Plantropica Journal of Agricultural Science. 2019. 4(1):30-38
Pengaruh Polyethylene Glycol (PEG) terhadap Hardening Planlet Apel ( Malus sp. ) Akibat Hiperhidrisitas Secara In Vitro
Influence of Polyethylene Glycol (PEG) to Hardening Planlet Apple ( Malus sp. )  by The Effect of Hyperhydricity On In Vitro
Ruwiyatul Maslukah 1*) , Farida Yulianti 2) , Moch. Roviq 1) dan Moch. Dawam Maghfoer 1)
1) Jurusan Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian, Universitas Brawijaya, Jln. Veteran Malang 65145, Jawa Timur, Indonesia
2) Balai Penelitian Tanaman Jeruk dan Buah Subtropika Jln. Raya Tlekung No 1. Junrejo, Kota Batu
*) E-mail: ruwiyatu.lmaslukah@gmail.com
Diterima 14 November 2018 / Disetujui 1 Januari 2019

## ABSTRAK
Hiperhidrisitas  ialah  perubahan  morfo-logi  dan  fisiologi  yang  terjadi  pada  jaringan  tanaman  yang sering  ditemukan  pada  perbanyakan  tanaman  secara  kultur  jaringan.  Kegagalan  mengatasi  masalahan ini  berpengaruh  terhadap  keberhasilan  aklimatisasi,  karena  planlet  yang  dihasilkan  sulit  untuk menyesuaikan  kondisi  saat  aklimatisasi.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  PEG terhadap  percepatan hardening planlet  akibat  hiperhidrisitas  dan  mendapatkan  konsentrasi  PEG  yang optimal  terhadap hardening planlet  apel . Penelitian  dilaksanakan  di  BALITJESTRO  Kecamatan  Junrejo Kota  Batu  pada  bulan  April-Juli  2018.  Penelitian  ini  menggunakan  rancangan  acak  lengkap  dengan perlakuan  yang  meliputi  PEG  (0,  1,  3,  5  dan  9  g  l -1 ).  Variabel  yang  diamati  meliputi  persentase  planlet hidup, perubahan morfologi dan warna daun. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan PEG 5 g l -1 berpengaruh terhadap persentase planlet hidup sebagai indikator tingkat tolerasi eksplan pada cekaman kekeringan. Disisi lain terdapat perubahan morfologi sebagai indikator tingkat kecepatan hardening akibat hiperhidrisitas. Terjadi perubahan warna daun dari warna hijau  muda sampai dengan warna hijau gelap yang dapat dijadikan sebagai indikator kandungan klorofil pada daun planlet.
Kata kunci: Batang Bawah Apel, Cekaman Kekeringan, Media MS, Warna Daun

## ABSTRACT
Abstract  merupakan  terjemahan  dari  Abstrak,  berisi  introduction,  method,  result,  dan  conclusion yang  ditulis  secara  singkat  dan  jelas.  Abstract  ditulis  dalam  satu  paragraf  menggunakan  layout  satu kolom,  jumlah  kata  antara150-250  kata,  huruf  Arial  ukuran  10  pt,  ditulis  normal,  tidak  miring,  serta menggunakan spasi 1. Hyperhydricity is a change of morphology and physiology that occurs in tissue of plant  which  found  in  micropropagation.  Failure  to  overcome  this  problem  has  been  an  effect  on  the success  of  acclimatization,  because  of  the  planlet  produced  had  stress  while  acclimatization.  The purpose of this study was to determine the effect of PEG to fast hardening of apple plantlet by the effect of  hyperhydricity  and  to  get  the  optimal  concentration  of  PEG.  The  research  was  conducted  at BALITJESTRO, Batu City, from April-July 2018. The research used a completely randomized design with the  treatment  of  PEG  (0,  1,  3,  5  dan  9  g  l-1).  The  variable  observation  were  percentage  of  surviving planlet,  change  of  morfologhy  and  leaf  colour.  The  result  showed  the  concentration  of  PEG  5  g  l-1 influenced  to the  percentage  of  surviving  planlet as  the indicator  tolerance  of  planlet  on  drought  stress.

## Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …
Concentration  of  PEG  gave  the effect  to  morfologhy  change  as  the indicator the  faster  of  hardening  by the  effect  of  hyperhydricity.  The  concentration  of  PEG  also  influenced  to  changes  of  leaf  colour  from moderate green to dark green which is the indicator of chlorophyll on planlet leaf.
Keyword: Apple Rootstock, Drought stress, Leaf Colour, MS Medium

## PENDAHULUAN
Apel  ( Malus sp.)  ialah  salah  satu jenis tanaman  tahunan  yang  buahnya  banyak digemari masyarakat untuk memenuhi kebutuhan  konsumsi.  Produksi  apel  di Indonesia  masih  tergolong  rendah  yaitu 87,59  ton  ha -1 (BPS,  2015).  Hal  ini disebabkan keterbatasan daerah yang sesuai  untuk  budidaya  apel.  Selain  itu penyediaan  bibit  juga  belum  terlalu  banyak. Salah  satu  faktor  penting  yang  dapat mendukung produksi dipengaruhi oleh penyediaan  bibit  bermutu,  seragam  dan diperoleh dalam jumlah yang banyak. Dalam memenuhi  kebutuhan  bibit  biasanya  petani konvensional melakukan perbanyakan dengan  okulasi.  Cara  tersebut  belum  dapat memenuhi ketersediaan bibit karena ketersediaan  batang  bawah  juga  masih sangat  terbatas,  untuk  itu  perlu  dilakukan perbanyakan batang bawah apel. Perbanyakan  dengan  kultur  jaringan  juga sudah  banyak  dilakukan  oleh  para  peneliti, namun belum mampu memenuhi kebutuhan, karena  terjadi  hiperhidrisitas  pada  planlet apel.  Menurut  Martinez  dan  Klerk  (2010) hiperhidrisitas  sering  ditemui  pada  spesies tanaman  ( Olearia  microdisca,  Prunus  sp., Malus sp. ). Kendala tersebut telah mengakibatkan  kegagalan  aklimatisasi,  oleh karena  itu  ketersedian  bibit  batang  bawah apel belum dapat terpenuhi.
Hiperhidrisitas  dapat  dikenal  juga dengan  vitrifikasi  yang  dapat  menyebabkan kelebihan air, lignifikasi rendah, dan berkurangnya  kekuatan  mekanik  tanaman yang dihasilkan dalam kultur jaringan. Gejala utama yang ditimbulakn akibat hiperhidrisitas ini  secara  umum  ialah  ditandai  dengan kekurangan  klorofil  dan  kandungan  airnya tinggi.  Hiperhidrisitas  dapat  menyebabkan
kehilangan  hasil  yang  cukup  signifikan  dan masalah-masalah  lain  dalam  perbanyakan secara  komersial  (Pancaningtyas,  2013). Hiperhidrisitas  dapat  dikendalikan  dengan memodifikasi komposisi media yang digunakan dalam perbanyakan. Upaya dalam mengatasi permasalahan  tersebut  dapat  dilakukan dengan  penambahan Polyethylene  Glycol (PEG)  pada  media.  Menurut  Rahayu et  al. (2005)  PEG ialah  senyawa  yang  dapat menurunkan potensial osmotik larutan melalui  aktivitas  matriks  sub  unit  etilena oksida  yang  mampu  mengikat  molekul  air dengan  ikatan  hidogen.  Penggunaan  PEG diharapkan  dapat  mempercepat hardening planlet  apel,  karena  PEG  dapat  menirukan kondisi cekaman kekeringan yang menyebabkan  ketersedian  air  dalam  media menjadi  berkurang.  Rahayu et  al., (2005) berpendapat  bahwa  eksplan  yang  ditanam dalam  media  selektif  dengan  penambahan PEG  diharapkan  memberikan  respon  yang sama  dengan  tanaman  yang  mengalami cekaman kekeringan. Evaluasi untuk menentukan  respon  planlet  apel  terhadap cekaman  PEG  dalam  media  kultur  jaringan perlu dilakukan sebagai langkah awal dalam penggunaan  PEG  terhadap  percepatan hardening planlet.  Penggunaan  konsentrasi PEG dipilih berdasarkan dari hasil penelitian Maftuchah dan Zainudin (2015) pada seleksi tanaman  jarak  pagar  yang  toleran  terhadap kekeringan secara in vitro .
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui  pengaruh  penggunaan  PEG terhadap percepatan hardening dan mendapatkan  konsentrasi  yang  optimal dalam  upaya  perbaikan  morfologi  planlet apel hiperhidrisitas .
Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …

## BAHAN DAN METODE
Penelitian dilaksanakan di Labo- ratorium  kultur  jaringan  BALITJESTRO, pada  bulan  April-Juli  2018.  Penelitian  ini menggunakan rancangan acak lengkap yang terdiri  dari  6  perlakuan  meliputi  PEG  0  g  l -1 (tanpa PEG), PEG 1 g l -1 , PEG 3 g l -1 , PEG 5  g  l -1 ,  PEG  7  g  l -1 ,  dan  PEG  9  g  l -1 .  Setiap perlakuan  diulang  sebanyak  5  kali  dengan jumlah  eksplan  5  planlet/  botol.  Variabel yang  diamati  meliputi  persentase  planlet hidup,  perubahan  morfologi  dan  perubahan warna  daun  (kriteria  berdasarkan  RHS colour  chart ,  2015). pada  taraf  5%  untuk mengetahui  perbedaan  antar  perlakuan. Data  pengamatan  warna  daun  dijadikan sebagai  indikator  kandungan  klorofil  dalam planlet dan disajikan dalam bentuk gambar.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh PEG terhadap Persentase Jumlah Planlet yang hidup
Berdasarkan dari hasil penelitian bahwa pemberian konsentrasi PEG berpengaruh  terhadap  persentase  jumlah planlet  yang  hidup  pada  umur  pengamatan 56 HSK sampai dengan 84 HSK. Pemberian konsentrasi  PEG  0  sampai  dengan  5  g  l -1 tidak berpengaruh nyata terhadap persentase  jumlah  planlet  yang  hidup, sedangkan  pemberian  konsentrasi  PEG  7 dan  9  g  l -1 menurunkan  persentase  jumlah planlet  yang  hidup  pada  umur  pengamatan 56  dan  70  HSK.  Konsentrasi  PEG  1  g  l -1 berpengaruh  nyata  terhadap  persentase jumlah  planlet  jika  dibandingkan  dengan PEG  3  g  l -1 sampai  dengan  9  g  l -1 , sedangkan  pada  perlakuan  kontrol  tidak menghasilkan beda nyata. Persentase jumlah  planlet  yang  hidup  didapatkan  hasil tertinggi  100%  pada  perlakuan  kontrol  dan perlakuan  konsentrasi  PEG  1  g  l -1 diakhir pengamatan (Tabel 1).
Pada  perlakuan  kontrol    planlet  dapat bertahan hidup hingga 100% karena kondisi
kebutuhan  air  planlet  dapat  terpenuhi, sedangkan pada perlakuan konsentrasi PEG 1  g  l -1 masih  dapat  bertahan  hidup  hingga 100% karena konsentrasi PEG yang diberikan  tergolong  rendah.  Hal  tersebut menunjukkan  bahwa  kandungan  potensial air  dalam  media  yang  terikat  oleh  PEG masih  dalam  jumlah  yang  sedikit,  sehingga kebutuhan  air  masih  tercukupi.  Hal  tersebut sesuai dengan hasil penelitian Sumarjan dan Hemon (2009) pada kacang tanah, perlakuan  kontrol  (PEG  0)  tidak  terjadi penghambatan,  sedangkan  pertumbuhan eksplan  yang  membentuk  embrio  somatik berkisar 95-98%..
Perlakuan konsentrasi PEG 1 g l -1 dan kontrol  menghasilkan  persentase  jumlah planlet  yang  hidup  lebih  tinggi  yaitu  100%, sedangkan pada perlakuan konsentrasi lebih tinggi  menghasilkan  persentase  planlet hidup  lebih  rendah.  Perlakuan  konsentrasi PEG  sampai  dengan  9  g  l -1 dapat menurunkan persentase jumlah planlet yang hidup  hingga  76%  diakhir  pengamatan (Tabel  1).  Hal  tersebut  sesuai  dengan  hasil penelitian Zuyasna et al. (2016) pada seleksi kedelai  kipas  merah  bahwa  persentase benih  yang  tidak  berkecambah  dalam medium  MS  yang  diberikan  PEG  meningkat seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi PEG.
Konsentrasi  PEG  20%  menyebabkan kematian benih sebesar 90,25%, sedangkan pada  konsentrasi  PEG  5%  dan  10% persentase  kematian  benih  hanya  6%  dan 26,25%  (Zuyasna et  al., 2016).  Hal  tersebut menunjukkan  respon  yang  sama  terhadap persentase jumlah planlet yang hidup seiring meningkatnya konsentrasi PEG yang diberikan.
Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …
Tabel 1. Data rerata persentase jumlah planlet yang hidup
% Planlet Hidup (%) pada Umur 42 HSK 56 HSK 70 HSK 84 HSK 0 100 100 c 100 b 100 c 1 100 100 c 100 b 100 c 3 100 100 c 100 b 92 bc 5 100 100 bc 96 b 88 abc 7 92 92 ab 88 ab 84 ab 9 88 84 a 84 a 76 a BNT (5%) tn 10,65 11,67 13,05 KK (%) 8,85 8,50 9,44 11,11
Keterangan: angka yang diikuti huruf sama pada kolom sama menunjukkan hasil tidak berbeda nyata berdasarkan uji BNT pada taraf 0,05; tn = tidak nyata; HSK = hari setelah kultur; KK = koefisien keragaman
Pemberian  PEG  pada  media  kultur tidak  berpengaruh  secara  langsung  pada eksplan,  akan  tetapi  pertumbuhan  planlet yang  terhambat  diakibatkan  oleh  kondisi potensial  air  yang  semakin  rendah  karena kandungan air dalam media telah terikat oleh PEG.  Kerusakan  atau  kematian  tanaman karena  penggunaan  PEG  dapat  dianggap sebagai  efek  kekeringan,  bukan  efek  dari senyawa  PEG  langsung  karena  PEG  tidak diserap oleh tanaman (Hapsari et al., 2017). Perlakuan  PEG  berpengaruh  terha- dap  tingkat  toleransi  planlet  dalam  kondisi cekaman  kekeringan  yang  secara  langsung berhubungan  dengan  persentase  jumlah planlet hidup. Hasil percobaan menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  yang diberikan,  menghasilkan  persentase  jumlah planlet hidup yang semakin rendah. Menurut Sumarjan dan Hemon (2009), meningkatnya konsentrasi  PEG  dalam  media  selektif  juga menyebabkan  peningkatan  penghambatan pertumbuhan  embrio  somatik  pada  kacang tanah.  Eksplan  yang  hidup  menunjukkan toleransi  terhadap  penurunan  potensial  air dalam media, sedangkan eksplan yang mati menunjukkan  kepekaan  terhadap  perlakuan konsentrasi  PEG.  Hapsari et  al.  ( 2017) berpendapat bahwa kemampuan PEG
dalam  menghidrasi  jaringan  tanaman  dapat
berfungsi sebagai screening in vitro sehingga  mampu  menyeleksi  variasi  ber- bagai  tanaman  dengan  tingkat  toleransi kekeringan yang lebih baik.
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  melihat kemampuan  eksplan  dalam  menghasilkan planlet  apel  yang  toleran  terhadap  cekaman kekeringan  akibat  pemberian  konsentrasi PEG.  Pengujian  toleransi  planlet  apel terhadap  cekaman  kekeringan  dijadikan sebagai  pendugaan  terhadap  keberhasilan aklimatisasi  yang  dilakukan  secara in  vitro. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan  PEG  sebagai  agen  penyeleksi pada fase hardening planlet apel berpengaruh  positif  dengan  pertumbuhan planlet.  Pada  percobaan  ini  menunjukkan bahwa  planlet  apel  memiliki  sifat  toleransi terhadap cekaman kekeringan pada pemberian  konsentrasi  PEG  5  g  l -1 .  Hal tersebut  didukung  dengan  hasil  analisis persentase  jumlah  planlet  yang  hidup  pada perlakuan  konsentrasi  PEG  5  g  l -1 yang menghasilkan  88%  planlet  hidup  diakhir pengamatan  (Tabel  1).  Oleh  karena  itu, perlakuan tersebut dijadikan sebagai seleksi planlet  apel  yang  toleran  terhadap  cekaman kekeringan.
Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …
Pengaruh PEG terhadap Perubahan Morfologi  Planlet  Apel  sebagai  Indikator Kecepatan Hardening Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa perlakuan PEG berpengaruh terhadap tingkat  percepatan hardening planlet  apel akibat  hiperhidrisitas  (Tabel  2).  Pada  umur pengamatan  14  HSK  planlet  apel  yang dikultur  pada  media  dengan  penambahan PEG mulai menunjukkan perbaikan morfologi.  Perubahan  morfologi  tersebut dicirikan pada batang eksplan yang menunjukkan  lebih  kuat  dari  sebelumnya. Disisi  lain juga terjadi perubahan pada daun yang sebelumnya lebih kecil dan menggulung  keatas  menghasilkan  daun yang  lebih  lebar  dan  mulai  berubah  warna menjadi  lebih  tua.  Tujuan  utama  melakukan percepatan hardening merupakan  langkah awal  sebelum  eksplan  dipindahkan  pada kondisi ex vitro . Hardening bisa juga disebut sebagai  pra-aklimatisasi  atau  aklimatisasi yang  dilakukan  secara in  vitro .  Dalam perbanyakan  kultur  jaringan  aklimatisasi merupakan  tahap  yang  sangat  penting karena  penyesuain  dari  kondisi in  vitro ke kondisi ex vitro (Singh et al ., 2017).
Efektifitas PEG untuk menduga respon planlet  apel  terhadap  cekaman  kekeringan secara in vitro telah diuji dengan mengevaluasi kemampuannya untuk mempercepat hardening .  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  perlakuan  konsentrasi PEG efektif untuk menirukan kondisi cekaman  kekeringan  pada  planlet  apel hiperhidrisitas. Pengujian hardening ini dapat dijadikan  sebagai  solusi  dalam  proses  pra- aklimatisasi  eksplan  yang  dilakukan  secara in  vitro .  Harapannya  dengan  perlakuan cekaman kekeringan eksplan akan menyesuaikan  dalam  kondisi  potensial  air yang  lebih  rendah,  sehingga  stress  yang ditimbulkan saat aklimatisasi tidak
berlebihan.  PEG  berperan  dalam  tingkat percepatan hardening karena dapat mengikat  air  dalam  media  kultur,  sehingga air  yang  terserap  oleh  eksplan  tidak berlebihan.  Induksi  cekaman  kekeringan yang  paling  popular  dan  banyak  dilakukan peneliti  adalah  dengan  menggunakan  PEG, karena bersifat tidak meracuni eksplan (Said et  al .,  2015).  Dengan  demikian  PEG  dapat mengendalikan  air  yang  berlebih  sehingga tujuan hardening tercapai  dengan  perlakuan simulasi cekaman kekeringan.
Hubungan antara PEG dengan cekaman  kekeringan  adalah  PEG  berfungsi untuk  mengikat  air  dalam  media  dan menimbulkan efek seperti cekaman kekeringan yang terjadi di lapang. Hubungan tersebut telah menghasilkan pengaruh positif terhadap  perbaikan  morfologi  planlet  apel dari kondisi hiperhidrisitas menuju hardening. Secara  tidak  langsung  efek cekaman kekeringan pada perlakuan berhubungan erat dengan tingkat kercepatan hardening eksplan.  Hal  tersebut  disebabkan perlakuan  efek  cekaman  kekeringan  yang ditimbulkan  menyebabkan  air  dalam  media tidak  sepenuhnya  dapat  diserap  oleh eksplan.  Oleh  karena  itu,  efek  cekaman kekeringan  dapat  mengendalikan  air  yang berlebihan, sehingga eksplan tidak menyerap  air  terlalu  banyak.  Dengan demikian secara perlahan perbaikan morfologi  planlet  apel  hiperhidrisitas  dapat teratasi dengan cara meningkatkan percepatan hardening. Hasil penelitian Barraco et  al .  (2012)  bahwa  kesuksesan mengatasi  vitrifikasi  (hiperhidrisitas)  dapat dilakukan  dengan  menggunakan  perlakuan percobaan yang bisa mengakibatkan dehidrasi.  Oleh  karena  itu,  efek  cekaman kekeringan  dapat  dijadikan  sebagai  solusi untuk meningkatkan percepatan hardening.

## Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …
Tabel  2.  Perubahan  morfologi  planlet  apel  hiperhidrisitas  dalam  percepatan  hardening menggunakan PEG
Konsentrasi PEG (gl -1 ) Perubahan Morfologi Planlet Apel Hiperhidrisitas umur 0 Mulai hardening umur 14 HSK
0
1 3 5 7 9
Keterangan: HSK: hari setelah kultur; umur 0 HSK menunjukkan planlet hiperhidrisitas.
Pengaruh PEG terhadap Perubahan Warna  Daun  Planlet  sebagai  Indikator Kandungan Klorofil
Perlakuan  konsentrasi  PEG  0  sampai dengan  9  g  l -1 berpengaruh  terhadap perubahan  warna  daun  planlet  akibat hiperhidrisitas. Pada masing-masing perlakuan konsentrasi PEG secara berurutan menghasilkan warna yang berbeda  baik  pada  permukaan  daun  bagian atas  maupun  bagian  bawah.  Pengamatan perubahan  warna  daun  planlet  dijadikan
sebagai  indikator  kandungan  klorofil  pada daun.  Semakin  gelap  warna  hijau  daun menunjukkan  semakin  tinggi  kandungan klorofilnya.  Warna  daun  paling  pekat  yakni 139  hijau  kekuningan  gelap  A  ditunjukkan pada  pemberian  konsentrasi  PEG  3  g  l -1 (Tabel 3). Pengamatan warna daun menggunakan standar colour chart dari royal hortikultura  society (RHS)  yang  dilakukan diakhir percobaan. Pada pemberian konsentrasi  PEG  3  g  l -1 menampakkan warna  hijau  daun  lebih  gelap/tua.  Menurut

## Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …
Sumenda et  al. (2011)  kandungan  klorofil pada daun hijau kekuningan 32% lebih tinggi dari  pada  daun  warna  hijau  muda  dan kandungan  klorofil  pada  daun  warna  hijau tua  72%  lebih  banyak  daripada  daun  warna hijau  muda.  Klorofil  ialah  pigmen  berwarna hijau  yang  terletak  didalam  kloroplas  dan kloroplas berfungsi sebagai tempat
fotosistesis. Secara umum tanaman yang mengalami cekaman kekeringan akan mengalami  pertumbuhan  yang  tidak  normal seperti  tumbuh  kerdil.  Selain  itu  juga  dapat mempengaruhi  laju  fotosintesis,  hal  ini disebabkan  air  sangat  berperan  penting dalam proses fotosintesis. Menurut
Kurniasari et  al. (2010)  tanaman  yang mengalami  kekurangan  air  secara  umum mempunyai ukuran yang lebih kecil dibandingkan dengan tanaman yang tumbuh normal.  Perlakuan  PEG  dalam  media  kultur memberikan efek yang sama seperti perlakuan  cekaman  kekeringan  di  lapang. Senyawa  PEG  dapat  mengikat  air  dalam media sehingga dapat menurunkan potensial air dalam media. Dengan demikian perlakuan  PEG  dapat  dijadikan  sebagai simulasi  cekaman  kekeringan  pada  planlet apel yang mengalamai hiperhirisitas.
Pancaningtyas  (2013)  menjelaskan  bahwa hiperhidrisitas  ialah  kelainan  fisiologis  yang menyerapnya dan mengolah bersama dengan  karbondioksida  dan  air  sehingga menghasilkan  glukosa  dan  oksigen.  Ai  dan Banyo (2011) menjelaskan bahwa tiga fungsi utama  klorofil  dalam  proses  fotosintesis adalah  memanfaatkan  energi  matahari, memicu  fiksasi  CO 2 untuk  menghasilkan karbohidrat  dan  menyediakan  energi  bagi ekosistem  secara  keseluruhan.  Perlakuan PEG  menyebabkan  penurunan  potensial  air dalam media, sedangkan air diperlukan pada proses  fotosintesis.  Kurangnya  ketersedian air  akan  menghambat  sintesis  klorofil  pada daun  akibat  laju  fotosintesis  yang  menurun
serta  terjadinya  peningkatan  suhu  dan transpirasi  yang  menyebabkan  desintegrasi klorofil (Hendriyani dan Setiari, 2009).
Tabel  3.  Perubahan  warna  daun  sebagai indikator kandungan klorofil
Konsentrasi
PEG (gl -1 ) Warna Daun Umur 84 HSK Daun Bagian Atas Dokumentasi 0 144 hijau kekuningan kuat A 1 N134 hijau kekuningan gelap A 3 139 hijau kekuningan gelap A 5 136 hijau kekuningan gelap B 7 137 hijau zaitun sedang A
9
143 hijau kekuningan kuat A

## KESIMPULAN
Berdasarkan dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa perlakuan PEG berpengaruh  terhadap  perubahan  morfologi sebagai  tingkat  kecepatan hardening planlet apel  akibat  hiperhidrisitas  pada  umur  14 HSK dengan ciri-ciri batang mulai mengeras, daun  membuka  sempurna  dan  berwarna hijau  lebih  tua.  Perubahan  paling  cepat
Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …
didapatkan pada perlakuan konsentrasi PEG 5 g l -1 .

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis mengucapkan terimakasih kepada  Kepala  Balai  Dr.  Ir.  Muhammad Taufiq  Ratule  M.Si  yang  sudah  meyediakan fasilitas untuk pelaksanaan penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Ai,  N.S.  dan  Y.  Banyo.  2011.  Konsentrasi Daun  sebagai  Indikator  Kekurangan Air pada Tanaman. Jurnal Ilmiah Sains 11(2):166-173.
Badan  Pusat  Statistika.  2015.  Statistika Produksi  Hortikultura  Tahun  2015.
Direktorat Jenderal
Hortikultura. Kementrian Pertanian.
Barraco,  G.,  P.  Chatelet,  E.  Balsemin,  T.
Decourcelle,  I.  Sylvestre,  and  F. Engelmann.2012.  Cryopreservation  of Prunus  cerasus Through  Vitrification and  Replacement  of  Cold  Hardening with  Precultue  on  Medium  Enriched with  Sucrose  and/or  Glycerol. Journal Scientia  Horticulturae 148(2012):104- 108.
Hapsari, B. W., A. F. Martin, Rudiyanto, dan T.  M.  Ermayanti.  2017.  Perlakuan
Polyethylene  Glycol  secara  In  Vitro terhadap  Pertumbuhan  Tunas  Mutan Taka untuk Seleksi Toleran Kekeringan. Prosiding Seminar Nasional 2017. 262-271.
Hendriyani,  I.  S.  dan  N.  Setiari.  2009.
Kandungan  Klorofil  dan  Pertumbuhan Kacang Panjang ( Vigna sinensis ) pada Tingkat Penyediaan Air yang Berbeda. Jurnal Sains dan Matematika .
17(3):145-150.
Kurniasari,  A.  M.,  Adisyahputra  dan  R.
Rosman.  2010.  Pengaruh  Kekeringan pada  Tanah  Bergaram  NaCl  terhadap
Pertumbuhan Tanaman Nilam. Bulletin Littro . 21(1):18-27.
Maftuchah  dan  A.  Zainudin.  2015.  In  Vitro Selection  of Jatropha  curcas Linn. Hybrids  Using  Polyethylene  Glycol  to Obtain  Drought  Tolerance  Character.
Journal Procedia Chemistry . 14(2015):239-245. Martinez,  L.R.  and  G.J.D.  Klerk.  2010. Hyperhydricity in Planlet Tissue Culture Drowing from Within.
International Seed Federation.
Pancaningtyas,  S.  2013.  Evaluasi  Kuantitas dan  Hiperhidrisitas  Embrio  Somatik Kakao  Pada  Kultur  Padat,  Kultur  Cair,
dan Subkultur Beruntun. Pelita Perkebunan . 29(1):10-19.
Rahayu,  E.  S.,  Edi,  G.,  Satriyas,  I.  dan
Sudarsono.  2005. Polyethylene  glycol (PEG) Dalam Media In Vitro Menyebabkankondisi Cekaman Yang Menghambat Tunas Kacang Tanah ( Arachis hypogaea L.).
Berkala Penelitian Hayati . 11(2005):39-48.
Royal  Horticultural  Society.  2015.  RHS Colour  Chart  Sixth  Edition.  London SW1P  2PE,  UK.  RHS  Media,  Royal
Horticultural Society, 80 Vincent
Square. www.rhs.org.uk. Said, E.M., R.A. Mahmoud, R.A. Akshar, and
G.  Safwat.  2015.  Drought  Stress Tolerance and Enhancement of Banana  Planlets  In  Vitro. Austin Journal of Biotechnology and Bioengineering . 2(2):1040.
Singh  V.K.,  V.M.  Prasad,  S.  Kumari,  P.
Rajoria,  P.  Mirsa.  2017.  Identification of the Suitable Hardening Protocol and
Hardening Medium
in Micropropagation  of  Gerbera  ( Gerbera jamesonii Bolus).  Int. Journal  of Current  Microbiology  and  Applied Sciences . 6(7):2476-2484.
Sumarjan dan A. F. Hemon. 2009.
Efektivitas Polietilena Glikol dan
Ruwiyatul Maslukah, Pengaruh Polyethylene Glycol …
Manitol  sebagai  Agens  Penyeleksi In Vitro untuk Cekaman KekeringanTerhadap Pertumbuhan Embrio Somatik Kacang Tanah. Jurnal
Crop Agro . 2(1):30-36.
Sumenda, L., H. L. Rampe dan F. R. Mantiri.
2011.  Analisis  Kandungan  Klorofil
Daun  Mangga  ( Mangifera  indica L.) pada  Tingkat  Perkembangan  yang Berbeda. Jurnal Bioslogos . 1(1):20-24. Zuyasna,  Effendi,  Chairunnas  dan  Arwin.
2016. Efektivitas Polietilen Glikol sebagai  Bahan  Penyeleksi  Kedelai Kipas  Merah  Bireun  yang  Diradiasi Sinar Gamma
untuk
Toleransi
terhadap Cekaman Kekeringan. Jurnal
Floratek . 11(1):66-74.
Firon,  N.,  D.  LaBonte,  A.  Villordon,  C. McGregor,  Y.  Kfir,  and  E.  Pressman. 2009.  Botany  and  physiology:  storage root  formation  and  development.  p.
13 –26. In Loebenstein, G., Thottappilly, G. (eds.), The
Sweetpotato. Springer Netherlands.
Viner,  D.  J.  I.  L.  Morison,  and  C.  Wallace.
2006.  Recent  and  future  climate change  and  their  implications  for  plant growth.  p.  1 –16.  In Morison , J.  I.  L., Morecroft ,  M.  D. Plant  Growth  and Climate  Change.  Blackwell  Publishing Ltd, Oxford.