## THE EFFECTIVENESS OF USING TOOTHPASTE CONTAINING ROBUSTA COFFEE BEAN EXTRACT IN INHIBITING THE FORMATION OF DENTAL PLAQUE
Rina Nanda Prasasti*, Desi Sandra Sari**, Peni Puji Astuti**

## ABSTRACT
Background: Periodontal  disease  is  caused  by  the  interaction between pathogenic bacteria and plaque, without the accumulation of plaque, periodontal disease will not appear. Plaque will be visible one to  two  days  if  no  oral  cleaning  steps  are  taken.  The  combination  of antimicrobial  therapy  such  as  antibiotics  and  mouthwash  as  well  as mechanical therapy such as scaling and root plain gives more effective results. However, if done in the long term it will cause resistance. To overcome this, alternative materials are needed that are used to inhibit bacterial growth, one of which is robusta coffee beans. The content of robusta  coffee  bean  extract  contains  phenolic  and  flavonoid compounds that function as antibacterials that work by disrupting the function of the cytoplasmic and cytoplasmic membranes of bacteria. Method: In  this  study,  6  groups  were  used,  namely  KN,  K-,  K+,  KP 25%, KP 50%, and KP 75%. The gingivitis model was made with wire using  ligation  technique  for  3  days,  then  toothpaste  was  applied, brushing  process,  and  disclosing  agent  was  given,  and  the  plaque index calculation was PHP (Personal Hygiene Performance). The data obtained were then analyzed using the Kruskall-Wallis test followed by the Mann-Whitney test.
Result: The  Robusta  coffee  bean  extract  toothpaste  group  at  a concentration  of  75%  experienced  a  significant  reduction  in  plaque compared to the negative control group and the 25% treatment group (p<0.05),  but  there  were  no  significant  differences  or  had  the  same ability  when  compared  to  the  experimental  group.  50%  treatment group, normal control group and positive control group.
Conclusion: The 75% concentration of Robusta coffee bean extract found in toothpaste is proven to be effective in inhibiting the formation of dental plaque.

## PENDAHULUAN
Penyakit periodontal merupakan salah satu penyakit yang paling  banyak diderita dan dikeluhkan  masyarakat  Indonesia  (Nisa  dan Primartha, 2013). Penyakit periodontal merupakan  salah  satu  penyakit  yang  kurang mendapat perhatian namun berdampak besar, menurut data penelitian Kementerian Kesehatan  Republik  Indonesia  tahun  2013. Penyakit  ini  memiliki  prevalensi  yang  sangat tinggi yaitu 96,58 persen (Djohari et al. , 2018).
P.  gingivalis  adalah  salah  satu  bakteri  paling umum yang menyebabkan penyakit
periodontal. P.
gingivalis diketahui
menghasilkan faktor virulensi seperti lipopolisakarida,  yang  dapat  menyebabkan pelepasan IL-1 dan TNF-1 oleh
inang(Kusumawardani et al ., 2010; Pujiastuti et al ., 2012; Fitriyana et al., 2013).
Lipopolisakarida  pada  P.  gingivalis memicu  cedera  jaringan  periodontal  dengan mengaktifkan respon inflamasi dengan menghasilkan sitokin proinflamasi seperti IL-1,
* Faculty of Dentistry, Jember University, Jember, Indonesia
** Periodontology Department of, Faculty of Dentistry, Jember University, Jember, Indonesia
Correspondence: desi_sari.fkg@unej.ac.id
Keywords:
Robusta Coffee; Periodontal; Plak
IL-16, dan IL-8 (How et al ., 2016). Lipopolisakarida adalah  endotoksin  yang ditemukan dalam metabolit P. gingivalis produk toksin  yang  dapat  merusak  jaringan  dan menyebabkan peradangan. Mereka diproduksi oleh bakteri gram negatif dan dilepaskan ketika mereka mati (Fuadiyah et al. , 2017). Dalam sel inang, lipopolisakarida memicu respons metabolik  dan  inflamasi.  Sel  fibroblas  gingiva terlibat dengan lipopolisakarida ini melalui Toll- Like  Receptors  (TLR),  yang  mengaktifkan sinyal  intraseluler  dan  memodulasi  produksi sitokin (Fitzsimmons and Bartold, 2018).
Bakteri plak dapat menyebabkan penyakit periodontal dengan menyerang jaringan  pendukung  gigi,  seperti  gingiva, ligamen  periodontal,  sementum,  dan  tulang alveolar.  Penyakit  periodontal  sebagian  besar disebabkan  oleh  plak  gigi.  Hasil  yang  lebih efektif dicapai ketika terapi antimikroba, seperti antibiotik  dan  obat  kumur,  dikombinasikan dengan terapi mekanis, seperti scaling dan root planing .  Akan  tetapi,  penggunaan  antibiotik seringkali tidak sesuai dengan aturan penggunaan yang dapat menyebabkan terjadinya  resistensi  antibiotik  (Jepsen  dan Jepsen, 2016). Obat kumur sintetis
menyebabkan efek samping seperti pigmentasi dan  fluorosis  bila  digunakan  sebagai  agen antibakteri. (Yuri, 2017). Selain itu, penggunaan  pasta  gigi  yang  mengandung senyawa  seperti  fluoride  sangat  berbahaya bagi  tubuh.  Fluorosis  pada  gigi  merupakan salah satu akibat negatif dari konsumsi bahan kimia  fluor  (Sukanto,  2012).  Untuk  mengatasi hal  tersebut  diperlukan  bahan  pengganti  yaitu biji  kopi  Robusta  yang  merupakan  komponen alami  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai penghambat  pertumbuhan  bakteri  (BPOM, 2015).
Kopi  robusta  merupakan  komoditas unggulan di Jember, khususnya di Kecamatan Silo.  Kafein,  asam  klorogenat,  fenol,  alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, dan trigonelin adalah semua  komponen  kimia  yang  terdapat  dalam biji  kopi  Robusta  yang  membantu  mencegah pembentukan  plak  (Bauer et  al .,  2018; Noviyanti et  al .,  2018).  Flavonoid  memainkan peran penting dalam pengembangan resistensi imunologi,  karena  memiliki  kemampuan  untuk meningkatkan  penghambatan  pertumbuhan bakteri (Indrawati et al ., 2014).
Ekstrak  biji  kopi  mengandung  bahan kimia  fenolik  dan  turunannya,  yang  berfungsi sebagai  antibakteri  dengan  mengubah  fungsi membran sitoplasma, memungkinkan metabolit kunci merembes keluar, menonaktifkan sistem enzim  bakteri.  Flavonoid  dapat  membuat senyawa kompleks dengan protein ekstraseluler,    Polisakarida  ini  mengandung gula amino N-asetilglukosamin dan asetilglukosamin,  keduanya  memiliki  potensi bakterisidal dengan merusak dinding sel bakteri dan membran sitoplasma. Akibatnya tegangan permukaan  dinding  sel  bakteri  menurun, sitoplasma  keluar,  dan  metabolisme  bakteri terganggu (Hanif dan Siddiq, 2009).
Pada dosis 10%, ekstrak biji kopi robusta memiliki  dampak  penghambatan  terhadap perkembangan isolat bakteri plak gigi, menurut penelitian  (Suhayat et  al., 2002).  Studi  lain menemukan bahwa memanfaatkan konsentrasi  50  persen  ekstrak  daun  kopi robusta  kering  beku  dalam  pasta  gigi  dapat menekan  pertumbuhan  bakteri  P.gingivalis. (2017, Pawestri).
Berdasarkan uraian sebelumnya, penulis ingin  mengetahui  efisiensi  biji  kopi  Robusta dalam mencegah pembentukan plak gigi pada gigi tikus pada berbagai dosis.

## METODE PENELITIAN

## A. Alat dan Bahan penelitian
1. Alat Penelitian
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian ini adalah: Handscoon, masker, tabung reaksi, erlenmeyer,  labu  ukur,  kuvet,  selotip  kran, alumunium  foil,  gelas  ukur,  pipet  ukur,  beaker glass,  pengaduk,  vial,  ayakan  60  mesh, oven, blender, interdental brush ukuran 3 mm, dental chair  rat,  kandang  hewan  coba,  kandang perlakuan  hewan  coba,  tempat  dan  minum hewan coba.

## 2. Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  adalah  ekstrak  biji  kopi  robusta (Coffea robusta) , tikus wistar jantan, makanan dan  minuman  tikus  disclosing  agent, wire 0,5mm, oven, alkohol 70%, etanol 96%, CMC- Na  1%,  6%  dan  12%,  aquades  steril, magnesium karbonat, kalsium karbonat, gliserin,  propilen  glikol,  TEA  (trietanolamin), oleum  menthae  piperithae,  calcii  carbonas, gliserin,  ketamin  70%,  buffer  formalin,  dan pasta gigi kopi robusta.

## B.  Prosedur Penelitian

## 1. Etical Clearance
Penelitian  ini  telah  diajukan  dan mendapat persetujuan dari Komisi Etik Penelitian  Kesehatan,  Fakultas  Kedokteran Gigi Universitas
Jember,
No.1120/UN25.8/KEPK/DL/2021.

## 2. Sterilisasi Alat
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian yang  terbuat  dari  bahan  plastik  dicuci  bersih kemudia  dikeringkan,  selanjutnya  disterilkan dengan menggunakan  alkohol 70%  dan untuk alat  yang  terbuat  dari  kaca  terlebih  dahulu
sebelum  digunakan  harus  dibersihkan  dan disterilkan  menggunakan  autoclave  dengan suhu  160oC  selama  1  jam.  Setelah  semua proses  sterilisasi  selesai  maka  alat  tersebut telah siap untuk digunakan.

## 3. Persiapan Hewan Coba
Penelitian
yang dilakukan menggunakan  hewan  coba  tikus  dengan kriteria  inklusi  yang  telah  ditentukan.  Sebelum perlakuan,  tikus  diadaptasikan  selama  7  hari dalam kandang tertutup kawat kassa dan diberi makanan  standar  serta  diberi  minum.  Hal  ini bertujuan  untuk  memperoleh  keseragaman sebelum dilakukan penelitian untuk mengontrol hewan coba.
4. Pembuatan  Ekstrak  Biji  Kopi  Robusta menggunakan Metode Liquid Chromatography –Mass  Spectrometry (LC– MS) Biji
kopi robusta dilakukan penggilingan  dengan  menggunakan  blender, kemudian  diambil  sebanyak  50  gram  di bungkus  kertas  saring,  di  ikat  dengan  tali  dan dimasukkan  ke  dalam  alat  sokletari.  Pelarut yang digunakan sebanyak 250 mL dimasukkan ke dalam labu alas bulat. Kemudian pelarut n- heksana,  dietil  eter  dan  etanol  untuk  proses sokletasi. Sokletasi digunakan pada temperatur masing-masing  titik  didih  pelarut,  dengan variasi  waktu  1,5;  2  dan  2,5  jam  (5-10 siklus/jam). Ekstaksi yang diperoleh dipekatkan dengan menggunakan temperatur 60oC dengan  kecepatan  90  rpm.  Semua  proses diekstraksi  dilakukan  triplo  yaitu  dengan  cara pengambilan  suatu  mikroorganisme  pada sampel  atau  bahan  uji  dengan  menggunakan perbandingan 3 contoh sampel (Ali dkk., 2015).
Senyawa  etanol  diinjeksi  sebanyak 5µL  pada  LC-MS  melalui  kolom  UPLC  C-18 (1,8  µm  2,1  x  50  mm).  Laju  alir  0,2  mL/min menggunakan  2  tingkat  energi,  yaitu  energi rendah  4  volt  dan  energi  tinggi  70  volt.  Fasa gerak yang digunakan adalah gradien asetonitril  :  akuades  dengan  perbandingan 5:9,5  hingga  95:5.  Hasil  pengukuran  dapat diinterpretasikan menggunakan aplikasi Maslynk.

## 5. Pembuatan  Pasta  Gigi  Ekstrak  Biji  Kopi Robusta
Proses  pembuatan  pasta  gigi  biji  kopi robusta dilakukan di laboratorium Farmasetika Fakultas  Farmasi  Universitas  Jember.  Dalam penelitian  ini  menggunakan  bahan  ekstrak  biji kopi  robusta  dengan  konsentrasi  25%,  50% dan  75%  dan  plasebo  (bahan  pasta  plasebo terdiri  dari  magnesium  karbonat,  kalsium karbonat, gliserin, propilen glikol, TEA (Trietanolamin),  akuades  steril  dan  Oleuum Menthae Piperithae.
Tabel 1. Formulasi Pasta Gigi Kopi Robusta Bahan Jumlah Magnesium Karbonat 26% Kalsium Karbonat 29% Gliserin 6% Propilen Glikol 8% Tea (Trietanolamin) 4% Akuades Steril 25% Oleum Menthae Piperithae 2% (Noviyanti, 2018)
Cara  membuat  pasta  plasebo  adalah  sebagai berikut:
a. Mencampurkan  seluruh  bahan  plasebo
pada mortar dan pastle.
b. Mengaduk seluruh bahan secara homogen sampai berbentuk pasta.
c. Menempatkan    seluruh  pasta  plasebo dengan besat 100 gr ke dalam wadah dan tutup dengan rapat agar tidak kering.
Cara  membuat  pasta  gigi  yang  mengandung ekstrak biji kopi 25%, 50%, 75%
a. Menimbang  ekstrak  biji  kopi  robusta sampai  mendapatkan  berat  25  gram,  50 gram, 75 gram.
b. Mencampurkan  seluruh  bahan  sehingga mencapai berat keseluruhan sebesar 100 gram.  Membuat  pasta  biji  kopi  robusta 25%,
50%, 75% dengan cara mencampurkan  75  gram  bahan  plasebo dan 25 gram ekstrak biji kopi robusta pada mortar dan pastle.
c. Mengaduk seluruh bahan secara homogen sampai pasta terbentuk.
d. Menempatkan pasta biji kopi robusta 25%, 50%,  75%  ke  dalam  wadah  dan  tutup dengan rapat agar tidak kering

## 6. Pembuatan Model Plak gigi tikus dengan Teknik Ligasi
Pada tahap pertama melakukan anestesi  dibagian  kaki  tikus  dengan  ketamin sebanyak  1  ml  dan  melakukan  fiksasi  tikus pada mouse  dental  chair .  Tahap  selanjutnya melakukan  pembuatan wire pada  mesial  M1 dengan menggunakan artery clamp . Jepit wire dengan menggunakan pinset dan memastikan wire tersebut  sudah  mencengkram  dengan sempurna pada servikal gigi M1 kiri bawah agar tidak lepas saat terkena beban.
Gambar 2. Tahapan Pembuatan Model Gingivitis Menggunakan Teknik Ligasi pada Gigi M1 Kiri Bawah

## 7. Penyikatan Plak Gigi
Setelah diligasi selama 3 hari pada gigi tikus langkah selanjutnya dilakukan penyikatan dengan waktu sehari satu kali pagi pukul 09.00. Proses penyikatan hari keempat menggunakan interdental  brush  dengan  teknik  roll  yaitu dengan cara ujung bulu sikat diletakkan dengan posisi mengarah ke akar gigi dan arahkan bulu sikat pada  margin  gingiva,  sehingga  sebagian bulu  sikat  menekan  gusi.  Penggunaan  pasta gigi ekstrak kopi robusta diaplikasikan seujung sonde. Selanjutnya ujung bulu sikat digerakkan perlahan-lahan  sehingga  kepala  sikat  gigi bergerak  membulat  melalui  permukaan  gigi. Permukaan atas mahkota juga disikat. Gerakan ini  diulangi  8-  12  kali  pada  setiap  daerah dengan sistematis.

## 8. Pengamatan  Plak  Setelah  di  Lakukan

## Penyikatan Gigi
Pengamatan  dilakukan  pada  hari kelima  oleh  1  orang,  sebelum  pengamatan tikus dieuthanasia terlebih dahulu dengan eter kemudian dilakukan pengamatan pada gigi M1 kiri  bawah  diberikan  disclosing  agent.  Hal  ini bertujuan  mengetahui  ada  atau  tidak  adanya plak.  Selelah  dilakukan  pengecekkan  dengan menggunakan  disclosing  agent,  selanjutnya
gigi M1 kiri bawah di ukur dengan rumus indeks PHP.
Pemeriksaan  dilakukan  pada  permukaan mahkota gigi bagian fasial atau lingual dengan membagi tiap permukaan mahkota gigi menjadi lima  subdivisi,  yaitu  distal  (D);  1/3  tengah gingival  (G);  mesial  (M);  1/3  tengah  dari  area tengah  (C);  1/3  insisal  atau  oklusal  dari  area tengah  (I/O).  Apabila  dalam  gigi  tersebut terlihat ada plak di salah satu area, maka diberi skor 1 dan jika tidak ada plak, maka diberi skor 0.  Pemeriksaan  dilakukan  dengan  sistematis sebagai berikut: (a) Permukaan labial gigi insisif pertama  kiri  bawah;  (b)  Permukaan  labial  gigi insisif pertama kiri bawah; (c) Permukaan bukal gigi  molar  pertama  kiri  bawah;  (d)  Permukaan bukal  gigi  molar  pertama  kiri  bawah;  (e) Permukaan  lingual  gigi  molar  pertama  kiri bawah;  (f)  Permukaan  lingual  gigi  molar pertama kiri bawah. Tetapi dalam penelitian ini hanya menggunakan gigi M1 kiri bawah. Hasil penilaian  plak  yaitu  dengan  menjumlahkan setiap  skor  plak  pada  setiap  permukaan  gigi kemudian dibagi dengan skor jumlah gigi yang diperiksa. Adapun dengan rumus berikut:
Keterangan: Sangat baik = 0 Baik =  0,1-1,7 Sedang = 1,8-3,4 Buruk = 3,5-5
Gambar 2. Gigi Molar M = mesial; D = distal; I = incisal; O = oclusal; C = central; G = gingival (Carissa, C., J.Runkat, dan Y. Herdiyati. 2011).

## HASIL PENELTIAN

## A. Model Tikus Gingivitis
Hewan  coba  tikus  dibuat  mengalami pertumbuhan  plak  periodontal  dengan  cara ligasi  menggunakan wire selama  3  hari  yang akan didekaputasi pada  hari ke-5. Pernyataan tersebut dapat dilihat pada gambar 4.1 dibawah ini.

## A. B.
Gambar 3. Model Tikus Gingivalis (A) Sebelum  dibuat  ligasi  pada  gigi  M1  kiri bawah dan tidak adanya partumbuhan plak; (B) Setelah  dibuat  ligasi  dan  diberikan  disclosing agent  serta  muncul  plak  pada  gigi  M1  kiri bawah

## B. Hasil Perhitungan Nilai Plak
Setiap  kelompok  penelitian  memiliki nilai  plak  yang  lebih  rendah,  menurut  temuan tersebut.  Tabel  4.1  menunjukkan  rata-rata distribusi  plak  pada  kelompok  kontrol  normal, kontrol  positif,  kontrol  negatif,  dan  pasta  gigi ekstrak biji kopi robusta pada konsentrasi 25 %, 50 %, dan 75 %.
Tabel 2. Rata-rata Nilai Plak pada Gigi M1 Kiri
Bawah No Kelompok N X̅(rata-rata) ± Standart Deviasi (mm) 1 KN 5 2,4±0,55 2 K- 5 3.4±0.55 3 K+ 5 1.4±0.55 4 KP 25% 5 1.8±0.45 5 KP 50% 5 1±0.71 6 KP 75% 5 0.2±0.45
Kelompok kontrol normal (KN)
menunjukkan nilai plak dengan SD rata-rata 2,4 0,55,  seperti  yang  ditunjukkan  pada  tabel  4.1. Nilai  plak  pada  kelompok  kontrol  negatif  (K-) memiliki  rerata  SD  sebesar  3.40.55. Nilai  plak pada  kelompok  kontrol  positif  (K+)  memiliki rerata  SD  sebesar  1.40.55.  Kadar  plak  pada kelompok  perlakuan  25%  (KP  25%  )  memiliki SD  rata-rata  1,8  0,45.  Kadar  plak  pada kelompok perlakuan 50 persen (KP 50 persen) rata-rata  10,7  SD.  Kadar  plak  pada  kelompok perlakuan 75 persen (KP 75 persen) memiliki SD rata-rata 0,20,45.
Gambar 4.2  menunjukkan  grafik  nilai plak berdasarkan data pengujian
Gambar  3.    Histogram  Nilai  Pengukuran  Plak Pada Gigi M1 kiri bawah Tikus
Indeks plak PHP (Personal Cleanliness Performance)  digunakan  untuk  mengukur derajat  kebersihan  gigi  dan  mulut.  Nilai  0 menunjukkan  kriteria  sangat baik,  nilai  0,1-1,7 menunjukkan nilai baik, nilai 1,8-3,4 menunjukkan  nilai  sedang,  dan  nilai  3,5-5 menunjukkan  nilai  buruk  (Ekoningtyas et  al ., 2016 ).
Gambar  3.  menunjukkan  bahwa  nilai pengukuran  plak  pada  gigi  M1  kiri  bawah adalah 3,4 plak pada kelompok kontrol negatif (K-),  3,4  plak  pada  kelompok  kontrol  normal (KN),  3,4  plak  pada  ekstrak  biji  kopi  robusta dengan  perlakuan  25%  kelompok  (KP  25 persen),  dan  3,4  plak  pada  ekstrak  biji  kopi robusta dengan kelompok  perlakuan 25% (KP 25  persen),Kelompok  kontrol  positif  mendapat skor 1,4 plak, ekstrak biji kopi robusta dengan kelompok perlakuan 50% (KP 50%) mendapat skor  1  plak,  dan  ekstrak  biji  kopi  robusta dengan  kelompok  perlakuan  75%  (KP  75%) mendapat skor plakat 0,2. K+, KP 50%, dan KP 75%  kali  memiliki  estimasi  nilai  plak  baik, sedangkan KN, K-, dan 25% memiliki estimasi nilai plak sedang.

## C. Hasil Statistik
Tabel 3. Hasil Uji Kruskal Wallis
D. Kruskal Wallis E. sig F. 23.483 G. 0,000* H. Nilai signifikansi (p<0,05) I.
Ket: tanda * menunjukkan nilai yang signifikan Tabel  3  menunjukkan  hasil  uji  Kruskal Wallis.  diperoleh  nilai  p  sebesar  0,05  yang sama dengan 0,000 yang menunjukkan bahwa rata-rata nilai plak pada M1 kiri bawah masing- masing kelompok berbeda secara signifikan. Uji Mann  Whitney  juga  digunakan  untuk  melihat apakah ada perbedaan rata-rata nilai plak antar kelompok.  Uji  Mann  Whitney menghasilkan nilai  p  value  0,05  yang  menunjukkan  adanya perbedaan  yang  signifikan  antar  kelompok berdasarkan  hasil penelitian  yaitu antara ekstrak  biji  kopi  Robusta  pada  kelompok perlakuan  75  persen  (KP  75  persen  )  dan ekstrak  biji  kopi  Robusta  pada  kelompok perlakuan  50  persen.  (KP  50%),  ekstrak  biji kopi  robusta  25%  pada  kelompok  perlakuan (KP  25%),  kontrol  positif  (K+),  kontrol  negatif (K), dan kontrol normal (K+) (KN). Hasil analisis data menggunakan Mann Whitney dapat dilihat pada tabel 4. di bawah ini.
Ket: tanda * menunjukkan nilai yang signifikan
Berdasarkan tabel 4.3, terdapat perbedaan  yang  signifikan  antara  kelompok normal (KN) dan kelompok kontrol negatif (K-) sebesar  0,031,  kelompok  kontrol  positif  (K+) sebesar  0,031,  kelompok  perilaku  (KP  50%  )
0 1 2 3 4 Nilai P lak Kelompok Penelitihan
sebesar  0,016,  dan  kelompok  perlakuan  (KP 50% ) 75 % ) sebesar 0,006. Kontrol positif (K+) berbeda nyata 0,007, kelompok perlakuan (KP 25%  )  berbeda  nyata  0,006,  kelompok perlakuan (KP 50%) berbeda nyata 0,007, dan kelompok  perlakuan  (KP  75  %  )  memiliki perbedaan  yang  signifikan  sebesar  0,006. Kelompok  kontrol  normal  (KN)  berbeda  nyata sebesar  0,031,  kelompok  kontrol  negatif  (K-) berbeda nyata 0,007, dan kelompok perlakuan (KP  75  %)  berbeda  nyata  0,014.  Kelompok perlakuan  (KP  25%  )  berbeda  nyata  dengan kelompok  kontrol  negatif  (K-)  sebesar  0,006 dan  kelompok  perlakuan  (KP  75%)  sebesar 0,007. Kelompok perlakuan (KP 50%) memiliki perbedaan  bermakna  sebesar  0,016  dari kelompok  kontrol  normal  (KN)  dan  0,007  dari kelompok  kontrol  negatif  (K-).  Kelompok perlakuan  (KP  75  %)  memiliki  perbedaan bermakna sebesar 0,006 dari kelompok normal (KN),  0,006  dari  kelompok  negatif  (K-),  0,014 dari  kelompok  positif  (K+),  dan  0,007  dari kelompok perlakuan (KP 25). %).

## DISKUSI
Uji  statistik  non  parametrik  dilakukan dengan menggunakan uji Kruskal-Walis berdasarkan  hasil  penelitian  di  atas,  dan ditemukan  adanya  perbedaan  yang  signifikan antar kelompok. Karena konsentrasi komponen obat dan perawatan berfluktuasi antar kelompok, inilah masalahnya. Adanya perbedaan  antar  kelompok  harus  dilakukan lebih  lanjut  dengan  menggunakan  uji  Man- Whitney  untuk  menentukan  apakah  kelompok signifikan dibandingkan dengan yang lain.
Uji  Mann-Whitney  mengungkapkan perbedaan  yang  signifikan  antara  KN  dan  K-, K+,  KP  50  persen,  dan  KP  75  persen,  tetapi tidak  antara KP 25 persen  dan  KP 75  persen.
Dengan semua kelompok, K- sangat berbeda. K+ berbeda 75 persen dengan KN, K-, dan KP, tetapi  tidak  berbeda  nyata  dengan  KP  25 persen  dan  KP  50  persen.  KP  25  persen berbeda secara substansial dari K- dan KP 75 persen  ,  tetapi  tidak  berbeda  dengan  KN,  K+, atau  KP  50  persen.  Hal  ini  sejalan  dengan Senjaya  yang  menyatakan  bahwa  kelompok KN  diinduksi  oleh  makanan  yang  dikonsumsi tikus,  dan  bahwa  proses  munculnya  plak dipengaruhi oleh makanan. Karena kelompok K tidak  diberikan  pasta  gigi  ekstrak  biji  kopi robusta  dan  dilakukan  ligasi  pada  gigi  M1  kiri bawah,  maka  memiliki  indeks  plak  3,4  yang menunjukkan nilai sedang. Hal  ini karena sisa makanan menempel pada permukaan gigi yang terluka.  Plak  dapat  disebabkan.  Menurut penelitian  yang  dilakukan  oleh  Hamsar  dan Ramadhan  ,  plak  menawarkan  nutrisi  bagi bakteri  untuk  berkembang,  mengumpulkan bakteri  pada  permukaan  yang  lengket,  dan menciptakan  lingkungan  asam  yang  membuat permukaan gigi, menyebabkan enamel hancur dan  menyebabkan  karies.  Kelompok  K+  yang diligasi pada gigi M1 kiri bawah dan pasta gigi ekstrak  biji  kopi  arabika  2  mg  memiliki  indeks plak  1,4  yang  menunjukkan  nilai  yang  sangat baik,  menurut  penelitian  Agtini  bahwa  kopi arabika mengandung 1,12% sodium monofluophosphate, yang dapat meningkatkan ketahanan  email,  mendorong  remineralisasi, dan  menghambat  bakteri  plak  dari  glikolisis, menurunkan indeks plak di mulut.
Indeks  plak  kelompok  KP  25  persen  yang diligasi pada gigi M1 kiri bawah dan diberi pasta gigi yang mengandung ekstrak biji kopi robusta 25  persen  adalah  1,8,  menunjukkan  nilai sedang.

## Mekanisme kopi robusta terhadap plak

## KESIMPULAN
Menurut  hasil  penelitian,  ekstrak  biji kopi robusta yang dimasukkan dalam pasta gigi pada  konsentrasi  25%,  50%,  dan  75%  dapat menurunkan  produksi  plak  gigi.  Pasta  gigi ekstrak  biji  kopi  robusta  yang  paling  efektif adalah  pada  konsentrasi  75%,  sesuai  dengan ketiga variabel konsentrasi yang diuji.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih kepada
Program  Pendidikan  Dokter  Gigi  Fakultas Kedokteran  Gigi  (FKG)  UNEJ  sebagai  sarana bagi klinisi untuk meningkatkan pengetahuan.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Nisa,  T.  D.  dan  R.  Primartha.  Pada penelitian  ini  dilakukan  pengukuran relatif untuk mendapatkan nilai akurasi. pengukuran  relatif  yang  digunakan adalah. Jurnal Generic. x(x):x ~ x. 2013
2.  Kusumawardani,  B.,  P.  Pujiastuti,  dan S. Sari. Uji  biokimiawi sistem api 20  a mendeteksi  porphyromonas  gingivalis isolat klinik dari plak subgingiva pasien periodontitis  kronis.  Jurnal  PDGI.
2010;59(3):110 –114.
3.  Fitzsimmons,  T.  R.,  S.  Ge,  dan  P.  M. Bartold.  Compromised  inflammatory cytokine response to p. gingivalis lps by fibroblasts from inflamed human gingiva.  Clinical  Oral  Investigations. 2018;22(2):919 –927. 4.  Jepsen, K. dan S. Jepsen. Antibiotics/antimicrobials: systemic and local administration in the therapy
of  mild  to  moderately  advanced periodontitis.  Periodontology  2000. 2016;71(1):82 –112.
5.  Bauer, D., J. Abreu, N. Jordão, J. S. da Rosa, O. Freitas-Silva, dan A. Teodoro. Effect  of  roasting  levels  and  drying process  of  coffea  canephora  on  the quality  of  bioactive  compounds  and cytotoxicity.  International  Journal  of Molecular Sciences. 2018;19(11). 6.  Noviyanti, A. M., R. Parnaadji, dan F. A. Soesetijo. Efektifitas penggunaan pasta biji kopi robusta sebagai pembersih gigi tiruan terhadap kekasaran permukaan resin akrilik heat cured.  E-Jurnal  Pustaka  Kesehatan. 2018;6(2):339 –344.
7.  Hanif, M. S. Al. Pola resistensi bakteri dari  kultur  darah  terhadap  golongan penisilin  di  laboratorium  mikrobiologi klinik  fakultas  kedokteran  universitas indonesia (l mk-fkui) tahun 2001-2006. Universitas Indonesia. 4 –30. 2009
8.  Suhayat,  C.  K.,  M.  Bahar,  dan  M.  S. Thadeus. Perbandingan hasil uji sensitivitas  antibakteri  ekstrak  etanol biji  kopi  robusta  (coffea  canephora)
sebelum  dan  sesudah  dipanggang terhadap  di  poliklinik  stan  tangerang selatan. 2002; 26(3):135 –144.
9.  Pawestri, R. I. Daya Antibakteri Ekstrak Kering  Beku  Daun  Kopi  Robusta (Coffea robusta) Terhadap
Porphyromonas gingivalis. 2017
10.  Ali, M. A., T. A. Al-hattab, dan I. A. Al- hydary. E xtraction o f d ate p alm s eed o il ( p hoenix d actylifera ) b y s oxhlet a  pparatus.  International  Journal  of Advances in Engineering & Technology,
2015;8(3):261 –271.