Perubahan Histologi dan  Fisiologi  Latisifer pada Tanaman Karet ( Hevea brasiliensis
Muell Arg.) yang diberi  Asam Jasmonat dan Asam Naftalen Asetat Eksogen
Histological and Physiological Changes of Rubber Tree ( Hevea brasiliensis Muell Arg.) Laticifere under Exogenous Jasmonic Acid and Naphtalene Acetic Acid Treatments
Radite Tistama 1* , Vahnoni Lubis 2 , Isnaini Nurwahyuni 2
1 Balai Penelitian Sungei Putih, Sungei Putih, Pusat Penelitian Karet Galang Deliserdang Sumatera Utara
2 Program Studi Biologi, FMIPA Universitas Sumatra Utara, Jl. Bioteknologi No.1 Kampus USU, Padang Bulan, Medan, Sumatera Utara
* Email: raditetistama@gmail.com
Diterima 7 Februari 2017/Disetujui 25 Februari 2017

## ABSTRAK
Produktivitas tanaman karet tergantung pada faktor dominan seperti jumlah latisifer dan aktivitas metabolism lateks. Perkembangan histologi dan fisiologi latisifer tanaman karet dipengaruhi oleh jenis klon dan interaksi antara  zat  pengatur  tumbuh  eksogen  dengan  klon.  Perubahan  histologi  dan  fisiologi  latisifer Hevea brasiliensis diteliti  dengan  aplikasi  asam  jasmonat,  asam  naftalen  asetat  dan  kombinasi  keduanya  pada permukaan  tunas  lateral  muda.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  zat  pengatur  tumbuh  menginduksi jumlah pembuluh kateks tetapi mengurangi perkembangan tebal kulit dan ukuran sel latisifer. Kombinasi JA dengan NAA paling efektif menginduksi jumlah pembuluh lateks pada klon metabolisme tinggi PB 260. Zat pengatur  tumbuh  memacu  perubahan  aktivitas  fisiologi  pada  klon  metabolisme  rendah  IRR  42.  Analisis histologi kulit dan fisiologi lateks pada tunas muda tanaman karet dapat digunakan sebagai pendeteksi potensi produktivitas dan sifat metabolisme tanaman karet.
Kata kunci : Latisifer Hevea, asam jasmonat, asam naftalen asetat, metabolisme lateks

## ABSTRACT
The  rubber  plant  productivity  is  depend  on  the  dominant  factors  such  as  laticifere  number  and  latex metabolism activity. The histological and physiological development of rubber plant laticifere are affected the type  of  clones  and  interaction  between  exogenous  plant  growth  regulator  with  clones.  The  changes  of histological and physiological laticiferes of Hevea brasiliensis was investigated by application JA, NAA and their combination to the surface of the young lateral buds. The result showed, plant growth regulators induced the  number  of  laticifere,  but  decreased  of  the laticifere  cell  size  and  bark  thickness.  The combination  of JA with NAA was the most effective to  induced laticifere number in high metabolism clone PB 260. The plant growth regulators led to change physiological activity in low metabolism clones IRR 42. The histological and physiological analysis of latisifer could be used to early detection of productivity and characters of rubber tree metabolism.
Keywords : Hevea laticifere, jasmonic Acid, naphtalene acetic acid, latex metabolism

## PENDAHULUAN
Latisifer  merupakan  sel-sel  khusus  untuk mensintesis  koloid  yang  disebut  dengan  lateks. Latisifer  dijumpai  sedikitnya  pada  20  kelompok tanaman Angiospermae.  Fungsi jaringan ini adalah sebagai  alat  pertahanan  dengan  menghasilkan
lateks.  Lateks  mengandung  berbagai  jenis  protein- protein pertahanan terhadap penyakit (Breton et al. 1997; Daruliza et al. 2011).. Latisifer tanaman karet secara  dinamis  dibentuk  oleh  kambium  dengan jumlah  cincin  latisifer  lateks  yang  bervariasi tergantung  klon  (Woelan  &  Sayurandi  2009). Latisifer  yang  terdiferensiasi  lebih  awal  akan
didesak ke arah luar oleh sel-sel latisifer yang baru dan  pada  umur  tertentu  latisifer  akan  mengalami lignisasi dan rusak (Sando et al . 2009).
Perakitan  klon-klon  karet  unggul  dilakukan dengan  menggabungkan  beberapa  karakter  genetik yang  menentukan  produksi  karet  yaitu  ketebalan kulit,  jumlah  latisifer  dan  diameter  latisifer  serta aktivitas  metabolisme  karet  (Woelan  &  Sayurandi 2009). Selain faktor genetik, produktivitas tanaman karet juga dipengaruhi oleh faktor-faktor lingkungan  (Daslin et  al. 2009).  Beberapa penelitian  mengupayakan  meningkatkan  jumlah latisifer  pada  tanaman  karet  pada  berbagai  tingkat umur  tanaman  karet.  Hoa  &  Wu,  (2000) melaporkan  perlakuan  asam  jasmonat  (JA)  pada kulit  tunas  lateral  muda  meningkatkan  2-4  unit lingkar latisifer. Sementara itu Asam naftalen asetat (NAA) diketahui menginduksi penebalan kulit pada tanaman karet muda (Koryati, 2004). Rahayu et al . (2016)  juga  melaporkan  bahwa  perlakuan  NAA meningkatkan  diferensiasi  sel  latisifer  tetapi  tidak mempercepat pemulihan kulit.
Kombinasi  JA  dengan  NAA  diharapkan dapat meningkatkan tebal kulit dan jumlah latisifer tanaman  karet.  Pengaruh  kombinasi  JA  dengan NAA terhadap perkembangan latisifer dan perubahan  fisiologi  lateks  antar  klon  karet  yang sifat metabolismenya yang berbeda belum diketahui.  Penelitian  ini  betujuan  untuk  menguji peran  JA  dan  NAA  dalam  menginduksi  tebal  kulit dan  diferensiasi  latisifer,  serta  perubahan  fisiologi pada  klon  karet  PB  260  (metabolisme  tinggi)  dan IRR 42 (metabolisme rendah).

## METODE PENELITIAN
Bahan  yang  digunakan  adalah  tunas  lateral tanaman Hevea  brasiliensis Muell  Arg  umur  50 hari,  klon  jenis  IRR  42  dan  PB  260.  Bahan  kimia yang  digunakan  antara  lain  JA,  NAA, whatman , parafilm ,  anthrone,  TCA  2,5%,  KH 2 PO 4 ,  H 2 SO 4 , heptamolibdat,  NaCl  0,9%,  HNO 3 ,  formalin,  asam asetat,  akuades,  alkohol  70%,  alkohol  absolut, sudan 3, aseton dan gliserin.

## Perlakuan JA dan NAA pada Tunas Lateral
Entres  umur  4  tahun  masing-masing  klon IRR  42  dan  PB  260  dipangkas  cabangnya  pada
jarak  10  cm  dari  pangkal  cabang.  Perkembangan tunas  dikontrol  setiap  minggu  dari  muncul  tunas lateral  hingga  tunas  berumur  50  hari.  Percobaan menggunakan  Rancangan  Petak  Tersarang  dengan tiga  ulangan.  Perlakuan  terhadap  tunas  lateral menggunakan  metode  Hao  dan  Wu  (2000)  yang telah  dimodifikasi.  Tunas  lateral  berumur  50  hari dari setiap  klon dibalut dengan whatman sepanjang 3  cm  yang  telah  ditetesi  0,5  ml  larutan  JA  1000 ppm,  larutan  NAA  1000  ppm  dan  kombinasi larutan JA  dengan  NAA 1000 ppm.

## Analisis Histologi
Pembuatan  preparat  jaringan  mengikuti metode Gomez et al (1972) yang telah dimodifikasi dan  pewarnaan  menggunakan  Sudan  III  selama  30 menit.  Sampel  kulit  batang  diiris  secara  melintang menggunakan silet dan diamati di bawah mikroskop.  Kulit  dari  masing-masing  perlakuan diiris  secara  melintang  dengan  cara  irisan  tangan ( free hand section ). Tebal kulit dan jumlah latisifer dihitung  di  bawah  mikroskop  cahaya  pada perbesaran  4  X  10.  Jumlah  latisifer  dihitung  pada penampang  preparat  sepanjang  500  µm 2 yang dilakukan  pada  3  titik.  Latisifer  yang  terhitung dicatat dan dihitung rata-ratanya. Diameter latisifer dihitung  pada  penampang  preparat  sepanjang  500 µm 2 yang dilakukan pada 3 titik.

## Analisis Fisiologi
Latek  diambil  dengan  cara  melukai  kulit sepanjang  ½  lingkaran  batang.  Lateks  disimpan  di dikumpulkan  di  dalam  botol  plastik  kemudian disimpan  di  dalam  kotak  es.  Lateks  sebanyak  1ml dimasukan  ke  dalam  9  ml  larutan  2,5% trichloric acid (TCA). Koagulan lateks diekstrak menggunakan  batang  gelas  untuk  mengeluarkan serumnya.  Serum  disimpan  pada  suhu  4 O C  hingga digunakan.

## a. Analisis Kandungan Sukrosa
Analisis kandungan sukrosa lateks dilakukan dengan  mereaksikan  150  µL  sampel  serum  lateks dengan  350  µL  2,5%    TCA  dan  3  ml  pereaksi anthrone  kemudian  divorteks.  Sampel  dimasukkan ke  dalam waterbath pada suhu  95 O C  selama  15 menit,  dan  direndam  ke  dalam  air  biasa  hingga
Perubahan Histologi dan  Fisiologi  Latisifer pada Tanaman Karet (Hevea brasiliensis Muell Arg.) yang diberi  Asam Jasmonat dan Asam Naftalen Asetat Eksogen
dingin.  Konsentrasi  sukrosa  dalam  sampel  diukur dengan  spektrofotometer  pada  panjang  gelombang 627 nm (Dische 1962).

## b. Analisis Kandungan Fosfat Anorganik
Analisis kandungan fosfat anorganik dilakukan dengan menggunakan metode Taussky & Shorr  (1953).  Sebanyak  0,3  ml  sampel  lateks dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan  TCA  2,5%  hingga  volume  1,5  ml. Sampel ditambahkan 1 ml pereaksi campur (Fe 2 SO 4 + akuades + larutan molibdat) kemudian divorteks. Sampel  didiamkan  selama  10  menit  pada  suhu kamar.  Konsentrasi  sampel  diukur  pada  panjang gelombang 750 nm.

## c. Analisis Produksi Karet
Analisis  produksi  karet  dilakukan  dengan menggunakan  metode  Rachmawan  &  Sumarmadji (2007). Tunas lateral tanaman disayat sepanjang  ½ keliling    lilit  batang  pada  bagian  yang  diberi perlakuan.  Tetesan  lateks  yang  keluar  ditampung menggunakan  kertas  saring  yang  telah  ditimbang beratnya  hingga  lateks  berhenti  mengalir.  Lateks yang  tertampung  di  atas  kertas  saring  ditimbang untuk  mendapati  berat  basah  lateks.  Lateks  yang tertampung pada kertas saring dikeringkan di dalam oven selama 1 jam pada suhu 100-105ºC, kemudian ditimbang.
Data yang diperoleh dianalisis menggunakan Rancangan  Petak  Tersarang.  Perlakuan  yang menunjukkan  perbedaan  nyata  diuji  lanjut  dengan
uji  jarak Duncan  Multiple  Range  Test (DMRT) pada taraf 5%.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Analisis Histologi

## a. Tebal Kulit (µm)
Kulit  tunas  lateral  klon  IRR  42  lebih  tebal dibandingkan dengan klon PB 260. Ketebalan kulit tanaman  karet  bersifat  genetis,  hal  tersebut ditunjukan  dengan  ketebalan  klon  IRR  42  yang lebih tebal dibandingkan PB 260 pada saat tanaman dewasa.  Pertumbuhan  tebal  kulit  akan  mengikuti pertumbuhan  lilit  batang  (Woelan  dan  Sayurandi, 2009).  Perlakuan  asam  jasmonat,  NAA  dan kombinasinya  tidak  berpengaruh  nyata  terhadap peningkatan  tebal  kulit  pada  cabang  muda  IRR  42 dan  PB  260.  Tebal  kulit  klon  IRR  42  cenderung mengalami  penurunan  dengan  pemberian  zat pengatur tumbuh bila dibandingkan dengan kontrol. Seperti dilaporkan oleh Rahayu et al . (2016) bahwa NAA tidak perpengaruh nyata terhadap peningkatan tebal kulit tanaman dewasa. Sebaliknya,  penggunaan  auksin  alami  IAA  pada konsentrasi  50  ppm  tanaman  muda  menginduksi pertambahan  tebal  kulit  yang  nyata  pada  klon  PB 260  tanaman Hevea  brasiliensis (Koryati,  2004). Sementara  itu  asam  jasmonat  justru  memberikan efek yang sebaliknya yaitu menghambat pertumbuhan  tebal  kulit.  JA  diketahui  lebih berperan  dalam  diferensiasi  latisifer  di  jaringan kulit tanaman karet (Wu et al . 2016).
Tabel 1.  Pengaruh pemberian JA, NAA dan kombinasinya terhadap tebal kulit (µm) tanaman pada klon karet PB 260 dan IRR 42.
Perlakuan Kontrol JA NAA JA+NAA Rataan PB 260 880,54 860,64 917,26 892,44 887,72 IRR 42 1601,23 a 1199,63 c 1450,39 b 1440,94 b 1423,05
Keterangan:  Angka-angka  yang  tidak  diikuti  huruf  pada  kelompok  perlakuan  yang  sama  menunjukkan  tidak berbeda nyata menurut Uji Duncan's Multiple Range Test pada   taraf α 5%
Karakteristik  tebal  kulit  karet  yang  memiliki korelasi  positif  terhadap  potensi  produksi  lateks (Daslin et al. , 2010). Kulit yang tebal memberikan ruang untuk meningkatnya jumlah latisifer. Namun
demikian  kulit  yang  tebal  tidak  selalu  diikuti dengan  jumlah  latisifer.  Dalam  proses  seleksi kandidat klon-klon unggul, ketebalan kulit dijadikan  salah  satu  penciri  klon  unggul  (Woelan
dan  Sayurandi,  2009).  Tanaman  dengan  kulit  yang terlalu  tipis  tidak  diharapkan  karena  berpotensi besar  untuk  terjadi  pelukaan  kambium  pada  saat penyadapan (Kurnia, 2011).
b. Jumlah Latisifer (sel/500 µm 2 )
Klon  PB  260  dan  IRR  42  menunjukkan respon  yang  sama  terhadap  aplikasi  JA,  NAA  dan kombinasinya.  Kedua  klon  tersebut  menunjukkan penambahan  jumlah  latisifer,  meskipun  jumlah peningkatannya  berbeda  antar  perlakuan (Tabel  2). Penambahan  latisifer  oleh  perlakuan  zat  pengatur tumbuh klon PB 260 lebih tinggi dibandingkan klon IRR  42.  Kombinasi  JA+NAA  menghasilkan pertambahan  jumlah  latisifer  yang  paling  banyak
dan  diikuti  oleh  perlakuan  JA  dan  NAA.  Secara tunggal  JA  lebih  kuat  menginduksi  diferensiasi latisifer dibandingkan dengan NAA baik pada klon PB  260  maupun  klon  IRR  42.  Secara  umum  klon PB  260  memiliki  latisifer  yang  lebih  padat dibanding  klon  IRR  42.  Kombinasi  JA  dengan NAA berinteraksi secara sinergis terhadap klon PB 260  dan  IRR  42  dalam  menginduksi  pertambahan jumlah  latisifer  pada  tanaman Hevea  brasiliensis. Pertambahan  jumlah  latisifer  mengindikasikan terjadinya peningkatan aktivitas diferensiasi kambium  menjadi  latisifer.  Peningkatan  aktivitas diferensiasi  ini  disebabkan  oleh  interaksi  antara jenis  zat  pengatur  tumbuh  dan  klon  dan  perbedaan genetik pada masing-masing klon.
Tabel 2.   Pengaruh pemberian JA, NAA dan kombinasinya terhadap kepadatan  latisifer (per 500 µm 2 ) pada klon karet PB 260 dan IRR 42
Perlakuan Kontrol JA NAA JA+NAA Rataan PB 260 16,78 de 27,45 b 21,11 cd 36,11 a 25,36 IRR 42 13,22 e 22,11 cd 17,78 de 26,67 bc 19,95
Keterangan:  Angka-angka  yang  tidak  diikuti  huruf  pada  kelompok  perlakuan  yang  sama  menunjukkan  tidak berbeda nyata menurut Uji Duncan's Multiple Range Test pada taraf α 5%
Berdasarkan  penelitian  Hao  &  Wu  (2000) dan  Wijayati et  al .  (2005),  JA  dan  auksin merupakan  zat  pengatur  tumbuh  (ZPT)  yang menginduksi  pertambahan  jumlah  sel-sel  sekretori tanaman. Wu et al. (2016), melaporkan aplikasi JA dan  perkursor  JA  (asam  linolenat)  menginduksi pembentukan  baris-baris  latisifer  pada  floem sekunder. Ini membuktikan bahwa laju diferensiasi latisifer  dari  kambium  vaskuler  dipengaruhi  oleh JA  dan  prekursor  JA.  JA  menginduksi  diferensiasi latisifer  primer  dan  sekunder  pada  berbagai tingkatan  pertumbuhan  batang  dan  daun  pada konsentrasi  0,005%  (Hao  &  Wu  2000).  Kulit berkembang  dengan  cara  yang  alami  tetapi kecepatannya meningkat jika diberi stimulasi etefon dan  auksin  (2,4-D)  (Jacob et  al ,  1989).  Auksin eksogen  akan  mempengaruhi  dinamika  kadar auksin  endogen.  Koryati  (2016)  menyebutkan bahwa  aplikasi  kombinasi  auksin  dengan  sitokinin menginduksi jumlah latisifer pada semua klon yang diuji.  Pemberian  ZPT  pada  konsentrasi  tertentu akan  menstimulasi  pertumbuhan  tanaman,  karena
meningkatkan  level  hormon  endogen  (Wattimena, 1988).  Ketebalan  kulit  bertambah  seiring  dengan pertambahan  umur  tanaman.  Pertumbuhan  tebal kulit  merupakan  karakteristik  spesifik  pada  klon tertentu.  Pemulia  tanaman  karet  melakukan evaluasi ketebalan kulit adalah untuk mendapatkan tanaman  yang  mempunyai  kulit  yang  cukup  tebal sehingga  diharapkan  menghasilkan  baris-baris latisifer yang lebih banyak (Gambar 1). Baris-baris latisifer  yang  satu  dengan  yang  lain  memiliki korelasi  positif  terhadap  ketebalan  kulit  tanaman (Gomez,  1982).  Menurut  Woelan  dan  Sayurandi (2009),  anatomi  kulit  saat  tanaman  belum menghasilkan juga perlu diketahui untuk memprediksi potensi produktivitasnya.
Jumlah  latisifer  pada  jaringan  kulit  berumur 50  hari  berkisar  antara  13  sampai  36  sel/500  µm 2 . Penelitian  tentang  diferensiasi  latisifer  yang  telah dilakukan oleh Wei-Min et al. (2003) menunjukkan bahwa  aplikasi  JA  menginduksi  baris  latisifer sekunder  pada  floem  yang  dilukai.  Baris  latisifer sekunder  yang  terbentuk  sangat  dekat  dengan
Perubahan Histologi dan  Fisiologi  Latisifer pada Tanaman Karet (Hevea brasiliensis Muell Arg.) yang diberi  Asam Jasmonat dan Asam Naftalen Asetat Eksogen
kambium, berjumlah lebih banyak, berukuran lebih kecil  dan  berisi  sedikit  karet  yang  ditandai  dengan warna  coklat  yang  terang  (Sando et  al .,  2009). Tomogami et  al. (2012)  menjelaskan  bahwa  asam jasmonat  eksogen  (dalam  bentuk  metil  jasmonat) ditransport  ke  dalam  jaringan  tanaman  dan mengalami  metabolisme  menjadi  asam  jasmonat.
Jasmonat  eksogen  diketahui  mempunyai  beberapa perananan fisiologis yaitu menghambat perkecambahan biji, pertumbuhan kalus, pertumbuhan  akar,  fotosintesis,  dan  biosintesis ribulosa  bifosfat  karboksilase  melalui  berbagai proses (Davies, 1995).
Gambar 1.   Sayatan melintang kulit batang tunas lateral Hevea brasiliensis klon  PB 260 dengan pewarnaan sudan 3, G:  jaringan gabus; K: kambium gabus; SB: Sel batu; LR: Latisifer; P:  Parenkim; Cb: Kambium,  Perbesaran 4 X 10, Scale bar 500 µm.
c. Diameter Latisifer (µm)
Klon  IRR  42  mempunyai  diameter  sel latisifer yang lebih besar jika dibandingkan dengan klon  PB  260.  Pemberian  JA,  NAA  dan kombinasinya  menyebabkan  diameter  kedua  klon karet  mengecil  jika  dibandingkan  dengan  kontrol. Jika  dikaitkan  dengan  variabel  sebelumnya, perlakuan  kontrol  memiliki  jumlah  latisifer  yang paling  sedikit tetapi  memiliki  diameter  yang  besar.
Dengan  demikian  induksi  zat  pengatur  tumbuh yang diberikan mengakibatkan pertambahan jumlah latisifer  dan  membuat  ukurannya  semakin  kecil. Diameter  latisifer  yang  bertambah  kecil  diduga karena  aktifitas  pembelahan  sel-sel  latisifer meningkat sehingga menghambat proses perbesaran selnya.  Diameter  sel-sel  latisifer  paling  kecil ditemukan  pada  perlakuan  kombinasi  JA+NAA, dan dipengaruhi oleh jenis klon.
Tabel 3. Pengaruh pemberian JA, NAA dan kombinasinya terhadap ukuran diameter latisifer (µm)  pada klon karet PB 260 dan IRR 42
Perlakuan Kontrol JA NAA JA+NAA Rataan PB 260 36,09 b 30,79 c 30,53 c 27,07 d 31,12 IRR 42 44,43 a 32,21 c 33,23 b 31,77 c 35,41
Keterangan:  Angka-angka  yang  tidak  diikuti  huruf  pada  kelompok  perlakuan  yang  sama  menunjukkan tidak berbeda nyata menurut Uji Duncan's Multiple Range Test pada taraf α 5%
Parameter-parameter  histologi  merupakan komponen yang penting untuk menentukan karakter produksi  pada  beberapa  progeni  tanaman Hevea brasiliensis .  Menurut  Sethuraj  &  Mathew  (1992),
salah  satu  parameter  histologi  yang  juga  penting adalah diameter latisifer. Besaran diameter pembuluh lateks sangat dipengaruhi oleh jenis klon dan  umur  tanaman  (Woelan  dan  Sayurandi,  2009).
Besaran  diameter  juga  dipengaruhi  oleh  posisi latisifer  terhadap  kambium  pada  jaringan  kulit (Sando et  al .  2009).  Ukuran  latisifer  di  dekat kambium  lebih  kecil  dibandingkan  latisifer  yang terletak lebih dekat dengan epidermis.

## Analisis Fisiologi
a. Kadar Sukrosa Lateks (mM)
Perhitungan  dan  sidik  ragam  kadar  sukrosa menunjukkan  perbedaan  klon  dan  interaksi  antara klon  dengan  jenis  zat  pengatur  tumbuh  berbeda nyata pada tunas muda berumur 2 bulan (Tabel 4). Kadar  sukrosa  pada  klon  PB  260  lebih  rendah dibandingkan kadar sukrosa klon IRR 42 dan  tidak dipengaruhi  oleh  perlakuan  JA,  NAA  dan kombinasinya.  Sedangkan  kadar  sukrosa  klon  IRR
42  dipengaruhi  oleh  aplikasi  IAA  dan  NAA  jika dibandingkan  oleh  kontrol.  Kadar  sukrosa  yang dihasilkan  berkisar  antara  21-38  mM  tergolong  ke dalam  kategori  tinggi  (Jacob et  al. ,  1989). Perbedaan  kadar  sukrosa  lateks  ini  mungkin disebabkan karena perbedaan genetik yang mendasar  antara  klon  PB  260  dan  klon  IR  42. Tingginya  kadar  sukrosa  lateks  ini  kemungkinan disebabkan  karena  belum  aktifnya  metabolisme lateks  di  dalam  latisifer,  di  mana  proses perombakan  sukrosa  menjadi  karet  belum  intensif. Pada  klon  IRR  42,  kadar  sukrosa  menurun  dengan adanya  perlakuan  ZPT  dibandingkan  dengan kontrol.  Hal  ini  kemungkinan  dipengaruhi  oleh pembagian  sukrosa  yang  lebih  besar  untuk pembentukan  jaringan  kulit  dan  batang  pada  klon IRR 42.
Tabel  4.  Pengaruh  pemberian  JA,  NAA  dan  kombinasinya  terhadap  kadar  sukrosa  (mM)    lateks  pada  klon karet PB 260 dan IRR 42.
Perlakuan Kontrol JA NAA JA+NAA Rataan PB 260 33,84 37,75 37,26 34,77 35,91 A IRR 42 38,34 a 21,43 c 27,13 b 25,74 b 28,16 B
Keterangan:  Angka-angka  yang  tidak  diikuti  huruf  pada  kelompok  perlakuan  yang  sama  menunjukkan  tidak berbeda nyata menurut Uji Duncan's Multiple Range Test pada taraf α 5%
Kisaran  kadar  sukrosa  pada  saat  tanaman dewasa  mulai  disadap  adalah  3,75  –  6,91  mM (Koryati  2016).  Dinamika  kadar  sukrosa  pada lateks sangat dipengaruhi oleh tingkat metabolisme dalam  jaringan  (Jacob et  al. ,  1989).  Pada  tanaman dewasa, kadar sukrosa yang rendah mengindikasikan bahwa metabolisme bahan asimilat  sangat  intensif, sehingga  cadangan karbohidrat terkuras untuk produksi karet.
Sebaliknya, kadar yang tinggi menunjukkan kurang aktifnya metabolisme tanaman. Kadar sukrosa yang tinggi  bisa  juga  berarti  bahwa  sel  latisifer  sudah tidak  berfungsi  lagi  atau  mengalami  degenerasi (Kuswanhadi et al ., 2009; Sumarmadji et al. , 2006).
Alokasi  sukrosa  ke  latisifer  didasari  pada keseimbangan  antara  sukrosa  yang  dihasilkan  dan dimanfaatkan  (Jacob et  al. ,  1989).  Kehadiran  gula pada latisifer merupakan komponen utama pengatur metabolisme lateks, yang bergantung pada ketersediaan karbohidrat pada jaringan latisifer dan
kegunaannya  dalam  tingkatan  sel.  Katabolisme sukrosa  menghasilkan  molekul  asetat  sebagai senyawa  prekusor  rantai  isoprene  dan  sebagian menghasilkan  energi  untuk  metabolisme  lateks. Konsentrasi  gula  yang  tinggi  di  dalam  lateks memiliki  korelasi  yang  positif  terhadap  produksi lateks (Priyadarshan, 2011).

## b. Kadar Fosfat Anorganik Lateks
Kandungan  fosfat  anorganik  lateks  berkisar antara  2-8  mM  yang  tergolong  dalam  kategori rendah-sedang menurut Jacob et al. (1989). Kisaran ini yang menunjukkan aktivitas metabolisme lateks belum  intensif  di  dalam  latisifer tunas-tunas  muda. Pada  klon  PB  260,  perlakuan  zat  pengatur  tumbuh tidak  mempengaruhi  kadar  fosfat  anorganik, sedangkan  kadar  fosfat  anorganik  lateks  klon  IRR 42 cenderung mengalami penurunan pada perlakuan JA. Penurunan kadar fosfat anorganik ini
Perubahan Histologi dan  Fisiologi  Latisifer pada Tanaman Karet (Hevea brasiliensis Muell Arg.) yang diberi  Asam Jasmonat dan Asam Naftalen Asetat Eksogen
kemungkinan  berkaitan  biosintesis  lateks  yang rendah dan aktivitas diferensiasi pada latisifer yang tinggi.  Pada  umur  cabang  2  bulan  diduga  latisifer belum  melakukan  aktifitas  metabolik  yang  intensif dalam  merubah  sukrosa  menjadi  partikel  karet.
Korelasinya  dengan  variabel  jumlah  dan  diameter latisifer adalah sebagian fosfat anorganik digunakan pada  aktifitas  pembelahan  sel-sel  kulit  dan diferensiasi latisifer.
Tabel 5.  Pengaruh pemberian JA, NAA dan kombinasinya terhadap kadar fosfat anorganik  (mM) lateks pada klon karet PB 260 dan IRR 42
Perlakuan Kontrol JA NAA JA+NAA Rataan PB 260 8,46 7,16 7,88 8,34 7,96 IRR 42 8,24 a 2,26 b 6,14 a 6,42 a 5,77
Keterangan:  Angka-angka  yang  tidak  diikuti  huruf  pada  kelompok  perlakuan  yang  sama  menunjukkan tidak berbeda nyata menurut Uji  Duncan's Multiple Range Test pada taraf α 5%
Menurut  Kuswanhadi et  al., (2009),  kadar fosfat  anorganik  lateks  yang  tinggi  menunjukkan aktifitas  metabolisme  lateks  yang  aktif  atau  justru sebaliknya.  Peningkatan  aktivitas  metabolisme lateks  dipengaruhi  oleh  beberapa  hal  seperti  iklim, pelukaan,  dan  stimulasi.  Karakter  fisiologi  lateks seperti kadar sukrosa, fosfat anorganik, magnesium, tiol,  pH  dan  potensial  redoks  merupakan  faktor yang  penting  dalam  biosintesis  karet.  Stimulasi pada tanaman karet dapat mempengaruhi perubahan karakter  fisiologi  lateks  tersebut  (Sethuraj  & Mathew,  1992;  Sumarmadji,  2000;  Silpi et  al. , 2006).
Korelasi antara variabel fosfat anorganik dan sukrosa  dapat  digunakan  untuk  menetapkan  tipe metabolisme  dari  tanaman  (Silpi et  al. ,  2006). Kehadiran fosfat anorganik menunjukkan metabolisme  energi  lateks.  Demikian  hal  dengan sukrosa,  selain  sumber  energi  juga  merupakan bahan baku untuk  menyusun isoprene atau  partikel karet.  Fosfat  mempengaruhi  sintesis  nukleotida, transfer  energi  dan  sintesis  isopren  melalui  ikatan adenosin fosfat dan pirofosfat (Sethuraj & Mathew, 1992; Sumarmadji, 2000).
Pada  tanaman  dewasa  yang  belum  aktif penyadapannya kandungan fosfat anorganik tergolong  rendah  yaitu  3,24  –  4,8  mM  (Koryati 2016).  Kisaran  optimal  kadar  fosfat  anorganik lateks pada tanaman yang  telah disadap adalah 10- 20 mM (Jacob et al. , 1989). Tanaman dengan kadar fosfat  yang  tinggi  mendukung  berlangsungnya proses  metabolisme  yang  aktif  dalam  sitosol  sel
latisifer  terutama  biosintesis  lateks  (Kurnia,  2011; Sumarmadji,  2000).  Semakin  rendah  kadar  fosfat anorganik  dari  kisaran  optimal  tersebut  berarti kemampuan tanaman dalam melakukan metabolisme  juga  semakin  berkurang.  Sebaliknya, jika  tinggi  kadar  fosfat  anorganik  melebihi  dari kisaran optimalnya, mengindikasikan bahwa tanaman mengalami telah mengalami cekaman atau mengindikasikan tanaman terserang penyakit (Jacob et  al. ,  1989).  Fosfat  anorganik  memiliki muatan  negatif  yang  membantu  menstabilkan partikel  karet  sehingga  memperlambat  koagulasi lateks dan memperlama waktu aliran lateks.

## c. Produksi Karet (mg/tunas/sadap)
Analisis  produksi  karet  dilakukan  dengan cara menampung tetesan lateks hingga aliran lateks berhenti  pada  kertas  saring  yang  sudah  diketahui beratnya dan melakukan pemanasan lateks di dalam oven  hingga  diperoleh  berat  karet  kering. Perhitungan dan sidik ragam menunjukkan produksi  karet  antara  kedua  klon  berbeda  nyata, sedangkan  interaksi  antara  klon  dengan  jenis  zat pengatur tumbuh tidak menunjukkan berbeda nyata terhadap  produksi  karet  pada  tunas  umur  2  bulan (Tabel 6).
Klon PB 260 memiliki produksi karet yang lebih  tinggi  dibandingkan  klon  IRR  42.  Hal  ini disebabkan  karena  perbedaan  tingkat  metabolisme pada  masing-masing  klon  dalam  merubah  sukrosa menjadi  partikel  karet  dengan  suplai  energi  yang berasal  dari  fosfat.  Klon  PB  260  dikategorikan
kelompok  metabolisme  tinggi,  sedangkan  IRR  42 tergolong  metabolisme  rendah  (Sumarmadji et  al. , 2006).  Selain  itu,  variabel  jumlah  latisifer memberikan  kontribusi  paling  tinggi  terhadap
produksi  karet  yang  dihasilkan  oleh  klon  PB  260 dan IRR 42, dalam hal ini  jumlah latisifer klon PB 260 lebih banyak dibandingkan klon IRR 42.
Tabel  6.  Pengaruh  pemberian  JA,  NAA  dan  kombinasinya  terhadap  produksi  karet   (mg/tunas/sadap)  pada klon  karet PB 260 dan IRR 42
Perlakuan Kontrol JA NAA JA+NAA Rataan PB 260 60,81 56,73 61,05 62,64 60,31 a IRR 42 44,36 43,22 41,09 42,81 42,87 b
Keterangan:  Angka-angka  yang  tidak  diikuti  huruf  pada  kelompok  perlakuan  yang  sama   menunjukkan  tidak berbeda nyata menurut Uji  Duncan's Multiple Range Test pada taraf α 5%
Menurut  Jacob et  al. (1989),  regenerasi lateks  dikontrol  oleh  empat  mekanisme  yakni ketersediaan  sukrosa,  regulasi  aktivitas  enzimatik, ketersediaan energi biokimia dan regenerasi in situ dan  reaksi  yang  menginduksi  fenomena  penuaan dan  reaksi  antioksidan  yang  melawan  molekul oksigen  toksik  atau  detoksifikasi  latisifer.  Hasil karet  kering  (gram/pohon/sadap)  suatu  klon  karet bergantung pada tebal kulit  dan ukuran lilit batang. Pada  klon  yang  sama  produksi  akan  lebih  besar pada  tanaman  dengan  tebal  kulit  dan  lilit  batang yang  besar  (Oktavia  &  Lasminingsih,  2010).  Jika dibandingkan  antar  klon,  kedua  variabel  ini  tidak memiliki  hubungan  yang  positif  terhadap  produksi karet. Klon IRR 42 yang memiliki kulit yang lebih tebal  memiliki  produksi  karet  yang  lebih  rendah dibandingkan  dengan  klon  PB  260  yang  memiliki kulit lebih tipis.
Lateks  umumnya  mengandung  25-40% bahan  padat  yang  mengandung  senyawa  kimia kompleks  antara  lain  karet  hidrokarbon,  protein, lipid,  karbohidrat,  garam  anorganik  dan  lain  lain. Kandungannya bergantung pada jenis tanaman dan penyadapan.  Pada  tanaman  yang  belum  disadap kandungan  karet  pada  tanaman  mampu  mencapai 60% atau lebih (Sethuraj & Mathew, 1992).
Parameter histologi dan fisiologi pada tingkat tunas muda dapat secara akurat membedakan antara dua klon yang berbeda sifat metabolismenya. Sifat- sifat  genetik  yang  berkaitan  dengan  produktivitas tanaman karet dapat diketahui dengan menganalisis kedua  parameter  tersebut  sejak  tanaman  muda. Dengan  demikian  pengamatan  kedua  parameter
tersebut  dapat  mempersingkat  siklus  seleksi pemuliaan  klon  karet  hingga  5  tahun  lebih  cepat dibandingkan seleksi konvensional.

## KESIMPULAN
Asam  jasmonat,  NAA  dan  kombinasi  asam jasmonat  dengan  NAA  meningkatkan  jumlah latisifer.  Kombinasi  JA  dan  NAA  paling  efektif menginduksi  diferensiasi  latisifer  dan  respon terhadap  zat  pengantur  tumbuh  tersebut  berbeda antar klon yang diuji. Diferensiasi latisifer klon PB 260  lebih  tinggi  dibandingkan  klon  IRR  42  dan berkorelasi  dtinggi  dengan  hasil  karet.  Perlakuan kedua  zat  pengatur  tersebut  berpengaruh  negatif terhadap  tebal  kulit,  diameter  latisifer,  serta mempengaruhi  aktivitas  metabolisme  lateks  pada klon  IRR  42.  Kadar  sukrosa,  fosfat  anorganik  dan produksi  karet  klon  IRR  42  lebih  rendah dibandingkan  klon  PB  260  yang  menggambarkan aktivitas metabolisme kedua klon berbeda. Analisis histologi kulit dan fisiologi lateks pada tunas muda tanaman  karet  dapat  digunakan  sebagai  pendeteksi potensi produktivitas dan sifatmetabolisme tanaman karet.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Ucapan terima kasih kepada Balai Penelitian Sungei  Putih,  Pusat  Penelitian  Karet  yang  telah memberikan  bantuan  fasilitas  penelitian  berupa bahan  tanam  di  kebun  percobaan  dan  berbagai peralatan laboratorium.

## DAFTAR PUSTAKA
Breton  F.,  M.  Coupe,  C.  Sanier,  J.  d’Auzac.
1997. Demonstration
β-1,3-glucanase activities  in  lutoid  of Hevea  brasiliensis latex. J. Nat. Rubb. Res , 10 (1): 37-45.
Jacob, J.l., J.C.  Prevot,  D. Roussel,  R.  Lacrotte,  E.
Serres,  J.  d'Auzac,  J.-M.  Eschbach,  and  H. Omont  L.  1989.  Physiology  of  Rubber  Tree Latex.  In,  J.  Auzac,  J.L.  Jacob,  H.  Chresti (eds). Physiology of Rubber Tree Latex . CRC
Press, Inc Boca Raton. 348-381.
Daruliza, K.M, K.L. Lam, K.L. Yang, J.T. Priscilla, E. Sunderasan, M.T.  Ong. 2011. Antifungal effect of Hevea brasiliensis latex C-serum on Aspergillus  niger .  Eur Rev  Med  Pharmacol Sci. 15(9): 1027-1033.
Daslin, A., Sayurandi, S.A. Pasaribu, 2010. Potensi keunggulan  klon  karet  harapan  IRR  seri  200 dari  hasil  seleksi  pohon  induk. Jurnal Penelitian Karet . 28(1): 5 – 12.
Daslin,  A.,  S.  Woelan,  I.  Suhendry.  2009.  Bahan Tanaman  Klon  Karet  Unggul.  Sungei  Putih: Pusat Penelitian Karet. 34 hal.
Davies,  P,  J.  1995.  Plant  Hormones:  Phisiology, biochemistry and molecular biology. Second Edition.  Netherlands:  Kluwer  Academic Publishers. 179 pages.
Dische Z.M. 1962. Carbohydrate Chemistry. Acad. Press. New York. 125  pages.
Gomez,  J.  B.,  1982.  Anatomy  of Hevea and  Its Influence  on  Latex  Production.  Monografi. Kuala  Lumpur:  Malaysian  Rubber  Research and Development Board. 30 pages.
Hao, B. Z., J.L. Wu. 2000. Laticifer Differentiation in Hevea brasiliensis : Induction by
Exogenous  Jasmonic  Acid  and  Linolenic Acid. Annals of Botany . 85: 37-43.
Koryati,  T.  2004.  Pemanfaatan  Zat  Pengatur Tumbuh  Untuk  Memperpendek  Masa  Non Produktif  Pada  Tanaman  Karet  ( Hevea brasiliensis ). Jurnal  Penelitian  Bidang  Ilmu Pertanian . 2(2): 24-31.
Koryati,  T.  2016.  Upaya  mempercepat  matang sadap  dan  karakter  produksi  lateks  beberapa
klon  karet  melalui  penggunaan  zatpengatur tumbuh.  Disertasi.  Sekolah  Pascasarjana Universitas Sumatra Utara
Kurnia,  F.  2011.  Studi  Karakter  Fisiologis  Dan Sifat  Aliran  Lateks  Klon  Karet  ( Hevea brasiliensis Muell  Arg.)  IRR  Seri  300.
Skripsi. Medan: Universitas Sumatera Utara.
Kuswanhadi,  Sumarmadji,  Karyudi,  T.  H.  S Siregar. 2009. Optimasi Produksi Klon Karet Melalui  Sistem  Eksploitasi  Berdasarkan Metabolisme  Lateks. Prosiding  Lokakarya Nasional  Pemuliaan  Tanaman :  152.  Pusat Penelitian Karet.
Oktavia,  F.,  M.  Lasminingsih.  2010.  Pengaruh kondisi  daun  tanaman  karet  terhadap keragaman  hasil  sadap  beberapa  klon  seri IRR. Jurnal Penelitian Karet . 28(2): 39.
Priyadarshan,  P,  M.  2011.  Biology  of Hevea
Rubber.  United  Kingdom:  MPG  Books Group. 54, 58.
Rachmawan,  A  dan  Sumarmadji.  2007.  Kajian karakter  fisiologi  dan  sifat  karet  pada  klon PB260  menjelang  buka  sadap. Jurnal Penelitian Karet . 25(2): 62-65.
Sando,  T.,  Hayashi,  T.,  Takeda,  T.,  Akiyama,  Y., Nakazawa,  Y.,  Fukusaki,  E.  and  Kobayashi, A.  2009.  Histochemical  Study  of  Detailed Laticifer  Structure  and  Rubber  Biosynthesis Related  Protein  Localization  in Hevea brasiliensis Using  Spectral  Confocal  Laser Scanning Microscopy. Planta . 230: 215-225.
DOI 10.1007/s00425-009-0936-0
Sethuraj,  M.  R.,  N.M.  Mathew.  1992.  Natural Rubber: biology, Cultivation and Technology.  Netherlands:  Elsevier  Science Publisher B. V. 145-147.
Silpi,  U.,  Chantuma,  P.,  Kasemsap,  P.,  Thaler,  P., Thanisawanyangkura, S., Lacointe, A., Ameglio,  T.,  Gohet,  E.  2006.  Sucrose  And Metabolism  Distribution  Patterns  In  The Laticiferes  Of  Three Hevea  brasiliensis Clones:  Effect  Of  Tapping  And  Stimulation On  The  Tree  Trunk. Journal  Of  Rubber Research . 9(2): 117.
Sumarmadji, Karyudi, Siregar, T. H. S., Junaidi, U. 2006.  Optimasi  produktivitas  klon  karet
melalui berbagai sistem eksploitasi.
Prosiding  Lokakarya  Nasional  Pemuliaan Tanaman : 125. Pusat Penelitian Karet.
Taussky,  H.  H.,  E.  Shorr.  1953.  A  Micro Colorimetric Methods For the Determination Of Inorganic Phosphorus. Journal Of Biology Chemistry. 202: 675-685.
Tomogami,  S.,  K.  Noge,  M.  Abe,  G.  Agrawal,  R.
Rakwal. 2012. Methyl Jamonate Is Transported  To  Distal  Leaves  Via  Vascular
Process  Metabolizing  Itself  Into  Ja-Ile  And
Triggering  VOCs  Emission  As  Defensive
Metabolites. Plant  Signaling  &  Behavior .  7: 11. 1-4.
Wattimena,  G.  A.  1988.  Zat  Pengatur  Tumbuh Tanaman. Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Wei-Min,  T.,  S.  Min-Jing,  Y.  Feng-Yi,  W.  Ji-Lin,
H. Bing-Zhong, C. Ke-Ming. 2003. Localized  Effects  of  Mechanical  Wounding ang  Exogenous  Jasmonic  Acid  on  The Induction of Seceondary Laticifer Differentiation in Relation to The Distribution  of  Jasmonic  Acid  in Hevea brasiliensis . Acta  Botanica  Sinica .  45(11):
1366-1372.
Wijayati,  A.,  Solichatun,    Sugiyarto.  2005. Pengaruh  Asam  Indol  Asetat  Terhadap
Pertumbuhan,  Jumlah  dan  Diameter  Sel Sekretori Rimpang Tanaman kunyit ( Curcuma domestica Val.). Jurnal
Biofarmasi . 3(1): 19-20.
Woelan,  S  dan  Sayurandi.  2009.  Keragaan  Klon Karet Unggul Harapan IRR Seri 400 Selama Tanaman Belum menghasilkan Di Pengujian Plot Promosi. Prosiding Lokakarya Nasional
Pemuliaan  Tanaman  Karet :  236-244.  Pusat
Penelitian Karet.
Wu  S.,  S.  Zhang,  J.  Chao,  X.  Deng,  Y.  Chen,  M. Shi,  W.M.  Tian.  2016.  Transcriptome analysis  of  the  signalling  networks  in coronatine induced secondary laticifer differentiation  from  vascular  cambia  in rubber trees. Scientific Reports : 1 – 13. DOI: 10.1038/srep36384