## AQUASAINS (Jurnal Ilmu Perikanan dan Sumberdaya Perairan)

## TOKSISITAS DAN KEMAMPUAN ANESTETIK MINYAK CENGKEH
( Sygnium aromaticum ) TERHADAP BENIH IKAN PELANGI MERAH ( Glossolepis incisus )
Yayu Saskia 1 · Esti Harpeni 2 · Tutik Kadarini 3
Ringkasan The research of cloves oil ( Syg- nium aromaticum ) as anesthetic material to rainbow fish ( Glossolepis incisus ) was investigated with the lethal concentration (LC 50 -48 hours), effective concentration (EC 50 - 1 hours), time passed out and recovery ti- me after conscious. Data analysis by using probit was conducted to find out the value of LC_50-48 and linear regression analysis used to find recovery time after conscious. The results showed that LC 50 -48 hours va- lue is 0,273 ml/L and EC 50 -1 hours value is 0,159 ml/L. Cloves oil at concentrations 0,159 ml/L was used as anesthetic within 50% rainbow fish stock during 40,02 minu- tes and time to recovery is 3,54 minutes.
Keywords ornamental fish, anesthetic, toxicity, probit, rainbow fish

## PENDAHULUAN
Ikan hias air tawar merupakan komoditas nonmigas bidang perikanan yang mampu menyumbang devisa negara cukup besar.
1 ) Mahasiswa Jurusan Budidaya Perairan Univer- sitas Lampung E-mail: saskia_yayu@yahoo.com 2 ) Staf pengajar jurusan Budidaya Perairan Unila, Jl. Sumantri Brodjonegoro No.1 Bandar Lampung E-mail: esti.harpeni@fp.unila.ac.id 3 ) Peneliti di Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Ikan Hias Depok Jawa Barat
Indonesia menduduki peringkat ke-3 di du- nia setelah Singapura dan Malaysia sebagai eksportir ikan hias dengan pasar sebesar 7,5%. Ikan hias pelangi ( Glossolepis inci- sus ) merupakan salah satu jenis ikan hias air tawar yang memiliki nilai jual lokal eks- por yang tinggi [1].
Persaingan perdagangan ikan hias di pasar lokal maupun regional kini semakin ketat. Berbagai tindakan perlu dilakukan untuk meningkatkan daya saing perdagangan ik- an hias yaitu dengan sistem pengangkutan benih ikan dalam kondisi pingsan dengan menggunakan teknik anestetik [2]. Teknik seperti anestetik perlu dilakukan agar kon- disi benih tetap baik, karena prinsip dasar anestetik adalah menghilangkan kesadaran suatu organisme terhadap rangsangan dari luar akibat penggunaan suatu bahan yang ditambahkan dari luar [3]. Anestetik digu- nakan selama pengangkutan dengan tuju- an untuk menenangkan ikan sehingga akti- vitasnya berkurang, mengurangi konsum- si oksigen, mengurangi produksi karbondi- oksida yang mudah terurai sehingga tidak menimbulkan efek negatif pada ikan [4].
Bahan anestetik dapat berupa bahan kimia sintetik atau bahan alami [3]. Bahan kimia yang biasa digunakan dalam anestetik di- antaranya MS-222, benzocaine, metomida- te, phenoxy ethanol, quinaldine, chinaldine [5]. Bahan kimia seperti MS-222, benzo- caine, metomidate, phenoxy ethanol, qui- naldine, chinaldine merupakan cairan tok-
Yayu Saskia 1 et al. sik. Penggunaan bahan kimia sebagai bah- an anestetik dapat meninggalkan residu yang berbahaya bagi ikan, manusia dan lingkung- an [6]. Sedangkan bahan anestetik alami yang biasa digunakan misalnya minyak ceng- keh ( Sygnium aromaticum ) [3]. Cengkeh mengandung minyak atsiri dan eugenol yang mempunyai fungsi anestetik dan antimik- robial [7]. Efek dari penggunaan minyak cengkeh terhadap benih ikan tidak menga- lami perubahan yang signifikan karena da- pat mengurangi stres dalam penanganan yang disebabkan oleh grading dan pengang- kutan [8]. Harga minyak cengkeh juga mu- rah dan mudah didapat [9].
Keunggulan minyak cengkeh tersebut mem- buka peluang pemanfaatannya sebagai bah- an anestetik benih ikan-ikan hias seperti ik- an pelangi yang harus tetap hidup dan se- hat setelah pengangkutan. Toksisitas dan kemampuan anestetik minyak cengkeh per- lu diketahui agar kegiatan pengangkutan benih ikan dapat berjalan dengan baik. Pe- nelitian ini bertujuan untuk menentukan toksisitas LC 50 -48 hours, konsentrasi efek- tif EC 50 - 1 hours minyak cengkeh terhadap benih ikan pelangi dan menentukan waktu pingsan serta waktu pulih sadar benih ik- an pelangi setelah dianestetik menggunak- an minyak cengkeh.

## MATERI DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Ju- li sampai Agustus 2012, di Balai Penelitian dan Pengembangan Budidaya Ikan Hias, Depok Jawa Barat. Alat dan bahan yang digunakan adalah mikropipet, stopwatch, termometer, pH meter, DO meter, toples kaca, aerasi, blower, benih ikan pelangi mi- nyak cengkeh. Akuarium untuk aklimatisa- si benih ikan dan wadah uji berupa toples kaca dibersihkan, diisi air, serta diaerasi dengan volume air sebanyak 4.620 cm³.
Konsentrasi ambang atas dan ambang ba- wah minyak cengkeh yang diperoleh dari uji pendahuluan kemudian digunakan un- tuk menentukan konsentrasi pada uji uta- ma. Kadar eugenol minyak cengkeh diukur pada masing-masing konsentrasi yang te- lah didapatkan dari persamaan untuk di-
gunakan dalam uji toksisitas untuk menca- ri nilai LC 50 -48 jam. Penentuan kemampu- an anestetik dilakukan dalam waktu dedah 60 menit untuk mendapatkan nilai (EC 50 - 1 jam) dan waktu pingsan setelah itu di- pulihsadarkan dalam waktu dedah 60 me- nit untuk mendapatkan waktu pulih sadar benih ikan pelangi. Parameter kualitas air diamati diawal dan diakhir perlakuan yang meliputi suhu, pH, DO dan amonia (NH 3 ).
Penelitian terdiri dari lima perlakuan dan kontrol sebanyak 3 kali ulangan yaitu :
1. Perlakuan minyak cengkeh dengan kon- sentrasi 0 (Kontrol)
2. Perlakuan minyak cengkeh dengan kon- sentrasi 0,0251 ml/L
3. Perlakuan minyak cengkeh dengan kon- sentrasi 0,063 ml/L
4. Perlakuan minyak cengkeh dengan kon- sentrasi 0,158 ml/L
5. Perlakuan minyak cengkeh dengan kon- sentrasi 0,396 ml/L
6. Perlakuan minyak cengkeh dengan kon- sentrasi 0,993 ml/L
Parameter yang diamati dalam penelitian ini adalah uji toksisitas minyak cengkeh untuk mendapatkan nilai Lethal Concen- tration (LC 50 -48 jam) dalam waktu 48 jam dan kemampuan anestetik minyak cengkeh untuk mendapatkan nilai Effective Concen- tration (EC 50 - 1 jam), dalam waktu de- dah 60 menit, waktu pingsan, waktu pulih sadar benih ikan pelangi setelah dianeste- tik menggunakan minyak cengkeh dan pa- ramater kualitas air yang meliputi suhu, pH, DO dan amonia (NH 3 ). Metode anali- sis probit yaitu metode yang digunakan un- tuk menganalisis berbagai jenis dosis-respons atau respon percobaan binomial terhadap berbagai bidang. Metode ini digunakan un- tuk mencari nilai LC 50 -48 jam yaitu kon- sentrasi minyak cengkeh yang mematikan 50% benih ikan pelangi selama waktu de- dah tertentu. EC 50 - 1jam yaitu dimana kon- sentrasi yang memingsankan 50% benih ik- an dalam waktu dedah tertentu dan anali- sis model regresi linier untuk mencari wak- tu pingsan dan waktu pulih sadar benih dengan hubungan waktu pengamatan (x)
dan jumlah benih ikan yang dapat diping- sankan dan dipulihsadarkan (y).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pada konsentrasi 0,01 ml/L pengamatan jam ke-24 sampai jam ke-48 benih masih dalam keadaan hidup sampai 100% karena tidak terjadi kematian. Pada pengamatan jam ke-24 minyak cengkeh mulai bereaksi dengan ditandai kematian yang terjadi pa- da konsentrasi 0,1 ml/L sebanyak 36% dan terjadi kematian total 100% pada konsen- trasi 1 ml/L. Pada pengamatan jam ke-48 pada konsentrasi 0,1 ml/L, kematian me- ningkat menjadi sebanyak 93%.
Kematian tersebut diduga karena bahan anes- tetik yang larut dalam air akan mengaki- batkan berkurangnya laju respirasi pada benih ikan. Kondisi tersebut menyebabkan benih ikan gelisah kemudian selalu berupa- ya untuk naik ke permukaan untuk men- dapatkan oksigen. Penurunan laju respira- si tersebut menyebabkan hilangnya seluruh rasa pada bagian tubuh ikan sebagai aki- bat dari penurunan fungsi syaraf sehingga menghalangi aksi dan hantaran impuls sya- raf. Selanjutnya dijelaskan juga bahwa se- cara langsung atau tidak langsung bahan- bahan anestetik akan mengganggu keseim- bangan ionik dalam otak benih ikan. Hal ini terjadi karena penurunan konsentrasi kation K + dan peningkatan kation Na + , Fe 3+ dan Ca 2+ . Kemudian gangguan ini akan mempengaruhi kerja syaraf motorik dan pernafasan, sehingga menyebabkan ke- matian rasa atau pingsan [10]. Maka dari hasil pengamatan pada penentuan konsen- trasi ambang minyak cengkeh yang telah dilakukan, didapatkan konsentrasi ambang atas sebesar 1 ml/L dan konsentrasi am- bang bawah sebesar 0,01 ml/L.
Pada pengukuran kadar eugenol minyak ceng- keh maka didapatkan persamaan regresi li- nier pada Gambar 1 diketahui bahwa Y = 0,249x - 0,001 yang berarti bahwa setiap kenaikan satu satuan konsentrasi minyak cengkeh akan menaikkan kadar eugenol mi- nyak cengkeh sebanyak 0,249 satuan. Ko-
Gambar 1 . Kadar eugenol pada masing-masing konsentrasi minyak cengkeh
efisien diterminasi dengan R² simbol me- rupakan proporsi variabilitas dalam suatu data yang dihitung didasarkan pada mo- del statistik. Dalam hubungannya dengan korelasi, maka R 2 merupakan kuadrat dari koefisien korelasi antara variabel yang di- gunakan sebagai predictor (X) dan variabel (Y) yang memberikan response. Sedangk- an nilai R 2 pada Gambar 1 didapatkan se- besar 0,999 hal ini menjelaskan bahwa ka- dar eugenol dalam minyak cengkeh berpe- ngaruh sebesar 99% terhadap konsentra- si minyak cengkeh, 1% dapat disebabkan oleh faktor-faktor lingkungan lainnya se- perti kualitas air.
Hasil penelitian pada pengukuran kadar eu- genol terhadap masing-masing konsentra- si minyak cengkeh menunjukkan bahwa se- makin tinggi konsentrasi minyak cengkeh maka akan semakin tinggi kadar eugenol yang terdapat didalamnya (Gambar 1).
Pengamatan jam ke-24 dan jam ke-48 ter- jadi peningkatan kematian pada benih. Mi- nyak cengkeh akan bekerja dengan cara meng- urangi laju metabolisme pada tubuh benih ikan pelangi, secara perlahan hingga ter- jadi kematian mulai jam ke-24 [5]. Berda- sarkan perhitungan uji toksisitas minyak cengkeh yang telah dilakukan, maka dida- patkan nilai probit untuk LC 50 -48 jam se- besar 0,273 ml/L. Hasil penelitian toksi- sitas minyak cengkeh menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi minyak cengkeh yang dimasukkan kedalam wadah uji, maka semakin tinggi pula tingkat kematian yang terjadi pada benih ikan pelangi seiring de- ngan bertambahnya waktu.
Pada pengamatan kemampuan anestetik mi- nyak cengkeh terhadap benih ikan pelangi, diperoleh hasil analisa model regresi linier
Yayu Saskia 1 et al. dengan hubungan waktu pengamatan (x) dan jumlah benih ikan yang dapat diping- sankan (y) (Gambar 2). Dari persamaan model regresi linier tersebut maka dida- patkan nilai waktu yang diperlukan untuk memingsankan 50% benih ikan pelangi un- tuk masing-masing konsentrasi yaitu 0,063 ml/L = 68,32 menit; 0,158 ml/L = 40,02 menit; 0,396 ml/L= 45,31 menit dan 0,993 ml/L = 8,85 menit. Kemampuan anestetik minyak cengkeh terhadap benih ikan pe- langi pada masing-masing konsentrasi me- nunjukkan bahwa semakin tinggi konsen- trasi minyak cengkeh maka akan semakin cepat benih yang dapat dipingsankan. Hal ini dikarenakan bahwa peningkatan kon- sentrasi yang diberikan menyebabkan per- cepatan waktu pingsan benih ikan, kare- na semakin tinggi konsentrasi semakin ce- pat proses penyerapan zat anestesi oleh da- rah yang kemudian akan menyebar ke selu- ruh bagian tubuh benih ikan. Zat anestesi yang telah terabsorpsi kedalam pembuluh darah kemudian akan dibawa ke susunan syaraf pusat yaitu otak dan medula spinalis (sistem syarat pusat atau SSP). Zat anes- tesi yang telah sampai pada sistem sya- rat pusat tersebut akan memblokir resep- tor dopamine post synaptic dan juga meng- hambat pelepasan dopamine serta menek- an sistem syaraf pusat sehingga akan me- nimbulkan efek sedasi, relaksasi otot, dan juga menurunkan kegiatan-kegiatan benih ikan yang bersifat spontan seperti kehilang- an rangsangan dari luar kemudian dapat mengakibatkan benih ikan pingsan [11].
Nilai R² yang didapatkan pada masing-masing konsentrasi (Gambar 2) yaitu pada kon- sentrasi 0,063 ml/L = 92,3%; konsentra- si 0,158 ml/L = 86,2%; konsentrasi 0,396 ml/L = 95,2%; dan konsentrasi 0,993 ml/L= 87,7%, hal ini menyatakan bahwa penam- bahan minyak cengkeh seperti pada kon- sentrasi 0,158 ml/L misalnya, akan berpe- ngaruh sebesar 86,2 % terhadap peming- sanan benih ikan pelangi 14,7% dapat di- sebabkan oleh faktor-faktor lingkungan la- innya seperti kualitas air, begitu juga pada konsentrasi-konsentrasi yang lain.
Penelitian yang telah dilakukan menunjukk- an perlakuan terbaik terdapat pada kon-
sentrasi 0,158 ml/L karena pada konsen- trasi tersebut dalam waktu dedah 60 me- nit, dapat memingsankan benih ikan pela- ngi hingga 70% dengan jumlah benih ter- banyak.dalam waktu 40,02 menit. Berda- sarkan perhitungan data yang diperoleh da- ri kemampuan anestetik minyak cengkeh terhadap benih ikan pelangi maka dida- patkan nilai EC 50 - 1 jam sebesar 0,159 ml/L.
Benih ikan pelangi yang telah di aneste- tik, segera dipulihsadarkan kembali dengan waktu yang diperoleh berdasarkan hasil ana- lisa model regresi linier dengan hubung- an waktu pengamatan (x) dan jumlah be- nih ikan yang dapat dipulihsadarkan (y) (Gambar 3). Dari persamaan model regresi linier tersebut maka didapatkan nilai wak- tu yang diperlukan untuk memulihsadark- an 50% benih ikan pelangi kembali seca- ra normal dengan waktu yang dibutuhk- an pada masing-masing konsentrasi adalah 0,063 ml/L = 27,91 menit; 0,158 ml/L = 3,54 menit; 0,396 ml/L = 24,34 menit; dan konsentrasi 0,993 ml/L = 18,78 menit. Pe- nelitian yang telah dilakukan menunjukk- an perlakuan terbaik terdapat pada kon- sentrasi 0,158 ml/L karena dapat memu- lihsadarkan 50% benih dalam waktu 3,54 menit.
Nilai R² yang didapatkan pada masing-masing konsentrasi (Gambar 3) yaitu pada konsen- trasi 0,063 ml/L= 75%; 0,158 ml/L = 86,2 %; 0,396 ml/L = 94,5% dan konsentrasi 0,993 ml/L = 94,4%. Hal ini menyatakan bahwa penambahan minyak cengkeh seper- ti pada konsentrasi 0,158 ml/L misalnya, akan berpengaruh sebesar 86,2% terhadap pemulihsadaran benih ikan pelangi, 14,8% dapat disebabkan oleh faktor-faktor ling- kungan lainnya seperti kualitas air, begitu juga pada konsentrasi-konsentrasi yang la- in.

## SIMPULAN
Pada penelitian ini didapatkan nilai Lethal Concentration LC 50 -48 jam sebesar 0,273 ml/L nilai Effective Concentration EC 50 - 1 jam sebesar 0,159 ml/L. Perlakuan terbaik
Gambar 2 Jumlah benih ikan pelangi yang pingsan pada masing-masing konsentrasi minyak cengkeh.
Gambar 3 Waktu pulih sadar benih ikan pelangi pada masing-masing konsentrasi minyak cengkeh
terdapat pada konsentrasi 0,158 ml/L de- ngan waktu pingsan dan memulihsadarkan 50% benih ikan pelangi 40,02 menit dan 3,54 menit.

## Pustaka
1. Kusrini, E. 2010. Pengaruh pH Terhadap Per- kembangan Gonad Ikan Rainbow Sawiat ( Me- lanotaenia , sp.). Jurnal Penelitian. Balai Riset Budidaya Ikan Hias Air Tawar. (5): 1.
2. Suparno, J. B. 1994. Pengaruh Suhu dan Wak- tu Pembiusan Pendinginan Bertahap Terha- dap Ketahanan Hidup Udang Windu Tambak ( Penaus monodon ) dalam Transportasi Sis- tem Kering. Jurnal Penelitian Pasca Panen Perikanan. (79): 73-78.
3. Fauziah, N. R. 2006. Pemingsanan Ikan Mas ( Cyprinus carpio ) dengan Mengunakan Eks- trak Tembakau, Ekstrak Mengkudu, Ekstrak Cengkeh. Jurnal Penelitian. Institut Pertani- an Bogor. (9):2-3. 4. Tahe, S. 2008. Penggunaan Phenoxyethanol Suhu Dingin dan Kombinasi Suhu Dingin dan Phenoxyethanol dalam Pembiusan Bandeng Umpan. Jurnal Media Akuakultur. (3)2: 7-9. 5. Coyle, S. D., Robert, M., Durborow, and Ja- mes, H.T. 2004. Anesthetics in Aquaculture. Kentucky State University Aquaculture Rese- arch Center. Journal Southren Regional Aqua- culture Center (SRAC) Publication No. 3900.
6. Supriyono, E., Budiyanti, Budiardi, 2010. Res- pon Fisiologi Benih Kerapu Macan Ephine- phelus fuscoghutotus terhadap Penggunaan Minyak Sereh dalam Transportasi Tertutup dengan Kepadatan Tinggi. Jurnal Ilmu Kela- utan (15)2: 103-112.
7. Laitupa, F. 2006. Pemanfaatan Eugenol dari Minyak Cengkeh untuk Mangatasi Ranciditas pada Minyak Kelapa. Jurnal Penelitian Uni- versitas Diponegoro (10): 2-5.
8. Imanpoor, R. M., Begheri, T., Hedayati,
S.A.A. 2010. The Anesthetic Effect of Cloves Essense in Persian Sturgeon Asipenser persi- cus . World Journal of Fish and Marine Scien- ce. 2(1): 29-36.
9. Atamanalp, M., and Ucar, A. 2010. The Effe- cts of Natural (Cloves Oil) and Synthetical (2- phenoxyethanol) Anesthesia Subtances on He- matology Parameters of Rainbow Trout ( On- chorynchus mykiss ) and Brown Trout ( Salmo trutte fario ). Journal of Animal and Veteri- nary Advance. 9(14): 1925-1933.
10. Yanto, H. 2009. Penggunaan MS-222 dan La- rutan Garam pada Transportasi Ikan Jelawat ( Leptobarbus hoevenii ). Jurnal Ilmu-ilmu Per- airan dan Perikanan Indonesia. (16)1: 47-54.
11. Andriyanto, Sutisna, A., Manalu, W. 2009.
Potensi Penggunaan Acepromazine sebagai Sediaan Transquilizier pada Transportasi Ikan Patin. Jurnal Berkala Perikanan. 38(1): 8-11.
Yayu Saskia 1 , et al