## ANTI BACTERIAL ACTIVITY OF ETHANOL EXTRACT OF ARECA VESTIARIA LEAVES (Areca vestiaria) Against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, And Pseudomonas aeruginosa Bacteria
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN PINANG YAKI (Areca vestiaria) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus, Escherichia coli, dan Pseudomonas aeruginosa
Wiranatika J Sangkoy 1)* , Herny E. I. Simbala 1) , Erladys M. Rumondor 1)
1) Program Studi Farmasi FMIA Universitas Sam Ratulangi *wiranatikasangkoy105@student.unsrat.ac.id

## ABSTRACT
One of the native plants of Indonesia that is widespread in several areas in Indonesia that has the potential to be developed in research testing antibacterial activity is the areca yaki leaf plant. This study  aimed  to  determine  the  antibacterial  activity  of  areca  yaki  (Areca  vestiaria)  leaves  against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, and Pseudomonas aeruginosa at concentrations of 20%, 40%, and 60%. This research was conducted using the Kirby-Bauer method. From the results of this study, the data obtained that concentrations of 20%, 40%, and 60% of Staphylococcus aureus and Escherichia  coli  bacteria  are  concentrations  that  are  included  in  the  moderate  group,  while Pseudomonas aeruginosa at a concentration of 20% is included in the strong group and 40% and 60% are only included in the moderate group.
Keywords: Vestiaria Leaves, Antibacterial Activity, Kirby-Bauer method

## ABSTRAK
Salah satu tanaman asli Indonesia yang tersebar luas di beberapa daerah di Indonesia yang berpotensi untuk  di kembangkan dalam  penelitian  uji  aktivitas  antibakteri  adalah  tanaman  daun  pinang  yaki. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri daun pinang yaki ( Areca vestiaria ) terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli ,  dan Pseudomonas  aeruginosa pada konsentrasi  20%,  40%,  dan  60%.  Penelitian  ini  dilakukan  dengan  menggunakan  metode Kirby- Bauer. Dari hasil penelitian ini data yang di dapatkan bahwa pada konsentrasi 20%, 40%, dan 60% pada bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli merupakan konsentrasi yang termsuk dalam golongan  sedang,  sedangkan  pada Pseudomonas  aeruginosa di  konsentrasi  20%  termasuk  dalam golongan kuat dan 40% dan 60% hanya termasuk di golongan sedang.
Kata kunci : Daun pinang yaki, Aktivitas antibakteri, metode Kirby-Baue

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  ±  30.000  jenis tumbuhan  dan  ±  7000  jenis  berkhasiat  obat (90%  spesies  tumbuhan  obat  dikawasan  Asia). Selain  itu,  Indonesia  juga  diakui  sebagai  salah satu  bagian  dunia  yang  masih  menyisakan kehidupan liar sebagai gudang keanekaragaman plasma  nutfah  untuk  memenuhi  kebutuhan manusia  masa  kini  maupun  masa  yang  akan datang (Simbala, 2016).
Penyakit  infeksi  masih  merupakan  jenis penyakit  yang  paling  banyak  diderita  oleh penduduk  di  negara  berkembang,  termasuk Indonesia. Salah satu penyebab penyakit infeksi adalah bakteri. Bakteri merupakan mikroorganisme yang tidak dapat dilihat dengan mata  telanjang,  tetapi  hanya  dapat  dilihat dengan bantuan mikroskop (Radji, 2011).
Staphylococcus  aureus dan Escherichia coli merupakan  bakteri  patogen  yang  paling banyak menyerang manusia. S. aureus merupakan  bakteri  Gram  positif  yang  hidup sebagai  saprofit  di  dalam  saluran  membran tubuh  manusia,  permukaan  kulit,  kelenjar keringat,  dan  saluran  usus  (Pelczar  dan  Chan, 1988).  Bakteri Escherichia  coli adalah  bakteri Gram  negatif  yang  merupakan  flora  normal  di usus manusia yang dapat menyebabkan Infeksi Saluran Kencing (ISK) dan diare (Jawetz et al ., 2005).
Pseudomonas  aeruginosa merupakan  flora normal  yang  banyak  terdapat  pada  tanah  dan lingkungan  berair.  Kondisi  imun  yang  rendah serta  faktor  virulensi  yang  tinggi  dapat menyebabkan infeksi pada saluran pernafasan, antara lain pneumonia nosokomial akut, infeksi akut  dan  infeksi  kronis  paru  (Gellatly  dan Hancock,  2013).  Resistensi  P.  aeruginosa terhadap  antibiotik  golongan  beta  lactamase pernah  dilaporkan  sebesar  30%  dari  144 sampel  dan  menimbulkan  infeksi  kronis  paru serta  tidak  menunjukkan  manifestasi  pada pemeriksaan radiologi (Fujitani et al ., 2011).

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  di  laksanakan  pada  bulan Oktober  –  Desember  2021,  di  Laboratorium Farmasi Lanjut Program Studi Farmasi Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Sam Ratulangi.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  antara  lain  pisau, sarung  tangan,  masker,  blender,  aluminium  foil, ayakan,  tissue,  kertas  label,  labu  ekstraksi, timbangan  analitik,  wadah  ekstrak,  erlenmeyer, jarum  ose,lampu  Bunsen,  pemanas  air,  cawan petri, tabung reaksi, rak tabung reaksi, gelas ukur, pipet tetes, autoklaf, inkubator, lemari pendingin, kertas  saring,  mikro  pipet,  mistar  berskala, laminar  air  flow ,  batang  pengaduk,  pinset,  alat fotografi, dan alat-alat gelas lainnya. Bahan-bahan yang  digunakan  yaitu  ekstrak  daun  Pinang  Yaki ( Areca  vestiaria ),  bakteri  uji Staphylococcus aureus dan Escherichia coli , aquades, etanol 96%, nutrient  agar  (NA),  ciprofloxacin,  H 2 SO 4 , BaCl 2 2H 2 O 1,175% dan  NaCl 0,9% .

## Jenis Penelitian
Penelitian  ini  merupakan  penelitian  dengan menggunakan metode eksperimental Laboratorium  yang  akan  menguji  aktivitas antibakteri  ekstrak  etanol  daun  Pinang  Yaki ( Areca vestiaria ) terhadap bakteri Staphylococcus aureus,  Escherichia  coli dan Pseudomonas aeruginosa.
.

## Pengambilan & Preparasi Sampel
Sampel ini diambil di Kota Tomohon secara acak, kemudian diambil dan dimasukan ke dalam keranjang  yang  sudah  di  siapkan  lalu  dibawa  ke Laboratorium Program Studi Farmasi Universitas Sam Ratulangi.
Identifikasi  tanaman  dilakukan  di  Bagian Toksonomi  Tumbuhan  Program  Studi  Biologi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi Manado.

## Ekstraksi
Ekstraksi  yang  digunakan  adalah  daging buah  Nanas  segar,  masing-masing  sebanyak 500gram  kemudian  dihaluskan.  Daging  buah Nanas  segar  yang  sudah  dihaluskan  lalu dilarutkan  dengan  aquades  sebanyak  100ml. untuk menentukan dari masing-masing parameter yaitu: warna,aroma,rasa,dan tekstur diukur dengan menggunakan pengujian analisis sensorik atau    uji  hedonic.  Ini  merupakan  pengujian organoleptik untuk mengetahui besarnya perbedaan  kualitas  diantara  beberapa  produk sejenis  dengan  memberikan  penilaian  skor terhadap  sifat  tertentu  dari  suatu  produk  untuk mengetahui tingkat kesukaan dari suatu produk

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI

## Sterilisasi Alat
Alat  –  alat  yang  digunakan  dalam penelitian uji aktivitas antibakteri ini disterilkan dalam  autoklaf  pada  suhu  121ºC  selama  15 menit (Lay, 1994).

## Pembuatan Larutan Kontrol Positif
Larutan kontrol positif dibuat dari sediaan obat  tablet  Ciprofloxacin  500  mg.  Satu  tablet Ciprofloxacin  digerus  lalu  ditimbang  0,05g, kemudian  dilarutkan  dalam  50  ml  CMC. Diambil  1  mL  dari  larutan  tersebut  dan ditambahkan  CMC  sampai  10  mL,  sehingga diperoleh larutan
Ciprofloxacin dengan
konsentrasi 50μg/50μl. Konsentrasi ini digunakan sebagai kontrol positif (Vandepitte et al ., 2005).

## Pembuatan Larutan Kontrol Negatif
Kontrol  negatif  dibuat  dari  CMC  1% dengan  cara  :  1  gram  serbuk  CMC  dilarutkan dalam  100  ml  aquades  steril.  Dikocok  sampai larutan  homogen.Kontrol  negatif  digunakan sebagai pembanding dan pelarut untuk pembuatan larutan uji.

## Pembuatan Larutan Uji
Dari  larutan  uji  20%,  40%,  60%  dengan cara ditimbang 0,2 g, 0,4 g, 0,6 g, ekstrak etanol daun  Pinang  Yaki  kemudian  masing-masing dilarutkan dalam 1 mL CMC.

## Pembuatan Media Pembuatan Media Agar Miring
Nutrient  Agar (NA)  sebanyak  0,4  gram dilarutkan  dalam  20  mL  aquades  (20  g  /  1000 mL) menggunakan Erlenmeyer. Larutan dihomogenkan  dengan stirrer diatas  penangas air  sampai  mendidih.  Sebanyak  5  mL dituangkan masing-masing pada 2 tabung reaksi steril dan ditutup dengan aluminium foil . Media tersebut  disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu 121°C  selama  15  menit,  kemudian  dibiarkan pada  suhu  ruangan  selama  ±  30  menit sampaimedia  memadat  pada  kemiringan  30°. Media  Agar  miring  digunakan untuk  inokulasi bakteri (Lay, 1994).

## Pembuatan Media Pengujian
Media dasar dibuat dengan cara ditimbang Nutrient  Agar  (NA)  sebanyak  5,6  g,  lalu dilarutkan dalam 200 mL akuades menggunakan erlenmeyer. Media dihomogenkan dengan stirer diatas penangas air
sampai mendidih. Media yang sudah homogen ini disterilkan  dalam  autoklaf  pada  suhu  121˚C selama  15  menit,  kemudian  didinginkan  sampai suhu  ±  45-50  ˚C.  Media  dasar  digunakan  dalam pembuatan media pengujian.

## Inokulasi Bakteri pada Media Agar Miring
Bakteri  uji  diambil  dengan  jarum  ose  steril, lalu  ditanamkan  pada  media  agar  dengan  cara digores.  Larutan  selanjutnya  diinkubasi  dalam inkubator pada suhu 37°C selama 24 jam. Perlakuan  yang  sama  dilakukan  pada  setiap jenis bakteri uji (Siregar, 2009).

## Pembuatan Larutan Standar Mc. Farland
Larutan H 2 SO 4 1% sebanyak 9,95 mL dicampurkan dengan larutan BaCl 2 2H 2 O 1,175% sebanyak 0,5 mL dalam Erlenmeyer. Larutan kemudian dikocok sampai terbentuk larutan yang keruh. Kekeruhan ini dipakai sebagai standar kekeruhan suspense bakteri uji (Victor, 1980).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi  dengan jarum  ose  steril  lalu  disuspensikan  ke  dalam tabung  berisi  3  mL  larutan  NaCl  0,9%  hingga diperoleh  kekeruhan  yang  sama  dengan  standar kekeruhan  Mc.  Farland.  Perlakuan  yang  sama dilakukan  pada  setiap  jenis  bakteri  uji  (Bresson dan Borges, 2004).

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah  metode  Kirby-Bauer,  yaitu  metode  difusi dengan  cakram  kertas.  Medium  NA  dituang  ke cawan  petri  sebanyak  30  ml,  masing-masing bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia  coli dan Pseudomonas  aeruginosa sebagai  bakteri biakan  uji,  dipipet  dari  medium  larutan  NACL 0,9%  ke  3  cawan  petri  steril  masing-masing sebanyak 200 μl. Cawan petri kemudian digoyang secara perlahan-lahan untuk menyebarkan biakan bakteri  secara  merata  dan  didiamkan  hingga medium  memadat  (Rostinawati,  2009).  Masing- masing  dari  cakram  kertas  steril  dipindahkan secara  aseptik  menggunakan  pinset  steril  ke konsentrasi  yakni  20%,  40%,  60%  serta  larutan antibiotik  (kontrol  positif)  dan  larutan  CMC (kontrol  negatif)  direndam  ±  1  menit.  Cakam kertas yang telah direndam dengan ekstrak etanol daun Pianang Yaki, larutan CMC serta antibiotik Ciprofloxacin dipindahlan dengan pinset steril ke medium  NA  berisi Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli secara  aseptik,  kemudian
diinkubasi selama 1 x 24 jam dengan suhu 37 °C (Bresson dan Borges, 2004).

## Pengamatan dan Pengukuran
Pengamatan dilakukan setelah 24 jam masa inkubasi.  Daerah  pada  sekitaran  cakram menunjukkan kepekaan ekstrak terhadap bakteri yang digunakan sebagai bahan uji yang dinyatakan  dengan  diameter  zona  bening. Diameter  zona  bening  diukur  menggunakkan jangka  sorong.  Kemudian  zona  bening  yang diukurdikategorikan kekuatan daya antibakterinya berdasarkan penggelongan (Davis dan Stout , 1971).
Penggolongan  antibakteri  digolongkan menjadi  empat  kategori  yaitu  kategori  sangat kuat, kuat, sedang dan lemah. Ekstrak dikatakan memiliki  daya  hambat  dengan  kategori  sangat kuat  apabila  diameter  daya  hambat  yang dihasillkan lebih dari 20 mm.Ekstrak dikatakan memiliki  daya  hambat  dengan  kategori  kuat apabila  diameter  daya  hambat  yang  dihasilkan berkisar  antara  10  mm  -  20  mm.  Ekstrak dikatakan  memiliki  diameterdaya  hambat kategori  sedang  apabila  daya  hambatnya berkisar  antara  5  mm  -  10  mm  dan  diameter daya  hambat  suatu  ekstrak  dikatakan  lemah yaitu  apabila  diameter  zona  hambat  yang dihasilkan kurang dari 5 mm (Davis dan Stout, 1971).

## Analisis Data
Diameter  zona  hambat  dari  ekstrak  etanol daun  Pinang  Yaki ( Areca  vestiaria )  disajikan dalam  tabel  dan  gambar.  Penggolongan kekuatan  antibakteri  dari  daya  hambat  yang diperoleh  ekstrak  daun  Pinang  Yaki  ( Areca vestiaria ) digolongkan menurut Davis dan Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Pengambilan dan Penyiapan Sampel
Pada penelitian ini sampel yang digunakan adalah  Daun  Pnang  Yaki  ( Areca  vestiaria ) yang  diambil  di  Kota  Tomohon  .  Sebelum dilakukan  proses  ekstraksi,  sampel  yang  telah didapat langsung dibersihkan, lalu di masukkan ke  dalam  oven  dengan  suhu  40◦C  dan kemudian  di  lakukan  proses  pembuatan simplisia. Kemudian di larutkan dengan etanol 95% dengan di lakukan dua kali pengulangan . Sifat kelarutan dari pelarut dan komponen yang akan dilarutkan merupakan dasar dari penambahan pelarut pada suatu bahan. Dalam
penelitian  ini  menggunakan  pelarut  etanol. Pelarut  ini  dipilih  karena  mempunyai  sifat selektif,  dapat  bercampur  dengan  air  dengan segala perbandingan, ekonomis, mampu mengekstrak  dan  menyari  sebagian  besar kandungan  senyawa  yang  ada  dalam  simplisia. dikarenakan  semakin  kecil  ukuran  sampel, interaksi sampel dengan pelarut semakin besar.

## Identifikasi Tanaman
Identifikas  Daun  Pinang  Yaki  ( Areca vestiaria )  bertujuan  untuk  mengetahui  apakah jenis  tanaman  yang  akan  digunakan  untuk penelitianini . Identifikasi dilakukan di laboratorium  Farmakognosi  Program  Studi Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan  Alam,  Universitas  Sam  Ratulangi Manado.

## Ekstraksi Sampel
Proses  ekstraksi  Daun  Pinang  Yaki  ( Areca vestiaria ) dengan menggunakan metode maserasi sedangkan  pelarut  yang digunakan  untuk  sampel tersebut adalah etanol 95% karena pelarut ini bisa melarutkan  semua  senyawa  organik,  baik  polar atau  non  polar.  Agar  senyawa  kimia  didalam sampel dapat terekstrak secara menyeluruh maka dilakukan re-maserasi atau pengulangan. Filtrat 1 dan 2 yang diperoleh dicampurkan menjadi satu, hasil  filtrat  yang  diperoleh  kemudian  dilakukan penguapam  menggunakan  oven  selama  1  x  24 jam. Penguapan bertujuan untuk proses pengentalan  larutan  dengan  cara  mendidihkan atau menguapkan pelarut.

## Pengujian Aktifitas Antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun pinang  yaki  ( Areca  vestiaria ).  alat-alat  yang digunakan  disterilisasikan  sebagai  langkah  awal pengujian,  sterilisasi  bertujuan  untuk  membunuh semua  jasad  renik  yang  ada,  sehingga  tidak terdapat mikroorganisme pada bahan atau barang yang  akan  digunakan  dalam  pengujian  (Lay, 1994).
Media agar miring dibuat dengan tujuan agar supaya memperluas permukaan untuk pertumbuhan atau perkembiakan bakteri (Katzung, 1994).
Media  pengujian  merupakan  medium  yang baik sebagai tempat tumbuhnya beberapa bakteri gram positif dan gram negatif yang dimanfaatkan sebagai  sumber  nutrisi  bagi  pertumbuhan  (Lay, 1994).
Inokulasi bakteri bertujuan untuk penanaman  bakteri  atau  pemindahan  bakteri dari  media  asli  ke  media  nutrient  baru,  dan dalam media nutrient agar baru ini bakteri dapat ditumbuhkan  dan  dikembagkan  dengan  baik (Poedjiadi, 1994).
Larutan  Mc.  Farland  dibuat  untuk digunakan sebagai referensi untuk menyesuaikan  kekeruhan  suspensi  bakteri sehingga  jumlah  bakteri  akan  berada  dalam kisaran  yang  diberikan  untuk  menstandarisasi pengujian  mikroba,  dan  suspensi  bakteri  uji dibuat  hingga  diperoleh  kekeruhan  yang  sama dengan  standar  kekeruhan  Mc.  Farland,  dan dilakukan pada setiap bakteri uji (Lay, 1994).
Pengukuran diameter zona hambat dilakukan  untuk  menggolongkan  antibakteri. Zona  bening  yang  terdapat  disekitar  cakram kertas  yang  diuji  menandakan  bahwa  terjadi aktivitas  antibakteri.  Adanya  zona  bening disekitar  cakram  kertas  merupakan  daerah difusi  dalam  mempengaruhi  pertumbuhan bakteri. Kekuatan antibakteri diketahui dengan mengukur besarnya diameter zona hambat yang terbentuk  dari  ekstrak  yang  diuji  (Harborne, 1987).
Tabel  1.  Diameter  Zona  Hambat  Ekstrak Daun Pinang Yaki ( Areca vestiaria ) Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus, Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa
Konsentrasi Diameter zona hambat E. coli S. aureus P. aeruginosa 20 8 6.25 11 40 8.16 6.3 8.5 60 8 9.1 8.58 K (-) - - - K(+) 13 15.1 19.75
Menurut Davis dan Stout (1971), kekuatan antibakteri dapat dikelompokkan sebagai berikut
- Daerah hambatan 20 mm/lebih : sangat kuat
- Daerah hambatan 10-20 mm : kuat
- Daerah hambatan 5-10 mm : sedang
- Daerah hambatan 5 mm atau kurang : lemah
Hasil  pengujian  ekstrak  etanol  daun Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria ).  Terhadap bakteri Staphylococcus aureus, terlihat memiliki zona bening di kosentrasi 20%, 40%
dan  60%  masing-masing  sebesar  6,25  mm,  6,3 mm  dan 9,1 mm. Kemampuan menghambat dari ekstrak  daun  Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria ) tampaknya  lebih  lemah  dibandingkan  dengan antibiotika  ciprofloxacin  yaitu  sebesar  13  mm. berdasarkan  kriteria  penggolongan  antibakteri dari  Davis  dan  Stout  (1971)  maka  daya antibakteri  ekstrak  daun  Pinang  Yaki  pada bakteri Staphylococcus aureus dengan konsentrasi ekstrak 20%, 40% dan 60% memiliki kekuatan  antibakteri  yang  termasuk  kategori sedang.
Hasil pengujian ekstrak etanol daun Pinang Yaki  ( Areca  vestiaria ).  Terhadap  bakteri Escherichia  coli, terlihat  memiliki  zona  bening dikosentrasi 20%, 40% dan 60% masing-masing sebesar 8 mm, 8,16 mm dan 8 mm. Berdasarkan kriteria penggolongan antibakteri dari Davis dan Stout (1971) maka daya antibakteri ekstrak daun Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria )  terhadap  bakteri Escherichia  coli, pada  kosentrasi  20%  (8  mm) kosentrasi  40%  (8,16  mm)  dan  60%  (8  mm) memiliki  kekuatan  antibakteri  kategori  sedang. Kamampuan  menghambat  dari  estrak  daun Pinang  Yaki  ( Areca  vestiaria )  tampaknya  lebih lemah dibandingkan dengan antibiotika ciprofloxacin yaitu sebesar 19,75 mm. Hasil pengujian ekstrak etanol daun Pinang Yaki ( Areca vestiaria ) terhadap bakteri Pseudomonas  aeruginosa. Terlihat  memiliki zona  bening  dikosentrasi  20%,  40%  dan  60% masing-masing 11 mm, 8,5 mm, 8,58 mm. Hal ini menunjukkan  bahwa  bahwa  estrak  daun  Pinang Yaki  ( Areca  vestiaria )  berdasarkan  kriteria penggolongan  antibakteri  dari  Davis  dan  Stout (1971)  maka  daya  antibakteri  ekstrak  daun Pinang  Yaki pada  bakteri Pseudomonas aeruginosa, pada  kosentrasi  20%  (11  mm) memiliki  antibakteri  golongan  kuat  sedangkan pada  kosentrasi  40%  (8,5  mm)  dan  60%  (8,58 mm) memiliki antibakteri kategori sedang. Berdasarkan hasil tersebut dapat diketahui bahwa bakteri  gram  positif  dan  gram  negatif  pada konsentrasi ekstrak memiliki sifat dan karakteristik  yang  berbeda  dalam  merespon bahan antibakteri.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa :
1. Ekstrak  etanol  daun  Pinang  Yaki  ( Areca vestiaria ) memiliki aktivitas sebagai antibakteri  terhadap Staphylococcus  aureus,
Escherichia coli dan Pseudomonas aeruginosa.
2. Kosentrasi  ekstrak  20%,  40%  dan  60% pada  bakteri Staphylococcus  aureus ,
Escherichia  coli merupakan  konsentrasi yang  termasuk  dalam  golongan  sedang, sedangkan  pada  bakteri Pseudomonas aeruginosa dikonsentrasi  20%  termasuk dalam  golongan  kuat,  dan  40%  dan  60% hanya termasuk digolongan sedang.

## SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui  senyawa  spesifik  yang  berkhasiat sebagai  antibakteri  pada  daun  Pinang  Yaki (Areca  vestiaria) dan  aktivitas  antibakterinya pada bakteri patogen yang lain.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdullah,  S.S.,  2021.  Pelatihan  Produksi Minuman Serbuk Jahe, Kunyit,
Temulawak  Majelis  Ta’lim  Irsyaadul Ibaad  dan  PKK  Bailang  Upaya
Peningkatan  Produktivitas  Ekonomi dan Imunitas. Vivabio. 3(3) :16-19. Abdullah,  S.S.,  Djide,  N.,  Natsir,  S.  (2021). KLT  Bioautografi  Hasil  Partisi  Ekstrak Etanol  Herba  Bandotan  ( Ageratum
conyzoides L. ) Terhadap Shigella dysentriae . Chem. Prog. 14(1) .15-17 Bischoff J, Domcrachev M, Federen S, Hotton C,  Leipe  D,  Soussov  V,  Sternberg  R, Turner S. 2003. Areca vestiaria .
Bresson, W., dan M.T. Borges. 2004. Delivery
Methods  for  Introducing  Endophitic Bacteria  into  Maize. Biocontrol . 49: 315-322.
Brooks,  G.  F.,  Carroll,  K.,  Butel,  J.S.  Jawetz,
Melnick,  &  Adelberg’s  Medical
Microbiology.  Ed ke-26.  Philadelphia: McGraw-Hill Company Inc; 2013 Bruneton. J.. 1995.. Pharmacognosy Phytochemistry Medicinal Plants. New Yotk: Intercept Ltd. 705- 706 Burton,  G.R.W.,  dan  P.  G.  Engelkirk.  2004. Burton’s  Microbiology  for  the  health sciences.
8thedition .  Lippincott
Williams danWilkins, Philadephia.
Davis, W. W dan T. R. Stout. 1971. Disc Plate Method  of  Microbiological  Antibiotic assay. Applied Microbiology.
de  Padua,  L.  S.,  Bunyapraphatsara,  N.  and Lemmens,  R.  H.  M.  S,  Plant  Resource of  South  East  Asia  No  12(1).  Medical
and Poisonous Plants 1. Printes in Bogor Indonesia (PROSEA). Leiden, the
Netherlands, Backhuys Publishers, 1999: 36-48 Eisenbrand  dan  Tang,  1992,  Chinese  Drugs  of Plant Origin, Chemistry, Pharmacology,and Use in Traditional and Modern  Medicine,  New  York,  Springer-
Verlag, p. 139-143.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia Edisi ke-
2. ITB Press, Bandung
Ismail, D. 2012. Uji Bakteri Escherichia coli Pada
Minuman  Susu  Kedelai  Bermerek  dan Tanpa merek di Kota Surakarta. Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah,
Surakarta.
Istiqomah.2014. Perbandingan Metode Ekstraksi
Maserasi  dan  Sokletasi  Terhadap  Kadar Piperin Buah Cabe Jawa (Piperis Retrofracti Fructus) [Skripsi] UIN Jakarta. Jawetz,  E.,  J.  L,  Melnick  dan  E.  A,  Adelberg.
2005. Mikrobiologi Untuk Profesi Kesehatan  Edisi  4.  Diterjemahkan  oleh Bonang,  G.  Penerbit  Buku  Kesehatan Jakarta. Jawetz, Melnick, dan Adelbergs. 2008. Mikrobiologi Kedokteran.  Edisi  23.  Alih Bahasa  Huriwati Hartanto. Buku Kedokteran ECG, Jakarta. Katzung,  B.  G.,  dan  Trevor,  A.  J.,  1994.  Buku Bantu  Farmakologi,  diterjemahkan  oleh Staf Pengajar, Laboratorium
Farmakologi,  Fakultas  Kedokteran  dan Universitas Sriwijaya, Cetakan I, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Kumala  S,  Raisa  N,  Rahayu  L,  Kiranasari  A. 2009.  Uji  Kepekaan  Bakteri  yang Diisolasi  dari  urin  Penderita  Infeksi Saluran  Kemih  (ISK)  terhadap  beberapa Antibiotika  pada  Periode  Maret-Juni 2008.  Majalah  Ilmu  Kefarmasian, 6(2) : 45-55.
Mopangga, E., Yamlean, P. V. Y., & Abdullah, S. S.  (2021).  Formulasi  Sediaan  Sabun Mandi  Padat  Ekstrak  Etanol  Daun  Gedi ( Abelmoschus  manihot L.)  Terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis . Pharmacon, 10(3) , 1017–1024.
Mandias, I.I., Yamlean, P. V. Y. , Abdullah , S. S.
(2022), Formulation  and  Antibacterial Activity Test of Peel-Off Gel Mask Ethyl Acetate Fraction of Cocoa Pods ( Theobroma cacao L.) Against

## PHARMACON– PROGRAM STUDI FARMASI, FMIPA, UNIVERSITAS SAM RATULANGI
Staphylococcus  aureus as  Anti-Acne, Pharmacon, 11(4) , 1258–1265.
Lay,  W.B.  1994.  Analisa  Mikroba  di
Laboratorium. Edisi I. PT.Raja Grafindo Persada, Jakarta. Pelczar, M. J. dan E. C. S. Chan. 1988. Dasar- Dasar Mikrobiologi. Jilid 2. Terjemahan  Ratna  Siri  Hadioetomo. UI-Press. Jakarta. Poedjiadi, 1994. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: UI-Press. Pratiwi. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Erlangga, Jakarta. Radji,  M.  dan  Biomed,  M.  2011.  Buku  Ajar Mikrobiologi Panduan Mahasiswa
Farmasi Dan Kedokteran. Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Redwik,  D.  U.,  Simbala,  H.  E.,  &  Edi,  H.  J.
(2019).  Identifikasi  Fitokimia  Dan  Uji Daya  Hambat  Dari  Ekstrak  Etanol Tangkai  Buah  Pinang  Yaki  ( Areca vestiaria Giseke)  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  Aureus,  Escherichia coli,  DAN  Psuedomonas  aeruginosa. Pharmacon , 8(4), 936-944.
Rosenbach, A. J. F. 1884. Mikroorganismen bel den  Wund-infectionskrankhelten  des Menschen. JF Bergmann, Netherlands Rundengan,  C.H.  (2017).  Uji  Daya  Hambat Ekstrak Etanol Biji Pinang Yaki ( Areca vestiaria ) terhadap Bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa.
Pharmacon , 6(1) .
Sakul,  G.,  Simbala,  H.  E.,  &  Rundengan,  G.
(2020).  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak Etanol  Daun  Pangi  (Pangium  edule Reinw.  ex  Blume)  Terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus,  Escherichia coli  dan  Pseudomonas  aeruginosa.
Pharmacon, 9(2), 275-283.
Sahuleka,  A.S.G.,  Edy,  H.J.,  Abdullah,  S.  S., (2021),  Formulasi  Sediaan  Krim Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun
Eceng  Gondok  ( Eichhornia  crassipes ) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus , Pharmacon, 10(4) , 1162–1168. Sinrang,  V.N.S.,  Edy,  H.J.,  Abdullah,  S.S.,, (2022), Formulasi Sediaan Obat Kumur Ekstrak  Etanol  Biji  Pinang  ( Areca catechu  L. ),  Pharmacon, 11(1) ,  1342– 1349.
Simbala  H  E  I.  2007.  Uji  Toksisitas  dan  Uji Preklinik Areca  vestiaria /Pinang  yaki sebagai antifertilitas.
Simbala, H. E. I. 2007. Keanekaragaman Floristik dan pemanfaatan Sebagai Tumbuhan Obat di Kawasan Konservasi II Taman Nasional
Bogani NaniWartabone (Kabupaten Bolaang Mongondow, Sulawesi Utara).[Disertasi]. Institut Pertanian Bogor, Bogor
Simbala,  H.E.I.  2016.  Proses  Produksi  dan Formulasi  Produk  Ekstrak  Buah  Pinang Yaki Areca vestiaria Sebagai Bahan Aktif Produk Fitofarmaka Antikanker.
Siregar,  S.F.  2009.  Uji  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak  Etanol  dan  Air  Rebusan  Kulit Batang  Ingul (Toona sinensis M. Roem) Terhadap  Beberapa  Bakteri.  [skripsi].
Fakultas Farmasi USU, Medan. Siswandono,  dan  B.  Soekardjo.  2000.  Kimia Medisinal. Universitas Airlangga, Surabaya. Strateva  T,  Yordanov  D.  2009.  Pseudomonas aeruginosa – A Phenomenon of Bacterial
Resistance.  J  Med  Microbiol 53: 1133- 1148.
Tenover.  2006.  Mechanisms  of  Antimicrobial Resistance  in  Bacteria. The  American Journal of Medicine . 11(6): 3-10.
Vandepitte, V.J., K. Engbaek, P. Rohner, P. Piot, dan  C.  C.  Heuck.  2005.  Prosedur Laboratorium  Dasar  Untuk  Bakteriologi Klinis Edisi 2. EGC, Jakarta.
Victor,  L.  1980. Antibiotics  in  Laboratory  Test .
The  Williams  and  Wilkins  Company, USA.
Wang,  C.L.,  dan  Lee,  W.H.,1996,  Separation Caracteristic, and Biological Activities of Phenolics  in  Areca  Fruit,  J.Agric.Food Chem 44 , 2014-2019
Warastri NF. 2007. Isolasi Bakteri Gram Negatif pada  Kasus  Penyakit  Infeksi  Saluran Pernafasan  Anjing  dan  Sensitivitasnya [Tesis].  Yogyakarta.  Universitas  Gadjah Mada.
Wattimena.  1991.  Farmakodinamik  dan  Terapi
Antibiotik.  Gajah  Mada  UniversityPress, Yogyakarta.
Yenny,  Elly  H.  2007.  Resistensi  dari  Bakteri
Enterik: Aspek Global terhadap Antimikroba.  Universa  Medicina 26(1) : 46-56.