Studi  Pemijahan  Kerang  Mutiara (Pinctada  maxima)  Dengan  Menggunakan Metode Kejut Suhu ( Thermal Shock)
Lindiyani Bahrudin 1* , Priyo Santoso 1 , Agnette Tjendanawangi 1
1 Program Studi Budidaya Perairan, Fakultas Peternakan, Kelautan dan Perikanan, Universitas Nusa Cendana Kupang, Jl. Adisucipto Kota Kupang, kodepos 852228. *Email Korespondensi : lindibahrudin@gmail.com
Abstrak. Kerang mutiara merupakan komoditas perikanan laut yang memiliki nilai pasar yang baik dan relative stabil. Untuk waktu yang akan datang pengembangan budidaya laut di Indonesia akan menjadi prioritas utama dan sumber pertumbuhan bagi sektor perikanan yang dimana dapat dilihat dari ketersediaan sumberdaya alam yang  cukup  luas.  Kegagalan  dalam  proses  penyediaan  benih  kerang  mutiara  menyebabkan  permintaan  benih kerang mutiara berupa juvenil terjadi peningkatan. Upaya peningkatan produksi kerang mutiara dapat dilakukan dengan pengembangan usaha budidaya. Teknik pemijahan induk dalam teknologi pembenihan merupakan salah satu aspek penting yang perlu dikembangkan. Oleh karena itu, usaha pembenihan larva yang dihasilkan melalui teknik pemijahan buatan menggunakan metode kejut suhu merupakan salah satu alternatif yang dapat dilakukan. Penelitian ini dilaksanakan selama 1 bulan yang bertempat di Laboratorium PT. Timor Otsuki Mutiara Kupang. Metode yang digunakan adalah metode deskrptif. Prosedur penelitian meliputi seleksi induk, persiapan wadah, proses pemijahan, proses penetasan telur, pemeliharaan dan penebaran larva serta pemberian pakan. Berdasarkan hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa,  kerang  mutiara  ( Pinctada  maxima )  dapat  dipijahkan  dengan menggunakan  metode  kejut  suhu  ( thermal  shock )  dengan  persentase  pemijahan  100%  memijah.  Tingkat kelangsungan  hidup  larva  kerang  mutiara  ( Pinctada  maxima )  untuk  perkembangan  dan  pertumbuhan  larva menggunakan metode kejut suhu menghasilkan 22.005.000.000 butir larva.
Kata kunci : Pemijahan, Kejut suhu, Kerang Mutiara

## Pendahuluan
Kerang mutiara merupakan komoditas perikanan laut yang memiliki nilai pasar yang baik dan relatif stabil (Hamzah, 2007). Indonesia merupakan salah satu negara penghasil mutiara kualitas ekspor yang dikenal dengan julukan south sea pearl setara dengan mutiara dari Australia, Filipina dan Myanmar (Poernomo, 2008). Akan tetapi secara internasional Indonesia masih berada pada peringkat ketiga dibawah Australia dan Myanmar, penyebabnya produksi  rendah  dan  kualitas  mutiara  yang  dihasilkan  dari  proses  budidaya  kurang  maksimal  (Susilowati  dan Sumantadinata, 2011).
Untuk waktu yang akan datang pengembangan budidaya laut di Indonesia akan menjadi prioritas utama dan sumber pertumbuhan bagi sektor perikanan yang dimana dapat dilihat dari ketersediaan sumberdaya alam yang cukup luas. Potensi kelestarian sumberdaya hayati perairan dapat meningkatkan devisa negara apabila dapat dimanfaatkan secara benar dan optimal.
Kegagalan  dalam  proses  penyediaan  benih  kerang  mutiara  sampai  pada  tahap  siap  operasi  (10  cm) menyebabkan  permintaan  benih  kerang  mutiara  berupa  juvenil  dengan  ukuran  yang  dianggap  aman  untuk selanjutnya dipelihara terjadi peningkatan. Peningkatan produksi mengharuskan ketersediaan benih/induk kerang mutiara secara kontinyu baik jumlah dan ukuran. Dilain pihak, benih yang dihasilkan oleh alam bervariasi dan tidak  kontinyu.  Hal  ini  menyebabkan  kegiatan  budidaya  kerang  mutiara  harus  memiliki  tempat  pembenihan (hatchery) guna pemenuhan kebutuhan benih/induk kerang.
Teknik pemijahan induk dalam teknologi pembenihan merupakan salah satu aspek penting yang perlu dikembangkan.  Pemijahan  kerang  mutiara  ( Pinctada  maxima )  pada  hatchery  biasanya  didahului  dengan perangsangan,  rangsangan  yang  diberikan  berupa  manipulasi  suhu.  Kondisi  lingkungan  seperti  perubahan salinitas, perubahan suhu, dan pergantian musim sangat dibutuhkan kerang mutiara sebagai rangsangan untuk memijah. Pengaruh kualitas air menjadi faktor penentu bagi pertumbuhan dan kelangsungan hidup larva. Salah satu parameter kulaitas air adalah suhu yang mempengaruhi laju metabolisme organisme akautik khususnya kerang mutiara (Pinctada  maxima )  Hamzah  (2008).  Berdasarkan  penelitian  sebelumnya,  metode  manipulasi  suhu  yang digunakan dalam pemijahan kerang mutiara yaitu fluktasi suhu dengan menaikkan suhu air (Erawati et al , 2001; Doroudi dan Soouthgate, 2003; Winanto, 2004; Tomatala 2008). Oleh karena itu, perlu dilakukan inovasi dan
penelitian lebih lanjut untuk mengetahui pengaruh perlakuan suhu terhadap tingkat pemijahan kerang mutiara ( Pinctada maxima) dengan menggunakan metode kejut suhu.

## Bahan dan Metode
Penelitian  ini  dilaksanakan  selama  1  bulan  dari  bulan  0ktober  sampai  bulan  November  2022  yang bertempat  di  Laboratorium  PT.  Timor  Otsuki  Mutiara  Kupang.  Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah: Kerang mutiara, plankton, dan air laut. Sedangkan, alat yang digunakan adalah: Bak fiber, keranjang tento, plankton net, thermometer, blower, sandfilter, senter, kamera dan alat tulis.

## Posedur Kerja
1.  Seleksi Induk
Induk kerang mutiara yang akan dipijahkan berasal dari hasil budidaya. Induk dipelihara dengan sistem long line , induk yang diangkat dari long line direndam dalam media air garam sebagai desiinfektan hama, selanjutnya hama yang menempel dibersihkan dengan pisau. Induk yang akan digunakan dipilih berdasarkan kematangan gonadnya. Induk kerang mutiara yang dipijahkan di laboratorium merupakan hasil yang dibudidayakan selama 2 tahun. Induk kerang mutiara yang dipijahkan memiliki kisaran panjang 14 cm – 19,5 cm dan lebar 15 cm – 20 cm. 2. Persiapan Wadah
Wadah pemeliharaan induk kerang mutiara yang digunakan adalah poket net. Poket net yang sudah berisi induk dibungkus dengan waring yang memiliki mess size 2 mm, kemudian digantung pada long line yang berada di tengah laut. Long line terbuat dari tali PE 22 mm dengan panjang 100 m, setiap less terdiri dari 60 net, dalam setiap net  terdiri  dari  8  induk  kerang  mutiara,  panjang  tali  pengikatnya  adalah  4  meter.  Jarak  setiap  ikatan  3  meter, sedangkan jarak setiap bola ke bola yang lainnya adalah 3 meter. Satu less terdiri dari 28 bola sebagai pelampung dan memiliki 3 barel, 2 di ujung dan satu di tengah.
Setelah melakukan seleksi induk, wadah yang digunakan dicuci menggunakan garam kemudian dibilas menggunakan  air  laut.  Sebelum  proses  pemijahan  dilakukan,  induk  ditampung  dan  dipuasakan  dalam  wadah plastik dengan air mengalir sebagai pengganti aerasi selama 24 jam, setelah proses pemuasaan, induk diberi respon stres dengan menguras total air bak pemuasaan.  Induk kerang mutiara diangin-anginkan di udara terbuka selama 1  jam  agar  otot  induk  kerang  mutiara  melemas  dan  dapat  membuka  cangkangnya  ketika  proses  pemijahan dilakukan.
3. Proses Pemijahan
Pemijahan dilakukan dengan menggunakan metode kejut suhu ( thermal shock ), dimana air panas sebagai perlakuan penaikan suhu dan air dingin sebagai perlakuan penurunan suhu. Induk yang telah diseleksi tingkat kematangan gonadnya ditempatkan di dalam bak yang bersuhu awal 28 ° C. Suhu air secara bertahap dinaikkan agar induk kerang mutiara merasakan stress dan kaget, perlakuan ini diberikan agar induk kerang mutiara dapat menggeluarkan  sel  telur  dan  sel  sperma.  Bila setelah  perlakuan  penaikan  suhu  belum  terjadi  pemijahan maka dilanjutkan  dengan  penurunan  suhu  awal,  perlakuan  ini  dapat  dilakukan  berulang  kali  sehingga  induk  akan teransang dan dapat memijah.
4. Proses Penetasan Telur
Setelah  poses  pemijahan  dilakukan,  induk  kerang  mutiara  yang  telah  mengeluarkan  sel  telur  dan  sel sperma dipindahkan ke wadah penetasan telur. Proses penetasan telur dibiarkan selama 8 jam agar sel telur dan sel  sperma  menyatu  kemudian  disaring  menggunakan  plankton  net  dan  dilakukan  pengamatan  dibawah mikroskop.
5. Pemeliharaan dan Penebaran Larva
Wadah yang digunakan untuk pemeliharaan larva kerang mutiara adalah bak fiber dengan kapasitas 1 ton/1000  liter, setelah  persiapan  media  selesai,  larva  yang  sudah  menetas  pada media  penetasan disaring  dan dicuci bersih sehingga sisa sel sperma dan sel telur terbuang, selanjutnya larva ditebar kedalam bak pemeliharaan. Sortasi dan grading dilakukan 3-4 hari dengan mengganti air media 100%, sebelum melakukan pergantian air larva dipuasakan agar larva dapat mengapung diatas permukaan air. Hal ini bertujuan untuk mengetahui ukuran, kondisi kesehatan larva dan menjaga kualitas air media pemeliharaan.
6. Pemberian Pakan
Pemberian  pakan  pada  larva  kerang  mutiara  dimulai  sejak  larva  mencapai  fase  D- Shape berupa fitoplankton jenis Chaetoceros sp . Dosis pakan yang diberikan pada awal penebaran larva 1000 ml/bak, dosis yang diberikan pada larva akan bertambah seiring dengan umur dan perubahan fase/stadia larva. Dosis ditambah 100 ml setiap 2 hari bertambah umur larva serta kondisi dan stadia larva. Pertumbuhan larva mencapai 5-10µm per hari (Sujoko, 2010). Pemberian pakan menggunakan alat bantu berupa cangkir plastik bervolume 2 liter. Waktu
pemberian pakan larva kerang mutiara yaitu 08.30 dan 15.30 WITA dengan frekuensi pemberian pakan 2 kali sehari.

## Metode Penelitian
Metode yang digunakan dalam penelitian ini yaitu: metode observasi, metode observasi digunakan untuk melakukan pengumpulan data yang dilakukan untuk mengamati, meninjau secara cermat dan langsung di lokasi penelitian  untuk  mengetahui  kondisi  yang  terjadi  kemudian  digunakan  untuk  membuktikan  kebenaran  dari penelitian yang dilakukan . Metode observasi yang digunakan meliputi penyeleksian induk kerang mutiara yang akan dipijahkan, perlakuan proses pemijahan, penetasan dan pengamatan telur dibawah mikroskop, penebaran hingga pemeliharaan larva, pemberian pakan pada larva dan perhitungan jumlah pada awal dan akhir masa larva kerang mutiara (Pinctada maxima ).

## Variabel Penelitian
1. Persentase pemijahan
Apakah  penelitian  tentang  pemijahan  kerang  mutiara  dengan  menggunakan  metode  kejut  suhu  layak untuk dilakukan. Untuk menjawab pertanyaan tersebut perlu menghitung persentase pemijahan sebagai berikut :
Presentase pemijahan = 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑒𝑟𝑎𝑛𝑔 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑚𝑒𝑚𝑖𝑗𝑎ℎ 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑒𝑠𝑒𝑙𝑢𝑟𝑢ℎ𝑎𝑛 𝑘𝑒𝑟𝑎𝑛𝑔 x100%
2. Telur yang dihasilkan
Telur yang berhasil menetas dilakukan pengamatan perubahan morfologi dari telur menjadi larva dengan cara mengambil sampel telur menggunakan plankton net. Sampel telur diamati sedikit demi sedikit kemudian diamati dibawah mikroskop.
3. Persentase penetasan
Persentase penetasan telur ditentukan setelah 100% telur telah menetas yaitu setelah larva memasuki stadia D-shape. Persentase penetasan dihitung dengan cara membandingkan jumlah telur yang dihasilkan dengan jumlah  telur  yang  berhasil  menetas  menjadi  larva  dikali  100%  untuk  mendapat  jumlah  persentase  penetasan. Persentase penetasan dihitung menggunakan rumus :
Persentase penetasan = 𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑡𝑒𝑙𝑢𝑟 𝑡𝑒𝑟𝑏𝑢𝑎ℎ𝑖 𝑡𝑒𝑙𝑢𝑟 𝑑𝑖ℎ𝑎𝑠𝑖𝑙𝑘𝑎𝑛 x100%
4. Sintasan larva
Sintasan larva diukur dengan cara menghitung jumlah larva pada awal masa larva dan diakhir masa larva. Jumlah larva pada akhir masa larva lalu dibandingkan dengan jumlah larva diawal masa larva dikali 100% untuk mendapat sintasan larva.
Sintasan larva dihitung menggunakan rumus:
SR (%) = 𝑁𝑡 𝑁𝑜 𝑥100% Keterangan: SR : Survival Rate Nt : Jumlah larva (embrio) yang hidup diakhir masa larva No : Jumlah larva (embrio) yang hidup diawal masa larva

## Hasil dan Pembahasan
A. Teknik Kejut Suhu ( Thermal Shock)
Hasil penelitian yang diperoleh selama satu bulan berupa data utama yaitu jumlah persentase pemijahan kerang mutiara (Pinctada maxima) , jumlah telur yang dihasilkan, jumlah telur yang terbuahi menghasilkan larva, persentase penetasan, serta tingkat kelulushidupan larva kerang mutiara (Pinctada maxima) . Teknik kejut suhu ini dilakukan  dengan  menggunakan  43  induk  kerang  mutiara (Pinctada  maxima) .  Data  yang  diperoleh  kemudian ditabulasi untuk dianalisis secara deskriptif. Adapun data penunjang yang didapat dari penelitian ini adalah data kualitas air pemeliharaan larva yang diukur selama penelitian.
Induk kerang mutiara (Pinctada maxima) berjumlah 43 induk dan memiliki jenis kelamin yang berbeda yaitu  jantan  sebanyak  22  induk  dengan  panjang  rata-rata  17,1  cm  dan  lebar  rata-rata  17,9  cm.  Induk  betina sebanyak 21 induk dengan panjang rata-rata 17,2 cm dan lebar rata-rata 17,7 cm. Induk kerang mutiara (Pinctada maxima) berhasil  memijah  dengan  teknik  kejut  suhu  27°C  sebagai  suhu  awal  pada wadah  peijahan,  kemudian dilakukan  penaikan  suhu  menjadi  32°C  dan  34°C  menggunakan  air  panas,  penurunan  suhu  menjadi  29°C menggunakan air dingin. Teknik kejut suhu yang digunakan menggunakan air panas dan air dingin pada proses pemijahan kerang mutiara (Pinctada maxima) berhasil memijah dengan persentase pemijahan 100% memijah. Pengamatan pembuahan telur dilakukan dengan menggunakan mikroskop, dimana telur yang terbuahi akan berbentuk bulat dan telur yang tidak terbuahi cenderung berbentuk lonjong. Telur yang telah dibuahi akan tampak  berada  di  dasar  dengan  diameter  ±47,5µm  (Sutaman,  1993).  Hasil  rata  yang  diperoleh  10  butir/ml, sehingga hasil telur yang diperoleh adalah 115.000.000 butir. Setelah telur menetas, dilakukan perhitungan jumlah telur yang menetas dengan sampling volumetric , hatching rate yang diperoleh sebesar 70% atau telur yang menetas menjadi larva sebanyak 80.000.000 butir
B. Data Persentase Pemijahan, Jumlah Telur yang dihasilkan, Jumlah Telur yang Terbuahi, Persentase Penetasan dan Sintasan Larva Kerang Mutiara
Hasil perhitungan persentase pemijahan, telur yang dihasilkan, telur yang terbuahi, persentase penetasan dan sintasan larva kerang mutiara menggunakan teknik kejut suhu selama penelitian dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Persentase pemijahan, telur yang dihasilkan, telur yang terbuahi, persentase penetasan dan sintasan larva kerang mutiara
Kerang mutiara Jumlah % pemijahan Jumlah telur dihasilkan Telur menetas (terbuahi) % penetasan % sintasan larva Jantan 22 100% 115.000.000 80.000.000 69,5% 27,5% Betina 21 100%
Hasil  perhitungan  persentase  pemijahan  kerang  mutiara  dengan  metode  kejut  suhu (thermal  shock) ini dilakukan menggunakan 43 induk kerang mutiara (Pinctada maxima). Persentase pemijahan kerang mutiara dengan menggunakan metode kejut suhu memiliki tingkat keberhasilan yang lebih dari 50%. Perubahan temperatur air secara  mendadak  dapat  menyebabkan  induk  kerang  melepaskan  gametnya  (Fallu,  1991).  Hal  senada  juga dinyatakan  oleh  Stoeckel et  al., (2004)  bahwa  sejumlah  besar  spesies  melakukan  pemijahan  bilamana  terjadi perubahan lingkungan.
Berdasarkan hasil pemeliharaan, telur yang dihasilkan mencapai 115.000.000 butir sedangkan telur yang terbuahi menjadi larva mencapai 80.000.000 butir, pada akhir masa pemeliharaan larva kerang mutiara (Pinctada maxima) dilakukan  selama  10  hari  masa  pemeliharaan  sehingga menghasilkan  22.005.000  larva  akhir.  Suhu memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap  perkembangan  larva,  selisih  perlakuan  suhu  (2°C)  ternyata memberikan efek yang signifikan pada sintasan dan pertumbuhan larva (Winanto, 2009). Telur biota laut yang disimpan  dalam  salinitas  rendah  (dibawah  salinitas  air  laut)  akan  mengkerut  karena  cairan  dalam  telur  akan bergerak keluar sehingga menyebabkan kematian (Nurmianto, 2005). Kerang mutiara (Pinctada maxima) dipelihara selama 25 hari, dalam masa pemeliharaan larva diberi pakan berupa plankton ( Chaetoceros sp .) yang telah dikultur terlebih  dahulu. Lebih  lanjut  Gervais  dan  Sims  (1992) dalam Southgate  dan Lucas (2008)  menjelaskan bahwa perkembangan larva kerang mutiara membutuhkan 16-30 hari dan dipengaruhi oleh faktor-faktor seperti suhu air, nutrisi dan ketersediaan substrat yang tepat.
Persentase  penetasan  telur  kerang  mutiara  yang  dicapai  dengan  menggunakan  metode  kejut  suhu memiliki  tingkat  keberhasilan  yang  lebih  dari  50%.  Sedangkan,  persentase  sintasan  larva  akhir  yang  dicapai sebanyak 27,5%. Persentase larva kerang mutiara yang dicapai dengan metode pemijahan kejut suhu memiliki tingkat keberhasilan yang kurang dari 50%. Menurut Effendi (1997), secara umum pertumbuhan larva dipengaruhi oleh dua faktor, yaitu faktor internal dan faktor eksternal yang meliputi keturunan, jenis kelamin, umur, penyakit, jumlah dan ukuran makanan yang tersedia didalam perairan serta kualitas perairan. Fathurrahman dan Aunurohim (2014),  menyatakan  bahwa  keberadaan  fitoplankton  sangat  berpengaruh  dengan  kehidupan  perairan  karena memegang peran penting sebagai makanan bagi organisme laut. Keberadaan fitoplankton juga dijadikan indikator
kesuburan  suatu  perairan.  Laju  mencerna  makanan  berkaitan  dengan  laju  metabolisme  dan  efektifitas metabolisme yang nantinya akan mempengaruhi energi yang dihasilkan untuk pertumbuhan dan aktivitas biologis lainnya (Zhang, 2006).
Intensitas  cahaya  juga  merupakan  salah  satu  faktor  utama  yang  mempengaruhi  pertumbuhan  dan perkembangan larva kerang mutiara. Larva kerang mutiara lebih menyukai tempat yang gelap atau remang-remang dari  pada  terang.  Untuk  itu,  pemeliharaan  larva  dilakukan  dengan  mematikan  lampu  ruangan  pemeliharaan. Sedangkan  kepadatan  larva  yang  baik  ±200  ekor/liter.  Kepadatan  yang  terlalu  tinggi  akan  mengurangi pertumbuhan normal (Aprisanto et al ., 2008). Berdasarkan hasil penelitian dapat diketahui bahwa larva kerang mutiara (Pinctada maxima) menghendaki kondisi lingkungan pemeliharaan dengan intensitas cahaya yang sedang, artinya tidak terlalu tinggi dan bukan tidak terdapat cahaya sama sekali. Hal ini dapat disimpulkan bahwa larva kerang mutiara bersifat fototaktis positif. Hasil ini juga dipertegas oleh pernyataan Alagarswami et al., (1987), bahwa  larva  kerang  mutiara (Pinctada  maxima) mempunyai  preferensi  kondisi  lingkungan  dengan  pencahayaan rendah dan untuk memanipulasi lingkungan digunakan wadah pemeliharaan yang berwarna gelap dan hasilnya larva menunjukkan perkembangan yang baik serta waktu penempelan yang baik. Hal ini juga berkaitan dengan laju  metabolisme  larva  pada  kondisi  dengan  cahaya  yang  sesuai  dengan  kebutuhan  yang  tepat  maka  dapat meningkatkan ritme metabolisme larva, sehingga larva dapat tumbuh dengan baik.

## C. Parameter Kualitas Air Pemeliharaan Larva
Kualitas air dalam media pemeliharaan larva kerang mutiara (Pinctada maxima) membantu pertumbuhan dan  kelulushidupan  larva  kerang  mutiara  ( Pinctada  maxima) .  Parameter  fisika-kimia  air  yang  diamati  dalam penelitian  ini  adalah  suhu  dan  salinitas.  Berdasarkan  hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  kualitas  air  selama penelitian kondisinya berada pada kisaran yang sesuai dengan pemeliharaan larva kerang mutiara. Data kualitas air dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2. Data kualitas air pada media pemeliharaan larva
Parameter Kisaran Kualitas Air Kisaran Optimum Suhu 28-29°C 28-30°C Salinitas 32 ppt 30-32 ppt
Parameter  kualitas  air  selama  penelitian  dikategorikan  baik  dan  mendukung  kehidupan  larva  kerang mutiara (Pinctada maxima) . Parameter kualitas air selama penelitian ini yaitu suhu pemeliharaan berkisar antara 28- 29°C, suhu ini masih dalam kisaran yang sesuai untuk pemeliharaan larva kerang mutiara. Menurut (Sutaman, 1993) suhu air optimum untuk perkembangan kerang mutiara ( Pinctada maxima) 28-30°C, salinitas pada media pemeliharaan 32ppt. Pada kondisi suhu dan salinitas optimum terjadi laju metabolisme maksimum, sehingga bisa dicapai  pertumbuhan  dan  laju  sintasan  maksimum,  suhu  dan  salinitas  berpengaruh  terhadap  kecepatan  dan keberhasilan pertumbuhan awal larva Pinctada imbricata (Gosling, 2004).

## Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa : 1.  Kerang mutiara ( Pinctada maxima ) dapat dipijahkan dengan menggunakan metode kejut suhu ( thermal shock ) dengan persentase pemijahan 100% memijah.
2.  Tingkat kelangsungan hidup larva kerang mutiara ( Pinctada maxima ) untuk perkembangan dan pertumbuhan larva menggunakan metode kejut suhu  menghasilkan 22.005.000.000 butir larva.
Ucapan Terimakasih Penulis mengucapkan terima kasih kepada Manager PT. Timor Otsuki Mutiara Kupang dan jajarannya yang telah memberikan, menyediakan dan turut membantu penulis dalam melaksanakan penelitian.

## Daftar Pustaka
Alagarswami, K., Dharmaraj, S., Velayudhan, T.S and Chellam, A., 1987. Hatchery Tecnology for Pearl Oyster Production. Pearl Culture CMFRI cochin, India Bull. 39(9): 62-71.
Aprisanto, D. L., Wildan dan Sarifin. 2008. Teknik pembenihan dan pendederan spat tiram mutiara (Pinctada maxima ) sebagai pendukung penimgkatan produksi mutiara. Laporan penelitian dan kegiatan pembenihan kerang mutiara Balai Budidaya Laut Lombok. 14 hal.
Atmomarsono, M dan A. Sudrajat. 1992. Pertumbuhan Japing-Japing, Pinctada margaratifera Pada Kedalaman Air Yang Berbeda Di Pasarwajo, Kab. Ruton, Sulawesi Tenggara. Jurnal Penelitian Budidaya Pantai, 3(7): 122-131.
Blasco, A., Moreno, I., Roca, E., & DelValls, T. A. 2013. Use Of Bivalves As Bioindicators Of Environmental Pollution In Three Port Areas Of The Western Mediterranean (Spain). Environmental Monitoring and Assessment, 185(1), 675-693.
Cahn, A.R. 1949. Pearl Culture in japan. Fish and Wildife Service. United States Departement Of Interior. New York. 88 hal.
Chen, Y., Li, L., Li, H., Liu, X., Li, S., & Chen, D. 2019. Effect Of Temperature On Survival And Growth Of Pinctada imbricata Larvae At Early Developmental Stage. Aquaculture Research, 50(10): 3095-3103. Darius T., Bergé M., Soyez C.,, Chin-Long Ky, Lefebvre, P. 2008 Phytoplankton And Bacteria-Feeding By The Pearl  Oyster Pinctada  margaritifera During  Non-Farming  Periods:  A  Dual  Stable  Isotope  Study. Aquaculture, 275(1): 160-166.
Doroudi, M. S., & Southgate, P. C. 2003. Embryonic and larval development of Pinctada margaritifera (Linnaeus, 1758). Molluscan Research, 23(2), 101-107.
Effendi, I., dan V. Nikijuluw, 2003. Pedoman Investasi Komoditas Mutiara di Indonesia. Direktorat Jenderal Peningkatan Kapasitas Kelembagaan dan Pemasaran. Departemen Perikanan dan Kelautan. Jakarta. 23 hal.
Fallu, R., 1991. Abalone Farming. Fishing News Books. England. 195p.
Fathurrahman, F., & Aunurohim, A. 2014. Kajian Komposisi Fitoplankton dan Hubungannya dengan Lokasi Budidaya Kerang Mutiara ( Pinctada maxima ) di Perairan Sekotong, Nusa Tenggara Barat. Jurnal Sains dan Seni ITS, 3(2): 93-98.
Gervis MH, Sims NA. 1992 The biology and culture of pearl oyster (Bivalvia: Pteriidae). ICLARM Stud Rev 21. Gosling, E., 2003. Bivalve Molluscs. Biology, Ecology, and Culture. Fishing New Book. Great Britain. Hamzah, MS, dan Sumadhiharga, K 2002. Studi Laju Pertumbuhan Dan Kelangsungan Hidup Anakan Kerang Mutiara  ( Pinctada  maxima )  Pada  Kedalam  Yang  Berbeda  Di  Perairan  Teluk  Kombal-Lombok  Barat. Dalam Kongres Nasional III, 21-24 mei 2002, Bali.
Hamzah,  M.  S.  2007.  Variasi  Musiman  Beberapa  Parameter  Oseanografi,  Kaitannya  dengan  Kisaran  Batas Ambang  Toleransi  Kehidupan  Tiram  mutiara  (Pinctada  maxima)  Dari  Beberapa  Lokasi  Di  Kawasan Tengah Indonesia. In Prosiding Semnas, Pusat Riset Perikanan Budidaya bekerja sama dengan Jurusan Ilmu Kelautan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Undip. Semarang.
Hamzah,  M.S.,  Sangkala,  dan  L.Ali.  2009.  Pengaruh  penurunan  suhu  air  secara  gradual  terhadap  tingkat kelangsungan hidup dan pertumbuhan anakan kerang mutiara (Pinctada maxima). Jurnal oseanologi. Hal 45-51.
Honkoop, P.J., and J. J. Beukema. 1997. Loss Of Body Mass In Winter In Three Intertidal Bivalve Species: An Experimental  And  Obsevational  Study  Of  The  Interacting  Effects  Between  Water  Temperatures, Feeding Time And Feeding Behaviours. J. Exp. Mar. Biol. Ecol., 21(2): 277-297.
Kishore, R., Moya, A., Rumengan, S. S., & Smith, D. J. 2021. Metabolic Rate And Energy Budget of Pinctada margaritifera In Response To Thermal Stress. Aquaculture International, 29(2): 1057-1066. Marrouchi, I., Gharbi, R., El Abed, A., Ben Hassine, O. K., & Bakhrouf, A. 2014. Effect Of Salinity On Growth And Survival Of Larval Pinctada imbricata (Röding, 1798). Aquaculture International, 22(5): 1649-1659.
Monma,  A.  1993.  Population  Genetics  Of  The  Silver-Lipped  Pearl  Oyster Pinctada  maxima (Jameson)  from Western Australia. Aquaculture Research. 24(2): 301-308.
Mulyanto.,  1987.  “Teknik  Budidaya  Laut  Tiram  Mutiara  di  Indonesia”.  DirektoratJenderal  Perikanan  – International Development Research Centre, Jakarta.
Ndimele, M. T. Z., Degnan, M. T. Z. dan M. J. Keough. 2004. Species Identification Of Commercial Pearl Oysters ( Pinctada spp.) Using Shell Morphology And Mitochondrial DNA Analysis. Aquaculture Research, 35(4): 751-761.
Nugroho.  1993.  Pertumbuhan  kerang  mutiara  di  berbagai  kedalaman.  Skripsi  Jurusan  Perikanan  Fakultas Peternakan. Universitas Diponegoro. Semarang.
Nurmianto, M. 2006. Perkembangan Embrio dan Larva Ikan Budidaya. Skripsi. Institut Teknologi Bogor. Bogor (Tidak dipublikasikan).
Poernomo, S.H. 2008. Mengangkat Mutiara Yang Terbenam. Majalah Samudra. Edisi 10 (diakses 17 Juli 2013). Rodrigues, P.S.L. 2001. Feeding And Digestion In Bivalves. Aquaculture Research, 32(1): 65-78.
Susilowati, R., & Sumantadinata, K. 2011. Keragaman Genetik Tiram Mutiara Sebagai Informasi Dasar Untuk Pemuliaan Tiram Mutiara. Prosiding Refleksi Pengembangan Budidaya Kekerangan di Indonesia. 53-67. Stoecker,  J.A.,  D.K  Padiila.,  D.W.  Schneider,  and  C.R.  Rehmann,  2004.  Laboratory  Culture  of  Dreissena Polymorpha  Larvae:  Spawning  Success,  Adult  Fecundity  and  Larval  Mortality  Patterns.  The  NRC Research Press. Canada. 1436-1443p.
Sutaman, 1992. Memproduksi Benih Tiram Mutiara. Penerbit Kanisius. Yogyakarta. Sutaman,  1993.  Tiram  Mutiara  Teknik  Budidaya  Dan  Proses  Pembuatan  Mutiara.  Kanisus.  Yogyakarta.  93 halaman.
Sudjiharno.  1997.  Rekayasa  Teknologi  Pembenihan  Tiram  Mutiara  ( Pinctada  maxima ).  Direktorat  Jenderal Perikanan. Yogyakarta.
Sunaryo, A., Lovatelli, A., & Rombenso, A. N. 2015. Effects Of Stocking Density And Temperature On Growth And Survival Of Juvenile Pearl Oyster Pinctada maxima . Aquaculture Research, 46(7): 1703-1713.
Southgade PC and Lucas JS. 2008. The Pearl oyster. Elsevier, Amsterdam. 542p. Tomatala,  P.  2011.  Pengaruh  Suhu  Terhadap  Pemijahan  Kerang  Mutiara Pinctada  maxima (Jameson).  Jurnal Perikanan dan Kelautan Tropis, 7(1): 36-38.
Winanto, 2004. “Memproduksi Benih Tiram mutiara”. Depok.: Penebar Swadaya. Wada, K. T., Jerry, D. R., Southgate, P. C., & Lucas, J. S. 2008. Population Genetics And Stock Improvement. The pearl oyster Journal, 37(1): 171-179.
Wang,  R.,  Li,  C.,  Stoeckel,  J.,  Moyer,  G.,  Liu,  Z.,  &  Peatman,  E.  2012.  Rapid  Development  Of  Molecular Resources  For  A  Freshwater  Mussel, Villosa  lienosa (Bivalvia:  Unionidae),  Using  An  RNA-seq-based Approach. Freshwater Science, 31(3): 695-708.
Winanto T, Soedharma D, Affandi R dan Sanusi HS. 2009. Pengaruh suhu dan salinitas terhadap respon fisiologis larva tiram mutiara Pinctada maxima (Jameson). Jurnal Biologi Indonesia , 6(1): 51-69. Zhang, L. (2006). Laju perkembangan rumen dan pertumbuhan mikrobia yang belum diidentifikasikan.