RESPONS PERTUMBUHAN UDANG VANAME ( Litopenaeus vannamei )

## DI MEDIA BERSALINITAS RENDAH DENGAN PEMBERIAN PAKAN  PROTEIN DAN KALSIUM BERBEDA

## GROWTH RESPONSE OF WHITE SHRIMP (Litopenaeus vannamei) REARED IN LOW SALINITY MEDIUM, FED DIFFERENT PROTEIN AND CALCIUM LEVEL S

## Erly Kaligis
Program Studi Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, UNSRAT, Manado Email: erly_kaligis@yahoo.co.id

## ABSTRACT
The  white  shrimp  (Litopenaeus  vannamei)  has  been  an  important  commercial  shrimp  species  in Indonesia. This species is tolerance to low salinity therefore, it is important to develop its aquaculture. The  purpose  of  this  study  was  to  study  the  effect  of  protein  and  calcium  levels  in  diet  on  growth performance of the white shrimp post larvae. A factorial experiment at three levels of dietary protein (25, 35, 45%) and three levels of calcium (0, 2, 4%) with three replicates were used in this experiment. Fifteen shrimps (PL25) were placed in triplicate 45-l glasses aquarium. Salinity in shrimp aquarium was  2  ppt. The  shrimps  were  fed  of  about  8%  of  body  weight  four  times  per  day  for  28  days. Measured parameters were daily growth rate, feed efficiency, RNA/DNA ratio, frequency of moulting, calcium and protein retentions. Results showed that shrimp fed on diet 45% protein and 2% calcium levels produce higher daily growth rate, feed efficiency, RNA/DNA ratio, protein retention, compared to the other treatments. It was concluded that the white shrimp post larvae required 45% protein and 2% calcium for the shrimp maintenance in a low salinity condition.
Keywords :  protein, calcium, RNA/DNA ratio, moulting,  Litopenaeus vannamei

## ABSTRAK
Udang  vaname  ( Litopenaeus  vannamei )  merupakan  jenis  udang  bernilai  komersial  penting  di Indonesia.  Spesies  ini  dapat  hidup  di  salinitas  rendah  untuk  itu  perlu  dikembangkan  budidayanya. Penelitian  ini  dilaksanakan  untuk  mengetahui  pengaruh  protein  dan  kalsium  pakan  terhadap  kinerja pertumbuhan  pasca  larva  vaname.  Disain  faktorial  digunakan  dalam  penelitian  terdiri  tiga  tingkat protein  (25,  35,  45%) dikombinasi  dengan  tiga  tingkat  kalsium  (0,  2,  4%)  dengan  tiga  ulangan digunakan dalam penelitian ini. Lima belas udang (PL 25) dimasukkan dalam 45 L akuarium. Salinitas dalam  wadah  adalah  2  ppt.  Udang  kemudian  diberi  pakan  sekitar  8%  dari  bobot  badan  empat  kali perhari.  Percobaan  dilaksanakan  selama  28  hari.  Parameter  uji  yang  digunakan  adalah  laju  per- tumbuhan  rerata  harian,  efisiensi  pakan,  rasio  RNA/DNA,  frekuensi  ganti  kulit,  retensi  kalsium  dan protein. Hasil penelitian menunjukkan bahwa udang yang diberi kombinasi  pakan mengandung  45% protein  dan  2%  kalsium  menghasilkan  laju  pertumbuhan  rerata  harian,  efisiensi  pakan,  rasio RNA/DNA, retensi protein lebih tinggi dibandingkan  perlakuan lainnya. Kesimpulan diperoleh bahwa pasca larva vaname membutuhkan 45% protein dan 2% kalsium untuk pemeliharaan di kondisi media salinitas rendah.
Kata kunci :  protein, kalsium, rasio RNA/DNA, ganti kulit, Litopenaeus vannamei

## I. PENDAHULUAN
Udang  vaname  ( Litopenaeus  vanna- mei ) merupakan salah satu produk perikanan unggulan sektor perikanan. Berbagai kelebih- an yang dimiliki mulai dari mudahnya mem-
budidaya udang ini, produksi yang stabil dan relatif tahan terhadap penyakit menyebabkan sebagian besar petambak di Indonesia meng- geluti usaha budidaya udang vaname ( Litope- naeus vannamei) . Di samping itu, ada kelebi- han lain udang vaname, yaitu bersifat euriha-
lin.  Udang  ini  mampu  hidup  pada  perairan dengan  salinitas  sekitar  0,5-40  ppt  (Bray et al .,  1994).  Kemampuan  ini  membuka  pelu- ang  bagi  petambak  udang  untuk  mengem- bangkan  budidaya  vaname  di  perairan  darat- an  ( inland  water )  bersalinitas  rendah.  De- ngan  budidaya  udang  vaname  di  perairan bersalinitas  rendah  akan  meningkatkan  pro- duksi komoditas ini.
Secara umum, perubahan kondisi dari media  bersalinitas  normal  (30  ppt)  ke  media bersalinitas rendah dalam tahap awal budida- ya  udang  akan  menyebabkan  udang  mudah stres dan juga lemah. Pada kondisi demikian udang laut secara spontan terjadi regulasi  hi- perosmotik untuk  dapat  mempertahankan diri  terhadap  kondisi  stres  (Mantel  and  Far- mer,  1985).  Kenyataan  yang  ada  bahwa  se- lama  terjadi  penurunan  salinitas  menyebab- kan peningkatan laju metabolisme dan proses osmoregulasi  yang  berkorelasi  langsung  de- ngan  menurunnya  kelangsungan  hidup  dan pertumbuhan  udang.  Oleh  karena  itu,  perlu upaya  untuk  meningkatkan  kesehatan  dan vitalitas  pasca  larva  sebagai  penentu  utama keberhasilan  pemeliharaan  udang  di  lingku- ngan bersalinitas rendah.
Pengaruh  pakan  terhadap  pertumbuh- an  udang  vaname  telah  diinvestigasi  oleh berbagai  peneliti,  terutama  terkait  pengaruh mineral  kalsium  dan  protein  pakan.  Davis et al .  (1992)  melaporkan  bahwa  interaksi  ber- bagai macam mineral dalam pakan dapat me- ningkatkan  pertumbuhan.  Selanjutnya  pakan dengan rasio Ca/P berbeda menentukan  kan- dungan  kalsium  karapas  dan  efisiensi  pakan udang  (Davis et  al .,  1993).  Upaya  lain  de- ngan  pemberian  protein  telah  menunjukkan bahwa kebutuhan protein untuk juvenil vana- me  adalah  sekitar  32%  (Kureshy  and  Davis, 2002).  Peningkatan  untuk  vitalitas  pasca  lar- va  udang  vaname  dipengaruhi  secara    lang- sung oleh kandungan protein dan kalsium pa- kan.  Davis et  al. (2002)  menyatakan  bahwa kandungan asam amino dan mineral berperan dalam  pembelanjaan  energi  selama  proses osmoregulasi serta mempertahankan keseim-
bangan ion. Namun, untuk pasca larva vana- me yang dipelihara di media bersalinitas ren- dah,  apakah  kombinasi  protein  dan  kalsium pakan  juga  dapat  mempengaruhi  pertumbuh- an. Penelitian ini bertujuan mengkaji peranan protein dan kalsium pakan terhadap laju per- tumbuhan rerata harian, efisiensi pakan, rasio RNA/DNA, frekuensi ganti kulit, retensi kal- sium  dan  protein.  pasca  larva  vaname  yang dipelihara pada media bersalinitas rendah.

## II. METODE PENELITIAN

## 2.1.  Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilakukan  selama  sekitar  5 minggu  dimulai  dari  tahap  aklimatisasi  he- wan uji pada laboratorium hingga pelaksana- an percobaan. Tempat pelaksanaan penelitian di  laboratorium  Fisiologi  Hewan  Air,  IPB Bogor.

## 2.2.   Pakan
Percobaan  terdiri  atas  9  perlakuan dengan  pengulangan  sebanyak  3  kali.  Ran- cangan  perlakuan  adalah  disain  faktorial  di- dasarkan  pada  pemberian  kadar  protein  (25, 35,  dan  45%)  dan  kalsium  (0,  2,  dan  4  %) dalam pakan buatan.  Kadar protein pada pe- nelitian  ini  didasarkan  hasil  penelitian  Shiau et al. (1991) yang  melaporkan pertumbuhan maksimal  udang  pada  kadar  44%  protein, sedangkan  kadar  kalsium  digunakan  antara 0%  hingga  4%  berdasarkan  hasil  penelitian Davis et  al . (1993).  Sumber   protein   adalah tepung rebon, tepung ikan, dan bungkil kede- lai.  Rasio  energi  protein  dari  perlakuan  dite- tapkan  sama.  Penambahan  mineral  kalsium menggunakan  dikalsium  fosfat  (CaHPO 4 ). Komposisi bahan dan proksimat pakan disaji- kan pada Tabel 1.

## 2.3. Pemeliharaan Pasca larva dan Pem- berian Pakan
Sampel  hewan  uji  adalah  pasca  larva vaname  berumur  25  hari    (PL  25).    Untuk meminimalkan  variasi  unit  percobaan,  PL diperoleh  dari  hasil  pemijahan  satu  induk.
Tabel 1. Komposisi bahan pakan, proksimat dan kandungan energi pakan percobaan.
Perlakuan Kombinasi Protein dan Kalsium Pakan
Bahan Pakan (% bobot kering) A (25;0) B (25;2) C (25;4) D (35;0) E (35;2) F (35;4) G (45;0) H (45;2) I (45;4) Tepung ikan 6 6 6 21 21 21 44 44 44 Tepung terigu 2 2 2 8.5 8.5 8.5 14 14 14 Tepung kedelai 39,5 39,5 39,5 34 34 34 15,5 15,5 15,5 Tepung rebon 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Minyak Ikan 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Minyak cumi 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 Lecithin 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 CMC 5 5 5 5 5 5 5 5 5 Selulosa 36,5 32,5 28,5 20,5 16,5 12,5 10,5 6,5 2,5 Vitamin mix. 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 Mineral mix CaHPO 4 2 2 2 2
2 2 2 2 2 2 CaHPO 4 0 4 8 0 4 8 0 4 8 Total 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Komposisi  Proksimat & Kalsium  (% bobot Kering) Protein 26,15 26,59 26,48 35,80 36,12 35,56 46,59 46,43 46,36 BETN 34,0 34,24 32,65 33,57 33,26 33,28 29,72 30,29 30,22 Lemak 6,18 5,12 7,15 6,56 6,22 6,84 7,73 7,65 7,39 Serat Kasar 25,19 24,14 22,61 16,65 15,52 14,13 9,51 7,91 7,21 Kadar abu 8,48 9,91 11,11 7,42 8,88 10,19 6,45 7,72 8,82 Kalsium 0,79 2,31 3,40 0,71 2,70 3,39 0,76 2,24 3,42 Kandungan Energi DE (kkal/g pakan) 242,9 2 242,92 242,9 2 337,5 7 337,5 7 337,5 7 434,1 4 434,1 4 434,1 4 C/P (kkal/g protein) 3 9,55 9,55 9,55 9,52 9,52 9,52 9,54 9,54 9,54
Keterangan:
1. CMC   : Carboxyl Methyl Cellulose.
2. Komposisi Mineral mix (per 100 g): NaCl 1,0 g, MgSO 4 .7H 2 O 15,0 g, NaH 2 PO 4 .2H 2 O 25,0  g,  KH 2 PO 4 32,0  g,  Fe-citrate  2,5  g,  Trace  element  mix.  1,0  g  (100  g  trace element: ZnSO 4 .7H 2 O 35,3 g , MnSO 4 .4H 2 O 16,2 g, CuSO 4 .5H 2 O 3,1 g, CoCL 2 .6H 2 O 0,1 g, KlO 3 0,3 g, selulosa  45 g )  (Takeuchi, 1988).
3. Komposisi Vitamin mix. (per 100 g):  vitamin B 1 6 mg, vitamin B 2 10 g, vitamin B 6 4 g,  vitamin  B 12 0,01  mg,  vitamin  C  500  mg,  Niacin    40  mg,  Ca-pantothenate  10  mg, Inositol  200  mg,  Biotin  0,6  mg,  Folic  acid  1,5  mg,  p-Amino-benzoic  acid  5  mg, vitamin K 3 5 mg, vitamin A 4000 IU, vitamin D 3 4000 IU (Takeuchi,  1988).
Dalam kondisi laboratorium, benih diaklima- tisasi  selama  10  hari  dari  PL  10  hingga  PL 20.  Kemudian  saat  PL  20,  dapat  dilakukan aklimasi  salinitas  secara  gradual  selama  4 hari dari salinitas 25 ppt menjadi 2 ppt. Sela- ma  tahap  persiapan  ini,  pakan  yang  diguna- kan  adalah Artemia  salina yang  telah  diper- kaya  dengan  minyak  ikan    sebagai  sumber HUFA (Gapasin et al., 1998). Pemberian pa- kan dilakukan kontinu 4 kali per hari  hingga PL25.
Sebelum  percobaan  dimulai,  seluruh wadah percobaan diatur secara acak menurut perlakuan  yang  diterapkan.  Wadah  berupa akuarium  berukuran    60×30×40  cm 3 dengan jumlah  27  buah  yang  dilengkapi  sistem resirkulasi.  Seluruh  wadah  diisi  dengan  air bersalinitas  2  ppt  yang  dipersiapkan  melalui pengenceran.  Pada  media  ditambahkan  kal- sium    (CaCO 3 )  dan  potasium  (K 2 CO 3 )  de- ngan kadar masing-masing 70 ppm dan 41,44 ppm, kemudian diaerasi untuk mempertahan- kan kualitas air.
Pemeliharaan  benih  berlangsung  se- lama  4  minggu.  Awalnya  PL  25  diseleksi berdasarkan ukuran yang sama dengan bobot awal rata-rata sekitar 0,0279 gram, kemudian ditebar  dalam  setiap  akuarium  sebanyak  15 individu.  Pemberian  pakan  setiap  hari  ber- kisar 8 % dari bobot basah dengan frekuensi 4 kali perhari, selanjutnya diatur berdasarkan jumlah pakan terkonsumsi. Banyaknya pakan yang  diberikan  dan  sisa  pakan  selama  pene- litian    dicatat  untuk  penentuan  tingkat  kon- sumsi  pakan  yang  nantinya  dijadikan  dasar untuk  menghitung  efisiensi  pakan.  Untuk mempertahankan  kualitas  media pemeliha-
raan, sisa pakan dan kotoran dikeluarkan dari media  dengan  cara  disifon  yang  dilakukan sore  hari  sebelum  pemberian  pakan.  Setiap hari juga dilakukan pergantian air  dalam tiap wadah dengan media baru sebanyak ± 10%.
Pengambilan  data  dilakukan  berbeda waktu. Pengamatan jumlah udang yang hidup serta  penimbangan  bobot  basah  untuk  per- tumbuhan dilaksanakan setiap 7 hari. Pengu- kuran  bobot  basah  pada  semua  udang.  Kan- dungan  RNA,  DNA,  dan  kalsium  tubuh  di- ukur pada akhir penelitian. Pengukuran prok- simat  untuk  hewan  uji  dilakukan  pada  awal dan  akhir  percobaan,  sedangkan  pakan  dila- kukan sebelum dan sesudah peramuan pakan. Kandungan  DNA  dan  RNA  diukur  menggu- nakan  peralatan  spektrofotometer  ( Gene  Qu- ant ).  Sebelum  pengukuran  konsentrasi  DNA dan RNA,  dilakukan ektraksi pada DNA dan RNA (Gwak et al., 2003). Sekitar 1 individu udang  yang  tidak  sedang  ganti  kulit  dipisah- kan  dari  tiap    perlakuan,  kemudian  diambil bagian  otot  putih  untuk  dianalisa.  Pengu- kuran proksimat seperti  protein kasar, kadar lemak kasar, serat kasar, kadar abu, kadar air, dan  BETN  juga  mengikuti  metode  Takeuchi (1988).  Besarnya  penyerapan  kalsium  pakan diukur  melalui  kandungan  kalsium tubuh mengunakan  peralatan Atomic  Absorption Spectrofotometer (AAS  Shimadzu  AA-680) Pengambilan  data  dilakukan  tiga  kali  ulang- an.  Pengamatan  pada  ganti  kulit  dilakukan lewat pengujian tersendiri dengan mengguna- kan  akuarium-akuarium  kecil  sejumlah  per- lakuan  yang diberlakukan. Pengambilan data frekuensi  ganti  kulit  dengan  menghitung jumlah udang ganti kulit setiap hari selama 4 minggu percobaan.

## 2.4.  Analisis Data
Peubah  yang  dianalisis  dalam  peneli- tian  adalah  laju  pertumbuhan  rerata  harian (Huisman,  1976),  efisiensi  pemanfaatan  pa- kan (Takeuchi, 1988), rasio RNA/DNA (Sat- terwhite,  2003),  retensi  protein  dan  kalsium (Takeuchi,  1988),  dan  frekuensi  ganti  kulit. Seluruh data nilai tengah perlakuan dianalisis ragam  dengan  menggunakan  program  SPSS 15.00 dan Excel 2007. Jika terdapat perbeda- an nyata dilanjutkan dengan Uji Tukey (Steel and Torrie, 1991).

## III.  HASIL DAN PEMBAHASAN

## 3.1.  Hasil
Pemberian  pakan  yang  mengandung protein dan kalsium  berbeda terhadap  pasca- larva udang vaname dalam media bersalinitas 2 ppt menunjukkan pertumbuhan yang berbe- da antar perlakuan (Gambar 1). Secara umum seluruh  udang  yang  dipelihara  pada    seluruh perlakuan juga mengalami peningkatan. Pada awal  percobaan,  bobot  rata-rata  yaitu  sekitar 0,0279 g kemudian meningkat  di atas 0,6123 g pada akhir percobaan (minggu ke-4). Perla- kuan G (45% protein; 0% Ca 2+ )  dan  H (45% protein; 2% Ca 2+ ) menunjukkan pe-ningkatan pertumbuhan  lebih  tinggi  ( P> 0,05 ) setelah
pada  minggu  pertama.  Data  laju  pertumbuh- an  bobot  rerata  harian  (LPRH)  yang  didapat dari perhitungan bobot rata-rata individu me- nunjukkan  nilai  tertinggi  dicapai  pada    per- lakuan yaitu H  (45% protein;  2 % kalsium) sebesar 12,90 %, yang berbeda nyata dengan perlakuan  lain  ( P>0, 05).  Pada  perlakuan  F (35  %  protein;  4  %  kalsium),  rata-rata  nilai LPRH  dicapai  teren-dah  yaitu  sekitar  11,66 % (Tabel 2).
Efek pakan terhadap pertumbuhan PL pada salinitas  2 ppt dapat diindikasikan dari perbedaan  nilai  efisiensi  pemanfaatan  pakan (EP).  Karena  LPRH  tertinggi  dicapai  pada perlakuan H (45% protein; 2% Ca 2+ ), dengan jumlah  pakan  sama  maka  EP  dicapai  juga tertinggi  sekitar  73,99%  pada  perlakuan  ter- sebut.  Respons  EP  cenderung  menurun  pada perlakuan  I  (45%  protein;    4%  kalsium)  dan mencapai  nilai  terendah  pada  perlakuan  E (35% protein; 2% Ca 2+ ) yaitu sekitar 52,81% (Tabel 2).
Data  rasio  RNA/DNA    memperlihat- kan  bahwa  kadar  protein  dan  kalsium  dalam pakan  secara  umum  berpengaruh  terhadap rasio RNA/DNA postlarva. Nilai  rataan rasio RNA/DNA  tertinggi  ditunjukkan  pada  per- lakuan G (45% protein; 0 % Ca 2+ ) yaitu sebe- sar  0,141  yang  tidak  berbeda  nyata  dengan
Gambar 1. Pertumbuhan bobot rata-rata individu pasca larva vaname ( Litopenaeus vannamei ) dipelihara selama empat  minggu penelitian pada salinitas 2 ppt.
Tabel 2.  Nilai rataan dan simpangan baku laju pertumbuhan rerata harian (LPRH),  efisiensi pakan (EP), dan rasio RNA/DNA pasca larva vaname ( Litopenaeus vannamei ).
Perlakuan Protein-Ca Pakan Peubah LPRH (%) EP (%) rasio RNA/DNA A  (25 - 0) 12,37 ± 0,124 ab 56,58 ± 1,63 b 0,069 ± 0,019 a B  (25 - 2) 12,51 ± 0,172 b 59,19 ± 1,53 b 0,057 ± 0,005 a C  (25 - 4) 12,39 ± 0,128 ab 60,64 ± 1,11 b 0,064 ± 0,045 a D  (35 - 0) 11,93 ± 0,298 a 54,76 ± 1,65 ab 0,021 ± 0,011 a E  (35 - 2) 11,77 ± 0,084 a 52,81 ± 1,62 a 0,057 ± 0,021 a F  (35 - 4) 11,66 ± 0,027 a 55,72 ± 1,93 ab 0,042 ± 0,002 a G  (45 - 0) 12,86 ± 0,124 b 69,35 ± 0,69 c 0,141 ± 0,003 b H  (45 - 2) 12,90 ± 0,168 bc 73,99 ± 1,41 d 0,137 ± 0,018 b I   (45 - 4) 12,34 ± 0,064 b 62,61 ± 0,74 bc 0,059 ± 0,013 a
Keterangan  :  Nilai  tengah  dengan  tanda  huruf  yang  sama  pada  baris  berbeda  adalah  tidak berbeda nyata ( P>0,05 ).
perlakuan  H  (45%  protein;  2%  Ca 2+ )  namun berbeda nyata dengan seluruh perlakuan  lain- nya.  Adanya  perbedaan  rasio  RNA/DNA mengindikasikan  bahwa  pada perlakuan pro- tein  dan  kalsium  pakan  mempengaruhi  ak- tivitas metabolism  untuk sintesis  protein.
Berdasarkan  rata-rata  jumlah  ganti kulit yang terjadi  pada  tiap  individu  udang diperoleh data frekuensi ganti kulit (Tabel 3). Rata-rata  frekuensi  ganti  kulit  (FGK)  udang dicapai  lebih  rendah  dengan  pemberi-an kadar  kalsium  rendah  (0%)  dalam  pakan.
Peningkatan  kadar  protein  dengan  kalsium pakan  minimum  2%  memberikan  pengaruh positif  terhadap ganti kulit udang. Nilai FGK tertinggi  dicapai  pada  perlakuan  I  (45% protein;  4%  kalsium)  yaitu  sekitar  7,33  kali, sedangkan  FGK  terendah  sekitar  2,67  kali dicapai  pada  perlakuan  A  (25%  protein;  0% kalsium) dan D (35% protein; 0% kalsium).
Penambahan  protein  dan  kalsium  da- lam pakan ternyata  berpengaruh terhadap ni- lai  retensi  protein  (RP)  dan  retensi  kalsium (RCa).  Udang  yang  diberi  pakan  perlakuan
Tabel  3.  Nilai  rataan  dan  simpangan  baku  frekuensi  ganti  kulit  (FGK),  retensi  kalsium (RCa), dan retensi protein (RP)  pasca larva vaname ( Litopenaeus vannamei ).
Perlakuan Protein-Ca Pakan Peubah dan simpangan baku FGK RCa (%) RP (%) A  (25 - 0) 3,67 ± 0,577 a 1,43 ± 0,007 c 2,11 ± 1,282 a B  (25 - 2) 6,00 ± 1,000 b 0,99 ± 0,006 a 3,09 ± 1,136 a C  (25 - 4) 6,00 ± 0,000 b 1,26 ± 0,005 b 1,64 ± 1,403 a D  (35 - 0) 3,67 ± 0,577 a 1,46 ± 0,006 c 9,64 ± 1,473 b E  (35 - 2) 5,67 ± 0,578 b 1,73 ± 0,012 d 10,29 ± 1,489 b F  (35 - 4) 6,33 ± 0,578 b 0,98 ± 0,047 a 3,99 ± 0,708 a G  (45 - 0) 6,00 ± 1,000 b 1,83 ± 0,065 e 14,09 ± 2,146 b H  (45 - 2) 6,33 ± 0,578 b 1,85 ± 0,049 e 14,67 ± 4,916 b I   (45 - 4) 7,33 ± 0,578 b 1,86 ± 0,027 e 12,48 ± 2,702 b
Keterangan  :  Nilai  tengah  dengan  tanda  huruf  yang  sama  pada  baris  berbeda  adalah  tidak berbeda nyata ( P>0,05 ).
H  (45%  protein;  2%  kalsium)  menghasilkan RP tertinggi  sebesar 14,67 ±  4,91%, sedang- kan terendah dicapai pada perlakuan A (25% protein; 0% kalsium)  sebesar 2,11 ± 1,283%. Namun  nilai  RCa  pada  seluruh  perlakuan tidak terlalu tinggi. Banyaknya kalsium yang terakumulasi  tubuh  meningkat  sejalan  de- ngan  naiknya  kandungan  protein    dalam  pa- kan.  Nilai  RCa  tertinggi  didapat  pada  per- lakuan  I  (45%  protein;  4%  kalsium)  yang tidak  berbeda  nyata  dengan  perlakuan  G (45% protein; 0% kalsium) dan H (45% pro- tein;  2%  kalsium),  sedangkan  nilai  RCa terendah pada perlakuan F (35% protein; 4% kalsium)  dan  B  (25%  protein;  2%  kalsium). Seperti  hasil  nilai  RP,  pemberian  protein 45%  dalam  pakan  akan  menghasilkan  res- pons  RCa  lebih  tinggi  dibandingkan  pakan kadar protein lebih rendah.

## 3.2.  Pembahasan
Adanya    peningkatan  kadar    protein pakan  dalam  penelitian  ini  mampu  mening- katkan pertumbuhan PL udang vaname.  Cus- on et al . (2004) menyatakan bahwa laju per- tumbuhan vaname pada salinitas 15 ppt lebih tinggi bila diberi pakan buatan dengan kadar protein 50 % dibandingkan pakan buatan de- ngan kadar protein 30%. Pengaruh kadar pro- tein  tinggi  juga  telah  dilaporkan  Shiau et  al . (1991)  pada  udang  windu  ( Penaeus  mono- don ) yang dipelihara di salinitas 16 ppt. Per- lakuan  kadar  protein  pakan  44%,  48%,  52% menunjukkan penambahan bobot lebih tinggi dibandingkan  kadar  protein  pakan  lebih  ren- dah (32%, 36%, 40%).  Dalam penelitian ini, selain  ditentukan  kadar  protein  tinggi,  nilai LPRH maksimal  yang dicapai  (Tabel  2) me- ngindikasikan  bahwa  kadar  protein  45%  de- ngan kalsium 2% pakan dibutuhkan bagi pe- meliharaan PL  vaname di salinitas  2 ppt.
Menurut  Cuzon et  al .  (2004),  pem- berian  protein  pakan  tinggi  pada  kondisi  sa- linitas  rendah  memberikan  suplai  asam  ami- no pakan lebih banyak  sebagai sumber ener- gi dan menggantikan kehilangan asam amino dalam    jaringan  tubuh.    Naiknya  kandungan protein  berarti  asam  amino  dengan  porsi
yang  lebih  banyak  tersedia  dalam  pakan sehingga  udang  vaname  mampu  secara  efi- sien  memanfaatkan  kelebihan  protein  pakan untuk pertumbuhan.
Nilai  efisiensi  pakan  tertinggi  pada perlakuan  H  (45%  protein;  2%  Ca 2+ ) membuktikan  bahwa  PL  membutuhkan  pe- ningkatan  pasokan  nutrien  khususnya  pro- tein.  Sebagai  sumber  energi  penggunaan energi  protein  secara  relatif  kurang  efisien bila dibandingkan dengan lipid, karena dapat mengurangi jumlah ketersediaan protein bagi penyusun  jaringan  tubuh  (Kureshy  and Davis,  2002).  Dari  hasil  yang  didapat,  nilai EP  dihubungkan  dengan  nilai  LPRH  maksi- mum  menunjukkan  bahwa  penggunaan  pro- tein 45% dan kalsium 2% dalam pakan dapat lebih efisien untuk meningkatkan pertumbuh- an.
Peningkatan  rasio  RNA/DNA  dengan pemberian  kadar  protein  45%  dan  kalsium 2%  pakan  menggambarkan  bahwa  parameter ini  dapat  digunakan  untuk  mendiagnosis  res- pons  pertumbuhan  pada  PL  vaname  dengan perlakuan pakan. Perbedaan rasio RNA/DNA secara  umum  dapat  disebabkan  oleh  spesies dan  lingkungan  percobaan  (Ali et  al .,  2006). Walaupun  demikian,  rasio  RNA/DNA  dapat memberikan  informasi  berguna  mengenai status nutrisi dari hewan air. Pada umumnya, pertumbuhan  larva  sangat  tergantung  dari sintesis  protein,  oleh  karena  itu  rasio  RNA/ DNA  juga  secara  sensitif    dipengaruhi  kadar protein  pakan,  sedangkan  kadar  Ca  pakan tidak berpengaruh pada rasio RNA/DNA. Ni- lai  rasio  RNA/DNA  tertinggi  dalam  peneliti- an  ini  mengindikasikan  bahwa  dengan  pem- berian pakan optimal terjadi peningkatan akti- vitas  ribosomal  dalam  sel  sehingga  mening- katkan  sintesis  protein  dalam  setiap  ribosom pada  udang  vaname.  Kompensasi  dari  akti- vitas ini seperti  perubahan ukuran tubuh. Bila dibandingkan  dengan  hasil  pengukuran  pada larva ikan, nilai rasio RNA/DNA udang vana- me  lebih  kecil.  Hasil  penelitian  pada  ikan gobi  ( Gobiosoma  bosc )  sekitar  8,41  (Satter- white, 2003),  atau  ikan flounder ( Paralich- thys  olivaceus )  sekitar  5,91  (Gwak et  al .,
2003).  Perbedaan  ini  diduga  disebabkan perubahan morfologi dramatis yang berhubu- ngan  dengan  ontogeni kebanyakan  krustasea (Aiken and Waddy, 1992).
Adanya  peningkatan  kadar  protein dan kalsium pakan juga memberikan respons terhadap  frekuensi  ganti  kulit  (FGK)  PL. Pada seluruh perlakuan, frekuensi ganti kulit udang  (FGK)  tertinggi  pada  perlakuan  I (45%  protein;  4%  Ca 2+ )  yaitu  7,33.  Sumber kalsium  pakan  dalam  penelitian  ini  merupa- kan  bentuk  persenyawaan  dikalsium  fosfat (CaHPO 4 )  yang  mendukung  formasi  eksos- keleton  tubuh.  Menurut  Davis et  al .  (1993), ratio Ca/P dalam pakan dapat mempengaruhi kandungan kalsium karapas namun tidak ber- hubungan dengan  pertumbuhan. Oleh karena itu  peningkatan  kadar  kalsium  pakan  dan protein diduga berperan penting untuk retensi kalsium  bagi  pembentukan  eksoskeleton tubuh.  Davis  and  Gatlin  III  (1991)  menyata- kan  konsentrasi  kalsium  dalam  tubuh  diper- tahankan  karena  adanya  ikatan  dengan  pro- tein.  Nilai  RCa  menunjukkan  respons  ber- fluktuasi dari pengaruh kalsium pakan diban- dingkan  protein  pakan.  Secara  keseluruhan pemberian kalsium 4% dengan protein pakan tinggi  (45%)  dapat  meningkatkan  simpanan kalsium  dalam  jaringan  tubuh,  walaupun  se- cara langsung hewan air dapat menyerap kal- sium  dari  lingkungan  media.  Meningkatnya retensi kalsium menunjukkan bahwa perlaku- an  protein  dan  kalsium  pakan  berpengaruh terutama untuk mempertahankan homeostasis kalsium pada PL vaname.
Sintesis protein  berbeda terlihat pada nilai  retensi  protein  (RP).  Ketika  kandungan protein pakan rendah, maka tekanan terhadap protein  tubuh    meningkat  karena  kebutuhan perbaikan  jaringan    dan kehilangan    nitrogen metabolik. PL yang menerima asupan supple- mentasi  optimal  dengan  protein  tertinggi (45%)  memperlihatkan  nilai  RP  yang  tinggi (Tabel  3).  Namun  dibandingkan  yang  lain, perlakuan H (45% protein; 2% Ca 2+ ) menun- jukkan RP tertinggi sebesar 14,67%, sedang- kan terendah dicapai pada perlakuan A (25%
protein;  0%  Ca 2+ ) sebesar  2,11  ±  1,283%. Naiknya  nilai  RP  merupakan  respons  selan- jutnya dari sintesis protein tubuh yang tinggi. Perlakuan  optimal  diduga  mampu  mening- katkan aktivitas RNA dalam ribosom sehing- ga  mempengaruhi  naiknya  sintesis  protein. Hasil ini juga memperlihatkan bahwa walau- pun protein tinggi (45%) dibutuhkan, dengan naiknya  kadar  kalsium  pakan  justru  dapat menghambat  retensi  protein.  Hal  ini  telah dilaporkan  berdasarkan  percobaan  penamba- han  kalsium  pada  beberapa  level  fosfor  pa- kan  dan  level  kalsium  pakan  (Davis et  al ., 1993).  Kadar  kalsium  4%  secara  nyata  tidak terlalu  mempengaruhi  aktivitas  sintesis  pro- tein  PL  vaname  disebabkan  kalsium  dapat memberikan efek penghambatan bagi penye- rapan  fosfor  dan  mineral  penting  lainnya (Cheng et al., 2003; Wickins and Lee, 2002).

## IV.   KESIMPULAN
Dari  beberapa  kombinasi,  pemberian protein  45%  dan  kalsium  2%  dalam  pakan memberikan  hasil  yang  terbaik  terhadap  laju pertumbuhan  rerata  harian,  efisiensi  peman- faatan  pakan,  rasio  RNA/DNA,  dan  retensi protein  pada  PL  udang  vaname  yang  dipeli- hara pada salinitas rendah. Perlakuan dengan kandungan  protein  45%  dengan  kalsium  2% merupakan  kombinasi  yang  optimum  karena kandungan  protein  (asam  amino)  lebih  ba- nyak  tersedia  dalam  pakan  sehingga  udang vaname  mampu    secara  efisien  memanfaat- kan kelebihan protein untuk pertumbuhan.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima  kasih  penulis  sampaikan  ke- pada beberapa pihak yang mendukung pelak- sanaan penelitian, yaitu pertama kepada Dikti yang memberikan dana  hibah penelitian pas- casarjana  melalui  IPB  pada  tahun  2009,  Pe- merintah  Provinsi  Sulawesi  Utara  yang telah memberi  bantuan  dana  tambahan  sehingga penelitian  ini  dapat  terlaksana  dan  berjalan dengan lancar.

## DAFTAR PUSTAKA
Aiken,  D.E.  and  S.L.  Waddy.  1992.  The growth  process  in  crayfish. Aquatic Science, 6:335-381.
Ali, M., M. Iqbali, S.A. Rana, M. Athar, and F. Iqbali. 2006. Effect of feed cycling on  specific  growth  rate,  condition factor  and  RNA/DNA  ratio  of Labeo rohita . Africa J. Biotechnology, 5(17) :1551-1556.
Bray, W.A., A.L. Lawrence, and J.R. Leung- Trujillo.  1994.  The  effect  of  salinity on  growth  and  survival  of Penaeus vannamei, with  observations  on  the interaction  of  IHHN  virus  and  Sali- nity. Aquaculture , 122:133-146. Cheng,  W.,  C.H.  Liu,  and  C.M.  Kuo.  2003. Effects of dissolved oxygen on hemo- lymph  parameters of freshwater  giant prawn, Macrobrachium  rosenbergii (de Man). Aquaculture , 220:843–856. Cuzon,  G.,  A.  Lawrence,  G.  Gaxiola,  C. Rosas, and J.Guillaume. 2004.  Nutri- tion  of Litopenaeus  vannamei reared in  tanks  or  in  ponds. Aquaculture , 235:513-551.
Davis, D.A. and D. Gatlin  III.  1991. Dietary mineral  requirements  of  fish  and shrimp. In: Akiyama et al. (eds.). Pro- cedings of the Aquaculture Feed Pro- cessing  and  Nutrition  Workshop.
American Soybean Association.
49-67pp.
Davis,  D.A.,  A.L.  Lawrence,  and  D.  Gatlin. 1992.  Mineral  requirements  of Pena- eus  vannamei :  a  preliminary  exami- nation  of  the  dietary  essentiality  for thirteen  minerals. J.  World  Aqua- culture Society , 23:8–14.
Davis, D.A., A. Lawrence, and D. Gatlin III. 1993. Response of Penaeus vannamei to  dietary  calcium,  phosphorus,  and calcium:  phosphorus  ratio .  J.  World Aquaculture Society , 24:504-515. Davis,  D.A.,  I.P.  Saoud,  W.J.  McGraw,  and D.B. Rouse.  2002. Considerations for Litopenaeus  vannamei reared  in
inland  low  salinity  waters. In: Cruz- Suárez et al. (eds.). Avances en Nutri- ción  Acuícola  VI.  Memorias  del  VI Simposium  Internacional  de  Nutri- ción  Acuícola.  3  al  6  de  Septiembre del  2002.  Cancún,  Quintana  Roo, México. 73-90pp.
Gapasin,  R.S.J.,  R.  Bombeo,  L.  Lavens,  P. Sorgeloos,  and  H.  Nelis.  1998.  En- richment  of  live  food  with  essential fatty  acids  and  vitamin  C:  effects  on milkfish  ( Chanos  chanos )  larval  per- formance. Aquaculture, 162:269-286. Gwak,  W.S.,  T.  Tsusaki,  and  M.  Tanaka. 2003.  Nutritional condition, as evalu- ated by RNA/DNA ratios, of hatchery -reared  Japanese  flounder  from  hatch to release. Aquaculture , 219:503–514. Huisman,  E.A.  1976.  Food  conversion  effi- ciencies  at  maintenance  and  produc- tion  level  of  carp, Cyprinus  carpio and  rainbow  trout, Salmo  gairdneri.
Aquaculture , 9:259-273.
Kureshy,  N.  and  D.A  Davis.  2002.  Protein requirement  for  maintenance  and maximum weight  gain  for the  Pacific white  shrimp, Litopenaeus  vannamei . Aquaculture, 204:125–143.
Mantel L.H. and L.L. Farmer. 1983. Osmotic and ionic regulation. In: Mantel, L.H. (ed.). The biology of crustacea, vol 5. Academic  Press.  New  York.  53- 161pp.
Satterwhite,  M.C.  2003  RNA:  DNA  as  an indicator  of  nutritional  condition  and growth  in  larval  naked  Goby, Gobio- soma  bosc .  Thesis.  Louisiana  State University  and  Agricultural  and  Me- chanical College. 53p.
Shiau,  S.Y.,  C.C.  Kwok,  and  B.S.  Chow. 1991. Optimal dietary protein level of Penaeus  monodon reared  in  seawater and  brackish  water. Nippon  Suisan Gakkaishi , 57(4):711-716.
Steel, R.G.D. and J.H. Torrie. 1991.  Princip- les  and  procedures  of  statistics.  Mc Graw-Hill  Book  Company.  London. 487p.
Takeuchi,  T.    1988.    Laboratory  work,  che- mical  evaluation  of  dietary  nutrients. In: Watanabe,  T.  (ed.).  Fish  nutrition and  mariculture.  JICA  Textbook,  the General  Aquaculture  Course.  Depar- tment  of  Aquatic  Biosciences,  Tokyo University of  Fisheries. 179-229pp.
Wickins, J.F. and D.O.C. Lee. 2002.  Crusta- cean  farming,  ranching  and  culture.
2 nd ed. Blackwell Science. 446p.
Diterima : 27 Oktober 2014 Direview : 30 April 2014 Disetujui : 3 Juni 2015