BERKALA SAINSTEK 2023 11(2): 96-105 doi: 10.19184/bst.v11i2.34875 https://jurnal.unej.ac.id/index.php/BST/article/view/34875

## RESEARCH   ARTICLE
Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke Leaves Extract Potent as a Medicinal Plant Based on Its Phytochemical Profile and The Total Phenolic Content
(Ekstrak Daun Paku Resam ( Gleichenia linearis (Burm.) C.B. Clarke) Berpotensi sebagai Tanaman Obat berdasarkan Profil Fitokimia dan Kadar Total Fenol)
Monica Kharisma Swandi*, Salmi
Program Studi Biologi, Fakultas Pertanian, Perikanan dan Biologi, Universitas Bangka Belitung, Kabupaten Bangka, Kepulauan Bangka Belitung 33172, Indonesia

## ABSTRACT
Resam fern ( Gleichenia linearis (Burm.) C.B. Clarke) is a terrestrial plant that is easy to grow and has been used for medicinal purposes as by the community empirically. This study aimed to explore the potential of Gleichenia linearis (Burm.) C.B. Clarke) as medicinal plants based on their phytochemical profiles and total phenol content of the extract. Gleichenia linearis (Burm.) C.B. Clarke leaves were extracted with aquadest and methanol as a solvent by maceration method. Phytochemical content was detected qualitatively and the total  phenol content  was determined using colorimetric method with Folin-Ciocalteu reagent. As  the result, qualitative screening for secondary metabolic contents in Gleichenia linearis (Burm.) C.B. Clarke extract found that the aqueous extract contains alkaloids, phenols, flavonoids, tannins, triterpenoids and steroids, but the saponin and steroid were not detected. In the methanol extract, all secondary metabolites were detected except triterpenoids. The total phenol content of methanol extract was higher than that of aqueous extract with levels of 127,08 mg/g GAE and 42,32 mg/g GAE, respectively. Based on these findings, it can be concluded that the Gleichenia linearis (Burm.) C.B. Clarke leaf has the potential to be developed as a medicinal plant.
Paku  resam ( Gleichenia linearis (Burm.)) adalah tanaman  terestrial yang mudah tumbuh dan  dimanfaatkan oleh masyarakat  untuk tujuan  pengobatan  secara  empiris.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menganalisis  fitokimia  dan  kadar  total  fenol  daun  paku resam dengan membandingkan dua pelarut yang digunakan yaitu metanol dan air. Daun paku resam diekstraksi dengan pelarut metanol dan air dengan metode maserasi pada perbandingan 1:10. Kandungan fitokimia dideteksi secara kualitatif yang meliputi alkaloid, flavonoid, fenolik, tanin, saponin, triterpenoid, dan steroid. Kadar total fenol ditentukan menggunakan metode kolorimetri dengan perekasi Folin-Ciocalteu. Hasil analisis menunjukkan bahwa ekstrak air daun paku resam mengandung alkaloid, fenol, flavonoid, tanin, triterpenoid dan tidak terdeteksi kandungan steroid dan saponin. Pada ekstrak metanol daun paku resam, semua kandungan metabolit sekunder terdeteksi kecuali triterpenoid. Kadar total fenol ekstrak metanol lebih tinggi dibandingkan ekstrak air dengan kadar masing-masing 127,08 mg/g GAE dan 42,32 mg/g GAE. Berdasarkan temuan ini, dapat disimpulkan bahwa daun paku resam berpotensi untuk dikembangkan sebagai tanaman obat.
Keywords: Gleichenia linearis (Burm.) C.B. Clarke, Phytochemical, Phenolic content.

## PENDAHULUAN
Paku  resam  atau Gleichenia  linearis (Burm.)  C.B. Clarke merupakan salah satu jenis paku-pakuan yang tumbuh secara terestrial di tempat terbuka, di daerah tepi  sungai  dan  tebing-tebing  di  tepi  jalan pengunungan.  Paku  resam  memiliki  daun  yang menyirip  berjajar  dua  dan  tangkainya  bercabang
mendua  (dikotom).  Tumbuhan  ini  dapat  tumbuh memanjat  dan  menggantung.  Tipe  akar  paku  resam adalah serabut. Batang tegak dengan percabangan dua dan  masing-masing  cabang  bercabang  dua  lagi  dan seterusnya. Tumbuhan ini tumbuh berkelompok pada ketinggian 150-2100 mdpl dengan kondisi lembab [1].
Paku  resam  dikenal  juga  sebagai  tanaman  invasif karena  mendominasi  permukaan  tanah  dan
*) Corresponding author: Monica Kharisma Swandi E-mail: monica@ubb.ac.id

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …
menghambat  pertumbuhan  lainnya.  Tumbuhan  ini dapat  memberi  manfaat  dengan  kemampuannya menyuburkan  tanah  serta  menyerap  racun  yang  ada disekitar tempat tumbuhnya [2]. Beberapa pemanfaatan  lain  dari  paku  resam  oleh  masyarakat diantaranya  sebagai  tanaman  hias,  akar  dan  batang paku resam sebagai bahan untuk pembuatan produk kerajinan,  alat  penggosok  dan  alat  pembersih. Penggunaan  paku  resam  terutama  bagian  daun berpotensi  untuk  tujuan  pengobatan  yang  dilakukan oleh  masyarakat  secara  tradisional.  Masyarakat Malaysia  menggunakan  tumbuhan  ini  sebagai  tonik dan penurun suhu tubuh [3] dan [4]. Masyarakat Papua New  Guinea  memanfaatkan  paku  resam  dalam menggobati luka dan ulkus secara tradisional [5]. Di Indonesia,  paku  resam  juga  menjadi  salah  satu tanaman  obat  yang  sering  dimanfaatkan  masyarakat dan  memperkaya  etnobotani  Indonesia.  Masyarakat Desa Saham, Kalimantan Barat dan Masyarakat Desa Bukit Mas, Sumatera Utara telah menggunakan daun paku  resam  untuk  pengobatan  demam  dengan  cara direbus [6]. Masyarakat Bangka Belitung memanfaatkan  daun  tumbuhan  ini  sebagai  alternatif sabun pencuci muka [7].
Studi  saintifik  untuk  mengetahui  manfaat  paku resam bagi kesehatan juga sudah dilakukan. Aktivitas biologis paku resam yang bermanfaat bagi kesehatan disebabkan  oleh  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  yang  terkandung  pada  tiap  bagian  paku. Kandungan  senyawa  metabolit  sekunder  pada  paku resam  dengan  menggunakan  ekstrak  etanol  70% menghasilkan  flavonoid,  alkaloid,  steroid,  saponin, tanin,  dan  quinon  [8].  Paku  resam  juga  memberikan manfaat sebagai antijamur, antivirus [9], antiinflamasi, dan antikanker [10]. Ekstrak metanol paku resam telah dilaporkan  sebagai  antibakteri  terhadap  bakteri penyebab  akne  vulgaris  [11].  Namun  kandungan senyawa  metabolit  sekunder  menggunakan  ekstrak metanol  dan  air  belum  dilaporkan.  Oleh  karena  itu, penting  untuk  dilakukannya  pengujian  fitokimia ekstrak metanol dan ekstrak air daun paku resam asal Bangka  Belitung.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk menganalisis fitokimia dan kadar total fenol daun paku resam  dengan  membandingkan  dua  pelarut  yang digunakan yaitu metanol dan akuades. Hasil penelitian ini  diharapkan  menjadi  acuan  dalam  penelitian lanjutan sebagai salah satu kandidat bahan pembuatan obat.

## METODE PENELITIAN
1. Pengambilan dan Preparasi Sampel Sampel berupa daun paku resam yang diambil pada bagian pucuk daun yang berwarna hijau muda. Daun selanjutnya  dibersihkan  dengan  air  mengalir  sampai kotoran yang menempel terlepas kemudian ditiriskan. Daun  paku  resam  yang  sudah  bersih  selanjutnya dikeringkan pada suhu ruang. Pengeringan dilanjutkan menggunakan oven pada suhu 50 °C hingga diperoleh kadar air ≤10 %. Daun paku resam yang telah kering dihaluskan  hingga  diperoleh  serbuk  berukuran  100 mesh.  Serbuk  tersebut  yang  selanjutnya  disebut sebagai simplisia [8].

## 2. Analisis Kadar Air (modifikasi metode SNI 01-
2891-1992)
Cawan  porselen  bersih  ditimbang  bobot  awalnya. Cawan dikeringkan dalam oven bersuhu 105 °C selama 30 menit, didinginkan dan ditimbang bobot keringnya. Sebanyak  dua  gram  sampel  dimasukkan  ke  dalam cawan porselen, kemudian dimasukkan ke dalam oven bersuhu  105  °C  selama  3  jam.  Cawan  beserta  isinya diangkat  dan  didinginkan  dalam  deksikator,  lalu ditimbang  bobotnya.  Pengeringan  dilakukan  hingga diperoleh bobot yang tetap.

## 3. Ekstraksi Metanol Daun Paku Resam
Simplisia daun paku resam diekstrasi menggunakan metode maserasi dengan perbandingan simplisia dan pelarut  1:10  selama  24  jam  sambil  digoyang menggunakan  shaker  dengan  kecepatan  150  rpm. Pelarut dan simplisia dipisahkan menggunakan kertas saring. Residu dimaserasi kembali dengan pelarut yang sama hingga 3 kali pengulangan. Filtrat yang diperoleh dari  3  kali  maserasi  digabungkan  dan  dipekatkan dengan rotary  evaporator pada  suhu  50  °C  hingga diperoleh ekstrak berbentuk pasta [12].
4. Ekstraksi Air Daun Paku Resam Ekstrak  air  daun  paku  resam  diperoleh  dengan metode  perebusan  simplisia.  Ekstraksi  air  dilakukan dengan  mencampur  simplisia  dan  akuades  dengan perbandingan 1:10. Campuran simplisia dan akuades selanjutnya  direbus  pada  suhu  60  °C  selama  5  jam. Hasil rebusan selanjutnya disaring dengan kalin blacu dan  disaring  kembali  dengan  kertas  saring.  Residu direbus  ulang  dengan  metode  yang  sama  hingga diperoleh  ekstrasi  sebanyak  3  kali.  Hasil  ekstrak digabungkan  dan  dipekatkan  dengan rotary  evaporator

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …
pada  suhu  50  °C  hingga  diperoleh  ekstrak  yang berbentuk pasta [12].

## 5.  Analisis  Fitokimia  -  Uji  Alkaloid  (modifikasi Harbone [13])
Sebanyak 0,1 gram ekstrak dilarutkan dengan 5 mL kloroform  dan  5  tetes  amoniak.  Fraksi  kloroform dipisahkan dan diasamkan dengan 1,5 mL H 2 SO 4 2 M (Modifikasi pada volume pereaksi). Fraksi asam dibagi ke dalam 3 tabung, kemudian masing-masing tabung ditambahkan dengan pereaksi Dragendorf, Meyer dan Wagner. Adanya alkaloid ditandai dengan terbentukknya  endapan  putih  pada  perekasi  Meyer, endapan  merah  pada  perekasi  Dragendorf   dan endapan coklat pada pereaksi Wagner.

## 6. Analisis Fitokimia - Uji Flavonoid dan Fenolik (modifikasi Harbone [13])
Sebanyak  0,1  g  ekstrak  dilarutkan  dengan  5  mL metanol, lalu dipanaskan pada suhu 50 °C (Modifikasi perbandingan ekstrak dan metanol). Filtratnya dibagi ke dalam dua tabung. Filtrat pertama ditambah H 2 SO 4 pekat, jika warna merah yang terbentuk maka positif adanya  senyawa  flavonoid.  Filtrat  kedua  ditambah dengan NaOH 10%, jika warna merah yang terbentuk maka positif  adanya senyawa fenolik hidroquinon.

## 7.  Analisis  Fitokimia  -  Uji  Tanin  (modifikasi Harbone [13])
Sebanyak  0,05  gram  ekstrak  ditambah  dengan akuades  2,5  mL  kemudian  dididihkan  pada  suhu 100  °C  selama  5  menit.  Larutan  tersebut  kemudian ditambahkan 1 tetes FeCl 3 1N (Modifikasi konsentrasi FeCl 3 ). Adanya kandungan tanin ditunjukkan dengan terbentuknya warna biru atau hijau kehitaman.

## 8.  Analisis  Fitokimia  -  Uji  Saponin  (modifikasi Harbone [13])
Sebanyak  0,05  g  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi dan ditambah dengan 2,5 mL akuades (Modifikasi  pada  perbandingan  ekstrak  dan  pelarut). Larutan selanjutnya didihkan pada suhu 100 °C selama 5  menit,  lalu  dikocok  hingga  berbusa.  Adanya kandungan saponin ditunjukkan dengan terbentuknya busa yang stabil selama 15 menit.
9.  Analisis  Fitokimia  -  Uji  Triterpenoid  dan Steroid (modifikasi Harbone [13])
Sebanyak  0,1  gram  ekstrak  dimasukkan  ke  dalam tabung reaksi lalu ditambahkan dengan 5 mL etanol 30%  (Modifikasi  pada  persentase  etanol).  Campuran selanjutnya  dipanaskan di atas bunsen ±1 menit dan
disaring. Filtratnya diuapkan lalu ditambahkan dengan dietileter  hingga  larut.  Fraksi  dietileter  diambil  lalu ditambahkan  pereaksi  Liebermen  Buchard  (3  tetes asam  asetat  anhidrida  dan  1  tetes  H 2 SO 4 pekat). Adanya  steroid  ditujukkan  dengan  terbentuknya warna  biru  atau  hijau,  sedangkan  triterpenoid ditunjukkan  dengan  terbentuknya  warna  merah  atau ungu.
10. Penentuan Kadar Total Fenol Sebanyak 0,3 mL larutan ekstrak dicampur dengan 1,5  mL  reagent  Folin-Cieocalteau  dan  1,2  sodium karbonat  7,5%  (w/v).  Campuran  disimpan  dalam ruang  gelap  selama  30  menit,  kemudian  diukur absorbansinya  pada  panjang  gelombang  743  nm. Kurva  standar  dibuat  dengan  standar  asam  galat, dimana y adalah absorbasi pada 743 nm, dan x adalah konsentrasi asam galat dalam mg/l. Kadar total fenol dinyatakan sebagai mg ekuivalen asam galat (gallic acid equivalent-GAE)/100 g daun segar [14].

## 11. Analisis Data
Data  penelitian  disajikan  secara  deskriptif.  Kadar air dinyatakan dalam persentase±SD. Hasil penapisan fitokimia  dinyatakan  dalam  tanda  positif   (+)  jika terdapat  metabolit  sekunder  yang  diuji  dan  tanda negatif   (-)  jika  tidak  terdapat  metabolit  sekunder. Kadar  total  fenol  pada  kedua  ekstrak  dinyatakan sebagai mg/g GAE±SD.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Kadar Air dan Ekstraksi Daun Paku Resam Simplisisa  daun  paku  resam  yang  diperoleh memiliki  persentase  kadar  air  sebesar  8,74±0,17% seperti pada Tabel 1. Syarat minimal kadar air dalam simplisia yaitu <10% [15]. Kadar air yang rendah akan menurunkan  kemungkinan  terjadinya  pertumbuhan bakteri  maupun  jamur  saat  penyimpanan  [16].  Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa simplisia daun paku resam  telah  memenuhi  syarat  minimal  kadar  air  dan aman dalam tahap penyimpanan.
Ekstraksi  metabolit  sekunder  daun  paku  resam dilakukan dengan metode maserasi dengan dua jenis pelarut  air  dan  metanol.  Maserasi  adalah  metode ekstraksi  yang  konvensional  yang  memiliki keuntungan  seperti  peralatan  yang  sederhana,  tidak membutuhkan  keahlian  khusus  dari  peneliti,  hemat energi, dan murah [17].

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …

## Tabel 1. Kadar air serbuk daun paku resam
Ulangan ke- Bobot awal (g) Bobot akhir (g) Kadar air (%) Rerata Kadar air ±SD (%) 1 2,0000 1,8228 8,86 8,74±0,17 2 2,0000 1,8236 8,82 3 2,0000 1,8290 8,55 Tabel 2. Kandungan metabolit sekunder ektrak air dan ekstrak metanol daun paku resam No  Senyawa Metabolit Sekunder Ekstrak Air Ekstrak Metanol Keterangan 1 Alkaloid R. Dragendorff + + Endapan coklat R. Wagner + + Endapan merah kecoklatan R. Mayer + + Endapan cream 2 Fenol hidroquinon + + Larutan bewarna merah 3 Flavonoid + + Larutan bewarna merah 4 Tanin + + Endapan biru kehitaman 5 Saponin - + Terbentuknya busa yang stabil 6 Streroid/Triterpenoid (-) steroid (+)  triterpenoid (+) steroid (-) triterpenoid (+) steroid;
(-) triterpenoid
Selama  proses  ekstraksi,  metabolit  sekunder  akan terlarut  dan  berdifusi  pada  fase  pelarut.  Kelarutan metabolit  sekunder  ini  didasarkan  pada  prinsip  “ like disolve like ”, senyawa yang polar akan larut pada pelarut polar dan senyawa non-polar akan larut pada pelarut non  polar  [18].  Air  dan  metanol  adalah  dua  pelarut yang  bersifat  polar,  namun  berbeda  tingkat kepolarannya.  Air  adalah  pelarut  paling  polar, sedangkan  metanol  memiliki  tinggat  kepolaran  yang lebih rendah dari air. Penggunaan air didasarkan pada kebiasaan  masyarakat  dalam  mengolah  bahan  alam dengan  pelarut  air,  sedangkan  pemilihan  metanol sebagai  pelarut  dikarenakan  metanol  merupakan pelarut  polar  yang  sering  digunakan  untuk mengekstrasi senyawa fenolik [19]. Pada akhir proses ekstraksi,  pelarut  yang  digunakan  diuapkan menggunakan rotary  evaporator untuk  mendapatkan ekstrak yang kental.

## 2. Penapisan Fitokimia
Penapisan  fitokimia  pada  tanaman  yang  diduga memiliki  khasiat  obat  berguna  untuk  mengetahui kandungan  metabolit  sekunder  pada  tanaman tersebut.  Penapisan  fitokimia  dilakukan  secara kualitatif   pada  kedua  ekstrak  daun  paku  resam. Senyawa  metabolit  sekunder  yang  dideteksi  pada penelitian ini meliputi alkaloid, fenol, flavonoid, tanin, saponin,  steroid  dan  triterpenoid.  Hasil  penapisan kandungan metabolit sekunder ekstrak air dan ekstrak metanol daun paku resam dapat dilihat pada Tabel 2. Hasil  menunjukkan  bahwa  ekstrak  air  daun  paku
resam  mengandung  alkaloid,  fenol,  flavonoid,  tanin, terpenoid dan tidak terdeteksi kandungan steroid dan saponin.  Pada  ekstrak  metanol,  semua  kandungan metabolit sekunder terdeteksi kecuali triterpenoid.
Alkaloid merupakan kelompok metabolit sekunder yang  mengandung  nitrogen  pada  strukturnya. Senyawa metabolit sekunder yang memiliki prekursor asam amino ini dapat ditemukan dalam bentuk bebas, garam alkaloid atau oksida nitrogen [20]. Keberadaan alkaloid pada ekstrak pelarut dideteksi menggunakan tiga jenis reagent yaitu reagent Dragendorff, Wagner dan Mayer. Hasil penambahan ketiga reagent ini dapat dilihat  pada  Gambar  1.  Kedua  ekstrak  pelarut  daun paku  resam  menunjukkan  reaksi  positif   alkaloid setelah  penambahan  reagent  Dragendorff,  Wagner dan Mayer.
Keterangan:  (1)  reagent  wagner,  (2)  reagent  dragendorff,  (3) reagent Mayer, (a) ekstrak air, (b) ekstrak metanol
Gambar 1. Penapisan senyawa alkaloid pada ekstrak air dan metanol daun paku resam

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …
Hasil  positif   dengan  penambahan  reagent Dragendorff   ditunjukkan  dengan  adanya  endapan bewarna  kuning  hingga  orange  atau  merah  hingga coklat.  Reagen  Dragendorff   mengandung  komplek kaliumtetraiodobismuthate  yang  terbentuk  melalui reaksi  antara  komponen  penyusun  reagent  berupa bismut subnitrat, kalium iodida dan asam seperti asam asetat  atau  asam  tartarat.  Gugus  amina  tersier  R3N yang  terdapat  pada  sebagian  besar  alkaloid  dapat bertindak  sebagai  basa  dan  dengan  tambahan  asam akan  membentuk  garam  ammonium.  Komplek bewarna akan terbentuk akibat reaksi pertukaran ion antara  garam  ammonium  dan  kaliumiodobismuthate [21].  Reaksi  positif   dengan  reagent  Mayer  berupa endapan  bewarna  krem  yang  terbentuk  akibat  rekasi antara  alkaloid  dengan  kaliummerkuri  iodida  pada reagent  Mayer.  Pada  penambahan  reagent  Wagner, reaksi  positif   akan  ditunjukkan  dengan  endapan bewarna merah kecoklatan sebagai hasil reaksi antara komponen alkaloid dan kalium idodida yang terdapat pada reagent Wagner [22].
Komponen  fenol  merupakan  senyawa  kimia dengan  gugus  hidroksi  terikat  pada  hidrokarbon
aromatik.  Senyawa  ini  sangat  tinggi  keragamannya dalam metabolit sekunder. Berdasarkan jumlah karbon pada  molekulnya,  senyawa  fenolik  dikelompokkan menjadi  fenol  sederhana  (C6),  asam  fenol  (C6-C1), asetofenol  dan  asam  fenilasetat  (C6-C2),  asam sinamat, sinamil aldehid dan sinamil alkohol (C6-C3), kumarin,  isokumarin  dan  kromona  (C6-C3), Khalkona, aurona, dihidrokhalkona (C6-C3-C6 (C15) flavonoid),  biflavonil (C30), benzofenon dan santhon (C6-C1-C6),  stilben  (C6-C2-C6),  kuinon  (C6,  C10, C14)  dan  betasianin  (C18)  [20].  Penapisan  senyawa flavonoid dan fenolik hidroquinon dilakukan dengan melarutkan  ekstrak  dengan  metanol.  Keberadaan flavonoid diidentifikasi menggunakan reaksi Shibata/Uji  Sianidin.  Kedua  ekstrak  yang  diuji bewarna merah setelah ditambahi Mg dan HCl yang menunjukkan  adanya  kandungan  flavonoid  pada ekstrak.  Penapisan  fenolik  hidroquinon  dilakukan dengan menambahkan NaOH pada ekstrak yang telah dilarutkan  dengan  metanol  dan  hasil  positif ditunjukkan oleh warna merah seperti pada Gambar 2.
Keterangan:  (a)  uji  flavonoid  ekstrak  air,  (b)  uji  flavonoid  ekstrak  metanol,  (c)  uji  fenolik  hidroquinon  ektrak  air,  (d)  uji  fenolik hidroquinon ekstrak metanol
Gambar 2. Identifikasi kualitatif  flavonoid dan fenolik hidroquinon ekstrak air dan metanol daun paku resam Tanin  termasuk  dalam  senyawa  polifenol  yang mengandung  gugus  hidroksil  atau  karboksil  dan membentuk  komplek  dengan  makromolekul  seperti karbohidrat.  Penapisan  tanin  pada  kedua  ekstrak dilakukan  dengan  melarutkan  ekstrak  dalam  air  lalu direaksikan  dengan  FeCl 3 .  Hasil  positif   ditujukkan dengan perubahan larutan menjadi hijau hingga biru kehitaman.  Komplek warna  ini  terbentuk  dari  reaksi antara tanin dengan FeCl 3 [22]. Hasil  pengujian  menunjukkan  kedua  ekstrak mengandung  senyawa  tanin  seperti  pada  Gambar  4. Kandungan tanin pada ekstrak air diduga lebih banyak dibandingkan  ekstrak  metanol  jika  dilihat  dari intensitas  warna  biru  kehitaman  yang  terbentuk. Kedua pelarut yang digunakan, air dan metanol adalah
2 pelarut polar yang dapat digunakan untuk ekstraksi senyawa polar seperti tanin. Namun hasil temuan pada penelitian  ini  berbeda  jika  dibandingkan  dengan penelitian  sebelumnya.  Pelarut  metanol  dilaporkan mampu mengekstrak lebih banyak tannin dibandingkan air [24,25].
Gambar 3 Reaksi antara tannin dan FeCl 3 [23]

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …
Adanya  kemungkinan  pembentukan  kompleks tanin-protein  menyebabkan  efesiensi  ekstraksi  tanin dengan  air  lebih  rendah  dibandingkan  metanol  [26]. Adanya  pengaruh  suhu  juga  dapat  meningkatkan efesiensi  ekstraksi  tanin.  Penggunaan  air  panas dilaporkan  menjadi  metode  yang  banyak  digunakan dalam industri maupun laboratorium [27].
Keterangan: (a) ekstrak air (b) ekstrak metanol
Gambar 4.   Identifikasi  kualitatif   senyawa  tanin pada ekstrak air dan metanol daun paku resam
Saponin  diidentifikasi  dengan  melarutkan  kedua ekstrak  daun  paku  resam  dengan  air,  kemudian mengocoknya  dengan  kencang.  Hasil  positif ditunjukkan  dengan  adanya  busa  yang  stabil  setelah didiamkan  selama  10  menit  [28].  Pengujian  pada ekstrak  metanol  menunjukkan  hasil  positif   saponin, namun  pada  ekstak  air  kandungan  saponin negatif/sangat  rendah  seperti  pada  Gambar  5. Perbedaan pelarut yang digunakan berpengaruh pada kelarutan  saponin.  Pelarut  air  menyebabkan kandungan  saponin  pada  ekstrak  paling  rendah  jika dibandingkan  dengan  pelarut  lain  seperti  metanol, etanol  dan  aseton  yang  dicampur  dengan  air  [29]. Saponin  secara  struktural  mengandung  aglikon  yang larut  lemak  dan  rantai  gula  yang  larut  air  sehingga memberi  sifat  ampifilik  [30].  Adanya  gugus  aglikon dengan  sifat  hidrofobik  menyebabkan  ekstraksi dengan air menjadi tidak optimal [31].
Keterangan : (a) ekstrak air, (b) ekstrak metanol
Gambar 5.   Identifikasi  senyawa  saponin  pada ekstrak daun paku resam
Keterangan : (a) ekstrak metanol, (b) ekstrak air
Gambar  6.  Identifikasi  senyawa  triterpenoid  dan steroid pada ekstrak daun resam
Penapisan  triterpenoid  dan  steroid  dilakukan dengan  penambahan  pereaksi  Liebermenn  Burchard yang berisi asam asetat anhidrida dan H2SO4. Pereaksi Liebermann  Burchard  dapat  menghasilkan  respon warna  yang  beragam  tergantung  pada  ikatan  ganda, gugus  fungsi  dan  keberadaan  ikatan  nonpolar  pada senyawa  [32].  Keberadaan  senyawa  steroid ditunjukkan dengan warna hijau kebiruan, sedangkan keberadaan senyawa triterpenoid ditunjukkan dengan warna  merah  atau  ungu  pada  larutan  sampel.  Hasil pengujian menunjukkan bahwa ekstrak air mengandung triterpenoid, sedangkan ekstrak metanol mengandung steroid spserti pada Gambar 6.
3.  Penentuan  Kadar  Total  Fenol  Esktrak  Daun Paku Resam Penentuan kadar total fenol merujuk pada metode kolorimetri Folin  and  Ciocateu (Folin-C)  [33].  Reagen utama yang digunakan yaitu Folin-ciocalteu yang berisi campuran asam fosfotungstat (H 3 PW 12 O 40 ) dan asam fosfomolibdat (H 3 PMo 12 O 40 ). Campuran kedua bahan ini  bereaksi  dengan  senyawa  fenol  dan  non-fenol tereduksi  membentuk  suatu  kromogen  yang  dapat dideteksi secara spektrofotometri. Pada kondisi alkali, senyawa oxotungstat dan oxomolibdat akan terbentuk dalam  reaksi  redoks  dan  menampilkan  warna  biru yang  proporsional  dengan  konsentrasi  polifenol  dari sampel yang diukur [34].
Panjang  gelombang  dan  waktu  inkubasi  yang digunakan  dioptimasi  terlebih  dahulu  untuk mendapatkan  hasil  yang  optimal.  Optimasi  panjang gelombang  dilakukan  dengan  mengamati  absorbansi asam galat sebagai standar fenol pada variasi panjang gelombang  dengan  rentang  600-800  nm.  Panjang gelombang  maksimal  ditentukan  berdasarkan absorbansi  tertinggi  asam  galat.  Hasil  pengukuran absorbansi  asam  galat  pada  panjang  gelombang berbeda menunjukkan nilai absorbansi tertinggi pada panjang  gelombang  743  nm  dan  ditetapkan  sebagai panjang gelombang maksimal seperti pada Gambar 7.

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …
Waktu  inkubasi  dengan  nilai  absorbansi  asam  galat tertinggi dipilih sebagai waktu inkubasi optimal. Hasil pengukuran menunjukkan bahwa waktu inkubasi 130 menit  menghasilkan  nilai  absorbansi  asam  galat tertinggi  dan  ditetapkan  sebagai  waktu  inkubasi optimal seperti pada Gambar 8.
Kadar  total  fenol  ekstrak  daun  paku  resam diperoleh  dengan  memasukkan  nilai  absorbansi ekstrak  (y)  terhadap  persamaan,  sehingga  diperoleh nilai  x  yang  merupakan  kadar  fenol  ekstrak  yang ekuivalen  dengan  kadar  asam  galat.  Hubungan  liner antara  konsentrasi  dan  absorbansi  asam  galat  pada panjang  gelombang  maksimal  (743  nm)  diperoleh
persamaan  y  =  0,0062x  +  0,0476  dengan  nilai  r2= 99,55%  seperti  pada  Gambar  9.  Hasil  pengukuran diperoleh  kadar  fenol  ekstrak  metanol  daun  paku resam  lebih  tinggi  dibandingkan  ekstrak  airnya  yaitu sebesar  127,08  mg/g  GAE  dan  42,32  mg/g  GAE (Tabel 3). Perbedaan total fenol pada kedua ekstrak ini berkaitan dengan kelarutan senyawa fenol pada kedua pelarut. Senyawa fenolik memiliki kelarutan yang lebih tinggi  pada  pelarut  organik  yang  kepolarannya  lebih rendah  dari  air.  Haminiuk  [19],  melaporkan  bahwa penggunaan  pelarut  metanol  100%  sebagai  pelarut memberikan  hasil  kadar  fenolik  total  tertinggi dibandingkan pelarut lainnya.
Gambar 7. Penentuan panjang gelombang maksimal asam galat
Gambar 8. Waktu inkubasi optimal asam galat 1,18 1,19 1,2 1,21 1,22 1,23 1,24 1,25 0 50 100 150 200 Abs o rba ns i (A) Waktu inkubasi (menit)

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …

## Gambar 9. Kurva standar asam galat

## Tabel 3. Kandungan total fenol ekstrak daun paku resam
No. Ekstrak daun paku resam Ulangan Nilai Absorbansi (A) Total Fenol GAE (mg/g GAE) Rerata Total Fenol GAE (mg/g GAE) 1 Ekstrak Air A1 0,314 42,968 42,32±0,91 A2 0,306 41,677 2 Ekstrak Metanol M1 0,822 124,903 127,08±3,08 M2 0,849 129,258
Komponen  senyawa  fenolik  memiliki  aktivitas biologis  yang  sangat  bermanfaat.  Senyawa  fenolik mampu  menghambat  radikal  bebas,  dekomposisi peroksida,  inaktivasi  logam  dan  penangkap  oksigen dalam  sistem  biologi,  serta  mencegah  penyakit oksidatif  [35]. Komponen metabolit sekunder ini lebih larut dalam pelarut organik polar karena keberadaan gugus  hidroksil  sehingga  metanol  dipilih  menjadi pelarut pengekstraksinya [36]. Ekstrak air daun paku resam  mengandung  senyawa  fenolik  seperti  asam kafeat  dan  asam  2-kumarat  [37].  Adanya  kandungan flavonoid pada paku resam memberi manfaat sebagai antijamur, antivirus [9], antiinflamasi, antikanker [10], dan  antibakteri  [11],  sehingga  berpotensi  untuk dikembangkan sebagai tanaman obat.

## KESIMPULAN
Pengujian metabolit sekunder secara kualitatif  pada ekstrak  air  daun  paku  resam  menujukkan  bahwa ekstrak  air  daun  paku  resam  positif   mengandung alkaloid,  fenol,  flavonoid,  tanin,  triterpenoid  dan negatif   mengandung  steroid  dan  saponin.  Pada ekstrak  metanol  daun  paku  resam,  positif mengandung  semua  metabolit  sekunder  kecuali
triterpenoid.  Analisis  kuantitatif   kandungan  total fenol diperoleh kadar total fenol yang lebih tinggi pada ekstrak  metanol  dibandingkan  ekstrak  air  dengan kadar  masing-masing  127,08  mg/g  GAE  dan  42,32 mg/g  GAE.  Adanya  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  pada  daun  paku  resam  ini  menunjukkan adanya potensi daun paku resam untuk dikembangkan sebagai tanaman obat.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Universitas Bangka Belitung atas pendanaan penelitian melalui  Skema  Penelitian  Dosen  Tingkat  Jurusan (PDTJ)  pada  tahun  2022  dengan  kontrak  penelitian pada  Lembaga  Penelitian  dan  Pengabdian  kepada Masyarakat (LPPM) Nomor: 295.H/UN50/L/PP/2022.

## DAFTAR PUSTAKA
[1]  J. Batoro, Pengantar Umum Keanekaragaman Hayati dan Tumbuhan Beracun, Jakarta: Media Nusa Creative (MNC Publishing), 2021.
[2]   H.  Hasibuan,  P.  W.  Rizalinda,  and  E.  Rusmiyanto, “Inventarisasi jenis paku-pakuan ( Pteridophyta ) di hutan
y = 0,0062x + 0,0476 R² = 0,9955 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 0 50 100 150 200 250 Abs o rba ns i (A) Konsentrasi Asam Galat (mg/L)

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …
sebelah  darat  Kecamatan  Sungai  Ambawang Kalimantan Barat,” Protobiont ,  vol. 5, no. 1, 2016.
[3]  Z. A. Zakaria, F. H. Kamisan, N. M. Nasir, L. K. Teh, and  M.  Z.  Salleh,  “Aqueous  partition  of   methanolic extract  of Dicranopteris  lienaris leaves  protects  againts liver  damage  induced  by  Paracetamol,” Nutrient, vol. 11, pp. 29-45, 2019.
[4]   Z. A. Zakaria, A. M. Jais, M. Mastura, S. H. Jusoh, A.
M.  Mohamed,  and  N.  S.  M.  Jamil,  “In  vitro antistaphylolcoccal  activity  of   extract  of   several neglected plants in Malaysia,” Int. J. Pharm , vol. 3, no. 5, pp. 428-431, 2007.
[5]  F.  H.  Kamisan,  F.  Yahya,  S.  S.  Mamat,  M.  F.  F. Kamarolzaman,  N.  Mohtarrudin,  and  T.  L.  Kek, “Effect  of   methanol  extract  of Dicarnopteris  linearis againts carbon tetrachloride-induced acute liver injury in rats,” BMC Complentary & Alternative Medicine , vol. 14, pp. 123, 2014.
[6]   G.  W.  Winda,  S.  Budhi,  and  L.  Sisilia,  “Etnobotani masyaralat  desa  saham  (Studi  kasus  di  Desa  Saham, Kecamatan  Sengah  Temila  Kabupaten  Landak, Kalimantan Barat,” J. Hutan Lestari , vol. 4, no. 1, pp. 1- 8, 2015.
[7]  J.  Nasution,  P.  D.  Masitah,  and  Riyanto,  “Kajian etnobotani  tumbuhan  obat  oleh  etnis  masyarakat  di dusun Aras Napal Kiri dan Dusun Aras Napal Kanan Desa  Bukit  Mas  Kecamatan  Besitang  Kabupaten Langkat,” Jurnal Biosains, vol.2, no. 2, pp. 91-96, 2016. [8]  O.  Komalasari,  S.  Maryani,  O.  Juairiyah,  and  D. Novriadhy, “Kearifan lokal masyarakat Desa Bakung dalam  memanfaatkan  Resam  ( Gleichenia  linearis ), Seduduk  ( Melastoma  malabathricum )  dan  Tembesu ( Fagraea  fragrans )  yang  tumbuh  di  tanah  bergambut sebagai  obat  herbal,”  In: Seminar  Nasional  Lahan Suboptimal, pp. 354-359, 2019.
[9]   L.  A.  Weston,  and  U.  Mathesius,  “Flavonids:  their structure,  biosynthesis  and  role  in  the  rhizosphere including allelopathy”, J. Chem. Ecol, vol. 39, pp. 283- 297, 2013.
[10] A.  N.  Pache,  A.  D.  Diwan,  and  S.  R.  Chandra, “Flavonoids: an overview,” J. Nutr. Sc, vol. 5, pp. 47, 2016.
[11] Salmi  dan  Swandi,  M.  K,  “Uji  aktivitas  antibakteri ekstrak  metanol  daun  paku  resam  ( Glechenia  linearis Burm.)  pada  tiga  bakteri  penyebab  akne  vulgaris,” Pharmaceutical and Biomedical Sciences Journal, vol. 4, no. 2, pp. 69-78, 2022.
[12]  Badan  Pengawas  Obat  dan  Makanan,  Monografi Ekstrak  Tumbuhan  dan  Obat  Indonesia,  Jakarta: BPOM RI, 2004.
[13] J. B. Harborne, Phytochemical Methods: A Guide to Modern  Techniques  of   Plant  Analysis,  London: Chapman and Hall, 2007.
[14] H.  Y.  Lai,  Y.  Y.  Lim,  and  S.  P.  Tan,  “Antioxidative, tyrosinase inhibiting and antibacteria activities of  leaf extracts from medicinal ferns,” Bioscience , vol. 73, no. 6, pp. 1362-1366, 2014.
[15]  A.  Saifudin,  V.  Rahayu,  H.  W.  Teruna,  Standardisasi Bahan Obat Alam, Jakarta: Graha Ilmu, 2011.
[16] Katno,  Penanganan  Pasca  Panen  Tanaman  Obat, Departemen  Kesehatan:  Balai  Besar  Penelitian  dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat Trandisional, 2008.
[17] M. G. Rasul, “Conventional extraction methods use in medicinal plants, their advantages and disadvantages,” International  Journal  of   Basic  Sciences  and  Applied Computing , vol. 2, no. 6, pp. 10-14, 2018.
[18] K.  M.  Roopashree,  D.  Naik,  “Advanced  method  of secondary metabolite extraction and quality analysis,” Journal of  Pharmacognosy and Phytochemistry , vol. 8, no. 3, pp. 1829-1842, 2019.
[19] C. W. I. Haminiuk, M. S. V. Plata-Oviedo, G. de Mattos, S.  T.  Carpes,  and  I.  G.  Branco,  “Extraction  and quantification  of   phenolic  acids  and  flavonols  from Eugenia pyriformis using different solvents,” J. Food Sci. Technol , vol. 51, no. 10, pp. 2862-2866, 2014.
[20] I.  F.  G.  Mera,  D.  E.  G.  Falconi,  V.  M.  Cordova, “Secondary  metabolite  in  plants:  main  classes, phytochemical analysis and pharmacological activities,” Bionatura , vol. 4, no. 4, pp. 1000-1009, 2019.
[21] A.  Raal,  A.  Moes,  H.  Hinrikus,  J.  Heinamaki,  E. Romane,  V.  Gudiene,  V.  Jakstas,  O.  Koshovyi,  A. Kovaleva,  C.  Fursenco,  T.  Chiru,  H.  T.  Nguyen, “Dragendorff ’s  reagent:  Historical  perspective  and current status of  versatile reagent introduced over 150 years ago at the University of  Dorpat, Tart, Estonia,” Pharmazie , vol. 75, pp. 299-306, 2020.
[22] W. C. Evans, Trease and Evans Pharmacognosy 16th Ed, New York: Elsevier, 2009.
[23] E.K. Sulasmi, M. Saptasari, K. Mawaddah, F.A. Zulfia. “Tannin identification of  4 species Prerydophyta from Baluran  National  Park”, IOP.  Conf.  Series:  Journal  of Physics: Conf. Series , vol.1241, pp. 012002, 2019.
[24] R.  Duraisamy,  T.  Shuge,  B.  Worku,  A.  K.  Berekete, “Extraction, screening and spectral characterization of tannin from Acacia xanthopholoea (Fever Tree) Bark. Res”, J. Textile Leather , vol. 1, no. 1, pp. 1-10, 2020.
[25] R.A. Alfauzi, L. Hartati, D. Suhendra, T.P. Rahayu, N.
Hidayah,  “Ekstraksi  senyawa  bioaktif   kulit  jengkol (Archidendron  jiringa)  dengan  konsentrasi  pelarut metanol  berbeda  debagai  pakan  tambahan  ternak ruminansia”, Jurnal Ilmu Nutrisi dan Teknologi Pakan , vol. 20, no. 3. pp. 95-103, 2022.
[26] N. Lokeswari, P. Sujatha, “Isolation of  Tannins from Caesalpinia  Coriaria  and  Effect  of   Physical

## Swandi, Gleichenia linearis (Burm.) C. B. Clarke …
Parameters”, International Research Journal  of   Pharmacy , vol. 2, no. 2, pp. 146-152, 2011.
[27]    A.K.  Das,  Md.  N.  Islam,  Md.  O.  Faruk,  Md. Ashaduzzaman,  R.  Dungani,  “Review  on  tannins: extraction  processes,  aplications  and  possibilities”, South African Journal of  Botany , vol. 135, pp. 58-70, 2020
[28] H.  O.  Edeoga,  D.  E.  Okwu,  B.  O.  Mbaebie,
“Phytochemical  constituents  of   some  Nigerian medicinal plants”, Afr. J. Biotecnol, vol. 4, pp. 685-688,
2005.
[29] T. V. Ngo, C. J. Scarlett, M. C. Bowyer, P. D. Ngo, Q. V. Voung, “Impact of  different extraction solvents on bioactive  compounds  and  antioxidant  capacity  from the root of Salina chinensis L.”, Journal of  Food Quality , vol. 2017, ID 9305047, 2017.
[30] O. Guclu-unstudag, G. Mazza, “Saponins: properties, aplications,  and  processing”, Critical  Review  in  Food Science and Nutrition , vol. 47, pp. 231-258, 2007.
[31]  P.  Riwanti,  F.  Izazih,  A.  Amaliyah,  “Pengaruh perbedaankonsentrasi  etanol  pada  kadar  flavonoid total ekstrak etanol 50, 70 dan 96% Sargassum polycystum dari  Madura”, Journal  of   Pharmaceutical  Care  Anwar Medika (J-PhAM), vol. 2 no.2, pp. 82-95, 2020.
[32] Q.  Xiong,  B. Ruan, F.  G. Whitby,  R.  P. Tuohy,  T.  L. Belanger,  R.  I.  Kelley,  W.  K.  Wilson,  G.  J.  Jr. Schroepfer,  “A  colorimetric  assay  for  7- dehydrocholesterol  with  potential  application  to screening  for  Smith-Lemli-Optitz  syndrome”, Chem. Phys. Lipid , vol. 115, no. 1-2, pp. 1-15, 2002.
[33] S.  Kupina,  C.  Fileds,  M.  C.  Roman,  S.  L.  Brunelle, “Determination  of   total  phenolic  centent  using  the folin-C assay: single-laboratory validation”, Journal of
AOAC International , vol. 102, no. 1, 2019.
[34] R. M. Lamuela-Raventos, Folin-Ciocalteu method for the  measurement  of   total  phenolic  content  and antioxidant  capacity  in  Measurement  of   Antioxidant Activity & Capacity; Recent Trends and Applications,
R.  Apak,  E.  Capanoglu,  and  F.  Shahidi,  editors, Hoboken: John Wiley & Sons Ltd, 2018.
[35] H.  S.  Oberoi,  S.  K.  Sandhu,  “Therapeutic  and nutraceutical  potential  of   bioactive  compounds extracted  from  fruit  residues  Au-Babbar”, Food  Sci. Nutr , vol. 55, pp. 319-337, 2015.
[36] L.  Wang,  and  C.  L.  Weller,  “Recent  advance  in extraction  of   nutraceutical  from  plants”, Trends  Food Sci. Technol , vol. 17, pp. 300-312, 2006.
[37] R.  Othman,  R.  Ramya,  N.  M.  Hassan,  S.  Kamoora,
“Qualitative  and  quantitative  phenolic  compound analysis  of   Dicranopteris  linearis  different  fractional polarities leaves extract”, J. Pharm. Nutr., vol. 10, no. 1, pp. 1-10, 2020.