## PENGARUH HABBATUSSAUDA (NIGELLA SATIVA) TERHADAP VIABILITAS BAKTERI PROTEUS MIRABILIS PADA LUKA KAKI DIABETIK SECARA IN VITRO
Alifia Ayu Delima 1 , Saharuddin 2
1 Departemen Mikrobiologi, Program Studi Pendidikan Dokter, UIN Alauddin Makassar 2 Departemen Anatomi, Program Studi Pendidikan Dokter, UIN Alauddin Makassar Email: 1 alifia.ayu@uin-alauddin.ac.id

## Abstrak
Luka kaki diabetik merupakan salah satu komplikasi utama pada penyakit diabetes mellitus. Jika ulkus dibiarkan tanpa penatalaksanaan  yang  baik  akan mengakibatkan  infeksi  atau  gangrene.  Habbatusauda  ( nigella  sativa) memiliki  efek antimikroba,  antiinflamasi,  dan  antidiabetik.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  habbatussauda terhadap viabilitas bakteri Proteus mirabilis pada luka kaki diabetik. Penelitian ini dilakukan secara in vitro pada isolat luka kaki diabetik yang berasal dari 15 sampel. Uji antimikroba dilakukan dengan inokulasi pada media PCA ( Plate Count Agar ), medium MSA ( Manitol Salt Agar ), dan uji daya hambat dilakukan dengan pengukuran diameter tiap jenis cakram.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  jumlah  koloni  bakteri proteus  mirabilis tertinggi  pada  sampel  ialah sebanyak  3x10 12 dengan  diameter  daya  hambat  habbatusauda  terkecil  yaitu  14  mm 2 .  Kesimpulan dari  penelitian  ini adalah  terdapat  asosiasi  yang  bermakna  antara  diameter  daya  hambat  habbatussauda  terhadap  pertumbuhan  koloni bakteri Proteus mirabilis.
Kata kunci : luka kaki diabetik, diabetes melitus, habbatusauda, proteus mirabilis .

## Pendahuluan
Salah satu komplikasi penyakit diabetes melitus yang utama adalah Luka Kaki Diabetik  (LKD).  Secara  global  prevalensi LKD  ditemukan  6.3%  dengan  prevalensi tertinggi  di  Belgia  16.6%,  dan  terendah  di Australia  1.5% 1 .  Di  Indonesia  dilaporkan kejadian  LKD  sekitar  12  %  dan  resiko  LKD sekitar 55.4% 2 . LKD dapat mengalami infeksi ( Diabetic  foot  infection/DFI )  dimana  sekitar 44 – 68% pasien LKD yang dirawat di Rumah Sakit mengalami Diabetic Foot Osteomyelitis (DFO) yang  berujung  pada  terjadinya amputasi pada tungkai bawah. 3
Mikroorganisme  ˃1x106/gram  jaringan  pada luka  dianggap  infeksi 4 .  Mikroba  pada  luka kaki diabetik dapat bersifat monomikroba dan polymikroba.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh Tiwari et al menemukan bahwa 43.5% infeksi monomikroba dan 35.5% infeksi polymikroba
dengan  bakteri  yang  dominan  adalah  bakteri gram negatif (-) salah satunya adalah Proteus mirabilis . 5
Melihat angka kejadian diatas, maka diperlukan  suatu  alternatif  untuk  mengurangi angka  kejadian  LKD  tanpa  menimbulkan resistensi  terhadap  antibiotik.  Salah  satu pengobatan  yang  sering  dilakukan  adalah pengobatan konvensional.
Berbagai penelitian telah memperlihatkan efek habbatussauda ( nigella sativa) sebagai analgesik, antipiretik, antihipertensi, bronkodilator, berpotensi meningkatkan sistem kekebalan tubuh, antioksidan, antitumor dan antidiabetik. Penelitian tentang habbatussauda  juga  menunjukkan  adanya potensi sebagai antibakteri. Aktivitas antimikroba  habbatussauda  disebabkan  oleh komponen utamanya yaitu tannin, tymoquinon , thymol , a-pinene , p-cymene
dengan cara menghambat pembentukan asam nukleat (RNA) dan sintesis protein.
Tymoquinon  sebagai  komponen  utama  dapat menyebabkan  tidak  aktifnya  protein  bakteri dengan  membentuk  kompleks irreversible dengan  asam  amino  nukleofilik  sehingga protein kehilangan fungsinya serta meniadakan substrat bagi mikroorganisme. 6

## Bahan dan Metode
Penelitian ini dilakukan secara in vitro di Laboratorium RS Unhas selama 3 minggu. Populasi  sampel  ialah  pasien  luka  kaki diabetik.  Sampel  penelitian  yang  digunakan adalah  isolat  koloni  bakteri  dari  pasien  luka kaki  diabetik  yang  bersedia  mengikuti penelitian  dan  menandatangani informed concent ,  dan  terdaftar  sebagai  pasien  ulkus kaki diabetik yang rawat inap dan rawat jalan di  RS  Unhas.  Adapun  alat  dan  bahan  yang digunakan  ialah  Habbatussauda  yang  dalam bentuk minyak jintan hitam asal Syiria dengan merk  dagang  G,  isolat  luka  kaki  diabetik, Blood  Agar  /  Agar  Darah  Domba  (ADD), media  PCA  (Plate  Count  Agar),  effendor, inkubator  37 o C,  sentrifus,  medium  ( Nutrient
Agar ), MCA (MacConkey Agar), medium TSI (Triple  Sugar  Iron),  SIM  (Sulfida  Indole Motility), citrate urea, kovacks, medium MSA (Manitol  Salt  Agar),  dan  katalase  (H 2 O 2 ).
Prosedur penelitian diawali dengan persiapan habbatussauda,  lalu  dilakukan  inokulasi bakteri, uji antimikroba, dan uji daya hambat.
Parameter  yang  diamati  pada  penelitian  ini adalah jumlah koloni bakteri Proteus mirabilis pada  isolat  luka  kaki  diabetik  dan  uji  daya
hambatnya terhadap habbatussauda. Data yang diperoleh disajikan dalam bentuk tabulasi dan narasi.

## Hasil Penelitian
Penelitian ini dilakukan secara in vitro yaitu  suatu  metode  uji  pada  media  buatan, yang  sesuai  dengan  lingkungan  optimal yang diperlukan mikroba untuk hidup. Penelitian ini menguji  daya  hambat  yang  dihasilkan  oleh habbatusauda terhadap bakteri yang ditemukan  pada  ulkus  kaki  diabetik.  Zona hambat  yang  terbentuk  diukur  dengan  satuan mm.  Hasil  yang  ditemukan  berupa  jumlah koloni  bakteri  dan  diameter  daya  hambat habbatusauda  pada  sampel  dengan  bakteri dominan Proteus mirabilis .
Tabel  1  menunjukkan  bahwa  koloni bakteri Gram negatif yang dominan ditemukan pada  luka  kaki  diabetik  adalah Proteus Mirabilis yaitu 6 responden (40 %), sedangkan Gram  Positif Staphylococcus  haemolyticus sebanyak 5 responden (33,4 %).
Tabel 1. Karakteristik Bakteri dominan pada sampel
Bakteri Dominan
Golongan n % Staphylococcus haemolyticus Gram positif 5 33,4 Staphylococcus aureus Gram positif 2 13,3 Proteus Mirabilis Gram negatif 6 40 Acinetobacter baumanii Gram negatif 2 13,3
Berdasarkan  tabel  2,  jumlah  koloni Proteus mirabilis tertinggi yaitu pada sampel AY.11  yaitu  sebanyak  3  x  10 12 ,  sedangkan jumlah  koloni  terendah  didapatkan  pada sampel  AY.10  dimana  jumlah  koloni  bakteri
nya  sebanyak  4  x  10 10 .  Mean  diameter  daya hambat  habbatusauda  tertinggi  terhadap bakteri Proteus  mirabilis pada  sampel penelitian  ini  adalah  22,5  mm,  yaitu  kode sampel  AY.10  sedangkan  terendah  diperoleh pada  kode  sampel  AY.11  yaitu  14  mm  dapat dilihat pada Gambar 1.
Tabel 2. Diameter daya hambat habbatusaudah pada sampel dengan bakteri dominan Proteus mirabilis
Kode Sampel Jumlah Koloni Diameter daya hambat Habbatusaudah (Mean+ SD/mm) AY.7 29 x 10 10 21 AY.8 18 x 10 10 21 AY.9 8 x 10 10 21 AY.10 4 x 10 10 22,5 AY.11 3 x 10 12 14 AY.12 11 x 10 10
15
Gambar 1. Hasil uji daya hambat habbatusauda terhadap bakteri Proteus mirabilis

## Pembahasan
Salah  satu  penyebab  terjadinya  luka kaki  diabetik  adalah  infeksi.  Infeksi  dapat dibagi menjadi tiga yaitu superfisial dan lokal,
selulitis  dan  osteomyelitis.  Infeksi  akut  pada penderita yang belum mendapatkan antibiotik biasanya  monomikrobial  sedangkan  pasien dengan ulkus kronis, gangrene dan osteomyelitis bersifat polimikrobial.
Karakteristik  bakteri  pada  luka  kaki diabetik  didapatkan  bahwa  bakteri Proteus mirabilis yaitu  bakteri  Gram  negatif  yang paling banyak ditemukan. Hal tersebut sesuai dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh Saltoglu  et  al  yangjuga  menunjukkan  bahwa bakteri garam negatif paling banyak menyebabkan  infeksi  kaki  diabetik  (54.8%). 7
Namun,  Penelitian  ini  tidak  sejalan  dengan penelitian  yang  dilakukan  Jockenhöfer  et  al (bahwa bakteri gram negatif (-) yang dominan adalah Pseudomonas Aeruginosa (31.1%). 8
Terlihat kecenderungan bahwa semakin  tinggi  koloni  bakteri  Proteus mirabilis,  maka  diameter  daya  hambat habbatusauda yang terbentuk semakin sempit. Keadaan  ini  bisa  saja  terjadi  karena kemampuan habbatusauda sebagai antimikroba  bekerja  lebih  ekstra  ketika menghadapi  jumlah  koloni  yang  lebih  besar, sehingga diameter daya hambat  yang terbentuk bisa saja jauh lebih sempit dibanding ketika  menghadapi  jumlah  koloni  yang  lebih kecil. Pola ini juga terbaca pada empat sampel lainnya. Pola yang sedikit berbeda ditemukan pada sampel AY.12 dimana jika mengacu pada pola  yang  lain,  maka  seharusnya  diameter daya  hambat  yang  terbentuk  tidak  jauh berbeda daripada jumlah koloni AY.7, AY.8, dan AY.9.
Penelitian  ini  telah  membuktikan bahwa habbatussauda (Nigella sativa) merupakan salah satu  pengobatan islam yang sering digunakan sebagai antimikroba.
Rasulullah  SAW  bersabda  "Tetaplah  kamu berobat dengan habbatussauda, karena sesungguhnya ia mengandung bahan penyembuh bagi setiap penyakit kecuali mati" (Hadist  Al  Bukhori) 9 .  Perlu  dilakukan penelitian lebih lanjut untuk membandingkan antara  habbatusaudah  dengan  antibiotik,  atau senyawa lainnya untuk melihat efek antimikrobial dan efek anti inflamasi khususnya  pada  pasien  dengan  luka  kaki diabetik.

## Simpulan
Terdapat  asosiasi  yang  bermakna antara  diameter  daya  hambat  habbatussauda terhadap pertumbuhan koloni bakteri Proteus mirabilis .

## Daftar Pustaka
1. Zhang, P., Lu, J., Jing, Y., Tang, S., Zhu, D., & Bi, Y. (2016). Annals of Medicine Global  epidemiology  of  diabetic  foot ulceration:  a  systematic  review  and meta-analysis. Annals of Medicine.
2. Yusuf, S., Okuwa, M., Irwan, M., Rassa, S.,  Laitung,  B.,  Thalib,  A.,  Sugama,  J. (2016). Prevalence  and  risk  factor  of diabetic foot ulcer in a regional hospital , Eastern  Indonesia.  Open  Journal  of Nursing, 6 (January), 1-10.
3. Asten,  S.  A.  V.  Van,  Fontaine,  J.  La, Peters, E. J. G., Bhavan, K., & Kim, P. J. (2016). The microbiome of diabetic foot osteomyelitis .  Eur  J  Clin  Microbiol Infect Dis, 35, 293–298.
4. Baranoski,  S.,  &  Ayello,  E.  (2012). Wound Care Essentials; Practice
Principles (Third  Edit).  Philadelphia.
New  York:  Lippincott  William  & Wilkins.
5. Tiwari, P., Kumar, B., Kaur, M., Kaur G. &  Kaur  H.,  2011, Phytochemical Screening  and  Extraction:  A  Review , International  Pharmaceutica  Sciencia,  1 (1), 98-106.
6. Raisa  adhiba  dkk.  2009. Obat  kumur jintan  hitam  (nigella  sativa)  17,5% terhadap penurunan gingivitis.
Surabaya. FKG Unair.
7. Saltoglu N, Yemisen M, Ergonul O et al (2015) Predictors  for  limb  loss  among patient with diabetic foot infections: An observational retrospective multicentric study  in  Turkey . Clin  Microbiol  Infect 21(7): 659–64
8. Jockenhöfer, Gollnick, Herberger, Isbary,  Renner,  Stücker,  Dissemond. (2013). Bacteriological pathogen spectrum  of  chronic  leg  ulcers:  Results of  a  multicenter  trial  in  dermatologic wound  care  centers  differentiated  by regions .
9. Hadits  Al-Bukhari  no.  5688/Al-Fath X/143,  dan  Muslim  no.  2215  dari  Abu Hurairah  Radhiyallahuanhu.  Lafazh  ini adalah lafazh Muslim.