## AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL TANGKAI
( Begonia multangular Blume Stalk ) TERHADAP PERTUMBUHAN
( Aggregatibacter actinomycetemcomitans)
ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF ( Begonia multangula Blume Stalk) ETHANOLIC EXTRACT AGAINTS THE GROWTH OF
( Aggregatibacter actinomycetemcomitans )
Dwi Nur Indah Sari 1 *, Christiana Cahyani Prihastuti 1 , Restian Febi Andini 1 , Aldina Gusri 1 , Muhammad Hisyam Ghani 1 , Haidy Lailatun Nabila 1 ,
1 Jurusan Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman Jalan Dr. Soeparno, Kampus Karangwangkal Gedung E, Purwokerto Utara,
Jawa Tengah, Indonesia

## ABSTRAK
Periodontitis  adalah  penyakit  gigi  dan  mulut  yang  paling  sering  ditemukan  pada masyarakat  dan  dapat  menyebabkan  tanggalnya  gigi.  Salah  satu  bakteri  penyebab periodontitis  adalah Aggregatibacter  actinomycetemcomitans .  Perawatan  periodontitis dilakukan  dengan  terapi  mekanik  ( scaling  and  root  planning) disertai  terapi  kimiawi (antibiotik  dan  obat  kumur).  Penggunaan  terapi  kimiawi  yang  berkepanjangan  dapat menyebabkan  resistensi  bakteri,  gangguan  pengecapan  dan  perubahan  warna  gigi. Alternatifnya  dapat  digunakan  bahan  herbal  yang  memiliki  daya  antibakteri  Tangkai Begonia  multangula Blume di  beberapa  wilayah  digunakan  sebagai  tanaman  obat  serta memiliki  aktivitas  antibakteri.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  tangkai Begonia  multangula Blume terhadap  pertumbuhan A. actinomycetemcomitans secara  in  vitro.  Penelitian  dilakukan  secara  eksperimental laboratoris  dengan  sampel A.  actinomycetemcomitans ATCC  43718.  Tangkai Begonia multangula Blume diekstraksi menggunakan metode maserasi dan dibuat 5 seri konsentrasi (3,12%,  6,25%,  12,5%,  25%,  dan  50%).  Uji  antibakteri  dilakukan  metode  difusi  kertas cakram  dengan  kontrol  positif Chlorhexidine  gluconate 2%  serta  kontrol  negatif  DMSO 1%.  Diameter  zona  hambat  selanjutnya  dianalisis  statistik.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  tangkai Begonia  multangula Blume meningkat seiring  peningkatan  konsentrasi  dengan  aktivitas  tertinggi  pada  konsentrasi  50%  dengan zona  hambat  sebesar  20,33  mm  (p<0,05).  Simpulan  dalam  penelitian  ini  bahwa  ekstrak etanol  tangkai Begonia  multangula Blume memiliki  aktivitas  sebagai  antibakteri A. actinomycetemcomitans .
Kata  kunci : Aggregatibacter  actinomycetemcomitans ,  antibakteri,  ekstrak  etanol  tangkai Begonia multangula Blume , periodontitis
aktivitas antibakteri ekstrak etanol tangkai ( begonia multangular blume) terhadap pertumbuhan aggregatibacter actinomycetemcomitan ( dwi nur indah sari)

## ABSTRACT
Periodontitis  is the  most common  dental and  oral  disease found  in  society  and  can cause  tooth  loss.  One  of  the  bacteria  that  causes  periodontitis  is  Aggregatibacter actinomycetemcomitans.  Periodontitis  treatment  is  carried  out  by  mechanical  therapy (scaling  and  root  planning)  accompanied  by  chemical  therapy  (antibiotics  and mouthwash). But, prolonged use of chemical therapy can cause resistance, impaired taste and discolored teeth. Herbal ingredients that have antibacterial properties can be used as an alternative. Begonia multangula Blume stalks are used in several areas as a medicinal plant  and  have  antibacterial  activity.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the antibacterial  activity  of  B.  multangula  Blume  stalk  extract  on  the  growth  of  A. actinomycetemcomitans  in  vitro.  The  study  was  conducted  in  an  experimental  laboratory with  A.  actinomycetemcomitans  ATCC  43718  as  a  sample.  Begonia  multangula  Blume stalks were extracted using the maceration method and 5 concentration series were made (3.12%, 6.25%, 12.5%, 25% and 50%). The antibacterial test was carried out by the paper disc  diffusion  method  with  a  positive  control  of  2%  Chlorhexidine  gluconate  and  a negative  control  of  1%  DMSO.  The  diameter  of  the  inhibition  zone  was  then  statistically analyzed.  The  results  showed  that  the  antibacterial  activity  of  B.  multangula Blume  stem extract  increased  with  increasing  concentration  with  the  highest  activity  at  50% concentration  with  an  inhibition  zone  of  20.33  mm  (p<0.05).  The  conclusion  of  this research was the ethanolic extract of B. multangula Blume stalk has antibacterial activity against A. actinomycetemcomitans.
Keywords :  antibacterial,  Aggregatibacter  actinomycetemcomitans,  ethanolic  extract  of Begonia multangula Blume stalk, periodontitis .
Penulis korespondesi:
Nama : Dwi Nur Indah Sari Jurusan Kedokteran Gigi, Fakultas Kedokteran, Universitas Jenderal Soedirman Jalan Dr. Soeparno, Kampus  Karangwangkal Gedung E, Purwokerto Utara, Jawa Tengah, Indonesia Email : dwi.nurindahsari@unsoed.ac.id

## PENDAHULUAN
Periodontitis  adalah  salah  satu  penyakit  gigi  dan  mulut  yang  paling  sering ditemukan  pada  masyarakat  dunia,  termasuk  di  Indonesia. World  Health  Organization (WHO)  melaporkan  bahwa  periodontitis  memiliki  prevalensi  yang  cukup  tinggi  baik  di negara maju maupun negeara berkembang. Prevalensi periodontitis di negara maju berkisar antara 14-47%, sedangkan di negara berkembang prevalensi periodontitis cenderung lebih tinggi yaitu 36-63% (Nazir, 2017) Di Indonesia, menurut data Riset Kesehatan Dasar 2018 angka  prevalensi  periodontitis  mencapai  74,1%  (Kementerian  Kesehatan  Republik Indonesia, 2018).
Periodontitis  merupakan  penyakit  inflamasi  destruktif  yang  menyerang  jaringan periodontal  akibat  adanya  infeksi  bakteri  periopatogen.  Periodontitis  dapat  menyebabkan
terbentuknya  poket  periodontal,  resesi  gingiva,  hingga  tanggalnya  gigi  (Newman et  al , 2019). Etiologi utama penyakit periodontitis adalah adanya plak gigi  yang terbentuk oleh berbagai bakteri rongga mulut. Aggregatibacter actinomycetemcomitans merupakan salah satu  bakteri  dominan  penyebab  periodontitis,  khususnya  periodontitis  agresif  yang menyebabkan  kerusakan  jaringan  periodontal  secara  progresif  (Ridhwana,  2020). Aggregatibacter  actinomycetemcomitans termasuk  dalam  bakteri  anaerob  Gram  negatif yang  mampu  memproduksi  toksin  yang  menyebabkan  respon  imun  yang  berlebihan  dan berdampak  terhadap  destruksi  jaringan  serta  degradasi  kolagen  yang  berlebihan  pada jaringan periodontal.
Perawatan  untuk  penyakit  periodontitis  saat  ini  dilakukan  secara  mekanis  dan kimiawi.  Perawatan  mekanis  periodontitis  dilakukan  dengan  melakukan scaling  and  root planning ,  sedangkan  perawatan  kimiawi  dapat  dilakukan  dengan  antibiotik  maupun  obat kumur  (Newman et  al ,  2019). Chlorhexidine  gluconate 0,2%  merupakan gold  standard untuk  obat  kumur  yang  digunakan  dalam  perawatan  periodontitis  sebagai  antiplak  dan antigingivitis  (Balagopal  dan  Arjunkumar,  2013). Chlorhexidine gluconat e  digunakan untuk mengontrol pertumbuhan bakteri plak gigi namun pada penggunaan jangka panjang dapat  menyebbakan  beberapa  efek  samping  seperti  discolorisasi  pada  gigi,  terganggunya indera  perasa,  mulut  kering,  dan  reaksi  alergi.  Selain  itu, Chlorhexidine  gluconate memiliki kontraindikasi jika digunakan pada anak-anak (Vahabi et al ., 2019). Penggunaan bahan  alam  dapat  menjadi  alternatif  dalam  menghambat  bakteri  patogen  rongga  mulut dengan  efek  samping  yang  minimal  (Nurrahman  dan  Widyarman,  2020).  Salah  satu tanaman yang memiliki potensi sebagai antibakteri adalah Begonia multangula Blume .
Begonia  multangula  Blume .  merupakan  salah  satu  spesies  dari  family Begoniaceae yang  tumbuh  liar  menyebar  di  daaerah  tropis  dan  subtropis  termasuk  di wilayah  Gunung  Slamet  Baturaden  Banyumas.  Efendi  (2019)  melaporkan  bahwa B. multangula  Blume dimanfaatkan  oleh  masyarakat  sebagai  tanaman  obat.  Hal  ini dikarenakan  tanaman  begonia  pada  umumnya  mengandung  senyawa  aktif  seperti flavonoid, tanin, saponin, dan terpenoid yang dapat berperan sebagai antibakteri. Penelitian oleh Siregar et al . (2009) menunjukkan bahwa ekstrak Begonia multangula Blume dengan konsentrasi  50  μg,  100  μg,  dan  200  μg  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap S.  aureus dengan diameter zona hambat yang terbentuk  secara berurutan  sebesar 7 mm, 7 mm, dan 10  mm.  Penelitian  lain  mengenai B.  multangula  Blume telah  dilakukan  oleh  Putri et  al (2019).  Pada  penelitian  tersebut,  peneliti  membandingkan  aktivitas  antibakteri  antara tangkai  dengan  daun  dari Begonia  multangula  Blume terhadap  bakteri Porphyromonas gingivalis . Hasilnya menunjukkan bahwa ekstrak etanol dari tangkai B. multangula Blume lebih efektif menghambat pertumbuhan bakteri P.gingivalis dibandingkan ekstrak daunnya. Bakteri P.  gingivalis dan A.actinomycetemcomitans memiliki  kesamaan  berupa  Gram negatif  anaerob  dan  keduanya  bakteri  utama  periopatogen.    Berdasarkan  hal  tersebut, diperlukan penelitian lebih lanjut mengenai aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol tangkai B. multangula Blume terhadap bakteri periopatogen A.actinomycetemcomitans

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  secara  eksperimental  laboratoris  dengan  rancangan post- test  only kontrol group .  Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi  Farmasi  Jurusan Farmasi  Fakultas  Ilmu  Kesehatan  Universitas  Jenderal  Soedirman  untuk  proses  ekstraksi
aktivitas antibakteri ekstrak etanol tangkai ( begonia multangular blume) terhadap pertumbuhan aggregatibacter actinomycetemcomitan ( dwi nur indah sari)
tangkai B.  multangula  Blume dan  di  Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Kedokteran Universitas  Jenderal  Soedirman  untuk  uji  antibakteri  tangkai B.  multangula  Blume terhadap pertumbuhan A.actinomicetemcomitans.
Tangkai B.  multangula  Blume yang  digunakan  pada  penelitian  ini  berasal  dari Kebun Raya Baturaden, Banyumas, Jawa Tengah. Sampel bakteri A.actinomycetemcomitans ATCC  4371  didapatkan  dari  Laboratorium  Mikrobiologi Fakultas  Kedokteran  Gigi  Universitas  Airlangga,  Surabaya  Jawa  Timur. Kelompok penelitian  terdiri  5  kelompok  perlakuan  ekstrak  etanol  tangkai B.  multangula  Blume dengan berbagai konsentrasi (3, 12%, 6,25%, 12,5%, 25%, 50%) dan 2 kelompok kontrol yaitu  kontrol  negatif  (DMSO  1%)  dan  kontrol  positif  ( Chlorhexidine  gluconate 0,2%). Tiap perlakuan dilakukan ulangan sebanyak tiga kali.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  pada  penelitian  ini  terdiri  dari  oven,  blender,  toples  kaca, penangas  air,  cawan  petri,  jarum  ose,  bunsen,  autoklaf,  inkubator  CO 2 ,  neraca  digital, mikropipet, gelas ukur dan tabung reaksi Bahan  yang digunakan  terdiri tangkai B. multangula Blume , etanol 96%, akuades, kultur  bakteri Aggregatibacter  actinomycetemcomitans ATCC  43718, chlorhexidine gluconat 0,2%  (Minosep,  Depok),  Media  Mueller  Hinton  Agar  (Himeda,  India), Brain Heart Infusion (Himeda, India), blank disk (Oxoid, UK) , DMSO (merck, Jerman).

## Jalannya Penelitian 1. Pembuatan ekstrak
Proses  pembuatan  ekstrak  etanol  tangkai B.  multangula  Blume dilakukan  dengan metode  maserasi.  Tangkai B.  multangula  Blume sebanyak  1  kg  dicuci  hingga  bersih kemudian  dijemur  di  bawah  sinar  matahari  selama  ±  10  jam.  Tangkai B.  multangula Blume yang  sudah  dijemur  kemudian  di  oven  selama  ±  10  menit  dengan  suhu  70  ºC. Tangkai yang sudah kering dihaluskan menggunakan blender. 10 g tangkai yang sudah dihaluskan kemudian direndam dalam 100 mL akuades dan 100 mL etanol 96% selama 3x24  jam  pada  suhu  ruang  tanpa  cahaya  matahari.  Pelarut  yang  digunakan  setelah  48 jam  diganti  dengan  cara  menyaring  filtrat.  Hasil  saringan  pertama,  kedua,  dan  ketiga disatukan  ke  dalam  wadah  untuk  diuapkan  pelarutnya  menggunakan  penangas  dengan suhu  70ºC  hingga  diperoleh  ekstrak  sebanyak  setengah  dari  volume  awal  (Putri et  al , 2019).
2. Skrining Fitokimia
1. Uji Flavonoid Ekstrak  etanol  tangkai B.  multangula  Blume ditimbang  sebanyak  10  mg  dan ditambah  5  ml  etanol.  Selanjutnya  ke  dalam  larutan  tadi  diteteskan  larutan  FeCl 3 hingga  terjadi  perubahan  warna.  Hasil  positif  adanya  senyawa  flavonoid  pada ekstrak  ditunjukkan  dengan  perubahan  warna  menjadi  biru,  ungu,  hijau,  merah maupun hitam. Apabila sampai 20 tetes FeCl3 tidak terjadi perubahan warna, maka hasil dinyatakan tidak mengandung flavonoid (Kumalasari dan Andriana, 2020).
2. Uji Tanin Ekstrak etanol tangkai B. multangula Blume ditimbang sebanyak 0,5 gr. Ekstrak selanjutnya  ditambahkan  ke  dalam  20  ml  akuades  di  dalam  tabung  reaksi  dan direbus hingga larut. Larutan disaring dan ditambahkan beberapa tetes 0,1% FeCl 3
sampai berubah warna. Hasil dinyatakan mengandung tanin jika terjadi perubahan warna hijau kecoklatan atau warna biru hitam (Kumalasari dan Andriana, 2020).
3. Uji Alkaloid
Ekstrak etanol tangkai B. multangula Blume sebanyak 10 mg ditambah 10 mL HCl  dipanaskan  selama  2  menit  dan  diaduk.  Setelah  dingin,  saring  campuran ekstrak  etanol  tangkai B.  multangula  Blume dan  HCl.  Kemudian  filtrat  dilarutkan dengan  5  mL  HCl  2  N.  Selanjutnya  disiapkan  tiga  tabung  reaksi  dan  masukkan larutan  residu  yang  didapatkan.  Tabung  pertama  ditambahkan  dengan  HCl  2  N yang  berfungsi  sebagai  blanko.  Tabung  kedia  ditambahkan  pereaksi  Dragendroff sebanyak 3 tetes dan tabung ketiga ditambahkan pereaksi  Mayer sebanyak 3 tetes. Ekstrak  dinyatakab  menngandung  alkaloid  jika  terbentuk  endapan  jingga  pada tabung  kedua  dan  endapan  putih  hingga  kekuningan  pada  tabung  ketiga (Kumalasari dan Andriana, 2020).
4. Uji Saponin
Ekstrak  etanol  tangkai B.  multangula  Blume ditimbang  sebanyak  0,5  gram selanjutnya  ditambahkan  aquadestilata  sebanyak  5  ml,  kemudian  dipanaskan selama 2 hingga 3 menit. Setelah larutan dingin dilakukan pengocokan secara kuat. Ekstrak dinyatakan mengandung saponin jika terbentuk busa yang stabil dan setelah ditambahkan 1 tetes HCl 2N, busa tidak hilang (Kumalasari dan Andriana, 2020).
5. Uji Terpenoid Ekstrak etanol tangkai B. multangula Blume ditimbang sebanyak 2 gram lalu di tambahkan 10 mL etanol dan dipanaskan. Larutan disaring dan diambil sebanyak 5 mL.  Selanjutnya  klorofom  sebanyak  2  mL  dan  asam  sulfat  sebanyak  3  mL ditambahkan  dalam  larutan  tersebut.  Ekstrak  dinyatakan  mengandung  terpenoid jika terbentuk cincin kecoklatan atau violet pada perbatasan dua pelarut (Supriyanto et al ., 2017).
3. Pembuatan larutan uji antibakteri
Pada penelitian ini dilakukan uji antibakteri ekstrak etanol tangkai B.multangula Blume dengan  konsentrasi  3,125%,  6,25%¸12,5%,  25%,  dan  50%  yang  dibuat  melalui pengenceran dengan larutan DMSO 1%. Pembuatan konsentrasi yang dilakukan sesuai dengan rumus sebagai berikut:
V1 x N1 =V2 x N2
V1 = Volume_larutan yang akan diencerkan (ml) N1= Konsentrasi ekstrak yang tersedia (%) V2= Volume larutan (air dan ekstrak) yang diinginkan N2= Konsentrasi ekstrak yang akan dibuat (%)
Selain  larutan  ekstrak,  disiapkan  pula  larutan Chlorhexidine  gluconate 0,2%  yang digunakan  sebagai  kontrol  positif  dan  larutan  DMSO  1%  yang  digunakan  sebagai kontrol negatif
4. Pembuatan suspensi bakteri Bakteri A.actinomycetemcomitans yang akan digunakan untuk uji antibakteri dilakukan peremajaan terlebih dahulu. Sebanyak 1-3 ose A. actinomycetemcomitans ditumbuhkan pada  media  MRSA  dengan  metode streak T  kemudian  diinkubasi  secara  anaerob  di inkubator CO 2 pada suhu 37°C selama 24 jam. Bakteri A.actinomycetemcomitans hasil
aktivitas antibakteri ekstrak etanol tangkai ( begonia multangular blume) terhadap pertumbuhan aggregatibacter actinomycetemcomitan ( dwi nur indah sari)
peremajaan  selanjutnya  diambil  1  ose  dan  ditanam  pada  media  BHIB,  kemudian diinkubasi  secara  anaerob  di inkubator  CO 2 pada  suhu  37°C  selama  24  jam.  Suspensi tersebut  selanjutnya  diencerkan  dengan  akuades  steril  sampai  kekeruhan  mencapai standar McFarland 0,5 (Pargaputri et al , 2017).
5. Uji Antibakteri
Uji  efektivitas  ekstrak  etanol  tangkai B.multangula  Blume dalam  menghambat pertumbuhan bakteri A.actinomycetemcomitans dilakukan uji difusi kertas cakram pada media  MHA.  Uji  antibakteri  dilakukan  dengan  tiga  kali  ulangan.  Suspensi A. actinomycetemcomitans sebanyak 0,1 mL disebar pada cawan petri yang berisi media MHA.  Selanjutnya,  sebanyak  15μl  ekstrak  etanol B.multangula  Blume dari  tiap konsentrasi yang telah ditentukan diteteskan pada kertas cakram steril. Hal yang sama juga dilakukan untuk kontrol positif ( chlorhexidine gluconat 0,2%) dan kontrol negatif (DMSO 1%). Kertas cakram yang telah ditetesi larutan uji selanjutnya diletakkan pada permukaan  media  MHA  yang  telah  diinokulasikan A.  actinomycetemcomitans, secara aseptis  menggunakan  pinset  steril.  Media  tersebut  diinkubasi  di  inkubator  CO 2 pada suhu 37°C selama 24 jam. Daerah jernih di sekitar kertas cakram menunjukkan adanya daerah penghambatan pertumbuhan bakteri A. actinomycetemcomitans . Diameter zona hambat diukur dalam satuan milimeter (mm).

## Analisis Data
Data  rerata  diameter  zona  hambat  selanjutnya  diinterpretasikan  berdasarkan klasifikasi Davis dan Stout (Tabel I) serta analisis statistik. Analisis berdasarkan klasifikasi Davis dan Stout dilakukan untuk mengetahui kategori kemampuan daya hambat larutan uji. Analisis  statistik  dilakukan  untuk  mengetahui  perbedaan  efektifitas  antibakteri  ekstrak B.multangula  Blume dalam  menghambat  bakteri A.  actinomycetemcomitans tiap konsentrasi . Analisis  statistic  dilakukan  dengan  uji  nonparametric  uji  Kruskal-Wallis  dan uji post hoc Mann-Whitney karena data yang didapatkan tidak terdistribusi normal.
Tabel 1. Klasifikasi Davis dan Stout Diameter Zona Hambat (mm) Kategori Kemampuan Daya Hambat >20 Sangat kuat 10-20 Kuat 5-10 Sedang <5 Lemah

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak  etanol  tangkai B.multangula Blume diuji  kandungan  senyawa  fitokimia yang memiliki potensi sebagai antibakteri  Hasilnya menunjukkan bahwa ekstrak tersebut mengandung  senyawa  flavonoid,  tannin,  alkaloid,  dan  saponin  tetapi  tidak  mengandung terpenoid. Hasil ini sedikit berbeda dari penelitian Indrakumar et al (2019) dan Bhattarai et al .  (2020)  yang  menunjukan  bahwa  tanaman  jenis family begoniaceae mengandung senyawa  flavonoid,  steroid,  dan  alkaloid,  tannin,  saponin  serta  senyawa  terpenoid. Perbedaan  kandungan  fitokimia  dapat  terjadi  karena  adanya  perbedaan  gen  penghasil senyawa fitokimia yang seringkali dijumpai walaupun masih dalam spesies tanaman yang
sama, kandungan unsur hara, lingkungan tempat hidup tanaman (ketinggian tanah, cahaya, suhu, kelembapan, pH tanah), dan iklim tempat tanaman tumbuh (Katuuk et al ., 2019). Pengujian aktivitas antibakteri ekstrak etanol tangkai B.multangula Blume terhadap A.actinomycetemcomitans dilakukan dengan cara mengukur zona hambat di sekitar kertas cakram  pada  tiap  perlakuan.  Ekstrak  uji  dimasukkan  ke  dalam  kertas  cakram  yang selanjutnya  akan  berdifusi  ke  media  pertumbuhan  bakteri  ketika  kertas  cakram  ditanam pada  media  tersebut  Adanya  aktivitas  penghambatan  terhadap  pertumbuhan  bakteri A.actinomycetemcomitans dapat  diketahui  dengan  adanya  zona  jernih  di  sekitar  kertas cakram  yang  selanjutnya  diukur  diameternya.  Hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat ekstrak  etanol  tangkai B.multangula Blume terhadap  pertumbuhan  bakteri A. actinomycetemcomitans tersaji dalam tabel II berikut :
Tabel 2. Nilai Daya Hambat Ekstrak etanol tangkai B.multangula Blume terhadap Aggregatibacter actinomycetemcomitans Kelompok Uji Rerata Zona Hambat (mm) Kemampuan daya hambat 50% 20,33 Sangat kuat 25% 18,16 Kuat 12,5% 12,33 Kuat 6,25% 8,33 Sedang 3,12% 6,33 Sedang Kontrol positif 23,67 Sangat kuat Kontrol negative 0,00 Lemah/Tidak ada
Berdasarkan  table  2  diketahui  bahwa  ekstrak  etanol  tangkai B.multangula Blume menyebabkan penghambatan pertumbuhan A.actinomycetemcomitans dengan ukuran zona hambat bervariasi di tiap konsentrasi. Ukuran diameter zona hambat ekstrak etanol tangkai B.multangula Blume pada  konsentrasi  3,12%  hingga  50%  menunjukkan  peningkatan seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi  ekstrak.  Hal  ini  berkaitan  dengan  semakin  tinggi konsentrasi ekstrak maka senyawa antibakterinya semakin banyak sehingga semakin besar pula  efek  antibakteri  yang  diberikan  (Febriana et  al .,  2015).  Budaraga et  al (2020) melaporkan  bahwa  kemampuan  dan  efek  antibakteri  suatu  agen  antibakteri  baik  bahan alam  maupun  antibiotik  sangat  tergantung  pada  konsentrasi  yang  diberikan.  Selain  itu, sebagian  besar  sel  bakteri  memiliki  banyak  komponen  yang  dapat  digunakan  sebagai potensial  target  senyawa  agen  antimikroba,  tetapi  ada  kalanya  beberapa  bakteri  memiliki kemampuan untuk mengubah komponen target di dalam selnya sehingga menjadi resisten terhadap zat antimikroba maupun antibiotik. Pada penelitian ini, bakteri A.actinomycetemcomitans tampak  cukup  sensitif  terhadap  ekstrak  etanol  tangkai B.multangula Blume , sejalan dengan penelitian sebelumnya. Penelitian Siregar et al (2009) melaporkan bahwa ekstrak B.multangula Blume dengan konsentrasi 50 μg, 100 μg, 200 μg terbukti memiliki daya antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus yang dilihat dari zona hambat yang terbentuk sebesar 7 mm, 7 mm, dan 10 mm. Hasil penelitian lain oleh Putri et  al (2019)  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  dari  tangkai B.  multangula Blume cukup  efektif  menghambat  pertumbuhan  bakteri  Gram  negatif  anaerob  P.  gingivalis dengan diameter zona hambat sebesar 10,17 mm pada volume ekstrak 20 μl.
Rata-rata  zona  hambat  selanjutnya  diklasifikasi  kemampuan  daya  hambatnya menurut Davis dan Stout. Kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri
aktivitas antibakteri ekstrak etanol tangkai ( begonia multangular blume) terhadap pertumbuhan aggregatibacter actinomycetemcomitan ( dwi nur indah sari)
A.actinomycetemcomitans dari ekstrak etanol tangkai B.multangula Blume termasuk dalam kategori  sedang  hingga  sangat  kuat  pada  konsentrasi  3,12%  hingga  50%.  Kemampuan penghambatan paling tinggi diperoleh pada konsentrasi ekstrak 50% dengan diameter zona hambat sebesar 20,33 mm dikategorikan sangat kuat diikuti oleh konsentrasi ekstrak  25%, 12,5%,  6,25%  dan  3,12%.  Pada  penelitian  Putri et  al (2019),  ekstrak  etanol  tangkai B. multangula Blume menunjukkan  kemampuan  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri periodontopatogen P. gingivalis pada kategori sedang-kuat (10,17 mm). A.actinomycetemcomitans maupun P.  gingivalis termasuk  dalam  bakteri  Gram  negatif anaerob  sehingga  dimungkinkan  mekanisme  antibakteri  yang  terjadi  sama.  Namun  pada penelitian Putri et al (2019) tidak diketahui konsentrasi uji yang digunakan sehingga tidak diketahui  konsentrasi  yang  menghasilkan  aktivitas  antibakteri  tertinggi  untuk  bakteri P.gingivalis . Penelitian lain oleh Ngazizah et al (2016) menunjukkan bahwa ekstrak etanol tanaman  begonia  pada  konsentrasi  500  ppm  mampu  menghambat  pertumbuhan  bakteri S.aureus dan E.coli dengan  rata-rata  diameter  zona  hambat  masing-masing  sebesar  11,00 dan 10,25  sehingga termasuk dalam kategori sedang-kuat
Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  tangkai B.  multangula Blume berhubungan dengan  senyawa  yang  terkandung  didalam  tangkai B.  multangula Blume antara  lain saponin,  alkaloid,  flavonoid  dan  tannin  yang  memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri. Saponin sebagai antibakteri dapat menyebabkan kerusakan protein dan enzim di dalam sel (Taufiq et  al .,  2015).  Alkaloid  sebagai  antibakteri  mengandung  senyawa  aromatik kuartener  yang  sangat  tinggi,  sehingga  di  dalam  sel  dapat membentuk interkhelat dengan DNA,  yang  meyebabkan  sel  mengalami  mutasi  atau  kerusakan  genetik  (Amalia et  al ., 2014).  Flavonoid  sebagai  antibakteri  bekerja  merusak  dinding  sel  karena  dapat  berikatan dengan  protein  dan  lipid,  menggumpalkan  protein,  merusak  dinding  sel,  dan mengakibatkan  sel  lisis  hingga  mati  (Karima,  2015).  Selain  itu,  flavonoid  juga  dapat menghambat  fungsi  membran  sel  dan  metabolisme  energi  bakteri.  Flavonoid  membentuk senuawa  komplaeks  dengan  protein  ekstraseluler  yang  dapat  merusak  membrane  sel bakteri  diiukuti  dengan  keluarnya  senyawa  intraseluler  bakteri  (Nuria et  al ,  2009). Flavonoid  juga  dapat  mengganggu  fungsi  metabolisme  sel  dengan  mendenaturasi  enzim protease  di  dalam  sel  (Ngazizah et  al .,  2016).  Tanin  sebagai  antibakteri  dapat  merusak permeabilitas dinding sel bakteri dan dapat berikatan dengan membran sel sehingga bakteri menjadi  lisis  (Karima,  2015).  Tanin  juga  memiliki  kemampuan  untuk  menginaktifkan enzim  bakteri  serta  mengganggu  jalannya  protein  pada  lapisan  dalam  sel  (Ngajow et  al , 2013).
Pada penelitian ini, diameter zona hambat kontrol positif Chlorhexidine gluconate 0,2% sebesar 23,67 mm sedangkan  kontrol negatif DMSO 1% sebesar 0,00 mm, masing- masing  menjadi  diameter  terbesar  dan  terkecil  diantara  kelompok  uji. Chlorhexidine gluconate merupakan  agen  antimikrobia  terbaik  dalam  perawatan  gingivitis  dan periodontitis  (Balagopal  dan  Arjunkumar,  2013). Chlorhexidine  gluconate memiliki kemampuan  untuk  berikatan  erat  dengan  dinding  sel  bakteri  Gram  negatif,  merubah integritas  membrane  sel  bakteri,  dan  berikatan  dengan  fosfolipid  membrane  sel  bakteri sehingga  menyebabkan  terjadinya  presipitasi  sitoplasma  bakteri  yang  akhirnya menyebabkan  bakteri  mati  (Balagopal  dan  Arjunkumar,  2013).  DMSO  1%  digunakan sebagai  kontrol  negatif  karena  tidak  memiliki  kemampuan  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri. Selain itu, pada penelitian ini DMSO 1% digunakan sebagai pelarut ekstrak kental dalam pembuatan konsentrasi ekstrak sehingga juga dapat berfungsi sebagai
kontrol  pelarut.  Assidqi  (2012)  menyatakan  bahwa  DMSO  memiliki  sifat  yang  dapat melarutkan  senyawa  polar  maupun  non  polar  dan  dapat  digunakan  sebagai  pengencer ekstrak.  DMSO  dengan  kadar  1%,  tidak  berpengaruh  terhadap  aktivitas  mikrobial  dan penggunaan  DMSO  sebagai  pelarut  tidak  boleh  melebihi  konsentrasi  akhir  10%  karena dapat menyebabkan pecahnya membran sel (Andayani et al , 2016).
Diameter  zona  hambat  selanjutnya  dilakukan  analisis  statistik  uji  Kruskal-wallis untuk  melihat  perbedaan  rerata  diameter  zona  hambat  pada  kelompok  uji.  Hasilnya menunjukkan bahwa terdapat perbedaan signifikasi dengan nilai p=0,02 sehingga  analisis dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc Mann Whitney.  Hasilnya  tersaji  pada table  III  di  bawah ini :
Tabel 3. Hasil Uji Mann Whitney K 50% K 25% K 12,5% K 6,25% K 3,12% Kontrol + Kontrol - K 50% - 0,043* 0,043* 0,043* 0,034* 0,043* 0,034* K 25% - 0,043* 0,043* 0,034* 0,043* 0,034* K 12,5% - 0,043* 0,034* 0,043* 0,034* K 6,25% - 0,034* 0,043* 0,034* K 3,12% - 0,043* 0,034* Kontrol + - 0,034* Kontrol – - Keterangan : Kontrol + : Chlorhexidine gluconate 0,2%, Kontrol negatif : DMSO 1% *terdapat perbedaan signifikan (p<0,05)
Hasil  uji  Mann  Whitney  menunjukkan  bahwa  tiap  perlakuan  menunjukkan perbedaan signifikan (tabel III) baik dengan kontrol  negatif, kontrol positif maupun antar perlakuan ekstrak. Hal ini dapat ditunjukkan dari besar nilai p< 0,05. Perbedaan signifikan pada perlakuan ekstrak dengan kontrol negatif menunjukkan bahwa ekstrak etanol tangkai B.mulangula Blume memiliki  kemampuan  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri A.actinomycetemcomitans sedangkan larutan DMSO 1% tidak memiliki kemampuan untuk menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Namun  demikian,  kemampuan  ekstrak  etanol  tangkai B.mulangula Blume belum  dapat  menyamai  kemampuan  kontrol  positif Chlorhexidine gluconate dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri A.actinomycetemcomitans .  Hal  ini tampak pada pengukuran diameter zona hambat yang menunjukkan diameter ekstrak etanol tangkai B.mulangula Blume konsentrasi tertinggi (50%) masih lebih rendah dibandingkan Chlorhexidine  gluconate serta  secara  statistik  menunjukkan  adanya  perbedaan  yang signifikan.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  tangkai Begonia multangula Blume memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans .  Aktivitas  antibakteri  terbesar  terdapat  pada  konsentrasi  50% dengan  kategori  kemampuan  sangat  kuat  sebagai  antibakteri.  Dengan  potensinya  sebagai antibakteri Aggregatibacter  actinomycetemcomitans yang  cukup  baik,  dapat  membuka peluang penelitian lebih lanjut mengenai ekstrak etanol tangkai Begonia multangula Blume baik sebagai antibakteri pada bakteri periodontopatogen lainnya maupun pengambangannya dalam penelitian antibiofilm atau antiplak.
aktivitas antibakteri ekstrak etanol tangkai ( begonia multangular blume) terhadap pertumbuhan aggregatibacter actinomycetemcomitan ( dwi nur indah sari)

## UCAPAN TERIMA KASIH
Segenap  peneliti  mengucapkan  terimakasih  kepada  LPPM  Universitas  Jenderal Soedirman  yang  membantu  para  peneliti  dalam  bentuk  pembiayaan  penelitian  melalui hibah  BLU  skim  penelitian  Riset  Peningkatan  Kompetensi.  Peneliti  juga  menyampaikan terimakasih  kepada  pihak  Kebun  Raya  Baturraden  yang  berkenan  memberikan  ijin  untuk melakukan penelitian tanaman Begonia multangula Blume .

## DAFTAR PUSTAKA
Amalia  S.,  S  Wahdaningsih  dan  N.  K.  Untari.  2014.  Antibacterial  Activity  Testing  of NHexane  Fraction  of  Red  Dragon  (Hylocereus  polyrhizus  Britton  &  Rose)  Fruit Peel on Staphylococcus aureus ATCC 25923. Trad. Med.J .19 (2): 89 - 94.
Assidqi  K,  Tjahjaningsih  W,  dan  Sigit  S.  2012.    Potensi  ekstrak  daun  patikan  kebo (Euphorbia  hirta) sebagai  antibakteri  terhadap  aeromonas  hydrophila  secara  In Vitro. Journal of Marine and Coastal Science . 1(2):113 – 124.
Andayani, R. Mubarak, Z. Rinanda, D.R. 2016. Aktivitas antibakteri tepung cacing  tanah ( lumbricus rubellus ) terhadap enterococus facialis secara in vitro. Journal of Syiah Kuala Dentistry Society . 1(2): 201-210.
Balagopal,  S.  dan  Arjunkumar,  R.  2013.  Chlorhexidine:  The  Gold  Standard  Antiplaque Agent. J. Pharm. Sci. & Res. Vol.5(12), 2013, 270 – 274.
Bhattarai, B. dan Rana, M. 2020. Diversified morphological and phytochemical screening of Wild Begonia of Sikkim Himalaya. Eco. Env. Cons. 26: 129–138
Budaraga, I.K., Putra, D.P., Wellyalina. 2020. Antibacterial activity of moringa leaf layer cake  against  s.  aureus  and  e.  coli. Journal  of  Applied  Agricultural  Science  and Technology . 4 (1): 56-63
Efendi, M. 2019. Begonia alam di kebun raya baturaden, jawa tengah. Pros Sem Nas Masy Biodiv Indon 5 , 13–17.
Febriana,  N.,  Prasetya,  F.,  dan  Ibrahim,  A.  2015.  Aktivitas  antimikroba  ekstrak  daun bungur ( Langerstoremia speciosa (L.) Pers). Jurnal Sains dan Kesehatan. 1(2):45- 50.
Indrakumar,  I.R.  Gomathi,  dan  Karpagam,  S.  2014.  Antimicrobial  and  In  Vtro Antioxidant Potential of Begonia dipetala Graham. Int. J. Pharam . 27(2): 382-386. Karima A. M. 2015. Uji Daya Antibakteri Ekstrak Etanol Kayu Siwak (Salvadora persica) terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Porphyromonas  gingivalis  penyebab  Gingivitis  In Vitro. Skripsi S1 . Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta Katuuk,  R.H.H.,  Wanget,  S.A.,  dan  Tumewu,  P.,  2019,  Pengaruh  Perbedaan  Ketinggian Tempat  terhadap  Kandungan  Metabolit  Sekunder  pada  Gulma  Babadotan ( Ageratum conyzoides L.). Cocos e-Journal Unsrat. 1(4): 1-6. Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia.  2018.  Hasil  Utama  Riset  Kesehatan  Dasar 2018. Balai Penelitian dan Pengembangan Kementerian Kesehatan RI. Jakarta.
Kumalasari,  F.L.M.  dan  Andriana,  F. 2020.  Uji fitokimia ekstrak daun kemangi (ocimum basilicum l). Indonesian Journal for Health Sciences . 4(1): 39-44. Nazir, M.A. 2017. Prevalence of periodontal disease, its association with systemic diseases and prevention. Int J Health Sci (Qassim). 11(2): 72–80.
Newman,  M.G.  Takei,  H.H.  dan  Klokkevold,  P.R.  2019. Carranza’s  Clinical Periodontology 13 edition. Elsevier.
Ningsih  A.  P,  Nurmiati  dan  Anthoni  A.  2013.  Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  kental tanaman  pisang  kepok  kuning  (musa  paradisiaca  linn.)  terhadap  staphylococcus aureus dan escherichia coli. Jurnal Biologi Universitas Andalas 2(3): 207 – 213.
Ngajow, M.  Abidjulu, J. dan Kamu, V.S. 2013. Pengaruh  antibakteri ekstrak kulit batang matoa  ( pometia  pinnata )  terhadap  bakteri  staphylococcus  aureus  secara  in  vitro. Jurnal MIPA UNSRAT Online . 2(2): 128-32
Ngazizah,  F.  N.,  Ekowati,  N.    dan  Septiana,  A.  T.  Potensi  daun  trembilungan  (begonia hirtella link) sebagai antibakteri dan antifungi. Biosfera 33: 126.
Nuria, M.C., Faizatun, A. dan Sumantri. 2009. Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun jarak pagar ( jatropha curcas l.) terhadap bakteri staphylococcus aureus atcc 25293, escherichia coli atcc 25922 , dan salmonella typhi atcc 1408. Jurnal Ilmu Pertanian . 5(2): 26-37.
Nurrahman,  H.F.  dan  Widyarman,  A.S.  2020.  Efectiveness  of  matricaria  chamomilla essential  oil  on  aggregatibacter  actinomycetemcomitans  and  treponema  denticola biofilm. Journal of Indonesian Dental Association. 3(2):77-82. Pargaputri,  A.F.  Munadzirog,  E.  Indrawati,  R.  2017.  The  effect  of  pluchea  indica  less leaves  extract  againts  biofilm  of  enterococcus  faecalis  and  fusobacterium nucleatum in vitro . Denta Jurnal Kedokteran Gigi . 11(1): 51-61.
Putri,  N.  H.  S.,  Nurdiwiyati,  D.  Lestari,  S.  Ramdhan,  B.  Efendi,  M.  dan  Nurhidayat,  N. 2019.  Aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  tangkai  dan  daun  begonia  multangula Blume terhadap  prophyromonas  gingivalis. Jurnal  Biologi  Universitas  Andalas . 7(1): 51-58.
Ridhwana, L. Panjaitan, F.U.A., Wasiaturrahmah, Y.  2020. Efektivitas antibakteri ekstrak daun  kasturi  (Mangifera  casturi)  terhadap  pertumbuhan  bakteri  aggregatibacter actinomycetemcomitans . Jurnal Kedokteran Gigi. 4 (2): 49-55
Siregar  H.  M.  Purwanto  R.  S.  Sudarmono.  Dan  Agusta  A.  2009.  Pengungkapan  potensi obat  pada  tiga  jenis  begonia  terpilih  (b.muricata Blume ,  b.multangula Blume , b.bacem  kebo)  melalui  uji  antibakteri  eschericia  coli  dan  staphylococcis  aureus secara in vitro. Prosiding Seminar Nasional Sains II
Supriyanto.  Simon,  B.W.  Rifa’i,  M.  Yunianta.  2017.  Uji  fitokimia  dan  aktivitas antioksidan  ekstrak  daun  mimba  ( azaradiracta  indica  juss ). Prosiding    SNATIF . 4(1): 523-529.
Taufiq S, U. Yuniarni dan S. Hazar. 2015. Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol biji buah pepaya (carica papaya l.) terhadap escherichia coli dan salmonella thypi. Prosiding Penelitian SPeSIA Unisba . Bandung. Vahabi,  S.  Hakemi-Vala,  M.,  Gholami,  S.  2019. In  vitro Antibacterial  Effect  of Hydroalcoholic  Extract  of Lawsonia  inermis , Malva  sylvestris ,  and Boswellia serrata on Aggregatibacter actinomycetemcomitans. Adv Biomed Res. 8: 22.