SINTESIS DAN UJI TOKSISITAS SENYAWA 1-(2,4-DIKLOROFENIL)-3- (3,4-DIMETOKSIFENIL)PROPENON
Husnul Khatimah 1 , Agung Rahmadani 1,2 , M.Arifuddin 1 , Rolan Rusli 1,2* 1 Fakultas Farmasi, Universitas Mulawarman, Samarinda, Kalimantan Timur 2 Kelompok Bidang Ilmu Kimia Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Mulawarman, Samarinda, Indonesia
*Email: rolan@farmasi.unmul.ac.id
Artikel diterima: 9 Januari 2019; Disetujui: 20 Maret 2019

## ABSTRAK
Senyawa kalkon memiliki berbagai aktivitas seperti sitotoksik, antioksidan, dan antibakteri. Sintesis menjadi cara yang tepat untuk mendapatkan kalkon karena dapat  menghasilkan  rendemen  dengan  jumlah  besar  dan  dapat  dilakukan  variasi struktur  sesuai  dengan  yang  dikehendaki.  Senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4- dimetoksifenil)propenon  disintesis  dengan  metode  konvensional  selama  6  jam menggunakan katalis NaOH 40% diperoleh rendemen 90,87%. Pengujian toksisitas senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4-dimetoksifenil)propenon  dilakukan  dengan metode Brine Shrimp Lethalit y Test (BSLT). Hasil pengujian menunjukkan bahwa senyawa 1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4-dimetoksifenil)propenon memiliki nilai toksisitas LC 50 613,05 ppm.
Kata kunci: 1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4-dimetoksifenil)propenon,  kalkon,  uji toksisitas

## ABSTRACT
Chalcone  has  been  widely  reported  to  have  various  activities  such  as cytotoxic, antioxidant, antibacterial, and others. Synthesis becames the right way to get chalcone because it can produce much yield of chalcone and can be varied in accordance with the desired structure. The compound of 1-(2,4-dichlorophenyl)- 3-(3,4-dimethoxyphenyl)propenone was synthesized by conventional method for 6 hours using a 40% NaOH catalyst with a yield of 90.87%. The toxicity  test of 1- (2,4-dichlorophenyl)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propanone  was  done  by  Brine Shrimp Lethality Test method (BSLT). The results of the test showed that the 1-(2,4- dichlorophenyl)-3-  (3,4-dimethoxyphenyl)propenone  has  toxicity  value  LC 50
613.05 ppm.
Keywords:  1-(2,4-dichlorophenyl)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propenone, toxicity test, chalcone

## PENDAHULUAN
Kalkon  secara  alami  terdapat pada beberapa jenis tumbuhan di alam
yang  berperan  sebagai  senyawa perkursor  untuk  biosintesis  flavonoid dan  pirazolina  (Patil,  C.  B.  dkk.,
2009).  Senyawa  kalkon  juga  berguna dalam sintesis berbagai macam senyawa heterosiklik seperti isokazol, quinolinon,  thiadiazin,  benzofuranon, benzodiazepin  dan  lain  sebagainya (Jayapal, M. dkk., 2010).
Pemanfaatan  senyawa  kalkon yang  ditemukan  melalui  isolasi  dan sintesis  telah  banyak  diaplikasikan  di bidang  farmasi,  hal  ini  dikarenakan kalkon  memiliki  berbagai  aktivitas seperti aktivitas sitotoksik, antimikroba,  antioksidan,  dan  lain sebagainya  (Jayapal,  M.  dkk.,  2010). Kalkon juga berperan sebagai senyawa  intermediet  dalam  beberapa reaksi adisi nukleofilik (Sarda, S. dkk., 2009).
Kalkon  dapat  diperoleh  dengan cara  mengisolasi  suatu  tumbuhan, namun  untuk  memperoleh  senyawa kalkon  tersebut  terdapat  keterbatasan diantaranya  jumlahnya  yang  sangat terbatas dibandingkan dengan senyawa  flavanoid  lain.  Menurut (Gaikwad,  K.  V.  dkk.,  2010),  kalkon sangat  susah  diisolasi  dari  tanaman karena adanya enzim kalkon sintetase (CSH) yang dengan mudah mengubah kalkon  menjadi  flavanon.  Kalkon yang terdapat dalam tumbuh-
tumbuhan  biasanya  memiliki  variasi struktur relatif terbatas.
Oleh karena itu, sintesis merupakan upaya untuk mendapatkan senyawa  kalkon  dan  turunannya dengan  struktur  sesuai  dengan  yang dikehendaki. Modifikasi struktur pada cincin aromatik A dan B dari senyawa kalkon diharapkan menghasilkan senyawa yang memiliki aktivitas yang baik.  Modifikasi  struktur  pada  cincin aromatik  A  dan  B  dapat  dilakukan dengan  penambahan  gugus  seperti gugus  halogen  atau  metoksi.  Pada penelitian  ini  dilaporkan  sintesis senyawa  kalkon  dengan  penambahan gugus halogen pada cincin aromatik A dan  gugus  metoksi  pada  cincin aromatik B.

## METODE PENELITIAN
Sintesis senyawa kalkon
5 mmol 2’,4’-dikloroasetofenon dilarutkan  dengan  etanol  absolut  lalu dimasukkan dalam labu bulat kemudian  ditambahkan  5  mL  NaOH 40%,  dan  5  mmol  veratraldehid  yang telah dilarutkan dengan etanol absolut. Campuran  diaduk  dengan magnetic stirrer selama 6 jam, reaksi  dikontrol dengan  KLT.  Setelah  terbentuk  noda
yang  diduga  noda  tersebut  adalah senyawa  murni  dari  kalkon  yang diinginkan,  selanjutnya  campuran didinginkan  dalam  wadah  berisi  es. Kemudian  ditambahkan  HCl  10% setetes  demi  tetes  hingga  terbentuk padatan kristal. Penambahan HCl 10% dihentikan saat larutan mencapai pH 7. Selanjutnya  padatan  tersebut  disaring dan  dicuci  dengan  aquades  dingin. Produk  yang  terbentuk  dikeringkan dalam desikator vakum selama 24 jam dan  dianalisis  menggunakan  FTIR, GC-MS, dan spektrofotometer NMR.

## Uji Toksisitas
Disiapkan  vial  uji  yang  telah dikalibrasi  dengan  volume  10  mL. Mula-mula dibuat larutan induk 2000 ppm dengan cara menimbang 0,2 gram senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4- dimetoksifenil)propenon lalu dilarutkan  dengan  air  laut  dan  tween 80.  Selanjutnya  dibuat  larutan  seri pengenceran  dengan  konsentrasi  200 ppm,  400  ppm,  600  ppm,  800  ppm, dan 1000 ppm dengan 5 kali replikasi. Dibuat juga larutan kontrol yang berisi air laut dan tween 80. Dimasukkan 10 ekor  larva  udang  ke  masing-masing vial larutan uji dan kontrol, kemudian ditambahkan  air  laut  hingga  tanda
batas  kalibrasi.  Diamati  kematian larva udang setelah 24 jam. Data hasil pengujian  dihitung  nilai  LC 50 dengan analisis Reed and Muench .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Sintesis senyawa 1-(2,4- diklorofenil)-3-(3,4- dimetoksifenil)propenon dilakukan melalui reaksi Claisen-Schmidt dengan mereaksikan 2’,4’-
dikloroasetofenon  dan  veratraldehida dengan  menggunakan  katalis  NaOH 40%.  Reaksi  claisen-schmidt  adalah reaksi  antara  keton  aromatik  dan aldehid aromatik, mula-mula terbentuk  ion  enolat  dari  keton aromatik  dengan  adanya  katalis  basa yang  selanjutnya  ion  enolat  tersebut bereaksi  dengan  gugus  karbonil aldehida  membentuk  senyawa β - hidroksi  keton  yang  selanjutnya mengalami pelepasan molekul air dan akhirnya terbentuk senyawa α,β-keton tak  jenuh.  Metode  sintesis  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  yaitu pengadukan  dengan  stirrer.  Hasil sintesis  senyawa  1-(2,4-diklorofenil)- 3-(3,4-dimetoksifenil)propenon diperoleh  kristal  kuning  dengan rendemen sebesar 90,87%. Profil KLT
dari  senyawa  hasil  sintesis  yaitu didapatkan  nilai  Rf  sebesar  0,45 berbeda  dengan  nilai  Rf  bahan  dasar 2’,4’-dikloroasetofenon  yaitu  0,375 dan  veratraldehida  sebesar  0,82,  dari profil klt ini dapat disimpulkan bahwa telah  terbentuk  senyawa  baru  dan diduga  senyawa  tersebut  adalah senyawa  kalkon.  Dugaan  tersebut dikuatkan dengan karakterisasi senyawa hasil sintesis dengan spektroskopi  IR,  spektroskopi  massa, dan spektroskopi NMR.
Hasil  spektrum  IR  dapat  dilihat pada  gambar  1  yang  menunjukkan adanya  vibrasi  ikatan  C-Cl  pada bilangan gelombang 601,79 cm -1 , C=C trans  pada  979,84  cm -1 ,  C-O  pada 1265,30  cm -1 ,  C=C  aromatik  pada 1589,34  cm -1 ,  C=O  pada  1658,78 cm -1 , C-H alifatik pada 2947, 23 cm -1 , dan C-H aromatik pada 3078,39 cm -1 .
Hasil  spektrum  massa  dapat dilihat  pada  gambar  2.  Spektrum menunjukkan  puncak  pada  m/z  337 yang sesuai dengan berat molekul dari senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4- dimetoksifenil)propenon.
Hasil  spektrum  H-NMR  dapat dilihat pada tabel 1 yang menunjukkan adanya  10  sinyal  dengan  jumlah proton 14 yang sesuai dengan jumlah proton  senyawa  1-(2,4-diklorofenil)- 3-(3,4-dimetoksifenil)propenon. Sinyal-sinyal tersebut pada pergeseran kimia (δ) 7,46 ppm (d: 8,5); 7,39 ppm (d: 2,5: 1H); 7,34 ppm (dd: 8;2 : 1H); 7,32  ppm  (d:  16:  1H);  7,08  ppm  (dd: 8,25; 2,5: 1H); 7,02 ppm (d: 2,5: 1H);
6,91 ppm (d: 16: 1H); 6,81 ppm (d: 8: 1H);  3,851  ppm  (s:  3H);  dan  3,847 ppm (s: 3H).
Hasil  spektrum  C-NMR  dapat dilihat pada tabel 1 yang menunjukkan adanya  17  sinyal  yang  berarti  ada  17 atom  C  pada  senyawa  hasil  sintesis yang  sesuai  dengan  jumlah  atom  C pada  senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3- (3,4-dimetoksifenil)propenon.  Sinyal- sinyal  tersebut  diantaranya  pada pergeseran kimia (δ) 55,950 ppm dan 56,046 yang menunjukkan sinyal dari atom C metoksi, 14 sinyal pada δ 110- 150  ppm  menunjukkan  sinyal  dari atom  C=C,  dan  pada  δ  192,67  ppm menunjukkan sinyal dari C=O.
Gambar 1. Spektrum IR senyawa 1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4-dimetoksifenil)propenon
Gambar 2. Spektrum MS senyawa 1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4-dimetoksifenil)propenon
Uji toksisitas senyawa dilakukan dengan metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT).  Metode  ini  digunakan sebagai  skrining  awal  pencarian senyawa  yang  berpotensi  sebagai antikanker. Hasil uji toksisitas senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4- dimetoksifenil)propenon  dapat  dilihat
pada  tabel  2.  Berdasarkan  analisis Reed  and  Muench maka  didapatkan nilai LC 50 senyawa 1-(2,4-
diklorofenil)-3-(3,4-dimetoksifenil) propenon sebesar 613,05 ppm. Hal ini menunjukkan  bahwa  senyawa  kalkon hasil  sintesis  ini  tidak  berpotensi
sebagai
senyawa antikanker (Anderson, J. dkk., 1991).

## KESIMPULAN
Senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3-
(3,4-dimetoksifenil)propenon telah berhasil disintesis dengan bahan dasar 2’,4’-dikloroasetofenon dan veratraldehida dengan
metode
pengadukan dengan bantuan magnetic stirrer menggunakan  katalis  NaOH dan  diperoleh  rendemen  sebesar 90,87%.  Senyawa  ini  memiliki  nilai LC 50 sebesar 613,05 ppm yang berarti senyawa  1-(2,4-diklorofenil)-3-(3,4- dimetoksifenil)propenon tidak berpotensi sebagai senyawa antikanker.
Tabel 1. Hasil analisis spektrum 1 H-NMR dan 13 C-NMR senyawa 1-(2,4-diklorofenil)-3- (3,4-dimetoksifenil)propenon Posisi Pergeseran kimia δ H-NMR (ppm) Pergeseran kimia δ C-NMR (ppm) 1 - 127,268 2 7,02 d ( J= 2,5 Hz) 111,305 3 - 151,927 4 - 149,326 5 7,46 d ( J= 8,5 Hz) 110,038 6 7,08 dd ( J= 8,25 Hz ; 2,5 Hz) 123,956 1’ - 132,259 2’ - 137,702 3’ 7,39 d ( J= 2,5 Hz) 127,374 4’ - 136,617 5’ 7,34 dd ( J= 8 Hz ; 2,5 Hz) 130,205 6’ 6,81 d ( J= 8 Hz) 130,301 α 7,32 d ( J= 16 Hz) 123,678 β 6,91 d ( J= 16 Hz) 147,070 C=O - 192,673 4-O-CH 3 3,847 s 55,950 3-O-CH 3 3,851 s 55,046 Tabel 2. Hasil Analisis Reed and Muench
Konsentrasi (ppm) Log Konsentrasi Jumlah Terakumulasi Rasio x/(x+y) Mortalitas (%) LC 50 Mati  Hidup  Mati (x)  Hidup (y) 200 2,30 8 42 8 129 0,058 5,8 613,05 ppm 400 2,60 13 37
21 87 0,194 19,4 600 2,78 26 24 47 50 0,484 48,4 800 2,90 31 19 78 26 0,75 75 1000 3 43 7 121 7 0,945 94,5

## DAFTAR PUSTAKA
Anderson, J., Goestz, C., Mc Laughlin, J. (1991): A blind comparison of simple  bench-top  bioassay  and human tumour cell
cytotoxicities as antitumour prescreens  in  natural  product chemistry, Elsevier Amsterdam, Gaikwad,  K.  V.,  Gaikwad,  S.  V., Jadhav,  S.  B.,  Rathod,  S.  D.
(2010): Synthesis of some novel chalcones  of  phthalimidoester possessing good anti- inflammatory  and  antimicrobial activity, Indian  Journal  of Chemistry  -Section  B,  49 ,  131- 136.
Jayapal,  M.,  Prasad,  K.  S.,  Sreedhar, N. (2010): Synthesis and
characterization of 2, 5- dihydroxy substituted chalcones using SoCl 2 /EtOH, International Journal of Pharma
Bio Sciences, 1 , 361-366. Patil,  C. B., Mahajan, S., Katti,  S. A. (2009):  Chalcone:  A  versatile molecule, Journal of Pharmaceutical  Sciences  and
Research, 1 , 11.
Sarda,  S.,  Jadhav,  W.,  Bhusare,  S., Wasmatkar, S., Dake, S., Pawar,
R.  (2009):  Solvent-free  NaOH-
Al 2 O 3 supported  synthesis  of  1,
3-diaryl-2-propene-1-ones, International Journal of ChemTech  Research,  1 ,  265- 269.