BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 4 Nomor 1 (2022):  38-45 E-ISSN: 2714-8564

## Pengaruh pH dan Waktu Inkubasi berbeda terhadap Pertumbuhan dan Produksi β-Glukan Schizophyllum commune

## Amalia Sofia Maharani, Nuraeni Ekowati*, Nuniek Ina Ratnaningtyas
Fakultas Biologi, Universitas Jenderal Soedirman Jl. dr. Suparno 63, Purwokerto, 53122 *Email : nuraeni.ekowati@unsoed.ac.id
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 26/07/2021 Disetujui  : 26/06/2022

## Abstract
Schizophyllum commune is a fungus that grows naturally on tree trunks and wood processing waste. This mushroom contains β-glucan compounds which have the potential for drug development in the world of health. The main purpose of this study was to determine the optimum value of pH and incubation time on S. commune' s growth, and also the optimum value of pH and incubation time on β-glucan production of S. commune. The research was conducted by experimental method of completely randomized factorial design (CRD factorial). The treatment given includes variations in  pH  (P)  with  three  levels,  namely  pH  5  (P1),  pH  6  (P2),  and  pH  7  (P3),  and  variations  in incubation time (W) with three levels, namely incubation time of 20 days (W1), 25 days (W2), and 30 days (W3). . The independent variables were pH and incubation time, while the dependent variables were fungal mycelium growth and β-glucan production. The main parameter observed was  β-glucan  weight.  The  supporting  parameters  were  dry  biomass  weight  and  the  final  pH medium.  Data  analysis  was  performed  by Analysis  of  Variance (ANOVA)  at  95%  accuracy levels, followed by Duncan's test ( Ducan Multiple Range Test ). The results showed that pH and incubation time were significantly affected to the growth and production of β-glucan fungus S. commune . The value of pH 6 and incubation time of 25 days was the optimum condition for the growth of S. commune , and also pH 5 and incubation time of 25 days was the optimum condition for β-glucan production of S. commune .
Key words : β-glucan, pH, Schizophyllum commune, incubation time.

## Abstrak
Schizophyllum  commune merupakan  jamur  yang  tumbuh  melimpah  secara  alami  pada  batang pohon  maupun  limbah  olahan  kayu.  Jamur  ini  memiliki  kandungan senyawa  β-glukan  yang berpotensi  untuk  pengembangan  obat  di  dunia  kesehatan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui pengaruh pH dan waktu inkubasi yang berbeda terhadap pertumbuhan dan produksi β-glukan  jamur S.  commune ,  dan  mengetahui  nilai  pH  dan  waktu  inkubasi  yang  optimum terhadap pertumbuhan dan produksi β-glukan jamur S. commune . Penelitian dilakukan dengan metode eksperimental rancangan acak lengkap pola faktorial (RAL Faktorial).. Perlakuan yang diberikan meliputi variasi pH (P) dengan tiga taraf yaitu pH 5 (P1), pH 6 (P2), dan pH 7 (P3), dan  variasi  waktu  inkubasi  (W)  dengan  tiga  taraf  yaitu  waktu  inkubasi  20  hari  (W1),  waktu inkubasi 25 hari (W2), dan waktu inkubasi 30 hari (W3). Variabel bebas yaitu pH dan waktu inkubasi, sedangkan variabel terikat yaitu pertumbuhan miselium jamur dan produksi β-glukan. Parameter utama  yang diamati adalah bobot β-glukan. Parameter pendukungnya adalah bobot biomasa  kering  dan  pH  akhir  medium.  Analisis  data  dilakukan  dengan Analysis  of  Variance (ANOVA) pada tingkat ketelitian 95%, dilanjutkan dengan uji Duncan ( Ducan Multiple Range Test ). Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa pH dan waktu inkubasi berpengaruh terhadap pertumbuhan dan produksi β-glukan jamur S. commune . Nilai pH 6 dan waktu inkubasi 25 hari merupakan  pH  dan  waktu  inkubasi  yang  optimum  terhadap  pertumbuhan  jamur S.  commune, serta  pH  5  dan  waktu  inkubasi  25  hari    merupakan  pH  dan  waktu  inkubasi  yang  optimum terhadap produksi β-glukan jamur S. commune .
Kata Kunci: β-glukan, pH, Schizophyllum commune, waktu inkubasi

## PENDAHULUAN
Jamur makroskopis sebagian besar berasal dari Filum  Basidiomycota  yang  memiliki  kandungan  zat bioaktif  yang  dapat  diekstrak,  serta  mempunyai nutrisi  dan  kandungan  obat  untuk  pencegahan  dan pengobatan suatu penyakit (Kadnikova et al., 2015). Kandungan  aktif  yang  tersedia  antara  lain  seperti antikanker, antikolesterol, antimikroba dan antivirus (Krisnawati  &  Fitriani, 2020).  Jamur  menghasilkan berbagai  jenis  metabolit  bioaktif,  contohnya  seperti metabolit  primer  dan  metabolit  sekunder.  Jenis metabolit  primer  salah  satunya  yaitu  β-glukan.  β- glukan  merupakan  salah  satu  jenis  metabolit  primer yang disintesis dari dinding sel jamur dan merupakan suatu komponen utama dari dinding sel jamur (Rahmi et al., 2014). Jamur Schizophyllum  commune merupakan kelompok jamur kayu yang termasuk kategori jamur pelapuk  dan  memiliki  potensi  untuk  dapat  tumbuh secara  alami  pada  permukaan  batang  pohon (Herliyana et al., 2011). Jamur S. commune memiliki karakteristik  makromorfologi  yaitu  bentuk  tudung seperti  kipas  yang  berwarna  abu-abu  dengan permukaan  tudung  berbulu  sangat  rapat,  bentuk lamela  teratur,  perlekatan  esentrik,  dan  diameter jamur sebesar 1-2 cm (Rahma et al ., 2019). Jamur S.  commune mampu  menghasilkan senyawa  bioaktif  seperti  β-glukan  (Ekowati et  al., 2016).  Tipe  β-glukan  sangat  beragam  tergantung pada  sumbernya  sesuai  dengan  komposisi  penyusun gula, struktur cabang, berat molekul, dan struktur tiga dimensinya.  β-glukan  merupakan  polisakarida  yang terdapat  dalam  dinding  sel  dengan  berbagai  jenis ikatan glikosidik, seperti (1-3) dan (1-6)-β-D-glukan. Tipe  β-glukan  yang  dihasilkan  tergantung  pada spesies  jamur  yang  menghasilkannya,  jamur S. commune menghasilkan jenis β-glukan schizophyllan.  Polisakarida  β-1,3  dan  1,6  glukan jamur S.  commune mempunyai  komposisi  homogen yang  dihasilkan  secara  ekstraselular  dengan  kultur cair (Rahmi et al., 2014). Apabila jamur dikultur pada medium  cair  maka  β-glukan  akan  disekresikan  ke dalam filtrat medium (Ekowati et al., 2016). β-glukan merupakan senyawa metabolit primer yang  dapat  diisolasi  dan  dihasilkan  dari  tanaman maupun mikroorganisme. β-glukan yaitu homopolimer  glukosa  yang  diikat  melalui  ikatan  β- (1,3)  dan  β-(1,6)-glukosida  dan  banyak  ditemukan pada  dinding  sel  beberapa  jamur,  tumbuhan  dan khamir.  β-glukan  termasuk  ke  dalam  kategori senyawa yang tidak memiliki toksisitas maupun efek samping berbahaya (Widyastuti, 2013).
Produksi  senyawa  aktif  β-glukan  dari  jamur dapat dilakukan menggunakan metode ekstraksi yang dilakukan  oleh  Yap  &  Ng  (2001).  Metode  ekstraksi β - glukan  ini  menggunakan  pelarut  air  seperti aquades,  dan  di  ekstraksi  menggunakan  air  panas, kemudian  dilakukan  presipitasi  atau  pengendapan
menggunakan  etanol.  Keuntungan  dari  penggunaan metode  ekstraksi  ini  hemat  waktu,  ekonomis,  dan efisien.  Menurut  Widyastuti et  al .  (2011),  ekstrak senyawa  aktif  polisakarida  β-glukan  memiliki kemampuan  larut  dalam  air  dan  alkali,  maka  proses ekstraksi dilakukan secara bertahap agar mendapatkan hasil ekstrak yang optimum.
Produksi  metabolit  jamur  dapat  dipengaruhi oleh  beberapa  faktor,  salah  satunya  yaitu  pH. Produksi  enzim  jamur  dan  pertumbuhan  jamur  juga dipengaruhi oleh pH medium. Enzim akan kehilangan fungsi  dalam  pemecahan  sumber  nutrisi  pada  pH yang  terlalu  ekstrim.  Aktivitas  enzim  memiliki  pH optimum  yang  berbeda-beda  (Widyastuti et  al., 2007).  Jamur  mempunyai  rentang  pH  yang  optimal untuk  pertumbuhan  yaitu  antara  pH  4,0  sampai  7,0 untuk  miselium  (Bellettini et  al .,  2019).  Laju pertumbuhan  jamur  ditentukan  oleh  lamanya  waktu inkubasi  (Tampubolon et  al., 2015).  Faktor  pH  dan waktu  inkubasi  dapat  mempengaruhi  produksi  β - glukan di dalam medium cair (Shah & Moodi, 2018).
Tujuan  penelitian  ini  yaitu  :  1)  mengetahui pengaruh  pH  dan  waktu  inkubasi  yang  berbeda terhadap pertumbuhan dan produksi β-glukan jamur S.  commune ,  2)  mengetahui  nilai  pH  dan  waktu inkubasi  yang  optimum  terhadap  pertumbuhan  dan produksi  β-glukan  jamur S.  commune .    Manfaat penelitian  ini  yaitu  memberikan  informasi  ilmiah mengenai nilai pH dan waktu inkubasi yang optimum terhadap  pertumbuhan  miselium  dan  produksi  β- glukan jamur S. commune .

## MATERI DAN METODE
Penelitian ini dilakukan dengan metode metode eksperimental  Rancangan  Acak  Lengkap  pola faktorial  (RAL  Faktorial)  dengan  dua  faktor  yang dilakukan  dalam  tiga  kali  pengulangan.  Perlakuan yang  diberikan  meliputi  variasi  pH  (P)  dengan  tiga taraf yaitu pH 5 (P1), pH 6 (P2), dan pH 7 (P3), dan variasi  waktu  inkubasi  (W)  dengan  tiga  taraf  yaitu waktu inkubasi 20 hari (W1), waktu inkubasi 25 hari (W2),  dan  waktu  inkubasi  30  hari  (W3).  Variabel yang digunakan dalam penelitian ini adalah variabel bebas dan terikat. Variabel bebas yaitu pH dan waktu inkubasi, sedangkan variabel terikat yaitu pertumbuhan miselium jamur dan produksi β-glukan. Parameter  utama  yang  diamati  adalah  bobot  β- glukan.  Parameter  pendukungnya  adalah  bobot biomasa kering dan pH akhir medium.
Bahan-bahan  yang digunakan dalam penelitian adalah  isolat  dari  hasil  peremajaan  jamur S. commune ,  medium Potato  Dextrose  Agar (PDA) instan, alkohol 70%, glukosa, pepton, ekstrak  yeast, KH 2 PO 4 ,  M g SO 4 .7H 2 O,  K 2 HPO 4 ,  NaOH,  HCL,  air destilasi, etanol 95%, etanol absolut, kapas, korek api, kertas saring, plastik wrapper , alumunium foil , label, masker, kertas tissue dan sarung tangan.
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  adalah  bor gabus,  jarum  ose,  pipet  tetes,  corong,  labu Erlenmeyer  250  mL,  cawan  petri  10  cm  x  2  cm, tabung  reaksi  15  mL,  botol  vial  10  mL,  botol  selai, lampu  spiritus, beaker  glass volume  1000  ml,  alat tulis,  kamera,  mortar  dan pestle , hot  plate , stirrer, autoklaf, pH meter, shaker resiprokal, pompa vakum, timbangan  digital,  sentrifugator, water  bath , oven , dan Laminar Air Flow (LAF).
Pembuatan Potato Dextrose Agar (PDA) PDA  instan  sebanyak  39  gram  ditimbang  dan ditambahkan  air  destilasi  hingga  volume  mencapai 1000  mL.  Medium  dipanaskan  dan  dihomogenkan menggunakan hot  plate hingga  larut  dengan sempurna.  Medium  sebanyak  100  mL  dituang  ke dalam labu Erlenmeyer ukuran 250 mL, dan disumbat dengan  kapas,  lalu  disterilisasi  di  dalam  autoklaf selama 15 menit, pada suhu 121ºC, dengan tekanan 2 atm.

## Proses peremajaan isolat
Medium PDA dalam labu Erlenmeyer dipanaskan  menggunakan hot plate hingga  mencair, kemudian  medium dituang sebanyak 9  ml  ke dalam cawan  petri  dan  dibiarkan  dingin.  Biakan  murni S. commune diambil satu plug dan diinokulasikan pada cawan petri  yang berisi  medium PDA di  meja kerja aseptis Laminar Air Flow (LAF), cawan petri tersebut selanjutnya  dibungkus  dengan  plastik wrapper dan diinkubasi pada suhu ruang selama 7 hari atau hingga miselium memenuhi cawan (Kim et al ., 2002).
Pembuatan medium kultivasi Mushroom Complete Medium (MCM) Bahan-bahan  meliputi  glukosa  20  g,  KH 2 PO 4 0,46 g, K 2 HPO 4 1 g, M g SO 4 . 7 H 2 O 0,5 g, pepton 2 g, yeast  extract 2  g,  dilarutkan  dengan  air  destilasi hingga volume mencapai 1000 mL dan dihomogenkan dengan hot plate dan stirrer. Derajat keasaman atau pH  medium diatur  menggunakan pH meter sesuai dengan perlakuan yang diinginkan (pH 5,  pH  6  dan  pH  7).  Apabila  pH  terlalu  asam,  maka ditambah dengan NaOH dan apabila pH terlalu basa maka ditambah HCl. Medium dituang ke dalam labu Erlenmeyer  berukuran  250  ml  sebanyak  100  ml, kemudian disumbat dengan  kapas. Medium  tersebut selanjutnya  disterilisasi  menggunakan  autoklaf  pada suhu  121ºC  dengan  tekanan  2  atm  selama  15  menit (Mohamad et al ., 2015).
Kultivasi miselium S. commune ke dalam medium MCM
Pertama  medium  MCM  yang  telah  diatur  pH nya  menjadi  pH  5,  pH  6,  dan  pH  7  disiapkan kemudian  diinokulasikan  sebanyak  5  plug  isolat S. commune dengan  ukuran  diameter  masing-masing 0,5 cm. Plug tersebut dicetak dengan bor gabus dan diambil  dari  kultur  peremajaan  menggunakan  jarum
ose.  Medium  yang  telah  diinokulasikan  dengan S. commune kemudian diinkubasi selama 20, 25 dan 30 hari  menggunakan shaker. Nilai  pH  akhir  medium diukur menggunakan pH meter (Kim et al. , 2002).
Pemanenan  bobot  kering  dan  bobot  basah miselium S. commune Kultur  miselium S.  commune yang  telah berumur 20, 25 dan 30 hari dipanen. Kultur miselium disaring  menggunakan  kertas  saring  dengan  corong Buchner dan  untuk  mempercepat  penyaringan digunakan  pompa  vakum.  Miselium  yang  telah disaring kemudian diletakkan di atas alumunium foil dan  ditimbang  menggunakan  timbangan  digital sebagai  bobot  basah  miselium.  Miselium  kemudian dikeringkan dalam oven dengan suhu 50-60ºC hingga bobot miselium konstan dan dicatat hasilnya sebagai bobot miselium kering (Kim et al. , 2002).
Ekstraksi β-glukan dari biomassa miselium kultur jamur S. commune
Biomassa  miselium  kering  yang  telah  ditimbang dihaluskan  menggunakan mortar & pestle .  Serbuk biomassa  miselium  dalam  botol  selai  diekstraksi menggunakan 100 ml air panas (98-100ºC) selama 5 jam  di  dalam water  bath ,  kemudian  endapan dipisahkan.  Supernatan  diambil  dan  natannya kembali  diekstrak  menggunakan  100  ml  air  panas (98-100ºC)  selama  5  jam  di  dalam water  bath (ekstraksi  ke  dua).  Supernatan  kedua  hasil  ekstraksi disatukan  dan  dipekatkan  hingga  volume  5  ml, kemudian  ditambahkan  5  ml  etanol  95%  dan disimpan  semalam  pada  suhu  4ºC.  Natan  atau endapan  dipisahkan  dengan  sentrifugasi  selama  15 menit  dengan  kecepatan  7500  rpm.  Supernatan direndam  kembali  dengan  etanol  95%  dan  diulang sebanyak  tiga  kali.  Endapan  dari  ke  tiga  hasil sentrifugasi  yang  merupakan  β - glukan  disatukan kemudian ditimbang menggunakan timbangan digital (Yap & Ng, 2001).
Ekstraksi  β-glukan  dari  filtrat  kultur  jamur S. Commune Filtrat kultur dipekatkan menggunakan waterbath sampai volume 5 ml kemudian ditambahkan etanol 95% dan disimpan semalam pada suhu  4ºC.  Natan  dipisahkan  dengan  sentrifugasi selama  15  menit  dengan  kecepatan  7500  rpm. Endapan  yang  terbentuk  dibilas  dengan  5  ml  etanol absolut  dan  disimpan  semalam  pada  suhu  4ºC. Endapan  tersebut  merupakan  β - glukan,  kemudian dikeringkan  pada  suhu  ruang.  Endapan  β-glukan kemudian ditimbang menggunakan timbangan digital (Yap & Ng, 2001).
Data  yang  diperoleh  dianalisis  dengan  uji analisis ragam atau Analysis  of Variance (ANOVA) pada  tingkat  ketelitian  95%,  kemudian  dilanjutkan dengan uji Duncan ( Duncan Multiple Range Test ).
Gambar 1. Pertumbuhan miselium S. commune pada pH dan Waktu inkubasi berbeda

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Jamur S.  commune pada  penelitian  ini ditumbuhkan  pada  medium  kultivasi Mushroom Complete  Medium (MCM)  dengan  nilai  pH  yang berbeda  yaitu  pH  5,  6,  dan  7  serta  lama  waktu inkubasi  yang  berbeda  yaitu  20,  25  dan  30  hari menunjukkan  pertumbuhan  yang  berbeda  pula. Pertumbuhan  tersebut  dapat  dilihat  dari  rata-rata bobot bobot kering miselium yang dihasilkan. Grafik pertumbuhan S. commune dapat dilihat pada Gambar 1.
Berdasarkan Gambar 1, pertumbuhan miselium pada jamur S. commune yang dimulai dari waktu inkubasi 20, 25 hingga 30 hari memiliki hasil nilai  yang  berbeda-beda.  Jamur S.  commune yang ditumbuhkan dalam medium MCM dengan pH 5, pH 6 dan pH 7 mengalami kenaikan pada waktu inkubasi 20 dan 25 hari kemudian mengalami penurunan pada waktu inkubasi 30 hari. Secara keseluruhan nilai pH mengalami  peningkatan  bobot  miselium  kering tertinggi  pada  waktu  inkubasi  25  hari,  dan  mulai mengalami  penurunan  pada  waktu  inkubasi  30  hari. Gambar  1,  di  atas  menunjukkan  bahwa  secara keseluruhan pH dan waktu inkubasi yang efektif bagi pertumbuhan miselium jamur S. commune yaitu pada pH 6 dengan waktu inkubasi 25 hari. Menurut Rahayu (2018),  pertumbuhan  pada  jamur Auricularia auricula belum memasuki fase stasioner pada waktu inkubasi  30  hari  yang  ditandai  dengan  bobot  kering miselium  yang  terus  meningkat.  Nasreen et  al. (2015),  menyatakan  bahwa  miselium  jamur S. commune dapat  tumbuh  maksimal  pada  kisaran  pH medium  5,5  dengan  suhu  pertumbuhan  25ºC. Menurut  Muthu  &  Shanmugasundaram  (2015), dalam  hal  ini  pertumbuhan  miselium  dapat dipengaruhi  oleh  faktor  medium  tumbuh,  waktu inkubasi, pH, dan nutrisi.
Hasil  penelitian  yang  dilakukan  Purwati (2017),  menyimpulkan  bahwa  waktu  inkubasi  yang paling  baik    untuk  pertumbuhan  miselium S.
commune adalah  25  hari.  Menurut  Syarifah et  al. (2021), medium MCM dapat memproduksi biomassa miselium yang tinggi. Jamur dalam masa pertumbuhan  dan  produksi  metabolit  membutuhkan waktu  untuk  menghidrolisis  sumber  nutrisi  yang tersedia.  Semakin  lama  masa  waktu  inkubasi  maka pertumbuhan miselium dapat terus meningkat hingga batas waktu tertentu sehingga produksi metabolitnya mengalami peningkatan. Pertumbuhan jamur Mycena pelianthina pada  medium  MCM  terus  meningkat hingga  waktu  inkubasi  30  hari,  dan  waktu  inkubasi berpengaruh  nyata  terhadap  berat  kering  miselia. Penelitian  lain  Syarifah et  al .  (2021),  menyatakan bahwa dalam penelitiannya pada pertumbuhan jamur M . pelianthina yang  ditumbuhkan  dalam  medium MCM tidak berada pada fase diam maupun pada fase mati,  karena  jamur  tersebut  masih  memanfaatkan unsur hara untuk pertumbuhan sehingga bobot kering miselium terus meningkat.
Menurut  Rosnan et  al .  (2019),  sebagian besar  penelitian  menyatakan  bahwa  jamur S. commune cocok  tumbuh  di  daerah  tropis  dengan kisaran suhu 25-35°C. Laju pertumbuhan jamur juga dipengaruhi oleh pH medium baik yang bersifat asam maupun  basa.  Spesies  jamur  yang  berbeda  akan berbeda  pula  nilai  pH  optimalnya.  Pertumbuhan miselium  Basidiomycetes  sering  berada  pada lingkungan  dengan  kisaran  optimum  sedikit  asam yaitu  pH  4-6,  dalam  penelitian  tersebut  pH  5 merupakan  pH  yang  paling  menguntungkan  dalam pertumbuhan miselium S. commune .
Data  bobot  kering  β-glukan  yang  berasal  dari  filtrat kultur  jamur S.  commune dianalisis  menggunakan analisis ragam atau Analysis  of Variance (ANOVA) yang  menunjukkan  perlakuan  berpengaruh  nyata pada  tingkat  ketelitian  95%.  Berdasarkan  hasil  dari analisis  ragam  bobot  β-glukan  yang  dihasilkan  dari filtrat  kultur  jamur S.  commune dapat  diketahui bahwa  pada  perlakuan  pH  dan  waktu  inkubasi berpengaruh  nyata  terhadap  produksi  β-glukan  dari
0,9 0,98 0,95 1,12 1,97 0,9 1,04 1,18 1,01 0 0,5 1 1,5 2 2,5 20 25 30 B o b o t M ise li u m K er in g
(m g /1 0 0 m L) Waktu Inkubasi (Hari) pH 5 pH 6 pH 7
jamur S.  commune .  Analisis  data  bobot  β-glukan jamur S. commune dilanjutkan dengan melakukan uji Duncan  (Tabel  1)  dengan  tingkat  kepercayaan  95% untuk  mengetahui  interaksi  antara  pH  dan  waktu inkubasi yang paling efektif dalam memproduksi β- glukan jamur S. commune
Tabel 1. Hasil Uji Lanjut Duncan (DMRT) β-glukan dari Filtrat  Kultur  Jamur S.  commune dengan  pH  dan  Waktu Inkubasi yang Berbeda
Perlakuan Bobot β-glukan (g/L) P1W1 0,4700 bc P1W2 1,1967 d P1W3 0,1867 abc P2W1 0,5567 c P2W2 0,5600 c P2W3 0,1100 ab P3W1 0,2367 abc P3W2 0,0633 a P3W3 0,2967 abc
Keterangan: P1W1): pH 5 dengan waktu inkubasi 20 hari, (P1W2): pH 5 dengan waktu inkubasi 25 hari, (P1W3): pH 5  dengan  waktu  inkubasi  30  hari,  (P2W1):  pH  6  dengan waktu  inkubasi  20  hari,  (P2W2):  pH  6  dengan  waktu inkubasi 25 hari, (P2W3): pH 6 dengan waktu inkubasi 30 hari,  (P3W1):  pH  7  dengan  waktu  inkubasi  20  hari, (P3W2): pH 7 dengan waktu inkubasi 25 hari, (P3W3): pH 7 dengan waktu inkubasi 30 hari, angka yang diikuti oleh huruf yang sama menunjukkan hasil perbedaan yang tidak nyata.
Berdasarkan Tabel 1 dapat diketahui bahwa, pH 5  dan  waktu  inkubasi  25  hari  merupakan  pH  dan waktu  inkubasi  yang  optimum  dalam  memproduksi β-glukan.  pH  mempunyai  peran  penting  dalam mengatur  proses  metabolisme  dan  sistem-sistem enzim.  Menurut  Elisashvili  (2012),  senyawa polisakarida jamur diproduksi pada pH 5-6. Shah & Moodi (2018) berpendapat bahwa produksi senyawa metabolit pada Basidiomycetes lebih cocok pada pH asam,  karena  pertumbuhan  miselium  pada  pH  asam dapat  menghasilkan  senyawa  polisakarida  yang tinggi.  Menurut  hasil  penelitian  Saskiawan et  al . (2017),  pada  jamur  tiram  putih  dengan  waktu inkubasi optimum, jamur tersebut dapat memproduksi  eksopolisakarida  pada  hari  ke-15. Umumnya jamur memproduksi senyawa eksopolisakarida pada pH rendah berkisar pH 3-6,5. Senyawa  eksopolisakarida  pada  jamur A.  auricula diproduksi pada pH 5,5 dan terdapat interaksi antara pH dan waktu inkubasi terhadap produksi senyawa β- glukan. Apabila waktu inkubasi mengalami peningkatan,  maka  nilai  pH  semakin  menurun  dan produksi senyawa β-glukan juga ikut menurun.
Menurut Joshi et al. (2012), jamur S. commune merupakan salah satu anggota kelas Basidiomycetes yang  dapat  menghasilkan  eksopolisakarida  sebagai komponen molekul utama. Produksi eksopolisakarida S.  commune dipengaruhi  oleh  kondisi  lingkungan serta  nutrisi  pada  medium  pertumbuhan.  Glukosa yang terdapat pada medium berperan penting dalam menghasilkan  eksopolisakarida.  Sumber  karbon
seperti  glukosa  berfungsi  dalam  proses  sintesis eksopolisakarida (Joroszuk et al., 2015).
Hasil  bobot  β-glukan  yang  berasal  dari miselium  kultur  jamur S.  commune dianalisis menggunakan  analisis  ragam  yang  menunjukkan perlakuan  berpengaruh  nyata  pada  tingkat  ketelitian 95%.  Berdasarkan  hasil  analisis  ragam  bobot  β- glukan yang dihasilkan dari miselium kultur jamur S. commune dapat  diketahui  bahwa  perlakuan  pH  dan waktu inkubasi berpengaruh nyata terhadap produksi β-glukan dari miselium jamur S. commune. Interaksi antara  pH  dan  waktu  inkubasi  tidak  ditemukan adanya interaksi dari kedua perlakuan tersebut. Hasil tersebut  menunjukkan  bahwa  dikarenakan  adanya sedikit perbedaan antara pengaruh dari perlakuan pH dan  waktu  inkubasi  dalam  memproduksi  β-glukan. Analisis  data  dilanjutkan  menggunakan  uji  Duncan pada  Tabel  2  untuk  mengetahui  pH  dan  waktu inkubasi  yang  optimum  dalam  memproduksi  β- glukan dari jamur S. commune.
Tabel 2. Hasil Uji Lanjut Duncan (DMRT) β-glukan dari Miselium Kultur Jamur S. commune dengan pH dan Waktu Inkubasi yang Berbeda
Perlakuan (nilai pH) Bobot β- glukan (g/L) Perlakuan (Waktu Inkubasi) Bobot β-glukan (g/L) P1 0,2011 b W1 0,1289 a P2 0,1289 a W2 0,2144 b P3 0,1278 a W3 0,1144 a
Keterangan:    (P1):  pH  5,  (P2):  pH  6,  (P3):  pH  7;  (W1): waktu  inkubasi  20  hari,  (W2):  waktu  inkubasi  25  hari, (W3):  waktu  inkubasi  30  hari.  Angka  yang  diikuti  oleh huruf yang sama menunjukkan hasil perbedaan yang tidak nyata
Berdasarkan hasil penelitian dengan uji lanjut Duncan dari miselium kultur jamur S. commune , pH dan  waktu  inkubasi  berpengaruh  terhadap  jamur S. commune dalam memproduksi β-glukan, pada Tabel 2 dapat diketahui bahwa pH 5 dan waktu inkubasi 25 hari  merupakan  pH  dan  waktu  inkubasi  yang optimum  dalam  memproduksi  β-glukan  dari miselium  kultur  jamur S.  commune .  Menurut  Hasan &  Ghada  (2012),  jamur Auricularia  polytrica menghasilkan  biomassa  miselium  terbaik  pada  nilai pH  6,5.  Devi et  al .  (2015), juga  menyatakan  bahwa produksi  biomassa  miselium A.  auricula dan A. polytricha maksimum  pada  waktu  inkubasi  20  hari dalam medium cair. Menurut Johnsy & Kaviyarasan. (2013),  hasil  produksi  biomassa  miselium  terbaik dihasilkan dengan rentang suhu 25ºC dan 30ºC.
Metabolit  sekunder  diproduksi  selama  fase pertumbuhan  stasioner.  Menurut  Pelczar  &  Chan (1986),  fase  stasioner  merupakan  fase  pertumbuhan jamur  yang  dapat  diketahui  dari  kenaikan  populasi yang  terjadi,  karena  jamur  mulai  memasuki pertumbuhan  yang  berhenti  dan  beralih  ketingkat
metabolisme  yang  lebih  rendah,  sehingga  pada  fase ini  jamur  memproduksi  senyawa  metabolit  yang optimum.  Tampubolon et  al .  (2012),  menyatakan bahwa lama waktu inkubasi menentukan pertumbuhan jamur dalam memecah sumber nutrien yang  tersedia  dalam  medium  untuk  pertumbuhan miselium  jamur.  Waktu  inkubasi  merupakan  salah satu faktor penting dalam memproduksi eksopolisakarida  secara  maksimum  dari  jamur  yang ditumbuhkan kedalam medium cair.
Tabel  3. Rata-Rata  pH  Awal  dan  pH  Akhir  Jamur S . commune
Perlakuan Rata-rata pH awal pH akhir P1W1 5,00 4,50 P1W2 5,00 4,50 P1W3 5,00 4,60 P2W1 6,00 5,30 P2W2 6,00 5,40 P2W3 6,00 5,30 P3W1 7,00 6,50 P3W2 7,00 6,40 P3W3 7,00 6,50
Keterangan: (P1W1): pH 5 dengan waktu inkubasi 20 hari, (P1W2): pH 5 dengan waktu inkubasi 25 hari, (P1W3): pH 5  dengan  waktu  inkubasi  30  hari,  (P2W1):  pH  6  dengan waktu  inkubasi  20  hari,  (P2W2):  pH  6  dengan  waktu inkubasi 25 hari, (P2W3): pH 6 dengan waktu inkubasi 30 hari,  (P3W1):  pH  7  dengan  waktu  inkubasi  20  hari, (P3W2): pH 7 dengan waktu inkubasi 25 hari, (P3W3): pH 7 dengan waktu inkubasi 30 hari.
Berdasarkan  hasil  penelitian  pada  Tabel  3, menunjukkan bahwa nilai pH mengalami penurunan pada setiap perlakuan. Semakin lama masa inkubasi maka  dapat  mempengaruhi  nilai  pH  akhir  pada medium.  Hal  tersebut  sesuai  dengan  pernyataan Elisashvili  (2012),  semakin  meningkatnya  waktu inkubasi menyebabkan pH media semakin menurun. Hal  tersebut  disebabkan  oleh  jamur  memproduksi asam-asam  organik  tertentu  yang  disekresikan  ke medium sehingga pH medium mengalami penurunan. Penelitian  Syarifah et  al .  (2021),  menyatakan  pada jamur M.  pelianthina yang  ditumbuhkan  dalam medium MCM pada waktu inkubasi 15, 20, 25, dan 30 hari mengalami penurunan pH yaitu dari pH awal 6,00  menurun  hingga  pH  5,00.  Peningkatan  waktu inkubasi dapat menurunkan nilai pH medium karena lebih  banyak  gula  yang  diubah  menjadi  asam. Medium  MCM  mengandung  sumber  karbon  utama glukosa yang lebih mudah dimetabolisme oleh jamur. Nilai  pH  awal  medium  merupakan  faktor  penting yang  berhubungan  dengan  pertumbuhan  jamur karena  pH  mempengaruhi  fungsi  membran  sel, keadaan ion substrat, penyerapan berbagai nutrisi dan biosintesis produk (Lai et al ., 2014). Menurut Yenie & Utami (2018), jamur mampu tumbuh dalam kisaran
cukup  luas  antara  pH  4,5-8,0,  dengan  pH  optimum antara 5-7,5.

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian diperoleh kesimpulan  bahwa  pH  dan  waktu  inkubasi  yang berbeda  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  dan produksi β-glukan jamur S. commune .  Nilai pH dan waktu inkubasi yang optimum terhadap pertumbuhan pada  jamur S.  commune yaitu  pH  6  dengan  waktu inkubasi  25  hari,  sedangkan  nilai  pH  dan  waktu inkubasi  yang  optimum  terhadap  produksi  β-glukan jamur S. commune yaitu pH 5 dengan waktu inkubasi 25 hari.

## DAFTAR REFERENSI
Basarang,  M.  &  Muh.  R,R.,  2018.  Pertumbuhan Candida sp  Dan Aspergillus sp  Dari  Bilasan Bronkus  Penderita  Tuberkulosis  Paru  pada Media  Bekatul. Jurnal  Ilmu  Alam  Dan Lingkungan , 9(18), pp.74-82.
Bellettini,  M.B.,  Fiorda,  F.A.,  Maieves,  H.A., Teixeira,  G.L.,  Ávila,  S.,  Hornung,  P.S., Júnior, A. M. & Ribani, R. H., 2019. Factors Affecting  Mushroom Pleurotus Spp. Saudi Journal of Biological Sciences , 26(4), pp.633- 646.
Chihara,  G.,  Hamuro,  J.  &  Maeda,  Y.,  1987.
Antitumor and Metastatis-Inhibitory Activities of Lentinan
as an Immunomodulator:  An  Overview. Cancer Detect Prev. 19(1), pp.423-443.
Devi,  M.B.,  Mukta,  S.S.  &  Irabanta,  N.S.,  2015. Biomass Production in Auricularia spp. (Jews ear) Collected from Manipur, India. Int J Curr Microbiol App Sc., 4(6), pp.985-989.
Ekowati, N., Ina, R,N. & Mumpuni, A., 2016. Potensi Jamur Trametes  versicolor dan Russula sp. dalam Menghasilhan β-Glukan Melalui Proses Fermentasi. Seminar Nasional Pendidikan dan Saintek. Universitas Muhamadiyah Surakarta.
Elisashvili,  V.I.,  2012.  Submerged  Cultivation  of Medicinal  Mushrooms:  Bioprocesses  and Products. International  journal  of  medicinal mushrooms , 14(3), pp.211-239.
Hasan,  F.R.H.  &  Ghada,  M.M.,  2012.  Studies  on Submerged  Culture  Conditions  for  Mycelial Biomass Production of Wood Ears Mushroom ( Auricularia polytricha ). Middle East Journal of Agriculture Research, 1(1), pp.33-39.
Herliyana,  E.N.,  Maryam,  L.F.  &  Hadi,  Y.S.,  2011. Schizophyllum  commune Fr.  Sebagai  Jamur Uji  Ketahanan  Kayu  Standar  Nasional Indonesia  pada  Empat  Jenis  Kayu  Rakyat: Sengon ( P. falcataria ), Karet ( H. brasiliensis ),
Tusam ( P. merkusii ), Mangium ( A.
mangium ). Jurnal  Silvikultur  Tropika ,  2(3), pp.176-180.
Johnsy,  G.  &  Kaviyarasan,  V.,  2013.  Effect  of Physico-Chemical Factors and Semi- Synthetic  Media  on  Vegetative  Growth  of Neolentinus Kauffmanii an Edible Mushroom from  Kanyakumari  District .  Int  J  Pharm  Bio Sci , 4(1), pp.469-478.
Joruszuk, M.O., Wilkolazka, A.J., Scisel, J.J., 2015. Extracellular
Polysaccharides
from
Ascomycota  and  Basidiomycota:  Production Conditions,  Biochemical  Characteristics,  and Biological  Properties. World  J  Microbiol Biotechnol . 31, pp.1823-1844.
Joshi,  M.,  Patel,  H.,  Gupte,  S.  &  Gupte,  A.,  2013. Nutrient  Improvement  for  Simultaneous Production of Exopolysaccharide and Mycelial  Biomass  by  Submerged  Cultivation of Schizophyllum  commune Agmj-1  Using Statistical  Optimization. 3  Biotech ,  3(4), pp.307-318.
Kadnikova, I.A., Costa, R., Kalenik, T.K., Guruleva, O.  N.  &  Yanguo,  S.,  2015.  Chemical Composition  and  Nutritional  Value  of  the Mushroom Auricularia Auriculajudae . Journal of Food and Nutrition Research , 3(8), pp.478–482.
Kim, S.W., Hwang, H.J., Park, J.P., Cho, Y.J., Song, C.  H.  &  Yun,  J.  W.,  2002.  Mycelial  Growth and Exo ‐ Biopolymer Production By Submerged  Culture  of  Various  Edible Mushrooms Under Different Media. Letters In Applied Microbiology , 34(1), pp.56-61.
Krisnawati,  Y.  &  Fitriani,  L.,  2020.  Pengembangan Lembar  Kerja  Mahasiswa  (LKM)  Berbasis Eksplorasi  Jamur  Makroskopis. Bioedusains: Jurnal  Pendidikan  Biologi  dan  Sains ,  3(1), pp.8-23.
Lai,  W.H.,  Salleh,  S.M.,  Daud,  F.,  Zainal,  Z., Othman,  A.M.  &  Saleh,  N.M.,  2014.
Optimization of Submerged Culture
Conditions  for  the  Production  of  Mycelial Biomass and Exopolysaccharides from Lignosus rhinocerus . Sains
Malaysiana , 43(1), pp.73-80.
Mohamad, S.A., Awang, R.M., Ibrahim, R., Keong, R.,  Hamzah.,  Rashid,  R.A.,  Hussein,  S., Rahim, A., Daud, A., Hamid, A. & Yusof, W., 2015.  Production  of  Endopolysaccharides from Malaysia’s Local Mushrooms in Air-Lift Bioreactor. Bioscience and Biotechnology , 6, pp.456-46.
Muthu, N & Shanmugasundaram, K., 2015. Effect of Five  Different  Culture  Media  on  Mycelial Growth  of  Agrocybe  Aegerita. International
Journal  of  Pharmaceutical  Sciences  and Research (IJPSR) , 6(12), pp.5193-5197.
Nasreen,  Z.,  Khan,  S.J.,  Ammara,  Y.,  Muafia,  S., Shumaila,  U.  &  Sakhawat,  A.,  2015.
Optimization of Sub-Merged Culture Conditions for Biomass Production Schizophyllum commune , a Medicinal Mushroom. International  Journal  of  Current Microbiology  and  Applied  Sciences ,  4(2), pp.258-266.
Pelczar , M.J.  &  Chan,  E.C.S., 1986 . Dasar-Dasar Mikrobiologi .  Jakarta:  Universitas  Indonesia Press
Purwati,  E.,  2017.  Optimasi  Medium  Pertumbuhan Dan  Waktu  Inkubasi  Terhadap  Bobot Miselium Schizophyllum commune dan Golongan Metabolit
Sekunder yang Dihasilkan. Skripsi .  Purwokerto:  Fakultas Biologi Universitas Jenderal Soedirman.
Rahayu,  AM.,  2018.  Pengaruh  Jenis  Medium  Dan Waktu Inkubasi Terhadap Pertumbuhan Jamur Auricularia auricula Serta Deteksi Golongan Metabolit Sekunder yang Dihasilkan. Skripsi. Purwokerto:  Fakultas  Biologi  Universitas Jenderal Soedirman.
Rahma,  K.,  Mahdi,  N.  &  Hidayat,  M.,  2019.
Karakteristik Jamur Makroskopis Di Perkebunan Kelapa Sawit Kecamatan Meureubo Aceh Barat. Prosiding Biotik , 5(1), pp.157-164.
Rahmi, D., Ratnawati, E., Yunilawati, R. & Aidha, N. N.,  2014.  Peningkatan  Aktivitas  Anti  Aging pada Krim Nanopartikel dengan Penambahan Bahan  Aktif  Alam. Jurnal  Kimia  dan Kemasan , 36(2), pp.215-224.
Rosnan,  N.D.R.,  Chuen,  N.  &  Ngadin,  A.A.,  2019. First Record of in Vitro Growth Evaluation of Wild  Mushroom, Schizophyllum  commune from Pulau Kapas in Malaysia. Asian Journal Of Agriculture And Biology , 7(4), pp.602-609.
Saskiawan,  I.,  Munir,  M.  &  Achmadi,  S.S.,  2017. Optimasi  Produksi  Serta  Analisis  Aktivitas Antioksidan  dan  Antimikroba  Senyawa Eksopolisakarida  dari  Jamur  Tiram  Putih ( Pleurotus ostreatus ) pada Media Cair. Berita Biologi  Jurnal  Ilmu-Ilmu  Hayati ,  15(2), pp.133-140.
Shah,  P.  &  Modi,  H.A.,  2018.  Optimization  of Culture Conditions for Biomass Production of Ganoderma lucidum . International Journal of
Current Microbiology and Applied Sciences, 7(02), pp.1882-1889.
Syarifah,  N.D.T.,  Ekowati,  N.,  Mumpuni,  A.  & Saskiawan,  I.,  2021.  Detection  of  Secondary
Metabolite of Mycena pelianthina Growth In Various Liquid Medium. Journal of Functional  Food  and  Nutraceutical ,  2(2), pp.89-97.
Tampubolon,  M.B.,  Utomo,  B.  &  Yunasfi.,  2012. Keanekaragaman  Jamur  Makroskopis  Di Hutan Pendidikan Universitas Sumatera Utara Desa  Tongkoh  Kabupaten  Karo  Sumatera Utara. Saintia Biologi , 2, pp.176-182.
Tampubolon., Santa, D.B.M., Utomo, B. & Yunasfi., 2015.  Keanekaragaman  Jamur  Makroskopis Di  Hutan  Pendidikan  Universitas  Sumatera Utara  Desa  Tongkoh  Kabupaten  Karo Sumatera  Utara. Artikel  Ilmiah .  Medan: Universitas Sumatera Utara.
Widiastuti,  H.,  Siswanto.  &  Suharyanto.,  2007. Optimasi  Pertumbuhan  Dan  Aktivitas  Enzim Ligninolitik Omphalina Sp.  Dan Pleurotus ostreatus pada  Fermentasi  Padat. Menara Perkebunan , 75(2), pp.93-105.
Widyastuti,  N.,  2013.  Pengolahan  Jamur  Tiram ( Pleurotus  ostreatus )  Sebagai  Alternatif Pemenuhan  Nutrisi. Jurnal  Sains  dan Teknologi Indonesia , 15(3), pp.1-7.
Widyastuti,  N.,  Baruji,  T.,  Giarni,  R.,  Isnawan,  H., Wahyudi,  P.  &  Donowati.,  2011.  Analisa Kandungan Beta-Glukan Larut Air Dan Larut Alkali  dari  Tubuh  Buah  Jamur  Tiram ( Pleurotus  ostreatus )  Dan  Shiitake  ( Lentinus edodes ). Jurnal Sains dan Teknologi Indonesia , 13(3), pp.182-191.
Yap,  A.T.  &  Ng,  M.L.M.,  2001.  An  Improved
Methode  for  the  Isolation  of  Lentinan  from Lentinula edodes (Berk) Sing
(Agaricomycetidae). International Journal of Medical Mushroom , 3, pp.6-19.
Yenie, E. & Utami, S.P., 2018. Pengaruh Suhu Dan pH  Pertumbuhan  Jamur  Merang  ( Volvariella volvacea ) Terhadap Degradasi Lignin Tandan Kosong Kelapa Sawit. Jurnal APTEK , 10(1), pp.29-35.