## Peredaman Radikal Bebas DPPH dan Aktivitas Inhibisi α-Glukosidase oleh Ekstrak Air Jahe Merah
(DPPH Free Radical Scavenging and α-Glucosidase Inhibition Activity of Aqueous Extract of Red Ginger)
Dinar Mutiara Hikmah 1 , Mega Safithri 2,3 , Tiana Fitrilia 1*
1 Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi, Fakultas Ilmu Pangan Halal, Universitas Djuanda Bogor
2 Departemen Biokimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, IPB University
3 Pusat Studi Biofarmaka, IPB University
Received: 12 September 2023; Review: 15 December 2023; Accepted: 25 January 2024
Corresponding author, email: tiana.fitrilia@unida.ac.id*

## ABSTRACT
Red ginger (Zingiber officinale Roxb. var. Rubrum) contains phenolic compounds that can potentially reduce  blood  glucose  levels  (antihyperglycemic)  in  patients  with  diabetes  mellitus.  This  study  aimed  to determine the inhibitory activity toward α-glucosidase, antioxidant activity in reducing DPPH free radicals, and total phenolic content of aqueous extract of red ginger. The red ginger was extracted using water solvent at 100 ο C for 15 minutes. Analysis of antioxidant activity, inhibitory activity of α-glucosidase, and total phenolic content using the spectrofotometry. Antioxidant activity showed that the extracts from the first, second and third replicates were not significantly different (p<0.05). α-glucosidase inhibition activity showed that the 1st replicate extract had the highest value of 97.729% and was significantly different (p<0.05) from the 2nd and 3rd replicate extracts and acarbose. The total phenolic content showed that the 2nd replicate extract had the highest value, namely 27,624 mg GAE/g extract and was significantly different (p<0.05) from the 1st and 3rd replicate extracts. The 1st, 2nd, and 3rd replicates of red ginger aqueous extract has the same antioxidant activity and equivalent glucosidase inhibitory activity as acarbose.
Keywords : α-glucosidase, antioxidant, red ginger, water extract

## ABSTRAK
Jahe  merah  (Zingiber  officinale  Roxb.  var.  Rubrum)  mengandung  senyawa  fenolik  yang  berpotensi menurunkan  kadar  glukosa  darah  (antihiperglikemik).  Penelitian  ini  bertujuan  menentukan  aktivitas antioksidan,  aktivitas  inhibisi  α-glukosidase,  dan  kadar  total  fenolik  ekstrak  air  jahe  merah  pada  ekstrak ulangan 1, 2, dan 3. Jahe merah diekstraksi menggunakan pelarut air pada suhu 100 ο C selama 15 menit. Analisis aktivitas antioksidan, aktivitas inhibisi α-glukosidase, dan kadar total fenolik menggunakan teknik spektrofotometri. Aktivitas antioksidan menunjukkan bahwa ekstrak ulangan pertama, kedua dan ketiga tidak berbeda nyata (p<0,05). Aktivitas inhibisi α-glukosidase menunjukkan bahwa ekstrak ulangan ke-1 memiliki nilai tertinggi 97.729% dan berbeda nyata (p<0,05) dengan ekstrak ulangan ke-2 dan ke-3. Kadar total fenolik menunjukkan bahwa esktrak ulangan ke-2 memiliki nilai tertinggi yaitu 27.624 mg GAE/g ekstrak dan berbeda nyata  (p<0,05)  dengan  ekstrak  ulangan  1  dan  3.  Ekstrak  air  jahe  merah  ulangan  ke-1,2,  dan  3  memiliki kekuatan aktivitas antioksidan yang sama dan aktivitas inhibisi α-glukosidase yang masih berada diatas 90%. Kata kunci: α-Glukosidase, Antioksidan, Ekstrak air, Jahe Merah
CURRENT BIOCHEMISTRY ISSN: 2355-7877 | e-ISSN: 2355-7931
Journal homepage: http://journal.ipb.ac.id/index.php/cbj
1. PENDAHULUAN Diabetes  melitus  merupakan  penyakit metabolik yang ditandai dengan hiperglikemia kronis  (kadar  glukosa postprandial mencapai ≥200  mg/dL).  Diabetes  melitus  dibedakan menjadi  tipe  1  yang  umumnya  dialami  oleh anak-anak  dan  remaja  karena  pankreas  tidak mampu  atau  hanya  sedikit  menghasilkan insulin sehingga diperluan terapi insulin setiap hari sesuai anjuran dokter, adapun tipe 2 yang lebih  banyak  dialami  oleh  orang  dewasa  dan menyumbangkan ±90% dari total kasus akibat gaya  hidup  tidak  sehat  sehingga  tubuh  tidak mampu memanfaatkan insulin yang dihasilkan dengan baik (International Diabetes Federation 2021).  Berdasarkan  hasil  Riset  Kesehatan Dasar (Riskesdas 2018), faktor risiko diabetes melitus  tipe  2  yaitu  pola  konsumsi  makanan manis  dengan  prevalensi  47.8%  (1–6  kali per  minggu)  dan  konsumsi  minuman  manis dengan  prevalensi  61.3%  (>1  kali  per  hari), selain itu prevalensi aktivitas fisik yang hanya mencapai  33.5%  (kurang  dari  66.5%)  juga dapat menyebabkan gula darah tidak terkontrol dengan baik.
International Diabetes Federation memprediksi kenaikan pasien diabetes melitus pada rentang usia 20–79 tahun di Indonesia dari 19.5  juta  jiwa  (2021)  menjadi  28.6  juta  jiwa (2045). Hasil Riskesdas 2018 juga menunjukkan peningkatan  jumlah  pasien  berusia  ≥15  tahun dengan  puncak  penderita  berusia  55-64  tahun dari  6.9%  (2013)  menjadi  8.5%  (2018). Tingginya  angka  diabetes  melitus  membuat dokter  melakukan  upaya  pengobatan  dengan pemberian obat oral antidiabetes maupun terapi insulin. Obat oral antidiabetes yang umumnya diberikan yaitu akarbosa yang bekerja dengan menginhibisi  aktivitas  enzim α -glukosidase. Enzim α -glukosidase  merupakan  enzim golongan  hidrolase  yang  mengkatalis  reaksi pemotongan ikatan glikosidik pada polisakarida menjadi  monosakarida  agar  dapat  diserap tubuh.  Pada  pasien  diabetes  melitus,  aktivitas enzim  ini  memicu  peningkatan  kadar  radikal bebas akibat peningkatan kadar gula darah yang berisiko  menyebabkan  komplikasi.  Akarbosa dapat  membantu  menjaga  kadar  gula  darah
sebagai  inhibitor  kompetitif  enzim  (Febrinda et al .  2013).  Namun  penggunaan  akarbosa jangka panjang dapat menyebabkan gangguan gastrointestinal seperti mual, muntah, dan nyeri perut sehingga kini banyak digunakan alternatif herbal  yang  minim  efek  samping  dan  disertai dengan  pengaturan  pola  makan  juga  olahraga (Yuniarto dan Selifiana 2018).
Salah  satu  herbal  yang  sudah  teruji mampu  membantu  mencegah  dan  menangani diabetes melitus adalah jahe merah. Jahe merah mengandung  komponen  khas  yaitu  minyak atsiri  dan  oleoresin.  Minyak  atsiri  merupakan komponen  volatil  yang  memberikan  aroma khas dan kandungannya lebih tinggi 2.6–3.9% dibandingkan  jenis  jahe  yang  lain.  Adapun oleoresin  merupakan  komponen  non  volatil pemberi  rasa  pedas  sehingga  terasa  lebih hangat  saat  mengkonsumsinya  (Pairul et al . 2017).  Potensi  jahe  merah  sebagai  herbal antidiabetes  didukung  penelitian  Safithri et al . 2016, yaitu formulasi minuman fungsional ekstrak  sirih  merah  ( Piper cromatum )  dan kayu  manis  ( Cinnamomum burmanii )  yang ditambahkan 15% ekstrak jahe merah ( Zingiber officinale Roxb. var . Rubrum) mampu menekan hiperglikemia  yang  memicu  diabetes  dengan menghinhibisi α -glukosidase  hingga  88.7%, meningkatkan  aktivitas  antioksidan  hingga 873.2 g/mL, menurunkan radikal bebas DPPH hingga  8.9%,  dan  meningkatkan  kadar  total fenolik  hingga  317.6  g/mL.  Secara  tunggal, ekstrak jahe merah pelarut air (500 mg/kg BB) diteliti  oleh  Al-amin et  al. (2016)  memiliki efek  penurunan  serum  glukosa,  kolesterol, dan  triasilgliserol  pada  tikus  yang  diinduksi diabetes.
Penelitian sebelumnya dilakukan dengan  menganalisis  aktivitas  antidiabetes dan  antioksidan  dari  ekstrak  ke-1  saja, sehingga  dilakukan  pengembangan  penelitian dengan melakukan ekstraksi secara bertingkat menggunakan  pelarut  air  sehingga  dapat ditentukan  aktivitas  inhibisi α -glukosidase, aktivitas  antioksidan  dalam  meredam  radikal bebas  DPPH,  dan  kadar  total  fenolik  dari ekstrak ke-1, ekstrak residu ke-1, dan ekstrak residu ke-2 jahe merah.
Hikmah et al. – Peredaman Radikal DPPH oleh Minuman Mikroenkapsulasi dan Nanoenkapsulasi

## 2. METODOLOGI
Preparasi Sampel Metode preparasi merupakan modifikasi dari metode Safithri et al . (2020). Jahe merah sebanyak 1 kg berumur 8–10 bulan dari Pusat Studi  Biofarmaka  Tropika  dicuci,  dipotong- potong  kecil  lalu  dikeringkan  dalam  oven EYELA NDO-700 pada suhu 50℃ selama 3–5 hari. Jahe merah kering diblender dan disaring untuk mendapatkan serbuk simplisia berukuran 80 mesh .
Ekstraksi Sampel Metode  ini  merupakan  modifikasi  dari metode Safithri et al . (2016). Serbuk simplisia sebanyak 10 g dihomogenkan dengan 100 mL akuades dengan perbandingan 1:10 triplo lalu dipanaskan  pada  penangas  selama  15  menit (50–60  ℃).  Larutan  disaring  dengan  kertas saring Whatman, lalu ampas (residu) diekstraksi kembali  dengan  100  mL  akuades.  Ekstraksi diulangi  hingga  didapatkan  masing-masing filtrat ekstrak residu ke-2. Filtrat hasil ekstraksi diuapkan menggunakan oven (evaporasi) pada suhu  50℃  selama  3  jam.  Rendemen  ekstrak ditimbang sebanyak 50 mg lalu dihomogenkan dengan  5  mL  akuades  sehingga  diperoleh larutan  sampel  uji  dengan  konsentrasi  10000 μg/mL.
Analisis Aktivitas Inhibisi α -Glukosidase Metode  ini  merupakan  modifikasi  dari metode  Sancheti et al .  (2009)  dan  Holidah et al. (2018).  Larutan  blanko,  larutan  ekstrak jahe  merah,  dan  larutan  standar  akarbosa disiapkan  ke  dalam 96-well  microplate berdasarkan  komposisi  pada  Tabel  1.  Enzim α -glukosidase  yang  digunakan  dari Bacillus stearothermophilus (SIGMA). Larutan diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  37℃. Reaksi  dihentikan  dengan  penambahan  100 μL  Na 2 CO 3 0.2  M.  Absorbansi  diukur  pada panjang  gelombang  410  nm  menggunakan SPECTROstar Nano BMG-LABTECH.

## Analisis Aktivitas Antioksidan Metode
DPPH Metode  ini  merupakan  modifikasi  dari metode  Rafi et al .  (2018).  Larutan  blanko,
larutan  ekstrak  jahe  merah,  dan  larutan  asam askorbat  (kontrol  positif)  disiapkan  ke  dalam 96-well microplate berdasarkan komposisi pada Tabel  2.  Konsentrasi  DPPH  yang  digunakan adalah 125 μmol/L. Larutan diinkubasi selama 30  menit  pada  suhu  25℃. Absorbansi  diukur pada  panjang  gelombang  515  nm.  Aktivitas antioksidan  dihitung  berdasarkan  kurva kalibrasi  standar  asam  askorbat  dan  hasilnya dinyatakan  dalam  satuan  mg  AAE/g  ekstrak kering.
Analisis Kadar Total Fenolik Metode  ini  merupakan  modifikasi  dari metode  Rafi et  al. (2018).  Larutan  blanko, larutan  ekstrak  jahe  merah,  dan  larutan  asam galat  (kontrol  positif)  disiapkan  ke  dalam 96-well  microplate berdasarkan  komposisi pada  Tabel  3.  Larutan  diinkubasi  selama  5 menit  pada  suhu  37℃.  Absorbansi  diukur pada panjang gelombang 750 nm. Kadar total fenolik  dihitung  berdasarkan  kurva  kalibrasi standar  asam  galat  dan  hasilnya  dinyatakan dalam satuan mg GAE/g ekstrak kering. Hasil dihitung dengan rumus sebagai berikut:
Total fenolik / g bobot kering mg GAE X L mg GAE FP m = Keterangan: V   = volume sampel di microplate (L) m   = massa sampe di microplate (g) FP  = faktor pengenceran
Analisis Data Metode  ini  mengacu  pada  Aunuddin (2005).  Data  hasil  penelitian  dianalisis menggunakan  program  Microsoft  Excel 2016  dan  SPSS  versi  25  dengan analysis of variance (ANOVA One Way ) dan diuji kembali menggunakan Uji Duncan dengan nilai level of significancy (α) 0.05.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Rendemen Ekstrak Air Jahe Merah Rendemen merupakan nilai perbandingan berat  kering  produk  yang  dihasilkan  dengan berat  bahan  baku  (Sani et al .  2014).  Nilai rendemen  berkaitan  dengan  banyaknya kandungan  senyawa  bioaktif  dalam  ekstrak,
semakin  tinggi  nilai  rendemen  maka  semakin tinggi  pula  kandungan  senyawa  bioaktifnya dan  ekstrak  dapat  dijadikan  sebagai  sumber antioksidan,  antibakteri,  antiinflamasi,  dan antikanker (Dewatisari et al . 2017). Rendemen ekstrak  air  jahe  merah  yang  diperoleh  dapat dilihat pada Tabel 4. Penurunan nilai rendemen dari  ekstrak  ke-1  hingga  ekstrak  residu  ke-2 terjadi  karena  terdapat  senyawa  bioaktif yang  terkandung  dalam  ekstrak  larut  dalam air  sehingga  terjadi  penurunan  bobot  sampel setelah  diekstraksi  (Dewatisari et al .  2017). Hasil  analisis  rendemen  menunjukkan  nilai p<0.05  yang  menunjukkan  bahwa  data  yang dianalisis berbeda secara signifikan.
Aktivitas Inhibisi α -Glukosidase Ekstrak Air Jahe Merah Uji kolorimetri merupakan metode yang paling  umum  dilakukan  untuk  mendeteksi aktivitas dan skrining α -glukosidase. Aktivitas  enzim  dan  efek  inhibitor  enzim ditentukan  melalui  hidrolisis p -nitrofenil- α - D-glukopiranosida  ( p -NPG).  Substrat p -NPG dihidrolisis  untuk  melepaskan  glukosa  dan p -nitrofenol  ( p -NP)  dan  dihasilkan  anion p -nitrofenolat  yang  berwarna  kuning. Adanya senyawa inhibitor α -glukosidase menyebabkan intensitas  warna  kuning  menjadi  beragam sesuai dengan nilai inhibisinya, semakin jernih warna  kuning  yang  dihasilkan  maka  glukosa yang  dihasilkan  semakin  sedikit,  artinya aktivitas inhibisi yang dihasilkan tinggi (Zhang et al . 2020). Hasil  analisis  pada  Gambar  1 menunjukkan  bahwa  ekstrak  ke-1  memiliki rata-rata  nilai  inhibisi α -glukosidase  tertinggi, yaitu  97.729  ±  0.160%,  dilanjutkan  dengan ekstrak  residu  ke-1  dan  ekstrak  residu  ke-2. Ekstrak  residu  ke-2  memiliki  nilai  rata-rata persen inhibisi α -glukosidase yang sama dengan akarbosa  (kontrol  positif)  konsentrasi  10  µg/ ml,  yaitu  95.143  ±  0.264%.  Hasil  analisis  uji ANOVA One Way menunjukkan  nilai  p<0.05 yang menunjukkan bahwa data yang dianalisis memiliki nilai yang berbeda nyata.
Analisis  aktivitas  inhibisi α -glukosidase ekstrak  air  jahe  merah  juga  telah  diuji  oleh Oboh et al . (2010) secara in vitro. Ekstrak air
jahe  merah  ( Zingiber  officinale  var .  Rubra) yang dibuat konsentrasi 1 mg/mL dan 2 mg/mL memiliki aktivitas inhibisi enzim α -glukosidase masing-masing  sebesar  25%  dan  50%.  Hasil analisis  aktivitas  inhibisi α -glukosidase  tidak selalu  sesuai  dengan  analisis  kadar  total fenolik  dan  aktivitas  antioksidan  karena jahe  merah  diketahui  mengandung  senyawa- senyawa fitokimia non fenolik yang merupakan penghambat  enzim  yang  kuat  (Oboh et al . 2010).

## Aktivitas Antioksidan Metode DPPH
Ekstrak Air Jahe Merah Analisis  aktivitas  antioksidan  ekstrak air  jahe  merah  dilakukan  menggunakan metode DPPH, sesuai dengan prinsip menurut Molyneux (2004) dalam (Rahman et al . 2014), yaitu  antioksidan  bereaksi  dengan  1,1-difenil- 2-pikrilhidrazil  (DPPH)  yang  menstabilkan radikal bebas dan mereduksi DPPH. DPPH akan bereaksi  dengan  atom  hidrogen  dari  senyawa peredam  radikal  bebas  membentuk  DPPH-H yang lebih stabil. Reagen DPPH yang bereaksi dengan antioksidan akan mengalami perubahan warna  dari  ungu  ke  kuning  dengan  intensitas warna  yang  bergantung  dari  kemampuan antioksidan. Metode DPPH memiliki keunggulan  yaitu  mudah,  cepat,  dan  sensitif untuk pengujian aktivitas antioksidan senyawa tertentu atau ekstrak tanaman (Wilapangga dan Sari 2018).
Analisis  aktivitas  antioksidan  ekstrak air  jahe  merah  diukur  berdasarkan  kapasitas antioksidan  ekstrak  yang  disetarakan  dengan standar  asam  askorbat  dan  dinyatakan  dalam miligram Ascorbic  Acid  Equivalent per  gram (mg  AAE/g)  ekstrak.  Hasil  analisis  pada Gambar 2 menunjukkan bahwa ekstrak residu ke-1  memiliki  rata-rata  aktivitas  antioksidan tertinggi  sebesar  4.682  ±  0.023  mg  AAE/g, dilanjutkan  dengan  ekstrak  ke-1  dan  ekstrak residu  ke-2.  Tingginya  aktivitas  antioksidan pada ekstrak residu ke-1 dikarenakan tingginya kandungan  senyawa-senyawa  metabolit  yang memiliki  aktivitas  spesifik  sebagai  senyawa antioksidan  dalam  ekstrak  (Lakshmi et al . 2018).  Hasil  uji  ANOVA  menunjukkan  nilai p>0.05  yang  menunjukkan  bahwa  data  yang
Hikmah et al. – Peredaman Radikal DPPH oleh Minuman Mikroenkapsulasi dan Nanoenkapsulasi
Tabel 1 Komposisi larutan analisis aktivitas inhibisi α -glukosidase Larutan Blanko (μL) Kontrol (-) blanko (μL) Akarbosa (μL) Kontrol (-) akarbosa (μL) Sampel (μL) Kontrol (-) sampel (μL) Sampel (10000 µg/mL) - - - - 10 10 Akuades 10 10 - - - - Akarbosa (10 µg/mL) - - 10 10 - - Buffer fosfat 0.1 M pH 7.0 50 75 50 75 50 75 p -NPG 0.5 mM 25 25 25 25 25 25 Enzim α -glukosidase 0.07 U/mL 25 - 25 - 25 - Na 2 CO 3 (0.2 M) 100 100 100 100 100 100 Tabel 2 Komposisi larutan analisis aktivitas antioksidan metode DPPH Larutan Blanko (μL) Kontrol (-) blanko (μL) Asam askorbat (μL) Kontrol (-) asam askorbat (μL) Sampel (μL) Kontrol (-) sampel (μL) Sampel (10000 µg/mL) - - - - 40 290 Akuades 40 290 - - - - Asam askorbat (100,50,25,12.5, 6.25,3.125,1.5625 µg/mL) - - 40 290 - - DPPH 125 µ mol/L dalam metanol 250 - 250 - 250 - Tabel 3 Komposisi larutan analisis kadar total fenolik Larutan Blanko (μL) Kontrol (-) blanko (μL) Asam galat (μL) Kontrol (-) asam galat (μL) Sampel (μL) Kontrol (-) sampel (μL) Sampel (10000 µg/mL) - - - - 10 20 Akuades 10 20 - - - - Asam galat (1000, 500, 250, 125, 62.5, 31.25, 15.625 µg/mL) - - 10 20 - - Reagen Folin-Ciocalteu 10% 10 - 10 - 10 - Na 2 CO 3 7.5% 25 25 25 25 25 25 Tabel 4 Rendemen ekstrak air jahe merah Sampel Rendemen (%) Ekstrak ke-1 9.616 ± 2.620 a Ekstrak residu ke-1 3.993 ± 0.569 b Ekstrak residu ke-2 2.579 ± 0.405 b
dianalisis  memiliki  nilai  yang  tidak  berbeda nyata. Analisis  aktivitas  antioksidan  DPPH ini  dilakukan  menggunakan  pelarut  air  agar hasilnya sesuai dengan tujuan pembuatan ekstrak sebagai  minuman  fungsional.  Penggunaan  air sebagai pelarut ini menyesuaikan dengan sifat DPPH yang larut pada pelarut polar. Menurut pernyataan  Arguirre  dan  May  (2008),  asam askorbat larut dalam air karena asam askorbat
merupakan  komponen  yang  banyak  terlibat dalam membantu metabolisme energi. Vitamin larut air biasanya tidak disimpan dalam tubuh dan dikeluarkan melalui urin dalam jumlah kecil sehingga  perlu  dikonsumsi  setiap  hari  untuk mencegah kekurangan yang dapat mengganggu homeostasis metabolisme tubuh.
Analisis  aktivitas  antioksidan  ekstrak jahe merah juga dilakukan oleh Herawati dan Saptarini  (2019)  menggunakan  jenis  pelarut
Gambar 1. Aktivitas inhibisi α -glukosidase ekstrak air jahe merah
Data analisis yang dicantumkan adalah data mean ± standard error mean (SEM). Huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan hasil tidak beda nyata pada taraf kepercayaan 95% (α = 0.05).
Gambar 2 Aktivitas antioksidan metode DPPH ekstrak air jahe merah
Data analisis yang dicantumkan adalah data mean ± standard error mean (SEM). Huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan hasil tidak beda nyata pada taraf kepercayaan 95% (α = 0.05).
Gambar 3 Kadar total fenolik ekstrak air jahe merah
Data analisis yang dicantumkan adalah data mean ± standard error mean (SEM). Huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan hasil tidak beda nyata pada taraf kepercayaan 95% (α = 0.05).
Hikmah et al. – Peredaman Radikal DPPH oleh Minuman Mikroenkapsulasi dan Nanoenkapsulasi
polar  lain,  yaitu  etanol  96%:HCl  12  N  (pH 1). Sampel dibuat deret konsentrasi 200, 400, 600, 800, dan 1000 ppm serta larutan standar asam askorbat juga dibuat deret konsentarasi 2, 4, 6, 8, dan 10 ppm dengan hasil uji tertinggi yaitu 97.4% pada konsentrasi standar 10 ppm dan  sebesar  54.91%  pada  konsentrasi  ekstrak jahe  merah  100  ppm.  Aktivitas  antioksidan ekstrak  jahe  merah  memiliki  nilai  persen yang lebih rendah dari asam askorbat sebagai kontrol  positif.  Ekstrak  bukan  merupakan sampel  dengan  kandungan  senyawa  murni karena  ekstrak  juga  mengandung  komponen lainnya  seperti  flavonoid,  tanin,  dan  alkaloid yang  juga  memiliki  aktivitas  antioksidan yang  memiliki  gugus  hidroksil  sehingga dapat  menyumbangkan  atom  hidrogen  untuk berinteraksi dengan radikal DPPH.

## Kadar Total Fenolik Ekstrak Air Jahe
Merah Senyawa  fenolik  merupakan  senyawa metabolit  sekunder  yang  berperan  sebagai antioksidan  alami  pada  tumbuhan.  Senyawa fenolik  memiliki  satu  cincin  fenol  atau  lebih (polifenol), cincin ini merupakan gugus hidroksi yang  terikat  pada  cincin  aromatis  sehingga mudah  teroksidasi  dengan  menyumbangkan atom hidrogen (H + ) pada radikal bebas sehingga senyawa radikal akan bersifat stabil (Dhurhania dan Novianto 2018).
Analisis  kadar  total  fenolik  ekstrak jahe  merah  dilakukan  secara  kolorimetri menggunakan metode Folin-Ciocalteu . Prinsip metode  ini  yaitu  reduksi  gugus  fungsional senyawa fenol berupa kompleks fosfotungstat- fosfomolibdenum  pada  suasana  basa  yang akan  membentuk  kompleks  berwarna  biru yang  diukur  absorbansinya  dengan  serapan maksimum 730–770 nm. Intensitas warna yang terbentuk  akan  sesuai  dengan  kadar  fenolik yang terkandung dalam sampel, semakin pekat kompleks  warna  yang  dihasilkan  maka  kadar total  fenoliknya  akan  semakin  tinggi  pula (Nurhayati et al . 2012). Analisis  kadar  total  fenolik  ekstrak  air jahe merah yang diukur berdasarkan kapasitas fenolik  ekstrak  yang  disetarakan  dengan standar  asam  galat  dan  dinyatakan  dalam
miligram Gallic Acid Equivalent per gram (mg GAE/g)  ekstrak.  Hasil  analisis  pada  Gambar 3  menunjukkan  bahwa  ekstrak  residu  ke-2 memiliki  rata-rata  tertinggi  sebesar  27.624  ± 0.149  mg  GAE/g,  dilanjutkan  dengan  ekstrak ke-1  dan  ekstrak  residu  ke-1.  Hasil  analisis dapat dipengaruhi oleh suhu pemanasan karena jahe merah mengandung gingerol yang sangat tidak  stabil  dengan  adanya  panas  sehingga akan  berubah  menjadi  shogaol,  kondisi  ini menunjukkan  adanya  penurunan  kualitas  jahe merah  karena  pemanasan  yang  terjadi  saat proses  ekstraksi  (Srikandi et al .  2020).  Hasil uji  ANOVA  menunjukkan  nilai  p<0.05  yang menunjukkan  bahwa  data  kadar  total  fenolik ekstrak air jahe merah yang dianalisis memiliki nilai yang berbeda nyata.
Analisis  kadar  total  fenolik  juga diuji  oleh  Suryani  (2012)  pada  ekstrak  jahe emprit  ( Zingiber  officinalle  var .  Rubrum) menggunakan pelarut etanol 95%. Hasil analisis ekstrak  jahe  yang  diekstraksi  dengan  metode maserasi  didapatkan  nilai  kadar  total  fenolik yang ditentukan pada jam ke-12 sebesar 203.00 mg/g GAE, lalu pada jam ke-24 sebesar 219.14 mg/g GAE, dan pada jam ke-36 sebesar 371.12 mg/g  GAE.  Penggunaan  pelarut  etanol  dan semakin lamanya waktu ekstraksi meningkatkan efektivitas ekstraksi karena proses inisiasi yang mengekstrak komponen polifenol dari bahan dan proses  difusi  pelarut  ke  bagian-bagian  sampel yang lebih dalam sehingga komponen polifenol (pigmen)  akan  ikut  terekstrak.  Nilai  kadar total fenolik lebih tinggi dibandingkan dengan hasil  analisis  yang  menggunakan  pelarut  air. Hal ini dipengaruhi oleh kemampuan senyawa metabolit  berikatan  dengan  pelarut  (kepolaran senyawa metabolit).
Jahe  merah  ( Zingiber  officinale Roxb. var . Rubrum) yang telah diekstraksi bertingkat hingga  didapatkan  ekstrak  residu  ke-2 memiliki nilai  aktivitas inhibisi α -glukosidase tertinggi  pada  ekstrak  ke-1  sebesar  97.729%. Nilai  aktivitas  antioksidan  dalam  meredam radikal bebas DPPH tertinggi didapatkan pada ekstrak  residu  ke-1  sebesar  4.682  mg AAE/g ekstrak,  dan  nilai  kadar  total  fenolik  tertinggi didapatkan  pada  ekstrak  residu  ke-2  sebesar 27.624  mg  GAE/g  ekstrak.  Nilai  aktivitas inhibisi α -glukosidase  dan  kadar  total  fenolik
memiliki  perbedaan  nilai  yang  signifikan (p<0.05), sedangkan nilai aktivitas antioksidan dalam meredam radikal bebas DPPH memiliki perbedaan nilai yang tidak signifikan (p>0.05).

## 4. UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan  terimakasih  kami  sampaikan kepada Lembaga Kawasan Sains dan Teknologi (LKST) IPB melalui Program Inovasi Prospektif dan  Pengembangan  Minuman  Fungsional LKST IPB 2021 dengan judul Herbal Ready To Drink Sirih Merah sebagai Antidiabetes an. Dr. Mega Safithri, S.Si., M.Si.

## DAFTAR PUSTAKA
[IDF]  International  Diabetes  Federation. 2021.  IDF  Diabetes  Atlas . 10 th edition. International Diabetes Federation, Brussels.
[Kemenkes  RI]  Kementerian  Kesehatan Republik  Indonesia.  2018.  Hasil  Utama Riskesdas.  Diunduh  3  April  2022  dari https://www.litbang.kemkes.go.id/hasil- utama-riskesdas-2018/.
Aguirre R, May JM. 2008. Inflammation in the vascular  bed:  importance  of  vitamin  C. Pharmacol Ther . 119(1):96–103.
Al-amin  ZM,  Thomson  M,  Al-Qattan  KK,
Peltonen-Shalaby R, Ali M. 2006. Anti- diabetic  and  hypolipidaemic  properties of  ginger  ( Zingiber  officinale )  in streptozotocin-induced diabetic rats. Br J Nutr . 96(4):660-6.
Aunuddin.  2005.  Statistika:  Rancangan  dan Analisis Data. IPB Press, Bogor.
Dewatisari  WF,  Rumiyanti  L,  Rakhmawati  I. 2017.  Rendemen  dan  skrining  fitokimia pada ekstrak daun Sanseviera sp. J Penelit Pertan Terap . 17(3):197–202.
Dhurhania  CE,  Novianto  A.  2019.  Uji kandungan fenolik total dan pengaruhnya terhadap  aktivitas  antioksidan  dari berbagai  bentuk  sediaan  sarang  semut
( Myrmecodia pendens ). J Farm Dan Ilmu Kefarmasian Indones . 5(2):62–68.
Febrinda EA, Astawan M, Wresdiyati T, Dewi Yuliana  N.  2013.  Kapasitas  antioksidan dan  inhibitor  alfa  glukosidase  ekstrak
umbi  bawang  dayak. J Teknol dan Ind Pangan . 24(2):161–167. Herawati  IE,  Saptarini  NM.  2019.  Studi fitokimia  pada  jahe  merah  ( Zingiber officinale Roscoe Var .  Sunti  Val). Maj Farmasetika . 4(1):22–27. Holidah D, Yasmin Y, Christianty FM. 2018. Uji aktivitas  antidiabetes  ekstrak  teh  hitam dan teh hijau secara in vitro menggunakan metode  inhibisi  enzim α -glukosidase. Pustaka Kesehat . 6(2):235–239. Lakshmi BKM, Muni Kumar D, Hemalatha KPJ. 2018. Purification and characterization of alkaline  protease  with  novel  properties from Bacillus cereus strain S8. J. Genet. Eng. Biotechnol . 16(2):295–304. Nurhayati,  Siadi  K,  Herjono.  2012.  Pengaruh konsentrasi  natrium  benzoat  dan  lama penyimpanan  pada  kadar  fenolat  total pasta tomat. Indo. J. Chem. Sci . 1(2):158– 163.
Oboh  G,  Akinyemi  AJ,  Ademiluyi  AO, Adefegha  SA.  2010.  Inhibitory  effects of  aqueous  extracts  of  two  varieties  of ginger  on  some  key  enzymes  linked  to type-2 diabetes in vitro. J Food Nutr Res . 49(1):14–20.
Pairul  PPB,  Susianti,  Nasution  SH.  2017. Jahe  ( Zingiber  officinale )  sebagai  anti ulserogenik. Medula . 7(5):42–46.
Rafi M, Febriany S, Wulandari P, Suparto IH, Ridwan  T,  Rahayu  S,  Siswoyo  DM. 2018.  Total  phenolics,  flavonoids,  and anthocyanin  contents  of  six  Vireya Rhododendron  from  Indonesia  and evaluation of their antioxidant activities.
J Appl Pharm Sci . 8(9):49–54.
Rahman N, Bahriul P, Diah A. 2014. Uji aktivitas antioksidan ekstrak daun salam ( Syzygium polyanthum )  dengan  menggunanakan 1,1-difenil-2-pikrilhidrazil. J  Akad  Kim . 3(3):143–149.
Safithri  M,  Indariani  S,  Septiyani  D.  2020.
Aktivitas  antioksidan  dan  total  fenolik minuman  fungsional  nanoenkapsulasi berbasis  ekstrak  sirih  merah. Indones J Hum Nutr . 7(1):69–83.
Hikmah et al. – Peredaman Radikal DPPH oleh Minuman Mikroenkapsulasi dan Nanoenkapsulasi
Safithri  M,  Kurniawati  A,  Syaefudin.  2016. Formula  of Piper cromatum , Cinnamon burmanii , and Zingiber officinale extracts as a functional beverage for diabetics. Int Food Res J. 23(3):1123–1130. Sancheti  S,  Sandesh  S,  Sung  YS.  2009. Chaenomeles  sinensis:  a  potent  α-and β-glucosidase inhibitor. Am J Pharm and Toxicol . 4(1):8–11.
Sani RN, Nisa FC, Andriani RD, Maligan JM. 2014.  Analisis  rendemen  dan  skrining fitokimia  ekstrak  etanol  mikroalga laut Tetraselmis chuii . J Pangan dan Agroindustri . 2(2):121–126. Srikandi S, Humaeroh M, Sutamihardja R. 2020.
Kandungan  gingerol  dan  shogaol  dari ekstrak  jahe  merah  ( Zingiber  Officinale Roscoe)  dengan  metode  maserasi bertingkat. Al-Kimiya . 7(2):75–81.
Suryani  L.  2012.  Optimasi  metode  ekstraksi fenol dari rimpang jahe emprit ( Zingiber officinale  Var .  Rubrum). J AgriSains . 3(4):63–70.
Wilapangga A, Sari LP. 2018. Analisis fitokimia dan  antioksidan  metode  DPPH  ekstrak metanol daun salam ( Eugenia polyantha ). Indones J Biotechnol Biodivers . 2(1):19– 24.
Yuniarto A, Selifiana N. 2018. Aktivitas inhibisi enzim  alfa-glukosidase  dari  ekstrak rimpang  bangle  ( Zingiber cassumunar Roxb.)  secara  in  vitro. Media Pharm Indones . 2(1):22–25. Zhang X, Li GD, Yu Y, Hu N, Wang H, Li X, Wu Y. 2020. Emerging strategies for the activity assay and inhibitor screening of alpha-glucosidase. Food Funct . 11(1):66– 82