## UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK HEKSANA RIMPANG LENGKUAS MERAH
( Alpinia purpurata K. Schum) TERHADAP BAKTERI Klebsiella pneumoniae

## ISOLAT URIN PADA INFEKSI SALURAN KEMIH
Firdaus Alamri 1) , Fatimawali 1) , Imam Jayanto 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Galangal  rhizome  traditionally  used  to  treat  diseases.  Red  galangal  rhizome  contains flavonoid compounds, which are thought to be able to inhibit the growth of bacteria. Urinary tract  infections  are  infections  that  occur  due  to  the  proliferation  of  microorganisms  in  the urinary tract. This study aims to determine the antibacterial activity of non-polar extracts of red  galangal  (Alpinia  purpurata  K.Schum)  against  the  growth  of  Klebsiella  pneumoniae bacterial urine isolates in urinary tract infections. Extraction was carried out by maceration method  using  n-hexane  solvent.  The  antibacterial  activity  was  testing  using  the  paper  disc diffusion method (Kirby and Bauer diffusion). The results showed that the inhibitory activity of extracts with concentrations of 80%, 40%, 20%, and 10% of the average diameter of the clear zone were 11.03 mm, 8.75 mm, 7.1 mm and 6.03 mm. Shows that the inhibition at 80% concentration  is  strong,  while  at  40%  concentration,  20%  is  moderate  and  at  10% concentration is moderate. Based on this study it can be concluded that the non-polar extract of red galangal can inhibit the bacteria Klebsiella pneumoniae urine isolate in urinary tract infections.
Keywords: Red Galangal Rhizome, Antibacterial, Inhibition

## ABSTRAK
Rimpang  lengkuas  secara  tradisional  digunakan  untuk  mengobati  penyakit.  Rimpang Lengkuas  merah  mengandung  senyawa  golongan  flavonoid  yang  diduga  mampu menghambat  pertumbuhan  bakteri.  Infeksi  saluran  kencing  merupakan  infeksi  yang  terjadi akibat berkembangbiaknya mikroorganisme di dalam saluran kemih . Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak  non-polar  rimpang  lengkuas  merah ( Alpinia  purpurata  K.Schum )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Klebsiella  pneumoniae isolat urin pada infeksi saluran kemih. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut n-heksan. Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi dengan cakram kertas  (difusi  Kirby  dan  Bauer).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  daya  hambat  ekstrak dengan konsentrasi 80%, 40%, 20%, dan 10% rata-rata diameter  zona beningnya 11,03 mm, 8,75 mm,  7,1  mm,  dan  6,03  mm.  Menunjukkan  bahwa  daya  hambat  pada  konsentrasi  80% termasuk kuat, sedangkan pada  konsentrasi  40%,20% termasuk sedang dan pada konsentrasi 10%  termasuk    sedang.  Berdasarkan  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak  non- polar  lengkuas  merah  dapat  menghambat  bakteri Klebsiella  pneumoniae isolat  urin  pada infeksi saluran kemih.
Kata Kunci: Rimpang Lengkuas Merah, Antibakteri, Daya Hambat

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  yang terkenal  dengan  keanekaragaman  tanaman terutama  hasil  pertanian  dan  rempah- rempah.  Hal  ini  didukung  oleh  keadaan geografis  Indonesia  yang  beriklim  tropis dengan  curah  hujan    rata-rata  tinggi sepanjang  tahun. Sumber daya alam  yang dimiliki  telah  memberikan  manfaat  dalam kehidupan  sehari-hari  disamping  sebagai bahan makanan dan bahan bangunan,  juga dimanfaatkan    sebagai  obat  tradisional. Penelitian  tentang  kimia  bahan    alam  dari tanaman  semakin    banyak  dieksploitasi sebagai  bahan  obat-obatan  baik  untuk farmasi  maupun    untuk  kepentingan pertanian, karena di samping keanekaragaman  struktur  kimia  yang dihasilkan juga mengurangi  efek samping yang ditinggalkan  dan mudah  didapatkan. Bagian dari tanaman lengkuas  yang sering digunakan sebagai obat adalah rimpangnya.  Rimpang  lengkuas  secara tradisional  digunakan  untuk  mengobati penyakit (Parwata dan Dewi, 2008).
Keanekaragaman hayati yang memiliki  potensi  untuk  dikembangkan sebagai  obat  tradisional  ialah  Lengkuas merah (Alpinia  purpurata  K.Schum ). Rimpang  Lengkuas  merah  mengandung golongan  senyawa  flavonoid,    karena rimpang  Lengkuas  memiliki  kandungan senyawa  flavonoid  yang    diduga  mampu menghambat  pertumbuhan  (Yuharmen, et al 2002).  Infeksi  Saluran  Kemih  (ISK) merupakan  infeksi  yang  terjadi  akibat berkembangbiaknya  mikroorganisme  di dalam saluran kemih (Fish,2009).
Menurut  penelitian  Harum  (2018) bakteri Klebsiella  pneumoniae merupakan penyebab penyakit infeksi saluran kencing yang resisten terhadap antibiotik. Permasalahan resisten terjadi ketika bakteri  berubah  yang  menyebabkan  turun
atau  hilangnya  efektivitas  obat  atau senyawa  kimia  yang  digunakan  untuk mencegah  atau  mengobati  infeksi  (Utami, 2012).
Hasil penelitian diatas menunjukkan  adanya  indikasi  ekstrak rimpang Lengkuas merah (Alpinia purpurata  K.Schum) mempunyai  daya antibakteri, maka hal ini menarik perhatian peneliti  untuk  melakukan  uji  daya  hambat ekstrak  rimpang  Lengkuas  merah  ( Alpinia purpurata K.Schum ) terhadap pertumbuhan bakteri
Klebsiella pneumoniae isolat  urine  pada  infeksi saluran kemih.

## METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Mei 2019 –  September  2019  di Laboratorium Penelitian  Farmasi  Lanjutan (Laboratorium Mikrobiologi Farmasi) Program Studi Farmasi, Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam,
Universitas Sam Ratulangi, Manado.

## Alat dan Bahan
Alat-alat
yang digunakan Erlenmeyer  (pyrex),  gelas  ukur  (pyrex), aluminium  foil ,  cakram  ( paper  disc) , laminar air flow (Clean Bench), timbangan  analitik,  tabung  reaksi,  cawan petri,  gelas  piala,  lampu  Bunsen,  jarum ose, autoklaf (autoklaf KT-30s), incubator incucell (N  –  Biotek),  lemari  pendingin, rak  tabung  reaksi,  gunting,  pinset,  pisau, oven, antibiotic  blank  disc ,  penggaris, mikropipet.
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  meliputi  rimpang  lengkuas merah  ( Alpinia  purpurata ),  biakan  murni bakteri Klebsiella  pneumoniae ,  medium Nutrient Agar (NA), aquadest, NaCl 0.9%,
Carboxy  Methyl  Cellulose  (CMC),  n- heksan dan ciprofloxacin.
Prosedur Penelitian Preparasi Sampel Rimpang
lengkuas merah dibersihkan dari pengotor dengan air  yang mengalir,  ditiriskan  kemudian  dirajang kecil-kecil,  selanjutnya    ditimbang  1  kg dikeringkan dengan cara diangin anginkan selama  7  hari.  Sampel  kering  kemudian ditimbang dihaluskan dengan cara diblender.

## Ekstraksi
Sebanyak 100 g serbuk dimasukkan ke  dalam  wadah  dan  dimaserasi  dengan heksan  sebanyak  500  mL  kemudian disimpan  selama  5  hari  sambil  sesekali diaduk  dan  ditutup  dengan almunium  foil.
Selanjutnya  larutan  tersebut  disaring menggunakan  kertas  saring  sehingga dihasilkan  filtrat  1  dan  residu  1,  residu yang  diperoleh  kemudian  ditambahkan pelarut heksan kembali sebanyak 500 mL, ditutup  dengan  aluminium  foil,  dan dibiarkan  selama  2  hari  sambil  sesekali diaduk.  Sampel  disaring  menggunakan kertas  saring  menghasilkan  filtrat  2  dan residu 2. Filtrat 1 dan 2 dicampur menjadi satu,  kemudian  dikeringkan  menggunakan oven  selama  24  jam  pada  suhu  40 o C diperoleh ekstrak kental (Rundengan et al , 2017).

## Sterilisasi Alat yang Digunakan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam penelitian  uji  daya  hambat  ini  disterilkan terlebih  dahulu.  Alat-alat  gelas  disterilkan menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121 o C selama  15  menit,  pinset  dibakar  dengan pembakaran  di  atas  api  langsung  dan media  disterilkan  menggunakan  autoklaf pada suhu 121 o C selama 15 menit.

## Pembuatan Media
1) Pembuatan Media Agar Miring
Nutrient  Agar  (NA)  sebanyak  2.8  g dilarutkan  dalam  100  mL  aquades menggunakan Erlenmeyer. Sebanyak 5 mL  dituangkan  masing-masing  pada  3 tabung reaksi steril dan ditutup dengan aluminium foil. Media tersebut disterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 21 o C selama 15 menit, kemudian dibiarkan pada suhu ruangan selama ± 30 menit  sampai media memadat  pada kemiringan  30 o .  Media  Agar  miring digunakan sebagai inokulasi bakteri.
2) Pembuatan Media Dasar Media  dasar  dibuat  dengan  cara ditimbang Nutrient Agar (NA)
sebanyak  2.8  g,  lalu  dilarutkan  dalam 100 mL aquades menggunakan erlenmeyer. Media yang telah homogen ini disterilkan dalam autoklaf pada  suhu  121 o C  selama  15  menit. Media  dasar  digunakan  sebagai  media pengujian.
Pembuatan Larutan Standar 0,5 Mc.

## Farland
Pembuatan  standar  kekeruhan  0,5 Mc.  Farland  dibuat  dari  campuran  1  gram BaCl 2 1%    dilarutakan  sebanyak  100  mL aquades    dan  larutan  1  gram  H 2 SO 4 1% dilarutkan  sebanyak  100  mL  aquades.
Dicampurkan 0,5 mL BaCl 2 1% tambahkan    9,5  mL  H 2 SO 4 1%  kemudian dikocok  sampai  terbentuk  larutan  yang keruh.  Kekeruhan  ini  dipakai  sebagai standar  kekeruhan  suspensi  bakteri  uji (Sutton, 2011).

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri  uji  yang  telah  diinokulasi diambil  dengan  kawat  ose  steril  lalu disuspensikan ke dalam tabung yang berisi 2 mL larutan NaCl 0,9% hingga di peroleh
kekeruhan  yang  sama  dengan  standar kekeruhan larutan Mc. Farland .

## Pembuatan Kontrol Negatif dan Kontrol Positif
Kontrol  negatif  dibuat  dari  1  g serbuk  CMC  dilarutkan  dalam  100  mL aquades  steril.  Dikocok  sampai  larutan homogen.  Kontrol  positif  Menggunakan Ciprofloxacin  Antimicrobial  Susceptibility Disks (5ug).

## Pembuatan Larutan Uji
Larutan  stok  dengan  konsentrasi ekstrak  100%  b/v  dibuat  dengan  cara ditimbang  2  g  ekstrak  heksan  rimpang lengkuas  merah  kemudian  dilarutkan dalam  2  mL  larutan  CMC.  Selanjutnya dibuat larutan uji dalam berbagai konsentrasi dengan cara sebagai berikut:
1) Larutan  uji  10%  b/v  dibuat  dengan cara  dipipet  0.1  mL  larutan  stok kemudian ditambahkan 0.9 mL larutan CMC
2) Larutan  uji  20%  b/v  dibuat  dengan cara  dipipet  0.2  mL  larutan  stok kemudian ditambahkan 0.8 mL larutan CMC
3) Larutan  uji  40%  b/v  dibuat  dengan cara  dipipet  0.4  mL  larutan  stok kemudian ditambahkan 0.6 mL larutan
CMC
4) Larutan  uji  80%  b/v  dibuat  dengan cara  dipipet  0.8  mL  larutan  stok kemudian ditambahkan 0.2 mL larutan CMC

## Pengujian Aktivitas Antibakteri
Aktivitas  antibakteri  dari  ekstrak rimpang lengkuas merah ditentukan menggunakan metode Kirby-Bauer . Media
NA  dituang  masing-masing  sebanyak  20 mL  ke  dalam  3  cawan  petri  dan  dibiarkan hingga mengeras.
Selanjutnya
ditambahkan  suspensi  bakteri  uji  (10 8
CFU/ mL) dengan dengan cara menggunakan  pipa  bentuk  L  agar  suspesi merata pada media dan diamkan selama 10 menit  agar  suspense  terserap  pada  media. Disiapkan  kertas  cakram  yang  masing- masing mengandung 50 μL ekstrak dengan konsentrasi 10%, 20%, 40% dan 80% serta larutan  CMC  (sebagai  kontrol  negatif). Kertas cakram tersebut kemudian diletakkan  pada  permukaan  media  NA yang  sudah  berisi  bakteri Klebsiella pneumoniae . Diletakkan juga
Ciprofloxacin  Antimicrobial  Susceptibility Disks (5ug)  sebagai  kontrol  positif  ke permukaan  media  NA  yang  sudah  berisi bakteri uji. Kemudian diinkubasi selama 1 x  24  jam  dengan  suhu  37 o C  (Tangopa, 2005).

## Pengamatan Dan Pengukuran
Pengamatan  dilakukan  setelah  1x24 jam  masa  inkubasi.  Daerah  bening merupakan  petunjuk  kepekaan  bakteri terhadap  antibiotik  atau  bahan  antibakteri lainnya  yang  digunakan  sebagai  bahan  uji yang  dinyatakan  dengan  lebar  diameter zona  hambat.  Diameter  zona  hambat diukur  dalam  satuan  milimeter  (mm) menggunakan penggaris berskala.

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi
Sampel  Lengkuas  Merah  ( Alpinia purpurata K.  Schum)  diekstraksi  dengan metode  maserasi  dan  diperoleh  randemen sebesar 8,5 %. Metode maserasi digunakan karena  cara  pengerjaanya  yang  mudah dikerjakan dengan menggunakan peralatan yang sederhana, tidak menggunakan pemanasan dan dapat menarik  senyawa  –  senyawa  aktif    dari sampel  dengan  maksimal.  Perendaman sampel  dalam    pelarut  pada  metode
maserasi  dapat  membuat  dinding  sel  dari sampel  pecah  dan  membuat  senyawa- senyawa  yang  terdapat  dalam  sitoplasma akan    larut,    kemudian  karena  adanya perbedaan    konsentrasi  antara  larutan    zat aktif  yang ada di dalam  sel dengan  yang di luar sel, maka zat aktif  yang terpekat di dalam sel akan berdifusi ke luar.  Semakin lama  waktu  ekstraksi,  maka  kesempatan sampel  kontak  dengan  pelarut  juga semakin besar, sehingga dapat menarik zat aktif lebih banyak hingga pelarut mencapai titik  jenuh  kelarutan.  Kontak  sampel dengan  pelarut  dapat  ditingkatkan  dengan bantuan pengadukan. Pada proses maserasi dilakukan  pengadukan  agar  pelarut  dapat melarut  ke  dalam  sampel  dan  akan  masuk ke  rongga-rongga  sampel  karena  dalam keadaan diam selama maserasi menyebabkan turunnya perpindahan bahan aktif.  Senyawa  aktif  dalam  sampel  agar tertarik  semua  ke  dalam  pelarut  dilakukan remaserasi  dengan  penggantian  pelarut sebanyak  dua  kali  dengan  pelarut  n- heksan,  sehingga  meserasi  lebih  efisien dilakukan    berulang  kali  dibandingkan hanya dilakukan sekali (Mujipradhana,2018).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Aktivitas antibakteri ekstrak rimpang lengkuas  merah  ditentukan  menggunakan metode difusi Kirby-bauer dengan melakukan  pengukuran  diameter  zona bening.  Zona  bening  yang  terdapat  di sekitar  kertas  cakram  menandakan  bahwa adanya  aktivitas  antibakteri  dari  larutan uji. Kertas cakram yang sudah ditambahkan larutan uji akan mengandung senyawa  aktif  yang  berpotensi  sebagai antibakteri,  senyawa  tersebut  kemudian akan berdifusi ke media yang sudah berisi bakteri karena adanya perbedaan konsentrasi.  Senyawa  yang  memiliki
aktivitas  antibakteri  akan  menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  terdapat  pada media  sehingga  setelah  diunkbasi  selama 24  jam  akan  memunculkan  zona  bening pada daerah  yang tidak ditumbuhi bakteri. Hasil  pengukurian  diameter  zona  hambat ekstrak  n-heksan  rimpang  lengkuas  merah terhadap  bakteri Klebsiella  pneumonia dengan  konsentrasi  10%  ,20%,  40%  dan 80% dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel  1.  Hasil  Pengukuran  Daya Hambat
Perlakuan
Diameter zona hambat (mm) R1 R2 R3 Rata- rata K(-) 0 0 0 0 K(+) 14,5  13,10  13,9 13,83 80% 11,8 10,7 10,6 11,03 40% 7,6 9,6 9,05 8,75 20% 6,4 7,5 7,4 7,1 10% 5,4 6,4 6,3 6,03
Keterangan : R1 = Replikasi 1, R2 = Replikasi 2, R3 = Replikasi 3
Hasil penelitian menunjukkan larutan  uji  konsentrasi  80%,  40%,  20%, dan 10% memiliki rata-rata diameter  zona hambat  sebesar  11,03  mm,  8,75  mm,  7,1 mm,  dan  6,03  mm.  Hal  ini  menunjukkan uji  daya  hambat  pada  konsentrasi  80% termasuk kuat, sedangkan pada konsentrasi    40%,  20%  termasuk  sedang dan  pada  konsentrasi  10%  termasuk sedang.  Penelitian  yang  dilakukan  oleh Poetry et  al .,(2019),  dari  hasil  yang dilakukan    untuk    metode  difusi  cakram menunjukan    diameter  zona    hambat  dari kontrol  positif  bakteri  uji    lebih  besar dibandingkan  dengan  ekstrak dan kontrol positif  yaitu  21,3  mm.  Untuk  larutan    uji konsentrasi  100%,  75%,  50%,  25%  dan 12,5%  pada  metode  cakram  rata-rata diameter zona beningnya 9,6 mm, 8,6 mm,
8,5 mm, 8,5 mm dan 7,6 mm. Terbentuknya daerah zona hambat menunjukkan  terjadinya  penghambatan pertumbuhan  koloni bakteri  yang di  duga akibat pengaruh senyawa bioaktif flavonoid  yang  terdapat  pada  ekstrak Lengkuas merah (Poetry et al, 2019).
Kriteria  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  untuk  menggolongkan  daya hambat  dari  larutan  uji,  menggunkan kriteria  kekuatan  antibakteri  menurut Davis  dan Stout (1971) yaitu dapat  dilihat pada Tabel 2 dibawah ini:

## Tabel 2. Standar Kekuatan Daya
Antimikroba Diameter Zona Bening (mm) Kategori >20 Sangat Kuat 10 – 20 Kuat 5 – 10 Sedang <5 Lemah Pertumbuhan bakteri yang terhambat dapat disebabkan oleh penghambatan  terhadap  sintesis  dinding sel, penghambatan terhadap fungsi membran  sel,  penghambatan  terhadap sintesis protein atau penghambatan terhadap  sintesis  asam  nukleat  (Poetry et al, 2019).
Volk dan Wheeler
(2008) menambahkan  bahwa  walaupun  dinding sel  seperti  yang  terdapat  pada  bakteri memiliki  struktur  yang  dapat  memberikan kekuatan  tambahan  bagi  sel,  namun senyawa  kimia  seperti  tannin  yang  juga terkandung dalam Lengkuas merah mempunyai  sifat  sebagai  pengelat  yang berefek  spasmolitik,  menciutkan  atau mengkerutkan  sel  sehingga  pertumbuhan bakteri terganggu.
Pada  penelitian  Kusriani  dan  Zahra (2015)  bahwa  ekstrak  n-heksan  dari
rimpang  lengkuas  merah  mengandung senyawa  tannin,  terpenoid  dan  steroid. Senyawa-senyawa tersebut memiliki potensi  sebagai  antibakteri.  Hal  inilah yang  menjadi  dasar  adanya  zona  bening yang ditunjukkan ekstrak n-heksan rimpang  lengkuas  merah  terhadap  bakteri Klebsiella  pneumonia .  Madduluri et  al. (2013) menyatakan bahwa tannin memiliki daya antibakteri dengan cara mempresipitasi  protein,  karena  diduga tannin mempunyai efek yang sama dengan senyawa  fenolik.  Tannin  dapat  bereaksi dengan membran sel, dan dapat menginaktivasi  fungsi  materi  genetik. Senyawa tannin juga mampu menghambat pertumbuhan bakteri dengan cara mengkoagulasi protoplasma bakteri (Pratiwi, 2008).
Mekanisme kerja senyawa terpenoid sebagai  zat  antibakteri  diduga  melibatkan kerusakan membrane oleh senyawa lipofilik. Terpenoid dapat bereaksi dengan porin (protein transmembran) pada membrane  luar  dinding  sel  bakteri, membentuk  ikatan  polimer  yang  kuat  dan merusak  porin,  mengurangi  permeabilitas dinding  sel  bakteri  sehingga  sel  bakteri kekurangan  nutrisi,  pertumbuhan  bakteri terhambat  atau  mati.  Mekanisme  kerja steroid  sebagai  antibakteri  yaitu  dengan merusak membran lipid, sehingga mengalami  kebocoran  sel  bakteri.  Steroid juga  diketahui  dapat  berinteraksi  dengan membrane  fosfolipid  karena  sifatnya  yang permeable terhadap senyawa-senyawa lipofilik menyebabkan integritas membran menurun  dan  morfologi  sel  terganggu sehingga  mengakibatkan  sel  mengalami lisis dan rapuh (Ahmed, 2007).

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  yang  didapatkan dari  penelitian  ini,  maka  dapat  dambil
kesimpulan bahwa ekstrak n-heksan rimpang lingkuas merah ( Alpinia purpurata K.  Schum)  dapat  menghambat pertumbuhan
bakteri Klebsiella pneumoniae isolat  urine  pada  infeksi saluran  kemih,  dengan  rata-rata  zona hambat untuk konsentrasi 80%, 40%, 20%, dan  10%  secara  berturut-turut  yaitu sebesar  11,03 mm, 8,75 mm, 7,1 mm, dan 6,03 mm.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut tentang isolasi senyawa dari ekstrak non  polar  rimpang  lengkuas  merah ( Alpinia  purpurata K.  Schum)  yang berkhasiat  sebagai  antibakteri  terhadap Klebsiella pneumonia

## DAFTAR PUSTAKA
Ahmed,  Bahar.  2007. Chemistry  Of
Natural Products. New Delhi:
Departemen of Pharmaceutical Chemistry of Science Jamia
Hamdard.
Davis, W.W., Stout, T.R. 1971. Disc plate method  of  microbiological  assay.
Journal  of  microbiology .  22(4):659- 665.
Fish,  D.N.  2009 .  Urinary  Tract  Infection, in  Koda  Kimble ,  M.  A.,  (Eds), Applied  Therapeuticd  :  The  Clinical Use of Drugs, 9th Edition, Lippincott  Williams  &  Wilkins, USA, pp. 64.1-64.4.
Harum,  2018 . Isolasi  dan  Identifikasi
Biomolekuler Bakteri Penyebab
Penyakit    Pneumonia  yang  Resisten Terhadap  Antibiotik  Seftriakson  di
RSUP  Dr.  R.D  Kandou .[Skripsi]. Fakultas  Matematika  dan Ilmu
Pengetahuan Alam: Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Kusriani,  R.  H.,  S.  Az  Zahra.2015. Skrining  Fitokimia  dan  Penetapan Kadar Senyawa  Fenolik  Total  Ekstrak Rimpang  Lengkuas  Merah  dan Rimpang  Lengkuas  Putih  ( alpinia galangal  L .). Prosiding  SNaPP Kesehatan .  Pisnn  2477-2364,  Eisnn 2477- 2356. 1(1)  295-305.
Madduliri, Suresh, Rao, K. Babu. Sitaram, B.  2013.  In  vitro  evaluation  of  five Indegenous  plants  extract  Againts five  bacterial  Phatogens  of  Human. International  Journal  of  Pharmacy and  Phrmaceutical  Science 5(4): 679-684.
Mujipradhana,  V.,  Defny,  W.,  Edi,  S.
2018.    Aktivitas  antimikroba  dari ekstrak  ascidian herdmania  momus pada  mikroba  patogen    manusia. Jurnal Ilmiah Farmasi 7(3).
Parwata,  I.M.O.A,  Dewi,  P.F.S  2008. Isolasi  dan  Uji  Aktivitas  Antibakteri Minyak Atsiri dari Rimpang
Lengkuas  ( Alpinia  galanga L.). Jurnal Kimia 2:(2), 100-104.
Poetry  A,  Fatimawali,  Paulina  V.  Y.  Y.
2019.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak Rimpang Lengkuas Merah (Alpiniapurpurata K.Schum) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Klebsiella pneumoniae Isolat Sputum Pada Penderita PneunomiaResisten Antibiotik Seftriakson. Pharmacon 8:(1),  11- 21.
Pratiwi, S. T.2008. Mikrobiologi Farmasi . Jakarta: Erlangga.
Rundengan,  C.,  Fatimawali,  Herny  S.
2017.  Uji  Daya  Hambat  Ekstrak
Etanol  Biji  Pinang  Yaki  (Areca vestiaria) terhadap Bakteri Stapyhlococcus  aureus,  Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa. Pharmacon 6:(1), 37-46.
Sutton, S. 2011. Measurement of Microbial  Cells  by  Optical  Density.
Journal  of  Validation  Technology. 17:(1), 46-49.
Utami,  E.R.  2012.  Antibiotika,  Resistensi, dan  Rasionalitas  Terapi. Saintis
2012 , 1:(1),124 -38.
Volk,  W.A.,Wheeler.  2008. Mikrobiologi
Dasar . Penerbit Erlangga. Jakarta.
Wewengkang,  D.,  Deiske.  S.,  Hengki.  R.
2014.  Karakterisasi  dan  bioaktif antibakteri senyawa spons Haliclona sp. dari teluk manado. Jurnal LPPM Bidang Sains dan Teknologi . 1(1).
Yuharmen,  Eryanti,  Nurbalatif. . 2002.  Uji Aktivitas Antimikroba Minyak Atsiri dan  Ekstrak  Methanol  Lengkuas (Lenguas  galang), [Skripsi], Jurusan Kimia,  Fakultas  Matematika  dan Ilmu Pengetaguan Alam, Universitas Riau.