p-ISSN: 2086-8277 e-ISSN: 2807-3282
PENGARUH INOKULASI BAKTERI ENDOFIT DAN EKOENZIM TERHADAP PERTUMBUHAN BIBIT KAYU KUKU (Pericopsis mooniana Thw.)
Effect of Endophytic Bacteria Inoculation and Eco-enzyme on Kayu Kuku (Pericopsis mooniana Thw.) Seedlings Growth
Arum Sekar Wulandari 1* , Yunik Istikorini 1 , dan Yus Septiawati 1
(Diterima 17 Januari 2023 / Disetujui 21 Maret 2023)

## ABSTRACT
Improving  the  physical  quality  of  kayu  kuku  seedlings  can  be  done  by  applying  endophytic  bacteria  and  ec- enzymes. The aims of this study were to examine (1) the effect of inoculation of endophytic bacteria on the germination of  kuku wood seeds, and (2) the effect  of  inoculation  and application  of  eco-enzymes on the growth  of  kuku wood seedlings. The endophytic bacteria were isolated from the shoot of Shorea balangeran plant with the codes SBP 1, SBP 2, and SBP 19. Bacterial application was conducted on seeds and seedlings, while eco-enzyme application was only conducted on kayu kuku seedlings. The results of the research at the seed level showed that inoculation of the endophytic  bacteria  SBP  19  could  accelerate  the  germination  rate  of  kayu  kuku  seeds.  At  the  seedling  level, inoculation of endophytic bacteria SBP 1, SBP 2, SBP 19 and application of eco-enzymes had no significant effect on height, diameter, number of new leaves, total fresh weight and total dry weight of kayu kuku seedlings. The shoot root ratio of kayu kuku seedlings ranged from 2.66-5.04 and the seedlings quality index ranged from 0.41-0.93, indicating that the seedlings were ready to be transplanted into the field. In general, inoculation of endophytic bacteria had  a significant effect on kayu kuku seed germination, but had not been able to increase the growth of kayu kuku seedlings during the 14 weeks of observation.
Keywords:  Pericopsis mooniana Thw., seed dormancy, seed germination, seedling quality index, shoot root ratio

## ABSTRAK
Peningkatan mutu fisik bibit kayu kuku, dapat dilakukan dengan aplikasi bakteri endofit dan ekoenzim. Tujuan penelitian ini adalah mengkaji (1) pengaruh inokulasi bakteri endofit terhadap perkecambahan benih kayu kuku, dan (2) pengaruh inokulasi dan aplikasi ekoenzim terhadap pertumbuhan bibit kayu kuku. Bakteri endofit yang digunakan berasal dari pucuk tanaman Shorea balangeran dengan kode SBP 1, SBP 2, dan SBP 19. Aplikasi bakteri dilakukan pada benih dan bibit kayu kuku, sedangkan aplikasi ekoenzim hanya dilakukan pada bibit kayu kuku. Hasil penelitian pada  tingkat  benih,  menunjukkan  inokulasi  bakteri  endofit  SBP  19  dapat  mempercepat  laju  kecambah  benih  kayu kuku. Pada tingkat bibit, inokulasi bakteri endofit SBP 1, SBP 2, SBP 19 dan aplikasi ekoenzim tidak berpengaruh terhadap tinggi, diameter, jumlah daun baru, berat basah total, dan berat kering total bibit kayu kuku. Nilai NPA bibit kayu  kuku  berkisar  antara  2,66-5,04  dan  nilai  IMB  berkisar  antara  0,41-0,93,  yang  menunjukkan  bibit  siap  untuk dipindahkan ke lapangan. Secara umum, inokulasi bakteri endofit berpengaruh terhadap perkecambahan benih kayu kuku, tetapi belum dapat meningkatkan pertumbuhan bibit kayu kuku selama 14 minggu pengamatan.
Kata kunci:   daya  kecambah  benih,  dormansi  benih,  kayu  kuku  ( Pericopsis  mooniana Thw.),  nisbah  pucuk  akar, indeks mutu bibit
1 Departemen Silvikultur, Fakultas Kehutanan dan Lingkungan, IPB University Jl. Ulin Kampus IPB, Dramaga, Bogor, Jawa Barat, Indonesia 16680 * Penulis korespondensi: e-mail: rr_arum@yahoo.com

## PENDAHULUAN
Kayu kuku ( Pericopsis mooniana Thw.) merupakan  salah  satu  spesies  pohon  endemik  dari famili Fabaceae yang tumbuh secara alami di wilayah Sulawesi  dan  Pulau  Borneo.  Kayu  kuku  digolongkan sebagai kayu mewah karena memiliki kelas awet II dan kelas kuat  I sehingga  dapat digunakan sebagai  bahan baku  konstruksi,  vinir,  mebel  dan  barang  kerajinan (Alfaizin et  al .  2016).  Lembaga Internasional Union for Conservation of  Nature (IUCN) menetapkan kayu kuku  sebagai  spesies  flora  yang  rawan  punah (Nursyamsi dan Toaha 2017).
Keberadaan  kayu  kuku  di  habitat  aslinya  Cagar Alam Lamedae, Sulawesi Tenggara semakin berkurang karena  permudaan  alami  kayu  kuku  yang  lama, persentase  tumbuh  yang  rendah,  dan  eksploitasi  yang berlebihan.  Perbanyakan  generatif  kayu  kuku  dapat dilakukan  setiap  saat  karena  merupakan  jenis  pohon yang  selalu  berbuah  setiap  tahun  dengan  periode pembuahan  bulan  Juni  sampai  dengan  September (Suhartati et al. 2015) dan benihnya termasuk ke dalam golongan  benih  ortodoks  (Alfaizin et  al. 2016). Meskipun ketersediaan buahnya berlimpah, perbanyakan  generatif  kayu  kuku  mengalami  kendala akibat dormansi benih yang disebabkan oleh kulit benih yang  keras  dan  kedap  air  (dormansi  fisik),  sehingga menjadi penghalang bagi air dan oksigen untuk masuk ke dalam benih (Sandi et al. 2014).
Benih yang memiliki dormansi seperti kayu kuku dapat dipatahkan dengan skarifikasi melalui perendaman  dengan  air  panas,  zat  kimia,  maupun hormon (Suhartati et al. 2015). Perlakuan perendaman dengan  air  panas  bertujuan  memudahkan  penyerapan air oleh benih (Asyi’ah et  al. 2019). Selain perlakuan perendaman dengan air panas, penggunaan agen hayati juga  mampu  memberikan  dampak  positif  terhadap perkecambahan benih dan pertumbuhan bibit (Miljakovic et al. 2022). Banyak jenis agen hayati yang dapat berasosiasi dengan tanaman, salah satunya adalah bakteri endofit.
Bakteri  endofit  merupakan  jenis  bakteri  non- patogen  yang  hidup  dan  berasosiasi  di  jaringan tanaman  tanpa  menimbulkan  penyakit  bagi  tanaman tersebut  (Puspita et al . 2018). Manfaat  bakteri endofit yang  sudah  diteliti  di  antaranya  menurunkan  jumlah populasi nematoda Pratylenchus coffea dan meningkatkan    pertumbuhan  bibit  tanaman  kopi arabika  (Damayanti  2018),  meningkatkan  tinggi tanaman, diameter batang, jumlah daun dan luas daun tanaman kakao (Puspita et al . 2018), dan meningkatkan pertumbuhan  tanaman  karet  (Hidayati et  al .  2014). Selain  penggunaan  agen  hayati,  penambahan  pupuk organik  juga  diperlukan  untuk  mempertahankan  sifat fisik  tanah  dan  mensuplai  kebutuhan  hara  tanaman (Sodakh et al . 2017)
Penggunaan  pupuk  organik  digunakan  sebagai pengganti  dari  pupuk  kimia  yang  kurang  ramah lingkungan. Salah satu jenis pupuk organik yang mulai banyak diteliti dan dipakai adalah ekoenzim. Ekoenzim
merupakan  bahan  organik  komposit  yang  terdiri  atas asam  organik,  protein  dan  garam  mineral  yang dihasilkan  dari  fermentasi  limbah  sayuran,  buah- buahan  atau  kulit  buah,  gula  dan  air  (Neupane  dan Khadka  2019).  Penelitian  ini  bertujuan:  mengkaji pengaruh inokulasi bakteri endofit terhadap perkecambahan  kayu  kuku,  dan  mengkaji  pengaruh inokulasi  bakteri  endofit  dan  aplikasi  ekoenzim terhadap pertumbuhan bibit kayu kuku.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian berlangsung dari bulan September 2020 sampai dengan Mei  2021. Lokasi  penelitian  adalah di Rumah Kaca, Laboratorium Silvikultur, dan Laboratorium Patologi Hutan Departemen Silvikultur, Fakultas Kehutanan dan Lingkungan, Institut Pertanian Bogor.

## Alat dan Bahan Penelitian
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah bak kecambah, plastik, polibag ukuran 18 cm x 18 cm, timbangan  dengan  ketelitian  0.01,  oven,  autoklaf, laminar  air  flow , microwave ,  cawan  petri, shaker , mikropipet,  gelas  ukur,  segitiga  penyebar  sel,  wadah plastik ,  sprayer ,  kaliper  digital,  sterofom,  tabung reaksi, sudip, kompor, panci, mistar, kamera, alat tulis, software Microsoft Excel 2016 dan IBM SPSS Statistics version 25.  Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian adalah  benih  dan  bibit  kayu  kuku,  bakteri  endofit, alkohol 70% dan 90%, air steril, NaOH, media nutrient agar (NA),  media nutrient  broth (NB),  molase, ekoenzim,  pasir  zeolit,  tanah,  kompos,  kokopit  dan arang sekam.

## Prosedur Penelitian

## Tahap Persiapan
A. Pengunduhan dan ekstraksi benih kayu kuku Buah  kayu  kuku  diunduh  di  sekitar  Fakultas Kehutanan  dan  Lingkungan,  Institut  Pertanian Bogor (koordinat: 6033’24.59”S 106043’45,11”E). Selanjutnya diekstraksi untuk diambil benihnya dan diseleksi dengan cara memilih benih yang berwarna oranye  kecoklatan,  ukuran  seragam,  tidak  ada kerusakan fisik, serta bebas hama dan penyakit.
B. Persiapan media semai dan media tanam Media  tabur  yang  digunakan  yaitu  pasir  zeolit. Media  tanam  untuk  penyapihan  yang  digunakan adalah  tanah,  kompos,  kokopit,  dan  arang  sekam. Pasir  zeolit  dan  tanah  yang  digunakan  disterilisasi menggunakan  autoklaf  pada  suhu  121°C,  pada tekanan  1  atm  selama  1  jam.  Media  tanah  steril, kompos,  kokopit,  dan  arang  sekam  dicampur dengan perbandingan 5:2:2:1 (v/v/v/v). Media yang
sudah  tercampur  dimasukkan  ke  dalam  polibag ukuran 18 cm x 18 cm.
C. Inokulum bakteri endofit Bakteri  endofit  yang  digunakan  diisolasi  dari bagian  pucuk  tanaman Shorea  balangeran, merupakan koleksi  Laboratorium  Patologi  Hutan, FAHUTAN IPB; dengan kode isolat SBP 1, SBP 2, dan SBP 19.  Bakteri-bakteri  tersebut  diremajakan terlebih  dahulu  pada  medium  NA  dan  diinkubasi pada  suhu  ruang  selama  24  jam.  Biakan  murni bakteri  endofit  kemudian  dipindahkan  ke  dalam medium NB dan dikocok dengan shaker selama 24 jam.  Media  NB  yang  mengandung  bakteri digunakan  sebagai  sumber  inokulum.  Banyaknya bakteri yang diaplikasikan adalah 10 9 cfu.mL -1 .
D. Larutan ekoenzim Larutan  ekoenzim  terbuat  dari  campuran  kulit mangga  +  pepaya,  molase,  dan  air;  dengan perbandingan  3:1:10  (b/b/b).  Campuran  tersebut difermentasikan selama 40 hari. Setelah terfermentasi, campuran tersebut dipisahkan antara bagian  padat  dan  bagian  cair.  Cairan  yang dihasilkan digunakan sebagai larutan stok ekoenzim,  dan  disimpan  pada  suhu  ruang. Konsentrasi  larutan  ekoenzim  yang  digunakan adalah 5%, dengan pH larutan berkisar 5,6-6,0.

## Inokulasi Bakteri Endofit pada Benih Kayu Kuku
A. Rancangan percobaan Rancangan  penelitian  menggunakan  rancangan acak lengkap dengan satu faktor yaitu jenis bakteri endofit.  Faktor  jenis  bakteri  endofit  terdiri  atas  4 taraf  yaitu  kontrol  (tanpa  bakteri  endofit),  bakteri endofit  dengan  kode  isolat  SBP  1,  bakteri  endofit dengan  kode  isolat  SBP  2,  dan  bakteri  endofit dengan  kode  isolat  SBP  19.  Masing-masing  taraf terdiri atas 3 ulangan, 1 ulangan terdiri atas 50 benih kayu  kuku,  sehingga  total  percobaan  terdapat  600 benih kayu kuku.
B. Pematahan  dormansi  benih  dan  inokulasi  bakteri endofit
Pematahan dormansi benih kayu kuku dilakukan dengan  menggunakan  air  panas  pada  suhu  80  ºC selama 20 menit.  Setelah itu,  benih direndam pada biakan  bakteri  endofit  selama  24  jam.  Sebagai kontrol,  benih  direndam  dengan  air  suhu  ruang. Benih  kayu kuku kemudian dikecambahkan dalam media  pasir  zeolit.  Jumlah  benih  kayu  kuku  yang dikecambahkan adalah 50 benih per bak kecambah.
C. Pengamatan Pengamatan  dilakukan  selama  48  hari  dengan mencatat  jumlah  kecambah  yang  tumbuh.  Peubah yang  diamati  selama  penelitian  adalah  daya kecambah  benih,  laju  kecambah,  nilai  kecambah, potensi tumbuh maksimum, dan kecepatan tumbuh kecambah kayu kuku.

## Penyapihan dan Seleksi Bibit
Kecambah kayu kuku umur 4 minggu sudah siap untuk disapih. Penyapihan dilakukan pada sore hari dan
kecambah yang sudah disapih ditempatkan pada lokasi yang  teduh  dan  didiamkan  selama  2  minggu  agar beradaptasi  dengan  media  yang  baru.  Untuk selanjutnya  kecambah  kayu  kuku  yang  sudah  disapih dan  sudah  beradaptasi  dengan  media  sapih  disebut sebagai  bibit  kayu  kuku.  Bibit  kayu  kuku  kemudian dipindahkan ke rumah kaca.

## Inokulasi Bakteri Endofit dan Ekoenzim pada Bibit Kayu Kuku
A. Rancangan percobaan
Rancangan percobaan  menggunakan  rancangan acak  lengkap  (RAL)  pola  tersarang  ( nested )  yang terdiri atas dua faktor yaitu jenis bakteri endofit dan ekoenzim. Faktor utama sebagai petak utama yang terdiri dari 4 taraf, yaitu kontrol, jenis bakteri SBP 1, SBP 2, dan SBP 19.  Ekoenzim merupakan anak petak yang terdiri atas 2 taraf, yaitu tanpa pemberian ekoenzim  atau  kontrol  dan  dengan  pemberian ekoenzim.  Masing-masing  taraf  terdiri  atas  3 ulangan  dengan  setiap  ulangan  terdiri  atas  6-unit percobaan.
B. Aplikasi isolat bakteri endofit dan larutan ekoenzim pada tanaman
Semai kayu kuku yang telah disapih diinokulasi dengan  bakteri  endofit  dengan  cara  menyiramkan larutan bakteri endofit pada media tanam sebanyak 10  mL  (kepadatan  populasi  bakteri  10 9 cfu.mL -1 ) secara  rata  di  atas  permukaan  media.  Semai  yang sudah  disapih,  selanjutnya  disebut  sebagai  bibit kayu  kuku.  Inokulasi  bakteri  endofit  dilakukan setiap  4  minggu  sekali  sebanyak  3  kali pengaplikasian selama waktu pengamatan.
Larutan ekoenzim dengan konsentrasi ekoenzim 5% sebanyak 10 mL disiramkan pada media tanam kayu  kuku  setiap  4  minggu  sekali  dengan  jarak pengaplikasian  dengan  inokulasi  bakteri  endofit yaitu 2 minggu. Pengaplikasian diulang sebanyak 3 kali  selama  waktu  pengamatan  berlangsung. Pemeliharaan dilakukan selama 14 minggu  dengan cara  menyiram  tanaman  pada  pagi  atau  sore  hari, pencabutan  gulma  yang  tumbuh,  pengendalian hama  secara  mekanik  dan  penyemprotan  pestisida nabati pada tanaman terserang hama.
C. Pengamatan Pengamatan  dan  pengambilan  data  dilakukan selama  14  minggu.  Peubah  yang  diamati  adalah tinggi  (cm),  diameter  (mm),  jumlah  daun  baru (helai), berat basah total (g), berat kering total (g), nisbah  pucuk  akar  (NPA)  dan  indeks  mutu  bibit (IMB). Tinggi bibit diukur setiap 1 minggu sekali, diameter  dan  jumlah  daun  baru  diukur  setiap  4 minggu  sekali.  Pengukuran  biomassa  pucuk  dan akar dilakukan pada akhir pengamatan (minggu ke- 14).

## Pengolahan dan Analisis Data
Pengujian  sidik  ragam  dengan  uji  F  dilakukan untuk mengetahui pengaruh perlakuan dalam penelitian
ini.  Data  diolah  menggunakan  software  IBM  SPSS Statistics version 25, jika:
a. Nilai  P-value  >  α  (0.05),  maka  perlakuan  tidak memberikan  pengaruh  nyata  terhadap  daya kecambah, laju kecambah, nilai kecambah, potensi tumbuh  maksimum,  kecepatan  tumbuh,  tinggi tanaman, diameter tanaman, jumlah daun tanaman, berat  basah  total,  berat  kering  total,  dan  kadar  air tanaman.
b. Nilai  P-value  <  α  (0.05),  maka  perlakuan memberikan  pengaruh  nyata  terhadap  daya kecambah, laju kecambah, nilai kecambah, potensi tumbuh  maksimum,  kecepatan  tumbuh,  tinggi tanaman, diameter tanaman, jumlah daun tanaman, berat  basah  total,  berat  kering  total,  dan  kadar  air tanaman.  Kemudian  dilanjutkan  dengan  uji  lanjut Duncan’s Multiple Range Test .
Nilai NPA mengacu pada klasifikasi Haase (2009) yang  menyatakan  nilai  NPA  ideal  bibit  adalah  1-3. NPA  yang  nilainya  mendekati  1  pada  umumnya menghasilkan  daya  hidup  dan  adaptasi  tumbuh  yang lebih  tinggi.  Nilai  IMB  mengacu  pada  Sudomo  dan Santosa  (2011)  yang  menyatakan  bahwa  nilai  IMB >0.09  menunjukkan  kualitas  bibit  yang  baik  untuk ditanam di lapangan.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil

## Aplikasi Bakteri Endofit pada Benih Kayu Kuku
Inokulasi  bakteri  endofit  pada  benih  kayu  kuku hanya  berpengaruh  signifikan  terhadap  satu  peubah dari lima peubah yang diamati yaitu pada peubah laju kecambah. Hasil sidik ragam pada laju perkecambahan benih mengindikasi adanya perbedaan signifikan tetapi tidak  untuk  peubah  daya  kecambah,  potensi  tumbuh maksimum,  dan  kecepatan  tumbuh.  Inokulasi  bakteri endofit dapat mempercepat laju perkecambahan benih kayu kuku. Benih  kayu kuku yang diinokulasi  bakteri endofit SBP 19 memberikan nilai laju perkecambahan tercepat dibandingkan dengan perlakuan lainnya. Laju perkecambahan  benih  kayu  kuku  yang  diberikan bakteri endofit SBP 19  lebih cepat 4 hari dibandingkan dengan perlakuan lainnya (Tabel 1).
Benih  kayu  kuku  berkecambah  tidak  serempak, pengamatan  sampai  hari  ke-63  setelah  tanam menunjukkan kurva perkecambahan masih meningkat. Benih  kayu  kuku  pada  perlakuan  kontrol,  inokulasi bakteri SBP2 dan SBP19 mulai berkecambah pada hari ke-8  setelah  tanam,    sedangkan  benih  kayu  kuku dengan  inokulasi  bakteri  SBP1  mulai  berkecambah pada  hari  ke-9  setelah  tanam.  Benih  kayu  kuku  yang diberi  perlakuan  dengan  bakteri  endofit  SBP19 memiliki  daya  kecambah  tertinggi  dibandingkan dengan  perlakuan  lainnya.  Pada  hari  ke-63  daya kecambah benih kayu kuku mencapai 34%.  Pada hari ke-120 setelah tanam, daya kecambah benih kayu kuku mencapai 69%.

## Aplikasi Bakteri Endofit dan Ekoenzim pada Bibit Kayu Kuku
Presentase  hidup  bibit  kayu  kuku  yang  diberi perlakuan bakteri endofit dan ekoenzim adalah 100%. Selama  14  minggu  pengamatan  ditemukan  adanya serangan  hama  berupa  ulat  kantung  dan  kutu  putih dengan luas serangan sebesar 8%. Pengendalian secara mekanik dilakukan untuk mengatasi serangan hama ini. Secara  umum,  bibit  kayu  kuku  umur  14  minggu menunjukkan performa yang baik (Gambar 1).
Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  inokulasi  bakteri endofit  pada  bibit  kayu  kuku  tidak  berpengaruh signifikan  terhadap  semua  peubah  pertumbuhan  bibit kayu kuku yang diamati (tinggi, diameter, jumlah daun, berat basah total, berat kering total dan kadar air bibit kayu kuku). Perlakuan ekoenzim yang tersarang dalam perlakuan  inokulasi  bakteri  endofit  juga  belum  dapat meningkatkan pertumbuhan bibit kayu kuku (Tabel 2).
Tabel 1  Pengaruh bakteri endofit terhadap perkecambahan benih kayu kuku setelah 63 hari dikecambahkan
No Peubah Satuan Jenis bakteri endofit P-value Kontrol SBP 1 SBP 2 SBP 19 1 Daya kecambah % 30,67 a 31,33 a 34,67 a 42,67 a 0,083 tn 2 Laju perkecambahan hari 37,46 b 37,59 b 37,32 b 33,67 a 0,004 * 3 Potensi tumbuh maksimum % 30,67 a 31,33 a 34,67 a 42,67 a 0,083 tn 4 Kecepatan tumbuh %/etmal 1,26 a 1,04 a 1,25 a
1,58 a 0,06 tn tn = perlakuan tidak berpengaruh signifikan pada selang kepercayaan 95% dengan nilai signifikan ( P-value ) > 0,05 (α).
Gambar 1  Performa bibit kayu kuku selama 14 minggu pengamatan.
B1= SBP 1, B2= SBP 2, B3= SBP 19,
E0= tanpa ekoenzim, E1= dengan ekoenzim.
Inokulasi  bakteri  endofit  dan  ekoenzim  belum dapat meningkatkan tinggi bibit kayu kuku. Pertambahan  tinggi  bibit  kayu  kuku  pada  perlakuan kontrol,  inokulasi  bakteri  endofit  SBP1,  SBP2,  dan SBP19  menunjukkan  hasil  yang  tidak  berbeda signifikan. Semua bibit kayu kuku dalam percobaan ini mengalami  pertambahan  tinggi  yang  hampir  sama (Gambar  2a).  Inokulasi  bakteri  endofit  dan  ekoenzim juga  belum  dapat  meningkatkan  diameter  bibit  kayu kuku.  Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  tidak  adanya perbedaan yang signifikan pada peubah diameter bibit kayu kuku (Gambar 2b).
Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  inokulasi  bakteri endofit  dan  ekoenzim  belum  dapat  meningkatkan jumlah daun bibit kayu kuku (Gambar 3). Pertambahan jumlah  daun  bibit  kayu  kuku  sejalan  dengan pertambahan tinggi bibit. Penambahan ekoenzim pada bibit  kayu  kuku  memberikan  efek  yang  sama  pada peubah  jumlah  daun  untuk  semua  perlakuan, sedangkan  penambahan  bakteri  endofit  memberikan efek yang berbeda terhadap penambahan jumlah daun bibit kayu kuku.
Penambahan bakteri endofit dan ekoenzim  belum dapat  meningkatkan  biomassa  tanaman  (Gambar  4). Berdasarkan  tren  data  penelitian,  penambahan ekoenzim  meningkatkan  biomassa  bibit  kayu  kuku, tetapi  menurunkan  efektivitas  bakteri  SBP1  pada peubah berat basah total (Gambar 4a) dan berat kering total bibit kayu kuku (Gambar 4b).
Nilai IMB bibit kayu kuku yang diberi perlakuan inokulasi bakteri endofit dan ekoenzim berkisar antara 0,41-0,93.    Pemberian  ekoenzim  dapat  meningkatkan nilai  IMB  pada  perlakuan  kontrol,  tetapi  menurunkan efektivitas bakteri SBP 1 dan SBP 2 sehingga nilai IMB pada  perlakuan  pada  perlakuan  ini  menurun  (Gambar 5a). Nilai NPA bibit kayu kuku yang diberi perlakuan inokulasi bakteri endofit dan ekoenzim berkisar antara 2,6-5,04.  Berdasarkan  tren  data  penelitian,  pemberian ekoenzim  dapat  menurunkan  nilai  NPA  perlakuan kontrol,  tetapi  dapat  meningkatkan  nilai  NPA  pada perlakuan inokulasi bakteri SBP 1, SBP 2, dan SBP 19 (Gambar 5b).
Gambar 2  Pengaruh inokulasi bakteri endofit dan ekoenzim terhadap (a) peubah tinggi dan (b) peubah diameter bibit kayu kuku umur 14 minggu setelah perlakuan
Tabel 2  Rekapitulasi  hasil  sidik  ragam  pengaruh  inokulasi  bakteri  endofit  dan  ekoenzim  terhadap pertumbuhan bibit kayu kuku umur 14 minggu Peubah Petak utama : Bakteri endofit Anak petak (tersarang): Ekoenzim Tinggi (cm) 0,920 tn 0,992 tn Diameter (mm) 0,603 tn 0,945 tn Jumlah daun (helai) 0,725 tn 0,700 tn Berat basah total (g) 0,683 tn 0,551 tn Berat kering total (g) 0,624 tn 0,494 tn
Keterangan: tn = perlakuan tidak berpengaruh signifikan pada selang kepercayaan 95% dengan nilai signifikan ( P-value ) > 0,05 (α).
Gambar 3  Pengaruh  inokulasi  bakteri  endofit  dan ekoenzim terhadap pertambahan jumlah daun  bibit  kayu  kuku  umur  14  minggu setelah perlakuan
0 5 10 15 20 25 30 Tanpa ekoenzim Ekoenzim Pe rt am b ah an j u m la h d au n
(h el ai ) Perlakuan Kontrol SBP 1

## Pembahasan
Penelitian  ini  menggunakan  isolat  bakteri  endofit yang diisolasi dari tanaman balangeran ( S. balangeran ) dengan  kode  SBP1,  SBP2,  dan  SBP19.  Penggunaan ketiga isolat bakteri endofit memberikan respons positif bagi  benih  kayu  kuku.  Hal  ini  berkaitan  dengan pengaruh  bakteri  endofit  yang  signifikan  terhadap peubah  laju  kecambah,  sehingga  hipotesis  pertama diterima.  Inokulasi  bakteri  endofit  dan  penambahan ekoenzim  pada  bibit  kayu  kuku  menunjukkan  tidak berpengaruh  terhadap  pertumbuhan  bibit,  sehingga hipotesis kedua ditolak.
Bakteri endofit telah banyak dipakai sebagai agen hayati  pada  berbagai  jenis  tanaman.  Beberapa  jenis bakteri  endofit  yang  diperoleh  dari  tanaman  lada mempunyai  kemampuan  untuk  melarutkan  unsur  P, mengikat  unsur  N  dan  menghasilkan  hormon  IAA (Gusmaini  dan  Kartikawati  2019).  Inokulasi  bakteri endofit  pada  tanaman  lada  dapat  meningkatkan  berat akar dan tajuk tanaman lada serta menekan jumlah puru dan  populasi  nematoda  di  dalam  akar  (Harni  dan Ibrahim  2011).  Ekoenzim  dapat  digunakan  sebagai pupuk  organik.  Pemberian  ekoenzim  pada  tanaman selada  memberikan  pengaruh  signifikan  terhadap
pertumbuhan  akar  dan  bobot  kering  tanaman (Yuliandewi et al . 2018).

## Aplikasi Bakteri Endofit pada Benih Kayu Kuku
Benih  kayu  kuku  tergolong  ke  dalam  tipe  benih ortodoks  (Alfaizin et  al. 2016)  yang  mempunyai dormansi  fisik.  Dormansi  fisik  dapat  dipatahkan dengan beberapa teknik skarifikasi baik secara mekanik, fisik,  maupun  kimia  (Fathurrahman  dan  Wangiyana 2018).    Pematahan  dormansi  yang  dilakukan  pada penelitian  ini  berupa  perendaman  benih  ke  dalam  air panas  bersuhu  80°C  selama  5  menit.  Perendaman  air panas  dimaksudkan  untuk  melunakkan  lapisan  kulit benih  kayu  kuku  sehingga  dapat  mempercepat perkecambahan benih. Perkecambahan benih merupakan  proses  muncul  dan  berkembangnya radikula  dan  plumula  yang  ada  di  dalam  benih (Marthen et al . 2013).  Perkecambahan benih meliputi beberapa  tahapan,  antara  lain (1)  imbibisi; (2)  sekresi hormon  dan  enzim;  (3)  hidrolisis  cadangan  makanan; (4) pengiriman bahan makanan terlarut dan hormon ke daerah titik tumbuh (Sadjadi 2006).
Inokulasi  bakteri  endofit  dengan  kode  SBP  19 berpengaruh  signifikan  terhadap  laju  perkecambahan benih kayu kuku. Inokulasi SBP 19 menghasilkan laju
Gambar 4  Pengaruh inokulasi  bakteri endofit dan ekoenzim terhadap (a) berat basah total (b) berat  kering total bibit kayu kuku umur 14 minggu setelah perlakuan
Gambar 5  Pengaruh inokulasi bakteri endofit dan ekoenzim terhadap nilai: (a) indeks mutu bibit (IMB), (b) nisbah pucuk akar (NPA) bibit kayu kuku umur 14 minggu setelah perlakuan
perkecambahan  selama  33,67  hari  sedangkan  pada kontrol  memiliki  laju  perkecambahan  37,46  hari. Inokulasi  bakteri  endofit  SBP  19  mempercepat  laju perkecambahan benih kayu kuku, hal ini diduga karena bakteri  endofit  yang  dapat  menghasilkan  hormon tertentu  (Gusmaini et  al. 2013).  Laju  perkecambahan menunjukkan  kemampuan  benih  untuk  berkecambah secara cepat pada kisaran waktu tertentu (Oktaviana et al. 2016). Laju perkecambahan dengan nilai lebih kecil memiliki  rata-rata  hari  berkecambah  yang  lebih  cepat (Marjenah et al. 2021).
Hasil  penelitian  menunjukkan  aplikasi  bakteri endofit  tidak  berpengaruh  terhadap  daya  kecambah, potensi tumbuh maksimum, dan kecepatan tumbuh. Hal ini karena isolat bakteri yang digunakan tidak memiliki kemampuan  untuk  mempercepat  perkecambahan (Long et  al. 2008).  Masing-masing  bakteri  memiliki kemampuan  yang  berbeda  dalam  menghasilkan senyawa  yang  mendukung  pertumbuhan  tanaman (Sartiyana 2020). Daya kecambah benih menunjukkan jumlah  kecambah  yang  dihasilkan  oleh  benih  pada kondisi  lingkungan  tertentu.    Daya  kecambah  benih kayu  kuku  yang  paling  rendah  ada  pada  perlakuan kontrol sebesar 30% dan yang tertinggi pada perlakuan SBP 19 sebesar 42%.
Potensi  tumbuh  maksimum  (PTM)  merupakan kemampuan  benih  untuk  tumbuh  atau  berkecambah dalam  kondisi  yang  optimum  (Nasrul  dan  Fridayanti 2014).  Hasil  penelitian  menunjukkan  penggunaan ketiga  jenis  bakteri  endofit  tidak  berpengaruh signifikan. Benih kayu kuku yang ditanam tidak dapat tumbuh  secara  keseluruhan  dan  menghasilkan  nilai PTM  sebesar  30-42%.  Benih  yang  ditanam  tidak tumbuh  secara  keseluruhan,  tetapi  benih  yang  tidak tumbuh  masih  dalam  keadaan  baik  dan  tidak mengalami  kerusakan  secara  fisik.  Hal  ini  dapat disebabkan  oleh  kurangnya  waktu  pengamatan  dan benih kayu kuku tidak dapat tumbuh serentak. Hal ini dapat  diakibatkan  oleh  faktor  genetik  setiap  benih berbeda (Sadjad et al. 1999).
Kecepatan  tumbuh  benih  dihitung  berdasarkan total pertambahan kecambah normal setiap hari (Nasrul dan  Fridayanti  2014).  Kecepatan  tumbuh  digunakan untuk mengukur kekuatan tumbuh benih, karena benih yang cepat  tumbuh lebih mampu menghadapi  kondisi lapangan  yang  suboptimal  (Lesilolo et  al. 2013). Kecepatan tumbuh benih kayu kuku terendah ada pada perlakuan  SBP  1  sebesar  1,04%/etmal  dan  kecepatan tumbuh  terbesar  ada  pada  perlakuan  SBP  19  sebesar 1,58%/etmal.  Hasil  sidik  ragam  menunjukkan  tidak adanya  perbedaan  yang  signifikan  antara  perlakuan terhadap peubah kecepatan tumbuh benih. Hal ini dapat disebabkan  oleh  kurangnya  waktu  pengamatan  dan sifat  dormansi  benih  kayu  kuku  yang  memiliki  kulit benih  yang keras serta lapisan lilin  yang menghalangi terjadinya  imbibisi.  Menurut  Krisnawati  dan  Adie (2016), kulit benih menentukan kecepatan berkecambah  suatu  benih.  Benih  berkulit  tipis  akan lebih  cepat  menyerap  air  sehingga  mempercepat perkecambahan  benih,  begitu  pula  sebaliknya.  Benih
pada  perlakuan  kontrol  banyak  berkecambah  pada minggu  ke-2  dan  menurun  setelah  minggu  ke-4, sedangkan  pada  benih  yang  diberikan  bakteri  endofit sedikit berkecambah pada minggu ke-2 dan meningkat setelah minggu ke-4.

## Aplikasi Bakteri Endofit dan Ekoenzim pada Bibit Kayu Kuku
Pertumbuhan  tanaman  merupakan  peristiwa bertambahnya ukuran tanaman yang diukur dari besar tinggi  dan  diameter.  Pertambahan  ukuran  tumbuhan merupakan hasil dari pertambahan jumlah dan ukuran sel (Hapsari et al. 2018). Penelitian ini menggunakan 6 peubah untuk mengamati pertumbuhan bibit kayu kuku yang  diberikan  bakteri  endofit  dan  ekoenzim.  Hasil sidik ragam menunjukkan tidak adanya perbedaan yang signifikan  pada  6  peubah  yang  diamati  terhadap bibit kayu  kuku  yang  diinokulasi  3  jenis  bakteri  endofit dengan  dan  tanpa  pemberian  ekoenzim.  Berdasarkan hasil tersebut, diduga pemberian ekoenzim belum dapat memenuhi  kebutuhan  hara  bibit  kayu  kuku.  Bakteri endofit membantu penyerapan hara tanaman sehingga dapat  mengefisienkan  penggunaan  pupuk  yang diberikan (Gusmaini et al. 2019).
Hasil penelitian menunjukkan pertumbuhan tinggi, diameter,  dan  jumlah  daun  bibit  kayu  kuku  tidak dipengaruhi  oleh  bakteri  endofit  dan  ekoenzim. Pertambahan  tinggi  bibit  kayu  selama  14  minggu pengamatan berkisar antara  9,8-10,5 cm. Pertambahan diameter  bibit  kayu  kuku  selama  14  minggu  berkisar antara 1,9-2 mm.. Pertambahan jumlah daun sama pada semua perlakuan selama 14 minggu pengamatan yaitu sebanyak  22  helai.  Perlakuan  kontrol  dengan penambahan  ekoenzim  meningkatkan  jumlah  daun bibit  sehingga  tren  yang  dihasilkan  sama  pada  petak ekoenzim.  Peran  bakteri  endofit  dipengaruhi  oleh kesesuaian  tanaman  inang  tertentu  terhadap  bakteri endofit  tertentu.  Keberhasilan  kolonisasi  bakteri  pada tanaman  inang  membutuhkan  kompetensi  endofit seperti flagella, gen - Nod, enzim pendegradasi dinding sel,  dll.  Tanaman  sebagai  inang  yang  menyediakan ruang bagi bakteri menjadi sumber nutrien bagi bakteri dan  asosiasi  antara  bakteri  dan  tanaman  inang  dapat bermanfaat  bagi  kesehatan dan produktivitas tanaman tersebut (Monalisa 2020).
Berat basah total dan berat kering total bibit kayu kuku  dipengaruhi  oleh  aplikasi  bakteri  endofit  dan ekoenzim.  Ekoenzim  apabila  diaplikasikan  secara bersamaan  dengan  bakteri  SBP  1  akan  menghasilkan efek yang negatif untuk bibit kayu kuku yang ditandai dengan  adanya  penurunan  berat  basah  total  dan  berat kering  total  bibit  kayu  kuku.  Hal  ini  menunjukkan adanya interaksi antagonis antara bakteri endofit SBP 1 dengan  ekoenzim  yang  digunakan.  Hal  ini  sesuai dengan  penelitian  Welfalini et  al. (2023)  yang menemukan bahwa ekoenzim dengan konsentrasi 30%, 70%,  dan  100%  berpotensi  dalam  menghambat pertumbuhan  bakteri Streptococcus spp.  Ekoenzim yang  digunakan  pada  penelitian  ini  terbuat  dari  kulit
mangga  dan  pepaya  dengan  pH  akhir  2,85;  berwarna kuning  kecoklatan  dengan  bau  asam.  Fermentasi ekoenzim dikatakan berhasil jika menghasilkan larutan berwarna  kuning  kecoklatan  dengan  bau  asam  khas buah-buahan serta memiliki pH di bawah 4 (Win 2011). Kulit pepaya mengandung senyawa flavonoid, saponin dan  steroid.  Senyawa  flavonoid  berperan  sebagai antimikrob dan antivirus (Trisna dan Nizar 2018). Kulit mangga  juga  memiliki  senyawa  flavonoid  yang  dapat menghambat  pertumbuhan bakteri patogen (Noviyanty et al. 2021).
Indeks  mutu  bibit  (IMB)  ditujukan  untuk mengetahui  tingkat  ketahanan  suatu  bibit  untuk dipindahkan ke lapangan. Penambahan ekoenzim pada kontrol  menghasilkan  nilai  IMB  tertinggi  sedangkan nilai  IMB terendah  ada  pada  inokulasi  SBP  1  dengan penambahan ekoenzim. Inokulasi  bakteri  endofit SBP 1 dengan penambahan ekoenzim menurunkan performa bakteri  sehingga  mempengaruhi  nilai  IMB  bibit. Sudomo  dan  Santosa  (2011)  menyatakan  tanaman dengan  nilai  IMB  >0,09  memiliki  ketahanan  cukup baik  dan  dapat  dipindahkan  ke  lapangan.  Semakin besar nilai IMB semakin tinggi pula mutu bibit tersebut. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  bibit  kayu  kuku yang diberi perlakuan dengan inokulasi bakteri endofit dan ekoenzim siap untuk dipindahkan ke lapangan.
Salah  satu  faktor  penting  dalam  menentukan kualitas  bibit  sebelum  ditanam  di  lapangan  adalah dengan  nilai  nisbah  pucuk  akar  (NPA).  Nilai  NPA mengacu  pada  klasifikasi  Haase  (2009)  yang menyatakan nilai NPA ideal pada bibit yaitu 1-3. Nilai NPA  pada  bibit  kayu  kuku  berkisar  antara  2,66-5,04. Nilai  NPA  yang  besar  menunjukkan  tajuk  yang dihasilkan lebih besar dibandingkan dengan perkembangan  akar  (Neugebauer et  al. 2020).  NPA dapat  menggambarkan  kesuburan  suatu  media  yang mempengaruhi  kemampuan  akar  dalam  menyerap  air dan hara. NPA yang besar menujukkan ketersediaan air dan  hara  yang  optimal  bagi  tanaman,  sehingga  akar tidak  perlu  memanjang  untuk  mencari  air  dan  hara (Wasis et al. 2015).
Bakteri  endofit  dapat  memacu  pertumbuhan dengan  dua  acara,  yaitu:  (1)  secara  tidak  langsung dengan membantu penyerapan nutrisi dan membentuk resistensi tanaman terhadap hama dan penyakit, dan (2) secara  langsung  dengan  memproduksi  fitohormon seperti  auksin  atau  sitokinin  (Long et  al .  2008). Penggunaan bakteri endofit dengan kode SBP 1, SBP 2 dan  SBP  19  terbukti  belum  dapat  meningkatkan pertumbuhan  bibit  kayu  kuku  pada  fase  vegetatif. Meskipun  demikian, penggunaan bakteri  endofit pada bibit kayu kuku menghasilkan daya hidup bibit 100%. Peran  bakteri  endofit  dapat  dipengaruhi  oleh kesesuaian  tanaman  inang  dengan  bakteri  endofit tertentu sehingga bakteri endofit dapat mengkolonisasi tanaman  inang  tanpa  menyebabkan  infeksi  patogen (Long et al . 2008).
Secara  umum,  inokulasi  bakteri  endofit  pada tanaman  kayu  kuku  memberikan  hasil  positif  pada perkecambahan  benih  dan  pertumbuhan  bibit  kayu
kuku.  Inokulasi  bakteri  endofit  dengan  kode  SBP  19 dapat  meningkatkan  laju  perkecambahan  benih  kayu kuku  sehingga  dapat  digunakan  untuk  melakukan budidaya  tanaman  kayu  kuku  secara  generatif. Inokulasi SBP19 dapat menyeimbangkan pertumbuhan pucuk  dan  akar  bibit  kayu  kuku.  Inokulasi  bakteri endofit  secara  umum  tidak  berpengaruh  signifikan terhadap  pertumbuhan  bibit  kayu  kuku,  tetapi  juga tidak  menimbulkan  pengaruh  yang  negatif  bagi pertumbuhan bibit. Aplikasi ekoenzim pada perlakuan kontrol  memberikan  hasil  yang  positif  terhadap  berat basah,  berat  kering  dan  nilai  IMB  serta  dapat menyeimbangkan  pertumbuhan  pucuk  dan  akar  bibit kayu  kuku.  Aplikasi  ekoenzim  dapat  memengaruhi efektivitas  bakteri  endofit,  baik  pengaruh  positif maupun  negatif,  bergantung  pada  jenis  bakteri  yang dipakai.  Aplikasi  ekoenzim  tidak  dianjurkan  pada aplikasi  bakteri  SBP  1  karena  dapat  menurunkan efektivitas  bakteri  tersebut  pada  pertumbuhan  bibit kayu kuku.

## SIMPULAN
Inokulasi  bakteri  endofit  pada  benih  kayu  kuku berpengaruh signifikan terhadap peubah laju perkecambahan  benih.  Inokulasi  bakteri  SBP19 menghasilkan  laju  perkecambahan  tercepat  selama 33,67 hari dan menghasilkan daya kecambah terbanyak dengan 42,67% benih  berkecambah. Inokulasi  bakteri endofit  dan  aplikasi  ekoenzim  pada  bibit  kayu  kuku tidak  berpengaruh  signifikan  terhadap  peubah  tinggi, diameter,  jumlah  daun,  berat  basah  total,  dan  berat kering  total.  Inokulasi  bakteri  SBP  2  atau  SBP  19  + ekoenzim  memberikan  pengaruh  yang  sama  dengan kontrol  pada  semua  peubah  yang  diamati.  Ekoenzim dapat  menurunkan  efektivitas  bakteri  SBP  1,  terlihat dari penurunan berat basah total dan berat kering total, dan peningkatan nilai NPA bibit kayu kuku. Nilai NPA bibit kayu kuku berkisar antara 2,66-5,04 dan nilai IMB berkisar  antara  0,41-0,93,  sehingga  bibit  siap  untuk dipindahkan ke lapangan.

## DAFTAR PUSTAKA
Alfaizin  D, Suhartati,  Kurniawan  E.  2016.  Benih  dan perkecambahan kayu kuku ( Pericopsis mooniana THW). Info Teknis Eboni 13(1):1-11. https://doi.org/10.20886/ buleboni.5070.
Asyi’ah S, Adelina E, Made U.  2019.  Pengaruh suhu air  panas  dan  lama  perendaman  giberelin terhadap  pematahan  dormansi  palem  putri ( Veitchia Merrilli ). J. Agrotekbis. [diakses 2021 Jul  8] 7(6):712–72.  http://jurnal.faperta.untad. ac.id/index.php/agrotekbis/ article/view/589.
Damayanti  AI.    2018.    Pengaruh  kombinasi  isolat bakteri  endofit  asal  kebun  kopi  Kalibendo terhadap jumlah populasi nematoda Pratylenchus  coffea dan  pertumbuhan  bibit
tanaman kopi  arabika ( Coffea arabica L.) serta pemanfaatannya  sebagai  serial  poster  [skripsi]. Jember: Universitas Jember.
Fathurrahman  F,  Wangiyana  GAS.    2018.    Pengaruh lama  perendaman  H 2 SO 4 terhadap  pematahan dormansi  biji  asam  ( Tamarindus  indica L.). Jurnal  Silva  Samalas 1(1):61-69.    https://e- journal.undikma.ac.id/index.php/jss/article/vie w/3671/2514.
Gusmaini, Aziz SA, Munif A, Sopandie D, Bermawie N.  2013.  Potensi  bakteri  endofit dalam upaya meningkatkan  pertumbuhan,  produksi,  dan kandungan andrografolid pada tanaman sambiloto. Jurnal Littri .  19(4):167-177. Gusmaini,  Kartikawati  A.    2019.    Potensi  bakteri endofit asal tanaman lada sebagai pelarut fosfat dan  pengikat  nitrogen  serta  penghasil  IAA. Jurnal Littri. 25(1):11-21. DOI: http://dx.doi.org/10.21082/littri.v25n1.2019.
Gusmaini,  Kartikawati  A,  Nurhayati  H.    2019. Pengujian bakteri endofit terhadap efisiensi hara pada  pertumbuhan  tanaman  lada  di  Lampung. Jurnal Pertanian Tanaman Industri. 25(2):100- 106. http://dx.doi.org/10.21082/jlittri.v25n2. 2019.100-107.
Haase  DL.  2009.    Understanding  Forest  seedling quality: measurements and interpretation. Tree Planter’s Notes 52(2):24-29.
Hapsari  AT,  Darmanti  S,  Hastuti  ED.    2018. Pertumbuhan  batang,  akar  dan  daun  gulma ketumpangan  ( Pilea  microphylla (L.)  Liebm.). Buletin  Anatomi  dan  Fisiologi 3(1):79-84. https://doi.org/10.14710/baf.3.1.2018.79-84. Harni R, Ibrahim MSD.  2011.  Potensi bakteri endofit menginduksi  ketahanan  tanaman  lada  terhadap infeksi Meloidogyne incognita . Jurnal Littri .17(3): 118-123. http://dx.doi.org/ 10.21082/jlittri.v17n3.2011.118-123.
Hidayati U, Chaniago IA, Munif A, Siswanto, Santosa DA.    2014.    Potensi  kultur  campuran  bakteri endofit  sebagai  pemacu  pertumbuhan  bibit tanaman  karet. Jurnal  Penelitian  Karet 32(2):129  –  138.    https://doi.org/10.22302/ ppk.jpk.v32i2.159.
Krisnawati  A,  Adie  MM.    2016.    Ragam  karakter morfologi  kulit  biji  beberapa  genotip  plasma nutfah kedelai. Buletin Plasma Nutfah 14(1):14- 18. http://dx.doi.org/10.21082/blpn.v14n1. 2008.p14-18.
Lesilolo  MK, Riry J, Matatula  EA.  2013.  Pengujian viabilitas  dan  vigor  benih  beberapa  jenis tanaman yang beredar di pasaran Kota Ambon. J Agrologi. 2(1):1-9. http://dx.doi.org/ 10.30598/a.v2i1.272.
Long  HH,  Schmidt  DD,  Baldwin  IT.    2008.    Native bacterial  endophytes  promote  host  growth  in  a species-specific manner; phytohormone manipulations do not result in  common growth responses. Plos  Digital  Health. 3(7):1-10. https://doi.org/10.1371/ journal.pone.0002702.
Marjenah, Matius P, Hura A.  2021.  Aplikasi air kelapa pada  perkecambahan  benih  kalangkala  ( listea garciae Vidal)  dengan  perlakuan  perendaman dan pemeraman. Jurnal AGRIFOR .  20(3):139- 152. https://doi.org/10.31293/agrifor.v20i1.5091. Marthen, Kaya E, Rehatta H. 2013. Pengaruh perlakuan
pencelupan dan perendaman terhadap perkecambahan  benih  sengon  ( Paraserianthes falcataria L.). J Ilmu Budidaya Tanaman 2(1):1- 85. http://dx.doi.org/10.30598/a.v2i1.273.
Miljakovi´c  D,  Marinkovi´c  J,  Tamindži´c    G,  Ðor devi´c V, Tintor, B.; Miloševi´c D. Ignjatov M,
Nikoli´c Z. 2022.  Bio-priming  of soybean with Bradyrhizobium japonicum and Bacillus megaterium : strategy to improve seed germination  and  the  initial  seedling  growth. Plants 11:1927-1942.  https://doi.org/10.3390/ plants11151927.
Monalisa  A.    2020. Bakteri  Endofit:  Pemacu Pertumbuhan  Tanaman  dan  Penghasil  Enzim . Bandung: CV. Patra Media Grafindo.
Nasrul  N,  Fridayanti  N.    2014.    Pengaruh  lama perendaman  dan  suhu  air  terhadap  pemecahan dormansi benih sengon ( Paraseriathes falcataria (L.)  Nielsen). Jurnal  Agrium 11(2):129-134. https://doi.org/10.29103
/agrium.v11i2.618.
Neugebauer  K, El-Serehy  HA, George  TS, McNicol JW,  Moraes  MF, Sorreano  MCM, White  PJ. 2020.  The influence of phylogeny and ecology on  root,  shoot  and  plant  ionomes  of  14  native Brazilian  species. Physiologia  Plantarum 168(4):790-802. https://doi.org/
10.1111/ppl.13018.
Noviyanty  Y,  Hepiyansori,  Insani  TD.    2021.    Uji aktivitas  senyawa  flavonoid  dari  ekstrak  etanol kulit  buah  mangga  ( Mangifera  indica L.) terhadap Staphylococcus aureus . Jurnal Oceana Biomedicina 4(1):38-52.  http://dx.doi.org/10. 30649/obj.v4i1.67.
Neupane K, Khadka R.  2019.  Production of garbage enzyme from different fruit and vegetable waste and evaluation of its enzymatic and antimicrobial  efficacy. TUJM .  6(01):113-118. DOI:https://doi.org/10.3126/tujm.v6i0.26594.
Nursyamsi, Toaha AQ.  2017.  Tahapan sterilisasi dan skarifikasi  benih  kayu  kuku  ( Pericopsis mooniana THW) untuk mempercepat perkecambahan  secara in  vitro . Info  Teknis EBONI 14(1):11-21.    https://doi.org/10.20886 /buleboni.5091.
Noviyanty  Y,  Hepiyansori,  Insani  TD.    2021.    Uji aktivitas  senyawa  flavonoid  dari  ekstrak  etanol kulit  buah  mangga  ( Mangifera  indica L.) terhadap Staphylococcus aureus . Jurnal Oceana Biomedicina. 4(1):38-52.  http://dx.doi.org/10. 30649/obj.v4i1.67.
Oktaviana  Z,  Ashari  S,  Purnamaningsih  SL.    2016. Pengaruh perbedaan umur masak benih terhadap
hasil  panen  tiga  varietas  local  mentimun ( Cucumis sativus L.). Jurnal Produksi Tanaman 4(3):218-223. http://protan.studentjournal.ub.ac.id/index.php/ protan/article/ view/284.
Puspita  F,  Saputra  SI,  Merini  J.    2018.  Uji  beberapa konsentrasi  bakteri Bacillus sp.  endofit  untuk meningkatkan pertumbuhan bibit kakao ( Theobroma  cacao L.). J  Agron  Indonesia. 46(3):322-327. DOI: https://dx.doi.org/10.24831/jai.v46i3.16342. Sadjadi  B.    2006. Fisiologi  Lingkungan  Tanaman . Yogyakarta: UGM Press
Sadjad  S,  Muniarti  E,  Ilyas  S.    1999. Parameter Pengujian  Vigor  Benih  dari  Komparatif  ke Simulatif .  Jakarta: PT Grasindo Sandi  ALI,  Indriyanto,  Duryat.    2014.    Ukuran  benih dan  skarifikasi  dengan  air  panas  terhadap perkecambahan  benih  pohon  kuku  ( Pericopsis mooniana) . J  Sylva  Indonesia. 2(3):83-92. http://dx.doi.org/10.23960/jsl3283-92.
Sartiyana  N.    2020.    Studi  komparatif  bakteri  endofit tunggal  dan  konsorsium  dalam  mengendalikan ( Meloidogyne spp.)  pada  tanaman  tomat [skripsi].  Bogor: Institut Pertanian Bogor.
Sodakh  TD,  Sumampow  DMF,  Polii  MGM.    2017. Perbaikan  sifat  fisik  dan  kimia  tailing  melalui pemberian amelioran berbasis bahan organik .  J. Eugenia .23(3):130-137. https://doi.org/10.35791/eug.23.3.2017.18965.
Sudomo  A,  Santosa  HB.    2011.    Pengaruh  media organik dan tanah mineral terhadap pertumbuhan  dan  indeks  mutu  bibit  mindi. Jurnal  Penelitian  Hutan  dan  Konservasi  Alam 8(3):263-271.    https://doi.org/10.20886/jphka. 2011.8.3.263-271.
Suhartati,  Nursyamsi,  Alfaizin  D.    2015.    Mengenal morfologi,  tipe  buah  dan  biji  pada  pohon  kayu kuku ( Pericopsis mooniana THW). Info Teknis EBONI 12(2):87-96.  https://doi.org/10.20886 /buleboni.5060.
Trisna C, Nizar M.  2018.  Aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah pepaya muda ( Carica papaya L.) terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus  aureus secara  in  vitro. Jurnal Medikes 5(2):96-103.  https://doi.org/10.36743/ medikes.v5i2.51.
Wasis B, Mulyana D, Winata B.  2015.  Pertumbuhan se  mai  jabon  ( Anthocepalus  cadamba )  pada media bekas tambang pasir dengan penambahan sub  soil  dan  arang  tempurung  kelapa. Jurnal Silvikultur Tropika 6(2):93-100. http://docplayer.info/49806897-Pertumbuhan- semai-jabon-anthocephalus-cadamba-pada- media-bekas-tambang-pasir-dengan- penambahan-sub-soil-dan-arang-tempurung- kelapa.html.
Welfalini  ST, Suartha NI, Sudipa PH. 2023. Uji daya hambat eko-enzim terhadap perumbuhan bakteri Streptococcus spp.  yang  diisolasi  dari  jaringan ektodermal  kulit  anjing. Buletin  Veteriner Udayana 15(2):169-176. DOI: 10.24843/bulvet.2023.v15.i02.p02 Win YC.  2011. Eco-enzyme Activating the Earth’s Self Healing Power . Malaysia: Summit Print SDN. Yuliandewi NW, Sukerta IM, Wiswasta IGNA.  2018.
Utilization  of  organic  garbage  as  "eco  garbage enzyme" for lettuce plant growth ( Lactuca sativa L.). International  Journal  of  Science  and Research 7(2):1521-1525. DOI: 10.21275/ART2018367.