Hasil Penelitian                                 Jurnal.Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XIII, No.1 Th. 2002

## PENGARUH EKSTRAK JAMU TERHADAP AKTIVITAS SEL NATURAL KILLER DALAM MELISIS ALUR SEL LEUKIMIA (K-562) SECARA IN VITRO
[The Effects  of Commercial “Jamu” Extracts on Natural Killer Cell Activity in Lysing Leukemic Cell Line (K-562 ) in vitro ]
Fransiska R. Zakaria 1) , dan Elisa Veronica D.C. 2)
1) Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi, Fateta-IPB
2) Alumni Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi, Fateta-IPB

## ABSTRACT
Natural killer (NK) cell consitutes white blood cells which specifically functions in lysing tumor and virus invected cells. In this research, a commercial “Jamu”  was tested to observe its effect on NK cells activity against leukemic cell lines (K562) in vitro. Jamu  was extracted with hot water, diluted and added into cell cultures consisted of a mixture of human peripheric limphocyte cells, as the source of the effector NK cells, and K562 cell line i.e., the target cells which were cell line derived from human leukemia and had been labelled with H3-thymidine. The mixture of the cells were made by culturing the two cells at the ratio of 50:1 and 100 : 1, respectively. The results showed that lysing activity of NK cells in  the  presence  of  “Jamu”  water  extract  measured  as  lysing  percentage  and  lysing  index  increased  only  slightly,  which  were  not  statiscally significant. It should be considered that the test used in this research represents only a part of the lysing mechanism by NK cells against the target cells.  An in vivo test  for a period of time will be recessary to elucidate ffurther this NK cell activity.
Key words : “ Natural Killer” Cell, Leucemic, Cell Line,  and  “jamu“  extracts

## PENDAHULUAN
Jamu  adalah  obat  tradisional  yang  terdiri  dari campuran  tanaman  obat  yang  diracik  dengan  komposisi tertentu. Penggunaan jamu dikalangan masyarakat sampai saat  ini  masih  dipercaya  sebagai  obat  yang  mampu mengatasi    gangguan-gangguan  kesehatan  yang  dialami. Khasiat jamu atau aktivitas fungsionalnya disebabkan oleh adanya berbagai senyawa  bioaktif yang terkandung dalam bahan  yang  digunakan,  seperti  jahe,  kencur,  lempuyang dan bidara laut. Jahe telah dilaporkan mempunyai aktivitas antioxidan  yang  tinggi  (Tejasari  dan  Zakaria,  2000)  dan dapat  menaikkan  aktifitas  NK  secara in  vitro dan in  vivo (Zakaria et al., 1999;  Prangdimurti et al., 1999).
Penyebab    penyakit  kanker  diketahui  sangat kompleks  dan  85  persen  berasal  dari  faktor  eksternal, seperti  zat-zat  kimia  karsinogen,  virus,  radiasi  dan ketidakseimbangan gizi (WCRC & ACRI, 1997). Karsinogen atau  kokarsinogen  penyebab  kanker  dapat  juga  berasal dari pencemar kimia pada makanan (Zakaria et al., 1996). Upaya  untuk  mengurangi  resiko  dengan  cara  mencari bahan-bahan yang bersifat sebagai pencegah kanker yang ramah  efek  samping  merupakan  kebutuhan  yang mendesak.  Alternatif bahan antikanker yaitu dari berbagai jenis  rempah-rempah  yang  banyak  terdapat  di  Asia Tenggara  dan  juga  berfungsi  sebagai  tanaman  obat  yang banyak digunakan  secara tradisional (Murakami, 1999).
Sel Natural  Killer (NK)  merupakan  bagian  dari  sel darah  putih  yang  berfungsi  membunuh  sel  tumor  dan  sel yang  terinveksi  virus  secara  spesifik  atau  non  spesifik. Salah  satu  mekanisme  pembunuhan  sel  target  oleh  NK adalah  melalui  pengenalan  molekul  glikoprotein  yang terekspresi  pada  permukaan  sel  tumor  atau  sel  yang terinfeksi  virus.  Glikoprotein  tersebut  bertindak  sebagai lektin  yang  dapat  mengikat  sel  NK  melalui  reseptor  yang terdapat pada permukaan sel NK sehingga sel target dapat dilisis (Roitt, 1991).
Kemampuan sel NK dalam melisis sel kanker atau sel yang terinfeksi virus dapat diukur secara in vitro . Sel NK akan  mengenali  sel  kanker  yang  dikultur  bersama-sama dan kemudian melisis sel kanker tersebut. Aktifitas sel NK didefinisikan  sebagai  persentase  kemampuan  sel  NK dalam melisis sel target (Dean et al., 1989).
Dari  penelitian  ini  diharapkan  ekstrak  jamu  yang banyak  mengandung  rempah-rempah  akan  berpengaruh terhadap aktifitas sel NK dalam melisis alur sel leukimia (K- 562), yaitu sel target yang spesifik bagi sel NK manusia.

## METODOLOGI

## Bahan dan Alat
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  antara lain  jamu  komersial  (KBTL,  Sido  Muncul),  RPMI  1640 (Sigma,  USA),  NaHCO 3 ,  Fetal  Calf  serum  (Sigma,  USA), 3 H-Thimidin, L-glutamin, gentamicin, Ficol Hypaque (Sigma,
USA),  Sel  target  K-562  (alur  sel  yang  berasal  dari  efusi pleural  wanita  berusia  53  tahun  yang  mengidap  leukimia myelogenous kronik di terminal  blast crises-American Type Culture Collection, Rockville, MD), cairan sintilasi (Sigma), biru tripan, akuades steril. Sedangkan alat yang digunakan adalah pipet steril, lempeng 96 sumur, lempeng 24 sumur, tabung  sentrifus  dan  sentrifus,  pemanen  sel  (Cambridge technol,  200A),  hemasitometer,  syringe,  mikropipet, inkubator dengan 5% CO 2 pada 37  C (VWR scientific), alat penghitung sinar  (Beckman)

## Metode Penelitian
Analisa Kimia Analisa  kimia  meliputi  analisa  proksimat  terhadap bubuk jamu yang terdiri  dari kadar abu, kadar air (metode diilasi  azeotropik)  dan  kadar  protein  (metode  Bradford). Selain  itu  dilakukan  analisa  total  fenol,  oleoresin  dan minyak atisiri dengan cara diilasi air (AOAC, 1984).

## Ekstrak Jamu
Pembuatan  ekstrak  jamu  dilakukan  dengan  cara menyeduh  jamu sebanyak 7 gram dengan 100 ml akuades mendidih  dan  diaduk  selama  30  menit  untuk memaksimalkan  ekstraksi  komponen-komponen  yang terdapat dalam jamu. Jamu kemudian disentrifus,   diambil supernatannya    dan  disaring  dengan  kertas  whatman  no. 42. Ekstrak jamu yang sudah disaring kemudian disterilkan dengan  cara  melewatkannya  pada  membran  0,2  mikron. Ekstrak  yang  diperoleh  kemudian  diencerkan  20,  40,  60 dan 80 kali dengan larutan RPMI-1640.

## Isolasi Limfosit (Zakaria et al., 2000)
Darah  dari  seorang  responden  mahasiswa  sehat diambil  secara  steril  dan  ditambah  dengan  antikoagulan lalu  disentrifus  dengan  kecepatan  1500  rpm  selama  20 menit.  Lapisan buffy  coat yang    mengandung  sel  darah putih dan terletak diantara kedua lapisan diambil kemudian dilewatkan  perlahan  dalam  tabung  sentrifus  yang mengandung  fikol  (1  :  1).  Tabung  disentrifus  2500  rpm selama  30  menit.  Bagian  atas  yang  mengandung  limfosit diambil dan ditambah dengan 10 ml media RPMI kemudian disentrifus  1000  rpm  selama  10  menit,.  Supernatan dibuang,  kemudian  ditambah10  ml  media  RPMI  dan dilanjutkan    dengan  penghitungan  sel  dengan  biru  tripan menggunakan  hemasitometer.  Limfosit  yang  diperoleh ditepatkan sampai berjumlah 2x10 6 sel/ml.
Pelabelan  Sel K562 Sel  kanker  K-562  dipelihara  dalam  tabung  dan diinkubasi dalam inkubator CO 2 5% dan suhu 37  C sampai sel  berada  pada  fase  logaritmik.  Sebanyak  1  x  10 4 sel/ml
ditambah  dengan 3 H-Timidin  (2  Ci/ml)  kemudian diinkubasi  selama  semalam  pada  inkubator  CO 2 .  Setelah waktu  inkubasi  berakhir,  sel  dicuci  2  x  dengan  cara disentrifus  1000  rpm selama  10 menit, untuk membuang kelebihan 3 H-Timidin.

## Pengujian  Aktifitas NK (Zakaria et al., 1999)
Untuk  kultur  dengan  perbandingan  sel  limosit  (SL) dan K-562 sebesar 100:1, sebanyak 50  l suspensi  K-562 berlabel  dimasukkan  kedalam  lempeng  mikrokultur  96 sumur lalu ditambah 50  l sel limfosit (SL) dan 80  l media (kontrol);    atau    80  l  ekstrak  air  jamu  dari  berbagai pengenceran.  Semua  kultur  ditambah  dengan  20  l  FCS lalu diinkubasi  selama 4 jam dalam inkubator CO 2 5% dan suhu  37  C. Untuk perbandingan sel limfosit (SL) : K562 = 50:1,  digunakan  hanya  25  l  suspensi  SL  dengan tambahan 25  l media. Semua kultur dilakukan dengan tiga ulangan.
Setelah    inkubasi  selesai  waktu  kultur  sel  dipanen dengan  alat  pemanen  sel  dan  dibilas  sebanyak  sepuluh kali.  Sel  yang  tidak  lisis  akan  tertampung  pada  filter. Radioaktivitas sel pada filter dibaca dengan alat penghitung sinar  .  Dengan  bantuan  larutan  sintillasi.  Hasil penghitungan  dari  alat  penghitung  sinar  dalam  bentuk cpm  (count  per  minute).  Hasil  pengujian  aktifitas  sel  NK dinyatakan dalam persen lisis, dengan rumus :

## A-B
% lisis =  -------- x 100 %
A
Dimana:  A  =  cpm  sel  K-562  yang  dikultur  pada  medium pertumbuhan  tanpa  sel  efektor  (kontrol  lisis spontan)
B  =  cpm  sel  yang  dikultur  dengan  sel  efektor pada  medium  yang  ditambahkan  ekstrak jamu
Sedangkan indeks lisis dihitung menurut rumus : C Indeks lisis  =   ----- D dimana  :  C  =  persen  lisis  sel  K-562  oleh  sel  NK  pada medium yang ditambahkan ekstrak jamu
D  =  persen  lisis  sel  K-562  oleh  sel  NK  pada medium standar tanpa ekstrak jamu

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis Kimia
Analisa kimia yang dilakukan terhadap ekstrak jamu meliputi  kadar  air,  kadar  abu,  total  fenol,  kadar  protein, oleoresin  dan  minyak  atsiri.  Komponen-komponen  ini diamati  untuk  melihat  pengaruhnya  terhadap  aktivitas  Sel NK. Hasil selengkapnya dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil analisa kimia ekstrak jamu
Analisa Kandungan Kadar Air 5.30% Kadar Abu 8.99% Protein 1.08 mg/ml ekstrak Total Fenol 0.61 mg/ml ekstrak Oleoresin 13.99% Minyak Atsiri 0.95%
Kadar  abu  yang  diperoleh  merupakan  akumulasi dari  kandungan  mineral,  yang  mungkin  berasal  dari kandungan  mineral  bahan  baku  dan  kontaminasi  dengan kotoran, seperti tanah dan pasir. Kandungan senyawa fenol dalam jamu berasal dari senyawa fenol dari bahan bakunya yaitu antara lain jahe,  lempuyang, kencur dan bidara laut. Berbagai  hasil  penelitian  telah  melaporkan  bahwa  bahan- bahan  ini  mengandung  senyawa  fenol  yang  tinggi. Senyawa  fenol  diketahui  bersifat  sebagai  antioksidan  dan fungsional  dalam  berbagai  reaksi  biologis,  antara  lain sebagai  anti  kanker  (Starvic  dan  Matula,  1992).  Ekstrak oleoresin merupakan ekstrak yang dilakukan dengan etanol sehingga sebagian besar senyawa fenolik ikut terekstraksi. Oleoresin  merupakan  komponen  rempah-rempah  yang diperdagangkan secara komersial. Minyak atsiri merupakan hasil  ekstraksi  komponen  yang  menguap  dan  berperan sebagai  pemberi  aroma  dan  juga  mempunyai  peranan fungsional  dalam  berbagai  reaksi  biologis.  Adanya kandungan senyawa fenol dan oleoresin yang tinggi dalam ekstrak  jamu  yang  diteliti  menunjukkan  potensi  adanya aktivitas  antikanker.  Senyawa-senyawa  ini  dapat  berperan sebagai  komponen  antikanker  antara  lain  karena  sifat antioksidannya  yang  tinggi  dan  aktivitas  sitotoksiknya (Nurahman  et  al.,  1999).  Aktivitas  antioksidan  suatu senyawa dapat bersifat antikanker karena kemampuannya dalam meredam sifat radikal yang dihasilkan oleh senyawa kokarsinogenik,  yaitu  senyawa  kimia  yang  menjadi karsinogen  karena  proses  metabolisme  detoksifikasi  yang terjadi dalam tubuh (Starvic dan Matula, 1992; WCRF dan AICR. 1997; Zakaria, 1996).

## Pengaruh Ekstrak Jamu Terhadap Aktivitas NK
Hasil pengujian dari dua perbandingan sel K-562 dan limfosit  (SL)  sebesar  1  :  50  dan  1  :  100  yang  dihitung
berdasarkan persen lisis dapat  dilihat pada Tabel 2.  Hasil perhitungan  persen  lisis    antara  kontrol  dan  berbagai tingkat pengenceran ekstrak jamu, menunjukkan nilai rata- rata untuk perbandingan K-562 : SL = 1 : 50 sebesar 45.8% sedangkan  untuk  perbandingan  K-562  :  SL  =  1:  100 sebesar  36.1%. Nilai 45.8% pada perbandingan K-562 : SL =  1:  50  berada  diatas  kontrol  perlakuan,  yaitu  39.4% sedangkan rata-rata persen lisis pada perbandingan K-562 :  SL  =  1:  100  sebesar  36.2%  berada  dibawah  kontrol perlakuan, yaitu 41,0%. Kedua nilai ini secara statistik tidak berbeda nyata.
Tabel 2. Nilai persen lisis sel K-562 oleh sel NK pada kultur yang  diberi  tambahan  ekstrak  jamu  dengan beberapa tingkat pengenceran dan perbandingan K-562 : SL = 1: 50 dan 1: 100
% lisis Pengenceran K-562 : SL = 1: 50 K-562 : SL = 1: 100 Kontrol Tanpa 20 40 60 80 Rata-rata 39.430 - 40.997 44.742 45.732 51.797 45.814 41.000 42.366 21.654 35.084 37.202 44.333 36.129
Keterangan : K-562 = Sel target (alur sel leukimia ) SL = Sel limfosit (sel efektor)
Perbandingan  antara  nilai  persen  lisis  tiap pengenceran  dan  kontrol  perlakuan  untuk  perbandingan SE: K-562 = 1: 50 dapat lihat pada Gambar 1. Hasil yang diperoleh  menunjukkan  semua  nilai  persen  lisis  pada pengenceran  sampai 80 kali berada diatas nilai persen lisis kontrol perlakuan. Semakin tinggi tingkat pengenceran, nilai persen lisis semakin tinggi.
Gambar 1.  Persen lisis sel K-562 oleh NK pada kultur yang diberi  tambahan  ekstrak  jamu  dengan beberapa    pengenceran  pada  perbandingan SE  :  K-562  =  1:  50  Nilai  persen  lisis dibandingkan  dengan  nilai  kontrol  perlakuan tanpa penambahan ekstrak
1.567 5.312 6.302 12.367 0 5 10 15 20 40 60 80 Tingkat Pengenceran P er se n l is is
Nilai persen lisis pada perbandingan K-562 : SL = 1: 50 ternyata lebih tinggi dibandingkan pada perbandingan 1: 100.  Hal  ini  kemungkinan  disebabkan  karena  komponen bioaktif yang terdapat dalam jamu sangat kuat terhadap sel limfosit,  sehingga  menyebabkan  lisis  pada  sel  kanker  dan pada sel limfosit.
Ekstraksi yang dilakukan dalam penelitian ini setara dengan  jumlah  air  panas  untuk  penyeduhan  jamu  dalam praktek  sehari-hari.  Ketika  jamu  diminum,  akan  terjadi proses penyerapan komponen bioaktif ekstrak jamu melalui sel  mukosa  usus  halus  yang  akan  diangkut  dalam  sistem plasma  darah.  Pada  saat  komponen  memasuki  plasma darah,  komponen  akan  terencerkan  dengan  plasma manusia yang berjumlah kurang lebih 6 liter. Pengenceran dalam  penelitian  ini  dilakukan  untuk  mensimulasi  proses pengenceran  yang  terjadi  secara in  vivo dalam  plasma, oleh  karena  itu  dilakukan  pengenceran  sampai  80  kali. Namun  demikian  kemungkinan  kandungan  komponen bioaktif  dalam  kultur  terlalu  tinggi  sehingga  bersifat  toksik baik  pada  sel  kanker  maupun  pada  sel  limfosit  yang  ada dalam kultur. Tejasari dan Zakaria (2000) dan Prangdimurti et al., (1999) melaporkan bahwa konsentrasi oleoresin dan komponen  bioaktif  jahe  pada  konsentrasi  tinggi  dapat menghambat pertumbuhan sel limfosit manusia dan mencit secara in  vitro .  Karena  sel  kanker  sudah  mengalami perubahan secara genetik, lebih dapat bertahan hidup pada kondisi in  vitro dibandingkan  dengan  sel  normal.  Pada perbandingan    1:  100,  jumlah  sel  limfosit  lebih  banyak dibandingkan      perbandingan    1:  50,  sehingga  lisis  sel limfosit  mungkin  lebih  banyak    terjadi  pada  perbandingan 1:100.  Aktivitas  prooksidan  dari  berbagai  senyawa  fenolik pada  konsentrasi  tinggi  telah  dilaporkan  juga  olah Murakami et al., (1999) dan Starvic dan Matula, 1002).
Nilai  indeks  lisis  dari  tiap  pengenceran,  diperoleh dengan  cara  menghitung  persen  lisis  sel  K-562    yang dikultur bersama dengan sel limfosit dan ekstrak, dibanding dengan persen lisis sel target yang dikultur bersama tanpa ekstrak.  Perhitungan  ini  dimaksudkan  untuk  mengetahui pengaruh  ekstrak  terhadap  sel  NK  dan  sel  limfosit.  Hasil perhitungan  nilai indeks lisis untuk tiap pengenceran  pada dua perbandingan dapat dilihat pada Tabel 3.
Nilai indeks lisis tertinggi untuk perbandingan K-562 : SL = 1: 50 terdapat pada pengenceran 80 kali, sedangkan nilai  indeks  lisis  terkecil  pada  pengenceran  20  kali.  Mulai pengenceran  20  sampai  80  kali  terlihat  nilai  indeks  lisis diatas  satu.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak  ternyata berpengaruh  sedikit  dalam  lisis  sel  K-562  mulai  pada pengenceran 20 dan seterusnya.
Untuk  perbandingan  K-562  :  SE  =  1:  100,  nilai indeks lisis tertinggi terdapat pada pengenceran 80 kali dan tanpa  pengenceran.  Sedangkan  untuk  pengenceran  yang lain  nilai    iindeks  lisis  berada    dibawah  satu,  yang
menunjukkan    tidak  adanya  pengaruh  ekstrak  jamu terhadap aktifitas sel NK pada pengenceran tersebut.
Tabel 3. Nilai indeks lisis sel K-562 oleh sel NK pada kultur yang  diberi  tambahan  ekstrak  jamu  dengan beberapa tingkat pengenceran dan perbandingan K-562 : SL = 1: 50 dan 1: 100
Indeks Lisis Pengenceran 1 : 50 1 : 100 0 - 1.033 20 1.040 0.529 40 1.135 0.558 60 1.160 0.908 80 1.314 1.081
Komponen  bioaktif  yang  terdapat  dalam  jamu, antara lain adalah flavonoid fenol. Flavonoid yang bersifat antitumor telah diperlihatkan menaikkan aktivitas sel secara sinergik  dengan  interleukin-2  (Starvic  dan  Matula,  1992). Quasinoid  merupakan  senyawa  yang  termasuk  golongan triterpen  yang  banyak  terdapat  pada  tanaman Simaraoubaceous .  Jamu  yang  diteliti  juga  mengandung quasinoid    yang  berasal  dari  bidara  laut.  Quasnoid  telah diteliti bersifat antitumor karena dapat menghambat aktivasi awal antigen virus Epstein Barr (EBV-EA) (Rahman et al., 1997).
Dalam  keadaan  normal,  baik  persen  lisis  K-562 maupun  indeks  lisis  pada  kultur  dengan  perbandingan  SL dan K-562 = 100:1 seharusnya lebih besar daripada kultur 50:1.  Hasil  yang  cenderung  sebaliknya  mungkin menunjukkan bahwa pada perbandingan 100:1, sel limfosit normal juga ikut mengalami kematian sehingga tidak dapat melisis sel targetnya. Kematian sel normal karena senyawa kimia  antikanker  merupakan  hal  yang  umum  karena  sifat sitotoksik  senyawa  antikanker  tidak  bersifat  spesifik,  baik senyawa  alami  maupun  sintetik  (Murakami  et  al.,  1999). Yang perlu diperhatikan juga dalam penelitian senyawa anti kanker  adalah  sifat  spesifik,  yaitu  mematikan  sel  kanker tetapi  tidak  sel  normal.  Sifat  ini  akan  sangat  membantu dalam  proses  kemoterapi,  yaitu  pengobatan  penyakit kanker dengan senyawa kimia.
Walaupun  hasil  penelitian  ini  tidak  menunjukkan kenaikan  aktivitas  lisis  NK  yang  nyata  oleh  ekstrak  jamu, belum  dapat  disimpulkan  bahwa  jamu  tidak  mempunyai potensi sebagai bahan antikanker. Pada sistem in vitro , sel NK  hanya  dapat  melisis  sel  targetnya  melalui  proses pengikatan  sel  yang  disusul  dengan  pelepasan  porfirin yang  dapat  melisis  membran  sel  kanker  (Roitt.  1991, Lillehoj dan Yong. 1998 ).
Metode in  vitro tidak  memperlihatkan  kemampuan ekstrak  jamu  dalam  meningkatkan  aktivitas  sel  NK mensintesis  perforin,  demikian  juga  dengan  faktor-faktor
Hasil Penelitian                                 Jurnal.Teknol. dan Industri Pangan, Vol. XIII, No.1 Th. 2002
endogenus  lain  yang  berperan  dalam  proses  pelisisan  sel tomor  secara in  vivo ,  seperti  adanya  peningkatan  sintesis inteferon,  yang  dapat  menaikkan  aktivitas  sel  NK  dalam melisis  sel  targetnya,  aktivitas  kemotaktik,  aktivitas sitotoksis  sel cytotoxi c,  ataupun  menaikkan  sistem  imun secara keseluruhan (Roitt. 1991, Lillehoj dan Yong. 1998 ).
Ekstrak  jamu  dalam  penelitian  ini  meskipun  tidak berpengaruh  nyata  terhadap  aktivitas  sel  NK,  akan  tetapi pada  penelitian  yang  dilakukan    oleh  Yuana  (1998), ternyata  dapat  melisis  secara  langsung  alur  sel  Leukimia (K-562), myeloma dan melanoma. Pengaruh ekstrak jamu terhadap  sel  kanker  dapat  terjadi  melalui  aktivitas  sel Natural Killer dan bisa melalui  mekanisme lisis  sel kanker secara langsung.

## KESIMPULAN
Hasil  analisa  kimia  menunjukkan  kadar  air  jamu yang  diteliti  sebesar  5.30%,  kadar  abu  8.99%,  oleoresin 13.99%,  minyak  atsiri  0.948%,  kadar  protein  1.08  mg/ml ekstrak  dan  total  fenol  sebesar  0.61  mg/ml  ekstrak. Kandungan  fenol  dan  oleoresin  yang  tinggi  memberikan peluang bagi adanya aktivitas antikanker pada jamu ini.
Nilai persen lisis yang diperoleh tidak berbeda nyata untuk  semua  perlakuan  pengenceran.  Kemungkinan konsentrasi  ekstrak  masih  terlalu  tinggi  sehingga  bersifat toksik pada kedua jenis sel yang digunakan. Disamping itu, komponen  sitotoksik  pada  sel  kanker  K-562  mungkin bersifat  sitotoksik  juga  pada  sel  limfosit  normal.  Hal  ini mungkin  menunjukkan  adanya  sifat  sitotoksik  yang  tidak spesifik.
Pengaruh ekstrak jamu terhadap sel kanker dapat terjadi melalui aktifitas sel NK dan bisa melalui mekanisme lisis sel kanker secara langsung. Walaupun hasil penelitian ini tidak menunjukkan adanya aktivitas lisis NK yang nyata oleh  ekstrak  jamu,  belum  dapat  disimpulkan  bahwa  jamu tidak mempunyai potensi sebagai bahan antikanker, karena mekanisme  antikanker  lainnya  masih  bayak  dan  belum diteliti.

## DAFTAR PUSTAKA
AOAC.  1984. Official  Methods  of  analysis . AOAC  Inc. Arlington, Virgina
Dean  J.H.,  Cornacoff  J.B.,  Rosenthal  G.J.  dan  Luster M.I. 1989. Immnune system: Evaluation of injury.In: Hayes  A.W.  (Ed),  Principle  and  Methods  of Toxicology. Raven Press, NY.
Lillehoj,  H.S.  and  Yong  YC.  1998 Comparative  natural killer  activities  of  thymic,  bursal  splenic  and
intestinal intraepithical lymphocytes of chicken. Dev. Comparative Immunol. 12 (3) : 629 – 643.

## Murakami  A,  Ohigashi  H,  Koshimizu  K.  1999
Chemoprevention  :  Insight  into  biological mechanisms and promising food factors. Food Rev. Int. 15 (3) : 335-395.
Nurahman,  Zakaria  FR,  Sanjaya  dan  Sayuthi  D.  1999 . Pengaruh konsumsi jahe terhadap perlindungan sel limfosit  dari  stress  oxidatif  pada  mahasisa  di Pondok  Pesantren  Ulil  Albab,  Kedung  Badak, Bogor. Prosid Seminar Nasional Teknologi Pangan, PATPI& MENPANGHOR
Prangdimurti E, FR Zakaria, S. Fardiaz dan D. Sayuthi. 1999 Efek  perlindungan  ekstrak  jahe  terhadap respon  imun  mencit  yang  diberi  perlakuan  stres oxidatif oleh pestsida paraquat. Pros.Sem. Makanan Tradisonal UGM, Yogyakarta.
Rahman,  S.,  Fukamiya,  N.,  Ohno,  N.,  Tokuda,  M., Nishino, H., Tagahara, K., Lee, H.K, dan Okano, M. 1997. Inhibitory Effects of Quassinoid Derivatives on-Epstein-Barr  Virus  Early  Antigen  Activation. Chem pharm Bull, 45:675-677
Roitt IM. 1991. Essential Immunology. Blackwell Sci Publ. London
Starvic,  B.  dan  Matula,  T.I.  1992. Flavonoids  in  Foods: Their  Significance  for    Nutrition  and  Health.  Di dalam  Lipid  Soluble  Antioksidan:  Biochemistry  and Clinical  Aplications.  A.S.  H.  Ong  and  L.  Packer (eds). Birlhauser Verlag, Basel/Switzerland.
Tejasari dan Zakaria FR. 2000 Sifat fungsional jahe: fraksi 1  dan  2  senyawa  bioaktif  oleoresin  rimpang  jahe ( Zingiber  officinale Roscoe)  menurunkan  produk peroxidasi lipid membran sel limfosit secara in vitro. Prosid  Seminar  Nasional  Industri  Pangan,Vol  II. PATPI, Bogor
Yuana. 1998. Pengaruh Ekstrak Jamu terhadap Proliferasi Limfosit  dan  Beberapa  Alur  Sel  Kanker  Secara  in vitro. Skripsi. FATETA, IPB. Bogor
WCRF dan AICR. 1997 . Food, Nutrition and the Prevention of Cancer. A Global Perspective. WCRF dan AICR , USA, London .
Zakaria  FR,  Wiguna  Y  dan  Hartoyo  A.1999 .  Konsumsi sari jahe  ( Zingiber officinale Roscoe) meningkatkan aktifitas  sel  Natural  Killer  pada  mahasiswa pesantren  Ulil  Albab  di  Bogor.  Bul  Tek  &  Industri Pangan, Vol IX (3):
Zakaria  FR,  Irawan  B,  Pramudya  MS,  Sanjaya,  200 0. Intervensi  Sayur  buah  pembawa  vitamin  C  dan Vitamin  E  untuk  meningkatkan  system  imum populasi buruh pabrik di Bogor. Bul Teknol Industri Pangan, XI, no. 2, 21-27.
Zakaria  F.  1996 .  Sintesis  Senyawa  radikal  dan  elektrofil dalam  dan  oleh  komponen  pangan,  Pros.  Sem. Senyawa  Radikal  dan  Sitem  Pangan.  Reaksi Molekuler  dan  Penangkalannya.  Zakaria  FR, Dewanti  R,  Yasni  S  (eds).  CFNS  dan  Kedutaan Perancis, Bogor.