Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 843 - 850

## Pengaruh BAP (Benzyl Amino Purine) Pada Pertumbuhan Brokoli Hibrida
(Brassica oleracea Var. Valencia) Dan Kandungan Sulforafan Pada Kultur In vitro
Effect of BAP (Benzyl Amino Purine) on the Growth of Broccoli Hybrids (Brassica oleracea Var. Valencia) and Sulforaphane Content in In vitro Culture
Dewi Chintya Tompo (1) , Wenny Tilaar (2) , Edy Fredy Lengkong (2)
1) Mahasiswa Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado 2) Dosen Program Studi Agronomi, Fakultas Pertanian, Universitas Sam Ratulangi, Manado
*Penulis untuk korespondensi: chintyadhewi93@gmail.com
Naskah diterima melalui e-mail jurnal ilmiah agrisosioekonomi@unsrat.ac.id : Senin, 05 Desember 2022
Disetujui diterbitkan
: Rabu, 28 September 2022

## ABSTRACT
This  study  aimed  to  determine  the  effect  of  BAP  on  the  growth  of  hybrid  broccoli  and  the  synthesis  of sulforaphane  content  grown  on  MS  media.  Observations  were  made  for  2  weeks,  namely  on  the  first  day  after planting until  the  14th day  after  planting.  This  study  used a  completely  randomized  design  with  4  treatments  and was repeated 9 times. The results showed that on the first day after planting the hybrid broccoli had germinated. It was found that the highest Broccoli sprout height in the treatment without BAP (Control) was 8.82cm, the highest weight of Broccoli sprouts in the treatment without BAP (Control) was 0.17g, and the highest sulforaphane content in the 1 ppm BAP treatment was 6.56µg/g.
Keywords : broccoli; benzyl amino purine; sulforaphane

## ABSTRAK
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh BAP terhadap pertumbuhan Brokoli hibrida dan sintesis kandungan sulforafan yang ditumbuhkan pada media MS . Pengamatan dilakukan selama 2 minggu yaitu pada hari pertama  setelah  tanam  sampai  hari  ke-14  setelah  tanam.  Penelitian  ini  menggunakan  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL)  dengan  4  perlakuan  dan  diulang  sebanyak  9  kali.  Hasil  penelitian  mendapatkan  pada  hari  pertama  setelah tanam  Brokoli  hibrida  sudah  berkecambah.  Ditemukan  bahwa  tinggi  kecambah  Brokoli  yang  tertinggi  pada perlakuan  tanpa  BAP  (Kontrol)  yaitu    8.82cm,  berat  kecambah  Brokoli  yang  tertinggi  pada  perlakuan  tanpa  BAP (Kontrol) yaitu 0.17g, dan kandungan sulforafan  yang tertinggi pada perlakuan BAP 1 ppm yaitu 6.56µg/g.
Kata kunci : brokoli; benzyl amino purine; sulforafan
Pengaruh BAP (Benzyl Amino Purine) pada Pertumbuhan Brokoli Hibrida..….……………(Dewi Tompo, Wenny Tilaar, Edy Lengkong)

## PENDAHULUAN

## Latar Belakang
Proses  memperbanyak  tanaman  seperti brokoli  biasanya  dilakukan  secara  generatif atau  menanam  menggunakan  benih.  Metode lain  yang  bisa  digunakan  adalah  dengan teknik  kultur  jaringan  yang  salah  satu keuntungannya  dapat  memperbanyak  bibit dalam  jumlah  banyak,  seragam  dan  cepat. Kultur  jaringan  tanaman  adalah  pengetahuan dan  teknologi  tentang  pertumbuhan  sel, jaringan  atau  organ  yang  diisolasi  dari tanaman  induk  dan  ditumbuhkan  pada  media buatan  yang  aseptik.  Teknologi  kultur jaringan  ini  sudah  banyak  digunakan  untuk perbanyakan  bibit  tanaman  yang  sulit diperbanyak secara vegetatif (Mandang et al., 2021).  Dalam  teknologi  kultur  jaringan banyak  ditambahkan  Zat  Pengatur  Tumbuh (ZPT)  seperti  BAP (Benzyl  Amino  Purine) . BAP  merupakan  zat  pengatur  tumbuh  yang dapat  memacu  pembentukan  tunas  dan  dapat memutus  masa  dormansi.  ZPT  ini  sangat penting digunakan dalam teknik kultur jaringan jika ingin mendapatkan hasil yang lebih cepat.
Brokoli  ( Brassica  oleracea L.)  adalah sayuran  yang  tinggi  akan  kandungan  vitamin A  dan  vitamin  D.  Bagian  yang  dikonsumsi dari tanaman brokoli adalah berupa bongkahan  bunga  yang  mirip  bunga  kol namun  berwarna  hijau.  Brokoli  termasuk sayuran  yang  tidak  tahan  terhadap  udara panas,  akibatnya,  brokoli  cocok  ditanam  di dataran  tinggi  yang  lembab  dengan  suhu rendah,  yaitu  di  atas  700m  dpl.  Sayuran  ini, juga  tidak  tahan  terhadap  hujan  yang  terus menerus. Jika hal ini terjadi, tanaman Brokoli akan  menjadi  kekuning-kuningan  dan  jika membusuk  warnanya  berbintik-bintik  hitam. Panen  bunga  brokoli  dilakukan  setelah umurnya  mencapai  60  samapi  90  hari  sejak ditanam,  sebelum  bunganya  mekar,  dan sewaktu  kropnya  masih  berwarna  hijau.  Jika bunganya telah mekar, tangkai bunganya akan memanjang  dan  keluarlah  kuntum-kuntum bunga berwarna kuning (Pianika et al., 2011).
Tanaman  brokoli  bermanfaat  sebagai obat  pencegah  kanker  bila  dikonsumsi  setiap hari. Antioksidan dari brokoli sangat berguna untuk mencegah terjadinya penuaan dini yang sering  dikhawatirkan  para  kaum  hawa. Brokoli juga bisa menjadi salah satu alternatif dalam  mencegah  terjadinya  gejala  maupun penyakit  diabetes.  Salah  satu  senyawa  yang terkandung  pada  brokoli  adalah  sulforafan. Sulforafan cukup populer karena menawarkan beragam manfaat kesehatan. Manfaat tersebut adalah menurunkan resiko kanker, memelihara kesehatan jantung, memiliki efek antidiabetes,  menangani  gejala  autisme, melindungi  kulit  dari  kerusakan  akibat  sinar ultraviolet,  mengurangi  penurunan  kondisi mental  setelah  cedera  otak  dan  mempercepat pemulihannya, mengendalikan konstipasi atau sembelit  (Putra,  2020).  Hasil  penelitian  yang dilakukan  oleh  Lintong et  al. (2022), menyatakan  bahwa  BAP  1  ppm  dan  2  ppm mampu merangsang sintesis sulforafan terutama  pada  kecambah  jenis  hibrida  tetapi ini  pula  terjadi  pada  kecambah  jenis Lucky Taichung hanya  masih  kurang  sintesisnya dibandingkan  pada  jenis  hibrida.  Pada penelitian  tersebut  tidak  disebutkan  dengan jelas varietas brokoli hibrida yang digunakan, sehingga  penulis  ingin  meneliti  kandungan sulforafan  pada  kecambah  brokoli  hibrida varietas Valencia yang  diberi  BAP (Benzyl Amino Purine) .

## Rumusan Masalah
Berdasarkan  latar  belakang  yang  telah diuraikan,  yang  menjadi  rumusan  masalah yakni  bagaimana  pertumbuhan  kecambah pada tumbuhan brokili hibrida dan kandungan sulforafan  dengan  penambahan  BAP (Benzyl Amino Purine) pada media MS?

## Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian adalah untuk
mengetahui pengaruh BAP terhadap pertumbuhan  kecambah  brokoli  hibrida  dan kandungan sulforafan yang ditumbuhkan pada media MS.
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 843 - 850

## Manfaat Penelitian
Penelitian ini bermanfaat untuk memperoleh pengetahuan baru terkait dengan proses pertumbuhan serta kandungan sulforafan  yang  terdapat  pada  tanaman brokoli  hibrida  yang  diberi  BAP (Benzyl Amino Purine).

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada  bulan Juli sampai Agustus 2022 pada Laboratorium Bioteknologi  Fakultas  Pertanian  Universitas Sam  Ratulangi  Manado  untuk  perbanyakan kultur  jaringan  dan  di  Laboratorium  Jurusan Teknik  Kimia  Politeknik  Negeri  Malang untuk analisis kandungan sulforafan. Penelitian  dilaksanakan  dengan  beberapa tahapan,  yaitu  pembuatan  media,  sterilisasi benih  brokoli,  penanaman,  ekstraksi  dan isolasi sulforafan.

## Variabel Pengamatan
Variabel  yang  diamati  pada  penelitian ini:
1. Waktu  terbentuknya  kecambah,  diamati pada minggu pertama setelah tanam.
2. Tinggi  kecambah,  diamati  pada  minggu kedua setelah tanam (14 HST).
3. Berat  kecambah,  diamati  pada  minggu kedua setelah tanam (14 HST).
4. Analisis  kandungan  Sulforafan,  diamati pada  minggu  ketiga  setelah  tanam  (21 HST).

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat  yang  digunakan  adalah  botol kultur,  gelas  beker,  gelas  ukur,  pipet,  pinset, pH  meter,  timbangan  analitik,  autoclave, Laminar Air Flow (LAF), petridish, Erlenmeyer,  spatula,  kompor,  scalpel,  lampu Bunsen,  aluminium  foil,  panci,  rak  kultur, sonicleaner,  hot  plate,  sentrifuga,  mortal  dan alat-alat  gelas  lainnya.  Perangkat  Liquid Chromatography  Mass  spectroscopy,  kolom shim-Pack  XR-ODSIL  (50mm×2.0mm  I.D),
fase gerak A: 5mmol/l ammonium format-air, fase  gerak  B:  asetonitril,  laju  pengaliran 0.3ml/menit,  volume  injeksi  5ul,  temperature kolom  40℃,  pengaliran  gas  1.5  l/menit, tekanan gas kering 10 l/menit.
Bahan yang digunakan dalam penelitian adalah agar, gula, media MS, aquades, larutan stok  hara,  metionin,  alkohol  70%  dan  95%, NaOH,  HCl,  spritus,  Bayclin,  BAP  ( Benzyl Amino  Purine ),  benih  brokoli  varietas Valencia, serta senyawa kimia untuk ekstraksi.  Bahan-bahan  tersebut  antara  lain methanol  p.a,  acetonitril,  ammonium  format dan akuades, serta standart sulforafan.

## Pelaksanaan Penelitian
Penelitian dilaksanakan dengan beberapa  tahapan,  yaitu  pembuatan  media, sterilisasi benih brokoli, penanaman, ekstraksi dan isolasi sulforafan.
1. Pembuatan Media
a. Mempersiapkan  alat  dan  bahan  yang dibutuhkan.
b. Menimbang  agar  8g  (masing-masing 2g sesuai dengan perlakuan), gula 30g dan media MS 4,4g.
c. Bahan-bahan  tersebut  kecuali  agar- agar  dimasukkan  dalam  gelas  beker yang  sudah  ditambahkan  aquades sebanyak  500ml  untuk  melarutkan bahan-bahan.
d. Tambahkan Metionin 50 mg.
e. Menambahkan aquades sampai larutan mencapai 1 liter
f. Pisahkan  larutan  tersebut  menjadi  4 bagian  yang  sama  banyak  (masing- masing perlakuan 250ml) dan tambahkan BAP (Benzyl Amino Purine) sesuai dengan perlakuan yang akan digunakan.
g. Mengukur  pH  sampai  mencapai  5,8 menggunakan  pH  meter.  Apabila  pH kurang  maka  dapat  ditambahkan NaOH, dan jika lebih maka ditambahkan HCl.
h. Memasukan  agar  pada  panci  dan tambahkan dengan larutan yang sudah dibagi tadi.
Pengaruh BAP (Benzyl Amino Purine) pada Pertumbuhan Brokoli Hibrida..….……………(Dewi Tompo, Wenny Tilaar, Edy Lengkong)
i. Kemudian  masak  larutan  sampai mendidih.
j. Menuangkan  larutan  tersebut  dalam botol kultur steril.
k. Tutup  permukaan  botol  dengan  rapat menggunakan plastik bening dan karet gelang.
l. Mensterilkan  media  pada  autoclave 121°C selama 20 menit.
2. Sterilisasi Benih Brokoli
Sterilisasi  benih  brokoli  dilakukan  secara bertingkat yaitu pertama, benih dimasukkan  kedalam  larutan  air  steril 100ml+15%  bayclin  dan  dikocok  selama  5 menit  kemudian  dibilas  dengan  air  steril. Selanjutnya,  benih  dimasukkan  kedalam larutan  air  steril  100ml+10%  bayclin  dan dikocok  selama  10  menit  kemudian  dibilas dengan air steril. Terakhir, benih dimasukkan  kedalam  larutan  air  steril 100ml+5%  bayclin  dan  dikocok  selama 15  menit  kemudian  dibilas  dan  ditanam pada media MS.
3. Penanaman
a. Laminar  Air  Flow  (LAF)  disterilkan dengan  cara  UV  dihidupkan  selama kurang lebih 1 jam sebelum digunakan.
b. Sterilkan  botol  kultur,  alat  dan  bahan yang  ada  di  dalam  LAF  dengan  cara disemprot  dengan  alkohol  ataupun dibakar dengan api spritus.
c. Benih  brokoli  ditanam  sebanyak  3 benih  dalam  1  botol  kultur  berisi media sesuai perlakuan
d. Setelah  itu,  tutup  rapat  media  dengan plastik  bening  dan  diikat  dengan gelang  karet  supaya  tidak  terjadi kontaminasi.
e. Letakan  media  yang  sudah  berisi benih brokoli pada rak-rak kultur.
4. Ekstraksi dan Isolasi sulforafan Sampel  yang  telah  dilarutkan  dalam acetonitrile  dilakukan  sentrifugasi  dengan kecepatan  4.000  rpm  selama  10  menit.  1ml supernatant  ditambahkan  1ml  acetonitrile dimasukkan  dalam  ependorf  yang  berisi adsorben.  Sampel  dikocok hingga  sampel
dan adsorbent tercampur kemudian dilakukan  sentrifugasi  pada  kecepatan 10.000  rpm  selama  10  menit.  Supernatan disaring  dengan  membrane  filter  dengan ukuran  0.2  mikron  dan  siap  dilakukan  uji dengan LC-MSMS.. Kolom yang digunakan dengan  spesifikasi  phenomenex
(50mm × 2,1mm × 1,7µm). UHPLC merek ACCELLA  type  1250  buatan  Thermo Scientific yang terdiri dari degasser vakum, pompa  quartener,  autosampler  termostatik dikendalikan  Personal  computer  melalui program  x-calibur  2.1.  Fase  gerak  A  terdiri dari  0.1%  asam  format  dalam  aquabidest, fase B terdiri dari 0.1% asam format dalam acetonitril.  Sebuah  gradien  linier  dengan kecepatan  300µl/menit  dengan  pengaturan fase gerak sebagai berikut: Kolom dikontrol pada suhu 30°C, dan kompartemen autosampler ditetapkan untuk 16°C. Penggunaan  MS/MS  Triple  Q  (quadrupole) spektrometer  massa  TSQ  QUANTUM ACCESS  MAX  dari  Thermo  Finnigan dengan  sumber  ionisasi  ESI  (Electrospray Ionization) dikendalikan oleh software TSQ Tune  yang  dioperasikan  dengan  ionisasi mode  negatif.  Kondisi  ionisasi  ESI  adalah sebagai  berikut: tegangan  spray  3  kV;  suhu penguapan  300°C;  suhu  kapiler  300°C; nitrogen sebagai sheath gas pressure 40 psi, dan  Aux  gas  pressure  10  psi  dengan  gas argon.  Ionisasi  dilakukan  pada  muatan positif  dengan  pengaturan  ion  precursor 178m/z,  sebagai  ion  produk  diatur  pada 114m/z  (quantitative)  dan  72m/z  sebagai (qualitative).

## Analisis Data Penelitian
Penelitian menggunakan Rancangan Acak Lengkap  dengan  4  perlakuan  dan  diulang sebanyak  9  kali.  Susunan  perlakuan  penelitian sebagai berikut:
Perlakuan pertama  : BAP 0 ppm (Tanpa BAP) Perlakuan kedua     : BAP 0,5 ppm Perlakuan ketiga     : BAP 1 ppm Perlakuan keempat : BAP 1,5 ppm
Data diamati dan dianalisis menggunakan analisis  Ragam  dan  jika  berbeda  nyata  maka dilanjutkan dengan uji BNT 5%.
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 843 - 850

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Waktu Terbentuknya Kecambah
Pertumbuhan  suatu  tanaman  merupakan proses  bertambahnya  ukuran  baik  volume, massa  dan  tinggi  serta  jumlah  sel  secara irreversible (tidak  dapat  kembali  ke  bentuk semula).  Tahap  pertumbuhan  ini  terjadi  karena pertambahan  jumlah  sel  serta  pembesaran  sel. Kecambah merupakan tanaman muda yang baru dan  berkembang  dari  tahap  embrionik  dalam biji.  Perkembangan  tersebut  juga  disebut dengan  perkecambahan  dan  merupakan  suatu tahap  kritis  dalam  tumbuhan  (Ucihadiyanto, 2022).
Tabel 1. Waktu Terbentuknya Kecambah Perlakuan Hari 1 2 BAP 0 89 100 BAP 0.5 56 100 BAP 1 78 100 BAP 1.5 67 100 Perkecambahan meliputi
beberapa tahapan,  antara  lain  proses  penyerapan  air masuk ke dalam biji (imbibisi), sekresi hormon dan  enzim,  hidrolisis  cadangan  makanan, pengiriman bahan makanan terlarut dan hormon ke daerah titik tumbuh atau daerah lainnya serta asimilasi  atau  fotosintesis.  Proses  penyerapan air pada biji terjadi melalui mikrofil. Masuknya air  pada  biji  menyebabkan  enzim  aktif  bekerja. Air yang masuk ke dalam kotiledon menyebabkan  volumenya  bertambah,  sehingga kotiledon membengkak. Pembengkakan
tersebut pada akhirnya menyebabkan melunaknya  biji  dan  pecahnya  testa.  Enzim amilase  bekerja  memecah  tepung  menjadi maltosa  selanjutnya  maltosa  dihidrolisis  oleh menjadi  asam  amino.  Senyawa  glukosa  masuk kedalam proses metabolism untuk menghasilkan  energy  atau  diubah  menjadi senyawa  karbohidrat  penyusun  struktur  tubuh- Asam amino dirangkaikan menjadi protein yang berfungsi  untuk  menyusun  struktur  sel  dan menyusun  enzim-enzim  baru.  Asam  lemak terutama dipakai untuk menyusun membran sel (Setiawan et al., 2021).
Berdasarkan pengamatan, pada hari pertama setelah tanam, kecambah brokoli sudah terbentuk.  Salah  satu  cirinya  yaitu  belum
memiliki  daun  yang  jelas.  Dapat  dilihat  pada Tabel  1  bahwa  dengan  penambahan  BAP ( Benzyl  Amino  Purine )  memberikan  pengaruh pada  waktu  terbentuknya  kecambah  brokoli. Jumlah  kecambah  hari  pertama  yang  paling banyak  adalah  pada  BAP  0  (kontrol)  yaitu  8 botol  dan  paling  sedikit  pada  perlakuan  BAP 0.5  ppm  yaitu  5  botol  dan  pada  hari  kedua setelah tanam, semua sudah berkecambah.

## Tinggi Kecambah
Hasil  pengamatan  menunjukan  bahwa pemberian  BAP  berpengaruh  terhadap  tinggi kecambah  brokoli  berumur  2  minggu.  Dari Tabel 2 terlihat bahwa perlakuan menggunakan BAP  dapat  menekan  pertumbuhan  tinggi kecambah  brokoli.  Ini  berkaitan  dengan  fungsi dari  sitokinin  yaitu  terjadi  pembelahan  sel. Semakin tinggi konsentrasi BAP maka semakin rendah  pertumbuhan  tinggi  kecambah.  Rataan tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  BAP  0  ppm (Kontrol)  yaitu  8.82cm  dan  terendah  pada perlakuan BAP 1.5 ppm.
Tabel 2. Tinggi Kecambah Brokoli Umur 2 Minggu
Perlakuan BAP 0 ppm BAP 0.5 ppm BAP 1 ppm BAP 1.5 ppm Ulangan (cm)
1 9.8 4.7 5 5.3 Grand Total BNT 5% = 0.18 2 9.6 4.8 5.4 5.1
3 8.8 5.1 3.5 4.3 4 8.7 3.6 4.6 4.4 5 9.2 4.1 4.3 3.8 6 8.4 4.1 3.7 3.8 7 8.6 4.4 3.9 4 8 8.3 4.6 4.4 3.8 9 8 4.5 4.8 4.1 Total (cm) 79.4 39.9 39.6 38.6 197.5 Rata-rata (cm) 8.82 b 4.43 a 4.40 a 4.29 a 5.485
Keterangan : Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%.
Perlakuan  BAP  0.5  ppm,  1  ppm,dan  1.5 ppm  tidak  berbeda  nyata  tetapi  berbeda  nyata dengan perlakuan tanpa BAP (Kontrol). Pengaruh dari BAP tersebut sejalan dengan yang dilaporkan oleh  Silaen  (2018),  dimana  semakin  tinggi konsentrasi  maka  rataan  tinggi  tanaman  yang dihasilkan  semakin  menurun  dan  penelitian  yang dilakukan  oleh  Tilaar  (2016)  pada  perlakuan kombinasi NAA dan BAP dihasilkan rataan tunas tertinggi  diperoleh  pada  konsentrasi  NAA  2  ppm dan BAP 3 ppm.
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Sofia (2007)  menyatakan  bahwa  semakin  tinggi
Pengaruh BAP (Benzyl Amino Purine) pada Pertumbuhan Brokoli Hibrida..….……………(Dewi Tompo, Wenny Tilaar, Edy Lengkong)
konsentrasi  BAP  maka  tinggi  tanaman  makin menurun  terutama  pada  konsentrasi  4  ppm BAP.  Penelitian  dari  Purba  (2021)  pada tanaman  Kantung  Semar  dengan  penambahan BAP  0.5mg/L  dan  1mg/L  dapat  menghambat pertumbuhan  eskplan  termasuk  pertambahan tinggi  tunas  dan  mendapatkan  hasil  terendah yaitu 0.00mm.
Berdasarkan  hasil  penelitian  dari  Lutfiani et al. (2022) menyatakan bahwa eksplan dengan jumlah  tunas  terbanyak  tidak  menghasilkan panjang  tunas  tertinggi.  Hal  ini  karena  energi yang  dibutuhkan  untuk  pemanjangan  tunas digunakan  untuk  pembentukan  calon  tunas lainnya, sehingga tinggi tunas dapat mengalami penghambatan. Penelitian Muchsin et al. (2022) menunjukkan bahwa pada perlakuan B0 (BAP 0 ppm) merupakan konsentrasi yang berpengaruh tinggi terhadap pertumbuhan tinggi batang yaitu sebesar  1.77±0.798cm  sampai  dengan  60  hari setelah  tanam.  Sedangkan  konsentrasi  1.5  ppm merupakan  konsentrasi  yang  paling  rendah terhadap  pertumbuhan  tinggi  batang,  yaitu sebesar  0.64±0.058  cm.  Hal  ini  diduga  bahwa konsentrasi  ZPT  eksogen  yang  ditambah  pada eksplan  M  petola  terlalu  tinggi  sehingga menghambat pertumbuhan eksplan.

## Berat Kecambah
Berdasarkan Tabel 3 menunjukkan bahwa pemberian  BAP (Benzyl  Amino  Purine) berpengaruh  secara  signifikan  terhadap  berat kecambah  brokoli  umur  2  minggu.  Walaupun fungsi  dari  sitokinin  khususnya  BAP  berperan dalam  pembelahan  sel,  tetapi  dari  hasil pengamatan  yang  paling  tinggi  adalah  pada perlakuan kontrol (BAP 0 ppm) yaitu 0.17g dan paling rendah pada perlakuan BAP 1 ppm yaitu 0.11g.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa BAP  0.5  dan  BAP  1.5  tidak  berbeda  nyata tetapi berbeda nyata dengan perlakuan lainnya.
Tabel 3. Berat Basah Kecambah Brokoli Umur 2 Minggu
Perlakuan BAP 0 ppm BAP 0.5 ppm BAP 1 ppm BAP 1.5 ppm Ulangan (g) 1 0.27 0.11 0.1 0.14
BNT 5% = 0.01
2 0.26 0.12 0.13 0.12
3 0.19 0.15 0.11 0.11
4 0.14 0.14 0.12 0.17
5 0.19 0.14 0.11 0.14
6 0.11 0.13 0.11 0.1
7 0.18 0.12 0.09 0.15
8 0.12 0.15 0.1 0.1 Grand Total 9 0.14 0.13 0.16 0.14 Total (g) 1.6 1.19 1.93 1.17 4.99 Rerata 0.17 c 0.13 b 0.11 a 0.13 b 0.135
Keterangan  :  Angka  yang  diikuti  dengan  huruf  yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%
Menurut Tilaar et al. (2022), menyatakan bahwa berat kecambah tertinggi  pada perlakuan tanpa  BAP  dan  metionin  yaitu  0.304g sedangkan terendah    pada  perlakuan  kombinasi BAP  1  ppm  dan  Metionin  25g  yaitu  0.172g. Semakin tinggi metionin tanpa BAP menghambat  pertambahan  berat  kecambah brokoli  hibrida  tetapi  bila  dikombinasikan dengan BAP maka keduanya saling mendukung dalam  memacu  pertambahan  berat  kecambah brokoli  hibrida  tersebut,  meskipun  demikian bahwa kedua faktor tersebut sedikit menghambat  pertambahan  berat  kecambah Brokoli hibrida tersebut.

## Kandungan Sulforafan
Hasil  penelitian  pada  brokoli  varietas Valencia  menunjukkan  bahwa  kandungan sulforafan  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan BAP  1  ppm  yaitu  6.76µg/g  dan  yang  terendah terdapat pada perlakuan tanpa BAP atau kontrol yaitu  3.03µg/g.  Ini  berarti  telah  terjadi peningkatan kandungan sulforafan jika ditambahkan BAP (Benzyl Amino Purine).
Tabel 4. Kandungan Sulforafan pada Kecambag Brokoli
Perlakuan BAP 0 ppm BAP 0.5 ppm BAP 1.0 ppm BAP 1.5 ppm Kandungan Sulforafan (µg/g) 1 3.19 5.21 6.49 4.09
BNT 5%
= 0.06 2 3.08 5.19 6.53 4.09 3 3.03 5.47 6.39 4.13 4 3.08 5.30 6.6 4.08 5 3.22 5.31 6.76 4.14 Total 15.38 26.48 32.83 20.53 Rerata 3.076 a 5.296 c 6.566 d 4.106 b
Ket. Angka yang diikuti dengan huruf yang sama, tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT 5%
Penelitian  yang  dilakukan  Tilaar et  al. (2018),  berpendapat  bahwa  hasil  dari  rata-rata kandungan  sulforafan  pada  kecambah  dari jenis-jenis  kubis  menunjukkan  brokoli  jauh lebih  besar  dibandingkan  dengan  kandungan sulforafan  pada  kecambah  kol  bunga  putih,  kol batu  dan  petsai.  Besarnya  tujuh  kali  dari  pada kol  batu  dan  162.6  kali  lebih  besar  dari  kol bunga  putih  serta  308.1  kali  lipat  lebih  besar dari  kandungan  sulforafan  pada  kecambah
Agri- SosioEkonomi Unsrat, ISSN (p) 1907– 4298, ISSN (e) 2685-063X , Sinta 5, Volume 18 Nomor 3, September 2022 : 843 - 850
petsai.  Kandungan  sulforafan  tertinggi  pada kecambah brokoli yaitu 117.08ug/g.
Menurut  Tilaar  (2016)  bahwa  hasil sulforafan pada 0 ppm NAA dengan penambah 0 BAP lebih tinggi bila ditambah 2.5 ppm BAP. Tetapi  bila  penambah  5ppm  BAP  maka  terjadi peningkatan  sulforafan  mencapai  16.35ng  g-1 tunas.  Tetapi  jika  ditambah  dengan  5ppm  BAP meningkatkan sulforafan mencapai 47.76ng g-1 tunas.  Hasil  ini  sangat  ditentukan  oleh keseimbangan  akan  zat  pengatur  tumbuh  yang diberikan pada media.
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan oleh Tilaar et al. (2022), menyatakan kombinasi BAP  1  ppm  dan  metionin  25mg  mendapatkan kandungan  sulforafan  tertinggi  yaitu  729.84. Umumnya  metionin  yang  diberikan  secara tunggal    maupun  diberikan  secara  kombinasi dengan  BAP    dan  NAA  dapat  meningkatkan sintesis sulforafan pada konsenterasi  25g  tetapi bila  dikombinasikan  dengan  konsenterasi    50g akan  menghambat  sintesis    sulforafan.    BAP yang  diberikan  secara  tunggal  meningkatkan sintesis  sulforafan  pada  konsenterasi  1  ppm namun  pada  konsenterasi  2  ppm  dapat menghambat sintesis sulforafan.

## KESIMPULAN DAN SARAN

## Kesimpulan
Penggunaan Benzyl  Amino  Purine (BAP) berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  kecambah brokoli  dimana  perlakuan  BAP  menekan  tinggi dan  berat  tanaman.  BAP  juga  berpengaruh dalam  meningkatkan  kandungan  sulforafan brokoli  hibrida  varietas  Valencia  yaitu  yang terbaik  pada  perlakuan  BAP  1  ppm  yaitu 6.76µg/g.

## Saran
Berdasarkan hasil yang diperoleh dalam penelitian
maka disarankan untuk menggunakan  perlakuan  BAP  1  ppm  pada kecambah  brokoli  hibrida  umur  2  minggu dalam meningkatkan kandungan sulforafan

## DAFTAR PUSTAKA
Lintong,  R.T.J.,  J.P.  Mandang.,  &  E.F. Lengkong.  2022.  Pertumbuhan  Dan Morfogenesis  Krisan (Chrisanthemum Morifolium) Kulo  Dengan  Eksplan Pucuk  Dan  Nodus  Pada  Media  Ms Yang  Diberi Benzil  Amino  Purin (BAP). AGRI-SOSIOEKONOMI ,  18(1),
239-246.
Lutfiani,  I.,  A.  Lestari.,  N.  Widyodaru.  &  S.
Suhesti. 2022. Pengaruh
Pemberian Berbagai  Konsentrasi  NAA (Naphthalene Acetic  Acid) dan  BAP (Benzyl  Amino Purine) terhadap Multiplikasi Tunas
Tanaman Tebu (Saccharum officinarum L.). Jurnal Agrotek Indonesia , 7(1):49-57.
Mandang,  J.,  &  B.  Doodoh.  2021. Kultur Jaringan. Unsrat Press, Manado.
Muchsin, M.E., A. Supriatna., A. Adawiyah., & A.V  Darnia.  2022.  The  Effect  of  Various Concentration  BAP  (6-Benzyl  Amino Purine) on Orchid Growth (Macodes petola (Blume)  Lindl.)  In-Vitro. Jurnal  Berkala Saintek , 10 (1):2531.
Pianika,  R.,  I.  Setiawati.,  L.  Krismala.,  &  A, Fitriani.  2011.  Makalah  Tanaman  Brokoli. Dokumen.tips.
https://dokumen.tips/documents/makalah- tanaman-Brokoli.html. 23 Maret 2022.
Purba,  D.F.  2021.  Multiplikasi  Tunas  Kantung
Semar ( Nepenthes ampullaria Jack.)
Dengan  Berbagai  Konsentrasi  BAP  dan Ekstrak  Tauge  Secara In  vitro . Jurnal Ilmiah Mahasiswa Pertanian, 1(3):112.
Setiawan,  R.B.,  R.  Indarwati.  M.  Fajarfika.,  R. Asril.,  P.E.  Jumawati.,  E.P.  Joeniarti., Ramdan.,    &  Arsi.  2021.  Teknologi Produksi  Benih.  Yayasan  Kita  Menulis. Medan.
Pengaruh BAP (Benzyl Amino Purine) pada Pertumbuhan Brokoli Hibrida..….……………(Dewi Tompo, Wenny Tilaar, Edy Lengkong)

## Silaen,  R.  2018.  Pengaruh  Pemberian  BAP
(Benzyl Amyno Purine) dan Pola Pemotongan Eksplan Terhadap Pertumbuhan  Tunas  Mangis  ( Garcinia mangostana L.)  Secara In  vitro . Prosiding Seminar Nasional Biologi dan Pembelajarannya . Universitas Negeri Medan, 12 Oktober 2018. Sofia, D. 2007. Pengaruh Berbagai Konsentrasi Benzyl Amino Purine Dan Cycocel
Terhadap  Pertumbuhan  Embrio  Kedelai ( Glycine  max L.  Merr.)  Secara In  vitro . Laporan Penelitian. USU Repository. Medan.

## Tilaar,  W.  2016.  Mikropropagasi  Brokoli
( Brassica  oleracea L. var.  Italica  Plenck ) dan  Biosintesis  Sulforafan. Pascasarjana
Unsrat. Manado.
Tilaar,  W.,  J.  Mandang.,  &  A.  Pinaria.  2018. Analisis Kandungan Sulforafan Pada
Beberapa Fase Pertumbuhan Dari Beberapa Jenis  Brassica  sp  Secara In  vitro . Laporan Penelitian.  Universitas  Sam  Ratulangi. Manado.
Tilaar,  W.,  J.  Mandang.,  &  A.  Pinaria.  2022. Analisis Kandungan Sulforafan Pada Kecambah  Brokoli  Hibrida  Dalam  Media MS  Yang  Diberikan  NAA  dan  BAP  Serta Metionin Secara In vitro . Laporan
Penelitian.  Universitas  Sam  Ratulangi.
Manado .
Ucihadiyanto. 2022. Kecambah. Tanah Kaya.com. https://tanahkaya.com/kecambah/,  Diakses pada tanggal 3 Oktober 2022.