Uji Efek Sedasi dan Durasi Waktu Tidur Ekstrak Etanol Herba Putri Malu (Mimosa microphylla D. ) pada Mencit
(Mus musculus) Galur Swiss Webster

## Sedation Effect and Sleep Duration Time Test of Putri Malu Herbs (Mimosa microphylla D.) Ethanol Extract in Swiss Webster Mice
Putri Malu has widely used by people as a cure for kidney stones disorders, respiratory tract inflammation, anti- microbial agent, expectorant, antipyretic, anti-inflammatory, and diuretic. However, Mimosa microphylla D., a species of Putri Malu is rarely been studied. Moreover, there are few literatures, especially regarding its sedation activity when compared with Mimosa pudica L. Therefore, this experiment was conducted to study the potential sedation effects of Mimosa microphylla D. herb extract in Swiss webster mice. Mimosa microphylla D. herb was extracted by maceration with ethanol 96% and administered to 25 male Swiss webster mice which divided into 5 groups of 600 mg/kgBW , 1200 mg/kgBW, and 2400 mg/kgBW dose. This study was performed using several methods: holeboard, evasion box, platform, rotarod, sleep induction test, and test of sleep duration, and phenobarbital was used as the positive control 30 mg/kgBW. The treatment dose 600 mg/kgBW of ethanol extract of  Mimosa microphylla D. herb has the most potent sedative activity and dose of 1200 mg/kgBW of mice were able to extend the sleep duration time, but ethanol extracts of Mimosa microphylla D. Herb was not shorten the sleep inducing time of mice. The ethanol extract of Mimosa microphylla D. herb has sedative activity, extend the time duration of sleep, but not able to shorten the sleep induction time.
Keywords: Mimosa microphylla D., sedation effect, sleep duration time, sleep induction time .
Yeremia Kevin Muliadi (a) , Wahyu Dewi Tamayanti (a)* , Lisa Soegianto (a)
(a) Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala , Surabaya , Indonesia
Sejak dahulu tanaman Putri Malu banyak digunakan oleh masyarakat sebagai obat batu ginjal, radang saluran nafas, anti mikroba, peluruh dahak, antipiretik, antiinflamasi, diuretik. Namun, tanaman Putri Malu dengan jenis spesies Mimosa microphylla D. masih jarang dilakukan penelitian serta masih sedikit literatur yang ada, terutama aktivitasnya dalam menimbulkan efek sedasi bila dibandingkan dengan tanaman Putri Malu dari spesies Mimosa pudica L. Oleh sebab itu dilakukan penelitian untuk menguji efek sedasi ekstrak herba Putri Malu ( Mimosa microphylla D.) terhadap mencit (Mus musculus) galur Swiss webster untuk mengetahui potensi sedatifnya. Herba Putri Malu Mimosa microphylla D. diekstraksi dengan cara maserasi dengan etanol 96% dan diberikan kepada mencit jantan galur Swiss webster sebanyak 25 ekor yang dibagi dalam 5 kelompok dengan dosis pemberian 600 mg/kgBB, 1200 mg/kgBB, dan 2400 mg/kgBB masing-masing 1 ml/20 gBB. Penelitian ini dilakukan dengan berbagai metode: holeboard, evasion box, platform, rotarod untuk melakukan uji efek sedasi , uji induksi mula tidur, dan uji durasi waktu tidur, serta sebagai pembanding digunakan fenobarbital 30 mg/kgBB. Dari hasil percobaan uji sedatif, diketahui bahwa dosis 600 mg/kgBB ekstrak etanol herba Putri Malu ( Mimosa microphylla D.) memiliki aktivitas sedatif terbaik dan pemberian pada 1200 mg/kgBB mampu memperpanjang durasi tidur mencit, namun ekstrak etanol herba Putri Malu ( Mimosa microphylla D.) tidak mampu memperpendek waktu mula tidur mencit. Ekstrak etanol herba Putri Malu ( Mimosa microphylla D.) memiliki aktivitas dalam menimbulkan efek sedatif, memperpanjang durasi waktu tidur, namun tidak mampu memperpendek waktu mula tidur mencit.
Kata kunci: Mimosa microphylla D., efek sedatif, durasi waktu tidur, waktu mula tidur.
Uji Efek Sedasi dan Durasi Waktu Tidur Ekstrak Etanol Herba Putri Malu (Mimosa microphylla D. ) pada Mencit (Mus musculus) Galur Swiss Webster

## PENDAHULUAN
Putri Malu merupakan tumbuhan liar yang telah lama dipergunakan sebagai obat tradisional. Tanaman ini diperkirakan memiliki khasiat sebagai penenang  atau  sedatif.  Selain  itu,  tanaman  ini juga  telah  banyak  digunakan  oleh  masyarakat sebagai  obat  batu  ginjal,  radang  saluran  nafas, herpes,  cacingan,  anti  mikroba,  peluruh  dahak, antipiretik, antiinflamasi, diuretik (Soedibyo dan Mooryati, 1998). Kandungan senyawa kimia yang dimiliki oleh putri malu antara lain: alkaloid, tanin, flavonoid, steroid, sterol (Departemen Kesehatan Republik  Indonesia,  1995;  Tambupolon,  1981). Pada  penelitian  terdahulu,  tanaman  Putri  Malu dengan jenis spesies M. pudica L. memiliki akti- vitas sebagai sedatif (Haq, 2009), penghancur batu kandung kemih (Waldi, 1991), diuretik, penurun aktivitas motorik spontan (Indratno, 2000), anti- biotik , antidiabetes, antiemetik (Azmi et al., 2011), dan  antijamur  (Tamilarasi  and  Ananthi,  2012). Spesies lain tanaman Putri Malu Mimosa micro- phylla Dryand masih jarang dilakukan penelitian serta masih sedikit literatur yang ada. Penelitian saat  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  aktivitas tanaman  Putri  Malu  ( M.  microphylla D.)  dalam menimbulkan efek sedasi.

## METODE PENELITIAN
Pada penelitian ini digunakan simplisia segar herba Putri Malu ( M. microphylla D.). Bahan penelitian ini diperoleh dari HRL (Herb Research Laboratories) dan telah dilakukan determinasi pada bahan tana- man berdasarkan kunci determinasi di Laboratorium Botani Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala, Surabaya.

## Hewan Percobaan
Hewan  yang  digunakan  mencit  jantan  ( Mus musculus) galur Swiss Webster , dengan berat 20- 40 gram dan berumur dua bulan. Sebelum dipakai untuk  penelitian,  mencit  diadaptasikan  terlebih dahulu dalam kondisi yang sama selama satu minggu. Mencit dikatakan sehat dan mampu digunakan dalam percobaan tidak menunjukkan gejala-gejala sakit dan bobot tubuhnya tidak berkurang  lebih  10%  dari  bobot  semula  (Smith dan Mangkoewidjojo, 1988).

## Tahapan Penelitian
Penelitian dilakukan di Fakultas Farmasi Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya. Herba Putri Malu ( M. microphylla D.) yang diperoleh diamati secara makroskopis,  mikroskopis  dan  dideterminasi  di Laboratorium  Botani  Farmasi  Fakultas  Farmasi Unika Widya Mandala. Kemudian diangin-anginkan hingga kering. Dilakukan penggilingan serta penga- yakan dari serbuk yang diperoleh dengan ayakan nomor 4/18. Serbuk simplisia kering herba M. microphylla diekstrak  secara  maserasi  dengan etanol 96% dan dipekatkan dengan alat Vaccum Evaporator. Dilakukan standarisasi simplisia dan ekstrak etanol herba Putri Malu meliputi: organo- leptis, kadar abu, kadar abu tidak larut asam, kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, dan
profil Kromatografi Lapis Tipis dengan menggunakan fase diam lempeng Silica Gel F 254. dan fase gerak etil asetat-metiletilketon-asam format-asam asetat glasial-air (50:30:7:3:10). Juga dilakukan uji skrining fitokimia pada ekstrak etanol herba Putri Malu.

## Uji Aktivitas Sedatif
Terdapat tiga dosis dalam pembuatan larutan uji ekstrak herba M. microphylla yaitu: 600 mg/kgBB, 1200 mg/kgBB, dan 2400 mg/kgBB, lalu disuspen- sikan dengan HPMC 0,1%. Sebagai pembanding di- berikan fenobarbital secara oral dengan dosis pem- berian 30 mg/kgBB. Untuk mengukur waktu induksi tidur dan durasi waktu tidur mencit, setiap kelom- pok diberikan induksi fenobarbital secara oral dengan dosis 125 mg/kgBB sebelum diberikan dosis per- lakuan. Hewan percobaan yang digunakan pada penelitian  ini  seluruhnya  berjumlah  25  ekor dikelompokkan secara acak menjadi 5 kelompok dan masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor. Pengujian Efek Sedatif dengan Metode Holeboard Dilakukan pengamatan terhadap jumlah gerakan spontan  dari  mencit  yaitu  memasukan  kepala hingga kedua telinga juga ikut masuk pada lubang- lubang  papan  kayu  dengan  diameter  1  cm  dan kedalaman 2 cm secara berulang yang mengindi- kasikan suatu perilaku eksplorasi (File and Wardril, 1975).

## Pengujian  Efek  Sedatif  dengan  Metode

## Evasion Box
Mencit pada awalnya dimasukkan ke dalam kotak kayu dan ditutup dengan papan selama 10 detik, kemudian  papan  tersebut  disandarkan  miring  di dalam kotak sehingga memberikan jalan bagi mencit untuk  keluar  dari  kotak  melalui  papan  tersebut (Turner, 1965).
Pengujian Efek Sedatif dengan Metode Platform Mencit diletakkan di atas platform sambil dilakukan pengamatan terhadap aktivitasnya dalam menje- ngukkan atau menundukkan kepala sampai keluar dari tepi platform . Dilakukan pencatatan terhadap jumlah jengukan pada tepi platform (Harun et al., 1986).
Pengujian Efek Sedatif dengan Metode Rotarod Mencit diletakkan pada balok silinder berdiameter 3 cm yang berputar dengan kecepatan lambat dan konstan (10 putaran per menit) pengamatan dila- kukan pada berapa lama waktu mencit bertahan di atas balok silinder yang sedang berputar (Dunhan dan Miya, 1957).

## Pengujian Efek Ekstrak Terhadap Waktu Mula
Tidur dan Durasi Waktu Tidur
Mulanya mencit diberikan suatu perlakuan supaya dapat tertidur dengan pemberian fenobarbital secara oral dosis 125 mg/kg BB sebelum diberikan dosis perlakuan. Dilakukan pengamatan terhadap waktu induksi tidur dengan mengamati waktu dari mencit masih sadar hingga tertidur, sedangkan percobaan durasi  waktu  tidur  mengamati  lamanya  mencit tertidur sampai bangun kembali dan tidak kembali tertidur. Indikator tidur adalah hilangnya reflek dari  mencit  untuk  kembali  ke  posisinya  yang semula apabila mencit dibalik dengan perut dan
TABEL 1. Hasil Standar disasi Simplisia dan Ekstrak Etanol Herba Putri Malu ( M. microphylla D.) (Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995)
TABEL 2.  Hasil  Uji  Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol Herba Putri Malu ( M. microphylla D.) (Fansworth, 1966)
TABEL 3 . Harga Rf Profil Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Herba Putri Malu ( M.microphylla D.) dengan Pem- banding Rutin
TABEL 4 . Data Hasil Pengamatan Uji Efek Sedatif Ekstrak Herba Putri Malu ( M. microphylla D.) pada Mencit dengan Metode Holeboard, Evasion Box, dan Platform
TABEL 5 . Data Hasil Pengamatan Uji Efek Sedatif Ekstrak Herba Putri Malu ( M. microphylla D.) dengan Metode Rotarod, Waktu Induksi Tidur dan Durasi Waktu Tidur pada Mencit
GAMBAR  1. Profil KLT ekstrak etanol herba Putri Malu ( M. microphylla D.)  dengan  fase  diam  lempeng Silica  Gel  F 254 dan  fase  gerak  etil  asetat – metiletilketon – asam  format – asam  asetat  glasial – air  (50:30:7:3:10)  pada (a) sinar  UV 254  nm, (b) sinar  UV  366  nm, (c) penyemprotan  pereaksi aluminium  (III)  klorida  1%  LP  pada  sinar  UV  366  nm. Keterangan : 1. Ekstrak Herba Putri Malu, 2. Pembanding (rutin).
GAMBAR  2 . Uji efek sedasi ekstrak etanol herba Putri Malu ( M. microphylla D.) dengan metode holeboard, evasion box, dan platform, dengan pemberian fenobarbital sebagai kontrol positif.
kaki menghadap ke atas. Indikator bangun adalah saat  mencit  sudah  dapat  menapakkan  keempat kakinya ke dasar tempat percobaan (dimodifikasi dari Sayidin, 2009).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  standardisasi  simplisia  dan  ekstrak herba Putri Malu ditunjukan pada Tabel  1 dan skrining fitokimia ekstrak M. micropylla D. pada Tabel 2 . Profil KLT Ekstrak Etanol Herba Putri Malu ( M. microphylla D.) dengan pembanding Rutin ditun- jukan pada Gambar  1 dan Tabel  3 . Pada uji efek sedatif  dengan  metode  uji Holeboard,  Evasion Box, Platform, dan Rotarod dapat dilihat bahwa jumlah aktivitas mencit yang paling sedikit pada pemberian dosis 600 mg/kgBB bila dibandingkan dengan pemberian dosis lainnya, selain itu dari data yang diperoleh juga tidak memiliki perbedaan yang signifikan bila dibandingkan dengan kontrol positif ( Tabel 4 ).
Dari  hasil  rata-rata  aktivitas  mencit  yang diamati, dengan pemberian dosis yang meningkat akan diikuti dengan penambahan jumlah aktivitas mencit  dan  aktivitas  sedasi  yang  diharapkan justru semakin berkurang ( Gambar 2 ).
Analisis Hasil Analisis  Pustaka  Kesimpulan Simplisia Kadar abu 4,52% <10% Sesuai Kadar air 8,68% <10% Sesuai Kadar sari larut air 20,82% >9% Sesuai Kadar sari larut etanol 20,32% >7% Sesuai Ekstrak  Kadar abu total 3,07% <10% Sesuai Kadar abu tidak larut asam 1,4% <1% Tidak Sesuai Kadar air 6,68% <10% Sesuai No . Senyawa Hasil Pustaka Kesimpulan 1 . Alkaloid Dengan pereaksi Dragendorf terbentuk endapan jingga Dengan pereaksi Dragendorf terbentuk endapan jingga Positif 2 . Flavonoid Terbentuk warna kuning pada lapisan amil alkohol Terbentuk warna kuning pada lapisan amil alkohol Positif 3 . Saponin Tidak terbentuk busa Terbentuk busa Negatif 4 . Tanin Warna hijau Warna hijau Positif 5. Terpen Endapan hijau Endapan hijau Positif Ekstrak Pembanding (Rutin) Pereaksi AlCl 3 Rutin UV 254 UV 366  UV 254 UV 366 UV 366 UV 366 0,94 (hitam) 0,94 (merah) 0,94 (putih kekuningan) 0,73 (hitam) 0,73 (hijau kekuningan) 0,79 (hijau terang) 0,69 (cokelat) 0,7 (hijau kekuningan) 0,65 (bir u) 0,63 (biru muda) 0,58 (hitam) 0,58 (biru) 0,58 ( hitam) 0,58 ( hitam) 0,58 (hijau kekuningan) 0,58 (hijau kekuningan) 0,52 (biru muda) 0,23 ( hitam) 0,23 (hijau) 0,12 ( hitam) 0,06 (biru tua)
2 1 (a) 2 1 2 1 (b) (c) Rf
Perlakuan Holeboard (Jumlah) Evasion Box (Jumlah) Platform (Jumlah) Ekstrak600 mg/kg BB 6,6±3,05 0,8±0,84 2,6±1,95 Ekstrak 1200 mg/kg BB 7,8±2,59 2±1,22 7±3,67 Ekstrak 2400 mg/kg BB 11±5,43 2,2±1,48 15,2±5,26 Kontrol (+) 5,4±3,29 0,2±0,45 4,8±6,38 Kontrol (-) 21±3,32 3,6±0,55 43,4±14,05
Perlakuan Rotarod (detik) Waktu Induksi Tidur (menit) Durasi Waktu Tidur (menit) Ekstrak 600 mg/kg BB 21,2±11,12 33,2±21,05 406,2±120,99 Ekstrak 1200 mg/kg BB 125,2±121,69 19,8±3,49 457,4±103,50 Ekstrak 2400 mg/kg BB 246,2±73,97 23,8±8,23 431,8±23,66 Kontrol (+) 100,2±73,34 14,2±5,49 508±99,13 Kontrol (-) 300±0 16,4±6,11 46,8±12,38
GAMBAR 3. Uji efek sedasi ekstrak etanol herba putri malu ( M. microphylla D.) dengan metode Rotarod, waktu induksi tidur , dan durasi waktu tidur dengan pemberian fenobarbital sebagai kontrol positif.
Pada pemberian dosis ekstrak sebesar 1200 mg/kgBB  diperoleh  hasil  yang  lebih  baik  dalam memperpendek waktu induksi tidur serta memper- panjang durasi waktu tidur pada mencit bila diban -dingkan  dengan  pemberian  dosis  ekstrak  2400 mg/kgBB dan dosis 600 mg/kgBB ( Gambar 3 ). Dari  hasil  standarisasi  diketahui  bahwa kadar abu tidak larut asam tidak memenuhi per- syaratan pustaka, hal ini dikarenakan masih ada pengotor  berupa  kandungan  logam  atau  zat  an- organik yang tidak dapat terlarut pada larutan asam. Hasil Kromatografi Lapis Tipis ekstrak etanol herba Putri  Malu  ( M.  microphylla D.)  didapat  bebe- rapa noda dengan warna hijau kekuningan yang sama dengan rutin. Sehingga, diduga senyawa flavonoid  yang  dapat  menimbulkan  efek  sedasi pada mencit. Hal ini senada dengan penelitian yang pernah  dilakukan  sebelumnya  (Wasowski  dan Marder, 2012). Data penelitian dianalisis meng- gunakan program komputer SPSS 16.0 for Win- dows yang diawali dengan uji  homogenitas data dengan  menggunakan  metode  uji Levene .  Hasil analisa data uji efek sedasi (dengan uji Levene ) pada  berbagai  metode holeboard,  evasion  box, platform,  rotarod, waktu  induksi  tidur,  dan durasi  waktu  tidur,  dapat  disimpulkan  bahwa hanya  data  pada  uji holeboard dan evasion  box yang  mempunyai  varian  data  homogen  sebab memiliki nilai signifikansi di atas 0,05.
Analisa  data  yang  homogen  dilanjutkan dengan uji Anava dan Post Hoc Tukey untuk me- ngetahui adanya perbedaan yang bermakna antar kelompok . Pada uji Holeboard diperoleh perbe- daan  yang  bermakna  antara  kelompok  kontrol negatif dengan kelompok lainnya. Pada data hasil uji evasion box juga terdapat perbedaan yang ber- makna antarkelompok perlakuan, seperti: kelom- pok dosis 600 mg/kgBB dengan kontrol negatif, kelompok  dosis  2400  mg/kgBB  dengan  kontrol positif,  kelompok  kontrol  positif  dengan  dosis 2400 mg/kgBB dan kontrol negatif, serta kelom- pok  kontrol  negatif  dengan  dosis  600  mg/kgBB dan kontrol negatif.
Untuk  data  yang  memiliki  sebaran  yang tidak homogen, dilakukan analisis dengan meng- gunakan metode uji Kruskal Wallis . Hasil perhi- tungan statistik nilai Chi-square didapatkan seba- gai  berikut:  18,437;  16,560;  7,891;  13,403.  Dari
data  yang  diperoleh  diketahui  bahwa  nilai Chi- square hitung  waktu  induksi  tidur  lebih  kecil bila dibandingkan dengan nilai Chi-square tabel (11,07). Hal ini menunjukan bahwa data uji waktu induksi tidur memang tidak memiliki perbedaan bermakna.
Pada penelitian ini juga dilakukan pemban- dingan nilai mean dari masing-masing kelompok perlakuan setiap metode uji. Untuk uji holeboard , evasion box, platform, dan rotarod , dosis efektif yang diperoleh sebesar 600 mg/kg BB, hal ini dapat dilihat  dari  jumlah  aktivitas  mencit  yang  paling sedikit bila dibandingkan dengan pemberian dosis lainnya. Selain itu dari data yang diperoleh juga tidak memiliki perbedaan yang signifikan bila diban- dingkan dengan kontrol positif. Namun dengan pe- nambahan dosis, aktivitas sedasi yang diharapkan justru semakin berkurang dan terjadi peningkatan aktivitas pada mencit. Hal ini diduga karena adanya kandungan aphrodisiac berupa  senyawa  mimopu- dine dan fenil etil amin (Muthumani et al., 2010) dari  golongan  senyawa  alkaloid  pada  tanaman Putri Malu yang memiliki efek dalam meningkatkan aktivitas seksual bila diberikan dengan dosis lebih dari 500  mg/kg BB (Pande et  al., 2009). Selain itu, adanya senyawa polifenol berupa tanin akan mengikat  kuat protein serta derivatnya  (enzim), karbohidrat, vitamin, dan mineral sehingga unsur- unsur  tersebut  tidak  dapat  diserap  dalam  usus dan kemudian dikeluarkan bersama feses (Candra et al., 2008).
Dosis efektif yang diperoleh untuk uji waktu induksi  dan  uji  durasi  waktu  tidur  mencit  yaitu 1200 mg/kgBB, namun tidak terdapat perbedaan yang signifikan atau  bermakna dari  ketiga dosis pemberian (600, 1200, 2400 mg/kgBB) dan kontrol positif.  Dari  hasil  percobaan  uji  waktu  induksi tidur  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak etanol herba Putri Malu  tidak mampu memper- pendek waktu mula tidur mencit. Sebab, hasil dari data  kontrol  negatif  menunjukan  waktu  induksi tidur yang lebih cepat dibandingkan dengan data ketiga dosis pemberian ekstrak etanol herba Putri Malu.

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol herba Putri Malu ( M. microphylla D.)  memiliki  aktivitas  sedasi  pada  mencit (Mus musculus). Dosis efektif paling kuat yang diperoleh dari ekstrak etanol herba Putri Malu dengan uji holeboard,  evasion  box,  platform, dan rotarod sebesar 600 mg/kgBB. Sedangkan, untuk uji waktu  mula  tidur  dan  durasi  waktu  tidur didapatkan  dosis  efektif  paling  kuat  sebesar 1200 mg/kgBB.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Kami  berterima  kasih  kepada  PPOT  (Pusat Penelitian Obat Tradisional), Universitas Katolik Widya  Mandala  Surabaya,  dan  PT.  HRL (Herb Research  Laboratories) dalam  mendanai  dan menyediakan  bahan  penelitian  berupa  tanaman Putri Malu untuk penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Azmi  L,  Singh  MK,  dan  Akhtar  AK,  2011,  Pharmacological and  Biological  Overview  on Mimosa  pudica Linn., Int  J Pharm Life Sci , 2(11), 1226-1234.
Candra AA, Ridwan Y, dan Retnani EB, 2008, Potensi Anthel- mintik Akar Tanaman Putri Malu ( Mimosa pudica L.) terhadap Hymenolepis nana pada Mencit, Media Peternak , 31(1), 29-35.
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia,  1995, Materia Medika Indonesia , Jilid 6, Jakarta, 158-162.
Dunhan NW dan Miya, TS, 1957, A Note on a Simple Apparatus for  Detecting  Neurological  Deficit  in  Rats  and  Mice, J  Am Pharm Ass oc , 46, 208.
File SE dan Wardril AG, 1975, Validity of Head Dipping as a Measure of Exploration in a Modified Hole-Board, Psycho- pharmacol , 44, 53-59.
Haq, AS, 2009, Pengaruh Ekstrak Herba Putri Malu ( Mimosa pudica Linn.) terhadap  Efek  Sedasi  pada  Mencit  BALB/C, Skripsi , Sarjana Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang.
Harun  N,  Soegiarso  NC,  dan  Yulinah,  ES,  1986,  Pengaruh Brugmansia suaveolens terhadap Perilaku Tikus, Skripsi .
Indratno,  J,  2000,  Uji  Aktivitas  Motorik  dari  Ekstrak  Daun Putri Malu ( Mimosa pudica L . ) terhadap Mencit Jantan , Skripsi ,
Sarjana Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala, Surabaya.
Katzung BG, 2004, Farmakologi Dasar dan Klinik , Buku 2, ed. 8, Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga (penerjemah), Salemba Medika, Jakarta, 25-53.
Muthumani P, Meera R, Devi LV, Koduri SK, Manavarthi S, dan Badmanaban R, 2010, J Chem Pharm Res , 2(5), 108-114.
Pande M dan Pathak, A, 2009, Aphrodisiac Activity of Roots of Mimosa  pudica Linn.  Ethanolic  Extract  in  Mice, Int  J Pharm Sci Nanotechnol , 2(1), 477-486.
Sayidin  AS,  2009,  Uji  Pendahuluan  Pengaruh  Ekstrak  Biji Pala  ( Myristica  fragrans Houtt)  terhadap  Waktu  Induksi Tidur dan Durasi Tidur Mencit Balb/C yang Diinduksi Tiopental, Skripsi, Sarjana Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang.
Smith dan Mangkoewidjojo, 1988, Pemeliharaan, Pembiakan , dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis , Universitas Indonesia Press, Jakarta, 2011.
Soedibyo dan Mooryati BRA, 1998, Alam Sumber Kesehatan Manfaat dan Kegunaan, Balai Pustaka, Jakarta, 314.
Tambupolon OT, 1981, Tumbuhan Obat Bagi Pecinta Alam , Bharatara Karya Aksara, Jakarta, 1, 93-94.
Tamilarasi  T  dan  Ananthi  T,  2012,  Phytochemical  Analysis and  Anti  Microbial  Activity  of Mimosa pudica Linn., Res J Chem Sci , 2(2), 72-74.
Turner RA, 1965, Screening  Methods  in  Pharmacology , Academic Press, New York and London, 101-118, 87-89.
Waldi M, 1991, Pengaruh Ekstrak Daun Putri Malu (Mimosa pudica  L.) terhadap  Batu  Kandung  Kemih  yang  Diinduksi pada Tikus Putih Jantan, Skripsi, Sarjana Farmasi, Univer- sitas Andalas, Bandung.
Wasowski C dan Marder M, 2012, Flavonoid as GABA A receptor ligands: the whole story?, J Exp Pharmacol , 9(24), 9-24.