## PENGARUH EKSTRAK ETANOL BUAH  PINANG YAKI (Areca vestiaria) TERHADAP GAMBARAN MAKROSKOPIS ORGAN  HATI
PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR

## WISTAR (Rattus norvegicus)
Jessica Regina Liwandouw 1) , Herny Simbala 1) , Widdhi Bodhi 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
The  crownshaft  plant  ( Areca  vestiaria )  is  used  by  the  community  as  a  traditional  medicine ingredient.  Crownshaft  palm  nuts  appears  to  be  a  multi-function  plant.Where  the  people  of  North Sulawesi  usually  use  this  plant  to  cure  various  diseases  such  as  diabetes  and  diarrhea,  also  as  a contraceptive,  empirically.Clinically  the  use  of  traditional  medicine  is  not  recognized,  if  not scientifically  proven  it’s    efficacy  and  safety.The  aim  of  this  research  is  to  know  the  effect  of crownshaft palm nut ( Areca vestiaria ) extracts against macroscopic description of liver organ in white male  wistar  rats  ( Rattus  norvegicus ).This  study  was  conducted  using  the  animal  experiments  of twelve  male  white  rats  wistar  strain.The  extraction  was  done  by  maceration  using  96%  of ethanol.Treatment was conducted for 40 days and after that the surgery and macroscopic observation was  done.The  results  showed  that  the  color  consistency  and  the  surface  of  the  liver  organ  in  all treatments appeared normal. There is no difference in all treatments of the weight of rat body and the liver organ after using the statistic test of One Way ANOVA. It can be concluded that the crownshaft palm nuts does not affect the liver organ of male rats wistar ( Rattus norvegicus ).
Keywords: Crownshaft  palm  (Areca  vestiaria),  macroscopic  liver,  white  rat  (Rattus norvegicus)

## ABSTRAK
Tumbuhan  pinang  yaki  ( Areca  vestiaria) digunakan  oleh  masyarakat  sebagai  bahan  obat tradisional.  Pinang  yaki  ternyata  merupakan  tanaman  multi  fungsi.  Dimana  masyarakat  Sulawesi Utara  biasanya  menggunakan  secara  empiris  tanaman  ini  untuk  menyembuhkan  berbagai  macam penyakit  seperti  diabetes  dan  diare,  juga  suatu  obat  kontrasepsi.  Secara  klinik  penggunaan  obat tradisional tidak diakui, bila belum terbukti secara ilmiah khasiat maupun keamanannya. Penelitian ini dilakukan  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  ekstrak  etanol  buah  pinang  yaki  ( Areca  vestiria ) terhadap gambaran makroskopis organ hati pada tikus putih jantan galur wistar ( Rattus norvegicus ). Penelitian ini dilakukan menggunakan hewan percobaan tikus putih jantan galur wistar berjumlah 12 ekor.  Ekstraksi  dilakukan  dengan  cara  maserasi  menggunakan  etanol  96%.Perlakuan  dilakukan selama  40  hari  dan  setelah  itu  dilakukan  pembedahan  dan  pengamatan  secara  makroskopis.  Hasil penelitian  menujukkan  bahwa  warna  konsistensi  dan  permukaan  organ  hati  pada  semua  perlakuan terlihat normal. Pada berat badan tikus serta berat organ hati tikus dengan uji statistika menggunakan metode One Way ANOVA pada semua perlakuan tidak terlihat perbedaan. Dapat disimpulkan bahwa buah pinang yaki tidak memberi pengaruh terhadap organ hati tikus putih jantan galur wisar ( Rattus norvegicus ).
Kata Kunci : Pinang yaki (Areca vestiaria), makroskopis hati, tikus putih (Rattus norvegicus)

## PENDAHULUAN
Tumbuhan  pinang  yaki  ( Areca vestiaria) digunakan  oleh  masyarakat sebagai bahan obat tradisional. Pinang yaki ternyata merupakan tanaman multi fungsi. Dimana  masyarakat  Sulawesi  Utara biasanya  menggunakan  secara  empiris tanaman ini untuk menyembuhkan berbagai  macam  penyakit  seperti  diabetes dan diare, juga suatu obat kontrasepsi. Dan hasil  analisis  fitokimia  menunjukkan bahwa ekstrak buah pinang yaki mengandung  senyawa    tanin,  flavonoid, triterpenoid    dimana  senyawa  senyawa tersebut berpotensi sebagai agen pendamping kemoterapi (Simbala 2007).
Hewan coba merupakan hewan yang dikembang  biakkan  untuk  digunakan sebagai  hewan  uji  coba.  Tikus  sering digunakan pada berbagai macam penelitian medis  selama  bertahun-tahun.  Hal  ini dikarenakan  tikus  memiliki  karakteristik genetik  yang  unik,  mudah  berkembang biak, murah serta mudah untuk mendapatkannya. Tikus merupakan hewan yang  melakukan  aktivitasnya  pada  malam hari  ( nocturnal ).  Tikus  Wistar  saat  ini menjadi salah satu yang strain tikus paling populer  yang  digunakan  untuk  penelitian laboratorium.  Hal  ini  ditandai  oleh  kepala lebar,  telinga  panjang,  dan  memiliki panjang  ekor  yang  selalu  kurang  dari panjang  tubuhnya.  Galur  tikus  Sprague dawley  dan  Long-Evans  dikembangkan dari Tikus galur  wista r . Tikus wistar lebih aktif  (agresif)  daripada  jenis  lain  seperti tikus Sprague dawley (Sirois, 2005).
Secara struktural dan fungsional, hati merupakan  organ  terkompleks  kedua setelah  otak  dan  merupakan  kompartemen ekstraseluler utama pada vertebrata (Malarkey et al ., 2005). Hati memiliki tiga fungsi utama yaitu penyimpanan, metabolisme,  dan  biosintesis.  Hati  juga
memiliki peranan dalam proses penyerapan  makromolekul  seperti  asam amino,  karbohidrat,  vitamin,  lipid,  asam empedu  dan  kolesterol.  Selain  itu,  hati merupakan  kompartemen  utama  tempat terjadinya proses metabolisme xenobiotika (Hodgson, 2004; Malarkey et al ., 2005).
Pada  penelitian  ini  dilakukan  uji farmakodinamik  secara  in  vivo  terhadap hewan coba yang bertujuan untuk  melihat pengaruh dari obat tradisional ekstrak buah Pinang  yaki  ( Areca  vestiaria )    terhadap gambaran makroskopis organ jantung pada tikus putih. pengamatan makroskopis yang dimaksud  ialah  pengamatan  organ  yang bisa  dilihat  dengan  mata  telanjang  tanpa bantuan alat pembesar.

## METODOLOGI PENELITIAN Alat dan Bahan
Beaker  gelas,  batang  pengaduk, blender  (Philips),  vorteks,  kertas  saring, ayakan 200 mesh, aluminium foil, vacuum rotary  evaporator  (Bunchi),  timbangan digital  (Adam),  oven  (  Ecocell),  corong pisah  (Pyrex),  gelas  ukur  1000  mL,  botol kecil  (M150),  hot  plate  (Nesco  lab), sonikator  (Janres  Ultra  8060-H),  kulkas pendingin  dan  cawan  petri,  pisau,  gelas erlenmeyer  100  mL,  sikat,  kandang  tikus, wadah  makanan  tikus,  botol  minuman tikus,  kawat  kasa,  dan  dedak  padi,  sonde lambung  metal,  gunting,  sarung  tangan, dan  dispo  (One  med),  tempat  otopsi, jarum,  gunting,  pinset,  pisau  bedah  dan toples.
Bahan    yang  digunakan  ialah  ialah buah  pinang  yaki (Areca  vestiaria) yang sudah masak, etanol 96 % akuades, latutan CMC,  eter,    makanan  (pellet)  ayam  dan tikus  putih  jantan  galur  wistar (Rattus norvegicus).

## PROSEDUR KERJA Pembuatan Simplisia
Tahap  awal  dilakukan  pengumpulan bahan  baku  buah      Pinang  yaki (Areca vestiaria) .  Buah    pinang  yaki (Areca vestiaria) di sortasi basah untuk memisahkan  kotoran  dan  bahan-bahan asing dari buah. Selanjutnya buah  Pinang yaki (Areca  vestiaria) dicuci  dibawah  air yang mengalir, ditiriskan kemudian dirajang  kecil-kecil  dengan  mengunakan pisau, selanjutnya dikeringkan dengan cara diangin-anginkan  selama  7  hari.  Sampel kering  kemudian  dihaluskan  mengunakan blender  dan  diayak  mengunakan  ayakan 200 mesh dan  didapatkan  serbuk  simplisia halus.
Pembuatan  Ekstrak  Buah  Pinang  yaki (Areca vestiaria)
Serbuk  dari  buah  pinang  yaki (Areca  vestiaria) ditimbang  sebanyak  400 gr  kemudian  dimasukkan  didalam  wadah dan dimaserasi dengan pelarut etanol 96% sebanyak  1000  mL  selama  5  hari  dan  di remaserasi  selama  2  hari,  larutan  tersebut disaring menggunakan kain sifon kemudian disaring dengan kertas Whatman No  42  dan  dimasukkan  kedalam  gelas erlenmeyer  untuk  dipisahkan  residu  dari filtrat  (Frengki  et  al.,  2014).  filtrat kemudian diuapkan menggunakan vacuum rotary evaporator pada suhu 40o C sampai diperoleh  ekstrak  etanol  yang  pekat. Ekstrak  etanol  pekat  kemudian  diuapkan didalam  oven  dengan  suhu  40o  C  sampai kental 1 x 24 jam,  ektrak kental dari buah pinang  yaki    (Areca  vestiaria)  di  timbang dan disimpan.
Pembuatan Larutan CMC 1 %
Larutan CMC dibuat dengan melarutkan  1g  CMC  ke  dalam  30  mL aquadest dipanaskan sambil diaduk sampai homogen  kemudian  ditambahkan  dengan
aquadest sampai volume 100ml, kemudian didinginkan.
Pembuatan  Larutan  Ekstrak  Buah Pinang yaki ( Areca vestiaria) Dosis pemakaian ekstrak buah pinang  yaki  ( Areca  vestiaria) dengan factor  konversi  dosis  dari  manusia  (70kg) ke  hewan  uji  (200g)  dengan  dikalikan 0,018  yaitu  7,2mg,  14,4mg  dan  21,6mg.
Ekstrak  buah    pinang  yaki (Areca vestiaria) ditimbang  sesuai  dengan  dosis (0,72g,  1,44g,  dan  2,16g)  disuspensikan dengan  larutan  CMC  0,5%  dalam  labu ukur  100  mL.  Kemudian  disonifikasi hingga homogen.
Perlakuan Penelitian dilakukan perlakuan selama 40 hari, masing- masing konsentrasi  menggunakan  3  hewan  uji.
Ekstrak buah pinang yaki (Areca vestiaria)
diberikan  sesuai  dengan  dosis,  yang diberikan secara oral dengan menggunakan  sonde  lambung  metal  dan dispo    10  ml  dengan  dosis  perhari  1cc sonde lambung dimasukkan melalui mulut sampai  esophagus,  dimasukkan  perlahan- lahan untuk menghindari refluks.

## Pembedahan
Tikus  yang  akan  dibedah  dimatikan dengan  cara    memasukkan  tikus  kedalam toples  yang  sudah  ditetesi  cairan  eter. Kemudian  Setelah  beberapa  saat  tikus  di pindahkan  di  letakkan  diatas  baki  parafin keempat  kaki  tikus  ditusuk  dengan  jarum untuk  mencegah  gerakan-gerakan  yang mengganggu pada saat pembedahan kemudian tikus siap di otopsi pembedahan diawali  dengan  membelah  bagian  perut bawah tikus hingga bagian dada, kemudian organ  diambil  keluar  dari  dalam  tubuh organ yang diambil ialah organ hati.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Gambaran  Makroskopis    Tikus  Putih Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Gambaran  makroskopis  tikus  putih jantan  galur  wiatar  ( Rattus  norvegicus) dapat dilihat pada Tabel 2 dibawah:
Tabel 2. Gambaran makroskopis organ hati
Kelompok      Warna          Konsistensi    Permukaan     Berat          Berat Hewan Uji                                                    Tikus         Organ Kontrol         Merah                Kenyal          Halus         165,333       5,714 kecokelatan A400            Merah                Kenyal          Halus         129,666       4,461 kecokelatan
A800            Merah                Kenyal          Halus         137,666       4,993
kecokelatan
A1200          Merah                Kenyal          Halus         133,333       4,793
kecokelatan Gambaran  makroskopis  tikus  wistar kelompok kontrol
negatif tidak menunjukkan perubahan ataupun kelainan, hati tidak mengalami pengerasan, permukaan  halus  dan  berwarna  merah kecokelatan.  Pada  kelompok  perlakuan
Dosis I, Dosis II, dan Dosis III. Gambaran
makroskopis  hati  tikus  wistar    tidak menunjukkan  perubahan  ataupun  kelainan yang bermakna. Organ hati tidak mengalami  pengerasan,  permukaannya halus  dan  warnanya  terlihat  merah kecoklatan
Gambar 1. Kontrol                                                      Gambar 2. Dosis A400
Gambar 3. Dosis A800                                              Gambar 4. Dosis A1200
Dari hasil pengamatan yang dilakukan  dapat  dilihat  bahwa  dari kelompok perlakuan kontrol negatif, dosis A400,  dosis  A800,  dan  dosis  A1200 gambaran  makroskopis  hati  tikus  wistar menunjukkan  bahwa  hati  terlihat  normal permukaan hati licin dan warnanya terlihat merah  kecokelatan  tidak  menunjukkan perubahan  ataupun  kelainan  apapun. Konsistensi hati masih kenyal pada semua perlakuan dan tidak mengalami pengerasan atau  kerusakkan.  Hal  ini  sesuai  pendapat Robins  dan  Kumar  (1992), yang menyatakan  bahwa  hati  yang  normal memiliki  permukaan  rata  dan  halus  serta berwarna  merah  kecokelatan,  sedangkan hati  yang  abnormal  memiliki  permukaan berbintik-bintik, terdapat kista dan mengalami  perubahan  warna.  Menurut Rita  (2008),  hati  yang  normal  berwarna merah  kecokelatan,  permukaannya  licin dan konsistensinya kenyal.
Menurut  penelitian  yang  dilakukan Kurniawan, et al (2014) Secara makroskopis tidak nampak adanya perbedaan  warna  maupun  morfologi  hati antara kelompok kontrol dengan kelompok perlakuan.  Warna  hati  yang  diamati  baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan
sama-sama  berwarna  merah  kecokelatan atau merah pekat.
Menurut  penelitian  yang  dilakukan oleh  Manatar, et  al (2012)    Hasil pengamatan makroskopik hati pada kelima kelompok  wistar  tidak  menunjukkan adanya perbedaan yang mencolok.
Penelitian  yang  dilakukan  Tappi, et al (2013)  pada  kelompok  tikus  perlakuan yang  diberikan  CCl 4 selama  5  hari kemudian  diberikan  jus  tomat  selama  7 hari  secara  makroskopik  menunjukkan jaringan hati berwarna merah kecokelatan, konsistensi kenyal.
Menurut  penelitian  yang  dilakukan Sulistianto, et  al (2004)  pengamatan terhadap  masing-masing  kelompok  tidak memperlihatkan  perubahan  bentuk  atau morfologi. Perubahan warna dan morfologi  organ  biasanya  disebabkan adanya  perubahan  fisiologis  dan  struktur makroskopis jaringan yang cukup berarti.
Hasil  Penimbangan  Berat  Badan  dan Berat  Organ  Hati  tikus  Putih  Jantan Galur Wistar (Rattus norvegicus)
Data  rata-rata  hasil  penimbangan berat  badan  tikus  wistar  setelah  perlakuan dapat dilihat pada gambar 6.
Gambar 6 . Grafik rata- rata hasil penimbangan berat badan tikus wistar
165,333 129,666 137,666 133,333 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 Kontrol A4 A8 A12
Gambar 7. Grafik berat organ hati tikus wistar semua perlakuan
Dari  hasil  pengamatan  yang dilakukan dapat dilihat bahwa berat badan tikus  pada  perlakuan  kontrol  negatif menujukkan  yang  paling  tinggi  dan  yang kedua  ada  di  perlakuan  dosis  A8,  ketiga A12  dan  yang  keempat  ada  di A4.    Pada berat organ hati tikus sama seperti diagram berat  badan  tikus  dapat  dilihat  bahwa perlakuan  kontrol  yang  paling  tinggi  dan yang  kedua A8,  ketiga A12,  dan  keempat A4.  Menurut  penelitian  yang  dilakukan Kusnadi, et  al Pada  tabel  di  atas  dapat dilihat  bahwa  rerata  berat  hati  mencit setelah  diberikan  ekstrak  daun A. conyzoides L. selama tujuh hari perlakuan tidak  memperlihatkan  perbedaan  yang signifikan  antara  kelompok  perlakuan  dan kelompok  kontrol.  Pemberian  perlakuan dosis ekstrak daun dan akar A. conyzoides L. sebesar 14, 28, 42, 56, 70 mg/kg masih dapat  di  respon  baik  oleh  tubuh  mencit, dimana setelah masuk ke dalam peredaran darah,  yang  selanjutnya  akan  di  bawa  ke hati. Di hati bahan semua zat yang dibawa oleh  darah  akan  disintesis  menjadi molekul-molekul  yang  lebih  sederhana yang  siap  untuk  diedarkan  ke  seluruh tubuh. Pemberian ekstrak daun dan akar A.
conyzoides L tidak memberikan kerja yang berat  buat  hati  sehingga  fungsi  hati  dapat berjalan  normal  dan  tidak  mempengaruhi berat  organ  hati.      Menurut  Elisma  dkk, Rasio  berat  organ  hati  tidak  terjadi perubahan  yang  begitu  nyata  artinya hewan  yang  diberi  variasi  dosis  memilki rasio  berat  organ  hati  yang  sama  dengan kelompok  kontrol  (yang  tidak  diberi dosis).  Sehingga  pemberian  ekstrak  herba sawi  langit  tidak  memiliki  pengaruh ataupun efek toksik pada rasio berat organ hati.
Dalam  tanaman  terdapat  senyawa aktif  sedangkan  pada  obat  terdapat  zat aktif.  Jika  pada  obat  semakin  tinggi  dosis maka  semakin  tinggi  toksisitas  sebaliknya pada tanaman semakin rendah dosis maka semakin tinggi  toksisitas.  Ini  yang terlihat pada  hasil  pengamatan  pada  perlakuan dosis yang paling rendah yaitu A400 yang mengalami  penurunan  dibandingkan  pada perlakuan-perlakuan yang lainnya.
Hasil   penelitian  Simbala  (2007), Uji toksisitas buah pinang yaki menggunakan  Metode  BSLT  (Brine
5,714 4,641 4,993 4,793 0 1 2 3 4 5 6 Kontrol A4 A8 A12
Shrimp  Lethality  Test).  Pada  penelitian tersebut  konsentrasi  ekstrak  pinang  yaki yang  digunakan  dalam  uji  toksisitas  yaitu 400,  600,  800,  dan  1000  ppm  dan  hasil penelitian menunjukkan ekstrak biji pinang yaki  memiliki  potensi  bioaktif,  dalam  hal ini berada pada nilai LC50 sebesar 334.99 ppm,berarti  pada  konsenrasi  tersebut menyebabkan  kematian  50%  hewan  uji Nilai  tersebut  menunjukkan  bahwa  secara farmakologis  bersifat  toksik  terhadap hewan uji. Menurut  Meyer et al. 1982,  Solis et  al. 1983  penelitian National  Centre  Institut  (NCl)  Amerika Serikat, suatu ekstrak atau fraksi dari suatu tanaman  dianggap  mempunyai  potensi bioaktif  terhadap  kematian  hewan  uji  jika dinilai LC50 < 1000 ppm, hanya spektrum keaktifannya  masih  sangat  luas,  semakin kecil  nilai  LC50nya,  maka  ekstrak  tadi akan  semakin  toksik.  Hal  inilah  yang menjadi  dasar  adanya  penurunan  berat badan  paling  rendah  pada  kelompok perlakuan A400.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang didapatkan  bahwa  ekstrak  etanol  buah pinang  yaki (Areca  vestiaria) tidak berpengaruh terhadap gambaran
makroskopis  organ  hati  pada  tikus  putih jantan galur wistar (Rattus norvegicus) dan pada  hasil  penimbangan  rata-rata  berat badan  dan  berat  organ  hati  tikus  di  uji menggunakan  uji One  way ANOVA  Hasil pengujian tersebut menunjukkan tidak ada perbedaan  bermakna  pada  taraf  uji  0,05 antara berat organ kelompok kontrol, dosis A400,  dosis  A800,  dan  dosis  A1200  (p> 0,05).

## SARAN
Disarankan untuk dilakukan penelitian  lebih  lanjut  untuk  mengetahui apakah  ada  pengaruh  ekstrak  etanol  buah pinang  yaki  secara  mikroskopis  terhadap gambaran  organ  hati  agar  pembaca mendapat informasi yang lebih luas.

## DAFTAR PUSTAKA
Hodgson,  E.  (2004). Textbook  of  Modern Toxicology .  3rd  Ed.  United  States ofAmerica: Wiley Interscience. P.3- 6;359-362
Kumar,  Vinay,  cotran,  at  al.  2007. Buku Ajar Patologi Anatomi Edisi 7 vol. 2 . Jakarta : EGC pp 367-378 Kurniawan  I,  dkk.  2014. Histologi  Hati Mencit  (Mus  musculus  L.)  yang diberi  Ekstrak  Daun  Lamtoro (Leucaena  leucocephala). FMIPA Universitas Udayana: Denpasar Kusnadi,  Any  Fitriani,  Hernawati. Uji Toksisitas Ekstrak Tumbuhan Ageratum  conyzoides  L.  Terhadap Pertumbuhan  dan  Fisiologi  Darah Mencit. Universitas  Pendidikan Indonesia: Bandung Malarkey,  D.  E.,  Johnson,  K.,  Ryan, L.,Boorman, G.., and Maronpot, R.
R.  (2005 ).  New  Insight  into Functional Aspect of Liver Morphology.Toxicologic Pathology.
Vol . 33 (1): 27-34 Manatar  Amelia,  dkk.  2012. Gambaran Histologik  Hati  Tikus  Wistar  yang Diberi  Virgin  coconut  oil  dengan Induksi  Parasetamol .  Fakultas
Kedokteran UNSRAT: Manado
Meyer  BN,  Feriggni  JE,  Putnam  LB,
Jacobson DE, Nichols JL, McLaughin.  1982. Brin  Shrim  :  a Convenient  General  Bioassay  for Active  plant  Costituens.Planta Medica . 45:31-34 Simbala, H.E.I. 2007. KeanekaragamanFloristik dan pemanfaatan SebagaiTumbuhan Obat  di  KawasanKonservasi  II Taman NasionalBogani Nani
Wartabone (KabupatenBolaang Mongondow, SulawesiUtara). [Disertasi].  Institut  PertanianBogor : Bogor. Simbala,  H.E.I.  2007. Uji  Toksisitas  dan Uji Preklinik Areca vestiaria/Pinang yaki sebagai antifertilitas.
Sulistianto  Dian,  Dkk.  2004. Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Buah  Mahkota Dewa [Phaleriamacrocarpa (Scheff)Boerl]  terhadap  Struktur Histologis  Hepar  Tikus  Putih (Rattus  norvegicus  L.)  setelah Perlakuan dengan Karbon Tetraklorida  (CCl4)  secara  Oral. FMIPA  Universitas  Sebelas  Maret: Surakarta Tappi Eka, Dkk. 2013. Gambaran Hispatologi  Hati  Tikus  Wistar Yang Diberikan Jus Tomat (Solanum lycopersium) Pasca Kerusakkan  Hati  Wistar    yang Diinduksi Karbon Tetraklorida (ccl 4)