Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, Vol 6.No.1 Juni 2020 Avaiable online at www.jurnal-pharmaconmw.com/jmpi p -ISSN : 2442-6032 e -ISSN :  2598-9979
Efek Antidiabetes Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.)  Dan  Daun  Salam  ( Syzygium  polyanthum Wight.)  Pada Tikus Putih Dengan Metode Induksi Aloksan
Nikeherpianti Lolok, Wa Ode Yuliastri, Fiqri Algafiq Abdillah Program Studi Farmasi, STIKES Mandala Waluya, Kendari
Corresponding author email : nikeherpianti.apt@gmail.com

## ABSTRAK
Diabetes  melitus (DM) ditandai dengan terjadinya hiperglikemi.  Indonesia    menempati  urutan  ke  7 dengan penderita DM sejumlah 8,5 juta. Penggunan obat  bahan  alam  sudah  banyak  digunakan  secara empiris oleh masyarakat, diantaranya Ekstrak Daun Pandan  Wangi  dan  Daun  Salam  masing-masing telah  dilaporkan  memilikiefek  hipoglikemik  dan berpotensi  sebagai  antioksidan  yang  dapat memperbaiki  sel-sel  tubuh  yang  rusak,  termasuk pankreas.  Tujuan  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  kombinasi  Ekstrak  Daun  Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.) dan Daun
Salam ( Syzygium polyanthum Wight.)
memberikan  efek dalam   penurunan  kadar  gula darah  pada  tikus ( Rattus norvegicus ) putih galur wistar  yang  diinduksi  diabetes  dibandingkan dengan  kelompok  negatif  dan  kelompok  positif. Penelitian ini merupakan  penelitian eksperimental laboratorium.  Sampel  diekstraksi  dengan  metode maserasi  menggunakan      pelarut  etanol  96%. Pengujian  efek  antidiabetes  hewan  uji  dibagi
menjadi 3 kelompok yaitu kelompok kontrol positif, kombinasi  ekstrak  dan  kelompok  kontrol  negatif. Analisis  data  dilakukan  dengan  menggunakan  uji Kruskal- Wallis dan dilanjutkan dengan uji Mann- Whitney .  Hasil  uji  terhadap  tikus  yang  diinduksi diabetes  menunjukkan  bahwa  kombinasi  ekstrak etanol daun pandan wangi dan  daun  salam secara signifikan  mampu  menurunkan  kadar  gula  darah pada  tikus  yang  diinduksi  diabetes  dibandingkan kontrol  negatif  (p<0,05),  dan  hasilnya  tidak berbeda  nyata  dengan  kelompok  kontrol  positif (p>0,05).
Kata  Kunci :  Daun  Pandan  Wangi,  Daun  Salam, Diabetes Mellitus, Aloksan

## Penulis Korespondensi :
Nikeherpianti Lolok Program Studi Farmasi, STIKES Mandala Waluya, Kendari E-mail : nikeherpianti.apt@gmail.com

## PENDAHULUAN
Diabetes  melitus  (DM)  ditandai dengan  terjadinya  hiperglikemik.  Pada DM terjadi penumpukan gula dalam darah sehingga insulin gagal masuk ke dalam sel. Peningkatan  kadar  gula  darah  dalam darah  atau  hiperglikemia  adalah  kondisi terjadinnya  abnormalitas  metabolisme karbohidrat,  lemak,  dan  protein  yang disebabkan  oleh  penurunan  sekresi insulin  atau  penurunan  sensitivitas insulin  atau  keduanya  dan  menyebabkan komplikasi kronis mikrovaskular, makrovaskular,  dan  neuropati  (Nurarif dan  Kusuma,  2015).  Kegagalan  tersebut terjadi  akibat  kurangnya  hormon  insulin atau  cacat  fungsi.  Hormon  insulin merupakan  hormon  yang  membantu masuknya gula darah (WHO, 2016).Dalam metabolisme  tubuh  hormon  insulin bertanggung jawab dalam mengatur kadar glukosa  darah.  Hormon  ini  diproduksi dalam  pankreas  kemudian  dikeluarkan untuk  digunakan  sebagai  sumber  energi. Apabila  di  dalam  tubuh  kekurangan hormon insulin maka dapat menyebabkanhiperglikemi (IDF, 2015).
Diabetes  melitus  merupakan  salah satu  penyakit  yang  menjadi  masalah kesehatan  yang  paling  serius  yang dihadapi  masyarakat  di  dunia  seabad terakhir  ini.  Diabetes  melitus  (DM)  telah membunuh 38 juta orang setiap tahunnya. Indonesia  merupakan  negara  menempati urutan  ke  7  dengan  penderita  DM sejumlah  8,5  juta  penderita  setelah  Cina,
India dan Amerika Serikat, Brazil, Rusia, Mexico  (IDF,  2015).  Salah  satu  tujuan terapi  bagi  penderita  Diabetes  melitus yaitu  pengontrolan  kadar  gula  darah dengan pemberian obat hipoglikemik oral maupun  insulin.  Namun,  sering  kali terdapat  efek  samping  yang  tidak diinginkan.  Oleh  karena  itu,  peneliti tertarik untuk melakukan penelitian yang menggunakan sumber bahan alam sebagai salah  satu  alternatif  dalam  menangani penyakit  diabetes  melitus  (Lolok et  al , 2019).
Telah  banyak  masyarakat  yang menggunakan obat tradisional dari bahan alam  sebagai  penyembuhan  berbagai macam penyakit, sehingga dengan memanfaatkan  sumberdaya  alam  di Indonesia  dilakukan  eksplorasi  bahan alam  yang  akan  menjadi  sumber  dalam pencarian obat baru. Beberapa tumbuhan yang sering dimanfaatkan oleh masyarakat  secara  empiris  sebagai  obat diabetes melitus yaitu daun pandan wangi dan daun salam sebagai penurunan kadar gula  darah.  Penggunaan  bersama  pada daun pandan wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb.)  dan  daun  salam ( Syzygium polyanthum Wight.) memberikan efek yang sinergis yaitu pada penelitian yang dilakukan oleh Prasmeswari  dan  Widjanarko  (2014), menunjukkan  ekstrak  air  daun  pandan wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.) dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah dan  memperbaiki  kerusakan  jaringan
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
pankreas, sedangkan kandungan senyawa yang terdapat pada daun salam diantaranya  yaitu  alkaloid  dan  saponin dapat menstimulasi sekresi insulin dari sel beta pankreas (Patel. et al , 2012; Murray. et  al ,  2003),  serta  terpenoid  seperti triterpenoid  dapat  dapat  meningkatkan penyerapan  glukosa  dengan  bertindak meniru  kerja  insulin  dan  sebagai insulin sensitizer (Lee dan Thuong, 2010).
Pada peneliti sebelumnya menyatakan  bahwa  ekstrak  daun  pandan wangi  mengandung  senyawa  kimia flavonoid yang juga mampu menurunkan kadar  glukosa  darah  pada  tikus  diabetik dengan  cara  menghambat  kerja  dari GLUT2 ( Glucose Transporter Isoform 2 ), suatu protein transporter glukosa yangterdapat  pada  membran  usus  yang menyebabkan  kadar  glukosa  darah  akan turun (Song J, et al , 2002), flavanoid juga dapat  berfungsi  sebagai  antioksidan alami,  sehingga  dapat  memperbaiki kerusakan jaringan pankreas yang diakibatkan  alkilasi  DNA  akibat  induksi aloksan  akibatnya  dapat  memperbaiki morfologi  pankreas  tikus  (Prasmeswari dan Widjanarko, 2014). Penelitian lainnya yang  dilakukan  oleh  Widyawati et  al.,
(2014)  menyimpulkan  bahwa  kandungan flavonoid yang terkandung di dalam daun salam  merupakan  salah  satu  golongan senyawa  yang  dapat  menurunkan  kadar glukosa darah.
Penggunaan  bersama  pada  daun
pandan wangi
( Pandanus
amaryllifolius Roxb.)  dan  daun  salam
( Syzygium polyanthum Wight.) memberikan efek yang sinergis yaitu pada penelitian yang dilakukan oleh Prasmeswari  dan  Widjanarko  (2014), menunjukkan  ekstrak  air  daun  pandan wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.) dapat  menurunkan  kadar  glukosa  darah dan  memperbaiki  kerusakan  jaringan pankreas, sedangkan kandungan senyawa yang terdapat pada daun salam diantaranya  yaitu  alkaloid  dan  saponin dapat menstimulasi sekresi insulin dari sel beta pankreas (Patel. et al. , 2012; Murray. et  al. ,  2003),  serta  terpenoid  seperti triterpenoid  dapat  dapat  meningkatkan penyerapan  glukosa  dengan  bertindak meniru  kerja  insulin  dan  sebagai insulin sensitizer (Lee dan Thuong, 2010).
Berdasarkan  hal  tersebut,  peneliti ingin  mengetahui  efek  dari  kombinasi ekstrak etanol daun pandan wangi( Pandanus  amaryllifolius Roxb.) dan  daun  salam( Syzygium  polyanthum Wight.) jika dibandingkan dengan potensi hipoglikemik  dari  insulin  pada  tikus ( Rattus  norvegicus )  putih  galur  wistar dengan metode induksi Aloksan. Sehingga hasil  penelitian  ini  dapat  menjadi referensi  dalam  penemuan  senyawa  obat baru  untuk  mengatasi  penyakit  diabetes melitus.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilaksanakan  pada Bulan  April  hingga  Mei  2019.  Penelitian
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
ini  merupakan  penelitian  eksperimental laboratorium  yang  bertujuan  untuk mengetahui  efek  antidiabetes  kombinasi ekstrak  etanol  daun  pandan  wangi ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.)dan daun  salam  ( Syzygium  polyanthum
Wight.)  pada  tikus( Rattus  norvegicus ) putih galur wistar dengan metode induksi aloksan..
A. Alat Penelitian
Alat-alat  yang  digunakan  adalah seperangkat alat ekstraksi, rotary evaporator ( Buchi) ,  corong  ( Herma ),
timbangan analitik ( Ohouse USA ), penangas  air  ( Intralab  Instrument ), kertas  saring( Hario  V60 ),  spoit  injeksi ( Onemed ),  jarum  oral  tikus  ( Onemed ), mortir dan stamper ( Powerbond ), gunting (Stainless), dan seperangkat alat untuk uji kadar  gula  darah  :  glukometer  ( Nesco ), strip glukometer ( Nesco ).

## B. Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan adalah  akuades,  etanol  96%,  aloksan monohidrat,  hewan  coba,  pakan  hewan coba,  Daun  Pandan  Wangi  ( Pandanus amaryllifolius Roxb.),  Daun  Salam
( Syzygium  polyanthum Wight.)  Natrium Karboksi  Metil  Selulosa  (Na-CMC),  dan insulin eksogen (Novomix).
C. Prosedur Kerja 1.Pengambilan Sampel
Sampel  Daun  Pandan  Wangi ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.)  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  diambil dari,  Kecamatan  Anggotoa,  Kabupaten
Konawe,  Provinsi  Sulawesi  Tenggara, sedangkan daun salam ( Syzygium polyanthum Wight.) diambil dari Kelurahan  Tobuha,  Kecamatan  Puuwatu, Kota Kendari, Provinsi Sulawesi Tenggara. 2. Determinasi Sampel
Tanaman yang diperoleh dilakukan determinasi  di  Laboratorium  Biologi Fakultas  Keguruan  dan  Ilmu  Pendidikan Universitas Halu Oleo.
3. Pengolahan Sampel
Sampel  daun  Pandan  Wangi ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.),  dan daun  Salam  ( Syzygium  polyanthum Wight.) dicuci bersih dengan air mengalir, kemudian  dikeringkan  dengan  cara diangin – anginkan tanpa sinar matahari langsung, lalu dirajang.
4. Ekstraksi Sampel
Sampel  daun  Pandan  Wangi ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.),  dan daun  Salam  ( Syzygium  polyanthum Wight.)yang  telah  dirajang  masing- masing  diekstraksi  dengan  metode maserasi  menggunakan  cairan  penyari etanol 96% dengan perbandingan sampel dan cairan penyari 1 : 3. Proses maserasi ini  dilakukan  selama  3  x  24  jam  dengan sesekali  pengadukan,  kemudian  diambil filtratnya  dan  ampasnya  diremaserasi kembali dengan cairan penyari yang baru sampai  pelarutnya  menjadi  bening  dan disatukan,  ekstrak  lalu  diuapkan  dengan rotary evaporator.
5. Penentuan Parameter Standarisasi 1 . Parameter Spesifik
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
a. Penentuan  Kadar  Senyawa  yang Larut Dalam Air
Sejumlah  1,0  g  ekstrak dimasukkan  ke  dalam  labu bersumbat dan ditambahkan 25,0 mL  air-kloroform  LP  (2,5  mL kloroform  dimasukkan  dalam labu ukur 1000 mL dan ditambahkan  air  hingga  tanda batas).  Kemudian  didiamkan selama  24  jam  sambil  dikocok berkali-kali selama 6 jam pertama dan dibiarkan selama 18 jam lalu disaring.  Sebanyak  5,0  mL  filtrat diuapkan  hingga  kering  dalam cawan dangkal berdasar rata yang
telah ditara. Lalu residu dipanaskan  pada  suhu  105 o C hingga  bobot  tetap.  Kadar  dalam persen  senyawa  yang  larut  air dihitung  terhadap  ekstrak  awal (Saifudin, Rahayu,
&
Teruna,2011).
b. Penentuan  Kadar  Senyawa  Larut Dalam Etanol Sejumlah  1,0  g  ekstrak dimasukkan  ke  dalam  labu bersumbat dan ditambahkan 25,0 mL  etanol  (96%).  Kemudian didiamkan  selama  24  jam  sambil dikocok berkali-kali selama 6 jam pertama dan dibiarkan selama 18 jam.  Lalu  disaring  dengan  cepat untuk menghindarkan penguapan etanol.  Sebanyak  5,0  mL  filtrat diuapkan  hingga  kering  dalam
cawan dangkal berdasar rata yang telah  ditara.  Residu  dipanaskan pada  suhu  105 o C  hingga  bobot tetap. Kadar dalam persen senyawa  yang  larut  etanol  (95%) dihitung terhadap ekstrak awal
6. Penyiapan Sampel Bahan Penelitian
a. Pembuatan larutan koloidal Na CMC 0,5 % b/v
Aquadest  sebanyak  100  ml dipanaskan  hingga  suhu  70 o C  lalu dimasukkan kedalam lumpang. Natrium  CMC  sebanyak  0,5  g dimasukkan sedikit demi sedikit dan diaduk  hingga  terbentuk  suspensi yang homogen, kemudian volumenya  dicukupkan  dengan  air panas hingga volume 100 ml.
b. Pembuatan Suspensi Ekstrak
Etanol  Daun  Pandan  Wangi (EEDPW) dan Ekstrak Etanol Daun Salam (EEDS) Pembuatan suspensi
EEDPW  dan  EEDS  dilakukan dengan  cara  sebagai  berikut: sebanyak  12  mg/ml  EEDPW  dan
12,5  mg/ml  EEDS  dimasukkan kedalam vial yang berbeda, kemudian diukur suspensi Na CMC 0,5%  dalam  gelas  ukur  10  ml, setelah  itu  dimasukkan  kedalam masing-masing  vial  yang  berisi EEDPW dan EEDS. dikocok hingga homogen.
7. Pengujian
a. Pengkondisian Hewan Coba
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
Hewan  coba  yang  digunakan pada  penelitian  ini  adalah  tikus jantan  galur  Wistar  yang  berusia  8
minggu  dengan  berat  badan  antara 150-200 g. Hewan coba diadaptasikan dalam kandang
percobaan  satu  minggu  sebelum diberi perlakuan. Hewan coba diberi pakan  pelet  diet  standar  dan  air minum  ad  libitum  (Sornalakshmi dkk., 2016; Suresha dkk., 2012).
b. Induksi  Diabetes  Pada  Hewan
Coba Pada hari pertama sebelum perlakuan, semua tikus
dipuasakan,  kemudian  diperiksa kadar  gula  darah  puasanya.
Induksi diabetes pada hewan coba dilakukan  dengan  pemberian aloksan  monohidrat  (150  mg/kg BB) secara intraperitoneal. Kadar gula darah tikus diperiksa kembali pada  hari  kedua,  24  jam  setelah penyuntikan  aloksan.  Parameter keberhasilan penginduksian yaitu naiknya  kadar  glukosa  darah puasa  yang  melebihi  125  mg/dL (Anitha dkk., 2012; Sornalakshmi dkk., 2016, Etuk., 2010; Swastini, 2018; ADA, 2014).
c. Pengujian Efek Antidiabetes Pada  pengujian  ini  hewan
uji  dibagi  menjadi  3  kelompok pada  uji  toleransi  glukosa  oral pada tikus yang diinduksi diabetes.  Tiap  kelompok  terdiri
dari 3 tikus. Uji Toleransi Glukosa pada  Tikus  yang  Diinduksi
Diabetes Kelompok I : Kontrol Negatif (Na CMC) Kelompok II : Kontrol Positif (Insulin eksogen) Kelompok III : Kombinasi ekstrak
ekstrak  etanol  daun pandan  wangi  (600 mg/kg BB) dan daun salam  (625  mg/kg BB) per oral.
Setelah  3  hari  pelakuan, masing-masing  kelompok  tikus dilakukan pemeriksaan kadar gula darah,  kemudian  dilanjutkan perlakuan  hingga  hari  ke-15  dan dilakukan pemeriksaan kadar gula darah  untuk  semua  kelompok tikuss pada jam ke-0, 6, 12, 18, dan 24.  Semua  sampel  darah  diambil melalui  pemotongan  ujung  ekor tikus dan kadar gula darah diukur dengan  glukometer.  Masing – masing pengambilan sampel darah dilakukan dengan replikasi tiga kali.

## D. Pengumpulan dan Pengelolaan
Data
Hasil  penelitian  dinyatakan  dalam rata-rata  ±  SEM.  Signifikansi  data dianalisis  dengan One-way  Analysis  of Variance (ANOVA) (program SPSS 16.0).
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
Data  dianggap  signifikan  jika  nilai  p kurang dari 0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## 1. Hasil Karakterisasi Simplisia
Tabel 3. Hasil Karakterisasi Simplisia
1. Daun Pandan Wangi
No Karakterisasi Hasil 1. Penetapan kadar senyawa larut air 11% 2. Penetapan kadar senyawa larut etanol 9% 1. Daun Salam No  Karakterisasi Hasil 1. Penetapan kadar senyawa larut air 11% 2. Penetapan kadar senyawa larut etanol 11%

## 2.   Hasil Pengukuran Kadar Gula Darah Tikus Putih
Tabel   4.   Hasil   Rata-rata   Pengukuran   Kadar   Gula   Darah   Sebelum   dan
Sesudah Induksi Diabetes :
No
Kelompok Kadar rata-rata gula darah
(mg/dL) ± std
Sebelum Sesudah 1 Kontrol Positif 103,66 ± 11,01                 159,66 ± 15,17 2 Kombinasi Ekstrak 95 ± 12,12                        159,33 ± 10,01 3 Kontrol Negatif 100,66 ± 2,51 158 ± 12,16 Ket    : 1. Kontrol Positif (Insulin Pen)
2. Kombinasi Ekstrak (600 mg/kgBB + 625 mg/kgBB Tikus)
3. Kontrol Negatif (Na CMC)
Hasil pengukuran rata-rata kadar gula darah Tikus ( Rattus norvegicus ) H+3 dan H+15 dapat dilihat pada tabel berikut:
Tabel                                    5. Hasil Pengukuran Rata-rata Kadar Gula Darah pada H+3:
No Kelompok Kadarr rata-rata gula darah tikus (mg/dL) ± std Jam ke- 0 6 12 18 24 1 Kontrol Positif 99,3 ± 21,3       91,3 ± 21,3 88,3 ± 25,1 87 ± 15,71 94,3 ± 24,6 2 Kombinasi Ekstrak 110,3 ± 8,3 100,6 ± 2,8 92,3 ± 10,9 82 ± 9,8 88,3 ± 14,1 3 Kontrol Negatif 177,3 ± 6,6        172,6 ± 19,6      162,6 ± 4,6        176,3 ± 8,5        178,3 ±9,0 Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
Tabel 6. Hasil Pengukuran Rata-rata Kadar Gula Darah pada H+15:
No  Kelompok Kadarr rata-rata gula darah tikus (mg/dL) ± std Jam ke- 0 6 12 18 24 1 Kontrol Positif 111 ± 16,3 129,3 ± 16,2 106,3 ± 30,1 110 ± 32,5 91,3 ± 6,8 2 Kombinasi Ekstrak 128 ± 4,3 105,6 ± 23,2 105,3 ± 15,0 90 ± 9 81,6 ± 7,0 3 Kontrol Negatif 185 ± 4,5           172 ± 5,2           176,3 ± 5,8        177,6 ± 6,0        180 ± 1,7
Grafik hasil pengkuran kadar gula dalam darah tikus putih pada H+3 dapat dilihat pada gambar berikut :
Gambar 1 . Hasil Pengukuran Kadar Gula Darah Tikus Putih pada H+3 Ket :   KGDP : Kadar Gula Darah Puasa (mg/dL) KGDA : Kadar Gula Darah 24 jam Setelah Induksi Aloksan (mg/dL) H+3(0) : Kadar Gula Darah H+3 Perlakuan jam ke- 0 (mg/dL) H+3(6) : Kadar Gula Darah H+3 Perlakuan jam ke- 6 (mg/dL)
H+3(12) : Kadar Gula Darah H+3 Perlakuan jam ke- 12 (mg/dL)
H+3(18) : Kadar Gula Darah H+3 Perlakuan jam ke- 18 (mg/dL) H+3(24) : Kadar Gula Darah H+3 Perlakuan jam ke- 24 (mg/dL) 100,6 158 177,3 162,6 162,6 176,3 178,3 103,6 159,6 99,3 91,3 88,3 87 94,3 95 169 110,3 100,6 92,3 82,3 88,3 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 KGDP KGDA H+3(0) H+3(6) H+3(12) H+3(18) H+3(24) K ad ar G u la Dal am D ar ah ( m g/ d L) Hasil Perlakuan K. Negatif K. Positif K. Perlakuan
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
Hasil pengkuran kadar gula dalam darah tikus putih pada H+15 dapat dilihat pada gambar berikut :
Gambar 2 . Hasil Pengukuran Kadar Gula Darah Tikus Putih pada H+15 Ket :  H+15(0) : Kadar Gula Darah H+15 Perlakuan jam ke- 0 (mg/dL) H+15(6) : Kadar Gula Darah H+15 Perlakuan jam ke- 6 (mg/dL) H+15(12) : Kadar Gula Darah H+15 Perlakuan jam ke- 12 (mg/dL) H+15(0,05 18)  : Kadar Gula Darah H+15 Perlakuan jam ke- 18 (mg/dL) H+15(24) : Kadar Gula Darah H+15 Perlakuan jam ke- 24 (mg/dL)
Senyawa dalam daun pandan wangi yang diduga  berperan  dalam  menurunkan kadar  glukosa  darah  adalah  flavonoid. Sampai  saat  ini  mengenai  mekanisme flavonoid  dalam  menurunkan  kadar glukosa  darah  belum  diketahui  secara pasti,  namun  dari  beberapa  teori menyebutkan  bahwa  flavonoid  diketahui mampu  berperan  dalam  menangkap radikal bebas atau dapat berfungsi sebagai antioksidan  alami.  Aktivitas  antioksidan tersebut  memungkinkan  flavonoid  untuk menangkap  atau  menetralkan  radikal bebas,  sehingga  dapat  memperbaiki keadaan  jaringan  yang  rusak.  Flavonoid dapat berperan dalam kerusakan jaringan
pankreas  yang  diakibatkan  oleh  alkilasi DNA  akibat  induksi  aloksan  sebagai akibatnya  dapat  memperbaiki  morfologi pankreas  tikus.  Flavonoid  dilaporkan memiliki  aktivitas  antidiabetes  yang mampu  meregenerasi  sel  pada  pulau Langerhans (Prameswari, 2014). Flavonoid  dapat  mencegah  komplikasi atau  progresifitas  diabetes  mellitus dengan cara membersihkan radikal bebas yang  berlebihan,  memutuskan  rantai reaksi radikal bebas,  mengikat ion logam (chelating),  dan  memblokade  jalur  poliol dengan  menghambat  enzim  aldose reduktase.  Flavonoid  juga  memiliki  efek penghambatan  terhadap  enzim  alfa
185 172 176,3 177,6 180 111 129,3 106,3 110 91,3 128
105,6 105,3 90 81,6 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 H+15(0) H+15(6) H+15(12) H+15(18) H+15(24) K ad ar G u la Dal am D ar ah ( m g/ d L) Hasil Perlakuan K. Negatif K. Positif K. Perlakuan
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
glukosidase  melalui  ikatan  hidroksilasi dan  substitusi  pada  cincin  β.  Prinsip penghambatan ini serupa dengan acarbose  yang  selama  ini  digunakan sebagai  obat  untuk  penanganan  diabetes mellitus,  yaitu  dengan  menghasilkan penundaan  hidrolisis  karbohidrat  dan disakarida  dan  absorpsi  glukosa  serta menghambat metabolisme sukrosa menjadi glukosa dan fruktosa (Soewonto, H. 2001; Mills, S and K. Bone. 2002; Ho, E  and  T.M.  Bray.  1999).  Kandungan senyawa  yang  terdapat  pada  daun  salam diantaranya  yaitu  alkaloid  dan  saponin yang  dapat  menstimulasi  sekresi  insulin dari sel beta pankreas (Patel. et al , 2012;
Murray. et  al ,  2003),  serta  terpenoid seperti triterpenoid dapat dapat meningkatkan penyerapan glukosa dengan  bertindak  meniru  kerja  insulin dan  sebagai insulin  sensitizer (Lee  dan Thuong, 2010).
Standardisasi suatu simplisia tidak lain  pemenuhan  terhadap  persyaratan sebagai  bahan  dan  penetapan  nilai berbagai  parameter  dari  suatu  produk. Standardisasi  simplisia  juga  mempunyai pengertian  bahwa  simplisia  yang  akan digunakan untuk obat sebagai bahan baku harus  memenuhi  persyaratan  yang tercantum  dalam  monografi  terbitan resmi  Departemen  Kesehatan  (Materia Medika  Indonesia)  (Depkes  RI,  2000). Salah  satu  tujuan  dari  standardisasi adalah menjaga konsistensi dan keseragaman  khasiat  dari  obat  herbal.
Standardisasi melibatkan pemastian kadar senyawa aktif farmakologis melalui analisis  kuantitatif  metabolit  sekunder yang akan menjamin keseragaman khasiat (Saefudin,  et  al.,  2011).  Standardisasi ekstrak  daun  pandan  wangi  ( Pandanus amaryllifolius Roxb.)  dan  daun  salam ( Syzygium  polyanthum Wight.)  yang dilakukan  di  dalam  penelitian  ini  adalah karakterisasi  ekstrak  berupa  parameter spesifik  sesuai  acuan  dari  PPOMN (Depkes  RI,  2000)  meliputi  kadar senyawa  yang  larut  dalam  air  dan  kadar senyawa  yang  larut  dalam  etanol. Penentuan kadar senyawa larut dalam air bertujuan  untuk  menunjukkan  jumlah kandungan  senyawa  yang  bersifat  polar (memiliki  sifat  kepolaran  sama  dengan air). Penetapan kadar senyawa larut etanol dilakukan untuk menunjukkan kandungan senyawa-senyawa yang bersifat  semi  polar  (memiliki  sifat kepolaran  sama  dengan  etanol).  Etanol yang  digunakan  sebagai  pelarut  adalah etanol  96%  yang  kemudian  diuapkan  di atas  titik  didih  etanol  (80 o C).  Hasil karakterisasi simplisia daun pandan wangi dan  daun  salam  yaitu  penetapan  kadar senyawa  larut  dalam  air  berturut-turut yaitu  sebesar  11%  dan  9%,  sedangkan kadar  senyawa  larut  dalam  etanol sebanyak 11% dan 11%. Berdasarkan hasil yang  diperoleh,  dapat  diketahui  bahwa kadar  senyawa  larut  dalam  etanol  lebih tinggi dibandingkan dengan senyawa larut dalam  air,  artinya  kadar  senyawa  semi
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
polar  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan kadar  senyawa  polarnya.  Hal  ini disebabkan  karena  pelarut  dalam  proses maserasi  yang  digunakan  adalah  etanol yang mana bersifat semi polar.  Hasil yang diperoleh pada penetapan kadar senyawa larut  air  dan  kadar  senyawa  larut  etanol sudah  sesuai  berdasarkan  MMI  yang menyatakan bahwa persyaratan parameter spesifik kadar senyawa larut air yaitu  <  24%  dan  kadar  senyawa  larut etanol  >  6%.  Penetapan  kadar  senyawa larut dalam air dan etanol ini merupakan dugaan secara umum banyaknya senyawa yang  bersifat  polar  (yang  larut  air) maupun  bersifat  semi  polar  (terlarut dalam  etanol).  Penetapan  senyawa  larut dalam air maupun etanol ini tidak secara langsung mempengaruhi efek farmakologis senyawa aktif dalam ekstrak (Saifudin, 2011).
Diabetes mellitus dapat disebabkan oleh  banyak  faktor.  Faktor  tersebut diantaranya  faktor  genetik,  infeksi  oleh kuman,  faktor  nutrisi,  zat  diabetogenik, dan  radikal  bebas  (stres  oksidatif). Senyawa  aloksan  merupakan  salah  satu zat  diabetogenik  yang  bersifat  toksik, terutama terhadap sel beta pankreas, dan apabila  diberikan  kepada  hewan  coba seperti  tikus  maka  dapat  menyebabkan hewan  coba  tikus  menjadi  diabetes. Mekanisme  toksisitas  aloksan  diawali dengan  masuknya  aloksan  ke  dalam  sel- sel  beta  pankreas  dan  kecepatan pengambilan  akan  menentukan  sifat
diabetogenik  aloksan.  Induksi  aloksan pada dosis 150 mg/kgBB secara intraperotoneal  mampu  meningkatkan kadar glukosa darah dan kerusakan pada sel  β  pankreas  tikus.  Tikus  dinyatakan hiperglikemia bila kadar glukosa darah > 135 mg/dL (Giri, 2008).
Sebelum  dilakukan  perlakuan, Tikus Putih diadaptasikan terlebih dahulu dengan  lingkungan  selama  7  hari  untuk menghindari  terjadinya  stres  pada  saat perlakuan.  Sebelum  perlakuan  dimulai, tikus  dipuasakan  terlebih  dahulu  selama 16 jam agar terjadi pengosongan lambung oleh makanan yang dapat mempengaruhi hasil  penelitian,  tetapi  tetap  diberi minum.
Pada pengujian diabetes mellitus , 9 ekor  tikus  putih  ( Rattus  norvegicus ) dibagi  menjadi  3  kelompok  perlakuan. Masing – masing kelompok terdiri dari 3 ekor  tikus.  Kelompok yang  diberi  Insulin Pen  dengan  dosis  0,7  mg/kg  BB  tikus, kelompok  diberi  Na  CMC  1  %,  dan Kelompok yang diberi suspensi kombinasi ekstrak daun pandan wangi dengan dosis 600 mg/KgBB tikus dan daun salam 625 mg/kgBB tikus. Diberikan selama 15 hari dan  diukur  kadar  gula  darah  tikus  putih pada hari ke 3 dan hari ke 15. Sebelumnya terlebih  dahulu  diukur  kadar  gula  darah puasa  dan  kadar  gula  darah  setelah induksi aloksan. Diukur kadar gula darah tikus putih menggunakan alat glukometer.
Berdasarkan  data  penelitian  pada tabel 4, rata-rata kadar gula darah hewan
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
uji  pada  kelompok  sebelum  perlakuan dan sesudah perlakuan terdapat perbedaan  bermakna.  Kadar  gula  darah tikus sebelum induksi belum mengalami hiperglikemi ditandai dengan kadar gula darah masih terlihat normal dengan nilai <125  mg/dL,  namun  setelah  diinduksi diabetes  mengalami  peningkatan  kadar gula  darah  sehingga  menyebabkan hiperglikemi  dengan  nilai  >125  mg/dL. Pada H+3 dan H+15 jam ke- 0, 6,  12,  18, dan  24  setelah  pemberian  perlakuan, diperoleh  hasil  pengukuran  rata-rata kadar gula darah pada kelompok kontrol positif  dan  kelompok  perlakuan  ekstrak mengalami    penurunan    kadar    gula darah,  namun  tidak  terjadi  penurunan pada kelompok kontrol negatif.
Berdasarkan hasil analisis statistik, menunjukkan bahwa kadar gula darah  sebelum  induksi  diabetes  dan sesudah  induksi  diabetes  diperoleh  hasil yang  berbeda  nyata  tiap  kelompoknya yaitu  p<0,05.  Hal  ini  membuktikan bahwa  induksi  aloksan  dapat    merusak sel   beta   pankreas   yang  menyebabkan produksi    insulin    menurun  sehingga terjadi    peningkatan    kadar    glukosa darah.    Selanjutnnya    diberi    perlakuan hingga  H+15  kemudian  diukur  kembali kadar  gula  darah  tikus  pada  H+3  dan H+15.
Dalam penelitian tersebut, berdasarkan hasil analisis statistik diatas, H+3 perlakuan jam ke-0, 6, 12, 18 dan 24 diperoleh hasil bahwa terdapat
perbedaan  yang  bermakna      ( p <0,05) antara   kelompok   kontrol   positif   dan perlakuan      ekstrak  dibandingkan kelompok  kontrol  negatif  dengan  nilai signifikan ( p <0,05). Tidak ada perbedaan yang bermakna antara kelompok kontrol positif  dan  perlakuan  ekstrak  dengan nilai  signifikan  ( p >0,05).  Selanjutnya hasil  analisis  statistik  pada  H+15 perlakuan jam ke- 0, 6, 12, 18, dan 24 juga menunjukkan adanya perbedaan bermakna  pada  kelompok  perlakuan ekstrak  dan  kelompok  kontrol  positif dibandingkan dengan kelompok  kontrol negatif  dengan  nilai  signifikan  masing- masing  yaitu  ( p <0,05). Kadar gula darah kelompok perlakuan mengalami penurunan  setelah  diberikan  perlakuan ekstrak,  sedangkan  asil  analisis  pada kelompok  kontrol  positif  dibandingkan perlakuan  ekstrak  menunjukkan  tidak ada perbedaan yang bermakna baik pada jam ke- 0, 6, 12, 18 dan 24, nilai signifikan (p<0,05).
Berdasarkan hal penelitian diatas, sejalan dengan beberapa penelitian lainnya seperti penelitian yang dilakukan  Prasmeswari,  (2014)  bahwa ekstrak  daun  pandan  wangi  dapat menurunkan kadar gula darah tikus yang diinduksi  diabetes  selama  4  minggu, dibandingkan  penelitian  saat  ini  lebih cepat  efeknya  dalam  menurunkan  kadar glukosa  darah  tikus  disebabkan  karena menggunakan  kombinasi  ekstrak  daun pandan  wangi  dan  daun  salam  yang
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
efeknya saling sinergis dalam penurunan kadar  gula  darah  dapat  dilihat  pada pengukuran H+3 telah terjadi penurunan kadar gula darah hingga H+15. Penelitian ini juga sejalan dengan penelitian Lolok et al . (2019) yang menggunakan kombinasi ekstrak  kulit  bawang  merah  dan  kulit bawang  putih  dengan  metode  induksi aloksan terhadap tikus yang menyatakan bahwa ekstrak tanaman yang dikombinasi  mempercepat  penurunan kadar gula darah pada hewan coba tikus. Senyawa  yang  terkandung  dalam  daun pandan wangi dan daun salam mempunyai khasiat sebagai antidiabetes. Senyawa-senyawa yang terkandung dalam  daun  pandan  wangi    antara    lain, tanin,  alkaloid,  flavonoid,  dan  polifenol. Flavonoid    diketahui  mampu  berperan menangkap  radikal bebas atau  berfungsi sebagai  antioksidan  alami  (Lugasi et  al .,
2003).  Flavonoid  dapat  berperan  dalam kerusakan  jaringan  pankreas  yang diakibatkan  oleh  alkilasi  DNA  akibat induksi  aloksan  sebagai  akibatnya  dapat memperbaiki  morfologi  pankreas  tikus. Flavonoid  dilaporkan  memiliki  aktivitas antidiabetes  yang  mampu  meregenerasi sel  pada  pulau  Langerhans  (Sandhar et al .,  2011).  Alkaloid  terbukti  mempunyai kemampuan  regenerasi  sel β pankreas yang rusak (Arjadi, 2010).
Aktivitas antioksidan yang dimiliki  ekstrak  air  daun  pandan  wangi juga tinggi yaitu 66.82% sehingga diduga mampu memperbaiki sel β pankreas yang
rusak.  Aktivitas  antioksidan  mampu menangkap radikal bebas yang menyebabkan perbaikan pada kerusakan sel β pankreas  penyebab  DM  (Suryani, 2013).  Dengan  adanya  perbaikan  pada jaringan pankreas, maka terjadi peningkatan  jumlah  insulin  didalam tubuh  sehingga  glukosa  darah  akan masuk  kedalam  sel  sehingga  terjadi penurunan  glukosa  darah  dalam  tubuh (Prasmeswai,  2014),  dan  senyawa  kimia yang  terdapat  dalam  daun  salam  yaitu flavanoid  dimana  kandungan  flavonoid utama  pada  ekstrak  etanol  daun  salam berupa  kuersitrin  dan  fluoretin  yang berfungsi  sebagai  antioksidan  (Badan POM    RI,    2004).    Flavonoid  bekerja dengan  cara  menghambat  reabsorbsi glukosa  dari  ginjal  (Lukacinova et  al , 2008),  mengatur  kerja  enzim  yang terlibat pada jalur metabolisme karbohidrat, meningkatkan sekresi insulin  (Brahmachari,  2011),  sehingga mampu  menurunkan  kadar  glukosa darah.
Berdasarkan uraian hasil penelitian diatas, dapat diketahui bahwa kombinasi  ekstrak  etanol  daun  pandan wangi  dosis  600  mg/kgBB  dan  daun salam  625  mg/kgBB  dapat  menurunkan kadar  gula  darah  pada  tikus  ( Rattus norvegicus )  putih  galur  wistar  yang diinduksi diabetes. Menurut Wolfenshon dan  Lloyd  (2013)  kadar  gula  darah normal 50 – 135 mg/dl. Penurunan kadar gula  darah  pada  tikus  yang  terjadi
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
masih  dalam  kategori  normal,  artinya tidak  terjadi  hipoglikemik.  Pengaruh ekstrak  etanol  daun  pandan  wangi ( Pandanus  amaryllifolius  Roxb .)  dalam menurunkan  kadar  gula  darah  terjadi karena dalam ekstrak etanol daun pandan wangi  terdapat  kandungan  tannin, alkaloid  dan  flavonoid.  Tannin  yang terdapat  didalam  daun  pandan  wangi akan  memicu  metabolisme  glukosa  dan lemak,  yang  nantinya  digunakan  untuk mencegah adanya timbunan glukosa dan lemak  di  darah  (Dalimartha,  2005). Alkaloid  akan  menghambat    sintesis glukosa  dengan  menghambat  enzim glukosa  6-fosfatase  dan  fruktosa  1,6- biofosfatase  yang berfungsi menurunkan pembentukan glukosa dari substrat selain karbohidrat  sehingga  kadar  glukosa darah  turun  (Arjadi,  2010).  Flavanoid dengan  mekanisme  kerja  menghambat GLUT2 ( Glucose Transporter Isoform 2), suatu  protein  transporter  glukosa  pada membran usus (Song J et al , 2002) yang merupakan kendaraan pengangkut glukosa  dari  saluran  cerna  kemudian masuk  ke    dalam    darah    melewati membran  menuju  ke  dalam  sel  (Sudoyo et  al ,  2006). Sehingga kadar gula darah tidak  meningkat.  Sedangkan  kandungan senyawa  yang terdapat pada daun salam diantaranya  yaitu  alkaloid  dan  saponin dapat  menstimulasi  sekresi  insulin  dari sel  beta  pankreas  (Patel et  al ,  2012;
Murray et  al ,  2003),  serta  terpenoid seperti triterpenoid dapat dapat
meningkatkan penyerapan glukosa dengan  bertindak  meniru  kerja  insulin dan  sebagai insulin  sensitizer (Lee  dan Thuong, 2010).

## KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian setelah  dianalisis  secara  statistik  dan pembahasan  maka  dapat  disimpulkan bahwa :
Kombinasi  ekstrak  Daun  Pandan Wangi  ( Pandanus  amaryllifolius Roxb.) dan Daun Salam  ( Syzygium  polyanthum Wight.) memberikan efek dalam penurunan  kadar  gula    darah  serta memberikan  hasil  optimal  yang  hampir sama  dengan  kelompok  positif  dalam penurunan  kadar  gula  darah  dibuktikan dengan nilai signifikan yang tidak berbeda nyata p > 0,05.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Dengan  selesainya  penelitian  ini, penulis mengucapkan terima kasih kepada semua  pihak  yang  telah  berkontribusi yaitu  Dr.  PH.  Hj.  Tasnim,  S.KM.,  M.PH, selaku  ketua  STIKES  Mandala  Waluya Kendari,
Apt. Waode Yuliastri, S.Farm.,M.Si selaku selaku Ketua
Program Studi Farmasi STIKES Mandala Waluya  Kendari,  Staf  Administrasi STIKES  Mandala  Waluya  Kendari, Laboratorium
Farmakognosi-Fitokimia dan Biofarmasi STIKES Mandala
WaluyaKendari,  mahasiswa(i)  Program Studi  Farmasi  STIKES  Mandala  Waluya Kendari,  serta  seluruh  pihak  yang  telah
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
membantu  selama  penulis  melakukan penelitian.

## DAFTAR PUSTAKA
American Diabetes Association (ADA) (2014) Diagnoses  and  classification  of diabetes mellitus , Diabetes Care 37(1): 81 – 90. Anitha, M., Sakthidevi, G., Muthukumarasamy,  S.,  dan  Mohan, V.R.,  2012.  Effect  of Cynoglossum zeylanicum (Vehl ex Hornem) Thunb. Ex Lehm on OralGlucose Tolerance in rats.
Arjadi,  F.,  dan  Susatyo,  P.,  2010,  Regenerasi
Sel Pulau Langerhans Pada Tikus Putih (Rattus  norvegicus)  Diabetes  yang Diberi Rebusan Daging Mahkota Dewa (Phaleria macrocarp (scheff.) Boerl.),Efek  Anti  Diabetes  Rebusan Buah Mahkota Dewa, 2 (2): 117-26.
Badan  POM  RI.,  2004, Monografi  Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia Brahmachari, G., 2011, Bio- Flavonoids With Promosing  Antidiabetic  Potentials:A Critical Survey, Research Signpost .
Chang,  C.L.T.,  Y.  Lin,  A.P.  Bartolome,  Y.C. Chen, S.C. Chiu, & W.C. Yang. 2013. Dalimartha,  S.,  2005,  Ramuan  Tradisional Untuk Pengobatan Diabetes Mellitus,Penebar Swadaya, Bogor. Departemen Kesehatan RI. (2000). Parameter  Standar  Umum  Ekstrak Tumbuhan  Obat .  Dirjen  Pengawasan Obat dan Makanan.Volume 1 : Jakarta
Ditjen  POM,  1986. “Sediaan  Galenik” , Departemen Kesehatan Tepublik Indonesia, Jakarta Dipiro,  J.T.,  R.L.  Talbert,  G.C.  Yee,  G.R. Matzke,  B.G.  Wells,  &  L.M.  Posey. 2011. Pharmacotherapy: A Pathophysiologic  Approach  pp  1205, 1209-1211.  New  York:  Mc  Graw  Hill Medical. Doughari,J.H., 2012. Phytochemicals :Extraction  methods,  Basic  Structures and  Mode  of  Action  as  Potensial Chemotheraupetic Agents, Phytochemicals _ A Global Perspective of  thei  Role  in  Nutrition  and  Health, Intech.
Etuk,  2010.  Animals  Models  for  Studying Diabetes  mellitus.  Agriculture  and
Biology Journal of North America 1:2, 130-134.
(FHI),  F.  H.  I.  (2009) Farmakope  Herbal Indonesia . 1st edn. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.
Ginting,  E.  (2013)  Carotenoid  extraction  of orange-fleshed  sweet  potato  and  its application as natural food colorant, J.
Teknol. dan Industri Pangan, 24. Giri,  L.N.  2008.  Potensi  Antioksidasi  Daun Salam  :  Kajian  In  Vivo  Pada  Tikus Hiperkolesterolemia dan Hiperglikemia. Skripsi. Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam. Bogor Harbone,  J.B.,  1987. Metode  Fitokimia, Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan, Terbitan II . ITB : Bandung Harismah,  K.  dan  Chusniatun,  2016. Pemanfaatan Daun Salam ( EugeniaPolyantha )  Sebagai  Obat
Herbal  Dan  Rempah  Penyedap Makanan. WartaLpm , Pp. Vol .19 No. 2 110-118. Ho,  E  and  T.M.  Bray.  1999.  Antioxidants,
NFKB Activation, and Diabetogenesis. Proc  Soc  Exp  Biol  Med.  1999  Dec: 222(3): 205-13
International Diabetes Federation. 2015. IDF Diabetes  Atlas  7th  Edition. Brussels: InternationalDiabetes Federation. http://www.diabetes atlas.org/. [Sitasi:  9  Februari  2017].  [Sitasi  pada 18November 2016]. Kairupan,B.Y.,Wowor,M.P.,Mambo,C.2015. Pengaruh  Pemberian  Ekstrak  Umbi
Bawang  Merah  ( Allium  cepa L.) terhadap  Kadar  Gula  Darah  Tikus Wistar  ( Rattus  novergicus )  yang diinduksi  dengan  Aloksan.  Jurnal  e  - biomedik (eBM) 3:1, 4-5. Lee, M. S., & Thuong, P. T. (2010). Stimulation of  Glucose  Uptake  by  Triterpenoids From Weigela Subsessilis. Phytotherapy research, 24 , 49-53. Lenzen, S. 2007. The Mechanisms of Alloxan and  Streptozocin-  Induced  Diabetes  , Clinical  and  Experimental  Diabetes and Metabolism. Liliwirianis, et  al .  2011.  Preliminary  Studies On Phytochemical Screening Of Ulam And Fruit From Malaysia. EJournalOf Chemistry, Volume VIII. Lolok, et al. 2019. Antidiabetic Effect Of The Combination  Of  Garlic  Peel  Extract ( Allium  sativum )  And  Onion  Peel ( Allium  cepa )  In  Rats  WithOral- Glucose  Tolerance  Method. Research Joournal of Pharmacy and Technology . Fakultas Farmasi STIKES Mandala Waluya, Kendari.
Lucacinova, A., Mojzis, J., Benacka, R., Keller, J., Maguth, T., Kurila, P.,et, al., 2008,
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
Preventive  Effect  Of  Flavonoids  On Alloxan- Induced Diabetes Mellitus In Rats, Acta Vet, brno, 77: 175-182. Lugasi,  A.,  J.  Hovari,  K.V.  Sagi  and  L.  Biro. The Role of Antioxidant Phytonutrients  In  The  Prevention  of Disease. Acta  Biologica  Szegediensis . 2003; 47: 119-125 Mills,  S  and  K.  Bone.  2002.  Principles  and Practice  of  Phytotherapy  :  Modern Herbal Medicine. Edinburgh, Scotland, Churral Livingstone Murray, R. K., Granner, D. K., Mayes, P. A., & Rodwel,  V.  W.  (2003). Biokimia Harper (Vol.  25).  Jakarta:  Penerbit Buku Kedokteran EGC. Nastiandari,  D.  J.  (2016).  Pengaruh  Air Rebusan Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) terhadap  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus Jantan  Galur  Wistar  yang  Terbebani Glukosa.  Skripsi.  Fakultas  Farmasi. Universitas Sanata Dharma:hal. 1-3.
Nublah., 2011, Identifikasi Golongan Senyawa Penurun  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus Putih  (Rattus  norvegicus  Berkenhout, 1769) Hiperglikemia pada Daun Sukun (Artocarpus  altilis  (park.)  fosberg  ), Tesis, Universitas Gajah Mada.
Nurarif,  H.A  &  Kusuma,  H.  (2015).  Aplikasi Asyhan  Keperawatan  Berdasarkan
Diagnosa Medis Nanda dan NIC-NOC. Yogyakarta : Medi Action Nurhasnawati, H., Sukarmi dan Fitri H., 2017, Perbandingan Metode Ekstraksi Maserasi  dan  Sokletasi  Terhadap Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Etanol Daun Jambu Bol ( Syzygium malaccense L.) , Jurnal Ilmiah ManuntungVol.3 No.1 : 3 Octavia, D.R., 2009, Uji Aktivitas Penangkap
Radikal  Ekstrak  Petroleum  Eter,  Etil Asetat  dan  Etanol  Daun  Binahong ( Anredera  Corfolia (Tenore)  Steen) dengan  metode  DPPH  (2,2-difenil-1- pikrihidrasil), Skripsi .  Universitas Muhamadiyah, Surakarta. Patel, D., Kumar, R., Laloo, D., & Hemalatha,
S.  (2012).  Natural  Medicines  From Plant  Source  Used  For  Therapy  of Diabetes  Mellitus:  An  Overview  of  Its Pharmacological Aspects. Asian Pacific  Journal  of  Tropical  Disease , 239-250.
Piero,  M.N.,  Nzaro,  G.M.,  dan  Njagi,  J.M.,
2015.  Diabetes  mellitus-a  devastating metabolic  disorder. Asian  journal  of
biomedical and pharmaceutical sciences , 5 : 1. Prahastuti,  S.,  Tjahjani,  S.  dan  Hartini,  E., 2011. The Effect Of Bay Leaf Infusion ( Syzygium Polyanthum (Wight) Walp) To  Decrease  Blood  Total  Cholesterol Level  In  Dyslipidemia  Model  Wistar Rats. Jurnal Medika Planta, P. Vol. 1
No.4. Prasmeswari,  O.  M.,  dan  Widjanarko,  S.  B., 2014.  Uji  Efek  Ekstrak  Daun  Pandan Wangi, Jurnal Pangan dan Agroindustri, No.  2,  Vol.  2,  FTP Universitas Brawijaya, Malang, hal. 16
– 27. Pourcel,  L.,  Routaboul,  J,M et  al., 2006, Flavonoid  Oxidation  In  Plants:  From Biochemical Properties To Physiological, Elsevier . Radenkovic,  et  al.  2015. Experimental diabetes  induced  by  alloxan  and streptozotocin:  The  current  state  of the  art .  Journal  of  Pharmacological and Toxicological Methods.
Saifudin,  A.,  Rahayu,  V.,  &  Teruna,  H.  Y.
(2011).  Standardisasi  Bahan  Obat Alam. Yogyakarta: Graha Ilmu.
Sandhar,  H.K.,  B.  Kumar,  S.  Prashes,  P. Tiwari, M. Salhan, P. Sharma. 2011. A Review  Of  Phytochemistry  And Pharmacology Of Flavonoids. Internationale Pharmaceutica Scienca Jan-Mar 2011 Vol 1 Issue 1 Sharp,  P.,  dan  Villano,  J.,  2013,  The
Laboratory  Rat,  Edisi  2,  9-11,  CRC Press, California.
Soewonto,  H.  2001.  Antioksidan  Eksogen Sebagai Lini Pertahanan Kedua Dalam Menanggulangi  Peran  Radikal  Bebas. Didalam:  Prosiding  Khusus  Penyegar Radikal Bebas dan Antioksidan dalam Kesehatan  :  Dasar  Aplikasi  dan Pemanfaatan  Bahan  Alam.  Jakarta  16 April  2011.  Bagian  Biokimia  Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia Song J, Kwon O, Cheng S, Daruwala R, Eck P and  Park  JB,  2002, Flavonoid inhibitionof sodium-dependent vitamin ctransporter 1 (svctl) andglucose transporter isoform 2(glut2),  intestinal  transportersfor vitamin c and glucose, J Biol Chem. Sornalakshmi, V., Tresina Soris, P., Paulpriya, K., Packia Lincy, M., dan Mohan, V.R., n.d.  Oral  Glucose  Tolerance  Test (OGTT)  in  Normal  Control  and Glucose  Induced  Hyperglycemic  Rats
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29
with  Hedyotis  leschenaultiana  DC. Group , 1 : 0 – 9. Sumono,  A.  &  A.  Wulan.2009.  Kemampuan Air  Rebusan  Daun  Salam  (Eugenia polyantha  W)  dalam  Menurunkan Jumlah  Koloni  Bakteri  Spectroccocus sp. Majalah Farmasi Indonesia. 20 (3),
112-117.
Suresha,  R.N.,  Sushma,  V.N.,  Ashwini,  V., Kalabharathi,  H.L.,  Jayanthi,  M.K., dan  Prathima,  C.,  2012.  The  effect  of nifedipine  on  oral  glucose  induced glycaemic  changes  in  normal  albino rats. pancreas , 10 : 13 Suryani, N., T. Endang dan Aulanni’am. 2013. Pengaruh Ekstrak Metanol Biji Mahoni Terhadap  Peningkatan  Kadar  Insulin, Penurunan  Ekspresi  TNF- α  dan Perbaikan  Jaringan  Pankreas  Tikus Diabetes. Jurnal Kedokteran Brawijaya ,  Vol.  27,  No.  3,  Februari 2013 Swastini, Dewa Ayu. 2018. Penurunan Kadar Glukosa Darah dan Gambaran Histopatologi Pankreas dengan Pemberian Gula Aren (Arenga pinnata)  pada  Tikus  Jantan  Galur Wistar  yang  Diinduksi  Aloksan. Indonesia Medicus Veterinus. 7(2): 94-
105.
Szkuldelski,  T.  2008.  The  Mechanism  of
Alloxan and Streptozotocin Action in B Cells of The Rat Pancreas. Physiol. Res. 50: 536-546, 2001 Szkudelski,  T.  2001.  The  Mechanism  Of Alloxan And Streptozotocin Action In β
Cells Of The Rat Pancreas, Physiology Research, 50: 536-54.
Tiwari,  P.,  Kumar,  B.,  Kaur,  M.,  Kaur  G.  &
Kaur H., 2011, Phytochemical
Screening  And  Extraction:  A  Review, International Pharmaceutica Sciencia,
1 (1), 98-106. Udia,  P.M.,  Ogbonna,  O.J.,  Antai,  A.B., Mbatutung,  I.F.,  dan  Eyo,  S.E.,  2013.
Oral  glucose  tolerance  test  and  some haematological effects of aqueous leaf extract  of Rothmannia  hispida (K Schunn)  Fargel  on  normoglycaemic albino rats. J.Pharmacog. Phytochemistry , 5 : 300 – 305. Van  Steenis,  C.G.G.J.,  2003, Flora ,  hal  233-
236, P.T. Pradya Paramita, Jakarta.
Van Steenis CGGJ. 2008. Flora , Cetakan ke-7. Jakarta: PT Pradnya Paramita Van  Steenis.  2008. Flora ,  Cetakan  ke-12.
Jakarta: PT. Pradnya Paramita Widyawati  PS,  Budianta,  and  FA  Kusuma. Difference  of  Solvent  Polarity  to Phytochemical Content and Antioxidant Activity of Pluchea indica Less  Leaves  Extracts,  International Journal  of  Pharma  cognosy  and Phytochemical  Research.  2014;  6(4): 850-5. Winarto WP, Tim Karyasari. Mememanfaatkan bumbu dapur untuk mengatasi  aneka  penyakit.  Jakarta: Agromedia Pustaka; 2004.p.50
Wolfensohn,  S.  dan  Lloyd,  M.,  2013.
Handbook  of  Laboratory  Animal Management  and  Welfare. ,  4th Edition. ed. John Wiley & Sons, Ltd. World  Health  Organization.  2016. Global Report  onDiabetes. France:  World Health Organization. http://www.who.int/diabetes/global- report/en/. [Sitasi: 29 Mei 2017].
Lolok dkk.,  Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia 6(1);2020 : 13-29