FOTOREDUKSI BESI Fe 3+ MENGGUNAKAN EKSTRAK DAUN KAYU MANIS ( Cinnamomum burmanii )
Meizy Vaneza Tan 1) , Johnly A. Rorong 1) , Meiske S. Sangi 1)
1) Jurusan Kimia, FMIPA Universitas Sam Ratulangi Manado e-mail: tanmeizy@gmail.com; rorongjohnly@yahoo.co.id; meiskesangi@gmail.com

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  fotoreduksi  besi  Fe 3+ menggunakan  ekstrak  daun  kayu  manis ( Cinnamomum  burmanii )  dengan  bantuan  cahaya fluorescent 65  watt.  Penelitian  ini  dilaksanakan pada  bulan  Juli  –  September  2017, bertempat  di  Laboratorium  Biokimia  Jurusan  Kimia; Laboratorium  Penelitian  Jurusan  Farmasi;  dan  Laboratorium  UPT  Terpadu  Universitas  Sam Ratulangi,  Manado.  Serbuk  daun  kayu  manis  diekstraksi  secara  refluks  dengan  metanol:  40;  60; dan  80%.  Kandungan  total  fenolik;  flavonoid;  dan  tanin  ditentukan  dengan  reagen  Folin- Ciocalteu;  AlCl 3 ;  dan  vanilin-HCl.  Untuk  kandungan  besi  tereduksi  diukur  dengan  pembentukan kompleks  besi(II)bipiridin.  Hasil  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol:  40;  60; dan  80%  memiliki  kemampuan  dalam  mereduksi  besi.  Untuk  ekstrak  metanol  60%  mempunyai efek  fotoreduksi  besi  yang  baik  dimana  kandungan  besi(II)  yang  terbentuk  sebesar  63,833  mg/L dengan  waktu  penyinaran  selama  2  jam,  dibandingkan  ekstrak  dengan  konsentrasi  pelarut  metanol lainnya
Kata  Kunci:  Daun  Kayu  Manis,  Fenolik,  Flavonoid,  Tanin,  Fotoreduksi  Besi
Fe 3+ IRON  PHOTOREDUCTION  USING  CINNAMON  LEAF EXTRACT ( Cinnamomum  burmanii )

## ABSTRACT
A  study  of Fe 3+ iron  photoreduction  has  been  done  using  cinnamon  leaf  extract  ( Cinnamomum burmanii )  with  the  aid  of  65  watt fluorescent light.  This  research  was  conducted  in  July  - September  2017,  held  at  Biochemistry  Laboratory  of  Chemistry  Department;  Research  Laboratory of  Pharmaceutical  Department;  and  the  Integrated  UPT  Laboratory  of  Sam  Ratulangi  University, Manado.  The  cinnamon  leaf  powder  is  extracted  by  reflux  with  methanol:  40;  60;  and  80%.  Total phenolic  content;  flavonoids;  and  tannins  are  determined  by  Folin-Ciocalteu  reagents; AlCl 3 ;  and vanilin-HCl.  For  reduced  iron  content  is  measured  by  the  formation  of  iron(II)bipyridine  complex. The  result  showed  that  methanol  extracts:  40,  60:  and  80%  had  ability  in  reducing  iron.  Methanol extract  60%  had  good  iron  photoreduction  effect  in  which  the  iron(II)  content  was  formed  at 63.833 mg/L with  irradiation  time  for  2  hours,  compared  to  extract  with  other  methanol  solvent concentration.
Keywords:  Cinnamon  Leaf,  Phenolic,  Flavonoid,  Tannin,  Iron Photoreduction

## PENDAHULUAN
Indonesia terkenal dengan kekayaan flora  dan  fauna  yang  melimpah.  Di  Sulawesi Utara,  produk-produk  alami  sebagai  sisa  atau bagian  akhir  dari  proses  kehidupan  flora, yang  merupakan  produk-produk  dan  bagian dari  suatu  ekosistem,  seperti  batang  kayu  dan daun-daunan  belum  diolah  dan  dimanfaatkan. Tanaman kayu manis ( Cinnamomum burmanii )  adalah  salah  satu  flora  yang  ada  di
Sulawesi  Utara  yang  biasanya  diambil  kulit batangnya  sebagai  bahan  baku  rempah  dan menghasilkan limbah  berupa  daun  yang belum diolah secara optimal, hanya dibiarkan,  dibuang  bahkan  dibakar  sehingga terjadi  pencemaran  udara.
Tanaman kayu manis dimanfaatkan sebagai  obat  tradisional  untuk  sariawan, batuk,  sesak  napas,  nyeri  lambung,  diare, perut kembung, rematik, menghangatkan
2 Jurnal Ilmiah Sains Vol. 18 No. 1, April 2018
lambung,  dan  juga  sebagai    antikanker (Vangalapati et  al .,  2012).  Handayani  (2014)
mengatakan kayu manis mengandung senyawa metabolit sekunder berupa
flavonoid,  saponin,  fenol,  tanin,  dan  sterol/ triterpenoid.
Senyawa  fenolik,  flavonoid,  dan  tanin merupakan  bahan  organik  yang  diekstrak  dari limbah  pertanian,  seperti  daun  cengkih,  eceng gondok,  dan  jerami  padi,  apabila  ekstrak dikenai cahaya matahari,  bahan  organik tersebut dapat bertindak sebagai  bahan sensitizer  alami  (biosensitizer)  pada  proses fotoreduksi  besi  (Rorong  dan  Suryanto, 2014).  Bahan  sensitizer  adalah  suatu  bahan organik  yang  mengandung  komponen  fenolik yang  bersifat  sangat  peka/  sensitif  terhadap cahaya  sinar  ultra  violet  (UV)  dari  matahari sehingga  dapat  bertindak  sebagai  donor elektron  (Rorong,  2012).  Ekstrak  fenolik, flavonoid,  dan  tanin  pada  limbah  pertanian, seperti  daun,  kulit,  dan  cangkang  biji  pala yang diekstraksi dengan cara refluks memiliki kemampuan sebagai sensitizer alami  pada  proses  fotoreduksi  besi  dengan bantuan  cahaya fluorescent,  incandescent , dan UV (Tempomona et al., 2015).
Tanaman  memerlukan  makanan  yang disebut  unsur  hara  tanaman.  Tanaman  yang kekurangan  atau  ketiadaan  unsur  hara  akan menampakkan gejala pada suatu organ tertentu  yang  spesifik  yang  disebut  gejala kekahatan,  dan  gejala  ini  akan  hilang  apabila unsur  hara  pada  tanaman  ditambahkan  ke dalam  tanah  atau  melalui  daun  (Rosmarkam dan  Yuwono,  2002).  Salah  satu  unsur  hara yang  dibutuhkan  tanaman  adalah  zat  besi. Secara  umum,  tanaman  mengambil  besi dalam  bentuk  ion  Fe 2+ ,  tetapi  ketersediaan besi  di  alam  dalam  bentuk  ion  Fe 3+ .  Oleh karena  itu  ion  Fe 3+ harus  direduksi  lebih dahulu  menjadi  ion Fe 2+ (Rorong, 2012).
Limbah  daun  kayu  manis  mengandung bahan  organik  yang  dapat  diolah  menjadi bahan  sensitizer  alami  (biosensitizer)  untuk fotoreduksi besi yang bermanfaat bagi pertumbuhan tanaman dan meningkatkan kesuburan  tanah.  Namun  sampai  saat  ini, belum  ada  penelitian  yang  mengungkapkan tentang  peran  komponen  fenolik,  flavonoid, dan  tanin  dari  ekstrak  daun  kayu  manis sebagai donor elektron yang dapat menghasilkan  bahan  sensitizer  alami  untuk proses  fotoreduksi  besi.  Oleh  karena  itu peneliti  tertarik  untuk  melakukan  penelitian
mengenai Fotoreduksi Besi Fe 3+
menggunakan  Ekstrak  Daun  Kayu  Manis ( Cinnamomum burmanii ). Penelitian ini dilaksanakan  pada  bulan  Juli  –  September 2017, bertempat  di  Laboratorium  Biokimia Jurusan Kimia; Laboratorium Penelitian Jurusan  Farmasi;  dan  Laboratorium  UPT Terpadu Universitas  Sam Ratulangi,  Manado.

## BAHAN  DAN METODE

## Alat  dan  Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu  alat-alat  gelas, sudip,  neraca  analitik  (Shimadzu),  botol serum  25  mL,  blender,  aluminium  voil,  kertas saring,  ayakan  65  mesh,  vorteks, rotary vacuum
evaporator (STRIKE 300– Steroglass), oven (Memmert),
spektrofotometer  UV-Vis  (Shimadzu  UV- 1800),  ruang  penyinaran  yang  dilengkapi dengan  cahaya fluorescent 65  Watt  berukuran 70 x 50 x 60 cm , seperangkat  alat  refluks.
Bahan  yang  digunakan  adalah  daun  kayu manis, akuades, metanol (CH 3 OH)  pro analis/p.a,  etanol  (C 2 H 5 OH)  p.a,  reagen  Folin Ciocalteu, natrium karbonat (Na 2 CO 3 ), aluminium  klorida  (AlCl 3 ),  vanilin,  asam klorida pekat (HCl), larutan logam ammonium besi(III) sulfat dodekahidrat (NH 4 Fe(SO 4 ) 2 ∙12H 2 O), larutan logam ammonium besi(II)sulfat heksahidrat
((NH 4 ) 2 Fe(SO 4 )2∙6H 2 O,  dan  2,2’  bipiridin 0.07%.

## Preparasi  Sampel
Sampel  daun  kayu  manis  yang  diperoleh terlebih dahulu dibersihkan
dan dikeringanginkan  pada  suhu  ruang  (25 0 C) selama  14  hari,  selanjutnya  diblender  dan disaring  dengan  ayakan  65  mesh  sehingga diperoleh  serbuk daun kayu  manis.

## Ekstraksi
Sebanyak  25  g  serbuk  daun  kayu  manis diekstraksi  dengan  refluks  menggunakan  500 mL  metanol:  40;  60;  dan  80%  selama  2  jam. Selanjutnya disaring menggunakan kertas saring  dan  diperoleh  filtrat  serta  endapan, ekstraksi  dilakukan  secara  duplet.  Filtrat dipekatkan    menggunakan rotary  vacuum evaporator sehingga  diperoleh  ekstrak  kental masing-masing  konsentrasi  pelarut.  Ekstrak kental  kemudian  dioven  4x24  jam  pada  suhu 40 o C sehingga diperoleh ekstrak  kering masing-masing  konsentrasi  pelarut.

## Kandungan  Total Fenolik
Pengujian kandungan total fenolik ekstrak  dengan  metode  Jeong et  al .  (2004). Sebanyak  0,1  mL  larutan  ekstrak  1000 µg/mL dari
masing-masing-masing konsentrasi  pelarut  dimasukkan  ke  dalam tabung  reaksi  dan  ditambahkan  0,1  mL reagen Folin  Ciocalteu  50%.  Kemudian divorteks  kurang  lebih  selama  3  menit  dan ditambahkan  2  mL  larutan  Na 2 CO 3 2%  lalu divorteks kembali. Selanjutnya campuran
diinkubasi  selama  30  menit  pada  suhu  ruang.
Absorbansi ekstrak dibaca pada
spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang gelombang 750 nm. Hasilnya  diplotkan terhadap  kurva  standar  asam  galat  yang dipersiapkan dengan cara yang sama. Kandungan  total  fenolik  dinyatakan  sebagai mg  ekuivalen  asam  galat/g  sampel  dengan metode Abdelhady et al . (2011)
menggunakan  persamaan  rumus  yaitu  :
𝑇 = 𝐶 𝑥 𝑉 𝑚
Keterangan:
T :Kandungan total fenolik (mg/g) dariekstrak  sebagai  ekuivalen  asam galat C   :Konsentrasi asam galat yang terbentukdari  kurva  kalibrasi  (mg/mL)
V   :Volume  Larutan  ekstrak  (mL)
m :Berat  ekstrak  (g)

## Kandungan  Flavonoid
Penentuan  kandungan  flavonoid  ekstrak ditentukan  menurut  metode  Meda  et  al. (2005).  Sebanyak  2  mL  larutan  ekstrak ditambahkan  dengan  2  mL  AlCl 3 2%  yang telah  dilarutkan  dalam  metanol,  kemudian divorteks  dan  dibaca  absorbansinya  pada spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang gelombang 415 nm. Hasilnya  diplotkan terhadap kurva standar kuersetin yang dipersiapkan dengan cara yang sama.
Kandungan total flavonoid dinyatakan
sebagai  mg ekuivalen  kuersetin/g  sampel.
Kandungan  Tanin Penentuan kandungan tanin ekstrak ditentukan  menurut  metode  Julkunen-Titto (1985).  Sebanyak  0,1  mL  larutan  ekstrak dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  yang dibungkus  aluminium  foil,  lalu  ditambahkan 2  mL  vanilin  4%  dalam  metanol  (b/v)  dan divorteks.  Setelah  itu  ditambahkan  1  mL  HCl pekat dan divorteks lagi. Selanjutnya campuran  diinkubasi  selama  20  menit  pada
suhu  ruang.  Absorbansi  ekstrak  dibaca  pada spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang gelombang 500 nm. Hasilnya  diplotkan terhadap kurva standar katekin yang dipersiapkan dengan cara yang sama. Kandungan total tanin terkondensasi dinyatakan  sebagai  mg  ekuivalen  katekin/g sampel.
Fotoreduksi  Ion  Fe 3+ dari  Ekstrak  Daun Kayu  Manis
Pengaruh  ekstrak  terhadap  fotoreduksi ion Fe 3+ menggunakan metode Saragih (2002)  yang  dimodifikasi.  Ekstrak  daun  kayu manis 1000 ppm diinteraksikan dengan larutan logam NH 4 Fe(SO 4 ) 2 ∙12H 2 O pada konsentrasi  25  ppm  yang  dilarutkan  di  dalam akuades.  Sampel  diambil  sebanyak  20  mL dan  dimasukkan  ke  dalam  botol  serum berukuran  25  mL  kemudian  botol  ditutup dengan sumbat karet. Sampel tersebut diletakkan  ke  dalam  kotak  cahaya fluorescent 65  Watt  selama  5  jam.  Sampel  diambil sebanyak  5  kali,  yaitu  0,  1,  2,  3,  dan  5  jam. Setelah  selesai  penyinaran  dilakukan  analisis kadar besi tereduksi. Hal yang sama dilakukan  pada kondisi  tanpa  cahaya.

## Kandungan  Besi Tereduksi
Interaksi  ekstrak  daun  Kayu  Manis dengan  besi  dievaluasi  efeknya  terhadap fotoreduksi  ion  Fe 3+ .  Sampel  sebanyak  2  mL dicampur dengan 0,5 mL  2,2’-bipiridin 0,07%  dan  divorteks  selama  2  menit  dan absorbansi sampel dibaca pada
spektrofotometer  UV-Vis  dengan  panjang gelombang 520 nm  pada  suhu  ruang. Hasilnya  diplotkan  terhadap  kurva  standar (NH 4 ) 2 Fe(SO 4 ) 2 ∙6H 2 O yang dipersiapkan dengan  cara  yang  sama.  Kandungan  besi yang tereduksi dinyatakan sebagai mg ekuivalen
(NH 4 ) 2 Fe(SO 4 ) 2 ∙6H 2 O/ liter sampel.

## HASIL  DAN PEMBAHASAN

## Ekstraksi
Dari  proses  ekstraksi  refluks  serbuk daun  kayu  manis  masing-masing  konsentrasi pelarut,  diperoleh  berat  ekstrak  metanol  40; 60;  dan  80%  secara  berturut-turut  4;  5,3;  dan 5 g dengan warna coklat kehitaman. Pemilihan  metode  ekstraksi  dengan  cara refluks  ini  dilakukan  karena  berdasarkan penelitian  dari  Utami  et  al.  (2015),  metode
Na 2 WO 4 /Na 2 MoO 4(Kuning) + Fenol                    (Fenol-MoW 11 O 40 ) -4 (Biru) Mo 6+ (Kuning) +    e - Mo 5+ (Biru)
ekstraksi  dengan  cara  refluks  dari  ekstrak metanol daun sukun (Artocarpus altilis (Parkonsin) Fosberg) menghasilkan kandungan  fenolik,  flavonoid  dan  tanin  yang tinggi  dibandingkan  dengan  metode  maserasi bertingkat.
Metanol digunakan sebagai  pelarut dalam  ekstraksi  daun  kayu  manis  karena metanol  merupakan  pelarut  universal  yang dapat  melarutkan  hampir  semua  senyawa metabolit  sekunder  yang  bersifat  polar  dan non  polar  (Firdausi  et  al.,  2015).  Penentuan rendemen  berfungsi  untuk  mengetahui  kadar metabolit  sekunder  yang  terbawa  oleh  pelarut tersebut  namun  tidak  dapat  menentukan  jenis senyawa  yang  terbawa  tersebut  (Ukieyanna, 2012).  Rendemen  ekstrak  daun  kayu  manis masing-masing konsentrasi pelarut dapat dilihat  pada Tabel  1.
Tabel  1 .  Rendemen  Ekstrak  Daun  Kayu Manis pada Masing-masing Konsentrasi  Pelarut
Berdasarkan  Tabel  1  terlihat  bahwa  persen rendemen  tertinggi  ditunjukkan  oleh  ekstrak metanol  60%  diikuti  dengan  metanol  80% dan  metanol  40%  berturut-turut  21,2;  20;  dan
16%.  Tingginya  rendemen  ekstrak  metanol 60%  dibandingkan  metanol  80%  dan  40% mungkin disebabkan sebagian senyawa fenolik  dalam  daun  kayu  manis  lebih  banyak larut dalam sistem tersebut. Menurut
Harborne  (1987)  pelarut  metanol  diduga mempunyai  sifat  yang  dapat  melarutkan semua  jenis  komponen  yang  berupa  senyawa polar, non polar, dan semi  polar.

## Kandungan  Total Fenolik
Pembuatan larutan ekstrak untuk pengujian  fenolik  dilakukan  dengan  cara ditimbang  0,01  gram  ekstrak  dari  masing- masing  konsentrasi  pelarut  dan  dilarutkan dalam  etanol  p.a  sebanyak  10  mL  sehingga menghasilkan  larutan  ekstrak  1000  µg/mL. Kandungan  total  fenolik  dinyatakan  sebagai mg  ekuivalen  asam  galat/g  ekstrak.  Asam
galat digunakan sebagai larutan standar dikarenakan  asam  galat  mempunyai  gugus hidroksil  dan  ikatan  rangkap  terkonjugasi pada  masing-masing  cincin  benzena  sehingga sangat  efektif  untuk  membentuk  senyawa kompleks dengan reagen Folin-Ciocalteu (Julkunen-Titto,  1985).
Kandungan total fenolik dilakukan dengan  membuat  kurva  standar  asam  galat dari  konsentrasi  dengan  absorbansi  sehingga diperoleh  persamaan  regresi  yaitu  y  = 0,0063x  +  0,0578  (x  =  kandungan  total fenolik  (mg/g); dan  y  =  absorbansi)  dengan R²  =  0,9967.  Larutan  standar  asam  galat dibuat  dengan  konsentrasi  0;  10;  20;  30;  40; dan  50  µg/mL.  Nilai  R 2 atau  koefisien determinasi  merupakan  angka  yang  nilainya berkisar  0  sampai  1  yang  menunjukkan seberapa  dekat  nilai  perkiraan  untuk  analisis regresi  yang  mewakili  data  yang  sebenarnya. Analisis  regresi  dapat  dipercaya  jika  nilai  R 2 - nya  sama  dengan  atau  mendekati  1  (Siagian dan Sugiarto,  2006).
Menurut  Agbor et  al .  (2014)  reaksi  kimia yang  terjadi  dengan  reagen  folin  ciocalteu sebagai  berikut.
Kandungan  total  fenolik  dalam  ekstrak daun kayu manis ditentukan dengan menggunakan metode Folin-Ciocalteu berdasarkan  kemampuan  senyawa  fenolik dalam  ekstrak  daun  kayu  manis  bereaksi dengan asam fosfomolibdat-fosfotungstat dalam  reagen  Folin-Ciocalteu  (kuning)  yang akan  mengalami  perubahan  warna  menjadi biru,  semakin  tua  intensitas  warna  yang dihasilkan  maka  total  kandungan  senyawa fenolik  dalam  esktrak  semakin  besar  (Shahidi dan Naczk, 1995). Dalam penentuan kandungan total fenolik ini digunakan Na 2 CO 3 yang  bertujuan  untuk  membentuk suasana  basa  agar  terjadi  reaksi  reduksi Folin-Ciocalteu  oleh  gugus  hidroksil  dari fenolik  di  dalam  sampel  (Nely,  2007). Kandungan  total  fenolik  ekstrak  masing- masing  konsentrasi  pelarut  dapat  dilihat  pada Gambar  1. Ekstrak Berat Sampel (g) Berat Ekstrak (g) Rendemen (%) Metanol 40% 25 4 16 Metanol 60% 25 5.3 21.2 Metanol 80% 25 5 20
Gambar 1. Kandungan  total  fenolik  (mg/g) masing-masing konsentrasi pelarut
Dari  Gambar  1  terlihat  bahwa  kandungan fenolik  yang  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak metanol  80%  yaitu  71,540  mg/g,  diikuti metanol  60%    (55,270  mg/g),  dan  metanol 40% (42,016 mg/g). Fenol merupakan senyawa yang bersifat polar sehingga
kelarutannya paling  tinggi  dalam  pelarut polar.  Pelarut  yang  bersifat  polar  mampu melarutkan fenol lebih baik sehingga kadarnya dalam ekstrak menjadi tinggi (Moein dan Mahmood, 2010). Tinggi rendahnya  kandungan  fenolik  pada  masing- masing  konsentrasi  pelarut  karena  senyawa yang  terekstrak  dalam  metanol  80%  bersifat polar  dengan  polaritas  yang  lebih  rendah dibandingkan  metanol  60%  dan  metanol 40%.
Menurut  Aiken et  al .  (1985),  senyawa fenolik memiliki kemampuan untuk mereduksi  beberapa  ion  logam  teroksidasi karena  senyawa  fenolik  banyak  terdapat gugus  yang  dapat  dijadikan  sebagai  donor elektron,  seperti  gugus  –OH  fenol  namun  hal ini  juga  dipengaruhi  oleh  tinggi  rendahnya konsentrasi  fenolik  dalam  suatu  ekstrak  yang berhubungan  dengan  aktivitas  penyumbang elektron  dalam  fotoreduksi  besi.

## Kandungan  Flavonoid
Kandungan  flavonoid  dinyatakan  sebagai mg ekuivalen kuersetin/ g ekstrak.
Kandungan flavonoid dihitung dengan menggunakan  persamaan  garis  linear  kurva standar  kuersetin  (mg/g)  yaitu  y  =  0,0096x  – 0,0251  (x  =  kandungan  flavonoid  (mg/g); dan y  =  absorbansi)  dengan  R 2 =  0,9894  (Tulung et  al .,  2017).  Penentuan  kandungan  flavonoid dilakukan dengan kompleks
AlCl 3 berdasarkan  pembentukan  warna  (kuning). Prinsip  penetapan  flavonoid  dengan  metode AlCl 3 adalah terbentuknya senyawa kompleks  antara  AlCl 3 dengan  gugus  keto pada  atom  C-4  dan  juga  dengan  gugus hidroksi  pada  atom  C-3  atau  C-4  yang
bertetangga  dengan  flavon  dan  flavonol (Cahyanta,
2016).Kandungan flavonoid ekstrak dari masing-masing konsentrasi pelarut  dapat dilihat  pada Gambar  2.
Gambar 2. Kandungan  total  flavonoid (mg/g) masing-masing
konsentrasi  pelarut
Dari  Gambar  2  menunjukkan  bahwa ekstrak  metanol  80%  memiliki  kandungan flavonoid  yang  tertinggi  yaitu  30,583  mg/g, diikuti  oleh  ekstrak  metanol  60%  (26,521 mg/g),  dan  ekstrak  metanol  40%  (22,823 mg/g).  Hasil  ini  menunjukkan  bahwa  ada hubungan  yang  positif  antara  kandungan flavonoid  dengan  kandungan  fenolik  dari ketiga  jenis  pelarut  yang  digunakan  untuk mengekstraksi  daun  kayu  manis.  Menurut Larson  (1988),  komponen  fenolik  seperti flavonoid  yang  dikenal  sebagai  antioksidan primer  dari  tanaman  bersifat  polar  sehingga dapat larut  pada pelarut  metanol.
Menurut  Azizah et  al .  (2014)  reaksi kimia yang terjadi antara flavonoid (kuersetin)  dengan  AlCl 3 sebagai  berikut.
O HO OH O OH OH OH O HO O OH OH OH O Al Cl Cl + AlCl 3 + HCl

## Kuersetin
Menurut  Rorong  dan  Suryanto  (2014), flavonoid  merupakan  komponen  oganik  yang dapat  melindungi  sel  dari  senyawa  oksigen reaktif  (ROS)  dan  berfungsi  juga  sebagai agen  pengkhelat  besi  (Fe)  hal  ini  dikarenakan flavonoid  mempunyai  gugus  karboksil  dan satu  gugus  fenolik  atau  dua  gugus  hidroksil yang  berdekatan  yang  dapat  bereaksi  dengan ion Fe menghasilkan  kompleks  yang  stabil.

## Kandungan  Tanin
Kandungan  tanin  dinyatakan  sebagai  mg ekuivalen  katekin/  g  ekstrak.  Kandungan tanin dihitung dengan menggunakan
42.016 55.270 71.540 0 20 40 60 80 Metanol 40% Metanol 60% Metanol 80% K a n d u ng an F e n ol ik (mg /g ) Ekstrak dengan Konsentrasi Pelarut 22.823 26.521 30.583 0 10 20 30 40 Metanol 40% Metanol 60% Metanol 80% K a n d u ng an F la vo n oi d (mg /g ) Ekstrak dengan Konsentrasi Pelarut
persamaan  garis  linear  kurva  standar  katekin (mg/g)  yaitu  y  =  0,0141x  –  0,221  (x  = kandungan  tanin  ( 𝜇 g/ml); dan  y  =  absorbansi) dengan  R 2 =  0,9836  (Tulung et  al .,  2017). Penentuan  kandungan  tanin  dilakukan  dengan uji  vanilin-HCl,  dimana  vanilin  terprotonasi dalam  asam  yang  dapat  dilihat  pada  Gambar 3,  membentuk  karbokation  dan  bereaksi dengan  flavonoid,  dimana  tanin  terkondensasi
terdiri dari polimer flavonoid.  Senyawa antara  yang  dihasilkan  mengalami  reaksi dehidrasi dan menghasilkan senyawa berwarna  ungu  atau  merah,  reaksinya  dapat dilihat  pada  Gambar  4  (Salunkhe  et  al., 1990).    Kandungan  tanin  ekstrak  dari  masing- masing  konsentrasi  pelarut  dapat  dilihat  pada Gambar  5.
H 3 CO HO CHO + H + Vanilin H 3 CO HO CH O + H H 3 CO HO C + H OH
Gambar 3 . Reaksi  protonasi vanilin  dalam  larutan  asam (Salunkhe et al . 1990)
H 3 CO HO C + H OH + A B OH O OH HO OH OH OH Leukosianidin H 3 CO O CH OH O OH HO OH OH O H H OH A B + A B H 3 CO O CH OH O OH HO OH OH OH - H 2 O Gambar  4 .  Reaksi  pembentukan  senyawa kompleks Vanilin-Flavonoid (Salunkhe et al ., 1990)
Gambar  5  terlihat  bahwa  kandungan tanin  yang  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak metanol  40%  yaitu  30,106  mg/g,  diikuti dengan  metanol  60%  (29,468  mg/g),  dan metanol 80%
(28,617 mg/g). Hasil kandungan tanin tidak sejalan dengan kandungan  fenolik,  hal  ini  diduga  dalam ekstrak metanol 80% yang kandungan fenoliknya  tinggi  tetapi  kandungan  taninnya rendah karena yang terekstrak adalah
senyawa  dengan  golongan  fenolik  selain tanin  yaitu  steroid, triterpenoid.
Gambar 5. Kandungan Tanin (mg/g) masing-masing konsentrasi pelarut

## Kandungan  Besi Tereduksi
Kandungan  besi  tereduksi  dinyatakan sebagai miligram ekuivalen (NH 4 ) 2 Fe(SO 4 ) 2 ∙6H 2 O/liter ekstrak.
Kandungan  besi  tereduksi  dihitung  dengan menggunakan  persamaan  garis  linear  kurva standar  (NH 4 ) 2 Fe(SO 4 )2∙6H 2 O  (mg/L)  yaitu  y =  0,006x  +  0,021  dan  R 2 =  0,987.  Kurva standar (NH 4 ) 2 Fe(SO 4 )2∙6H 2 O  (mg/L)  dibuat dengan cara serbuk
(NH 4 ) 2 Fe(SO 4 )2∙6H 2 O ditimbang sebanyak 0,1  g  dan  dilarutkan  dalam  100  mL  aquades (infus), sehingga menghasilkan larutan standar 1000 ppm. Selanjutnya dibuat konsentrasi  0;  10;  20;  30;  40;  dan  50  ppm dari larutan standar 1000 ppm dan dimasukkan ke dalam kotak cahaya fluorescent 65  watt  selama  5  jam.  Larutan dikeluarkan  dari  kotak  cahaya  dan  diambil sebanyak  2  mL  kemudian  dicampur  0,5  mL
30.106 29.468 28.617 27.5 28 28.5 29 29.5 30 30.5 Metanol 40% Metanol 60% Metanol 80% K a n d u n g an T a n in
(mg /g )
2,2’-bipiridin 0,07% dan divorteks. Selanjutnya  dibaca  absorbansi  pada  panjang gelombang 520 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Hasilnya kemudian diplotkan pada grafik
menggunakan program Microsoft Excel. Kemampuan  masing-masing  ekstrak  dalam mereduksi  besi dapat dilihat  pada Gambar  6.
Gambar 6. Konsentrasi  Fe 2+ pada  penyinaran  dengan  lampu fluorescent selama  5  jam menggunakan  ekstrak  daun  kayu  manis  masing-masing  konsentrasi  pelarut.
Pada Gambar 6 terlihat bahwa kemampuan  ekstrak  daun  kayu  manis  dalam fotoreduksi  besi  Fe 3+ →  Fe 2+ ditunjukkan oleh  ekstrak  metanol:  40;  60;  dan  80%. Konsentrasi  Fe 2+ yang  tertinggi  ditunjukkan oleh  ekstrak  metanol  60%  dengan  waktu penyinaran  selama  2  jam  yaitu  sebanyak 63,833  mg/L,  diikuti  ekstrak  metanol  80% sebanyak 44,833 mg/L dengan waktu penyinaran  selama  5  jam,  dan  yang  terendah pada  ekstrak  metanol  40%  yaitu  40,083  mg/L dengan  waktu  penyinaran  selama  3  jam. Konsentrasi  Fe 2+ (mg/L)  yang  terbentuk  dari masing-masing  ekstrak  dan  kontrol  dapat dilihat  pada  Tabel  2.  Hasil  ini  sejalan  dengan data  rendemen  ekstrak  dari  masing-masing konsentrasi  pelarut  metanol.  Dalam  hal  ini tanpa  cahaya  (KTC)  dan  cahaya  (KC) merupakan  kontrol  karena  konsentrasi  yang diperoleh  kecil,  hal  ini  disebabkan  tidak terdapat  ekstrak  melainkan  hanya  larutan ammonium  besi  sulfat  saja.  Kontrol  dengan cahaya  menunjukkan  kenaikan  absorbansi pada jam ke-3 dan ke-5 yang mengindikasikan bahwa hanya dengan cahaya,  besi  Fe 3+ mampu  direduksi  menjadi Fe 2+ ,  dan  dengan  adanya  penambahan  ekstrak fenolik,  flavonoid,  dan  tanin  dari  daun  kayu manis  membuat  proses  reduksi  besi  menjadi lebih  cepat  terjadi.  Hal  ini  dikarenakan elektron yang terdapat  pada  komponen fenolik    dalam  daun  kayu  manis  tereksitasi ketika  terkena  cahaya  dari  lampu fluorescent
65  watt,  elektron  ini  kemudian  didonorkan pada  senyawa  NH 4 Fe(SO 4 ) 2 ∙12H 2 O  sehingga besi  yang  tadinya  dalam  keadaan  ion  Fe 3+ tereduksi  menjadi  ion  Fe 2+ . Kemampuan terbesar pada ekstrak
metanol  60%  dalam  mereduksi  besi  yang dicahayai dengan lampu fluorescent, disebabkan  karena  molekul  yang  menyusun senyawa  fenolik  pada  ekstrak  metanol  60% memerlukan  energi  yang  lebih  sedikit  dalam mengeksitasi elektronnya dibandingkan dengan ekstrak lain sehingga menyerap energi  yang  panjang  gelombangnya  lebih panjang,  dan  energi  yang  dihasilkan  oleh sumber  cahaya fluorescent sebanding  dengan energi yang dibutuhkan untuk mempromosikan elektronnya (Dunkley,
1982).  Waktu  yang  diperlukan  senyawa fenolik  dari  ekstrak  metanol  60%  untuk mereduksi  Fe 3+ menjadi  Fe 2+ lebih  sedikit dibandingkan  dengan  senyawa  fenolik  yang terdapat  pada  ekstrak  metanol  40  dan  80%. Hal  ini  diduga  karena  senyawa  fenolik  yang terekstrak  dalam  metanol  60%  lebih  reaktif terhadap cahaya sehingga membutuhkan waktu  yang  lebih  cepat  dibandingkan  ekstrak dengan konsentrasi  pelarut  metanol  lain untuk  mendonorkan  elektronnya.  Fe 2+ -fenolik merupakan  khelat  yang  mantap  sehingga  besi terlindungi  dari  reaksi  tanah  dan  akan  mudah bermobolisasi  dan  diserap  oleh  tanaman (Buckman,  1982).
-10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 0 1 2 3 4 5 K o n se n tr as i F e 2 + (m g/ l) Waktu (Jam) MeOH 40% MeOH 60% MeOH 80% KC
8 Jurnal Ilmiah Sains Vol. 18 No. 1, April 2018
Tabel  2. Konsentrasi  Fe 2+ (mg/L)  masing-masing  ekstrak  dengan  konsentrasi  pelarut  metanol (MeOH)  dan kontrol
Ekstrak Konsentrasi Fe 2+ per Jam 0 1 2 3 5 MeOH  40% 0,500 29,250 32,667 40,083 39,583 MeOH  60% 2,167 31,333 63,833 38,250 44,083 MeOH  80% 0,417 22,167 23,833 38,333 44,833 KC -1,583 -1,167 -1,667 -1,333 -1 KTC -1,416 -1,25 -1,583 -1,583 -2

## KESIMPULAN
Kandungan  total  fenolik  dan  flavonoid yang  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak  metanol 80%,  diikuti  ekstrak  metanol  60%,  dan terendah pada ekstrak metanol 40%. Kandungan  tanin  berbanding  terbalik  dengan kandungan total fenolik dan flavonoid dimana  yang  tertinggi  terdapat  pada  ekstrak metanol  40%,  diikuti  dengan  ekstrak  metanol 60%,  dan  terendah  pada  ekstrak  metanol 80%.  Ekstrak  fenolik,  flavonoid,  dan  tanin dari  daun  kayu  manis  menggunakan  pelarut metanol:  40;  60;  dan  80%  menunjukkan kemampuan  mereduksi  besi  Fe 3+ menjadi Fe 2+ dan kemampuan yang tertinggi ditunjukkan oleh ekstrak metanol 60% dengan  waktu  penyinaran  yang  dibutuhkan adalah  2 jam.

## DAFTAR PUSTAKA
Abdelhady, M.I.S.,Motaal, A.A.,dan Beerhues,  L.  2011.  Total  Phenolic Content  and  Antioxidant  Activity  of
Standardized  Extracts  from  Leaves  and Cell  Cultures  of  Three Callistemon Species. American  Journal  of  Plant Sciences . 2: 847-850.
Agbor,  G.A.,  Vinson,  J.A.dan  Donnelly,  P.E. 2014.  Folin-Ciocalteau  Reagent  for Polyphenolic Assay. International Journal  of Food Science, Nutrition and Dietetics . 3: 147-156.
Azizah,  D.  N.,  E.  Kumolowati,  dan  F. Faramayuda.  2014.  Penetapan  Kadar Flavonoid  Metode  AlCl 3 pada  Ekstrak Metanol Kulit Buah Kakao ( Theobroma  cacao L). Kartika  Jurnal Ilmiah Farmasi . 2 : 45-49.
Aiken,  G.  R.,  D.  M.  McKnight,  R.  L. Wershaw,  dan  P.  MacCarthy.  1985. Humic  Substances  in  Soil  Sediment and  Water:  Geochemistry,  Isolation, and  Characterization .  John  Willey  and Sons, New York.
Buckman,  H.  O.,  dan  N.  C.  Brady.  1982. Ilmu  Tanah.  Terjemahan  Soegiman.
Bhrata  Karya  Aksara,  Jakarta.
Cahyanta,  A.  N.,  2016.  Penetapan  Kadar Flavonoid  Total  Ekstrak  Daun  Pare Metode  Kompleks  Kolorimetri  dengan
Pengukuran Absorbansi Secara Spektrofotometri. Jurnal Ilmiah Farmasi:  Jurnal  Parapemikir. 5 :  58- 61.
Dunkley,  L.  F.  1982. Effects  of  fluorescent Light  On  Flavor,  Absobic  Acid  and Riboflavin  In  Milk .  Universitas  Of
Calivornis. Firdausi,  I.,  Retnowati,  R.  dan  Sutrisno. 2015. Fraksinasi Ekstrak Metanol Daun Mangga  Kasturi  ( Mangifera  casturi Kosterm )  dengan  Pelarut  n-Butanol. Kimia Student Journal . 1 : 785-790.
Handayani,  R.  2014.  Formulasi  Sediaan Tablet  Hisap  dari  Ekstrak  Etanol  Kulit Kayu  Manis  ( Cinnamomum  burmanni , Blume)  sebagai  Antioksidan. Jurnal Ilmiah Farmako Bahari . 5 : 5-30.
Harborne,  J.B.  1987.  Uji  Fitokimia.  Institut Teknologi  Bandung,  Bandung.
Jeong,  S. M., S. Y. Kim, D. R. Kim, S. C. Jo, K.  C.  Nam,  D.  U.  Ahn, dan S. C. Lee., 2004.  Effect  of  Heat  Treatment  on  the Antioxidant  Activity  of  Extracts  from Citrus  Peels. Journal  of  Agricultural and Food Chemistry. 52 : 3389-3393.
Tan, Rorong dan Sangi:  Fotoreduksi Besi Fe 3+ …………… 9 Julkunen-Titto, R. 1985. Phenolic Constituents  in  the  Leave  of  Northern Willows:  Methods  for  the  Analysis  of Certain Phenolics. Journal of Agricultural  and  Food  Chemistry . 33 : 213-217.
Larson,  R.  A.  1988.  The  Antioxidants  of Hinghest  Plants. Phytochemistry . 27 : 969-977.
Meda,  A.,  C.  E.  Lamein,  M.  Romito,  J. Milliogo,  dan  O.  G.  Nacoulina.  2005. Determination  of  the  Total  Phenolic, Flavonoid  and  Proline  Content  in Burkina  Fasan  Honey,  as  well  as  Their Radical  Scavenging  Activity. Journal of Food Chemistry . 91 : 571-577.
Moein,  S.,  dan  R.  M.  Mahmood.  2010.
Relationship between antioxidant
properties  and  phenolics  in Zhumeria majdae . Journal  of  Medicinal  Plants Research . 7 : 517-521.
Nely,  F.  2007.  Aktivitas  Antioksidan  Rempah Pasar  dan  Bubuk  Rempah  Pabrik dengan  Metode  Polifenol  danUji  Aom ( Active  Oxygen  Method ).  [Skripsi].
Fakultas Teknologi Pertanian IPB, Bogor. Rorong,  J.  A.,  2012.  Fitokimia  Limbah Pertanian Sebagai Sensitizer  Alami Untuk  Fotoreduksi  Besi [Disertasi] . Program Doktor. Universitas Brawijaya,  Malang. Rorong,  J.  A.,  dan  E.  Suryanto. 2014. Potensi Daun  Cengkih  Sebagai  Biosensitizer Untuk  Fotoreduksi  Besi  Pada  Lahan Pertanian Hortikultura. Prosiding Seminar  Nasional  Lahan  Suboptimal; Palembang  26-27  September  2014. ISBN:  979-587-529-9.Hlm  1-12. Rosmarkam dan Yuwono. 2002. Ilmu Kesuburan Tan ah . Kanisius,
Yogyakarta.
Salunkhe,  D.  K.,  J.  K.  Chavan,  S.  S.  Kadam.
1990. Dietary  Tannins  Consequences and  Remedies .  CRC  Press,  Boca Raton.
Saragih,  B.  C.  2002.  Isolasi  Asam  Humat  dan Aplikasinya  Sebagai  Sensitizer  Dalam Fotoreduksi  Fe(III) [Thesis] .  Program Pasca Sarjana.  UGM,  Yogyakarta.
Shahidi,  F.,  dan  Naczk,  M.  1995. Food Phenolics . Technomicpub.Co. Inc.
Lancester-Basel.
Siagian,  D.,  dan  Sugiarto.  2006.  Metode Statistika  untuk  Bisnis  dan  Ekonomi .
PT Gramedia  Pustaka  Utama,  Jakarta.
Tempomona,  Y.,  J.  A.  Rorong,  dan  A.  D. Wuntu.  2015.  Fotoreduksi  Besi  Fe 3+ Menggunakan  Ekstrak  Limbah  Daun,
Kulit, dan Cangkang Biji Pala ( Myristica  fragrans ). Jurnal  MIPA UNSRAT Online . 4 : 46-50.
Tulung,  P.  C.,  J.  A.  Rorong,  dan  J.  Pontoh.
2017. Analisis Fitokimia dan Uji
Toksisitas  dari  Kulit  Batang  Kersen ( Muntingia calabura ). Chemistry Progress . 10 : 15-19.
Ukieyanna,  E.  2012.  Aktivitas  Antioksidan, kadar  fenolik,  dan  flavonoid  Total Tumbuhan Suruhan (Peperomia pellucid  L.  Kunth) . Fakultas  Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor, Bogor. Utami,  R.  D,  K.  M.  Yuliawati,  dan  L. Syafnir. 2015. Pengaruh Metode Ekstraksi terhadap Aktivitas Antioksidan  Daun  Sukun  ( Artocarpus altillis (Parkinson)  Fosberg).  Prosiding
Penelitian SPeSIA Unisba. ISSN:
2460-6472.
Vangalapati,  M.,  S.  Satya,  S.  Prakash,  dan  S.
Avanigadda.  2012.  A  Review  on Pharmacological Activities and
Clinical  Effects  of Cinnamon Species. Research  Journal  of  Pharmaceutical, Biological  and  Chemical  Sciences . 3 : 653-663.