Hasil Penelitian                                                        Jurnal. Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XIII, No. 2 Th. 2002

## AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAN FRAKSI EKSTRAK BIJI ATUNG
( Parinarium glaberrimum Hassk.) 1)
[Antioxidant Activities of Parinarium glaberrimum Hassk Extracts and their Fractions]
Dewi Sarastani 2) , Soewarno T. Soekarto 3) , Tien R. Muchtadi 3) , Dedi Fardiaz 3) , dan Anton Apriyantono 3)
1) Makalah dipresentasikan pada Seminar Nasional  PATPI, Semarang  9-10 Oktober 2001
2) Alumni IPN – IPB, Staf Pengajar FT-UIKA, Bogor
3) Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi, Fateta-IPB

## ABSTRACT
The seed of Parinarium glaberrimum Hassk was extracted with non polar solvent (hexane) and or polar solvent (ethanol).  Antioxidative activity of extracts was measured by rates of carotene bleaching in the coupled oxidation of linoleic acid and  -carotene.  Ethanolic-Hexanoic Extract  (EHE)  of  the  seed  was  found  to  possess  the  highest  antioxidative  activity.  Furthermore,  EHE  was  fractionated  by  silica  column chromatography and eight major fractions were isolated  according to UV absorption.  Antioxidative activity of these fractions was evaluated in a  -carotene-linoleate system.  Fractions III , I , and II showed the major activity, but fractions I and II have the best value of relative capacity, so they were chosen for further identification.
Key words: Seed of Parinarium glaberrimum Hassk, extract, fraction,  and antioxidant activity

## PENDAHULUAN
Oksidasi  lipida  (minyak  dan  lemak)  merupakan penyebab  terbesar  kerusakan  mutu  makanan.  Terjadinya oksidasi lipida dapat mengawali perubahan-perubahan lain dalam  makanan  yang  berdampak  pada  mutu  nutrisi, keamanan, warna, flavor dan tekstur makanan (Shahidi dan Naczk, 1995).
Salah satu cara efektif untuk mencegah kerusakan oksidatif  tersebut  adalah  penggunaan  antioksidan. Antioksidan  merupakan  senyawa  prinsipal  yang  dapat menghambat  terjadinya  kerusakan  oksidatif  lipida,  namun tidak  dapat  memperbaiki  produk  makanan  yang  telah teroksidasi.
Ada  beberapa  macam  antioksidan  yang  diijinkan untuk  makanan,  baik  dari  jenis  antioksidan  sintetis  (Butil Hidroksi  Anisol/BHA,  Butil  Hidroksi  Toluen/BHT)  maupun antioksidan  alami  (ekstrak  daun  Rosemary).    Antioksidan sintetis  yang  diproduksi  secara  reaksi  kimia  dianggap kurang  aman,  maka  konsumen  cenderung  mencari antioksidan  alami  yang  dipandang  lebih  aman  karena diperoleh dari ekstrak bahan alami.
Semakin  meningkatnya  permintaan  antioksidan alami, mendorong banyak peneliti untuk terus menggali dan mencari  lebih  jauh  bahan  pangan  yang  dapat  menjadi sumber antioksidan alami. Ada banyak bahan pangan yang dapat menjadi sumber antioksidan alami, misalnya rempah- rempah,  teh,  coklat,  dedaunan,  biji-bijian  serealia,  sayur- sayuran,  enzim  dan  protein.  Menurut  Pratt  dan  Hudson (1990),  kebanyakan  sumber  antioksidan  alami  adalah tumbuhan dan umumnya merupakan senyawa fenolik yang
tersebar  di  seluruh  bagian  tumbuhan,  baik  di  kayu,  biji, buah, daun, akar, bunga maupun serbuk sari.
Salah  satu  bahan  pangan  yang  menarik  untuk diteliti  sebagai  salah  satu  sumber  komponen  aktif antioksidan  adalah  biji  buah  Atung  ( Parinarium glaberrimum Hassk.) . Tanaman  Atung  merupakan tumbuhan  hutan  tropis  yang  tumbuh  alami  di  daerah Maluku ke Timur hingga ke daerah Pasifik.
Secara  tradisional,  kegunaan  buah  atung  telah dikenal secara turun temurun dan meluas oleh masyarakat pulau Maluku.  Diantaranya, inti biji atung dicampur dengan cincangan  ikan  mentah  atau  goreng  dan  bumbu  menjadi makanan yang disebut Kohu-kohu .  Olesan biji buah atung juga  dapat  digunakan  untuk  memperpanjang  kesegaran ikan  selama  di  laut.    Selain  itu,  inti  biji  atung  juga  dapat berguna  untuk  mencegah  diare,  pendarahan  ataupun keputihan  pada  wanita  hamil.    Biji  yang  setengah  masak dicampur  air  dan  dibuat  bubur  untuk  dioleskan  pada bangunan  rumah  atau  kapal  sehingga  terbebas  dari serangan bubuk atau cacing (Heyne, 1987).
Moniharapon  (1991)  mengkaji  kegunaan  biji  buah atung,  diperoleh  hasil  bahwa  bubuk  biji  atung  mampu mempertahankan  kesegaran  udang  windu  dari  4  jam menjadi 17 jam.  Soeherman (1997) meneliti kegunaan biji buah atung untuk meningkatkan umur simpan pindang ikan mujair,  dan  diperoleh  hasil  baik  dengan  bubuk  biji  atung maupun ekstrak biji atung dapat menghambat pertumbuhan mikroba  sehingga  mampu  memperpanjang  umur  simpan pindang dari satu hari menjadi empat hari. Selain itu, dapat pula  memperbaiki  tekstur  daging  ikan  menjadi  lebih  padat dan kompak.
Penelitian  selanjutnya  dilakukan  oleh  Saragih (1998),  meneliti  pencegahan  infestasi  lalat  selama pengolahan  ikan  jambal  roti  dengan  preparat  biji  buah atung. Adawiyah (1998) meneliti metode ekstraksi senyawa antimikroba dari biji buah atung. Hasil penelitian Adawiyah diperoleh  bahwa  senyawa  antimikroba  yang  memiliki aktivitas  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak  yang  dihasilkan dari  ekstraksi  serbuk  biji  atung  secara  bertingkat  dengan pelarut  heksana  dan  pelarut  etil  asetat.    Senyawa antimikroba  ini  bersifat  semi  polar  dan  memiliki  aktivitas bakterisidal.  Dari  hasil  penelitian  Adawiyah  (1998) diperoleh  pula  bahwa  ekstrak  biji  atung  hasil  ekstraksi bertahap  dengan  pelarut  heksana,  etil  asetat,  dan  etanol memiliki  total  fenolik  tinggi,    yang  cukup  menarik  untuk diteliti  aktivitas antioksidannya.

## Tujuan Penelitian
Penelitian ini bertujuan mencari komponen aktif dari biji buah atung yang bekerja sebagai antioksidan.

## METODOLOGI

## Bahan dan Alat
Bahan  utama  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  buah  Atung  ( Parinarium  glaberrimum  Hassk )  yang diperoleh  dari  desa  Hutumuri,  kecamatan  Sirimau, kotamadya  Ambon,  propinsi  Maluku.    Bagian  buah  yang digunakan untuk penelitian adalah bagian biji.
Bahan  kimia  meliputi  pelarut  heksana  dan  etanol,
 -karoten  asam linoleat; silikat  gel aktif. Peralatan  yang  digunakan  adalah  serangkaian  alat soxhlet,  alat  refluks,  blender, shaker ,  pompa,  rotavapor, penangas air, homogeniser , serangkaian alat kromatografi kolom    dan  spektrophotometer  UV-160  (SHIMADZU, Jepang).

## Metode 1.  Ekstraksi Komponen Antioksidan
Ekstraksi komponen antioksidan dari serbuk biji atung dilakukan dengan cara:
a.  Ekstraksi Bertingkat : pertama kali serbuk biji buah atung  (30  mesh)  diekstraksi  dengan  pelarut  non polar  heksana  secara  prosedur  Soxhlet  untuk menghilangkan  lemaknya.    Kemudian  residunya diekstraksi  dengan  pelarut  polar  etanol menggunaka Reflux.
b.    Ekstraksi  Tunggal  :    serbuk  biji  buah  atung diekstraksi langsung dengan pelarut polar etanol secara  metode Hammerschmidt dan Pratt (1978) yang di  modifikasi.

## 2.  Fraksinasi Ekstrak Antioksidan
Ekstrak  antioksidan  dari  biji  buah  atung  yang memiliki  aktivitas  antioksidan  tertinggi  difraksinasi  dengan menggunakan Kromatografi Kolom.  Kolom yang digunakan adalah  asam  silika  aktif  (Kiesel  Gel  60  GF  254,  Merck, Germany) yang dipak pada suatu pipa gelas ( 15 x 30 cm). Eluen yang digunakan adalah kombinasi  pelarut non polar heksana  (H)  dan  pelarut  polar  etanol  (E)  dengan perbandingan volume 75%  H/E,  50%  H/E, 25%  H/E, 10% H/E  dan  100%  etanol.    Fraksinasi  dilakukan  dengan mengelusi  1  ml  ekstrak  antioksidan  dengan  kombinasi pelarut  diatas  secara  bertahap  ( gradien  elution ).    Elusi dilakukan  pada  suhu  kamar  dan  untuk  mempercepat  laju elusi  digunakan  dorongan  udara  dari  atas  kolom  dengan bantuan  pompa.    Volume  setiap  kombinasi  pelarut  adalah 150ml  dan  akan  diperoleh  20  fraksi  @  7,5  ml,  sehingga untuk 5 kombinasi pelarut akan diperoleh 100 fraksi.

## 3.   Pengukuran Aktivitas Antioksidan
Aktivitas  antioksidan  dari  ekstrak  biji  buah  atung maupun dari hasil fraksinasi diuji dengan sistem emulsi  - karoten – linoleat dengan modifikasi (Hammerschmidt dan Pratt, 1978; Lee et al.,  1995 ).

## 4. Kapasitas Relatif Aktivitas Fraksi
Kapasitas  relatif  ini  dapat  menjadi  petunjuk kelompok fraksi mana yang memiliki komponen antioksidan paling potensial dalam biji buah atung.
Kapasitas  relatif  kelompok  fraksi  dari  1  ml  ekstrak biji buah atung E-HE dapat dicari dari perhitungan berikut :
keterangan :
Kr  =    Kapasitas relatif A   =   Total perolehan komponen kering dari kelompok fraksi (mg) B  =  Jumlah komponen kering kelompok fraksi yang digunakan untuk uji aktivitas (mg)
Fp = Faktor protektif  = Absorbansi sampel pada pemanasan 30 menit Absorbansi kontrol pada pemanasan 30 menit

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi  Komponen Antioksidan
Proses  dan  hasil  ekstraksi  antioksidan  dari  serbuk biji  buah  atung (30  mesh)  dengan  pelarut  non  polar (heksana)  dan  atau  pelarut  polar  (etanol),  baik  secara ekstraksi  bertingkat  ataupun  tunggal  dapat  dilihat  pada Tabel 1.
Kr  =   A     X    Fp B

## Tabel 1.  Proses dan hasil ekstraksi antioksidan biji buah Atung
Ekstraksi Pelarut Nama ekstrak Karakteristik ekstrak Bertingkat 1. Heksana
2. Etanol Ekstrak Heksana (E-H)
Ekstrak Heksana- Etanol (E-HE) Warna       :  kekuningan Bau           :  khas atung di suhu ruang  (  25  C):  lemak cair di suhu lemari es (-10  C) : kental
Warna :  merah kecoklatan
Bau     :  khas atung di suhu ruang (  25  C):  cair di suhu lemari es (-10  C):  cair Tunggal Etanol Ekstrak Etanol (E-E) Warna :  merah kecoklatan Bau     :  khas atung di suhu ruang  (  25  C):  cair di suhu lemari es (-10  C):  cair Berat ekstrak dibagi dengan berat basah serbuk biji atung  digunakan  untuk  menghitung  rendemen  ekstrak. Kadar bahan kering ekstrak dihitung dengan cara membagi berat komponen kering ekstrak dengan berat atau volume ekstrak  yang  diuapkan  pelarutnya.  Hasil  perhitungan rendemen  dan  kadar  bahan  kering  ketiga  ekstrak  tersaji pada Tabel 2.
Toluen).  Hal  ini  berarti  ketiga  ekstrak  biji  atung  memiliki aktivitas antioksidan lebih tinggi dari aktivitas BHT.
Selain  dengan  penyajian  secara  grafik,  hasil aktivitas  antioksidan  dapat  dinyatakan  pula  dalam  faktor protektif,  yaitu  nilai  perbandingan  antara  nilai  absorbansi sampel pada pemanasan selama 30 menit terhadap nilai
Tabel 2.  Rendemen dan kadar bahan kering dari ekstrak biji Atung Ekstrak Rendemen ekstrak Kadar bahan kering ekstrak %  berat basah % (berat /berat) % (berat /vol.) E-H 21,4 92,6 88,4 E-HE 11,9 13,4 10,1 E-E 33,5 17,1 14,0 Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Ketiga  ekstrak  biji  atung  kemudian  diuji  aktivitas antioksidannya  dengan  sistem  emulsi  -karoten-linoleat. Dasar  pengujian  dengan  sistem  ini  adalah  penurunan intensitas  warna  emulsi  oleh  karena  terdegradasinya  - karoten-linoleat oleh oksidasi dan pemanasan. Pengukuran penurunan intensiatas warna emulsi dilakukan dengan  pembacaan  absorbansi  pada  spektrofotometer pada  470  nm.    Jumlah  antioksidan  yang  digunakan dalam setiap uji adalah 1 mg komponen kering dalam 3 ml emulsi  uji  (333  ppm).    Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  dari ketiga ekstrak dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar  1  memperlihatkan  pola  penurunan  warna emulsi  selama  pemanasan.    Emulsi  yang  mengandung senyawa  antioksidan,  akan  memiliki  kurva  lebih  landai dibanding kontrol.  Dari Gambar 1 terlihat bahwa kurva dari ketiga  ekstrak  biji  atung  lebih  landai  dari  kurva  kontrol ataupun kurva antioksidan sintetik BHT (Butil Hidroksi
absorbansi  kontrol  pada  pemanasan  selama  30  menit (Gambar 2).
Dari  Gambar  2  terlihat  bahwa  ketiga  ekstrak  biji atung memiliki faktor protektif lebih tinggi dari BHT, hal ini berarti  ketiga  ekstrak  memiliki  aktivitas  antioksidan  lebih tinggi  dari  BHT.    Diantara  ketiga  ekstrak  biji  atung,  maka ekstrak  heksana-etanol  (E-HE)  memiliki  aktivitas antioksidan  tertinggi  dengan  tingkat  aktivitas  1,7  kali aktivitas  BHT,  oleh  karena  itu  ekstrak  E-HE  terpilih  untuk dilakukan fraksinasi.

## Fraksinasi Ekstrak Antioksidan
Dari  hasil  fraksinasi  diperoleh  100  macam  fraksi yang masing-masing sebanyak 7,5 ml.   Hasil pengukuran setiap  fraksi  pada    panjang  gelombang  254  nm  dan  280 nm, tersaji pada Gambar 3.
Hasil Penelitian                                                        Jurnal. Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XIII, No. 2 Th. 2002
Gambar  1.  Pola  penurunan  intensitas  warna  emulsi  terhadap  lama  pemanasan  pada  uji  aktivitas  antioksidan  ekstrak  biji atung (333 ppm).
Keterangan : EHE = ekstrak heksana etanol , EH = ekstrak heksana, EE = ekstrak etanol, BHT = butil hidroksitoluen
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 Lama pemanasan (menit) A b so rb an si ( 470 n m ) EHE EH EE BHT Kontrol 4,87 4,2 3,93 2,83 0 1 2 3 4 5 6 EHE EH EE BHT Jenis antioksidan F aktor p ro tekti f (F p )
Hasil Penelitian                                                        Jurnal. Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XIII, No. 2 Th. 2002
Gambar 2. Aktivitas antioksidan ekstrak biji buah Atung (333 ppm) dengan sistem  -karoten-linoleat
Gambar 3.  Hasil fraksinasi ekstrak heksana etanol (E-HE) dibaca dengan  absorbansi pada  254 nm dan  280 nm.
Nomor-nomor  fraksi  yang  termasuk  dalam  satu puncak  pada  Gambar  3  digabung  menjadi  satu  kelompok fraksi.  Dari  100  fraksi  dikelompokkan  menjadi  8  kelompok seperti terlihat pada Tabel 3.
Jumlah total komponen kering kedelapan kelompok fraksi (Tabel 3) adalah 84 mg, sementara total komponen kering dalam I ml ekstrak E-HE  adalah 101 mg, sehingga terdapat  selisih  17  mg.    Selisih  tersebut  dapat  ditemukan pada  17  fraksi  yang  tidak  terkelompokkan  sehingga  tidak dilakukan pengeringan, dan  sisanya masih tertahan dalam kolom silika aktif.

## Aktivitas Antioksidan Fraksi
Kedelapan kelompok fraksi biji atung kemudian diuji aktivitas  antioksidannya  dengan  sistem  emulsi  -karoten- linoleat  pada  konsentrasi  33  ppm.  Hasil  uji  aktivitas antioksidan  dari  kelompok  –  kelompok  fraksi  ini  dapat dilihat pada Gambar 4 dan 5.
Tabel 3. Kelompok fraksi hasil fraksinasi ekstrak biji Atung E-HE
Kelompok fraksi Nomor fraksi Jenis eluen Warna komponen kering Komponen kering (mg) I 2 - 12 75% H/E * Kuning 43 II 13 – 19 75% H/E Kuning 20 III 21 – 40 50% H/E Putih kekuningan 1 IV 49 – 52 25% H/E Putih Kekuningan 3 V 60 – 62 10% H/E Putih Kekuningan 3 VI 63 – 65 10% H/E Putih kotor 1 VII 66  - 80 10% H/E Putih kecoklatan 12 VIII 81-100 100% Etanol
Putih kecoklatan 1 0 0,5 1 1,5 2 2,5 0 10 20 30 40 50 60 70
80 90 100 110 120 Nomor fraksi A b so rb an si l 280 nm l 254 nm
Hasil Penelitian                                                        Jurnal. Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XIII, No. 2 Th. 2002
Gambar 4.    Pola penurunan intensitas warna emulsi dengan lama pemanasan pada uji aktivitas antioksidan kelompok fraksi biji Atung dengan sistem  emulsi  -karoten-linoleat pada konsentrasi 33 ppm.
Dari gambar 4 terlihat bahwa ada 6 kelompok fraksi antioksidan biji atung memiliki kurva lebih landai di banding kurva antioksidan BHT, hal ini berarti ke 6 kelompok fraksi tersebut memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dari
BHT.  Dua  kelompok  fraksi  biji  atung  lainnya  memiliki aktivitas  antioksidan  dibawah  BHT.  Tingkat  aktivitas antioksidan dari kedelapan kelompok  fraksi dibanding BHT akan lebih jelas terlihat pada  Gambar 5.
Gambar 5. Aktivitas antioksidan kelompok fraksi biji atung dengan sistem emulsi  -karoten-linoelat pada konsentrasi  33 ppm.
3,06 2,35 5,56 1,73 1,41 1,1 1,8 0,66 1,24 0 1 2 3 4 5 6 I II III IV V VI VII VIII BHT Fraksi antioksidan F aktor p ro tekti f (F p ) 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 Lama pemanasan (menit) A b so rb an si ( 470 n m ) III (Fr 21-40) I (Fr 2-12) II (Fr 13-19) VII (Fr 66-80) IV (Fr 49-52) V (Fr 60-62) BHT Kontrol VI (Fr 63-65) VIII (Fr 81-100)
Gambar  5  memperlihatkan  kelompok  fraksi  III memiliki  aktivitas  antioksidan  paling  tinggi,  bahkan  jauh lebih tinggi dari aktivitas pembanding BHT.  Faktor protektif kelompok  fraksi  III  (Fr  21-40)  sebesar  5,56,  sedangkan faktor  protektif  BHT  sebesar  1,24,  hal  ini  berarti  aktivitas antioksidan dari kelompok fraksi III hampir 4,5 kali aktivitas antioksidan BHT.
Dari  hasil  uji  aktivitas  antioksidan  kelompok  fraksi seperti  tersaji  pada  Gambar  4  dan  5,  maka  8  kelompok fraksi  tersebut  dapat  dikelompokkan  dalam  4  golongan antioksidan  yaitu  sangat  kuat,  kuat,  sedang,  dan  lemah seperti tersaji pada Tabel 4.  Untuk  menentukan kelompok fraksi terpilih diantara kedelapan kelompok fraksi biji buah atung, diperlukan satu kriteria lain yaitu kapasitas relatif.
Dari  Tabel  4  terlihat  bahwa  kelompok  fraksi  III meski memiliki faktor protektif tertinggi (5,56) tetapi jumlah komponen  kering  per  1  ml  ekstrak  hanya  1  mg,  sehingga kapasitas  relatifnya  tidak  besar  (55,6).    Berbeda  dengan kelompok  fraksi  I,  selain  memiliki  faktor  protektif  terbesar kedua (3,06) juga memiliki jumlah komponen kering per 1 ml ekstrak terbesar, sehingga kapasitas relatifnya memiliki nilai  terbesar    (1315,8).    Kelompok  fraksi  II  memiliki aktivitas  kuat  (2,35)  dan  jumlah  komponen  kering  20  mg, sehingga kapasitas relatifnya adalah 470. Kelompok fraksi I dan II terpilih sebagai kelompok fraksi potensial dalam biji buah atung yang menarik untuk diteliti lebih lanjut.
Pengujian  lebih  lanjut  dari  kelompok  fraksi  I  dan  II adalah  pengujian  spektrum  serapan.  Pengujian  ini dilakukan  dengan  alat  spektrofotometer  pada  panjang gelombang  200  –  800  nm.  Hasil  uji  spektrum  serapan kelompok fraksi antioksidan I dan II disajikan pada Gambar 6.    Dari  Gambar  6  terlihat  bahwa  spektrum  serapan dominan  dari  kelompok  fraksi  I  dan  II  berada  di  daerah sinar ultra violet (200 – 400 nm).  Kelompok fraksi I memiliki 3 puncak, sedangkan kelompok fraksi II memiliki 2 puncak, sebagaimana tersaji pada Tabel 5.
Dari  uji  spektrum  serapan  diperoleh  bahwa kelompok  fraksi  I  memiliki  puncak  serapan  primer  pada panjang  gelombang  213,8  nm  dan  puncak  serapan sekunder  pada  270,6  nm.    Kelompok  fraksi  II  memiliki puncak serapan primer pada panjang gelombang 207,4 nm dan  puncak  serapan  sekunder  pada  270  nm.    Dari  hasil tersebut  diperoleh  petunjuk  bahwa  kedua  fraksi antioksidan, baik kelompok fraksi I maupun II mengandung senyawa  dari  golongan  fenol.    Hal  ini  sebagaimana dinyatakan  oleh  Pavia  et  al.  (1996)  bahwa  senyawa aromatik  golongan  fenol  pada  pengujian  dengan spektroskopi  ultra  violet  -  sinar  tampak,  memiliki  puncak serapan sekunder di panjang gelombang 270 nm.
(A)
(B)
Gambar 6.  Spektrum serapan kelompok fraksi antioksidan I (A) dan II (B) dari   ekstrak biji  buah Atung E- HE.
Tabel 4. Golongan dan kapasitas relatif antioksidan dari kelompok fraksi Kelompok fraksi Faktor protektif Golongan antioksidan Berat komponen kering (mg) Kapasitas relatif antioksidan / 1 ml ekstrak III (fr 21-40) 5,56 sangat kuat 1 mg 55,6 I  (Fr 2-12) II (Fr 13-19) 3,06 2,35 kuat kuat 43 mg 20 mg 1315,8 470 VII (Fr 66-80) IV  (Fr 49-52) V   (Fr 60-62) 1,80 1,73 1,41 sedang sedang sedang 12 mg 3 mg 3 mg 216 51,9 42,3 VI    (Fr 63-65) VIII (Fr81-100) 1,10 0,66 lemah lemah 1 mg 1 mg 11 6,6 BHT 1,24 pembanding ---- ----
Tabel  5.  Hasil  spektrum  serapan  kelompok  fraksi antioksidan I dan II K. Fraksi Puncak Panjang Gelombang (nm) Absorbansi I 1 2 3 213,8 270,6 318,2 2,066 1,192 0,382 II 1 2 207,4 270.0 0,989 0,236

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Ekstrak Heksana (E-H), Ekstrak Heksana-Etanol (E- HE) dan Ekstrak Etanol (E-E). Uji aktivitas antioksidan dari ketiga  ekstrak  dengan  sistem  emulsi  -karoten-linoleat memberi  hasil  bahwa  ketiga  ekstrak  biji  atung  memiliki aktivitas  antioksidan  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan aktivitas  antioksidan  sintetik  Butil  Hidroksi  Toluen  (BHT). Ekstrak E-HE memiliki aktivitas antioksidan 1,7 kali aktivitas BHT, ekstrak E-H memiliki 1,5 kali, dan ekstrak E-E 1,4 kali aktivitas antioksidan BHT.
Uji  aktivitas  antioksidan  dari  kedelapan  kelompok fraksi dengan sistem emulsi  -karoten-linoleat menunjukkan  kelompok  fraksi  III  memiliki  aktivitas antioksidan  tertinggi,  yaitu  4,5  kali  aktivitas  BHT,  tetapi kapasitas  relatif  per  1    ml  ekstrak  kecil  (55,6).  Kelompok fraksi I memiliki aktivitas antioksidan 2,5 kali aktivitas BHT dan  memiliki  kapasitas  relatif  tinggi  (1315,8).  Kelompok fraksi II memiliki aktivitas antioksidan 1,9 kali aktivitas BHT dan kapasitas relatif cukup (470). Tiga kelompok fraksi lagi memiliki  aktivitas  antioksidan  diatas  aktivitas  BHT, sedangkan  dua  kelompok  fraksi  lainnya  memiliki  aktivitas dibawah BHT.
Kelompok  fraksi  I  dan  II  mengandung  senyawa fenol.  Kedua  kelompok  merupakan  kelompok  fraksi  yang bersifat  polar  dimana  tingkat  polaritas  kelompok  fraksi  I kurang polar dibanding kelompok fraksi II.

## Saran
Isolasi  dan  identifikasi  struktur  komponen antioksidan pada kelompok fraksi atung I,II dan III.

## DAFTAR  PUSTAKA
Adawiyah,  D.R.    1998 .    Kajian  Pengembangan  Metode Ekstraksi  Komponen  Antimikroba  Biji  Buah  Atung ( Parinarium  glaberrimum Hassk.).  Tesis  Program Studi  Ilmu  Pangan.    Program  Pascasarjana  IPB, Bogor.
Hammerschmidt,  P.A.  dan  D.E.  Pratt.    1978. Phenolic antioxidants  of  dried  soybeans . J.  Food  Sci.  43: 556-559.
Heyne, K.  1987 .  Tumbuhan Berguna Indonesia.  Jilid II. Badan  Litbang  Kehutanan,  penerjemah.  Koperasi Karyawan Departemen Kehutanan, Jakarta.
Lee, Y., L.R. Howard, dan B. Villalon.  1995. Flavonoids and  antioxidant  activity  of  fresh  pepper  ( Capsicum annuum ) cultivars.  J. Food Sci. 60 : 473-476.
Moniharapon, T.  1991. Kajian Penanganan Udang Windu ( Panaeus  monodon Fab.)  untuk Mempertahankan Kesegaran Udang.  Tesis Program Studi Teknologi Pasca panen.  Program Pascasarjana IPB, Bogor.
Pavia,  D.L.,  G.  M.  Lampman,  G.  S.  Kriz.    1996 . Introduction  to  Spectroscopy.  Ed.  ke-2.    Saunders College Publishers, USA .
Pratt, D. E. dan B.J.F. Hudson. 1990 . Natural antioxidants not  exploited  commercially.    Di  dalam:  B.J.F. Hudson,  editor.    Food  Antioxidants.    Elsevier Applied Science, London .
Saragih, B.S.  1998 .  Aplikasi Pengawetan Ikan Segar dan Olahan  dengan  Preparat  Biji  Buah  Atung ( Parinarium  glaberrimum Hassk.).    Tesis  Program Studi  Teknologi  Pasca  Panen.    Program Pascasarjana IPB, Bogor.
Shahidi,  F.  dan  M.  Naczk.    1995 .    Food  Phenolics. Technomic pub. Co. Inc.  Lancester-Basel.
Soeherman, A.  1997. Kajian Penggunaan Biji Buah Atung ( Parinarium glaberrimum Hassk.)
untuk Meningkatkan  Umur  Simpan  Pindang  Ikan  Mujair . Skripsi  Jurusan  Teknologi  Pangan  dan  Gizi. FATETA IPB,  Bogor.