Jurnal Nukleus Peternakan (Desember 2015), Volume 2, No. 2:117 - 128                             ISSN : 2355-9942

## PENGARUH SARI WORTEL  DENGAN LEVEL YANG BERBEDA PADA PENGENCER SITRAT KUNING TELUR TERHADAP  MOTILITAS, VIABILITAS,  DERAJAT KEASAMAN  SPERMATOZOA BABI LANDRACE
( EFFECT OF JUICE CARROT  WITH DIFFERENT LEVEL IN THE EGG  YOLK  CITRATE DILUTION ON THE MOTILITY, VIABILITY, ACIDITY PIG LANDRACE SPERMATOZOA )
Alextriston Kauki Ndeta, Henderiana L. L. Belli, Kirenius Uly
Fakultas Peternakan, Universitas Nusa Cendana, Jln Adisucipto Penfui, Kupang 85001. Email : Umbualex19@gmail.com

## ABSTRAK
Suatu  penelitian  ini  telah  dilaksanakan  untuk    mengetahui  pengaruh  level  sari  wortel  yang  berbeda, sebagai  sumber  antioksidan  dalam  pengencer  sitrat  kuning  telur  terhadap  motilitas,  viabilitas,  dan  derajat keasaman (pH) spermatozoa  babi peranakan landrace, yang terdiri dari 5 perlakuan dan 4 ulangan tersebut adalah Sebagai berikut; P0 = sitrat 80 % + 20 % kuning telur, P1 =  sitrat kuning telur 99 % + 1.00 % sari wortel, P2 =  sitrat kuning telur 98 %+ 2.00 % sari wortel, P3 = sitrat kuning telur 97 % + 3.00 % sari wortel P4 =  sitrat kuning telur 96 % + 4.00 % sari wortel. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL),  yang    dianalisis  dengan Analysis  of  variance (ANOVA)  dan  dilanjutkan  dengan  uji Duncan menggunakan program SPSS versi 13.0. Hasil penelitian menunjukkan  bahwa motilitas, viabilitas  dan pH spermatozoa  setelah  pengenceran  berbeda  nyata  (P>0,05)  antar  perlakuan.  Untuk  motilitas  dan  viabilitas perlakuan  terbaik  pada  P1.  Perlakuan  ini  mampu  mempertahankan  sampai  jam  pengamatan  ke-28  dengan nilai  motilitas 43,75±2,50%, viabilitas 45,17±5,21%. Pada parameter pH perlakuan terbaik pada P0 dimana sampai jam pengamatan ke-28 pHnya adalah 7,13±0,13. ________________________________________________________________ Kata kunci: sari wotel, sitrat-kuning telur, semen babi, motilitas, viabilitas, dan  pH

## ABSTRACT
A research  was carried out to know the carrot influence cider different, as a  source of antioksidant in citric thinner egg yolks against motility, viability and degrees acidity ( ph ) spermatozoa pigs and landrace, consisting of 5 treatment and 4 the test is as follows; P0 citric = 80 % + 20 % egg yolks, P1= citric egg yolks 99 % + 1.00 % cider carrot, P2= citric egg yolks 98 % + 2.00 % cider carrot, P3= citric egg yolks 97 % + 3.00  %  cider  carrot  P4  =  citric  egg  yolks  96  %  +  4.00  %  cider  carrot.  This  research  using  random  design complete (RDC), who analyzed by Analysis of variance (ANOVA) and followed by test duncan on the SPSS 13.0 version. The result showed that motility, viability and pH spermatozoa after dilution markedly dissimilar (P>0,05) between treatment.To motility viability best and treatment on p1. Treatment is capable of sustaining to observation to 28 hours worth motility 43,75 ±  2,50 %, viability 45,17 ± 5,21 %. On the parameter best ph treatment on P0 where until observation to 28 pH is 7,13 ± 0,13%. __________________________________________________________ Keywords: cider carrot, citrate egg yolk, pigs semen, motility viability,  pH

## PENDAHULUAN
Usaha  peternakan  babi  di  Nusa  Tenggara Timur  masih  merupakan  peternakan  rakyat berskala  kecil  atau  skala  rumah  tangga, sehingga  kurang  menghasilkan  mutu  genetik yang  baik.  Salah  satu  upaya  yang  dapat dilakukan adalah menerapkan teknologi
reproduksi  Inseminasi  Buatan (IB).  Inseminasi
buatan  atau  yang  lebih  dikenal  dengan  kawin suntik merupakan cara pemasukan spermatozoa ke dalam organ reproduksi betina dengan  menggunakan  suatu  alat  tertentu melalui bantuan manusia. Penerapan teknologi IB dapat menggunakan semen segar, semen cair maupun
semen beku. Semen segar harus diinseminasikan  sesegara  mungkin  setelah dikoleksi, sedangkan semen cair dapat disimpan  di  dalam refrigerator suhu  5 o C  dan semen  beku  dapat  disimpan  pada container nitrogen  cair  suhu  -196 o C.    Di  Indonesia semen  beku  babi  belum  diproduksi.  Oleh karena  itu,  semen  cair  merupakan  solusi  bagi penerapan  IB  dalam  upaya  peningkatan populasi  dan  produktivitas  ternak  babi.  Akan tetapi,  pencapaian  tujuan  dari  program  IB tergantung  pada  beberapa  faktor  yaitu  kualitas semen,  dan  keterampilan  inseminator.  Semen segar  tidak  bertahan  lama  dalam  penyimpanan in vitro , bahkan hanya bertahan 3-4 jam (Rizal, 2009).  Paulenz et  al. (2000)  menjelaskan bahwa  pada  saat  temperatur  rendah  atau dibawah 20 ºC, pada membran sel spermatozoa direduksi,  sehingga  sel  mengalami  kerusakan permananen  dan  mengurangi  fungsi  membran sel. Untuk meminimalkan kerusakan sel akibat pengaruh  suhu  dingin,  maka  perlu  dilakukan penambahan  zat  tertentu  ke  dalam  semen (Aurich et al ., 1999).
Pengencer  yang  sering  digunakan  untuk mengencerkan  semen  cair  babi  adalah  sitrat. Sitrat  merupakan  bahan  pengencer  yang mengandung buffer yang  mempunyai  peran sebagai  penyangga  atau  mempertahan  pH selama proses penyimpanan suhu dingin dalam pengencer  kuning  telur  untuk  preservasi  daya tahan hidup dan fertilitas spermatozoa ( Garner dan  Hafez,  2000),  sedangkan  kuning  telur berfungsi  sebagai  pelindung  spermatozoa terhadap cold shock dan sebagai sumber energi bagi  pergerakan  spermatozoa.  Komposisi utama  kuning  telur  adalah  terdiri  dari  air, protein,  lemak,  karbohidrat,  mineral,  vitamin dan  protein,  termasuk  sempurna  karena mengandung  semua  jenis asam  amino  esensial dalam  jumlah  yang  cukup  besar,  selain  itu,
kuning  telur  mengandung  lipoprotein  dari  sel spermatozoa  dan  mencegah cold  shock (Kommisrud et al ,  2002).
Akan  tetapi  adanya  kuning  telur  dapat menyebabkan  ketidakstabilan  pada  membran dan perubahan pada konsentrasi struktur matrik lipid  akibat  terjadi  hidrolisis  lesitin  kuning telur menjadi isolilesitin dan asam lemak yang dikatalis  oleh  enzim  fosfolipase  A  yang disekresi oleh kelenjar bulbouretralis (Hartono, 2008).  Reaksi  peroksida  lipid  dapat  di  dengan penambahan antioksidan, yakni suatu zat yang dapat mengikat senyawa radikal bebas.
Karena itu diperlukan bahan yang mampu mempertahankan  motilitas  dan  daya  tahan hidup  semen  yang  lebih  lama,  mudah diperoleh, cepat dan murah. Wortel merupakan salah  satu  jenis  sayuran  yang  mudah  ditemui dan mengandung zat-zat penting yang dibutuhkan  oleh  sel,  diantaranya  karbohidrat yang  dapat  digunakan  oleh  spermatozoa sebagai    sumber    energi,    vitamin  C  dan  β- karoten    sebagais  enyawa    antioksidan,  dan berbagai mineral Yulnawati (2005). Pemanfaatan    wortel    sebagai    bahan pengencer  telah  dilaporkan  dengan  hasil  yang baik  dalam  prosespreservasi    semen    domba Garut    (Parera et    al .,  2009).  Berdasarkan uraian    di  atas    maka  telah  dilakukan penelitian dengan  judul “Pengaruh Sari Wortel ( Daucus  Corata )  dengan  Level  yang  Berbeda pada  Pengencer  Sitrat  Kuning  Telur  terhadap Motilitas,  Viabilitas  dan  Derajat  Keasaman (pH)  Spermatozoa Babi Peranakan Landrace ” Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  pengaruh  dan  level  terbaik penggunaan  sari  wortel  sebagai  sumber antioksidan dalam pengencer sitrat kuning telur terhadap motilitas, viabilitas dan pH spermatozoa babi Peranakan Landrace .

## METODE PENELITIAN

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  menggunakan  semen  segar yang  ditampung  dari  dua  ekor  babi Landrace berumur ± 3 tahun dengan  kondisi tubuh yang sehat  dan  proposional  serta  alat  reproduksi normal  (testes  simetris)  dan  terlatih  untuk
penampungan  semen,  ditempatkan  dalam kandang  individu  dengan  kebersihan  kandang dan  kesehatan  ternak  terjaga  baik  karena adanya tenaga kerja yang dibiaya khusus untuk mengontrol ternak. Kandang pejantan dibersihkan tiap pagi dan sore hari pada pukul
07.00  dan  15.00  WITA  dilanjutkan  dengan pemberian  pakan,  pembrian  air  minum  secara ad  libitum .  Penampungan  semen  dilakukan  2 kali seminggu pada pagi atau sore hari.
Bahan  pengencer  yang  digunakan  adalah sari  wortel, sitrat,  kuning  telur.  peralatan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  alat koleksi  semen  (tabung  penampung  semen  dan betina buatan/ dammy ); seperangkat alat pembuat pengencer (timbangan elektrik, kertas saring/saringan, corong gelas, batang pengaduk,  gelas  ukur,  glas  elemeyer,  pipet hisap,  karet  hisap,  tissu)  ;  seperangkat  alat evaluasi  semen  (mikroskop  elektrik,  gelas objek,  gelas  penutup,  kertas  pH,  pinset,  tisu, haemocytometer );  alat  penyimpanan  semen ( styrofoam ,  botol  tempat  semen,  es  batu, thermometer pengukur suhu); Alat tempat cuci peralatan  yang  digunakan  (dua  baskom  besar berisi  air  bersih  dan  air  sabun,  dua  baskom kecil  berisi  air  bersih  tempat  cuci  gelas  objek, gelas penutup).

## Persiapan Bahan Pengencer
Pada  penelitian  ini  diawali  dengan persiapan  bahan  pengencer.  Bahan  pengencer yang  digunakan  adalah  sari  wortel,  sitrat  dan kuning  telur.  Persiapan  sari  wortel  adalah wortel dicuci  menggunakan air yang steril dan
bersih  kemudian  di  belah  menjadi  beberapa bagian, blender daging wortel untuk menghasilkan  bubur  ( pulp ),  bubur  wortel tersebut  diperas  menggunakan  kain  kasa  yang bersih  dan  steril  untuk  mendapatkan  sari buahnya  dan  sari  wortel  yang  diperoleh  dan disimpan didalam kulkas dengan suhu 5 o c.
Persiapan  natrium  sitrat,  timbang  natrium sitrat 2,9 gram dengan menggunakan timbangan  analitik  dan  larutkan  dalam  100  ml aquades,    natrium  sitrat  siap  dipakai. Persiapkan  kuning  telur,  bersihkan  telur dengan  alkohol  70%  dan  biarkan  kering  bila kering  pecahkan  kulit    telur  dari  bagian lancipnya,  tuangkan  semua  putih  telur  dan pisahkan  dari  kuningnya.  kuning  telur  yang masih  terbungkus  dengan  selaput  vitelin, pecahkan  selaput  vitelinnya,  masukan  kuning telur  ke  dalam  gelas  ukur  kuning  telur  siap digunakan sesuai dengan kebutuhan.
Pencampuran
bahan pengencer, campurkan  terlebih  dahulu  sitrat  dan  kuning telur  yang  dibutuhkan  kemudian  bahan  yang sudah  dicampur  dikurangi  dengan  sari  wortel yang akan digunakan sebagai pengencer semen kemudian  ditambah  lagi  dengan  sari  wortel sesuai perlakuan, pencampuran bahan pengencer dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Komposisi pengencer pada perlakuan
Perlakuan Sitrat kuning telur (SKT) % Sari buah wortel (SBM) % P0 100 0 P1 99 1,00 P2 98 2,00 P3 97 3,00 P4 96 4,00

## Koleksi Semen
Semen ditampung pada pagi maupun sore hari  dengan  interval  penampungan  dua  kali seminggu. Sebelum penampungan semen, babi jantan  dimandikan  dan  dibersikan  bagian preputium untuk mencegah terjadinya kontaminasi. Penampungan semen
menggunakan metode massage atau pemijatan. Segera  setelah  semen  ditampung  di  bawa  ke Laboratorium  untuk  dilakukan  evaluasi  secara
makroskopis  meliputi  volume,  warna,  bau, konsistensi,  dan  pH  (derajat  keasaman)  dan evaluasi secara mikroskopis meliputi motilitas, viabilitas abnormalitas dan konsentrasi.

## Pengenceran semen
Semen segar yang dapat diproses menjadi semen  cair  harus  memenuhi  syarat  dengan motilitas  ≥70%, konsentrasi ≥200 x10 6 sel/ml,
Ndeta et al : Pengaruh sari wortel  dengan level yang berbeda pada pengencer sitrat kuning telur
viabilitas  ≥80%  dan  abnormalitas  ≤20% diencerkan  dengan  bahan  pengencer  yang sudah disiapkan (Sumardani, 2007 ).

## Penyimpanan dan Evaluasi Semen
Semen  yang  telah  diencerkan  dibagi kedalam  empat  tabung  sesuai  perlakuan  yang diteliti  dan setiap tabung reaksi disimpan pada kotak styrofoam dengan  suhu    15-20 o C.
Evaluasi  kualitas  semen  meliputi  presentase motilitas, viabilitas dan derajat keasaman (pH) spermatozoa  yang  dilakukan  tiap  4  jam    dari waktu  penyimpanan.  Pemeriksaan  dilakukan hingga  motilitas  spermatozoa  mencapai  40% layak IB  dan suhu tempat penyimpanan dijaga agar  konstan  dilihat  setiap  kali  pengamatan semen. Persentasi  motilitas  ditentukan  secara subjektif  dengan  menggunakan  mikroskop pembesaran  40x10  untuk  melihat  spermatozoa yang  bergerak  progresif  pada  sepuluh  lapang pandang  yang  berbeda.  Nilai  yang  diberikan berkisar  antara  0%  (tidak  ada  spermatozoa yang  bergerak  kedepan)  hingga  100%  (semua spermatozoa  bergerak  kedepan).    Persentasi spermatozoa hidup diukur dengan menggunakan  mikroskop  pembesaran  40x10. Untuk  dapat  membedakan  spermatozoa    yang mati  dan  yang  hidup  digunakan  perwarnaan eosin-negrosin  sedangkan  spermatozoa  mati akan  terlihat    berwarna  merah.  Persentase spermatozoa dihitung  ≥200 sel spermatozoa.

## Rancangan Percobaan
Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  yang  terdiri  dari  5 perlakuan  dan  4  ulangan,  setiap  perlakuan menggunakan    sitrat  80%  dan    kuning  telur 20%    kemudian  dikurang  dengan  konsetrasi
sari  wortel    sesuai    level  yang  diteliti  1,00  % 2,00  %,  3,00  %,  4,00  %,    Pada  penelitian    ini ternak  yang  digunakan  2  ekor  babi Landrace jantan.    Adapun  perlakuan  tersebut    adalah Sebagai berikut :
P0  =  sitrat  80  %  +  20  %  kuning telur
P1  =    sitrat  kuning  telur  99  %  + 1.00 % sari wortel
P2  =    sitrat  kuning  telur  98  %+ 2.00 % sari wortel
P3  =  sitrat  kuning  telur  97  %  +
3.00 % sari wortel
P4  =    sitrat  kuning  telur  96  %  +
4.00 %sari wortel

## Variabel Penelitian
a. Motilitas  spermatozoa  (%)  adalah  motilitas spermatozoa  yang  bergerak  progresif  pada suata  lapang  pandang.  Evaluasi  motilitas dilakukan  pasca  pengenceran  dan  pada perlakuan penyimpanan yang diamati setiap empat  (4)  jam  hingga  mencapai  40%  motil progresif.
b. Viabilitas spermatozoa (%) dalam pengamatan  tiap  4  jam,  yaitu  daya  tahan hidup  spermatozoa  dalam  penyimpanan hingga mencapai 40% motilitas progresif.
c. Derajat  Keasam    (pH)  yang  diamati  dalam tiap  4  jam  hingga  mencapai  40%  motilitas progresif.

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan analysis of variance (ANOVA) dan dilanjutkan  dengan  uji Duncan menggunakan software SPSS versi 13.0.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Krakteristik Semen Segar Babi Landrace Pada  umum,  pengamatan  semen  segar yang  dilakukan  secara  makroskopis  maupun mikroskopis  merupakan  pemeriksaan  awal semen yang dijadikan dasar untuk menentukan kelayakan  semen  yang  akan  diproses  lebih
lanjut.  Semen  yang  diperoleh  dari  4  kali penampungan  mempunyai  mutu  yang  cukup baik,  bersifat  voluminous  dengan  motilitas spermatozoa  lebih  dari  60%  dan  konsentrasi spermatozoa  lebih  dari  150x  0 6 sel/ml,  (Tabel 2).
Tabel 2. Nilai Krakteristik Semen Segar Babi Landrace Parameter NilaiRataan ± Standar Deviasi (SD) *) Standar **) Volume (ml) 212,50±47,87 200-250 Warna Putih susu Putih susu Kosistensi Encer Encer pH 7,28 ± 0,15 7,40±0,2 Motilitas (%) 78,75±4,79 ≥60 Viabilitas (%) 84,23±3,90 ≥80 Abnormalitas (%) 14,99 ±3,25 ≤20 Konsentrasi (10 6 sel/ml) 250 ± 29,44 200-300 *) Hasil penelitian; **) Johnson et al .,  (2000)
Secara  umum,  karakteristik  semen  segar yang  dihasilkan  tidak  berbeda  jauh  dengan hasil  penelitian  dari  peneliti  lainnya.  Robert (2006)  menyatakan  volume  semen  babi  tanpa gelatin  berkisar  200-250  ml,  dengan  warna hasil  pengamatan  adalah  putih  susu  dan konsistensi  encer,  serta  dengan  pH  rata-rata 7,28±0,15. Hasil penelitian terhadap pH semen sama dengan  penelitian  Gadea  (2003)  yaitu 7,4±0,2  dan  Sumardani    (2007)  yaitu 7,78±0,44.
Beberapa faktor yang mempengaruhi volume, warna, konsistensi dan pH  semen  adalah  variasi  umur,  tingkat rangsangan, frekuensi ejakulasi, kualitas pakan,  serta  perbedaan  buffer,  fraksi  semen yang  ditampung  praspermatozoa  atau  kaya- spermatozoa, Johnson et al ., (2000).
Motilitas    spermatozoa    pada    penelitian ini  memperoleh  rataan    yaitu  78,75±4,79% dan    masih    berada    pada    kisaran  persentase motilitas    spermatozoa    hasil  penelitian  yaitu 50-80  (Shukla et  al .,1992).  Adapun  faktor- faktor yang mempengaruhi motilitas, konsentrasi  dan  abnormalitas  spermatozoa yakni  genetik,  umur,  cahaya  dan  temperatur,
manajemen
pemeliharaan,
frekuensi penampungan dan pengenceran serta lingkungan (Everett dan Beans 1982).
Rataan  Konsentrasi    spermatozoa    hasil penelitian    mencapai    250±29,44  x10 6 sel/ml dan  berada    pada    kisaran    konsentrasi spermatozoa  hasil    penelitian    Garner  dan Hafez  (2000), yaitu   250-300 x 10 6 sel/ml dan 200-300  x  10 6 sel/ml.  Persentase    abnormal spermatozoa    hasil  penelitian    yaitu    14,99 ±3,25%  dan    berada        dibawah    standar
maksimal abnormalitas  yang  dianjurkan  yaitu 20% (Garner  dan  Hafez,  2000).

## Motilitas spermatozoa
Kesanggupan  spermatozoa  bergerak  aktif menentukan kualitas spermatozoa dalam kaitannya  terhadaptingkat  fertilitas.  Penilaian motolitas digunakan sebagai ukuran kemampuan spermatozoa dalam membuahi sel telur  atau  ovum.  Sifat  morfologi  dan  palo metabolisme  yang  dimiliki  oleh  spermatozoa mampu bergerak maju kedepan dalam lingkungan cair.
Hasil    analisis    statistik    menunjukkan bahwa  dengan  level  sari  wortel  yang  berbeda berpengaruh  nyata  (P<0,05)  antar  perlakuan terhadap  motilitas  spermatozoa  babi  selama penyimpanan    pada    pengamatan    jam    ke-4 sampai pengamatan jam ke-28 (Tabel  3).
Pada Tabel  3  tampak bahwa berdasarkan hasil  uji  statistik  pada  jam  ke-8,  perlakuan  P4 (55,00±0,00%) dan P1 (56,25±2,50%) berbeda nyata,  namun  kedua  perlakuan  tersebut  tidak berbeda nyata dengan perlakuan P0 (56,25±2,50%),  P2  (60,00±4,08%)  dan  P3 (57,50±2,88%).    Pada  jam  pengamatan  ke  12, jam  ke-16  dan  jam  ke-20  perlakuan  P4 (50,00±0,00%, 45,00±0,00%, dan 40,00±0,00%), P3 (51,25±2,50%, 48,75±2,50%  dan  43,74±2,50%),  dan  P0 (51,25±2,50%, 47,50±5,00% dan 42,50±5,00%)  tidak  berbeda  nyata,  namun berbeda nyata dengan perlakuan P1 (58,75±2,50%, 57,50±2,88%, dan 52,50±2,88%) dan P2 (57,50±2,88%, 55,00±0,00% dan 50,00±0,00%). Jam
pengamatan ke-24 perlakuan P0
(10,00±20,00%)  dan  P4  (0%)  tidak  berbeda nyata,  namun  berbeda  nyata  dengan  perlakuan P1  (47,50±2,88%),  P2  (42,50±2,88%)  dan  P3
(30,00±20,00%).  Pada  jam  pengamatan  ke-28
perlakuan  P0,  P3,  dan  P4  dengan  persentase 0%  tidak  berbeda  nyata  namun  berbeda  nyata dengan  perlakuan  P2  (43,75±2,50%)  dan  P3 (20,00±23,00%),  perlakuan  P2  dan  P3  juga berbeda nyata.
Tabel 3. Motilitas Spermatozoa Babi Landrace
Pengamatan (jam) Perlakuan P0 P1 P2 P3 P4 0 72,50±2,88 a 72,50±2,88 a 72,50±2,88 a 72,50±2,88 a 72,50±2,88 a 4 62,50±2,88 ab 66,25±2,50 b 66,25±2,50 b 62,50±2,88 ab 60,00±0,00 a 8 56,25±2,50 ab 61,25±4,78 b 60,00±4,08 ab 57,50±2,88 ab 55,00±0,00 a 12 51,25±2,50 a 58,75±2,50 b 57,50±2,88 b 51,25±2,50 a 50,00±0,00 a 16 47,50±5,00 a 57,50±2,88 b 55,00±0,00 b 48,75±2,50 a 45,00±0,00 a 20 42,50±5,00 a 52,50±2,88 b 50,00±0,00 b 43,75±2,50 a 40,00±0,00 a 24 10,00±20.00 a 47,50±2,88 b 42,50±2,88 b 30,00±20,00 b 0 a 28 0 a 43,75±2,50 c 20,00±23,00 b 0 a 0 a
a,b,c superskrip  dengan  huruf  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama  menujukan  perbedaan  yang  nyata (P<0,05)
Perbedaan  motilitas  pada  semen  babi Landrace yang diencerkan dengan kuning telur dengan level sari wortel yang  berbeda  diduga disebabkan  plasma  semakin  kental. Menurut Kommisrud et  al (2002)  peranan  membran
plasma  adalah  melindungi  organel-organel intraseluler    secara    fisik,    menjaga    keluar masuknya    zat-zat    makanan    serta  menjaga keseimbangan elektrolit intra dan ekstraseluler.
Gambar 1. Grafik Penurunan Motilitas Spermatozoa Babi Landrace
Gambar  1  menunjukan  bahwa  persentasi motilitas  jam  ke-0  pada  perlakuan  P0,  P1,  P2, P3,  dan  P4  memiliki  nilai  yang  sama  yakni 72,50±2,88%.
Penurunan motilitas spermatozoa  dimulai  pada  jam  ke-4  hingga pada  jam  ke-28  yang  diukur  dengan  tingkat motilitas  minimal  layak  IB  40%.  Menurut
Evans  dan  Maxwell  (1987)  Standar  Nasional Indonesia  (SNI),  semen  cair  yang  memenuhi syarat  kualitas  digunakan  dalam  program  IB harus  memiliki  persentase  spermatozoa  motil minimum  40%.  Hasil    penelitian    ini membuktikan  bahwa dengan level sari   wortel 1%  dan  2%  dalam  pengencer    sitrat      kuning
telur  dapat    memperbaiki    komposisi    dan kondisi  fisiologis    pengencer,    sebagaimana terlihat dari  persentase  motilitas  spermatozoa yang  lebih  tinggi  dari  kontrol.  Kondisi  ini terlihat  secara  nyata  pada  waktu  pengamatan jam  ke-12  sampai  dengan  jam  ke-28    setelah pengenceran,  dimana  kedua  perlakuan  mampu mempertahankan persentase motilitas layak  IB hingga  jam  ke-28  untuk    perlakuan  P1  (level sari wortel 1%) dan jam ke-24 untuk pelakuan P2 (level sari wortel 2%).
Hal  ini  disebabkan  oleh  bahan  pengencer pada perlakuan tersebut (P1 dan P2) mengandung  sumber  karbohidrat,  buffer  dan protein  yang  cukup  dan  seimbang  untuk mempertahankan  hidup  spermatozoa  serta  β- karoten  sebagai  senyawa  antioksidan  yang berfungsi  menimimalisir  terjadinya  radikal bebas.  Sari  wortel  yang  ditambahkan  dalam pengencer  sitrat  kuning  telur  juga  berfungsi sebagai  sumber  energi,  vitamin  C,  β-karoten sebagai  senyawa  antioksidan,  dan  berbagai mineral  yang  berperan  sebagai  penangkal radikal  bebas  yang  dapat  disebabkan  oleh kuning telur.
Hasil  penelitian  ini  juga  membuktikan bahwa  dengan level sari   wortel 3%, dan 4% dalam    pengencer    sitrat  kuning    telur  sama dengan  kontrol,  bahkan  perlakuan  P4  (level sari  wortel  4%)  lebih  rendah  dari  kontrol. Dimana  persentase  motilitas  layak  IB  pada ketiga  perlakuan  ini  (P0,  P1,  dan  P3)  hanya mampu  bertahan  hingga  jam  pengamatan  jam ke-20.  Bahkan  penurunan  persentase  motilitas pada  perlakuan  P4  terjadi  secara  drastis,  yaitu
pada  jam  pengamatan  ke-24  tidak  terdapat gerakan  lagi.  Fenomena  ini    terjadi    karena adanya    efek    negatif    akibat  kandungan kalsium  tinggi  yang  terdapat  dalam  larutan sari  wortel    yang    mempengaruhi  kapasitasi spermatozoa.  Menurut    Johnson et  al (2000), konsentrasi  kalsium  ekstraseluler  yang  tinggi di  dalam  medium  dapat  menurunkan  motilitas dan  metabolisme  spermatozoa  dengan  cepat karena  adanya    peningkatan    kadar    ion-ion intraseluler  di    dalam    sel,    sebaliknya rendahnya    ion-ion  intraseluler    dalam    media pengencer    mampu  menstimulir    metabolisme sel.  Perubahan  temperature  dan  tekanan osmotic  juga  dapat  mempengaruhi    struktur komposisi lipid dari membrane sel spermatozoa  sehingga  dapat    menyebabkan penurunan  motilitas  spermatozoa  (Chun-Xia dan Zeng-Ming (2000).

## Viabilitas spermatozoa
Viabilitas  spermatozoa  ditentukan  dengan melihat perbedaan afinitas zat warna dalam sel- sel  spermatozoa  yang  mati  dan  hidup. Spermatozoa  yang  mati  tampak  berwarnah merah  sedangkan  spermatozoa  yang  hidup tampak  bening  transparan  atau  tidak  berwarna (Zhou et  al ,  2004).  Hasil  uji  statistik menunjukkan bahwa terdapat perbedaan viabilitas  spermatozoa  yang  nyata  antar perlakuan  (P<0,05).  Dengan  uji  Duncan diperoleh rata-rata viabilitas spermatozoa pada perlakuan  P1  lebih  tinggi  dari  perlakuan  P0, P2, P3, dan P4.
Tabel 4. viabilitas Spermatozoa Babi Landrace
Pengamatan (jam) Perlakuan P0 P1 P2 P3 P4 0 80,88±0,77 a 80,88±0,77 a 80,88±0,77 a 80,88±0,77 a 80,88±0,77 a 4 70,28±0,60 a 70,50±4,08 a 72,73±4,47 a 66,78±6,23 a 66,34±4,61 a 8 57,29±3,40 a 64,05±3,15 a 61,96±4,32 a 59,44±5,69 a 57,65±4,30 a 12 53,31±2,19 a 62,61±2,49 b 60,56±5,05 b 54,73±5,63 a 52,05±2,41 a 16 50,16±1,95 a 61,23±2,37 c 56,75±5,25 bc 52,17±3,94 ab 49,44±1,00 a 20 44,66±4,25 a 56,52±5,65 c 52,73±6,32 bc 46,51±3,16 ab 40,16±2,05 a 24 11,01±22,03 a 48,38±14,87 b 42,49±6,92 b 23,45±19,08 ab 0 a 28 0 a 45,17±5,21 c 16,02±20,62 b 0 a 0 a
superskrip dengan haruf yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaan yang nyata (P<0,05)
Pada  Tabel  4.  Menunjukan    hasil  uji statistik  viabilitas  spermatozoa.  Pada  jam pengamatan  ke-12  terdapat  perbedaan  yang nyata  antara  perlakuan  P0  (53,31±2,19%),  P3 (54,73±5,63%), dan P4 (52,05±2,41%) dengan perlakuan P1 (62,61±2,49%) dan P2
(60,56±5,05%),  sedangkan    perlakuan  P1  dan P2  tidak  terdapat  perbedaan  yang  nyata.  Pada jam  pengamatan  ke-16  dan  jam  ke-20 perlakuan P0 (50,16±1,95%
dan 44,66±4,25%), P3 (52,17±3,94% dan 46,51±3,16%)  dan  P4  (49,44±1,00%  dan 40,16±2,05%)  tidak  terdapat  perbedaan  nyata namun  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P1 (61,23±2,37%  dan  56,52±5,65%)  dan  P2
(56,75±5,25%  dan  52,73±6,32%),  sedangkan pelakuan  P3  dan  P2  tidak  berbeda  nyata  dan perlakuan P2 dan P1 tidak berbeda nyata. Pada jam pengamatan ke-24 perlakuan P0 (11,01±22,03  %)  dan  P4  (0%)  tidak  berbeda nyata  dengan  perlakuan  P3  (23,45±19,08%) namun  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P1 (48,38±14,87%) dan P2 (42,49±6,92%). Sedangkan  pada  jam  pengamatan  ke  28 perlakuan P0, P3 dan P4 dengan persentase 0% tidak  terdapat  perbedaan  yang  nyata  namun berbeda nyata dengan perlakuan P1 (45,17±5,21%) dan P2 (16,02±20,62%), sedangkan  perlakuan  P1  dan  P2  terdapat perbedaan yang nyata.
Gambar 2. Grafik Penurunan Viabilitas Spermatozoa Babi Landrace
Hasil  uji  statistik  menunjukkan  bahwa dengan level sari wortel 1 % dalam pengencer sitrat      kuning    telur  mampu  mempertahankan persentase  hidup  (viabilitas)  hingga  pada  jam pengamatan  ke-28  dengan  rataan  persentasi 45,17±5,21%.  Demikian  halnya  dengan  level sari wortel 2 % pada sitrat kuning telur mampu mempertahankan viabilitas spermatozoa hingga  pada  jam  pengamatan  ke-24  dengan persentasi  42,49±6,92%.  Hal  ini  kemungkinan disebabkan  karena  karbohidrat  protein  dan bahan-bahan pelidung serta buffer masih cukup seimbang  untuk  mempertahankan  viabilitas spermatozoa,  Shipley  (1999)  menyatakan bahwa pengencer yang ideal memiliki beberapa persyaratan antara lain dapat menyediakan  sumber  energi  (karbohidrat) mengandung bahan-bahan yang dapat melindungi spermatozoa terhadap efek pendinginan  dan  pembekuan,  bersifat buffer yang  berguna  mencegah  perubahan  pH  yang
membunuh  spermatozoa  akibat  terbentuknya asam laktat.
Pada perlakuan P3 (level sari wortel  3%) pada  jam  pengamatan  ke-12  hingga  pada  jam pengamatan  ke-28  cenderung  sama  dengan kontrol  (P0),  namun  perlakuan  P4  (level  sari wortel  4%)  lebih  rendah  dari  kontrol. Penurunan  viabilitas  spermatozoa  juga dapat disebabkan  oleh  stres  oksidatif  yang dialami spermatozoa  selama  penyimpanan pada  suhu dingin.  Hal  ini  sesuai  pendapat  Situmorang (2002),    bahwa    proses    pendinginan mengakibatkan    stres    fisik    dan    kimia    pada membran    sel    yang    dapat    menurunkan viabilitas spermatozoa.
Secara fisiologis terdapat hubungan motilitas  dan  daya  tahan  hidup  spermatozoa. Lebih  lanjut  dijelaskan  bahwa  kerusakan membran akan menyebabkan hilangnya enzim- enzim yang diperlukan dalam proses metabolisme  sehingga  tidak  dihasilkan  energi
dan  pada  akhirnya  motilitas  dan  daya  tahan hidup  menjadi  rendah.  Jika    dibandingkan dengan    persentase  motilitas,    terlihat    bahwa persentase spermatozoa  hidup  yang  diperoleh pada  penelitian    ini  perlakuan  P1  lebih    tinggi pada semua kelompok perlakuan penambahan    sari    wortel  dan  di  ikuti  oleh perlakuan P2, P3 dan P4.  Hal  ini  menunjukan bahwa    banyak  diantara    spermatozoa    yang masih    hidup  namun    tidak    mampu    bergerak (motil)  atau  hanya  bergerak    secara    abnormal (bergetar).  Persentase    spermatozoa    hidup biasanya 10 % lebih tinggi dari pada persentase motil, Arifiantini et al ., (2006). Pada penelitian ini  daya  tahan  hidup  semen  cair  babi  landrace
dalam  penyimpanan  sampai  motil  progresif 40%  dapat  bertahan  samapai  jam  pengamatan ke-28  yaitu  perlakuan  P1  dengan  presentasi motilitas 43,75±2,50% (Tabel 5) dan presentase  hidup  spermatozoa  45,17±5,21% (Tabel 6).

## Derajat Keasaman (pH) semen cair
Hasil analisis menunjukkan bahwa terdapat  perbedaan  pH  (derajat  keasaman) spermatozoa  yang  nyata  antar  perlakuan (P>0,05).  Dengan  uji  Duncan  diperoleh  rata- rata pH spermatozoa yang beda antar perlakuan P1,  P2,  P3  dan  P4.  Hal  tersebut  dapat  dilihat pada Tabel 5 dibawah ini.
Tabel 5. Derjat keasaman (pH) Spermatozoa Babi Landrace
Pengamatan (jam) Perlakuan P0 P1 P2 P3 P4 0 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 4 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 8 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 12 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 16 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 7,33±0.13 a 20 7,28±0,21 c 7,25±0,21 c 7,07±0,15 bc 6,80±0,22 ab 6,75±0,20 a 24 7,17±0,15 c 7,10±0,10 bc 6,89±0, 13ab 6,69±0,17 a 6,64±0,17 a 28 7,13±0,13 c 6,90±0,29 bc 6,69±0,14 ab 6,58±0,13 a 6,49±0,14 a superskrip dengan huruf yang tidak sama pada baris yang sama menunjukkan beda nyata (P<0,05).
Pada Tabel 5. Menunjukan bahwa hasil uji statistik  pada  jam  pengamatan  ke-0,  hingga jam    pengamatan  ke-16  antara  perlakuan  P0, P1,  P2,  P3,  dan  P4  dengan  derajat  keasaman sebesar  7,33±0.13 tidak  terdapat  yang  nyata ditunjukan  oleh  superskrip  dengan  huruf  yang tidak  sama  dengan  baris  yang  sama.  Namun pada  jam  pengamatan  ke-20  sampai  jam pengamatan  ke-28  terdapat  perbedaan  yang nyata, yang ditunjukan oleh superskrip dengan huruf  yang  tidak  sama  pada  baris  yang  sama, yaitu  pada  jam  pengamatan  ke-20  pada perlakuan  P0  (7,28±0,21)  dan  P1  (7,25±0,21), tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  P2 (7,07±0,15),  P3  (6,80±0,22),    dan  P4 (6,75±0,20),  namun  perlakuan  P2  tidak berbeda  nyata  dengan    P3  namun  berbeda nyata  dengan  P4,  sedangkan  P3  dan  P4  tidak berbeda nyata.
Pada  jam  pengamatan  ke-24  sampai  pada jam pengamatan ke-28 perlakuan P0 (7,17±0,15, dan  7,13±0,13), P2(6,89±0,13 dan
6,69±0,14),  P3 (6,69±0,17 dan  6,58±0,13)  dan P4  (6,64±0,17  dan  6,49±0,14)  berbeda  nyata dengan  P1  (7,10±0,10,  dan  6,90±0,29),  tetapi P1  tidak  berbeda  nyata  dengan  P2  namun berbeda  nyata  dengan  P3  dan  P4,  P2  tidak berbeda nyata dengan P3 namun berbeda nyata dengan  P4 dan  P3 tidak  berbeda  nyata  dengan P4.
Pada  grafik    3  menunjukan  persentase derajat  keasaman  (Ph)    pada  jam  pengamatan ke-0  sampai  jam  pengamatan    ke-16  pada perlakuan    P0,  P1,  P2,  P3,  dan  P4    memiliki nilai  rataan  yang  sama  yakni,  7,33±0.13%  , derajat keasaman medium yang tetap baik akan berpengaruh  baik  pula  terhadap  daya  hidup spermatozoa.  Penurunan  pH  terjadi    pada  jam pengamatan ke-20 yaitu pada perlakuan P0, P1,
Ndeta et al : Pengaruh sari wortel  dengan level yang berbeda pada pengencer sitrat kuning telur
P2,  P3,  dan  P4  dengan  masing-  nilai  rataan,
7,28±0,21%, 7,25±0,21%, 7,07±0,15%, 6,80±0,22%,  dan  6,75±0,20%,  dan  terjadi  lagi penurunan  pada  jam  pengamatan  ke-24  pada setiap perlakuan P0, P1, P2, P3 dan P4 dengan nilai rataan, 7,17±0,15%, 7,10±0,10%,
6,89±0,13%,  6,69±0,17%  dan  6,64±0,17%, sampai  pada  jam  pengamatan  ke-28  terus terjadi penurunan dengan nilai rataan 7,13±0,13%, 6,90±0,29%, 6,69±0,14%, 6,58±0,13% dan 6,49±0,14%. Gambar 3. Grafik Penurunan derajat keasaman pada Spermatozoa Babi Landrace
Hasil  penelitian  ini  membuktikan  bahwa dengan  level  sari  wortel  yang  berbeda penurunan  pH  spermatozoa  mulai  terjadi  pada jam pengamatan ke-20 sampai jam pengamatan ke-28  pada  perlakuan  P1,  P2,  P3  dan  P4,  dan penurunan  pH  paling  rendah  terjadi  pada perlakuan  P4  diikuti  oleh  perlakuan  P3,  P2, dan  P1  dengan  nilai,  (Tabel.5  ).  Keadaan    ini kemungkinan disebabkan karena dengan semakin    tingginya    konsentrasi    sari    wortel dengan  level  yang  berbeda    juga    akan meninggikan    kandungan  vitamin    C    nya dalam pengencer, sehingga akan mempercepat  laju  fruktolisis  dan peningkatan konsentrasi  asam  laktat  dalam pengencer.
Tingginya  konsentrasi  asam laktat  akan mempercepat    penurunan    pH  semen    yang selanjutnya  akan  menyebabkan  penurunan aktivitas enzim-enzim
metabolisme, akibatnya kebutuhan energi untuk kelangsungan    hidup    tidak    dapat  dipenuhi (Lehninger,  1993).    Selain    itu  dengan menurunnya pH, terjadi peningkatan konsentrasi  H+  yang  akan  bereaksi  dengan radikal    membentuk    hidrogen    peroksida. Hidrogen    peroksida    akan    menjadi    katalis dalam    pembentukan    peroksidasi    lipid    yang dapat    merusak    membran    plasma    dan selanjutnya    menghambat    glikolisis    dan tingkat    kematian    spermatozoa    semakin meningkat (Hammersttedt, 1993).

## SIMPULAN
Berdasarkan  hasil  dan  pembahasan,  dapat disimpulkan  bahwa  level  sari  wortel  yang berbeda  sebagai  sumber  antioksidan  dalam perngencer sitrat kuning telur berpengaruh baik terhadap  motilitas  dan  viabilitas  spermatozoa
babi Peranakan Landrace karena lebih mampu mempertahankan daya tahan hidup spermatozoa  dalam  waktu  yang  lebih  lama yaitu  sampai pada jam ke-28 (P1) dengan nilai Motilitas 43,75% dan Viabilitas 45,17%

## DAFTAR PUSTAKA
Arifiantini  RI,  Wresdiyanti  T,  Retnani  EF. 2006.  Pengujian  morfologi  spermatozoa  sapi bali  ( Bos sondaicus ) menggunakan pewarnaan Williams. Jurnal  Pengembangan  Peternakan Tropis 31(2): 105-110 Aurich JE,    Schoneher U, Hoppe H, Aurich C. 1999.    Effect    of  antioxsidands    on motility    and    membrane    integrity    of chilledstored stallition
semen.
Theriogenology 4(8):185-192.
Chun-Xia  Z,  Zeng-Ming  Y.  2000.  Evaluation on  sperm  quality  of  freshly    ejaculated boar  semen  during  in  vitro  storage  under differen  temperatures. Theriogenology
5(3):1477-1488.
Evans  G,  Maxwel  WME.  1987. Artificial insemination  of  shee  pand  goat. Buter wonthy. Sindany .
Everett    RW,  Beans  B.  1982.  Environmental infl  uence  on  semen  output. J  Dairy    Sci 65(1):303-1310.
Gadea  J.  2003.  Semen  extenders  used  in  the artifi  cial  insemination  of  swine. Spanish J.of agric.research 1(5):17-27.
Garner  DL,  Hafez  ESE.  2000.  Spermatozoa and  Seminal  Plasma. In :  Hafez  ESE  and Hafez  B  (Eds.). Reproduction  In  Farm Animals 7 th Ed . Williams & wilkins, USA.
Hammerstedt,    HR.  1993.    Maintenance    of bioenergetic    balance    in    sperm    and prevention of lipid peroxidation : a review of    the    effect    on    design    of  storage preservation    system. Reprod  Fertil  Dev 5(3):675-690.
Hartono  M.  2008.  Optimalisasi  penambahan vitamin  e  dalam  pengencer  sitrat  kuning telur    untuk    mempertahankan    kualitas semen  kambing  boer. J Indon Trop Anim Agric 33(1):11-19.
Johnson  LA,  Weitze  KF,  Fiser  P,  Maxwell
WMC.  2000.  Storage  of  boar  semen. J Anim Sci 6(2):143-172.
Kommisrud E, Paulenz KF, Sehested E, Grevle IS.  2002.    Influence  of  boar  and  semen parameters  on  motility  and  acrosome
integrity in liquid of boar semen stored for five days. J Acta Vet  Scand 43(1):49-55. Lehminger  AL.  1993, Dasar-Dasar  Biokimia Jilid  I. Alih    Bahasa  : Thenawijaya  M,
Erlangga, Jakarta.
Paulenz  H,  kommisrud  E,  Hofmo  PO.  2000.
Effect  of  long  -  term  storage  at  different temperatures  on  quality  of  libido  boar semen. J Reprod Dom Anim 35(3):83-88. Parera  FZ,    Prihatiny  DF,  Souhoka,  Rizal  M. 2009.    Pemanfaatan  sari  wortel  sebagai pengencer    alternative    spermatozoa epididimis  sapi bali. J Indonesia Tropical Animal Agriculture 34(1):50-56 .
Rizal M. 2009. Viability of bali bull epididymal  spermatozoa  preserved  at  3-
5oc  in  trisextender  with  different  laktose concentration. Jur  Ilmu  Ternak  Dan
Veteriner 14(2)  21-127. Robert VK. 2006. Semen Processing,
Extending  &  Storage  For  Artificial
Insemination  In  Swine .  Dep.  Of  Animal Science University Of IIIinois.
Situmorang P.  2002.  The  effect  of  inclusion of  exogenous    phospholipid    in    tris diluents containing a different level of egg yolk  on  the    viability    of    bull spermatozoa. JITV 7(3):181-187.
Shipley CF. 1999. Breeding sounders examination  of  the  boar. Swine  Health
Prod 7(3):117-120.
Shukla  SN,  Sigh  BB,  Tomar  NS,  Misra  BS.
1992.  Factor  Effecting  Spermatozoa Motility In Preserved Semen. J Indian vet 6(9):856-857.
Sumardani NLG. 2007. Viabilitas dan motilitas spermatozoa  dalam  modifikasi  pengencer BTS  dan  Zorlesco    dengan  penyimpanan berbeda  dalam  rangkaian  inseminasi buatan  pada  babi. Tesis. Program  Pasca Sarjana, IPB. Bogor.
Yulnawati  MA,  Setiadi,    Herdis.  2005.
Pemanfaatan  sari  buah  melon  dan  sari wortel  sebagai    media    pengencer alternatif    semen    cair  domba  garut. Protein 1(2):151-160.
Zhou JB, Yuek KZ, Luo MJ, Chang ZL, Liang H,  Wang  ZY,  Tan  JH.  2004.  Effect  of extender    and    temperatures    on    sperm viability  and  fertility  capacity  of harbin
white boar semen during long-term liquid storage. Asian-Aus  J  Anim  Sci 17 (11):1501-1508.