## POTENSI EKSTRAK LAMUN Enhalus acoroides KERING DAN BASAH DARI PERAIRAN SAPEKEN-MADURA SEBAGAI ANTIBAKTERI Vibrio parahaemolyticus
POTENTIAL OF SEAGRASS EXTRACT Enhalus acoroides DRY AND WET FROM SAPEKEN WATERS, MADURA AS ANTIBACTERIAL Vibrio parahaemolyticus
Yuniar Mardiyanti, Eka Nurrahema Ning Asih* , Fina Rohmatika, Siti Nihayatun Ni’amah
Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Pertanian, Universitas Trunojoyo Madura Jl. Raya Telang, Telang-Kamal, Bangkalan, Jawa Timur 69162 Indonesia
*Corresponden author email: eka.asih@trunojoyo.ac.id
Submitted: 05 July 2023 / Revised: 21 May 2024 / Accepted: 31 May 2024
http://doi.org/10.21107/juvenil.v5i2.20998

## ABSTRAK
Bakteri  Vibrio  parahaemolyticus  merupakan  bakteri  patogen  yang  memicu  kegagalan  panen  budidaya udang di beberapa unit tambak budidaya udang di Madura. Salah satu kandidat bahan hayati laut yang bisa dijadikan sebagai agen antibakteri Vibrio parahaemolyticus adalah ekstrak lamun Enhalus acoroides. Perlu dilakukan telaah secara ilmiah untuk mengetahui konsentrasi ekstrak lamun ini dalam menghambat pertumbuhan bakteri  Vibrio  parahaemolyticus. Tujuan penelitian ini adalah mengidentifikasi  perbedaan kemampuan  antibakteri  dari  ekstrak  Enhalus  acoroides  kering  dan  basah  dengan  konsentrasi  yang berbeda  terhadap  pertumbuhan  bakteri  Vibrio  parahaemolyticus  selama  3  waktu  pengamatan  dan menganalisis  konsentrasi  terbaik  ekstrak  Enhalus  acoroides  kering  dan  basah  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri  Vibrio  parahaemolyticus  dari  Perairan  Sapeken  Madura.  Metode  pengujian antibakteri  menggunakan  difusi  cakram  dan  analisa  statistik  menggunakan  One  Way  Anova  dan  uji Tukey  HSD.  Hasil  uji  antibakteri  menunjukkan  bahwa  ekstrak  Enhalus  acoroides  kering  dan  basah memiliki  nilai  tertinggi  pada  konsentrasi  80000  ppm  pada  masing-masing  ekstrak  dengan  kategori lemah dengan kisaran zona hambat nilai 1.53±0,70 mm-2.15±0.91 mm pada lamun kering dan kategori sedang  dengan  kisaran  zona  hambat  2.35±0.13 mm-3.55±1.60  mm  pada  lamun  basah.  Konsentrasi 80000  ppm  ekstrak  Enhalus  acoroides  kering  dan  basah  memiliki  pengaruh  yang  signifikan  dan termasuk  konsentrasi  terbaik  sebagai  antibakteri  Vibrio  parahaemolyticus  dengan  nilai  signifikan (p<0.05) sebesar 0.022 untuk lamun kering dan 0.010 untuk lamun basah.

## Kata kunci: Antibakteri, Vibrio parahaemolyticus, Enhalus acoroides

## ABSTRACT
The Vibrio parahaemolyticus bacteria is a pathogenic bacteria that triggers shrimp cultivation harvest failures in several shrimp cultivation pond units in Madura. One candidate for marine biological materials that can be used as an antibacterial agent for Vibrio parahaemolyticus is Enhalus acoroides seagrass extract. A scientific study needs to be carried out to determine the concentration of this seagrass extract in inhibiting the growth of Vibrio parahaemolyticus bacteria. This research aims to identify differences in the antibacterial ability of dry and wet Enhalus acoroides extracts with different concentrations against the growth of Vibrio parahaemolyticus bacteria during 3 observation periods and to analyze the best concentrations  of  dry  and  wet  Enhalus  acoroides  extracts  in  inhibiting  the  growth  of  Vibrio parahaemolyticus bacteria from Sapeken Madura Waters. The antibacterial testing method uses disc diffusion and statistical analysis uses One Way Anova and the Tukey HSD Test. The antibacterial test results showed that dry and wet Enhalus acoroides extracts had the highest value at a concentration of 80,000 ppm in each extract with a weak category with a range of inhibition zone values of 1.53 ± 0.70 mm-2.15 ± 0.91 mm for dry seagrass and a medium category with a range of inhibition zone 2.35 ± 0.13 mm-3.55 ± 1.60 mm in wet seagrass. A concentration of 80000 ppm of dry and wet Enhalus acoroides extract  has  a  significant  effect  and  is  among  the  best  concentrations  as  an  antibacterial  for  Vibrio parahaemolyticus with a significant value (p<0.05) of 0.022 for dry seagrass and 0.010 for wet seagrass.
Keywords: Antibacterial, Vibrio parahaemolyticus, Enhalus acoroides

## PENDAHULUAN
Sumberdaya pesisir dan laut merupakan salah satu  kekayaan  alam  yang  berpotensi  besar dikelola dan dimanfaatkan untuk pembangunan di Indonesia (Oktawati et al., 2018). Sumberdaya  ini  secara  garis  besar  terbagi menjadi 3 ekosistem yaitu ekosistem mangrove,  ekosistem  lamun  dan  ekosistem terumbu  karang  (Kartika et  al .,  2023).  Tiga ekosistem  ini  memiliki  peran  yang  beraneka ragam  diantaranya  mangrove  berpotensi sebagai  bahan  herbal  kaya  antioksidan (Widiyawati  dan  Asih,  2024),  lamun  sebagai bahan  kosmetik  (Badriyah et  al .,  2023a),  dan terumbu  karang  sebagai  kandidat  obat  diare (Asih et  al .,  2021).  Salah  satu  ekosistem  laut yang berpotensi besar dikembangkan menjadi kandidat  obat  adalah Seagrass atau  yang dikenal  sebagai  lamun.  Lamun  merupakan tumbuhan  tingkat  tinggi  yang  tumbuh  di perairan  laut  dangkal  pada  substrat  berpasir, berlumpur,  dan  kerikil  (Sari  &  Dahlan,  2015). Lamun  memiliki  kandungan  senyawa  aktif sehingga  berpotensi  untuk  dikembangkan sebagai  kandidat  obat.  Senyawa  tersebut dikenal sebagai senyawa bioaktif.
Kandungan  senyawa  bioaktif  vegetasi  lamun beraneka ragam sesuai dengan lokasi dimana vegetasi ini tumbuh. Beberapa hasil penelitian terdahulu  menunjukkan  bahwa  kandungan senyawa bioaktif lamun Enhalus acoroides dari perairan Pulau Sapeken-Madura adalah senyawa  tanin,  alkoloid  (Badriyah et  al ., 2023b).  Senyawa  lainnya  yang  terkandung pada  lamun Enhalus  acoroides dari  perairan Pulau  Sapeken-Madura  yaitu    flavonoid, triterpeoid,  saponin  (Ningrum et  al .,  2023), sedangkan  lamun Enhalus  acoroides dari Pantai  Sepanjang-Yogyakarta  mengandung tanin,  saponin,  triterpenoid,  flavonoid,  dan steroid  (Permana et  al., 2020).  Senyawa bioaktif  yang  terkandung  lamun Enhalus acoroides berpotensi  besar  dikembangkan sebagai antibakteri, antikanker, dan antioksidan. Ekstrak lamun Enhalus acoroides telah terbukti mampu menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio sp (Hitijahubessy et al., 2021).  Hal  ini  mengindkasikan  bahwa ekstrak lamun Enhalus acoroides juga berpotensi  besar  menghambat  pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus .
Bakteri Vibrio  parahaemolyticus merupakan salah satu jenis bakteri patogen yang hidup di laut dan memicu penyakit cute hepatopancreatic necrosis disease (AHPND) pada  budidaya  udang  (Suryana et al ., 2023). Jenis bakteri ini juga dapat memicu penyakit Early Mortality Syndrome (EMS) yang
menyebabkan  kematian  massal  sehingga merugikan  petambak  (Fajriani et  al., 2018). Dampak infeksi bakteri ini pada manusia dapat menyebabkan  kasus septisema dan  diare  di berbagai  wilayah  Asia  Tenggara  (Kusmarwati et  al., 2020).  Perlu  alternatif  solusi  untuk menanggulangi
dampak buruk yang ditimbulkan oleh bakteri Vibrio
parahaemolyticus. Salah  satu  alternatif  solusi yang  dapat  dilakukan  untuk  menanggulangi dampak  yang  ditimbulkan  oleh  bakteri Vibrio parahaemolyticus adalah  dengan  mencari bahan  hayati  laut  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri  tersebut,  salah  satunya adalah  ekstrak  lamun Enhalus  acoroides. Pentingnya  eksplorasi  tentang  potensi  ekstrak lamun Enhalus  acoroides dilakukan  untuk menghambat aktivitas antibakteri Vibrio parahaemolyticus inilah yang melatarbelakangi penelitian  ini  dilaksanakan.  Tujuan  penelitian ini  adalah  untuk  mengidentifikasi  perbedaan kemampuan  antibakteri  dari  ekstrak Enhalus acoroides kering dan basah dengan konsentrasi yang berbeda terhadap pertumbuhan  bakteri Vibrio  parahaemolyticus selama 3 waktu pengamatan dan menganalisis konsentrasi  terbaik  ekstrak Enhalus  acoroides kering dan basah dalam menghambat pertumbuhan  bakteri Vibrio  parahaemolyticus dari Perairan Sapeken Madura.

## BAHAN DAN METODE
Bahan  utama  yang  digunakan  pada  penelitian ini  diantaranya:  lamun Enhalus  acoroides , metanol PA, alkohol, air laut, aquadest, bakteri Vibrio  parahaemolyticus ,  kloramfenikol,  kertas cakram,  TSB,  dan  zobel.  Sedangkan  alat utama  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini diantaranya  yaitu  :  cawan  petri,  jarum  ose, spreader, pipet mikro, pipet ukur, pipet volume, pipet  pump,  hot  plate,  tabung  reaksi,  pinset, mikropipet  dan  TIP,  jangka  sorong  digital, inkubator,  bunsen,  autoclave,  gelas  ukur, erlenmeyer, dan gelas beaker.
Sampel Enhalus  acoroides didapatkan  dari Perairan  Sapeken,  Kabupaten  Sumenep, Madura  ( Gambar  1 ).  Sampel  dibawa  ke
Laboratorium Biologi Laut, Universitas Trunojoyo Madura untuk dilakukan uji aktivitas antibakteri.  Sampel  kemudian  dicuci  hingga bersih.  Sampel  dibedakan  menjadi  sampel kering  dan  basah  yang  akan  digunakan sebagai  perbandingan  dalam  menghambat bakteri. Sampel kering melewati proses kering angin  sebelum  maserasi,  sedangkan  sampel basah  tidak  melewati  proses  kering  angin. Sampel  dihaluskan  menggunakan  blender untuk  dilakukan  proses  ekstraksi  sampel  dan dilanjutkan dengan uji aktivitas antibakteri.

## Pembuatan Ekstrak Lamun Enhalus
acoroides Kering dan Basah
Pembuatan  ekstrak  lamun Enhalus  acoroides dilakukan  dengan  cara  maserasi.  Metode meserasi  adalah  teknik  ekstrasi  sampel menggunakan  teknik  perendaman  sampel dengan  pelarut  organik  pada  suhu  ruang namun  terlindung  dari  cahaya  matahari (Widiawati dan Asih, 2024). Sampel yang telah halus direndam menggunakan pelarut methanol  PA  dengan  perbandingan  sampel dan pelarut yaitu 1:2 hingga sampel terendam seluruhnya. Proses maserasi dilakukan selama  1x24  jam  pada  suhu  ruang.  Sampel
kemudian  dilakukan  proses  penyaringan  atau filtrasi  menggunakan  kertas  saring Whatman untuk  memisahkan  filtrat  dan  residu.  Filtrat yang  telah  diperoleh  selanjutnya  dipekatkan menggunakan Vacuum rotary evaporator pada suhu  59 ° C  hingga  diperoleh  ekstrak  kasar. Ekstrak kemudian ditimbang untuk mengetahui nilai  rendemennya.  Berikut  adalah  rumus perhitungan  rendemen  yang  digunakan  pada ekstrak lamun kering dan ekstrak lamun basah merujuk  pada  perhitungan  Marraskuranto et al ., (2021) yaitu:
Rendemen = 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑒𝑘𝑠𝑡𝑟𝑎𝑘 𝑝𝑎𝑠𝑡𝑎 (𝑔𝑟) 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑘𝑒𝑟𝑖𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 (𝑔𝑟) 𝑥 100% ... (1)
Gambar 1 Peta Lokasi Pengambilan Sampel Lamun Enhalus acoroides
Pengenceran Ekstrak Lamun Enhalus acoroides Kering dan Basah
Pengenceran ekstrak Enhalus acoroides menggunakan  pelarut  aquadest  sebanyak  10 ml  dengan  4  konsentrasi  yaitu  10000  ppm, 20000  ppm,  40000  ppm,  dan  80000  ppm. Rumus pengenceran mengacu pada (Sulastrianah et al., 2014) yaitu sebagai berikut :
1 ppm = 1µ l l = 1 mg l ………………………….. (2)
Uji Aktivitas Antibakteri Vibrio parahaemolyticus
Pengujian  antibakteri  menggunakan  metode difusi  cakram  dengan  cara  meletakkan  kertas cakram  pada  media  agar  untuk  melihat seberapa  besar  aktivitas  antibakteri  ekstrak lamun dalam menghambat bakteri uji (Hitijahubessy et  al., 2021).  Media  yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri adalah media padat zobell agar 2216E. Media ini dibuat
dengan cara menimbang 2,5 gr peptone, 0,5 gr yeast,  dan  15  gram  agar  kemudian  dilarutkan dengan  aquadest  sebanyak  1000  ml.  Tahap selanjutnya  adalah  proses  pencampuran  dan sterilisasi  media.  Proses  pencampuran  media dilakukan dengan alat hotplate yang dilengkapi magnetic  stirrer,  sedangkan  proses  sterilisasi dilakukan  dengan  cara  memsaukkan  media yang  telah  dicampurkan  (homogen)  kedalam autoclave dengan suhu 121 ° C selama 15 menit.
Media yang telah disterilkan tersebut kemudian dituangkan  kedalam  cawan  petri  sebanyak  20 ml, kemudian diamkan media dalam cawan petri ini hingga memadat.
Proses selanjutnya yaitu memindahkan bakteri Vibrio parahaemolyticus yang  telah  diinkubasi sebanyak  100  µl  kedalam  cawan  petri  yang berisi  media  padat.  Media  padat  yang  telah berisi  bakteri Vibrio parahaemolyticus 100  µl tersebut, selanjutnya diberi kertas cakram steril yang  telah  ditetesi  100  µl  ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering  dan  ekstrak  basah dan  diinkubasi  selama  2x24  jam.  Masing-
masing  cawan  petri  juga  diberi  kertas  cakram yang diteteskan aquades  steril sebagai kontrol negatif  dan  diteteskan  kloramfenikol  sebagai kontrol  positif  (Asih et  al .,  2023).  Pengamatan visualisasi  aktivitas  antibakteri  yang  diamati berupa pengamatan zona bening yang terbentuk disekitar kertas cakram
menggunakan jangka sorong (Asih et al ., 2021).
Pengamatan  zona  bening  ini  dilakukan  pada selang  waktu  24  jam,  48  jam,  dan  72  jam. Rumus  perhitungan  diameter  zona  hambat dihitung menggunakan rumus menurut (Winastri et al., 2020) yaitu:

## Gambar 2 Rumus Pengukuran Zona Hambat

## Analisa Data
Analisis  nilai  randemen  dilakukan  secara deskriptif  menggunakan  Microsoft  Excel  dan disajikan dalam bentuk tabel. Analisa perbedaan  signifikan  konsentrasi  ekstrak lamun Enhalus  acoroides kering  dan  basah terhadap kemampuan menghambat pertumbuhan  bakteri Vibrio parahaemolyticus dianalisis  menggunakan  uji  one  way  ANOVA. Analisis  nilai  aktivitas  antibakteri  diawali dengan  uji  normalitas  dan  dilanjutkan  dengan One  Way  ANOVA  jika  data  berdistribusi dengan normal. Jika data hasil analisis one way anova  menunjukkan  perbedaan  signifikan (ρ<0,05), maka uji akan dilanjukan menggunakan  Uji  Post  Hoc  metode  Tukey HSD.  Uji  ini  digunakan  untuk  mengetahui konsentrasi  terbaik  ekstrak  yang  berbeda secara signifikan dalam menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Rendemen Ekstrak Lamun Enhalus acoroides
Rendemen adalah perbandingan antara ekstrak  yang  diperoleh  dengan  simplisia  awal dengan  satuan  persen  dengan  persamaan, semakin tinggi nilai rendemen yang dihasilkan maka menandakan nilai ekstrak yang dihasilkan  semakin  banyak  (Wijaya et  al., 2018).  Nilai  rendemen  ekstrak  umumnya merupakan  hasil  analisis  perbandingan  berat kering dan berat basah sampel yang dihasilkan
dengan  berat  total  sampel  (Rohmatika et  al. , 2023).  Hasil  rendemen  ekstrak Enhalus acoroides kering  dan  basah  menggunakan pelarut  metanol  PA  yang  diperoleh  dalam penelitian  ini  berbeda  ( Tabel  1 ).  Total  nilai rendemen  yang  diperoleh  sebanyak  15,589% dari total berat ekstrak 25,489 g. untuk lamun kering  dan  19,207%  untuk  lamun  basah  dari total berat ekstrak 31,405 g. Rendemen ektrak lamun Enhalus acoroides yang diperoleh pada penelitian  ini  lebih  kecil  jika  dibandingkan dengan  rendemen  penelitian  yang  dilakukan oleh  Mahmiah et al., (2023) dengan perolehan nilai  rendemen  ekstrak  lamun Enhalus acoroides sebesar  8.64%  dengan  bobot rendemen  sebesar  43.20  g.  Faktor  yang mempengaruhi  nilai  rendemen  adalah  jenis pelarut yang digunakan dalam proses ekstraksi, metode ekstraksi, dan juga lamanya maserasi.  Perbedaan  jenis  pelarut  akan mempengaruhi  jumlah  ekstrak  kasar  yang dihasilkan  (Permana et  al., 2016).  Jenis pelarut, konsentrasi pelarut, lama penyaringan berpengaruh  terhadap  total  nilai  rendemen ekstrak  yang  diperoleh  yaitu  semakin  tinggi konsentrasi  pelarut  yang  dipakai  maka  total nilai rendemen yang diperoleh semakin besar (Rohmatika et al ., 2023). Penggunaan pelarut metanol  PA  yang  digunakan  untuk  proses ekstraksi  juga  bertujuan  untuk  menarik senyawa metabolit sekunder yang terkandung pada  rendemen  ekstrak  lamun Enhalus acoroides yang diduga mempengaruhi kemampuan  daya  hambat  ekstrak  terhadap pertumbuhan Vibrio parahaemolyticus .
Tabel 1 . Hasil Rendemen Ekstrak Lamun Enhalus acoroides
No Spesifikasi Sampel Total Berat Lamun (gram) Total Berat Ekstrak (gram) Rendemen (%) 1 Lamun Kering 163.5 25.489 15.59 2 Lamun Basah 163.5 31.405 19.21

## Karakteristik Ekstrak Lamun Enhalus
acoroides Kering dan Basah
Karakteristik ekstrak lamun Enhalus acoroides kering  dan  basah  menunjukkan  hasil  yang berbeda baik dari segi warna, tekstur, bau, dan rendemen  ( Gambar  3 ).  Hasil  yang  didapat menunjukkan  pada  ekstrak  lamun  kering berwarna  hijau  tua,  sedangkan  ekstrak  lamun basah  berwarna  hijau  kehitaman. Warna  hijau menunjukkan  bahwa  lamun  mengandung
pigmen  berwarna  hijau  atau  klorofil  yang berperan  penting  dalam  proses  fotosintesis. Jenis  pelarut  juga  mempengaruhi  warna ekstrak yang dihasilkan, pelarut metanol dapat menghasilkan  warna  hijau  yang  lebih  pekat pada ekstrak lamun, hal ini disebabkan karena metanol  dapat  melarutkan  hampir  semua senyawa organik yang ada dalam sampel, baik bersifat polar maupun non polar (Akasia et al., 2021).
(a)                                             (b) Gambar 3 Ekstrak lamun Enhalus acoroides : a) Ekstrak lamun kering, b) Ekstrak lamun basah
Berdasarkan  hasil  yang  didapat,  tekstur  dari ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering  dan basah juga berbeda. Ekstrak lamun kering yang didapat berupa butiran seperti pasir, sedangkan ekstrak lamun basah yang didapat berupa  pasta.  Bau  yang  dihasilkan  kedua ekstrak  adalah  bau  khas  lamun.  Pemilihan pelarut  metanol  dalam  proses  maserasi  pada lamun dapat mempengaruhi warna ekstrak dan banyaknya  rendemen  yang  didapat.  Ukuran partikel  yang  semakin  kecil  menyebabkan jumlah  rendemen  yang  didapat  semakin banyak (Sayoga et al., 2020).
Daya  Hambat  Ekstrak  Lamun  Enhalus acoroides  Kering  Terhadap  Bakteri  Vibrio parahaemolyticus
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering  terhadap  bakteri Vibrio  parahaemolyticus dapat  dilihat  pada Tabel  2 .  Konsentrasi  80000  ppm  ekstrak Enhalus acoroides kering merupakan konsentrasi  tertinggi  yang  dapat  menghambat pertumbuhan  bakteri Vibrio  parahaemolyticus dengan  kisaran  nilai  1.53±0.70  mm  sampai 2.15±0.91 mm pada waktu pengamatan 24 jam dengan kategori lemah. Kategori zona hambat lemah  ditemukan  pada  seluruh  konsentrasi disebabkan oleh beberapa faktor salah satunya kemampuan  adaptasi  bakteri  yang  akan dihambat  (Asih et  al .,  2023).  Lemahnya  daya hambat  yang  dihasilkan  oleh  ekstrak Enhalus acoroides kering  diduga  disebabkan  karena kandungan senyawa bioaktif dalam lamun yang
berpotensi sebagai penghambat bakteri hanya sedikit, sehingga tidak maksimal menghambat pertumbuhan  bakteri Vibrio  parahaemolyticus . Bakteri Vibrio parahaemolyticus termasuk jenis bakteri yang susah dihambat karena tergolong jenis bakteri gram negatif. Bakteri gram negatif memiliki  ciri  khas  berupa  dinding  sel  dengan lapisan berlapis sehingga sulit untuk menembus dinding sel bakteri ini (Chairunisa & Indradi,  2020).  Kemampuan  kelompok  bakteri gram negatif yang sulit ditembus oleh zat aktif ini  yang  menyebabkan  kelompok  bakteri  ini khususnya Vibrio dan Esherichia  coli juga dikategorikan  sebagai  bakteri  pencemar  (Asih et  al .,  2024).  Hasil  pengukuran  zona  hambat ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering terdapat pada Tabel 2 .
Lamun Enhalus acoroides kering yang dicobakan untuk menguji aktivitas bakteri yang paling tinggi terdapat pada pengukuran 24 jam pada  masing-masing  konsentrasi  ( Tabel  2 ), sedangkan  pada  pengamatan  48  jam  dan  72 jam menunjukkan diameter zona hambat yang menurun.  Hal  ini  membuktikan  bahwa  ekstrak lamun Enhalus  acoroides kering  memiliki  sifat bakteriostatik  yang  ditandai  dengan  zona hambat  yang  terlihat  keruh  karena  terdapat titik-titik bakteri (Pringgenies et al., 2020). Sifat bakteriostatik adalah kemampuan ekstrak yang hanya  menghambat  pertumbuhan  dari  bakteri uji  (Purniasih, et  al 2022),  hal  ini  terbukti  dari hasil  yang  menunjukkan  bahwa  kemampuan ekstrak  dalam  menghambat  bakteri  uji  terus mengalami penurunan pada 48 jam dan 72 jam.
Tabel  2 .  Hasil  perhitungan  daya  hambat  bakteri Vibrio  parahaemolyticus menggunakan  ekstrak Enhalus acoroides kering selama 3 waktu pengamatan
Perlakuan (ppm) Diameter Zona Hambat (mm) 24 Jam Kategori 48 Jam Kategori 72 Jam Kategori 10000 0.78±0.60 Lemah 0.57±0.40 Lemah 0.32±0.18 Lemah 20000 0.38±0.32 Lemah 0.35±0.26 Lemah 0.25±0.21 Lemah 40000 0.58±0.20 Lemah 0.50±0.18 Lemah 0.33±0.16 Lemah 80000 2.15±0.91 Lemah 1.72±0.67 Lemah 1.53±0.70 Lemah K+ 24.02±0.33 Kuat 21.93±1.32 Kuat 20.08±1.46 Kuat K- 0±0 - 0±0 - 0±0 - K0 0±0 - 0±0 - 0±0 -
Keterangan : Nilai yang tertera pada tabel merupakan nilai ± standart deviasi dari 3 ulangan
Daya  Hambat  Ekstrak  Lamun  Enhalus acoroides  Basah  Terhadap  Bakteri  Vibrio parahaemolyticus
Hasil  penelitian  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak lamun Enhalus  acoroides basah  terhadap bakteri Vibrio  parahaemolyticus dapat  dilihat pada Tabel  3 ,  dimana  konsentrasi  80000  ppm merupakan  konsentrasi  tertinggi  yang  dapat menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus dengan kisaran nilai 2.35±0.13  mm  sampai  3.55±1.60  mm  pada waktu  pengamatan  24  jam  dengan  kategori sedang. Namun pada ekstrak basah, konsentrasi  10000  ppm  memiliki  nilai  zona
hambat  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan konsentrasi 20000 ppm dan 40000 ppm. Hasil ini berbanding terbalik dengan pernyataan Syarifah et  al., (2018)  mengemukakan  bahwa  diameter zona  hambat  cenderung  meningkat  sebanding dengan  meningkatnya  konsentrasi  ekstrak. Tingginya  kemampuan  zona  hambat  bakteri pada  konsentrasi    ekstrak  lamun  10000  ini diduga  disebabkan  karena  semakin  kental larutan  ekstrak  yang  digunakan  maka  larutan ekstrak  semakin  sulit  berdifusi  secara  baik dalam  media  agar.  Hasil  pengukuran  zona hambat ekstrak lamun Enhalus acoroides kering dapat dilihat pada Tabel 3 .
Diameter  zona  hambat  tidak  selalu  naik sebanding dengan naiknya konsentrasi antibakteri,  kemungkinan  ini  terjadi  karena perbedaan kecepatan difusi senyawa antibakteri pada  media  agar  serta  jenis  dan  konsentrasi senyawa antibakteri yang berbeda juga memberikan  diameter  zona  hambat  yang berbeda pada lama waktu tertentu. Berdasarkan hasil  pada  tabel  2  dan  tabel  3,  zona  hambat pada kedua ekstrak diatas menunjukkan bahwa kontrol  positif  mendapatkan  hasil  tertinggi
dengan kategori kuat. Penelitian ini menggunakan  kloramfenikol  sebagai  kontrol positif.  Kloramfenikol  adalah  antibiotik  yang mempunyai  spektrum  luas,  berasal  dari  jamur Streptomyces  denezuelae sehingga  dapat menghambat  bakteri  dengan  kategori  kuat (Wardaniati  &  Gusmawarni,  2021).  Kontrol negatif aquadest digunakan untuk membuktikan bahwa aquadest yang digunakan tidak mempunyai  aktivitas  terhadap  bakteri  yang diujikan (Kusuma et al ., 2022).
Tabel  3 .  Hasil  perhitungan  daya  hambat  bakteri Vibrio  parahaemolyticus menggunakan  ekstrak Enhalus acoroides basah selama 3 waktu pengamatan Perlakuan (ppm) Diameter Zona Hambat (mm) 24 Jam Kategori 48 Jam Kategori 72 Jam Kategori 10000 1.67±0.45 Lemah 1.38±0.49 Lemah 1.13±0.36 Lemah 20000 0.57±0.14 Lemah 0.47±0.07 Lemah 0.23±0.07 Lemah 40000 0.72±0.36 Lemah 0.62±0.27 Lemah 0.45±0.22 Lemah 80000 3.55±1.60 Sedang    3.12±1.24 Sedang 2.35±0.13 Lemah K+ 25.75±4.39 Kuat 23.05±3.05 Kuat 21.72±3.34 Kuat K- 0±0 - 0±0 - 0±0 - K0 0±0 - 0±0 - 0±0 -
Keterangan : Nilai yang tertera pada tabel merupakan nilai ± standart deviasi dari 3 ulangan
Perbedaan  Signifikan  Kemampuan  Ekstrak dalam Menghambat
Bakteri Vibrio parahaemolyticus
Ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering  dan basah pada masing-masing perlakuan konsentrasi  memiliki  kemampuan  menghambat bakteri Vibrio  parahaemolyticus yang  berbeda.
Hasil  pengolahan  data  diameter  zona  hambat terhadap  konsentrasi  ekstrak  lamun Enhalus acoroides kering dan basah pada bakteri Vibrio parahaemolyticus tertera pada Tabel 4 .
Berdasarkan  hasil  Uji  ANOVA  pada Tabel  4 tersebut  menunjukkan  bahwa  kedua  ekstrak lamun  kering  dan  basah  memiliki  perbedaan
yang  signifikan  pada  konsentrasi  ekstrak terhadap bakteri Vibrio parahaemolyticus . Hasil ini ditunjukkan oleh nilai signifikansinya sebesar 0.022 untuk lamun kering dan 0.010 untuk lamun basah. Kedua nilai tersebut lebih kecil dari 0.05 yang  artinya  terdapat  perbedaan  kemampuan
setiap  konsentrasi  ekstrak  lamun Enhalus acoroides kering dan basah dalam menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus .
Tabel  4. Hasil  Uji  Statistik  ANOVA  Kemampuan  Zona  Hambat  bakteri Vibrio  parahaemolyticus
Menggunakan Ekstrak Lamun Enhalus acoroides Kering dan Basah Spesifikasi Sampel Nilai Signifikan (p) Beda Signifikan Ekstrak Lamun Kering 0.022* <0.05 Ekstrak Lamun Basah 0.010* <0.05 Keterangan= * Beda signifikan (<0.05)
Konsentrasi Terbaik Ekstrak Lamun Enhalus acoroides dalam Menghambat Bakter i Vibrio parahaemolyticus
Penentuan  konsentrasi  ektrak  lamun Enhalus acoroides dalam  menghambat  bakteri Vibrio parahaemolyticus dapat  diketahui  dengan melakukan  uji  lanjut  dari  Uji  One  Way  Anova yang  telah  dilakukan  yaitu  dengan  uji  Uji  Post
Hoc  berupa  Uji  Tukey  HSD.  Syarat  utama dilakukan uji Uji Post Hoc berupa Uji Tukey HSD ini  adalah  nilai  signifikan  Uji  One  Way  Anova yang  dilakukan  dibawah  0.05.  Uji  Tukey dilakukan untuk mengetahui konsentrasi terbaik ekstrak  yang  berbeda  secara  signifikan  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus . Hasil uji lanjut Tukey ekstrak lamun kering dan basah tersaji pada Tabel 5 .
Tabel  5 .  Uji  Tukey  Kemampuan  zona  hambat  bakteri Vibrio  parahaemolyticus yang  terbentuk  pada konsentrasi ekstrak lamun Enhalus acoroides kering dan basah Konsentrasi Nilai Signifikansi Ekstrak Lamun Kering Nilai Signifikansi Ekstrak Lamun Kering 10000 ppm 20000 ppm 0.833 0.044* 40000 ppm 0.973 0.555 80000 ppm 0.079 0.102 20000 ppm 10000 ppm 0.833 0.443 40000 ppm 0.973 0.996 80000 ppm 0.024* 0.012* 40000 ppm 10000 ppm 0.973 0.555 20000 ppm 0.973 0.996 80000 ppm 0.044* 0.015* 80000 ppm 10000 ppm 0.079 0.102 20000 ppm 0.024* 0.012* 40000 ppm 0.044* 0.015*
Berdasarkan  hasil  Uji  Tukey  pada Tabel  5 diketahui  bahwa  baik  lamun  kering  dan  basah pada  konsentrasi  20.000  ppm  dan  40.000  ppm memiliki  perbedaan  yang  signifikan  dengan konsentrasi  80.000  ppm,  karena  nilai  signifikan yang  dihasilkan  kurang  dari  0.05.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  konsentrasi  80.000  ppm ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering  dan basah memiliki pengaruh yang signifikan dalam menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticu s. Konsentrasi 80000
merupakan konsentrasi terbaik dalam menghambat aktivitas bakteri Vibrio parahaemolyticu s.
Hubungan antara daya hambat dengan konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  sebagai antibakteri  umumnya  berbanding  lurus,  yaitu semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  yang digunakan  maka  zona  hambat  yang  dihasilkan akan lebih besar (Sari et al ., 2014). Perbedaan
yang  signifikan  dari  zona  hambat  di  setiap konsentrasi  ekstrak  disebabkan  oleh  beberapa faktor yaitu kecepatan difusi ektrak yang masuk dalam  media,  sifat  media  yang  digunakan, jumlah  organisme  yang  diinokulasi,  kecepatan tumbuh  bakteri,  konsentrasi  bahan  kimia,  serta kondisi  bakteri  dan  media  saat  inkubasi (Citradewi et  al., 2019).  Semakin  besar konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan,  maka semakin  besar  senyawa  zat  aktif  yang terkandung  dalam  ekstrak  sehingga  zona hambat yang terbentuk lebih besar (Surjowardojo et al ., 2015). Hasil penelitian lain juga  menunjukkan  bahwa  vegetasi  pesisir  dan laut  berupa Rhizophora  mucronata memiliki perbedaan  signifikan  dalam  menghasilkan diameter  zona  bening  pada  paper  disk  untuk menghambat  pertumbuhan S.  Aureus dengan konsentrasi  besar  yaitu  75%,  dan  100% (Karundeng et al., 2022).

## KESIMPULAN DAN SARAN
Ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering  dan basah  memiliki  kemampuan  tidak  efektif menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus .  Ekstrak  lamun  basah  pada konsentrasi  80.000  ppm  memiliki  kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus dengan  kategori  sedang dengan  diameter  zona  hambat  3.55±1.60  mm (24  jam)  dan  3.12±1.24  mm  (48  jam)  , sedangkan  ekstrak  lamun  kering  memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri dengan  kategori  lemah  dengan  diameter  zona hambat  2.15±0.91mm  (24  jam),1.72±0.67  mm (48  jam),  dan  1.53±0.70  (72  jam).  Konsentrasi 80.000  ppm  ekstrak  lamun Enhalus  acoroides kering  dan  basah  memiliki  pengaruh  yang signifikan  dan  termasuk  konsentrasi  terbaik dalam menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticu s dari Perairan Sapeken Madura.  Penelitian ini  diharapkan  bisa menjadi acuan  pada  penelitian  selanjutnya.  Perlu dilakukan  pemurnian  ekstrak  dan  eksplorasi menggunakan  konsentrasi  lebih  tinggi  untuk mendapatkan konsentrasi terbaik dalam menghambat pertumbuhan bakteri Vibrio parahaemolyticus.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terimakasih diberikan kepada Laboratorium Biologi Laut dan Bioteknologi Laut, Jurusan  Kelautan  dan  Perikanan,  Universitas Trunojoyo  Madura  yang  telah  memfasilitasi kegiatan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Akasia,  A.  I.,  Nurweda  Putra,  I.  D.  N.,  &  Giri Putra,  I.  N.  (2021).  Skrining  Fitokimia Ekstrak  Daun  Mangrove Rhizophora Mucronata Dan Rhizophora  Apiculata Yang  Dikoleksi  Dari  Kawasan  Mangrove Desa  Tuban,  Bali. Journal  Of  Marine Research  And  Technology , 4 (1),  16. https://doi.org/10.24843/Jmrt.2021.V04.I 01.P03.
Asih, E.N.N, & Kartika, A. G. D. (2021). Potensi dan Karakteristik Bakteri Simbion Karang Lunak  Sinularia  sp.  sebagai  Anti  Bakteri Escherichia  coli dari  Perairan  Pulau  Gili Labak  Madura  Indonesia. Journal  of Marine Research , 10 (3), 355 –362. https://doi.org/10.14710/jmr.v10i3.30689. Asih, E.N.N., Fitri, D.A., Kartika, A. G. D., Astutik, S., & Efendy, M.  (2023). Potensi Bakteri
Halofilik  Ekstrim  dari  Tambak  Garam Tradisional sebagai Penghambat Aktivitas Bakteri Salmonella sp. Journal of Marine Research , 12 (3), 382 –390.
https://doi.org/10.14710/jmr.v12i3.35372. Asih  E.N.N.,  Ramadhanti,  A.,  Wicaksono,  A., Dewi.,  K., &  Astutik,  S.,    (2024). Deteksi Total  Bakteri Escherichia  coli Pada Sedimen  Laut  Perairan  Desa  Padelegan Sebagai Indikator Cemaran Mikrobiologis Wisata  Pantai  The  Legend-Pamekasan. Journal of Marine Research, 13 (1), 161- https://doi.org/170. 10.14710/jmr.v13i1.37063.
Badriyah,  L.,  Asih,  E.N.N.,  Ni’amah,  S.N., Ningrum, R.H., Mardiyanti, Y., & Wulansari, D.S. (2023a). Deteksi Indikasi Eritema Pada Sediaan Hand Body Lotion Dari  Ekstrak  Lamun  ( Enhalus  acoroides )
dan Gonad Bulu Babi ( Diadema setosum ). Jurnal  Perikanan  Unram , 13 (1), 299-306. https://doi.org/10.29303/jp.v13i1.437.
Badriyah,  L.,  Asih,  E.  N.  N.,  Ni'amah,  S.  N.,
Ningrum,  R.  H.,  Mardiyanti,  Y.,  & Wulansari,  D.  R.  (2023b).  Penambahan Ekstrak  Lamun  ( Enhalus  acoroides )  dan Gonad  Bulu  Babi  ( Diadema  setosum ) Sebagai  Formulasi  Sediaan  Moisturizer Body  Lotion. Jurnal  Pengolahan  Hasil Perikanan  Indonesia ,  26(1),  97-106. http://dx.doi.org/10.17844/jphpi.v26i1.448 80
Chairunisa, I., & Indradi, B. R. (2020). Aktivitas Antibakteri  dan  Kandungan  Fitokimia Ekstrak  Etanol  Alga  Merah  ( Eucheuma cottonii ). Farmaka Suplemen , 17 (1), 105 – 110. https://doi.org/10.24198/jf.v17i1.22221.
Citradewi, A., Sumarya, I M., Juliasih, N. . K. A. (2019).  Daya  Hambat  Ekstrak  Rimpang
Bangle  (Zingiber  Purpureum  Roxb.) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  Aureus .  J urnal  Widya Biologi , 10 (1), 68 –75.
https://doi.org/10.32795/widyabiologi.v10i 01.236.
Fajriani, B., Budiharjo, A., & Pujiyanto, S. (2018).
Isolasi  dan  Identifikasi  Molekuler  Bakteri Antagonis terhadap Vibrio parahaemolyticus Patogen  pada  Udang
Litopenaeus vannamei dari Produk Probiotik  dan  Sedimen  Mangrove  di Rembang. Jurnal  Akademika  Biologi,
7 (1), 52 –63.
Hitijahubessy, H., Susiyanto, A. Y., Samid, A., & Cesar,  O.  (2021).  Pengaruh  Ekstrak Lamun Enhalus Acoroides Secara In Vitro Sebagai  AntibakterI  Vibrio  sp.  Penyebab Penyakit  Ice-Ice  Pada  Rumput  Laut Eucheuma  cottoni . Molluca  Journal  of Chemistry Education (MJoCE) , 11 (2), 93- 98.https://doi.org/10.30598/mjocevol11is
s2pp93-98
Kartika,  A.D.G.,  Asih,  E.N.N.,  Nuzula,  N.I.,  & Dewi, K. (2023). Penyuluhan Pengenalan Biota  Dan  Lingkungan  Laut  Di  SDN  61
Gresik-Jawa  Timur. Sakai  Sambayan ,  7 (3): 169-174. http://dx.doi.org/10.23960/jss.v7i3.438. Karundeng, E. D. B., Hanizar, E., & Sari, D. N. R. (2022). Potensi Ekstrak Daun Rhizophora mucronata Sebagai Antibakteri  pada  Staphylococcus  aureus. Biosapphire , 1 (1), 10 –18. http://jurnal.ikipjember.ac.id/index.php/BI
OSAPPHIRE/article/view/642%0Ahttps://j urnal.ikipjember.ac.id/index.php/BIOSAP PHIRE/article/download/642/677
Kusmarwati,  A.,  Andayani,  F.,  &  Yennie,  Y.
(2020). Prevalensi Vibrio
parahaemolyticus Pada  Udang  Vaname Di  Unit  Pengolahan  Ikan  Jawa  Tengah Dan Jawa Timur. J urnal Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan Dan Perikanan , 1 5 (1). 21 – 31.http://dx.doi.org/10.15578/jpbkp.v15i1.
570
Marraskuranto,  E.,  Nursid,  M.,  Utami,  S., Setyaningsih,  I.,  &  Tarman,  K.  (2021). Kandungan Fitokimia, Potensi Antibakteri dan Antioksidan Hasil Ekstraksi Caulerpa racemosa  dengan  Pelarut  Berbeda.  JPB Kelautan  Dan  Perikanan,  16(1),  1 –10. https://doi.org/10.15578/jpbkp.v16i1.696 Kusuma, I.,M., Jastian, S.,Y., & Amir, M. (2022). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Metanol Kulit Buah Kawista (Limonia acidissima) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus. Sainstech Farma: Jurnal Ilmu Kefarmasian, 15 (1), 31 –34. https://doi.org/10.37277/sfj.v15i1.1099. Ningrum,  R.  H.,  Asih,  E.  N.  N.,  Ni'amah, S.  N., Badriyah, L., Mardiyanti, Y., & Wulansari, D. R. (2023). Formulasi body Lotion Dari Ekstrak  Lamun  dan  Gonad  Bulu  Babi. Jurnal Pengolahan
Hasil Perikanan Indonesia , 26(3), 510-519. http://dx.doi.org/10.17844/jphpi.v26i3.448
93
Oktawati,  N.  O., Sulistianto,  E.,  Fahrizal, W., & Maryanto,  F.  (2018).  Nilai  Ekonomi Ekosistem  Lamun  Di  Kota  Bontang.
EnviroScienteae , 14 (3), 228.
https://doi.org/10.20527/es.v14i3.5695 Permana, A. H. C., Husni, A., & Budhiyanti, S. A. (2016). Antioxidant Activity and Toxicity of Seagrass Cymodocea sp. Extracts. Jurnal Teknologi Pertanian , 17 (1), 37 –46. https://doi.org/10.21776/ub.jtp.2016.017. 01.5
Permana, R., Andhikawati, A., Akbarsyah, N., &
Putra, P.,K., D., N., Y. (2020). Identifikasi Senyawa  Bioaktif  Dan  Potensi  Aktivasi
Antioksidan  Lamun Enhalus  Acoroides (Linn.  F). Jurnal Akuatek , 1 (1),  66 –72. https://doi.org/10.24198/akuatek.v1i1.280 45.
Pringgenies, D., Setyati, W. A., Wibowo, D. S., & Djunaedi,  A.  (2020).  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak Jeruju Acanthus ilicifolius terhadap  Bakteri  Multi  Drug  Resistant. Jurnal  Kelautan  Tropis , 23 (2),  145 –156. https://doi.org/10.14710/jkt.v23i2.5398
Purniasih,  N.  K.  P.,  Ginting,  E.  L.,  Wullur,  S.,
Mangindaan,  R.  E.,  Rumampul,  N.  D.,  & Pratasik, S. B. (2022). Aktivitas
Antibakteri  dari  Bakteri  Endofit  Simbion Lamun Enhalus  acoroides asal  Perairan Tiwoho,  Minahasa  Utara. Jurnal  Ilmiah PLATAX , 10 (2), 402 –414.
https://doi.org/10.35800/jip.v10i2.42485
Rohmatika,  F.,  Asih,  E.N.N.,  Mardiyanti,  Y.,  &
Ni'amah,  S.  N.  (2023).  Potensi  Ekstrak dan  Skrining  Fitokimia  Caulerpa  sp.
Sebagai antibakteri Vibrio parahaemolyticus  dari  Perairan  Socah, Bangkalan-Madura. Jurnal Perikanan , 13 (4) 1138-1149. DOI: 10.29303/jp.v13i3.557. Mahmiah,  Sa'adah,  N.,  Sunur,  H.  N.,  &
Wijayanti,  N.  (2023).  Profil  Metabolit Ekstrak Etanol Enhalus acoroides ( L. F.) Royle,  1839  dari  Nusa  Tenggara  Timur. 12 (1),
151 –160. https://doi.org/10.14710/jmr.v12i1.35076
Sari,  A.,  &  Dahlan,  D.  (2015).  Komposisi  jenis dan  tutupan  lamun  di  perairan  teluk  yos sudarso  Kota  Jayapura. The  Journal  of Fisheries  Development , 2 (3),  1 –8. https://doi.org/10.55098/tjfd.v2i1.
Sari,  E.,  Ruf,  W.,  &  Sumardianto,  S.  (2014).
Kajian Senyawa Bioaktif Ekstrak Teripang Hitam  ( Holothuria  Edulis )  Basah  Dan Kering  Sebagai  Antibakteri  Alami. Jurnal Pengolahan  Dan  Bioteknologi  Hasil Perikanan , 3(4), 16 –24.
Sayoga,  M.  H., Wartini,  N.  M.,  &  Suhendra,  L.
(2020).  Pengaruh  Ukuran  Partikel  dan Lama  Ekstraksi  terhadap  Karakteristik Ekstrak  Pewarna  Alami  Daun  Pandan Wangi  (Pandanus  amaryllifolius  R.).
Jurnal Rekayasa Dan Manajemen Agroindustri , 8 (2), 234.
https://doi.org/10.24843/jrma.2020.v08.i0 2.p08
Sulastrianah,  Imran,  &  Fitria,  E.  S.  (2014).  Uji Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Sirsak ( Annona  muricata  L .)  dan  Daun  Sirih ( Piper  betle  L .)  Terhadap  Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli . Jurnal MEDULA: Jurnal Ilmiah Fakultas Kedokteran
Universitas  Halu  Oleo , 1 (2),  76 –84. https://doi.org/10.33772/medula.v1i2.19.
Surjowardojo,  P.,  Susilorini, T.,  E., &  Sirait, G., R.,  B.  (2015).  Daya  Hambat  Dekok  Kulit Apel  Manalagi  ( Malus  sylvestrs  Mill .) Terhadap  Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Pseudomonas sp. Penyebab
Mastitis  Pada  Sapi  Perah. Jurnal  Ternak TropikaI, 16 (2): 40-48. https://doi.org/10.21776/ub.jtapro.2015.0 16.02.6
Suryana,  A.,  Asih,  E.N.N.,  &  Insafitri.  (2023).
Fenomena Infeksi Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease pada Budidaya  Udang  Vaname  di  Kabupaten Bangkalan . 12 (2), 212 –220.
https://doi.org/10.14710/jmr.v12i2.35632.
Syarifah, R., Fakhrurrazi, Harris, A., Sutriana, A., Erina,  &  Winaruddin.  (2018).  Uji  Daya Hambat Ekstrak Biji Buah Pala ( Myristica fragrans  Houtt) Terhadap  Pertumbuhan Bakteri Escherichia  coli . Jurnal  Ilmiah Mahasiswa Veteran , 2 (3), 361 –372.
Wardaniati,  I.,  &  Gusmawarni,  V.  (2021).  Uji
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Propolis Terhadap Streptococcus Mutans. Jurnal  Farmasi  Higea , 1vibrio 3 (2),
115. https://doi.org/10.52689/higea.v13i2.372
Widiawati,  &  Asih,  E.  N.  A.  (2024).  Potensi skrining fitokimia dan aktivitas antioksidan ekstrak  daun Avicennia  marina dan Avicennia  alba dari Selat  Madura.  Jurnal Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia, 27(5),
393-406.
http://dx.doi.org/10.17844/jphpi.v27i5.524
21
Wijaya,  H.,  Novitasari,  &  Jubaidah,  S.  (2018).
Perbandingan Metode Ekstraksi Terhadap  Rendemen  Ekstrak  Daun Rambui  Laut  ( Sonneratia  caseolaris L. Engl ). Jurnal Ilmiah Manuntung , 4 (1), 79- 83. https://doi.org/10.51352/jim.v4i1.148.
Winastri, N. L. A. P., Muliasari, H., & Hidayati, E. (2020).  Aktivitas  Antibakteri  Air  Perasan dan  Rebusan  Daun  Calincing  (Oxalis corniculata  L.)  Terhadap Streptococcus mutans.  Berita  Biologi,  19(2),  223 – 230.https://doi.org/10.14203/beritabiologi .v19i2.3786