Efektivitas Sari Buah Lemon (Citrus limon (L.) Burm. f. sebagai Khelating Agent Logam Berat Tembaga
Novena Yety Lindawati, Juni Nofitasari*
Program Studi Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Nasional, Sukoharjo, Indonesia
*Corresponding author: juni.nofita18@gmail.com
Submitted: 30 Mei 2020 Accepted: 11 November 2020 Published: 27 April 2021

## Abstract
Background: Lemon (Citrus limon (L.) Burm. F is a fruit that contains citric acid. Citric acid has the ability to bind heavy metals, one of which is copper heavy metals.  Objective: The purpose of this study was to determine the effectiveness of lemon juice in reducing copper heavy metals. Phytochemical screening test was carried out to  determine  the  content  of  secondary  metabolites  contained  in  lemon  juice.  Methods:  Determination  of  the reduction  in  copper  heavy  metal  levels  was  carried  out  by  squeezing  lemon  added  10  ppm  simulated  copper metal  which  was  read  by  the  Atomic  Absorption  Spectrophotometer  (AAS)  method  with  a  wavelength  of 324.8  nm.  Determination  of  the  reduction  in  copper  metal  was  carried  out  using  a  series  of  lemon  juice concentrations of 10, 20, 30, 40, 50, 60 and 70%. Results: The results showed that lemon juice (Citrus limon (L.) Burm. F. Contains metabolites in the form of citric acid, alkaloids, saponins, and steroids. The average value of reduction in copper metal levels after administration of lemon juice 10% concentration is 0.69 (± 0.42%), 20% concentration of 1.80 (± 0.42%), 30% concentration of 11.85 (± 1.28%), 40% concentration of 33.57 (± 0.33%), 50% concentration was 49.92 (± 0.86%), 60% concentration was 54.14 (± 0.69%) and 70% concentration was 64.89 (± 0.30%). Conclusion: Effectiveness of lemon juice concentration which was able to reduce copper levels by 50% (EC50) was 55.88%.
Keywords: lemon juice, EC 50 value, copper metal reduction, AAS method
Abstrak Pendahuluan :  Lemon  ( Citrus  limon (L . )  Burm.  F  merupakan  salah  satu  buah  yang  mengandung  asam  sitrat. Asam  Sitrat  memiliki  kemampuan  mengikat  logam  berat,  salah  satunya  logam  berat  tembaga. Tujuan : Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui efektivitas sari  buah lemon dalam menurunkan logam berat tembaga. Uji Skrining  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  yang  terdapat  dalam  sari  buah lemon. Metode :  Penentuan  penurunan  kadar  logam  berat  tembaga  dilakukan  dengan  cara  perasan  buah  lemon ditambahkan  logam  simulasi  tembaga  10  ppm  yang  dibaca  dengan  metode  Spektrofotometer  Serapan  Atom (AAS)  dengan  panjang  gelombang  324,8  nm.  Penentuan  penurunan  logam  tembaga  dilakukan  dengan menggunakan seri  konsentrasi  sari  buah lemon  sebesar 10, 20, 30, 40, 50, 60 dan 70%. Hasil : Hasil penelitian menunjukkan  bahwa  sari  buah  lemon  ( Citrus  limon (L . )  Burm.  f.  mengandung  metabolit  berupa  asam  sitrat, alkaloid, saponin, dan steroid. Nilai rata-rata penurunan kadar logam tembaga setelah pemberian sari buah lemon kosentrasi 10% sebesar 0,69 (±0,42%), konsentrasi 20% sebesar 1,80 (± 0,42%), konsentrasi 30% sebesar 11,85 (±  1,28%),  konsentrasi  40%  sebesar  33,57  (±  0,33%),  konsentrasi  50%  sebesar  49,92  (±  0,86  %),  konsentrasi 60%  sebesar  54,14  (±  0,69%)  dan  konsentrasi  70%  sebesar  64,89  (±  0,30%). Kesimpulan :  Nilai  efektivitas konsentrasi sari buah lemon yang mampu menurunkan kadar tembaga sebesar 50% (EC 50 ) adalah 55,88%.
Kata kunci : sari buah lemon, nilai EC 50 , Penurunan logam tembaga, metode AAS

## PENDAHULUAN
Keberadaan  logam  berat  sangat  berbahaya  bila kadar yang terlarut dalam tubuh manusia cukup tinggi. Logam  berat  akan  tertimbun  di  dalam  jaringan terutama  hati  dan  ginjal.  Logam  berat  tersebut  dapat masuk  dalam  tubuh  organisme  melalui  permukaan tubuh dan rantai makanan (Nurvita dkk., 2015).
Salah  satu  logam  penyebab  kerusakan  hati  yaitu tembaga  (Cu).  Tembaga  merupakan  suatu  logam esensial  yang  diperlukan  oleh  tubuh.  Kandungan  Cu dalam  air  minum  yang  diperbolehkan  adalah  2  mg/L (Kuntum, 2014).
Bahan  alam  yang  bersifat chelating  agent adalah jeruk lemon. Kandungan jeruk lemon yaitu asam sitrat. Asam  sitrat  dapat  membentuk  senyawa  kompleks dengan  logam  karena  memiliki  gugus  fungsional COOH  dan  –OH  (Solihah  dkk.,  2016),  sehingga  asam sitrat  yang  terkandung  dalam  buah  jeruk  lemon  dapat digunakan  untuk  menurunkan  kadar  logam  tembaga (Nurvita dkk., 2015).
Buah  lemon  mengandung  senyawa  lain  selain asam  sitrat  yang  dapat  mengikat  logam,  salah  satunya yaitu  flavonoid  yang  berfungsi  sebagai  agen  pengikat logam berat. Flavonoid dapat mentransfer elektron atau atom  hidrogennya  ke  senyawa  radikal  bebas  untuk dilakukan  pengikat  pada  logam  berat  (Destria  dkk., 2019).
Penelitian  sebelumnya  yang  dilakukan  oleh Hartika  (2018)  menunjukkan  bahwa  air  perasan  buah lemon  dapat  menurunkan  logam  Cd.  Penelitian  yang dilakukan  oleh  Harisman  (2017),  menunjukkan penambahan air perasan buah lemon dapat menurunkan logam  Pb. Perendaman dengan 100%  air perasan buah lemon  selama  60  menit  efektif  untuk  menurunkan kadar  logam  Pb  pada  ikan  nila  hitam  sebesar 1,54  mg/Kg  dengan  besaran  nilai  penurunannya  yaitu 82,80 %.
Penelitian  buah  lemon  sebagai  pengikat  logam yang  membentuk  kompleks  logam  Cu  belum dilaporkan,  sehingga  mendorong  untuk  dilakukannya penelitian.

## BAHAN DAN METODE Bahan
Bahan-bahan yang dibutuhkan dalam penelitian ini adalah  Buah  lemon  masih  segar  dan  matang  serta memiliki panjang diameter 5 - 8 cm dengan bobot 50 - 80 gr buahnya berwarna kuning terang, yang diambil di salah  satu  mall  di  solo,  aquabides  (PT.  Eka Pharmindo),  HCl  pekat,  serbuk  Mg,  gelatin  0,5%,
CuSO 4. 5H 2 O, H 2 SO 4 2N,  Mayer,  Wagner,  Dragendrof, HCl  1N,  Lieberman  Burchard,  H 2 SO 4 pekat,  perak nitrat  (Merck),  kloroform  (gradien  grate  ≥  99,7% Emsure).

## Alat
Alat  yang  digunakan  adalah  Spektrofotometri Serapan  Atom  (Thermo  Scientific  iCE-3500  GFZ), labu ukur 100,0 mL (Pyrex), corong pisah, klem statif, neraca  analitik  (Ohaus,  EP214),  alat  stirrer  magnetik, alat-alat gelas.

## Metode

## Determinasi sampel
Determinasi  bertujuan  untuk  memastikan  keaslian sampel  yang  digunakan  dalam  penelitian.  Hasil determinasi  menunjukkan  bahwa  tanaman  yang diambil    dari  Kemuning,  Karanganyar  tersebut  adalah tanaman  lemon.  Lemon  dengan  Spesies  ( Citrus  limon (L . ) Burm. f. dengan famili Rutaceae .

## Uji Skrining ftokimia Uji flavonoid
Filtrat ditambahkan HCl pekat dan logam Mg. Jika positif flavonoid ditunjukkan dengan perubahan warna kuning tua menjadi orange (Khotimah, 2016).

## Uji tannin
Larutan  filtrat  ditambahkan  gelatin  0,5%.  Hasil positif  ditunjukkan dengan  terbentuknya  endapan coklat (Mabruroh, 2015).

## Uji alkaloid
Filtrat  dimasukkan  kedalam  tabung  reaksi  lalu ditambahkan  2  tetes  H 2 SO 4 2N,  kemudian  dikocok hingga  tercampur,  kemudian  dituangkan  di  plat  tetes dan  ditetesi  pereaksi  Mayer  dengan  melihat  endapan putih, pereaksi Wagner dengan melihat endapan coklat, dan  pereaksi  Dragendrof  dengan  melihat  endapan jingga (Erviani dkk., 2019).

## Uji saponin
Filtrat  ditambahkan  air,  dikocok,  setelah  dikocok tambahkan HCl 1N. Jika positif saponin terbentuk busa yang stabil (Wijaya dkk., 2014).

## Uji steroid triterpenoid
Filtrat  ditetesi  pada  2  bagian  plat  tetes  1  bagian ditambahkan dengan pereaksi Lieberman Burchard jika terbentuk  warna  violet  hasil  ini  menunjukkan  positif untuk  terpenoid,  terbentuk  warna  biru  menunjukkan positif steroid (Faskalia & Wibowo, 2014).

## Uji asam sitrat
Pertama,  filtrat  dipanaskan  dengan  asam  sulfat pekat  hasil  positif  berupa  larutan  warna  menjadi  lebih gelap  (Puspadewi  dkk.,  2017).  Lau  yang  kedua,  filtrat
direaksikan  dengan  (AgNO 3 ),  hasil  positif  endapan putih (Puspadewi dkk., 2017).
Uji  kuantitatif  untuk  memastikan  keberadaan logam di dalam sampel
Seri konsentrasi perasan lemon 10, 20, 30, 40, 50, 60,  dan  70%.  Sari  buah  lemon  masing-masing konsentrasi  di  buat  dengan  cara  10,  20,  30,  40,  50,  60 dan 70 mL. Buah lemon segar dicuci, dipotong menjadi 3  bagian  dimasukkan  ke  dalam  wadah,  disaring  di ambil  sarinya  dengan  cara  air  perasan  lemon  di masukkan  kedalam  labu  ukur  volume  100  mL tambahkan  aquabides  hingga  volume  100  mL, kemudian  identifikasi  menggunakan  spektrofotometer serapan atom.
Pembuatan  larutan  baku  induk  logam  Cu  1000 ppm
Ditimbang  0,3929  gram  CuSO 4. 5H 2 O  kemudian dilarutkan  dengan  aquabides  hingga  volume  larutan 100 mL.

## Pembuatan larutan baku induk logam Cu 10 ppm
Pipet  1  mL  larutan  baku  induk  Cu  1000  ppm, masukkan  dalam  labu  ukur  volume  100,0  mL selanjutnya  ditambah  aquabides  hingga  volume 100 mL.

## Uji penurunan logam tembaga
Seri  konsentrasi sari lemon 10, 20, 30, 40, 50, 60 70% dibuat dengan cara melarutkan air perasan lemon 10,  20,  30,  40,  50,  60  dan  70  mL  air  perasan  lemon dengan  aquabides,  selanjutnya  di  saring,  masukkan dalam    labu  ukur  volume  100,0  mL,  dan  ditambahkan limbah  simulasi  logam  Cu  dengan  konsentrasi 1000  ppm  sebanyak  1  mL,  ditambahkan  aquabides sampai volume 100 mL. Campuran diaduk menggunakan  stirer  magnetik  selama  60  menit. Campuran  masukkan  ke  dalam  corong  pisah  dan ditambah  10  mL  kloroform  penambahan  kloroform bertujuan  untuk  memisahkan  antara  fase  air  dan  fase kloroform, kemudian digojog selama 10 menit. Larutan tersebut  didiamkan  hingga  terbentuk  2  fase.  Fase  air dianalisis.  Fraksinasi  dilakukan  3  kali.  Fase  air  yang diperoleh selanjutnya dianalisis dengan
Spektrofotometri  Serapan  Atom  untuk  menentukan
konsentrasi  logam  Cu  sisa  dalam  larutan.  Pengujian dilakukan replikasi sebanyak 3 kali.
Analisis data penelitian Pengukuran penurunan kadar dilakukan menggunakan Spektrofotometer Serapan Atom panjang gelombang  Cu  324  nm.  Persen  penurunan  logam  Cu diperoleh menggunakan rumus:
%Penurunan =
(Konsentrasi awal – Konsentrasi akhir) X 100% Konsentrasi  awal
(Anggraini dkk., 2014) Nilai  EC 50 merupakan  konsentrasi  suatu  metabolit yang  diperlukan  untuk  menurunkan  kadar  logam tembaga sebanyak 50% dari kadar total logam awal.
Presisi  diperoleh  dari  data  rata-rata  penurunan logam  berat  Cu  yang  masing-masing  dilakukan  3  kali replikasi  (n  =  3).  Persen  presisi  dari  nilai  koefisien variasi.  Nilai  %  KV  kecil  maka  data  yang  diperoleh baik.  Ketentuan  nilai  KV  adalah  kurang  dari  2% (Harmita, 2004).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian  yang  dilakukan  bertujuan  mengetahui kemampuan sari buah lemon dalam menurunkan logam berat  tembaga  dengan  metode  Spektrofotometri Serapan  Atom.  Hasil  determinasi  menunjukkan  bahwa tanaman  yang  diambil  dari  Kemuning,  Karanganyar tersebut adalah tanaman lemon.
Uji skrining fitokimia untuk mengetahui kandungan  metabolit  sekunder  yang  terdapat  dalam sari  buah  lemon,  maka  dilakukan  skrining  fitokimia yang  terkandung  dalam  buah  lemon  yang  dapat mengikat  kadar  logam  tembaga.  Penelitian  ini menggunakan  sampel  lemon  karena  mempunyai kandungan asam sitrat.
Hasil  dari  Tabel  1  uji  skrining  fitokimia didapatkan hasil senyawa yang terkandung dalam buah lemon  yaitu  asam  sitrat,  alkaloid,  flavonoid,  fenolik, saponin,  dan  steroid.  Kandungan  dalam  buah  lemon yang  mampu  mengikat  logam  Cu  adalah  asam  sitrat dan flavonoid.
Tabel 1. Hasil uji kandungan fitokimia pada perasan buah lemon Uji Senyawa Reagen Teoritis Hasil Keterangan Asam sitrat Asam sulfat pekat Warna lebih gelap Warna lebih gelap Positif Perak nitrat Endapan putih Endapan putih Positif Flavonoid HCl Pekat dan Serbuk Mg Orange Orange Positif Alkaloid Asam sulfat 2N + Mayer Endapan putih Endapan putih Positif Asam sulfat 2N + Wagner Endapan coklat Endapan coklat Positif Asam sulfat 2N + Dragondroff Endapan jingga Endapan jingga Positif Tanin Gelatin 0,5% Endapan coklat Tidak terdapat endapan coklat Negatif Saponin Air dikocok 1 menit + HCl 1N Busa stabil Busa stabil Positif Steroid/Triterpe noid Liberman burchard Merah/violet untuk triterpenoid Biru Positif steroid, negatif triterpenoid Hijau/biru untuk steroid

## Uji Kuantitatif keberadaan logam dalam sampel
Uji  kuantitatif  ini  bertujuan  untuk  mengetahui keberadaan  logam  tembaga  pada  perasan  buah  lemon yang  akan  digunakan  untuk  penelitian.  Buah  lemon jika mengandung logam tembaga dapat mempengaruhi kadar logam mula-mula sebelum di  tambahkan logam. Hasil  dari  uji  kuantitatif  pada  sampel  sari  buah  lemon yang digunakan mengandung logam tembaga konsentrasi  10%  kandungan  logam  dalam  sampel 0,0374%,  konsentrasi  20%  kandungan  logam  dalam sampel  0,0662%,  konsentrasi  30%  kandungan  logam dalam  sampel  0,6258%,  konsentrasi  40%  kandungan logam  dalam  sampel  0,8604%,  konsentrasi  50% kandungan  logam  dalam  sampel  0,6103%,  konsentrasi 60%  kandungan  logam  dalam  sampel  0,2508%, konsentrasi  70%  kandungan  logam  dalam  sampel 0,1743%.  Kandungan  logam  tembaga  ini  akan diperhitungkan  dalam  presentse  penurunan  kadar logam tembaga.

## Uji penurunan logam tembaga
Pengujian  buah  lemon  terhadap  penurunan  kadar logam tembaga seri konsentrasi buah lemon 10, 20, 30, 40,  50,  60  dan  70%  yang  telah  ditambahkan  logam tembaga  10  ppm.  Proses  pengikat  logam  dilakukan 60  menit  untuk  memaksimalkan  penurunan  kadar logam  tembaga.  Proses  pemisahan  kompleks  dengan sisa  logam  tembaga  dilakukan  melalui  metode ekstraksi. Metode ekstraksi dilakukan pada lemon yang sudah  ditambahkan  dengan  logam.  Ekstrasi  dilakukan menggunakan  pelarut  organik  kloroform  penambahan
kloroform  bertujuan  untuk  memisahkan  sisa  logam tembaga dengan kompleks. Pelarut tersebut mempunyai  sifat  non  polar  dibanding  dengan  air  dan tidak  bercampur  dengan  air.  Senyawa  yang  masuk dalam  fase  kloroform  yaitu  senyawa  non  polar sedangkan  senyawa  yang  masuk  dalam  air  yaitu senyawa polar. Sifat kepolaran akan sangat berpengaruh  terhadap  kemudahan  kompleks  yang terbentuk  terdistribusi  ke  fase  organik,  sedangkan sifatnya  yang  tidak  bercampur  dengan  air  akan memudahkan  dalam  proses  pemisahan  kompleks tersebut  dari  campurannya  dalam  fase  air  (Anggraini dkk., 2014). Senyawa yang masuk dalam fase air yaitu flavonid  sedangkan  senyawa  yang  masuk  dalam  fase kloroform alkaloid. Fase air yang diperoleh selanjutnya di analisis Spektrofotometer Serapan Atom.
Hasil dari Tabel 2 sari buah lemon semakin tinggi konsentrasi  perasan  buah  lemon  semakin  besar penurunan  logam  tembaga.  Hal  ini  berarti  senyawa organik  yang terdapat  pada sari  lemon dapat  mengikat logam  tembaga.  Penurunan  logam  tembaga  kosentrasi 10%  sebesar  0,69 (±  0,42%),  konsentrasi  20%  sebesar 1,80  (±  0,42%),  konsentrasi  30%  sebesar  11,85 (±  1,28%),  konsentrasi  40%  sebesar  33,57  (±  0,33%), konsentrasi  50%  sebesar  49,92  (±  0,86%),  konsentrasi 60%  sebesar  54,14  (±  0,69%)  dan  konsentrasi  70% sebesar  64,89  (±  0,30%).  Nilai  EC 50 yang  diperoleh dari  penelitian  pengembangan  mengenai  pemanfaatan perasan  buah  lemon  sebagai  khelating  agent  logam berat Cu yaitu 55,88%.
Tabel 2. Rata-rata penurunan kadar tembaga dari setiap konsentrasi konsentrasi sampel Penurunan kadar logam tembaga %KV Persamaan regresi linear EC 50 10% 0,69% 0,42 y =1,1975x + -16,9157 55,88% 20% 1,80% 0,42 30% 11,85% 1,28 40% 33,57% 0,33 50% 49,92% 0,86 60% 54,14% 0,69 70% 64,89% 0,30
Senyawa  organik  dalam  sari  buah  lemon  yang berperan  dalam  mengikat  logam  menurut  penelitian yang  sebelumnya  adalah  senyawa  asam  sitrat  dan flavonoid.  Asam  sitrat  mempunyai  gugus  fungsional karboksil  –COOH,  mengalami  deprotonisasi,  sehingga mempunyai  peluang membentuk  kompleks dengan ion logam yang disebut khelasi (Gambar 1).
Gambar 1. Reaksi asam sitrat dengan logam Cu (Wandya, 2018)
Senyawa  flavonoid  dapat  mentransfer    elektron atau  atom  hidrogennya  untuk  dilakukan  pengikatan dengan  logam  berat.  Senyawa  organik  yang  dapat berikatan  dengan  ion  logam  membentuk  kompleks dengan  struktur  seperti  cincin  yang  disebut  dengan kelat.  (Gambar 2). Reaksi  dari  pengikatan logam berat oleh flavonoid sebagai berikut:
Gambar 2. Reaksi flavonoid dengan logam Cu (Widyawati, 2007)
Koefisien variasi  (%KV) ditetapkan untuk mengetahui  kedekatan  hasil  analisis  satu  dengan  hasil analisis  lain  dari  suatu  seri  pengukuran  secara berulang-ulang  dari  sampel  yang  homogen,  kriteria nilai  KV  yang  baik  adalah  kurang  dari  2%.  Nilai  KV yang diperoleh dari masing-masing konsentrasi kurang dari  2%.  Hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  data diperoleh memenuhi  persyaratan yaitu kurang dari  2% (Harmita, 2004), maka dapat dikatakan data replikasi 1, replikasi  2,  dan  replikasi  3  tidak  berbeda  jauh  hal tersebut  menunjukkan  bahwa  data  diperoleh  dengan tingkat ketelitian kerja yang baik.

## KESIMPULAN
Sari  lemon Citrus  limon (L.)  Burm.  f.  mampu menurunkan  kadar  logam  berat  tembaga  (Cu)  dan memiliki nilai EC 50 sebesar 55,88%.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggraini,  D.  I.,  Sukirno  &  Wulansari,  A.  D.  (2014).
Antidotum  Logam  Timbal  (Pb)  secara  In  Vitro dengan  Seduhan  Air  Teh  Hijau. Jurnal  Ilmiah Kesehatan; 6; 105-108.
Destria,  M.,  Ari,  W.  &  Afghani,  J.  (2019).  Senyawa
Flavonoid  dari  Fraksi  Diklorometana  Buah Mangga  Golek ( Mangifera  spp. ) sebagai pengompleks  Fe 2+ . Jurnal  Kimia  Khatulistiwa;
8; 17-25.
Erviani, E. A., Arif, R. A. & Nurfahmiatunnisa. (2019).
Analisis  Rendemen  dan  Skrining  Fitokimia Ekstrak  Cacing  Laut Eunice  siciliensis . Jurnal Ilmu Alam dan Lingkungan; 10; 1-7.
Faskalia & Wibowo, A. M. (2014). Skrining Fitokimia Uji  Aktivitas  Antioksidan  dan  Uji  Sitotoksik Ekstrak  Metanol  pada  Akar  dan  Kulit  Batang Soma ( Ploiarium  alternifolium ). Jurnal  Kimia
Khatulistiwa; 3; 1-6
Harisman,  M. H. (2017). Efektivitas Air Perasan Buah
Lemon  ( Citrus  Limon ) terhadap  Penurunan Kadar  Timbal (Pb)  Pada  Daging  Ikan  Nila Hitam (Oreochromis nilaticus) . Skripsi; Fakultas Farmasi Universitas Al-Ghifari, Bandung.
Harmita.  (2004).  Petunjuk  Pelaksanaan  Validasi
Metode dan Cara Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian; 1; 117-135.
Hartika,  F.  (2018).  Pemanfaatan  Air  Perasan  Jeruk Lemon (Citrus  limon) terhadap  Penurunan Kadar  Kadmium  pada  Kerang  Darah ( Anadara Granosa  L .)  secara  Spektrofotometri  Serapan Atom. Skripsi; Fakultas  Farmasi  Universitas Sumatera Utara, Medan.
Khotimah,  K.  (2016).  Skrining  Fitokimia  dan Identifikasi Metabolit Sekunder Senyawa
Karpain  pada  Ekstrak  Metanol  Daun (Carica
pubescens  Lenne)  &  K.  Koch  dengan  LC/MS (Liquid Chromatograph-Tandem Mass Spectrometry) . Skripsi; Fakultas  Sains  dan Teknologi  Universitas  Islam  Negeri  Maulana Ibrahim, Malang.
Kuntum,  K. (2014).  Analisis  Kadar  tembaga  (Cu)  dan
Seng  (Zn)  dalam  air  Minuman  Isi  Ulang Kemasan  Galon  di  Kecamatan  Lima  Kaum Kabupaten  Tanah  Datar. Jurnal  Sainstek;  6; 116-123
Mabruroh  I.  A.  (2015).  Uji  Aktivitas  Antioksidan Ekstrak  Tanin  dari  Daun  Rumput  Bambu
(Lophatherum gracile Brongn) dan
Identifikasinya. Skripsi; Fakultas  Sains  dan Teknologi  Universitas  Islam  Negeri  Maulana Malik Ibrahim, Malang.
Nurvita,  S.  N.,  Yunita  &  Astorina,  Nikie.  (2015).
Pengaruh  Variasi  Konsentrasi  Air  Jeruk  Nipis ( Citrus  aurantifolia )  Dalam  Menurunkan  Kadar Kadmium  (Cd)  Pada  Daging  Kerang  Darah ( Anadara granosa ). Jurnal Kesehatan Masyarakat; 3; 807-818. Puspadewi,  R.,  Anugrah,  R.  &  Sabila,  D.  (2017). Kemampuan Aspergillus wentii dalam
Menghasilkan  Asam  Sitrat. Jurnal  Ilmiah Farmasi; 5; 15-20
Solihah,  M.,  Rachmadiarti,  F.  &  Raharjo.  (2016).
Pemanfaatan  Filtrat  Asam  Jawa (Tamarindus indica. L ) untuk menurunkan Kadar Timbal (Pb)
pada Ikan Bander Putih (Barbonymus gonionotus) . Lentera Bi; 5; 133-138.
Wandya, T. U., (2018). Efektivitas Larutan Jeruk Nipis terhadap  Penurunan  Kadar  Timbal (Pb) pada Kerang  Darah (Andara  granosa) Tahun  2018.
Skripsi; Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Sumatera Utara, Medan.
Widyawati,  W.  (2007).  Efek  Ekstrak  Daun  Sambung
Nyawa  ( Gynura  procumbens ( Lour )) .  Skripsi; Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Wijaya, P. D., Paendonga, E. J. & Abidjulu, J.  (2014),
Skrining Fitokimia dan Uji Aktivitas Antioksidan dari Daun Nasi (phrynium capitatum) dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2- pikrilhidrazil) . Jurnal MIPA UNSRAT ONLINE;
3; 11-15.