## Toksisitas Diazinon terhadap Ginjal dan Hepar Tikus Wistar Jantan  ditinjau dari Parameter Biokimia dan Histopatologi
Diazinon Toxicity to Kidney and Liver of Wistar Male Rats in terms of Biochemical and Histopathological Parameters
Desie Dwi Wisudanti 1 , Firman Herdiana 2 , Tegar Syaiful Qodar 2
1 Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Jember e-mail korespondensi: desie.fk@unej.ac.id

## Abstrak
Diazinon merupakan salah satu pestisida jenis organofosfat yang masih sering digunakan oleh petani di Indonesia, dengan efek menghambat enzim asetilkolinesterase, sehingga menimbulkan penumpukan asetilkolin dalam celah sinaps  yang  akan  berujung  pada  inkoordinasi,  konvulsi,  dan  kematian  pada  hama  serangga.  Selain  memiliki  efek neurotoksik  diazinon  juga  dapat  merusak  sel  melalui  mekanisme  stres  oksidatif.  Keracunan  diazinon  berpotensi tinggi menimbulkan kerusakan pada organ ginjal, karena jalur eksresi diazinon dan metabolit aktifnya ialah lewat sistem  urin.  Tujuan  penelitian  ini  untuk  mengetahui  efek  pemberian  diazinon  terhadap  hepar  dan  ginjal  tikus wistar jantan. Dosis diazinon sebesar 40 mg/kgBB, diberikan pada tikus sehari dua kali selama 5 hari, dengan setiap kali pemberian sebanyak 5 ml menggunakan sonde lambung.  Sampel penelitian berupa darah tikus yang diambil secara  intrakardiak  untuk  dilakukan  pemeriksaan  kadar  BUN,  kreatinin  serum,  SGOT,  SGPT,  dan  GSH,  kemudian ginjal dan hepar tikus diambil untuk dibuat preparat histopatologi dan pemeriksaan MDA. Analisis data penelitian ini  menggunakan  uji  T-test  untuk  seluruh  variabel.  Terdapat  perbedaan  bermakna  antara  kelompok  tikus  yang diberi  diazinon  dengan  kelompok  tikus  yang  tidak  diberi  diazinon  didasarkan  pada  kadar  BUN,  kreatinin,  SGOT, SGPT, GSH dan MDA. Pada kelompok tikus yang tidak diberi diazinon menunjukkan gambaran  histopatologi ginjal yang lebih baik dibandingkan dengan yang diberi diazinon.
Kata kunci: diazinon, pestisida, organofosfat

## Abstract
Diazinon  is  an  organophosphate  type  pesticide that  is  still  often  used  by  farmers  in  Indonesia,  with  the  effect  of inhibiting  the  acetylcholinesterase  enzyme,  giving  rise  to  the  accumulation  of  acetylcholine  in  the  synapse  gap which will lead to incoordination, convulsions and death in insect pests. Apart from having the neurotoxic effects of diazinone  it  can  also  damage  cells  through  the  mechanism  of  oxidative  stress.  Diazinone  poisoning  has  a  high potential  to  cause  damage  to  the  kidney  organs,  because  the  diazinone  excretion  pathway  and  its  active metabolites are through the urinary system. The purpose of this study was to determine the effect of diazinone on the liver and renal wistar male kidney. Diazinone dosage of 40 mg / kgBW, given to mice twice a day for 5 days, with each given as much as 5 ml using the gastric sonde. The research sample was in the form of rat blood taken intracardiac to examine BUN levels, serum creatinine, SGOT, SGPT, and GSH, then kidney and liver rats were taken to make histopathological preparations and MDA examinations. Analysis of this research data using the T-test for all variables. There were significant differences between groups of rats given diazinone and groups of rats not given diazinone based on levels of BUN, creatinine, SGOT, SGPT, GSH and MDA. In the group of mice not given diazinone, kidney histopathology was better than those given diazinon.
Keywords: diazinon, pesticides, organophosphates

## Pendahuluan
Proses  penanggulangan  hama  yang  mengganggu aktivitas  pertanian  paling  sering  yaitu  dengan menggunakan  pestisida.  Efek  buruk  yang  dapat terjadi  dari  pemanfaatan  pestisida  ialah  akumulasi residu pada produk pertanian, pencemaran lingkungan,  serta  masalah  kesehatan  pada  manusia dan  hewan  akibat  efek  toksik  non-target  dari penggunaan  pestisida  tersebut.  Berdasarkan World Health  Organisation (WHO)  kasus  keracunan pestisida  pada  pekerja  bidang  pertanian  di  dunia terjadi  sekitar  5  juta  kasus  setiap  tahunnya  dengan tingkat  mortalitas  mencapai  220.000  jiwa.  Kejadian keracunan  pestisida  di  Indonesia  pada  tahun  1990- 2005 terjadi sebanyak 4867 kasus dengan mortalitas sebesar 3789 jiwa (Ma’rufi, 2012).
Pestisida  yang  sering  digunakan  di  Indonesia  ialah jenis  Organofosfat (Raini,  2007).  Organofosfat merupakan  golongan  pestisida  yang  dianjurkan Kementerian  Pertanian  Indonesia  dan  disukai  oleh petani  karena  sifatnya  yang  lebih  cepat  dan signifikan  dalam  membasmi  hama  dibanding golongan  pestisida  lainnya  (Tuhumury et  al., 2012). Salah satu jenis organofosfat yang banyak digunakan ialah diazinon. Diazinon relatif dapat terurai menjadi bentuk turunan lain namun dapat juga meninggalkan residu  di  lingkungan  (Aziz et  al., 2011).  Pada tanaman  sawi  (Brassica  juncea  (L.))  ditemukan adanya  residu  dari  insektisida  diazinon  yang  baru dapat  terurai  setelah  8-35  hari  (Muflihah et  al., 2015),  residu  ini  tentu  berpotensi  terkonsumsi  oleh konsumen. Berdasarkan penelitian yang dilakukan di Taiwan  terdapat  4799  kasus  keracunan  pestisida organofosfat  terhitung  dari  Juli  1985  sampai Desember 2006 (Linn et al., 2008).
Paparan  diazinon  dapat  menyebabkan  efek  toksik berupa  penghambatan  asetilkolinesterase  (AChE) sistem saraf, yang menyebabkan akumulasi asetilkolin  (ACh)  pada  sinapsis  dan neuromuscular junction .  Keracunan  organofosfat  menunjukkan gambaran  yang  heterogen  berkaitan  dengan  krisis kolinergik  serta  kerusakan  fungsi  organ  hepar  dan ginjal  (Amanvermez,  2010) . Hepar  dan  ginjal merupakan  organ  yang  dapat  terpengaruh  karena merupakan organ yang bertugas untuk memetabolisme  dan  mengekskresi  diazinon.  Dalam beberapa  penelitian  sebelumnya  telah  terbukti bahwa  diazinon  dapat  menimbulkan  kerusakan histopatologi  dan  mengganggu  status  biokimia. Pemberian diazinon 10 mg/kgBB dapat meningkatkan  kadar  BUN  dan  kreatinin  serum
sekitar  1,2  kali  lipat  dan  1,1  kali  lipat  dari  kontrol normal (Shah and Iqbal , 2010).
Diazinon  dapat  menyebabkan  akumulasi  Reactive Oxygen Species (ROS), menurunkan enzim superoxidedismutase
(SOD), glutathione peroxidase (GPx),  dan glutathione  reductase (GR) yang  menyebabkan  terjadinya  peroksidasi  lemak yang dibuktikan
dengan
peningkatan malondialdehyde (MDA)  (Husain,  2010;  Ozbek, 2012).  Selain  kerusakan  karena  akumulasi  ROS, diazinon  dapat  menyebabkan  kerusakan  DNA (Poovala et al., 1999) dan kerusakansel melalui jalur apoptosis (Sargazi, 2016).

## Metode

## Hewan Coba
Sampel dalam penelitian ini ialah tikus wistar ( Rattus novergicus ) jantan usia 3 bulan dengan berat badan 150-300 gram. Jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian  ini  ialah  10  ekor  tikus  yang  dibagi  ke dalam 2 kelompok tikus, yaitu kelompok kontrol dan kelompok  perlakuan.  Setiap  kelompok  terdiri  atas  5 ekor tikus. Sebelum diberi perlakuan tikus dilakukan proses  adaptasi  terhadap  lingkungan  baru  selama  7 hari.  Selama  penelitian  tikus  diberi  makan  dan minum  secara ad  libitum. Kelompok  kontrol  diberi akuades  per  oral  dengan  menggunakan  sonde lambung,  sedangkan  kelompok  perlakuan  diberi diazinon  per  oral  dengan  dosis  40  mg/kgBB menggunakan sonde lambung selama 5 hari. Setelah selesai  semua  perlakuan,  tikus  dimatikan  dengan menggunakan  eter  dan  dilakukan  pengambilan sampel. Proses pengambilan  sampel diawali  dengan laparotomi untuk mengambil organ ginjal dan hepar, sedangkan  untuk  sampel  darah  diambil  secara intrakardiak.

## Histopatologi Ginjal
Organ ginjal yang telah diambil difiksasi menggunakan formalin 10% dan dilakukan pembuatan preparat histopatologi dengan pewarnaan  Hematoksilin-Eosin.  Metode  skoring histopatologi  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini berdasarkan penelitian Anggraini, kerusakan sel yang diamati meliputi pelebaran lumen tubulus, akumulasi  sel-sel  debris  dalam  lumen,  vakuolisasi lumen tubulus, pelebaran ruang bowman, degenerasi,  hiperplasia,  kariomegali,  dan  benda- benda  inklusi  (Anggraini,  2008).  Setiap  preparat histopatologi  ginjal  diamati  5  lapang  pandang  di
bawah  mikroskop  dengan  perbesaran  400x, pengamatan  dilakukan  oleh  dua  orang  pengamat dengan metode double blind.

## Histopatologi Hepar
Preparat  histopatologi  hepar  dipulas  menggunakan teknik  pewarnaan  Hematoksilin-Eosin.  Histopatologi hepar diamati menggunakan skoring Roenigk dengan lesi  yang  diamati  berupa  degenerasi  parenkim, degenerasi  hidropis,  dan  nekrosis  sel  hepar.  Setiap preparat diamati di bawah mikroskop pada 5 lapang pandang dengan perbesaran 400x.
BUN (Blood Urea Nitrogen )
Pemeriksaan  urea  serum  dilakukan  dengan  metode Urease-GLDH ( Glutamate dehydrogenase ) enzymatic UV  test.  Persiapan  reagen  dengan  mencampurkan reagen  1  (terdiri  dari  TRIS,  2- Oxoglutarat e,  ADP, urease,  dan glutamate  dehydrogenase (GLDH)) dengan reagen 2 ( nicotinamide adenine dinucleotide + hydrogen (NADH)),  dengan  perbandingan  4  :  1 sehingga  didapat  reagen  baru  atau  reagen  mono. Reagen mono disimpan dalam suhu 15-25 o C selama minimal  30  menit  dan  dihindarkan  dari  sinar matahari.  Tabung  reaksi  diisi  dengan  serum sebanyak 10 µL. Reagen dimasukan ke dalam tabung reaksi  sebanyak  1000  µL.  Larutan  dalam  tabung reaksi  di  vortex  beberapa  saat.  Larutan  dibaca dengan  menggunakan  alat Biolyzer  100  Analytic on yang telah diatur waktu inkubasi selama 2 menit dan panjang  gelombang  340  nm.  Hasil  pemeriksaan didapatkan  kadar  BUN  dan  kreatinin  serum  dalam satuan mg/dL.

## Kreatinin
Pemeriksaan kreatinin dilakukan dengan metode tes kinetik  tanpa  deproteinasi  berdasarkan  metode Jaffe. Prinsip pemeriksaanya ialah kreatinin membentuk  kompleks  warna  jingga-merah  dalam larutan  pikrat  alkali.  Persiapan  reagen  dengan mencampurkan reagen 1 ( Sodium Hydroxide ) dengan reagen  2  ( Picric  Acid )  dengan  perbandingan  4  :1 sehingga  didapat  reagen  kerja.  Tabung  reaksi  diisi dengan  serum  sebanyak  50  µL,  kemudian ditambahkan  reagen  kerja  sebanyak  1000  µL. Larutan dalam tabung reaksi divortex beberapa saat. Larutan  dibaca  dengan  menggunakan  alat Biolyzer 100  Analyticon yang  telah  diatur  waktu  inkubasi selama  2  menit  dan  panjang  gelombang  492  nm. Hasil  pemeriksaan  didapatkan  kadar  BUN  dan kreatinin serum dalam satuan mg/dL.

## SGOT dan SGPT
Metode  yang  digunakan  untuk  mengukur  kadar SGOT  dan  SGPT  ialah  metode  IFCC,  kadar  tersebut didapatkan  dari  nilai  absorbansi  spektofotometer dengan  panjang  gelombang  340  nm  yang  dikalikan dengan faktor koreksi 1745.

## MDA
Pengukuran  kadar  MDA  pada  hepar  tikus  dilakukan menggunakan  metode  spektrofotometri  UV-Vis dengan prinsip pereaksi TBA  yang akan membentuk produk MDA-TBA berwarna merah muda dan diukur dengan  spektofotometer.  Organ  hepar  diambil  dan dipotong  kecil-kecil lalu dicuci dengan menggunakan PBS,  sebanyak  1  gram  dan  digerus  dalam  mortar  di atas  balok  es  kemudian  ditambahkan  NaCl  0,9% dingin.  Setelah  dilakukan  pembuatan  homogenat, kemudian  disentrifugasi  pada  kecepatan  8000  rpm selama  20  menit,  supernatan  diambil,  dan dipindahkan  dalam microtube .  Sebanyak  100  µL supernatan  hepar  ditambahkan  550  µL  akuades steril,  100  µL  TCA,  250  µL  HCl  1  M,  dan  100  µL  Na- Thiobarbiturat.  Homogenat  dipanaskan  dalam waterbath dengan  suhu  100 o C  selama  20  menit, diangkat,  dan  dibiarkan  dingin  pada  suhu  ruang. Selanjutnya, dilakukan sentrifugasi dengan kecepatan  500  rpm  selama  10  menit.  Supernatan diambil,  dan  dipindahkan  dalam microtube baru. Sampel  diukur  absorbansinya  pada  panjang gelombang maksimum 533 nm. Nilai hasil absorbansi sampel  akan  dimasukkan  ke  dalam  formula  kurva standar dan dihasilkan nilai akhir MDA dalam satuan nmol/dL.

## GSH
Metode  yang  digunakan  untuk  mengukur  kadar glutation darah  (GSH)  adalah  metode  Ditio  Bisnitro Benzoate  (DTNB).  Prinsip  pengukurannya  adalah reaksi  antara  DTNB  dengan  GSH  menghasilkan senyawa  DTNB  yang  berwarna  kuning.  Campurkan 0,1  ml  supernatan  hasil  sentrifugasi,  1  ml  buffer natrium  fosfat  (pH  8)  dan  0,5  ml  DTNB  (39,6  mg dalam  100  ml  larutan  natrium  sitrat  1%  untuk memberikan konsentrasi 1 mM). Absorbansi sampel diukur  dengan  spektrofotometer  pada  panjang gelombang 412 nm.

## Hasil
Kadar  BUN,  kreatinin,  SGOT,  SGPT,  MDA,  dan  GSH menunjukkan perbedaan signifikan ketika
dibandingkan antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan (p < 0,05) (Tabel 1).
Tabel 1. Data rata-rata seluruh parameter pemeriksaan
Kelompok Kontrol Diazinon histopatologi ginjal* 2,43 ± 0,19 4,27 ± 0,22 Kadar BUN* 24,08 ± 1,34 28,77 ± 3,27 Kadar Kreatinin* 0,87± 0,39 1,31± 0,13 Histopatologi Hepar* 1,11 ± 0,05 3,13 ± 0,11 SGOT* 81,76 ± 4,99 126,27± 9,17 SGPT* 41,59± 1,52 55,40± 2,01 MDA Hepar* 6,35 ± 0,75 9,23 ± 1,35 GSH* 5,48 ± 0,32 2,40± 0,18
*p < 0,05: terdapat perbedaan signifikan antara kelompok kontrol dan kelompok perlakuan.
Pemeriksaan  histopatologi  hepar,  pengamatan mikroanatomi  hati  menunjukkan  hati  yang  terpapar diazinon  mengalami  perubahan  struktur  berupa gambaran degenerasi parenkim, degenerasi hidropik, dominasi sel nekrosis, dan dilatasi sinusoid (p  <  0,05)  (Gambar  1).  Pada  pemeriksaan histopatologi  ginjal  terdapat  dominasi  gambaran pelebaran  lumen  tubulus,  vakuolisasi,  penumpukan sel  debris,  dan  pelebaran  ruang  bowman  (p  <  0,05) (Gambar 2).
: degenerasi hidropik :  degenerasi parenkim : nekrosis : dilatasi sinusoid Gambar 1. Gambaran histopatologi hati tikus wistar jantan kelompok kontrol (a) dan perlakuan (b) dengan perbesaran 400x. :  pelebaran  lumen  tubulus :  pelebaran  ruang Bowmen :  degenerasi :  vakuolisasi                      : hiperplasia : akumulasi sel-sel debris : kariomegali
Gambar  2.  Gambaran  histopatologi  ginjal  tikus  wistar jantan  kelompok  kontrol  (a)  dan  perlakuan (b) dengan perbesaran 400x

## Pembahasan
Secara umum, insektisida diazinon bersifat neurotoksik  dengan  bertindak  sebagai  inhibitor aktivitas  enzim  asetilkolinesterase.  Namun  dalam beberapa penelitian diketahui bahwa diazinon dapat menyebabkan efek  lain seperti lipid peroksidasi dan gangguan terhadap enzim-enzim antioksidan (Altuntas et  al., 2004).  Hasil  dalam  penelitian  ini menunjukkan
bahwa pemberian diazinon
menyebabkan  perubahan  patologis  pada  jaringan ginjal  dan  hepar  serta  peningkatan  kadar  BUN, serum  kreatinin,  SGOT,  SGPT,  dan  MDA  dalam jaringan  hepar,  sedangkan  tingkat  GSH  tubuh menurun secara signifikan.
Pemberian  diazinon  dengan  dosis  40  mg/kgBB selama  5  hari  menimbulkan  terjadinya  peningkatan kadar  MDA  pada  kelompok  tikus  perlakuan,  hal  ini menunjukkan  bahwa  diazinon  dapat  menginduksi terjadinya  stres  oksidatif  dilihat  dari  terjadinya peningkatan  kadar  MDA  (Altuntas et  al., 2004). Peningkatan  kadar  MDA  yang  terjadi  akibat  induksi diazinon  disebabkan  oleh  peningkatkan  produksi ROS.  Dalam  sebuah  penelitian in  vitro ditemukan bahwa  sel  yang  diinduksi  diazinon  menunjukkan adanya  peningkatan  produksi  ROS  intraseluler  yang menyebabkan  gangguan  keseimbangan  status redoks dalam sel. Induksi stres oksidatif menyebabkan  terjadinya  beberapa  kerusakan  pada protein, lipid, dan DNA yang menghasilkan kematian sel.  Selain  menyebabkan  kematian  sel  secara langsung,  stres  oksidatif  yang  terjadi  juga  akan memicu  peroksidasi  lipid  yang  akan  membuat kerusakan jaringan lebih luas sehingga menimbulkan
perubahan  patologis  pada  struktur  histologi  suatu jaringan,  terutama  pada  hepar  dan  ginjal.  Temuan biomarker  pada  penelitian  ini  yakni  kadar  BUN, kreatinin  serum,  SGOT,  dan  SGPT  mengalami peningkatan  yang  signifikan  pada  pemberian diazinon. Temuan ini terkonfirmasi dengan gambaran  histopatologi  hepar  dan  yang  juga menunjukkan  terjadinya  kerusakan  jaringan.  Hasil temuan  dalam  penelitian  ini  sesuai  dengan penelitan-penelitan  sebelumnya  yang  menunjukkan bahwa  peroksidasi  lipid  akibat  induksi  diazinon utamanya  dapat  menyerang  beberapa  organ-organ tertentu  yakni  jantung  (Akturk et  al. ,  2013)  dan organ  reproduksi  (Aksay et  al., 2013).  Hasil pemeriksaan marker biokimia  lain  yakni  GSH menunjukan  terjadinya  penurunan  yang  signifikan, hal  ini  membuktikan  bahwa  diazinon  tidak  hanya merusak  sel  melalui  peningkatan  produksi  ROS melainkan  juga  melalui  cara  penghambatan terhadap  enzim-enzim  antioksidan.  Enzim-enzim antioksidan  dapat  mencegah  terjadinya  stres oksidatif. Salah satu enzim antioksidan yang memiliki peran cukup besar dalam proses stabilisasi ROS ialah GSH.  GSH  bertugas  untuk  mengubah  hidrogen peroksida  yang  merupakan  produk  hasil  konversi superoksida radikal yang merupakan salah satu jenis ROS  oleh  SOD  menjadi  molekul  air  (H2O)  (Gultekin, 2001). Ketika terjadinya penurunan pada kadar GSH, maka  sel-sel  dalam  tubuh  akan  semakin  rentan mengalami  stres  oksidatif  ketika  zat-zat  yang prooksidan masuk.

## Kesimpulan
Diazinon memiliki efek hepatotoksik dan nefrotoksik, kerusakan  sel  yang  terjadi  akibat  induksi  diazinon disebabkan  oleh  stres  oksidatif  intraseluler  yang dihasilkan, baik disebabkan oleh peningkatan radikal bebas  dalam  sel  maupun  melalui  penghambatan terhadap  enzim  antioksidan.  Oleh  karena  itu, mencegah  terjadinya  penumpukan  radikal  bebas dapat  menjadi  salah  satu  solusi  efektif  untuk mengurangi toksisitas diazinon.

## Daftar Pustaka
Akturk  O,  Demirin  H,  Sutcu  R,  Yilmaz  N,  Koylu  H,
Altuntas  I.  2006.  The  Effects  of  Diazinon  on Lipid  Peroxidation  and  Antioxidant  Enzymes in Rat Heart and Ameliorating Role of Vitamin E  and  Vitamin  C. Cell  Biol  Toxicol .  22(6):455– 461.
Altuntas  I,  Kilinc  I,  Orhan  H,  Demirel  R,  Koylu  H,
Delibas  N.  2004.  The  Effects  of  Diazinon  on Lipid  Peroxidation  and  Antioxidant  Enzymes in  Erythrocytes  In  Vitro.  Human  and Experimental Toxicology. 23: 9-13.
Amanvermez  R, Baydin A,  Yardan T, Basol N, Gunay M. 2010. Emergency laboratory abnormalities in suicidal patients with acute organophosphate  poisoning. Turkish  Journal of Biochemistry–Turk J Biochem . 34(1): 29-34.
Anggraini  DR.    2008.  Gambaran  makroskopis  dan mikroskopis  hati  dan  ginjal  mencit  akibat pemberian  plumbum  asetat  [Tesis].  Medan: Program  Pasca  Sarjana  Universitas  Sumatra Utara.
Aziz T. 2011. Analisis residu pestisida diazinon dalam tanaman kubis (Brassica olarecea)
menggunakan  biosensor  elektrokimia  secara voltametri siklik. J. Prog. Kim. Si . 1(1): 32-40.
Gultekin F, Delibas N, Yasar S, Kilinc I.  2001. In Vivo Changes in Antioxidant Systems and Protective  Role  of  Melatonin  and  a Combination  of  Vitamin  C  and  Vitamin  E onOxidative  Damage  in  Erythrocytes  Induced by  Chlorpyrifos-Ethyl  in  Rats. Arch  Toxicol . 75: 88-96.
Husain  AL.  2010.  Role  of  Oxidative  Stress  in Organophosphate  Insecticide  Toxicity:  Short
Review. Pesticide Biochemistry and Physiology . 98(2): 145-150. doi: 10.1016/j.pestbp.2010.07.006.
Linn TJ, Walter FG, Hung DZ, Tsai JL, Hu SC, Chang JS, Deng  J,  Chase  PB,  Denninghoff  K,  Chan  HM. 2008.    Epidemiology  ofOrganophosphate Pesticide  Poisoning  in  Taiwan. Clinical Toxicology . 46: 794-801. doi: 10.1080/15563650801986695
Ma’rufi  I.  2012.  Perilaku  Penggunaan  Pestisida  dan Kadar Acetil  Cholinesterase dalam  Darah Petani  Tembakau  di  Kecematan  Wuluhan Kabupaten Jember. Jurnal artocarppus Media Pharmaceutica Indonesia. 9(2)
Muflihah YM, Fithria A, Indarti D. 2015. Kromatografi Lapis Tipis-Densitometri untuk Analisis Residu Pestisida Diazinon dalam Sawi Hijau (Brassica juncea L.). Prosiding Seminar Nasional Kimia .
Oksay  T,  Nazıroğlu  M,  Ergün  O,  Doğan  S,  Özatik  O, Armağan A,  ÖzorakA,  Çelik  Ö.  2013. N-Acetyl
Cysteine  Attenuates  Diazinon  Exposure Induced  Oxidative  Stress  in  Rat  Testis. Andrologia . 45(3):171–177.
Ozbek  E.  2012.  Induction  of  oxidative  stress  in kidney. International  Journal  of  Nephrology . 12(1): 1-9. doi: 10.1155/2012/465897.
Poovala  VS, Huang H, Salahudeen AK.  1999.  Role of reactive oxygen metabolites in organophosphate-bidrin-induced renal tubular  cytotoxicity. Journal  of  the  American
Society of Nephrology . 10(8): 1746-1752.
Raini M. 2007. Toksikologi Pestisida dan Penanganan Akibat  Keracunan  Pestisida. Media  Penelitian dan Pengemvangan Kesehatan. 17(3):10-18
Sargazi  Z,  Nikravesh  MR,  Jalali  MR,  Sadeghnia  HR,
Anbarkeh  FR.  2016.  Apoptotic  effect  of organophosphorus insecticide diazinon on rat ovary  and  protective  effect  of  vitamin  E. Iranian Journal of Toxicology . 10(2): 37-44.
Shah  MD and Iqbal  M.  2010.  Diazinon-induced oxidative stress and renal dysfunction in rats. Food  and  Chemical  Toxicology. 48(12):  3345- 3353. doi:10.1016/j.fct.2010.09.003
Tuhumury GNC, Leatemia JA, Rumthe RY, Hasinu JV. 2012.  Residu  Pestisida  Produk  Sayuran  Segar di  Kota  Ambon. Agrologia. 1(2):  99-105. doi:org/10.30598/a.vli2.284