BIOSYNTHESIS OF SILVER NANOPARTICLES USING KETAPANG LEAF EXTRACT, MODIFICATION WITH p- COUMARIC ACID FOR DETECTING MELAMINE
Biosintesis Nanopartikel Perak menggunakan Ekstrak Daun Ketapang, Modifikasi dengan Asam p- kumarat untuk Aplikasi Deteksi Melamin
Andi Rusnaenah * , Muhammad Zakir, Prastawa Budi
Department of Chemistry, Faculty of Science, University of Hasanuddin Jl. Perintis Kemerdekaan 90245, Makassar-Indonesia
*Corresponding author, email: andiena.chem@gmail.com
Received: Nov.2016 Published: Jan. 2017

## ABSTRACT
Biosynthesis of silver nanoparticles (AgNPs) using ketapang leaf extract, modification with p- coumaric acid for detecting  melamine  has  conducted.  This  research  aimed  to  synthesize  AgNPs  via  bio-reduction  method  using ketapang  leaf  extract  followed  by  modification  with p -coumaric  acid  (APK),  and  evaluating  its  application detecting  melamine.  The  AgNPs  were  characterized  through  ultraviolet-visible  absorption  spectroscopy  (UV- Vis)  and  X-ray  diffraction  (XRD).  Observation  suggested  that  an  increase  of  incubation  time  had  affected  its surface Plasmon resonance trend. Further analysis of crystallite via XRD suggested that nanoparticle size at  43 nm  estimated  using  Debye-Scherer,  within  the  form  of  unit  cells  is  cubic.  The  performance  of  product  as melamine detector suggested that the AgNPs-APK had detected melamine in range of concentration from 0.1 to 1000 ppm.
Keywords : Silver nanoparticles, ketapang, p-coumaric acid, melamine

## PENDAHULUAN
Melamin  banyak  menarik  perhatian  sejak terjadinya  kasus  gagal  ginjal  dan  kematian  pada hewan  kucing  dan  anjing  di  Amerika  Serikat  di awal  tahun  2007.  Pada  tahun  2008,  kasus merebaknya  susu  formula  tercemar  melamin menyebabkan  penyakit  batu  ginjal  pada  ribuan bayi  di  Cina  (Wu  dkk.,  2011;  Song  dkk.,  2014). Kasus yang terjadi di Indonesia pada tahun yang sama,  susu  dan  produk  makanan  berbasis  susu buatan  Cina  beredar  luas,  beberapa  merek  susu impor  asal  cina  ini  dinyatakan  mengandung melamin antara 8.51 mg/kg (ppm) sampai 945.86 mg/kg (Rachmawati dan Widiyanti, 2013).
Melamin (1,3,5-triazina-2,4,6-triamin) adalah  suatu  basa  organik  dan  trimer  dari sianamida.  Melamin  merupakan  bahan  kimia industri  yang  digunakan  secara  luas  dalam pembuatan  resin,  karena  sifatnya  tahan  api,  dan memiliki  beberapa  kegunaan  lainnya  dalam industri, diantaranya digunakan bersama formaldehida  untuk  memproduksi  resin,  plastik, dan  laminasi  (Liang  dkk.,  2011;  Chen  dkk., 2015).  Melamin  mengandung  66%  nitrogen  dari
total  massanya,  sehingga  beberapa  kasus dilaporkan bahwa melamin secara ilegal ditambahkan  ke  dalam  produk  susu  dan makanan.  Penambahan  melamin  ke  dalam produk  susu  dan  makanan  meningkatkan kandungan  nitrogen  produk  tersebut  sehingga ketika  produk  diidentifikasi  dengan  uji  protein standar  seperti  metode  Kjeldahl,  seolah-olah produk  mempunyai  kandungan  protein  yang tinggi (Liang dkk., 2011; Kumar dkk., 2016).
Beberapa  metode  seperti  kromatografi gas/spektrofotometer massa (GC/MS), kromatografi cair/spektrofotometer massa (LC/MS),  dan  elektroforesis  kapiler  telah dikembangkan  dan  digunakan  untuk  mendeteksi kandungan  melamin.  Meskipun  masing-masing metode  ini  memiliki  sensitivitas  tinggi,  namun membutuhkan waktu yang lama, dan insrumentasi  yang  relatif  mahal  (Kumar  dkk., 2016). Dengan demikian, diperlukan pengembangan  metode  analisis  sederhana,  cepat dan  sensitif  untuk  memudahkan  mendeteksi melamin.
Nanopartikel  perak  (AgNPs)  merupakan salah  satu  nanopartikel  logam  yang  dapat
Andi Rusnaenah , dkk / Ind. J. Chem. Res. , 2017, 4(2), 367-372
digunakan untuk mendeteksi keberadaan melamin . Beberapa  penelitian  menggunakan AgNPs  yang  dimodifikasi  dengan  senyawa organik untuk mendeteksi melamin,  diantaranya p- nitroanilin dengan limit deteksi 7,9 x 10 -7 mL -1 (Han  dan  Li,  2010),  dopamin-AgNPs  dengan limit  deteksi  7,9  x  10 -8 mL -1 (Ma  dkk.,  2011), sitrat-AgNPs dengan limit deteksi 8,0 x 10 -11 mL - 1 (Wang  dkk.,  2012),  sitrat-AgNPs  dengan  limit deteksi  2,3  x  10 -6 mL -1 (Ping,  dkk.,  2012),  α- siklodextrin-AgNPs dengan limit deteksi  3 x  10 - 3 mgL -1 mL -1 (Ma dkk., 2013), asam kromotropik- AgNPs  dengan  limit  deteksi  3,6  x  10 -8 mL -1 (Song dkk., 2014).
Ketapang  merupakan  salah  satu  tumbuhan yang  berpotensi  digunakan  sebagai  bioreduktor dalam  mensisntesis  AgNPs.Tumbuhan  ketapang merupakan  sumber  daya  alam  terbarukan. Ketapang  termasuk  jenis  tumbuhan  tepi  pantai yang  tumbuh    alami    pada  pantai  berpasir  atau berbatu,  mampu  bertahan  pada  daerah  tropis (Chu,  dkk.,  2007),  dapat  tumbuh  di  tanah  yang kurang  nutrisi,  dan  tersebar  hampir  diseluruh wilayah  Indonesia  sehingga  mudah  untuk dibudidayakan  (Riskitavani  dan  Purwani,  2013). Lembang  (2013)  melaporkan  bahwa  senyawa fenolik  dalam  ekstrak  daun  ketapang  dapat mereduksi Ag + menjadi Ag o .
Modifikasi  permukaan  nanopartikel  perak, umumnya  menggunakan  polimer,  surfaktan  atau ligan  yang  sesuai.  Penggunaan  senyawa  organik sebagai  ligan  dalam  modifikasi  nanopartikel untuk  deteksi  melamin  menunjukkan  tingkat deteksi  yang  relatif  lebih  sensitif.  Penelitian Huang,  dkk.,  (2011),  melaporkan  perbandingan AgNPs  termodifikasi  dan  tidak  termodifikasi menghasilkan  nilai  deteksi  melamin  masing- masing  sebesar  46.5  nM  dan  41.7  nM.  Adanya ligan pada permukaan nanopartikel memungkinkan terjadi interaksi dengan melamin.  Interaksi  seperti  interaksi  donor- akseptor  (Han  dan  Li,  2010),  ikatan  hidrogen (Jean,  dkk.,  2010),  dan  secara  elektrostatik (Ma, dkk., 2011) antara nanopartikel termodifikasi  dengan  melamin  (Huang  dkk., 2011; Song dkk., 1014).
Modifikasi AgNPs hasil bioreduksi menggunakan  ekstrak  daun  ketapang  perlu dilakukan  untuk  meningkatkan  selektivitas AgNPs  terhadap  deteksi    melamin  secara kolorimetri  (Huang,  dkk ., 2011).  Salah  satu senyawa  yang  berpotensi  digunakan  untuk
modifikasi  adalah  senyawa  asam p -kumarat (C 9 H 8 O 3 ).  Senyawa  C 9 H 8 O 3 memiliki  gugus karbonil,  hidroksil  dan  α-hidroksi  fenol  yang berpotensi  berinteraksi  dengan  AgNPs  dan melamin.
Penelitian Song , dkk. (2014) melaporkan bahwa modifikasi asam kromatropik pada permukaan  AgNPs melalui  gugus hidroksil yang  menandai  keberhasilan  modifikasi  AgNPs. Oleh  karena  itu,  penelitian  sintesis  AgNPs menggunakan  ekstrak  daun  ketapang  serta modifikasi  material  AgNP  dengan  asam p - kumarat  telah  dilakukan  dan  digunakan  dalam deteksi melamin secara kolorimetri.

## METODOLOGI
Bahan
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  ekstrak  daun  ketapang  (Terminalia catappa),  AgNO 3 (Merck,  99,8%),  asam p- kumarat  (Merck,  99%),  metanol,    melamin,  dan akuabides.

## Alat
Alat  yang  diperlukan  dalam  penelitian  ini adalah alat gelas yang umum dalam laboratorium,  oven  (Gen  Lab),  neraca  analitik (OHAUS), spektrofotometer UV-Vis (UV-2600), X-ray  diffraction (Shimadzu  7000),  pH  meter, botol semprot, dan sendok tanduk.

## Prosedur Kerja
Ekstrak  sampel  (0,25  g/mL)  sebanyak  0,2 mL  ditambahkan  ke  dalam  50  mL  larutan AgNO 3 1  mM  pada  suhu  30 o C.  Koloid  AgNPs disentrifuse  pada  kecepatan  10.000  rpm  selama 30  menit.  Endapan  AgNPs  dikarakterisasi menggunakan FTIR, dan XRD. Modifikasi APK- AgNPs  dibuat  dengan  menambahkan  0,2  mL ekstrak sampel ke dalam 50 mL larutan AgNO 3 1 mM.  Setelah  itu,  ditambahankan  2  mL  asam p -kumarat 1 mM.
Analisis  UV-Vis  terhadap  koloid  AgNPs dilakukan  pada  suhu  ruang  menggunakan spektrofotometer  UV-2600  (Shimadzu)  pada resolusi  0.5  nm.  Ekstrak  sebelum  dan  larutan hasil setelah reaksi dikeringkan pada suhu 60  C, dan  biomassa  kering  dianalisis  menggunakan spektrofotometer  FTIR  (IRPrestige-21).  Koloid AgNPs hasil sintesis disentrifuse pada kecepatan 10,000  rpm  selama  30  menit.  Hasil  sentrifuse berupa  padatan  dikumpulkan  dan  dikeringkan pada  suhu  60  C  untuk  analisis  XRD.  Analisis
XRD  dilakukan  menggunakan  difraktometer XRD  Rigaku  MiniFlex  pada  arus  40  mA  dan beda potensial 45 kV dengan radiasi CuKα untuk mengonfirmasi bentuk kristal nanopartikel perak.
Analisis melamin dilakukan dengan menambahkan  koloid  APK-AgNP  pada  masing- masing  larutan  melamin  konsentrasi  0.1,  1,  10, 100, dan 1000 ppm. Selanjutnya, masing-masing campuran diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Sintesis Nanopartikel Perak
Pertumbuhan  Nanopartikel  perak  (AgNPs) diamati  menggunakan  spektrofotometer  UV-Vis berdasarkan  pita  serapan Surface  Plasmon Resonance (SPR). Pita SPR merupakan kumpulan  osilasi  terhadap  elektron  konduksi (wiley, dkk ., 2006).
Spektroskopi  UV-Vis  dapat  digunakan untuk  mengamati  pertumbuhan  nanopartikel
perak. Pada Gambar 1a, menunjukkan perubahan pola  intesitas  serapan  SPR  selama  waktu  reaksi. Puncak  SPR  yang  khas  sekitar  430  nm  sesuai untuk  karakter  SPR  AgNP  (Zakir,  dkk.,  2014). Nilai  SPR  ini  relatif  seperti  yang  dilaporkan Rajakannu,  dkk.  (2015)  yang  menunjukkan  nilai serapan  SPR  AgNP  pada  430  nm.  Adanya kumpulan  osilasi  elektron  pada  permukaan logam  menyebabkan  eksitasi  getaran  Plasmon
permukaan  nanopartikel  perak  sehingga  pita serapan  SPR  akan  muncul  pada  daerah  sekitar 430  nm  yang  berhubungan  dengan  frekuensi getaran  Plasmon  (Willets,  2007).  Kumpulan oskilasi  elektron  dapat  diamati  dari  perubahan warna  larutan  dari  kuning  menjadi  coklat  gelap (Gambar  1b)  mengindikasikan  adanya  sebaran partikel AgNPs dalam larutan.

## Analisis Fasa Kristal menggunakan XRD
Untuk  mengonfirmasi  fasa  kristal  AgNP dilakukan analisis pola X-ray diffraction (XRD). Karakteristik  puncak  yang  diamati  pada  pola XRD  terhadap  nanopartikel  yang  dihasilkan melalui  reduksi  AgNO 3 1  mM  menggunakan ekstrak  daun  ketapang  0.25  g/mL  pada  suhu  30  C  mengonfirmasi  adanya  nanopartikel  perak (Gambar  2).  Puncak  difraksi  pada  sudut  37.73  , 44.03  , dan 64.37  masing-masing sesuai dengan bidang  (111),  (200),  dan  (202)  perak.  Pola difraksi  dengan  indeks  miller  (111)  sesuai dengan  sistem  kristal  kubik  AgNP  (Zakir,  dkk.
2014). Puncak yang relatif tajam pada pola XRD (111) mengindikasi fasa kristal AgNP. Perkiraan ukuran  partikel  perak  dapat  dihitung  dari persamaan Debye-Scherer (Ahmad,  dkk ., 2010) dengan  menentukan  lebar  terhadap  indeks refleksi  Bragg  (111).  Berdasarkan  perhitungan menggunakan  persamaan  tersebut  diperoleh estimasi ukuran partikel sebesar 43,33 nm.
Gambar 1 Spektra UV-Vis AgNPs (a) hasil reduksi [AgNO 3 ] 1 mM dengan ekstrak daun ketapang 0,25 g/mL, (b) Perubahan warna koloid AgNPs setelah waktu reaksi 54 jam.
0 200 400 600 800 1000 10 30 50 70 in te n si ta s (c p s) 2 theta (202) (200) (111) Gambar 4 Pola XRD AgNPs 0 1 2 3 4 300 400 500 600 700 800 A b so rb a n si Panjang Gelombang (nm) APK-AgNPs AgNPs Gambar 3 Pola SPR AgNPs dan APK-AgNPs 0 0.5 1.0 1.5 2.0 300 400 500 600 700 800 A bs or ba ns i a AgNPs + APK + melamin 0.1 ppm AgNPs + APK + melamin 1 ppm AgNPs + APK + melamin 10 ppm AgNPs + APK + melamin 100 ppm AgNPs + APK + melamin 1000 ppm AgNPs + APK
Panjang Gelombang (nm)
Gambar 2 Pola SPR AgNPs dan APK-AgNPs
Andi Rusnaenah , dkk / Ind. J. Chem. Res. , 2017, 4(2), 367-372
Modifikasi AgNPs dengan asam p -kumarat Modifikasi AgNPs dilakukan dengan menggunakan  larutan  asam p- kumarat  (APK). Pemilihan  senyawa  APK  didasarkan  pada  gugus fungsi  karbonil,  hidroksil,  dan  hidroksi  fenol yang  berpotensi  berinteraksi  dengan  AgNPs  dan melamin.  Larutan  APK  1  mM  dengan  volume  1 mL  ditambahkan  ke  dalam  larutan  AgNP  hasil sintesis dengan  waktu pengadukan selama 2 jam (Song,  dkk ., 2014).  Pengukuran  nilai  SPR dilakukan  setelah  waktu  ke-54  jam  untuk memonitor  pertumbuhan  AgNPs  berdasarkan modifikasi dengan APK (Gambar 3).
Perbandingan  nilai  serapan  SPR  AgNPs  dan
APK-AgNPs  menunjukkan  adanya  penurunan
intesitas  serapan  dari  3,492;  =431  nm  menjadi 1,795;  =428  nm.  Adanya  senyawa  APK  yang berperan  sebagai  ligan  menyebabkan  terjadi penurunan  intesitas  serapan  SPR  sebelum  dan setelah modifikasi (Ma, dkk, 2011).
Aplikasi APK-AgNP dalam mendeteksi melamin
Interaksi cahaya dengan nanopartikel logam memberikan  suatu  hal  yang  menarik.  Salah  satu aplikasi  dari  interaksi  ini  digunakan  untuk aplikasi deteksi secara kimia dan biologi. Prinsip deteksi  ini  didasarkan  pada  cahaya  yang dilokasilasi,  dimanipulasi  dan  dikuatkan  dalam skala  nanometer  melalui  eksitasi  kumpulan osilasi  elektron  dalam  nanopartikel  logam  yang dikenal  dengan localized  surface  Plasmon resonance (LSPR).
Pengujian  terhadap  deteksi  melamin  oleh APK-AgNPs  dilakukan  melalui  penambahan melamin  ke  dalam  koloid  nanopartikel  dan mengamati  puncak  serapan  terhadap  perubahan warna sistem (Wu, dkk., 2011). Melamin dengan konsentrasi  0.1;  1;  10;  100;  1000  ppm,  masing- masing  ditambahkan  ke  dalam  APK-AgNPs  dan diukur  dengan  spektrofotometer  UV-Vis  pada daerah  300–800  nm.  Pendeteksian  melamin ditandai  dengan  menurunnya  serapan  SPR terhadap APK-AgNP setelah ditambahkan melamin  berbagai  konsentrasi  (Gambar  4)  yang ditandai  dengan  perubahan  warna  dari  kuning muda  menjadi  kuning  kecoklatan.  Hal  ini  dapat disebabkan  oleh  agregasi  yang  terjadi  pada nanopartikel  seletah  ditambahkan  suatu  analit seperti melamin  (Shang, dkk., 2013; Song, dkk., 2014; Ma, dkk., 2011).

## KESIMPULAN
Nanopartikel perak dapat disintesis menggunakan  ekstrak  kulit  buah  manggis  dan dapat  dimodifikasi  dengan  asam p- kumarat. Waktu  inkubasi  berpengaruh  terhadap  hasil sintesis  nanopartikel  perak.  Ukuran  nanopartikel perak  yang  dihasilkan  berdasarkan  estimasi perhitungan  dengan  persamaan Debye-Scherer adalah  43,33  nm  dengan  bentuk  kubik.  Serapan SPR  nanopartikel  perak  berada  pada  daerah  430 nm.  Nanopartikel  perak  hasil  modifikasi  dengan asam p- kumarat  memiliki  sensitifitas  terhadap melamin konsentrasi 0.1–1000 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmad,  N.,  Sharma,  S.,  Alam,  Md.K.,  Singh, V.N.,  Shamsi,  S.F.,  Mehta,  B.R.,  dan  Fatma, A. 2010. Rapid Synthesis of Silver Nanoparticle  using  Dried  Medicinal  Plant  of Basil. Colloids  Surf.  B.  Biointerfaces. 81: 81-86.
Chen, N., Cheng, Y., Li, C., Zhang, C., Zhao, K. dan Xian, Y. 2015.Determination of Melamine in Food Contact Materials using an Electrode  Modified  with  Gold  Nanoparticles and  Reduced  Graphene  Oxide. Microchim . Acta . 182: 1967-1975.
Han, C.P. dan Li, H.B. 2010. Visual Detection of Melamine in Infant Formula at 0.1 ppm Level Based  on  Silver  Nanoparticles. Analyst .135: 583-588.
Huang,  H.,  Li,  L.,  Zhou,  G.,  Liu,  Z.,  Feng,  Y., Zeng,  G.,  Tinnefeld,  P.,  Ma,  Q.  dan  He,  Z. 2011a.Visual  detection  of  melamine  in  milk samples  based  on  label-free  and  labeled  gold nanoparticles. Talanta. 85: 1013-1019.
Jean,  R.D.,  Chiu,  K.C.,  Chen,  T.H.,  Chen,  C.H. dan  Liu,  D.M.  2010.  Functionalized  Silica Nanoparticles by Nanometallic Ag Decoration  for  Optical  Sensing  of  Organic Molecule. J . Phys.  Chem.  C. 114:  15633-
15639.
Kumar, N., Harish, K., Bimlesh, M., dan Raman,
S.,  2016,  Colorimetric  Determination  Of Melamine  In  Milk  Using  Unmodified  Silver Nanoparticles, Spectrochim.  Acta,  Part  A: Molecular  and  Biomolecular  Spectroscopy , 156, 89-97.
Lembang,  E.  Y.,  Maming,  Zakir,  M.,  2013, Sintesis  Nanopartikel  Perak  dengan  Metode Reduksi  Menggunakan  Bioreduktor  Ekstrak
Andi Rusnaenah , dkk / Ind. J. Chem. Res. , 2017, 4(2), 367-372
Daun Ketapang (Terminalia catappa) , Repository, Universitas Hasanuddin, Makassar. Liang, X.,  Wei, H., Cui, Z., Deng, J., Zhang, Z., You,  X.  dan  Zhang,  X.E.  2011.  Colorimetric Detection  of  Melamine  in  Complex  Matrices
Based on Cysteamine-Modified Gold Nanoparticles. Analyst . 136: 179-183. Ma,  P.,  Liang,  F.,  Sun,  Y.,  Jin,  Y.,  Chen,  Y., Wang,  X.,  Zhang,  H.,  Gao,  D.,  Song,  D. 2013.  Rapid  determination  of  melamine  in milk  and  milk  powder  by  surface-enhanced Raman  spectroscopy  and  using  cyclodextrin- decorated  silver  nanoparticles. Microchim.
Acta . 180:1173–1180
Ma, Y.R., Niu, H.Y., Zhang, X.L. dan Cai, Y.Q. 2011. One-step  Synthesis  of  Silver/dopamine Nanoparticles  and  Visual  Detection  of Melamine  in  Raw  Milk. Analyst .  136:  4192- 4196.
Ping, H., Zhang, M.W., Li, H.K., Li, S.G., Chen, Q.S., Sun, C.Y. dan Zhang, T.H. 2012. Visual Detection  of  Melamine  in  Raw  Milk  by
Label-free Silver Nanoparticles. Food
Control . 23: 191-197.
Rachmawati  dan  Widiyanti,  2013,  Kadar Melamin  pada  Produk  Berbahan  Susu  dan Susu  Bubuk  yang  Dianalisis  Secara  Liquid Chromatography  Mass  Spectrometry  (LC- MS). JITV . 18 (1):63-69
Rajakannu,  S.,  Shankar,  S.,  Perumal,  S., Subramanian,  S.,  dan  Dhakshinamoorthy, G.P. 2015. Biosynthesis of Silver Nanoparticles  using Garcinia  mangostana
Fruit Extract and their Antibacterial, Antioxidant  Activity, Int.  J.  Curr  .Microbiol. App. Sci. 4(1), 944-952.
Riskitavani,  D.V.  dan  Purwani,  K.I.  2013.Studi Potensi  Bioherbisida  Ekstrak  Daun  Ketapang (Terminalia catappa) terhadap Gulma Rumput Teki  (Cyperus  rotundus). J.  Sains  &  Seni
Pomits . 2(2): 2337-3520.
Shang,  Y.,  Gao,  D.,  Wu,  F.  dan  Wan,  X.  2013. Silver Nanoparticle Capped with 8- hydroxyquinoline-5-sulfonate for the
Determination  of  Trace  Aluminium  in  Water Samples  and  for  Intracellular  Fluorescence Imaging. Microchim. Acta. 180: 1317-1324. Song,  J.,  Wu,  F.,  Wan,  Y.  dan  Ma,  L.H.  2014.
Visual  Test  for  Melamine  using  Silver Nanoparticles  Modified  with  Chromotropic Acid. Microchim. Acta . 181: 1267-1274.
Wang, W.N., Tarafdar, J.C. dan Biswar, P. 2013.
Nanoparticle  Synthesis  and  Delivery  by  an Aerosol  Route  for  Watermelon  Plant  Foliar Uptake. J. Nanopart. Res. 15(1417): 1-13.. Wiley,  B.J.,  Im,  S.H.,  Li,  Z.Y.,  McLellan,  J., Siekkinen, A. dan Xia, Y. 2006. Maneuvering the  Surface  Plasmon  Resonance  of  Silver Nanostructure through Shape-Controlled
Synthesis. J.  Phys.  Chem.  B. 110:  15666- 15675.
Willets,  K.A.,  Hall,  W.P.,  Sherry,  L.J.,  Zhang, X.,  Zhao,  J.  dan  Duyne,  R.P.V.  2007.
Nanoscsale Localized Surface Plasmon Resonance  Biosensors. Nanobiotech.  II .  159- 173.
Wu, Z., Zhao, H., Xue, Y., Cao, Q., Yang, J., He, Y.,  Li,  X.,  dan  Yuan,  Z.,  2011,  Colorimetric Detection  of  Melamine  during  the  Formation of  Gold  Nanoparticles, Biosens.  Bioelectron.,
26: 2574-2578.
Zakir,  M.,  Maming,  Lembang,  E.Y.  dan Lembang,  M.S.  2014.Synthesis  of  Silver  and Gold Nanoparticles through Reduction Method  using  Bioreductor  of  Leaf  Extract  of Ketapang ( Terminalia catappa ). Int. Con. Adv. Mater. & Prac.Nanotech . Jakarta.