## Kajian potensi ekstrak daun pepaya (carica papaya l) terhadap immunitas non spesifik Udang vaname (litopenaeus vannamei)
The study of the potential papaya leaf extract (carica papaya l) agninst non specific immunity of vannamei shirmp (vannamei dhirmp)
Mona monica 1 , Wardiyanto 2 , Oktora susanti 2 Mahasiswa Budidaya Perairan Unila Email : monamonica321@gmail.com

## Abstrak
Dalam berbudidaya udang vaname terdapat kendala yang harus dihadapi, salah satunya adalah serangan penyakit. Upaya pencegahan dan penanggulangan dapat berupa pemberian imunostimulan menggunakan ekstrak daun pepaya yang diaplikasikan dengan cara perendaman. Tujuan penelitian ini adalah mempelajari pengaruh ekstrak daun pepaya terhadap imunitas non spesifik udang vaname ( Litopenaeus vannamei ).  Penelitian ini dilaksanakan pada bulan juli-agustus dengan menggunakan empat perlakuan yang diterapkan yaitu perlakuan A (0 mg/l ekstrak daun pepaya), B (10 mg/l ekstrak daun pepaya), C (20 mg/l ekstrak daun pepaya), dan D (30 mg/l ekstrak daun pepaya). Parameter yang diuji yaitu total hemocyte count, aktivitas fagositosis, indeks fagositosis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak daun pepaya sebagai imunostimulan dapat meningkatkan respon imun udang vaname. Konsentrasi terbaik yaitu 30 mg/l.
Kata kunci : Udang vaname, Ekstrak daun pepaya, Perendaman, Imunostimulan, Respon imun non spesifik.

## Abstrack
In the activity of cultivating shrimp there are some obstacles that must be faced such as diseases attack. One of the efforts that we can do as the prevention and solve the problem in shrimp that us through the giving of immunostimulant using papaya leaf extract which applicated with dipping method. This research aimed to study the effect of papaya leaf extract against the non specific immunity of vannamei shrimp ( Litopenaeus vannamei ). This research was carried out in July-August which applied with 4 treatments, treatment A (0 mg/l papaya leaf extract), B ( 10 mg/l papaya leaf extract), C (20 mg/l papaya leaf extract), and D (30 mg/l papaya leaf extract). The parameters that used in this research were total hemocyte count, phagocytosis activity, and phagocytosis index. The result showed that papaya leaf extract as immunostimulant can improve the immune response of vannamei shrimp. The treatment  with 30 mg/l is the best consentration.
Keyword : vannamei shirp, papaya leaf extract, etanol 96%, immunostimulant, non specific immune response

## Pendahuluan
Latar belakang U dang vaname merupakan komoditas ekspor unggulan dan memiliki produktifitas tinggi di Indonesia. Keberhasilan produksi sangat didukung oleh keberhasilan dalam budidaya. Dalam berbudidaya udang banyak ditemukan kendala yang harus dihadapi yaitu adanya serangan penyakit. Salah satu upaya dalam penanggulangan dan pencegahan penyakit pada udang yaitu melalui peningkatan sistem pertahanan tubuh udang melalui pemberian imunostimulan, vitamin dan hormon (Johny et al ., 2005). Sistem imun udang tergantung pada proses pertahanan non spesifik sebagai pertahanan terhadap infeksi (Lee et al ., 2004).
Imunostimulasi merupakan salah satu cara yang sering digunakan untuk meningkatkan sistem ketahanan tubuh udang, dengan pemberian komponen mikroba seperti β-glukan dan lipopolisakarida (LPS) atau sel bakteri yang telah dimatikan (Smith et al ., 2003).
Tanaman pepaya merupakan tanaman herbal yang dapat dimanfaatkan sebagai
imunostimulan. Didalam daun pepaya terkandung enzim papain yang memiliki aktivitas preteolitik dan antimikroba, sedangkan alkaloid carpain berfungsi sebagai antibakteri (Ardina, 2007).

## Tujuan Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah mempelajari pengaruh ekstrak daun pepaya terhadap imunitas non spesifik udang vaname ( Litopenaeus vannamei ).

## Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah sebagai informasi tentang aplikasi  ekstrak daun pepaya sebagai imunostimulan pada udang vaname.

## Metode penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Juli–Agustus 2017, bertempatkan di Laboratorium Perikanan, Universitas Lampung. Pembuatan ekstrak daun pepaya dilakukan dengan cara, daun  pepaya dijemur dalam ruangan tanpa terkena sinar matahari secara langsung. Diiblender sampai halus, dimaserasi dengan perbandingan 50 gram per 500 ml etanol 96%, dimaserasi selama 5 jam, lalu diuapkan menggunakan rotary evaporator .
Penelitian
ini mengaplikasikan
imunostimulan berupa ekstrak daun pepaya ( Carica papaya L ) dengan cara perendaman pada udang vaname ukuran 10 gram sebanyak 10 ekor dalam 10 liter air setiap perlakuan. Perlakuan A (0 mg/l ekstrak daun pepaya), B (10 mg/l ekstrak daun pepaya), C (20 mg/l ekstrak daun pepaya), dan D (30 mg/l ekstrak daun pepaya). Pemeliharaan selama 12 hari dengan frekuensi pemberian pakan 4 kali dalam satu hari pada pukul 07.00; 12.00; 17.00; dan 22.00 WIB, dengan sampling pada hari ke 0, 4, 8, dan 12.
Metode pengambilan hemolymph dan sampling mengacu pada metode (Permatasari, D, 2017)
Pengamatan respon imun dilakukan dengan menghitung total  hemocyte count (THC) mengacu pada Blaxhall dan
Daishley, (1973) dalam (Ridlo A dan Pramesti R, 2009), dengan rumus THC (sel/ml) = jumlah sel terhitung x pengenceran x 10 4. Parameter aktivitas fagositosis dan indeks fagositosis berdasarkan Anderson dan Swicki (1993), sampel hemolimph segar (20 µl ) disuspensi dengan Staphylococcus aureus inaktif dan dibentuk dalam preparat ulas. Preparat dicat menggunakan safranin 10%. Rumus fagositosis AF = (a/b) x 100% sedangkan indeks fagositosis IF = c/a (dalam 100 sel), dengan keterangan a = jumlah sel fagosit, b = jumlah keseluruhan sel yang diamati, c = jumlah bakteri yang difagosit. Parameter kualitas air yaitu suhu, DO, pH, dan salinitas diamati lalu dianalisis secara deskriptif.
Hasil dan pembahasan Total Haemocyte Count

## Gambar 1. Hasil pengamatan THC
Hasil pengamatan THC yang diperoleh pada H0 dapat dikatakan seragam, kemudian mengalami peningkatan di H4 dan H12, namun  mengalami penurunan pada H8. Pada H4 nilai THC tertinggi pada perlakuan C yaitu 14,3 x 10 7 sel/ml, dan pada  H12 nilai THC tertinggi yaitu perlakuan D sebesar 14,9  x 10 7 sel/ml (Gambar 1).
Berdasarkan perhitungan yang telah dilakukan maka diketahui nilai THC dapat
sangat bervariasi.  Jumlah THC dapat sangat bervariasi berdasarkan respon terhadap infeksi (Damayanti, 2011). Terjadinya peningkatan THC adalah karena molekul lectin yang merupakan bagian pertahanan humoral udang berfungsi untuk melakukan pengenalan terhadap benda asing yang masuk kedalam tubuh udang (Roddriguez dan Le Moullac, 2000).
Aktivitas Fagositosi
Gambar 3. Hasil Pengamatan IF
Hasil AF pada H0 dapat dikatakan seragam, kemudian mengalami peningkatan di H4 sampai H12 di masing- masing  perlakuan. Dapat dilihat pada gambar  2, pada H4 nilai aktifitas fagositosis tertinggi yaitu perlakuan D sebesar 85% dan pada H12 nilai tertinggi yaitu sebesar 91,6%. Yin et al . (2006) menyatakan bahwa cara kerja imunostimulan dalam meningkatkan sistem imun adalah dengan cara meningkatkan aktivitas sel-sel fagosit. Hal ini menunjukkan bahwa meningkatnya aktifitas fagositosis akibat pemberian ekstrak daun pepaya dengan cara direndam
mampu meningkatkan sistem imun pada udang vaname.

## Indeks Fagositos
Hasil pengamatan indeks fagositosis menunjukan  peningkatan di H4 dan H12, dan mengalamai penurunan di H8. Nilai indeks fagositosis dari awal sampai akhir pengamatan berkisar dari 1,3% – 1,6% hal ini menunjukkan  bahwa sel yang difagosit hampir sama dengan jumlah sel yang memfagositnya. Hal ini menandakan bahwa jumlah hemosit yang lebih masih diperlukan dalam proses fagositosis. Berger dan Jarcova (2012), menyatakan bahwa kemampuan sel fagosit untuk menelan partikel bergantung pada karakter

## Gambar 2. Hasil pengamatan AF
partikel yang digunakan. Indeks fagositosis teramati menunjukkan  bahwa nilai indeks fagositosis pada perlakuan D memiliki nilai yang lebih stabil.
Pengamatan parameter air yang dilakukan pada awal, tengah, dan akhir menunjukkan bahwa parameter kualitas air masih dalam kisaran normal sesuai dengan SNI-01- 7246-2006. Dengan demikian, parameter kualitas air selama pemeliharaan dalam kondisi yang baik sehingga jika terdapat pengaruh terhadap respon imun udang vaname pada perlakuan bukan diakibatkan oleh kualitas air pemeliharaan.

## Penutup

## Kesimpulan
Pemberian ekstrak daun pepaya sebagai imunostimulan dapat meningkatkan total hemocyte count dan aktifitas fagositosis, sedangkan untuk indeks fagositosis pemberian ekstrak daun pepaya menghasilkan nilai stabil. Dengan konsentrasi 30 mg/l.
Daftar pustaka
Anderson, D.P. 1992. Immunostimulant, adjuvant and vaccine carrier in fish: Applications to aquaculture. Annual Review of Fish Diseases . 21:281-307.
Ardina Y. 2007. Development of antiacne gel formulation and minimum inhibitory concentration determination from Carica Papaya  leaves extract   (Carica papaya A Linn.). Bogor. IPB.
Berger, J., & Jarcova, M. 2012. Phagocytosis of insect haemocytes as a new alternative
model. Journal of Applied Biomedicine. 10:35-40.
Damayanti. 2011. Pemberian sInbiotik dengan Dosis Berbeda Pada Pakan Udang Vaname Untuk Pencegahan Infeksi IMNV (Infevtious Myonecrosis Virus).
Bogor. Institut Pertanian Bogor. Johny E., Roza D.K., Mahardika, Zafran,
& Priyono. 2005. Penggunaan Imunostimulan untuk Meningkatkan Kekebalan Nonspesifik Benih Ikan Kerapu Lumpur, Epinephehelus coiodes terhadap Infeksi imunostimulan. Jurnal Penelitian Perikanan Indonesia . 11 (5):75-78.
Lee, M. H. & S. Y Shiau. 2004. Vitamin E Requirements of Juvenile Grass Shrimp, P. monodon and Effects on Nonspecific Immune Responses, Fish & Shellfish Immunology . 16:475–485. Permatasari, D. 2017. Penerapan Bacillus sp. D2.2 dalam Sinbiotik untuk Meningkatkan Respon Imun Seluler Udang Vaname (Litopenaeus vannamei) . (skripsi). Universitas Lampung.
Ridho, A., & Pramesti, R. 2009. Aplikasi ekstrak rumput laut  sebagai agen imunostimulan sistem pertahanan non spesifik pada udang (Litopenaeus vannamei). Ilmu Kelautan. 14:133-137.
Smith VJ, JH. Brown and Ch. Hauton. 2003. Immunostimulation in crustaceans: does it really protect against infection. Fish and Shellfish Immunology . 15:71–90. SNI. 2006. Produksi udang vaname (L. vannamei) di tambak dengan teknologi intensif. Jakarta: Badan Standarisasi Nasional : SNI-01- 7246-2006.
Rodriguez, J., and G. Le Moullac, 2000.
State of The Art of Immunological Tools and Health  Contol of Penaeid (Penaeus monodon) .
(Thesis). Wageningen University.
Netherland.
Yin, G., Jeney, G., Racs, T., Xu P., Jun X., Jeney, Z. 2006. Effect of two
Chinese herbs ( Astragalus
radix and Scutellaria radix ) on nonspecific immune system of tilapia, Oreochromis niloticus . Aquaculture . 253:39-47.