Abstrak—Indonesia  merupakan  negara  produsen  minyak  bumi yang  cukup  besar,  sehingga  memiliki  banyak  kegiatan  yang berkaitan  dengan  penambangan  minyak  bumi.  Kegiatan  ini memberikan dampak pada lingkungan sekitar berupa tumpahan minyak.  Salah  satu  kasus  tumpahan  minyak  yang  terjadi  di Indonesia  adalah  kasus  sumur  YYA-1  PT.  PHE  ONWJ  yang terjadi  pada  tahun  2019.  Tumpahan  minyak  merupakan  Bahan Berbahaya dan Beracum (B3) sehingga membutuhkan penanganan yang menyeluruh. Saat ini penanganan yang banyak dilakukan adalah dengan pendekatan fisik dan kimia, sedangkan pendekatan  ini  memiliki  potensi  dampak  yang  lebih  lama  bagi ekosistem.  Bioremediasi  memiliki  potensi  yang  yang  baik  untuk diterapkan  sebagai  alternatif  penanganan  tumpahan  minyak mentah  pada  perairan  laut.  Bioremediasi  memanfaatkan metabolisme  mikroba  sebagai  pendegradasi  hidrokarbon  untuk mengubah  polutan  menjadi  senyawa  yang  tidak  berbahaya. Beberapa  spesies  bakteri  yang  terbukti  dapat  digunakan  untuk bioremediasi  adalah  Bacillus  subtilis  dan  Pseudomonas  putida. Berdasarkan  beberapa  data  hasil  penelitian  pada  laboratorium. Diperkirakan  penggunaan  kedua  bakteri  ini  dapat  efektif menyisihkan  tumpahan  minyak  mentah  dengan  menerapkan penanganan fisik kimia sebagai penanganan awal, serta beberapa faktor  dan  prosedur  yang  harus  diperhatikan  dengan  seksana pada saat penerapan bioremediasi dilakukan.
Kata  Kunci—Bioremediasi,  Bacillus  subtilis,  Minyak  Mentah, Pseudomonas putida, TPH.

## I. PENDAHULUAN
INYAK  mentah  adalah  salah  satu  hal  yang  banyak digunakan oleh masyarakat di Indonesia guna membantu kegiatan sehari-hari. Minyak mentah merupakan minyak bumi yang  telah  dipisahkan  dari  gas  alam  setelah  proses penambangan  karena  minyak  bumi  sejatinya  ditemukan bersama-sama  dengan  gas  alam  [1].  Kegiatan  penambangan minyak  bumi  tidak  bisa  lepas  dengan  adanya  dampak  pada lingkungan di sekitarnya. Salah satu masalah yang sering terjadi adalah  adanya  tumpahan  minyak  mentah.  Pada  kasus-kasus tumpahan minyak mentah pada perairan laut yang telah terjadi, tumpahan  minyak  dapat  menyebar  luas  dengan  cepat  karena pengaruh  angin,  gelombang,  dan  arus  laut  [2],  [3].  Adanya angin  yang  berhembus  di  atas  permukaan  laut  menyebabkan terjadinya arus laut sehingga bisa membawa tumpahan minyak sampai  pada  area  dekat  pantai  [3],  [4].  Minyak  mentah merupakan Bahan Berbahaya dan Beracun (B3) karena bersifat
toksik  dan  karsinogenik,  sehingga  minyak  mentah  dapat berbahaya bagi ekosistem laut maupun kepada masyarakat yang bertempat tinggal di dekat pantai.
Kasus  tumpahan  minyak  mentah  sumur  YYA-1  miliki  PT. PHE ONWJ juga terbawa mencapai area dekat pantai dengan cepat. Dalam kurun waktu 6 hari, yang semulanya pada tanggal 12 Juli 2019 mulai muncul gelembung gas di Anjungan YY dan Rig  Ensco-67 yang  terletak di wilayah offshore , pada  tanggal 18  Juli  2019  tumpahan  minyak  sudah  mencapai  area  pantai bagian barat [5], [6]. Faktor utama yang menyebabkan minyak dan  gas  menyembur  adalah  terjadinya  ledakan  prematur  di bagian  dalam  sumur.  Ledakan  yang  seharusnya  terjadi  pada kedalaman 6.600 ft atau 2011,68 m terjadi pada kedalaman 700 ft atau 213,36 m. Sehingga, akibatnya adalah rusaknya pipa dan formasi lapisan tanah yang membuat anjungan ikut miring [7].
Tumpahan  mencapai  3.000  BPD  semenjak  munculnya gelembung  gas  [8].  Hal  ini  menyebabkan  tumpahan  minyak mencemari  wilayah  Teluk  Balikpapan  dan  wilayah  Pantai Karawang,  tertutupnya  lokasi  usaha  pariwisata  pantai  di Karawang dan Bekasi, mengganggu kesehatan anak-anak dan warga sekitar seperti gatal, pusing, dan mual karena mencium bau  limbah  minyak  yang  mengandung  B3  [9],  merusak  area tambak ikan dan udang, merusak dan membunuh ribuan pohon mangrove  [10],  dan  berdampak  buruk  pada  ekosistem  laut Pantai Karawang, hilangnya mata pencaharian sebagai nelayan karena  tercemarnya  lokasi  penangkapan  ikan  oleh  tumpahan minyak [11].
Penanganan  yang  telah  dilakukan  oleh  PT.  PHE  ONWJ untuk  menangani  kasus  ini  adalah  dengan  pendekatan  yang banyak dilakukan pada umumnya untuk menangani tumpahan minyak mentah, yaitu secara fisik dan kimia saja. Penanganan ini  memiliki  beberapa  kelemahan  dan  potensi  dampak  yang lebih berbahaya. Pertama adalah terkait kegiatan pembersihan dengan masyarakat berdampak besar terhadap kesehatan karena para warga diminta terjun langsung ke air untuk mengumpulkan limbah  minyak,  sedangkan  minyak  mengandung  B3.  Kedua adalah  terkait  Penggunaan oil  skimmer menurut  memiliki kelemahan  yaitu  hanya  dapat  digunakan  secara  efektif  di perairan  yang  memiliki  hidrodinamika  air  yang  rendah  [12]. Terakhir  adalah  terkait  penggunaan  dispersan,  hal  ini  dinilai cepat dalam penanganan tumpahan minyak namun, menjelaskan  bahwa  campuran  minyak  dan  dispersan  lebih
Studi Literatur Alternatif Penanganan Tumpahan Minyak Mentah Menggunakan Bacillus subtilis dan Pseudomonas putida (Studi Kasus:

## Tumpahan Minyak Mentah Sumur YYA-1)
Widhowati Kesoema Wardhani dan Harmin Sulistiyaning Titah Departemen Teknik Lingkungan, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) e-mail : harminsulis@gmail.com
M
toksik  dibandingkan  dengan  minyak  mentah  itu  sendiri sehingga  lebih  membahayakan  ekosistem  bawah  laut  karena dapat terkonsumsi oleh hewan laut dan tersebar melalui rantai makanan [13].
Bioremediasi dinilai dapat menghasilkan pembersihan yang lebih  optimal  karena  mengubah  pencemar  menjadi  senyawa tidak  toksik  dan  mikroba  yang  digunakan  akan  mati  dengan sendirinya saat pencemar habis terdegradasi. Beberapa spesies bakteri  yang  terbukti  dapat  digunakan  untuk  bioremediasi adalah Bacillus  subtilis dan Pseudomonas  putida. Pada  studi kasus ini diharapkan dapat menentukan kemampuan B. subtilis dan P.  putida untuk  penanganan  tumpahan  minyak  mentah sumur YYA-1.

## II. METODOLOGI

## A. Studi Literatur
Studi  literatur  yang  digunakan  meliputi  teori-teori  yang mengenai minyak mentah, bioremediasi, B. subtilis, P. putida, proses  biodegradasi,  penerapan  bioremediasi  in-situ,  faktor- faktor  penting  bioremediasi  dan  data  penelitian  terdahulu terkait  penyisihan Total  Petroleum  Hydrocarbon (TPH)  oleh bakteri pada air laut untuk memperkirakan potensi penyisihan. Sumber literatur yang digunakan adalah berupa jurnal nasional maupun internasional, buku, peraturan perundangan, disertasi, tesis, website hingga  makalah  seminar/ proceeding yang mendukung dan terkait dengan topik studi.
B. Penelitian Pendahuluan
Penelitian  pendahuluan  yang  dilakukan  meliputi range finding test (RFT) untuk mengetahui apakah B. subtilis dan P. putida dapat  bertahan  hidup  dengan  berbagai  konsentrasi minyak mentah pada media Nutrient Agar (NA) datar dengan metode streak  plate .  Hal  ini  bertujuan  untuk  mengetahui konsentrasi  maksimal  minyak  mentah  dimana  masing-masing mikroorganisme yang digunakan masih dapat hidup dan dapat melakukan biodegradasi terhadap minyak mentah. Konsentrasi minyak  mentah  yang  digunakan  adalah  0,  5,  10,  15%  (v/v) dengan  waktu  inkubasi  selama  7  hari  dengan  suhu  37 o C. Konsentrasi 15% (v/v) ditetapkan menjadi konsentrasi terbesar karena  disesuaikan  dengan  peraturan  Keputusan  Menteri Lingkungan Hidup Nomor 128 Tahun 2003 dimana konsentrasi minyak  mentah  maksimal  yang  dapat  diolah  dengan bioremediasi  adalah  15%  [14].  RFT  dilakukan  dengan mengamati  perubahan  pertumbuhan  bakteri  pada  cawan  petri dengan membandingkan pertumbuhan bakteri pada cawan petri kontrol atau pada konsentrasi 0% (v/v) minyak mentah setiap 24 jam selama 7 hari.

## C. Metode Bioremediasi
Prinsip utama bioremediasi adalah memanfaatkan metabolisme  mikroorgamisme  untuk  mengubah  pencemar menjadi  senyawa  tidak  toksik  dan  mikroba  yang  digunakan akan mati dengan sendirinya saat pencemar habis terdegradasi [15].
Terdapat  3  pendekatan  yang  umum  dilakukan  untuk mengaplikasikan  teknologi  bioremediasi  yaitu  bioatenuasi,
bioaugmentasi  dan  biostimulasi.  Bioatenuasi  adalah  proses pemulihan  lingkungan  tercemar  dengan  memanfaatkan mikroorganisme  yang  ada  pada  lingkungan  dan  membiarkan proses biodegradasi terjadi secara alami tanpa intervensi (tanpa penambahan  apapun).  Potensi  penerapan  bioatenuasi  sangat kecil,  menjelaskan  bahwa  bioremediasi  akan  efektif  jika kondisi  lingkungan  dapat  mendukung  mikroorganisme pendegradasi minyak untuk dapat tumbuh dan aktif, sedangkan proses  biodegradasi  secara  alami  atau  bioatenuasi  biasanya berjalan sangat lebih lambat dari penganganan fisika dan kimia (dapat mencapai tahunan) [16].
Bioaugmentasi  adalah  proses  dimana  jumlah  mikroba ditambahkan  jika  lingkungan  tercemar  tidak  memiliki  jumlah mikroba  yang  cukup  untuk  mendegradasi  jumlah  pencemar yang terkandung. Jenis mikroorganisme yang digunakan untuk ditambahkan  pada  lingkungan  tercemar  dapat  berupa  kultur tunggal  maupun  kultur  campuran  (konsorsium)  yang mengandung  campuran  beberapa  mikroorganisme  yang memiliki potensi mendegradasi pencemar [17]. Pada umumnya metode yang banyak digunakan dalam mendegradasi tumpahan minyak mentah atau hidrokarbon adalah dengan menggunakan konsorsium  bakteri,  dimana  konsorsium  adalah  campuran populasi  mikroba  dalam  bentuk  komunitas  yang  mempunyai hubungan  saling  mendukung  dan  memiliki  manfaat  satu  dan lainnya  [18].  Beberapa  bakteri  yang  terbukti  memiliki kemampuan mendegradasi hidrokarbon disebutkan oleh yaitu, Pseudomonas, Micrococcus, Staphylococcus, Bacillus, Flavobacterium , Achromobacter,  Klebsiella,  Actinomycetes, Acetobacter, dan Rhodococcus telah  ditemukan  pada lingkungan  tercemar  hidrokarbon  dan  memiliki  kemampuan mendegradasi hidrokarbon [19].
Sedangkan, biostimulasi adalah proses pemulihan lingkungan tercemar dengan menambahkan jumlah nutrien atau ko-substrat lainnya untuk menstimulasi mikroba pendegradasi. Penambahan nutrien ditinjau dari rasio C: N: P yang terkandung pada media tercemar [20]. Hasil penelitian menyatakan bahwa rasio  terbaik  untuk  proses  degradasi  minyak  mentah  adalah 100:10:1 [21]. Sehingga setelah diketahui rasio C: N: P media tercemar dapat ditambahkan nutrien organik maupun anorganik untuk mencapai rasio yang ideal.
Besar  pencemaran  minyak  di  laut  ini  dipantau  dengan Analisis Total Petroleum Hydrocarbon (TPH) yang merupakan pengukuran  menyeluruh  dari  senyawa  alifatik,  alisiklik  dan aromatik.  Menurut  KepMen  LH  No  128  Tahun  2003 konsentrasi minyak mentah maksimal yang dapat diolah dengan bioremediasi  adalah  15%.  Sedangkan  besar  TPH  menurut BPPT Indonesia, minyak tidak berbahaya bagi lingkungan jika bernilai ≤1 %. Besar konsentrasi TPH didapatkan dari analisis TPH  dengan  metode  gravimetri  dan  dengan  menggunakan analisis  yang  lebih  akurat  yaitu  menggunakan  analisis Gas Chromatography – Mass Spectrometry (GC – MS) [22].

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN

## A. Minyak Mentah
Menurut Keputusan Menteri Lingkungan Hidup Nomor 128 Tahun  2003,  “minyak  bumi adalah  hasil  proses  alami berupa
hidrokarbon  yang  dalam  kondisi  tekanan  dan  temperatur atmosfer  berupa  fasa  cair  atau  padat,  termasuk  aspal,  lilin mineral, atau ozokerit, dan bitumin yang diperoleh dari proses penambangan,  tetapi  tidak  termasuk  batu  bara  atau  endapan hidrokarbon  lain  yang  berbentuk  padat  yang  diperoleh  dari kegiatan  yang  tidak  berkaitan  dengan  kegiatan  usaha  dan minyak  bumi”.  Sedangkan  minyak  mentah  sendiri  adalah minyak bumi yang telah dipisahkan dari gas alam setelah proses penambangan  karena  minyak  bumi  sejatinya  ditemukan bersama-sama dengan gas alam [1].
Bahan-bahan  utama  penyusun  minyak  mentah  merupakan campuran kompleks yang terdiri dari rantai hidrokarbon  [23].
Senyawa  penyusun  minyak  bumi  tersusun  atas  senyawa hidrokarbon dan non hidrokarbon. Minyak mentah mengandung  senyawa  hidrokarbon  sekitar  50-98%  dan selebihnya  senyawa  non-hidrokarbon  seperti  sulfur,  nitrogen, oksigen, dan beberapa logam berat [24], [25].
Gabungan  dari  karbon  dan  hidrogen  akan  membentuk senyawa  hidrokarbon  pada  minyak.  Senyawa  hidrokarbon penyusun minyak bumi terdiri dari beberapa jenis, diantaranya paraffin,  naptena,  aromatik  dan  aspaltena  [26].  Hidrokarbon aromatik sendiri banyak terdapat di alam sebagai polutan yang kemudian  dinyatakan  pula  bahwa  senyawa  hidrokarbon aromatik  bersifat  toksik  dan  karsinogenik  13  [25].  Sehingga, kasus tumpahan minyak mentah tidak bisa dibiarkan begitu saja dan harus segera ditanggulangi secara tuntas karena  termasuk kedalam  Bahan  Berbahaya  dan  Beracun  (B3)  yaitu  bersifat toksik dan karsinogenik.
B. Range Finding Test
Range finding test dilakukan dengan menggunakan minyak mentah  PT  Pertamina  dengan  variasi  konsentrasi  minyak mentah  yang  digunakan  adalah  0,  5,  10,  15%  (v/v),  waktu inkubasi selama 7 hari dengan suhu 37 o C. Sedangkan, bakteri yang  digunakan  adalah B.  subtilis dan P.  putida. Alasan pemilihan  kedua  bakteri  ini  adalah  merupakan  bakteri  yang terbukti  memiliki  kemampuan  mendegradasi  hidrokarbon minyak mentah, dapat hidup pada kondisi lingkungan dengan tingkat  salinitas  mencapai  37 o / o [27],  tidak  toksik  dan  mudah ditemukan.  Gambar 1. adalah hasil RFT hari ke-7 B. subtilis dan  Gambar  2.  adalah  hasil  RFT  hari  ke-7 P.  putida. Dapat dilihat pada gambar bahwa semakin besar konsentrasi minyak mentahnya maka semakin sedikit B. subtilis dan P. putida yang tumbuh.  Hal  ini  juga  menyatakan  bahwa B.  subtilis dan P. putida dapat  hidup  pada  area  dengan  konsentrasi  minyak mentah sebesar 0% sampai dengan 15% (v/v). Jika dilihat dari hasil  RFT  ini  secara  kasat  mata B.  subtilis dan P.  putida memiliki potensi untuk digunakan dalam biodegradasi minyak mentah  karena  tidak  mengalami  kematian  yang  signifikan selama  7  hari  pengamatan,  dimana  pada  umumnya  screening hanya dilakukan selama 48 jam [21].

## C. Penelitian Terdahulu
Pada studi literatur ini data hasil penelitian terdahulu terkait dengan  penyisihan  TPH  oleh  bakteri  pada  air  laut  digunakan untuk  memperkirakan persen penyisihan minyak mentah oleh B.  subtilis dan P.  putida. Tabel  1  [28]–[34].  berisi  kumpulan hasil penelitian terdahulu terkait dengan penyisihan TPH oleh bakteri  pada  air  laut.  Dari  data  tersebut  diperkirakan  isolat tunggal  Bacillus  subtilis  dapat  menyisihkan  kira-kira  60-80% dalam  kurun  waktu  satu  bulan  (tergantung  dari  faktor-faktor biodegradasi),  sedangkan  isolat  tunggal  Pseudomonas  putida dapat  menyisihkan  kira-kira  60-70%  dalam  kurun  waktu  satu bulan  (tergantung  dari  faktorfaktor  biodegradasi).  Perkiraan tersebut  bukanlah  kesimpulan  yang  pasti  karena  merupakan penarikan  kesimpulan  dari  data  penelitian  dengan  kontrol nutrisi  yang  berbeda  dan  jumlah  konsentrasi  pencemar  yang berbeda.
Maka  diperkirakan  persen  penyisihan  dengan  metode
Gambar 1. Hasil RFT Hari Ke-7 B. subtilis.
Gambar 2. Hasil RFT Hari Ke-7 P. putida.
konsorsium  oleh B.  subtilis dan P.  putida adalah  sebesar  70- 90% dalam perkiraan waktu 1-2 bulan (tergantung konsentrasi pencemar)  hal  ini  didasari  oleh  penelitian  yang  disebutkan dalam Tabel 1 [34]. dimana hasil konsorsium Bacillus sp dan Pseudomonas sp memiliki rentang antara 70-90% dalam kurun waktu 5 minggu dan kosentrasi pencemar sebesar 5% minyak mentah. Sedangkan perkiraan persen penyisihan dengan oleh B. subtilis dan P. putida dapat lebih baik yaitu sebesar 80-95% jika menggunakan metode sequencing. Hal ini dikarenakan metode sequencing diperkirakan  dapat  lebih  mengoptimalkan  proses biodegradasi  tumpahan  minyak  mentah  pada  perairan  laut. Metode sequencing adalah  metode  biodegradasi  yang menggunakan beberapa isolat bakteri tunggal secara berurutan, bukan  secara  langsung  dicampur  bersamaan.  Hal  ini diperkirakan dapat menghasilkan nilai penyisihan hidrokarbon minyak mentah yang lebih baik daripada menggunakan metode kultur  tunggal  ataupun  kultur  campuran  (konsorsium).
Sayangnya,  masih  belum  ada  hasil  penelitian  dengan menggunakan metode ini.

## D. Proses Biodegradasi
Proses biodegradasi minyak mentah secara umum dijelaskan oleh [35], yaitu:
1) Pada  lingkungan  yang  tercemar  minyak  mentah  secara alami  akan  memiliki  presentase  kandungan  mikroba pendegradasi hidrokarbon (hidrokarbonoklastik).
2) Bakteri  hidrokarbonoklastik  memanfaatkan  hidrokarbon sebagai sumber energi dan sumber karbon dan hidrogen.
3) Mikroba  pendegradasi  menghasilkan  biosurfaktan  yang melarutkan  hidrokarbon  dalam  fase  cair,  mengurangi tegangan permukaan, meningkatkan aksesibilitas mikroorganisme pendegradasi teradap butiran minyak.
4) Mikroba  mentransfer  hidrokarbon  ke  dalam  sel  mikroba dengan cara interaksi sel dengan hidrokarbon yang terlarut dalam  fase  air,  melalui  proses  difusi  atau  transport  aktif atau dengan interaksi sel dengan tetesan hidrokarbon yang teremulsi oleh sel bakteri [36].
5) Karakter,  jumlah  sel  dan  enzim  yang  terkandung  dalam mikroba  akan  menentukan  hasil  degradasi  hidrokarbon minyak  bumi.  Secara  garis  besar,  hidrokarbon  akan teroksidasi  atau  terpecah  oleh  bantuan  enzim  hingga menghasilkan  aldehida  dan  asam  sederhana  yang  dapat masuk  yang  dapat  masuk  ke  dalam  proses  metabolisme seperti siklus Kreb dan proses transpor elektron.
6) Siklus kreb akan menghasilkan ATP, NADH, FADH 2 , dan melepaskan  CO 2 ,  sedangkan  NADH  dan  FADH 2 masuk kedalam proses  transpor  elektron  menhasilkan  H 2 O, dan sejumlah ATP.
Dari proses yang telah dijelaskan makan jelas bahwa proses biodegradasi,  bakteri  memanfaatkan  senyawa  hidrokarbon minyak  bumi  sebagai  substrat  dan  mengubahnya  menjadi senyawa yang tidak toksik seperti CO 2 dan H 2 O.

## E. Penerapan Bioremediasi In-Situ
Prediksi  kebutuhan  jumlah  bakteri  yang  ditambahkan  untuk kasus  sumur  YYA-1  ini  adalah  dengan  membandingkan beberapa  literatur  penelitian  dimana  konsentrasi  yang  banyak digunakan untuk ditambahkan pada area tercemar hidrokarbon adalah antara 5-10% (v/v) yaitu yang merupakan volume isolat per  volume  media  tercemar.  Cara  penambahan  bakteri  pada perairan  laut  yaitu  penerapan  bioremediasi  pada  kasus tumpahan  4,6  juta  gallon  minyak  mentah  oleh  Megaborg  di teluk  Mexico  [37].  Pada  kasus  ini,  bakteri  telah  diuji  coba sebelumnya  pada  kolam  berisi  air  dengan  tambahan  minyak mentah dan hasilnya menyatakan bahwa metode ini efektif serta media  menjadi  tidak  toksik  dan  aman  bagi  ekosistem  bawah laut.  Penambahan  bakteri  dilakukan  dengan  memindahkan bakteri siap pakai pada drum dan dibawa dengan kapal menuju tengah  laut.  Selanjutnya  bakteri  disemprotkan  pada  area tercemar dengan bantuan alat pemadam kebakaran kapal.
Sehingga untuk kasus sumur YYA-1, hal ini dapat diterapkan dengan memasang pembatas berupa oil boom dan menghitung luas  areanya  serta  mengukur  kedalaman  air  pada  area  yang
Tabel 1.
Beberapa Hasil Penelitian Terdahulu Terkait dengan Penyisihan TPH oleh
Bakteri pada Air Laut Bakteri Jenis Pencemar Penyisihan Pseudomonas sp. Konsorsium 0,5 % Diesel 30,95% (15 hari) Alcanivorax sp. Konsorsium 10% Arabian Light Crude Oil (ALCO) 55,9% (28 hari) Bordetella sp. Pseudomonas balearica
Bacillus cereus Konsorsium 10% Minyak mentah 24,9% (15 hari) Bacillus licheniformis Tunggal Diesel 25,04% (5 hari) Bacillus subtilis Tunggal Diesel 5,42% (5 hari) Bacillus cereus Tunggal Diesel 5,89% (5 hari) Pseudomonas sp. Konsorsium Diesel 30,95% (15 hari) Bacillus subtilis Bacillus jeotagali Konsorsium 1% Minyak Mentah 95,5% (20 hari) Bacillus foraminis Bacillus subtilis Tunggal 2% Minyak Mentah 82% (15 hari) Bacillus cereus Konsorsium 5% Minyak Mentah 67,2% (5 minggu) Bacillus sp Pseudomonas sp Konsorsium 5% Minyak Mentah 73,2% (5 minggu) Bacillus sp Bacillus cereus Konsorsium 5% Minyak Mentah 89,1% (5 minggu) Pseudomonas sp Bacillus sphaericus Konsorsium 5% Minyak Mentah 78,5% (5 minggu) Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas sp Tunggal 1% Minyak Mentah 67% (30 hari) Bacillus sp Tunggal 1% Minyak Mentah 61% (30 hari) Bacillus cereus Tunggal 1% Minyak Mentah 54% (30 hari) Pseudomonas putida Tunggal 2% Minyak Mentah 65% (7 hari)
terbatasi  oil  boom.  Dengan  mengetahui  luasan  area  dan kedalaman  dapat  diperkirakan  berapa  banyak  volume  yang dibutuhkan.  Sayangnya  saat  ini  tidak  ada  data  lengkap  dari literatur yang dapat digunakan oleh penulis untuk menghitung perkiraan volume penambahan bakteri yang dapat ditambahkan untuk  proses  bioaugmentasi  studi  kasus  tumpahan  minyak mentah  sumur YYA-1  ini.  Namun, pada  umumnya salah satu masalah  utama  yang  menyangkut  penggunaan  bioaugmentasi secara in situ adalah dengan pengontrolan jumlah bakteri yang cukup  untuk  biodegradasi  [38].  Maka  setidaknya  harus dianalisis CFU secara berkala untuk memastikan jumlah bakteri paling  tidak  antara  10 6 –10 7 sel/mL  pada  lingkungan  selama proses bioremediasi.
Dari  hasil  dari  kajian  literatur  yang  telah  dilakukan, bioremediasi  pada  kasus  tumpahan  minyak  sumur  YYA-1  ini memiliki potensi yang baik untuk diterapkan sebagai alternatif penanganan  pembersihannya  karena  bioremediasi  dapat membersihkan  secara optimal  dan  lebih  aman  bagi  ekosistem laut.  Sudah  ada  beberapa  produk  inokulum  campuran (konsorsium)  yang  dijual  secara  komersial  untuk  digunakan sebagai  penanganan  tumpahan  minyak  mentah  di  alam (umumnya di Indonesia adalah produk untuk media tanah atau pasir  tercemar).  Hal  ini  berarti  memang  sudah  banyak  yang mempertimbangkan bahwa bioremediasi adalah jawaban yang lebih  tepat  untuk  penanganan  tumpahan  minyak  mentah. Mungkin  beberapa  faktor  yang  mempengaruhi  gagalnya bioremediasi  di  alam  bisa  terjadi  [20],  namun  jika  prosedur penggunaan  bioremediasi  diperhatikan  dengan  baik  sebelum diterapkan  maka  hasil  yang  didapatkan  lebih  optimal  setelah
penanganan pertama dengan fisik kimia.
Maka, Gambar 3. adalah skema atau bagan langkahlangkah penanganan untuk studi kasus tumpahan minyak mentah sumur YYA-1 ini secara keseluruhan.
Faktor  penting  yang  harus  diperhatikan  disebutkan  dalam [17], bahwa suhu yang tepat, nutrien, dan makanan harus siap untuk mikroba agar bioremediasi dapat berjalan dengan lancar. Selain itu, konsentrasi polutan, jenis polutan, tingkat salinitas, pH  lingkungan  dan  oksigen  juga  merupakan  faktor  penting yang harus diperhatikan. Konsentrasi polutan dan jenis polutan mempengaruhi  kekompleksan  jenis  minyak  mentah.  Tingkat salinitas  dan  pH  lingkungan  berkaitan  dengan  jenis  mikroba yang  dapat  digunakan.  Sedangkan  oksigen  merupakan  faktor penting karena biodegradasi melibatkan enzim oksigenase agar molekul  hidrokarbon  dapat  digunakan  oleh  mikroba  sebagai sumber  karbon  untuk  metabolisme  sel.  Sehingga  dalam keadaan  aerobik  proses  biodegradasi  dapat  berjalan  lebih efektif. Kekurangan oksigen akan membuat proses biodegradasi  tidak  berjalan  sempurna.  Sehingga  perlu  adanya kontrol  terkait jumlah oksigen yang ada pada media tercemar saat  dilakukan  proses  bioremediasi  menggunakan  mikroba. [30].

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan  uraian  yang  dijelaskan  pada  hasil  dan pembahasan dapat diperoleh kesimpulan bahwa:
1) Hasil studi kasus tumpahan minyak mentah sumur YYA-1 yang  terjadi  pada  tahun  2019  lalu,  menyatakan  bahwa bioremediasi merupakan metode alternatif yang diterapkan setelah  penanganan  fisika  dan  kimia  dilakukan  sebagai langkah awal untuk melokalisir tumpahan minyak mentah dalam waktu singkat sehingga pencemaran minyak mentah tersebut tidak meluas. Walaupun ada beberapa faktor dan prosedur  yang  harus  diperhatikan  dengan  seksama  pada saat penerapan bioremediasi sebagai penanganan pencemaran tumpahan minyak mentah pada perairan laut agar  tidak  gagal  dan  mati  (bakterinya)  pada  saat diterapkan.
2) B.  subtilis dan P.  putida dapat  hidup  pada  lingkungan tercemar minyak mentah hingga konsentrasi 15% v/v.
3) Penyisihan hidrokarbon minyak dengan isolat tunggal dari data  penelitian  terdahulu  diperkirakan  adalah  60-80% untuk B. subtilis dan 60-70% untuk P. putida dalam kurun waktu satu bulan (tergantung dari faktot-faktor biodegradasi).
4) Penyisihan hidrokarbon minyak dengan metode konsorsium B.  subtilis dan P.  putida dari  data  penelitian terdahulu diperkirakan adalah 70-90% dan 80-95% dengan metode sequencing dalam  waktu  1-2  bulan  atau  lebih (tergantung konsentrasi pencemar).
Berdasarkan  uraian  yang  dijelaskan  pada  hasil  dan pembahasan,  maka  disarankan  untuk  perlunya  penelitian dengan  skala  laboratorium  terkait  saran  metode sequencing perlu dilakukan.
Gambar  3.  Skema  Langkah  Penanganan  untuk  Studi  Kasus  Tumpahan Minyak Mentah Sumur YYA-1 Keseluruhan.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  L.  D.  AGUSTIN,  “Perbandingan  Karbon  Aktif  dari  Ampas  Tebu  dan Tongkol  Jagung  sebagai  Adsorben  Logam  Cu  pada  Limbah  Tumpahan Minyak Mentah (Crude Oil),” Politeknik Negeri Sriwijaya, 2014.
[2]  M. Fingas, “The basics of oil spill cleanup, third edit,” Taylor & , 2013.
[3]  M.  Wibowo,  “Pemodelan  Sebaran  Pencemaran  Tumpahan  Minyak  di Perairan Cilacap,” J. Teknol. Lingkung. , vol. 19, no. 2, pp. 191–202, 2018.
[4]  I.  .  Hadi,  S.  dan  Radjawane,  “Arus  Laut,”  Institut  Teknologi  Bandung, Bandung, 2009.
[5]  “Kronologi  Kebocoran  Migas  di  Sumur  YYA-1  ONWJ  Menurut Pertamina  -  Tirto.ID.”  https://tirto.id/kronologi-kebocoran-migas-di- sumur-yya-1-onwj-menurut-pertamina-ee3T (accessed May 09, 2020).
[6]  “Pertamina  Beberkan  Kronologi  Kebocoran  Migas  di  Sumur  YYA-1  - Warta  Kota.”  https://wartakota.tribunnews.com/2019/07/25/pertamina- beberkan-kronologi-kebocoran-migas-di-sumur-yya-1.
[7]  “Mulai Terkuak, Misteri Dibalik Insiden Kebocoran Sumur YYA-1 Versi Kementerian ESDM - Dunia Energi.” https://www.dunia- energi.com/mulai-terkuak-misteri-dibalik-insiden-kebocoran-sumur-yya- 1-versi-kementerian-esdm/ (accessed May 09, 2020).
[8]  “Sumur  Pertamina  Bocor,  Laut  Karawang  Tercemar  51  Ribu  Barel
Minyak - Bisnis Liputan6.com.” https://www.liputan6.com/bisnis/read/4024605/sumur-pertamina-bocor-
laut-karawang-tercemar-51-ribu-barel-minyak (accessed May 09, 2020).
[9]  “Tragedi Tumpahan Minyak Pertamina di Karawang, Horor bagi Manusia dan Lingkungan : Mongabay.co.id.” https://www.mongabay.co.id/2019/07/30/tragedi-tumpahan-minyak- pertamina-di-karawang-horor-bagi-manusia-dan-lingkungan/  (accessed May 09, 2020).
[10]  “Petaka  Tumpahan  Minyak  di  Karawang  -  Kolom  Tempo.co.” https://kolom.tempo.co/read/1231257/petaka-tumpahan-minyak-di- karawang (accessed Sep. 18, 2020).
[11]  “Begini  Nasib  Buruk  Masyarakat  Pesisir  akibat  Tumpahan  Minyak  di Karawang : Mongabay.co.id.” https://www.mongabay.co.id/2019/07/29/begini-nasib-buruk- masyarakat-pesisir-akibat-tumpahan-minyak-di-karawang/ (accessed Apr. 24, 2020).
[12]  S. Sulistyono, “Dampak Tumpahan Minyak (Oil Spill) di Perairan Laut pada Kegiatan Industri Migas dan Metode Penanggulangannya,” Swara Patra , vol. 3, no. 1, 2013.
[13]  Josh  Clark,  “How  do  you  clean  up  an  oil  spill?  |  HowStuffWorks.” http://science.howstuffworks.com/environmental/green- science/cleaning-oil-spill.htm (accessed Apr. 24, 2020).
[14]  L.  H.  KEPMEN,  “Keputusan  Menteri  Lingkungan  Hidup  Nomor:  128 Tahun  2003  Tentang  Tata  Cara  dan  Persyaratan  Teknis  Pengolahan Limbah  Minyak  Bumi  dan  Tanah  Terkontaminasi  oleh  Minyak  Bumi Secara Biologis.” Kementerian Lingkungan Hidup, 2003.
[15]  Z. AlDisi, S. Jaoua, D. Al-Thani, S. AlMeer, and N. Zouari, “Isolation, screening  and  activity  of  hydrocarbon-degrading  bacteria  from  harsh soils,” 2016.
[16]  Y. Darmayati, “Pengenalan Tentang Bioremediasi Untuk Perairan Pantai Tercemar Minyak.” Oseana, 2013.
[17]  “A  Citizen’s  Guide  to  Bioremediation.  EPA  542-F-12-003  September 2012,” United States Environmental Protection Agency (US EPA), 2012.
[18]  A.  C.  Asri  and  E.  Zulaika,  “Sinergisme  antar  isolat  Azotobacter  yang dikonsorsiumkan,” J. Sains dan Seni ITS , vol. 5, no. 2, 2016.
[19]  C. Bhuvaneswar, G. Swathi, B. V Bhaskar, T. Munichandrababu, and W. Rajendra, “Effective synergetic biodegradation of diesel oil by bacteria,” Int. J. Environ. Biol. , vol. 2, no. 4, pp. 195–199, 2012.
[20]  “Guidelines for The Bioremediation of Marine Shorelines and Freshwater Wetlands. Cincinnati. EPA,” 2001.
[21]  M.  F.  Imron,  “Optimasi  Proses  Biodegradasi  Solar  oleh  Isolat  Bakteri dengan  Menggunakan  Response  Surface  Methodology  (RSM)  Desain Box Behnken,” ITS, 2018.
[22]  “Method  9071B,  n-Hexane  Extractable  Material  (HEM)  for  Sludge, Sediment, and, Soild Samples. Washington DC. U.S. EPA,” United States Environmental Protection Agency (US EPA), 1999.
[23]  I.  Crystiana,  T.  M.  Susantoro,  and  N.  Firdaus,  “Pengolahan  Data  Citra Satelit  untuk  Mengidentifikasi  Potensi  Jebakan  dalam  Kegiatan Eksplorasi Migas,” Lembaran Publ. Miny. dan Gas Bumi , vol. 49, no. 1, pp. 41–51, 2015.
[24]  G. J. Connel, D.W., dan Miller, “Kimia dan Otoksikologi Pencemaran,” Universitas Indonesia Press. Jakarta, 1995.
[25]  D.  Rachmawani,  F.  Yulianda,  C.  Kusmana,  M.  Boer,  and  E.  Parwati, “Dampak  Hidrokarbon  Aromatik  Terhadap  Ekosistem  Mangrove  Di Kawasan  Binalatung  Kota  Tarakan  Kalimantan  Utara  (Impact  of Aromatic  Hydrocarbon  on  Mangrove  Ecosystem  in  Binalatung  Area Tarakan City North Kalimantan),” J. Mns. dan Lingkung. , vol. 23, no. 3, pp. 295–303, 2016.
[26]  P.  Jurdilla,  N.  Azizah,  A.  F.  Wati,  and  others,  “Industri  Pengolahan Minyak Bumi di Indonesia,” 2019.
[27]  R.  Rajagukguk,  “Pengaruh  Bakteri  Azotobacter,  Bacillus  Subtilis,  Dan Pseudomonas  Putida Terhadap Laju  Korosi Alumunium 6063,” Institut Teknologi Sepuluh Nopember, 2017.
[28]  S. K. Panda, R. N. Kar, and C. R. Panda, “Isolation and identification of petroleum hydrocarbon degrading microorganisms from oil contaminated environment,” Int. J. Environ. Sci. , vol. 3, no. 5, pp. 1314–1321, 2013.
[29]  D.  Astuti,  “Pengaruh  Variasi  Jumlah  Inokulum  Konsorsium  Bakteri Terhadap Degradasi Hidrokarbon Minyak Bumi,” Skripsi. Fak. Mat. dan
Ilmu Pengetah. Alam. Progr. Stud. Biol. Univ. Indones. Depok , 2012.
[30]  R.  A.  Bhaktinagara,  A.  Suprihadi,  and  B.  Raharjo,  “Biodegradasi Senyawa  Hidrokarbon  Oleh  Strain  Bacillus  cereus  (VIC)  Pada  Kondisi Salinitas Yang Berbeda,” J. Akad. Biol. , vol. 4, no. 3, pp. 62–71, 2015. [31]  I. F. Purwanti et al. , “Biodegradation of diesel by bacteria isolated from Scirpus mucronatus rhizosphere in diesel-contaminated sand,” Adv. Sci.
Lett. , vol. 21, no. 2, pp. 140–143, 2015.
[32]  P.  Prabhakaran,  A.  Sureshbabu,  S.  Rajakumar,  and  P.  M.  Ayyasamy, “Bioremediation of crude oil in synthetic mineral salts medium enriched with aerobic bacterial consortium,” Int. J. Innov. Res. Sci. Eng. Technol. , vol. 3, no. 2, pp. 9236–9242, 2014.
[33]  N. Sakthipriya, M. Doble, J. S. Sangwai, and others, “Bioremediation of coastal  and  marine  pollution  due  to  crude  oil  using  a  microorganism Bacillus subtilis,” Procedia Eng. , vol. 116, no. 1, pp. 213–220, 2015.
[34]  D.  Sudrajat,  N.  Mulyana,  and  D.  L.  Tri  Retno,  “Isolasi  dan  aplikasi mikroba  indigen  pendegradasi  hidrokarbon  dari  tanah  tercemar  minyak bumi,” Pros. Pertem. dan Present. Ilmiah-BATAN , 2015.
[35]  M. J. S. Wenti and others, “Biodegradasi Oil Sludge dengan Variasi Lama Waktu  Inkubasi  dan  Jenis  Konsorsium  Bakteri  112  yang  Diisolasi  dari Lumpur Pantai Kenjera,” UNIVERSITAS AIRLANGGA, 2012.
[36]  T.  Sumarsono,  “Efektivitas  Jenis  dan  Konsentrasi  Nutrien  dalam Bioremediasi  Tanah  Tercemar  Minyak  Mentah  yang  Diaugmentasi dengan Konsorsium Bakteri,” Universitas Airlangga, Surabaya, 2009.
[37]  “Megaborg Oil Spill - YouTube.”
https://www.youtube.com/watch?v=eCzhmGHQ_1c  (accessed  Jul.  01, 2020).
[38]  A.  Nzila,  S.  A.  Razzak,  and  J.  Zhu,  “Bioaugmentation:  an  emerging strategy of industrial wastewater treatment for reuse and discharge,” Int. J. Environ. Res. Public Health , vol. 13, no. 9, p. 846, 2016.