Antibacterial Activity of Ethanol Extract of Senduduk ( Melastoma malabathricum L.) Against Escherichia coli and Staphylococcus aureus
Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Senduduk ( Melastoma malabathricum L.) Terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus
Alfi Sapitri*, Nofita Lara, Panal Sitorus
Program Studi Sarjana Farmasi, Fakultas Farmasi dan Ilmu Kesehatan Universitas Sari Mutiara, Jl. Kapten Muslim No. 79 Medan 20123, Indonesia *e-mail : alfi.syahfitri@gmail.com
Diterima 6 Juni 2020 dan Disetujui 29 September 2020

## Abstrak
Senduduk  ( Melastoma  malabathricum L.)  merupakan  salah  satu  tumbuhan  liar  yang  digunakan sebagai  obat  tradisional.  Daun  senduduk  dimanfaatkan  sebagai  obat  sariawan,  bisul,  diare  dan cacar.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun senduduk  terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus .  Pengujian  aktivitas  antibakteri dilakukan  dengan  metode difusi  agar menggunakan  kertas  cakram.  Percobaan  menggunakan  4 varian konsentrasi  yaitu  20%,  40%,  60% dan  80%.  Ekstrak etanol daun senduduk  mengandung flavonoid, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid. Hasil pengujian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun senduduk memiliki aktivitas antibakteri terhadap E. coli dan S. aureus yang ditandai dengan adanya zona hambat yang terbentuk di sekeliling kertas cakram. Pada bakteri E. coli zona hambat  terkecil  dihasilkan  pada  konsentrasi  20%  dengan  diameter  zona  hambat  11  mm  dan diameter  zona  hambat  terbesar  pada  konsentrasi  80%  dengan  diameter  zona  hambat  19  mm, sedangkan  untuk  bakteri S.aureus zona  hambat  terkecil  pada  konsentrasi  20%  dengan  diameter zona  hambat  12,6  mm  dan  diameter  zona  hambat  terbesar  pada  konsentrasi  80%  dengan diameter zona hambat 21,3 mm. Hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol daun senduduk memiliki aktivitas antibakteri terhadap E. coli dan S. aureus .
Kata  kunci :  Difusi  cakram,  Anti  bakteri,  Ekstrak  Etanol,  Daun  senduduk ,  Escherichia  coli, Staphylococcus aureus

## Abstract
Senduduk (Melastoma malabathricum L.) is one of the wild plants used as traditional medicine. Senduduk leaves  are  used  as  a  medicine  for  sprue,  boils,  diarrhea  and  smallpox.  The  purpose  of  this  study  was  to determine the antibacterial activity of the ethanol extract of senduduk leaves of the against Escherichia coli and Staphylococcus aureus. Antibacterial activity testing was carried out using the agar well diffusion method using paper discs. This experiment was using 4 concentrations such as 20%, 40%, 60% and 80%. Ethanol extract of the senduduk leaves contains flavonoids, saponins, tannins and steroids/triterpenoids. The results showed that the ethanol extract of the leaves has antibacterial activity against E.coli  and S. aureus which is characterized by the inhibition zone formed around the disc paper. In Escherichia coli bacteria the smallest inhibition zone at concentration of 20% with a diameter of inhibition zone 11 mm and the largest diameter  of  the  inhibitory  zone  at  a  concentration  of  80%  with  a  diameter  of  inhibition  zone  19  mm. Whereas  for  the  smallest  inhibitory  zone  S.  aureus  bacteria  at  a  concentration  of  20%  with  an  inhibition zone diameter of 12.6 mm and the largest inhibitory zone dameter at a concentration of 80% with a diameter of the inhibitory zone 21,3 mm.The results of the study concluded that the ethanol extract of Senduduk leaves has antibacterial activity against E. coli and S. aureus.
Keyword : Disc diffusion, Antibacterial, Senduduk leaves, Escherichia coli, Staphylococcus aureus.

## PENDAHULUAN
Senduduk  ( Melastoma  malabathricum L.)  tumbuhan  yang  berasal  dari  famili melastomataceae yang dapat digunakan sebagai obat tradisional, tanaman ini tumbuh liar dan terdapat pada lereng gunung, semak belukar dan lapangan yang tidak gersang (Gholib & Djaenudin, 2009). Khasiat dari tumbuhan ini dimanfaatkan masyarakat umum sebagai obat  sariawan,  bisul  dan  diare  (Sari et  al ,  2016).  Berdasarkan  penelitian  Marsepriani et  al (2017) bahwa daun senduduk berkhasiat sebagai obat penurun panas, penghilang rasa sakit, mengatasi diare dan cacar.
Daun senduduk memiliki kandungan kimia yang sudah diketahui seperti saponin, flavonoid dan tanin (Sari et al , 2016). Senyawa  saponin, flavonoid dan tanin merupakan senyawa  kimia  yang memiliki  potensi sebagai  antibakteri  (Gholib & Djaenudin, 2009). Menurut  penelitian  Arifa  &  Periadnadi  (2018)  kandungan  daun  senduduk  yang berfungsi sebagai antibakteri, antara lain flavonoid. Berdasarkan penelitian Faradiba, et al (2016)  bahwa  flavonoid  mengandung  senyawa  fenol  yang  mempunyai  kemampuan denaturasi  protein  dan  merusak  membran  sel,  fenol  berikatan  dengan  protein  melalui ikatan hidrogen sehingga mengakibatkan struktur protein menjadi rusak.
Antibakteri  adalah  zat  yang  dapat  mengganggu  pertumbuhan  ataumematikan bakteri  dengan  cara  mengganggu  metabolisme  mikroorganisme  yang  merugikan. Mikroorganisme  dapat  menyebabkan  bahaya  karena  kemampuan  menginfeksi  dan menimbulkan penyakit serta merusak bahan pangan (Fajar & Desi, 2013). Mekanisme senyawa  antibakteri  secara  umum  dilakukan  dengan  cara  merusak  dinding  sel, mengubah permeabilitas membran, mengganggu sintesis protein dan menghambat kerja enzim (Septiani, 2017).
Penyakit infeksi merupakan salah satu masalah kesehatan yang paling utama di negara berkembang  termasuk  Indonesia  (Mutsaqof et  al .,  2015).  Beberapa  penyakit  infeksi  yang sering  dialami  oleh  masyarakat  antara  lain  infeksi  akut  pernafasan  atas,  penyakit  infeksi kulit dan diare. Penyakit infeksi kulit dapat disebabkan oleh S. aureus sedangkan diare dapat disebabkan oleh E. coli (Maradona, 2013).
Eschericia  coli merupakan  bakteri  gram  negatif,  berbentuk  batang  pendek,  motil  aktif dan  tidak  membentuk  spora. E.  coli merupakan  mikrobiom  normal  yang  terdapat  pada saluran pencernaan manusia dan berperan dalam proses pembusukkan sisa-sisa makanan. Namun  bila  keberadaannya  telah  diatas  jumlah  normal  dan  telah  berpindah  dari  habitat normalnya,  yaitu  usus  besar  maka E.  coli dapat  membahayakan  kesehatan  (Putri,  2014).
Berdasarkan  penelitian  Purwanto  (2015)  menunjukkan  bahwa  fraksi  etil  asetat  daun senduduk memiliki aktivitas antibakteri terhadap E. coli pada konsentrasi 250 µg/ml dengan rata-rata  diameter  hambatannya  7,50  mm  dan  pada  fraksi  methanol  air  pada  konsentrasi 1000 µg/ml dengan rata-rata diameter hambatannya 6,25 mm.
Staphylococcus aureus merupakan flora normal yang terdapat pada kulit manusia. Secara ekologis S.  aureus erat  hubungannya  dengan  manusia  terutama  pada  bagian  kulit,  hidung dan tenggorokan (Fhitryani, 2017). S.aureus bersifat koagulase positif merupakan populasi mikroorganisme  yang  paling  besar  dan  dapat  menyebabkan  bisul  dan  furunkel  (Fajar, 2013). Ketika kulit mengalami luka, S. aureus akan masuk melalui luka dan menyebabkan infeksi (Misna, 2016).
Berdasarkan  penelitian  Marsepriani  (2017)  menunjukkan  bahwa  ekstrak  daun senduduk  mampu  menghambat  pertumbuhan Streptococcus  mutans pada  konsentrasi  20% dengan diameter 10,26 mm. Melihat potensi tumbuhan  senduduk sebagai obat tradisional, maka  perlu  dilakukan  karakterisasi  simplisia  dan  skrining  fitokimia  ekstrak  daun senduduk  ( Melastoma  malabathricum L.)  sehingga  dapat  menetapkan  mutu  dan keamanan  bahan  baku  ekstrak  yang  digunakan  dalam  menunjang  kesehatan (Rahmawati  &  Sari,  2018).  Potensi  daun  senduduk  terhadap  bakteri  uji  lainnya  belum banyak dilakukan, maka berdasarkan latar belakang tersebut perlu dilakukan pengujian aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  senduduk  ( Melastoma  malabathricum L.) terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

## METODE Metode Penelitian
Metode  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  metode  eksperimental. Penelitian  ini  secara  uji  untuk  membuktikan  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun Senduduk  ( Melastoma  malabathricum L.)  terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus aureus .  Pengujian  aktivitas  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  difusi  disk menggunakan kertas cakram.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  blender,  oven,  autoklaf, laminar  air flow ,  kertas  saring Whatman ,  timbangan  analitik,  mikropipet,  cawan  petri,  gelas  beker, erlenmeyer,  aluminium  foil,  batang  pengaduk,  benang  wol,  jangka  sorong,  jarum  ose, lampu  spritus,  kapas,  penangas  air,  kertas  cakram,  pinset,  inkubator,  gelas  ukur,  cawan porselin,  kertas  perkamen, Rotary  evaporator, pipet  tetes,  toples  kaca,  tabung  reaksi, mikroskop  dan  gelas  ukur.  Bahan  yang  digunakan  antara  lain  ekstrak  daun  senduduk ( Melastoma  malabathricum L.),  bakteri Escherichia  coli,  Staphylococcus  aureus ,  etanol  96%, Nutrient  agar (NA),  media Mueller  Hinton  Agar (MHA),  standard Mc. Farland ,  aquadest dan  kloramfenikol.  Bahan  kimia  yang  digunakan  yaitu  :  FeCl 3 ,  H 2 SO 4 ,  Etanol  96%, NaCl  0,9%,  pereaksi  meyer,  pereaksi Dragendorf ,  pereaksi Bouchardart ,  HCl  (p)  dan kloralhidrat.

## Prosedur Kerja

## Sterilisasi Alat dan Bahan
Alat  dan  bahan  yang  digunakan  untuk  perlakuan  harus  disterilkan  terlebih  dahulu sebelum dipakai. Alat-alat gelas yang tahan pemanasan tinggi dalam jangka waktu lama seperti gelas beaker, erlenmeyer, tabung reaksi dan cawan petri disterilkan dengan oven pada suhu 180°C selama 1-2 jam. Alat atau bahan yang tidak tahan pemanasan tinggi dalam  jangka  waktu  lama  seperti  gelas  ukur,  media,  pipet  tetes,  disterilkan  pada autoklaf pada suhu 121°C selama 15 menit, sedangkan jarum ose dan pinset disterilkan menggunakan bunsen (Riyani, 2018).

## Pembuatan Simplisia Daun Senduduk
Sampel  tumbuhan  yang  digunakan  sebanyak  7  kg  daun  senduduk,  dikoleksi  dan dibersihkan  dari  debu/kotoran  yang  melekat,  selanjutnya  daun  dicuci  sampai  bersih kemudian  ditiriskan  (pengeringan)  pada  suhu  kamar  hingga  simplisia  rapuh  (diremas menjadi  hancur).  Daun  senduduk  yang  telah  kering  kemudian  dihancurkan  dengan menggunakan blender sampai berbentuk serbuk (Perangin-angin, 2017).

## Pembuatan Ekstrak Daun Senduduk
Serbuk  simplisia  diekstraksi  dengan  cara    maserasi    dengan    menggunakan  pelarut etanol 96%. Simplisia daun senduduk ditimbang sebanyak 500 g dimasukkan  kedalam toples    kaca    dan  direndam  75  %  bagian  (3,75  liter)  dengan  pelarut  etanol  96%, dibiarkan selama 5 hari terlindung dari cahaya sambil sering diaduk, saring, peras, cuci ampas dengan cairan penyaring (1,25 liter) secukupnya hingga diperoleh 100% bagian, dibiarkan    selama  2  hari    terlindung  dari  cahaya,  disaring.  Ekstrak  yang  didapat kemudian  diuapkan  dengan  menggunakan rotary  evaporator pada  suhu  50°C  sampai diperoleh ekstrak kental (Ditjen POM,1979).

## Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia Pemeriksaan Makroskopik
Pemeriksaan  makroskopik  dilakukan  dengan  mengamati  bentuk,  bau,  rasa  dan  warna dari daun senduduk.

## Pemeriksaan Mikroskopik
Pemeriksaan mikroskopik meliputi anatomi simplisia yang memiliki karakteristik tersendiri dan  melihat  penyusun  simplisia  ataupun  haksel.  Serbuk  simplisia  diletakkan  diatas  kaca objek  yang  telah  ditetesi  dengan kloralhidrat dan  ditutup  dengan  kaca  penutup,  kemudian dilihat  di  bawah  mikroskop,  kemudian  diamati  bentuk-bentuk  mikroskopik  dari  simplisia dengan berbagai pembesaran pada mikroskop.

## Penetapan Kadar Air

## Penjenuhan toluen
Sebanyak 200 ml toluen dimasukkan ke dalam labu alas bulat, lalu ditambahkan 2 ml air suling, kemudian alat dipasang dan dilakukan destilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan  dibiarkan  dingin  selama  30  menit,  lalu  volume  air  dalam  tabung  penerima  dibaca dengan ketelitian 0,1 ml. Penetapan kadar air dilakukan dengan metode destilasi .

## Penetapan kadar air simplisia
Labu  berisi  toluen  dimasukkan  5  g  serbuk  simplisia  yang  telah  ditimbang  seksama, dipanaskan hati-hati selama 15 menit, setelah toluen mendidih, kecepatan toluen diatur 2 tetes per detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes per detik dan setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen. Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, tabung penerima dibiarkan mendingin pada  suhu  kamar.  Setelah  air  dan  toluen  memisah  sempurna,  volume  air  dibaca  dengan ketelitian  0,1  ml.  Selisih  kedua  volume  air  yang  dibaca  sesuai  dengan  kadar  air  yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (Depkes RI, 1995).

## Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Air
Serbuk simplisia sebanyak 5 g dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam aquadest sampai 100 ml) dengan  menggunakan botol bersumbat sambil sesekali  divortex  selama  6  jam  pertama,  kemudian  dibiarkan  selama  18  jam  setelah  itu disaring. 20 ml filtrat pertama diuapkan hingga kering dalam cawan penguap berdasar rata yang telah ditara dan sisa dipanaskan pada suhu 105°C sampai bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

## Penetapan Kadar Sari Larut Dalam Ethanol
Sebanyak 5 g serbuk simplisia di maserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dengan menggunakan botol bersumbat sambil sesekali di maserasi selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam dan saring 20 ml filtrat diuapkan hingga kering dalam cawan yang berdasar rata yang telah di panaskan dan ditara (Depkes, 1980).

## Penetapan Kadar Abu Total
Sebanyak  2  g  serbuk  yang  telah  digerus  dan  ditimbang  seksama  dimasukkan  dalam  krus porselin  yang  telah  dipijar  dan  ditara,  kemudian  diratakan.  Krus  dipijar  perlahan-lahan sampai  arang  habis,  pijaran  dilakukan  pada  suhu  600°C  selama  3  jam  kemudian didinginkan  dan  ditimbang  sampai  diperoleh  bobot  tetap.  Kadar  abu  dihitung  terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes, 1995).

## Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu yang dihasilkan pada penetapan kadar abu total didihkan dengan 25 ml asam klorida encer  selama 15 menit, pada bagian yang tidak larut dalam asam, disaring dengan kertas saring,  dipijarkan  kemudian  didinginkan  dan  ditimbang  sampai  bobot  tetap.  Kadar  abu yang  tidak  larut  dalam  asam  dihitung  terhadap  bahan  uji,  dinyatakan  dalam  bobot  yang dikeringkan (Depkes RI, 2000).

## Penyiapan Konsentrasi Ekstrak Daun Senduduk
Formulasi  ekstrak  daun  senduduk  dengan  konsentrasi  20%  hingga  80%.  Padaekstrak daun senduduk dengan konsentrasi 20%; 20% = 20 g/100 ml atau 2 g/10 ml, timbang sebanyak  2  g  ekstrak  daun  senduduk  kemudian  cukupkan  dengan  etanol  96%  10  ml. Padaekstrak daun senduduk dengan konsentrasi 40%; 40% = 40 g/100 ml atau 4 g/10 ml,  timbang  sebanyak  4  g  ekstrak  daun  senduduk  kemudian  cukupkan  dengan  etanol 96% 10 ml. Padaekstrak daun senduduk dengan konsentrasi 60%; 60% = 60 g/100 ml atau  6  g/10  ml,  timbang  sebanyak  6  g  ekstrak  daun  senduduk  kemudian  cukupkan dengan etanol 96% 10 ml. Pada ekstrak daun senduduk dengan konsentrasi 80%; 80% = 80 g/100 ml atau 8 g/10 ml. Timbang sebanyak 8 g ekstrak daun senduduk kemudian cukupkan dengan etanol 96% 10 ml.

## Prosedur Skrining Fitokimia

## Pemeriksaan Alkaloid
Serbuk    simplisia    ditimbang    sebanyak    0,5    g    kemudian    ditambahkan  1    ml  asam klorida (HCl 2 N) dan 9 ml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit, didinginkan dan disaring.

## Pemeriksaan Flavonoid
Sebanyak  0,5  g  serbuk  simplisia  ditambahkan  20  ml  air  panas,  didihkan  selama  10 menit  dan  disaring  dalam  keadaan  panas,  ke  dalam  5  ml  filtrat  ditambahkan  0,1  g serbuk  magnesium  dan  1  ml  asam  klorida  pekat  dan  2  ml  amil  alkohol,  dikocok  dan dibiarkan  memisah.  Flavonoida  positif  jika  terjadi  warna  merah,  kuning,  jingga  pada lapisan amil alkohol (Sari, 2018).

## Pemeriksaan Saponin
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 ml  air  panas,  didinginkan  kemudian  dikocok  selama  10  detik,  jika  terbentuk  busa setinggi 1 sampai 10 cm yang stabil tidak kurang dari 10 menit dan tidak hilang dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Depkes RI, 1995).

## Pemeriksaan Tanin
Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia disari dengan 10 ml air suling kemudian disaring. Filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Selanjutnya larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1  sampai 2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%.Jika terjadi warna hijau, biru atau kehitaman adanya tanin (Sari, 2018).

## Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida
Sampel dimaserasi sebanyak 1 g dengan n-heksana selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Pada sisa ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrida dan  1  tetes  asam  sulfat  pekat.  Timbul  warna  ungu  atau  merah  kemudian  berubah menjadi hijau biru menunjukkan adanya steroid/triterpenoid (Sari, 2018).

## Uji Aktivitas Antibakteri
Semua  alat  dan  bahan  yang  akan  dipakai  disterilkan.  Media  MHA  (Mueller Hinton  Agar)  steril  sebanyak  15  ml  dituang  ke  dalam  cawan  petri  dan  dibiarkan memadat.  Kemudian  dicelupkan  kapas  lidi  steril  kedalam  suspensi  bakteri,  setelah  itu diinokulasi  pada  seluruh  permukaan  media  hingga  rata.  Cawan  petri  dibuat  tanda dengan masing-masing konsentrasi 20%, 40%, 60% dan 80%. Kertas cakram ( paper disk ) direndam  kedalam  ekstrak  daun  senduduk  pada masing-masing  konsentrasi  kemudian dimasukkan kedalam cawan petri yang telah berisi media dan biakan bakteri Escherichia coli .  Ukuran  kertas  cakram  tergantung  keperluan  peneliti  (umumnya  0,6  cm/6  mm). Inkubasi  selama  18-24  jam  pada  suhu  37°C.  Setelah  itu  diamati  hasilnya  dengan mengukur zona hambatan dengan jangka sorong. Percobaan ini dilakukan secara  triplo (3  cawan  petri  sekaligus).  Dilakukan  juga  dengan  cara  yang  sama  terhadap  bakteri Staphylococcus aureus (Kusumawati, 2016).
MIC metode Kirby Bauer diffusion,

## Rumus Indeks Zona Hambat = Diameter Zona Hambat – Diameter Cakram Diameter Cakram

## Analisis Data
Analisa data penelitian dan pengamatan disajikan dalam bentuk tabel dan gambar yang kemudian  dianalisis  secara  deskriptif  dengan  melihat  dari  data  konsentrasi  larutan  uji terhadap lebar diameter daerah hambat pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus aureus.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Pemeriksaan Makroskopik Karakterisasi Simplisia
Hasil  pemeriksaan  makroskopik  daun  senduduk  diketahui  bahwa  daun  bertangkai pendek,  berbentuk  bundar  memanjang,  panjangnya  8-14  cm,  lebar  2-4  cm,  ujungnya runcing,  daun  berwarna  hijau  tua  dan  daun  terasa  kaku.  Hasil  pemeriksaan makroskopik dari simplisia daun senduduk yaitu berwarna coklat tidak berbau dan tidak berasa.

## Pemeriksaan Mikroskopik Karakterisasi Simplisia
Hasil  pemeriksaan  mikroskopik  terhadap  serbuk  simplisia  daun  senduduk  dijumpai rambut  penutup  yang  banyak  dipermukaan  daunnya,  kristal kalsium  oksalat berbentuk druse dan pada daun senduduk terdapat stomata tipe anisositik pada perbesaran 10 x 10.

## Pemeriksaan Karakterisasi Serbuk Simplisia
Dari pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia daun senduduk dapat dilihat pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Serbuk Simplisia Daun Senduduk Parameter Hasil (%) Persyaratan MMI (%) Kadar air 7,54% <10,00 % Kadar sari larut air 16,45% >7,00 % Kadar sari larut etanol 19,87% >3,00 % Kadar abu total 4,12% <15,00 % Kadar abu tidak larut asam 0,76% <1,00 %
Berdasarkan hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun senduduk pada tabel  1.  menunjukkan  bahwa  pemeriksaan  karakteristik  serbuk  daun  senduduk  yang terdiri  dari  kadar  air,  kadar  sari  larut  air,  kadar  sari  larut  etanol,  kadar  abu  total  dan kadar  abu  tidak  larut  asam  memenuhi  persyaratan.  Hasil  penetapan  kadar  air  pada simplisia dilakukan untuk mengetahui jumlah air yang terkandung dalam simplisia yang digunakan. Kadar airsimplisia ditetapkan untuk menjaga kualitas simplisia karena kadar air  berkaitan  dengan  kemungkinan  pertumbuhan  jamur  atau  kapang.  Hasil  penetapan kadar air diperoleh tidak melebihi dari 10% yaitu 7,54%, menunjukkan bahwa simplisia memiliki kadar air yang sulit ditumbuhi oleh jamur (Handoko, 2015). Penetapan kadar sari dilakukan menggunakan dua pelarut, yaitu air dan etanol. Penetapan  kadar  sari  larut  air  adalah  untuk  mengetahui  kadar  senyawa  kimia  bersifat
polar  yang  terkandung  di  dalam  simplisia,  sedangkan  kadar  sari  larut  dalam  etanol dilakukan  untuk  mengetahui  kadar  senyawa  larut  dalam  etanol,  baik  senyawa  polar maupun  non  polar  (Yemima,  2018).  Hasil  karakteristik  simplisia  daun  senduduk menunjukkan kadar sari yang larut dalam air sebesar 16,45% sedangkan kadar sari yang larut dalam etanol sebesar 19,87%.
Penetapan  kadar  abu  total  dilakukan  untuk  mengetahui  kandungan  mineral internal  (abu  fisiologis)  yang  berasal  dari  jaringan  tumbuhan  itu  sendiri  yang  terdapat pada  sampel  (Depkes,  2000).  Kadar  abu  tidak  larut  asam  untuk  menunjukkan  jumlah silikat,  khususnya  pasir  yang  ada  pada  simplisia  dengan  cara  melarutkan  abu  total dalam  asam  klorida  (Sari,  2018).  Penetapan  kadar  abu  total  sebesar  4,12%  dan  kadar abu  tidak  larut  asam  sebesar  0,76%.  Kadar  abu  total  dan  abu  tidak  larut  asam  pada simplisia memenuhi  persyaratan  yang  tertera pada Materia  Medika  Indonesia .  Jilid  VI (1995)  sehingga  dapat  dikatakan  kadar  pencemaran  logam  pada  simplisia  daun senduduk memenuhi persyaratan sebagai simplisia yang baik.

## Hasil Uji Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Senduduk
Skrining  fitokimia  terhadap  ekstrak  daun  senduduk  dilakukan  untuk  mengetahui adanya  golongan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  didalam  ekstrak  daun senduduk.  Adapun  pemeriksaan  yang  dilakukan  meliputi  pemeriksaan  alkaloid, flavonoid, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid. Hasil skrining fitokimia ekstrak daun senduduk dapat dilihat pada Tabel 2.
Hasil  skrining  ekstrak  etanol  daun  senduduk  menunjukkan  adanya  senyawa flavonoid,  saponin,  tanin  dan  steroid/triterpenoid.  Menurut  Yemima  (2018)  hasil skrining  fitokimia  bahwa  daun  senduduk  mengandung  senyawa  flavonoid,  saponin, tanin dan steroid/triterpenoid sebagai antibakteri.
Tabel 2. Hasil Uji Skrining Fitokimia Ekstrak Daun Senduduk
Senyawa Pereaksi Ekstrak Daun Senduduk Perubahan Yang Terjadi Alkaloid Bouchardart - - Dragendorf - - Maeyer - - Flavonoid Mg + HCl (p) + Larutan warna jingga kemerahan Saponin Aquades + HCl 2 N + Terbentuk busa Tanin FeCl 3 + Larutan warna hitam Steroid /Triterpenoid n–heksan, (CH 3 CO) 2 O, H 2 SO 4 (p) + Biru/merah jingga Keterangan :
+ = Menunjukkan adanya golongan senyawa
- = Menunjukkan tidak adanya golongan senyawa

## Hasil Ekstraksi Simplisia Daun Senduduk
Hasil ekstraksi dari 500 g serbuk simplisia daun senduduk dengan menggunakan pelarut etanol 96% secara maserasi, kemudian maserat dipekatkan dengan rotary evaporator pada
suhu ±50 °C sampai diperoleh ekstrak kental berwarna coklat sebanyak 56,85 g dengan rendemen sebesar 11,37 %.
Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Senduduk Terhadap Escherichia coli Dan Staphylococcus aureus.
Berdasarkan  hasil  pengukuran  diameter  zona  hambat  ekstrak  daun  senduduk ( Melastoma malabathricum L.) terhadap bakteri E. coli dan S. aureus ditunjukkan dengan adanya  zona hambat  berupa zona  bening disekitar  kertas  cakram  yang  diukur dengan jangka  sorong.  Jika  dikaitkan  dengan  ketentuan  kriteria  aktivitas  daya  hambat  yang dikemukaan  oleh  Davis  &  Stout  (1971) dalam Rita  (2010)  Hasil  pengukuran  dapat dilihat pada tabel 3 dan 4 berikut,
Tabel 3. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Ekstrak Daun Senduduk Terhadap Pertumbuhan Escherichia coli . Konsentrasi EDS (b/v) Diameter Zona Hambat (mm) Zona Hambat Rata-Rata Kategori Respon Hambatan (Davis & Stout 1971) P1 P2 P3 Kontrol (+) 30 32 30 30,6 ± 1,15 Sangat kuat 20% 12 11 10 11 ± 1,00 kuat 40% 13 14 13 13,3 ± 0,58 Kuat 60% 15 15 17 15,6 ± 1,15 Kuat 80% 19 18 20 19 ± 1,00 Kuat
Keterangan : P1 = Pengulangan 1, P2 = Pengulangan 2, P3 = Pengulangan 3
Berdasarkan  tabel  3.  hasil  pengujian  antibakteri  terhadap Escherichia  coli untuk konsentrasi  terkecil  adalah  20%  dengan  zona hambat  sebesar  11  mm  termasuk  dalam respon hambatan kuat dan untuk konsentrasi terbesar adalah 80% dengan zona hambat sebesar  19  mm  termasuk  respon  hambatan  kuat.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tingkat penghambatan  pertumbuhan  bakteri Escherichia  coli oleh  ekstrak  daun  senduduk mengalami  kenaikan  dari  konsentrasi  20%  sampai  80%.  Gambar  1.  menunjukkan adanya  peningkatan  besar  zona  hambat  yang  terbentuk  dari  4  perlakuan  dengan konsentrasi ekstrak berbeda.
Gambar 1 . Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Senduduk ( Melastoma malabathricum L.) Terhadap Escherichia coli 30,67 11,00 13,33 15,67 19,00 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 Kontrol (+) 20% 40% 60% 80% Re ar ata Z on a H am b at Konsentrasi Ekstrak
Pemberian  konsentrasi  ekstrak  daun  senduduk  berbanding  lurus  dengan  zona hambat yang terbentuk di sekeliling paper disc , yaitu semakin tinggi konsentrasi ekstrak yang diberikan maka semakin besar pula zona hambat yang terbentuk. Hasil penelitian yang  dilakukan  Dewi  (2019)  padauji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  daun  senduduk terhadap Staphylococcus aureus didapatkan rata-rata zona hambat pada konsentrasi 20%, 25%  dan  30%  adalah:  15,1  mm,  15,9  mm,  20,5  mm,  sedangkan  pada  kontrol  positif sebesar 29,15 mm.
Tabel 4. Hasil Pengukuran Diameter Zona Hambat Ekstrak Daun Senduduk Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus Konsentrasi EDS (b/v) Diameter Zona Hambat (mm) Zona Hambat Rata-Rata Respon Hambatan P1 P2 P3 Kontrol (+) 33 33 31 32,3 ± 1,15 Sangat kuat 20% 13 13 12 12,6 ± 0,58 Kuat 40% 17 15 16 16,0 ± 1,00 Kuat 60% 19 18 18 18,3 ± 0,58 Kuat 80% 20 23 21 21,3 ± 1,53 Sangat kuat
Dari  tabel  4  dapat  diketahui  hasil  pengujian  antibakteri  terhadap Staphylococcus aureus untuk konsentrasi 20% menunjukkan zona hambat sebesar 12,6 mm termasuk dalam respon  hambatan  kuat  dan  untuk  konsentrasi  terbesar  adalah  80%  dengan  zona  hambat sebesar  21,3  mm  termasuk  respon  hambatan  sangat  kuat.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa tingkat  penghambatan  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus  aureus oleh  ekstrak  daun senduduk mengalami kenaikan dari konsentrasi 20% sampai 80%. Hasil ini menunjukkan bahwa ukuran zona hambat yang terbentuk berbeda-beda pada konsentrasi. Semakin tinggi konsentrasi ekstrak daun senduduk, maka makin besar zona hambat yang terbentuk. Begitu pula sebaliknya, semakin rendah konsentrasi ekstrak maka semakin kecil zona hambat yang terbentuk.
Gambar  2. Hasil  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Senduduk  ( Melastoma malabathricum L.) Terhadap Staphylococcus aureus
32,33 12,67 16,00 18,33 21,33 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 Kontrol (+) 20% 40% 60% 80% Zo n a H am b at R ata -r ata Konsentrasi Ekstrak
Batas daerah hambat dinilai kuat apabila memiliki diameter zona hambat yaitu 10-20 mm  dan  kategori  sangat  kuat  yaitu  lebih  dari  20  mm.  Beberapa  faktor  yang  dapat mempengaruhi  aktivitas  antibakteri  antara  lain  konsentrasi  antibakteri,  intensitas senyawa  antibakteri,  suhu  inkubasi  dan  kepekaan  bakteri  terhadap  konsentrasi antibakteri  (Fauzi,  2015).Kontrol  positif  yang  digunakan  yaitu  kloramfenikol. Mekanisme  kerja  kloramfenikol  dalam  menghambat  pertumbuhan  bakteri  adalah dengan  menghambat  sintesis  protein  yang  kuat  pada  mikroorganisme  dan  antibakteri yang bersifat bakteristatik dan berspektrum luas. Obat ini menghalangi pelekatan asam amino  pada  rantai  peptida  yang  baru  timbul  pada  unit  50S  pada  ribosom,  dengan mengganggu  daya  kerja  peptidil  transferase.  Kloramfenikol  umumnya  bersifat bakteristatik,  pada  konsentrasi  tinggi  kloramfenikol  bersifat  bakterisid  untuk  bakteri- bakteri tertentu (Wasitaningrum, 2009).
Hasil  uji  aktivitas  antibakteri  ekstrak  etanol  daun  senduduk  menunjukkan  bahwa aktivitas  antibakteri  lebih  tinggi  terhadap S.  aureus daripada E.  coli .  Hal  tersebut  dapat diakibatkan  perbedaan  dinding  sel  mikroba  yang  merupakan  penentu  penetrasi,  ikatan dan  aktivitas  obat.  Dinding  sel  bakteri S.  aureus berlapis  tunggal  dan  tersusun  atas peptidoglikan  (protein  dan  gula)  serta  lipid  dengan  kadar  rendah  (1  -  4%),  sehingga ekstrak etanol yang mengandung senyawa-senyawa polar seperti flavonoid lebih mudah menembus  dinding  sel.  Dinding  sel  bakteri E.  coli lebih  sulit  ditembus  senyawa  yang bersifat  polar  karena  struktur  dinding  sel  bakteri  ini  berlapis  tiga  yang  tersusun  atas peptidoglikan dan lipid dengan kadar yang tinggi (11 - 22%) (Arifa, 2018).
Terbentuknya  zona  hambat  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  daun  senduduk mempunyai  sifat  antibakteri  yang  mampu  menghambat  pertumbuhan  pertumbuhan bakteri S.  aureus daripada E.  coli. Hasil  skrining fitokimia  menunjukkan  bahwa  ekstrak daun  senduduk  mengandung  golongan  senyawa  flavonoid,  saponin,  tanin  dan steroid/triterpenoid. Mekanisme kerja saponin sebagai antibakteri adalah menurunkan tegangan permukaan sehingga mengakibatkan naiknya permeabilitas atau kebocoran sel dan mengakibatkan senyawa intraseluler akan keluar (Nor, 2018).
Mekanisme  kerja  flavonoid  sebagai  antibakteri  adalah  membentuk  senyawa kompleks  dengan  protein  ekstraseluler  dan  terlarut  sehingga  dapat  merusak  membran sel  bakteri  dan  diikuti  dengan  kluarnya  senyawa  intraseluler  (Nor,  2018).  Mekanisme kerja steroid sebagai antibakteri yaitu dengan merusak membran lipid, sehingga liposom mengalami  kebocoran.  Steroid  juga  diketahui  dapat  berinteraksi  dengan  fosfolipid, karena  sifatnya  yang  permeabel  terhadap  senyawa-senyawa  lipofilik  menyebabkan integritas  membran  menurun  dan  morfologi  membran  sel  terganggu  yang mengakibatkan sel mengalami lisis dan rapuh (Sudarmi, 2017). Berdasarkan Farmakope Indonesia (1995),  daerah hambat  efektif  apabila menghasilkan  batas  daerah  hambatan dengan diameter lebih kurang 14 mm sampai 16 mm. Kusumawati (2016), menjelaskan bahwa  kategori  zona  hambat  terbagi  atas,  kategori  lemah  yaitu  kurang  dari  5  mm, kategori sedang yaitu 5-10 mm, kategori kuat yaitu zona hambat 10-20 mm dan sangat kuat yaitu lebih dari 20 mm.

## KESIMPULAN
Simplisia  dan  ekstrak  etanol  daun  senduduk  ( Melastoma  malabathricum L.) menunjukkan  adanya  senyawa  flavonoid,  saponin,  tanin  dan  steroid/triterpenoid. Ekstrak etanol daun senduduk ( Melastoma malabathricum L.) Hasil penelitian uji aktivitas daun  senduduk  mempunyai  aktivitas  antibakteri  terhadap Escherichia  coli dan Staphylococcus  aureus, konsentrasi  terkecil  adalah  20%  dengan  zona  hambat  sebesar  12,6 mm  termasuk  dalam  respon  hambatan  kuat  dan  untuk  konentrasi  terbesar  adalah  80% dengan  zona  hambat  sebesar  21,3  mm  termasuk  respon  hambatan  sangat  kuat  sehingga dapat disimpulkan bahwa tingkat penghambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus oleh ekstrak daun senduduk mengalami kenaikan dari konsentrasi 20% sampai 80%.

## DAFTAR PUSTAKA
Arifa, N., Periadnadi. 2018. Aktivitas Antimikroba Ekstrak Segar Tumbuhan Sikaduduak ( Melastoma malabathricum L.). Jurnal Metamorfosa . Volume 5(2): 29-34.
Davis,  W  W.,  and  Stout,TR.  1971.  Disc  Plate  Methods  of  Microbiological Antibiotic Assay. Jurnal Apply Microbiology . Volume 22(4): 659-665.
Depkes  RI. 1995. Materia  Medika  Indonesia .  Jilid  VI.  Jakarta:  Departemen Kesehatan RI. Halaman 299-306; 321-325.
Depkes    RI.  2000. Parameter  Standar  Umum  Ekstrak  Tumbuhan  Obat .  Cetakan  I.  Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 5-17.
Dewi,  A.P.  2019.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Daun  Senduduk  ( Melastoma  Affine D.Don)  Terhadap Staphylococcus  Aureus . JOPS  (Journal  of  Pharmacy  and  Science . Volume 3(1): 12-29
Ditjen  POM. 1979. Farmakope  Indonesia .  Edisi  III.  Jakarta:  Departemen Kesehatan RI. Halaman 33; 649; 712.
Ditjen  POM. 1995. Farmakope  Indonesia .  Edisi  IV.  Jakarta:  Departemen Kesehatan RI. Halaman 33; 649; 712.
Fajar, S., Desi, R,. 2013. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Ubi Jalar Ungu ( Ipomoea batatas Var Ayamurasaki ) Terhadap  Bakteri  Staphylococcus  aureus  DanPseudomonas aeruginosa Dengan Metode Difusi Agar. Skripsi . UIN Alauddin Makassar. Halaman 1, 3.
Faradiba, A., Gunadi A., Praharani D. 2016. Daya Antibakteri Infusa Daun Asam Jawa ( Tamarindus  indica Linn)  Terhadap Streptococcus  mutans . Jurnal  Pustaka  Kesehatan . Volume 4(1): 55-60.
Fauzi,  M.  2015. Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Cengkodok ( Melastoma malabathricum L.) Terhadap  Shigella  flexneri  Secara  In  Vitro. Universitas  Tanjungpura. Halaman 13.
Fhitryani, S., Suryanto D., Karim A. 2017. Pemeriksaan Escherichia coli, Staphylococcus aureus  Dan  Salmonella  sp.  Pada  Jamu  Gendong  Yang  Dijajakan  Di  Kota Medan. Jurnal Biologi Lingkungan Industri dan Kesehatan . Volume 3(2): 145-151.
Gholib,  D.  2009.  Uji  daya  Hambat  Daun  Senggani  (Melastoma  malabathricum  L.) Terhadap Trichophyton  mentagrophytees dan Candida  albicans.  Jurnal  Ilmu-ilmu  Hayati . Volume 9(5): 524-526.
Handoko, Y. 2015. Formulasi Sediaan Krim Dari Ekstrak Etanol Daun Pandan Wangi ( Pandanus amaryllifolius Roxb. ) Sebagai Pelembab Kulit Alami. Universitas Sumatera Utara. Medan. Halaman 36.
Kusumawati, E., Apriliana A., Khatimah K. 2016. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Kerehau ( Callicarpa longifolia Lam)Terhadap Escherichia coli Dan Staphylococcus aureus. Jurnal Ilmiah Manuntung . Volume 2(2): 167, 170.
Maradona, D. 2013. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Durian (Durio zibethinus L.), Daun Lengkeng (Dimocarpus longan Lour) Dan Daun Rambutan (Nephelium lappaceum L ) Terhadap  Bakteri  Staphylococcus  aureus  ATCC  25925  Dan  Esherichia  coli  ATCC  25922.
Skripsi Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Halaman 1, 21-22.
Marsepriani.,  Fifendy  M.,  Hidayat  Y.  2017.  Daya  Hambat  Ekstrak  Daun  Senduduk ( Melastoma  malabathricum L.)  Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Streptococcus mutans. Skripsi Program Studi Pendidikan Biologi STKIP PGRI Sumatera Barat. Halaman 1- 3.
Misna., Diana, K. 2016. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit Bawang Merah ( Allium cepa L.) Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus . Galenika  Journal  of  Pharmacy .  Volume  2(2):
138-144.
Mutsaqof, A A N., Wiharto.,Suryani E. 2015. Sistem Pakar Untuk Mendiagnosis Penyakit Infeksi Menggunakan Forward Chaining. Jurnal Itsmart . Volume 4(1): 43-47.
Nor, TA. 2018. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak  Etanol Daun Pepaya ( Carica papaya L.) Terhadap  Pertumbuhan  Bakteri Escherichia  coli Secara  In  Vitro .  Cendana  Medical Journal . Volume 15(3): 332-333.
Perangin-angin,  G.M.U.  2017. Formulasi  Sediaan  Krim  Ekstrak  Daun  Senduduk  (Melastoma malabathricum L .)  Sebagai  Anti-Aging .  Skripsi  Universitas  Sumatra  Utara.  Medan. Halaman 5-6, 21-22.
Purwanto,  S.  2015.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi  Aktif    Ekstrak  Daun  Senggani ( Melastoma  malabthricum L.)  Terhadap Escherichia  coli . Jurnal  Keperawatan  Sriwijaya. Volume 2(2): 85-90.
Putri,  D  A.  2014. Pengaruh  Metode  Ekstraksi  Dan  Konsentrasi  Terhadap  Aktivitas  Jahe  Merah (Zingiber  officinale Var. rubrum ) Sebagai Antibakteri Escherichia coli. Skripsi Universitas Bengkulu. Halaman 20.
Putri,  Z.F.  2010. Uji  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Etanol  Daun  Sirih ( Piper  betle L.) Terhadap Propionibacterium  acne  Dan  Staphylococcus  aureus  Multiresisten .  Skripsi  Universitas Muhammadiyah Surakarta. Halaman 1.
Rahmawati,  N.,  Sari,  D.  2018.  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi  Etil  Asetat  Daun Senduduk  ( Melastoma  affine D.  Don)  Asal  Bengkalis  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus dan Escherichia  coli . Jurnal  Penelitian  Farmasi  Indonesia . Volume 6(2): 62-71
Rita,  W.S.  2010.  Isolasi  identifikasi  dan  uji  aktivitas  antibakteri  senyawa  golongan triterpenoid  pada  rimpang  temu  putih  ( Curcuma  zedoaria (Berg)  Roscoe). Jurnal Kimia , Volume 4(1): 20-26.
Sari, E R., Arsa N., Lita S. 2016. Skrining Senyawa Sitotoksik Dari Ekstrak Daun, Bunga, Buah,  Batang  Dan  Akar  Pada  Tumbuhan  Senduduk  ( Melastoma  malabathricum L.) Terhadap  Larva  Artemia  Salina  Leach  Dengan  Metode Brine  Shrimp  Lethality Bioassay . Jurnal Scientia . Volume 6(1): 67-71.
Septiani.,  Dewi  EN,  Wijayanti  I.  2017.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Lamun  ( Cymodocea rotundata )  Terhadap  Bakteri Staphylococcus  aureus Dan Escherichia  coli . Saintek Perikanan . Volume 13(1): 1-2.
Sudarmi,  K.,  Darmayasa  I.B.G.,  Muksin  I.K.  2017.  Uji  fitokimia  Dan  Daya  Hambat Ekstrak  Daun  Juwet  ( Sygygium  cumini )  Terhadap  Pertumbuhan Escherichia  coli Dan Staphylococcus aureus ATCC . Jurnal simbiosis . Volume 5(2): 47-51. Wasitaningrum, I.D.A. 2009. Uji Resistensi Bakteri  Staphylococcus  aureus Dan Escherichia coli Dari  Isolat  Susu  Sapi  Segar  Terhadap  Beberapa  Antibiotik. Skripsi  Universitas Muhammadiyah Surakarta. Halaman 23.