## UJI MIKROBIOLOGI AIR SUMUR GALI DI WILAYAH KEBON SARI KELURAHAN KAMPUNG BARU DENGAN TEKNIK TABUNG GANDA
A.A.Ngr.Hendra Darma Universitas Pendidikan Ganesha Singaraja, Indonesia e-mail: darma4hendra@gmail.com

## Abstrak
Penelitian  ini  adalah  penelitian  deskriptif  yang  bertujuan  untuk    (1)  menganalisis  ada tidaknya  bakteri  coliform  tinja  pada  air  sumur  gali  di  wilayah  Kebon  Sari  kelurahan  Kampung Baru,  (2)  mengetahui  nilai  MPN  ( Most  Probable  Number )  air  sumur  gali  di  wilayah  Kebon kelurahan Kampung Baru. Populasi penelitian ini adalah sumur di wilayah Kebon Sari kelurahan Kampung  Baru  Kabupaten  Buleleng,  sedangkan  yang  dijadikan  sampel  adalah  sebanyak  9 sumur.  Penetapan  sampel  dilakukan  dengan  teknik Area  Sampling .  Data  tentang  kandungan bakteri coliform tinja dan nilai MPN dianalisis di laboratorium PDAM Kabupaten Buleleng. Data yang  diperoleh  dianalisis  secara  deskriptif.  Hasil  penelitian  menunjukkan (1)  air  sumur  gali  di wilayah Kebon Sari Kelurahan Kampung Baru positif mengandung bakteri Coliform tinja dengan menggunakan  teknik  tabung  ganda,  (2)  nilai  MPN  air  sumur  gali  di  wilayah  Kebon  Sari Kelurahan  Kampung  Baru  sebesar  218  yang  yang  menunjukkan  air  sumur  gali  tersebut beresiko untuk air minum apabila dikonsumsi secara langsung.
Kata kunci: Uji Mikrobiologi, Air Sumur Gali, Teknik Tabung Ganda

## 1.  Pendahuluan
Setiap  mahkluk  hidup  di  dunia  ini  tanpa  terkecuali  sangat  menggantungkan  hidupnya pada air. Khususnya manusia, air selain sebagai konsumsi makan dan minum juga diandalkan untuk  keperluan  pertanian,  industri,  dan  lain-lain.  Namun  seiring  dengan  semakin bertambahnya jumlah penduduk, kebutuhan akan air minum semakin meningkat, dan  kegiatan atau  aktivitas  manusia    akan  bertambah  pula  yang    akan  mengakibatkan  meningkatnya pencemaran.  Ternyata  kebutuhan  akan  air  untuk  keperluan  sehari-hari  berbeda  untuk  tiap tempat, tingkatan kehidupan atau tiap bangsa dan negara.
Dalam memenuhi kebutuhan akan air, khususnya air minum, sebagian  besar manusia masih    mengambil  dari  sumber-sumber  air  yang  ada  didekatnya,  seperti  halnya  air  sumur,  di samping  sumber  air  lainnya  seperti  kolam,  sungai,  mata  air,  air  hujan  dan  tidak  kalah pentingnya air yang bersumber dari PDAM.
Sumur  gali  merupakan  salah  satu  alternatif  dalam  memenuhi  kebutuhan  akan  air minum  dan  pemanfaatannya  masih  banyak  ditemukan,  baik  di  daerah  perkotaan  ataupun  di pedesaan.  Tetapi  sebagian  besar  penduduk  belum  mengindahkan  kualitas  dari  air  sumur  gali yang  dimanfaatkan  baik  dilihat  dari  parameter  fisik,  kimia,  dan  mikrobiologinya.  Selain  itu kedalaman  dari  sumur  gali  yang  dibuat  relatif  tidak  terlalu  dalam,  yaitu  2  -  15  m.  Dengan demikian  kemungkinan  air  tercemari  oleh  pengotor,  kuman  penyakit,  atau  bahan-bahan beracun  sangat  berpeluang  besar.  Pencemar-pencemar  ini  dapat  bersumber  dari  limbah domestik  seperti  limbah  rumah  tangga,  perkampungan,  kota,  pasar,  jalan  dan  sebagainya, ataupun  yang  bersumber  dari  non  domestik  seperti  limbah  pabrik,  industri,  pertanian, peternakan,  perikanan  serta  sumber-sumber  lainnya,  sehingga  perlu  memperhatikan persyaratan sanitasi.
Di  daerah  perkotaan,  persyaratan  sanitasi  tersebut  belum  dapat  terlaksana, dikarenakan  daerah  pemukiman  yang  relatif  sempit    akibat  keterbatasan  daerah  pemukiman yang  tersedia.  Pembuatan  sumur  gali  dilakukan  tanpa  memperhatikan  syarat  konstruksi  dan syarat  lokasi,  seperti  halnya  sumur-sumur  yang  terdapat  di  wilayah  Kebon  Sari  Kelurahan Kampung Baru, kecamatan Buleleng Kabupaten Buleleng.
Dari  hasil  observasi  yang  dilakukan  peneliti,  sebagian  besar  penduduk  telah menggunakan  air  PDAM  sebagai  sumber  air  minum,  namun  ada  beberapa  penduduk  yang masih menggunakan sumur gali sebagai sumber air minum. Sumur sumur yang dibuat tersebut berdekatan  dengan  sumber  pencemar  seperti  comberan,  resapan  kakus.  Hal  itu  dapat menyebabkan air sumur mengandung bakteri pantogen seperti bakteri Coliform tinja.
Bakteri  Coliform  tinja  berasal  dari  kotoran  manusia  ataupun  hewan  berdarah  panas, yang  merupakan  salah  satu  indikator  tercemarnya  air  selain  indikator  fisik  dan  kimia. Terdapatnya  bakteri Coliform tinja pada air, akan dapat menyebabkan berbagai  penyakit  yang membahayakan diantaranya adalah typhus, para thypus, disentri dan cholera.
Dalam penelitian  ini terdapatnya bakteri Coliform tinja  di dalam air sebagai pencemar dapat  diketahui  keberadaannya,  dengan  menggunakan  teknik  tabung  ganda.  Sedangkan penentuan  tingkat  resiko  yang  ditimbulkan  dapat  diketahui  dari  nilai  MPN  ( Most  Probable Number ).
Berdasarkan  keputusan  Menteri  Kesehatan  RI  Nomor  907/MENKES/VII/2002  tentang syarat-syarat  dan  pengawasan  kualitas  air  minum,  menyatakan  bahwa  kandungan  Coliform total dan Coliform tinja dalam air adalah 0. Dengan demikian adanya bakteri Coliform tinja pada air sumur gali yang manfaatkan sebagai sumber air minum penting untuk diteliti.
Berdasarkan  uraian  latar  belakang  masalah  di  atas  dapat  dirumuskan  permasalahan sebagai  berikut  :  (1)  apakah  air  sumur  gali  di  wilayah  Kebon  Sari  Kelurahan  Kampung  Baru mengandung bakteri Coliform tinja, (2) berapakah nilai MPN ( Most Probable Number )  dari air sumur gali di wilayah Kebon Sari Kelurahan Kampung Baru.

## 2. Metode
Penelitian  ini  adalah  penelitian  deskriptif,  yang  bertujuan  untuk  mengetahui  ada tidaknya  bakteri  Coliform  tinja  pada  air  sumur  gali  dan  menentukan  nilai  MPNnya  ( Most Probable  Number ).  Populasi  dalam  penelitian  ini  adalah  air  sumur  gali  di  wilayah  Kebon  Sari Kelurahan  Kampung Baru  Singaraja, sedangkan sampel  dalam penelitian  adalah beberapa air sumur  gali  yang  diambil  dengan  teknik Area  Sampling. Sampel  air  sumur  gali  yang  diambil sebanyak 9 titik, dimana  5 titik diambil di wilayah Kebon Sari Atas  dengan jalan 4 titik diambil disetiap ujung dan 1 titik  di tengah, sedangkan 4 titik berikutnya diambil di wilayah Kebon Sari Bawah  dengan  jalan  3  titik  diambil  di  setiap  ujung  dan  1  titik  di  tengah.  Untuk  dapat menganalisis  sampel  maka  diperlukan  persiapan.  Persiapan  ini  meliputi  persiapan    alat  yang berupa  pipet  ukur  10  ml,  gelas  kimia  250  ml,pipet  ukur  1  ml,  tabung  durham,  pipet  ukur  5  ml, batang  pengaduk  terbuat  dari  gelas,  neraca  ohaus,  botol  uji  250  ml,  tabung  reaksi,  lampu spritus,  otoklaf,  oven,  inkubator,  kapas.sedangkan  untuk  persiapan  bahannya  berupa  medium lactose  broth,  medium  brilliant-green  bile  lactose  broth,  aquades.  Air  sumur  yang  dijadikan sampel dimasukkan ke dalam media lactose broth  yang dilakukan pada tahap pendugaan dan sampel  yang  positif  diduga  mengandung  bakteri  coliform  tinja  yang  ditandai  dengan  adanya gelembung pada tabung durham di masukkan ke dalam media brilliant-green bile lactose broth pada  tahap  penegasan  untuk  mengetahui  positif  atau  tidak  mengandung  bakteri  coliform  tinja dan  menentukan  nilai  MPN  ( Most  Probable  Number ).  Dari  analisis  sampel  diperoleh  data tentang  positif  tidaknya  bakteri  coliform  tinja  di  dalam  air  sumur  gali    dan  nilai  MPNnya,  yang selanjutnya data ini dianalisis secara deskriptif.
Tahap  Persiapan  dalam  penelitian  ini  meliputi:  a)  Pembuatan  Larutan  Media  Lactose Broth  Reagen Lactose  Broth ditimbang  sebanyak  3.25  gram  dan  dilarutkan  dengan  aquades sebanyak  250  mL.  Larutan  media  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  yang  telah  diisi  tabung durham  sebanyak 23 tabung. disterilkan media didalam autoklap sampai mencapai suhu 250 o F lalu didinginkan; b) Pembuatan Larutan Briliant-green Bile Lactose Broth, Reagen Briliant-green Bile Lactose Broth ditimbang sebanyak  10 gram dan dilarutkan dengan aquades sebanyak 250 mL.  Larutan  media  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  yang  telah  diisi  tabung  Durham sebanyak  jumlah  tabung  yang  mengandung  gas  dalam  tes  pendugaan.  disterilkan  media  di dalam autoklap sampai mencapai suhu 250 o F lalu didinginkan. Tahap Pengambilan Sampel dalam penelitian ini yaitu: Sampel yang digunakan diambil dari  air  sumur  gali  di  Kelurahan  kampung  baru.  Air  yang  akan  diperiksa  di  ambil  secara representatif,  dengan  menggunakan  botol  sampel  yang  telah  disterilisasi  pada  suhu  180 o C. Botol sampel diberi pemberat dibagian bawah dan bertali  20 m yang diikat pada pertengahan botol. Sebelum botol sampel diturunkan kedalam sumur, mulut botol dipanaskan dengan nyala api untuk menghindari adanya bakteri disekitar leher botol. Botol diturunkan pelan-pelan sampai mulut  botol  masuk  minimum  10  cm  kedalam  air.  Setelah  terisi  penuh,  botol  diangkat  dan  isi
dibuang sampai volume sampel air menjadi 2/3 volume botol. Kemudian leher botol dipanaskan kembali dengan nyala api dan dibungkus.
Tahap Analisis Sampel Pada tahap analisa sampel ini yang dilakukan meliputi 2 tahap yakni, tahap pendugaan dan tahap penegasan. a) Tahap Pendugaan, Tahap pendugaan terdiri dari: Inokulasi Sampel, Media yang telah siap, ditambahkan sampel air uji sebanyak 10 mL  (5 tabung), 1 mL (1 tabung ) dan 0,1 mL (1 tabung). Inokulasi dilakukan selama 24 jam dan 48 jam pada suhu 35  0.5 0 C. diamati gas yang tertangkap di dalam tabung durham setelah 24 dan 48 jam; b) Tahap Penegasan, Tahap penegasan terdiri dari: a) Inokulasi Sampel, Media yang telah siap,  ditambahkan  sampel  yang  menghasilkan  gas  (+)  pada  tahap  pendugaan  dengan menggunakan loop/ose  yang telah  dibakar membara. Inokulasi dilakukan selama 24 jam pada suhu  44,5  0,2 o C.  diamati  gas  yang  tertangkap  di  dalam  tabung  durham  setelah  24  jam  pada suhu  44,5  0,2 o C;  b)  Penentuan  nilai  MPN,  Dihitung  jumlah  tabung  positif  yang  mengandung bakteri Coliform tinja. Kemudian jumlah tabung positif dikomparasikan dengan  tabel  dari nilai MPN.
Terakhir  yaitu  Teknik  Analisa  Data,  Data  yang  didapat  dalam  penelitian  ini  dianalisis secara  deskriptif,  berupa  jumlah  tabung  positif  yang  ditandai  dengan  adanya  gelembung  gas pada tabung, serta nilai MPN air sumur gali yang dikomparasikan dengan tabel dan dicari harga rata-ratanya dengan rumus :
n X Me  
Keterangan : Me  = Rata-rata nilai MPN X   = Nilai MPN n   = Jumlah Sampel( Sugiyono, 1992,47)

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Penelitian ini merupakan penelitian  deskriptif,  yang dilakukan dalam dua tahap. Tahap pertama  merupakan  tahap  pendugaan  yang  digunakan  untuk  menduga  ada  tidaknya  bakteri Coliform  tinja  yang  terdapat  dalam  air    sumur.  Dari  ke-9  sumur  yang  dijadikan  sampel seluruhnya  positif  diduga  mengandung  bakteri  Coliform  tinja,  dengan  jumlah  tabung  setiap sampel adalah 7 tabung.  Adapun hasil tahap pendugaan secara lengkap disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Penentuan Jumlah Tabung Positif pada Tahap Pendugaan
No Sampel Air Sumur Gali di Titik 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Jumlah Tabung Positif 7 7 7 7 7
7 7 7 7
Dalam    penelitian  tahap  kedua  yang  merupakan  tahap  lanjutan  dari  tahap  penelitian pertama  bertujuan  untuk  menegaskan  apakah  air  sumur  gali  memang  benar  mengandung bakteri  Coliform  tinja.  Dari  9  sumur  yang  dijadikan  sampel  semuanya  positif  mengandung bakteri  Coliform  tinja.  Pada  tahap  ini  juga  ditentukan  nilai  MPN (  Most  Probable  Number  ) . Adapun nilai MPN (Most Probable Number) dari ke 9 sumur disasjikan pada tabel 4.2.
Tabel 2. Data Hasil Nilai MPN (Most Probable Number) Bakteri Coliform Tinja
No Sampel 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Nilai MPN 240 240 240 240 174 240 108 240 240 Ket Be- resiko Be- resiko Be- resiko Be- resiko Be- resiko Be- resiko Be- resiko Be- resiko Be- resiko
Nilai MPN rata-rata adalah:
9 1962 
Me Me = 218
Dari  hasil  analisa  data  yang  dilakukan  pada  tahap  pendugaan  dengan    menggunakan larutan lactosa  broth sebagai  media  didapatkan  seluruh  sampel  positif  diduga  mengandung bakteri  Coliform  tinja.  Pada  tahap  pendugaan  ini  adanya  tabung  positif  belum  menyatakan bahwa  air  sumur  gali  di  wilayah  Kebon  Sari  Kelurahan  Kampung  Baru  dinyatakan  positif mengandung bakteri Coliform tinja. Karena pada tahap ini tidak hanya bakteri Coliform tinja saja yang  dapat  mefermentasi lactosa  broth selama  proses  inokulasi  tersebut  melainkan  ada beberapa jenis bakteri yang dapat memfermentasi media, berupa bakteri golongan coliform lain di  luar  dari  tinja  binatang  berdarah  panas,  yakni  dari  tumbuh-tumbuhan  dan  dari  tanah  yang juga  dapat  memfermentasi lactose  broth pada  suhu  35 o C  yang  ditunjukkan  juga  dengan terbentuknya gelembung gas.
Pada  tahap  penegasan  yang  menggunakan  medium briliant-green  bile  lactose  broth dalam meninokulasi sampel bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya bakteri Coliform tinja. Hal ini  dikarenakan  medium  yang  digunakan  tersebut  hanya  dapat  difermentasi  oleh  bakteri Coliform  tinja  pada  suhu  44,5 o C,  dan  juga  disebabkan  adanya  senyawa  brilliant-green  yang berguna untuk menghambat pertumbuhan  bakteri gram positif dan menggiatkan pertumbuhan bakteri  golongan  colon.  Dari  hasil  analisa  data  didapatkan  seluruh  sampel  air  sumur  gali  di wilayah Kebon Sari Kelurahan Kampung Baru positif mengandung bakteri Coliform tinja.
Adanya  bakteri  Coliform  tinja  pada  air  sumur  gali  di  wilayah  Kebon  Sari  Kelurahan Kampung  Baru  mengindikasikan  bahwa  air  sumur  gali  tersebut  tercemari  dan  tidak  layak digunakan  sebagai  air  minum  sesuai  dengan  Keputusan  Menteri  Kesehatan  Nomor 907/MENKES/VII  /2002.  Sehingga  di  dalam  pemanfaatan  air  sumur  gali  sebagai  air  minum perlu  melakukan  perebusan  terlebih  dahulu  ataupun  dengan  jalan  menambahkan  desinfektan ke dalam air untuk mendesinfeksi bakteri yang ada di dalam air terutama bakteri Coliform tinja.
Pencemaran bakteri Coliform tinja disebabkan sumur gali di wilayah Kebon Sari dibuat berdekatan dengan tempat tinggal penduduk, sehingga secara tidak langsung  jarak pencemar ke sumur akan semakin dekat. Pencemar dalam hal ini bakteri Coliform tinja yang dimaksudkan berasal  dari  tukad  Buleleng  yang  mengalir  di  dekat  perumahan  penduduk,  serta  adanya septictank  yang  berdekatan  dengan  sumur  gali  penduduk  dan  adanya  pembuatan  sumur  gali yang  tidak  memenuhi  syarat  lokasi  yaitu  jarak  sumur  ke  pencemar  kurang  dari  10  meter. Sehingga  pencemar  tersebut  dapat  mengalami  perembesan  menuju  ke  sumur  gali    dan  akan menyebabkan  air  sumur  gali  mengandung  atau  tercemari  oleh  bakteri  Coliform  tinja  yang berasal dari pencemar tersebut.
Dilihat  dari  nilai  MPN  ( Most  Probable  Number )  yang  menunjukkan  angka  perkiraan terdekat bakteri Coliform tinja yang terdapat di dalam air sumur gali, serta menunjukkan bahwa air  sumur  tersebut  beresiko  bagi  kesehatan(  Anonim,60,2002).  Dari  hasil  analisa  data didapatkan nilai MPN pada air sumur gali di wilayah Kebon Sari rata-rata sebesar 218. Nilai ini menunjukkan  status  kontaminasi  bakteriologi  beresiko  untuk  air  bersih  dan  beresiko  untuk  air minum( Keputusan Menteri Kesehatan No. 907 Tahun 2002 ).

## 4.  Simpulan dan Saran
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa: 1) Air sumur gali di wilayah Kebon Sari Kelurahan Kampung Baru positif mengandung bakteri Coliform tinja, 2) Nilai MPN air sumur gali di  wilayah  Kebon  Sari  Kelurahan  Kampung  Baru  sebesar  218  yang  menunjukkan  status kontaminasi bakteriologi beresiko apabila dikonsumsi secara langsung.
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan saran bagi: a) Bagi Masyarakat, Agar masyarakat  di  wilayah  Kebon  Sari,  dalam  memanfaatkan  air  sumur  gali  sebagai  air  minum, perlu melakukan perebusan air terlebih dahulu untuk membunuh bakteri yang terdapat di dalam air,  ataupun  dengan  menambahkan  desinfektan  seperti  kaporit,  Agar  di  dalam  pembuatan sumur  gali  masyarakat  perlu  memperhatikan  syarat  lokasi  dan  syarat  konstruksi;  b)  Bagi Pemerintah,  Agar  pemerintah,  dalam  hal  ini  dinas  kesehatan  Kab.  Buleleng,  untuk  dapat memberikan  penyuluhan  kepada  masyarkat  tentang  bahaya  yang  ditimbulkan  oleh  adanya bakteri  colifom  tinja  dan  cara  pengolahan  air  unutuk  mendapatkan  air  yang  sesuai  dengan standar  PERMENKES  No.907/MENKES/VII/2002,  dalam  rangka  meningkatakan  derajat kesehatan masyakat.

## Daftar Pustaka
Alaert, G. dan Sri Sumestri Santika. 1984. Metode Penelitian Air . Surabaya : Usaha Nasional
Kusnadi,2003. Common TextBook Mikrobiologi. Universitas Pendidikan Indonesia : Bandung
Schlegel,  Hans  G,  1994.  Mikrobiologi  Umum.  Terjemahan  Tedjo  Baskoro  :  Allgemeine Mikrobiologie. Gajah Mada Universty Press : Yogyakarta
Slamet Ryadi, 1984. Pencemaran Air. Karya Anda : Surabaya
Sudiana, Manipan Siregar dan Lanang Wiratrma, I Gusti, 2002. Bahan Ajar Kimia
Analisis Air, Singaraja, Jurdik Kimia IKIP Negeri Singaraja
Suriawiria, U., 1996. Air Dalam Kehidupan Dan Lingkungan Yang Sehat. Alumni : Bandung
Sutrisno, Totok, 2002. Teknologi Penyediaan Air Bersih. Rineka Cipta : Jakarta