Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
PENGARUH PEMBERIAN KOMBINASI EKSTRAK BUAH MENGKUDU (Morinda citrifolia L.) DAN KUNYIT (Curcuma longa) TERHADAP HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS WISTAR YANG DIINDUKSI ALLOXAN
Pelastri Rahayu*, Retno Hestiningsih, Martini Martini, Dwi Sutiningsih Bagian Epidemiologi dan  Penyakit Tropik, Fakultas Kesehatan Masyarakat,
Universitas Diponegoro
*Email: pelastrirahayu@gmail.com
Artikel diterima: 04 Juni 2020; Disetujui: 29 September 2020 DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v5i2.513

## ABSTRAK
Prevalensi DM pada riskesdas 2018 menurut konsensus Perkeni 2015 lebih tinggi  dibandingkan  menurut  konsensus  perkeni  2011  yaitu  sebesar  10,9%. Penyakit dapat berkembang menjadi diabetes nefropati yang merupakan salah satu komplikasi mikrovaskuler pada penderita diabetes berkembang sekitar 30% pada penderita  DM  tipe  I  dan  sekitar  40%  pada  penderita  DM  tipe  II.  Ekstrak  kunyit memiliki efek antioksidan dan antiinflamasi untuk mencegah perkembangan buruk penyakit  diabetes  nefropati.  Penelitian  ini  mengamati  pengaruh  pemberian kombinasi  ekstrak  mengkudu  dan  kunyit  terhadap  histopatologi  ginjal  yang diinduksi aloksan. Sebanyak 25 tikus yang dibagi menjadi 5 kelompok perlakuan, yaitu kelompok PI (dosis ekstrak 250 mg/kgBB), kelompok PII (dosis ekstrak 500 mg/kgBB), kelompok PIII (dosis ekstrak 750 mg/kgBB), kelompok kontrol postif (pemberian glibenklamid) dan kelompok kontrol negatif (tidak diberi perlakuan). Penelitian  menggunakan  rancangan  penelitian Post  Test  Only  Group. Persentase penurunan  glukosa  darah  tertinggi  pada  kelompok  PI  sebesar  56,11%  dan penurunan terendah pada kelompok PIII sebesar  24,12% dengan p= 0.012. Hasil penelitian  tidak  berdasarkan  jumlah  dosis  pemberian  ekstrak.  Hasil  pengukuran berat badan tikus dan diameter glomerulus tidak dipengaruhi tingkat glukosa darah dengan  p=  0.700  untuk  berat  badan  dan  p=0.187  untuk  hasil  pengukuran glomerulus.
Kata kunci: Mengkudu, Morinda citrifolia L., kunyit, Curcuma longa, Diabetes Mellitus, Diabetik nefropati

## ABSTRACT
The  prevalence  of    DM  in  Riskesdas  in  2018  according  to  the  Perkeni consensus in 2015 is higher than according to the Perkeni consensus in 2011, the prevalence  was10.9%.  The  disease  can  develop  into  diabetes  nephropathy, Increased  prevalence  of  diabetic  nephropathy  directly  proportional  with  an increase  in  diabetes  prevalence.  Diabetic  nephropathy  is  a  microvascular complication in diabetics that develops around 30% in patients with type I DM and about 40% in patients with type II DM. Turmeric extract has antioxidant and anti-
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
inflammatory effects to prevent the bad development of diabetes nephropathy. This study looked at the effect of giving a combination of noni and turmeric extract on histopathology of alloxan-induced renal rats. A total of 25 mice were divided into 5 treatment groups, namely the PI group (250 mg / kgBB extract dose), PII group (500 mg / kgBB extract dose), PIII group (750 mg / kgBB extract dose), positive control  group  (glibenklamid)  and  negative  control  group  (without  extract  and glibenklamid).  The  study  used  Post  Test  Only  Group.  The  highest  percentage decrease in blood glucose in the PI group was 56.11% and the lowest decrease in the PIII group was 24.12% with p = 0.012. The results of the study were not based on the number of extract doses. The measurement results of rat body weight and glomerular diameter were not affected by blood glucose level with p = 0.700 for body weight and p = 0.187 for glomerular measurement results.
Keywords: Noni,  Morinda  citrifolia  L.,  turmeric,  Curcuma  longa,  Diabetes Mellitus, Diabetic nephropathy

## PENDAHULUAN
Diabetes melitus (DM)
merupakan  gangguan  metabolisme tubuh  berupa  sekresi  insulin  dalam tubuh  yang  kurang  maksimal  dan selanjutnya  dapat  memicu  resistensi tubuh  terhadap  insulin  (Watkins, 2003)(Susanti  &  Bistara,  2018). Diabetes  melitus  tipe  I  dan  diabetes melitus tipe II memiliki faktor risiko berbeda  antara keduanya (Touchette, 2005).
Penderita  diabetes  di  seluruh dunia pada tahun 2015 sebanyak 415 juta  orang  dewasa,.  Jumlah  tersebut diperkirakan  akan  meningkat  pada tahun  2040  menjadi 642  juta penderita  diabetes (WHO,  2016).  Di Provinsi  Jawa  Tengah  penyakit diabetes  mellitus  menempati  urutan
kedua  setelah  penyakit  Hipertensi yaitu  dengan  presentase  sebesar 16,42% atau sebanyak 119.400 orang menderita diabetes (Dinas Kesehatan Provinsi Jawa Tengah, 2016) .
Diabetes nefropati, berkembang sekitar 30% pada penderita DM tipe I dan  sekitar  40%  pada  penderita  DM tipe  II  (Alicic et  al ,  2017). Diabetik nefropati  atau ditandai oleh ekskresi kadar albumin tetap pada urin 30-300 mg/24 jam setelah 3-6 bulan (Reutens, 2013). Peningkatan prevalensi  diabetik  nefropati  sejalan dengan peningkatan prevalensi diabetes. (Alicic et al ., 2017).
Histopatologi glomerulus ginjal pada  pasien  penderita  nefropati diabetik mengalami hipertrofi dengan penebalan  pada  membran  basal
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
glomerulus  dan  perluasan  mesangial dengan akumulasi dari protein matriks ekstraseluler (Schrijvers et al , 2004).
Penatalaksanaan penyakit diabetes  mellitus  diperlukan  untuk mencegah terjadinya komplikasi vaskuler dan neuropati. (Haque et al , 2013).  Interaksi  pada  penggunaan obat  herbal  hampir  sama  dengan interaksi  penggunaan  obat  (Gupta et al ,  2017).  Pengobatan  Mengkudu untuk tikus diabetes secara signifikan mengurangi  kadar  HbA1c  yang menandakan  potensi  perbaikan  dari ekstrak  buah  selama  hiperglikemia.
Kinerja antidiabetes ekstrak mengkudu dikaitkan dengan peningkatan insulin plasma dan kadar C-peptida, menghipotesiskan
aktivitas  stimulan  insulin  ekstrak mengkudu. Peningkatan kadar insulin dan  C-peptida  dalam  penelitian  ini
menunjukkan bahwa ekstrak mengkudu merangsang sekresi insulin  dari  sel-β  yang  diregenerasi (Haque et  al ,  2013). Curcumin  telah terbukti  mencegah  stres  oksidatif pada  beberapa  tipe  sel  termasuk  sel endotel  dan  pada  beberapa  tipe  sel ganas,  selain  itu  curcumin  efektif
dalam mengurangi transkrip p300 dan kadar  protein  dalam  ginjal  diabetes dan  mencegah  translokasi  nuclear NF-B (Zin et al , 2002).

## METODE PENELITIAN

## Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimen dengan rancangan Post  Test  Only  Control Group.

## Alat dan Bahan
Alat-alat penelitian yang digunakan  yaitu  kandang  untuk pemeliharaan  tikus,  tempat  makan dan minum tikus, glucometer dengan merk  yang  digunakan Gluco  Dr. , spuit,  disposable  syringe  1  ml, timbangan  analitik,  gelas  ukur  100 ml, Erlenmeyer 50 ml, sarung tangan, kertas saring, alat bedah, objek glass, deck  glass,  botol  organ,  mikrotom dan mikroskop leica dm750.

## Subjek penelitian
Tikus  dibagi  menjadi  lima kelompok perlakuan dengan lima kali ulangan yang terdiri dari kelompok PI (ekstrak dosis 250 mg/dL), kelompok PII  (ekstrak  dosis  500  mg/dL), kelompok  PIII  (ekstrak  dosis  750 mg/dL),  kelompok  kontrol  positif
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
(glibenklamid) dan kelompok kontrol negatif  (aloksan).  Kadar  glukosa darah  diamati  selama  21  hari. Parameter  yang  diukur  adalah  kadar glukosa  darah,  berat  badan,  serta histopatologi ginjal.

## Cara Kerja Perlakuan
Injeksi aloksan  monohidrat secara  intraperitonial  dengan  dosis 120 mg/kg BB yang dilarutkan dalam larutan NaCl 0.5% pada 25 ekor tikus. Pengamatan  terhadap  respon  kadar glukosa  darah  dilakukan  selama  3 hari  karena  pada  fase  antara  24  jam
hingga  48  jam  setelah  dilakukan injeksi  aloksan  merupakan  fase terakhir  dari  respon  glukosa  darah yang  disebut  sebagai  fase  permanen hiperglikemik  (Macdonald et  al , 2018)(Elangovan et al , 2019). Pengambilan darah tikus
menggunakan  alat GlucoDr pada bagian  ekor  lateralis  karena  hanya memerlukan  sedikit  darah  yaitu sekitar  0.3-1µl.  pengukuran  berat badan dilakukan dua kali, yaitu pada awal sebelum perlakuan dan pada saat akhir perlakuan.
Tabel 1. Pengaruh kombinasi ekstrak mengkudu dan kunyit terhadap kadar glukosa darah, berat badan dan glomerulus ginjal. Kelompok Perlakuan Persentase Kadar Glukosa Darah Persentase Pengukuran Berat Badan Diameter Glomerulus (µm) PI (250 mg/ kg BB) 56.11 a 0.45 98.6±7.02 PII (500 mg/ kg BB) 42.17 ac 13.53 108.41±14.16 PIII (750 mg/ kg BB) 24.12 b 3.2 112.6±7.505 K(+) 38.01 ad 9.73 99.3±17.58 K(-) 35.03 bcd 7.52 123±28.69
Keterangan: Huruf kecil yang berbeda dan mengikuti angka menyatakan perbedaan pada α = 0.05 dengan Anova
Euthanasia  dilakukan  dengan mematahkan leher tikus, cara tersebut dipilih  untuk  menghindari  paparan bahan  kimia  ke  dalam  metabolisme tikus yang mungkin dapat mempengaruhi hasil penelitian.
Ginjal  yang  diambil  difiksasi  ke
dalam buffer formalin 10% kemudian dihidrasi dalam larutan etanol bertingkat. Pemotongan jaringan ginjal  dilakukan  dengan  ketebalan 4µm dan  dilakukan  pewarnaan dengan  menggunakan  hematoxylin eosin, kemudian dilakukan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
pengamatan  dengan  menggunakan mikroskop binokuler Leica DM 750.

## Analisis Data
Analisis data dilakukan dengan menggunakan  uji  statistik one  way ANOVA .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Setelah kriteria
diabetes
tercapai,  tikus  diberi  perlakuan dengan memberikan kombinasi ekstrak mengkudu dan kunyit selama 15  hari.  Penurunan  kadar  glukosa darah  pada  kelompok  PI  sebesar 56,11% dan penurunan terendah pada kelompok PIII sebesar 24,12%. Hasil analisis Post  Hoc dengan  p  <  0.05 diperoleh  hasil  bahwa  dosis  ekstrak yang  bertambah  tidak  berpengaruh pada penurunan kadar glukosa darah.
Persentase  peningkatan  berat badan  tikus  dapat  dilihat  dengan peningkatan  terkecil  pada  kelompok PI  yaitu  sebesar  0.45  %  dan peningkatan  berat  badan  tertinggi pada  kelompok  PII  dengan  nilai persentase sebesar 13.53 %..
Hasil pengukuran diameter ginjal  tikus  diperoleh  hasil  rata-rata diameter  terbesar  adalah  kelompok K(-)  dan  rata-rata  diameter  terkecil
adalah kelompok PI dengan perlakuan  pemberian  dosis  ekstrak 250  mg/kg  BB.  Rata-rata  nilai diameter  kelompok  K(-)  adalah  123 µm  dan  nilai  diameter  kelompok  PI adalah 98.6 µm.
Gambar 1. Histopatologi ginjal tikus Keterangan:  K(-)  =  Kontrol  negatif, K(+) = kontrol positif, PI = Kelompok perlakuan  dosis  ekstrak  250  mg/Kg BB, PII = Kelompok perlakuan dosis ekstrak  500  mg/Kg  BB,  PIII  = Kelompok  perlakuan  dosis  ekstrak 750 mg/Kg BB
= Glomerulus ginjal
Penurunan  kadar  glukosa  tidak berdasar  pada  jumlah  dosis  yang
PI PII PIII K+ K-
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
diberikan. Herba  drug  interaction
(HDI) dapat  berinteraksi  secara aditif/sinergis atau
antagonis.
Pencampuran  dari  dua  atau  lebih senyawa  aktif  dapat  berpotensi menyebabkan interaksi kimia
farmakologis . Interaksi tersebut dapat mengubah  efek  dari  salah  satu  agen yang mengarah pada penurunan atau peningkatan  efektivitas  bahan  herbal (Haque et al , 2013).
Penurunan kadar glukosa darah dipengaruhi  oleh  beberapa  faktor. Gangguan metabolisme glukosa adalah  perubahan  patologis  yang paling  penting  dan  mendasar  pada diabetes,  sehingga  kadar  glukosa darah  adalah  indikator  utama  untuk mengevaluasi  keberhasilan  model dan efektivitas obat (JK et al , 2001).
Pada  penelitian  yang  telah dilakukan  oleh  Mainul  Haque  dan U.S  Mahadeva  Rao  menyatakan bahwa  pemberian  ekstrak  buah mengkudu  dengan  dosis  300  mg/kg BB  menunjukkan  respon  positif dibandingkan kelompok kontrol tanpa  pemberian  ekstrak  mengkudu. Kadar glukosa darah pada kelompok hewan  uji  yang  diberikan  ekstrak mengkudu  sebesar  112.02  mg/dL,
sedangkan  kelompok  kontrol  tanpa pemberian  ekstrak  mengkudu  adalah 245.16  mg/dL.  Khasiat  anti-diabetes ekstrak  buah  mengkudu  dikaitkan dengan  peningkatan  insulin  plasma dan kadar
C-peptida, menghipotesiskan  aktivitas  stimulan insulin  ekstrak  buah  mengkudu. Peningkatan  kadar  insulin  dan  C- peptida dalam penelitian ini menunjukkan  bahwa  ekstrak  buah mengkudu merangsang sekresi insulin  dari  sisa  dan  dari  sel-β  yang diregenerasi (Haque et al , 2013).
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Li Qing Su, dkk yang melibatkan    hewan  uji  sebanyak  30 ekor  tikus  dibagi  dalam  2  kelompok yaitu kelompok model dan kelompok yang  diberikan  perlakuan  ekstrak kurkumin diperoleh hasil bahwa pada minggu  ke-4  FBG  ( Fasting  Blood Glucose )  kelompok  kurkumin  pada menit ke 30, 60 dan 120 lebih rendah dibandingkan dengan kelompok kontrol. Pada minggu ke-4 menit 120 FBG  kelompok  kurkumin  adalah 10.91  mmolL -1 ,  sedangkan  untuk kelompok  kontrol  13.78  mmolL -1 . Begitu pula dengan minggu ke-8 FBG pada  kelompok  kurkumin  lebih
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
rendah  dibanding  dengan  kelompok kontrol (Su et al , 2017). Zat curcumin dapat  menurunkan  kadar  glukosa darah dan kadar hemoglobin glikosilasi  yang  diamati  pada  dosis 0.08  g  curcumin/  KG  BB  yang diberikan pada tikus  diabetes selama 3 minggu (Wickenberg et al , 2010).
Membran  basal  pada  bagian glomerulus (panah biru) pada kontrol negatif  mengalami  penebalan  dan terdapat peningkatan diameter kapiler dalam  sel  ginjal,  sedangkan  pada kelompok  lain  Struktur  membran basal  glomerulus  dan  tubular  pada kelompok  PI  secara  umum  tampak normal dan tidak mengalami penebalan dibandingkan dengan kelompok  kontrol  (-).  Salah  satu tahapan  nefropati  diabetik  adalah gangguan struktural di ginjal, terutama  di  glomerulus.  Pembesaran area mesangial, dan penebalan membran  dasar  glomerulus  dan tubular  diamati.  Glomeruli  atubular adalah di antara perubahan histopatologis yang dapat dilihat pada nefropati. Selain pembesaran mesangial,  juga  disebabkan  karena peningkatan produksi matriks
ekstraseluler, nodul eosinofilik
sentral hiposeluler juga dapat diamati setelah nefropati parah (Ulubay et al , 2019).Kurkumin secara historis dikenal  sebagai  pengobatan  untuk proses  inflamasi,  Cedera  ginjal  yang dimediasi makrofag memainkan peran  penting  dalam  perkembangan DN,  berdasarkan  penelitian  Li-Na Sun, et  al menunjukkan  bahwa jumlah  makrofag  (sel  positif-ED-1) dalam  glomeruli  berkurang  secara signifikan dengan pengobatan kurkumin (Sun et al , 2014).

## KESIMPULAN
Pemberian  kombinasi  ekstrak buah  mengkudu  dan  kunyit  mampu menurunkan  kadar  glukosa  darah pada  tikus  hiperglikemik  dengan dosis  optimal  250  mg/kg  BB penurunan sebesar 56.11%. kombinasi  ekstrak  buah  mengkudu yang  diberikan  pada  kelompok perlakuan  dapat  mencegah  resiko kerusakan histopatologi ginjal.

## DAFTAR PUSTAKA
Alicic,  R.  Z.,  Rooney,  M.  T.,  & Tuttle,  K.  R.  (2017).  Diabetic Kidney Disease, 12 (18). Dinas  Kesehatan  Provinsi  Jawa Tengah. (2016). Profil Kesehatan Provinsi Jawa
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
Tengah  Tahun  2016 (Vol.
3511351). Semarang: Dinas
Kesehatan Provinsi Jawa Tengah. Elangovan, A., Subramanian, A., & et al.  (2019).  Antidiabetic  and hypolipidemic  efficacy  of  skin and seed extracts of Momordica cymbalaria  on  alloxan  induced diabetic model in rats. Journal of Ethnopharmacology , 241 (May), 111989.
Gupta, R. C., Chang, D., & Namm, S. et al. (2017). Interactions Between Antidiabetic Drugs and Herbs : an Overview of Mechanisms  of  Action  and Clinical Implications, 9 (59).
Haque, M., & Rao, U. S. M. (2013).
Modulatory Effect of Mengkudu Fruit  on  the  Activities  of  Key
Enzymes  of  Glucose  Synthesis and  Utilization  Pathways  of Diabetic Induced Rats, 7 (1).
JK,  G.,  &  V,  V.  (2001).  Shifting Paradigm :  From  Conventional
An  Introduction  on  Traditional Indian Medicines, 5 (1), 28–32.
Macdonald, O., Mohammed, A., & et al. (2018). Alloxan-induced diabetes  ,  a  common  model  for evaluating  the  glycemic-control potential of therapeutic compounds  and  plants  extracts in experimental studies. Medicina , 53 (6), 365–374.
Reutens, A. T. (2013). Epidemiology of  Diabetic  Kidney  Disease, 97 (1).
Schrijvers, B. F., Vriese, A. S. De, & Flyvbjerg,  A.  (2004).  From Hyperglicemia to Diabetic Kidney  Disease:  The  Role  of Metabolic, Hemodynamic, Intracellular Factors and Growth
Factors/Cytokines, 25 (6).
Su, L., Wang, Y., &  Chi,  H. (2017). Effect  of  curcumin  on  glucose and lipid metabolism , FFAs and TNF-  a  in  serum  of  type  2 diabetes  mellitus  rat  models. Saudi  Journal  of  Biological Sciences , 24 (8).
Sun,  L.,  Yang,  Z.,  &  et  al.  (2014). International Immunopharmacology Curcumin prevents diabetic nephropathy against in fl ammatory response via reversing  caveolin-1  Tyr  14 phosphorylation  in  fl  uenced TLR4  activation. International Immunopharmacology , 23 (1),
236–246.
Susanti,  &  Bistara,  D.  N.  (2018).
Hubungan  Pola  Makan  Dengan Kadar Gula Darah Pada
Penderita  Diabetes  Mellitus,
3 (1).
Touchette,  N.  (2005). American Diabetes  Association  Complete
Guide to Diabetes . (R. Lanning, Ed.)  (4th  Editio).  Alexandria, Virginia 2231: American Diabetes Association. Ulubay, M., Alkan, I., & et al. (2019). Acta Histochemica The protective e ff ect of curcumin on the  diabetic  rat  kidney :  A stereological , electron microscopic and immunohistochemical study. Acta Histochemica , (September).
Watkins,  P.  J.  (2003). ABC  Of Diabetes (5th ed.). BMA House, Tavistock Square, London
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 5(2), Oktober 2020, 319-327 p-ISSN: 2502-647X; e-ISSN: 2503-1902
WC1H  9JR:  BMJ  Publishing Group Ltd.
WHO.  (2016). Diabetes  Fakta  dan Angka .
Wickenberg,  J.,  Ingemansson,  S.  L., &  Joanna  Hlebowicz.  (2010). Effects of Curcuma longa (Turmeric) on Postprandial
Plasma  Glucose  and  Insulin  in
Healthy Subjects, 9 (43). Zin, Z. M., Hamid, A. A., & Osman,
A. (2002). Antioxidative Activity of Extracts from Mengkudu  (  Morinda  citrifolia
L.) Root, Fruit and Leaf, 78 .