Jurnal Ilmiah Kesehatan Sandi Husada hhttps://akper-sandikarsa.e-journal.id/JIKSH Vol 11,  No, 1, Juni 2020, pp;430-440 p-ISSN: 2354-6093 dan e-ISSN: 2654-4563 DOI: 10.35816/jiskh.v10i2.319
ARTIKEL PENELITIAN
Efektivitas Antibakteri Campuran Nanokitosan 1% dengan Berbagai Konsentrasi Ekstrak Biji Kelengkeng Terhadap Staphylococcus Aureus
Comparison of Antibacterial Effectiveness of Nanochitosan 1% Mixture with Various Concentrations of Longan Seed Extract against Staphylococcus Aureus
Sabrina Khairunnisa 1 , Titania Aurelya Tandra 2 , Mellisa Sim 3 , Florenly 4 1 2 Pendidikan Dokter Gigi, Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Prima Indonesia
3 4 Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Prima Indonesia

## Artikel info
Artikel history: Received; 20 April 2020 Revised: 20 Mei 2020 Accepted; 23 Mei 2020 Abstract. As  shown  on  the  qualitative  phytochemical examinations,  longan  seeds  contains  bioactive  compounds  of flavonoids,  glycosides,  saponins  and  tannins,  hence  it  has antibacterial potential. Whereas nanochitosan, besides having antibacterial activity, is used as a matrix for various types of drugs  and  plant  extracts.  This  study  aims  to  compare  the effectiveness  of  nanochitosan  1%  mix  with  longan  seed extract  in  inhibiting  the  growth  of  Staphylococcus  aureus, between  80%,  60%  and  40%  concentration.  Longan  seed extract  was  prepared  using  maceration  method  and  made into  various  concentration,  i.e.  80%,  60%  and  40%.  The nanochitosan  1%  was  prepared  with  ionic  gelation  method. The  two  ingredients  were  mixed  in  a  ratio  of  1:  1.  The antibacterial  investigations  on  the  different  concentration utilized  the  disk  diffusion  method.  The  results  presented  the mean inhibition power of a mixture of 80% concentration was 9.38 mm; concentration of 60% (8.47 mm) and concentration of 40% (7.10 mm). Statistical analysis using one way ANOVA showed  the  most  effective  concentration  of  mixture  in inhibiting Staphylococcus aureus was seen at 80%, where p = 0,000  (p  <0.05).  The  results  of  this  study  indicate  that increasing  the  concentration  of  longan  seed  extract strengthens  the  inhibitory  power  against  Staphylococcus aureus.  The  outcome  was  justified  as  the  increment  in concentration of longan seed extracts lead to increase in the quantity  of  active  compounds,  thereby  upsurge  its effectiveness in damaging Staphylococcus aureus cells. Abstrak. Uji fitokimia kualitatif menunjukkan biji kelengkeng mengandung  senyawa  bioaktif  flavonoid,  glikosida,  saponin dan  tanin,  sehingga  berpotensi  sebagai  antibakteri. Sedangkan nanokitosan, selain memiliki aktivitas antibakteri,
dapat  juga  dijadikan  penghantar  obat-obatan  dan  ekstrak tanaman.  Penelitian  ini  bertujuan  membandingkan perbedaan  efektivitas  campuran  nanokitosan  1%  dengan ekstrak  biji  kelengkeng  konsentrasi  80%,  60%,  40%  dalam menghambat  pertumbuhan  bakteri  Staphylococcus  aureus. Pembuatan ekstrak biji kelengkeng dilakukan dengan metode maserasi  dan  dibuat  dalam  konsentrasi  80%,  60%,  40%. Adapun  nanokitosan  1%  dibuat  dengan  metode  gelasi  ionik. Kedua  bahan  tersebut  dicampurkan  dengan  perbandingan 1:1.  Uji  antibakteri  terhadap  campuran  ekstrak  dan nanokitosan  tersebut  menggunakan  metode  difusi  cakram. Hasil  penelitian  menunjukkan  mean  daya  hambat  dari campuran  konsentrasi  80%  adalah  9.38  mm;  konsentrasi 60% (8,47 mm) dan konsentrasi 40% (7,10 mm). Uji statistik one way ANOVA menunjukkan bahwa campuran yang paling efektif  dalam  menghambat  Staphylococcus  aureus  terlihat pada  konsentrasi  80%  dibandingkan  konsentrasi  60% maupun  40%,  dimana  p=0.000  (p<0.05).  Hasil  penelitian  ini menunjukkan  pertambahan  konsentrasi  ekstrak  biji kelengkeng meningkatkan daya hambat terhadap Staphylococcus  aureus.  Hal  ini  disebabkan  oleh  adanya peningkatan  jumlah  kandungan  senyawa  aktif  dari  ekstrak biji  kelengkeng  seiring  dengan  pertambahan  konsentrasi sehingga  meningkatkan  efektivitasnya  dalam  merusak  sel Staphylococcus aureus. Keywords: Biji Kelengkeng; Nanokitosan; Staphylococcus Aureus Coresponden author:
Email: sabrinaichaa@gmail.com
artikel dengan akses terbuka dibawah lisensi BCC BY NC ND-4.0

## Pendahuluan
SKRT  dalam  Kemenkes  RI  pada  tahun  2013  mengemukakan  penyakit  gigi  dan  mulut berada  pada  peringkat  6  yang  menjadi  suatu  permasalahan  umum  penduduk  Indonesia (Herlinawati,  2018).  Menurut  penelitian  Yamin  (2014)  sebesar  50,73%  bakteri  gram positif penyebab penyakit gigi dan mulut seperti abses ditemukan pada daerah akar gigi yang  sudah  tidak  vital.  Dari  beberapa  jenis  bakteri  gram  positif  yang  diketahui  pada rongga  mulut, Staphylococcus  aureus merupakan  salah  satu  bakteri  penyebab  penyakit rongga  mulut  tersebut  (Apridamayanti,  2017).  Banyaknya  kasus  resistensi  terhadap Staphylococcus  aureus yang  menjadi  masalah  dan  perlu  diperhatikan  (Panuluh,  2019). Pemberian obat yang tidak rasional semakin meningkatkan resistensi bakteri ini terhadap berbagai  jenis  antibiotik.  Penelitian  menyatakan  antibitotik  golongan  penisilin  sangat resisten pada bakteri Staphylococcus epidermis, Staphylococcus aureus dan Staphylococcus hemolyticus (Marhamah, 2016).
Penelitian  dengan  bahan  tanaman  dapat  dilakukan  dalam  mengembangkan  alternatif untuk  menghambat  dan  membunuh  bakteri  (Ngajow et  al .,  2013).  Pada  penelitian Lumbessy (2013) terbukti tanaman memilki banyak kandungan senyawa aktif yang dapat dimanfaatkan, seperti flavonoid yang ditemukan pada berbagai tanaman. Tanaman yang terbukti memiliki efektivitas antibakteri karna kandungan senyawanya adalah kelengkeng
( Dimocarpus longan Lour) (Prasetya et al ., 2019). Penelitian yang dilakukan Ripa (2010) membuktikan tanaman kelengkeng dapat dimanfaatkan karna memiliki golongan senyawa aktif di bagian kulit dan bijinya.
Terdapat senyawa fenolik pada bagian kulit dan biji kelengkeng yang berguna melindungi sel  dari  kerusakan  oksidatif,  serta  menghambat  pertumbuhan  ragi,  jamur,  virus  dan bakteri.  Biji  kelengkeng  mengandung  turunan  tanin,  asam  galat  dan  asam  ellagalat turunan  senyawa  fenolik  serta  flavonoid  dan  polisakarida.  Senyawa  tersebut  memiliki aktifitas  anti-inflamasi,  antimutagenik,  antikanker  dan  antioksidan  pada  biji  kelengkeng (Soong et  al .,  2005;  Tseng,  2014).  Kulit  buah  kelengkeng  juga  mengandung  antioksidan dan mampu melindungi ginjal dari toksisitas logam berat (Florenly et al ., 2016).
Penelitian dari Prakash (2014) memperkuat hipotesa dimana dinyatakan bahwa ekstrak etanol  80%  biji  kelengkeng  paling  efektif  dibandingkan  konsentrasi  100%,  60%,  50%, 40%  dan  20%  untuk  pengekstrakan  kandungan  quercetin.  Pada  penelitian  Prasetya (2019) fraksi etil asetat menggunakan ekstrak etanol biji kelengkeng konsentrasi 100000 ppm  memiliki  aktivitas  penghambatan  biofilm  tertinggi  pada  bakteri Staphylococcus aureus dengan penghambatan pembentukan biofilm sebesar 99,08%.
Penelitian  lain  yang  dilakukan  Tseng  (2014)  fraksi  ekstrak  metanol  biji  kelengkeng memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap Propionibacterium  acne , Streptococcus  mutans , Staphylococcus  aureus, dan MRSA. Meningkatnya  konsentrasi  ekstrak  menyebabkan tingginya  senyawa  polyphenolic  dalam  menghambat  bakteri-bakteri  tersebut.  Selain kandungan  senyawa  fitokimia,  buah  kelengkeng  juga  memiliki  komponen  kimia  sebagai bahan  biosorben,  dimana  daya  adsorpsi  logam  berat  dari  biji  kelengkeng  lebih  bagus dibandingkan kulitnya (Florenly et al ., 2015).
Biomaterial  alam  lain  sebagai  alternatif  pengobatan  yang  memiliki  aktivitas  antibakteri adalah  kitosan  yang  di  ekstraksi  dari  cangkang  hewan  laut  seperti  rajungan  dan  udang. Kitosan  merupakan  bahan  bioaktif  yang  punya  banyak  kelebihan  terutama penggunaannya sebagai penghantaran obat (Mohanraj et al ., 2006). Penelitian Damayanti (2016)  membuktikan  kitosan  konsentrasi  1%,  2%,  dan  3%  dapat  digunakan  untuk menghambat  bakteri  seperti Escherichia  coli , Staphylococcus  aureus dan Bacillus  subtilis yang berada di filet ikan patin.
Banyak ahli saat ini mengolah kitosan dengan nanoteknologi dan menghasilkan substansi yang disebut dengan nanokitosan. Nanokitosan mempunyai daya serap dan kemampuan antibakteri  serta  antijamur  yang  lebih  baik  daripada  kitosan.  Selain  itu,  nanokitosan mempunyai  sifat  yang  tidak  beracun,  tidak  mudah  berubah  ketika  digunakan,  tingginya luas permukaan dan juga bisa digunakan sebagai penghantar beragam jenis obat-obatan serta pengekstrakan tanaman (Berger et al ., 2004).
Penelitian yang dilakukan Qudsi (2015) menggunakan konsentrasi nanokitosan 1%, 0,5%, 0,25%,  0,125%,  dan  0,0625%  dalam  menghambat  bakteri Enterococcus  faecalis menunjukkan nanokitosan memiliki daya hambat berbeda dalam setiap konsentrasi tetapi zona hambatan terbesar ditunjukkan pada konsentrasi 1%. Banyak penelitian yang telah dilakukan dalam membuat alternatif dari bahan-bahan alami yang mengandung senyawa aktif untuk menghambat bakteri. Namun penelitian-penelitian yang telah dilakukan masih terbatas pada ekstrak biji kelengkeng atau nanokitosan secara terpisah.

## Metode
Jenis  penelitian  ini  menggunakan  penelitian  eksperimen  dalam  laboratorium    secara in vitro ,  dilakukan  penelitian post  test  only  control  group  design yaitu  dengan  observasi setelah perlakuan diberikan.    Sampel  buah  kelengkeng  segar  diperoleh  dari  perkebunan PTPN III Lubuk Pakam dan di identifikasi jenisnya di Herbarium Medanese USU. Delapan ratus  gram  sampel  biji  buah  kelengkeng  ditumbuk  dengan  lumpang  dan  diblender sehingga  halus,  kemudian  dikeringkan  dengan microwave .  Ekstraksi  dilakukan  dengan metode  maserasi  menggunakan  etanol  95%  lalu  di  aduk  setiap  24  jam  selama  5  hari. Penyaringan  dengan  kertas  saring  dan  bantuan  pompa  vakum.  Filtrat  yang  terkumpul dimasukkan kedalam rotary evaporator . Kemudian diuapkan dengan beaker glass di dalam inkubator  untuk  mendapatkan  ekstrak  pekat  biji  kelengkeng.  Ekstrak  pekat  dibuat menjadi  tiga  konsentrasi  yaitu  80%,  60%  dan  40%  dengan  DMSO.  Ekstrak  pekat  biji kelengkeng di uji fitokimia dengan metode skrinning untuk menentukan senyawa bioaktif pada  ekstrak  etanol  biji  kelengkeng  yaitu  uji  alkaloid,  flavonoid,  triterpen/steroid, saponin, tanin dan glikosida (Nugraha et al ., 2017).
Pembuatan nanokitosan menggunakan metode gelasi ionik. Bubuk kitosan sebanyak 0,2 g dicairkan  kedalam  10  mL  asam  asetat  1%  dengan magnetic  stirrer selama  8  jam,  lalu disonikasi selama 40 menit. Natrium tripolifosfat 0,1 g dicairkan kedalam 100 mL akuades dengan perlakuan  yang  sama.  Larutan  natrium  tripolifosfat  0,1%  dicampurkan  dengan larutan  kitosan  1%  dengan  perbandingan  2  :  1  menggunakan  spuit  1  mL  dengan kecepatan  penetesan  15  tetes/menit,  kemudian  di  stirrer  selama  8  jam  dan  disonikasi selama 45 menit. Sampel larutan nanokitosan dianalisis ukurannya dengan menggunakan alat PSA ( Particle Size Analysis ) dengan alat dan metode yang berbeda yaitu Dynamic light scattering dan dispersi larutan di dua laboratorium yang berbeda.  (Bangun et al ., 2018). Pencampuran larutan nanokitosan 1% kedalam tiap konsentrasi 80%, 60%, 40% ekstrak biji  kelengkeng  dengan  perbandingan  campuran  larutan  nanokitosan  dengan  tiap konsentrasi yaitu 1 : 1 (Rismana et al ., 2014).
Alat  disterilisasi,  kemudian  dilakukan  uji  pertumbuhan  bakteri  menggunakan  metode difusi  cakram.  Bakteri Staphylococcus  aureus diremajakan  dan  disebarkan  pada  media agar  dengan  kapas  pengulas  yang  steril.  Cakram  kertas  disusun  pada  bagian  atas permukaan media dengan letak yang sesuai. Peneliti membuat cakram kertas yg di tetesin ekstrak  biji  kelengkeng  80%,  60%,  40%  dan  nanokitosan  1%  dengan  mikropipet,  lalu media-media  tersebut  diletakkan  ke  dalam  suhu  37 o C  pada  inkubator  dengan  dengan waktu 24 jam. Prosedur tersebut diulangi sebanyak 6 kali pada setiap sampel. Pengukuran diameter  zona  hambat  dengan colony  counter dan  jangka  sorong  pada  media  agar dilakukan oleh peneliti (Sari et al ., 2017).
Uji  normalitas Shapiro-Wilk ,  data  yang  terdistribusi  normal  diuji  parametrik one  way ANOVA  untuk  menganalisis  signifikasi  sehingga  peneliti  dapat  mengetahui  perbedaan rata-rata antara grup perlakuan (Ramadhani et al ., 2017)

## Hasil Dan Pembahasan
Hasil identifikasi sampel biji kelengkeng pada penelitian ini didapatkan kelengkeng dari :

## Gambar 1. Pohon Kelengkeng
( Dimocarpus longan Lour )
Hasil uji skrinning fitokimia diperoleh ekstrak biji kelengkeng  pada penelitian ini positif mengandung golongan senyawa flavonoid, glikosida, saponin, dan  tannin (Tabel 1). Pada penelitian  Parubak  (2013)  menyatakan  bahwa  flavonoid  adalah  jenis  senyawa  polifenol yang dapat mencegah radikal bebas, tumor, radang dan mencegah pertumbuhan bakteri serta  virus.  Senyawa  glikosida  memiliki  fungsi  sebagai  antibakteri,  antikanker  dan imunostimulan  (Nonci et  al .,  2015).  Saponin  terdiri  dari  saponin  steroid  dan  saponin triterpenoid  yang  memiliki  fungsi  sebagai  antimikroba.  Tanin  berfungsi  sebagai antioksidan,  antiviral,  anti-inflamasi,  anti-HIV,  antitumor  dan  antibakteri  (Wau et  al ., 2019; Prasad et al ., 2009). Menurut Soong (2006) pada biji kelengkeng terdapat senyawa polifenol  seperti  asam  gallic,  corilagin,  asam  chebulinic,  asam  chebulagic,  asam  ellagic, minyak atsiri. Fungsi dari senyawa polifenol sebagai antioksidan, antikanker, antibakteri dan  menghambat  pertumbuhan  jamur.  Penelitian  lain  yang  dilakukan  oleh  Rangkadilok (2012)  mengatakan  bahwa  golongan  senyawa  pada  biji  kelengkeng  dapat  dimanfaatkan dalam menghambat bakteri dan jamur.
a                     b                    c                   d                  e                      f

## Gambar 2. Hasil Skrinning Fitokimia
Keterangan :
a. Alkaloid         d. Saponin
b. Flavonoid      e. Tanin
c. Glikosida       f. Triterpen/Steroid
Kingdom Divisi Kelas Ordo Famili Genus Spesies Nama Lokal : : : : : : : : Plantae Spermatophyta Dicotyledoneae Sapindales Sapindaceae Dimocarpus Dimocarpus longan Lour
Kelengkeng

## Tabel 1.  Golongan senyawa ekstrak biji kelengkeng
Nama Sampel  Alkaloid  Flavonoid  Glikosida  Saponin Tanin Triterpen/ Steroid Biji Kelengkeng - + + + + -
Sumber : Data primer, 2020 Ket :     +  = Positif -  = Negatif
Penelitian  ini  juga  menggunakan  nanokitosan  dengan  dua  kali  pengujian  untuk memastikan  ukuran  partikel  nanokitosan.  Uji  PSA  ( Particle  Size  Analysis )    yang  pertama menggunakan  alat  PSA  (Horiba  SZ-100)  dengan  metode Dynamic  light  scattering menunjukkan  ukuran  partikel  101,8  nm.  Kemudian,  uji  PSA  kedua  menggunakan Analysette  22  NanoTec dengan  metode  dispersi  larutan  menunjukkan  ukuran  partikel 93,71  nm.  Ukuran  nanokitosan  tersebut  sesuai  dengan  penelitian  Rachmawati  (2018) yang menyatakan nanopartikel berukuran kisaran 10–1000 nm. Pernyataan ini diperkuat oleh penelitian Gupta (2006) bahwa ukuran nanopartikel yang menjadi dasar matriks obat adalah 50-300 nm. Pada penelitian Dustgania (2008), nanokitosan berukuran 250-350 nm dijadikan  penghantar  deksametason  natrium  fosfat  agar  masuk  keperedaran  darah dengan  cepat.  Penelitian  lain  yang  dilakukan  Putri  (2018)  didapatkan  nano  partikel kitosan dengan ekstrak daun ubi jalar putih ungu berukuran 302,6 nm.
Gambar 3. Grafik Hasil Ukuran Nanokitosan Horiba SZ-100
Gambar 4. Grafik Hasil Ukuran Nanokitosan Analysette 22 NanoTec
Pada  penelitian  ini  rerata  diameter  zona  hambat  campuran  nanokitosan  1%  dengan ekstrak  biji  kelengkeng  konsentrasi  80%,  60%  dan  40%  adalah  9,38±0,802  mm, 8,47±0,690  mm  dan  7,10±0,978  mm.  Sedangkan  pada  kontrol  positif  ekstrak  biji kelengkeng  murni  konsentrasi  80%  (9,10  mm),  60%  (7,15  mm)  dan  konsentrasi  40% (6,18  mm).  Secara  statistik  diperoleh  adanya  perbedaan  yang  bermakna  dari  ketiga kelompok  sampel  dengan  derajat  kemaknaan  α=5%.  Data  menunjukkan  zona  hambat terhadap Staphylococcus aureus semakin besar seiring meningkatnya konsentrasi ekstrak yang diberikan, baik pada campuran maupun ekstrak murni. Penelitian ini sesuai dengan Santi  (2011)  yang  mengatakan  ekstrak  etanol  biji  kelengkeng  dimana  konsentrasi  2% hingga  8%  menunjukkan  peningkatan  aktivitas  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus dengan  cara  merusak  permebealitas  dinding  sel.  Penelitian  lainnya  dilakukan Trisia  (2018)  terhadap  ekstrak  daun  kalanduyung  ( Guazuma  ulmifolia  Lam. )  yang mengandung  saponin,  flavonoid,  steroid,  tanin  dan  memiliki  kandungan  alkaloid  yang efektif  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus pada  konsentrasi  80%  adalah  14,9  mm, 60%  adalah  10,2  mm  dan  40%  adalah  8,5  mm.  Bertambahnya  zona  hambat  tersebut didapat  dari  peningkatan  konsentrasi  ekstrak  dimana  semakin  banyak  pula  kandungan senyawa antibakteri di dalamnya (Alam et al ., 2017).
Tabel  2. Diameter  zona  hambat  campuran  nanokitosan  1%  dengan  ekstrak  biji kelengkeng  konsentrasi  80%,  60%,  40%  dalam  menghambat pertumbuhan Staphylococcus Aureus Bahan Uji  Konsentrasi Replikasi (mm) Diameter Mean (mm) SD 1 2 3 4 5 6 Campuran 80% 8,15  10,10  10,05  9,08  10,5  8,4 9,38 0,802 60% 7,5 9,25 9,3 8,35  8,3  8,15 8,47 0,690 40% 6,23  8,43 7,28 7,2 7,2 6,3 7,10 0,978 Kontrol Positif Ekstrak biji kelengkeng 80% 9,10 0,000 60% 7,15 40% 6,18 Nanokitosan           1% 9,45 0,000 Sumber : Data primer, 2020
Ket :  Campuran = nanokitosan 1% dengan ekstrak biji kelengkeng konsentrasi 80%, 60%, 40%
Tabel 3.  Hasil uji one way ANOVA
Bahan uji Mean SD p value Campuran 80% 9,38 0,802 0,000*
60%
8,47 0,690 40% 7,10 0,978 Kontrol Positif Ekstrak Biji Kelengkeng 80% 9,10 0,000 60% 7,15 40% 6,18 Kitosan 1% 9,45 0,000

## Sumber : Data primer, 2020
Ket :  Campuran = nanokitosan 1% dengan ekstrak biji kelengkeng konsentrasi 80%,60%,40%
*    = adanya perbedaan yang signifikan (p<0.05)
Gambar 5.  Hasil uji efektivitas antibakteri Staphylococcus aureus pada campuran nanokitosan 1% dengan ekstrak biji kelengkeng konsentrasi 80%, 60%, 40%
Gambar 6.   Hasil uji efektivitas antibakteri Staphylococcus aureus pada kontrol positif ekstrak biji kelengkeng konsentrasi 80%, 60%, 40%
Gambar 7.  Hasil uji efektivitas antibakteri Staphylococcus aureus pada kontrol positif kitosan 1%
Hasil  penelitian  ini  sejalan  dan  sesuai  oleh  penelitian    Rismana  (2014)  menyatakan campuran  nanokitosan  dengan  ekstrak  kulit  buah  manggis  1%-2%  menunjukkan  hasil daya  hambat  yang  paling  besar.  Daripada  ekstrak  kulit  buah  manggis,  campuran nanokitosan dan ekstrak lebih baik dalam menghambat Propionibacterium acnes. Hal ini dikarenakan  fungsi  nanokitosan  sebagai  bahan  matriks  yang  membawa  dan menghantarkan  senyawa  aktif  (ekstrak)  sehingga  aktivitasnya  lebih  tinggi.  Hasil  diatas sesuai dengan penelitian Lestari (2018) dimana zona hambat meningkat dari konsentrasi 0,20%-1,40%  dikarenakan  campuran  kitosan  dengan  ekstrak  daun  kesum  yang  sama- sama  memiliki  kemampuan  sebagai  antibakteri.  Kandungan  daun  kesum  yaitu  senyawa golongan fenolik, triterpenoid/steroid, flavonoid, alkaloid dan minyak atsiri yang apabila konsentrasinya semakin tinggi maka mempengaruhi nilai daya hambat terhadap bakteri.

## Simpulan Dan Saran
Terdapat  perbedaan  efektivitas  antibakteri  antara  campuran  nanokitosan  1%  dengan ekstrak biji kelengkeng ( Dimocarpus longan Lour) konsentrasi 80%,  60%, 40% terhadap Staphylococcus  aureus ,  dimana  diameter  zona  hambat  paling  optimal  pada  konsentrasi tertinggi dan minimal pada konsentrasi terendah. Demikian juga pada ekstrak murni biji kelengkeng dengan  konsentrasi  80%,  60%  dan  40%  terlihat  kecenderungan  sejenis.  Hal ini membuktikan bahwa daya hambat ekstrak biji kelengkeng terhadap bakteri meningkat seiring peningkatan konsentrasi ekstrak.
Penting  bagi  peneliti  selanjutnya  untuk  membuat  beberapa  variasi  konsentrasi nanokitosan  sehingga  dapat  dianalisa peningkatan  zona  hambat  yang  paling  optimal,  uji konsentrasi  bunuh  minimum  (KBM)  ekstrak  biji  kelengkeng  dengan  penambahan nanopartikel  nanokitosan  1%  terhadap  pertumbuhan Staphylococcus  aureus ,  uji  daya hambat ekstrak biji kelengkeng dengan penambahan nanokitosan terhadap pertumbuhan bakteri rongga mulut lainnya.

## Daftar Rujukan
Alam,  A.N  et  al.  (2017).  Penentuan  Konsentrasi  Minimum  Ekstrak  Daun  Anting-Anting (Acalypha  indica  L  .)  Sebagai  Antibakteri  Pada  Staphylococcus  Aureus. Unnes Journal of Life Science , 6 (1), 34–39.
Apridamayanti,  P.  et  al.  (2017).  Sensitivitas  Bakteri  Staphylococcus  Aureus  Terhadap Antibiotik Terapi Ulkus Diabetikum Derajat III Dan IV Wagner. Seminar Nasional Penerapan Ilmu Pengetahuan Dan Teknologi , 77–83.
Bangun,  H.  et  al.  (2018).  Preparation  and  Evaluation  of  Chitosan-Tripolyphospate Nanoparticles  Suspension  as  an  Antibacterial  Agent.  Journal  of  Applied Pharmaceutical  Science. Journal  of  Applied  Pharmaceutical  Science , 8 (12),  147– 156. https://doi.org/10.7324/JAPS.2018.81217
Berger, J. et al. (2004). Structure and Interaction In Covalently and Ionically Crosslinked
Chitosan  Hydrogels  for  Biomedical  Applications.  In European  Journal  of Pharmaceutics and Biopharmaceutics (pp. 19–34). https://doi.org/10.1016/S0939-6411(03)00161-9 Damayanti, W. et al. (2016). Aplikasi Kitosan Sebagai Antibakteri Pada Filet Patin Selama Penyimpanan Suhu Rendah . 19 (3), 321–328. https://doi.org/10.17844/jphpi.2016.19.3.321
Dustgania,  A.  et  al.  (2008).  Preparation  Of  Chitosan  Nanoparticles  Loaded  By Dexamethasone  Sodium  Phosphate. Iranian  Journal  of  Pharmaceutical  Sciences ,
4 (2), 111–114.
Florenly  et  al.  (2015).  The  Removal  Of  Cr(VI)  With  Dimocarpus  longan  As  a  Low  Cost Biosorbent. Journal of Chemical and Pharmaceutical Research , 7 (9), 81–88. Florenly  et  al.  (2016).  The  Effects  Of  Cr(VI)  In  The  Kidney  Of  Experimental  Rats  And Utilization  Of  Longanpeel  Fruit  (Dimocarpus  longan)  As  Renal  Protector  In Dentistry. Der Pharma Chemica , 8 (16), 144–148.
Gupta,  R.  et  al.  (2006).  Nanoparticle  Technology  for  Drug  Delivery.  In Nanoparticle Technology for Drug Delivery . https://doi.org/10.1201/9780849374555
Herlinawati.  (2018).  Pengetahuan  Tentang  Pemeliharaan  Kesehatan  Gigi  Dan  Deskripsi Jumlah  Karies  Gigi  Ibu  Pekerja  Di  Kelurahan  Tualang  Kecamatan  Perbaungan Serdang Bedagai. Jurnal Ilmiah PANNMED , 13 (2), 121–125.
Lestari, R.B. et al. (2018). Pemanfaatan Kitosan Kulit Udang Dengan Penambahan Ekstrak Daun  Kesum  Sebagai  Penghambat  Bakteri  Pada  Edible  Coating. Jurnal  Teknologi Pertanian , 19 (3), 207–214. https://doi.org/10.21776/ub.jtp.2018.019.03.7
Lumbessy, M. et al. (2013). Uji Total Flavonoid Pada Beberapa Tanaman Obat Tradisonal Di  Desa  Waitina  Kecamatan  Mangoli  Timur  Kabupaten  Kepulauan  Sula  Provinsi Maluku Utara. Jurnal MIPA , 2 (1), 50–55. https://doi.org/10.35799/jm.2.1.2013.766 Marhamah.  (2016). Resistensi  Bakteri  Gram  Positif  Terhadap  Antibiotik  Di  UPTD  Balai Laboratorium Kesehatan Lampung Tahun 2012-2014 . 5 (1), 467–474. Mohanraj, V.J. et al. (2006). Nanoparticles - A review. Tropical Journal of Pharmaceutical Research , 5 (1), 561–573. https://doi.org/10.4314/tjpr.v5i1.14634
Ngajow,  M.  et  al.  (2013).  Pengaruh  Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Batang  Matoa  (Pometia Pinnata)  Terhadap  Bakteri  Staphylococcus  aureus  Secara  In  Vitro. Jurnal  MIPA
UNSRAT , 2 (2), 128–132. https://doi.org/10.35799/jm.2.2.2013.3121
Nonci, F. et al. (2015). Uji Efektivitas Antibakteri Sari Buah Mengkudu (Morinda citrifolia
L) Asal Makassar Pada Daging Sapi. JF FIK UINAM , 3 (1), 17–21.
Nugraha,  A.  et  al.  (2017).  Isolasi,  Identifikasi,  Uji  Aktivitas  Senyawa  Flavonoid  Sebagai Antibakteri Daun Mangga. Indonesian Journal of Chemical Science , 6 (2), 91–96. Panuluh,  P.  (2019).  Potensi  Cengkeh  (Syzigium  Aromaticum)  Sebagai  Antibakteri Methicillin  Resistant  Staphylococcus  Aureus  (  MRSA  ). Jurnal  Ilmiah  Kesehatan Sandi Husada , 10 (2), 270–274. https://doi.org/10.35816/jiskh.v10i2.168 Parubak, A. S. (2013). Senyawa Flavonoid Yang Bersifat Antibakteri Dari Akway (Drimys becariana. Gibbs). Jurnal Kimia Universitas Sam Ratulangi , 6 (1), 34–37.
Prakash,  D.  V.  S.  et  al.  (2014).  Optimization  of  Physico-Chemical  Parameters  for  the Extraction  of  Quercetin  from  Medicinal  Herbs. Journal  of  Life  Sciences  and Technologies , 2 (2), 90–93. https://doi.org/10.12720/jolst.2.2.90-93
Prasad,  K.  N.  et  al.  (2009).  High  Pressure  Extraction  of  Corilagin  from  Longan (Dimocarpus  Longan  Lour.)  Fruit  Pericarp. Separation  and  Purification Technology , 70 , 41–45. https://doi.org/10.1016/j.seppur.2009.08.009
Prasetya,  O.  S.  et  al.  (2019).  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Dan  Antibiofilm  Fraksi  Biji Kelengkeng  (Euphoria  longan  Lour.  Steud.)  Terhadap  Staphylococcus  Aureus ATCC 6538. Journal of Pharmacey Science Annd Practice , 6 (2), 84–90. Putri,  A.  I.  et  al.  (2018).  Karakterisasi  Nanopartikel  Kitosan  Ekstrak  Daun  Ubijalar ( Ipomoea batatas L .) Menggunakan Metode Gelasi Ionik. Jurnal Pendidikan Dan Ilmu Kimia , 2 (2), 203–207.
Qudsi, D. C. M. et al. (2015). Perbandingan Efektivitas Kitosan (2-Acetamido-2-Deoxy-D- Glucopyranose)  dan  Nano  Kitosan  terhadap  Pertumbuhan  Bakteri  Enterococcus faecalis secara In Vitro. Majalah Kesehatan FKUB , 2 (4), 229–240.
Rachmawati,  A.  et  al.  (2018).  Formulasi  Dan  Karakterisasi  Nanopartikel  Sambungsilang Gom  Xantan  Dan  Gom  Akasia  Untuk  Penghantaran  Insulin  Oral. Pharmaceutical Sciences and Research , 5 (3), 159–168.
Ramadhani, P. et al. (2017). Hambat Ekstrak Etanol Rimpang Kunyit (Curcuma domestica V.) terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Secara In Vitro. Jurnal Kesehatan Andalas , 6 (3), 590–595. https://doi.org/10.25077/jka.v6i3.743 Rangkadilok, N. et al. (2012). In-vitro Antifungal Activities of Longan (Dimocarpus Longan Lour.) Seed extract. Fitoterapia , 83 (3), 545–553.
https://doi.org/10.1016/j.fitote.2011.12.023
Ripa, F. A. et al. (2010). In-vitro Antibacterial, Cytotoxic and Antioxidant Activities of Plant Nephelium  Longan. Pakistan  Journal  of  Biological  Sciences , 13 ,  22–27. https://doi.org/10.3923/pjbs.2010.22.27
Rismana, E. et al. (2014). Pengujian Aktivitas Antiacne Nanopartikel Kitosan-Ekstrak Kulit Buah  Manggis  (Garcinia  Mangostana). Media  Penelitian  Dan  Pengembangan Kesehatan , 24 (1), 19–27. https://doi.org/10.22435/mpk.v24i1.3483.19-27
Santi,  R.  N.  et  al.  (2011).  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Etanol  Kulit  Dan  Biji Kelengkeng (Euphoria  longan  (Lour.)  Steud)  terhadap  Escheria  coli  dan  Staphylococcus
aureus  Serta  Toksisitasnya  Terhadap  Artemia  salina  Leach. Pharmachon , 12 (1), 33–39.
Sari,  R.  et  al.  (2017).  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Gaharu  (Aquilaria microcarpa Baill.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Proteus mirabilis. Pharmaceutical Sciences Research , 4 (3), 143–154.
Soong, Y. Y. et al. (2005). Isolation and Structure Elucidation of Phenolic Compounds from Longan  (Dimocarpus  Longan  Lour)  Seed  by  High-Performance  Liquid Chromatograpghy-Electrospray  Ionization  Mass  Spectometry. Journal  of Chromatography A , 1085 , 270–277.
https://doi.org/10.1016/j.chroma.2005.06.042
Soong,  Y.  Y.  et  al.  (2006).  Quantification  of  Gallic  Acid  and  Ellagic  Acid  from  Longan (Dimocarpus  Longan  Lour.)  Seed  and  Mango  (Mangifera  Indica  L.)  Kernel  and Their  Effects  on  Antioxidant  Activity. Food  Chemistry , 97 ,  524–530. https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2005.05.033
Trisia,  A.  et  al.  (2018).  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Kalanduyung (Guazuma  Ulmifolia  Lam.)  Terhadap  Pertumbuhan  Staphylococcus  Aureus Dengan  Metode  Difusi  Cakram  (Kirby-Bauer). Anterior  Jurnal , 17 (2),  136–143. https://doi.org/10.33084/anterior.v17i2.12
Tseng,  H.  C.  et  al.  (2014).  Antimcrobial  Activties  of  Various  Fraction  of  Longan (Dimocarpus  Longan  Lour.  Fen  Ke)  Seed  Extract. International  Journal  of  Food Sciences and Nutrition , 65 (5), 589–593.
https://doi.org/10.3109/09637486.2014.886181
Wau,  T.  P.  K.  et  al.  (2019).  Uji  Efektivitas  Ekstrak  Buah  Kesemek  (Dyospiros  Kaki  L.) Sebagai  Antibakteri  Terhadap  Bakteri  Escheria  Coli. Jurnal  Biologi  Tropis , 19 (2),
260–267. https://doi.org/10.29303/jbt.v19i2.1049
Yamin,  I.  F.  et  al.  (2014).  Bakteri  Dominan  di  Dalam  Saluran  Akar  Gigi  Nekrosis. Dentofasial , 13 (2), 113–116.