## Original Article
Analisis  Profil  Minyak  Atsiri  Daun  Kayu  Putih  (Melaleuca leucadendra L.) dan Produk di Pasaran
Nawwar Irfan, Laela Hayu Nurani*, Any Guntarti, Nina Salamah, Citra Ariani Edityaningrum
Fakultas Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta, Indonesia *Corresponding author: Laela Hayu Nurani | Email: laela.farmasi@pharm.uad.ac.id
Received: 5 October 2022; Revised: 21 December 2022; Accepted: 26 December 2022; Published: 31 December 2022
Abstract:  Minyak  kayu  putih  merupakan  salah  satu  minyak  atsiri  yang  biasa  digunakan  dalam  sehari-hari. Produksi  dalam  negeri  hanya  dapat  memproduksi  minyak  kayu  putih  650  ton/tahun  dari  permintaan kebutuhan  dalam  negeri  dalam  setahun  sebesar  3.500  ton  sehingga  memacu  pemalsuan.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  membandingkan  profil  minyak  kayu  putih  hasil  destilasi  dengan  minyak  kayu  putih  yang ada di pasaran berdasarkan mutu Standar Nasional Indonesia (SNI).  Destilasi minyak atsiri dilakukan dengan 5 kg daun kayu putih menggunakan metode destilasi uap air selama 3 hari didapatkan rendemen sebesar 2,32 % v/b.  Minyak kayu putih hasil destilasi dan minyak produk A, B, dan C dilakukan pengujian profil minyak berdasarkan SNI 06-3954-2006 meliputi warna, bau, bobot jenis, indeks bias, kelarutan dalam etanol 70 %, dan profil  KLT.    Hasil  pengamatan  organoleptis  minyak  hasil  destilasi,  produk  A,  B,  dan  C  memiliki  perbedaan warna,  bobot  jenis,  dan  kelarutan  dalam  etanol  70%  serta  tidak  ada  perbedaan  bau  dan  indeks  bias.  Hasil penelitian  menunjukkan  adanya  perbedaan  profil  minyak  produk  A,  B,  dan  C  dengan  tidak  memenuhi  SNI pada  pengujian  bobot  jenis  pada  produk  C.  KLT  dengan  menggunakan  fase  diam  silika  gel  GF 254 dan  fase gerak toluen 100 %.  Profil KLT pada produk C tidak terlihat noda yang sama dengan standar eucalyptol yang diperlihatkan oleh minyak lainnya.
Keywords: Analisis profil, Eucalyptol, Minyak kayu putih, SNI 06-3954-2006

## 1. PENDAHULUAN
Minyak atsiri adalah salah satu hasil metabolisme pada tanaman yang digunakan sebagai bahan  pertahanan  atau  untuk  menghalau  serangan  dari  luar.  Minyak  atsiri  biasa  bersifat  mudah menguap,  beraroma  khas,  dan  larut  dalam  pelarut  organik  [1],  [2]. Minyak  atsiri  kayu  putih dihasilkan  dari  tanaman  kayu  putih  (Melaleuca  leucadendra  L.)  [2],  [3].  Minyak  atsiri  kayu  putih berasal  dari  daun  tanaman  kayu  putih  yang  dihasilkan  melalui  proses  penyulingan.    Metode penyulingan yang biasa digunakan adalah destilasi air, destilasi uap air, dan destilasi uap [4].
Kandungan  utama  minyak  kayu  putih  adalah  1,8-Cineole  (Eucalyptol)  yang  merupakan salah  satu  senyawa  monoterpen.  Kandungan  minyak  kayu  putih  selain  didominasi  1,8-cineole (44,76–60,19%) terdapat senyawa lain seperti senyawa α-terpineol (5,93-12,45%), d(+)-limonene (4,45– 8,85%), dan β -caryophyllene (3,78-7,64%). Penelitian ini dilakukan dengan membandingkan beberapa varietas  tanaman  kayu  putih  di  pulau  Jawa  yaitu  pada  daerah  Gunung  Kidul  (D.I.  Yogyakarta), Gundih (Jawa tengah), dan Sukun (Jawa Timur)  [5].  Kandungan utama  minyak  atsiri kayu putih banyak terdapat di dalam daun.
Daun  tanaman  kayu  putih  memiliki  khasiat  secara  empiris  pada  pengobatan  gejala penyakit seperti batuk, pilek, mual, dan muntah. Daun nya dapat digunakan setelah dihancurkan atau dibakar terlebih dahulu, dihirup langsung baunya, dan diminum air rebusan dari daun kayu putih  tersebut  [6].  Senyawa  1,8-Cineole  memiliki  beberapa  khasiat  secara  klinis  dalam  mengobati penyakit infeksi saluran pernapasan seperti influenza  [7]–[9] serta meringankan sesak napas pada pasien  asma  bronkial  [10].  Penelitian  kandungan  1,8-Cineole  pada  minyak  kayu  putih  memiliki potensi menghambat virus penyebab Covid-19 [11], [12].
Penggunaan minyak kayu putih di Indonesia semakin meningkat dan semakin bervariasi. Indonesia menjadi salah satu penghasil utama minyak kayu putih dengan produksi terbesar pada pulau Jawa, pulau Sulawesi, dan kepulauan Maluku. Hasil produksi minyak kayu putih ini masih belum  cukup  untuk  memenuhi  permintaan  minyak  kayu  putih  untuk  dalam  negeri.  Produksi dalam  negeri  hanya  dapat  memproduksi  minyak  kayu  putih  650  ton/tahun  dari  permintaan kebutuhan dalam negeri per tahun sebesar 3.500 ton [13]. Akibat kurang mampu dalam memenuhi permintaan dalam negeri banyak pelaku usaha yang mengimpor dari luar negeri dan tidak sedikit juga produsen yang mengurangi kualitas produknya dengan mengurangi kemurnian minyak kayu putih tersebut [14].
Analisis  kemurnian  minyak  kayu  putih  dilakukan  dengan  upaya  untuk  mencegah  terjadi nya pemalsuan minyak kayu putih di pasaran. Analisis disesuaikan dengan standar mutu minyak kayu  putih  yang  ditetapkan  oleh  Standar  Nasional  Indonesia  (SNI).  Penelitian  sebelumnya mengenai  uji  kualitas  minyak  atsiri  dari  berbagai  daerah  di  Maluku  terjadi  perbedaan  kualitas minyak  yang  diuji.  Bobot  jenis  yang  didapat  dari  kabupaten  Buru  (0,9163),  Seram  bagian  Barat (0,9166), Maluku Barat Daya (0,9455), dan Maluku Tenggara Barat (0,9138). Bobot jenis pada daerah Maluku Barat Daya (0,9455)  lebih tinggi  dari syarat SNI (0,900-0,930), sedangkan untuk indeks bias pada ke 4 kabupaten yang di uji telah memenuhi syarat SNI [15].  Penelitian lain membandingkan metode  destilasi  pada  daun  kayu  putih.  Hasil  bobot  jenis  pada  metode  steam-destilasi  (0,899) belum  mencapai  syarat  SNI  dan  metode  hidrodestilasi  (0,904)  sudah  memenuhi  syarat  SNI.  Hasil pengujian  indeks  bias  pada  kedua  metode  destilasi  tersebut  sudah  memenuhi  syarat  SNI  [16]. Berdasarkan  pengujian  pada  SNI  06-3954-2006  kualitas  minyak  yang  diuji  meliputi  organoleptis (bau dan warna), bobot jenis, indeks bias, putaran optik, dan kelarutan dalam etanol 70%.
Penelitian ini melakukan pengujian  kualitas minyak  secara  kualitatif berdasarkan SNI  06- 3954-2006, uji dilakukan pada minyak kayu putih hasil destilasi sendiri dengan minyak kayu putih yang  ada  di  pasaran.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mencegah  pemalsuan  minyak  kayu  putih  di pasaran  dan  meningkatkan  mutu  minyak  kayu  putih.  Penelitian  ini  akan  menganalisis  profil minyak  kayu  putih  secara  organoleptis  (bau  dan  warna),  indeks  bias,  bobot  jenis,  kelarutan  di dalam etanol 70%, dan profil KLT.

## 2. BAHAN DAN METODE

## 2.1 Alat dan Bahan
Alat yang digunakan berupa seperangkat alat destilasi, alat-alat gelas (PYREX), mikropipet (SOCOREX),  piknometer  (Isolab),  refractometer  (ATAGO),  TLC  chamber  (CAMAG)  TLC  Silica  Gel 60 F 254 (MERCK) dan timbangan analitik (OHAUS).
Bahan yang digunakan daun kayu putih yang diperoleh dari CV. Green Herbal Yogyakarta pada bulan Juni tahun 2022. Minyak kayu putih merk A, B, dan C sebagai sampel didapatkan dari berbagai Apotek dan secara online. Natrium sulfat anhidrat, vanilin-asam sulfat, standar eucalyptol dan toluen.

## 2.2 Prosedur
2.2.1 Determinasi daun kayu putih
Daun kayu putih dilakukan pemastian spesies tanaman kayu putih di laboratorium biologi Universitas Ahmad Dahlan.
2.2.2 Standarisasi daun kayu putih
Standarisasi  daun  putih  yang  dilakukan  adalah  uji  kadar  abu  dan  uji  kadar  air  dengan metode destilasi toluen.
a. Uji kadar abu
Uji  kadar  abu  dilakukan  berdasarkan  metode  dari  Farmakope  Herbal  Indonesia  edisi  II [17].  Kadar  abu  dihitung  terhadap  berat  dari  bahan  yang  akan  diuji.  Kadar  abu  dapat  dihitung sebagai berikut:
𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝑎𝑏𝑢 𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙  = 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝐴𝑏𝑢 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑎𝑤𝑎𝑙 × 100%
b. Uji kadar air dengan destilasi toluen
Uji  kadar  air  dengan  destilasi  toluen  dilakukan  berdasarkan  metode  dari  Farmakope Herbal Indonesia edisi II [17].
2.2.3 Destilasi dan uji kualitas minyak kayu putih
Daun  kayu  putih  sebanyak  5  kg  disortasi  kering,  kemudian  di  destilasi  dengan  destilasi uap-air selama 3 hari. Minyak hasil destilasi dimurnikan dari kandungan air dengan menggunakan Na 2 SO 4 anhidrat. Uji kualitas minyak yang dilakukan adalah organoleptis, bobot jenis (BJ),  indeks bias, dan kelarutan dengan etanol.
a. Organoleptis
Warna dan  bau dari minyak  kayu putih hasil destilasi dan produk minyak kayu putih di pasaran.
b. Bobot Jenis (BJ)
Pengujian  bobot  jenis  minyak  dilakukan  dengan  metode  gravimetri  berdasarkan  SNI  06- 3954-2006.  Nilai  bobot  jenis  dihitung  dengan  memperhatikan  suhu  saat  pengerjaan  yang  akan  di konversikan menjadi suhu 20 ° C. Bobot jenis dapat dihitung sebagai berikut [18]:

## 𝐵𝐽  = 𝑀1 − 𝑀
𝑀2 − 𝑀 + (0,0007 × (𝑡 − 20 °𝐶) Keterangan: M1 : Berat piknometer dengan sampel M2
: Berat piknometer dengan air
M
: Berat piknometer kosong
t
: Suhu saat pengerjaan
c. Indeks Bias
Pengujian  indeks  bias  dilakukan  menggunakan  alat  refraktometer  berdasarkan  SNI  06- 3954-2006.  Nilai  indeks  bias  dihitung  dengan  memperhatikan  suhu  saat  pengerjaan  yang  akan dikonversikan menjadi 20 ° C. indeks bias dapat dihitung sebagai berikut [18]:
𝐼𝑛𝑑𝑒𝑘𝑠 𝐵𝑖𝑎𝑠  = 𝐴 + 0,0004 × (𝑡 − 20 °𝐶)
Keterangan: A : Nilai indeks bias terbaca oleh alat
t
: Suhu saat pengerjaan
d. Kelarutan dengan etanol
Pengujian  dilakukan  di  dalam  gelas  ukur.  Minyak  dilarutkan  dengan  etanol  70%  secara bertahap hingga larutan campuran minyak dan etanol mencapai bening.

## e. Uji kualitatif kandungan kimia dengan KLT
Uji kualitatif dengan KLT dimodifikasi dari metode uji kandungan eucalyptol dalam ekstrak daun  kayu  putih  [17].  Minyak  hasil  destilasi  dan  3  produk  minyak  kayu  putih  A,  B,  dan  C dilakukan pengenceran dengan konsentrasi kandungan eucalyptol diasumsikan sebesar 20%v/v tiap minyak.  Kemudian  masing-masing  minyak  ditotolkan  sebanyak  2µL  pada  plat  KLT  dengan  jarak totol 1,5 cm. Standard yang digunakan eucalyptol 20% v/v. Fase gerak yang digunakan toluen 100 %. Hasil elusi KLT dilihat di bawah lampu UV pada panjang gelombang 254 nm dan penampak noda vanilin-asam sulfat. Nilai Rf hasil KLT dapat dihitung dari nilai tinggi noda dengan nilai elusi dari fase gerak. Nilai Rf dapat dihitung sebagai berikut:
𝑅𝑓  =

## 𝑇𝑖𝑛𝑔𝑔𝑖 𝑛𝑜𝑑𝑎
𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑒𝑙𝑢𝑠𝑖 𝑓𝑎𝑠𝑒 𝑔𝑒𝑟𝑎𝑘

## 2.3 Analisis Data
2.3.1 Rendemen minyak hasil destilasi
Jumlah  persen  rendemen  minyak  dihitung  berdasarkan  jumlah  volume  minyak  yang diperoleh  dengan  jumlah  sampel  yang  di  destilasi.  Rendemen  minyak  dapat  dihitung  sebagai berikut [19]:
% 𝑅𝑒𝑛𝑑𝑒𝑚𝑒𝑛  = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑚𝑖𝑛𝑦𝑎𝑘 (𝑚𝑙) 𝐵𝑒𝑟𝑎𝑡 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑑𝑒𝑠𝑡𝑖𝑙𝑎𝑠𝑖 (𝑔𝑟) × 100%

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1 Determinasi daun kayu putih
Hasil  determinasi  daun  kayu  putih  di  laboratorium  biologi  Universitas  Ahmad  Dahlan nama spesies daun kayu putih yang digunakan adalah Melaleuca leucadendra (L.).

## 3.2 Standarisasi daun kayu putih
Kadar abu daun kayu putih 2,2% dengan syarat pada Farmakope Herbal Indonesia edisi 2 sebesar  7,2%.  Uji  kadar  abu  ini  bertujuan  melihat  kadar  cemaran  logam  yang  terkandung  pada daun  kayu  putih  [20].  Kadar  abu  juga  di  pengaruhi  oleh  tempat  tumbuhnya  tanaman  bahkan kandungan logam dapat mencapai nektar tanaman  [21], [22]. Uji kadar air menggunakan destilasi toluen bertujuan untuk menentukan kadar air tanpa dipengaruhi oleh minyak atsiri yang ada pada daun kayu putih 11%v/b dengan persyaratan kadar air <10%v/b [23].

## 3.3 Destilasi minyak kayu putih
Minyak  kayu  putih  yang  didapatkan  menggunakan  destilasi  uap  dan  air  dari  daun  kayu putih  sebanyak  5  kg  selama  3  hari  menghasilkan  rendemen  sebesar  2,32  %v/b.  Penelitian  yang membandingkan  metode  dalam  destilasi  minyak  kayu  putih,  hasil  rendemen  didapat  dengan menggunakan  metode  destilasi  uap-air  sebanyak  2,5%v/b,  lebih  besar  dibandingkan  dengan metode lain. Tujuan menggunakan metode destilasi uap-air ini diharapkan rendemen yang didapat lebih besar dibandingkan dengan metode yang lainnya. Hal yang menyebabkan jumlah rendemen yang  dihasilkan  dipengaruhi  oleh  faktor  internal  seperti  jenis  varietas  tanaman,  tempat  tumbuh, umur tanaman dan kondisi tanah. Selain faktor tersebut ada faktor eksternal yang berperan seperti metode penyulingan dan lama penyimpanan  [4], [24].

## 3.4 Analisis profil minyak kayu putih dan produk
Minyak  kayu  putih  hasil  destilasi  memiliki  warna  cairan  yang  jernih  sedikit  kuning kehijauan  hampir  tidak  berwarna.    Warna  cairan  yang  bening  dapat  menandakan  minyak  masih dalam keadaan bagus dan masih segar. Dibandingkan dengan produk lain produk A dan produk C memiliki warna yang lebih kuning, produk B  memiliki warna yang  hampir sama dengan  minyak kayu  putih  hasil  destilasi.    Perbedaan  warna  yang  terlihat  dapat  dipengaruhi  oleh  kandungan kimia  yang  terkandung  pada  minyak  tersebut  [25].  Bau  yang  dihasilkan  juga  memiliki  bau  yang khas  kayu  putih  yang  segar.  Perbandingan  warna  antara  minyak  kayu  putih  hasil  destilasi  dan produk di pasaran dapat di lihat pada Gambar 1.
(a)
(b) (c) (d)
Gambar  1.  Profil  organoleptis  minyak  kayu  putih  dan  produk  di  pasaran  (a)  minyak  hasil  destilasi  (b) produk A (c) produk B (d) produk C.
Penentuan  nilai  bobot  jenis  dimaksudkan  untuk  membandingkan  kerapatan  dari  minyak sampel  terhadap  kerapatan  dari  air,  penentuan  nilai  ini  harus  dalam  suhu  yang  sama  jika  tidak dapat dilakukan perlu adanya cara lain yang khusus [20]. Tabel 1 terlihat nilai rata-rata bobot jenis pada minyak kayu putih hasil destilasi sebesar 0,917 ± 0.005. Untuk rata-rata nilai bobot jenis pada produk  yang  ada  di  pasaran  berturut-turut  0,918  ±  0.001  untuk  produk  A,  0,917  ±  0.002  untuk produk B, dan 0,867 ± 0.003 untuk produk C. Nilai rata-rata bobot jenis yang didapatkan produk A memiliki nilai yang tidak memenuhi SNI dengan persyaratan 0,900  – 0,930. Perbedaan bobot jenis dapat  terjadi  oleh  beberapa  faktor  diantaranya  metode  dalam  penyulingan,  perlakuan  daun sebelum  akan  didestilasi,  jenis  varietas  tanaman  kayu  putih,  kondisi  tempat  tumbuh,  faktor eksternal, dan faktor internal [26].
Perbedaan hasil bobot jenis dari jumlah air dan suhu ketika proses destilasi. Ketika destilasi pada suhu yang tinggi akan terjadi hidrolisis yang akan menyebabkan terlarut  beberapa senyawa pada  minyak  ke  dalam  air,  hal  ini  menyebabkan  terjadinya  penurunan  bobot  jenis  pada  minyak yang  dihasilkan.  Saat  memperoleh  minyak  atsiri  kayu  putih  saat    proses  destilasi  menggunakan metode  destilasi  uap  air  yang  menyebabkan  kurangnya  kontak  air  secara  langsung  dengan  daun kayu putih selama pemanasan [26].
Indeks  bias  digunakan  untuk  melihat  ukuran  pembiasan  cahaya  antara  minyak  dengan udara.  Alat  yang  digunakan  adalah  refractometer  dengan  memperhatikan  suhu  saat  pengukuran [20].  Nilai  rata-rata  indeks  bias  yang  didapatkan  pada  minyak  kayu  putih  hasil  destilasi  sebesar 1,468 ± 0.002 (Tabel 1). Nilai rata-rata indeks bias pada produk yang di pasaran berturut-turut 1,460 ± 0.001 pada produk A, 1,468 ± 0.002 pada produk B, dan 1,468 ± 0.001 pada produk C. Nilai indeks bias yang didapatkan pada semua minyak kayu putih telah sesuai SNI dengan persyaratan antara 1,450  –  1,470.  Nilai  indeks  bias  dapat  terjadi  perbedaan  disebabkan  oleh  beberapa  faktor  salah satunya terjadinya hidrolisis pada proses destilasi. Saat hidrolisis terjadi pemutusan ikatan rangkap benzaldehid menjadi toluen yang menyebabkan terjadinya penurunan indeks bias pada minyak kayu putih [27].
Tabel 1. Profil minyak kayu putih hasil destilasi dan minyak kayu putih di pasaran
Jenis Uji SNI 06-3954-2006 Minyak Kayu putih hasil destilasi Produk minyak kayu putih A B C Warna Jernih hingga kuning kehijauan Jernih kuning kehijauan Jernih kuning Jernih kuning kehijauan Jernih kuning Bau Khas kayu putih Khas kayu putih Khas kayu putih Khas kayu putih Khas kayu putih Bobot Jenis 20 o C 0,900 - 0,930 0,917 ± 0.005 0,918 ± 0,001 0,917 ± 0,002 0,867 ± 0,003 Indeks Bias 20 o C 1,450 – 1,470 1,468 ± 0.002 1,460 ± 0,001 1,468 ± 0,002 1,468 ± 0,001 Kelarutan  dalam etanol 70%  (v/v) 1:1 sampai 1:10 jernih 1:7 1:7 1:7 1:9
Semua minyak atsiri yang di uji kelarutan dalam  etanol 70%v/v masih sesuai SNI dengan persyaratan sebesar 1:1 sampai 1:10 v/v jernih [18]. Kelarutan dalam etanol ini dapat dipengaruhi oleh kandungan senyawa terpen yang menyebabkan kelarutan minyak dalam etanol 70%.

## 3.5 Uji kualitatif kandungan kimia dengan KLT
(a)
(b)
Gambar 2. Profil KLT (a) di bawah sinar UV 254 nm (b) dengan penampak noda vanilin-asam sulfat minyak kayu putih hasil destilasi (MKP) dan produk di pasaran (A, B, dan C) dengan  pembanding  eucalyptol (EU) dengan volume totolan 2µL.
Uji  kandungan  kimia  dengan  menggunakan  metode  Kromatografi  Lapis  Tipis  (KLT) bertujuan  untuk  melihat  secara  kualitatif  kandungan  kimia  utama  pada  minyak  kayu  putih. Pembanding  yang  digunakan  pada  uji  KLT  ini  adalah  eucalyptol  (1,8-Cineole).  Senyawa  eucalyptol merupakan  senyawa  terbanyak  yang  terkandung  dalam  minyak  kayu  putih.  Fase  gerak  yang digunakan  adalah  toluen  100%  karena  senyawa  eucalyptol  termasuk  senyawa  monoterpen  yang bersifat  non  polar.  Detektor  yang  digunakan  adalah  sinar  UV  254  nm  dan  disemprotkan  dengan larutan vanilin-asam sulfat. Larutan vanilin-asam sulfat digunakan untuk memperjelas noda yang didapatkan.  Larutan  vanilin-asam  sulfat  menjadi  salah  satu  detektor  senyawa  yang  bersifat monoterpen [17].
Pola  noda  saat  di  bawah  lampu  UV  254  nm  pada  Gambar  2  terlihat  kurang  jelas,  tetapi ketika menggunakan penampak noda vanilin-asam sulfat noda terlihat jelas dengan Rf: 0,50. Noda senyawa  eucalyptol  berdasarkan  farmakope  herbal  indonesia  memiliki  nilai  Rf:  0,65  dengan  fase gerak toluen : etil asetat (9:1 v/v) dengan detektor vanilin-asam sulfat [17].  Pola noda terlihat pada Gambar  2  saat  setelah  disemprotkan  dengan  vanilin-asam  sulfat    pada  produk  A  dan  B  memiliki pola  noda  yang  sama  dengan  standard  baku  eucalyptol  sedangkan  pada  produk  C  noda  tidak terlihat.    Hal    ini  terjadi  karena  konsentrasi  senyawa  eucalyptol  yang  dikandung  oleh  minyak produk C sangat kecil. Hasil ini sesuai dengan hasil GC-MS yang menunjukkan konsentrasi relatif eucalyptol  dalam  produk  A  11,52%,  produk  B 23,44%,  dan produk  C 6,13% [28].  Perbedaan konsentrasi  senyawa  1,8-Cineole  pada  minyak  kayu  putih  dipengaruhi  oleh  tempat  tumbuhnya tanaman kayu putih [29]. Selain tempat tumbuh, konsentrasi senyawa juga dipengaruhi oleh jenis spesies tanaman kayu putih dan waktu panen dari daun kayu putih [30], [31]

## 4. KESIMPULAN
Terjadi  perbedaan warna,  bobot jenis, dan  kelarutan  dalam etanol 70%v/v  serta tidak  ada perbedaan  bau  dan  indeks  bias  antara  minyak  kayu  putih  hasil  destilasi  dan  minyak  kayu  putih yang  ada  di  pasaran.  Hasil  penelitian  menunjukkan  adanya  produk  yang  tidak  memenuhi  SNI pada  pengujian  bobot  jenis  pada  produk  C.  KLT  dengan  menggunakan  fase  diam  silika  gel  GF 254 dan fase gerak toluen 100%v/v.  Profil KLT pada produk C tidak terlihat noda yang sama dengan standard eucalyptol.
Funding:  Penelitian ini didanai oleh Lembaga Penelitian dan Pengabdian Masyarakat Universitas Ahmad Dahlan (LPPM UAD) melalui Penelitian Dasar dengan Nomor kontrak PD-033/SP3/LPPM- UAD/VII/2022.

## Acknowledgments: Terimakasih atas dana penelitian yang diberikan oleh Lembaga Penelitian dan
Pengabdian  Kepada  Masyarakat  (LPPM)  Universitas  Ahmad  Dahlan  melalui  Penelitian  Dasar dengan ketua Dr. apt. Laela Hayu Nurani, M.Si Nomor : PD-033/SP3/LPPM-UAD/VII/2022.

## Conflicts of interest: Peneliti menyatakan tidak adanya konflik kepentingan pada penelitian ini

## References
[1] J.  Sharifi-rad  et  al.,  “Biological  Activities  of  Essential  Oils:  From  Plant  Chemoecology  to Traditional Healing Systems Javad,” Molecules, vol. 22, no. 70, 2017.
[2] A.  Widiyanto  and  M.  Siarudin,  “Karakteristik  Daun  Dan  Rendemen  Minyak  Atsiri  Lima Jenis Tumbuhan Kayu Putih,” J. Penilitian Has. hutan, vol. 31, no. 4, pp. 235–241, 2013.
[3] S.  E.  Sudradjat,  “Minyak  Kayu  Putih,  Obat  Alami  dengan  Banyak  Khasiat:  Tinjauan Sistematik,” J. Kedokt. Meditek, vol. 26, no. 2, 2020.
[4] R.  Helfiansah,  H.  Sastrohamidjojo,  and  Riyanto,  “Isolasi,  identifikasi  dan  pemurnian senyawa 1,8-Sineol minyak kayu putih (Malaleuca leucadendron),” ASEAN J. Syst. Eng., vol. 1, no. 1, pp. 19–24, 2013.
[5] R.  Pujiarti,  Y.  Ohtani,  and  H.  Ichiura,  “Physicochemical  properties  and  chemical compositions  of  Melaleuca  leucadendron  leaf  oils  taken  from  the  plantations  in  Java, Indonesia,” J. Wood Sci., vol. 57, no. 5, pp. 446–451, 2011.
[6] J.  J.  Brophy,  L.  A.  Craven,  and  J.  C.  Doran,  “Melaleucas:  their  botany,  essential  oils  and uses,” ACIAR Monogr., vol. 156, p. 415 pp., 2013.
[7] H. Sudhoff et al., “1,8-Cineol reduces mucus-production in a novel human ex vivo model of late rhinosinusitis,” PLoS One, vol. 10, no. 7, pp. 1–12, 2015.
[8] C. Zhao, J. Sun, C. Fang, and F. Tang, “1,8-cineol attenuates LPS-induced acute pulmonary inflammation in mice,” Inflammation, vol. 37, no. 2, pp. 566–572, 2014.
[9] Y. Li, Y. Lai, Y. Wang, N. Liu, F. Zhang, and P. Xu, “1, 8-Cineol Protect Against Influenza- Virus-Induced Pneumonia in Mice,” Inflammation, vol. 39, no. 4, pp. 1582–1593, 2016.
[10] F.  Zulkarnain,  A.  Karim,  and  A.  R.  Vanchapo,  “Uap  Minyak  Kayu  Putih  Efektif Menurunkan Sesak Napas Pada Pasien Asma Bronkial,” J. Penelit. Keperawatan, vol. 8, no. 2, pp. 212–216, 2022.
[11] T. T. A. My et al., “Evaluation of the Inhibitory Activities of COVID-19 of Melaleuca cajuputi Oil Using Docking Simulation,” ChemistrySelect, vol. 5, no. 21, pp. 6312–6320, 2020.
[12] S.  Panikar  et  al.,  “Essential  oils  as  an  effective  alternative  for  the  treatment  of  COVID-19: Molecular  interaction  analysis  of  protease  (Mpro)  with  pharmacokinetics  and  toxicological properties,” J. Infect. Public Health, vol. 14, no. 5, pp. 601–610, 2021.
[13] A.  Rimbawanto,  Minyak  Kayuputih:  Dari  Tanaman  Asli  Indonesia  untuk  Masyarakat  Indonesia. Yogyakarta: Kaliwangi, 2017.
[14] K.  Rimbawanto  A,  Prastyono  NK  and  Sumardi.,  “Kebun  Kayuputih  Skala  Kecil  Untuk Memenuhi  Kebutuhan  Minyak  Kayu  putih  Dalam  Negeri  dan  Mengurangi  Impor  Minyak Substitusi,” in Seminar Nasional Silvikultur IV, 2018.
[15] H. Smith and S. Idrus, “Karakteristik minyak kayu putih pada berbagai lokasi di maluku,” Maj. Biam, vol. 14, no. 2, pp. 58–69, 2018.
[16] M.  E.  Mbaru,  M.  Victor,  W.  D.  Proborini,  and  A.  C.  K.  F,  “Perbandingan  Metode  Distilasi Minyak  Atsiri  Daun  Kayu  Putih  Menggunakan  Hydrodistillation  dan  Steam  Distillation,” eUREKA  J. Penelit. Tek. Sipil dan Tek. Kim., vol. 2, no. 2, pp. 215–221, 2018.
[17] Anonim,  Farmakope  Herbal  Indonesia  edisi  II.  Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia, 2017.
[18] SNI, “Minyak kayu putih,” Badan Standar Nas. ICS 71.100.60, pp. 1–12, 2006.
[19] A. Mercy NPJ, Nithyalakshmi B, “Extraction of Orange Oil by Improved Steam Distillation and its Characterization Studies,” Int. J. Eng. Technol. Manag. Appl. Sci., vol. 3, no. 2, pp. 1–8, 2015.
[20] A.  Guntarti,  K.  Sholehah,  N.  Irna,  and  W.  Fistianingrum,  “Penentuan  Parameter  Non Spesifik  Ekstrak  Etanol  Kulit  Buah  Manggis  (Garcinia  mangostana)  Pada  Variasi  Asal Daerah,” Farmasains, vol. 2, no. 5, pp. 202–207, 2015.
[21] S.  Prabowo,  Y.  A.  Prayitno,  and  Yuliani,  “Chemical  Profile  and  Observing  Honey Adulteration  Using  Fourier  Transform  Infrared  (  FTIR  )  Spectroscopy  and  Multivariate Calibration,” J. Food Pharm. Sci., vol. 8, no. 1, pp. 215–225, 2020.
[22] P.  M.  da  Silva,  C.  Gauche,  L.  V.  Gonzaga,  A.  C.  O.  Costa,  and  R.  Fett,  “Honey:  Chemical composition, stability and authenticity,” FOOD Chem., vol. 196, pp. 309–323, 2015.
[23] B. P. O. D. M. Republik and Indonesia,  Peraturan Kepala Badan Pengawas Obat Dan Makanan Republik  Indonesia  Nomor  12  Tahun  2014  Tentang  Persyaratan  Mutu  Obat  Tradisional.  Jakarta: Kepala BPOM, 2014.
[24] I.  N.  Zuzani  F,  Harlia,  “Aktivitas  Termitisida  Minyak  Atsiri  Dari  Daun  Cekalak  (Etlingera elatior (JACK) RM. SM.) terhadap Rayap Coptotermes curvignathus Sp pada Tanaman Karet,” J. Kim. Khatulistiwa, vol. 4, no. 3, pp. 16–21, 2015.
[25] R. Amrullah, S. Nurjanah, A. Widyasanti, M. Muhaemin, J. Raya, and B. Sumedang, “Kajian pengaruh  rasio  refluks  terhadap  karakteristik  minyak  nilam  hasil  distilasi  fraksinasi,”  J. Teknotan, vol. 11, no. 2, 2017.
[26] E. Guenther, Minyak Atsiri Jilid 1. Jakarta: UI press, 2011.
[27] A.  T.  Ratnaningsih,  E.  Insusanty,  and  A.  Azwin,  “Rendemen  dan  Kualitas  Minyak  Atsiri Eucalyptus  Pellita  pada  Berbagai  Waktu  Penyimpanan  Bahan  Baku,”  Wahana  For.  J. Kehutan., vol. 13, no. 2, pp. 1–9, 2018.
[28] N.  Irfan,  “Autentikasi  Minyak  Kayu  Putih  (melaleuca  leucadendra  L.)  dalam  Produk Menggunakan Metode GS-MS dan FTIR,”  Thesis, Yogyakarta, 2022.
[29] N. K. Kartikawati and A. Rimbawanto, “Peningkatan Genetik Aktual dan Interaksi Sumber Benih  X  Lokasi  terhadap  Kadar  1,8  Cineole  Dan  Rendemen  Minyak  Pada  Kayuputih,”  J. Pemuliaan Tanam. Hutan, vol. 10, no. 2, pp. 123–134, 2016.
[30] A.  Widiyanto  et  al.,  “Kualitas  Minyak  Kayu  Putih  Hasil  Penyulingan  Daun  Asteromyrtus symphiocarpa pada Musim  Hujan dan Kering,”  J. Ilmu Teknol.  Kayu Trop., vol. 15, no. 2, pp. 110–117, 2017.
[31] M.  Siarudin  and  A.  Widiyanto,  “Karakteristik  Penguapan  Air  Dan  Kualitas  Minyak  pada Daun Kayu Putih Jenis Asteromyrtus symphyocarpa,” J. Penelit. Has. Hutan, vol. 32, no. 2, pp. 139–150, 2014.
© 2022 by the authors. Submitted for possible open access publication under the terms and  conditions  of  the  Creative  Commons  Attribution  (CC  BY)  license (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).