Abstrak— Penyakit akibat infeksi Trichodina sp. menjadi salah  satu  ancaman  keberhasilan  akuakultur,  sehingga  perlu dicari  alternatif  pengobatan  dengan  bahan  alami.  Api-api memiliki  senyawa  metabolit  yang  berpotensi  cukup  tinggi sebagai  obat untuk trichodiniasis. karena mengandung senyawa polar seperti flavonoid, tannin dan saponin yang telah diketahui mampu  mengendalikan  perkembangan  Trichodina  sp.  Tujuan penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  tingkat  efektifitas ekstrak  daun  api-api  terhadap  perkembangan  populasi Trichodina  sp.  yang menyerang benih ikan mas,  dengan metode perendaman selama 4 jam. Dengan konsentrasi 20%; 10%; 5%; 2,5% dan kontrol. Analisa data statistik menggunakan ANOVA. Hasil penelitian didapatkan bahwa perasan larutan daun api-api berpengaruh  dalam  mengendalikan  perkembangan  Trichodina sp.  sehingga  dilanjutkan  dengan  uji  TUKEY  dan  didapatkan hasil  bahwa  perlakuan  antar  konsentrasi  tidak  berbeda signifikan  dibandingkan  dengan  kontrol.  Pengamatan  leukosit ikan  mas  mengalami  penurunan  pada  sel  limfosit  dan peningkatan pada sel eosinofil, dan neutrofil.
Kata  kunci — Avicennnia  marina,  ikan  mas,  leukosit, Trichodina sp.

## I. PENDAHULUAN
KAN  mas  merupakan  salah  satu  sumber  protein  hewani untuk  memenuhi gizi  masyarakat  Indonesia.  Sehingga  ikan mas  menjadi  salah  satu  komoditas  ikan  air  tawar  yang banyak  dikembangkan di Indonesia [1]. Permintaan akan ikan konsumsi  ini  terus  meningkat.  Akibatnya,  produksi  budidaya ikan juga berkembang, ditandai dengan terus naiknya produksi jenis  ikan  mas  setiap  tahunnya.  Kenaikan  rata-rata  produksi ikan mas pada tahun 2013 mencapai 7,00%. Para pembudidaya banyak  mengalami  kendala  dalam  usaha  pembenihan  dan perbesaran  benih  ikan  mas,  karena  pada  tingkat  pembenihan merupakan  periode  yang  rawan  terhadap  serangan  penyakit. Semakin  tua  inang  akan  semakin  resisten  terhadap  serangan penyakit. Salah satu penyakit yang sering menyerang ikan mas adalah  parasit  jenis  Trichodina  sp.  yang  menyebabkan penyakit trichodiniasis (penyakit gatal).
Penyakit akibat infeksi Trichodina sp. ini menjadi salah satu ancaman  keberhasilan  akuakultur  [2].  Menurut  [3].  Predileksi
Trichodina sp. adalah permukaan tubuh, sirip dan insang. Ikan yang  terserang  Trichodina  sp.  ditandai  dengan  adanya  bintik- bintik  putih  keabu-abuan  dan  terjadi  peningkatan  produksi lendir  [4].  Trichodina  sp.  menjadi  sangat  patogen  terhadap ikan  dan  dapat  menyebabkan  kerusakan  parah  bahkan menyebabkan  kematian  pada  inangnya.  Inang  yang  paling sering  terserang  Trichodina  sp.  biasanya  berasal  dari  family Cyprinidae.  Salah  satu  spesies  Cyprinidae  yang  sering terserang  Trichodina  sp.  adalah  ikan  mas  (Cyprinus  carpio linn)  [5].  Trichodina  sp.  menginfeksi  dengan  cara  menempel di  lapisan  epitel  ikan  dengan  bantuan  hook  atau  pengait. Pengait ini melakukan perputaran sehingga dapat merusak sel- sel di sekitar tempat penempelannya. Kemudian Trichodina sp. memakan sel-sel epitel yang hancur dan mengakibatkan iritasi yang serius [6].
Pencegahan dan pengobatan penyakit parasit Trichodina sp. Pada ikan selama ini menggunakan bahan kimia dan antibiotik seperti  NaCl,  formalin  dan  CuSO 4 [7].  Penggunaan  antibiotik dan bahan kimia secara terus menerus dapat menimbulkan efek samping  pada  ikan  dan  lingkungannya  [8].  Dibutuhkan alternatif  lain  untuk  mengatasi  masalah  tersebut  dengan menggunakan  bahan  alami.  Penggunaan  bahan  alami merupakan suatu langkah yang tepat karena bahan alami selain berfungsi  sebagai  antioksidan  juga  dapat  meningkatkan kekebalan  tubuh  ikan  terhadap  perubahan  lingkungan.  Salah satu  bahan  alami  yang  dapat  digunakan  adalah  api-api (Avicennia marina).
Hasil  penelitian  [7]  daun  api-api  (A.  marina)  digunakan sebagai  antibakteri  karena  pada  daun  ini  mengandung beberapa  senyawa  polar  yang  mampu  mengendalikan perkembangan  Trichodina  sp.  Senyawa  polar  tersebut  yaitu saponin,  flavonoid  dan  tannin  yang  dapat  bekerja  sebagai antimikroba  dengan  cara  merusak  membran  sitoplasma  dan membunuh  sel  epidermis  [9].  Berdasarkan  latar  belakang  di atas, penelitian ini akan menguji pengaruh konsentrasi ekstrak daun  api-api  (A.  marina)  sebagai  antiparasit  terhadap Trichodina  sp.  pada  ikan  mas  (C.  carpio  L).  Penelitian bertujuan  untuk  mengetahui  berapa  konsentrasi  perendaman larutan  daun  api-api  (Avicennia  marina)  yang  paling  efektif
Efektifitas Perendaman Benih Ikan Mas (Cyprinus carpio L.) dalam Larutan Perasan Daun Api-api (Avicennia marina) terhadap Penurunan Jumlah Trichodina sp.
Bidayatul Afifah 1 , Nurlita Abdulgani 1 dan Gunanti Mahasri 2
1. Jurusan Biologi, Fakultas MIPA, Institut Teknologi Sepuluh Nopember (ITS)
2. Jurusan Perikanan, Fakultas Perikanan, Universitas Airlangga. Jl. Arief Rahman Hakim, Surabaya 60111 Indonesia
e-mail: nurlita@bio.its.ac.id
untuk menurunkan kelimpahan Trichodina sp. pada benih ikan Mas (Cyprinus carpio L.)

## II. METODOLOGI
A. Pembuatan Perasan Larutan Daun Api-api (Avicennia marina).
Daun api-api yang masih segar diambil dari Desa Wonorejo sebanyak  500  g  dan  dicuci  bersih  untuk  mempertahankan kesegarannya,  kemudian  ditambahkan  500  ml  air  dan diblender  menggunakan  blender.  Hasil  dari  proses  blender diperas menggunakan kain bersih. Hasil perasan daun tersebut merupakan larutan daun A. marina konsentrasi 100%. [10].

## B. Pemeriksaan Trichodina sp.
Pemeriksaan  Trichodina  sp.  dilakukan  bedasarkan  metode natif  (pemeriksaan  secara  langsung)  [11].  Pemeriksaan  pada benih  ikan  Mas  (Cyprinus  carpio  L.)  dilakukan  pada  sirip, insang  dan  permukaan  tubuh  dengan  cara  pengerokan (scrapping)  menggunakan  scalpel.  Lendir  yang  didapat, kemudian diletakkan diatas objek  glass serta  ditetesi 1-2  tetes air  dan  ditutup  dengan  cover  glass.  Preparat  diamati menggunakan  mikroskop  dengan  perbesaran  100  kali. Selanjutnya,  dilakukan  perhitungan  jumlah  Trichodina  sp. dengan  hand  counter.  Hasil  dari  perhitungan  Trichodina  sp. dimasukkan ke dalam tabel pengamatan data.

## C. Metode Perendaman
Metode  perendaman  dilakukan  selama  4  jam  dengan konsentrasi 20%, 10%, 5% dan 2,5% dan kontrol yang diambil dari  stok  perasan  daun  api-api  dengan  konsentrasi  100%. Untuk  mendapatkan  konsentrasi  20%,  yaitu  perasan  larutan daun  api-api  sebanyak  20  ml  dicampur  dengan  akuades sebanyak 80 ml. sehingga pencampuran tersebut mencapai 100 ml.  Kemudian  untuk  mendapatkan  konsentrasi  10%,  5%  dan 2,5%dapat  dilakukan  hal  yang  sama  seperti  menentukan konsentrasi 20%.

## D. Pemeriksaan Leukosit Ikan Mas
Pengambilan  darah  diambil  kira-kira  0,5  ml  lewat  arteri caudalis,  pengambilan  darah  dengan  spuit  1  ml  yang  sudah diberi  EDTA  (antikoagulan)  kemudian  jarum  ditusukkan cukup  dalam  melalui  garis  lateralis,  pembuluh  darah  berada tepat  di  bawah  vertebra  dapat  dilihat  pada  gambar,  darah diambil  1  tetes  dan  letakkan  di  bagian  tepi  obyek  glass. diambil obyek glass lain, buat ulas/hapusan darah tipis dengan kemiringan  300,  dikeringkan  di  udara  dan  difiksasi  dengan methanol  selama 3 menit setalah itu ulasan darah dimasukkan ke dalam staining jar yang berisi zat warna giemsa 20% selama 30  menit  kemudian  dicuci  dengan  air  mengalir  dan  dikering anginkan  dengan  mendirikan  pada  salah  satu  sisi  ujungnya setelah  itu  ulasan  diamati  dibawah  mikroskop  dengan perbesaran 1000x untuk mengetahui jumlah leukosit ikan mas yang  terinfeksi  Trichodina  sp  [7].  Perhitungan  leukosit dihitung dengan rumus sebagai berikut :
(1)

## III. HASIL DAN PEMBAHASA N
Penelitian  penggunaan  perasan  larutan  daun  api-api terhadap  perkembangan  Trichodina  sp.,  dilakukan  dengan menghitung  jumlah  Trichodina  sp.  yang  menempel  pada permukan  tubuh,  sirip  dan  insang  benih  ikan  mas  yang  telah diberi  perlakuan  perendaman  selama  4  jam.  Penelitian  ini menggunakan  5  perlakuan  yaitu  perlakuan  A  (kontrol)  tanpa pemberian  perasan  larutan  daun  api-api,  perlakuan  B pemberian  perasan  larutan  daun  api-api  konsentrasi  20%, perlakuan  C  pemberian  perasan  larutan  daun  api-api konsentrasi 10%, perlakuan D pemberian perasan larutan daun api-api  konsentrasi  5%  dan  perlakuan  E  pemberian  perasan larutan  daun  api-api  konsentrasi  2,5%  (Tabel  1).  Pengamatan berupa  data  jumlah  intensitas  Trichodina  sp.  di  permukaan tubuh, insang dan sirip benih ikan mas.
Pada kelima perlakuan di atas menunjukkan bahwa semakin meningkat  konsentrasi  perasan  larutan  daun  api-api  maka semakin  menurun  jumlah  Trichodina  sp.  yang  menginfestasi pada benih ikan mas. Hal ini terlihat dari perhitungan ANOVA diketahui bahwa perlakuan A (kontrol) mengalami peningkatan jumlah  Trichodina  dan  perlakuan B (20%), C (10%), D (5%) dan E (2,5%) mengalami penurunan jumlah Trichodina sp. hal ini  bisa  disimpulkan  bahwa  pada  perlakuan  A  (kontrol) menunjukkan  tidak  berpengaruh  signifikan pada perasan  daun api-api  terhadap  menurunya  infestasi  Trichodina  sp.  pada benih  ikan  mas.  Sedangkan  pada  perlakuan  B(20%), C(10%), D(5%),  dan  E(2,5%)  ditunjukkan  berpengaruh  signifikan dengan penurunan jumlah infestasi Trichodina sp.
Dari  hasil  uji  ANOVA  dilanjutkan  uji  TUKEY  untuk mendapatkan perbedaan signifikan antar perlakuan. (Tabel 1). dari  hasil  uji  TUKEY  terlihat  tidak  berbeda  signifikan  pada perlakuan 5 konsentrasi yakni B (20%), C (10%), D (5%), dan E  (2,5%).  Dikarenakan  peningkatan  dan  penurunan  intensitas Trichodina sp. di pengaruhi oleh parameter lingkungan seperti suhu,  DO  dan  pH.  (Mahasri,  2008)  dari  penelitian  ini didapatkan  parameter  lingkungan  sama  dan  masih  dalam kisaran  normal  pada  semua  perlakuan,  sehingga  penurunan intensitasnya  tidak  berbeda  nyata.  Antara  konsentrasi  paling rendah dan paling tinggi mampu mengendalikan perkembangan  Trichodina  sp,  tetapi  konsentrasi  yang  paling efektif  adalah  pada  perlakuan  B  (20%)  dengan  rata-rata  60 Trichodina sp.karena dalam perendaman 4 jam, konsentrasi ini paling  cepat  menurunkan  jumlah  Trichodina  sp.  Diikuti dengan  konsentrasi  perasan  larutan  daun  api-api  pada konsentrasi  C  (10%),  D  (5%)  dan  E  (2,5%)  yang  juga tergolong  memberi  respon  yang  cukup  tinggi,  yaitu  94,  158 dan  197  Trichodina  sp.  (Gambar  1).  Menurut  Mahasri  [5],
Tabel 1.
Rata-rata jumlah Trichodina sp. yang menginfestasi benih ikan mas.
Perlakuan Rata-rata ± SD (%) A (kontrol) 580 ± 118,6 a B (20%) 60 ± 22,45 b C (10%) 94 ±33, 62 b D (5%) 158 ± 89, 93 b E (2,5%) 197 ± 48,93 b
Keterangan : Superskip berbeda menunjukkan perbedaan yang nyata (p <0,05).
intensitas Trichodina sp. tersebut tergolong sangat berat dalam menginfeksi benih ikan mas. (Tabel 2).
Peningkatan  populasi  trichodina  pada  perlakuan  kontrol setelah 4 jam mencapai  rata-rata  580 Trichodina sp. (Gambar 2).  Menurut  [8],  besarnya  nilai  intensitas  Trichodina  sp. disebabkan  oleh  kecepatan  pembelahan  pada  Trichodina  sp. setiap  ½  jam  pada  suhu  optimal  yakni  20-24 0 C,  adapun penularan  Trichodina  sp  ini  melalui  air  atau  kontak  langsung dengan  ikan  yang  terinfeksi  dan  penularannya  akan  semakin cepat  jika  kualitas  air  rendah  pada  wadah  tempat  ikan dipelihara. Organisme ini berkembang biak dengan pembelaran  binner  dimana  organisme  yang  dihasilkan  akan kembali ke inang semula atau mencari inang baru di dalam air. Parasit  jenis  ini  termasuk  dalam  parasit  yang  dominan  dalam budidaya ikan air tawar [10]. Hal tersebut akan membahayakan  benih.  Parasit  ini  tumbuh  dengan  baik  pada kolam-kolam  yang  dangkal  dan  menggenang  terutama  pada tempat-tempat pemijahan dan pembibitan ikan.
5 4 3 2 1 198.5 198.0 197.5 197.0 196.5 196.0 dosis M e a n Main Effects Plot for respon Fitted Means
Gambar 1. Grafik hubungan antara dosis dan respon Trichodina sp. Terhadap perasan larutan daun api-api.
Pada  penelitian  pengerokan  dilakukan  pada  permukaan tubuh, insang dan sirip karena predileksi Trichodina sp. adalah permukaan tubuh, sirip dan insang [4]. Dari hasil pengamatan sebelum  perendaman,  pada  organ  tersebut  didapatkan intensitas  rata-rata  yakni  391  Trichodina  sp.  Trichodina  sp. ditemukan  pada  permukaan  tubuh  karena  pada  permukaan tubuh mengandung mucus yang merupakan makanan baik bagi parasit  dan  menjadi  tempat  hidup  yang  baik  ektoparasit. Mucus  ikan  mengandung  lisosim,  komplemen  dan  antibodi yang  berperan  untuk  mendegradasi  patogen.  Selain  itu permukaan  tubuh  berhubungan  langsung  dengan  lingkungan yang memudahkan serangan Trichodina sp. Setelah Trichodina sp. menempel, parasit ini akan berputar-putar 360 o dengan  menggunakan  cilia  sehingga  akan  merusak  sel-sel disekitar  dan  memakan  sel  epitel  yang  hancur  hingga mengakibatkan  iritasi  pada  permukaan  tubuh  [12].  Tingginya kandungan  bahan  organik  dalam  kolam  dapat  menyebabkan
kerusakan  pada  kulit  karena  sekresi  mucus  yang  berlebih, sehingga  lebih  mudah  terinfeksi  oleh  parasit  terutama ektoparasit.  Serangan  Trichodina  sp.  dengan  intensitas  tinggi dapat  menyebabkan  hyperplasia  pada  permukaan  tubuh  dan insang [13].
Menurut  Anshary,  Trichodina  sp.  banyak  ditemukan  di insang karena pada insang terdapat sel epitel, peredaran darah dan  mucus  yang  merupakan  makanan  baik  bagi  Trichodina sp.[14].  Serangan  parasit  ini  menyebabkan  hyperplasia  yang dapat  menyebabkan  gangguan  osmotik,  pernapasan  bahkan menyebabkan kematian. Kondisi ini megakibatkan terhalangnya  aliran  air  menuju  filamen  insang  sehingga  dapat menyebabkan  ikan  stres  dan  sulit  untuk  bernafas.  Ikan  yang terserang  parasit  ini  akan  berenang  lambat,  berenang  dekat permukaan  air  dan  nafsu  makan  berkurang.  Menurut  Laird, Trichodina  sp.  sedikit  ditemukan  di  sirip  karena  sirip  bersifat keras  berupa  tulang,  sehingga  Trichodina  sp.  sulit  untuk menempel  pada  sirip  [15].  Pada  sirip  juga  tidak  terdapat makanan  bagi  parasit.  Gambar  Trichodina  sp.  bisa  dilihat dibawah ini.
Gambar  3.  Hasil  pengamatan  Trichodina  sp.  pada  benih  ikan  mas  (C.carpio L.) perbesaran 100 kali.
Keterangan gambar : (1). Cillia (2). Border membrane (3). Adhesive disc.
Pengamatan  gejala  klinis  ikan  mas  dilakukan  selama perendaman  perasan  larutan  daun  api-api  4  jam.  Menurut Harbone, gejala klinis yang timbul akibat infestasi Trichodina sp. pada benih ikan adalah terdapat luka pada kulit tubuh, sisik terlepas,  pada  permukaan  tubuh  tampak  pendarahan  [16]. Beberapa  gejala  klinis  tersebut  terlihat  pada  perlakuan  yang dilakukan.  Hasil  pengamatan  gejala  klinis  pada  perlakuan  A (kontrol),  yaitu  terdapat  banyak  sisik  yang  lepas  dan  terdapat luka  pada  tubuh  benih  ikan  mas.  Pada  perlakuan  B  (20%),  C (10%)  dan  D  (5%)  tidak  terdapat  sisik  yang  lepas  dan  tidak
Tabel 2.
Kategori Frekuensi Intensitas Serangan Parasite Protozoa [5]. Range Frekuensi 0-5 Normal 5-25 Sedang 26-50 Berat < 50 Sangat berat
Gambar  2.  Grafik  Perbandingan  Sebelum  dan  Sesudah  Rata-rata Intensitas Trichodina sp.
Keterangan:  Garis miring: rata-rata Trichodina sp.sebelum perendaman.
Garis kotak : rata-rata Trichodina sp. setelah perendaman.
1 3 2
terdapat  luka  pada  tubuh  benih  ikan  mas.  Sedangkan  pada perlakuan  E  (2,5%)  tidak  terdapat  sisik  yang  lepas  dan terdapat  luka  pada  tubuh  benih  ikan  mas.  Dari  hasil  tersebut bahwa  perlakuan  dengan  konsentrasi  tinggi  (20%)  akan menghambat  infestasi  Trichodina  sp.  sehingga  ikan  tidak mengalami  gejala  klinis.  semakin  tinggi  konsentrasi  zat antiparasit  maka  semakin  besar  kemampuannya  untuk menghambat pertumbuhan parasit.
Akibat infestasi Trichodina sp. pada tubuh ikan mas, selain menimbulkan  gejala  klinis  juga  menunjukkan  tingkah  laku yang  berbeda.  Pengamatan  tingkah  laku  benih  ikan  mas dilakukan saat perendaman perasan larutan daun api-api 4 jam dengan  konsentrasi  yang  berbeda.  Pengamatan  tersebut dilakukan  selama  5  menit  sebelum  perendaman,  saat perendaman  dan  setelah  perendaman.  Dari  hasil  pengamatan perlakuan  A  (Kontrol)  yaitu  benih  ikan  mas  berenang  tidak aktif,  berenang  ke  permukaan  air  dan  sering  menggosok- gosokkan  tubuhnya  ke  dinding  akuarium.  Sedangkan  pada perlakuan  konsentrasi  benih  ikan  mas  berenang  aktif,  tidak sering  berenang  ke  permukaan  air  dan  tidak  menggosok- gosokkan  tubuhnya  ke  dinding  akuarim.  Pada  konsentrasi 2,5%  mengalami  perubahan  tingkah  laku  dengan  berenang  ke permukaan  air.  Hal  ini  diakibatkan  infestasi  Trichodina  sp. yang  tinggi  pada  benih  ikan  mas  mengakibatkan  benih mengalami stress sehingga mengalami perbedaan tingkah laku dan mempengaruhi respon makan menjadi menurun. [2].
Tingkah laku dari benih ikan mas berhubungan dengan cara Trichodina sp. menginfeksi benih. Trichodina sp. menginfeksi benih  dengan  cara  mengaitkan  pengait  atau  hook  pada permukaan tubuh ikan maupun insang ikan sehingga parasit ini akan menempel pada inang dan akan menghisap makanan pada tubuh  atau  insang  ikan,  sedangkan  silia berfungsi sebagai alat gerak  dari  satu  tempat  ke  tempat  yang  lain  pada  ikan.  Parasit ini  akan  tetap  berputar  selama  menyerang  inang  dan  akan merusak  semua  lapisan  tubuh  yang  di  serang.  Ikan  yang terinfeksi  parasit  ini  akan  mengalami  iritasi  pada  kulit  dan kerusakan  pada  organ  yang  diserang  sehingga  dapat  sebagai faktor predisposisi bagi penyakit sekunder. [7].
Berkurangnya  jumlah  Trichodina  sp.  yang  dilakukan  oleh perasan larutan daun api-api (A. marina) menunjukkan adanya respon  dalam  menghambat  perkembangan  Trichodina  sp.  Hal ini  dikarenakan  adanya  kandungan  senyawa  metabolit sekunder yang bersifat polar pada perasan larutan daun api-api (A.  marina).  yaitu  tannin,  flavonoid  dan  saponin[18]. Flavonoid  mampu  merusak  membran  sel  yang  berperan  pada keutuhan  sel  dengan  cara  mendenaturasi  protein  pada membran  sel,  sehingga  membran  sel  tersebut  terganggu permeabilitasnya  dan  menyebabkan  kebocoran  isi  sel.  Hal  ini dapat  menghambat  pertumbuhan  dan  akhirnya  menyebabkan kematian terhadap parasit. Kandungan lain yang terdapat daun api-api  adalah  tannin.  Mekanisme  kerja  tannin  diduga  dapat mengkerutkan membran sel sehingga mengganggu permeabilitas sel itu sendiri. Akibat terganggunya permeabilitas,  sel  tidak  dapat  melakukan  aktivitas  hidup sehingga pertumbuhannya terhambat dan mati. Senyawa lainya yaitu saponin, dengan mekanisme kerja melakukan penghambatan  dengan  cara  membentuk  senyawa  kompleks dengan  membran  sel  melalui  ikatan  hidrogen.  Sehingga  dapat
menghancurkan  sifat  permeabilitas  membran  sel  dan  akhirnya dapat menimbulkan kematian sel [19].
Pemeriksaan  gambaran  leukosit  pada  ikan  mas  berupa jumlah  masing-masing  komponen  leukosit  (limfosit,  monosit, neutrophil  dan  eosinofil).  Jumlah  leukosit  normal  ikan  [20], yaitu  3390-14200  /mm 3 .  Dari  hasil  pengamatan  gambaran ulasan  leukosit  benih  ikan  mas didapatkan  jumlah  sel  limfosit 40%,  sel  eosinofil  20%,  sel  neutrofil  35%,  dan  sel  monosit 4%.  Dilihat  dari  Tabel  3,  leukosit  benih  ikan  mas  mengalami peningkatan  pada  sel  neutrofil,  eosinofil  dan  monosit  dari jumlah  normalnya,  sedangkan  sel  limfosit  dalam  kisaran normal.
Leukosit  normal  ikan  mas  terdiri  dari  sel  limfosit  dengan persentasi  60,20-81%,  sel  eosinofil  2,40-8%,  sel  neutrofil 3,25-8,40%,  sel  monosit  1-8%  dan  sel  basofil  0,2%.  Jika dibandingkan  antara  hasil  penelitian  dengan  diferensiasi  sel leukosit  normal  menurut  Hrubec  dan  Smith[20],  ditemukan bahwa  diferensial  sel  leukosit  sampel  ikan  mengalami peningkatan sel eosinofil dan sel neutrofil. Hal ini disebabkan oleh  infeksi  Trichodina  sp.  yang  semakin  berkembang,  yang menyebabkan  terjadinya  penurunan  kondisi  tubuh  sehingga terjadi infeksi sekunder oleh bakteri dan mengalami penurunan pada sel limfosit. Hal tersebut dikarenakan ikan mas terinfeksi parasit.  Penurunan  dan  peningkatan  dari  beberapa  macam  sel leukosit di atas diakibatkan oleh tingkat infeksi Trichodina sp. Menurut  Brooker,  infeksi  Trichodina  sp.  dapat  memberikan pengaruh  pada  leukosit  berupa  peningkatan  persentase  sel eosinofil [21]. Trichodina juga dapat menyebabkan stress yang akan menyebabkan meningkatnya persentase sel neutrofil serta akan menurunkan persentase sel limfosit dari kisaran normal.
Menurut  Suhermanto  dkk.,  stress  dan  inflamasi  dapat menyebabkan  peningkatan  jumlah  sel  neutrofil  [22].  Hal  ini didukung oleh fungsi sel neutrofil sebagai pertahanan pertama tubuh  terhadap  banyak  infeksi  [23].  Ketika  neutrofil  tidak mampu  memfagosit  parasit,  hal  tersebut  akan  diantisipasi tubuh  dengan  memunculkan  sel  eosinofil  sebagai  pertahanan tubuh spesifik terhadap serangan ektoparasit.
Eosinofil  pada  ikan  diperlukan  untuk  kekebalan  dalam melawan  infeksi  parasit.  Peningkatan  jumlah  secara  umum menggambarkan  adanya  kondisi  penyakit  kronis,  sedangkan penurunan  eosinofil  (eosinopenia)  biasanya  terjadi  pada kondisi  penyakit  akut.  Sehingga  respon  eosinofilia  terjadi bukan  merupakan  akibat  dari  kondisi  penyakit  tunggal, melainkan  sebagai  akibat  adanya  beragam  penyakit  kronis [24].
Monosit berkemampuan masuk ke jaringan dan berdiferensiasi  menjadi  sel  makrofag.  Peran  monosit  sangat penting,  sebagai  sel  fagosit  utama  untuk  menghancurkan berbagai  patogen  dan  berperan  pula  sebagai  antigen presenting  cells  (APC)  yang  fungsinya  untuk  menyajikan antigen kepada sel limfosit [25]. Suhermanto, dkk. mengatakan bahwa  monosit  bersifat  fagosit  lebih  kuat  jika  dibandingkan neutrofil  dan  dapat  memfagosit  partikel  yang  lebih  besar, monosit yang matang disebut makrofag [23].
Limfosit  merupakan  sel  yang  berfungsi  memproduksi antibodi  atau  sebagai  sel  efektor  dalam  menanggapi  antigen terikat  makrofag.  Limfosit  yang  bersirkulasi  terutama  berasal dari  timus,  beberapa  diantaranya  secara  relatif  tidak
mengalami  diferensiasi  bermigrasi,  memperbanyak  diri  dan bersifat  limfosit  T,  kemudian  dapat  masuk  kembali  ke  dalam aliran  darah.  Sel-sel  T  bertanggung  jawab  terhadap  reaksi imun  seluler  dan  mempunyai  reseptor  permukaan  spesifik untuk  mengenal  antigen  asing.  Limfosit  lain  berdiferensiasi menjadi  limfosit  B,  memproduksi  antibodi  humoral  dalam peredaran  darah  dan  mengikat  secara  khusus  antigen  asing penyebab fagositosis, lisis sel dan sel pembunuh (killer sel atau sel K) dari organisme yang menyerang. Sel T dan sel B secara morfologis  hanya  dapat  dibedakan  ketika  diaktifkan  oleh antigen [24].

## IV. KESIMPULAN
Konsentrasi yang paling efektif dalam penurunan kelimpahan  Trichodina  sp.  pada  benih  ikan  mas  yaitu konsentrasi  20%  perasan  larutan  daun  api-api  dengan perendaman  selama  4  jam.  Leukosit  benih  ikan  mas  yang terinfeknsi  Trichodina  sp.  mengalami  kenaikan  nilai  sel neutrofil,  sel  eotrofil  dan  sel  monosit.  Dan  mengalami penurunan  pada  sel  limfosit  dari  batas  nilai  normal  leukosit benih ikan mas.

## DAFTAR PUSTAKA
[1] Rukmana,  R.  1997.  Budidaya  dan  Prospek  Agribisnis.Yogyakarta:
Kanisus.
[2] Irianto,  2005.  Faktor-Faktor  Lingkungan  Abiotik  air  tawar.  Jurnal Manusia Dan Lingkungan. Vol 11. 2
[3] Afrianto, E., dan E, Liviawaty. 1992. Pengendalian Hama dan Penyakit Ikan. Jakarta: Penerbit Kanisius.
[4] Gusrina.  2008.  Budidaya  Ikan.  Jilid  3.  Jakarta:  Direktorat  Pembinaan Sekolah Menegah Kejuruan.
[5] Basson,  L.,  Van  As,  J.  G.  and  Paperna,  I.  1983.  Trichodinid ectoparasites  of  cichlid  and  cyprinid  fishes  in  South  Africa  and  Israel.
Systematic Parasitology 5(4): 245-257.
[6] Yuasa  et.  al.  2003.  Penuntun  Diagnosa  Penyakit  Ikan-II.  Balai  Besar Riset  Perikanan  Budidaya  Laut  Gondol  dan  Japan  International Cooperation (JICA). Bali
[7] Mahasri,  G.  2009.  Patologi  Ikan.  Surabaya:  Diktat  Kuliah.  Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Airlangga.
[8] Baticados,  M.C.L.,  dan  Paclibare,  J.O.  1992.  The  use  of chemotherapeutic  agents  in  aquaculture  in  the  Philippines.  Diseases  in Asian Aquaculture. Proceedings of the First Symposium on Diseases in Asian Aquaculture, Bali, Indonesia. November 1990, 26-29.
[9] Rahayu,  I.  D.  2008.  Produksi  Antibiotik  Alami  Hasil  Isolasi  Aloe barbadensis Miller: Penanggulangan Mastitis pada Sapi Perah. Laporan Penelitian Hibah.
[10] Mahasri,  G.  2008.  Gambaran  Patologi  Insang  dan  Kulit  Udang  Windu (Penaeus  monodon  Fab.)yang  Terserang  Ciliata  Patogen  dari  Famili Vorticellidae  (Zoonthanium  sp.).  Jurnal  Ilmiah  Perikanan  Surabaya: Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga. 3: 1
[11] Ohoiulun,  I.  2002.  Inventarisai  Parasit  Pada  Ikan  Cupang  (Betta splendens),  ikan  gapi  (Poecilis  reticulate)  dan  Ikan  Rainbow (Melanotaenia macculochi) di Daerah Jakarta Barat, DKI Jakarta. Jurnal Akuakultur.  Bogor:  Fakultas  Perikanan  dan  Ilmu  Kelautan  Institut Pertanian Bogor.
[12] Pramono,  T.  dan  Syakuri,  H.  2008.  Infeksi  Parasit  Pada  Permukaan Tubuh  Ikan  Nilem  (Osteochilus  hasellti).  yang  Diperdagangkan  di  PPI
Purbalingga. Jurnal Ilmiah Perikanan. Vol. 3 No.2.
[13] Heckmann,  R.  2003.  Other  Ectoparasites  Infesting  Fish,  Copepods, Branchiurans, Isopods, Mites and Bivalves. Aquakultur Magazine, USA
[14] Anshary, H. 2008. Tingkat Infeksi Parasit Pada Ikan Mas Koi (Cyprinus carpio)  Pada  Beberapa  Lokasi  Budidaya  Ikan  Hias  di  Makassar  dan Gowa.  Jurnal  Sains  &  Teknologi.  Makassar:  Jaringan  Sains  dan Teknologi 8: 139-147.
[15] Laird,  M.  1952.  The  Protozoa  of  New  Zealand  Intertidal  Zone  Fishes. Department of Zoology, Victoria University Collage, Wellington.
[16] Harbone,  JB.,  1987.  Metode  Fitokimia  :  Penuntun  Cara  Modern Menganalisis  Tumbuhan.  Ed  ke-2.  Terjemahan  K.  Padmawinata  dan  I. Soediro. Bandung: Institut Tekhnologi Bandung.
[17] Noor,  R,  Y.,  M.  Khazali,  dan  I  N.N.  Suryadiputra.  1999.  Panduan Pengenalan Mangrove di Indonesia. Bogor: PHKA/WI-IP.
[18] Watson  A,  Craig  H,  Pouder  EJ,  Debora  B.2004.  Species  Profile:  Koi and Goldfish. SRAC Publication; 7201.
[19] Martins  ML,  Dias  MT,  Fujimoto  RY,  Onaka  EM,  Nomura  DT.  2004.
Hematological alteration
of
Leporinus macrocephalus (Osteichtyes:Anostomidae)  naturally  infected  by  Goezia  leporini (Nematoda:  Anisakidae)  in  fish  pond.  Arq.  Bras  Med  Vet  Zootec 56(5):640-646.
[20] Hrubec  TC,  Smith  SA.  2010.  Hematology  of  Fishes.  Di  dalam:  Weiss DJ  dan  Wardrop  KJ,  editor.  Schalm’s  Veterinary  Hematology  Sixth Edition:  Hematology  of  fishes.  Singapure:  Wiley-Blackwell.  Hlm  994- 1003.
[21] Brooker  C.  2005.  Churchill  Livingstone’s  MiniEncyclopaedia  Of Nursing. 1 st edition.Elsevier Ltd: Singapura.
[22] Suhermanto,  A.  Sri,  A,  Maftuch.  2013.  Pengaruh  Total  fenol  Teripang Pasir  (Holothuria  scraba)  Terhadap  Respon  Imun  Non  Spesifik  Ikan Mas (Cyprinus carpio.) Jurnal Bumi lestari. 13: 2
[23] Suhermanto,  A.  Sri,  A,  Maftuch.  2013.  Pengaruh  Total  fenol  Teripang Pasir  (Holothuria  scraba)  Terhadap  Respon  Imun  Non  Spesifik  Ikan Mas (Cyprinus carpio.) Jurnal Bumi lestari. 13: 2
[24] Kresno  SB.  2001.  Imunologi  Diagnosis  dan  Prosedur  Laboratorium. Edisi ketiga. Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta.