BioEksakta: Jurnal Ilmiah Biologi Unsoed Volume 3, Nomor 4 (2021): 222-227 E-ISSN: 2714-8564
Respon Pertumbuhan dan Fisiologis Bayam (Amaranthus tricolor) yang Dipapar Timbal pada Sistem Hidroponik Sumbu
Eka Fitriani Yuspiah 1 , Yeni Rahayu 1* , Miftahuddin 2
1 Program Studi Biologi, Jurusan Sains, Institut Teknologi Sumatera. Jl. Terusan Ryacudu, Way Huwi, Jati Agung, Lampung Selatan, 35365, Lampung, Indonesia.
2 Jurusan Biologi, Fakultas MIPA, Institut Pertanian Bogor. Jl Agatis, Kampus IPB Darmaga, Bogor 16680, Jawa Barat, Indonesia.
* corresponding author : yeni.rahayu@bi.itera.ac.id
Rekam Jejak Artikel:
Diterima  : 29/08/2021
Disetujui  : 13/06/2022

## Abstract
Green amaranth ( Amaranthus tricolor ) is a popular vegetable in Indonesia as a source of vitamins and minerals. This plant is susceptible to the contamination of heavy metals such as lead. This study aimed to analyze the growth responses and morphophysiological of A. tricolor in response to the application of lead in the forms of (Pb (NO 3 ) 2 using a wick hydroponic system. This study used factorial randomized design with four treatments of lead level, i.e. 0 ppm, 1 ppm, 3 ppm, and 5 ppm, repeated 2 times. Data were analyzed by analysis of one-way ANOVA and post hoc test  by  Duncan  in  P-value  5%.  The  growth  responses  were  observed  by  measuring  the  plant height,  the  number  of  leaves,  leaf  color,  shoot  and  roots  fresh  weight,  also  its  dry  weight. Whereas, the physiological responses were observed by analyzing the plant chlorophyll levels. The  results  obtained  that  the  applications  of  (Pb(NO 3 ) 2 decreased  plant  height,  leaf  number, fresh weight of shoot and roots, dry weight of shoot and roots, also the chlorophyll levels. These lead treatments were affecting root loss, changed the color of leaves to become yellowish-green, and  showing  yellow-spotted  close  to  the  midrib.  Analysis of  lead  uptake  in  stems  and leaves showed  that  the  absorption  value  increased  along  with  the  applications  of  (Pb(NO 3 ) 2 in  the treatment. The treatment of 5 ppm of (Pb(NO 3 ) 2 showed the lowest result on all parameters.
Key Words:  Amaranthus tricolor, Wick Hydroponic System, The Leads, Metal Pollution.

## Abstrak
Bayam ( Amaranthus tricolor ) adalah sayuran yang popular di Indonesia sebagai sumber vitamin dan mineral. Tanaman ini rentan terkontaminasi logam berat, salah satunya timbal. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis respons pertumbuhan dan fisiologi A. tricolor yang dipapar timbal (Pb(NO 3 ) 2 menggunakan  sistem  hidroponik  sumbu.  Penelitian  dilakukan  menggunakan rancangan acak lengkap dengan empat perlakuan konsentrasi timbal, yaitu 0 ppm, 1 ppm, 3 ppm, dan 5 ppm, diulangi 2 kali. Data dianalisis menggunakan ANOVA, dan uji lanjut dengan Duncan pada taraf kepercayaan 5%. Respons pertumbuhan yang diamati yaitu tinggi tanaman, jumlah daun, warna daun, berat segar tajuk dan akar, serta berat kering tajuk dan akar. Respons fisiologi yang diamati yaitu kandungan klorofil tanaman. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tanaman bayam  yang  dipapar  (Pb(NO 3 ) 2 mengalami  penurunan  pertumbuhan  yang  signifikan,  pada parameter tinggi tanaman, jumlah daun, berat segar tajuk dan akar, berat kering tajuk dan akar, serta kandungan  klorofinyal. Perlakuan timbal dapat menyebabkan kerontokan akar, perubahan warna daun menjadi kekuningan, serta terdapat bintik kuning dekat pertulangan daun. Analisis serapan logam timbal pada batang dan daun bayam menunjukkan nilai serapan meningkat seiring penambahan konsentrasi timbal pada perlakuan. Perlakuan (Pb(NO 3 ) 2 dengan konsentrasi 5 ppm menunjukkan hasil yang terendah pada seluruh parameter pengamatan.
Kata kunci : Amaranthus tricolor , Cemaran Logam, Sistem Hidroponik Sumbu, Timbal.

## PENDAHULUAN
Bayam merupakan sayuran popular di Indonesia,  karena  memiliki  harga  yang  ekonomis sehingga  dapat  dikonsumsi  oleh  semua  kalangan. Bayam  memiliki  kandungan  gizi  yang  bermanfaat bagi  kesehatan  tubuh.  Kandungan  mineral  yang ditemukan  pada  bayam  yaitu  besi,  seng,  fosfor, magnesium,  dan  kalsium  (Schönfeldt  &  Pretorius, 2011).  Bayam  mengandung  vitamin  C  berkisar
antara  89,66  mg/100  gr  -  140,57  mg/100gr, kandungan serat bayam berkisar antara 0,36 mg/100 gr  -  2,36  mg/100gr.  Sementara  itu,  kandungan  air yang  cukup  tinggi  berkisar  antara  86%  -  90% (Rahayu et al., 2013). Selain itu, Ahmed et al. (2013) menyatakan  bahwa  ekstrak  daun  dan  biji  bayam mengandung  antioksidan  yang  tinggi,  berupa senyawa flavonoid, alkaloid, tanin, dan glikosida.
Sayur bayam yang dikonsumsi, rentan terpapar logam berat timbal. Pencemaran logam timbal pada tanaman  dapat  diamati  dari  perubahan  morfologi, respons pertumbuhan dan fisiologi tanaman. Gejala yang  ditimbulkan  oleh  timbal  berupa  perubahan warna  daun  atau  klorosis,  dan  pembusukan  daun (Irma &  Susanti, 2014). Paparan dari logam timbal sangat berbahaya dan memberikan dampak toksisitas bagi  tanaman  dan  manusia  (Fibrianti  &  Azizah, 2015). Batas maksimum dari paparan logam timbal pada tanaman bayam yaitu 0,5 mg/Kg, jika melewati batasan  tersebut  maka  bayam  tidak  baik  untuk dikonsumsi (SNI 7387, 2009).
Selama  ini,  sistem  hidroponik  dianggap  lebih aman  dibandingkan  budidaya  dengan  media  tanah, untuk memproduksi sayuran organik. Hasil penelitian  Erdayanti et  al. (2015),  mengungkapkan akumulasi  timbal  pada  tanaman  kangkung  dan bayam  berbanding  lurus  dengan  cemaran  timbal yang  terdapat  pada  tanah  pertanamannya.  Oleh karena  itu,  pemeliharaan  tanaman  dengan  sistem hidroponik  dalam  kondisi  rumah  kaca,  diharapkan dapat  mengurangi  paparan  timbal  yang  bersumber dari tanah dan udara. Namun, sayuran yang ditanam dengan  sistem  pertanaman  hidroponik  masih  dapat terpapar  timbal  yang  bersumber  dari  air,  pupuk, pestisida  dan  fungisida  (Erfandi  &  Juarsah,  2013). Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  respons pertumbuhan dan fisiologi tanaman bayam ( Amaranthus  tricolor )  terhadap  cekaman  logam timbal  pada  berbagai  konsentrasi  menggunakan sistem hidroponik sumbu. Hasil yang diperoleh dari penelitian diharapkan bermanfaat untuk memberikan informasi umum terkait respons tumbuh dan ciri-ciri tanaman  bayam  yang  terpapar  timbal  bagi masyarakat,  baik  oleh  produsen  maupun  oleh konsumen sayuran bayam.

## MATERI DAN METODE
Penelitian  dilaksanakan  pada  Januari  hingga Juni 2021 di rumah hidroponik  Jaya Anggara Farm, Laboratorium  Biologi  Institut  Teknologi  Sumatera, dan UPT Laboratorium Terpadu serta Sentra Inovasi Teknologi (LTSIT) Universitas Lampung. Penelitian dilakukan  menggunakan  rancangan  acak  lengkap (RAL)  dengan empat perlakuan konsentrasi  timbal, yaitu  0  ppm,  1  ppm,  3  ppm,  dan  5  ppm,  diulangi  2 kali. Setiap  konsentrasi  dan  ulangan  ditanam sebanyak  12  lubang  tanam  pada  sistem  hidroponik sumbu dengan modifikasi. Modifikasi yang dilakukan  adalah  penambahan  aerator,  untuk meningkatkan  sirkulasi  pada  media,  sehingga  dapat mencegah pertumbuhan lumut dan dapat mendukung perakaran tanaman.

## a. Pembuatan Larutan Baku Timbal
Larutan  baku  timbal  1000  ppm  dibuat  dengan melarutkan  sebanyak  0,1598  g  padatan  Pb(NO 3 ) 2 menggunakan  akuades  25  ml,  diaduk  hingga  larut.
Selanjutnya , larutan dimasukkan ke dalam labu ukur 100  ml,  dan  larutan  diencerkan  dengan  HNO 3 1  N sampai tanda batas. Pembuatan larutan standar timbal 1  ppm,  3  ppm,  dan  5  ppm  dilakukan  dengan  cara mengambil  0,1  ml,  0,3  ml,  dan  0,5  ml  larutan  baku timbal,  kemudian  dimasukkan  ke  dalam  masing- masing  labu  ukur  100  ml  dan  diencerkan  dengan HNO 3 1 N sampai tanda batas (Fajriah et al. , 2017).
b. Penyemaian dan Pemeliharaan Tanaman
Benih  bayam  di  semai  pada  nampan  semai, dibasahi  dan  ditutup  dengan penutup  selama  2  hari, sampai benih berkecambah. Bibit yang telah tumbuh dipindahkan  ke  meja nursery 1  dan  diberikan  tanda sebagai nutrisi awal selama 7 hari. Kemudian, setelah tanaman  berumur  7  HSS  (Hari  Setelah  Semai) dipindahkan  ke  meja nursery 2,  untuk  pembesaran selama 7 hari. Setelah itu, tanaman berumur 14 HSS dipindahkan ke rangkaian hidroponik sumbu hingga tanaman  berumur  30  hari.  Perlakuan  timbal  mulai diberikan pada saat tanaman berumur 20 HSS.

## c. Parameter Pengamatan
Parameter  yang  diamati  meliputi  karakter pertumbuhan  tanaman  dan  karakter  fisiologi. Pertumbuhan tanaman yang diamati terdiri atas tinggi tanaman  (cm),  penambahan  jumlah  daun  (helai), berat segar tajuk dan akar (g), berat kering tajuk dan akar  (g),  serta  warna  daun  bayam  yang  ditentukan dengan  bantuan unsell  color  chart dan leaf  color chart .
Parameter  fisiologi  yang  diamati  adalah kandungan  klorofil  tanaman,  serapan  timbal  pada organ  batang  dan  daun.  Kandungan  klorofil  bayam diukur  dengan  spektrotofometer  UV-Vis.  Ekstraksi klorofil dilakukan terhadap sampel daun berumur 28 HSS  menggunakan  aseton  80%.  Filtrat  diukur absorbansinya  dengan  panjang  gelombang  645  nm dan  663  nm.  Kadar  timbal  pada  batang  dan  daun bayam  diukur  dengan Microwave  Plasma  Atomic Emission  Spectrocopy (MP-AES  4100).  Sampel batang  dan  daun  bayam  yang  telah  dikeringkan, kemudian  ditimbang  sebanyak  1  g  dan  digerus menggunakan mortar. Sampel didestruksi kering dan diletakkan di dalam wadah yang terbuat dari polimer dan kuarsa. Sampel ditambahkan senyawa asam kuat seperti  HCL,  H 2 SO 4 ,  HNO 3 ,  H 2 O 2 ,  dan  HF  sampai dicapai  pH  berkisar  antara  4  dan  5.  Selanjutnya, sampel ditempatkan pada vial, dan diukur absorbansinya  dengan  panjang  gelombang  405,781 nm.

## d. Analisis Data
Data  dianalisis  menggunakan  Analisis  Varian (Anova)  untuk  mengetahui  pengaruh  perlakuan terhadap variabel yang diukur. Apabila terdapat beda nyata  antar  perlakuan  maka  dilanjutkan  dengan Duncan Multiple Range Test (DMRT) pada taraf 5%.
Tabel 1. Respons Pertumbuhan Tanaman Bayam terhadap Cekaman Logam Timbal
Konsentrasi Timbal Parameter Pertumbuhan TT (cm) JD (helai) BST (g) BSA (g) BKT (g) BKA (g) 0 ppm 57,20 d 35,00 c 483,30 c 71,00 c 20,65 a 5,55 d 1 ppm 46,80 c 23,50 b 335,15 b 43,20 b 27,45 a 4,80 c 3 ppm 38,85 b 19,00 ab 283,30 ab 39,90 b 42,15 b 3,15 b 5 ppm 31,60 a 14,00 a 254,75 a 28,80 a 64,30 d 2,45 a
Catatan:   Angka-angka dalam kolom yang sama diikuti oleh huruf yang sama tidak berbeda nyata pada taraf uji DMRT 0,05. TT=Tinggi  Tanaman,  JD=Jumlah  Daun,  BST=Bobot  Segar  Tajuk,  BSA=Bobot  Segar  Akar,  BKT=Bobot  Kering Tajuk, dan BKA=Bobot Kering Akar.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tanaman  bayam  yang  dipapar  larutan  timbal dengan  berbagai  konsentrasi  perlakuan  (0  ppm,  1 ppm,  3  ppm,  dan  5  ppm)  menunjukkan  respons adanya  gangguan  pertumbuhan  dan  fisiologi  seiring peningkatan  konsentrasi  larutan  timbal  yang diberikan. Gangguan pertumbuhan yang diamati dan diukur antara lain: penurunan tinggi tanaman, rerata penambahan  jumlah  daun,  penurunan  bobot  segar tajuk dan akar, penurunan bobot kering tajuk dan akar (Tabel 1).
Tinggi  tanaman  menurun  seiring  dengan peningkatan  konsentrasi  timbal  pada  tanaman perlakuan. Tinggi tanaman paling rendah diperlihatkan  oleh  perlakuan  konsentrasi  timbal  5 ppm, dan tinggi tanaman paling tinggi diperlihatkan oleh  perlakuan  konsentrasi  timbal  0  ppm.  Hal  ini sejalan dengan hasil penelitian yang dilaporkan oleh Alia et  al. (2015)  mengenai  dampak  pencemaran irigasi  lahan  pertanian  jangka  panjang  oleh  logam berat  timbal  (Pb),  cadmium  (Cd)  dan  Seng  (Zn) terhadap  penurunan  pengambilan  nutrisi  esensial tanaman Spinacia  oleracea. Kekurangan  sejumlah nutrisi esensial menghambat proses pembelahan dan diferensiasi  sel-sel  tanaman,  sehingga  mampu menurunkan panjang akar dan tajuk, serta berdampak pula terhadap penurunan tinggi tanaman.
Tanaman bayam yang dipapar timbal memperlihatkan adanya respons yang mengarah pada penurunan jumlah daun baru. Tanaman bayam yang diperlakukan pada konsentrasi timbal 0 ppm (kontrol) menunjukkan  rata-rata  penambahan  jumlah  daun yang lebih tinggi dibandingkan tanaman bayam yang dipapar  timbal  1  ppm,  3  ppm  dan  5  ppm.  Daun tanaman  bayam  yang  dipapar  timbal  dengan konsentrasi  3  ppm  dan  5  ppm  memperlihatkan perubahan  warna  daun,  yang  semula  hijau  berubah menjadi  kuning  ( yellowish  green )  (Tabel  2).  Dalam jangka  waktu  pemaparan  yang  lebih  lama,  daun tanaman  yang  dipapar  timbal  mengalami  layu  dan gugur setelah umur tanaman 23 HSS.
Warna daun bayam yang dipapar timbal tampak menguning  pada  bagian  tengah  helai  daun,  dekat pertulangan daun (Gambar 1). Gejala ini menyerupai respons tanaman terhadap defisiensi unsur magnesium (Mg). Alia et al. (2015) melaporkan efek pemberian timbal sebesar 300 mg/kg, 400 mg/kg dan 500  mg/kg  terhadap  penurunan  pengambilan  nutrisi esensial  oleh  tanaman Spinacia  oleracea. Hasil eksperimen  tersebut  menunjukkan  penghambatan pengambilan nutrisi, antara lain natrium 41%, kalium 20%, kalsium 27%, zat besi  19%, magnesium 66%, mangan  28% dan  tembaga 16%.  Unsur  nutrisi  yang mengalami  penurunan  penyerapan  terbesar  adalah Magnesium. Magnesium dan zat besi bersama-sama merupakan  unsur  penting  dalam  proses  sintesis klorofil.
Tabel 2. Respons  Perubahan  Warna  Daun  terhadap Cekaman Logam Timbal Konsentrasi Timbal Warna Daun 0 ppm 5GY 6/6 1 ppm 5GY 6/8 3 ppm 5GY 7/8 5 ppm 5GY 8/6
Catatan:  Warna  daun  diamati  dengan  bantuan  Munsell color Chart.
Respons  tanaman  bayam  terhadap  cekaman logam  timbal  menunjukkan  penurunan  bobot  segar tajuk  dan  akar.  Demikian  pula  respons  tanaman bayam terhadap cekaman logam timbal menunjukkan penurunan  bobot  kering  tajuk  dan  akar.  Penurunan bobot segar dan bobot kering ini tampak signifikan, seiring  dengan  peningkatan  konsentrasi  timbal  pada perlakuan. Menurut Hamim et al . (2018), logam berat timbal  dapat  menyebabkan  kerusakan  membran  sel dan  menonaktifkan  protein  yang  berperan  dalam proses pertumbuhan tanaman. Perlakuan konsentrasi logam timbal yang semakin besar, dapat menyebabkan penurunan kemampuan tumbuh hingga kematian tanaman.
Gambar 1. Respons Perubahan Warna Daun Bayam terhadap Cekaman Logam Timbal
Hasil pengamatan menunjukkan bahwa tanaman  bayam  yang  diberi  perlakuan  timbal  lebih lama terlihat mengalami kerontokan akar dan proses pembusukan  di  ujung  akarnya.  Akar  adalah  organ yang terpapar langsung dengan logam timbal dengan waktu papar paling lama, sehingga mengalami gejala toksisitas  yang  lebih  parah  dibandingkan  organ lainnya.
Gangguan  fisiologi  tanaman  bayam  yang disebabkan  cekaman  logam  timbal  dapat  diamati melalui  analisis  kadar  klorofil  tanaman  dan  nilai serapan  logam  timbal  pada  batang  dan  daun.  Hasil pengamatan  menunjukkan  penurunan  kadar  klorofil total  pada  tanaman  yang  dipapar  timbal.  Kadar klorofil  total  tertinggi  tampak  pada  tanaman  bayam yang diberi perlakuan  timbal 0  ppm  (kontrol), yaitu sebesar  25,4  mg/L.  Sedangkan  kadar  klorofil  total pada  tanaman  bayam  yang  dipapar  timbal  dengan konsentrasi  1  ppm,  3  ppm,  dan  5  ppm  mengalami penurunan,  yaitu  berturut-turut  20,17  mg/L,  16,65 mg/L, dan 8,49 mg/L (Gambar 2).
Interaksi logam timbal terhadap tanaman bayam dapat  mengubah  sintesis  protein  dan  pigmen tanaman,  terutama  klorofil  (Hamiim et  al .,  2018). Penurunan kadar klorofil tertinggi yang teramati pada perlakuan  timbal  5  ppm,  berbanding  lurus  dengan hasil  penelitian  Dogan et  al. (2018) bahwa  semakin
besar  kadar  logam  timbal  yang  diakumulasi  daun, maka kadar klorofil pada daun tersebut akan semakin menurun.
Menurut  (Gupta et  al .,  2019)  kadar  klorofil tanaman dapat mengalami penurunan karena adanya hambatan  pada  jalur  biosintesisnya.  Timbal  yang diberikan  pada  tanaman  akan  mempengaruhi kandungan  klorofil  dengan  cara  menghambat aktivitas enzim pada tanaman yang dipapar. Apabila biosintesis  pada  tanaman  terhambat  maka  terjadi penghambatan  jalur  transportasi  Mg  dan  Fe  yang merupakan  mineral-mineral  penting  dalam  proses sintesis  klorofil,  sehingga  kemampuan  molekul tersebut  hilang  dan  tidak  dapat  bekerja  efektif (Ahamad et al ., 2018).
Hasil  pengamatan  serapan  timbal  pada  batang dan  daun  menunjukkan  besarnya  kadar  timbal  yang terserap  di ketiga  perlakuan.  NIlai  serapan  timbal pada  batang  dan  daun  paling  tinggi  terlihat  pada tanaman  bayam  yang  diberi  perlakuan  cekaman timbal  5  ppm,  yaitu  9,15  mg/Kg  dan  9,16  mg/Kg, sedangkan nilai serapan timbal pada batang dan daun paling  rendah  terlihat  pada  tanaman  bayam  yang diberi  perlakuan  cekaman  timbal  1  ppm.  Nilai serapan  timbal  tampak  berbanding  lurus  dengan besarnya konsentrasi timbal yang diberikan (Gambar 3 dan Gambar 4).
Gambar 2. Respons Penurunan Kadar klorofil Total Daun Bayam terhadap Cekaman Logam Timbal
25,4 20,17 16,65 8,49 0 5 10 15 20 25 30 Kontrol 1 ppm 3 ppm 5 ppm Klorofi l To ta l (m g/ L) Konsentrasi Timbal
Gambar 3. Serapan Timbal pada Batang Tanaman Bayam yang Dipapar Logam Timbal
Gambar 4. Serapan Timbal pada Daun Tanaman Bayam yang Dipapar Logam Timbal
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  nilai serapan timbal pada organ batang dan daun tanaman bayam  cukup  tinggi,  dan  meningkat  seiring penambahan konsentrasi timbal pada perlakuan. Nilai serapan timbal terlihat lebih tinggi pada bagian daun, dibandingkan batang tanaman bayam.
Terserapnya logam timbal ke bagian batang dan daun  tanaman  bayam  dapat  melalui  dua  cara  yaitu simplas dan apoplas. Logam tersebut diserap tanaman dalam  bentuk  ion  garam.  Timbal  yang  terserap melalui jalur apoplas akan berdifusi melalui dinding sel  korteks,  sedangkan  logam  yang  terserap  dengan cara simplas terjadi secara osmosis. Ion timbal yang terserap  secara  osmosis  akan  bergerak  melalui plasmodesmata  dengan  gerakan  plasma  untuk mencapai  organ  batang  dan  daun  tanaman  (Irawan, 2019).

## SIMPULAN
Tanaman bayam yang diberi perlakuan cekaman logam timbal dengan konsentrasi 1 ppm, 3 ppm dan 5 ppm  menunjukkan  respons  pertumbuhan  dan fisiologis  negatif.  Penurunan  pertumbuhan  tanaman bayam  terjadi  secara  signifikan,  seiring  dengan adanya  peningkatan  konsentrasi  timbal  yang diberikan  ke  tanaman  bayam.  Nilai  serapan  timbal cukup  tinggi  pada  organ  batang  dan  daun  tanaman bayam.

## DAFTAR  REFERENSI
Ahamad,  S.J.,  Sumithra,  S.,  Senthilkumar,  P.  2018. Mercury uptake and translocation by indigenous plants.
Rasayan Journal
Chemistry , 11(1). pp.1 − 12
0 4,79 5,46 9,15 0 2 4 6 8 10 12 14 Kontrol 1 3 5 Se rap a n Ti m ba l pa da Bata ng (m g/ Kg) Konsentrasi Timbal (ppm) 0 7,03 7,36 9,16 0 2 4 6 8 10 12 14 Kontrol 1 ppm 3 ppm 5 ppm Se rap a n Ti m ba l pa da Dau n (m g/ Kg)
Konsentrasi Timbal (ppm)
Ahmed,  S.  A.,  Iftikhar.  T.,  Hanif,  S.  2013. Phyfochemical profiling with antioxidant and antimicrobal screening of Amaranthus viridis
L.  leaf  and  seed  extracts. Open  Journal  of Medical Microbiology , 3. pp. 164-171
Alia, N., Sardar, K., Said, M., Khalid, S., Alam, S., Siddique,  S.,  Ahmed,  T.,  Scholz,  M.  2015. Toxicity and bioaccumulation of heavy metals in  Spinach  ( Spinacia  oleraceae )  grown  in conttrolled  environronment. International Journal  Environment  Public  Health, 12. pp.7400-7416.
Badan Standardisasi Nasional. 2009. Batas maksimum  cemaran  logam  pada  pangan  SNI 7387. [Online]
Tersedia pada: https://sertifikasibbia.com/upload/logam_bera t.pdf [Diakses 17 Mei 2021].
Dogan,  M.,  Kratas,  M.,  Aasim,  M.  2018.  Cadmium and  lead  bioaccumulation  potentials  of  an aquatic macrophyte Ceratophyllum demerstum L.: a laboratory study. Ecotoxicology Environmental Safety , 148, pp.
431 − 440
Erdayanti, P., Hanifah, T.A., Anita, S. 2015. Analisis kandungan  timbal  pada  sayur  kangkung  dan bayam  di  jalan  kartama  pekanbaru  secara spektrofotometri  serapan  atom. Jurnal  JOM FMIPA , 2(1), pp. 75-82 Erfandi, D., Juarsah, I. 2013. Teknologi pengendalian pencemaran logam  berat pada lahan pertanian . Jakarta: Balai penelitian Tanah.
Fajriah,  N.,  Zulfadli,  Z.,  Nasir,  M.  2017.  Analisis kadar  logam  timbal  (pb)  dan  kadmium  (cd) pada tanaman Kangkung ( Ipomoea aquatica ) menggunakan spektrofotometri  serapan atom  (ssa). Jurnal  Ilmiah  Mahasiswa Pendidikan Kimia, 2(3), pp. 162-71
Fibrianti, D.L., Azizah, R. 2015. Karakteristik, kadar timbal (Pb) dalam darah dan hipertensi pekerja home  industry aki  bekas  di  Desa  Talun, Kecamatan  Sukodadi,  Kabupaten  Lamongan.
Jurnal  Kesehatan  Lingkungan, 8(1),  pp.  92- 102
Gupta,  D.K.,  Nicoloso,  F.T.,  Schetinger,  M.R.C., Rossato,  L.V.,  Perreira,  L.B.,  Castro,  G.Y., Srivasta, S., Tripathi, R.D. 2009. Antioxidant defense  mechanism  in  hydroponically  grown Zea  mays seedlings  under  moderate  lead stress. Journal  of  Hazardous  Material ,  172, pp. 479 − 484 Hamim,  H.,  Miftahudin,  M.,  Setyaningsih,  L.  2018. Cellular  and  ultrastructure  alteration  of  plant roots in response to metal stress. In Ratnadewi, D.,  Hamim,  H.  (Eds.). Plant  Growth  and Regulation: Alteration to
Sustain
Unfavourable  Conditions .  London:  Intech Open, 21 − 41 pp. doi: https://doi.org/10.5772/intechopen.79110
Irawan,  B.  2019.  Hubungan  kandungan  timbal  (Pb) dengan produksi pada sayuran Sawi ( Brassica juncea L.). Media  Publikasi Promosi Kesehatan Indonesia , 2(1), pp. 27-32
Irma,  W.,  Susanti,  N.  2014.  Pengaruh  pemberian timbal  (Pb)  terhadap  morfologi  dan  kadar terserapnya  timbal  (Pb)  pada  daun  bayam dalam skala laboratorium. Photon: Jurnal sain dan kesehatan, 5(1), pp. 7-12
Rahayu,  T.S.,  Asgar,  A.,  Hidayat,  I.M.,  Kusmana, Djuariah, D. 2017. Evaluasi kualitas beberapa genotype  Bayam  ( Amaranthus sp.)  pada penanaman  di  Jawa  Barat. Berita  Biologi , 12(2),pp. 153-160
Schönfeldt,  H.C.,  Pretorius,  B.  2011.  The  nutrient content of five traditional South African dark green  leafy  vegetables:  A  preliminary  study. Journal  of  food  composition  and  analysis, 24(8), pp . 1141-1146.