JFFI. 2018; 5(1) 271-278 www.jurnal.farmasi.umi.ac.id/index.php/fitofarmakaindonesia
AKTIFITAS EKSTRAK JAHE MERAH DALAM MENURUNKAN ASAM URAT PADA KELINCI SERTA ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA BIOAKTIFNYA
Subehan Lallo 1 , Muhammad Mirwan 2 , Adrianti Palino 1 , Nursamsiar 2 , Besse Hardianti 2
1 Fakultas Farmasi, Universitas Hasanuddin
2 Sekolah Tinggi Farmasi Makassar subehan@unhas.ac.id

## ABSTRAK
Jahe merah (Zingiber officinalle var. Amarum) merupakan salah satu tumbuhan yang banyak digunakan sebagai  bumbu  makanan  sehari-hari  dan  juga  berkhasiat  sebagai  obat  tradisional  untuk  mengobati  berbagai penyakit  termasuk  asam  urat.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  menguji  aktifitas  biologi  dari  jahe  merah  dan mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa bioaktif yang tekandung di dalam ekstraknya. Berdasarkan penelitian yang dilakukan terhadap ekstrak etanol jahe merah memperlihatkan kemampuannya dalam menurunkan asam urat pada kelinci yang diinduksi dengan kalium bromat (KBrO 3 ) pada konsentrasi 0,6 b/v yang diamati pada 1 dan 3 jam  setelah  diinduksi  dan  dibandingkan  dengan  allopurinol  yang  digunakan  sebagai  positif  kontrolnya.  Ekstrak etanol jahe merah juga memperlihatkan hubungan konsentrasi dengan penurunan asam urat pada kelinci. Isolasi senyawa bioaktif dalam tanaman ini telah dilakukan dengan menggunakan metode kromatografi dan identifikasi stukturnya  didasarkan  pada  analisis  data  spektrofotometri  dan  NMR.  Berdasarkan  data  spectra  yang  diperoleh terhadap senyawa yang paling dominan yang berhasil diisolasi dan diidentifikasi adalah senyawa 6-gingerol. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol jahe merah memiliki aktifitas dalam menurunkan kadar asam urat dengan senyawa utama 6-gingerol.
Keywords: Jahe merah, Zingiber officinalle var. Amarum, asam urat, 6-gingerol

## I. PENDAHULUAN
Tumbuhan  merupakan  salah  satu  sumber terbesar  dari  alam  yang  digunakan  sebagai  obat tradisional  dan  menjadi  objek  penelitian  dalam pencarian  obat  baru.  Pemanfaatan  tanaman  untuk obat  tradisional  memiliki  kelebihan  tersendiri  yaitu toksisitasnya  rendah,  mudah  diperoleh,  murah harganya  dan  kurang  menimbulkan  efek  samping. Kelebihan  ini  juga  telah  dibuktikan  secara  empiris pada  penggunaan  langsung  oleh  manusia  secara tradisional.  Hal  inilah  yang  menjadi  salah  satu motivasi  untuk  melirik  kembali  potensi  alam  untuk mengupayakan  penanggulangan  berbagai  penyakit atau  gangguan  kesehatan  yang  sering  muncul termasuk  dalam  proses  pencegahannya.  Indonesia termasuk  negara  dengan  sumber  keanekaragaman hayati terbesar di dunia. Kekayaan alam yang sangat berpotensi dan besar ini seharusnya mulai dilakukan pemberdayaan  dan  pemanfaatan  serta  penelitian mengenai  obat  tradisional  untuk  memberikan  bukti ilmiah mengenai khasiat suatu tanaman obat dan juga dapat  digunakan  sebagai  sumber  senyawa  penuntun “lead  compound”  untuk  mensintesis  senyawa  obat baru.  Kemajuan  ilmu  pengetahuan  dan  teknologi dibidang ilmu kefarmasian menimbulkan
perkembangan dan inovasi penemuan obat baru yang berasal dari obat tradisional mulai berkembang pesat.
Kesadaran  masyarakat  akan  pentingnya kesehatan  juga  mengalami  peningkatan,  namun seiring  dengan  hal  tersebut  juga  berkembang berbagai jenis penyakit akibat perubahan gaya hidup yang  lebih  modern  dengan  tingkat  stres  yang  lebih tinggi.  Munculnya resistensi terhadap berbagai jenis bakteri  ataupun  parasit  mengakibatkan  perlunya pengembangan  dan  penemuan  obat  baru.  Kondisi lingkungan  yang  beriklim  tropis  juga  sangat memungkinkan  berbagai  jenis  penyakit  untuk tumbuh berkembang. Salah satu gangguan kesehatan yang  paling  banyak  muncul  diusia  lanjut  adalah penyakit asam urat.
Asam  urat  merupakan  suatu  produk  akhir dari  metabolisme  purin.  Proses  metabolisme  purin sangat  essensial  bagi  tubuh  karena  mampu menghasilkan  komponen-komponen  asam  nukleat penting seperti DNA, RNA, dan kebutuhan energi sel yaitu ATP. Produk akhir dari proses metabolime ini menjadi  bahan  dasar  untuk  pembentukan  asam  urat yang  merupakan  senyawa  yang  sukar  larut  dan apabila  terjadi  pengendapan  serta  jumlah  yang berlebih dalam darah (hiperurisemia) dapat
menyebabkan  gout  (Vincent  dkk,  2003).  Asam  urat dapat  menjadi  sumber  penyakit  bila  kadarnya berlebihan  dalam  darah  (>7  mg/dL)  atau  karena penurunan  eksresi  asam  urat  oleh  ginjal,  dapat  pula karena kombinasi keduanya (Luk dan Simkin, 2005). Berbagai  teknik  pengobatan  telah  dilakukan  untuk mengatasi  penyakit  ini  termasuk  penggunaan senyawa  anti  inflamasi  seperti  anti  inflamasi  non steroid (AINS) dan penggunaan senyawa penghambat enzim xanthin oxidase untuk mengurangi  produksi  asam  urat.  Beberapa  kasus penggunaan anti inflamasi non steroid (AINS) dapat memberikan  efek  samping  berupa  retensi  nitrogen dan hiperkalemia (Sarawek, 2007). Munculnya efek samping dan berbagai kekurangan dari berbagai obat- obat modern yang digunakan saat ini menuntut untuk tetap  mencari  obat  yang  lebih  mujarab  dengan  efek samping yang sekecil mungkin. Salah satu alternatif sumber  bahan  yang  dapat    dikembangkan  untuk membuat bahan obat baru atau obat baru adalah obat tradisional.
Berbagai  jenis  tumbuhan  obat  yang  telah terbukti secara empiris dapat menurunkan kadar asam urat.  Salah  satu  tumbuhan  yang  digunakan  untuk pengobatan  tradisional  untuk  penyakit  asam  urat adalah jahe merah ( Zingiber officinale var. Amarum). Jahe  merah  yang  merupakan  anggota  famili Zingiberaceae  merupakan  tanaman  yang  mudah tumbuh  di  tempat  terbuka  seperti  kebun  dan pekarangan. Tanaman ini juga dapat tumbuh di tanah padat, kering ataupun gembur (Heinrich dan Subroto, 2000). Ada tiga jenis jahe yang telah dibudidayakan di  Indonesia  yaitu:  Jahe  Gajah  ( Zingiber  officinale var. Officinale), Jahe Emprit ( Zingiber officinale var. Rubrum)  dan  Jahe  Merah  ( Zingiber  officinale var. Amarum)  (Wijayakusuma,  2006).  Kegunaan  praktis ketiganya  kadang-kadang  berbeda.  Jahe  gajah  yang ukurannya  besar,  berkulit  putih  atau  kuning  dan rasanya  tidak  terlalu  pedas  dapat  diolah  sebagai manisan  atau  asinan.  Jahe  emprit  yang  ukurannya kecil,  berkulit  putih  atau  kuning  dan  sangat  pedas sering  digunakan  untuk  bumbu  masakan  dan  obat. Jahe  merah  yang  ukurannya  sedang  dan  berkulit merah  umumnya  digunakan  untuk  obat.  Di  antara jahe gajah dan jahe emprit terdapat berbagai variasi ukuran jahe. Jahe ini paling umum ditanam dan sering diperdagangkan berdasarkan daerah asalnya (Sudemo, 2004).
Jenis Zingiber  officinale var.  Amarum merupakan  jenis  yang  sangat  populer  digunakan sebagai  bahan  baku  tradisional.  Hal  ini  disebabkan karena  kandungan  minyak  atsiri,  zat  gingeral,  serta oleoresin  atau  zat  yang  memberikan  rasa  pahit  dan pedas  lebih  tinggi  dibandingkan  dengan  dua  jenis jahe  lainnya,  yaitu  jahe  gajah  dan  jahe  emprit.  Jahe juga  dapat  digunakan  pada  industri  obat,  minyak
wangi,  dan  sampai  pada  industri  jamu  tradisional (Herlina, 2004). Adapun manfaat dan kegunaan lain dari  jahe  merah  secara  empiris  antara  lain  sebagai karminatif,  anti  muntah,  pereda  kejang,  anti pengerasan  pembuluh  darah,  peluruh  keringat,  anti inflamasi, anti mikroba dan parasit, anti piretik, anti rematik,  serta  merangsang  pengeluaran  getah lambung dan getah empedu (Harmono dan Andoko, 2005).
Berdasarkan  uraian  diatas,  maka  timbul suatu permasalahan yaitu untuk membuktikan secara ilmiah apakah ekstrak jahe merah ( Zingiber officinale var. Amarum) memiliki kemampuan dalam menurunkan  kadar  asam  urat  pada  hewan  coba kelinci  dan  mengisolasi  serta  mengidentifikasi komponen  kimia  dari  rimpang  jahe  merah.  Adapun tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui senyawa atau komponen kimia bioaktif dari rimpang jahe merah dengan mengisolasi dan mengidentifikasi dan menguji aktivitas ekstraknya dalam menurunkan kadar  asam  urat.  Manfaat  penelitian  ini  adalah sebagai  salah  satu  sumber  informasi  secara  ilmiah pada  bidang  kefarmasian,  tentang  penggunaan rimpang jahe merah sebagai obat tradisional maupun modern dalam menyembuhkan berbagai penyakit.

## II. METODE PENELITIAN
A. Alat dan Bahan yang Digunakan Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini  adalah  lampu  UV  254  nm  dan  366  nm, seperangkat  alat  kromatografi  lapis  tipis,  alat sentrifus  ( Hettich ),  balon  kateter,  spektrofotometer UV-Vis,  NMR  (Jeol),  Humalyser  ( human  body ), gelas arloji, labu tentukur 100 ml ( Pyrex ), lumpang dan alu, pipet ukur, tabung darah, tabung sentrifuge, timbangan  analitik  ( Sartorius ),  timbangan  gram ( O’hauss ), timbangan hewan ( Berkel ), dan spoit. Bahan-bahan  yang  digunakan  dalam penelitian ini adalah air suling,  etanol, jahe merah ( Zingiber  officinale Linn.Var.rubrum),  n-heksan, etil asetat, ethanol 70%, kertas saring, H 2 SO 4 10%, silica  gel,  reagen  Dragendroff,    H 2 SO 4 2N,  reagen Mayer, reagen wagner, serbuk Fe, HCl pekat, eter, asam asetat anhidrat, H 2 SO 4 pekat, FeCl 3 , silika gel, kalium  bromat  (KBrO 3 ),  natrium  CMC,  reagen untuk analisis asam urat dan tablet Allopurinol.

## B. Pengambilan dan Penyiapan Sampel
Sampel  jahe  merah  ( Zingiber  officinale Linn.Var.rubrum)  diperoleh  dari  Tana  Toraja, Sulawesi  Selatan. Sampel  dibersihkan  kemudian diangin-anginkan  pada  tempat  yang  tidak  terkena cahaya  matahari  langsung  hingga  mengering. Sebanyak kurang lebih 100 g sampel jahe merah yang telah kering, dipotong kecil-kecil kemudian dimasukkan dalam wadah maserasi, lalu
ditambahkan  dengan  cairan  penyari  sampai  sampel terendam  seluruhnya.  Ekstraksi  dilakukan  selam  5 hari,  hasil  ekstraksi  yang  diperoleh  selanjutnya diuapkan hingga diperoleh ekstrak kental.

## C. Identifikasi Golongan Kimia Ekstrak

## 1. Uji Alkaloid
Uji  Alkaloid  dilakukan  dengan  metode Mayer, Wagner dan Dragendorff. Sampel sebanyak 3 mL  diletakkan  dalam  cawan  porselin  kemudian ditambahkan 5 mL HCl 2 M , diaduk dan kemudian didinginkan  pada  temperatur  ruangan.  Filtrat  yang diperoleh  ditambahkan  HCl  2  N  sebanyak  3  tetes  , kemudian  dipisahkan  menjadi  3  bagian  A,  B,  C. Filtrat A ditambah pereaksi Mayer, filtrat B ditambah pereaksi  Wagner,  sedangkan  filtrat  C  ditambah Dragendorf.  Apabila  terbentuk  endapan  pada penambahan pereaksi Mayer, Wagner dan Dragendorf  maka  identifikasi  menunjukkan  adanya alkaloid

## 2. Uji Flavonoid
Sebanyak  3  mL  sampel  diuapkan,  dicuci dengan  heksana  sampai  jernih.  Residu  dilarutkan dalam 20 mL etanol kemudian disaring. Filtrat dibagi 4 bagian A dan B. Filtrat A ditambahkan 0,5 mL HCl pekat  kemudian  dipanaskan  pada  penangas  air,  jika terjadi  perubahan  warna  merah  tua  sampai  ungu menunjukkan hasil yang positif (metode Bate Smith- Metchalf).  Filtrat  B  ditambahkan  0,5  mL  HCl  dan logam Mg kemudian diamati perubahan warna yang terjadi  (metode  Wilstater).  Warna  merah  sampai jingga diberikan oleh senyawa flavon,  warna  merah tua  diberikan  oleh  flavonol  atau  flavonon,  warna hijau  sampai  biru  diberikan  oleh  aglikon  atau glikosida.

## 3. Uji Teroenoid dan Steroid
Ekstrak  dimasukkan  sedikit  dalam  tabung reaksi kecil, lalu dikocok dengan sedikit eter. Lapisan eter  diambil  lalu  diteteskan  pada  plat  tetes,  dan dibiarkan sampai kering. Setelah kering, ditambahkan dua tetes asam asetat anhidrat dan satu tetes  asam  sulfat  pekat.  Apabila  terbentuk  warna orange, merah, atau kuning berarti positif terpenoid. Tetapi  apabila  terbentuk  warna  hijau  berarti  positif steroid.

## 4. Uji Saponin
Uji Saponin dilakukan dengan metode Forth yaitu  dengan  cara  memasukkan  2  mL  sampel kedalam tabung reaksi kemudian ditambahkan 10 mL akuades  lalu  dikocok  selama  30  detik,  diamati perubahan yang terjadi. Apabila terbentuk busa yang mantap  (tidak  hilang  selama  30  detik)  maka identifikasi menunjukkan adanya saponin.

## 5. Uji Fenolik
Sejumlah  kecil  ekstrak  dimasukkan  ke dalam  tabung  reaksi  kecil,  lalu  dikocok  dengan sedikit eter. Lapisan eter dikeringkan pada plat tetes, ditambah larutan  FeCl 3 . Terbentuk  warna ungu biru berarti positif fenolik.

## 6. Uji Tanin
Ekstrak dimasukkan ke dalam tabung reaksi kemudian dikocok dengan air panas hingga homogen kemudian  ditambahkan  FeCl 3 .  Jika  berwarna  hijau biru (hijau hitam) berarti positif adanya tanin katekol sedangkan  jika  berwarna  biru  hitam  berarti  positif adanya tanin pirogalol.
D. Pengujian Aktivitas Asam Urat
1. Penyiapan  Suspensi  Ekstrak  Etanol  Jahe Merah
Ekstrak jahe merah akan diberikan dalam 3 variasi dosis yaitu 0,2 % b/v, 0,4 % b/v, 0,6 % b/v . Untuk membuat suspensi ekstrak dengan konsentrasi 0,2  %  b/v,  sebanyak  0,2  g  ekstrak  digerus  dalam lumpang,  ditambah  larutan  koloidal  Natrium  CMC 1%  sedikit  demi  sedikit  sambil  digerus  hingga homogen, lalu dimasukan ke dalam labu tentukur dan volumenya  dicukupkan  hingga  100  ml.  Untuk membuat suspensi ekstrak dengan konsentrasi 0,4 % b/v dan 0,6 % b/v , diperlukan ekstrak masing-masing 0,4 dan 0,6  gram untuk 100 ml.

## 2. Pemilihan dan Penyiapan Hewan Uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah  kelinci jantan  sebanyak  15  ekor  dengan  bobot  badan  1,5–2 kg  yang  dibagi  dalam  3  kelompok  perlakuan  yaitu kelompok  1  (kontrol  negatif)  yang  diberi  suspensi Natrium CMC 1%, kelompok 2 (kontrol positif) yang diberi  allopurinol,  kelompok  3,  4,  dan  5  diberi suspensi  ekstrak  etanol  jahe  merah  dengan konsentrasi masing-masing 0,2 % b/v, 0,4 % b/v, dan 0,6 % b/v.

## 3. Perlakuan Pada Hewan Uji
Sebelum  perlakuan  hewan  diadaptasikan dengan  lingkungan  selama  1–2  minggu,  lalu ditimbang  untuk  mengetahui  bobot  badannya, kemudian dikelompokkan menjadi 3 kelompok yang masing-masing  terdiri  dari  3  ekor,  lalu  dipuasakan selama 8 jam. Ekstrak etanol jahe merah dari larutan stok di berikan secara per oral pada kelinci kelompok ke-3 (0,2 %b/v), ke-4 (0,4 % b/v), ke-5 (0,6 % b/v). Perlakuan kontrol diberikan untuk kelinci kelompok ke-1  (Natrium  CMC  1  %)  dan  kelompok  ke-2 (Allopurinol 0,058 % b/v).
Pengambilan dan pengukuran darah dilakukan  pada  masing-masing  kelinci  di  tiap kelompok.  Pengambilan  dan  pengukuran  darah
pertama  kali  dilakukan  sebelum  semua  kelinci diberikan  perlakuan.  Pengambilan  dan  pengukuran darah  yang  kedua  kali  dilakukan  setelah  semua kelinci  di  induksi  dengan  KBrO 3 111  mg/kg  BB. Pengambilan dan pengukuran darah yang ketiga kali dilakukan  setelah pemberian obat dan sampel.

## 4. Pengukuran Kadar Asam Urat dalam Darah
Cuplikan darah yang diperoleh (1 ml)  lalu disentrifuge selama 15 menit, akan diperoleh larutan supernatan  yang  kemudian  diukur  absorbsinya dengan menggunakan Humalyser.

## 5. Pengumpulan dan Analisis Data
Pengumpulan data berdasarkan hasil pengamatan  dilanjutkan  dengan  analisis  data  secara statistik  dengan  menggunakan  metode  Rancangan Acak  Lengkap  (RAL)  dan  analisis  lanjutan  dengan metode uji Beda Jarak Nyata Duncan (BNJD).

## E. Isolasi Senyawa
1. Kromatografi Lapis Tipis
Lempeng yang telah diberi garis diaktifkan dalam  oven  dengan  suhu  100 ̊C  selama  15  menit. Ekstrak  kental  kemudian  dilarutkan  kedalam  vial dengan  pelarut,  dan  selanjutnya  ditotolkan  pada lempeng  yang  sudah  diaktifkan.  Dibuat  eluen  n- heksan:  etil  asetat  dimasukkan  kedalam  bejana setelah itu dijenuhkan dengan kertas saring kemudian dielusi.    Dilakukan  pengamatan  pada  penampakan noda dengan menggunakan UV 254 nm dan 366 nm serta pereaksi semprot H 2 SO 4 10%.

## 2. Kromatografi Kolom
Kolom kromatografi terlebih dahulu dibilas dengan  n  heksan-etil  asetat,  dimasukkan  sedikit kapas  kedalam  tabung  bagian  bawah  Kolom kromatografi  terlebih  dahulu  dibilas  dengan  n heksan-etil  asetat,  dimasukkan  sedikit  kapas  pada bagian bawah tabung kolom selanjutnya dipasangkan tegak  lurus  pada  statif.  Ke  dalam  tabung  kolom dimasukkan  sebanyak  30  gram  sedikit  demi  sedikit silica gel sambil diketuk-ketuk tabung kolom hingga memadat.
Ke dalam lumpang digerus sebanyak 5 gram ekstrak kental dan ditambahkan sedikit demi sedikit silica  gel  dan  pelarut,  sambil  di  gerus  hingga homogen.  Kemudian  dimasukkan  ke  dalam  tabung kolom dan di elusi dengan eluen n heksan : etil asetat dengan  berbagai  perbandingan.  Hasil  yang  keluar ditampung  dalam  vial  berupa  beberapa  fraksi. Diambil  masing  –  masing  fraksi  dilakukan kromatografi dengan menggunakan eluen n-heksan : etil asetat. Fraksi yang memiliki kesamaan pada KLT digabung menjadi satu fraksi.

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN
Standarisasi  dalam  kefarmasian  tidak  lain adalah  serangkaian  parameter,  prosedur  dan  cara pengukuran  yang  hasilnya  merupakan  unsur-unsur terkait  paradigma  kefarmasian,  mutu  dalam  artian memenuhi  syarat  standar  (kimia,  biologi  dan farmasi),  termasuk  jaminan  batas-batas  stabilitas sebagai produk kefarmasian umumnya. Dengan kata lain,  pengertian  standarisasi  juga  berarti  proses menjamin  bahwa  produk  akhir  obat  (obat,  ekstrak atau  produk  ekstrak)  mempunyai  nilai  parameter tertentu yang konstan dan ditetapkan terlebih dahulu. Terdapat  dua  faktor  yang  mempengaruhi  mutu ekstrak yaitu faktor biologi dari bahan asal tumbuhan obat dan faktor kandungan kimia bahan obat tersebut (Depkes RI 2000).
Pada  penelitian  ini  dimaksudkan  untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak etanol jahe merah  ( Zingiber  officinale var.  Amarum)  terhadap kadar asam urat kelinci ( Oryctolagus cuniculus ) dan isolasi  serta  identifikasi  senyawanya  dengan menggunakan metode kromatografi dan spektrofotometri.  Jahe  merah  diekstraksi  dengan menggunakan metode maserasi dengan pelarut etanol 70 %. Pelarut ini merupakan pelarut polar yang dapat mengekstraksi  lebih  banyak  kandungan  kimia  yang bersifat  polar.  Metode  maserasi  merupakan  metode ekstraksi  secara  dingin  dengan  membiarkan  pelarut atau cairan penyari masuk kedalam sel sampel secara difusi  dan  melarutkan  senyawa  dengan  jarak kepolaran  yang  sama  dengan  etanol  70%  dalam  air yang  kemudian  keluar  kembali  dari  sel  tumbuhan yang  dijadikan  sampel  dengan  membawa  senyawa kimia atau metabolic sekunder dari tanaman. Metode ini sangat sederhana namun butuh waktu yang lebih lama  untuk  proses  penyariannya  sehingga  dapat mengakibatkan  senyawa  yang  tersari  yang  bersifat kurang stabil akan terurai dan bahkan berubah bentuk menjadi  senyawa  lainnya.  Ekstrak  yang  diperoleh kemudian diliofilisasi untuk menghilangkan penyarinya untuk menghasilkan ekstrak yang kering atau kental.
Pada penelitian uji bioaktifitasnya dilakukan pengujian  kemampuan  dari  ekstrak  jahe  tersebut dalam  menurunkan  kadar  asam  urat  pada  kelinci. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok hewan coba kelinci  dimana  kelompok  pertama  sebagai  kontrol negatif diberikan Na CMC, kelompok kedua sebagai kontrol  positif  diberikan  suspensi  allopurinol, kelompok  ketiga  sebagai  kelompok  perlakuan diberikan  suspensi  ekstrak  etanol  jahe  merah  0,2  % b/v, kelompok keempat sebagai kelompok perlakuan diberikan  suspensi  ekstrak  etanol  jahe  merah  0,4  % b/v,  dan  kelompok  kelima  sebagai  kelompok perlakuan  diberikan  suspensi  ekstrak  etanol  jahe merah  0,6  %  b/v.  Hewan  coba  kelinci  mula-mula
diukur  kadar  asam  urat  awal  sebelum  diberikan perlakuan,  dengan  tujuan  untuk  mengetahui  kadar asam  urat  kelinci  pada  keadaan  normal.  Kemudian hewan coba kelinci diinduksi dengan kalium bromat (KBrO 3 ) dengan dosis 111 mg/kg BB selama 72 jam untuk menaikkan kadar asam urat darah. Mekanisme kerja dari kalium bromat  yaitu dengan  menginduksi hiperurisemia  dan  gout.  Mekanisme  hiperurisemia dari  kalium  bromat  disebabkan  adanya  percepatan metabolisme  purin  dengan  meningkatnya  aktivitas xantin oksidase akibatnya kadar asam urat meningkat dalam  darah  (Watanabe  dkk,  2004).  Setelah  itu diberikan  perlakuan  dengan  pemberian  suspensi ekstrak  etanol  jahe  merah  dengan  konsentrasi berbagai variasi kelompok konsentrasi yang dibandingkan  dengan  kelompok  control  positif suspensi allopurinol 0,06 % b/v dan Na CMC 1 % b/v sebagai  kontrol.  Kadar  asam  urat  darah  kemudian diukur  dengan  humalizer  untuk  mengetahui  efek pemberian masing-masing perlakuan terhadap kadar asam urat darah.
Pada penelitian ini digunakan kontrol positif suspensi  allopurinol.  Senyawa  ini  dipilih  karena kemampuannya yang sangat efektif dalam menormalkan  kadar  asam  urat  dalam  daran  dan kemih  yang  meningkat  (Tan  dan  Rahardja,  2002). Allopurinol  merupakan  senyawa  alternatif  yang digunakan  untuk  meningkatkan  ekskresi  asam  urat melalui penghambatan enzim xantin oksidase dan 80 % diabsorbsi setelah pemberian oral. Seperti halnya asam  urat,  allopurinol  sendiri  dimetabolisme  oleh xantin oksidase menjadi allantoxantin, mempertahankan  kapasitas  untuk  mencegah  xantin oksidase  dan  memiliki  durasi  efek  yang  cukup panjang sehingga terapinya cukup sekali dalam sehari (Katzung, 2001).
Berdasarkan  persen  penurunan  kadar  asam dari  data  pengamatan  terlihat  bahwa  kelompok kontrol  positif  yang  diberikan  suspensi    allopurinol memberikan efek penurunan kadar asam urat sebesar 54%.  Pada  kelompok  perlakuan  yang  diberi  ekstrak etanol jahe merah 0,2% mengalami penurunan kadar asam urat sebesar 26% dan pada kelompok perlakuan yang  diberi  ekstrak  etanol  jahe  merah  0,4% mengalami penurunan kadar asam urat sebesar 37%,
dimana  penurunan  kadar  asam  uratnya  masih  lebih kecil daripada ekstrak etanol jahe merah 0,6% yaitu sebesar  43%.  Sedangkan  kelompok  kontrol  negatif mengalami juga tetap menunjukkan penurunan kadar asam  urat  namun  sangat  kecil dibandingkan dengan semua jenis perlakuan yaitu sebesar 18%.
Data hasil pengamatan menunjukkan bahwa ekstrak  etanol  jahe  merah  0,6%  memberikan  efek menurunkan kadar asam urat darah kelinci yang lebih besar  daripada  ekstrak  etanol  jahe  merah  0,2%  dan ekstrak  etanol  jahe  merah  0,4%.  Ini  disebabkan karena  flavonoid  yang  ada  pada  jahe  merah menghambat  kerja  xantin  oksidase  sehingga  tidak terbentuk  asam  urat.  Efek  flavonoid  sebagai penghambatan enzim xantin oksidase tidak berlangsung  lama  karena  cepat  di  ekskresi  melalui urin.
Berdasarkan analisis statistik dengan menggunakan  metode  Rancangan  Acak  Lengkap (RAL) dan Analisis Sidik Ragam (ASR) memperlihatkan  bahwa  pemberian  ekstrak  etanol jahe  merah  memberikan  efek  yang  sangat  nyata (sangat  signifikan)  terhadap  penurunan  kadar  asam urat pada hewan coba kelinci yang dapat dilihat dari besarnya F hitung yang lebih besar daripada F tabel. Kemudian dilanjutkan dengan uji lanjutan menggunakan uji Beda Nyata Jarak Duncan (BNJD) diperoleh  bahwa  ekstrak  etanol  jahe  merah  dengan konsentrasi 0,6% b/v memberikan efek yang berbeda sangat  nyata  dengan  kontrol  negatif  dan  ekstrak etanol jahe merah dengan konsentrasi 0,2 %, hal ini berarti ekstrak etanol jahe merah dengan konsentrasi 0,6%  b/v  memberikan  efek  penurunan  yang  lebih baik daripada kontrol negatif dan ekstrak etanol jahe merah dengan konsentrasi 0,2%. Serta berbeda nyata dengan ekstrak etanol jahe merah dengan konsentrasi 0,4%  b/v,  hal  ini  berarti  efek  penurunan  ekstrak etanol jahe merah dengan konsentrasi 0,6% b/v lebih besar  dari  ekstrak  etanol  jahe  merah  dengan konsentrasi  0,4%  b/v  tetapi  berbeda  tidak  nyata dengan  kontrol  positif  (allopurinol),  hal  ini  berarti antara  kontrol  positif  dengan  ekstrak  etanol  jahe merah  dengan  konsentrasi  0,6  %  b/v  memberikan efek penurunan yang hampir sama.
Gambar 1. Penurunan Kadar Asam Urat dalam darah Kelinci
Telah dilaporkan bahwa ekstrak etanol daun singkong ( Manihot utilissima Pohl.) dengan konsentrasi 25% dapat menurunkan kadar asam urat dengan  persen  penurunan  sebesar  27  %  (Julianti, 2010).  Berdasarkan  hasil  penelitian  yang  diperoleh dibandingkan  dengan  penelitian  sebelumnya  dapat disimpulkan  bahwa  ekstrak  etanol  jahe  merah ( Zingiber officinale Linn.Var.rubrum) dengan konsentrasi 0,6% mempunyai kemampuan lebih baik dibandingkan  dengan  ekstrak  etanol  daun  singkong ( Manihot utilissima Pohl.) dalam menurunkan kadar asam urat dengan persen penurunan sebesar 43%.
Penelitian  selanjutnya  dilakukan  untuk mengisolasi  senyawa  bioaktif  dari  rimpang  jahe merah  dan  mengidentifikasi  struktur  senyawanya dengan  menggunakan  spektrofotometer  UV  dan NMR. Sebelum proses pemisahan senyawa, dilakukan  terlebih  dahulu  orientasi  eluen  dengan menggunakan  pelarut  Metanol,  Heksan,  Etil  asetat, dan  Kloroform.  Orientasi  dilakukan  menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT) dengan adsorben yang digunakan berupa Silika gel 40 F254. Hasil orientasi menunjukkan  eluen  Heksan  :  Etil  asetat  (4:3) memberikan  pemisahan  yang  baik,  kemudian dilakukan uji identifikasi golongan terhadap ekstrak rimpang  Jahe  Merah.  Dari  hasil  identifikasi golongan,  ekstrak  Heksan  rimpang  Jahe  Merah positif mengandung Tanin dan Saponin.
Berdasarkan  profil  KLT,  heksan:etil  asetat (4:3)  adalah  merupakan  eluen  terbaik  dalam pemisahan  senyawa  ini  kemudian  dilakukan Fraksinasi  dengan    menggunakan  Kromatografi kolom konvensional, dengan fase diam silica gel 40 dan eluen yang berupa komposisi pelarut heksan:etil asetat  dengan  perbandingan  100:0,  90:10,  80:20, 70:30, dan 60:40. Hasil fraksinasi ditampung dalam vial dengan masing-masing ukuran 10 ml
menghasilkan  berjumlah  30  vial  yang  selanjutnya disebut subfraksi.
Subfraksi  yang  telah  diperoleh  kemudian dipantau kembali dengan KLT dengan menggunakan eluen heksan:etil asetat 4:3. Subfraksi  1, 5, 10, 15, 20 dan 30 yang merupakan perwakilan dari 30 vial untuk dilakukan  KLT.  Hasil  KLT  menunjukkan  bahwa penampakkan noda terdapat pada subfraksi 1 dan 15 sehingga  memungkinkan  untuk  dilakukan  KLT kembali  pada  subfraksi  1  sampai  15.  Kromatografi diamati dibawah UV pada 254 nm dan 366 nm. Serta digunakan penampak bercak asam sulfat 10%. Hasil pemantauan dengan kromatografi lapis tipis menunjukkan  adanya  pemisahan  bercak-bercak dengan  jumlah  dan  nilai  Rf  yang  berbeda-beda  dari masing-masing  subfraksi.  Hal  ini  membuktikan bahwa proses pemisahan komponen kimia berdasarkan  tingkat  kepolarannya  sudah  terjadi. Subfraksi  yang  memiliki  kesamaan  profil  KLT disatukan yakni subfraksi 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 dan 15  sehingga  memungkinkan  untuk  dilakukan penggabungan fraksi, kemudian diuapkan. Selanjutnya, fraksi gabung diamati kembali menggunakan  KLT,  dengan  fase  gerak  heksan-etil asetat 4:3, fase diam silica gel 40 dan penampak noda menggunakan UV 254 nm, UV 366 nm, dan dengan penyemprotan  H 2 SO 4 .  Dari  hasil  pengamatan diperoleh 1 fraksi dengan nilai Rf 0,60, dengan UV 254  nm  dan  UV  366  nm  memberikan  penampakan noda  berwarna  ungu,  dan  dengan  pereaksi  semprot H 2 SO 4 menghasilkan warna cokelat.
0 0,5 1 1,5 2 2,5 Kontrol (-) Ekstrak 0,2% Ekstrak 0,4% Ekstrak 0,6% Kontrol (+) Ka d ar Asa m Ura t (mg/d L) Sebelum Induksi Setelah Induksi
Setelah Perlakuan
Gambar 2. Hasil KLT (A) Fraksi ekstrak jahe merah dengan penampak noda H 2 SO 4 . (B) Isolat dengan penampak noda sinar UV 254 nm dan H 2 SO 4 pada lempeng KLT silica gel dielusi dengan hexan:EtoAc (4:3).
Data H-NMR (400 MHz) terhadap senyawa yang  diisolasi  menunjukkan  adanya  signal  δ H 0.87 (3H,  t,  J=6.8  Hz,  H-10),  1.25-1.40  (8H,  H-6,7,8,9), 2.50 (1H, d, J=8.8 Hz, H-4a), 2.54 (1H, d, J=3.2 Hz, H-4b), 2.74 (2H, d, J=7.1 Hz, H-2), 2.82 (2H, d, J=7.1 Hz, H-1), 3.86 (3H, s, OCH 3 ), 4.03 (1H, m, H-5), 6.65
(1H, dd, J=8, 1,9 Hz, H-6’), 6.67 (1H, d, 1,9 Hz, H- 2’), 6.81 (1H, d, J=8 Hz, H-5’). Hal ini menunjukkan adanya gugus metil primer pada δ H 0.87 yang ditandai dengan multiplicity triplet dengan  8 proton metilen pada δ H 1.25-1.40 serta 2 proton metilen lainnya yang berada  pada  posisi  yang  lebih  bergeser  kearah downfield (deshielded) δ H 2.50 (1H, d, J=8.8 Hz, H- 4a),  2.54  (1H,  d,  J=3.2  Hz,  H-4b),  dan  4  proton lainnya  pada  δ H 2.74  (2H,  d,  J=7.1  Hz,  H-2),  2.82 (2H,  d,  J=7.1  Hz,  H-1).  Keberadaan  satu  gugus metoksi  ditandai  dengan  munculnya  signal  pada  δ H 3.86  (3H,  s,  -OCH 3 )  dengan  ciri  signal  intensitas tinggi  sebanyak  3  proton.  Proton  teroksigenasi  juga terdeteksi  dengan  munculnya  sinyal  pada  δ H 4.03 (1H,  m,  H-5).  Gugus  aromatis  terlihat  pada  daerah yang  lebih  deshielded  dengan  geseran  kimia  yang lebih  besar  dari  6  ppm.  Pada  data  H-NMR menunjukkan  keberadaan  signal  tersebut  berupa aromatic dengan ABX system pada δ H 6.65 (1H, dd,
J=8, 1,9 Hz, H-6’), 6.67 (1H, d, 1,9 Hz, H-2’), 6.81 (1H, d, J=8 Hz, H-5’). Berdasarkan data H-NMR ini dan  dengan  membandingkan  dengan  beberapa literature yang telah dilaporkan sebelumnya menunjukkan  senyawa  tersebut  adalah  6-gingerol (Hou  Wo,  2007).  Senyawa  ini  memang  banyak ditemukan dalam tanaman dari family Zingiberaceae termasuk  pada  tanaman  jahe  ( Zingiber  officinale ) atau  pada  lempuyang  wangi  ( Zingiber  aromaticum )
yang  merupakan  senyawa  bioaktif  dengan  berbagai aktifitas  biologi  yang  telah  dilaporkan  (Subehan, 2005).
Gambar 3. Struktur kimia 6-Gingerol

## IV. KESIMPULAN
Penelitian  ini  membuktikan  bahwa  ekstrak etanol jahe merah ( Zingiber officinale Var. Amarum) pada  konsentrasi  0,6  %  b/v  memiliki  kemampuan paling baik untuk menurunkan   kadar asam urat pada hewan  uji  kelinci  serta  6-gingerol  merupakan senyawa  bioaktif  yang  diisolasi  dari  ekstrak  etanol jahe merah.

## V. UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Laboratorium Natural Products  Chemistry,  Institute  of  Natural  Medicine, University  of  Toyama  atas  dukungannya  dalam pengukuran  data  spektra  H-NMR  terhadap  isolat yang diperoleh.

## DAFTAR PUSTAKA
Vincent  M.F.,  Marie  S.,  Race  V.,  Timmerman  T., 2003.  Purine  Metabolism. Hospital  Saint- Luc University . pp.13-17.
Luk  J.  A.,  Simkin  A.  P.,  2005.  Epidemiology  of Hyperuricemia  and  Gout. The  American Journal  of  Managed  Care .  pp.  11,  S435- S442.
Sarawek  S.,  2007.  Xanthine  Oxidase  Inhibition  and Antioksidant Activity Of An Artichoke Leaf Extract (Cynara  scolymus  L.) And  its Compounds.  A  Dissertation  Presented  To The Graduate School Of The University Of Florida  In  Partial  Fulfillment  Of  The Requirements For The Degree Of Doctor Of Philosohy. University Of Florida . p. 19, 21, 25.
Heinrich  M.,  Subroto  A.,  2000.  Gempur  Penyakit dengan  Minyak  Herbal  Papua. Agromedia
Pustaka . Jakarta. pp. 5-8. Wijakusuma H., Sehat dengan Jahe.
http://www.suarakarya.online/news.
Diakses 13 agustus 2006 .
Sudemo  B.,  2004.  Tanaman  Obat  Populer,
Penggempur  Aneka  Penyakit. Agremedia Pustaka Pesona . pp. 1-12.
Herlina  R.,  Murhananto,  Endah  J.,  Listyarini  S.P., Pribadi  S.T.,  2004.  Khasiat  Dan  Manfaat
A B
Jahe  Merah  si  Rimpang  Ajaib. Agromedia Pustaka . pp. 1-12. Harmono, Andoko A., 2005. Budidaya dan Peluang Bisnis Jahe, Penerbit Agromedia Pustaka. Watanabe  S.,  Tajima  Y.,  Yamaguchi  T.,  Fukui  T., 2004. Potassium Bromate-Induced
Hyperuricemia  Stimulates  Acute  Kidney
Damage Oxidative Stress. Journal of Health Science. 647-653. Tan  H.T.,  Rahardja  K.,  2002.  Obat-Obat  Penting, Khasiat, Penggunaan dan Efek-Efek
Sampingnya. ed.5. PT. Elex Media
Komputindo  Gramedia .  Jakarta..  Hal.  319, 321-322 Katzung B. G. 2001. Farmakologi Dasar dan Klinik. Ed. 8. Terjemahan oleh Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga. Salemba Medika . Jakarta. Hal 487 – 490 Julianti  T.B.  2010.,  Pengaruh  Pemberian  Ekstrak Etanol  dan  Infus  Daun  Singkong  ( Manihot utilissima Pohl.) terhadap Kadar Asam Urat Kelinci  ( Oryctolagus  cuniculus) .  Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin . Makassar. pp. 34-36. HouWu,  2007.  Isolation  And  Characterization  Of Natural  Products  From  Ginger  And  A llium ursinum. A  Dissertation  Submited  To  The Graduate  School-New  Brunswick  Rutgers, The  State  University  Of  New  Jersey.  In Partial Fulfillment Of The Requirements For The  Degree  Of  Doctor  Of  Philosohy. Graduate Program In Food Science . P. 81. Subehan,  Usia  T.,  Kadota  S.,  Tezuka  Y.,  2005. Constituents  of Zingiber  aromaticum and Their  CYP3A4  and  CYP2D6  Inhibitory Activities. Chemical  and  Pharmaceutical Bulletin , 53(3). pp. 333-335.