## UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL RIMPANG
KUNYIT ( Curcuma longa L.) TERHADAP Staphylococcus aureus DAN Pseudomonas aeruginosa
1 Lia Fikayuniar M.Si, 2 Neni Sri Gunarti M.Si., Apt, 3 Mellya Apriliani 1 Prodi Farmasi Fakultas Teknologi dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( lia.fikayuniar@ubpkarawang.ac.id )
2 Prodi Farmasi Fakultas Teknologi dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( neni.gunarti@ubpkarawang.ac.id ) 3 Prodi Farmasi Fakultas Teknologi dan Ilmu Komputer Universitas Buana Perjuangan Karawang ( fm15.mellyaapriliani@mhs.ubpkarawang.ac.id )

## ABSTRAK
Kunyit  ( Curcuma  longa L.)  merupakan  salah  satu  jenis  tanaman  obat  yang termasuk  dalam  keluarga Zingiberaceae .  Senyawa  aktif  yang  terkandung  dalam rimpang kunyit ( Curcuma longa L.) mampu bekerja sebagai antibakteri. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  etanol  rimpang kunyit  ( Curcuma  longa L.)  terhadap Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa . Ekstraksi dilakukan dengan cara refluks menggunakan pelarut etanol 96%. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan menggunakan metode difusi paper disk dengan masing-masing konsentrasi ekstrak 10%, 20%, 30%, 40% b/v. Kontrol positif  yang  digunakan  adalah  Ciprofloxacin  sedangkan  kontrol  negatif  yang digunakan adalah DMSO. Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol rimpang kunyit mengandung  alkaloid,  flavonoid,  fenol,  tanin  dan  terpenoid.  Berdasarkan  hasil penelitian,  ekstrak  etanol  rimpang  kunyit  dapat  menghambat  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa pada konsentrasi 10%, 20%, 30%, 40% dan konsentrasi 40% merupakan konsentrasi yang memberikan diameter zona hambat terbesar terhadap kedua bakteri uji yaitu 8,63 mm dan 7,8 mm.
Kata Kunci : aktivitas antibakteri, Curcuma longa L. , Staphylococcus aureus,

## ABSTRACT
Turmeric ( Curcuma  longa L.) is  one  type  of  medicinal  plant that  belongs  to  the Zingiberaceae family. The active compounds contained in the  Curcuma longa L. rhizome can work as antibacterial. This study aims to determine the antibacterial activity of the ethanol extract of  Curcuma longa L. Antibacterial activity testing was  carried  out  using  the  paper  disk  diffusion  method  with  each  extract concentration  of  10%,  20%,  30%,  40%.  The  positive  control  used  was Ciprofloxacin  while  the  negative  control  used  was  DMSO.  The  results  of phytochemical  screening  of  the  ethanol  extract  of  Curcuma  longa L. rhizome contain alkaloids, flavonoids, phenols, tannins and terpenoids. Based on the results of  the  study,  the  ethanol  extract  of  turmeric  rhizome  can  inhibit  Staphylococcus aureus  and  Pseudomonas  aeruginosa  bacteria  at  concentrations  of  10%,  20%, 30%, 40% and 40% concentrations which give the largest inhibition zone diameter of the two test bacteria which is 8.63 mm and 7.8 mm.
Keywords :  antibacterial activity, Curcuma longa L. , Staphylococcus aureus,

## PENDAHULUAN
Infeksi merupakan salah satu penyakit yang paling banyak diderita oleh masyarakat saat  ini,  khususnya  di  negara  berkembang  seperti  halnya  Indonesia.  Salah  satu penyebab dari penyakit infeksi ini adalah bakteri (Katrin, 2015). Beberapa bakteri telah mengalami resistensi terhadap antibiotik tertentu, oleh karena itu, diperlukan alternatif  dalam  mengatasi  masalah  ini  dengan  memanfaatkan  bahan-bahan  aktif antimikroba dari tanaman (Sari, 2017).
Indonesia mempunyai banyak tanaman yang berkhasiat obat. Salah satu tanaman obat yang sering digunakan oleh masyarakat adalah kunyit ( Curcuma domestica ) terutama bagian rimpangnya (Dalimartha, 2009). Kunyit merupakan salah satu jenis tanaman obat yang termasuk dalam keluarga Zingiberaceae . Secara empiris, kunyit dipercaya  dapat  mengobati  sakit  maag,  diare,  nyeri  haid,  dan  infeksi (Widyaningsih, 2017).
Senyawa utama yang terkandung dalam rimpang kunyit (Curcuma domestica) yaitu kurkumin  dan  minyak  atsiri.  Senyawa  tersebut  mempunyai  peranan  sebagai antioksidan,  antitumor,  antikanker,  antijamur  dan  antimikroba  (Hartati,  2013). Untuk memperoleh senyawa aktif dari tanaman dapat dilakukan proses ekstraksi. Refluks merupakan salah satu metode ekstraksi yang mampu memisahkan senyawa yang tahan terhadap pemanasan seperti kurkumin.
Berbagai  penelitian  telah  melaporkan  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  rimpang kunyit yang diperoleh dengan cara maserasi (Andrew, 2016) dan sokletasi (Nikhil, 2017)  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus,  Bacillus  subtilis,  Klebsiella pneumonia dan Pseudomonas  aeruginosa .  Namun  belum  ada  yang  penelitian melaporkan aktivitas antibakteri dari ekstrak rimpang kunyit yang diperoleh dengan cara refluks.
Berdasarkan  hal  tersebut  maka  dilakukan  penelitian  mengenai  uji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  rimpang  kunyit  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa secara  difusi paper  disk . Metode ekstraksi yang digunakan untuk mengekstrak rimpang kunyit yaitu dengan cara refluks.

## METODE PENELITIAN

## Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  antara  lain  seperangkat  alat ekstraksi  refluks, rotary  evaporator (Eyela),  waterbath  (Memmert),  batang pengaduk, tabung reaksi, rak tabung reaksi, neraca analitik, botol kaca, spatula, gelas  ukur  (Pirex),  gelas  kimia  (Pirex),  batu  didih,  cawan  petri,  erlenmeyer (Pirex),  kompor  listik,  autoklaf  (All  American),  jarum  ose,  inkubator,  kapas lidi  steril, laminar  air  flow (CV  Quadrant),  alat  tulis,  jangka  sorong  (Tricle Brand), mikropipet (Fisherbrand Elite), pinset, cawan penguap.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  antara  lain  rimpang  kunyit ( Curcuma  longa L.),  etanol  96%  redest,  aquadest  steril  (Widatra  Bhakti),
DMSO  (Dimetil  Sulfoksida)  (Merck), Staphylococcus  aureus ATCC  6538,
Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, larutan NaCl 0,9% (b/v) (Otsu – NS), medium nutrient  agar (Oxoid), paper  disk (Macherey  Nagel)  dan  tablet Ciprofloxacin generik.

## Cara Kerja

## Determinasi Tanaman
Determinasi  tanaman  dilakukan  di  Laboratorium  Sekolah  Ilmu  dan  Teknologi Hayati Institut Teknologi Bandung.

## Pembuatan Simplisia
Sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  rimpang  kunyit.  Rimpang kunyit  disortasi  basah  kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir.  Kemudian  rimpang kunyit tersebut dirajang dan dikeringkan dengan dijemur di bawah sinar matahari. Setelah  proses  pengeringan  selesai,  rimpang  dihaluskan  hingga  diperoleh  serbuk yang akan digunakan untuk proses ekstraksi.

## Pembuatan Ektsrak
Rimpang kunyit diekstraksi dengan cara refluks menggunakan pelarut etanol 96%. Rimpang  kunyit  yang  telah  halus  ditimbang  lalu  dimasukkan  ke  dalam labu alas bulat,  kemudian  ditambahakan  pelarut  etanol  96%  dengan  perbandingan  sampel
dan pelarut (1:5). Rangkai alat refluks, dan kemudian lakukan ekstraksi. Filtrat yang diperoleh selanjutnya diuapkan pelarutnya dengan menggunakan rotary evaporator dan waterbath hingga diperoleh ekstrak kental etanol rimpang kunyit.

## Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia dilakukan terhadap serbuk simplisia dan ekstrak etanol rimpang kunyit. Skrining fitokimia yang dilakukan meliputi uji alkaloid, flavonoid, fenol, tanin, saponin, steroid dan terpenoid.

## Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian dicuci bersih dan dikeringkan, kemudian dibungkus  dengan  kertas.  Setelah  itu  dilakukan  sterilisasi  dengan  menggunakan autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit. Untuk alat seperti jarum ose dan pinset disterilkan dengan cara dipijarkan atau dipanaskan pada nyala api bunsen.
Pembuatan Medium NA ( Nutrient Agar )
Medium  NA  ( Nutrient  Agar )  dibuat  dengan  cara Nutrient  Agar dilarutkan dalam aquadest dan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer. Kemudian panaskan sampai mendidih. Selanjutnya media tersebut disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit.

## Peremajaan Bakteri
Peremajaan  Bakteri  dilakukan  dengan  cara  masing-masing  biakan  murni bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa diinokulasikan dengan digoreskan pada media NA secara aseptik. Kemudian diinkubasi pada suhu 37 o C selama 24 jam.

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Pembuatan  suspensi  bakteri  dilakukan  dengan  cara  mengambil  bakteri  uji  yang telah diremajakan dengan jarum ose steril lalu disuspensikan ke dalam tabung yang berisi 5 ml NaCl 0,9% (b/v) hingga diperoleh kekeruhan yang sama dengan standar kekeruhan larutan 0,5 Mc. Farland .
Pembuatan Larutan Uji
Dibuat larutan uji 10%, 20%, 30%, 40% b/v dengan cara ditimbang ekstrak etanol rimpang kunyit masing-masing sebanyak 0,1 g, 0,2 g, 0,3 g, dan 0,4 g kemudian dilarutkan dalam 1 ml DMSO.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Tuangkan nutrien agar (NA) kedalam cawan petri steril dan biarkan memadat. Setelah memadat, oleskan suspensi bakteri yang telah diukur kesetaraannya dengan Mc. Farland di atas media dengan kapas ulas steril. Setelah itu letakkan masing- masing paper  disk yang  telah  diteteskan  ekstrak  etanol  rimpang  kunyit  dengan berbagai  konsentrasi  (10%,  20%,  30%,  40%), paper  disk yang  mengandung ciprofloxacin (kontrol positif), dan paper disk yang mengandung DMSO (kontrol negatif) secara aseptis menggunakan pinset steril pada permukaan media yang telah memadat. Kemudian media tersebut diinkubasi pada suhu 37°C selama 18 – 24 jam, dan  selanjutnya  dilakukan  pengamatan  serta  pengukuran  zona  hambat  yang terbentuk.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Determinasi Tanaman
Determinasi  tanaman  dilakukan  di  Laboratorium  Sekolah  Ilmu  dan  Teknologi Hayati  Institut  Teknologi  Bandung.  Berdasarkan  hasil  determinasi,  diperoleh bahwa sampel yang digunakan adalah benar merupakan Curcuma longa L dengan sinonim Curcuma domestica Val.

## Ekstraksi
Ekstraksi terhadap serbuk simplisia rimpang kunyit ( Curcuma longa L.) dilakukan dengan  menggunakan  ekstraksi  cara  panas,  yaitu  dengan  metode  refluks menggunakan pelarut etanol 96%. Simplisia yang digunakan dalam penelitian ini sebanyak 300 gram dengan total pelarut etanol 96% yang digunakan sebanyak 4,5 L. Nilai rendemen yang diperoleh sebesar 14,3%.

## Skrining Fitokimia
Skrining fitokimia merupakan tahap pendahuluan dalam penelitian yang bertujuan untuk  memberikan  gambaran  tentang  golongan  senyawa  yang  terkandung  dalam
tanaman  yang  diteliti.  Hasil  skrining  fitokimia  pada  simplisia  dan  ekstrak  etanol rimpang kunyit ( Curcuma longa L.) dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 1 . Hasil Skrining Fitokimia Simplisia Rimpang Kunyit Golongan Senyawa Pereaksi Simplisia Alkaloid Dragendorff Mayer + + Flavonoid NaOH 10% + Saponin Aquadest - Fenol FeCl 3 1% - Terpenoid H 2 SO 4 + Steroid HCl, H 2 SO 4 - Tanin Gelatin - Tabel 2 . Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Rimpang Kunyit Golongan Senyawa Pereaksi Ekstrak Alkaloid Dragendorff Mayer + + Flavonoid Serbuk Mg, HCl + Saponin Aquadest - Fenol FeCl 3 1% + Terpenoid HCl, H 2 SO 4 + Steroid HCl, H 2 SO 4 - Tanin Gelatin + Keterangan: (+) : Positif (-)  : Negatif
Berdasarkan  uji  fitokimia  yang  telah  dilakukan  pada  simplisia  rimpang  kunyit menunjukkan hasil positif pada alkaloid, flavonoid dan terpenoid. Sedangkan pada ekstrak etanol rimpang kunyit menunjukkan hasil positif pada alkaloid, flavonoid, fenol,  terpenoid,  dan  tanin.  Senyawa  fenol  dan  tanin  yang  tidak  terdeteksi  pada simplisia dapat disebabkan oleh perbedaan kepolaran dari pelarut yang digunakan dengan senyawa tersebut. Menurut Sirwutubun (2016), Pelarut dapat mengekstrak senyawa senyawa yang memiliki kepolaran yang sama atau mirip dengan kepolaran pelarut yang digunakan.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol rimpang kunyit ( Curcuma longa ) terhadap Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa dilakukan  dengan menggunakan metode difusi paper disk dengan variasi konsentrasi 10%, 20%, 30% dan  40%.  Kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  antibiotik  Ciprofloxacin  dan kontrol  negatif  yang  digunakan  adalah  DMSO.  Hasil  uji  aktivitas  antibakteri menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  rimpang  kunyit  ( Curcuma  longa L.)  dapat menghambat  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas aeruginosa . Hasil pengukuran diameter zona hambat ekstrak etanol rimpang kunyit dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel 3. Hasil Rata-rata Diameter Zona Hambat
Konsentrasi Rata-rata Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri (mm) Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa 10% 6,1 ± 0,1 5,6 ± 0,1 20% 7,26 ± 0,15 6,63 ± 0,25 30% 7,8 ± 0,2 7,03 ± 0,20 40% 8,63 ± 0,05 7,8 ± 0,1 Kontrol (+) 26,23 ± 0,05 24,23 ± 1,44 Kontrol (-) 0 0
Berdasarkan  klasifikasi  respon  daya  hambat  David  and  Stout  (1971)  dalam  Sari (2017), diameter zona hambat 5 mm atau kurang termasuk dalam kategori lemah, diameter zona hambat 5 – 10 mm termasuk dalam kategori sedang, diameter zona hambat 10 – 20 mm termasuk dalam kategori kuat dan diameter zona hambat 20 mm  atau  lebih  termasuk  dalam  kategori  sangat  kuat.  Berdasarkan  klasifikasi tersebut,  respon  daya  hambat  ekstrak  etanol  rimpang  kunyit  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa pada konsentrasi 10%, 20%,
30% dan 40% termasuk ke dalam kategori sedang.
Hasil  dari  penelitian  menunjukkan  bahwa  kontrol  negatif  DMSO  tidak menunjukkan adanya zona hambat di sekitar paper disk. Hal tersebut sesuai dengan penelitian  sebelumnya  yang  menyatakan  bahwa  DMSO  tidak  memiliki  aktivitas
antibakteri  (Trisia,  2018). Rerata  diameter  zona  hambat  yang  didapatkan  dari kontrol  positif  Ciprofloxacin  terhadap  pertumbuhan  bakteri S.  aureus dan P. aeruginosa yaitu 26,23 mm dan 24,23 mm.
Gambar 1. Kurva Hubungan Konsentrasi
Ekstrak Etanol Rimpang Kunyit terhadap
Diameter Zona Hambat Pertumbuhan
Bakteri Staphylococcus aureus Gambar 2. Kurva Hubungan Konsentrasi Ekstrak Etanol Rimpang Kunyit terhadap Diameter Zona Hambat Pertumbuhan Bakteri Pseudomonas aeruginosa
Jika dilihat dari gambar 1 dan gambar 2, konsentrasi 40% merupakan konsentrasi yang memberikan zona hambat terbesar dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus  aureus dan Pseudomonas  aeruginosa dengan  rata-rata  diameter zona  hambat  8,63  mm  dan  7,8  mm.  Sedangkan  konsentrasi  terkecil  yang  masih dapat  mengambat  pertumbuhan  kedua  bakteri  terdapat  pada  konsentrasi  ekstrak 10% dengan rata-rata diameter zona hambat 6,1 mm pada bakteri Staphylococcus aureus dan 5,6 mm pada bakteri Pseudomonas aeruginosa .
Dari  data  hasil  penelitian  didapatkan  bahwa  zona  hambat  yang  dihasilkan  oleh ekstrak  etanol  rimpang  kunyit  terhadap  pertumbuhan  bakteri  gram  positif ( Staphylococcus  aureus )  lebih  besar  dibandingkan  dengan  zona  hambat  ekstrak etanol rimpang kunyit terhadap pertumbuhan bakteri gram negatif ( Pseudomonas aeruginosa ).  Perbedaan  sensitivitas  bakteri  terhadap  antibakteri  tersebut  dapat disebabkan oleh perbedaan struktur dinding selnya, dimana menurut Yunita (2012) dalam Sari (2017) bakteri gram positif cenderung lebih sensitif terhadap antibakteri karena  struktur  dinding  sel  bakteri  gram  positif  lebih  sederhana  dibandingkan dengan struktur dinding sel bakteri gram negatif sehingga memudahkan senyawa antibakteri  untuk  masuk  ke  dalam  sel  bakteri  gram  positif.  Menurut  Pelczar  dan
Chan (1986) struktur dinding sel bakteri gram negatif relatif lebih kompleks dimana terdapat  lapisan  luar  yang  berupa  lipoprotein  dan  lipopolisakarida  serta  lapisan dalam yang berupa peptidoglikan.

## PENUTUP
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak etanol  rimpang  kunyit  memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas  aeruginosa ,  konsentrasi  40%  merupakan  konsentrasi yang memberikan zona hambat terbesar dalam menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus (8,63 mm) dan Pseudomonas aeruginosa (7,8 mm).

## DAFTAR PUSTAKA
Dalimartha, S. 2009. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia . Edisi ke-6. Jakarta: Pustaka Bunda.
Hartati Yuni S, Balittro. 2013. Khasiat kunyit sebagai obat tradisional dan manfaat lainnya. Warta Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri , 19(2)
Katrin, Dina., Idiawati, Nora., Sitorus, Berlian. 2015. Uji Aktivitas Antibakteri Dari Ekstrak Daun Malek (Litsea Graciae Vidal) Terhadap Bakteri Stapylococcus aureus Dan Escherichia coli . Jurnal Kimia Khatulistiwa, 4(1)
Pangemanan, Andrew.,  Fatimawati., dan Fona  B. 2016. Uji daya hambat ekstrak rimpang  kunyit  ( Curcuma  longa )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dan Pseudomonas sp. Jurnal e-Biodemik (eBm), 4
Sari,  Rafika.,  Muhani,  M.,  Fajrianty,  I.  2017.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Daun  Gaharu  (Aquilaria  microcarpa  Baill.)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus aureus dan Proteus mirabilis . Pharm Sci Res, 4(3)
Sari,  Rafika., et.al .  2017.  Penentuan  Nilai  FICI  Kombinasi  Ekstrak  Etanol  Kulit Daun Lidah Buaya (Aloe vera (L) Burm.f) dan Gentamisin Sulfat Terhadap Bakteri Escherichia coli . Pharm Sci Res Vol. 4 No. 3
Singh,  Nikhil.,  Sangeeta  G.,  dan  Vaibhav  R.  2017.  Comparative  Antimicrobial Study  of  Ethanolic  Extract  of  Leaf  and  Rhizome  of Curcuma  longa Linn. Pharmacognosy Journal, 9
Sirwutubun, Magdalena., Maya M. L., Dekie Rawung. 2016. Pengaruh Konsentrasi Etanol  Terhadap  Karakteristik  Ekstrak  Pewarna  Alami  Buah  Merah  ( Pandanus
conoideus Lamk.) Dan Aplikasinya Pada Produk Pangan. Jurnal Unsrat Vol. 7 No.
5
Trisia, Adelgrit., Phylyria R., Novia Angeline. 2018. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kalanduyung ( Guazuma ulmifolia Lam.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aurues Dengan Metode Difusi Cakram (Kirby-