## PENELITIAN
Pengaruh  Melatonin Terhadap  Kadar  Leukosit Tikus Wistar Model Luka Bakar Dalam Kurun Waktu Dua Hari
The Effect of Melatonin on Leukocyte Levels in Burn Model Wistar Rats Within Two Days
Shafira Dian Prameswari  * , Ardana Tri Arianto ** , Purwoko ** , Sugeng Budi Santoso **
* Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, Surakarta, Indonesia
** SMF Anestesiologi dan Terapi Intensif, Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret/ RSUD Dr. Moewardi, Surakarta, Indonesia
 Korespondensi: shafdp17@student.uns.ac.id

## ABSTRACT
Background: Burns are injuries that occur as a result of touching the body surface with objects that generate heat, either directly or indirectly. This can be caused by heat (fire, hot liquid/fat, or hot steam), radiation, electricity, or chemicals. Giving melatonin can be a therapy for burn patients. In burn therapy, melatonin plays a role in reducing oxidative stress and inflammation.
Objective: This study aims to determine the effect of melatonin on leukocyte levels in burn wound Wistar rats (within two days).
Methods : The research was experimental and was carried out in a laboratory using the randomized control group pre-test and post-test methods. The 12 rats used in this study were divided into 2 groups: K1−the control group and K2−the treatment group that was injected with melatonin. The data will be tested for distribution using the Shapiro-Wilk test.  If  the  data  distribution  is  normal,  the  hypothesis  test  is  carried  out  with  the Independent T-test and Paired T-test, but if the data distribution is not normal, the Mann- Whitney test can be carried out.
Results : From the results of the research conducted, there was a significant decrease in leukocyte levels of 6.483 x 109/L in K2 significantly which was supported by the Paired T-test hypothesis which showed a comparison of leukocyte levels at T1 and T3 obtained P value = 0.01 which means significant and said to be significant if P < 0.05 Conclusion :  There  is  an  effect  of  melatonin  on  the  leukocyte  levels  of  the  burn  model Wistar rats (within two days).
Keywords : burn; leukocyte levels; melatonin; rats; wistar

## Jurnal Anestesiologi Indonesia

## ABSTRAK
Latar Belakang: Luka bakar adalah luka yang terjadi akibat sentuhan permukaan tubuh dengan  dengan  benda-benda  yang  menghasilkan  panas  baik  kontak  secara  langsung maupun tidak langsung. Hal tersebut bisa disebabkan oleh panas (api, cairan/lemak panas, maupun uap panas), radiasi, listrik, kimia. Pemberian melatonin mampu menjadi salah satu terapi pada penderita luka bakar. Dalam terapi luka bakar melatonin berperan dalam mengurangi stress oksidatif dan peradangan.
Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh melatonin terhadap kadar leukosit tikus wistar model luka bakar (dalam kurun waktu dua hari).
Metode: Penelitian  yang  dilakukan  bersifat  eksperimental  yang  dilakukan  pada laboratorium dengan metode randomized control group pre test dan post test. Tikus yang digunakan  pada  penelitian  ini  berjumlah  12  yang  akan  dibagi  menjadi  2  kelompok: K1−kelompok kontrol dan K2−kelompok perlakuan yang diinjeksi melatonin. Data akan dilakukan uji distribusinya menggunakan uji Shapiro-Wilk. Jika distribusi data normal uji hipotesis  dilakukan  dengan Independent T-test dan Paired  T-test namun jika  distribusi data tidak normal dapat dilakukan uji Mann-Whitney.
Hasil: Dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan  terdapat  penurunan  kadar  leukosit  yang signifikan  sebesar  6,483  x  10 9 /L  pada  K2  secara  signifikan  yang  didukung  dengan  uji hipotesis Paired T-test yang menunjukkan perbandingan kadar leukosit pada T1 dan T3 didapatkan  nilai  P  =  0,01  yang  berarti  signifikan  dan  dikatakan  signifikan  apabila  P  < 0,05
Kesimpulan: Terdapat pengaruh melatonin terhadap kadar leukosit tikus wistar model luka bakar (dalam kurun waktu dua hari).
Kata Kunci : kadar leukosit; luka bakar; melatonin; tikus; wistar

## PENDAHULUAN
Luka  bakar  adalah  luka  yang  terjadi akibat adanya sentuhan permukaan tubuh dengan benda-benda yang menghasilkan panas  baik  kontak  secara  langsung maupun tidak langsung. Hal tersebut bisa disebabkan oleh panas (api, cairan/lemak panas,  maupun  uap  panas),  radiasi, listrik, kimia. 1
Menurut WHO diperkirakan  terjadi  lebih  dari  300.000
kematian di dunia setiap tahunnya  yang berhubungan  dengan  luka  bakar  yang disebabkan oleh kebakaran. 2 Di Indonesia  sendiri  menurut  laporan nasional Riset Kesehatan Dasar Kementerian Kesehatan RI 2018
prevalensi luka bakar yang terjadi yakni 1,3%,  dimana  prevalensi  tertinggi  yaitu
Provinsi  Papua  sebesar  2,1%. 3 Dalam luka  bakar  gender  berperan  penting dalam  faktor  risikonya,  rata-rata  di
negara  berkembang  didominasi  oleh perempuan akibat kebakaran dari bahan bakar masak ataupun pemanas, sedangkan  di  negara  maju  didominasi oleh  pria  akibat  kecelakaan  industri. Anak-anak  juga  rentan  terhadap  luka bakar,  dimana  pada  penelitian  tercatat hampir  50%  dari  pasien  luka  bakar mayoritas anak-anak. 4
Luka  bakar  memiliki  efek  yang  terjadi pada kulit, sistem kardiovaskular, renal, gastrointestinal, imun dan sistem respiratori.  Efek  yang  terjadi  pada  kulit setelah luka bakar bergantung pada luas dan ukuran dari luka bakar sendiri. Pada luka bakar yang berukuran kecil, respons tubuh akan terbatas pada area luka saja. Pada  luka  bakar  yang  berukuran  luas terjadi  respons  tubuh  yang  bersifat sistemik dan memengaruhi sistem tubuh

## Jurnal Anestesiologi Indonesia
kitaseperti  sistem  kardiovaskuler.  Pada 18-36  jam  setelah  paparan  luka  bakar, permeabilitas  kapiler  akan  menurun, namun  tidak  mampu  kembali  seperti keadaan normal sampai 2 atau 3 minggu setelah terkena luka.
Setelah  itu  ada  sistem  renal  dan gastrointestinal,  apabila  terjadi  luka bakar, respons awal tubuh menunjukkan berkurangnya  darah  ke  ginjal  dan turunnya  GFR (Glomerular  Filtration Rate) yan  akan  menyebabkan  oliguri. Sehingga  aliran  darah  yang  menuju  ke usus  berkurang,  dan  terjadi  ileus intestinal serta disfungsi gastrointestinal pada pasien dengan luka bakar.
Selain  itu,  sistem  imun  juga  akan mengalami depresi. Depresi yang terjadi yakni  pada  aktivitas  limfosit,  adanya penurunan  produksi  immunoglobulin, gangguan fungsi neutrofil serta makrofag.
Sistem  respiratori  juga  akan  terjadi gangguan  dengan  adanya  luka  bakar, seperti terjadinya hipertensi arteri pulmoner, yang mengakibatkan turunnya kadar oksigen arteri dan “lung compliance”. 5
Luka bakar akan memengaruhi  kadar  leukosit,  dimana kadar leukosit akan cenderung meningkat. 6
Leukosit  adalah  salah  satu  bagian  dari susunan  sel  darah  manusia  yang berfungsi  pada  sistem  imunitas  ataupun membunuh  kuman  serta  bibit  penyakit yang  masuk  ke  dalam  aliran  darah manusia.  Pada luka bakar inflamasi dan infeksi mampu terjadi yang menyebabkan kadar leukosit meningkat.
Inflamasi  yang  terjadi  pada  luka  bakar, mampu  diredakan  dengan  pemberian melatonin. 7
Melatonin  adalah  neurohormon  yang sintesis  dan  sekresinya  dilakukan  oleh kelenjar  pineal  pada  cahaya  normal ataupun  pada  kondisi  yang  gelap. Dengan adanya cahaya mampu menekan produksi  melatonin. 8 Dalam  terapi  luka bakar melatonin berperan dalam mengurangi stress oksidatif dan
peradangan.  Penguran  stress  oksidatif pada  fungsi  melatonin  pada  sel  mampu timbul  dari  radikal  bebas  juga  adanya stimulasi  dari  aktivitas  pertahanan  pada mekanisme  antioksidan.  Hal  tersebut membuat aktifnya reseptor pada membran  melatonin  yakni  melatonin  1 (MT1)  meliputi    hipotalamus,  pars tuberalis  dari  hipofisis,  serta  pembuluh darah  jantung  serta  melatonin  2  (MT2) meliputi  retina  dan  hippocampus,  yang memiliki  fungsi  merangsang  produksi berbagai  enzim  antioksidan  melalui beberapa  jalur  sinyal.  Sehingga  stress oksidatif  mampu  berkurang.  Sedangkan pada perannya dalam mengurangi peradangan atau anti-inflamatory , melatonin  mampu  memberikan  reaksi terhadap  peradangan  akut  dan  juga kronis.  Pemberian  melatonin  eksogen pada  hewan,  sebelum  peradangan  akut, terbukti menunjukkan adanya penurunan respons  inflamasi,  pengurangan  sitokin pro  inflamasi,  interleukin-1  (IL-1  ), tumor necrosis  factor (TNF-  ),  serta terjadi  peningkatan  kadar  sitokin  IL-4 anti  inflamasi  dalam  serum.  Selain  itu, melatonin akan menghambat siklooksigenase  (COX)  serta inducible nitric oxide synthase (iNOS),
berbarengan dengan pengurangan produksi  prostanoid  dan  leukotriene yang  memiliki  konsentrasi  tinggi,  dan menjadi  mediator  lain  pada  proses inflamasi,  yakni  seperti  kemokin  serta molekul adhesi. 9 Dalam peran
farmakologisnya melatonin mampu menstimulasi berbagai enzim antioksidan,  mengurangi  proinflamasi pada  sitokin,  menghambat  molekul

## Jurnal Anestesiologi Indonesia
adhesi,  dan  mengurangi  toksisitas  obat yang digunakan untuk terapi luka bakar termal. 10 Penelitian  yang  sebelumnya telah dilakukan dengan judul “Pengaruh Melatonin  Terhadap  Kadar  leukosit Tikus  Wistar  Model  Luka  Bakar”,
memiliki hasil yaitu pemberian melatonin  terhadap  kadar  leukosit  tikus wistar  pada  kelompok  perlakuan  tidak menunjukan penurunan secara signifikan dibanding dengan kelompok kontrol. 11
Penulis  ingin  melakukan  penelitian  ini yang pertama dari kesimpulan penelitian sebelumnya dimana pemberian
melatonin  terhadap  kadar  leukosit  tikus wistar  pada  kelompok  perlakuan  tidak menunjukan penurunan secara signifikan dibanding  dengan  kelompok  kontrol. Kemudian  yang  kedua  yakni  pengaruh melatonin  terhadap  siklus  nokturnal ataupun  tidur  dimana  dengan  dilakukan selama  dua  hari  supaya  lebih  optimal,
mengingat dimana pembentukan
melatonin pada keadaan yang gelap atau keadaan tidur dan biasa disebut “hormone of darkness” . 12 Penulis  ingin mengetahui lebih lanjut apakah terdapat pengaruh  melatonin  terhadap  kadar leukosit  tikus  wistar  akibat  luka bakar dalam kurun waktu dua hari.

## METODE
Penelitian  yang  dilakukan  ini  bersifat eksperimental  yang  dilakukan  pada laboratorium dengan metode randomized control group pre test dan post test. Dari sampel  yang  ada  akan  dibagi  menjadi dua  kelompok  yaitu  kelompok  kontrol dan  kelompok  diberi  perlakuan  yang dipilih  secara  acak.  Disini  peneliti  akan menggunakan sistem tabel angka random dengan  penomoran.  Penelitian yang penulis lakukan akan dilaksanakan di  Laboratorium  Biologi  Universitas Negeri Semarang (UNNES) dan
Laboratorium  Kesehatan  Hewan  Kota Semarang  untuk  menghitung  kadar
leukosit.  Populasi  yang  akan  digunakan pada  penelitian  ini  yakni  tikus  wistar
(Rattus novergicus) dengan jenis kelamin jantan yang berada di Laboratorium Biologi Universitas
Negeri  Semarang  (UNNES).  Sampel penelitian yang diambil dipastikah telah memenuhi  kriteria  inklusi  dan  eksklusi yang  telah  ditentukan.  Kriteria  inklusi pada  penelitian  ini  yakni  tikus  wistar dengan kelamin jantan, sehat dengan ciri bergerak dengan aktif, berusia 2-3 bulan dengan  berat  badan  150-300  gram. Kemudian,  untuk  kriteria  eksklusinya yakni tikus wistar tidak bergerak dengan aktif selama masa adaptasi dan terdapat kelainan anatomis pada tikus. Selain itu, terdapat  kriteria  dropout  seperti  tikus mati selama penelitian.
Variabel  yang  akan  digunakan  pada penelitian  ini  meliputi  variabel  bebas, terikat,  dan  moderator.  Untuk  variabel bebas  yang  digunakan  yakni  melatonin. Variabel  terikat  terdiri  dari  kadar leukosit.  Serta  variabel  moderator  yang memengaruhi  kedua  variabel  bebas  dan terikat  yakni  dalam  kurun  waktu  dua hari. Ethical clearance yang digunakan pada  penelitian  ini  keluarkan  oleh Komite  Etika  Penelitian  Kesehatan RSUD Dr. Moewardi.

## HASIL
Kelompok  pertama  atau  K1  merupakan kelompok tikus yang tidak diberi injeksi melatonin  pasca  luka  bakar.  Kelompok kedua  atau  K2  merupakan  kelompok tikus  yang  diberi  injeksi  melatonin dengan dosis 2mg/tikus via intraperioteneal  pasca  luka  bakar  yang dibuat sebesar 30% dari besar permukaan tubuh tikus yang sebelumnya telah  dihitung  menggunakan  rumus Meeh’s  formula  dengan  menggunakan lempeng  besi  yang  telah  dimasukan  ke dalam air panas dengan suhu 90°C. Pada K1 dan K2 dilakukan pemeriksaan kadar

## Jurnal Anestesiologi Indonesia
leukosit  jam  ke  0  (T1) , jam  ke  24  (T2) dan jam ke 48 (T3) setelah luka bakar.
Perhitungan kadar leukosit pada
penelitian ini dilakukan dengan
menggunakan alat Hematology Analyzer yang  dilaksanakan  di  Laboratorium Kesehatan  Hewan  Semarang . Sampel darah yang digunakan pada pemeriksaan kadar  leukosit  diambil  pada  pembuluh darah  pada  retro-orbital  kemudian
dilakukan  pemeriksaan  sebanyak  tiga kali  yakni  sesaat  T1 , T2  dan  T3. Kegiatan  dilaksanakannya  pemberian luka  bakar  hingga  perhitungan  kadar leukosit  dilaksanakan  pada  25  dan  26 April  2022.  Dari  perhitungan  kadar leukosit  menggunakan  alat Hematology Analyzer didapatkan  hasil  sebagai berikut:
Tabel 1. Hasil perhitungan kadar leukosit menggunakan alat hematology analyzer
Kadar Leukosit ( x 10 9 /L) Kode T1 T2 T3 K1.1 11,8 9,4 16 K1.2 14,2 6,9 7,9 K1.3 14,5 9,8 9,3 K1.4 14,6 9,6 14,1 K1.5 12,2 12 11,4 K1.6 14,2 10,1 9,7 K2.1 11,6 6,9 5,2 K2.2 16 8,8 8,8 K2.3 12,1 5,3 5,2 K2.4 18,8 10,9 12,2 K2.5 9,2 8,6 6,4 K2.6 16,2 18,2 7,2
Tabel 2. Hasil uji normalitas menggunakan metode Shapiro-Wilk
Variabel (Kadar Leukosit) Kelompok K1 K2 Ket T1 0,034 0,726* K1 : TN T2 0,453* 0,208* N T3 0,633* 0,242* N
Tabel 3. Hasil uji hipotesis paired T-Test
Kelompok Kadar Leukosit T1 & T2 T2 & T3 T3 & T1 K1 0,217 K2 0,051 0,265 0,01*

## Jurnal Anestesiologi Indonesia
Tabel 4. Ranks uji Mann-Whitney Kelompok N Mean Rank Sum of Ranks T1 K1 6 6,33 38,00 K2 6 6,67 40,00 Total 12
Tabel 5. Test statistics a uji Mann-Whitney Pada T1 Mann-Whitney U 17,000 Wilcoxon W 38,000 Z -.160 Asymp. Sig. (2-tailed) 0,873 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] 0,937 b
Tabel 6. Hasil uji hipotesis parametic independent T-Test
Kadar Leukosit Rerata Leukosit(x10 9 /L) ± Standar Deviasi P K1 K2 T2 9,63 ± 1,63 9,78 ± 4,53 0,941 T3 11,40 ± 3,09 7,50 ± 2,67 0,042*
Gambar 1. Perbandingan Kadar Leukosit
0 5 10 15 T1 T2 T3 Rerata Kadar Leukosit pada K1 dan K2 Rerata K1 Rerata K2

## Jurnal Anestesiologi Indonesia
Tabel 1 menunjukkan adanya perbandingan kadar leukosit K1 dan K2 pada  waktu  T1,  T2,  dan T3  pada  setiap tikusnya.  Uji Shapiro-Wilk merupakan uji untuk mengetahui apakah sebuah data terdistribusi  normal  atau  tidak.  Pada Tabel  2  diatas  menunjukkan  adanya distribusi data yang normal pada semua waktu dan kelompok kecuali pada waktu T1 kelompok K1 memiliki distribusi data yang tidak normal.
Tabel 3 menunjukkan hasil uji hipotesis Paired  T-  Test dimana  perbandingan waktu  T3  dan  T1  pada  kelompok  K2 menunjukkan  hasil  yang  signifikan dengan P = 0,01.
Data Tabel 4 dan Tabel  5 menunjukkan adanya  hasil  uji  statistik Mann-Whitney
yang menunjukkan nilai Asymp.
Signifikansi 0,873.
Pada  Tabel  6  uji  hipotesis Parametic Independent  T-Test diatas  perbandingan kadar leukosit pada K1 ataupun K2 pada waktu  T2  didapatkan  P  =  0,941.  Maka dapat disimbulkan bahwa T2 pemberian melatonin  tidak  ditemukan  adanya perbedaan kadar leukosit yang
bermakna.
Sementara, pada T3
didapatkan nilai P yang signifikan.

## PEMBAHASAN
Luka  bakar  adalah  luka  yang  terjadi akibat sentuhan permukaan tubuh dengan  dengan  benda-benda yang menghasilkan  panas  baik  kontak  secara langsung  maupun  tidak  langsung.  Hal tersebut bisa disebabkan oleh panas (api, cairan/lemak panas, maupun uap panas), radiasi,  listrik,  kimia. 1 Luka  bakar mampu  menyebabkan  adanya  inflamasi yang memengaruhi berbagai sistem imun sehingga  bisa  menyebabkan  kegagalan organ  yang multiple bahkan  terjadi kematian. 13
Dengan tingginya angka kematian akibat luka  bakar  terutama  pada  negara berkembang,  penulis  terdorong  untuk melakukan  penelitian  dengan  harapan melatonin  mampu  berpengaruh  dalam mencegah  komplikasi  pada  luka  bakar selama 2 hari pasca paparan. 4
Dampak  dari  adanya  reaksi  sumsum tulang  terhadap  inflamasi  dan  infeksi akibat luka bakar, mampu menyebabkan adanya  leukositosis  atau  peningkatan kadar leukosit. Kadar leukosit dikatakan darurat  dalam  keadaan  medis  apabila diatas 100.000 /mm 3 (100 x 10 9 /L). 14
Dari  penelitian  yang  penulis  lakukan didapatkan  hasil  terdapat  penurunan kadar leukosit dari waktu T1 hingga T3 pada  kelompok  perlakuan.  Sedangkan, pada  kelompok  K1  terdapat  penurunan pada  waktu  T1  ke  T2  kemudian meningkat pada waktu T2 ke T3. Dimana hal  tersebut  sejalan  dengan  teori  bahwa melatonin pada tikus mampu mengoptimalkan penurunan kadar
leukosit  karena  melatonin  memiliki fungsi  sebagai  penghambatan  sitokin proinflamasi. 10
Melatonin  adalah  neurohormon  yang disekresikan  oleh  kelenjar  pineal  dan diatur  oleh  siklus  gelap  atau  terang. Terutama disekresikan pada malam hari dan  terlibat  dalam  tidur  dan  aktivitas manusia. Selain itu, melatonin memiliki fungsi sebagai antioksidan yang mampu membantu pasien dengan luka bakar. 15,16
Menurut penelitian yang berjudul Protectice  effects  of  Melatonin  on  the Skin:  Future  Perspectives melatonin memiliki  peran  sebagai  antioksidan  dan anti-inflamasi  yang  mempu  mengobati adanya patologi pada kulit salah satunya dalam penyembuhan luka. 16

## Jurnal Anestesiologi Indonesia
Hal  tersebut  sesuai  dengan  penelitian penulis  yang  diperkuat  dengan  sebuah penelitian yang berjudul Innate Immune System  Response  to  Burn  Damage  – Focus  on  Cytokine  Alteration. Pada penelitian itu disebutkan bahwa melatonin  merupakan  sebuah  senyawa neurohormon yang memiliki sifat
antioksidan  yang  mampu  berkontribusi dalam  pengurangan  stres  oksidatif  dan memiliki efek perlindungan pada kerusakan  kulit  akibat  luka  bakar. Dengan  pemberian  melatonin  mampu menekan  IL-1b  dan  IL-6  yang  nantinya dapat menurunkan kadar leukosit. 17
Luka bakar yang terjadi pada permukaan yang luas mampu menghasilkan adanya respons  luka  dan  disant-organ  injury (DOI)  yang  disebabkan  oleh  adanya stress  oksidatif  dan  juga  peradangan. Dalam hal tersebut melatonin menujukkan  adanya  harapan  dalam mengurangi  stress  oksidatif  dan  juga peradangan 7 . Pengaruh melatonin terhadap luka  bakar  yaitu  dalam  bentuk penghambat produksi sitokin proinflamasi dalam mengurangi peradangan  akut  dan  kronis  serta berperan  sebagai  anti  inflamasi  dengan cara  menekan  respons  peradangan dengan  menunjukkan  adanya  sebuah perbaikan  atau  kekebalan  pada  keadaan yang  tidak  meradang. 18 Selain  itu, didukung  juga  oleh  penelitian  yang berjudul Effects of Melatonin Treatment in Septic Newborns menyebutkan bahwa melatonin  memiliki  efek  anti-inflamasi yang  nantinya  akan  menurunkan  WBC ( White  Blood  Cell) setelah  24  jam  dan turun  kembali  secara  signifikan  setelah 48 jam. 19
Hal  tersebut  relevan  dengan  hasil  pada penelitian  ini  dimana  pada  pengukuran rerata  kadar  leukosit  pada  T1  diawali dengan  peningkatan  kadar  leukosit. Kemudian,  pada  T2  masih  terdapat
peningkatan kadar leukosit dan pada T3 diperoleh  penurunan  kadar  leukosit pasca pemberian melatonin dengan dosis 10  mg/KgBB.  Dari  hasil  tersebut  dapat ditarik kesimpulan bahwa lama pemberian  melatonin  sesuai  dengan hipotesis  dimana  pemberian  melatonin dapat menurunkan kadar leukosit terhadap  tikus  wistar  model  luka  bakar dalam kurun waktu dua hari.
Keterbatasan  yang  ada  pada  penelitian ini  adalah  peneliti  tidak  menggunakan dosis  melatonin  yang  bervariasi  dan derajat luka bakar yang bertingkat untuk mengetahui dosis melatonin yang efektif untuk  menurunkan  kadar  leukosit  pada derajat tertentu. Kemudian, keterbatasan lainnya  pada  penelitian  ini  adalah peneliti  hanya  melakukan  pemeriksaan pada  parameter  darah  leukosit  saja karena  pada  saat  terjadinya  luka  bakar terdapat  adanya  peningkatan  kadar leukosit yang disebabkan adanya infeksi, semakin  tinggi  kadar  leukosit  semakin tinggi  pula  infeksi  yang  terjadi. 20 Sehingga  peningkatan  kadar  leukosit tersebut  harus  teratasi  untuk meredakan adanya  infeksi  lebih  lanjut  pada  pasien luka bakar.
Dengan  keterbatasan  tersebut  tidak memengaruhi keberhasilan pada penelitian  ini  karena  hasil  yang  didapat sesuai  dengan  hipotesis  melatonin berpengaruh  terhadap  kadar  leukosit tikus wistar dalam kurun waktu dua hari.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh  dapat  disimpulkan  bahwa terdapat  pengaruh  melatonin  terhadap penurunan  kadar  leukosit  pada  tikus wistar  model  luka  bakar  (dalam  kurun waktu dua hari).

## Jurnal Anestesiologi Indonesia

## DAFTAR PUSTAKA
1.   Anggowarsito JL. Luka Bakar Sudut Pandang Dermatologi. J Widya Med [Internet].  2014  [cited  2021  Dec
4];2(2):115–20.  Available  from: http://journal.wima.ac.id/index.php/ JWM/article/view/852
2.   Charles M, Michael P, Etienne K. A WHO plan for burn prevention and care. World Heal Organ. 2008; 3.   RI Kemenkes. Laporan_Nasional_RKD2018_FIN AL.pdf.  Badan  Penelitian  dan Pengembangan  Kesehatan. 2018. p. 198 4.   Dissanaike S, Rahimi M. Epidemiology  of  burn  injuries:
Highlighting  cultural  and  socio- demographic  aspects.  Int  Rev
Psychiatry  [Internet].  2009  Jan  1 [cited  2021  Dec  4];21(6):505–11.
Available from: https://doi.org/10.3109/0954026090 3340865 5.   Doub  JP.  penatalaksanaan  luka bakar (combustio). 2012;08(September):262 6.   Febrianto  R,  Farhanah  N,  Sari  EP. Hubungan  Luka  Bakar  Derajat Sedang Dan Berat Menurut Kategori American  Burn  Association  Dan Faktor Â€“ Faktor Yang Memengaruhi  Kejadian  Sepsis  Di Rsup Dr. Kariadi. Diponegoro Med
J  (Jurnal  Kedokt  Diponegoro). 2016;5(4):1526–34 7.   Sumsuzzman DM, Choi J, Khan ZA,
Hong  Y.  Protective  effects  of melatonin  against  severe  burn- induced  distant  organ  injury:  A systematic review and meta-analysis of
experimental studies. Antioxidants. 2020;9(12):1–21
8.   Claustrat  B,  Leston  J.  Melatonin:
Physiological  effects  in  humans. Neurochirurgie.  2015;61(2–3):77–
84 9.   Chitimus DM, Popescu MR,
Voiculescu  SE,  Panaitescu  AM, Pavel  B,  Zagrean  L,  et  al. Melatonin’s impact on antioxidative and anti-inflammatory reprogramming  in  homeostasis  and disease. Biomolecules. 2020;10(9):1–28 10.  Maldonado MD, Murillo-Cabezas F, Calvo  JR,  Lardone  PJ,  Tan  DX, Guerrero  JM,  et  al.  Melatonin  as pharmacologic  support  in  burn patients:  A  proposed  solution  to thermal injury–related lymphocytopenia and oxidative damage.  Crit  Care  Med  [Internet]. 2007  [cited  2021  Dec  4];35(4). Available from: https://journals.lww.com/ccmjourna l/Fulltext/2007/04000/Melatonin_as _pharmacologic_support_in_burn.2 5.aspx
11.  Kurniawan MF, Utami SB,  Fulyani F,  Kresnoadi  E,  Wicaksono  SA.
Melatonin prevented the elevation of leukocyte count and the decreased of hematocrit  levels  in  burn-induced wistar rats. Bali Med J.
2021;10(2):668–72
12.  Guardiola-Lemaitre  B.  Toxicology of  Melatonin.  J  Biol  Rhythms.
1997;12(6):697–706
13.  Jeschke  MG,  van  Baar  ME, Choudhry  MA,  Chung  KK,  Gibran NS,  Logsetty  S.  Burn  injury.  Nat Rev Dis Prim. 2020;6(1)
14. Kurdi  MS,  Patel  T.  The  role  of melatonin    in    anesthesia    and critical    care.    Indian    J    Anaesth. 2013;57(2):137-44
15.  Pandi-Perumal       SR,       Srinivasan V,         Maestroni    GJ,    Cardinali DP,   Poeggeler   B,    Hardeland    R. Melatonin:        Nature’s        most versatile  biological  signal?  FEBS J.  2006;273(13):2813-38
16.  Rusanova  I,  Mart  L,  Florido  J.
Protective E ff ects of Melatonin on the Skin : Future Perspectives. 2019;

## Jurnal Anestesiologi Indonesia
17.  Sierawska O, Małkowska P, Taskin C,  Hrynkiewicz  R,  Mertowska  P,
Grywalska  E,  et  al.  Innate  Immune System Response to Burn Damage—Focus on Cytokine Alteration. Int J Mol Sci. 2022;23(2) 18.  Gitto  E,  Karbownik  M,  Reiter  RJ,
Xian Tan D, Cuzzocrea S, Chiurazzi
P,  et  al.  Effects  of  melatonin treatment  in septic newborns. Pediatr Res. 2001;50(6):756–60 19.  Shareef  RH,  Zwain  ZD,  Mahbuba WA.  Superiority  of  lymphocyte ratio  over  total  leukocyte  count  in detecting the severity of COVID- 19 pneumonia. Heliyon. 2021;7(11):e08412 20. Espino J, Pariente JA and Rodríguez AB  (2012).  Oxidative  Stress  and Immunosenescence: Therapeutic
Effects  of  Melatonin.  Oxidative Medicine  and  Cellular  Longevity, 20