Dewi et al.;Perbandingan Aktivitas…..Pharmacoscript Volume 4 No. 1, Februari 2021
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIDEPRESAN EKSTRAK ETANOL DAUN PARE ( Momordica charantia L.) BERDASARKAN SIKLUS SIRKADIAN

## Maharani Dewi, Muharam Priatna, Hendy Suhendy*
Program Studi Farmasi, STIKes Bakti Tunas Husada
*Email: radhwa04@gmail.com
Received: 28/01/2021, Revised: 11/02/2021, Accepted: 25/02/2021, Published: 28/02/2021

## ABSTRAK
Depresi  adalah  gangguan    mental  umum  ditandai  dengan  kesedihan,  kehilangan  kesenangan, insomnia.  Kerja  obat  dalam  tubuh  dipengaruhi  oleh  siklus  sirkadian  (24  jam)  yang  akan memberikan efek terapi yang berbeda. Obat herbal digunakan sebagai alternatif utama pengobatan antidepresan salah  satunya daun pare. Tujuan penelitian ini untuk  mengetahui aktivitas ekstrak daun pare ( Momordica charantia L) sebagai antidepresan, berdasarkan siklus sirkadian yaitu pada pagi  dan  malam  hari.  Metode  penelitian  yang  digunakan  adalah Forced  Swimming  Test. Efek depresi pada mencit diketahui melalui keadaan Immobility pada saat mencit direnangkan. Hewan uji yang digunakan yaitu mencit jantan sebanyak 30 ekor dengan bobot badan 20-30 gram. Mencit dibagi menjadi 6 kelompok  secara acak yaitu kelompok kontrol negatif siklus pagi (PGA 1%), kelompok  kontrol  negatif  siklus  malam  (PGA  1%),  kelompok  kontrol  positif  siklus  pagi (fluoxetine 0,052 mg/20 g BB mencit), kelompok kontrol positif siklus malam (fluoxetine 0,052 mg/20  g BB mencit), kelompok dosis uji siklus pagi  (16,8 mg/20  g BB mencit)  dan kelompok dosis  uji  siklus  malam  (16,8  mg/20  g  BB  mencit).  Hasil  penelitian  menunjukan  nilai  rata-rata waktu imobilitas pada siklus pagi hari yaitu 105,44 detik untuk kelompok kontrol negatif, 69,64 detik untuk kelompok kontrol positif dan 72,71 detik untuk kelompok dosis uji. Sedangkan nilai rata-rata  waktu  imobilitas  pada  siklus  malam  hari  yaitu  119,52  detik  untuk  kelompok  kontrol negatif,  93,02  detik  untuk  kelompok  kontrol  positif  dan  85,62  detik  untuk  kelompok  dosis  uji. Ekstrak etanol daun pare ( Momordica charantia L) memberikan aktivitas antidepresan yang lebih baik pada siklus pagi hari dibandingkan malam hari.
Kata kunci : Antidepresi, Siklus Sirkadian, Daun Pare

## ABSTRACT
Depression is a common mental disorder that indicated by sadness los of pleasure and insomnia. The action of drugs in the body is affected by circadian cycle (24 hours) which will give a different therapeutic effect. One of herbal medicine as an anti-depressant treatment is bitter melon. The objective  of  the  research  is  to  determine  anti-depressant  activity  of  bitter  melon  extract (Momordican  charantina  L)  based  on  the  circadian  cycle  in  the  morning  and  evening.  The methods use forced swimming test. The depression effect was seen from the immobility state when the mice were swimming. The test uses 30 male mice with weight of 20-30 grams. The mice were divided into 6 groups randomly, namely the negative control group morning cycle (PGA 1%), the negative control group night cycle (PGA) 1%), positive control group, morning cycle (fluoxetine
Dewi et al./Pharmacoscript, Volume 4 No, 1, Februari 2021, 1-8
Safitri.,et al./Pharmacoscript, Volume 1, No. 2, Februari 2019, 1-12
0.052 mg / 20 g BW of mice), night cycle positive control group (fluoxetine 0.052 mg / 20 g BW of mice), morning cycle test dose group (16.8 mg / 20 g BW of mice) and group cycle test dose night (16.8 mg / 20 g BW of mice). The results show the average immobility time values of the morning cycle are 105.44 second for negative control group, 69.64 second for positive control group and 72.71 second for dosage test group. Meanwhile the average immobility time values of the evening cycle are 119.42 second for negative control group, 193.02 second for positive control group and 82.62 second for dosage test group. Ethanolic extract of bitter melon (Momordica charntia L) has a better anti-depressant activity in the morning cycle than night cycle.
Keywords : antidepressant, circadian cycle, bitter melon

## PENDAHULUAN
Depresi  adalah  gangguan  mental umum  yang  ditandai  dengan  kesedihan, hilang keinginan dan kesenangan, penurunan kekuatan, perasaan bersalah, tidur terganggu, tidak  nafsu  makan  dan  kurang  konsentrasi. Prevalensi  gangguan  depresi  pada  populasi dunia adalah 3-8 % dengan 50% kasus terjadi pada usia produktif yaitu 20-50 tahun. World Health  Organization menyatakan  bahwa gangguan  depresi  berada  pada  urutan keempat penyakit di dunia.
Bioritme kerja obat (kronofarmakologi)  merupakan  berbagai fungsi  organ  yang  bergantung  kepada  hari atau musim menunjukan bahwa fungsi organ dipengaruhi penyimpanan bioritme .
Pengaruh yang paling besar terutama berasal dari    ritme  sirkadian  (ritme  siang  sampai malam  dalam  24  jam)  dimana    pemberian obat  pada  jam  berbeda  menyebabkan  efek yang berbeda (Mutschler, 1991).
Obat  antidepresan  sangat  penting diperhatikan  dalam  bagaimana  menentukan apakah  harus  di  minum  di  malam  hari  atau
pagi  hari,  agar  memberikan  efek  yang diinginkan  dan  meminimalkan  terjadinya efek  samping  yang  mungkin  terjadi.  Salah satu  contoh  obat  golongan  SSRI  adalah fluoxetine. Obat antidepresan golongan SSRI ini obat-obat dengan efek positif memperbaiki  mood  tetapi    umumnya memiliki  efek  samping  yang  serius  seperti Insomnia,  muntah,  dan  kelelahan.  (Yerkade & Siddiqui, 2017). Pemanfaatan bahan alam yang  bersifat  alami  telah  menjadi  pilihan utama  bagi  masyarakat,  salah  satu  tanaman yang memiliki aktivitas sebagai antidepresan adalah  tanaman pare ( Momordica Charantia L).   Penelitian  Fadhila  (2019) menyebutkan bahwa  dosis  uji  ekstrak  etanol  daun  pare (16,8  mg/20  g  BB  mencit)  dengan  metode FST memberikan aktivitas antidepresan yang sigfnifikan   akan tetapi pengujiannya hanya dilakukan  pada  pagi  hari,  oleh  karena  itu penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui lebih  lanjut  waktu  yang  tepat  penggunaan ekstrak etanol daun pare sebagai antidepresan berdasarkan siklus sirkadian.

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat-alat yang  digunakan  pada penelitian ini adalah  bejana maserasi, rotary evaporator (EYELA OSB-2100), timbangan analitik  sonde  oral,  spuit  1  mL,  kandang mencit, alat minum mencit, pellet
, stopwatch , water  bath ,  bejana  plasik  dan alat-alat  lain  yang  lazim  dipakai  di laboratorium.
Bahan-bahan  yang  digunakan  pada penelitian  ini  adalah  simplisia  basah  daun pare ( momordica charantia L) , etanol 96%, mencit  putih  jantan  galur  Swiss  Webster, Fluoxetine  20  mg,  pulvis  gummi  arabici, aquadest ,  kertas  saring whatman ,  serbuk seng,  besi  III  klorida  1%,  gelatin  1%, kloroform,  asam  sulfat,  Iodium dan  kalium iodida,  raksa  II  klorida dan  kalium  iodida, natrium klorida, asam klorida, amil alkohol, amonia, eter, natrium hidroksida dan vanilin asam sulfat.

## Jalannya Penelitian
1. Determinasi Tanaman
Bahan  yang  diteliti  dideterminasi  di Laboratorium  Teknologi  V  Sekolah  Ilmu Teknologi Hayati ITB.

## 2. Penyiapan Bahan Tanaman
Bahan uji berupa daun pare diperoleh dari  Desa  Setiajaya,  Kec.  Cibeureum, Kabupaten Tasikmalaya. Sebelum
digunakan,  bahan  dicuci  menggunakan  air mengalir,  kemudian  lakukan  sortasi  basah, lalu  dikeringkan  dibawah  sinar  matahari secara  tidak  langsung  dengan  ditutupi  kain hitam  sampai  kering.  Simplisa  kering disortasi lalu dibuat menjadi serbuk menggunakan alat penghalus simlpisia.

## 3. Ethical Clearance
Persetujuan  dan  perizinan  pengujian hewan  percobaan  diajukan  terlebih  dahulu kepada  Komisi  Etik  Penelitian  Kesehatan STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya.

## 4. Penyiapan Hewan Uji
Hewan  percobaan  yang  digunakan adalah  mencit  jantan  galur  Swiss-Webster dengan bobot 20-30 gram, sehat dan perilaku normal. Tikus ditempatkan di kandang kawat dalam  kondisi  standar  (suhu,  25  -  30  °  C, siklus terang 12 jam dan siklus gelap 12 jam) dan  dibiarkan  menyesuaikan  diri  selama  5 hari (Priatna et al., 2018).
5. Ekstraksi Etanol Daun Pare ( Momordica charantia L)
Serbuk simplisia daun pare sebanyak 500  gram  direndam  dalam  maserator menggunakan  pelarut  etanol  96%  sambil sesekali  di  aduk.  Setiap  24  jam  sekali dilakukan  pergantian  pelarut,  maserasi dilakukan 3 x 24 jam. Filtrat yang diperoleh dipekatkan menggunakan rotary evaporator dan  diuapkan  di  atas water  bath hingga
didapatkan  ekstrak  kental  etanol  daun  pare (Departemen  Kesehatan  RI,  2008).  Ekstrak kental  yang  dihasilkan  kemudian  ditimbang dan dihitung rendemennya.

## 6. Penapisan  Fitokimia  Simplisia  Dan Ekstrak
Penapisan  Fitokimia  simplisia  dan ekstrak dilakukan terhadap golongan senyawa metabolit sekunder alkaloid, flavonoid,  saponin,  tanin,  steroid/terpenoid dan kuinon (Farnsworth, 1996).
7. Uji  Aktivitas  Antidepresan  dengan metode Forced Swimming Test Metode  penelitian  yang  digunakan Forced Swimming Test dimana e fek depresi pada  mencit  diketahui  melalui  keadaan Immobility  pada  saat  mencit  direnangkan. Hewan  uji  yang  digunakan  yaitu  mencit jantan sebanyak 30 ekor dengan bobot badan 20-30 gram yang dibagi menjadi 6 kelompok secara  acak  yaitu  kelompok  kontrol  negatif siklus  pagi  (PGA  1%),  kelompok  kontrol negatif  siklus  malam  (PGA  1%),  kelompok kontrol  positif  siklus  pagi  (fluoxetine  0,052 mg/20  g  BB  mencit),  kelompok  kontrol positif siklus malam (fluoxetine 0,052 mg/20 g BB mencit), kelompok dosis uji siklus pagi (16,8  mg/20  g  BB  mencit)  dan  kelompok dosis  uji  siklus  malam  (16,8  mg/20  g  BB mencit).  Test  dilakukan  setelah  satu  jam pemberian  dosis  uji.  Mencit  dimasukan
kedalam  bejana  yang  berisi  air  kemudian waktu  imobilitas  dihitung    selama  jangka waktu 6 menit. Mencit dikeringkan kemudian dihangatkan (Buccafusco, 2009).

## Analisis Data
Data  yang  diperoleh  dihitung  dan dianalisis  secara  statistik  menggunakan s oftware SPSS 16.00 meliputi uji normalitas untuk  melihat  apaakah  data  terdistribusi normal  atau  tidak,  uji  homogenitas  untuk melihat  data  homogen  atau  tidak,  uji  anova dengan post hoc test uji LSD untuk melihat apakah  data  aktivitas  antidepresan  pada masing-masing kelompok berdasarkan siklus sirkadian memiliki perbedaan yang signifikan atau tidak (p<0,05)  dan uji paired sample  t  test  terhadap  kelompok  uji  siklus pagi  dan  malam  untuk  menentukan  waktu pemberian mana yang memberikan aktivitas antidepresan terbaik

## HASIL DAN PEMBAHASAN
1. Hasil Determinasi
Hasil determinasi menunjukkan bahwa  sampel  yang  digunakan  adalah tanaman  pare  ( Momordica  charantia L) dengan  familia  Cucurbitaceae  dengan  no determinasi 6684/I1.CO2 2/PL/2019
2. Hasil Pengolahan Simplisia dan
Ekstraksi Pengolahan simplisia basah menghasilkan  rendemen  simplisia  kering sebesar 8,3%. Sementara itu proses ekstraksi menghasilkan  rendemen  ekstrak  pekat sebesar 7,39 %. Kecilnya rendemen simplisia kering  diduga  dipengaruhi  oleh    kadar  air yang tinggi seperti  pada  penelitian  Sriutami (2008)  yang    menyatakan  bahwa  kadar  air yang  terkandung  dalam  pare  sebesar  91,20 %.

## 3. Penapisan Fitokimia
Penapisan  Fitokimia  dilakukan  pada simplisia  dan  ekstrak  dengan  tujuan  untuk mengetahui  kandungan  senyawa  metabolit sekunder  yang  terdapat  pada  simplisia  dan ekstrak secara kualitatif  (Hanani,  2015) dan hasilnya dapat dilihat  pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Penapisan Fitokimia Simplisia dan Ekstrak Daun Pare Metabolit sekunder Hasil Penapisan Simplisia Ekstrak Alkaloid - + Flavonoid + + Tanin - - Polifenol - - Saponin + + Kuinon + + Steroid + + Triterpenoid + +
Keterangan : + = Teridentifikasi -  = Tidak Teridentifikasi
Ekstrak mengandung semua senyawa golongan  metabolit  sekunder  yang  diujikan kecuali  tannin  dan  polifenol.  Senyawa- senyawa  yang  ada  pada  ekstrak  daun  pare diduga  sebagai  kontributor  utama  aktivitas antidepresan  terutama  alkaloid,  flavonoid dan triterpenoid (Puspitasari, 2017).

## 4. Ethical Clearance
Penelitian telah mendapatkan persetujuan  dan  perizinan  dari  Komisi  Etik Penelitian  Kesehatan  STIKes  Bakti  Tunas Husada
Tasikmalaya No.031/kepk- bth/06/2020.
5. Hasil  Uji  Aktivitas  Antidepresan

## Berdasarkan Siklus Sirkadian
Pengamatan  yang  dilakukan  pada metode Forced    Swimming  Test adalah immobility  time ,  efek  antidepresan  diukur melalui  lama immobility  time yang  lebih singkat  dibandingkan  dengan  kelompok  uji yang  tidak  diberikan  obat  antidepresan. Pengukuran immobility  time dinilai  ketika hewan  uji  tidak  bergerak  di  dalam  air  yang menandakan hewan tersebut depresi (Puspitasari, 2017). Semakin besar immobility  time maka  hewan  uji  semakin depresi  begitupun  sebaliknya  semakin  kecil immobility  time maka  hewan  uji  semakin tidak depresi (Nofri et al, 2013).

## Pharmacoscript Volume 4 No. 1 Februari 2021
Grafik    1. Rataan Immobility  Time (Detik) Pada siklus Pagi dengan metode FST
Hasil  data immobility  time pada metode Forced  Swimming test  dilakukan perbandingan  antara  perlakuan  pemberian sediaan  pagi  hari  dan  malam  hari.  Grafik  1 dan Grafik 2 merupakan penyajian aktivitas antidepresan berdasarkan siklus sirkadian.
Pada  Grafik  1  terlihat  bahwa kelompok  kontrol  positif  dan  dosis  uji memiliki  rataan immobility  time yang  lebih rendah  dibandingkan  dengan  kelompok control negative. Analisis statistik One-Way ANOVA  menunjukkan  adanya  perbedaan yang signifikan antar kelompok (p<0,05) dan setelah  dilakukan  uji  lanjutan  dengan  LSD terdapat perbedaan signifikan antara pasangan  kelompok  kontrol  negatif  dengan positif  dan  kelompok  kontrol  negatif  dan dosis uji. Sementara itu tidak ada perbedaan yang  signifikan  antara  kelompok  control positif dan dosis uji (p>0,05). Sehingga bisa dikatakan bahwa pada siklus pagi pemberian
ekstrak  etanol  daun  pare  memberikan aktivitas  antidepresan  yang  sama  kuat dengan fluoxetine.
Grafik    2. Rataan Immobility  Time (Detik) Pada siklus Malam dengan metode FST
Pada Grafik 2 Rataan immobility time dosis  uji  dan  kelompok  kontrol  positif memiliki nilai yang lebih rendah dibandingkan  kelompok  kontrol  negatif  dan setelah  dianalisis  statistik  dengan One-Way ANOVA  dan  LSD  hasilnya  sama  seperti pada siklus pagi. Artinya bahwa pada siklus malam  pemberian  ekstrak  etanol  daun  pare juga memberikan aktivitas antidepresan yang sama kuat dengan fluoxetine.
Uji Paired  Sample  T  test dilakukan untuk  mengetahui  apakah  ada  perbedaan signifikan  antara  kelompok  uji  siklus  pagi dan  kelompok  uji  siklus  malam.  Hasil pengujian menujukkan adanya perbedaan yg signifikan  (p<0,05)  antara  dosis  uji  siklus pagi dan dosis uji siklus malam. Jika dilihat dari  nilai  rataan immobility  time siklus  pagi yang lebih kecil dibandingkan siklus malam
105,44 69,64 72,71 0 20 40 60 80 100 120 Kontrol Negatif (-) Kontrol Positif (+)
Uji Dosis R ata Im m o b ill ity Ti m e ( d e tik) 119,52 93,02 85,62 0 20 40 60 80 100 120 140 Kontrol Negatif (-) Kontrol Positif (+) Uji Dosis R ata -r ata Im m o b ili ty ti m e (d et ti k)
maka  dapat  dikatakan  bahwa  pemberian ekstrak  etanol  daun  pare  lebih  efektif  pada siklus pagi.
Obat-obat  antidepresan  termasuk yang  bersumber  dari  bahan  alam  harus diperhatikan  pemberiannya  yang  efektif berdasarkan siklus sirkadian mempertimbangkan  proses  ritme  biologis karena  senantiasa  berputar  seiring  kegiatan rutin  yang  dikerjakan.  Ritme  biologis  ini berjalan  kontinu  dan  akan  berubah  dengan adanya  perubahan  pola  kegiatan  dan pengaruh  dari  luar  (Prabowo,  2005). Pemberian  ekstrak  etanol  daun  pare  yang lebih  baik  pada  pagi  hari  menunjukkan bahwa  aktivitas  dan  kondisi  pada  waktu  ini memberikan    efek  antideperesan  yang maksimal  berkaitan  dengan  fungsi  saluran cerna.  Pengosongan  lambung  50%  lebih cepat terjadi pada pagi hari sehingga ekstrak etanol daun pare tidak terganggu oleh adanya aktivitas enzim yang mencerna makanan.

## KESIMPULAN
Ekstrak etanol daun pare ( Momordica charantia L) memberikan aktivitas antidepresan yang lebih baik pada siklus pagi hari dibandingkan malam hari.
Perlu  dilakukan  riset  lanjutan  untuk mengetahui secara pasti pengaruh siklus pagi
hari terhadap ritme biologis berkaitan dengan efek antidepresan ekstrak etanol daun pare.

## DAFTAR PUSTAKA
Buccafusco, J. (2009). Methods of Behavior Analysis  in  Neuroscience,  2nd  ed. London:  Taylor  &  Francis  Group, LLC , 169-329.
Departemen Kesehatan RI. (2008). Farmakope Herbal Indonesia .
Jakarta : Departemen Kesehatan RI. Fadhila,  Y.A.  (2019). Uji  Aktivitas  Ekstrak Etanol  Daun  Pare  (Momordica Charantia  L.)  Sebagai  Antidepresan Terhadap Mencit Putih Jantan Galur Swiss  Webster  Dengan  Metode Forced  Swimming  Test  (FST),  Tail Suspension  Test  (TST)  Dan  Open Field  Test  (OFT) (Tesis  Sarjana). STIKes BTH, Tasikmalaya.
Farnsworth,  N.  R.  (1996)  :  Biological  and Phytochemical  Screening  of  Plants,
J.Pharm Sci ., 53(3) , 243-268 Hanani,  E.  (2015). Analisis  fitokimia .
Jakarta: Buku Kedokteran EGC.
Mutschler E., Nat.R. (1991). Dinamika Obat . Bandung: ITB.
Nofri, P. K., Widdhi, B., & Weny W. (2013). Uji  Efek  Antidepresan  Ekstrak Metanol  Jamur  Tlethong  ( Psilocybe cubensis )  pada  Tikus  Putih  Jantan

## Pharmacoscript Volume 4 No. 1 Februari 2021
( Rattus  norvegicus ):  ditinjau  dari Immobility  Time  dengan  Metode Forced  Swim  Test. Jurnal  Ilmiah
Farmasi – UNSRAT , 2(03) , 29-33.
Prabowo,  T.  (2005).  Pengaruh Jetlag dan
Cara  Mengatasi  Tinjauan  Fisiologi.
Medikora, 1(1) , 89-101
Priatna, M., Suhendy, H., & Sukmawan, Y.P.
(2018).  Antidepressant  Activity  of
Some  Fractions  of  the  Basil  Leaves
( Ocimum basilicum L.) on the Swiss
Webster  Male  Mice. Jurnal  Ilmu
Kefarmasian  Indonesia , 16(2), 188-
193
Puspitasari,  L.  (2017). Ekstrak Etanol  Daun
Pandan Wangi ( Pandanus
amaryllifolius R.)  10%  Menurunkan
Immobility  Time dan  Kadar  Kortisol
Tikus  Jantan  Galur  Wistar  yang Depresi. Intisari  Sains  Medis,  8  (1) ,
24-30.
Sriutami, S. (2008). Efek Pemberian Tepung
Buah Pare (Momordica charantia l.) Terhadap Profil Lemak Serum Darah Tikus  (Rattus  norvegicus) (Tesis
Sarjana) . Scientific  Repository  IPB.
(1526).
Yerkade, V. & Siddiqui, R.A. (2017). A Drug
Utilization Study Of Antidepressant Drug In A Tertiary Care Hospital.
International
Journal  of  Basic  &  Clinical Pharmacology, 6(6) , 1405-1409 .