## PEMANFAATAN GETAH BIDURI DALAM PRODUKSI ALBUMIN IKAN GABUS
( Ophiocephalus striatus )
[Utilization of Sap Biduri in The Production of Albumin Fish Cork ( Ophiocephalus striatus )]
Ita Mustrini 1*) , Mappiratu 1) , Nurakhirawati 1)
1) Jurusan Kimia FMIPA Universitas Tadulako, Palu Jl. Soekarno Hatta Km.9, Kampus Bumi Tadulako Tondo Palu, Telp. 0451- 422611
Diterima 10 Mei 2016, Disetujui 1 Juli 2016

## ABSTRACT
The  Research  about  utilization  of  sap  Biduri  in  the  production  of  albumin  fish  cork  ( Ophiocephalus striatus ). Has been done  This research   purposes to determine the ratio of sap Biduri to extract cork fish that produce the protein albumin with the highest yield and optimum heating time which produces the  highest  yield  of  the  protein  albumin.  The  study  used  a  completely  randomized  design  (CRD), which consists of the influence of the ratio of sap Biduri to extract protein and the effect of heating time Biduri to extract latex mixture. Each treatment is done twice to obtain 22 units of the experiment. The highest protein yield was obtained at a ratio of sap Biduri 3,0 : 30 and the heating time of 60 minutes at 53,43 %. The purity of the highest degree obtained at the optimum 50  minutes warm up period of 35.50 %.
Keywords : Fish Cork, Biduri Protease enzyme, Protein yield of albumin, Albumin purity degree

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  pemanfaatan  getah  biduri  dalam  produksi  albumin  ikan  gabus ( Ophiocephalus  striatus ).  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  rasio  getah  biduri  terhadap ekstrak  ikan  gabus  yang  menghasilkan  protein  albumin  dengan  rendemen  tertinggi  dan  waktu pemanasan  optimum  yang  menghasilkan  rendemen  protein  albumin  tertinggi.  Penelitian menggunakan  rancangan acak lengkap (RAL) yang terdiri atas pengaruh rasio getah biduri terhadap ekstrak  protein  dan  pengaruh  waktu  pemanasan  campuran  getah  biduri  dengan  ekstrak.  Setiap perlakuan dilakukan sebanyak dua kali sehingga diperoleh 22 satuan percobaan. Rendemen protein tertinggi diperoleh pada rasio getah biduri 3,0 : 30 dan waktu pemanasan 60 menit sebesar 53,43 %. Derajat Kemurnian tertinggi diperoleh pada waktu pemanasan optimum 50 menit sebesar 35,50 %.
Kata  kunci: Ikan  gabus,  Enzim  protease  biduri,  Rendemen  protein  albumin,  Derajat  kemurnian albumin .
*)Coresponding Author: ithachemist@gmail.com

## LATAR BELAKANG
Ikan Gabus termasuk kedalam hewan karnivora  yang  hidup  didasar  perairan, cenderung  hidup  dirawa,  sungai  dan perairan  keruh.  Ikan  gabus  merupakan salah  satu  ikan  konsumsi  yang  populer dikalangan  masyarakat  Indonesia.  Secara morfologi ikan  gabus  ini  memiliki  ciri  yaitu bentuk  badan  yang  bulat  di  depan  dan pipih  di  belakang.  Mempunyai  punggung yang  berwarna  coklat  tua  hampir  hitam dengan  perut  putih  kecoklatan.  Bagian punggung cembung, perut rata dan kepala pipih  seperti  ular.  Ukuran  maksimal  ikan ini  dapat  mencapai  90 –  110  cm (Suprayitno, 2008).
Albumin  merupakan  jenis  protein terbanyak didalam plasma yang mencapai kadar  60  persen  dari  total  plasma  atau sebanyak  4,5  g/dl.  Kadar  albumin  normal dalam tubuh 3,5 - 4,5 g/dl, bila kurang dari 2,2  menunjukkan  adanya  masalah  dalam tubuh (Carvallo, 1998). Kekurangan
albumin dalam serum dapat
mempengaruhi pengikatan dan pengangkutan senyawa –  senyawa endogen  dan  eksogen,  termasuk  obat – obatan  karena  diperkirakan distribusi  obat keseluruh  tubuh  pengikatannya  melalui fraksi  albumin.  Jika  kadar  albumin  berada dibawah  nilai  normal,  maka  fraksi  obat yang  terikat  protein  tersebut  berkurang, dengan kata lain fraksi obat bebas banyak sehingga  keadaan  ini  dapat  menimbulkan pengaruh  obat  yang  tidak  diinginkan (Tandra dkk, 1988).
Hasil  penelitian  sebelumnya  oleh Suprayitno,  dkk  (2013),  diketahui  bahwa ikan  gabus  memilki  kadar  albumin  yang tinggi,  adapun  cara  ekstraksi  untuk memperoleh  albumin  ikan  gabus  dari penelitiannya  yaitu  menggunakan  metode pengendapan  dengan  ammonium  sulfat yang  dilanjutkan  dengan  pengeringan vakum.  Metode  lain  yang  juga  dapat mengekstrak  albumin  dari  ikan  gabus adalah  metode  enzimatik.  Enzim  yang digunakan  adalah  enzim  protease  dari getah tanaman biduri ( Calotropis gigantea ). Menurut Witono (2007a, 2007b,
2007c),  ekstrak  protease  tanaman  biduri baik dari getah, batang, maupun dari daun sangat  potensial  sebagai  sumber  enzim protease. Biduri merupakan jenis tumbuhan semak liar tropis yang populasinya  cukup  melimpah,  tumbuh pada lahan kering dan areal sekitar pantai. Protease sendiri merupakan enzim penghidrolisa protein yang banyak digunakan  dalam  industri  pangan,  seperti pembuatan keju, penjernih bir, pembuatan roti, pengempuk daging, hidrolisat protein, ekstraksi minyak dan sebagainya.
Pada Industri penyamakan kulit memanfaatkan  enzim  protease  sebagai agensia  bating  (pengikis  protein  globular), didalam  perdagangan  dikenal  dengan nama  oropon  atau  enzylon.  Menurut Poedjiadi (1994), albumin termasuk dalam golongan  protein  globular  yang  umumnya berbentuk  bulat  atau  elips  dan  terdiri  dari rantai  polipeptida  yang  berlipat.  Protein globular  pada  umumnya  mempunyai  sifat
dapat larut dalam air, dalam larutan asam atau basa dan dalam etanol. Ditambahkan oleh  De  Man  (1997),  albumin  juga mempunyai  sifat  dapat    dikoagulasi dengan  pemanasan.  Enzim  protease berguna  untuk  menggumpalkan  protein yang  salah  satunya  termasuk  albumin, sehingga  enzim  protease  berpeluang digunakan  untuk  mengekstrak  protein albumin dari ikan gabus.

## METODE PENELITIAN Bahan dan Peralatan
Bahan  dasar  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  ikan  gabus.  Bahan – bahan  lain  yang  diperlukan  yaitu  getah tanaman biduri dan aquadest.
Peralatan yang digunakan antara lain: baskom, pisau, timbangan, neraca analitik, blender,  gelas  kimia  50  ml,  erlenmeyer 250  ml,  gelas  ukur  100  ml,  sentrifuge, tabung sentrifuge, labu ukur 25 ml, batang pengaduk,  corong  kaca,  termometer, stopwatch,  waterbath,  kain  saring,  oven vakum,  cawan  petri,  spektrofotometer  Uv, dan kuvet.

## Prosedur Penelitian
Ekstraksi  Protein  Albumin  Ikan  gabus (Askar, 2005)
Ekstraksi  protein  albumin  ikan  gabus dilakukan  dengan  cara  menimbang  ikan gabus kemudian disiangi (dibuang sisik, isi perut,  insang,  sirip,  kepala  dan  kulitnya). Ikan selanjutnya dipotong-potong kemudian dicuci hingga bersih dan daging dipisahkan dari tulang. Daging selanjutnya ditimbang  kemudian  ditambah  aquadest
dengan perbandingan 1: 5 (100 g : 500 ml) atas  dasar  berat  /  volume,  dihancurkan dengan blender. Campuran disaring, filtrat (ekstrak) ditampung dan diukur volumenya,  selanjutnya  ditentukan  kadar proteinnya.

## Pengendapan  Protein  dengan  Getah Biduri
Pengendapan protein secara enzimatik  menggunakan  getah  biduri dilakukan  melalui  penerapan  perlakuan pengaruh  rasio  getah  biduri  terhadap ekstrak  protein  dan  pengaruh  waktu pemanasan.  Pada  pengaruh  rasio  getah biduri  terhadap  ekstrak  digunakan  5 tingkatan rasio masing-masing 1 : 30; 1,5 : 30;  2  :  30;  2,5  :  30;  3  :  30  atas  dasar volume/volume. Pengaruh waktu pemanasan  diterapkan  6  tingkatan  waktu masing-masing  10,  20,  30,  40,  50  dan  60 menit.  Parameter  yang  diamati  adalah rendemen  protein  albumin  dan  derajat kemurnian albumin.
Ekstrak protein dengan jumlah tertentu  dimasukkan  kedalam  gelas  kimia 50 ml, kemudian ditambahkan getah biduri sesuai  perlakuan.  Campuran  dipanaskan pada  suhu  60°C  selama  30  menit. Endapan yang terbentuk dipisahkan kemudian  dikeringkan  dan  ditimbang untuk  mengetahui  beratnya.  Perlakuan menghasilkan rendemen tertinggi digunakan untuk menentukan waktu pemanasan.

## Penetapan Kadar Protein Ekstrak
Kadar  protein  ekstrak  ikan  gabus ditentukan menggunakan metode
spektrofotometri.
Ekstrak protein diencerkan  jika  perlu  kemudian  diukur serapannya pada panjang gelombang 260 nm  dan  280  nm.  Kadar  protein  dihitung menggunakan persamaan berikut :
Kadar Protein (mg/ml) = A280 x faktor koreksi

## x pengenceran
Ket: (faktor koreksi = A280 / A260)
Penetapan  Derajat  Kemurnian  Ekstrak Albumin
Protein albumin yang dihasilkan dilarutkan  dengan  100  ml  aquadest. Larutan  albumin  selanjutnya  disentrifuge pada 3000 rpm selama 1 jam. Supernatan yang  dihasilkan  diukur  volumenya  dan ditentukan kadarnya menggunakan metode UV pada panjang gelombang 260 nm  dan  280  nm.  Kadar  albumin  dihitung menggunakan persamaan :
Kadar Albumin (mg/ml) = A280 x faktor koreksi x pengenceran
Ket: (faktor koreksi = A280 / A260)

## Derajat Kemurnian=

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tahapan  pertama  yaitu  ekstraksi protein albumin ikan gabus. Pada tahap ini ikan  gabus  terlebih  dahulu  ditimbang kemudian  disiangi  (dibuang  sisik,  insang, isi  perut,  sirip,  kepala,  dan  kulitnya) setelah  itu  daging  ikan  gabus  diblender dengan perbandingan 1 : 5 (100 gr daging ikan gabus : 500 ml aquadest) atas dasar b/v.  Tahapan  ekstraksi  ini  merupakan metode kontrol. Berdasarkan hasil penelitan Askar (2005), secara keseluruhan konsentrat protein ikan gabus
yang  diolah  dengan  metode  kontrol merupakan  cara  pengolahan  yang  paling baik dibandingkan dengan metode perebusan  dan  pengukusan  karena  ikan gabus langsung diekstrak tanpa pemanasan  terlebih  dahulu  sehingga rendemen  protein  yang  dihasilkan  lebih tinggi.
Kemudian  ekstrak  yang  dihasilkan diukur  kadar  proteinnya  menggunakan spektrofotometer Uv pada λ 260 nm dan λ 280  nm.  Metode  spektrofotometri  Uv merupakan  analisis  kadar  protein  secara kuantitatif. Panjang gelombang maksimum spesifik untuk setiap sampel yang berfungsi  mengurangi  adanya  interferensi serapan oleh molekul zat lain dalam suatu sampel  (Day  &  Underwood,  2001). Menurut  Rohman  (2007),  Asam  amino penyusun  protein  diantaranya  adalah triptofan,  tirosin,  dan  fenilalanin  yang mempunyai  gugus  aromatik.  Triptofan mempunyai absorpsi maksimum pada 280 nm.  Absorpsi  sinar  pada  280  nm  dapat digunakan  untuk  estimasi  konsentrasi protein  dalam  larutan.  Supaya  hasilnya lebih  teliti  perlu  dikoreksi  kemungkinan adanya asam nukleat dengan pengukuran absorpsi  pada  260  nm  untuk  melihat kemungkinan  kontaminasi  asam  nukleat. Rasio  absorpsi  280/260  menentukan faktor koreksi yang ada dalam suatu tabel. Spektrofotometer  UV  memiliki  panjang gelombang  190 –  380  nm.  Sebagai sumber sinar  dapatdigunakan lampu deuterium  karena  sinar  Uv  tidak  dapat dideteksi  oleh  mata,  maka  senyawa  yang
dapat  menyerap  sinar  ini  merupakan senyawa  yang  tidak  memiliki  warna, bening,  dan  transparan.  Oleh  karena  itu sampel  tidak  berwarna  tidak  perlu  dibuat berwarna  dengan  penambahan  reagen tertentu.  Bahkan  sampel  dapat  langsung dianalisa meskipun tanpa preparasi.
Namun  sampel  keruh  tetap  harus  dibuat jernih  dengan  filtrasi  atau  sentrifugasi. Prinsip  dasar  spektrofotometri  adalah sampel  harus  jernih  dan  larut  sempurnah tidak ada koloid apalagi suspenssi (Riyadi, 2009).  Dari  hasil  pengukuran  kemudian dihitung kadar proteinnya yaitu 5,64 mg/ml dan berat protein 2818,62 mg.
Tahapan selanjutnya yaitu pengendapan protein dengan getah biduri. Pada  tahap  ini  pengendapan  protein dilakukan  secara  enzimatik  atau  hidrolisis protein  menggunakan  enzim  protease getah  biduri.  Menurut  Witono  (2007d), melalui  tehnik  hidrolisis,  protein  suatu bahan  dapat  diubah  menjadi  senyawa asam  amino  L,  nukleotida,dan  berbagai ragam  peptida.  Proses  hidrolisis  dapat dilakukan secara kimiawi maupun enzimatis.  Proses  hidrolisis  kimiawi  yaitu dengan  penambahan  asam  klorida  dapat memperpendek waktu pembuatan, mempermudah  dan  mengurangi  biaya pembuatan.  Namun  demikian,  dengan tehnik kimia produk protein yang dihasilkan kurang baik dan keamanan bagi kesehatan  kurang  terjamin.  Hidrolisis secara  enzimatik  lebih  menguntungkan secara kimiawi karena dapat menghasilkan  asam – asam amino bebas
dan  peptide  dengan  rantai  pendek  yang bervariasi misalnya albumin.
Pada tahapan ini diterapkan  5 tingkatan  rasio  getah  biduri  yaitu  1,0  :  30; 1,5  :  30;  2,0  :  30;  2,5  :  30;  dan  3,0  :  30 atas  dasar  v/v  dan  setiap  perlakuan diulang sebanyak 2 kali pengulangan. Dari hasil  perlakuan  diperoleh  berat  endapan tertinggi  yaitu  pada  penambahan  getah biduri  sebanyak  3  ml  pada  waktu pemanasan 30 menit (Gambar  1).
Gambar 1. Grafik hubungan antara rasio getah biduri  terhadap  ekstrak  protein dengan rendemen protein albumin.
Dari  Gambar  1  diketahui  bahwa rendemen  protein  albumin  tertinggi  pada rasio 3,0 : 30 yaitu sebesar 44,79 %. Pada saat  penambahan  enzim  protease  biduri, ekstrak  pada  berbagai  rasio  getah  biduri mulai mengalami penggumpalan (koagulasi) pada waktu 5 menit. Terjadinya penggumpalan disebabkan sifat dari enzim protease biduri yang dapat menggumpalkan  protein  dan  memecah ikatan peptida menjadi ikatan-ikatan pendek.  Adapun  suhu  pemanasan  pada waterbath  untuk  semua  perlakuan  sama yaitu  suhu  60 0 C,  digunakan  suhu    60 0 C
23,61 28,38 31,70 38,62 44,79 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 45,00 50,00 1,0:30 1,5:30 2,0:30 2,5:30 3,0:30 re n d e m e n p ro te in a lb u m in (% ) Rasio Getah Biduri Terhadap Ekstrak Protein (v/v)
karena  merupakan  suhu  optimum  kerja enzim  protease  biduri  berdasarkan  hasil penelitian  Witono  (2002a  dan  2002b). Setelah  dipanaskan  selama  30  menit kemudian  disentrifuge  3000  rpm  selama 30 menit. Begitupula dengan suhu pengeringan  oven  pada  semua  perlakuan sama yaitu 50 0 C. Dari gambar 1 diketahui bahwa  rendemen  protein  terus  meningkat seiring  dengan  rasio  getah  biduri  yang semakin  besar.  Hal  ini  menunjukkan bahwa  raasio  getah  biduri  berpengaruh terhadap rendemen protein albumin.
Menurut  Witono  (2007d),  semakin banyak  konsentrasi  enzim  protease  biduri yang  ditambahkan  dan  semakin  lama waktu  hidrolisis,  maka  semakin  banyak ikatan  peptide  dari  protein  yang  terputus menjadi  molekul  yang  lebih  kecil.  Hal  ini karena  enzim  protease  bersifat  memecah protein menjadi peptide pendek dan asam- asam  amino  yang  mudah  larut.  Sehingga diketahui  bahwa  semakin  besar  rasio getah biduri maka semakin tinggi rendemen protein albuminnya.
Sebagaimana  dikatakan  oleh  Nielsen (1997)  bahwa  semakin  besar  konsentrasi protease  akan  semakin  banyak  ikatan peptida dari protein yang terputus menjadi peptida-peptida sederhana, sehingga kelarutan protein akan semakin meningkat.
Hasil  ini  dibuktikan  dengan  hasil  uji statistik  rendemen  protein  albumin  ikan gabus  yaitu  nilai  F  hitung  425,55  dan  F tabel  0,01  dan  0,05  yaitu  5,19  dan  11,39 sehingga nilai F hitung > F tabel 0,01 dan
0,05  (berbeda  sangat  nyata).  Selain  itu juga dibuktikan dengan hasil Uji BNJ taraf 1 % rendemen protein albumin ikan gabus yang  menunjukkan  angka  yang  diikuti huruf yang sama  pada kolom yang sama, hasilnya  pada  semua  perlakuan  1,0:30, 1,5:30, 2,0:30, 2,5:30, dan 3,0:30 berbeda nyata.  Jadi,  rasio  getah  biduri  yang menghasilkan  rendemen  protein  albumin tertinggi  yaitu  pada  rasio  3,0:30  dengan rendemen protein albumin sebesar 44,79%.
Dari  perlakuan  sebelumnya  diketahui bahwa  rasio  getah  biduri  3,0  :  30 menghasilkan  rendemen  protein  tertinggi. Sehingga untuk menentukan waktu pemanasan yang menghasilkan rendemen tertinggi digunakan rasio getah biduri 3,0 : 30  pada  6  tingkatan  waktu  pemanasan (10, 20, 30, 40, 50, dan 60 menit). Dimana parameter yang diamati pada perlakuan ini yaitu  rendemen  protein  albumin  dan derajat  kemurnian  albumin  ikan  gabus. Pada  perlakuan  ini  dihasilkan  berat endapan  yang  semakin  besar  serta rendemen protein yang semakin meningkat  seiring  dengan  lamanya  waktu pemanasan (waktu hidrolisis).
Gambar 2. Grafik  hubungan  antara  waktu pemanasan dengan rendemen protein
37,62  39,58 43,53  46,28 52,69  53,43 0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 10 20 30 40 50 60 R e n d e m e n Prot e in A lb u m in (% )
Waktu Pemanasan (menit)
Dari Gambar 2 diketahui bahwa waktu pemanasan 60 menit menghasilkan rendemen  protein  tertinggi  yaitu  53,43  %. Hasil  penelitian  Askar  (2005),  rendemen protein  yang  dihasilkan  dengan  metode kontrol  yaitu  64,36  %.  Rendemen  protein yang  diperoleh  belum  maksimal  diduga karena  proses  koagulasi  protein  belum mencapai  titik  optimum  sehingga  rasio getah  biduri  terhadap  ekstrak  protein  ikan gabus  masih  dapat  ditingkatkan  lagi. Sedangkan  hasil  penelitian  Suprayitno, dkk  (2013),  rendemen  protein  dengan metode pengendapan menggunakan ammonium sulfat yang dilanjutkan dengan pengeringan vakum yaitu 37,21 %. Hal  ini menunjukkan  bahwa  metode  ekstraksi secara enzimatik lebih optimum digunakan selain  itu  lebih  aman  karena  tanpa penambahan  bahan  kimia.  Adapun  waktu pemanasan dari 10 menit sampai 50 menit terus  mengalami  peningkatan  yang  cepat namun  pada  waktu  pemanasan  60  menit laju  peningkatan  berat  endapan  serta rendemen protein mulai berkurang sehingga    persentasenya  tidak  berbeda jauh  dengan  waktu  pemanasan  50  menit. Sehingga dapat disimpulkan bahwa waktu pemanasan optimum ekstrak protein pada 60 menit.
Menurut  Witono  (2007d),  semakin besar  konsentrasi  enzim  protease  biduri dan  semakin  lama  waktu  hidrolisis  maka kadar  protein  terlarut  semakin  tinggi. Semakin  lama  waktu  hidrolisis,  kontak enzim  dengan  substrat  semakin  lama, sehingga  tingkat  hidrolisis  semakin  tinggi
dan  dihasilkan  molekul-molekul  protein yang pendek sehingga kelarutannya meningkat.  Sebagaimana  juga  dilaporkan oleh  Hrckova,  dkk  (2002),  bahwa  jumlah asam  amino  bebas  dari  hidrolisis  protein kedelai bebas lemak menggunakan protease  selektif  juga  meningkat  seiring dengan lamanya waktu inkubasi.
Adapun  hasil  uji  statistik  rendemen protein  albumin  ikan  gabus  yaitu  nilai  F hitung  4322,5  dan  F  tabel  0,01  dan  0,05 yaitu  4,39  dan  8,15    sehingga  nilai  F hitung  >  F  tabel  0,01  dan  0,05  (berbeda sangat nyata). Selain itu hasil Uji BNJ taraf 1 % rendemen protein albumin ikan gabus yang  menunjukkan  angka  yang  diikuti huruf yang sama  pada kolom yang sama, hasilnya pada perlakuan waktu pemanasan  10,  20,  30,  40,50    dan  60 menit berbeda nyata. Jadi, waktu pemanasan  optimum  yang  menghasilkan rendemen  protein  albumin  tertinggi  yaitu pada  waktu  60  menit  dengan  rendemen protein albumin sebesar 53,43 %.
Gambar 3. Grafik  hubungan  antara  waktu pemanasan dengan derajat
kemurnian albumin ikan gabus. Penentuan Derajat
kemurnian albumin juga bergantung pada rasio getah biduri  dan  waktu  pemanasan.  Hubungan
23,05  23,30 24,29 25,20 35,50  35,91 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 10 20 30 40 50 60 D e ra ja t K e m u rn ia n A lb u m in ( % )
Waktu Pemanasan  (menit)
derajat  kemurnian  albumin  dengan  waktu pemanasan dapat dilihat pada Gambar 3.
Dari gambar 3 dapat diketahui bahwa pada  waktu  pemanasan  10  sampai  50 menit  mengalami  peningkatan  sedangkan pada  waktu  pemanasan  50  sampai  60 menit  laju  peningkatannya  berkurang sehingga  derajat  albumin  yang  dihasilkan tidak berbeda jauh persentasenya. Persen rendemen protein berbanding lurus dengan persen derajat kemurnian albumin, yaitu semakin meningkat persentasenya
seiring dengan
meningkatnya  waktu  pemanasan.  Adapun derajat  kemurnian  albumin    tertinggi diperoleh pada waktu pemanasan optimum 50 menit sebesar 35,50%.
Hal  ini  dibuktikan  dengan  uji  statistik pada analisis sidik ragam diperoleh nilai  F Hitung  1495,80  serta  F  tabel  0,01  dan 0,05  sebesar  4,39  dan  8,15  sehingga terjadi  perbedaan  sangat  nyata  (F  Hitung > F tabel). Dan dari hasil uji BNJ taraf 1 % menunjukkan  bahwa  angka  yang  diikuti huruf  yang  sama  pada  kolom  yang  sama berbeda  tidak  nyata.  Dimana  pada  waktu pemanasan  10  dan  20  menit  berbeda nyata  dengan  waktu  30,  40,  50,  dan  60 menit  namun  tidak berbeda nyata  dengan waktu  10  dan  20  menit.  Pada  waktu  30 menit  berbeda  nyata  dengan  waktu  10, sampai  60  menit.  Pada  waktu  40  menit semua  waktu  berbeda  nyata.  Sedangkan pada  waktu  50  dan  60  menit  berbeda nyata  dengan  waktu  10,  20,  30,  dan  40 menit kecuali pada waktu 50 dan 60 menit berbeda  tidak  nyata.  Sehingga  waktu
pemanasan  optimum  yang  menghasilkan derajat  kemurnian  albumin  tertinggi  yaitu pada  waktu  50  menit  dengan  derajat kemurnian  albumin  sebesar  35,50%. Sedangkan  hasil  penelitian    Suprayitno dkk (2013) dengan pengendapan menggunakan  ammonium  sulfat  kadar albumin  ikan  gabus  yang  diperoleh  yaitu sebesar  4,71  %.  Hal  ini  menunjukkan metode  secara  enzimatik  menghasilkan kadar  albumin  yang  lebih  tinggi  dan  lebih aman  dikomsumsi  karena  tanpa  adanya penambahan zat kimia yang dapat bersifat racun bagi tubuh.

## KESIMPULAN
Rendemen protein tertinggi dihasilkan pada rasio getah biduri 3,0 : 30 dan waktu pemanasan  60  menit  yaitu  sebesar 53,43%. Derajat Kemurnian Albumin tertinggi dengan waktu pemanasan optimum  dihasilkan  pada  waktu  50  menit yaitu sebesar 35,50 %.

## DAFTAR PUSTAKA
Askar,  I.S.  2005. Studi  Pembuatan Konsentrat  Ikan  (Fish  Protein Concentrate)  dari  Ikan  Gabus . Jakarta: Epetani Deptan.
Carvallo,  Y.N.,  1998. Study  Profit  Asam
Amino,  Albumin,  Mineral  Zn  pada Ikan Gabus (Ophiocephalus striatus) dan Ikan Tomang (Ophiocephalus micropeltus) . Malang: Fakultas Perikanan. Universitas Brawijaya.
Day, R.A., Underwood, A.L. 2001. Analisis Kimia Kuantitatif, Edisi 6 . Jakarta: Erlangga. hal 391
De  Man.  1997. Kimia  Makanan  Edisi Kedua . Bandung: ITB press.
Hrckova, M., Rusnakova M., Zemanovic J. 2002.  Enzimatyc  Hydrolysis  of
Defatted  Soy  Flour  by  Three
Different  Proteases  and  their
Effect on the Functional Properties  of  Resulting  Protein
Hydrolysates. Czech  J.  food  Sci .
20 (1): 7-14.
Nielsen,  P.M.  1997. Food  Proteins  and
Their Applications. NewYork: Marcel Dekker, Inc.
Poedjiadi,  A.  1994. Dasar-dasar  Biokimia .
Jakarta: Universitas Indonesia.
Riyadi. 2009. Macam Spektrofotometri dan Perbedaannya  (UV,  Vis,  dan  Ir) .
Jakarta: Erlangga.
Rohman,  Abdul.  2007. Kimia  Farmasi Analisis . Yogyakarta: Pustaka
Pelajar.
Suprayitno,  E.  2008. Albumin  Ikan  Gabus Sebagai Makanan Fungsional Mengatasi Permasalahan Gizi
Masa  Depan .  Malang:  Fakultas
Perikanan Universitas Brawijaya.
Suprayitno,  E.,  Sulistiyati  D.T.,  Yuniarti W.D.,  2013 . Pengaruh  Suhu Pengeringan  Vakum  Terhadap Kualitas  Serbuk  Albumin  Ikan Gabus (Ophiocephalus  striatus) . THPi Student Journal . 1(1) : 1-9.
Tandra,  H.;  Soemartono,  H.W.  dan  A.
Tjokroprawiro,  1988.  Metabolisme dan  Aspek  Klinik  Albumin. J.
Med. , 3: 249-258
Witono,
Y., 2002a. Isolasi dan
Karakterisasi Enzim Protease dari Getah  Tanaman  Biduri. Jurnal Teknologi Hasil Pertanian . 1(1): 1- 14.
Witono,  Y.,  2002b.  Pemanfaatan  Enzim Protease  dari  Tanaman  Biduri untuk Pengolahan Makanan.
Jurnal  Sains  dan  Teknologi ,  1(1): 32-37.
Witono,  Y.,  Aulanni’am.,  Subagio,  A.,  dan Widjanarko,  S.B.,  2007a.  Telaah
Teknologi Produksi Protease Secara  Langsung  dari  Tanaman Biduri (Calotropis gigantea) .
Jurnal  of  Agrotechnologi .1(1):  8-
16.
Witono,  Y.,  Aulanni’am.,  Subagio,  A.,  dan
Widjanarko, S.B., 2007b. Presipitasi dari Getah Biduri (Calotropis Gigantea) Secara Salting Out Menggunakan Ammonium  Sulfat. Journal  of
Agricultural  Product Technologi .  7 (1): 20-26. Witono,  Y.,  Aulanni’am.,  Subagio,  A.,  dan Widjanarko, S.B., 2007c. Purifikasi dan Karakterisasi Parsial Enzim Protease dari Getah Tanaman Biduri (Calotropis gigantea) . Jurnal  Teknologi  dan
Industri Pangan . 18(1): 1-9
Witono,  Y.,  Aulanni’am.,  Subagio,  A.,  dan
Widjanarko, S.B., 2007d. Karakterisasi  Hidrolisat  Protein Kedelai Hasil Hidrolisis Menggunakan Protease dari Tanaman Biduri (Calotropis gigantea) . Jurnal Penelitian Hayati . 13(1): 7-13.