Triyono, dkk./ ROTASI, Vol. 22  No. 2  (April  2020) Hal. 111-118
Karakterisasi dan Laju Biodegradasi Material Biokomposit Bovine Hidroksiapatit (Bha)/ Ampas Kopi/ Shellac sebagai Material Pengisi Tulang
Joko Triyono a, *, Taufik Hidayat a , Abu Masykur b
a Departemen Teknik Mesin, Fakultas Teknik, Universitas Sebelas Maret
Jln Ir. Sutami no. 36a Kentingan, Surakarta
b Departemen Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Sebelas Maret
Jln Ir. Sutami no. 36a Kentingan, Surakarta *E-mail: jokotriyono@staff.uns.ac.id

## 1. Pendahuluan
Hidroksiapatit (HA) merupakan biomaterial dari komponen utama jaringan tulang dan gigi. HA dapat diperoleh dari tulang  sapi  (selanjutnya  disebut  dengan  bovine  hidroksiapatit  =  BHA)  dan  telah  secara  luas  dipergunakan  untuk mencangkok, memperbaiki, mengisi, atau mengganti tulang serta pemulihan jaringan gigi karena sifat biokompabilitasnya yang sangat baik dengan jaringan keras dan bersifat bioaktif untuk merekonstruksi ulang jaringan tulang yang telah rusak dalam jaringan yang lunak [1]. Sifat biokompatibilitas berhubungan dengan beberapa karakteristik dari biomaterial yang menunjukkan  apakah material  tersebut  dapat  diterima di  dalam tubuh  manusia  seperti tidak mengandung racun,  tidak bersifat karsinogenik, tidak menyebabkan alergi, dan tidak immunogenic [2]. Sebagai material pengisi tulang ( bone filler ),

## Abstract
The incidence of fractures in Indonesia is so high and it needs biomaterials in the health sector that are economical and environmentally. Bovine bone is a type of biomaterial that can be used to graft, repair,  replenish  and  replace  bone  tissue.  The  aim  of  this  study  is  to  characterize  the  bovine hydroxyapatite (BHA) from bovine bones with waste of coffee and shellac. Coffee waste was chosen as a porosity forming material. Coffee waste would evaporate and form porous holes when heated to a temperature of 900 o C. Shellac was used as a binder between BHA particles. Calcination and sintering processes were carried out to obtain this biocomposite. Based on SEM-EDX observations showed the presence of inorganic elements Ca and P with high intensity while the elements Na, Mg, O and C with low intensity. Observation of the XRD diffraction pattern shows a value of 2θ in accordance with the HA JCPDS 9-432 standard diffraction pattern. The FTIR functional group analysis did not show any major apex besides the PO 4 3- phosphate functional group, CO 3 2- carbonate and hydroxyl (OH-). It can be stated that the waste of coffee and shellac have completely evaporated during the sintering process and only leave BHA content. The more coffee waste mixture that is used will reduce the density and increase the amount of porosity and accelerate the rate of biodegradation of the material.
Keywords: Hydroxyapatite, shellac, coffee waste, bone fracture

## Abstrak
Angka kejadian patah tulang di Indonesia cukup tinggi sehingga perlu biomaterial di bidang kesehatan yang  ekonomis  dan  ramah  lingkungan.  Tulang  sapi  adalah  salah  satu  jenis  biomaterial  yang  dapat digunakan  untuk  mencangkok,  memperbaiki,  mengisi  dan  mengganti  jaringan  tulang.  Tujuan penelitian  ini  adalah  melakukan  karakterisasi  material  biokomposit  hidroksiapatit  dari  tulang  sapi ( bovine hydroxyapatite = BHA) dengan ampas kopi dan shellac . Ampas kopi dipilih sebagai material pembentuk  porositas.  Ampas  kopi  akan  menguap  dan  membentuk  lubang  porus  ketika  dipanaskan hingga  suhu  900 o C. Shellac digunakan  sebagai  pengikat  antar  partikel  BHA.  Dilakukan  proses kalsinasi  dan  sintering  untuk  mendapatkan  biokomposit  ini.  Berdasarkan  pengamatan  SEM-EDX menunjukkan adanya unsur anorganik Ca dan P dengan intensitas tinggi sedangkan unsur Na, Mg, O dan C dengan intensitas rendah. Pengamatan pola difraksi XRD menunjukkan nilai 2θ sesuai dengan pola difraksi standar HA JCPDS 9-432. Analisis gugus fungsi FTIR tidak menunjukkan titik puncak utama selain gugus fungsi fosfat PO 4 3 , karbonat CO 3 2- dan hidroksil (OH-). Dapat dinyatakan bahwa kandungan  kopi  dan shellac telah  menghilang  sepenuhnya  ketika  proses  sintering  dan  hanya menyisakan  kandungan  BHA.  Semakin  banyak  campuran  ampas  kopi  yang  digunakan  akan menurunkan  nilai  densitas  dan  meningkatkan  jumlah  porus  serta  mempercepat  laju  biodegradasi material.
Kata kunci: hidroksiapatit, shellac , ampas kopi, patah tulang
Triyono, dkk./ ROTASI, Vol. 22  No. 2  (April  2020) Hal. 111-118
HA juga harus bersifat biodegradable yaitu kemampuan material untuk terdegradasi seiring dengan tumbuhnya tulang manusia secara alami. Degradasi dari material adalah aspek yang sangat penting untuk dipertimbangkan ketika material tersebut dipakai untuk kepentingan medis, karena kemampuannya untuk difungsikan pada suatu aplikasi tergantung pada lama  waktu  yang  dibutuhkan  untuk  menyimpannya  di  dalam  tubuh.  Proses  biodegradasi  biomaterial  dan  kecepatan degradasi di dalam sebuah organisme berhubungan dengan karakteristik dari material dan tempat di dalam tubuh yang digunakan [3].
Sifat  material  hidroksiapatit  mampu  beradaptasi  dengan  tubuh  manusia  (biokompatibel)  karena  dapat  menyatu dengan tulang manusia dan juga merangsang pertumbuhan dan pembentukannya ( osteokonduktif ) [4]. Variasi porositas material hidroksiapatit dalam bentuk scaffold memiliki sifat mampu diserap tubuh ( resorbable ) dan osteokonduktif yang lebih  baik  daripada  yang  padat.  Oleh  karena  itu,  material  ini  lebih  banyak  dikembangkan  dalam  aplikasi  biomedis. Material  hidroksiapatit  memiliki  area  permukaan  yang  luas,  yang  berguna  untuk  adhesi  sel  jaringan  biologis  dan pertumbuhan fase tulang baru [5].
Pada kegiatan ini dilaporkan hasil penelitian mengenai komposit BHA/ampas kopi/ shellac . Penggunaan ampas kopi pada  penelitian  ini  sebagai  material  pembentuk  porositas,  ketika  proses sintering ampas  kopi  akan  bereaksi  dengan oksigen O 2 dan berubah menjadi fasa gas yang menyebabkan serbuk dari ampas kopi akan menghilang dan membentuk struktur berpori pada komposit . Struktur berpori tersebut berguna sebagai jalan sel-sel yang ada pada tulang agar dapat menyatu,  dan memungkinkan  dalam  pertumbuhan tulang.  Struktur  berpori  akan  mengurangi  kekuatan  dari bone filler tetapi akan mempercepat laju degradasi. Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai rintisan awal untuk penelitian lebih lanjut sebagai bahan pengisi tulang ( bone filler ) dan dapat diimplementasikan bagi penderita patah tulang.

## 2. Material dan metode penelitian

## 2.1 Material
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah hidroksiapatit (HA) dari bagian paha tulang sapi , ampas kopi, dan larutan shellac. Tulang sapi dilakukan proses perlakuan hingga menjadi hidroksiapatit (bovine HA = BHA) Ampas kopi digunakan sebagai material pembentuk porus. Larutan shellac digunakan sebagai pengikat antar serbuk BHA dan larutan Phosphate Buffered Saline (PBS) untuk menguji biodegradasi material. Tabel 1 menunjukkan bahan penelitian yang digunakan.
Tabel 1 . Material yang digunakan No Material Fungsi 1 Hidroksiapatit dari tulang sapi (BHA)  Pengisi material (filler)
2 Ampas kopi Pembentuk porositas 3 Larutan shellac Matriks (pengikat serbuk HA) 4 Larutan Phosphate Buffered Saline (PBS) Larutan untuk menguji biodegradasi material

## 2.2 Metode
Serbuk  hidroksiapatit (HA)  diperoleh  dari  serbuk  tulang  sapi  bagian  paha  yang  dijadikan  serbuk  dengan  ukuran 250µm.  Serbuk kemudian dikalsinasi dengan suhu 900°C untuk menghilangkan kandungan zat-zat organiknya. Serbuk tulang  sapi  yang  sudah dikalsinasi ini  sudah  berubah  strukturnya menjadi hidroksiapatit  (bovine  HA  =  BHA).  Ampas kopi  yang  digunakan  adalah  ampas  kopi  yang  telah  dibersihkan  dari  kotoran  dan  ketika  dicuci  sudah  tidak  memiliki warna.  Larutan shellac diperoleh  dari  campuran  antara  sekresi  kutu  lak  dan ethanol 97%  dengan  perbandingan  1:10. Selanjutnya, BHA dicampur dengan ampas kopi dengan perbandingan volume BHA dan ampas kopi berturut-turut yaitu 70/30, 60/40, 50/50, 40/60, dan 30/70, kemudian  masing-masing kelompok rasio campuran BHA/ampas kopi tersebut dicampur dengan 1 ml larutan shellac dan diaduk menggunakan pengaduk magnetik dengan kecepatan 200 rpm. Serbuk yang sudah tercampur dikompaksi dengan beban 974 MPa dengan penahanan 5 menit  dalam cetakan berbentuk tablet dengan  ukuran  diameter  13  mm  dan  tebal  3  mm.  Spesimen  tersebut  kemudian  disinter  dengan  suhu  1000°C  untuk mengikat antar serbuk BHA dan menghilangkan kandungan dari ampas kopi dan shellac.
Pengujian  densitas,  porositas,  pengamatan  SEM-EDX,  XRD  dan  uji  biodegradasi  material  dilakukan  untuk mengetahui karakterisasi material. Tingkat biodegradasi material diamati dengan merendam material tersebut ke dalam larutan Phosphate Buffered Saline (PBS) untuk mengamati prosentasi berat yang hilang dalam 8 minggu.

## 3. Hasil dan Pembahasan
3.1 Pengujian Densitas
Hasil pengujian densitas menunjukkan perbandingan densitas aktual dan densitas teori. Nilai densitas diperoleh dari sampel BHA/ampas kopi/ shellac setelah proses sintering. Hasil pengujian densitas dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1 . Hasil pengujian densitas
Hasil pengujian densitas menunjukkan semakin banyak campuran ampas kopi yang digunakan maka nilai densitas semakin menurun. Nilai densitas dari yang paling tinggi ke yang paling rendah berturut-turut yaitu material kontrol, 70/30, 60/40, 50/50, 40/60 dan 30/70 dengan nilai densitas teori sebesar 3,16, 2,53, 2,32, 2,11, 1,90 dan 1,69 serta densitas aktual sebesar  1,74,  1,33,  1,09,  0,96,  0,86,  dan  0,73.  Nilai  densitas  akan  menurun  seiring  dengan  meningkatnya  kandungan ampas kopi yang ditambahkan. Hal ini disebabkan karena semakin banyak ampas kopi yang digunakan maka semakin banyak porositas yang terbentuk dan menyebabkan kerapatan dari spesimen semakin berkurang.
Hasil penelitian dari Khalil  [6] juga menyatakan bahwa nilai densitas akan menurun seiring dengan menurunnya kandungan hidroksiapatit yang ditambahkan.

## 3.2 Pengujian porositas
Hasil  pengujian  densitas menunjukkan  persentase  porositas yang  terkandung  dalam  sampel.  Prosentase  porositas diperoleh dari perhitungan densitas aktual dan densitas teoritis sampel BHA/ampas kopi/ shellac setelah proses sintering . Persentase porositas dari tiap variasi campuran dapat dilihat pada Gambar 2.
Gambar 2 . Hasil pengujian porositas
Hasil  pengujian  porositas  menunjukkan  semakin  banyak  campuran  ampas kopi  yang digunakan maka  persentase porositas  semakin  meningkat.  Persentase  porositas  dari  yang  paling  rendah  ke  yang  paling  tinggi  berturut-turut  yaitu material kontrol, 70/30, 60/40, 50/50, 40/60 dan 30/70 dengan persentase porositas sebesar 45%, 47%, 53%, 54%, 55% dan  57%. Terbentuknya  porositas  disebabkan  oleh  kandungan  ampas  kopi  dan shellac yang  bereaksi  dengan  oksigen ketika proses sintering sehingga berubah menjadi gas dan menguap.
Hasil penelitian dari Wattanutchariya dan Changkowchai [7] juga menyatakan bahwa persentase porositas dari HA scaffold yang dicampur dengan chitosan dan gelatin (campuran pembentuk pori) akan meningkat dengan menurunnya konsentrasi dari HA scaffold serta meningkatnya konsentrasi dari chitosan dan gelatin.

## 3.3 Hasil Pengamatan Foto SEM
Hasil  pengamatan  foto  SEM  memperlihatkan  bentuk  porositas  dari  variasi  sampel  yang  diperoleh  dari  sampel BHA/ampas kopi/ shellac setelah proses sintering. Hasil foto SEM dapat dilihat pada Gambar 3 dan Gambar 4.
Gambar 3 . Foto SEM perbesaran 100x
Keterangan Gambar 3 dan Gambar 4 yaitu:
a. BHA kontrol
b. BHA/ampas kopi/ shellac 70/30
c. BHA/ampas kopi/ shellac 60/40
d. BHA/ampas kopi/ shellac 50/50
e. BHA/ampas kopi/ shellac 40/60
f. BHA/ampas kopi/ shellac 30/70 g. HA komersil
Hasil  pengamatan  foto  SEM  (Gambar  3  dan  4)  menunjukkan  terbentuknya  porositas  pada  BHA/ampas kopi/ shellac dengan variasi 70/30, 60/40, 50/50, 40/60 dan 30/70. Pada proses sintering terjadi pertumbuhan bulir yang disebabkan  serbuk-serbuk  BHA  yang  mencair  sebagian  dan  saling  mengikat  ketika  dipanaskan  sampai  suhu  1000°C kemudian menjadi keras ketika didinginkan sampai suhu ruangan (27°C). Pembentukan porus disebabkan oleh kandungan ampas  kopi  dan shellac yang  bereaksi  dengan  oksigen  ketika  proses sintering sehingga  berubah  menjadi  fasa  gas  dan menguap, hal ini menyebabkan terbentuknya rongga diantara serbuk BHA.
Hasil pengamatan foto SEM (Gambar 3 dan 4) juga memperlihatkan porositas yang terbentuk tidak beraturan dan  tidak  merata  serta  semakin  banyak  campuran  ampas  kopi  yang  digunakan  maka  semakin  banyak  porositas  yang terlihat. Pada BHA kontrol porus tidak terlalu terlihat hal ini disebabkan karena tidak adanya material pembentuk porus.
Triyono, dkk./ ROTASI, Vol. 22  No. 2  (April  2020) Hal. 111-118
Sedangkan bila dibandingkan dengan HA komersil, porus pada HA komersil terlihat sangat besar ini disebabkan karena pada HA komersil tulang sapi yang digunakan tidak dijadikan bentuk serbuk terlebih dahulu dan masih banyak terkandung unsur-unsur organik sehingga ketika dilakukan proses sintering bahan-bahan organik menghilang dan membentuk porus.

## Gambar 4. Foto SEM perbesaran 200x

## 3.4 Hasil Pengamatan SEM-EDX
Hasil  pengamatan  SEM-EDX  menunjukkan  unsur-unsur  yang  terkandung  dalam  sampel  sampel  HA  murni, HA/ampas kopi/ shellac sebelum proses sintering dan HA/ampas kopi/ shellac setelah proses sintering. Hasil SEM-EDX dapat dilihat pada Gambar 5-7. Hasil spektrum EDX HA murni (Gambar 5) menunjukkan adanya unsur-unsur anorganik pembentuk  HA  yang  terdiri  dari  Ca  13,2%;  P  6,6%;  dan  O  16,7%  sebagai  unsur  utama  serta  beberapa  unsur  dengan intensitas yang rendah yaitu Na 0,9% dan Mg 0,4%. Pada BHA/ampas kopi/ shellac sebelum proses sintering (Gambar 6) menunjukkan unsur anorganik Ca 3,1%; P 1,6%; O 16,1% dan beberapa unsur dengan intensitas rendah yaitu Na 0,3%; Cl 0,2%; Si 0,1% dan Mg 0,1% serta adanya unsur C 15% yang menunjukkan adanya kandungan dari material pembentuk porus yaitu ampas kopi.
Pada BHA/ampas kopi/ shellac setelah proses sintering (Gambar 7) menunjukkan unsur anorganik Ca: 10,6%; P: 5,2%  dan  O: 12,4%  serta  beberapa  unsur  dengan intensitas rendah  yaitu C:  0,7%;  Mg:  0,2%  dan  Na:  0,1%.  Hasil  ini menunjukkan bahwa pada HA murni tidak terdapat kandungan lain selain HA (Ca, P, O, Na dan Mg) dan ketika dicampur dengan ampas kopi dan shellac menunjukkan adanya kandungan selain HA yaitu C, Cl dan Si sedangkan ketika dilakukan proses sintering kandungan ampas kopi dan shellac (C, Cl dan Si) bereaksi dengan O 2 sehingga membentuk fasa gas dan menyebabkan kandungan ampas kopi dan shellac menguap dan menghilang.
Gambar 5. SEM EDX BHA murni
Gambar 6 . SEM EDX BHA/ampas kopi/ shellac sebelum disinter
Gambar 7 . SEM EDX BHA/ampas kopi/ shellac sebelum disinter
Hasil penelitian dari Ooi dkk [8] juga menyatakan bahwa spektrum EDX dari BHA yang dipanaskan sampai suhu 900°C menunjukkan adanya unsur anorganik berupa Ca dan P dengan intensitas tinggi serta Na, Mg, O dan C dengan intensitas rendah.

## 3.5 Hasil Pengamatan Laju Degradasi
Hasil  pengamatan  laju  degradasi  menunjukkan  penurunan  berat  sampel  BHA/ampas  kopi/ shellac setelah  proses sintering yang direndam pada larutan PBS ( Phospat Buffered Saline ) selama 8 minggu. Penurunan berat sampel dapat dilihat pada Gambar 8.
Dari  Gambar  8  dapat  dilihat  bahwa  semua  jenis  sampel  memiliki  sifat biodegradable dan  selama  8  minggu mengalami  penurunan  berat  yang  berbeda-beda.  Kemampuan  terdegradasi  material  dari  yang  paling  lambat  ke  yang paling cepat berturut-turut yaitu material kontrol, 70/30, 60/40, 50/50, 40/60 dan 30/70. Laju penurunan berat material komersial berada di antara laju material 60/40 dan 50/50.  Dapat dilihat bahwa semakin banyak variasi campuran dari ampas  kopi  maka  kemampuan  degradasi  dari  material  semakin  cepat.  Kemampuan  degradasi  ini  dipengaruhi  oleh semakin  banyaknya  variasi  campuran maka  persentase  porositas  semakin meningkat dan  kerapatan  semakin  menurun sehingga menyebabkan semakin luasnya permukaan dari spesimen yang bersentuhan dengan larutan PBS.
Triyono, dkk./ ROTASI, Vol. 22  No. 2  (April  2020) Hal. 111-118
Gambar 8 . Laju degradasi selama 8 minggu
Laju degradasi menunjukkan sampel 30/70, 40/60 dan 50/50 lebih cepat terdegradasi hal ini disebabkan ketika proses perendaman  dan pengambilan  berat  sampel  ada  sebagian  sampel  yang  mulai hancur  sehingga  berat  yang hilang lebih banyak dari sampel 60/40 dan 70/30. Sedangkan pada sampel 60/40 dan 70/30 membutuhkan waktu lebih lama untuk terdegradasi. HA kontrol memiliki waktu degradasi paling lama dari semua variasi sampel hal ini disebabkan karena pada HA  kontrol  tidak  terdapat  campuran  ampas  kopi  pembentuk  porus  sehingga  larutan  PBS  yang  bersentuhan  dengan permukaan  spesimen  semakin  sedikit,  dan  jika  dibandingkan  dengan  HA  komersil,  HA  kontrol  lebih  lama  untuk terdegradasi karena HA komersil memiliki persentase porositas yang lebih besar.
Hasil penelitian dari Wattanutchariya dan Changkowchai  [7] juga menyatakan bahwa kemampuan degradasi dari HA scaffold yang dicampur dengan chitosan dan gelatin (campuran pembentuk pori) akan menurun dengan meningkatnya konsentrasi dari HA scaffold serta menurunnya konsentrasi dari chitosan dan gelatin.

## 3.6 Hasil pengamatan pola difraksi XRD
Hasil  pengamatan  pola  difraksi  XRD  menunjukkan  puncak-puncak  dari  fasa  kristalin  HA.  Pola  difraksi  XRD diperoleh dari sampel HA murni,  BHA/ampas kopi/ shellac setelah proses sintering yang dibandingkan dengan standar HA JCPDS 9-432. Pola difraksi dari sampel di atas dapat dilihat pada Gambar 9.
Gambar 9 . Pola difraksi  (a) BHA/ampas kopi/ shellac dan (b) standard HA JCPDS 9-432
Pola difraksi dari BHA/ampas kopi/ shellac memiliki titik puncak dan intensitas yang hampir sama dengan standar HA JCPDS 9-432. Perbandingan titik puncak tertinggi dari HA murni, BHA/ampas kopi/ shellac dan HA JCPDS 9-432 dapat dilihat pada Tabel 2. Pola difraksi HA murni dikonfirmasi dengan pola difraksi standard HA JCPDS 9-432. Pola difraksi HA murni menghasilkan intensitas tertinggi pada nilai 2θ: 31,753°, 32,170°, 32,887°. Jika dibandingkan dengan intensitas  tertinggi  dari  standard  HA  JCPDS  9-432  yang  mempunyai  nilai  2θ:  31,773°,  32,196°,  32,902°  maka  bisa dikatakan  HA  murni telah menjadi hidroksiapatit  (HA).  Hasil  penelitian  Herliansyah  dkk  [9]  juga menyatakan  bahwa
pola  difraksi  XRD  dari  serbuk  HA  yang  dipanaskan  900°C  dengan  kenaikan  temperatur  5°C/menit  dan  penahanan temperatur selama 2 jam menunjukkan intensitas tertinggi pada nilai 2θ: 31,760°, 32,160°, 32,900°.
Tabel 2 . Perbandingan titik puncak tertinggi dari BHA murni, BHA/ampas kopi/ shellac dan HA JCPDS 9-432
Pada  Pola  difraksi  BHA/ampas  kopi/ shellac menghasilkan  intensitas  tertinggi  pada  nilai  2θ:  31,811°,  32,949°, 32,220°. Jika dibandingkan dengan pola difraksi HA murni, HA JCPDS 9-432 dan penelitian Herliansyah dkk [9] maka bisa  dikatakan  bahwa  kandungan  dari ampas  kopi  dan shellac telah mengalami  penghilangan  secara  sempurna  ketika BHA/ampas kopi/ shellac disinter hingga suhu 1000°C

## 4. Kesimpulan
Berdasarkan  proses  pengujian,  pengamatan  serta  hasil  pembahasan  yang  telah  dilakukan  dalam  penelitian  dapat diambil kesimpulan sebagai berikut:
1. Pengujian densitas dan porositas menunjukkan semakin banyak campuran ampas kopi yang digunakan maka nilai densitas semakin menurun dan persentase porositas semakin meningkat.
2. Pengamatan  foto  SEM memperlihatkan  terbentuknya  porus pada  BHA/ampas  kopi/ shellac dengan  variasi  70/30, 60/40,  50/50,  40/60,  dan  30/70.  Porus  yang  terbentuk  tidak  beraturan  dan  tidak  merata  serta  semakin  banyak campuran ampas kopi yang digunakan maka semakin banyak porositas yang terlihat. Pada pengamatan SEM-EDX menunjukkan adanya  unsur anorganik  berupa Ca  dan  P  dengan intensitas  tinggi  serta  Na,  Mg,  O dan C  dengan intensitas rendah.
3. Pengamatan  laju  degradasi menunjukkan  bahwa  semua  jenis  variasi  sampel  bersifat biodegradable dan  semakin banyak campuran ampas kopi yang digunakan maka semakin cepat sampel untuk terdegradasi. Laju degradasi dari yang paling cepat ke yang paling lambat berturut-turut yaitu 30/70, 40/60, 50/50, 40/60 dan 70/30.
4. Pengamatan  pola difraksi  XRD  menunjukkan  HA/ampas  kopi/ shellac sebagai  fasa  kemurnian  dari hidroksiapatit (HA).  Nilai  2θ  untuk  senyawa  HA  sesuai  dengan  pola  difraksi  standar  HA  JCPDS  9-432.  Maka  bisa  dikatakan bahwa kandungan dari ampas kopi dan shellac telah menghilang secara sempurna setelah proses sintering sampai suhu 1000°C.

## Daftar Pustaka
[1]  E. Kusrini, M. Sontang, Characterization of X-Ray Diffraction and Electron Spin Resonance: Effects of Sintering Time  and  Temperature  on  Bovine  Hydroxyapatite,  Radiat.  Phys.  Chem.  81  (2012)  118–125. doi:10.1016/j.radphyschem.2011.10.006.
[2]  J. Park, L. R. S., Biomaterials, Springer, New York, 2007. doi:10.1007/978-0-387-37880-0.
[3]  E.  Tamariz,  A.  Rios-Ramrez,  Biodegradation  of  Medical  Purpose  Polymeric  Materials  and  Their  Impact  on Biocompatibility, in: Biodegrad. - Life Sci., InTech, 2013: pp. 1–16. doi:10.5772/56220.
[4]  A. Fahimah Diniyah Wathi, S. Wardhani, M. Misbah Khunur, Effect of Comparison of Ca:P Mass ratio on Hydroxyapatite Synthesis of Bovine Bones by Dry Method, 1 (2014) 196–202.
[5]  H. Ismawati, A. Fadli, F. Akbar, D. Chemical Department, Engineering Faculty, University of Riau, Effect of Addition of Dispersant and Stirring Time on Making Hydroxyapatite Scaffold using Gambas Coir as Template, 3 (2016) 1–6.
[6]  K.A.  Khalil,  A  New-Developed  Nanostructured  Mg  /  HAp  Nanocomposite  by  High  Frequency  Induction  Heat Sintering Process, Int. J. Electrochem. Sci. 7 (2012) 10698–10710.
[7]  W.  Wattanutchariya,  W.  Changkowchai,  Characterization  of  Porous  Scaffold  from  Chitosan  -  Gelatin  / Hydroxyapatite for Bone Grafting, Proc. Int. MultiConference Eng. Comput. Sci. II (2014).
[8]  C.Y. Ooi, M. Hamdi, S. Ramesh, Properties of Hydroxyapatite Produced by Annealing of Bovine Bone, Ceram. Int. 33 (2007) 1171–1177. doi:10.1016/j.ceramint.2006.04.001.
[9]  M.K. Herliansyah, M. Hamdi, A. Ide-Ektessabi, M.W. Wildan, J.A. Toque, The Influence of Sintering Temperature on  the  Properties  of  Compacted  Bovine  hydroxyapatite,  Mater.  Sci.  Eng.  C.  29  (2009)  1674–1680. doi:10.1016/j.msec.2009.01.007.