Jurnal Pharmascience, Vol. 10, No.1, Februari 2023, hal: 51-57 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Studi Fitokimia Jamur Endofit Tumbuhan Seluang Belum (Luvunga sarmentosa (Blume) Kurz) Asal Kabupaten Tabalong Kalsel
Nashrul Wathan*, Pratika Viogenta, Jehan Azizah, Fery Ramadhan, Sindwi Rinanda Sari
Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru, Kalimantan Selatan, Indonesia
Email: nashrul.far@ulm.ac.id

## ABSTRAK
Seluang  belum  adalah  tumbuhan  asal  Kalimantan  yang  dipercaya  oleh masyarakat  sekitar  sebagai  afrodisiaka  karena  memiliki  metabolit  sekunder  yang bervariasi. Endofit adalah mikroba yang hidup di dalam jaringan tumbuhan dan mampu menghasilkan metabolit sekunder yang serupa dengan inangnya. Tujuan dari penelitian ini  adalah  mendapatkan  isolat  jamur  endofit  dari  akar  Seluang  belum  (Luvunga sarmentosa  (Blume)  Kurz.)  dan  melakukan  skrining  fitokimia  senyawa  yang dikandungnya.  Proses  penumbuhan  isolat  jamur  endofit  dari  akar  seluang  belum  (L. sarmentosa) dilakukan pada media Potato Dextrose Agar (PDA) hingga didapatkan isolat terpisah.  Jamur  endofit  murni  yang  dihasilkan  kemudian  diamati  identitasnya  secara makroskopik dan mikroskopik. Jamur endofit hasil isolasi lalu dibiakkan dalam media Potato  Dextrose  Broth  (PDB),  senyawa  bioaktif  yang  terkandung  lalu  diekstraksi menggunakan etil  asetat dan  dilanjutkan identifikasi  senyawa  fitokimianya.  Penelitian ini  mendapatkan  6  isolat  endofit  yang  diidentifikasi  sebagai  Rhizoctonia  solani, Corynespora  citricola  Ellis,  Arthrobotrys  oligospora  Fresenius,  Alternaria  Nees:Fr., Phytophthora  capsici  dan  Tripospermum  Speg.  Kandungan  senyawa  fitokimia  yang diskrining dari ekstrak etil asetat keenam jamur endofit hasilnya beberapa isolat positif mengandung golongan senyawa fenolik, flavonoid, steroid, dan terpenoid.
Kata Kunci: Saluang Bilung, lavanga sarmentosa, Fungi Endofit, Herba Kalimantan, Suku Dayak

## ABSTRACT
Seluang belum. is a plant from Kalimantan which commonly believes by local people as an aphrodisiac because it has various secondary metabolites. Endophytes are microbes that live in plant tissues and are able to produce secondary metabolites similar to their host. The  purpose  of  this  study  is  to  isolating  the  endophytic  fungus  from  Seluang  belum
(Luvunga  sarmentosa  (Blume)  Kurz)  root  and  to  perform  phytochemical  screening  of  its metabolites. Endophytic fungi isolated from seluang belum roots then grown in PDA (Potato Dextrose  Agar)  media  until  obtained  separate  isolates.  The  obtained  fungal  isolates  then identified macroscopically and microscopically to determine their identity. The isolated fungi then  fermented  in  PDB  (Potato  Dextrose  Broth)  media,  the  secondary  metabolites  then extracted  with  ethyl  acetate  and  identified  its  phytochemicals.  The  results  showed  that  6 endophytic  isolates  were  identified  as  Rhizoctonia  solani,  Corynespora  citricola  Ellis, Arthrobotrys  oligospora  Fresenius,  Alternaria  Nees:Fr.,  Phytophthora  capsici  and Tripospermum Speg. The phytochemical content that screened from the ethyl acetate extract of 6 endophytic fungi was resulting some positive containing groups of phenolic compounds, flavonoids, steroids, and terpenoids.
Keywords: Saluang Bilung, Lavanga sarmentosa, Endophytes Fungi, Kalimantan’s Herbs, Dayak Tribes

## I. PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang kaya akan keanekaragaman hayati (Arsyad, 2018). Khususnya daerah Kalimantan yang didukung  oleh  potensi  kearifan  tradisional dan  kearifan  lokal  masyarakatnya.  Salah satu tanaman yang dimanfaatkan masyarakat lokal Kalimantan  adalah seluang  belum  ( L . sarmentosa )  yang dikonsumsi  dengan  cara  meminum  air rebusan  akarnya  dan  dipercaya  untuk meningkatkan  kekuatan  tubuh,  gairah seksual  dan  kesuburan  laki-laki  (Wathan dan Imaningsih, 2019).
Penemuan  obat  baru  dapat  diawali dari  penelusuran  senyawa  bioaktif  yang dihasilkan oleh bahan hayati, dimana salah satunya adalah jamur endofit.
Kemungkinan  adanya  beragam  aktifitas biologis  dari  senyawa  bioaktif  ini  dapat dimanfaatkan  menjadi starting  material untuk  pengembangan  produk  farmasi  atau pun  bidang  pertanian.  Mikroba  endofit
yang  hidup  bersimbiosis  dalam  tumbuhan obat tradisional kemungkinan besar memiliki  potensi  untuk  dikembangkan, selain  itu  kondisi  iklim  tropis  pada  hutan Kalimantan  diyakini  berpotensi  mengha- silkan  senyawa  bioaktif  dengan  variasi yang  lebih  banyak  dibandingkan  dengan endofit  tanaman-tanaman  yang  ada  di daerah  selain  beriklim  tropis  (Aly et  al ., 2013).  Mengacu  alasan  tersebut  maka endofit yang bersimbiosis, hidup  di dalam akar  tumbuhan L . sarmentosa menarik untuk diteliti lebih lanjut.

## II. METODE

## A. Determinasi Sampel Tumbuhan
Sampel  tumbuhan  seluang  belum ( L.  sarmentosa ) diambil  dari  Desa  Muara Uya Kabupaten Tabalong Kalsel.
Determinasi  terhadap  sampel  dilakukan  di Laboratorium FMIPA ULM.

## B. Sterilisasi Sampel
Akar  tumbuhan L . sarmentosa disiapkan  dengan  cara  dipotong  lebih kurang  1  cm.  Potongan  tersebut  selan- jutnya dibersihkan dengan dialiri air selama 10  menit.  Potongan  organ  akar  lalu disterilisasi  menggunakan  alkohol  70% kira-kira selama 1 menit, Natrium hipoklorit (NaOCl/ Bayclin ® ) 5,25% selama lebih  kurang  3  menit  dan  terakhir menggunakan alkohol 70% selama 30 detik dan  dicuci  aquadest  steril  (Juwita et  al ., 2019).

## C. Isolasi Jamur Endofit
Sampel potongan akar ditempelkan di  media Potato  dextrose  agar /PDA (Himedia ® ) yang mengandung amoksisillin 100  mg/L  dan  inkubasi  selama  3-7  hari pada suhu ruang sambil diamati pertumbuhannya.  Koloni  yang  muncul selanjutnya  dimurnikan  dan  diidentifikasi baik secara makroskopik maupun mikroskopik  (Barnett  dan  Hunter,  1998). Pemurnian  dilakukan  dengan  memotong bagian  jamur  dengan  ose  lalu  isolat diinokulasikan pada media PDA yang baru dan diinkubasi pada suhu ruang  selama  7- 10 hari.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Determinasi Tumbuhan
Determinasi  tumbuhan  yang  telah dilakukan  laboratorium  FMIPA  ULM menghasilkan  data  klasifikasi  sampel  dan
menunjukkan sampel seluang  belum termasuk  dalam  family  Rutaceae  dengan nama spesies Luvunga sarmentosa (Blume.) Kurz.

## B. Sterilisasi Sampel Akar
Cara  isolasi  jamur  endofit  dari sampel L.  sarmentosa yaitu  mengambil bagian  akar  pada  posisi lateral  yang  dekat dengan  rambut  akar.  Sampel  akar  dicuci dengan dialiri air, bertujuan untuk menghilangkan  keberadaan  zat  asing ataupun tanah yang kemungkinan menempel di permukaan sampel, kemudian dilakukan  sterilisasi  permukaan  bertujuan menghilangkan  mikroba  selain  jamur endofit  yang  menempel  pada  bagian  akar sehingga  jamur  yang  nantinya  diisolasi benar-benar  merupakan  jamur  endofit (Strobel dan Daisy, 2003).
Dalam  proses  sterilisasi  permu- kaan,  larutan  alkohol  yang  digunakan bukan  alkohol  murni  melainkan  alkohol konsentrasi  70%  karena  dalam  proses mematikan mikroorganisme patogen diperlukan  air  sebagai  perantara  proses denaturasi protein pada sel mikro- organisme.  NaOCl/ Bayclin ® digunakan karena NaOCl dapat merusak membran sel mikroorganisme karena proteinnya
teroksidasi yang selanjutnya menonaktifkan  enzim  mikroorganisme (Pratiwi,  2008).  Sampel  akar  yang  telah disterilisasi  dicuci  aquadest  steril  dan
ditiriskan  di  atas  tisu  steril,  lalu  dipotong secara  membujur  guna  mendapatkan bagian  dengan  luas  permukaan  yang  lebih besar.

## C. Isolasi Jamur Endofit
Masing-masing  sampel  potongan akar L.  sarmentosa ditempelkan  di permukaan  medium  PDA  mengandung amoksisillin yang ada di dalam cawan petri dan diinkubasi selama 3-7 hari. Komposisi medium  PDA  terutama  adalah  ekstrak kentang,  merupakan  sumber  nutrisi  utama untuk  menumbuhkan  jamur.  Amoksisillin ditambahkan  ke  dalam  media  berfungsi menghambat  pertumbuhan  bakteri  Gram positif  maupun  bakteri  Gram  negatif, diketahui amoksisillin merupakan antibiotik berspektrum luas (Fayyaz et al. , 2013).
Jamur  yang  tumbuh  di  sekeliling sampel L.  sarmentosa diambil  dan ditumbuhkan pada media baru. Jamur terus ditumbuhkan  pada  media  baru  hingga
didapat  isolat  murni.  Fungi  yang  tumbuh dalam  bentuk  koloni  di  sekitar  sampel dimurnikan berdasarkan tampilan morfologi makroskopik yang dapat diamati dari bentuk pertumbuhan dan warna koloni jamur  (Ariyono et  al. ,  2014).  Hasilnya didapat  6  koloni  murni  yang  dapat  dilihat pada Gambar 1.
Isolat jamur endofit yang dimurnikan,  diamati  secara  makroskopis dengan melihat warna, bentuk, margin dan elevasi.  Identifikasi  secara  mikroskopis dilakukan  untuk  melihat  spora  jamur endofit (Sulistiyono & Mahyuni, 2019) dan hasil pengamatan dicocokkan dengan buku referensi Pictorial  Atlas  of  Soil  and  Seed Fungi (Watanabe,  2010),  didapatkan identitas jamur endofit berturut-turut dari 1 sampai  6  yaitu Rhizoctonia  solani ,
Corynespora  citricola Ellis, Arthrobotrys oligospora Fresenius, Alternaria Nees :Fr.,
Phytophthora  capsici dan Tripospermum Speg. (Gambar 1).
Gambar 1. Koloni-koloni jamur endofit hasil pemurnian dari sampel akar L. sarmentosa pada medium PDA (1-6)
Tabel 1. Hasil skrining fitokimia ekstrak etil asetat intraseluler dari jamur endofit seluang
belum Isolat Uji Hasil Kesimpulan 1 Fenol Larutan Coklat Tua (-) Flavonoid Jingga (-) Triterpenoid Cincin coklat tua (+) Steroid Tidak terbentuk cincin (-) 2 Fenol Larutan hitam-kehijauan (-) Flavonoid Orange (+) Triterpenoid Cincin coklat tua (+) Steroid Cincin Hijau-kehitaman (-) 3 Fenol Larutan Coklat Tua (-) Flavonoid Orange (+) Triterpenoid Cincin coklat tua (+) Steroid Tidak terbentuk cincin (-) 4 Fenol Larutan Coklat Tua (+) Flavonoid Orange (+) Triterpenoid Cincin coklat (+) Steroid Tidak terbentuk cincin (+) 5 Fenol Larutan Hitam-kehijauan (+) Flavonoid Kuning (-) Triterpenoid Cincin coklat (+) Steroid Tidak terbentuk cincin (-) 6 Fenol Larutan Coklat Tua (-) Flavonoid Kuning (+) Triterpenoid Cincin coklat tua (+) Steroid Tidak terbentuk cincin (-)
Keenam  isolat  jamur  endofit  yang didapat kemudian ditumbuhkan dan difermentasi  pada  media Potato  Dextrose Broth / PDB ( Himedia ® ) dengan alat shaker untuk  menghasilkan  metabolit  sekunder.
Media  PDB  digunakan  karena  berbentuk cair  dan  lebih  efektif  dalam  menghasilkan biomassa jamur. Media PDB juga memiliki kelebihan  menghasilkan  biomassa  yang lebih banyak dalam tempat yang lebih kecil
dan
memperkecil kemungkinan kontaminasi  (Saskiawan et  al .,  2016).
Jamur  hasil  inkubasi  selama  14  hari  lalu dimasukkan ke alat centrifuge ( Clements ® ) dan disentrifugasi selama 15 menit dengan kecepatan  3000  rpm  untuk  memisahkan antara supernatan dan biomassanya. Biomassa yang didapat kemudian diekstraksi dengan etil asetat dan diskrining kandungan fitokimianya dan hasil pengujian disajikan pada Tabel I.
Hasil  skrining  fitokimia  menun- jukkan beberapa isolat jamur endofit positif mengandung  golongan  senyawa  fenolik, flavonoid, triterpenoid dan steroid. Adapun skrining  fitokimia  terhadap  tumbuhan L. sarmentosa yang  dilakukan  Wathan  dan Abdullah  (2017)  menunjukkan  kandungan senyawa  fenolik,  flavonoid,  dan  steroid. Adanya kesamaan metabolit sekunder yang dihasilkan  baik  jamur  endofit  maupun inang karena  diduga  mengalami  koevolusi transfer  genetik  antara  kedua  golongan organisme tersebut (Hasiani et al. , 2015).

## IV. KESIMPULAN
Isolasi  jamur  endofit  dari  akar seluang  belum  ( Luvunga  sarmentosa (Blume)  Kurz.)  didapatkan  6  isolat  jamur yang telah diidentifikasi. Skrining fitokimia dari  ekstrak  etil  asetat  6  jamur  endofit hasilnya  positif  mengandung  golongan senyawa  fenolik,  flavonoid,  steroid,  dan terpenoid.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Seluruh penulis menyatakan bahwa tidak  ada  konflik  kepentingan  dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terima  kasih  disampaikan kepada Kementerian Pendidikan, Kebudayaan, Riset, dan Teknologi khususnya Lembaga Penelitian dan Pengabdian Masyarakat
(LPPM)
Universitas Lambung Mangkurat dan dana DIPA ULM Tahun anggaran 2021 Nomor: SP  DIPA – 023.17.2.677518/2021 tanggal 23  Nopember  2020  sesuai  SK  Rektor Universitas  Lambung  Mangkurat  No: 697/UN8/PG/2021 tanggal 22 Maret 2021.

## DAFTAR PUSTAKA
Aly, A.H., Debbab, A., Proksch, P. (2013) Fungal  Endophytes  –  Secret  Produ- cers  of  Bioactive  Plant  Metabolites. Pharmazie, No. 68 hal 499-505.
Ariyono,  R.Q.,  Syamsuddin  D.,  Lilik  S.,
(2014) Keanekaragaman Jamur Endofit  Daun  Kangkung  Darat ( Ipomea  reptans Poir.)  Pada  Lahan Pertanian  Organik  dan  Konven- sional. Jurnal HPT 2.(1) hal 19-28.
Arsyad,  M.  (2018)  Studi  Etnobotani Tumbuhan  Obat  Oleh  Masyarakat Desa  Sidorejo  Kecamatan  Tamban Kabupaten  Barito  Kuala.  Jurnal InsanFarmasi Indonesia. 1 hal 85-95. Barnett,  H.L.  and  B.B.  Hunter.  (1998) Illustrated marga  of imperfect fungi. 4th ed. USA: Prentice-Hall, Inc.
Fayyaz, M., Irfan A.M, Zaheer A., Shahid A.A.,  Amir  H.,  dan  Shamsad  A.,
(2013)  In  Vitro  Susceptibility  of
Chloramphenicol Againts
Methicillin-Resistan Staphylococcus aureus ,  Journal  of  the  College  of Physicians  and  Surgeons  Pakistan. 23(9) hal 637-640.
Gandjar  I, Koentjoro  IR, Mangunwardoyo W,  Soebagya  L.  (1992)  Pedoman
Praktikum Mikrobiologi Dasar.
Jurusan Biologi, FMIPA, UI, Jakarta. Hasiani, Vilca V., Ahmad. I, Rijai., La Ode (2015)  Isolasi  Jamur  Endofit  Dan
Produksi Metabolit Sekunder Antioksidan Dari Daun Pacar
( Lawsonia  inermis L.),  Jurnal  Sains dan Kesehatan. Vol 01 No 4. Hal 146- 153.
Juwita, D., F. Puspita & Y. Haryani. 2019.
Isolasi  Jamur  Endofit  dari  Akar
Mangrove  Kabupaten  Bengkalis. Jurnal Karya Ilmiah. 1: 1-6.
Musfirah  Y.,  Bachri  M.S.,  Nurani.  L.H.,
(2016)  Efek  Ekstrak  Etanol  70% Akar  Saluang  Balum  ( Lavanga sarmentosa ,  Blume  kurz)  Terhadap Spermatogenesis dan Gambaran Histopatologik Testis
Mencit, Pharmascience,  Vol  03  no  02,  hal 131-141.
Pratiwi, S.T. (2008) Mikrobiologi Farmasi, Erlangga Jakarta.Strobel, G.A. 2002.
Microbial  Gifts  from  Rain  Forest.
Canadian Journal of Plant Pathology,
Vol. 24, hal. 14-20.
Saskiawan, I., M. Munir & S. S. Achmadi.
(2016)  Optimasi  Produksi  Serta Analisis  Aktivitas  Antioksidan  dan Antimikroba Senyawa Eksopoli- sakarida  Dari  Jamur  Tiram  Putih ( Pleurotus  ostreatus )  Pada  Media Cair. Berita Biologi. 15 hal 113-140. Strobel,  G.  and  Daisy,  B.,  (2003).
Bioprospecting for Microbial Endophytes and Their Natural Products. Microbiology and Molecular  Biology  Reviews,  No.  4, Vol. 67, hal. 491 – 502. Sulistiono, F. Dewi dan Mahyuni S. (2019) Isolasi dan Identifikasi Jamur Endofit Pada Umbi Talas ( Colocasia esculenta (L.)  Schoot),  Jurnal  Sains
Natural 9 (22) hal 66-70.
Wathan, N. dan Abdullah., (2017)
Karakterisasi Simplisia Akar Seluang Belum ( Luvunga sarmentosa
(Blume) Kurz.) dan Profil KLT nya,
Prosiding  Seminar  Nasional  APTFI II, hal: 121-126.
Wathan,  N.  dan  Imaningsih,  W.,  (2019) Isolasi  Jamur  Endofit  Dari  Akar Tumbuhan Seluang Belum (Luvunga sarmentosa  (Blume)  Kurz.),  Jurnal Pharmascience Vol. 06, hal: 68 – 73
Watanabe  T  (2010)  Pictorial  Atlas  of  Soil and  Seed  Fungi,  Morphologies  of Cultured  Fungi  and  Key  to  Species Third Edition, CRC Press.