p-ISSN : 2442-6032 e-ISSN :  2598-9979
DOI : 10.35311/jmpi.v9i2.425
Formulasi  dan  Evaluasi Dermal  Patch Ekstrak  Metanol  Rimpang Lempuyang  Gajah  ( Zingibe  zerumbet L.)  Sebagai  Antibakteri  Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Secara In Vitro dan In Vivo Nurul Muhlisah Maddeppungeng * , Karlina Amir Tahir, Nislah Cahyani Nurdin, Sri Wahyuni Program Studi Farmasi, Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar

## ABSTRAK
Luka atau kerusakan kulit dapat mengakibatkan serangan mikroorganisme yang dapat menyebabkan infeksi pada kulit. Zingiber zerumbet L. telah dilaporkan memiliki jumlah zerumbon  yang  tinggi  dan  menunjukkan  aktivitas  antibakteri  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus . Langkah awal dalam pengobatan infeksi luka adalah penutupan luka pada kulit. Patch adalah sediaan yang mudah menempel pada bagian kulit yang terinfeksi  dan  dapat  mengantarkan  senyawa  obat  di  lapisan  kulit  dengan  pelepasan terkontrol. Telah dilakukan formulasi sediaan patch yang mengandung ekstrak Zingiber zerumbet L.  dengan  menggunakan  berbagai  polimer  yang  berbeda  yaitu  HPMC, NaCMC,  kitosan,  karbopol,  dan  dilakukan  uji  karakteristik  sediaan patch dimana hasilnya  menunjukkan  sediaan patch yang  dihasilkan  menunjukkan  bahwa patch memiliki  kestabilan  fisik  yang  baik,  memiliki  nilai  keseragaman  bobot  ≤  5%,  dan ketebalan patch ≤ 1 mm, nilai daya tahan lipat yang sangat baik, lebih dari 300 kali lipat, dengan nilai pH permukaan mendekati pH patch, dan uji penyerapan kelembapan air yang  menunjukkan  kemampuan  penyerapan  air  yang  tertinggi  yaitu  NaCMC  dan sebaliknya kemampuan penyerapan air yang terendah yaitu kitosan. Kemudian untuk hasil  uji in  vitro dan in  vivo menunjukkan  bahwa patch memiliki  aktivitas  antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus, dimana dari keempat formula tersebut formula HPMC memiliki daya hambat bakteri terkuat dan penyembuhan luka tercepat, hal ini dikarenakan HPMC salah satu polimer hidrofilik yang mampu mengembang lebih baik dibandingkan dengan polimer yang lain sehingga mampu melepas obat dari matriks lebih cepat.
Kta Kunci: Lempuyang Gajah ( Zingiber zerumbet L.), Patch , Polimer, Antibakteri, Luka Infeksi

## ABSTRACT
Wounds or skin damage can result in attacks by microorganisms which can cause skin infections. Zingiber zerumbet L. has been reported to have high amounts of zerumbon and shows antibacterial activity against Staphylococcus aureus bacteria. The first step in treating a wound infection is to close the wound on the skin. Patches are preparations that are easily attached to infected parts of the skin and can deliver drug compounds to the  skin  layers  with  controlled  release.  A  patch  preparation  containing  Zingiber zerumbet L. extract has been formulated using various different polymers, namely HP. MC, NaCMC, chitosan, carbopol, and a characteristic test of the patch preparation was carried out where the results showed that the resulting patch preparation showed that the  patch  had  good  physical  stability,  had  a  weight  uniformity  value  of  ≤  5%,  and  a patch thickness of ≤ 1 mm, a good folding resistance value. very good, more than 300 times,  with  a  surface  pH  value  close  to  the  pH  of  the  patch,  and  an  air  moisture absorption  test  that  shows  the  highest  air  absorption  ability,  namely  NaCMC  and conversely, the lowest air absorption ability, namely chitosan. Then the in vitro and in vivo test results show that the patch has antibacterial activity against Staphylococcus aureus  bacteria,  where  of  the  four  formulas  the  HPMC  formula  has  the  strongest bacterial  inhibitory  power  and  the  fastest  wound  healing,  this  is  because  HPMC  is  a hydrophilic  polymer  that  is  able  to  expand  better.  Compared  to  other  polymers,  it  is able to remove drugs from the matrix more quickly .
Keywords: Lempuyang Gajah (Zingiber zerumbet L.), Patch, Polymer, Antibacterial, Wound Infection
Sitasi: Maddeppungeng, N. M., Tahir, K. A., Nurdin, N. C., & Wahyuni, S. (2023). Formulasi dan Evaluasi Dermal Patch Ekstrak Metanol Rimpang Lempuyang Gajah ( Zingibe zerumbet L.) Sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Secara In Vitro dan In Vivo . Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia, 9(2), 621-631. https://doi.org/10.35311/jmpi. v9i2.425
Submitted: 31 Oktober 2023 Accepted: 07 Desember 2023 Published: 31 Desember 2023
*Penulis Korespondensi: Nurul Muhlisah Maddeppungeng Email: Nurul.muhlisah@uin- alauddin.ac.id
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License

## PENDAHULUAN
Kulit merupakan organ terbesar pada tubuh  manusia,    hampir  di  seluruh  tubuh manusia  dilapisi  oleh  kulit.  Kulit  memiliki fungsi utama untuk melindungi dan menjaga tubuh  dari  pengaruh  luar  (Budiarti,  2023). Kulit  merupakan  bagian  tubuh  terluar  dari manusia, sehingga kulit bisa dengan mudahnya  terluka  akibat  goresan  maupun sayatan  yang  mengakibat  kerusakan  pada kulit.  Luka  atau  kerusakan  kulit  diartikan sebagai gangguan integritas kulit yang terjadi dari membran mukosa hingga jaringan organ. Rusaknya  kulit  dapat  membuat  patogen masuk  dan berkembang  biak  dalam  jaringan sehingga  dapat  mengakibatkan  infeksi  pada luka.  Sebagian  besar  infeksi  luka  pada  kulit yang  terjadi  di  Indonesia  disebabkan  oleh berbagai  mikroorganisme  seperti  bakteri, jamur,  dan  virus  (Rahmadsyah,  2021).  Salah satu  jenis  bakteri  yang  sering  dikaitkan dengan  infeksi  kulit  adalah Staphylococcus aureus (Hidayah,  2016).  Pada  dasarnya,
Staphylococcus aureus adalah bagian dari flora normal yang ada di tubuh manusia, termasuk kulit,  saluran  pernafasan,  dan  saluran pencernaan.  Namun,  apabila  bakteri  ini berkembang  biak  secara  berlebihan  atau menyebar keluar dari habitat alaminya, dapat menyebabkan terjadinya infeksi (Pani, 2022)
Langkah  awal  dalam  pengobatan infeksi  luka  pada  kulit  adalah  dengan penutupan  luka  dan  dengan  memberikan obat  antimikroba  secara  topikal  (Rahman, 2021).  Penerapan  perawatan  secara  topikal yang  masih  menggunakan  tangan  seperti mengoleskan  sediaan  salep,  krim,  dan  gel seringkali  dapat  menimbulkan  risiko  infeksi pada  luka  yang  terbuka.  Selain  itu,  teknik perawatan luka yang kurang steril juga dapat menyebabkan  ketidaknyamanan  bagi  pasien (Nitiariksa, 2021).
Patch merupakan  inovasi  baru  yang lebih  mudah  untuk  digunakan  serta  dapat meningkatkan  kepatuhan  dan  kenyamanan bagi  yang  menggunakannya  dan  dapat membantu  menghindari  kontaminasi  karena penggunaan patch yang ditempelkan langsung  pada  luka. Patch adalah  sistem
pembawa yang mengandung lapisan adhesive dan menghantarkan senyawa obat ke lapisan kulit dengan cara yang terkendali. Selain itu, patch  juga  dapat  memperpanjang  waktu retensi senyawa obat di kulit. Ini dikarenakan adanya  lapisan adhesive yang  mampu membentuk  ikatan  kuat  dengan  kulit, sehingga  memastikan  pengiriman  senyawa obat  berjalan  secara  efisien  (Cherukuri  S, 2017).
Dermal patch adalah metode penghantaran obat yang ditempatkan di atas kulit,  bertujuan  memberikan  efek  tertentu melalui  pelepasan  yang  terkontrol.  Tujuan penghantaran  obat  secara  dermal  adalah meminimalkan  penyerapan  ke  dalam  aliran darah  dan  meningkatkan  jumlah  obat  yang mencapai lapisan kulit yang diinginkan, serta mengurangi efek samping. Secara teraupetik, sistem  penghantaran  obat  melalui  plester dermal  bisa  mencapai  dua  tujuan,  yakni penghantaran superfisial kulit (subkutan dan epidermis) (Yilmaz, 2023).
Pengobatan  dengan  menggunakan obat  tradisional  hingga  kini  lebih  diminati oleh masyarakat mudah didapatkan dan juga relatif    memiliki  efek  samping  yang sedikit.Lempuyang gajah adalah jenis tumbuhan  dari  famili  Zingiberaceae  yang sering dimanfaatkan di Indonesia. Lempuyang  gajah  (Zingiber  zerumbet)  telah dikenal  dan  dimanfaatkan  sejak  lama  dalam budaya  tradisional  Indonesia  dan  sering digunakan oleh masyarakat Indonesia sebagai bahan untuk jamu tradisional (Silalahi, 2018). Lempuyang  gajah  terutama  pada  bagian rimpangnya  banyak  dimanfaatkan  dalam pengobatan  tradisional,  karena  memiliki sejumlah  manfaat  yang  didasarkan  pada karakteristik  biologis  dan  farmakologisnya. Beberapa  senyawa  metabolit  sekunder  yang terdapat  pada  rimpang Zingiber  zerumbet mencakup flavonoid, alkaloid, terpenoid, dan minyak  atsiri.  Salah  satu  jenis  minyak  atsiri yang  terkandung  dalam  tanaman  ini  adalah zerumbon,  yang  telah  terbukti  memiliki aktivitas  antimikroba.  Tidak  hanya  itu, zerumbon juga menunjukkan berbagai aktivitas lain seperti anti-inflamasi,
antioksidan, antidiabetes, antikanker, analgesik, dan antivirus (Hanwar, 2019).
Dalam penelitian ini, kami menunjukkan,  pemanfaatan  dan  potensi tanaman tradisional sebagai upaya pemeliharaan  kesehatan  dan  pencegahan penyakit  dimana  tanaman  lempuyang  gajah dibuat dalam sediaan patch dengan membandingkan  berbagai  jenis  polimer  dan selanjutnya  dilakukan  uji  karakteristik  dan studi efikasi antimikroba terhadap Staphylococcus aureus dilakukan dalam model in  vitro  dan  in  vivo untuk  menghasilkan sediaan patch yang  memiliki  kualitas  yang baik.

## METODE PENELITIAN Bahan
Bahan yang dibutuhkan dalam penelitian  ini  adalah  aquades,  metanol, rimpang lempuyang gajah ( Zingiber zerumbet ) (diperoleh dari produsen resmi asal Bandung, Jawa Barat), karbopol, kitosan (diperoleh dari PT.  Phy  Edumedia),  NaCMC,  PVP  K-90 (diperoleh dari PT. Kimia Market), propilenglikol,  HPMC,  kalsium  klorida anhidrat , magnesium  klorida  heksahidrat (diperoleh  dari  PT.  Phy  Edumedia) , natrium nitrit , kalium  sulfat , trietanolamin,  asam asetat,  kelinci  ( Oryctogalus  cuniculus ), Tryptic Soy Broth (TSB), Tryptic Soy Agar (TSA), biakan bakteri Staphylococcus  aureus ,  alkohol  70%, NaCl  0,9%,  H 2 SO 4 1%,  BaCl 2 1  %,  antibiotik kloramfenikol, dan ethyl chloride spray.

## Ekstraksi
Sebanyak  500  gram  serbuk  simplisia lempuyang  gajah  diekstraksi  dengan  teknik maserasi  dengan  pelarut  metanol  sampai terendam  selama  3  x  24  jam  dengan  suhu ruang  dan  sesekali  dilakukan  pengadukan. Kemudian saring hasil maserasi. Residu yang didapatkan kemudian dimaserasi dan dilakukan pengulangan hingga warna larutan menjadi  bening.  Selanjutnya  filtrat  berupa ekstrak  encer  dipekatkan  menggunakan vacum  rotary  evaporator pada  suhu  40°C  dan diperoleh ekstrak pekat.
Penentuan  Kadar  Zerumbon dalam  Ekstrak
dengan GC-MS
Disiapkan
ekstrak
rimpang lempuyang  gajah (Zingiber  zerumbet) yang telah  diencerkan  menggunakan  metanol, kemudian akan dianalisis menggunakan GC- MS  dengan THERMO  TRACE  1310 gas kromatografi yang dilengkapi dengan THERMO  ISQ  7000 detektor  massa.  Volume ekstrak  0,1  μl  disuntikkan  dalam  mode splitless.  Gas  metana  digunakan  sebagai  gas pembawa  dengan  laju  aliran  kontinyu  1  ml/ min.  Kolom  yang  digunakan  adalah  kolom TG  5MS  (30m  X  0,25mm,  0,25  μm)  kapiler silika  kolom.  Untuk  deteksi  ionisasi  elektron sistem energi yang digunakan adalah sumber ion temperatur pada suhu 200°C, temperatur injektor dan suhu jalur transfer dipertahankan pada suhu 250°C.
Persiapan Patch yang Mengandung Ekstrak Zingiber zerumbet
Patch disiapkan menggunakan PVP K- 90  sebagai  polimer  untuk  membentuk  film. Selain  itu,  propilenglikol  digunakan  sebagai penambah penetrasi dan pemlastis pada patch . Polimer  yang  berbeda  juga  digunakan,  yaitu NaCMC,  HPMC,  kitosan,  dan  karbopol. Pertama,  PVP  K-90  dilarutkan  dalam aquadest. Untuk formulasi yang mengandung NaCMC  dan  HPMC,  polimer  dicampur langsung  dengan  PVP  K-90  yang  telah dilarutkan. Untuk formulasi yang mengandung  kitosan,  polimer  pertama-tama dilarutkan dalam larutan asam asetat 1,5% v/v dan  dicampur  dengan  PVP  K-90.  Untuk formulasi  yang  mengandung  karbopol, polimer  didispersikan  dalam  air, dinetralkan dengan  trietanolamin  (1,5  kali  konsentrasi karbopol,  pH  yang  diamati  adalah  7,05)  dan dicampur  dengan  PVP  K-90.  Selanjutnya, ekstrak Zingiber zerumbet dilarutkan menggunakan propilenglikol kemudian ditambahkan  ke  dalam  setiap  formulasi. Campuran  kemudian  diaduk  menggunakan magnetic  stirrer dengan  kecepatan  500  rpm selama  30  menit  pada  suhu  kamar  dan campuran akhir dituangkan ke dalam wadah plastik  dan  dikeringkan  pada  suhu  kamar selama 48 jam.

## Evaluasi Sediaan Patch
1. Uji Organoleptik
Pengamatan  ini  dilakukan  dengan cara  mengamati  secara  visual  tanpa  bantuan alat khusus meliputi bau, bentuk, warna, dan kondisi permukaan.
2. Evaluasi Keseragaman Kandungan Obat Keseragaman  kandungan  zerumbon pada patch dilakukan dengan mendispersikan setiap patch dalam  10  ml  metanol.  Dan dianalisis  menggunakan  GC-MS  dengan THERMO TRACE 1310 gas kromatografi yang dilengkapi  dengan THERMO  ISQ  7000 detektor  massa.  Volume  ekstrak  0,1  μl disuntikkan  dalam  mode  splitless.  Gas metana  digunakan  sebagai  gas  pembawa dengan laju aliran kontinyu 1 ml/ min. Kolom yang digunakan adalah kolom TG 5MS (30m X  0,25mm,  0,25  μm)  kapiler  silika  kolom. Untuk deteksi ionisasi elektron sistem energi yang digunakan adalah sumber ion temperatur  pada  suhu  200°C,  temperatur injektor dan suhu jalur transfer dipertahankan pada suhu 250°C.
3. Evaluasi
Keseragaman Berat dan
Ketebalan
Keseragaman  berat patch dilakukan dengan  menimbang  enam patch secara  acak dan  dihitung  bobot  rata-ratanya.  Untuk keseragaman ketebalan, jangka sorong digunakan  untuk  menentukan  keseragaman ketebalan, jangka sorong ditempatkan di lima titik  berbeda  pada patch dan  nilai  ketebalan dicatat. Ketebalan rata-rata patch dihitung.
4. Uji Ketahanan Lipat
Evaluasi  ketahanan  lipat  formulasi patch dilakukan  dengan  melipat patch bioadhesif  pada  posisi  yang  sama  sampai lebih dari 300 lipatan.
5. Pengukuran pH Permukaan Patch direndam  dalam  10  mL  buffer fosfat  selama  2  jam  dan  pH  permukaan ditentukan menggunakan pH meter.
6. Kemampuan Penyerapan Kelembaban dari Patch
Patch ditempatkan  dalam  desikator yang  mengandung  kalsium  klorida  anhidrat selama 24 jam sebelum digunakan. Setelah itu, tiga  desikator  dengan  tiga  nilai  kelembaban
relatif (RH) yang berbeda disiapkan menggunakan  larutan  jenuh  magnesium klorida,  natrium  nitrit  dan  kalium  sulfat untuk masing-masing mewakili 33% RH, 65% RH dan 97% RH. patch ditempatkan ke dalam setiap  desikator  dan  berat patch ditentukan setiap 48 jam selama 14 hari. Dan persentase penyerapan air ditentukan dengan menggunakan perhitungan berikut:
𝑃𝑒𝑟𝑠𝑒𝑛𝑡𝑎𝑠𝑒 𝑝𝑒𝑛𝑦𝑒𝑟𝑎𝑝𝑎𝑛 𝑎𝑖𝑟 =
Massa 𝑃𝑎𝑡𝑐ℎ Dalam Desikator − Massa Awal 𝑀𝑎𝑠𝑠𝑎 𝐴𝑤𝑎𝑙 x 100 % Aktivitas antibakteri secara in vitro Pengujian aktivitas antibakteri
dilakukan dengan menggunakan teknik difusi menggunakan  metode  cawan  sebar  ( Spread Plate  Method ).  Pertama-tama,  media  TSA dimasukkan  ke  dalam  cawan  petri  dan dibiarkan  hingga  mengeras  atau  menguat. Setelah  itu,  bakteri  disebar  secara  merata  di atas media TSA menggunakan mikropipet 100 mikroliter. Disiapkan patch yang mengandung empat formula ekstrak metanol dari  rimpang  lempuyang  gajah  ( Zingiber zerumbet ), salep kloramfenikol sebagai kontrol positif,  dan patch tanpa  ekstrak  metanol  dari rimpang lempuyang gajah ( Zingiber zerumbet ) sebagai  kontrol  negatif.  Selanjutnya, patch tersebut  dicetak  dengan  cetakan berdiameter 6  mm  dan  ditempatkan  di  atas  media  agar. Proses  inkubasi  dilakukan  pada  suhu  37°C selama 24 jam di dalam inkubator. Setelah itu, diameter  zona  hambat  terhadap  bakteri Staphylococcus  aureus diamati  dan  diukur secara visual menggunakan jangka sorong.
Aktivitas antibakteri secara in vivo Satu  hari  sebelum  menciptakan  luka sayatan,  bulu  di  punggung  kelinci  dicukur hingga  benar-benar  halus.  Setelah  itu, punggung kelinci yang akan dijadikan tempat luka sayatan dibersihkan dengan alkohol 70%. Luka  sayatan  dengan  ukuran  1,5  cm  dan kedalaman  2  mm  yang  menembus  lapisan subkutan  dibuat  pada  punggung  kelinci menggunakan  pisau  bedah  steril  ( surgicale blade ),  dengan  lima  luka  untuk  setiap kelompok.  Sebelumnya,  kelinci  telah  diberi anestesi lokal dengan ethyl. Infeksi pada luka dilakukan  dengan  menyuntikkan  suspensi
bakteri Staphylococcus aureus sebanyak 0,1 ml pada setiap  lokasi  luka  sayatan.  Kulit  kelinci yang terinfeksi bakteri Staphylococcus aureus kemudian diperlakukan dengan cara menempelkan  sediaan  formula patch ekstrak metanol  dari  rimpang  lempuyang  gajah
( Zingiber  zerumbet  L. ), patch tanpa  ekstrak metanol  dari  rimpang  lempuyang  gajah ( Zingiber zerumbet L.) sebagai kontrol negatif, dan  salep  kloramfenikol  sebagai  kontrol positif.  Setiap  kelompok  terdiri  dari  lima sampel.
Tabel 1. Komposisi Patch No. Bahan Formula Keterangan F1 (%) F2 (%) F3 (%) F4 (%) 1 Sampel ekstrak 5 5 5 5 Zat Aktif 2 PVP K-90 10 10 10 10 Polimer 3 HPMC 2 - - - Polimer 4 NaCMC - 2 - - Polimer 5 Kitosan - - 2 - Polimer 6 Karbopol - - - 0,3 Polimer 7 Propilenglikol 0,5 0,5 0,5 0,5 Plasticizer

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Proses  pembuatan  sediaan patch ditujukkan untuk melihat formula mana yang dapat  menghasilkan  sediaan patch yang  baik dan berkualitas dengan menggunakan ekstrak  rimpang  lempuyang  gajah  ( Zingiber zerumbet )  dan  polimer  yang  berbeda-beda. Polimer  dapat  diibaratkan  sebagai  jantung dan  tulang  punggung  dari  sediaan patch , dimana  polimer  sendiri  memiliki  peranan yang penting dalam mengendalikan pelepasan  obat  dari patch .  Penggunaan kombinasi  polimer  lebih  efektif  daripada penggunaan polimer tunggal untuk mencapai obat yang terkontrol. Kombinasi polimer yang tepat dan rasio konstituen yang optimal dapat menghasilkan patch dengan sifat fisio-mekanis yang  diinginkan,  terutama  daya  tahan  lipat, dan  kemampuan  daya  serap  air  dari patch (Saumyajyoti, 2022) .
Dalam  pembuatan  sediaan patch digunakan  kombinasi  polimer,  yang  dapat dilihat  pada  (tabel  1) . Polivinil  pirolidon (PVP)  polimer  yang  larut  dalam  air,  PVP sebagai  bahan  yang sering  digunakan  dalam pengembangan  formulasi,  PVP  memiliki sistem  penghantaran  obat  konvensional hingga terkontrol yang luas. PVP juga sering digunakan  untuk patch karena  karakteristik pembentuk film yang melekat. Hidroksipropil metilselulosa  (HPMC)  merupakan  polimer semi-sintetik termasuk dalam kategori
polimer  hidrofilik.  HPMC  memiliki  potensi untuk pembentukan film. Natrium karboksimetil  selulosa  (NaCMC)  merupakan polimer yang memiliki sifat mukoadhesif dan memiliki  kemampuan  dalam  pembentukan film dalam sediaan patch . Kitosan merupakan salah  satu  polimer  alami  kitosan  memiliki sifat seperti non sitotoksisitas, biokompatibilitas,  perilaku  non-alergi,  dan kemampuan  pembentukan  film.  Karbopol merupakan  polimer  sintetis  dan  memiliki kemampuan  bioadesif  yang  baik.  Selain  dari polimer  penambahan  propilenglikol  juga digunakan  sebagai plasticizer ,  penambahan propilenglikol  juga  penting  agar  dapat membuat patch menjadi lebih elastis
(Saumyajyoti, 2022). Pengamatan
organoleptik, uji organoleptik  ini  dapat  dilihat  pada  (tabel  2). Pada semua formula F1, F2, F3, dan F4 tidak memiliki perbedaan yang berarti, pada semua formula  memiliki  bau,  bentuk,  warna,  dan khas  permukaan  yang  hampir  serupa.  Ini menunjukkan bahwa pengamatan dan parameter  sediaan patch dari  empat  formula dapat dikatakan memiliki sifat fisik yang baik.
Pengamatan pengukuran keseragaman bobot digunakan untuk menilai sejauh mana bobot dari masing-masing patch serupa, sehingga dapat mengevaluasi konsistensi  dalam  proses  formulasi.  Proses formulasi  yang  efektif  akan  menghasilkan
patch dengan  bobot  yang  relatif  seimbang, sehingga dosis obat pada patch dapat dijamin seragam  dan  pengamatan  ketebalan patch memiliki tujuan untuk melihat kesamaan dari masing-masing patch , semakin tipis patch yang dibuat maka penetrasi zat aktif ke dalam kulit tentu  akan  semakin  baik,  dimana patch yang tipis  akan  lebih  mudah  diterima  dalam pemakaiannya  (Fuziyanti,  2022).  Bobot  dan ketebalan patch memiliki  hubungan  yang signifikan  dikarenakan  semakin  berat patch yang dihasilkan maka akan berpengaruh pada ketebalan patch .  Pada  penelitian  ini  untuk pengamatan  bobot patch ditimbang  enam patch secara  acak  dan  ketebalan patch dilakukan  dengan  mengukur  dari  lima  titik
yang  berbeda  dengan  menggunakan  jangka sorong pada pengamatan keseragaman bobot yang  dapat  dilihat  pada  (tabel  3).  Hasilnya keseragaman  bobot  memiliki  nilai  standar deviasi dari rata-rata berat patch ≤ 0,05%. Yang berarti  berat  dan  ketebalan patch dapat diterima,  dimana  syarat  dari  keseragaman berat patch yaitu  memiliki  standar  deviasi  ≤ 0,05% (Fuziyanti, 2022). Pengamatan ketebalan patch dapat dilihat pada pada (tabel 3).  Dimana  hasilnya  menunjukkan  ketebalan patch yang  diperoleh  memiliki  rata-rata  ≤  1 mm.  Dari  hasil  ketebalan patch sudah memenuhi  syarat  yang  dimana  syarat  dari ketebalan  patch  yaitu  ≤  1  mm  (Fuziyanti, 2022).
Table 2. Uji Organoleptik No. Formula Bau Bentuk Warna Kondisi Permukaan 1 F1 Khas Lempuyang gajah Bulat dan elastis Coklat kekuning- kuningan Halus 2 F2 Khas Lempuyang gajah Bulat dan elastis Coklat kekuning- kuningan Halus, Sedikit Bergelembung 3 F3 Khas Lempuyang gajah Bulat dan elastis Coklat kekuning- kuningan Halus, Sedikit Bergelembung 4 F4 Khas Lempuyang gajah Bulat dan elastis Coklat kekuning- kuningan Halus Gambar 1. Sediaan Patch F1(A) F2(B) F3(C) F4(D)
Tabel 3. Hasil Pengamatan Evaluasi (Rata-rata ± SD)
Pengamatan  ketahanan  lipat  untuk mengetahui  fleksibilitas  dan  elastisitas  dari patch setelah  dilipat  dari  sudut  yang  sama, dari keempat formula tersebut memiliki daya lipat  yang  lebih  dari  300  lipatan.  Pada  uji ketahanan  lipat  dapat  dilihat  pada  (tabel  3). Menunjukkan bahwa formula F1, F2, F3, dan F4  memenuhi  syarat.  Dimana  syarat  dari ketahanan lipat yaitu ≥ 300 lipatan (Fuziyanti, 2022).  Ketahanan  lipat  ini  dipengaruhi  dari penggunaan plasticizer yang mampu meningkatkan fleksibilitas formulasi patch . Ini mungkin disebabkan oleh pengikatan plasticizer ke matriks polimer. Oleh karena itu, plasticizer berpotensi  meningkatkan  volume rongga  di  antara  rantai  polimer,  sehingga memungkinkan bagian rantai untuk berpindah  dengan  mudah.  Oleh  karena  itu, peningkatan  pergerakan  polimer  berpotensi meningkatkan  fleksibilitas  dan  elastisitas patch (Rahman, 2021).
Pengamatan pengukuran pH, pengukuran pH juga sangat penting dikarenakan  pH  yang  tidak  sesuai  dapat menyebabkan iritasi pada selaput lendir kulit. Selain  itu,  ini  juga  dapat  mempengaruhi tingkat hidrasi polimer di kulit. Dapat dilihat pada  (tabel  3).  Hasil  dari  pengamatan  pH pada  formula  F1,  F2,  F3,  dan    F4, menunjukkan  bahwa  nilai  pH  dari  keempat formula  tersebut  memenuhi  syarat  dimana nilai pH patch yaitu 4 – 6,5. Pada rentang pH 4 – 6,5  merupakan pH yang aman untuk kulit karena tidak mengiritasi kulit (Amalia, 2023).
Pada ekstrak kental rimpang lempuyang  gajah  yang  diperoleh  dilakukan identifikasi  senyawa  zerumbone dengan menggunakan  analisis  GC-MS,  dari  hasil identifikasi tersebut tidak didapatkan
senyawa  zerumbon di  dalam  ekstrak  kental rimpang lempuyang gajah. Hal ini dikarenakan  stabilitas  ekstrak  mungkin  saja tidak baik. Stabilitas ekstrak dapat dipengaruhi  oleh  suhu,  lama  penyimpanan, paparan  oksigen,  dan  waktu  ekstraksi.  Suhu penyimpanan maupun suhu proses pengolahan  dapat  mempengaruhi  degradasi dari  senyawa,  paparan  oksigen  juga  dapat menyebabkan  oksidasi  senyawa  dalam ekstrak,  dan  waktu  ekstraksi  yang  terlalu lama dapat menyebabkan ekstrak terhidrolisis.  Oleh  karena  itu,  penting  untuk memperhatikan  kondisi  penyimpanan  dan waktu  ekstraksi  untuk  memastikan  kualitas dan  stabilitas  ekstrak  yang  optimal  (Wayan, 2017). Dari hasil pengamatan kadar zerumbon, maka  evaluasi  keseragaman kandungan obat tidak dapat dilakukan.
Pengamatan  penyerapan  kelembapan  untuk mengetahui kemampuan patch dalam menyerap  lembab.  Nilai  dari  kemampuan daya serap yang rendah dapat membuat patch menjadi  relatif  stabil  dan  terlindung  dari kontaminasi  mikroba.  Kemampuan patch untuk  menyerap  kelembapan  merupakan parameter penting karena berpotensi mempengaruhi  profil  pelepasan  dan  sifat mekanik.  Dapat  dilihat  pada  (gambar  2,3,4). Evaluasi  kemampuan  penyerapan  air  dibagi dalam tiga nilai RH yang berbeda yaitu 33%, 65%  dan  97%.  Dan  dilakukan  penimbangan setiap  48  jam  selama  14  hari  untuk  melihat daya  serap  air  pada patch .  HPMC,  NaCMC, kitosan,  dan  karbopol  merupakan  polimer yang bersifat hidrofilik yang artinya senyawa yang  dapat  berikatan  dengan  air  (Ermawati, 2019).
Gambar 3.  RH 65% Gambar 4.  RH 65%
Pada nilai RH 33%, RH 65% dan nilai RH  97%,  diperoleh  hasil  yang  menunjukkan kemampuan  penyerapan  air  yang  tertinggi yaitu  F2  (NaCMC),  Peningkatan  penyerapan air pada patch terjadi karena polimer NaCMC signifikan dalam meningkatkan kadar penyerapan  air  pada patch dibandingkan dengan  HPMC,  kitosan,  dan  karbopol.  Ini disebabkan  karena  sifat  NaCMC  yang berinteraksi  dengan  molekul  air  melalui ikatan  hidrogen  sehingga  air  akan  teretensi dan menyebabkan NaCMC mampu meningkatkan  kadar  penyerapan  air  pada patch. Selain itu, NaCMC memiliki sifat yang higroskopis  yang  artinya  dapat  menyerap banyak  (Ermawati,  2019).  Dan  sebaliknya kemampuan  penyerapan  air  yang  terendah yaitu F3 (kitosan) hal ini mungkin dikarenakan  kitosan  mempunyai  gugus bermuatan  positif  yaitu  gugus  amina  dan terdapat  gugus  bermuatan  negatif  yaitu gugus hidroksil sehingga dapat terjadi ikatan ionik,  dengan  adanya  gugus  hidroksil  pada kitosan  dapat  menyebabkan  sifat  hidrofilik dari  kitosan  melemah  sehingga  memiliki penyerapan  kelembapan  air  sedikit  lebih rendah  dibandingkan  dengan  formula  yang lain (Muharram, 2020). Syarat nilai dari persen daya  penyerapan  kelembapan    yaitu    ≤  10% (Fuziyanti, 2022). Pada nilai RH 33 % memiliki nilai  rata-rata  ≤  dari  1  %  dan  65  %  memiliki nilai  rata-rata  ≤  10%,  ini  menunjukkan  rata rata nilai persen daya penyerapan kelembapan  memenuhi  syarat.  Sedangkan pada RH 97 % memiliki nilai rata-rata  ≥ 10 % yang  artinya  tidak  memenuhi  syarat.  Hal  ini dikarenakan semakin tinggi nilai RH, semakin banyak  uap  air  yang  terkandung  dalam
udara,  dimana  kelembapan  udara  yang normal berada pada kisaran 45% - 65%,  jika ≤ 45%  artinya  terlalu  kering,  dan  jika  ≥  65% artinya  terlalu  lembab  (AbdulHalim,  2017). Berbeda  dengan  penelitian  yang  dilakukan oleh  rahman  dkk  pada  tahun  2021  dengan menggunakan  ekstrak Zingiber  cassumunar Roxb.  Hasil  penyerapan  kelembapan  dari patch menunjukkan  penyerapan  tertinggi yaitu  NaCMC  dan  yang  terendah  yaitu HPMC. Dan penyerapan kelembapan dilakukan  dengan  nilai  3  RH  yang  berbeda yaitu  33%,  65%  dan  97%  dan  hasilnya menunjukkan  pada  ke  tiga  RH  tersebut memiliki  nilai  persen  penyerapan  ≤  10% (Rahman, 2021).
Pengamatan terhadap aktivitas antibakteri patch terhadap
bakteri
Staphylococcus  aureus secara in  vitro dengan variasi  formula  polimer  HPMC,  NaCMC, kitosan,  dan  karbopol  dapat  dilihat  pada (gambar  5).  Menunjukkan  adanya  aktivitas antibakteri  terhadap  bakteri  S taphylococcus aureus dengan  adanya  daerah  zona  hambat yang  terbentuk  di  sekitar patch .  Untuk formula 1 dengan polimer HPMC membentuk daerah zona hambat dengan rata - rata sebesar 24,36  mm  yang  masuk  dalam  kriteria  daya hambat bakteri sangat kuat. Untuk formula 2 dengan polimer NaCMC membentuk daerah zona  hambat  dengan  rata-  rata  sebesar  16,80 mm yang masuk dalam kriteria daya hambat bakteri kuat. Untuk formula 3 dengan polimer kitosan  membentuk  daerah  zona  hambat dengan  rata-  rata  sebesar  14,61  mm  yang masuk  dalam  kriteria  daya  hambat  bakteri kuat.  Untuk  formula  4  dengan  polimer karbopol  membentuk  daerah  zona  hambat
dengan rata-rata 22,20 mm yang masuk dalam kriteria  daya  hambat  bakteri  sangat  kuat. Sedangkan untuk kontrol positif membentuk daerah zona hambat dengan rata  - rata 48,50 mm yang masuk dalam kriteria daya hambat bakteri sangat kuat. Kemudian data uji in vitro
di  analisis  menggunakan  SPSS  uji one  way annova diperoleh  nilai  signifikan  0,000 sehingga dapat disimpulkan terdapat perbedaan  signifikan  tiap  formula  patch dalam memberikan aktivitas antibakteri.
Gambar 5. Hasil Uji In Vitro
Gambar 6. Diagram Hasil pengukuran uji in vitro
Pengamatan  proses  penyembuhan luka  terinfeksi  oleh  bakteri Staphylococcus aureus dapat  diamati  dari  pembentukan keropeng ( scab ) hingga penutupan luka untuk setiap  kelompok  perlakuan.  Data  rata-rata waktu  penyembuhan  luka  terdokumentasi pada Gambar 7. Hasil pengamatan menunjukkan  bahwa  dari  hari  ke-1  hingga hari  ke-11,  terjadi  perubahan  panjang  luka sayatan  yang  terinfeksi  bakteri.  Pada  hari pertama,  luka  infeksi  pada  semua  kelompok perlakuan  masih  dalam  keadaan  terbuka. Pada hari ketiga, terjadi kemerahan di sekitar tepi  luka  dan  tubuh  kelinci  terasa  sedikit panas.  Pada  hari  ke-4,  tepi  luka  mulai menyempit  dengan  munculnya  keropeng  di sekitar  tepi  luka.  Pada  hari  ke-5  dan  6,  luka semakin  menyempit  dengan  terbukanya keropeng.  Pada  rentang  hari  ke-7  hingga  11, luka  mulai  tertutup  dan  mengalami  proses penyembuhan.  Pada  kelompok  perlakuan dengan  formula  HPMC,  luka  sudah  sembuh
sepenuhnya pada hari ke-7 untuk kelompok 5, kelompok 4 sembuh pada hari ke-8, kelompok 3 sembuh pada hari ke-9, dan kelompok 1 dan 2  sembuh  pada  hari  ke-10.  Pada  kelompok perlakuan dengan formula NaCMC, kelompok 1, 3, 4, dan 5 sembuh pada hari ke- 10, sedangkan kelompok 2 sembuh pada hari ke-11.  Pada  kelompok  perlakuan  dengan formula  kitosan,  kelompok  1,  3,  4,  dan  5 sembuh  pada  hari  ke-10,  dan  kelompok  2 sembuh  pada  hari  ke-11.  Pada  kelompok perlakuan dengan formula karbopol, sembuh pada  hari  ke-10.  Pada  kelompok  kontrol negatif,  sembuh  pada  hari  ke-11,  sementara kelompok  kontrol  positif  rata-rata  sembuh pada hari ke-7. Hasil analisis data uji in vivo menggunakan  SPSS  dengan  uji  one  way ANOVA  menunjukkan  nilai  signifikansi sebesar  0,000.  Oleh  karena  itu,  dapat disimpulkan  bahwa  terdapat  perbedaan signifikan antara setiap formula patch dalam
memberikan aktivitas antibakteri dengan efek penyembuhan  luka  sayat  yang  terinfeksi bakteri Staphylococcus aureus pada punggung kelinci.
Kandungan  ekstrak  lempuyang  gajah ( Zingiber zerumbet L.) terhadap penyembuhan luka masih minim sehingga diperlukan studi lanjutan.  Namun,  berdasarkan  penelitian yang  dilakukan  oleh  Wayne  Young  dan Thong  Fong  tahun  2017  menunjukkan senyawa  sesquiterpen  monosiklik  yang merupakan  senyawa  bioaktif  dominan  pada rimpang Zingiber  zerumbet. Senyawa  yang
terkandung mempunyai
kapasitas
penyembuhan  luka  yang  kuat  berdasarkan pemeriksaan  histopatologi  dari  bagian  luka yang sembuh menunjukkan jaringan regenerasi  yang  lebih  besar,  fibroblas  dan angiogenesis yang lebih banyak. Efek sinergis dari antibakteri dalam lempuyang gajah telah mempercepat  penyembuhan  luka  sehingga lempuyang gajah memiliki potensi penyembuhan luka yang kuat dan mempercepat  penyembuhan  luka  infeksi (Wayne Young & Thing Fong, 2017).
Gambar 7. Grafik Uji rata-rata pengukuran panjang luka infeksi pada kelinci (cm) In Vivo
Gambar 8. Hasil Uji In Vivo

## KESIMPULAN
Ekstrak  metanol  rimpang  lempuyang gajah ( Zingiber zerumbet L.) dapat stabil dalam bentuk  sediaan patch dengan  menggunakan berbagai  kombinasi  polimer.  Hasil  evaluasi menunjukkan kestabilan fisik yang baik, berat dan ketebalan, daya tahan lipat, pengukuran pH,  dan  penyerapan  kelembapan  pada  RH 33%  dan  65%  memenuhi  syarat.  Sedangkan pada penyerapan  kelembapan  RH  97%  tidak memenuhi  syarat.  Secara in  vitro dan in  vivo, formula dermal patch ekstrak metanol rimpang lempuyang  gajah  ( Zingiber  zerumbet L.) memiliki  aktivitas  antibakteri  terhadap bakteri Staphylococcus  aureus. Dari  hasil pengujian  yang  telah  dilakukan  didapatkan formula  yang  baik  yaitu  HPMC,  dimana
HPMC  memiliki  kestabilan  fisik  yang  baik serta  memiliki  daya  hambat  bakteri  terkuat dan memiliki efek penyembuhan luka infeksi tercepat.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  mengucapkan  terima  kasih kepada  prodi  farmasi  Universitas  Islam Negeri Alauddin Makassar atas terlaksananya penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
AbdulHalim, R. B. (2017). A fine-tuned metal– organic  framework  for  autonomous indoor  moisture  control. J.  Am.  Chem. Soc., 139 (31), 10715-10722.
Amalia, A. (2023). Sifat Fisikokimia dan Laju
Difusi  Patch  Transdermal  Dispersi Padat  Meloksikam yang  Menggunakan Natrium Lauril Sulfat Sebagai Peningkat Penetrasi. J. Farm. Udayana .
Budiarti,  &.  S.  (2023). Seri  Panca  Indera  Kulit.
PT. Bumi Aksara.
Cherukuri  S,  B.  U.  (2017).  Formulation  and evaluation of transdermal drug delivery of topirama. Int. J. Pharm., 7 (1), 10.
Ermawati,  D.  P.  (2019).  pengaruh  Kombinasi Polimer Hidroksipropilmetilcelulosa dan  Natrium  Karboksimetilselulosa terhadap  Sifat  Fisik  Sediaan  Matrix- based  Patch  Ibupropen. J.  Pharm.  Sci. Clin. Res , 109-119.
Fuziyanti,  N.  (2022).  Pengaruh  Kombinasi Polimer  PVP:  EC  dan  HPMC:  EC Terhadap  Sediaan  Transdermal  pada Karakteristik Patch yang Baik. Pharm. J. Indones, 7 (2), 147-152.
Hanwar,  D.  E.  (2019).  Standardisasi  Ekstrak Rimpang  Lempuyang  Gajah  (Zingiber zerumbet Smith). Res. Colloqium, 9 (1).
Hidayah, N. H. (2016). Uji Efektifitas Ekstrak Sargassum ivitas Staphylococcus aureus sebagai Alternatif Obat Bisul Akibat Ak.
J.Creat.Student, 1 (2), 1438-1444.
Made,  S.  (2016).  National  Symposium  of Tropical Skin Infection.
Muharram,  F.  I.  (2020).  Penambahan  Kitosan pada  Biofoam  Berbahan  Dasar  Pati. EDUFORTECH, 2 (2), 5(2).
Nitiariksa,  N.  &.  (2021).  Pengembangan  dan Evaluasi Formula Sediaan Patch Ekstrak Daun  Binahong  (Anredera  cordifolia
(Tenore) Steenis). Journal of Pharmacopolium , 4(2).
Pani,  P.  R.  (2022).  Formulasi  dan  Uji
Efektivitas  Antibakteri  Krim  Ekstrak Etanol  Daun  Ara  (Ficus  carica  L.) Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus Penyebab Infeksi Kulit.
Pharmacon, 11 (2), 1438-1444.
Rahmadsyah,  F.  &.  (2021).  Sistem  Pakar Diagnosa  Penyakit Kulit  Akibat  Infeksi Jamur  Menggunakan  Teorema  Bayes.
Jurnal  Komputer  dan  Informatika,  9(1),, 4 (2), 38-44. doi:https://doi.org/10.35508/jicon.v9i1.3 170
Rahman,  L.  L.  (2021).  Bioadhesive  dermal patch  as  promising  approach  for improved  antibacterial  activity  of bioactive compound of Zingiber cassumunar Roxb in ex vivo Staphylococcus  aureus  skin  infection model. J.  Ilmu  dan  Teknol  Pengiriman Obat , 63, 102522.
Saumyajyoti. (2022). Polymers in Matrix Type Transdermal Patch. Int. J. Pharm. Sci.
Silalahi,  M.  (2018).  Botani  dan  Bioaktivitas Lempuyang  (Zingiber  zerumbet  (L.) Smith.). J. EduMatSain, 2 (2), 49-62.
Wayan,  N.  I.  (2017).  Kandungan  Flavonoid Dan Aktivitas Antioksidan Daun Sirsak ( Annona muricata L ). 18.
Wayne Young, & Thing Fong. (2017). Healing
Potential  of  Zerumbon  Ointment  on Experimental
Full- Thinckness
ExcisionCutaneous  Wounds  in  Rat. Joutnal of Tissue Viability , 1-16.
Yilmaz, E. E. (2023). A Sustainable Solution to Skin  Diseases:Ecofriendly  Transdermal Patches. Pharmaceutics, 15 (2), 579.