EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr

## Pengaruh Salinitas Terhadap Kandungan Lutein Spirulina platensis

## Donna Nur’Aurelya Mahardhika*, Retno Hartati, Widianingsih
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. Jacub Rais, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia *Corresponding author, e-mail: donnaaurly1708@gmail.com
ABSTRAK: Spirulina platensis merupakan mikroalga yang mengandung protein tinggi. Mikroalga ini tidak  hanya  bertindak  sebagai  sumber  protein  sel  tunggal,  tetapi  juga  memberikan  beberapa manfaat  lainnya  antara  lain  sumber  karotenoid,  klorofil,  serta  sumber  mikronutrien.  Salah  satu kandungan  karotenoid  yaitu  lutein.  Lutein  memiliki  manfaat  sebagai  antioksidan  untuk  melawan radikal  bebas  pada  mata.  Pertumbuhan  mikroalga  dipengaruhi  oleh  beberapa  macam  faktor lingkungan,  salah  satunya  yaitu  salinitas.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh salinitas  terhadap  kandungan  lutein  pada S.  platensis . Metode  yang  digunakan  ialah  eksperimen laboratoris. Mikroalga S. platensis dikultivasi dengan tiga perlakuan salinitas yang berbeda yaitu 15, 23,  dan  27ppt.  Pertumbuhan  sel S.  platensis diamati  selama  5  hari  kemudian  dipanen  untuk perhitungan biomassanya. Biomassa basah hasil kultivasi diekstraksi menggunakan pelarut aseton. Ekstrak aseton S. platensis kemudian dianalisis kandungan luteinnya secara spektrofotometri. Hasil penelitian  menunjukkan  salinitas berbeda tidak memberikan pengaruh  nyata terhadap  kandungan lutein S. platensis . Kandungan pigmen lutein S. platensis yang tertinggi terdapat pada salinitas 23 ppt sebesar 0.0113 µg/g.
Kata kunci: Spirulina platensis ; Pertumbuhan; Salinitas; Lutein
The Effect of Salinity on Lutein Content of Spirulina platensis
ABSTRACT: Spirulina platensis is a microalga that contains high protein. This microalga is not only  acts  as  a  single  cell  protein  source,  but  also  provides  several  other  benefits,  including  a source  of  carotenoids,  chlorophyll,  and  a  source  of  micronutrients.  One  of  the  carotenoids contents  is  lutein.  Lutein  has  benefits  as  an  antioxidant  to  fight  free  radicals  in  the  eyes. Microalgae  growth  is  influenced  by  several  kinds  of  environmental  factors,  one  of  which  is salinity. This study aims to determine the effect of salinity on lutein content in S. platensis. The method  used  is  a  laboratory  experiment.  Microalgae  S.  platensis  was  cultivated  with  three different  salinity  treatments,  namely  15,  23,  and  27ppt.  The  growth  of  S.  platensis  cells  was observed for 5 days and then harvested for biomass calculation. Wet biomass from cultivation was extracted using acetone as a solvent. The acetone extract of S. platensis was then analyzed for its lutein content spectrophotometrically. The results showed that different salinity didn’t have a  significant  effect  on  the  S.  platensis.  The  lutein  content  of  S.  platensis  is  highest  at  23  ppt (0.0113 µg/g).

## Keywords: Spirulina platensis; Cell Growth; Salinity; Lutein

## PENDAHULUAN
Mikroalga adalah mikroorganisme tumbuhan yang bersel tunggal dan hidup di seluruh wilayah perairan, baik air tawar maupun air laut. Mikroalga memang sudah lama dipergunakan untuk industri farmasi, kesehatan  dan sebagainya. Spirulina  platensis merupakan  mikroalga  yang  mengandung protein tinggi. Mikroalga ini tidak hanya bertindak sebagai sumber protein sel tunggal, tetapi juga memberikan  beberapa  manfaat  lainnya  antara  lain  sumber  karotenoid,  klorofil,  serta  sumber mikronutrien. Pertumbuhan mikroalga S. platensis dipengaruhi beberapa faktor. Salinitas termasuk
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 83-88
Pengaruh Salinitas Terhadap Kandungan Lutein Spirulina platensis (D.N.A. Mahardhika et al.)
salah satu faktor yang penting dalam kultur S. platensis . Menurut Djunaedi et al . (2017), salinitas merupakan  faktor  eksternal  yang  dapat  menjadi  pemicu  utama  stress  dan  penghambat pertumbuhan. Salinitas yang ekstrem akan menyebabkan tekanan osmosis dan pertukaran ion yang berpengaruh  terhadap  metabolisme  organisme  fotosintetik.  Salinitas  penting  dalam  kultivasi S. platensis dikarenakan salinitas yang tinggi menyebabkan berkurangnya cairan yang ada pada sel sehingga akan mempengaruhi proses fotosintesis.
Menurut  Farihah et  al .  (2014), S.  platensis juga  tinggi  kandungan  pigmennya,  di  antaranya 1,6% klorofil-a, 18% fikosianin, dan 17% β-karoten. S. platensis mengandung asam lemak esensial yaitu 20- 30% asam γ-linoleat (GLA) yang merupakan asam lemak majemuk. β-karoten merupakan salah  satu  kandungan  karotenoid.  Adapun  kandungan  karotenoid  lainnya  yaitu  lutein,  astaxantin, zeaxantin, dan kriptoxantin (Pirenantyo dan Limantara, 2008).
Lutein adalah salah satu jenis karotenoid alami yang termasuk golongan xantofil (Tanjung dan Sjarif, 2013). Lutein diperlukan tubuh untuk memenuhi kebutuhan dapat melalui asupan makanan karena tubuh tidak dapat mensintesis senyawa lutein. Lutein memiliki manfaat sebagai antioksidan yang membantu melawan radikal bebas  di mata (Kimberly et al. , 2019). Lutein  bertindak sebagai antioksidan yang dapat mencegah penyakit katarak atau degenerasi makula, penyakit degeneratif terkait  usia  dan  digunakan  sebagai  suplemen  makanan  bagi  manusia  yang  berguna  melindungi terhadap degenerasi makula Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh salinitas terhadap kandungan lutein mikroalga S. platensis.

## MATERI DAN METODE
Penelitian dilakukan pada bulan Oktober – November 2021 di Laboratorium Biologi Laut FPIK, Universitas  Diponegoro.  Bahan  uji  yang  digunakan  yaitu  stok  kultur  murni S.  platensis yang diperoleh dari Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Payau (BBPBAP) Jepara, Jawa Tengah. Media  kultur  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  media  Walne.  Metode  penelitian  yang digunakan  adalah  eksperimen  laboratorium.  Rancangan  percobaan  dalam  penelitian  ini  adalah rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dengan  3  perlakuan  (15,  23,  dan  27  ppt)  dan  3  pengulangan. Penentuan 15 ppt berdasarkan batas bawah kontrol salinitas bibit S. platensis yang di dapatkan dari BBPBAP Jepara (19 ppt). Hal ini juga di dukung oleh penelitian Widawati et al . (2022), menunjukkan kepadatan mikroalga tertinggi pada (salinitas 15 ppt) sebesar 211.875±1994 unit/mL. Penentuan 23 dan 27 ppt yaitu salinitas dengan jarak 4 ppt dari kontrol.
Sebelum  masuk  ke tahap  kultur  yang  perlu  diperhatikan  adalah  persiapan  alat  serta  bahan yang digunakan. Alat dan bahan yang digunakan untuk kultur mikroalga S. platensis disterilkan untuk menghindari kontaminan bakteri dan jenis mikroalga lainnya (Wulandari et al ., 2019). Bahan media kultur dan peralatan lainnya juga disterilisasi dengan penyinaran UV selama 2 jam (Sulatri et al ., 2017). Air laut untuk media diatur sesuai salinitas perlakuan yang berbeda, yaitu 15, 23, dan 27 ppt.
Proses kultur diawali dengan memasukkan air laut yang sudah dipersiapkan ke dalam wadah kultur. Perbandingan yang digunakan adalah 1:2 antara inokulan dengan media air, dimana media sebanyak 1000 ml dan inokulan sebanyak 2000 ml. Total volume seluruh media kultur menjadi 3000 ml, maka pupuk Walne yang digunakan adalah 3 ml (dosis 1ml/L) (Buwono dan Nurhasanah, 2018). Selanjutnya bibit S. platensis diinokulasikan ke dalam media kultur yang telah disiapkan. Pengamatan  densitas  sel S.  platensis dilakukan  setiap  24  jam  selama  5  hari  dengan menggunakan haemocytmeter di  bawah  mikroskop  dengan  perbesaran  100x.  Jumlah  sel/mL S. platensis dihitung  dengan  menggunakan  rumus  Satyantini  dan  Masithah  (2008).  Penghitungan menggunakan  metode  “ Big  Block ”  karena  ukuran  sel  Spirulina  sp.  lebih  dari  6  µm.  Cara penghitungan sebagai berikut: Sel mikroalga dihitung mulai dari sisi kiri kotak ke arah kanan kotak dan  menghitung  sel  yang  berada  di  dalam  garis  atau  yang  mendekati  garis  batas  bagian  dalam kotak,  kemudian  penghitungan  pada  blok  A,  B, C,  D  pada  bidang  penghitungan  bagian  atas  dan bagian  bawah  pada haemocytometer dijumlahkan  dan  kepadatan  fitoplankton  (sel/ml)  dihitung dengan menggunakan rumus “ Big Block ” (Satyantini dan Masithah, 2008):
Pemanenan biomassa S. platensis dilakukan pada masa puncak kepadatan sel atau fase awal stasioner. Pemanenan dilakukan dengan sentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm selama 5 menit
(Imron,  2016).  Lalu  supernatan  dibuang  dan  endapan  yang  terbentuk  ditimbang  menggunakan timbangan analitik dan didapatkan berat biomassa basah.
Ekstraksi  pigmen  lutein  dilakukan  dengan  melakukan  maserasi  1  gram  biomassa  basah S. platensis dengan pelarut aseton selama 12 jam dengan perbandingan 1:1 (gram biomassa basah : mililiter pelarut aseton) (Imron, 2016). Sisa filtrat disentrifugasi kembali dengan kecepatan 3000 rpm selama 5 menit. Pembacaan absorbansi dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer UV Vis Shimadzu  1280 Single  Beam pada  panjang  gelombang  446  nm.  Perhitungan  kandungan  lutein menggunakan rumus Hajare et al . (2013).
Data kandungan pigmen lutein diolah menggunakan aplikasi SPSS 25 dan Microsoft Excel . Data analisis statistik SPSS 25 menggunakan Uji One Way ANOVA, yang mana sebelumnya telah dilakukan uji normalitas dan uji homogenitasnya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kultivasi S. platensis dengan salinitas yang berbeda menunjukkan pola pertumbuhan yang bervariasi pada hari ke-5. Media dengan salinitas 15 ppt menghasilkan densitas tertinggi (15,33 x 10 4 sel/ml)  dan  salinitas  23  ppt  dengan  densitas  terendah  (6,67  x  10 4 sel/  ml).  Hasil  tersebut merupakan  hasil  yang  diperoleh  pada  perhitungan  sel  di  fase  awal  stasioner.  Fase  stasioner merupakan fase yang tepat, karena pada fase ini mikroalga mengakumulasikan energi nya dalam bentuk  lipid  untuk  mempertahankan  hidupnya.  Menurut  Kawaroe et  al .  (2010)  pola  pertumbuhan mikroalga  pada  sistem  kultivasi  terbagi  menjadi  5  tahapan  yaitu,  fase  adaptasi  ( lag  phase ),  fase eksponensial  ( log  phase ),  fase  penurunan  pertumbuhan  ( declining  growth ),  fase  stasioner,  fase kematian  ( death  phase ).  Fase  lag/adaptasi  adalah  fase  mikroalga  mulai  menyesuaikan  dengan lingkungan barunya. Fase eksponensial/logaritmik adalah fase ini mikroalga membelah secara aktif dan  signifikan  meningkat  dari  sebelumnya.  Meningkatnya  sel  mikroalga  ini  terjadi  karena  nutrien dalam  media  kultivasi  masih  tersedia  dan  mencukupi  untuk  pertumbuhan  sel.  Fase  berikutnya adalah penurunan pertumbuhan yang ditandai dengan menurunnya jumlah sel. (Utomo dan Winarti, 2005). Fase stasioner adalah fase ini mikroalga menunjukkan jumlah populasi yang relatif stabil atau sedikit mengalami penurunan. Fase kematian adalah fase ini sel mikroalga mengalami penurunan sel yang tajam. Penurunan sel ini dipicu oleh berkurangnya nutrisi pada media (Budiardi et al ., 2010).
Gambar 1. Pola Pertumbuhan Mikroalga S. platensis
0 5 10 15 20 25 30 35 H - 0 H - 1 H - 2 H - 3 H - 4 H - 5 K ep ad atan S el ( x 10 ^4 sel /m l) HARI KE- Densitas 15 ppt
Densitas 23 ppt
Densitas 27 ppt
Journal of Marine Research Vol 12, No. 1 Februari 2023, pp. 83-88
Berdasarkan  hasil  pengukuran  kualitas  air  media  kultur S.  platensis tergolong  normal (Isnansetyo  dan  Kurniastuty,  1995).  Kisaran  suhu  media  25.2-25.9 o C  dan  pH  8.2-8.6.  Kondisi lingkungan  mikroalga  yang  sangat  mempengaruhi  pertumbuhan  dan  kandungan  lipid  mikroalga salah  satunya  adalah  adanya  perubahan  salinitas  pada  lingkungan  hidupnya.  Tinggi  rendahnya salinitas akan mempengaruhi tekanan osmosis sel mikroalga (Angka,1976).
Hasil  penelitian  memperlihatkan  hari  pertama  bibit  diinokulasi  hingga  hari  ke-2  densitas masih mengalami kenaikan. Hal ini dikarenakan mikroalga S. platensis beradaptasi terlebih dahulu terhadap  lingkungannya.  Hal  tersebut  sesuai  dengan  Maharsyah et  al .  (2013),  bahwa  mikroalga dalam  proses  pertumbuhannya  diperlukan  waktu  tertentu  untuk  beradaptasi  di  kondisi  tersebut. Fase selanjutnya  (Gambar  1)  ialah eksponensial/logaritmik. Pada grafik, fase ini terjadi pada hari ke-3  hingga  ke-4.  Hal  ini  ditandai  dengan  kenaikan  pada  sel  hingga  pertumbuhan  mencapai puncaknya. Fase berikutnya ialah stasioner, fase ini merupakan fase dimana sel mulai mengalami penurunan hingga kematian. Fase ini terjadi pada hari ke 5, fase ini akan menurun terus menerus hingga  fase  kematian  (Maharsyah et  al .  2013).  Fase  ini  dipengaruhi  oleh  berkurangnya  nutrien (Budiardi et al ., 2010).
Menurut  Hariyati  (2008),  temperatur  dan  salinitas  adalah  faktor  yang  penting  bagi penyebaran dan tingkah laku alga hijau biru. Kebanyakan alga hijau biru bersifat eurythermal dan euryhaline, sehingga pengaruh kedua faktor tersebut pada alga hijau biru relatif lebih kecil dibanding pengaruhnya pada alga jenis lain. Suhu kultur saat penelitian rata-rata berada di angka 25 o C. Suhu ini tidak membahayakan sel S. platensis karena masih dalam kisaran suhu optimal pertumbuhan S. platensis . Menurut Isnansetyo dan Kurniastuty (1995), S. platensis dapat tumbuh baik pada kisaran suhu 25-35 o C. Nilai pH juga merupakan faktor pembatas bagi pertumbuhan mikroalga yakni apabila pH berada pada ambang batas normalnya maka kecepatan tumbuh dari mikroalga akan menurun. Derajat  keasaman  (pH)  kultur  saat  penelitian  rata-rata  berada  pada  angka  8.  Isnansetyo  dan Kurniastuty (1995) menerangkan bahwa pH optimal untuk S. platensis adalah 7,2-9,5. Menurut Budiardi et al . (2010), kematian S. platensis diduga disebabkan kurangnya nutrisi. Nitrat dan fosfat digunakan oleh spirulina untuk memenuhi kebutuhan sel akan nutrien. Grobbelaar (2004)  menyebutkan  bahwa  nitrogen  dan  fosfor  merupakan  unsur  yang  sangat  penting  bagi mikroalga. Nitrogen yang dibutuhkan biasanya didapatkan dalam  bentuk nitrat (NO3 - ) sedangkan fosfor didapatkan dalam bentuk fosfat (PO4 3- ) (Budiardi, 2010).
Hasil menunjukkan bahwa kadar  lutein pada setiap perlakuan salinitas  (15, 23, dan 27 ppt)  tidak menunjukkan  hasil  yang  berbeda  yaitu  0,0111 –0,0113  µg/g.  U ji  normalitas  dan  homogenitas kandungan lutein pada S. platensis menunjukkan hasil yang signifikan ( p ≥0,05 ). One Way ANOVA; F hitung (0,788) ≤  F tabel (4,07)  menunjukkan  tidak  ada  pengaruh  perbedaan  salinitas  terhadap kandungan lutein pada mikroalga S. platensis . Salinitas tidak mempengaruhi banyaknya kandungan lutein  pada  mikroalga S.  platensis .  Walaupun  hasil  lutein  pada  setiap  perlakuan  salinitas  tidak menunjukkan hasil yang berbeda, lutein memiliki banyak manfaatnya. Lutein adalah salah satu jenis vitamin karotenoid yang diyakini bermanfaat untuk mengatasi kondisi kekurangan lutein, menjaga kesehatan mata,  dan  mencegah  terjadinya  degenerasi  makula  (AMD)  atau  katarak  yang dikemukakan dalam penelitian  Kimberly et al . (2019 ), s ehingga mikroalga S. platensis berpotensi untuk dikembangkan sebagai sumber lutein.
Tabel 1. Analisis Kandungan Lutein S. platensis
Konsentrasi Salinitas Ulangan Kadar Lutein Rata-rata ± SD 15 ppt 1 0,0112 0,0112 ± 0,0001 2 0,0110 3 0,0113 23 ppt 1 0,0113 0,0112 ± 0,0001 2 0,0111 3 0,0111 27 ppt 1 0,0112 0,0112 ± 0,0001 2 0,0112 3 0,0111

## KESIMPULAN
Salinitas  media  kultivasi  yang  berbeda  tidak  memberikan  pengaruh  nyata  terhadap kandungan lutein S. platensis (0,0110-0,0113 µg/g). Hal ini disebabkan karena S. platensis adalah mikroalga yang masuk ke dalam divisi cyanophyta , yang tidak menyimpan karotenoid di lipid tetapi di membran tilakoid. Dimana karotenogenesis biasanya tergantung pada kondisi yang mendorong pertumbuhan daripada stress abiotic. Dari data pertumbuhan, salinitas tidak berpengaruh terhadap densitas sehingga spirulina juga tidak berpengaruh terhadap kandungan luteinnya.

## DAFTAR PUSTAKA
Angka,  S.L.  1976.  Kultur  Laboratories  Diatom  Laut.  Proyek  Penelitian  dan  Pengembangan Perguruan Tinggi. Institut Teknologi Bandung. 44 hlm.
Budiardi,  T.,  Utomo,  N.B.P.,  &  Santosa,  2010.  Pertumbuhan  dan  kandungan  nutrisi  Spirulina  sp. pada  fotoperiode  yang  berbeda. Jurnal  Akuakultur  Indonesia ,  9(2):146-156.  DOI: 10.19027/jai.9.146-156
Buwono,  N.R.,  &  Nurhasanah,  R.Q.  2018.  Studi  Pertumbuhan  Populasi Spirulina  sp.  Pada  Skala Kultur  yang  Berbeda. Jurnal  Ilmiah  Perikanan  dan  Kelautan ,  10(1):26-33.  DOI: 10.20473/jipk.v10i1.8516
Djunaedi,  A.,  Suryono,  C.A.,  &  Sardjito,  S.  2017.  Kandungan  Pigmen  Polar  dan  Biomassa  pada Mikroalga Dunaliella salina dengan Salinitas Berbeda. Jurnal Kelautan Tropis , 20(1):1-6. DOI: 10.14710/jkt.v20i1.1347 Farihah, S., Yulianto, B., & Yudiati, E. 2014. Penentuan Kandungan Pigmen Fikobiliprotein Ekstrak Spirulina platensis dengan Teknik Ekstraksi Berbeda dan Uji Toksisitas Metode BSLT. Journal of Marine Research , 3(2):140-146.
Grobbelaar,  J.U.,  2004.  Algal  Nutrition:  Mineral  Nutrition.  Di  dalam  Richmond,  A.E.  (editor).
Handbook  of  Microalgal  Culture,  Biotechtology  and  Applied  Phycology.  Blackwell  Publ  Ltd., Iowa, USA. hlm. 97-115.
Hajare, R., Ray, A., Shreya, T.C., Avadhani, M.N., & Selvaraj, I.C. 2013. Extraction and quantification of  antioxidant  lutein  from  various  plant  sources. International  Journal  of  Pharmaceutical Sciences Review and Research, 22(1):152-157.
Hariyati, R. 2008. Pertumbuhan dan Biomassa Spirulina sp dalam Skala Labora toris. Laboratorium Ekologi  dan  Biosistematik  Jurusan  Biologi  FMIPA  Universitas  Diponegoro ,  10(1):19-22.  DOI: 10.14710/bioma.10.1.19-22
Imron, M.A. 2016. Pengaruh Salinitas Terhadap Kandungan Lutein pada Mikroalga  Botryococcus braunii. Repository Universitas Airlangga.
Isnansetyo,  A.,  &  Kurniastuty.  1995.  Teknik  Kultur  Phytoplankton  dan  Zooplankton.  Kanisius.
Yogyakarta. 34-85 hlm.
Kawaroe, M., Prartono, T., Sunuddin, A., Sari, D.W., & Augustine, D. 2010. Mikroalga, Potensi dan Pemanfaatannya Untuk Produksi Bio Bahan Bakar. Institut Pertanian Bogor Press. Bogor. 150 hlm.
Kimberly, F.D., Supriyantini, E., & Sedjati, S. 2019. Pertumbuhan dan Kandungan Lutein Dunaliella salina pada  Salinitas  yang  Berbeda. Buletin  Oseanografi  Marina ,  8(1):44-48.  DOI: 10.14710/buloma.v8i1.20839
Maharsyah, T., Lutfi, M., & Nugroho, W.A. 2013. Efektifitas Penambahan Plant Growth Promoting Bachteria (Azospirillum sp.) dalam Meningkatkan Pertumbuhan Mikroalga ( Chlorella sp.) pada Media  Limbah  Cair  Tahu  Setelah  Proses  Anaerob. Jurnal  Keteknikan  Pertanian  Tropis  dan Biosistem, 1(3): 258-264.
Pirenantyo,  P.,  &  Limantara,  L.  2008.  Pigmen  Spirulina  sebagai  Senyawa  antikanker.  Indonesian Journal of Cancer, 2(4):155-163. DOI: 10.33371/ijoc.v2i4.61
Satyantini, W.H., & Masithah, E.D., 2008. Pemilihan Jenis dan Nilai Nutrisi Pakan Alami. Universitas Airlangga. Surabaya.
Sulatri,  N.L.,  Yogeswara,  I.B.A.,  &  Nursini,  N.W.  2017.  Efektivitas  Sinar  Ultraviolet  terhadap Cemaran  Bakteri  Patogen  pada  Makanan  Cair  Sonde  untuk  Pasien Immune-Compremissed. Jurnal Gizi Indonesia , 5(2):112-117. DOI: 10.14710/jgi.5.2.112-118
Tanjung,  C.,  &  Sjarif,  D.R.  2013.  Manfaat  Penambahan  Lutein  dalam  Susu  Formula:  Tinjauan Sistematik.
Utomo, N.B.P., & Winarti, E.A. 2005. Pertumbuhan Spirulina platensis yang dikultur dengan Pupuk Inorganik (Urea,  TSP,  dan  ZA)  dan  Kotoran  Ayam. Jurnal  Akuakultur  Indonesia ,  4(1):  41-48. DOI: 10.19027/jai.4.41-48
Widawati,  D.,  Santosa,  G.W.,  &  Yudiati,  E.  2022.  Pengaruh  Pertumbuhan  Spirulina  platensis terhadap  Kandungan  Pigmen  beda  Salinitas. Jornal  of  Marine  Research ,  11(1):61-70.  DOI: 10.14710/jmr.v11i1.30096
Wulandari,  R.,  Dharma,  A.,  &  Syafrizayanti,  S.  2019.  Pengaruh  Pemberian  Variasi  pH  terhadap Produksi Trigliserida Total dan Komposisi Asam Lemak dari Chlorella vulgaris Air Tawar. Jurnal Riset Kimia , 10(2):66 –74.DOI: 10.25077/jrk.v10i2.316