## Research Articles
Optimasi Kondisi Pengujian Senyawa Flavonoid Total di dalam Ekstrak Tanaman Sebagai  Pengayaan  Bahan  Ajar  Praktikum  Makromolekul  dan  Hasil  Alam  di Laboratorium Kimia Organik
Lusi Suwartini 1,*) , Nopri Yanti 2) dan Winta Efrinalia 3)
Laboratorium Terpadu, Universitas Sriwijaya, Sumatera Selatan 30862
Received 25 November 2020; Accepted 31 Desember 2020; Published 14 Januari 2021
Keyword: flavonoids, plant extracts, optimization
ABSTRACT: Macromolecules and Natural Products are one of the practicums served by the  Integrated  Laboratory  Unit  and  are  new  practicums,  so  that  to  meet  the  learning objectives it is necessary to test the appropriate practicum objects. The purpose of this research  was  to  obtain  the  conditions  that  allow  the  total  flavonoid  compound  to  be used as an effective and efficient practicum object. In this research, the optimazion of testing  conditions  for  total  flavonoids  in katuk , pandan ,  and mengkudu leaf  extracts with  the  spectrophotometric method using AlCl 3 reagent.  As for the  parameters  used were the effect of volume and concentration of AlCl 3 , CH 3 COONa, reduction time and sampel weighton color stability of the AlCl 3 complex compound. From the results of this study, the optimum conditions were AlCl 3 with volume of 0,2 mL with a concentration of  5%,  and  CH 3 COONa  0,2  mL  with  a  concentration  of  1  M.  While  the  optimum reduction time was 45 minutes, and the optimum weight of leaf extract ranges from 50 mg-700 mg. @2020 Published by UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University.
Kata Kunci: flavonoid, ekstrak tanaman, optimasi ABSTRAK: Makromolekul dan Hasil Alam merupakan salah satu praktikum yang dilayani UPT.Laboratorium  Terpadu  dan  merupakan  praktikum  yang  baru,  sehingga  untuk memenuhi tujuan pembelajaran perlu dilakukan uji coba objek praktikum yang sesuai. Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mendapatkan  kondisi  yang  memungkinkan  dari pengujian senyawa flavonoid total agar dapat digunakan sebagai objek praktikum yang efektif  dan  efisien.  Pada  penelitian  ini  dilakukan  optimasi  kondisi  pengujian  senyawa flavonoid  total  dalam  ekstrak  daun  katuk,  pandan  dan  mengkudu  dengan  metode spectrofotometri yang menggunakan pereaksi AlCl 3 . Adapun parameter yang digunakan adalah  pengaruh  volume  dan  konsentrasi  AlCl 3 ,  CH 3 COONa,  waktu  reduksi  dan  berat sampel  terhadap  kestabilan  warna  senyawa  kompleks  AlCl 3 .  Dari  hasil  penelitian  ini diperoleh kondisi optimum AlCl 3 dengan volume 0,1 mL konsentrasi 5%, dan CH 3 COONa 0,2 mL konsentrasi 1M. Sedangkan waktu reduksi optimum adalah 45 menit, dan berat optimum  ekstrak  daun  berkisar  antara  50  mg-700  mg.  @2020  Published  by  UP2M, Faculty of Mathematics and Natural Sciences, Sriwijaya University.

## Jurnal Penelitian Sains
http://ejurnal.mipa.unsri.ac.id/index.php/jps/index
∗ Corresponding author. E-mail address: lusi_slamet@unsri.ac.id
2597-7059  Online,  1410-7058  print/  @2020  Published  by  UP2M,  Faculty  of  Mathematics  and  Natural Sciences, Sriwijaya University

## PENDAHULUAN
Makromolekul dan Hasil Alam merupakan praktikum  yang  baru  di  Laboratorium  Kimia Organik,  sehingga  diperlukan  beberapa  objek praktikum  yang  dapat  mengakomodir  tujuan pembelajaran. Evaluasi terhadap metode pengujian  objek  tersebut  perlu  dilakukan,  agar efektif  dan  efesien  serta  dapat  dilaksanakan dengan  keterbatasan  waktu  praktikum  yang hanya berlangsung selama 2 jam [1].
Pada  penelitian  ini  dilakukan  pengujian senyawa flavonoid total dalam ekstrak beberapa jenis  tanaman.  Penelitian-penelitian  tentang senyawa  flavonoid  terus  berkembang  dengan pesat,  sehingga  laboratorium  Kimia  Organik sebagai penyelenggara praktikum Makromolekul dan  Hasil  Alam  harus  melakukan  uji  coba  objek praktikum  baru  yang  mengikuti  perkembangan teknologi  agar  dapat  memberikan  pelayanan yang sesuai dengan kondisi saat ini.
Prosedur yang digunakan dalam pengukuran  senyawa  flavonoid  total  biasanya menggunakan  metode  spektrofotometeri  dan kromatografi.  Metode  spektrofotometri  yang menggunakan  pereaksi  Aluminium  Klorida  dan Natrium Asetat banyak dipakai karena metodenya sederhana, dapat diulang (reproducible),  sensitif,  hasilnya  relatif  akurat dan  tidak  memerlukan  peralatan  yang  spesifik dan canggih.
Beberapa  prosedur  pengukuran  senyawa flavonoid  total  telah  dilakukan  oleh  peneliti diantaranya  dengan  menggunakan  volume  dan konsentrasi  yang  bervariasi  dari  pereaksi  AlCl 3 dan  CH 3 COOK[2][3][4],  pereaksi  AlCl 3 dan CH 3 COONa[5][6][7],  AlCl 3 ,  NaNO 3 dan  NaOH[8]. Pada  penelitian  ini  akan  dipelajari  pengaruh volume  dan  konsentrasi  AlCl 3 dan  CH 3 COONa, waktu  reduksi,  dan  pengaruh  berat  sampel terhadap  pembentukan  kompleks  warna  stabil dari AlCl 3 yang digunakan pada penentuan total senyawa flavonoid.

## BAHAN DAN METODE
Dalam  penelitian  ini  dilakukan  optimasi kondisi  pengujian  yang  meliputi  parameter volume  dan  konsentrasi  AlCl 3 ,  volume  dan konsentrasi  CH 3 COONa,  waktu  reduksi  serta berat  sampel  terhadap  kestabilan  warna senyawa  kompleks  AlCl 3 ,  dengan  menggunakan metode spektrofotometri.

## Waktu dan Tempat
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Kimia  Organik  UPT.  Laboratorium  Terpadu Universitas  Sriwijaya  pada  bulan  Mei  s.d September 2020.

## Prosedur Penelitian
Prosedur  awal  yang  dilakukan  dalam penelitian  ini  adalah  membuat  ekstrak  pekat melalui  beberapa  tahap  perlakuan  dalam preparasi sampel.

## Preparasi sampel
Sampel  berupa  daun  katuk,  mengkudu dan  pandan  diiris  halus  dan  dikering  anginkan. Kemudian sampel dihaluskan dengan Laboratory Blender dan diayak. Sampel dimaserasi menggunakan  etanol  96  %  dengan  rasio  100  gr sampel:  500  mL  pelarut  etanol  selama  72  jam. Maserat  disaring  dengan  menggunakan  kertas saring.  Hasil  rendemen  tersebut  dievaporasi dengan menggunakan LCD Rotary Evaporator RE 100-Pro sampai diperoleh ekstrak pekat.

## Optimasi Kondisi Pengujian Senyawa Flavonoid Total
Tahap  selanjutnya  adalah  melakukan optimasi  kondisi  dari  volume  dan  konsentrasi pereaksi  AlCl 3 dan  CH 3 COONa,  waktu  reduksi serta berat optimum sampel terhadap pengujian senyawa flavonoid total.

## Pembuatan standar quersetin
Dibuat  larutan  standar  quersetin  1000 ppm  dengan  melarutkan  25  mg  quersetin dengan  etanol  96%  dalam  labu  ukur  sampai
volumenya  tepat  25  mL.  Kemudian  dari  larutan standar diencerkan dan dibuat standar quersetin 5 ppm.
Penentuan  volume  dan  konsentrasi  optimum AlCl 3
Volume  dan  konsentrasi  optimum  AlCl 3 ditentukan dengan menggunakan larutan standar  quersetin  5  ppm  sebanyak  5  mL  yang dimasukkan kedalam 10 tabung reaksi, kemudian ditambahkan ke dalam masing-masing tabung  reaksi  0,1;  0,2  mL;  0,3  mL;  0,4  mL;  0,5 mL;  0,6  mL;  0,7  mL;  0,8  mL;  0,9  mL;  1  mL  AlCl 3 dengan konsentrasi 3% dan 0,1 ml CH 3 COONa 1 M,  dihomogenkan  dan  diinkubasi  30  menit. Panjang  gelombang  maksimum  di  scan  dengan menggunakan salah satu standar pada Spektrofotometer  UV-Vis  Single  Beam  merk Inscienpro  Type  US-120  PC.  Absorbansi  masing- masing  larutan  dibaca  dengan  menggunakan panjang  gelombang  optimum.  Langkah-langkah ini diulangi untuk AlCl 3 konsentrasi 4 - 10%.
Penentuan  volume  dan  konsentrasi  optimum CH 3 COONa
Digunakan  larutan  standar  quersetin  5 ppm sebanyak 5 mL yang dimasukkan ke dalam 10  tabung  reaksi,  ditambahkan  AlCl 3 dengan volume dan  konsentrasi  optimum  pada masing- masing  tabung  reaksi , dan  CH 3 COONa  dengan volume 0,1 mL; 0,2 mL; 0,3 mL; 0,4 mL; 0,5 mL; 0,6 mL, 0,7 mL; 0,8 mL; 0,9 mL; 1 mL konsentrasi 0.5  M,  kemudian  dihomogenkan,  diinkubasi  30 menit. Absorbansi masing-masing larutan dibaca pada  panjang  gelombang  optimum.  Langkah- langkah ini diulangi untuk CH 3 COONa konsentrasi 1-2,5 M.

## Penentuan waktu reduksi optimum
Dipipet  larutan  standar  5  ppm  sebanyak 25  ml,  ditambahkan  AlCl 3 dan  CH 3 COONa dengan  volume  dan  konsentrasi  optimum. Kemudian dihomogenkan. Dibaca absorbansinya pada menit ke 5 - 90.
Penentuan kisaran linier larutan standar
Larutan standar dibuat dengan konsentrasi 1-10 ppm, dan dimasukkan kedalam 10  tabung  reaksi.  Ditambahkan  ke  dalam masing-masing tabung reaksi AlCl 3 dan CH 3 COONa  dengan  volume  dan  konsentrasi optimum, dihomogenkan dan diinkubasi dengan waktu  reduksi  optimum.  Dibaca  absorbansi masing-masing  larutan  standar  pada  panjang gelombang  optimum.  Kemudian  dibuat  kurva kalibrasi linier dan ditentukan nilai regresi linier (R 2 > 0.998).

## Penentuan berat sampel optimum
Ditimbang  masing-masing  sampel  ekstrak daun  100  mg,  dilarutkan  dengan  etanol  tepat 100  ml,  kemudian  larutan  diencerkan  dengan memipet  0,5,  1,  2,  3,  4,  5,  6,  7,  8,  9  dan  10  ml, masing-masing  dilarutkan  dengan  etanol  96% sampai volume larutan tepat 10 ml. Ditambahkan  AlCl 3 ,  CH 3 COONa  dengan  volume dan  konsentrasi  optimum,  dihomogenkan  dan diinkubasi  selama  waktu  reduksi  optimum. Absorbarsi  masing-masing  sampel  dibaca  pada panjang  gelombang  optimum.  Pengukuran sampel dilakukan secara duplo.

## Analisis Data
Analisis  parameter  metode  pengujian untuk  volume  dan  konsentrasi  Aluminium Klorida,  Natrium  Asetat,  waktu  reduksi  dan berat  sampel  dilakukan  dengan  mengevaluasi nilai  absorbansi  hasil  pengujian  dengan  kriteria Absorbansi  optimum  yang  diambil.  Untuk  batas linier  kurva  kalibrasi  dengan  melihat  nilai koefisien  regresi  linier  (r)  dari  persamaan  garis linier kurva.
Data  optimasi  kondisi  yang  diperoleh dapat  digunakan  untuk  menentukan  kadar flavonoid  dalam  sampel  dengan  menggunakan persamaan:
……………….. [3]
dimana:
F: jumlah flavonoid metode AlCl 3 c: kesetaraan Quersetin (mg/L)
V: volume total ekstrak (mL) f: faktor pengenceran m: berat sampel (g)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Pengaruh  volume  dan  konsentrasi  optimum AlCl 3 Penentuan  volume  dan  konsentrasi optimum  AlCl 3 5%  diukur  pada  panjang gelombang  maksimum  yang  diperoleh  yaitu 454,1nm.  Hasil  masing-masing  dapat  dilihat pada Gambar 1 dan 2. Pada gambar 1 diperoleh volume  optimum  0,1  ml  dan  konsentrasi  AlCl 3 optimum pada 4-5%.
Gambar 1. Pengaruh volume AlCl 3 terhadap absorbansi
Gambar 2. Pengaruh konsentrasi AlCl 3 terhadap absorbansi
Pengaruh  volume  dan  konsentrasi  optimum CH 3 COONa Volume optimum CH 3 COONa dapat dilihat pada  Gambar  3  yaitu  0,2  ml  dan  konsentrasi CH 3 COONa 1 M pada Gambar 4.
Gambar 3. Pengaruh volume CH 3 COONa terhadap absorbansi
Gambar 4. Pengaruh konsentrasi CH 3 COONa terhadap absorbansi

## Waktu reduksi optimum
Waktu  reduksi  optimum  yang  ditentukan dengan  menggunakan  0,1  ml  AlCl 3 5%,  0,2  ml CH 3 COONa  1M  dan  dibaca  pada  panjang gelombang 454,1 nm terdapat pada menit ke 45 seperti diperlihatkan pada gambar 5.

## Gambar 5. Waktu reduksi optimum Penentuan kisaran linier larutan standar
Kisaran  linier  larutan  standar  ditentukan pada  panjang  gelombang  maksimum  454,1nm dengan kisaran konsentrasi quercetin 0-10 mg/L. Kurva larutan standar dapat dilihat pada gambar
6.
Gambar 6. Kurva larutan standar quersetin

## Pengaruh berat sampel
Tiga  jenis  sampel  yang  digunakan  dalam penentuan berat sampel
optimum menggunakan 0,1 ml AlCl 3 5%, 0,2 ml CH 3 COONa 1M, diinkubasi selama 45 menit dan diukur pada panjang  gelombang  454,1  nm.  Hasil  masing- masing dapat dilihat pada Gambar 7, 8, dan 9.
Gambar 7. Pengaruh berat sampel mengkudu terhadap absorbansi
Gambar 8. Pengaruh berat sampel pandan terhadap absorbansi
Gambar 9. Pengaruh berat sampel katuk terhadap absorbansi
Pembahasan
Pengaruh  volume  dan  konsentrasi  optimum AlCl 3 Kondisi optimum AlCl 3 yang diperoleh dari hasil  penelitian  adalah  volume  0,1  ml  dengan konsentrasi  5%,  dimana  pada  kondisi  tersebut terjadi  serapan  yang  tertinggi  dari  senyawa kompleks
Quercetin-Aluminium
klorida.
Penambahan Aluminium klorida akan
membentuk  kompleks  yang  stabil  dengan  C-4 gugus  keto,  serta  pada  C-3  atau  C-5  gugus hidroksil  dari  flavon  dan  flavonol[9][10], sehingga terjadi pergeseran panjang gelombang ke  arah  visible  (tampak)  yang  ditandai  dengan terbentuknya  larutan  berwarna  lebih  kuning[2]. Terbentuknya  senyawa  kompleks  tersebut terjadi  karena  adanya  reaksi  reduksi-oksidasi antara  flavonoid  dan  AlCl 3 ,  dimana  flavonoid sebagai  reduktor  [11]  dan  AlCl 3 sebagai oksidator [12].
Volume  dan  konsentrasi  AlCl 3 yang  lebih besar  dari  0,1  ml  dan  5%  akan  menyebabkan kemampuan  mengoksidasi  dari  AlCl 3 tidak optimal.  Hal  tersebut  diperlihatkan  oleh  nilai absorbansi  yang  kecil.  Reaksi  pembentukan senyawa  kompleks  quersetin-AlCl 3 dapat  dilihat pada Gambar 7 [3] .
C C CH C C C H O C C C C C H CH C CH C O OH O H OH OH OH AlCl 3 C C CH C C C H O C C C C C H CH C CH C O O O H OH O O Al 2+ Al + Gambar 7. Reaksi pembentukan senyawa kompleks quersetin-AlCl 3
Pengaruh volume dan konsentrasi CH 3 COONa
Volume  0,2  ml  dan  konsentrasi  1  M merupakan  kondisi  optimum  dari  CH 3 COONa yang diperoleh dari hasil penelitian.
Penambahan  Natrium  Asetat  dalam  penentuan senyawa flavonoid total adalah sebagai pereaksi geser  [13]  dan  untuk  mendeteksi  adanya  gugus 7-OH [3], selain itu juga untuk mempertahankan panjang  gelombang  pada  daerah  visible (tampak)  [2][14].  Penambahan  Natrium  asetat dengan  volume  dan  konsentrasi  optimum  akan menghasilkan maksimum.

## Kisaran linier larutan standar
Kisaran  daerah  kerja  yang  diperoleh  dari hasil  penelitian  ini  terletak  pada  absorbansi  0- 0,706.  Penentuan  kisaran  ini  berdasarkan  kurva linier  larutan  standar  pada  gambar  6,  dimana hubungan  linier  antara  konsentrasi  larutan standar  dan  absorbansi  diperlihatkan  oleh persamaan  y  =  0,0763x-0,0086  dengan  regresi linier  (R 2 )  0,9943.  Sedangkan  nilai  koefisien korelasi  yang  diperoleh  0,997  menunjukkan adanya  hubungan  yang  sangat  kuat  diantara variabel yang digunakan[15].

## Penentuan waktu reduksi optimum
Waktu  reduksi  adalah  waktu  yang dibutuhkan senyawa flavonoid untuk mereduksi AlCl 3 sehingga  terbentuk  senyawa  kompleks yang berwarna kuning dari quersetin-aluminium klorida.  Reaksi  akan  berjalan  sempurna  jika waktu yang dibutuhkan tepat dan menghasilkan intensitas  warna  yang  lebih  maksimal,  sehingga absorbansi  yang  terbaca  mempunyai  nilai  yang besar.  Waktu  reduksi  45  menit  yang  diperoleh dari  hasil  penellitian  merupakan  waktu  yang mempunyai absorbansi tertinggi.

## Penentuan berat sampel optimum
Berat  sampel  optimum  yang  akan digunakan  dalam  praktikum  berdasarkan  pada daerah  kerja  yang  diperoleh  dari  kurva  linier larutan standar, dimana absorbansi yang terbaca dari  sampel  harus  berada  dalam  kisaran  linier
larutan  standar  yaitu  0-0,706.  Absorbansi  yang berada  pada  kisaran  kurva  linier  dari  ketiga sampel dalam penelitian ini bervariasi, mengkudu  dengan  kisaran  50  mg-700  mg, pandan 50 mg-600 mg, katuk 50 mg-200 mg.
Dengan  menggunakan  data  tersebut, maka  berat  sampel  yang  dapat  dipakai  dalam praktikum  mempunyai  kisaran  50  mg-700  mg, dengan  ketentuan  absorbansinya  harus  berada dalam garis linier kurva larutan standard. Seperti terlihat  pada  gambar  (6)  dengan  konsentrasi diatas 9 ppm kurva menjadi tidak linier lagi. Hal ini  dikarenakan  semakin  tinggi  konsentrasi senyawa  flavonoid  dalam  sampel,  maka kemampuan senyawa flavonoid untuk mereduksi  Aluminium  Klorida  semakin  cepat, akan tetapi dengan semakin tingginya konsentrasi senyawa flavonoid membuat reduksi menjadi tidak optimal. Dengan demikian dalam penentuan berat sampel, absorbansi yang terbaca harus berada dalam range yang tepat.
Dengan  menggunakan  optimasi  kondisi pengujian  flavonoid  dari  hasil  penelitian  ini, maka  diperoleh  kandungan  flavonoid  dari sampel  daun  mengkudu,  pandan,  dan  katuk secara  berturut-turut  yaitu  0,00137  %,  0,00147 % dan 0,0037 %.

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang dilakukan  diperoleh  kesimpulan  bahwa  kondisi optimum  pada  pengujian  senyawa  flavonoid total adalah AlCl3 dengan vol. 0.1 ml konsentrasi 5%,  CH3COONa  vol.  0.2  ml  konsentrasi  1  M, waktu  reduksi  45  menit  dan  berat  optimum sampel  dengan  kisaran  50  mg-700  mg.  Kondisi optimum  yang  diperoleh  ini  dapat  digunakan sebagai SOP praktikum Makromolekul dan Hasil Alam,  karena  dengan  waktu  2  jam  kondisi tersebut dapat mengakomodir tujuan pembelajaran.

## Ucapan terima kasih
Peneliti mengucapkan terima kasih kepada  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian kepada  Masyarakat  Universitas  Sriwijaya  yang telah  memberikan  dana  penelitian  dengan nomorkontrak  0175.03/UN9/SB3.LPPM.PT/2020 tahun  2020  dengan  skema  penelitian  Tenaga Kependidikan.

## REFERENSI
[1] Z. Zuraida, S. Sulistiyani, D. Sajuthi, and I. H.  Suparto,  “ Fenol,  Flavonoid,  Dan
Aktivitas  Antioksidan  Pada  Ekstrak  Kulit Batang  Pulai (Alstonia  scholaris  R.Br),” J. Penelit.  Has.  Hutan ,  vol.  35,  no.  3,  pp. 211 – 219,
2017, doi: 10.20886/jphh.2017.35.3.211-219. [2] A.  Aminah,  N.  Tomayahu,  and  Z.  Abidin, “Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Kulit Buah Alpukat (Persea americana Mill.) Dengan Metode Spektrofotometri UV- VIS,” J. Fitofarmaka Indones. , vol. 4, no. 2, pp. 226 – 230, 2017, doi: 10.33096/jffi.v4i2.265.
[3] K.  Keahlian  Biologi  Farmasi  and  F.  P. Farmasi  Universitas  Jenderal  Achmad Yani  Jl  Terusan  Jenderal  Sudirman  BOX,
“ Penetapan  Kadar  Flavonoid  Metode
Alcl3  Pada  Ekstrak  Metanol  Kulit  Buah Kakao  (Theobroma  cacao  L.)  Dyah  Nur Azizah,  Endang  Kumolowati,  Fahrauk Faramayuda,” Des ,  vol.  2014,  no.  2,  pp. 45 – 49, 2014.
[4] T. Bhaigyabati, P. G. Devi,  and G. C. Bag, “Research  Journal  of  Pharmaceutical  ,
Biological  and  Chemical  Sciences  Total Flavonoid  Content  and  Antioxidant Activity  of  Aqueous  Rhizome  Extract  of Three  Hedychium  Species  of  Manipur Valley . September - October,” vol. 5, no. 970, pp. 970 – 976.
[5] Sumaiyah,  Masfria,  and  A.  Dalimunthe, “Determination of total phenolic content, total flavonoid content, and antimutagenic  activity  of  ethanol  extract nanoparticles  of  rhaphidophora  pinnata (L.f)  schott  leaves,” Rasayan  J.  Chem. , vol.  11,  no.  2,  pp.  505 – 510,  2018,  doi:
10.7324/RJC.2018.1122068.
[6] P. Kadar, F. Pada, K. Batang, K. Raru, and S. Uv-vis, “1 , 1 , 2,” vol. 4, no. 1, pp. 29– 36, 2019.
[7] R.  Ahmed et  al. ,  “Phenolic  contents - based assessment of therapeutic potential  of  Syzygium  cumini  leaves extract,” PLoS One , vol. 14, no. 8, pp. 1 – 16, 2019, doi: 10.1371/journal.pone.0221318.
[8] O.  Ullah  Shirazi,  M.  Muzaffar  Ali  Khan Khattak,  N.  Azwani  Mohd  Shukri,  M.  A. Mohd  Nur  Nasyriq,  O.  Shirazi,  and  M.  A. Nur  Nasyriq,  “Determination  of  total phenolic,  flavonoid  content  and  free radical  scavenging  activities  of  common herbs  and  spices,” J.  Pharmacogn. Phytochem.  JPP ,  vol.  104,  no.  33,  pp.
104 – 108, 2014.
[9] R.  Supriningrum,  N.  Fatimah,  and  S.  N. Wahyuni, “Penetapan  Kadar  Flavonoid Ekstrak Etanol Daun Pacar Kuku (Lawsonia inermis L.) Berdasarkan
Perbedaan  Cara  Pengeringan ,” J.  Ilm. Manuntung ,  vol.  4,  no.  2,  p.  156,  2018, doi: 10.51352/jim.v4i2.195.
[10] Cahyanta,  “Penetapan  Kadar  Flavonoid
Total  Ekstrak  Daun  Pare  Metode Kompleks Kolorimetri dengan Pengukuran Absorbansi secara Spektrofotometri,” Electron.  J.  Politek.
Harapan  Bersama  Tegal ,  vol.  5,  pp.  58 – 61, 2016.
[11] Haeria and al. Hermawati. et, “Penentuan  Kadar  Flavonoid  Total  dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Bidara  (Ziziphus  spina- christi  L.)  Haeria,”
J. Pharm. Med. Sci. , vol. 1, no. 2, pp. 57 – 61, 2016.
[12] M. P. J. R et al. , “Chimica et Na tura Acta Penentuan  Fenolik  Total  dan  Flavonoid Ekstrak Etanol Kulit Batang,” vol. 8, no. 1, pp. 36 – 41, 2020.
[13] I.  A.  R.  A.  Asih,  “Isolasi  dan  identifikasi senyawa isoflavon dari kacang kedelai (,” pp. 33 – 40, 1907.
[14] A.  Fadillah,  A.  Rahmadani,  and  L.  Rijai, “ Analisis  Kadar  Total  Flavonoid  Dan  Uji
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Daun Kelubut (Passiflora foetida L.),” no. April, pp. 23 – 24, 2017, doi: 10.25026/mpc.v5i1.217.
[15] D.  S.  Pratomo  and  E.  Z.  Astuti,  “Analisis Regresi  dan  Korelasi  Antara  Pengunjung
dan Pembeli Teradap Nominal Pembelian di  Indomaret  Kedungmundu  Semarang Dengan  Metode  Kuadrat  Terkecil,” Ilmu Komput. , no. 1, 2014.