J. Kartika Kimia , May 2023, 6, (1), 69-77 Journal homepage : http://jkk.unjani.ac.id/index.php/jkk P-ISSN: 2655-1322     E-ISSN: 2655-0938

## Uji Bioinsektisida Ekstrak Buah Bintaro dan Umbi Gadung Terhadap Hama Walang Sangit (Leptocorisa acuta T.)

## Bioinsecticide Test of Bintaro Fruit Extract and Umbi Gadung Against Walang Sangit Pest (Leptocorisa acuta T.)
Syaiful Bahri*, Ilim, Hardoko Insan Qudus, Yuli Ambarwati, Ika Rizki Wulandari Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Lampung, Rajabasa, Bandar Lampung, Lampung, 35141
*E-mail: syaiful.bahri@fmipa.unila.ac.id
DOI: https://doi.org/10.26874/jkk.v6i1.189
Received : 29 Jan 2023, Revised : 10 March 2023, Accepted : 17 March 2023, O nline : 29 May 2023

## Abstrak
Insektisida  ialah  salah  satu  jenis  pestisida  yang  umum  digunakan  oleh  para  petani  untuk  membasmi hama serangga, salah satunya yakni walang sangit.  Penggunaan secara berlebih mengakibatkan resisten dan  pencemaran  tanah,  air  dan  udara.  Alternatif  lain  yakni  bioinsektisida  yang  aman  dan  tidak menimbulkan  resisten.  Pada  penelitian  ini  sampel  yang  digunakan  yakni  ekstrak  umbi  gadung  dan bintaro.  Metode yang digunakan yakni maserasi, setelah proses maserasi, filtrat akan diuji ke hewan target, dicari mortalitas walang sangit terbaik dan diskrining fitokimia.  Terakhir larutan bioinsektisida terbaik diidentifikasi dengan spektrofotometer FT-IR dan UV-Vis.  Hasil larutan bioinsektisida terbaik dengan mortalitas 60% dan 40% yakni bioinsektisida dengan konsentrasi 70% gadung dan 30% gadung 20% bintaro.  Uji skrining fitokimia dilakukan pada keduanya hasilnya positif mengandung terpenoid dan  alkaloid.    Identifikasi  menggunakan  spektrofotometer  FTIR  menunjukkan  bahwa  larutan bioinsektisida mengandung metabolit sekunder dengan gugus O-H yang muncul pada serapan bilangan gelombang 3260  cm -1 ,  gugus C=O  yang  muncul  pada  bilangan  gelombang  1637cm -1 dan  gugus C-H muncul  pada  bilangan  gelombang  1359  cm -1 .    Hasil  Spektrum  UV-Vis  menunjukkan  larutan bioinsektisida memiliki gugus fungsi C=C yang ditunjukkan dengan munculnya puncak pada panjang gelombang 210 nm, 217 nm dan 223 nm.
Kata kunci: bioinsektisida, metabolit sekunder, mortalitas

## Abstract
Insecticides are a type of pesticide that is commonly used by farmers to eradicate insect pests, one of which is the  stink  bug.  Excessive  use  results in  resistance  and  contamination  of  soil,  water,  and  air. Another  alternative  is  bioinsecticides  which  are  safe  and  do  not  cause  resistance.  In  this  study,  the samples  used  were  gadung  and  bintaro  root  extracts.  The  method  used  is  maceration,  after  the maceration  process,  the  filtrate  will  be  tested  on  the  target  animal,  looking  for  the  best  insecticide mortality  and  screening  for  phytochemicals.  Lastly,  the  best  bioinsecticide  solutions  were  identified using  FT-IR  and  UV-Vis  spectrophotometers.  The  best  bioinsecticide  solutions  with  60%  and  40% mortality  were  bioinsecticides  with  a  concentration  of  70%  gadung  and  30%  gadung  20%  bintaro. Phytochemical screening tests were carried out on both of them, the results were positive for terpenoids and alkaloids. Identification using the FTIR spectrophotometer showed that the bioinsecticide solution contained secondary  metabolites with  O-H  groups  appearing  at  absorption  wave  number 3260  cm -1 , C=O groups appearing at wave number 1637cm -1 , , and C-H groups appearing at wave number 1359
cm -1 . The results of the UV-Vis spectrum showed that the bioinsecticide solution had the C=C functional group as indicated by the appearance of peaks at a wavelength of 210 nm, 217 nm, and 223 nm.
Keywords: bioinsecticide, mortality, secondary metabolites.

## 1 Pendahuluan
Padi  merupakan  tanaman  penghasil  beras yang merupakan  salah  satu  makanan  pokok  bagi masyarakat  Indonesia.    Indonesia  menempati posisi  ke  empat  sebagai  penghasil  beras  terbesar di dunia [1]. Produksi padi pada tahun 2021 yaitu sebesar  54,42  juta  ton  Gabah  Kering  Giling (GKG),  mengalami  penurunan  sebanyak  233,91 ribu  ton  atau  0,43%  dibandingkan  produksi  padi pada tahun 2020 yang sebesar 54,65 juta ton GKG [2].  Produksi  beras  mengalami  penurunan disebabkan  oleh  beberapa  faktor,  salah  satunya yakni  serangan  hama.    Hama  yang  sering menyebabkan  gagal  panen  pada  tanaman  padi adalah serangga walang sangit ( Leptocorisa acuta T.).
Walang  sangit  dari  Famili Alydidae ordo Hemiptera merupakan  hama  dalam  bentuk serangga  dewasa  ataupun  nimfa.    Hama  walang sangit  menyerang  padi  dengan  mengambil  sari padi pada saat padi memasuki fase berisi.  Hal ini menyebabkan  padi  memiliki  bulir  yang  kosong akibatnya petani beresiko mengalami gagal panen. Hasil  penelitian  yang  dilakukan  menunjukkan bahwa  populasi  5  ekor  walang  sangit  untuk sembilan ikat padi akan menurunkan hasil sebesar 15% [3].
Petani  di  Indonesia  sering  menggunakan insektisida sintetis untuk mengatasi hama walang sangit.  Penggunaan dosis dan penggunaan jangka panjang  dari  insektisida  ini  menyebabkan resistensi atau kekebalan hama terhadap pestisida yang  digunakan.  Efek  jangka  panjang  lainnya yakni  pencemaran  tanah,  air  dan  udara  di  area tersebut.    Pencemaran  terjadi  karena  residu  dari insektisida  sintesis  sulit  untuk  terdegradasi  atau terurai,  akibatnya  residu  insektisida  menempel pada padi ataupun pada tanah dan air.  Keracunan dan kerusakan tanaman juga dapat terjadi apabila penggunaan insektisida sintesis ini terus dilakukan.    Oleh  karena  itu,  perlu  alternatif  lain untuk  membasmi  hama  walang  sangit,  salah satunya  dengan  menggunakan  insektisida  nabati atau bioinsektisida.
Keunggulan insektisida nabati adalah mudah, murah,  tidak  menimbulkan  efek  negatif  bagi lingkungan, tidak berisiko menimbulkan keracunan,  tanaman  sehat,  tidak  menimbulkan resisten  (kekebalan)  pada  hama,  dan  hasil pertanian  lebih  sehat  dan  bebas  residu  [4].
Insektisida nabati atau bioinsektisida ini umumnya  berasal  dari  tanaman  herbal  atau tanaman dengan aktivitas tertentu.
Tumbuhan  merupakan  gudang  bahan  kimia yang  memiliki  berbagai  jenis  bahan  aktif  dan dikenal  sebagai  kelompok  agen  yang  disebut “metabolit  sekunder”.  Metabolit  sekunder digunakan  sebagai  bahan  aktif  dalam  produk perlindungan tanaman [5]. Pemanfaatan tumbuhan  sebagai  bahan  aktif  bioinsektisida mulai  banyak  digunakan  untuk  pengendalian hama dan penyakit, hal ini dikarenakan tumbuhan adalah  sumber  bahan  kimia  potensial  yang  dapat digunakan  sebagai  insektisida  yang  ramah lingkungan  dan  lebih aman  secara  kesehatan  [6]. Indonesia  memiliki  bahan  bioinsektisida  yang melimpah di alam.  Sebanyak 37.000 spesies flora telah diidentifikasi dan baru sekitar 1% yang telah dimanfaatkan [7].  Beberapa contoh tanaman yang dapat  digunakan  sebagai  bahan  baku  pembuatan bioinsektisida  adalah  umbi  gadung  dan  buah bintaro.
Tumbuhan yang berpeluang untuk digunakan sebagai  bioinsektisida  adalah  gadung  ( Discorea hispida Dennst . ).  Tanaman gadung mengandung senyawa  aktif  toksik  yaitu  diosgenin,  steroid, saponin,  alkaloid  dan  fenol  yang  mampu mengendalikan  ulat  dan  serangga  pengisap  [8]. Senyawa  yang  terkandung  dalam  gadung  sangat beracun  bagi  manusia  karena  dapat  mengganggu saraf, menyebabkan pusing dan muntah.  Senyawa beracun  tersebut  akan  didistribusikan  ke  seluruh organ  tanaman  sehingga  berpotensi  untuk digunakan sebagai racun bagi hama tanaman [9].
Tanaman lain yang memiliki potensi sebagai bahan baku bioinsektisida yakni tanaman bintaro. Penelitian tentang tanaman bintaro membuktikan bahwa buah bintaro sangat berpengaruh terhadap tingkat kematian hama.  Buah bintaro memberikan efek  kematian  yang  sangat  tinggi  terhadap  kutu beras  ( Sitophilus  oryzae ),  hampir  seluruh  bagian tanaman  bintaro  beracun  karena  mengandung senyawa  golongan  alkaloid  yang  bersifat  toksik, repellent dan  mempunyai  aktivitas  penghambat makan  terhadap  serangga  hama  gudang  atau antifeedant [10]. Bintaro menghasilkan metabolit sekunder seperti saponin, polifenol dan tanin.  Zat- zat tersebut memiliki potensi dimanfaatkan untuk mengendalikan hama pada tanaman secara efektif dan  ramah  lingkungan.    Pemanfaatan  bintaro
sebagai bahan bioinsektisida belum dikenal secara umum, sehingga perlu penelitian untuk mengetahui  pengaruh  ekstrak  bintaro  sebagai bioinsektisida [11].
Indonesia  kaya  dengan  rempah-rempah seperti  lada,  kencur,  cabai  merah,  serai, temulawak,  rimpang  temu  hitam,  rosella,  jahe merah,  kunyit,  daun  salam  dan  kayu  manis. Rempah-rempah  ini  memiliki  potensi  sebagai bioinsektisida.  Selain  itu  terdapat  juga  sampah organik, seperti lindi (cairan yang dihasilkan dari pembusukan  sampah  organik).    Total  sampah nasional pada tahun 2021 mencapai 68,5 juta ton [12].  Tempat  Pembuangan  Akhir  (TPA)  di Indonesia  sebagai  besar  masih  menggunakan sistem  penimbunan  sampah  terbuka  ( open dumping ).    Hal  tersebut  menyebabkan  masalah pencemaran lingkungan sehingga terbentuk lindi. Air lindi ( leachate ) adalah cairan yang merembes melalui  tumpukan  sampah  dengan  membawa materi  terlarut  atau  tersuspensi  terutama  hasil proses  dekomposisi  materi  sampah  [13].    TPA dengan sistem open dumping yang tidak memiliki pelapis dasar kemungkinan besar akan menimbulkan masalah seperti merembesnya lindi ke  dalam  air  tanah  sehingga  mengakibatkan pencemaran air tanah [14].
Pada penelitian  ini  ekstrak  buah  bintaro  dan umbi  gadung  serta  ekstrak  rempah  dicampurkan dengan  lindi  dengan  berbagai  konsentrasi, kemudian dilakukan uji fitokimia serta diuji pada hama  target  yakni  walang  sangit.    Lindi mengandung  berbagai  senyawa  organik  yang dapat  memiliki  potensi  sebagai  insektisida. Beberapa senyawa yang terdapat dalam lindi dapat memiliki  aktivitas  toksik  terhadap  serangga sehingga dapat meningkatkan efektivitas dan daya bunuh  terhadap  walang  sangit.  Hasil  larutan dengan  konsentrasi  terbaik  diidentifikasi  dengan menggunakan Spektofotometer Fourier Transform Infrared (FT-IR) dan spektrofotometer UV-Vis.
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengekstrak dan mengidentifikasi senyawa metabolit sekunder yang  terkandung  dalam  buah  bintaro  dan  umbi gadung,  menguji  potensi  bioinsektisida  ekstrak buah  bintaro  dan  umbi  gadung  terhadap  walang sangit.    Penelitian  ini  diharapkan  untuk memberikan beberapa manfaat untuk memberikan informasi  terkait  kandungan  senyawa  metabolit sekunder yang terkandung dalam buah bintaro dan umbi  gadung,  memberikan  informasi  tentang potensi  bioinsektisida  tanaman  bintaro,  gadung, serta lindi terhadap walang sangit, dan
menghasilkan bioinsektisida yang ramah lingkungan, murah dan aman.
2 Metode Penelitian

## 2.1 Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  dibutuhkan  dalam  penelitian ini  antara  lain;  timbangan,  toples  besar,  wadah tertutup,  blender,  gelas  beaker,  Erlenmeyer, tabung reaksi, labu ukur dengan berbagai volum, kertas saring, pipet tetes, rak tabung reaksi, corong gelas,  batang  pengaduk,  spektrofotometer  UV- Vis, dan spektrofotometer IR.
Bahan-bahan yang dibutuhkan dalam penelitian ini antara lain; umbi gadung, bintaro, air lindi,  minyak  nabati  (CPO),  minyak  hewani (lemak  sapi),  rempah  atau  temu-temuan  (temu hitam,  sembiloto,  daun  jati  belanda,  remujung, keladi  tikus,  daun  jati  cina,  bubuk  rosella, lempuyang,  pulosari,  temu  giring,  kulit  manggis, daun  sirih,  temu  putih,  kulit  buah  delima, temulawak,  kapulaga,  kencur,  sereh,  adas  jamu, cabe  jawa,  jahe  merah,  bawang  putih  tunggal, jinten, temu kunci, kunyit, daun salam, brotowali, merica  hitam,  temu  mangga,  kayu  manis,  kunyit putih,  bangle,  asam  jawa),  asam  klorida  (HCl), akuades,  asam  asetat  glasial,  asam  sulfat  pekat (H 2 SO 4 ),    FeCl 3 ,  kloroform,  serbuk  Mg  dan pereaksi Meyer.

## 2.2 Tahapan Penelitian
2.2.1 Pengumpulan dan Persiapan Sampel
Umbi gadung dan bintaro diambil dari daerah Punggur,  Lampung  Tengah.    Umbi  gadung dipisahkan  dari  kulitnya,  lalu  diiris  menjadi potongan  yang  lebih  kecil.  Tahap  selanjutnya umbi  gadung  dihaluskan  menggunakan  blender. Untuk bintaro cukup dicuci dan dipotong menjadi potongan lebih kecil.  Air lindi diambil dari TPA Bandar  Lampung,  minyak  hewani  (minyak  sapi) dibeli  di  Bandar  Lampung.  Rempah  dan  temu temuan  sebanyak  33  jenis  didapatkan  dari  pasar Bandar Lampung.

## 2.2.2 Pembuatan Larutan Biang
Dicampurkan  temu-temuan  sejumlah  5  kg yang  telah  disiapkan,  lalu  dimasukkan  ke  dalam wadah tertutup.  Campuran temu-temuan diambil 700  gram,  ditambahkan  minyak  nabati  (CPO) sebanyak  715  mL,  minyak  hewani  (lemak  sapi) sebanyak  875  mL,  diaduk  hingga  homogen,  lalu dimasukkan ke dalam toples besar.  Larutan yang telah  tercampur  diambil  500  mL  dan  dicampur dengan 250 mL air lindi atau dengan perbandingan 2:1  dimasukkan  ke  dalam  wadah  tertutup  dan didiamkan selama 24 jam.  Setelah 24 jam larutan dipisahkan filtrat dan endapannya.  Filtratnya akan
digunakan  untuk  tahap  selanjutnya.    Filtrat  ini dinamakan sebagai larutan biang.

## 2.2.3 Pembuatan Bioinsektisida
Ekstrak  buah  bintaro,  umbi  gadung,  dan  air lindi ditambahkan dengan 1 mL larutan biang, lalu dicampurkan hingga homogen. Larutan didiamkan  selama  24  jam.    Larutan  didiamkan selama 24 jam agar metabolit sekunder yang ada pada  larutan  biang,  bintaro  dan  umbi  gadung terekstrak,  sehingga  metabolit  sekunder  yang terkandung  dapat  digunakan  sebagai  bahan  aktif bioinsektisida.    Air  lindi  digunakan  sebagai pelarut dalam proses ekstraksi senyawa metabolit sekunder  pada  penelitian  ini.    Setelah  24  jam, larutan diaduk sebelum disaring.  Larutan disaring dengan  kertas  saring  agar  terpisah  filtrat  dan endapannya,  yang  akan  digunakan  sebagai bioinsektisida yakni filtratnya.
Larutan  ini  dibuat  dengan  sebanyak  12 variasi  dengan  volume  100  mL.    Variasi penambahan  ekstrak  buah  bintaro  dan  umbi gadung yang digunakan pada penelitian ini yakni untuk  bintaro  30-60%;  umbi  gadung  50  hingga 90%,  terakhir  dibuat  juga  variasi  campuran bintaro  dan  gadung  yakni,  30%  gadung  10% bintaro,  30%  gadung  20%  bintaro  dan  40% gadung 30% bintaro.  Pembuatan berbagai variasi ini  akan  digunakan  untuk  menguji  mortalitas walang sangit terhadap bioinsektisida yang dibuat pada  penelitian  ini,  lalu  ditentukan  konsentrasi yang paling baik mortalitasnya.

## 2.2.4 Uji Sampel pada Hewan Target
Disiapkan hewan target, yakni walang sangit sebanyak 75 ekor, dimasukkan lima ekor walang sangit ke tiap wadah uji yang telah diberi ventilasi dan makanan yakni tanaman padi.  Walang sangit didiamkan  selama  minimal  24  jam  sebelum disemprot  dengan  larutan  sampel.    Larutan bioinsektisida  dengan  berbagai  variasi  diambil sebanyak  satu  mL  tiap  variasi  lalu  diencerkan dengan akuades sebanyak 100 mL.  Diaplikasikan bioinsektisida  yang  telah  dibuat  dengan  cara disemprotkan  bioinsektisida  tersebut  pada  tiap wadah  uji  yang  telah  disiapkan  sebelumnya. Penyemprotan  dilakukan  dengan hand  sprayer . Lalu  dilakukan  pengamatan  perubahan  tingkah laku  dan  dilakukan  pula  pengamatan  kematian walang sangit, tiap rentang waktu yakni 7, 24, 43, 54  dan  67  jam  setelah  pengaplikasian  [15]. Dihitung  mortalitas  walang  sangit  dengan Persamaan (1).
𝑀 = 𝐴−𝐵 𝐴 𝑥 100% Pers. 1
Keterangan: M = Mortalitas
A = Populasi sebelum aplikasi
B = Populasi setelah aplikasi 2.2.5 Skrining Fitokimia Skrining fitokimia dilakukan untuk memberikan gambaran tentang golongan senyawa yang  terkandung  dalam  tanaman  yang  diteliti. Metode  skrining  fitokimia  dilakukan  dengan pengujian  warna  dengan  menggunakan  suatu pereaksi warna [16].
a. Uji Alkaloid Sebanyak  0,5  mL  sampel  dimasukkan  dalam tabung reaksi lalu ditambahkan dengan 5 tetes kloroform  dan  5  tetep  pereaksi  Meyer,  lalu dikocok  tabung  reaksi  sampai  homogen.    Uji positif  ditunjukkan  dengan  terbentuknya endapan putih [17].
b. Uji Flavonoid Sebanyak 1 mL sampel ditambahkan 0,05 mg serbuk  Mg  dan  1  mL  HCl  pekat,  kemudian dikocok  kuat-kuat.    Uji  positif  ditunjukkan dengan terbentuknya warna merah, kuning atau jingga [17].
c. Uji Steroid dan Terpenoid
0,5  mL  sampel  dimasukkan  dalam  tabung reaksi  lalu  ditambahkan  0,5  mL  asam  asetat glasial dan 0,5 mL asam sulfat pekat (H 2 SO 4 ).
Jika  larutan  berubah  warna  menjadi  kuning atau  jingga  merah  kecokletan  maka  positif terpenoid.    Apabila  larutan  berubah  warna menjadi biru atau biru kehijauan maka positif steroid [17].
d. Uji Tanin Sebanyak 1 mL sampel ditambahkan dengan 3 tetes  larutan  besi  (III)  klorida  10%.  Jika terbentuk warna biru tua atau hitam kehijauan menunjukkan adanya tanin [18].
e. Uji Saponin
0,5  mL  sampel  dimasukkan  dalam  tabung reaksi  lalu  ditambahkan  5  ml  akuades,  kocok 30  detik,  lalu  didiamkan  beberapa  saat  jika terbentuk busa maka positif saponin [17].

## 2.2.6 Analisis Gugus Fungsi
Untuk  mengidentifikasi  gugus  fungsi  pada larutan bioinsektisida diamati dengan menggunakan
Spektrofotometer Fourier
Transform  Infrared (FTIR)  dilakukan  di  UPT- LTSIT Universitas Lampung.
2.2.7 Analisis Spektra UV-Vis
Untuk  mengidentifikasi  ikatan  terkonjugasi pada  larutan  bioinsektisida  diamati  dengan menggunakan
spektrofotometer UV-Vis, dilakukan  di  Laboratorium  Biokimia  Universitas Lampung.

## 3 Hasil dan Diskusi

## 3.1 Pembuatan Larutan Biang
Temu-temuan  yang  mengandung  33  jenis temu-temuan  dengan  total  5  kg  dicampurkan. Didapatkan campuran berwarna kuning kecoklatan  dan  memiliki  bau  khas  dari  tanaman herbal seperti terlihat pada Gambar 1.
Sebanyak  700  gram  campuran Gambar  1 (a), temu-temuan  ditambahkan  dengan  minyak nabati  dan  minyak  hewani,  didapatkan  larutan kental berminyak berwarna cokelat gelap oranye. Campuran ini ditambah dengan air lindi Gambar 1(b). Campuran setelah didiamkan selama 24 jam menjadi lebih  kental,  seperti  pada Gambar  1(c), kemudian  campuran  disaring.  Filtrat  yang didapatkan  berjumlah  300  mL,  berwarna  cokelat kekuningan seperti pada Gambar 1(d). Filtrat ini dinamakan  dengan  larutan  biang.    Larutan  ini nantinya akan digunakan sebagai induk atau biang yang  berfungsi  sebagai  bioaktivator  untuk pembuatan  berbagai  produk.    Pada  penelitian  ini larutan  biang  ditambahkan  sebagai  bioaktivator dalam  pembuatan  bioinsektisida  sebanyak  1  mL pada tiap variasi bioinsektisida.

## 3.2 Pembuatan Bioinsektisida
Larutan bioinsektisida dibuat dalam berbagai variasi  dan  menghasilkan  larutan  seperti  pada Gambar 2.
Larutan  dengan  penambahan  ekstrak  umbi gadung  memiliki  warna  coklat  susu  seperti Gambar 2(a) ,  dengan  bau  dominan  lindi,  atau memiliki  bau  kurang  sedap.    Larutan  dengan penambahan  buah  bintaro  memiliki  warna  hitam kemerahan,  seperti  yang  ditunjukkan  pada
Gambar 2(b) dengan  bau  yang  kurang  sedap. Larutan dengan penambahan ekstrak umbi gadung dan  buah  bintaro  memiliki  warna  cokelat kemerahan, seperti pada Gambar 2(c) dengan bau yang kurang sedap.
Air  lindi  digunakan  sebagai  pelarut  untuk pemanfaatan  kembali  air  lindi,  juga  karena  air merupakan  pelarut  universal,  memiliki  polaritas yang  paling  tinggi.    Hasil  larutan  bioinsektisida yang  didapat  dan  air  lindi  yang  digunakan  dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1 . Jumlah Air Lindi yang digunakan dan Jumlah Bioinsektisida yang dihasilkan
No. Variasi Bioinsektisida Jumlah air lindi yang digunakan (mL) Bioinsektisi da yang dihasilkan (mL) 1 Larutan 50% Gadung 49 75 2 Larutan 60% Gadung 39 58,5 3 Larutan 70% Gadung 29 55 4 Larutan 80% Gadung 19 53 5 Larutan 90% Gadung 9 55 6 Larutan 30% Bintaro 69 64 7 Larutan 40% Bintaro 59 25 8 Larutan 50% Bintaro 49 10 9 Larutan 60% Bintaro 39 4,5 10 Larutan 30% Gadung 10% Bintaro 59 75 11 Larutan 30% Gadung 20% Bintaro 49 50 12 Larutan 40% Gadung 30% Bintaro 29 48
3.3 Uji Sampel pada Hewan Target
Walang  sangit  dimasukkan  ke  dalam  wadah uji.    Wadah  uji  yang  digunakan  yakni  toples tertutup  yang  telah  diberi  lubang  dengan  tujuan untuk memberi ventilasi bagi walang sangit untuk bernafas  dan  diberi  makanan  berupa  tanaman padi. Walang sangit sebaiknya didiamkan selama minimal  24-48  jam  sebelum  disemprot  dengan bioinsektisida  yang  telah  diencerkan  dengan aquades.    Tujuan  didiamkan  agar  walang  sangit dapat  beradaptasi  dengan  lingkungan  baru. Perlakuan  ini  dilakukan  agar  diketahui  selama masa adaptasi apakah walang sangit akan bertahan hidup atau stress dengan lingkungan baru.  Hingga menyebabkan  walang  sangit  mati  sebelum disemprot,  jadi  dapat  dieliminasi  salah  satu variabel  lain  penyebab  walang  sangit  mati. Bioinsektisida disemprotan pada pukul 11.00 WIB ke  tanaman  padi  yang  ada  pada  wadah  uji  yang juga  telah  berisi  5  ekor  walang  sangit  dengan ukuran  yang  seragam.    Hasil  pengamatan kematian walang sangit pada rentang waktu yang telah ditentukan dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel  2. Hasil  Pengamatan  Kematian  Walang Sangit Terhadap Bioinsektisida
No Variasi Bioinsekti sida Waktu Pengamatan (jam) 7 24 43 54 67 1 Larutan  50% Gadung - - 1 mati - - 2 Larutan  60% Gadung - 1 mati - 2 mati - 3 Larutan  70% Gadung 1 mati - 2 mati 3 mati - 4 Larutan  80% Gadung - 1 mati - - - 5 Larutan  90% Gadung 1 mati - - - - 6 Larutan  30% Bintaro - - - - - 7 Larutan  40% Bintaro - - - - - 8 Larutan  50% Bintaro - - - - - 9 Larutan  60% Bintaro - - 1 mati - - 10 Larutan  30% Gadung  10% Bintaro - - - 1 mati - 11 Larutan  30% Gadung  20% Bintaro - 1 mati - - 2 mati 12 Larutan  40% Gadung  30% Bintaro - - - - -
Kematian  walang  sangit  dapat  diamati melalui beberapa tahapan, yaitu terjadi perubahan tingkah laku dari walang sangit yakni kurang aktif
bergerak, aktivitas makan menurun, tungkai depan menggesek  ke  antena  kemudian  hinggap  pada bagian  bawah  daun,  jatuh  dan  mati.    Morfologi nimfa  walang  sangit  juga  mengalami  perubahan, perubahan  dimulai  dengan  perubahan  warna walang  sangit  yang  awalnya  hijau  muda  menjadi hijau  kekuningan,  kemudian  menjadi  hitam kecoklatan,  hal  ini  serupa  dengan  hasil pengamatan  yang  dilakukan.    Selain  perubahan warna  ada  pula  perubahan  pada  tubuh  walang sangit, yakni tubuh menjadi kaku, tidak bergerak, dan mengeras kemudian mengeluarkan cairan dari tubuh  dan  akhirnya  menjadi  kering  [19].  Selain pengamatan morfologi dan tingkah laku dilakukan juga  uji  mortalitas  walang  sangit.  Hasil  uji mortalitas  disajikan  dalam Tabel  3 .  Pengamatan morfologi,  tingkah  laku,  dan  uji  mortalitas dapat digunakan untuk menentukan keberhasilan aktivitas bioinsektisida ini.
Berdasarkan tabel di atas bioinsektisida pada penelitian  ini  memiliki  puncak  mortalitas terbaik pada  variasi  gadung  70%,  60%  bintaro  dan  30% gadung  20%  bintaro.    Jika  dibandingan  dengan penelitian  [15],  dengan  perbedaan  pelarut  yakni metanol.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  hasil yang  hampir  menyerupai  [15],  dimana  pada penambahan  60  gr  ekstrak  gadung  dalam  1  liter air, mortalitas yang didapatkan yakni 65%.   Hal ini  terjadi  karena  pada  penelitian  ini  digunakan larutan biang, yang difungsikan untuk meningkatkan  efisiensi  dari  bioinsektisida  yang dibuat.    Larutan  biang  terbukti  dapat  digunakan untuk meningkatkan efisiensi bioinsektisida.
Biopestisida  dalam  penelitian  ini  termasuk kedalam  racun  perut  karena  pada  penelitian  ini penyemprotan  bioinsektisida  dilakukan  pada tanaman padi selaku makanan dari walang sangit. Padi  yang  dimakan  oleh  hewan  uji  telah mengandung  racun,  masuk  melalui  mulut melewati sistem pencernaan, hingga melumpuhkan  sistem  syaraf  dari  hewan  uji  [20]. Dioskorin  merupakan  suatu  senyawa  aktif  yang memiliki  sifat  pembangkit  kejang  apabila dikonsumsi  oleh  manusia  dan  hewan.    Alkaloid dioskorin  adalah  subtansi  yang  bersifat  basa  dan memiliki  atom  nitrogen  yang  lebih  dari  satu  dan memiliki sifat racun [21].
Daun  dan  buah  dari  bintaro  mengandung polifenol  yang  dikenal  berisifat  toksik  terhadap serangga  dan  mampu  menghambat  aktivitas makan hama.  Selain polifenol, buah bintaro juga mengandung  racun  cerberin  yang  bersifat  racun kuat. Cerberin merupakan golongan alkaloid yang diduga  berperan  terhadap  mortalitas  serangga [11].
Tabel 3 . Mortalitas walang sangit terhadap variasi larutan bioinsektisida.
No Variasi Bioinsektisida Mortalitas (%) 1 Larutan 50% Gadung 20 2 Larutan 60% Gadung 40 3 Larutan 70% Gadung 60 4 Larutan 80% Gadung 20 5 Larutan 90% Gadung 20 6 Larutan 30% Bintaro 0 7 Larutan 40% Bintaro 0 8 Larutan 50% Bintaro 0 9 Larutan 60% Bintaro 20 10 Larutan  30%  Gadung 10% Bintaro 20 11 Larutan  30%  Gadung 20% Bintaro 40 12 Larutan  40%  Gadung 30% Bintaro 0

## 3.4 Skrining Fitokimia
Bioinsektisida yang akan diskrining fitokimia berjumlah  3  larutan,  yakni  larutan  bioinsektisida memiliki  mortalitas  terbaik:  70%  Gadung,  30% Gadung 20% Bintaro dan 60% Bintaro, selain ke tiga  larutan  tersebut  larutan  biang  serta  air  lindi juga  dilakukan  skrining  fitokimia.    Hasil  dari skrining fitokimia dari larutan biang, serta larutan bioinsektisida dapat dilihat pada Tabel 4 . Kandungan senyawa metabolit berupa fenol, flavonoid,  terpenoid,  saponin  dan  tanin.    Fenol, flavonoid, saponin dan tanin merupakan senyawa yang  bersifat  polar  sehingga  dapat  terlarut  oleh pelarut air yang bersifat polar.  Hasil positif pada terpenoid  diduga  karena  terpenoid  merupakan kelompok triterpenoid, dimana beberapa senyawa triterpenoid yang  memiliki  struktur  siklik  berupa alkohol,  aldehid  atau  asam  karboksilat  dengan gugus  -OH  mengakibatkan  senyawa  ini  bersifat semipolar  sehingga  dapat  terlarut  oleh  pelarut yang bersifat polar seperti air [21].

## 3.5 Analisis Gugus Fungsi
Spektrofotometer  yang  digunakan  untuk menganalisis gugus fungsi pada sampel bioinsektisida  adalah  spektrofotometer infra-red. Spektrum infra-red dapat membantu mengidentifikasi  senyawa-senyawa  aktif  dalam ekstrak  yang  berpotensi  berperan  sebagai  agen bioinsektisida  dan  juga  dapat  menentukan  jenis ikatan  kimia  yang  terdapat  dalam  senyawa- senyawa bioaktif sehingga membantu memahami cara kerja senyawa tersebut dalam mengendalikan hama  walang  sangit.  Identifikasi  gugus  fungsi berdasarkan area spektrum infrared atau infrared
chart .    Spektrum  FT-IR  pada  umumnya memperlihatkan serapan dari gugus fungsi.  FT-IR dilakukan  pada  kisaran  gelombang  inframerah tengah  yakni  gelombang  4000-400  cm -1 .  Hasil serapan IR larutan bioinsektisida disajikan dalam Gambar 3.
Tabel 4 . Hasil Skrining Fitokimia Bioinsektisida, Air Lindi dan Larutan Biang
Larutan Uji Kandungan Kimia Hasil Larutan Biang Flavonoid Terpenoid/Steroid Alkaloid Tanin Saponin ++ ++ ++ - + Lindi Flavonoid Saponin Tanin Terpenoid/Steroid Alkaloid - - - + - Larutan  70% Gadung Flavonoid Terpenoid/ Steroid Alkaloid Tanin Saponin - ++ ++ ++ - + Larutan  30% Gadung 20% Bintaro Flavonoid Terpenoid/Steroid Alkaloid Tanin Saponin - ++ + - - Larutan  60% Bintaro Flavonoid Terpenoid/Steroid Alkaloid Tanin Saponin + + - - -
Gambar 3. Spektrum IR larutan bioinsektisida a) 70% gadung dan b) 30% gadung 20% bintaro
Pada  Gambar  3,  pita  serapan  pada  daerah bilangan  gelombang  3260,94  cm -1 dan  3260,94 cm -1 diperkirakan  merupakan  hasil  dari  vibrasi ulur  hidroksi  (O-H).    Pita  serapan  yang  lebar disebabkan  oleh  adanya  ikatan  hidrogen  yang terjadi dalam molekul alkohol atau air [22].  Ciri absorpsi  infra  merah  aldehid  dan  keton  adalah adanya streching C=O  karena  gugus  karbonil sangat  polar. Streching ini  mengakibatkan perubahan  momen  dipol  yang  cukup  besar,  oleh karena  itu  terjadi  di  daerah  yang  umunnya  tidak
ada  serapan  lain. Streching karbonil  merupakan metode  yang  mudah  untuk  menganalisis  adanya gugus  fungsional  pada  suatu  senyawa.    Gugus karbonil  umumnya  menyerap  pada  bilangan gelombang  1950-1550  cm -1 ,  vibrasi  ulur  dari gugus  karbonil  dapat  di  karakteristik  di  sini. Semua  senyawa  yang  memiliki  gugus  karbonil memiliki  puncak  sekitar  1700  cm -1 .    Jadi  pita serapan  pada  bilangan  gelombang  1637,98  cm -1 merupakan vibrasi ulur dari gugus karbonil C=O.

## 3.6 Analisis Spektrum UV-Vis
Larutan  bioinsektisida  yang  diukur  dengan spektrofotometer  UV-Vis  adalah  70%  gadung serta  30  %  gadung  20%  bintaro.    Pengukuran dilakukan  dengan  pengenceran  sampel  1000×. Pelarut  yang  digunakan  adalah  air.    Pengukuran dilakukan  pada  panjang  gelombag  200-800  nm. Spektrum  hasil  pengukuran  bioinsektisida  70% gadung  dan  30%  gadung  20  %  bintaro menggunakan spektrofotometer UV-Vis ditunjukkan pada Gambar 4 .
Gambar 4. Spektrum UV-Vis larutan bioinsektisida a) 70% gadung dan b) 30% gadung 20% bintaro
Berdasarkan spektrum UV-Vis ( Gambar 4 ), larutan  bioinsektisida  70%  gadung  diperoleh serapan  panjang  gelombang  maksimum  pada panjang  gelombang  210  nm  dengan  absorbansi 1,128.  Larutan  bioinsektisida  30%  gadung  20% bintaro  diperoleh  serapan  panjang  gelombang maksimum  pada  217  nm  dan  223  nm  dengan absorbansi  1,5939  dan  1,6560.  Serapan  pada panjang gelombang 210 nm, 217 nm dan 223 nm. spektrum UV-Vis bioinsektisida diduga mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  atau bioaktif  seperti  senyawa  polifenol  atau  fenolat yang  memiliki  serapan  panjang  gelombang  210 nm,  217  nm  dan  223  nm  yang  merupakan  tanda serapan gugus C=C,  serta  memiliki  gugus fungsi O–H, C–H alifatik dan C=O karbonil.

## 4 Kesimpulan
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa larutan biang yang dihasilkan dari 500 mL campuran temuan-temuan
dan minyak dengan 250 air lindi adalah 300 mL. Mortalitas  walang  sangit  terbaik  yakni  pada larutan  bioinsektisida  70%  gadung  sebesar  60%, diikuti  oleh  60%  gadung  dan  30%  gadung  20% bintaro  dengan  mortalitas  40%,  dan  terakhir dengan  mortalitas  20%  yakni  50%,  80%,  90% gadung,  60%  bintaro  dan  30%  gadung  10% bintaro.  Larutan  bioinsektisida  yang  positif mengandung  terpenoid  dan  alkaloid  yaitu  70% gadung dan 30% gadung 20% bintaro. Bioinsektisida  mengandung  senyawa  metabolit sekunder yang memiliki gugus fungsi C=C, O–H, C–H alifatik dan C=O karbonil.

## Daftar Pustaka
[1] U.S.  Department  of  Agriculture.  Crop Production [Internet]. U.S. Department of Agriculture.
[2] Badan Pusat Statistik. 2021. Produksi Padi Tahun  2021  Turun  0,43  persen  (Angka Tetap) [Internet]. Badan Pusat Statistik.
[3] Manopo, m. M., rante, c. S., engka, r. A., & ogie, t. B. 2021. Types and populations of insect pests in rice fields (oryza sativa l.) In  mogoyunggung  village,  dumoga  timur district,  bolaang  mongondow  regency. Jurnal agroekoteknologi terapan , 2(2), 53- 61. [4] Grdiša, M. and  Gršić, K. 2013.  Botanical Insecticides in Plant Protection. Agriculturae  Conspectus  Scientificus ,  78 (2) 85–93.
[5] Yusuf,  R.  2012.  Potensi  dan  Kendala Pemanfaatan  Pestisida  Nabati  dalam
Pendalian  Hama  pada  Budidaya  Sayuran Organik. Seminar UR-UKM Ke-7 , Universitas Riau, Riau. p. 172–3.
[6] Wiratno,  Rizal,  M.  and  Laba,  I.W.  2011. Potensi  Ekstrak  Tanaman  Obat  dan Aromatik Sebagai Pengendali Keong Mas. Buletin Penelitian Tanaman Rempah Dan Obat , Jakarta. 54–64.
[7] Djunaedy, A. 2009. Ketahanan Padi (Way Apo  Buru,  Sinta  Nur,  Ciherang,  Singkil dan  IR  64)  Terhadap  Serangan  Penyakit Bercak  Coklat  (Drechslera  oryzae)  dan Produksinya. Agrovigor ,  2  (1)  8–15. 10.21107/agrovigor.v2i1.235
[8] Sudarmo,  S.  2005.  Pestisida  Nabati: Pembuatan dan Pemanfaatannya. Kanisius, Yogyakarta.
[9] Djaafar, T.F., Rahayu, S. and Gardjito, M. 2009.  Pengaruh  Blanching  dan  Waktu Perendaman dalam Larutan Kapur terhadap  Kandungan  Racun  pada  Umbi
dan Ceriping Gadung. Penelitian Pertanian Tanaman Pangan , 28 (3) 192–8.
[10] Guswenrivo, I., Tarmadi, D. and Yusuf, S. 2013.  Aktivitas  Insektisida  Ekstrak  Buah Bintaro (Cerbera manghas) terhadap Kutu
Beras  Sitophilus  oryzae  (Coleoptera: Curculionidae). Jurnal Ilmu Dan Teknologi Kayu Tropis , 11 (1) 84–9.
[11] Tarmadi,  D.,  Prianto,  A.H.,  Guswenviro, I.,  Kartika,  Ti.  and  Yusuf,  S.  2007. Pengaruh Ekstrak Bintaro (Carbera odollam Gaertn) dan Kecubung
(Brugmansia  candida  Pers)  terhadap Rayap Tanah Coptotermes sp. Jurnal Ilmu
Dan Teknologi Kayu Tropis , 5 (1) 39–42.
[12] Kementerian  Lingkungan  Hidup  dan Kehutanan, Direktorat Jenderal Pengelolaan  Sampah,  L.  dan  B.,  & Sampah,  D.  P.  (2021). Sistem  Informasi Pengelolaan Sampah Nasional .
[13]    Mahardika,  A.,  Muhammad  D.Z.,  dan Akhmad A.L.(2010). Mendeteksi Dampak
Polutan  Sampah  Terhadap  Air  Tanah
Permukiman di Sekitar Tempat Pembuangan Akhir (TPA) dengan Menggunakan Metode Geolistrik . Program Kreativitas  Mahasiswa  Gagasan  Tertulis, Universitas Negeri Malang, Malang.
[14] Han, Z.,  Ma,  H.,  Shi,  G.,  He,  L.,  Wei,  L. and Shi, Q. 2016. A review of groundwater contamination  near  municipal  solid  waste landfill sites in China. Science of The Total Environment ,  Elsevier  BV.  569–570 1255–64. 10.1016/j.scitotenv.2016.06.201
[15] Muhidin, M., Muchtar, R. and Hasnelly, H.
2020.  Pengaruh  Insektisida  Nabati  Umbi
Gadung terhadap Wereng Batang
Cokelat   (Nillavarpata   lugens Stall)  Pada Tanaman  Padi. Jurnal  Ilmiah  Respati , Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian Masyarakat  (LPPM)  Universitas  Respati Indonesia. 11 (1) 62–8. 10.52643/jir.v11i1.856 [16] Permana, A.W., Widayanti, S.M.,
Prabawati,  S.  and  Setyabudi,  D.A.  2017.
Sifat  Antioksidan  Bubuk  Kulit  Buah Manggis (Garcinia Mangostana L.) Instan Dan Aplikasinya Untuk Minuman Fungsional. Jurnal Penelitian Pascapanen Pertanian , Indonesian Agency For Agricultural  Research  and  Development (IAARD). 9 (2) 88. 10.21082/jpasca.v9n2.2012.88-95 [17] Marliana,  S.D.,  Suryanti,  V.  and  Suyono, S.  2005.  The  phytochemical  screenings and thin layer chromatography analysis of chemical compounds in ethanol extract of labu  siam  fruit  (Sechium  edule  Jacq. Swartz.). Biofarmasi  Journal  of  Natural Product  Biochemistry ,  UNS  Solo.  3  (1) 26–31. 10.13057/biofar/f030106
[18] Jones,  W.P.  and  Kinghorn,  A.D.  2006. Extraction of Plant Secondary Metabolites [Internet].  Natural  Products  Isolation. Humana  Press.  p.  323–51.  10.1385/1- 59259-955-9:323
[19] Harefa,  Agusman,  Hafis  Fauzana,  and Desita Salbiah .2019. Penggunaan
Beberapa  Konsentrasi  Ekstrak  Umbi Gadung  ( Dioscorea  hispida  Dennst .) dalam  Mengendalikan  Hama  Walang Sangit  ( Leptocorisa  acuta  T .)  pada Tanaman  padi  Gogo  (Oryza  sativa  L.)  di Lapangan. Jurnal  Online  Mahasiswa (JOM) Bidang Pertanian 6, 1-10.
[20] Dadang.  2006.  Pengenalan  Pestisida  dan Teknik Aplikasi. Bogor.
[21] Kardinan,  A.  1999.  Pestisida  Nabati: Ramuan  &  Aplikasi.  Penebar  Swadaya, Jakarta.
[22] Fessenden, R.J. 1986. Kimia Organik Edisi Ketiga Jilid 1. 3rd ed. Penerbit Erlangga.
[23] Burikov,  S.,  Dolenko,  S.,  Dolenko,  T., Patsaeva,  S.,  &  Yuzhakov,  V.  2010. Decomposition of water Raman stretching band  with  a  combination  of  optimization methods. Molecular Physics , 108(6), 739- 747.