Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
DAUN Alphitonia incana (Roxb.) Teijsm. & Binn. ex Kurz SEBAGAI ANTI- Escherichia coli: STUDI IN SILICO DAN IN VITRO
Hafiz Ramadhan*, Dyera Forestryana, Wahyudin Bin Jamaludin, Ahmad Nur Hadi, Raudatunnisa
Fakultas Farmasi, Universitas Borneo Lestari, Banjarbaru
Email*: hafizramadhan14@gmail.com
Artikel dipublikasikan pada: Webinar Nasional & Call for Paper

## ”Inovasi Terkini dalam Dunia Kesehatan: Terapi Gen dan Perkembangan Obat
Baru Berbasis Genomika dalam Mengubah Paradigma Pengobatan”
28 Oktober 2023
DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v8i3.1701

## ABSTRAK
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  potensi  kandungan  fitokimia dalam  menghasilkan  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  etanol  70%  daun  Balik Angin  ( Alphitonia  incana (Roxb.)  Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  terhadap  bakteri Escherichia coli secara in silico dan in vitro . Pengujian in silico dari 20 senyawa yang  terkandung  dalam  spesies  Alphitonia  terhadap  reseptor DNA  gyrase menggunakan  PLANTs.  Uji  aktivitas  anti- E.coli daun  Balik  Angin  yang dimaserasi  dengan  pelarut  etanol  70%  menggunakan  metode  difusi  sumuran.
Studi in  silico menunjukkan  β-Sitosterol,  Stigmasterol,  Rutin,  Kaempferol  3-O- rutinoside,  dan  Zizyphoiside  C memiliki energi ikatan  dengan DNA  gyrase yang dapat  melampaui  Ciprofloxacin.  Hasil  uji  antibakteri  pada  konsentrasi  tertinggi 26,56 mg/ml dapat memberikan rata-rata diameter zona hambat sebesar 12,75±0,2 mm  dengan  konsentrasi  hambat  minimum  (KHM)  yaitu  1,66  mg/ml  (5,87±1,5 mm).  Ekstrak  etanol  70%  daun  Balik  Angin  berpotensi  sebagai  anti- Escherichia coli didukung dengan kandungan senyawa fitokimia yang dapat berperan sebagai inhibitor DNA gyrase .
Kata kunci: Anti- Escherichia coli , Daun Balik Angin, DNA gyrase .

## ABSTRACT
This research was conducted to determine the potential of phytochemical contents  in  producing  antibacterial  activity  from  70%  ethanol  extract  of  Balik Angin  leaves    (Alphitonia  incana  (Roxb.)  Teijsm  .  &  Binn.  ex  Kurz)  against Escherichia  coli  bacteria  in  silico  and  in  vitro.  In  silico  assay  of  20  compounds contained in Alphitonia species against the DNA gyrase receptor using PLANTs. Anti-E.coli  activity  assay  of  Balik  Angin  leaves  macerated  with  70%  ethanol solvent  using  the  Well  diffusion  method.  In  silico  studies  show  that  β-Sitosterol, Stigmasterol, Rutin, Kaempferol 3-O-rutinoside, and Zizyphoiside C have binding energies with DNA gyrase that can exceed Ciprofloxacin. The antibacterial assay results  at  a  highest  concentration  of  26.56  mg/ml  can  provide  an  average inhibitory  zone  diameter  of  12.75  ±  0.2  mm  with  a  minimum  inhibitory
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
concentration (MIC) of 1.66 mg/ml (5.87 ± 1.5 mm). The 70% ethanol extract of Balik Angin leaves has the potential as an anti-Escherichia coli, supported by the content of phytochemical compounds that can act as DNA gyrase inhibitors.
Keywords: Anti-Escherichia coli, Balik Angin Leaves, DNA gyrase.

## PENDAHULUAN
Mayoritas  bakteri  melibatkan enzim  yang  dapat  berperan  penting dalam  menginisiasi  infeksi  pada inang. DNA  gyrase adalah  enzim topoisomerase  II  yang  terdapat  pada genom  bakteri  termasuk Escherichia
coli (Ashley et  al .,  2017).  Bakteri ini merupakan  kuman  oportunis  yang normal  bila  ditemukan  dalam  usus besar  manusia,  namun  juga  dapat menyebabkan  infeksi  primer  seperti diare (Syahrinastiti et al ., 2015).
DNA gyrase berfungsi sebagai target kuinolon dan turunannya, salah satunya  yang  digunakan  dalam  terapi infeksi E.coli adalah Ciprofloxacin .
Mekanisme kerja Ciprofloxacin dengan  membentuk ciprofloxacin-
gyrase-DNA complex
sehingga
menghambat terjadinya  sintesis  DNA
(Egorov et  al .,  2018).  Berdasarkan
data  tahun  2020, World  Health Organization menyebutkan  bahwa
masalah yang muncul dalam
penggunaan Ciprofloxacin adalah
tingkat  restensi    yang  tinggi  yaitu
8,4%-92,9%  di  33  negara  termasuk
Indonesia (Siahaan et al ., 2022)
Enzim bakteri berperan
penting  dalam  munculnya  resistensi.
Analisis  struktur  dan  karakteristik fungsional enzim, akan memungkinkan kita dalam mengembangkan  strategi  baru  untuk mengatasi  resistensi  menggunakan senyawa fitokimia. Spesies Alphitonia  merupakan  sumber  bahan alam  yang  memiliki  kandungan
fitokimia dengan bioaktivitas
beranekaragam terutama sebagai
antimikroba,  salah  satunya  adalah Alphitonia  incana (Roxb.)  Teijsm.  &
Binn.  ex  Kurz  (Wulandari et  al .,
2018;  Hirsch  &  Klostermeler,  2021;
Al Omar et al ., 2022).
Tanaman yang memiliki nama
lokal yaitu Balik Angin ini merupakan  tanaman  endemik  yang berkhasiat asal Kalimantan
(Forestryana et  al .,  2022).  Penelitian
Cock (2020) menyebutkan daun Balik
Angin yang dimaserasi dengan metanol  memiliki  nilai  Konsentrasi
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Hambat  Minimum  (KHM)  yaitu

## 0,415  mg/mL  terhadap  pertumbuhan
E.coli dengan rata-rata diameter zona
hambat 6-8 mm menggunakan
metode  difusi  disk.    Pada  uji  difusi
sumuran  yang  dilakukan  oleh  Sandra
et  al .  (2022)  didapatkan  KHM  yaitu
1,66 mg/mL dengan rata-rata
diameter  zona  hambat  6,9  mm.  Hasil
penelitian  tersebut  juga  menyebutkan kandungan fitokimia
yang
teridentifikasi  di  dalam  ekstraknya antara lain: fenol, flavonoid, alkaloid, tanin, saponin, dan steroid.
Pada  penelitian  lain  oleh
Ramadhan et al . (2023b)
menyebutkan  daun  Balik  Angin  yang
dimaserasi dengan etanol 70%
berpotensi sebagai antibakteri, karena mengandung  golongan  senyawa  yang sama  dengan  ekstrak  metanolnya. Berdasarkan  latar  belakang  tersebut diatas,  maka  dilakukan  penelitian  ini dengan  tujuan  untuk  mengetahui potensi  kandungan  fitokimia  Balik Angin  dalam  menghasilkan  aktivitas penghambatan DNA  gyrase secara in
silico dan  aktivitas  antibakteri  dari
ekstrak etanol 70% daun Balik Angin terhadap  pertumbuhan E.coli secara in vitro .

## METODE PENELITIAN

## Alat
Alat  yang  digunakan  pada  uji in  silico yaitu  perangkat  keras  laptop ASUS  442UR  dengan  spesifikasi Processor  Intel®  Core™  i5-8250U @1.60  GHz,  8GB  of  RAM , 64-bit operating  system,  Windows®  11 Home Version 22H2. Sedangkan alat- alat yang pada uji in vitro antara lain:
autoklaf (Xinfeng®), inkubator
(Memmert®),  mikropipet  (Dragon
Lab®),  rotary  evaporator  (IKA®), waterbath (Memmert®), dan peralatan gelas lainnya (Pyrex®).

## Bahan
Bahan-bahan pada uji in silico antara  lain  struktur  3D  DNA  gyrase beserta  ligan  natif  yang  diunduh  dari www.rcsb.org dengan  kode  PDB 1KZN,  struktur  2D  Ciprofloxacin, dan  20  senyawa  pilihan  dari  Genus Alphitonia.
Bahan-bahan  pada  uji  in  vitro antara  lain:  daun  Balik  Angin,  etanol 70% (Onemed®),
Na-CMC
(Himedia®),  serbuk  Nutrient  Agar (Merck®),  serbuk  Muller  Hinton Agar (Oxoid®), aquadest, infus NaCl 0,9%  (PT  Widatra  Bakti®),  biakan bakteri E.  coli ATCC  25922,  dan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Ciprofloxacin 5µg/disk (Oxoid®).

## Uji In Silico
Pengujian in  silico secara
molecular  docking meliputi  preparasi
ligan  dan  protein,  validasi,  proses
docking ,  dan  visualisasi  dijalankan berdasarkan  tahapan  prosedur  yang dilakukan  oleh  Purnomo,  (2013)  dan Ramadhan et al ., (2023a).

## Uji In Vitro
1. Ekstraksi
Proses pembuatan simplisia
sampai  ekstraksi  daun  Balik Angin  mengikuti  tahapan  yang sudah dilakukan oleh  Ramadhan
et al . (2023b).

## 2. Uji aktivitas antibakteri
Pengujian  aktivitas  antibakteri terhadap E.  coli menggunakan
metode  difusi  sumuran  sesuai tahapan pada penelitian
Ramadhan et  al .  (2020b).  Seri
konsentrasi  ekstrak  mengikuti penelitian  Sandra et  al .  (2022)
menggunakan Ciprofloxacin
(kontrol  positif)  dan  Na-CMC
0,5% (kontrol negatif).

## 3. Analisis data
Data  diameter  zona  hambat dianalisis  menggunakan  SPSS dengan  taraf  kepercayaan  95%
(Ramadhan et al ., 2023b).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil In Silico
Penelitian diawali dengan
pengujian in  silico dari  metabolit sekunder  yang  dilaporkan  oleh  Al Omar et al. (2022)  terkandung dalam
spesies Alphitonia. Molecular docking adalah  salah  satu  metode in silico yang  dapat  dilakukan  untuk
prediksi potensi tersebut yang ditunjukkan oleh skor docking .
PLANTs ( Protein-Ligand ANT
System )  merupakan  aplikasi docking yang digunakan pada studi ini karena memiliki  kelebihan  yaitu  praktis, sederhana  dan  mudah  digunakan. Tahapan  awal  yaitu  validasi  metode docking dengan tujuan untuk menetapkan  validitas  metode  yang tepat  dalam redocking DNA  gyrase.
Parameter  validitas  metode docking yaitu Root  Mean  Square  Deviation
(RMSD)  yang  dinyatakan  valid  jika didapatkan  nilai  <2Å  (Purnomo, 2013). Tabel 1 memberikan informasi
bahwa hasil validasi docking
menunjukkan  nilai  RMSD  protein target  kurang  dari  2Å,  sehingga docking PLANTs  yang  digunakan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
pada  penelitian  ini  dapat  diterapkan untuk senyawa-senyawa uji.
Tabel 1. Validasi dan penentuan nilai RMSD ligan asli pada DNA gyrase
(PDB : 1KZN) Conformer Skor Docking RMSD (KJ/mol) (Kcal/mol) 1 -114,29 -27,30 2,9012 2 -117,71 -28,11 0,9593* 3 -115,84 -27,67 2,4008 4 -114,71 -27,40 4,6272 5 -110,96 -26,50 0,8511* 6 -118,39 -28,28 0,9251* 7 -113,15 -27,02 0,9746* 8 -109,59 -26,18 3,3584 9 -116,06 -27,72 1,7618* 10 -105,69 -25,24 4,4634 *Nilai yang memenuhi RMSD <2Å DNA  gyrase pada E.coli merupakan  target  selular  utama  dari antibiotik golongan kuinolon contohnya ciprofloxacin. Pembentukan  kompleks DNA  gyrase merupakan  kondisi  yang  diperlukan untuk  penghambatan  oleh  antibiotik tersebut  (Egorov et  al .,  2018) . Hasil
uji in silico ditampilkan pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil uji in silico terhadap
DNA gyrase (PDB : 1KZN) Senyawa Skor Docking (KJ/mol) (Kcal/mol) Native (Clorobiocin)  -118,39 -28,28 Ciprofloxacin -82,95 -19,81 Methy salicylate -63,16 -15,09 Alphitolic acid -68,08 -16,26 Ceanothic acid -66,32 -15,84 Betulinic acid -62,97 -15,04 Betulin -67,56 -16,14 Isorhamnetin 3-O- beta-D- glucopyranoside -77,33 -18,47 Lupeol -68,42 -16,34 β-Sitosterol -87,69* -20,94*
Senyawa Skor Docking (KJ/mol) (Kcal/mol) Quercetin 3-O-β-D- glucopyranoside -80,84 -19,31 Quercetin 3-O-α-L- arabinopyranosyl(1 →2)-α-L- rhamnopyranoside -80,94 -19,33 Ceanothenic acid -62,86 -15,01 Stigmasterol -84,96* -20,29* 29- Hydroxyceanothenic acid -64,18 -15,33 Rutin -96,76* -23,11* Kaempferol 3-O- rutinoside -95,15* -22,73* 2α-Formyl- A(1)norlup-20(29)- en-28-oic acid -77,24 -18,45 Alphitonin -80,19 -19,15 Adouetine X -78,99 -18,87 Alphitol -64,45 -15,39 Zizyphoiside C -90,66* -21,65* *Nilai skor docking < Ciprofloxacin Afinitas  penambatan  molekul dari senyawa-senyawa uji
ditunjukkan  oleh  skor docking yang menggambarkan  energi  ikatan  antara ligan  dan  reseptor  ( DNA  gyrase ).
Semua senyawa uji bahkan
ciprofloxacin  tidak  dapat  menandingi skor docking dari ligan asli
(clorobiocin)  yang  menginisiasi  aksi dari  DNA  gyrase,  akan  tetapi β-
Sitosterol, Stigmasterol, Rutin, Kaempferol 3-O-rutinoside , dan
Zizyphoiside C dapat melampaui skor
docking dari  ciprofloxacin.  Hasil tersebut  dapat  diasumsikan  bahwa terdapat  5  senyawa  uji  yang  mampu
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
menggantikan  ciprofloxacin  dalam
pengobatan infeksi E.coli . Skor
docking dapat diartikan yaitu semakin kecil  (semakin  negatif)  nilai  energi ikatan yang dihasilkan maka dikatakan senyawa tersebut
mempunyai  afinitas  pengikatan  yang baik  terhadap  reseptor  (Purnomo,
2013). Aktivitas inhibitor DNA
gyrase divisualisasikan menggunakan
Discovery  Studio  Visualizer  untuk mengetahui  jenis  interaksi  antara ligan  dan  reseptor.  Visualisasi  akan memberikan  informasi  jenis  ikatan dan  residu  asam  amino  yang  terlibat dalam  pembentukan  ikatan  tersebut, sehingga memberikan gambaran informasi  mekanisme  kerja  senyawa
sebagai  antibakteri.  Hasil  visualisasi ditampilkan pada Gambar 1.
Gambar 1. Visualisasi interaksi 2 senyawa potensial sebagai inhibitor
DNA gyrase dibandingkan (a) ligan natif dan (b) Ciprofloxacin yaitu (c)
Rutin dan (d) Kaempferol 3-O-
rutinoside
(a) (b) (c) (d)
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Visualisasi  pada  Gambar  1 hanya  menampilkan  2  senyawa  yang berpotensi  menghambat  aksi  DNA gyrase  berdasarkan  klasifikasi  jenis ikatan  yang  terbentuk  dan  kemiripan residu  asam  amino  yang  berikatan dengan  ligan  (Tabel  3).  Jenis  ikatan yang  melandasi  parameter docking adalah ikatan hidrogen yang merupakan  interaksi  stabil  antara ligan-reseptor karena memiliki
kekuatan  yang  paling  besar  dengan energi  1-7  kkal/mol.  Ikatan  kimia lainnya juga dapat terjadi akibat ligan yang  fleksibel  berinteraksi  dengan reseptor.  Interaksi  dapat  berupa interaksi non kovalen atau non ikatan
( non-bonded  interaction ,  sehingga dapat  meningkatkan  afinitas  ikatan (Syahputra, 2014).
Tabel 3. Perbandingan interaksi senyawa potensial dari Spesies
Alphitonia dibandingkan ligan asli dan Ciprofloxacin terhadap residu asam amino DNA gyrase (PDB : 1KZN) Senyawa Ikatan Hidrogen Non Ikatan Hidrogen Native ASN-A:46 , ASP-A:73 , ARG-A:136 GLY-A:77 , ASN-A:46 , ALA-A:47 , VAL-A:71 , ALA-A:86 , PRO-A:79 , ILE-A:78 , ILE-A:90 Ciprofloxacin VAL-A:71 , THR-A:165 ASN-A:46 , ALA-A:47 ,
Senyawa Ikatan Hidrogen Non Ikatan Hidrogen VAL-A:71 , ILE-A:78 , VAL-A:167, ASP-A:73 , VAL-A:120 Rutin ASP-A:73 , THR- A:165, ASP-A:49, ILE-A:90 , SER-A:121, HIS-A:95, VAL-A:118 ASN-A:46 , PRO-A:79 , ILE-A:78 , GLY-A:119, GLU-A:50, ARG-A:76, ARG-A:136 Kaempferol 3- O-rutinoside ASN-A:46 , ASP-A:73 , ALA-A:96, SER-A:121, ILE-A:90 , VAL-A:120 GLY-A:77 , ASN-A:46 , PRO-A:79 , ILE-A:78 , ILE-A:90 , VAL-A:120, GLU-A:50, ARG-A:76

## Tabel  3  menunjukkan  bahwa
Rutin dan Kaempferol  3-O-rutinoside memiliki kemiripan ikatannya dengan residu  asam  amino  dari  ligan  asli
sebanyak 60% dibanding
Ciprofloxacin  yang  hanya  memiliki kemiripan  sebanyak  40%,  bahkan Kaempferol  3-O-rutinoside memiliki kemiripan  2  asam  amino  yang
membentuk ikatan hidrogen
dibanding Rutin dan  Ciprofloxacin.
Interaksi  tersebut  ditandai  dengan warna  yang  menunjukkan  kesamaan asam  amino    senyawa  dengan  ligan asli.  Visualisasi  ikatan  ini  linier dengan  skor  docking  Rutin  dan Kaempferol 3-O-rutinoside yang
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
memberikan  energi  ikatan  paling
rendah dibanding senyawa uji
lainnya, sehingga
memberikan informasi  bahwa  mekanisme  aksi antibakteri  2  senyawa  tersebut  dalam terapi  infeksi E.coli yaitu  melalui inhibisi DNA gyrase . Senyawa-
senyawa  potensial  tersebut  kemudian dilakukan  uji Lipinski's  Rule  of  Five yang ditampilkan pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil pemeriksaan 'Lipinski's Rule of Five ' senyawa potensial dari Spesies Alphitonia dibandingkan ligan asli dan Ciprofloxacin. Senyawa a b c d e Native (Clorobiocin) 696  5  12  4,881  176.461 Ciprofloxacin  331  2  6 1,368  87,032 β-Sitosterol 312  5  6 - 0,053 77,145 Stigmasterol 412  1  1 7,800  128,122 Rutin 609  9  16  - 2,483 135,902 Kaempferol 3-O- rutinoside 593  8  15  - 2,188 134,237 Zizyphoiside C 954  8  18  1,565  232,971 Keterangan : (a) Mass (≤ 500g/mol)
(b) H bond donor (≤ 5)
(c) H bond acceptors (≤ 10)
(d) Log P (≤ 5)
(e) Molar Refractivity (40-130 g/mol g/mol)
Pencarian  senyawa  obat  baru, harus memenuhi Lipinski's rule of five
untuk  memprediksi  kesamaan  obat, khususnya  sifat  fisikokimia  untuk penyerapan  oral  yang  tinggi  dalam
tubuh. Ketika suatu senyawa memenuhi  lima  prinsip  tersebut, maka sifat farmakokinetik dan bioavailabilitasnya  meningkat  dalam proses  metabolisme  (Goodwin et  al. , 2017). Hasil uji memberikan
informasi  bahwa  selain  Ciprofloxacin hanya  β-Sitosterol  yang  memenuhi persyaratan,  namun  aturan  lipinski tidak  mutlak  menjadi  acuan  dalam pemilihan  senyawa  potensial,  karena struktur senyawa masih bisa dioptimalkan melalui modifikasi pada bagian  struktur  yang  tidak  terikat pada  situs  aktif  atau  residu  asam amino penting, sehingga dapat diabsorbsi dengan baik tanpa
merubah afinitas daya ikatnya
terhadap reseptor (Opera et al ., 2001).

## Hasil In Vitro
Daun  Balik  Angin  diperoleh dari  Gunung  Tahura,  Kab.  Banjar, Kalimantan  Selatan  dan  berdasarkan hasil  determinasi  di LIPI,  Pusat  Riset Biologi,  Cibinong,  Bogor  memiliki nama latin Alphitonia  incana (Roxb.)
Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz  dengan
nomor sertifikat B- 208/V/DI.05.07/1/2022. Rendemen yang diperoleh dari pembuatan
simplisia  sebesar  26,15%.  Proses
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
ekstraksi daun Balik Angin dilakukan menggunakan metode maserasi
dengan  pelarut  etanol  70%  sebanyak 3 kali proses penggantian pelarut agar metabolit  sekunder  yang  terkandung dalam  sampel  tersari  secara  optimal.
Penggunaan  ekstraksi  dingin  seperti maserasi dapat menghindari degradasi zat  aktif  dalam  simplisia  akibat pemanasan  (Ramadhan et  al. ,  2021;
Sayakti et al., 2022).
Rendemen ekstrak etanol 70% daun Balik Angin didapatkan 45,92%.
Hasil  ini  menunjukkan  rendemen yang lebih besar dibandingkan
ekstrak  metanol  daun  Balik  Angin pada  penelitian  Sandra et  al. ,  (2022) yaitu 26,2236%. Hal ini menunjukkan bahwa  kandungan  senyawa  dalam daun  Balik  Angin  lebih  efektif
diekstraksi menggunakan pelarut
etanol 70% dibanding metanol
(Ramadhan et al. , 2020a).
(a) (b)
(c) (d) (e) (f)
Gambar 2. Kultur Uji Anti-E.coli dari (a, b, c) Ekstrak Etanol 70%
Daun Balik Angin, (d, e, f) Ciprofloxacin dan Na-CMC
Uji  aktivitas  antibakteri in vitro terhadap E.coli menggunakan metode  difusi  sumuran.  Metode  ini lebih  mudah  dalam  mengukur  luas zona  hambat  yang  terbentuk  karena aktivitas  isolat  yang  berdifusi  tidak hanya di permukaan atas media tetapi sampai ke dalam media (Agistia et al ,
2021). Hasil uji aktivitas menunjukkan  potensi  ekstrak  daun Balik Angin sebagai  anti- E.coli
ditunjukkan pada Gambar 2.
Ekstrak  etanol  70%  daun
Balik Angin dapat menghasilkan rata- rata  diameter  zona  hambat  sebesar
12,75±0,2 mm yang termasuk
kategori kuat pada konsentrasi tertinggi 26,56 mg/ml. Diameter zona
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
hambat yang dihasilkan tersebut lebih besar  jika  dibandingkan  ekstrak metanol  daun  Balik  Angin  pada penelitian  Sandra et  al .  (2022)  yang hanya  sebesar  10,91  ±  0,77  mm, begitupula  pada  konsentrasi  12,28 mg/ml. Akan
tetapi, hasil
perbandingan  diameter  zona  hambat pada  konsentrasi  6,64  mg/ml,  3,32 mg/ml, dan 1,66 mg/ml tidak berbeda signifikan  antar  ekstrak  dan  semua variasi  konsentrasi  ekstrak  masih belum dapat melampaui ciprofloxacin (39,86  ±  0,29)  yang  lebih  efektif dalam menghambat pertumbuhan
E.coli (Tabel 5).
Tabel 5. Hasil Uji In Vitro Anti- Escherichia coli Ekstrak Etanol 70%
Daun Balik Angin Konsentrasi (mg/mL) *Rerata zona hambat ± SD Kategori 25,56 12,75 ± 0,2 Kuat 12,28 11,46 ± 0,3 Kuat 6,64 9,48 ± 0,9 Sedang 3,32 8,7 ± 0,8 Sedang 1,66 5,86 ± 1,5 Sedang Kontrol (+) Ciprofloxacin 39,86 ± 0,29 Sangat Kuat Kontrol (-) Na-CMC 0,5% 0 - *Rerata sudah dikurang 5 mm sumuran Data tersebut di atas dilakukan
analisis SPSS menggunakan One Way
ANOVA karena  terdistribusi  normal (nilai  sig  0,174  (p  ≥0,05))  dan
homogen  (nilai  sig  0,991  (p  ≥0,05)). Analisis  statistik  menggunakan One Way  ANOVA menunjukan  terdapat perbedaan  yang  signifikan  (p<0,05) pada  rata-rata  diameter  zona  hambat dari masing-masing konsentrasi ekstrak  terhadap  kontrol  positif  dan negatif. Hasil analisis tersebut menunjukkan bahwa semua
konsentrasi  uji  ekstrak  etanol  70% daun  Balik  Angin  memiliki  aktivitas anti- E.coli , akan tetapi belum
memiliki  kemampuan  penghambatan yang sebanding denganciprofloxacin.
Aktivitas yang dihasilkan
Balik  Angin  didukung  oleh  peran penting senyawa yang dapat berperan sebagai  antibakteri. β-Sitosterol dan
Stigmasterol adalah  golongan  steroid yang  dapat  merusak  membran  lipid sel bakteri , sedangkan Zizyphoiside C
yang merupakan saponin mengganggu  permeabilitas  dinding sel  sehingga  bakteri  mengalami kebocoran. Rutin dan Kaempferol  3-
O-rutinoside adalah  flavonoid  yang dapat menghambat sintesis DNA. Hal ini berhubungan dengan inhibisi DNA gyrase yang pada akhirnya
menghambat  replikasi  bakteri  (Wu et
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
al .,  2013;  Al  Omar et  al .,  2022;
Fitriyanti et al ., 2023)

## KESIMPULAN
Senyawa fitokimia yang
diduga  terkandung  dalam  daun  Balik
Angin  ( Alphitonia  incana (Roxb.)
Teijsm.  &  Binn.  ex  Kurz)  berpotensi
sebagai  inhibitor DNA  gyrase dari
bakteri Escherichia  coli secara in
silico karena dapat melampaui
potensi Ciprofloxacin antara  lain yaitu β-Sitosterol, Stigmasterol,
Rutin,  Kaempferol  3-O-rutinoside ,
dan Zizyphoiside  C .  Ekstrak  etanol
70%  daun  Balik  Angin  berpotensi
sebagai  anti- Escherichia  coli dengan menghasilkan  rata-rata  diameter zona hambat  pada  konsentrasi  tertinggi 26,56  mg/ml  yaitu  12,75±0,2  mm yang  termasuk  kategori  kuat  dan konsentrasi  hambat  minimum  1,66 mg/ml dengan rata-rata diameter zona
hambat sebesar 5,87±1,5 mm
termasuk kategori sedang.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Para  peneliti  mengucapkan terimakasih kepada Universitas Borneo Lestari yang telah menyediakan fasilitas dalam
mendukung kelancaran penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Agistia, N., Oktaviani, M., Mukhtadi,  W.K.,  Ariska,  D. (2021).  Formulasi  dan  Uji Aktivitas  Antibakteri  Sediaan
Emulgel  Minyak  Biji  Jintan
Hitam  ( Nigella  sativa L.) terhadap Bakteri Staphylococcus epidermidis . Jurnal  Kefarmasian  Indonesia. 11(2), 121–131. Al  Omar,  R.,  Micklewright,  R., Masud, K., Naz, T., Vemulpad,  S.  dan  Jamie,  J.
(2022).  The  genus  Alphitonia reissek ex endl. (rhamnaceae):
a review of its customary uses, phytochemistry  and  biological activities. Journal of Ethnopharmacology. 294(115168), 1-24 Ashley, R.E., Dittmore, A., McPherson,  S.A.,  Turnbough, Jr.,  C.L.,  Neuman,  K.C.  dan Osheroff, N. (2017). Activities of  gyrase  and  topoisomerase IV  on  positively  supercoiled DNA. Nucleic Acids Research. 45(16), 9611-9624.
Cock,  I.E.  (2020). Alphitonia excelsa (Fenzl)  Benth.  Leaf
Extracts Inhibit the Growth of a Panel of Pathogenic Bacteria. Phcog Commn. 10(2), 67-74. Egorov,  A.M.,  Ulyashova,  M.M., dan  Rubtsova,  M.Y.  (2018). Bacterial Enzymes and Antibiotic  Resistance.  Acta Naturae. 10(4), 33-48.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Fitriyanti., Ridha, A., dan Ramadhan,  H.  (2023).  Daya Antibakteri  Ekstrak  Etanol 96%  Umbi  Bawang  Dayak ( Eleutherine Americana Merr.) Terhadap Bakteri Propionibacterium acnes .
LUMBUNG  FARMASI.  4(2),
265-272.
Forestryana,  D.,  Ramadhan,  H., Sayakti,  P.I.,  Nurjanah,  T.,
Faradillah,  N.,  dan  Nafila. (2022). Identification of
Essential  Oils  from  The  Bark of  Balik  Angin  ( Alphitonia incana (Roxb.)  Teijsm.  &
Binn.  ex  Kurz).  Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology. SUPP 1(1), 85-95. Goodwin,  R.J.A.,  Bunch,  J.,  dan McGinnity, D.F. (2017). Mass Spectrometry Imaging in Oncology  Drug  Discovery. Advances in Cancer Research. 134, 133-171
Hirsch,  J.,  dan  Klostermeler,  D.
(2021).  What  makes  a  type IIA topoisomerase a gyrase or a  Topo  IV?.  Nucleic  Acid Research. 49(11), 6027-6042.
Krieger,  E.,  Koraimann,  G.,  dan Vriend,  G.  (2002).  Increasing the  precision  of  comparative models with YASARA NOVA–a  self-parameterizing force  field.  Proteins.  47(3), 393–402 Nasab,  R.R.,  Mansourian,  M.,  dan Hassanzadeh F. (2018). Synthesis, antimicrobial evaluation and docking studies of  some  novel  quinazolinone Schiff base derivatives.
Research  in  Pharmaceutical Sciences. 13(3), 213-221.
Oprea,  T.I.,  Davis,  A.M.,  Teague,
S.J.,  dan  Leeson,  P.D.  (2001).
Is  there  a  difference  between leads  and  drugs?  A  historical perspective. Journal of Chemical Information and Computer  Sciences.  41(5), 1308–1315. Purnomo, H. (2013). Kimia Komputasi Untuk Farmasi dan Ilmu  Terkait  Uji  in  Siliko Senyawa  Antikanker.  Pustaka Pelajar, Yogyakarta. Ramadhan, H., Andina, L., Vebruati.,  Nafila.,  Yuliana, K.A.,  Baidah,  D.,  dan  Lestari, N.P.  (2020a).  Phytochemical Screening and Randemen Comparison  of  96%  Ethanol Extract  of  Terap  ( Artocarpus odoratissimus Blanco)  Leaf,
Flesh  And  Peel.  Jurnal  Ilmiah Farmako  Bahari.  11(2),  103- 112.
Ramadhan,  H.,  Arsyad,  M.,  dan Sayakti, P.I. (2020b). Skrining Fitokimia  Dan  Uji  Aktivitas
Antibakteri  Ekstrak  Etanol 70%  Biji  Kalangkala  ( Litsea angulata Bl.) Terhadap Bakteri Penyebab Jerawat Propionibacterium acnes . Borneo Journal of Pharmascientech. 4(1), 60-70.
Ramadhan,  H.,  Forestryana,  D., Sayakti,  P.I.,  Riyad,  M.,  dan Restapaty,  R.  (2023a).  In- silico  study  of  antioxidant- anticancer activity of phenolic and  flavonoid  compounds  of
Mangifera species using molecular  docking  PLANTs.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 139-151 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Jurnal Ilmiah Farmasi. Special edition, 8-22.
Ramadhan, H., Muthia, R.,
Wahyunita, S., Forestryana, D, Soleha,  S.M.,  dan  Lihimi. (2023b). Comparison of Extraction  Solvents  Towards
Anti- Propionibacterium  acnes activity  of Alphitonia  incana (Roxb).  Teijsm.  &  Binn.  ex Kurz Leaves. Indonesian Journal of Pharmaceutical Science and Technology. SUPP 1(1), 10-19.
Ramadhan,  H.,  Rezky,  D.P.,  dan Susiani, E.F. (2021). Penetapan  Kandungan  Total Fenolik-Flavonoid pada Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Kasturi  ( Mangifera  casturi Kosterman).  Jurnal  Farmasi Dan Ilmu Kefarmasian Indonesia. 8(1), 58-67. Sandra, E., Fitriyanti,  dan Yunarti, A. (2022). Efektivitas Antibakteri  Ekstrak  Metanol
Daun Balik Angin ( Alphitonia
incana )  Terhadap Escherichia coli Menggunakan Difusi
Sumuran. Pharmacoscript.
5(2), 201-211. Sayakti,  P.I.,  Anisa,  N.,  dan Ramadhan, H. (2022). Antioxidant activity of ethanol extract  of  cassava  leaves ( Manihot  esculenta Crantz) using CUPRAC method.
Jurnal Ilmiah Farmasi. Special Edition 2022, 97-106. Siahaan,  S.,  Herman,  M.J.,  dan Fitri., N. (2022). Antimicrobial Resistance Situation  in  Indonesia:  A Challenge  of  Multisector  and
Global  Coordination.  Journal of Tropical Medicine. 2022, 1-
10. Syahputra,  G.  (2014).    Simulasi Docking Kurkumin Enol, Bisdemetoksikurkumin dan Analognya  sebagai  Inhibitor Enzim12-lipoksigenase. Jurnal Biofisika. 10(1), 55-57. Syahrinastiti,  T.  A.,  Djamal,  A., dan Irawati, L. (2015). Perbedaan Daya Hambat Ekstrak  Daun  Sirih  Hijau ( Piper  betle L.)  dan  Daun
Sirih  Merah  ( Piper  crocatum Ruiz & Pav) terhadap Pertumbuhan Escherichia coli .
Jurnal  Kesehatan  Andalas.
4(2), 2–5.
Wu, T., Zang, X., He, M., Pan, S., dan  Xu,  X.  (2013).  Structure- activity relationship of flavonoids on their anti- Escherichia  coli activity  and inhibition  of  DNA  gyrase.  J Agric  Food  Chem.  61(34),
8185-8190.
Wulandari,  L.  I.,  Rahmadani,  A., dan Rusli, R. (2018). Mekanisme Antibakteri Senyawa  Turunan  Kalkon  4- Asetil  Piridin.  Jurnal  Ilmiah Ibnu Sina. 3(2), 234 - 241.