## EKSTRAK KULIT BUAH MANGGIS MENURUNKAN AKTIVITAS
GAMMA-GLUTAMYLTRANSFERASE (  -GT) SERUM PADA PAPARAN

## ASAP ROKOK
Loo Hariyanto Raharjo 1 , Hwa Tjeen Anna Lewi Santoso 2
1 Bagian Biokimia Fakultas Kedokteran Universitas Wijaya Kusuma Surabaya 2 Bagian Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Wijaya Kusuma Surabaya
1 Email : loohiandao@rocketmail.com

## Abstrak
Paparan  asap  rokok  dapat  menyebabkan  stress  oksidatif,  yang  ditandai  dengan  peningkatan aktivitas  -GT  serum.  Kulit  manggis (Garcinia  mangostana  L.) mengandung  pigmen antosianin,  yang  berperan  sebagai  antioksidan  yang  dapat  mengurangi  radikal  bebas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak kulit manggis untuk menurunkan aktivitas  -GT  serum  pada  tikus  yang  terpapar  asap  rokok.  Penelitian  ini  merupakan penelitian  eksperimental  dengan  menggunakan  rancangan  acak post-test only  control group. Penelitian  ini  menggunakan  30  ekor  tikus  putih  jantan  yang  dibagi  menjadi  6  kelompok perlakuan.  Tikus  dipapar  dengan  asap  rokok  yang  berasal  dari  2  batang  rokok  selama  4 minggu  untuk  meningkatkan  radikal  bebas  di  tubuhnya.  Peningkatan  aktivitas  -GT    serum untuk  meredam  radikal  bebas.  Ekstrak  kulit  manggis  dapat  mengurangi  radikal  bebas sehingga aktivitas  -GT serum menurun.
Kesimpulan dari penelitian  ini adalah ekstrak  kulit manggis dapat menurunkan aktivitas dari  -GT serum.
Kata Kunci : Asap rokok, radikal bebas, aktivitas  -GT serum, ekstrak kulit manggis
MANGOSTEEN SKIN EXTRACTS DECREASE THE ACTIVITY OF THE GAMMA-GLUTAMYLTRANSFERASE (  -GT) SERUM ON THE CIGARETTE EXPOSURE

## Abstract
Exposure  to  cigarette  smoke  can  cause  oxidative  stress,  which  characterized  by  increased activity  of  -GT  serum.  The  skins  of  the  mangosteen  (Garcinia  mangostana  L.)  contain anthocyanins  pigments,  which  can  act  as  antioxidants  to  reduce  free  radicals.  This  study mainly aims to investigate the effect of mangosteen skin extracts to decreased activity of  -GT serum  in  rats  exposed  to  cigarette  smoke.  This  study  was  true  experimental  designs  with randomized  post-test  only  control  group  design.  This  study  used  thirty  male  rats  were dividing  into  six  treatment  groups.  Rats  exposed  to  cigarette  smoke,  which  came  from  two cigarettes, for 4 weeks lead to an increase free radicals in the body. The increased activity of  -GT serum to damp the free radicals. Mangosteen skin extracts can reduce free radicals so that the activity of  -GT serum decreased.
The  conclusion  of this  research  is  the  mangosteen  skin  extracts  can decrease  the activity  of the  -GT serum.
Keywords: cigarette smoke, free radicals, activity of  -GT serum, mangosteen skin extract

## PENDAHULUAN
Enzim  -GT (  -glutamil transferase) memecah  Glutathion  (GSH)  ekstraseluler menjadi  asam  amino konstitutif sehingga berperan  untuk  penyediaan  sistein,  yang merupakan  asam  amino  yang  berperan untuk sintesis  de  novo GSH  intraseluler.
Dengan  demikian,  -GT  penting  untuk mengatur ketersediaan GSH dan homeostasis sistein,  serta defisiensinya dapat  mengakibatkan  terjadinya  stres oksidatif  dan  kerentanan  seluler  terhadap cedera oksidan 1 .
Asap  rokok  mengandung  dua populasi radikal bebas  yang berbeda,  yang satu berasal dari fase tar dan  yang  lainnya berasal dari fase gas 2 . Fase tar didefinisikan sebagai bahan yang terperangkap ketika aliran asap dilewatkan melalui Cambridge  glass-fiber  filter yang dapat menyimpan 99,9% dari semua bahan partikulat  dengan  ukuran  >0,1  µm 2 .
Sedangkan  fase  gas  adalah  bahan  yang dapat melalui filter ini 2 . Fase tar dari asap rokok  mengandung  >10 17 radikal  bebas/g yang  relatif  stabil  (jam  –  bulan). Sedangkan  fase  gas  mengandung  >10 15 radikal bebas/isapan rokok yang merupakan small  oxygen-radicals dan carbon-centered  radicals dengan life  span yang  pendek  (detik)  dan  juga  jauh  lebih reaktif daripada fase tar 3 .
Sel-sel  paru,  khususnya  sel-sel epitel alveolar tipe II , rentan terhadap efek yang  merugikan  dari oksidan, mengalami perubahan  rasio  GSH/GSSG  (GSH  , GSSG  )  dimana  perubahan  tersebut  akan mempengaruhi  berbagai  proses  sinyal seluler 1 .  Hal  tersebut  menyebabkan  sel-sel paru  akan  melepaskan mediator  inflamasi dan sitokin/khemokin seperti tumour necrosis  factor-  (TNF-  ), interleukin-1
(IL-1)  dan interleukin-8 (IL-8)  sebagai
respon terhadap stres oksidatif/nitrosatif 4,5,6 . Pelepasan sitokin/khemokin tersebut akan
menginduksi perekrutan netrofil dan mengaktifkan faktor  transkripsi seperti NF-  B  ( Nuclear  Factor  kappa-light- chain-enhancer )  dan  AP-1  ( Activator Protein-1 )  sehingga  menambah  respon inflamasi dan kerusakan jaringan 4,5,6 .
NF-  B dan AP-1 dapat meningkatkan  ekspresi  -GCS  (  -glutamyl cystein  sintetase )  yang  merupakan  enzim pengendali  kecepatan sintesa  de  novo GSH 5,6,7 .    Respon adatif ini  dapat menjelaskan  peningkatan  GSH  di  dalam cairan alveolar pada  perokok  kronis 4,5,7 . Selanjutnya  -GT, sebagai enzim penyelamat  untuk  pembentukan  GSH intraseluler , akan meningkatkan aktivitasnya  dengan  memanfaatkan  GSH ekstraseluler dari cairan alveolar 5,6,7 .
Ehiozomwanogie  OJ  dan  kawan- kawan (2011) melakukan penelitian terhadap 60 orang subyek  yang terdiri dari 30 orang adalah perokok sigaret (25 orang pria  dan  5  orang  wanita)  dan  30  orang yang  lain  tidak  merokok  (25  orang  pria dan  5  orang  wanita) 8 .  Hasil  penelitian tersebut  menunjukkan  adanya  peningkatan aktivitas  -GT  serum  pada  kelompok perokok  (49  U/L  ±  16.26)  dibandingkan kelompok  yang  tidak  merokok  (15  U/L  ± 7.04) 8 .  Pada  individu  yang  merokok  lebih dari 20 batang/hari didapatkan peningkatan aktivitas  -GT  serum  bila  dibandingkan dengan individu yang merokok kurang dari 20 batang/hari (73 U/L ± 4.69 vs 43 U/L ± 11.86) 8 .
Buah  manggis  di  luar  negeri dikenal  sebagai  “ Queen  of  fruits ” dan “ The  Finest  Fruit  of  Tropis “,  karena memiliki  keistimewaan  dari  warna  kulit, daging  buah  dan  mempunyai  rasa  yang unik yaitu manis, asam serta menyegarkan 5 . Selain itu, manggis juga memiliki nilai gizi yang tinggi. Salah satu nilai gizinya adalah sebagai  sumber  vitamin  dan  mineral  yang sangat bermanfaat bagi tubuh manusia 9 .
Kulit  manggis  bermanfaat  bagi kesehatan  karena  mengandung  antosianin, tanin,  senyawa  fenol/polifenol, epikatekin , dan xanthone . Kulit  buah  manggis mengandung  14  jenis  turunan xanthone 5 . Alfa-mangostin merupakan turunan
xanthone yang  banyak  terdapat  pada  kulit dan  buah  manggis 9 .    Alfa-mangostin memiliki kemampuan menekan pembentukan  senyawa  karsinogen  pada kolon. Pada penelitian yang dilakukan oleh Asep W. Permana dan kawan-kawan (2012) diketahui  bahwa  kulit  buah  manggis mengandung  alfa-mangostin  sebesar  0,59 mg/g,  antosianin  sebanyak  1,13mg/g,  dan kadar  fenolik  sebesar  8,49  mg/g  yang mempunyai kapasitas antioksidan  (metode DPPH) sebesar 19,72 mg/g 10 .
Pada  penelitian  yang  dilakukan oleh Adiputro DL dan kawan-kawan (2013) diketahui  bahwa  ekstrak  kulit  manggis dengan  etanol  pada  dosis  200  mg/kg  BB dan  800  mg/kg  BB  dapat  menurunkan kadar  TNF-  dan  NF- κB  pada  tikus  coba yang  diberi  diit  hiperkolesterolemia 11 . Pada uraian diatas telah dikemukan bahwa TNF-  dan  NF- κB  dapat  menyebabkan terjadinya peningkatan kadar enzim aktivitas  -GT  serum  sehingga  apabila ekstrak  kulit  manggis  dapat  menurunkan kadar  TNF-  dan  NF- κB  maka  diduga dapat  pula  menurunkan  aktivitas  -GT serum.
Dengan  demikian, xanthone yang terdapat  pada  kulit  buah  manggis  bersifat antioksidan, antidiabetik, antikanker, antiimflammatory , hepatoprotective , immuno-modulation , aromatase inhibitor ,
antibakteri, juga bersifat fungsional lainnya 9,12 .
Berdasarkan  uraian  tersebut  diatas penulis ingin melakukan penelitian mengenai  pengaruh  pemberian  ekstrak kulit manggis terhadap penurunan aktivitas
 -GT  serum  pada  tikus  putih  jantan strain
Wistar (Rattus  norvegicus) yang  dipapar dengan asap rokok.

## BAHAN DAN METODA

## Hewan Coba
Penelitian  ini  memakai  30  ekor tikus  putih  jantan  (160-170  g) strain Wistar  (Rattus  Norvegiccus) ,  diperoleh dari unit  hewan  coba  Fakultas  Kedokteran Universitas  Wijaya  Kusuma  Surabaya. Tikus  coba  ditempatkan  pada  ruangan yang  suhu  dan  kelembabannya  terkendali dan  siklus  gelap-terang  yang  bergantian setiap  12  jam.  Tikus  coba  tersebut  dibagi secara  random  menjadi  6  kelompok perlakuan,  yaitu:  Kelompok  yang  tanpa paparan  asap  rokok  dan  diberikan  ekstrak kulit  manggis  dalam  Na-CMC  0,5% dengan  dosis  400  mg/kg  BB/hari  (K KM ),
Kelompok  yang  tanpa  paparan  asap  rokok dan diberikan Na-CMC  0,5%  saja  (K CMC ), Kelompok  yang  diberikan  paparan  asap rokok  +  Na-CMC  0,5%  (K AR ),  Kelompok yang  diberikan  paparan  asap  rokok  + ekstrak  kulit  manggis  dalam  Na-CMC 0,5%    dengan  dosis  200  mg/kg  BB/hari
(P1),  Kelompok  yang  diberikan  paparan asap  rokok  +  ekstrak  kulit  manggis  dalam Na-CMC  0,5%    dengan  dosis  400  mg/kg BB/hari(P2),  Kelompok  yang  diberikan paparan  asap  rokok  +  ekstrak  kulit manggis  dalam  Na-CMC  0,5%    dengan dosis  800  mg/kg  BB/hari(P3).  Masing- masing  kelompok  perlakuan  terdiri  dari  5 (lima)  ekor  tikus  putih  jantan  galur  Wistar sehingga  pada  penelitian  ini  digunakan  30 (tiga  puluh)  ekor  tikus  putih  jantan  galur Wistar.
Setelah periode aklimatisasi selama 1  minggu,  tikus  coba dipapar dengan  asap rokok  dari  dua  batang  rokok,  dua  kali sehari,  1  batang  rokok  pada  pagi  hari  jam 08.00   dan 1 batang  rokok pada  siang  hari jam  13.00,  7  hari  dalam  1  minggu  selama 4 minggu. Setelah 4 minggu semua hewan coba  dikorbankan  dengan  terlebih  dahulu dianestesi  dengan  chloroform  kemudian dilanjutkan  dengan  pengambilan  darah intra  kardial.  Selanjutnya  tikus  coba dikuburkan secara layak.
Pemeriksaan aktivitas  -GT serum
Aktivitas  -GT serum  diukur dengan  menggunakan Gamma-GT  FS (Szasz  mod./IFCC  stand.) ,  DiaSys  Cat. No.1  2801  99  10  021.  Darah  hewan  coba, dari  semua  kelompok  perlakuan,  yang diambil  secara  intra  kardial  dimasukkan kedalam tabung reaksi. Selanjutnya
dilakukan sentrifuge sehingga sel-sel darah mengendap  dan  didapatkan supernatant yang  berupa  serum.  Selanjutnya  diambil 100  l serum dengan memakai mikropipet dan  ditambahkan  1000  l  reagensia Gamma-GT  FS  (Szasz  mod./IFCC  stand.) juga dengan mikropipet. Kemudian
dicampur dan dibaca dengan
spektrofotometer  dengan  λ  =  405  nm.
Hasil  yang  diperoleh  dinyatakan  dalam satuan IU/L 1 .
Pembuatan  ekstrak  kulit  manggis  secara maserasi
Pembuatan  ekstrak  kulit  manggis secara  maserasi  ini  dilakukan  dengan mengikuti  cara  pembuatan  yang  dipakai pada  percobaan  oleh  Wiwin  S  (2010) 9 .
Manggis  sebanyak  3,49  kg  dibeli  di TOTAL  BUAH  SEGAR,  Surabaya  dan dibuang  isi  buahnya.  Selanjutnya  kulit manggis dikeringkan dengan cara diangin- anginkan  serta  tidak  boleh  terkena  sinar matahari  selama  satu  hari  satu  malam. Kulit manggis  yang sudah kering dipotong kecil-kecil  dan  diblender  sampai  menjadi serbuk  kering  sebanyak  50  g  serta disimpan  didalam  toples  plastik  yang kering.
Kemudian dilanjutkan dengan melakukan  proses  maserasi  dengan  cara: serbuk kering kulit manggis yang disimpan dalam  toples  plastik  direndam  dengan
larutan  etanol  70%  selama  6  hari  pada suhu  kamar.  Pada  hari  ke-7,  filtrat dipisahkan  dengan  cara  disaring  dengan memakai  kertas saring dan proses diulangi sebanyak  dua  kali.  Filtrat  yang  diperoleh kemudian dipekatkan dengan cara evaporasi  sehingga  diperoleh  filtrat  kental sebanyak 25,7 g.

## Analisa statistik
Semua  data  dinyatakan  sebagai mean ± SD. One Way ANOVA dilanjutkan dengan Tamhane post hoc yang digunakan untuk  membandingkan  perbedaan  antara beberapa kelompok perlakuan. Pada penelitian  ini  dipakai  p  <  0,05  untuk menerima  hipotesa  nol  sebagai  indikasi adanya perbedaan statistik yang bermakna. Untuk  penghitungan  statistik  digunakan PASW  (Predictive  Analytic  SoftWare) Statistics version 18.0.

## HASIL
Hasil  analisis  rerata  ( x̄ )  dan simpangan  baku  (SD)  aktivitas  -GT serum pada kelompok K CMC , K KM , K AR , P1, P2, dan P3 adalah sebagai berikut:
Tabel  1.  Rerata  ( x̄ )  dan  Simpangan  baku
(SD) aktivitas  -GT serum
Aktivitas  -GT serum pada kelompok K CMC , K KM , K AR , P1, P2, dan P3 dapat  disajikan  dalam  bentuk  diagram batang seperti pada Gambar 1 dibawah ini.
Gambar 1. Grafik rerata aktivitas  -GT serum pada tikus putih jantan strain Wistar .
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan adanya  peningkatan  aktivitas  -GT  serum yang  tinggi  pada  kelompok  K AR ,  yang diberikan  paparan  asap  rokok  +  Na-CMC
0,5%, bila dibandingkan dengan kelompok
K CMC (hanya  diberi  Na-CMC  0,5%) maupun  K KM (hanya  diberi  ekstrak  kulit
manggis  dalam  Na-CMC  0,5%  dengan dosis  400  mg/kg  BB),  dimana  kedua kelompok ini tidak diberikan paparan  asap rokok. Pada pemberian paparan asap rokok yang  disertai  dengan  pemberian  ekstrak kulit  manggis  dalam  Na-CMC  0,5% menunjukkan  adanya  penurunan  aktivitas  -GT serum.
Selanjutnya dilakukan analisis statistik  inferensial  yang  diawali  dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui  hasil  pengukuran aktivitas  - GT serum mempunyai distribusi data yang normal atau tidak.
Tabel  2.  Hasil  Uji  Uji Kolmogorov-
Smirnov Aktivitas  -GT serum Variabel Penelitian x̄ ± SD p Keterangan Aktivitas  -GT serum 1,975 ± 1,362 0,407 Distribusi data normal Setelah  diketahui  hasil  pengukuran aktivitas  -GT serum mempunyai distribusi data yang normal maka dilanjutkan dengan melakukan uji homogenitas  varians  (uji  Levene) yang bertujuan  untuk  mengetahui  kelompok data  (K CMC ,  K KM ,  K AR ,  P1,  P2,  P3) mempunyai varians homogen atau tidak .
Tabel  3.  Hasil  Uji Levene Aktivitas  -GT Serum
Variabel Penelitian df p Keterangan Aktivitas  -GT serum 5 0,008 Varians data tidak homogen Variabel Penelitian Kelompok Perlakuan K CMC K KM K AR P1 P2 P3 aktivitas  -GT serum (U/L) 0,350 ±
0,031 0,724
± 0,182 3,710
± 0,052 3,290
± 0,306 2,278
± 0,125 1,500 ±
0,218
Setelah  diketahui  bahwa  kelompok data  (K CMC ,  K KM ,  K AR ,  P1,  P2,  P3)  dari hasil  pengukuran  aktivitas  -GT  serum mempunyai  distribusi  data  normal  dan varians data  tidak  homogen  maka  untuk mengetahui  ada  tidaknya  perbedaan  antar kelompok dilanjutkan dengan uji Anova.
Tabel  4.  Hasil  Uji Anova Aktivitas  -GT Serum Variabel Penelitian F p Aktivitas  -GT serum 286,617 0,000*
Keterangan:Uji  Anova  dengan  =  0,05, Subscript*  menunjukkan  adanya  perbedaan yang bermakna
Setelah diketahui adanya
perbedaan yang bermakna diantara kelompok data (K KCMC , K KM , K AR , P1, P2,
P3)  yang  tidak  homogen  dari  hasil pengukuran  aktivitas  -GT  serum  maka dilanjutkan  dengan  uji Post  Hoc dengan Tamhane . Uji ini bertujuan untuk mengetahui adanya perbedaan yang bermakna  diantara  dua  kelompok  pada pengukuran aktivitas  -GT serum.
Tabel  5.  Hasil  Uji Post  Hoc dengan Tamhane Aktivitas  -GT Serum Kelompok Perlakuan Variabel Penelitian Aktivitas  -GT serum (U/L) x̄ ± SD KCMC 0,350 ± 0,031 a KKM 0,724 ± 0,182 ab KAR 3,710 ± 0,052 c P1 3,290 ± 0,306 cd P2 2,278 ± 0,125 e P3 1,500 ± 0,218 f
Keterangan: Superscript a,b,c,d,e,f dengan huruf yang sama pada kolom variabel penelitian (aktivitas  -GT serum) berarti tidak terdapat perbedaan yang bermakna (p > 0,05).
Berdasarkan  Tabel  5  diatas,  hasil
uji Post Hoc
dengan Tamhane menunjukkan  bahwa  kelompok  K CMC dengan  K KM tidak  terdapat  perbedaan bermakna  aktivitas  -GT  serum  dengan nilai p >  0,05.  Kelompok  K AR dengan  P1 tidak terdapat perbedaan bermakna aktivitas  -GT  serum  dengan  nilai p > 0,05. Hal ini menunjukkan bahwa kelompok yang dipapar asap rokok dengan pemberian  ekstrak  kulit  manggis  dengan dosis 200 mg/kg BB (P1) tidak menunjukkan  adanya  penurunan    aktivitas
 -GT serum dibandingkan dengan kelompok  yang  dipapar  asap  rokok  tanpa pemberian  ekstrak  kulit  manggis  (K AR ).
Kelompok  K CMC dengan  K KM tidak terdapat  perbedaan  bermakna  aktivitas  - GT  serum  dengan  nilai p >  0,05.  Hal  ini menunjukkan bahwa kelompok yang tanpa paparan asap rokok dan diberi ekstrak kulit manggis  dengan  dosis  400  mg/kg  BB/hari (K KM ) tidak menunjukkan adanya penurunan aktivitas  -GT serum dibandingkan  dengan  kelompok  yang tanpa  paparan  asap  rokok  dan  diberi  Na- CMC  0,5%  saja  (K CMC ).  Sedangkan Kelompok  K AR dengan  K CMC ,  K KM ,  P2, dan  P3  terdapat  perbedaan  bermakna aktivitas  -GT  serum  dengan  nilai p  < 0,05. Hal ini menunjukkan bahwa kelompok yang dipapar asap rokok dengan pemberian  ekstrak  kulit  manggis  dengan
dosis  400  mg/kg  BB  (P2)  dan  dosis  800 mg/kg  BB  (P3)  menunjukkan  adanya
penurunan aktivitas  -GT serum dibandingkan  dengan  kelompok  yang dipapar  asap  rokok  tanpa  pemberian ekstrak  kulit  manggis  (K AR ).  Selain  itu menunjukkan  bahwa  kelompok  yang dipapar  asap  rokok  (K AR )  menunjukkan adanya  peningkatan    aktivitas  -GT  serum dibandingkan dengan kelompok yang tidak dipapar asap rokok (K CMC dan K KM ).

## PEMBAHASAN
Enzim  -GT memecah GSH
ekstraseluler menjadi asam amino konstitutif sehingga berperan untuk penyediaan  sistein,  asam  amino  yang berperan  untuk  regulasi sintesis  de  novo GSH 1,7 .  Dengan  demikian  -GT  penting untuk  mengatur  ketersediaan  GSH  dan homeostasis sistein,  serta defisiensinya dapat  mengakibatkan  terjadinya  stres oksidatif  dan  kerentanan  seluler  terhadap cedera  oksidan 4,6 .  Hal  ini  menunjukkan bahwa  -GT  memainkan  peran  penting didalam  pertahanan  tubuh  terhadap  stres oksidatif 5 .
Asap  rokok  mengandung  dua populasi radikal bebas  yang berbeda,  yang satu berasal dari fase tar dan  yang  lainnya berasal  dari  fase  gas 2,3 . Fase  tar dari  asap rokok  mengandung  >10 17 radikal  bebas/g yang  relatif  stabil  (jam  –  bulan).
Sedangkan  fase  gas  mengandung  >10 15
radikal bebas/isapan rokok 2,3 yang merupakan small  oxygen-radicals dan carbon-centered  radicals dengan life  span yang  pendek  (detik)  dan  juga  jauh  lebih reaktif  daripada fase  tar 3 .  Hal  ini menyebabkan mahluk  hidup  yang terpapar dengan  asap  rokok  akan  menimbulkan terbentuknya radikal bebas didalam tubuhnya 13 .  Adanya  peningkatan  radikal bebas  didalam  tubuh  akan  menimbulkan peningkatan  pembentukan  ROS/RNS 13,14 ,
menyebabkan
terjadinya gangguan homeostasis  rasio GSH/GSSG,  dimana GSH  akan  menurun  dan  GSSG  akan meningkat 6,14 . Keadaan ini akan menyebabkan terjadinya fosforilasi, ubiquinasi ,  dan degradasi proteolitik dari inhibitor NF-  B (I  B) dan disertai dengan pelepasan NF-  B yang selanjutnya mengalami translokasi kedalam nukleus dan berikatan pada gen  yang memiliki  B- site 1,5,7 . Selain itu juga terjadi fosforilasi c- Jun  N-terminal  protein  kinase (JNK), menyebabkan aktivasi AP-1, yang kemudian
terikat pada tetradecanoylphorbol-13-acetate  response element (TRE)-nya 1,5,7 . Peningkatan faktor transkripsi NF-  B dan AP-1 menyebabkan terjadinya peningkatan ekspresi gen pengkode  enzim  terkait  peran  antioksidan termasuk ekspresi  -GT 1,5,7 .  Peningkatan ekspresi  -GT  seluler  ini  akan  diikuti
dengan  peningkatan  aktivitas  -GT  serum
meskipun mekanisme yang
menghubungkannya  masih  belum  jelas 1,5,7 .
Hasil  penelitian  ini  menunjukkan bahwa  kelompok  perlakuan  yang  diberi paparan  asap  rokok  (K AR )  menunjukkan peningkatan  aktivitas  -GT  serum  secara bermakna ( p < 0,05) dengan rerata 3,710 ± 0,052 U/L, dibandingkan dengan kelompok  yang  tidak  dipapar  asap  rokok (K CMC dan  K KM )  dengan  rerata  0,350  ± 0,031 U/L dan 0,724 ± 0,182 U/L.
Hal ini menunjukkan bahwa paparan  asap  rokok  yang  berasal  dari  satu batang  rokok  di  pagi  hari  dan  satu  batang rokok  di  siang  hari  dapat  menyebabkan terjadinya  peningkatan  aktivitas  -GT serum yang bermakna.
Aktivitas  -GT serum akan menurun dengan adanya pemberian ekstrak kulit manggis ( Garcinia mangostana  L. )  yang  diduga  mengandung bahan  antioksidan. Kulit  buah  manggis bermanfaat bagi kesehatan karena mengandung  antosianin,  tanin,  senyawa fenol/polifenol, epikatekin ,  dan xanthone 9,15,16,17 .
Kemampuan antioksidan dari antosianin tergantung pada orientasi struktur  dasar  dari  senyawa  tersebut, karena  orientasi  cincin  akan  menentukan kemudahan  dimana  atom  hidrogen  dari
gugus  hidroksil  dapat  disumbangkan  ke suatu  radikal bebas  serta  kapasitas antosianin  untuk  mendukung  elektron yang  tidak  berpasangan 9,15,16,17 .  Selain  itu, keberhasilan  untuk  memangsa  berbagai ROS  berbeda  dari  satu  antosianin  dengan yang  lain,  misalnya delphinidine adalah paling  efisien  untuk anion  superoksida (diikuti  oleh sianidin dan pelargonidin ) dan pelargonidin adalah  paling  efisien untuk radikal  hidroksil 9,14,15,16 .  Umumnya aktivitas antioksidan dari antosianin dihubungkan  dengan  jumlah  hidroksil bebas  di  sekitar  cincin pyrone .  Semakin besar  jumlah hidroksil semakin  besar aktivitas  antioksidan.  Antosianin  dengan gugus  3,4-dihidroksil  dapat  dengan  cepat meng-khelat ion  logam  untuk  membentuk kompleks  antosianin-logam  yang  stabil 12,
15,16,17 .
Ekstrak kulit buah manggis mempunyai  aktivitas  antioksidan  dengan nilai  EC50  adalah  8,5539  μg/mL,  lebih besar daripada nilai  EC50  vitamin  C  yaitu 3,3676  μg/mL mL 9,11,16 .  Walaupun  daya antioksidan  vitamin  C  2,5  kali  lebih  kuat dari  ekstrak  kulit  buah  manggis,  tetapi hasil  tersebut  menunjukkan  bahwa  ekstrak kulit  buah  manggis  mempunyai  daya antioksidan  yang  sangat  kuat,karena  nilai EC50 kurang dari 50 μg/mL 9,12,17 .
Hasil yang diperoleh pada penelitian ini menunjukkan bahwa kelompok  perlakuan  yang  diberi  paparan
asap rokok yang disertai dengan pemberian  ekstrak  kulit  manggis,  yaitu dosis  400  mg/kg  BB  (P2)  dan  dosis  800 mg/kg  BB  (P3  menunjukkan  penurunan aktivitas  -GT serum secara bermakna ( p < 0,05) dengan rerata 2,278 ± 0,125 U/L dan 1,500  ±  0,218  U/L,  dibandingkan  dengan kelompok  perlakuan  yang  diberi  paparan asap rokok tanpa disertai dengan pemberian  ekstrak  kulit  manggis  (K AR ) dengan rerata 3,710 ± 0,052 U/L.
Untuk  kelompok  perlakuan  yang diberi  paparan  asap  rokok  yang  disertai dengan  pemberian  ekstrak  kulit  manggis dengan  dosis  200  mg/kg  BB  (P1) menunjukkan  tidak  adanya  penurunan aktivitas  -GT serum secara bermakna ( p > 0,05)  dengan  rerata  3,290  ±  0,306  U/L, dibandingkan  dengan  kelompok  perlakuan yang  diberi  paparan  asap  rokok  tanpa disertai  dengan  pemberian  ekstrak  kulit manggis  (K AR )  dengan  rerata  3,710  ± 0,052 U/L.
Hal ini menunjukkan bahwa pemberian  ekstrak  kulit  manggis  dengan dosis  400  mg/kg  BB  (P2)  dan  dosis  800 mg/kg  BB  (P3)  lebih  efektif  untuk menurunkan  aktivitas  -GT  serum  pada paparan  asap  rokok  yang  berasal  dari  satu batang  rokok  di  pagi  hari  dan  satu  batang rokok di siang hari.

## KESIMPULAN
1.  Paparan  asap  rokok  yang  berasal  dari satu  batang  rokok  di  pagi  hari  dan  satu batang  rokok  di  siang  hari  dapat menyebabkan  terjadinya  peningkatan aktivitas  -GT serum yang bermakna.
2. Pemberian ekstrak kulit manggis dengan dosis  400  mg/kg  BB  dan  dosis  800 mg/kg BB lebih efektif untuk menurunkan  aktivitas  -GT  serum pada paparan  asap  rokok  yang  berasal  dari satu  batang  rokok  di  pagi  hari  dan  satu batang rokok di siang hari.

## DAFTAR PUSTAKA
1.  Whitfield  JB. Gamma  Glutamyl
Transferase. Critical Reviews in
Clinical  Laboratory. Sciences .  2001. 38(4):263–355.
2. Ambrose JA, Barua RS. The Pathophysiology  of  Cigarette  Smoking and Cardiovascular Disease: An update.
Journal  of  the  American  College  of Cardiology . 2004.43 (10): 1731-1737.
3.  Church  DF,  Pryor  WA.  Free-Radical Chemistry  of  Cigarette  Smoke  and  Its Toxicological Implications. Environmental Health Perspectives .1985.64: 111- 126.
4.  Rahman  I,  Macnee  W.  Oxidative  stress and  regulation  of  glutathione  in  lung inflammation. Eur  Respir  J .  2000.16:
534-554.
5.  Emdin  M,  Pompella  A,  Paolicchi  A. Gamma-glutamyltransferase,
atherosclerosis, and cardiovascular disease:  triggering  oxidative  stress within  the  plaque. Circulation. 2005.
112:2078–80.
6.Jain A, Agrawal B K. Antioxidant status and  smoking  habits:  relationship  with diet. Singapore Med J 2009.50(6) : 624-
627.
7.  Mason  JE,  Starke  RD,  Kirk  JEV. Gamma-Glutamyl Transferase: A Novel Cardiovascular Risk Biomarker. Preventive Cardiology . 2010. 54:36-41.
8.  Ehiozomwanogie  OJ,  Osazee  OP. Serum gamma-glutamyl transferase level  in  cigarette  smokers .  TaJONAS.
2011.2;2:405-408.
9.  Wiwin  S,  Endang  D  W,  Lia  K.  Uji Aktivitas  Antioksidan  dan  Penentuan
Kandungan  Antosianin  Total  Kulit Buah  Manggis  (Garcinia  mangostana L.). Majalah Obat Tradisional .
2010.15(2): 64 – 70.
10. Permana AW, Widayanti SM, Prabawati S, dan  Setyabudi  DA.  Sifat  Antioksidan Bubuk  Kulit  Buah  Manggis  ( Garcinia Mangostana L.)  Instan  dan  Aplikasinya Untuk  Minuman  Fungsional  Berkarbonasi. 2012. J. Pascapanen 9(2): 88 – 95.
11. Adiputro DL, Khotimah H, Sargowo D. et al. Cathecins in Ethanolic Extracts of
Garcinia Mangostana Fruit Pericarp and Anti-inflamatory Effect in Atherosclerotic  Rats.2013.  J.Universa Medicina 32(1):37-43. 12. Sarma AD, Sreelakshimi Y, Sharma R.
Antioxidant  ability  of  anthocyanins against ascorbic acid oxydation.
Phytochem. 1997.45: 671–674.
13.  Murray  RK,  Granner  DK,  Mayes  PA, Rodwell  VW , 2000. Biokimia  Harper.
Edisi 25 . Jakarta. EGC. hal: 609-612.
14.  Paolicchi  A,  Franzini  M,  Emdin  M, Passino  C, et  al. 2006. The  Potential Roles  of  Gamma-Glutamyltransferase
Activity in the Progression of Atherosclerosis and Cardiovascular
Diseases .  Vascular  Disease  Prevention 3(3): 1-5. 15.  Kay  C,  2004. Analysis  of  the bioactivity, metabolism, and pharmacokinetics  of  anthocyanins  in humans. PhD  thesis.  University  of Guelph, Ontario, Canada: 46-72.
16. Antal DS., Gârban G, Gârban Z, 2003.
The anthocyans: biologicallyactive
substances  of  food  and  pharmaceutic interest. The  Annals  of  the  University Dunarea de Jos of Galati, Food Technol. 6: 106-115.
17.  Kaliora  A  C,  Dedoussis  G  V  Z, Schmidt  H,  2006.  Dietary  antioxidants in preventing atherogenesis.
Atherosclerosis 187 (001):1–17.
Reviewer
Dr. dr. I Ketut Gede Muliartha, Sp. PA