## UJI DAYA HAMBAT NANOPARTIKEL EKSTRAK RIMPANG LENGKUAS MERAH
( Alpinia purpurata K. Schum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Klebsiella pneumoniae ISOLAT URIN PADA PENDERITA INFEKSI SALURAN

## KEMIH RESISTEN ANTIBIOTIK CIPROFLOXACIN
Misella Regina C. Lasut 1) , Fatimawali 1) , Irma Antasionasti 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Nanoparticles  can  increase  the  solubility  of  compounds,  reduce  the  treatment  dose  and  increase absorption. Flavonoid and phenol compounds in red galangal can inhibit the growth of bacteria that have been resistant to antibiotics. The bioactivity of red galangal compounds is expected to increase when  the  size  of  nanoparticles  increases  antibacterial  activity.  This  study  aims  to  determine  the inhibition of the content of Red Galangal nanoparticles (Alpinia purpurata K.Schum) using chitosan on  the  growth  of  Klebsiella  pneumoniae  bacterial  urine  isolates  of  UTI  antibiotic-resistant Ciprofloxacin.  Nanoparticles  extracts  of  red  galangal  rhizome  was  made  using  ionic  gelation method, using extract concentration of 0.4%, tested for antibacterial activity using the wells method with  a  comparison  of  chitosan  0.4%,  acetic  acid  5%,  red  galangal  extract  25%.  Red  galangal rhizome  nanoparticles  gave  antibacterial  activity  value  to  the  bacteria  Klebsiella  pneumoniae  of 13.5  mm.  Therefore,  red  galangal  extracts  nanoparticles  can  inhibit  the  growth  of  Klebsiella pneumoniae urine isolate in  patients  with urinary tract infections with strong inhibitory categories based on Davis and Stout categories.
Keywords : Alpinia purpurata K. Schum, Klebsiella pneumonia, Nanoparticles.

## ABSTRAK
Nanopartikel  dapat  meningkatkan  kelarutan  senyawa,  mengurangi  dosis  pengobatan  dan meningkatkan  absorbsi.  Senyawa  flavonoid  dan  fenol  dalam  lengkuas  merah  mampu  menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  telah  resisten  terhadap  antibiotik.  Sifat  bioaktivitas  senyawa  lengkuas merah  diharapkan  akan  meningkat  ketika  berukuran  nanopartikel  untuk  meningkatkan  aktivitas antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui daya hambat kandungan nanopartikel rimpang Lengkuas Merah ( Alpinia purpurata K.Schum) menggunakan kitosan terhadap pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae isolat urin penderita ISK yang resisten antibiotik Ciprofloxacin. Nanopartikel ekstrak  rimpang  lengkuas  merah  dibuat  dengan  menggunakan  metode  gelasi  ionik,  dengan menggunakan  konsentrasi  esktrak  sebesar  0,4  %,  dilakukan  pengujian  aktivitas  antibakteri mengunakan metode sumuran dengan pembanding kitosan  0,4%, asam  asetat 5%, ekstrak lengkuas merah  25%.  Nanopartikel  rimpang  lengkuas  merah  memberikan  nilai  aktifitas  antibakteri  terhadap bakteri Klebsiella  pneumoniae sebesar  13,5  mm.  Oleh  karena  itu  nanopartikel  ekstrak  rimpang lengkuas  merah  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri Klebsiella  pneumoniae isolate  urin penderita  infeksi  saluran  kemih  dengan  kategori  daya  hambat  kuat  berdasrkan  kategori  Davis  dan Stout.
Kata Kunci : Alpinia purpurata K. Schum, Nanopartikel, Klebsiella pneumoniae.

## PENDAHULUAN
Aplikasi teknologi nanopartikel dalam
bidang farmasi mempunyai berbagai keunggulan  antara  lain  dapat  meningkatkan kelarutan senyawa, mengurangi dosis pengobatan dan meningkatkan absorbsi. Saat ini,  sintesis  nanopartikel  secara  biologi  lebih disukai  dibandingkan  metode  fisikokimia, karena  dinilai  lebih  memiliki  banyak keuntungan,  diantaranya  :  lebih ecofriendly , non-toxic, lebih reproducible dan morfologinya lebih baik (Kim, 2015).
Sumber  sintesis  nanopartikel  secara biologi adalah mikroorganisme dan tanaman. Namun demikian, dalam prakteknya penggunaan tanaman untuk sintesis nanopartikel  lebih  disukai  dibandingkan dengan  mikroorganisme  karena  berbagai alasan,  diantaranya:  langkah  yang  lebih sederhana,  lebih  cepat,  lebih cost-effective , lebih biocompatible sehingga  lebih  aplikatif untuk  digunakan  dalam  ranah  medis  (Kim dkk,  2016).  Sekian  banyak  tanaman  yang bisa  dimanfaatkan,  salah  satunya  adalah lengkuas merah ( Alpinia purpurata K.Schum).  Kandungan  metabolit  sekunder dalam  lengkuas  merah  adalah  flavonoid, fenol  yang  diduga  mampu  menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  telah  resisten terhadap antibiotik (Yuharmen dkk, 2002).
Sikome (2018)
di Manado melaporkan  bahwa  hasil  uji  resistensi dengan  17  isolat  menunjukan  ciprofloxacin memiliki  persentase  resisten  47,06  %  dan sensitif  sebesar  52,94  %  terhadap  Bakteri yang  berhasil  diidentifikasi  dari  1  isolat dengan  resistensi  tinggi  yaitu Klebsiella pneumoniae . Selain itu Klebsiella pneumoniae telah menjadi masalah serius di rumah  sakit  sebagai  akibat  dari  penyebaran infeksi  nosokomial  melalui  kateterisasi  urin (Aly, 2016).
Salah satu upaya yang dapat dilakukan dalam mengatasi resistensi adalah mengkombinasikan antibiotik dengan tanaman  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri dari antibiotik (Useng, 2014). Dalam hal ini, sifat  bioaktivitas  senyawa  lengkuas  merah diharapkan akan meningkat ketika berukuran nanopartikel  untuk  meningkatkan  aktivitas antibakteri.  Modifikasi  penelitian  mengenai nanopartikel  menggunakan  kitosan  telah banyak  dilakukan  baik  dalam  proses  kimia maupun  fisik  dengan  mengubah  ukuran partikel kitosan yaitu dalam bentuk nanopartikel.  Nanopartikel  menggunakan kitosan memiliki daya serap dan kemampuan  yang  lebih  baik  sebagai senyawa antibakteri (Karmelia 2009).
Kitosan  dimanfaatkan  sebagai  antibakteri dilihat  dari  kemampuan  muatan  positifnya berinteraksi  dengan  permukaan  sel  bakteri bermuatan negatif, sehingga dapat mengganggu  pertumbuhan  koloni  bakteri (Goy dkk, 2009).
Berdasarkan  latar  belakang  diatas, maka  penulis  tertarik  untuk  melakukan penelitian  uji  daya  hambat  nanopartikel rimpang lengkuas merah ( Alpinia  purpurata K.Schum)  terhadap  pertumbuhan  bakteri Klebsiella  pneumoniae K.  Schum  yang diisolasi  dari  urin  penderita  Infeksi  Saluran Kemih yang resisten antibiotik Ciprofloxacin.

## METODOLOGI PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Maret  sampai  Juni  2019  di  Laboratorium Mikrobiologi, Program studi Farmasi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi Manado.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu  gelas  ukur  ( Pyrex ),  Erlenmeyer  ( Pyrex ), tabung reaksi ( Pyrex ), corong, ayakan mesh 200, pisau,  timbangan  analitik  (aeADAM®),  blender
( Philips ),  thermometer,  sudip,  beker  gelas ( Pyrex ),  cawan  petri  ( Pyrex ), autoklaf (ALP), Laminar  Air  Flow (N-Bioteck), incubator (MMM  Group),  Alat  Destilasi,  Ose,  pingset,  L glass,  pipet  mikro  (ecopippette™),  mistar berskala  (Combo®) aluminium  foil ,  kertas saring, kertas lebel dan spritus.
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  meliputi  rimpang  Lengkuas Merah ( Alpinia purpurata K.Schum),
Kitosan,  Na-TPP,  Polysorbat  80,  bakteri Klebsiella pneumoniae , antibiotik ciprofloxacin, aquadest, etanol 96%, H2SO4 1%,  BaCl2.2H2O  1,175%,  NaCl  0,9%, media  Nutrient  Agar,  Larutan  standar  Mc. Farland 0,5.
Jenis penelitian ini merupakan eksperimental  laboratorium  dengan  sampel rimpang lengkuas merah 0,4% dan dilakukan pengujian pada bakteri.

## Persiapan Sampel
Sampel  yang  digunakan  diambil  dari kelurahan  Rurukan,  Kecamatan  Tomohon Timur,  Tomohon,  Sulawesi  Utara.  Sampel yang diambil ialah bagian rimpang Lengkuas  merah  yang  masih  segar.  Pada tahap awal sampel rimpang Lengkuas merah ditimbang  dengan  berat  1,5  kg.  Selanjutnya dicuci  dengan  air  mengalir  dengan  tujuan menghilangkan  pengotor.  Sampel  kemudian dirajang untuk mempermudah proses pengeringan.  Pengeringan  sampel  dilakukan dengan  cara  diangin-anginkan  selama  1 minggu.

## Pembuatan Ekstrak
Metode  yang  digunakan  untuk mengekstrak  rimpang  Lengkuas  merah ( Alpinia  purpurata  K.Schum ),  yaitu  dengan menggunakan  metode  maserasi.  Sebanyak 1,5 kg rimpang Lengkuas merah, dikeringkan  dan  dihaluskan  menjadi  serbuk
simplisia.  Sampel  yang  telah  ditimbang diekstraksi dengan 750 mL etanol 96% pada suhu  kamar  selama  5  hari  sambil  sesekali diaduk.  Setelah  5  hari  sampel  disaring dengan menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat satu. Sisanya dimaserasi kembali  dengan 450 mL pelarut  etanol 96% selama  2  hari  sambil  sesekali  diaduk kemudian  di  saring  dengan  kertas  saring menghasilkan  filtrat  dua.  Filtrat  satu  dan filtrat  dua  dikumpulkan  dan  diuapkan, sehingga  diperoleh  ekstrak  kental  lengkuas merah.
Pembuatan  Media  Dasar  dan  Media Pembenihan
Diambil Nutrient Agar (NA)
sebanyak 5,6 gram dilarutkan dalam 200 mL aquadest  menggunakan  erlenmeyer.  Setelah itu,  media  dihomogenkan  dengan stirer di atas  penangas  air  sampai  mendidih.  Media yang  sudah  homogen  ini  disterilkan  dalam autoklaf  pada  suhu  121ºC  selama  15  menit, kemudian  didinginkan  sampai  suhu  ±  45- 50ºC.  Media  dasar  dan  media  pembenihan digunakan dalam pembuatan media pengujian  sebagai  lapisan  dasar  dan  lapisan kedua.
Pembuatan  Larutan  Mc.  Farland  0,5 (standart kekeruhan)
Larutan H 2 SO 4 1% sebanyak 9,95 mL dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 .2H 2 O
1,175% sebanyak 0,05 mL dalam
erlenmeyer.  Kemudian  dikocok  sampai terbentuk larutan yang keruh. Kekeruhan ini dipakai  sebagai  standar  kekeruhan  suspensi bakteri uji (Borges dan Bresson, 2004).

## Suspensi Bakteri
Bakteri  uji  pada  media  agar  miring diambil  dengan  jarum  ose  steril  lalu
disuspensikan  dengan  cara  dimasukkan  ke dalam tabung yang berisi 5 mL larutan NaCl steril  0,9%.  Suspensi  yang  terbentuk disetarakan  kekeruhannya  dengan  larutan Mc. Farland 0,5.

## Pembuatan  Larutan  Kontrol  Positif  dan Larutan Kontrol Negatif
Larutan  kontrol  positif  dibuat  dari sediaan  obat  tablet  ciprofloxacin  500  mg, dengan  cara  satu  tablet  ciprofloxacin digerus.  Setelah  itu  ditimbang  sebanyak  50 mg  dan  dilarutkan  dalam  50  mL  aquades. Selanjutnya  diambil  1  mL  dan  ditambahkan aquades  hingga  10  mL  untuk  memperoleh larutan  ciprofloxacin  5μg/50μl.  Larutan kontrol negatif digunakan aquadest.

## Pembuatan Larutan Kitosan
Kitosan ditimbang sebanyak 0,4 gram kemudian  kitosan  dilarutkan  dengan  larutan asam  asetat  5  %v/v  hingga  100  ml  dan diaduk  dengan  pengaduk  magnetik  hingga larut.

## Pembuatan larutan Na-TPP
Natrium Tripolifosfat (Na-TPP) ditimbang masing-masing sebanyak 0,1 gram kemudian dilarutkan dengan aquadest hingga 100  ml  kemudian  diaduk  dengan  pengaduk magnetik hingga larut.

## Penyiapan Ekstrak Lengkuas Merah
Sebanyak  0,1  gram  ekstrak  lengkuas merah ditimbang dan dilarutkan dalam etanol 96%  sebanyak  4  ml  dan  dilakukan  sonikasi selama 10 menit.
Pembuatan
Nanopartikel
Ekstrak Lengkuas Merah
Larutan kitosan 0,4%  dimasukkan ke dalam  gelas  beaker  sebanyak  100  ml.
Kemudian ditambahkan polysorbat 80 sebanyak  1  ml  dan  diaduk  menggunakan pengaduk  magnetik    dengan  kecepatan  1000 rpm  selama  10  menit.  Setelah  itu,  pada larutan  kitosan  0,4%  dimasukkan  0,1  gram ekstrak  Lengkuas  Merah  dan  diaduk  dengan menggunakan homogenizer dengan kecepatan  1500  rpm  selama  30  menit. Setelah  itu,  ke  dalam  larutan  kitosan  0,4% ditambahkan larutan Na-TPP sebanyak 20 ml lalu dihomogenizer pada kecepatan 1500 rpm selama 90 menit.

## Uji Aktivitas Antibakteri secara In-vitro
Larutan  uji  nanopartikel  rimpang lengkuas  merah  dengan  konsentrasi  0,4%; larutan  kitosan  0,4%:  ekstrak  lengkuas merah  25%;  aquadest  sebagai  kontrol negatif;  larutan  Ciprofloxacin  5μg/50μl sebagai  kontrol  positif,  masing-masing diteteskan  pada  sumur  yang  berbeda sebanyak  50µl  Kemudian  cawan  petri diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  37°C selama 1x24 jam.

## Pengamatan dan Pengukuran
Pengamatan  dilakukan  setelah  1x24
jam masa inkubasi. Daerah bening merupakan petunjuk kepekaan bakteri terhadap  antibiotik  atau  bahan  antibakteri lainnya  yang  digunakan  sebagai  bahan  uji yang dinyatakan dengan lebar diameter zona hambat. Diameter zona hambat diukur dalam satuan milimeter (mm) menggunakan mistar berskala  dengan  cara  diameter  keseluruhan dikurangi diameter sumuran 7 mm.
Kemudian  diameter  zona  hambat  tersebut dikategorikan  kekuatan  daya  antibakterinya berdasarkan  penggolongan  Davis  and  Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ektraksi
Sampel  rimpang  lengkuas  merah seberat  1,5  kg,  dikeringkan  dan  dihaluskan menghasilkan serbuk simplisia sebanyak 100 gram, selanjutnya diekstraksi dengan metode maserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96% sebanyak  750mL.  Proses  maserasi  dilakukan 3x24  jam  dengan  dua  kali  remaserasi  atau pergantian  pelarut  yang  baru.  Hasil  maserasi selanjutnya  diuapkan  menggunakan  oven dengan  suhu  40°C  sehingga  diperoleh ekstrak  kental  lengkuas  merah  sebanyak  5,8 gr.

## Nanopartikel Lengkuas Merah
Nanopartikel ekstrak etanol Lengkuas Merah  dibuat  berdasarkan  metode  gelasi ionik  antara  kitosan  dan  Na-TPP.  Proses pembuatan  formulasi  nanopartikel  ekstrak Lengkuas  Merah  dilakukan  dengan  cara mereaksikan  campuran  kitosan,  ekstrak Lengkuas Merah dengan natrium tripolifosfat (Na-TPP).  Dengan  mengatur  konsentrasi kitosan dan Na-TPP, perbandingan konsentrasi  antara  kitosan  dan  Na-TPP  yang digunakan sebagaimana pada metode penelitian ini yaitu kitosan 0,4% dan Na-TPP 0,1%.  Penetesan  campuran  Na-TPP  dan Polysorbate  80  dalam  larutan  ekstrak lengkuas  merah  dan  kitosan  dilakukan dengan  kecepatan  konstan  pengadukan  tetap dilakukan selama 90 menit untuk menyempurnakan
pembentukan nano partikel.

## Uji Aktivitas Antibakteri
Tabel  1.  Hasil  Pengukuran  Diameter  Zona
Hambat menggunakan Metode Sumuran Perlakuan Diameter Zona Hambat (mm) UI UII UIII Rata- rata Kontrol (-) Kontrol (+) Nanopartikel Kitosan 0,4% Asam Asetat Ekstrak 25% 0 11,5 13 4,5 9 2,5 0 12 14 7 7,5 2
0 11 13,5
5 7,5 2,5 0 11,5 13,5 5,5 8 2,3 Uji  daya  hambat  ekstrak  Lengkuas merah terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae menggunakan  metode  difusi sumur,  digunakan    metode  ini  agar  supaya cocok  digunakan  untuk  komponen  yang berbahan  dasar  cair  kerena  komponen tersebut dapat berdifusi baik ke dalam media agar  padat.  Metode  ini  menggunakan  media Nutrient  Agar (NA). Media Nutrient  Agar (NA) merupakan medium yang baik sebagai tempat  tumbuhnya  beberapa  bakteri  gram positif  dan  gram  negatif  yang  dimanfaatkan sebagai  sumber  nutrisi  bagi  pertumbuhan bakteri. Dalam uji efektivitas hasil diperoleh melalui  pengamatan  yang  dilakukan  selama 1  x  24  jam  masa  inkubasi  pada  suhu  37°C dengan 3 kali pengulangan.
Pengujian  ini  menggunakan  kontrol positif  dan  kontrol  negatif.  Kontrol  positif berfungsi sebagai kontrol dari zat uji dengan membandingkan  diameter  daerah  hambat yang  terbentuk  (Dwijendra,  2014).  Kontrol positif menggunakan Ciprofloxacin. Ciprofloxacin  dipilih  sebagai  kontrol  positif untuk  melihat  apakah  bakteri Klebsiella pneumoniae yang  diujikan    benar  resisten terhadap  antibiotik  ciprofloxacin.  Menurut Sarro (2001) antibiotik Ciprofloxacin merupakan antibiotik dengan spektrum luas, yaitu  antibiotik  yang  memiliki  aktivitas
banyak  jenis  bakteri,  virus,  jamur  dan protozoa.  Pada  penelitian  ini,  didapatkan hasil adanya zona hambat  yang terbentuk  di sekitar sumur yang diberi antibiotik ciprofloxacin. Dalam pengujian zona hambat dikategorikan  kuat  dengan  ukuran  11,5  mm akan  tetapi  pada  zona  hambat  masih terbentuk  sel  bakteri  yang  manandakan bakteri Klebsiella  pneumoniae resisten terhadap  antibiotik  ciprofloxacin.  Bakteri menjadi  resisten  terhadap  antibiotik  dapat mengubah  permukaan  selnya  sehingga antibiotik  tidak  lagi  mampu  membunuh  sel bakteri  (Schulz dkk,  2016).  Sel  resisten terjadi  dengan  adanya  penurunan  membran sel  terhadap  antibiotik  dan  variasi  jalur metabolisme tersebut oleh antibakteri. Akibatnya  obat  tersebut  tidak  efektif  lagi bagi bakteri (Setyabudy dkk, 1995). Kontrol negatif  digunakan  untuk  mengetahui  ada tidaknya pengaruh pelarut terhadap pertumbuhan  bakteri  uji  sehingga  dapat diketahui  bahwa  aktivitas  yang  ditunjukan ialah  zat  yang  terkandung  dalam  sampel bukan  berasal  dari  pelarut  yang  digunakan. Dalam  pengujian  kontrol  negatif  aquades tidak  menunjukkan  adanya  daya  hambat terhadap bakteri uji.
Tabel 2. Standar Kekuatan Daya Antibakteri Menurut  Davis  dan  Stout (1971) Diameter Zona Bening (mm) Kategori <5 Lemah 5-10 Sedang 11-20 Kuat >20 Sangat Kuat Pengujian aktifitas antibakteri nanopartikel ekstrak lengkuas merah memiliki  zona  hambat  sebesar  13,5  mm dikategorikan memiliki aktifitas antibakteri
kuat  menurut  standar  kekuatan  antibakteri Davis dan Stout (1971). Aktivitas antibakteri yang dihasilkan dari nanopartikel ekstrak lengkuas merah menunjukkan peningkatan  dibandingkan  dengan  larutan kitosan  yang  hanya  memiliki  ukuran  zona hambat  5,5  mm  tergolong  dalam  kategori lemah.  Hal  ini  disebabkan  karena  suspensi nanopartikel ekstrak lengkuas merah mempunyai  aktifitas  interaksi  yang  lebih besar  terhadap  sel  bakteri  dibandingkan dengan  larutan  kitosan  saja.  Semakin  kecil ukuran  partikel  dari  suspensi  nanopartikel maka  akan  mempunyai  sifat  fisika  kimia yang unik seperti luas permukaan yang besar dan  reaktivitas  yang  besar  dan  karenanya dapat  meningkatkan  interaksi  antar  muatan pada  permukaan  bakteri  dan  mengakibatkan efek  antibakteri  yang  lebih  besar  (Zhang dkk, 2004).
Asam  asetat  digunakan  sebagai pelarut  dari  kitosan,  digunakan  sebagai pelarut karena sifat kitosan yang tidak dapat larut  dalam  air,  hanya  dapat  larut  dalam kondisi  pH  yang  asam,  namun  asam  asetat mempunyai  aktivitas  antibakteri.  Oleh karena  itu,  dilakukan  pengujian  aktivitas antibakteri  larutan  asam  asetat  sebagai pembanding  terhadap  aktivitas  antibakteri larutan  kitosan.  Dalam  pengujian  ini  asam asetat  memiliki  daya  hambat  antibakteri sebesar  8  mm  tergolong  dalam  kategori sedang.
Dalam pengujian zona hambat ekstrak lengkuas merah 25% memiliki daya hambat antibakteri sebesar 2,3 mm tergolong  dalam  kategori  lemah.  Jika dibandingkan dengan penelitian yang dilakukan  oleh  Abubakar  (2019)  pada ekstrak  Lengkuas  Merah  konsentrasi  25%, besar zona  hambat  yang dihasilkan 4,5 mm. Hal  ini  menunjukan  bahwa  hasil  yang diperoleh selaras dengan penelitian
sebelumnya  atau  sama-sama  tergolong dalam kategori lemah. Abubakar (2019) juga menyatakan bahwa semakin besar konsentrasi  ekstrak  Lengkuas  Merah  yang diberikan, maka semakin besar pula diameter  zona  bening  yang  terbentuk. Adanya  pengaruh  senyawa  bioaktif  yang terdapat  pada  ekstrak  Lengkuas  merah seperti golongan senyawa flavonoid, tannin, kuinon dan terpenoid (Kusriani dkk, 2015).  Senyawa-senyawa  tersebut  diduga merupakan  senyawa  yang  berperan  dalam menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae .

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan dapat disimpulkan bahwa Nanopartikel ekstrak rimpang Lengkuas Merah ( Alpinia  purpurata K.Schum) memiliki  daya
hambat
terhadap bakteri
Klebsiella pneumoniae isolat  urin  penderita  infeksi saluran kemih. D engan hasil pengukuran rata- rata  13,5  mm  dikategorikan  daya  hambat kuat berdasarkan teori Davis dan Stout.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  tentang  potensi  antibakteri  dari  zat aktif  yang  terdapat  dalam  ekstrak  rimpang Lengkuas Merah.

## DAFTAR PUSTAKA
Abubakar,  Poetry  Melinda  S .  Uji  daya
hambat  ekstrak  rimpang  lengkuas merah  (Alpinia  purpurata  K.Schum) terhadap pertumbuhan bakteri Klebsiella  pneumoniae  isolat  sputum pada  penderita  pneumonia  resisten antibiotik seftriakson. [skripsi]. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam
Ratulangi. Manado. 2019.
Aly,  S.A.  2016.  Bacterial  catheterassociated urinary tract infection in the intensive care  unit  of  Assiut  University Hospital .  Al  Azhar  Assiut  Medical Journal . 14:52–58.
Dwijendra,  I.  M. Aktivitas  Antibakteri  dan Karakterisasi  Senyawa  Fraksi  Spos Lamellodysidea herbacea yang Diperoleh dari Teluk Manado . [skripsi].  Program  Studi  Farmasi FMIPA  Universitas  Sam  Ratulangi, Manado. 2014.
Davis,  W.  W.,  T.R.  Stout.  1971.  Disc  plate method  of  microbiological  assay. Journal of microbiology 22: 659-665.
Goy  RC,  Douglas  B,  Odilio  BGA.  2009.  A review of the antimicrobial activity of chitosan. Journal Polymer. 19:1-7.
Karmelia  S. Pengaruh  derajat  deasetilasi nano  kitosan  untuk  menyerap  ion Zn2+ dari limbah cair industri karet. [tesis].  Universitas  Sumatera  Utara. Medan. 2009.
Kim,  Y.  (2015).  Biogenic  silver  and  gold nanoparticles  synthesized  using  red ginseng  root  extract  ,  and  their applications. Artificial Cells, Nanomedicine,  and  Biotechnology . International journal of nanomedicine . 10:3593-3601. Kim,  Y.,  Yang,  D.,  Singh,  P.,  Kim,  Y.,  & Zhang, D. (2016). Biological Synthesis  of  Nanoparticles  from Plants and Microorganisms. International  Journal  of  Pharmacy and  Pharmaceutical  Sciences .  7:387- 389.
Kusriani,  R.H.,dan  Shofia  Az  Zahra.  2015. Skrinning  Fitokimia  dan  Penetapan Kadar Senyawa Fenolik Total Ekstrak Rimpang Lengkuas Merah dan Rimpang  Lengkuas  Putih (Alpinia galangal  L.),  Prosiding  Seminar Nasional Penelitian dan PKM Kesehatan . 1:295-302.
Sarro,  A.D.,  G.D.  Sarro.  2001.  Adverse Reactions  to  Fluoroquinolones.  An Overview  on  Mechanism  Aspect. Current Medicinal Chemistry . 8 :371- 384
Sikome  C.,  Fatimawali.,  Trina  E.  Tallei. 2018.  Isolasi  dan  Identifikasi  secara biomolekuler bakteri penyebab penyakit  infeksi  saluran  kemih  yang resisten terhadap antibiotik ciprofloxacin  di  RSUP.  DR.R.D.
Kandou  Manado. Jurnal  Ilmiah
Farmasi Pharmacon . 7:62-70.
Setiabudy, R., Gunawan, S. G., Nafrialdi dan Elysabeth.  2009. Antimikroba .  Balai Penerbit FK UI, Jakarta.
Useng, Asmah. Analisis Penggunaan
Antibiotik Pada Penyakit Infeki Saluran Kemih Berdasarkan Evidance  Base  Medicine  (EBM)  di RSUD Dr. Moewardi Periode Januari-Juni 2013. [skripsi]. Universitas  Muhamadiah.  Surakarta.
2014.
Yuharmen, dkk. 2002. Uji Aktivitas Antimikroba Nanopartikel dan Ekstrak Methanol Lengkuas ( Lenguas galang )  Jurusan  Kimia,  FMIPA.
Universitas Riau,Riau.
Zhang, H., Oh, M., Allen, C., Kumacheva. E.
(2004). Monodisperse chitosan
nanoparticles for mucosal drug
delivery. Biomacromolecules.
5:2461–2468.