Anti-Bacterial And Anti-Ultraviolet Activity Test Of Black Cucumber (Holothuria atra) Extract From Tongkaina Waters, Bunaken District, Manado City
(Uji Aktivitas Anti Bakteri Dan Anti Ultraviolet Ekstrak Teripang Hitam  (Holothuria atra)  Dari Perairan Tongkaina Kecamatan Bunaken Kota Manado)
Nazarrian Mangangkung 1 ,  Esther D. Angkouw 1* , Veibe Warouw 1 , Remy E. P. Mangindaan 1 , Fitje Losung 1 , Revol D. Monijung 2
1 Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi, Manado 95115 Sulawesi Utara, Indonesia
2 Staf Pengajar Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Sam Ratulangi Jl. Kampus Unsrat Bahu, Manado 95115 Sulawesi Utara, Indonesia
*Corresponding author: estherangkouw@unsrat.ac.id
Manuscript received: 18 June 2023. Revision accepted: 23 July 2023.

## Abstract
The purpose of this study was to obtain the crude extract of Holothuria atra , test its antibacterial activity against Escherichia coli and Bacillus megaterium strains using the disc diffusion method (Kirby-Bauer  disc  diffusion),  test  the  anti-UV  of Holothuria  atra extract  taken  from  Tongkaina Waters, Bunaken District, Manado City. Antibacterial testing was carried out with several different concentrations, from the results of antibacterial testing carried out the average inhibition zone on E. coli bacteria with 100,000 ppm the average inhibition zone was (9.67 mm), for 50,000 ppm the average  inhibition  zone  was  (8  mm),  from B.  megaterium bacteria  known to  have H.a 100,000 ppm producing an average inhibition zone (9.67 mm), H.a 50,000 ppm an average inhibition zone of (8.67 mm). The results of the anti-UV test for Holothuria atra extract showed absorption in UV- C at λ 210 nm with the highest absorbance value of 2.774.
Keywords : Sea cucumber, Antibacterial, Anti-UV, Escherichia coli , Bacillus megaterium .

## Abstrak
Tujuan  dari  penelitian  ini  untuk  mendapatkan  ekstrak  kasar Holothuria  atra , menguji  aktivitas antibakteri terhadap strain Escherichia coli dan Bacillus megaterium dengan metode difusi agar ( disc  diffusion  Kirby-Bauer ),  menguji  anti-UV  dari  ekstrak Holothuria  atra yang  diambil  dari Perairan Tongkaina Kecamatan Bunaken Kota Manado. Pengujian antibakteri dilakukan dengan beberapa konsentrasi yang berbeda, dari hasil pengujian antibakteri yang dilakukan rerata zona hambat pada bakteri E. coli dengan 100.000 ppm rerata zona hambat sebesar (9,67 mm), untuk 50.000  ppm  rerata  zona  hambat  sebesar  (8  mm),  dari  bakteri B.  Megaterium diketahui H.a 100.000 ppm menghasilkan rerata zona hambat (9,67 mm), H.a 50.000 ppm rerata zona hambat sebesar (8,67 mm). Untuk hasil pengujian anti-UV ekstrak Holothuria atra menunjukkan serapan pada UV- C pada λ 210 nm dengan nilai absorban tertinggi 2,774.
Kata kunci : Teripang laut, antibakteri, anti-UV, Escherichia coli, Bacillus megaterium.

## PENDAHULUAN
Indonesia  dikenal  sebagai  negara kepulauan  yang  2/3  luas  wilayah  meliputi lautan.  Hamparan  laut  yang  sangat  luas merupakan  potensi  sekaligus  tantangan bagi  bangsa  Indonesia  untuk  dapat mengembangkan sumber daya perairannya  (Arini,  2013).  Perairan  laut Indonesia  memiliki  keanekaragaman  biota laut sangat tinggi yang dapat dimanfaatkan untuk  kehidupan.  Pemanfaatan  biota  laut
saat  ini,  bukan  hanya  sekadar  untuk konsumtif  saja,  tetapi  mengarah  kepada penelitian yang lebih maju seperti penemuan  obat-obatan  berbahan  dasar biota laut (Rasyid, 2008). Salah satu biota laut yang berpotensi menghasilkan senyawa  bioaktif  yang  dapat  digunakan sebagai  bahan  baku  obat-obatan  adalah teripang (Albuntana dan Wardana 2011).
Teripang  adalah  hewan  invertebrata yang memiliki tubuh yang lunak, berdaging
dan berbentuk silindris memanjang. Bentuk tersebut  menyerupai  mentimun  sehingga teripang  dikenal  dengan  nama  mentimun laut  (sea  cucumber).  Teripang  memiliki potensi ekonomi yang cukup tinggi sebagai bahan  makanan  dengan  kandungan  gizi dan  protein  yang  juga  cukup  tinggi. Teripang  dapat  ditemukan  hampir  di seluruh  perairan  pantai, mulai  dari  daerah pasang  surut  yang  dangkal  sampai perairan  yang  dalam  (Martoyo  Dan Winarto, 2006).
Teripang diketahui bermanfaat sebagai  bahan  obat  karena  banyak mengandung  senyawa  bioaktif.  Beberapa senyawa  yang  telah  berhasil  diekstrak adalah saponin, triterpen glikosida, chondroitin sulphate, neuritogenic gangliosides,  12-methyltetradecanoic  acid (12- MTA) dan lektin (Meydia dkk, 2016 ).
Senyawa triterpen
glikosida merupakan senyawa metabolit yang dominan  dihasilkan  oleh  teripang.  Salah satu  triterpen  glikosida  pada  teripang adalah  holothurin.  Menurut  Zhang  dkk (2006), senyawa triterpen glikosida memiliki  aktivitas  biologis  seperti  anti- jamur,  sitotoksik  melawan  sel  tumor, hemolitik,  dan  meningkatkan  kekebalan tubuh.  Studi  di  Cina  menunjukkan  bahwa senyawa saponin pada teripang mempunyai  suatu  struktur  yang  serupa dengan  komponen  ginseng  yang  aktif sebagai  anti-kanker.  Selain  berpotensi sebagai anti-kanker dan anti-tumor, senyawa  bioaktif  pada  teripang  juga digunakan untuk menghambat pertumbuhan  bakteri  dan  jamur  (Kumar dkk.  2007).  Salah  satu  senyawa  bioaktif yang  terkandung  dalam  teripang  adalah senyawa  steroid  alami  yang  sangat potensial. Kandungan steroid dalam jaringan tubuh dan pembuluh darah dapat berupa hormon steroid, asam lemak bebas, trigliserida  maupun  kolesterol  (Kustiariyah 2006; Nurjanah 2008).

## METODE PENELITIAN

## Pengambilan dan Penanganan Sampel
Sampel teripang diambil dari perairan Tongkaina,  Kecamatan  Bunaken  Kota Manado.  Pengambilan  sampel  dilakukan secara langsung menggunakan alat
penjepit  kemudian  dimasukan  ke  dalam plastik sampel. Selanjutnya sampel dibawa ke Laboratorium Bioteknologi dan Farmasitika  Laut,  Fakultas  Perikanan  dan Ilmu  Kelautan,  Universitas  Sam  Ratulangi Manado untuk diekstrasi, evaporasi dan uji aktivitas antibakteri. Dan untuk uji aktivitas anti-UV akan dilakukan di UPT. Laboratorium  Terpadu  Universitas  Sam Ratulangi Manado.

## Identifikasi Sampel
Sampel  yang  diperoleh  diidentifikasi menurut  pola,  warna  dan  bentuk  tubuh mengunakan buku (Dit.KKHL-KKP, 2015).

## Ektraksi sampel
Ekstraksi  sampel  Teripang  dilakukan dengan  cara  maserasi.  Sampel  dipotong kecil-kecil  dimasukkan  ke  dalam  botol, kemudian direndam dengan pelarut alkohol 95%  sampai sampel terendam semuanya, dan di biarkan selama 24 jam. Sampel yang direndam  disaring  menggunakan  kertas saring menghasilkan filtrat  1 dan debris 1. Debris  1  kemudian  direndam  dengan pelarut  alkohol  95%  sampai  sampel terendam semuanya dan dibiarkan selama 24 jam, sampel tersebut disaring menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat  2  dan  debris  2.  Debris  2  kemudian direndam  dengan  pelarut  alkohol  95% sampai  sampel  terendam  semuanya  dan dibiarkan  selama  24  jam,  sampel tersebut disaring menggunakan kertas saring menghasilkan filtrat 3 dan debris 3. Filtrat 1, 2, dan 3 dicampur menjadi satu kemudian disaring,  lalu  dievaporasi  menggunakan rotary  evaporator  pada  suhu  40-450C, sampel di evaporasi sampai pelarut benar- benar  terpisah  dengan  sampel  hingga tersisa ekstrak kasar/crude extract. Ekstrak kasar  dikeluarkan  dari  labu  menggunakan micro  pipet  1000ml,  kemudian  dimasukan kedalam  botol  sampel  yang  sudah  diberi label. Ekstrak kasar nantinya ditimbang lagi untuk mengetahui berat ekstrak kasar yang diperoleh.

## Pengujian Anti bakteri
Media  NA  yang  telah  diautoklaf sebelumnya  dan  didinginkan  pada  suhu ruangan  selanjutnya  ditambahkan  bakteri uji,  yaitu  E.  coli  dan  B.  megaterium  yang
telah disediakan sebelumnya
menggunakan  jarum  ose  steril.  Media kemudian diaduk dengan cara menggoyangkan erlenmeyer secara perlahan kemudian dituang ke cawan petri.
Dalam pengujian antibakteri ini menggunakan  metode  difusi  agar  (Disc Diffusion Kirby and Bauer Method). Kertas cakram diambil menggunakan pinset yang telah  steril  kemudian  ditempelkan  pada media  NA.  Selanjutnya  hasil  ekstraksi diambil menggunakan mikropipet sebanyak 30 µl dan ditotolkan di atas kertas cakram. Pengujian antibakteri ini menggunakan  2  kali  pengulangan  untuk bakteri uji dan ekstraksi yang sama. Media akan  diinkubasi  selama  2  x  24  jam  untuk selanjutnya akan dilihat zona hambat yang diberikan  oleh  ekstrak.  Adanya  aktivitas ditandai  dengan  munculnya  zona  bening pada  daerah  sekitar  kertas  cakram  yang menunjukkan  kepekaan  bakteri  terhadap bahan antibakteri. Kemudian diukur diameter zona hambat (mm) yang terbentuk dengan menggunakan
penggaris.

## Pengujian anti UV
Pengujian  menggunakan  alat  UV- Visible  Spectrophotometer.  Uji  dilakukan pada  sampel  Holothuria  atra.  Pertama-
tama  alat  spektrofotometer  dinyalakan kemudian kuvet yang pertama diisi dengan etanol  96%  yang  digunakan  sebagai blanko.  Kuvet  yang  kedua  diisi  dengan etanol  hasil  rendaman  sampel.  Masing- masing  kuvet  diisi  sebanyak  1  ml.  Kuvet selanjutnya dimasukkan pada spektrofotometer dan diuji pada λ 280-360 nm.  Setelah  itu,  diamati  nilai  absorbansi yang dihasilkan pada λ 280-360 nm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pengambilan Sampel di Lapangan
Pengambilan sampel dilakukan pada pukul 11.00 – 13.00 WITA. Kondisi perairan Tongkaina  sedang  surut  dan  cuaca  cerah pada  saat  itu  sehingga membantu  peneliti saat  pengambilan  sampel.  Pengambilan sampel  dilakukan  peneliti  dengan  cara mengambil sampel Holothuria atra langsung  dari  subtratnya  menggunakan penjepit  dan  memasukkan  sampel  ke dalam  plastik  tip  sampel  yang  telah disediakan.  Sampel  yang  telah  diperoleh kemudian dibawa ke laboratorium.
Dari  hasil  ekstraksi  yang  telah dilakukan, didapatkan ekstrak kasar Holothuria atra seberat 78 gr dengan warna merah pekat dari berat basah sampel 1200 gr.
Gambar 1. Ekstrak kasar Holothuria atra
Pengujian Antivitas antibakteri Holothuria atra
Uji  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak Holothuria atra terhadap bakteri E. Coli dan B  megaterium ,  mengggunakan  metode difusi  agar  dengan  cara  sumur  Metode difusi menjadi metode yang dipilih dalam uji
aktivitas  karena  memiliki  kelebihan  yaitu prosedurnya  yang sederhana  (mudah  dan praktis)  untuk  dilakukan  dan  merupakan metode  serbaguna  bagi  semua  bakteri patogen  yang  tumbuh  cepat  dan  sering digunakan  dalam  uji  kepekaan  antibiotik
dalam program pengendalian mutu (Mapila, 2012).
Bakteri uji yang digunakan adalah B. megaterium dan E.  Coli. B.  Megaterium mewakili  bakteri  gram  positif  dan E.  coli untuk  mewakili  bakteri  gram  negatif. Penggunaan  bakteri  ini  bertujuan  untuk mengetahui  bahwa  apakah  ekstrak  kasar dari Holothuria  atra memiliki  aktivitas antibakteri  serta  mengetahui  spektrum aktivitas antibakteri dari ektsrak Holothuria atra .
Aktivitas  antibakteri  dilihat  dengan adanya  zona  hambat  pada  sekitar  kertas cakram.  Pengamatan  dan  pengukuran zona hambat menggunakan mistar dilakukan  pada  media  mikroorganisme  uji E. coli dan B. megaterium . Hasil pengamatan  aktivitas  antibakteri  pada media  bakteri E.  coli dan  bakteri B. megaterium pada  kedua  ulangan  semua memiliki zona hambat Gambar 2. Hasil dari uji aktivitas antibakteri dapat dilihat di tabel
1.
Tabel 1. Hasil pengukuran zona hambat pada 1x24 jam Kode  Sampel Bakteri Uji E. coli (mm) B. megaterium (mm) 1 2 3 Rerata 1 2 3 Rerata H.a 100000 ppm 8 11 10 9,67 10 9 10 9,67 H.a 50000 ppm 7 8 9 8 8 8 10 8,67 Kontrol Positif 13 12 11 12 10 10 11 10,33 Kontrol Negatif - - - - - - -
Escherichia coli

## Bacillus megaterium
Gambar 2. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Holothuria atra terhadap Bakteri E.Coli dan B.megaterium .
Penggolongan kriteria kekuatan suatu  bahan  antibakteri,  yakni  diameter zona hambat 5 mm atau kurang dikategorikan  lemah,  zona  hambat  5-10 mm  dikategorikan  sedang,  sedangkan diameter zona hambat 10-20 mm dikategorikan  kuat  dan  diameter  zona hambat  yang  melebihi  dari  20  mm dikategorikan sangat kuat. Dari rerata zona
hambat (tabel 3) pada bakteri E. coli yang diperoleh maka diketahui H.a 100.000 ppm menghasilkan rerata zona hambat sebesar (9,67  mm),  H.a  50.000  ppm    mengasilkan rerata zona hambat sebesar (8 mm), yang menunjukkan bahwa kedua ekstrak tersebut memiliki aktivitas antibakteri yang tergolong sedang.
Pada  tabel  3,  zona  hambat  dari bakteri  B.  Megaterium  diketahui  H.a 100.000  ppm  menghasilkan  rerata  zona hambat  (9,67  mm),  H.a  50.000  ppm menghasilkan rerata zona hambat sebesar (8,67 mm). Dari hasil tersebut menunjukkan bahwa kedua ekstrak Holothuria artra memiliki aktivitas antibakteri yang tergolong sedang.
Pada  penelitian  yang  dilakukan tampak bahwa kontrol positif kloramfenikol jauh  lebih  efisien  untuk  menghambat pertumbuhan bakteri uji yaitu pada bakteri E. coli rerata zona hambatnya sebesar (12 mm)  dan  pada  bakteri  B.  megaterium menghasilkan rerata zona hambat sebesar (10,33  mm).  Faktor  yang  mempengaruhi hal  di  atas  karena  Minimum  Inhibitory Concentration  (MIC)  kloramfenikol  telah diketahui  kosentrasi  yang  paling  tepat untuk  menghambat  aktivitas  pertumbuhan bakteri  (Opa  dkk.,  2018).  Kloramfenikol juga    telah  diketahui  merupakan  antibiotik berspektrum  luas.  Senyawa  antibakteri dapat  digolongkan  juga  sebagai  spektrum luas  dan  spektrum  sempit.  Spektrum  luas yang  senyawa  tersebut  bekerja  aktif
terhadap banyak jenis bakteri, baik bakteri Gram positif maupun bakteri Gram negatif. Sedangkan spektrum sempit artinya suatu senyawa yang bekerja hanya terhadap satu golongan  bakteri  saja,  baik  pada  bakteri Gram positif atau hanya pada bakteri Gram negatif  (WHO,  2014).  Dari  hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  senyawa  antibakteri yang terdapat pada ekstrak Holothuria atra termasuk  berspektrum  kecil  dikarenakan memiliki kemampuan menghambat bakteri Gram  positif  dan  bakteri  Gram  negative tergolong lemah. Sebelumnya penelitian uji aktivitas  antibakteri  ini  pernah  dilakukan oleh Kano (2022) menggunakan beberapa ekstrak  teripang  dan  mendapatkan  hasil adanya aktivitas antibakteri masing-masing H.a  9,0  mm,  B.marmorata  8,0  mm,  dan P.graeffei 8,0 mm.

## Pengujian Anti UV
Pengujian anti-UV dilakukan menggunakan alat UV-Vis
Spectrophotometer  yang  diujikan  pada ekstrak  Holothuria  atra    yang  absorbansi atau serapan pada λ 280-360 nm.
Gambar 3. Hasil scan UV
Hasil  pengujian  anti-UV  ekstrak Holothuria atra menunjukkan serapan pada UV-C pada λ 210 nm dengan nilai absorban tertinggi 2,774. Nilai absorbansi
selanjutnya menurun hingga 0,454 pada λ 300 nm dan nilai absorbansi pada λ 323 nm naik  hingga  0.514,  dimana  kedua  pick tersebut  tidak  memiliki  pengaruh  yang begitu besar karena nilai absorbansinya di bawah 1. Sehingga berdasarkan data yang telah  diuraikan  diatas,  ekstrak Holothuria
atra menunjukan kemampuan dalam menghasilkan  senyawa  anti-UV  sebagai perlindungan  kulit  terhadap  paparan  sinar UV. Sebelumnya penelitian anti UV sudah pernah  dilakukan  oleh.  Otay  (2022) menggunakan  beberapa  ekstrak  daun mangrove yang mendapatkan hasil adanya aktivitas  anti  UV  pada  beberapa  ekstrak mangrove. Tumonggor dkk (2022) melakukan  penelitian  anti  UV  dengan menggunakan  ekstrak  beberapa  spesies
lamun,  dan  mendapatkan  hasil  adanya aktivitas  anti  UV  pada  beberapa  spesies lamun.

## KESIMPULAN
Ekstrak Holothuria  atra memiliki aktivitas antibakteri terhadap kedua bakteri uji dan diketahui senyawa antibakteri yang dihasilkan  masuk  dalam  kategori  sedang dengan  rata-rata  memiliki  zona  hambat  7- 11  mm  atau  senyawa  dari  hasil  ekstrak Holothuria  atra bekerja  pada  bakteri  gram positif dan gram negatif.
Pengujian  anti-UV  yang  dilakukan menunjukkan serapan pada ekstrak Holothuria atra memiliki aktivitas anti-UV-C dengan nilai absorbans tertinggi yaitu 2.774 mAU pada λ 210 nm.

## DAFTAR PUSTAKA
Afiyatullov,  S.  S.,  A.  I.  Kalinovsky,  T.  A.
Kuznetsova,  V.  V.  Isakov,  M.  V. Pivkin,  P.  S.  Dmitrenok  and  G.  B.
Elyakov, 2002. New diterpene glycosides of the fungus Acremonium striatisporum  isolated  from  a  sea cucumber. J Nat. Prod., 65: 641-4.
Agustini  S.  W.  N.  Kusmiati  2007.  Uji Aktivitas  Antibakteri  dari  Mikroalga
Porphyridium
cruetum . Jurnal
Biodiversitas Vol. 8 No. 1. Hal : 48-53. Aji J. N Martoyo dan Tjahjo Winarto, 2006. Budidaya  Teripang.  Jakarta  penebar swadaya.
Albuntana  A.  Yasman  dan  Wardhana,  W.
2011.  Uji  Toksisitas  Ekstrak  Empat Jenis  Teripang  Suku Holothuridae dari Pulau Panjairan Timur, Kepulauan Seribu, Jakarta Menggunakan Brine Shrimp Lethality Test (BSLT), Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis, 3:65. Anonim. 2008. Artikel bakteri. http://www.bacillus subtilis/Bakteri- Wikipedia bahasa Indonesia, ensoklopedia uikukl bebas.htm. diakses  pada  tanggal  12  Desember 2008. Darsono Prapto, 2007. Teripang (Holothureidea) Kekayaan Alam Dalam Keragaman Biota Laut. Oseana, Volume XXXII.
Davis, W. W., T. R. Stout. 1971. Disc plate methods  of  microbiological  antibiotic assay. Microbiology 22: 659-665. Devi  P.,  Wahidullah  S.,  Rodrigues  C., Souza  L.  D.  2010.  The  Sponge- associated
Bacterium Bacillus licheniformis. SAB1:  A  Source  of Antimicrobial  Compounds  Marine Drugs 8:1203-1212 ISSN 1660-3397. Elfidasari Dewi, Nita Noriko dan Ninditasya Wulandari.  2012.  Analekta  Tiara Perdana.  Identifikasi  Jenis  Teripang
Genus  Holothuria  Asal  Perairan Sekitar Kepulauan Seribu Berdasarkan PerbedaanMorfologi .
Jurnal Al-Azhar Indonesia Seri Sains Dan Teknologi, Vol. 1, No. 3.
Ghous  Farrouk  Abd  Hamid    and  B.H. Ridzwan. 2007. New species isolated fron  Malaysian  Sea  Cucumber  with optimized secreted antibacterial activity, American J. of Biochem. and Biotech., 3(2): 60-65.
Gunawan I. 2007. Penapisan awal ekstraksi  senyawa  bioaktif  sebagai antibakteri  serta  uji  toksisitas  dan  uji minimum inhibitori concentration (MIC) dari karang lunak asal perairan Pulau  Panggang,  Kepulauan  Seribu. Fakultas Perikanan dan Ilmu kelautan, Institut Pertanian Bogor, 74.
Han, H. Yi, Y. Xu, Q. La, M. And Zhan, H.
2009.  Two  New  Cytotoxic  Triterpene Glycosides  from  the  sea  Cucumber Holothuria scabra , Planta Med. 75.
Hatakeyama,  T.,  N.  Matsuo,  K.  Shiba,  S. Nishinohara, N. Yamasaki, H.
Sugawara  and  H.  Aoyagi.  2002. Amino acid sequence and carbohydrate-binding  analysis  of  the N-acetylD-galactosamine-specific  C- type lectin, CEL-I, from the Holothuroidea,  Cucumaria  echinata. Biosci. Biotechnol. Biochem., 66: 157- 163.
Heryani Noer Anita. 2012. Studi Viasibilitas Dan  Pola  Pertumbuhan Bacillus megaterium Pada Konsentrasi
Molase  Dan  Waktu  Inkubasi  Yang Berbeda.  Skripsi  thesis,  Universita Airlangga.
Jaladudin  dan  Ardeslan.  2017.  Identifikasi
Dan Klasifikasi Phylum Echinodermata Di Perairan Laut Desa Sembilan Kecamatan Simeulue Barat Kabupaten  Simeulue.  Jurnal  Biology
Education, Vol 6.
Kano Nancy Nia, Losung Fitje, Mangindaan
P.E.  Remy,  Lintang  A.J.  Rosita,
Wullur  Stenly,  dan  Tumbol  A.  Reiny. 2022. Aktivitas Antibakteri dari Teripang  Laut  Yang  Diperoleh  Dari Perairan Bunaken. Jurnal pesisir dan laut tropis, Vol 10, hal 65.
Katili  dan  Sidik  Abubakar  .  2011 . Struktur Komunitas Echinodermata Pada Zona  Intertidal  Di  Gorontalo . Jurnal Penelitian dan Pendidikan, Volume 8 nomor 1.
Kumar,  Cotran  dan  Robbins.  2007.  Buku Patologi. EGC. Jakarta
Kustiariyah. 2006. Isolasi, karakterisasi dan uji  aktivitas  biologis  senyawa  steroid dari  teripang  sebagai  aprodisiaka alami  [Tesis].  Bogor:  Program  studi Bioteknologi, Tesis Program Pascasarjana Institut Pertanian Bogor. Michael S. 2003. http://tolweb.org/tree?group=Holothu roidea&contgroup = Echinoder- mata#TOC1 [14 Oktober 2003].
Mamangkey  Epsan,  2022,  Isolasi  dan  Uji Anti Bakteri Dari Jamur Symbion Dari Teripang  ( Holothuroidea  sp) Yang Diambil di Perairan  Kelurahan Molas Kecamatan  Bunaken  Kota  Manado. Ilmu kelautan, 2022.
Manoppo S Edison, Defny S. Wewengkang dan  Novel  Kojong.  2017. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Teripang (Holothuria  Edulis)  Yang  Diperoleh Dari  Teluk  Manado. Pharmacon
Jurnal Ilmiah Farmasi – UNSRAT Vol.
6.
Meydia,  Suwandi,  R.,  dan  Suptijah,  P.
2016.  Isolasi  Senyawa  Steroid  dari Teripang
Gama (Stichopus variegatus)  dengan  Berbagai  Jenis Pelarut. Jurnal Masyarakat Pengolahan Hasil Perikanan Indonesia, 19 (3), 362-369. Munif, A. 2009. Eschericia coli Disekitar Air
Minum Kita. Environmental Sanitation
Jurnal. Nurjanah  S.  2008. Identifikasi  Steroid
Teripang  Pasir  (Holthuria  Scabra)
Dan Pemanfaatannya Sebagai Sumber  Steroid  Alami  [Disertasi] .
Bogor: Sekolah Pascasarjana Institut Pertanian Bogor.
Opa  S.  L.,  Bara,  R.  A.,  Gerung  G.  S.,
Rompas, R. M. Lintang, R. A. J, dan
Sumilat,  D.  A.  2018.  Uji  Aktivitas Antibakteri Fraksi N-Heksana,
Metanol  Dan  Air  Dari  Ascidian Lissoclinumsp.  Jurnal  Pesisir  dan Laut Tropis. 1 (1):69
Otay Sabatri Lawry, 2022.Uji Aktivitas Anti
UV  Dan  Penentuan  Nilai  SPF  Pada Beberapa  Ekstrak  Daun  Mangrove Asal Perairan Desa Mokupa Kabupaten  Minahasa,  2022.  Ilmu Kelautan. Patricia, S. et. Al. 2007. Bacillus megaterium- dari bakteri tanah
sederhana  menjadi  inang  produksi protein industri. Sadili  Didi  Dit.KKHL-KKP,  Sarmintohadi Dit.KKHL-KKP, Ihsan Ramli
Dit.KKHL-KKP,  Ana  Setyastuti  P20 LIPI, Turni Hartati, P4KSI – Balitbang KP 2015, Pedoman umum Identifikasi Dan  Monitoring  Populasi  Teripang. ISBN : 978-602-7913-24-0. Hal.8. Simanjuntak,  Jasman  Fery.  2008.  Uji Aktivitas  Antijamur Candida  albicans
Oleh 32 Isolat Jamur Endofit Tumbuhan Raru ( Cotylelobium melanoxylon ).
Skripsi. Medan:
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Medan.
Yanti Ni Putu Mery, Job Nico Subagio dan Joko  Wiryatno,  2014.  Jenis  Dan Kepadatan  Teripang  (Holothuroidea) Di  Pantai  Bali  Selatan . Jurnal simbiosis II (I): 158-172, ISSN: 2337- 7224.
Priyatmoko,  W.  2008.  Aktivitas  Antibakteri Karang  Lunak  Hasil  Transplantasi (Sinularia Sp.) Pada Dua Kedalaman Berbeda  Di  Perairan  Pulau  Pramuka Kepulauan  Seribu,  DKI  Jakarta. Institut Pertanian Bogor. Bogor.
Rasyid, A. 2008. Biota laut sebagai sumber
obat-obatan. Oseana, 33(1):11-18
Rocky  Mountain  Laboratories,  NIAID,
NIH. Escherichia
coli . 2015.
www.wikipedia.com  (Diakses  pada  2 September 2019).
Roihanah  S.  Sukoso  dan  Andayani  S. 2012.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Teripang Holothuria sp.  Terhadap Bakteri Vibrio harveyi Secara In vitro. FPIK Universitas Brawijaya, Malang. Soeratri,  W.  dan  Purwanti,  T.  2004. Pengaruh penambahan asam glikolat terhadap  efektivitas  sediaan  tabir surya kombinasi anti UV-A dan UV-B
dalam  basis  gel,  Majalah  Farmasi
Airlangga. 4(3): hal 95-102
Tantari,  S.  W.  H.  2003.  Pakaian  Sebagai
Pelindung Surya. Maj. Kedok.
Unibraw. Vol. 19, No. 2. Tumonggor, M. L. R., Warouw, V., Losung,
F.,  Rumengan,  I.  F.  M.,  Rumampuk,
N.  D.  C.,  &  Salaki,  M.  (2022).  Uji Aktivitas Anti Uv Dari Ekstrak Lamun Di  Perairan  Sekitar  Desa  Bahowo Teluk  Manado  Kecamatan  Bunaken dalam Jurnal Pesisir dan Laut Tropis (Vol. 10, Issue 2).
Warouw, V .dan Losung, F. 2015. Potensi Substans Anti-UV Dari Serangga Laut Family Gerridae Di Tasik Ria Mokupa Manado,  Sulawesi  Utara.  Jurnal LPPM  Bidang  Sains  dan  Teknologi, 2(2): hal. 95-102.
WHO.  2014.  Antimicrobial  resistance: global  report  on  surveillance  2014. World Health Organization. 257
Zancan, P and P.A. Mourao, 2004, venous and arterial thrombosis in rat models: dissociation  of  the  antithrombotic effects of glycosaminoglycans. Blood Coagul. Fibrinolysis, 15: 45.