Jumlah dan Fungsi Melanosit Leukotrikia pada Vitiligo Berdasarkan Pemeriksaan Imunohistokimia S100 dan Microphtalmia Associated Transcription Factor (MITF)
(Melanocyte Function and Count of Leukotrichia in Vitiligo Using S100

## Immunohistochemistry and Microphtalmia Associated Transcription Factor
(MITF))

## M. Yulianto Listiawan, Marina Rimadhani, Willy Sandhika
Departemen/Staf Medik Fungsional Ilmu Kesehatan Kulit dan Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga/Rumah Sakit Umum Daerah Dr. Soetomo Surabaya

## ABSTRAK
Latar Belakang: Melanosit yang terletak pada folikel rambut adalah sumber utama repigmentasi pada vitiligo. Leukotrikia adalah depigmentasi komplit dengan pemutihan rambut yang bermakna.  Leukotrikia pada vitiligo nonsegmental dikatakan memiliki kontribusi pada rendahnya respons terapi. Leukotrikia sering dihubungkan dengan tidak didapatkannya melanosit, menunjukkan  prognosis  yang  buruk  pada  terapi  vitiligo. Tujuan: Mengevaluasi  jumlah  dan  fungsi  melanosit  leukotrikia pada vitiligo dan membandingkan dengan efloresensi lain. Metode: Jumlah  melanosit pada setiap  efloresensi lesi dari 18 pasien dengan vitiligo nonsegmental diamati berdasarkan vitiligo extent tensity index (VETI). Jumlah melanosit dievaluasi menggunakan  pemeriksaan  imunohistokimia  S100  dan microphtalmia  associated  transcription  factor (MITF). Hasil: Delapan belas pasien merupakan vitiligo nonsegmental, dan lima pasien didapatkan leukotrikia.  Dua dari 5 pasien dengan leukotrikia tidak terdeteksi ekspresi MITF maupun melanosit. Ekspresi MITF dan melanosit tidak terdapat perbedaan antara pasien  dengan  leukotrikia  maupun  yang  tidak. Simpulan: Leukotrikia  merupakan  indikator  prognosis  yang  buruk  dalam memprediksi  respons  terapi  vitiligo,  namun  berdasarkan  hasil  penelitian  ini  leukotrikia  pada  vitiligo  tidak  berkontribusi pada buruknya respons terapi.
Kata kunci: leukotrikia, melanosit, vitiligo.

## ABSTRACT
Background: Melanocyte  of  the  hair  follicle  is  one  of  the  major  sources  of  repigmentation  in  vitiligo.  Leukotrichia  is complete depigmentation with significant bleaching hair.  Leukotrichia in nonsegmental vitiligo may contribute to the lack of response to medical treatment. Leukotrichia is often associated with absent of melanocyte, showing poor prognosis for vitiligo  treatment. Purpose: To  evaluate  melanocyte  count  and  function  of  leukotrichia’s  melanocyte  in  vitiligo  and comparing with other feature. Method: Melanocyte count in each feature of lesional skin in 18 segmental vitiligo patients were  evaluated  based  on  vitiligo  extent  tensity  index  (VETI).  Melanocyte  count  has  been  evaluated  using immunohistochemistry  S100  and  microphtalmia  associated  transcription  factor  (MITF). Results: Eighteen  patients  were nonsegmental  vitiligo,  and  five  of  them  had  leukotrichia.  Two  of  five  leukotrichia  patients  did  not  express  MITF  nor melanocyte. There  were no differences of melanocyte and MITF expression between patient with  or without leukotrichia. Conclusion: Leukotrichia is a  poor indicator for treatment response  in vitiligo, but this research showed that leucotrichia may not contribute to the lack of response upon medical treatment.
Key words : leukotrichia, melanocyte, vitiligo.
Alamat  korespondensi:  M.  Yulianto  Listiawan.  Departemen/Staf  Medik  Fungsional  Ilmu  Kesehatan  Kulit  dan  Kelamin Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga/Rumah Sakit Umum Daerah Dr. Soetomo, Jl. Mayjen Prof. Dr. Moestopo No 6- 8 Surabaya 60131, Indonesia. Telepon: +62315501609, e-mail: yuliantowawan@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Vitiligo  merupakan  kelainan  depigmentasi  yang paling  sering  ditemukan  di  dunia.  Vitiligo  bersifat dapatan  dan  melibatkan  beberapa  gen  dan  faktor lingkungan.  Vitiligo  ditandai  dengan  hilangnya
melanosit.  Berdasarkan  distribusi  klinis,  vitiligo diklasifikasikan sebagai segmental dan nonsegmental. Vitiligo  nonsegmental  ialah  semua  kasus  yang  tidak diklasifikasikan  sebagai  segmental,  termasuk  lokal, generalisata  dan  akrofasial. 1 Respons  terapi  yang
Microphtalmia Associated Transcription Factor (MITF)
buruk  pada  vitiligo  sering  dikaitkan  dengan leukotrikia.  Leukotrikia  sering  digunakan  sebagai indikator prognosis pada vitiligo. 1,2
Leukotrikia adalah depigmentasi komplit ditambah  dengan  pemutihan  rambut  bermakna,  yang dapat  dengan  mudah  dievaluasi  secara  klinis. Leukotrikia pada rambul velus tipis sulit dievaluasi. 3,4 Melanosit  yang  terletak  di  folikel  rambut  dipercaya sebagai  salah  satu  sumber  utama  untuk  repigmentasi pada  vitiligo,  sehingga  untuk  mengevaluasi  warna rambut  pada  lesi  dan  mengaitkannya  dengan  jumlah serta  fungsi  melanosit  mungkin  memiliki  implikasi klinis berkaitan dengan pengobatan vitiligo. 5-7
Vitiligo  extent  tensity  index (VETI)  ialah  sistem baru  yang  digunakan  untuk  menilai  luasnya  vitiligo melalui  skor  numerik  dan  menggabungkan  analisis luas dan keparahan vitiligo, menghasilkan angka yang dapat digandakan seperti psoriasis area severity score (PASI).  Efloresensi  vitiligo  berdasarkan  tingkat keparahan  menurut  VETI,  yaitu  tingkat  0:  kulit normal; tingkat 1: hipopigmentasi (termasuk pigmentasi  trikrom  dan  homogeni);  tingkat  2: depigmentasi  komplit  dengan  rambut  hitam  dan pigmentasi  perifolikuler;  tingkat  3:  depigmentasi komplit  dengan  rambut  hitam  tanpa  pigmentasi perifolikuler; tingkat 4: depigmentasi komplit dengan campuran  rambut  putih  dan  hitam  dengan/tanpa pigmentasi  perifolikuler;  tingkat  5:  depigmentasi komplit  ditambah  dengan  pemutihan  rambut  yang bermakna atau leukotrikia. 8
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mengevaluasi jumlah dan fungsi melanosit leukotrikia  pada  vitiligo  dan  membandingkan  dengan efloresensi lainnya berdasarkan VETI .
METODE
Penelitian ini menggunakan consecutive sampling dengan  mengambil  setiap  penderita  yang didiagnosis vitiligo dan memenuhi kriteria penerimaan  sampel  di  Unit  Rawat  Jalan  (URJ) Kesehatan Kulit dan Kelamin Divisi Kosmetik RSUD. Dr.  Soetomo  Surabaya  selama  3  bulan,  yaitu  sejak November  2015  hingga  Februari  2016.  Sampel penelitian  adalah  pasien  vitiligo  segmental  dan nonsegmental yang tidak menggunakan kortikosteroid topikal, calcineurin  inhibitor topikal,  maupun kalsipotriol  topikal  dalam  2  minggu  terakhir,  tidak mengonsumsi  kortikosteroid  sistemik  dalam  3  bulan terakhir, tidak menerima terapi psoralen ultra violet A (PUVA), narrow band-ultraviolet B (NB-UVB), laser excimer dalam    3  bulan  terakhir ,  tidak  hamil,  berusia lebih dari 15 tahun , keadaan umum baik dan bersedia untuk  mengikuti  penelitian  dengan  menandatangani informed consent . Jumlah sampel penelitian adalah 18 pasien.  Catatan  dan  gambaran  klinis  diambil  dari  18 pasien tersebut. Efloresensi lesi dievaluasi menggunakan  VETI,  lalu  dilakukan  biopsi  plong untuk mengambil spesimen pemeriksaan imunohistokimia  S100  dan microphtalmia  associated transcription  factor (MITF).  Pemeriksaan  tersebut bertujuan  mengevaluasi  jumlah  melanosit  per  dua lapang pandang.

## HASIL
Data  pada  Tabel  1  menunjukkan  proporsi efloresensi berdasarkan  VETI, yang terbanyak adalah depigmentasi komplit dengan rambut tanpa pigmentasi  perifolikuler  (VETI  3)  sebanyak  7  orang (38,9%),  diikuti  oleh  depigmentasi  komplit  ditambah dengan  pemutihan  rambut  yang  bermakna  (VETI  5) sebanyak 5 orang (27,8%).
Tabel 1. Distribusi proporsi efloresensi pasien vitiligo VETI Efloresensi Jumlah Persentase (%) 1 Makula depigmentasi (termasuk pigmentasi trikrom dan homogen) 2 11,1 2 Depigmentasi  komplit  dengan  rambut  hitam  dan pigmentasi perifolikuler 2 11,1 3 Depigmentasi  komplit  dengan  rambut  hitam  tanpa pigmentasi perifolikuler 7 38,9 4 Depigmentasi  komplit  dengan  campuran  rambut  putih dan hitam dengan/tanpa pigmentasi perifolikuler 2 11,1 5 Depigmentasi komplit ditambah dengan pemutihan rambut yang bermakna 5 27,8 Total 18 100 Keterangan: VETI = vitiligo extent tensity index
Terdapat lima pasien dengan leukotrikia pada vitiligo  nonsegmental,  tidak  tergantung  usia  dan durasi  penyakit,  seperti  tersaji  pada  Tabel  1.  Luas leukotrikia  tidak  sama  pada  semua  pasien,  namun kulit normal di sekitarnya menunjukkan rambut hitam. Di  antara  lima  pasien  tersebut,  dua  pasien  (pada pasien nomer 7 dan 8) tidak terdeteksi ekspresi MITF maupun  melanosit,  sisanya  jika  dibandingkan  dengan pasien  vitiligo  yang  tidak  memiliki  leukotrikia,
ekspresi MITF dan melanosit tidak terdapat perbedaan (Tabel 2).
Data yang tertera pada Tabel 2 menunjukkan jumlah  sampel  penelitian  laki-laki  sebanyak  sepuluh orang  (55,6%)  dan  perempuan  sebanyak  delapan orang (44,4%). Usia sampel berkisar antara 16 hingga 69 tahun. Lama menderita vitiligo bervariasi, mulai 7 bulan hingga 22 tahun.
Tabel 2 . Hasil imunohistokimia S100 dan microphtalmia associated transcription factor (MITF)
No. Pasien Jenis Kelamin Usia Lama vitiligo VETI* IHC* S100 IHC MITF* 1 L 30 7 bulan 2 +++ + 2 L 25 3 tahun 2 +++ - 3 P 30 6 tahun 1 + + 4 L 45 10 tahun 3 ++ + 5 P 50 22 tahun 1 +++ ++ 6 L 30 1 tahun 5 ++ + 7 P 60 5 tahun 5 - - 8 P 49 11 tahun 5 - - 9 P 42 15 tahun 3 - + 10 L 49 2 tahun 5 ++ + 11 L 16 1 tahun 3 ++ ++ 12 L 64 20 tahun 5 +++ + 13 P 48 11 tahun 3 +++ + 14 L 18 9 tahun 3 ++ ++ 15 P 50 5 tahun 3 ++ ++ 16 P 45 10 tahun 3 ++ + 17 L 58 1 tahun 2 ++ ++ 18 L 69 4 tahun
4
+++ ++
*Keterangan  VETI: vitiligo  extent  tensity  index ,  IHC: immunohistochemistry, MITF: microphtalmia associated transcription factor . Efloresensi VETI: [1] Makula depigmentasi (termasuk  pigmentasi  trikrom  dan  homogen),  [2]  Depigmentasi  komplit  dengan  rambut hitam  dan  pigmentasi  perifolikuler,  [3]  Depigmentasi  komplit  dengan  rambut  hitam  tanpa pigmentasi  perifolikuler,  [4]  Depigmentasi  komplit  dengan  campuran  rambut  putih  dan hitam  dengan/tanpa  pigmentasi  perifolikuler,  [5]  Depigmentasi  komplit  ditambah  dengan pemutihan rambut yang bermakna.
Gambar 1 . Ekspresi microphtalmia associated transcription factor (MITF) pada leukotrikia vitiligo. Pembesaran 400x.
Gambar 2. Imunohistokimia S100 pada leukotrikia.
Pembesaran 400x.
Microphtalmia Associated Transcription Factor (MITF)

## PEMBAHASAN
Leukotrikia  atau  depigmentasi  komplit  pada vitiligo yang diikuti dengan pemutihan rambut, akibat penurunan  melanosit  pada  bulbus  rambut,  sering digunakan  sebagai  indikator  prognosis  terhadap respons  terapi. 9 Penelitian  Lee  dan  kawan-kawan menyatakan leukotrikia pada vitiligo dapat berkontribusi  pada  rendahnya  respons  terapi  yang diberikan. 3 Penelitian  Van  geelk  Ongenay  NAC menunjukkan  dari  13  pasien  yang  mengalami leukotrikia  dan  dilakukan grafting ,  12  pasien  (92%) mengalami  repigmentasi  yang  buruk  pada  tiga  bulan pertama,  namun  10  dari  11  pasien  mengalami repigmentasi  yang  sangat  baik  setelah  sembilan bulan. 10
Penelitian  ini  menunjukkan  tidak  ada perbedaan  jumlah  dan  fungsi  melanosit  antara leukotrikia dengan efloresensi VETI lainnya, sehingga dianggap  memiliki  probabilitas  yang  sama  dalam merespons terapi. Penelitian ini menyimpulkan bahwa leukotrikia  tidak  dapat  dijadikan  sebagai  indikator prognosis pada vitiligo.

## KEPUSTAKAAN
1. Birlea  SA,  Spritz  RA,  Norris  DA.  Vitiligo.  In: Wolff K, Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest BA, Leffel  DJ,  editors.  Fitzpatrick’s  Dermatology General  Medicine.  8 th Ed.  New  York:  McGraw Hill Co; 2013. p. 792-803.
2. Alikhan  MD,  Felsten  LM,  Daly  M,  Petronic- Rosic V. Vitiligo:  A comprehensive overview. J Am Acad Dermatol 2011; 65:473-91.
3. Lee  DY,  Kim  CR,  Park  JH,  Lee  JH.  The
incidence  of  leukotrichia  in  segmental  vitiligo: implication  of  poor  response  to  medical treatment.  Int  J  Dermatol  2011  Aug;  50(8):925- 7.
4. Al Jasser M, Ghwish B, Al Issa A, Mulekar SV. Repigmentation of vitiligo-associated leukotrichia  after  autologous,  non-  cultured melanocyte-  keratinocyte  transplantation.  Int  J Dermatol 2013 Nov; 52(11):1383-6.
5. Gan EY, Geel NV, Goh BK. Repigmentation of leucotrichia  in  vitiligo  with  noncultured  cellular grafting.  British  Association  of  Dermatologists 2012; 166:196-9.
6. Joong Jee H, Eun Do J, Noh S, Hoon Park S, Ho Oh  S.  Leukotrichia  in  stable  segmental  vitiligo: Implication of an alternate treatment option. Ann Dermatol 2014 feb; 26(1):132-4.
7. Park  HY,  Yaar  M.  Biology  of  melanocytes.  In: Wolff K, Goldsmith LA, Katz SI, Gilchrest BA, Leffel  DJ,  editors.  Fitzpatrick’s  Dermatology  in General  Medicine  8 th Ed.  New  York:  McGraw
Hill Co; 2013. p.792-803.
8. Feily  A.  Vitiligo  Extent  Tensity  Index  (VETI) score:  a  new  definition,  assessment  and treatment evaluation criteria in vitiligo. Dermatol Pract Concept 2014; 4(4):18.
9. Kutlubay  Z, Karakus O, Engin B, Serdaroglu S. Vitiligo  as  autoimun  disease.  J  Turk  Acad Dermatol 2012; 6(2):126r1.
10. Van  geelk  Ongenay  NAC,  Vander  Haeghen MSJ,  Naeyaret  JM.  Autologus  transplantation techniques for vitiligo: how to evaluate treatment outcome. Eur J Dermatol 2004; 14:46-51.