Jurnal Pharmascience, Vol. 05 , No.01, Februari 2018, hal: 71 - 77 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 http://jps.unlam.ac.id/

## Research Article

## Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol
Akar Kalakai ( Stenochlaena palustris Bedd)
Asal Kalimantan Tengah
*Rabiatul  Adawiyah 1 , Muhammad Ikhwan Rizki 2
1 Prodi D3 Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Palangkaraya 2 Prodi Profesi Apoteker, FMIPA, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru Email : abi.ubiet@gmail.com

## ABSTRAK
Tanaman  khas  Kalimantan  yang  banyak  digunakan  sebagai  tanaman  obat adalah kalakai atau sering juga disebut paku haruan ( Stenochlaena palustris Bedd ) atau pakis.  Kalakai  mengandung  beberapa  senyawa  bioaktif  seperti  fenolik,  flavonoid, alkaloid dan keluarga terpenoid yang telah terbukti sangat efektif sebagai antioksidan. Kalakai  merupakan  tumbuhan  yang  tumbuh  subur  di  tanah  gambut  dan  juga ditemukan  tumbuh  baik  di  tanah  berpasir.  Penelitian  ini  bertujuan  mengetahui aktivitas  antioksidan  dari  akar  kalakai  ( Stenochlaena  palustris) yang  tumbuh  pada tanah  gambut  dan  tanah  berpasir  berdasarkan  parameter Inhibitory Concentration 50 (IC 50 ).  Aktivitas  antioksidan  diuji  menggunakan  metode  DPPH  (2,2-difenil-1-pikril- hidrazil)  dan  kuersetin  sebagai  pembanding.  Nilai  IC 50 untuk  ekstrak  akar  kalakai pada tanah gambut yaitu sebesar 19,06 ppm dan pada ekstrak akar kalakai pada tanah pasir  didapat  IC50  sebesar  24,40  ppm.  Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  pada  ekstrak etanol  akar  kalakai  yang  tumbuh  pada  tanah  pasir  dan  tanah  gambut  memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.
Kata Kunci :  Akar, Antioksidan, Kalakai, Stenochlaena palustris Bedd

## ABSTRACT
Borneo plants that are widely used as medicinal plants are kalakai or often also called  paku  Haruan  (Stenochlaena  palustris  Bedd).  Kalakai  contains  several  bioactive compounds such as phenolics, flavonoids, alkaloids and terpenoid that have been shown to be  very  effective  as  antioxidants.  Kalakai  is  a  plant  that  thrives  on  peat  soils  and  is  also found to grow well in sandy soils. This study aims to determine the antioxidant activity of kalakai  root  (Stenochlaena  palustris)  that  grows  on  peat  soil  and  sandy  soil  based  on Inhibitory  Concentration  50  (IC50).  Antioxidant  activity  was  tested  using  DPPH  method (2,2-diphenyl-1-picryl-hydrazil)  and  quercetin  as  a  comparison.  IC50  value  for  kalakai root extract on peat soil that is 19,06 ppm and at kalakai root extract on sand soil obtained
IC50 that is 24,40 ppm. The results of antioxidant activity test on kalakai root extract that grow on sand and peat soil have very strong antioxidant activity.
Keywords: Antioxidant, Kalakai, Root, Stenochlaena palustris Bedd

## I. PENDAHULUAN
Penggunaan tumbuh–tumbuhan alami  sebagai  tanaman  obat  di  Indonesia sedang populer, kebanyakan masyarakat di daerah–daerah mempercayai bahwa penggunaan  tumbuhan  alami  sebagai  obat relatif  aman  karena  tidak  memiliki  efek samping  yang  berlebih  (Sharma et  al ., 2014).  Kalimantan  sebagai  daerah  hujan tropis menyimpan sekurangkurangnya 4.000  spesies  tumbuhan  yang  dapat menjadi sumber temuan obat baru (Kepmenkes, 2007). Tanaman khas Kalimantan yang banyak digunakan sebagai  tanaman  obat  adalah  kalakai  atau sering juga disebut paku haruan ( Stenochlaena  palustris Bedd ) atau  pakis.
Kalakai  di  Filipina  disebut  sebagai barangbang,  dan  di  Malaysia  disebut sebagai pucuk manis.
Penelitian sebelumnya telah menjelaskan  bahwa  kalakai  atau  pakis (daun  dan  batang)  mengandung  zat  besi yang sangat tinggi sehingga baik digunakan pada penderita anemia (Maharani et  al., 2013).  Liu et  al. (1999) menyebutkan  bahwa  terdapat  5  (lima) glikosida  flavonol  baru  dalam  daun Stenochlaena palustris , dimana satu sampai  empat  dari  kandungan  tersebut
secara  signifikan  menunjukan  aktivitas antibakteri gram negatif. Selain itu, kalakai atau  pakis  juga  mengandung  beberapa senyawa bioaktif seperti fenolik, flavonoid, alkaloid dan keluarga terpenoid (Ho et al ., 2010) yang telah terbukti sangat efektif  sebagai  antioksidan  (Dai  & Mumper,  2010).  Senyawa  fenolik  seperti antosianin  dan  beberapa  zat  besi  paling banyak  terdapat  pada  daun  muda  dari pakis (Chai et al., 2012).
Akar kalakai ( Stenochlaena palustris) belum  banyak  diteliti.  Data ilmiah  yang  mendukung  efektivitas  akar kalakai  sebagai  antioksidan  belum  banyak dilakukan  sehingga  minim  informasi  pada publikasi  ilmiah  yang  hal  tersebut  pada bagian  akar  kalakai.  Kalakai  merupakan tumbuhan  yang  tumbuh  subur  di  tanah gambut  dan  juga  ditemukan  tumbuh  baik di tanah berpasir. Secara karakteristik sifat fisik dan sifat kimianya, terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara  tanah gambut  dan  tanah  berpasir.  Tanah  gambut merupakan  tanah  dengan  kandungan organik  ≥  50%  (Mankinen dan Gelfer , 1982)  bahkan  ≥75%  (ASTM,  1985). Penelitian ini bertujuan mengetahui aktivitas  antioksidan  dari  akar  kalakai ( Stenochlaena  palustris) yang  tumbuh
pada    tanah  gambut  dan  tanah  berpasir berdasarkan parameter
Inhibitory Concentration 50  (IC 50 )  dengan  metode 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH).

## II. METODE PENELITIAN

## A. Bahan
Bahan utama yang digunakan pada penelitian  ini  adalah  akar  kalakai.  Bahan baku tumbuhan ini diambil dari dua lokasi dengan  jenis  tanah  yang  berbeda  yaitu tanah gambut terletak di Jl. Dolin Kandang (Mahir  Mahar)  Palangkaraya  dan  tanah berpasir  di  Jl.  Cilik  Riwut  KM  22 Palangkaraya
B. Pengumpulan dan
Pengolahan
Simplisia Proses
penyiapan simplisia dilakukan dengan melakukan sortasi basah,  pencucian  dengan  air  bersih, penirisan,  perajangan.  Proses  pengeringan dilakukan dengan mengeringkan di tempat yang  teduh  (kering-angin).  Kemudian dilakukan  sortasi  kering,  selanjutnya simplisia  kering  tersebut  dibuat  dalam bentuk  serbuk.  Serbuk  diayak  dengan pengayak nomor 14.

## C. Pembuatan Ekstrak
Serbuk  ditimbang  sebanyak  100 gram  kemudian  diekstraksi  menggunakan pelarut  etanol  70%  dengan  perbandingan 1:10  selama  3x24  dengan  pergantian
pelarut  setiap  24  jam.  Ekstrak  cair kemudian dipisahkan dari residu menggunakan  kertas  saring.  Dilakukan remaserasi  sebanyak  2  kali.  Ekstrak  cair yang  diperoleh  dipekatkan  menggunakan rotary  evaporator ,  kemudian  diuapkan  di atas waterbath hingga  terbentuk  ekstrak kental (Jamshidi et al ., 2014).
D. Pembuatan  larutan  kuersetin  sebagai pembanding
Larutan kuersetin  dibuat seri kadar dengan  konsentrasi  berbeda  yaitu  1;  2;  3; 4; 5; dan 6 ppm. Larutan sebanyak 0,5 mL DPPH  0,4  mM ditambahkan  dengan masing-masing  larutan  standar  kuersetin sebanyak  2  ml,  kemudian  didiamkan  di tempat  gelap  selama operating  time . Absorbansi dibaca pada panjang gelombang maksimum.

## E. Pengujian aktivitas antioksidan
Larutan  sampel  dibuat  dengan variasi konsentrasi 10, 20, 40, 60, 80 ppm. Sebanyak  0,5  ml  larutan  DPPH  0,4  mM ditambahkan  pada  setiap  larutan  sampel sebanyak 2 mL kemudian larutan didiamkan ditempat gelap selama operating  time dan  dibaca  absorbansinya pada panjang gelombang maksimum.

## F. Analisis Data
Nilai  IC 50 merupakan  konsentrasi sampel  yang  dapat  menghambat  radikal
bebas  sebesar  50%  diperoleh  dengan memakai  persamaan  regresi  linear  y= bx+a.  Data  hasil  absorbansi  masing- masing  sampel  digunakan  untuk  mencari % inhibisinya.
Tabel 1. Aktivitas Antioksidan
Berdasarkan Nilai IC 50 (Jun et al. , 2003).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji  aktivitas  antioksidan  memakai metode  peredaman  radikal  bebas  2,2- difenil-1-pikrilhidrazil  (DPPH)  dengan menggunakan  alat  spektrofotometer  UV- Vis. Metode ini memiliki kelebihan karena sederhana,  mudah,  cepat  dan  memerlukan sedikit  sampel  (Hanani et  al., 2005).
Senyawa  DPPH  merupakan  senyawa radikal  bebas  yang  stabil  yang  dapat dijadikan model dalam penentuan aktivitas antioksidan  suatu  sampel.  Antioksidan dapat  memberikan  elektronnya  kepada DPPH,  sehingga  terjadi  perubahan  warna dari  ungu  kehitaman  menjadi  warna kuning  (Vaya  &  Aviram,  2001).  DPPH dapat  larut  dalam  pelarut  organik  yang memiliki  sifat  polar  diantaranya  pelarut metanol  dan  etanol  (Rohman  &  Riyanto, 2005).
Uji aktivitas antioksidan dibandingkan  dengan  suatu  kontrol  positif untuk  membandingkan  antioksidan  yang dimiliki.  Kuersetin  digunakan  sebagai kontrol  positif  karena  terbukti  memiliki aktivitas antioksidan. Kuersetin mengandung gugus OH pada posisi 3’, 4’, 3, 5, dan 7 (Salamah & Widyasari, 2015). Gugus  OH  mampu    menstabilkan  radikal bebas melalui mekanisme transfer atom H atau  transfer  elektron  dari  gugus  tersebut. Grafik  hubungan  konsentrasi  larutan pembanding  kuersetin  dengan  persen inhibisi dapat dilihat pada gambar.
Gambar  1. Grafik  hubungan  antara  konsentrasi kuersetin dengan persen inhibisi
Persamaan  regresi  yang  didapat dari hubungan konsentrasi kuersetin dengan  persen  inhibisi  yaitu  y  =  7,633x  – 30,256  dengan  koefisien  korelasi  (r) sebesar 0,995. Besarnya nilai IC 50 kuersetin  yaitu  pada  konsentrasi  2,6  ppm. Hasil  nilai  IC 50 tersebut  menunjukkan kuersetin masuk dalam kategori antioksidan  yang  sangat  aktif  (Jun et  al., 2003).  Semakin  kecil  nilai  IC50,  maka
Aktivitas Nilai IC 50 Sangat Aktif <50 ppm Kuat 50-100 ppm Sedang 101-250 ppm Lemah 250-500 ppm Tidah kuat >500 ppm
semakin  besar  aktivitas  antioksidan.  Hal tersebut disebabkan semakin kecil konsentrasi yang diperlukan sampel dalam menghambat  radikal  bebas.  Hasil  ini  juga dapat  menunjukkan  validitas  metode dalam pengujian antioksidan karena secara teoritis  kuersetin  memiliki  aktivitas  yang kuat dalam melawan radikal bebas.
Aktivitas  antioksidan  diuji  pada sampel  menggunakan  metode  DPPH.
Sampel dibuat dalam bentuk seri konsentrasi, selanjutnya ditambahkan
DPPH,  dilakukan  inkubasi  selama  30 menit  untuk  memastikan  reaksi  terjadi sempurna.  Campuran  larutan  tersebut kemudian  dibaca  absorbansinya  pada panjang  gelombang  maksimum  516  nm. Absorbansi  sampel  dapat  dihitung  untuk mendapatkan  persen  inhibisi.  Grafik  yang menunjukkan hubungan antara konsentrasi dengan persen inhibisi pada ekstrak etanol akar  kalakai  dari  tanah  gambut  dan  tanah pasir  ditunjukkan  pada  gambar  2  dan gambar 3.
Gambar  2. Hubungan  antara  konsentrasi  dengan persen  inhibisi  ekstrak  etanol  akar  kalakai  pada tanah gambut
Gambar  3. Hubungan  antara  konsentrasi  dengan persen  inhibisi  ekstrak  etanol  akar  kalakai  pada tanah pasir
Tabel  2 .  Hasil  IC50  Ekstrak  Etanol  Akar  Kalakai Pada Tanah Gambut dan Pasir
No. Sampel IC50 1. Ekstrak etanol akar kalakai pada tanah gambut 19,06 ppm 2. Ekstrak etanol akar kalakai pada tanah pasir 24,40 ppm
Hasil perhitungan IC 50 untuk ekstrak  akar  kalakai  pada  tanah  gambut dari persamaan linier y = 0,599x + 38,577 yaitu sebesar 19,06 ppm. Pada ekstrak akar kalakai pada tanah pasir dengan persamaan linear  y  =  0,688x  +  33,187,  didapat  IC50 sebesar  24,40  ppm.  Hasil  IC 50 kedua ekstrak  tersebut  termasuk  dalam  golongan antioksidan  yang  sangat  aktif  (Jun et  al., 2003).
Terdapat perbedaan aktivitas
antioksidan  pada  akar  kalakai  yang berbeda kondisi tempat tumbuh. Kemampuan  aktivitas antioksidan terbesar terdapat  pada  akar  kalakai  yang  berasal dari  tanah  gambut  yang  ditunjukkan dengan kecilnya nilai IC50. Semakin kecil
nilai  IC50,  maka  semakin  kuat  aktivitas antioksidannya. Perbedaan tersebut disebabkan  adanya  perbedaan  tempat tumbuh  yang  dipengaruhi  perbedaan nutrisi  yang  terdapat  pada  dua  jenis  tanah yang  berbeda  tersebut (Rohaeti et  al ., 2011). Akar kalakai tumbuh optimum pada daerah  yang  memiliki  kelembaban  tinggi seperti  lahan  gambut  (Shinta  dan  Atyk, 2011). Faktor yang juga dapat berpengaruh yaitu temperatur, tingkat kebasahan tanah, intensitas  sinar  matahari,  dan  kadar  CO2 pada  daerah  sekitar  tumbuhan  (Neldawati et al., 2013).

## IV. KESIMPULAN
Hasil uji aktivitas antioksidan pada ekstrak  etanol  akar  kalakai  yang  tumbuh pada  tanah  pasir  dan  tanah  gambut memiliki aktivitas antioksidan yang sangat kuat.  Hal  tersebut  ditandai  dengan  nilai IC50  pada  ekstrak  etanol  akar  kalakai tanah  gambut  sebesar  19,06  ppm  dan ekstrak  etanol  akar  kalakai  tanah  pasir sebesar 24,40 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
ASTM.  1985. Standard  Classification  of Peat Samples by Laboratory Testing (D4427-84). ASTM, Section  4,  Volume  04.08  Soil  and Rock:883-884
Chai,Tsun-Thai.,  Panirchellvum,E.,  Ong,
Hean-Chooi  and  Wong,  Fai-Chu.
2012. Phenolic contents and antioxidant
properties of
Stenochlaena  palustris,  an  edible medicinal fern, Botanical Studies . Hanani,  E.,  A.  mun’im,  &  R.  Sekarin.
2005. Identifikasi Senyawa Antioksidan dalam Spons Callyspongia Sp  dari  Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian . 2 : 127 – 133.
Ho, R., T. Teai, J.-P. Bianchini, R. Lafont, and  P.  Raharivelomanana.  2010. Ferns:  From  traditional  uses  to pharmaceutical development, chemical  identification  of  active principles .  p.  321-346.  In  H.
Fernández,  M.A.  Revilla,  and  A. Kumar  (ed.).  Working  with  ferns: Issues  and  applications.  Springer,
New York. Jamshidi, M., E. Shabani, Z. Hashemi, dan M.A. Ebrahimzadeh. 2014. Evaluation  of  Three  Method  for The Extraction of Antioxidant from Leaf  and  Aerial  Parts  of Lythrun salicaria L. (Lythraceae). International Food Research Journal. 2 : 783-788
Jun,  M.  H.  Y.,  J.Y.  Yu,  C.  X.  Fong,  S.
Wan,  &  C.  T.  Yang.  2003. Comparison of Antioxidant
Activities  of  Isoflavones  from Kudzu  Root  ( Pueraria  labata Ohwl.). Journal  of  Food  Science.
68 : 2117-2122
Kepmenkes. 2007. Kebijakan Obat Tradisional  Nasional  Tahun  2007. Keputusan Menteri Kesehatan Republik Indonesia Nomor 81/Menkes/SK/III/2007 . Kementrian Kesehatan RI. Jakarta. Liu,  H.,  J.  Orjala,  O.  Sticher,  dan  T.  Rali.
1999. Acylated flavonol glycosides from leaves of Stenochlaena palustri. Jurnal  Natural  Product . 62: 70-75
Maharani  ,  D.M.,  Haidah,  S.N.,  dan Haiyinah.  2013. Studi  Potensi Kalakai  (Stenochlaena  palustris (Burm.F)  Bedd)),  Sebagai  Pangan Fungsional , Jurusan Budidaya

## Pertanian.  Universitas  Lambung
Mangkurat. Banjarbaru
Mankinen,  G.W.  dan  Gelfer,  B.  1982.
Compressive  Use  Peat  in  The
USSR . DOE 5 th
Technical
Conference of Peat.
Neldawati,  Ratnawulan  dan  Gusnedi.
2013.  Analisis  Nilai  Absorbansi dalam  Penentuan  Kadar  Flavonoid untuk Berbagai Jenis Daun Tanaman Obat. Pillar of Physics . 2 :76-83
Rohaeti,  E.,  Heryanto,  R.,  Fari,  M.,
Wahyuningrum,  A.,  Darusman,  L. 2011.  Prediksi  Kadar  Flavonoid Total Tempuyung ( Sonchus arvensis L.) Menggunakan Kombinasi Spektroskopi Ir Dengan Regresi  Kuadrat  Terkecil  Parsial.
JURNAL KIMIA , 5 (2): 101-108.
Rohman,  A.  &  S.  Riyanto.  2005.
Antioxidant  potency  of  ethanolic extract  of  Kemuning    leaves ( Murraya paniculata (L) Jack )  in vitro. Majalah Farmasi Indonesia.
16: 136-140.
Salamah,  N.  &  E.  Widyasari.  2015.
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Metanol Daun
Kelengkeng
( Euphoria  Longan (L)  Steud.) Dengan  Metode  Penangkapan
Radikal
2,2’-Difenil-1- Pikrilhidrazil. Pharmaciana. 1 : 23-29.
Sharma,  P.,  Bhardwaj,  P.,  Arif,  T.,  Khan, I.,  Singh,  R.  2014.  Pharmacology, Phytochemistry  and  Safety  of Aphrodisiac  Medicinal  Plants:  A Review. RRJPTS .  Volume  2,  Issue
3.
Shinta.  dan  Atyk.  2011.  “ Kalakai” Sayuran  Lokal  Potensial  dan  Kaya
Manfaat . Balai Pengkajian Teknologi Pertanian Kalimantan
Tengah.
http://kalteng.litbang.pertanian.go.id/ ind/index.php/publikasi-mainmenu- 47/artikel/185-kalakai-sayuran-lokal- potensial-dan-kaya-manfaat
Vaya,  J.  &  M.  Aviram.  2001.  Nutritional
Antioxidants Mechanisms of Action, Analyses  of  Activities  and  Medical Applications. Bentham Science Publisher . 1 :99-117