Jurnal Hasil Penelitian Bidang Ilmu Akuakultur ISSN 2503-4766 (Print) ISSN 2597-8837 (Online) DOI 10.33087/akuakultur.v9i1.194
Fitokimia, Uji Antibakteri dan Uji Toksisitas dan Dari Ekstrak Daun Kayu Manis ( Cinnamomum burmannii ) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach
Phytochemical, Toxicity Test
and Antibacterial Activity of Cinnamon Leaf Extract (Cinnamomum Burmannii) on the Mortality Rate of Artemia Salina Leach Larvae
*1 Jane  L. Dangeubun, 1 AM Serang, 1 Petrus Letsoin, dan 2 Maryani
1 Politeknik Perikanan Negeri Tual, Politeknik Perikanan Negeri Tual, Politeknik Perikanan Negeri Tual
2 Jurusan Perikanan, Fakultas Pertanian Universitas Palangkaraya
*1 e-mail korespondensi: linda@polikant.ac.id
Abstract. Cinnamon leaves have properties as lowering blood sugar levels, inhibiting bacterial growth. Cinnamon traditional medicine  contains  the  largest  component  of  chemical  substances,  namely  cinnamic  alcohol,  coumarin,  cinnamic  acid, sinamaldehyde,  anthocinin  and  essential  oils  with  sugar,  protein,  simple  fat,  pectin  and  others.  Furthermore,  it  is  said  that cinnamon has antimicrobial, antifungal, antiviral, antioxidant, antitumor, blood pressure lowering, cholesterol and has low fat compounds.  The  dominant  polyphenolic  compound  in  cinnamon  leaves  is  from  the  aldehyde  group,  which  has  insulin-like activity and antioxidant activity.  This study aims to determine the compounds contained in cinnamon leaves and antibacterial and toxicity testing of cinnamon leaves (Cinnamomum burmanni) was carried out to determine the effect on the mortality rate of Artemia  salina  Leach  larvae.  The  results  of  toxicity  testing  of  cinnamon  leaf  extract  are  known  to  be  non-toxic  and  have  an LC50 value of 128.6 ppm.  From the results of antibacterial tests of cinnamon leaf extracts with methanol, ethyl acetate and N hexanes  solvents,  it  is  known  that  the  highest  inhibition  is  in  leaf  extracts  using  methanol  solvents  with  a  yield  of  12%  and inhibition  of  5  mm,  while  phytochemical  tests  of  cinnamon  leaf  water  extracts  contain  Alkaloids,  tannins,  saponins  and flavonoids, triterpenoids and flavonoids.
Keywords: Cinnamon leaves, Artemia salina Leach, toxicity, phytochemical, antibacterial
Abstrak. Daun  kayu  manis  memiliki  khasiat  sebagai  penurun  kadar  gula  darah,  penghambat  pertumbuhan  bakteri.  Obat tradisional  kayu  manis  mengandung  komponen  zat-zat  kimia  terbesar  yaitu  alkohol  sinamat,  kumarin,  asam  sinamat, sinamaldehid,  antosinin  dan  minyak  atsiri  dengan  kandungan  gula,  protein,  lemak  sederhana,  pektin  dan  lainnya.  Selanjunya dikatakan bahwa bahwa kayu manis mempunyai kemampuan antimikroba, antifungi, antivirus, antioksidan, antitumor, penurun tekanan  darah,  kolesterol  serta  mempunyai  senyawa  rendah  lemak.  Senyawa  polifenol  yang  dominan  pada  daun  kayu  manis adalah  dari  golongan  aldehid  yaitu  memiliki  aktivitas  seperti  insulin  dan  aktivitas  antioksidan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  senyawa  yang  terkandung  pada  daun  kayu  manis  dan  pengujian  antibakteri  serta  toksisitas  daun  kayu  manis ( Cinnamomum burmanni ) dilakukan untuk mengetahui pengaruh yang ditimbulkan pada tingkat kematian larva Artemia salina Leach.  Hasil  pengujian toksistas  dari ekstrak daun kayu manis, diketahui  tidak bersifat toksit  dan  memiliki nilai  LC50  adalah 128,6 ppm.  Dari hasil ujji antibakteri dari ekstrak daun kayu manis dengan pelarut metanol, etil asetat dan N heksan diketahui yang memiliki penghambatan tertinggi ada pada esktrak daun dengan menggunakan pelarut metanol dengan rendemen 12% dan penghambatan 5 mm, sedangkan uji fitokimia dari ekstrak air daun kayu manis mengandung kandungan Alkaloid, tanin, saponin dan flavonoid, triterpenoid
Kata kunci: Daun kayu manis, Artemia salina Leach, toksisitas, fitokimia, antibakteri

## PENDAHULUAN
Kayu  manis  ( Cinnamomum  burmannii )  tergolong  tanaman  rempah  yang  biasa  digunakan  oleh  masyarakat untuk kebutuhan sehari-hari seperti penyedap  makanan dan  minuman (Al-Dhubiab, 2012).  Kayu  manis  merupakan tanaman  yang  pada  umumnya  dimanfaatkan  pada  bagian  kulit  batangnya  karena  dapat  diolah  menjadi  bahan tambahan makanan maupun minuman, dan daun kayu manis dapat diolah menjadi minyak astiri.  (Guenther, 2006; Ammar,  2017).  Terdapat  berbagai  kandungan  senyawa  pada  tanaman  kayu  manis.  Salah  satu  golongan  senyawa yang terdapat pada kayu  manis adalah flavonoid. Flavonoid  merupakan senyawa organik alami  yang terdapat pada akar, daun, kulit kayu, benang sari, bungah, buah dan biji buah tanaman (Nugrahaningtyas et al.,  2005; Reppi et al., 2016; Wea, 2016).
Berdasarkan  penelitian  sebelumnya  daun  kayu  manis  memiliki  khasiat  sebagai  penurun  kadar  gula  darah, penghambat  pertumbuhan  bakteri.  Senyawa  polifenol  yang  dominan  pada  daun  kayu  manis  adalah  dari  golongan
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach
aldehid  yaitu  trans-  2  sinnamaldehid  sebesar  60,17%  memiliki  aktivitas  seperti  insulin  (insulin  mimetik)  yang disebut zat methyl hydroxychalcone polymer (MHCP)7 dan aktivitas antioksidan (Hasan, 2011; Ervina et al., 2016; Nursofia., 2021).
Salah  satu  parameter  awal  yang  diperlukan  untuk  mengevaluasi  keamanan  suatu  obat  adalah  potensi toksisitas akut obat atau ramuan tradisional yang di impelementasikan untuk tujuan pengembangan dan pemanfaatan daun  kayu  manis  kedepannya.  Oleh  karena  itu,  sangat  diperlukan  informasi  yang  menyampaikan  batas  aman penggunaan daun kayu manis tersebut. Toksisitas dapat menyebabkan kerusakan pada beberapa organ, salah satunya adalah hati.  Organ tubuh yang paling sering terpapar bahan kimia adalah hati. Hati yang sering terpapar bahan kimia akan  mengalami  proses  detoksifikasi  dan  inaktivasi  sehingga  bahan  kimia  tersebut  menjadi  tidak  berbahaya  bagi tubuh.  Hati  sering  terpapar  bahan  kimia  yang  akan  mengalami  proses  detoksifikasi  dan  inaktivasi  sehingga  bahan kimia  tersebut  menjadi  tidak  berbahaya  bagi  tubuh.  Di  dalam  tubuh,  hati  memegang  peranan  penting  dalam memetabolisme segala sesuatu  yang  masuk ke dalam tubuh dan mengubah struktur obat yang bersifat lipofilik dan mengubah  struktur  obat  yang  bersifat  lipofilik  menjadi  hidrofilik  sehingga  mudah  dikeluarkan  dari  tubuh  melalui urin atau empedu. Kerusakan hati akibat obat dan bahan kimia dapat terjadi karena hilangnya kemampuan regenerasi sel  hati,  sehingga  hati  akan  mengalami  kerusakan  permanen  yang  dapat  menyebabkan  kematian  (Makiyah  et  al., 2017).
Pengujian  toksisitas  daun  kayu  manis  ( C.  burmanni )  dilakukan  untuk  mengetahui  pengaruh  yang ditimbulkan dari senyawa yang terkandung. Salah satu uji toksisitas yang dapat dilakukan adalah uji toksisitas akut oral  dimana  pengujian  yang  ditujukan  untuk  mendeteksi  efek  toksik  yang  muncul  dalam  waktu  singkat  setelah pemberian  sediaan  uji  yang  diberikan  secara  oral  dalam  dosis  tunggal,  atau  dosis  berulang  yang  diberikan  dalam waktu 24 jam.
Penggunaan  tumbuhan  menjadi  obat  tradisional  dianggap  relatif  efektif  serta  aman,  sebab  jarang mengakibatkan pengaruh efek samping dan harganya cukup murah. Obat tradisional bisa didapatkan dari biji, buah- buahan, daun, kulit tumbuhan, batang tumbuhan, bunga, maupun akar suatu tumbuhan yang mengandung zat kimia yang  mempunyai  pengaruh  pada  pengobatan  penyakit.  Salah  satunya  adalah  kayu  manis,  komponen  zat-zat  kimia terbesar pada kayu manis yaitu alkohol sinamat, kumarin, asam sinamat, sinamaldehid, antosinin dan minyak atsiri dengan kandungan gula, protein, lemak sederhana, pektin dan lainnya (Prasad et al., 2009; Plumeriastuti & Effendi, 2019)  .  Kulit  batang  kayu  manis  yang  sudah  dilakukan  ekstrak  mengandung  senyawa  antioksidan  utama  berupa polifenol (tanin, flavonoid) adapun minyak atsiri golongan fenol (Intan et al., 2021; Prasetyorini, 2021). Selanjunya dikatakan bahwa bahwa cinnamon mempunyai kemampuan antimikroba, antifungi, antivirus, antioksidan, antitumor, penurun  tekanan  darah,  kolesterol  serta  mempunyai  senyawa  rendah  lemak.  Senyawa  eugenol  dan  sinamaldehid memiliki potensi sebagai antibakter (Ngadiwiyana et al., 2011; Zhu et al., 2017)
Artemia salina Leach atau sering disebut brine shrimp merupakan jenis udang udangan primitif yang sudah dikenal  cukup  lama  dan  oleh  Linnaeus  pada  tahun  1778  yang  diberi  nama  Cancer  salinus,  kemudian  oleh  Leach diubah menjadi Artemia salina pada tahun 1819. Hewan ini hidup planktonik di perairan yang berkadar garam tinggi (antara 15-300 per mil). Suhu  yang berkisar antara 25-30°C, oksigen terlarut sekitar 3 mg/L, dan pH antara 7,3– 8,4. Sebagai plankton, Artemia salina L. tidak dapat mempertahankan diri terhadap musuhnya, karena tidak mempunyai cara  maupun  alat  untuk  mempertahankan  diri.  Satu-satunya  kondisi  yang  menguntungkan  dari  alam  adalah lingkungan  hidup  yang  berkadar  garam  tinggi,  karena  pada  kondisi  tersebut  pemangsanya  pada  umumnya  sudah tidak dapat hidup lagi (Jurut dan Santoso, 2019). Dengan demikian perlu dilakukan uji toksistas, kandungan kimia dan antibakteri terhadap kayu manis.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilakukan selama 3 bulan, yakni dari bulan Juli-September 2023 di Laboratorium Hama dan Penyakit Ikan Politeknik Perikanan Negeri Tual.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat yang digunakan yaitu alat ayakan 65 mesh Sieve, timbangan analitik Mettler Toledo, blender Philips HR2223,  gelas  kimia  1000  ml  Pyrex,  alumunium  foil,  batang  pengaduk,  pipet  mikro,  pipet  tetes,  tabung  reaksi, lampu  pijar  Electra  40  watt,  aerator  Amara  AA350,  kaca  pembesar,  penyaring  larva,  kertas  saring,  dan  tissue. Sedangkan  bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu  daun  kayu  manis  yang  diperoleh  dari  Desa  Sather Kabupaten  Maluku  Tenggara,  methanol  Merck,  etil  asetat  Merck  dan  n-heksan  Merck,  alkohol  70%,  aquades,  dan telur udang A. salina L Golden West Supreme Plus Indah Sari Windu.
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach

## Rancangan Penelitian
Rancangan  penelitian  yang  digunakan  adalah  rancangan  acak  lengkap  Ral  untuk  mengetahui  pengaruh perlakuan  terhadap  respon  parameter  yang  diukur  maka  digunakan  analisis  sidik  ragam  (  RAL).  Jika  hasil  yang diperoleh menunjukan pengaruh nyata maka dilanjutkan dengan menggunakan uji jarak berganda danken  dengan 5 perlakuan dan 3 ulangan. Perlakuan dan dosis yang digunakan dalam penelitian sebagai berikut:
Perlakuan A : 10 larva + 1 ml ekstrak dari 10.000 ppm + 1 ml air laut Perlakuan B : 10 larva + 1 ml ekstrak 1.000 ppm + 1 ml air laut Perlakuan C : 10 larva + 1 ml ekstrak 100 ppm + 1 ml air laut Perlakuan D : 10 larva + 1 ml ekstrak 10 ppm + 1 ml air laut.

## Prosedur Penelitian Preparasi sampel
Sebanyak 20 kg sampel daun kayu manis yang diperoleh dari hutan Desa Sather, dikirim ke kota Tual. Daun kayu manis dibersihkan, kemudian dikering-anginkan selama 7 hari pada suhu ruangan (25 0 C) sampai daun kering, kemudian diblender dan disaring dengan ayakan 65 mesh sehingga diperoleh serbuk daun kayu manis. Serbuk yang diperoleh kemudian disimpan pada wadah yang kedap udara sebelum dianalisis.

## Ekstraksi Serbuk Daun Kayu Manis
Serbuk  daun  kayu  manis  ditimbang  sebanyak  100  g  dimasukkan  ke  dalam  wadah  toples.  Kemudian ditambahkan 1000 ml pelarut metanol hingga serbuk terendam, berikan perlakuan yang sama pada pelarut etil asetat, dan N- heksana  kemudian  dibiarkan  selama  3  hari  dalam  bejana tertutup  dan  terlindung  dari  sinar  sambil  berulang- ulang diaduk. Setelah 3 hari serbuk disaring dan ampasnya direndam lagi dengan cairan penyari  yang baru, hal ini dilakukan sebanyak 2 kali. Hasil penyaringan  yang didapat kemudian dikumpulkan dan diuapkan hingga diperoleh ekstrak yang kental (Dangeubun. J., 2021).

## Uji Fitokimia
Metode  uji  fitokimia  yang  dilakukan  menurut  Sangi, et  al .,  (2008)  yang  meliputi  uji  flavonoid,  alkaloid, terpenoid/steroid,  tannin  dan  saponin.  Uji  fitokimia  ini  bertujuan  mengidentifikasi  secara  kualitatif  kandungan golongan flavonoid, alkaloid, terpenoid/steroid, tannin dan saponin sebagai antibakteri.

## Analisis senyawa alkaloid
Sebanyak  4  gram  sampel  daun  kayu  manis  yang  telah  dihaluskan  ditambahkan  kloroform  secukupnya  lalu dihaluskan lagi.  Kemudian ditambah 10 ml amoniak dan 10 ml kloroform. Larutan disaring ke dalam tabung reaksi, dan  filtrat  ditambahkan  asam  sulfat  2N  sebanyak  10  tetes.  Filtrat  dikocok  dengan  teratur  kemudian  dibiarkan beberapa lama sampai terbentuk dua lapisan. Lapisan atas dipindahkan ke dalam tiga tabung reaksi masing-masing 2,5  ml.  Ketiga  larutan  ini  dianalisis  dengan  pereaksi  Mayer,  Dragendorff  dan  Wagner.  Terbentuknya  endapan menunjukkan bahwa contoh tersebut mengandung alkaloid. Reaksi dengan pereaksi Mayer akan terbentuk endapan putih, dengan pereaksi Dragendorff terbentuk endapan merah jingga dan dengan pereaksi wagner terbentuk endapan coklat.

## Analisis senyawa triterpenoid dan steroid
Sebanyak  50-100  mg  sampel  daun  kayu  manis  yang  telah  dihaluskan,  ditempatkan  pada  plat  tetes  dan ditambahkan  asam  asetat  anhidrat  sampai  sampel  terendam  semuanya,  dibiarkan  selama  kira-kira  15  menit,  enam tetes  larutan  dipindahkan  ke  dalam  tabung  reaksi  dan  ditambah  2-3  tetes  asam  sulfat  pekat.  Adanya  triterpenoid ditunjukkan dengan terjadinya warna merah jingga atau ungu, sedangkan adanya steroid ditunjukkan dengan adanya warna biru.

## Analisis senyawa flavonoid
Sebanyak  200  mg  sampel  daun  kayu  manis  yang  telah  diekstrak  dengan  5  ml  etanol  dan  dipanaskan  selama lima  menit  di  dalam  tabung  reaksi.  Selanjutnya  ditambah  beberapa  tetes  HCl  pekat.  Kemudian  ditambahkan  0,2  g bubuk mg. Hasil positif ditunjukkan dengan timbulnya warna merah tua (magenta) dalam waktu 3 menit.

## Analisis senyawa saponin
Sebanyak 2 g sampel daun kayu manisyang telah dihaluskan dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambah air suling  sehingga  seluruh  cuplikan  terendam,  dididihkan  selama  2-3  menit,  dan  selanjutnya  didinginkan,  kemudian dikocok kuat-kuat. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya buih yang stabil.
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach

## Analisis senyawa tannin
Analisis  senyawa  tannin:  sebanyak  20  mg  sampel  daun  kayu  manis  yang  telah  dihaluskan,  ditambah  etanol sampai  sampel  terendam  semuanya.  Kemudian  sebanyak  1  ml  larutan  dipindahkan  kedalam  tabung  reaksi  dan ditambahkan 2-3 tetes larutan FeCl3 1%. Hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya warna hitam kebiruan atau hijau.
Uji Toksisitas Menggunakan Larva A. salina Leach Penetasan Larva A. salina Leach Larva Artemia  salina L  disiapkan  dengan  cara  menetaskan  telur A.  salina L  selama  dua  hari  sebelum dilakukan pengujian. Penetasan dilakukan dengan cara merendam telur larva tersebut ke dalam gelas piala 1000 ml yang  berisi  air  laut.  Setelah  48  jam  perendaman,  telur  menetas  dan  menghasilkan  larva A.  salina Leach  yang  siap digunakan dalam pengujian (Indrayani et al ., 2006).
Wadah  plastik  berupa toples  untuk  perendaman  dan  dua  botol  aqua  besar   disiapkan  untuk  penetasan telur udang. Pada wadah steroform dilubangi debagai tempat keluarnya telur yang telah menetas. Sejumlah 1 liter air laut dimasukan kedalam wadah hingga kedua lubang pada sterofom terendam. Air laut  yang digunakan terlebih dahulu diukur  Ph  dengan  kertas  lakmus,  pH  yang  digunakan  berkisar  8-9.  Kemudian  salah  satu  ruangan  dalam  wadah tersebut  diberi  penerangan  dengan  cahaya  lampu  pijar  untuk  menghangatkan  suhu  dalam  wadah  penetasan  dan merangsang  proses  penetasan.  Untuk  penerangan,  lampu  dinyalakan  selama  24  jam  untuk  menetaskan  telur. Ruangan  yang  satunya  diisi  1  gram  telur  udang  kemudian  ditutup  dengan  alumenium  foil  dan  lak  ban  agar  tidak terkena cahaya lampu. Setelah 24 jam, telur akan menetas menjadi larva dan akan bergerak secara alamiah menuju ruang  terang.  Kemudian  larva  yang  sehat  dan  aktif  bergerak  dipindahkan  ke  wadah  satunya  dengan  keadaaan  yag sama  (air  laut  dengan  Ph  berkisar  8-9  dan  seluruh  bagian  wadah  terkena  cahaya  lampu  pijar).  Setelah  24  jam kemudian,  larva  sudah  berumur  48  jam.  Larva  yang  digunakan  untuk  hewan  uji  pada  metode  BSLT  adalah  larva yang sudah berumur 48 jam, aktif bergerak dan bersifat fototropik (Dangeubun. J, 2021).

## Penyiapan Larutan Induk
Eksrak  daun  kayu  manis  ditimbang  sebanyak  0,1grm  untuk  larutan  induk  1000  ppm  dan  1  gram  untuk larutan  induk  10.000  ppm.  Setelah  di  timbang  ekstrak  dimasukan  dalam  gelas  Erlenmeyer  dan  diberi  air  laut sebanyak 1000 ml. Kemudian lauran dicampurkan dengan cara menggores larutan dengan spatula atau digoyang.

## Penyiapan Larutan Uji
Pembuatan  larutan  uji  dari  ekstrak  yang  efektif  untuk  membunuh  larva Artemia  salina leach,  dilakukan percobaan  orentasi  dengan  konsentrasi  ekstrak  air  kayu  manis  10.000  ppm,  1.000  ppm,  100  ppm,  dan  10  ppm ditimbang, kemudian dilarutkan dalam 100 ml air laut untuk membuat larutan uji. untuk kontrol (0 ppm) dilakukan tanpa  penambahan  ekstrak  (Sirait,  2001).  Dengan  perbandingan  1:1,  dimana  ekstrak  1  ml  :  air  laut  1  ml.  sehingga didalam  tabung  reaksi  terdapat  2  ml  larutan  yang  berasal  dari  air  laut  sebanyak  1  ml  dan  larutan  konsentrasi  awal sebanyak  1 ml .    Volume  akhir  masing-masing  perlakuan  adalah  2  ml  dilakukan  dengan 3  ulangan.  Setelah  24 jam pemberian  ekstrak  dilakukan  perhitungan  jumlah  larva  yang  mati  dan  menghitung  persentasi  kematian  larva  pada tiap konsentrasi, setelah itu menentukan LC 50 dengan metode probit.

## Uji Toksisitas
Masing-masing larutan uji dipipet sebanyak 10 ml dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 10 ekor  larva  udang  yang  telah  berumur  2  hari.  Masing-masing  larutan  uji  dilakukan  tiga  kali  pengulangan  dan dibandingkan  dengan  kontrol.  Pengamatan  I  dilakukan  selama  6  jam  dengan  selang  waktu  1  jam.  Selanjutnya pengamatan II dilakukan pada 12, 18 dan 24 jam. Jumlah larva udang yang mati dihitung tiap 6, 12, 18 dan 24 jam (Sirait,  2001).  Analisis  data  perhitungan  LC 50 dilakukan  dengan  cara  data  %  kematian  ditransformasikan  ke  dalam log konsentrasi (Keostoni, 1985).
Perhitungan kematian udang A. salina dihitung dengan rumus berikut:
% Mortalitas = Jumlah larva yang mati /Ju ml ah larva uji x 100%
Apabila  pada  kontrol ada  udang  yang  mati, presentase  kematian  udang A. salina ditentukan  dengan  rumus Abbot’s, sebagai berikut:
% Mortalitas = %kematian pada uji - %kematian pada kontrol100 - %kematian pada kontrol x 100%.
Perhitungan  LC 50 dilakukan  analisis  probit  dimana  data  %  mortalitas  ditransformasikan  ke  dalam  nilai probit.  Lalu  hitung,  menggunakan  persamaan  regresi  linear  dengan  menghubungkan  pengaruh  konsentrasi  sampel
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach
(logaritma  nilai  konsentrasi)  sebagai  sumbu  x  dan  persen  mortalitas  larva  uji  yang  dikonversi  dalam  nilai  probit sebagai sumbu y.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Rendemen Hasil Ekstraksi Daun Kayu Manis
Sampel  daun  kayu  manis  pertama-tama  dikering  anginkan  selama  7  hari.  Setelah  itu,  dipisahkan  daun  dari batang  kemudian  dihaluskan  menggunakan  blender.  Setelah  itu,  serbuk  daun  kayu  manis  diayak  menggunakan ayakan  halus  sampai  menjadi  bubuk.  Dengan  tujuan  agar  semakin  kecil  ukuran  sampel  maka  luas  permukaannya semakin  besar  sehingga  penyerapan  pelarut  dapat  berjalan  lebih  optimal.  Kemudian  serbuk  daun  kayu  manis diekstrasi secara maserasi dengan menggunakan pelarut metanol, etil asetat, dan N- heksana selama 7 hari. Perendaman  menggunakan  masing-masing  pelarut  metanol,  etil  asetat, n- heksana  sebanyak  500  ml  dalam wadah tertutup dan selama 7 hari dan diaduk setiap hari. Setelah  7 hari masing-masing sampel disaring, lalu filtrat hasil penyaringan dipindahkan ke erlenmeyer. Dan dikeringkan pada suhu ruang dengan bantuan kipas angin.
Rendemen  masing-masing  sampel  yang  dimaserasi  dengan  pelarut  metanol,  etil  asetat  dan n- heksana ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Rendemen ekstrak Daun Kayu Manis Sampel Rendemen (%) EDM 12 EDEA 12 EDNH 15
Berdasarkan  data  tabel  1,  nilai  rendemen  serbuk  daun  kayu  manis  yang  dimaserasi  menggunakan  pelarut metanol,  etil  asetat,  dan n- heksana,  EDKM  (ekstrak  daun  kayu  manis  yang  diekstraksi  dengan  metanol)  sebanyak 12%, EDKME (ekstrak daun kayu manis yang diekstraksi dengan etil asetat ) 12 % EHB (ekstrak daun kayu manis yang diekstraksi dengan N- heksana), berturut-turut adalah 15% Berdasarkan data yang diperoleh sampel ekstrak etil asetat memiliki nilai rendemen paling tinggi ada pada pelarut N-heksan.
Penggunaan  pelarut  mempengaruhi  jumlah  ekstrak  yang  dihasilkan  dan  rendamen  ekstraknya.  Digunakan pelarut metanol dikarenakan pelarut ini bersifat universal sehinggal mampu mengikat semua komponen kimia yang terdapat di dalam tumbuhan. Metanol mampu mengikat senyawa yang bersifat polar, non polar dan semi polar.

## Hasil Uji Aktivitas Antibakteri
Metode  difusi  cakram  merupakan  pengukuran  daerah  zona  bening  yang  terbentuk  di  sekitar  kertas  cakram yang digunakan untuk mengetahui aktivitas antimikroba. Kertas cakram direndam dalam larutan ekstrak kayu manis selama  15  menit  dengan  tujuan  agar  ekstrak  menyerap  secara  sempurna  kedalam  kertas  cakram,  selanjutnya diletakkan pada media yang telah ditanami oleh bakteri Vibrio algynoliticus . Pengujian daya hambat bakteri ditandai dengan terbentuknya zona bening pada permukaan media agar. (Rizki & Ferdinan, 2020). Hasil penelitian pengaruh ekstrak herbal kayu manis terhadap zona hambat bakteri Vibrio algynoliticus dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Hasil uji antibakteri Keterangan: A : Metanol
B :  N-Heksan
Ekstrak  daun  kayu  manis  dilarutkan  dengan  pelarut dimethyl  sulfoxide (DMSO  10%)  untuk  membuat konsentrasi  ekstrak  sebanyak  0,5  gram  dari  masing-masing  pelarut.  Diantara  ekstrak  kayu  manis  dengan
B B A
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach
menggunakan N -Heksan  dan  ekstrak  kayu  manis  dengan  menggunakan  pelarut  metanol.  Dari  hasil  ekstrak  ini diambil 0,2 gram dan kemudian dilarutkan dan diuji dengan menggunakan bakteri Vibrio algynoliticus. Selanjutnya di inkubasi selama 24-48 jam pada suhu 37 0 C, diamati serta dihitung zona bening yang terbentuk, dan di inkubator selama  24  jam.    Hasilnya  adalah  yang  memiliki  penghambatan  antibakteri  tertinggi  atau  zona  bening  berasal  dari ekstrak  metanol  yaitu,  5  mm  dan  kemudian  ekstrak N -heksana  2,5  mm,  sedangkan  ekstrak  etil  asetat  tidak  ada penghambatan.
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Intan  et  al.,  (2021),  bahwa  hasil  pengamatan  daya  hambat ekstrak  kulit  kayu  manis  ( C.  burmani )  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus setelah  diinkubasi  selama  48  jam menunjukkan terbentuknya zona bening pada semua konsentrasi. Diameter zona hambat  yang terbentuk ukurannya berbeda-beda, kemudian diukur menggunakan penggaris yang dilakukan dengan cara mengukur diameter horizontal dan diameter vertikal lalu hasil yang diperoleh dikurangi diameter cakram 6 mm.
Pada  ekstrak  daun  kayu  manis  dengan  0,5  gram  memberikan  daya  hambat  lemah  dengan  rata-rata  dari masing-masing zona hambat sebesar 5,0 mm, dan 2,5 mm termasuk kategori lemah. Kategori diameter zona hambat ini disesuaikan berdasarkan Susanto tahun 2012 (Nurnasari Wijayanti, 2019).  Diameter zona hambat menjadi tolak ukur terhadap kekuatan dari senyawa  yang terkandung dalam ekstrak kayu  manis dan menandakan bahwa semakin besar  daya  hambat  yang  terbentuk  oleh  mikroba  maka  semakin  kuat  pula  senyawa  aktif  yang  dapat  menghambat pertumbuhan bakteri. (Amrie et al., 2015)
Dalam penelitian Kurniati, 2012, bahwa terdapat efek antimikroba pada ekstrak kayu manis ( Cinnamomum burmannii ) terhadap MRSA. Efek antimikroba tersebut diperkirakan diperankan oleh zat-zat aktif yang larut dalam etanol,  sebab  metode  ekstraksi  pada  penelitian  ini  menggunakan  pelarut  etanol.  Empat  zat  aktif  utama  yaitu sinamaldehid  dan  eugenol  yang  terkandung  dalam  minyak  atsiri,  serta  saponin  dan  tanin.  Mekanisme  antimikroba tanin  berkaitan  dengan  kemampuan  tanin  membentuk  kompleks  dengan  protein  polipeptida  dinding  sel  bakteri sehingga terjadi gangguan pada dinding bakteri dan bakteri lisis (Agastia et al., 2021).
Besarnya  perbedaan  diameter  hambat  ini  dapat  disebabkan  oleh  beberapa  faktor  antara  lain  konsentrasi ekstrak  yang diberikan, kecepatan difusi bahan antimikroba pada media agar, jumlah bakteri  yang di inokulasikan, temperatur  suhu  inkubasi,  kepekaan  terhadap  pertumbuhan  bakteri  dan  reaksi  antara  bahan  aktif  dengan  medium. (Dewi et al., 2019). Senyawa  metabolit sekunder  yang terkandung dalam ekstrak kayu  manis dapat  mempengaruhi daya hambat bakteri Staphylococccus aureus yaitu senyawa flavonoid, alkaloid, saponin, dan triterpenoid. Senyawa falvonoid diketahui dapat merusak membram sel bakteri dengan cara menghambat sintesis protein. Mekanisme kerja alkaloid  yaitu  merusak  sel  bakteri  dengan  cara  menghambat  pembentukan  sel  sehingga  menyebabkan  kematian bakteri.  Senyawa  saponin  diketahui  memiliki  mekanisme  antibakteri  dengan  mengganggu  permeabilitas  membran sel bakteri. (Ernawati & Sari, 2015) Senyawa terpenoid juga memiliki mekanisme kerja sebagai antimikroba dengan cara  merusak  dan  mengurangi  permeabilitas  dinding  sel  bakteri  sehingga  sel  bakteri  kekurangan  nutrisi  dan perkembangan bakteri menjadi terhambat bahkan mati. (Wulansari et al ., 2020)

## Hasil Analisa Kandungan Kimia dari Kayu Manis
Hasil uji kandungan kimia dari kayu manis dapat dilihat pada tabel 2
Tabel 2. Hasil analisa kandungan kimia kayu manis Senyawa yang diidentifikasi Interpretasi Hasil Keterangan Flavonoid Alkoloid Saponin Tanin Triterpenoid Steroid Positif Positif Positif Positif Positif Negatif Terbentuk warna merah Terbentuk warna merah Terbentuk busa Terbentuk warna hitam pekat
Terbentuk cincin kecoklatan Tidak terbentuk perubahan warna
Berdasarkan  uji  fitokimia  dari  daun  kayu  manis  diketahui  bahwa  ekstrak  daun  kayu  manis  mengandung Alkaloid, tanin, saponin dan flavonoid, triterpenoid . Kulit kayu manis yang sudah di ekstrak kemudian dilakukan uji fitokimia  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  senyawa  yang  terkandung  dalam  kayu  manis  sebagai  zat  antimikroba. Hasil  uji  fitokimia  senyawa  yang  teridentifikasi  dalam  kayu  manis  adalah  flavonoid,  alkaloid,  saponin,  tannin  dan triterpenoid.
Aktivitas  farmakologi  dari  flavonoid  adalah  sebagai  antiinflamasi,  antibakteri,  analgesik,  anti-oksidan. Flavanoid  merupakan  senyawa  polar  yang  umumnya  mudah  larut  dalam  pelarut  polar  seperti  etanol,  menthanol, butanol,  dan  aseton.  Flavanoid  merupakan  golongan  terbesar  dari  senyawa  fenol,  senyawa  fenol  mempunyai  sifat efektif  menghambat  pertumbuhan  virus,  bakteri,  dan  jamur.  Senyawa-senyawa  flavanoid  umumnya  bersifat antioksidan dan banyak  yang digunakan sebagai salah satu komponen bahan baku obat-obatan. Senyawa flavanoid
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach
dan turunanya  memilki dua fungsi fisiologi tertentu,  yaitu sebagai bahan kimia untuk mengatasi serangan penyakit (sebagai antibakteri) dan anti virus bagi tanaman. Para peneliti lain juga  menyatakan pendapat sehubungan dengan mekanisme kerja dari flavonoid dalam menghambat pertumbuhan bakteri, antara lain bahwa flavonoid menyebabkan terjadinya  kerusakan  permeabilitas  dinding  sel  bakteri10  .  Mekanisme  antiinflamasi  terjadi  melalui  efek penghambatan  pada  jalur  metabolisme  asam  arakhidonat,  pembentukan  prostaglandin,  pelepasan  histamin  pada radang.  Manfaat  lain  dari  flavanoid  adalah  melindungi  struktur  sel  tubuh.  Flavanoid  mengandung  senyawa  fenol. Fenol  merupakan  sejenis  alkohol  bersifat  asal  sehingga  disebut  juga  asam  karbolat.  Fenol  memiliki  kemampuan mendenaturasi protein dan merusak dinding sel bakteri (Thomson, 1993; Kurniawan dan Aryana, 2015).
Alkaloid merupakan golongan zat tumbuhan sekunder yang terbesar. Alkaloid memiliki kemampuan sebagai antibakteri.  Mekanisme  yang  diduga  adalah  dengan  cara  mengganggu  komponen  penyusun  peptidoglikan  pada  sel bakteri,  sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara  utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel  tersebut  (Ajizah, 2004). Sedangkan saponin merupakan senyawa aktif yang kuat dan menimbulkan busa bila dikocok. Saponin bekerja sebagai  antibakteri  dengan  mengganggu  stabilitas  membran  sel  bakteri  sehingga  menyebabkan  sel  bakterilisis. Mekanisme  kerja  saponin  termasuk  dalam  kelompok  antibakteri  yang  mengganggu  permeabilitas  membran  sel bakteri, yang mengakibatkan kerusakan membran sel dan menyebabkan keluarnya berbagai komponen penting dari dalam sel bakteri yaitu protein, asam nukleat dan nukleotida. Hal ini akhirnya mengakibatkan sel bakteri mengalami lisis (Kurniawan dan Aryana, 2015).
Mekanisme  kerja  antibakteri  tanin  mempunyai  daya  antibakteri  dengan  cara  memprepitasi  protein.  Efek antibakteri  tanin  melalui  reaksi  dengan  membran  sel,  inaktivasi  enzim  dan  inaktivasi  fungsi  materi  genetik. Mekanisme kerja tanin sebagai antibakteri adalah menghambat enzim reverse transkriptase dan DNA topoisomerase sehingga  sel  bakteri  tidak  dapat  terbentuk  (Nuria  et  al.,  2009).    Tanin  memiliki  aktivitas  antibakteri  yang berhubungan  dengan  kemampuannya  untuk  menginaktifkan  adhesin  sel  mikroba,  menginaktifkan  enzim,  dan menggangu transport protein pada lapisan dalam sel (Cowan, 1999). Tanin juga mempunyai target pada polipeptida dinding sel sehingga pembentukan dinding sel menjadi kurang sempurna. Hal ini menyebabkan sel bakteri menjadi lisis karena tekanan osmotik maupun fisik sehingga sel bakteri akan mati (Sari & Sari, 2011). Kompleksasi dari ion besi  dengan  tanin  dapat  menjelaskan  toksisitas  tanin.  Mikroorganisme  yang  tumbuh  di  bawah  kondisi  aerobik membutuhkan zat besi untuk berbagai fungsi, termasuk reduksi dari prekursor ribonukleotida DNA. Enzim reverse transkriptase dan DNA topoisomerase sel bakteri tidak dapat terbentuk oleh kapasitas pengikat besi yang kuat oleh tannin (Akiyama et al., 2001).
Mekanisme  kerja  dari  senyawa  terpenoid  diyakini  bahwa  senyawa  terpenoid dapat  menghambat pertumbuhan dengan mengganggu proses terbentuknya membran dan atau dinding sel, membran dan atau dinding sel tidak terbentuk atau terbentuk tidak sempurna (Cowan, 1999).
Uji Toksisitas ( Brine Shrimp Lethality Test )
Uji  toksisitas  dengan  metode  BSLT  dilakukan  pada  ekstrak  air  daun  kayu  manis.  Uji  toksisitas  dilakukan terhadap  larva Artemia  salina Leach yang  berusia  48  jam  pada  media  air  laut.  Penggunaan  air  laut  ini  untuk mengkondisikan bahwa air laut ini untuk mengkondisikan bahwa air laut yang digunakan tidak terkontaminasi atau tercemar  karena  jika  menggunakan  air  laut  asli  dikhawatirkan  terdapat  cemaran  atau  kontaminasi.  Media  air  laut tersebut  juga  dijadikan  pengencer  ekstrak  yang  akan  dijadikan  larutan  uji.  Ekstrak  air  dibuat  dengan  konsentrasi 1000 ppm dalam 1 liter air sebagai larutan induk kemudian dibuat larutan uji dengan konsentrasi 250 ppm, 500 ppm, 750  ppm  dan  1000  ppm    ditambah  kontrol  (tanpa  sampel).  Untuk masing-masing  konsentrasi  dibutuhkan  6 tabung reaksi dan 1 tabung untuk kontrol.
Larutan  uji  masing-masing  konsentrasi  tersebut  dimasukkan  sebanyak  10 ml pada  tabung  reaksi  lalu ditambahkan 10 ekor larva Artemia salina Leach. Dimana setiap konsentrasi lakukan sebanyak 3 kali pengulangan dan  dibandingkan  dengan  kontrol.  Pengamatan  dilakukan  selama  1x24  jam  terhadap  kematian  larva  udang. Pengamatan  ju ml ah larva  udang  yang  mati  dihitung  tiap  selang  waktu  1  jam  pada  6 jam  pertama  kemudian  selang waktu 6 jam pada jam ke-12, 18 dan 24.  Untuk nilai LC 50 ekstrak air daun kayu manis dapat dilihat pada tabel 2. Pengujian  toksisitas  pada  penelitian  ini  dilakukan  analisis  probit  kemudian  diolah  menggunakan Microsoft Excel untuk mencari regresi linear berdasarkan grafik garis. Dari grafik tersebut didapatkan persamaan y=ax + b dan nilai R square (R 2 ).  Nilai LC 50 dari Ekstrak EM Daun kayu manis dapat dilihat pada tabel 3.
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach
y = 0,0632x + 9,2 R² = 0,9202 0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 200 400 600 800 1000 1200 M o rt alit as Konsentrasi %Mortalitas Linear (%Mortalitas)
Tabel 3. Nilai LC 50 dari Ekstrak EM Daun kayu manis Sampel Jenis Ekstrak Nilai LC 50 (ppm) Daun kayu manis Ektrak air 128, 6
Berdasarkan  table  3,  didapatkan  bahwa  ekstrak  metanol  daun  kayu  manis  mempunyai  potensi  toksisitas terhadap  larva  udang Artemia  salina L.  Ekstrak  daun  kayu  manis  memiliki  nilai  LC 50 yang  berbeda  namun  sama- sama berpotensi sebagai antibakteri dengan LC 50 yaitu 128,6 ppm. Suatu  senyawa  dikategorikan  sangat  toksik  jika  memiliki  nilai  LC 50 kurang  dari  30  ppm,  dikategorikan toksik jika memiliki nilai LC 50 30-1000 ppm, dan dikategorikan tidak toksik jika memiliki harga LC 50 di atas 1000 ppm.  Tingkat  toksisitas  tersebut  juga  dapat  menunjukkan  potensi  aktivitasnya  sebagai  antikanker  dimana  semakin kecil nilai LC 50 maka semakin toksik suatu senyawa dan berpotensi sebagai antikanker (Meyer et al ., 1982).
Gambar 2. Grafik Hubungan Konsentrasi dan Presentase Kematian Larva
Pada  gambar  2  menunjukkan  bahwa  besarnya  konsentrasi  ekstrak  yang  diberikan  mempengaruhi  jumlah kematian larva udang. Dari gambar tersebut dapat dilihat bahwa kenaikan konsentrasi ekstrak air daun kayu  manis selalu  diikuti  dengan  kenaikan  presentase  kematian  larva  udang Artemia  salina L.  semakin  besar  nilai  konsentrasi ekstrak  yang  diberikan,  maka  mortalitas  pada Artemia  salina L.  juga  semakin  besar.  Hal  ini  sesuai  dengan  hasil penelitian sebelumnya yang menyebutkan bahwa setiap zat kimia apabila diberikan dengan dosis cukup besar akan menimbulkan gejala-gejala yang semakin meningkat (Lu, 2006).
Menurut  Meyer et  al., (1982)  suatu  ekstrak  dikatakan  toksik  apabila  ekstrak  mampu  membunuh  50% hewan  uji  pada  konsentrasi  <  1000  ppm  setelah  waktu  kontak  24  jam.    Ekstrak  dapat  dikatakan  toksik  apabila memiliki nilai toksisitas yang dinyatakan dalam LC 50 sebesar 1000 ppm-30 ppm dan apabila nilai LC 50 dibawah 30 ppm  maka  ekstrak  tersebut  sangat  toksik  dan  berpotensi  mengandung  senyawa  bioaktif  antikanker.  Jika  nilai  LC 50 diatas 1000 ppm maka dikategorikan tidak toksik.
Faktor  lainnya  juga  pada  mekanisme  kematian  larva Artemia  salina yang  mungkin  terjadi  adalah berhubungan  dengan  fungsi  senyawa  fenolik,  flavonoid  dan  juga  tanin  yang  dapat  menghambat  daya  makan  larva ( antifedant ).  Cara  kerja  senyawa-senyawa  tersebut  adalah  dengan  bertindak  sebagai stomach  poisoning atau  racun perut  (Zulfiah  et  al.,  2020).  Oleh  karena  itu,  bila  senyawa-senyawa  ini  masuk  ke  dalam  tubuh  larva,  alat pencernaannya  akan  terganggu.  Senyawa  ini  menghambat  reseptor  perasa  pada  daerah  mulut  larva.  Hal  ini mengakibatkan larva gagal mendapatkan stimulus rasa sehingga tidak mampu mengenali makanannya, dan akibatnya larva mati kelaparan (Rita et al ., 2008).

## KESIMPULAN

## Berdasarkan hasil dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa
1. Hasil pengujian toksistas dari ekstrak daun kayu manis, diketahui tidak bersifat toksit dan memiliki nilai LC50 adalah 128,6 ppm.
2. Dari  hasil  ujji  antibakteri  dari  ekstrak  daun  kayu  manis  dengan  pelarut  metanol,  etil  asetat  dan  N  heksan diketahui  yang  memiliki penghambatan tertinggi ada pada esktrak daun dengan menggunakan pelarut  metanol dengan rendemen 12% dan penghambatan 5 mm
3. Uji fitokimia dari ekstrak air daun kayu manis mengandung kandungan Alkaloid, tanin, saponin dan flavonoid, triterpenoid.
.
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach

## DAFTAR PUSTAKA
Agastia,  A.,  Arifin,  M.Z.,  Setyorini,  E.    2021.    Uji  Efektivitas  Antimikroba  Ekstrak  Daun  Belimbing  Wuluh (Avverhoa Bilimbi L) Terhadap Bakteri Eschericia Coli.  Jurnal Insan Cendekia Volume 8 (1), 29-38. Ajizah A. 2004. Sensitivitas Salmonella Typhimurium Terhadap Ekstrak Daun PsidiumGuajava L. Bioscientie. 1(1):
31-8.
Akiyama,  H.  K.  Fujii.  O.  Yamasaki.,  T.  Oono.  K.  Iwatsuki.  2001.  Antibacterial  Action  of  Several  Tannin  against Staphylococcus aureus. Journal of Antimicrobial Chemotherapy.;48: 487 – 491.
Al-Dhubiab,  B.  E.  2012.  Pharmaceutical  Applications  and  Phytochemical  Profile  of Cinnamomum  burmannii. Pharmacognosy Reviews, 6(12), 125–131.
Ammar.    2017.    Pengaruh  umur  pohon  terhadap  perolehan,  komposisi  kimia  dan  produktivitas  minyak  atsiri  dari kulit cabang pohon kayu  manis ( Cinnamomum burmannii ). Skripsi. Institut  Teknologi  Bandung,  Bandung,
Indonesia.
Amrie, A. G. al, Ivan, Anam, S., & Ramadhanil. (2015). Uji Efektifitas Ekstrak Daun dan Akar Harrisonia perforata Merr.  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Vibrio  cholerae.  Jurnal  of  Natural  Science,  3(3),331-340. http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index.php/ejurnalfmipa/article/view/3343/2382
Cowan, M.M. Plant Products as Antimicrobial Agents. Clinical Microbiology Reviews. 1999;12: 564 – 582. Dewi,  S.,  Asseggaf,  S.  N.,  Natalia,  D.,  &  Mahyarudin,  M.  (2019).  Efek  Ekstrak  Etanol  Daun  Kesum  (Polygonum minus  Huds.)  sebagai  Antifungi  terhadap  Trichophyton  rubrum.  Jurnal  Kesehatan  Andalas,  8(2),  198. https://doi.org/10.25077/jka.v8i2.992
Ernawati., Sari, K. 2015.  Kandungan Senyawa Kimia dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Alpukat ( Persea americana P. Mill) Terhadap Bakteri Vibrio alginolyticus . Jurnal Kajian Veteriner, 3(3), 203–211. Ervina,  M.,  Nawu,  Y.E.,  Esar,  S.Y.    2016.  Comparison  of  In  Vitro  Antioxidant  Activity  of  Infusion,  Extract  and Fractions  of  Indonesian  Cinnamon  ( Cinnamomum  burmannii) Bark.  International  Food  Research  Journal 23(3): 1346-1350
Guenther E. 2006. Minyak Atsiri Jilid 1. Penerjemah Ketaren S. Penerbit UI Press, Jakarta, Indonesia. Hasan,  N.F.  2011.  Chemical  Composition  and  Biological  Activity  of  Essential  Oil  From  Cinnamomum  spp.  and Litsea spp. Dissertation. Faculty of Resource Science and Technology. Universiti Malaysia Sarawak Intan,  K.,  Diani,  A.,  Nurul,  A.SR.  2021.    Aktivitas  Antibakteri  Kayu  Manis  ( Cinnamomum  burmannii )  terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus . Jurnal Kesehatan Perintis 8 (2) 2021: 121-127.
Kurniawan,  B.,  dan  Aryana,  W.F.    2015.    Binahong  (Cassia  Alata  L)  For  Inhibiting  The  Growth  Of  Bacteria Escherichia Coli.  Jurnal Majority  4 ( 4): 100-104.
Kurniati, N.T. 2012. Uji ekstrak kayu manis (Cinnamomum burmannii) sebagai antimikroba terhadap pertumbuhan Methicillin  Resistant  Staphylococcus  aureus  (MRSA)  kode  isolat  m2036t  secara  in  vitro  [skripsi].  Malang: Fakultas Kedokteran, Universitas Brawijaya.
Lu, F.C., 2006. Toksikologi Dasar Asas Organ Sasaran dan Penilaian Resiko, Edisi II. Jakarta: Universitas Indonesia Press.
Makiyah A., Tresnayanti S. Uji Toksisitas Akut Yang Diukur Dengan Penentuan LD50 Ekstrak Etanol Umbi Iles-
Iles ( Amorphophallus variabilis Bl.) Pada Tikus Putih Strain Wistar. 2017.  Majalah Kedokteran Bandung, 49 (3): 145-155.
Meyer, B.N., Ferrigni, N.R., Putnam, J.E.,Jacobsen, L.B., Nicholas, D.E., & Mc Laughlin., J.L. 1982.  Brine Shrimp: aconvenient general bioessay for active plant constituent, Planta Medica, 45 : 31-4
Ngadiwiyana.,  Ismiyarto.,  Nor,  B.A.P.,  Purbowatiningrum,  R.S.  2011.  Potensi  Sinamaldehid  Hasil  Isolasi  Minyak Kayu Manis Sebagai Senyawa Antidiabetes. Majalah Farmasi Indonesia, 22 (1), 9 – 14.
Nugrahaningtyas,  K.  D.,  Matsjeh,  S.  &  Wahyuni,  T.  D.    2005.    Isolasi  dan  Identifikasi  Senyawa  Flavonoid  dalam Rimpang Temu Ireng (Curcuma aeruginosa Roxb.). Biofarmasi, 3(1): 32–38.
Nurnasari, E., & Wijayanti, K. S. 2019. Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Daun Tembakau terhadap Pertumbuhan Bakteri  Escherichia  coli  dan  Staphylococcus  aureus.  Jurnal  Kefarmasian  Indonesia,  9(1),  48–56. https://doi.org/10.22435/jki.v9i1.1219
Nuria, M.C., Arvin, F., Sumantri.  2009. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Jarak Pagar (Jatropha Curcas
L) Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Atcc 25923, Escherichia Coli Atcc 25922, Dan Salmonella Typhi Atcc 1408, Mediagro.2009;5(2):26–37.
Nursofia., 2021. Uji toksisitas akut dari ekstrak etanol daun kayu  manis (cinnamomum  burmanni) terhadap  mencit putih (mus musculus l.) Betina. Skrip[si. Jurusan farmasi fakultas kedokteran ilmu kesehatan Plumeriastuti,  H.,  &  Effendi,  M.  H.  2019.  Identification  of  Bioactive  Compound  of  The  Essential  Oils  of Cinnamomum  burmannii  From  Several  Areas  In  Indonesia  by  Gas  Chromatography  –  Mass  Spectrometry Method for Antidiabetic Potential. National Journal of Physiology, Pharmacy and Pharmacology, 9(4), 279  - 283
Jane    L.  Dangeubun,  AM  Serang, Petrus  Letsoin,  dan  Maryani. Fitokimia,  Uji  Antibakteri  dan  Uji  Toksisitas  dan  Dari Ekstrak Daun Kayu Manis (Cinnamomum burmannii) Terhadap Tingkat Kematian Larva Artemia Salina Leach
Prasad,  K.  N.,  Yang,  B.,  Dong,  X.,  Jiang,  G.,  Zhang,  H.,  Xie,  H.,  &  Jiang,  Y.  2009.  Flavonoid  Contents  and Antioxidant  Activities  from  Cinnamomum  Species.  Innovative  Food  Science  and  Emerging  Technologies, 10(4), 627– 632.
Prasetyorini .,  Novi, F. U., Yulianita., Novi, N., Widya, F.  2021.  Potensi Ekstrak Refluks Kulit Batang Kayu Manis (Cinnamomum Burmannii) Sebagai Antijamur Candida Albicans Dan Candida Tropicalis.  FITOFARMAKA : Jurnal Ilmiah Farmasi Vol.11, No.2, Desember 2021 : 164-178.  DOI : 10.33751/jf.v11i2.2272 Rita,  W.  S.,  Suirta,  I.W.,  &  Sabikin,  A.  2008.  Isolasi  dan  identifikasi  senyawa  yang  berpotensi  sebagai  antitumor pada daging buah pare (Momordica charantia L.). Jurnal Kimia. 2(1), 1907- 9850.
Rizki, F.S., Ferdinan. A.  2020.  Uji Daya Hambat Antibakteri Salep Ekstrak Etanol Daun Pandan Hutan (Freycinetia sessiliflora Rizki.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus epidermidis.  Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(1), 1–9.
Reppi,  N.  B.,  Mambo,  C.,  &  Wuisan,  J.  2016.  Uji  efek  antibakteri  ekstrak  kulit  kayu  manis  (Cinnamomum burmannii) terhadap Escherichia coli dan Streptococcus pyogenes. Jurnal E-Biomedik,
4(1). https://doi.org/10.35790/ebm.4.1.2016.12204.
Sangi, M., Runtuwene, M. R. J., Simbala, H. E. I., & Makang, V. M. A. (2019). Analisis Fitokimia Tumbuhan Obat Di Kabupaten Minahasa Utara. Chemistry Progress, 1(1), 47–53. https://doi.org/10.35799/cp.1.1.2008.26
Sari,  F.P.  dan  S.  M.  Sari.  2011.  Ekstraksi  Zat  Aktif  Antimikroba  dari  Tanaman  Yodium  (Jatropha  multifida  Linn) sebagai Bahan Baku Alternatif Antibiotik Alami. Semarang: Fakultas Teknik Universitas Diponegoro. Suteja, I.K.P., Rita, W.S., Gunawan, I.W.G.  2016.  Identifikasi Dan Uji Aktivitas Senyawa Flavonoid Dari Ekstrak Daun  Trembesi  (Albizia  Saman  (Jacq.)  Merr)  Sebagai  Antibakteri  Escherichia  Coli.    Jurnal  Kimia  10  (1), Januari 2016: 141-148.
Thomson, R.H. 1993.  The Chemistri Of Natural Producst. 2 ndEd. Glasgow: Chapman andhall ltd.
Wea,  C.  N.  2016.  Studi  Fitokimia  dan  Potensi  Antioksidan  Ekstrak  dan  Fraksi  Kayu  Manis  (Cinnamomum  sp.) dengan Metode Soxhletasi. In Skripsi. Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya Wulansari, E. D., Lestari, D.,  Khoirunissa, M. A. 2020. Kandungan Terpenoid Dalam Daun Ara (Ficus carica L.) Sebagai Agen Antibakteri Terhadap Bakteri Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus. Pharmacon, 9(2), 219–225. DOI: https://doi.org/10.35799/pha.9.2020.29274 Zhu, R., Haixia, L., Chenyue, L., Lili W., Rufeng, M., Beibei, C., Lin, L., Jianzhao N.,  Min F., Dongwei, Z.,  Sihua G.    2017.    Cinnamaldehyde  In  Diabetes:  A  Review  of  Pharmacology,  Pharmacokinetics  and  Safety.  Jurnal Online. Pharmacological Research Volume 122, Pages 78-89
Zulfiah, Z., Megawati, M., Herman, H., H. Ambo Lau, S., Hasyim, M. F., Murniati, M., Roosevelt, A.  2020.  Uji Toksisitas  Ekstrak  Rimpang  Temu  Hitam  (Curcuma  aeruginosa  Roxb.)  Terhadap  Larva  Udang  (Artemia salina Leach) dengan Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT). J. Farm. Sandi Karsa, 6(1): 44–49 (2020).