172 | How to cite this article (APA) : Rompas,I.F.X.,& Gasah,O.(2022) . Efektifitas Ekstrak Rumput Laut Hijau  ( Ulva  Lactuca )  Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Sebagai  Sumber  Pangan  Berkelanjutan. BIO-EDU: Jurnal Pendidikan Biologi, 7 (3),172-189. doi: https://doi.org/ 10.32938/jbe.v7i3.1917

## BIO-EDU: JURNAL PENDIDIKAN BIOLOGI
Tahun 2022, VOL.7, No.3, Halaman 172-189, e-ISSN: 2527-6999
https://doi.org/ 10.32938/jbe.v7i3.1917
EFEKTIFITAS  EKSTRAK  RUMPUT  LAUT  HIJAU  ( ULVA LACTUCA )  TERHADAP  AKTIVITAS  ANTIOKSIDAN  SEBAGAI

## SUMBER PANGAN BERKELANJUTAN
Indra Fransiskus Xaverius Rompas 1 , Orlendy Gasah 2
1 Program Study Budidaya Perairan, Universitas Sari Putra Indonesia Tomohon
2 Program Study Agribisnis, Universitas Sari Putra Indonesia Tomohon
Received 13 Agustus 2022 ABSTRACT Revised 29 November 2022 One  of  the  plants  that  have  antioxidant  compounds  is  green  seaweed  or  Ulva  Lactuca which is found in Tiberias Village, Poigar District, Bolaang Mongondow Regency, but has not been used for consumption by the surrounding community. The purpose of this study was to test  the  active  ingredients and  antioxidant  activity  using the DPPH  method.  This research is a quantitative research that includes 3 stages of activity, namely the first stage to process powder preparation and extracting, the second stage is to test phytochemicals and antioxidant activity tests, and the third stage is to analyze the data. The experimental design  was  a  completely  randomized  design  (CRD)  and  the  data  analysis  of  the experimental results for the antioxidant activity test used the One-Way ANOVA test with the  IBM  SPSS  statistics  program α  =  0.05.  Phytochemical  test  results  obtained  70% ethanol extract of Ulva Lactuca showed the presence of alkaloids, flavonoids, triterpenoids and steroids. The results of inhibition on 70% ethanol Ulva  Lactuca at concentrations of 25, 50, 75, and 100 ppm respectively resulted in an average inhibition of 23.81%, 48.15%, 74.33% and 85.05% and an average IC50 value of 46.68 ppm. While the alphatocopherol used as a comparison compound has an IC50 value of 4.44 ppm. In the One-Way ANOVA test, sig. = 0.001 (H0 is rejected if sig. < 0.05), so H0 is rejected, and Ha is accepted. So that the average inhibition of the three treatments is not identical (significantly different) or it  can  be  said  that  there  is  a  relationship  between  the  concentration  of  extraction  and inhibition.  Extraction  concentration  has  an  effect  on  the  amount  of  inhibition  of  DPPH. Thus, the 70% ethanol extract of Ulva Lactuca has activity as an effective antioxidant.
.
Accepted 1 Desember 2022
Published 5 Desember 2022
Corresponding Author
Indra Fransiskus Xaverius
Rompas, indrarompas@gmail.com Distributed under CC BY-SA 4.0 Keywords : Free radical; Antioxidants; Ulva Lactuca .

## 1 PENDAHULUAN
Radikal bebas merupakan suatu atom atau molekul dengan satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan dan bersifat tidak stabil, berumur pendek, dan sangat reaktif untuk penarikan elektron  molekul  lain  dalam  tubuh  untuk  mencapai  stabilitas  yang  menyebabkan  potensi kerusakan pada biomolekul dengan merusak integritas lipid, protein, dan DNA yang mengarah pada  peningkatan  stres  oksidatif  seperti  penyakit  neurodegenerative,  diabetes  mellitus, penyakit kardiovaskular, proses penuaan dini, bahkan kanker (Phaniendra, et al, 2015). Tubuh perlu  substansi  untuk  menetralisir  radikal  bebas  dan  mencegah  kerusakan  yang  ditimbulkan oleh  radikal  bebas,  yaitu  dengan  antioksidan.  Antioksidan  adalah  suatu  senyawa  atau komponen  kimia  yang  dalam  kadar  atau  jumlah  tertentu  mampu  menghambat  atau memperlambat  kerusakan  akibat  proses  oksidasi,  dan  dibutuhkan  tubuh  untuk  melindungi tubuh dari serangan radikal bebas (Sayuti dan Yenrina, 2015).
Antioksidan berfungsi sebagai donor elektron bagi senyawa yang bersifat radikal maupun senyawa  yang  tergolong  kedalam  Reactive  Oxygen  Species  (ROS).  Senyawa-senyawa  ini
merupakan  senyawa  yang  bersifat  karsinogenik  dan  penyebab  penyakit  stress  generatif. Antioksidan yang berasal dari tanaman digolongkan kedalam   antioksidan alami, sedangkan antioksidan yang tidak berasal dari tumbuhan maupun   hewan merupakan antioksidan sintetis. Pemakaian  antiosidan  sintetis  telah  banyak  diaplikasikan  untuk  bahan  pangan,  tetapi pemakaiannya  dapat  menimbulkan  berbagai  penyakit,  termasuk  penyakit  stress  generatif. Antioksidan  alami  dapat  ditemui  pada  berbagai  sumber  seperti  pada  sayuran,  buah-buahan, tanaman  serealia,  umbi-umbian  serta  di  bagian-bagian  tertentu  pada  tanaman.  Antioksidan alami jauh lebih baik dibandingkan dengan antioksidan sintetis (Anggrainy, 2017)
Salah satu tumbuhan yang memiliki senyawa antioksidan ialah rumput laut hijau.  Rumput laut  hijau  atau  Ulva  Lactuca  banyak  ditemukan  di  Desa  Tiberias,  Kecamatan  Poigar, Kabupaten  Bolaang  Mongondow,  namun  belum  di  manfaatkan  untuk  dikonsumsi  oleh masyarakat  sekitar.  Padahal  rumput  laut  mengandung  berbagai  senyawa  bioaktif,  yang beberapa  di  antaranya  tidak  terdapat  pada  tanaman  terrestrial  lain,  seperti  lektin  atau fikobiliprotein,  senyawa  polifenol,  florotannin  dan  polisakarida  tertentu.  Senyawa  tersebut memiliki sifat meningkatkan kesehatan, berperan dalam modulasi penyakit kronis (Brown dkk, 2014). Rumput laut yang mengandung senyawa bioaktif yaitu fenol, saponin, tanin, flavonoid, sesquiterpenoid,  diterpenoid  dan caulerpin  yang  memiliki aktivitas antioksidan, anti bakteri, anti  jamur,  antitumor  dan  bisa  digunakan  untuk  terapi  tekanan  darah  rendah  serta  penurun glukosa darah (Kelman dkk, 2012).
Ulva adalah rumput laut makro alga yang tergolong dalam divisi Chlorophyta. Termasuk dalam divisi Chlorophyta karena sel-sel mengandung banyak mengandung klorofil a sehingga memberikan warna hijau pada rumput laut ini. Habitatnya adalah di air laut dan morfologinya berupa thallus tipis dan gepeng seperti pedang yang terdiri atas 2 lapis sel (Dewi, 2018).
Ulva  lactuca  memiliki  panjang  sampai  100  cm  dan  berwarna  hijau  apel  terang,  dan memiliki  bentuk  strap-shaped  blades  (pedang  melipat)  dengan  tepi  yang  halus  tapi bergelombang.  Bagian  tengah  dari  setiap  helaian  seringkali  berwarna  pucat  dan  semakin  ke arah tepi warnanya semakin gelap. Pada daerah tropis, tumbuhan ini biasanya terdapat di air yang  dangkal  (zona  intertidal  bagian  atas  sampai  kedalaman  10  meter).  Pada  substrat  yang tepat,  seringkali  melakukan  asosiasi  dengan  daerah  yang  memiliki  nutrien  yang  tinggi (contohnya bakau) atau dekat sumber air tawar (Dewi, 2018).
Habitat karang dan dibawah aliran pasang surut Spesies ini, memiliki blade berwarna hijau terang,  rapuh,  berkerut,  berbentuk  lonjong  atau  bulat,  memiliki  diameter  lembaran  blade sepanjang 65 cm, dan hidupnya di zona intertidal atau di daerah yang dangkal. Salinitasi yang baik untuk pertumbuhan Ulva adalah 29-31,5%. Ulva hidup pada kisaran suhu 28-31oC (Dewi, 2018).
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas  mendorong  peneliti  untuk  mengadakan  penelitian ilmiah  dengan  mengangkat  judul  “Efektifitas  Ekstrak  Rumput  Laut  Hijau  (Ulva  Lactuca) Terhadap  Aktivitas  Antioksidan  Sebagai  Sumber  Pangan  Berkelanjutan”.  Penelitian  ini diharapkan  dapat  memberikan  informasi  ilmiah  tentang  manfaat  yang  terkandung  dalam rumput laut sebagai sumber pangan alami untuk masyarakat Desa Tiberias, Kabupaten Bolaang Mongondow. Adapuun hal yang akan dibahas dalam penelitian ini adalah Bagaimanakah bahan aktif yang terkandung dalam ektrak Ulva Lactuca? Dan Bagaimanakah pengaruh bahan aktif dari ekstrak Ulva Lactuca terhadap aktivitas antioksidan?

## 2 METODE

## 1. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  laboratorium  Universitas  Sari  Putra  Indonesia Tomohon yang berlangsung dari bulan Januari – Desember 2021.

## 2. Alat dan Bahan
Ekstraksi.  Sempel  rumput  laut  diambil  langsung  dari  Desa  Tiberias,  Kecamatan Poigar, Kabupaten Bolaang Mongondow. Bahan kimia yang digunakan adalah etanol 70%, kloroform, air bebas ion. Alat yang digunakan adalah oven, penggiling, blender, neraca analitik, labu ukur, corong pisah, labu bulat, rotavapor dan erlenmeyer.
Analisis  fitokimia.  Bahan  kimia  yang  digunakan  pareaksi  Dragendorff,  pareaksi Mayer’s, pareaksi Wagner, etanol 95%, hidrogen clorida (HCL), logam Mg, natrium karbonat (Na2CO3), feri klorida (FeCl3), Asam sulfat (H2SO4) dan anhidrida asetat. Alat yang digunakan adalah tabung reaksi, rak tabung reaksi, gelas ukur, erlenmeyer, pengaduk, hot plate dan neraca analitik.
Uji  aktivitas  antioksidasi.  Bahan  yang  digunakan  antara  lain  ekstrak  rumput  laut hijau, 1.1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH), alfatokoferol (vitamin E), dan kertas saring. Alat yang digunakan adalah botol gelap berulir berpenutup, tabung reaksi, gelas ukur, inkubator, pH indikator,  sentrifuse model 800 dan spektrofotometer UV-Vis U-2800 Hitachi.
3. Metode Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian kuantitatif yang meliputi beberapa tahap kegiatan, yaitu:

## 3. 1 Penyiapan Serbuk rumput laut hijau
Sempel  rumput  laut  hijau  diambil  langsung  dari  pantai  Desa  Tiberias, Kecamatan Poigar, Kabupaten Bolaang Mongondow yang masih segar, kemudian disiapkan dengan prosedur sebagai berikut:
Proses Penyiapan Serbuk Ekstraksi Uji Fitokimia Uji Aktivitas Antioksidan Analisis Data Bersihkan dan diblender Serbuk rumput laut Sampel rumput laut hijau
Diangin-anginkan dalam suhu ruangan (1 minggu)

## 3.2. Penyiapan Sempel Ekstrak Etanol 70% rumput laut hijau
Ekstrak etanol 70% dari rumput laut hijau disiapkan dengan metode maserasi, yakni merendam serbuk rumput laut hijau dengan etanol 70% dengan perbandingan 1:4. Maserasi dilakukan selama 3 hari ke dalam environmental shaker dengan 90 RPM.  Maserat  yang  diperoleh  dipisahkan  menggunakan  kertas  saring.  Maserat kemudian diuapkan dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator dengan suhu 400C sampai diperoleh sampel ekstrak etanol 70% rumput laut hijau. Kemudian diperoleh ekstrak etanol 70% rumput laut hijau.

## 3.3 Uji Fitokimia
Uji alkaloid.
Alkaloid = endapan putih oleh pareaksi Meyer dan endapan
coklat oleh pareaksi Wegner.
0.1 gram ekstrak + 3 mL kloroform + 3 tetes amoniak
Fraksi kloroform dipisahkan dan diasamkan dengan 10 tetes H2SO4 2 M
Fraksi asam diambil, ditambahkan pareaksi Meyer dan Wagner
Uji saponin dan flavonoid.
Uji tanin . Saponin = adanya buih/busa yang stabil Flavonoid = terbentuknya warna merah, kuning dan jingga pada lapisan amil alkohol
1 gram ekstrak dimasukkan dalam gelas piala + 100 ml air panas lalu didihkan selama 5 menit
Disaring dan filtratnya digunakan untuk
pengujian
Uji saponin = pengocokkan 10 ml filtrat dalam tabung reaksi tertutup selama 10 detik.
Dibiarkan selama 10 menit
10 ml filtrat yang lain + 0.5 gram serbuk magnesium + 2ml alkohol karbohidrat (campuran HCL 37% dan etanol 95% dengan perbandingan 1:1) + 20 ml amil alkohol kemudian dikocok kuat.
Tanin  = Adanya warna biru tua atau hitam
kehijauan 0.1 gram ekstrak + 2 ml air. Dididihkan selama beberapa menit
Disaring dan filtratnya di tambah 1 tetes FeCl3 1 % (b/v).

## Uji triterpenoid dan steroid
.

## 3.4. Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH (Salazar, 2011)
Pengujian  aktivitas  antioksidan  Metode  DPPH  didasarkan  pada  kemampuan antioksidan untuk menghambat radikal bebas dengan mendonorkan atom hidrogen. Perubahan  warna  ungu  DPPH  menjadi  ungu  kemerahan  dimanfaatkan  untuk mengetahui  aktivitas  senyawa  antioksidan  yang  terkandung  dalam  senyawa tersebut.  Urutan  pengujian  antioksidan  dengan  metode  DPPH  adalah  sebagai berikut:
Lapisan eter + pareaksi Lieberman Burchard (3 tetes asam asetat anhidrida dan 1 tetes H2SO4 pekat).
Steroid = Adanya warna hijau triterpenoid = Adanya warna merah dan warna hijau
0.1 gram ekstrak + 2 mL etanol 30 % .
dipanaskan dan disaring
Filtratnya diuapkan dan ditambah eter 1:1
Sebagai kontrol positif digunakan alfatokoferol dengan konsenterasi disesuaikan. Nilai IC 50 dihitung masing-masing dengan menggunakan rumus persamaan regresi.
Larutkan 0.2 mg ekstrak dalam etanol agar konsentrasinya menjadi 1000 ppm
divortex
konsentrasinya dibuat menjadi 25, 50, 75, dan 100 ppm Diangin-anginkan dalam suhu ruangan (1 minggu)
Larutkan 5 mg DPPH dalam 2 mL etanol (Pembuatan larutan
DPPH)
Ditambahkan dengan etanol 100 dan larutan DPPH
hingga volume 300 μL μL
Kemudian larutan disimpan dalam keadaan gelap
Masing-masing konsentrasi dilakukan sebanyak 3 kali ulangan
Larutan standar, blanko, dan sampel dimasukkan ke dalam sumur microplate sebanyak 100 μL
Masing-masing konsentrasi dilakukan sebanyak 3 kali ulangan
Plate yang sudah berisi campuran diinkubasi dalam keadaan gelap
Hasil reaksi diukur dengan microplate reader pada panjang gelombang 517 nm
% inhibisi = (Absorbansi kontrol−Absorbansi sampel) (Absorbansi kontrol) x 100%                (1)
4.  Rancangan Percobaan dan Analisis Data Penelitian Rancangan percobaan ini adalah rancangan acak lengkap (RAL). Analisis data hasil  percobaan  untuk  uji  aktivitas  antioksidan  menggunakan  uji  One-Way ANOVA dengan program IBM SPSS statistics 20 pada α = 0.05. Daerah kritis pada uji ini adalah H0 ditolak jika sig.< α, dengan hipotesis sebagai berikut:
H0: rata-rata inhibisi keempat perlakuan identik Ha: rata-rata inhibisi keempat perlakuan tidak identik

## 3 HASIL DAN PEMBAHASAN

## HASIL 3.1.Ekstraksi
Rumput  laut  hijau  (Ulva  Lactuca)  sebagai  bahan  utama  dalam  penelitian  ini  diambil langsung  dari  pantai  Desa  Tiberias,  Kecamatan  Poigar,  Kabupaten  Bolaang  Mongondow. Sampel yang diperoleh tersebut kemudian dikeringkan dengan cara diangin-anginkan dalam suhu ruangan atau dalam rumah sampai kering, lalu dihaluskan dengan cara di blender sampai halus  kemudian  menjadi  serbuk.  Serbuk  inilah  yang  akan  dipakai  untuk  bahan  ekstraksi. Ekstraksi bertujuan untuk mengambil zat-zat yang terkandung dalam suatu campuran dengan bantuan pelarut tertentu. Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode maserasi  dengan  pelarut  etanol  70%.  Metode  maserasi  dengan  cara  perendaman  sampel dilakukan, karena metode ini sederhana dan tidak menggunakan pemanasan, sehingga dapat mencegah rusaknya senyawa metabolit sekunder yang tidak tahan terhadap suhu tinggi. Etanol digunakan  dalam  ekstraksi  ini  karena  termasuk  golongan  pelarut  polar,  sehingga  dapat mengikat senyawa-senyawa aktif yang terkandung dalam sampel. Tabel berikut adalah hasil ekstraksi yang telah diperoleh pada Ulva Lactuca.

## Tabel 1.  Hasil Ekstrak Etanol 70% Ulva Lactuca
Pelarut Berat sampel (g) Berat ekstrak (g) Rendemen (%) Etanol 70% 250 13. 0341 5.2
Hasil ekstraksi seperti yang ditunjukan pada Tabel 3.1.1 diperoleh ekstrak etanol berwarna hijau kehitaman, beraroma khas Ulva Lactuca dan lengket. Rendemen adalah persentasi antara ekstrak yang diperoleh terhadap jumlah simplisia yang diekstraksi. Ekstrak Ulva Lactuca 250 gram yang dimaserasi dengan etanol 70% menghasilkan berat ekstrak sebesar 13.0341 gram dan rendemennya sebesar 5.2 %.

## 3.2. Analisis Fitokimia
Analisis  fitokimia  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit  sekunder  yang terkandung dalam suatu sampel tumbuhan. Senyawa fitokimia yang terkandung dalam tanaman merupakan  senyawa  kimia  yang  memiliki  peranan  sangat  penting  bagi  kesehatan  dan pencegahan  terhadap  beberapa  penyakit  degeneratif.  Hasil  analisis  fitokimia  pada  ekstrak etanol 70% Ulva Lactuca adalah sebagai berikut:
Tabel 2. Hasil Uji Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Ulva Lactuca
Golongan senyawa Hasil uji Alkaloid +
Golongan senyawa Hasil uji Saponin - Flavonoid + Tanin - Triterpenoid + Steroid + Keterangan : +    = terdeteksi - = tidak terdeteksi
Hasil  uji  fitokimia  seperti  pada  Tabel  2  menyatakan  bahwa  ekstrak  etanol  70% Ulva Lactuca menunjukkan  adanya  kandungan  alkanoid,  flavonoid,  triterpenoid  dan  steroid. Sedangkan saponin dan tanin menunjukan hasil negatif, dengan demikian tidak ada kandungan saponin dan tanin pada ekstrak Ulva Lactuca. Senyawa-senyawa metabolit sekunder tersebut diduga memiliki aktivitas antioksidan.

## 3.3. Aktivitas Antioksidasi Metode  DPPH
Radikal  bebas  sintesis  yang  digunakan  adalah  Difenil  pikril  hidrazil  hidrat  (DPPH), senyawa  ini  akan  menghasilkan  radikal  bebas  jika  dilarutkan  dengan  pelarut  alkohol. Penggunaan  DPPH  sebagai  radikal  bebas  sintetis  dan  mereduksinya  dengan  senyawa  aktif antioksidan  merupakan  salah  satu  metode  yang  biasa  digunakan  untuk  analisis  kualitatif aktivitas  antioksidan.  Metode  ini  digunakan  dalam  penelitian  ini  karena  lebih  cepat,  lebih sederhana dan membutuhkan sampel dalam jumlah yang sedikit. Dalam penelitian ini, ekstrak Ulva  Lactuca akan  digunakan  sebagai  penghambat  radikal  DPPH.  Berikut  adalah  hasil  uji antioksidan pada ektrak etanol 70% Ulva Lactuca Tabel 3. Data Hasil Persen Inhibisi dan Nilai IC 50 Ekstrak Etanol 70% Ulva Lactuca sebagai Antioksidan Sampel Konse ntrasi (ppm) Persen Inhibisi (%) Percobaan 1 Percobaan 2 Percobaan 3 Rerata Ekstraksi Ulva Lactuca 25 24.02 23.91 23.49 23.81 50 48.14 47.66 48.64 48.15 75 74.32 73.95 74.71 74.33 100 85.63 84.49 85.02 85.05 IC 50 46.53 46.99 46.53 IC 50 rerata 46.68 ppm IC 50 Alfatokoferol 4.44 ppm Kons. Alfatokoferol Absorbansi %Inhibisi 2.5 0.713 25.03 5 0.485 49.00 7.5 0.194 79.60 10 0.093 90.22
Hasil yang diperoleh seperti pada Tabel 3 menunjukkan bahwa ekstrak etanol 70% Ulva Lactuca pada konsentrasi 25, 50, 75, dan 100 ppm secara berturut-turut menghasilkan rerata inhibisi sebesar 23.81%, 48.15%, 74.33% dan 85.05%. Rerata nilai IC 50 sebesar 46.68 ppm.
Sedangkan  alfatokoferol  yang  digunakan  sebagai  senyawa  pembanding  memiliki  nilai  IC 50 sebesar 4.44 ppm.
Tabel 4. Hasil Uji Kesamaan Varian dengan Menggunakan

## Program IBM SPSS statistics
Berdasarkan Tabel 4 uji kesamaan varian, maka:
1. Hipotesis :
H 0 : Varian ketiga perlakuan pada sampel identik
H a : Varian ketiga perlakuan pada sampel tidak identik
2. Statistik Uji : Uji Levene
3. α = 0.05
4. Daerah khusus : H 0 ditolak jika sig.< α
5. Dari hasil pengolahan dengan SPSS, diperoleh Sig. = 0.126
6. Karena Sig.> α (0.812 > 0.05), maka H 0 diterima.
Kesimpulan : H 0 diterima sehingga varian ketiga perlakuan pada populasi identik (tidak berbeda secara signifikan) dan berdistribusi normal

## Tabel 5. Hasil Uji One-Way ANOVA dengan Menggunakan Program IBM SPSS
Statistics
Berdasarkan pada Tabel 5 hasil uji One-Way ANOVA, maka: 1.  Hipotesis:
H0: Rata-rata inhibisi keempat perlakuan identik Ha: Rata-rata inhibisi keempat perlakuan tidak identik
2.  Statistik Uji: Uji F
3.  α = 0.05
4.  Daerah kritis: H0 ditolak jika sig.< α
5.  Dari hasil pengolahan dengan SPSS, diperoleh Sig. = 0.001
6.  Karena Sig. < α (0.001 < 0.05), maka H0 ditolak.
Kesimpulan:  H0  ditolak  sehingga  rata-rata  inhibisi  keempat  perlakuan  tidak  identik (berbeda secara signifikan) atau bisa dikatakan terdapat hubungan antara konsentrasi ekstraksi dan  inhibisi.  Sehingga  perlu  diadakan  uji  lanjut.  Uji  lanjut  Tukey  kemudian  dipilih  untuk melihat perbedaan setiap perlakuan.
Tabel 6. Hasil Uji Tukey dengan Menggunakan Program IBM SPSS Statistics
Berdasarkan Tabel 3.3.4 hasil uji Tukey, maka:
1.  Hipotesis
H0: μ_i = μ_j Ha: μ_i ≠ μ_j Untuk i ≠ j, dan i,j : 1= 25 ppm, 2=50 ppm, 3=75 ppm, 4=100 ppm 2.  Uji Statistik: Uji Tukey
3.  Tingkat Signifikansi α = 0.05
4.  Daerah Kritis, Jika Sig. < α   : tolak H0
5.  Keputusan: Pada semua perlakuan menyatakan sig. = 0.001   (0.000 < 0.05): tolak H0 Kesimpulan terdapat perbedaan rata-rata antar setiap perlakuan terhadap inhibisinya.

## PEMBAHASAN

## Ekstraksi
Tujuan  dari  ekstraksi  adalah  untuk  mengambil  zat-zat  yang  terkandung  dalam  suatu campuran dengan bantuan pelarut tertentu. Metode ekstraksi yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  maserasi  dengan  pelarut  etanol  70%.  Metode  maserasi  dengan  cara  perendaman sampel dilakukan, karena metode ini sederhana dan tidak menggunakan pemanasan, sehingga dapat mencegah rusaknya senyawa metabolit sekunder yang tidak tahan terhadap suhu tinggi. Etanol digunakan dalam ekstraksi ini karena termasuk golongan pelarut polar, sehingga dapat mengikat senyawa-senyawa aktif yang terkandung dalam sampel.
Sampel Ulva Lactuca yang digunakan untuk  ekstraksi  adalah Ulva Lactuca kering yang sudah berbentuk serbuk yang sangat halus. Kemudian direndam dengan etanol 70 % dengan
perbandingan 1:4. Maserasi dilakukan selama 3 hari ke dalam environmental shaker dengan 90 RPM.  Maserat  yang  diperoleh  kemudian  dipisahkan  menggunakan  kertas  saring.  Maserat kemudian diuapkan dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator dengan suhu 400 C sampai diperoleh sampel ekstrak etanol 70% Ulva Lactuca .
Berdasarkan hasil ekstraksi diperoleh ekstrak etanol berwarna hijau kehitaman, beraroma khas Ulva  Lactuca dan  lengket.  Rendemen  adalah  persentasi  antara  ekstrak  yang  diperoleh terhadap  jumlah  simplisia  yang  diekstraksi.  Ekstrak Ulva  Lactuca yang  dimaserasi  dengan etanol 70% menghasilkan rendemen sebesar 5.25 % dari berat sampel 250 g (tabel 3.1.1).
Sampel tumbuhan yang diekstrak dapat digunakan untuk tujuan obat herbal adalah pelarut etanol.  Etanol  dapat  bercampur  dengan  air  dalam  berbagai  perbandingan  dan  mudah  dalam penguapan residu yang ada dalam ekstrak (Faraouq, 2003). Hal ini perkuat dengan Ichsan Sitha (2011) yang melakukan ekstraksi pada kulit kayu suren dengan menggunakan pelarut etanol dan air. Rendemen yang diperoleh untuk  pelarut  etanol sebesar 4.8  % dan untuk  pelarut  air sebesar 2.6% pada berat sampel 250 g. Rendemen yang dihasilkan dengan menggunakan etanol lebih  besar  dari  pada  pembandingnnya.  Hal  ini  menunjukan  bahwa  etanol  dapat  menarik senyawa metabolit sekunder yang terkandung dalam ekstrak dengan baik.

## Uji Fitokimia
Analisis  fitokimia  dilakukan  dengan  tujuan  untuk  mengetahui  kandungan  metabolit sekunder yang terkandung dalam suatu sampel tumbuhan. Senyawa fitokimia yang terkandung dalam  tanaman  merupakan  senyawa  kimia  yang  memiliki  peranan  sangat  penting  bagi kesehatan  dan  pencegahan  terhadap  beberapa  penyakit  degeneratif.  Berdasarkan  hasil  uji fitokimia  ekstrak  etanol  70% Ulva  Lactuca menunjukkan  adanya  kandungan  alkanoid, flavonoid, triterpenoid dan steroid (tabel 3.2.1). Senyawa-senyawa metabolit sekunder tersebut diduga  memiliki  aktivitas  antiosidan  yang  sangat  bermanfaat  dalam  mencegah  berbagai penyakit degenaratif.
Pada pengujian sampel dengan substansi pereaksi Mayer pada tabung reaksi menghasilkan endapan berwarna putih, Dragendrof menunjukan adanya endapan berwarna merah jingga dan pada pengujian sampel pada substansi pereaksi Wagner menunjukan adanya endapan cokelat. Hal  ini  menunjukan  bahwa  lewat  pengujian  ini  ternyata  sampel  terdeteksi  adanya  alkaloid. Hasil  penelitian  ini  sejalan  dengan  Harborne  yang  menyatakan  bahwa  apabila  suatu  larutan diuji pereaksi Mayer pada tabung reaksi akan menghasilkan endapan berwarna putih, dengan pereaksi Dragendrof menunjukan adanya endapan berwarna merah jingga dan pada pereaksi Wagner  menunjukan  adanya  endapan  cokelat,  maka  sampel  tersebut  mengandung  alkaloid (Harborne JB, 1996).
Pada pengujian flavonoid, sampel menunjukan hasil yang positif mengandung flavonoid. Hal ini karena pengujian sampel menghasilkan warna merah, kuning dan jingga pada lapisan amil  alkohol  sehingga  menunjukan  adanya  kandungan  flavonoid  (Harborne  JB,  1996). Pengujian triterpenoid menunjukan hasil Positif karena terbentuk warna merah dan warna hijau pada  tabung  reaksi  untuk  uji  triterpenoid.  Pada  pengujian  steroid  menunjukan  hasil  positif karena terbentuk warna hijau pada tabung reaksi untuk uji steroid. Sedangkan untuk pengujian saponin  pada  sampel  menunjukan  hasil  negatif  karena  sampel  tidak  menunjukkan  terbentuk buih/busa  yang  stabil  pada  tabung  reaksi  untuk  uji  saponin  yang  telah  dibuat  dan  pada
pengujian tanin menunjukan hasil negatif karena pada tabung reaksi yang telah dibuat untuk uji tanin tidak menunjukan warna biru tua atau hitam kehijauan (Harborne, 1996).
Menurut Shoviyyah (2019), menyatakan bahwa hasil dari uji fitokimia pada alga hijau Ulva Lactuca menggunakan penambahan reagen menunjukkan adanya senyawa flavonoid, alkaloid, steroid,  dan  triterpenoid.  Sedangkan  menurut  Windyaswari,dkk  (2019),  menyatakan  bahwa hasil pengujian kualitatif pada selada laut ( Ulva lactuca )  menunjukkan kandungan metabolit primer    dan  sekunder  berturut-turut  adalah  karbohidrat,  alkaloid,  flavonoid,  mono  dan seskuiterpenoid.

## Daya Hambat Ekstrak Terhadap Radikal Bebas DPPH
Pengujian daya hambat ekstrak terhadap radikal bebas dengan metode DPPH menggunakan konsentrasi  25,  50,  75  dan  100  ppm  untuk  memperoleh  nilai  IC 50 .  Alfatokoferol  digunakan sebagai kontrol positif dengan konsentrasi 2.5, 5, 7.5, dan 10 ppm. Alfatokoferol merupakan vitamin  E  yang  berperan  sebagai  antioksidan  yang  sangat  efektif  dengan  mudah menyumbangkan  atom  hidrogen  pada  gugus  hidroksil  (OH)  dari  struktur  cincin  ke  radikal bebas sehingga radikal bebas menjadi tidak reaktif (Silalahi, 2006). Penelitian ini dilakukan dengan tiga kali ulangan, kemudian dari hasil pengukuran didapat nilai absorbansinya. Hasil absorbansi  sampel  digunakan untuk  memperoleh  nilai  persen inhibisinya.  Berdasarkan hasil pengukuran  tersebut  kemudian  dibuat  grafik  persamaan  regresi  logaritmik  dengan menggunakan microsoft office excel 2010 yang menggambarkan hubungan antara konsentrasi dan persen inhibisi sampel,  sehingga dari persamaan garis kurva dapat  ditentukan nilai  IC 50 setiap perlakuan.

## Gambar 1. Persamaan Logaritmik untuk Antioksidan
Parameter  yang  digunakan  untuk  melihat  aktivitas  antioksidan  adalah  inhibitory consentration  (IC).  Nilai  IC 50 adalah  konsentrasi  larutan  sampel  yang  dibutuhkan  untuk menghambat 50 % radikal bebas DPPH. Semakin kecil nilai IC 50 maka senyawa uji tersebut mempunyai keefektifan sebagai penangkap radikal yang lebih baik. Nilai IC 50 kurang dari 200 μg/ml  dapat  menyatakan bahwa senyawa tersebut  memiliki kandungan antioksidan (Blouis, 1958).
Hasil  penelitian  yang  diperoleh  menunjukan  bahwa  ekstrak Ulva  Lactuca mampu menghambat  aktivitas  DPPH  dengan  baik.  Nilai  inhibisi  yang  telah  diperoleh  menunjukkan bahwa  semakin  tinggi  konsentrasi  ekstrak  dan  standart  uji,  maka  semakin  tinggi  juga  nilai inhibisinya. Nilai inhibisi adalah daya hambat ekstrak terhadap DPPH. Pada konsentrasi 25, 50,  75,  dan  100  ppm  untuk  ekstrak Ulva  Lactuca secara  berturut-turut  menghasilkan  rerata inhibisi sebesar  23.81%, 48.15%, 74.33%, 85.05%, Sedangkan alfatokoferol yang digunakan sebagai kontrol positif menghasilkan inhibisi secara berturut-turut 25.03%, 49.00%, 79.60%, 90.22% (tabel 3.3.1). Hal tersebut menunjukan bahwa besar konsentrasi ekstrak dan kontrol positif alfatokoferol dapat memberikan pengaruh lebih besar terhadap penghambatan radikal bebas. Nilai inhibisi yang paling efektif adalah pada konsentrasi 100 ppm karena menghasilkan inhibisi  yang  paling  besar  untuk  penghambatan  DPPH  sebesar  85.05%  (lebih  dari  50% penghambatan  radikal  DPPH),  sedangkan  alfatokoferol  sebesar  90.22%  pada  konsentrasi tertingginya.  Jika  dibandingkan  perbedaan  inhibisi  pada  perlakuan  tersebut  memiliki  selisih 5.17%.
Nilai IC 50 diperoleh dari persamaan logaritmik dengan nilai x adalah nilai IC 50 apabila y = 50 . Misalkan persamaan logaritmik pada percobaan pertama adalah y = 45.482ln(x) - 124.51 y = a ln(x)
50 = y = 45.482ln(x) - 124.51 In(x) = 50+124.51 45.482 In(x) = 3.84 Antilog x = 46.53 ppm
Tabel 7. Nilai IC 50 Jenis Ekstrak In(x) IC 50 IC 50 rerata Percobaan 1 3.84 46.53 46.68 Percobaan 2 3.85 46.99 Percobaan 3 3.84 46.53 Alfatokoferol 1.49 4.44 4.44
Berdasarkan hasil perhitungan  IC 50 pada  tabel  7  menunjukan bahwa  ekstrak etanol 70% Ulva  Lactuca memiliki  rerata  nilai  IC 50 sebesar  46.68  ppm.  Sedangkan  alfatokoferol  yang digunakan sebagai  senyawa pembanding  memiliki nilai  IC 50 sebesar 4.44  ppm.  Hal  tersebut menunjukan bahwa alfatokoferol 10.51 kali lebih kecil dibandingkan dengan nilai ekstrak Ulva Lactuca . Secara  spesifik suatu  senyawa dikatakan sebagai  senyawa antioksidan yang sangat kuat jika nilai IC 50 kurang dari 50 ppm, kuat untuk IC 50 bernilai antara 50 ppm – 100 ppm, sedang jika IC 50 bernilai antara 100 ppm – 150 ppm, dan lemah jika nilai IC 50 antara151 ppm – 200 ppm (Mardawati, 2008). Berdasarkan hasil penelitian dapat dilihat bahwa ektrak Ulva Lactuca dan  alfatokoferol  termasuk  dalam  golongan  kadar  antioksidan  yang  sangat  kuat, karena  memiliki  daya  hambat  nilai  IC 50 kurang  dari  50  ppm.  Namun  jika  dibandingkan alfatokoferol memiliki daya hambat lebih kuat dari pada ekstrak Ulva Lactuca , karena memiliki nilai IC 50 lebih kecil. Hal tersebut merupakan hal yang wajar karena alfatokoferol merupakan golongan vitamin E yang sangat efektif untuk antioksidan (Silalahi, 2006).
Hasil persen inhibisi kemudian dianalis menggunakan program IBM SPSS statistics untuk uji  kesamaan  varian,  uji  One-Way  ANOVA  dan  dilanjutkan  dengan  uji  Tukey  dengan  taraf kepercayaan 95%. Hasil analisis statistika menunjukan untuk  uji kesamaan  varian diperoleh nilai  sig.  =  0.812  (H0  ditolak  jika  sig.  <  0.05),  sehingga  H0  diterima.  Maka  varian  ketiga populasi  tersebut  adalah  identik  (tidak  berbeda  secara  signifikan)  dan  berdistribusi  normal. Maka dilanjutkan dengan uji One-Way ANOVA. Pada uji One-Way ANOVA diperoleh nilai sig. = 0.001 (H0 ditolak jika sig. < 0.05), sehingga H0 ditolak, dan Ha diterima. Sehingga rata- rata inhibisi dari ketiga perlakuan tersebut tidak identik (berbeda secara signifikan) atau bisa dikatakan terdapat hubungan antara konsentrasi ekstraksi dan inhibisi. Konsentrasi ekstraksi memberikan  pengaruh  terhadap  besarnya  penghambatan  terhadap  DPPH.  Kemudian dilanjutkan  dengan  uji  lanjut  untuk  melihat  kelompok  yang  berbeda  antara  konsentrasi ekstraksi dan inhibisinya, disini menggunakan uji Tukey karena ukuran sampel yang sama pada setiap perlakuan. Dari hasil uji Tukey didapat keempat perlakuan memiliki nilai sig. = 0.001, sehingga (0.001 < 0.05 tolak H0). Ha diterima sehingga menyatakan terdapat perbedaan rata- rata antar setiap perlakuan terhadap inhibisinya atau bisa dikatakan untuk setiap penambahan konsentrasi  ektraksi  akan  mempengaruhi  daya  hambat  terhadap  DPPH.  Semakin  tinggi konsentrasi  yang  diberikan  maka  daya  inhibisinya  akan  semakin  besar,  sehingga  setiap perlakuan  memiliki  daya  hambat  yang  berbeda  dan  memberikan  pengaruh  terhadap penghambatan DPPH.
Menurut  Shoviyyah  (2019),  melaporkan  bahwa  hasil  dari  aktivitas  antioksidan  alga hijau Ulva lactuca menunjukkan persen (%) aktivitas antioksidan terbaik pada fraksi etil asetat sebesar 43,18 % dan hasil persen (%) aktivitas atioksidan pada ekstrak kasar sebesar 24,34 %. Nilai IC 50 yang dapat meredamkan radikal DPPH yaitu fraksi etil asetat sebesar 84,71 µg/mL. Hal ini didukung oleh penelitian dari Widyaningsih, dkk (2015) yang menyatakan bahwa hasil penelitian  menunjukkan  bahwa  kadar  MDA  hepar  meningkat  dan  aktivitas  enzim  SOD menurun secara signifikan akibat induksi CCl4 (p<0,05). Tablet curcuma dosis 200 mg/kgBB, ekstrak etanol ganggang hijau dosis  100 dan 200 mg/KgBB dapat  menurunkan kadar MDA dan meningkatkan aktivitas SOD hepar tikus yang diinduksi CCl4 secara signifikan (p<0,05). Kesimpulan penelitian ini adalah ekstrak etanol ganggang hijau ( Ulva lactuca L. ) mempunyai aktivitas antioksidan dengan menurunkan kadar MDA dan meningkatkan aktivitas enzim SOD hepar tikus yang diinduksi CCl4. Kemudian penelitian menurut Arbi,dkk (2016), menyatakan bahwa hasil penelitian menunjukkan adanya interaksi antara konsentrasi ekstrak U. lactuca dan lama penyimpanan berpengaruh nyata (P<0,05). Ekstrak U. lactuca 0,2% menghasilkan angka peroksida terendah yaitu 25,606±0,116 mEq/kg, dan 0,1% menghasilkan angka TBA terendah yaitu  26,802  ±0,309  malonaldehide/kg  pada  hari  ke-10.  Kesimpulannya  ekstrak U.  lactuca terbukti  memiliki  aktivitas  antioksidan  yang  tinggi  dan  dapat  menghambat  laju  oksidasi minyak  ikan.  Dengan  demikian  berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  peneliti  dan beberapa  penelitian  pendukung  lainya,  maka  ekstrak  etanol  70% Ulva  Lactuca memiliki aktivitas sebagai antioksidan yang efektif.

## 4 KESIMPULAN DAN SARAN

## 4.1 Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan  oleh  peneliti,  maka  dapat  disimpulkan sebagai berikut:
1. Hasil uji fitokimia ekstrak etanol 70% Ulva Lactuca menunjukkan adanya kandungan alkanoid, saponin, flavonoid, triterpenoid dan steroid yang efektif untuk antioksidan.
2. Ekstrak  etanol  70% Ulva  Lactuca memiliki  daya  yang  sangat  kuat  untuk  inhibisi antioksidan  dengan  nilai  rerata  IC50  sebesar  46.68  ppm,  sehingga  dapat  dijadikan sumber pangan berkelanjutan

## 4.2 Saran
1. Masyarakat dapat mengkonsumsi Ulva Lactuca sebagai sumber pangan berkelanjutan karena bermanfaat sebagai antioksidan.
2. Bagi  calon  peneliti  dapat  meneliti  kembali  konsentrasi  yang  tepat  untuk  keefektifan Ulva Lactuca sebagai antioksidan dan pemanfaatannya

## DAFTAR RUJUKAN
Anggrainy Tuty. 2017. Sumber Antioksidan Alami (Cetakan Pertama). Padang: Erka. ISBN: 978-602-6506-54-2
Arbi.  B,  Ma’ruf  W.  F  dan  Romadhon  (2016).  Aktivitas  senyawa  bioaktif  selada  laut  (Ulva Lactuca) sebagai antioksidan pada minyak ikan. Semarang: Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro.
Brown ES, Allsopp PJ, Magee CI, Gill S, Nitecki CR, Strain EM. 2014. Seaweed and human health. Nutrition Reviews. 72: 205–216.
Dewi Nurcahya Eko. 2018. Ulva Lactuca: Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Diponegoro. Semarang: http://eprints.undip.ac.id/67364/1/BUKU_ULVA_FIX.pdf (Akses: 22 Oktober 2020)
Faraouq. 2003. Ekstrak sebagai salah satu pengembangan bentuk obat tradisional. Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXIII, Jakarta. 45-52
Guiry, M.D. and a.M. Guiry. 2015. AlgaeBase. World-wide electronic publication, National University of Ireland, Galway (taxonomic information republished from AlgaeBase with permissionofM.D.Guiry).
http://www.marinespecies.org/aphia.php?p=taxdetails&id=145984  (Akses:  22  Oktober 2020).
Harborne JB. 1996. Metode Fitokimia, penuntun  dan cara modern menganalisis Tumbuhan. Penerjemah: Padmawinata K dan Soediro I. Penerbit ITB Bandung.
Ichsan  Sitha.  2011.  Aktivitas  ekstrak  kulit  kayu  suren  (toona  sinensis  merr.)  sebagai antioksidan dan antidiabetes secara in vitro. Bogor : Institut Pertanian Bogor.
Kelman  D,  Posner  EK,  Dermid  KJ,  TabanderaNK,  Wright  PR,  Wright  AD.  2012. Antioxidantactivity of Hawaiian marine algae. Marine Drugs. 10:403–416.
Kementerian  Riset  (2017),  Rencana  Induk  Riset  Nasional  Tahun  2017-2045,  Edisi  28  Feb 2017, Kementerian Riset, Teknologi, Dan Pendidikan Tinggi 2017.
Mardawati.  E,  Filian  F,  dan  Marta.  H.  2008.  Kajian  antioksidan  ekstrak  kulit  manggis ( Garcinia mangostana L ) dalam rangka pemanfaatan limbah kulit manggis di kecamatan puspahiang, kabupaten tasikmalaya (Penelitian Staf Pengajar Jurusan Teknologi Industri Pangan  Fakultas  Teknologi  Industri  Pertanian  Universitas  Padjadjaran).  Bandung: Universitas Padjadjaran
Phaniendra,  A.,  Jestadi,  D.  B.  &  Periyasamy,  L.,  2015.  Free  Radicals:  Properties,  Sources, Targets, and Their Implication in Various Diseases. Indian J Clin Biochem, 30(1), pp. 11-26
Salazar-Aranda R, Pérez-López LA, López-Arroyo J, Alanís-Garza BA, Waksman de Torres N.  2011.  Antimicrobial  and  antioxidant  activities  of  plants  from  northeast  of  Mexico. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011: 1-6.
Sayuti, K dan R. Yenrina. 2015. Antioksidan Alami dan Sintetik. Cetakan pertama. Padang:
Andalas University Press. ISBN 978-602-8821-97-1
Silalahi Jansen. 2006. Makanan Fungsional. Yogyakarta: Kanisius
Widyaningsih. W, Sativa. R, Primardiana. I  (2015). Efek antioksidan ekstrak etanol Ganggang Hijau  ( Ulva  Lactuca  L.) Malondialdehid  (MDA)  dan  aktivitas  enzim  superoksida dismutase  (SOD)  hepar  tikus  yang  diinduksi  CC14.  Yogyakarta:    Fakultas  Farmasi
Universitas Ahmad Dahlan.
Windyaswari A.S, Elfahmi, Faramayuda. F, Riyanti.S , Luthfi O. M, Ayu I. P, Pratiwi N. T. M, Husna K. H. N, Maghfira R (2019). Profil fitokimia selada laut (Ulva lactuca) dan mikro  alga  filamen  (Spirogyra  sp)  sebagai  bahan  alam  bahari  potensial  dari  perairan Indonesia. Cimahi: Fakultas Farmasi, Universitas Jendral Achmad Yani