## PENGARUH EKSTRAK DAUN KEMANGI ( Ocimum sanctum L.) TERHADAP MOTILITAS DAN KONSENTRASI
SPERMATOZOA MENCIT JANTAN ( Mus musculus )
Safwan, Taufan . Sugara, Mutiara Kusuma Rohmi
Universitas Muhammadiyah Mataram Email : safwan_afan@yahoo.com

## ABSTRAK
Telah  dilakukan  penelitian  tentang  pengaruh  ekstrak  daun  kemangi  ( Ocimum sanctum L.)  terhadap  mencit  ( Mus  musculus )  jantan  untuk  melihat  konsentrasi  s dan  motilita  spermatozoa.  Sebanyak  20  mencit  jantan  berumur  2  bulan  dengan berat  badan  20-25  g  dibagi  kedalam  4  kelompok  perlakuan.  Pemberian  ekstrak dilakukan  peroral setiap hari sampai hari ke 20. Pada hari ke 21 mencit dibunuh dan  diperiksa  motilitas  dan  konsentrasi  spermatozoanya.  Hasil  penelitian menunjukkan ekstrak daun kemangi ( Ocimum sanctum L.) yang diberikan 20 hari, dengan dosis 50 mg/g bb, 100 mg/g bb, dan 250 mg/g bb secara signifikan dapat meningkatkan motilitas dan konsentraasi spermatozoa mencit jantan.
Kata kunci : Daun Kemangi, Konsentrasi Spermatozoa, Motilitas Spermatozoa

## ABSTRACT
We have conducted a research on the effect of the extract of leaves basil (Ocimum sanctum  L)  on  male  mice  to  investigate  the  consentration  and  motility spermatozoa mice. Twoty male mice which has age about 2 months with wight 20 – 25 g were divided into four groups. The extract was provided orally daily until the  20  th  day.  At  21 th day  were    sacrificed  and  determine  of  consentration  and motility. The result of  the research showed that the extract of Ocimum sanctum L leaves  that being  given during 20 days with  the dosage of  50 mg/g body weight, 100  mg/g  bw,  and  250  mg/g  bw  could  signifi  increase  the  consentration  and motility spermatozoa mice.
Keywords  : Leaves  Basil  (Ocimum  sanctum  L.),  Consentration  Spermatozoa, Motility Spermatozoa

## PENDAHULUAN
Angka  kejadian  infertilitas masih  menjadi  masalah  kesehatan  di dunia  termasuk  Indonesia.  Menurut WHO  (2011),  36%  kasus  infertilitas berasal  dari  faktor  pria  sedangkan 64%  lagi  berasal  dari  faktor  wanita. Mascarenhas et al ., (2012) menambahkan  bahwa  terdapat  48,5 juta  pasangan  usia  produktif  yang tidak  dapat  memiliki  anak,  dimana 19,2  juta  pasangan  tidak  dapat memiliki anak pertama dan 26,3 juta pasangan  tidak  dapat  memiliki  anak kedua  dan  selanjutnya.  Kesuburan atau  fertilitas  pada  pria  sangat dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor, salah  satunya  yaitu  gangguan  fungsi kelenjar  hipotalamus  dan  hipofisis yang  memproduksi  FSH  ( Follicle Stimulating  Hormone ),  serta  LH
( Luteinizing Hormone ) atau gangguan pada organ-organ reproduksi  seperti  gangguan  pada jaringan  testis  dan  epididimis  karena penyakit  tertentu  (Soenanto  dan Kuncoro, 2009). Agarwal dan
Prabakaran  (2005)  juga  mengatakan bahwa  faktor  yang  mempengaruhi ketidaksuburan  pria  adalah  pola
hidup  yang  tidak  sehat  seperti merokok.
Kemangi  sangat  populer  di Indonesia. Di daerah Jawa, Sumatera dan  daerah-daerah  lainnya  daun kemangi  sering  dikonsumsi  sebagai lalapan pelengkap makan dan penguat  aroma  dalam  makanan. Menurut  Kurniawan  (2013),  secara empiris  kemangi  digunakan  sebagai afrodisiak karena memiliki kandungan  araginin  yang  dapat memperkuat  daya  tahan  sperma  dan mencegah kemandulan.
Selain araginin,  pada  daun  kemangi  juga terdapat kandungan metabolit skunder lainnya seperti minyak atsiri, fitosterol,  alkaloid,  senyawa  fenolik, tanin,  lignin,  saponin,  flavonoid, terpenoid  dan  antrakuinon  (Sarma et al. ,  2011).  Hasil  penapisan  fitokimia ekstrak  etanol  70%  herba  kemangi sendiri menunjukkan adanya senyawa metabolit sekunder golongan  flavonoid,  saponin,  tanin dan  triterpenoid/steroid  (Medica et al ., 2004).
Tujuan  penelitian  ini  adalah untuk  mengetahui  apakah  pemberian ekstrak daun kelor dapat
meningkatkan  jumlah  dan  motilitas spermatozoa mencit jantan.

## METODE PENELITIAN Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  pada bulan Mei sampai Juni 2016. Sampel daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum L.) diperoleh  dari  Dusun  Rungkang, Desa  Gelora  Kecamatan  Sikur, Lombok  Timur.  Proses  ekstraksi sampel  dan  perlakuan  hewan  uji dilakukan di Laboratorium Farmakologi dan Farmakognosi, Fakultas  Ilmu  Kesehatan  Universitas Muhammadiyah Mataram,
sedangkan  pengamatan  motilitas  dan konsentrasi  spermatozoa  dilakukan di  Laboratorium  Biologi  Universitas Mataram.
Desain Penelitian
Jenis  penelitian  ini  adalah penelitian  true  eksperimental  dengan pendekatan post c test  only  control group  design terhadap  20  ekor mencit yang dibagi dalam 4 kelompok.  Dimana  kelompok  1, kelompok mencit yang dicekok CMC Na  ( Carboxymethyl  celluolsse )  0,5% 1  ml/hari.  Kelompok  2,  3,  dan kelompok  mencit  yang  dicekok
ekstrak daun kemangi masing- masing  dosis  50  mg/g  bb,  100  mg/g bb, dan 250 mg/g bb/hari.
Pembuatan  Ekstrak  Etanol  Daun Kemangi ( Ocimum sanctum L.)
Ekstraksi bahan aktif dilakukan  dengan  mengacu  pada penelitian  Juniarti et  al ,  (2009)  yang dimodifikasi. Metode ekstraksi dilakukan menggunakan metode
Soxhletasi. Bahan yang akan diekstraksi  dimasukkan  ke  dalam sebuah  kantung  ekstraksi  (kertas, karton  dan  sebagainya)  dibagian dalam  alat  ekstraksi  dari  gelas  yang bekerja continue (perkolator).  Proses ekstraksi  telah  selesai  apabila  warna larutan  sama  dengan  warna  pelarut, kemudian  di  uapkan  di waterbath dengan suhu 70 0 C.

## Perlakuan Hewan Uji
Hewan  uji  dibagi  menjadi  4 kelompok yaitu  satu  kelompok kontrol  dan  3  kelompok  perlakuan ekstrak  dosis  50,  100,  dan  250 mg/kgBB.  Masing-masing  kelompok terdiri  dari  5  ekor  mencit.  Sebelum perlakuan  hewan  uji  dipuasakan selama  1  kali  24  jam  kemudian diadaptasi  selama  3  hari.  Perlakuan dilakukan  selama  20  hari  dan  pada
hari  ke-21  hewan  uji  dikorbankan dengan  menggunakan  eter.    Kedua testis  dikeluarkan,  bagian  kedua epididimisnya dipisahkan dan dibersihkan  dari  lemak-lemak  yang masih  menempel.  Kemudian  disedot dengan spuit e, diberi larutan natrium klorida  fisiologis,  kemudian  diaduk hingga rata. Spermatozoa diencerkan hingga  110  kali  dalam  larutan natrium  klorida 0,9%,  dikocok perlahan hingga merata.
Uji  Motilitas  dan  Konsentrasi Spermatozoa
Motilitas dilihat dibawah
mikroskop elektrik berdasarkan
gerakan spermatozoa yang hidup dan
bergerak maju/progresif.
Data didiperoleh dengan  cara  meneteskan sampel  semen  (sperma)  yang  telah diencerkan pada
kamar hemasitometer improved  Neubauer kemudian ditutup dengan cover glass lalu  diamati  di  bawah  mikroskop dengan pembesaran 400  kali, jumlah spema  yang  bergerak  dan  tidak bergerak  dihitung  pada  lima  bidang kecil improved  Neubauer, motilitas sperma dibagi dalam 5 kategori yaitu kategori  4  (Bergerak  sangat  aktif atau  cepat,  gelombang  besar  dan
bergerak cepat), kategori 3 (bergerak  aktif  atau  cepat, ada  gelombang  dan  gerakan  massa yang  cepat),  kategori  2  (bergerak agak  aktif,  terlihat  gelombang  tipis yang  jarang  serta  gerakan  massa yang  lambat),  kategori  1  (bergerak kurang  aktif/  kurang  cepat,  tidak terlihat  gelombang,  hanya  gerakan individual  sperma),  dan  kategori  0 (gerakan  individual  sperma  (sedikit sekali  gerakan  individual  sperma atau  tidak  ada  gerakan  sama  sekali mati)).
Perhitungan konsentrasi spermatozoa  dilakukan  dengan  cara mengambil  spermatozoa  pada  kauda epidermis. Spermatozoa yang didapat diletakkan pada cawan penguap yang berisi cairan NaCl sebanyak 250 µL. Spermatozoa  dimasukkan  ke  dalam bilik hitung Neubauer
(Hemasitometer) sampai kamar
Neubauer terisi rata kemudian hitung jumlah  spermatozoa  pada  salah  satu kamar hitung Neubauer dan selanjutnya  ditentukan  pengenceran yang  akan  dilakukan  dalam  jumlah kotak  yang  akan  di  hitung.  Hasil perhitungan motilitas dan konsentrasi spermatozoa  diuji    statistik  Anova.
Bila  datanya  normal  dan  homogen dan  bila  tidak  digunakan  uji  non parametrik.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Konsentrasi Spermatozoa
Hasil perhitungan jumlah sperma mencit jantan setelah pemberian  ekstrak  etanol Moringa oleifera L.  selama  20  hari  dapat dilihat pada Tabel I.
Berdasarkan hasil
pengamatan  pengaruh  ekstrak  daun
kemngi terhadap jumlah spermatozoa mencit  jantan  (Tabel  1)  menunjukan peningkatan jumlah spermatozoa secara  signifikan  ( p <  0,05)  pada kelompok  dosis  50  mg/kgBB,  100 mg/kgBB,  dan  250  dibandingkan dengan  kelompok  normal.  Hal  ini menunjukkan bahwa pemberian ekstrak daun kemangi dapat memberikan efek yang baik terhadap  peningkatan  konsenterasi spermatozoa. Tabel I . Data rata-rata pengaruh perlakuan hewan uji terhadap jumlah spermatozoa Kelompok Rata-rata Jumlah Sperma (Juta/ml) ± SD Kontrol Normal 223,40 ± 32,36 Dosis 50 mg/kgBB 489,33 ± 70,55* Dosis 100 mg/kgBB 548,00 ± 177,32* Dosis 250 mg/kgBB 514,00± 15.87 *
Keterangan: (*) menunjukkan perbedaan yang bermakna terhadap kelompok kontrol ( p < 0.05).
Menurut Nuraini et al , (2012) sperma  dianggap  normal  apabila konsentrasi  spermatozoa  lebih  dari 200  juta/ml  dan  dianggap  infertile apabila  konsentrasi  sperma  kurang dari  200  juta/ml.  Menurut  Mahendra (2009)  yang  melakukan  penelitian terhadap  ekstrak  rimpang Zingiber officinale  roscoe  var mangatakan bahwa  kandungan araginin pada tanaman
tersebut dapat meningkatkan motilitas
dan
konsentrasi  spermatozoa.  Kurniawan (2013)  juga  menambahkan  bahwa pada daun kemangi terdapat kandungan araginin yang  diduga dapat memperkuat daya tahan sperma  dan  mencegah  kemandulan. Araginin merupakan  asam  amino non-esensial  dan  bersifat  polar  yang sangat  diperlukan  dalam  sintesis protein  dan  memiliki  peran  penting dalam  sistem  ketahanan  tubuh  dan imunitas  seluler.  Selain  itu, araginin
juga  berperan  penting  dalam  proses pembentukan spermatozoa (Srivastava et al ., 2006).
Motilitas Spermatozoa
Perhitungan motilitas spermatozoa dilakukan untuk
mengetahui  kualitas  spermatozoa karena  motilitas  sangat  berpengaruh terhadap  pembuahan.  Pengamatan motilitas  sperma  didasarkan  pada  5 kategori  yaitu  kategori  0  untuk sperma immotile atau tidak bergerak, kategori  1  untuk  sperma  berputar ditempat,  kategori  2  untuk  sperma
bergerak  lambat,  kategori  3  untuk sperma  bergerak  cepat,  dan  kategori 4  untuk  sperma  bergerak  sangat cepat.  Hasil  pengamatan  pemberian ekstrak  etanol  kemangi  terhadap motilitas  sperma  diperoleh  dari  hasil pengamatan pergerakkan spermatozoa yang kemudian diklasifikasikan berdasarkan kategori yang sudah ditentukan. Hasil pengamatan pengsruh pemberian
ekstrak daun kemangi selama 20 hari dapat  dilihat  pada  Gambar  1.
Keterangan :
- Huruf a menunjukkan motilitas kategori 0 (hijau) berbeda signifikan dengan kelompok kontrol
- Huruf b menunjukkan motilitas kategori 1 (biru) berbeda signifikan dengan kelompok kontrol
- Huruf c menunjukkan motilitas kategori 3 (orange) berbeda signifikan dengan kelompok kontrol
Gambar 1 . Data rata-rata pengaruh prlakuan hewan uji terhadap jumlah spermatozoa Hasil  pengamatan  motilitas spermatozoa (Gambar 1)
menunjukkan  bahwa  pada  dosis  50
mg/kgBB ada perbedaan yang signifikan terhadap motilitas kategori 0, 1 dan 3 terhadap kelompok kontrol
a b c b c b c
(p  <  0,05).  Hal  ini  mengindikasikan bahwa  ekstrak  dosis  50  mg/kgBB mampu  penurunan  motilitas  kategori 0  dan  1,  dan  peningkatan  motilitas kategori  3.  Menurut  Nuraini et  al , (2012)  semakin  besar  persentase motilitas  sperma  immotile  (gerak ditempat  dan  tidak  bergerak)  maka kemungkinan  adanya  kemandulan atau infertile semakin  besar,  oleh karena itu motilitas sangat diperlukan agar  sperma  dapat  mencapai  ovum dan melakukan fertilisasi.
Pada dosis 100 mg/kgBB dan 250  mg/kgBB  ada  perbedaan  yang signifikan  pada  motilitas  kategori  1 dan  3  terhadap  kelompok  kontrol. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  dosis tersebut berefek baik terhadap penurunan  motilitas  kategori  1  dan peningkatan  motilitas  kategori  3. Semakin  besardosis  yang  diberikan semakin  kecil  persentase  rata-rata sperma motile (bergerakmaju  atau zig-zag) dan semakin besar persentase  sperma immotile (gerak ditempatatau  tidak  bergerak),  hal  ini dapat  menyebabkan infertile pada mencit  (Nuraini et  al .,  2012).
Sedangkan untuk motilitas kategori 2 dan  kategori  4  tidak  ada  perbedaan
yang  signifkan  antara  kelompok dosis  50  mg/kgBB,  dosis  100 mg/kgBB  dan  dosis  250  mg/kgBB terhadap  kelompok kontrol.
Motilitas kategori 2 ini didefinisikan  sebagai  spermatozoa yang  bergerak  sedang,  sedangkan kategori  4  untuk  spermatozoa  yang bergerak  sangat  cepat.Dari  kelima kategori tersebut yang paling diharapkan  untuk  meningkat  yaitu kategori  3  dan  kategori  4.Dengan meningkatnya kategori 3 dan kategori  4  berarti  pemberian  ekstrak etanol daun kemangi dapat berpengaruh  terhadap  peningkatan motilitas spermatozoa.
Menurut  Rahardhianto et  al , (2012)  juga  mengatakan  bahwa motilitas spermatozoa sangat dipengaruhi  oleh  struktur  morfologi yang normal dan keadaan
lingkungan.  Struktur  morfologi  yang normal berkaitan
dengan spermatogenesis  yang  menghasikan sel-sel  spermatozoa  normal  untuk mendukung  daya  geraknya  sehingga dapat  masuk  ke  organ  reproduksi betina.

## KESIMPULAN
Ekstrak daun kemangi
( Ocimum sanctum L.) yang diberikan 20  hari,  dengan  dosis  50  mg/g  bb, 100 mg/g bb, dan 250 mg/g bb secara
signifikan dapat meningkatkan motilitas dan konsentraasi
spermatozoa mencit jantan.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Ucapan  terima  kasih  penulis sampaikan kepada Program Studi D3 Farmasi  Universitas  Muhammadiyah Mataram  yang  telah  membantu penyelesaian artikel ini

## DAFTAR PUSTAKA
Agorwala  A,  Prabakaran  SA.  2005.
Mechonism, Mesurement and prevention of  oxidative stress in male reproductive physiology.  Indian  journal  of experimental. Biology43, 936-974. Juniarti,  D.  Osmeli  dan  Yuhernita. 2009.  Kandungan  Senyawa Kimia, Uji Toksisitas (Brine Shrimp Lethality Test) dan Antioksidan  (1,1-diphenyl-2- pikrilhydrazyl)  dari  Ekstrak Daun Saga (Abrus precatorius l.). Makara Sains, 13 (1) : 50-54. Kurniawan  S.2013.  Daun  Kemangi, Bawang Merah, Bawang
Putih  dan  Bengkuang  Terapi Herbal Kesehatan dan Kecantikan. Yogyakarta: DIVA Press. Mahendra, T. 2009. Pengaruh Pemberian  Ekstrak  Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale roscoe var. rubrum) Terhadap Motilitas Dan Konsentrasi Spermatozoa Tikus Putih (Rattus novergicus)  Jantan.  Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga. Surabaya. Mascarenhas,  Maya  N,  Flaxman, Seth R, Boerma, Ties, Vanderpoel,  Sheryl,  Stevens, Gretchen  A.  2012.  National, Regional,  and  Global  Trends in Infertility Prevalence Since 1990:  A  Systematic  Analysis of  277  Health  Surveys.  Plos Medicine. Vol 9 (2).
Medica  V,  Ruslan  W,  Nawawi  A. 2004. Telaah Fitokimia Herba Kemangi Ocimum  sanctum L.).  Fakultas  Farmasi  Institut Teknologi Bandung. Skripsi
Nuraini,  T.  Dadang,  Kusmana.  Efy,
Afifah.2012. Penyuntikan Ekstrak  BijiCarica  papaya  L. Varietas Cibinong Pada Macaca fascicularis L. DanKualitas Spermatozoa Serta Kadar Hormon Testosteron.Makara,Kesehata n. 16 : 9-16. Rahardhianto,  A.,  Abdulgani,  N., Trisyani,  N.  2012.  Pengaruh Konsentrasi  Larutan  Madu dalam NaCl Fisiologis terhadap Viabilitas dan Motilitas  Spermatozoa  Ikan
Patin  (Pangasius  pangasius) selama Masa Penyimpanan.Jurnal Sains dan  Seni  ITS.  Vol.1  (1):  58- 63. Sarma D, Sai Koteswar and Babu, A. Venka Suresh. 2011. Pharmacognostic and Phytochemical Studies of Ocimum  mericanum . Jurnal of Chemical and Pharmaceutical Research , Volume  3.  Nomor  3.  Hal 337-347 Soenanto,  H  dan  Kuncoro,  S. 2009.obat  tradisional.  PT. Elex Media Komputindo.Jakarta. Srivastava  SP,  Desai  E,  Coutinho, Govil G. 2006. Mechanism of Action Of L-Araginine on the Vitality  of  Spermatozoa  is Primarily  Through  Increased Biosynthesis of  Nitric Oxide. Tata Institute Of Fundamental Research. Indian Biology of Reproduction Journal.Volume 74. 954-958 World  Health  Organization.2011. Prevalence  and  Incidence  of Selected Sexually Transmitted Infections: methods  and  result  used  by WHO to generate 2005 estimates.geneva.