Uji Konsentrasi Daya Hambat Rebusan Daun Srikaya ( Annona squamosa L. ) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus
(1) Isramilda, (2) Sukma Sahreni, (3) Andi Ipaljri Saputra
Fakultas Kedokteran Universitas Batam (1) (2)(3)
isramilda@univbatam.ac.id (1) , sukmasahreni@univbatam.ac.id (2) andiipaljri@univbatam.ac.id (3)

## ABSTRAK
Daun  srikaya  ( Annona  squamosal  l.) mengandung  zat-zat  kimia  yang  dipercaya  memiliki  efek  antimikroba antara lain flavonoid, terpenoid, dan alkaloid. Pernelitian ini bertujuan untuk mengetahu aktifitas antibakteri rebusan  daun  srikaya (Annona  squamosal  l.) terhadap Staphylococcus  aureus. Metode  penelitian  ini  adalah eksperimen murni menggunakan rancangan secara acak dengan tes dan kelompok kontrol yang dilakukan di Laboratorium  Mikrobiologi  Fakultas  Farmasi  Universitas  Muslim  Indonesia  Makassar.  Penelitian  ini menggunakan rebusan daun srikaya  ( Annona squamosal  l. ) dengan variasi konsentrasi 25%, 50%, 75% dan 100% terhadap Staphylococcus aureus. Kontrol yang digunakan adalah amoksisilin sebagai kontrol positif dan NaCl fisiologis sebagai kontrol negatif sekaligus pengencer dalam pembuatan konsentrasi. Semua perlakuan akan diinkubasi selama 1x24 jam pada 37°C. Hasil pengamatan akan dianalisis menggunakan analisis varians (ANOVA). Rebusan daun srikaya ( Annona squamosal l. ) menghasilkan zona bening disekitar sumuran yang diartikan adanya daya hambat dengan mengukur diameternya. Hasil menunjukkan adanya perbedaan signifikan pada  setiap  kelompok  perlakuan.  Berdasarkan  hasil  penelitian  ini  dapat  disimpulkan  bahwa  rebusan  daun srikaya dapat menghambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .
Kata Kunci : Antibakteri, Staphylococcus aureus. Daun Srikaya ( Annona squamosal L)

## ABSTRACT
Sugar-apple’s leaves ( Annona squamosal l. ) contains chemicals that are believed has antimicrobials effect such as  flavonoid, terpenoid, and alkaloid. This  study  was  intended to identify the antibacterial  activity  of apple sugars’s  leaves  toward Staphylococcus  aureus. The  method  of  this  study  is True  experimental  randomized Posttest Only Control Group Design which was done in Microbiology Laboratory of the Pharmacy Faculty of Muslim Indonesia University. This study use the various concentrations of boiled water of sugar-apple’s leaves ( Annona squamosal l. ) to inhibit the growth of Staphylococcus aureus and they are 25%, 50%, 75%, and 100%. Controls that are used in this study are amoxicillin as positive control and NaCl both as negative control and diluted in making the concentration. Each treatment will be incubated for 24 hours at the temperature of 37° C.  The  observation  results  will  be  analyzed  using  statical analysis  of  variance (ANOVA).  Boiled  water  of sugar-apple’s leaves ( Annona squamosal l.) produce a clear zone around the well which can be considered as the inhibition by measuring the diameter. The results shown a significant difference in each group of treatment. Based on the result of this study we can conclude that boiled water of sugar-apple’s leaves can ihibit the growth of Staphylococcus aureus. .
Keywords : Antibacterial, Staphylococcus aureus , Sugar-apple’s Leaves ( Annona squamosal )

## I. PENDAHULUAN

## 1. Latar Belakang
Indonesia  adalah  negara  kepulauan  dengan  keanekaragaman  budayanya.  Indonesia  juga kaya  akan  keanekaragaman  flora  dan  faunanya.  Berbagai  macam  flora  di  indonesia merupakan Sumber Daya Alam (SDA) hayati.Keberagaman flora ini senantiasa memberikan keuntungan besar bagi masyarakat Indonesia misalnya dalam kesehatan yang dapat diolah sebagai  obat  tradisional.  Salah  satu  tanaman  yang  telah  lama  dimanfaatkan  sebagai  obat tradisional adalah srikaya ( Annona squamosal L. ). Di Indonesia, srikaya telah dikenal sejak zaman penjajahan Belanda. Buah yang juga dikenal dengan sebutan buah nona ini memiliki nilai ekonomi yang tinggi hampir diseluruh bagian tanamannya. Daging buah dengan rasa yang  khas  dan  lembut  dapat  digunakan  sebagai  bahan  baku  pembuatan  selai,  sirup  dan olahan makanan lainnya.  Biji mudanya  memiliki sifat anti cacing dan anti insektida yang efektif. Sedangkan kulit kayu, akar dan daunnya dapat digunakan untuk pengobatan berbagai jenis penyakit. Daun srikaya mengandung terpenoid, alkaloid dan  flavonoid yang berpotensi sebagai antibiotik (Tansil et al , 2016). Antibiotik merupakan terapi yang dapat digunakan untuk mengatasi infeksi bakteri. Pemakaian dan distribusi obat-obatan khususnya antibiotik di Indonesia tergolong tinggi. Hal ini terlihat dari praktik penjualan obat-obatan secara bebas di  warung-warung  kecil,ketidaktahuan  masyarakat  mengenai  cara  pemakaian  obat  yang rasional, dandampak yang dapat terjadi dari pemakaian obat tergolong tinggi. Fenomenaini dapat menyebabkan terjadinya resistensi bakteri terhadap antibiotik tertentu akan  semakin tinggi (Rahayu, 2011). Tingkat resistensi Staphylococcus aureus terhadap antibiotik  yang paling sering digunakan sudah mencapai 30-70% (Meta 2013).

## 2. Perumusan Masalah
Apakah ada hasil dari uji Konsentrasi Daya Hambat dari Rebusan Daun Srikaya ( Annona squamosal ) terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus ?

## 3. Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui bagaimana hasil dari uji Konsentrasi Daya Hambat  dari  Rebusan  Daun  Srikaya  ( Annona  squamosal )  terhadap  pertumbuhan  bakteri Staphylococcus aureus

## 4. Manfaat Penelitian
Adapun manfaat yang menjadi target temuan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Sebagai  literatur  dan  referensi  bagi  praktisi-praktisi  laboratorium,  scientist(ilmuwan) tentang  bagaimana  tanaman  Skrikaya  memiliki  banyak  manfaat  terutama  menekan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus
2. Semoga dapat menjadi input bagi para dosen dalam meningkatkan pengetahuan dan daya analisnya di bidang ilmu Biology Sains dan Biologi Kedokteran
3. Bagi Umum. Semoga dapat menjadi input bagi masyarakat umum terutama manfaat dan kegunaan dari tanaman Srikaya.

## II. METODE PENELITIAN Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan eksperimen murni menggunakan rancangan secara acak dengan tes  dan  kelompok  kontrol  ( The Randomized  Posttest  Only  Control  Group  Design ) untuk mengetahui efek antimikroba rebusan daun srikaya ( Annona squamosal l. ) dengan variasi konsentrasi terhadap bakteri Staphylococcus aureus.
Isramilda, Sahreni  S, Saputra  AI  : Uji Konsentrasi Daya Hambat Rebusan Daun  Srikaya  ( Annona squamosal l.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus

## Populasi dan Sampel
Populasi  penelitian  adalah  Tanaman  Srikaya  ( Annona  squamosal )  dan  Bakteri Staphylococcus aureus .

## Tempat dan Waktu penelitian
Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Farmasi Universitas Muslim Indonesia pada bulan September hingga Desember 2018.

## Defenisi Operasional dan Indikator/Etika Kerja Islami
Pengembangan suatu alternatif pengobatan yang tidak menyebabkan efek samping dengan memanfaatkan  bahan-bahan  alam  dari  senyawa  kimia  perlu  dilakukan  (Melisa,  2015). Berdasarkan hasil penelitian Maria (2013), perasan daun srikaya menunjukkan hasil yang signifikan  dalam  menghambat  pertumbuhan E.coli .  Dilakukan  penelitian  dengan  5 perlakuan yaitu 0%, 25%, 50%, 75%, dan 100%. Sedangkan penelitian yang dilakukan oleh Tansil et al (2016) yaitu daya hambat ekstrak etanhol daun srikaya terhadap pertumbuhan E. coli dan Staphylococcus  aures juga  menunjukkan  hasil  yang  signifikan  dengan  variasi konsentrasi 50%, 25%, dan 12,5%. Hasil penelitian keduanya menunjukkan bahwa semakin tinggi konsentrasi ekstrak ataupun perasan daun srikaya maka zona hambat yang terbentuk semakin besar yang berarti semakin efektif dalam menghambat pertumbuhan bakteri.

## A. Alat Dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  autoklaf,  aluminium  foil,  plastik wrap, bunsen, cawan petri, erlenmeyer, gelas kimia, corong, vial, inkubator, kain kasa kapas, masker, mistar/ jangka sorong, ose, oven, pinset, pipet, spoit, dan timbangan analitik.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah aquades, 100gr daun srikaya, NaCl 0,9%, Nutrient  Agar (NA),  amoksisilin  sirup  kering,  dan  bakteri Staphylococcus aureus.
B. Sterilisasi Alat
Semua alat dicuci bersih terlebih dahulu. Alat yang tahan panas seperti cawan petri dan  vial,  dibungkus  dengan  kertas  lalu  dimasukkan  kedalam  oven.  Alat-  alat  yang tidak  tahan  panas  dibungkus  terlebih  dahulu  dengan  aluminum  foil  dan  disterilkan menggunakan autoklaf, sedang alat-alat seperti ose dan pinset disterilkan dengan cara dibakar menggunakan Bunsen.

## C. Pembuatan Rebusan Daun Srikaya
Daun srikaya dicuci bersih dengan air mengalir lalu ditiriskan. Selanjutnya ditimbang sebanyak  100grdan  ditambahakan  100ml  NaCl  0,9%  kemudian  direbus  selama  10 menit.  Hasil  rebusan  disaring  terlebih  dahulu  sebelum  ditampung  dalam  gelas erlenmeyer atau gelas kimia.Hasil saringan selanjutnya dibuat konsentrai 25%, 75%, dan 50% dengan pengenceran dari 100%.Misal : konsentrasi 25%
Maka, 2,5 ml rebusan daun srikaya dari  konsentrai 100% ditambahkan 7,5 ml NaCl akan menghasilkan konsentrasi 25%, dan seterusnya.
Isramilda, Sahreni  S, Saputra  AI  : Uji Konsentrasi Daya Hambat Rebusan Daun  Srikaya  ( Annona squamosal l.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus

## D. Pembuatan Medium Agar
Sebanyak  4  gr  Nutrien  Agar  dialrutkan  dalam  200  ml  aquades,  kemudian dihomogenkan  dan  diterilkan  kedalam  autoklaf.Medium  yang  telah  diterilkan selanjutnya dituang dan disebar ke dalam cawan petri.

## E. Pembiakan Bakteri Uji
Satu  koloni  bakteri  diambil  dengan  ose  yang  telah  dibakar  dan  dihomogenkan kedalam NA pada vial.Selanjutnya NA yang telah ditamkan bakteri, dituang ke dalam cawan petri.

## F. Uji Antimikroba
Medium  NA  pada  cawan  petri  yang  telah  dibuatkan  sumuran  masing  kelompok perlakuan dan kontrol, diteteskan sebanyak 2-5 tetes persumuran. Setiap kelopok akan diulang  sebanyak  4  kali,  kemudia akan  diinkubasi  selama  24 jam  pada  suhu  37 o C, setelah  itu  dilakukan  pengamatan  dan  pengukuran  terhadap  zona  bening  yang terbentuk disekitar sumuran. Zona hambat diukur menggunakan jangka sorong dan hitung dangan rumus :
Dh: Diameter horizontal (mm) Dv: Diameter vertical (mm) Dd: Diameter diagonal (mm) Ds: Diameter sumuran (6mm)

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji aktifitas antibakteri rebusan daun srikayaterhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus menunjukkan adanya hambatan pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus setelah diberi intervensi denganrebusan daun srikaya berbagai konsentrasi.
Pada gambar di bawah ini dapat dilihat zona bening yang terbentuk yang ditandai dengan lingkar merah dan panah merah. Berdasarkan hasil pengamatan dan perhitungan diameter rata-rata zona hambat setiap variasi konsentrasi menunjukkan adanya perbedaan yang dapat dilihat pada tabel berikut:
Isramilda, Sahreni  S, Saputra  AI  : Uji Konsentrasi Daya Hambat Rebusan Daun  Srikaya  ( Annona squamosal l.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus
Gambar 1. Kelompok perlakuan daun srikaya replikasi I dan II
Gambar 2. Kelompok kontrol replikasi I dan II
Tabel 1. Diameter zona hambat kelompok kontrol dan perlakuan (mm)
Replikasi Diameter zona hambat (mm) 25% 50% 75% 100% K+ K- I 5.25 5.81 6.11 6.24 24.28 0 II 4.75 5.32 5.62 6.39 21.84 0 III 4.43 4.97 5.86 6.42 23.72 0 IV 4.36 5.03 5.84 6.37 21.06 0 Rata-rata 4.69 5.28 5.85 6.35 22.75 0

## PEMBAHASAN
Tabel  1  memperlihatkan  besar  rata-rata  daya  hambat  yang  dilakukan  sebanyak  4  kali replikasi  pada  masing-masing  konsentrasi  rebusan  daun  srikaya  dan  kelompok  kontrol. Pada konstentrasi 25% terbentuk 4,69 mm, pada konsentrasi 50% terbentuk 5,28 mm, pada konsentrasi 75% terbentuk 5,85 mm, dan pada 100% sebesar 6,35 mm. Sedangkan untuk kelompok kontrol dimana kontrol positif adalah amoksisilin terbentuk 22,75 mm dan pada kontrol negatif tidak terntuk hambatan.
Berdasarkan  hasil  pengamatan  yang  telah  dilakukan,  terdapat  perbedaan  rata-rata  zona hambat pada setiap perlakuan, dimana semakin besar kosentrasi rebusan daun srikaya maka makin  besar  zona  hambat  yang  dihasilkan.  Hasil  penelitian  ini  sesuai  dengan  penelitian sebelumnya  oleh Maria et al (2013) yang mengemukakan bahwa semakin besar konsentrasi perasan  daun  srikaya  maka  daya  hambatnya  terhadap  bakteri  makin  efektif,  yang  juga serupa dengan penelitian oleh Tansil et al (2016) yang menggunakan ekstrak etanol daun
Isramilda, Sahreni  S, Saputra  AI  : Uji Konsentrasi Daya Hambat Rebusan Daun  Srikaya  ( Annona squamosal l.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus
srikaya.  Dalam  penelitian  keduanya  mengatakan  flavonoid  dalam  daun  srikaya  dapat menyebabkan  tejadinya  kerusakan  dinding  sel  bakteri.  Senyawa  alkaloid  dan  terpenoid dapat mengganggu proses pembentukan dan penyususnan lapisan dinding sel bakteri yang dapat menyebabkan kematian bakteri itu sendiri.
Bakteri Staphylococcus  aureus merupakan  bakteri  gram  positif.Dinding  sel  gram  positif lapisan peptidoglikan yang lebih tebal dibandingkan dengan gram negatif.Dinding sel gram positif  dapat  terdiri  dari  60-100%  peptidoglikan  dan  mengandung  asam  teikoat  yang dikaitkan pada asam muramat dari lapisan peptidoglikan.Asam teikoat merupakan polimer larut air yang berfungsi mengatur pembelahan sel normal dan sebagai transpor ion positif untuk keluar dan masuk.Sifatnya yang larut air menunjukkan bakteri gram positif bersifat lebih polar.
Sifat polar bakteri gram positif ini memudahkan senyawa flavonoid, alkaloid dan terpenoid  pada  daun  srikaya  menembus  lapisan  peptidoglikan  yang  juga  bersifat  polar. Flavonoid  dalan  daun  srikaya  dapat  dikatan  memiliki  jumlah  yang  cukup  banyak (Kusmardiyani et  al, 2012).  Flavonoid  bekerja  sebagai  antibakteri  dalam  3  cara  yaitu menghambat  sintesis  asam  nukleat,  menghambat  fungsi  membran  sel  dan  menghambat metabolisme  energi.  Flavonoid  berperan  penting  dalam  proses  ikatan  hidrogen,  dengan menumpuk  basa  asam  nukleat  sehingga  menghambat  pembentukan  DNA  dan  RNA, flavonoid menyebabkan terjadinya kerusakan permeabilitas dinding sel bakteri, mikrosom dan lisosom, merupakan hasil interaksi antara flavonoid dengan DNA bakteri.  Flavonoid dalam menghambat metabolisme energi adalah dengan menghambat penggunaan oksigen oleh bakteri, sedangkan dalam menghambat fungsi membran sel adalah dengan membentuk senyawa kompleks dari protein ekstraseluler dan terlarut sehingga merusak membran sel bakteri dan diikuti dengan keluarnya senyawa intraseluler (Ernawati et al, 2015).
Alkaloid bersifat basa dan mudah terdekomposisi oleh panas dan sinar matahari yang dapat berpengaruh pada kandungan alkaloid ketika direbus pada suhu yang tinggi.Sifat alkaloid lainnya  adalah  alkaloid  larut  pada  pelarut  organik  tetapi  sukar  larut  dalam  air.Sehingga, berdasarkan sifat tersebut dibutuhkan dosis  yang lebih besar dalam pemanfaatan rebusan daun  (Adibah et  al ,  2017).Alkaloid  bersifat  antimikroba  sebagai  interkelator  DNA  dan menghambat  enzim  sel  bakteri  (Ernawati et  al, 2015).  Mekanisme  penghambatan pertumbuhan  bakteri  dari  bahan  antimikroba  alkaloid  bekerja  dengan  cara  menghambat enzim  yang  berperan  dalam  proses  replikasi  DNA.  Inhibisi  replikasi  DNA  akan menyebabkan  bakteri  tidak  dapat  melakukan  pembelahan  sehingga  menghambat pertumbuhan bakteri (Dianita, 2011). Terpenoid sebagai antibakteri adalah bereaksi dengan protein transmembran pada membran luar dinding sel bakteri, membentuk ikatan polimer yang  kuat  sehingga  mengakibatkan  rusaknya  protein  transmembran.  Rusaknya  protein transmembran akan mengganggu pasokan nutrisi bakteri yang dapat bakteri tersebut mati (Rachmawati et al, 2011). Zona hambat yang terbentuk membuktikan adanya zat-zat aktif yang terdapat pada daun srikaya yang berfungsi sebagai zat antimikroba.Namun, besarnya zona hambat yang terbentuk oleh rebusan daun srikaya masih belum bisa menyamai daya hambat kontrol positif yaitu amoksisilin. Dalam penelitian ini zona hambat terbesar rebusan daun  srikaya  terbentuk  pada  konsentrasi  100%  denga  rerata  diameter  adalah  6.35  mm, sedangkan amoksisilin menghambat dengan rerata diameter 22,75 mm. Terdapat perbedaan ukuran yang sengat besar terhadap perlakuan 100% dan amoksisilin dengan selisih hampi
Isramilda, Sahreni  S, Saputra  AI  : Uji Konsentrasi Daya Hambat Rebusan Daun  Srikaya  ( Annona squamosal l.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus
4 kali lipat, sehingga untuk menyamai efektifitas amoksisilin diperlukan konsentrasi daun srikaya yang lebih besar.
Untuk mencapai efektifitas yang sama dengan amoksisilin perlu diperhatikan toksisitasi dari  rebusan  daun  srikaya  sendiri.  Sejauh  penelitian  yang  ada  belum  ditemukan  adanya penelitian  mengenai  toksisitas  air  rebusan  daun  srikya,  namun  ditemukan  beberapa  studi mengenai  toksisitas  ektrak  daun  srikaya  terhadap  mencit.  Salah  satu  penetian  tersebut adalah Acute and sub-acute toxicity studies of methanol leaf extracts of Annona squamosa linn.  in  mice yang  dilakukan  oleh  Onwusonye, et  al (2014).  Pada  penelitian  tersebut mengemukan  bahwa  ekstrak  methanol  daun  srikaya  masih  bisa  ditolerir  dan  tidak ditemukan kelainan oleh mencit hingga dosis 5000mg per kg berat badan

## IV. KESIMPULAN
1. Rebusan daun srikaya ( Annona squamosal l.) dapat menghambat pertumbuhan bakteri Stapylococcus aureus.
2. Semakin besar konsentrasi rebusan daun srikaya maka makin besar zona hambat yang terbentuk.
3. Walaupun dapat menghambat pertumbuhan bakteri, rebusan daun srikaya belum dapat menyamai efektifitas dari amoksisilin

## DAFTAR PUSTAKA
Adibah, A., & Dharmana, E. (2017). Uji Efektivitas Larvisida Rebusan Daun Sirih (Piper Betle  L.)  Terhadap  Larva  Aedes  Aegypti  :  Studi  Pada  Nilai  Lc50,  Lt50,  Serta Kecepatan Kematian Larva . Jurnal Kedokeran Diponegoro, Vol. 6, No. 2, April 2017 : 244-252.
Alex. (2012). Budidaya dan Khasiat Srikaya. Yogyakarta: Pustaka Baru. Dianita.  (2011). Mekanisme  Seyawa  Kimia  Antibiotik. Dipetik  Januari  15,  2019,  dari (http://micymicy.blogspot.com/2011/02/blog12-keluhan-digesti-skenario 113.html Ernawati, & Sari, K. (2015). Kandungan Senyawa Kimia Dan Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit  Buah  Alpukat  (Persea  Americana  P.Mill)  Terhadap  Bakteri  Vibrio alginolyticus . Jurnal Kajian Veteriner, Vol. 3 No. 2 : 203-211. Irianto, K. (2014). Bakteriologi, Mikrologi dan Virologi. Bandung: Alfabeta. Jawetz, Melnick, & Adelberg. (2007). Mikrobiologi Kedokteran Edisi 23. Jakarta: EGC. Kusmardiani,  S.,  Ferlin,  &  Komar.  (2012).  Acts  Pharmaceutica  Indonesia. Telaah Fitokimia Daun Srikaya (Annona squamosa) yang Berasal dari Dua Lokasi , h.9-14. Melisa, Billy, & Michael. (2015). Jurnal Ilmiah Farmasi Unsrat. Uji Daya Hambat Ekstrak Daun Sirsak (Annona muricata) Terhadap Pertumnuhan S.aureus Secara In Vitro , h.65-70.
Meta,  D.,  Endriani  ,  R.,  &  Sembiring,  L.  (2013). Identifikasi  dan  Resistensi  Bakteri Methicilin resistant Staphylococcus aureus dari Ulkus Diabetikum Derajat I dan II Wagner di Bagian Penyakit Dalam RSUD Arifin Achmad .
Onwusonye, J., Uwakwe, A., & Patrick. (2014). Acute and sub-acute toxicity studies of methanol  leaf  extracts  of  Annona  squamosa  linn.  in  mice. Sky  Journal  of Biochemistry Research , Vol. 3(7), pp. 053 – 059.
Isramilda, Sahreni  S, Saputra  AI  : Uji Konsentrasi Daya Hambat Rebusan Daun  Srikaya  ( Annona squamosal l.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus
Rachmawati,  F.,  Nuria,  M.  C.,  &  Sumantri.  (2011). Uji  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi Kloroform  Ekstrak  Etanol  Pegagan  (Centella  Asiatica  (L)  Urb)  Serta  Identifikasi Senyawa Aktifnya . e-Publikasi Ilmiah Fakultas Farmasi Unwahas.
Tansil, A. Y., Nangoy, A., Posangi, J., & Bara, R. A. (2016). Jurnal e-Biomedik Unsrat. Uji  Daya  Hambat  Ekstrak  Etanol  Daun  Srikaya  (Annona  squamosa)  Terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .
Yunikawati,  M.,  Besung,  I.,  &  Hamatami.  (2013).  Indonesia  Mediscus  Veterinus.
Efektifitas  Perasan  Daun  Srikaya  Terhadap  Daya  Hambat  Pertumbuhan  E.coli , h.170-179