Pharmauho Vol. 5 No. 1, 04/2019, Hal. 13-15
Uji  Larvasida  Ekstrak  Etanol  Pare  ( Momordica charantia L.) Terhadap Larva Nyamuk Aedes spp.
Parawansah 1* , Arimaswati 2 , Risky Sesa Rini 3 , Nuralifah 4
1 Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Halu Oleo, Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu, Kendari 93232
2 Bagian Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Halu Oleo, Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu, Kendari 93232
3 Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu, Kendari 93232
4 Fakultas Farmasi Universitas Halu Oleo, Kampus Hijau Bumi Tridharma Anduonohu, Kendari 93232
E-mail: parawansah_biom@yahoo.acom

## Abstrak
Pencegahan  kejadian  DBD  dengan  penggunaan  temefos  yang  terbuat  dari bahan sintetis  sudah  mengalami  resistensi  di beberapa daerah sehingga diperlukan larvasida yang berasal dari bahan alam yang efektif. Buah pare yang mengandung alkaloid, flavonoid dan saponin dapat dijadikan alternatif sebagai antiparasit. Penelitian ini bertujuan untuk menguji ekstrak etanol buah pare dan granul ekstrak  etanol buah pare ( Momordica  charantia L.) sebagai larvasida terhadap larva nyamuk Aedes spp. Penelitian ini menggunakan studi eksperimental laboratorium dengan desain pre and post test . Pengujian larvasida ekstrak etanol  buah pare dengan konsentrasi 10, 13, 16, dan 19 mg/100 mL. Granul ekstrak  etanol buah pare dibuat dengan dengan massa 100 mg, Temefos 0,02 ppm sebagai kontrol positif,  akuades sebagai control  negatif, serta granul plasebo (non ekstrak). Hasil penelitian  menunjukkan nilai LC 50 dan LT 50 berdasarkan analisis regresi log probit dengan nilai LC 50 pada pengamatan 10,080 menit adalah 48,9 mg/100mL dan LT 50 pada konsentrasi 19 mg/100 mL adalah 144,543,9771 menit. Kematian larva pada pengujian ekstrak etanol buah pare mencapai 29%  pada konsentrasi 16  mg/100  mL  dan mortalitas  dari pengujian    granul  ekstrak  etanol buah pare   adalah  2%.  Ekstrak  etanol  buah pare efektif pada konsentrasi 16 mg/100 mL dan granul ekstrak buah pare tidak efektif sebagai larvisida terhadap Aedes spp.
Kata kunci: Momordica charantia L., Aedes spp., granul,

## 1. Pendahuluan
Demam  dengue  ( Dengue  Fever /DF)  dan  Demam Berdarah  Dengue  atau  DBD  ( Dengue  Haemorrahge Fever /DHF) adalah penyakit infeksi yang disebabkan oleh virus dengue. Penularan virus dengue terjadi melalui vektor nyamuk  genus Aedes (terutama Ae.  Aegypti dan Ae. Albopictus )  [1].  Indonesia  merupakan  negara  endemis DBD dengan sebaran di seluruh wilayah tanah air, dimana pada tahun 2015 tercatat sebanyak  126.675 penderita DBD di 34 provinsi di Indonesia dengan 1.229 orang di antaranya meninggal dunia [2].
Metode  pengendalian  vektor  telah  banyak  diketahui dan  digunakan  dalam  program  pengendalian  DBD  yaitu manajemen lingkungan, pengendalian biologis, pengendalian kimiawi, partisipasi masyarakat, perlindungan  individu  dan  peraturan  perundangan. Pengendalian  secara  kimiawi  dengan  menggunakan insektisida merupakan program yang paling populer, tetapi penggunaan  secara  terus-menerus  dan  lama  akan menimbulkan resistensi vektor [3].
Kondisi  resistensi  terhadap  insektisida  saat  ini mengharuskan  kita  untuk  mencari  alternatif  lain  dalam penyelesaian masalah terhadap vektor DBD. Salah satunya adalah  penggunaan  larvasida  alami  yang  berasal  dari tanaman  yaitu  pare.  Pare  adalah  salah  satu  tanaman  yang memiliki efek larvasida degan  nilai 130 ppm [4]. Senyawa yang  berfungsi  sebagai  larvasida  dalam  buah  pare  adalah
alkaloid,  saponin,  flavonoid,  triterpenoid,  dan  minyak lemak (linoleat) [5].

## 2. Metode

## 2.1 Umum
Penelitian  ini  dilakukan  di  Laboratorium  Terpadu Fakultas  Kedokteran  dan  Laboratorium  Farmasi  Fakultas Farmasi  Universitas  Halu  Oleo.  Buah  pare  diperoleh  dari Desa  Duriaasi,  Kecamatan  Wonggeduku,  Kabupaten Konawe, Provinsi Sulawesi Tenggara. Lokasi penyimpanan  ovitrap  untuk  mendapatkan  telur  nyamuk Aedes spp . berlokasi  di  perumahan  warga  di  Kecamatan Kambu,  Kelurahan  Kambu,  Kota  Kendari,  Sulawesi Tenggara.

## 2.2 Ekstraksi
Buah pare sebanyak 4 kg dipreparasi dan dikeringkan. Sebanyak 335,63 gram buah pare kering yang telah dicacah kasar  dimaserasi  dengan  etanol  96%  selama  3  x  24  jam pada suhu kamar dengan beberapa kali pengadukan. Filtrat yang  didapat  diuapkan dengan rotary  vacuum evaporator pada suhu 45-50 o C [6].
2.3 Penyiapan Larva Uji
Telur  nyamuk Aedes spp. yang  diperoleh  dari pemasangan  ovitrap  di  perumahan  warga  di  kelurahan Kambu,  ditetaskan  dengan meletakkan kertas saring  yang berisi  telur  ke  dalam  nampan  plastik  yang  berisi  air setinggi 3 / 4 nampan  plastik. Setelah telur menetas  menjadi larva, maka larva dipindahkan ke  nampan plastic lain yang telah diisi air setinggi 3 / 4 nampan plastik dan diberi makan hati  ayam  pada  setiap  nampan  plastik.  Setiap  2  hari,  air diganti dengan yang baru [7].

## 2.4 Uji Aktivitas Larvasida Ekstrak
Pengujian  ekstrak  etanol  buah  pare  ( Momordica charantia L.)  dilakukan  untuk  mencari  nilai  LC 50 dengan menggunakan empat  varian  konsentrasi   yaitu  10  mg/100 mL,    13  mg/100  mL,  16  mg/100mL,  dan  19  mg/100mL. Setiap  konsentrasi  masing-masing  akan  ditimbang  lalu dilarutkan  menggunakan  DMSO  10%,  Sampel  kemudian dilarutkan  ke  dalam  akuades.  Setiap  kontainer  kemudian diisikan  larva Aedes spp . instar  III/IV  sebanyak  25  larva. Pengujian akan dilakukan sebanyak empat kali pengulangan  dan   setiap  perlakuan akan diamati dalam 24 jam sampai 7x24 jam. Analisis data menggunakan analisis regresi log probit untuk menentukan nilai LC 50 dan LT 50.

## 2.5 Pembuatan Granul Ekstrak
Pembuatan  granul  pada  penelitian  ini  menggunakan metode granulasi kering. Granul dibuat dengan menggunakan ekstrak etanol buah pare menggunakan nilai LC 50 .  Bahan  pengisi  yang  digunakan  untuk  membentuk massa granul adalah laktosa, bahan pengikat massa granul adalah  PVP  ( Polivinilpirolidon ).  Bahan  yang  diperlukan ditimbang  sesuai  dengan  yang  diperlukan  dan  dicampur sampai homogeny. Setelah semua  bahan berubah menjadi granul, lalu dikeringkan menggunakan oven pada suhu 40- 50 0 C.  Setelah  granul  tersebut  kering,  granul  kemudian kembali diayak menggunakan ayakan [8], sedangkan untuk pembuatan granul placebo menggunakan metode granulasi basah.

## 2.6 Uji Aktivitas Granul Ekstrak
Sebanyak  100  mL  akuades  serta  larva  nyamuk  yang sudah  mencapai  instar  III/IV  dimasukkan  ke  dalam  tiga kontainer yang berbeda. Jumlah larva yang dimasukkan ke dalam tiap-tiap kontainer adalah 25 larva. Tujuh kontainer ini  terdiri  dari  3  kelompok  perlakuan  yaitu  kelompok granul  uji,  kelompok  kontrol  negatif,  dan  kelompok placebo .  Massa  awal  granul  yang  akan  diujikan  dalam kontainer uji adalah 100 mg untuk 100 mL air.

## 2.7 Analisis Data
Data  aktivitas  tersebut  dianalisis  dan  dihitung  nilai LC 50 dan  LT 50 menggunakan  persamaan  regresi  linier dengan sumbu x adalah konsentrasi larutan uji, sedangkan sumbu y adalah persentase kematian larva.

## 3. Hasil dan Pembahasan
Sampel  setelah  dimaserasi  menghasilkan  ekstrak sebesar  55,61  gram  dengan  rendemen  16,57%,  dan  telur nyamuk yang diperoleh dari pemasangan ovitrap sebanyak ± 2100. Persentase kematian larva pada pengujian ekstrak etanol buah pare terlihat pada Gambar 1.
(a) (b)
Gambar 1. (a) Persentase kematian larva pada pengujian ekstrak etanol buah pare; (b) Persamaan garis untuk nilai LC 50 dan LT 50
Berdasarkan  Gambar  1,  persentase  kematian  larva Aedes spp.  setelah  pengamatan  7x24  jam,  konsentrasi terkecil  yang  menimbulkan  efek    larvasida    adalah  10 mg/100  mL  dengan  persentase  mortalitas  sebesar  3%. Konsentrasi dengan  nilai  mortalitas  sebesar  29% adalah 16  mg/100mL.  Sedangkan  konsentrasi  13  mg/100mL memiliki persentase mortalitas sebesar 0% dan konsentrasi 19 mg/100mL memiliki persentase mortalitas sebesar 3%. Mortalitas pada kontrol positif  adalah 100% dan mortalitas pada kontrol negatif adalah 0%. Persentase kematian pada konsentrasi  tertinggi  yaitu  19  mg/100  mL  sama  dengan konsentrasi  10  mg/100  mL  yaitu  3%.  Hal  tersebut  dapat dipengaruhi  oleh  kejenuhan  kelarutan  bahan  pada  suatu pelarut, sehingga menurunkan efek bahan tersebut terhadap target [9].
Berdasarkan  kurva  yang  diperoleh  pada  Gambar  1b, Nilai  LC 50 pada  menit  ke-10.080 adalah 48,9  mg/100mL. Nilai  LT 50 yang  diperoleh  adalah  144.543,9771  menit. Nilai  LC 50 yang  diperoleh  digunakan  sebagai  massa senyawa  aktif  pada  pembuatan  granul.  Hasil  pengujian larvasida  granul  ekstrak  setelah  pengamatan  2x24  jam persentase  kematian  larva Aedes spp setelah  pemberian granul  sebesar  2%.  Kontrol  positif  yaitu  menggunakan larutan  Abate ® yang  mengandung  temefos  0,02  ppm memiliki  persentase  kematian  larva Aedes spp sebesar 100%.  Kontrol  negatif  sendiri  menunjukkan  persentase kematian larva sebesar 0%.
Perbedaan  tingkat  toksisitas  pada  setiap  ekstrak bergantung  pada  kandungan  insektisida  setiap  ekstrak, tingkat kelarutan pada berbagai macam pelarut yang sangat
bervariasi  pada  setiap  tanaman,  bagian  tanaman,  usia bagian  tanaman  yang  akan  diekstrak,  pelarut  untuk ekstraksi,  variasi  musim,  dan  spesies  serangga  yang dijadikan  target  [10].  Efektifitas  bahan  dipengaruhi  oleh kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  kemudian akan  memberikan  efek  mortalitas  terhadap  larva  uji. Kandungan metabolit sekunder dipengaruhi oleh formulasi/komposisi  media  kultur,  fakto  fisik  (suhu, cahaya,  kelembaban  dan  sebagainya),  faktor  genetik (genotip  sel),  faktor  stress  lingkungan  (logam  berat, elicitor, sinar UV) [11].
Ekstrak  etanol  buah  pare  tidak  dapat  larut  secara keseluruhan dan masih terdapat sampel yang menggumpal. Sampel ekstrak uji dilarutkan terlebih dahulu menggunakan DMSO  10%.  Kondisi  tersebut  mempengaruhi  kelarutan senyawa dari ekstrak etanol buah pare yang memiliki efek sebagai  larvasida,  sehingga  belum  bisa  memberikan  efek yang maksimal terhadap persentase mortalitas larva. Faktor yang mempengaruhi tidak larutnya ekstrak etanol buah pare di dalam pelarut DMSO adalah diduga adanya kandungan senyawa β sitosterol. Senyawa β sitosterol tidak dapat larut dalam  DMSO.  DMSO  tidak  dapat  melarutkan  senyawa  β sitosterol karena senyawa sterol memiliki efek memadatkan  dan  menebalkan  membran  fosfolipid.  Selain itu,  senyawa  sterol  membuat  membran  menjadi  resisten terhadap DMSO. Senyawa β-sitosterol menurunkan jumlah difusi DMSO sehingga tidak dapat  melarutkan [12]. Oleh karena  itu,  dilakukan  uji  kelarutan  untuk  mengetahui pelarut  yang  dapat  melarutkan  granul  dan  ekstrak  etanol buah  pare.  Hasil  pengujian  kelarutan  didapatkan  bahwa ekstrak etanol buah pare mudah larut dalam pelarut aseton dan  granul  ekstrak  etanol  buah  pare  sangat  sukar  larut dalam akuades.
Berdasarkan  kriteria  WHO,  larvasida  dinyatakan efektif  jika  persentase  kematian  larva  uji  adalah  10-95% [16].  Formulasi  granul  ekstrak  etanol  buah  pare  hanya memiliki  persentase  kematian sebesar  2%, sehingga  tidak efektif  sebagai  larvasida,  sedangkan  pada  ekstrak  etanol buah  pare  efektif  sebagai  larvasida  pada  konsentrasi  16 mg/100 mL dengan persentase mortalitas mencapai 29%.

## 4. Kesimpulan
Ekstrak  etanol  buah  pare  ( Momordica  charantia L . ) efektif sebagai larvasida terhadap larva nyamuk Aedes spp. pada konsentrasi 16 mg/100 mL. Formulasi granul ekstrak etanol  buah  pare  tidak  efektif  sebagai  larvasida  terhadap larva nyamuk Aedes spp.

## Ucapan Terima Kasih
Terima kasih kami ucapkan kepada semua pihak yang telah terlibat dalam penelitian yang kami lakukan baik itu pihak  Laboratorium  Farmasi  dan  Laboratorium  Terpadu
Fakultas Kedokteran Universitas Halu Oleo, maupun yang terlibat dalam pengolahan data hasil penelitian.

## Daftar Pustaka
1. Sudoyo AW, Setiyohadi B, Alwi I, Simadibrata M, Setiati S, Buku Ajar Ilmu Penyakit Dalam . Jakarta: Interna Publishing, 2009.
2. Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia. Infodatin Pusat  Data  dan  Informasi  Kementerian  Kesehatan  RI . Jakarta: Kementerian Kesehatan Republik Indonesia, 2016.
3. Sukowati  S. Buletin  Jendela  Epidemiologi  Topik  Utama Demam  Berdarah  Dengue .  Jakarta:  Pusat  Data  dan Surveilans Epidemiologi Kementerian Kesehatan RI, 2010.
4. Astriani  Y,  Widawati  M.  Potensi  Tanaman  Di  Indonesia sebagai  Larvasida  Alami  Untuk Aedes  aegypti . Jurnal Spirakel, 2010, 8(2) :37-46.
5. Subahar  TSS. Sehat  Dengan  Ramuan  Tradisional  Khasiat dan  Manfaat  Pare  Si  Pahit  Pembasmi  Penyakit .  Depok: Agromedia Pustaka, 2004.
6. Sulfa LZ. Uji Efektivitas Antibakteri dan Antifungi Ekstrak Etanol  Buah  Pare  ( Momordica  charantia  L. )  Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli, Staphylococcus aureus, dan Candida albicans . Skripsi . Fakultas Kedokteran Universitas Halu Oleo, 2017.
7. Gama ZP, Yanuwiadi B, Kurniati HT. Strategi Pemberantasan  Nyamuk  Aman  Lingkungan:  Potensi Bacillus thuringiensis Isolat Madura Sebagai Musuh Alami Nyamuk Aedes aegypti . Jurnal  Pembangunan  dan  Alam Lestari, 2010, 1(1) :2087-3522
8. Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan. Pedoman  Teknologi Formulasi  Sediaan  Berbasis  Ekstrak  Volume  2 .  Jakarta: Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan  Republik  Indonesia, 2013.
9. Willybrordus  YPAP,  Rini  H.  Review:  Teknik  Peningkatan Kelarutan  Obat. Jurnal  Farmaka  Suplemen, 2017, 14(2) : 288-297
10. Gandung P, Aulung A, Mila C. Uji efektivitas ekstrak buah pare  ( Momordica  charantia )  pada  mortalitas  larva Aedes Aegypti . Jurnal Profesi Medika, 2016, 10(1) :46-53
11. Mariska I. Metabolit Sekunder:  Jalur pembentukan dan kegunaannya. http://biogen.litbang.deptan. go.id/index.php/ 2013/08/metabolit-sekunder-jalur-pembentukan-dan- kegunaannya , diakses 3 Maret  2018
12. Hughes ZE, Mancera RL. Molecular dynamics simulations of mixed DOPC- β sitosterol bilayers and their interactions with  DMSO. http://pubs.rsc.org/content/articlelanding/ 2013/ , diakses 1 Februari 2018.
13. Rochmat  A,  Napitasari  M,  Karina  AM.  Efikasi  Granul Biolarvasida Nyamuk Aedes aegypti dari Ekstrak Etil Asetat Daun Beluntas. Jurnal Penelitian Saintek, 2017, 22(1) :15-24 14. Brown TL, Lemay Jr. HE, Bruce E. Chemistry: The Central Science . Australia: Pearson Australia, 2014.
15. Wei  D, Wang  L, Liu  C, Wang B. β-Sitosterol  Solubility  in Selected  Organic  Solvent. Journal  of  Chemical  and Engineering Data, 2010 , 55(8) :2917-19.
16. World Health Organization. Guidelines For Laboratory And Field  Testing  of Mosquito Larvicides .  Geneva: Department of  Communicable  Disease  Control,  Prevention,  and Eradication, 2010.
© 2019 by the authors; This article is an open access article distributed under the terms and conditions of the Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/ licenses/by/4.0/)