Identifikasi ikan gabus, Channa spp. (Scopoli 1777) stok liar dan generasi I hasil domestikasi berdasarkan gen Cytochrome C Oxidase Subunit I (COI)
[Identification of wild stock and the first generation (F1) of domesticated snakehead fish, Channa spp. (Scopoli 1777) using partial Cytochrome C Oxidase Subunit I (COI) gene]
Irmawati 1 , Joeharnani Tresnati 1 , Nadiarti 1 , Liestiaty Fachruddin 1 , Nur Rahmawaty Arma 2 , Andi Haerul
1 Jurusan Perikanan, Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Hasanuddin, Jln. Perintis Kemerdekaan Km 10, Makassar, 90245
2 Program Studi Budidaya Perairan, Politeknik Pertanian Negeri Pangkep, Jln. Poros Makassar-Parepare Km 83 Mandalle, Kabupaten Pangkajene dan Kepulauan, 90655
Diterima: 22 Oktober 2016; Disetujui: 11 April 2017

## Abstrak
Populasi ikan gabus (famili Channidae) tersebar luas di wilayah perairan tawar Indonesia. Ikan gabus merupakan ikan asli di Sumatera, Jawa, dan Kalimantan) tetapi merupakan ikan introduksi di Sulawesi dan Papua. Identifikasi berdasar- kan gen cytochrome c oxidase subunit I (COI) telah dilakukan terhadap ikan gabus dari perairan di Tasikmalaya, Amba- rawa, Bali, Aceh, Pontianak dan Banjarmasin, tetapi ikan gabus dari perairan Sulawesi Selatan belum dilakukan. Tuju- an penelitian adalah untuk mengidentifikasi species ikan gabus dari Danau Towuti Sorowako dan ikan gabus generasi I (F1) hasil domestikasi dari induk yang berasal dari perairan tawar Kabupaten Bantaeng Sulawesi Selatan menggunakan gen COI untuk DNA barcoding , dan untuk menganalisis filogeni ikan gabus tersebut. Sekuen gen COI ikan gabus terse- but disejajarkan dengan sekuen nukleotida ikan gabus yang terdeposit di GenBank. Pohon filogenetik dikonstruksi de- ngan  menggunakan  program  MEGA  7.0.20.  Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa nukleotida  gen  COI  sampel  ikan gabus  dari  Danau  Towuti  Sorowako  memiliki  kemiripan  99%  dengan Channa  striata nomor  aksesi  KU692418 dan KU692421 dan 98% dengan Channa striata nomor aksesi KU852443 sehingga dapat disimpulkan bahwa di Danau To- wuti terdapat ikan gabus jenis Channa striata . Tingkat kemiripan sekuen nukleotida ikan gabus F1dari perairan Kabu- paten  Bantaeng  adalah  65%  dengan  ikan  gabus Channa  pleurophthalma (KJ937390)  asal  perairan  Banjarmasin  dan ikan gabus Channa gachua (KX389277). Berdasarkan hasil tersebut maka diduga bahwa ikan gabus dari Danau Towu- ti Sorowako berkerabat jauh dengan ikan gabus dari perairan Bantaeng, dan diperlukan analisis yang lebih lanjut untuk menentukan jenis populasi ikan gabus F1 asal perairan tawar Kabupaten Bantaeng tersebut.
Kata penting: filogenetik, gabus, cytochrome c oxidase subunit I (COI),

## Abstract
The snakehead fish (Channidae) is widely distributed in inland water of Indonesia.  This fish is native species in Suma- tera, Java and Kalimantan, but non-native species in Sulawesi and Papua.  Study on molecular identification and phylo- geny of this fish using cytochrome c oxidase subunit I (COI) gene has only been conducted on snakehead fish origin from Tasikmalaya, Ambarawa, Bali, Aceh, Pontianak, and Banjarmasin waters, but none is available in South Sulawesi waters.  The objectives of this research are to identify species of snakehead fish from Towuti Lake Sorowako and the first generation (F1) of domesticated snakehead fish from Bantaeng waters of South Sulawesi using COI gene for DNA barcoding, and to analyze the phylogenetic resolution of the fish.  Partial sequences of the COI gene of the snakehead fish were aligned with sequences of snakehead fish deposited in GenBank. The phylogenetic tree was constructed using MEGA 7.0.20 program. The result indicated that COI gene nucleotides of snakehead fish from Towuti Lake Sorowako showed 99% homology with Channa striata acc no. KU692418 and KU692421, and showed 98% homology with those of acc no. KU852443. Therefore it can be conclude that Channa striata exist in Towuti Lake Sorowako. Nucleotide sequences of the  first generation (F1) of domesticated snakehead fish  from Bantaeng  waters showed 65% homology with Channa  pleurophthalma (acc  no.  KJ937390)  origins  from  Banjarmasin  waters  and Channa  gachua (acc  no. KX389277). Based on this result, it assumed that snakehead fish from Towuti Lake Sorowako are distantly in gene to those from Bantaeng waters, and further analyses are required to identify the population of snakehead fish from Ban- taeng waters.
Keywords: Channa striata , phylogenetic, cytochrome c oxidase subunit I (COI), snakehead fish
_____________________________
Penulis korespondensi Alamat surel: trif.ahwa@gmail.com

## Pendahuluan
Ikan gabus, snakehead fish , yang dikenal se- bagai spesies invasif, merupakan ikan dari famili Channidae.    Famili  Channidae  terdiri  dari  dua genera,  yaitu Channa dan Parachanna .  Genus Channa terdiri  dari  34  spesies  dan  merupakan ikan asli di wilayah Asia sedangkan genus Para- channa terdiri  atas  tiga  spesies  dan  merupakan ikan  asli  di  wilayah  Afrika  (Froese  &  Pauly 2016).  Ikan  gabus  tersebar  hampir  di  seluruh wilayah  perairan  umum  daratan  Indonesia.  Ikan gabus di Indonesia  merupakan  ikan asli di  wila- yah  perairan  umum  daratan  di  paparan  Sunda (Sumatera,  Jawa,  dan  Kalimantan)  sedangkan ikan  gabus  yang  terdapat  di  wilayah  perairan umum daratan Wallacea (Sulawesi, Sunda Kecil, Maluku)  dan  Paparan  Sahul  (Papua)  merupakan ikan introduksi.
Ikan gabus telah banyak dieksploitasi karena diketahui  memiliki  potensi  farmaseutika  (Mat Jais et al . 1997; Michelle et al . 2004).  Ikan ga- bus  juga  kaya  akan  albumin,  asam  lemak,  asam amino, dan mineral (Mustafa et al . 2012).  Kan- dungan gelatin dan kolagen pada bagian kulit dan tulang menyebabkan ikan gabus di Indonesia ba- nyak dieksploitasi untuk kebutuhan industri.
Keanekaragaman  jenis  ikan  gabus  cukup tinggi  di  Indonesia.    Muchlisin et  al .  (2013) mengidentifikasi  dua  jenis  ikan  gabus  di  Danau Laut Tawar Aceh, yaitu ikan gabus jenis Channa gachua dan Channa striata . Lebih jauh Serrao et al .  (2014)  melaporkan  bahwa  ikan  gabus  yang tersebar  di  perairan  tawar  Indonesia  adalah  ikan gabus dari jenis C. bankanensis , C. cyanospilos , C. gachua ,  C. marulioides ,  C. melanoptera ,  C. melasoma ,  C. micropeltes ,  C. lucius ,  C. striata dan Channa pleurophthalma .  Dahruddin et  al . (2017)  melaporkan  bahwa  ikan  gabus Channa striata teridentifikasi di Danau Rawa Pening Ja- wa  Tengah,  Cigede  Tasikmalaya,  dan  Tukad
Unda  Bali  serta  ikan  gabus  jenis Channa pleu- rophthalma terdapat  di Banjarmasin  Kalimantan Selatan. Genus Channa yang berbeda jenis terse- but memiliki toleransi ekologi yang berbeda dan kemampuan  menginvasi  dari  setiap  spesies  juga berbeda  (Herborg et  al .  2007).  Meskipun  ikan gabus bukan merupakan ikan asli di Sulawesi Se- latan, akan tetapi ikan tersebut ditemukan hampir di seluruh perairan umum daratan Sulawesi Sela- tan. Ikan gabus ditemukan di Danau Tempe, Da- nau  Sidenreng,  Danau  Towuti,  Danau  Matano, dan  sungai-sungai  serta  kanal-kanal  di  area  per- sawahan.    Status  taksonomi  ikan  gabus  pada  le- vel spesies dari genus Channa di Sulawesi Sela- tan belum jelas sehingga menarik untuk dikaji.
Identifikasi dan karakterisasi ikan gabus me- rupakan  hal  yang  sangat  penting.  Selain  terkait dengan  kemampuan  adaptasi  dan  invasi  yang berbeda  (bergantung  kepada  spesies/jenis),  juga terkait  dengan  budi  daya  dan  pengelolaan  serta konservasi ikan gabus di habitat aslinya. Saat ini, informasi  tentang  identifikasi,  karakterisasi,  dan distribusi  ikan  gabus  di  Indonesia  masih  sangat terbatas,  dan  khusus  di  wilayah  perairan  umum daratan Sulawesi Selatan belum tersedia.
DNA barcoding berdasarkan  parsial  sekuen gen  COI  adalah  salah  satu  metode  yang  banyak digunakan  untuk  mengidentifikasi  spesies  ikan (Hebert et  al .  2003a;  Lakra et  al .  2009).  DNA barcoding menggunakan sekitar 650 pasang basa dari segmen gen cytochrome c oxidase subunit I (COI)  mitokondria  sebagai  marka/penanda (Hebert et al . 2003b). Gen COI adalah satu dari dua gen yang mengkode protein yang ditemukan di  semua  eukariot.  COI  memiliki  laju  mutasi asam amino yang sangat rendah (Lynch & Jerrell 1993)  dengan  sekuen  DNA  yang  terkonservasi tinggi di dalam spesies yang sama (Lambert et al . 2005).  Berdasarkan  karakter  tersebut,  gen  COI cukup efisien dan akurat digunakan dalam meng-
identifikasi  spesies  eukariot  (Ma et  al .  2012, Hebert et al . 2003a)
Berdasarkan latar belakang tersebut peneliti- an ini dirancang dengan tujuan untuk mengiden- tifikasi sampel ikan gabus yang berasal dari Da- nau Towuti dan benih ikan gabus generasi I (F1) dari  induk  alam  perairan  tawar  di  Desa  Rappoa Kabupaten Bantaeng menggunakan metode DNA barcoding .  Hasil  penelitian  diharapkan  berman- faat  bagi  studi  ikan  gabus  selanjutnya  terutama dalam  hal  pengelolaan  sumber  daya  ikan  gabus dan pengembangan budi daya ikan gabus.

## Bahan dan metode

## Sampel ikan gabus
Sampel ikan gabus masing-masing sebanyak dua  ekor  merupakan  ikan  hasil  tangkapan  dari Danau Towuti dan generasi I (F1) hasil domesti-
kasi  dari  induk  yang  berasal  dari  perairan  tawar di  Desa  Rappoa  Kabupaten  Bantaeng  (Gambar 1). Sampel ikan gabus dari Danau Towuti diam- bil  pada  bulan  Juni  2016  dengan  menggunakan alat tangkap pancing. Benih ikan gabus F1 bera- sal dari sepasang induk yang memijah pada bulan Mei 2016 di Balai Benih Ikan (BBI) Rappoa Ka- bupaten  Bantaeng.  Sampel  insang  dan  otot  dari dua  ekor  ikan  gabus  di  masing-masing  stasiun diawetkan dengan menggunakan Ethanol absolut (Gambar 2).

## Ekstraksi DNA
Ekstraksi  DNA  dilakukan  terhadap  sampel ikan  asal  organ  sirip  pektoral  yang  dipreservasi dalam  ethanol 70%.  Ekstraksi dilakukan  meng- gunakan DNeasy mini KIT (Qiagen) dengan pro- sedur mengacu pada manual.
Gambar 1.  Lokasi pengambilan sampel. Sampel ikan gabus pada penelitian ini merupakan sampel hasil tangkapan di Danau Towuti dan benih ikan gabus hasil domestikasi dari induk yang berasal dari perairan tawar Kabupaten Bantaeng

## (A)
(B)
Gambar 2.  Sampel ikan gabus yang digunakan dalam penelitian. Ikan gabus yang tertangkap di Danau Towuti (A).  Ikan gabus generasi I (F1) hasil hibridisasi induk dari perairan tawar Kabupaten Bantaeng (B). Skala bar: 1 cm

## Amplifikasi
Gen COI ikan gabus  diamplifikasi  menggu-
-
TCA  ACC  AAC  CAC  AAA  GAC  ATT  GGC AC-    dan  Fish  R1:  5 -  TAG  ACT  TCT  GGG TGG  CCA  AAG  AAT  CA  - Target  segmen DNA  dari  gen  COI  dengan  menggunakan  pa- sangan primer tersebut adalah sekitar 650 pasang basa (bp).  Reaksi PCR untuk 25 µL terdiri dari 1 µL  masing-masing  primer,  12,5  µL  KAPA hot start ready mix (berisi: DNA polymerase , 10 mM
dNTPs,  25  mM  MgCl 2 ,  dan  2X buffer ),  5,5  µL nuclease  free  water (air  bebas  enzim nuclease ) dan 5 µL sampel DNA sebagai cetakan.  Proses amplifikasi (penggandaan) DNA di dalam mesin PCR  meliputi:  predenaturasi  (pemisahan  untai ganda  DNA)  pada  94 o C  selama  5  menit;  40 siklus  pada  94 o C  selama  30  detik  untuk  proses denaturasi,  52 o C  selama  30  detik  untuk  proses annealing (penempelam primer), 72 o C selama 30 detik  untuk  proses extension (polimerisasi  pri- mer).    Proses  tersebut  diakhiri  dengan  proses post-extension pada  suhu  72 o C  selama  7  menit dan disimpan pada suhu 4 o C.

## Visualisasi pita DNA
Produk  PCR  selanjutnya  dijalankan  dalam elektroforesis  agarose  1,8%  dalam  buffer  TAE dengan  menggunakan ethidium  bromide sebagai pewarna DNA.  Elektroforesis dijalankan meng-
gunakan tegangan 100 V selama 45 menit.  Pro- duk  PCR  hasil elektroforesis  selanjutnya  divisu- alisasi  menggunakan  sinar ultraviolet dalam alat GelDoc (BioRad).

## Perunutan nukleotida (sequencing)
Sekuensing dilakukan di 1 st BASE Malaysia dengan  menggunakan  BigDye®  Terminator  ver. 3.1  cycle  sequencing  KIT  dan  mesin  otomatis HiSeq-X  sequencing.  Primer  yang  digunakan untuk  proses  sekuensing  adalah  sama  dengan primer yang digunakan untuk proses amplifikasi PCR.

## Analisis data
Sekuen  parsial  gen  COI  mitokondria  hasil sekuensing  dianalisis  menggunakan  program BioEdit,  ClustalW,  MEGA, Melecular  Evolu- tionary Genetics Analysis , ver. 7.0.20 (Tamura et al . 2013) dan program BLASTn, Nucleotide The Basic  Local  Alignment  Search  Tool dari  NCBI. Program  MEGA  ver.  7.0.20  yang  dapat  link  ke NCBI  ( National  Center  of  Biotechnology  Infor- mation ),  digunakan  untuk  identifikasi  dan  men- dapatkan gambaran tentang evolusi gen COI ikan gabus stok alami/liar dari Danau Towuti dan ikan gabus  hasil  domestikasi  dari  Kabupaten  Banta- eng.    Identifikasi  ikan  gabus  dilakukan  dengan menyejajarkan  ( alignment )  sekuen  nukleotida sampel  ikan  gabus  hasil  sekuensing  dengan  se-
kuen nukleotida gen COI vertebrata lainnya yang terdeposit  di  Bank  Gen.  Hasil  penyejajaran  ke- mudian dianalisis secara deskriptif.

## Hasil
Amplifikasi  genom  ikan  gabus  menghasil- kan pita DNA gen COI berukuran sekitar 700 pa- sang basa (pb) (Gambar 3). Penyejajaran 655 pa- sang basa (pb) gen COI mitokondria sampel ikan gabus  dari  Danau  Towuti  Sulawesi  Selatan  de- ngan beberapa sekuen gen COI ikan gabus yang terdeposit di Bank Gen menunjukkan bahwa spe- sies ikan gabus dari Danau Towuti adalah Chan- na  striata .  Sekuen  gen  COI  sampel  ikan  gabus yang  tertangkap  di  Danau  Towuti  meliputi  99% sekuen  gen  COI Channa  striata nomor  aksesi:
KU692418 dari Cigede Tasikmalaya Jawa Barat dan Channa  striata nomor  aksesi:  KU692421 dari  Danau  Rawa  Pening  Ambarawa  Jawa Tengah (Tabel 1).
Penyejajaran 547 pb gen COI mitokondria sampel ikan gabus generasi pertama (F1) dari in- duk ikan gabus yang tertangkap di perairan tawar Kabupaten Bantaeng dengan beberapa sekuen gen COI vertebrata lainnya menunjukkan bahwa nukleotida gen COI ikan gabus hasil domestikasi tersebut mengcover 100% nukleotida COI Chan- na pleuropthalma (nomor aksesi KJ937390) asal Banjarmasin Kalimantan Selatan dan Channa ga- chua (nomor aksesi KX389277) dengan derajat homologi masing-masing sebesar 65% (Tabel 2).
Gambar 3.  Pita DNA gen COI hasil amplifikasi genom ikan gabus. S1, S2 = pita DNA gen COI ikan gabus dari Danau Towuti; B1, B2 = pita DNA gen COI benih ikan gabus generasi I (F1) hasil domes- tikasi dari induk yang berasal dari perairan tawar Kabupaten Bantaeng
Tabel 1.  Hasil penyejajaran sekuen gen cytochrome c oxidase subunit I (COI) mitokondria ikan gabus dari Danau Towuti dengan sekuen gen cytochrome c oxidase subunit I (COI) ikan gabus lainnya (%) Nomor aksesi Takson Query cover (%) Homologi (%) KU692418 Channa striata (Cigede, Tasikmala- ya, Jawa Barat) 99 99 KU692421 Channa striata (Danau Rawa Pe- ning, Jawa Tengah) 99 99 KU692419 Channa striata (Cigede, Tasikmala- ya, Jawa Barat) 99 99 KU692423 Channa striata (Tukad Unda, Bali) 99 99 KJ937425 Channa striata (Pontianak, Kali- mantan Barat) 99 99 KJ937421 Channa striata (Way Batang Hari, Lampung) 99 99
Tabel 2. Hasil penyejajaran sekuen gen cytochrome c oxidase subunit I (COI) mitokondria ikan gabus gene- rasi I (F1) hasil domestikasi induk yang berasar dari perairan tawar di Kabupaten Bantaeng dengan sekuen gen cytochrome c oxidase subunit I (COI) ikan gabus lainnya (%) Nomor aksesi Takson Query cover (%) Homologi (%) KJ937390 Channa pleuropthalma (Banjarmasin Indonesia) 100 65 KX389277 Channa gachua (India) 100 65 KU495729 Channa microcephalus (Filipina) 100 63 JX260840 Channa marulius (India) 34 71 KX389275 Channa punctate (India) 31 73
Pohon filogenetik menunjukkan bahwa sam- pel ikan gabus yang tertangkap di Danau Towuti membentuk  satu  kelompok  dengan Channa striata dari  Tasikmalaya  Jawa  Barat  (no  aksesi KU692418), Channa  striata asal  Danau  Rawa Pening,  Jawa  Tengah  (no  aksesi:  KU692421), dan Channa  striata asal  Bali  (no  aksesi KU692423). Channa  striata yang  berasal  dari Aceh  membentuk  kelompok  lain  bersama-sama dengan Channa  striata dari  Filipina,  Vietnam,
Thailand,  dan  Tiongkok.  Ikan  gabus  generasi  I
(F1) dari induk yang tertangkap di perairan tawar Kabupaten Bantaeng memiliki hubungan kekera- batan  terdekat  dengan Channa  pleurophthalma (no aksesi KJ937390) asal Banjarmasin Kaliman- tan  Selatan  dan Channa  gachua (no  aksesi KX389277) yang berasal dari India.  Ikan gabus yang  tertangkap  di  Danau  Towuti  berkerabat jauh  dengan  ikan  gabus  generasi  I  (F1)  dari  in- duk  alam  yang  tertangkap  di  perairan  tawar Kabupaten Bantaeng (Gambar 4 dan 5).
Gambar 4.  Filogeni ikan gabus ( Channa striata ) dari Danau Towuti (Soroako) dan generasi I (F1) hasil do- mestikasi induk yang berasal dari perairan tawar di Kabupaten Bantaeng dengan beberapa spe- sies ikan dan vertebrata lainnya berdasarkan sekuen gen cytochrome c oxidase subunit I (COI)
Gambar 5. Jarak genetik sampel ikan gabus ( Channa striata ) dari Danau Towuti (Soroako) dan generasi I (F1)  hasil  domestikasi  induk  yang  berasal  dari  perairan  tawar  di  Kabupaten  Bantaeng  dengan beberapa  spesies  ikan  dan  vertebrata  lainnya  berdasarkan  sekuen  gen cytochrome  c  oxidase subunit I (COI)

## Pembahasan
Identifikasi jenis yang  akurat dan hubungan kekerabatan  antarjenis  sangat  dibutuhkan  dalam pengelolaan  sumber  daya  hayati  perairan  dan program  pemuliabiakan  ikan.  Identifikasi  berda- sarkan  DNA  barcoding  terbukti  mampu  menge- lompokkan  sampel-sampel  ikan  gabus  pada  pe- nelitian ini ke dalam kelompok taksanya.  Anali- sis filogeni menunjukkan bahwa sampel ikan ga- bus yang tertangkap di Danau Towuti berada satu kelompok  dengan Channa striata asal  Tasikma- laya  Jawa  Barat,  Danau  Rawa  Pening  Jawa  Te- ngah, dan Channa striata yang berasal dari Bali.
Hebert et  al .  (2004)  menyatakan  bahwa  DNA barcoding  adalah  metode  yang  telah  dibakukan untuk  mengidentifikasi  spesies  berdasarkan fragmen  gen  COI.  DNA  barcoding diramalkan sebagai solusi untuk mempercepat laju penemuan spesies baru dan membuka perspektif baru dalam konservasi. Oleh karena itu, DNA barcoding me- rupakan  solusi  cepat  dan  tepat  dalam  mengung- kap  keanekaragaman  hayati  sebelum  mengarah ke kondisi kepunahan sebagai akibat pemanasan global dan degradasi lingkungan.
Beberapa penelitian yang dilakukan menun- jukkan bahwa identifikasi ikan gabus secara mor-
fologi  memiliki  keterbatasan  karena  ikan  gabus memiliki  variasi  morfologi  yang  sangat  kecil  di antara  individu.  Identifikasi  secara  morfometrik dan  meristik  terhadap  ikan  gabus  dari  wilayah perairan  tawar  Kabupaten  Wajo  dan  perairan payau di daerah Batangase serta Sungai Maros di Kabupaten  Maros  menunjukkan  bahwa  karakter penciri  ikan  gabus  dari  setiap  daerah  tersebut berbeda-beda  atau  tidak  konsisten  (Arma et  al . 2014, Irmawati et al . 2015). Hal tersebut sejalan dengan  hasil  penelitian  Song et  al .  (2013)  yang menemukan  bahwa  keragaman  genetik  dalam spesies Channa  striata lebih  rendah  dibanding- kan dengan spesies-spesies lainnya dan tidak ber- korelasi  dengan  variasi  morfologi.  Hasil  peneli- tian Zhu et al . (2013) menunjukkan bahwa iden- tifikasi ikan gabus berdasarkan karakter morfolo- gi menunjukkan hasil yang sangat tidak menentu karena keanekaragaman ikan gabus yang tinggi.
Nukleotida gen COI mitokondria ikan gabus dari Danau Towuti memiliki homologi yang ting- gi dengan Channa striata dari Tasikmalaya Jawa Barat nomor aksesi KU692418, Danau Rawa Pe- ning Jawa Tengah nomor aksesi KU692421, Bali (KU692423), Lampung (KJ937421), dan Pontia- nak  Kalimantan  Barat  (KJ937425)  yaitu  sebesar
Nomor aksesi/takson 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 1 HQ174837_Epinephelus_lanceolatus 2 HQ960897_Anguilla_anguilla 0.252 3 KX389278_Channa_striata_(India) 0.252 0.262 4 KX389277_Channa_gachua_(India) 0.234 0.271 0.231 5 KX389275_Channa_punctata_(India) 0.231 0.283 0.116 0.215 6 KU852443_Channa_striata_(China) 0.255 0.243 0.028 0.231 0.121 7 KU692423_Channa_striata_(Bali_Indonesia) 0.251 0.243 0.028 0.231 0.123 0.012 8 KU692421_Channa_striata_(Rawa_Pening_Jawa_Tengah) 0.254 0.246 0.026 0.231 0.121 0.010 0.006 9 KU692418_Channa_striata_(Tasikmalaya_Jawa_Barat) 0.251 0.243 0.024 0.228 0.119 0.008 0.004 0.002 10 KU495729_Clarias_macrocephalus_(Filipina) 0.259 0.290 0.257 0.267 0.246 0.257 0.246 0.246 0.249 11 KT001936_Channa_striata_(Vietnam) 0.255 0.244 0.034 0.237 0.128 0.006 0.018 0.016 0.014 0.260 12 KJ937390_Channa_pleurophthalma_(Banjarmasin_Kalimantan) 0.228 0.239 0.215 0.229 0.225 0.213 0.210 0.208 0.210 0.262 0.222 13 JX983214_Anabas_testudineus 0.235 0.303 0.248 0.257 0.230 0.259 0.250 0.255 0.253 0.272 0.267 0.217 14 JX260840_Channa_marulius_(India) 0.224 0.256 0.181 0.220 0.188 0.181 0.176 0.181 0.179 0.241 0.187 0.228 0.242 15 HM345931_Channa_striata_(Aceh) 0.255 0.248 0.028 0.226 0.126 0.004 0.016 0.014 0.012 0.260 0.010 0.213 0.259 0.177 16 KC789519_Channa_striata_(Filipina) 0.252 0.246 0.032 0.234 0.126 0.004 0.016 0.014 0.012 0.257 0.002 0.219 0.265 0.184 0.008 17 HM102290_Bos_taurus 0.270 0.254 0.238 0.271 0.248 0.240 0.238 0.241 0.238 0.223 0.238 0.219 0.262 0.245 0.238 0.241 18 JQ661364_Channa_striata_(Thailand) 0.255 0.243 0.028 0.231 0.121 0.000 0.012 0.010 0.008 0.257 0.006 0.213 0.259 0.181 0.004 0.004 0.240 19 Danau_Towuti_Soroako 0.309 0.289 0.068 0.271 0.170 0.049 0.047 0.045 0.043 0.297 0.051 0.265 0.301 0.227 0.053 0.053 0.283 0.049 20 Generasi_I_Induk_wild_stok 0.577 0.542 0.589 0.545 0.579 0.590 0.592 0.588 0.592 0.594 0.594 0.539 0.594 0.576 0.590 0.590 0.582 0.590 0.666
99%.  Tingkat  homologi  ikan  gabus  dari  Danau Towuti  dengan  ikan  gabus  dari  Tiongkok (KU852443), Filiphina (KC789519, HQ682668), dan  Thailand  (KJ937376)  adalah  sebesar  98%. Tingkat  homologi  sekuen  nukleotida  gen  COI ikan gabus dari Danau Towuti sebesar 98   99% dengan Channa  striata dari  beberapa  daerah menunjukkan  bahwa  ikan  gabus  tersebut  adalah Channa striata . Identifikasi ikan gabus dari  Da- nau Towuti sebagai Channa striata juga diperte- gas oleh data tentang jarak genetik dan gap /situs polimorfik/keragaman sekuen gen COI. Jarak ge- netik  antara  ikan  gabus  dari  Danau  Towuti  de- ngan ikan gabus dari Tasikmalaya, Jawa Tengah, Bali,  Aceh,  Tiongkok,  Thailand,  Filiphina,  dan Vietnam  adalah  sebesar  4,3-5,1%  menunjukkan bahwa ikan gabus-ikan gabus tersebut berkerabat sangat dekat. Muchlisin et al . (2013) menyatakan bahwa jarak nukleotida sebesar 7,1% menunjuk- kan tingkat  kekerabatan  yang sangat dekat. Gap atau situs polimorfik yang menggambarkan kera- gaman  nukleotida  gen  COI  ikan  gabus  dari  Da- nau Towuti dengan Channa striata dari beberapa wilayah yang disebutkan di atas adalah 0,0028 0,0031 atau 0,00% yang menunjukkan bahwa di Danau Towuti terdapat ikan gabus jenis Channa striata . Lambert et al . (2005) menyatakan bahwa suatu  spesimen  ditetapkan  sebagai  spesies  baru apabila  terdapat gap /situs  polimorfik/keragaman sekuen  gen  COI  lebih  besar  atau  sama  dengan
Sekuen  nukleotida  gen  COI  ikan  gabus  F1 hasil domestikasi dari induk alam asal Bantaeng memiliki  homologi  65%  dengan  sekuen  nukleo- tida Channa  pleurophthalma asal  Banjarmasin Kalimantan  Selatan  dan Channa  gachua asal (India).  Analisis  filogeni  menunjukkan  bahwa ikan gabus asal Bantaeng, Channa pleurophthal- ma, dan Channa  gachua masing-masing  mem- bentuk kelompok tersendiri. BLASTn sekuen nu-
kleotida  gen  COI  ikan  gabus  F1  asal  Bantaeng dengan sekuen nukleotida Channa pleurophthal- ma dan Channa gachua yang terdeposit di Bank Gen  menunjukkan  adanya gap berturut-turut  se- besar  2%  dan  3%.  Oleh  sebab  itu,  diperlukan marka  untuk  menentukan  jenis/spesies  ikan  ga- bus F1 asal Bantaeng tersebut.

## Simpulan
Penelitian  ini  menyimpulkan  bahwa  ikan gabus  jenis Channa  striata terdapat  di  Danau Towuti  Sulawesi  Selatan.  Nukleotida  gen  COI ikan  gabus  generasi  I  yang  berasal  dari  induk yang  tertangkap  di  perairan  tawar  Kabupaten Bantaeng  memiliki  homologi  65%  dengan  nu- kleotida  gen  COI Channa  pleurophthalma dari Banjarmasin  Kalimantan  Selatan  dan Channa gachua dari  India dengan  gap  berturut-turut  2% dan 3%.

## Persantunan
Penelitian ini dibiayai oleh Direktorat Jende- ral Penguatan Riset dan Pengembangan, Kemen- terian  Riset  dan  Pendidikan  Tinggi  dengan nomor  kontrak  019/SP2H/LT/DRPM/II/2016. Ucapan terima kasih disampaikan kepada LP2M Universitas  Hasanuddin  selaku  institusi  penang- gungjawab  kegiatan  dan  kepada  semua  pihak yang  membantu  dalam  pengadaan  sampel  ikan gabus.

## Daftar pustaka
Arma NR, Illijas MA, Irmawati, Mappanyiwi A. 2014.  Morphometric  and  meristic  charac- teristics of  snakehead fish  for hatchery pro- duction. In : Hutauruk et al . (ed.). Proceed- ing of the 3 rd International and National Se- minar  on  Fisheries  and  Marine  Science : Strengthening  science  and  technology  to- wards  the  development  of  Blue  Economy, Faculty  of  Fisheries  and  Marine  Science University of Riau, Riau. pp.198-201.
Dahruddin  H,  Hutama  A,  Busson  F,  Sauri  S, Hanner  R,  Keith  P,  Hadiaty  R,  Hubert  N. 2017. Revisiting the ichthyodiversity of Java and Bali through DNA barcodes: taxonomic coverage, identification accuracy, cryptic di- versity  and  identification  of  exotic  species. Molecular  Ecology  Resources ,  17(2):  288- 299.
Froese R, Pauly D. 2016. FishBase . World Wide Web  electronic  publication.  www.fishbase. org version (10/2016).
Hebert PDN, Cywinska A, Ball SL, de Waard JR. 2003a. Biological identifications through DNA barcodes. In : Barrett S (ed.). Proceed- ings of The Royal Society B. Royal Society of London, 270(1512): 313-321.
Hebert  PDN,  Ratnasingham  S,  de  Waard  JR.
2003b.  Barcoding animal life: cytochrome c oxidase  subunit  1  divergences  amongst closely  related  species. In :  Barrett  S  (ed.). Proceedings of  The  Royal Society B.  Royal Society of London,  270: S96-S99.
Hebert PDN,  Stoeckle MY,  Zemlak TS,  Francis CM.  2004.    Identification  birds  through DNA  barcodes. PloS  Biology ,  2(10):  1657- 1663.
Herborg LM, Mandrak NE, Cudmore BC, Macl- saac HJ. 2007. Comparative distribution and invasion risk of snakehead (Channidae) and Asian  carp  (Cyprinidae)  species  in  North America. Canadian Journal of Fish Aquatic Science , 64(12): 1723-1735.
Irmawati, Nadiarti, Tresnati J, Hidayani AA, Ar- ma NR. 2015. Reproductive performance of snakehead  fish  in  tank.  Disampaikan  pada The 5 th International Conference of Aquacul- ture  Indonesia Aqua- culture for the F 31 Ok- tober 2015.
Lambert  DM, Baker A, Huynen  L,  Haddrath  O, Hebert  PDN,  Millar  CD.  2005.  Is  a  large- scale  DNA-based  inventory  of  ancient  life possible? Journal  of  Heredity , 96(3):  279 84.
Lakra  WS,  Goswami  M,  Gopalakrishnan  A, Singh  DP,  Singh  A,  Nagpure  NS.  2010. Genetic  relatedness  among  fish  species  of genus Channa using  mitochondrial  DNA genes. Biochemical  Systematics  and  Ecolo- gy , 38(6): 1212-1219.
Lynch M, Jarrell PE. 1993. A method for calibra- ting  molecular  clocks  and  its  application  to
animal  mitochondrial  DNA. Genetics , 135(4): 1197-1208.
Ma H, Ma C, Ma L. 2012. Molecular identifica- tion of genus Scylla (Decapoda: Portunidae) based  on  DNA  barcoding  and  polymerase chain reaction. Biochemical Systematics and Ecology , 41: 41-47.
Mat  Jais  AM,  Dambisya  YM,  Lee  TL.  1997. Antinociceptive  activity  of Channa  striatus (haruan) extracts in mice. Journal of Ethno- pharmacology , 57(2): 125-130.
Michelle  NYT,  Shanti  G,  Loqman  MY.    2004. Effect  of  orally  administered Channa  stria- tus extract  against  experimentally-induced osteoarthritis in rabbits. International Jour- nal  of  Applied  Research  in  Veterinary  Me- dicine , 2(3):171-175.
Muchlisin  ZA,  Thomy  Z,  Fadli  N,  Sarong  MA, Siti-azizah  MN.  2013.  DNA  barcoding  of freshwater  fishes  from  Lake  Laut  Tawar, Aceh  Province,  Indonesia. Acta  Ichthyolo- gica et Piscatoria , 43(1): 21-29.
Mustafa, Widodo AMA, Kristianto Y. 2012. Al- bumin  and  zinc  content  of  snakehead  fish ( Channa  striatus )  extract  and  is  role  and health. International  Journal  of  Sciene  and Technology , 1(2): 1-8.
Serrao NR, Steinke D,  Hanner RH. 2014.  Cali- brating  snakehead  diversity  with  DNA  Bar- codes:  expanding  taxonomic  coverage  to enable  identification  of  potential  and  esta- blished  invasive  species. Plos  One ,  9(6): 1- 13.
Song  LM,  Munian  K,  Rashid  AZ,  Bhassu  S. 2013.  Characterisation  of  Asian  snakehead Murrel Channa  striata (Channidae)  in  Ma- laysia:  An  insight  into  molecular  data  and morphological  approach. The  scientific World Journal, 2013:1-16.
Tamura  K,  Stecher  G,  Peterson  D,  Filipski  A, Kumar S. 2013. MEGA 6: Molecular evolu- tionary  genetics  analysis  version  6.0. Mole- cular  Biology  and  Evolution ,  30(12):  2725- 2729.
Zhu  SR,  Ma  KY,  Xing  ZJ,  Xie  N,  Wang  YX, Wang  Q,  Li  JL.  2013.   The  complete  mito- chondrial genome of Channa argus , Channa maculata and hybrid snakehead fish [ Chan- na maculata Channa argus Mi- tocondrial DNA , 24(3): 217-218.