EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr

## Flokulasi Mikroalga Nannochloropsis oculata dengan Kitosan
Emia Sayniri Sembiring, Widianingsih*, Endang Supriyantini
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof. H. Soedarto S.H, Tembalang, Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia
*Corresponding author: widia2506@gmail.com
ABSTRAK: N. oculata adalah salah satu jenis mikroalga yang memiliki kandungan nutisi yang tinggi seperti karbohidrat, protein,  dan lipid,, sehingga banyak dimanfaatkan sebagai  pakan alami pada budidaya udang  ikan, dan ternak N. oculata memiliki ukuran sel yang sangat kecil  berkisar 2-8 µm dan sulit untuk dipanen. Salah satu cara yang efisien untuk pemanenan mikroalga adalah metode flokulasi dengan mengoptimalkan nilai pH. Bahan flokulan yang digunakan adalah kitosan. enelitian ini bertujuan untuk mempelajari efektivitas konsentrasi kitosan untuk flokulasi N. oculata . Rancangan yang  digunakan  adalah  rancangan  acak  lengkap  (RAL)  dan  perlakukan  yang  digunakan  adalah konsentrasi Kitosan dengan 3 kali ulangan. Tahapan pelaksanaan penelitian dimulai dari kultur N. oculata selama  6  hari  Selanjutnya  proses  pemanenan  dilakukan menggunakan  flokulasi  dengan konsentrasi kitosan yang berbeda-beda (15, 20, dan 25 ppm).  Nilai pH akhir yang digunakan adalah 10. Ketika proses flokulasi berlangsung sampel diambil pada menit ke 0, 20, dan 40 untuk mengukur efisiensi  flokulasinya.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  flokulasi N.  oculata menggunakan kitosan dan optimalisasi pH merupakan metode yang efektif dan mudah diterapkan, Hasil penelitian menunjukkan bahwa efisiensi flokulasi yang diperoleh telah mendekati 100% dan  berarti flokulasi berhasil  dilakukan  Flokulasi N.  oculata dengan  menggunakan  konsentrasi  kitosan  15  ppm menunjukkan nilai efisiensi flokulasi sebesar 85,27%. Selanjutnya flokulasi dengan menggunakan konsentrasi kitosan 20 maka akan menghasilkan rata-rata tingkat efisiensi flokulasi sebesar 99,17%, dan konsentrasi kitosan 25 ppm menghasilkan rata-rata tingkat efisiensi flokulasi sebesar 99,99%.
Kata kunci : Flokulasi; Kitosan; Mikroalga; Nannochloropsis oculata

## Microalgae Nannochloropsis oculata Flocculation with Chitosan
ABSTRACT: N. oculata is one type of microalgae that has high nutrients, involved carbohydrates, protein, and lipids.  so it is widely used as natural feed for culture shrimps, fishes,  and   livestock. N. oculata has a very small cell size ranging from 2-8 µm and is difficult to harvest, These factors make it difficult for N. oculata to be harvested. One of the efficient for harvesting microalgae is the flocculation method by optimazing the pH value. The Flocculnt material is chitosan.  The research purpose is to study the effectiveness  of the concentration of chitosan for flocculation of N. oculata The  design  used  was  a  completely  randomized  design.    This  reseach  has  treatment  chitosan concentration with 3 replicates. The research was started by culturing microalgae N. oculate for 6 days.  Furthermore,  the  harvesting  process  was  carried  out  using  flocculation  with  different concentrations  of  chitosan  (15,  20,  and  25  ppm).  The  final  pH  value  used  was  10.  During  the flocculation  process,  samples  were  taken  at  0,  20,  and  40  minutes  to  measure  the  flocculation efficiency. The results showed that flocculation of N. oculata using chitosan and pH optimization was an effective and easy method to apply. The result showed that the flocculation efficiency obtained was  close  to  100%,  and  it means that  the flocculation  was  successful.  Furthermore,  flocculation using  a  chitosan  concentration  20  ppm  will  produce  an  average  level  of  flocculation  efficiency  of 99.17%,  and  a  concentration  of  25  ppm  chitosan  will  produce  an  average  level  of  flocculation efficiency of 99.99%.
Keywords: Flocculation; Chitosan; Microalgae; Nannochloropsis oculata

## PENDAHULUAN
Mikroalga  adalah    tumbuhan  bersel  tunggal  (uniseluler)  yang    berukuran  kecil  (Darsi et  al., 2012).  Mikroalga  banyak  dikultur  dan  dimanfaatkan  karena  memiliki  kandungan  nilai  nutrisi  yang tinggi  seperti  karbohidrat,  protein,  lipid,  dan  sebagainya  (Susilaningsih et  al .,  2014).  Mikroalga memiliki  manfaat  yang  sangat  luas  dalam  berbagai  bidang  seperti  sumber  bahan  baku  untuk produksi  biodiesel,  pakan  fungsional    obat-  obatan,  kosmetik,  maupun  bioremediasi  pada  limbah cair (Jay et al ., 2018). Selain itu, kemampuan tumbuhnya cepat dan tidak membutuhkan area yang terlalu  luas  untuk  memproduksinya,  sehingga  banyak  dibudidayakan  oleh  masyarakat.  Namun demikian,  terdapat  kelemahan  dalam  pemanenan  mikroalga,  khususnya  spesies N.  oculata. Kesulitan  dalam  proses  pemanenan N.oculata karena  ukuran  sel  yang  sangat  kecil  dan  sulit mengendap di dasar media kultur, sehingga ketika dipanen banyak yang lolos terbawa air. Banyak metode  pemanenan  mikroalga  yang  telah  dilakukan  oleh  pembudidaya,  seperti  sentrifugasi, koagulasi,  flokulasi,  filtrasi,  flotasi,  dan  sedimentasi  (Barros et  al .,  2015).  Namun  tidak  semua metode dapat diaplikasikan terutama dalam kultur skala besar. Metode yang dianggap paling efisien adalah dengan flokulasi (pembentukan flok) yaitu salah satu metode pemanenan dengan biaya yang paling hemat (Chua et al ., 2018). Flokulasi adalah kombinasi antara pencampuran bahan flokulan dan  pengadukan,  sehingga  akan  menghasilkan  agregasi  yang  mengendap  (Aji et  al .,  2012). Terdapat  banyak  jenis  flokulan  seperti  Al 2 (SO 4 ) 3 ,  FeCl 3 ,  NaOH,  dan  sebagainya.  Namun  flokulan bebahan  dasar  kimia  tidak  disarankan  untuk  diaplikasikan  pada  industri  pangan,  karena dikhawatirkan mempengauhi mutu pada makanan. Oleh kaena itu dibutuhkan flokulan alami yang bersifat  ramah  lingkungan,  tidak  beracun,  memiliki  kemampuan  mengadsorbsi  yang  tinggi (Kusumaningsih et al ., 2004; Prasetiyo et al ., 2016; Hambali et al ., 2017). Flokulan yang dianggap paling sesuai adalah kitosan karena telah memenuhi seluruh persyaratan tersebut. Meski demikian penggunaan kitosan tunggal sebagai flokulan kurang efektif karena tidak dapat larut dalam air, dan pelarutannya membutuhkan asam asetat. Pelarutan dengan asam asetat akan membuat pH pada media  kultur  menjadi  turun.  Disinilah  pentingnya  perlakuan  pengoptimalan  pH  terhadap  media. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh konsentrasi kitosan terhadap efficiensi flocullation dalam proses pemanenan mikroalga N. oculate .

## MATERI DAN METODE
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah sampel N. oculata dan pupuk walne yang diperoleh dari Balai Besar Perikanan Budidaya Air Payau (BBPBAP) Jepara, kitosan, NaOH, asam asetat, dan aquades. Sedangkan peralatan yang dibutuhkan diantaranya adalah toples kaca 3000  ml,  aerator,  lampu  neon,  termometer, refraktometer,  pH  meter,  neraca  digital,  dan  lain-lain. Metode  yang  digunakan  adalah  eksperimen  laboratorium  dan  rancangan  yang  digunakan  adalah rancangan  faktorial  dua  faktor.  Langkah  awal  yang  dilakukan  dalam  penelitian  ini  adalah  kultur mikroalga N. oculata dalam  wadah toples kaca 3000  ml. Media kultur  diamati setiap hari dengan pengukuran  parameter  kualitas  air  media  secara  berkala.  Pengamatan  dilakukan  terhadap  suhu, salinitas,  dan  pH  setiap  pukul  10.00-11.00  WIB.  Selanjutnya  pada  fase  eksponensial N.  oculata dipersiapkan  untuk  proses  flokulasi.  Lama  kultur  dan  pengamatan  pertumbuhan N.  oculata pada penelitian ini dilakukan pada hari ke-0 (H-0) hingga hari ke-6 (H-6). Lama masa kultur pengamatan N.  oculata berpatokan  pada  penelitian  Meria et  al .  (2015),  yang  menjelaskan  fase  eksponensial dimulai dari hari ke-4 hingga hari ke-6, sehingga pemanenan dilakukan pada hari ke-6.
Flokulasi N. oculata dilakukan pada wadah gelas beaker ukuran 500 ml, dan sampel N. oculata yang digunakan sebanyak 300 ml. Perlakuan flokulasi adalah dengan membagi sampel menjadi 3 kelompok konsentrasi flokulan kitosan, yaitu adalah 15, 20, dan 25 ppm. Ketiga konsentrasi kitosan tersebut  memperoleh  pengulangan  masing-masing  sebanyak  tiga  (3)  kali.  Langkah  awal  yang dilakukan yakni dengan menempatkan kitosan yang telah dipersiapkan ke wadah yang kecil. Kitosan tersebut dilarutkan dengan meneteskan asam asetat sebanyak 1-3 tetes, kemudian ditambahkan ±10  ml  aquades  dan  diaduk  hingga  larut.  Larutan  kitosan  tersebut  dimasukkan  kedalam  gelas beaker  yang  telah  diisi  dengan N.  oculata dan diaduk  menggunakan  magnetic  stirrer  selama  3-5
menit  dengan  kecepatan  100  rpm.  Apabila  larutan  kitosan  telah  larut,  dilakukan  pengukuran  pH untuk mengetahui pH awal media. Selanjutnya sampel tersebut diberikan NaOH sedikit-demi sedikit hingga pH-nya mencapai 10 (Morales et al ., 1985). Setelah itu, sampel diamati hingga mengendap dengan sempurna dan sampel diambil pada menit ke-0, 20, dan 40. Pengambilan sampel dilakukan untuk mengetahui nilai optical density (OD) dan efisensi flokulasi. Efisiensi  flokulasi  ( flocculation  efficiency )  merupakan  pengukuran  yang  dilakukan  untuk mengetahui seberapa besar jumlah sel N. oculata yang dapat dipindahkan dari media kultur (Garcia- Perez et al ., 2014). Nilai FE dihitung dalam satuan persen (%), dimana semakin tinggi nilai FE, maka akan  semakin  banyak  sel N.  oculata yang  mengalami  flokulasi  (Praharyawan  dan  Putri,  2017). Rumus yang digunakan untuk perhitungan  efisiensi flokulasi sampel diadopsi dari penelitian Chua et al . (2018) :
Flocculation efficiency (FE, in%) = (1 − OD Sampel OD kontrol . . ) × 100

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  telah  dilakukan,  diketahui  bahwa  pola  pertumbuhan N. oculata (Gambar  1)  sesuai  dengan  pola  pertumbuhan  mikroalga  pada  umumnya.  Pertumbuhan mikroalga N. oculata terdiri dari empat fase, yaitu fase lag, eksponensial, stasioner, dan kematian. Fase lag atau adaptasi biasanya terjadi selama 1-3 hari pertama kultivasi, fase eksponensial dimulai dari hari ke-4 hingga hari ke-6, selanjutnya fase stasioner dimulai pada hari 7-9, dan fase kematian di hari 10-11 (Meria et al ., 2015). Berdasarkan hasil pengamatan N. oculata pada penelitian ini, fase pertumbuhannya telah sesuai dengan fase pertumbuhan mikroalga pada umumnya, dimana pada fase  lag N.oculata melakukan  penyesuaian  dengan  lingkungan  barunya,  jadi  pertumbuhannya masih belum signifikan (Maulana et al., 2017). Bahkan pada fase tersebut, N. oculata masih belum stabil dan pertumbuhan selnya masih naik-turun, seperti halnya pada hari ke-2 menuju hari ke-3 di media kultur 2 dan 3 (Gambar 1). Sedangkan pada fase eksponensial (hari ke-4 sampai hari ke-6), N. oculata menunjukkan pertambahan jumlah sel yang drastis (Meria et al ., 2015). Pertumbuhan sel N. oculata menunjukkan bahwa kepadatan tertinggi terdapat pada media kultur pertama. Jumlah sel di H-0 kultur pertama yaitu 216x10 6 sel/ml dan jumlah selnya di puncak kultur adalah 324x10 6 sel/ml. Pertumbuhan yang signifikan terihat jelas khusunya di hari ke-3 dan hari ke-6. Sedangkan kepadatan terendah terdapat  pada kultur kedua, dimana jumlah kepadatan sel H-0 hanya 133x10 6 sel/ml dan jumlah selnya di puncak kultur yakni 186x10 6 sel/ml. Selain itu, pada  kultur  kedua  sempat  terjadi  penurunan  jumlah  sel  di  hari  ke-2  menuju  hari  ke-3.  Namun pertumbuhannya kembali naik hingga hari ke-6. Hal tersebut juga terjadi pada kultur ketiga, dimana terjadi penurunan jumlah sel pada hari ke-2 menuju hari ke-3, dan kembali naik hingga hari terakhir. Pertambahan  sel  kultur  kedua  dan  ketiga  terbilang  standar,  tidak  ada  pertambahan  drastis, melainkan sedikit demi sedikit.
0 50 100 150 200 250 300 H-0 H-1
H-2 H-3 H-4 H-5 H-6
D en si tas N . ocu lata
(x 10 6 sel /m l)
Journal of Marine Research Vol 11, No. 4 November 2022, pp. 752-757
Hasil  FE  yang  diperoleh  cukup  baik  dan  hampir  semua  perlakuan  konsentrasi  mendekati angka  100%.  Hasil  yang  diperoleh  dapat  dilihat  pada  Tabel  1  berikut.  Proses  flokulasi  tergolong sangat cepat, karena sampel telah memperoleh nilai FE yang mendekati 100% dalam waktu yang cukup  singkat,  yakni  20  menit.  Menit  terakhir,  yakni  menit  ke-40,  terdapat  sampel  yang  sudah mencapai 100%, yaitu sampel dengan pemberian kitosan konsentrasi 25 ppm, pengulangan 1 dan 2. Hal ini menandakan bahwa proses flokulasi telah berhasil dan sampel telah mengendap di dasar media.  Hasil  yang  diperoleh  sesuai  dengan  penelitian  yang  dilakukan  oleh  Chua et  al .  (2018), dimana Nannochloropsis sp.  telah  berhasil  diflokulasi  hanya  dengan  waktu  selama  20  menit menggunakan kitosan konsentrasi 22 ppm dan pengoptimalan pH hingga 10.
Adapun nilai rata-rata efisiensi flokulasi N. oculata pada menit ke-40 terendah terdapat pada sampel kitosan konsentasi 15 ppm sebesar 85,273%, selanjutny adalah sampel kitosan konsentrasi 20  ppm  sebesar  99,173%,  serta  yang  tertinggi  adalah  sampel  kitosan  konsentrasi  25  ppm  yakni sebesar 99,99%. Penggunaan kitosan dan pengoptimalan pH menghasilkan nilai efisiensi flokulasi yang  lebih  tinggi  dan  waktu  flokulasi  yang  lebih  singkat  daripada  menggunakan  flokulan  lain. Hidayati et al. (2015) melakukan penelitian mengenai perbedaan konsentrasi Al(SO 4 ) 3 untuk flokulasi Nannochloropsis sp..  Konsentrasi  yang  digunakan  diantaranya  50,  100,  150,  200,  250,  dan  300 ppm, serta kontrol yang digunakan adalah NaOH 200 ppm. Hasil yang diperoleh setelah 60 menit adalah nilai efisiensi flokulasi tertinggi diperoleh pada konsentrasi 150 ppm yakni 94,55%. Adapun nilai  efisiensi  flokulasi  kontrol  NaOH  adalah  72,91%.  Dari  segi  jumlah  flokulan,  konsentasi  yang digunakan  dalam  penelitian  Hidayati et  al. (2015)  jauh  lebih  tinggi  daripada  jumlah  konsentrasi flokulan kitosan yang dilakukan pada penelitian ini. Begitu juga dari segi waktu, waktu flokulasi yang dibutuhkan dalam penelitian ini jauh lebih singkat.
Tabel 1. Flokulasi efisiensi N. Oculata
Konsentrasi Kitosan (ppm) pH awal pH akhir OD (0) OD (20) OD (40) FE (0) (%) FE (20) (%) FE (40) (%) 15 7,3 10 2,128 0,797 0,727 -15,520 56,710 60,550 15 7,6 10 1,060 0,060 0,033 42,450 96,770 98,190 15 6,7 10 1,358 0,041 0,054 26,250 97,790 97,080 20 7,0 10 1,922 0,026 0,025 -4,340 98,590 98,650 20 5,8 10 2,102 -0,003 0,001 -14,140 100 99,930 20 7,2 10 2,086 0,014 0,020 -13,240 99,220 98,940 25 6,8 10 1,969 0,455 -0,007 -6,900 75,310 100 25 7,2 10 2,062 0,317 -0,036 -11,960 82,780 100 25 7,3 10 2,242 0,167 0,000 -21,750 90,920 99,980
Keterangan: OD = optical density; FE = Flocculation efficiency
Gambar 4 . Proses flokulasi menit ke-0, 20, dan 40
Journal of Marine Research Vol 11, No. 4 November 2022, pp. 752-757
Banyaknya N. oculata yang diflokulasi adalah 300 ml per medai perlakuan (gelas beaker). Jika diukur  menggunakan  penggaris,  maka  tinggi  keseluruhan  media  adalah  5cm  dari  dasar  media perlakuan. Maka dari itu, posisi pengambilan sampel untuk mengukur optical density (OD) adalah pada titik 2,5 cm atau pada tengah-tengah media. Menit ke-0 flokulasi terlihat jelas bahwa N. oculata dan  air  masih  bercampur.  Menit  ke-20  flokulasi N.  oculata sudah  mulai  terpisah  dari  air  mskipun belum sepenuhnya. N. oculata terlihat membentuk layer berwarna hijau ditengah media, tepatnya pada  3  cm  dari  permukaan  media.  Sedangkan  pada  menit  ke-40,  N.  oculata  benar-benar  sudah mengedap  di  bagian  dasar  media,  dan  terlihat  jelas  bahwa  air  yang  terdapat  di  gelas  geaker berwarna  bening.  Menit  tersebut  juga, N.  oculata berada  4  cm  dari  permukaan  media  tepatnya dibawah  garis  keterangan  100ml.  Hasil  flokulasi  menunjukkan  bahwa  warna  endapan N.  oculata mendekati  warna  asli  N.  oculata  sebelum  diflokulasi.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa  tidak  ada kerusakan  pada  sel N.  oculata, khususnya  pada  bagian  dinding  selnya,  maka  penggunaan pengoptimalan pH 10 cocok dilakukan untuk flokulasi N. oculata . Penggunaan pH yang terlalu tinggi dikhawatirkan merusan dinding sel N. oculata ,  dimana pH yang tinggi menyebabkan kerusakan sel dalam jumlah besar (Yani et al ., 2015). Kadar NaOH yang terlalu tinggi membuat konsentrasi antara sitoplasma sel dan lingkungannya berbeda, sehingga terjadi kerusakan sel dikarenakan dinding sel N. oculata telah mengalami lisis dan perubahan bentuk (Wahyuni et al ., 2001).

## KESIMPULAN
Penggunaan kitosan untuk flokulasi N. oculata dapat dilakukan pada ketiga jenis konsentrasi Yakni 15, 20, dan 25 ppm dengan pengoptimalan pH akhir 10. Hanya dalam waktu 20 menit, hampir semua  nilai  efisiensi flokulasi  (FE) sampel telah mendekati  100%.  Sedangkan  pada menit  ke-40, proses  pengendapan  ( floculasi )    kultur N.  oculate dengan  konsentrasi  kitosan  25  ppm  telah mencapai  nilai  efisien  flokulasi  sebesar  100%.  Rata-rata  nilai  efisiensi  flokulasi    pada  proses pengendapan N.  oculate kitosan  15  ppm  adalah  85,27%,  konsentrasi  kitosan  20  ppm  adalah 99,17%,  dan  konsentrasi  kitosan  dengan  konsentrasi  25  ppm  adalah  99,99%.  Jadi  dapat disimpulkan bahwa konsentrasi kitosan yang paling baik untuk flokulasi pada penelitian ini adalah 25 ppm.

## DAFTAR PUSTAKA
Aji, R.W., Gusniawati, W.S.  & Rokhati, N. 2012. Pengaruh Konsentrasi Kitosan  Terhadap Proses Flokulasi pada Pemanenan Mikroalga. Jurnal Teknologi Kimia , 1(1):28-33.
Barros,  A.I.,  Goncalves,  A.L.,  Simoes,  M.  &  Pires,  J.C.  2015.  Harvesting  Techniques  Applied  to Microalgae: A Review. Renewable and Sustainable Energy Reviews, 41(1):1489-1500 Chua,  E.T.,  Eltanahy,  E.,  Jung,  H.,  Uy,  M.,  Thomas-Hall,  S.R.  &  Schenk,  P.M.  2018.  Efficient Harvesting  of  Nannochloropsis  Microalgae  via  Optimized  Chitosan-Mediated  Flocculation. Global Challenges, 3(1): p.1800038.
Darsi,  R.,  Supriadi,  A.  &  Sasanti,  A.D.  2012.  Karakteristik  Kimiawi  dan  Potensi  Pemanfaatan Dunaliella salina dan Nannochloropsis sp. Jurnal Fishtech, 1(1):14-25.
Garcia-Perez,  J.S.,  Beuckels,  A.,  Vandamme,  D.,  Depraetere,  O.,  Foubert,  I.,  Parra,  R.  & Muylaert, K. 2014. Influence of Magnesium Concentration, Biomass Concentration and pH on Flocculation of Chlorella vulgaris . Algal Research , 3:24-29.
Hambali, M., Wijaya, E. & Reski, A. 2017. Pembuatan Kitosan dan Pemanfaatannya Sebagai Agen Koagulasi-Flokulasi. Jurnal Teknik Kimia , 2(23):28-36
Hidayati, S.,  Nawansih, O. & Febiana, V. 2015. Teknik Pemanenan Mikroalga Nannochloropsis sp. yang  Dikultivasi  Dalam Media  Limbah  Cair  Karet  Remah  Dengan  Flokulan  Aluminium  Sulfat. Jurnal Teknologi Industri & Hasil Pertanian , 20(2):97-108 Jay, M.I., Kawaroe, M. & Effendi, H. 2018. Lipid and Fatty Acid Composition Microalgae Chlorella vulgaris Using  Photobioreactor  and  Open  Pond. IOP  Conference  Series:  Earth  and Environmental Science, 141(2):1-7
Kusumaningsih, T., Masykur, A. & Arief, U. 2004. Pembuatan Kitosan dari Kitin Cangkang Bekicot ( Achatina fulica ). Biofarmasi , 2(2):64-68.
Maulana,  P.M.,  Karina,  S.  &  Mellisa,  S.  2017.  Pemanfaatan  Fermentasi  Limbah  Cair  Tahu Menggunakan  EM4  sebagai  Alternatif  Nutrisi  Bagi  Mikroalga Spirulina sp. Jurnal  Ilmiah Mahasiswa Kelautan dan Perikanan Unsyiah , 2(1):104-112
Praharyawan,  S.  &  Putri,  S.A.  2017.  Optimasi  Efisiensi  Flokulasi  pada  Proses  Panen  Mikroalga Potensial Penghasil Biodiesel dengan Flokulan Ion Magnesium. Biopropal Industri , 8(2):89-98 Prasetiyo,  W.,  Khabibi.,  D.  S.  Widodo.  2016.  Adsorpsi  Ion  Logam  Mg  (II)  Menggunakan  Kitosan Termodifikasi Asam Askorbat. Junal Kimia Sains dan Aplikasi , 17(2):70-74
Susilaningsih,  D.,  Lestari,  S.,  Kusnadi,  K.,  Hidayat,  T.  &  Susanti,  H.  2014.  Efikasi  Limbah  Sagu sebagai    Substrat Kaya Nutrisi Uuntuk Mikroalga Isolat LIPI11-2-AL002. Berita Biologi , 13(3): 301-307
Wahyuni, K.A., Anindiastuti., Sapta, L.M. & Agus, H. 2001. Teknik Penyimpanan dan Kegunaan Nata de Nanno. Direktorat Jendral Perikanan Budidaya Laut, Lampung.
Yani,  A.,  Murwani  S.  &  Rusyani,  E.  2015.  Kultur Nannochloropsis sp.  dan  Pembuatan  Pasta Nannochloropsis Sp.  dengan  Menggunakan  Dosis  NaOH  yang  Berbeda  di  Balai  Besar Perikanan Budidaya Laut (BBPBL) Lampung. Seminar Nasional Swasembada Pangan Polinela. p.588-595
Zulfahmi,  I.,  Meria,  R.  &  Puspitasari,  W.,  2021.  Teknik  Kultur Nannochloropsis sp.  Skala Laboratorium di   Balai  Perikanan  Budidaya  Air  Payau  Ujung  Batee,  Aceh  Besar. Journal  of Biological Sciences and Applied Biology , 1(1):31-38