Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 38-45 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
ANALISIS KADAR OKSALAT PADA DUA JENIS TANAMAN KALE (Brassica oleracea var. acephala dan Brassica oleracea var. palmifolia ) DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI UV
Emma Emawati * , Deden Indradinata, Dina Yulia Agustina Fakultas Farmasi, Universitas Bhakti Kencana Bandung, Indonesia
*Email: emma.emawati@bku.ac.id
Artikel diterima: 30 Oktober 2021; Disetujui: 15 Maret 2022 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v7i1.798

## ABSTRAK
Sayuran  menjadi  sumber  nutrisi  yang  penting  bagi  manusia.  Sayuran memiliki fungsi penting bagi proses metabolisme dan fisiologis dalam tubuh. Kale dijuluki  sebagai  super  food  karena  memiliki  manfaat  besar  bagi  kesehatan.  Kale mengandung nutrisi seperti vitamin A, C, kalium, kalsium, zat besi, dan mangan. Meskipun  sayuran  memiliki  banyak  kandungan  gizi,  sayuran  juga  mengandung anti-nutrisi, salah satunya asam oksalat. Asam oksalat dapat mengganggu usus dan dapat  berakibat  fatal  jika  dikonsumsi  dalam  dosis  tinggi  sehingga  perlu  dibatasi pada kisaran 0,60-1,25 g per hari. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kadar  oksalat  pada  kale  dengan  metode  spektrofotometri  UV  yang  diukur  pada panjang  gelombang  351  nm.  Produk  hasil  reaksi  berupa  I3  yang  sebanding jumlahnya  dengan  konsentrasi  oksalat.  Penelitian  ini  dimulai  dengan  validasi metode.  Hasil  validasi  metode  analisis  kurva  kalibrasi  memiliki  garis  regresi persamaan y = 0,4943x + 0,244 dengan koefisien korelasi 0,998. Batas deteksi dan batas kuantisasi masing masing 0,4018 dan 1,3395. Koefisien variansi 0,8180 dan persen  recovery  masing-masing  89,  92  dan  101  %.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan bahwa kadar oksalat dalam kale keriting adalah 0,6911 mg/100g dan kale nero adalah 1,7045 mg/100g.
Kata kunci: Kale, oksalat, spektrofotometri uv

## ABSTRACT
Vegetables  have  an  important  function  for  metabolic  and  physiological processes in the body. Kale is dubbed as a super food because it has great health benefits. Kale contains nutrients such as vitamins A, C, potassium, calcium, iron, and  manganese.  Although  vegetables  have  a  lot  of  nutritional  content,  they  also contain  anti-nutrients,  one  of  which  is  oxalic  acid.  Oxalic  acid  can  irritate  the intestines and can be fatal if taken in high doses, so it should be limited to 0.60- 1.25 g per day. The purpose of this study was to determine the levels of oxalate in kale by UV spectrophotometry method measured at a wavelength of 351 nm. The product  of  the  reaction  is  I3  which  is  proportional  to  the  oxalate  concentration. This research begins with method validation.  The results of the validation of the calibration curve analysis method have a regression line equation y = 0.4943x + 0.244 with a correlation coefficient 0.998. The detection limit and quantization limit
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
are  0.4018  and  1.3395.  The  coefficient  of  variance  is  0.8180  and  the  percent recovery  is  89,  92  and  101%.  The  results  of  this  study  showed  that  the  oxalate content in curly kale was 0.6911 mg/100g and kale nero was 1.7045 mg/100g.
Keywords: Kale, oxalate, UV spectrophotometry

## PENDAHULUAN
Meskipun bukan sebagai makanan pokok dan dapat memberikan
banyak energi, namun sayuran memiliki  fungsi    dalam  proses metabolisme  dan  fisiologis  tubuh manusia (Lingga, 2010).
Salah  satu  sayuran  tersebut adalah  Kale.  Kale  dijuluki  sebagai super  food  karena  merupakan  salah satu  tanaman  yang  bermanfaat  besar bagi  kesehatan. Tanaman  kale  saat ini sedang  menjadi  primadona  komoditi hortikultura  yang  banyak  diminati masyarakat.  Kandungan  karbohidrat kale dianggap sebagai makanan kesehatan yang mengenyangkan karena  diperkaya  oleh  prebiotik  dan serat makanan yang berpotensi mengurangi  risiko  penyakit  seperti obesitas, kanker, jantung, dan diabetes (Migliozzi et al., 2015).
Gambar1. Kale Keriting dan Nero
Kale mengandung nutrisi seperti vitamin A, C, kalium, kalsium, zat besi, dan  mangan.  Saat  dipanen  kale  hijau memiliki kandungan vitamin C mencapai  152,18  mg/100  g  panen dilakukan  pada  umur  175  hari  setelah tanam  (hst)  dan  kale  ungu  mencapai 182,3 mg/100 g saat dipanen pada umur 85 hst (Agustin dan Ichniarsyah, 2018). Kandungan vitamin C kale lebih tinggi dibandingkan dengan jambu biji (49,86 mg/100 g) maupun jeruk (96,8 mg/100 g)  yang  dikenal  secara  luas  memiliki kandungan  vitamin  C  tinggi  (Agustin dan  Fauzi.,  2019).  Meskipun  sayuran banyak medungan gizi, namun kenyataannya sayuran juga terkandung beberapa  unsur  dan  senyawa  yang berefek buruk bagi tubuh. (Mawaddah, Roto, and Suratman 2017).
Salah  satu  senyawa  yang  dapat berefek  buruk  tersebut  adalah  oksalat. Oksalat akan berikatan dengan kalsium dan  terbentuk  menjadi  kristal  kalsium oksalat,  sehingga  akan  membentuk batu ginjal dan menghambat
penyerapan  zat  besi jika  kadar  oksalat
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 38-45 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
terlalu tinggi. Komponen yang diperlukan  oleh  tumbuh  salah  satunya adalah  zat  besi.  Seseorang  dapat menderita  anemia  dan  gangguan pertumbuhan jika kekurangan zat besi. (Fitriani,  Nurlailah,  &  Rakhmina, 2016)
Berdasarkan  hal  diatas  maka perlu  dilakukan  analisis  oksalat  dalam tanaman kale.  Analisis oksalat dengan metode  spektrofotometri  ultraviolet visible (Uv-Vis) dilakukan dengan cara sederhana  dan  dapat  menetapkan jumlah  oksalat  yang  sangat  kecil,  hal ini  menjadi  kelebihan  dari  metode spektrofotometri  ultraviolet  visible (Uv-Vis).  Hasil  yang  diperoleh  dari metode ini cukup akurat, karena angka yang  terdeteksi  akan  segera  dicatat melalui detector kemudian akan tercetak  menjadi  bentuk  angka  digital maupun grafik yang telah diregresikan (Mustikaningrum, 2015). Oksalat dapat mengaktif kan reaksi oksidasi katalitik iodide  oleh  bromate  dengan  Besi  (II) sebagai katalis dngan menghasilkan I3. I3  yang  terbentuk  sebanding  dengan oksalat  dalam  sampel.  (Chamjangali, dkk dalam Emawati, 2018).

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  adalah Spektrofotometer  uv-vis,  pH  digital dan  bahan  yang  digunakan  Kale ( Brassica  oleracea  var.  acephala dan Brassica  oleracea  var.  palmifolia ), buffer  asetat,  CH₃COOH,  Fe  (II) ammonium  sulfat,  H 2 SO 4 ,  KI,  KBrO 3 , dan Na 2 C 2 O 4.

## Pembuatan Kurva Kalibrasi
Untuk penetapan kurva kalibrasi dibuat seri  konsentrasi 1, 2, 3, 4, 5 dan 6  µg/ml.  Kemudian  di  pipet  masing masing 1 ml dimasukan ke dalam labu 10 ml ditambahkan. 2 ml buffer asetat pH  5,  1  ml  Fe  (II)  ammonium  sufat  7 mg/L, 1 ml KI 0,12 mol/L, 1 ml larutan kalium  bromat  0,1  mol/L    lalu  add hingga  tanda  batas.  Kemudian  ukur absorbansinya pada
Panjang gelombang 351nm. (Chamjangali,
M.A, et al, 2006)
Uji Presisi
Keseksamaan dilakukan menggunakan  metode  adisi,  dengan mengukur  konsentrasi  oksasalat  3 µg/ml,  yang  dilakukan  pengulangan sebanyak 6 kali.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 38-45 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Uji Akurasi Parameter akurasi melalui
metode  adisi  dengan  peengukuran  3 konsentrasi yang berbeda yaitu konsentrasi  0,  1,  0,3  dan  0,5  μg/ml dengan penambahan 1 ml sampel..

## Penentuan Kadar Oksalat
Dipipet ekstrak sampel sebanyak 1 ml masukan kedalam labu ukur 10 ml ditambahkan 2 ml larutan buffer asetat (pH 5), 1 ml Fe (II) ammonium sulfat 7 mg/L , 1 ml KI 0,12 mol/L, 1 ml larutan kalium  bromat  0,1  M  dan  terakhir encerkan  dengan  aquabidest  sampai batas.  Lalu  absorban  diukur  pada panjang gelombang 351 nm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini menggunakan jenis kale  kale  keriting  dan  kale  nero. Sampel kale didapatkan dari supermarket di kota Bandung. Pengukuran kadar oksalat
menggunakan metode spektrofotometri UV. Reaksi yang terjadi adalah oksalat yang sebagai aktivator terhadap besi(II) yang  bertindak  sebagai  katalis    reaksi antara BrO 3 dengan KI yang menghasilkan  I 3 .  Jumlah  I 3 yang dihasilkan  akan  sebanding  dengan jumlah oksalat sebagai aktivator.
Penetapkan  panjang  gelombang maksimum  oksalat  digunakan  larutan baku  oksalat  50  µg/ml  yang  di pindai.dan diperoleh panjang gelombang  maksimum  pengukuran 315 nm.
Gambar 2. Spektrum panjang gelombang maksimum oksalat
Menurut Riyanto (2014
Parameter  validasi  berkaitan  dengan sejauh  mana  zat  lain  mengganggu identifikasi  atau  analisis  kuantifikasi analit. Kehadiran zat lain, baik endogen maupun eksogen, dalam sampel matriks  di  bawah  kondisi  yang dinyatakan suatu  metode. Kemampuan metode  analisis  untuk  memberikan respon  yang  proposional  terhadap konsentrasi  analit  dinyatakan  dalam linieritas.  Linieritas  sendiri  diperoleh dari  kurva  kalibrasi  oksalat.  Menurut Habibah  dkk  2018,  Penetapan  kadar dengan  persamaan  kurva  kalibrasi
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 38-45 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
memiliki kelebihan yaitu hasil pengukuran sampel lebih akurat
Gambar 3. Kurva kalibrasi
Tabel 1. Parameter Linieritas Nama Nilai Syarat Persamaan regresi linier y = 0,4943x + 0,244 Slope (b) 0,4943 Intercept (a) 0,244 Sy/x 0,0043 Koefisien Korelasi (r) 0,998 >1 BD 0,0261 BK 0.0872 Vxo% 0,8180 <2%
Dari  hasil  kurva  baku  dilakukan pengujian  batas  deteksi  maupun  batas kuantisasinya dengan menghitung simpangan  baku  (sy/x).  Dimana  batas deteksi  merupakan  konsentrasi  analit terendah  yang  mampu  menghasilkan
signal  cukup  besar  sehingga  mampu terdeteksi dan dapat dibedakan dengan signal blanko dengan tingkat
kepercayaan  99%.  Batas  kuantisasi merupakan  konsentrasi  analit  yang menghasilkan  signal  lebih  besar  dari blanko  atau  jumlah  terkecil  analit dalam  sampel  yang  masih  memenuhi kriteria cermat dan seksama dan dapat dikuantifikasi  dengan  akurasi  dan presisi yang baik.

## Akurasi
Uji  akurasi  dilakukan  untuk mengetahui  ukuran  yang  menunjukkan derajat  kedekatan  hasil  analis  dengan kadar analit yang sebenarnya. Menurut (Harmita, 2004) kecermatan dinyatakan sebagai  persen  perolehan  kembali (recovery)  analit  yang  ditambahkan. Nilai  persen  perolehan  kembali  yang menentukan  nilai  akurasi  yang  baik adalah 80-110%. Hasil uji akurasi dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Data Hasil Uji Akurasi Konsentrasi (bpj) Kadar Terukur (µg/ml) Kadar Sebenarnya (µg/ml) %Recovery SD Rata-rata (%) 0,1 bpj 0,4005 0,0910 91,03 0,0011 91 0,4005 0,0910 91,03 0.4025 0,0930 93,06 0,3 bpj 0,5624 0,2528 84,29 0,0050 85 0,5664 0,2569 85,64 0,5725 0,2629 87,66 0,5 bpj 0,8233 0,5138 102,77 0,0042 103 0,8294 0,5199 103,98 0,8213 0,5118 102,36
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 38-45 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Pada  pengujian  akurasi  ini menggunakan  metode  adisi,  dimana
dilakukan dengan menambahkan sejumlah  analit  dengan  konsentrasi tertentu pada sampel yang.  Hasil yang diperoleh dikatakan cukup baik karena didapatkan persen 91-103 %.
Presisi
(Harmita,  2004)  menyebutkan bahwa  keseksamaan  (presisi)  adalah ukuran  yang  menunjukkan  derajat kesesuaian antara hasil uji individual, diukur  melalui  penyebaran  hasil individual  dari  rata-rata  jika  prosedur diterapkan  secara  berulang  pada sampel-sampel  yang  diambil  dari campuran yang homogen.
Uji presisi dilakukan dengan dua metode  yaitu  intraday  dan  interday. Uji  presisi  interday  dilakukan  pada hari  berbeda  selama  tiga  hari. Sedangkan uji presisi intraday dilakukan  dengan  mengukur  larutan baku oksalat yang sudah ditambahkan dengan  sejumlah  sampel  kale  pada panjang  gelombang  351  nm.  Presisi intraday  dilakukan  sebanyak  6    kali pengulangan  pada 1 konsentrasi yang sama selama 3 hari berbeda menggunakan  spektrofotometri  UV.
Konsentrasi  yang  digunakan  yaitu pada konsentrasi 0,3 (µg/ml).
Tabel 3. Hasil Uji Presisi Intraday (Dalam hari)
No. Konsen- trasi hari ke 1 (µg/ml) Konsen- trasi hari ke 2 (µg/ml) Konsen- trasi hari ke 3 (µg/ml) 1 0,5502 0,5826 0,5826 2 0,5664 0,5765 0,5705 3 0,5725 0,5887 0,5765 4 0,5624 0,5846 0,5684 5 0,5563 0,5705 0,5846 6 0,5603 0,5725 0,5806 Rata- rata 0,5613 0,5792 0,5772 SD 0,0077 0,0072 0,0066 %RSD 1,3816 1,2429 1,1446
Berdasarkan  hasil  data  tabel  di atas  yang  diperoleh  uji  presisi keterulangan  (repeability),  dihasilkan nilai  %RSD  pada  hari  ke  1,  2  dan  3 masing-masing  yaitu  1,3816  %, 1,2429 % dan 1,1446 % dimana hasil tersebut  kurang  dari  2%  yang  berarti menunjukan  bahwa  metode  uji  yang digunakan  pada  penentuan  kadar oksalat  dengan  menggunakan  metode spektrofotometri UV memiliki ketelitian  yang  baik.    Persyaratan  uji presisi  dikatakan  valid  adalah  bila %RSD  yang  dihasilkan  adalah  <  2% sehingga  data  uji  presisi  yang didapatkan  dari  penelitian  ini  adalah valid.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 38-45 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Uji  presisi  interday  dilakukan oleh analit yang sama pada waktu yang berbeda atau antar hari.  Dari hasil uji presisi didapatkan nilai %RSD kurang dari  2  %  yaitu  1,7387  %  hal  ini menunjukan  bahwa  metode  yang digunakan  cukup  baik.  Uji  presisi yang  dilakukan  adalah  valid  karena nilai %RSD nya < 2%.
Tabel 4. Data Presisi Oksalat (antar hari) Hari ke Kadar terukur (µg/ml) 1 0,5613 2 0,5792 3 0,5772 Rata-rata 0,5726 SD 0,0097 %RSD 1,7089

## Penetapan Kadar
Pengukuran kadar oksalat menggunakan  spektrofotometri  UV
menghasilkan produk I3 yang sebanding dengan produk oksalat yang dihasilkan. Reaksi yang terjadi setelah penambahan  pereaksi  adalah  oksalat yang  bertindak  sebagai  activator terhadap  besi  (II)  yang  bertindak sebagai katalis sehingga terjadi reaksi antara BrO 3 dengan KI yang menghasilkan I 3 dan merupakan hasil reaksi  yang  sebanding  jumlahnya
dengan konsentrasi oksalat.
(Chamjangali, dkk. 2005). Tabel 5. Hasil Kadar Sampel Sampel Kadar Oksalat (mg/100 g) SD Rata- rata Kale keriting 0,6975 0,0046 0,6911 0,6783 0,6975 Kale nero 1,7168 0,0061 1,7045 1,7076 1,6891
Dari  hasil  pengukuran  sampel kale dapat diketahui bahwa kandungan oksalat pada sayuran kale keriting(Brassica oleraceae var achepala)  diperoleh  kadar  0,6911 mg/100g an pada kale nero ( Brassica oleraceae var palmifolia) yaitu 1,7045 mg/100g

## KESIMPULAN
Hasil  penelitian  menunjukkan kadar  oksalat  dalam  sampel    kale keriting (Brassica oleracea var. achepala)  dan  kale  nero  (Brassica oleracea  var.  palmifolia)  dengan menggunakan metode spektrofotometri  UV  masing-masing sebesar 0,6911 mg/100g kale keriting keriting  ( Brassica  oleracea  var. achepala )  dan  1,7045  mg/100g  kale
p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
nero ( Brassica oleracea var.
palmifolia ).

## DAFTAR PUSTAKA
Agustin,  H.,  &  Ichniarsyah,  A.  N.
(2019). Efektivitas KNO3 Terhadap  Pertumbuhan  Dan Kandungan  Vitamin  C  Kale. Agrin: Jurnal Penelitian Pertanian, 22(1), 46-55. Agustin,  H.,  &  Fauzi,  A.  R.  (2019). Induksi  Pembungaan    Kale Dengan  Aplikasi  Pupuk  N,  P Dan Pemberian Hormon Giberelin Chamjangali, M.A, et al, 2006, Kinetic Spectrophotometric Method For  The  Determination  of Trace  Amouns  of  Oxalate  by an Activation Effect, Analitycal  Scienes,  The  Japan Society For Analitycal Chemestry Emawati,  E.,  2018.  Analisis  kadar oksalat  dari  teh  segar  dan  teh olahan terhadap lama penyeduhan menggunakan metode  spektrofotometri  uv. Jurnal  Kesehatan  Bakti  Tunas Husada: Jurnal Ilmu-ilmu Keperawatan, Analis Kesehatan dan Farmasi, 18(2) .Fitriani, H., Nurlailah, N., & Rakhmina, D. (2016). Kandungan Asam Oksalat Sayur Bayam. Medical Laboratory Technology Journal, 2(2), 51-55. Harmita, H., 2004. Petunjuk Pelaksanaan  Validasi  Metode Dan  Cara  Perhitungannya. Maj. Ilmu Kefarmasian 1, 117– 135.
https://doi.org/10.7454/psr.v1i 3.3375
Habibah, N., Dhayanaputri, I G. A. S.,
Karta,  I.  W.,  Dewi,  N.  N.  A., (2018):  Analisis  Kuantitatif Kadar  Nitrit  dalam  Produk Daging  Olahan  di  Wilayah Denpasar Dengan Metode Griess Secara Spektrofotometri, International Journal  of  Natural  Sciences and  Engineering,  (2017)    P-
ISSN:  2615-1383  E-ISSN: 2549-6395, Vol 2, NO.1.
Lingga,  L.  (2010).  Cerdas  Memilih
Sayuran . Jakarta: PT. AgroMedia Pustaka. Mawaddah,  Aida,  Roto  Roto,  and Adhitasari Suratman. 2017. “Pengaruh Penambahan  Urea  Terhadap Peningkatan Pencemaran Nitrit Dan  Nitrat  Dalam  Tanah
(Influence of Addition of Urea to  Increased  Pollution  of Nitrite  and  Nitrate  in  The Soil).”  Jurnal  Manusia  Dan Lingkungan  23(3):360.  doi: 10.22146/jml.22473.
Migliozzi,  M.,  Thavarajah,  D., Thavarajah,  P.,  &  Smith,  P. (2015). Lentil and kale: Complementary  nutrient-rich whole  food  sources  to  combat micronutrient and calorie malnutrition.  Nutrients,  7(11),
9285-9298.
Riyanto, (2014) Valdasi dan Verivikasi  Metode  uji  sesuai dengan ISO/IEC 17025 Laboratorium  Pengujian  dan Kalibrasi  -Ed.1,  Cet.  1— Yogyakarta.