ISSN: 1410-8917 e-ISSN: 2597-9914
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (3) (2019): 73 – 78

## Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi
Journal of Scientific and Applied Chemistry
Journal homepage: http://ejournal.undip.ac.id/index.php/ksa
Uji Sitotoksik Ekstrak dan Fraksi Dendrophtoe pentandra (L) Miq pada Sel T47D
Masayu Farah Diba a , Salni b , Subandrate c,*
a Biomedical Program, Faculty of Medicine, Universitas Sriwijaya, Palembang, Indonesia
b Department of Biology, Faculty Mathematics and Natural Sciences, Universitas Sriwijaya, Palembang, Indonesia
c Department of Biochemistry, Faculty of Medicine, Universitas Sriwijaya, Palembang, Indonesia
* Corresponding author: subandrate@unsri.ac.id https://doi.org/10.14710/jksa.22.3.73-78
Art ic le   Info

## Ab s t rac t
Article history:
Received: 14 January 2019 Revised: 8 April 2019
Accepted: 24 April2019 Online: 31 May 2019
Keywords: Cytotoxic; Dendrophtoe petandra (L.) Miq; Extract; Fraction
Title: Cytotoxic Test of Extract and Fraction of Dendrophtoe Pentandra (L) Miq on T47D Cell
Indonesia has a variety of plants that have the potential for medicine. One of the plants used by the community as a drug with anticancer effects is Dendrophtoe petandra (L.) Miq. This study aims to determine the cytotoxic effect of ethanol extract, ethyl acetate fraction and water ethanol fraction of Dendrophtoe petandra (L.) Miq on  T47D breast cancer cells.  The cytotoxic effects of ethanol extract, ethyl acetate fraction  and water ethanol fraction were carried out by MTT assay method using series concentration. Cytotoxic effects were assessed by  calculating  IC 50 values  using  linear  equations.  Phytochemical  test  showed  that Dendrophtoe petandra (L.) Miq contained saponins, terpenoids, flavonoids and tannins. The IC 50 value  of  the  ethanol  extract,  ethyl  acetate  fraction  and  water  ethanol  fraction  were 417.506 μg/mL, 233.617 μg/mL, and 2748.357 μg/mL, respectively. The smaller the IC 50 value means that the compound is more active. Water ethanol fraction of Dendrophtoe petandra (L.) Miq does not have a cytotoxic effect, whereas ethanol extract and ethyl acetate fraction of Dendrophtoe petandra (L.) Miq have cytotoxic effects in the medium strength category. The content  of  flavonoids  and  saponins  in  ethanol  extract  and  ethyl  acetate  fraction  of Dendrophtoe petandra (L.) Miq is thought to play role in causing T47D cell death. Cytotoxic effects of ethyl acetate fraction are stronger than ethanol extracts.

## Ab s t rak
Kata Kunci:
Dendrophtoe petandra (L.); Ekstrak; Fraksi; Sitotoksik
Indonesia  memiliki  berbagai  tanaman  yang  berpotensi  sebagai  obat.  Salah  satu  tanaman yang  dimanfaatkan  masyarakat  sebagai  obat  dengan  efek  antikanker  adalah Dendrophtoe petandra (L.) Miq. Penelitian ini bertujuan mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanol, fraksi etil asetat dan fraksi etanol air Dendrophtoe petandra (L.) Miq terhadap sel kanker payudara T47D.  Uji  efek  sitotoksik  ekstrak  etanol,  fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  etanol  air  dilakukan menggunakan  metode MTT  assay dengan  konsentrasi  bertingkat.  Efek  sitotoksik  dinilai dengan  menghitung  nilai  IC 50 menggunakan  persamaan  linier.  Hasil  uji  fitokimia menunjukkan  bahwa Dendrophtoe  petandra (L.) Miq  mengandung  saponin,  terpenoid, flavonoid and tanin. Nilai IC 50 ekstrak etanol, fraksi etil asetat dan fraksi etanol air masing- masing adalah 417,506 μg/mL, 233,617 μg/mL, dan 2748,357 μg/mL. Semakin kecil nilai IC 50 berarti senyawa tersebut semakin aktif. Fraksi etanol air Dendrophtoe petandra (L.) Miq. tidak memiliki  efek  sitotoksik,  sedangkan  ekstrak  etanol  dan  fraksi  etil  asetat Dendrophtoe petandra (L.) Miq memiliki efek sitotoksik  dengan kategori kekuatan sedang. Kandungan flavonoid dan saponin dalam ekstrak etanol dan fraksi etil astetat Dendrophtoe petandra (L.)
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (3) (2019): 73 – 78
Miq  diduga  berperan  dalam  menyebabkan  kematian  sel  T47D.  Efek  sitotoksik  fraksi  etil asetat lebih kuat dibandingkan dengan ekstrak etanol.

## 1. Pendahuluan
Indonesia  merupakan  negara  yang  kaya  akan  obat tradisional  berbasis  herbal  yang  memiliki  aktivitas antikanker  yang  secara  empiris  digunakan  masyarakat dalam  mengatasi  tumor  dan  kanker.  Menurut Moghadamtousi dkk. [1] produk herbal telah membentuk dasar  dari  etnomedisin  selama  berabad-abad.  Berbagai aktivitas  farmakologis  menjadi  asas  herbal  obat-obatan herbal.  Ini  termasuk  asal  mula  obat  yang  berasal  dari tanaman  untuk  pengobatan  berbagai  penyakit  sebagai porsi  yang  signifikan  dari  obat-obatan  modern.  Salah satu jenis tanaman obat yang dimanfaatkan  masyarakat untuk obat adalah tanaman benalu dari pohon jeruk nipis ( Dendrophtoe  petandra (L.) Miq.).  Daun  benalu Dendrophtoe petandra (L.) Miq dianggap memiliki khasiat antikanker terutama kanker payudara [1, 2].
Dendrophtoe  petandra merupakan  obat  tradisional yang  digunakan  oleh  masyarakat  Indonesia  yang berkhasiat  sebagai  obat  antiradang,  antibakteri, antibengkak, obat radang rahim dan obat batuk rejan [2]. Penelitian yang dilakukan Endharti dkk. [3] menunjukkan ekstrak Dendrophtoe  petandra (L.) Miq.)  dapat menghambat proliferasi sel epitel usus besar melalui jalur p53.  Penelitian  Elsyana dkk. [4],  menyatakan  fraksi  n- heksan Dendrophtoe petandra (L.) Miq.) yang diuji dengan metode  BSLT  ( Brine  Shrimp  Lethality  Test) terbukti memiliki  aktivitas  antiproliferasi  terhadap  sel  kanker K562 ( human chronic myelogenous leukemia ) dan MCM-B2 ( canine benign mixed mammary ).
Pengujian  aktivitas  sitotoksik  daun  benalu  jeruk nipis dapat dilakukan secara in vitro menggunakan kultur sel  yang  digunakan  untuk  mendeteksi  adanya  aktivitas antineoplastik  dari  suatu  senyawa.  Menurut  Amir  dan Murcitro  [5],  uji  MTT  (mikrotetrazolium)  dapat digunakan untuk menentukan parameter nilai sitotoksik IC 50 .  Nilai  tersebut  menunjukkan  nilai  konsentrasi  yang menghasilkan  hambatan  proliferasi  sel  50%  dan menunjukkan  potensi  ketoksikan  suatu  senyawa terhadap sel yang merupakan patokan untuk melakukan uji pengamatan kinetika sel.
Pada prinsipnya ekstrak dan fraksi aktif dari benalu jeruk  nipis  diyakini  memiliki  potensi  sebagai  agen antikanker  berbasis  herbal  dengan  cara  meningkatkan kematian  sel  (sitotoksik).  Penelitian  ini  bertujuan mengetahui  efek  sitotoksik  ekstrak  dan  fraksi  aktif benalu  jeruk  nipis  ( Dendrophtoe  petandra (L.) Miq.) terhadap sel kanker payudara T47D.

## 2. Metode Penelitian

## 2.1. Alat Penelitian
Alat yang digunakan untuk ekstraksi, fraksinasi, uji fitokimia  dan  uji  sitotoksik  meliputi  alumunium  foil, batang pengaduk, blender, botol selai, botol vial, corong pisah,  tabung  erlenmeyer,  gelas  ukur, hair  dryer ,  kertas saring,  labu  pisah,  kolom kromatografi berdiameter  1,7
cm,  pipa  kapiler,  penangas  air, plat  Kromatografi  Lapis Tipis (KLT) ukuran 1x7 cm, rotary evaporator, timbangan analitik,  media  kultur  RPMI  ( Roswell  Park  Memorial Institude )  1641,  inkubator  CO 2 5%  dengan  suhu  37 0 C, mikropipet, blue tip, yellow tip, timbangan analitik, conical, microtube,  mikroskop  inverted,  vortek, LAF  ( Laminar  air flow), ELISA reader, heamocytometer, timer dan kamera.
Bahan  yang  digunakan  yakni  daun Dendrophtoe petandra (L.) Miq, etanol 96%, etil asetat, dimetilsulfoksida  (DMSO),  H 2 SO 4 10%, silica  gel  F 254 , phosfat buffer saline 1x, media kultur (MK) (DMEM), MTT 5  mg/mL  PBS  (50  mg  MTT  dan  10  mL  PBS),  SDS  10% dalam  0,1  N  HCl, foetal  bovine  serum (FBS), diphenyltetrazolium bromide , sodium dodecyl sulfate (SDS), HCl,  NaOH,  natrium  bikarbonat, N-(2-hydroxyethyl) piperazine-3-n-ethanol  sulfanic  acid (Hepus),  aqua destilata, fungison  1  %,  penisilin-streptomisin  3  %  dan tripsin-EDTA 0,25%.

## 2.2. Cara Kerja Penelitian

## 2.2.1. Esktraksi dan Fraksinasi.
Ekstraksi  dan  fraksinasi  dilakukan  di  Laboratorium Bioteknologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Sriwijaya. Sampel  benalu  jeruk  nipis  ( Dendrophtoe  pentandra ) dikeringkan  di  udara  terbuka  dan  tidak  terkena  cahaya matahari  langsung.  Kemudian  benalu  jeruk  nipis  di haluskan  dengan  blender  sehingga  didapat  simplisia benalu  jeruk  nipis. Simplisia  dari  benalu  jeruk  nipis ditimbang sebanyak 250 g, kemudian diekstraksi dengan metode maserasi selama 2x24 jam dalam etanol 96% [6]. Ekstrak  kental  dikeringkan  dengan hair  drayer sehingga didapatkan  ekstrak  kering.  Fraksinasi  dilakukan  dengan metode  FCC  (Fraksinasi  Cair-Cair)  dengan  pelarut  etil asetat  dan  etanol.  Ekstrak  kering  dilarutkan  ke  dalam etanol  dan  aquades  dengan  perbandingan  1:1  sebanyak 200 ml. Selanjutnya dimasukkan ke dalam corong pisah, dan  ditambahkan  200  mL  etil  asetat  sehingga  diperoleh fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  etanol  air.  Fraksi  etil  asetat dan fraksi etanol air diuapkan dengan rotary evaporator sampai didapatkan fraksi kental dan dikeringkan dengan hair drayer sehingga didapatkan fraksi kering [6].

## 2.2.2. Uji Fitokimia.
Uji  fitokimia  dilakukan  di  Laboratorium  Kimia Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas  Sriwijaya.  Identifikasi  flavonoid  dilakukan dengan  cara  ditambahkan  serbuk  Mg  dan  2  mL  HCl  2N pada  2  mL  larutan  ektrak.  Hasil  uji  positif  mengandung flavonoid  jika  terbentuk  warna  merah  atau  kuning. Identifikasi Alkaloid dilakukan dengan cara 3 mL larutan ekstrak  ditambahkan  dengan  1  mL  HCl  2N  dan  6  mL  air suling,  kemudian  dipanaskan  selama  2  menit, didinginkan  dan  disaring.  Filtrat  diperiksa  dengan pereaksi  Mayer.  Adanya  alkaloid  ditunjukkan  dengan terbentuknya  endapan  putih.  Identifikasi  saponin dilakukan  dengan  ditambahkan  aquades.  Kemudian dikocok  vertikal  selama  10  detik.  Hasil  uji  positif  jika
timbul  busa  stabil  selama  beberapa  menit.  Skrining fitokimia  tanin  dilakukan  dengan  cara  sebanyak  1  mL larutan ekstrak uji direaksikan dengan FeCl3 10%. Adanya tanin  ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna  biru  tua atau  hitam  kehijauan.  Skrining  fitokimia  terpenoid  dan steroid  dilakukan  dengan  cara  bahan  uji  dilarutkan dengan  kloroform,  setelah  itu  ditambahkan  dengan anhidrida  asam  asetat  sebanyak  0,5  mL.  Selanjutnya ditambahkan  2  mL  asam  sulfat  pekat  melalui  dinding tabung. Adanya triterpenoid ditandai dengan terbentuknya  cincin  kecoklatan  atau  violet  pada perbatasan  larutan,  sedangkan  adanya  steroid  ditandai dengan terbentuknya cincin biru kehijauan [7].

## 2.2.3. Uji Sitotoksik
Uji  efek  sitotoksik  dilakukan  di  Laboratorium Parasitologi  Fakultas  Kedokteran  Universitas  Gadjah Mada.  Sel  T47D  secara  rutin  tumbuh  dengan  media RPMI-1640 dilengkapi dengan 10% fetal calf serum dan 1%  penisilin/Streptomycin  dan  diinkubasi  pada  37°C suasana kelembaban 5% CO 2 di T75 (75 cm 2 ) tabung labu. Potensi  efek  pada  viabilitas  sel  diselidiki  menggunakan MTT  assay  sebagai  indikator  dari  sel-sel  aktif  secara metabolik.  Sel-sel  diencerkan  dalam  medium  kultur menjadi  konsentrasi  1×10 5 sel/mL  dan  dipipetkan  ke dalam 96-well  plate ,  dan  diinkubasi  pada  37 0 C  suasana kelembaban 5% CO 2 , selama 24 jam. Sel kemudian diberi perlakuan  dengan  ekstrak  etanol,  fraksi  etil  asetat  dan fraksi  etanol  air  daun Dendrophtoe  pentandra dengan konsentrasi  bertingkat  (2000;  1000;  500;  250;  125;  67,5 μg/mL) melalui pengenceran seri ganda. Sebagai kontrol positif  sel  diperlakukan  dengan  doxorubicin  dengan konsentrasi  bertingkat  (1;  0,5;  0,25;  0,125;  0,0625; 0,03125 μg/mL). Sel -sel juga diperlakukan dengan kultur media  (1%  DMSO)  digunakan  sebagai  kontrol  negatif. Setelah  24  jam  ekstrak,  fraksi  aktif  dan  paparan  obat, medium kultur dihapus dan ditambahkan 10 μl pereaksi MTT. Setelah inkubasi untuk 4 jam, MTT/media dihapus dan  ditambahkan  DMSO  (100  μl)  untuk  melarutkan kristal  formazan  dengan  SDS  10%.  Absorbansi  diukur dengan  ELISA  reader.  Seluruh  eksperimen  dilaksanakan secara  triplo.  Konsentrasi  zat  yang  diperlukan  untuk pertumbuhan  50%  penghambatan  (IC 50 )  diperkirakan sebagai  konsentrasi  yang  memberikan  50%  penurunan daya  serap  dibandingkan  dengan  kontrol  negatif  [8,  9]. Persentase dari sitotoksitas dihitung sebagai berikut:

## Prosentase sel hidup
= Absorbansi perlakuan –  Absorbansi kontrol media
Absorbansi kontrol sel –  Absorbansi kontrol media 𝑥100%
Nilai  IC 50 ditentukan  dengan  persamaan  linier  dan viabilitas  sel  dikonversi  menggunakan Microsoft  excel 2013.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## 3.1. Ekstraksi dan Fraksinasi
Simplisia  basah  seberat  750  g  dibuat  menjadi simplisia  kering,  didapat  seberat  330  g.  Hasil  ekstraksi etanol simplisia benalu jeruk nipis ( Dendropthoe petandra (L.) Miq), seberat 250 g diperoleh ekstrak etanol sebanyak 24,68  g  dalam  bentuk  pasta  dengan  persentase  ekstrak 9,872 %. Persentase rendemen ekstrak (9,872%) dengan
menggunakan pelarut etanol dengan 3 kali pengulangan lebih  banyak  dibandingkan  dengan  hasil  ekstrak  batang benalu  jeruk  ( Dendropthoe  pentandra) dari  penelitian Hanif dkk. [10] dengan persentase rendemen 2,11% dari 6 kali  pengulangan.  Persentase  berat  ekstrak  dipengaruhi oleh  besar-kecilnya  partikel  simplisia,  tingkat  solute jenis  pelarut  dalam  mengikat  bahan  bioaktif  ataupun waktu  perendaman  yang  terlalu  singkat.  Sesuai  dengan pendapat  Nirwana  [11]  dan  Wijaya dkk. [12]  yang menyatakan  bahwa  besar  kecilnya  nilai  persentase rendemem  menunjukkan  keefektifan  proses  ekstraksi. Efektivitas proses ekstrasi dipengaruhi oleh jenis pelarut yang  digunakan  sebagai  penyari,  ukuran  partikel simplisia,  metode  dan  lamanya  ekstrasi.  Perbandingan prosentase  tidak  mempengaruhi  uji  sitotoksik  tetapi hanya memperlihatkan keefektifan proses esktraksi atau fraksinasi.
Sebanyak  20,75  g  ekstrak  kental  benalu  jeruk  nipis ( Dendropthoe  petandra (L.)  Miq)  dipisahkan  untuk dilakukan fraksinasi dengan metode fraksinasi cair-cair (FCC)  menggunakan  pelarut  dengan  tingkat  kepolaran berbeda yaitu etil asetat (semi polar) dan etanol  (polar). Dari 20,75 g ekstrak etanol benalu jeruk nipis didapatkan 9,26  g  fraksi  etil  asetat  dan  8,39  g  fraksi  etanol  air. Perbedaan berat fraksi yang diperoleh disebabkan karena pelarut-pelarut  tersebut  mempunyai  kemampuan memisahkan senyawa berdasarkan kepolarannya. Sesuai dengan  pendapat  Pratiwi dkk. [13],  yang  menyatakan bahwa  senyawa-senyawa  yang  bersifat  non  polar  akan terikat dengan pelarut non polar, senyawa yang bersifat semi polar akan terikat dengan pelarut semi polar, begitu juga  senyawa  yang  bersifat  polar  akan  terikat  dengan pelarut polar.

## 3.2. Fitokimia
Skrining  fitokimia  adalah  sebuah  analisis  premier untuk menentukan kandungan metabolit sekunder pada tanaman. Kandungan fitokima yang ada dapat digunakan untuk  membuat  obat-obatan  baru.  Hasil  yang  didapat dari  skrining  fitokimia  pada  ekstrak  dan  fraksi-fraksi Dendropthoe petandra (L.) Miq. dapat dilihat pada table 1.
Tabel 1 . Hasil Uji Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol, Fraksi Etil Asetat dan Fraksi Etanol Air Dendropthoe petandra (L.) Miq Senyawa kimia
Ekstrak Etanol Fraksi etil asetat Fraksi etanol air Alkaloid - - - Steroid - - - Terpenoid + + - Tanin + + + Saponin + + + Flavonoid + + +
Hasil  skrining  fitokimia  pada  ekstrak  dan  fraksi benalu  jeruk  nipis  menunjukkan  senyawa  flavonoid, tanin,  dan  saponin  terdapat  pada  ekstrak  dan  semua fraksi.  Sedangkan  senyawa  alkaloid  dan  steroid  tidak terdapat  pada  ekstrak  dan  semua  fraksi.  Senyawa terpenoid  terdapat  pada  ekstrak  etanol  dan  fraksi  etil asetat.
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (3) (2019): 73 – 78
Hasil penelitian ini  tidak jauh berbeda dengan hasil penelitian lainnya. Pada penelitian Elsyana dkk. [4], hasil uji  kualitatif  kandungan  senyawa  fitokimia  daun  benalu cengkih  mengandung  flavonoid,  saponin,  tanin,  dan triterpenoid,  namun  tidak  mengandung  alkaloid.  Hanif dkk. [10]  menyatakan  bahwa  batang  benalu  jeruk mengandung  flavonoid  pada  ekstrak  (n-heksan,  etil asetat,  etanol  dan  air),  saponin  hanya  pada  ekstrak etanol,  serta  tanin  pada  ekstrak  etil  asetat  dan  ekstrak etanol.  Pada  penelitian  Nirwana  [11],  disebutkan  bahwa ekstrak  benalu  kersen  mengandung  flavonoid,  alkaloid, tanin,  terpenoid,  dan  saponin.  Hal  ini  memperkuat pernyataan Ma’at  [14] dan  Marvibaigi dkk. [15]  bahwa kandungan fitokimia benalu bervariasi bergantung pada jenis tanaman inang. Selain itu, pelarut yang digunakan untuk  ekstraksi  akan  menentukan  kandungan  fitokimia ekstrak benalu [16].

## 3.3. Uji Sitotoksik
Hasil  uji  sitotoksik  menunjukkan  bawah  ekstrak, fraksi  etil  asetat  dan  fraksi  etanol  air  memberikan pengaruh  toksik  terhadap  sel  kanker  T47D  (Gambar  1). Setelah diberikan perlakuan, sel  tersebut ada yang tetap hidup (berbentuk lonjong) dan ada yang mati (berbentuk bulat).  Berdasarkan  nilai  persentase  viabilitas,  dengan menggunakan  perhitungan  persamaan  linier microsoft excel dapat ditentukan besarnya nilai IC 50 untuk tiap-tiap kelompok perlakuan. Korelasi antara konsentrasi ekstrak yang  digunakan  dengan  persentase  kematian  sel  dapat dilihat dari koefiesien determinasi (r) berganda  di mana nilai koefisiennya antara 0≤ 1. Nilai r yang semakin besar mendekati  1  merupakan  indikator  yang  menunjukkan semakin kuatnya kemampuan variabel independen yang dalam hal ini adalah ekstrak etanol, fraksi etil asetat dan fraksi  etanol  air  dari  benalu  jeruk  nipis  dalam mempengaruhi kondisi variabel dependen (kematian sel T47D).
Diketahui  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  sebesar  417,506 μg/mL,  fraksi  etil  asetat  sebesar  233,617  μg/mL,  dan fraksi etanol air sebesar 2748,357 μg/mL. Nilai IC 50 fraksi etil  asetat  paling  kecil  dibandingkan  kelompok  ekstrak etanol  dan  fraksi  etanol  air.  Nilai  IC 50 esktrak  dan  fraksi dikategorikan  lemah-sedang  dan  sangat  jauh  bila dibandingkan dengan doxorubicin (sangat kuat) (tabel 2).
Efek  kematian  yang  terjadi  pada  sel  T47D kemungkinan  disebabkan  oleh  kandungan  senyawa metabolit  sekunder  seperti  flavonoid  yang  terkandung ekstrak  dan  fraksi-fraksi  benalu  jeruk  nipis  [17].  Fitrilia dkk. [18] menyatakan kandungan utama dari D. pentandra, flavonoid, termasuk senyawa fenolik alam yang potensial sebagai antioksidan dan mempunyai bioaktivitas sebagai obat. Ide [19] menjelaskan bahwa monomer flavanoid dan dimer  dari  flavonoid  yang  merupakan  oligomer  kecil merupakan  penyebab  flavonoid  mampu  berdifusi melewati  membran  dan  masuk  ke  dalam  sel.  Menurut Ikawati dkk. [20] flavonoid (kuersetin) dapat menghambat  pertumbuhan  sel  dengan  cara  meregulasi siklus  sel.  Selain  itu,  saponin  telah  diketahui  dapat menghambat  pertumbuhan  sel  dengan  cara  memicu  G1 cell cycle arrest [21].
Gambar 1 . Morfologi sel T47D yang telah diberikan reagen MTT. Sel yang hidup berwarna ungu kebiruan dan berbentuk lonjong berserabut formazan (panah hijau), sedangkan sel yang mati berbentuk bulat dan tidak terdapat serabut formazan (panah merah)
Aktivitas  sitotoksik  fraksi  etanol  air  benalu  jeruk nipis  terhadap  sel  T47D  tidak  mengindikasikan  adanya toksisitas  terhadap  sel  T47D  karena  memiliki  nilai  IC 50 lebih  besar  dari  1000  μg/mL,  sampel  tersebut diasumsikan  tidak  berpotensi  memiliki  aktivitas antikanker. Sedangkan untuk aktivitas sitotoksik ekstrak etanol  dan  fraksi  etil  asetat  dari  benalu  jeruk  nipis mengindikasikan  adanya  toksisitas  terhadap  sel  T47D kerena  memiliki  nilai  IC 50 kurang  dari  500  μg/mL.  Nilai IC 50 dari sampel tersebut  termasuk dikatogorikan dalam sitotoksik  sedang  berdasarkan  tingkat  sitotoksik  dalam penelitian. Nilai IC 50 dikatakan sangan kuat sitotoksiknya jika < 10 μg/mL, sitotoksik kuat jika IC 50 di antara 10-100 μg/mL, sitotoksik sedang jika nilai IC 50 di antara 100-500 μg/mL [21,  22].  Perbedaan  tingkat  sitotoksik  ekstrak etanol, fraksi etil asetat dan fraksi etanol air D. pentandra dapat disebabkan perbedaan kandungan dan konsentrasi senyawa  aktif  yang  terdapat  dalam  ektrak  atau  fraksi tersebut [6].
Tabel 2 . Hasil Uji Sitotoksik Ekstrak dan Fraksi
Dendropthoe petandra Bahan Uji Konsent rasi Rata-rata absorbansi % sel hidup IC 50 (µg/mL)
(µg/mL)
Ekstrak
1000 0,139 5,274
417,506 500 0,545 53,207 250 0,775 80,401 125 0,872 91,814 62,5 0,926 98,268 Fraksi Etil Asetat 1000 0,123 3,463 233,617
500 0,232 16,332 250 0,475 44,982 125 0,682 69,421 62,5 0,881 92,955 Fraksi Etanol Air 1000 0,820
85,714
2748,357
500 0,939 99,764 250 1,009 107,989 125 0,991 105,864 62,5 0,960 102,204 Doxorubicin 0,5 0,116 2,558
0,074 0,25 0,114 2,322 0,125 0,237 16,844 0,0625 0,639 64,384 0,03125 0,785 81,621
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (3) (2019): 73 – 78
Aktivitas sitotoksik ekstrak etanol pada konsentrasi 417,5 μg/mL dan fraksi etil asetat pada konsentrasi 233,6 μg/mL  mampu  menghambat  50%  pertumbuhan  sel kanker  T47D.  Nilai  IC 50 ekstrak  etanol  dan  fraksi  etil asetat  di  bawah  500  μg/mL  diatas  menunjukkan  bahwa benalu  jeruk  nipis  memiliki  sifat  toksik  terhadap  sel kanker T47D.  Perbedaan  sel  lestari  yang  digunakan  dan jenis benalu dari inang yang berbeda menunjukkan hasil yang  berbeda.  Penelitian  Elsyana dkk. [4]  yang  menilai aktivitas sitotoksik ekstrak daun benalu cengkih terhadap larva  udang  menunjukkan  fraksi  etil  asetat  pada konsentrasi 649,12 μg/mL  mampu mematikan setengah populasi  larva  udang.  Hal  ini  mengindikasikan  adanya toksisitas  fraksi  tersebut  pada  larva  udang  sehingga diduga  berpotensi  memiliki  aktivitas  antikanker. Senyawa  yang  diduga  berperan  memiliki  aktivitas sitotoksik  dalam  penelitian  ini  adalah  flavonoid,  tanin dan triterpenoid.

## 4. Kesimpulan
Dendropthoe pentandra (L.) Miq memiliki kandungan terpenoid,  tanin,  saponin  dan  flavonoid.  Ekstrak  etanol dan  fraksi  etil  asetat Dendropthoe  pentandra (L.)  Miq memiliki  aktivitas  sitotoksik  pada  sel  kanker  T47D dengan  kekuatan  sedang,  tetapi  fraksi  etanol  air  tidak memiliki aktivitas sitotoksik pada sel kanker T47D.

## Ucapan Terima Kasih
Terima kasih kepada dr. Triwani, M.Kes dan Srinita, S.Si,  M.Si  yang  telah  memberikan  sumbang  saran,  ilmu pengetahuan  dan  pengalaman  sehingga  penelitian  ini dapat dilakukan dengan baik.

## Daftar Pustaka
[1]  Soheil  Zorofchian  Moghadamtousi,  Muhamad  Noor Alfarizal Kamarudin, Chim Kei Chan, Bey Hing Goh, Habsah Abdul Kadir, Phytochemistry and Biology of Loranthus  parasiticus  Merr,  a  Commonly  Used Herbal  Medicine, The  American  Journal  of  Chinese Medicine , 42, 01, (2014) 23-35 https://doi.org/10.1142/S0192415X14500025
[2]  Kementerian  Kesehatan  Republik  Indonesia,  Stop Kanker, in:  InfoDATIN, Jakarta, 2015.
[3]  Agustina  Tri  Endharti,  Adisti  Wulandari,  Anik Listyana,  Eviana  Norahmawati,  Sofy  Permana, Dendrophthoe pentandra (L.) Miq extract effectively inhibits inflammation, proliferation and induces p53 expression  on  colitis-associated  colon  cancer, BMC Complementary and Alternative Medicine , 16, 1, (2016)
374 https://doi.org/10.1186/s12906-016-1345-0
[4]  Vida  Elsyana,  Maria  Bintang,  Bambang  Pontjo Priosoeryanto,  Cytotoxicity  and  Antiproliferative Activity  Assay  of  Clove  Mistletoe  (Dendrophthoe pentandra  (L.)  Miq.)  Leaves  Extracts, Advances  in Pharmacological Sciences , 2016, (2016) 6 https://doi.org/10.1155/2016/3242698
[5]  Hermansyah  Amir,  Bambang  Gonggo  Murcitro,  Uji Microtetrazolium  (Mtt)  Ekstrak  Metanol  Daun Phaleria  macrocarpa (Scheff.)  Boerl  terhadap  Sel Kanker Payudara  Mcf-7, ALOTROP  Jurnal  Pendidikan dan Ilmu Kimia , 1, 1, (2017) 27-32
[6]  Azis  Saifudin,  Senyawa  Alam  Metabolit  Sekunder Teori,  Konsep,  dan  Teknik  Pemurnian,  Deepublish, Yogyakarta, 2014.
[7]  P.D.  Padmasari,  K.W.  Astuti,  N.K.  Warditiani, Skrining  Fitokimia  Ekstrak  Etanol  70%  Rimpang Bangle  (Zingiber  purpureum  Roxb.), Jurnal  Farmasi Udayana , 2, 4, (2013) 1-4
[8]  Maisarah Abdul Mutalib, Faisal Ali, Fauziah Othman, Rajesh Ramasamy, Asmah Rahmat, Phenolics profile and  anti-proliferative  activity  of  Cyphomandra Betacea  fruit  in  breast  and  liver  cancer  cells, SpringerPlus , 5, 1, (2016) 2105
https://doi.org/10.1186/s40064-016-3777-x
[9]  Lau Shin Yee, Fauzi, Nurul Fatihah Mohd, Nik Nurul Najihah, Nik Mat Daud, Mohd Dasuki Sulain, Study of Dendrophthoe  Pentandra  Ethyl  Acetate  Extract  as Potential  Anticancer  Candidate  on  Safety  and Toxicity Aspects,
Journal of Analytical & Pharmaceutical  Research ,  6,  1,  (2017)  00167 http://doi.org/10.15406/japlr.2017.06.00167
[10] Rizky  Maulida  Amalia  Hanif,  Rudi  Kartika, Partomuan  Simanjuntak,  Isolasi  dan  Identifikasi Senyawa Kimia dari Ekstrak n-heksan Batang Benalu Tanaman  Jeruk  (Dendrophtoe  pentandra  (L.)  Miq.), Jurnal Kimia Mulawarman , 14, 1, (2016) 36-41
[11]  Ardy Prian Nirwana, Aktivitas Antiproliferasi Ekstrak Etanol Daun Benalu Kersen ( Dendrophtoe pentandra L. Miq.)  terhadap  Kultur  Sel  Kanker  Nasofaring  (Raji Cell Line), Study program of Bioscience, Universitas Sebelas Maret,
[12] Heri  Wijaya,  Novitasari  Novitasari,  Siti  Jubaidah, Perbandingan Metode Ekstraksi Terhadap Rendemen Ekstrak Daun Rambai Laut (Sonneratia Caseolaris L. Engl), Jurnal Ilmiah Manuntung , 4, 1, (2018) 79-83
[13] Liza  Pratiwi,  Achmad  Fudholi,  Ronny  Martien, Suwidjiyo  Pramono,  Ethanol  Extract,  Ethyl  Acetate Extract,  Ethyl  Acetate  Fraction,  and  n-Heksan Fraction Mangosteen Peels (Garcinia mangostana L.) As  Source  of  Bioactive  Substance  Free-Radical Scavengers, JPSCR :  Journal of Pharmaceutical Science and  Clinical  Research ,  1,  1,  (2016)  71-82 http://doi.org/10.20961/jpscr.v1i2.1936
[14] Suprapto  Ma’at,  Tanaman  Obat  untuk  Pengobatan Kanker, Jurnal  Bahan  Alam  Indonesia ,  2,  4,  (2003) 146-150
[15] Mohsen  Marvibaigi,  Eko  Supriyanto,  Neda  Amini, Fadzilah  Adibah  Abdul  Majid,  Saravana  Kumar Jaganathan,  Preclinical  and  Clinical  Effects  of Mistletoe  against  Breast  Cancer, BioMed  Research International , 2014, (2014) 15 https://doi.org/10.1155/2014/785479 [16] Nina Artanti, Taufik Firmansyah, Akhmad Darmawan,  Bioactivities  evaluation  of  Indonesian mistletoes  (Dendrophthoe  pentandra  (L.)  Miq.) leaves  extracts, Journal  of  Applied  Pharmaceutical Science , 2, 1, (2012) 24
[17] Palak  Mayur  Shah,  Vishnu  V  Priya,  R  Gayathri, Quercetin-a flavonoid: a systematic review, Journal of Pharmaceutical Sciences and Research , 8, 8, (2016) 878
[18] Tiana  Fitrilia,  Maria  Bintang,  Mega  Safithri, Phytochemical screening and antioxidant activity of clove  mistletoe  leaf  extracts  (Dendrophthoe pentandra  (L.)  Miq), IOSR  Journal  of  Pharmacy ,  5, 8,
(2015) 13-18
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 22 (3) (2019): 73 – 78
[19] Pangkalan  Ide,  Dark  Chocolate  Healing,  Elex  Media Komputindo, 2013.
[20] Muthi  Ikawati,  Andy  Wibowo,  Navista  Sri  Octa  U, Rosa  Adelina,  Pemanfaatan  Benalu  sebagai  Agen Antikanker, in: International Seminar of Indonesia – Malaysia Update 2008, Yogyakarta, Indonesia, 2008.
[21] Maya Fitria, DB Septhea, AHM Ikawati, E Meiyanto, Ekstrak  Etanolik  Herba  Ciplukan  (Physalis  angulata L.)  Berefek  Sitotoksik  dan  Menginduksi  Apoptosis pada  Sel  kanker  Payudara  MCF-7, Bionatura ,  13,  2,
(2011) 101-107
[22] Dita Widia  Ningrum, Dewi Kusrini, Enny Fachriyah, Uji  Aktivitas  Antioksidan  Senyawa  Flavonoid  dari Ekstrak  Etanol  Daun  Johar  (Senna  siamea  Lamk), Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi , 20, 3, (2017) 123-129 https://doi.org/10.14710/jksa.20.3.123-129