DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938
ISSN 2460-6804 (online)

## JBIO: JURNAL BIOSAINS
(The Journal of Biosciences)
http://jurnal.unimed.ac.id/2012/index.php/biosains email : jbiosains@unimed.ac.id
HEPATOPROTEKTIF EKSTRAK ETANOL DAUN DAN BUAH KERSEN ( Muntingia calabura L .)

## PADA TIKUS YANG DI INDUKSI ALKOHOL
Hendro Pranoto, Meida Nugrahalia
Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Medan Email korespondensi: hendrop.unimed77@gmail.com
Diterima:  Desember 2019; Direvisi: Juni 2020; Disetujui: Juli 2020

## ABSTRAK
Penelitian  ini  dilakukan  untuk  mengetahui  potensi  hepatoprotektif  ekstrak  etanol  daun  kersen (EEDK) dan ekstrak etanol buah kersen (EEBK) pada tikus putih (Rattus novergicus Sprague Dawley strain). 30 ekor tikus dibagi menjadi 6 kelompok yaitu kelompok I  (diberikan 10 mL / KgBB CMC 0.5%); kelompok II (diberikan 3 mL alkohol 30%): kelompok III (diberikan 25 mg / KgBB sylimarin and 3 mL alkohol 30%); kelompok IV (500 mg / KgBB EEDK and 3mL alkohol 30%) and kelompok V (500 mg / KgBB EEBK and 3 mL alkohol 30%) selama  15 hari. Parameter yang diukur meliputi indeks organ hati, histopatologi  hati, total bilirubin,  direct  bilirubin,  indirect  bilirubin,  SGPT,  ALP,  total  protein  and  albumin.  Data  yang  diperoleh dianalisis  menggunakan  ANOVA  dan  dilanjutkan  dengan  uji  Tukey  menggunakan  SPPS  versi  22.  Hasil penelitian menunjukkan penurunan yang signifikan pada indeks organ hati, total bilirubin, direct bilirubin, indirect bilirubin, SGPT and ALP jika dibandingkan dengan tikus yang di induksi dengan alkohol (kelompok II). Total protein dan albumin mengalami peningkatan yang signifikan jika dibandingkan dengan kelompok II. Hasil skrining fitokimia bahwa pada daun dan buah kersen mengandung senyawa alkaloid, falvonoid, fenol dan terpenoid. Dapat disimpulkan bahwa baik EEDK dan EEBK berpotensi sebagai hepatoprotektif pada tikus yang diinduksi alkohol.
Kata Kunci : Daun Kersen, Buah Kersen, Hepatoprotektif
HEPATOPROTECTIVE ETHANOL EXTRACTS OF KERSEN ( Muntingiacalabura L .) LEAVES AND FRUIT IN ALCOHOL-INDUCED RATS

## ABSTRACT
This study was conducted to determine the hepatoprotective potential of ethanol extract of Kersen leaves  (EEKL)  and  ethanol  extract  of  Kersen  fruits  ( EEKF )  in  laboratory  rats  ( Rattus  novergicus  Sprague Dawley strain). 30 rats were divided into 6 groups namely group I (given 10mL/KgBW CMC 0.5%); group II (given 3mL 30% alcohol); group III (given 25 mg / KgBW silymarin and 3 mL of 30% alcohol); group IV (given 500 mg/kg BW of EEKL and 3mL of 30% alcohol); and group V (given 500 mg/kg BW of EEKF and 3mL of 30% alcohol) for 15 days. The parameters measured included the index of the liver, liver histopathology, total bilirubin, direct bilirubin, indirect bilirubin, SGPT, ALP, total protein, and albumin. The obtained data were analyzed using ANOVA and Tukey test using SPSS version 22.From the results of the study, it was found that there was a significant decrease in the index of the liver, total bilirubin, direct bilirubin, indirect bilirubin, SGPT, and ALP compared to the rats induced with alcohol (group II). Total protein and albumin experienced a  significant increase compared  to group  II. Phytochemical  screening  results  showed  that  the  leaves and cherries contain an alkaloid, flavonoid, phenols, and terpenoids. Thus, it can be concluded that both EEKL and EEKF have the potential to be hepatoprotective in alcohol-induced rats.
Keywords: Kersen leaves, Kersen fruit, hepatoprotective
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938 ISSN 2460-6804 (online)

## Pendahuluan
Kerusakan  organ  hepar  dapat  disebabkan oleh  berbagai  faktor  seperti  infeksi,  obat-obatan tertentu,  lingkungan  dan  faktor  sosial  seperti alkoholism  (Ali et  al. ,  2004).  Minuman  beralkohol baik legal maupun ilegal merupakan masalah besar di  Indonesia  karena  dikonsumsi  oleh  berbagai tingkatan sosial ekonomi, baik yang kaya maupun yang miskin (Nurwijaya & Zullies, 2009). Meminum alkohol  secara  berlebihan  dapat  merusak  semua organ tubuh dan jaringan hepar merupakan lokasi yang  mengalami  kerusakan  terparah  karena merupakan jalur utama metabolisme etanol (Lieber, 2000).  Konsumsi  alkohol  akan  meningkatkan peroksidasi  lipid  (Nanji et  al. ,  2003).  Kerusakan struktur  dan  integritas  membran  sel  hepatosit akibat  peroksidasi  lipid  berkaitan  dengan peningkatan  kadar  enzim  GGT  ( gamma-glutamyl transferase ), SGPT ( glutamate pyruvate transaminase ),  SGOT  ( glutamate  oxaloacetate transaminase ), ALP ( alkaline phosphatase ) dan total bilirubin (Singh & Gupta, 2011).
Evaluasi  aktivitas  hepatoprotektif  melalui aksi  antioksidan  merupakan  fokus  penelitian tanaman  obat  saat  ini  (Singh  &Gupta,  2011). Konsumsi  herbal  untuk  terapi  pengobatan  di seluruh  dunia  mengalami  peningkatan  sehingga sangatlah  penting  untuk  mengembangkan  obat- obatan yang bersumber dari bahan alam (Said et al. , 2002).
Salah  satu  tanaman  yang  berpotensi sebagai  hepatoprotektif  adalah  kersen  ( Muntingia calabura  L ).  Mahmood et  al (2014a)  mengatakan bahwa daun, batang, kulit batang, bunga, buah dan akar  tanaman  kersen  sudah  digunakan  secara tradisional  untuk  mengobati  berbagai  macam penyakit.Di  indonesia,  tanaman  kersen  sudah digunakan  secara  tradisional  untuk  mengobati asam urat, obat batuk dan luka bakar (Handayani & Sentat,  2016).  Sudargo et  al (2017)  mengatakan bahwa  jus  buah  kersen  berpotensi  untuk  terapi nutrisi pada pasien dengan kondisi hiperlipidemia. Senyawa  flavonoid,  tannin  dan  fenol  memiliki aktivitas antioksidan (Amic et al. , 2003; Toul et al ., 2016;  Lin et  al .,  2015).Daun  dan  buah  kersen diketahui memliki aktivitas antioksidan (Puspitasari  &Wulandari,  2017;  Sami et  al. ,  2017; Farida  &  Sari,  2009;  Triswaningsih et  al. ,  2015). Aktivitas  hepatoprotektif  ekstrak  metanol  daun kersen  pada  tikus  yang  diinduksi  parasetamol sudah  dilakukan  oleh  Mahmood et  al. ,  (2014b). Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui potensi  hepatoprotektif  ekstrak  etanol  daun  dan buah kersen pada tikus putih Spraguey Dawley yang diinduksi alkohol.

## Bahan dan Metode
Daun  yang  digunakan  adalah  daun  tua karena  memiliki  aktifitas  antioksidan  yang  sangat kuat (Kuntorini et al. , 2013). Buah yang digunakan adalah buah yang masih mentah karena kandungan senyawa  flavonoidnya  lebih  tinggi  dari  pada  buah yang sudah matang (Kubola et al. , 2011). Daun kersen yang telah di pilih, kemudian di keringkan pada tempat yang tidak terkena cahaya matahari  langsung.  Untuk  pembuatan  ekstrak etanol buah  kersen, terlebih dahulu buah kersen di blanching pada  suhu  75 – 95 0 C  selama  30  detik selanjutnya dibekukan selama 24 jam. Buah kersen yang sudah beku di keringkan menggunakan freeze dryer selama  48  jam  dengan  kadar  air  ±  10% selanjutnya  dipotong-potong.  Simplisia  (daun  dan buah) ini kemudian di haluskan dan dimasukkan ke dalam  maserator  selama  48  jam  dalam  larutan etanol.  Selanjutnya  dilakukan  pemekatan  ekstrak encer dengan menggunakan rotary evaporator pada suhu  40 0 C.  Hasil  ekstraksi  di  gunakan  untuk  uji hepatoprotektif.  Deteksi  senyawa  alkaloid,  fenol, terpenoid dan flavonoid secara kualitatif pada daun dan buah kersen berdasarkan Singh et al (2017) dan Ajiboye et al (2013). Dosis  ekstrak  etanol  daun  dan  buah ditetapkan berdasarkan hasil penelitian Mahmood et al (2014b) dan rancangan penelitian diadaptasi dari  Singh& Gupta (2011). Sebanyak 30 ekor tikus putih  digunakan  dalam  penelitian  ini  yang  dibagi menjadi  enam  kelompok  yaitu  Kelompok  I, diberikan  10  mL/KgBB  CMC  0,5%  ;  Kelompok  II, diberikan  3  mL  alkohol  30%:  Kelompok  III, diberikan 25 mg/KgBB sylimarin dan 3 mL alkohol 30%; Kelompok IV, diberikan 500 mg/KgBB EEDK dan 3mL alkohol 30% dan Kelompok V, diberikan 500mg/KgBB EEBK dan 3 mL alkohol 30% selama 15  hari.  Pada  hari  ke-16  dilakukan  penimbangan berat  badan,  pengambilan  sampel  darah  dan terminasi  untuk  penimbangan  organ  hepar  untuk menentukan indeks hepar (berat hepar x 100/berat badan).
Pengambilan  sampel  darah  melalui  sinus orbitalis  kemudian  sampel  darah  di  sentrifugasi dengan  kecepatan  3000  rpm  selama  10  menit. Kadar albumin dan total protein  ditentukan secara kuantitatif dengan metode kolorimetri (Lowry et al. , 1951).  Kadar  SGPT  diukur  menggunakan spektofotometri dengan metode Reitman &Frankel (1957).  Serum  ALP  diukur  dengan  metode  King &Armstrong (1934). Penentuan total bilirubin dan bilirubin  yang  terkonjugasi  menggunakan  metode Balistrei &Shaw (1987). Kadar bilirubin yang tidak terkonjugasi  dihitung  berdasarkan  selisih  antara total bilirubin dan bilirubin terkonjugasi.
Pembuatan preparat histologi menggunakan  metode  parafin  dan  pewarnaan
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938
ISSN 2460-6804 (online)
Hematoksilin-Eosin  (Clark,  1973).  Analisis  data menggunakan  ANOVA  dengan  taraf  kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan uji Tukey. Semua data dianalisis menggunakan program SPSS versi 22.

## Hasil dan Pembahasan
Hasil skrining yang ditampilkan pada tabel 1 memperlihatkan bahwa baik EEDK maupun EEDK mengandung senyawa alkaloid, fenol, terpenoid dan flavonoid.
Tabel 1. Hasil Analisis fitokimia Fitokimia EEDK dan EEDB Sampel tanaman Alkaloid Fenol Terpenoid Flavonoid Daun + + + + Buah + + + +
Keterangan : tanda + menunjukkan keberadaan senyawa
Pengaruh pemberian ekstrak etanol daun dan buah kersen terhadap indeks hepar disajikan pada tabel 2.
Tabel 2. Pengaruh EEDK dan EEBK terhadap indeks hepar pada tikus putih yang diinduksi alkohol Kelompok Berat badan (gr) Berat hepar (gr) Indeks hepar I (Normal) 217,12±3,46 6,27±0,24 2,89±0,10 a II (Alkohol) 220,48±3,33 9,15±0,56 4,15±0,15 b III (Alkohol + 25 mg/KgBB sylimarin) 209,16±3,20 6,27±0,84 3,00±0,09 ac IV (Alkohol + 500 mg/KgBB EEDK) 241,21±3,11 7,55±0,72 3,13±0,06 cd V (Alkohol + 500 mg/KgBB EEBK) 204,26±4,31 6,7±0,68 3,28±0,05 d
Keterangan : masing-masing nilai menunjukkan hasil rata-rata ± standar deviasi, (n=6). Notasi yang berbeda menunjukkan perbedaan yang signifikan (p˂0,05).
Pemberian
25mg/KgBB
sylimarin (kelompok III), 500 mg/KgBB EEDK (kelompok IV) dan  500  mg/KgBB  EEBK  (kelompok  V)  mampu menurunkan  nilai  indeks  hepar  secara  signifikan jika  dibandingkan  dengan  tikus  yang  diinduksi alkohol  (kelompok  II).  Penurunan  nilai  indeks hepar  pada  pemberian  EEDK  lebih  baik  jika
dibandingkan  dengan  pemberian  EEBK  meskipun tidak  berbeda  signifikan.  Namun  demikian, pemberian  25  mg/KgBB  sylimarin  memiliki  efek yang  lebih  baik  dalam  menurunkan  nilai  indeks hepar  jika  dibandingkan  dengan  kelompok  V  dan memiliki kemampuan yang sama dengan kelompok IV.
Tabel  3. Pengaruh pemberian EEDK dan EEBK terhadap kadar protein total, albumin, SGPT dan ALP pada tikus yang diinduksi alkohol Kelompok Parameter Total Protein (mg/dl) Albumin (gr/dl) SGPT ALP I (Normal) 9,24±1,68 a 4,41±0,56 a 68,83±4,29 a 72,16±12,48 a II (Alkohol) 5,62±0,89 b 2,96±0,40 b 86,51±1,71 b 88,66±1,36 b III (Alkohol + 25 mg/KgBB sylimarin) 7,81±1,25 a 4,89±0,61 a 68,75±1,77 a 74,16±9,43 ab IV (Alkohol + 500 mg/KgBB EEDK) 8,80±1,01 a 3,81±0,36 ac 73,38±6,31 c 73,00±8,64 a V (Alkohol + 500 mg/KgBB EEBK) 7,82±0,60 a 3,52±0,48 bc 76,63±2,59 cd 75,33±10,17 ab
Keterangan : masing-masing nilai menunjukkan hasil rata-rata ± standar deviasi, (n=6). Notasi yang berbeda menunjukkan perbedaan yang signifikan (p˂0,05).
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938
ISSN 2460-6804 (online)
Pengaruh  pemberian  EEDK  dan  EEDB terhadap  kadar  protein  total,  albumin,  SGPT  dan ALP  pada  tikus  yang  diinduksi  alkohol  disajikan pada  tabel  3.  Pemberian  25mg/KgBB  sylimarin (kelompok III), 500 mg/KgBB EEDK (kelompok IV) dan  500  mg/KgBB  EEBK  (kelompok  V)  mampu meningkatkan kadar protein total dan albumin jika dibandingkan dengan tikus yang diinduksi alkohol (kelompok II). Kadar albumin dan ALP mengalami penurunan  setelah  pemberian    25mg/KgBB sylimarin  (kelompok  III),  500  mg/KgBB  EEDK (kelompok IV) dan 500 mg/KgBB EEBK (kelompok
V)  jika  dibandingkan  dengan  tikus  yang  diinduksi alkohol (kelompok II). Peningkatan kadar albumin setelah pemberian 500 mg/KgBB EEBK lebih baik jika  dibandingkan  dengan  pemberian  25mg/KgBB sylimarin.  Penurunan  kadar  SGPT  setelah pemberian  sylimarin  lebih  baik  jika  dibandingkan dengan  pemberian  EEDK  dan  EEBK.  Namun demikian,  Sylimarin,  EEDK  serta  EEBK  memiliki kemampuan yang sama dalam meningkatkan kadar protein total, albumin dan menurunkan kadar SGPT dan ALP.
Tabel  4. Pengaruh EEDK dan EEBK terhadap kadar Bilirubin total,Bilirubin direk dan Bilirubin indirek.
Kelompok Parameter Bilirubin Total (µmol/L) Bilirubin direk (µmol/L) Bilirubin indirek (µmol/L) I (Normal) 2,68±0,40 a 2,11±0,13 a 0,56±0,12 a II (Alkohol) 4,92±0,20 b 3,10±0,36 b 1,82±0,36 b III (Alkohol + 25 mg/KgBB sylimarin) 2,71±0,23 a 1,75±0,09 a 0,95±0,23 ac IV (Alkohol + 500 mg/KgBB EEDK) 2,76±0,24 a 1,80±0,06 a 0,99±0,29 c V (Alkohol + 500 mg/KgBB EEBK) 2,86±0,13 a 1,83±0,09 a 1,03±0,10 c
Keterangan : masing-masing nilai menunjukkan hasil rata-rata ± standar deviasi, (n=6). Notasi yang berbeda menunjukkan perbedaan yang signifikan (p˂0,05).
Pengaruh  pemberian  EEDK  dan  EEDB terhadap  kadar  bilirubin  total, bilirubin  direk  dan bilirubin indirek pada tikus yang diinduksi alkohol disajikan pada tabel 4. Pemberian sylimarin, EEDK dan  EEBK  dapat  menurunkan  protein,  albumin, total bilirubin, bilirubin direk, bilrubin indirek jika dibandingkan  dengan  kelompok  II  (kerusakan hepar  yang  diinduksi  alkohol).  Pemberian sylimarin,  EEDK  dan  EEDK  memiliki  kemampuan
yang sama dalam menurunkan kadar total bilirubin , bilirubin direk, bilrubin indirek.
Studi  histopatologi  menunjukkan  bahwa jaringan  hati  pada  tikus  yang  dinduksi  alkohol menunujukkan adanya inflamasi dan nekrosis pada hepatosit.  Pemberian  EEDK  dan  EEDK  berhasil memulihkan kerusakan jaringan hati yang diinduksi oleh alkohol.
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938
Gambar  1. Pengamatan  mikroskopis  jaringan  hati  setelah  pemberian  EEBK  dan  EEDK  pada  tikus  yang diinduksi alkohol : (a) normal, (b) jaringan hati yang diinduksi alkohol menunjukkan adanya nekrosis dan inflamasi, (c) pemberian sylimarin 25 mg/KgBB menunjukkan histologi normal, (d) pemberian EEBK 500 mg/KgBB menunjukkan histologi normal, (e) pemberian EEDK 500 mg/KgBB menunjukkan histologi normal. VS = Vena sentralis, N = Nekrosis, I = Inflamasi.
Peningkatan  kadar  SGPT,  ALP,  total bilirubin,  bilirubin  direk,  bilirubin  indirek,  total protein  serta  albumin  pada  tikus  yang  di  induksi alkohol merupakan tanda terjadinya kerusakan hati (Bagban et  al .,  2012).  Minuman  beralkohol utamanya  di  metabolisme  pada  sel-sel  parenkim hepatosit yang membentuk 70% dari massa organ hati (Jones, 1996). Menurut Osna et al (2017) bahwa enzim-enzim  yang  mengkatalisis  oksidasi  alkohol, seperti alcohol dehidrogenase (ADH) dan sitokrom P 450 2E1 atau CYP 2E1 akan mengalami peningkatan
tajam sehingga menghasilkan asetaldehid. Asetaldehid  ini  sangat  reaktif  dan  toksik  karena dapat  berikatan  dengan  albumin(Donohue et  al ., 1983), fosfolipid (Kenney, 1982) dan asam nukleat (Brooks  &Zakhari,  2014).  Mauch et  al (1986) menegaskan  bahwa  asetaldehid  dapat  merusak pada  tingkat  enzim  secara in  vitro sehingga berpotensi merusak pada tingkat subseluler bahkan seluler.  Semakin  banyak  CYP  2E1  yang  dibentuk maka  semakin  banyak  pula  asetaldehid  yang dihasilkan  dan  tidak  hanya  itu,  beragam reactive
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938
ISSN 2460-6804 (online)
oxygen  species (ROS)  juga  dihasilkan  (Osna et  al ., 2017). Peningkatan molekul ROS akan menciptakan kondisi  yang  disebut  stres  oksidatif,  dimana  laju pembentukan ROS melebihi kapasitas jaringan hati untuk  menetralisirnya.  Gilgun-Sherki et  al (2001) mengatakan  bahwa  antioksidan  endogen  tidak cukup efektif menurunkan stres oksidatif sehingga dibutuhkan juga antioksidan eksogen.
Stres  oksidatif  akan  diperparah  jika pembentukan  ROS  mengalami  reaksi  sekunder dengan  protein  dan  lipid  yang  kemudian  akan membentuk  lipid  peroksida  (Osna et  al .,  2017). Situnayake et  al (2011)  juga  menegaskan  bahwa konsumsi  alkohol  yang  berlebihan  dapat menyebabkan infalamasi hati dan peroksidasi lipid. Peningkatan  peroksidasi  lipid  menyebabkan kerusakan  jaringan  dan  kegagalan  mekanisme pertahanan antioksidan untuk mencegah pembentukan radikal bebas  yang berlebihan  serta menimbulkan respon imun (Alagammal et al ., 2013; Tuma et al ., 1996).
EEDK  dan  EEBK  berhasil  mengembalikan efek hepatotoksik pada tikus yang diinduksi alkohol dengan  cara  menurunkan  kadar  SGPT,  ALP,  total bilirubin, bilirubin direk dan bilirubin indirek serta meningkatkan  kadar  total  protein  dan  albumin. Analisis  histopatologi  menunjukkan  adanya inflamasi  dan  nekrosis  pada  hepatosit  pada  tikus yang  dinduksi  alkohol.  Inflamasi  dan  nekrosis merupakan  karakteristik  umum  yang  ditunjukkan pada penyakit hati yang disebabkan alkohol (Ma & Brunt, 2012; Nanji &Hiller-Sturmhöfel, 1997). Hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  pemberian  EEDK dan  EEBK  memberikan  efek  pemulihan  terhadap jaringan  hati.    Restorasi  biokimia  dan  pemulihan jaringan  hati  ini  kemungkinan  disebabkan kemampuan  EEDK  dan  EEBK  dalam  menghambat sitokrom CYP2E1. Lin et al (2014) juga menegaskan bahwa  pencegahan  kerusakan  jaringan  hati  dapat dilakukan  dengan  cara  penghambatan reactive oxygen spesies (ROS) yang menginduksi peroksidasi lipid  atau  secara  langsung  menurunkan  produksi ROS dan kemungkinan juga melalui penghambatan aktivitas CYP2E1.
Kemampuan  untuk  menurunkan  kadar enzim  berkaitan  dengan  pencegahan  peroksidasi lipid  pada  retikulum  endoplasmik  dengan  cara mendisrupsi  pengikatan  radikal  bebas  terhadap makromolekul,  mencegah  proses  peroksidasi lipidserta  stabilisasi  membran  hepatoseluler (Mahmood et  al .,  2014b;  Mujeeb et  al .,  2009). Mekanisme perlindungan juga dapat terjadi dengan cara mengaktivasi regenerasi sel-sel hepar melalui peningkatan sintesis protein dan glikoprotein atau akselerasi detoksifikasi dan ekskresi (Kumar et al. , 2009).
Beberapa  studi  menyebutkan  bahwa konsumsi etanol secara kronik dapat menurunkan aktivitias  dan  atau  jumlah  beberapa  enzim antioksidan  (Chen et  al .,  1995;  Dong et  al .,  2014; Zhao et  al .,  1996).  Kemungkinan  EEDK  dan  EEBK dapat  meningkatkan  aktivitas  dan  atau  jumlah enzim-enzim antioksidan. Dugaan ini diperkuat dari hasil  skrining  fitokimia  dari  EEDK  dan  EEDB mengandung  flavonoid,  fenol,  alkaloid  dan terpenoid. Potensi hepatoprotektif EEDK dan EEBK dapat  dijelaskan  berdasarkan  komposisi  senyawa aktif  yang  terdapat  pada  ekstrak.  Sebagai  contoh, flavonoid  dan  fenol  memiliki  aktifitas  antioksidan (Senet et al. , 2017) dan hepatoprotektif (Tapas et al. , 2008). Alkaloid memiliki aktivitas antioksidan dan hepatoprotektif  (Gan et  al .,  2017;  Sangale  &  Patil, 2017;  Dalimunthe et  al .,  2018).  Hal  ini  sejalan dengan  pendapat  Mahmood et  al (2014b)  bahwa aktifitas hepatoprotektif daun kersen kemungkinan melibatkan  aksi  sinergisitas  dari  konstituen fitokimia  yang  terdapat  pada  ekstrak  tersebut. Namun  demikian,  perlu  dilakukan  penelitian lanjutan untuk mengetahui kemungkinan mekanisme  hepatoprotektif  serta  isolasi  senyawa bioaktif pada EEDK dan EEBK.

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  bahwa ekstrak  tanaman  kersen  memiliki  potensi  untuk dikembangkan  sebagai  hepatoprotektif  akibat mengkonsumsi  alkohol.  Namun  demikian,  perlu dilakukan  penelitian  lanjutan  untuk  mengetahui kemungkinan  mekanisme  hepatoprotektif  yang terlibat dan isolasi dan pengujian senyawa bioaktif pada tanaman ini.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis mengucapkan terima kasih kepada Universitas Negeri Medan yang telah memberikan dana penelitian (nomor : 282/UN33.8/PL/2018).

## Daftar Pustaka
Ajiboye,  B.O.,  Ibukun,  E.O.,  Edobor,  G.,  OJO,  A.O  & Onikanni,  S.A.  (2013).  Qualitative  and Quantitative  Analysis  of  Phytochemicals  in Senecio biafrae Leaf . Int.J.Inv.Pharm.Sci 1 : 428- 432. Alagammal, N., Lincy, M.P & Mohan, V.R.(2013).Hepatoprotective  and  antioxidant effect of Polygala rosmerinifolia Wight & Arn against  CCL4  induced  hepatotoxicity  in  rats.
Journal of Pharmacognosy
and
Phytochemistry 2 : 118-124.
Ali, M.,  Ramachandran, R., Rafiullah, M.R.M., Singh, O., Siddiqui, A.W & Mir, S.R. (2004). Prevention of carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938 ISSN 2460-6804 (online)
by the ethanol extract of Capparis moonii fruits in rats. Pharmaceutical Biology 42 : 286-288. Amic, D., Davidovic-Amic, D., Beslo, D & Trinajstic. (2003). Structure-Radical Scavenging Activity Relationships of Flavonoids. Croat. Chem. Acta
76 : 55 – 61. Bagban,  I.M.,    Roy,  S.P.,  Chaudhary,  A.,  Das,  S.  K., Gohil, K.J & Bhandari, K.K.
(2012).Hepatoprotective  activity  of  the methanolic extract of  Fagonia indica  Burm in carbon tetra chloride induced hepatotoxicity in albino  rats. Asian  Pacific  Journal  of  Tropical Biomedicine : S1457-S1460 Balistrei,  W.R.  &Shaw,  L.M  (1987). Liver  function In:Fundamental  of  Clinical  Chemistry ,  (Ed) Tietz  N.W.  3rd  edition.  W.B.  Saunders Company, Philadelphia.; 729-761.
Brooks, P.J & Zakhari, S. (2014). Acetaldehyde and the Genome: Beyond Nuclear DNA Adducts and Carcinogenesis. Environmental  and  Molecular Mutagenesis 55 :77-91.
Chen,  L.H  & Cohen,  D.A.  (1995). Liver  Antioxidant defenses  in  Mice  Fed  Ethanol  and  the  AIN- 76A. Alcohol l2 : 453-457. Fed Clark,  G.,  (ed.).(973).    Staining  Procedures,  3rd Edition, Williams & Wilkins, Baltimore.
Dalimunthe, A., Hasibuan, P.A.Z., Silalahi, J., Sinaga, S.F & Satria, D. (2018). Antioxidant Activity of Alkaloid  Compounds  from Litsea  cubeba Lour . Oriental  Journal  of  Chemistry 34 :  1149- 1152.
Dong,X., Liu,H., Chen,F.,  Li,D & Zhao, Y. (2014). MiR- 214  Promotes  the  Alcohol-Induced  Oxidative Stress  via  Down-Regulation  of  Glutathione Reductase and Cytochrome P450 Oxidoreductase in Liver Cells. Alcoholism Clin and Exp Res 38 : 68-77. Donohue,  T.M.,  Tuma,  D.J  &  Sorrell,  M.F.  (1983). Acetaldehyde Adduct with protein: Binding of ( 14 C) Acetaldehyde to Serum Albumin. Archives of Biochemistry And Biophysics 220 : 239-246. Farida,  Y.,  Sugiastuti,  S  &  Sari,  W.L.  (2009).  Uji Aktivitas  Antioksidan  Pada  Buah  Talok ( Muntingia calabura L. ) dengan metode DPPH dan Rancimat. Seminar Nasional Perhimpunan Ahli  Teknologi  Pangan  Indonesia  (PATPI), Jakarta, 3-4 November.
Gan,  J.,  Feng,  Y.,  He,  Z.,  Li,  X  &  Zhang,  H.  (2017).
Correlations between Antioxidant Activity and Alkaloids  and  Phenols  of  Maca (Lepidium meyenii) . Journal of Food Quality . 1-10.
Gilgun-Sherki,Y.,    Melamed,E  &  Offen,  D.  (2001). Oxidative  stress  induced-neurodegenerative diseases:  the  need  for  antioxidants  that penetrate the blood brain barrier. Neuropharmacology 40: 959 – 975.
Handayani,  F  &  Sentat,  T.  (2016).  Uji  Aktivitas Ekstrak  Etanol  Daun  Kersen  ( Muntingia calabura  L .)  Terhadap  Penyembuhan  Luka Bakar  Pada  Kulit  Mencit  Putih  Jantan  ( Mus musculus ). Jurnal Ilmiah Ibnu Sina 1 : 131-142. Jones, A.L. (1996). Anatomy of the normal liver. In: Zakim, D., and Boyer, T.D., eds. Hepatology: A Textbook  of  Liver  Disease,  Third  Edition. Philadelphia: W.B. Saunders : 3 – 32.
Kenney,  W.C.  (1982).  Acetaldehyde  Adducts  of Phospholipids. Alcoholism  :  Clinical  And Experimental Research 6 : 412-416.
King, E.J & Armstrong, A.R. (1934) Determination of serum and bile phosphatase activity. Cannadian Medical Association Journal 31 : 56-63. Kubola J, Siriamornpun, S& Meeso, N. (2011).Phytochemicals,  vitamin  C  and  Sugar Content  of  Thai  Wild  Fruits. Food Chemistry 126: 972-981.
Kumar, G.,  Banu,G.S.,  Pappa, P.V., M. Sundararajan,
M  &  M.  Rajasekara  Pandian,  M.R.  (2004). Hepatoprotective  activity  of Trianthema portulacastrum L.  against  paracetamol  and thioacetamide  intoxication  in  albino  rats.
Journal of Ethnopharmacology 92 :37 – 40.
Kuntorini,  E.M.,  Setya,  F  &Astuti,  M.D.( 2013). Struktur Anatomi Dan Uji Aktivitas
Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Daun  Kersen ( Muntingia  calabura ). Prosiding  Semirata FMIPA Universitas Lampung : 291-296.
Lieber, C.S. (2000). Ethnic and Gender Differences in Ethanol  Metabolism. Alcoholism  :  Clinical  and Experimental Research 24 : 417-418. Lin, Y.C., Cheng, K.M., Huang, H.Y., Chao, P.Y., Hwang, J.M., Lee, H.H., Cheng-You Lu, C.Y., Chiu, Y.W & Liu,  J.Y.  (2014).  Hepatoprotective  activity  of Chhit-Chan-Than  extract  powder  against carbon  tetrachlorideinduced  liver  injury  in rats. Journal of Food and Drug Analysis 22 :  220- 229.
Lin,  Mei-Su.,    Yu,  Zer-Ran.,    Wang,  Be-Jen.,  Wang, Cheng-Chi.,  Weng, Yih-Ming&Koo, M. (2015). Bioactive  Constituent  Characterization  and Antioxidant  Activity  of Ganoderma  lucidum Extract  Fractionated  by  Supercritical  Carbon Dioxide. Sains Malaysiana 44 : 1685 – 1691.
Lowry, O.H., Rosebrough,N.J., Farr, A.L& Randall R.J. (1951).  Protein  measurement  with  the  folin phenol  reagent. Journal  of  Biological Chemistry 193: 265-275.
Mahmood, N. D., Nasir, N. L., Rofiee, M. S., Tohid, S. F.; Ching, S. M., Teh, L. K., Salleh, M. Z & Zakaria, Z. A. (2014a). Muntingia calabura : a review of its  traditional  uses,  chemical  properties,  and
DOI: https://doi.org/10.24114/jbio.v6i2.17938
ISSN 2460-6804 (online)
pharmacological  observations. Pharm  Biol 52 : 598-623.
Ma,  C  &  Brunt,  E.M.  (2012).  Histopathologic Evaluation  of  Liver  Biopsy  for  Cirrhosis. Adv Anat Pathol 19 : 220-230.
Mahmood, N.D., Mamat, S.S., Kamisan, F.H., Yahya, F.,
Kamarolzaman, M.F.F., Nasir, N., Mohtarrudin,
N.,  Tohid,  S.F.  Md  &  Zakaria  Z.A.  (2014b).
Amelioration of Paracetamol-induced
Hepatotoxicity in Rat by the Administration of
Methanol  Extract  of Muntingia  calabura  L . Leaves. BioMed Research Journal International 2014: 1-10. Mauch, T.J., Donohue, T.M., ZetterMan, R.K., Sorrel,
M.F & Tuma, D.J. (1986). Covalent Binding of Acetaldehyde Selectively Inhibits the Catalytic Activity  of  Lysine-Dependent  Enzymes.
Hepatology 6 : 263-269.
Mujeeb, M., Aeri, V., Bagri, P & Khan, S. A. (2009). Hepatoprotective  activity  of  the  methanolic extract  of Tylophora  indica (Burm.  f.)  Merill. Leaves. International  Journal  of  Green Pharmacy : 125-127.
Nanji, A.A & Hiller-Sturmhöfel, S. (1997). Apoptosis And  Necrosis:  Two  Types  of  Cell  Death  in Alcoholic  Liver  Disease.  Alcohol  Healt  & Research World 21 : 325-330.
Nanji, AA., Jokelainen, K., Tipoe, G.L., Rahemtullah,
H.,  Thomas,  P  &  Dannenberg,  A.J.(2002). Curcumin  prevents  alcohol-induced  liver disease in rats by inhibiting the expression of NFKB- dependent genes. Am J PhysioGastrointest  Liver  Physiol 284 :  G321-
G327.
Nurwijaya H., Ikawati,Z. (2009). Bahaya Alkohol dan Cara Mencegah Kecanduannya . Jakarta: PT Elex Media Komputindo. Osna, N.A., Donohue, T.M & Kharbanda, K.K. (2017). Alcoholic  Liver  Disease  :  Pathogenesis  and Current  Management. Alcohol  Research  : Current Reviews 38 : 147-161.
Puspitasari, A.D & Wulandari, R.L. (2017). Aktivitas antioksidan dan penetapan kadar fenolik total dan  flavonoid  total  ekstrak  daun  kersen ( Muntingia  calabura  L .). Pharmaciana 7 :  147- 158.
Reitman,  S&  Frankel,  S.A.(1957).  Colorimetric method  for  the  determination  of  serum glutamic  oxaloacetic  and  glutamic  pyruvic transaminases. American  Journal  of  Clinical
Patholog 28 : 56-63.
Said,  O.,  Khalil,  K.,  Fulder,  S  &  Azaizeh,  H.  (2002). Ethnopharmacological  survey  of  medicinal herbs in Israel, the Golan Heights and the West Bank region. Journal of Ethnopharmacology 83
: 251-265.
Sami, FJ., Nur, S., Ramli, N & Sutrisno, B.(2017).Uji Aktivitas Antioksidan Daun Kersen ( Muntingia calabura L .) dengan Metode DPPH (1,1-difenil- 2-pikrilhidrazil)  dan  FRAP  (Ferric  Reducing Antioxidant Power). As-Syifaa 09 : 106-111.
Sangale,  P  &  Patil,  R.  (2017).  Hepatoprotective Activity  of  Alkaloid  Fractions  from  Ethanol Extract  of Murraya  koenigii Leaves  in Experimental Animals. Journal of Pharmaceutical Sciences and Pharmacology 3 :
28-33.
Senet,  M.R.M.,  Parwata,  I.M.O.A  &  Sudiarta, I.W.(2017).Kandungan  Total  Fenol  Dan Flavonoid  Dari  Buah  Kersen  ( Muntingia calabura )  serta  Aktivitas  Antioksidannya.
Jurnal Kimia . 11 : 187-193.
Singh,D  &  Gupta,  R.S.(2011).  Hepatoprotective Activity  of  Methanol  Extract  of Tecomella undulata against  Alcohol  and  Paracetamol Induced  Hepatotoxicity  in  Rats.  Life  Sciences and Medicine Research: LSMR-26 1 Situnayake,  R.D.,  Crump,  B.J.,  Thurnham,  D.I., Davies, J.A., Gearty, J & Davis, M. (1990). Lipid peroxidation  and  hepatic  antioxidants  in alcoholic liver disease. Gut 31 : 1311-1317 Tapas,  A.R.,  Sakarkar,  D.M.  &  Kakde,  R.  B.  (2008). Flavonoids  as  nutraceuticals:  a  review, Tropical Journal of Pharmaceutical Research 7 : 1089 – 1099.
Toul,  F.,  Belyagoubi-Benhammou,  N.,  Zitouni,  A., Ghembaza,  N  &  Atik-Bekkara,  F.  (2016). In- Vitro Antioxidant Effect of Tannin Extracts of Pistacia atlantica . IJPSR 7 : 1000-06.
Triswaningsih,  D.,  Kumalaningsih  S,  Wignyanto  & Pratikto.  (2017).  Estimation  of  Chemical Compound  and  Antioxidant  Activity  of Muntingia  calabura  Extract. International Journal of ChemTech Research 10 : 17-23. Tuma, D.J., Thiele, G.M., XU,D., Klassen, L.W & Sorrell, M.F. (1996). Acetaldehyde and Malondialdehyde  React  Together  to  Generate Distinct  Protein  Adducts  in  the  Liver  During Long-term Ethanol Administration. Hepatology 23 :872-880.
Zhao, M., Matter,K.,  Laissue, J.A & Zimmermann, A.
(1996). Copper/zinc and manganese superoxide  dismutases  in  alcoholic  liver disease:  immunohistochemical  quantitation.
Histol Histopathol 11 : 899-907.