## Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Ungu

## (Graptophyllum pictum (L) Griff) terhadap Pertumbuhan Streptococcus sanguinis
Antibacterial Activity Test of Purple Leaf Ethanol Extract (Graptophyllum pictum (L) Griff) against the Growth of Streptococcus sanguinis
Nafila Syahrani, Atik Kurniawati, Ayu Mashartini Prihanti, Erna Sulistyani, Pujiana Endah Lestari Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember
Jl. Kalimantan No. 37 Jember e-mail: atik.fkg@unej.ac.id

## Abstract
Streptococcus sanguinis has strong adhesion with salivary pellicles which causes other oral bacteria to attach more  and  has  contribution  in  causing  caries  and  periodontal  disease.  S. sanguinis  mediated  the adhesion of S. mutans to dental pellicle receptors so inhibiting the interaction between S. sanguinis and S. mutans would prevent the risk of dental caries. Purple leaf (Graptophyllum pictum) is one of the medicinal plants or natural ingredients that are useful as antibacterials. The purpose of this study was to examine antibacterial activity of purple leaf extract against S. sanguinis. This experimental laboratory study with a pre-posttest control group design was conducted by dilution method on treatment groups, purple leaf extract with  concentrations  of  25%,  12.5%,  6.25%  and  3.12%.  Visual  and  spectrophotometer  examination  was observed  before  and  after  incubation.The  result  showed  that  purple  leaf  extract  with  concentrations  of 6.25% and 3.12% and control + groups had not turbidity and decreased absorbance value. Furthermore, the One Way Anova parametric statistical test and also Post-Hoc Least Significant Difference showed that there were significant differences between the study groups. The purple leaf extract (Graptophyllum pictum L. Griff) had antibacterial activity against S. sanguinis. The antibacterial test for extracts that are dark in color can be continued using the TVC (Total Viable Count) method to provide a quantitative estimate of the concentration of bacterial cells in the sample in units of CFU/ml.
Keywords: dilution method, purple leaves, S. sanguinis

## Abstrak
Streptococcus sanguinis memiliki daya adhesin yang kuat dengan pelikel saliva yang menyebabkan bakteri rongga mulut lain dapat menempel lebih banyak serta memiliki kontribusi dalam menyebabkan karies dan penyakit periodontal. Bakteri S. sanguinis membantu adhesi S. mutans pada reseptor pelikel gigi sehingga hambatan  interaksi  antara S.  sanguinis dan S.  mutans akan  mencegah  resiko  karies  gigi.  Daun  ungu ( Graptophyllum pictum ) merupakan salah satu tanaman obat atau bahan alam yang bermanfaat sebagai antibakteri. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengkaji aktivitas antibakteri ekstrak daun ungu terhadap S. sanguinis .  Penelitian  eksperimental  laboratoris  dengan  rancangan  penelitian  pre-posttest  control  group design  ini  dilakukan  dengan  metode  dilusi  pada  kelompok  perlakuan  yaitu  ekstrak  daun  ungu  dengan konsentrasi  25%,  12.5%,  6.25%  dan  3.12%.  Dilakukan  pengamatan  secara  visual  dan  pemeriksaan spektrofotometer sebelum dan sesudah diinkubasi. Hasil penelitian menunjukkan pada kelompok ekstrak daun  ungu  konsentrasi  6,25%;  3,12%  dan  Kontrol  +  tidak  terdapat  kekeruhan  dan  nilai  absorbansi menurun. Hasil uji One Way Anova dan juga Post-Hoc Least Significant Difference menunjukkan terdapat perbedaan yang bermakna antar kelompok penelitian. Ekstrak daun ungu (Graptophyllum pictum L. Griff) mempunyai daya antibakteri terhadap S. sanguis . Uji antibakteri untuk ekstrak yang berwarna gelap dapat dilanjutkan dengan menggunakan metode TVC ( Total Viable Count ) untuk memberikan estimasi kuantitatif dari konsentrasi sel bakteri dalam sampel dengan satuan CFU/ml.
Kata kunci: daun ungu, metode dilusi S. sanguinis

## Pendahuluan
Streptococcus  sanguinis merupakan  bakteri jenis  gram  positif  yang  bersifat  anaerob  fakultatif dan termasuk dalam kelompok oral streptococci [1]. Bakteri S. sanguinis memfasilitasi bakteri lain untuk berkoloni  karena  bakteri  ini  mampu  menginisiasi adhesi  dari  bakteri-bakteri  rongga  mulut  lainnya seperti Streptococcus  mutans,  Streptococcus gordonii,  Actinomyces  naeslundii,  Haemophilus parainfluenzae,  Prevotella  loescheii .  Hal  ini dikarenakan S.  sanguinis memiliki  reseptor  untuk adhesin dari bakteri pengkloni selanjutnya [2].
Interaksi  dari  bakteri-bakteri  tersebut  pada permukaan  gigi  akan  menyebabkan  terbentuknya plak  gigi.  Bakteri  ini  juga  dapat  memicu  zat-zat nutrisi  dan  memfasilitasi  lingkungan  baru  untuk bakteri  gram  negatif rongga  mulut sehingga  dapat menyebabkan  ketidak  seimbangan  sistem  imun pada rongga mulut [3]. Bakteri S. sanguinis sudah lama  diyakini  sebagai  bakteri  utama  pengkloni bakteri lain pada rongga mulut manusia dan dapat berikatan  kuat  secara  langsung  dengan  pelikel saliva yang menyebabkan perlekatan mikroorganisme  rongga  mulut  lain,  terbentuknya plak  gigi,  serta  berkontribusi  dalam  menyebabkan karies  serta  penyakit  periodontal  contohnya  yang paling  sering  ditemui  adalah  gingivitis  dan periodontitis[4].  Pada  beberapa  penelitian  didapati bahwa  bakteri S.  mutans merupakan  bakteri  yang paling  banyak  ditemui  pada  plak  gigi  dikarenakan bakteri  ini  dapat  hidup  pada  lingkungan  yang bersifat asam [5].
Hasil penelitian menyebutkan bahwa adhesi S. mutans pada  reseptor  pelikel  gigi  terjadi  karena adanya  bakteri S.  sanguinis [2].  Selain  karies, bakteri S.  sanguinis ini  juga  berhubungan  dengan penyakit periodontal. Penyakit periodontal diketahui berawal  dari  penumpukan  plak  dan  juga  kalkulus [6].  Bakteri ini mempunyai agregasi tinggi dengan bakteri lain serta mempunyai peran penting dalam proses maturasi plak pada permukaan gigi, dimana plak  ini  dapat  berkalsifikasi  menjadi  kalkulus  atau biasa  disebut  dengan  karang  gigi  [7].  Kalkulus merupakan suatu faktor iritasi terus menerus yang menyebabkan tahap awal dari penyakit periodontal yang disebut dengan gingivitis dan apabila kalkulus dibiarkan dan tidak segera dibersihkan maka akan berlanjut menjadi periodontitis [6].
Prevalensi penyakit periodontal di Indonesia menduduki urutan kedua setelah karies, yaitu  mencapai  96,58%.  Upaya  untuk  mencegah pertumbuhan  berlebih S.  mutans di  dalam  plak dapat  dilakukan  dengan  menghambat  interaksi yang  terjadi  antara S.  sanguinis dan S.  mutans sehingga  mencegah  risiko  karies  gigi  [2].  Dari
pernyataan  diatas,  disimpulkan  bahwa  perlu adanya  penghambatan  pertumbuhan  bakteri S. sanguinis .
Penggunaan obat kumur yang mengandung  antiseptic  memiliki  efek  antimikroba, namun  obat  kumur  kimia  masih  memiliki keterbatasan yaitu efek samping berupa peningkatan pewarnaan gigi dan sensasi perubahan rasa pada penggunaan jangka panjang, maka  dari  itu  perlu  digunakan  obat  alternatif  yaitu obat herbal salah saatunya daun ungu [8,9]
Daun  ungu  adalah  salah  satu  tanaman yang  mengandung  senyawa  antibakteri  yaitu flavonoid,  alkaloid,  saponin  dan  tanin . Flavonoid mengganggu  fungsi  membrane  sel  dengan  cara denaturasi, yaitu perubahan bentuk normal protein akibat  terputusnya  ikatan  hydrogen  [10]. Alkaloid menghambat  pertumbuhan  bakteri  dengan  cara mengganggu komponen pada penyusun peptidoglikan  sel  bakteri  [11]. Lalu  untuk  tanin sendiri  menghambat  pertumbuhan  bakteri  melalui interaksi ikatan hidrofobik dimana ikatan hidrofobik ini  akan  menyebabkan  denaturasi  dan  membuat metabolisme  sel  terganggu  [10]. Kandungan senyawa  antibakteri  ini  diharapkan  mampu menghambat aktivitas dari S. sanguinis. Berdasarkan uraian yang telah disebutkan, penulis ingin  mengetahui  apakah  esktrak  daun  ungu memiliki  aktivitas  terhadap  pertumbuhan S. sanguinis.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan pre-posttest control  group  design dengan  sampel  yang  dibagi menjadi  4  kelompok  perlakuan  dan  2  kontrol pertumbuhan yang masing-masing diberi suspense bakteri.  Setiap  perlakuan  dilakukan  4  kali pengulangan maka total sampel pada penelitian ini adalah 24 sampel. Ekstrak daun ungu diambil dari daun  ungu  segar  yang  tidak  terkena  hama.  Daun ungu sebesar 700gr dicuci terlebih dahulu dengan air  bersih  kemudian  ditiriskan.  Setelah  itu  daun ungu  dipotong  kecil-kecil  dan  diangin-anginkan hingga  bebrapa  hari  sampai  kering.  Pastikan  juga daun ungu tidak terkena matahari secara langsung. Setelah  itu  daun  ungu  kering  dihaluskan  dengan blender dan diayak sampai diperoleh serbuk halus (simplisia) sebanyak 200 gram.
Simplisia  inii  direndam  dengan  etanol  96% dengan  perbandingan  1:7,5  kali  yaitu  sebanyak 1500  ml  dan  ditaruh  dalam  wadah  toples  kaca selama kurang lebih 3 hari. Pengadukan rendaman simplisia ini dilakukan 2 kali yaitu pada pagi hari dan sore  hari.  Setelah  tiga  hari  rendaman  ini  disaring dengan  menggunakan  kertas  saring  lalu  akan
didapatkan hasil saringan yang disebut ekstrak cair. Ekstrak cair ini akan diuapkan sampai terbebas dari pelarut  etanol  dengan  menggunakan  vakum evaporator  selama  45  menit  pada  suhu  45-50 ॰ C sampai ekstrak menjadi kental dengan konsentrasi 100%.
Pembuatan  media Brain  Heart  Infusion  Broth atau  BHIB  diawali  dengan  serbuk  BHIB  ditimbang sebesar  7,4gram  dan  dimasukkan  ke  tabung autoklaf lalu ditambahkan aquades steril sebanyak 200  ml.  kemudian  dilakukan  pengadukan  secara perlahan  dan  dilakukan  pemanasan  dalam waterbath pada suhu 90 ॰ C selama 10 menit sampai didapatkan larutan BHIB yang homogen. Setelah itu larutan  BHIB  tadi  disterilkan  dalam  autoklaf  pada suhu 121 ॰ C selama 15 menit.
Dilanjutkan  dengan  pembuatan  suspensi S. sanguinis. Bakteri S. sanguinis dapat diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Matematika dan Ilmu  Pengetahuan  Alam  Universitas  Jember. Setelah  itu  dilakukan  identifikasi  bakteri  di Laboratorium  Bioscience  RSGM  Universitas Jember. S.  sanguinis diambil  sebanyak  1  ose kemudian dimasukkan pada media BHIB sebanyak 5  ml.  Kemudian  dilakukan  inkubasi  menggunakan inkubator pada suhu 37 ॰ C selama 24 jam. Suspensi S.  sanguinis dibuat  dengan  menggunakan  cara dilarutkan  dalam  NaCl  fisiologis  0,45%  dan kekeruhannya  dapat  disesuaikan  berdasarkan larutan  standar  McFarland  no.  0,5  yaitu  1,5  x  10 8 CFU/ml.
Kemudian  pembuatan  ekstrak  daun  ungu dengan  konsentrasi  100%  dilakukan  dengan  cara serial dilution. Enam tabung reaksi steril disiapkan dan  diberi  label.  Tabung  1  diisi  dengan  ekstrak daung  ungu  konsentrasi  100%  sebanyak  10  ml, kemudian tabung ke 2 sampai ke 6 diisi media BHIB sebanyak  5  ml.  Pada  tabung  pertama  dilakukan pengambilan  larutan  uji  ekstrak  daun  ungu sebanyak 5 ml kemudian dimasukkan pada tabung 2,  maka  tabung  2  ini  akan  tercipta  larutan  ekstrak daun ungu 50%. Kemudian pada tabung 2 diambil juga larutan sebanyak 5 ml kemudian dimasukkan pada  tabung  3,  dan  tabung  3  ini  adalah  ekstrak dengan  konsentrasi  25%.  Selanjutnya  tabung  3 diambil  juga  sebanyak  5  ml  dan  dimasukkan  ke dalam  tabung  ke  4  dan  tabung  ke  4  ini  adalah ekstrak daun ungu dengan konsentrasi 12,5%. Hal ini dilakukan seterusnya hingga tabung ke 6. Pada tabung  ke  6  larutan  diambil  sebanyak  5  ml  dan dibuang  sehingga  akan  didapatkan  konsentrasi 100%, 50%, 25%, !2,5%, 6,25%, dan 3,12%.
Konsentrasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah 25% (tabung 3), 12,5% (tabung 4), 6,25% (tabung  5),  dan  3,125%  (tabung  6).    Tabung  3-6 yang berisi larutan ekstrak daun ungu diisi suspensi
bakteri Streptococcus  sanguinis sebanyak  0,1  ml. Untuk  tabung  K+  diisi  5  ml  amoksisilin  dan  BHIB serta  suspensi  bakteri Streptococcus  sanguinis sebanyak  0,1  ml.  Tabung  K-  diisi  5  ml  BHIB  dan suspensi bakteri Streptococcus sanguinis sebanyak 0,1  ml.  Setiap  kelompok  dilakukan  pengulangan sebanyak 4 kali.
Gambar  1. Ilustrasi  pembuatan  ekstrak  daun  ungu dengan  konsentrasi  100%  dilakukan denga cara serial dilution
Setelah  itu  dilakukan  pengamatan  secara visual dengan cara melihat keruh dan bening pada tiap-tiap  konsentrasi.  Pembacaan  dilanjutkan dengan  menggunakan  spektrofotometer  yaitu dengan cara memindahkan beberapa ml larutan ke dalam wadah microplate lalu dimasukkan ke dalam spektrofotometer.  Hasil  yang  didapatkan  nantinya akan berupa angka. Tabung reaksi larutan uji tadi kemudian  diinkubasi  selama  24  jam  dalam  suhu 37 o C.
Metode  uji  antibakteri  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  metode  dilusi  cair  dengan pengamatan  secara  visual  dan  juga  pengukuran hasil  secara  kuantitatif  menggunakan  metode spektrofotometri  dengan  alat  spektrofotometer. Aktivitas  atibakteri  dapat  dilihat  melalui  adanya perubahan  kekeruhan  seacara  visual  dan  juga melalui  nilai  absorbansi  yang  diukur  dengan spektrofotometer.

## Hasil
Hasil  penelitan  kualitatif  (visual)  yaitu mengamati  kekeruhan  yang  ada  pada  larutan  uji sebelum  dan  sesudah  inkubasi  didapati  bahwa pengamatan  sebelum  inkubasi  terlihat  larutan  uji tidak  mengalami  kekeruhan  yang  berarti  bahwa belum  terdapat  pertumbuhan  dari  bakteri  yang dapat dilihat pada Gambar 2 sedangkan pada hasil pengamatan  pada  larutan  uji  sesudah  inkubasi
terdapat  yang  kekeruhan  dan  warna  pada  tiap konsentrasinya dapat dilihat pada Gambar 3.
Gambar  2. Hasil  Pengamatan  Kekeruhan  Sebelum Inkubasi.  K+)  Kelompok  kontrol  positif (Amoksisilin). K -) Kelompok kontrol negatif (BHIB).  A)  Kelompok  ekstrak  daun  ungu konsentrasi  25%.  B)  Kelompok  ekstrak daun  ungu  konsentrasi  12,5%.  C) Kelompok  ekstrak  daun  ungu  konsentrasi 6,25%.  D)  Kelompok  ekstrak  daun  ungu konsentrasi 3,12%
Gambar  3. Hasil  Pengamatan  Kekeruhan  Sesudah Inkubasi . K+)  Kelompok  kontrol  positif (Amoksisilin). K -) Kelompok kontrol negatif larutan  BHIB.  A)  Kelompok  ekstrak  daun ungu  konsentrasi  25%.  B)  Kelompok ekstrak  daun  ungu  konsentrasi  12,5%.  C) Kelompok  ekstrak  daun  ungu  konsentrasi 6,25%.  D)  Kelompok  ekstrak  daun  ungu konsentrasi 3,12%.
Hasil  pengamatan  setelah  diinkubasi  secara visual lebih jelas disajikan pada tabel pengamatan (Tabel  1).  Pengamatan  ditunjukkan  dengan  tanda (+) yang berarti masih terdapat pertumbuhan bakteri S.  sanguinis, kemudian  tanda  (-)  berarti  bahwa pertumbuhan  bakteri  terhambat.  Pada  konsentrasi 25%  dan  12%  larutan  tidak  dapat  diamati  karena warnanya  yang  terlalu  pekat  maka  dari  itu  data dieksklusi  dan  tidak  dianalisis.  Pengamatan  visual dinilai kurang efektif karena hanya membandingkan dengan kelompok kontrol saja dan tergantung pada pengelihatan  masing-masing  pengamat.  Oleh karena  itu  perlu  dilakukan  pengujian  secara
kuantitatif dengan spektrofotometer.
Tabel 1. Hasil  Pengamatan  Setelah  inkubasi Secara Visual. Kelompok Hasil P1 P2 P3 P4 K+ - - - - K- + + + + 6,25% + - - - 3,12% - - - -
Hasil pengamatan secara kuantitatif diakukan dengan  spektrofotometer  yang  bertujuan  untuk menghitung  rata-rata  nilai  absorbansi  masing- masing  kelompok  sebelum  dan  sesudah  inkubasi selama 24 jam. Pada grafik (Gambar 4) dapat dilihat rata-rata  nilai  absorbansi  sebelum  dan  sesudah inkubasi.  Nilai  absorbansi  pada  kelompok  K+, konsentrasi  6,25%  dan  3,12%  menurun  setelah dilakukan inkubasi. Nilai absorbansi pada kelompok K- terlihat meningkat setelah diinkubasi. Konsentrasi 25% dan 12,5% data tidak dianalisis. Tabel 2. Hasil Pengukuran Nilai Absorbansi Kelompok Hasil Rata-rata ∆OD Ket Sebelum Inkubasi Sesudah Inkubasi K+ 0.6985 0.1415 -0.557 Turun K- 0.2595 0.26 0.0005 Naik 6,25% 1.565 0.6845 -0.881 Turun 3,12% 0.86025 0.45775  -0.4025 Turun
Gambar 4. Diagram nilai absorbansi
0 1 2 K + K- 6,25% 3,12% Nilai Absorbansi Sebelum Inkubasi Sesudah Inkubasi
Pada  kelompok  K+,  konsentrasi  6,25%  dan 3,12%  terdapat  penurunan  nilai  absorbansi sesudah  inkubasi  ditunjukkan  dengan  nilai  ∆OD negatif (∆OD ≤ 0). Nilai ∆OD ≤ 0 berarti bahwa tidak ada  pertumbuhan  bakteri  dan  aktivitas  bakteri terhambat. Sedangkan pada kelompok K- terdapat peningkatan nilai absorbansi sesudah inkubasi yaitu nilai  ∆OD  positif  (∆OD  >  0).  Nilai  ∆OD  >  0  ini menunjukkan bahwa terdapat pertumbuhan bakteri dan aktivitas bakteri tidak terhambat atau tidak ada penghambatan.
Data  hasil  penelitian  secara  kuantitatif kemudian  dilakukan  analisis  dengan  analisis statistik.  Analisis  pertama  yaitu  uji  normalitas Saphiro-Wilk dengan nilai signifikansi lebih dari 0,05 (α > 0,05). Hasil dari perhitungan dapat disimpulkan bahwa  data  berdistribusi  normal.  Kemudian dilanjutkan  dengan  analisis  statistik  untuk  uji homogenitas Levene dan didapat bahwa hasil nilai signifikansi  lebih  dari  0,05  (α  >  0,05)  yang  berarti data homogen. Dilanjutkan dengan uji statistik One Way  Anova yang  bertujuan  untuk  mengetahui perbedaan  antar  kelompok  percobaan.  Hasil analisis  statistik  menunjukkan  bahwa  nilai signifikansi  0,000  (α  <  0,05)  yang  berarti  terdapat perbedaan yang signifikan antar kelompok. Terakhir analisis statistik dilanjutkan dengan uji post hoc LSD sebagai  penentu  signifikansi  perbedaan  antar kelompok.  Hasil  uji post  hoc  LSD menunjukkan bahwa  pada  kelompok  yang  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri yaitu kelompok K+, konsentrasi  6,25%  dan  3,12%  memiliki  nilai signifikansi  lebih  dari  0,05  (α  >  0,05)  yang menandakan bahwa kelompok tidak signifikan atau memiliki kemampuan yang sama dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri Streptococcus sanguinis
Tabel 3. Hasil  uji Post  Hoc  LSD kelompok yang mengalami  penurunan  nilai  absorbansi (∆OD ≤ 0) Kelompok K+ 6,25% 3,12% K+ - 0.189 0.727 6,25% 0.189 - 0.103 3,12% 0.727 0.103 - Pembahasan Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental  laboratoris  untuk  mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak daun ungu
( Graptophyllum  pictum  (L.)  Griff )  yang  dilakukan dengan cara maserasi dan pengenceran menggunakan pelarut etanol 96% terhadap bakteri S.  sanguinis. Metode  maserasi  dipilih  karena metode  ini  tidak  membutuhkan  waktu  yang  lama dan tidak memerlukan bahan yang banyak. Etanol digunakan  sebagai  pelarut  karena  bersifat universal,  polar  dan  mudah  didapat.  Etanol  96% dipilih sebagai pelarut karena selektif, tidak toksik, absorbsinya  baik  dan  kemampuan  penyariannya yang tinggi sehingga dapat menyari senyawa yang bersifat  non-polar,  semi  polar  dan  polar.  Pelarut etanol  96%  lebih  mudah  masuk  ke  dalam  dinding sel  sampel  uji  daripada  pelarut  etanol  dengan kosentrasi  lebih  rendah,  sehingga  menghasilkan ekstrak yang pekat [12].
Pengamatan  secara  kualitatif  pada  kelompok K- terlihat adanya kekeruhan yang berarti terdapat aktivitas  bakteri  (pertumbuhan  bakteri  tidak terhambat).  Lalu  setelah  dilakukan  pengamatan kuantitatif  dengan  menggunakan  spektrofotometer didapati bahwa nilai selisih nilai absorbansi (∆OD) dari kelompok K- adalah lebih dari 0 (∆OD > 0). Hal ini menunjukkan bahwa pada kontrol negatif diduga terdapat  aktivitas  atau  pertumbuhan S.  sanguinis . Untuk  pengamatan  kualitatif  kelompok  K+, konsentrasi  6,25%  dan  konsentrasi  3,12%  terlihat tidak terdapat kekeruhan yang berarti bahwa pada kelompok  dan  konsentrasi  tersebut  tidak  ada pertumbuhan  bakteri.  Hal  ini  sebanding  dengan pengamatan  kuantitatif  yang  menunjukkan  bahwa nilai  kelompok  tersebut  memiliki  ∆OD  ≤  0  yaitu kelompok  ini  memiliki  daya  antibakteri  terhadap Streptococcus sanguinis.
Semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  maka aktivitas  bakteri  semakin  berkurang  karena kandungan  senyawa  yang  bersifat  antibakteri dalam  ekstrak  semakin  besar.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  pada  konsentrasi  kecil  yaitu 6,25%  dan  3,12%  nilai  absorbansi  menurun  yang berarti  terjadi  penghambatan  pertumbuhan  bakteri sedangkan  pada  ekstrak  daun  ungu  dengan konsentrasi  besar  yaitu  25%  dan  12,5%  justru terjadi  peningkatan  yang  berarti  bahwa  masih terdapat  aktivitas  bakteri.  Konsentrasi  25%  dan 12,5%  merupakan  konsentrasi  yang  lebih  besar disbanding  dengan  6,25%  dan  3,12%  dimana seharusnya  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri.  Kenaikan  nilai  pada  konsentrasi  25%  dan 12,5% tidak sepenuhnya dikarenakan pertumbuhan bakteri,  namun  dapat  juga  disebabkan  oleh kepekatan  konsentrasi  pada  larutan  dengan konsentrasi  tinggi,  sehingga  nantinya  dapat memengaruhi  penyerapan  cahaya  oleh  sel-sel bakteri  yang  mati  di  dalam  larutan  [13].  Untuk  itu d ibutuhkan  penelitian  lebih  lanjut  dengan  media agar  sebagai  pembanding viable  counts untuk
mengetahui  aktivitas  bakteri  yang  terdapat  pada konsentrasi  tinggi  yaitu  konsentrasi  6,25%  dan 3,12%  apakah  bakteri  didalamnya  hidup  ataukah sudah mati [14].

## Simpulan dan Saran
Ekstrak daun ungu (Graptophyllum pictum L. Griff) mempunyai  daya  antibakteri  terhadap S. sanguis . Namun ekstrak daun ungu (Graptophyllum pictum  L.  Griff) yang  berwarna  gelap  memberikan hasil  yang  kurang  baik  sehingga  sulit  untuk diinterpretasikan.  Oleh  karena  itu  uji  antibakteri untuk ekstrak yang berwarna gelap sebaiknya dapat dilanjutkan  dengan  menggunakan metode  TVC ( Total  Viable  Count )  untuk  memberikan  estimasi kuantitatif dari konsentrasi sel bakteri dalam sampel dengan satuan CFU/ml.

## Daftar Pustaka
[1] Zhu, B., Macleod, L. C., Kitten, T., & Xu, P. Streptococcus  sanguinis  biofilm  formation  & interaction  with  oral  pathogens.  Future microbiology, 2018;13(8):915–932.
[2] Andayani,  R.,  Chismirina,  S.,  Kumalasari,  I. Pengaruh  ekstrak  buah  belimbing  wuluh (Averrhoa bilimbi) terhadap interaksi
Streptococcus sanguinis  dan  Streptococcus mutans  secara  in  vitro.  Cakradonya  Dental Journal, 2014;6(2):727-736.
[3] Lilyawati,  S.  A.,  Fitriani,  N.,  &  Prasetya,  F. Aktivitas  Antimikroba  Ekstrak  Etanol  Biji Pinang Muda (Areca catechu). In Proceeding of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences 2019;10:135-138 [4] Marsh,  P.  D.,  Moter,  A.,  &  Devine,  D.  A.
(Dental plaque biofilms: communities, conflict and
control. Periodontology 2000, 2011;55(1):16-35.
[5] Corby, P. M., Lyons-Weiler, J., Bretz, W. A., Hart,  T.  C.,  Aas,  J.  A.,  Boumenna,  T.,  ...  & Paster, B. J. Microbial risk indicators of early childhood caries. Journal of clinical microbiology, 2005; 43(11):5753-5759.
[6] Artawa,  I.  M.  B.,  &  Swastini,  I.  G.  A.  A. Perbedaan  kondisi  karang  gigi  pada masyarakat  yang  mengkonsumsi  air  sumur dengan bukan air
sumur. Jurnal
Periodontology, 2010;8:1-2. [7] Kemal,  Y.,  Lesang,  R.,  Bachtiar,  B.  M.,  & Makmun, L. H. Analisis Morfoogi Koloni dan Keragaman Genotip Streptococcus sanguinis  yang  Berasal  dari  Plak  Gigi  dan Saliva Penderita Penyakit Jantung Koroner; Dentika: Dental Journal, 2012;17(2):153-156
[8] Kemala, D., Hendiani, I., & Satari, M. H. Uji daya  antibakteri  ekstrak  etanol  kulit  buah manggis  (Garcinia  mangostana  L)  terhadap Streptococcus  sanguinis  ATCC  10556. Padjadjaran  Journal  of  Dental  Researchers and Students, 2018);2(2):137-140.
[9] Aminah,  A.,  Muflihunna,  A., &  Abidin, Z.  Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Etil Asetat Daun Wungu  (Graptophyllum  pictum  (Linn)  Griff) Dengan  Metode  FRAP  (Ferric  Reducing Antioxidant Power). Jurnal Ilmiah As-Syifaa, 2016; 8 (1):39-44.
[10]  Sya’haya,  S.,  &  Iyos,  R.  N.  Pengaruh pemberian ekstrak daun ungu (Graptophylum pictum Griff) terhadap penyembuhan hemoroid.  Jurnal  Majority,  2016; 5 (5):155- 160.
[11] Juliantina,  F.,  Citra,  D.  A.,  Nirwani,  B., Nurmasitoh, T., & Bowo, E. T. Manfaat sirih merah  (Piper  crocatum)  sebagai  agen  anti bakterial  terhadap  bakteri  gram  positif  dan bakteri gram negatif. Jurnal Kedokteran dan Kesehatan Indonesia, 2009;1:12-20.
[12] Wendersteyt,  N.  V.,  Wewengkang,  D.  S.,  & Abdullah, S. S. Uji Aktivitas Antimikroba Dari Ekstrak  Dan  Fraksi  Ascidian  Herdmania momus  Dari  Perairan  Pulau  Bangka Likupang  Terhadap  Pertumbuhan  Mikroba Staphylococcus aureus, Salmonella typhimurium dan Candida albicans. Pharmacon, 2021;10(1):706-712.
[13] Warokka, K. E., & Wuisan, J. Uji konsentrasi hambat  minimum  (KHM)  ekstrak  daun binahong  (Anredera  cordifolia  Steenis) sebagai  antibakteri  terhadap  pertumbuhan Streptococcus mutans. e-GiGi, 2016;4(2).
[14] Domínguez, M. C., de la Rosa, M., & Borobio, M.  V.  Application  of  a  spectrophotometric method  for  the  determination  of  post- antibiotic  effect  and  comparison  with  viable counts  in  agar. Journal  of  Antimicrobial Chemotherapy, 2001;47(4):391-398.