## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174

## Studi Aktivitas Antioksidan Dan Antikanker Payudara (MCF-7)
Ekstrak Etanol  Daun Benalu Langsat Dendrophthoe pentandra
Desi E. Gusungi 1 *, Wilmar Maarisit 1 , Hariyadi 2 , Nerni O. Potalangi 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
*Penulis Korespondensi; desigusungi97@gmail.com Diterima : 24 Januari 2020  Disetujui : 01 Februari 2020

## ABSTRAK
Daun  Benalu  langsat Dendrophthoe  pentandra mengandung  senyawa  fitokimia  seperti  flavonoid, alkaloid,  triterpenoid,  dan  saponin  yang  dapat  berperan  sebagai  antioksidan  dan  antikanker. Antioksidan  merupakan  senyawa  yang  dapat  menghambat  reaksi  radikal  bebas  didalam  tubuh. Flavonoid  dan  alkaloid  bekerja  sebagai  antioksidan  yaitu  dengan  cara  menyumbangkan  atom hydrogen,  sehingga  radikal  DPPH  dapat  tereduksi.  Senyawa  saponin  dan  triterpenoid  juga mempunyai  efek  antioksidan  dengan  membentuk  spesies  reaktif  seperti  hidroperoksida  dan superoksida  sebagai  antioksidan  sehingga  menghambat  pembentukan  lipid  peroksida.  Senyawa Flavonoid,  alkaloid  dan  triterpenoid  juga  dikatakan  sebagai  antikanker  yaitu  dengan  cara menghambatan mekanisme pembelahan serta pengaktifan jalur apoptosis  sel kanker. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dan antikanker ekstrak etanol daun benalu langsat. Pengujian  ini  menggunakan  metode  DPPH  dan  MTT.  Hasil  yang  diperoleh  menunjukan  bahwa aktivitas antioksidan daun  benalu langsat  sangat kuat, dilihat dari  nilai  IC 50 yaitu  1.9787  ppm/mL dan kurang aktif pada aktivitas antikanker dengan nilai IC 50 sebesar 1497 µg/mL.
Kata kunci : Daun Benalu Langsat, antioksidan, antikanker, DPPH, MTT

## ABSTRACT
Benalu  Langsat  Leaves Dendrophthoe  pentandra contain  phytochemical  compound  such  as flavonoids,  alkaloids,  triterpenoids,  and  saponins  that  can  act  as  antioxidants  and  anticancer. Antioxidans are compouds that can inhibit free radical reaction in the body. Flavonoids and alkaloid work as antioxidans by donating hydrogen atoms, so DPPH radicals can be reduced. Saponins and Triterpenoid  compounds  also  have  antioxidant  effects  by  forming  reactive  species  such  as hydroperoxide and superoxide as an antioxidant thereby inhibiting the formation of lipid peroxide. The flavonoid compounds, alkaloids and triterpenoids are also said to be anticancer by the means of infiltration the cleavage mechanism as well as the activation of cancer cell apoptosis pathways. The research  aims  to  determine  the  antioxidant  and  anticancer  activity  of  the  leaf  ethanol  extract  in Langsat. This test uses the DPPH and MTT methods. The results showed that the antioxidant activity of the leaves of the leaf is very strong, judging by the value of IC 50 1.9787 ppm/mL and less active in anticancer activity with a IC 50 value of 1497 µg/mL.
Keywords :Benalu Langsat  Leaves, antioxidant, anticancer, DPPH, MTT.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174

## PENDAHULUAN
Obat  tradisional  merupakan  obat-obatan yang  berasal  dari  alam  dan  telah  dimanfaatkan oleh  masyarakat  Indonesia  sejak  zaman  dahulu [1]. Obat  tradisional  dipercaya  mempunyai khasiat yang dapat menyembuhkan penyakit yang sulit  untuk  disembuhkan.  Salah  satu  penyebab penyakit
seperti kanker, peradangan,
artheosclorosis ,  maupun  penuaan  dini  adalah spesi-spesi  oksigen  reaktif  seperti  hydrogen, peroksida, superoksida, radikal hidroksil maupun senyawa radikal lainnya. Oksigen reaktif maupun senyawa  radikal  ini  akan  mengoksidasi  sel-sel tubuh  manusia  sehingga  pertumbuhan  sel-sel akan terganggu dan akan menimbulkan penyakit [2].
Kanker  adalah  penyakit  yang  ditandai dengan  pertumbuhan  sel  yang  abnormal.  Data Globocan (Global Burden Cancer) menyebutkan di tahun 2018 terdapat 18,1 juta kasus baru dengan angka kematian sebesar 9,6 juta kematian. Angka kejadian penyakit kanker di Indonesia berada pada urutan  8  di  Asia  Tenggara.  prevalensi  tertinggi adalah di Yogyakarta 4,86/1000 penduduk, diikuti Sumatera  Barat  2,47/1000  penduduk  dan Gorontalo  2,44/1000  penduduk [3]. Salah  Satu jenis  Kanker  yang  menjadi  penyebab  kematian terbanyak  di  dunia  adalah  kanker  payudara [4]. Untuk menangkal terjadinya oksidasi ini diperlukan antioksidan yang berfungsi menstabilkan  dengan  melengkapi  kekurangan elektron  dari  radikal  bebas  sehingga  sel-sel terlindungi dari senyawa reaktif tersebut [5].
Secara  empiris  masyarakat  di  Kabupaten Halmahera  Barat  menggunakan  batang  benalu langsat  untuk  mengobati  kanker  payudara.  Kulit batang  langsat  dapat  digunakan  sebagai  obat antikanker  sedangkan  biji  langsat  digunakan sebagai  obat  cacing,  obat  demam  dan  diare. Biasanya  masyarakat  Halmahera  menggunakan daun  benalu  langsat  dengan  jumlah  yang  ganjil misalnya  tujuh  daun  dan  di  rebus  dengan  tiga gelas air lalu di seduh menjadi satu gelas. [6]

## METODE PENELITIAN

## Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  dilaksanakan  di  labolatorium Fakultas  MIPA-UKIT,  Fakultas  MIPA- UNSRAT  dan  UNPAD-Bandung.  Waktu penelitian  pada  bulan  Oktober-November 2019.

## Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  yaitu  :  ember,  toples, gunting,  spatula,  pengaduk, erlenmeyer 500 mL, aluminium  foil ,  gelas  ukur  100  mL,  vial, kertas  label, beaker  glass 100  mL,  kertas saring, rotary  evaporator ,  botol  vial,  corong, pipet,  oven,  tabung  reaksi,  cawan  petri, timbangan  analitik,  labu  ukur,  mikropipet, botol  vial,  kertas  label, Biosafety  Cabinet (BSC), Centrifuge,
CO2 Incubator,
Microscope, Multimode Reader .
Bahan  yang  digunakan  yaitu  aquades, etanol  70%,  HCl  pekat, magnesium ,  asam asetat  glasial,  asam  sulfat  pekat,  kloroform, asam  ammonia,  HgCl 2 ,  Potasium  iodide, bismut, iodine  resublimed ,  DPPH  0.1  mM, Vitamin  C  (sebagai  control  positif)  100  mL, 1,5 mL microtube , 15 mL tube , 75 ml T-flask , 96 well  plate,  Cisplatin,  Antibiotik,  Dimethyl sulfoxide (DMSO), Phosphate buffered saline (PBS), PrestoBlue ™ Cell  Viability  Reagent , Roswell  Park  Memorial  Institute  Medium (RPMI), Fetal  Bovine  Serum (FBS), Trypsin- EDTA , Trypan Blue .

## Prosedur Penelitian Pengujian Skrining Fitokimia
1. Uji Flavonoid
Sampel  ekstrak  daun  benalu  langsat  di timbang  sebanyak  0.2  gram  masukkan  dalam tabung reaksi lalu tambahkan etanol sebanyak 5  mL  dan  di  panaskan  di  dalam  tambahkan beberapa tetes HCl pekat dan tambahkan juga 0.2  gram  bubuk  Mg  ( Magnesium ),  lalu  di amati. Hasil positif dengan menunjukan warna merah tua.
2. Uji Triterpenoid/Steroid
Sampel  ekstrak  daun  benalu  langsat sebyanyak  0.2  gram  di  masukkan  dalam tabung  reaksi  dan  tambahkan  dengan

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174
asam  asetat  glasial  sampai  terendam, dibiarkan selama 15 menit lalu tambahkan 3 tetes asam sulfat pekat. Hasil Positif dengan membentuk warna merah.
3. Saponin
Sampel  ekstrak  daun  benalu  langsat sebanyak  0.2  gram  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi, kemudian tambahkan aquades 5 mL,  panaskan  dalam  oven  (60 0 C)  selama  10 menit,  lalu  dikocok  kuat-kuat.  Hasil  positif dengan terbentuknya buih.
4. Alkaloid Sampel  ekstrak  daun  benalu  langsat sebanyak 0.2 gram dimasukan kedalam tabung reaksi lalu ditambahkan 10 tetes kloroform dan 10 tetes  asam  ammonia  kemudian  tambahkan 10 tetes H 2 SO 4 2N (Asam sulfat) dan di aduk, diamkan  hingga  terbentuk  2  lapisan.  Lapisan yang di atas dipindahkan dalam 3 tabung reaksi kemudian pada masing-masing tabung diteteskan  reagen  wagner,  reagen  mayer  dan reagen  dragendrof.  Hasil  positif  dengan menunjukan adanya endapan.

## Pengujian Antioksidan
1. Pembuatan Larutan DPPH (0.1 mM)
Larutan DPPH 0.1 mM dibuat dengan cara menimbang serbuk DPPH sebanyak 0.39432 gram dan dilarutkan dengan etanol
p.a  10  ml.  Larutan  DPPH  0.1  M,  lalu dipipet  100  µl  masukan  dalam  labu  ukur 100 mL lalu dicukupkan dengan etanol p.a sampai tanda batas (0.1 mM).
2. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH.
dengan  etanol  p.a  sambil  diaduk  dan dihomogenkan  lalu  dimasukan  ke  dalam labu  ukur  100  mL  dan  dicukupkan volumenya hingga tanda batas. selanjutnya  dibuat  variasi  konsentrasi  2.5 ppm, 5 ppm, 7.5 ppm, 10 ppm, 12.5 ppm.
4. Pembuatan Larutan Pembanding (Vitamin C) 1000 ppm.
Larutan  dibuat  dengan  menimbang  100 mg  vitamin  c  dan  dilarutkan  dengan etanol  p.a  lalu  dicukupkan  volumenya hingga 100 mL. Selanjutnya dibuat variasi larutan dengan konsentrasi 2.5 ppm, 5 ppm, 7.5 ppm, 10 ppm dan 12.5 ppm.
5. Pengukuran  Serapan  larutan  Ekstrak  dan Larutan Vitamin C Menggunakan
Spektrofotometer UV-Vis .
Pengujian  dilakukan  dengan  memipet masing-masing konsentrasi larutan ekstrak dan larutan vitamin c (2.5 ppm, 5 ppm,  7.5  ppm,  10  ppm  dan  12.5  ppm). Masing-masing ditambahkan dengan etanol hingga 5 mL lalu tambahkan 1 mL larutan  DPPH  0.1  mM,  divortex  hingga homogen  dan  diinkubasi  dalam  ruangan gelap  selama  30  menit.  Selanjutnya diukur  nilai  absorbansinya  pada  panjang gelombang 517 nm.
6. Penentu Persen Inhibisi Akitivitas penangkal radikal
diekspresikan  sebagai  persen  inhibisi yang dapat dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut :
𝐴𝑏 − 𝐴𝑠 Larutan DPPH 0.1 mM sebanyak 2 mL
dimasukan  ke  dalam  tabung  reaksi
Keterangan : % 𝑖𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖 𝑥100% 𝐴𝑏
tambahkan etanol p.a 2 mL di vortex hingga homogen, diinkubasi dalam ruangan gelap selama  30  menit,  lalu  dituang  ke  dalam kuvet dan diukur pada panjang gelombang menggunakan spektrofototmeter  UV-Vis panjang gelombang maksimum 517 nm.
3.  Pembuatan  Larutan  Stok  Ekstrak  1000 ppm.
Larutan  stok  1000  ppm  dibuat  dengan  cara menimbang  ekstrak  etanol  daun  benalu langsat  sebanyak  0.01  gram  di  larutkan
Ab : Absorban blanko = Nilai absorbansi DPPH As : Absorbansi sampel = Nilai absorbansi sampel
Dari % perendaman yang diperoleh tentukan IC 50 yaitu konsentrasi  yang  mampu  menghambat 50% radikal bebas. Harga IC 50 ditentukan dengan rumus :
IC 50 = 50−𝑎 𝑏 Keterangan : a
: nilai x pada kurva linear b : nilai y pada kurva linear

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174

## Pengujian Antikanker
1. Preparasi Media/Kontrol Positif/Sampel
a. Disiapkan  media  kultur  cair Roswell  Park
Memorial Institute Medium ( RPMI ) komplit (yang  mengandung Fetal  Bovine  Serum ( FBS ) 10% dan 50 μL/ 50mL antibiotik).
b. Disiapkan  kontrol  positif  yang  akan digunakan. Kontrol positif yang digunakan dalam uji ini adalah Cisplatin .
c. Dilarutkan sampel untuk membuat konsentrasi  7.81  µg/mL,  15.63  µg/mL, 31.25  µg/mL,  62.50  µg/mL,  125  µg/mL, 250 µg/mL, 500 µg/mL, dan 1000 µg/mL.
Digunakan  pelarut  yang  tidak  bersifat toxic terhadap sel.
d. Disiapkan  Larutan  kerja antiproliferasi assay . Larutan kerja yang akan digunakan adalah PrestoBlue™  Cell  Viability
Reagent .
2. Preparasi Sel
a. Sel  yang  akan  digunakan  telah  konfluen min 70%.
b. Dibuang  media  pada  dish,  lalu  bilas  sel sebanyak 2x dengan 1 mL PBS.
c. Ditambahkan  1  mL  larutan Trypsin- EDTA lalu diinkubasi selama 5 menit agar lapisan sel terdispersi (di bawah mikroskop  inverted  sel  akan  tampak melayang.
d. Dipindahkan sel kedalam tube yang telah berisi media.
e. Disentrifuge  sel  dengan  kecepatan  3000 rpm selama 5 menit.
f. Dibuang supernatan, lalu pelet dilarutkan kedalam tube berisi media.
3. Seeding Sel ke dalam 96 well plate
a. Ditentukan  jumlah  dan  viabilitas  sel (dengan trypan  blue  exclusion ),  dan resuspend sel dengan kepadatan sel akhir 170.000  sel/mL  dalam  media.  (17.000 sel/well).
1. Disiapkan  10  μL trypan  blue dalam microtube steril.
2. Ditambahkan  10  μL  suspensi  sel  ke dalam  larutan trypan  blue lalu dihomogenkan.
3. Dibersihkan hemacytometer dan tutup slip  menggunakan etanol 70%
kemudian dikeringkan.
4. Dengan menggunakan pipet, perlahan-lahan  dimasukkan  10 μL  larutan sel-trypan  blue ke salah satu sisi bilik/ chamber .
5. Dihitung  jumlah  sel  yang  sehat dan  tentukan  jumlah  sel  (viabel) per mL.
b. Seeding/kultur sel kedalam 96
wellplate, kemudian diinkubasi selama 24 jam (atau sampai sel konfluen min.
70%) pada pada suhu 37°C dan 5% gas CO 2 .
4. Perlakuan  sel  dengan  sampel/kontrol positif/kontrol negatif
a. Disiapkan delapan buah microtube 1,5 mL,  lalu  masing-masing microtube diberi  label  konsentrasi  pengenceran yang  sesuai,  kemudian  stock  sampel diencerkan  menjadi  delapan  varian konsentrasi menggunakan pelarut media.
b. Dikeluarkan  96 well  plate yang  telah berisi  sel  dari inkubator .  Diberi  label pada plate sepanjang margin kiri untuk baris mana yang akan diberi perlakuan oleh standar dan baris mana yang akan diberi sampel. Lalu dibuang media dari setiap well .
c. Dengan menggunakan mikropipet dipindahkan  100  μL  masing-masing sampel  dan  kontrol  positif cisplatin dari microtube ke  dalam  masing- masing  well yang sesuai pada 96 well plate yang telah berisi sel.
d. Kemudian di inkubasi kembali selama 24 jam.
5. Pemberian reagen Presto Blue dan
Pengukuran absorbansi.
a. Dibuang Media pada setiap well .
b. Disiapkan 9 mL media pada tube yang ditambahkan  1  mL  “ PrestoBlue™ Cell Viability Reagent ” (10 μL reagen untuk 90 μL media), lalu dimasukkan 100  μL  campuran  larutan  tersebut kedalam tiap well microplate kemudian  diinkubasi  selama  1-2  jam sampai terlihat perubahan warna (Saat

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174
memasuki sel hidup, reagen PrestoBlue® akan  direduksi  dari  senyawa  biru resazurin tanpa nilai fluorescent intrinsik ,  menjadi  senyawa resorufin yang  berwarna  merah  dan  sangat berpendar.  Konversi  nilai  sebanding dengan  jumlah  sel  yang  aktif  secara metabolik  dan  oleh  karena  itu  dapat diukur secara kuantitatif. Untuk mengukur
absorbansi, digunakan
spektrum absorbansi untuk resazurin dan resorufin ).
Selanjutnya  diukur  absorbansinya  pada panjang  gelombang  570  nm  ( reference : 600 nm) menggunakan multimode reader .

## ANALISIS DATA
persamaan regersi  linear menggunakan  program Microsoft Excel dan ELISA reader.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil dari proses maserasi berupa maserat yang diperoleh  sebanyak  3  liter  dari  4  liter  pelarut etanol.  Maserat  yang  diperoleh  berwarna  hijau, kemudian  dipekatkan  sehingga  diperoleh  ekstrak kental  sebanyak  23.4  gram  untuk  keperluan penelitian.
Hasil  ekstrak  kental  yang  diperoleh kemudian dilakukan pengujian skrining fitokimia  senyawa  flavonoid,  triterpenoid, saponin dan alkaloid. Skrining fitokimia ekstrak dilakukan dengan menggunakan uji tabung yaitu mereaksikan  sampel  dengan  larutan  pereaksi spesifik untuk mengetahui kandungan metabolit sekunder yang ada dalam tumbuhan.

## Hasil Uji Skrining Fitokimia
Pada  Tabel 1  menunjukan  bahwa  ekstrak daun benalu  langsat  memiliki  kandungan  metabolit sekunder yaitu flavonoid, triterpenoid, saponin, dan alkaloid.
Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia
Metabolit Sekunder Pereaksi Hasil Pengamatan Ket (1) (2) (3) (4) Flavonoid HCl pekat dan Mg Menunjukan  warna  merah + tua Triterpenoid Asam asetat glasial dan asam sulfat pekat Menunjukan warna merah + Saponin aquades Membentuk  buih yang stabil Alkaloid Reagen Mayer (HgCl3 dan Potasium Iodide) Terbentuk  bentuk  endapan + putih Reagen Dragendrof (Bismut Nitrat dan Potasium) Terbentuk endapan jingga + Reagen Wagner (Potasium Iodide dan iodine resublismed) Terbentuk endapan cokelat +

## Hasil Uji Antioksidan
Pada Tabel 2 menunjukan bahwa semakin tinggi konsentrasi sampel dan semakin rendah nilai  absorbansi  maka  semakin  besar  nilai % antioksidan.  Hal  ini  dikarenakan  semakin besar konsentrasi maka semakin banyak
kandungan  senyawa  yang  berperan  sebagai antioksidan  pada ekstrak  benalu langsat  sehingga dapat  meredam  aktivitas  radikal  bebas  DPPH (ditandai  dengan  perubahan  warna  ungu  dari DPPH  menjadi  warna  kuning) [7]. Perubahan warna ungu menjadi warna kuning ini disebabkan karena elektron tunggal pada DPPH berpasangan
+

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174
dengan hidrogren dari antioksidan.
Senyawa  pembanding  yang  digunakan adalah vitamin C (Asam Askorbat), vitamin C merupakan  senyawa  antioksidan  alami  yang sering digunakan sebagai senyawa pembanding dalam pengujian aktivitas antioksidan,  karena  senyawa  antioksidan
alami  relatif  aman  dan  tidak  menimbulkan toksisitas [4]. Nilai  IC 50 diartikan  sebagai konsentrasi efektif ekstrak yang dibutuhkan untuk merendam 50%  dari  total  DPPH [8]. Terdapat  beberapa sifat  antioksidan  berdasarkan  nilai  IC 50 . Seperti dirangkum dalam Table 3 [9].
Tabel 2. Nilai IC 50 Sampel Konsentrasi ppm Absorbansi
U1 U2 Nilai Rata- rata Absorbansi DPPH 0.1 mM Nilai % Antioksidan IC50 ppm/mL (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) Ekstrak 2.5 0.532 0.530 0.531 36.71 5 0.476 0.452 0.464 44.696 7.5 0.271 0.270 0.2705 67.759 1.9787 10 0.112 0.112 0.112 86.65 12.5 0.097 0.099 0.098 88.319 Vit. C 2.5 0.301 0.300 0.83 0.3005 9 64.183 5 0.272 0.270 0.271 67.699 7.5 0.192 0.199 0.1955 76.698 0.7602 10 0.107 0.109 0.108 87.127 12.5 0.078 0.077 0.0775 90.762
Tabel 3. Sifat Antioksidan Berdasarkan Nilai IC 50 [9].
50 ppm< Sangat Kuat 50 ppm - 100 ppm Kuat 100 ppm - 150 ppm Sedang 150 ppm - 200 ppm Lemah
Semakin  kecil  nilai  IC 50 maka  semakin  kuat daya  antioksidannya.  Senyawa  dikatakan memiliki  aktivitas  antioksidan  sangat  kujika nilai  IC 50 <50  ppm.  Berdasarkan  hasil  nilai IC 50 tersebut  maka  dapat  dikatakan  bahwa ekstak daun benalu langsat memiliki aktivitas antioksidan sangat
kuat [10]. Hasil  penelitian,  Tabel  3  dan  4 menunjukan  bahwa  besarnya  konsentrasi sampel  yang  dapat  menghambat  50% absorbansi  DPPH  (IC 50 )  adalah  1.9787 ppm/mL  untuk  ekstrak  daun  benalu  langsat dan  nilai  IC 50 dari  vitamin  C  yaitu  sebesar 0.7602 ppm/mL.
(2) (1) Sifar Antioksidan Nilai IC 50
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174

## Pengujian Antikanker
Media Media+
Sel DMSO
Konsentrasi Sampel (µg/ml) Cisplatin 0.10%    1000.00 500.00 250.00 125.00 62.50 31.25 15.63 7.81 (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12)
Gambar 1. Hasil Pewarnaan Antikanker
Pada  Gambar  1  menunjukan  bahwa semakin  tinggi konsentrasi  maka  warna  pada media semakin pekat. Hal ini disebabkan oleh reaksi  pembentukan  kristal  formazan  yang berwarna ungu. Perubahan warna yang terjadi
dalam plate 96 well dapat diamati melalui nilai absorbansinya menggunakan ELISA ( Enzime- linked  Immunosorbent  Assay ) reader pada panjang gelombang 600 nm untuk warna biru dan 570 nm untuk warna pink.
Tabel 4. Spektrum Sinar Tampak
Konsentrasi Absorbansi Konsentrasi S Absorbansi ampel IC 50 (1) (2) (3) 1000.00 0.4057 500.00 0.4716 250.00 0.5364 125.00 0.5467 1497.00 µg/mL 62.50 0.5580 31.25 0.5630 15.63 0.5608 7.81 0.5746
Dalam  spektrum  cahaya  terdapat  warna asli  dan  warna  komplementer,  warna  asli merupakan  warna  yang  diserap  oleh  benda, sedangkan  warna  komplementer  merupakan warna yang diteruskan atau warna yang dapat dilihat secara kasat mata [11].
Perubahan warna digunakan untuk melihat  adanya  proliferasi  sel.  Sel  yang mengalami  proliferasi  dalam  mitokondria akan menyerap MTT sehingga sel-sel tersebut akan  berwarna  ungu  akibat  terbentuknya kristal  tetrazolium  ( formazan ).  Intensitas warna  ungu  yang  terbentuk  proporsional dengan jumlah sel hidup, sehingga jika
intensitas  warna  ungu  semakin  besar,  maka jumlah sel hidup semakin banyak [8]. Dari hasil perubahan  warna  pada  ekstrak  daun  benalu langsat  kemudian  diamati  pertumbuhan  selnya dibawah  mikroskop  pada setiap  sampel  ekstrak. Hasil  penelitian menunjukan  bahwa  konsentrasi 1000  µg/mL  memiliki  jumlah  sel  mati  lebih banyak  dibandingkan  dengan  jumlah  sel  mati pada konsentrasi  yang  lebih  rendah.  Dari  hasil tersebut kemudian Nilai IC 50 sampel dapat dilihat pada Tabel 5.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174
Tabel 5. Nilai IC 50 Konsentrasi Absorbansi Konsentrasi Sampel Absorbansi IC 50 (1) (2) (3) 1000.00 0.4057 500.00 0.4716 250.00 0.5364 125.00 0.5467 1497.00 µg/mL 62.50 0.5580 31.25 0.5630 15.63 0.5608 7.81 0.5746
Pada Tabel 5 dapat dilihat bahwa nilai IC 50 dari sampel adalah 1497 µg/mL. aktivitas sitotoksik dari  ekstrak  yang  menyerang  sel-sel  kanker dapat  diklasifikasikan  menjadi  empat  yaitu, suatu  ekstrak  dikatakan  sangat  aktif  memiliki aktivitas antikanker  apabila  memiliki  nilai  IC 50 <10 µg/mL,  aktif  jika  IC 50 10-100 µg/mL,  dan cukup  aktif  jika  IC 50 100-500  µg/mL,  serta dikatakan  kurang  aktif  jika  nilai  IC 50 >500 µg/mL.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah dilakukan  maka  dapat  disimpulkan  bahwa tumbuhan benalu langsat Dendrophthoe pentandra memiliki senyawa metabolit sekunder  jenis  flavonoid.  Ekstrak  daun  benalu langsat  memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan nilai  IC 50 1.9787  µg/mL,  dan  anti-kanker payudara  (MCF-7)  dengan  nilai  IC 50 1497.00 µg/mL.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Hieronymus.  2008.  Ragam  dan  Khasiat Tanaman  Obat.  Agromedia  Pustaka. Jakarta Selatan. hal 1-148.
[2] Chaterjee, S., Niaz Z., Gautam, S., Adhikari, S.,  Variyar,  P.S.  and  Sharma,  A.  2007. Antioxydant  Activity  of  Some  Phenolic Constituens  From  Green  Pepper  ( Piper ningrum L.)  and  Fresh  Nutmeg  Mace ( Myristica  fragrans ).  Food  chemistry. 101(2):515-523.
[3] Kementrian Kesehatan Republik Indonesia.
2019. Hari Kanker  Sedunia. KEMENKES RI. Jakarta. hal 1-2.
[4] Lung  J.K.S.,  Dika  P.  Destiani.  2017.  Uji Aktivitas  Antioksidan  Vitamin  A,C,E
Dengan Metode DPPH. Universitas
Padjadjaran. 15(1): 53-62.
[5] Maharani,  S.  2009.  Kanker.  Mengenal  13 Jenis  Kanker  Dan  Pengobatannya.
Katahati. Yogyakarta. hal 179-187
[6] Indrayani  Alimuddin,  2010,  Uji  Efek Ekstrak  Metanol  Daun  Langsat  (Lansium Domesticum L)Terhadap Penurunan Kadar Glukosa Darah  Pada  Mencit (Mus Musculus).  Fakultas  Ilmu  Kesehatan  Uin Alauddin Makassar.
[7] Winarno  E.  2011.  Uji  Sitotoksik  Ekstrak Kapang Aspergilus  sp. Terhadap  Sel Kanker  Payudara  T47D.Program  Studi
Sarjana Biologi Depok. Universitas Indonesia. hal 1-69.
[8] Tristantini  D.,  Alifah  I.,  Bhayangkara  T.P., Jadon  G.J.  2016.  Pengujian  Aktivitas Antioksidan Menggunakan Metode  DPPH Pada  Daun  Tanjung  ( Minusops  elengi L). ISSN 1693-4393.
[9] Molyneux,  P.  2003.  The  use  of  the  stable free radikal diphenylpicrylhydrazyl
(DPPH) for estimating antioxidant activity. Journal  Science  of  Technology.  26  (2):
211-219.

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (1), 166-174
[10] Widyasanti A., Chintya L.F., Rohdiana D. 2016.  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Teh Putih  ( Camelia  sinensis )  Dengan  Metode
DPPH  ( 2,2Difenil-Pikrilhidrazil ).  Jurnal Teknik Pertanian Lampung 5(3): 125-136.
[11] Afandi R. 2018.Spektrofotometer Cahaya Tampak Sederhana Untuk Menentukan Panjang Golombang Serapan Maksimum Larutan