Jurnal Lahan Suboptimal ISSN: 2252-6188 (Print), ISSN: 2302-3015 (Online, www.jlsuboptimal.unsri.ac.id) Vol. 5, No.1: 35-42, April 2016
Produktivitas Feminimisasi  Larva Ikan Betok ( Anabas testudineus ) Menggunakan Ekstrak Buah-buahan dengan Metode Dipping
Productivy of Feminization of Anabas testudineus Larvae Used Fruits Extract by Dipping Method
Helmizuryani, Boby Muslimin, Khusnul Khotimah Dosen Tetap Budidaya Perairan Fakultas Pertanian Universitas Muhammadiyah Palembang Hp: 081377842150, email: helmizuryani@gmail.com

## ABSTRACT
Anabas testudineus is one of indigenous fish in Indonesia spread on swamp and river, need attention because the population endangered and higher people consumption. This research aims  to  identification  fruits  extract  function  toward  larvae  feminization.  It  has  dipping together with larvae for 10 hours, which doze 3 ml/l by different fruits extract.The larvae was  7  days  old.  After  dipping,  it  has  rearing  on  aquarium  during  90  days  became  seed stage which observation sex ratio and seed growth.  This research was conduct on hatchery at  Community  Unit  “Mulia”  Plaju,  Palembang  and  Chemical  Laboratory,  University  of Muhammadiyah  Palembang  from  Februari  until  April  2016.  Larvae  was  got  from broodstock  reproduction  at  hatchery.  Experiment  method  used  completely  ramdomized design and three treatment of different fruits extract, and three repetation.The treatment are P1:  the  avocado  extract,  P2:  the  bengkoang  extract,  and  P3:  date  palm  extract.  The experiment showed the higher survival rate was P2 (64,44%), the higher length growth was P1 (3,11 mm), the highest weigth growth  was  P1 (1,03 gr). The best sex ratio for female was P1 (74.07%).The best sex ratio for male was P2 (48,12%).
Keywords: Productvity,Anabas tesdudineus, Feminization,Fruits extracrt, Dipping

## ABSTRAK
Ikan betok ( Anabas testudineus ) merupakan salah satu spesies indigenous indonesia  yang tersebar di rawa dan sungai di Indonesia, saat ini sudah mulai langka dan terancam punah, kebutuhan  akan  ikan  betok  di  Sumatera  selatan  semakin  meningkat,  dari  hasil  penelitian sebelumnya didapatkan  pertumbuhan ikan betok betina lebih  cepat  dari jantan. Penelitian ini  bertujuan  untuk  mengetahui  fungsi  ekstrak  buah-buahan  terhadap  pembetinaan  larva ikan betok.  Larva ikan betok direndam dalam ekstrak buah-buahan   yang berbeda selama 10  jam  dengan  dosis  3  ml/l.  Adapun  umur  larva  ikan  betok  yang  digunakan  untuk penelitian  ini  adalah  umur  7  hari  .  Setelah  proses  dipping,  larva  akan  dipelihara  dalam akuarium  selama  90  hari  sampai  menjadi  benih  dengan  memperhatikan  sex  ratio  dan tingkat  pertumbuhan benih ikan betok.  Penelitian ini dilakukan di  Mini Hatchery di  UPR Mulia, Plaju, Palembang dari bulan Februari  sampai bulan April 2016. Larva ikan berasal dari  hasil  pemijahan  Laboratorium  basah  Fakultas  Pertanian  universitas  Muhammadiyah Palembang. Penelitian ini dilakukan dengan cara eksperimen dengan menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL) dan perlakuan perendaman dengan ekstrak buah-buahan berbeda,  masing-masing  perlakuan  diulang  sebanyak  tiga  kali.  Perlakuanya  adalah:  P1: Perendaman dengan ekstrak alpukat, Perlakuan P2: Perendaman dengan ekstrak bengkoang dan  Perlakuan  P3:  Perendaman  dengan  ekstrak  kurma.  Hasil  penelitian  didapatkan kelangsungan  hidup  larva  ikan  betok  tertinggi  pada  perlakuan  P2  sebesar  64,44%,
pertumbuhan panjang tertinggi terdapat pada perlakuan P1 sebesar 3,11 mm , p ertumbuhan berat tertinggi terdapat pada perlakuan P1 sebesar 1,03 gr .  Nisbah kelamin betina tertinggi terdapat pada perlakuan P1 sebesar 74,07 % . Nisbah kelamin jantan tertinggi terdapat pada perlakuan P2 sebesar 48,12 %.
Kata Kunci : Produktivitas,ikan betok, femnisasi,ekstrak buah-buahan, dipping

## PENDAHULUAN
Konsumsi  Ikan  betok  ( Anabas testudineus )  di  daerah  Sumatera  Selatan masih  cukup  tinggi  akan  tetapi  ikan  ini didapat  dari  hasil  penangkapan  diperairan rawa,  belum  pernah  dilakukan  budidaya. Dalam upaya untuk dapat membudidayakan ikan betok, maka dilakukan  serangkaian  penelitian  dan mendapatkan hasil bahwa ikan betok dapat terdomestikasi  dengan  baik.  Domestikasi adalah  suatu  upaya  membiasakan  ikan  liar yang  hidup  di  alam  bebas  agar  terbiasa pada  lingkungan  rumah  tangga  manusia, baik  berupa  pakan  maupun  habitatnya (Helmizuryani dan Muslimin 2013).
Pengarahan jenis kelamin merupakan salah satu pendekatan teknologi untuk  memaksimalkan  pertumbuhan  ikan seperti ikan nila dan ikan mas pada ikan air tawar,  seperti  halnya  ikan  betok  pada beberapa  penelitian  disebutkan  ikan  jenis kelamin  betina  dapat  lebih  maksimal pertumbuhan.  Pengarahan  jenis  kelamin tersebut dapat dilakukan dengan menggunakan bahan sintesis yang dikhawatirkan  dapat  berpengaruh  negatif bila  dikonsumsi  oleh  manusia  dalam jangka  panjang.  Oleh  karena  itu  penelitian ini  akan  menguji  bahan  organik  berupa buah  untuk  pengarahan  jenis  kelamin dikarenakan  ekstrak  buah-buahan  yang dapat  memacu  hormone  estrogen  yang lebih tinggi.
Pengarahan  ikan  berkelamin  betina adalah  menggunakan    hormon estrogen , yang  biasa  dilakukan  adalah  hormon estradiol-17ß yakni  salah  satu  hormon sintetik,  namun  saat  ini  hormon  sintetik dilarang  pemakaiannya.  DKP  (2014), menyatakan  larangan  penggunaan  21  jenis obat-obatan  dalam  kegiatan  budidaya perikanan, salah satunya steroid
sintetik estradiol-17ß . Oleh  karena  itu  perlu dilakukan  kajian  terhadap  hormon  alami dan  bahan  alami  untuk  menggantikan hormon sintetik. Buah-buahan banyak yang mengandung  estrogen  diantaranya  adalah alpukat,  bengkoang  dan    kurma.  Rekayasa ini  dilakukan  secara sex  reversal ,  yaitu pengarahan jenis kelamin dengan meningkatkan  pertumbuhan,  mencegah pemijahan  liar,  meningkatkan  tampilan morfologi  ikan  untuk  menunjang  genetika ikan (Zairin, 2002).
.Kandungan Estrogen banyak ditemukan  pada  buah  alpukat,  bengkoang dan  kurma  dalam  bentuk  Fitoestrogen. Biben  (2012)  menyatakan  bahwa  hormon fitoestrogen  dapat  ditemukan  di  tanaman golongan lignan seperti kurma.
Berdasarkan penelitian Putra (2011) menyatakan bahwa kandungan fitoestrogen dapat ditemukan pada beberapa buah tropis seperti alpukat.  Selanjutnya  Lukitaningsih (2012)  menambahkan  bahwa  ratusan  jenis tanaman  ditemukan  mengandung  hormon fitoestrogen salah satunya yaitu bengkoang.
Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah mengamati  nisbah  kelamin  ikan  betok monoseks  betina  menggunakan  beberapa jenis buah-buahan.

## BAHAN DAN METODE

## Pemijahan induk
Pemeliharaan dan pengamatan penelitian  ini  dilakukan  di  hatchery  UPR (Unit  Pembenihan  Rakyat)  Mulia  di  Plaju dan  untuk  pengamatan  kualitas  air  lebih lanjut  dilakukan  di  Laboratorium  Kimia Fakultas
Pertanian Universitas
Muhammadiyah  Palembang  yang  telah diselesaikan  dari  bulan  Februari  sampai bulan April 2016.
Ikan uji adalah ikan betok pada fase larva  sebanyak  500  ekor  yang  didapatkan dari  hasil  pemijahan  secara  alami  dengan memijahkan  induk  matang  gonad  yang menghasilkan  larva  yang  diberikan  pakan alami  secara  bertahap,  yaitu  artemia  (1-20 hari),  cacing  sutera  (20-40  hari)  dan  pelet (41-90  hari)  dengan  frekuensi  yang  sama tiga  kali  sehari  (pagi,  siang,  dan  sore). Khusus pada pemberian pakan alami, yaitu artemia  dan  cacing  sutera  diberikan  secara adlibitum .

## Perendaman dan pemeliharaan larva
Saat  larva  mencapai  usia  7  hari, larva  direndam  dengan  ekstrak  buah- buahan.  Rata-rata  larva  tersebut  memiliki bobot  0.01-0.02  g/larva  dengan  perlakuan P1:  dengan  ekstrak  alpukat,  P2:  dengan ekstrak bengkoang dan  P3: dengan ekstrak kurma.  Perandaman  dilakukan    selama  10 jam  dengan  dosis  3  ml  L -1 air  pada  wadah stoples berukuran 10 liter dengan kepadatan  50  ekor.  Proses  selanjutnya, larva  dipelihara  dalam  akuarium  ukuran 30x30x30  cm 3 selama  60  hari  dengan ketinggian air 20 cm.
Setelah larva mencapai usia 90 hari yang mencapai ukuran benih, lalu dilakukan  pemeriksaan  gonad  ikan  uji dengan asetokarmin (Zairin,  2002)  yaitu pewarnaan  pada  gonad  yang  telah  dicacah dan diletakkan diatas gelas objek. Pengamatan ini berfungsi untuk memperjelas/  mempermudah  pengamatan
histologi  gonad  dalam  menentukan  nisbah kelamin  dibantu  dengan  menggunakan mikroskop.  Pada  pengamatan  ini,  sample ikan  uji  diambil  sebanyak  10%  dari  total ikan uji. Kemudian cacahan atau cincangan gonad di letakkan di atas objek glass, diberi larutan asetokarmin sebanyak  2  tetes. Objek  glass  ditutup  dengan  cover  glass. Gonad  dalam  bentuk  preparat  siap  diamati dibawah  mikroskop  binokuler  dengan pembesaran 40x.

## Pengamatan
Parameter yang diamati adalah kelangsungan  hidup  dengan  menggunakan rumus  (Effendi,  2004):  Jumlah  larva  yang masih  hidup/  Jumlah  larva  awal  x  100  %. Pertumbuhan  panjang  dan  berat  dengan menggunakan  rumus  Effendie  (Hartati et al., 2013)  :  Wt  (berat  ikan  pada  akhir pemeliharaan  (g)  –  Wo  (berat  ikan  pada awal  pemeliharaan  (g).  Pt  (panjang  ikan pada  akhir  pemeliharaan  (cm)  –  Po (panjang  ikan  pada  awal  pemeliharaan (cm).  nisbah  kelamin,  dengan  rumus: Jumlah anakan  Betina/Jumlah  larva total  x 100%.  Parameter  air  selama  budidaya diamati  dengan  mengukur  suhu  air,  DO, pH  dilakukan  setiap  hari  menggunakan Termometer, DO meter, kertas lakmus dan NH 3 diukur setiap 2 minggu menggunakan spektrofotometer .

## HASIL
Kelangsungan Hidup
Gambar 1.  Kelangsungan hidup
Gambar 1. memperlihatkan tingkat kelangsungan  hidup  larva  ikan  betok tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  P2 sebesar 64,44 % diikuti P3 sebesar 57,78% dan  yang  terendah  P1  sebesar  50,00%.
Analisis  sidik  ragam  tingkat  kelangsungan hidup  menunjukkan  bahwa  perlakuan dengan  perendaman  ekstrak  buah-buahan tidak berpengaruh nyata terhadap kelangsungan hidup larva  ikan betok.
Pertumbuhan Panjang dan Berat larva ikan betok
Gambar 2.  Rata-rata pertumbuhan
Gambar 2 merupakan hasil tingkat pertumbuhan  panjang  larva  ikan  betok. Hasi  tertinggi  terdapat  pada  perlakuan  P1 sebesar 3,11 mm dan  terendah P3   sebesar 2,78  mm.  Hasil  analisis  sidik  ragam menunjukkan  bahwa  perlakuan  dengan perendaman  ekstrak  buah-buahan  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  pertumbuhan panjang larva  ikan betok.
Tingkat  pertumbuhan  bobot  larva ikan  betok    tertinggi  diperlakuan  P1 sebesar  1,03  gr,    dan  terendah  P3  sebesar 0,81  gr.  Hasil  analisis  sidik  ragam menunjukkan  bahwa  perlakuan  dengan perendaman  ekstrak  buah-buahan  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  pertumbuhan berat larva ikan betok.

## Nisbah Kelamin Betina Larva Ikan Betok
Gambar 3.  Nisbah Kelamin
Gambar  3  adalah  tingkat  nisbah  kelamin betina  larva  ikan  betok  tertinggi  terdapat pada  perlakuan  P1  sebesar  74,07  %  dan terendah  pada  P2  sebesar  51,85  %. Pengolahan  data  secara  analisis  sidik
ragam,  perlakuan  dengan  perendaman ekstrak  buah-buahan  tidak  berpengaruh nyata terhadap nisbah kelamin betina larva ikan betok.

## Kualitas air
Tabel 1.  Pengukuran Kualitas Air
Parameter Satuan Kisaran Terendah Tertinggi Suhu o C 28 32 DO Mg/L 4,45 8,940 pH 6,1 7,2 Amonia Mg/L 0,0205 0,24 Selama  penelitian,  kualitas  air masih dalam batas toleransi untuk kehidupan  larva  dan  benih  yang  menurut Ghufron  dan  Kordi  (2013)  untuk  suhu antara  25-33 0 C Dari  hasil  pengukuran  air selama  penelitian  suhu  air  berkisar  antara 28 o C  –  32 o C  ,  kandungan  oksigen 3-4  ppm, dan  suhu 6,5  –  9,0.  Sedangkan  untuk amonia > 1 mg/l (Lesmana, 2001).

## PEMBAHASAN Kelangsungan Hidup
Suksesi  kehidupan  ikan  pada  masa larva menjadi tolak ukur dalam keberhasilan  memproduksi  calon  benih. Hal  ini  dikarenakan  terjadinya  perubahan morfologi  dan  pembentukan  organ-organ tubuh  larva  sehingga  dalam  proses  ini organisme  akan  mengalami  kerentanan akan  lingkungan  disekitarnya.  Perubahan tersebut  seperti  saat  telur  menetas  pasca embryogenesis,  larva  akan  dilengkapi dengan  yolk  atau  kuning  telur  yang terhubung  dengan  saluran  pencernaan. Yolk  akan  melengkapi  kebutuhan  nutrisi larva  selama  3  hari.  Kantong  kuning  telur akan  ada  sampai  dengan  usia  larva mencapai  5  hari  (Morioka et  al .,  2009). Pasca  3  hari,  larva  akan  membutuhkan asupan  pakan  dari  lingkungan  sekitarnya. Menurut  Morioka et  al .  (2009)  organ
gelembung  renang  akan  terbentuk  pada usia  5  hari  yang  akan  mempengaruhi perilaku  dalam  renang  dan  menangkap pakan alami. Masa ini disebut dengan masa pre-felxion  dan  flexion.  Pada  usia  8  hari sepenuhnya  organ  renang  akan  terbentuk seperti  sirip  belakang,  sirip  bawah,  sirip ekor,  sirip  dada,  organ  labirin,  dan gelembung renang. Selama proses budidaya,  kebutuhan  pakan  ini  dapat dipenuhi dengan menyediakan pakan alami secara rekayasa seperti penyediaan artemia selama proses pemeliharaan.
Selama  pemeliharaan,  larva  ikan betok  terlihat  beberapa  yang  mengalami kanibalisme,  hal  ini  juga  sependapat dengan  penelitian  Maidie et  al .  (2015) khususnya  pada  usia  satu  minggu  hingga sepuluh hari. Pada penelitian ini, larva ikan betok  di  usia  7  hari  diberikan  perlakuan perendaman  ekstrak  buah-buahan  dengan tujuan  pengarahan  jenis  kelamin  menjadi betina atau sex reversal.
Untuk  proses  perendaman,  larva ikan  betok  ditemukan  persentase  kematian yang  berbeda  dan  kematian  pada  saat pemeliharaan  pasca  perendaman  dengan hasil  semua  perlakuan  berpengaruh  tidak nyata terhadap tingkat kelangsungan hidup larva ikan betok yang dihasilkan. Persentase  kelangsungan  hidup  antara  50-
64%.  Persentase  tertinggi  tersebut  adalah ekstrak  bengkoang.  Hal  ini  dikarenakan sari bengkoang memiliki kandungan vitamin  C  sebesar  13,8565  mg, polifenol dan flavonoid untuk  penangkal  bakteri dengan  senyawa keton menghasilkan Xanton (Ramadhani,  2014;  Mardiana, 2009).
Bila dibandingkan dengan
penelitian  lainnya,  angka  ini  termasuk dalam skala  yang  cukup baik  karena dapat mencapai persentase diatas 60%, sedangkan  menurut  Maidie et  al .  (2015) diatas 50%.
Pengarahan Jenis Kelamin dan Pertumbuhan
Pada penelitian
sebelumnya pertumbuhan  ikan  betok  dipengaruhi  oleh perbedaan  jenis  kelamin  pada  masa pembesaran  dan  dapat  maksimal  dengan pertumbuhan  yang  dipisah  serta  memiliki kecenderungan  pertumbuhan  yang  lebih cepat pada jenis kelamin betina (Helmizuryani dan Muslimin, 2016).
Pengarahan  jenis  kelamin  dengan melakukan  rekayasa  untuk  menghasilkan keturunan berjenis kelamin betina menggunakan  bahan  alami  seperti  susu sapi  (Helmizuryani, et  al .,  2016)  karena memiliki  kandungan  estrogen  yang  dapat mempengaruhi  pengarahan  jenis  kelamin ikan.  Seperti  halnya  pada  penelitian  ini, untuk  memaksimalkan  pertumbuhan  ikan melalui  perendaman  bahan  alami  lainnya berupa buah-buahan dengan dosis 3 ml.
Perendaman  dilakukan  saat  ikan memasuki  usia  diatas  6  hari  dikarenakan awal  pembentukan  gonad  dijumpai  pada usia  diatas  6  hari  (Yuniarti et  al .  2007). Terdapat  faktor  lainnya  yang  menjadi pertimbangan dan faktor pendukung keberhasilan dalam pengarahan jenis kelamin, diantaranya umur, lama perlakuan,  dan  lingkungan  (Phelps et al .2001). Untuk lingkungan akan berkaitan pada suhu selama pemeliharaan berlangsung.
Teknik  pengarahan  jenis  kelamin ini  disebut  dengan  sex  reversal  yang
dipengaruhi oleh kandungan hormone pada lingkungan  eksternal  dan  internal  pada organisme  (Zairin,  2002).  Pembetinaan dilakukan  dengan  mengukur  kandungan estrogen  yang  pada  penelitian  ini  nisbah kelamin  betina  terbaik  pada  perlakuan ekstrak  alpukat  (P1)  dengan  persentase 74,07%  berkelamin  betina.  Diduga  ekstrak alpukat  memiliki  kandungan  hormon fitoestrogen alami.
Sedangkan pada perlakuan bengkuang  (P2)  menghasilkan  persentase nisbah  kelamin  sebesar  51,85%.  Diduga hal  ini  dikarenakan  hormon  tidak  terserap maksimal dengan kadar asam yang rendah. Menggunakan  larutan  asetokarmin  sebagai pewarna untuk mengetahui histologi gonad larva  ikan  betok  pada  penelitian  ini  yang digambarkan pada gambar 5 yang mencirikan  adanya  pembentukan  oosit (5a).
Faktor-faktor  yang  dapat  menjadi suksesi kelangsungan hidup dan pertumbuhan larva ikan betok adalah padat tebar, persaingan, dan pakan (Mahmood et al .  2004).  Pada  pakan  alami,  larva  akan menyesuaikan dengan ukuran mulut. Menurut  Morioka et  al .  (2009),  gigi  larva terdeteksi  pada  usia  diatas  tiga  hari  pasca menetas dengan ukuran rata-rata 4 mm dan ukuran  artemia  pada  penelitian  dapat mencapai  ukuran  1,5-2,5  mm  (Ritar et  al ., 2003),  sehingga  pakan  artemia  dapat dikonsumsi  dengan  baik.  Pakan  alami dibutuhkan  larva  selama  pertumbuhannya karena  memiliki  kandungan  endozim dengan nutrisi protein dan lemak (Bugar et al ., 2013).
Pada tahap selanjutnya larva diberikan  pakan  berupa  cacing  sutera, karena pembentukan organ yang mempengaruhi perlaku ikan dalam memangsang  pakan  alami  dan  perilaku renang yang lebih lincah dengan pertumbuhan  gigi  yang  terus  bertambah (Morioka et al.,  2009),  sehingga  pada  usia diatas  20  hari  memungkinkan  diberikan
pakan  buatan  atau  pelet  dengan protein  yang  cukup  sebagai  pengganti pakan  alami  yaitu  dengan  komposisi protein  sebesar  32%.  Dari  berbagai  jenis pakan  yang  dimanfaatkan  akan  dipilih kesesuaiannya agar dapat mencapai pertumbuhan  yang  optimal.  Kanibalisme pada larva ikan juga dipengaruhi oleh padat tebar dan ketersediaan pakan, sehingga hal ini  dapat  diantisipasi  dengan  sortir  ukuran secara berkala.
Pertumbuhan  panjang  larva  ikan betok selama pertumbuhan dapat mencapai 2,78 cm  - 3,11 cm  dan  berat  antara 0,81  – 1,03  gram.  Bila  dibandingkan  dengan penelitian  Helmizuryani  (2015)    mengenai pertumbuhan  benih  ikan  betok  yang  diberi pakan  pelet  dengan  kandungan  protein  32
%  dapat  meningkatkan  pertumbuhan  rata- rata    sebesar  1,43  cm  untuk  panjang  dan 2,68  gram  untuk  berat  ikan  betok.  Hal-hal yang  mempengaruhi  pertumbuhan  lainnya adalah pakan, nutrisi genetik dan lingkungan (Akbar et al., 2012; Suriansyah, 2012).
Gambar  5.  Histologi  gonad  ikan  betok: betina (5a), dan jantan (5b)

## KESIMPULAN
Gonad  pada  ikan  betok dapat dilakukan rekayasa pada usia diatas 6 hari, dengan hasil nisbah kelamin kelamin diatas 70%.  Untuk  dapat  melengkapi  proses rekayasa  ini  masih  terdapat  faktor-faktor pendukung  lainnya  seperti  lingkungan berupa  temperature  dan  lama  perendaman yang  masih  perlu  dikaji  pada  penelitian yang akan datang.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  menyampaikan  terima  kasih kepada  Dirjen  Dikti,  Ketua  Kopertis Wilayah  2  Sumatera  bagian  Selatan, Rektor
Universitas Muhammadiyah Palembang,  dan    Ibu  Dekan  Fakultas Pertanian Universitas Muhammadiyah Palembang yang telah memberikan semangat dan dukungan sehingga selesainya  penelitian,  dan  semua  instasi yang  turut  membantu  dalam  penyelesaian penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
Akbar,  J.  2012.  Ikan  Betok  Budidaya  dan Peluang  Bisnis.  Eja  Publisher, Yogyakarta, juni 2012, Kronggahan, Gamping, sleman.
Biben,  H.,  A.  2012. Fitoestrogen  Khasiat Terhadap  Sistem  Reproduksi,  Non Reproduksi dan Keamanan Penggunanya . Prosiding. Universitas Padjajaran.
Bugar  H.,  Bungas  K.,  Monalisa  S.S.,  dan
Christiana  I.  2013. Pemijahan  dan Penanganan  Larva  Ikan  Betok (Anabas  testudineus  Bloch)  pada Media  Air  Gambut ,  vol.  2  (2):  90-
96.
DKP.  2014.  Keputusan  Menteri  Kelautan & Perikanan. Klasifikasi Obat Ikan. Nomor52/Kepmen-KP/2014.
Effendi,  H.  2004.  Telaah  Kualitas  Air.
Kanisius. Yogyakarta Ghufran  H.  dan  Kordi,  K.  2013. Budidaya Ikan  Konsumsi  di  Air  Tawar .  Edisi ketiga. Yogyakarta: Lily Publisher.
Hartati,  S.,  A.D.  Sasanti  dan  F.H  Taqwa.
2013.  Kualitas  Air,  Kelangsngan Hidup dan Pertumbuhan Benih Ikan Gabus (Channa striata) yang Dipelihara  Dalam  Media  dengan Penambahan Probiotik. Jurnal a b
Akuakultur  Rawa  Indonesia,  1(2):  192- 202.
Helmizurnyani  dan  Muslimin,  B.  2013. Respon  Pertumbuhan  Larva  Ikan Betok (Anabas testudineus) Terhadap  Variasi  Pakan  dalam Akuarium . Prosiding Seminar Nasional VII. Masyarakat Konservasi Tanah Indonesia. Helmizuryani  2015.  Pertumbuhan  Ikan Betok (Anabas testudineus) Dengan Jenis Kelamin Berbeda Yang Dipelihara Dalam Waring. Kopertis
Wilayah II.
Helmizuryani, Muslimin B., dan Khotimah
K.  2016. Pembetinaan  ikan  betok,
Anabas  testudineus  (Bloch,  1792) menggunakan  larutan  susu  dan kedelai  melalui  perendaman  larva . Jurnal  Iktiologi  Indonesia,  vol.  17 (2): 123-132.
Helmizuryani dan Muslimin. 2016. Growth performance  of  mono  sex  and mixed  sex  climbing  perch  (Anabas testudineus) , vol. 12 (2): 99-103. Lukitaningsih,  E.  2012. Fitoestrogen  :
Senyawa Alami yang Aman Sebagai Pengganti  Hormon  Estrogen  Pada Wanita http://farmasi.ugm.ac.id diakses  pada  tanggal  14  Agustus 2016.
Mahmood SU, Ali  MS, Anwar  UM. 2004. Effect of different feed in larval/fry rearing  of  climbing  perch, Anabas testudineus (Bloch)  in  Bangladesh: II.  Growth  and  survival. Pakistan Journal of Zoology, 36(1): 13-19.
Maidie A, Sumoharjo, Asra SW, Ramadhan  M,  Hidayanto  DN. 2015.  Pengembangan  pembenihan ikan  betok  ( Anabas  testudineus) untuk  skala  rumah  tangga. Media Akuakultur , 10(1): 31-37.
Mardiana, T.Y. 2009. Teknologi Pengarahan Kelamin Ikan Menggunakan Madu. PENA Akuatika volume 1 No 1 April 2009.
Morioka  S.,  Ito  S.,  and  Kitamura  S.  2009.
Growth and Morphological Development  of  Laboratory-reared
larval  and  juvenile  climbing  perch Anabas  testudineus .  Journal  of Ichtyol Research, vol. 56 : 162-171. Phelps RP, Sanchez WC, Couturier GM;
Abiado M, Dabrowski K. 2001. Studies on fate of methyltestosteron and its metabolism in tilapia and on the use of phytochemicals as an alternative method to produce a monosex population of tilapia. Twenty-First Annual Technical Report. Aquaculture CRSP, Oregon State University, Cprvallis, Oregon: 53-60p. Putra,  L.,  Hening.  2011. Kandungan Fitoestrogen Alami Pada Beberapa Buah-buahan    Suatu  silih  Terapih Hormon  di  Masa  Depan  Pada Wanita  Monopouse. Jurnal.  JPB Vol 13. No 3: 164-168 hlm.
Ramadhani,  A.  2014. Perbedaan  Kadar Trigliserida  Sebelum  Dan  Setelah
Pemberian Sari Bengkuang (Pachyrrhizus erosus) Pada Wanita .  Universitas  Diponegoro Semarang.
Ritar  A.J.,  Smith  G.G.,  Dunstan  G.A., Brown  M.R.,  and  Hart  B.P.  2003. Artemia  prey  size  and  mode presentation: effects on the survival and growth of phyllosoma larvae of southern rock lobster (Jasus edwardsii) , vol. 11 (1-2): 163-182.
Suriansyah.  2012.  Kelangsungan  Hidup Larva Ikan Betok (Anabas testudineus Bloch ) dengan
Pemberian  Pakan  Alami  Hasil Pemupukkan pada Media Air Gambut. Anterior  Jurnal, Volume 12  Nomor  1,  Desember  2012,  Hal 72 – 80
Yuniarti T, Hanif S, Prayoga T, Suroso. 2007. Teknik produksi induk betina ikan nila. Jurnal Budidaya Air
Tawar ,4 (1): 32-36.
Zairin.Jr.  M.  2002.    Sex  Reversal: Memproduksi  Benih  Ikan  Jantan atau  Betina.  Penebar  Swadaya.
Jakarta.