JIPI (Jurnal IPA dan Pembelajaran IPA), 4(1), 120-131, 2020
http://jurnal.unsyiah.ac.id/jipi
p-ISSN: 2614-0500 e-ISSN: 2620-553X

## KINETIKA REAKSI HIDROLISIS PATI BIJI ALPUKAT
( Persea americana Mill) DENGAN KATALIS HCl
Sitti Rahmawati * , Asnila, Suherman, Paulus Henghy Abram
Departement of Mathematic’s and Natural Sciences Education, Faculty of Teacher Training and Education, Tadulako University, Jl. Soekarno Hatta Km 9 Palu 94118, Indonesia
*Corresponding author: sittirahmawati@yahoo.com
DOI: 10.24815/jipi.v4i1.16480
Received: 21 April 2020 Revised: 27 Mei 2020                    Accepted: 9 Juni 2020
Abstrak. Salah  satu tumbuhan yang dapat digunakan  sebagai bahan baku pembuatan gula yaitu tumbuhan  yang  mengandung  kadar  pati  seperti  biji  alpukat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui orde reaksi, konstanta laju reaksi dari hidrolisis pati biji alpukat dengan menggunakan HCl. Metode penelitian ini dilakukan yaitu penentuan konsentrasi optimum reaksi hidrolisis HCl dari pati biji alpukat menggunakan berbagai konsentrasi HCl (0,5 M; 1 M; 1,5 M; 2 M; 2,5 M) pada suhu optimum  dan  waktu  pengadukan  (90 o C  selama  70  menit).  Proses  hidrolisis  dilanjutkan  dengan netralisasi menggunakan laruran NaOH 5 M dan diuapkan untuk mendapatkan glukosa pekat, glukosa dianilisis  secara  kualitatif  dan  kuantitatif  dengan  metode  Benedict  dan  metode  asam  fenol  sulfat. Berdasarkan hasil kadar glukosa maksimum yang diperoleh dari hasil hidrolisis variasi konsentrasi HCl pati biji alpukat yaitu HCl 1,5 M. Selanjutnya  menentukan kinetika reaksi hidrolisis pati yang menggunakan variasi waktu (30, 40, 50, 60 dan 70) menit pada suhu 90 o C dan konsentarsi HCl 1,5 M. orde reaksi ditentukan dengan metode intgral dan metode grafik. Penetapan orde satu metode grafik  dilakukan  dengan  memplotkan  nilai  ln  [A]  versus  waktu,  sedangkan  orde  dua  dengan memplotkan nilai 1/[A] versus waktu. Orde satu dengan tingkat kepercayaan mencapai 93% yang diperoleh  dari  nilai  R 2 =  0,9312,  sedangkan  orde  dua  yaitu  85%    yang  diperoleh  dari  nilai  R 2 = 0,8581. Penetapan orde metode integral nilai k cenderung tetap pada rumusan orde satu dengan rata-rata k = 0,01962 menit -1 . Berdasarkan kedua metode tersebut dapat ditentukan bahwa kinetika reaksi hidrolisis pati biji alpukat mengikuti reaksi orde satu.
Kata kunci : Pati biji alpukat, kinetika reaksi, orde reaksi
Abstract. One of the plants that can be used as raw material for making sugar is plants that contain starch content such as avocado seeds. This study aims to determine the reaction order, the reaction rate constant from the hydrolysis of avocado seed starch using HCl. The method of this research is to determine the optimum concentration of HCl hydrolysis reaction from avocado seed starch using various concentrations of HCl  (0.5 M; 1 M; 1.5 M; 2 M; 2.5 M) at the  optimum temperature and stirring time (90 o C for 70 minute). The hydrolysis process was followed by neutralization using 5 M NaOH solution and evaporated to obtain concentrated glucose, glucose was analyzed qualitatively and quantitatively by the Benedict method and the phenol sulfuric acid method. Based on the results of the maximum glucose levels obtained from the hydrolysis of variations in the concentration of HCl avocado seed starch, HCl 1.5 M. Furthermore, determine the kinetics of the starch hydrolysis reaction using time variations (30, 40, 50, 60 and 70) minutes at 90oC and concentrations The HCl 1.5 M. reaction order is determined by the intral method and the graph method. Determination of the first order graph method is done by plotting the value of ln [A] versus time, while the second order by plotting the value of 1 / [A] versus time. The first order with a 93% confidence level was obtained from the value of R2 = 0.9312, while the second order was 85% obtained from the value of R2 = 0.8581. Determination of the order of the integral method k value tends to remain in the first order formula with an average of k = 0.01962 minutes-1. Based on the two methods, it can be determined that the kinetics of the avocado seed starch hydrolysis reaction follows a first-order reaction.
Keywords: Avocado seed starch, reaction kinetics, reaction order

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  Negara  yang  kaya  akan  sumberdaya  alam.  Hampir  semua tanaman dapat tumbuh subur di Indonesia. Tanaman alpukat memiliki nama latin Persea americana Mill dan merupakan tanaman pohon berkayu yang tumbuh menahun dan dapat dibudidayakan  di  iklim  tropis  dan  subtropis.  Alpukat  merupakan  salah  satu  komoditas pertanian yang memiliki waktu panen kurang lebih enam bulan. Buah alpukat merupakan salah satu komoditas tanaman hortikultura yang memiliki nilai ekonomis tinggi (Tamalia, dkk., 2017).
Buah alpukat juga kaya antioksidan dan zat gizi dan sekitar 90 persen kandungan alpukat adalah lemak. Delapan puluh persen kandungan lemak ini adalah oleic acid atau asam  oleat  yang  merupakan  lemak  tidak  jenuh  tunggal.  Lemak  jenis  ini  memberikan banyak  keuntungan  bagi  kesehatan  manusia.  Separuh  buah  alpukat  mengandung  57 miligram  folat  dan  548  miligram  kalium.  Kandungan  folat  dari  separuh  alpukat  ini mendekati sepuluh persen dari kebutuhan tubuh sehari. Separuh alpukat dapat memenuhi 16 persen kebutuhan kalium sehari.  Alpukat juga mengandung sejumlah fitokimia seperti flavonoid, saponin, alkaloid, tannin, asam folat, lesitin, asam pantotenat, beta-sitosterol, niasin, serat, sejumlah vitamin seperti vitamin B1, B2, B5, C, A, K, E, biotin dan sejumlah mineral  seperti  fosfor,  tembaga,  zat  besi,  kalium,  magnesium,  zink,d  an  glutathione (Malangngi, dkk., 2012).
Selain  buah  alpukat,  pada  daun  dan  biji  alpukat  juga  terdapat  kandungan magnesium,  kalsium, kalium,  tannin,  vitamin C,  karotenoid,  senyawa  fenolik,  flavonoid, tokoferil asetat, Epicatechin, rutin, asam klorogenat, dan kuersetin. Sifat antioksidannya dikontribusikan  dari  kandungan  fenolik  dan  flavonoid  (Kingne,  dkk.,  2018;  Princwill- Ogbonna,  dkk.,  2019;  Soldera-Silva,  dkk.,  2018).  Biji  alpukat  juga  memiliki  sifat bakterisida  dan  fungisida  yang  mampu  menetralisir  berbagai  mikroorganisme  yang berbahaya. Kandungan yang baik pada biji alpukat sangat baik untuk kesehatan rambut dan  kulit.  Daun  dan  biji  alpukat  digunakan  dalam  pengobatan  tradisional  untuk pengobatan/  manajemen  penyakit  Alzheimer  (AD)  (Oboh,  dkk.,  2016).  Tepung  dari  biji alpukat biasa dijadikan sebagai scrub dan masker wajah. Selain dari itu,limbah biji alpukat bisa juga diolah menjadi keripik dan pembuatan dodol serta untuk pembuatan mie instan fan bias juga diguanakan sebagai ekstrak pembusa detergent (Damayanti, dkk., 2015).
Pati dari biji alpukat dapat dihidrolisis glukosa. Katalis asam yang biasa digunakan untuk proses hidrolisis adalah asam sulfat (H 2 SO 4 ) , asam klorida (HCl) dan asam nitrat (HNO 3 ).  Akan  tetapi,  HNO 3 jarang  digunakan  karena  harganya  mahal  dan  dapat menghasilkan  gas  NO 2 yang  bersifat  toksit  sedangkan  H 2 SO 4 merupakan  oksidator  kuat yang  memiliki  tingkat  keasaman  yang  cukup  tinggi  dibandingkan  HCl,  sehingga  dapat merusak struktur molekul pati yang akan dihidrolisis. Selain itu, HCl sangat mudah dalam proses pemisahannya yaitu dengan cara diuapkan, sehingga produk murni terbebas dari HCl  serta  pada  proses  penetralan  akan  menghasilkan  natrium  klorida (NaCl) yang  tidak berbahaya.  Glukosa  hasil hidrolisis  dapat  diolah,  selanjutnya  akan  menjadi  produk  baru yang lebih bermanfaat seperti etanol dan lain sebagainya (Handoko, 2006).
Proses  hidrolisis  pati  biji  alpukat  baik  ukuran/dimensi  serta  kondisi  operasinya diperlukan data kinetik dari reaksi tersebut. Pemahaman mengenai kinetika reaksi-reaksi pada  bahan  pangan  juga  memungkinkan  digunakan  untuk  menentukan  waktu penyimpanan  atau  masa  kadaluarsa  suatu  produk  pangan.  Mekanisme  reaksi  dan
konstanta laju reaksi (k), dapat digunakan untuk menentukan pilihan suatu kondisi proses atau  penyimpanan  terbaik  yang  dapat  memberikan  mutu  produk  yang  optimum (Kusnandar,  2010).  Berbagai  penelitian  tentang  kinetika  hidrolisis  pati  menjadi  glukosa telah dilakukan antara lain: kinetika reaksi hidrolisis pati pisang tanduk dengan katalisator asam  klorida,  diperoleh  diperoleh  nilai  konstanta  kecepatan  reaksi  k=  0,007383  s -1 (Yuniwati dkk., 2011) dan kinetika reaksi hidrolisis pati pada biji nangka, k= 0,0216 menit - 1 (Endang,  dkk.,  2011),  Penentuan  kinetika  reaksi  oksidasi  vitamin  C  dilakukan  dengan menggunakan metode integral dan grafik sedangkan kadar asam askorbat sisa ditentukan dengan metode titrasi iodimetri tiap interval waktu enam puluh menit. Kerusakan vitamin C diukur pada temperatur 40, 50, 60, 70 dan 80 °C. Hasil penelitian menunjukkan bahwa kinetika reaksi oksidasi vitamin C mengikuti reaksi orde satu pada temperatur 40, 50, 60, 70 dan 80 °C dengan tetapan laju reaksi berturut-turut 4,55 x 10-4, 5,85 x 10 -4 , , 8,4 x 10 -4 , 1,1 x 10 -3 dan 1,015 x 10 -3 menit -1 . Energi aktivasi dan faktor pre-eksponensial reaksi oksidasi asam askorbat adalah 20,73 kJ.mol -1 dan 1,372 menit -1 (Rahmawati dan Bunjali, 2012).   Mengingat pentingnya data kinetika suatu reaksi maka pada penelitian ini, peneliti mencoba menghitung konstanta laju reaksi (konstanta kecepatan reaksi dan orde reaksi) hidrolisis pati dari biji alpukat.

## METODE

## Penyiapan Sampel
Memisahkan  biji  alpukat yang  diperoleh  dari  pasar  Inpres kota  Palu  dari  buahnya. Kemudian mencuci bersih biji alpukat dan meniriskan, selanjutnya mengeringkan dengan cara  mengangin-anginkan  tanpa terkena  sinar  matahari langsung, memotong kecil-kecil biji alpukat setengah kering kemudian mengeringkan kembali dengan teknik yang sama. Selanjutnya  menghaluskan  potongan  biji  alpukat  dan  mengayak  dengan  ukuran  (+40,- 100) mesh (Endang, dkk., 2011).

## Penentuan Kadar Air
Menyiapkan  beberapa  cawan  petri/porselin  kemudian  memanaskan  dalam  oven selama  1  jam  pada  suhu  105 o C  dan  mendinginkan  dalam  desikator  selama  15  menit kemudian  menimbang  bobot  konstan  masing-masing  cawan  (a).  selanjutnya  mengisi masing-masing cawan dengan sampel biji alpukat hasil ayakan lalu menimbang bobot awal (a+b)  dan  memanaskan  dalam  oven  selama  1  jampada  suhu  105 o C  dan  mendinginkan dalam  desikator  selama  15 menit.  Selanjutnya  menimbang  bobot  akhir  (c)  kemudian menentukan kadar air sampel biji alpukat (Endang, dkk., 2011).

## Penentuan Kadar Pati
Penetapan Gula BM Rendah yang Hilang (Perlakuan dengan Etanol 80%)
Menimbang  tepung  biji  alpukat  hasilpenentuan  kadar  air  sebanyak  10  gram kemudian  melarutkan  ke  dalam  etanol  80%  pada  suhu  sekitar  40 o C  dan  mendinginkan secara perlahan hingga terbentuk endapan, selanjutnya menyaring dengan menggunakan kertas  saring  yang  telah  diketahui  bobot  awalnya,  kemudian  memanaskan  residu bersamaan dengan kertas saring selama 3 jam pada suhu 80 o C sampai kering. Selanjutnya mendinginkan  ke  dalam  desikator  selama  30  menit  dan  menimbang  bobot  akhirnya selanjutnya  menentukan  gula  BM  rendah  yang  hilang  dari  tepung  biji  alpukat  (Endang, dkk., 2011).

## Penentuan Kandungan Pati
Menimbang  0,1  gram  residu  perlakuan  etanol  80%  (triplo)  ke  dalam  3  tabung reaksi,  kemudian  menambahkan  5  mL  DMSO  (dimetil  sulfoksida).  Selanjutnya memasukkan semua sampel dalam penangas air (dengan kondisi air mendidih) selama 20 menit lalu divorteks. Setelah larutan dingin dan endapan terbentuk, mengambil cairannya (tanpa endapan) kemudian mensentrifus dengan kecepatan 2500 rpm selama 20 menit. Menempatkan  supernatant  ke  dalam  labu  ukur  50  mL  dan  mengencerkan  dengan aquabidest.  Selanjutnya  mengencerkan  kembali  sebanyak  10  kali  dan  mengocok sempurna,  melanjutkan  dengan  uji  gula  total  (TS)  dengan  metode  asam  fenol  sulfat (Endang, dkk., 2011).

## Penentuan Variasi Konsentrasi HCl terhadap Hasil  Hidrolisis Pati Biji Alpukat
Menimbang  masing-masing  10  gram  pati  biji  alpukat  hasil  penentuan  kadar  air kemudian  menambahkan masing-masing  50  mL  aquabidest  dan  100  mL  katalisator  HCl variasi  konsentrasi  0,5  M;  1,0  M;  1,5  M;  2,0  M;  dan  2,5  M.  selanjutnya  menghidrolisis selama  70  menit  pada  suhu  90 o C  (optimum)  ke  dalam  shaker  water  bacth  dengan kecepatan  200  rpm,  mendinginkan  hasil  hidrolisis  selam  beberapa  menit  kemudian menetralkan  dengan  larutan  NaOH  5  M  tetes  per  tetes,  selanjutnya  menyaring  dengan penyaringan  vakum  dengan  menggunakan  kertas  whatman  No.  41  dan  mengambil filtratnya.  Selanjutnya  menguapkan  filtrate  hasil  penyaringan  menggunakan  rotavapor hingga memperoleh ekstrak glukosa kental+ 15-35 mL kemudian mengimpitkan ke dalam labu takar 25 mL atau 50 mL sebagai ekstrak glukosa kental (Endang, dkk., 2011).

## Penentuan Nilai Tetapan Laju Reaksi Hidrolisis Pati oleh HCl
Menimbang  masing-masing  10  gram  pati  biji  alpukat  hasil  penentuan  kadar  air kemudian  menambahkan masing-masing  50  mL  aquabidest  dan  100  mL  katalisator  HCl 1,5 M. selanjutnya dihidrolisis selama 30, 40, 50, dan 60 menit pada suhu 90 o C (optimum) ke  dalam  shaker  water  bacth  dengan  kecepatan  200  rpm,  mendinginkan  hasil  hidrolisis selama beberapa menit kemudian menetralkan dengan larutan NaOH 5 M tetes per tetes, selanjutnya menyaring dengan penyaringan vakum dengan menggunakan kertas whatman No.  41  dan  mengambil  filtratnya.  Selanjutnya  menguapkann  filtrat  hasil  penyaringan menggunakan rotavapor hingga memperoleh ekstrak glukosa kental + 15-35 mL kemudian mengimpitkan  ke  dalam  labu  takar  25  mL  atau  50  mL  sebagai  ekstrak  glukosa  kental (Endang, dkk., 2011)

## Analisis Kualitatif Glukosa dengan Uji Benedict
Memipet 5 mL larutan Benedict ke dalam tabung reaksi dan menambahkan 8 tetes glukosa pekat hasil hidrolisis lalu mengocok secara sempurna, selanjutnya memasukkan ke dalam penangas air mendidih selama 5  menit. Mendinginkan secara perlahan hingga terbentuk endapan merah bata. Uji positif apabila terdapat endapan merah bata sedangkan warna larutan tidak berpengaruh (Endang, dkk., 2011).

## Analisis Kuantitatif Glukosa dengan Metode Asam Fenol Sulfat Pembuatan deret standar glukosa
Menimbang  0,1  gram  padatan  glukosa  kemudian  melarutkan  dan  mengencerkan dengan  aquabidest  hingga  100  mL  lalu  menghomogenkan  (larutan  induk  1000  ppm).
Selanjutnya mengambil 10 mL larutan induk 1000 ppm kemudian mengencerkan hingga 100 mL (larutan  standar  100  ppm).  Memipet lagi  masing-masing  2,5;  5,0;  7,5;  10  dan 12,5 mL dari larutan standar 100 ppm kemudian mengencerkan ke dalam labu takar 25 mL (deret standar 10, 20, 30, 40, dan 50 ppm) (Endang, dkk., 2011).

## Pembuatan Kurva Standar Glukosa Metode Asam Fenol Sulfat (Ts)
Memipet masing-masing 1 mL larutan standar glukosa 10, 20, 30, 40, dan 50 ppm ke dalam tabung reaksi bertutup dan merendam kembali selama 10 menit lalu mengocok dengan  vortex  mixer  selam  5  menit  dan  membiarkan  selama  20  menit  selanjutnya mengukur absorbansi dengan spektrofotometer UV-Vis pada max 485 nm (Endang, dkk., 2011).

## Analisis Kuantitatif Glukosa Pekat Hasil Hidrolisis Pati yang dikatalisis HCl
Memipet 0,1 mL ekstrak glukosa kental 50 mL dan 0,2 mL ekstrak glukosa kental 25 mL menggunakan pipet mikro dan mengencerkan hingga 250 mL aquabidest (50*Fp) dan  menghomogenkan.  Selanjutnya,  mengambil  masing-masing  1  mL  larutan  glukosa tersebut dan memasukkan ke dalam tabung reaksi bertutup dan merendam ke dalam air dan menambahkan masing-masing 1 mL larutan fenol 5% dan 5 mL H 2 SO 4 pekat kemudian merendam kembali selama 10 menit lalu mengocok dengan vortex mixer selama 5 menit dan  membiarkan  selama  20  menit  selanjutnya  mengukur  absorbansi  dengan spektrofotometer UV-Vis pada max 485 nm (Endang, dkk., 2011).

## Teknik Analisa Data
Dari data hasil pengamatan, ditentukan kinetika reaksi hidrolisis pati, yang meliputi orde  reaksi,  konstanta  laju  reaksi,  dan  energi  aktivasi.  Penentuan  orde  reaksi  dan konstanta  laju  reaksi  digunakan  metode  integral,  yakni  dengan  mengukur  perubahan konsentrasi  dengan  waktu  dan  harga  k  dihitung  berdasarkan  persamaan  integral  yang berbeda untuk orde reaksi berbeda dan juga melalui metode grafik.  Metode integral untuk reaksi  orde  satu  menggunakan  Persamaan
A A k o ln t  dan  untuk  reaksi  orde  dua menggunakan  Persamaan
o A A k 1 1 t   .  Orde  reaksi  akan  diperoleh  dari  persamaan yang memberikan harga k yang tetap.  Metode grafik menggunakan Persamaan 1 untuk orde satu dan Persamaan 2 untuk orde dua (Sukarjo, 2013).
b x m y A t k A      0 ln ln …………………………..    (1) b x m y A t k A     ] [ 1 ] [ 1 0 ...................…….     (2)

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Penentuan Kandungan Pati
Penentuan  kandungan  pati  diawali  dengan  pengukuran  kadar  air  dari tepung biji  alpukat  kering.  Pengukuran kadar air bertujuan untuk mendapatkan sampel yang telah bebas  air  sehingga  diperoleh  bobot  sebenarnya  dari  pati  yang  terkonversi dalam penentuan kadar pati yang sebenarnya (Endang, dkk., 2011). Tepung  biji  alfukat kering    diayak  menggunakan  ayakan  50  mesh,  supaya  serbuk  yang  dihasilkan  sangat halus.    Keseragaman  ukuran    partikel    merupakan    salah    satu    faktor    yang mempengaruhi    tumbukan  dan    pergerakan    molekul    dalam    reaksi    kimia    dengan menggunakan  energi yang  sama  sehingga  secara  langsung  dapat  meningkatkan  nilai kecepatan reaksi (Endang, dkk., 2011). Pada dasarnya kadar air yang didapat  merupakan hasil  dari  proses  penguapan  air  (dengan  menggunakan oven). Hasil perhitungan kadar air dapat dilihat pada Tabel 1.
Berdasarkan data pada Tabel 1 kadar air tepung biji alpukat 8,49%. Kadar air yang diperoleh  tidak  berbeda  jauh   dari   teori   yang   menyatakan   bahwa   kadar  air   yang terkandung  dalam  biji  buah alpukat yaitu sebesar 10,2% (Halimah, dkk., 2014). Kadar air  pati  yang  dihasilkan  secara  garis  besar  masih  memenuhi  syarat standar industri pati di Indonesia.  Standar mutu pati menurut standar industri Indonesia maksimum kadar air pati biji alpukat adalah 14% (Chandra, dkk., 2013), Makin tinggi kadar air suatu bahan maka  makin  mudah  bahan  tersebut  rusak  atau  tidak    tahan    lama.    Kadar  air  sangat dipengaruhi oleh proses  pengeringan.  Pengeringan  pada  pati biji alpukat  bertujuan untuk  mengurangi  kadar  air sehingga  pertumbuhan  mikroba  dan  aktivitas  enzim penyebab  kerusakan  pada  pati  dapat dihambat.
Tahapan  selanjutnya  adalah  sampel hasil pengukuran kadar air dilarutkan dalam etanol 80%.  Tujuan dari tahapan ini untuk melarutkan  gula  berbobot  molekul  (BM) rendah,  supaya  yang  tersisa  hanya pati  dan  serat-serat  lainnya. Perhitungan kadar gula BM rendah ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1 . Data kadar air dan kadar gula BM rendah yang hilang
Analisis Pati Hasil (%) Kadar Air 8,49 Kadar Gula BM Rendah yang Hilang 8,7
Berdasarkan  Tabel  1  kadar  gula  berbobot  molekul  rendah  adalah  8,7%.  Pada penentuan kadar gula BM  rendah digunakan etanol  80%  sebagai pelarut karena  etanol bersifat  polar  sehingga  dapat  melarutkan  gula  atau  senyawa-senyawa  yang  polar  dan mempunyai  bobot  molekul  yang  rendah. Tahapan selanjutnya yaitu penentuan kadar pati.  Residu dari perlakuan dengan etanol 80% ditambahkan larutan  dimetilsulfoksida (DMSO), salah satu pelarut polar yang umum digunakan untuk melarutkan pati.
Penentuan  pengaruh  variasi  konsentrasi  HCl  terhadap  hasil  Hidrolisis Pati Hidrolisis  pati  akan  menghasilkan  glukosa,  sehingga  dengan  diketahuinya  kadar glukosa  hasil  yang  diperoleh,  dapat  pula  ditentukan  kadar  patinya.  Untuk  menentukan kadar  glukosa    diperlukan  larutan  standar  glukosa.  Larutan  standar  glukosa  diukur absorbansinya dengan UV-Vis dengan panjang gelombang max (λ max ) 485 nm. Hasil yang diperoleh ditunjukkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Absorbansi standar glukosa
No . Konsentrasi/ppm Absorbansi 1 0 0,062 2 10 0,221 3 20 0,361 4 30 0,577 5 40 0,664 6 50 0,853
Langkah  selanjutnya  yaitu  menghidrolisis  pati  selama  70  menit  pada  suhu  90 o C dengan  katalisator HCl variasi konsentrasi 0,5 M; 1,0 M; 1,5 M; 2,0 M; dan 2,5 M. Hasil yang diperoleh kemudian dihitung konsentrasi glukosa dan kadar glukosa yang terdapat pada  pati  biji  alpukat  (Tabel  4).  Berdasarkan    Tabel    4    dapat    diketahui    bahwa konsentrasi glukosa terbesar yang dihasilkan yaitu pada konsentrasi HCl 1,5 M. Atas dasar tersebut  maka  untuk  penentuan  kadar  pati  dilakukan  hidrolisis  dengan  menggunakan katalisator HCl 1,5 M. Glukosa hasil hidrolisis dianalisa kualitatif  dengan  uji  Benedict memberikan  hasil  yang  positif  (+)  dengan  adnya warna endapan merah bata.
Tabel 3. Data absorbansi, konsentrasi glukosa dan kadar glukosa hasil hidrolisis pati biji alpukat variasi konsentrasi  HCl
No. Konsentasi HCl Absorbansi Konsentrasi Glukosa/ppm Kadar glukosa/ (% berat) 1 0,5 M 0,163 6,3184 3,1592 2 1  M 0,171 6,8280 3,414 3 1,5 M 0,175 7,0828 3,5414 4 2  M 0,153 5,6815 3,414 5 2,5 M 0,152 5,6178 2,8089
Pati biji alpukat tersebut selanjunya dihidrolisis menggunakan katalisator HCl 1,5 M pada  suhu  90 o C  dengan  variasi  waktu  30,  40,  50,  dan  60  menit.  Hidrolisis  pati  akan menghasilkan  glukosa.  Semakin  lama  waktu  hidrolisis  semakin  besar  glukosa  yang dihasilkan.  Berdasarkan  Tabel  2  dapat  diperoleh  kurva  larutan  standar  glukosa  pada Gambar 1.
Gambar 1 . Kurva larutan standar glukosa terhadap absorbansi Persamaan linier, y = 0,0157 x + 0,0638, yang diperoleh dari grafik pada Gambar 1, digunakan untuk menentukan nilai Total Glukosa (TG), sehingga dapat diperoleh kadar pati biji alpukat yaitu 20,11%.  Hasil yang diperoleh tersebut jauh lebih kecil dibandingkan kandungan  pati  biji  alpukat  kering yaitu  59,87%.   Perbedaan nilai tersebut  disebabkan karena  dalam  tepung  biji  alpukat  terdapat  banyak  serat-serat  kasar  yang  tidak  larut secara  sempurna  pada proses  pelarutan dengan pelarut  DMSO (Chandra,  dkk.,  2013). Penentuan  kandungan  pati  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  seberapa  banyak pati yang  terhidrolisis  menjadi  glukosa  dengan  menggunakan  katalisator HCl.

## Penentuan nilai tetapan laju reaksi hidrolisis pati biji alpukat oleh HCl
Kadar    glukosa    yang    diperoleh    bukan    merupakan    landasan    utama  dalam penetapan    data   kinetika    reaksi   hidrolisis   sebab    dalam    penentuan   nilai konstanta reaksi    yang    diperhatikan    lebih    jauh    adalah    konsentrasi    pati    mula-  mula    dan konsentrasi    pati    sisa.    Perhitungan  konsentrasi  pati  yang  tersisa  tiap  interval  waktu tersebut ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 4. Data kadar pati bereaksi dan kadar pati sisa hasil hidrolisis pati biji alpukat menggunakan HCl 1,5 M variasi waktu
No. Waktu (menit) Kadar glukosa terbentuk (%berat) Pati bereaksi (%) Pati sisa(%) Konversi pati (%) 1 30 1,69425 8,42 11,69 41,86 2 40 1,91715 9,53 10,58 47,38 3 50 2,29935 11,43 8,68 56,83 4 60 2,96815 14,75 5,36 73,34 5 70 3,35030 16,65 3,46 82,79
Berdasarkan data pada Tabel 4 dapat dihitung tetapan laju reaksi tiap interval waktu dan  orde  reaksi  hidrolisis  pati  menggunakan  metode  integral  dan  metode  grafik.  Hasil perhitungan tetapan laju reaksi untuk orde satu dan orde dua dapat dilihat pada Tabel 5. Dari kedua hasil perhitungan dalam Tabel 5, harga tetapan laju reaksi cenderung konstan pada rumusan orde satu, sehingga dapat disimpulkan bahwa orde reaksi hidrolisis pati biji alpukat adalah orde satu. Orde reaksi diperoleh dari persamaan yang memberikan nilai k yang konstan terhadap pertambahan nilai t (Sukardjo,  2013).
Tabel 5 . Harga tetapan laju reaksi hidrolisis pati biji alpukat berdasarkan  persamaan orde satu dan orde dua dengan konsentrasi pati mula-mula 20,11%.
No. t/menit
Orde satu Orde dua k (menit -1 ) k (persen -1 menit -1 ) 1 30 0,01808 0,00119 2 40 0,01605 0.00111 3 50 0,01680 0,00130 4 60 0,02203 0.00228 5 70 0,025140 0,003410 Rata-rata 0,01962 0,001862
Tabel 6 . Data persen pati yang sisa [A] tiap interval waktu t.
No. t/menit [A] ln [A] 1 30 11,69 2,4587 2 40 10,58 2,3589 3 50 8,68 2,1610 4 60 5,36 1,6789 5 70 3,46 1,2412
Penentuan orde reaksi dapat pula ditentukan dengan metode grafik, yaitu persamaan 1  untuk  orde  satu  dan  Persamaan  2  untuk  orde  dua.  Grafik  untuk  orde  satu  diperoleh dengan mengalurkan persen pati yang tersisa ([A]) tiap interval waktu (Tabel 6) dan Grafik nya pada Gambar 2.  Berdasarkan grafik pada Gambar 2 diperoleh persamaan regresi y = -0.0254 x +  3.5372,  dari  persamaan  ini  dapat  ditentukan  harga  tetapan  laju  reaksinya adalah 2,54 x 10 -2 menit -1 dengan koefisien regresi R 2 = 0,9312.
Gambar 2 . Grafik [A] terhadap waktu (t) untuk reaksi hidrolisis pati y = -0.0254x + 3.5372 R² = 0.9312 0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 0 10 20 30 40 50 60 70 80 [A] (p er sen )
Waktu, t (menit)
Metode grafik untuk orde dua ditentukan dari hasi pati sisa [A] kemudian   dihitung 1/[A]  tiap interval waktu (Tabel  7)  dan  Grafik  nya  pada  Gambar  3.   Berdasarkan  grafik pada  Gambar  2  diperoleh  persamaan  regresi y = 0.0032 x -  0.0252,  dari  persamaan ini dapat ditentukan harga tetapan laju reaksinya adalah 3,20 x 10 -3 persen -1 menit -1 dengan koefisien regresi R 2 = 0,8581.
Tabel 7. Data Penetapan Orde II
No. t/menit [A] 1/[A] 1 30 11,69 0,0855 2 40 10,58 0,0945 3 50 8,68 0,1152 4 60 5,36 0,1865 5 70 3,46 0,2890
Nilai  koefisien  regresi  adalah  nilai  statistik  dalam  regresi  linier  yang menggambarkan  kekuatan  dan  arah  hubungan linier  ( linear  association )  antara  variabel terikat  (kriteria)  dan  variabel  bebas  (prediktor).    Nilai  ini  disebut  baku  karena  kisaran nilainya  antara  -1  sampai 1.    Jika nilai ini  semakin  besar (mendekati  1),  maka  prediksi yang dibuat semakin akurat (Cramer & Howitt, 2006).  Pada penelitian ini, nilai koefisien regresi R 2 = 0,9312 untuk orde satu lebih besar dibandingkan koefisien regresi  R 2 = 0,8581 untuk orde dua.
Gambar 3 . Grafik 1/[A] terhadap waktu (t) untuk reaksi hidrolisis pati
Hal ini menunjukkan bahwa tingkat kepercayaan orde reaksi satu 93,12%, lebih besar  tujuh  persen  dibandingkan  tingkat  kepercayaan  orde  dua  85,81%.  Nilai  koefisien regresi tersebut lebih besar dibandingkan nilai koefisien regresi pada penentuan kinetika enzim model Langmuir, R 2 = 0,9260, dan persamaan lineweaver-Burk, R 2 = 0,9093 pada reaksi hidrolisis  pati  sagu-amyloglucosidase (Lai,  dkk.,  2014;  Bandjar,  dkk.,  2015). Berdasarkan hal tersebut reaksi hidrolisis pati dari biji alpukat mengikuti reaksi orde satu.
y = 0.0032x - 0.0252 R² = 0.8581 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0 10 20 30 40 50 60 70 80 1 /[ A] Waktu t (menit)
Hasil ini sama dengan reaksi hidrolisis pati dari jagung menggunakan katalis enzim amylase yang juga mengikuti kinetika reaksi orde satu (Tatsumi, dkk., 2007).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa kinetika reaksi hidrolisis pati biji alpukat mengikuti reaksi orde satu. Nilai  konstanta laju reaksi hidrolisis pati biji alpukat adalah 0,01962 menit -1 atau 1,962 x 10 -2 menit -1 dan orde reaksi hidrolisis pati dari biji alpukat adalah orde satu.

## DAFTAR PUSTAKA
Achmad, H. 2001. Elektrokimia dan Kinetika Kimia .  Bandung: PT. Citra Aditya Bakti.
Bandjar,  A,  Tanasale,  M.F.J.D.P.,  dan  Luhukay,  M.S.  2015.    Kinetic  parameters determination of glucoamylase on hydrolysis reaction of sagoo starch  ( Metroxylon sp ). Indonesian Journal of  Chemical Research , 2(2):176-181.
Chandra,  A., Inggrid, H.M., dan Verawati. 2013.  Pengaruh  pH  dan  jenis  pelarut  pada perolehan  dan karakterisasi  pati  dari  biji  alpukat. Laporan Penelitian .  Bandung: Universitas  Katolik Parahyangan.
Cramer,  D.  dan  Howitt,  D.  2006. The  Sage  Dictionary  of  Statistics .  London:  Sage Publication.
Damayanti,  H.M.,  Praditia,  N.A.,  Murti,  R.W.,  Ahmad,  M.  dan  Widyaningrum,  N.  2015. Ekstrak  biji  alpukat  sebagai  pembusa  detergen:  pemanfaatan  potensi  bahan  alam dan  menekan  biaya  produksi . Prosiding  Seminar  Nasional  Peluang Herbal  Sebagai Alternatif Medicin e. ISBN: 978-602-19556-2-8.
Endang, S., Yudi, M., dan Saleh, A. 2011. Kinetika hidrolisis pati biji nangka ( Atrocarpus heterophyllus ) menggunakan katalisator asam klorida (HCl). Al-Kimia , 11-24.
Halimah,   A.D.N,   Istiqomah,   dan   Siti,   S.R.   2014.   Pengolahan limbah biji alpukat untuk pembuatan dodol pati sebagai alternatif  pengobatan  ginjal. Jurnal  Ilmiah Mahasiswa ,  4(1):32–37.
Handoko, D.S.P. 2006. Kinetika hidrolisis maltosa pada variasi suhu dan jenis asam sebagai katalis . Jurnal Sains dan Teknologi , 9(1):9-16.
Kusnandar, F. 2010. Kimia Pangan Komponen Makron, Cetakan 1. Jakarta: Dian Rakyat.
Kingne,  F.K.,  Tsafack,  H.D.,  Boungo,  G.T.,  Mboukap,  A.,  dan  Azia,  A.  2018.  Phenolic content and antioxidant activity of young and mature mango ( Mangifera indica ) and avocado ( Persea americana ) leave extracts. Journal of Food Stability , 1:14–27.
Lai,  L. W.,  Teo,  C.L.,  Wahidin,  S.,  dan  Annuar,  M.S.  2014.  Determination  of  enzyme kinetic  parameters  on  sago  starch  hydrolysis  by  linearized  graphical  methods. The  Malaysian Journal of Analytical Sciences , 18: 527–533.
Malangngi,  L.,  Sangi,  M.,  dan  Paendong,  J.  2012.  Penentuan  kandungan  tanin  dan  uji aktivitas antioksidan ekstrak biji buah alpukat ( Persea americana Mill) . Jurnal MIPA UNSRAT Online, 1(1):5-10.
Oboh,  G.,  Odubanjo,  V.O.,  Bello,  F.,  Ademosun,  A.O.,  Oyeleye,  S.I.,  Nwanna,  E.E.,  dan Ademiluyi, A.O., 2016. Aqueous extracts of avocado pear ( Persea americana Mill.) leaves  and  seeds  exhibit  anti-cholinesterases  and  antioxidant  activities  in  vitro. Journal of Basic Clinical Physiology and Pharmacology, 27:131–140.
Princwill-Ogbonna,  I.,  Ogbonna,  P.,  dan  Ogujiofor,  I.,  2019.  Proximate  composition, vitamin,  mineral  and  biologically  active  compounds  levels  in  leaves  of Mangifera indica (Mango), Persea americana ( Avocado pea ), and Annona muricata (Sour sop) . Journal Applied Science Environmental Management, 23:65–74.
Rahmawati, S. dan Bundjali, B. 2012. Kinetics of the oxidation of vitamin C. Indonesian Journal of Chemistry , 12(3):291–296.
Soldera-Silva,  A.,  Seyfried,  M.,  Campestrini,  L.H.,  Zawadzki-Baggio,  S.F.,  Minho,  A.P., Molento, M.B., dan Maurer, J.B.B., 2018. Assessment  of  anthelmintic  activity  and bio-guided  chemical    analysis  of Persea  americana seed  extracts. Veterinary Parasitology, 251:34–43.
Sukardjo. 2013. Kimia Fisika. Jakarta: PT. Rineka Cipta.
Tamalia,  D.I,  Santoso,  S.I.,  dan  Budiraharjo,  K.  2018.  Analisis  tingkat  pendapatan usahatani  alpukat  di  Kelompok  Tani  Kabupaten  Semarang. Jurnal  Ilmu-ilmu Pertanian , 14(1):1-11.
Tatsumi, H., Katano, H., dan Ikeda, T. 2014. Kinetic analysis of glucoamylase-catalyzed hydrolysis of  starch  granules  from  various  botanical  sources. Bioscience,  Biotechnology,  and Biochemistry , 71(4):946–950.