## PENGARUH PEMBERIAN AIR PERASAN JERUK NIPIS (CITRUS AURANTIFOLIA SWINGLE) TERHADAP KADAR KOLESTEROL PADA MENCIT HIPERKOLESTEROLEMIA
The Effect of Giving Water the Light of Lime (Citrus Aurantifolla Swingle) to Cholesterol Levels in Hypercolesterolemia Mencit

## Dewi Pangestuti
Bagian Farmakologi dan Terapi, Fakultas Kedokteran UISU Jln. STM No.77, Suka Maju Medan, Sumatera Utara, Email : pangestuti241073@gmail.com

## Abstrak
Jeruk  nipis  (Citrus  Aurantifolia)  mengandung  flavonoid  utama  dalam  jeruk  nipis,  yaitu  herperidin. Hesperidin  dapat  membantu  mengurangi  kadar  kolesterol  total  dan  memiliki  sifat  hiperkolesterolemia. Hiperkolesterolemia adalah faktor risiko independen utama penyakit jantung koroner (PJK). Penelitian ini bertujuan  untuk  mengetahui  ada  tidaknya  pengaruh  ekstrak  air  jeruk  nipis  secara  oral  dengan  kadar kolesterol  pada  tikus  hiperkolesterolemia.  Isi  penelitian  eksperimental  ini  dirancang  mengikuti  desain kontrol acak dan post test only desain kelompok kontrol dengan menggunakan 24 tikus (Mus musculus) strain  pria  dewasa  DD  Webster  dibagi  menjadi  4  kelompok:  kelompok  kontrol  (P0)  yang  Diberikan adlibitum,  (P1)  yang  diberi  hiperkolesterolemia  0,2  cc,  (P3)  yang  diberi  hiperkolesterolemia  0,2  cc  dan ekstrak  kapur  air  0,3  cc  dengan  lambung  sonde  sehari  sekali  selama  15  hari.  Pada  hari  ke-46  tikus dilakukan  dislokasi  leher.  Hasil  data  dianalisis  dengan  uji  One  Way-Anova  dan  dilanjutkan  dengan  uji post-hoc.  Hasil  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  pemberian  ekstrak  air  jeruk  nipis  0,3  cc  per  tikus secara oral dapat menurunkan kadar kolesterol hiperkolesterolemia tikus dibandingkan pemberian ekstrak air jeruk nipis 0,1 cc orraly per tikus.
Kata kunci : jeruk nipis, hesperidin, tingkat kolesterol, hiperkolesterolemia

## Abstract
Lime  (Citrus  Aurantifolia)  contains  of  main  flavonoid  in  limes,  that  is  herperidin.  Hesperidin  can  help reducing  total  Cholesterol  level  and  has  the  property  of  hypercholesterolemic.  Hypercholesterolemia  is the main factor independent risk factor of coronary heart disease (CHD). This study intend to determine whether or not the effect od water lime extract orally with cholesterol level in the hypercholesterolemia mice.  This  isi  an  experimental  study  designed  following  randomize  control  design  and  post  test  only control  group  design  by  using  24  mice  (Mus  musculus)  adult  male  strain  DD  Webster  divided  into  4 groups:  control  group  (P0)  that  Given  adlibitum,  (P1)  that  given  hypercholesterolemia  0,2  cc,  (P3)  that given hypercholesterolemia 0,2 cc and water lime extract 0,3 cc by gastric sonde once a day for 15 days. In  the  day46  mice  are  done  neck  dislocation.  Data  result  was  analyzed  by  One  Way-  Anova  test  and continuous and continued with post-hoc test. Result of this study showed that giving of water lime extract 0,3  cc  orally  per  mice  could  reduced  cholesterol  level  of  mice  hypercholesterolemia  than  giving  water lime extract 0,1 cc orraly per mice.
Keywords: lime, hesperidin, cholesterol level, hypercholesterolemia

## PENDAHULUAN
Organisasi  Kesehatan  Dunia  (WHO) melaporkan  bahwa  kadar  kolesterol  yang tinggi  dalam  darah  menyumbang  56%  dari kasus  penyakit  jantung  koroner  di  seluruh dunia  dan  menyebabkan  sekitar  4,4  juta kematian  setiap  tahunnya.  Penyakit  jantung koroner terutama disebabkan oleh aterosklerosis,  yaitu  penyempitan  pembuluh darah koroner yang mengakibatkan insufisiensi  aliran  darah  ke  miokardium. Salah  satu  penyebab  aterosklerosis  adalah
tingginya kadar kolesterol darah. Di Indonesia,  sekitar  36  juta  penduduk,  atau sekitar  18%  dari  total  penduduk  Indonesia, menderita hiperkolesterolemia. (Stephanie et al, 2010).
Citrus  aurantifolia swingle merupakan nama  ilmiah  dari  jeruk  nipis.  Sebutan “lime” dalam  bahasa  Inggris  justru  berasal dari  Arab,  yaitu limun dan  Persia,  yaitu limou. Tanaman jeruk nipis yang tumbuh di Indonesia  berasal  dari  Birma  Utara,  Cina Selatan,  India  sebelah  utara,  tepatnya  di
Himalaya,  serta  Malaysia  yang  dibawa  oleh orang Belanda. Selain vitamin C, kandungan flavonoid  utama  dalam  jeruk  nipis  yaitu hesperidin  dapat  membantu  menurunkan kadar kolesterol. Hesperidin
dapat menghambat kerja enzim 3-hydroxy- 3methylglutaryl coenzim A-reductase sehingga  dapat  menekan  sintesis  kolesterol oleh hati dan dapat meningkatkan konsentrasi reseptor LDL. (Kurnia, 2014). Hesperidin merupakan
flavonoid spesifik pada buah jeruk yang memiliki sifat anti  hiperkolesterolemik.  Hesperidin  paling banyak  ditemukan  pada  jeruk  yang  masih muda  dan  berwarna  hijau,  konsentrasinya meningkat selama penyimpanan. Hesperidin memiliki efek signifikan dalam menurunkan kadar  kolesterol,  kadar  kolesterol  LDL  dan meningkatkan kadar kolesterol HDL. Hesperidin  berperan  sebagai scavenger yang menangkap radikal bebas dan mencegah  kerusakan  akibat  proses  oksidasi (Haryanto & Sayogo, 2013). Menurut Aresta Wulan dalam penelitiannya  menyatakan  bahwa  jeruk nipis berpengaruh dalam penurunan kolesterol  tetap  pada  tikus sprague  dawley (Aresta, 2014)
Penurunan  kadar  kolesterol  plasma ditunjukkan pada penelitian Bok et al. pada tahun  1999  yang  memberikan  hesperidin pada  30  tikus  jantan.  Namun,  pada penelitian Demonty et al . pada tahun 2010 yang  memberikan  hesperidin  sintesis,  tidak didapatkan  efek  hipokolesterolemik  dari hesperidin (Haryanto & Sayogo, 2013).

## Metodologi Penelitian
Jenis  penelitian  ini  dilakukan  dengan menggunakan  metode  eksperimen  yang didesain  mengikuti  rancangan randomize control  design dan post  test  only  control grup  design untuk  mengetahui  pengaruh  air perasan jeruk nipis terhadap kadar kolesterol pada mencit hiperkolesterolemia.
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium FMIPA Biologi Universitas Sumatera Utara. Penelitian  menggunakan  mencit  jantan (Dewasa) berusia 8 minggu dengan berat 25- 40  gr. Mencit  diperoleh  dari  Laboratorium
FMIPA USU. Mencit penelitian di
tempatkan  pada  kandang  yang  terbuat  dari bahan plastik yang berukuran 30 X 20 X 10
cm  yang  ditutup  dengan  kawat.  Dasar kandang  dilapisi  dengan  sekam  padi  dan diganti setiap tiga hasri sekali. Mencit dapat mengkonsumsi pakan standar (pellet komersial) 5-8 gr setiap hari dan minum 4-8 ml  (air  PAM)  di  berikan  adlibitum  setiap hari.  Mencit  di  adaptasi  selama  7  hari sebelum diberikan perlakuan. Setelah adaptasi  kemudian  bagi  mencit  dalam  4 kelompok  secara  acak  atau  random.  Masing – masing 6 ekor mencit setiap kelompok P0, P1, P2, P3 setelah itu diberikan perlakuan. Air  perasan  jeruk  nipis,  berasal  dari  buah jeruk  nipis  yang  berkulit  berwarna  hijau yang dibeli dipasar tradisional sambas.

## Pembuatan Pakan diet tinggi lemak
Makanan tinggi lemak yang akan digunakan pada  penelitian  ini  adalah  makanan  berupa pellet  ditambahkan  kolesterol  dari  kuning telur  1,5%,  lemak  kambing  10  %  dan minyak kelapa 1 %.
Cara  mempersiapkan  diet  tinggi lemak  yaitu  dengan  cara  mengikuti  tahap- tahapan dibawah ini. Pertama-tama mempersiapkan  minyak  kelapa  dengan  cara mengambil  daging  kelapa  tua  sebanyak  1 buah dan diparut, diambil patinya kemudian pati  tersebut  dipanaskan  diatas  kuali  hingga terpisah  ampas  dan  minyak  kelapa.  Dan minyak  kelapa  disaring,  diambil  sebanyak 96  ml.  Kedua,  mempersiapkan  kuning  telur puyuh  dengan  memisahkan  kuning  telur dengan putihnya.
Bahan-bahan  yang  telah  disiapkan dicampurkan  dengan  cara  tuangkan  minyak kelapa  yang  baru  saja  disiapkan  dan ditambahkan  air  aquades,  aduk  hingga  rata. Tambahan  kuning  telur  puyuh    kedalam wadah  sedikit  demi  sedikit  sambil  diaduk hingga bahan-bahan tersebut diatas tercampur  dengan  rata.  Kemudaian  berikan ke  mencit  dengan  menggunakan  sonde lambung dengan dosis yang telah ditentukan.
Bahan Jeruk Nipis Jeruk nipis digunakan adalah campuran  air  perasan  jeruk  nipis (Citrus Aurantifolia  Swingle )  beserta  bulir–bulirnya ±  1.050  ml  jeruk  nipis.  Air  perasan    jeruk nipis  yang  digunakan  adalah  air  perasan
jeruk  yang  dibuat  setiap  hari  selama intervensi.

## Prosedur Penelitian Perlakuan Hewan Percobaan
Jumlah total hewan coba yang dipergunakan dalam  penelitian  ini  ada  sebanyak  24  ekor. Penelitian  ini  terdiri  dari  atas  4  kelompok perlakuan, yaitu:
1. Kelompok  I  (P0)  =  terdiri  dari  6  ekor mencit jantan dewasa yang diberi pakan standar selama 45 hari.
2. Kelompok  II  (P1)  =  terdiri  dari  6  ekor mencit jantan dewasa yang diberi pakan standar  selama  15  hari  dan    pakan hiperkolestrerol selama 30 hari
3. Kelompok  III  (P2)  =  terdiri  dari  6  ekor mencit jantan dewasa yang diberi pakan standar  selama  15  hari    dan  pakan hiperkolestrerol 15 hari serta air perasan jeruk nipis 0,1 cc + pakan hiperkolestrerol selama 15  hari 4. Kelompok  IV  (P3)  =  terdiri  dari  6  ekor mencit jantan dewasa yang diberi pakan standar  selama  15  hari    dan  pakan hiperkolestrerol 15 hari serta air perasan jeruk nipis 0,3 cc + pakan hiperkolestrerol selama 15  hari Pemeriksaan  kolesterol  mencit  pada hari  ke-46  sampel  darah  yang  telah diambilkan  diletakan  ke  dalam  tabung  atau wadah  steril  dan  dibawa  ke  Laboratorium
Kesehatan.  Lalu  ambil  serum  darah  yang melalui proses centrifuge dengan memisahkan  antara  darah  dengan  serum darah  dilakukan  oleh  peneliti.  pemeriksaan menggunakan  alat spektrofotometri atau kolometri. Mencit dikatakan turun kolesterol bila ≤ 200mg/dl.

## Analisa Data
Data  dipersentasikan  dalam  bentuk rata-rata  ±  simpang  baku  (rata-rata  ±SD). Dilakukan  uji  normalitas  dan  homoenitas data.  Jika  data  berdistribusi  normal  dan homogen. Maka dilakukan uji ANOVA. Bila terdapat  perbedaan  dilakukan  uji Post  Hoc untuk  melihat  perbedaan  antara  kelompok control  dan  kelompok  perlakukan.  Jika distribusi  data  tidak  normal  atau  tidak homogen,  makan  dilakukan  transformasi data  dan  di  uji  lagi  normalitas  dan homogenitas  data.  Apabila  masih  tidak normal  distribusinya  atau  tidak  homogen maka  di  uji  dengan  uji  Kruskal  Wallis (ANOVA  nonparametric)  untuk  melihat antara  kelompok  control  dan  kelompok perlakuan menggunakan Uji Mann-Whitney. Semua  analisis  data  menggunakan  SPSS 13.0,  dalam  penelitian  ini,  hanya  perbedaan rata-rata  pada    ≤  0,05  yang  dianggap bermakna (signifikan).

## HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN Hasil Penelitian
Dari  hasil  penelitian  yang  dilakukan,  maka  diperoleh  hasil    perhitungan  kadar kolesterol pada masing-masing kelompok ditunjukan pada gambar 1.
Gambar 1. Kadar Kolesterol Pada Mencit Hiperkolesterolemia.
Perlakuan Mencit 1 Mencit 2 Mencit 3 Mencit 4 Mencit 5 Mencit 6 P0 (Kontrol) 167 mg/dl 170 mg/dl 167 mg/dl 172 mg/dl 178 mg/dl 165 mg/dl P1 (Pakan Hiperkolesterol) 204 mg/dl 208 mg/dl 152 mg/dl 195 mg/dl 210 mg/dl 210 mg/dl P2 (Perlakuan 0,1 cc/BB/oral) 161 mg/dl 191 mg/dl 172 mg/dl 167 mg/dl 168 mg/dl 170 mg/dl P3 (Perlakuan 0,3 cc/BB/oral) 180 mg/dl 182 mg/dl 184 mg/dl 148 mg/dl 153 mg/dl 160 mg/dl
Gambar  2 Grafik  Rata-Rata  Kadar  Kolesterol  Pada  Mencit  Hiperkolesterolemia. Keterangan:  P0  =  Makan  dan  minum  adlibitum,  P1=  Pemberian  Pakan Hiperkolesterolemia  0,2  cc,  P2  =  Pemberian  Pakan  Hiperkolesterolemia  0,2  cc  dan Pemberian  Air  Perasan  Jeruk  Nipis  0,1  cc,  P3  =  Pemberian  Pakan  Hiperkolesterolemia 0,2 cc dan Pemberian Air Perasan Jeruk Nipis 0,3 cc.
Gambar 1 menunjukkan peningkatan kadar kolesterol pada perlakuan  mencit  yang  diberikan  pakan hiperkolesterol  (P1).  Kadar  kolesterol tidak  terjadi  penurunan  berarti  pada perlakuan yang diberikan pakan hiperkolesterol  dan  diberikan  air  perasan jeruk  nipis  0,1  cc  (P2).  dan  serta  mencit yang diberikan hiperkolesterol dan diberikan  air  perasan  jeruk  nipis  0,3  cc
(P3) mengalami penurunan yang berarti.
Hasil  analisis  distribusi  data  dan homogenitas data adalah semua data
pengukuran  kadar  kolesterol  terdistribusi normal (p≥0,05), sehingga  tidak  perlu dilakukan uji transformasi data dan dapat dilakukan  uji  ANOVA  satu  arah.  Dari hasil  uji  ANOVA  satu  arah,  ternyata ditemukan  perbedaan  bermakna  kadar kolesterol antara masing-masing kelompok  perlakuan  penelitian.  Oleh karena  itu  perlu  dilakukan  uji  lanjut untuk  melihat  perbedaan  masing-masing kelompok perlakuan dengan uji Post Hoc untuk melihat perbedaan antara P0 P1 P2 P3 Rata - rata kolesterol 169.83 196.5 171.5 167.83 150 155 160 165 170 175 180 185 190 195 200 m g/d l
kelompok kontrol dan kelompok perlakuan (p≤0,05).
Berdasarkan  hasil  uji  Post  Hoc menunjukan  perbedaan  yang  signifikan (p≤0,05) antara  kelompok  kontrol  dan kelompok    perlakuan.  Hasil  nilai  P0  dan
P1 menunujukan hasil perbedaan bermakna. Sedangkan P1 dan P2 menunjukan hasil perbedaan tidak bermakna,  dan  P1  dan  P3  menunjukan hasil perbedaan bermakna antara keduanya. Pembahasan Dari hasil penelitian ini ditemukan  adanya  peningkatan  kadar kolesterol pada kelompok yang diberikan hiperkolesterol (P1) dibandingkan dengan kelompok kontrol (P0). Kelebihan  lipid  yang  dikonsumsi  setiap hari  oleh  mencit  dapat  meningkatkan kadar  kolesterol  pada  mencit.  Hal  ini terjadi  oleh  karena  pakan  tinggi  lemak yang  dikonsumsi  mencit  diabsorbsi dengan  baik.  Pada  jalur  eksogen, menghantarkan lipid yang dikonsumsi ke jaringan  tubuh  dan  hati.  Trigliserida  dan kolesterol  yang  dikonsumsi  bergabung dengan  apoprotein  dalam  mukosa  usus
untuk membentuk kilomikron. Kilomikron  ini  masuk  ke  dalam  aliran darah  melalui  sistem  limfatik,  dan berikatan  dengan  endotel  kapiler  dalam otot  dan  jaringan  adiposa.  Didalam  otot dan jaringan adiposa tersebut, trigliserida terhidrolisis oleh enzim lipoprotein lipase (LPL),  menghasilkan  asam  lemak  yang memasuki  jaringan.  Hati  mengambil kilomikron  renman  residual.  Kilomikron ini  dipecah  untuk  membentuk  kolesterol yang juga disentetis oleh hati (Aaroson & Ward, 2010).
Pemberian  pakan  hiperkolesterol terhadap  mencit  berupa  kuning  telur puyuh  dan  minyak  kelapa  merupakan asupan  lemak  jenuh  yang  menyebabkan hiperkolesterolemia. (Haryanto & Sayogo, 2013) Dari hasil penelitian ini ditemukan  adanya  penurunan  kadar kolesterol pada masing-masing kelompok yang  diberikan  perlakuan  hiperkolesterol
+  0,1  cc  jeruk  nipis  (P2)  dengan
kelompok perlakuan hiperkolesterol (P1). walaupun pada kelompok P2 tidak terjadi penurunan  yang  berarti.  Pada  perlakuan hiperkolesterol  +  0,3  cc  jeruk  nipis  (P3) dibandingkan dengan kelompok perlakuan  hiperkolesterol  (P1)  didapat penurunan  yang  berarti.  Penurunan  ini terjadi karena adanya kandungan flavonoid  utama  dalam  jeruk  nipis  yaitu hesperidin.  (Kurnia,  2014).  Hesperidin merupakan  flavonoid  spesifik  pada  buah jeruk nipis yang memilki sifat hipokolesterolemik. Hesperidine memiliki efek signifikan dalam menurunkan kadar kolesterol, kadar LDL dan meningkatkan kadar HDL. (Haryanto & Sayogo, 2013) Hesperidin dapat membantu menurunkan kadar kolesterol. Hesperidin dapat  menghambat  kerja  enzim 3- hydroxy-3methylglutaryl coenzim A- reductase sehingga dapat menekan sintesis  kolesterol  oleh  hati  dan  dapat meningkatkan  konsentrasi  reseptor  LDL. (Kurnia, 2014). Sesuai dengan penelitian Bok et  al. pada  tahun  1999  yang memberikan  hesperidin  pada  30  tikus jantan. (Haryanto & Sayogo, 2013).
Kesimpulan Dari hasil penelitian dapat disimpulkan:
1. Terdapat peningkatan yang bermakna kadar  kolesterol  antara  perlakuan kelompok  kontrol  (P0)  dengan  yang diberikan pakan hiperkolesterol (P1).
2. Terdapat  penurunan  yang  bermakna kadar  kolesterol  dengan  perlakuan yang  diberi  pakan    hiperkolesterol ditambah  dengan  0,3  cc  jeruk  nipis (P3).

## DAFTAR PUSTAKA
Aaronson, P.I., Ward, Jeremy P.T., 2010.
At a Glance Sistem Kardiovaskular.  Ed.  3.  Jakarta :Erlangga, Hal 78-79 Alwi,  I.,  2010.  Stratifikasi  Risiko Penyakit  Jantung  Koroner  Pada Pasien Dislipidemia. Divisi Kardiologi  Departemen  Penyakit Dalam Fakultas Kedokteran
Univesitas  Indonesia    Vol.  60, No.6. Jakarta. Hal 253 Arisman., 2011. Obesitas, diabetes mielitus  &  dislipidemia:  Konsep, teori,  dan  penganganan  aplikatif. Jakarta: EGC. Hal 125 Gaw, Allan. et al., 2012. Biokimia Klinis :  Teks  Bergambar,  Ed.4.  Jakarta: EGC Haryanto, A., Sayogo,S., 2013. Hiperkolesterolemia: Bagaimana Peran  Hesperidine.  Vol  40,  No  1. Available from: http://www.kalbemed.com/Events. aspx Kurnia,  A.,  2014.  Khasiat  Ajaib  Jeruk Nipis – Dari A-Z untuk Kesehatan dan Kecantikan. Ed.1. Yogyakarta: Rapha Publishing
Stephanie,  L.  et  al.,  2010.  Hubungan antara  pengeluaran  energi  harian dengan  kadar  kolesterol  total  pada pasien  usia  minimal  30  tahun.
Fakultas  Kedokteran  Universitas Tarumanagara.  Vol.16,  No.2,  Hal
106. Wulan,  A.,  2014.  Pengaruh  Pemberian Jus  Pare  (Momordica  charantia  L) dan Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) terhadap Kadar Kolesterol  Total  Tikus  Sprague Dawley Hiperkolesterolemia. Universitas diponegoro, semarang