Bulletin of Applied Animal Research

## Pengaruh Interaksi Antara Fermentasi Dengan Trichoderma Reesei Dan Amoniasi Terhadap Kandungan Komponen Serat Ampas Aren
Nurul Husnah Febrianti, Agung Subrata dan Joelal Achmadi Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro, Semarang Jl. Prof.H. Soedarto, S. H. – Tembalang Semarang, Indonesia (50275 Corresponding E-mail : nurulhusnahfebrianti@gmail.com

## ABSTRAK
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  kombinasi  lama  fermentasi dengan  Trichoderma  reesei  dan  amoniasi  terhadap  komponen  serat  ampas  aren.  Penelitian menggunakan ampas aren Boyolali yang dijemur. Fermentasi ampas aren dengan Trichoderma reesei membutuhkan  nitrogen  untuk  pertumbuhan  mikroba.  Proses  amoniasi  dapat  melepaskan  ikatan lignoselulosa  dan  menyediakan  pasokan  nitrogen  untuk  Trichoderma  reesei,  sehingga  perlakuan  ini dapat mengoptimalkan Trichoderma reesei dalam proses fermentasi. Sampel difermentasi selama 0, 3 dan 6  hari dengan 1,5%  Trichoderma  reesei.  Perlakuan penelitian dialokasikan  menurut Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dengan  pola  faktorial  2x3.  Faktor  pertama  adalah  perlakuan  amoniasi  dan faktor  kedua  adalah  variasi  waktu  fermentasi.  Parameter  yang  diamati  adalah  NDF,  ADF, hemiselulosa,  selulosa  dan  lignin.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  tidak  terdapat  pengaruh interaksi  antara  perlakuan  terhadap  penurunan  kadar  NDF  dan  ADF,  namun  perlakuan  interaksi menurunkan  kadar  selulosa  dan  lignin  (P  <0,05).  Kesimpulannya,  pengaruh  interaksi  antara  waktu fermentasi  dengan  Trichoderma  reesei  dan  amoniasi  menurunkan  kadar  hemiselulosa,  selulosa  dan lignin pada ampas aren.
Kata kunci: Ampas aren, fermentasi, Trichoderma reesei, amoniasi, komposisi serat.
The purpose of this research was  to examine the  combination effect  of fermentation time by Trichoderma reesei and ammoniation on fiber component of sugar palm pulp. The research used sugar  palm  pulp  from  Boyolali  which  was  sun-dried.  Sugar  palm  pulp  fermentation  with Trichoderma  reesei requires  nitrogen  for  microbial  growth.  Ammoniation  process  could  loose lignocellulosic  bonds  and  provides  the  nitrogen  supply  for Trichoderma  reesei ,  therefore  these treatments  could  optimize Trichoderma  reesei in  the  fermentation  process.  Samples  were fermented  for  0,  3  and  6  days  with  1,5% Trichoderma  reesei. The  research  treatments  were allocated  according  to  a  completely  randomize  design  with    pattern  of  2x3  factorial.  First  factor was ammoniation treatment and second factor was variation of fermentation time. The parameters observedd were NDF, ADF, hemicellulose, cellulose and lignin. Research result showed that there is was no interactive effect between treatments on reducing levels of NDF and ADF, but interaction treatments  decreased  (P<0.05)  levels  of,  cellulose  and  lignin.  In  conclusion,  the  interactive  effet between  fermentation  time  with Trichoderma  reesei and  ammoniation  reduce  levels  of hemicellulose, cellulose and lignin in sugar palm pulp.
Keywords: Sugar palm pulp, fermentation, Trichoderma reesei, ammoniation, fiber compotition.

## PENDAHULUAN
Di  Indonesia  banyak  ditemui  pohon  aren (Arenga  pinnata  merr)  yang  memiliki  berbagai manfaat  di  bidang  industri.  Hampir  semua bagian  pohon  aren  bermanfaat  dan  dapat digunakan untuk berbagai kebutuhan, mulai  dari bagian  fisik  (akar,  batang,  daun,  ijuk  dan  lain- lain) maupun hasil produksinya (nira, pati/tepung  dan  buah).  Ampas  aren  merupakan hasil  samping  dari  pengolahan  pati  aren memiliki kandungan selulosa (60,6%), hemiselulosa  (15,74%)  dan  lignin  (14,21%) (Purnavita dan Herman, 2011).
Pengolahan limbah pertanian dan perkebunan  dapat  dilakukan  dengan  kombinasi proses amoniasi dan fermentasi. Proses amoniasi dapat  merenggangkan  ikatan  lignoselulosa  dan lignohemiselulosa  serta  meningkatkan  nitrogen pada  bahan  pakan  sehingga  perombakan  oleh Trichoderma  reesei  menjadi  mudah.  Fermentasi digunakan  untuk  memutus  ikatan  lignoselulosa dan lignohemiselulosa sehingga dapat menurunkan komponen serat pada ampas aren.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji pengaruh  interaksi  antara  perlakuan  amoniasi dan  lama  fermentasi  menggunakan  Trichoderma reesei terhadap kandungan komponen serat pada ampas  aren.  Hipotesis  dari  penelitian  ini  yaitu semakin  lama  fermentasi  pada  ampas  aren teramoniasi akan menurunkan kadar NDF, ADF, hemiselulosa, selulosa dan lignin.

## MATERI DAN METODE
Penelitian tentang pengaruh lama fermentasi  dengan Trichoderma  reesei terhadap kandungan  komponen  serat  ampas  aren  yang teramoniasi  dilaksanakan  pada  bulan  September 2019  –  Januari  2020  di  Laboratorium  Ilmu Nutrisi  dan  Pakan,  Fakultas  Peternakan  dan Pertanian, Universitas Diponegoro Semarang.
Materi  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  yaitu  ampas  aren  teramoniasi  dan  tanpa amoniasi  yang  difermentasi  dengan  lama  peram 0, 3 dan 6 hari.
Rancangan yang digunakan dalam penelitian  yaitu  rancangan  acak  lengkap  (RAL)
pola  faktorial    2  perlakuan  3  ulangan  yang  terdiri dari :
T0 : Ampas  aren  +  1,5% Trichoderma  reesei dari BK difermentasi tanpa inkubasi T1 : Ampas  aren  +  1,5% Trichoderma  reesei dari BK difermentasi selama 3 hari T2 : Ampas  aren  +  1,5% Trichoderma  reesei dari BK difermentasi selama 6 hari
AT0  : Ampas  aren  +  1,5% Trichoderma  reesei dari BK yang diamoniasi dan difermentasi tanpa inkubasi
ATI  : Ampas  aren  +  1,5% Trichoderma  reesei dari BK yang diamoniasi dan difermentasi selama 3 hari
AT2  : Ampas  aren  +  1,5% Trichoderma  reesei dari BK yang diamoniasi dan difermentasi selama 6 hari
Parameter  yang  diamati  yaitu  kandungan neutral  detergent  fiber (NDF), acid  detergent  fiber (ADF),  hemiselulosa,  selulosa  dan  lignin  (AOAC, 2005).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tabel 1. Kadar NDF Ampas Aren Lama Pemeraman Rata- rata 0 hari  3 hari 6 hari -------------(%)------------ Amoniasi  79,78 66,61 62,73 69,71 x Non Amoniasi 82,81 64,62 64,39 70,61 y
Rata-rata  81,30 p 65,62 qr 63,56 qr
Superskrip  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05).
Semakin  lama  fermentasi  pada  ampas  aren teramoniasi  tidak  dapat  menurunkan  kadar  NDF secara  signifikan.  Hal  tersebut  diduga  disebabkan oleh tingginya kandungan serat ampas aren sehingga sulit dicerna.
Kandungan  komponen  serat  ampas  aren semakin  meningkat  seiring  dengan  bertambahnya umur  pohon  aren.  Fariani  dan  Akhadiarto  (2016) menyatakan  bahwa  semakin  lama  umur  tanaman maka  kandungan  fraksi  serat  akan  semakin  tinggi. Hal  ini  disebabkan  karena  ikatan  lignoselulosa  dan ikatan  lignohemiselulosa  semakin  kuat  sehingga menghasilkan  kecernaan  yang  rendah.  Styawati (2014) menyatakan bahwa tinggi rendahnya kandungan  serat  dapat  menentukan  kualitas  pakan
yang  dilihat  dari  kuat  atau  tidaknya  ikatan lignohemiselulosa, lignoselulosa dan silika.
Tabel 2. Kadar ADF Ampas Aren Lama Pemeraman Rata- rata 0 hari 3 hari 6 hari -------------(%)---------- Amoniasi  55,28 43,04 43,47 47,26 x Non Amoniasi 60,29 43,47 43,05 48,94 y Rata-rata  57,78 p 43,26 qr 43,26 qr
Superskrip  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05).
Semakin  lama  proses  fermentasi  pada ampas  aren  yang  diamoniasi  tidak  dapat menurunkan kadar ADF secara signifikan. Hal ini diduga  karena  pertumbuhan Trichoderma  reesei yang kurang optimal yang menyebabkan menyebabkan  proses  fermentasi  yang  tidak optimal.
Kapang  dapat  bertumbuh  optimal  pada kurun  waktu  tertentu.  Pertumbuhan Trichoderma reesei yang  optimum  ditandai  dengan  terdapat miselium  pada  fermentasi  ampas  aren.  Jaelani (2007) menyatakan bahwa pertumbuhan miselium  secara  optimal  menandakan  bahwa Trichoderma  reesei dapat  berkembang  secara optimal. Trichoderma reesei mampu mensekresikan  enzim  selulase  yang  dapat memecah  serat  pada  bahan  pakan.  Murad  dan Azzaz  (2010)  menyatakan  bahwa  selulase merupakan  sekelompok  enzim  fibrolitik  yang dapat  menghidrolisis  serat  pada  dinding  sel tanaman menjadi glukosa.
Tabel 3. Kadar Hemiselulosa Ampas Aren
Lama Pemeraman Rata- rata 0 hari  3 hari 6 hari --------------(%)---------- Amoniasi  24,50 d 23,57 e 22,72 f 22,93 x Non Amoniasi 22,51 a 21,16 b 21,34 c 21,67 y Rata-rata  23,50 p 22,36 q 22,03 r
Superskrip  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05).
Semakin lama proses fermentasi pada ampas aren teramoniasi dapat menurunkan kadar hemiselulosa secara signifikan. Hal tersebut disebabkan  karena  mikroba  memiliki  nutrien  yang cukup dari proses amoniasi untuk proses fermentasi. Proses amoniasi yang berperan dalam merenggangkan ikatan selulosa serta dapat membantu  penyediaan  substrat  mikroba,  akan menunjang keberhasilan proses fermentasi. Trichoderma  reesei menghasilkan  enzim  untuk memutus ikatan lignoselulosa dan lignohemiselulosa dalam  proses  fermentasi.  Enzim  yang  dihasilkan oleh Trichoderma reesei untuk degradasi hemiselulosa  adalah  enzim  xilanase  yang  dapat memutus ikatan lignoselulosa dan lignohemiselulosa sehingga  menghasilkan  ikatan-ikatan  pendek.  Dewi et  al .  (2019)  menyatakan  bahwa  enzim  xilanase memecah xilan menjadi xilosa yang dapat digunakan untuk nutrien bagi mikrobia.
Tabel 4. Kadar Selulosa Ampas Aren
Lama Pemeraman Rata- rata 0 hari 3 hari 6 hari --------------(%)----------- Amoniasi  33,43 b 26,94 cd 22,78 d 27,72 x Non
Amoniasi
44,17 a 27,94 cd 26,14 cd 32,75 y
Rata-rata  38,80 p 27,44 q 26,96 r
Superskrip  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05).
Semakin lama proses fermentasi pada ampas aren  teramoniasi  dapat  menurunkan  kadar  selulosa secara signifikan. Hal tersebut diduga karena dengan bantuan amoniasi, kapang dengan mudah mendegradasi serat seiring berjalannya fermentasi.
Penambahan  urea  pada  proses  amoniasi membantu ikatan
lignoselulosa dan lignohemiselulosa
merenggang sehingga Trichoderma  reesei lebih  mudah  dalam  mencerna selulosa.  Andayani  (2008)  menyatakan  bahwa  urea yang terhidrolisis dengan bantuan enzim urease akan menghasilkan  amonia  yang  akan  terikat  dalam jaringan dan dapat merenggangkan ikatan ligninselulosa dan lignohemiselulosa.
Perenggangan ikatan tersebut akan memudahkan enzim selulase yang disekresi Trichoderma reesei dalam proses degradasi selulosa, sehingga  terdapat  penurunan  kadar  selulosa.
Tahapan  pemecahan  selulosa  yaitu  pemecahan selulosa menjadi selobiosa dan selobiosa menjadi glukosa dengan peranan  enzim selulase. Kodri et al. (2013)  menyatakan  bahwa  enzim  selulase pada  mikrobia  selulolitik  memiliki  mekanisme perombakan  rantai  ikatan  dengan  melibatkan  3 komponen  besar,  yaitu  endo-β-1,4-glukanase sebagai  pemutus  ikatan  selulosa  pada  bagian  sisi internal  daerah  amorf  serat,  sehingga  pada  sisi yang  terbuka  akan  diserang  oleh  endo-β-1,4- glukanase  atau cellobihydrolase yang  kemudian akan  memotong  bagian  ujung  rantai  individu selulosa sehingga dihasilkan selobiosa, kemudian β-glukosidase  merombak  selobiosa  menjadi molekul glukosa.
Ampas  aren  yang  teramoniasi  memiliki  kadar selulosa  yang  lebih  rendah  dibanding  dengan ampas  aren  yang  tidak  diamoniasi.  Hal  tersebut menunjukkan bahwa proses amoniasi menggunakan  urea  dapat  mendegradasi  selulosa dalam bahan pakan.
Tabel 5. Kadar Lignin Ampas Aren Lama Pemeraman Rataan 0 hari 3 hari 6 hari --------------(%)----------- Amoniasi  17,09 14,80 14,58  15,49 x Non Amoniasi 14,58 14,13 16,54 15,08 y Rataan 15,84 p 14,46 q 15,56 r
Superskrip  yang  berbeda  pada  baris  yang  sama menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05).
Semakin  lama  fermentasi  pada  ampas aren  teramoniasi  tidak  dapat  menurunkan  kadar lignin secara signifikan. Hal tersebut menunjukkan  bahwa enzim  lignoltik    dapat bekerja  optimal  dalam  mendegradasi  lignin. Enzim  selulase  dan  enzim  lignolitik  dapat memecah ikatan kompleks serat menjadi komponen  yang  lebih  sederhana.  Naufala  dan Pandenbesie  (2015)  menyatakan  bahwa  tujuan fermentasi  untuk  memecah  ikatan  lignoselulosa menjadi  komponen  yang  lebih  sederhana  yaitu lignin  dan  selulosa  kemudian  selulosa  dipecah oleh enzim selulase menjadi glukosa.
Peningkatan kadar lignin terjadi pada ampas aren tanpa  amoniasi  yang  difermentasi  dengan  lama peram 6 hari. Hal ini menunjukkan bahwa nutrien
pada  substrat  semakin  berkurang  karena  digunakan Trichoderma  reesei sebagai  sumber  energi  selama proses  fermentasi.  Mikroba  membutuhkan  nutrien yang cukup agar fermentasi berjalan secara optimal. Ngaji et al. (2016) menyatakan bahwa selama proses fermentasi  substrat  akan  kehilangan  sebagian komponen  nutrisi  karena Trichoderma  reesei membutuhkan energi untuk tetap bertahan hidup.

## KESIMPULAN
Semakin  lama  fermentasi  pada  ampas  aren teramoniasi tidak dapat menurunkan kadar NDF dan ADF  secara  signifikan,  tetapi  dapat  menurunkan kadar  hemiselulosa,  selulosa  dan  lignin  secara signifikan.

## REFERENSI
Andayani,  J.  2008.  Evaluasi  kecernaan in  sacco beberapa  pakan  serat  yang  berasal  dari limbah pertanian dengan amoniasi. J. Ilmiah Ilmu-Ilmu Peternakan. 11 (2): 88 – 92.
AOAC,  2005.  Official  Methods  of  Analysis.  18 th .
Association of Analytical Chemist, Washington D. C.
Dewi, A. A., B. I. M. Tampoebolon dan E. Pangestu. 2019.  Pengaruh  lama  fermentasi  kulit kacang tanah teramoniasi terhadap kandungan  bahan  kering  total, neutral detergent  fiber dan acid  detergent  fiber . J. Agromedia. 37 (2): 34-42.
Fariani, A., dan S. Akhadiarto. 2016. Pengaruh lama ensilase  terhadap  kualitas  fraksi  serat  kasar silase  limbah  pucuk  tebu  ( Saccharum officinarum ) yang diinokulasi dengan bakteri  asam  laktat  terseleksi. J.  Teknologi Lingkungan. 13 (1): 85-92.
Jaelani,  A.  2007.  Optimalisasi  fermentasi  bungkil inti  sawit  ( Elaeis  guineensis  jacq )  oleh kapang Trichoderma  reesei . J.  Ilmu  Ternak Universitas Padjadjaran. 7 (2): 88-94.
Kodri,  K.,  B.  D.  Argo  dan  R.  Yulianingsih.  2013.
Pemanfaatan enzim selulase dari Trichoderma  reseei dan Aspergillus  niger
sebagai  katalisator  hidrolisis  enzimatik
jerami padi dengan pretreatment microwave . Jurnal  Bioproses  Komoditas Tropis. 1 (1): 36-43.
Murad  and  Azzaz.  2010.  Cellulase  and  dairy animal  feeding.  J.  Biotechnology.  9  (3): 238-258.
Naufala,  W.  A.  dan  E.  S.  Pandebesie.  2015.
Hidrolisis  eceng  gondok  dan  sekam  padi untuk menghasilkan gula reduksi sebagai tahap  awal  produksi  bioetanol.  J.  Teknik
ITS. 4 (2): 109-113.
Ngaji,  S.  H.,  A.  Saleh  dan  M.  Nenobais.  2016. Pengaruh fermentasi kulit buah kopi dengan Trichoderma  reseei yang  ditambah  Zn–Cu isoleusinat  terhadap  perubahan  kandungan nutrisi. J. Nukleus Peternakan. 3 (1): 9-16.
Styawati,  N.  E.  2014.  Pengaruh  lama  fermentasi Trametes  sp. terhadap  kadar  bahan  kering, kadar abu, dan kadar serat kasar daun nenas varietas
Smooth cayene . J. Ilmiah Peternakan Terpadu. 2 (1): 19-24.