Jurnal Kedokteran Universitas Palangka Raya ISSN 2355-0015 EISSN 2723-5890
Vol 11 (2): 54-62
https://e-journal.upr.ac.id/index.php/JK DOI: 10.37304/jkupr.v11i2.11038
Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International
PERBANDINGAN EKSTRAKSI AKAR KUCING ( Acalypha indica L.)

## DENGAN EKSTRAK ETANOL 96% DAN EKSTRAK AKUADES TERHADAP PERTUMBUHAN EPEC DAN Candida albicans
COMPARISON OF THE EFFECTS OF EXTRACTING AKAR KUCING (Acalypha indica L. ) WITH 96% ETHANOL AND WITH WATER ON THE DEVELOPMENT OF Candida albicans AND EPEC
Musjaya M. Guli 1 * , Yuyun Jannatul Zahra 1 , Muh. Akbar Ardiputra 1 , Agnes Immanuela Toemon 2
1 Program Studi Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengentahuan Alam, Universitas Tadulako, Kota Palu, Sulawes Tengah, Indonesia. *e-mail: musmedik@gmail.com
2 Departemen Parasitologi, Fakultas Kedokteran, Universitas Palangka Raya, Palangka Raya, Kalimantan Tengah, Indonesia
( Naskah diterima: 9 Oktober 2023. Disetujui: 29 Oktober 2023)
Abstrak. Akar kucing ( Acalypha indica L.) dijadikan sebagai objek penelitian dan dilakukan ekstraksi yang bertujuan untuk mengetahui aktivitas antimikroba ekstrak etanol 96% dan akuades terhadap bakteri EPEC ( Enterophatogenic  Escherichia  coli )  dan  jamur Candida  albicans. Metode  pengambilan  sampel tumbuhan menggunakan purposive sampling . Ekstraksi senyawa aktif dilakukan dengan metode maserasi. Pengujian  potensi  antimikroba  menggunakan  metode  difusi-agar  dengan  dua  jenis  mikroba  patogen bakteri EPEC dan  jamur Candida  albicans .  Pada  setiap paper  disk diberi  masing-masing  50  µL  isolat bakteri,  diinkubasi  pada  suhu  37 0 C  selama  24  jam  sampai  48  jam.  Parameter  yang  diamati  yaitu  zona bening  yang  terbentuk  di  sekeliling paper  disk .  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  tumbuhan  akar kucing  ( A.  indica L.)  mengandung  senyawa  yang  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri EPEC dan jamur C. albicans . Pelarut yang baik untuk menyaring senyawa aktif yang terkandung di dalam tumbuhan akar kucing ( A. indica L.) adalah akuades. Perlakuan ekstrak akuades dengan konsentrasi 100% memiliki zona  hambat  yang  terluas  diantara  perlakuan  yang  lain,  yakni  6,8  mm  terhadap  pertumbuhan  bakteri EPEC dan  ekstrak  etanol  dengan  konsentrasi  100%  dan  3,8  mm  terhadap  pertumbuhan  jamur Candida albicans .
Kata kunci: Acalypha indica L., zona hambat, antimikroba
Abstract. Acalypha indica L. extracted and used to examine the antimicrobial activity of the extract using ethanol 96% and aquadest as solvent against EPEC ( Enterophatogenic Escherichia coli ) bacteria and the fungus Candida  albicans .  Sampling  method  used  was  purposive  sampling  and  extraction  method  used was  materation.  Antimicrobial  activity  test  was  evaluated  using  the  disk  diffusion  method.  Fifty  µL  of microbial  was pour to disk and incubated in 37 o C  for 24 to 48 hours.  Zone inhibition that  formed  was observed around the disk. Results showed that A. indica L. can inhibit the growth of EPEC bacteria and the fungus C. albicans . A good solvent to extract A. indica L. is aquadest. Group of aquadest extract with 100% concentration had the widest inhibition zone among other group with 6.8 mm against the growth of EPEC bacteria and ethanol extract with 100% concentration was 3.8 mm against the growth of the fungus C. albicans .
Keywords: Acalypha indica L , zone of inhibition, antimicrobial

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  salah  satu  negara yang  beriklim  tropis  sehingga  memiliki  tanah yang  subur.  Terdapat  banyak  spesies  tumbuhan
yang  beranekaragam  di  sekitar  kita  yang memiliki  manfaat  untuk  menunjang  kehidupan manusia,  baik sebagai bahan makanan maupun sebagai  bahan  obat.  Jumlah  tumbuhan  yang sudah  terdata  kurang  lebih  38.000  spesies
teridentifikasi  di  Indonesia,  dan  sekitar  2.000 spesies yang baru sebagai tumbuhan obat. 1
Tumbuhan akar kucing ( Acalypha indica L.)  banyak  ditemukan  di  Indonesia,  India, Indocina  dan  Ethiopia.  Tumbuhan  berhabitus herba  menahun dengan tinggi  mencapai 80 cm, Batangberambut,biasanya tidak bercabang- cabang.  Helaian  daun  tunggal,  letak  berseling, panjang tangkai daun 2-6 cm, bentuk daun bulat telur  sampai  belah  ketupat.  Bunga  jantan tersusun dalam satu bulir, perhiasan bunga kecil berwarna  putih,  daun  pelindung  hijau  dengan tepi  bergerigi  halus.  Bunga  betina  tersusun dalam satu bulir, daun pelindung berwarna hijau seperti mangkuk, tepi daun pelindung bergerigi, tidak  berambut,  lebar  daun  pelindung  3-4  mm, dan  panjang  7-10  mm.  Buah  berbentuk  kapsul kecil,  terdiri  atas  tiga  ruang  ovarium,  ukuran diameter  buah  2-2-5  mm,  setiap  buah  berisi  3 biji,  berwarna  coklat  keabu-abuan.  Berbunga sepanjang  tahun,  banyak  tumbuh  di  dataran rendah, tepi jalan atau sawah. 2
Penelitian  ini  menggunakan  tumbuhan akar  kucing  ( A.  indica L.)  karena  memiliki banyak  manfaat  dan  banyak  digunakan  oleh masyarakat  luas  sebagai  obat  disentri,  diare, gangguan  pencernaan,  muntah  darah,  berak darah,  dan  kencing  darah. 3 Tumbuhan  akar kucing  ( A.  indica L.)  mengandung  glikosida sianogenik: akalipin (0,3% turunan 3- siaonopiridon);  tannin:  asam  tri-o-metilelagat; minyakatsiri; flavonoid : krisin, galangin, mauritianin,  klitorin,  nikotiflorin  dan  biorobin. 4
Berdasarkan database dari Phytochemical  and Ethnobotanical kandungan  kimia  dari  akar kucing  ( A.  indica L.)  meliputi  fiber,  asam askorbat, beta-sitosterol, beta D-glukosa, tannin, kaempferol.  Hasil  penelitian  menunjukkan bahwa  senyawa  tersebut  dapat  digunakan sebagai  antibakteri  atau  anti  jamur.  Secara Etnobotani tumbuhan akar kucing (A. indica L.) dapat  dijadikan  sebagai  obat  disentri,  diare, gangguan  pencernaan,  muntah  darah,  berak darah, dan kencing darah. 3
Bakteri  patogen EPEC dan Candida albicans dipilih  sebagai  mikroba  uji  karena kedua  jenis  mikroba  ini  memiliki  sifat  sebagai patogen  klinis. Enteropathogenic  Escherichia coli ( EPEC )  merupakan  salah  satu  bakteri patogen yang dapat menyebabkan diare. Bakteri
EPEC melekat  pada  sel  mukosa  usus  dan meyebabkan  terjadinya  perubahan  struktur  sel. 5 C.  albicans merupakan  suatu  jamur  dari kelompok  khamir  yang  berbentuk  lonjong,
berkembang dengan bertunas, dan menghasilkan pseudomiselium baik  dalam biakan  maupun  dalam  jaringan  dan  eksudat. Jamur ini dapat menyebabkan penyakit sistematik  progresif  pada  penderita  yang memiliki  sistem  kekebalan  tubuh  yang  rendah. C.  albicans dapat  menimbulkan  invasi  dalam aliran  darah,  tromboflebitis,  endokarditis,  atau infeksi pada mata dan organ-organ lain. 6
Tumbuhan  akar  kucing  ( A.  indica L.) memiliki  manfaat,  kegunaan,  dan  kandungan yang  dibutuhkan  dalam  kehidupan  manusia, utamanya  dalam  aspek  kesehatan.  Penelitian mengenai  aktivitas  antimikroba  dari  ekstrak akar  tumbuhan  akar  kucing  ( A.  indica L.) terhadap  pertumbuhan  bakteri  patogen EPEC maupun  jamur  patogen C.  albicans belum banyak dilakukan dan terpublikasi. Oleh karena itu  penelitian  ini  bertujuan  untuk  menentukan perbandingan  aktivitas  ekstrak  etanol  dan akuades dari akar kucing ( A. indica L.) terhadap pertumbuhan  bakteri  patogen EPEC dan  jamur C.  albicans ,  hasil  penelitian  ini  diharapkan dapat  memberikan  informasi  baru  terhadap perbandingan  aktivitas  ekstrak  etanol  dan akuades dari akar kucing ( A. indica L.) terhadap pertumbuhan  bakteri  patogen EPEC dan  jamur C. albicans .

## METODE
Penelitian  dilaksanakan  pada  bulan Januari  hingga  Maret  2021.  Sampel  tumbuhan akar  kucing  ( A.  indica L.)  diperoleh  dari Kelurahan Tondo Kecamatan Mantikulore Kota Palu  dengan  metode  pengambilan  sampel purposive  sampling .  Sampel  diambil  pada habitatnya  secara  acak.  Pemeriksaan  sampel dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi
Jurusan  Biologi  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Tadulako.
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimental laboratorium, dengan pendekatan kuantitatif.  Rancangan  yang  digunakan  adalah Rancangan  Acak  Lengkap  Faktorial  (RAL- Faktorial)  yang  terdiri  dari  dua  faktor  yakni pelarut  dan  konsentrasi  ekstrak.  Faktor  pelarut terdiri  dari  dua  taraf  yaitu  pelarut  etanol  96% dan akuades steril, sedangkan faktor konsentrasi
ekstrak  terdiri  dari  dua  taraf  juga  yaitu konsentrasi  50%  dan  100%.  Selanjutnya diujikan  terhadap  kedua  macam  mikroba patogen manusia yaitu bakteri EPEC dan jamur
C. albicans . Pengulangan yang dilakukan untuk setiap  perlakuan  penelitian  ini  adalah  sebanyak tiga  kali.  Alat  yang  digunakan  pada  penelitian ini  adalah  blender,  cawan  petri,  gelas  ukur, tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi,  pipet  tetes, neraca analitik, Erlenmeyer, toples kaca, batang segitiga,  spatula,  batang  pengaduk, Autoclave , laminar  air  flow ,  Bunsen,  saringan,  jarumose, corong,  mikropipe,  mistar,  sekop,  rotary evavorator , hotplate , vortex , inkubator ,  jangka sorong,  spidol  dan  kamera.  Bahan  yang digunakan pada penelitian ini adalah simplisia  tumbuhan  akar  kucing  ( A.  indica L.)  yang  berasal  dari  Kelurahan  Tondo Kecamatan  Mantikulore  Kota  Palu.  Mikroba uji  yang  digunakan  untuk  menguji  aktivitas senyawa aktif yang terkandung di dalam ekstrak akar kucing ( A. indica L.) adalah bakteri EPEC dan  jamur Candida  albicans yang  berasal  dari Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  MIPA Universitas
Brawijaya, Malang . Medium pertumbuhan bakteri EPEC yaitu Nutrient Agar (NA) (Oxoid) sedangkan jamurnya menggunakan  medium Potato  Dextrose  Agar (PDA)  (Oxoid).  Pelarut  yang  digunakan  adalah etanol  96%  dan  akuades  steril  yang  diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan  Alam Universitas Tadulako.

## Persiapan Sampel Untuk Simplisia
Sampel  akar  kucing  ( A.  indica L.) diambil menggunakan metode purposive sampling di  Kelurahan  Tondo  Kecamatan Mantikulore  Kota  Palu.  Tumbuhan  akar  kucing ( A.  indica L.)  diambil  pada  pagi  hari  karena tekstur  tumbuhannya  masih  segar.  Sampel diambil  pada  bagian  akarnya  saja,  yaitu  dari leher  akar  sampai  keseluruhan  akar  yang  digali dengan  bantuan  sekop.  Akar  yang  telah dikumpulkan  dicuci  dengan  air  mengalir, kemudian  dikeringkan  dengan  cara  diangin- anginkan  sampai  kering  selama  satu  minggu. Setelah sampel kering lalu diblender sebanyak 1 kg  sampai  terbentuk  jadi  serbuk.  Selanjutnya sampel  simplisia  yang  sudah  berbentuk  serbuk dimasukkan  ke  dalam  toples  sesuai  dengan perlakuan  untuk  dilakukan  proses ekstraksi dengan menggunakan metode maserasi.
Pembuatan Ekstrak Dengan Metode Maserasi Proses pengenceran ekstrak untuk
memperoleh  konsentrasi  50%  dengan  cara masing-masing ekstrak kental diencerkan
dengan  cara  dicampurkan  dengan  pelarut akuades steril masing-masing dengan perbandingan (1:1), sedangkan untuk konsentrasi 100% tidak dilakukan pencampuran/pengenceran. Kontrolnya
menggunakan  larutan  etanol  dan  akuades. Setelah  itu  diinkubasi  pada  suhu  37°C  selama 24 jam dan dilanjutkan sampai 48 jam.
Pembuatan  ekstrak  dengan metode maserasi  yaitu  dengan  ditimbang  masing- masing  sebanyak  500  g  serbuk  sampel,  lalu dimasukkan  masing-masing  kedalam  toples yang  telah  dipersiapkan  untuk  proses  maserasi. Selanjutnya  dilakukan  proses  ekstraksi  dengan metode maserasi (perendaman) yang menggunakan  dua  macam  pelarut  yaitu  etanol 96%  sebanyak  1000  mL  dan  akuades  steril sebanyak  1000  mL.  Caranya  adalah  merendam serbuk  akar  dengan  masing-masing  pelarut dengan  sesekali  pengadukan  sampai  terendam semua  serbuk  akar  tersebut.  Proses  maserasi dilakukan  secara  berulang  dengan  pelarut  yang sama  sebanyak  tiga  kali  penyaringan.  Proses penggantian  pelarut  dilakukan  selama  24  jam dengan  diberikan  pengadukan  setiap  1-2  jam sampai  tenggelam  semua  serbuk  sampel  akar. Maserasi  hari  pertama  menggunakan  pelarut etanol  96%  sebanyak  1000  mL  dan  akuades steril  sebanyak  1000  mL,  maserasi  hari  kedua menggunakan  etanol  96%  sebanyak    500  mL dan  akuades  steril  sebanyak  500  mL,  maserasi hari  ketiga  menggunakan  pelarut  etanol  96% sebanyak  200  mL    dan  akuades  steril  sebanyak 200 mL. Setelah proses maserasi selesai selama 3  hari  perendaman,  selanjutnya  hasil  dari  air perendaman tersebut dimasukkan dan disatukan dalam satu wadah untuk dilanjutkan pada proses selanjutnya
Cara  pemekatan  hasil  ekstraksi  akar  kucing ( A. indica L.)
Masing-masing ekstrak cair dari pelarut  etanol  dan  akuades  hasil  ekstraksi pertama, kedua dan ketiga disatukan. Dari hasil
ekstraksi  didapatkan  masing-masing  1500  mL ekstraksi  etanol  96%  yang  berwarna  coklat  tua dan  1500  mL  ekstraksi  akuades  yang  berwarna coklat  muda.  Kemudian  dilakukan  pemekatan ekstrak dengan
menggunakan rotary evaporator . Semua ekstrak cair yang dihasilkan selanjutnya dipekatkan
menggunakan evaporator bertekanan  rendah  pada  suhu  40°C selama  empat  hari  dengan  waktu  yang  berbeda (satu hari untuk ekstrak etanol 96% dan tiga hari untuk  akuades  steril)  sampai  diperoleh  ekstrak kental.  Pertama  disiapkan  sampel  atau  bahan cairan  yang  telah  dipreparasi  sebelumnya. Dilepaskan  labu  alas  bulat  dan  dimasukan sampel ke labu alas bulat sesuai dengan volume yang  telah  ditentukan,  dipastikan  mencatat volume  atau  jumlah  dari  sampel  di  labu  alas bulat,  kemudian  dipasang  kembali  labu  alas bulat  ke  main  unit.  Jika  dirasa  proses  melepas dan  memasang  labu  alas  bulat  cukup  sulit,  bisa dihubungkan  langsung  ke  sumber  daya  terlebih dahulu, dinyalakan power rotary evaporator dan meninggikan  posisi  alat.    C hamber  waterbath diisi  dengan  akuades  lalu disetting suhu  sesuai dengan kebutuhan (40°C). Kemudian waterbath dinyalakan  dan  diturunkan  posisi  labu  alas bulat,  sehingga  air  pada chamber  waterbath bisa   memanaskan  labu  alas  bulat,  namun  tidak merendam  terlalu  banyak.  Kemudian disetting kecepatan putaran dan metode putaran. Kemudian dimulai putaran.
Diamati  proses  perputaran  labu  alas bulat,  jika  terdapat  kejanggalan,  seperti  tidak simetris  perputarannya,  maka  diperbaiki  posisi labu alas bulat dengan  penjepitnya.  Dinyalakan vakum  untuk  menurunkan  tekanan  karena proses pemanasan akan meningkatkan suhu dan tekanan.  Diamati  prosesnya,  apakah  terdapat tetesan pelarut yang masuk ke labu penampang. Proses evaporasi ini  cukup  memakan  waktu yang  berbeda-beda,  tergantung  pada  suhu  pada waterbath yang  telah  diatur  sebelumnya. Dipastikan  sudah  memahami  tentang  beberapa titik  didih  dari  masing-masing  pelarut  sebelum menggunakan  alat  ini.  Setelah  proses  ekstraksi berakhir, dilepaskan kembali labu alas bulat dan labu  penampung  dari main  unit ,  dan  dipastikan telah mematikan tombol putaran dan waterbath . Perlu  berhati-hati  ketika  melepas  labu  alas bulat.  Jika  dirasa  cukup  sulit  dan  panas,  bisa
mngatur  ketinggiannya.  Pada  dasarnya  alat  ini bekerja  dan  merubah  energi  listrik  menjadi gerak dan energi panas. Energi panas diperlukan untuk  memanaskan chamber  waterbath ,  dan energi  gerak  diperlukan  untuk  memutar  (rotasi) labu alas bulat.

## Pembuatan Suspensi Mikroba Uji
Bakteri  yang  digunakan  sebagai  bakteri uji  adalah  bakteri EPEC yang  bersifat  patogen
terhadap manusia yang berasal dari Laboraturium  Mikrobiologi  FMIPA Universitas Brawijaya,  Malang  dan  jamurnya  adalah C. albicans yang  berasal  dari  Laboraturium Mikrobiologi  FMIPA  Universitas  Brawijaya , Malang . Kedua  jenis  mikroba  ini  diremajakan dengan  ditumbuhkan  pada  medium Nutrient Broth (NB) dan Potato  Dextro  Agar (PDA). Kedua  mikroba  uji  ini  ditumbuhkan  pada  suhu 37°C selama 48 jam dengan agitasi. Selanjutnya masing-masing  mikroba uji  yaitu bakteri EPEC ditumbuhkan pada medium Nutrient Broth (NB) dan  jamur C.  albicans ditumbuhkan  pada medium Potato Dextro Agar (PDA). (EPEC dan C.  albicans )  perlu  diremajakan  dalam  media cair/broth  NB  dan  PDA  Dari  media  broth  ini sudah  ditentukan  densitas/kerapatan  selnya  10 6 sel/mL  diambil  sebanyak  100  µL  untuk  siap diinokulasikan  dengan  metode  sebar  ( spread plate )  pada  agar  cawan  yang  disesuaikan dengan rancangan perlakuzn.

## Pengujian Aktivitas Ekstrak
Uji aktivitas antimikroba ekstrak
tumbuhan  akar  kucing  ( A.  indica L.)  ini menggunakan
metode
difusi dengan
menggunakan paper-disk. Metode ini digunakan untuk penentuan aktivitas  yang didasarkan oleh kemapuan difusi dari zat antimikroba yang telah diinokulasi  dengan  bakteri  uji  (Brooks et  al .,
2007).  Pada  Cawan  diisi  medium Nutrien  Agar
(NA)  sebanyak  20  mL,  lalu  diinokulasikan mikroba  uji  bakteri EPEC dan  jamur C. albicans sebanyak    50  µL  dengan  kerapatan se10 6 sel/ml.  selanjutnya paper  disk diletakan
diatas permukaan medium dengan jarak tertentu namun  sebelumnya  masing-masing paper  disk telah ditetesi ekstrak (A. indica L.) sebanyak 50 µL  yang  sesuai  dengan  rancangan  penelitian. Parameter  yang  diukur  adalah  zona  hambat
pertumbuhan  mikroba  uji  yang  ditandai  dengan terbentuknya  zona  bening  di  sekitar  sumuran. Data  penelitian  yang  diperoleh  dianalisis dengan  menggunakan  Anova  ( analysis  of variance )  two  way  anova  pada  Program  SPSS Versi  24.0  dengan  tingkat  signifikansi  yang digunakan p < 0,05.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil  uji  aktivitas  ekstrak  akar  kucing ( A.  indica L.)  terhadap  pertumbuhan  bakteri EPEC dan jamur C. albicans dengan perlakuan pelarut  etanol  dan  akuades,  serta  konsentrasi ekstrak  50%  dan  100%  menunjukkan  adanya
aktivitas  penghambatan  terhadap  pertumbuhan bakteri EPEC dan  jamur C.  albicans .  Hal  ini dibuktikan  dengan  terbentuknya  zona  hambat disekitar  lubang  sumuran  pada  gambar  1.  Zona hambat yang dihasilkan dari ekstrak akar kucing ( A  indica L.)  dengan  menggunakan  etanol  dan akuades  memiliki  daya  hambat  yang  berbeda. Adanya  zona  bening  (zona  hambat)  di  sekitar paper  disk menunjukkan  adanya  penghambatan pertumbuhan mikroba uji.
Gambar 1. Pembentukan zona hambat dari ekstrak akar kucing ( A. indica L.) yang berbeda pelarut dan konsentrasi terhadap pertumbuhan bakteri EPEC dan jamur C. albicans : (a) ekstrak akuades dengan  konsentrasi  50%  dan  100%  terhadap C.  albicans, (b)  ekstrak  etanol  96%  dengan konsentrasi  50%  dan  100%  terhadap C.  albicans, (c)  ekstrak  akuades  dengan  konsentrasi 50%  dan  100%  terhadap EPEC dan  (d)  ekstrak  etanol  96%  dengan  konsentrasi  50%  dan 100% terhadap EPEC . a b d c
Gambar 2.  Perlakuan uji aktivitas ekstrak akar kucing ( A. indica L.) terhadap pertumbuhan bakteri EPEC dengan pelarut etanol dan akuades dengan konsentrasi 50% dan 100%Ekstrak akar kucing ( A. indica L.)  yang  dihasilkan  dari  pelarut  yang  menggunakan  akuades  steril  lebih  baik dibandingkan  dengan  etanol  96%  dengan  nilai mean  difference (I-J)  4.80, sedangkan konsentrasi  ekstrak  yang  tinggi  zona  hambatnya  terhadap  pertumbuhan  bakteri EPEC adalah konsentrasi 100%. Zona hambat terbesar terhadap pertumbuhan bakteri EPEC dengan rata-rata 6,8 mm, dan berbeda secara signifikan pada semua perlakuan yang diujikan pada gambar 2.
Gambar  3.    Perlakuan  uji  aktivitas  ekstrak  akar  kucing  ( A.  indica L.)  terhadap  pertumbuhan  jamur C. albicans dengan pelarut etanol dan akuades dengan konsentrasi 50% dan 100%.
Ekstrak  akar  kucing  ( A.  indica L).  yang dihasilkan  dari  pelarut  yang  menggunakan etanol  96%  lebih  baik  dibandingkan  dengan menggunakan  akuades  dengan  nilai mean difference (I-J) = -4.083. Sedangkan konsentrasi ekstrak  yang  tinggi  zona  hambatnya  terhadap pertumbuhan jamur C. albicans adalah konsentrasi  100%.  Zona  hambat  terbesar terhadap  pertumbuhan  jamur C.  albicans dengan  rata-rata  3,8  mm,  dan  berbeda  secara signifikan  pada  semua  perlakuan  yang  diujikan pada gambar 3. Hasil penelitian ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  akar  kucing  ( A. indica L.)  dengan  menggunakan  etanol  96% lebih  efektif  karena  pelatutnya  bersifat  semi polar.  Pelarut  etanol  96%  yang  digunakan adalah  etanol  96%  karena  mudah  melarutkan
senyawa-senyawa  metabolik  aktif  yang  berefek anijamur  seperti  fenol,  tanin,  flavonoid  dan minyak atsiri yang terkandung dalam tumbuhan akar kucing ( A. indica L.). Menurut Nursal et al.
(2006) akar kucing ( A. indica L.)
mengandungsenyawa antimikroba golongan
fenol,  tanin,  falvonoid  daun  minyak  atsiri  yang terdapat pada ekstrak akar kucing ( A. indica L.) merupakan  golongan  senyawa  bioaktif  yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba. 7
Penelitian  ini  melakukan  ekstraksi yang  menggunakan  pelarut  polar  yaitu  akuades dan  ekstraksi  yang  menggunakan  semi  polar yaitu  etanol  96%.  Senyawa  yang  memiliki kepolaran yang sama akan lebih mudah tertarik atau  terlarut  dengan  pelarut  yang  memiliki tingkat  kepolaran  yang  sama,  sehingga  pelarut
akuades mendapatkan isolasi komponen senyawa  aktif  tanin  dan  flavonoid  karena senyawa-senyawa  tersebut  dapat  larut  dalam pelarut akuades tapi hal yang sama tidak terjadi pada  minyak  atsiri  karena  minyak  atsiri merupakan  senyawa  non-polar.  Kemungkinan besar  minyak  atsiri  banyak  terikat  dengan etanol  96%  karena  sifatnya  yang  sama,  oleh karena  itu  ekstrak  akar  kucing  ( A.  indica L.) dengan  pelarut  etanol  96%  lebih  efektif dibandingkan dengan pelatut akuades.
Hasil  pengujian  ekstrak  akar  kucing ( A.  indica L.)  terhadap  pertumbuhan  bakteri EPEC dan  jamur C.  albicans dipengaruhi  oleh konsentrasi pada larutan yang berbeda.
Berdasarkan hasil penelitian pada uji antimikroba tersebut, maka ekstrak akar kucing ( A.  indica L.)  dengan  konsentrasi  ekstrak akuades 100% EPEC memiliki rata-rata 6,8 mm dan  konsentrasi  ekstak  etanol  100%  Ca memiliki  rata-rata  3,8  mm.  Rata-rata  zona hambat  terluas  terdapat  pada  konsentrasi akuades  100%  pada  bakteri EPEC yakni  6,8 mm  dan  konsentrasi  etanol  100%  jamur C. albicans memiliki  rata-rata  3,8  mm  dari  semua konsentrasi  ekstrak,  sedangkan  rata-rata  zona hambat terkecil yang terbentuk pada konsentrasi etanol  50%  pada  bakteri EPEC yakni  1,0  mm dan  konsentrasi  etanol  50%  pada  jamur C. albicans . yakni 1,3 mm.   Hal ini sesuai dengan hipotesis  yang  menyatakan  bahwa  semakin besar atau tinggi konsentrasi ekstrak maka zona hambat  yang  terbentuk  akan  semakin  besar. Zona  hambat  yang  dihasilkan  dari  berbagai konsetrasi  akuades  50%  dan  100%  serta  etanol 50%  dan  100%  terhadap pertumbuhan  mikroba uji memiliki diameter yang berbeda dan kriteria kekuatan  antimikroba  yang  berbeda.  Rentang zona  hambat  yang  terbentuk  hanya  1,0  mm hingga 6,8 mm.
Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak akar  ( A.  indica L.)    mengandung  zat antimikroba yang dapat menghambat pertumbuhan  bakteri EPEC dan  jamur C. albicans walaupun  daya  hambatnya  lemah  dan sedang.  Hasil  skrinig  fitokimia  ekstrak  etanol ( A. indica L.)  menunjukan bahwa ( A. indica L.) mengandung  senyawa alkaloid dan tannin  yang memiliki  aktivitas  antifungi  terhadap  jamur
Candida glabrata,
Aspergillus flavus,
penecilium chrysogenum, dengan besar penghambatan yaitu  3,8  mm,  2,0  mm,  1,3  mm pada  konsentrasi  yang  paling  tinggi    yaitu konsentrasi  100%. 8 Menurut  Priya  (2015) menambahkan  bahwa  hasil  ekstrak  metanol  ( A. indica L.)  yaitu  tannin,  flavonoid,  saponin, alkaloid,  dan  terponoid  dapat  menghambat bakteri EPEC dan  jamur C.  albicans dengan besar  zona  hambat  6,8  mm,  4,0  mm,  1,7  mm. Identifikasi  golongan  senyawa  saponin  yang telah dilakukan pada tumbuhan akar kuicng ( A. indica L.).  Saponin  merupakan  senyawa  aktif permukaan  yang  kuat  dan  pada  senyawa  ini dapat  menimbulkan  busa  bila  dikocok  dalam air.  Busa  yang  ditimbulkan  karena  adanya senyawa  saponin  ini  karena  adanya  kombinasi strukstur  senyawa  penyusunanya  yang  disebut dengan  rantai  sapogenin  nonpolar  dan  rantai samping  polar  yang  larut  dalam  air.  Senyawa saponin  ini  mempunyai  molekul  yang  menarik air  atau  hidrifilik  dan  molekul  yang  dapat melarutkan  lifopilik  atau  lemak  sehingga  dapat mengganggu  permeabilitas  membrane  sel  suatu mikroba,  serta  dapat  mengubah  struktur  dan fungsi  membran  sehingga  membran  sel  rusak dan kemudian lisis.
Rata-rata  dari  diameter  zona  hambat yang  terbentuk  dari  ekstrak  akar  kucing  ( A. indica L.)  dapat  dikategorikan  dalam  golongan antibiotik sedang. Hal ini di karenakan rata-rata diameter zona hambat yag terbentuk kurang < 7 mm.  Terdapat  4  kategori  antibakteri  yaitu kategori  sangat  kuat,  kuat,  sedang  dan  lemah. Kategori  antibakteri  sangat  kuat  yaitu  dapat membentuk diameter zona hambat lebih dari 20 mm.  Kategori  antibakteri  kuat  yaitu  dapat membentuk  diameter  zona  hambat  antara  10 mm  –  20  mm.  Kategori  ekstak  sedang  yaitu dapat membentuk diameter zona hambat 5 – 10 mm.  Kategori  ekstrak  lemah  yaitu  dapat membentuk  diameter  zona  hambat  kurang  5 mm. 9
Penggunaan  etanol  digunakan  sebagai pelarut  dikarenakan  mempunyai  gugus  OH sehingga  mampu  menarik  senyawa-senyawa yang bersifat polar juga memiki gugus CH yang mampu  menarik  senyawa  non  polar  sehingga semua  jenis  yang  terkandung  pada  tumbuhan. 10 Hal  ini  dikarenakan  etanol  yang  bersifat  semi polar  dapat  melarutkan  senyawa-senyawa  yang
polar maupun non-polar seperti tanin, flavonoid, fenol  dan  minyak  atsiri.  Sedangkan  akuades adalah zat kimia yang istimewa, terdiri dari dua atom  hydrogen  dan  satu  atom  oksigen  dengan rumus  kimia.  Akuades  bersifat  netral  (pH=7) dalam keadaan murni. Akuades tidak berwarna, tidak berasa dan tidak berbau. Akuades bersifat polar karena adanya perbedaan muatan merupakan pelarut yang baik karena kepolarannya,  konstanta  dielektrik  yang  tinggi dan  ukurannya  yang  kecil, terutama  untuk senyawa  ionik  dan  garam  yang  polar  yang bersifat  polar  dapat  melarutkan  senyawa  tanin dan flavonoid yang mempunyai efek
menghambat dan membunuh bakteri EPEC dan jamur C. albicans . Senyawa antijamur mempunyai berbagai  mekanisme  penghambatan  terhadap sel jamur. Menurut Djunaedy (2008) menyatakan bahwa senyawa antijamur memiliki  mekanisme  kerja  dengan  cara menetralisasi  enzim  yang  terkait  dalam  invasi dan  kolonisasi  jamur,  merusak  membran  sel jamur,  menghambat  sistem  enzim  jamur sehingga  mengganggu  terbentuknya  ujung  hifa dan  mempengaruhi  sintesis  asam  nukleat  dan protein. 11 Metabolit  lain  yang  didapatkan  dan memiliki  kemampuan  yang  baik  sebagai  anti
jamur ialah saponin. Saponin merupakan golongan  metabolit  yang  dapat menghambat  atau  membunuh  C.  albicans dengan  cara  menurunkan  tegangan  permukaan membran  sterol  dari  dinding  sel  C.  albicans, sehingga permeabilitasnya meningkat.
Permeabilitas  yang  meningkat  mengakibatkan cairan  intraseluler  yang  lebih  pekat  tertarik keluar sel sehingga nutrisi, zat-zat metabolisme,  enzim,  protein  dalam  sel  keluar dan  jamur  mengalami  kematian. 12 Saponin memiliki  kerangka  glikosida  kompleks  yang apabila  dihidrolisis  akan  menghasilkan  suatu senyawa  triterpenoid  dan  glikosida.  Menurut Ismaini  (2011)  menambahkan,  triterpenoid bersifat  toksik  yang  dapat  menimbulkan kerusakan  pada  organel-organel  sel  sehingga menghambat  terjadinya  pertumbuhan  jamur patogen. 13
Isolat  bakteri  penghasil  antimikroba memiliki kemampuan berbeda dalam menghambat mikroba patogen uji. Kemampuan isolat  bakteri  dalam  menghambat  mikroba patogen  uji  dapat  di  golongkan  menjadi  dua yaitu  bersifat  bakterisidal  dan  bakteriostatik. 14 Kemampuan  senyawa  antibakteri  yang  baik adalah  bersifat  bakterisidal  dan  sensitif,  yang digunakan  karena  dengan  kedua  sifat  ini  maka bakteri  uji  atau  patogen  yang  digunakan  lisis dan  membentuk  zona  hambat  yang  tinggi meskipun  dengan  kuantitas  antibakteri  yang rendah. Aktivitas penghambatan terjadi melalui banyak  mekanisme.  Mekanisme  kerja  senyawa antimikroba  dapat  sebagai  penghambatan sintesis  dinding  sel  yakni  sintesis  terganggu sehingga dinding sel menjadi kurang sempurna
dan  tidak  tahan  terhadap  tekanan  osmotik  dari plasma  sel,  akibatnya  dinding  sel  pecah  dan lisis,  kedua  yaitu  mengubah  permeabilitas membran  plasma  dengan  cara  mengganggu sintesis  molekul  lipoprotein  sehingga  plasma sel  dapat  merembes  keluar,  ketiga    yaitu menghambat  sintesis  protein  sel  dengan  cara mengganggu proses translasi, keempat menghambat sintesis asam nukleat dengan cara mengganggu  proses  replikasi  dan  transkripsi, kelima  penghambatan  kerja  enzim  dalam  sel yang  dapat  mengakibatkan  metabolisme  sel terganggu. 14

## KESIMPULAN
Ekstrak tumbuhan akar kucing ( A. indica L.) memiliki rata-rata zona hambat < 7 mm atau masuk  dalam  kategori  antibaketri  sedang  dan pengujian  zona  hambat  dengan  menggunakan konsentrasi  yang  berbeda  diperoleh  hasil  yang tidak  berbeda  nyata  dengan  pertumbuhan bakteri.    Hal  ini  menunjukkan  bahwa  ekstrak akar  ( A.  indica L.)    mengandung  zat antimikroba yang dapat menghambat pertumbuhan  bakteri EPEC dan  jamur C. albicans walaupun  daya  hambatnya  lemah  dan sedang.  Hasil  skrinig  fitokimia  ekstrak  etanol ( A. indica L.) menunjukan bahwa ( A. indica L.) mengandung  senyawa  alkaloid  dan  tannin  oleh karena  itu  ekstrak  akar  kucing  ( A.  indica L.) dengan  pelarut  etanol  96%  lebih  efektif dibandingkan dengan pelatut akuades.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Damayanti  KE,  Hikmat  A,    Zuhud  EAM, 2011.  Linking  Biodiversity  and  Computer Vision  Technology  to  Enhance  Sistainable Utilization of Indonesian Tropical Medicinal Plants.  International  Workshop  Bogor  11 Agustus.
2. Nita  N.  2013.  Potensi  Daun  Teh  ( Camellia sinensis )  dan  daun  anting  anting Acalypha indica L.  dalam  menghambat  pertumbuhan salmonella typhi. Jurnal AL-AZHAR Indonesia  seri  sains  dan  teknologi.  Vol. 2:2.Doi: 10.36722/sst.v2i2.131
3. Hariana  A.  2005.  Tumbuhan  obat  dan khasiatnya,  seri  Agrisehat  I,  Penebar  Swa Daya, Jakarta.
http://www.phac-
aspc.gc.ca/fs-sa/fs-fi/ecoli-eng.php  pada  6
November 2014. 4. Nahrstedt  A,  Kant  JD,  Victorwray.  1982. Acalyphin,  A  Cyanogenic  Glucoside  From Acalypha indica . Institutfur pharmazeutischeBiologie  der  Technischen Universitlt,  D-3300  Braunschwing,  West Germany: 21(1): 101:105. 5. Astawan MT, Wresdiyati II, Arief,
Febiyanti  D.  2011.  Potensi  bakteri  asam laktat  probiotik  indigenus  sebagai  Antidiare dan  Immunomodulatioin.  Jurnal  teknologi dan indiustri pangan. 22(1) : 11-1 6 .
6. Jawetz  E.  1995.  Mikrobiologi  untuk  profesi Kesehatan,  Edisi  16.  Alih  Bahasa  oleh  Dr. H. Tonang. Jakarta: EGC.
7. Nursal  W,  Sri,  Wilda  S.  2006.  Bioaktifitas Ekstrak  Jahe  ( Zingiber  officinale Roxb.) Dalam  Menghambat  Pertumbuhan  Koloni Bakteri  Escherichia  coli  dan  Bacillus subtilis. Jurnal Biogenesis 2(2): 64-66.
8. Davis  WW,  Stout  TR.  1971.  Disc  Plate Method of Microbiological Antibiotic assay.
Applied Microbiology 659-665. Doi: 10.1128/am.22.4.659-665.1971
9. Mahartiny NN, Payani NPS.  2004. Skrining Fitokimia  Ektrak  Etanol  Daun  Pepaya  yang diperoleh  dari  Daerah  Ubud  Bali.  Jurnal Farmasi. Universitas Udayana
10. Djunaedy  A.  2008.  Aplikasi  Fungisida Sistemik  dan  Pemanfaatan  Mikoriza  dalam Rangka  Pengendalian  Patogen  Tular  Tanah pada  Tanaman  Kedelai  ( Glycine  max L.  ). Embryo, 5 (2 ): 149-157.
11. Hardiningtyas SD. 2009. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Karang Lunak Sarcophyton  Sp.  yang  Difragmentasi  dan Tidak  Difragmentasi  di  Perairan  Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu. Skripsi. Bogor:
Institut Pertanian Bogor.
12. Ismaini L. 2011. Aktivitas Antifungi Ekstrak ( Centella  asiatica (L.  )  Urban  terhadap Fungi Patogen pada Daun Anggrek ( Bulbophyllum  ﬂavidiﬂorum Carr.  ).  Jurnal Penelitian Sains, 4 (1 ): 47-50.
13. Madigan MT,  Martinko JM, Parker J. 2005.
Biology of Microorganisms. Pearson
Education Inc. London 14. Tortora  GJ,  Funke  BR,  Case  CL.  2010. Microbiology an Introduction (Tenth edition).  Pearson  Benjamin  Cummings.  San Fransisco.