## PREDIKSI TOKSISITAS IN SILICO SENYAWA BIOAKTIF DAUN KEMANGI (OCIMUM SANCTUM L.)

## IN SILICO TOXICITY PREDICTION OF BASIL LEAVES (OCIMUM SANCTUM L.)
Ester Wangsasaputra 1, *, Satria Prihandini 1 , Chrismis Novalinda Ginting 2 , Linda Chiuman 2
1 Fakultas Kedokteran, Kedokteran Gigi dan Ilmu Kesehatan Universitas Prima Indonesia, Jl. Belanga No. 1, Simpang Ayahanda, Medan, Sumatera Utara 20118
2 Program  Studi  Magister  Sains  Biomedik,  Fakultas  Kedokteran,  Kedokteran  Gigi  dan  Ilmu  Kesehatan Universitas Prima Indonesia, Jl. Belanga No. 1, Simpang Ayahanda, Medan, Sumatera Utara 20118
* Korespondensi: ester.wangsaputra234@gmail.com

## ABSTRACT
Introduction:  Ocimum  sanctum  L.  is  commonly  found  and  often  used  as  a  food  ingredient  in  Indonesia. Flavonoid compounds are a group of chemical compounds found in Ocimum sanctum L. These compounds are  known  for  their  diverse  biological  activities,  including  antibacterial,  antimicrobial,  anti-inflammatory, antimalarial,  and  anticancer  properties.  In  this  study,  we  aimed  to  investigate  the  absorption,  distribution, metabolism, excretion, and toxicity (ADMET) of flavonoid compounds in Ocimum sanctum L.
Methods:  To  achieve  the  research  objective,  the  ADMET  properties  of  flavonoid  compounds  in  Ocimum sanctum  L. were predicted using three web servers consisting  of SwissADME,  pkCSM, and  ProTox-II. The observed parameters are divided into ADMET parameters.
Results: The results revealed that the flavonoid compounds in Ocimum sanctum L. have a median lethal dose (LD 50 ) range of 2000 mg/kg to 5600 mg/kg, classifying them into toxicity classes IV, V, and VI. Additionally, these flavonoid compounds showed immunotoxicity, cytotoxicity, and impact on the Mitochondrial Membrane Potential (MMP).
Conclusions: Our study demonstrates that the metabolic compounds derived from Ocimum sanctum L. are considered safe.
Key Words: Ocimum sanctum, flavonoids, toxicity prediction, metabolism, in silico

## ABSTRAK
Pendahuluan: Ocimum sanctum L . (daun kemangi) banyak ditemukan dan sering digunakan sebagai bahan makanan  di  Indonesia.  Senyawa  flavonoid  merupakan  kelompok  senyawa  kimia  yang  banyak  terkandung dalam Ocimum  sanctum  L. Senyawa  ini  dikenal  dengan  aktivitas  biologisnya  yang  beragam,  antara  lain antibakteri, antimikroba, antiinflamasi, antimalaria, dan antikanker. Pada penelitian ini, kami bertujuan untuk menyelidiki  penyerapan,  distribusi,  metabolisme,  ekskresi,  dan  toksisitas  ( the  absorption,  distribution, metabolism, excretion, and toxicity/ADMET) senyawa flavonoid dalam Ocimum sanctum L. Metode: Dalam  mencapai  tujuan  penelitian,  prediksi  properti  ADMET  senyawa  flavonoid  pada Ocimum sanctum  L. dilakukan  menggunakan  tiga  web  server  yang  terdiri  dari SwissADME,  pkCSM,  dan  ProTox-II . Parameter yang diamati dibagi menjadi parameter ADMET.
Hasil: Hasil penelitian menunjukkan bahwa senyawa flavonoid dalam Ocimum sanctum L. memiliki median lethal dose (LD 50 ) yang berkisar antara 2000 mg/kg hingga 5600 mg/kg, dengan klasifikasi kelas toksisitas IV, V,  dan  VI.  Selain  itu,  senyawa flavonoid  ini  menunjukkan  imunotoksisitas,  sitotoksisitas,  dan  dampak  pada Mitochondrial Membrane Potential (MMP). Simpulan: Penelitian kami menunjukkan bahwa senyawa metabolik yang berasal dari Ocimum sanctum L. dianggap aman.
Kata Kunci: Ocimum sanctum , flavonoid, prediksi toksisitas, metabolisme, in silico

## PENDAHULUAN
Daun  kemangi  ( Ocimum  sanctum  L. ) merupakan anggota dari keluarga Lamiaceae
dan diketahui mengandung berbagai senyawa fitokimia dengan potensi efek farmakologis. 1,2
Senyawa-senyawa ini meliputi karotenoid, ter-

## ARTIKEL PENELITIAN
penoid,  alkaloid,  saponin,  flavonoid,  tannin, dan minyak atsiri, yang berfungsi sebagai anti- oksidan  dan  menunjukkan  sifat  antibakteri. 3
Daun  kemangi  diyakini  bermanfaat  dalam pengobatan  gangguan  pencernaan,  bersifat renoprotektif,  dan  menjanjikan  dalam  ber- bagai bidang seperti antikarsinogenik, neuro- protektif, kardioprotektif, antikoagulan, imuno- modulator, analgesik/antipiretik, hipolipidemik, antiinflamasi,  antidiabetes,  antistres,  dan  he- patoprotektif. 3-6 Minyak  atsiri  yang  diekstrak dari  daun  kemangi  juga  memiliki  sifat  fungi- statik, insektisidal, dan nematisidal. 7 Studi te- lah mengidentifikasi triterpenoid tetrasiklik se- bagai senyawa bioaktif yang terisolasi. 5 Selain itu,  kandungan  antioksidan  dalam  daun  basil telah  terbukti  memberikan  efek  bermanfaat pada kondisi patologis seperti aterosklerosis, iskemia, kanker, katarak, dan gangguan fung- si hati. 8
Ekstrak hidroalkohol dari daun Ocimum sanctum  L. memiliki  nilai  terapeutik  dan  pro- filaksis  dalam  mengobati  infark  miokard. 9,10
Penemuan  dan  pengembangan  obat  adalah proses  yang  menantang  dan  mahal,  dengan sebagian  besar  obat  yang  potensial  gagal mencapai pasar karena kurangnya efektivitas atau efek samping yang tidak dapat diterima.
Dalam  mengoptimalkan  efikasi  dan  efisiensi terapeutik  suatu  senyawa,  keamanan,  sifat farmakokinetik, dan toksisitasnya harus dieva- luasi. Interaksi farmakokinetik, toksisitas, dan potensi  merupakan  faktor  penting  dalam efikasi  obat.  Pengujian in  vitro dan in  vivo biasanya  dilakukan  untuk  menyelidiki  kea- manan obat, termasuk berbagai toksisitas dan efek samping. Meskipun telah dilakukan upa-
ya  untuk  mengembangkan  model in  vitro seperti " organ on a chip ," pendekatan sema- cam  itu  masih  relatif  mahal  dan  memakan waktu. 11,12
Saat  ini,  metode  komputasi  menawar- kan banyak keuntungan dibandingkan dengan pendekatan eksperimental karena ramah ling- kungan, cepat, biaya terjangkau, sangat aku- rat,  dan  dapat  dilakukan  sebelum  senyawa disintesis. 13,14 Prediksi  Toksisitas In  silico
(PTI)  adalah  pendekatan  komputasi  untuk menganalisis,  mensimulasikan,  memvisuali- sasikan, dan memprediksi toksisitas zat kimia. Pendekatan ini mencakup semua metode un- tuk menganalisis sifat kimia dan biologis struk- tur kimia, baik yang mewakili zat kimia aktual maupun yang diusulkan (virtual). Pendekatan in-silico sering digunakan bersamaan dengan pengujian toksisitas lainnya dan secara berta- hap  mulai  digunakan  untuk mengevaluasi  in- formasi  toksisitas  tanpa  perlu  studi in  vitro atau in vivo . Toksikologi in silico (IST) meng- gunakan model berkode perangkat lunak un- tuk  memprediksi  potensi  toksisitas  zat  kimia dan  dalam  beberapa  kasus  mengkuantifikasi dosis  toksik.  Model  ini  didasarkan  pada  data eksperimental,  hubungan  aktivitas-struktur, dan bukti ilmiah (misalnya struktur peringatan yang diterbitkan dalam literatur). 15
Penilaian absorption, distribution, meta- bolism,  excretion,  and  toxicity (ADMET)  se- nyawa flavonoid Ocimum sanctum L. menggu- nakan SwissADME,  Pharmacokinetics-Com- putational  ADMET  Spectrum ( pkCSM),  dan ProTox-II .  Penilaian  ini  menggunakan  alat komputasi untuk memprediksi dan mengeva- luasi  berbagai  sifat  farmakokinetik  dan  toksi-
kologi dari senyawa-senyawa ini. Pendekatan pK-CSM digunakan untuk memprediksi karak- teristik  penyerapan,  distribusi,  metabolisme, ekskresi, dan toksisitas flavonoid. Alat ini mem- berikan  informasi  tentang  parameter-para- meter seperti kelarutan dalam air, penyerapan di  saluran  pen-cernaan,  permeabilitas  kulit, volume  distribusi,  metabolisme  oleh  enzim tertentu,  dan  potensi  toksisitas. SwissADME
mengevaluasi  sifat  farmakokinetik  flavonoid, memberikan  data  tentang  penyerapan  di  sa- luran pencernaan, permeabilitas sawar darah- otak  ( blood  brain  barrier /BBB),  metabolisme oleh  enzim-enzim  tertentu,  potensi  sebagai substrat P-glikoprotein, dan permeabilitas ku- lit. ProTox  II memprediksi  berbagai  akhiran toksikologi  dan  jalur  toksisitas  dari  flavonoid.
Alat  ini  memberikan  informasi  tentang  kelas- kelas  toksisitas  berdasarkan  nilai  LD 50 .  Juga mengevaluasi potensi efek toksikologi seperti imunotoksisitas,  sitotoksisitas,  dan  dampak- nya pada MMP. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi absorption,  distribution,  meta- bolism,  excretion,  and  toxicity (ADMET)  se- nyawa  flavonoid Ocimum  sanctum  L. meng- gunakan ketiga alat yang telah disebutkan.

## METODE
Studi  ini  dilakukan  menggunakan  se- rangkaian  laptop  Asus  X441BA  dengan  spe- sifikasi prosesor AMD A4-9125 RADEON R3, 4 COMPUTE CORE 2C + 2G, RAM 4 GB, dan hard  drive 1  TB,  serta  perangkat  lunak  dan sistem operasi Windows 10 . Perangkat lunak
yang  digunakan  meliputi PubChem,  pK-CSM
Tools, SwissAdME, dan Pro-Tox II . Senyawa yang  menjadi  fokus  penelitian  adalah  kelom-
pok flavonoid, yaitu aphanamol II; aromaden- drene;  bulnesol;  -cadinene;  -cadinene;  - cadinene;  -cadinol;  -copaene;  elemol;  - caryo phyllene; β-elements; γ-elements;  -eu- desmol;  -eudesmol;  --eudesmol;  germa- crene;  humulene  oxide;  -humulene ;  dan ledene .
Situs  web  PubChem  (https://pubchem. ncbi.nlm.nih.gov/)  digunakan  untuk  menda- patkan Canonical  SMILES dari  masing-ma- sing  senyawa.  Prediksi  toksisitas  senyawa dilakukan menggunakan pK-CSM Tools yang dapat  diakses  melalui  http://biosig.unimelb. edu.au/pkcsm/prediction.  Prosesnya  dimulai dengan memasukkan Canonical SMILES dari senyawa-senyawa yang diteliti  dan kemudian menekan  ADMET  untuk  mendapatkan  hasil analisis  penyerapan,  termasuk  kelarutan  da- lam  air,  permeabilitas CaCO 2 ,  penyerapan usus,  permeabilitas  kulit,  substrat  P-gliko- protein,  inhibitor  P-glikoprotein  I,  inhibitor  P- glikoprotein II, analisis distribusi (VDss, fraksi terikat, permeabilitas BBB, dan permeabilitas Sistem  Saraf  Pusat  (SSP)),  analisis  meta- bolisme (substrat CYP2D6, substrat CYP3A4, inhibitor CYP1A2, inhibitor CYP2C19, inhibitor CYP2C9,  inhibitor  CYP2D6,  dan  inhibitor CYP3A4), analisis ekskresi ( Total Clearance , substrat Renal OCT2), dan analisis toksisitas (toksisitas Ames, dosis maksimum yang dapat ditoleransi manusia, inhibitor hERG I, inhibitor hERG  II,  LD 50 ,  LOAEL,  hepatotoksisitas, sensitivitas  kulit,  toksisitas T.  Pyriformis ,  dan toksisitas Minnow ).
Prediksi  toksisitas  senyawa  dilakukan dengan menggunakan SwissADME yang da- pat diakses melalui http://www.swissadme.ch/.
Prosesnya  diawali  dengan  memasukkan Ca- nonical  SMILES dari  senyawa-senyawa  ter- sebut dan kemudian memilih Run untuk men- dapatkan  hasil  analisis  penyerapan  (penye- rapan  gastrointestinal  (GI),  substrat  P-GP,
Log  Kp),  analisis  distribusi  (permeabilitas
BBB),  dan  analisis  metabolisme  (inhibitor
CYP1A2, inhibitor
CYP2C19, inhibitor
CYP2C9,  inhibitor  CYP2D6,  dan  inhibitor CYP3A4).
Prediksi  toksisitas  senyawa  dilakukan menggunakan Pro-Tox II , yang dapat diakses melalui https://tox-new.charite.de/protox_II/.
Prosesnya  dengan  mengklik Tox  Prediction ,
memasukkan Canonical  SMILES dari  senya- wa-senyawa  tersebut,  memilih  semua  para- meter toksisitas, dan kemudian memulai Tox-
Prediction untuk  mendapatkan  hasil  analisis toksisitas  senyawa,  termasuk  LD 50 ,  hepa- totoksisitas, karsinogenisitas, imunotoksisitas, mutagenisitas,  sitotoksisitas,  AhR,  AR,  AR- LBD,  Aromatase,  ER,  ER-LBD,  PPAR- Gamma,  nrf2/ARE,  HSE,  MMP,  penekan tumor Phosphoprotein, dan ATAD 5.

## HASIL
Hasil  prediksi  toksisitas  senyawa  de- ngan  PK-CSM  disajikan  pada  Tabel  1.  Hasil menunjukkan  bahwa  seluruh  senyawa ses- quiterpene dalam Ocimum  sanctum  L. (20
senyawa) memiliki kelarutan air yang rendah, berkisar dari -3,67 log mol/L hingga -6,50 log mol/L.  Prediksi  permeabilitas  CaCO 2 menun- jukkan  bahwa  semua  senyawa  memiliki  per- meabilitas  tinggi,  berkisar  dari  1,37  hingga 1,62.  Prediksi  penyerapan  GI  juga  menun- jukkan  bahwa  semua  senyawa  memiliki  pe-
nyerapan tinggi (92,23% hingga 97,15%). Ter- dapat  18  senyawa  yang  memiliki  permea- bilitas rendah pada kulit (-1,27 log Kp hingga - 2,22  log  Kp),  sedangkan  2  senyawa  lainnya, yaitu  APH  memiliki  log  Kp  -2,69  <-2,5,  dan HMO memiliki log Kp -2,97 <-2,5.
Sembilan  belas  senyawa  diidentifikasi sebagai  inhibitor  dan  substrat  P-glikoprotein, yang menunjukkan independensi pada jalur P- glikoprotein.  Tujuh  belas  senyawa  memiliki VDss <0,71 (distribusi rendah), dan 3 senya- wa lainnya memiliki distribusi yang lebih baik ( ARO=VDss  0,75;  -COP=VDss  0,81;  and
LDN=VDss  0,75 ).  Hasil fraksi tak  terikat (Fu) yang  dianalisis  berkisar  dari  0,12-0,41, terendah adalah  -COP , dan tertinggi adalah
HMO.  Tabel  1  menunjukkan  bahwa  semua senyawa  memiliki  nilai  log  BB  >0,3  kecuali APH. Sepuluh senyawa memiliki nilai logPS > -2  ( ARO,  α-CAD,  -CAD,  -CAD,  - CAD,  α  - COP,  -ELM,  -ELM,  -EUS,  dan  LDN ).
Senyawa lainnya memiliki nilai logPS berkisar dari  -2,1  hingga  -2,92.  Sebelas  senyawa  ( α- CAD,  -CAD,  -CAD,  -CAD,  -CDL,  -CAR,
ELE,  -ELM,  GMC,  -HUM,  dan  HMO )  tidak mengalami metabolisme oleh sitokrom P450. Dalam penelitian ini, nilai clearance total diper- oleh  antara  0,25-1,44.  Tidak  ada  senyawa yang berpotensi sebagai inhibitor hERG I dan hERG  II.  Nilai  LD 50 berkisar  dari  1,51 mol/kg hingga 1,92 mol/kg, dan nilai LOAEL berkisar dari  1,13-2,06.  Hasil  uji  pada  parameter hepatotoksisitas  menunjukkan  bahwa  semua senyawa tidak berpotensi beracun. Dalam uji sensitivitas  kulit,  17  senyawa  menunjukkan potensi  alergi  kulit,  sementara  tiga  senyawa lainnya (ARO,  -COP, dan LDN) memiliki risi-
Tabel 1. Toksisitas Senyawa PK-CSM
P a ra m e te r AP H ARO

## BUL 
-CAD  -CAD  -CAD  -CAD  -CDL  -CAR  -COP E L E  -E L M  -E L M  -E US  -E US  - E US GM C  -HUM HM O L DN
Ab s o rp si
K e lar u ta n a ir -3 ,6 8 -5 ,7 6 -4 ,4 1 -5 ,9 2 -5 ,8 1 -6 ,2 3 -5 ,9 2 -4 ,0 7 -5 ,5 6 -5 ,7 1 -4 ,6 5 -6 ,4 3 -6 ,5 0 -4 ,4 2 -4 ,9 -4 ,5 2 -5 ,4 1 -5 ,1 9 -4 ,0 5 -5 ,8 4
P e rm e a b ilita s CaCO 2 1 ,6 2 1 ,4 0 1 ,5 0 1 ,4 1 1 ,4 3 1 ,4 3 1 ,4 2 1 ,4 8 1 ,4 2 1 ,3 7 1 ,5 2 1 ,4 1 1 ,4 1 1 ,5 0 1 ,5 1 1 ,5 0 1 ,4 2 4 1 ,4 2 1 ,4 2 1 ,3 9
A b so rp si I n te stin a l 9 4 ,6 5 9 5 ,3 0 9 2 ,7 8 9 4 ,6 4 9 7 ,1 5 9 6 ,4 8 9 6 ,1 3 9 4 ,3 0 9 4 ,8 5 9 6 ,2 2 9 3 ,4 9 9 4 ,3 6 9 3 ,3 8 9 3 ,0 2 9 4 ,3 0 9 2 ,2 3 9 4 ,9 3 9 4 ,7 0 9 5 ,5 2 9 4 ,7 4
P e rm e a b ilita s ku lit -2 ,6 9 -1 ,8 2 -1 ,8 7 -1 ,4 4 -1 ,4 8 -1 ,5 6 -1 ,4 6 -1 ,9 2 -1 ,5 8 -2 ,2 3 -1 ,5 8 -1 ,2 8 -1 ,3 3 -1 ,8 7 -1 ,9 7 -1 ,8 5 -1 ,5 9 -1 ,7 4 -2 ,9 7 -1 ,8 2
S u b st ra t P - g liko p ro te in T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k Ya T ida k T ida k
P e n g h a m b a t P - g liko p ro te in I T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
In h ib ito r P - g liko p ro te in I I T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
Dis tr ib u s i V Dss 0 ,2 8 0 ,7 5 0 ,4 8 0 ,6 8 0 ,6 9 0 ,6 7 0 ,6 9 0 ,4 2 0 ,6 5 0 ,8 1 0 ,4 1 0 ,6 0 0 ,5 7 0 ,4 9 0 ,4 6 0 ,4 9 0 ,5 4 0 ,5 1 0 ,4 4 0 ,7 5
F ra ksi ti d a k te rikat 0 ,2 7 0 ,1 7 0 ,2 7 0 ,2 0 0 ,2 0 0 ,1 3 0 ,2 0 0 ,2 8 0 ,2 6 0 ,1 2 0 ,2 5 0 ,1 6 0 ,1 5 0 ,2 8 0 ,1 6 0 ,2 7 0 ,3 2 0 ,3 5 0 ,4 2 0 ,1 7
P e rm e a b ilita s S DO 0 ,0 7 0 ,8 2 0 ,6 0 0 ,7 9 0 ,7 9 0 ,8 1 0 ,7 7 0 ,6 0 0 ,7 3 0 ,8 9 0 ,6 3 0 ,8 1 0 ,7 8 0 ,5 9 0 ,6 3 0 ,5 8 0 ,7 0 0 ,6 6 0 ,6 7 0 ,8 1
P e rm e a b ilita s S S P -2 ,1 0 -1 ,7 7 -2 ,3 1 -1 ,9 0 -1 ,9 6 -1 ,6 3 -1 ,9 5 -2 ,1 5 -2 ,1 7 -1 ,6 6 -2 ,1 5 -1 ,7 1 -1 ,6 4 -2 ,3 1 -1 ,8 6 -2 ,3 0 -2 ,4 5 -2 ,5 6 -2 ,9 3 -1 ,7 7
M e ta b o lis m e S u b st ra t CY P 2 D6 T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
S u b st ra t CY P 3 A 4 Ya Ya T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k Ya T ida k T ida k Ya T ida k Ya T ida k T ida k T ida k T ida k Ya
P e n g h a m b a t CY P 1 A 2 T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k Ya T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
P e n g h a m b a t CY P 2 C19 T ida k T ida k Ya T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k Ya T ida k Ya T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
P e n g h a m b a t CY P 2 C9 T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k Ya T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
P e n g h a m b a t CY P 2 D6 T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
P e n g h a m b a t CY P 3 A 4 T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
E k s k re s i K lir e n s t o ta l 1 ,2 1 0 ,9 3 1 ,0 7 1 ,1 8 1 ,1 8 1 ,1 9 1 ,1 8 1 ,0 9 1 ,0 9 0 ,9 5 1 ,3 1 0 ,2 5 1 ,4 1 1 ,0 3 1 ,0 3 1 ,0 3 1 ,4 4 1 ,2 8 1 ,0 7 0 ,9 1
S u b st ra t OCT 2 r e n a l T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
T o k s is it a s T o ksisi ta s A m e s T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
Dosis t o le ra n si
m a ksim a l 0 ,0 2 -0 ,1 5 0 ,2 1 0 ,1 3 0 ,3 6 0 ,0 5 0 ,2 1 0 ,3 4 0 ,3 5 -0 ,3 0 0 ,2 8 0 ,0 6 -0 ,0 8 0 ,1 3 -0 ,2 2 0 ,0 6 0 ,5 4 0 ,5 5 0 ,3 8 -0 ,2 1
P e n g h a m b a t h E RG I T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
P e n g h a m b a t h E RG I T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
L D50
1 ,7 6 1 ,5 3 1 ,7 0 1 ,5 3 1 ,5 9 1 ,5 4 1 ,5 5 1 ,9 2 1 ,6 2 1 ,6 4 1 ,6 9 1 ,5 4 1 ,5 1 1 ,6 8 1 ,7 3 1 ,6 8 1 ,7 6 1 ,7 7 1 ,6 2 1 ,5 2
L OA E L 2 ,0 6 1 ,3 3 1 ,2 3 1 ,3 8 1 ,4 5 1 ,4 7 1 ,4 5 1 ,4 8 1 ,4 2 1 ,3 6 1 ,2 3 1 ,3 1 1 ,3 4 1 ,2 3 1 ,3 0 1 ,2 5 1 ,3 5 1 ,3 4 1 ,1 3 1 ,3 7
Hep a to ksi sita s T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k
S e n sitivi ta s K u lit Ya T ida k Ya Ya Ya Ya Ya Ya Ya T ida k Ya Ya Ya Ya Ya Ya Ya Ya Ya T ida k
T o ksisi ta s P ir ifo rm is 1 ,0 6 1 ,4 3 1 ,5 2 1 ,6 2 1 ,6 1 1 ,7 3 1 ,6 1 1 ,4 9 1 ,4 0 1 ,1 2 1 ,9 2 1 ,9 0 1 ,7 7 1 ,5 2 1 ,8 1 1 ,5 2 1 ,5 7 1 ,4 5 1 ,0 9 1 ,4 3
T o ksisi ta s M inT ida kw 0 ,8 9 0 ,4 3 0 ,8 5 0 ,3 7 0 ,0 4 -0 ,0 2 0 ,0 9 0 ,7 4 0 ,5 0 0 ,1 3 0 ,5 4 0 ,1 2 0 ,2 2 0 ,8 2 0 ,4 1 0 ,8 4 0 ,5 0 0 ,7 2 1 ,1 9 0 ,4 2
L ip in s k i
BM 2 3 6 ,3 6 2 0 4 ,3 6 2 2 ,3 7 2 2 0 4 ,3 6 2 0 4 ,3 6 2 0 4 ,3 6 2 0 4 ,3 6 2 2 2 ,3 7 2 0 4 ,3 6 2 0 4 ,3 6 2 2 2 ,3 7 2 0 4 ,3 6 2 0 4 ,3 6 2 2 2 ,3 7 2 2 2 ,3 7 2 2 2 ,3 7 2 0 4 ,3 6 2 0 4 ,3 6 2 2 0 ,3 6 2 0 4 ,3 6
L o g P 2 ,9 6 4 ,2 7 3 ,9 2 4 ,5 8 4 ,5 8 4 ,5 8 4 ,7 3 3 ,7 8 4 ,7 3 4 ,2 7 3 ,9 4 4 ,7 5 4 ,8 9 3 ,9 2 3 ,9 2 4 ,0 7 5 ,0 4 5 ,0 4 4 ,2 5 4 ,4 2
HB D 1 0 1 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 1 1 0 0 0 0
HB A 2 0 1 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 1 1 0 0 1 0
ko  lebih  rendah  dalam  menyebabkan  alergi.
Nilai  toksisitas T.  Pyriformis diperoleh  dari
1,05  hingga  1,92.  Delapan  belas  senyawa memenuhi hukum Lipinski, dan dua senyawa memiliki nilai log P lebih besar dari +5 (GMC dan  -HUM dengan nilai log P= 5,04).
Hasil  prediksi  toksisitas  senyawa  de- ngan  SwissADME  ditampilkan  pada  Tabel  2.
Delapan memiliki penyerapan GI tinggi, yaitu senyawa APH, BUL,  -CDL,  ELE,  -EUS,  -
EUS,  -EUS,  and  HMO ,  sementara  12  se- nyawa  lainnya  memiliki  penyerapan  GI  yang rendah.  Pada  analisis,  tidak  ada  senyawa yang  ditemukan  sebagai  substrat  P-gliko- protein.  Dalam  memprediksi  permeabilitas kulit, nilai berkisar dari -3,21 cm/s hingga -5,61 cm/s, dimana semakin negative log Kp maka senyawa makin tidak  permeabel.  Pada  para- meter  distribusi  BBB,  10  senyawa  menun- jukkan  sifat  yang  permeabel.  Dalam  prediksi metabolisme  senyawa,  parameter  meliputi inhibitor CYP1A2, inhibitor CYP2C19, inhibitor CYP2C9,  inhibitor  CYP2D6,  dan  inhibitor
CYP3A4. Senyawa APH, BUL,  -EUS, dan  -
EUS  tidak  mengalami  metabolisme  oleh enzim-enzim  tersebut.  Pada  senyawa  ARO,
 -COP mengalami metabolisme oleh inhibitor
CYP1A2,  inhibitor  CYP2C19,  dan  inhibitor
CYP2C9 serta tidak mengalami metabolisme oleh inhibitor CYP2D6 dan inhibitor CYP3A4.
Sementara  itu,  senyawa α-CAD,  -CAD,  -
CAD,  -CAD ,  -CAR,  -ELM,  -ELM, dan LDN tidak  mengalami  metabolisme  oleh  inhibitor CYP1A2,  inhibitor  CYP2D6,  dan  inhibitor
CYP3A4  tetapi  mengalami  metabolisme  oleh inhibitor CYP2C19 dan inhibitor CYP2C9.
Tabel 2. Toksisitas Senyawa SwissADME
P a ra m e te r AP H ARO BUL α -CAD β -CAD ɣ- CAD ö -CAD α -CDL β -CAR α -COP E L E β -E L M ɣ- E L M α -E US β -E US ɣ- E US GM C α -HUM HM O L DN Ab s o rp s i
A b so rp si GI T inn g i Ren d a h T ing g i Ren d a h Ren d a h Ren d a h Ren d a h T ing g i Ren d a h Ren d a h T ing g i Ren d a h Ren d a h T ing g i T ing g i T ing g i Ren d a h Ren d a h T ing g i Ren d a h S u b st ra t P -g p T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k L o g K p ( skin
p e rm e a tio n ) -5 ,6 1 cm /s -4 ,2 0 cm /s -5 ,5 9 cm /s -4 ,6 5 cm /s -4 ,7 1 cm /s -4 ,4 9 cm /s -4 ,8 5 cm /s -5 ,2 9 cm /s -4 ,4 4 cm /s -4 ,3 7 cm /s -4 ,5 3 cm /s -3 ,2 1 cm /s -3 ,7 5 cm /s -5 ,1 7 cm /s -5 ,0 0 cm /s -5 ,2 5 cm /s -3 ,3 8 cm /s -4 ,3 2 cm /s -4 ,8 7 cm /s -4 ,6 9 cm /s Dis tr ib u s i B B B p e rm e a n t Ya Ya Ya T ida k T ida k T ida k T ida k Ya T ida k Ya Ya T ida k T ida k Ya Ya Ya T ida k T ida k Ya T ida k M e ta b o lis m e P e n g h a m b a t CY P IA 2
T ida k Ya
T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k Ya T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k P e n g h a m b a t CY P 2 C19
T ida k Ya
T ida k Ya Ya Ya Ya Ya Ya Ya T ida k Ya Ya T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k Ya P e n g h a m b a t CY P 2 C9 T ida k Ya T ida k Ya Ya Ya Ya T ida k Ya Ya Ya Ya Ya T ida k Ya T ida k Ya Ya Ya Ya P e n g h a m b a t CY P 2 D6 T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k P e n g h a m b a t CY P 3 A 4 T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k T ida k L ip in s k i BM 2 3 6 ,3 5 2 0 4 ,3 5 2 2 2 ,3 7 2 0 4 ,3 5 2 0 4 ,3 5 2 0 4 ,3 5 2 0 4 ,3 5 2 2 2 ,3 7 2 0 4 ,3 5 2 0 4 ,3 5 2 2 2 ,3 7 2 0 4 ,3 5 2 0 4 ,3 5 2 2 2 ,3 7 2 2 2 ,3 7 2 2 2 ,3 7 2 0 4 ,3 5 2 0 4 ,3 5 2 2 0 ,3 5 2 0 4 ,3 5 L o g P 2 ,9 5 4 ,2 7 3 ,9 2 4 ,5 8 4 ,5 8 4 ,5 8 4 ,7 3 3 ,7 8 4 ,7 3 4 ,2 7 3 ,9 4 4 ,7 5 4 ,8 9 3 ,9 2 3 ,9 2 4 ,0 6 5 ,0 4 5 ,0 4 4 ,2 5 4 ,4 2 HB D 1 0 1 1 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 1 1 0 0 0 0 HB A 2 0 1 0 0 0 0 1 0 0 1 0 0 1 1 1 0 0 1 0
Tabel 3 . Toksisitas Senyawa Pro-Tox II Parameter Farmakologi APH ARO BUL α- CAD β- CAD ɣ-CAD ö- CAD α-CDL β- CAR α- COP Toksisitas LD 50 5000 5000 5600 4400 4400 4400 4390 2830 5300 3700 a. Toksisitas organ Hepatotoksisitas Inaktif (0,54) Inaktif (0,81) Inaktif (0,71) Inaktif (0,83) Inaktif (0,87) Inaktif (0,84) Inaktif (0,82) Inaktif (0,82) Inaktif (0,80) Inaktif (0,85) b. Titik akhir toksisitas KarsiTidakgenisitas Inaktif (0,57) Inaktif (0,65) Inaktif (0,63) Inaktif (0,80) Inaktif (0,69) Inaktif (0,76) Inaktif (0,75) Inaktif (0,66) Inaktif (0,70) Inaktif (0,77) ImuTidaktoksisitas Active (0,64) Inaktif (0,86) Inaktif (0,95) Inaktif (0,68) Inaktif (0,95) Active (0,55) Inaktif (0,66) Active (0,69) Active (0,54) Inaktif (0,68) Mutagenisitas Inaktif (0,68) Inaktif (0,76) Inaktif (0,87) Inaktif (0,60) Inaktif (0,89) Inaktif (0,69) Inaktif (0,68) Inaktif (0,91) Inaktif (0,95) Inaktif (0,88) Sitotoksisitas Inaktif (0,95) Inaktif (0,69) Inaktif (0,67) Inaktif (0,76) Inaktif (0,76) Inaktif (0,74) Inaktif (0,69) Inaktif (0,87) Inaktif (0,75) Inaktif (0,69) c. Jalur pensinyalan reseptor nuklir Tox21 Reseptor Aryl hdrocarbon(AhR) Inaktif (0,98) Inaktif (0,99) Inaktif (0,98) Inaktif (0,89) Inaktif (0,94) Inaktif (0,91) Inaktif (0,88) Inaktif (0,98) Inaktif (0,99) Inaktif (0,95) Reseptor Androgen (AR) Inaktif (0,85) Inaktif (0,99) Inaktif (0,95) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,87) Inaktif (1,0) Inaktif (0,99) Domain Pengikatan Ligan Reseptor Androgen (AR- LBD) Inaktif (0,80) Inaktif (0,98) Inaktif (0,95) Inaktif (0,97) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,96) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Aromatase Inaktif (0,95) Inaktif (0,94) Inaktif (0,91) Inaktif (0,72) Inaktif (0,77) Inaktif (0,67) Active (0,53) Inaktif (0,92) Inaktif (0,93) Inaktif (0,60) Reseptor Estrogen Alpha (ER) Inaktif (0,84) Inaktif (0,99) Inaktif (0,93) Inaktif (0,83) Inaktif (0,86) Inaktif (0,83) Inaktif (0,77) Inaktif (0,80) Inaktif (0,98) Inaktif (0,96) Domain Pengikatan Ligan Reseptor Estrogen (ER- LBD) Inaktif (0,90) Inaktif (0,99) Inaktif (0,97) Inaktif (0,94) Inaktif (0,96) Inaktif (0,97) Inaktif (0,98) Inaktif (0,83) Inaktif (0,98) Inaktif (0,99) Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPAR -Gamma) Inaktif (0,97) Inaktif (1,0) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (1,0) Inaktif (1,0) Inaktif (1,0) d. Tox21 – Jalur respons stres Faktor Nuklir (turunan eritroid 2) seperti elemen responsif antioksidan (nrf2/ ARE) Inaktif (0,80) Inaktif (0,88) Inaktif (0,90) Inaktif (0,95) Inaktif (0,96) Inaktif (0,87) Inaktif (0,93) Inaktif (0,69) Inaktif (0,92) Inaktif (0,98) Elemen respons faktor kejut panas (HSE) Inaktif (0,80) Inaktif (0,88) Inaktif (0,90) Inaktif (0,95) Inaktif (0,96) Inaktif (0,87) Inaktif (0,93) Inaktif (0,69) Inaktif (0,92) Inaktif (0,98) Potensi Membran Mitokondria Inaktif (0,74) Inaktif (0,95) Inaktif (0,76) Inaktif (0,87) Inaktif (0,89) Inaktif (0,91) Inaktif (0,86) Active (0,50) Inaktif (0,95) Inaktif (0,90) Fosfoprotein (Tumor Supressor) p53 Inaktif (0,95) Inaktif (0,98) Inaktif (0,98) Inaktif (0,99) Inaktif (0,96) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) ATPase keluarga AAA domain yang mengandung protein 5 (ATAD5) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (0,99) Inaktif (1,0) Inaktif (1,0) Lipinski BM 236,35 g/mol 204,35 g/mol 222,37 g/mol 204,35 g/mol 204,35 g/mol 204,35 g/mol 204,35 g/mol 222,37 g/mol 204,35 g/mol 204,35 g/mol Log P 2,95 4,27 3,92 4,58 4,58 4,58 4,73 3,78 4,73 4,27 HBD 1 0 1 0 0 0 0 1 0 0 HBA 26 24 27 24 24 24 24 27 24 24
Senyawa  -CDL  hanya  mengalami  metabo- lisme oleh inhibitor CYP2C19. Senyawa ELE,
 -EUS,  GMC,  -HUM,  HMO  hanya  meng- alami metabolisme oleh inhibitor CYP2C9.
Berdasarkan Tabel 3, LD 50 dari senya-
wa-senyawa  tersebut  berkisar  dari  2000 mg/kg  hingga  5600  mg/kg  dan  dikategorikan ke  dalam  kelas  IV,  V,  dan  VI.  Dua  senyawa termasuk  dalam  kelas  IV  (ELE  dan  -EUS) dengan nilai LD 50 sebesar 2000 mg/kg. Ada 15
senyawa  yang  termasuk  dalam  kelas  V
(2000<LD 50 ≤5000), sementara dalam kelas VI terdapat  tiga  senyawa,  yaitu  -ELM  and  -
CAR,  dengan  LD 50 sebesar  5300  mg/kg  dan
BUL  dengan  LD 50 sebesar  5600  mg/kg.
Senyawa-senyawa  tersebut  tidak  aktif  dalam parameter  hepatotoksisitas  dan  uji  karsino- genisitas. Dalam uji imunotoksisitas, terdapat empat  senyawa  yang  aktif  (APH,  -CAD,  -
CDL,  -COP) sementara 16 senyawa lainnya tidak  aktif.  Sedangkan  dalam  uji  mutageni- sitas,  tidak  ada  senyawa  yang  aktif.  Pada parameter  uji  sitotoksisitas,  didapatkan  dua senyawa aktif (  -EUS dan  -EUS). Jalur sinyal reseptor  nuklir  Tox21  untuk  AhR,  AR,  AR- LBD,  ER,  ER-LBD,  dan  PPAR-Gamma menunjukkan  bahwa  semua  senyawa  tidak aktif.  Dalam  uji  jalur  respons  stres  Tox21 untuk  nrf2/ARE,  HSE,  MMP,  Fosfoprotein (Penekan  Tumor)  p53,  dan  ATAD5,  19 senyawa ditemukan tidak aktif. Sementara itu, senyawa -CDL bersifat toksik terhadap MMP.

## DISKUSI
Dalam mengkaji aktivitas farmakokinetik dan toksisitas, algoritma komputasi digunakan untuk menganalisis, memodelkan, atau mem- prediksi  toksisitas  kimiawi. 14 Pendekatan  pk-
CSM  dapat  memprediksi  sifat  ADMET  dari suatu senyawa. 15 Hasil prediksi dari penelitian ini menunjukkan bahwa semua senyawa me- miliki  kelarutan  air  rendah  dan  permeabilitas CaCO 2 yang tinggi. Suatu senyawa dikatakan memiliki  permeabilitas  CaCO 2 tinggi  jika  me- miliki nilai Papp >8x10-6 cm/s, dan pada pre- diksi  PK-CSM,  dikatakan  memiliki  permea- bilitas  CaCO 2 tinggi jika nilainya  >0,90. 16 Se-
mua  senyawa  memiliki  penyerapan  GI  yang tinggi,  namun  18  senyawa  memiliki  permea- bilitas kulit yang rendah. Prediksi distribusi se- nyawa  mencakup  VDss,  Fraksi  tak  terikat, permeabilitas  BBB,  dan  permeabilitas  SSP. Semakin tinggi nilai VD, semakin banyak obat yang  akan  didistribusikan  dalam  jaringan. 17
Kemampuan  suatu  obat  untuk  menembus BBB  sangat  penting  dalam  mengurangi  efek samping  dan  toksisitas  serta  meningkatkan efektivitas  dan  aktivitas  farmakologis  obat  di otak.  Menurut  Pires, et  al .,  senyawa  dengan nilai log BB >0,3 akan mudah menembus BBB dengan baik, sementara senyawa dengan ni- lai  log  BB  <-1  tidak  akan  didistribusikan  de- ngan baik. Hasil penelitian menunjukkan bah- wa semua senyawa memiliki nilai log BB >0,3 kecuali senyawa APH, sehingga dapat dipre- diksi  bahwa  19  senyawa  sesquiterpene  dari tanaman Ocimum  sanctum  L. dapat  menem- bus  BBB  dengan  baik,  dan  senyawa  APH dapat  menembus  BBB  secara moderate . 16
Senyawa yang memiliki nilai logPS >-2 dapat menembus SSP, sementara senyawa dengan nilai  logPS  <-3  tidak  dapat  menembus SSP. 15,16 Studi mengungkapkan bahwa sepu- luh senyawa dapat menembus SSP. Prediksi metabolisme  senyawa  didapatkan  11  senya- wa    yang  tidak mengalami  metabolisme  oleh sitokrom P450.
Prediksi  ekskresi  senyawa  dapat  diten- tukan  dengan Total  Clearance dan  substrat
Renal  Organic  Cation  Transporter 2  (OCT2).
Total  clearance adalah  kombinasi  dari clear- ance (keluaran) hati (metabolisme di hati dan empedu) dan keluaran ginjal (ekskresi melalui ginjal). OCT2 adalah transporter di ginjal yang
berperan  dalam  disposisi  dan  ekskresi  obat dan  senyawa  endogen.  Senyawa  OCT2 memiliki potensi untuk interaksi buruk dengan inhibitor  OCT2  jika  diberikan  bersamaan.
Dalam penelitian ini, semua senyawa
sesquiterpene dari tanaman Ocimum sanctum
L. bukan  merupakan  substrat  OCT2.  Uji toksisitas  Ames  adalah metode  yang  banyak digunakan  untuk  menilai  potensi  mutagenik senyawa  dengan  menggunakan  bakteri. 17
Studi ini menunjukkan bahwa tidak ada senya- wa yang memiliki potensi efek mutagenik atau inhibitor.  Uji  hepatotoksisitas  mendapatkan bahwa  semua  senyawa  tidak  berpotensi  be- racun.
Uji sensitivitas kulit menemukan bahwa 17  senyawa  memiliki  potensi  menyebabkan alergi  kulit,  dan  ada  tiga  senyawa  (ARO,  -
COP,  dan  LDN)  yang  berpotensi  tidak menyebabkan  alergi  kulit.  Senyawa  yang memiliki nilai toksisitas T. Pyriformis >-0,5 di- anggap beracun. 18,19 Berdasarkan hasil pene- litian ini, nilai toksisitas T. Pyriformis diperoleh dari  1,057  hingga  1,921,  sehingga  disimpul- kan  bahwa  semua  senyawa  berpotensi  be- racun. Uji toksisitas Minnow mendapatkan ni- lai yang berkisar dari 0,118 hingga 0,894, dan hanya ada 1 senyawa (γ-CAD) dengan nilai - 0,024;  ini berarti senyawa tersebut tidak ber- potensi beracun. Senyawa dengan nilai di ba- wah 0,5 mM (log LC50 <-0,3) dianggap memi- liki toksisitas akut tinggi. Hukum Lipinski  me- nyatakan  bahwa  suatu  senyawa  memenuhi jika  memiliki  BM  <500;  nilai  log  koefisien partisi  oktan-air  (log  P)  lebih  kecil  dari  +5; donor ikatan hidrogen (HBD), yang dinyatakan oleh  jumlah  gugus  O-H  dan  N-H  lebih  kecil
dari  5;  dan  akseptor  ikatan  hidrogen  (HBA) dinyatakan  oleh  jumlah  atom  O  dan  N  lebih kecil dari 10. 18
SwissADME  membantu  mengetahui  si- fat fisiko-kimia, farmakokinetik obat, dan para- meter terkait lainnya untuk satu atau beberapa molekul. 20 Delapan  senyawa  memiliki  penye- rapan  GI  tinggi,  sementara  12  senyawa  lain- nya memiliki penyerapan rendah pada saluran GI.  Tidak  ada  yang  ditemukan  sebagai  sub- strat P-glikoprotein dari 20 senyawa yang diuji. Nilai  yang  didapatkan  dari  prediksi  permea- bilitas  kulit  berkisar  dari  -3,21  cm/s  hingga  - 5,61 cm/s. Semakin negatif nilai log Kp, sema- kin  rendah  permeabilitas  kulit  molekul  terse- but. 20 Parameter distribusi dalam penelitian ini dilihat  dari  permeabilitas  BBB.  BBB  secara aktif membatasi masuknya zat dari darah dan mengeluarkan  molekul-molekul  tersebut  dari otak. 21
Parameter prediksi metabolisme senya- wa,  termasuk  inhibitor  CYP1A2,  inhibitor CYP2C19, inhibitor CYP2C9, inhibitor
CYP2D6,  dan  inhibitor  CYP3A4.  Studi  ini mengungkapkan  bahwa  senyawa-senyawa APH,  BUL,  -EUS,  dan  -EUS  tidak mengalami metabolisme oleh enzim-enzim ini. Pada  senyawa  ARO,  -COP  mengalami metabolisme  oleh  inhibitor  CYP1A2,  inhibitor CYP2C19,  dan  inhibitor  CYP2C9  serta  tidak mengalami metabolisme oleh inhibitor
CYP2D6  dan  inhibitor  CYP3A4.  Sementara itu,  senyawa α-CAD,  -CAD,  -CAD,  -CAD ,
 -CAR,  -ELM,  -ELM,  dan  LDN  tidak mengalami metabolisme oleh inhibitor
CYP1A2,  inhibitor  CYP2D6,  dan  inhibitor CYP3A4  tetapi  mengalami  metabolisme  oleh
inhibitor  CYP2C19  dan  inhibitor  CYP2C9.
Senyawa  -CDL  hanya  mengalami  metabo- lisme oleh inhibitor CYP2C19. Pada senyawa ELE,  -EUS, GMC,  -HUM, dan HMO hanya mengalami metabolisme oleh inhibitor
CYP2C9. Delapan belas senyawa memenuhi hukum Lipinski, sehingga senyawa ini mudah diserap dan memiliki permeabilitas yang baik, sementara  dua  senyawa  lainnya  tidak memenuhi hukum karena memiliki nilai log P lebih besar dari +5 (GMC dan  -HUM); mere- ka tidak mudah diserap dan memiliki permea- bilitas yang buruk.
Pro-Tox  II  memiliki  keunggulan  seperti memprediksi tingkat toksisitas  oral,  toksisitas organ (hepatotoksisitas), titik akhir toksikologi (seperti  mutagenisitas,  karsinogenisitas,  sito- toksisitas,  dan  imunotoksisitas),  jalur  toksi- sitas,  dan  toksisitas target,  sehingga menun- jukkan mekanisme molekuler yang mungkin di balik  respons. 18 Kelas  toksisitas  didefinisikan berdasarkan sistem klasifikasi GHS ( Globally
Harmonized  System ),  yang  terbagi  menjadi enam  kelas.  Kelas  I  (LD 50 ≤5),  kelas  II
(5<LD 50 ≤50), kelas III (50<LD 50 ≤300), kelas IV
(300<LD 50 ≤2000), kelas V (2000<LD 50 ≤5000),
dan kelas VI (LD 50 >5000). Semakin tinggi nilai
LD 50 ,  semakin  rendah  toksisitasnya. 18,19 LD 50
dari  senyawa-senyawa  berkisar  dari  2000 mg/kg  hingga  5600  mg/kg,  sehingga  mereka dikategorikan  ke  dalam  kelas  IV,  V,  dan  VI. Pada  parameter  hepatotoksisitas,  tidak  ada senyawa yang menimbulkan potensi beracun. Pada  uji  karsinogenisitas,  senyawa  yang menimbulkan  potensi  beracun  juga  tidak ditemukan  karena  tidak  aktif.  Dalam  uji imunotoksisitas, terdapat empat senyawa aktif
(APH,  -CAD,  -CDL,  -COP) yang menunjukkan  potensi  beracun,  dan  16 senyawa  lainnya  tidak  aktif.  Sementara  itu, dalam  uji  mutagenisitas,  tidak  ada  senyawa aktif. Dengan demikian, semua senyawa tidak bersifat mutagenik. Pada uji sitotoksisitas, dua senyawa  aktif  (  -EUS  dan  -EUS)  memiliki potensi sitotoksik. Satu senyawa bersifat tok- sik  terhadap  MMP  (  -CDL),  yang  berarti  se- nyawa  tersebut  berpotensi  beracun  terhadap membran  mitokondria  tetapi  tidak  berpotensi beracun terhadap jalur lainnya. Senyawa yang tidak  aktif  tidak  dapat  menimbulkan  potensi beracun dan tidak bersifat mutagenik. Dalam uji respons stres Tox21, satu senyawa bersifat toksik  terhadap  MMP,  yang  berarti  senyawa tersebut  berpotensi  beracun  terhadap  mem- bran  mitokondria  tetapi  tidak  berpotensi  be- racun terhadap jalur lainnya.

## SIMPULAN
Senyawa  flavonoid Ocimum  sanctum.L
memiliki  LD 50 berkisar  antara  2000  mg/kg hingga 5600 mg/kg sehingga dikategorikan ke dalam kelas toksisitas IV, V, dan VI. Senyawa flavonoid Ocimum  sanctum.L memiliki  sifat imunotoksisitas, sitotoksisitas, dan MMP.

## DAFTAR PUSTAKA
1. A çıkgöz  MA.  Establishment  of  cell  suspension cultures  of  Ocimum  basilicum  L.  and  enhanced production  of  pharmaceutical  active  ingredients.
Ind Crops Prod. 2020;148:112278.
2. Dharsono HDA, Putri SA, Kurnia D, Dudi D, Satari MH.  Ocimum  species:  A  review  on  chemical constituents  and  antibacterial  activity.  Molecules.
2022;27(19):6350.
3. Almalki  DA.  Renoprotective  Effect  of  Ocimum
Basilicum  (Basil)  Against  Diabetes-induced  Renal
Affection in Albino Rats. Mater Socio-Medica. 2019
Dec;31(4):236 –40.
4. Larasati  DA,  Apriliana  E.  Efek  potensial  daun kemangi  (Ocimum  basilicum  L.)  sebagai  peman- faatan  hand  sanitizer.  J  Major.  2016  Dec
1;5(5):124 –8.
5. Thadani  S,  Salman  MT,  Tewari  S,  Singh  S,
Bhagchandani D, Ahmad A. Renoprotective effect of  Ocimum  sanctum  in  comparison  with  Olme- sartanmedoxomil  and  Pitavastatin  in  Metformin treated  diabetic  rats.  Int  J  Pharm  Sci  Res  IJPSR.
2015;6(10):4433 –41.
6. Chaudhary A, Sharma S, Mittal A, Gupta S, Dua A.
Phytochemical  and  antioxidant  profiling  of  Ocimum sanctum. J Food Sci Technol. 2020;57(10):3852 –63.
7. Mittal  R,  Kumar  R,  Chahal  HS.  Antimicrobial activity of Ocimum sanctum leaves extracts and oil.
J Drug Deliv Ther. 2018;8(6):201 –4.
8. Sharma P, Joshi T, Joshi T, Chandra S, Tamta S.
In  silico  screening  of  potential  antidiabetic  phyto- chemicals from Phyllanthus emblica against thera- peutic  targets  of  type  2  diabetes.  J  Ethnophar- macol. 2020;248:112268.
9. Almatroodi SA, Alsahli MA, Almatroudi A, Rahmani AH.  Ocimum  sanctum:  role  in  diseases  mana- gement through modulating various biological acti- vity. Pharmacogn J. 2020;12(5).
10.   Iqbal  Chowdhury  I,  Rahman  MA,  Hashem  MA,
Bhuiyan  MMH,  Hajjar  D,  Alelwani  W,  et  al.
Supplements  of  an  aqueous  combination  of Justicia  adhatoda  and  Ocimum  tenuiflorum  boost antioxidative  effects  and  impede  hyperlipidemia.
Anim Models Exp Med. 2020;3(2):140 –51.
11.   Deore  AB,  Dhumane  JR,  Wagh  R,  Sonawane  R.
The stages of drug discovery and development pro-
cess. Asian J Pharm Res Dev. 2019;7(6):62 –7.
12.   Kiriiri  GK,  Njogu  PM,  Mwangi  AN.  Exploring different  approaches  to  improve  the  success  of drug discovery and development projects: a review.
Future J Pharm Sci. 2020;6(1):1 –12.
13.   Sliwoski  G,  Kothiwale  S,  Meiler  J,  Lowe  EW.
Computational methods in drug  discovery.
Pharmacol Rev. 2014;66(1):334 –95.
14.   Tropsha A, Bajorath J. Computational methods for drug  discovery  and  design.  Vol.  59,  Journal  of medicinal chemistry. ACS Publications; 2016. p. 1 –1.
15.   Kar S, Leszczynski J. Open access in silico tools to predict  the  ADMET  profiling  of  drug  candidates.
Expert Opin Drug Discov. 2020;15(12):1473 –87.
16.   Reddy S, Fox J, Purohit MP. Artificial intelligence- enabled  healthcare  delivery.  J  R  Soc  Med.
2019;112(1):22 –8.
17.   Hardjono S. Prediksi sifat farmakokinetik, toksisitas dan  aktivitas  sitotoksik  turunan  N-benzoil-N ’-(4- fluorofenil)  tiourea  sebagai  calon  obat  antikanker melalui  pemodelan  molekul.  J  Ilmu  Kefarmasian
Indones. 2017;14(2):246 –55.
18.   Pires  DE,  Kaminskas  LM,  Ascher  DB.  Prediction and  optimization  of  pharmacokinetic  and  toxicity properties  of  the  ligand.  In:  Computational  drug discovery and design. Springer; 2018. p. 271 –84.
19.   Pires  DE,  Blundell  TL,  Ascher  DB.  pkCSM:
predicting  small-molecule  pharmacokinetic  and toxicity properties using graph-based signatures. J
Med Chem. 2015;58(9):4066 –72.
20.   Daina A, Michielin O, Zoete V. SwissADME: a free web  tool  to  evaluate  pharmacokinetics,  drug- likeness  and  medicinal  chemistry  friendliness  of small molecules. Sci Rep. 2017 Mar 3;7:42717.
21.   Fan J, de Lannoy IAM. Pharmacokinetics. Biochem
Pharmacol. 2014 Jan 1;87(1):93 –120.