Journal Syifa Sciences and Clinical Research (JSSCR)
Volume 4 Nomor 3
Journal Homepage: http://ejurnal.ung.ac.id/index.php/jsscr , E-ISSN: 2656-9612 P-ISSN:2656-8187 DOI : https://doi.org/10.37311/jsscr.v4i1.45678

## Isolasi dan Karakterisasi Jamur Endofit Lamun ( Thalassia hemprichii ) Dari Kawasan Teluk Tomini
Mahdalena Sy. Pakaya 1* , Wiwit Zuriati Uno 2 , Dizky Ramadani Putri Papeo 3 , Dewi Rahmawaty Moo 4
1,2,3,4 Jurusan Farmasi Fakultas Olahraga dan Kesehatan, Universitas Negeri Gorontalo, Jl. Jenderal Sudirman No. 06 Kota Gorontalo 96128, Indonesia
* Penulis Korespondensi. Email: mahdalena@ung.ac.id

## ABSTRAK
Jamur endofit hidup didalam jaringan inangnya. Jamur endofit dapat menghasilkan senyawa  yang  mirip  dengan  inangnya  juga.  Dalam  hal  ini,  pemanfaatan  jamur endofit dapat mengurangi eksploitasi terhadap populasi lamun ( Thalassia hemprichii ) di  Teluk  Tomini.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengisolasi  dan  mengetahui karakteristik jamur endofit lamun ( Thalassia hemprichii ) dari kawasan Teluk Tomini. Metode  pengujian  yang  digunakan  adalah  isolasi  dan  karakterisasi  secara makroskopis dan mikroskopis. Hasil isolasi diperoleh dua isolate jamur endofit yang diberi  kode  J1  dan  J2  dengan  karakteristik  yang  berbeda.  Kode  isolat  J1  memiliki karakteristik mikroskopis berbentuk seperti yeast sedangkan kode isolat J2 memiliki karakteristik hifa tidak bersepta.
Kata Kunci: Teluk Tomini; Lamun ( Thalassia hemprichii ); Jamur Endofit
Diterima: 08-07-2022 Disetujui: 12-08-2022 Online: 01-10-2022

## ABSTRACT
Endophytic fungi live in their host tissues. Endophytic fungi can produce compounds similar to their hosts as well. In this case, the use of endophytic fungi can reduce the exploitation of seagrass (Thalassia hemprichii) populations in Tomini Bay. This study aims to isolate and determine the characteristics of the endophytic fungus of seagrass (Thalassia hemprichii) from the Tomini Bay area. The test method used  is  the  isolation  and  characterization  macroscopically  and  microscopically.  The  results  of  the isolation obtained two isolates of endophytic fungi coded J1 and J2 with different characteristics. The isolate code J1 had microscopic characteristics of  a yeast-like  shape, while the isolate  code J2 had the characteristic of non-septate hyphae.
Copyright © 2022 Jsscr. All rights reserved.
Keywords:
Tomini Bay; Seagrass (Thalassia hemprichii); Endophytic fungi
Received: 2022-08-07 Accepted: 2022 -08-12 Online: 2022-10-01

## 1. Pendahuluan
Lamun merupakan tumbuhan tingkat tinggi yang dapat menyesuaikan diri dengan tempat  tinggalnya.  Lamun  memiliki  karakteristik  tersendiri.  Lamun  memiliki  daun hijau untuk proses fotosintesis. Agar proses fotosintesis berjalan optimal, lamun perlu sinar matahari yang cukup, karena itu lamun dapat tumbuh baik di perairan dangkal yang berair jernih, sampai kedalaman sekitar 40 m atau sampai batas cahaya matahari menjangkau. Lamun juga masih bisa tumbuh di perairan yang relatif keruh. Di daerah pasang surut, lamun tetap dapat bertahan, meskipun daun-daunnya terjemur di terik matahari  pada  waktu  air  surut  rendah  yangmenyebabkan  daun  mengering.  Daun lamun  yang  di  atas  permukaan  air  boleh  mengering,  namun  rimpang  dan  akarnya tetap  bertahan  hidup  [2].  Rimpang  dan  akarnya  ini  juga  mampu  menyesuaikan  diri dengan  berbagai  tipe  dasar  perairan,  sehingga  mereka  dapat  tumbuh  di  dasar pasir, lumpur  atau  bahkan  di  pecahan  karang  mati  ataupun  juga  di  campuran  ketiganya. Lamun juga memiliki sifat halofitik, yaitu menyukai air yang berkadar  garam cukup tinggi, oleh sebab itu lamun hanya tumbuh dan berkembang di laut,  yaitu di perairan laut dangkal [1].
Di perairan Indonesia terdapat 13 species lamun, yang terdiri atas 2 familia dan 7  genus.  Kedua  familia  itu  ialah Cymodoceaceae dan Hydrocharitaceae. Cymodoceaceae terdiri dari 4 genus, yaitu Cymodocea dengan 2 species, yaitu Cymodocea rotundata dan Cymodocea serrulata . Adapun Halodule dengan 2 species Halodule pinifolia dan Halodule uninervis . Syringodium dengan  1  species Syringodium  isoetifolium ,  dan Thalassodendron dengan  1  species Thalassodendron ciliatum .  Sedangkan Hydrocharitaceae terdiri  dari  3 genus,  yaitu Enhalus dengan  1  species Enhalus acoroides ,  halophila  dengan  5  species yakni Halophila  decipiens,  Halophila  minor,  Halophila  ovalis,  Halophila  spinulosa, dan Halophila sulawesii . Untuk genus Thalassia terdapat 1 spesies , yaitu Thalassia hemprichii Pemanfaatan  jamur  endofit  yang  bersimbiosis  dalam  lamun  ( Thalassia hemprichii )  dapat  menjadi  alteratif  untuk  mencegah  penurunan  biodeversitas dikawasan  teluk  tomini.  Berdasarkan  uraian  diatas,  maka  dilakukan  penelitian bertujuan untuk mengisolasi dan mengetahui karakteristik jamur endofit pada lamun ( Thalassia hemprichii ).

## 2.  Metode Bahan penelitian
Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  Alkohol  70%, Alumunium  Foil,  Aquades,  Aqua  Pro  Injeksi,  kloramfenikol,  NaOCl, Nutrient  Agar (NA), Potato Dextrose Agar (PDA), Potato Dextrose Broth (PDB) dan Tisu..

## Alat penelitian
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah  Autoklaf (Hirayama ® ),
Batang pengaduk, Bunsen, Cawan petri, Erlenmeyer, Gelas kimia, Gelas ukur , Gunting Steril,  Inkubator , Jarum  Ose,  Korek  Api,  LAF  ( Laminar  air  flow )  Mikropipet,  Oven (Shel Lab ® ), Spatula, Tabung Reaksi Dan Timbangan Analitik (Kern ® ).
Pembuatan Media

## a. Potato Dextrose Agar (Media PDAC)
Pembuatan  media  dilakukan  dengan  cara  menimbang  20  gram  PDA,  kemudian dimasukan ke dalam erlenmeyer dan dilarutkan dengan 500 mL aqua pro injeksi dan ditambahkan  kloramfenikol  0.01%.  Setelah  itu,  ditutup  menggunakan  kapas  dan alumunium  foil  selanjutnya  disterilkan  pada  autoklaf  selama  15  menit  pada  suhu 121˚C.

## b. Nutrient Agar (Media NA)
Media  NA  dibuat  dengan  cara  menimbang  sebanyak  5,6  gram,  kemudian dimasukan  ke  dalam  Erlenmeyer  dan  dilarutkan  dengan  200  mL  aqua  pro  injeksi. Setelah  itu,  ditutup  menggunakan  kapas  dan  alumunium  foil  kemudian  disterilkan pada autoclave selama 15 menit pada suhu 121˚C.

## c. Potato Dextrose Broth (PDB)
Media  PDB  dibuat  dengan  cara  menimbang  sebanyak  20  gram,  kemudian dimasukan  ke  dalam  Erlenmeyer  dan  dilarutkan  dengan  500  mL  aqua  pro  injeksi. Setelah  itu,  ditutup  menggunakan  kapas  dan  alumunium  foil  kemudian  disterilkan pada autoklaf selama 15 menit pada suhu 121˚C.
Isolasi Jamur Endofit Lamun ( Thalassia hemprichii )
Bagian  lamun  yang  digunakan  adalah  daun  dan  akar  dalam  kondisi  segar. Sampel  dibersihkan  dengan  air  mengalir,  dipotong  1  sampai  2  cm,  lalu  dipisahkan sesuai  bagian  tanaman.  Potongan  sampel  direndam  dengan  alkohol  70%  selama  1 menit, larutan natrium hipoklorit 1% selama 5 menit, alkohol 70% selama 30 detik, lalu bilas dengan aquades steril. Pada proses pertumbuhan jamur, sampel yang sudah steril diletakkan  dalam  media  PDA  yang  telah  mengandung  kloramfenikol  kemudian diinkubasi dengan suhu 25-28ºC selama 3-5 hari.
Pemurnian Jamur Endofit Lamun ( Thalassia hemprichii )
Medium yang digunakan untuk pemurnian jamur endofit yaitu medium Potato Dextrose  Agar (Media  PDA).  Jamur  endofit  yang  tumbuh  pada  medium  PDA dimurnikan pada media PDA yang baru. Kemudian diinkubasi selama 3-5                   hari pada suhu 25-28ºC.
Karakterisasi Jamur Endofit Lamun ( Thalassia hemprichii )
Identifikasi  jamur  endofit  secara  makroskopik  berdasarkan  warna  dan permukaan  koloni,  garis-garis  radial  dari  pusat  koloni  ke  arah  tepi  koloni, lingkaran-lingkaran  konsentris,  serta  warna  balik  koloni.  Selanjutnya,  pengamatan secara  mikroskopis  dilakukan  dengan  cara  mengambil  isolat  jamur endofit  secara aseptis  menggunakan  jarum  ose  lurus  dan  diletakkan  di atas  permukaan object  glass , lalu  ditetesi  oil  imersi  kemudian  diamati  di  bawah  mikroskop.  Ciri-ciri  mikroskopis yang diamati meliputi struktur hifa dan struktur reproduksi.

## 3.  Hasil dan Pembahasan
Isolasi Jamur Endofit Lamun ( Thalassia hemprichii )
Isolasi  jamur  endofit  dari  Lamun (Thalassia  hemprichii ) menggunakan  metode tanam langsung pada  media  padat Potato  Dextrose  agar (PDA)  untuk  pertumbuhan jamur  endofit.  Sampel  Lamun (Thalassia  hemprichii) yang  digunakan  harus  dalam keadaan  segar,  hal  ini  akan  menjamin  jaringan  tanaman  sehat.   Penelitian  ini menggunakan daun dan akar dari tanaman Lamun (Thalassia hemprichii) , karena secara garis besar tanaman ini terdiri dari bagian daun dan akar.
Tabel 1. Hasil Isolasi Jamur Endofit
Lamun (Thalassia hemprichii) Jamur Endofit Daun - - Akar J1 J2
Berdasarkan Tabel 1 menunjukan bahwa  jamur  endofit  hanya  terdapat  pada bagian  akar  sedangkan  pada  bagian  daun  tidak  ada  pertumbuhan  jamur  endofit. Secara makroskopik  terlihat  pada  media  PDA  disekitar  akar  terdapat  2  koloni  yang tampak berbeda, maka dapat dikatakan terdapat 2 isolat jamur.
Proses  isolasi  jamur  endofit,  hal  pertama  yang  harus  diperhatikan  adalah sterilisasi  permukaan  sampel.  Hal  ini  merupakan  awal  pengerjaan  untuk  mencegah terjadinya kontaminasi, karena pertumbuhan yang diharapkan adalah mikroba endofit yang  berasal  dari  dalam  jaringan  tanaman,  bukan  mikroba  lain  yang  bisa  saja menempel  pada  permukaan  sampel.  Sterilisasi  permukaan  secara  berurutan menggunakan  alkohol  70%  selama  1  menit,  larutan  natrium  hipoklorit  1%  selama  5 menit, alkohol 70% 30 detik, lalu dibilas dengan aquades steril. Desinfeksi permukaan sampel  bertujuan  untuk  menghilangkan  kotoran,  bakteri,  dan  jamur  yang  ada  pada sampel sehingga  saat penanaman sampel tidak akan tumbuh bakteri atau jamur lain dipermukaan media melainkan hanya menumbuhkan bakteri endofit yang berasal dari jaringan  tanaman  sampel  [5].  Pendapat  ini  didukung  dengan  sterilisasi  permukaan sampel dapat mencegah kontaminasi mikroorganisme, sterilisasi dapat menggunakan lebih dari 1 bahan sterilan seperti NaOCl dan alkohol 70% [4]. Kemudian pembilasan sampel  menggunakan  aquades  steril  setelah  disterilisasi  bertujuan  untuk membersihkan  sisa  desinfektan  yang  menempel  pada  permukaan  sampel  agar  tidak mengganggu  proses  pertumbuhan  mikroba  endofit.  Daun  dan  akar  yang  telah disterilisasi  ditanam  langsung  pada  media  PDA  secara  aseptis.  Sebelumnya  sampel dipotong ±  2  cm  menggunakan  pisau steril  sacara  vertikal,  posisi  bekas  potongan tertanam  pada  permukaan  media  sehingga  mikroba  yang  hidup  dalam  jaringan tanaman  mendapatkan  nutrisi  dari  media  PDA.  Sebelum  digunakan,  media  PDA ditambahkan  kloramfenikol  0.01%  (b/v)  dengan  tujuan  yang  sama  yaitu  untuk
mencegah terjadi pertumbuhan bakteri kontaminan pada media tersebut. Penambahan zat  antimikroba ini  bertujuan  untuk  mengoptimalkan  hasil  isolasi  [ 6 ].  Kemudian diinkubasi  selama  1  hari  pada  suhu  37°C  untuk  pertumbuhan  bakteri,  dan  3-5  hari pada  suhu  28°C  untuk  pertumbuhan  jamur.  Setelah  masa  inkubasi,  akan  terlihat pertumbuhan jamur endofit pada cawan petri.
Karakterisasi Jamur Endofit Lamun ( Thalassia hemprichii )
Karakterisasi  yang  dilakukan  bertujuan  untuk  mengetahui  karakter  jamur endofit  secara  makroskopis  dan  mikroskopis.  morfologi  jamur  secara  makroskopis, meliputi  warna  permukaan,  warna  sebalik,  tekstur  koloni,  adanya  zonasi,  zona pertumbuhan, tetes eksudat dan garis radial. Sedangkan secara mikroskopis bertujuan untuk mengetahui jenis spora dan bentuk  hifa dari isolat jamur tersebut.
Tabel 2. Hasil Karakterisasi Makroskopis Jamur Endofit
Karakteristik Kode Isolat J1 J2 Warna Permukaan Putih bintik hitam Putih Warna Sebalik Putih keabu-abuan Putih Tekstur Koloni Granular Kapas Zonasi Tidak Ada Tidak Ada Zona Pertumbuhan Ada Ada Tetes Eksudat Tidak Ada Tidak Ada Garis Radial Tidak Ada Tidak Ada
Untuk  mengidentifikasi  jamur  secara  makroskopik,  karakteristik  yang  perlu diamati antara  lain adalah warna  permukaan  dan  sebalik  dari koloni,  tekstur  koloni, adanya zonasi, zona pertumbuhan, tetes eksudat dan garis-garis radial.
Hasil yang diperoleh dari karakterisasi secara makroskopis, yaitu  isolat jamur 1 putih bintik hitam, warna sebalik putih, memiliki tekstur granular pada permukaan koloni dan pinggirannya seperti kapas, terdapat zona petumbuhan, akan tetapi tidak terlihat zonasi, tetes eksudat dan garis-garis radial. Sedangkan isolat 2 berwarna putih, warna putih, memiliki tekstur permukaan seperti kapas,  terdapat zona pertumbuhan dan tidak terdapat garis-garis radial, zonasi dan tetes       eksudat.

## Tabel 3. Hasil Karakterisasi Mikroskopis Jamur Endofit
Kode isolate Hifa Jenis spora J1 - Yeast
J2 Tidak bersepta Oidiofor
Hasil  yang  diperoleh  dari  karakterisasi  secara  mikroskopis  ialah isolat  1 menujukkan ciri jamur dengan bentuk sel mirip ragi ( yeast ), sedangkan pada isolat 2 menunjukan ciri oidiofor dan  memiliki hifa yang tidak bersekat atau tidak bersepta.

## Kesimpulan
Berdasarkan  penelitian  yang  telah  dilakukan,  maka  dapat  simpulkan  bahwa terdapat dua isolate jamur endofit yang diberi kode J1 dan J2 pada bagian akar lamun ( Thallasia hemprichii ). Jamur endofit J1 dan J2 memiliki karakteristik yang berbeda baik secara  makroskopis  maupun  mikroskopis.  Untuk  perbedaan  secara  mikroskopis terlihat dari perbedaan bentuk selnya, yaitu pada J1 bentuk sel mirip yeast sedangkan J2 memiliki ciri hifa tidak bersepta.

## Referensi
[1]. Hutomo, M., dkk., 2009. Prosiding Lokakarya Nasional I Pengelolaan Ekosistem Lamun. Pusat Kajian Sumberdaya Pesisir dan Lautan, Institut Pertanian Bogor. Bogor, 224 hal.
[2]. Kamaruddin  Z.S.,  Rondonuwu,  S.B.,  &  Maabuat,  P.V.,  2016. Keragaman  Lamun (Seagrass)  di  Pesisir  Desa  Lihunu  Pulau  Bangka  Kecamatan  Likupang  Kabupaten Minahasa  Utara,  Sulawesi  Utara .  Jurnal  Mipa  Unsrat  Online,  5(1):  20-24.  DOI: 10.35799/jm.5.1.2016.11194.
[3]. Kusumawati,  D.  E.,  Fachriyan,  H.  Pasaribu.,  dan  Maria,  B.  2014. Aktivitas Antibakteri Isolat Bakteri Endofit dari Tanaman Miana (Coleus Scutellariodes [L.] Benth.) terhadap S. aureus dan E. coli. Current Biochemistry.
[4]. Martiansyah, Irfan. 2013. Optimasi Prosedur Sterilisasi Permukaan Eksplan Stek Mikro Karet  (Hevea  brasiliensis Muell.  Arg ). Balai  Penelitian  Bioteknologi  Perkebunan Indonesia : Bogor.
[5]. Priharta, A. A. Y. D. 2008. Isolasi dan identifikasi bakteri endofit dalam batang tanaman Artemisia  annua  L.  yang  diuji  potensi  antibakterinya  terhadap  Eschericia  coli  dan Staphylococcus aureus . Universitas Sanata Dharma: Yogyakarta [6]. Purwanto, Ukhradiya M. Safira. 2014. Isolasi Bakteri Endofit dati Tanaman Sirih Hijau (Piper  betle. L.) dan  Potensinya  sebagai  Pengahasil  Senyawa  Antibakteri. Institut Pertanian Bogor: Bandung.