Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Volume 20, Nomor 1, April 2020, Hal.31-39
https://journal.unpak.ac.id/index.php/ekologia
e-ISSN: 2686-4894 ; p-ISSN: 1411-9447

## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL BIJI KAPULAGA JAWA
( Amomum compactum Soland. ex Maton) TERHADAP Streptococcus pyogenes
Oom Komala 1* , Ismanto 1 , Muhammad Alan Maulana 1
1 Program Studi Biologi, FMIPA, Universitas Pakuan, Bogor.
*e-mail: oom.komala@unpak.ac.id
diterima: 8 Januari 2020; direvisi: 11 Februari 2020; disetujui: 2 Maret 2020

## ABSTRAK
Streptococcus  pyogenes merupakan  salah  satu  bakteri  patogen  penyebab  penyakit  faringitis. Pengobatan  alami  untuk  mengatasi  penyakit  tersebut  dengan  menggunakan  biji  kapulaga. Tujuan  penelitian  ini  adalah  menguji  aktivitas  antibakteri,  menentukan  konsentrasi  daerah hambat  dan  senyawa  fitokimia  dari  ekstrak  etanol  96%  biji  kapulaga  jawa  ( Amomum compactum Soland.  ex  Maton)  terhadap Streptococcus  pyogenes .  Metode  yang  digunakan adalah  metode  dilusi  padat  dan  metode  difusi  kertas  cakram.  Metode  dilusi  padat  digunakan untuk  uji  Konsentrasi  Hambat  Minimum  (KHM)  dengan  konsentrasi  1,25%,  2,5%,  5%  dan 7,5%  sedangkan  metode  difusi  kertas  cakram  digunakan  untuk  uji  Diameter  Daerah  Hambat (DDH) dengan menggunakan lima macam perlakuan yaitu tiga konsentrasi ekstrak etanol 96% biji kapulaga jawa (7,5%, 10% dan 12%), satu kontrol positif amoksisilin 0,01 mg/mL dan satu kontrol  negatif  akuades  steril.  Data  hasil  uji  DDH  kemudian  di  analisis  menggunakan  Anova dengan  tingkat  kepercayaan  95%  dan  α  =  0,05  serta  uji  lanjut  Duncan  untuk  mengetahui perbedaan  antar  perlakuan.  Hasil  penelitian  menunjukan  pada  pengujian  KHM  terdapat  pada konsentrasi  7,5%  sedangkan  untuk  uji  DDH  yang  memiliki  aktivitas  tertinggi  terdapat  pada konsentrasi  12%  dengan  rata-rata  diameter  daerah  hambat  12,03±0,14  mm.  Selain  itu,  ekstrak etanol 96% biji kapulaga jawa mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, terpenoid serta tanin yang berfungsi dalam aktivitas antibakteri.
Kata Kunci: Amomum compactum , Faringitis, Streptococcus pyogenes

## ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF JAVA CARDAMOM SEED EXTRACT
( Amomum compactum Soland. ex Maton) AGAINST Streptococcus pyogenes

## ABSTRACT
Streptococcus  pyogenes is  one  of  the  pathogenic  bacteria  that  causes  pharyngitis.  Natural treatment to overcome these problems is to use cardamom seeds. The purpose of this study was to  test  the  antibacterial  activity,  determine  the  concentration  of  inhibitory  zone  and phytochemical  compounds  from    ethanol  96%  extract  of  Java  cardamom  seeds  ( Amomum compactum Soland.  Ex  Maton)  against Streptococcus  pyogenes .  The  method  is  used      solid dilution  and  paper  disc  diffusion  method. The  solid  dilution  method  is  used  for the  Minimum Inhibitory Concentration (MIC) test with a concentration of 1.25%, 2.5%, 5% and 7.5% while the paper diffusion method is used for the Inhibition zone Diameter (IZD)  using five treatments namely  three  concentrations  of  ethanol  96%  extract  of  Java  cardamom  seeds  (7.5%,  10%  and 12%),  one  positive  control  of  amoxicillin  0.01  mg/mL  and  one  negative  control  of  sterile distilled water. IZD data were  analyzed using ANOVA with a confidence level of 95% and α = 0.05 and Duncan's further tests to determine differences between treatments. The results showed that  the  MIC    was  at  a  concentration  of  7.5%  while  for  the  IZD  test  which  had  the  highest activity there was a concentration of 12% with an average inhibition diameter of 12.03 ± 0.14 mm.  In  addition,  ethanol  96%  extract  of  Java  cardamom  seeds  contain  alkaloids,  flavonoids, terpenoids and tannins which function in antibacterial activity.
Key words: Amomum compactum. Pharyngitis, Streptococcus pyogenes
Oom Komala, Dkk: Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji Kapulaga Jawa...

## PENDAHULUAN
Streptococcus  β  hemolyticus Grup  A atau Streptococcus  pyogenes merupakan salah  satu  bakteri  patogen  yang  banyak menginfeksi manusia. Bakteri ini merupakan  bakteri  penyebab  paling  umum dari faringitis akut, dimana prevalensi kasus pada  anak-anak  sekitar  20  -  30%  dan  pada orang  dewasa  sekitar  5  -  15%  (Aini  dkk., 2016;  Shulman et  al., 2012).  Di  Indonesia kasus  faringitis  akut  pada  tahun  2004 termasuk  ke  dalam  sepuluh  penyakit terbanyak  pada  pasien  rawat  jalan  dengan persentase  jumlah  penderita  sebesar  1,5% atau  sebanyak  214.781  orang  (Depkes  RI, 2006).
Faringitis yang disebabkan oleh bakteri  memiliki  gejala  berupa  sakit  kepala hebat,  muntah, kadang demam dengan suhu yang  tinggi  dan  jarang  disertai  batuk (Kemenkes RI, 2013). Pengobatan faringitis umumnya menggunakan sejumlah antibiotik,  akan  tetapi  pengobatan  dengan antibiotik  dapat  menimbulkan efek samping seperti  reaksi  alergi,  reaksi  idiosinkrasi, reaksi  toksik  serta  terjadinya  perubahan biologik  dan  metabolik  (Indijah  dan  Fajri, 2016).
Kapulaga merupakan salah satu tanaman yang termasuk dari suku Zingiberaceae  dan  bermanfaat  sebagai bumbu  masakan  maupun  obat-obatan.  Di Indonesia  tanaman  kapulaga  memiliki  dua macam  jenis  yaitu  kapulaga  sabrang ( Elettaria  cardamomum (L.)  Maton)  dan kapulaga jawa ( Amomum compactum Soland. ex Maton) (Setyawan et al., 2014).
Menurut  Agoes  (2010)  biji  kapulaga diketahui  memiliki  berbagai  macam  khasiat seperti    mengencerkan  dahak,  memudahkan pengeluaran  air  dari  perut,  menghangatkan, membersihkan  darah,  menghilangkan  rasa sakit, stimulan dan pemberi aroma. Menurut Lee et  al., (2010),  ekstrak A.  compactum memiliki  nilai  potensi  terapi  bila  digunakan
sebagai ajuvan untuk pengobatan imunomodulator  alergi  asma.  Sehubungan dengan hal itu, senyawa yang terkandung di dalam  biji  kapulaga  seperti  fenol,  tanin  dan terpenoid  mampu  menghambat  aktivitas pertumbuhan  bakteri  pada Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus (Sukandar  dkk., 2015). Dari hasil tersebut perlu dilakukannya  sebuah  penelitian  dari  ekstrak pelarut  etanol  96%  biji  kapulaga  jawa ( Amomum  compactum Soland.  ex  Maton) untuk mengetahui adanya aktivitas antibakteri pada Streptococcus pyogenes . Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menguji  aktivitas  antibakteri,  menentukan konsentrasi  daerah  hambat  dan  menentukan senyawa  fitokimia  dari  ekstrak  etanol  96% biji  kapulaga  jawa  terhadap  pertumbuhan Streptococcus pyogenes .

## BAHAN DAN METODE Determinasi Tanaman Kapulaga Jawa
Determinasi  tanaman  kapulaga  jawa dilakukan  di  Pusat  Penelitian  Konservasi Tumbuhan  dan  Kebun  Raya-LIPI  Bogor, Jalan  Ir.  H.  Juanda  No.  13  Bogor,  Provinsi Jawa Barat.

## Preparasi Sampel Biji Kapulaga Jawa
Sampel  sebanyak  10  kg  didapatkan dari  petani  yang  bertempat  di  Desa Cileungsi,  Kecamatan  Ciawi,  Kabupaten Bogor.  Buah  kapulaga  dicuci  di  bawah  air mengalir  dan  dikeringkan  di  bawah  sinar matahari  langsung  selama  tujuh  hari.  Buah selanjutnya  disortasi  dan  diambil  bijinya. Biji diblender dan diayak dengan menggunakan saringan mesh. Hasil saringan mesh  akan  didapatkan  simplisia  serbuk  biji kapulaga jawa.

## Uji  Kadar  Air  Simplisia  Serbuk  Biji Kapulaga Jawa
Pertama-tama cawan dikeringkan pada suhu  105 o C  ±  30  menit.  Setelah  itu,  cawan diletakkan  dalam  desikator  dan  sampel
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
ditimbang sebanyak 5 g. Sampel dimasukkan  ke  dalam  oven  dengan  suhu 105 o C  selama  ±  6  jam.  Setelah  itu, dimasukkan  ke  dalam  desikator  kembali kemudian  ditimbang  hingga  memperoleh bobot konstan.

## Pembuatan  Ekstrak  Etanol  96%  Biji Kapulaga Jawa
Simplisia  sebanyak  200  g  diekstraksi dan  dimaserasi  menggunakan  pelarut  etanol 96% sebanyak 2000 mL selama 3 x 24 jam. Proses  dilakukan  secara  bertingkat  dengan menuangkan pelarut  sebanyak 700 mL, 700 mL dan 600 mL  Maserat  didiamkan  selama 1  x  24  jam  dengan  sesekali  diaduk  dan disimpan pada suhu ruang. Maserat disaring dengan kertas saring sehingga akan didapatkan  filtrat  dan  residu.  Semua  filtrat dievaporasi  dengan rotary  evaporator pada suhu 50 o C.
Uji  Kadar  Abu  Ekstrak  Etanol  96%  Biji

## Kapulaga Jawa
Ekstrak  sebanyak  2  gram    di masukkan  ke  dalam  cawan  porselen  yang sebelumnya sudah ditimbang. Ekstrak dipijar  menggunakan  tanur  dengan  suhu 600 o C  hingga  mendapatkan  bobot  konstan dan ditimbang hingga bobotnya tetap.
Uji  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  96%  Biji

## Kapulaga Jawa

## Uji Alkaloid
Satu  gram  ekstrak  ditetesi  HCl  2  N, lalu  dibagi  dalam  beberapa  tabung  reaksi. Setiap  tabung  ditambahkan  dengan  masing- masing  pereaksi.  Pereaksi  Mayer  positif mengandung  alkaloid  jika  membentuk endapan putih atau kuning. Pereaksi Wagner positif  mengandung  alkaloid  jika  terbentuk endapan coklat. Pereaksi Dragendrof, positif mengandung alkaloid jika terbentuk endapan jingga.

## Uji Flavonoid
Satu gram ekstrak dilarutkan dengan 1 mL  etanol  96%,  lalu  ditambahkan  serbuk magnesium,  kemudian  ditambahkan  HCL pekat.  Apabila  terbentuk  warna  oranye, merah atau kuning, berarti positif flavonoid.

## Uji Saponin
Satu  gram  ekstrak  ditambahkan  5  mL air  panas,  didinginkan  lalu  kocok  kuat-kuat selama  10  detik.  Apabila  terbentuk  busa setinggi  1-10  cm  selama  tidak  kurang  dari 10 menit dan pada penambahan 1 tetes HCl 2 N busa tidak hilang maka positif saponin.

## Uji Steroid dan Terpenoid
Satu  gram  ekstrak  ditambahkan  3  mL eter kemudian dikocok. Lapisan eter diambil lalu ditambahkan 2-3 tetes pereaksi Liebermen  Bouchard.  Apabila  terbentuk warna  merah  keunguan,  berarti  positif terpenoid  tetapi  apabila  terbentuk  warna hijau berarti positif steroid.

## Uji Tanin
Satu  gram  ekstrak  ditambahkan  5  mL akuades  dan  dipanaskan  selama  5  menit, dikocok  hingga  homogen  lalu  disaring. Filtrat hasil saringan ditambahkan FeCl 3 3% sebanyak  2  tetes,  jika  menghasilkan  warna hitam  kehijauan  atau  hijau  violet  maka positif senyawa tanin.

## Pembuatan Kertas Cakram
Kertas  saring  dengan  diameter  6  mm disterilisasi  di  dalam  oven  selama  1  x  24 jam  dengan  suhu  105 o C.  Kertas  saring ditetesi  dan  direndam  pada  konsentrasi ekstrak  7,5%,  10%  dan  12%,  serta  larutan antibiotik  amoksisilin  0,01  mg/mL  sebagai kontrol  positif  dan  akuades  steril  sebagai kontrol negatif. Hasil perendaman kemudian dimasukkan  ke  dalam  oven  dengan  suhu 40 o C selama 1 x 24 jam.
Pembuatan  Media Brain  Heart  Infusion Agar (BHI Agar )
Serbuk  BHI  ditimbang  sebanyak  37  g dan  ditambah  15  g bacto  agar kemudain dilarutkan  dalam  1000  mL  akuades.  Media agar  dimasukkan  ke  dalam  autoklaf  dengan suhu  121 o C  dengan  tekanan  1  atm  selama 15-20 menit.
Peremajaan Bakteri Streptococcus pyogenes Bakteri  didapatkan  dari  Departemen Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia. Peremajaan
dilakukan  dengan  mengambil  sediaan  satu ose  biakan  murni  kemudian  diinokulasikan pada  media  BHI Agar miring.  Hasil inokulasi  kemudian  di  inkubasi  di  dalam inkubator selama 1 x 24 jam.

## Pengujian  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa
Sebelum  dilakukan  pengujian  bakteri hasil peremajaan kemudian dilakukan pengenceran  dengan  NaCl  fisiologis  0,9%. Pengenceran  dilakukan  sampai  konsentrasi 10 -6 koloni/mL  dengan  mengikuti  prosedur pengenceran standar McFarland 0,5.
Uji Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) Sebanyak 15 mL BHI Agar dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  dan ditambahkan  0,2  mL  suspensi  bakteri  serta bahan  uji  sebanyak  1  mL.  Campuran dihomogenkan dan didiamkan hingga media agar  padat,  lalu  dimasukkan  ke  dalam inkubator  selama  1  x  24  jam  dengan  suhu 37 o C.

## Uji Diameter Daerah Hambat (DDH)
Cawan  petri  diisi  media  BHI Agar sebanyak  15  mL  dan  ditetesi  suspensi bakteri sebanyak 0,2 mL secara zig-zag lalu
didiamkan  hingga  agar  padat.  Kemudian  5 jenis  kertas  cakram  diletakkan  yaitu:  1 kontrol  negatif,  1  kontrol  positif,  dan  3 konsentrasi ekstrak 7,5%, 10% dan 12% lalu disimpan  di  inkubator  dengan  suhu  37 o C selama 1 x 24 jam.

## Parameter yang Diamati
Mengukur  diameter  daerah  hambat dari  ekstrak  etanol  96%  biji  kapulaga  jawa terhadap  bakteri Streptococcus  pyogenes serta menentukan golongan senyawa bioaktif  dari  ekstrak  etanol  96%  biji kapulaga jawa.

## Analisis Data
Rancangan  yang  digunakan  adalah Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL).  Analisis data  menggunakan Analysis  of  Variance (Anova) satu arah dengan tingkat k epercayaan  95%  dan  α  =  0,05  serta uji lanjut  Duncan  untuk  mengetahui  perbedaan antar perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Determinasi Tanaman Kapulaga Jawa
Determinasi  tanaman  dilakukan  untuk memastikan  kebenaran  dan  kejelasan  suatu tanaman  yang  akan  digunakan  pada  saat proses  penelitian  dan  bertujuan  untuk menghindari adanya kesalahan dalam pemilihan  suatu  sampel  bahan.  Determinasi tanaman  dilakukan  di  Pusat  Penelitian Konservasi  Tumbuhan  dan  Kebun  Raya- LIPI  Bogor  dengan  sampel  yang  dibawa yaitu  berupa  tanaman  yang  meliputi  akar, batang,  daun,  dan  buah.  Hasil  determinasi menunjukkan bahwa tanaman yang dideterminasi  adalah  jenis  kapulaga  jawa ( Amomum  compactum Sol.  ex  Maton)  dari suku Zingiberaceae.
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Kadar Air Simplisia
Serbuk Biji

## Kapulaga Jawa
Kadar  air  merupakan  banyaknya  air yang  dinyatakan  dalam  persentase  massa (SNI,  1992).  Hasil  pengujian  kadar  air menyatakan  bahwa  simplisia  serbuk  biji kapulaga  jawa  memiliki  rata-rata  kadar  air sebesar  11,73±0,04%,  hasil  tersebut  sudah sesui  dengan  persyaratan  mutu  kapulaga lokal  berdasarkan  SNI-01-3180-1992  yaitu maksimal 12%.

## Ekstrak Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa
Serbuk sebanyak 600 gram yang telah dimaserasi dan dirotari evaporasi menghasilkan  ekstrak  kental  sebanyak  17,4 gram  dengan  rendemen  sebesar  2,9%. Ekstrak  yang  didapat  dari  proses  rotari
evaporasi  memiliki  warna  coklat  kuning kemerah-merahan.  Pelarut  yang  digunakan dalam proses ekstraksi adalah pelarut etanol 96%,  hal  ini  dikarenakan  menurut  Arifianti dkk. (2014) pelarut etanol beserta campurannya dengan air mempunyai extractive power yang terbaik  untuk  hampir semua  senyawa  yang  mempunyai  berat molekul  rendah.  Hasil  pengamatan  ekstrak etanol  96%  biji  kapulaga  jawa  dapat  dilihat pada Tabel 1.
Hasil pengujian kadar abu  didapatkan bahwa  ekstrak  etanol  96%  biji  kapulaga jawa memiliki kadar abu sebesar 12,14±0,03%. Pengujian kadar abu dilakukan karena bertujuan untuk menentukan  baik  atau  tidaknya  suatu pengolahan maupun mengetahui jenis bahan yang digunakan (Pine dkk., 2015).
Tabel 1 . Hasil Karakteristik Ekstrak Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa Bahan Uji Warna Filtrat Warna Ekstrak Bobot Awal Bobot Ekstrak Rendemen Kadar Abu Ekstrak Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa Kuning Minyak Coklat Kuning Kemerah- merahan 600 g 17,4 g 2,9% 12,14±0,03%

## Kandungan  Fitokimia  Ekstrak  Etanol
96% Biji Kapulaga Jawa
Berdasarkan  hasil  pengujian  fitokimia pada  Tabel  2  dapat  dinyatakan  bahwa ekstrak  etanol  96%  biji  kapulaga  jawa memiliki  kandungan  senyawa  alkoloid, flavonoid,  terpenoid  dan  tanin.  Hasil tersebut  sedikit  berbeda  dengan  hasil penelitian  Sukandar  dkk.  (2015)  pada ekstrak  metanol  biji  kapulaga  ( Amomum compactum Sol.  ex  Maton)  yang  memiliki senyawa  fenol,  tanin  dan  terpenoid  (Tabel 2).
Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa Uji Senyawa Hasil Pengujian Alkaloid + Flavonoid + Saponin - Steroid - Terpenoid + Tanin +
Keterangan : (+) Ada Senyawa Fitokimia; (-) Tidak Ada Senyawa Fitokimia
Oom Komala, Dkk: Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji Kapulaga Jawa...
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa
Konsentrasi Hambat Minimum (KHM)
Pengujian konsentrasi hambat minimum  dilakukan  untuk  mengetahui konsentrasi  hambatan terkecil  yang ditandai dengan  tidak  adanya  aktivitas  pertumbuhan bakteri. Pengujian ini dilakukan dengan cara dilusi  padat.  Konsentrasi  yang  dibuat  yaitu 1,25%, 2,5%, 5%, dan 7,5%.
Dari hasil pengujian dinyatakan bahwa  konsentrasi  hambat  minimum  pada ekstrak  etanol  96%  biji  kapulaga  jawa terdapat  pada  konsentrasi  7,5%.  Hasil tersebut  sedikit  berbeda  dengan  hasil penelitian Putri dkk. (2016) dengan menggunakan  ekstrak  etil  asetat  biji kapulaga  ( Amomum  compactum )  terhadap bakteri Aeromonas hydrophila yang memiliki  nilai  KHM  sebesar  1,35%. Perbedaan  hasil  KHM  ini  diakibatkan karena perbedaan penggunaan bahan uji dan metode pada masing-masing penelitian.

## Diameter Daerah Hambat (DDH)
Pengujian  diameter  daerah  hambat dilakukan  dari  tingkat  konsentrasi  yang telah didapatkan pada pengujian konsentrasi hambat  minimum.  Pengujian  ini  dilakukan dengan  menggunakan  metode Kirby-Bauer Disk  Method atau  difusi  kertas  cakram  dan dilakukan  sebanyak  empat  kali  ulangan. Pengujian  dilakukan  dari  konsentrasi  7,5%, 10% dan 12% untuk ekstrak etanol 96% biji kapulaga  jawa  sedangkan  untuk  kontrol negatif  dan  kontrol  positif  bahan  yang digunakan  adalah  akuades  steril  dan amoksisilin  0,01  mg/mL.  Uji  diameter daerah  hambat  ditandai  dari  adanya  daerah bening dari ekstrak etanol 96% biji kapulaga jawa  terhadap Streptococcus  pyogenes . Hasil  pengujian  dapat  dilihat  pada  Gambar 1.
Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa konsentrasi  7,5%  memiliki  nilai  rata-rata diameter  daerah  hambat  yaitu  sebesar 9,15±0,07  mm,  sedangkan  konsentrasi  10% dan konsentrasi 12% memiliki nilai rata-rata diameter  daerah  hambat  yaitu  sebesar 10,90±0,20  mm  dan  12,03±0,14  mm.  Dari hasil  tersebut  bila  dilihat  berdasarkan kategori penentuan respon hambatan menurut  Greenwood  (1995)  pada  Tabel  3 konsentrasi  7,5%  termasuk  ke  dalam kategori  tidak  ada,  sedangkan  untuk konsentrasi 10%     dan 12%   termasuk ke dalam kategori lemah.
Keterangan : K- = Akuades Steril; K+ = Amoksisilin 0,01 mg/mL.
Gambar  1. Hasil  Pengujian  Diameter Daerah  Hambat  (DDH)  dari  Ekstrak  Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa terhadap Pertumbuhan Streptococcus Pyogenes .
Hasil  tersebut  sangat  berbeda  jauh dengan  kontrol  positif  dimana  kontrol positif  memiliki  nilai  rata-rata  sebesar 24,06±1,77  mm  dengan  kategori  respon hambatan  yaitu  kuat,  sedangkan  untuk kontrol  negatif  dengan  diamter  6,00±0,00 mm tidak terdapat adanya respon hambatan. Besaran  diameter  pada  kontrol  negatif merupakan  diameter  dari  kertas  cakram pada pengujian diameter daerah hambat.
K+ K- 7,5% 12% 10%
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Adapun  hasil  dari  rata-rata  diameter daerah  hambat  dapat  dilihat  pada  Tabel  4. Berdasarkan hasil analisis data menggunakan  Anova  dan  uji  lanjut  Duncan dengan  tingkat  kepercayaan  95%,  ekstrak etanol  96%  biji  kapulaga  jawa  diperoleh hasil signifikan sebesar 0,063 pada konsentrasi  10%  dan  konsentrasi  12% denga n  nilai  α  sebesar  0,05.  H asil  tersebut membuktikan bahwa kedua konsentrasi
Tabel 3. Penentuan Kategori Respon Hambatan
Diameter Daerah Hambat (mm) Kategori ≤ 10 (mm) Tidak Ada 11-15 (mm) Lemah 16-20 (mm) Sedang ≥ 20 (mm) Kuat
Sumber : Greenwood (1995) dalam Milah dkk., (2016).
Tabel 4. Rata-Rata Diameter Daerah Hambat (DDH) Ekstrak Etanol 96% Biji Kapulaga Jawa terhadap Streptococcus
pyogenes Bahan Uji Rata-Rata DDH (mm) Kategori Respon Hambatan K- 6,00±0,00 a - 7,5% 9,15±0,07 b Tidak Ada 10% 10,90±0,20 c Lemah 12% 12,03±0,14 c Lemah K+ 24,06±1,77 d Kuat
Keterangan : K- = Akuades Steril; K+ = Amoksisilin 0,01 mg/mL.
Sedangkan  konsentrasi  7,5%  dan kontrol  negartif  memiliki  pengaruh  yang tidak  beda  nyata  terhadap  pertumbuhan bakteri.  Hasil  yang  berbeda  ditunjukkan pada  kontrol  positif  yang  menggunakan amoksisilin  0,01  mg/mL,  hasil  menyatakan bahwa  kontrol  positif  memiliki  pengaruh yang  sangat  nyata  terhadap  pertumbuhan bakteri Streptococcus pyogenes . Aktivitas adanya daerah hambat disebabkan karena adanya senyawa fitokimia  yang  terkandung  dalam  ekstrak
etanol  96%  biji  kapulaga  jawa  seperti senyawa  alkoloid,  flavonoid,  terpenoid  dan tanin.  Senyawa  alkaloid  diketahui  dapat mengganggu  bakteri  dengan  cara  meracuni protoplasma, merusak dan menembus dinding  sel  serta  mengendapkan  protein. Selain  itu  juga,  senyawa  alkaloid  mampu menginaktifkan  enzim  esensial  di  dalam  sel mikroba  meskipun  pada  konsentrasi  yang sangat  rendah  serta  mampu  memutuskan ikatan peptidoglikan saat menerobos dinding sel. Setelah menerobos dinding sel, senyawa akan menyebabkan kebocoran isi sel dengan cara  merusak  ikatan  hidrofobik  yang berakibat  pada  meningkatnya  permeabilitas membran.  Akibat  dari  adanya  kerusakan pada membran sel maka akan menyebabkan terhambatnya aktivitas dan  biosintesis enzim-enzim  spesifik  yang  diperlukan dalam reaksi metabolisme sehingga pertumbuhan bakteri dapat dihambat (Robinson, 1991 dalam Putri dkk., 2016).
Sehubungan  dengan  itu,  senyawa  lain seperti flavonoid diketahui dapat membentuk  senyawa  kompleks  terhadap protein  ekstraseluler  yang  nantinya  dapat mengganggu integritas membran sel. Senyawa ini dapat menghambat pertumbuhan  bakteri  dengan  cara  merusak dinding  sel,  membran  sel,  serta  dapat menonaktifkan  kerja  enzim  pada  bakteri (Cowan, 1999; Nugraha dkk., 2017).
Senyawa  lain  juga  ditunjukkan  pada senyawa  terpenoid,  senyawa  ini  diketahui dapat  bereaksi  dengan  porin  (protein transmembran)  pada  membran  luar  dinding sel  bakteri  dan  membentuk  ikatan  polimer yang kuat sehingga mengakibatkan rusaknya porin.  Rusaknya  porin  yang  merupakan pintu  keluar  masuknya  senyawa  yang dibutuhkan  sel  bakteri  akan  mengurangi permeabilitas  dinding  sel  bakteri  yang mengakibatkan  sel  bakteri  akan  kekurangan nutrisi, sehingga pertumbuhan bakteri terhambat  atau  mati  (Cowan,  1999  dalam Sukandar dkk., 2015).
Oom Komala, Dkk: Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Biji Kapulaga Jawa...
Selain  senyawa  alkaloid,  flavonoid dan  terpenoid,  senyawa  tanin    langsung berhubungan  pada  metabolisme  mikro organisme, melalui penghambatan fosforilasi oksidatif; mekanisme yang melibatkan kulit tanin dengan ion metabolik, mengurangi  ketersediaan  ion  penting  untuk metabolisme  mikroorganisme  (Xie et  al., 2015)  sehingga  dapat  menghambat  dan membunuh bakteri. Selain itu senyawa tanin juga  dapat  membentuk  ikatan  kompleks dengan  protein  dan  interaksi  hidrofobik sehingga  jika  terbentuk  ikatan  hidrogen antara  tanin  dengan  protein  enzim  maka kemungkinan akan terdenaturasi dan menyebabkan metabolisme
bakteri terganggu (Ummah, 2010
dalam Roslizawaty dkk., 2013)

## KESIMPULAN DAN SARAN Kesimpulan
Ekstrak etanol 96% biji kapulaga jawa memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Streptococcus  pyogenes dengan    rata-rata diameter  daerah  hambat  tertinggi  sebesar 12,03±0,14 mm pada konsentrasi 12%.
Hasil  uji  fitokimia  menunjukkan bahwa  ekstrak  etanol  96%  biji  kapulaga jawa mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, terpenoid dan tanin.

## Saran
Perlu  dilakukannya  sebuah  penelitian mengenai  ekstrak  biji  kapulaga  jawa ( Amomum  compactum Soland.  ex  Maton) dengan  menggunakan  pelarut  dan  mikroba uji  yang  lain  serta  penelitian  lebih  lanjut mengenai  senyawa  fitokimia  pada  ekstrak tersebut secara kuantitatif.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  disampaikan  kepada Laboratorium  Biologi  dan  Laboratorium Kimia,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Pakuan, Bogor.

## DAFTAR PUSTAKA
Agoes, A. (2010). Tanaman Obat Indonesia .
Salemba Medika. Jakarta.
Aini,  F., A.  Djamal, dan E. Usman.  (2016).
Identifikasi Carrier Bakteri
Streptococcus  β  hemoliticus Group A pada Murid SD Negeri 13 Padang Berdasarkan  Perbedaan  Umur  dan Jenis  Kelamin. Jurnal  Kesehatan Andalas . 5 (1): 145-148.
Arifianti,  L.,  R.  D.  Oktarina,  dan  I.
Kusumawati. (2014). Pengaruh Jenis Pelarut Pengekstraksi terhadap Kadar  Sinensetin  dalam  Ekstrak Daun Orthoshipon  stamineus Benth .
E-Journal Planta Husada . 2 (1): 1-4.
Cowan,  M.  M.  (1999).  Plant  Products  as Antimicrobial Agents. Clinical Microbiology  Reviews .  12  (4):  564- 582. [Depkes RI] Departemen Kesehatan Republik  Indonesia.  (2006). Profil Kesehatan Indonesia 2004 . Departemen Kesehatan RI. Jakarta. Indijah,  S.  W.  dan  P.  Fajri.  (2016). Modul Bahan Ajar Cetak Farmasi: Farmakologi . Kementerian Kesehatan RI. Jakarta. [Kemenkes  RI]  Kementerian  Kesehatan Republik Indonesia. (2013). Panduan Praktik Klinis Bagi Dokter di  Fasilitas  Layanan  Kesehatan Prime r. Edisi I. Kementerian Kesehatan RI. Jakarta
Lee, J.A., Lee, M.Y., Seo, C.S., Jung, D.Y.,
Lee,  N.H.,  Kin,  J.H.,  Hyekyung,
H.A.,  and  Shin,  H.K.,  (2010),  Anti- Ashmatic  Effects  of  an  Amomum compactum Extract on an Ovalbumin  (OVA)-Induced  Murine Asthma Model,
Biosci.Biotechnol.Biochem.  74  (9), 1814-1818.doi:10.1271/bbb.100177. https://www.tandfonline.com/doi/pdf /10.1271/bbb.100177
Milah,  N.,  S.  H.  Bintari,  dan  D.
Mustikaningtyas.  (2016).  Pengaruh
Konsentrasi  Antibakteri  Propolis terhadap
Pertumbuhan Bakteri
Ekologia : Jurnal Ilmiah Ilmu Dasar dan Lingkungan Hidup
Streptococcus  pyogenes secara In Vitro . Life Science . 5 (2): 95-99.
Nugraha,  A.  C.,  A.  T.  Prasetya,  dan  S. Mursiti.  (2017).  Isolasi,  Identifikasi, Uji  Aktivitas  Senyawa  Flavonoid sebagai Antibakteri dari Daun Mangga. Indonesian  Journal  of Chemical Science . 6 (2): 91-96.
Pine,  A.  T.  D.,  G.  Alam,  dan  F.  Attamimi. (2015).  Standardisasi  Mutu  Ekstrak Daun  Gedi  ( Abelmoschus  manihot (L.) MEDIK) dan Uji Efek Antioksidan  dengan  Metode  DPPH.
Jurnal Farmasi Fakultas Kedokteran dan  Ilmu  Kesehatan  UIN  Alauddin (JF FIK UINAM). 3 (3): 111-128. Putri,  S.  D.  K.,  A.  Susilowati,  dan  R. Setyaningsih.  (2016).  Uji  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Biji  Kapulaga ( Amomum compactum ) terhadap Aeromonas  hydrophyla secara In Vitro . Biofarmasi . 14 (1): 10-18.
Roslizawaty,  N.  Y.  Ramadani,  Fakhrurrazi, dan  Herrialfian.  (2013).  Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Rebusan Sarang Semut ( Myrmecodia sp.)  terhadap  Bakteri Escherichia coli.  Jurnal  Medika  Veterinaria. 7 (2): 91-94.
Saxena,  M.,  J.  Saxena,  R.  Nema,  D.  Singh
dan A. Gupta. (2013). Phytochemistry  of  Medical  Plants.
Journal  of  Pharmacognosy  and Phytochemistry . 1 (6): 168-182. Setyawan,  A.  D.,  Wiryanto,  Suranto,  N. Bermawie  dan  Sudarmono.  (2014).
Short  Communication:  Comparisons of  isozyme  diversity  in  local  Java cardamom  ( Amomum  compactum ) and true cardamom ( Elettaria cardamomum ). Nusantara Bioscience . 6(2): 94-101.
Shulman,  S.  T.,  A.  L.  Bisno,  H.  W.  Clegg, M. A. Gerber, E. L. Kaplan, G. Lee, J.  M.  Martin  dan  C.  V.  Beneden .
(2012).  Clinical  Practice  Guideline for  the  Diagnosis  and  Management of Group A Streptococcal Pharyngitis:  2012  Update  by  the Infectious Diseases Society of America. Clinical Infectious Diseases . 55 (10): 86-102.
[SNI]  Standar  Nasional  Indonesia.  (1992) .
SNI  01-3180-1992  Kapulaga  Lokal . Standar Nasional Indonesia.
Sukandar, D., S. Hermato, E. R. Amelia dan M.  Zaenudin.  (2015).  Aktivitas  Biji Kapulaga ( Amomum compactum Sol. Ex  Maton). Jurnal  Kimia  Terapan Indonesia . 17 (2): 119-129.
Xie,  Y.,  Yang,  W.,  Tang,  F.,  Chen,  X.,  and Ren, I., (2015), Antibacterial activities  of  flavonoids:  Structure- activity relationship and mechanism, Current  Medicinal  Chemistry, 22(1), 132-149. DOI :
10.2174/0929867321666140916113
443. www.eurekaselect.com/124655/ article