Jurnal Pharmascience, Vol. 9, No.2, Oktober 2022, hal: 319-326 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience Research Article

## Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Bunga Ceguk (Combretum indicum L.) Tipe Membulat pada Beberapa Wilayah di Kalimantan Selatan
Amalia Khairunnisa*, Samsul Hadi, Sri Oktaviana Sari
Program Studi Farmasi Fakultas MIPA Universitas Lambung Mangkurat, Banjarbaru, Kalimantan Selatan, Indonesia Email: amalia.khairunnisa@ulm.ac.id

## ABSTRAK
Tanaman ceguk (Combretum indicum L.) memiliki 2 variasi yaitu tipe membulat dan tipe memanjang dan berpotensi sebagai antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan bunga ceguk tipe membulat pada beberapa wilayah di Kalimantan  Selatan  yakni  di  Kota  Banjarbaru,  Kabupaten  Banjar  dan  Kabupaten Kotabaru.  Penentuan  aktivitas  antioksidan  baik  secara  kualitatif  maupun  kuantitatif dilakukan  dengan  menggunakan  KLT  dan  Spektrofotometer  UV-Vis.  Ekstrak  etanol bunga  C.  indicum  tipe  membulat  dari  Kota  Banjarbaru,  Kabupaten  Banjar,  dan Kabupaten  Kotabaru  secara  kualitatif  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  ditandai dengan  adanya  bercak  kuning  dengan  latar  belakang  ungu  pada  plat  KLT  setelah penyemprotan  reagen  DPPH.  Adapun  nilai  IC 50 ekstrak  etanol  bunga  C.  indicum  tipe membulat pada Kota Banjarbaru, Kabupaten Banjar, dan Kabupaten Kotabaru masing- masing sebesar 16,358 ppm, 28,445 ppm, dan 20,868 ppm dengan kategori sangat kuat. Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  bunga  C.  indicum  tipe  membulat  memiliki  aktivitas antioksidan tertinggi pada wilayah  Kota Banjarbaru.
Kata Kunci : Combretum indicum L, Bunga Ceguk, Ekstrak, Antioksidan

## ABSTRACT
Combretum indicum L. has 2 types, rounded and elongated , as an antioxidant activity. This study aims to determine the antioxidant activity of round-type flowers in several  areas  in  South  Kalimantan,  such  as  in  Banjarbaru  City,  Banjar  Regency  and Kotabaru. Determination of antioxidant activities, qualitatively and quantitatively, was carried out using TLC and UV-Vis Spectrophotometer. The qualitative test of ethanolic extract of round type  C. indicum flowers from Banjarbaru City, Banjar Regency, and Kotabaru had antioxidant activity which was indicated by the presence of yellow spots on a purple background on the TLC plate after spraying DPPH reagent. The IC 50 values
for the ethanolic extract of C. indicum flower type in Banjarbaru City, Banjar Regency, and Kotabaru were 16.358 ppm, 28.445 ppm, and 20.868 ppm with a very strong category antioxidant. Based on the results of this study, the round type of C. indicum flowers had the highest antioxidant activity in the Banjarbaru City area.
Keywords: Combretum indicum L, Hiccup Flower, Extract, Antioxidant

## I. PENDAHULUAN
Tanaman  ceguk  atau Combretum indicum L.  merupakan  salah  satu  tanaman yang memiliki khasiat sebagai antioksidan. Tanaman  ini  biasa  digunakan  sebagai antihiperlipidemia,  antipiretik,  antibakteri, imunomodulator  serta  antioksidan  (Valeri et al ., 2015). Tanaman C. indicum memiliki 2  variasi  yaitu  tipe  membulat  dan  tipe memanjang.  Bunga  pada  tanaman  tipe membulat  memiliki  kelopak  bunga  yang lebih  besar  dibandingkan  dengan  tanaman tipe  memanjang  (Gentallan et  al .,  2021).
Tanaman ini mengandung beberapa senyawa  kimia  yaitu  alkaloid,  saponin, tanin,  flavonoid  dan  senyawa  fenolik (Yadav et al ., 2011). Penelitian sebelumnya yang  dilakukan  oleh  Shah et  al (2019) menyebutkan  bahwa  ekstrak  bunga C. indicum tipe membulat memiliki kemampuan  antioksidan  sebesar  0,6842 mmol.  Penelitian  lain  juga  menunjukkan bahwa ekstrak bunga C.  indicum memiliki aktivitas antioksidan pada metode aktivitas penangkal  radikal  DPPH  diperoleh  nilai IC 50 sebesar  40,92  µg/mL,  pada  metode aktivitas  penangkal  radikal  superoksida diperoleh  nilai  IC 50 sebesar  38,76  µg/mL dan pada metode aktivitas penangkal kation
radikal  (ABTS+)  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar  54,22  µg/mL  (Kiruthika  & Sornaraj, 2014).
Tanaman C. indicum banyak dijumpai di berbagai daerah di Kalimantan Selatan.  Berdasarkan  Diskominfo  Provinsi Kalimantan  Selatan,  secara  geografis wilayah  Kalimantan  Selatan  terdiri  atas kawasan dataran rendah di bagian barat dan pantai timur serta kawasan dataran tinggi di bagian  tengah.  Kawasan  dataran  rendah berupa  tanah  biasa,  lahan  gambut  hingga rawa-rawa,  sedangkan  kawasan  dataran tinggi berupa pegunungan dan hutan tropis (Diskominfo , 2021).  Pada  penelitian  ini dilakukan analisis kualitatif antioksidan dan aktivitas  antioksidan  pada  bunga C. indicum tipe  membulat  di  beberapa  lokasi dengan  berbagai  perbedaan  kondisi  yakni Kota Banjarbaru (dataran rendah),
Kabupaten  Banjar  (lahan  gambut)  dan Kotabaru (dataran tinggi) sehingga dengan adanya perbedaan kondisi wilayah ini perlu dilakukan  analisis  penentuan  aktivitas antioksidan  pada  daerah  yang  paling optimal.

## II. METODE

## A. Alat dan Bahan Penelitian
Alat-alat gelas ( Pyrex ® dan Iwaki ® ), aluminium  foil,  ayakan  mesh  35,  bejana maserator,  blender  ( Philips ® ),  batang pengaduk,  cawan  porselen, chamber , corong kaca, kertas saring, lampu UV 254 nm dan 366 nm, neraca analitik ( Ohaus ® ), oven  ( Finco  Inc  OV  50 ® ),  labu  ukur ( Iwaki ® ),  lemari  pengering  ( Merck ® ), penggaris,  pinset,  pipa  kapiler,  pipet  ukur, plat  KLT,  propipet,  rak  tabung  reaksi, spektrofotometri  UV-Vis  ( PerkinElme r ® ), tabung  reaksi,  vortex  ( Lab  Companion ® ) dan waterbath ( Memmert ® ).  Bahan  yang digunakan  antara  lain  sampel  bunga C. indicum tipe  membulat,  aquadest,  etanol 96%  teknis,  metanol  p.a,  H 2 SO 4 10%,  etil asetat, n-heksana, pereaksi DPPH ( Sigma ® ),  plat  silica  gel  F254  dan  standar kuersetin ( Sigma ® ).

## B. Determinasi Tanaman
Determinasi  tanaman  dilakukan  di Laboratorium  Dasar  FMIPA,  Universitas Lambung  Mangkurat,  Banjarbaru.  Hasil determinasi dengan nomor 032/LB.LABDASAR/II/2022  menyatakan bahwa tanaman ceguk yang diuji merupakan spesies Combretum indicum L. dengan tipe bunga membulat.

## C. Pembuatan Ekstrak
Simplisia  yang  telah  diserbukkan diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan  larutan  penyari  etanol  96%. Serbuk  simplisia  ditimbang  sebanyak  50 gram dan dimasukkan ke dalam maserator. Pelarut etanol 96%  ditambahkan ke  dalam maserator  hingga  serbuk  simplisia  bunga terendam  sekitar  2-3  jari.  Pengadukan dilakukan  tiap  8  jam  pada  suhu  kamar. Ekstraksi  dilakukan  selama  3  x  24  jam dengan pergantian pelarut yang sama setiap 1 x 24 jam. Ekstrak cair bunga C. indicum disaring menggunakan kertas saring Whatman.  Ekstrak  cair  sampel  setelah dilakukan penyaringan, diuapkan menggunakan waterbath dengan suhu 50ºC hingga didapatkan bobot tetap dan dilakukan  perhitungan  %  rendemen  dari ekstrak yang diperoleh (Fauzi et al ., 2017).

## D. Analisis kualitatif antioksidan dengan metode kromatografi lapis tipis
Uji  ini  dilakukan  secara  kualitatif dengan melarutkan sebanyak 5 mg ekstrak kental  dengan  5  mL  etanol.  Sampel ditotolkan  pada  plat  KLT  yang  sudah diaktifkan  menggunakan  oven  pada  suhu 105°C  selama  15  menit.  Eluen  yang digunakan  pada  penelitian  ini  terbuat  dari campuran  pelarut n -heksan  :  etil  asetat dengan  berbagai  perbandingan  yaitu  7:3. Masing-masing  plat  KLT  yang  berisi
totolan  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam chamber hingga  terelusi.  Plat  KLT  yang telah terelusi diamati dibawah sinar UV 254 nm  dan  366  nm.  Plat  KLT  pertama disemprot dengan larutan H 2 SO 4 10% agar noda menjadi tampak oleh mata (Khopkar, 1990).  Plat  KLT  kedua  disemprotkan dengan  reagen  DPPH.  Hasil  positif mengandung antioksidan apabila membentuk  bercak  warna  kuning  dengan latar belakang berwarna ungu dalam waktu tidak  lebih  dari  30  menit  (Sutomo et  al ., 2016).  Noda  diamati  dan  diukur  jaraknya menggunakan  penggaris  (Roosevelt  & Ghari, 2018).

## E. Analisis kuantitatif aktivitas antioksidan dengan metode DPPH
Aktivitas antioksidan ekstrak etanol
C.  indicum tipe  membulat  ditentukan dengan  cara  melarutkan  10  mg  ekstrak kental  dalam  10  mL  metanol  p.a  hingga diperoleh larutan  dengan  konsentrasi  1000 ppm  dan  diencerkan  menjadi  100  ppm. Larutan  ekstrak  100  ppm  tersebut  dibuat larutan  seri  kadar  dengan  konsentrasi  10, 20, 30, 40, dan 50 ppm dengan metanol p.a dalam labu ukur 10 Ml hingga tanda batas. Masing-masing  larutan  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi  sebanyak  4  mL  dan ditambahkan  dengan  1  mL  larutan  DPPH 0,4 mM. Larutan didiamkan di tempat gelap selama  30  menit.  Selanjutnya  dilakukan pengukuran  absorbansi  pada  panjang
gelombang  maksimum  dan  dilakukan perhitungan IC 50 (Mardiah et al ., 2017).

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstrak  etanol  bunga C.  indicum tipe  membulat  pada  ketiga  wilayah  di Kota  Banjarbaru,  Kabupaten  Banjar,  dan Kabupaten  Kotabaru  memiliki  aktivitas antioksidan  yang  ditandai  adanya  bercak berwarna  kuning    dengan  latar  belakang ungu  pada  KLT  yang  dapat  dilihat  pada Gambar  1.  Aktivitas  antioksidan  Ekstrak etanol  bunga C.  indicum tipe  membulat sangat  kuat  dengan  nilai  IC 50 berturut- turut  sebesar  16,358  ppm,  28,445  ppm, dan  20,868  ppm  dimana  lokasi  yang memiliki  aktivitas  antioksidan  tertinggi adalah  dari  Kota  Banjarbaru  (Tabel  I,  II, III dan IV).
Adanya perbedaan aktivitas antioksidan  pada  masing-masing  sampel dapat dikarenakan kondisi tempat tumbuh yang berbeda-beda. Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh Rakhmadevi et  al .,  (2021)  bahwa ketinggian  wilayah  dapat  mempengaruhi aktivitas  antioksidan  suatu  tanaman. Dataran  rendah  memiliki  kondisi  yang optimal  dalam  proses  produksi  senyawa fitokimia  dan  antioksidan  karena  dataran rendah  cenderung  mempunyai  intensitas cahaya  dengan  suhu  lingkungan  yang lebih tinggi dibandingkan dengan dataran sedang  hingga  tinggi  sedangkan  daerah
gambut pada umumnya memiliki pH asam antara  3-4  dan  tingkat  kesuburan  yang rendah  karena  kandungan  unsur  haranya yang rendah sehingga berpengaruh terhadap  kandungan  metabolit  tanaman baik  primer  maupun  sekunder,  selain  itu
tanaman C.  indicum merupakan  tanaman yang  menyukai  daerah  yang  cenderung kering  dan  memiliki  intensitas  cahaya tinggi (Lestari et al ., 2021; Hartatik et al ., 2005; Brown & Knox, 2013).
Lampu UV 254 nm
Rf = 0,36 0,78 Lampu UV 366 nm H 2 SO 4 10% Rf = 0,36 0,45 DPPH 0,4 Mm Rf = 0,36 0,56 0,78 Keterangan: Ekstrak etanol bunga C. indicum (a) Banjarbaru
(b) Banjar
(c) Kotabaru
Gambar  1. Kromatogram  Ekstrak  Etanol  Bunga C.  indicum Tipe  Membulat  Perbandingan Eluen (7:3) v/v
Tabel I . Hasil IC 50 Larutan Pembanding Kuersetin
Konsentrasi (ppm)
x̄ Persen Inhibisi (%) x̄ IC 50 ± SD RSD (%) 1 18,007
4,761
±
0,006 0,124
2 22,673 4 39,067 6 61,373 8 82,233
Tabel II. Hasil 1C 50 Ekstrak Etanol Bunga C. indicum Tipe Membulat Kota Banjarbaru Konsentrasi (ppm)
x̄ Persen Inhibisi (%) x̄ IC 50 ± SD RSD (%)
5
29,947 16,358 ±  0,206 1,256 10 43,177 20 51,072 30 75,193 40 89,412 a   b   c a   b   c a   b   c a   b   c
Tabel III. Hasil 1C 50 Ekstrak Etanol Bunga C. indicum Tipe Membulat Kabupaten Kotabaru Konsentrasi (ppm)
x̄ Persen Inhibisi (%) x̄ IC 50 ± SD RSD (%)
5 10,201
28,445 ± 0,069 0,242
10 20,801
20 38,554 30 49,286 40 70,101
Tabel IV . Hasil 1C 50 Ekstrak Etanol Bunga C. indicum Tipe Membulat Kabupaten Banjar Konsentrasi (ppm)
x̄ Persen Inhibisi (%) x̄ IC 50 ± SD RSD (%)
5
22,934 20,868 ± 0,044 0,209 10 32,773 20 51,587 30 64,998 40 78,752
Hal  ini  sesuai  dengan  hasil  yang didapatkan yaitu sampel Kota Banjarbaru yang  merupakan  daerah  dataran  rendah memiliki aktivitas antioksidan yang lebih besar dibandingkan dengan sampel Kabupaten  Kotabaru  yang  merupakan dataran  rendah  dan  Kabupaten  Banjar yang merupakan daerah gambut.

## IV. KESIMPULAN
Berdasarkan analisis kualitatif menggunakan  metode  KLT    dan  analisis kuantitatif  menggunakan  metode  DPPH, ekstrak  etanol  bunga C.  indicum tipe membulat  pada  ketiga  wilayah  di  Kota Banjarbaru,  Kabupaten  Banjar,  dan
Kabupaten  Kotabaru  memiliki  aktivitas antioksidan. Aktivitas antioksidan termasuk  kategori  sangat  kuat  dengan nilai  IC 50 berturut-turut  sebesar  16,358 ppm,  28,445  ppm,  dan  20,868  ppm dimana  lokasi  yang  memiliki  aktivitas antioksidan  tertinggi  adalah  dari  Kota Banjarbaru.

## KONFLIK KEPENTINGAN
Seluruh penulis menyatakan bahwa tidak  ada  konflik  kepentingan  dalam penelitian ini.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Terimakasih  kepada  Universitas Lambung Mangkurat  yang  teleh  mendanai penelitian ini melalui hibah dana Penelitian
Dosen Wajib Meneliti (PDWM
No.458/UN8/PG/2022).

## DAFTAR PUSTAKA
Valeri,  S.,  L.  Soegianto  &  S.  Wijaya. (2015).  Perbandingan  Antibakteri dari  Ekstrak  Etanol  dan  Fraksi Ekstrak  Etanol  Tanaman  Ceguk ( Quisqualis  indica L.)  Terhadap Staphylococcus aureus dan
Escherichia coli . Journal of Pharmaceutical Science and Pharmacy Practice . 2(2) : 37-40. Gentallan, R. P., M. C. B. Bartolome, R. D. Cejalvo,  E.  B.  S.  Timog,  N.  C. Altoveros,  T.  H.  Borromeo  &  L.  E. Endonela.  (2021).  Morphological variations in Combretum indicum (L.) DeFilipps from the Philippines. Genet Resour Crop Evol . 68(1) : 451–456. Yadav, Y., P. K. Mohanty & S. B. Kasture. (2011).  Anti-Inflammatory  Activity of Hydroalcoholic Extract of Quisqualis  indica Linn.  Flower  in Rats. International Journal of
Pharmacy & Life Sciences . 2(8) : 977- 981.
Kiruthika,  A  &  R.  Sornaraj.  (2014).
Assessment  of  Antioxidant  Property Of  Quisqualis  Indica. Asian  Journal of Pharmaceutical Science & Technology . 4(1) : 34-36.
Fauzi, N. P., Sulistiyaningsih & D. Runadi. (2017).  Uji  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Etanol  dan  Fraksi  Daun Jawer  Kotok  (Coleus  artopurpureus
(L.) Benth.) terhadap Bakteri
Propionibacterium acnes ATTC 1223 dan Staphylococcus epidermidis ATTC  12228. Farmaka . 15(3) :  45- 55.
Roosevelt, A & A. L. G. I. S. Ghari. (2018).
Identifikasi  Senyawa  Kimia  Daun Bidara  ( Ziziphusmauritiana Lam) Dari  Kabupaten  Timor  Tengah
Selatan Provinsi NTT Secara Kromatografi Lapis Tipis Dan Kromatografi Kolom. Jurnal Farmasi Sandi Karsa . 4(7) : 5-10. Rakhmadevi,  A.  G.,  M.  ‘Azizah  &  A.  M.
Handayani. (2021). Karakteristik Kimiawi  dan  Aktivitas  Antioksidan Daun  Kersen  ( Muntingia  calabura ) pada  Ketinggian  Wilayah  yang Berbeda. Jurnal Agroteknologi . 15(1) : 34-39.
Lestari,  S.,  R.  D.  Aryani  &  D.  Palupi. (2021). Pengaruh Ketinggian Tempat Tumbuh
Terhadap  Kandungan  Fitokimia  dan Antioksidan  Ekstrak  Akar  Sawi Langit ( Vernonia cinerea L.).
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology. 5(2) : 84-93.
Brown,  S.  P  &  G.  W.  Knox.  (2013).
Flowering Vines of Florida . Institute of  Food  and  Agricultural  Sciences University of Florida, USA.
Ćujić,  N.,  K.  Savikin,  T.  Jankovic,  D.
Pljevljakusic  &  G.  Zdunic.  (2016). Optimization of Polyphenols
Extraction  From  Dried  Chokeberry Using  Maceration  As  Traditional Technique. Food  Chemistry 194(1) : 135–142.
Hidayah,  M.  T.,  P.  Apridamayanti  &  R.
Sari. (2020). Penentuan profil kromatografi  lapis  tipis  teh  daun senggani ( Melastoma malabathricum L.). Jurnal Cerebellum . 6(1) :  1-5.
Jayanudin,  A.  Z.  Lestari  &  F.  Nurbayanti.
(2014).  Pengaruh  Suhu  dan  Rasio Pelarut Ekstraksi
Terhadap
Rendemen  dan  Viskositas  Natrium Alginat  dari  Rumput  Laut  Cokelat ( Sargassum sp ). Jurnal  Integrasi Proses . 5(1) : 51-55. Kemenkes RI. (2014). Farmakope Indonesia Edisi  V.  Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta.
Maesaroh,  K.,  D. Kurnia & J.  A. Anshori.
(2018).  Perbandingan  Metode  Uji Aktivitas  Antioksidan  DPPH,  FRAP dan  FIC  Terhadap  Asam  Askorbat, Asam  Galat  dan  Kuersetin. Chimica et Natura Acta . 6(2) : 93-100. Mahajan,  C.  P  &  A.  N.  Aher.  (2017).  A
Review on Ethnobotanical,
Phytochemical  and  Pharmacological
activities  of Quisqualis  indica Linn. Research Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry . 9(1) : 47-52. Mardiah,  B.,  C.  Muluyanto.,  A.  Amelia.,
Lisnawati.,  D,  Anggraeni  &  D.
Rahmawaty. (2017). Penentuan Aktivitas  Antioksidan  dari  Ekstrak Kulit Bawang Merah ( Allium ascolicum L.) dengan Metode DPPH. Jurnal  Pharmascience . 4(2) :  147- 154.