PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## GAS CHROMATOGRAPHY - MASS SPECTROMETRY ANALYSIS OF N-HEXANE EXTRACT
FROM GREEN GEDI LEAVES ( Abelmoschus manihot (L . ) Medik)
ANALISIS GAS CHROMATOGRAPHY - MASS SPECTROMETRY EKSTRAK N-HEKSAN
DARI DAUN GEDI HIJAU ( Abelmoschus manihot (L . ) Medik)
Siboantua Broolin Simanjuntak 1)* , Elly Suoth 1) , Fatimawali 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115 *sbsimanjuntak@gmail.com

## ABSTRACT
Green Gedi Leaf ( Abelmoschus manihot (L.) Medik) is an herb often used by the people of Sulawesi as food and traditional medicine, among others, for the treatment of cholesterol, kidney disease, high blood pressure, and diabetes. This study aims to analyze the phytochemical compounds contained in the Green Gedi leaves. The method used is the extraction of dry powder of Green Gedi leaves through maceration using n-hexane solvent, then analyzed using gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The results showed that there were 56 possible compounds contained in the n-hexane extract of Green Gedi leaves. The analysis results also showed three possible compounds at the highest peak of the chromatogram: Ethyl 9,12,15-octadecatrienoate; 9,12,15-Octadecatrienoic acid, ethyl ester, (Z,Z,Z)- and Methyl 8,11,14-heptadecatrienoate.
Keywords : Abelmoschus manihot (L.) Medik , Green Gedi Leaf, GC - MS

## ABSTRAK
Daun  Gedi  Hijau Abelmoschus  manihot (L.)  Medik  merupakan  herbal  yang  dimanfaatkan  oleh  masyarakat Sulawesi  sebagai  pangan  dan  obat  tradisional  antara  lain  untuk  pengobatan  kolestrol,  sakit  ginjal,  tekanan darah  tinggi,  dan  diabetes.  Penelitian  ini  berujuan  untuk  menganalisis  senyawa  fitokimia  yang  terkandung dalam  daun  Gedi  Hijau.  Metode  yang  digunakan  yaitu  ekstraksi  serbuk  kering  daun  Gedi  Hijau  melalui maserasi menggunakan pelarut n-heksan, kemudian dianalisis menggunakan  kromatografi gas–spektrometri massa ( GC - MS ). Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat 56  kemungkinan  senyawa yang terkandung dalam ekstrak n-heksan daun Gedi Hijau. Hasil analisis juga menunjukkan bahwa terdapat tiga kemungkinan senyawa  pada  puncak  tertinggi  kromatogram: Ethyl  9,12,15-octadecatrienoate;  9,12,15-Octadecatrienoic acid, ethyl ester, (Z,Z,Z)- dan Methyl 8,11,14-heptadecatrienoate .
Kata kunci : Abelmoschus manihot (L.) Medik , Daun Gedi Hijau , GC - MS
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,

## PENDAHULUAN
Abelmoschus  manihot (L.) Medik  atau  yang dikenal dengan nama daerah gedi (Sulawesi), degi (Ternate),  ki  dedi,  edi  (Jawa)  dan  singa  depa (Sunda)  adalah  salah  satu  tumbuhan  dari  suku Malvaceae yang umum ditanam di Sulawesi Utara dan  Tengah.  Gedi  hijau  biasanya  dimanfaatkan oleh  masyarakat  Manado sebagai  bahan  makanan dan  sebagai  herbal  tradisional  untuk  pengobatan beberapa  penyakit,  seperti  kolestrol,  sakit  ginjal, tekanan  darah  tinggi  dan  diabetes  (Mamahit  dan Soekamto,  2010).  Gedi  hijau  memiliki  tinggi sekitar  1,2–1,8  m,  daun  yang  lebar  dan  panjang sekitar 10–40 cm, bertulang daun menjari berlekuk dengan  3–7  lobus.  Daun,  tangkai  daun  dan batangnya  berwarna  hijau,  bunganya  berdiameter 4-8 cm, dengan lima kelopak putih hingga kuning (Todarwal, 2011).
GC - MS merupakan  kombinasi  dua  metode analisis,  yaitu  antara Gas  Chromatography dan Mass Spectrometry . Gas Chromatography digunakan  untuk  memisahkan  dan  mendeteksi senyawa-senyawa  yang  mudah  menguap  dalam suatu  campuran. Mass  Spectrometry digunakan untuk  mendapatkan  berat  molekul  dengan  cara mencari perbandingan massa terhadap muatan dari ion  dengan  mengukur  jari-jari  orbit  yang melingkarnya  dalam  medan  magnetik  seragam (Rubiyanto, 2017).
Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi senyawa-senyawa  fitokimia  yang  terkandung dalam  ekstrak  daun  gedi  hijau  yang  didapat  dari hasil  maserasi  menggunakan  pelarut  n-heksan menggunakan metode GC - MS . Pemilihan n-heksan sebagai  pelarut  dikarenakan  tingkat  kepolarannya yang rendah sehinggah mampu mengekstrak lebih banyak senyawa non-polar dalam daun gedi hijau.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Peneliatian
Pembuatan
simplisia dilakukan di Laboratorium Analisis dan Laboratorium
Mikrobiologi  Farmasi,  Fakultas  Matematika  dan Ilmu  Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam Ratulangi  Manado  selama  bulan  Oktober  2020. Ekstraksi  dan  analisis GC - MS dilakukan  di Laboratorium  Penelitian  dan  Pengujian  Terpadu Universitas  Gadjah  Mada  (LPPT  UGM)  selama bulan Januari 2021.

## Alat dan Bahan
Alat Ayakan mesh 40,  timbangan  analitik  Adam PW 254, Blender Philips HR115 , Thermo Scientific
Trace 1310 Gas  Chromatograph,  Thermo Scientific ISQ  LT Single  Quadropole  Mass Spektrometer, ATR Biotech Infors HT Ecotron Laboratory Benchtop Incubator  Shaker  Oven , vortex  mixer , centrifuge, aluminium  foil, alat-alat gelas,  pipet,  batang  pengaduk,  Laptop  Asus  tipe X454Y dengan spesifikasi CPU AMD A8-7410 up to 2.5 GHz, RAM (Random Access Memory) 4 GB dan Graphic  Card AMD Radeon  R5  Graphics , laptop terhubung ke internet.

## Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini, yaitu  daun  gedi  hijau Abelmoschus  manihot (L.) Medik dan pelarut n-heksan.

## Prosedur
Sampel yang digunakan, yaitu daun gedi hijau yang  diperoleh  dari  Girian  Bawah,  Bitung, Sulawesi  Utara.  Daun  dibersihkan  dari  pengotor dan  dicuci  di  bawah  air  mengalir  sampai  bersih. Sampel kemudian dikeringkan menggunakan oven pada  suhu  40°C.  Sampel  yang  telah  kering dihaluskan menjadi menggunakan blender , kemudian  diayak  menggunakan  ayakan mesh 40 sehingga  didapatkan  serbuk  halus  dan  homogen (simplisia).
Pembuatan ekstrak daun gedi hijau menggunakan  metode  maserasi,  dimana  simplisia daun gedi hijau dimasukkan ke dalam micro tube , ditambahkan  pelarut  n-heksan,  lalu  di- vortex dan disentrifugasi. Supernatan yang terbentuk  diambil untuk  dianalisis  dengan GC-MS .  Waktu  diatur selama  60  menit  dengan  suhu  injektor  260°C, detektor  250°,  dan  kolom  325°C.  Gas  helium digunakan  sebagai  pembawa  dengan  laju  aliran konstan 1 ml/menit. Identifikasi menggunakan GC- MS menunjukkan  daftar  senyawa  fitokimia berdasarkan  waktu  retensi  dan  berat  molekul  tiap senyawa yang disajikan dalam bentuk kromatogram.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Analisis GC - MS
Analisis GC - MS ekstrak  n-heksan  daun  gedi hijau  ditunjukkan  dalam  bentuk  kromatogram ( Gambar  1 ). GC - MS merupakan  teknik  analisis dengan  melakukan  pemisahan  dan  indentifikasi senyawa  berdasarkan  waktu  retensi  dan  berat molekul. Kromatografi gas dapat digunakan untuk membaca senyawa  dengan  konsentrasi  paling rendah sehingga dapat mengidentifikasi metabolit sekunder dalam tanaman yang ditampilkan dalam bentuk kromatogram (Al-Rubaye, et. al. , 2017).
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Gambar 1 . Hasil kromatogram GC - MS dari ekstrak N-Heksan Daun Gedi Hijau
Hasil GC - MS menjunjukkan  bahwa  terdapat 56 kemungkinan senyawa dengan Similarity Index (SI)  berbeda  yang  berhasil  diidentifikasi  dari ekstrak  n-heksan  daun  gedi  hijau  ( Tabel  1 ). Komponen  senyawa  terbanyak  dari  ekstrak  n- heksan  daun  gedi  hijau  yang  ditunjukkan  oleh
Tabel  1 terletak  pada peak 19  dengan  persentase kadar  ( retention  area )  yaitu  22.85%.  Senyawa- senyawa  yang  teridentifikasi  pada peak tersebut adalah Ethyl  9,12,15-octadecatrienoate;  9,12,15- Octadecatrienoic  acid,  ethyl  ester,  (Z,Z,Z)- dan Methyl 8,11,14-heptadecatrienoate .
Tabel 1. Hasil Kromatogram GC-MS dari Ekstrak N-Heksan Daun Gedi Hijau Peak RT Nama Senyawa Hit 1 Nama Senyawa Hit 2 Nama Senyawa Hit 3 Retent ion Area (%) 1 4.007 2-Ethyl- oxetane 1,6-Anhydro-2,4- dideoxy-ß- D-ribo - hexopyranose Cyclobutane, 1,1- dimethyl- 2-octyl- 1.78 2 4.256 Pentane, 2,2,3,4- tetramethyl- Hexane, 2,3,4- trimethyl- Hexane, 2,4-dimethyl- 0.67 3 8.095 Spiro [2.2] pentane -1- carboxylic acid, 2- cyclopropyl -2-methyl- 5-Tetradecen -3-yne, (E)- trans-Z-a- Bisabolene epoxide 0.42 4 9.612 Cyclohexene, 1- methyl-5- (1- methylethenyl)-, (R)- Cyclohexene, 1-methyl -5-(1-methylethenyl)- Cyclohexene, 1-methyl -4-(1-methylethenyl)-, (S)- 10.41 5 10.452 Octadecane, 6-methyl- 3-Trifluoroace toxypentadecane Tetradecane, 2,6,10- trimethyl- 0.67 6 16.799 Octadecane, 6-methyl- Tetradecane, 2,6,10 - trimethyl- 1-Iodo-2 - methylundecane 0.58 7 22.26 Guaia-1(10), 11-diene Naphthalene, 1,2,3,5,6,7, 8,8a - octahydro- 1,8a- dimethyl- 7-(1- methylethenyl)-, [1S- (1a,7a,8aa)]- a-Guaiene 7.05
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
8 22.380 Octadecane, 6-methyl- Tetradecane, 2,6,10 - trimethyl- 9-Octadecen- 12-ynoic acid, methyl ester 0.65 9 22.485 cis-a-Bisabolene a-Bulnesene (Guaia- 1(10) ,11-diene) 2,6,10,10-Tetramethyl bicyclo[7.2.0] undeca- 2,6-diene 0.79 10 27.332 Octadecane, 6-methyl- Octadecane, 3-ethyl - 5-(2-ethylbutyl)- Heptadecane, 9-octyl- 0.81 11 30.077 3,7,11,15-Tetramethyl- 2-hexadecen-1 -ol Neophytadiene Phytol, acetate 2.03 12 30.223 2-Trifluoroacetoxy pentadecane 3-Trifluoroace toxypentadecane 2-Trifluoroac etoxydodecane 0.74 13 30.951 17-Octadecynoic acid 13-Heptadecyn-1-ol Ethanol, 2-(9,12- octadecadienyloxy)-, (Z,Z)- 0.61 14 31.760 Octadecane, 3-ethyl-5 -(2-ethylbutyl)- Ethanol, 2- (octadecyloxy)- Tetradecane, 2,6,10- trimethyl- 1.01 15 33.158 Hexadecanoic acid, ethyl ester Hexadecanoic acid, 2- methyl-, methyl ester Nonadecanoic acid, ethyl ester 8.14 16 35.154 Ethyl iso-allocholate Cyclopropane dodecanoic acid, 2- octyl-, methyl ester 9-Octadecenoic acid (Z)-, 2-hydroxy-1- (hydroxymethyl)ethyl ester 0.54 17 35.464 Phytol 3,7,11,15-Tetramethyl- 2-hexadecen-1-ol Phytol, acetate 20.99 18 36.239 Ethyl 9.cis., 11.trans.- octadecadienoate Linoleic acid ethyl ester 9,12-Octadeca dienoic acid, ethyl ester 4.07 19 36.362 Ethyl 9,12,15- octadecatrienoate 9,12,15- Octadecatrienoic acid, ethyl ester, (Z,Z,Z)- Methyl 8,11,14- heptadecatrienoate 22.85 20 36.804 Ethyl iso-allocholate 3,9-Epoxypregnane- 11ß,20-diol, 3a- methoxy-18-[N- methyl-N-(2',14- epoxyethyl)amino]- 3-Pyridinecarboxylic acid, 2,7,10-tris (acetyloxy)-1,1a, 2,3,4,6, 7,10,11,11a- decahydro- 1,1,3,6,9- pentamethyl- 4-oxo- 4a,7a-epoxy -5H- cyclopenta[a] cyclopropa[f] cycloundecen-11-yl ester, [1aR-(1aR*, 2R*,3S*, 4aR*,6S*, 7S*,7aS*,8E, 10R*, 11R*,11aS*)]- 0.61 21 37.249 3,7,11,15- Tetramethyl-2- hexadecen-1-ol Z-14-Octadecen -1-ol acetate cis-10- Nonadecenoic acid 2.03 22 51.969 trans- Geranylgeraniol  Docosa-2,6,10, 14,18- pentaen-22-al, Spirost-8-en-11-one, 3-hydroxy-, 12.53
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
2,6,10,15,18- pentamethyl-, all-trans (3ß,5a,14ß,
20ß,22ß,25R)-
Senyawa-senyawa  metabolit  sekunder  yang teridentifikasi  menggunakan GC - MS dalam  hasil penelitian  ini  cukup  beragam,  diantaranya  ada senyawa 3-Pyridinecarboxylic  acid,2,7,10-tris (acetyloxy)-1,1a,2,3,4,6,7,10,11,11a-decahydro- 1,1, 3, 6, 9 - pentamethyl - 4 - oxo-4a,7a-epoxy-5H- cyclopenta[a] cyclopropa[f] cycloundecen - 11 - yl ester, [1aR-(1aR*, 2R*, 3S*, 4aR*, 6S*, 7S*, 7aS*, 8E,10R*,11R*,11aS*)] yang  merupakan  senyawa golongan  terpenoid,  kemudian  senyawa 3,9- Epoxypregnane-11ß, 20-diol, 3a- methoxy - 18 - [N -  methyl  -  N  -  (2',  14-epoxyethyl)  amino] yang merupakan senyawa golongan alkaloid. Selain itu senyawa Spirost-8-en-11-one, 3-hydroxy-, (3ß, 5a, 14ß,  20ß,  22ß,  25R) dan  senyawa Ethyl  iso- allocholate termasuk  dalam  golongan  steroid. Hasil  ini  memberikan  potensi  farmakologis  yang luas  bagi  penggunaan  senyawa-senyawa  yang didapat dari daun gedi hijau.
Menurut  penelitian  Dewantara, et.al .  (2017) tentang penurunan kadar gula darah tikus, ekstrak daun  gedi  hijau  memiliki  kandungan  metabolit sekunder  berupa  flavonoid,  fenolik,  alkaloid, steroid  dan  saponin,  sehingga  ekstrak  daun  gedi hijau mampu memberikan efek antihiperglikemia. Penelitian  Umboh, et.al .  (2019)  tentang  uji aktivitas  ekstrak  daun  gedi  hijau  terhadap  xantin oksidase,  membuktikan  bahwa  daun  gedi  hijau memiliki  kandungan  metabolit  sekunder  berupa flavonoid  yang  tinggi  dan  memiliki  potensi farmakologi  sebagai  antihiperurisemia.  Penelitian Susilawati, et.al .  (2016),  membuktikan  bahwa ekstrak  daun  gedi  hijau  mengandung  senyawa- senyawa  metabolit  sekunder  seperti  flavonoid, alkaloid,  tanin  dan  saponin  yang  mampu melindungi  mukosa  lambung  sebagai  agen gastroprotektif.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  menggunakan GC - MS ,  terdeteksi  22 peak yang  di  dalamnya terdapat  56  kemungkinan  komponen  senyawa fitokimia  dengan Similarity  Index (SI)  berbeda yang berhasil diekstraksi menggunakan pelarut n- heksan dari daun gedi hijau.

## SARAN
Penelitian ini merupakan dasar yang berisikan daftar senyawa hasil GC - MS , maka perlu dilakukan penelitian  lanjutan  baik  secara in  silico , in  vivo
maupun in  vitro untuk  memperjelas  potensi  dan aktivitas dari senyawa-senyawa fitokimia tersebut.

## DAFTAR PUSTAKA
Al-Rubaye, Abeer Fauzi, Imad Hadi Hameed 2 and Mohanad Jawad Kadhim.  2017. A Review: Uses of Gas Chromatography-Mass Spectrometry  (GC-MS)  Technique  for Analysis  of  Bioactive  Natural  Compounds of  Some  Plants. International  Journal  of
Toxicological and Pharmacological Research 2017. 9(1): 81-85.
Dewantara  I  Ketut  Gede  Dharma,  Gunawan  I Wayan Gede dan Wirajana I Nengah. 2017. Uji  Potensi  Ekstrak  Etanol  Daun  Gedi Abelmoschus manihot (L.) Terhadap Aktivitas Antioksidan dan Penurunan Kadar Glukosa  Darah  Tikus  Putih  Galur  Wistar Yang  Diinduksi  Aloksan. Cakra  Kimia (Indonesia E-Journal of Applied Chemistry) . 5(2): 94-101.
Mamahit Lexie dan Soekamto Nuhuk. 2010. Satu Senyawa Asam Organik Yang Diisolasi dari Daun  Gedi  ( Abelmoschus  Manihot L. Medik)  Asal  Sulawesi  Utara. Chem.  Prog . 3(1): 42-45.
Susilawati Ni Made, Yuliet dan Khaerati Khildah. 2016.  Aktivitas  Gastroprotektif  Ekstrak Etanol  Daun  Gedi  Hijau  ( Abelmoschus Manihot (L.) Medik) Terhadap Tikus Putih Jantan ( Rattus norvegicus L.) yang Diinduksi dengan Aspirin. Natural Science:
Journal  of  Science  and  Thecnology. 5(3): 296-306.
Rubiyanto, Dwiarso. 2017. Metode Kromatografi . CV Budi Utama, Yogyakarta.
Todarwal Amol. 2011. Abelmoschus manihot Linn:
Ethnobotany, Phytochemistry and Pharmacology. Asian Journal of Traditional
Medicines. 4(1): 5-21. Umboh Defritsevani, Queljoe Edwin dan Yamlean Paulina. 2019. Uji Aktivitas
Antihiperurisemia  Ekstrak  Etanol  Daun Gedi  Hijau  ( Abelmoschus  Manihot (L.)
PHARMACON – PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI,
Medik)  pada  Tikus  Putih  Jantan  Galur Wistar  ( Rattus  norvegicus ). Pharmacon . 8(4): 878-887.