya  perbedaan  bermakna  daya  lekat  krim  dari
siklus  ke-0  hingga  siklus  ke-6  dari  berbagai konsentrasi.  Sediaan  krim  dengan  konsentrasi 0,75%,  diperoleh  nilai  signifikansi  sebesar  0,305 (sig >0,05). Pada sediaan krim dengan konsentrasi 3,75%,  memiliki  nilai  signifikansi  sebesar  0,158 (sig  >0,05).  Hal  yang  sama  juga  terdapat  pada sediaan  krim  dengan  konsentrasi  6,75%  dengan perolehan  nilai  signifikan  sebesar  0,313  (sig >0,05%),  artinya  tidak  ada  perbedaan  daya  lekat yang  bermakna  pada  ketiga  krim  dari  siklus  ke-0 hingga siklus ke-6, sehingga dapat dikatakan krim memiliki daya lekat yang stabil.

## Tabel 7. Hasil uji aktivitas antioksidan
Gambar 1. Grafik uji aktivitas antioksidan
Pengujian  aktivitas  antioksidan  dilakukan dengan menggunakan metode DPPH (1,1- diphenyl-2-picrylhidrazyl). Metode  ini  dipilih karena  hanya  memerlukan  sedikit  sampel,  lebih peka,  sederhana,  mudah  dan  cepat  (Hanani, et  al ., 2005). Panjang gelombang maksimum DPPH yang didapat  untuk  pengukuran  aktivitas  antioksidan ekstrak    etanol  daun    murbei  adalah  517  nm, dengan  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis. Parameter  yang  digunakan  untuk  menunjukan aktivitas antioksidan adalah
Inhibition concentration ( ).  Nilai merupakan  nilai yang  menunjukan  konsentrasi  antioksidan  yang mampu  menghambat  50%  aktivitas  radikal  bebas (Haeria dan Andi, 2016).
Secara  kimia  senyawa  antioksidan  adalah senyawa  pemberi  elektron  (donor  elektron). Antioksidan  bekerja  dengan  cara  mendonorkan satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat
oksidan  sehingga  aktivitas  senyawa  oksidan tersebut dapat dihambat (Winarti, 2010).
Senyawa  antioksidan  yang  bereaksi  dengan radikal DPPH menyebabkan absorbsi DPPH akan berkurang yang ditandai dengan adanya perubahan warna  radikal  bebas  DPPH  yang  berwarna  ungu menjadi  kuning  pucat  (Haeria  dan  Andi,  2016). Hal  ini  juga  terjadi  pada  pengujian  aktivitas antioksidan  terhadap  krim  ekstrak  etanol  daun Murbei,  di  mana  terjadinya  perubahan  warna larutan  DPPH  yang  berwarna  ungu  pekat  menjadi ungu  pucat.  Sedangkan,  pada  larutan  pembanding Vitamin  C  terjadi  perubahan  warna  larutan  DPPH yang  berwarna  ungu,  menjadi  kuning  pucat. Sehingga,  dapat  dikatakan  bahwa  larutan  uji sampel  krim  dan  larutan  Vitamin  C  memiliki aktivitas  antioksidan  yang  dapat  mengurangi radikal bebas DPPH.
Berdasarkan  hasil  uji  aktivitas  antioksidan yang dilakukan pada sediaan krim FI, FII dan FIII diperoleh  nilai  IC 50 beruturut-turut  yaitu  1,7831 ppm,  0,8215  ppm  dan  0,7668  ppm.  Selain  itu, larutan  Vitamin  C  sebagai  pembanding  juga memperoleh  nilai  IC 50 sebesar  1,1113  ppm. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak yang terkandung  dalam  sediaan  krim,  maka  semakin tinggi  pula  aktivitas  antioksidan.  Nilai  yang diperoleh  tersebut  menunjukkan  bahwa  krim  FI, FII,  FIII  dan  Vitamin  C,  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  sangat  kuat.  Hal  ini  sesuai dengan  kategori  penentuan  kekuatan  aktivitas
1.7831 0.8215  0.7668 1.1113 0 1 2 Krim 0,75% Krim 3,75% Krim 6,75% Vitamin C IC5 0 IC50 Sampel Uji
IC50 Sediaan                                              Persamaan regresi (ppm) FI (0,75%) FII (3,75%) FIII (6,75%) Vitamin C y = 4.689x + 41.639; R² = 0.9794 y = 3.195x + 47.375; R² = 0.9532 y = 3.903x + 47.007; R² = 0.973 y = 8.297x + 40.779; R² = 0.8936 1,7831 0,8215 0,7668 1,1113
antioksidan  menurut  Molyneux  (2004),  yang menyatakan  bahwa  suatu  senyawa  memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 <  50  ppm,  kuat  apabila  50-100  ppm,  sedang apabila 101-150 ppm dan lemah apabila nilai IC50 > 150 ppm.

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  Murbei (Morus  alba L.) dapat  diformulasikan  dalam  bentuk  sediaan  krim, serta memenuhi syarat dalam evaluasi fisik dan uji stabilitas  sediaan  krim.  Sediaan  krim  FI,  FII  dan FIII,  diperoleh  nilai  IC 50 beruturut-turut  yaitu 1,7831  ppm,  0,8215  ppm  dan  0,7668  ppm.  Nilai menunjukkan  bahwa  krim  FI,  FII,  FIII  memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih  lanjut  untuk sediaan krim ekstrak etanol daun Murbei mengenai uji viskositas, uji iritasi dan uji antibakteri.

## DAFTAR PUSTAKA
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia.  1979.
Farmakope Indonesia. Edisi ke-3. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Haeria,  H.,  dan  Andi,  T.,  U.  2016.  Penentuan
Kadar  Flavonoid  Total  dan  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak    Etanol  Daun  Bidara ( Ziziphus  spina-  christi L.). Journal  of Pharmaceutical  and  Medicinal  Science (1): 57-61.
Hanani,  E.,  A.  Mun’im,  dan  R.  Sekarini.  2005. Identifikasi  Senyawa  Antioksidan  dalam Spons  callyspongia sp.  Dari  Kepulauan Seribu. Majalah  Ilmu  Kefarmasian .  2(3):
127 - 133.
Jurian,  Y.  V.  2016.  Aktivitas  Antioksidan  dan
Antibakteri  Ekstrak  Daun  Murbei (Morus alba) Terhadap Escherichia  coli [skripsi].
Universitas Jember, Jember.
Megawati, Aswad, M. Embu, dan Khadijah. 2019.
Uji  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun  Murbei  ( Morus  Alba L.)  Asal
Kupang,  Nusa  Tenggara  Timur  Dengan
Metode DPPH (2,2 Diphenil-1-
Picrylhydrazyl). Techno . 8(1): 246-252.
Molyneux,  P.  2004.  Use  of  The  Stable  Free Radical  Diphenylpicrylhydrazil  (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Journal of Science and Technologi . 26(2): 211- 219. Radhia,  R.,  A.N.  Aisyah,  A.  Awaluddin,  dan Nurindasari. 2017. Formulasi Krim
Pemutih  dari  Fitosom  Ekstrak  Daun Murbei (Morus  alba L.). JF  FIK  UINAM . 5(4): 233-238.
Rahmawati, D., A. Sukmawati, dan P. Indrayudha. 2010.  Formulasi  Krim  Minyak  Atsiri Rimpang Temu
Giring ( Curcuma heyneana Val  &  Zijp):  Uji  sifat  fisik  dan daya antijamur terhadap Candida albicans secara in vitro. Maj. Obat Trad . 15: 56-63.
Salem, M., H. Ali., Y. Gohar, dan A.W. El-Sayed.
2013.  Biologycal  Activity  of  Extract  from Morus  alba L.,  Albizzia  Lebbeck  (L.) Benth.  And  Casuarina  Gluacca  Sieber Against  The  Growth  of  some  Pathogenic Bacteri. International
Journal of Agricultural  an  Food  Research . 2(1): 9- 22.
Sharon, N., S. Anam, dan Yuliet. 2013. Formulasi Krim  Ekstrak  Etanol  Bawang  Hutan ( Eleutherine  palmifolia L.  Merr). Online Jurnal of Natural Science . 2(3): 111-122. Tranggono, R.I., Latifah, F. 2007. Buku Pegangan Ilmu  Pengetahuan  Kosmetik.  Gramedia Pustaka Utama, Jakarta. Halaman 33-36.
Wasitaatmadja,  S.M.  1997.  Penuntun  Ilmu Kosmetik  Medik.  Penerbit  Universitas Indonesia,  Jakarta.  Hal.  3,58-  59.62-63. 111-112.
Widiastuti,  N.  2010.  Pengukuran  Aktivitas Antioksidan  dengan  Metode  CUPRAC, DPPH, & FRAP Serta Kolerasinya dengan Fenol dan Flavonoid pada Enam Tanaman [Skripsi]. FMIPA Institut Pertanian, Bogor.
Winarti,  S.  2010.  Makanan  Fungsional.  Graha
Ilmu, Yogyakarta.