SERUM ANTIAGING KOMBINASI EKSTRAK BUAH CEREMAI ( Phyllanthus acidus L.
SKEELS) DAN KULIT BUAH SEMANGKA ( Citrullus lanatus THUNB.)
Eneng Elda Ernawati 1 *, Nani Suryani 2 , Sifa Nuramalia 1 , Tarso Rudiana 2
1 Program Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi, Sains dan Kesehatan, Universitas Mathla’ul Anwar 2 Program Sarjana Kimia, Fakultas Farmasi, Sains dan Kesehatan, Universitas Mathla’ul Anwar *Email : eldaernawati090291@gmail.com Received: 27/12/2023 , Revised: 15/02/2024 , Accepted: 27/05/2024, Published: 29/05/2024

## ABSTRAK
Kulit dapat mengalami penuaan atau aging yang didefinisikan sebagai hilangnya keseimbangan homeostatik  suatu  organisme  secara  progresif.  Indikator  aging  diantaranya  keberadaan hyperpigmentasi  yang  disebabkan  oleh  enzim  tyrosinase.  Banyak  Cara  yang  dapat  dilakukan untuk    mencegah  aging  adalah  dengan  melakukan  perawatan  kulit  menggunakan  serum antiaging . Senyawa  bioaktif  dari  tanaman  berkembang  dan  populer  untuk  digunakan  sebagai bahan  kosmetik  dalam  formulasi  karena  banyak  dilaporkan  mengandung  vitamin,  antioksidan, minyak  essensial,  protein,  senyawa  fenolik,  dan  zat  aktif  lainnya.  Buah  Ceremai  ( Phyllantus acidus ) diidentifikasi mengandung senyawa asam glikolat dan asam sitrat, sedangkan kulit buah semangka  ( Citrullus  lanatus )  mengandung  saponin,  tanin,  alkaloid  dan  flavonoid.  Tujuan penelitian ini adalah untuk membuat formulasi serum antiaging dari kombinasi buah ceremai ( Phyllantus acidus ) dan ekstrak kulit buah semangka ( Citrullus lanatus ) sebagai inhibisi enzim tirosinase.  Penelitian  ini    meliputi  pengujian  aktivitas  ekstrak  dan  sediaan  serum  terhadap inhibisi enzim tirosinase dengan metode in vitro menggunakan ELISA. Hasil penelitian aktivitas inhibisi enzim tirosinase ekstrak buah ceremai menunjukan nilai IC 50 sebesar 9.551 µg/mL dan ekstrak kulit buah semangka 3.304 µg/mL. Inhibisi enzim tirosinase serum F1 mendapatkan nilai IC 50 1.137  µg/mL  sedangkan  F2  sebesar  1.025  µg/mL.    Hasil  yang  dapat  disimpulkan  bahwa ekstrak kulit buah semangka lebih aktif sebagai inhibisi enzim tirosinase daripada ekstrak buah ceremai  tetapi  hasil  sediaan  serum  menunjukan  hasil  yang  memiliki  potensi  sebagai  inhibisi enzim tyrosinase.
Kata kunci : Antiaging, Citrullus lanatus , Serum, Phyllantus acidus

## ABSTRACT
Skin can experience aging or aging which is defined as the progressive loss of the homeostatic balance of an organism. Indicators of aging include the presence of hyperpigmentation caused by the enzyme tyrosinase. There are many ways you can prevent aging, namely by taking care of your skin using antiaging serum. Bioactive compounds from plants are developing and popular for  use  as  cosmetic  ingredients  in  formulations  because  they  are  widely  reported  to  contain vitamins, antioxidants, essential oils, proteins, phenolic compounds and other active substances. Ceremai  fruit  (Phyllantus  acidus)  was  identified  as  containing  glycolic  acid  and  citric  acid compounds, while watermelon (Citrullus lanatus) rind contains saponins, tannins, alkaloids and
Ernawati et al./Pharmacoscript, Volume 7, No, 1 Februari 2024, 110-121
Safitri.,et al./Pharmacoscript, Volume 1, No. 2, Februari 2019, 1-12
Ernawati et al.;Serum Antiaging Kombinasi…..Pharmacoscript Volume 7 No. 1, Februari 2024
flavonoids.  The  aim  of  this  research  is  to  create  an  antiaging  serum  formulation  from  a combination of cermai fruit (Phyllantus acidus) and watermelon rind extract (Citrullus lanatus) as  an  inhibitor  of  the  tyrosinase  enzyme.  This  research  includes  testing  the  activity  of extracts and serum preparations against the inhibition of the tyrosinase enzyme using the in vitro method using ELISA. The results of research on the tyrosinase enzyme inhibition activity of ceremai fruit extract  showed  an  IC 50 value  of  9,551  µg/mL  and  watermelon  rind  extract  3,304  µg/mL. Inhibition of the serum tyrosinase enzyme F1 obtained an IC 50 value of 1,137 µg/mL while F2 was 1,025 µg/mL. The results can be concluded that watermelon rind extract is more active as an  inhibitor  of  the  tyrosinase  enzyme  than  ceremai  fruit  extract,  but  the  results  of  the  serum preparation show results that have potential as an inhibitor of the tyrosinase enzyme.
Keywords : Antiaging, Citrullus lanatus , Serum, Phyllantus acidus

## PENDAHULUAN
Kulit  dapat  mengalami  penuaan  atau aging yang  didefinisikan  sebagai  hilangnya keseimbangan  homeostatik  suatu  organisme secara progresif. Aging bisa disebabkan oleh kerusakan  intrinsik  karena  penuaan  usia ataupun kerusakan ekstrinsik yang disebabkan oleh  kekeringan, sinar matahari, rokok,  dan  polusi  (Pratsinis  &  Kletsas, 2019).  Secara  klinis aging atau penuaan pada  kulit  ditandai  dengan  hilangnya kelembaban, tekstur kasar, kerutan, penipisan  kulit,  garis-garis  halus  dan hiperpigmentasi  (Azmi et  al .,  2014).
Indikator  aging  diantaranya  keberadaan hiperpigmentasi  yang  disebabkan  oleh enzim  tirosinase.  Enzim  tirosinase  adalah enzim  yang  terlibat  dalam  biosintesis melanin.  Ketika  proses  melanin  diproduksi secara  abnormal  oleh  bantuan  enzim tirosinase maka akan menyebabkan hiperpigmentasi kulit (Roselan et al. , 2020).
Ketertarikan  pada enzim  antitirosinase akan meningkatkan  produksi  pemutih  dalam
kosmetik,  Senyawa  sintesis  telah  banyak digunakan untuk mencegah produksi melanin  yang  berlebih  di  lapisan  epidermis sebagai  atau  agen  pemutih,  namun  banyak berefek  negatif.  Beberapa  senyawa  alami yang dikenal seperti asam kojat, asam salisil hidroksamat, katekin, dan hidrokuinon telah menunjukkan  sifat  penghambatan  tirosinase yang  signifikan.  Namun,  zat-zat  tersebut terindikasi  memiliki  efek  samping  negatif. Senyawa seperti hidrokuinon dan asam kojat terbukti menyebabkan sitotoksisitas, peradangan kulit dan kanker (Junlatat et al., 2018). Oleh karena itu senyawa bioaktif dari tanaman  berkembang  dan  populer  untuk digunakan  sebagai  bahan  kosmetik  dalam formulasi  karena  cenderung  lebih  aman, biodegradable dan ramah lingkungan dibandingkan  dengan  bahan  sintesis.    Cara yang  mudah  dilakukan  untuk    mencegah aging adalah  dengan  melakukan  perawatan kulit  menggunakan  serum antiaging (Garre et  al. ,  2018).    Zat  aktif  dalam  serum  bisa berasal  dari  bahan  sintesis  ataupun  dari
bahan  alam  seperti  pada  buah  ceremai  dan kulit buah semangka. Hasil analisis fiktokimia  dari  kulit,  daun,  akar  dan  buah Phyllantus acidus diidentifikasi mengandung  triterpen,  seskuiterpen,  dan glikosida sebagai zat bioaktif yang dominan ditemukan  pada  tanaman  ini  (Tan et  al. , 2020).
Buah  Ceremai  memiliki  total  fenolik (TPC)  sebesar  204,75  µg  GAE/g  dan vitamin  C  sebanyak  102,58  µg  AAE/g (Suliaman et  al. ,  2014) . Berdasarkan  hasil penelitian sebelumnya bahwa ekstrak etanol buah P.  acidus memiliki    antioksidan  kuat dengan  nilai  IC 50 sebesar  76,75  ppm (Ernawati  dkk.,  2021).  Zat  antioksidan dapat menginaktivasi berkembangnya reaksi  oksidasi  dengan  mengikat  radikal bebas  dan  molekul  yang  sangat  reaktif sehingga  kerusakan  sel  dapat  dihambat (Mardhiani dkk., 2017). Menurut Indriatmoko  dkk.  (2021)  terdapat  senyawa asam  glikolat  sebesar  27,77%  dan  asam sitrat  sebesar  39,81%  pada  buah P.  acidus . Asam  glikolat  dapat  memberikan  efek berupa  penampakan  kulit  yang  lebih  halus, mengurangi keriput, dan mengurangi bintik-bintik  pada  kulit  (Wulandari  dkk.,
2020).
Semangka ( Citrullus lanatus ) dilaporkan  memiliki  efek  farmakologis  dan terapeutik  seperti  antibakteri,  antijamur,
antioksidan  dan antiinflamasi  (Chinmay et al., 2015). Kulit buah C. lanatus kaya akan fenolik  seperti  flavonoid,  likopen  dan sitrulin  sebagai  komponen  utama  (Jayanta &  Kwang,  2015).  Kulit  buah C.  lanatus dilaporkan  mengandung  terpenoid,  kardiak glukosida, asam karboksilat dan xantoprotein  (Edori et  al., 2017).  Ekstrak etanol kulit C. lanatus memiliki antioksidan dengan  nilai  IC 50 sebesar  102,19  ppm (Ernawati dkk, 2021). Kulit buah semangka ( C.  lanatus ) mengandung  retinol,  thiamin, riboflavin,  niacin, pyridoxin dan  asam askorbat (Gladvin et al , 2017). Kulit bagian luar C.  lanatus mengandung  saponin, tannin, alkaloid,  flavonoid dan total fenolik sebesar 0,087 (mg/g) (Neglo et al., 2021).
Berdasarkan  penelitian  sebelumnya, ekstrak  buah  ceremai  ( P.  acidus )  dan  kulit buah  semangka  ( C.  lanatus )  menunjukkan antioksidan  yang  kuat,  sehingga  membuka peluang untuk dilakukan formulasi kombinasi ekstrak buah ceremai ( P. acidus ) dan kulit buah semangka ( C. lanatus ) dalam sediaan serum untuk mempermudah pengaplikasian  dan  memperbaiki  penetrasi pada kulit

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Bahan  yang  digunakan  yaitu  ekstrak etanol  buah  ceremai  ( P.  acidus )  (Ernawati
Ernawati et al.;Serum Antiaging Kombinasi…..Pharmacoscript Volume 7 No. 1, Februari 2024
dkk.,  2021),  ekstrak  etanol  kulit  buah semangka  ( C.  lanatus )  (Ernawati  dkk., 2021),  enzim  tirosinase,  substrat  L-DOPA, gom  xhantan (PT.  Sheva  Mutiara  Jaya, Bandung), butilen glikol (PT. Sheva Mutiara Jaya,  Bandung),  metil  paraben  (PT.  Sheva Mutiara  Jaya,  Bandung),  akuades (PT. Palapa Muda Perkasa, Jakarta),
Alat  yang  digunakan  yaitu  Gelas laboratorium (Pyrex, Indonesia) Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu), stirrer  (Thermo,  Korea), multiwell  plate reader (ELISA) (Bio-Rad).

## Jalannya Penelitian
Tahapan  penelitian  yang  dilakukan yaitu  uji  inhibisi  enzim  tirosinase  ekstrak, formulasi  sediaan  serum,  uji  inhibisi  enzim tirosinase sediaan serum.

## 1. Uji Inhibisi Enzim
Tirosinase

## Ekstrak
Dilakukan  pengujian  aktivitas  inhibisi enzim  tirosinase  dengan  mengkuti  metode Batubara et  al .,  (2010).  Sebanyak  1  g sampel  dilarutkan  dalam  DMSO  100  mL. Larutan  stok  ekstrak  10.000  ppm  dilakukan pengenceran    dalam  50  mM  buffer pottasium  fosfat  (pH  6,5).  Pada  tingkat konsentrasi  antara  7,8125  sampai  2000 mg/mL  sampel  diuji.  Kontrol  positif  yang digunakan  adalah  asam  kojat  dengan  cara dilarutkan  dengan  DMSO  pada  labu  100 mL.  Kemudian  diuji  pada  konsentrasi
7,8125  sampai  500  mg/mL.  Pada 96-well micro  plate ,  70  µg  dari  setiap  pengenceran ekstrak  dikombinasikan  dengan  30  µL tirosin  (sigma  333  unit  mL -1 dalam  buffer fosfat)  secara  triplo.  Selanjutnya  proses inkubasi pada suhu ruangan selama 5 menit, kemudian 110 μL substrat yang terdiri dari 2 mM  L-tirosin  atau  12  mM  L-DOPA dimasukan  pada 96-well  micro  plate . Diinkubasi  dalam  suhu  ruang  selama  30 menit.  Kemudian  densitas  optikal  lubang 96-well  micro  plate diukur  menggunakan multi-well  plate  reader (ELISA)  pada panjang gelombang 510 nm dengan aktivitas penghambatan  tirosinase  dihitung  menurut rumus berikut:
B  :  absorbansi  kontrol  –  absorbansi  kontrol blanko (B 1 -B 0 )
S  :  absorbansi  sampel    –  absorbansi  sampel blanko (S 1 -S 0 )
Hasil  yang  diperoleh  dari  aktivitas inhibisi  sampel  adalah  mennentukan  nilai IC 50 dengan  cara  menghitungnya  yaitu konsenterasi  sampel  memiliki  sebesar  50% aktivitas inhibisi tirosinase.

## 2. Formulasi Sediaan Serum
Pembutan  formula  serum  mengikuti formula Goeswin, (2015) dengan
modifikasi, disajikan pada Tabel. 1 Xanthan gum  sebanyak  0,4  g  ekstrak  buah  cermai
dan ekstrak kulit buah semangka didispersikan dengan aqua destilata sebanyak  20  mL  sampai  terbentuk  massa serum.  Pengawet  metil  paraben  dilarutkan pada  butilen  glikol  10  mL  kemudian dimasukan  ke  dalam  massa  serum  yang sudah  terbentuk.  Selanjutnya  ditambahkan aquadest  ad  100  mL  hingga  larut.  Serum yang  sudah  jadi  dikemas  ke  dalam  wadah yang rapi
Tabel 1. Serum antiaging
No. Bahan Fungsi Formula % (b/v) F0 F1 F2 1 EBC Zat aktif - 0,76 1,53 2 EKBS Zat aktif - 0,15 1,02 3 Xantan Gum Pengental 0,4 0,4 0,4 4 Methyl paraben Pengawet 0,3 0,3 0,3 5 Butilen glikol Humektan 10 10 10 6 Aquades Pelarut 100 Keterangan : EBC   : Ekstrak Buah Cermai
EKBS :Ekstrak Kulit Buah Semangka

## 3. Uji  Inhhibisi  Enzim  Tyrosinase Sediaan Serum
Sebanyak  1  g  serum  kombinasi  dan serum  kontrol  positif  yang  mengandung asam kojat dilarutan dalam 100 mL DMSO. Kemudian mengencerkan larutan stok hingga diperoleh konsentrasi larutan ekstrak ke  dalam  buffer  fosfat  50  mM  (pH  6,5). 0,15625; 0,3125; 0,625; 1,25; 2,5; 5 dan 10 %.  Kemudian  diuji  dalam  plat  tetes  96 sumur.  Ditambahkan  70  μL  dengan  30  μL enzim tirosinase 333 unit/ mL, dalam buffer
fosfat,  selanjutnya  diinkubasi  pada  suhu ruang  selama  5  menit.  Setelah  itu,  110  μL substrat (L-DOPA) atau L-tirosin ditambahkan  pada  masing-masing  plat  dan diinkubasi  lagi  selama  30  menit  pada  suhu ruang.  Kemudian  kerapatan  optik  pada  plat sumuran  diukur  dengan microplate  reader pada  panjang  gelombang  510    m  untuk menentukan persen inhibisi (Batubara et al ., 2014).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Hasil  uji  inhibisi  enzim  tirosinase ekstrak  buah  ceremai  (EBC)  dan ekstrak kulit buah semangka

## (EKBS)
Uji  penghambatan  enzim  tirosinase diukur  dengan  ELISA  hasil  pengujian disajikan pada Tabel 2 .
Tabel.  2 Hasil  uji  inhibisi  enzim  tyrosinase ekstrak
Sampel Pengujian Nilai IC 50 Rataan Nilai IC 50 (µg/mL) Kojic Acid 1 44,25 44,60 ± 0,00 2 44,38 3 45,19 EBC 1 8.765 9.551 ± 85,8 2 9.420 3 10.468 EKBS 1 3.318 3.304 ± 20,8 2 3.281 3 3.314 Keterangan :
EBC   : Ekstrak Buah Cermai
EKBS :Ekstrak Kulit Buah Semangka
Prinsip  untuk  pengujian  aktivitas inhibitor  enzim  tirosinase  adalah  untuk melihat  terhambatnya  dopakrom  hasil  dari reaksi  substrat  L-DOPA  dengan  enzim tirosinase. Pembentukan hambatan dopakrom ditandai dengan adanya penurunan  intensitas  warna  yang  diukur dengan  menggunakan microplate  reader dengan  panjang  gelombang  maksimum  510 nm.  Absorbansi  tersebut  yang  nantinya digunakan untuk menghitung seberapa besar penghambatan  yang  terjadi  pada  L-DOPA dan  L-Tyrosine  (Sagala  &  Rivaldo,  2020). Selanjutnya  oksidasi  terjadi  karena  adanya enzim  tirosinase  yang  menjadi  katalisator yang mengubah L-DOPA menjadi
DOPAquinone dan akan menjadi
DOPAchrome (Ningsi dkk, 2020).
Berdasarkan  hasil  pengujian  diperoleh  nilai IC 50 asam  kojat  dengan  substrat  L-DOPA sebesar  44,60  µg/mL.  Hasil  pengujian inhibisi enzim tirosinase dari EBC menghasilkan  nilai  IC 50 sebesar  9.551 µg/mL  dan  EKBS  3.304  µg/mL,  hal menunjukan aktivitas penghambatan tirosinase dari sampel jauh berbeda dibandingkan  asam  kojat  sebagai  kontrol positif.  Hal  ini  sejalan  dengan  penelitian Jayantie  dkk.  (2022)  Nilai    penghambatan aktivitas    enzim  tirosinase  ekstrak  etanol buah B.  macrophylla konsentrasi  2000  ppm merupakan          konsentrasi          tertinggi
yang  memiliki      penghambatan      terhadap persen penghambatan   L-DOPA   47,529%. Asam  kojat        yang        digunakan        sebagai kontrol  positif      konsentrasi  500      ppm merupakan konsentrasi tertinggi yang memiliki  penghambatan  terhadap  persen penghambatan L-DOPA 95,569%.
Pemilihan  asam  kojat  sebagai  kontrol pembanding dikarenakan asam kojat merupakan senyawa yang banyak digunakan secara  luas  sebagai  pemutih  dan  memiliki kestabilan yang paling besar dalam kosmetik  dengan  cara  mengatasi  gangguan hiperpigmentasi  pada  kulit  (Sagala  & Ripaldo, 2020). Asam kojat bekerja menghambat  enzim  tirosinae  dengan  cara berikatan  pada  salah  satu  sisi  aktif  dari enzim  tirosinase  sehingga  tidak  terjadinya hiperpigmentasi.  Selain  itu  asam  kojat memiliki  efek  untuk  menginhibisi  dan kestabilan  yang  besar  dalam  mencegah hiperpigmentasi  kulit  (Mardikasari,  dkk 2020). Penghambatan asam kojat berkaitkan dengan  kemampuannya  sebagai chelator yang  baik  untuk  logam  transisi  seperti  Cu² + dan  Fe 3+ .  Asam  kojat  dilaporkan  memiliki efek penghambatan kompetitif pada aktivitas monofenolase dan efek penghambatan  campuran  pada  aktivitas difenolase. Semakin tinggi konsentrasi asam kojat  yang  digunakan,  maka  semakin  tinggi kemampuan inhibisinya. Kemampuan
inhibisi  yang  tinggi  ditandai  dengan penurunan  pembentukan  dopakrom  dan penurunan  intensitas  warna  yang  terbentuk. Asam  kojat  digunakan  sebgaai  salah  satu inhibitor  tirosinase  terbaik  yang  dikenal tetapi    memiliki  efek  samping  yang  cukup serius  seperti  depigmentasi  permanen, eritema,  dan  dermatitis  kontak  (Sohretoglu et al , 2018).
Beberapa  faktor  yang  mempengaruhi aktivitas  enzim  adalah  konsentrasi  enzim, substrat,  produk,  senyawa  inhibitor  dan aktivator,  pH,  jenis  pelarut, ionik   kekuatan dan  suhu  ( Dolorosa et  al ,  2019). Setiap senyawa  fitokimia  menunjukkan  potensi terhadap beberapa tindakan biologis, misalnya flavonoid dengan efek antioksidannya berperan dalam menghambat enzim  tyrosinase  (Sholikha et  al ,  2020).
Senyawa    fenolik    seperti    flavonoid memiliki    aktivitas    menghambat  proses produksi      melanin      berlebih.  Flavonoid adalah  salah  satu  senyawa  polifenol  yang dapat  menghambat  enzim  tirosinase  yang mana  senyawa  flavonoid  akan  berikatan dengan  gugus  hidroksil.  Ikatan  gugus hidroksil polifenol tersebut akan menghambat  aktivitas  enzim  tirosinase  dan juga menghambat peroksidasi lipid tirosinase.  Peran  tirosinase  selama  proses melanogenesis  terjadi  karena  adanya  gugus tembaga  (Cu)  yang  berikatan  dengan
substrat  pada  proses  pembentukan  melanin. Penghambatan    enzim    tirosinase  oleh flavonoid  dapat  disebabkan  oleh  interaksi flavonoid    dengan    radikal    bebas    yang dihasilkan  di    sisi  aktif    enzim    atau    pada ion    tembaga    (Cu)  yang  merupakan active site enzim  tirosinase.  Sisi  tempat    gugus hidroksi  menempel  pada  struktur benzena dan    juga    jumlah    gugus    hidroksil    pada suatu    flavonoid    berperan    penting    dalam proses  penghambatan  enzim      tirosinase (Mustika dkk, 2020). Mekanisme penghambatan yang terjadi adalah penghambatan  kompetitif  untuk  oksidasi  L- DOPA  oleh  enzim  tirosinase  dan  bagian  3- hidroksi-4-keto dari struktur flavonoid yang berperan  sebagai  pengelat  logam  tembaga (Cu)  dari  struktur  enzim  tirosinase.  Pada umumnya  satu  molekul  enzim  tirosinase mengandung  dua  atom  Cu  yaitu  CuA  dan CuB  yang  terikat  dengan  tiga  asam  amino histidin.  Logam  Cu  berperan  sebagai kofaktor  pada  aktivitas  enzim  tirosinase. Kemampuan  katalitik  enzim  tirosinase menjadi  berkurang  dengan  hilangnya  Cu dari  situs  aktif  enzim,  sehingga    dopakrom tidak  terbentuk  (Sagala  &  Telaumbanua, 2020).  Oleh  karena  itu,  EBC  dan  EKBS dengan kandungan senyawa alami contohnya flavonoid masih memiliki peluang untuk dikembangkan sebagai inhibitor tirosinase.
2. Hasil  Inhibisi  Enzim  Tirosinase fomula  serum  kombinasi  ekstrak buah ceremai (EBC) dan kulit buah semangka (EKBS)
Tabel  3. Hasil  Inhibisi  Enzim  Tirosinase Sediaan Serum
Sampel Pengujian Nilai IC 50 Rataan Nilai IC 50 (µg/mL) K+ 1 1.159 1.143 ± 14,5 2 1.130 3 1.142 F0 1 3.026 3.001 ± 31,1 2 2.991 3 2.985 F1 1 1.143 1.137 ± 11,4 2 1.124 3 1.145 F2 1 1.037 1.025 ± 11,5 2 1.024 3 1.014
Gambar  1 .  Perbandingan  Nilai  IC 50 Sediaan Serum
Uji  penghambatan  aktivitas  enzim tirosinase  sediaan  serum  kombinasi  EBC dan EKBS dilakukan untuk melihat kemampuan sediaan serum sebagai inhibitor enzim  tirosinase. Paparan  sinar  UV  juga dapat  memicu  terjadinya  pigmentasi  kulit
akibat  peningkatan  produksi  melanin  oleh enzim  tyrosinase  (Lukitaningsih et  al , 2020).
Berdasarkan hasil penelitian
menunjukkan  bahwa  F2  mendapatkan  hasil penghambatan  tirosinase  terbaik  dengan nilai  penghambatan  sebesar  1.025  µg/mL. Hal  ini  dikarenakan  konsentrasi  ekstrak yang  digunakan  dalam  sediaan  serum  F2 lebih  besar  dibandingkan  dengan  F1 sehingga dapat dilihat bahwa semakin tinggi konsentrasi  ekstrak  yang  digunakan  maka persen  inhibisinya  semakin  meningkat  dan nilai IC 50 menurun. Nilai ini sejalan dengan penelitian  yang  dilakukan  oleh  Aji  dkk. (2021)  yang  juga  meneliti  serum  dari ekstrak  terpurifikasi  daun  apuh  apuhan ( Azolla  microphylla )  menunjukkan  hasil yang  baik  sebagai  anti  aging,  yaitu penghambatan  tirosinase  sebesar  42,45;
45,68; dan 45,80%.
Keuntungan menggunakan  sediaan  serum  yaitu  zat  aktif yang  terkandung  di  dalam  serum  lebih banyak  dibandingkan  sediaan  kosmetik lainnya  sehingga  serum  lebih  cepat  dan efektif mengatasi masalah kulit.
Selanjutnya  hasil  dianalisis  statistik, berdasarkan  hasil  pengambilan  keputusan untuk  Annova  dengan  syarat  data  harus normal  dan  homogen  sedangkan  hasil analisis mendapat data 0,487 dimana p>0,05 sehingga  data  selanjutnya  dianalisis  dengan

## Pharmacoscript Volume 7 No. 1 Februari 2024
menggunakan  uji  non  parametrik  Kruskal Wallis  untuk  mengetahui  efek  formula serum  terhadap  inhibisi  enzim  tirosinase hasil  diperoleh  nilai  0,024  dimana  p˂0,05 yaitu  adanya  perbedaan  statistika  yang signifikan  antar  formula.  Data  selanjutnya diuji  menggunakan  MannWhitney  untuk mengetahui  formula  mana  yang  berbeda. Dari hasil uji MannWhitney bahwa terdapat perbedaan  inhibisi  enzim  tirosinase    yang signifikan  antara  F0,  F1,  dengan  K+  nilai yang ditunjukkan adalah p<0,05. Sedangkan pada  F2  dengan  K+  tidak  mempunyai perbedaan yang signifikan.

## KESIMPULAN
Ekstrak  kulit  buah  semangka  lebih aktif  sebagai  inhibisi  enzim  tirosinase daripada ekstrak buah ceremai hal ini dilihat dari hasil nilai IC 50 yang didapatkan dimana EKBS mendapatkan nilai IC 50 sebesar 3.304 µg/mL  sedangkan  EBC  sebesar  9.551 µg/mL    tetapi  hasil sediaan  serum menunjukan  hasil  yang  memiliki  potensi sebagai  inhibisi  enzim  tyrosinase  serum  F1 mendapatkan  nilai  IC 50 1.137  µg/mL sedangkan  F2  sebesar  1.025  µg/mL  hampir mendekati  dengan  hasil  inhibisi  serum kontrol  positif  sebesar  1.143  µg/mL. Sediaan  serum  ini  bisa  dimanfaatkan sebagai alternatif kosmetik bahan alam.

## DAFTAR PUSTAKA
Azmi N, Hashim P, Hashim DM, Halimoon N,  Nik  Majid,  (2014)”  Anti-elastase, anti-tyrosinase and matrix metalloproteinase-1  inhibitory  activity of earthworm extracts as potential new anti-aging  agent”.  Asian  Pac  J  Trop Biomed. 4(Suppl 1):S348–52
Batubara  I,  Darusman  LK,  Mitsunaga  T, Rahminiwati M, Djauhari E. (2010)” Potency  of  indonesian  plants  as tyrosinase  inhibitor  and  antioksidan agent”. Journal of Biological Sciences. p. 138–44. Vol. 10.
Batubara.  I.,  Gazali  M.,  &  Zamani  P.  N.
(2014)  “Potensi  limbah  kulit  buah Nyirih Xylocarpus granatum sebagai inhibitor tirosinase”. Research  Gate , 3(3): 187-194.
Chinmay  D,  Deshmukh1,  Anurekha  Jain MST.  (2015)  “Phytochemical  and Pharmacological  profile  of  c itrullus lanatus (Thunb)”.  Biolife. 483–8.
Dolorosa  MT,  Nurjanah,  Purwaningsih  S,
Anwar  E,  Hidayat  T.  (2019). “Tyrosinase  inhibitory  activity  of Sargassum plagyophyllum and
Eucheuma cottonii methanol extracts”.  IOP  Conf  Ser  Earth Environ Sci. 278(1)
Edori  OS,  Harcourt  P,  Marcus  AC.  (2017).
“Phytochemical screening and
Ernawati et al.;Serum Antiaging Kombinasi…..Pharmacoscript Volume 7 No. 1, Februari 2024
physiologic  functions  of  metals  in seed  and  peel  of Citrullus  lanatus (Watermelon)”. International Journal of  Green  and  Herbal  Chemistry.  E- ISSN:  2278-3229.  Vol.6,  No.1,  035 – 046
Ernawati E, Farida Y, Taurhesia S. (2021). “
Formulasi Serum Antioksidan
Kombinasi  Ekstrak  Buah  Ceremai dan  Kulit  Buah  Semangka”  . Majalah Farmasetika. 6(5)  398-406 Garre  A,  Narda  M,  Valderas-Martinez  P,
Piquero  J,  Granger  C  (2018).  “ Antiaging  effects  of  a  novel  facial serum  containing  l-ascorbic  acid, proteoglycans,  and  proteoglycan- stimulating  tripeptide:  Ex  vivo  skin explant  studies  and  in  vivo  clinical studies in women”. Clinical Cosmetic Investigational
Dermatology. 11:253–63
Goeswin  Agoes  (2015)  “Sediaan  Kosmetik
(SFI-9) “. ITB Bandung
Gladvin G, Sudhaakr G, Swathi V, Santhisri
K  V.  (2017).  “Mineral  and  vitamin compositions contents in watermelon peel  (Rind)”.  International  Journal Of Current Microbiology and Applied  Sciences. 5(5):129–33
Indriatmoko  D,  Suryani  N,  Rudiana  T,
Kurniah M (2021). “Formulation and physical  evaluation  of  facial  cream
preparations from Ceremai fruit juice ( Phyllanthus  acidus (l.)  Skeels)”. Pharm Educ.21:87–92
Jayantie  DJ,  Farida  Y,  Taurhesia  S  (2022).
“Aktivitas  Antioksidan  dan  Enzim Tirosinase  Ekstrak  Etanol  Buah Gandaria  ( Bouea  macrophylla Grif.) Secara  In  Vitro”.  Pharmacoscript Volume 5 No. 1
Jayanta.K.P  &  Kwang.H.B  (2015)  “Novel green synthesis of gold nanoparticles using Citrullus  lanatus Rind  and investigation of proteasome inhibitory  activity,  antibacterial,  and antioxidant  potential” .  International Journal  of  Nanomedicine. 10  7253– 7264
Junlatat,
J, Fangkrathok, N & Sripanidkulchai, B. (2018). “Antioxidatif and Melanin Production  Inhibitory  Effects  of Syzygium cumini Extracts.
Songklanakarin  J”.  Sci.  Technol.  40
(5): 1136-1143
Lukitaningsih  E,  Saputro  AH,  Widiasri  M,
Khairunnisa N, Prabaswari N,
Kuswahyuningsih  R.  (2020)  “In Vitro  Antiaging  Analysis  of  Topical
Pharmaceutical
Preparation Containing  Mixture  of  Strawberry Fruit,  Pomelo  Peel,  and  Langsat

## Pharmacoscript Volume 7 No. 1 Februari 2024
Fruit  Extracts”.  Indones  J  Chemom Pharm Anal. 1(1):53
Mardikasari S,  Akib N,  Suryani  Apt (2020)
“Formulasi  dan  Uji  Stabilitas  Krim
Asam Kojat Dalam Pembawa
Vesikel  Etososm”.  Majalah  Farmasi dan Farmkologi. 24(2):49-53
Mardhiani  D  Yani,  Yulianti  H,  Azhary  D,
Rusdiana  T  (2017)  “Formulasi  dan
Stabilitas Sediaan serum Dari Ekstrak Kopi Hijau ( Coffea canephora var.Robusta ) Sebagai
Antioksidan”.  Indonesia  Natural Research  Pharmaceutical  Journal. Vol.2(2) : 2502-8421 Mustika  R,  Hindun  S,  Auliasari  N  (2020)
“Potensi Tanaman Sebagai Pencerah Wajah  Alami”.  J  Sains  dan Kesehatan 2(4):558–62.
Neglo  D,  Tettey  CO,  Essuman  EK,  Kortei NK,  Boakye  AA,  Hunkpe  G,  (2021) “Comparative antioxidant and antimicrobial  activities  of  the  peels, rind,  pulp  and  seeds  of  watermelon ( Citrullus  lanatus) fruit”.  Science African. 1;11: 00582
Pratsinis H, Kletsas D, (2019) “Special issue
“anti-aging  properties  of  natural compounds.” Cosmetics. 6(4):1–2
Roselan  M  ,  Ashari  S  NHF,  Mohamad
SMMF and R (2020) “An  Improved
Nanoemulsion Formulation
Containing Kojic Monooleate: Optimization,  Characterization  and In Vitro Studies”. Molecules. 1–23 S  Suliaman,  Shaida  Fariza  and  Ooi  LK. (2014) “Antioxidant and
α‑Glucosidase inhibitory activities of 40 tropical juices from malaysia and identification  of  phenolics  from  the bioactive  fruit  juices  of  Barringtonia racemosa  and  Phyllanthus  acidus”. Algriculture Food Chemistry Sagala Z, Telaumbanua K. (2020)
“Formulasi uji stabilitas dan aktivitas inhibitor  enzim  tirosinase  sediaan krim  dari  ekstrak  buah  harendong ( Melastoma  affine D.Don)”.  Indones Narutal Res Pharm J. 5(2):149–73 Sagala,  Z  &  Ripaldo,  F.  (2020).  “Uji Aktivitas  Inhibitor  Enzim Tirosinase dan  Uji  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Buah Harendong ( Melastoma malabathricum L.)  Secara  In  vitro”.
Indonesian Natural Research
Journal . 5(1): 1-16.
S  Ningsi,  A  Rauf  &  A  Husna,  (2020).  “ Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Kelor (Moringa  oleifera  Lam)  Sebagai Penghambat  Enzim  Tirosinase  “.
Jurnal Farmasi UIN Alauddin
Makassar 8(1), 57-66
Sohretoglu  D,  Sari  S,  Barut  B,  Özel A.(2018)  “Tyrosinase  inhibition  by
some  flavonoids:  Inhibitory  activity, mechanism  by  in  vitro  and  in  silico studies”.
Bioorg Chem. 2018;81:168–74. Sholikha M, Wulandari A. (2020)
“Phytochemical Screening And
Tyrosinase  Inhibition  Activity  Of
Leaves  Cassia  siamea  L”.  J  Midpro. 12(2):198
Tan  SP,  Tan  ENY,  Lim  QY,  Nafiah  MA.
(2020)  “Phyllanthus  acidus  (L.)
Skeels:  A  review  of  its  traditional uses, phytochemistry, and pharmacological properties”. Journal
Ethno pharmacology ;253
Wulandari D, Gusrizal G, Zaharah T (2020)
“Optimasi  dan  Validasi  Metode Penentuan Kadar Asam Glikolat dan
Asam Laktat Dalam Krim
Menggunakan  Kromatografi  Cair Kinerja  Tinggi”.  ALCHEMY  Jurnal Penelitian  Kimia  :  Vol.  16(1)  2020,
10-24