ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
Giry Marhento, Mashudi Alamsyah. (2020). Tingkat Keanekaragaman Hewan Troglobionts pada Ekosistem Gua di Tajur Bogor Jawa Barat. Journal Bioeksperimen. Vol. 6 (1) Pp. 24-28. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v6i1.2795

## TINGKAT KEANEKARAGAMAN HEWAN TROGLOBIONTS PADA EKOSISTEM GUA DI TAJUR BOGOR JAWA BARAT
Giry Marhento 1) , Mashudi Alamsyah 2) 1,2 Pendidikan Biologi Universitas Indraprasta PGRI E-mail korespondensi: girymarhento@gmail.com Paper submit : 11 Mei 2019, Paper publish : Maret 2020
Abstract – The purpose of this study was to determine the level of diversity of Troglobionts animals, species composition, species dominance, and uniformity in the Cave of Tajur Bogor, West Java. The variables in this study consisted of survey methods by calculating diversity, dominance, uniformity, and species composition to find out what types of animals are in the ecosystem of the cave. Based on the results of research on animal species found there were 10 species of biota belonging to 3 transects with a total of 88 species of cavernous biota. The sample in this study used the 10x10 M line transect method three times in different places. Determination of line transect measurements in this study is based on differences in the environmental zone at the outermost point or cave line which is the starting point of line transect measurement. The results of statistical calculations are obtained as follows: diversity biota index (H ‘) in the range of 0.4168-0.9684, the index of species composition (P) ranges between 0.2386-0.3861, the uniformity index (E) range between 0,4304-1, and the dominance of type (C) ranges between 5,2118-5,2118. Based on the calculation of diversity, composition, uniformity, and dominance of the type of biota in the area of Tajur Bogor, West Java, at the low-moderate level. Overall the types of biota found in this study were 3 transects, generally producing different amounts during the study, the total biota species found in the cave consisted of 88 individuals from 14 families and 14 species while the highest composition of biota types in transect III where of the 34 species found throughout the transect, 33 were in the second transect and the lowest was in transect I with only 21 species.
Keywords: Animal Diversity, Troglobionts, Cave Ecosystem

## Pendahuluan
Indonesia merupakan negara kepulauan yang mempunyai kawasan karst yang tersebar hampir semua pulau-pulau besar dari Sumatera sampai Papua. Namun sampai saat ini keberadaan kawasan karst di Indonesia masih terpinggirkan terutama untuk kawasan konservasi, yang menonjol hanyalah potensial dari sisi ekonomi seperti penambangan batu kapur. Gua merupakan sebuah bentuk alami berupa ruang dibawah tanah yang berdiri sendiri maupun saling terhubung dengan ruang-ruang lainnya sebagai proses pelarutan oleh air maupun aktifitas geologi. Gua merupakan laboratorium alami yang banyak terdapat di Indonesia. Gua memiliki lingkungan yang unik dan rentan terhadap perubahan. Kondisi yang khusus, ini membedakannya dengan lingkungan lainnya. Salah satu kondisi adalah intensitas cahaya
matahari yang sangat minim atau bahkan tidak ada cahaya sama sekali dan kelembaban yang selalu tinggi serta konstan sepanjang tahun dengan fluktuasi temperatur yang rendah (Rahmadi Cahyo, 2008). Penelitian biologi yang mengangkat tentang gua di Indonesia sampai saat ini masih sangat  tertinggal dibandingkan di luar negeri, namun akhir-akhir ini ada peningkatan kegiatan penelitian beberapa kelompok maupun lembaga penelitian. Hal ini tentunya membawa dampak positif terhadap pengetahuan biologi gua, khususnya keanekaragaman hayati dan konservasinya dan masih sangat sedikit yang meneliti tentang fisiologi maupun evolusi.
Ekosistem gua adalah ekosistem yang asing, seasing lingkungannya yang gelap, lembab dan tidak mudah untuk di capai. Sepertinya hal ini yang menjadikan ekosistem gua sampai saat ini masih menjadi ekosistem yang terabaikan.
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795
UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia *Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3
Abstract Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
Padahal ekosistem gua tidak kalah menarik dan tidak kalah terancam karena hampir kebanyakan kawasan karst di Indonesia belum dilindungi dan mempunyai kepadatan populasi penduduk yang tinggi.
Gua merupakan tempat berlangsungnya proses adaptasi dan evolusi berbagai jenis organisme. Gua yang terbentuk menciptakan sebuah habitat bagi makhluk hidup. Kondisi gua yang gelap dan sumber bahan organik yang terbatas menciptakan habitat unik dan menarik untuk dipelajari. Kehidupan biota di dalam gua pun menjadi sangat menarik sebagai objek penelitian karena kemampun adaptasi yang berbeda-beda. Biota gua dapat dikategorikan ke dalam tiga kelompok berdasarkan tingkat aktivitasnya dan adaptasi di dalam gua yaitu Trogloxene, Troglophile, dan Troglobite (Ferreira dan Horta, 2001).
Kegiatan Penambangan batu gamping dapat menyebabkan adanya eksternalitas negatif. Eksternalitas negatif yang ditimbulkan oleh penambangan batu gamping salah satunya berupa adanya degradasi ekosistem gua. Penambangan batu gamping mengancam keberadaan ekosistem gua, termasuk di dalamnya potensi-potensi tersembunyi berupa fungsi ekologi, ilmiah, sosial dan budaya. Gua yang terdapat didalamnya memiliki eksternalitas positif yang dapat kita rasakan misalnya melalui kegiatan wisata minat khusus ( caving/kegiatan penelusuran gua ), tersedia sumber air, kekayaan flora dan fauna gua yang khas, potensi gua sebagai laboratorium alam yang dapat dijadikan obyek penelitian, dan masih banyak lagi. Potensi- potensi tidak dapat tergantikan jika ekosistem gua tersebut rusak bahkan hilang akibat adanya aktifitas penambanagan batu gamping.
Arthropoda merupakan kelompok takson yang penting dalam gua karena kontribusinya yang besar baik keanekaragaman maupun kelimpahan individu di dalam gua. Banyak Arthropoda yang menarik karena telah mengalami proses adaptasi sehingga kemungkinan di temukan jenis baru. Perannya pun dalam lingkungan gua cukup sangat besar bagi jaringan-jaringan makanan dalam gua.
Pada lingkungan yang seperti ini masih di jumpai adanya kehidupan seperti biota gua salah satunya Arthropoda, Kondisi lorong yang berbeda-beda sangat menentukan kekayaan fauna di dalam gua karena variasi habitat berkorelasi positif dengan keanekaragaman biota gua terutama Arthropoda.

## Metode Penelitian
Dalam penelitian ini menggunakan metode survei dengan cara transek garis. Dengan menghitung keanekaragaman, komposisi jenis, dominasi dan kemerataan untuk mengamati jenis-jenis biota yang ditemukan dalam gua, sesuai fakta lapangan yang ada di dalam penelitian. Dengan pendekatan ini di harapkan dapat memperoleh gambar yang mendalam tentang ekosistem gua dan keragaman dari jenis biota gua yang di temukan dalam gua di kawasan tajur. Sampel dalam penelitian ini menggunakan metode transek garis 10x10 M sebanyak tiga kali di tempat yang berbeda. Penentuan pengukuran transek garis dalam penelitian ini dilakukan berdasarkan perbedaan zona lingkungan pada titik terluar atau garis gua yang di jadikan titik awal pengukuran transek garis. Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian yaitu: alat tulis, kamera digital, meteran, tali rapia, lampu senter, helm, sepatu boot, dan wearpack (pelindung badan), komunitas jenis biota gua yang ditemukan dalam gua Cidomba dan Garunggang di kawasan Tajur Bogor Jawa Barat. Transek 1 dilakukan berada di zona peralihan pada gua banyak kelelawar, tipe substratnya masih ada cahaya dari celah-celah batu dan tempat guano atau kotoran kelelawar. Pengukuran 2 berada di zona gelap pada gua Cidomba, dengan keadaan ruang sempit dan mulai terdapat air mengalir, tipe substraknya tidak terdapat lagi cahaya dan tempat kelompok hawan Triglobionts. Sedangkan transek 3 berada di zona gelap total pada gua Cidomba, dengan keadaan ujung dari gua tersebut, tipe substraknya terdapat banyak kelompok hewan Triglobionts.
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut. Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
Data dan hasil penelitian biota gua yang ada di ekosistem gua Tajur Bogor Jawa Barat di masukan ke dalam format pengamatan yang didalamnya terdapat beberapa nama spesies biota yang mendominasi di daerah kawasan Tajur Bogor Jawa Barat pada ekosistem gua, transek garis dan jumlah spesies. Adapun metode lain yang telah dilakukan yaitu Inventarisasi fauna gua. Metode inventarisasi gua yang digunakan adalah pengamatan bergerak, yaitu metode perhitungan fauna dengan cara satu pengamatan selama waktu yang ditentukan. Untuk Setiap perjumpaan dicatat jenis satwa yaitu penelusuran gua serta pencarian dan pengambilan, dilakukan di sepanjang lorong gua.
Tabel 1. Lembar Isian Pengamatan Jenis Biota Di Ekosistem Gua Tajur Bogor Jawa Barat No. Hewan transek Jumlah 1 2 3 1 2

## 3
dst

## Hasil dan Pembahasan
Berdasarkan hasil penelitian hewan troglobionts di tajur bogor jawa barat, data biota yang  di peroleh dalam penelitian ini terdiri dari 9 jenis biota yang dapat di temukan. Biota yang di temukan di setiap transek memilih jumlah yang berbeda-beda, penelitian ini dapat dilihat dari tabel berikut :
Tabel 2. Hasil Penelitian Jenis Biota Yang Ditemukan No Nama Biota Lokasi Di Temukan Zona/Transek Jml 1 2 3 1 Jangkrik Lantai,dinding dan di gorong-gorong gua, di zona gelap dan gelap abadi - 5 2 7 2 Kaki seribu Lantai dan dinding gua, di zona gelap dan gelap abadi - 8 5 13 3 Udang A ( stenasellus javanicus ) Di aliran air yang ada di bawah gua di zona gelap abadi - - 19 19 4 Laba-laba ( araneae ) Didinding gua dan lorong gua, di zona gelap dan gelap abadi - 2 3 5 5 Kelelawar Langit-langit gua, di zona peralihan dan gelap 19 10 - 29 6 Kepiting Dibalik batuan kecil di aliran air, di zona gelap - 1 - 1 7 Guano Di lantai gua dan di atas batuan besar, di zona peralihan dan gelap 8 Kodok Dinding gua, zona peralihan 2 - - 2 9 Kalacemetik (stygophryntus dammemani) Di dinding, lantai dan gorong-gorong gua, di zona gelap dan gelap abadi - 6 5 11 Total (n) 21 33 34 88 Total genus 2 6 6 14 Total spesies 2 6 6 14 Tabel 2. Hasil data perhitungan Indeks Transek/zona 1 II III P (komposisi jenis ) 0,2386 0,3634 0,3861 H’ (indeks keanekaragaman) 0,4168 0,0138 0,9684 E (indeks keseragaman) 0,4304 0,0142 1 C (dominasi) 5,2118 6,4854 5,2037
Bioeksperimen, Volume 5 No.1, (Maret 2019)
Salomon Christian, Wahyu Irawati. (2019). Uji Resistensi Isolat Khamir yang Diisolasi dari Limbah Industri di Rungkut, Surabaya, Indonesia. Jurnal Bioeksperimen . Vol. 5 (1) Pp. 1-10. Doi: 10.23917/bioeksperimen.v5i1.2795

## UJI RESISTENSI ISOLAT KHAMIR YANG DIISOLASI DARI LIMBAH INDUSTRI DI RUNGKUT, SURABAYA, INDONESIA
Salomo Christian 1) ; Wahyu Irawati 2)* 1 Fakultas Ilmu Pendidikan, Program Studi Pendidikan Biologi,
2 Fakultas sains dan Matematika, Program Studi Biologi, Universitas Pelita Harapan Jalan M.H. Thamrin Boulevard 1100, Lippo Karawaci, Tangerang 15811, Indonesia
*Email : w.irawati3@gmail.com
Abstrak Pencemaran tembaga di daerah Rungkut-Surabaya telah melebihi ambang batas sehingga dapat mengancam kehidupan organisme di laut. Tembaga tidak dapat didegradasi dan beracun pada konsentrasi tinggi sehingga diperlukan pengolahan limbah yang dapat menurunkan konsentrasi tembaga di lingkungan. Khamir resisten tembaga dapat diisolasi dari daerah tercemar dan dapat dijadikan sebagai agen bioremediasi untuk mengatasi pencemaran tembaga. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan isolasi dan uji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri. Sampel diambil dari lumpur aktif pusat pengolahan limbah PT. SIER Surabaya. Isolasi dilakukan dengan pengenceran sampel limbah kemudian diinokulasikan dengan metode sebar ke dalam medium Yeast Extract Peptone Dextrose Agar yang diperkaya dengan CuSO 4 . Uji resistensi dilakukan dengan menginokulasikan isolat murni dengan metode gores ke dalam medium Agar yang mengandung berbagai konsentrasi CuSO 4 untuk menentukan nilai Minimum Inhibitory Concentration (MIC). Hasil isolasi diperoleh delapan isolat khamir dengan kode ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, dan ES10.4. Nilai MIC isolat khamir tersebut berkisar antara 16-20 Mm CuSO 4 . Isolat yang paling resisten adalah isolat dengan kode ES9.3 dengan nilai MIC= 20 mM CuSO 4 , sehingga isolate ini dipilih sebagai isolate yang paling resisten terhadap polutan di Wilayah Rungkut, Surabaya, Indonesia.
Kata kunci: Isolasi, karakterisasi, khamir, resistensi, tembaga, isolate ES9.3

## Abstract
Copper pollution in Rungkut-Surabaya area has exceeded the threshold so that it can be threaten the life of organisms in the sea. Copper cannot be degraded and its very toxic at high concentrations. So that, we need to treat the water waste to reduce copper concentrations. Copper yeast can be isolated from polluted areas and can be used as a bioremediation agent to overcome copper pollution. This study aims to conduct copper isolation and yeast resistance testing from industrial waste. Samples taken from the activated sludge of PT. SIER Surabaya. Isolation was carried out by dilution of the waste sample and then inoculated with the scatter method into Yeast Extract medium Peptone Dextrose Agar enriched with CuSO 4 . The resistance test was carried out by inoculating the pure isolate with the scratch method into Agar medium containing various concentrations of CuSO 4 to determine the value of Minimum Inhibitory Concentration (MIC). The isolation results obtained eight yeast isolates with the code ES6.1, ES8.1, ES9.2, ES9.3, ES9.4, ES9.5, ES10.2, and ES10.4. The MIC value of yeast isolates ranged from 16-20 Mm CuSO4. The most resistant isolates were isolates with code ES9.3 with MIC = 20 mM CuSO 4 , so that this isolate was chosen as the most resistant isolate to pollutants in the Rungkut Region, Surabaya, Indonesia.
Keywords: Isolation, characterization, yeast, resistance, copper, isolate ES9.3

## Pendahuluan
Logam berat merupakan polutan yang tidak dapat didegradasi dan cenderung terakumulasi di dalam tubuh organisme. Logam berat dapat menjadi polutan karena merupakan senyawa sisa yang dihasilkan dari industri (Kobya, Demirbas, Senturk, & Ince, 2005). Tembaga adalah logam
berat yang banyak digunakan di dalam industri terutama industri elektronik dan bersifat toksik bagi organisme (Davis, Volesky, & Vieira, 2000). Tembaga merupakan salah satu logam berat esensial dan diperlukan oleh manusia dalam konsentrasi yang sangat kecil, yaitu tidak lebih dari 0,05 mg/kg berat badan yaitu untuk membentuk hemoglobin dan kolagen, tetapi akan menjadi racun jika konsentrasi
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020)
Selama penelitian yang dilakukan di gua Tajur Bogor Jawa Barat tercacat ada 6 golongan hewan Troglobionts yang ditemukan pada lokasi penelitian. Dilihat dari tingkat keragaman, dominasi, komposis, dan perataan yang menduduki semua transek.
Berdasarkan pada data tabel hasil penelitian, maka dapat dilakukan perhitungan komposisi jenis hewan Troglobionts dengan rumus indeks diversitas dari shannon sebagai berikut:
P = ni / N X 100%
Dimana
P= sebagai komposisi jenis (%) ni= jumlah individu jenis N= jumlah individu seluruh jenis
Contoh perhitungan komposisi jenis biota dapat dihitung pada transek 2:
P =  [ (5/88) + (8/88) + (2/88) + (10/88) + (1/88) + (6/88) ] x 100% = 0,2386
Hasil analisi data pada tingkat indeks keanekaragaman data dapat di hitung melalui rumus shannon Winner untuk mengukur tingkat keteraturan atau ketidakteraturan pada suatu sistem.
’ log  / n i ni H P pi In pi N = − = = ∑
H’  = indeks keanekaragaman jenis ni  = jumlah individu jenis N  = jumlah total individu seluruh jenis P  = komposisi jenis
Perhitungan di ambil pada contoh transek 1 yaitu:
H’   = - [ (19/88) In (19/88) + (2/88) In (2/88)
= 0,4168
Hasil analisi data pada indeks keseragaman data dapat di hitung pada rumus tertentu. Indeks keseragaman yang menggambarkan ukuran jumlah individu antara spesies dalam suatu komunitas biota gua. Dapat dijelaskan
bahwa semakain besar indeks keseragaman spesies atau genus berarti jumlah individu setiap spesies dapat dikatakan tidak jauh berbeda dan dalam komunitas tersebut didominasi tertentu kecil.
Hasil perhitungan data tersebut dapat dilihat pada perhitungan di bawah ini:
' H E H maks = Keterangan:
E = Indeks keseragaman H maks= Log2 S S = Jumlah spesies dalam komunitas H’ = Indeks keanekaragaman shannon wienner Transek I
0,4168 0,4304 0,9684 E = = Transek II 0,0138 0,0142 0,9684 E = = Transek III 0,9684 1 0,9684 E = =
Hasil analisis pada indeks dominasi data dapat di hitung melalui rumus tertentu adapun persamaannya yaitu:
2 C   =     Ni N Keterangan: C = indeks dominasi simpson Ni = jumlah individu setiap jenis N = jumlah individu  seluruh jenis Contoh perhitungan dapat di hitung melalui transek 3: 2 2 2 2 2 2 2 5 15 4
88 88 88 88 3 5 88 88 5,2037
C         + + + + = +                             =
ISSN 2460-1365
tembaga tersebut melebihi tingkat kebutuhan harian. Akumulasi tembaga di dalam tubuh manusia dapat mengakibatkan berbagai macam penyakit seperti gagal ginjal, kanker, kerusakan liver, kerusakan otak, gangguan saraf, bahkan kematian (Hocheng, Chakankar, & Jadhav, 2018).
Pencemaran tembaga di pantai timur Surabaya merupakan salah satu kasus pencemaran logam berat yang terjadi di Indonesia yang belum dapat ditanggulangi. Pencemaran ini dapat terjadi karena adanya pembuangan limbah cair ke sungai oleh industri yang berada di sekitar pantai timur Surabaya. Akibat yang ditimbulkan dari pencemaran tembaga adalah akumulasi tembaga oleh hewan yang hidup di sungai dan laut di sekitarnya seperti ikan, kerang, dan udang. Hewan-hewan yang mengakumulasi logam berat bila terkonsumsi oleh manusia dalam jangka panjang dapat menimbulkan kerusakan pada beberapa organ tubuh (Irawati, Parhusip, Christian, & Yuwono, 2017).
Data pencemaran logam berat menunjukkan bahwa kadar Cu pada ikan dan kerang dari pantai sekitar muara yang berasal dari Rungkut, yaitu pantai di kelurahan Sukolilo mengandung 2.290,20 ppb dan 5.920,20 ppb. Pencemaran di Rungkut telah melebihi ambang batas yang ditentukan oleh World Health Organization (WHO) yaitu 1.200 ppb sehingga dapat membahayakan kesehatan penduduk yang tinggal di desa tersebut.
Masalah kontaminasi tembaga di lingkungan telah dilakukan di beberapa daerah industri tetapi untuk mendegradasi dan menghilangkan logam berat tidak semudah mendegradasi limbah organik karena limbah logam berat bersifat nonbiodegradable. Degradasi dan reduksi logam berat dari lingkungan untuk skala kecil dapat dilakukan dengan cara fisik dan kimia melalui pertukaran ion (ion exchange), presipitasi, koagulasi, inverse osmosis, dan adsorpsi. Metode-metode tersebut cukup efisien dalam mengurangi kontaminasi logam berat tetapi akan sangat merugikan bila digunakan untuk mengolah limbah industri yang sangat banyak sehingga akan menimbulkan masalah baru, yaitu biaya  pengolahan limbah yang relatif mahal, membutuhkan energi dan bahan kimia cukup banyak (Jianlong, 2002). Pendekatan secara bioteknologi dengan menggunakan khamir merupakan alternatif yang
dapat dilakukan untuk masa yang akan datang dan merupakan langkah yang cukup berpotensi dalam meremediasi limbah cair yang mengandung logam berat. Mikroorganisme dapat mengurangi konsentrasi logam berat di lingkungannya melalui proses adsorpsi, produksi senyawa ekstraseluler, maupun sintesis enzimatis. Berbagai mikroorganisme memiliki toleransi terhadap logam pada konsentrasi yang lebih tinggi setelah ditumbuhkan pada medium yang mengandung logam berat (Irawati, Riak, Sopiah, & Sulistia, 2017). Hasil penelitian menunjukkan bahwa beberapa jenis khamir seperti Saccharomyces pombe strain 972, Saccharomyces cerevisiae, dan Candida tropicalis dapat mengabrsopsi tembaga di dalam medium masing-masing sebesar 70%, 86%, dan 82% (Stephen, 1992; Rahman, 2007). Mekanisme detoksifikasi tembaga pada khamir pada umumnya adalah dengan cara pengikatan ion tembaga pada membran, penyerapan ke dalam sel, dan dilanjutkan dengan pengikatan ion tembaga oleh protein metallothionein (MT) (Ashish, Neeti, & Himanshu, 2013). Eksplorasi khamir resisten tembaga yang dapat mengakumulasi tembaga perlu dilakukan untuk mendukung program bioremediasi limbah tembaga di Indonesia demi terciptanya lingkungan yang terbebas dari kontaminasi logam berat. Tingkat kontaminasi limbah tembaga di banyak daerah industri di Indonesia telah melebihi ambang batas dan perlu ditanggulangi untuk menghentikan pencemaran limbah tembaga ke lingkungan. Khamir resisten tembaga merupakan mikroorganisme yang sangat berpotensi dalam mengakumulasi tembaga dari limbah dalam proses bioremediasi tetapi penelitian mengenai isolasi dan karakterisasi khamir resisten tembaga belum banyak dilakukan di Indonesia (Qayyum, Khan, Maqbool, Zhao, & Peng, 2016) (Jianlong, 2002). Eksplorasi khamir resisten tembaga dari daerah industri Rungkut-Surabaya sangat penting untuk dilakukan sebagai langkah awal dalam rangka mendapatkan solusi dalam meremediasi lingkungan yang telah tercermar logam berat. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan menguji resistensi khamir resisten tembaga dari limbah industri Rungkut Surabaya.
Bioeksperimen, Volume 6 No. 1 (Maret 2020) ISSN 2460-1365
Pada penelitian yang telah dilakukan jumlah spesies yang ditemukan berkisar antara 88 pada tiga. Transek I ditemukan 21 jenis biota sedangkan transek II di temukan 33 jenis biota dan transek III ditemukan 34 jenis biota. Berikut ini beberapa definisi jenis biota gua yang ditemukan yaitu:

## Simpulan
Secara keseluruhan jenis biota yang di temukan dari penelitian ini sebanyak 3 transek umumnya  menghasilkan jumlah yang berbeda- beda selama penelitian, total jenis biota yang di temukan di dalam gua terdiri dari 88 individu
dari 14 famili dan 14 jenis sedangkan komposisi jenis biota tertinggi pada transek III dimana dari 34 spesies yang ditemukan diseluruh transek, 33 spesies berada pda transek II dan yang terrendah ada pada transek I dengan jumlah spesies hanya 21 spesies. Komposisi jenis hewan troglobionts tertinggi pada jenis Udang A ( stenasellus javanicus ) sedangkan presentase terendah yaitu Udang B ( stenasellus javanicus ). Keanekaragaman jenis biota gua di tajur bogor jawa barat dalam kategori tinggi ( 0,9684), nilai keseragamanan cenderung seragaman atau tidak ada yang mendominasi ( 0,4304 ), dan dominasi dalam katagori rendah ( 5,2037 ).

## Daftar Pustaka
KPG-HIMAKOVA. 2007. Laporan Rafflesia 2007: Eksplorasi keanekaragaman Hayati dalam Pengembangan dan Pengelolaan Ekowisata. Fakultas Kehutanan Institut Pertanian Bogor. Vol 2: Laporan Ilmiah.
Brahmantyo B dan Bachtiar T. 2004. Amanat Goa Pawon. Kelompok Riset Cekungan Bandung. Bandung.
Ferreira, R.L. and Horta, L.C.S..2001. Natural and Human Impacts on Invertebrate Communities in Brazilian Caves. Rev. Brasil. Biol., 61(1):7‐17pp
Rahmadi, Cahyo, dkk. 2002. Komunitas Collembola di Guano Kelelawar di Gua Lawa Nusakambangan, Jawa Tengah. Biologi 2 (14): 861‐875
Rahmadi C. 2005. Arthropoda Goa Karst Gunung sewu: Sebuah Tinjauan. Gunung Sewu; Indonesian Cave and Karst Journal
Samodra H. 2001. Nilai Strategi Kawasan Kars di Indonesia; Pengelolaan dan;  Perlindungannya. Departemen Energi dan Sumberdaya Mineral. Balai Penelitian dan Pengembangan Energi dan Sumberdaya Mineral. Bandung.
Sumarlin O. 2007. Keindahan Dunia Bawah Tanah. Perhimpunan Pencinta Alam Jantera, Geografi UPI.
Sunkar A. 2007. Pertimbangan Biospeologi dalam Konservasi Kawasan Karst. Departemen Konservasi Sumberdaya Hutan Fakultas Kehutanan-IPB.