ISSN: 1410-8917
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi 19 (1) (2016) : 15 – 20
Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi Journal of Scientific and Applied Chemistry
Journal homepage: http://ejournal.undip.ac.id/index.php/ksa
Penentuan Total Kadar Fenol dari Daun Kersen Segar, Kering dan Rontok ( Muntingia calabura L. ) serta Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Jaka Dwi Pamungkas a , Khairul Anam a* , Dewi Kusrini a
a Organic Chemistry Laboratory, Chemistry Department, Faculty of Sciences and Mathematics, Diponegoro University, Jalan Prof. Soedarto, Tembalang, Semarang
* Corresponding author: k.anam@live.undip.ac.id
A r t i c l e   I n f o

## A b s t r a c t
Keywords: Muntingia Calabura L, total phenol content, DPPH Research on the determination of chemical compound content, total phenol content of fresh, dried, and fallen Cherry leaf (Muntingia calabura L.) and antioxidant activity test (IC 50 ) were performed. The method used in this research was the determination of total phenol  content  with  Folin-Ciocalteu  method  and  antioxidant  activity  test  by  DPPH method. This research consisted of three stages. The first stage was the extraction to get a the concentrated ethanol extract. The second stage was a qualitative analysis using TLC and  phytochemical  screening  test.  The  last  stage  was  a  quantitative  analysis,  by calculating the total content of phenol and antioxidant test. The results showed that the yield obtained from fresh leaves was as much as 1.231%, the dry leaves were 0.772% and the falling leaves were 1.05%. The results of phytochemical screening test of cherry leaf are  alkaloids,  flavoloid,  tannin,  saponin,  and  steroid/terpenoid.  The  total  content  of phenols from fresh, dried and fallen cherry leaf extract were 6 mg equivalent of the gall/g sample acid, 14 mg equivalent of the gallic acid/g sample, and 12 mg equivalent of the gallic acid/g respectively. The antioxidant activity test on fresh, dried, and fallen cherry leaves were IC 50 of -291187,5 mg/L -48958,9 mg/L and -235305,6 mg/L respectively.

## A b s t r a k
Kata Kunci: Muntingia Calabura L, Total Kadar Fenol, DPPH
Telah dilakukan penelitian tentang penentuan total kadar fenol dari daun kersen segar, kering, dan rontok ( Muntingia calabura L. ) serta uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH. Penelitian ini bertujuan untuk memperoleh informasi kandungan senyawa kimia, total  kadar  fenol,  dan  Aktivitas  antioksidan  (IC 50 )  dari  daun  kersen  segar,  kering,  dan rontok. Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah penentuan total kadar fenol dengan  metode Folin-Ciocalteu dan  uji  aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH. Tahapan  penelitian  ini  meliputi  tiga  tahap,  tahap  pertama  yaitu  ekstrasi  untuk mendapatkan  ekstak  etanol  pekat.  Tahap  kedua  analisis  secara  kuanlitatif  dengan menggunakan KLT serta uji skrining fitokimia. Tahap terakhir analisis secara kuantitatif yakni  dengan  menghitungkan  kadar  total  fenol  dan  uji  antioksidan.  Hasil  penelitian menunjukkan  bahwa  rendemen  yang  didapat  dari  daun  segar  sebanyak  1,231%,  daun kering  sebanyak  0,772%  dan daun rontok  sebanyak  1,05%. Hasil  uji  skrining  fitokimia kandungan  dalam  daun  kersen  adalah  alkaloid,  flavoloid,  tanin,  saponin,  dan steroid/terpenoid.  Kadar  total  fenol  dari  ekstrak  daun  kersen  segar,  kering  dan  rontok masing – masing  6  mg  ekivalen  asam  galat/g  sampel,  14  mg  ekivalen  asam  galat/g sampel,  dan  12  mg  ekivalen  asam  galat/g  sampel.  Uji  aktivitas  antioksidan  IC 50 yang diperoleh dari daun kersen segar, kering, dan rontok masing – masing mengandung IC 50 sebesar -291187,5 mg/L -48958,9 mg/L dan -235305,6 mg/L.

## 1. Pendahuluan
Indonesia  adalah  merupakan  negara  yang  sedang berkembang dalam berbagai bidang dimana mempunyai iklim tropis kaya akan sumber daya alam yang melimpah. Salah satu sumber daya alam adalah beraneka ragamnya jenis  tumbahan  dimana  banyak  dimanfaatkan  dalam kehidupan  sehari-hari  oleh  manusia  sebagai  jenis  obat baik secara sintesis maupun obat tradisional yaitu jamu [1].
Salah  satu  tanaman  yang  sering  dijumpai diperkebunan  bahkan  pada  retakan  tembok  yakni tanaman  kersen  atau  yang  sering  juga  desebut  dengan tanaman talok. Tanaman ini sering digunakan untuk obat penyakit asam urat, diabetes, serta sebagai anti bakteria [2]. Tanaman kersen ini mempunyai senyawa metabolit sekunder  yakni  flavonoid,  saponin,  tanin  dan  juga terpenoid [3].
Senyawa  fenolik  merupakan  senyawa  yang  banyak ditemukan pada tumbuhan. Senyawa ini telah diketahui strukturnya,  antara  lain  flavonoid,  fenol  monosiklik sederhana,  fenil  propanoid,  polifenol  (lignin,  melanin, tannin),  dan  kuinon  fenolik  [4].  Senyawa  fenolik memiliki  sifat  farmakologi  yaitu  sebagai  anti  inflamasi [5], antioksidan [6], dan antibakteri [7].
Radikal  bebas  adalah  senyawa  kimia  yang  tidak stabil dan sangat reaktif yang dikarenakan mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital terluarnya.  Senyawa  ini  untuk  mencapai  kestabilan, maka  bereaksi  dengan  molekul  disekitarnya  untuk memperoleh  pasangan  elektron  [8].  Reaksi  ini  akan berlangsung secara terus-menerus dalam tubuh hingga dapat merusak sel yang menimbulkan berbagai penyakit seperti  kanker,  jantung,  katarak,  penuaan  dini,  serta penyakit degeneratif lainnya [9].
Antioksidan  adalah  senyawa  yang  dapat  menjadi substansi  untuk  menetralisir  radikal  bebas  dan mencegah  kerusakan  yang  ditimbulkan  oleh  radikal bebas  dengan  melengkapi  kekurangan  elektron  yang dimiliki radikal bebas dan menghambat terjadinya reaksi pembentukan radikal bebas [10, 11].
Berdasarkan  hal  diatas  maka  dilakukan  penelitian penentuan  total  kadar  fenol  dari  daun  kersen  segar, kering,  dan  rontok  ( Muntingia  calabura  L. )  serta  uji aktivitas  antioksidan  dengan  metode  DPPH.  Metode untuk  menentukan  kadar  total  fenol  menggunakan Folin-Ciocalteu  dengan  pembanding  asam  galat. Sedangkan pada pengujian aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode serapan radikal bebas DPPH.

## 2. Metode Penelitian

## Preparasi sampel
Sampel daun kersen yang didapat yaitu berupa daun segar, kering, dan rontok. Dimana daun segar merupakan daun  yang  dipetik  segar  dari  pohonnya,  daun  kering merupakan  pembagian  daun  segar  yang  dikeringkan pada  suhu  ruang,  sedangkan  pada  daun  rontok merupakan daun yang jatuh dari pohon tersebut.

## Uji Skrinning
Uji skrinning fitokimia terhadap daun kersen segar, kering,  dan  rontok  untuk  mengetahui  kandungan senyawa kimianya, dimana meliputi uji : uji alkaloid, uji flavonoid,  uji  tanin,  uji  saponin,uji  streorid,  dan  uji triterpen [12].

## Uji Alkaloid
Sampel  ekstrak  pekat  etanol  daun  kersen  segar, kering, dan roktok masing – masing ditambahkan dengan kloroform 20 mL, disaring dan filtrat ditambahkan HCl 10%.  Hasil  ekstraksi  akan  terbentuk  dua  lapisan, kemudian  lapisan  HCl  diambil  ke  dalam  tabung  reaksi masing-masing  5  mL.  Untuk  tabung  reaksi  1 ditambahkan  pereaksi  Dragendorff  jika  terbentuk endapan merah bata yang menunjukkan positif alkaloid, sedangkan untuk tabung reaksi 2 ditambahkan pereaksi Meyer jika terbentuk endapan putih yang menunjukkan positif alkaloid.

## Uji Flavonoid
Sampel  ekstrak  pekat  etanol  daun  kersen  segar, kering,  dan  rontok  yang  akan  diuji  dididihkan  terlebih dahulu  dengan  aquades  diambil  5  mL  kemudian ditambahkan potongan Mg, 1ml HCl pekat, dan 2 mL amil alkohol,  dan  dilakukan  pengocokan.  Adanya  flavonoid ditunjukkan  dengan  timbulnya  warna  merah,  kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol.

## Uji Tanin
Sampel  ekstrak  pekat  etanol  daun  kersen  segar, kering,  dan  rontok  yang  akan  diuji  dididihkan  terlebih dahulu  dengan  aquades  diambil  5  mL  kemudian ditambahkan  FeCl 3 1%.  Jika  terjadi  perubahan  warna coklat kehitaman maka menandakan tanin secara umum.

## Uji Saponin
Sampel  ekstrak  pekat  etanol  daun  kersen  segar, kering,  dan  rontok  yang  akan  diuji  dididihkan  terlebih dahulu  dengan  aquades  diambil  5  mL,  digojog  dengan kuat. Jika busa yang terbentuk, kemudian ditambah HCl 1 tetes  dengan  masih  adanya  busa  maka  hal  itu menunjukkan positif mengandung saponin.

## Uji Steroid/Terpenoid
Sampel,  ekstrak  pekat  etanol  daun  kersen  segar, kering,  dan  rontok  ditambahkan  dengan  pelarut  eter yang  kemudian  dipisahkan.  Filtrat  yang  didapat ditambahkan dengan 2 tetes anhidrat asam asetat dan 1 tetes  H 2 SO 4. Adanya  steroid  terbentuk  warna  dari  biru sampai  ungu,  sedangkan  triterpen  terbentuknya  warna merah.

## Pembuatan Ekstrak Etanol
Daun kersen sebanyak 6,6 kg. Masing – masing 4.1 kg  daun  segar,  dimana  2,1  kg  dikeringkan  pada  suhu ruang dan 2,4 kg daun rontok dihaluskan menjadi serbuk. Ekstrak  etanol  dibuat  dengan  mengekstraksi  masing- masing  daun  kersen  segar,  kering,  dan  rontok  dengan menggunakan metode maserasi. Maserasi pertama yang dilakukan  yaitu  perendaman  dengan  menggunakan
larutan  n-heksana  selama  3  x  24  jam  sampai  pelarut menjadi  berwarna  bening.  Setelah  itu  dilakukan rotary evaporator untuk mendapatkan ampas sampel yang akan digunakan  pada  tahap  kedua  dengan  perendaman menggunakan  etanol  96%.  Dipekatan  dengan rotary evaporator sehingga didapatkan ekstrak etanol.
Pembuatan Kurva Kalibrasi Asam Galat dengan Reagen Fenol Folin – Ciocalteu
Larutan asam galat (dalam metanol) dibuat dengan konsentrasi  300,  400,  500,  600,  dan  700  mg/L.  Dari masing-masing  konsentrasi  tersebut,  dipipet  0,2  mL ditambahkan  15,8  mL  akuades  dan  1  mL  reagen Folin- Ciocalteu lalu  dikocok  hingga  homogen  akan  terbentuk larutan berwarna jernih kekuningan. Larutan didiamkan selama 8 menit, ditambahkan 3 mL larutan Na 2 CO 3 20%, lalu  dikocok  hingga  homogen.  Larutan  kembali didiamkan  selama  30  menit  pada  suhu  kamar  hingga terbentuk  warna  biru.  Serapan  larutan  diukur  dengan spektrofotometer Vis pada  panjang gelombang  765 nm, lalu dibuat kurva kalibrasi hubungan antara konsentrasi asam galat (mg/L) dengan absorbansi .
Penetapan Kandungan Fenol Total dengan Metoda Folin – Ciocalteu
Ekstrak  etanol  daun  kersen  sergar,  kering,  dan rontok (dalam metanol)  sebanyak 0,2 mL dari masing- masing  larutan  ekstrak  ditambahkan  dengan  15,8  mL akuades dan 1 mL reagen Folin-Ciocalteu , dikocok hingga homogen.  Setelah  homogen  akan  terbentuk  larutan berwarna jernih kekuningan. Larutan didiamkan selama 8 menit, selanjutnya ditambahkan 3 mL larutan Na 2 CO 3 20%  lalu  dikocok  hingga  homogen.  Larutan  kembali didiamkan  selama  30  menit  pada  suhu  kamar  hingga terbentuk  warna  biru.  Serapan  larutan  diukur  dengan spektrofotometer Vis pada  panjang gelombang  765  nm. Kadar  fenol  yang  diperoleh  merupakan  mg  ekuivalen asam galat/gram sampel [13].
Aktivitas Antioksidan (IC 50 )
Ekstrak  sebanyak  100  mg,  kemudian  dilarutkan dengan  metanol  sampai  100 mL  dalam  labu  ukur  maka didapatkan  konsentrasi  1  mg/mL.  Dari  larutan  induk, dilakukan  pengenceran  dengan  menambahkan metanol dengan  perbandingan  yang  telah  ditetapkan,  sehingga diperoleh  sampel  dengan  konsentrasi  (100,  200,  300, 400, 5 00 μg/mL). Untuk penentuan aktivitas antioksidan masing-masing  konsentrasi  dipipet  sebanyak  0,2  mL larutan  sampel  dengan  pipet  mikro  dan  masukan  ke dalam vial, kemudian ditambahkan 3,8 mL larutan DPPH 50 μM. Campuran dihomogenkan dan dibiarkan selama 30  menit  di  tempat  gelap,  absorbansi  diukur  dengan spektrofotometer  UV- Vis pada  panjang  gelombang  515 nm dengan perbandingan kuersetin.

## 3. Hasil dan Pembahasan

## Preparasi Sampel dan Ekstrak Etanol
Daun kersen sebanyak 6,6 kg. Masing – masing 4.1 kg daun segar, dimana 2,1 kg dikeringkan pada suhu ruang dan 2,4 kg daun rontok, kemudian dilakukan penyotiran untuk  menghilangkan  pengotor  dan  pemotongan  pada
ukuran  kecil  hingga  serbuk.  Ekstrak  etanol  pekat sebanyak  17,059  gram  ekstrak  daun  segar,  25,89  gram ekstrak  daun  kering,  dan  21,89  ekstrak  daun  rontok. Dimana rendeman hasil ekstrak etanol masing – masing adalah  1.231%  daun  segar,  0,772%  daun  kering,  dang 1,05% daun rontok.

## Skrinning Fitokimia dan KLT
Daun  kersen  segar,  kering,  dan  rontok  terdapat senyawa  alkaloid,  senyawa  tanin,  senyawa  flavonoid, senyawa saponin, dan senyawa steroid/Terpenoid.

## Tabel 1: Kandungan Senyawa
Uji Daun Segar Daun Kering Daun Rontok Alkaloid + + + Flavonoid + + + Tanin + + + Saponin + + + Steroid/ Terpenoid + + +
KLT dilakukan penampak bercak yang beragam serta untuk  mengetahui  senyawa  kandungan  dari  tiap  daun segar, kering, dan rontok dengan penampak bercak FeCl 3 , H 2 SO 4 , dragendorff, liebermann burchard, uap Amoniak, AlCl 3 , dan menggunakan larutan DPPH. Keterangan A  = daun segar, B = daun kering, C = daun rontok
Gambar 1. KLT Ekstrak Daun Kersen Penampak Bercak H 2 SO 4 dengan Eluen Kloroform Pada Silika GF 254
Gambar 2. KLT Ekstrak Daun Kersen Penampak Bercak FeCl 3 dengan Eluen Kloroform Pada Silika GF 254
Gambar 3. KLT Ekstrak Daun Kersen Penampak Bercak
AlCl3 dengan Eluen Kloroform Pada Silika GF254
Gambar 4. KLT Ekstrak Daun Kersen Penampak Bercak Liebermann Burchard dengan Eluen Kloroform Pada Silika GF254
Gambar 5. Ekstrak Daun Kersen Penampak Bercak Dragendorff dengan Eluen Kloroform Pada Silika GF 254
Gambar 6. KLT Ekstrak Daun Kersen Penampak Bercak Uap Amoniak dengan Eluen Kloroform Pada Silika GF 254

## Gambar 7. KLT Ekstrak Daun Kersen Penampak Bercak
DPPH dengan Eluen Kloroform Pada Silika GF 254

## Kurva Kalibrasi Asam Galat
Kurva  kalibrasi  asam  galat  merupakan  analisis kalibrasi spektrofotometer UV-Vis dengan menggunakan asam galat sebagai pembanding.
Tabel 2: Hasil Absorbansi Asam Galat Konsentrasi (mg/L) Absorbansi 300 0,351 400 0,427 500 0,558 600 0,641 700 0,763

## Gambar 8. Kurva Kalibrasi Asam Galat
Dari kurva kalibrasi tersebut didapatkan persamaan regresi  y  =  0,001x  +  0,029 dan  harga  koefisien  korelasi (R 2 ) yaitu 0,993. Persamaan regresi linier ini menyatakan hubungan matematis antara konsentrasi asam galat dan absorbansinya pada pengukuran menggunakan spektrofotometer  UV-Vis.  Harga  koefisien  korelasi  (R 2 ) menyatakan  hubungan  /  korelasi  antara  konsentrasi (sumbu x) dan absorbansi (sumbu y).
Persamaan  regresi  asam  galat  tersebut  digunakan dalam penentuan total kadar fenol dengan memasukkan absorbansi  yang  didapat  pada  setiap  sampel  ke  y  dan akan didapatkan x sebagai mg/L kadar asam galat. Kadar asam  galat  tersebut  (mg/L)  digunakan  untuk menghitung  total  kadar  fenol  yaitu  banyaknya  kadar asam galat (mg/L) per kadar sampel (g/L).

## Penentuan Total Kadar Fenol
total kadar fenol bahwa hasil dari ekstrak daun segar mengandung  fenol  total  sebesar  6  mg  ekivalen  asam galat/g  sampel  kering.  Pada  ekstrak  daun  kering mengandung  fenol  total  sebesar  14  mg  ekivalen  asam galat/g  sampel  kering.  Pada  ekstrak  daun  rontok mengandung  total  fenol  sebesar  12  mg  ekivalen  asam galat/g sampel kering.
Tabel 3: Hasil Kadar Fenol Sampel Absorbansi Kadar Total Fenol (mg ekivalen asam galat/g sampel) Segar 0,032 6 Kering 0,036 14 Rontok 0,035 12

## Penentuan Aktivitas Antioksidan
Aktivitas antioksidan merupakan kemampuan suatu senyawa atau ekstrak untuk menghambat reaksi oksidasi yang  dapat  dinyatakan  dengan  persentase  inhibisi. Parameter yang digunakan untuk menunjukkan aktivitas antioksidan  adalah  harga Inhibition  Concentration (IC 50 ) yaitu  konsentrasi  suatu  zat  antioksidan  yang menyebabkan  50%  DPPH  kehilangan  karakter  radikal atau konsentrasi suatu zat antioksidan yang memberikan persentase  penghambatan  sebesar  50%.  Zat  yang mempunyai aktivitas antioksidan tinggi, memiliki harga IC 50 yang rendah.
Tabel 4: Hasil IC 50 Sampel IC 50 (mg/L) Kuersetin -9423,8 Segar -291187,5 Kering -48958,9 Rontok -245305,6
Hal tersebut menunjukkan bahwa memiliki aktivitas antioksidan  lebih  rendah  dari  ekstrak  daun  kering.  Ini disebabkan  karena  di  dalam  ekstrak  daun  segar  dan ekstrak  daun  rontok  meliputi  senyawa  non  fenolik  dan senyawa fenolik. Senyawa-senyawa tersebut mengakibatkan  terjadi penurunan  aktivitas antioksidan karena terdapat senyawa non fenolik yang tidak memiliki aktivitas  antioksidan  yang  ditunjukkan  pada  harga  IC 50 yang paling besar.
Hubungan Total Kadar Fenol dengan Aktivitas Antioksidan (IC 50 )
Untuk  mengetahui  hubungan  total  kadar  fenol dengan aktivitas antioksidan yang dinyatakan dalam IC 50 dilakukan dengan pembuatan kurva.
Gambar 9. Kurva total Kadar Fenol dengan Aktivitas Antioksidan (IC 50 )
Nilai  R 2 sama  dengan  0,657  menunjukkan persamaan  tersebut  linier  sehingga  dapat  diterima sebagai persamaan hubungan total fenol dengan IC 50 . Hal ini  membuktikan  bahwa  ada  hubungan  antara kandungan senyawa total fenol pada ekstrak daun kersen segar,  kering,  dan  rontok  dengan  kemampuannya menangkal radikal bebas pada uji DPPH atau uji aktifitas antioksidan. Hubungan antara kandungan senyawa total kadar fenol pada ekstrak daun kersen segar, kering, dan rontok  berbanding  lurus  dengan  kemampuannya meredam  radikal  DPPH  (aktivitas  antioksidan).  Kurva tersebut  dapat  menunjukkan  bahwa  semakin  banyak kandungan senyawa fenolik dalam ekstrak daun kersen segar, kering, dan rontok maka semakin besar aktivitas antioksidan.

## 4. Kesimpulan
Kandungan senyawa kimia dari daun segar, kering, dan  rontok  mempunyai  kandungan  senyawa  yang berbeda . Total  kadar  fenol  yang  diperoleh  dari  ekstrak daun  kersen  segar,  kering,  dan  rontok  masing – masing didapat 6 mg ekivalen asam galat/g sampel segar, 14 mg ekivalen asam galat/g sampel kering, dan 12 mg ekivalen asam  galat/g  sampel  rontok.  Aktivitas  antioksidan  IC 50 yang  diperoleh  dari  ekstrak  daun  kersen  segar,  kering, dan  rontok  masing – masing  sebesar  -291187,5  mg/L  - 48958,9 mg/L dan -245305,6 mg/L.

## 5. Daftar Pustaka
[1]  Fajar  Budi  Laksono,  Enny  Fachriyah,  Dewi  Kusrini, Isolasi  dan  Uji  Antibakteri  Senyawa  Terpenoid Ekstrak  N-Heksana  Rimpang  Lengkuas  Merah (Alpinia purpurata), Jurnal Kimia Sains dan Aplikasi , 17, 2, (2014) 37-42
[2]  Pramono,  Posisi  dan  Kontribusi  Kimia  dalam Mencari  Bahan  baku  Obat  Dari  Bahan  Alam,  in: Seminar  Obat  Tradisional  Anti  Rematik,  Semarang, 1998.
[3]  MH  Sani,  ZA  Zakaria,  T  Balan,  LK  Teh,  MZ  Salleh, Antinociceptive  activity  of  methanol  extract  of Muntingia  calabura  leaves  and  the  mechanisms  of action involved, Evidence-Based Complementary and
Alternative Medicine , 2012, (2012) [4]  Jeffrey Barry Harborne, Metode fitokimia,
Padmawinata  K,  S.  I,  Institut  Teknologi  Bandung, Bandung, 1987.
[5]  Tavamani Balan, Mohd Hijaz Mohd Sani, Salahuddin
Haji  Mumtaz  Ahmad,  Velan  Suppaiah,  Norhafizah Mohtarrudin, Zainul Amiruddin Zakaria, Antioxidant  and  anti-inflammatory  activities contribute to the prophylactic effect of semi-purified fractions obtained from the crude methanol extract of  Muntingia  calabura  leaves  against  gastric ulceration in rats, Journal of Ethnopharmacology , 164,
(2015)
1-15 http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2014.12.017
[6]  Mhd  Riza  Marjoni,  Afrinaldi  Afrinaldi,  Ari  Devi Novita,  Kandungan  Total  Fenol  Dan  Aktivitas Antioksidan  Ekstrak  Air  Daun  Kersen  (Muntingia Calabura L.), YARSI medical Journal , 23, 3, 187-196
[7]  William  Patrick  Cruiz  Buhian,  Raquel  Orejudos Rubio,  Demetrio  Lim  Valle,  Juliana  Janet  Martin- Puzon, Bioactive metabolite profiles
and
antimicrobial  activity  of  ethanolic  extracts  from Muntingia calabura L. leaves and stems, Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine , 6, 8, (2016) 682-685 http://dx.doi.org/10.1016/j.apjtb.2016.06.006
[8]  J. Javanmardi, C. Stushnoff, E. Locke, J. M. Vivanco, Antioxidant  activity  and  total  phenolic  content  of Iranian  Ocimum  accessions, Food  Chemistry ,  83,  4,
(2003)  547-550 http://dx.doi.org/10.1016/S0308- 8146(03)00151-1
[9]  Hiroe  Kikuzaki,  Masashi  Hisamoto,  Kanae  Hirose, Kayo  Akiyama,  Hisaji  Taniguchi,  Antioxidant properties of ferulic acid and its related compounds, Journal  of  Agricultural  and  Food  Chemistry ,  50,  7,
(2002)
2161-2168
http://dx.doi.org/10.1021/jf011348w
[10] Philip  Molyneux,  The  use  of  the  stable  free  radical diphenylpicrylhydrazyl  (DPPH)  for  estimating antioxidant activity, Songklanakarin Journal of Science and Technology , 26, 2, (2004) 211-219
[11]  Buyung  Rukmantara  Susena  Putra,  Dewi  Kusrini, Enny  Fachriyah,  Isolasi  Senyawa  Antioksidan  dari Fraksi  Etil  Asetat  Daun  Tempuyung  (Sonchus arvensis  L), Jurnal  Kimia  Sains  dan  Aplikasi ,  16,  3,
(2013) 69-72
[12] Norman R. Farnsworth, Biological
and phytochemical  screening  of  plants, Journal  of Pharmaceutical  Sciences ,  55,  3,  (1966)  225-276 http://dx.doi.org/10.1002/jps.2600550302
[13] H.  Hülya  Orak,  Total  antioxidant  activities, phenolics, anthocyanins, polyphenoloxidase activities  of  selected  red  grape  cultivars  and  their correlations, Scientia  Horticulturae ,  111,  3,  (2007) 235-241 http://dx.doi.org/10.1016/j.scienta.2006.10.019