Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etil Asetat Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe var. sunti) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia
coli
Sari Purbaya * , Lilis Siti Aisyah, Jasmansyah, Wenny Eliza Arianti Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan Informatika, Universitas Jenderal Achmad Yani Jalan Terusan Jendral Sudirman, Cimahi, Jawa Barat, 40285
*E-mail: saripurbaya@gmail.com

## Abstrak
Rimpang jahe merah ( Zingiber officinale Roscoe var. sunti ) salah satu herbal yang banyak dimanfaatkan sebagai  obat  tradisional.  Penelitian  kali  ini  adalah  untuk  mengetahui  metabolit  sekunder  yang terkandung  didalam  tanaman  rimpang  jahe  merah  dan  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli. Sebanyak  483,2  gram  serbuk  jahe  merah  diekstraksi dengan  metode  maserasi  didapatkan  ekstrak  etil  asetat  15,85  g.  Uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  jahe merah terhadap bakteri S. aureus dan E. coli menggunakan metode mikrodilusi menunjukkan ekstrak etil asetat dapat menghambat pertumbuhan S. aureus dengan MIC ( Minimum Inhibitory Concentration ) 6,3% dan MBC ( Minimum Bactericidal Concentration ) 25% dan ekstrak etil asetat rimpang jahe merah dapat MIC ( Minimum Inhibitory Concentration ) E. coli dengan konsentrasi hambat minimum 25% dan MBC  ( Minimum  Bactericidal  Concentration )  50%.  Hasil  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etil  asetat rimpang jahe merah paling berpengaruh dan lebih berpotensi dalam menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dibandingkan dengan penghambatan terhadap Gram negatif.
Kata Kunci  : Antibakteri, E.coli , Jahe Merah ( Z. officinale Roscoe var. sunti ), S. aureus

## Abstract
Red ginger rhizome (Zingiber officinale Roscoe var. Sunti) is one of the herbs that is  widely used as traditional medicine. The present study  was to determine the secondary metabolites contained in red ginger  rhizome plants  and  antibacterial  activity  against Staphylococcus  aureus  and  Escherichia  coli bacteria. A total of 483.2 grams of red ginger powder  was extracted by maceration method obtained from ethyl acetate extract 15.85 g. Antibacterial activity of red ginger extract against S. aureus and E. coli using microdilution method showed that ethyl acetate extract could inhibit S. aureus growth by MIC (Minimum Inhibitory Concentration) 6.3% and MBC (Minimum Bactericidal Concentration) 25% and extract Ethyl acetate red ginger rhizome can Minimum MIC (E. Inhibition Concentration) E. coli with a minimum inhibitory concentration of 25% and MBC (Minimum Bactericidal Concentration) 50%. The results showed that the red ginger rhizome ethyl acetate extract was the most influential and had more potential to inhibit the growth of Gram positive bacteria compared to inhibition of Gram negative.
Keywords: Antibacterial, E.coli, Red Ginger (Z. officinale Roscoe var. Sunti), S. aureus

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  penyakit  yang sering terjadi. Penyakit ini paling banyak diderita oleh  penduduk  di  negara  berkembang,  termasuk Indonesia.  Salah  satu  penyakit  infeksi  yang menyerang  sebagian  besar  penduduk  Indonesia adalah  diare.  Diare  dan  gastroenteritis  menjadi penyakit dengan urutan pertama yang menyebabkan  pasien  rawat  inap  dirumah  sakit sakit [5].
Pencegahan dan pengobatan penyakit infeksi selain  menggunakan  bahan-bahan  kimia,  juga dilakukan  dengan  menggunakan  bahan-bahan alam  sebagai  obat  tradisional  dari  ekstrak tanaman. Salah satu tanaman herbal yang banyak dimanfaatkan sebagai obat tradisional adalah jahe.
Rimpang jahe mengandung senyawa antimikroba golongan fenol, flavonoid, terpenoid dan minyak atsiri yang terdapat pada ekstrak jahe merupakan golongan senyawa bioaktif yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba [7].

## 2. METODOLOGI PENELITIAN

## 2.1. Alat
Alat  gelas  laboratorium,  bunsen,  blender merk  Philips,  rotary  evaporator  merk  Heidolph Laborata  4000  type  Heizbad  WB,  kertas pembungkus, inkubator merk ESCO type CelMate ®CO 2 , mikropipet Acura 815 Socorex, oven merk Memmert,  pisau,  satu  set  alat  maserasi,  spidol, batang  pengaduk,  ose,  spirtus,  tip  kuning,  kertas timbang,  cawan petri, pinset, mikrotiter plat,  dan objek glass.

## 2.2. Bahan
Jahe merah ( Z. officinale Roscoe var. sunti ), aquades,  antibiotik  ciprofloxaxin,  biakan  murni E.coli , biakan murni S. Aureus, dimetil sulfoksida (DMSO),  medium  mueller  hinton  agar  (MHA), medium mueller hinton broth (MHB), mac conkey agar,  metanol  (CH 3 OH)  redest,  natrium  klorida (NaCl)  0,9%,  barium  klorida    (BaCl)  1%,  asam sulfat  (H 2 SO 4 )  1  %,  etilasetat  (CH 3 COOC 2 H 5 ) redest dan pelat KLT.

## 2.3. Prosedur Penelitian

## 2.3.1. Persiapan sampel dan ekstraksi rimpang
jahe merah
Jahe  merah  yang  telah  halus  dimaserasi dengan  pelarut n -  heksan.  Ekstraksi    dilakukan hingga  larutan    tidak  berwarna  lagi,  kemudian dilanjutkan  dengan  proses  penyaringan.  Setelah disaring, pelarut diuapkan dengan rotary evaporator sehingga  diperoleh  ekstrak  kental. Residu dari ekstrak yang tidak tersaring kemudian dimaserasi  dengan  pelarut  etilasetat.    Ekstrak kental  etilasetat  yang  dihasilkan  selanjutnya dilakukan uji fitokimia.

## 1) Uji Fitokimia
Uji  fitokimia  yang  dilakukan  pada  masing- masing  ekstrak  kental    meliputi  uji  alkaloid,  uji flavonoid, uji terpenoid, uji tanin dan uji saponin.

## 2) Uji alkaloid
Ke  dalam  1  mL  ekstrak  teteskan  1-2  tetes pereaksi  Meyer.  Alkaloid  positif  jika  terjadi endapan kuning muda.

## 3) Uji flavonoid
Ke  dalam  5  mL    ekstrak  tambahkan  serbuk Mg, 2 mL larutan alkohol  – HCl (1:1) dan 5 mL larutan amil alkohol. Kocok dan amati perubahan
warnanya. Jika  timbul  warna merah, kuning  atau jingga pada lapisan amil alkohol maka positif ada flavonoid.

## 4) Uji terpenoid/steroid
Kedalam 1-2 mL ekstrak pada tabung reaksi ditambahkan 2 tetes Anhidrida asetat dan diaduk. Kemudian  teteskan  1-2  tetes  H 2 SO 4 pekat  dan amati  warna  yang  terbentuk.  Catat  warna  yang terbentuk  pada  saat  diteteskan  dan  warna  setelah beberapa saat. Uji ini positif bila terjadi perubahan warna merah ke hijau ke ungu ke biru.

## 5) Uji tanin
Sejumlah  ekstrak  pada  lempeng  porselin ditambahkan  beberapa  tetes  larutan  FeCl 3 1%. Golongan  tanin  positif  jika  terjadi  perubahan warna menjadi hjau ungu atau hitam.

## 6) Uji saponin
Sebanyak  10  mL  ekstrak  dimasukkan kedalam tabung reaksi dikocok vertikal selama 10 detik, jika terbentuk busa 1-10 cm stabil selama 10 menit maka saponin positif. Selanjutnya tambahkan 1 tetes larutan HCL 2N, saponin positif jika busa tidak hilang.
2.3.2. Uji Aktivitas Antibakteri
1) Penentuan  Konsentrasi  Hambat  Minimum (KHM) dengan metode dilusi cair (mikrodilusi)
Disiapkan  mikrotiter  plat  96  lubang.  Pada kolom 1 dimasukkan kontrol positif sebanyak 50 μL  antibiotik  ciprofloxaxin  dan  50  μL  bakteri, sedangkan  pada  kolom  2  dimasukkan  kontrol negatif sebanyak 50 μL MHB dan 50 μL bakteri. Pada kolom no 3-12 diisi dengan 50 μL campuran media MHB dan 50 μL bakteri. Pada kolom no 3 diisi dengan 100 μL ekstrak jahe merah kemudian dihomogenkan. Dari kolom no.3 diambil 100 μL dimasukkan ke kolom no.4 kemudian dihomogenkan,  dan  seterusnya  sampai  kolom no.12, dari kolom no.12 diambil 100 μL kemudian dibuang.  Pengujian  dilakukan  sebanyak  2 perlakuan.  Mikrotiter  plat  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C selama 18-24 jam. Dilihat  apakah terdapat endapan/tidak  atau  dilihat  kekeruhan  pada  setiap sumur. Bening pertama pada tiap baris menunjukkan  nilai  MIC  ( Minimum  Inhibitory Concentration ).
2) Penentuan  MBC  (Minimum  Bactericidal Concentration)
Dilakukan  pemindah  tanaman  dari  masing- masing kolom sampel uji yang tidak memperlihatkan  adanya  pertumbuhan  mikroba pada  uji  MBC  sebanyak  1  ose,  kemudian diinokulasikan  ke  cawan  petri  yang  sudah  berisi media  MHA.  Diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama 18-24  jam.  Dilihat  apakah  terjadi  pertumbuhan bakteri  atau  tidak.  Tidak  adanya  pertumbuhan bakteri  menunjukkan  nilai  konsentrasi  bunuh minimum atau MBC.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1. Hasil penelitian

## 3.1.1. Hasil Determinasi
Determinasi tumbuhan dilakukan di Laboratorium  Herbarium  Sekolah  Ilmu  dan Teknologi  Hayati  ITB  yang  menyatakan  bahwa tanaman  yang  digunakan  pada  penelitian  ini
adalah  jahe  merah  ( Z.  officinale Roscoe  var. sunti ).

## 3.1.2. Hasil Ekstraksi
Dari  hasil  preparasi  sampel  rimpang  jahe merah  basah  sebanyak  4kg  diperoleh  serbuk rimpang  jahe  merah  sebanyak  483,2  g.  Ekstrak etilasetat 15,85 g.

## 3.1.3. Uji Fitokimia
Hasil  uji  fitokimia  ekstrak  etil  asetat  positif mengandung alkaloid, flavonoid dan terpenoid.

## 3.1.4. Uji Aktivitas Antibakteri
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  yaitu  berupa konsentrasi  hambat  minimum  dan  konsentrasi bunuh minimum dari ekstrak jahe merah terhadap pertumbuhan  bakteri  S.  aureus  dan  E.  coli diperlihatkan pada Tabel 1-4.
Tabel 1. Hasil Pengamatan Konsentrasi Hambat Minimum Ekstrak Jahe Merah terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus Ekstrak Jahe Merah K (+) K (-) Pengenceran ekstrak jahe merah (%) 100 50 25 12,5 6,3 3,1 1,5 0,8 0,4 0,2 Fraksi etil asetat + - + + + + + - - - - - + - + +
+ + + - - - - -
Keterangan : (+) tidak terbentuk endapan/tidak ada pertumbuhan bakteri (-) terbentuk endapan/ada pertumbuhan bakteri
Tabel  2. Hasil  Pengamatan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  Ekstrak  Jahe  Merah  terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus Ekstrak Jahe Merah Pengenceran ekstrak jahe merah (%) 100 50 25 12,5 6,3 Fraksi etil asetat + + + - -
Keterangan : (+) membunuh bakteri  (-) tidak membunuh bakteri
Tabel  3. Hasil  Pengamatan  Konsentrasi  Hambat  Minimum  Ekstrak  Jahe  Merah  terhadap  pertumbuhan  bakteri E.coli
Ekstrak Jahe Merah K (+) K (-) Pengenceran ekstrak jahe merah (%) 100 50 25 12,5 6,3 3,1 1,5 0,8 0,4 0,2 Fraksi etil asetat + - + + + - - - - - - - + - + + + - - - - - - -
Keterangan : (+) tidak terbentuk endapan/tidak ada pertumbuhan bakteri (-) terbentuk endapan/ada pertumbuhan bakteri
Tabel  4. Hasil  Pengamatan  Konsentrasi  Bunuh  Minimum  Ekstrak  Jahe  Merah  terhadap pertumbuhan bakteri E. coli Ekstrak Jahe Merah Pengenceran ekstrak jahe merah (%) 100 50 25 12,5 6,3 Fraksi etil asetat + + - - -
Keterangan : (+) membunuh bakteri  (-) tidak membunuh bakteri

## 3.2. Pembahasan
Proses  pembuatan  ekstrak  rimpang  jahe merah  diperoleh  dengan  metode  maserasi.  Pada metode  ini  digunakan  pelarut  etil  asetat.  Hal  ini bertujuan untuk memperoleh jenis ekstrak dengan kandungan  senyawa  yang  lebih  spesifik.  Hasil menunjukkan  bahwa  ekstrak  etilasetat  positif mengandung terpenoid, flavonoid dan alkaloid.
Fraksi  ekstrak  etil  asetat  dan  metanol  jahe merah  mengandung  senyawa  alkaloid.  Alkaloid pada tumbuhan umumnya berbentuk garam, yakni berikatan  dengan  asam-asam  organik  yang
terdapat  dalam  tumbuhan,  seperti  asam  suksinat, maleat,  mekonat,  kinar  dan  bersifat  larut  dalam pelarut  polar  [3].  Menurut  Purba  [9]  alkaloid mengandung  nitrogen  sebagai  bagian  dari  sistem sikliknya  serta  mengandung  substituen  yang bervariasi  seperti  gugus  amina,  amida,  fenol  dan metoksi  sehingga  alkaloid  bersifat  semipolar  ke polar.  Pada  pengujian  alkaloid  [6]  hasil  positif akan  terbentuk  endapan  putih  kekuningan  pada penambahan  pereaksi  Mayer.  Persamaan  reaksi Mayer ditunjukkan oleh Gambar 1.
Gambar 1. Reaksi pembentukan Kalium-Alkaloid (endapan) dengan pereaksi mayer [11]
Gambar 2. Reaksi pembentukan garam flavilium [6]
Identifikasi  flavonoid  menunjukkan  hasil yang positif pada fraksi etilasetat  yaitu terbentuk lapisan  kuning  atau  orange  setelah  ditambahkan HCl  pekat  dan  logam  Mg  disebabkan  karena terbentuknya garam flavilium. Adapun mekanisme  reaksi  pembentukan  garam  flavilium diperlihatkan pada Gambar 2. Flavonoid umumnya  lebih  mudah  larut  dalam  pelarut  polar dikarenakan  memiliki  ikatan  dengan  gugus  gula
[12].  Fraksi  etilasetat  tidak  menunjukkan  hasil positif terhadap pengujian saponin dan tanin.
Hasil  pewarnaan  dapat  dilihat  pada  yang menunjukkan  preparat  bakteri S.aureus termasuk kelompok  bakteri  Gram  positif.  sedangkan preparat  bakteri E.coli merupakan  bakteri  Gram negatif.  Dinyatakan  bahwa  perbedaan  struktur dinding sel bakteri Gram positif dan Gram negatif menyebabkan perbedaan reaksi dalam permeabilitas  zat  warna  dan  penambahan  larutan pemucat. Sebagian besar dinding sel bakteri Gram positif  terdiri  dari  peptidoglikan,  sedangkan dinding  sel  bakteri  Gram  negatif  mempunyai kandungan lipid yang tinggi dibandingkan dinding sel bakteri Gram positif. Lipid ini akan larut dalam alkohol yang digunakan sebagai larutan pemucat, sehingga  pori-pori  dinding  sel  membesar  dan meningkatkan daya larut kompleks kristal violet- yodium  pada  dinding  sel  bakteri  Gram  negatif [13].
Pada  bakteri  Gram  positif  akan  terbentuk persenyawaan  kompleks  kristal  violet  yodium ribonukleat  yang  tidak  larut  dalam  larutan pemucat.  Persenyawaan  ini  tidak  terbentuk  pada bakteri  Gram  negatif  sehingga  diduga  adanya perbedaan  kandungan  asam  ribonukleat  antara bakteri Gram positif dan Gram negatif. Pemberian larutan  mordan  atau  yang  digunakan  adalah larutan  lugol  dimaksudkan  untuk  meningkatkan afinitas  pengikatan  zat  warna  oleh  bakteri sehingga  pengikatan  zat  warna  oleh  bakteri menjadi  lebih  kuat.  Setelah  penambahan  larutan lugol  zat  warna  akan  lebih  jelas  terlihat  dan  zat warna  lebih  sulit  dilarutkan.  Penambahan  zat warna  kedua  atau  safranin  tidak  menyebabkan perubahan  warna  pada  bakteri  Gram  positif, karena  persenyawaan  kompleks  kristal  violet- yodium tetap terikat pada dinding sel. Pada bakteri Gram negatif, penambahan safranin menyebabkan sel bakteri berwarna merah, karena persenyawaan kompleks kristal violet-yodium larut dan dinding sel  kemudian  mengikat  zat  warna  kedua.  Fungsi zat  warna  safranin  hanyalah  sebagai  pembeda (kontras) terhadap zat warna kristal violet.
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh, ekstrak  etil  asetat  jahe  merah  mempunyai  sifat antibakteri  diduga  akibat  adanya  senyawa metabolit  sekunder  yang  terkandung  sehingga dapat membunuh bakteri S.aureus dan E.coli yang ditandai dengan tidak adanya pertumbuhan bakteri yang  telah  ditambahkan  ekstrak  etil  asetat  jahe merah.
Nursal [7] menyatakan bahwa terpenoid dan flavonoid pada jahe merupakan beberapa senyawa aktif  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan
bakteri.  Senyawa  golongan  terpenoid  dapat berikatan  dengan  protein  dan  lipid  yang  terdapat pada membran sel dan bahkan dapat menimbulkan lisis pada sel. Rusaknya membran sel bakteri, akan mengganggu proses transport nutrisi, sehingga sel akan  mengalami  kekurangan  nutrisi  yang dibutuhkan dalam proses pertumbuhan.
Komponen  dinding  sel  bakteri  Gram  positif adalah  peptidoglikan  yang  tersusun  dari  N-asetil glukosamin  dan  N-asetil  asam  muramat,  yang terikat  melalui  ikatan β -1,4-glikosida.  Pada  N- asetil  asam  muramat  terdapat  rantai  asam  amino pendek  yang  terdiri  dari  L-alanin,  D-glutamat, asam  diaminopimelat,  dan  D-alanin  yang  terikat melalui ikatan peptida. Peranan ikatan peptida ini sangat  penting  dalam  menghubungkan  antara rantai  satu  dengan  rantai  lainnya.  Senyawa alkaloid  bekerja  sebagai  antibakteri  dengan  cara mengganggu  komponen  penyusun  peptidoglikan pada sel bakteri sehingga lapisan dinding sel tidak terbentuk  secara  utuh,  terganggunya  sintesis peptidoglikan  sehingga  pembentukan  sel  tidak sempurna karena tidak mengandung peptidoglikan dan dinding sel akan lisis [1].
Dinding  sel  yang  telah  rusak  dapat mengakibatkan  senyawa  metabolit  sekunder masuk lebih dalam dan merusak membran bakteri. Dinding  sel  yang  rusak  mengakibatkan  senyawa metabolit sekunder dapat masuk lebih dalam  dan merusak  membran  bakteri.  Senyawa  flavonoid dapat mendenaturasi protein sel bakteri dan dapat merusak  membran  sitoplasma  yang  dapat menyebabkan  bocornya  metabolit  penting  dan menginaktifkan  sistem  enzim  bakteri.  Kerusakan ini  memungkinkan  nukleotida  dan  asam  amino merembes keluar dan mencegah masuknya bahan- bahan  aktif  ke  dalam  sel,  keadaan  ini  dapat menyebabkan kematian bakteri. Senyawa flavonoid  juga  dapat  menembus  peptidoglikan yang bersifat polar karena flavonoid juga bersifat polar [8]. Senyawa flavonoid memiliki mekanisme  membentuk  senyawa  kompleks protein,  antara  protein  yang  dapat  larut,  protein ekstraseluler, dan dinding sel. Kompleks tersebut menyebabkan  terganggunya  integritas  membran sel bakteri [2].
Pada penentuan Minimum Inhibitory Concentration (MIC)  fraksi  etilasetat  memiliki potensi  pada  bakteri S.  aureus pada  konsentrasi 6.3%  maupun  bakteri E.coli pada  konsentrasi 25%,  dan Minimum  Bactericidal  Concentration
(MBC) S. aureus pada konsentrasi 25% dan E. coli pada konsentrasi 50%.
Pada  bakteri S.  aureus menunjukkan  hasil yang lebih baik dibandingkan pada bakteri E.coli .
Menurut Pelczar & Chan [8], perbedaan respon ini terjadi  akibat  perbedaan  permukaan  luar  dari dinding  sel  yaitu  lapisan  lipopolisakarida  antara bakteri  Gram-negatif  dan  bakteri  Gram-positif. Bakteri  Gram-positif  memiliki  dinding  sel  yang lebih  sederhana,  dengan  jumlah  peptidoglikan yang  relatif  banyak.  Dinding  sel  bakteri  Gram- negatif memiliki peptidoglikan yang lebih sedikit dan  secara  struktural  lebih  kompleks.  Membran bagian  luar  pada  dinding  sel  Gram-negatif mengandung  lipopolisakarida,  yaitu  karbohidrat yang  terikat  dengan  lipid.  Adanya  lapisan lipopolisakarida  dan  membran  luar  yang  lebih kompleks  pada  bakteri E.coli ini  menyebabkan struktur  bakteri  menjadi  lebih  kokoh  sehingga diduga  sulit  ditembus  oleh  senyawa  antimikroba dari ekstrak jahe.

## 4. Kesimpulan
Ekstrak etil asetat rimpang jahe merah merah ( Z.  officinale Roscoe  var. sunti )  memberikan pengaruh  baik  sebagai  antibakteri  terhadap pertumbuhan bakteri S. aureus dan E. coli . Ekstrak etil  asetat  rimpang  jahe  merah  ( Z.  officinale Roscoe  var. sunti )  memiliki  konsentrasi  hambat minimum (KHM) yang sangat berpengaruh yaitu S. aureus pada konsentrasi 6,3% dan E. coli pada konsentrasi 25%. Ekstrak etil asetat rimpang jahe merah  ( Z.  officinale Roscoe  var. sunti )  memiliki konsentrasi  bunuh  minimum  (KBM)  yaitu S. aureus pada  konsentrasi  25%  dan E.  coli pada konsentrasi 50%.

## Daftar Pustaka
[1] Cowan,  M.  M..,  1999.  Plant  Product  as Antimicrobial Agents. Clinical Microbiology Review . 27(2); 181.
[2] Dwidjoseputro, D. 1964. Dasar-dasar Mikrobiologi . Penerbit Djambatan, Malang.
[3] Endang,  H.  2015. Analisis  fitokimia .  EGC. Jakarta.
[4] Harbone,  J.B., Phytochemical  Methods , diterjemahkan oleh Kosasi Padmawinata dan Iwang  Soedio.  1987. Metode  Fitokimia :
Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan . Penerbit ITB. Bandung.
[5] Kementrian  Kesehatan  RI.  2011. Situasi Diare  di  Indonesia .  Jakarta:  Kementrian Kesehatan  Republik  Indonesia.  II.  pp  1-3. Lay,  B.W  &  Sugyo  H.  1992. Mikrobiologi .
Bioteknologi Institut  Pertanian  Bogor.
Jakarta. [6] Marliana,  D.S.,Venty,  S.,  &  Suyono.  2005.
Skrining Fitokimia dan Analisis
Kromatografi  Lapis  Tipis  Komponen  Kimia Buah  Labu  Siam  ( Sechium  edule Jacq. Swartz.)  dalam  Ekstrak  Etanol. Jurnal Biofarmasi. 3(1):29
[7] Nursal, W., Sri & Wilda S. 2006. Bioaktifitas ekstrak  jahe  ( Zingiber  officinale Roxb.) dalam  menghambat  pertumbuhan  koloni bakteri Escherichia coli dan Bacillus subtilis .
Jurnal Biogenesis. 2 (2): 64-66.
[8] Pelczar, M.J. & Chan, E.C.S. 1998. Dasar – Dasar Mikrobiologi . UI Press. Jakarta.
[9] Purba,  R..D.  2001.  Analisis  Komposisi Alkaloid  Daun  Handeuleun  ( Graptophyllum pictum  ( Linn),  Griff)  yang  Dibudidayakan dengan  Taraf  Nitrogen  yang  Berbeda. Skripsi . Bogor:Institut Pertanian Bogor.
[10] Radiati,
L.E. 2002 . Mekanisme Penghambatan Virulensi Bakteri Entropatogen  oleh  Ekstrak  Rimpang  Jahe ( Zingiber  officinale Roscoe). Disertasi . Pascasarjana, IPB, Bogor.
[11] Setyowati, W, Sri R.T.D.A, Ashadi, Bakti, M &  Cici,  P.R.  2014.  Skrining  Fitokimia  dan Identifikasi  Komponen  Utama  Ekstrak Metanol  Kulit  Durian  ( Durio  zibethinus Murr.)  Varietas  Petruk. Seminar  Nasional Kimia dan Pendidikan Kimia VI . Surakarta.
[12] Markham, K.R., 1988, Cara Mengidentifikasi Flavonoid,  diterjemahkan  oleh  Kosasih Padmawinata, 15, Penerbit ITB, Bandung.
[13] Alhadi, Fatri, Hidayat, R., 2012, Identifikasi Streptococcus  Equi  dari  Kuda  yang  Diduga Menderita  Strangles,  Jurnal  Imu  Pertanian Indonesia (JIPI), Vol. 17, No. 3.