## Pengaruh Kombinasi Suplementasi Omega 3 dengan Kalori Restriksi terhadap Penyembuhan Luka Bakar pada Tikus Sprague Dawley
Kajian Pada: Tumor Nekrosis Faktor – Alfa dan Perbaikan Luas Luka Bakar
1 2 3 2 3
Erwin Wibowo , Edi Dharmana , Erik Prabowo , Nani Maharani , Selamat Budijitno
Latar belakang : Luka bakar merupakan masalah klinis dengan komplikasi yang sering menyebabkan  morbiditas  dan  mortalitas.  Omega  3  memiliki  efek  anti  inflamasi  dan restriksi  kalori  memiliki  efek  anti  oksidan  yang  diduga  mampu  mempercepat  proses penyembuhan  pada  luka.  Penelitian  bertujuan  untuk  mengetahui  apakah  kombinasi suplementasi Omega 3 dan restriksi kalori dapat membantu dalam proses penyembuhan luka bakar yang dapat ditinjau dari kadar TNF Alfa dan perbaikan luas luka bakar.
Metode  : Penelitian  eksperimental  dengan  desain randomized  post  test  with  control group pada  tikus  yang  di  intervensi  luka  bakar  pada  punggungnya.  Random  alokasi dilakukan  untuk  membagi  tikus Sprague  Dawley dalam  4  kelompok  yaitu  kelompok kontrol (K1) dengan diet biasa, kelompok restriksi kalori (P1), kelompok suplementasi omega 3 (P2) dan kelompok kombinasi restriksi kalori dengan suplementasi omega 3 (P3). Data  dianalisis  dan  diolah  menggunakan  uji  hipotesis Kruskall  Wallis  –  Post  Hoc  test Mann–Whitney . Hasil : Penelitian didapatkan perbedaan bermakna yang signifikan kadar TNF Alfa pada kelompok Kontrol dengan kelompok P1, P2, dan P3 dengan p <0,001. Luas luka bakar didapatkan  hasil  bermakna  signifikan  antar  kelompok  dengan p <0,001. Post  Hoc  test kadar TNF alfa dan luas luka bakar menunjukkan tidak ada perbedaan bermakna antara kelompok P2 dengan P3.
Simpulan : Kombinasi pemberian suplementasi omega 3 dengan restriksi kalori dapat menurunkan kadar TNF Alfa dan memperkecil ukuran luas luka bakar secara bermakna namun tidak untuk restriksi kalori saja.
Kata kunci : penyembuhan luka, Omega 3, Kalori Restriksi, TNF Alfa
1 Bagian Ilmu Biomedik – Bagian Ilmu Bedah Umum Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang
2 Departemen Ilmu Biomedik, Fakultas Kedokteran, Universitas Diponegoro, Semarang
3 Bagian Ilmu Bedah Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang / RSUP Dr. Kariadi Semarang
Abstrak

## Original Article
Med Hosp 2020; vol 7 (1) : 75–81 p-ISSN: 2301-4369 e-ISSN: 2685-7898 https://doi.org/10.36408/mhjcm.v7i1.432
Diajukan: 17 Desember 2019 Diterima: 20 Januari 2020

## Afiliasi Penulis:
Bagian Ilmu Biomedik – Bagian Ilmu Bedah Umum Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang
Korespondensi Penulis: Erwin Wibowo Jl. Dr. Sutomo No. 16, Semarang Jawa Tengah 50244 Indonesia
E-mail: erwin_073@yahoo.com
Background : Burns are clinical problem with complications that often cause morbidity and mortality. Omega 3 has an anti-inflammatory effect and calorie restriction has an anti–oxidant effect which is thougth to accelerate the healing process in wounds. The research aims to determine wheteher the combination of Omega 3 supplementation and calorie restriction is expected to help in the process of healing burns that can be viewed from the level of tumor necrosis factor alpha and large burn healing.
Methods : This study an experimental study with design of randomized post test with control group in rats given burns to their backs. Random allocation was made to divide Sprague Dawley rats into 4 groups: the control group with a normal diet (K1), the calorie restriction group (P1), the omega 3 supplementation group (P2), and the combination of omega 3 with calorie restriction group (P3). Data were analyzed and processed using the Kruskall Wallis – Post Hoc Mann–Whitney hypothesis test. Results : The study found significant differences in levels of TNF Alpha in the control group with groups P1, P2, and P3 with p <0.001. Burn area showed significant results between groups with p <0.001. Post Hoc tests for levels of TNF alpha and burn area showed no significant diffrence between P2 and P3groups.
Conclusion : The combination of omega 3 supplementation with calorie restriction can significantly reduce TNF alpha levels and significantly reduce the area of burns but not for calorie restriction only.
Keywords : wound healing, omega 3, calorie restriction, TNF Alpha

## Abstract
The effect combination of omega-3 supplementation with calorie restriction in burn wound healing in Sprague Dawley mouse A study : tumor necrosis factor alpha and large burn healing

## PENDAHULUAN
Luka bakar merupakan luka yang dapat disebabkan oleh panas, radiasi, sengatan listrik, gesekan, maupun kontak
1 dengan  bahan-bahan  kimiawi.   Setiap  tahunnya  pada 2015 terdapat 67 juta kasus cedera luka bakar di seluruh 2 dunia.  Luka bakar merupakan salah satu penyumbang Disability-adjusted  life  years (DALYs)  pada  negara berkembang. Menurut Human Development Reports 2015, angka  mortalitas  pada  negara  berkembang  3  kali  lipat lebih  banyak  dibandingkan  negara  maju.  Angka kematian pada negara maju adalah 57 dan 106 per 1000 penduduk  untuk  perempuan  dan  laki-laki,  sedangkan pada  negara  berkembang  angka  kematian  menyentuh angka 249 dan 291 per 1000 penduduk untuk perempuan
3 dan  laki-laki.   Selain  tingginya  angka  mortalitas,  luka bakar  juga  memiliki  tingginya  angka  morbiditas, meningkatkan  lama  hospitalisasi,  kerusakan  struktur tubuh, dan disabilitas.
Penyembuhan  luka  merupakan  proses  fisiologis yang  sangat  penting.  Beberapa  mediator  inflamasi penting  yang  berperan  dalam  penyembuhan  luka, diantaranya  adalah  TNF–alfa.  Peran  TNF–alfa  dalam penyembuhan  luka  pada  berbagai  penelitian menunjukan TNF–alfa menginduksi pertumbuhan epitel d a n   n e o v a s k u l a r i s a s i .   T N F – a l f a   j u g a   d a p a t mengkompensasi  efek  negatif  dari  reduksi  makrofag yang  juga  memberikan  efek  langsung  pada 4,5 penyembuhan luka.
Pemberian  nutrisi  merupakan  salah  satu  faktor penting  dalam  penyembuhan  luka,  dikarenakan  pada saat  luka  sumber  energi  utama  yang  dipakai  adalah lemak.  Keterlibatan  asam  lemak  pada  kesehatan
epidermal  menunjukkan  bahwa  pemberian  omega–3 merupakan  terapi  yang  dapat  diberikan  untuk memperbaiki respon inflamasi.
P e m b e r i a n   n u t r i s i   y a n g   a d e k u a t   a k a n mempercepat penyembuhan luka, namun ada beberapa penelitian  mengenai  pengurangan  nutrisi  dengan restriksi  kalori,  peran  restriksi  kalori  dalam penyembuhan luka masih menjadi kontroversi. Namun penelitian  yang  lebih  baru  oleh  Christovan, et  al pada tahun  2019  menunjukkan  bahwa  restriksi  kalori  dapat mengaktivasi  Sirtuin  1  (SIRT1)  yang  akan  memodulasi penyembuhan  luka  melalui  induksi  angiogenesis,
6 fibroplasia,  dan  penyusunan  kolagen.   Beberapa penelitian  sebelumnya  juga  menyimpulkan  bahwa restriksi kalori dapat mempercepat proses peyembuhan luka, hal ini berdasarkan pada teori bahwa restriksi kalori akan  menekan  ekpresi  gen  stresoksidatif  dan  stres amelioratif  tingkat  seluler  saat  terjadi  cedera  jaringan 7 sehingga meningkatkan kemampuan regenerasi sel.
Oleh  sebab  itu,  perlu  dicari  alternatif  lain  untuk penyembuhan luka bakar yang bersifat aman, efektif dan mudah  dilakukan  tanpa  penggunaan  obat-obatan. Penelitian  ini  di  tujukan  untuk  mengetahui  pengaruh kombinasi  omega–3  dengan  restriksi  kalori  terhadap proses penyembuhan luka bakar di tinjau dari kadar TNF alfa dan perbaikan luas luka bakar.

## METODE
Penelitian  ini  merupakan  studi  eksperimental  hewan dengan desain randomized post–test with control group pada tikus jantan Sprague Dawley yang diberi luka bakar pada punggung. Semua subjek diperlakukan secara sama dari
segi tindakan dan post tindakan. Subjek hewan percobaan sebanyak  6  tikus  per  masing-masing  kelompok  setelah aklimatisasi selama 7 hari lalu dibagi secara acak menjadi empat  grup  sama  rata  satu  kelompok  kontrol  dan  tiga kelompok  intervensi,  yaitu:  kelompok  kontrol  1  (K1) diberikan  pakan  secara  normal  tanpa  diberikan suplementasi  omega–3  dan  restriksi  kalori,  kelompok perlakuan satu (P1) diberikan restriksi kalori sebesar 40% dari  kebutuhan  makanan  tikus  sehari,  kelompok perlakuan  dua  (P2)  diberikan  suplementasi  omega–3 tanpa  di  restriksi  kalori,  kelompok  perlakuan  tiga  (P3) diberikan suplementasi omega–3 dengan restriksi kalori sebesar 40 persen dari kebutuhan makanan tikus sehari. Suplementasi  omega–3  diberikan  sesuai  dengan kebutuhan  tikus  2gr/kgbb/hari  secara  peroral  dengan sondase.  Pada  hari  ke–14,  terminasi  dilakukan  pada seluruh tikus dan kemudian dilakukan pemeriksaan luas luka  bakar  secara  mikroskopis  dan  pewarnaan Hematoxyline Eosin staining dengan pengukuran luas luka 2 dilakukan   dalam satuan luas mikrometer persegi µm . dan  pemeriksaan  kadar  TNF–alfa  dengan  Elisa  dalam satuan pg/mL.
Analisis data dilakukan dengan analisis deskriptif dan  uji  hipotesis.  Pada  analisa  deskriptif  variabel tergantung  akan  disajikan  dalam  bentuk  tabel  dengan menyajikan  data  rerata  dan  standar  deviasi.  Uji normalitas  data  dilakukan  dengan  uji Saphiro–Wilk . Apabila distribusi normal, uji hipotesis yang digunakan adalah uji One Way Anova dilanjutkan dengan Post–Hoc Test untuk  mengetahui  perbedaan  antar  kelompok. Apabila  distribusi  tidak  normal,  uji  hipotesis  yang
digunakan  adalah  uji  Non  Parametrik Kruskal  Wallis , dilanjutkan  dengan  uji Mann–Whitney .  Analisa  data dilakukan  dengan software  SPSS  Ver.  23  for  Windows . Hasil  analisis  data  kemudian  disajikan  dalam  bentuk tabel  dan  grafik boxplot .  Penelitian  dilakukan  selama  2 bulan di Universitas Brawijaya Malang.
Penelitian  ini  menerapkan animal  ethics dalam mengelola  hewan  coba. Animal  ethics  /  Ethical  Clearence diperoleh  Komisi  Etik  Penelitian  Kesehatan  Fakultas K e d o k t e r a n   U n i v e r s i t a s   D i p o n e g o r o   d e n g a n No.144/EC/H/KEPK/FK–UNDIP/XI/2019.  Perlakuan pada hewan disesuaikan dengan standar pemeliharaan binatang  dan  pelaporan  penelitian  disesuaikan  dengan NC3R ARRIVE Guidelines for Animal Research .

## HASIL
Penelitian dilakukan terhadap 24 ekor tikus, yang terbagi menjadi  4  kelompok;  yaitu  kelompok  tikus  yang diberikan luka bakar dan diberikan pakan normal sesuai kebutuhan  tetapi  tidak  diberikan  omega–3  maupun restriksi  kalori  (K1),  kelompok  tikus  yang  diberikan restriksi  kalori  (P1),  kelompok  tikus  yang  diberikan suplementasi  omega  3  (P2),  dan  kelompok  tikus  yang diberikan suplementasi omega–3 dan restriksi kalori (P3).
Hasil  data  berat  badan  tikus  tidak  terdistribusi normal  sehingga  dilakukan  pengujian Kruskall  Wallis dengan uji ini, tampak bahwa p >0,05 dilanjutkan Post hoc Uji Mann Whitney sehingga bisa dinyatakan berat badan tikus tidak berbeda secara signifikan. Rerata berat badan tikus paling tinggi dapat ditemukan pada kelompokyang
Pengaruh Kombinasi Suplementasi Omega–3 dengan Kalori Restriksi terhadap Penyembuhan Luka Bakar pada Tikus Sprague Dawley Kajian Pada: Tumor Nekrosis Faktor – Alfa dan Perbaikan Luas Luka Bakar
Kadar TNF Alfa

## TABEL 1
Perbandingan kadar TNF Alfa dari masing-masing kelompok dengan menggunakan uji Kruskall Wallis
K1 P2 Median a 581,16 b 726,96 c 116,87 c
100,26
511,79 – 683,04 709,64 – 736,79 95,18 – 130,71 98,57 – 114,46 p < 0,001* Min–Max P1 P3 *Signifikan ( p <0,05) Perlakuan TABEL 2 Post Hoc Test Mann–Whitney Kadar TNF alfa P1
P3
K1
0,004*
0,004*
0,004* 0,004* 0,004*
P2 P1 P2
*memiliki perbedaan yang bermakna
0,149
diberikan suplementasi omega–3 (P2) sebesar 139,50 gr ± 14,89.
Hasil perbandingan kadar TNF–alfa dari masing- masing kelompok dengan uji Kruskal Wallis didapatkan nilai p <0,001  yang  artinya  bermakna  signifikan.  Hasil tersebut  didapatkan  perbedaan  yang  bermakna signifikan, untuk lebih jelas dapat dilihat pada tabel 1.
Untuk  mengetahui  terdapat  perbedaan  kadar TNF–alfa antara dua kelompok maka dilakukan analisis Post Hoc dengan menggunakan uji Mann–Whitney . Dari  hasil  uji Mann–Whitney ditunjukkan  pada kolomdiatas jika memuat tanda (*) berarti ada perbedaan
yang  bermakna  ( p–value <0,05)  dan  jika  tidak  memuat tanda  (*)  berarti  tidak  ada  perbedaan  yang  bermakna ( p–value >0,05).
Berdasarkan tabel 1, 2 dan gambar 1 diatas tampak bahwa kadar TNFalfa meningkat secara signifikan pada kelompok  luka  bakar  dengan  restriksi  kalori  (P1)  jika dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan  luka  bakar saja  (K1),  dengan  nilai  726,96pg/mL  berbanding 581,16pg/mL. Pemberian omega–3 pada masing-masing kelompok luka bakar dengan atau tanpa restriksi kalori menunjukkan  pengaruhnya,  dimana  kadar  TNF–alfa lebih rendah, tampak bahwa tanpa restriksi kalori kadar
Medica Hospitalia | Vol. 7, No. 1, Mei 2020
800,00 600,00 400,00 ,00 K1 Kelompok 200,00 TN F al p h a P1 P2 P3 Luas Luka Bakar
TABEL 3
Perbandingan perbaikan luas luka bakar dari masing-masing kelompok dengan uji Kruskall–Wallis K1
P3 Median 2486,45
1595,50
1151,14
1432,32 – 1601,47 1035,69 – 1635,09 P2 P1 P2 *Signifikan ( p <0,05)
2569,15 2469,59 – 2660,73
P1
2477,15 – 2551,92 < 0,001*
Perlakuan TABEL 4
Post Hoc Test Mann–Whitney Perbaikan Luka Bakar
P1
K1 0,109 0,004* 0,004* P2 P1 P3 *Memiliki perbedaan yang bermakna 0,004* 0,004* P2 0,055
Gambar 1. Grafik boxplot kadar TNF–alfa dari masing-masing kelompok
TNF–alfa  dengan  pemberian  omega–3  saja  (P2)  rendah secara  signifikan,  dengan  nilai  116,87pg/mL dibandingkan dengan kelompok P1 dan K1, dan kadar TNF–alfa  dengan  pemberian  omega–3  dan  restriksi kalori (P3) tampak rendah secara signifikan, dengan nilai 104,3452pg/mL dibandingkan dengan kelompok P1 dan K1. Namun tidak ada perbedaan yang bermakna antara kelompok P2 dengan P3.
Hasil  perbandingan  perbaikan  luas  luka  bakar dari  masing-masing  kelompok  dilakukan  dengan pemeriksaan mikroskopik dan pewarnaan Hematoxyline Eosin  staining dengan  pengukuran  dilakukan  memakai software  image  raster  versi  3.1 dengan  satuan  luas 2 mikrometer persegi µm . Hasil perbandingan perbaikan luas luka bakar dari masing-masing kelompok dengan uji Kruskal  Wallis  didapatkan  nilai p <0,001  yang  artinya bermakna  signifikan.  Hasil  tersebut  didapatkan perbedaan  yang  bermakna  signifikan,  untuk  lebih  jelas dapat dilihat pada tabel 3.
Untuk mengetahui terdapat perbedaan perbaikan luas  luka  bakar  antara  dua  kelompok  maka  dilakukan a n a l i s i s P o s t   H o c d e n g a n   m e n g g u n a k a n   u j i Mann–Whitney .
Dari  hasil  uji Mann–Whitney ditunjukkan  pada kolom  di  atas  jika  memuat  tanda  (*)  berarti  ada perbedaan yang bermakna ( p–value <0,05) dan jika tidak memuat  tanda  (*)  berarti  tidak  ada  perbedaan  yang bermakna ( p–value >0,05).
Berdasarkan  tabel  dan  gambar  di  atas  tampak bahwa  luas  luka  bakar  pada  kelompok  restriksi  kalori 2 (P1)  dengan  nilai  2569,15µm   dibandingkan  dengan 2 kelompok kontrol (K1) dengan nilai 2486,45µm  tidak ada perbedaan bermakna secara signifikan. Tampak bahwa pemberian  omega–3  saja  tanpa  restriksi  kalori  (P2) menunjukkan  hasil  perbaikan  luas  luka  bakar  yang mengecil  /  turun  bermakna  secara  signifikan,  dengan
2 nilai 1595,50µm  dibandingkan dengan kelompok K1dan P1.  Sedangkan  luas  luka  bakar  dengan  pemberian omega–3  dan  restriksi  kalori  (P3)  tampak  turun
2 bermakna  secara  signifikan,  dengan  nilai  1151,14µm dibandingkan dengan kelompok K1 dan P1, namun tidak ada perbedaan yang bermakna secara signifikan antara kelompok P2 dengan P3.

## DISKUSI
Penelitian  ini  ditujukan  untuk  melihat  pengaruh  dari kombinasi suplementasi omega–3 dengan restriksi kalori terhadap  penyembuhan  luka  bakar  pada  tikus Sprague Dawley kajian pada kadar TNF–alfa dan perbaikan luas luka bakar. Penelitian ini dilakukan kepada tikus Sprague Dawley karena  memiliki  struktur  anatomi  kulit  tubuh yang sama seperti manusia dan yang memenuhi kriteria inklusi  dan  telah  diberikan  perlakuan  selama  14  hari. Kemudian  dilihat  kadar  TNF–alfa  dengan  ELISA  dan perbaikan luas luka bakar pemeriksaan dilakukan secara mikroskopik.
Penelitian  ini  menggunakan  suplementasi omega–3  dan  restriksi  kalori  karena  peran  omega–3 dalam  proses  penyembuhan  luka  adalah  dengan
8 menginisiasi proses anti–inflamasi.  Omega–3 berperan sebagai  anti-inflamasi  melalui  banyak  mekanisme. Omega–3 memiliki efek menghambat proses kemotaksis saat  inflamasi.  Pengaruhnya  dalam  menghambat kemotaksis  neutrofil  dan  monosit  ke  lokasi  inflamasi. Omega–3 menghambat kemotaksis dengan mengurangi ekspresi  dan  menjadi  antagonis  terhadap  reseptor
8 kemotraktans.   Calder et  al pada  tahun  2012 menyimpulkan bahwa Omega–3 berperandalam proses penyembuhan luka dengan cara menginisiasi proses anti-
8 inflamasi.   Wang et  al pada  tahun  2012  menyimpulkan Omega–3 juga memiliki efek dalam proses penyembuhan
Pengaruh Kombinasi Suplementasi Omega–3 dengan Kalori Restriksi terhadap Penyembuhan Luka Bakar pada Tikus Sprague Dawley Kajian Pada: Tumor Nekrosis Faktor – Alfa dan Perbaikan Luas Luka Bakar
800,00 600,00 400,00 ,00 K1 Kelompok 200,00 TN F al p h a P1 P2 P3 1 24
Gambar 2. Grafik boxplot perbandingan perbaikan luas luka bakar masing-masing kelompok
luka diabetes. Sebuah studi pada manusia dengan ulkus diabetes menunjukkan pemberian asupan oral Omega–3 selama 12 minggu efektif untuk memperkecil luas ulkus
9 diabetes  bila  dibandingkan  kelompok  kontrol. Sedangkan restriksi kalori akan menekan pembentukan radikal bebas dan respons inflamasi, teori radikal bebas berkaitan dengan reactive oxygen species (ROS) yang mana restriksi kalori dapat mengurangi reaktifitas dari lemak viseral  dan  akumulasi  energi  akan  menginduksi 10 inflamasi kronik.  Sehingga kombinasi omega–3 dengan restriksi  kalori  dapat  membantu  dalam  proses penyembuhan luka.
Pada  kelompok  perlakuan  dengan  pemberian suplementasi  omega  3  pada  masing-masing  kelompok luka  bakar  dengan  atau  tanpa  restriksi  kalori menunjukkan  pengaruhnya,  dimana  kadar  TNF–alfa lebih  rendah  dan  bernilai  secara  signifikan  jika dibandingkan  dengan  kelompok  yang  tidak mendapatkan  suplementasi  omega–3.  Beberapa penelitian  telah  mengidentifikasi  TNF–alfa  sebagai penanda  prediktif  untuk  pengembangan  komplikasi septik  pada  pasien  luka  bakar.  Bahkan,  ekspresi TNF–alfa  meningkat  segera  pasca  luka  bakar,  memicu 11 respons peradangan, dan kemudian berkurang lagi.
Yi–Chi Peng, et al melakukan penelitian mengenai pemberian emulsi lipid yang diperkaya dengan omega–3 mempercepat  penyembuhan  luka  eksperimental  pada tikus  dengan  kontrol  placebo,  dan  ditemukan  bahwa peningkatan reepitelisasi, peningkatan kadar IL–6, IL–10 dan penurunan kadar TNF–alfa pada group tikus yang di
12 berikan omega–3 dibandingkan dengan kontrol.  Sejalan dengan  penelitian  ini,  ditemukannya  penurunan  kadar TNF–alfa  pada  kelompok  yang  diberikan  Omega–3 dibandingkan dengan yang tidak diberikan.
Penelitian  ini  juga  menilai  perbaikan  luas  luka bakar  pada  jaringan  kulit,  dari  hasil  pemeriksaan  luas luka  bakar  dengan  pemberian  suplementasi  omega–3 pada masing-masing kelompok luka bakar dengan atau tanpa  restriksi  kalori  menunjukkan  pengaruhnya, dimana luas luka bakar cenderung turun/mengecil dan bernilai  secara  signifikan  jika  dibandingkan  dengan kelompok  yang  tidak  mendapatkan  suplementasi omega–3.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa penurunan  tersebut  dikarenakan  pada  pengambilan jaringan pada hari ke–14 telah memasuki fase akhir dari proliferasi  di  mana  jumlah  angiogenesis  menurun  dan akan kembali ke jumlah pembuluh darah kulit normal. Omega 3 pada perbaikan luas luka bakar mempengaruhi fibroblas  dan  miofibroblas,  fibroblas  berperan  dalam penyembuhan  luka  oleh  karena  fibroblas  membantu memecah fibrin  clot ,  membentuk  matriks  ekstraseluler baru  serta  berikatan  dengan  kolagen  oleh  karena 12 fibroblas juga membantu membentuk struktur kolagen.
Pada penelitian ini ditemukan adanya perbedaan bermakna antara yang diberikan restriksi kalori saja (P1) dengan  kelompok  yang  mendapatkan  suplementasi
omega–3  (P2).  Dari  hasil  penelitian  ditemukan  bahwa kadar  TNF  alfa  cenderung  lebih  tinggi  dibandingkan kelompok P2, P3 dan kelompok kontrol (K1) sedangkan untuk perbaikan luas luka bakar cenderung masih luas atau lebar dibandingkan dengan kelompok P2 dan P3.
Penelitian  ini  ditemukan  juga  bahwa  kelompok restriksi  kalori  tidak  ada  perbedaan  bermakna  yang signifikan  dengan  kelompok  kontrol(K1)  dalam  hal perbaikan  luas  luka  bakar,  hal  ini  sejalan  dengan penelitian  lain  yang  juga  memiliki  hasil  bahwa penyembuhan  luka  pada  tikus  yang  mendapatkan restriksi kalori hampir sama hasilnya dengan kelompok kontrol, Nicole D. Hunt et al yang melakukan penelitian untuk  menilai  pengaruh  penyembuhan  luka  pada  tiga kelompok  mencit.  Kelompok  perlakuan  terdiri  atas retriksi kalori, diet normal, dan retriksi kalori beberapa saat perlakuan luka yang dilanjutkan dengan diet biasa. Percobaan  tersebut  menyimpulkan  penyembuhan  luka yang paling cepat adalah pada kelompok retriksi kalori yang  dilanjut  dengan  diet  biasa  disusul  dengan kelompok  diet  normal  dan  retriksi  kalori  sepanjang
13 percobaan.  Sehingga perlu di teliti lagi efek dari kalori restriksi  dengan  memastikan  kalori  yang  mana  yang harus di restriksi, selain itu juga harus dipastikan berapa jumlah  restriksi  kalori  yang  baik  untuk  penyembuhan luka.
Penelitian ini ditemukan tidak adanya perbedaan yang bermakna secara signifikan antara kelompok yang diberikan suplementasi omega–3 dengan retriksi kalori (P3)  dengan  kelompok  yag  diberikan  suplementasi omega–3 tanpa restriksi kalori (P2). Hal ini membuktikan bahwa  pemberian  suplementasi  omega–3  mempunyai efek yang baik dalam hal penyembuhan luka bakar jika di tinjau  dari  kadar  TNF–alfa  dan  perbaikan  luas  luka bakar.
Penelitian ini juga memiliki beberapa kekurangan dan  keterbatasan  seperti  ketidakseragaman  dalam tingkat higienitas dari masing-masing tikus dimana hal tersebut juga sebagai faktor dalam proses penyembuhan luka, pengambilan sampel jaringan luka yang tidak sama persis, dan tidak dapat ditentukannya secara pasti fase penyembuhan  luka  yang  sedang  terjadi  pada  hari  ke empat  belas.  Namun  tidak  lupa  berterimakasih  yang telah membantu selesainya penelitian ini.

## SIMPULAN
Kombinasi  pemberian  suplementasi  omega–3  dengan restriksi  kalori  mempunyai  pengaruh  mempercepat penyembuhan luka bakar pada tikus Sprague Dawley di tinjau dari penurunan kadar TNF–alfa dan memperkecil ukuran  luas  luka  bakar.  Pemberian  restriksi  kalori  saja tanpa  omega–3  tidak  ada  pengaruh  dan  cenderung memperlambat  penyembuhan  luka  bakar.  Dari  hasil penelitian  ini  dapat  menjadi  acuan  untuk  dilakukan penelitian lanjutan pada manusia.
Medica Hospitalia | Vol. 7, No. 1, Mei 2020

## DAFTAR PUSTAKA
1. World  Health  Organization.  Burns  [Internet].  Who.int.  2019 [ c i t e d   2 0   S e p t e m b e r   2 0 1 9 ] .   A v a i l a b l e   f r o m : https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/burns
2. GBD  2015  Disease  and  Injury  Incidence  and  Prevalence Collaborators:  Global,  regional,  and  national  incidence, prevalence, and years lived with disability for 310 diseases and injuries, 1990-2015: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2015. Lancet. 2016, 388:1545–602.
3. United  Nations  Development  Programme.  Work  for  human development.  New  York,  NY:  United  Nations  Development Programme; 2015.
4. Chaudhary  N,  Munawar  M,  Khan  M,  Rehan  K,  Sadiq  A, Tameez-ud-din A et al. Epidemiology, bacteriological profile, and antibiotic sensitivity pattern of burn wounds in the burn unit of a tertiary care hospital. Cureus. 2019;.
5. Wang Y, Beekman J, Hew J, Jackson S, Issler-Fisher A, Parungao R et al. Burn injury: Challenges and advances in burn wound healing,  infection,  pain  and  scarring.  Adv  Drug  Deliv  Rev. 2018;123:3–17.
6. Christovam  A,  Theodoro  V,  Mendonça  F,  Esquisatto  M,  dos Santos G, do Amaral M. Activators of SIRT1 in wound repair: an animal model study. Arch Dermatol Res. 2019; 311(3):193–201.
7. Bruncardi F C, Anderson DK, Billiar T R , Dunn DL. Schwartz's Principles of Surgery 10th Edition. New York   :McGraw–Hill Education. 2015
8. Calder  PC.  Omega-3  polyunsaturated  fatty  acids  and inflammatory processes: nutrition or pharmacology?. Br J Clin Pharmacol  [internet].  Desember  2007  [diakses  15  September 2019]:75(3): 645–662. https://www.ncbi.nlm.nih.gov
9. Wang J, Yu JC, Kang WM, and Ma ZQ. Superiority of a fish oil- enriched  emulsion  to  mediumchaintriacylglycerols/long- chain  triacylglycerols  in  gastrointestinal  surgery  patients:  a randomized clinical trial [internet]. Nutrition.2012 [diakses 25 maret 2018]; 28: 6  doi: 10.1016/j.nut.2011.08.004
10. Ye  J,  Keller  JN.  Regulation  of  energy  metabolism  by inflammation:  a  feedback  response  in  obesity  and  calorie restriction. Aging [internet]. Juni 2010 [diakses 15 September 2019];  (2):361368.  https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ articles/PMC2919256/pdf/aging-02-361.pdf
11. Landen NX, Li D, Stahle M. Transition from inﬂammation to proliferation: a critical step during wound healing. Cell. Mol. Life Sci. 2016;73:3861–85.
12. Peng Y, Yang F, Subeq Y, Tien C, Chao Y, Lee R. Lipid Emulsion Enriched  in  Omega-3  PUFA  Accelerates  Wound  Healing:  A Placebo-Controlled  Animal  Study.  World  J  Surg. 2017;42(6):1714–1720.
13. Hunt ND, Li GD, Zhu M, Levette A, Chachich ME, Spangler EL, Allard JS, Hyun DH, Ingram DK, de Cabo R. Effect of calorie restriction and refeeding on skin wound healing in the rat. Age. 2012;34(6):1453–8.