## Serambi Journal of Agricultural Technology (SJAT)
http://ojs.serambimekkah.ac.id/index.php/sjat
Vol. 3 No. 1 Thn. 2021                                                                                                    E-ISSN: 2684-9879
IN VITRO ACTIVITY TEST OF Murayya koenigii L. SPRENG LEAVES

## AS A NATURAL PRESERVATIVE FOR TILAPIA FISH MEAT
Su’adah 1) , Vivi Mardina 1)* , Fadhliani 1) ,
1 Program Studi Biologi, Fakultas Teknik, Universitas Samudra, Jl. Prof.Syarief Thayeb, Meurandeh, Langsa Lama, Kota Langsa, Aceh, Indonesia 24416
*email: vmardina@unsam.ac.id

## Article Info
Article history:
Received
04/30/2021
Received in revised 05/21/2021 Accepted 06/13/2021

## Abstract
Fish that are high in protein content are prone to quality degradation. This  is  strongly  thought  to  be  due  to  the  influence  of  microbes  that are  inside  or  outside  the  fish's  body.  The  use  of  formalin  for  food preservatives  is  not  recommended  because  it  can  interfere  with health.  In  Indonesia,  there  are  many  natural  preservatives  that  are safer  to  use,  such  as Murayya  koenigii L.  Spreng  which  is  rich  in antioxidants  and  has  antibacterial  properties.  This  study  aimed  to evaluate  the  effect  of M.  koenigii leaf  extract  as  an  inhibitor  of bacterial growth in Oreochromis . niloticus fish meat and to measure the  maximum  concentration  of M.  koenigii  leaf extract.  The  study used  a  completely  randomized  design  method  (RAL)  with  one factor,  namely  the  concentration  of  temurui  leaf  extract  (Murayya koenigii  L.  Spreng)  which  consisted  of  concentrations  of  0,  10,  20, 40% (g / mL). The data were taken on storage time, namely 0 days, 1 day,  2  days,  and  3  days.  The  observation  parameter  used  was  the inhibition  zone  diameter  (mm)  which  was  analyzed  using  one  way ANOVA. The results showed that temurui leaves  have the potential to  be  used  as  an  inhibitor  of  microbial  growth  in  O.  niloticus  fish meat  at  a  concentration  of  40%  (g  /  mL)  which  is  the  maximum concentration.
Keywords : , Murayya koenigii L. Spreng, Oreochromis nilaticus , natural preservatives
IN VITRO UJI AKTIVITAS DAUN Murayya koenigii L. Spreng  SEBAGAI PENGAWET ALAMI PADA DAGING  IKAN NILA

## Abstrak
Ikan yang tinggi kandungan protein mudah mengalami penurunan kualitas. Hal ini diduga kuat akibat pengaruh  mikroba  yang  terdapat  di  dalam  atau  diluar  tubuh  ikan.  Penggunaan  formalin  untuk pengawet makanan tidak dianjurkan karena dapat mengganggu kesehatan. Di Indonesia banyak bahan pengawet  alami  yang  lebih  aman  untuk  digunakan  seperti Murayya  koenigii L.  Spreng yang kaya antioksidan  dan  bersifat  antibakteri .  Penelitian  ini  telah  bertujuan  untuk  mengevaluasi  pengaruh ekstrak daun M. koenigii sebagai penghambat pertumbuhan bakteri pada daging ikan O. Niloticus dan mengukur konsentrasi maksimum ekstrak daun M. koenigii sebagai pemghambat pertumbuhan bakteri pada  daging  ikan O.  niloticus .  Penelitian  menggunakan  metode  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan  satu  faktor  yaitu  konsentrasi  ekstrak  daun  temurui  ( Murayya  koenigii L. Spreng)  yang  terdiri
atas  konsentrasi  0,  10,  20,  40%(g/mL).  Data  diambil  pada  lama  penyimpanan  yaitu  adalah  0  hari,  1 hari, 2 hari, dan 3 hari. Parameter pengamatan yang digunakan yaitu diameter zona hambat (mm) yang di analisa menggunakan one way ANOVA. Penelitian memiliki hasil bahwa daun temurui berpotensial untuk  digunakan  sebagai  penghambat  pertumbuhan  mikroba  pada  daging  ikan O.  niloticus pada konsentrasi 40% (g/mL) yang merupakan konsentrasi maksimum.
Kata kunci : Murayya koenigii L. Spreng, Oreochromis nilaticus , Pengawet alami

## PENDAHULUAN
Ikan  merupakan  salah  satu  hasil kekayaan  alam  laut  Indonesia  (Mardina dkk.,  2018)  yang  banyak  digemari  oleh masyarakat untuk dijadikan bahan pangan . Salah  satu  ikan  yang  digemari  di masyarakat  adalah Oreochromis  niloticus
(Vitria,  2016).  Menurut  Sumartini  dkk,
(2014), O.  niloticus mengandung  protein sebanyak 43,76%, lemak 7,01%, kadar abu 6,80% per 100 gram berat ikan.
Disisi lain, ikan yang tinggi kandungan  protein  mudah  mengalami penurunan  kualitas.  Hal  ini  diduga  kuat akibat  pengaruh  mikroba  yang  terdapat  di dalam  atau  diluat  tubuh  ikan.  Mikroba sangat  mudah  tumbuh  pada  substrat  yang menyediakan  kadar  protein  tinggi  dengan kandungan  asam  amino  bebas  (Apriyani dkk, 2017).
O.  niloticus sendiri mulai  mengalami penurunan  kualitas  fisik  setelah  2  jam kematian,  kerusakan  ini  dapat  terjadi secara  biokimia  maupun  mkrobiologi.  Hal ini  disebabkan  oleh  beberapa  hal  seperti kondisi  lingkungan  yang  sangat  sesuai untuk  pertumbuhan  mikroba  pembusuk yang  diakibatkan  bakteri,  khamir,  maupun jamur.    Perpanjangan  daya  simpan O. niloticus sehingga lebih  awet  dapat dilakukan  dengan  menurunkan  kadar  air atau  menambahkan  bahan  pengawet  yang mampu  memperpanjang  daya  simpan O. niloticus (Hakim, 2010; David dkk, 2013).
Menurut  Pemenkes  No.  033  Tahun 2012,  pengawet  adalah  bahan  tambahan pangan yang digunakan untuk
menghambat fermentasi, pengasaman, penguraian, dan perusakan lainnya terhadap  pangan  yang  di  sebabkan  oleh mikroorganisme. Bahan pengawet dibedakan  menjadi  alami  dan  sintetik. Penggunaan bahan pengawet sintetik harus diatur  dan  diawasi  dosis  penggunaannya agar  tidak  menimbulkan  kerugian  bagi pemakainya,  baik  yang  bersifat  langsung misalnya  keracunan  maupun  yang  bersifat tidak  langsung  misalnya  bahan  pengawet yang  bersifat  karsinogenik  (Sella,  2013). Sebagian masyarakat menggunakan pengawet  sintesis  yang  berbahaya  seperti formalin untuk mengawetkan ikan. Penggunaan  formalin  untuk  pengawet makanan  tidak  dianjurkan  karena  dapat mengganggu kesehatan. Untuk menghindari  efek  negatif  dari  pengawet sintetik,  pengawet/  proses  pengawetan alami  sangat  dianjurkan.  Salah  satu pengawetan  alami  yang  dilakukan  oleh masyarakat  agar  daging  ikan  lebih  awet biasanya  adalah  dengan  pendinginan  dan pengasapan/pengeringan (Aziz dkk, 2014) Di  Indonesia  banyak  bahan  pengawet alami  yang  lebih  aman  untuk  digunakan (Wardiny  dkk  2013;  Wafa,  dkk  2014) seperti M.  koenigii .  Daun M.  koenigii memiliki  kandungan  sebagai  berikut  air (66,3%),  protein  (1%),  lemak  (1%), karbohidrat  (16%),  serat  (6,4%),  dan mineral (4,2%). Kandungan mineral utama per  100  gram  daun  adalah  kalsium  (810 mg),  fospor  (600  mg)  dan  besi  (2,1  mg). Kandungan  vitaminnya  adalah  karoten (12.600 i.u.), asam nikotinat (2,3 mg), dan
vitamin  C  (4  mg),  serta  memiliki kandungan alkaloid, selain kandungan gizi yang  tinggi  dari  daun  temurui,  temurui juga  kaya  metabolit  sekunder  yaitu alkaloid, terponoid, saponin, flavonoid dan tanin  (Sukma  dkk,  2018).  Menurut  Rasyid (2016)  metabolit  sekunder  dapat  berfungsi sebagai penghambat pertumbuhan mikroba. Berdasarkan uraian diatas, penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui aktivitas M.  koenigii sebagai  penghambat proses  pembusukan  pada  daging  ikan O. niloticus.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  telah  dilaksanakan  pada Maret  hingga  September  2020  di  UPT Laboratorium  Dasar  Universitas  Samudra Langsa. Sampel O. niloticus Segar dikoleksi  dari  tambak  petani  desa  Sungai Pauh  Tanjung  Langsa  Barat,  kota  Langsa. Adapun  koleksi  sampel  daun  temurui ( Murraya  Koenigii L.  Spreng)  di  peroleh dari kota Langsa.

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian  ini  meliputi  pisau,  refrigerator, plastik  polyethylene,  timbangan  digital, petridish steril (pyrex), tabung reaksi streril (pyrex),  erlenmeyer  steril,  gunting,  pinset, autoklaf, magnatic stirer, pembakar spiritus,  mikropipet,  lilin,  toples,  spatula, tips  dan  gunting.  Bahan  utama  yang digunakan  adalah O.  niloticus dan M. Koenigii L.  Spreng.  Adapun  bahan pendukung  yaitu  aluminium  foil,  aquades, alkohol  70%,  alcohol  96%,  spiritus, nutrient  agar (NA), nutrient  broth (NB), tissue,  NaCl  Fisologis  dan  kertas  label (Aulya dkk ., 2020).
Rancangan Penelitian
Rancangan  yang  digunakan  pada penelitian  ini adalah dengan  menggunakan metode  Rancangan  Acak  Lengkap  (RAL) dengan  satu  faktor  yaitu  konsentrasi ekstrak daun temurui ( Murayya koenigii L. Spreng) yang terdiri atas konsentrasi 0, 10, 20,  40%  (g/mL).  Data  diambil  pada  lama penyimpanan  yaitu  adalah 0 hari, 1 hari, 2 hari,  dan  3  hari.  Parameter  pengamatan yang  digunakan  yaitu  diameter  zona hambat (mm) yang di analisa menggunakan one way ANOVA.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Uji Aktivitas Ektrak Daun Temurui Sebagai Penghambat Pertumbuhan Mikroba Secara In Vitro Hasil  uji  ekstrak  daun  temurui digunakan sebagai pengawet alami pada O, niloticus menggunakan  metode  difusi sumuran  dengan  parameter  pengamatan adalah diameter zona hambat. Uji sumuran dilakukan  pada  konsentrasi  0%,  10%  20% dan  40%  (g/mL).  Hasil  uji  ditampilkan pada  Tabel  4.1.  Adapun  pengamatan diameter  zona  hambat  ditampilkan  pada Gambar 4.1a, b, c, dan d.
Tabel  4.1.  Rerata  diameter  zona  hambat  (mm) pada  pengujian  ekstrak  daun  temurui sebagai  penghambat  pertumbuhan mikroba  pada  daging  ikan O, niloticus Hari ke Konsentrasi (g/mL) 0% 10% 20% 40% 0 0 0 0 21,66 mm a 1 0 0 0 18,5 mm a 2 0 0 0 15 mm b 3 0 0 0 4,5 mm b
(i) Kontrol (ii) perlakuan 10% (iii) perlakuan 20% (iv) perlakuan 40%
Gambar  4.1a.  Aktivitas  daun  temurui  sebagai penghambat pertumbuhan mikroba  pada  daging  ikan  nila yang  dibiarkan  0  hari  pada suhu ruang.
(i) Kontrol (ii) perlakuan 10%
(iii) perlakuan20% (iv) perlakuan 40%
Gambar  4.1b.  Aktivitas  daun  temurui  sebagai penghambat pertumbuhan mikroba  pada  daging  ikan  nila yang  dibiarkan  1  hari  pada suhu ruang.
(i) Kontrol (ii) perlakuan 10% (iii) perlakuan 20% (iv) perlakuan 40%
Gambar  4.1c.  Aktivitas  daun  temurui  sebagai penghambat pertumbuhan mikroba  pada  daging  ikan  nila yang dibiarkan 2 hari (i) Kontrol (ii) perlakuan 10%
(iii) perlakuan 20% (iv) perlakuan 40%
Gambar  4.1d.  Aktivitas  daun  temurui  sebagai penghambat pertumbuhan
mikroba  pada  daging  ikan  nila yang  dibiarkan  3 hari  pada suhu ruang.

## Preparasi Ekstrak
Maserasi  adalah  salah  satu  jenis metode  ektraksi  dengan  sistem  tanpa pemanasan atau bisa disebut dengan istilah ekstraksi dingin. Metode maserasi mempunyai banyak keuntungan di bandingkan dengan metode lainnya, keuntungan  utama  metode  maserasi  yaitu prosedur  dan  peralatan  yang  digunakan sangat  sederhana  dan  tidak  dipanaskan sehingga bahan alam tidak menjadi terurai, ektraksi  dingin  memungkinkan  banyak senyawa  terekstraksi  meskipun  beberapa senyawa memiliki kelarutan terbatas dalam pelariut  pada  suhu  kamar  (Manic  dkk, 2014; a Mardina dkk., 2020).
Pembuatan  serbuk  simplisia M. koenigi L.  Spreng  dilakukan  dengan mengumpulan  sampel  sebanyak  6  kg  yang diperoleh  dari  kota  Langsa,  kecamatan Langsa  Lama.  Daun  segar  di  kering anginkan  pada  suhu  ruangan  dan  tidak diberikan paparan cahaya matahari langsung  selama  ±20  hari.  Setelah  kering menjadi 2kg sampel di potong-potong kecil kemudian  dimasukkan  dalam  bejana, Setiap  6  ons  sample  direndam  dengan  7  L etanol  selama  3x  24  jam.  Perendaman sampel  diulang  3  kali  dengan  pengadukan setiap  hari.  Filtrat  di  saring  menggunakan Whatman  filter  paper No.1  dan  diperoleh hasil 14,84 L, kemudian dievaporasi secara manualpada  suhu  dibawah  40 o C  untuk memperoleh ekstrak kental sebanyak ±25,4 g  ( a Mardina  dkk.,  2020; b Mardina  dkk., 2020; Vivi dkk., 2020).
Aktivitas Ekstrak Temurui untuk Menghambat  Pertumbuhan  Mikroba pada Daging Ikan Nila secara In Vitro Metode  yang  digunakan  pada penelitian ini adalah metode difusi sumuran yang disebut juga sebagai metode
Kirby  bauer.  Keuntungan  metode  difusi tidak memerlukan peralatan yang sophisticated sehingga  relatif  murah  dan mudah  dalam  pengerjaannya.  Keuntungan lain  metode  difusi  sumuran  ialah  satu konsentrasi  ekstrak  dapat  digunakan  untuk menguji  beberapa  jenis  mikroba  (Tortora, 2010).
Pada  penelitian  ini,  metode  difusi sumuran  menggunakan  konsentrasi  0,  10, dan  20  dan  40%  (g/mL).  Parameter pengamatan  adalah  diameter  zona  hambat. Sebanyak 0,2 cm 3 daging ikan diambil dan diletakkan pada sumuran (diameter sumuran  ±0,8  cm)  yang  diberi  larutan ekstrak  daun  temurui  sebanyak  200µL. Inkubasi  dilakukan  pada  suhu  ruang selama 24 jam. Berdasarkan pada table 4.1 ditemui  bahwa  ekstrak  temurui  pada konsentrasi  40%  (g/mL)  menunjukkan zona  hambat  yang  maksimum  terhadap aktivitas  bakteri  pembusuk  pada  ikan O. niloticus dengan  zona  hambat  yaitu  21,7 mm pada 0  hari, 18.5 mm pada 1 hari,  15 mm  pada  hari  ke-2  dan  4.5  mm  pada  hari 3.  Adapun  konsentrasi  ekstrak  control (0%),  10%  dan  20%  (g/mL)  tidak  ditemui zona hambat baik pada 0, 1, 2, dan 3 hari. Semakin  tinggi  konsentrasi  pengawet alami ektrak daun temurui yang digunakan maka  semakin  luas  zona  hambat  yang terbentuk untuk menghambat pertumbuhan bakteri  penyebab  penurunan  kualitas  pada daging ikan nila.
Berdasarkan hasil analisa ANNOVA,  pada  perlakuan  40%  (g/mL), rerata diameter zona hambat yang dihasilkan pada 0  hari tidak  berbeda  nyata dengan  daging  ikan  nila  yang  dibiarkan  1 hari  pada  suhu  ruangan.  Namun  berbeda sangat  nyata  dengan  rerata  diameter  zona hambat  yang  dihasilkan  pada  1  hari  dan  2 hari.  Untuk  hasil  pada  daging  ikan  yang dibiarkan  1  dan  hari  pada  suhu  ruang,
pemberian  ekstrak  daun  temurui  tidak berbeda nyata.
Aktivitas penghambat pertumbuhan mikroba  penyebab  penurunan  kualitas daging ikan O. niloticus pada penelitian ini diduga karena kandungan metabolit sekunder  yang  ada  pada  daun Murraya Koenigii L.  Spreng.  Sukma  dkk  (2018)
melaporkan bahwa bahwa ekstrak daun M. koenigii
mengandung saponin, terpenoid/triterpenoid,  alkaloid,  glikosida, falvonoid,  dan  tanin.  Menurut  Niggapan dkk.,  (2011)  senyawa  flavonoid  yang terkandung  pada  temurui  dapat  berfungsi sebagai  antimikroba  yang  bekerja dengan merusak  permeabilitas  dinding  sel  bakteri, mikrosom,  dan  lisosom  sebagai  hasil interaksi  antara  flavonoid  dengan  DNA bakteri.  Adapun  menurut  (Rastina,  dkk., 2015)  flavonid  memiliki  sifat  lipofilik sehingga  dimungkinkan  akan  merusak membran sel bakteri.
Flavonoid merupakan senyawa fenol.  Senyawa  fenol  dapat  bersifat koagulator protein. Flavonoid dapat berperan sebagai antibakteri dengan mengganggu fungsi organel bakteri. Flavonoid menghambat pertumbuhan bakteri  dengan  menyebabkan  terjadinya kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri,  merusak  membrane  bakteri  yang menyebabkan lisis serta merusak mikrosom  dan  lisosom.  Adapun  senyawa alkaloid  mengganggu  komponen penyusun peptidoglikan  pada  sel  bakteri  sehingga lapisan  dinding  sel  tidak  terbentuk  secara utuh  dan  menyebabkan  kematian  sel tersebut (Fadhliani, 2020).
Fifendy  (2017)  dan  Pelczar  dan Chan,  (2008) menyatakan  bahwa  suatu senyawa  dalam  tumbuhan  dapat  bersifat antimikroba dengan cara kerja: (1) merusak  dinding  sel  bakteri,  (2)  merubah permeabilitas  membrane  sel  bakteri,  (3)
mengganggu  molekul  protein  dan  asam nukleat pada bakteri dengan cara mendenaturasi protein penyusun membrane  sel  bakteri,  (4)  menghambat kerja enzim pada baketri yang mengakibatkan  terganggunya  metabolism dalam tubuh bakteri, (5) serta menghambat proses  proses  sintesa  asam  nukleat  dan protein  yang  berakibat  rusak  total  tubuh bakteri.
Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan penelitian  Syifa  (2003)  yang  melaporkan bahwa  ektrak  bawang  putih  dengan konsentrasi  20%  efektif  menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  diisolasi  dari daging  ikan  bandeng  dalam  24  jam. Penelitian yang dilakukan oleh Ayu (2010) menyimpulkan penggunaan Morinda citrifolia yang  memiliki  aktivitas  anti bakteri  dalam  menghambat  jumlah  bakteri pada daging ikan tongkol pada konsentrasi 80%    memiliki  aktifitas  hampir  sama dengan formalin dalam menghambat jumlah  bakteri  pada  daging  ikan  tongkol. Penelitian Roosiana (2015) juga menemukan  bahwa  penggunaan  daun  sirih pada  ikan  nila  mampu  menghambat populasi  bakteri  pada  konsentrasi  30% karena senyawa fenol mendenaturasi protein  sel  bakteri    akibatnya  semua aktivitas metabolisme sel bakteri terhenti.
Pelczar dan Chan (2008) menjelaskan mekanisme bahan
antimikroba  merusak  dinding  sel  adalah karena  dinding  sel  bakteri yang  berfungsi mempertahankan  bentuk  dan  menahan  sel, tersusun atas peptidoglikan (polimer kompleks) yang terdiri atas rangkaian asam N-asetil  glukosamin  dan  asam  N-asetil muramat. Keberadaan lapisan peptidoglikan ini menyebabkan dinding sel bersifat  kaku  dan  kuat  sehingga  mampu menahan  tekanan  osmotik  dalam  sel. Struktur  dinding  sel  dapat  dirusak  dengan
cara  menghambat  pembentukannya  atau mengubahnya  setelah  selesai  dibentuk. Bahan antimikroba pada konsentrasi rendah  akan  menghambat  pembentukan ikatan  glikosida  sehingga  pembentukan dinding  sel  yang  baru  akan  terganggu. Konsentrasi tinggi pada bahan antimikroba akan menyebabkan ikatan glikosida
menjadi  terganggu  dan  pembentukan dinding sel terhenti.
Adapun mekanisme bahan antimikroba  merubah  permeabilitas  sel adalah dengan menggangu fungsi membran  sel  (Pelczar  dan  Chan,  2008). Membran  sel  tersusun  atas  fosfolipid  dan protein  yang  berfungsi  untuk  mengatur keluar masuknya zat-zat tertentu dalam sel. Terganggunya  fungsi  membran  sel  oleh adanya  bahan  antimikroba,  menyebabkan permeabilitas  sel  bakteri  akan  mengalami perubahan,  sehingga  akan  mengakibatkan terhambatnya pertumbuhan sel atau kematian sel (Campbell dkk, 2012).
Sel  mikroba  mengandung  enzim- enzim yang berperan  dalam  proses metabolisme. Kandungan metabolit
sekunder dalam suatu bahan/tanaman dapat menggangu  kerja  enzim  dengan  cara menonaktifkan  kerja  enzim.  Enzim  yang tidak berfungsi mengakibatkan metabolisme  mikroba  menjadi  lambat bahkan terhenti (Pelczar dan Chan, 2008).

## KESIMPULAN
Penelitian  yang  telah  dilakukan menyimpulkan  bahwa  hasil  uji  Difusi sumuran  merekomendasikan  bahwa  daun temurui  berpotensial  untuk  digunakan sebagai penghambat pertumbuhan mikroba pada  daging  ikan O.  niloticus dan konsentrasi 40% (g/mL) merupakan konsnetrasi maksimum ekstrak daun temurui  ( Murraya  Koinigii)  yang dapat menghambat  pertumbuhan  mikroba  pada
daging ikan nila penyebab proses pembusukan pada daging ikan.
Penelitian  menyarankan  penelitian lanjut  tentang  pengujian  organoleptik  dan uji in-vivo terhadap penghambat pertumbuhan  mikroba pada daging ikan.

## DAFTAR RUJUKAN
Apriani  R,  Ferasyi  R,  Razali  R,  (2017).
Jumlah  cemaran  mikroba  dan  nilai organoleptik ikan tongkol
( Euthynnus affiinis ). JIMVET 1(3): 598-603.
Aulya  W,  Fadhliani,  Mardina  V.  (2020). Analysis  of  coliform  and  colifecal total pollution test on various types of  drinking  water  using  the  MPN (most  propable  number)  method. Serambi  Journal  of  Agricultural technology, 2 (2): 64 – 72.
Ayu,  V,  S.  (2010).  Pengaruh  Konsentrasi Ekstrak  Etanol  Buah  Mengkudu ( Morinda citrifolia ) danWaktu Penyimpanan  terhadap  Kualitas
Daging  Ikan  tongkol. Skripsi .
Surakarta:Universitas Sebelas
Maret.
Aziz,  T.,  S.  Febrizki  dan  A.D.  Mario.
(2014).  Pengaruh  Jenis  Pelarut terhadap  persen  Yieldalkaloid  dari daun salam india (Murraya Koinigii). Teknik Kimia. 2(20):1-6.
Badan Standar Nasional Indonesia. (2006). Petunjuk  Pengujian  Organoleptik Dan  Atau  Sensori .  SNI  01-2346- 2006
Campbell. (2012). Biologi . Edisi 8. Jilid 1.
Jakarta: Erlangga.
Fadhliani,  (2020).  Pengujian  Antibakteri
Ektrak Etanol Jukut Pendul
(Kyllinga  Brefivolia  Rottb)  Untuk Menghambat  Pertumbuhan  Bakteri Pathogen  Eschericia  Coli. Jurnal
Biological Samudra 2(2); 114-120.
Hakim,R.R. (2010). Pengolahan dan Pengawetanikan.http://rizarahman.sta ff.umm.ac.id/files/2010/01/Pengolah an-ikan.pdf.
Manik,  D.F.,  Hertiana,  T.  Dan  Anshory. H., (2014) Analisis KulerasI Anatra Kadar  Flavonoid  dengan  Aktivitas Antibakteri  Ektrak  Etanol  dan Fraksin-fraksin  dari  Daun  Kersen ( Multingia  calabura  L) terhadap Staphilococcus  aureus. Khazanah, 6, 2, 1-11.
Mardina  V,  Fitriani,  Harmawan,  T., Hildayani,  G.M.  (2018)  Valorisasi
Pankreas  Ikan  Tongkol  (Eutynnus Affinis)  Untuk  Produksi  Enzim
Lipase. Elkawnie, 4 (2): 89 – 97.
Mardina, V., Halimatussakdiah, Harmawan,  T.,  Ilyas,  S.,  Tanjung, M.,  Aulya,  W.,  &  Nasution,  A. (2020).  Preliminary  phytochemical screening of different solvent extract of flower and whole plant of Wedelia  biflora .  IOP  Conf.  Series: Materials  Science  and  Engineering 725 (2020) 012077.
Mardina  V,  Ilyas  S,  Harmawan  T,
Halimatussakdiah,Halimatussakdia h, Masitta Tanjung, (2020). Antioxidant and cytotoxin activaties  of  the  ethyl  acetate extract  of Sphagneticola  trilobata (L)  J.F.  Pruski  on  MCF-7  breast cencer  cell. Jurnal  of  Advanced
Pharmaceutical Tecnology &
Research, 11: 123 – 127. Nigappan, Thilahgavani., Perunal Raamasamy.,  MohdEffendy  Abdul Wahid., thirukanthan Chandra
Sagarab  and  Charlas  S.  Vairappan (2011).  Biological  Activity  of
Carbazole  Alkaloids  and  Essential
Oil  of Murraya  Koenigii Against
Antibiotic  Microbes  and  Cancer
Cell  Lines. Molecules, 16 ,  9651- 9664.
Pelczar,  M.J.,  dan  Chan,  E.C.S..  (2005). Dasar-dasar  mikrobiolog  2 .  Jakarta: Universitas Indonesia
Peraturan  Menteri  Kesehatan  Nomor 033  Tahun  2012  Tentang  Bahan Tambahan Pangan.
Rastina,  Sudarwanto,  M.  &Wientarsis, I.,  (2015).  Aktivitas  Anti  Bakteri Ekstrak Etanol Daun Kari (Murraya koenigii)  Terhadap  Staphilococcus Aureus,  Escherichia  Coli,  Dan Pseudomas  Sp. Jurnal  Kedoktoran
Hewan, 9 (2): 185-188.
Rasyid, Abdullah. (2016). Analisis
Metabolit  Sekunder,  Aktivitas  Anti Bakteri  dan  Komposisi  Golongan Senyawa  dalam  Ekstrak  Teripang Bohadschia Sp .
Rosiana,  A.  D.  (2015).  Pengawetan  Ikan
Nila ( Oreochrombis niloticus )
menggunakan  Daun  Sirihdengan Variasi  Lama  Perendaman  yang
Berbeda. Skripsi . Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Sella,  (2013).  Analisis  Pengawet  Natrium Benzoat  dan  Pewarna  Rhodamin  B Pada  Saus  Tomat  J  dari  Pasar Tradisional  L  Kota  Blitar., Jurnal Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya . Universitas Surabaya.
Standar  Nasional  Indonesia.  SNI  No.  01-
2729.1-2006  Tentang  Ikan  Segar.
Jakarta : Badan Standarisasi Nasional.
Sukma,  Fisca  Fajriani  Sukma,  Dinda Sahara, Furqan Nur Ihsan,
Halimatussakdiah, Puji Wangyuningsih, Ulil Amma.
(2018).  Skrining  Fitokimia  Ekstrak Daun “Temurui” ( Murayya koenigii L. Speng) Kota Langsa, Aceh.
Sumartini.,  Fronthea  Swastawati,  Tri
Winarni  Agustini.  (2014).  Analisis Asam  Lemak  Omega  3,6,9  Dan Kadar Fenol Ikan Bandeng
( Channos  channos Forsk)  Asap Dengan  Kombinasi  Jarak  Tungku Dan Lamapenasapan. Jurnal Pengolahan Dan Bioteknologi Hasil Perikanan . Vol : 3. No : 1.
Syifa, N., Bintari,
S, H., dan
Mustikaningtyas,  D.  (2013).  Uji
Efektivitas  Ekstrak  Bawang  Putih ( Alliumsativum ) sebagai
Antibakteri  pada  Ikan  Bandeng ( Chanos  chanos ). Unnes  Journal Of Life Science . Vol 2. No 2.
Vitria,  Belvi.  (2016).  Pengolahan  Ikan
Bandeng (Channos Channos) Tanpa Duri. Jurnal Ilmu Pengetahuan  Dan  Rekayasa .  Hal 18-19. Vivi Mardina, Tisna Harmawan, Halimatussakdiah, Syafruddin Ilyas, dan Masitta Tanjung.  (2020). Anticancer  Activity  of  N-Hexane Extract from Sphagneticola trilobata (L.)  J.F  Pruski  Against MCF-7 Breast Cancer Cell. Elkawnie, 6 (1): 48 – 58. Wafa, Ali, Anisa Ulfah, Oty Kiki, dan Moh Arham. (2014). Komhamdan” Program Kreatifitas  Mahasiswa Bidang Pengabdian Masyarakat .
Wardini,  T.,M.,  Retnani,  Y.,  Dan  Taryati.
(2013). Pengaruh  Estrak  Daun Mengkudu  Terhadap  Profil  Darah Puyuh Starter , JITP, 2(2): 114-115.