## Aktivitas Hepatoprotektif Ekstrak Umbi Bit (Beta vulgaris L.) pada Histologi Hepar Mencit yang diinduksi Parasetamol

## Hepotoprotective Activity of Beta vulgaris on Histopathology Mice Induced by Paracetamol
Zikra Ulhusna 1 , Rulia Meilina 1* , Mona Fathia 2 , Raudhatun Nuzul ZA 3 1, 1*, 2 Program Studi S-1 Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Ubudiyah Indonesia, Jl. Alue Naga Desa Tibang Kota Banda Aceh
3 Program Studi D-IV Kebidanan Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Ubudiyah Indonesia, Jl. Alue Naga Desa Tibang Kota Banda Aceh *Correspoding Author: rulia.meilina@uui.ac.id

## Abstrak
Penelitian ini bertujuan untuk  mengetahui aktivitas hepatoprotektif dari ekstrak etanol  umbi  bit  pada  histologi  hepar  mencit  yang  diinduksi  paracetamol.  Metode penelitian dilakukan secara eksperimental laboratorium. Mencit diberikan ekstrak etanol umbi bit  dosis  500 mg/kg  BB (P1), ekstrak etanol umbi bit  dosis  300 mg/kg BB (P2), ekstrak etanol umbi bit dosis 100 mg/kg BB (P3), kontrol positif digunakan Curcuma® dan kontrol negatif digunakan Na CMC 0,5%. Perlakuan diberikan selama 7 hari berturut- turut. Pada hari ke-8 mencit diinduksi parasetamol dosis toksik selama 3 hari. Pada hari ke-10  dilakukan  pembedahan  untuk  diambil  hepar  mencit.  Hasil  penelitian  ini menunjukkan bahwa perlakuan dengan pemberian ekstrak etanol umbi bit dengan dosis 500  mg/kg  BB,  300  mg/kg  BB,  dan  100  mg/kg  BB  dapat  memberikan  efek hepatoprotektif  terhadap  gambaran  histopatologi  hepar.  Pada  penelitian  ini  dapat disimpulkan umbi bit mempunyai efektivitas hepatoprotektor.
Kata kunci : Umbi Bit, Hepatoprotektif, hepar

## Abstract
This  study  aimed  to  investigate  the  hepatoprotective  activity  of  the  ethanolic extract  of  Beta  Vulgaris  in  the  liver  histology  of  mice  induced  by  paracetamol.  The research method is carried out experimentally. Mice were given 500 mg/kgBW ethanolic extract of Beta Vulgaris (P1), 300 mg/kgBW of Beta Vulgaris ethanol extract (P2), 100 mg/kgBW  of  Beta  Vulgaris  ethanol  extract  (P3),  positive  control  was  used  Curcuma® and negative control was used Na CMC 0 ,5%. The treatment was given for 7 consecutive days. On the 8th day, the mice were induced with a toxic dose of paracetamol for 3 days. On the 10th day, surgery was performed to take the liver of the mice. The results of this study indicate that the treatment with ethanol extract of Beta Vulgaris at a dose of 500 mg/kg BW, 300 mg/kg BW, and 100 mg/kg BW can provide a hepatoprotective effect on the  histopathological  features  of  the  liver.  In  this  study  it  can  be  concluded  that  Beta Vulgaris has hepatoprotective effectiveness.
Keywords: Beta vulgaris, hepatoprotective , Liver, Histopathology.

## PENDAHULUAN
Hepar  merupakan  organ  serta  kelenjar  terbesar  dari  tubuh  manusia  setelah  kulit. Terlibat  dalam  sintesis,  penyimpanan  dan  metabolisme  banyak  senyawa  endogen  dan senyawa eksogen, termasuk metabolisme obat-obatan dan sangat berperan dalam sistem detoksifikasi  toksin  dari  tubuh  (Irianto,  2017).  Ditinjau  dari  fungsinya  maka  dapat diprediksikan hati sangat rentan terhadap serangan penyakit yang dapat disebabkan oleh berbagai faktor seperti infeksi virus, zat beracun (misalnya alkohol, obat-obatan tertentu) salah  satunya  parasetamol  dapat  menyebabkan  kerusakan  pada  hati  pada  penggunaan overdosis . Walaupun parasetamol dinyatakan aman pada dosis terapi, namun dosis tinggi parasetamol  dapat  menyebabkan  kegagalan  fungsi  hati,  memicu  peradangan  patologis, apoptosis,  dan  kerusakan  DNA  oksidatif  (Baleni,  Bekker,  Walubo,  &  Plessis  ,  2015). Toksisitas  pada  hepar  dapat  dikurangi  dengan  adanya  senyawa  antioksidan.  Dalam penelitian (Fotschki, Juskiewicz, Sojka, Jurgonski, & Zdunczyk, 2015) telah ditunjukkan bahwa  beberapa  fitokimia  seperti  fitosterol,  karotenoid,  polifenol  dan  betalain  yang merupakan  senyawa  antioksidan  terdapat  dalam  sayuran  dan  buah-buahan  dapat mempengaruhi  status  kesehatan  manusia  dan  hewan.  Salah  satu  buah  yang  terdapat kandungan antioksidan adalah umbi bit.
Umbi bit terkenal memiliki antioksidan yaitu pigmen yang disebut betalain, yang sebagian besar terdiri dari merah hingga ungu betacyanin (betanin, isobetanin, probetanin dan neobetanin) dan betaxanthin berwarna kuning ke oranye (Kumar, Bhaumik, Chopra, &  Devi,  2016). Beberapa  riset  juga  ditemukan  bahwa  umbi  bit  megandung  serat  yang memiliki  efek  baik  terhadap  kesehatan.  Dengan  adanya  betalain  sebagai  senyawa antiradikal dan telah diakui memiliki kapasitas antioksidan yang tinggi dan merupakan molekul yang mengandung nitrogen yang memberikan umbi bit pewarnaan dan terkait dengan  pemeliharaan  proses  reduksi  oksidasi  dan  regulasi  (Mikolajczyk  &  Czapski, 2017) . Penelitian  (Putri,  2016)  menunjukkan  hasil  bahwa  di  dalam  umbi  bit  terdapat pigmen  betasianin  yang  termasuk  flavonoid  golongan  khalkon  dengan  aktivitas antioksidan yang tinggi.

## METODE PENELITIAN

## Materials
Obat dan bahan kimia yang digunakan pada penelitian ini paracetamol, Na CMC , curcuma®, etanol 70%, akuades, larutan NaCL fisiologis, buffer netral formalin (BNF) 10%, ethanol,  paraffin, pewarna preparat hematoksilin eosin (HE), dan larutan xilol.

## Skrining Fitokimia
Umbi bit diperoleh di pasar Penayong, Kecamatan Kuta Alam Kota Banda Aceh dan identifikasi di MIPA Biologi Universitas Syiah. Kuala. Skirining fitokimia simplisia umbi bit meliputi  meliputi alkaloid, flavonoid, tannin, saponin, fenolik dan steroid dan
triterpenoid (Meilina & Afriana, Efek Antiinflamasi Gel Kacang Hijau Pada Mencit Putih (Mus musculus), 2019).

## Pembuatan ekstrak
Umbi  bit  dibersihkan  dan  dikeringkan  hingga  menjadi  simplisia,  lalu  dihaluskan untuk memperoleh serbuk halus. Serbuk umbi bit diekstraksi dengan metode maserasi. Hasil  ekstrak  cair  tersebut  dipekatkan  dengan  rotary  evaporator  sehingga  diperoleh ekstrak kental (Meilina, Suwarso, & Dalimunthe, Relaxation Effect of Ethanolic Extract of Averrhoa Bilimbi L. Leaves on Ileum Smooth Muscle Contraction of in Vitro Isolated Rat (Rattus novergicus), 2018).

## Pembuatan suspensi Na CMC 0,5%
Sebanyak  5  mg/ml  Na  CMC  ditaburkan  kedalam  lumpang  yang  berisi  air  suling panas  sebanyak  10  mL.  Didiamkan  selama  15  menit  hingga  diperoleh  masa  yang transparan,  digerus  hingga  terbentuk  gel  dan  diencerkan  dengan  sedikit  air  suling, kemudian  dituang  ke  dalam  labu  tentukur  100  mL,  ditambah  air  suling  sampai  batas tanda. Suspensi ini digunakan sebagai pembawa ekstrak etanol umbi bit dan parasetamol.

## Pembuatan Suspensi Curcuma®
Satu  tablet  Curcuma®  mengandung  20  mg  Curcuma  xanthorrhiza.  Sebanyak  20 tablet  Curcuma®  ditimbang,  digerus  halus  dalam  lumpang,  kemudian  timbang  serbuk sebanyak  1.207,85  mg  Curcuma  xanthorrhiza.  Serbuk  yang  ditimbang  dimasukkan  ke dalam  lumpang  kemudian  ditambahkan  Na  CMC  0,5%  sedikit  demi  sedikit    sambil digerus  hingga  homogen  lalu  dimasukkan  ke  dalam  labu  tentukur  10  mL.  Volume dicukupkan dengan suspensi Na CMC 0,5% sampai garis tanda.

## Pembuatan suspensi parasetamol
Suspensi parasetamol dalam suspensi Na CMC 0,5% dibuat dengan cara timbang setara, 1.294,86 mg serbuk parasetamol yang telah ditimbang ke dalam suspensi Na CMC 0,5%  di  dalam  lumpang,  digerus  hingga  homogen  lalu  dimasukkan  ke  dalam  labu tentukur 10 mL. Volume dicukupkan dengan suspensi Na CMC 0,5% sampai garis tanda.

## Pembuatan suspensi Ekstrak Umbi Bit
Sebanyak 500 mg dosis ektrak umbi bit dimasukkan kedalam lumpang, kemudian masukkan suspensi Na CMC 0,5% sedikit demi sedikit sambil digerus sampai homogen lalu  dimasukkan  kedalam  labu  tentukur  10  ml.  Volume  dicukupkan  dengan  Na  CMC 0,5%  sampai  garis  tanda.  Prosedur  yang  sama  dilakukan  untuk  pembuatan  suspensi ekstrak umbi bit dosis 300 mg dan 100 mg.
Tabel 1 . Kelompok perlakuan hewan uji
Journal of Healtcare Technology and Medicine Vol. 8 No. 1 April 2022 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Kelompok Perlakuan P1 Diberikan  ekstrak  umbi  bit  dosis  500 mg/kg  BB  yg  disuspensikan  dalam  Na CMC 0,5% per oral selama 7 hari P2 Diberikan  ekstrak  umbi  bit  dosis  300 mg/kg  BB  yg  disuspensikan  dalam  Na CMC 0,5% per oral selama 7 hari P3 Diberikan  ekstrak  umbi  bit  dosis  100 mg/kg  BB  yg  disuspensikan  dalam  Na CMC 0,5% per oral selama 7 hari Kontrol positif Diberikan Curcuma® per oral hingga hari ke-7 Kontrol negatif Diberi  larutan  Na  CMC  0,5%  per  oral hinga hari ke-7
Pada  hari  ke-8,  mencit  diinduksi  dengan  parasetamol  dosis  toksik  secara  oral selama 3 hari. Setelah 24 jam, tikus dikorbankan dengan cara embolik intrakardiak. Pada hari  ke-10  dilakukan  pengambilan  hepar  mencit  melalui  proses  pembedahan  (Meilina, Gultom, & Dewi, Relaksasi Ileum yang diinduksi Serotonin, 2021).

## Pembuatan Sayatan Histologi Hepar
Pada hepar mencit dilakukan proses fiksasi minimal 1x24 jam, kemudian dehidrasi dengan memasukkan sampel ke dalam alkohol konsentrasi bertingkat, yaitu alkohol  70%, 80%,  90%  dan  95%  masing-masing  dilakukan  selama  24  jam  dan  dilanjutkan  dengan alkohol  100%  selama  1  jam  yang  diulang  tiga  kali  pembilasan.  Kemudian  dilakukan parafin  ilfiltrasi  selama  4  jam,  dilanjutkan  proses  embedding  yaitu  proses  penanaman organ dalam media blok. Selanjutnya proses pemotongan sampel ukuran 6 um untuk di tempelkan di objek glass. Masukkan ke dalam pewarna ( water-based ) yaitu Hematoxilyn- Eosin.  Hematoxylin 10  menit,  cuci  dengan  air  kran,  masukkan  ke  etanol  asam  untuk menghilangkan kelebihan hematoxylin , bilas dengan akuades. Dehidrasi kembali dengan alkohol bertingkat, masing-masing tahapan selama 5 menit. 70% - 80% - 96% - 100%. Kemudian jaringan hepar mencit dilihat di bawah mikroskop cahaya.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Skrining Fitokimia
Hasil skrining fitokimia umbi bit mengandung alkaloid, flavonoid, fenolik, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid.

## Hasil Uji Aktivitas Hepatoprotektif
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  pemberian  sediaan  uji  berupa  perlakuan  kontrol negatif  diberikan  Na  CMC  0,5%,  perlakuan  kontrol  positif  diberikan  Curcuma®  dan ekstrak  umbi  bit  dosis  bertingkat  yaitu  dosis  500  mg/kg  BB,  300  mg/kg  BB  dan  100 mg/kg BB. Perlakuan tersebut diberikan selama 7 hari. Pada hari ke-8 mencit diinduksi dengan  parasetamol  dosis  1.050  mg/kg  BB  mencit.  Setelah  perlakuan  selesai  mencit dibedah  pada  hari  ke-10  untuk  di  ambil  hepar  dan  di  buat  preparat  histopatologi. Pemeriksaan  histopatologi  dilakukan  dengan  cara  mencit  dikorbankan  pada  akhir pengamatan,  kemudian  organ  heparnya  diambil  untuk  diamati  secara  mikroskopis. Pembuatan  preparat  histologi  dengan  metode  block  paraffin  dan  pewarnaan menggunakan  Haematoxilin  Eosin  (HE).  Kemudian  dilanjutkan  dengan  pemeriksaan mikroskopis dengan menggunakan mikroskopis cahaya dengan perbesaran 400 kali pada seluruh lapang pandang pada setiap sediaan (Rohmani & Rakhmawatie, 2015).
Hasil  pengamatan  derajat  histopatologi  sel  hepar  yang  mengalami  degenerasi parenkimatosa, degenerasi hidropik, dan nekrosis pada kelompok perlakuan dapat dilihat pada Tabel 2 dibawah ini.
Tabel 2. Hasil Rata-Rata Skor Histopatologi Hepar Mencit
Kelompok Perlakuan Skor Histopatologi Kontrol Negatif 166,6 Kontrol Positif 113,2 Perlakuan I 136,4 Perlakuan II 152,0 Perlakuan III 131,6
Berdasarkan hasil yang terlihat  pada tabel  1 diketahui bahwa terdapat  perbedaan nilai rata-rata skor histopatologi hepar mencit pada tiap perlakuan yang diberikan. Hasil yang  diamati  pada  pemberian  parasetamol  dosis  toksik  menunjukkan  perubahan gambaran  histopatologi  yaitu  terdapat  perbedaan  bermakna  tingkat  kerusakan  struktur histopatologi hepar antara perlakuan kontrol negatif yang diberikan parasetamol dengan perlakuan  yang  lainnya,  dikarenakan  hewan  uji  pada  kelompok  ini  tidak  diberikan antioksidan  sehingga  banyak  terjadi  kerusakan  sel  hepar  yang  berupa  kematian  sel, degenerasi  hidropik  dan  degenerasi  parenkimatosa.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa pemberian  parasetamol  dosis  toksik  cukup  membuat  kerusakan  pada  hepar (Nugrametalina, 2017). Diagram rata-rata skoring histopatologi hepar.
Penelitian  ini  menggunakan  analisis  data  menggunakan  uji  Kruskal  Wallis  yang kemudian dilanjutkan dengan uji analisis Mann-Whitney, dikarenakan pemeriksaan data berdasarkan uji normalitas menunjukkan data tidak berdistribusi normal dengan nilai Sig
= 0,006 yakni lebih kecil dari 0,05. Uji Kruskal-Wallis digunakan untuk melihat adakah perbedaan yang bermakna pada tiap kelompok yang ditunjukkan dengan nilai p < 0,05. Hal  ini  terbukti  dengan  dilakukannya  uji  Kruskal-Wallis  didapatkan  angka  signifikan sebesar  p  =  0,000  sehingga  data  dari  masing-masing  perlakuan  percobaan  penelitian menunjukkan  perbedaan  kerusakan  sel  hepar  yang  bermakna.  Sehingga  dapat disimpulkan  bahwa  setidaknya  terdapat  sepasang  perbedaan  skor  kerusakan  histologi hepar  di  antara  kelima  perlakuan  penelitian  tersebut.  Penelitian  ini  dilanjutkan  dengan menggunakan analisis Mann-Whitney dengan teknik post hoc test , yang bertujuan untuk mengetahui  perlakuan  mana  yang  mengalami  perbedaan  kerusakan  sel  hepar  dan perlakuan  mana  yang  tidak  mengalami  perbedaan  kerusakan  secara  signifikan  dengan membandingkan antara dua perlakuan (Nurrochmah, 2017).
Tabel 3. Hasil Analisis Mann-Whitney
Hasil  perbandingan  perbedaan  antara  perlakuan  kontrol  negatif  yang  diberikan parasetamol dengan perlakuan kontrol positif yang diberikan curcuma® diperoleh nilai Sig  (0,016)  <  0,05.  Dengan  demikian,  H0  dapat  ditolak.  Dapat  disimpulkan  bahwa terdapat perbedaan skor kerusakan histologi hepar di antara perlakuan kontrol negatif dan perlakuan  kontrol  positif.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  kerusakan  sel  hepar  yang disebabkan karena pemberian parasetamol dosis tunggal toksik 1.050 mg/kg BB mencit belum mampu memperbaiki mendekati normal oleh pemberian ekstrak etanol umbi bit dengan dosis 500 mg/kg BB dengan nilai rata-rata 136,4 dan diperoleh nilai signifikan 0,021 < 0,05, dosis 300 mg/kg BB dengan nilai rata-rata 152 dan diperoleh nilai signifikan 0,009 < 0,05, dan dosis 100 mg/kg BB dengan nilai rata-rata 131,6 dan diperoleh nilai signifikan 0,009 < 0,05. Namun secara rata-rata dan statistik kelompok perlakuan ekstrak etanol umbi bit dan kontrol negatif yang diinduksi parasetamol menunjukkan perbedaan yang signifikan hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol umbi bit mampu memberikan efek hepatoprotektor pada  sel  hepar  dari  kerusakan  sel hepatosit akibat  paparan
Kelompok Perlakuan Asymp. Sig. (0,05) Kontrol Negatif & Kontrol Positif 0,016 N.P Kontrol Negatif & Perlakuan Perlakuan I 0,021 N,I Perlakuan II 0,009 N,II Perlakuan III 0,009 N,III Kontrol Positif & Perlakuan Perlakuan I 0,009 P,I Perlakuan II 0,009 P,II Perlakuan III 0,009 P,III Kelompok Perlakuan Perlakuan I dan II 0,116 I,II Perlakuan I dan III 0,293 I,III Perlakuan II dan III 0,016 II,III
parasetamol  yang  diberikan  peroral,  meskipun  efek  perbaikan  ekstrak  etanol  umbi  bit tidak setara dengan kontrol positif yang diberikan curcuma®.
Pada  gambar  di  atas  terlihat  pada  pemberian  parasetamol  hepar  banyak mengalami  kerusakan  berupa  degenerasi  parenkimatosa,  degenerasi  hidropik  dan nekrosis. Mekanisme terbentuknya sel nekrosis setelah pemberian parasetamol berkaitan erat  dengan  fungsi  hati.  Parasetamol  membentuk  suatu  gugus  radikal  bebas  yang mempengaruhi lipid membran retikulum endoplasma sehingga menyebabkan perubahan morfologi  dari  membran  retikulum  endoplasma.  Enzim-enzim  retikulum  endoplasma akan kehilangan aktivitas katalitiknya. Tidak dapat mensintesis protein dan selanjutnya konjugasi lipid dengan protein (lipoprotein ) tidak dapat dikeluarkan dari hati ke dalam darah.  Nekrosis akibat interaksi  antara radikal  bebas hasil biotransformasi  parasetamol dan asam lemak tidak jenuh penyusun membran sel membentuk peroksida organik yang tidak stabil. Peroksida ini selanjutnya akan mudah pecah menjadi radikal bebas baru yang dapat memecah penyusunan membran sel selanjutnya (Yuwono, 2010).
Degenerasi hidropik atau swelling merupakan tahap awal terjadinya nekrosis yang ditandai dengan hepatosit yang membengkak, dimana terdapat vakuola berbentuk bundar dan  berwarna  pucat  yang  disebabkan  lumpuhnya  aktivitas  pompa  ion  di  plasma membrane  sehingga  tidak  mampu  mempertahankan  keseimbangan  ion  dan  cairan (Kumar, Bhaumik, Chopra, & Devi, 2016). Degenerasi parenkimatosa merupakan bentuk degenerasi paling ringan dan bersifat reversibel. Degenerasi parenkimatosa terjadi akibat kegagalan  oksidasi  yang  menyebabkan  air  tertimbun  dalam  sel  sehingga  transportasi protein terganggu (Tamad, Hidayat, & Sulistiyo, 2011).
Gambar 1. Perlakuan Kontrol Negatif (Parasetamol)
Journal of Healtcare Technology and Medicine Vol. 8 No. 1 April 2022 Universitas Ubudiyah Indonesia e-ISSN : 2615-109X
Pada gambar diatas terlihat pada kerusakan hepar terjadi proses perbaikan dengan pemberian  ekstrak  etanol  umbi  bit  .  Umbi  bit  dapat  dijadikan  sebagai  hepatoprotektor dengan  adanya  peningkatan  suplai  yang  diberikan  kepada  tubuh  dalam  bentuk antioksidan  sekunder  yang  akan  membantu  GSH  ( Glutathion )  dalam  menangani peningkatan  jumlah  NAPQI  ( N-acetyl-p-benzoquinon  imine ) yang  terbentuk  akibat mekanisme metabolisme tubuh yang secara langsung dilakukan oleh hepar. Suatu kondisi dimana sel hepar akan diikat oleh NAPQI (senyawa yang bersifat bebas akan mengikat asam amino) akan menjadi rusak. Namun, akan dapat tertanggulangi dengan banyaknya suplai antioksidan sekunder yang telah disediakan terlebih dahulu oleh ekstrak umbi bit ( Beta vulgaris L.) sebagai mekanisme perlindungan. Maka dari itu, kerusakan sel hepar dapat terminimalisir dengan baik dimana sebelum NAPQI akan berikatan dengan asam amino  sel  hepar  dan  merusak  sel  hepar,  sebagian  besar  antioksidan  sekunder  sudah tersedia dan berikatan dengan NAPQI. Sehingga, antioksidan memang mampu mencegah pembentukan  radikal  bebas  dan  membantu  dalam  memperbaiki  kerusakan  yang ditimbulkan  oleh  radikal  bebas.  Meningkatnya  jumlah  antioksidan  menjadi  pemasok ketersediaan glutathion yang akan mampu membantu mengurangi kerusakan pada hepar (Sayuti, 2015).
Hasil  penelitian    menunjukkan  ekstrak  umbi  bit  mengandung  komposisi  aktif yaitu flavonoid, terpenoid, fenolik, saponin, dan tanin. Umbi bit juga merupakan sumber terkaya  betalain (Esatbeyoglu,  Wagner  ,  Schini-Kerth,  &  Rimbach,  2015).  Umbi  bit banyak  mengandung  senyawa  antioksidan  seperti  polifenol,  betalain,  dan  flavonoid sehingga  berpotensi  dapat  dijadikan  sebagai  obat hepatoprotektor . Hepatoprotektor merupakan golongan senyawa obat yang dapat memelihara, mengobati, dan memulihkan hepar dari kerusakan. Flavonoid merupakan salah satu senyawa yang bertindak sebagai agen  antioksidan  dengan  mereduksi  radikal  bebas  yang  merusak  membran  sel  dan meregenerasi  sel–sel.  Betalain  juga  merupakan  salah  satu  senyawa  larut  air  serta antioksidan  yang  baik  untuk  stress  oksidatif  dan  inflamasi.  Pigmen  merah-keunguan betaxantin dalam bit juga merupakan salah satu agen detoksifikasi  yang baik bagi tubuh. Aktivitas antioksidan betalain lebih besar dibandingkan  vitamin C dan polifenol (Vargas, MAdrigal , Morales, Esquivel , Esquivel , & Garcia, 2014).
Gambar 2. Perlakuan Etanol Ekstrak Umbi Bit

## KESIMPULAN
Kesimpulan yang dapat diperoleh dari penelitian ini adalah ekstrak etanol umbi bit memiliki efektivitas hepatoprotektor sehingga dapat dijadikan sebagai bahan obat yang dapat memberikan perlindungan pada hepar mencit jantan yang diinduksi parasetamol.

## SARAN
Saran pada para peneliti selanjutnya adalah perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang uji toksisitas  dari tanaman umbi bit  agar  mengetahui batasan dosis maksimum yang dapat digunakan.

## DAFTAR PUSTAKA
Baleni, R., Bekker, Z., Walubo, A., & Plessis , J. B. (2015). Co-administration of fresh grape  fruit  juice  (GFJ)  and  bergamottin  prevented  paracetamol  induced hepatotoxicity after paracetamol overdose in rats. Toxicology Reports .
Esatbeyoglu, T., Wagner , A. E., Schini-Kerth, V. B., & Rimbach, G. (2015). Betanin—
A food colorant with biological activity.
Fotschki,  B.,  Juskiewicz,  J.,  Sojka,  M.,  Jurgonski,  A.,  &  Zdunczyk,  Z.  (2015). Ellagitannins  and  Flavan-3-ols  from  Raspberry  Pomace  Modulate  Caecal Fermentation Processes and Plasma Lipid Parameters in Rats. Journal Molecules . Irianto, K. (2017). Anatomi dan Fisiologi. Bandung: Alfabeta.
Kumar,  P.,  Bhaumik,  A.,  Chopra,  M.,  &  Devi,  K.  (2016).  Evaluation  of  anti  diabetic activity  of  ethanolic  extract  of  beet  root  (EEBT-Beta  vulgaris)  against streptozocin induced diabetic rats. Jurnal of Drug Discovery and Terapeutics . Meilina, R., & Afriana, S. (2019). Efek antiinflamsi gel kacang hijau pada mencit pada mencit. Journal of Healthcare Technology and Medicine , 5 (2), 231-238.
Meilina,  R.,  Gultom,  E.  D.,  &  Dewi,  R.  (2021).  Relaksasi  Ileum  Yang  Diinduksi Serotonin Relaxes The Serotonin Induced Contraction Of Ileum . 7 (1).
Meilina, R., Suwarso, E., & Dalimunthe, A. (2018). Relaxation effect of ethanolic extract of  averrhoa  bilimbi  l.  Leaves  on  ileum  smooth  muscle  contraction  of  in  vitro isolated  rat  (rattus  norvegicus). Asian  Journal  of  Pharmaceutical  and  Clinical Research, 11 (Spesial issue 1), 135-137.
Mikolajczyk, B. K., & Czapski, J. (2017). Effect of pH Changes on Antioxidant Capacity and the Content of Betalain  Pigments  During  the Heating of a Solution  of Red Beet Betalains. Polish Journal of Food and Nutrition Scienses . Nugrametalina, U. S. (2017). ). Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol Biji Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Gambaran Histopatologi Hepar Tikus Jantan Galur Wistar Yang Diinduksi Parasetamol. Surakarta: Universitas Setia budi Surakarta.
Nurrochmah,  L.  (2017). Efek  Hepatoprotektif  Ekstrak  Ethanol  Buah  Strawberry (Fragaria  Sp.)  Pada  Kerusakan  Oksidatif  Hepar  Mencit  (Mus  musculus)  Yang Diinduksi  Parasetamol  Dengan  Indikator  Kadar  SGPT. Surakarta:  Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Putri, S. M.  (2016). Identifikasi  dan Uji  Antioksidan Senyawa Betasianin  dari Ekstrak Buah  Bit  Merah  (Beta  vulgaris  L).  Skripsi. Semarang:  Universitas  Negeri Semarang.
Rohmani,  A.,  &  Rakhmawatie,  M.  D.  (2015).  efek  ekstrak  kulit  manggis  terhadap gambaran histopatologi hepar tikus wistar yang diinduksi formalin.
Sayuti, K. (2015). Antioksidan Alami dan Sintetik. Padang: Andalas University Press.
Tamad, F. S., Hidayat, Z. S., & Sulistiyo, H. (2011). Gambaran Histopatologi Hepatosit Tikus Putih Setelah Pemberian Jintan Hitam Dosis 500 Mg/Kgbb, 1000 Mg/Kgbb, Dan 1500 Mg/Kgbb Selama 21 Hari (Subkronik). 5 (3).
Vargas, M.  N., MAdrigal  , S. E., Morales, G. A., Esquivel , C. C., Esquivel  , S. J., & Garcia, L. Y. (2014). Pengaruh Pemberian Analgesik Kombinasi Parasetamol dan Tramadol terhadap Kadar Kreatinin Serum Tikus wistar.
Yuwono. (2010). Pengaruh Pemberian Analgesik Kombinasi Parasetamol dan Tramadol terhadap Kadar Kreatinin Serum Tikus wistar. 5 (4).