Abstrak —Pengaruh  variasi  komposisi  sabut  kelapa  sebagai media  pertumbuhan  jamur  tiram  putih  ( Pleurotusostreatus ) terhadap aktivitas antimikroba telah diteliti. Varias ikomposisi serbuk  kayu  sengon  dan  sabut  kelapa  yang  digunakan  adalah 0:100  (SK-1),  25:75  (SK-2),  50:50  (SK-3),  75:25  (SK-4)  dan 100:0  (SK-5).  Jamur  tiram  putih  diliofilisasi  dan  diekstrak dengan  metode  maserasi  menggunakan  pelarut  metanol. Ekstrak  metano  l P.  Ostreatus diujiaktivitas  antimikroba menggunakan  metode  dilusi  cair.  Hasil  yang  diperoleh menunjukkan  bahwa  konsentrasi  antara  variasi  komposisi sabut  kelapa  sebagai  media  pertumbuhan  jamur  tiram  putih mempengaruhi  aktivitas  antimikroba.  Hasil  uji  antimikroba menggunakan metode dilusi cair menunjukkan % penghambatan tertinggi pada SK-3 sebesar 72,380 % terhadap B.  subtilis ,  sedangkan P.  aeruginosa s  ebesar  133,696%. Komposisi  variasi  SK-3  menunjukkan  aktivitas  antimikroba terbaik terhadap bakteri B. subtilis dan P. aeruginosa .
Kata Kunci—Sabut kelapa; Jamur Tiram Putih; Antimikroba; Metode Dilusi Cair

## I. PENDAHULUAN
enyakit  menular  yang  disebabkan  oleh  mikroba menjadi  salah  satu  ancaman  besar  bagi  kesehatan manusia.  Walaupun  jumlah  agen  antimikroba sintetik-alami  telah  diisolasi  dan  dikembangkan  untuk membunuh  mikroorganisme  patogen  secara  efektif,  namun resistensi  mikroorganisme  patogen  terhadap  antimikroba akan meningkatkan masalah kesehatan masyarakat [1].
Berdasarkan penelitian  yang  dilakukan oleh Papaspyridi (2010)  menjelaskan  bahwa  jamur  tiram  putih  memiliki aktivitas  antioksidan,  efek  imunomodulator,  aktivitas antitumor,  antivirus,  anti-inflamasi,  antibiotik  dan  aktivitas penurunan  kolesterol .  Selain  itu,  jamur  tiram  putih  juga memiliki  aktivitas  antikanker,  antidiabetes,  antibakteri, antiparasit dan pengobatan kardiovaskular. Pada pembudidayaan  jamur  tiram  dibutuhkan  media  yang  cocok agar didapatkan hasil produksi yang maksimal [2].
Serbuk  gergaji  kayu  sengon  biasanya  dipakai  sebagai media  pertumbuhan  jamur.  Serbuk  kayu  dipilih  sebagai media  pertumbuhan  jamur  karena  mudah  didapatkan  dan harganya relatif murah. Namun, jumlah kayu sengon sangat terbatas  sehingga  dibutuhkan  sumber  alternatif  sebagai media tanam jamur tiram putih [3].
Salah  satu  alternatif  yang  dapat  digunakan  sebagai media  tanam  jamur  tiram  putih  adalah  sabut  kelapa.  Sabut kelapa  merupakan  limbah  lignoselulosa  yang  mempunyai
potensi  yang  sedemikian  besar  namun  belum  dimanfaatkan sepenuhnya untuk kegiatan produktif yang dapat meningkatkan  nilai  tambahnya.  Sabut  kelapa  memiliki kandungan  lignin  (35%-455)  dan  selulosa  (23%-43%), sedangkan kayu sengon memiliki kandungan selulosa tinggi (Holo-selulosa  74,9%  dan  alfa-selulosa  46,0%)  dan kandungan  lignin  yaitu  25,7%.  Jumlah  hara  dalam  serabut kelapa antara lain unsur N 0,975%, P 0,095%, K 0,29% dan C 54,89% [4].
Pada penelitian sebelumnya  yang telah dilakukan oleh Yuliani (2013) menunjukkan adanya pengaruh variasi sabut kelapa  pada  media  tanam  terhadap  kondisi  fisik  [5]  dan Puspitasari  (2015)  menyatakan  adanya  pengaruh  variasi media  tanam  terhadap  kandungan  nutrisi  jamur  tiram  putih [6]. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Nurhabibah (2015)  juga  menjelaskan  bahwa  adanya  pengaruh  variasi sabut  kelapa  pada  media  tanam  terhadap  kandungan fitokimia dan aktivitas antioksidan dalam jamur tiram putih [7].  Sebagai  kelanjutan  penelitian  tersebut,  pada  penelitian ini  dilakukan  analisa  pengaruh  variasi  komposisi  sabut kelapa  (%  kayu  sengon:  %  sabut  kelapa)  terhadap  aktivitas antimikroba jamur tiram.

## II. METODOLOGI PENELITIAN

## A. Pembuatan Media Tanam (Bag log)
Bahan  baku  media  tanam  jamur  tiram  putih  adalah sabut  kelapa  dan  serbuk  gergaji  kayu  sengon,  dengan perbandingan  sabut  kelapa:  kayu  sengon  adalah  100:0, 75:25,  50:50,  25:75  dan  0:100.  Masing-masing  variasi komposisi media tanam tersebut ditambahkan bekatul 600 g, kapur  200  g,  gipsum  200  g  dan  air  gula.  Campuran  bahan media tanam dimasukkan ke dalam plastik polipropilena (18 x 35 cm) sebanyak 500 gram dan dipadatkan dengan mesin press,  kemudian  dikompos  dan  disterilisasi  menggunakan autoclave pada  suhu  121 o C  selama  1  jam  (dua  kali sterilisasi).  Media  yang  telah  steril  kemudian  diinokulasi dengan  bibit  jamur  F3  melalui  cincin  hingga  bibit  tersebar merata  dibagian  atas  media.  Setelah  inokulasi  selesai, bag log ditutup  dengan  kertas  HVS  dan  diikat  dengan  karet gelang.  Kemudian  inkubasi  dalam  kumbung  jamur,  dengan suhu  diatur  22-28 o C  dengan  kelembapan  relatif  kumbung dijaga 60-70%.

## P

## Pengaruh Sabut Kelapa Sebagai Media Pertumbuhan Alternatif Jamur Tiram Putih ( Pleurotus ostreatus )
Terhadap Aktivitas Antimikroba
Siti Mamluatus Sa’adah, Refdinal Nafwa, dan Adi Setyo Purnomo Jurusan Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS) Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Email: refnawfa@chem.its.ac.id

## B. Pembuatan Ekstrak Jamur Tiram Putih
Jamur  tiram  putih  segar  hasil  panen  ditimbang  dan dipotong  kecil-kecil  kemudian  diliofilisasi  (dikeringkan) dengan freeze  dryer .  Jamur  tiram  putih  kering  ditimbang sebanyak  10  dan  dimasukkan  dalam  labu  erlenmeyer  lalu ditambahkan  150  mL  metanol  dan  didiamkan  diatas rotary shaker dengan kecepatan 120 rpm, pada suhu ruang, selama 24  jam.  Campuran  kemudian  disaring  dan  filtrat  hasil penyaringan  dievaporasi  dengan rotary  evaporator untuk diambil  hasil  ekstraksinya.  Hasil  ekstrak  metanol  kering yang didapatkan dilarutkan dengan DMSO.

## C. Pembuatan Kurva Pertumbuhan Bakteri
1  koloni  bakteri  diinokulasikan  ke  dalam  NB.  Kultur diinkubasi pada suhu 37 o C, 120 rpm. Kultur bakteri diambil dengan mikropipet sebanyak 2 ml, kemudian dimasukkan ke dalam  kuvet  dan  diukur  absorbansinya  pada  OD 600 setiap  1 jam  sekali  selama  48  jam.  Kurva  pertumbuhan  dibuat dengan absorbansi sebagai fungsi waktu.

## D. Preparasi Suspensi Bakteri
Sebanyak  25  ml  NB  dimasukkan  ke  dalam  labu erlenmeyer,  kemudian  pada  masing-masing  erlenmeyer diambil  satu  koloni  bakteri  dari  stok  bakteri  dengan menggunakan  jarum  ose.  Mulut  labu  erlenmeyer  ditutup dengan  menggunakan  spons  dan  diinkubasi  pada  inkubator shaker  pada  suhu  37 o C  dengan  kecepatan  120  rpm  selama 20  jam  untuk  bakteri B.  subtilis sedangkan P.  aeruginosa diinkubasi selama 21 jam.

## E. Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri
Sebanyak  10  tabung  falcon  dilabeli  10 -1 -10 -10 .  Dari masing-masing  tabung  falcon  dimasukkan  9  ml  NB  dan  1 mL suspensi bakteri (pengenceran 10 -1 ) kemudian campuran dihomogenisasi.  Suspensi  bakteri  diambil  1  ml  dari  hasil pengenceran  10 -1 ditambahkan  ke  dalam  tabung  falcon berlabel 10 -2 yang telah berisi 9  ml NB (pengenceran 10 -2 ). Proses pengenceran diulangi sampai didapatkan pengenceran  suspensi  bakteri  10 -3 -10 -10 .  suspensi  bakteri hasil pengenceran 10 -1 -10 -10 dipipet 2,5 ml dan dimasukkan ke  dalam  kuvet  untuk  diukur  absorbansinya  menggunakan spektrofotometer pada OD 600
Sepuluh  buah  cawan  petri  yang  berisi  NA  (3.4.6.2) kemudian  dilabeli  10 -1 -10 -10 .  Suspensi  bakteri  hasil pengenceran  10 -1 -10 -10 diambil  0,1  ml  dengan  mikropipet, lalu dimasukkan kedalam masing-masing cawan petri sesuai dengan  label.  Kultur  diinkubasi  statis  pada  suhu  37 o C. Cawan  petri  yang  digunakan  untuk  perhitungan  dipilih cawan  petri  ( petri  plate )  yang  berisi  25-250  koloni. Kemudian dihitung jumlah koloni bakteri (CFU)/ml dengan menggunakan persamaan:

## Jumlah koloni bakteri =
Jumlah koloni (CFU) faktor pengenceran x jumlah bakteri yang inokulasi (ml) .......... (3.1)

## F. Uji Antimikroba Dengan Metode Dilusi Cair
Dibuat  10  ml  campuran  NB  +  suspensi  bakteri  + sampel  dengan  berbandingan  89:  10:  1.  Dengan menggunakan  mikropipet  dipipet  8,9  mL  NB  lalu dimasukkan  ke  dalam  falcon  kemudian  ditambahkan  1  mL suspensi bakteri konsentrasi 10 4 dan 100 µL sampel dengan
konsentrasi  awal  sampel  250  mg/mL.  Falcon  yang  telah berisi campuran NB + suspensi bakteri + sampel ditutup dan diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  12  jam.  Kemudian campuran  suspensi  dipipet  2  ml  dan  dimasukkan  kedalam kuvet  untuk  diukur  absorbansinya  pada  OD 600 (diulang  3 kali  pengukuran).  Dari  nilai  absorbansi  yang  didapatkan maka  dihitung  nilai  %  penghambatan  ekstrak  metanol P. ostreatus terhadap  bakteri B.  subtilis dan P.  aeruginosa dengan persamaan:
% Penghambatan = ( OD 𝐃𝐌𝐒𝐎−OD 𝐬𝐚𝐦𝐩𝐞𝐥 OD 𝐃𝐌𝐒𝐎 ) X 100% ..(3.2)

## III. HASIL DAN DISKUSI

## A. Pertumbuhan Jamur Tiram Putih
Pada  proses  pembuatan  media  tanam  atau bag  log ditambahkan nutrisi utuk mempercepat proses pertumbuhan jamur. Bekatul sebagai sumber karbohidrat digunakan untuk pertumbuhan  dan  perkembangan  miselium  jamur.  Nitrogen yang  terdapat  pada  bekatul  juga  dapat  digunakan  untuk mensistesis kitin yang merupakan salah satu komponen dari dinding sel jamur dan mensintesis asam amino untuk protein dan  enzim.  Salah  satu  mineral  yang  terdapat  dalam  bekatul adalah  fosfat  yang  berperan  dalam  metabolisme  penghasil energi  (ATP,  ADP)  yang  digunakan  untuk  pertumbuhan miselium  jamur  [6].  Tepung  jagung  sebagai  sumber karbohidrat,  protein,  lemak,  mineral  dan  vitamin  [8]. Gipsum  (CaSO 4 )  sebagai  sumber  kalsium  yang  berfungsi untuk  memperkuat  dinding  sel  dan  mempengaruhi  kerja enzim. Kapur (CaCO 3 ) sebagai sumber mineral kalsium dan pengatur  pH  media.  Larutan  Gula  sebagai  sumber  glukosa. Kadar air dalam  media diatur 45-60% agar  miselium jamur dapat  menyerap  nutrisi  dengan  baik.  Proses  pengomposan dilakukan  untuk  membunuh jamur  liar  atau  bakteri  yang dapat mengganggu pertumbuhan jamur tiram dan mempercepat proses pelapukan. Proses inkubasi jamur tiram putih  dilakukan  di  dalam  kumbung  jamur.  Dalam  masa inkubasi  kelembapan  kumbung  dijaga 60-70% dengan dengan  cara  menyiram  dinding  kumbung  secara  berkala, dengan kadar CO 2 maksimum untuk pertumbuhan miselium jamur adalah 20%. Pada saat pertumbuhan miselium jamur, jamur tidak membutuhkan cahaya [9].
Setelah  miselium  jamur  memenuhi bag  log ,  kertas tutup bag  log dibuka  untuk  mempercepat  munculnya  bakal buah  jamur.  Menurut  Putranto  (2012)  menyatakan  bahwa pada  prinsipnya  pembukaan  media  adalah  bertujuan  untuk memberikan  O 2 yang  cukup  bagi  pertumbuhan  tubuh  buah jamur,  dimana  dengan  O 2 yang  cukup  maka  dapat memberikan  kesempatan  bagi  jamur  untuk  membentuk tubuh  ( fruiting  body )  dengan  baik.  Pada  masa  pematangan (miselium  memenuhi bag  log )  kelembapan  dijaga  80-90  % dengan  cara  menyiram  dinding  kumbung  jamur  secara berkala.  Selain  itu,  untuk  mempercepat  munculnya  bakal buah  (primordia)  juga  dapat  dilakukan  dengan  melubangi bagian  samping  atau  belakang  baglog  untuk  menurunkan kadar  CO 2 ,  karena  kadar  CO 2 yang  terlalu  tinggi  dapat menyebabkan pertumbuhan bakal buah menjadi terhambat.

## B. Ekstraksi Jamur Tiram Putih
Hasil  panen  jamur  yang  telah  ditimbang  berat basahnya di potong kecil-kecil kemudian diliofilisasi. Proses pengeringan  beku  ( freeze  drying )  dilakukan  untuk menghilangkan kandungan air dalam sampel tanpa merusak struktur  dan  kandungan  senyawa  dalam  jamur,  karena proses  menghilangkan  kadar  air  tidak  dilakukan  dengan pemanasan.  Ekstraksi  jamur  tiram  dilakukan  dengan menggunakan  metode  maserasi.  Metanol  dipilih  sebagai pelarut  karena  senyawa  aktif  dalam  jamur  tiram  putih (metabolit  sekunder  dan  total  fenolat)  merupakan  senyawa polar,  dimana  metanol  merupakan  senyawa  polar  sehingga metanol  dipilih  sebagai  pelarut.  Filtrat  hasil  ekstraksi  yang didapatkan kemudian diuapkan dengan menggunakan rotary evaporator .  Hasil  ekstraksi  jamur  tiram  SK-1,  SK-2,  SK-3, SK-4  dan  SK-5  masing-masing  adalah  19,97%,  18,98%, 16,98%,  18,97%  dan  17,98%.  Ekstrak  kering  yang didapatkan dilarutkan ke dalam DMSO.
C. Kurva Pertumbuhan Bakteri
(a) (b)
Gambar 1. Kurva Pertumbuhan Bakteri, (a) B. subtilis ; (b) P. aeruginosa
Dari Gambar 1 dapat diketahui bahwa fasa stasioner B. subtilis adalah  20  jam  sedangkan P.  aeruginosa adalah  21 jam. Waktu fase stasioner ini akan digunakan sebagai waktu inkubasi  bakteri  untuk  tahap  penelitian  uji  antimikroba. Karena dalam melakukan uji antimikroba dipilih fase bakteri yang  memiliki  pertahanan  diri  paling  baik.  Fasa  stasioner dipilih  sebagai  waktu  inkubasi  bakteri  dengan  pertahanan diri  paling  baik,  karena  pada  fase  stasioner  bakteri mengeluarkan  metabolit  sekunder  untuk  mempertahankan dirinya.

## D. Perhitungan Koloni Bakteri
Tujuan  perhitungan  jumlah  koloni  bakteri  ini  adalah dapat  membuat  suspensi  bakteri  pada  konsentrasi  tertentu untuk keperluan penelitian uji antimikroba selanjutnya. Dari 10 bakteri hasil pengenceran, pemilihan perhitungan jumlah koloni pada plate yang memiliki jumlah koloni 25-250.
(a)
(b)
Gambar 2. Grafik Perhitungan Jumlah Koloni (a) B. subtilis ; (b) P. aeruginosa
Dari  grafik  diatas  dapat  diketahui  bahwa  semua grafik  perhitungan  koloni  bakteri B.  subtilis dan P.aeruginosa memiliki  Regresi  (R 2 )  =  0,99.  Dari  nilai regresi  yang  didapatkan  maka  dapat  ditarik  kesimpulan bahwa adanya korelasi positif antara optical density dengan jumlah koloni bakteri.

## E. Hasil Uji Aktivitas Antimikroba Dengan Dilusi Cair
Uji  antimikroba  dengan  menggunakan  dilusi  cair digunakan  untuk  menentukan  %  penghambatan  ekstrak P. ostreatus terhadap bakteri B. subtilis dan P. aerugiosa. Pada uji  antimikroba  dengan  metode  dilusi,  dibuat  10  ml campuran  NB  +  suspensi  bakteri  +  sampel  dengan berbandingan  89:  10:  1.  Konsentrasi  suspensi  bakteri  yang digunakan adalah 10 4 . 0 0.5 1 1.5 2 0 10 20 30 Op tical Den sity Waktu (Jam) 0 0.5 1 1.5 2 0 20 40 60 O p tical D en sity Waktu (Jam)
y = 6E-09x + 0,0197 R² = 0,9988 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.00E+00 2.00E+07 4.00E+07 6.00E+07 Op tical Den sity CFU y = 3E-09x + 0,0204 R² = 0,9975 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.00E+00 5.00E+07 1.00E+08 Op tical Den sity CFU
(a) (b)
Gambar 3. % Penghambatan, (a) B. subtilis ; (b) P.
aeruginosa
Dari  Gambar  3  menunjukkan  semua  variasi  ekstrak metanol P.  ostreatus memiliki  aktivitas  antimikroba terhadap B. subtilis , dengan urutan sampel yang memiliki % penghambatan  dari  paling  tinggi  sampai  paling  rendah adalah  SK-3,  SK-4,  SK-1,  SK-2  dan  SK-5.  Variasi  sampel yang  memiliki  aktivitas  antimikroba  terhadap P.  aerugiosa adalah  SK-1,  SK-2,  SK-3  dan  Sk-4  yang  ditunjukkan dengan  %  penghambatan  bernilai  positif,  sedangkan  variasi SK-5 menunjukkan nilai % penghambatan yang negatif.

## IV. KESIMPULAN/RINGKASAN
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  dapat diambil kesimpulan bahwa variasi penambahan sabut kelapa sebagai  media  tanam P.  ostreatus mempengaruhi  aktivitas antimikroba P.  ostreatus ,  ditunjukkan  dengan  adanya  % penghambatan  pada  hasil  uji  antimikroba  menggunakan metode  dilusi.  Hasil  uji  antimikroba  menggunakan  metode dilusi  cair  menunjukkan  %  penghambatan B.  subtilis pada SK-1  10,476%;  SK-2  7,857%;  SK-3  72,380%;  SK-4 36,190%  dan  SK-5  1,429%,  sedangkan  %  penghambatan P. aeruginosa pada  SK-1  51,449%;  SK-2  8,696%;  SK-3 133,696%; SK-4 40,217% dan SK-5 tidak memiliki aktivitas antimikroba. Komposisi variasi SK-3 menunjukkan aktivitas antimikroba  terbaik  terhadap  bakteri B.  subtilis dan P. aeruginosa.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada  bapak Ardinal,  CV.  Puri  Kencana  yang  telah  bekerjasama  dan membimbing dalam proses budidaya jamur tiram putih.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Akyuz, M., Et. al. 2010. Antimicrobial Activity of Some Edible  Mushrooms  in  the  Eastern  and  Southeast Anatolia  Region  of  Turkey.  Gazi  University  Journal of Science 23(2), 125-130
[2]  Papaspyridi,  L.-M.,  Katapodis,  P.,  Gonou-Zagou,  Z., Kapsanaki-Gotsi,  E.,  &  Christakopoulos,  P.  2010. Optimization of Biomass Production With Enhanced Glucan  and  Dietary  Fibres  Content  by Pleurotus ostreatus ATHUM  4438  Under  Submerged  Culture. Biochemical Engineering Journal, 50 (3), 131-138.
[3]  Puspitarini,  Dian.  2006.  Sebaran  Diameter  Pohon Sengon ( Paraserianthes falcataria (L) Nielsen) yang Mendapat  Serangan Xystocera  festiva Pascoe  pada Berbagai  Umur  Tegakan.  Skripsi.  Institut  Pertanian Bogor.
[4]  Purnamasari,  Anisa.  2013.  Produktivitas  Jamur  Tiram Putih  ( Pleurotus  ostreatus) Pada  Media  Tambahan Sabut  Kelapa  ( Cocos  nucifera). Skripsi . Universitas Muhammadiyah Surakarta
[5]  Yuliani,  F.  A.  2014.  Pengaruh  Sabut  Kelapa  Sebagai Media Pertumbuhan Terhadap Kualitas Jamur Tiram ( Pleurotus  ostreatus ).  Skripsi.  Institut  Teknologi Sepuluh Nopember
[6] Puspitasari, Faradita Eka.  2015. Pengaruh Sabut Kelapa sebagai Media Pertumbuhan Jamur Tiram ( Pleurotus ostreatus )  Terhadap  Kandungan  Mineral  dan Vitamin. Skripsi. Institut Teknologi Speuluh Nopember
[7]  Nurhabibah,  Arfiani.  2015.  Studi  Kandungan  Fitokimia dan  Antioksidan  Jamur  Tiram  Putih  ( Pleurotus ostreatus )  dengan  Variasi  Media  Tanam  Sabut Kelapa. Skripsi. Institut Teknologi Sepuluh Nopember
[8]  Farichah,  Lailatul.  2015.  Pengaruh  Tongkol  Jagung Sebagai Media Pertumbuhan Jamur Tiram ( Pleurotus ostreatus )  Terhadap  Kandungan  Mineral  dan Vitamin. Skripsi. Institut Teknologi Sepuluh Nopember
[9] Tisdale, T. E. 2004. Cultivation of Oyster Mushroom ( Pleurotussp ) on Wood Substrates in Hawaii. Thesis. University of Hawaii
0 20 40 60 80 100 120 % P en g h am b atan -100 -50 0 50 100 150 % P en g h am b atan