p-ISSN: 2354-8487

## KAJIAN PUSTAKA KRISTAL CAIR ( CUBOSOME ) SEBAGAI SISTEM PENGHANTARAN OBAT NANOPARTIKEL
Astridani Rizky Putranti 1 Agnes Nuniek Winantari 2 , Ni Made Krisnadewi 3 (1,2,3) Program Studi Sarjana Farmasi Universitas Surabaya Email: astridaniputranti@staff.ubaya.ac.id

## ABSTRAK
Cubosomes merupakan sistem penghantaran berbasis lipid berbentuk kubik yang dapat menjadi pilihan untuk senyawa yang memiliki kelarutan rendah dalam air tergolong ke dalam BCS kelas II dan IV. Cubosome didefinisikan sebagai suatu diskret, submikron, nanopartikel  dari  bicontinuous  liquid  crystalline  phase.  Bentuknya  digambarkan sebagai  cubic  molecular  crystallography yang  menggunakan  lipid tertentu,  surfaktan dan  molekul  polimer  dengan  molekul  polar  dan  non-polar  yang  disebut  dengan ampifilik.  Cubosomes  memiliki  rasio  area  bilayer  yang  lebih  luas  dibandingkan liposomes  sehingga  dapat  menjebak  lebih  banyak  obat  untuk  kemudian  dibawa  ke target pelepasan obat. Cubosomes dibentuk dengan lipid cair (phytantriol, GMO) dan ditambahkan  stabilizer  dengan  metode  top-down  atau  bottom-up.  Identifikasi karakteristik cubosomes menggunakan cryo-TEM (morfologi), SAXS (kristalinitas), dan DLS  (size  distribution,  zeta  potential).  Hasil  karakteristik  yang  diperoleh  berbentuk kubik dengan ukuran partikel 100-500 nm dan nilai zeta potential ±17 mV s/d 30 mV. Sedangkan untuk entrapment efficiency dihasilkan ± 90% yang menunjukkan sebagian besar  obat dapat masuk  ke  dalam  sistem.  Pada kajian  pustaka  ini,  kami menjelaskan secara  luas  mengenai  aspek  formulasi,  pembuatan  dan  karakterisasi  dari  cubosomes sebagai salah satu alternative yang apat diaplikasikan sebagai sistem penghantaran obat berskala nanopartikel.
Kata kunci: cubosomes, SAXS, cryo-TEM, DLS, entrapment efficiency

## ABSTRACT
Cubosomes are cubic lipid-based delivery systems that can be an option for compounds that have low  solubility  in  water  belonging  to  BCS  grades  II  and  IV. Cubosomes  defined  as  discrete, submicron, nanoparticles of a bicontinuous liquid crystalline phase. The shape is described as cubic  molecular  crystallography  using  certain  lipids,  surfactants  and polymer  molecules  with polar and non-polar molecules called amphiphilic. Cubosomes have a wider bilayer area ratio than liposomes so they can trap more drug and then be carried to the target drug release. Cubosomes made  by  lipid  (phytantriol,  GMO)  and  added  with  stabilizer  using  top-down  or  bottom-up method. Characterization of cubosomes with instrument such as cryo-TEM (morphology), SAXS (crystalinity), and DLS (size distribution, zeta potential). The characteristic results obtained are cubic with size distribution of 100-500 nm and zeta potential values ±17 mV to 30 mV. As for entrapment efficiency generated ± 90% which indicates most drugs can enter the system. Herein, we describe extensively about the formulation, manufacture and characterization of cubosomes as an alternative application as a nanoparticle drug delivery system.
Keywords: cubosomes, SAXS, cryo-TEM, DLS, entrapment efficiency.

## PENDAHULUAN
Perkembangan  bahan aktif  dewasa  ini menunjukan  bahwa  lebih  dari  40%  bahan aktif dan 70% senyawa kimia baru tergolong ke dalam BCS kelas II dan IV yang memiliki kelarutan rendah di dalam air (Mei et al., 2017). Salah satu upaya mengatasi masalah kelarutan adalah melalui pembentukan drug delivery sistem berukuran nano. Emulsi, liposom,  solid  lipid  nanoparticles,  cubosomes  dan  micelles  merupakan  nanoparticle drug delivery sytem berbasis lipid (Kwon, Hong and Kim, 2012).
Cubosome  didefinisikan  sebagai  suatu  diskret,  submikron,  nanopartikel  dari bicontinuous liquid crystalline phase. Bentuknya digambarkan sebagai cubic molecular crystallography  yang  menggunakan  lipid  tertentu,  surfaktan  dan  molekul  polimer dengan molekul polar dan non-polar yang disebut dengan ampifilik (Akhlaghi et al., 2016). Cubosomes memiliki rasio area bilayer yang lebih luas dibandingkan liposomes sehingga  dapat  menjebak  lebih  banyak  obat  untuk  kemudian  dibawa  ke  target pelepasan obat (Kulkarni et al., 2017).
Pembentukan  cubosome  dilakukan  dengan  dua  pendekatan  yaitu  topdown  dan bottom-up.  Pendekatan  top-down  diawali  dengan  fase  kubik  didispersikan  kedalam larutan menggunakan energi, sedangkan pendekatan bottom-up larutan dimasukkan ke dalam fase Cubosomes dan fase cair (Akhlaghi et al., 2016). Cubosomes terbentuk dari lipid  cair  yang  sering  digunakan  untuk membentuk  fase  kubik  yaitu  monoolein  dan phytantriol, dan 2 penambahan polimer tween 80 dan Pluronic tribloc copolymer F127 yang sering digunakan sebagai penstabil (Barriga, Holme and Stevens, 2019).
Karakteristik  cubosomes  yang  dihasilkan  menurut  beberapa  jurnal  yaitu nanopartikel  yang  didapatkan  berbentuk  kubik  dengan  bagian  dalam  yang  teratur, entrapment efficiency obat tinggi (97%) (Flak et al., 2020). Menurut Mehanna et al., 2020, entrapment  efficiency  tinggi  (96.60  ±  3.58%)  dan  zeta  potensial  (31.50  ±4.20  mV) menunjukan efektivitas dari nanosystem. Pada tahun 2017 Mei et al. mengidentifikasi gambar  yang  dihasilkan  menunjukkan  cubosomes  dapat  membentuk  dirinya  sendiri dengan  diameter  sekitar  200  nm  dan  terbentuk  fase  Im3m.  Pada  penelitian  ini  akan dikaji  secara  pustaka  sistem  kristal  cair  (cubosomes)  sebagai  penghantaran  obat. Cubosomes  yang  telah  terbentuk  kemudian  diamati  morfologinya  (Cryo-TEM), kristalinitas  (SAXS),  size  distribution,  zeta  potensial.  Pengkajian  juga  dilakukan terhadap Entrapment efficiency dari cubosomes sehingga dapat diprediksi banyak obat yang dapat dijebak dalam sistem.

## METODE PENELITIAN
Jenis penelitian yang dilakukan yaitu Literature review yang merupakan kajian terhadap kumpulan jurnal ilmiah yang berkaitan dengan masalah dan tujuan penelitian. Literature review ditujukan untuk mengidentifikasi hasil pencarian baik menggunakan mesin  pencarian  dan  manual  yang  berkaitan  dengan  kristal  cair  (cubosome)  sebagai sistem penghantaran obat. Sumber data yang digunakan merupakan data primer yang diperoleh dari sumber pertama secara langsung. Sumber data primer yang dimaksud adalah jurnal ilmiah yang merupakan original studies. Jurnal ilmiah yang digunakan berkaitan  dengan  kristal  cair  (cubosome)  sebagai  sistem  penghantaran  obat.  Metode pengumpulan data penelitian yang dilakukan adalah metode dokumentasi. Metode ini diawali  dengan  pencarian  melalui  literatur  elektronik  seperti  PubMed  dan  Science Direct yang terkait dengan kristal cair (cubosome) sebagai sistem penghantaran obat. Data yang terpilih berdasarkan kriteria inklusi dan eksklusi pada diagram alur searching kemudian didokumentasikan dan dianalisis.

## Gambar 1. Diagram Alur Searching

## HASIL PENELITIAN
Cubosomes terdiri  dari  struktur  internal  kompleks bicontinuous  cubic yang terbentuk akibat lipatan rumit dari lipid bilayer dan dipisahkan oleh dua kanal yang identik  akan  tetapi  tidak  saling  berpotongan  yang  memiliki  skala  nanopartikel.
Hasil pencarian Pubmed 405 artikel Eksklusi: 1. Tahun jurnal dibawah 2011
2. Menggunakan bahasa asing selain bahasa inggris
3. Literatur yang tidak dapat diakses secara utuh
4. Duplikasi jurnal
5. Skrinning judul dan abstrak
6. Nilai % entrapment efficiency kurang dari 90%.
7. Jurnal tidak terindeks Scopus/ Scimago (Q1, Q2, Q3, Q4)
12 artikel
Hasil pencarian Science direct 1.940 artikel
Cubosomes lebih  menguntungkan  dibandingkan  liposome  karena  memiliki kompartemen lipid yang lebih besar sehingga dapat menghantarkan molekul lipofilik yang lebih banyak. Hal ini dapat dimanfaatkan untuk menghantarkan obat lipofilik ke otak. Selain itu juga dapat meningkatkan aktivitas hepatoprotektif yang dapat dilihat pada gambar 2.
Gambar 2. Efek dari Cubosomes Coq10 Terhadap Fungsi Hepatoprotektif; A) ALT, B) AST, C) ALP Direct Bilirubin , Dibandingkan dengan Coq10. (Mohsen et al. , 2021)
Cubosomes yang  disusun  dengan  phytantriol  menunjukkan  tidak  adanya liposomes yang juga ikut terbentuk, sedangkan dengan menggunakan GMO terdapat liposomes didalamnya. Ukuran partikel dengan GMO yaitu 170  ± 16 nm, phytantriol sebesar  215  ±  10  nm (Jabłonowska et  al. ,  2021).  Menurut  (Shi et  al. ,  2017)  dengan perbedaan lipid menghasilkan karakteristik fisik yang berbeda yang terlihat pada tabel 1. Metode persiapan dengan Top down (TD) lebih dipilih dan fase kubik yang dihasilkan berbeda dikarenakan instrument yang digunakan, stabilizer dan jenis lipid seperti pada tabel 2.
Tabel 1. Ukuran Partikel, Zeta Potensial dan %EE dari GMO dan Phytantriol Cubosomes Lipid Ukuran partikel (nm) Zeta potensial (mV) EE (%) GMO 174,8± 4,9 -22,1±3,4 91,3 ± 3,4 phytantriol 225,9 ± 5,6 -14,0±2,1 86,6 ± 1,5 (Shi et al. , 2017)
p-ISSN: 2354-8487
Tabel 2. Komposisi dan Metode Preparasi Top Down Jenis lipid Stabilizer Metode preparasi Fase Glyceryl monooleate/ oleic acid Pluronic F127 High pressure emulsifier Primitive (Im3m), double diamond (Pn3m) Phosphatidylethanolamine/ glycerol monooleate Glyceryl monooleate- PEG660 Centrifugation/vortex double diamond (Pn3m) Glyceryl monooleate Phytantriol β -casein β -casein Ultra-sonication Primitive (Im3m) double diamond (Pn3m) RYLO MG19 glyceryl monooleate Pluronic F127 Vortex, microfluidizer, heat treatment Primitive (Im3m)
(Mulet, Boyd and Drummond, 2013)
Identifikasi cubosomes dengan menggunakan SAXS seperti pada gambar 3 dan gambar 5 didapatkan  peak-peak  yang  merupakan  karakteristik  dari cubosomes. Partikel  yang dihidrasi yang diformulasi dengan OVA (ovalbumin) kemudian dilihat menggunakan SAXS pada gambar 3 menunjukkan adanya peak pada posisi √2 : √3 : √4 : √6 : √8 : √9 yang  menunjukkan  pola  dari  karakteristik  fase  kubik  (Pn3m)  akan  tetapi  pada dry powder tidak terdapat peak. Cryo-TEM juga digunakan untuk identifikasi dengan hasil seperti pada gambar 4 dan gambar 6 yang menunjukan bentuk khas cubosomes.
Gambar 3 . Identifikasi dengan SAXS dari A) Dispersi Cubosomes Blanko, Quil-A, OVA, dan Quil-A + OVA. B) Spray Dried Powders dari Monoolein dan Dextran Blanko, Quil- A, OVA, dan Quil-A + OVA. (Von Halling Laier Et Al. , 2018)
Gambar 4. Gambar Cryo-TEM dari Hydrated Cubosomes yang Mengandung OVA and Quil-A. (Von Halling Laier Et Al. , 2018)
Gambar 5 . Struktur internal cubosomes yang disiapkan dengan (a) metode bottom-up (b) top-down (Akhlaghi et al., 2016)
Gambar 6. Gambar Cryo-TEM (a) cubosomes yang bercampur beberapa hexosomes (b) nanopartikel yang teratur dari inverted bicontinuous cubic phase . (Bessone et al. , 2021)
Karakteristik khas dari cubosomes dapat dilihat pada ukuran partikel dan zeta potensial  yang diidentifikasi  menggunakan Dynamic  Light Scattering .  Ukuran  partikel dan  zeta  potensial  yang  terlihat  pada  tabel  3  dengan  berbagai  macam  formulasi.
Menurut  von  Halling  Lasier et  al. formulasi cubosomes mengandung  OVA  dan  /atau Quil-A  dan  juga  blanko  (tanpa  OVA  dan  Quil-A).  Akhlaghi et  al. dengan  perbedaan metode  pembuatan  dan  juga  komposisi  lipid  dan stabilizer yang  berbeda,  sedangkan
perbedaan pada jumlah latanprost yang dimasukkan ke dalam cubosomes diteliti oleh Bessone et al.
Dapsone sebagai obat yang dimasukkan kedalam sistem cubosomes atau Dapsone Cubosomes  (DC)  dapat  dilihat  dari  perbedaan  formulasinya  pada  tabel  7  DC7  yang memiliki entrapment  efficiency paling  besar  93,7%(Nithya,  Jerold  and  Siram,  2018). Menurut Bessone et  al. Latanoprost yang dimasukkan ke dalam cubosomes memiliki persen entrapment efficiency berkisar antara 87% hingga 94% dengan konsentrasi yang berbeda seperti yang terlihat pada tabel 3. Menurut Shi et al. oridonin yang dimasukkan ke  dalam cubosomes memiliki entrapment  efficiency yang  berbeda.  Hal  tersebut diakibatkan oleh perbedaan lipid yang digunakan untuk menyusun cubosomes tersebut. Dengan GMO didapatkan EE yang lebih besar yaitu 91,3 ±3,4 % sedangkan phytantriol hanya 86,6±1,5%.
Tabel 2. Ukuran Partikel dan Zeta Potensial Formulasi Ukuran Partikel (nm) Zeta Potensial Sumber Blanko 134 ± 7 -43,6±0,4 (von Halling Laier et al. , 2018) Partikel dengan Quil-A 120±3 -17,0±1,0 Cubosomes dengan OVA 316±21 -20,9±0,4 Cubosomes dengan OVA dan Quil-A 257±8 -18,0±0,6
BU-0,5 330±50
-23±1 (Akhlaghi et al., 2016)
BU-1
300±20
-25±3 BU-2 330±60 -25±4 BU-4 320±60 -26±5 BU-9 300±70 -21±8 BU-18 320±150 -28±4 BU-49 330±80 -23±3 TD-0,5 190±5 -23±4 TD-1 153±5 -25±8 TD-2 180±3 -28±2 TD-4 203±4 -25±3
TD-9 290±30 -23±1 TD-18 290±40 -30±7 TD-49 270±40 -25±3 CubLnp 0,00125% w/v 207,9 ± 6,3 -24,5 ± 0,3 (Bessone et al. , 2021) CubLnp 0,0025% w/v 217,8±19,6 -24,7 ±0,1 CubLnp 0,005% w/v 207,2 ± 5,1 -23,3 ± 1,6 CubLnp 0,01% w/v 204,6 ± 1,6 -24,1 ± 0,9 CubLnp 0,02% w/v 209,3 ± 5,1 -24,5 ± 0,6 Tabel 3. Formulasi dan Hasil % Entrapment Efficiency Formula %EE Sumber DC1 84,3±2,7
(Nithya, Jerold and Siram, 2018) DC2 83,6±1,6 DC3 82,5±2,1 DC4 90,8±1,8 DC5 89,7±3,5 DC6 88,8±3,7 DC7 93,7±3,8 DC8 92,6±2,9 DC9 90,5±1,8 CubLnp 0,00125% w/v 87,46±2,92
(Bessone et al. , 2021) CubLnp 0,0025% w/v 89,01±1,63 CubLnp 0,005% w/v 90,90±0,84 CubLnp 0,01% w/v 92,24±2,73 CubLnp 0,02% w/v 94,00±3,16

## PEMBAHASAN
Cubosomes merupakan  struktur  nano  yang  kompleks  dari bicontinuous  cubic . Cubosomes memiliki struktur lipid bilayer dan kanal air yang tidak berpotongan atau saling bertemu membentuk dispersi koloidal. Cubosomes memiliki beberapa kelebihan yaitu dapat menjerap obat lipofil lebih banyak dibandingkan dengan liposome sehingga
dapat menjadi salah satu alternatif untuk obat yang akan dihantarkan menuju target obat pada organ-organ tubuh tertentu seperti otak.
Otak memiliki sawar darah otak yang lebih sulit ditembus. Obat  yang bersifat lipofilik dengan jumlah yang besar dapat masuk ke dalam otak dengan menembus blood- brain barrier lebih mudah, akan tetapi dapat menginduksi adanya drug efflux transporters seperti  P-glycoprotein  (P-gp)  yang  diekspresikan  pada  sel capillary  endothelial. P- glycoprotein  berfungsi  untuk  mempertahankan  organ  dari  senyawa  toksik  dan mengeluarkan  senyawa  tersebut  keluar,  sehingga  dengan  sistem  penghantaran  obat dengan cubosomes menghantarkan obat hingga ke otak dengan jumlah obat lipofilik yang besar  tanpa  mengurangi  absorpsi  obat  yang  diakibatkan. Cubosomes juga  dapat meningkatkan  aktivitas  hepatoprotektif  dari  CoQ10  dengan  tidak  adanya  perbedaan signifikan antara CoQ10 yang dimasukkan ke dalam cubosome dengan formula F5 dan grup control (normal) dengan cara memproteksi hati sehingga jaringan pada hati tidak dirusak oleh Thioacetamide (TAA) dan mempertahankan serum level enzim agar tetap pada range normal. Cubosomes memiliki area permukaan yang luas, kemampuan untuk memuat molekul hidrofilik pada bagian aqueous. Pada molekul hidrofobik dimuat pada bagian rantai lipid dan molekul ampifilik pada bagian bilayer. Sifat viskoelastik juga dimiliki cubosomes yang menunjukkan karakteristik viskos dan elastis ketika mengalami deformasi  sehingga  dapat  menstabilkan  molekul.  Selain  itu  juga  memiliki  kemiripan dengan struktur biomembran sehingga dapat menembus membran lebih mudah.
Cubosomes tersusun  oleh  lipid  ampifilik  seperti  GMO  atau  phytantriol.
Penggunaan  lipid  yang  berbeda  memberikan  dampak  terhadap cubosomes yang dihasilkan.  Pada  GMO  ukuran  partikel  yang  dihasilkan  lebih  kecil  dibandingkan dengan phytantriol dan zeta potensial GMO lebih besar daripada phytantriol sehingga lebih stabil. Selain itu entrapment efficiency GMO juga lebih besar. Akan tetapi dengan ditemukannya liposome diantara cubosomes yang tersusun oleh GMO, sedangkan pada phytantriol  mayoritas  merupakan cubosomes menjadi  salah  satu  kelemahan  GMO dibandingkan dengan phytantriol sebagai penyusun cubosomes.
Terdapat  dua  metode  yang  digunakan  untuk  pembuatan cubosomes yaitu top- down dan bottom-up . Perbedaan dari kedua metode tersebut terdapat pada penggunaan ultrasonicator  dan  juga  penambahan  ethanol  sebagai hydrotrope .  Penggunaan  energi yang lebih besar pada metode top-down dikarenakan adanya pengecilan ukuran. Sampel BU-4 dan TD 4 dipilih untuk diidentifikasi lebih lanjut dikarenakan pada sampel yang lain peaks yang menunjukan fase kubik menghilang diduga akibat dari jumlah F127 yang
besar  sehingga  terbentuk mixed micelle  yang  lebih  kecil  dari cubosomes yang menyebabkan  larutan  terlihat  transparan.  Setelah  diidentifikasi  dengan  Cryo-TEM dapat  dilihat  bahwa  terdapat  liposome  pada  kedua  metode  tersebut,  akan  tetapi liposome  lebih  banyak ditemukan  pada metode Bottom  up (BU).  Hal  ini dikarenakan pada metode BU, cubosomes terbentuk secara spontan dikarenakan adanya perbedaan difusi molekul pada larutan/ permukaan larutan. Selain itu juga bisa disebabkan oleh evaporasi  etanol  yang  menyebabkan  terbentuknya  bilamellar  liposomes  (Kim et  al. ). Metode TD diketahui sebagai metode yang dapat memperkecil ukuran partikel. Metode Top-down (TD)  lebih  dipilih  dikarenakan  pada  metode  BU  sulit  untuk  mengontrol distribusi  ukuran  partikel  yang  diinginkan.  Perbedaan  jenis  lipid,  stabilizer  dan juga metode preparasi (dengan alat yang berbeda) dapat mempengaruhi fase cubosome yang dihasilkan.
Cubosomes yang  dihasilkan  dapat  diidentifikasi  melalui  karakteristiknya  yang khas dengan menggunakan instrumen cryo-TEM. Karakteristik berikutnya yang diuji yaitu kristalinitas. Kristalinitas dapat dikarakterisasi menggunakan SAXS menghasilkan peaks yang  menunjukkan  fase  kubik. Peaks yang  menunjukkan  bahwa  fase  tersebut merupakan cubosomes yaitu pada posisi posisi √2 : √3 : √4 .
Cubosomes merupakan bentukan nanopartikel yang memiliki ukuran antara 10- 500  nm.  Parameter  karakterisasi  berupa  ukuran  pratikel  dan  potensial  zeta  diukur dengan  menggunakan  instrument Dinamic  Light  Scattering  (DLS) . Polydispersity  index cubosomes 0,1-1,0  yang  juga  diidentifikasi  menggunakan  DLS.  Potensial  zeta menunjukkan kestabilan suatu partikel yang dikatan stabil ketika nilainya besar dengan mengabaikan  muatan  positif  maupun  negatif.  Penggunaan  sistem  penghantaran cubosomes dapat meningkatkan nilai zeta potensial. Jika suatu partikel stabil, maka tidak akan mudah berubah hanya dengan sedikit perbedaan pada lingkungannya.
Sistem  penghantaran  obat  diharapkan  memiliki  kemampuan  menjebak  obat lebih  tinggi,  dan  kemudian  mampu  melepaskan  obat  pada  target.  Kemampuan menjebak  obat  tersebut  dapat  ditentukan  dengan  persen entrapment  efficiency .
Entrapment efficiency berada pada rentang 82.5 ± 2.1 hingga 93.7 ± 3.8% dengan formula DC7  yang  memiliki entrapment  efficiency paling  besar  yaitu  93,7%  dengan  komposisi GMO sebanyak 5%, poloxamer 407 sebanyak 0,5% dan dapsone. Pembuatan cubosomes dengan phytantriol dan latanoprost memiliki Entrapment efficiency pada rentang 87% hingga  94%.  Masing-masing  formula  memiliki  bahan  aktif  yang  berbeda  akan  tetapi
sama-sama  merupakan  BCS  kelas  II  (dapsone  BCS  kelas  II/IV,  latanoprost  II berdasarkan  BCS  database).  Penggunaan  lipid  yang  berbeda  juga  mempengaruhi entrapment  efficiency akan  tetapi  masih  menjebak  mayoritas  obat. Entrapment  efficiency didapatkan dengan mengidentifikasi obat yang tidak terjebak. %EE yang tinggi dapat menjadi salah satu parameter bahwa sistem cubosomes dapat dipertimbangkan sebagai sistem yang dapat membantu obat dengan kelarutan rendah sampai pada target obat dengan jumlah obat maksimum yang diinginkan, selain itu organ yang berfungsi untuk memetabolisme obat tidak bekerja terlalu keras yang dapat mengakibatkan kerusakan organ  tersebut.  Penggunaan  lipid  yang  berbeda  ( phytantirol atau  GMO)  tidak mempengaruhi adanya kenaikan atau penurunan entrapment efficiency secara signifikan .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  review  artikel  yang  dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  hasil karakteristik yang khas dari cubosomes yaitu berbentuk kubik dengan ukuran partikel 100-500 nm dan nilai zeta potential ± 30 mV. Nilai zeta potential tersebut menunjukkan bahwa  cubosomes  tersebut  stabil  secara  termodinamika,  dan  menunjukkan  tidak adanya  pemisahan  sistem.  Sedangkan  untuk  entrapment  efficiency  dihasilkan  ±  90% yang menunjukkan sebagian besar obat dapat masuk ke dalam sistem.

## DAFTAR PUSTAKA
Akbar S., Anwar A., Ayish A., Elliott J., Squires A. (2017) “Phytantriol based smart nano- carriers for drug delivery applications,” European Journal of Pharmaceutical Sciences , 101, pp. 31 – 42. doi:10.1016/j.ejps.2017.01.035.
Akhlaghi S., Ribeiro I., Boyd B., Loh W. (2016) “Impact of preparation method and variables on the internal structure, morphology, and presence of liposomes in phytantriol- Pluronic® F127 cubosomes,” Colloids and Surfaces B: Biointerfaces , 145, pp. 845 – 853. doi:10.1016/j.colsurfb.2016.05.091.
Andrienko, D. (2018) “Introduction to liquid crystals,” Journal of Molecular Liquids , 267, pp. 520 – 541. doi:10.1016/j.molliq.2018.01.175.
Azhari H., Starauss M., Hook S., Boyd B., Rizwan S . (2016) “Stabilising cubosomes with Tween 80 as a step towards targeting lipid nanocarriers to the blood-brain barrier,” European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics , 104, pp. 148 – 155. doi:10.1016/j.ejpb.2016.05.001.
Barriga, H.M.G., Holme, M.N. and Stevens, M.M. (2019) “Cubosomes: The Next Generation of Smart Lipid Nanoparticles?,” Angewandte Chemie - International Edition , 58(10), pp. 2958 – 2978. doi:10.1002/anie.201804067.
Bessone, C.D.V., Akhlaghi S., Tartara L., Quinteros D., Loh W., Allemandi D . (2021) “Latanoprost - loaded phytantriol cubosomes for the treatment of glaucoma,” European Journal of Pharmaceutical Sciences , 160. doi:10.1016/j.ejps.2021.105748.
Boldon, L., Laliberte, F. and Liu, L. (2015) “Review of the fundamental theories behind small angle X-ray scattering, molecular dynamics simulations, and relevant integrated application,” Nano Reviews , 6(1), p. 25661.
doi:10.3402/nano.v6.25661.
Bryant, S.J., Bathke, E.K. and Edler, K.J. (2021) “Bottom -up cubosome synthesis without org anic solvents,” Journal of Colloid and Interface Science , 601, pp. 98 – 105. doi:10.1016/j.jcis.2021.05.072.
Chime, A. (2013) “Lipid -based drug delivery systems (LDDS): Recent advances and applications of lipids in drug delivery,” African Journal of Pharmacy and Pharmacology , 7(48), pp. 3034 – 3059. doi:10.5897/ajppx2013.0004.
Flak, D.K., Adamski V., Szutkowski K., Synowitz M., Jurga S., Held-Feindt J . (2020) “At101 -loaded cubosomes as an alternative for improved glioblastoma therapy,” International Journal of Nanomedicine , 15, pp. 7415 – 7431. doi:10.2147/IJN.S265061.
Fornasier, M., Biffi S., Bortot B., Macor P., Manhart A., Wurm F., Muriga S . (2020) “Cubosomes stabilized by a polyphosphoester -analog of Pluronic F127 with reduced cytotoxicity,” Journal of Colloid and Interface Science , 580, pp. 286 – 297. doi:10.1016/j.jcis.2020.07.038.
Fuhr, M. (2016) “An Overview on the Study of English and Other Languages in Brazil,” The Warwcik ELT Ezine , 12(31), pp. 1 – 3. Available at:
https://thewarwickeltezine.wordpress.com/2016/12/31/74/ .
Gaballa, S.A., el Garhy, O.H. and Abdelkader, H. (2019) Cubosomes: composition, preparation, and drug delivery applications . Available at: http://jabps.journals.ekb.eg .
von Halling Laier, C., Gibson B., van de Weert M., Boyd B., Rades T., Boisen A., Hook S., Nielsen L . (2018) “Spray drie d cubosomes with ovalbumin and Quil-A as a nanoparticulate dry powder vaccine formulation,” International Journal of Pharmaceutics , 550(1 – 2), pp. 35 – 44. doi:10.1016/j.ijpharm.2018.08.036.
Jabłonowska, E. , Matyeszewska D., Nazaruk E., Godlewska M., Gawe ł D., Bilewicz R .
(2021) “Lipid membranes exposed to dispersions of phytantriol and monoolein cubosomes: Langmuir monolayer and HeLa cell membrane studies,” Biochimica et Biophysica Acta - General Subjects , 1865(1). doi:10.1016/j.bbagen.2020.129738.
Karami , Z. and Hamidi, M. (2016) “Cubosomes: Remarkable drug delivery potential,” Drug Discovery Today , 21(5), pp. 789 – 801. doi:10.1016/j.drudis.2016.01.004.
Karmakar, S. (2019) “Particle Size Distribution and Zeta Potential Based on Dynamic Light Scattering : Techniques to Characterise Stability and Surface distribution
of Charged Colloids Particle Size Distribution and Zeta Potential Based on Dynamic Light Scattering : Technique, ” Recent Trends in Materials: Physics and Chemistry , (January), pp. 117 – 159.
Kulkarni, C. v., Vishwapathi V., Quarshie A., Moinuddin Z., Page J., Kendrekar P., Mashele S . (2017) “Self -Assembled Lipid Cubic Phase and Cubosomes for the Delivery of Aspirin as a Model Drug,” Langmuir , 33(38), pp. 9907 – 9915. doi:10.1021/acs.langmuir.7b02486.
Kwon, T.K., Hong, S.K. and Kim, J.C. (2012) “In vitro skin permeation of cubosomes containing triclosan,” Journal of Industrial and Engineering Chemistry , 18(1), pp. 563 – 567. doi:10.1016/j.jiec.2011.11.031.
Limited, M.I. (2011) “Zeta potential: An Introduction in 30 minutes,” Zetasizer Nano Serles Technical Note. MRK654-01 , 2, pp. 1 – 6. Available at:
http://scholar.google.com/scholar?hl=en&btnG=Search&q=intitle:Zeta+Potent ial+An+Introduction+in+30+Minutes#0 .
Mei, L., Xie Y., Jing H., Huang Y., Chen J., Ran H., Pan X., Wu C . (2017) “A novel design for stable self-assembly cubosome precursor-microparticles enhancing dissolution of insoluble drugs,” Drug Development and Industrial Pharmacy , 43(8), pp. 1239 – 1243. doi:10.1080/03639045.2017.1304958.
Mohsen, A.M., Younis M., Salama A., Darwish A . (2021) “Cubosomes as a Potential Oral Drug Delivery System for Enhancing the Hepatoprotective Effect of Coenzyme Q10,” Journal of Pharmaceutical Sciences , 110(7), pp. 2677 – 2686. doi:10.1016/j.xphs.2021.02.007.
Mulet, X., Boyd, B.J. and Dr ummond, C.J. (2013) “Advances in drug delivery and medical imaging using colloidal lyotropic liquid crystalline dispersions,” Journal of Colloid and Interface Science , 393(1), pp. 1 – 20. doi:10.1016/j.jcis.2012.10.014.
NAVEENTAJ, S. and MUZIB, Y.I. (2020) “a Review on Liquid Crystalline Nanoparticles (Cubosomes): Emerging Nanoparticulate Drug Carrier,” International Journal of Current Pharmaceutical Research , 12(1), pp. 5 – 9. doi:10.22159/ijcpr.2020v12i1.36820.
Nithya, R., Jerold, P. and Siram, K. (2018) “Cubosomes of dapsone enhanced permeation across the skin,” Journal of Drug Delivery Science and Technology , 48, pp. 75 – 81. doi:10.1016/j.jddst.2018.09.002.
Shi, X., Peng T., Huang Y., Mei L., Gu Y., Huang J., Han K., Li G., Hu C., Pan X., Wu C . (2017) “Comparative studies on glycerol monooleate - and phytantriol-based cubosomes containing oridonin in vitro and in vivo,” Pharmaceutical Development and Technology , 22(3), pp. 322 – 329. doi:10.3109/10837450.2015.1121496.
Sung, B. and Kim, M.H. (2018) “Liquid -crystalline nanoarchitectures for tissue engineering,” Beilstein Journal of Nanotechnology . Beilstein-Institut Zur
Forderung der Chemischen Wissenschaften, pp. 205 – 215. doi:10.3762/bjnano.9.22.
Tizro, P., Choi, C . and Khanlou, N. (2019) “Sample preparation for transmission electron microscopy,” Methods in Molecular Biology , 1897, pp. 417 – 424. doi:10.1007/978-1-4939-8935-5_33.
Winkler, R., Buchecker T., Hastreiter F., Touraud D., Kunz W . (2017) “PPh4Cl in aqueous solution - The aggregation behavior of an antagonistic salt,” Physical Chemistry Chemical Physics , 19(37), pp. 25463 – 25470. doi:10.1039/c7cp02677c.
Yasser, M. Teaima M., El-Nabarawi M., El-Monem R . (2019) “Cubosomal based oral tablet for controlled drug delivery of telmisartan: formulation, in-vitro evaluation and in- vivo comparative pharmacokinetic study in rabbits,” Drug Development and Industrial Pharmacy , 45(6), pp. 981 – 994. doi:10.1080/03639045.2019.1590392.