# Korespondensi:  Balai  Besar  Riset  Budidaya  Laut  dan Penyuluhan  Perikanan.  Jl.  Br.  Gondol  Kec.  Gerokgak Kab.  Buleleng,  Kotak  Pos  140,  Singaraja  81101,  Bali,  Indonesia. Tel.:  +  62  362  92278 E-mail:  moriasembiring@yahoo.co.id
Tersedia  online  di:  http://ejournal-balitbang.kkp.go.id/index.php/ma

## PREVALENSI INFEKSI  VIRAL NERVOUS  NECROSIS  (VNN)  DAN  IRIDOVIRUS PADA  HATCHERI  DAN BUDIDAYA IKAN  LAUT
Sari Budi Moria  Sembiring # , Gigih Setia  Wibawa, Ketut Mahardika, Zeny Widiastuti, dan Haryanti
Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Jl. Br. Gondol Kec. Gerokgak Kab. Buleleng, Kotak Pos 140, Singaraja 81101, Bali
(Naskah diterima: 17 Mei  2018; Revisi final: 31 Agustus 2018; Disetujui publikasi: 3 September 2018)

## ABSTRAK
Piscine nodavirus sebagai penyebab penyakit VNN (Viral Nervous Necrosis) dan iridovirus merupakan jenis virus yang dikenal menjadi penyebab utama kematian ikan laut yang dibudidayakan. Virus ini mampu menginfeksi ikan dari ukuran benih sampai ukuran konsumsi dan dalam waktu dua minggu, kematian mencapai 80% sampai 100%. Pada pembenihan larva dan benih ikan dalam skala rumah tangga ataupun hatcheri lengkap di sepanjang pantai di wilayah Bali Utara sering mengalami infeksi VNN dan iridovirus Namun, informasi terjadinya infeksi belum didata dengan baik. Tujuan penelitian ini untuk memperoleh data dan informasi mengenai peta infeksi atau serangan virus pada pembudidaya/pembenihan ikan sepanjang tahun 2017 di Bali Utara.  Sampling  dilakukan pada  bulan  Februari,  Mei, Agustus,  dan  Oktober.  Di samping  melakukan sampling, juga dilakukan input data dari hasil analisis sampel di laboratorium bioteknologi yang diperoleh dari  pemilik  hatcheri/pembudidaya  ikan.  Analisis  VNN  menggunakan  metode  IQ Plus sedangkan  analisis iridovirus  dengan  metode  PCR  konvensional  dengan  primer  spesifik.  Parameter  yang  diamati  adalah prevalensi  VNN  dan  iridovirus  dari  setiap  hatcheri  dan  keramba  jaring  apung.  Sebagai  data  penunjang pengukuran parameter kualitas air berupa suhu, salinitas, amoniak, dan nitrit yang dilakukan pada saat pengambilan sampel benih. Hasil penelitian menunjukkan bahwa tingkat infeksi VNN di hatcheri Bali utara terjadi di bulan September sebesar 33,3% dan iridovirus pada bulan Agustus mencapai 18,61%. Sedangkan tingkat  prevalensi VNN  tertinggi  di  KJA terjadi  pada  bulan Oktober  mencapai  83,4%  dan puncak  infeksi iridovirus terjadi di bulan Februari dengan nilai prevalensi sebesar 50,0%.
KATA KUNCI: prevalensi; VNN; iridovirus; hatcheri; budidaya laut
ABSTRACT: Infection prevalence of viral nervous necrosis (VNN) and iridovirus in hatcheries and mariculture. By: Sari Budi Moria Sembiring, Gigih Setia Wibawa, Ketut Mahardika, Zeny Widiastuti, and Haryanti
VNN and iridovirus are viral diseases causing the highest mortality in mariculture. These viruses are able to infect eggs, larvae, juveniles and even marketable size fish. They can cause 80% to 100% mortality in just two weeks. Larvae or fingerlings in small or big scale hatcheries in Northern Bali were frequently infected by VNN or Iridovirus. Unfortunately, information about the local disease outbreaks was not well documented. The aim of this research was to collect data and information about the infection of these viruses in hatcheries and floating net cage mariculture in Northern Bali during 2017. Sampling was conducted in February, May, August, and October, 2017. In addition to the primary data from the field activities, disease infection secondary dataset from the fish farmers who analyzed their infected fish in our laboratory were also used. The identification of VNN infection was performed following IQPlus method while Iridovirus was tested using the conventional PCR method with specific primers. The parameters observed were the VNN and Iridovirus prevalence in each hatchery and floating net cage. Water quality parameters were measured in situ such as temperature, salinity, ammonia, and nitrite. The results showed that infection of VNN in hatcheries at Northern  Bali, the highest infection was found in September as high as 33.3% and Iridovirus in August at 18.61%.  While in Floating Net Cage the highest infection for VNN was found in October with value of 83.4% and Iridovirus was found in February with value of 50.0%.
KEYWORDS: prevalence; VNN; iridovirus; hatcheries; mariculture

## PENDAHULUAN
Peningkatan permintaan produk perikanan di pasar global,  berdampak  pada  semakin  tingginya  minat pembudidaya untuk budidaya ikan di Karamba Jaring Apung  (KJA).  Bahkan  di  Asia  Tenggara,  produksi akuakultur telah tumbuh dengan cepat untuk dekade terakhir,  dan  telah  menyokong  secara  signifikan persediaan  pangan  di  seluruh  dunia,  serta  mampu meningkatkan  pendapatan  rata-rata  untuk  banyak negara.  Namun  intensifikasi  akuakultur  di  banyak negara  ini  telah  menimbulkan  penyebaran  berbagai penyakit dengan cepat, yang mana merupakan salah satu dari faktor penghalang untuk dapat mendukung produksi komoditas perikanan, terutama selama tahap pemeliharaan larva dan benih dari komoditas budidaya. Kematian yang ditimbulkan oleh penyakit ikan sangat tergantung  pada  jenis  penyakit  yang  menyerang, kondisi  ikan,  dan  lingkungan.  Apabila  kondisi lingkungan menurun maka kematian yang diakibatkan oleh  wabah  penyakit  sangat  tinggi,  tapi  sebaliknya apabila kondisi lingkungan baik maka kematian akibat infeksi suatu penyakit lebih rendah (Cole et al., 2009).
VNN dapat menyerang sistem saraf pusat, retina mata, serta organ reproduksi. Penyakit ini umumnya dapat  menginfeksi  hampir  pada  seluruh  fase pertumbuhan  ikan  (stadia  larva  dan  benih),  serta mortalitasnya dapat mencapai 100%. Penularan penyakit ini dapat  terjadi secara  vertikal maupun  horizontal. Gejala umum VNN antara lain nafsu makan menurun, ikan  sangat  lemah,  warna  tubuh  pucat,  dan  gejala spesifik berupa pergerakan yang tidak terkoordinasi, seperti  berenang  tidak  terarah,  berputar-putar, hiperaktif,  terbalik,  serta  sering  menghentakkan kepala ke atas permukaan air secara sporadik (Yuasa et  al.,  2001;  Gomez  &  Baeck,  2008;  Yanong,  2016). Sedangkan iridovirus sebagai penyebab penyakit Sleepy Grouper  Diseases  (SGD)  dapat  bersifat  akut  sampai kronis  dengan  morbiditas  dan  mortalitas  yang bervariasi antara 30% sampai dengan 100%, tergantung pada spesies, umur, serta kondisi lingkungan (Won et al., 2013). Penularan penyakit iridovirus terjadi melalui kontak langsung atau melalui air yang terkontaminasi. Organ  target  penyakit  ini  adalah  ginjal  dan  limpa. Gejala  klinis  ikan  yang  terinfeksi  iridovirus,  antara lain warna tubuh ikan gelap, insang pucat, nafsu makan turun, serta pergerakan renang yang lemah dan tidak terkoordinasi.  Gejala  spesifik  yang  sering  muncul adalah ikan  berenang di  dasar bak  dengan keadaan terbaring pada salah satu sisi tubuhnya (Mahardika et al., 2003; Asrazitah et al., 2014).
Hasil  analisis  sampel  yang  diperoleh  dari pembenihan ikan kerapu skala rumah tangga ataupun
hatcheri lengkap di sepanjang pantai di wilayah Bali Utara  sering  mengalami  infeksi  VNN  dan  iridovirus, namun informasi terjadinya infeksi atau serangan vi- rus  pada  bulan/musim  kemarau,  musim  hujan  atau terjadi  pada  peralihan  musim  belum  diketahui sehingga  dilakukan  pemantauan  prevalensi  infeksi penyakit  VNN  dan  iridovirus  setiap  bulan  dengan tujuan agar  diperoleh data  dan informasi  mengenai peta infeksi atau serangan virus pada pembenihan dan budidaya ikan laut sepanjang tahun 2017 di pantai Bali Utara.

## BAHAN DAN METODE

## Sampel  Uji
Sampel uji berupa ikan hibrida (kerapu cantik dan kerapu cantang) dan kakap putih masing-masing 10 ekor.  Hewan  uji  diperoleh  dari  enam  hatcheri  dan empat  pembudidaya  KJA  di  pantai  Bali  Utara. Pengambilan sampel ikan dari hatcheri dilakukan tiga periode pada bulan Februari (musim hujan), Mei-Juni (musim kemarau), dan Oktober-November (memasuki musim hujan), sedangkan di pembudidaya ikan (KJA) dilakukan empat periode yaitu bulan Februari (musim hujan); Mei, Agustus (musim kemarau); dan Oktober (memasuki musim hujan). Rata-rata hasil pengukuran panjang total dan bobot badan hewan uji dari hatcheri adalah: 3,14 ± 0,26 cm dan 0,49 ± 0,09 g; sedangkan ukuran  hewan  uji  dari  pembudidaya  di  KJA  sebesar 16,61 ± 0,95 cm dan 89,27 ± 9,96 g. Hatcheri yang di-sampling berada di Desa Gerokgak, Penyabangan, dan Banyupoh; sedangkan untuk pembudidaya ikan di KJA berlokasi di Teluk Panerusan, Desa Sumberkima.
Sebagai  data  pembanding  untuk  mengetahui tingkat prevalensi sepanjang tahun 2017 di Bali Utara, juga  digunakan  data  hasil  uji  dari  laboratorium  uji bioteknologi  yang  terakreditasi  yang  dibawa  oleh pemilik untuk dianalisis dan berasal dari hatcheri dan pembudidaya  KJA  yang  jumlah  dan  waktunya  tidak tertentu.

## Analisis  VNN
Teknik  deteksi  VNN  dilakukan  dengan  metode IQ Plus . Langkah kerja deteksi virus dengan IQ Plus meliputi beberapa tahapan antara lain ekstraksi, amplifikasi dan dokumentasi.

## Ekstraksi
Sampel jaringan dari 10 ekor ikan yang digunakan adalah mata atau otak. Bahan yang digunakan untuk ekstraksi sudah tersedia dalam kit yang terdiri atas: solution-1;  solution-2;  larutan  PB3,  dan  solution-3 sebagai elution buffer.

## Amplifikasi
Reaksi amplifikasi menggunakan bahan yang telah tersedia  di  dalam  kit  IQ Plus VNN  tersebut.  Setelah menyiapkan larutan untuk amplifikasi dan memasukkan genom sampel, kemudian proses amplifikasi dilakukan dalam mesin POCKIT PCR dengan panjang gelombang 520 nm. Proses amplifikasi berlangsung selama satu jam dan hasil deteksi langsung terlihat di layar mesin tersebut  yang  selanjutnya  di  dokumentasikan menggunakan kamera digital.

## Analisis  Iridovirus
Tahapan  analisis  iridovirus  meliputi  ekstraksi; amplifikasi, elektroforesis,  dan dokumentasi.

## Ekstraksi
Sampel jaringan dari 10 ekor ikan yang digunakan adalah:  organ  limpa/ginjal.  Ekstraksi  DNA menggunakan larutan lysis buffer (produk dari IQ-2000) dan tahapan ekstraksi sesuai dengan manual dari kit tersebut.

## Amplifikasi
Amplifikasi  menggunakan  kit  (Promega)  dengan primer  spesifik  untuk  iridovirus.  Pada  saat  proses amplifikasi, juga digunakan kontrol positif dari hasil kultur  sel  dan  kontrol  negatif    berupa  nuclease  free water.  Program  amplifikasi  sesuai  dengan  hasil penelitian Kurita et al. (1998).

## Elektroforesis
Elektroforesis menggunakan agarose 1,5% dalam larutan  1x  TAE  buffer  dan  proses  elektroforesis berlangsung selama 25 menit.

## Dokumentasi
Setelah  selesai  proses  elektroforesis,  untuk mengetahui positif atau negatif sampel yang dianalisis, gel elektroforesis diletakkan di atas alat UV transillu- minator.  Selanjutnya  hasil  yang  diperoleh didokumentasikan  menggunakan  Geldoc  camera. Sampel yang terinfeksi iridovirus menghasilkan pita pada ukuran 570 bp dan sejajar dengan pita DNA dari positif  kontrol.

## Parameter yang Diamati
Parameter yang diamati adalah prevalensi VNN dan Iridovirus dari setiap hatcheri dan KJA. Sebagai data penunjang  yaitu  pengukuran  parameter  kualitas  air berupa  suhu,  salinitas,  amoniak,  dan  nitrit  yang dilakukan pada saat pengambilan sampel di hatcheri dan KJA. Perhitungan prevalensi menggunakan rumus sebagai berikut:
Untuk  menganalisis  tingkat  prevalensi  serangan virus VNN dan iridovirus yang menginfeksi ikan laut di hatcheri dan pembudidaya di Bali Utara, semua data yang  diperoleh  dihimpun  dalam  bentuk  tabulasi selanjutnya dianalisis secara deskriptif.

## HASIL DAN BAHASAN
Masalah utama dalam budidaya ikan hingga saat ini  salah  satunya  adalah  tentang  penyakit.  Penyakit ini  menyebabkan  kerugian  ekonomis  karena  dapat menyebabkan  pertumbuhan  terhambat,  periode pemeliharaan  lebih  lama,  tingginya  konversi  pakan, padat tebar yang tinggi, dan kematian ikan, sehingga dapat  mengakibatkan  menurunnya  atau  hilangnya produksi (Abdullah et al., 2017).
Hasil deteksi VNN dan iridovirus pada sampel ikan yang dianalisis, jika terinfeksi VNN akan terlihat tanda positif  (+)  di  layar  mesin  IQ Plus (Gambar  1),  dan kategori sampel yang terinfeksi iridovirus terlihat satu pita  dari  hasil  elektroforesis  dengan  target  570  bp (Gambar 2).
Sampel  hewan  uji  yang  diperoleh  dari  beberapa hatcheri di pantai Bali Utara hampir 90% adalah kerapu hibrida  (cantik  &  cantang)  dan  10%-nya  adalah  ikan kakap  putih.  Hasil  deteksi  VNN  dan  iridovirus  dari sampel uji hatcheri terlihat pada Gambar 3.
100% x diperiksa yang sampel ikan Total feksi yang terin sampel Ikan Prevalensi 
Gambar 1. Hasil  deteksi VNN  dengan  metode IQ Plus terhadap  sampel  uji  dari hatcheri  dan  pembudidaya  KJA  (1, 3= sampel uji yang terinfeksi VNN; 2, 4, 5, dan 6= sampel uji yang tidak terinfeksi VNN;  7= kontrol  positif VNN; dan 8= kontrol negatif).
Figure 1. Detection  result  of  VNN  using  IQ Plus method for fish sampled from hatcher- ies  and floating  net  cages  (1, 3  were infected with VNN; 2, 4, 5, and 6 were not infected with VNN; 7 was positive control; and 8 was negative control).
Ikan  terinfeksi  VNN  terjadi  pada  bulan  Februari dan Oktober-November, sedangkan untuk parameter iridovirus  semua  sampel  uji  tidak  terinfeksi  virus tersebut. Pada bulan Agustus tidak dapat dilakukan sampling  di  hatcheri  akibat  ikan  yang  dipelihara sebagian besar mengalami kematian akibat terinfeksi VNN.
Sampel uji dari hasil sampling di KJA hampir 95% ikan  yang  dibudidayakan  adalah  kerapu  cantik  dan cantang dan sekitar 5% memelihara ikan kakap putih. Hasil  deteksi  VNN  dan  iridovirus  dari  sampel  KJA terlihat pada Gambar 4.
Ikan yang terinfeksi VNN di KJA terjadi pada bulan Februari,  Agustus,  dan  Oktober,  sedangkan  yang terinfeksi iridovirus terjadi pada saat sampling di bulan Februari. Apabila dilihat dari pola infeksi VNN baik di hatcheri  maupun  KJA  hampir  sama,  hal  ini  diduga karena pada bulan tersebut terjadi fluktuasi suhu air yang  tinggi,  dan  ini  terlihat  dari  salah  satu  hasil pemantauan suhu menggunakan alat logger pada bulan Februari  di  KJA  (Gambar 5).  Berdasarkan  Gambar  5, terlihat bahwa fluktuasi suhu di bulan Februari sangat tinggi yaitu antara 27,7°C sampai 32,45°C. Hal ini yang menyebabkan  ikan  mengalami  stres,  nafsu  makan berkurang, tingkat imunitas menurun, dan apabila ada serangan penyakit akan menyebabkan kematian. Hal ini  sesuai  dengan  pendapat  Nakajima  et  al.  (1997), menyatakan bahwa lingkungan yang terkontaminasi dan  kualitas  air  yang  buruk  memicu  peningkatan infeksi iridovirus. Hal ini utamanya disebabkan oleh kontak langsung antara insang dan saluran pencernaan ikan dengan lingkungan. Penyebaran virus antara ikan yang berada disistem produksi yang sama akan terjadi dengan sangat cepat bila ikan tidak memiliki sistem imun yang baik dan berada dalam kondisi lemah (Manin & Ransangan, 2011). Selanjutnya menurut Cao et al. (2007),  pemicu  terjadinya  serangan  penyakit  di antaranya  adalah  ketidakseimbangan  antara  daya dukung lingkungan dengan kuantitas produksi dalam satu areal budidaya (infeksi tidak seimbang antara ikan, patogen, dan lingkungannya).
Dari hasil penelitian Lio-Po & De la Pena (2004), menunjukkan  bahwa  suhu  mempunyai  peranan penting dalam proses replikasi dan peningkatan sifat patogenitas  dari  Piscine  nodavirus.  Sebagai  contoh: RGNNV yang diisolasi dari ikan kerapu menghasilkan efek  cytopathic  pada  sel  GF-1  pada  suhu  24°C-32°C tetapi tidak pada suhu 20°C atau 37°C. Pada larva yang
M      1       2        3       4

## 570 bp
Gambar 2. Hasil deteksi iridovirus menggunakan metode  PCR  konvensional  (M= marker 100 bp; 1-2= sampel uji yang terinfeksi  iridovirus;  3=  kontrol positif  iridovirus;  4=  kontrol negatif).
Figure 2. Detection result of Iridovirus using the conventional  PCR  method  (M:  marker 100 bp; 1-2 were infected by Iridovirus; 3: positive control; and 4: negative con- trol).
Gambar 3. Prevalensi VNN dan Iridovirus dari hasil sampling di hatcheri. Figure 3. VNN and iridovirus prevalence values sampled from hatcheries. 33.3 100.0 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 120.0 VNN Irido VNN Irido
VNN Irido Februari February Mei & Juni May & June Oktober & November October & November Pr ev al en si Pr ev al en ce (% ) Sampling (bulan/months) Februari February Mei & Juni
May & June Oktober & November October & November
diuji tantang dengan RGNNV pada suhu 28°C, kematian mencapai 100% pada 50-80 jam setelah inokulasi. Pada uji  coba  yang  dilakukan  pada  benih  ikan  kerapu  E. akaara, RGNNV menyebabkan kematian hingga 100% pada suhu 24°C-28°C, namun pada suhu 16°C dan 20°C, mortalitas berkurang hingga 57%-61% dan munculnya perilaku  berenang  yang  tidak  normal  tetapi  tidak menyebabkan kematian pada ikan tersebut.
Pada  saat  sampling  di  hatcheri  dan  KJA  juga dilakukan  pengamatan  kualitas  air  (Tabel  1).  Secara umum,  hasil  pengamatan  kualitas  air  untuk  sampel yang  diperoleh  pada  saat  sampling  dalam  kriteria kesesuaian untuk pembenihan dan budidaya ikan laut, namun di bulan Agustus dan Oktober pada beberapa KJA  untuk  salinitas  cenderung  tinggi  (35-36  ppt)
dibandingkan dengan bulan Februari dan Mei. Apabila terjadi fluktuasi salinitas yang cukup tinggi juga akan mengganggu  semua  fisiologis  ikan  dan  bahkan menyebabkan ikan menghabiskan energi hanya untuk menormalkan  fungsi  tubuh  dan  bukan  untuk pertumbuhan  (Landau,  1995).  Hal  ini  yang menyebabkan pada bulan Agustus dan Oktober tingkat prevalensi VNN tinggi. Menurut Amal et al. (2015) dan Ismail et al. (2016), menyatakan bahwa kualitas air yang tidak optimal akan mendukung pertumbuhan patogen pada ikan yang dibudidayakan dan juga lingkungannya. Selanjutnya Snieszko (1978) juga menyatakan bahwa perkembangan  penyakit  dalam  sistem  akuakultur adalah proses yang kompleks dan sangat tergantung pada interaksi antara inang, lingkungan, dan patogen.
Gambar 4. Prevalensi VNN dan Iridovirus dari hasil sampling di KJA. Figure 4. VNN and iridovirus prevalence values sampled from floating net cages.
83.35 50.0 50.0 75.0 0.0 20.0 40.0 60.0 80.0 100.0 VNN Irido VNN Irido VNN Irido VNN Irido
Februari
February
Mei May Agustus August Oktober October Pr ev al en si
Pr ev al en ce (% )
Sampling (bulan/months)
Gambar 5. Pengamatan suhu air laut pada bulan Februari di KJA menggunakan alat logger. Figure 5. Sea water temperature variation during the month of February 2017 in floating net cages using a data logger.
27 28 29 30 31 32 33 1 /2 /2 0 1 7 1 /2 /2 0 1 7 2 /2 /2 0 1 7 3 /2 /2 0 1 7 4 /2 /2 0 1 7 5 /2 /2 0 1 7 6 /2 /2 0 1 7 6 /2 /2 0 1 7 7 /2 /2 0 1 7 8 /2 /2 0 1 7 9 /2 /2 0 1 7 1 0 /2 /2 0 1 7 1 1 /2 /2 0 1 7 1 2 /2 /2 0 1 7 1 2 /2 /2 0 1 7 1 3 /2 /2 0 1 7 1 4 /2 /2 0 1 7 1 5 /2 /2 0 1 7 1 6 /2 /2 0 1 7 1 7 /2 /2 0 1 7 1 8 /2 /2 0 1 7 1 8 /2 /2 0 1 7 1 9 /2 /2 0 1 7 2 0 /2 /2 0 1 7 2 1 /2 /2 0 1 7 2 2 /2 /2 0 1 7 2 3 /2 /2 0 1 7 2 4 /2 /2 0 1 7 2 4 /2 /2 0 1 7 2 5 /2 /2 0 1 7 2 6 /2 /2 0 1 7 2 7 /2 /2 0 1 7 2 8 /2 /2 0 1 7 Su h u (T em pe ra tu re ) ( ° C ) Waktu (hari) / Time (days) Februari Mei
May February
Agustus August
Oktober October
Data  tingkat  prevalensi  VNN  dan  iridovirus  dari hasil  sampling  di  hatcheri  dan  KJA  tersebut,  jika dibandingkan dengan kompilasi data hasil analisis dari pelanggan hatcheri di laboratorium bioteknologi yang terakreditasi, ternyata menunjukkan pola yang sama untuk prevalensi VNN dan iridovirus (Gambar 6). Pola ikan  yang  terinfeksi  VNN  di  hatcheri  di  sepanjang pantai  Bali  Utara  setiap  bulan  ada  yang  terinfeksi, namun  nilai  prevalensi  yang  tinggi  terjadi  di  bulan Agustus  dan  September  yaitu  27,3%  dan  33,3%. Sedangkan  infeksi  iridovirus  di  hatcheri  puncaknya terjadi  pada  bulan  Agustus  dengan  nilai  prevalensi sebesar 18,6% (Gambar 6).
Apabila dilihat dari Gambar 6, ternyata pada bulan September,  ikan  yang  paling  banyak  terinfeksi  VNN adalah kerapu cantik dan kerapu cantang. Sedangkan untuk iridovirus, nilai prevalensi yang tertinggi terjadi di bulan Agustus sebesar 18,6% dengan jenis ikan yang paling banyak terinfeksi adalah kerapu cantang. Nilai prevalensi  yang  tinggi  ini  juga  disebabkan  kondisi perairan di pantai Bali utara yang kualitasnya sudah mulai  menurun.  Salah  satu  pemicu  menurunnya kualitas perairan, misalnya akibat tingginya kandungan bahan organik akibat buangan limbah dari daratan.
Hasil  diagnosis  klinis  di  lapangan  menunjukkan bahwa  ikan  yang  diduga  terinfeksi  oleh  VNN
Tabel 1. Hasil analisis kualitas air di hatcheri dan keramba jaring apung Table 1. Sea water quality measured at hatchery and floating net cages
Suhu Temperature  (°C) Salinitas Salinity  (ppt) Amoniak Ammonia  (mg/L) Nitrit Nitrite  (mg/L) Februari (February ) 19.2 ± 0.4 33.0 ± 1.0 0.36 ± 0.04 0.10 ± 0.06 Mei (May ) 23.0 ± 1.2 34.1 ± 0.5 0.01 ± 0.001 0.02 ± 0.0 Oktober (October ) 27.2 ± 0.2 34.0 ± 0.0 0.21 ± 0.12 < 0.01 ± 0.0 Mei (May ) 29.1 ± 0.1 33.0 ± 1.0 0.02 ± 0.0 < 0.003 ± 0.0 Agustus(August ) 27.9 ± 0.2 35.4 ± 0.5 0.02 ± 0.004 < 0.003 ± 0.0 Oktober (October ) 28.5 ± 0.3 35.0 ± 0.0 0.03 ± 0.005 < 0.003 ± 0.0
Parameter (Parameters ) Keramba jaring apung (Floating net cage ) Bulan Months Hatcheri (Hatchery )
Gambar 6. Grafik prevalensi VNN dan iridovirus setiap bulan di hatcheri di lokasi Bali Utara (data hasil uji dari laboratorium uji bioteknologi yang terakreditasi).
Figure 6. Monthly prevalence values of VNN and iridovirus infections in the hatcheries located in North Bali (Data  source were  from fish samples tested in the laboratory).
0 5 10 15 20 25 30 35 40 Januari January Maret
March Mei May Juli July September September November
November
Pr ev al en si (P re va le nc e) ( % ) Bulan (Months) VNN Iridovirus
Jan.     Febr.    Maret    April    Mei     Juni       Juli     Agust.    Sept.    Okt.     Nov.     Des. Jan.   Febr.   March   April   May  June     July   August. Sept.   Oct.    Nov.    Dec.
memperlihatkan gejala pergerakan renang yang tidak beraturan dan bahkan cenderung terbalik, nafsu makan selama  masa  pemeliharaan  kurang  dan  memiliki kerusakan pada organ mata. Kondisi ini sesuai dengan hasil  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Lio-Po  &  de  la Pena (2004) yang menyatakan bahwa umumnya ikan yang  terinfeksi  oleh  VNN  akan  menyebabkan  ikan menunjukkan perilaku berenang yang tidak beraturan, warna  tubuh  terlihat  lebih  gelap,  dan  nafsu  makan berkurang.
Berdasarkan  data  hasil  analisis  parameter  VNN mulai  dari  bulan  Januari  sampai  Desember,  terlihat bahwa  setiap  bulan  di  hatcheri  ada  yang  terinfeksi VNN.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  penyebaran  VNN dapat terjadi di antara hatcheri dengan mudah melalui peralatan yang terkontaminasi (Munday & Nakai, 1997); air yang terkontaminasi (Ransangan & Manin, 2012); dan melalui kontak fisik dengan ikan pembawa penyakit (Manin & Ransangan, 2011). Selain itu, suhu air juga berpengaruh terhadap kelangsungan hidup virus VNN. Infeksi  virus  VNN  di  suhu  perairan  27°C-31°C dilaporkan mampu menyebabkan kematian pada ikan kerapu  bebek  (Cromileptes  altivelis),  sedangkan peningkatan  suhu  di  35°C  dapat  menghambat perkembangbiakan virus VNN yang ditunjukkan dengan penurunan  kematian  ikan  (Yuasa  et  al.,  2007). Selanjutnya menurut Hata et al. (2007), suhu optimum untuk  perkembangbiakan  virus  VNN  isolat  RGNNV (redspotted grouper nervous necrosis virus) berkisar antara 25°C-30°C. Lebih lanjut dilaporkan bahwa patogenisitas dari virus VNN akan menurun pada suhu > 37°C. Hal tersebut, diduga bahwa keberadaan ikan yang bersifat carier VNN, suhu perairan laut dikisaran 25°C-32°C dan tidak  diaplikasikannya  sistem  biosekuriti  yang  baik pada hatcheri yang mengakibatkan tingkat prevalensi di Bali Utara cukup tinggi.
Demikian juga hasil diagnosa di pembudidaya (KJA) pada bulan Februari memperlihatkan gejala klinis yang memperkuat  dugaan  bahwa  ikan  terinfeksi  oleh iridovirus  seperti  gerakan  renang  yang  lemah  dan bahkan  seperti  diam  di  dasar  jaring  pemeliharaan, nafsu makan menurun, mengalami anemia yang berat, bercak  merah  pada  insang,  dan  terdapat pembengkakan pada beberapa organ seperti limpa dan ginjal. Hasil penelitian yang dilakukan oleh Johnny & Roza (2009), juga menyatakan bahwa umumnya ikan yang  terinfeksi  oleh  iridovirus  akan  menunjukkan gejala  klinis berenang  lemah atau  diam  di dasar  air sehingga  sering  disebut  sebagai  penyakit  tidur. Menurut Lio-Po & De la Pena (2004), lingkungan yang terkontaminasi dan kualitas air yang buruk memicu peningkatan infeksi VNN dan iridovirus. Selanjutnya OIE  (2006),  menyatakan  bahwa  wabah  iridovirus
umumnya terjadi pada musim panas atau ketika suhu lingkungan berada di atas suhu 25°C.
Infeksi  VNN  dan  iridovirus  pada  hatcheri  dan budidaya  ikan  laut  di  Bali  Utara  sering  terjadi  dan situasi  ini  akan  sangat  berdampak  terhadap peningkatan dan keberlanjutan produksi budidaya ikan laut. Oleh karena itu, pemilik hatcheri dan budidaya ikan harus menerapkan sistem biosekuriti yang baik.

## KESIMPULAN DAN SARAN
Infeksi VNN pada hatcheri dan budidaya ikan laut di Bali Utara sering terjadi dengan tingkat prevalensi yang  tertinggi  di  KJA  terjadi  pada  bulan  Oktober sebesar 83,35% dan infeksi iridovirus tertinggi terjadi pada bulan Februari sebesar 50%.
Tingkat  prevalensi  VNN  tertinggi  pada  hatcheri terjadi  pada  bulan  September  mencapai  33,33% sedangkan infeksi iridovirus tertinggi terjadi di bulan Agustus mencapai 18,6%.
Dalam  mempertahankan  laju  produksi  dan membuat produk hasil budidaya semakin kompetitif, program  biosekuriti  harus  diterapkan  di  seluruh fasilitas,  sarana,  prasarana,  serta  berbagai  faktor pendukung lainnya.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penelitian ini dibiayai dari APBN dalam DIPA Balai Besar Riset Budidaya Laut dan Penyuluhan Perikanan Gondol  tahun  2017.  Pelaksanaan  penelitian  dapat berlangsung dengan baik atas bantuan teknisi litkayasa Ni  Luh  Tati  Aryani,  Deny  Puji  Utami,  dan  Dadang Rusmana. Dan tentu bantuan berupa masukan dan sa- ran  atas tulisan  oleh  Prof.  Dr. Ketut  Sugama.  Untuk itu, penulis mengucapkan terima kasih.

## DAFTAR  ACUAN
Abdullah, A., Ramli, R.,  Ridzuan, M.S.M., Murni, M.,
Hashim, S., Sudirwan, F., Abdullah, S.Z., Mansor, M.N., Amira, S., Saad, M.Z., & Amal, M.N.A. (2017). The presence of vibrionaceae, betanodavirus and iridovirus  in  marine  cage  cultured  fish:  Role  of fish size, water physicochemical parameters and relationships  among  the  pathogens.  Aquaculture Reports, 7, 57-65.
Amal,  M.N.A.,  Zamri-Saad,  M.,  Siti-Zahrah,  A.,  & Zulkafli, A.R. (2015). Water quality influences the presence  of  Streptococcus  agalactiae  in  cage  cul- tured  red  hybrid  tilapia,  Oreochromis  niloticus  x Oreochromis mossambicus. Aquac. Res., 46, 313-323.
Asrazitah, A.R., Julian, R., & Ahemad, S. (2014). First report of Megalocytivirus (Iridoviridae) in grouper
culture in Sabah Malaysia. Inter. J. Curr. Microbiol. Appl. Sci., 3, 896-909.
Cao, L., Wang, W., Yang, Y., Yang, C., Yuan, Z., Xiong, S.,  &  Diana,  J.  (2007).  Environmental  impact  of aquaculture and countermeasures to aquaculture pollution in China. Environmental Science in Pollu- tion Res., 14(7), 452-46.
Cole,  D.W.,  Cole,  R.,  Gaydos,  S.J.,  Gray,  J.,  Hyland, G.,  Jacques,  M.L.,  Powell-Dunford,  N.,  Sawhney, C., & Au, W.W. (2009) Aquaculture: Environmen- tal, toxicological, and health issues. International Journal of Hygiene and Environmental Health, 212(4), 369-377.
Gomez,  D.K.  &  Baeck,  G.W.  (2008)  Genetic  analysis of  betanodaviruses  in  subclinically  infected aquarium fish and invertebrates. Springer Science, 56, 499-504.
Hata,  N.,  Okinaka,  Y.,  Sakamoto,  T.,  Iwamoto,  T.,  & Nakai, T. (2007). Upper temperature limits for the multiplication  of  betanodaviruses.  Fish  Pathol., 42(4), 225-228.
Ismail, N.I.A., Amal, M.N.A., Shohaimi, S., Zamri-Saad, M., & Siti-Zahrah, A. (2016). Associations of wa- ter quality and bacteria presence in cage cultured red  hybrid  tilapia,  Oreochromis  niloticus  ×  O. mossambicus. Aquac. Rep., 4, 57-65.
Jhonny, F. & Roza, D. (2009). Kasus infeksi virus irido pada benih ikan kerapu pasir Epinephelus corallicola di hatcheri. Jurnal Perikanan, 11, 8-12.
Kurita, J., Nakajima, K., Hirono, I., & Aoki, T. (1998). Polymerase chain reaction (PCR) amplification of DNA  of  red  sea  bream  iridovirus  (RSIV).  Fish Pathol., 33, 17-23.
Landau, M. (1995). Introduction to aquaculture. New York: John Willey and Sons, Inc., 440 pp.
Lio-Po, G.D. & de la Pena, L.D. (2004). Viral diseases.
Diseases of Cultured Grouper. ESAFDEC Govern- ment of Japan Trust Fund. Lo, Benny K. Antibody Engineering.  Method  and  Protocols.  Humana Press, 562 pp.
Mahardika,  K.,  Koesharyani,  I., Prijono,  A.,  &  Yuasa,
K.  (2003).  Infeksi  iridovirus  pada  induk  kerapu
lumpur  (Epinephelus  coioides).  Jurnal  Penelitian Perikanan Indonesia, 9(1), 49-54.
Manin, B.O. & Ransangan, J. (2011). Experimental evi- dence of horizontal transmission of Betanodavirus in hatcheri produced Asian seabass, Lates calcarifer and  brown  marbled  grouper,  Epinephelus fuscogutattus fingerling, Aquaculture, 321, 157-165.
Munday, B.L. & Nakai, T. (1997). Special topic review: Nodaviruses  as pathogens  in  larval and  juvenile marine  finfish.  World  Journal  of  Microbiology  and Biotechnology, 13, 375-381.
Nakajima, K., Maeno, Y., Kurita, J., & Inui, Y. (1997). Vaccination  against  red  seabream  iridoviral  dis- ease in red seabream. Fish pathology, 18, 99-101. OIE. (2006). Manual of diagnostic test for aquatic ani- mals.  Red  Sea  Bream  Iridoviral  Disease.  Capter 2.1.15.
Ransangan, J. & Manin, B.O. (2012). Genome analysis of Betanodavirus from cultured marine fish spe- cies in Malaysia. Veterinary Microbiology, 156, 16- 44.
Snieszko,  S.F.  (1978).  Control  of  fish  diseases.  U.S. Nat. Fish. Ser. Mar. Fish. Rev., 40, 65-68.
Won, K.M., Cho, M.Y., Park, M.A., Jee, B.Y., Myeong, J.I.,  &  Kim,  J.W.  (2013).  First  report  of Megalocytivirus infection in farmed starry floun- der, Platichthys stellatus, in Korea. Fish Aquat. Sci., 16(2), 93-99.
Yanong,  R.E.P.  (2016).  Viral  ner vous  necrosis (Betanodavirus) infections in fish. Department of Fisheries and Aquatic Sciences, UF/IFAS Extension. University of Florida, 6 pp.
Yuasa,  K.,  Koesharyani,  I.,  Roza,  D.,  Johnny,  F.,  & Zafran. (2001). Manual for PCR procedure; rapid diagnosis on viral nervous necrosis (VNN) in grou- per. Lolitkanta – JICA Booklet No 13: 35 pp.
Yuasa, K., Koesharyani, I., & Mahardika, K. (2007) Ef- fect of high water temperature on Betanodavirus infection  of  fingerling  humpback  grouper Cromileptes altivelis. Fish Pathol., 42(4), 219-221.