## Sinergisme Fungi Selulolitik Berbasis Limbah Jagung Sebagai Bioaktivator Pakan Berserat

## Synergisme of Corn-Based Cellulolytic Fungi as Fiber Feed Bioactivators
Fahri Husaini Nasution 1) , Yunilas 1*) , Tri Hesti Wahyuni 1)
1) Program Studi Peternakan, Fakultas Pertanian, Universitas Sumatera Utara Jl. Prof. Dr. A. Sofyan No. 3 Kampus USU Medan 20155
yunilas11@yahoo.co.id Diterima : 03 Februari 2019 Disetujui : 25 Agustus 2019 Diterbitkan : 31 Agustus 2019
Abstrak: Tujuan  penelitian  ini  adalah  menguji  kemampuan  sinergisme  fungi  selulolitik  asal  limbah  jagung untuk  dikonsorsiumkan  sebagai  bioaktivator  pakan  berserat.  Isolate  fungi  selulolitik  yang  dikonsorsiumkan merupakan  hasil  isolasi  dari  limbah  tanaman  jagung  yaitu  isolate  JB  (Aspergillus  sp.),  JC  (Fusarium  sp.),  JD (Aspergillus  sp),  JE  (Rizoctonia  sp.).  Parameter  yang  diamati  adalah  sinergisme  fungi  selulolitik  yang dikonsorsiumkan pada medium padat, pola interaksi antara fungi yang dikonsorsiumkan pada medium padat dan sinergisme  fungi  selulolitik  yang  dikonsorsiumkan  pada  medium  cair  (cocktail  inokulum).  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  dari  konsorsium  isolate  fungi  selulolitik  diperoleh  5  pasangan  isolat  fungi  selulolitik  yang dapat  bersinergi  dan  1  pasangan  tidak  dapat  bersinergi.  Pola  pertumbuhan  yang  terbentuk  bersifat  Mutual Intermingling (pasangan isolate JB vs JC dan JB vs JD), Partial Intermingling (pasangan isolate JB vs JE; JC vs JD; dan  JD  vs  JE);  dan  Inhibition  at  touching  point  (pasangan  isolate  JC  vs  JE).  Sinergisme  fungi  selulolitik  yang dikonsorsiumkan  pada  medium  cair  (cocktail  inokulum)  menunjukkan  tingkat  pertumbuhan  yang  berfluktuatif seiring  bertambahnya  waktu  fermentasi.  Kesimpulan:  dari  5  pasangan  isolat  fungi  selulolitik  yang dikonsorsiumkan diperoleh 1 pasang isolate yang tidak dapat bersinergis, dan sinegisme antara fungi membentuk pola  interaksi  yang  bervariatif.  Pertumbuhan  fungi  selulolitik  pada  medium  cair  berfluktuatif  dan  menunjukkan tingkat pertumbuhan optimum pada hari ke-3.
Kata Kunci: fungi selulolitik, limbah jagung, sinergisme
Abstract: The purpose of this study was to test the synergistic ability of cellulolytic fungi originating from corn waste to be sponsored as fibrous feed bioactivators. The cellulolytic fungi isolated were the result of isolation from corn waste, namely  JB  (Aspergillus sp.), JC  (Fusarium sp.), JD (Aspergillus sp), JE (Rhizoctonia sp.)  Isolates. The parameters  observed  were  the  synergism  of  the  cellulolytic  fungi  that  were  sponsored  on  solid  medium,  the interaction  pattern  between  the  fungi  that  were  consorted  on  solid  medium  and  the  synergism  of  the  cellulolytic fungi  which  were  consorted  in  the  cocktail  inoculum.  The  results  showed  that  from  a  consortium  of  cellulolytic fungi  isolates  5  pairs  of  cellulolytic  fungi  isolates  that  could  synergize  and  1  pair  could  not  work  together.  The growth  patterns  formed  are  Mutual  Intermingling  (pairs  of  JB  vs  JC  and  JB  vs  JD  isolates),  Partial  Intermingling (pairs of JB vs JE isolates; JC vs JD; and JD vs. JE); and Inhibition on touching points (pairs isolates JC vs JE). The synergism  of  the  cellulolytic  fungus,  which  was  contorted  in  the  cocktail  inoculum,  showed  fluctuating  growth rates with increasing fermentation time. Conclusion: from 5 pairs of consolatory cellulolytic fungi isolates obtained 1 pair of isolates who could not synergize, and synergy between fungi formed a pattern of varied interactions. The growth of cellulolytic fungi on liquid medium fluctuated and showed the optimum growth rate on day 3.: synergism, cellulolytic fungi, waste corn.
Keywords: cellulolytic fungi, corn waste, synergism.

## 1. Pendahuluan
Produktivitas  ternak  sebagai  sumber  protein hewani  salah  satunya  dipengaruhi  oleh  kualitas pakan  yang  diberikan  pada  ternak.  Pakan  pada kegiatan budidaya umumnya adalah pakan komersial
yang  menghabiskan  sekitar  70% – 80%  dari  total biaya produksi yang dikeluarkan [1].
Limbah  tanaman  jagung  dapat  digunakan sebagai pakan sumber energi bagi ternak ruminansia. [2]  menyatakan  proporsi  yang  terkandung  dalam
limbah  tanaman  jagung  yaitu  tongkol  (janggel)  yang mengandung  SK  46,52%,  PK  2,67%.  Jerami  jagung (brangkasan)  mengandung  SK  30,19%,  PK  6,38%  [3]. Kulit buah jagung (klobot) mengandung kadar air 45- 50%,  PK  2,8%  [4].  Kandungan  serat  yang  tinggi menyebabkan  kecernaan  yang  rendah.  Salah  satu upaya  yang  dapat  dilakukan  dalam  meningkatkan kecernaan  limbah  tanaman  jagung  adalah  secara biologis (fermentasi) menggunakan
mikroba indigenous. Mikroorganisme lokal ( indigenous microorganism )
merupakan mikroba yang dieksploitasi  dari  substratnya  sendiri  yang  memiliki kemampuan  optimal  dalam  mendegradasi  pakan berserat.  Melalui  ekplorasi  mikroba  indigenous  akan dihasilkan  multi  enzim  yang  sangat  berperan  dalam proses  pengolahan pakan.  Pengolahan  pakan fermentasi  menggunakan  mikroba  indigenous  akan mengoptimalkan kemampuan mikroorganisme rumen dalam mencerna pakan berserat tinggi [5].
Mikroba  yang  berasal  dari  substratnya  sendiri memiliki  kemampuan  tinggi  dalam  mendegradasi substratnya [5]. Selanjutnya [6] menyatakan penggunaan fungi indigenous lebih adaptif dan efektif perkembangannya,  sehingga  kemampuannya  dalam mendegradasi selulosa lebih tinggi.
Penggunaan  konsorsium  mikroba  cenderung memberikan  hasil  yang  lebih  baik  dibandingkan penggunaan  isolat  tunggal,  karena  diharapkan  kerja enzim  dari  tiap  jenis  mikroba  dapat  saling melengkapi sehingga proses fermentasi menjadi lebih cepat [6]. Penggunaan konsorsium beberapa mikroba indigenous dari limbah sawit seperti fungi, yeast dan bakteri mampu menurunkan kadar lignin dari limbah sawit itu sendiri [7].
Beberapa inokulan yang sudah beredar dipasaran  dapat  digunakan  sebagai  bioaktivator dalam  proses  fermentasi  pakan  diantaranya  EM4, Starbio,  promol  dll.  Akan  tetapi  kebanyakan  produk yang  beredar  di  masyarakat  tidak  ada  masa kadaluarsa.  Apabila  produk  bioaktivator  yang  telah kadaluarsa  dipakai  maka  tidak  akan  membantu proses  fermentasi  itu  sendiri  karena  mikrobanya sudah mati.
Menurut [8], inokulan yang sudah dikemas akan menurun seiring dengan habisnya nutrisi pada media pembawa  yang  disebabkan  pertumbuhan  yang semakin  banyak  namun  nutrisi  yang  ada  jumlahnya terbatas.  Menurut  [9],  populasi  mikroba  yang  akan digunakan  sebagai  produk  inokulan  harus  (≥105 cfu/ml).
Selain  itu  pertumbuhan  mikroba  harus  tetap tinggi  pada  saat  akan  diaplikasikan.  Salah  satu  cara mengetahui  pertumbuhannya  dengan  mengetahui pola  pertumbuhannya.  Untuk  itu  perlu  dilakukan penelitian  dalam  memperoleh  fungi  yang  dapat
dikonsorsiumkan  sehingga  nantinya  dapat  dijadikan bioaktivator pakan berserat.
Berdasarkan hal tersebut di atas perlu dilakukan penelitian  untuk  mengamati  sinergisme  fungi selulolitik  asal  limbah  jagung  yang  dikonsorsiumkan sebagai bioaktivator pakan berserat.

## 2. Materi dan Metode

## 2.1. Tempat dan Waktu
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan  Maret sampai  Juni  2018,  di  Laboratorium  Produksi  Ternak, Fakultas  Pertanian,  Universitas  Sumatera  Utara, Medan.

## 2.2. Alat dan Bahan
Alat  -  alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  inkubator,  autoklaf,  mikroskop,  Erlenmeyer, petri  dish,  tabung  reaksi,  rak  tabung,  pipet,  micro pipet,  stirer,  vortex,  bunsen,  objek  glass,  cover  glass, gelas ukur, becker glass, thermometer, pH meter, hot plate, timbangan digital, oven, jangka sorong, kamera digital.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah isolat fungi selulolitik asal limbah jagung telah lulus  uji  degradasi  selulosa  yang  diperoleh  pada penelitian  sebelumnya  yaitu  JB  ( Aspergillus  sp .),  JC ( Fusarium  sp .),  JD  ( Aspergillus  sp. ),  JE  ( Rhizoctonia sp. ).  Air  kelapa,  gula  merah,  garam.  Medium  umum PDA  ( Potato  Dextrose  Agar ),  medium  selektif  untuk uji  dalam  mendegradasi  serat  berupa  medium  agar selektif yang dimodifikasi yaitu: 0,2 % NaNO3; 0,05% KCL;  0,05%  MgSO4.7H2O;  0.001%  FeSO4.7H2O; 0,05% KH2PO4; 0,04% yeast ekstrak; 2% agar dan 1% (masing-masing  CMC,  xylan,  lignin),  klorofenikol  (1 mg dalam 100 ml air), pH diatur 4,5 [7]

## 2.3. Metode Pelaksanaan
Penelitian ini terdiri dari 2 tahap. Tahap pertama yaitu  uji  sinergisme  fungi  selulolitik  pada  media padat menggunakan metode oposisi langsung. Tahap kedua uji sinergisme fungi selulolitik pada media cair ( cocktail  inoculum )  yang  dimodifikasi  [7]  yaitu Mineral  1%,  urea  0,5%,  molases  0,5%,  dedak  2%, suspensi 1 % dan aquadest 1 L. Pada tahap ini melihat pertumbuhan  isolat  fungi  selulolitik  yang  telah  lulus uji  sinergi.  Pasangan  isolat  hasil  uji  sinergi ditumbuhkan  pada  medium  cair  ( cocktail  inoculum ) untuk  melihat  pola  pertumbuhan  yang  terbentuk pada hari ke 1, 3, 5, dan 7.

## 2.4. Parameter
Parameter yang diamati meliputi
1.  Sinergisme  fungi  yang  dikonsorsiumkan  pada medium padat.
2.  Pola interaksi antara fungi yang dikonsorsiumkan pada medium padat.
3.  Sinergisme  fungi  yang  dikonsorsiumkan  pada medium cair.

## 2.5. Prosedur Penelitian

## 2.5.1. Peremajaan isolat fungi
Isolat  fungi  selulolitik  diremajakan  kembali secara  aseptik  dari  agar  miring  untuk  ditumbuhkan di  cawan  petri  dengan  menggunakan  media  PDA. Media  PDA  yang  sebelumnya  telah  dipersiapkan dituang ke dalam cawan petri secukupnya, kemudian dibiarkan  hingga  memadat.  Setelah  itu,  spora  isolat fungi  diambil  sebanyak  satu  ose  dan  diletakkan  ke bagian  dalam  cawan  petri.  Setelah  itu,  cawan  petri dibungkus  dengan  kertas  dan  diinkubasi  selama  3 hari.

## 2.5.2. Uji sinergis pada medium padat (PDA)
Masing-masing  isolate  fungi  selulolitik  JB ( Aspergillus  sp.) ,  JC  ( Fusarium  sp.) ,  JD  ( Aspergillus sp. ), JE ( Rhizoctonia sp.) dipasangkan satu sama lain. Setiap cawan petri dengan ukuran 9 cm ditanam dua isolat  fungi  yang  berbeda  (metode  oposisi  langsung) sehingga  antar  isolat  akan  bertemu.  Diinkubasi selama  6  hari  dengan  suhu  27-29  ºC  dan  diamati apakah  terdapat  zona  hambat  diantara  dua  isolat yang  dipasangkan.  Isolat  dikatakan  kompatibel bersinergis  untuk  dikonsorsiumkan  apabila  tidak terdapat zona penghambatan pada daerah pertemuan kedua  isolat  dan  prtumbuhan  tidak  terhenti  setelah bersinggungan [10].
Uji  sinergisme  menggunakan  metode  oposisi langsung dilakukan pada medium padat PDA (Potato Dextrose Agar) yang ditempatkan dengan jarak 3 cm dari tepi petri dish dengan pola sebagai berikut:
a) Isolat  JB  ( Aspergillus  sp.) vs  Isolat  JC  ( Fusarium sp.)
b) Isolat JB ( Aspergillus sp.) vs Isolat JD ( Aspergillus sp.)
c) Isolat  JB  ( Aspergillus  sp.) vs  Isolat  JE ( Rhizoctonia sp.)
d) Isolat JC ( Fusarium sp.) vs  Isolat  JD ( Aspergillus sp.)
e) Isolat JC ( Fusarium sp.) vs Isolat JE ( Rhizoctonia sp.)
f)
Isolat  JD  ( Aspergillus  sp.)  vs Isolat  JE
( Rhizoctonia sp.)
Gambar 1. Posisi peletakan isolat pada uji sinergis
[10]
2.5.3. Pola interaksi fungi pada medium padat
Beberapa  pasangan  isolate  fungi  yang  diuji diinokulasi  pada  medium  padat  kemudian  diamati pola interaksi yang terbentuk.
Interaksi yang terbentuk mengacu pada hubungan:  1) Mutual  intermingling :  dimana  koloni fungi  yang  dipasangkan  akan    tumbuh  menuju  satu sama lain; 2) Partial intermingling : Dimana diantara dua    koloni  fungi  yang  dipasangkan  akan  ada  satu fungi yang pertumbuhannya mengarah pasangannya; 3) Invasion/  replacement :  dimana  salah  satu  koloni fungi  tumbuh  ke  arah  pasangan  dan  mulai mengkonsumsi  pasangannya;  4) Inhibition  at touching  point :  dimana  pertumbuhan  akan  berhenti setelah  miselium  dua  koloni  fungi  bertemu;  5) Inhibition : Adanya zona hambat ≥ 2mm [11].
Gambar 2. Pola interaksi yang akan terjadi saat uij sinergis [11]
2.5.4. Konsorsium fungi selulolitik pada medium cair
Pembuatan  inokulum  campuran  menggunakan bahan:  Mineral  1%,  urea  0,5%,  molases  0,5%,  dedak 2%,  suspensi  1  %.  Semua  bahan  dicampur  sesuai perlakuan lalu inkubasi selama 7 hari.
Gambar 3. Diagram alir inokulum campuran ( Cocktail inoculum ) [7].
SUSPENSI ISOLAT: ISOLAT DILARUTKAN DENGAN AQUADES SESUAI STANDARD
MC FARLAND 10 8 (DICAMPUR SESUAI PERLAKUAN) INKUBASI SELAMA 7 HARI PEREMAJAAN ISOLAT MURNI POTENSIAL PENDEGRADASI SERAT MINERAL 1%, UREA 0,5%, MOLASES 0,5%, DAN DEDAK 2%, SUSPENSE ISOLAT 1% DALAM 1 L AQUADEST INOKULUM CAMPURAN (COCKTAIL INOCULUM)
e-ISSN 2655-2159
Pertumbuhan koloni fungi (CFU) diukur dengan menggunakan  metode Total  Plate  Count (TPC) dengan tahapan sebagai berikut:
a) Ambil 0,1 ml dari erlenmeyer tiap perlakuan yang berisi konsorsium fungi hasil fermentasi selama satu hari lalu diencerkan dengan 9 ml aquadest steril (pengenceran 10 1 )
b) Kemudian  encerkan  kembali  pada  konsentrasi 10 -2 , 10 -3 , 10 -4 , 10 -5 , 10 -6 , 10 -7 .
c) Dengan  pipet  mikro  ambil  sebanyak  100  µl  dari pengenceran  10 -5 ,  10 -6 ,  10 -7 disebar  dalam  cawan petri  kemudian  dituang  PDA.  Dari  ketiga pengenceran  tersebut  masing-masing  diulang sebanyak tiga kali dalam cawan petri.
d) Kultur  selanjutnya  diinkubasi  selama  48-72  jam pada  suhu  ruang  dan  diamati  pertumbuhannya serta  dihitung  rerata  koloni  (CFU/ml)  yang terbentuk.
e) Pengamatan  dilakukan  pada  hari  1,  3,  5,  dan  7 untuk  melihat  grafik  pertumbuhannya.  Jumlah koloni  yang  hidup  dianggap  setara  dengan jumlah sel. [12].
1
Jumlah Sel (CFU) = Jumlah koloni X
Fak. Pengenceran

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Sinergisme Fungi yang Dikonsorsiumkan Pada Medium Padat
Berdasarkan uji sinergi antar isolat yang dikultur bersama  pada  media  padat  PDA,  dengan  lama inkubasi  selama  6  hari  terdapat  5  pasangan  isolat fungi selulolitik yang bersinergi dan 1 pasangan isolat fungi selulolitik yang tidak bersinergi (Tabel 1).

## Tabel 1. Uji sinergisme fungi selulolitik
No Isolat Fungi Aspergillus sp. (JB) Fusarium sp. (JC) Aspergillus sp. (JD) Rhizoctonia sp. (JE) 1 Aspergillus sp . (JB) 0 + + + 2 Fusarium sp. (JC) + 0 + _ 3 Aspergillus sp. (JD) + + 0 + 4 Rhizoctonia sp. (JE) + _ + 0
Keterangan: Sinergis (+); Antagonis (-) dan Tidak dilakukan uji (0)
Tabel  1  di  atas  menunjukkan  bahwa  pasangan isolat  fungi  selulolitik  asal  limbah  jagung Aspergillus sp. (JB)  vs Fusarium  sp. (JC), Aspergillus  sp. (JB) vs Aspergillus sp. (JD), Aspergillus sp. (JB) vs Rhizoctonia sp. (JE) . , Fusarium  sp. (JC) vs Aspergillus  sp. (JD), Aspergillus  sp. (JD)  vs Rhizoctonia  sp. (JE) , menunjukkan  hubungan  yang  saling  sinergis  dengan tidak  terbentuk  zona  hambat,  sedangkan  pasangan isolat fungi selulolitik asal limbah jagung Fusarium sp (JC)  vs Rhizoctonia  sp.  (JE) menunjukkan  hubungan yang tidak bersinergis (antagonis). Nampak walaupun  isolate  berasal  dari  sumber  yang  sama namun  pada  saat  dikonsorsiumkan  untuk  melihat kemampuan  sinergisme  antara  isolate-isolat  fungi menunjukkan ada diantaranya yang bersifat antagonis.
Hasil  penelitian  memperlihatkan  isolate  fungi Rhizoctonia  sp.  vs  Fusarium.  sp. bersifat  antagonis. Hal ini dapat disebabkan mekanisme kompetisi yang tinggi  antara  fungi  tersebut  sehingga  menyebabkan salah  satu  tumbuh  lebih  dominan  dibanding  yang lainnya. Mekanisme kompetisi dapat terjadi disebabkan  kemampuan  yang  berbeda  dalam memanfaatkan substrat (nutrient yang terdapat pada medium)  atau  diduga  terinduksi  metabolisme sekunder  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan fungi lain.
Kemampuan mendegradasi selulosa fungi Rhizoctonia  sp. lebih  tinggi  dibanding  fungi
Fusarium, sp . Kondisi inilah yang menyebabkan daya kompetisi Rhizoctonia  sp. lebih  tinggi  dari  pada Fusarium. sp. Berbeda halnya dengan pasangan fungi Aspergillus sp. vs Fusarium, sp. atau Aspergillus sp. vs Rhizoctonia. sp, walaupun kemampuan mendegradasi pada Aspergillus  sp. lebih  rendah  dibanding Fusarium.  sp  atau  Rhizoctonia  sp. namun  pasangan fungi  ini  dapat  bersinergis.  Hal  ini  diduga  karena hasil  degradasi  oleh  fungi Fusarium  sp.  atau Rhizoctonia  sp. dapat  dimanfaatkan  oleh Aspergillus sp. untuk pertumbuhannya sehingga fungi ini mampu tumbuh bersama (bersinergis).
[13]  menyatakan  bahwa  mekanisme  sinergisme antar  isolat  dalam  konsorsium  masih  belum diketahui  dengan  pasti,  namun  beberapa  penelitian menduga  disebabkan  karena  beberapa  faktor  antara lain:  (1)  salah  satu  anggota  genus  mampu menyediakan satu atau lebih faktor nutrisi yang tidak dapat  disintesis  oleh  anggota  genus  yang  lain,  (2) salah  satu  anggota  genus  yang  tidak  mampu mendegradasi bahan organik tertentu akan bergantung  pada  anggota  genus  yang  mampu menyediakan hasil degradasi bahan organik tersebut, (3)  salah  satu  anggota  genus  melindungi  anggota genus  lain  yang  sensitif  terhadap  bahan  organik tertentu  dengan  menurunkan  konsentrasi  bahan organik yang bersifat toksik dengan cara memproduksi  faktor  protektif  yang  spesifik  maupun non spesifik.

## 3.2. Pola Interaksi Antara Fungi Yang Dikonsorsiumkan Pada Medium Padat
Pertumbuhan  dan  pergerakan  miselium  dari isolat fungi yang
dipasangkan mampu menggambarkan hubungan yang bersinergis maupun yang  tidak  bersinergis  dari  setiap  isolat  fungi  yang dipasangkan  satu  sama  lain.  Dari  penelitian sebelumnya  didapatkan  bahwa  isolat  JB  dan  JD merupakan  fungi  ( Aspergillus  sp.) yang  termasuk kelompok  fungi  dengan  pertumbuhan  yang  lambat sedangkan  isolat  fungi  JC  ( Fusarium  sp.) ,  Isolat  JE ( Rhizoctonia  sp.) merupakan  kelompok  fungi  yang memiliki  laju  pertumbuhan  yang  cepat.  Kombinasi Isolat  fungi Aspergillus  sp. (JB)  vs Fusarium  sp. ,  dan Aspergillus  sp. (JB)  vs Aspergillus  sp. (JD) menunjukkan hubungan Mutual intermingling ( compatible )  hal  ini  dapat  dilihat  dari  Tabel  2  dan pada Gambar  4 yang menunjukkan bahwa  dua isolat fungi  yang  dipasangkan  dapat  tumbuh  bersama dengan saling mendekati pasangannya satu sama lain tanpa adanya zona hambatan.
Tabel 2. Jenis  interaksi  yang  berbeda  dari  empat jenis  fungi  selulolitik  pada  konsorsium fungi secara Invitro
Kode Isolat yang dipasangkan Keterangan Aspergillus sp. (JB) vs Fusarium sp. (JC)
Mutual  Intermingling ;  Dua  isolat  yang dipasangkan tumbuh bersama satu sama lain  (sinergis)  tanpa  menunjukkan dominansi oleh salah satu isolat terhadap pasangannya.
Aspergillus sp. (JB) vs
Aspergillus sp. (JD) Mutual  Intermingling ;  Dua  isolat  yang dipasangkan tumbuh bersama satu sama lain  (sinergis)  tanpa  menunjukkan dominansi oleh salah satu isolat terhadap pasangannya.
Aspergillus sp. (JB) vs
Rhizoctonia sp. (JE) Partial Intermingling ; Isolat fungi Rhizoctonia  sp. tumbuh  memenuhi cawan  petri  namun  tidak  menghambat pertumbuhan  dari  isolat Aspergillus  sp . (A) (sinergis). Fusarium sp. (JC) vs
Aspergillus sp. (JD)
Partial Intermingling ; Isolat fungi
Fusarium  sp. tumbuh  memenuhi  cawan petri namun tidak menghambat pertumbuhan  dari  isolat Aspergillus  sp (B) (sinergis).
Aspergillus sp. (JD) vs Rhizoctonia sp. (JE)
Partial  Intermingling ;  Hampir  sama situasinya seperti isolat fungi Aspergillus sp. (A)    vs  isolat  fungi Rhizoctonia  sp. (sinergis)
Fusarium sp. (JC) vs
Rhizoctonia sp. (JE) Inhibition at touching point ; Kedua isolat fungi  pertumbuhannya  berhenti  setelah bertemu ditengah (tidak sinergis)
Kesamaan  waktu  tumbuh  menjadi  alasan mengapa  isolat Aspergillus  sp. (JB)  Vs  Isolat Aspergillus  sp. (JD) terlihat  sama-sama  mengalami pertumbuhan  tanpa  adanya  dominansi  namun  pada pasangan isolat Aspergillus sp. (JB) Vs Isolat Fusarium sp. (JC) terlihat bahwa isolat fungi Aspergillus sp. (JB) dapat  mengikuti  kecepatan  pertumbuhan  yang dihasilkan  isolat Fusarium  sp. (JC).  Interaksi  isolate fungi  membentuk  pola  pertumbuhan Mutual Intermingling.
(a) (b) Gambar 4. Mutual Intermingling ; (a): Isolat
Aspergillus  sp. (JB)  Vs  Isolat Fusarium sp . (JC), (b): Isolat Aspergillus sp. (JB) Vs Isolat Aspergillus sp. (JD)
Konsorsium  isolat  fungi Aspergillus  sp. (JB)  Vs Isolat Rhizoctonia sp. (JE), Isolat Fusarium sp. (JC) Vs Isolat Aspergillus  sp. (JD),  Isolat  Aspergillus sp. (JD) Vs  Isolat Rhizoctonia  sp. (JE),  menunjukkan hubungan partial  mutual  intermingling ( partial Compatible ).  Dimana  Salah  satu  isolat  tumbuh menuju  pasangannya  namun  tidak  menghambat pertumbuhan dari pasangannya.  Hal ini dapat dilihat dari  Tabel  2  dan  pada  Gambar  5  yang  menunjukkan bahwa  fungi  yang  dipasangkan  dapat  tumbuh bersama satu sama lain tanpa adanya zona hambatan. Pada  Gambar  terlihat  bahwa  salah  satu  isolat mendatangi pasangannya yang disebabkan perbedaan kecepatan  waktu  tumbuh  namun  isolat  pasangannya tidak  terhambat  pertumbuhannya.  Dari  ketiga pasangan isolat tersebut terlihat dominansi salah satu isolat  terhadap  pasangannya  hal  ini  dikarenakan isolat fungi Fusarium sp. dan isolat fungi Rhizoctonia sp. memiliki  laju  pertumbuhan  yang  lebih  tinggi dibandingkan
pasangannya namun tidak menghambat pertumbuhan pasangannya. (a) (b) (c) Gambar 5. Partial  Intermingling ;  (a) Aspergillus  sp. (JB) vs Rhizoctonia sp. (JE); (b) Fusarium sp. (JC)  vs Aspergillus  sp. (JD)  dan  (c)
Aspergillus  sp. (JD)  vs Rhizoctonia  sp.
(JE)
Namun  konsorsium  pada  pasangan  isolat  fungi Fusarium  sp. Vs Rhizoctonia  sp. menunjukkan penghambatan  setelah  kedua  pasangan  bertemu dimana pertumbuhan berhenti setelah titik temu. Hal ini  disebabkan  karena  adanya  zat  antibiosis  yang dikeluarkan  oleh  pasangan  isolat  tersebut  sehingga menghambat  perkembangan  isolat  lainnya  dengan membentuk garis pemisah. Pada pasangan ini terjadi kompetisi  dalam  memperoleh  nutrisi  pada  media
biakan  PDA  oleh  isolat-isolat  tersebut.  Terjadinya saling  kompetisi menunjukkan fungi bersifat antagonis.
Hal  ini  dapat  dilihat  dari  Tabel  2  dan  pada Gambar  6  bahwa  terbentuk  dinding  atau  garis  batas antara  dua  isolat.  Batas  tersebut  dapat  berupa dinding sclerotia dan  mengalami  pigmentasi  hal  ini menunjukkan  reaksi  yang  tidak  sinergis.  [14] menyatakan  bahwa  pasangan  isolat  fungi  yang dilakukan  uji  sinergis  jika  sampai  mengalami perubahan  warna  maka  hal  itu  menandakan hubungan  tidak  sinergis  yang  kuat  sementara  jika hanya terbentuk zona jarang/hambat maka digolongkan tidak sinergis lemah.
Fungi  yang  tidak  saling  sinergis  menunjukkan sifat  yang  saling  berkompetisi.  Tidak  terjadinya keseimbangan  pada  pasangan  fungi  tersebut  akan saling  merugikan  pada  salah  satu  isolat  atau  bahkan keduanya.  Kompetisi  menunjukkan  adanya  interaksi negatif  antar  dua  populasi  mikroorganisme  dimana kedua populasi tersebut akan terpengaruh kehidupan
dan  pertumbuhannya.  Ketika  salah  satu  populasi mikroorganisme  memproduksi  zat  antimikroba untuk  menghambat  populasi  lainnya  maka  interaksi antar kedua populasi tersebut disebut antagonisme.
Gambar 6. Inhibition at touching point; Isolat fungi Fusarium sp. Vs Rhizoctonia sp.
3.3. Sinergisme Fungi yang Dikonsorsiumkan Pada Medium Cair ( cocktail inokulum )
Sinergisme  fungi  yang  dikonsorsiumkan  dalam medium cair dilihat dari pertumbuhan (total populasi koloni yang tumbuh) Tabel 3.

## Tabel 3. Populasi konsorsium mikroba (fungi) selulolitik selama fermentasi
Isolat Fungi Jumlah Koloni Fungi (Logx, CFU/ml) Hari 1 Hari 3 Hari 5 Hari 7 Aspergillus sp. (JB) vs Fusarium sp. (JC) 1,69 x 10 9 2,19 x 10 9 1,38x 10 9 1,06 x 10 9 Aspergillus sp. (JB) vs Aspergillus sp. (JD) 1,01 x 10 9 1,19 x 10 9 1,15 x 10 9 6,37 x 10 8 Aspergillus sp. (JB) vs Rhizoctonia sp. (JE) 6,83 x 10 8 8,90 x 10 8 7 x 10 8 4,23 x 10 8 Fusarium sp. (JC) vs Aspergillus sp. (JD) 1,26 x 10 9 1,57 x 10 9 1,08 x10 9 1,14 x 10 8
Aspergillus sp. (JD) vs Isolat Rhizoctonia sp. (JE) 7,37 x 10 8 1,04 x 10 9 9,2 x 10 8 5,17 x 10 8
Fungi  yang  dikonsorsiumkan  pada  medium  cair memperlihatkan  pertumbuhan yang  beragam selama masa  inkubasi  1,  3,  5,  dan  7  hari  (Tabel  3).  Hal  ini mengindikasikan  bahwa  terjadinya  interaksi  antara fungi  di  dalam  medium  cair.  Interaksi  yang  terjadi terlihat dari total  populasi  koloni yang  tumbuh yang menunjukkan  kemampuan  fungi  tumbuh  bersinergis dengan pasangannya selama dikonsorsiumkan.
Keberhasilan proses fermentasi
sangat dipengaruhi oleh
keberhasilan dalam mengoptimalkan  faktor-faktor  dari  pertumbuhan mikroba yang diinginkan. Faktor-faktor tersebut akan memberikan  kondisi  yang  berbeda  untuk  setiap mikroba sesuai dengan lingkungan hidupnya masing- masing sehingga mempengaruhi kinetika fermentasinya [15].
Secara  umum  gambaran  pertumbuhan  fungi selulolitik selama waktu inkubasi 1 hari, 3 hari, 5 hari, 7  hari  dapat  dibuat  dalam  bentuk  grafik  kurva
pertumbuhan,  dimana  pertumbuhan  jumlah  koloni fungi  selulolitik  di  transformasi  terlebih  dahulu dalam  bentuk  (log  x)  agar  dapat  dilihat  grafik pertumbuhan konsorsium fungi tersebut (Gambar 7).
Pembuatan  kurva  pertumbuhan  merupakan bagian  yang  penting  dari  suatu  penelitian  karena dapat  menggambarkan  karakteristik  populasi  fungi. Selain  itu,  penghitungan  waktu  generasi  juga diperlukan  untuk  mengetahui  prediksi  populasi setiap  mikroorganisme  dalam  jangka  waktu  yang sama  serta  keaktifannya  dalam  proses  metabolisme [12].  Pertumbuhan  konsorsium  fungi  selulolitik  yang telah  di  transformasi  dalam  satuan  (logx)  adalah sebagai berikut.
Berikut  data  hasil  pertumbuhan  konsorsium isolat  fungi  pada  medium  cair.  Pertumbuhan konsorsium fungi selulolitik yang telah di transformasi  dalam  satuan  (logx)  adalah  sebagai berikut.
Tabel 4. Populasi konsorsium mikroba (fungi) selulolitik selama fermentasi (Transformasi ke log x)
Isolat Fungi Jumlah Koloni Fungi (Logx, CFU/ml) Hari 1 Hari 3 Hari 5 Hari 7 P1: Isolat Aspergillus sp. (A) vs Isolat Fusarium sp. 9,227 9,340 9,139 9,025 P2: Isolat Aspergillus sp. (A) vs Isolat Aspergillus sp. (B) 9,004 9,075 9,060 8,804 P3: Isolat Aspergillus sp. (A) vs Isolat Rhizoctonia sp. 8,834 8,949 8,845 8,626 P4: Isolat Fusarium sp. vs Isolat Aspergillus sp. (B) 9,100 9,195 9,033 8,056 P5: Isolat Aspergillus sp. (B) vs Isolat Rhizoctonia sp. 8,867 9,017 8,963 8,713
Pada  awal  pengujian  tingkat  pertumbuhan koloni  isolat  fungi  selulolitik  hasil  konsorsium  pada hari pertama terlihat masih rendah namun sudah bisa digunakan sebagai bioaktivator. Hal ini sesuai dengan pernyataan  [9]  bahwa  batasan  tinggi  rendahnya tingkat  pertumbuhan  koloni  fungi  ditentukan berdasarkan  banyak  sedikitnya  rerata  kerapatan koloni  isolat  fungi  yang  tumbuh.  Isolat  yang menunjukkan  tingkat  pertumbuhan  tinggi  (rerata CFU ≥ 1x10 7 /ml) dan sedang (rerata CFU ≥ 1x10 6 /ml). Adapun isolat yang menunjukkan tingkat pertumbuhan  yang  rendah  (rerata  CFU  berkisar 1x10 5 /ml) atau sangat rendah (rerata CFU ≤ 1x10 4 /ml).
Pasangan isolat fungi Aspergillus sp. (A) vs isolat Fusarium sp. (Perlakuan
1)
lebih tinggi pertumbuhannya  dibandingkan  pasangan  isolat lainnya.  Hal  ini  mengindikasikan  bahwasanya kemampuan  pasangan  isolat Aspergillus  sp. (A)  vs isolat Fusarium sp. lebih tinggi dalam memfermentasi substrat  dibandingkan  pasangan  isolat  lainnya. Tingginya  angka  pertumbuhan  isolat  fungi  hasil konsorsium medium cair  dari semua perlakuan  pada tahap  ini  merupakan  gambaran  lanjut  dari  hasil  uji sinergis  pada  tahap  1  (pada  media  PDA),  dimana pasangan isolat Aspergillus sp. (A) vs isolat Fusarium sp. ,  isolat Aspergillus  sp. (A)  vs  isolat Aspergillus  sp. (B), isolat Aspergillus sp (A) vs isolat Rhizoctonia sp.) , isolat Fusarium  sp. vs  isolat Aspergillus  sp (B),  isolat Aspergillus  sp. (B) vs Isolat Rhizoctonia  sp. mampu hidup  bersama  pasangannya  dalam  satu  media.  Dari tabel  dapat  dibuat  grafik  viabilitas  fungi  selulolitik pada  media  cair  ( cocktail  inokulum )  yang  dapat dilihat pada Gambar 7.
Kurva pertumbuhan konsorsium fungi selulolitik menunjukkan  bahwa  waktu  adaptasi  atau  fase  lag fungi  selulolitik  memiliki  waktu  yang  relatif  singkat dapat  dilihat  pada  Gambar  7  yaitu  pertumbuhan sudah mengalami peningkatan pada inkubasi hari ke satu.  Pasangan  isolat  fungi  memiliki  pertumbuhan paling  tinggi  pada  fase  adaptasi  dapat  dilihat  pada Tabel 3 yaitu pasangan isolat fungi Aspergillus sp. (A) vs  Isolat Fusarium  sp. (1,69  x  10 9 ).  [15]  menyatakan, singkatnya  fase  adaptasi  fungi  dikarenakan  fungi tersebut  tumbuh  pada  media  yang  sama  pada  saat penyegaran, menyebabkan singkatnya waktu penyesuaian  diri  pada  lingkungan  yang  baru.  [12] menyatakan  bahwa  panjang  atau  pendeknya  fase adaptasi  sangat  ditentukan  oleh  jumlah  sel  yang diinokulasikan, kondisi fisiologis dan morfologis yang sesuai  serta  media  kultivasi  yang  dibutuhkan.  Pada fase adaptasi ini terlihat masih rendah dibandingkan hari  ketiga  dikarenakan  semua  isolat  fungi  yang dikonsorsiumkan masih beradaptasi dengan lingkungannya yang baru sebelum dapat menggunakan  nutrisi  yang  ada  di  sekitarnya  secara optimal.
Gambar  7 .  Grafik  pertumbuhan  konsorsium  isolat fungi selulolitik
Pada  hari  ke  3  terlihat  bahwa  perlakuan  isolat Aspergillus  sp. (A)    vs  isolat Fusarium  sp. ,  isolat Aspergillus  sp. (A)  vs  isolat Aspergillus  sp. (B),  isolat Aspergillus  sp. (A)  vs  isolat Rhizoctonia  sp. ,  isolat Fusarium  sp. vs  Isolat Aspergillus  sp. (B),  isolat Aspergillus sp. (B) vs Isolat Rhizoctonia sp. mengalami peningkatan  kemudian  mengalami  penurunan  pada hari  ke  5.  Pada  inkubasi  hari  ke  tiga  terjadi  fase logaritmik  atau  fase  eksponensial,  hal  ini  dapat dilihat  dari  Gambar  7  yang  dicirikan  dengan  adanya pertumbuhan  signifikan  pada  pertumbuhan  sel- selnya.  Hal  ini  didukung  oleh  pendapat  [16]  yang menyatakan  bahwa,  fase  logaritmik  menggambarkan sel  membelah  diri  dengan  laju  yang  konstan,  masa menjadi  dua  kali  lipat  dengan  laju  sama,  aktivitas metabolisme  konstan,  serta  keadaan  pertumbuhan seimbang.  Menurut  [17],  pada  saat  pertumbuhan aktivitas  metabolisme  sel  tinggi  maka  kecepatan pembelahan  tinggi  serta  waktu  generasi  pendek. Kenaikan yang cukup tinggi disebabkan karena fungi mensintesis  zat-zat  yang  terkandung  dalam  media cair  yang  dapat  memicu  fungi  dalam  menyekresi metabolit  selnya  untuk  pertumbuhan  sel  secara optimal. Kandungan nutrisi yang cukup dalam media cair  dapat  digunakan  sebagai  sumber  nutrisi  bagi fungi  selulolitik.  Hal  ini  menggambarkan  bahwa isolat  fungi  bersinergi  dengan  cepat  memanfaatkan substrat  yang  tersedia  dalam  waktu  yang  relatif singkat  sehingga  pada  hari  ke  3  konsorsium  fungi sudah  mencapai  fase stationer .  Pada  fase  ini konsorsium  isolat  fungi  dari  tiap  perlakuan  telah beradaptasi  dengan  lingkungannya  dan  mampu memanfaatkan  nutrisi  yang  ada  disekitar  sehingga pertumbuhan isolat fungi menjadi sangat cepat.
Memasuki  hari  ke  5  fermentasi  pertumbuhan fungi dalam konsorsium mengalami penurunan yang ditandai  semakin  berkurangnya  jumlah  koloni  fungi. Hal  ini  terjadi  karena  ketersediaan  substrat  yang berkurang  sehingga  terjadi  kompetisi  antara  isolat fungi  yang  dikonsorsiumkan,  sehingga  isolat  fungi yang  mati  lebih  banyak  dari  pada  isolat  fungi  yang hidup.  Sesuai  pernyataan  [7]  bahwa  penurunan pertumbuhan  terjadi  karena  daya  kompetisi  dalam memanfaatkan  substrat  mulai  berkurang  sehingga menghambat pertumbuhan sel.
e-ISSN 2655-2159
Laju  pertumbuhan  semakin  menurun  terjadi pada  hari ke  7.  Penurunan  pertumbuhan disebabkan karena  kurangnya  faktor  pertumbuhan  seperti menurunnya  suplai  nutrisi  yang  terkandung  dalam media  cair.  Menurut  [17],  keadaan  ini  menunjukkan adanya kompetisi sesama fungi dalam memperebutkan  nutrisi  dan  ruang.  Juga  disebabkan oleh adanya bahan- bahan yang dibuang sel ke dalam medium. Menurut [18], pada beberapa keadaan dapat diikuti  dengan  terjadinya  lisis  dari  sel  sehingga turbiditas  dan  jumlah  sel  yang  dihitung  secara langsung akan berkurang sejalan dengan pengurangan  sel  hidup.  Terjadi  akumulasi  lanjut produk  metabolit  yang  menghambat  serta  nutrien penting  dalam  medium  habis.  Lama  waktu penyimpanan juga berpengaruh terhadap pertumbuhan dan ketahanan hidup ( viabilitas ) fungi.
Ditinjau berdasarkan tingkat pertumbuhan pada medium cair saat konsorsium dengan menghubungkan  hasil  uji  degradasi  pada  penelitian sebelumnya,  konsorsium  isolat  fungi Aspergillus  sp. (A)  vs  isolat  JE  ( Rhizoctonia  sp.) menunjukkan tingkat  pertumbuhan  terendah  dimana  indeks selulolitik  pada  masing-masing  isolat  fungi  yaitu Aspergillus  sp. (A)  (0.674)  vs Rhizoctonia  sp. (1.178) terlihat perbedaan nilai indeks selulolitik yang cukup berbeda.  Pernyataan  [25]  bahwa  koeksistensi  hanya terjadi  apabila  kemampuan  kompetisi  antar  spesies adalah seimbang. Sebaliknya apabila tidak seimbang, spesies  yang  lemah  kemampuan  kompetisinya  akan tereliminasi oleh spesies yang kemampuan kompetisinya  lebih  tinggi.  Perbedaan  nilai  indeks selulolitik konsorsium isolat fungi Aspergillus sp. (A) vs  isolat  fungi Rhizoctonia  sp. sesuai  dengan  gambar 6 yang menunjukkan bahwa pasangan isolat tersebut memiliki tingkat sinergisme yang paling lemah.
Berdasarkan grafik pada Gambar 6 dapat dilihat pertumbuhan  pasangan  isolat  fungi  selulolitik Aspergillus  sp. (A)  vs  Isolat Fusarium  sp. hari  ke  3 adalah  konsorsium  fungi  yang  pertumbuhannya paling  tinggi  dalam  media  cair  yaitu  sebesar  2,19  x 10 9 sel/ml.  Sedangkan  konsorsium  isolat  fungi selulolitik Aspergillus sp (A) vs Isolat Rhizoctonia  sp. pada  hari  ke  5  merupakan  fungi  yang  memiliki tingkat pertumbuhan paling rendah dalam media cair yaitu  sebesar  8,90  x  10 8 sel/ml.  Tingginya pertumbuhan  kombinasi  fungi  selulolitik Aspergillus sp. (A) vs Isolat Fusarium sp. dimungkinkan pasangan ini memiliki kemampuan hidup/daya hidup ( viabilitas )  yang  tinggi  untuk  beradaptasi  dan bersaing dalam memperoleh makanan yang terkandung  dalam  media  cair  (cocktail  inokulum) untuk  pertumbuhan,  serta  kombinasi  diantara keduanya  tidak  saling  merugikan  tapi  saling menguntungkan atau mungkin bersifat netral.
Menurut  [19],  jika  pada  suatu  media  terdapat beberapa macam mikroba termasuk fungi, maka akan
terjadi  interaksi  atau  saling  mempengaruhi  antara mikroba satu dengan mikroba lainnya.

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian diperoleh beberapa isolat  selulolitik  asal  limbah  jagung  yang  mampu bersinergis dan tidak mampu bersinergis. Isolat yang mampu bersinergis adalah Aspergillus sp . (isolate JB) vs Fusarium sp. (isolate JC); Aspergillus sp . (isolate JB) vs Aspergillus  sp .  (isolate  JD);  Isolat Aspergillus  sp . (isolate  JB)  vs Rhizoctonia  sp .  (isolate  JE); Fusarium sp .  (isolate  JC)  vs Aspergillus  sp .  (isolate  JD); Aspergillus sp . (isolate JD)  vs Rhizoctonia sp . (isolate JE). Isolat yang tidak mampu bersinergi adalah fungi Fusarium  sp .  (isolate  JC)  vs Rhizoctonia  sp .  (isolate JE).  Pertumbuhan  konsorsium  fungi  selulolitik  asal limbah  jagung  pada  medium  cair  menunjukkan tingkat  pertumbuhan  optimum  pada  hari  ke  3 inkubasi (fermentasi).
Disarankan dalam pembuatan inokulum bioaktifator  sebaiknya  menggunakan  fungi  yang mampu bersinergi dengan lama inkubasi 3 hari.

## Referensi
[1] Pranata.  A.  D.  Kardaya.  T.  Harsi.  2016. Pemberian  pakan  konsentrat  dengan  kadar protein yang berbeda terhadap respon superovulasi  sapi  simental.  Jurnal  Peternakan Nusantara  ISSN  2442-2541  vol  2.  Bogor. Universitas Djuanda Bogor.
[2] Wartoyo.  E.  E.  2015.  Daya  cerna  serat  kasar  dan protein kasar wafer tongkol jagung mengandung sumber  protein  berbeda  pada  kambing  kacang jantan. Skripsi. Makasar.
Universitas Hasanuddin.
[3] Hidayat.  H.  2015.  Komposisi  Nutrisi  Jerami Jagung  di Kecamatan Gerung Kbupaten Lombok Barat  untuk  Pakan  Sapi.  Skripsi  Program  Studi Peternakan.  Fakultas  Peternakan  Universitas Mataram.
[4] Hidayat.  H.  2015.  Komposisi  Nutrisi  Jerami Jagung  di Kecamatan Gerung Kbupaten Lombok Barat  untuk  Pakan  Sapi.  Skripsi  Program  Studi Peternakan.  Fakultas  Peternakan  Universitas Mataram.
[5] Yunilas,  L.  Warly,  Y.  Marlida,  dan  I.  Riyanto. 2013.  Potency  of  Indigenous  Bacteria  from  Oil Palm  Waste  in  Degrades  Lignocelluse  as  a Sources  of  Inoculum  Fermented  to  High  Fibre Feed.  Pakistan  Journal  of  Nutrition  12  (9):851- 853.
[6] Handayani. I .N .2015. Pemanfaatan Konsorsium Mikrobia  Untuk  Meningkatkan  Kinerja  Sistem
Lumpur Aktif.
Jurnal Riset Tekhnologi
Pencegahan Penyakit Industri Vol 6 No 1.
Sinergisme fungi selulolitik ... (Nasution, F.H., Yunilas dan Wahyuni, T.H.)
[7] Yunilas.  2016.  Aplikasi  Bioteknologi  Dalam Pengolahan Pakan Komplit Menggunakan Mikroba Indigenous Berbasis Limbah
Perkebunan  Dan  Industri  Kelapa  Sawit  Sebagai Pakan  Ternak  Ruminansia.  Disertasi.  Program Pascasarjana. Universitas Andalas. Padang.
[8] Kho  Kholifath.  2016.  Viabilitas  Mikroorganisme Lokal  Dalam  Ragi  Kakao.  Skripsi  Universitas Halu Oleo.
[9] Ilyas M. 2007. Uji viabilitas koleksi kapang LIPI- MC  dalam  ampul  penyimpanan  kering-beku  L- drying  setelah  satu  tahun  penyimpanan  pada suhu 50C. Cibinong. LIPI.
[10] Istifadah. N, A. Melawati, P. Suryatmana, dan B. N. Fitriatin. 2014.Keefektifan konsorsium mikroba  agens  antagonis  dan  pupuk  hayati untuk menekan penyakit Rebah Semai (Rhizoctonia solani) pada  Cabai.  J.  Agrikultura.
1 (4): 337-345.
[11] Mohammad.  N,  Md.  Zhangir  Alam,  N.  A. Karbeshi, dan, O. S. Adebayo. 2011.
Development  of  compatible  fungal  mixed culture  for  composting  process  of  oil  palm industrial waste.Malaysia.BERU.
[12] Fardiaz.  S,  1992.  Mikrobiologi  Pangan  I. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
[13] Deng.  Y,  dan  S.  Y.  Wang.  2016.  “Synergistic growth  in  bacteria  depends  on  substrate complexity”, J Microbiol. 54(1): 23 -30.
[14] Sahashi.  N,  M.  Akiba,  M.  Ishihara,  K.  Miyazaki, and  S.  Seki.  2010.  Distribution  of  Genets  of Cylindribasidium  argenteum  in  a  River  Valley
Forest as Determined by Somatic
Incompatibility and the
Significance of Basiodiospores fot its Dispersal. Mycoll progress. 9: 425-449.
[15] Yuliana.  2008.  Kinetika  pertumbuhan  baktei asam  laktat  isolay  T5  yang  berasal  dari tempoyak.  Jurnal  teknologi  industri  dan  hasil pertanian. 73:2.
[16] Reiny. S. S. 2012. Potensi lactobacillus acidophilus  ATCC  4796  sebagai  biopreservatif pada rebusan daging ikan tongkol. Jurnal IJAS, II (2): 604 – 613.
[17] Mavitra  E.  2005.  Pertumbuhan  dan  Aktivitas Eksoprotease Bacillus Licheniformis dan Bacillus Megaterium  di  Medium  Ekstrak  Limbah  Padat Udang. Skripsi S1 Biologi FMIPA UNS Surakarta.
[18] Darmawan.  A.  N.  2000.  Mikrobiologi  Industri. (www.tip.ugm.ac.id,).
[19] Waluyo.  L.  2004. Mikrobiologi  Umum .  Malang: UMM Press