## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
Formulasi Dan Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan Sabun Cair Ekstrak Daun Pala Myristica fragrans Houtt
Mirabella V. Moningka 1 *, Douglas Pareta 1 , Hariyadi 2 , Nerni Potalangi 2
1 Program Studi Farmasi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
2 Program Studi Biologi, Fakultas MIPA, Universitas Kristen Indonesia Tomohon
*Penulis Korespondensi; mirabellamoningka26@gmail.com
Diterima :  25 Juni 2020; Disetujui : 10 Oktober 2020

## ABSTRAK
Sabun cair merupakan campuran dari senyawa kalium dengan asam lemak yang digunakan sebagai bahan pembersih tubuh, berbentuk cair, busa, dengan atau tanpa zat tambahan lain serta tidak menimbulkan iritasi pada  kulit.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  membuat  sediaan  sabun  cair  ekstrak  daun  pala  dan  melakukan pengujian aktivitas antibakteri sediaan sabun cair ekstrak daun pala terhadap bakteri S. aureus . Penelitian ini merupakan eksperimen laboratorium. Metode yang digunakan adalah difusi sumuran. Hasil penelitian menunjukkan  sediaan  sabun  cair  ekstrak  daun  pala  memiliki  aktivitas  antibakteri  ditandai  dengan terbentuknya  zona  hambat.  Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan  bawah  formulasi  sediaan  sabun  cair ekstrak daun pala dengan konsentrasi 8% dan 9% telah memenuhi persyaratan yang sesuai dengan standar yang  ditetapkan  SNI  06-4085-1996.  Sedangkan  pada  konsentrasi  10%  dalam  uji  pH  tidak  memenuhi persyaratan. Formulasi sediaan sabun cair ekstrak daun pala memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus yaitu pada konsentrasi 8% zona hambat 9.6 mm, konsentrasi 9% zona hambat 7.3 mm, dan konsentrasi 10% zona hambat 6.6 mm.
Kata kunci : daun pala, sabun cair, Staphylococcus aureus, antibakteri

## ABSTRACT
Liquid soap is a mixture of potassium compounds with fatty acids that are used as body cleaning agents, in the form of liquid, foam, with or without other additives and does not cause irritation to the skin. The purpose of this study was to make liquid soap extracts of nutmeg extract and to test the antibacterial activity  of  liquid  soap  extracts  of  nutmeg  extract  against  S.  aureus  bacteria.  This  research  is  a laboratory experiment. The method used is well diffusion. The results showed that nutmeg extract liquid soap preparations had antibacterial activity characterized by the formation of inhibitory zones. From the results of the study it can be concluded that the formulation of nutmeg leaf extract liquid soap with a concentration of 8% and 9% has met the requirements in accordance with the standards set by SNI 06-4085-1996. Whereas the 10% concentration in the pH test did not meet the requirements. Nutmeg leaf extract liquid soap formulation has antibacterial activity against Staphylococcus aureus bacteria, namely at a concentration of 8% inhibition zone 9.6 mm, concentration of 9% inhibition zone 7.3 mm, and concentration of 10% inhibition zone 6.6 mm Keywords : nutmeg leaves, liquid soap, Staphylococcus aureus, antibacterial

## PENDAHULUAN
Menjaga  kebersihan  merupakan  hal  yang sangat  penting  karena  semakin  banyaknya penyakit  yang  timbul  karena  bakteri  [1].  Kulit
merupakan  bagian  dari  tubuh  yang  melindungi bagian  dalam  tubuh  dari  gangguan  fisik  maupun mekanik  dan  gangguan  bakteri.  Hal  tersebut memicu  kebutuhan  akan  perlindungan  kulit

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
dengan  menggunakan  kosmetik  seperti  sabun cair[ 2 ].
Sabun  cair  merupakan  salah  satu  sarana untuk  membersihkan  dari  kotoran.  Penggunaan sabun  cair  lebih  praktis  dan  bentuknya  lebih menarik dibandingkan dengan bentuk sabun yang lain. Sabun cair dapat digunakan untuk mencegah penyakit,  seperti  penyakit  kulit  yang  disebabkan oleh bakteri [ 3–5 ].
Bakteri Staphylococcus aureus adalah salah satu  bakteri  gram  positif  yang  dapat  ditemukan hidup  di  kulit,  saluran  pernapasan  dan  saluran pencernaan. S. aureus dapat menjadi patogen jika mereka  masuk  ke  jaringan  bawah  kulit  sehingga dapat menyebabkan infeksi [ 6–12 ].
Seiring meningkatnya keinginan masyarakat  untuk  menggunakan  bahan  alam, maka dikembangkanlah sediaan  dari bahan alam. Salah  satu  bahan  alam  yang  dapat  digunakan adalah  daun  pala.  Hasil  penelitian  pendahuluan yang  dilakukan  oleh  peneliti  terhadap  skrining fitokimia bahwa daun pala mengandung senyawa flavonoid, alkaloid,  saponin,  dan triterpenoid).
Berdasarkan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  [ 13 ]. menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun  pala  memiliki aktivitas  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri Staphyloccocus aureus dan Escherichia coli .
Daun  pala  merupakan  salah  satu  bagian tanaman yang belum banyak termanfaatkan.[ 13,14 ]
Penelitian   tentang   daun   pala   belum   banyak dilaporkan,  namun  ketersediaan  daun  pala  lebih melimpah dibandingkan dengan bagian tumbuhan yang lain.
Berdasarkan  latar  belakang  di  atas,  maka peneliti  tertarik  untuk  melakukan  penelitian
tentang “Formulasi dan Uji Aktivitas Antibakteri Sediaan  Sabun  Cair  Ekstrak  Etanol  Daun  Pala ( Myristica fragrans Houtt )”.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan

## Alat dan Bahan
Alat–alat yang digunakan  dalam penelitian ini  adalah  toples,  neraca  analitik,  erlenmeyer, corong,  batang  pengaduk,kertas  saring,  gelas kimia,  aluminium  foil, rotary  evaporator, spatel, cawan  petri,  hot  plate,  gelas  ukur, magnetic stirrer ,  pH  meter,  pipet, autoclave , Laminar  Air Flow (LAF), tabung reaksi, kawat ose, pembakar Bunsen, pecandang, pingset, dan incubator.
Sedangkan  bahan  yang  digunakan  adalah ekstrak  daun  pala,  minyak  zaitun,  kalium hidroksia (KOH ), carboksil metil celulosa (CMC), sodium lauryl sulfat (SLS), asam stearate , buthyl hidroksi  anisol (BHA),  anisi  sintesis,  aquades, bakteri S. aureus, nutrient agar, etanol 70%, sabun cair dettol.

## Prosedur Pelaksanaan Penelitian Pembuatan Ekstrak Daun Pala
Pembuatan  ekstrak  daun  pala  dilakukan dengan  metode  maserasi,  yaitu  serbuk  daun  pala diambil  sebanyak  600  gr  dimasukkan  kedalam wadah  kaca  dan  direndam  dengan  pelarut  etanol 70% ditutup dengan aluminium foil dan dibiarkan selama 24 jam. Kemudian disaring menggunakan kertas saring dan  menghasilkan filtrat dan residu, kemudian residu di remaserasi sebanyak 2 kali.
Filtrat  yang  dihasilkan  dicampurkan  untuk menghasilkan  filtrat  total,  selanjutnya  filtrat dipekatkan dengan rotary evaporator hingga

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
diperoleh  ekstrak  kental.  Ekstrak  kemudian ditimbang  dan  disimpan  dalam  wadah  kaca tertutup sebelum digunakan untuk pengujian.

## Skrining Fitokimia
Uji Alkaloid
Ekstrak  daun  pala  sebanyak  0.2  gram  dimasukan kedalam  tabung  reaksi  lalu  ditambahkan  10  tetes kloroform  dan  10  tetes  asam  ammonia  kemudian tambahkan  10  tetes  H 2 SO 4 2N  (Asam  sulfat)  dan di  aduk,  diamkan  hingga  terbentuk  2  lapisan. Lapisan yang di atas dipindahkan dalam 3 tabung reaksi  kemudian  pada  masing-masing  tabung diteteskan  reagen  wagner,  reagen  mayer  dan reagen dragendrof. Hasil positif dengan menunjukan adanya endapan.
Uji Flavonoid
Ekstrak  daun  pala  timbang  sebanyak  0.2 gram  masukkan  dalam  tabung  reaksi  lalu tambahkan etanol sebanyak 5 mL dan di panaskan selama 15 menit. Selanjutnya tambahkan beberapa tetes  HCl  pekat  dan  tambahkan  juga  0.2  gram bubuk  Mg  ( Magnesium ),  lalu  di  amati.  Hasil positif dengan menunjukan warna merah tua. Uji Saponin
Ekstrak  daun  pala  sebanyak  0.2  gram dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi,  kemudian tambahkan  aquades  5  mL,  panaskan  selama  10 menit, lalu dikocok kuat-kuat. Hasil positif dengan terbentuknya buih.
Uji Triterpenoid
Ekstrak  daun  pala  sebanyak  0.2  gram  di masukkan  dalam  tabung  reaksi  dan  tambahkan dengan  asam  asetat  glasial  sampai  terendam, dibiarkan selama 15 menit lalu tambahkan 3 tetes
asam sulfat pekat. Hasil Positif dengan membentuk warna merah
Formulasi  Sediaan  Sabun  Cair  Ekstrak  Daun pala
Formulasi  sediaan  sabun  cair  ekstrak  daun  pala dibuat  dengan  konsentrasi  yang  bervariasi  yaitu 8%, 9% dan 10%.
Tabel 1. Formulasi Sediaan Sabun Cair EkstrakDaun Pala.[7]

## Pembuatan Sediaan Sabun Cair Ekstrak Daun Pala
Semua  bahan  yang  akan  digunakan  ditimbang terlebih dahulu sesuai dengan formulasi. Dimasukkan  minyak  zaitun  sebanyak  15  mL  ke dalam  gelas  kimia  dan  ditambahkan kalium hidroksida (KOH)  8  mL  sedikit  demi  sedikit sambil  terus  dipanaskan  pada  suhu  50 o C  dan  di aduk  dengan  menggunakan magnetic  stirrer sampai terbentuk sabun pasta. Kemudian ditambahkan  ±15  mL  aquades  dan  dimasukkkan carboksil  metil  celulosa (CMC)  yang  telah dikembangkan  dalam  aquades  panas,  diaduk hingga  homogen.  Kemudian  ditambahkan  asam stearate  yang  telah  dilelehkan,  diaduk  hingga homogen.
Ditambahkan sodium  lauryl  sulfat (SLS), diaduk  hingga  homogen.  Ditambahkan butyl hydroksil  anisol (BHA)  lalu  diaduk  hingga homogen, ditambahkan  anisi  sintesis,  diaduk

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
hingga  homogen.  Dimasukkan  ekstrak  daun  pala dan  diaduk  hingga  homogen.  Sabun  cair ditambahkan  dengan  aquades  hingga  volumenya 50 ml [ 4,15 ]. Untuk ekstrak daun pala disesuaikan dengan konsentrasi.
Pengujian  Mutu  Sediaan  Sabun  Cair Ekstrak Daun Pala
Uji Organoleptik
Uji  Organoleptik  bertujuan  untuk  melihat tampilan  fisik  dari  suatu  sediaan  yang  meliputi bentuk, warna, dan bau [ 5,8,15 ].
Uji pH
Uji  pH  merupakan  salah  satu  syarat  mutu sabun cair. pH sabun cair yang  diperbolehkan antara    8-11.    Penentuan    pH    diukur    dengan menggunakan pH universal. [ 5,8,15 ].
Pengujian Tinggi Busa
Pengujian  Tinggi  Busa  bertujuan  untuk melihat  seberapa  banyak  busa  yang  dapat dihasilkan. Syarat tinggi busa dari sabun cair yaitu 13-220  mm.  Pengujian  tinggi  busa  dilakukan dengan  cara  memasukkan  1  gr  sampel  sabun  ke dalam  tabung  yang  berisi  aquades  kemudian ditutup dan dikocok selama 20 detik [ 5,8,15 ]. .
Pengujian Bobot Jenis
Pengujian  bobot   jenis  dilakukan  untuk mengetahui pengaruh bahan-bahan yang digunakan  dalam  formulasi  sabun  cair  terhadap bobot jenis sabun yang  dihasilkan. Standar bobot jenis  pada  sabun  cair  yaitu  1,01-1.1g/ml. Pengujian     bobot     jenis     menggunakan     alat piknometer [ 5,8,15 ].
Pembuatan  Larutan  Nutrient  Agar  (NA)  dan Media Agar Miring
Untuk larutan Nutrient Agar (NA), sebanyak 0.28 g  dilarutkan  dengan  10  mL  aquadest  dalam
erlenmeyer,  selanjutnya  dihomogenkan  dengan magnetic  stirrer ,  larutan  NA  digunakan  untuk pembuatan media agar miring [ 16 ] . Sebanyak 5 mL Larutan  NA  dituangkan  dalam  tabung  reaksi  dan diletakan  dengan  posisi  miring  dan  dibiarkan hingga  memadat.  Media  agar  miring  digunakan untuk peremajaan bakteri uji
Peremajaan Bakteri
Bakteri Staphylococcus  aureus yang berasal  dari  biakan  murninya,  diambil  dengan menngunakan ose steril kemudian diinokulasikan dengan  cara  digores  pada  medium  Nutrient  Agar (NA) miring kemudian diinkubasi pada suhu 37 o C selama 18-24 jam [ 7,12,17–20 ].

## Pembuatan Suspensi Bakteri Uji
Bakteri uji yang telah diremajakan, diambil dengan  menggunakan  ose  steril  kemudian disuspensikan  kedalam  2  ml  larutan  NaCl  0,9% steril, setelah itu dihomogenkan [ 7,12,17–20 ].

## Pembuatan  Media  Dasar  dan  Pembenihan Nutrien Agar (NA)
Pembuatan  media  dilakukan  dengan  cara menyiapkan  bahan-bahan  untuk  medium  yaitu dengan  menimbang  media Nutrient  Agar (NA) sebanyak  4.2  gr  kemudian  dilarutkan  dengan aquades  sebanyak  150  ml.  kemudian  diaduk hingga  homogen,  setelah  homogen  disterilkan dengan autoclave pada  suhu  121 0 C  selama  15 menit[ 7,12,17–20 ].
Pembuatan  Media Pengujian  dan  Pengujian Antibakteri
Media  ini  dibuat  dengan  menggunakan metode  difusi  sumuran  dengan  cara  membuat lapisan dasar dengan menuangkan masing-masing 15  mL  larutan  NA  dari  media  dasar  ke  dalam  5 cawan  petri  lalu  dibiarkan  sampai  memadat. Setelah  memadat,  pada  permukaan  lapisan  dasar
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
diletakkan  5  pecandang  dan  diatur  jaraknya  agar daerah  pengamatan  tidak  bertumpu.  Kemudian campurkan  suspensi  bakteri  kedalam  media pembenihan  NA,  selanjutkan  dituangkan  15  mL NA  campuran  suspensi  bakteri  dan  media pembenihan  tersebut  ke  dalam  tiap  cawan  petri sebagai  lapisan  kedua.  Setelah  lapisan  kedua memadat,  pecandang  (sumuran)  diangkat  secara aseptic  dari  cawan  petri  sehingga  terbentuklah sumur-sumur yang akan digunakan dalam pengujian antibakteri [ 7,12,17–20 ].
Basis  sabun  (kontrol  negatif),  sabun  dettol (kontrol  positif)  dan  sediaan  sabun  cair  dengan konsentrasi 8%, 9%, dan 10% ditimbang masing- masing  sebanyak  0.1  gram  kemudian  diteteskan pada  sumuran.  Kemudian  diinkubasi  pada  suhu 37 0 C selama 24 jam. Setelah diinkubasi selama 24 jam, dilakukan pengamatan.
Cara Perhitungan Zona Hambat Perhitungan diameter zona hambat[10]
Rumus :  D = 𝑑1+𝑑2 − X……… (1) 2
Keterangan :
d1 = diameter vertikal zona hambat pada media. d2 = diameter horizontal zona hambat pada media. X = lubang sumuran

## Analisis Data
Data hasil pengujian daya antibakteri di uji secara  statistik,  sebelum  dilakukan  uji  statistik, terlebih  dahulu  di  uji  normalitas  dan  uji homogenitas.  Apabila  data  hasil  pengujian menunjukkan  terdistribusi  normal  dan  homogen, maka  data  dapat  dianalisis  dengan  menggunakan uji  parametik  ANOVA  ( Analysis  of  variant ) tingkat kepercayaan 95 % (α=0,05).) Apabila data tidak  terdistribusi  normal  dan  tidak  homogen, maka  data  dianalisis  dengan  menggunakan  uji non-parametik  yaitu Kruskal-Wallis .  Jika  ada
perbedaan  yang  signifikan  maka  dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney untuk melihat perbedaan antar perlakuan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  ekstraksi  terhadap  daun  pala  diperoleh sebanyak  45.15  gr  ekstrak  kental.  Selanjutnya ekstrak  di  uji  fitokimia  dengan  menggunakan metode  reaksi  warna.  Hasil  yang  diperoleh  dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia
Pada  Tabel  2.  menunjukkan  ekstrak  daun  pala mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, saponin,  dan  triterpenoid.  Senyawa  alkaloid, flavonoid,  saponin,  dan  triterpenoid  merupakan senyawa  kimia  yang  memiliki  potensi  sebagai antibakteri.

## Hasil Evaluasi Mutu Sediaan Sabun Cair
Uji Organoleptik
Uji  Organoleptik  bertujuan  untuk  melihat tampilan  fisik  dari  suatu  sediaan  yang  meliputi bentuk,  warna,  dan  bau.  Hasil  uji  organoleptik dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Uji Organoleptik

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
Pada  Tabel  3  menunjukkan  bentuk  dari sabun  cair  yang  dihasilkan  pada  penelitian  ini yaitu  cair,  hal  ini  dikarenakan  lemak  yang digunakan adalah minyak zaitun yang merupakan salah satu minyak yang mengandung asam lemak tak  jenuh.  Asam  lemak  tak  jenuh  akan menghasilkan sabun cair. Dan larutan alkali yang digunakan adalah Kalium Hidroksida (KOH) yang merupakan  alkali  yang  biasa  digunakan  pada sabun lunak (sabun cair)[ 15 ].
Bau yang dihasilkan pada basis sabun adalah bau anisi  sintesis  karena  pengharum  yang  digunakan adalah  anisi  sintesis  sedangkan  pada  konsentrasi 8%,  9%,  dan  10%  adalah  bau  khas  dari  ekstrak daun  pala  karena  adanya  penambahan  ekstrak daun  pala. Basis  sabun  cair  berwarna  putih kekuningan karena dari proses pemanasan minyak zaitun dan KOH hingga mendapatkan sabun pasta memiliki  warna  putih  kekuningan  sedangkan sediaan  sabun  konsentrasi  8%,  9%,  dan  10% berwarna  coklat  kemerahan  karena  penambahan ekstrak daun pala Uji pH
Uji  pH  merupakan  salah  satu  syarat mutu sabun cair. Menurut SNI 06-4085-1996 pH  sabun  cair  yang  diperbolehkan adalah 8- 11.  Uji  pH  bertujuan  untuk  mengetahui tingkat  kebasaan  sediaan  untuk  menjamin sediaan  tidak  menyebabkan  iritasi.  Hasil  yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Hasil Pengujian pH
Pada Tabel 4  menunjukkan basis sabun memiliki pH  11,  konsentrasi  8%  memiliki  pH  10, konsentrasi  9%  memiliki  pH  11,  dan  konsentari 10%  memiliki  pH  12.  Hal  ini  disebabkan  karena adanya  penambahan  ekstrak  daun  pala  dimana ekstrak  daun  pala  mengandung  senyawa  alkaloid yang bersifat basa ,sehingga dapat meningkatkan pH pada sediaan sabun cair yang dihasilkan [ 21 ]. Pengujian  pH  sediaan  sabun  cair  memiliki  pH yang  cenderung  basa,  hal  ini  karena  bahan  dasar penyusunnya yaitu KOH bersifat basa.
Nilai  pH    sabun    yang    terlalu    asam    dapat menyebabkan iritasi kulit dan nilai pH yang terlalu basa dapat menyebabkan kulit bersisik [13]. Dari hasil  yang  diperoleh  menunjukkan  bahwa  pH sediaan  sabun  cair  konsentrasi  8%  dan  9% memenuhi syarat mutu sabun cair.
Pengujian Tinggi Busa
Tinggi  busa  adalah  salah  satu  syarat  dari sabun  cair.  Tinggi  busa  yang  diperbolehkan adalah  13-220  mm  [ 1 ].  Pengujian  Tinggi  Busa bertujuan  untuk  melihat  seberapa  banyak  busa yang  dapat  dihasilkan  dari  sediaan.  Hasil  yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 5
Tabel 5. Hasil Pengujian Tinggi Busa
Pada Tabel 5 menunjukkan tinggi busa dari basis sabun  73  mm,  konsentrasi  8%  tinggi  busa  yang didapat 75 mm, konsentrasi 9% tinggi busa yang didapat  85 mm, dan konsentrasi 10% tinggi busa

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167 (The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
yang didapat 93 mm. Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh, menunjukkan bahwa penambahan ekstrak daun pala dapat mempengaruhi tinggi busa sediaan  sabun  cair.  Hal  ini  karena  ekstrak  daun pala  mengandung  senyawa  aktif  saponin  yang dapat menghasilkan busa jika direaksikan dengan air,  sehingga  dengan  penambahan  ekstrak  daun pala  dapat  meningkatkan  tinggi  busa  sediaan sabun  cair  yang  dihasilkan  [ 21 ].  Dari  hasil  yang diperoleh menunjukkan bahwa tinggi busa sediaan sabun  cair  ekstrak  daun  pala  memenuhi  syarat mutu sabun cair.
Pengujian Bobot Jenis
Pengujian  bobot  jenis  dilakukan  untuk mengetahui pengaruh bahan-bahan yang digunakan  dalam  formulasi  sabun  cair  terhadap bobot  jenis  yang  dihasilkan  [ 15 ].  Hasil  yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 6
Tabel.6 Hasil Pengujian Bobot Jenis
Pada Tabel 6 menunjukkan bobot jenis dari basis sabun  yaitu  1.0497  g/ml,  konsentrasi  8%  yaitu 1.0828  g/ml,  konsentrasi  9%  yaitu  1.0733  g/ml  , dan  konsentrasi  10%  yaitu  1.0752  g/ml.  Nilai bobot  jenis  pada  konsentrasi  meningkat,  hal  ini disebabkan karena penambahan ekstrak daun pala.
Namun  pada  konsentrasi  9%  dan  konssentrasi 10%  mengalami  penurunan,  hal  ini  dapat disebabkan pada saat pengujian bobot jenis sabun dengan  menggunakan  piknometer,  sampel  sabun mudah  membentuk  gelembung  udara  sehingga bobot   sampel  yang  ditimbang  akan  menjadi
berkurang  dan  dapat  mempengaruhi  nilai  bobot jenis yang dihasilkan [ 22 ]. Dari hasil yang diperoleh menunjukkan bahan yang digunakan dalam sabun cair memiliki pengaruh terhadap bobot jenis.

## Hasil Pengujian Daya Antibakteri
Tabel 7. Hasil Pengujian Zona Hambat
Pada  Tabel  7  menunjukkan  bahwa  adanya perbedaan  daerah  hambat  yang  terbentuk  pada masing-masing perlakuan yang dilakukan sebanyak 5 kali ulangan. Rata-rata daerah hambat tersebut  menunjukkan  bahwa  adanya  perubahan yang  terjadi  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus. Dari  hasil  pengujian, sediaan  sabun  dengan  konsentrasi  8%  didapat zona  hambat  9.6  mm,  konsentrasi  9%  didapat zona  hambat  7.3  mm,  dan  konsentrasi  10% didapat  zona  hambat  6.6  mm.  Hal  tersebut menunjukkan adanya aktivitas terhadap
Staphylococcus aureus .
Sediaan  yang  memiliki  zona  hambat  yang terbesar  adalah  sediaan  dengan  konsentrasi  8%. Pada umumnya diameter zona hambat cenderung meningkat  sebanding  dengan  meningkatnya konsentrasi ekstrak. Dalam penelitian ini terdapat penurunan  zona  hambat  pada  konsentrasi  yang lebih  besar,  hal  ini  disebabkan  karena  perbedaan nilai  pH  dari  masing-masing  sediaan  sabun  cair. Pertumbuhan bakteri akan lebih  mudah  dihambat pada pH yang lebih rendah  dibandingkan  dengan pH yang tinggi.
Kontrol negatif yang digunakan yaitu basis sabun.  Basis  sabun  tidak  menunjukkan  adanya zona hambat, hal ini mengindikasikan bahwa basis

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
sabun tidak memiliki aktivitas antibakteri. Kontrol positif  yang  digunakan  adalah  sabun  cair  dettol. Rata-rata zona hambat kontrol positif yang didapat yaitu  13.1  mm.  Berdasarkan  kategori  daya hambat, sediaan sabun cair ekstrak daun pala pada konsentrasi  8%  (9.6  mm)  dikategorikan  sedang, konsentrasi  9%  (7.3  mm)  dikategorikan  sedang, dan  konsentrasi  10%  (6.6  mm)  dikategorikan sedang.
Penelitian  ini  menggunakan  sampel  yang diambil  dari  tempat  yang  berbeda  dengan penelitian  sebelumnya.  Perbedaan  tempat  ini mengakibatkan  kandungan  senyawa  aktif  pada sampel berbeda dengan kandungan senyawa aktif pada sampel pada penelitian sebelumnya. Hal ini mempengaruhi  daya  hambat  antibakteri  sediaan sabun  cair  ekstrak  daun  pala  terhadap  bakteri S. aureus .
Sediaan  sabun  cair  ekstrak  daun  pala memiliki aktivitas sebagai antibakteri dikarenakan  ekstrak  daun  pala  mengandung senyawa  alkaloid,  saponin,  flavonoid,  dan terpenoid. Senyawa alkaloid memiliki kemampuan  sebagai  antibakteri.  Mekanisme alkaloid  adalah  dengan  cara  mengganggu komponen  penyusun  peptidoglikan  pada  sel bakteri,  sehingga  lapisan  dinding  sel  tidak terbentuk secara utuh dan menyebabkan kematian sel tersebut [ 23 ].
Senyawa saponin dapat merusak membrane sitoplasma bakteri. Rusaknya membran
sitoplasma dapat mengakibatkan sifat permeabilitas  membran  sel  berkurang  sehingga transport zat ke dalam sel dan ke luar sel menjadi tidak terkontrol sehingga pertumbuhan sel bakteri menjadi terhambat dan menyebabkan kematian sel
[ 7,24 ]. Flavonoid bekerja dengan cara mendenaturasi  protein  sel  bakteri  dan  merusak membrane sitoplasma sehingga dapat menyebabkan kematian bakteri [ 7,24 ].
Senyawa triterpenoid akan bereaksi dengan porin  (protein  transmembran)  yang  terdapat  pada membrane  luar  dinding  sel  bakteri.  Kemudian akan terbentuk ikatan polimer yang kuat sehingga mengakibatkan  rusaknya  porin.  Rusaknya  porin akan mengurangi permeabilitas dinding sel bakteri dan mengakibatkan sel bakteri kekurangan nutrisi sehingga  pertumbuhan  bakteri  terhambat  atau mati[ 25 ].
Uji Statistik Data hasil pengujian antibakteri di dianalisis dengan uji statistik non parametik yaitu Kruskal  Wallis .  Kriteria  pengujian Kruskal- Wallis yaitu jika p < 0.05, dapat diartikan adanya perbedaan yang signifikan dan jika p > 0.05, dapat diartikan tidak ada perbedaan yang signifikan.
Hasil  uji Kruskal-Wallis menunjukkan bahwa nilai signifikan  0.002  yaitu  kurang  dari 0.05  berarti  tiap-tiap  perlakuan  yang  diberikan, memiliki  zona  hambat  yang  berbeda.  maka dilanjutkan  dengan  uji Mann-Whitney. Hasil  yang diperoleh dapat dilihat pada Tabel 8
Tabel 8. Hasil uji Mann-Whitney

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
Hasil uji Mann-Whitney pada Tabel 8 menunjukkan bahwa pada kontrol negatif dengan kontrol positif berbeda signifikan, kontrol negatif dengan  konsentrasi  8%,  9%  dan  10%  berbeda signifikan, kontrol positif dengan konsentrasi 10% berbeda  signifikan,  kontrol  positif  dengan konsentrasi 8% dan 9% tidak berbeda signifikan, konsentrasi  8%  dengan  konsentrasi  9%  tidak berbeda  signifikan,  konsentrasi  8%  dengan konsentrasi 10% berbeda signifikan dan konsentrasi  9%  dengan  konsentrasi  10%  tidak berbeda signifikan

## KESIMPULAN
Dari  hasil  penelitian  dapat  disimpulkan bahwa  sediaan  sabun  cair  ekstrak  daun  pala dengan  konsentrasi  8%  dan  9%  dalam  uji organoleptik, uji pH, uji tinggi busa, dan uji bobot jenis  telah  memenuhi  persyaratan  yang  sesuai dengan  standar  yang  ditetapkan  SNI  06-4085- 1996. Sedangkan pada konsentrasi 10% dalam uji pH  tidak  memenuhi  persyaratan.  Sediaan  sabun cair  ekstrak  daun  pala  memiliki  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus yaitu pada konsentrasi 8% zona hambat 9.6 mm,  konsentrasi  9%  zona  hambat  7.3  mm,  dan konsentrasi 10% zona hambat 6.6 mm.

## DAFTAR PUSTAKA
(1) Gusviputri, A., Meliana P. S, N., Aylianawati.  2013.  Pembuatan  Sabun Dengan  Lidah  Buaya  (Aloe  Vera)  Sebagai Antiseptik  Alami. Jurnal  Widya  Teknik. 12
(1), 11–21.
(2) Sukawaty,  Y.  2016.  Formulasi  Sediaan Sabun  Mandi  Padat  EkstraK. Media Farmasi , 13 (1), 14–22.
(3) Anggraini,  D.,  Rahmides,  W.  S.  2012. Formulasi  Sabun  Cair  dari  Ekstrak  Batang Nanas  (Ananas  comosus.  L  )  untuk
Mengatasi  Jamur  Candida  albicans. Jurnal Penelitian Farmasi Indonesia , 1 (1), 30–33 .
(4) Pananginan,  A.  J.,  Hariyadi,  Paat,  V., Saroinsong,  Y.  2020.  Formulasi  Dan  Uji Aktivitas  Antibakteri  Sediaan  Sabun  Cair Ekstrak Daun Jarak Tintir Jatropha Multifidi L. Jurnal  Biofarmasetikal  Tropis , 3 (1), 148–158.
(5) Sahambangung, M. A., Datu, O. S., Tiwow, G.  A.  R.  T.,  Potolangi,  N.  O.  2019.
Formulasi Sediaan Sabun Antiseptik
Ekstrak Daun Pepaya Carica Papaya. Jurnal Biofarmasetikal Tropis , 2 (1), 43–51.
(6) Chakraborty,  S. P., Mahapatra,  S.  K.,  Roy, S.  2011.  Biochemical  Characters  and Antibiotic  Susceptibility  of  Staphylococcus Aureus  Isolates. Asian  Pacific  Journal  of Tropical Biomedicine , 1 (3), 212–216.
(7) Tampongangoy,  D.,  Maarisit,  W.,  Ginting, A. R.,  Tumbel,  S.,  Tulandi,  S.  2019.  Uji
Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Kayu Kapur Melanolepis multiglandulosa Terhadap  Bakteri  Staphylococcus  aureus dan  Bakteri  Escherichia  coli. Jurnal Biofarmasetikal Tropis , 2 (1), 107–1148.
(8) Kilis, T. N. I. M., Karauwan, F. A., Sambou, C.  N.,  Lengkey,  Y.  K.  2020.  Formulasi Sediaan Salep Ekstrak Daun Salam Syzygium  Polyanthum  Sebagai  Antibakteri Staphylococcus Aureus. Jurnal Biofarmasetikal Tropis , 3 (1), 46–53.
(9) Mawea,  F.,  Maarisit,  W.,  Datu,  O., Potalangi,  N.  2019.  Efektivitas  Ekstrak Daun Cempedak Artocarpus integer Sebagai Antibakteri. Jurnal  Biofarmasetikal  Tropis , 2 (1), 115–122.
(10) Untu, S. D. 2019. Aktivitas Antibakteri Kulit Batang  Santigi  Pemphis  acidula  Forst Terhadap Staphylococcus aureus dan Pseudomonas aeruginosa. Jurnal Biofarmasetikal Tropis , 2 (2), 61–68.
(11) Kanter,  J.  W.;  Untu,  S.  D.  2019.  Uji Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Kulit  Buah
Tanaman  Jengkol  Pithecellobium  Jiringa Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  Aureus  Dan  Pseudomonas

## Biofarmasetikal Tropis
e - ISSN 2685-3167
(The Tropical Journal of Biopharmaceutical) 2020, 3 (2), 17-26
Aeruginosa. Jurnal Biofarmasetikal Tropis , 2 (1), 170–179.
(12) Julianti, Maarisit, W., Potalangi, N., Kanter, J.  2020.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak Umbi Bawang Dayak Eleutherine palmifolia L.  Merr.  Terhadap  Bakteri  Klebsiella pneumoniae. Jurnal Biofarmasetikal Tropis ,
3 (1), 159–165.
(13) Yamami, R., Fakhraina. 2016. Uji Aktivitas Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Pala (Myristica
Fragrans) Terhadap Staphyloccocus  Aureus  Dan  Escherichia Coli.  Skripsi,  Universitas  Sumatra  Utara Medan.
(14) Ginting, B. 2013.Aktivitas Antifungi Ekstrak Daun Pala (Myristica Fra-Grans). In Prosiding Seminar Nasional Kimia .
(15) Dimpudus,  S.  A.,  Yamlean,  P.  V.  Y., Yudistira, A. 2017. FORMULASI SEDIAAN  SABUN  CAIR  ANTISEPTIK EKSTRAK  ETANOL. PHARMACON , 6 (3), 208–215.
(16) Jauhari,  L.  T.  Seleksi  Dan  Identifikasi Kapang  Endofit  Penghasil  Antimikroba Penghambat
Pertumbuhan Mikroba Patogen.  Skripsi,  UIN  Syarif  Hidayatullah Jakarta.
(17) Dwyana,  Z.,  Johannes,  E.  2012.  Uji Efektivitas  Ekstrak  Kasar  Alga  Merah Eucheuma  Cottonii  SEBAGAI  Antibakteri Terhadap Bakteri Patogen. Jurnal kimia .
(18) Maarisit,  W.,  Lawani,  M.  2020.  Chemical Investigation  and  Antimicrobial  Activity  of Medicinal  Plant Toddalia  Asiatica Lam.
Indones. J. Chem. , 20 (5), 1025.
(19) Maarisit, W., Ueda, K. 2013. Antimicrobial Metabolites From A Marine-Derived
FunguS. Indonesian J. Pharm , 24 (3), 163 – 169.
(20) Maarisit, W., Tangiono, D. H., Minelko, M.; Jan,  T.  T.,  Pinontoan,  R.,  Tombuku,  J.  L. 2013.  Antiangiogenesis  And  Antibacterial Activities From An Indonesian Marine-
Derived Fungus Dactylaria
Sp.
Indonesian J. Pharm. , 24 (2), 100-106.
(21) Widyasanti,  A.,  Farddani,  C.  L.,  Rohdiana, D. 2016. Making Of Transparent Solid Soap Using Palm Oil Based With Addition White Tea  Extracts  (Camellia  sinensis). Jurnal Teknik Pertanian Lampung , 5 (3), 125–136.
(22) Widyasanti,  A.,  Qurratu’ain,  Y.,  Nurjanah, S.  2017.  Pembuatan  Sabun  Mandi  Cair Berbasis  Minyak  Kelapa  Murni  (VCO) dengan  Penambahan  Minyak  Biji  Kelor (Moringa oleifera Lam). Chim. Nat. Acta , 5 (2), 77–84.
(23) Kurniawan, B., Aryana, W. F. 2015. Binahong (Cassia Alata L) As Inhibitor Ofescherichiacoli Growth. J Majority , 4 (4), 100–104.
(24) Retnowati, Y., Bialangi, N., Posangi, N. W. 2011. Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus Aureus Pada Media Yang Diekspos Dengan Infus Daun Sambiloto (Andrographis Paniculata). Saintek , 6 (2), 1–9.
(25) Yanuarisa, R., Agustina, D., Santosa, A. 2016. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Tempuyung ( Sonchus Arvensis L.
L.) Terhadap Salmonella Typhi Secara In Vitro. Journal of Agromedicine and Medical Sciences , 2 (2), 1–6.