## Pendahuluan
Penyakit  Demam  Berdarah  Dengue  (DBD) disebabkan oleh virus dengue dari genus Flavivirus ,
famili Flaviviridae .  DBD  ditularkan  ke  manusia  me-
lalui  gigitan  nyamuk Aedes yang  terinfeksi  virus dengue  adalah  penyakit  infeksi  yang  disebabkan oleh  salah  satu  dari  4  virus  dengue  berbeda  dan ditularkan melalui nyamuk terutama Aedes aegypti dan Aedes  albopictus yang  ditemukan  di  daerah tropis dan subtropis diantranya kepulauan di Indo- nesia hingga bagian utara Australia (Jatin, 2013).
Sejak  tahun  1968  telah  terjadi  peningkatan
Efektivitas  Ekstrak  Serbuk  Daun  Pulai ( Alstonia  scholaris )  Sebagai  Larvasida  Alami Terhadap Larva Aedes sp. Instar III
Salah  satu  tanaman  di  Indonesia  yang  dimanfaatkan  masyarakat  secara  tradisional  sebagai obat  adalah  batang  pulai (Alstonia  scholaris). Bagian  tanaman  yang  sering  digunakan  adalah  daun, kulit batang, dan bunga. Tumbuhan ini mengandung senyawa metabolit sekunder diantaranya flavo- noid,  alkaloid,  steroid  dan  triterpenoid.  Kandungan  tersebut  merupakan  senyawa  aktif  yang  dapat digunakan  sebagai  larvasida  alami  untuk  membunuh  larva Aedes  sp. sebagai  upaya  pengendalian vektor  penyebab  Demam  Berdarah  Dengue  (DBD)  yaitu  nyamuk Aedes  sp. Penelitian  ini  dilakukan pada dua lokasi yaitu Laboratorium Biologi-Farnasi dan Laboratorium Kesehatan Lingkungan Fakultas Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan  UIN  Alauddin  Makassar.  Penelitian  ini  adalah  penelitian  kuantitatif dengan menggunakan metode eksperimen murni ( true experiment ) dengan rancangan Posttest Only Control Group Design . Populasi dan sampel pada penelitian ini berjumlah 300 larva Aedes sp. Instar III sebagai hewan uji yang diambil dari Laboratorium Entomologi Universitas Hasanuddin dalam setiap replikasi menggunakan 25 larva. Perlakuan dilaksanakan dengan pemajanan terhadap larva Aedes sp. Instar III dengan konsentrasi 0%, 5%, 10% dan 15% masing-masing 2 gram serbuk daun pulai dengan tiga kali replikasi. Berdasarkan hasil pengamatan, presentase kematian larva Aedes sp. pada kontrol (- ) tidak terdapat kematian, pada konsentrasi 5% yaitu 22% kematian dan pada konsentrasi 10% yaitu 46%  kematian dan pada konsentrasi 15% yaitu 65% kematian. Dengan uji korelasi Pearson nilai Sig. 0,000<0,05 dan Koefisien korelasi Pearson sebesar 0,975 bahwa terdapat hubungan kuat antar varia- bel konsentrasi serbuk daun pulai dan jumlah kematian larva Aedes sp . serta semakin tinggi konsen- trasi serbuk daun pulai yang diberikan maka semakin banyak larva Aedes sp. yang mati. Berdasarkan hasil  uji  analisis Probit menunjukkan  nilai  LC 95 sebesar  42.165  atau  42%  dan  bila  dikonversi  dengan satuan part per million (ppm) adalah 126.000 ppm atau 12,6 g/l dan LT 95 sebesar 2.301 menit atau 38 jam. Saran yang diberikan perlu dilakukan pengujian lebih lanjut terhadap produk serbuk daun pulai untuk melihat tingkat efektifitas dilapangan dan tingkat partisipasi masyarakat dalam menggunakan larvasida alami dari daun pulai.
Kata Kunci : Tanaman Pulai, Larvasida Alami, Kematian Larva Aedes sp.

## Abstrak

## P E N E L I T I A N
Rachmat Saleh 1 *, Andi Susilawaty 2 , Abd. Majid HR. Lagu 3 , Muh. Saleh 4
ISSN (Print)   : 2443-1141 ISSN (Online)   : 2541-5301
1,2,3,4 Program Studi Kesehatan Masyarakat Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar
persebaran  jumlah  provinsi  dan  kabupaten/kota yang endemis DBD, dari 2 provinsi dan 2 kota, men- jadi  32  (97%)  dan  382  (77%)  kabupaten/kota  pada tahun 2009. Provinsi Maluku, dan tahun 2002 sam- pai tahun 2009 tidak ada laporan kasus DBD. Selain itu terjadi juga peningkatan jumlah kasus DBD, pada tahun  1968  hanya  58  kasus  menjadi  158.912  kasus pada tahun 2009 (Pusat Data dan Informasi Kemen- kes RI, 2016)
Incidence  rate DBD  berdasarkan  provinsi  pa- da  tahun  2015,  3  (tiga)  provinsi  tertinggi  adalah Provinsi  Bali,  yaitu  208,7  per  100.000  penduduk, Provinsi Kalimantan Timur yaitu 183,12 per 100.000 penduduk  dan  Provinsi  Kalimantan  Tenggara  yaitu 120.08  per  100.000  penduduk.  Sedangkan  3  (tiga) terendah  dengan incidence  rate terendah  adalah Provinsi  Nusa  Tenggara  Timur  adalah  0,68  per 100.000  penduduk.  Provinsi  Maluku  sebesar  4.63 per  100.000  penduduk  dan  Provinsi  Papua  Barat sebesar  7,57  per  100.000  penduduk.  Provinsi  Sula- wesi  dengan incidence  rate sebesar  46,64  per 100.000  penduduk  (Pusat  Data  dan  Informasi  Ke- menkes RI, 2016).
Pada tahun 2015, tercatat terdapat sebanyak 126.675  penderita  DBD  di  34  provinsi  di  Indonesia, dan  1229  orang  di  antaranya  rneninggal  dunia. Jumlah  tersebut  lebih  tinggi  dibandingkan  tahun sebelumnya yakni sebanyak 100.347 penderita DBD dan  sebanyak  907  penderita  meninggal  dunia  pada tahun  2014.  Hal  ini  dapat  disebabkan  oleh  peru- bahan iklim dan rendahnya kesadaran untuk menja- ga kebersihan lingkungan (Pusat Data dan Informasi Kemenkes RI, 2016).
Incidence  rate DBD  berdasarkan  provinsi  pa- da  tahun  2015,  3  (tiga)  provinsi  tertinggi  adalah Provinsi  Bali,  yaitu  208,7  per  100.000  penduduk, Provinsi Kalimantan Timur yaitu 183,12 per 100.000 penduduk dan Provinsi Kalimantan Tenggara dengan IR  sebesar  120.08  per  100.000  penduduk.  (Pusat Data dan Informasi Kemenkes RI, 2016).
Kabupaten Gowa jumlah kasus DBD yaitu 324 kasus  mengalami  kenaikan  dari  213  kasus  pada  ta- hun 2012, pada tahun 2014 Jumlah kasus DBD men- galami penurunan sebanyak 173 kasus dengan inci-
dence rate per 100.000 penduduk sebesar 26,4, pa- da  tahun  2015  sebanyak  173  kasus  dengan inci- dence  rate per  100.000  penduduk  sebesar  23,9  se- dangkan  pada  tahun  2016  sebanyak  429  kasus dengan incidence rate per 100.000 penduduk  sebe- sar 58,3 (Dinas Kesehatan Kabupaten Gowa, 2017).
DBD  dapat  dihindari  bila  Sistem  Kewaspa- daan  Dini  (SKD)  dan  pengendalian  vektor  dilakukan dengan  baik,  terpadu  dan  berkesinambungan. Kegiatan  Pemberantasan  Sarang  Nyamuk  (PSN)  dil- akukan  secara  periodik  oleh  masyarakat  yang dikoordinir  oleh  RT/RW  dalam  bentuk  PSN  dengan pesan inti 3M plus. Keberhasilan kegiatan PSN anta- ra  lain  dapat  diukur  dengan  Angka  Bebas  Jentik (ABJ).  Apabila  ABJ  lebih  atau  sama  dengan  95%  di- harapkan  penularan  DBD  dapat  dicegah  atau  diku- rangi (Kementerian Kesehatan RI, 2010).
Berdasarkan  penelitian  di  Jawa  Tengah  dan DIY  oleh  Balai  Besar  Penelitian  dan  Pengembangan Vektor  zdan  Reservoir  Penyakit  Salatiga  (B2P2VRP) Salatiga  pada  tahun  2006,  hasil  penelitian  terbukti dijumpai  adanya  resistensi  vektor  DBD  terhadap insektisida  Malathion  0,8  %.  Penelitian  selanjutnya dilakukan  pada  tahun  2011  vektor  DBD Aedes  ae- gypti di  beberapa  daerah  di  Jawa  Tengah  dan  Dae- rah  Istimewa  Yogyakarta  telah  resisten  terhadap Malation  0,8  %  Bendiokarb  0.1%,  Lambdasihalotrin 0.05%,  Permetrin  0,75%,  Deltametrin  0.05%  dan Etofenprok 0.5% (Widiarti dkk., 2011).
Terdapat banyak cara yang dapat diusahakan untuk  mencegah  atau  meminimalkan  penularan penyakit  demam  berdarah,  salah  satunya  adalah dengan memutus siklus hidup vektor menggunakan pestisida  maupun  pengendali  hayati  (Arnis  dkk., 2015)
Alstonia  scholaris merupakan  tumbuhan  en- demik  Indonesia  dengan  nama  daerah  pulai.  Uji fitokimia  terhadap  ekstrak  daun Alstonia  scholaris mengandung alkaloid, tanin, saponin, triterpenoids, dan  flavonoid.  Selain  itu,  pengujian  aktivitas  anti- oksidan  dengan  ekstrak  etanol Alstonia  scholaris dengan metode
DPPH (2,2-diphenyl-1-
picrylhydrazyl),  terbukti  mempunyai  aktivitas  anti- oksidan secara in vitro (Zuraida dkk., 2017).
56
Tanaman  yang  mengandung  flavonoid  dan saponin  setelah  diekstraksi  memiliki  potensi  untuk mampu  menjadi  larvasida  alami.  Flavonoid  meru- pakan  senyawa  pertahanan  tumbuhan  yang  dapat bersifat menghambat saluran pencernaan serangga dan  juga  bersifat  toksik  dan  Saponin  dapat  meng- hambat kerja enzim yang berakibat penurunan ker- ja  alat  pencernaan  dan  penggunaan  protein  bagi serangga. (Arnis dkk., 2015).
Berdasarkan landasan di atas, pada penelitian  ini  penulis  akan  meneliti  tentang  pem- anfaatan  ekstrak  serbuk  daun  pulai  sebagai  larva- sida  alami  untuk  membunuh  larva  nyamuk Aedes sp. Instar III.

## Metode Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan    di  Laboratorium Farmakologi  Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan  Universitas  Islam  Negeri  Alauddin  Ma- kassar  dan  Laboratorium  Kesehatan  Lingkungan Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu  Kesehatan  pada  bu- lan Februari-Maret 2020.
Penelitian  ini  menggunakan  pendekatan eksperimen  murni  ( true  experiment )  dengan rancangan Posttest Only Control Group Design , yai- tu  merupakan  desain  penelitian  yang  tidak menggunakan  pretes  terhadap  sampel  sebelum perlakuan. Dalam desain ini terdapat dua kelompok masing-masing dipilih secara acak ( randomization ).
Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah  Larva Aedes sp.  Instar  III  yang  dipelihara  di Laboratorium  Entomologi-Parasitologi  Fakultas Kedokteran Universitas Hasanuddin.
Variabel  bebas  pada  penelitian  ini  adalah kadar ekstrak daun pulai ( Alstonia scholaris ) dalam bentuk  granul  pada  berbagai  konsentrasi.  Variabel terikat  pada  penelitian  ini  adalah  jumlah  kematian larva nyamuk Aedes sp. Instar III setelah pemberian perlakuan. Variabel kontrol pada penelitian ini ada- lah  suhu  dan  Ph  karena  berpengaruh  besar  ter- hadap kematian larva. Suhu diukur dan dikendalikan  dengan  cara  menempatkan  media  uji pada ruangan yang tertutup sehingga suhunya akan stabil.  Pengukuran  suhu  pada  media  tempat  pen-
gujian  di  awal  pengamatan.  Pengendalian  Ph  dil- akukan dengan menggunakan air yang mempunyai Ph  yang  sama  dengan  cara  mengukur  Ph  awal. Pengamatan  dilakukan  sampai  hingga  36  jam dengan interval waktu pengecekan yaitu 12 jam.
Tahap pembuatan larutan induk dari ekstrak ethanol daun pulai yang memiliki konsentrasi 100% dengan  5  kg  daun  pulai  di  maserasi  dengan menggunakan  alat  danbahan  antara lain  vacuum rotary  evaporator ,  pemanas  waterbath  suhu  70 o C, cawan  porselin,  oven  suhu  50 o C,  etanol  96% sebanyak  5  liter.  Pembuatan  ekstrak  serbuk  daun pulai dengan metode granulasi dengan bahan pen- gisi  dan  pengikat  dari  NaCMC  dan  Sacarum  Lactis. Untuk  tahap  pengujian  ekstrak  serbuk  daun  pulai digunakan  ekstrak  daun  dengan  konsentrasi  5%, 10%, 15% yang dikeringkan ke dalam oven dengan suhu 50 o C selama 24 jam kemudian digerus hingga menjadi serbuk kemudian diujikan dalam beberapa variasi volume air.
Tahap  pengujian  dengan  menyiapkan  12 gelas tes dengan 1000 ml air, Ph meter, termome- ter,  timbangan  digital,  stopwatch,  pipet  plastik, alumunium foil, larva Ae. Aegypti instar III sebanyak 300  ekor,  ekstrak  daun  pulai  dengan  konsentrasi 5%, 10%, 15%. Kemudian diberi tanda pada masing- masing konsentrasi dan pengulangan. Pengulangan dilakukan  sebanyak  3  kali.  Pengumpulan  data  dil- akukan  dengan  cara  menghitung  jumlah  kematian larva  setelah  perlakuan  36  jam.  Uji  tatistic  yang digunakan adalah uji probit untuk mencari LC 95 dan LT 95 .  Selain  itu,  menggunakan  uji  one  way  anova untuk  mencari  perbedaan  jumlah  kematian  larva signifikan atau tidak.

## Hasil
Penelitian  yang  telah  dilakukan  selama  ku- rang lebih satu bulan mulai pada Januari 2020 sam- pai  Februari  2020  di  Laboratorium  Biologi-Farmasi dan  Kesehatan  Lingkungan  Fakultas  Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Alauddin Makassar.
Dalam  melakukan  penelitian  ini  dilakukan ekstraksi terhadap daun pulai dengan menggunakan  etanol  96%  untuk  menghasilkan
ekstrak 100% daun pulai ( Alstonia scholaris). Ekstrak induk  daun  pulai  kemudian  diserbukkan  dengan menggunakan  metode  granulasi  basah  dan  dil- akukan  perlakuan  dengan  beberapa  konsentrasi. Berdasarkan  hasil  pengamatan  di  laboratorium digambarkan  pada  tabel  1.  pH  larutan  ekstrak  ser- buk  daun  pulai    dari  berbagai  konsentrasi  dan  rep- likasi  sebelum  perlakuan  terhadap  larva  Aedes  sp. adalah 7,6-7,8. Setelah dilakukan perlakuan dengan
konsentrasi  5%,  10%  dan  15%  dan  kontrol  (-)  pada dengan  tiga  kali  replikasi  pada  tabel  2  ditemukan bahwa  pada  kelompok  kontrol  (-)  yang  tidak  diberi perlakuan  tidak  ditemukan  adanya  kematian  larva Aedes  sp. pada  semua  replikasi.  Pada  kelompok yang  diberi  perlakuan  dengan  pemberian  serbuk daun  pulai  rata-rata  kematian  larva  terendah  pada konsentrasi  5%  yaitu  22%  larva  mati  sedangkan  ra- ta-rata  kematian  larva  tertinggi  terdapat  pada  kon- sentrasi 15% yaitu 65% larva mati.
58 HIG IENE
VOLUM E  8,   NO.   1,  JAN UARI -AP RI L  2022
Tabel 1. Hasil Pengukuran pH Larutan Serbuk Daun Pulai ( Alstonia scholaris ) Sebelum Perlakuan
Konsentrasi Ekstrak (%) pH Replikasi I II III Kontrol (-) 5% 10% 15% 7,6 7,6 7,8 7,7 7,6 7,7 7,8 7,7 7,8 7,7 7,7 7,6
Tabel 2. Presentase Jumlah Kematian Larva Aedes sp. pada Berbagai Konsentrasi Setelah Pemberian Serbuk Daun Pulai ( Alstonia scholaris )
Repli kasi Jumlah Kematian Larva Waktu Perlakuan 12 jam 24 jam 36 jam 0% 5% 10% 15% 0% 5% 10% 15% 0% 5% 10% 15% I II III 0 0 0 3 4 2 5 12 9 12 14 14 0 0 0 2 4 2 4 2 3 5 2 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Jumlah 0 9 26 40 0 8 11 9 0 0 0 0 Rata-rata 0 3 8,6 13,3 0 2,6 3,6 3 0 0 0 0 Presen tase (%) 0% 12% 34% 53% 0% 10% 14% 12% 0% 0% 0% 0%
Gambar 1. Jumlah Kematian Larva Aedes sp. Setelah Pemberian Serbuk Daun Pulai ( Alstonia scholaris )
Selain  itu,  dapat  diketahui  juga  bahwa jumlah  kematian  larva  berbanding  lurus  dengan peningkatan konsentrasi serbuk daun pulai. Presen- tase  kematian  larva  dapat  dilihat  grafik  pada  gam- bar  1.  Diketahui  bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi serbuk  daun  pulai  menyebabkan  tingginya  jumlah kematian larva Aedes sp. Berdasarkan grafik diatas jumlah kematian larva tertinggi yaitu pada konsen- trasi  15%  yaitu  sebanyak  65  larva  yang  mati,  dan terendah  pada  konsentrasi  5%  yaitu  22  larva  yang mati.
Serbuk  efektif  bekerja  untuk  membunuh larva pada waktu 12 jam setelah perlakuan dengan menunjukkan  presentase  kematian  12%  pada  kon- sentrasi  5%,  34%  pada  konsentrasi  10%  dan  53% pada  konsentrasi  15%,  sedangkan  pada  waktu  36 jam  serbuk  sudah  tidak  dapat  membunuh  larva Aedes  sp. dengan  menunjukkan  presentase  ke- matian 0% pada semua kelompok perlakuan.

## Pembahasan
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji  efektivitas larvasida  alami  serbuk  daun  pulai  (Alstonia  schol- aris)  terhadap  larva  Aedes  sp.  dengan  berbagai konsentrasi  uji.  Serbuk  daun  pulai  dibuat  dengan cara  mengeringkan  sampel  terlebih  dahulu  karena pada banyak kasus sampel yang kering lebih unggul dibandingkan  sampel  yang  segar.  (Vongsak  dkk., 2013)
Setelah  dikeringkan,  kemudian  sampel dicacah  dengan  menggunakan  pisau  yang  ber- tujuan untuk menurunkan ukuran partikel sehingga permukaan  kontak  dengan  pelarut  menjadi  opti- mal.  Proses  ini  sangat  penting,  karena  hal  ini  ber- tujuan  untuk  membuat  proses  ekstraksi  menjadi lebih efisien (Azwanida, 2015).
Langkah  selanjutnya  adalah  maserasi.  Ma- serasi  merupakan  teknik  ekstraksi  yang  termudah dan paling sederhana yaitu dengan cara merendam sampel  yang  sudah  dikeringkan  dan  dihaluskan kedalam  suatu  pelarut  (ethanol)  pada  suhu  ru- angan selama minimum 3 hari dengan pengadukan yang  sering.  Proses  ini  bertujuan  untuk  merusak dinding  sel  tumbuhan  sehingga  sari-sarinya  dapat
larut pada pelarut yag digunakan (Azwanida 2015).
Setelah 3 hari, kemudian campuran difiltrasi dan  kemudian  diuapkan  agar  mendapat  ekstrak yang  murni  menggunakan  rotavapor.  Pelarut  yang digunakan adalah ethanol karena menurut bebera- pa  penelitian,  etanol  dapat  menghasilkan  ekstrak yang  lebih  banyak  karena  dapat  menghasilkan ekstrak  dengan  kandungan  phytoconstituents (alkaloid,  saponin,  karbohidrat,  tannis  dan flafonoid) lebih banyak dibandingkan dengan pela- rut  lain  seperti  petroleum  eter,  kloroform  dan  air. Pelarut non kovalen seperti petroleum eter dan air menunjukkan  efisiensi  yang  mirip  dengan  ethanol kecuali  pada  pelarut  air  tidak  ditemukan  adanya kandungan alkaloid pada ekstrak (Komansilan dkk.,
2012)
Selanjutnya  dilakukan  pembuatan  serbuk daun pulai dengan menggunakan metode granulasi basah. Metode ini dilakukan dengan menambahkan bahan  pengikat  dan  pengisi  yaitu  NaCMC  dan Sacarum  Lactis  dan  kemudian  mencetak  adonan granulasi  dengan  menggunakan  mess  No.  11  dan kemudian dikeringkan didalam oven untuk mengu- rangi  jumlah  air  pada  serbuk  daun  pulai  ( Alstonia scholaris ).
Larva Aedes sp. yang digunakan adalah larva instar  III  karena  pada  larva  stadium  ini  memiliki ketahanan yang cukup terhadap lingkungan ekster- nal.  Selain itu, Larva  instar III juga diketahui meru- pakan  stage  larva  yang  paling  sering  dijumpai  di lapangan,  sehingga  diharapkan  dapat  merepresen- tasikan  keadaan  lapangan  yang  sesungguhnya (Komansilan dkk. 2012).
Selanjutnya  dilakukan  pembuatan  serbuk daun pulai dengan menggunakan metode granulasi basah. Metode ini dilakukan dengan menambahkan bahan  pengikat  dan  pengisi  yaitu  NaCMC  dan Sacarum  Lactis  dan  kemudian  mencetak  adonan granulasi  dengan  menggunakan  mess  No.  11  dan kemudian dikeringkan didalam oven untuk mengu- rangi  jumlah  air  pada  serbuk  daun  pulai  (Alstonia scholaris).  Pada  penelitian  ini,  dilakukan  penguku- ran  suhu  dan  pH  serbuk  daun  pulai  pada  wadah sebelum larva dipindahkan.
Hasil pengukuran menunjukkan suhu ekstrak yaitu  27 o C  dan  28 o C  dan  pH  yaitu  7,6-7,8.  Hal  ini masih sesuai  dengan kriteria  rata-rata suhu dan pH yang  cocok  bagi  spesies  larva Aedes  sp. agar  hidup normal.  (Achmadi,  2010).  Larva  masih  tetap  dapat hidup  pada  pH  4-9  dan  pada  suhu  25 o C-27 o C  dan larva  akan  mati  ketika  berada  pada  suhu  di  bawah 10 o C dan diatas 50 o C (Adifian, 2013).
Hasil  uji  hipotesa  korelasi  pearson  membuk- tikan  hipotesa  bahwa  memang  terdapat  hubungan antara  peningkatan  konsentrasi  serbuk  daun  pulai dengan  jumlah  kematian  larva  dengan  didapatkan nilai  0,975.  Angka  ini  menunjukkan  bahwa  adanya hubungan  yang  kuat  dan  nilai  positif  menunjukkan hubungan  antara  peningkatan  konsentrasi  serbuk daun pulai dengan jumlah kematian larva Aedes sp. berbanding  lurus.    Nilai  R  (nilai  koefisien  korelasi) adalah  0,975.  Nilai  ini  dapat  diinterpretasikan  bah- wa  hubungan  peningkatan  konsentrasi  dengan jumlah  kematian  larva  ada  di  kategori  kuat.  Nilai koefisien  determinan  (KD)  diperoleh  adalah  97,5% yang  dapat  ditafsirkan  bahwa  variabel  peningkatan konsentrasi  serbuk  daun  pulai  memiliki  pengaruh kontribusi  sebesar  97,5%  terhadap  variabel  jumlah kematian larva Aedes sp. artinya semakin tinggi kon- sentrasi maka semakin banyak kematian larva Aedes sp. Hasil  nilai  Sig.  0,000  <  0,05  maka  dapat  diinter- pretasikan  bahwa  kita  dapat  menolak  H 0 .  Ada  hub- ungan  linier  antara  peningkatan  konsentrasi  serbuk daun pulai dengan jumlah kematian larva Aedes sp. Adapun hasil persamaan regresi untuk hub- ungan  antara  peningkatan  konsentrasi  terhadap kematian  larva  yaitu  y=0,167+1,100x,  lalu  dengan persamaan  regresi  tersebut  digunakan  untuk  men- cari nilai LC 95 dan LT 95. Lethal  Concentration (LC)  95%  adalah  kon- sentrasi  yang  menyebabkan  kematian  50%  larva  uji sedangkan Lethal Time (LT) 95% adalah waktu perla- kuan  yang  menyebabkan  kematian  95%  larva  uji dianalisis  setalah  36  jam  perlakuan.  Dalam penelitian  ini  estimasi  nilai  LC 95 dan  LT 95 masing- masing sebesar 42.165 atau 42% dan bila dikonversi dengan  satuan part  per  million (ppm)  adalah 126.000  ppm  atau  12,6  g/l  dan  LT 95 sebesar  2.301
menit  atau  38  jam  melalui  uji  analisis  probit. (Haditomo, 2010).
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dil- akukan,  telah  diketahui  bahwa  serbuk  daun  pulai efektif dalam mematikan larva Aedes sp. dan mem- iliki  hubungan  korelasi  yang  kuat  dimana  setiap penambahan  konsentrasi  serbuk  daun  pulai  diikuti dengan  jumlah  kematian  larva.  Hal  ini  disebabkan karena  semakin  tinggi  konsentrasi  yang  digunakan maka  kandungan  saponin,  flavonoid  dan  tanin  se- bagai bahan aktif yang ada pada daun pulai semakin tinggi pula. Penelitian ini sejalan dengan Arivia pada tahun 2018 tentang pemanfaatan ekstrak daun lidah buaya  ( Aloe  vera )  sebagai  larvasida  alami  yang dapat  efektif  mematikan  larva Aede aegypti sama halnya  dengan  daun  lidah  buaya,  daun  pulai  juga banyak mengandung senyawa aktif seperti saponin, flavonoid  dan  tanin.  Saponin  dapat  melakukan gangguan fisik serangga bagian luar (kutikula), yakni mencuci lapisan lilin yang melindungi tubuh serang- ga  dan  menyebabkan  kematian  karena  kehilangan banyak  cairan  tubuh.  Saponin  juga  dapat  masuk melalui organ pernapasan dan menyebabkan mem- bran  sel  rusak  atau  proses  metabolisme  terganggu (Arivia dkk., 2018)
Flavonoid  merupakan  senyawa  pertahanan tumbuhan yang dapat bersifat menghambat saluran pencernaan  serangga  dan  juga  bersifat  toksik  dan Saponin  dapat  menghambat  kerja  enzim  yang  be- rakibat  penurunan  kerja  alat  pencernaan  dan penggunaan  protein  bagi  serangga.    (Arnis  dkk., 2015). Selain itu, flavonoid ini bersifat menghambat makan  serangga  dan  juga  bersifat  toksik.  Flavonoid juga bekerja sebagai inhibitor kuat pernafasan atau sebagai racun pernafasan. (Waskito, 2018).
Tanin  merupakan  polifenol  tanaman  yang larut  dalam  air  dan  dapat  menggumpalkan  protein. Apabila tanin kontak dengan lidah maka reaksi pen- gendapan  protein  ditandai  dengan  rasa  sepat  atau astringen.  Tanin  terdapat  pada  berbagai  tumbuhan berkayu  dan  herba,  berperan  sebagai  pertahanan tumbuhan  dengan  cara  menghalangi  serangga  da- lam  mencerna  makanan.  Tanin  dapat  menurunkan kemampuan  mencerna  makanan  dengan  cara
menurunkan aktivitas  enzim  pencernaan (protease dan  amilase)  serta  mengganggu  aktivitas  protein usus.  Serangga  yang  memakan  tumbuhan  dengan kandungan  tanin  tinggi  akan  memperoleh  sedikit makanan,  akibatnya  akan  terjadi  penurunan  per- tumbuhan.  Respon  jentik  terhadap  senyawa  ini adalah  menurunnya  laju  pertumbuhan  dan gangguan nutrisi (Haditomo, 2010).
Pemanfaatan  senyawa-senyawa  di  atas relatif  aman  bagi  lingkungan,  manusia  dan  hewan ternak  karena  merupakan  bahan  alami  yang  si- fatnya mudah terurai di lingkungan ( Biodegradable ) sehingga  residunya  cepat  menghilang.  Karena  si- fatnya yang mudah terurai, jenis insektisida ini tid- ak akan cepat menimbulkan resistensi. (Musdalifah, 2016).
Secara  umum  fungsi  dan  efektivitas  insek- tisida berbanding lurus yang artinya semakin tinggi dosis/konsentrasi  insektisida  maka  semakin  tinggi pula  peluang  dalam  mengendalikan  larva.  Mes- kipun  belum  ada  penelitian  yang  secara  langsung meneliti  dan  menjelaskan  dampak  penggunaan insektisida  hayati  terhadap  kesehatan  manusia, namun  pengaplikasian  di  lingkungan  harus  tetap bijak  dan  terkendali,  karena  semua  bahan  kimia baik sintetik maupun nabati pasti akan memberikan pengaruh  terutama  bagi  kesehatan  manusia,  na- mun  keunggulan  dari  insektisida  hayati  daripada insektisida  sintetik  dari  segi  keamanan  dan kesehatan  adalah  insektisida  hayati  mudah  terurai di  alam,  sehingga  meskipun  dosis  yang  digunakan tinggi, maka akan tetap bisa  terurai di alam, selain itu  senyawa  insektisida  ini  juga  tidak  akan menganggu  organisme  lain  yang  bukan  sasaran. sedangkan  sifat  insektisida  sintetik  adalah  tidak bisa terurai di alam sehingga akan mencemari ling- kungan  dan  mempengaruhi  organisme  lain. (Musdalifah, 2016).
Sehingga  dengan  mengetahui  dampak  yang ditimbulkan  dari  penggunaan  insektisida,  untuk saat  ini,  penggunaan  insektisida  hayati  merupakan suatu  alternatif  pengendalian  serangga  rumah tangga  secara  aman,  dan  membantu  meminimal- kan  risiko  lingkungan.  Jadi  penelitian  dan  pen-
gaplikasian  insektisida  hayati  di  masyarakat  harus tetap  dikembangkan  terutama  insektisida  rumah tangga karena di Indonesia penggunaan insektisida hayati  lebih  populer  di  bidang  pertanian. (Musdalifah, 2016).
Larvasida yang terbuat dari bahan alami dan efektif  membunuh  jentik  atau  larva Aedes  sp. se- hingga  masyarakat  bisa  menghindari  perkem- bangan  jentik  dan  nyamuk Aedes  sp. yang  dapat menyebabkan Demam Berdarah Dengue (DBD).

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  dilakukan dengan memanfaatkan serbuk daun pulai ( Alstonia scholaris) untuk mematikan larva Aedes sp. Instar III dapat  diambil  kesimpulan  bahwa  ada  pengaruh ekstrak  serbuk  daun  pulai  ( Alstonia scholaris)  ter- hadap  jumlah  kematian  larva  nyamuk Aedes  sp.
Instar  III.  Ada  hubungan  antara  peningkatan  kon- sentrasi  ekstrak  serbuk  daun  pulai  ( Alstonia  schol- aris) dengan jumlah kematian larva Aedes sp. Instar III.  Peningkatan  konsentrasi  ekstrak  serbuk  daun pulai  menyebabkan  peningkatan  presentase  ke- matian  larva Aedes  sp. Instar  III.  Estimasi  nilai  LC 95 dan  LT 95 masing-masing  sebesar  42.165  dan  2.301 melalui  uji  analisis  probit.  Estimasi  nilai  ini  dapat diinterpretasikan  dengan  LC 95 yaitu  konsentrasi untuk membunuh larva uji sebanyak 95% yaitu 42% bila  dikonversi  dengan  satuan part  per  million (ppm) adalah 126.000 ppm dan nilai LT 95 menunjuk- kan  angka  2.301  artinya  waktu  yang  dibutuhkan untuk  membunuh  95%  larva  uji  yaitu  2.301  menit. Perlu  dilakukan  pengujian  lebih  lanjut  terhadap serbuk  daun pulai untuk  melihat tingkat efektifitas dilapangan  dan  tingkat  partisipasi  masyarakat  da- lam  menggunakan  larvasida  alami  dari  daun  pulai sehingga  dapat  menjadi  sebuah  produk  larvasida alami.

## Daftar Pustaka
Achmadi,  U.  F.  .  (2010). Manajemen  Penyakit  Ber- basis Wilayah. UI Press.
Adifian.  (2013). Kemampuan  Adaptasi  Nyamuk  Ae- des  aegypti  dan  Aedes  albopictus  dalam Berkembang Baik Berdasarkan Jenis Air . Uni- versitas Hasanuddin.
Arivia,  S.,  Kurniawan,  B.,  &  Zuraida,  R.  (2018).  Efek Larvasida  Ekstrak  Daun  Lidah  Buaya  (  Aloe vera ) Terhadap Larva Aedes aegypti Instar III.
MAJORITY  (Medical  Journal  of  Lampung  Uni- versity) , 137–146.
Arnis, S., Susilawaty, A., & Azriful. (2015). Efektivitas Larvasida  Ekstrak  Kulit  Pisang  Raja  (  Musa paradisiaca var . Raja ) Terhadap Larva Aedes sp. Instar III. Higiene , 2 , 67–73.
Azwanida,  N.  .  (2015).  A  Review  on  the  Extraction Methods  Use  in  Medicinal  Plants,  Principle,
Strength  and  Limitation.  s,  4,  196. Medicinal and Aromatic Plants , 4 , 16.
Dinas  Kesehatan  Kabupaten  Gowa.  (2017). Profil Kesehatan Kabupaten Gowa Tahun 2016 .
Haditomo,  I.  (2010). Efek  Larvasida  Ekstrak  Daun
Cengkeh  (Syzygium  aromaticum  L.)  terhadap Aedes  aegypti  L .  Universitas  Sebelas  Maret Surakarta.
Jatin, M. V. (2013). Medline Plus .
Katsir,  I.  (2004). Tafsir  Ibnu  Katsir  Jilid  3 (Vol.  3). Pustaka Imam AsySyafi’i.
Kementerian  Agama  RI.  (2014). Al - Qur’an  Terjema- han dan Tajwid . Sygma Kementerian.
Kementerian  Kesehatan  RI.  (2010).  Buletin  Jendela Epidemiologi.  In Pusat  Data  dan  Surveilans Epidemiologi:  Vol.  Volume  2 .  Kementerian Kesehatan RI.
Komansilan,  A.,  Abadi,  A.,  Yanuwiadi,  &  Kaligis,  D.
(2012).  .  .  Isolation  and  identification  of  bio- larvacide  from  sousop  (Annona  muricata Linn)  seed  to  mosquito  (Aedes  aegypti)  lar- vae. IJENS . International Journal of Engineer- ingi & Technology IJET , Vol. 12 (03), 28–32.
Musdalifah. (2016). Uji Efektivitas Ekstrak Kulit Buah Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) sebagai Insek- tisida  Hayati  terhadap  Nyamuk  Aedes  ae- gypti . UIN Alauddin Makassar.
Nirma, Susilawaty, A., Ibrahim, H., & Amansyah, M. (2015).  Efektivitas  Larvasida  Ekstrak  Kulit Buah  Jeruk  Nipis  (Citrus  aurantifolia)  dalam Membunuh  Jentik  Nyamuk  Aedes  sp  (  Studi di  Daerah  Epidemi  DBD  di  Wilayah  Kerja Puskesmas  Antang  Kecamatan  Manggala).
Higiene , Volume 3 (2), 87–96.
Pusat  Data  dan  Informasi  Kemenkes  RI.  (2016). Situasi DBD . InfoDatin.
Shihab, M. Q. (2012). Tafsir Al - Misbah . Lentera Hati.
Vongsak,  B.,  Sithisarn,  P.,  &  Mangmool,  S.  (2013). Maximizing  total  phenolics  ,  total  flavonoids contents  and  antioxidant  activity  of  Moringa oleifera  Leaf  extract  by  the  appropriate  ex- traction method Maximizing total phenolics , total  flavonoids  contents  and  antioxidant activity of Moringa oleifera leaf extract by the appropriate  extraction  method. Industrial Crops  &  Products , 44 (January),  566–571. https://doi.org/10.1016/
j.indcrop.2012.09.021
Waskito,  P.  E.,  &  Cahyati,  W.  H.  (2018).  Efektivitas Granul  Daun  Salam  (Eugenia  polyantha Wight)  sebagai  Larvasida  Nyamuk  Aedes  ae- gypti. Spirakel , 10 (1), 12–20.
Widiarti, Heriyanto, B., Tri Boewono, D., Widyastuti, U., Mujiono, Lasmiati, & Yuliadi. (2011). Peta Resistensi  Vektor  Demam  Berdarah  Dengue Aedes aegypti terhadap Insektisida Kelompok Organofosfat,  Karbamat,  dan  Pyrethroid  di Provinsi  Jawa  Tengah  dan  Daerah  Istimewa Yogyakarta.  In Balai  Besar  Penelitian  dan Pengembangan  Vektor  dan  Reservoir  Penya- kit Salatiga .
Zuraida, Sulistiyani, Sajithi, D., & Herawati, I. (2017).
Fenol,  Flavonoid  dan  Aktivitas  Antioksidan pada  Ekstrak  Kulit  Batang  Pulai  (Alstonia scholaris  R.Br)  (Phenolics,  Flavonoids,  and Antioxidant Activity of Alstonia scholaris R.Br Stem  Bark  Extract). Jurnal  Penelitian  Hasil Hutan , Volume  35 (No.  3),  211–219.  https:// doi.org/10.20886/jphh.2017.35.3.211-219 62 HIG IENE
VOLUM E  8,   NO.   1,  JAN UARI -AP RI L  2022