Accredited by Ministry of Research, Technology                                 DOI: https://doi.org/10.35799/jis.v22i1.38954 and Higher Education No: 28/E/KPT/2019                Available online at https://ejournal.unsrat.ac.id/index.php/jis
Skrining Fitokimia dan Uji Antibakteri Masker Peel-Off Ekstrak Etanol Daun Kalu Burung ( Barleria prionitis L.)
Meriam G.G. Wowor 1) , Josua Tampara 1) , Snigid P. Saogo 1) , Edi Suryanto 1) , Lidya I. Momuat 1*)
1) Program Studi Kimia Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Sam Ratulangi, Manado, Indonesia, Jl. Kampus Unsrat Manado, 95115
*) Corresponding author, e-mail: limomuat@unsrat.ac.id

## ABSTRAK
Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada ekstrak etanol daun kalu burung, membuat masker peel-off berbahan aktif ekstrak etanol daun kalu burung dan menguji aktivitas antibakteri dari ekstrak etanol dan sediaan masker peel-off . Metode yang digunakan adalah preparasi sampel, ekstraksi, uji senyawa fitokimia, pembuatan masker peel- off , uji sifat fisik dan kimia masker meliputi uji organoleptik, stabilitas fisik, lama mengering dan pH, serta uji antibakteri. Hasil penelitian menunjukkan bahwa serbuk daun kalu burung memiliki kadar  air  sebesar  6.13% dan  rendemen  ekstrak  etanol  sebesar  10.34%.  Ekstrak  etanol  daun  kalu burung  mengandung  senyawa  metabolit  sekunder  flavonoid,  saponin,  tanin,  steroid  dan  alkaloid pada uji Dragendorff. Sediaan masker peel-off memiliki karakteristik fisik dan  kimia yang aman digunakan pada kulit. Masker peel-off memiliki kisaran pH antara 5-6 dan lama mengering dengan kisaran  antara  23-29  menit.  Zona  hambat  pertumbuhan  bakteri  untuk  ekstrak  etanol  daun  kalu burung sebesar 12.33 mm dan masker peel-off mengandung daun  kalu burung sebesar 9.67 mm. Penelitian  ini  menyimpulkan  bahwa  daun  kalu  burung  mengandung  metabolit  sekunder  yang memiliki aktivitas antibakteri baik dalam ekstrak etanolnya maupun dalam sediaan masker peel-off ekstrak dan mempunyai sifat fisik dan kimia yang aman.
Kata kunci: antibakteri; fitokimia; kalu burung; masker peel-off
Phytochemical Screening and Antibacterial Test of Peel-Off Mask with Ethanol Extracts of Kalu Burung Leaves ( Barleria prionitis L.).

## ABSTRACT
This  research  aims  to  determine  the  content  of  secondary  metabolites  contained  in  the  ethanol extract of Kalu Burung leaves, to make peel-off masks from ethanol extract of Kalu Burung leaves and to test the antibacterial activity of ethanol extracts and peel-off masks. The methods used were sample  preparation,  extraction,  testing  of  phytochemical  compounds,  making  peel-off  masks, testing the physical and chemical properties of masks such as organoleptic tests, physical stability, drying  time  and  pH,  as  well  as  antibacterial  tests.  The  results  showed  that  the  Kalu  Burung  leaf powder had a moisture content of 6.13% and an ethanol extract yield of 10.34%. The ethanol extract of Kalu Burung leaves contains secondary metabolites of flavonoids, saponins, tannins, steroids and alkaloids in the Dragendorff test. The peel-off mask has physical and chemical characteristics which are  safe  to  use.  Peel-off  masks  have  a  pH  range  of  5-6  and  drying  time  of  23-29  minutes.  The inhibition  zone  of  bacterial  growth  for  ethanol  extract  was  12.33  mm  and  the  peel-off  mask containing Kalu Burung leaves was 9.67 mm. In conclusion, Kalu Burung leaves contain secondary metabolites  that  have  antibacterial  activity  both  in  the  ethanol  extract  and  in  the  peel-off extract mask with safe physical and chemical properties.
Keywords: antibacterial; kalu burung leaves; peel-off mask; phytochemistry
(Article History:  Received 07-02-2022; Accepted 30-04-2022; Published 01-05-2022)

## PENDAHULUAN
Indonesia  kaya  akan  keanekaragaman rempah-rempah dan tumbuhan obat.
Tumbuhan  obat  yaitu  tumbuhan  yang  oleh
masyarakat  dimanfaatkan  sebagai  obat  guna penyembuhan penyakit. Beberapa di antaranya  telah  digunakan  dalam  pengobatan tradisional.  Pengobatan  tradisional  adalah upaya  pengobatan  yang  dilakukan  oleh
masyarakat  berdasarkan  pengetahuan  yang berakar  pada  tradisi  tertentu  atau  diperoleh secara  turun-temurun.  Masyarakat  menyakini bahwa pengobatan tradisonal dapat menyembuhkan penyakit tanpa  efek samping yang  merugikan  (Mangamba et  al .,  2020).
Beberapa  tumbuhan  obat  yang  masih  murni, belum  tercampur  atau  belum  diolah,  telah digunakan sebagai bahan utama produk jamu.
Tumbuhan  kalu  burung  ( Barleria prionitis L.)  merupakan  tumbuhan  obat  yang oleh  masyarakat  Suku  Sangihe  di  Kabupaten Kepulauan Sangihe, Provinsi Sulawesi Utara, digunakan  sebagai  obat  tradisional  untuk menyembuhkan  penyakit  kulit  skabies  dan gatal-gatal, serta sakit gigi (Pandiangan et al .,
2019). Selain itu, daun kalu burung dilaporkan memiliki  aktivitas  antibakteri  (Manjusha et al .,  2013),  di  antaranya  terhadap  bakteri Streptococcus  mutans (Lupita  &  Kadiwijati, 2019) dan Staphylococcus aureus (Amit et al .,
2014).  Kemampuan  daun  kalu  burung  dalam menyembuhkan penyakit kulit diduga berhubungan dengan aktivitas antibakterinya. B. prionitis mengandung senyawa antibakteri barlerin, acetyl barlerin, verbascoside, shanzhiside methyl ester, pipataline, balarenone,  6-O-acetyl  shanzhiside  methyl ester  and  13,14-secostigmasta-5,14-diene-3- α-ol (Banerjee et al ., 2021).
Kulit  merupakan  organ  penting  dalam menjaga  kesehatan  manusia,  sehingga  harus dirawat dengan baik. Banyak produk perawatan kulit yang beredar di masyarakat di antaranya masker. Masker merupakan pembersih  kulit  wajah  yang  efektif  karena dapat mengangkat sel-sel kulit mati (Septiari, 2014). Masker peel-off merupakan  salah  satu jenis  masker  yang  praktis  digunakan  karena setelah  dioleskan,  gel  akan  mengering  dan membentuk  lapisan  film  transparan  yang elastis,  dan  mudah  dilepas  atau  diangkat (Rahim,  2014;  Rahmawanty et  al .,  2015). Keunggulan  masker peel-off dibandingkan masker  jenis  lain  yaitu  berbentuk  gel  yang sejuk,  mampu  merelaksasi  otot  wajah, melembabkan, melembutkan dan membersihkan  kulit  wajah  secara  maksimal (Muflihunna et  al .,  2019;  Velasco et  al ., 2014).
Untuk  meningkatkan  efektivitasnya, masker peel-off dapat dikombinasikan dengan bahan  yang  memiliki  bioaktivitas  seperti antibakteri.  Antibakteri  dikenal  juga  sebagai antibiotik,  yaitu  senyawa  kimia  yang  dapat
menghambat  pertumbuhan  bakteri,  terutama bakteri  yang  penyebab  penyakit  dan  infeksi. Senyawa  antibakteri  dapat  bekerja  secara bakteriostatik, bakteriosidal, dan  bakteriolitik (Pelczar et  al .,  2013).  Penelitian  mengenai formulasi masker peel-off antibakteri menggunakan  bahan  alam  yang  memiliki aktivitas  antibakteri,  seperti  ekstrak  daun kersen (Daimunon et al ., 2019), daun alpukat (Puluh et al ., 2019) dan daun kelor (Tunas et al., 2019), telah dilakukan.
Sejauh  ini  belum  diperoleh  informasi mengenai  aktivitas  antibakteri  dari  masker peel-off yang  mengandung  ekstrak  daun  kalu burung. Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk  mengetahui  kandungan  metabolit sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak  etanol daun  kalu  burung,  membuat  masker peel-off berbahan  aktif  ekstrak  etanol  daun  kalu burung dan menguji aktivitas  antibakteri dari ekstrak etanol dan sediaan masker peel-off .

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  selama  2 bulan di Laboratorium Kimia Organik Lanjut dan Laboratorium Farmasi
Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam, Universitas Sam Ratulangi, Manado.

## Alat dan Bahan
Penelitian  ini  menggunakan  peralatan gelas  laboratorium,  aluminium  foil,  blender, rotary  vacuum evaporator, ayakan 200 mesh, neraca analitik, kertas saring, cawan porselen, oven,  vortex,  stirrer,  kertas  pH  universal, jarum  ose,  inkubator,  botol  vial,  kaca  objek, pipet  mikro,  autoklaf,  sudip,  kertas  cakram, pinset,  erlenmeyer,  jangka  sorong,  wadah masker peel-off .
Bahan yang digunakan antara lain daun kalu burung ( B. prionitis L.), akuades, etanol 96%, propilen glikol, polivinil alkohol (PVA), hidroksi propil metilselulosa (HPMC), nutrient  agar  (NA),  nutrient  broth  (NB), suspensi  bakteri Staphylococcus  aureus , Ciprofloxacin  500  mg,  sediaan  masker peel- off pasaran,  kloroform,  ammonia,  larutan H 2 SO 4 , pereaksi Mayer, pereaksi Dragendorff, FeCl 3 ,  serbuk  Mg,  larutan  HCl,  CH 3 COOH glasial.

## Prosedur Penelitian

## Preparasi Sampel
Daun kalu burung diambil di Kelurahan
Kolongan Beha, Kabupaten Kepulauan Sangihe. Daun kalu burung dicuci dengan air bersih, ditiriskan, kemudian dikeringanginkan selama  8  hari.  Daun  yang  telah  kering, diblender hingga halus, dan diayak menggunakan ayakan 200 mesh.
Pengujian Kadar Air (AOAC, 2005)
Analisis  kadar  air  dimulai  dengan mengeringkan  cawan  porselen  dalam  oven bersuhu  105°C  selama  1  jam,  kemudian didinginkan  dalam  desikator  (15  menit),  lalu ditimbang.  Sebanyak  5  g  serbuk  daun  kalu burung  ditimbang  bersama  cawan  tersebut. Cawan yang telah diisi sampel dimasukkan ke dalam oven bersuhu 102-105°C selama 3 jam, kemudian dimasukkan ke dalam desikator dan dibiarkan  sampai  dingin  (15  menit),  lalu ditimbang.  Perlakuan  ini  diulangi  hingga diperoleh  bobot  konstan.  Persen  kadar  air ditentukan dengan rumus berikut:
Kadar air (%) = (berat awal − berat akhir) berat sampel × 100%

## Ekstraksi Sampel
Ekstraksi  dilakukan  secara  maserasi. Serbuk  daun  kalu  burung  sebanyak  300  g dimaserasi  menggunakan  pelarut  etanol  96% sebanyak  1,5  L  selama  1  x  24  jam,  dengan sesekali diaduk setiap 3 jam. Setelah 24 jam, sampel  disaring  menggunakan  kertas  saring dan  menghasilkan  ekstrak  etanol  dan  ampas. Ampas kemudian dimaserasi kembali menggunakan pelarut serta metode yang sama, dan  dilakukan  sebanyak  tiga  kali  ulangan. Selanjutnya,  semua  ekstrak  etanol  digabung lalu  dipekatkan  menggunakan  rotary  vacuum evaporator sehingga didapatkan ekstrak kental daun kalu burung, lalu disimpan dalam kulkas sebelum dianalisis.
Uji  Senyawa  Fitokimia  Ekstrak  Etanol Daun Kalu Burung (Harborne, 2006)

## Uji Alkaloid
Sebanyak  40  mg  ekstrak  daun  kalu burung  ditambahkan  2  mL  kloroform  dan  2 mL ammonia, lalu disaring. Filtrat ditambahkan  3  sampai  5  tetes  H 2 SO 4 pekat lalu  dikocok  hingga  terbentuk  dua  lapisan. Fraksi  asam  diambil,  kemudian  ditambahkan pereaksi  Mayer  dan  Dragendorff  masing- masing  4-5  tetes.  Apabila  terbentuk  endapan berwarna  putih  dalam  pereaksi  Mayer  dan kuning-merah  dalam  pereaksi  Dragendorff,
menunjukkan bahwa sampel tersebut mengandung alkaloid.

## Uji Fenolik
Sebanyak  1  mL  larutan  ekstrak  daun kalu  burung  dengan  konsentrasi  1000  µg/mL dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Tambahkan 2 tetes larutan FeCl 3 5%. Ekstrak positif mengandung fenolik apabila menghasilkan hijau kehitaman.

## Uji Flavonoid
3Sebanyak  50  mg  ekstrak  daun  kalu burung  ditambahkan  100  mL  air  panas,  lalu didihkan  selama  5  menit,  kemudian  disaring. Filtrat sebanyak 5 mL diambil lalu ditambahkan 0,05 g serbuk Mg dan 1 ml HCl pekat.  Kocok  larutan  dengan  kuat.  Jika  hasil nya berwarna merah, kuning, atau jingga maka positif mengandung flavonoid.

## Uji Saponin
Sebanyak  40  mg  ekstrak  daun  kalu burung  ditambahkan  10  mL  akuades  dalam tabung  reaksi.  Larutan  dikocok  selama  1 menit.  Jika  terbentuk  busa,  maka  ekstrak mengandung saponin. Selanjutnya, ditambahkan  1  tetes  HCl  pekat,  busa  tidak akan hilang.

## Uji Tanin
Sebanyak  1  mL  ekstrak  daun  kalu burung  dengan  konsentrasi  1000  µg/mL dilarutkan dengan FeCl 3 10%. Bila menghasilkan  warna  biru  tua  atau  hitam kehijauan,  maka  ekstrak  dinyatakan  positif mengandung tanin.

## Uji Steroid/Triterpenoid
Sebanyak  40  mg  ekstrak  daun  kalu burung  ditambahkan  10  tetes  CH 3 COOH glasial  dan  2  tetes  H 2 SO 4 pekat.  Campuran dikocok  dan  didiamkan  selama  beberapa menit. Jika hasil menunjukkan warna biru atau hijau,  maka  positif  mengandung  steroid.  Jika hasil  menunjukkan  warna  merah  atau  ungu, maka positif mengandung triterpenoid.
Formulasi dan Pembuatan Sediaan Masker Peel-Off Ekstrak  Etanol  Daun  Kalu Burung (Izzati, 2014)
Formula  masker peel-off ekstrak  daun kalu burung disajikan pada Tabel 1. Sebanyak 10  g  PVA  ditambahkan  akuades  hangat bersuhu 90ºC dan diaduk hingga mengembang sempurna  (wadah  A).  Sebanyak  1  g  HPMC ditambahkan akuades dingin dengan pengadukan yang konstan hingga
mengembang sempurna (wadah B). Sebanyak 10  mL  propilen  glikol  dilarutkan  dengan  25 mL  akuades  (wadah  C).  Kemudian  wadah  B dan  wadah  C  dicampurkan  secara  berturut- turut pada wadah A, dan diaduk sampai semua bahan  tercampur  homogen.  Maka,  akan dihasilkan basis masker peel-off (K-).
Tabel 1. Formulasi Masker Peel-Off Ekstrak
Etanol Daun Kalu Burung Bahan Kontrol negative (K-) Formula (F) Ekstrak etanol daun kalu burung (g) - 1 PVA (g) 10 10 HPMC (g) 1 1 Propilen glikol (mL) 10 10 Akuades (mL) Ad 100 Ad 100
Keterangan:  PVA  =  polivinil  alkohol,  HPMC  = hidroksi  propil  metil  selulosa;  K-  =  basis  masker peel-off ; F = sediaan masker peel-off ekstrak daun kalu burung
Pada wadah terpisah (wadah D), ekstrak etanol daun kalu burung dilarutkan dengan 25 mL  akuades  sedikit  demi  sedikit  sehingga ekstrak  daun  terdispersi.  Setelah  itu,  dibuat basis  masker peel-off secara  terpisah  dan dicampurkan pada wadah D hingga homogen. Maka,  dihasilkan  sediaan  masker peel-off ekstrak  etanol  daun  kalu  burung  (F).  Setiap formulasi  K-  dan  F  dibuat  tiga  kali pengulangan.

## Uji  Sifat Fisik  dan Kimia  Sediaan  Masker
Peel-Off
Uji sifat fisik dan kimia sediaan masker peel-off meliputi,  pengujian  organoleptik, stabilitas fisik,  lama pengeringan dan  uji pH. Uji  fisik  dan  kimia  dilakukan  pada  sediaan masker peel-off ekstrak  etanol  daun  kalu burung  (F),  basis  masker peel - off (K-),  dan sediaan  masker peel-off di  pasaran  (K+) sebanyak  3  kali  pengulangan  selama  7  hari pada  suhu  ruangan  (25 ̊C)  (Lutfiana et  al ., 2021).

## Uji Organoleptik
Uji  organoleptik  dilakukan  untuk sediaan  masker peel-off pada  15  orang sukarelawan sebagai panelis dengan parameter  yang  meliputi  warna,  aroma  dan tekstur.  Metode  pengujian  yang  digunakan adalah metode hedonik (uji kesukaan) dengan
skala 1-5, yaitu (1) sangat tidak suka, (2) tidak suka, (3) agak suka, (4) suka, (5) sangat suka (Adawiyah, 2007).

## Uji Stabilitas Fisik
Sediaan  masker peel-off yang  telah dibuat  kemudian  diamati  stabilitas  fisiknya. Pengamatan  meliputi  warna,  aroma,  dan tekstur (Septiani et al ., 2011).

## Uji Lama Mengering
Sebanyak 0.5 g sediaan masker peel-off dioleskan  pada  kaca  objek  dengan  ketebalan kira-kira  1  mm.  Lama  mengering  sediaan masker dihitung dengan menggunakan stopwatch,  dimulai  saat  masker  dioles  pada kaca  objek  hingga  membentuk  lapisan  film (ditandai dengan warna memudar).

## Uji pH
Sediaan  masker peel-off disiapkan sebanyak  1  g  dilarutkan  dengan  10  mL akuades (10%). Kertas pH universal dimasukkan  dalam  larutan  tersebut  lalu  pH diamati  berdasarkan  perubahan  warna  pada kertas  pH  yang  dicocokkan  dengan  warna indikator pH (Tranggono et al ., 2013).
Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun  Kalu  Burung  dan  Efektivitas Antibakteri  Sediaan  Masker Peel-Off Ekstrak Etanol Daun Kalu Burung (Ortez, 2005)

## Sterilisasi Alat
Sterilisasi alat dilakukan untuk mencegah  terjadinya  kontaminasi.  Alat-alat gelas terlebih dahulu dicuci, dikeringkan, dan dibungkus dengan aluminium foil. Selanjutnya,  sterilisasi  alat  menggunakan autoklaf pada suhu 121 o C selama 30 menit.

## Pembuatan  Nutrient  Agar  dan  Nutrient Broth
Sebanyak 4 g serbuk nutrient agar (NA) dan  0.16  g  serbuk  nutrient  broth  (NB) dilarutkan dengan 200 mL akuades kemudian disterilkan  di  autoklaf  pada  suhu  121 o C selama 30 menit.

## Uji Antibakteri
Sebanyak  1  mL  suspensi  bakteri dimasukkan ke dalam 200 mL media nutrient agar,  setelah  itu  dikocok  untuk  mencampur suspensi  bakteri  Staphylococcus  aureus  dan media,  lalu  dituang  sebanyak  20  mL  dengan suhu 45-50 o C pada 6 cawan petri. Selanjutnya campuran dalam media dihomogenkan dengan
cara  digoyang  membentuk  angka  8,  agar media dan suspensi bakteri tercampur rata.
Pada  pengujian  antibakteri  ekstrak etanol  daun  kalu  burung,  tiga  buah  kertas cakram  ukuran  6  mm  diletakkan  pada  cawan petri  dengan  menggunakan  pinset  steril  yang masing-masing  telah  direndam  dalam  larutan ekstrak etanol daun kalu burung 50%, larutan Ciprofloxacin 1 µg/10µL (kontrol positif), dan akuades 1 mL (kontrol negatif). Perlakuan ini dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan dalam cawan petri berbeda.
Pada  pengujian  antibakteri  sediaan masker peel-off ,  tiga  buah  kertas  cakram ukuran  6  mm  yang  telah  direndam  masing- masing dalam larutan masker pasaran 1 g/mL (kontrol positif), larutan basis masker peel-off 1  g/mL  (kontrol  negatif),  dan  larutan  masker peel-off ekstrak  etanol  daun  kalu  burung  1 g/mL, diambil menggunakan pinset steril lalu diletakkan  pada  cawan  petri.  Perlakuan  ini dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan dalam cawan  petri  berbeda.  Selanjutnya  semua media  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  24 jam dan diukur diameter zona hambatnya.

## Analisis Data
Data  penelitian  dianalisis  dengan Microsoft  Excel  dan  SPSS  20  menggunakan uji  ANOVA,  bila  terdapat  perbedaan  hasil, dilanjutkan dengan uji Duncan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Preparasi dan Pengujian Kadar Air Sampel
Penelitian  ini  menggunakan  sampel daun kalu burung ( Barleria prionitis L.) yang diambil  di  Kelurahan  Kolongan  Beha, Kabupaten  Kepulauan  Sangihe.  Serbuk  daun kalu  burung  yang  digunakan  memiliki  kadar air  6.13%.  Nilai  tersebut  didapatkan  dari persentase pembagian selisih berat basah dan berat  kering  yang  dilakukan  sebanyak  3  kali replikasi.    Kadar  air  merupakan  parameter untuk  menetapkan  residu  air  dalam  suatu simplisia  setelah  proses  pengeringan.  Kadar air serbuk daun kalu burung pada penelitian ≤ 10%.  Kadar  air  yang  terlalu  tinggi  (>  10%) menyebabkan tumbuhnya mikroba yang akan menurunkan  stabilitas  serbuk.    Simplisia kering  yang  memiliki  kadar  air  antara  5%  – 30% cenderung memiliki ekstrak yang kental. Penentuan  kadar  air  suatu  simplisia  juga terkait dengan kemurnian ekstrak.
Daun kalu burung dihaluskan menggunakan blender dan diayak
menggunakan  ayakan  200  mesh  bertujuan untuk  memperkecil  ukuran  sampel  dan memperbesar  luas  permukaan.  Menurut (Winahyu et al ., 2019), semakin kecil ukuran sampel maka semakin besar luas permukaannya  dan  interaksi  kontak  pelarut dalam ekstraksi akan semakin besar, sehingga proses ekstraksi akan semakin efektif. Serbuk daun  kalu  burung  yang  diperoleh  berwarna hijau kecoklatan yang pekat.

## Ekstraksi Sampel
Serbuk  daun  kalu  burung  diekstraksi secara  maserasi  menggunakan  pelarut  etanol. Maserasi  adalah  proses  perendaman  sampel untuk  menarik  komponen  yang  diinginkan pada  jangka  waktu  tertentu.  Keuntungannya yakni,  lebih  praktis,  pelarut  yang  digunakan lebih sedikit, dan tidak memerlukan pemanasan,  tetapi  waktu  yang  dibutuhkan relatif lama (Putra et al ., 2014).
Etanol (CH 3 CH 2 OH) merupakan pelarut  yang  bersifat  polar  dan  dapat mengekstrak  senyawa  polar  yang  ada  dalam sampel.  Selain  memiliki  gugus  hidroksil  (- OH) yang bersifat polar, molekul  etanol juga memiliki  gugus  etil  (C 2 H 5 -)  yang  relatif bersifat  non-polar  sehingga  dapat  juga melarutkan senyawa metabolit sekunder yang bersifat  non-polar  (Waworuntu et  al .,  2018).
Selain  itu,  pelarut  etanol  96%  dapat menghambat  pertumbuhan  mikroorganisme, sehingga  efektif  dalam  menghasilkan  ekstrak yang optimal. Pada proses maserasi
pengadukan dilakukan
untuk menghomogenkan dan mempercepat interaksi antara  pelarut  dan  serbuk  simplisia  sehingga diperoleh  ekstrak  yang  maksimal.  Ekstraksi sampel  menyebabkan  komponen  kimia  yang terkandung dalam sampel dapat berpindah dan larut dalam pelarut etanol yang digunakan.
Hasil  analisis  menunjukan  bahwa rendemen  ekstrak  daun  kalu  burung  yang diperoleh sebesar 10.34%. Ekstrak daun kalu burung  berwarna  cokelat,  kental  dan  berbau khas.  Proses  ekstraksi  yang  dilakukan  sangat efektif karena rendemen yang dihasilkan lebih dari  10%.  Menurut  (Rosidah et  al .,  2017), besar  rendemen  ekstrak  dapat  dipengaruhi oleh jumlah simplisia yang digunakan, ukuran partikel  simplisia,  jenis  pelarut  dan  lamanya waktu ekstraksi.
Uji  Senyawa  Fitokimia  Ekstrak  Etanol Daun Kalu Burung
Tabel 2. Hasil Uji Senyawa Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Kalu Burung
Keterangan: (+) : terkandung dalam sampel; (-) : tidak terkandung dalam sampel
Tabel  2  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol  daun  kalu  burung  mengandung senyawa  alkaloid,  saponin,  tanin,  flavonoid, dan steroid. Hasil uji fitokimia ini mendukung hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  (Diwan, 2012)  yang  menyatakan  bahwa  ekstrak  daun Barleria  prionitis L.  mengandung  senyawa alkaloid, flavonoid, fenolik sederhana, steroid, saponin dan tanin.
Prinsip metode analisis alkaloid adalah reaksi  pengendapan  yang  terjadi  karena adanya  penggantian  ligan.  Pada  pereaksi Mayer, terbentuknya endapan putih menunjukkan adanya senyawa alkaloid dalam sampel.  Pereaksi  Mayer  dibuat  dengan mereaksikan  larutan  merkuri(II)  klorida  dan kalium iodida menghasilkan senyawa merkuri(II) iodida (endapan merah). Penambahan  kalium  iodida  berlebih  akan menghasilkan  kalium  tetraiodomerkurat(II). Pada  uji  alkaloid  dengan  pereaksi  Mayer, endapan putih yang terbentuk dapat disebabkan  oleh  reaksi  antara  nitrogen  pada alkaloid  dengan  ion  logam  K+  dari  kalium
tetraiodomerkurat(II)  membentuk  kompleks K-alkaloid  yang  mengendap.  Demikian  pula pada  uji  dengan  pereaksi  Dragendorff, terbentuknya endapan
K-alkaloid
menunjukkan  adanya  alkaloid  dalam  sampel (Wardhani & Supartono, 2015).
Tabel  2  menunjukkan  adanya  senyawa alkaloid dalam ekstrak daun kalu burung pada pereaksi Dragendorff, tapi tidak pada pereaksi Mayer.  Adanya  alkaloid  pada  uji  dengan pereaksi Dragendorff ditandai dengan adanya endapan  berwarna  merah.  Hasil  skrining fitokimia yang dilakukan menunjukkan bahwa Barleria  prionitis L.  mengandung  alkaloid. Hasil ini mendukung penelitian yang dilakukan oleh Diwan (2012).
Pada uji fenol, ekstrak dilarutkan dalam air  dan  direaksikan  dengan  FeCl 3 5% menunjukkan  hasil  negatif  dengan  tidak adanya  perubahan  warna  menjadi  hijau kehitaman (Tabel 2). Menurut Diwan (2012), ekstrak Barleria  prionitis L.  mengandung senyawa fenolik menggunakan pelarut petroleum  eter,  kloroform  dan  aseton.  Maka dari  itu,  bisa  terjadi  adanya  perubahan  hasil pada  uji  fenolik  dengan  ekstrak  etanol. Fenolik bereaksi dengan FeCl 3 5% membentuk  warna  merah,  ungu,  biru,  atau hitam  yang  pekat  karena  FeCl 3 bereaksi dengan  gugus  –OH  aromatis  (Haryati  & Erwin,  2015).  Kompleks  berwarna  yang terbentuk diduga sebagai besi(III) heksafenolat.  Ion  Fe 3+ mengalami  hibridisasi orbital  d 2 sp 3 sehingga  ion  Fe 3+ (4s 0 3d 5 ) memiliki  6  orbital  kosong  yang  diisi  oleh pendonor  pasangan  elektron,  yaitu  atom oksigen pada senyawa fenolik yang memiliki pasangan  elektron  bebas  (Marliana  &  Saleh, 2011).
Uji  saponin  menunjukkan  hasil  positif karena buih yang terbentuk setelah pengocokan  bertahan  lama,  bahkan  saat ditetes  larutan  HCl  (Tabel  2).  Saponin memiliki  glikosil  sebagai  gugus  polar  serta gugus steroid atau triterpenoid sebagai gugus non-polar  sehingga  bersifat  aktif  permukaan dan  membentuk  misel  saat  dikocok  dengan air.  Pada  struktur  misel,  gugus  polar menghadap  ke  luar  sedangkan  gugus  non- polar menghadap ke dalam dan keadaan inilah yang tampak seperti busa (Sangi et al ., 2008). Ektrak  etanol  daun  kalu  burung mengandung  tanin  (Tabel  2).  Tanin  dalam ekstrak bila bereaksi dengan FeCl 3 , menghasilkan  senyawa  kompleks  berwarna
Senyawa Ha- sil Keterangan Alka- loid Pereaksi Mayer - Tidak membentuk endapan putih Pereaksi Dragend orff + Membentuk endapan merah Fenolik - Tidak menghasilkan warna hijau kehitaman Saponin + Menghasilkan buih yang stabil Tanin + Menghasilkan warna hitam kehijauan Flavonoid + Menghasilkan warna kuning Steroid + Menghasilkan warna hijau Triterpenoid - Tidak menghasilkan merah/ungu
hijau  kecoklatan.  Senyawa  kompleks  antara tanin  dan  FeCl 3 terbentuk  antara  ion  Fe 3+ sebagai atom pusat dari FeCl 3 dengan atom O pada  tanin.  Atom  O  yang  mempunyai pasangan elektron bebas yang bisa mengkoordinasikan  ke  atom  pusat  Fe 3+ sebagai  ligannya.  Ion  Fe 3+ mengikat  tiga molekul tannin, yang masing-masing memiliki 2 atom donor elektron yaitu atom O pada posisi 4’ dan 5’ dihidroksil, sehingga ada enam  pasangan  elektron  bebas  yang  bisa dikoordinasikan  ke  atom  pusat  Fe 3+ .  Atom O pada  posisi  4’  dan  5’  dihidroksil  memiliki energi  paling  rendah  dalam  pembentukan senyawa  kompleks,  sehingga  memungkinkan menjadi  sebuah  ligan.  Reaksi  uji  tanin  bisa dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Reaksi Uji Tanin
Ekstrak  etanol  daun  kalu  burung mengandung  flavonoid  (Tabel  2).  Tujuan penambahan  logam  Mg  dan  HCl  pada  uji flavonoid  adalah  untuk  mereduksi  inti benzopiron  yang  terdapat  dalam  struktur flavonoid sehingga terbentuk garam flavilium berwarna  merah  atau  jingga.  Flavonoid merupakan  senyawa  yang  mengandung  dua cincin aromatik dengan gugus hidroksil lebih dari  satu.  Senyawa  fenol  dengan  gugus hidroksil  semakin  banyak  memiliki  tingkat kelarutan  dalam  air  semakin  besar  atau bersifat polar, sehingga dapat terekstrak dalam pelarut polar (Robinson, 1995).
Pada uji steroid dan triterpenoid, reaksi triterpenoid  dengan  CH 3 COOH  glasial  dan H 2 SO 4 menghasilkan  warna  merah-ungu, sedangkan  steroid  memberikan  warna  hijau- biru.  Ekstrak  etanol  daun  kalu  burung menunjukkan  hasil  positif  mengandung steroid  (Tabel  2).  Hal  ini  didasari  oleh kemampuan senyawa triterpenoid dan steroid membentuk  warna  oleh  H 2 SO 4 .  Perbedaan warna  yang  dihasilkan  oleh  triterpenoid  dan streoid  disebabkan  perbedaan  gugus  pada
atom C-4 (Marliana & Saleh, 2011). Adapun reaksi  kimia  yang  terjadi  seperti  dalam Gambar 2.
Gambar 2. Reaksi Uji Steroid/Triterpenoid
Uji  Sifat Fisik  dan Kimia  Sediaan  Masker Peel-Off
Organoleptik
Tabel 3. Rata-Rata Nilai Kesukaan Hasil Organoleptik Perla- kuan Rata-rata±SD Warna Aroma Tekstur K- 4.47±0.7 a 3.13±0.9 b 3.73±1.1 a F 3.67±0.7 b 2.93±1.0 b 3.33±0.6 a K+ 3.60±0.6 b 4.53±0.8 a 3.80±0.4 a Keterangan:
Huruf yang sama dibelakang angka dalam satu kolom menunjukkan tidak berbeda nyata. F: formulasi masker peel-off ekstrak etanol daun kalu burung; K- : basis masker peel-off ; K+ : masker peel-off komersial
Uji  organoleptik  pada  penelitian  ini meliputi  parameter  warna,  aroma  dan  tekstur (Tabel  3).  Hasil  uji  organoleptik  terhadap warna  dan  tekstur  dari  masker peel-off (F) tidak berbeda secara signifikan dengan masker komersial  (K+).  Untuk  parameter  aroma, masker komersial (K+) memliki nilai tertinggi dan berbeda secara nyata dengan masker peel- off (F)  dan  basis  masker  (K-).  Aroma  dapat diterima  apabila  bahan  yang  dihasilkan mempunyai  aroma  spesifik.  Ini  dikarenakan masker  komersial  (K+)  mengandung  parfum yang cenderung lebih disukai oleh panelis.
Pada  Tabel  3,  uji  organoleptik  untuk warna  F  dan  K+  tidak  berbeda  nyata  dan mempunyai  nilai  kesukaan  3.60-4.47  (agak suka-suka).  Untuk  aroma  basis  masker  dan masker peel-off tidak  berbeda  nyata  dan memiliki nilai kesukaan 2.93-4.53 (tidak suka- suka). Terakhir untuk tekstur, semua perlakuan  tidak  berbeda  nyata  dan  memiliki nilai kesukaan 3.33-3.80 (agak suka).

## Stabilitas Fisik
Uji  stabilitas  fisik  adalah  uji  untuk melihat  karekteristik  secara  fisik  dari  masker peel-off . Parameter fisik yang diamati meliputi warna,  aroma,  dan  tekstur  (Tabel  4).  Uji stabilitas  fisik  dilakukan  untuk  melihat kestabilan  sediaan  masker peel-off selama  7 hari penyimpanan.
Tabel 4. Hasil Uji Stabilitas Fisik Sediaan Masker Peel-Off Perlakuan Stabilitas Fisik Warna Aroma Tekstur F coklat kehitaman khas basis masker semi solid K- putih bening khas basis masker semi solid K+ kuning keabu- abuan khas masker pasaran semi solid
Keterangan: F: formulasi masker peel-off ekstrak etanol daun kalu burung; K- : basis masker peel- off ; K+ : masker peel-off komersial
Pada  Tabel  4,  hasil  dari  uji  stabilitas fisik  masker peel-off menunjukkan  tidak adanya  perubahan  pada  warna,  aroma  dan tekstur selama penyimpanan.  Ini dikarenakan tidak  adanya  tambahan  perlakuan  pada formula sehingga tidak mempengaruhi sediaan  selama  penyimpanan.  Warna  yang pekat  pada  sediaan  disebabkan  oleh  warna ekstrak  yang  juga  pekat  dan  berwarna  coklat kehitaman. Adapun aroma yang memiliki ciri khas  basis  masker  disebabkan  oleh  basis masker  yang  mendominasi  formulasi  dari sediaan.  Masker peel-off memiliki  tekstur semi  solid  atau  sangat  kental  dan  bersifat lengket.

## Lama Mengering
Uji lama mengering adalah waktu yang dibutuhkan  sediaan  masker peel-off untuk mengering. Pengujian kecepatan waktu mengering  dalam  sediaan  masker peel-off bertujuan  mengetahui  kecepatan  masker membentuk film pada kulit .
Keterangan: F: formulasi masker peel-off ekstrak etanol daun kalu burung; K- : basis masker peel- off ; K+ : masker peel-off komersial
Gambar 3. Hasil Uji Lama Mengering Sediaan Masker Peel-Off
Hasil pengujian lama mengering masker peel-off disajikan  pada  Gambar  3.
Pengujian  lama  mengering  masker  dari  hari ke-1  sampai  ke-7  setelah  masker  dibuat memiliki  variasi  waktu  mengering  yang berbeda pada setiap rata-rata ulangan sediaan. Perlakuan  F,  K-  dan  K+  menunjukkan perbedaan  nyata  pada  lama  mengering menurut  uji statistik. Tetapi, lama mengering sediaan masker peel-off untuk setiap perlakuan  berada  pada  kisaran  23-29  menit. Lama mengering sediaan masker berada pada kisaran yang normal untuk sediaan masker gel yaitu 15-30 menit (Zhelsiana et al. , 2016). Beringhs et  al .  (2013)  melaporkan bahwa prinsip dari masker peel-off berdasarkan  kemampuan  untuk  membentuk film yang mudah dikelupas saat diaplikasikan pada  kulit.  Polivinil  alkohol  pada  masker berperan  dalam  memberikan  efek peel-off karena memiliki sifat seperti perekat sehingga dapat  memebentuk  lapisan  film  yang  mudah dikelupas setelah kering. Konsentrasi pemberian PVA yang tepat merupakan faktor terpenting yang berpengaruh terhadap kinerja pembentukan film dalam masker  wajah peel- off (Brick et al ., 2014).
pH
pH  adalah  derajat  keasaman  suatu larutan.  Uji  pH  dilakukan  untuk  mengetahui derajat  keasaman  dari  sediaam  masker peel- off . Hasil uji pH dari masker peel-off disajikan dalam Gambar 4.
10 15 20 25 30 35 40 0 1 2 3 4 5 6 7 Wa k tu m en g er in g (m en it ) Hari ke- F K- K+
Keterangan: F: formulasi masker peel-off ekstrak etanol daun kalu burung; K- : basis masker peel- off ; K+ : masker peel-off komersial
Gambar 4. Hasil Uji pH Sediaan Masker Peel-Off
Nilai pH masker peel-off dari hari ke-1 sampai ke-7 berkisaran antara 5-6. Uji statistik menunjukkan  bahwa  perlakuan  F  dan  K- memiliki  nilai  pH  yang  tidak  berbeda  nyata.
Sedangkan, perlakuan F dan K- berbeda secara nyata  dengan  K+.  Tranggono et  al .  (2013) melaporkan  rentang  pH  sediaan  harus mengikuti  pH  kulit  yang  berkisar  antara  4.5- 6.5.  Sediaan  masker peel-off pada  penelitian ini memiliki  nilai pH yang sesuai dengan pH kulit.
Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol Daun  Kalu  Burung  dan  Efektivitas Antibakteri Sediaan Masker Peel-Off
Uji antibakteri ini menggunakan bakteri Staphylococcus aureus . S. aureus merupakan bakteri  yang  paling  sering  menyebabkan infeksi  pada  kulit  sehingga  cocok  untuk dijadikan  dasar  uji  antibakteri  terhadap masker peel-off .  Uji  antibakteri  dilakukan terhadap ekstrak etanol daun kalu burung dan sediaan  masker peel-off ekstrak  etanol  daun kalu  burung.  Pengukuran  zona  hambat dilakukan  24  jam  setelah  inkubasi.  Hasil pengukuran zona hambat terhadap ekstrak dan masker peel-off secara berturut-turut disajikan pada Tabel 5 dan Tabel 6.
Tabel  5  menunjukkan  bahwa  ekstrak etanol  daun  kalu  burung  memiliki  aktivitas antibakteri  yang  lebih  tinggi  daripada Ciprofloxacin (antibiotik komersial). Rendahnya  zona  hambat S.  aureus oleh Ciprofloxacin diduga karena adanya resistansi bakteri  yang  digunakan  terhadap  antibiotic tersebut.  Menurut  Departemen  Kesehatan  RI (2014), suatu zat memiliki daya hambat yang
baik jika diameter zona hambat pertumbuhan bakteri berkisar antara 14-16 mm.
Tabel 5. Hasil Pengukuran Zona Hambat Ekstrak Etanol Daun Kalu Burung
Perlakuan Zona hambat pertumbuhan S. aureus (mm) 50% ekstrak daun kalu burung 12.33±2.25 a Ciprofloxacin 1 µg/10µL 7.67±0.76 b Akuades 0±0 c
Keterangan:
Huruf yang berbeda dibelakang angka dalam satu kolom menunjukkan berbeda nyata.
Tabel 6. Hasil Pengukuran Zona Hambat Sediaan Masker Peel-Off Perlakuan Zona hambat pertumbuhan S. aureus (mm) F 9.67±1.26 a K+ 8.67±0.58 a K- 0±0 b Keterangan:
F : sediaan masker peel-off (1 g/mL); K+ : sediaan masker peel-off komersial (1 g/mL); K- : basis masker (1 g/mL);
Huruf yang berbeda dibelakang angka dalam satu kolom menunjukkan berbeda nyata.
. Pada  Tabel  6,  aktivitas  antibakteri sediaan  masker peel-off ekstrak  etanol  daun kalu  burung  (F)  tidak  berbeda  nyata  dengan masker  komersial  (K+).  Zona  hambat pertumbuhan S. aureus oleh masker F dan K+ berkisar 8.7-9.7 mm. Sediaan masker peel-off mengandung ekstrak etanol daun kalu burung memiliki zona hambat yang lemah dikarenakan  ekstrak  yang  digunakan  dalam formulasi  masker  hanya  1  g  dalam  100  mL campuran. Untuk meningkatkan zona hambat pertumbuhan  bakteri S.  aureus ,  konsentrasi ekstrak  daun  kalu  burung  dalam  sediaan masker peel-off perlu ditingkatkan.
2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 0 1 2 3 4 5 6 7 pH Hari ke- F K- K+

## KESIMPULAN
Ekstrak  etanol  daun  kalu  burung mengandung  senyawa  metabolit  sekunder flavonoid, saponin, tanin, steroid dan alkaloid pada uji Dragendorff. Sediaan masker peel-off ekstrak  etanol  daun  kalu  burung  memiliki warna,  aroma  dan  tekstur  agak  disukai  oleh panelis,  stabil  dalam  penyimpanan,  lama mengering  yang  normal  dan  pH  yang  sesuai dengan  pH  kulit.  Ekstrak  etanol  daun  kalu burung  dan  masker peel-off berbahan  aktif ekstrak  etanol  daun  kalu  burung  memiliki aktivitas  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus.

## DAFTAR PUSTAKA
Adawiyah, D.R. 2007. Laboratorium Organoleptik  dan  Teknik  Penyiapan Contoh untuk Uji Organoleptik. Handout Pelatihan Pengujian Organoleptik Bahan dan Produk Pangan, Bogor.
Amit,  K.,  Shiwani,  S.,  Rajesh,  K.,  Rajinder,
K.,  Singh,  L.K.  &  Shilpa,  K.  2014. Pharmacognostical, preliminary phytochemical screening and antimicrobial  studies  of  leaves  of Barleria prionitis Linn. Int J Pharmacogn  Phytochem  Res , 6(2):
369–378.
AOAC. (2005). Official Methode of Analysis of  AOAC  International.  In The Association  of  Official  Analyticals, Contaminants.  Drugs.  Vol.  1  AOAC International. Gaithersburg .
Banerjee, S., Banerjee, S., Jha, G. K., & Bose, S.  (2021).  Barleria  prionitis  L.:  An Illustrative  Traditional,  Phytochemical and  Pharmacological  Review. The Natural  Products  Journal , 11 (3),  258– 274.
Beringhs, A.O., Rosa, J. & Stulzer, H.K. 2013. Green clay and Aloe vera peel-off facial maks:  Response  surface  metdhology apllied to the formulation design. AAPS Pharm Scitech. , 14(1): 445–455.
Brick,  C.S.,  Degoutin,  N.,  Tabary,  V.M.  & Bacquet,  M.    2014.  New  crosslinked cast films based on poly (vinyl alcohol):
Preparation and physico-chemical properties. Express  Polymer  Letters , 8(12): 941–952.
Daimunon, R., Yamlean, P.V.Y.  & Jayanto, I. 2019.  Formulasi  Dan  Efek  Antibakteri Masker  Peel-Off  Ekstrak  Etanol  Daun Kersen ( Muntingia calabura L.) Terhadap Bakteri Staphlococcous epidermidis . PHARMACON , 8(3): 686– 694. Diwan, P.D. 2012. Assessment of Phytochemical Composition and
Antibacterial  Activity  of  Different Extracts  of Barleria  prionitis L. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research , 5(2): 182–184.
Harborne,  J.B.  2006.  Metode  Fitokimia: Penuntun  Cara  Modern  Menganalisis Tumbuhan (alih bahasa: Kosasih Padmawinata  &  Iwang  Soediro).  ITB Press, Bandung.
Haryati,  N.A.  &  Erwin,  C.S.  2015.  Uji
Toksisitas  dan  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak Daun Merah ( Syzygium mytifolium Walp)  terhadap  Bakteri Staphylococus  aureus dan Escherichia coli . J. Kimia Mulawarman , 13(1): 35– 39.
Izzati, K.  2014. Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan  Sediaan  Masker  Peel-Off Ekstrak  Etanol  50%  Kulit  Buah Manggis (Garcinia  mangostana  L.) . UIN  Syarif  Hidayatullah  Jakarta, Jakarta.
Lupita.,  Kadiwijati,  L.R.  2019.  Pengaruh Perbedaan  Konsentrasi  Ekstrak  Etanol 70%  Daun  Landep  ( Barleria  prionitis L.) dalam Formulasi Sediaan Pasta Gigi terhadap  Sifat  Fisik,  Stabilitaas  Fisik dan  Aktivitas  Antibakteri  pada  Bakteri Streptococcus mutans . Indonesia Natural Research Pharmaceutical Journal , 4(1): 1–6.
Lutfiana,  S.I.,  Dellima,  B.R.E.M.  &  Rosita, M.E.  2021.  Formulasi  dan  Uji  Sifat Fisik Masker Gel Peel-Off Serbuk Biji Salak (Salacca zalacca (Gaertn.) Voss).
Jurnal Farmasi dan Kesehatan
Indonesia , 1(2): 54–64.
Mangamba, C., Pratiknjo, M.H.  & Matheosz, J.N.  2020.  Pengobatan  Tradisional (Bakera)  di  Desa  Talengan  Kecamatan Tabukan Tengah Kabupaten Kepulauan Sangihe. HOLISTIK,  Journal  of  Social and Culture .
Manjusha,  Kumar,  V.  &  Singh,  S.  2013. Gastroprotective  Activity  of  Methanol Leaves  Extract  of Barleria  prionitis Linn.  on  Ethanol  and  Indomethacin Induced  Ulcer  in  Rats. British  Journal of  Pharmaceutical  Research , 3(4): 817–829.
Marliana,  S.D.  &  Saleh,  C.  2011.  Uji Fitokimia  dan  Aktivitas  Antibakteri Ekstrak  Kasar  Etanol,  Fraksi  n- Heksana,  Etil  asetat,  dan  Metanol  dari Buah  Labu  Air  ( Lagenari  siceraria (Molina)). J. Kimia Mulawarman , 8(2): 63–69.
Muflihunna, A., Syarif, S., & Mursyid, A.M. 2019.  Formulasi  dan  Evaluasi  Masker Gel  Peel-Off  Etanol  Kulit  Buah  Apel ( Phyrus mallus L) Sebagai Antioksidan.
Jurnal Kesehatan , 35–44.
Ortez,  J.  2005.  Disk  Diffusion  Testing  in Manual of Antimicrobial Susceptibility testing.  Marie  B.  Coyle  (Coord.  Ed).
American Society for Microbiology . Pandiangan,  D.,  Silalahi,  M.,  Dapas,  F.  & Kandou,  F.    2019.  Diversity  of medicinal  plants  and  their  uses  by  the Sanger  tribe  of  Sangihe  Islands,  North Sulawesi, Indonesia. Biodiversitas
Journal  of Biological  Diversity , 20(3):
611–621.
Pelczar,  Michael,  J.  &  Chan,  E.C.S.  2013. Dasar-Dasar  Mikrobiologi  Jilid  I.  UI Press. Jakarta.
Puluh, E.A., Edy, H.J.  & Siampa, J.P.  2019. Uji  Antibakteri  Sediaan  Masker  Peel Off  Ekstrak  Etanol  Daun  Alpukat ( Persea  ameicana Mill. )  terhadap Bakteri Staphylococcus  epidermidis sebagai  Antijerawat. Jurnal  MIPA , 8(3): 101–104.
Putra,  A.A.B.,  Bogoriani,  N.W.,  Diantariani, N.P.  &  Sumadewi,  N.L.    2014. Ekstraksi  Zat  Warna  Alam  dari
Bonggol Tanaman Pisang ( Musa paradiasciaca L.)  dengan  Metode Maserasi,  Refluks,  dan  Sokletassi. Jurnal Kimia , 8(1): 113–119.
Rahim, F.K. 2014. Faktor risiko underweight balita umur 7-59 bulan. KEMAS: Jurnal
Kesehatan Masyarakat , 9(2): 115–121.
Rahmawanty, D., Yulianti, N. & Fitriana, M. 2015.  Formulasi  dan  evaluasi  masker wajah  peel-off  mengandung  kuersetin dengan  variasi  konsentrasi  gelatin  dan gliserin. Media  Farmasi:  Jurnal  Ilmu Farmasi , 12(1): 17–32.
Rosidah,  I.,  Zainuddin,  M.R.,  Bahua,  H.  & Saprudin,  M.    2017.  Optimasi  Kondisi Ekstraksi Senyawa Total Fenolik Buah Labu Siam (Sechium edule ( Jacq .) Sw.) Menggunakan Response Surface. Methodology . 27 (2): 79–88.
Sangi,  M.,  Runtuwene,  M.R.J.,  Simbala, H.E.I.  &  Makang,  V.M.A.  2008. Analisis  Fitokimia  Tumbuhan  Obat  di Kabupaten  Minahasa  Utara. Chemistry Progress , 1(1): 47–53.
Septiani,  S.N.,  Wathoni  &  Mita,  S.R.    2011.
Formulasi Sediaan Masker Gel
Antioksidan  dari  Ekstrak  Etanol  Biji Melinjo ( Gnetum gnemon Linn). Jurnal UNPAD , 1(1): 4–24.
Septiari,  N.W.S.    2014.  Pengaruh  Proporsi Puree Stroberi ( Fragaria vesca L.) dan Tapioka  Terhadap  Kualitas  Masker Wajah  Tradisional. Jurnal  Tata  Rias , 3(1): 166-173.
Tranggono, I., Latifah & Fatmah.  2013. Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik. PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Tunas, T.H., Edy, H.J.  & Siampa, J. P.  2019. Efek  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun Kelor  ( Moringa  oleifera Lam.)  dan Sediaan Masker Gel¬ Peel-Off Ekstrak Etanol  Daun  Kelor  ( Moringa  oleifera Lam.). Jurnal Mipa , 8(3): 112–115.
Velasco,  M.V.R.,  Vieira,  R.P.,  Fernandes, A.R.,  Dario,  M.F.,  Pinto,  C.,  Pedriali, C.A.,  Kaneko,  T.M.  &  Baby,    A.R. 2014.  Short‐term  clinical  of  peel‐off facial  mask  moisturizers. International Journal  of  Cosmetic  Science , 36(4): 355–360.
Wardhani,  R.A.P.,  &  Supartono.    2015.  Uji aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kulit Buah Rambutan ( Nephelium lappaceum L.) pada Bakteri. Indonesian Journal of Chemical Science , 4(1): 46–51.
Waworuntu,  M.G.,  Suryanto,  E,  &  Momuat,
L.I.  2018. Aktivitas Penangkal Radikal
Bebas  dan  Penstabil  Oksigen  Singlet dari  Ekstrak  Biji  Jagung  Manado Kuning  ( Zea  mays L.). Chemistry Progress , 11(1): 35–41.
Winahyu,  D.A.,  Retnaningsi,  A.  &  Aprillia, M.    2019.  Penetapan  Kadar  Flavonoid pada Kulit Batang Kayu Raru (CotylelobiummelanoxylonP)  dengan Metode Spektrofotometri UV-Vis.
Jurnal Analis Farmasi , 4(1): 29–36.
Zhelsiana, D.A., Pangestuti, Y.S., Nabilla, F., Lestari,  P.N.  &  Wikantyasning,  E.R. 2016. Formulasi dan evaluasi sifat fisik masker gel peel-off lempung bentonite. The 4 th Univesity Research Coloquium.