## ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SECARA BIOMOLEKULER BAKTERI PENYEBAB PENYAKIT INFEKSI SALURAN KEMIH YANG RESISTEN TERHADAP ANTIBIOTIK CIPROFLOXACIN DI RSUP PROF.DR.R.D.KANDOU MANADO
Christin M. Sikome 1) , Fatimawali 1) , Trina E. Tallei 2)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115
2) Jurusan Biologi Farmasi FMIPA UNSRAT , 95115

## ABSTRACT
Urinary tract infection (UTI) is the second most common type of infection in the human body. Treatment  of  infectious  disease  generally  use  antibiotics,  the  most  antibiotics  used  for  treatment  of UTI  was  the  flouroquinolon.  The  irrationality  of  antibitics  use  will  lead  to  emergence  of  many  side effects  and  bacterial resistance.  This  study aims to  test  the  resistance  and  identify  bacteria isolated from  the  urine  of  individuals  with  UTI  with  ciprofloxacin  antibiotics.  This  research  is  explorative descriptive.  The  urine  sample  was  taken  from  the  midstream  urine  of  five  participants  who  were willing and indicated with urinary tract infection (UTI) diseases, which had been or in process using ciprofloxacin antibiotics underwent inpatient at Prof. Dr. R. D. Kandou  Hospital. Bacterial isolates obtained  were  tested  for  resistance  against  ciprofloxacin  antibiotics.  The  resistance  result  with  17 isolates  showed  ciprofloxacin  had  a  47.06%  and  a  sensitive  percentage  of  52.94%.  One  isolate  of bacteria  with  high  resitance  levels  was  identified  biomolecularly  using  a  16S  rRNA  gene  and identified as Klebsiella pneumonia bacteria.
Keywords : Urinary tract infections, urine, antibiotic resistant bacteria,ciprofloxacin, 16S rRNA gene.

## ABSTRAK
Infeksi  saluran  kemih  (ISK)  merupakan  jenis  infeksi  kedua  yang  paling  umum  terjadi  di dalam  tubuh.  Pengobatan  penyakit  infeksi  umumnya  menggunakan  antibiotik,  Antibiotik  yang digunakan  untuk  pengobatan  ISK  sebagian  besar  yakni  fluoroquinolon.  Ketidakrasionalan penggunaan  antibiotik  akan  menyebabkan  munculnya  banyak  efek  samping  dan  resistensi  bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk menguji resistensi  dan mengidentifikasi bakteri yang diisolasi dari urin individu  penderita  ISK  dengan  antibiotik  ciprofloxacin.  Penelitian  ini  bersifat  deskriptif  eksploratif. Sampel  urin  diambil  dari  urin  porsi  tengah  ( midstream  urine )  lima  partisipan  yang  bersedia  dan terindikasi penyakit Infeksi Saluran Kemih (ISK) yang telah  atau sementara menggunakan antibiotik ciprofloxacin  yang  menjalani  rawat  inap  di  RSUP  Prof.  Dr.  R.  D.  Kandou.  Isolat  bakteri  yang diperoleh  dilakukan  uji  resistensi  terhadap  antibiotik  ciprofloxacin.  Hasil  Uji  resistensi  dengan  17 isolat  menunjukan  ciprofloxacin  memiliki  persentase resisten 47,06  %  dan  sensitif  sebesar  52,94  %. Satu  isolat  bakteri  dengan  tingkat  resistensi  yang  tinggi  diidentifikasi  secara  biomolekuler menggunakan gen 16S rRNA dan teridentifikasi sebagai bakteri Klebsiella pneumoniae.
Kata kunci : Infeksi saluran kemih, urin, bakteri resisten antibiotik, ciprofloxacin, gen 16S rRNA.

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  salah satu  masalah  dalam  dunia  kesehatan
(Rambiko, 2016). Menurut National Kidney and Urologic Diseases Information Clearinghouse (2011),  infeksi  saluran kemih  (ISK)  merupakan  jenis  infeksi kedua  yang  paling  umum  terjadi  di  dalam tubuh,  Di  Indonesia,  tercatat  sekitar  150 juta  penduduk  di  dunia  tiap  tahunnya terdiagnosis  menderita  ISK  (Rajabnia et al. , 2012). Penderita rawat darurat penyakit  ISK  di  Manado  pada  tahun  2016 tercatat  sebanyak  191  penderita  dalam sepuluh jenis penyakit terbanyak di RSUP Manado  (BPS  SULUT,  2017).    Infeksi saluran kemih digambarkan sebagai keberadaaan mikroba dalam jumlah bermakna di saluran kemih (Behzadi et al ., 2010).
Pengobatan penyakit infeksi
umumnya
menggunakan antibiotik.
Pemakaian antibiotik secara rasional sudah menjadi keharusan. Ketidakrasionalan penggunaan  dan  pemakaian  yang  tidak tepat akan menyebabkan munculnya banyak efek samping dan resistensi bakteri (Sutrisna, 2012). Antibiotik yang digunakan untuk pengobatan ISK sebagian besar yakni fluoroquinolon dan nitrofurantoin (Useng, 2014).
Penelitian Pratiwi (2013) di Jakarta menunjukkan  bahwa  bakteri Enterobacter
aerogees,
Acinetobcter baumanii, Klebsiella ozaenae, Raoultella
ornithynolyca, Morganella morganii, Staphylococcus saprophyticus dan Escherichia  coli telah  resisten  terhadap ciprofloxacin.  Dalam  peneltian  lain  di RSUP  Prof.dr.R.D  Kandou  Manado  telah dilakukan oleh Nua (2016) dengan metode identifikasi konvensional (biokimia) dengan  hasil  ciprofloxacin  memiliki  pola sensitif  sebesar  100%  dengan  intermediet
0%  terhadap  semua  jenis  bakteri  hasil isolasi.
Saat ini metode identifikasi berbasis molekuler yang telah dikembangkan  karena  dapat  mendeteksi secara  cepat  dengan  tingkat  sensitivitas dan spesifisitas yang tinggi yaitu menggunakan  sekuens  gen  16S  rRNA (16S  ribosomal  RNA)  untuk  identifikasi mikroorganisme dan konstruksi filogenetik,  karena  memiliki  laju  evolusi yang rendah (Srinivasan et al ., 2015).
Tingginya fenomena resistensi antibiotik terhadap  bakteri penyebab infeksi saluran kemih di tempat dan waktu yang  berbeda,    memiliki  pola  resistensi yang berbeda pula. Dengan demikian perlu dilakukan  penelitian  mengenai  identifikasi secara biomolekuler dengan menggunakan gen  16S  rRNA  untuk  mengetahui  spesies bakteri  yang  resisten  terhadap  antibiotik ciprofloxacin,  yang  merupakan  antibiotik yang  paling  sering  digunakan.p  antibiotik lain.

## METODE PENELITIAN

## Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian  dilakukan  pada  bulan Januari  –  Maret  2018,  di  Laboratorium Mikrobiologi  Program  Studi  Farmasi  dan Laboratorium Bioteknologi Jurusan Biologi,  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam.

## Metode Penelitian
Penelitian ini menggunakan metode deskriptif eksploratif. Sampel urin diambil dari  urin  porsi  tengah  ( midstream  urine ) lima partisipan yang bersedia dan terindikasi penyakit Infeksi Saluran Kemih (ISK) yang telah atau sementara menggunakan antibiotik ciprofloxacin yang  menjalani  rawat  inap  di  RSUP  Prof. Dr. R. D. Kandou.

## Alat dan Bahan
Alat-alat  yang  digunakan  yaitu erlenmeyer,  gelas  ukur,  gelas  kimia, tabung  reaksi,  rak  tabung  reaksi,  pipet tetes, timbangan analitik, batang pengaduk,  cawan  petri,  jarum  öse,  pinset, inkubator  ( Incucell ), laminar  air  flow (Biotek), termometer,  autoklaf  (ALP), mikropipet (Ecopipette) , mikroskop ( Olympus ), L-Glass, mistar  berskala, kertas  label,  plastik wrap , aluminium  foil ,
kapas,  kasa,  seperangkat  aalat  PCR ( Biometra  T-Personal )  dan  elektroforesis
( Biometra  T-Personal ),  dan  alat  fotografi.
Bahan-bahan yang digunakan yaitu sampel urin  dari  partisipan  yang  bersedia.  Bahan- bahan  lainnya  yang  mendukung  penelitian yaitu  aquades,  Luria  Bertani  Agar,  NaCl, A lcohol 70%, cakram antibiotik ciprofloxacin,  kit  isolasi  DNA  bakteri (Geneaid),  primer  set  (untuk  bakteri),  2x Master  Mix  (Tag  Polymerase,  MgCl 2 , dNTPS)  untuk  amplifikasi  DNA,  ddH 2 O, gel  agarosa,  1X  TBE  buffer  dan  etidium bromida.

## 1. Inokulasi Bakteri
Inokulasi  pada  bakteri  dilakukan dengan  mengambil  1  mL  lalu  diencerkan secara bertingkat sebanyak 7 kali kemudian  disuspensikan  ke  dalam  cawan petri berisi 20 mL media Luria Bertani dan diinkubasi  dalam  inkubator  pada  suhu  35- 36 ºC selama

## 2. Pemurnian Bakteri
Koloni  bakteri  yang  tumbuh  pada  cawan petri kemudian dibedakan berdasarkan ciri morfologi (bentuk, permukaan, warna, dan pinggiran). Masing-masing koloni tersebut dikultur  pada  media  agar  Luria  Bertani yang  telah  memadat  dengan  metode  gores ( streak plate  method ) menggunakan jarum öse  lalu  ditutup  dengan  plastik  kemudian inkubasi pada suhu 37˚C selama 24 jam.
Setiap  koloni  murni  yang  bebas dari hasil pemurnian dipindahkan ke media agar  miring  untuk  mendapatkan  isolat bakteri.

## Uji Resistensi
Bakteri  uji  diambil  dengan  jarum öse  steril  lalu  disuspensikan  ke  dalam tabung  yang  berisi  5  mL  larutan  NaCl 0,9%  hingga  diperoleh  kekeruhan  yang sama  dengan  larutan  standar  MacFarland 0,5.
Suspensi bakteri uji dipipet sebanyak  200  µL  dan  dituangkan  ke seluruh  permukaan  media  agar  LB. Suspensi  diratakan  menggunakan L-Glass dan  diamkan  selama  5  menit.  Cakram ciprofloxacin 5µg ditempatkan pada permukaan  media  agar  LB ditekan menggunakan pingset agar dapat menempel  secara  sempurna  selanjutnya diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama  18-24 jam.
Setelah  diinkubasi,  zona  bening yang terbentuk di sekitar cakram antibiotik diamati dan diameternya diukur menggunakan  jangka  sorong  dengan satuan  milimeter  (mm)  lalu  dibandingkan dengan  pedoman  menurut Clinical  and Laboratorium Standard Institute (CLSI). Identifikasi Bakteri Resisten Ciprofloxacin Secara Biomolekuler 1. Isolasi DNA Genomik
Isolasi  DNA  Genomik  dari  kultur bakteri  dilakukan  dengan  metode spin- column menggunakan Genomic DNA Mini Kit (Geneaid).

## Amplifikasi  gen  16S  rRNA  dengan Teknik PCR
Primer  yang  digunakan  untuk proses  PCR  yaitu  pasangan  primer  baru dikembangkan  oleh  Kolondam  (2018, komunikasi pribadi) yaitu BK-XF
( forward )5’GCYTAAYACATGCAAGTC G-3’dan BK-XR ( reverse ) 5’-
TTGACGTCATCCCCACCTTCC-3’. Amplifikasi dengan teknik PCR dilakukan dengan  variasi  komposisi  reagen  dan kondisi reaksi PCR yang telah dioptimalisasi.  Komposisi  campuran  PCR yaitu  15  µL miliQ  water ,  2  µL  templat DNA,  20  µL  2x  Master  Mix,  dan  1,5  µL masing-masing  primer.  Pengaturan  suhu untuk mesin PCR dimulai dengan denaturasi awal pada 95 o C selama 3 menit yang  kemudian  dilanjutkan  dengan  tahap denaturasi  ( denaturation )  pada  95 o C selama  20  detik,  penempelan  primer  pada DNA  pada  55 o C  selama  20  detik,  dan pemanjangan utas DNA pada 72 o C selama 1  menit  yang  diulang  dalam  35  siklus. Pemanjangan utas DNA terakhir dilakukan pada 72 o C selama 5 menit.

## 3. Elektroforesis dan Visualisasi
Produk PCR dielektroforesis
menggunakan gel agarosa 1% di dalam 1X buffer TBE  ( Tris-Boric EDTA).  Proses elektroforesis dilakukan dengan menggunakan tegangan listrik sebesar 130
Volt selama 20 menit, kemudian divisualisasikan
melalui
UV-
Transiluminator dan didokumentasikan.

## Sekuensing gen 16S rRNA
Proses  sekuensing  dilakukan  di penyedia  jasa  sekuensing  1 st BASE Malaysia. Hasil sekuensing DNA
diinterprestasi  dengan  aplikasi Geneious dan  hasilnya  dianalisis  menggunakan metode  BLAST  melalui  basis  data  daring (dalam  jaringan)  pada  Gen  Bank  (NCBI) untuk mencari kesamaan urutan nukleotida gen  16S  rRNA  dan  menentukan  spesies bakteri yang resisten ciprofloxacin.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Sampel  urin  diperoleh  dari  lima partisipan  yang  bersedia,  terdiri  atas  1 pasien  anak  dan  4  pasien  dewasa  yang sedang  menjalani  rawat  inap  di  Instalasi Rawat  Inap  C  dan  E  RSUP  Prof  DR.R.D Kandou  Manado.  Urin  porsi  tengah ( midstream  urine )  pagi  hari  dari  tiap partisipan  ditampung  dalam  pot  steril, diberi label, kemudian dibawa ke Laboratorium Mikrobiologi. Koloni bakteri  yang  tumbuh  setelah  inkubasi dibedakan  berdasarkan  ciri  morfologi  dan diakuan  pemurnian.  Diperoleh  17  isolat yang di gunakan untuk pengujian resistensi dan identifikasi.
Determinasi bakteri dilakukan dengan  pewarnaan  gram  dengan  hasil bahwa  8  isolat  merupakan  bakteri  Gram positif  dan  9  isolat  lainnya  merupakan bakteri  Gram  negatif  dengan  bentuk  rata- rata  kokus  dan  satu  basil.  Hal  ini    sejalan dengan Okayanti (2017)
dalam penelitiannya  mengenai  urin  pasien  non ISK,  yang  menemukan  bahwa  bakteri Gram negatif lebih banyak ditemukan pada urin  pasien  dibandingkan  Gram  positif, serta  tidak  ditemukannya  bentuk  bakteri lain  selain  kokus  dan  basil.  Akan  tetapi Kline  dan  Lewis  (2016)  menyatakan bahwa  bakteri  Gram  positif  merupakan penyebab  umum  ISK,  khususnya  pada orang  tua,  wanita  hamil,  dan  yang memiilki  faktor-faktor  resiko  lainnya untuk memperoleh ISK.
Uji Resistensi Bakteri Terhadap Antibiotik Pengujian resistensi bakteri
dilakukan  dengan  metode  difusi  ( Kirby- Bauer
disk diffusion method ).
Perbandingan  diameter    zona hambat  yang  dideskripsikan  pada  Tabel  3 menunjukan  bahwa  dari  17  isolat  yang diuji,  8  di  antaranya  menunjukkan  tingkat
resistensi yang tinggi, sedangkan 9 lainnya masih  termasuk  sensitif  dan  tidak  ada intermediate.
Tabel 3. Hasil uji resistensi terhadap
Kode Bakteri Diameter Zona
Bening (mm)
Ket CD11 24,3 S CD12 27,5 S CA11 7,2 R CA12 7,6 R CA13 7,5 R CA14 6,9 R CA15 7,9 R CA16 10,5 R CA17 24,6 S CD21 20,6 S CD22 23,3 S
Dalam  penelitian  lain  yang  di lakukan  oleh  Biswas  (2014)  di  Dhaka Square  hospital,  Bangladesh,  uropatogen yang  diuji  40%  sensitif  dan  60%  resisten
terhadap ciprofloxacin. Studi yang dilakukan oleh Nozarian (2015)
memaparkan  bahwa  bakteri  menunjukan presentasi resistensi terhadap ciprofloxacin yang  lebih  tinggi  pada  pasien  yang menjalani  rawat  inap  di  rumah  sakit  yaitu 46.9%  dibandingkan  dengan  pasien  rawat jalan 30.8%.
Masalah umum seputar pengobatan infeksi  saluran  kemih  yaitu  diagnosis dilakukan  tanpa  pengujian  yang  tepat, yang  mengarah  ke  pengobatan  dengan antibiotik  untuk  bakteri  asimtomatik. Pemberian  antibiotik  tanpa  mengetahui bakteri  tertentu  untuk  ditargetkan,  dapat membunuh  mikroorganisme  yang  baik dalam  tubuh  kita  yang  mempengaruhi kemampuan untuk menangkal
mikroorganisme patogen.
Dengan demikian,  bakteri  target  dapat  menjadi resisten  terhadap  antibiotik  dan  dapat mengubah  permukaan  selnya  sehingga antibiotik tidak lagi mampu membunuh sel bakteri (Schulz et al ., 2016). Dalam artikel yang  sama  ini,  Schulz  juga  menyatakan bahwa  laporan  CDC  ( Centers  for  Disease Control) menunjukkan  bahwa  hampir 40% dari semua antibiotik yang diresepkan untuk  infeksi  saluran  kemih  diduga  dapat dihindari.  Bagi  orang  yang  mengalami infeksi  berulang,  antibiotik  pencegahan dapat  diresepkan.  Orang  yang  menderita kekambuhan ini memiliki resistensi terhadap antibiotik dan harus mengkonsumsi obat-obatan yang
terkadang  lebih  mahal  dan  kurang  efektif. Resistensi antibiotik berulang juga menghasilkan  peningkatan  komorbiditas yang  menaikkan  biaya  medis  dan  secara negatif  mempengaruhi  kualitas  hidup.
Lebih  lanjut,  bagi  orang-orang  yang  lebih sering  menggunakan  antibiotik,  risiko mereka membawa patogen tambahan yang resisten  terhadap  beberapa  antibiotik
CD23 25,2 S CD24 26,6 S CD31 27,7 S CD32 16,2 S CD41 6,7 R CD42 8,3 R
semakin  meningkat  (Brumbaugh  dan
Mobley, 2012).
Organisme yang multiresisten  terhadap  antibiotik  telah teramati,  tidak hanya di lingkungan rumah sakit  tetapi  juga  sering  diidentifikasi  di komunitas,  sehingga  menunjukkan  bahwa reservoir bakteri resisten terhadap antibiotik  telah  hadir  di  luar  rumah  sakit (Munita dan Arias, 2016).
Dalam pengumpulan data sekunder melalui  wawancara,  2  dari  5  partisipan mengaku  memiliki  riwayat  ISK,  dengan kata  lain  sedang  mengalami  ISK  berulang (kekambuhan)  saat  dirawat  pada  periode penelitian  berlangsung.  Hal    ini  sejalan dengan hasil uji resistensi yaitu ditemukannya  isolat  dari  urin  partisipan tersebut  yang  menunjukan  daya  resistensi yang cukup tinggi (Tabel 4).
Tabel 4. Persentase resistensi terhadap
ciprofloxacin S I R Resistensi terhadap ciprofloxacin 9 0 8 Persentase 52,94% 0
% 47,06
*Ket: S = Suceptible, I= Intermediate, R=

## Resistant

## Hasil  Identifikasi  Biomolekuler  Dengan Gen 16S rRNA
Isolat  yang  dilanjutkan  ke  tahap identifikasi  biomolekuler  menggunakan Gen 16S rRNA merupakan bakteri dengan tingkat  resistensi  yang  tinggi  yaitu  bakteri dengan kode CD41.
Berdasarkan  pencarian  pada  basis data dalam jaringan di GenBank menunjukkan bahwa sekuens yang diperoleh  dari  isolat  bakteri  yang  resisten
terhadap  antibiotik  (CD41)  merupakan Klebsiella  pneumoniae dengan  identitas 99%.  Hal  ini  sejalan  dengan  hasil pewarnaan  Gram  yang  menunjukkan bahwa isolat ini berbentuk basil dan Gram negatif.
Presentase  identitas  yang  diperoleh ini  terkonfrimasi  oleh  Tamisier  (2015) dalam penelitiannya mengungkapkan bahwa  nilai  yang  diharapkan  untuk  hasil identifikasi  dengan  Gen  16S  rRNA  antar spesies  yaitu  95%  dan  98,7  % . Gen  16S rRNA mungkin memiliki kesamaan barisan ambang digunakan sebagai indikator,  dan  bukan  sebagai  alat  yang pasti untuk klasifikasi strain bakteri.
Penelitian  yang  dilakukan  oleh Lin  et  al  (2014)  menemukan  agen  bakteri K . pneumoniae memainkan  peran  penting dalam  terjadinya  ISK  Berulang (Recurent Urinary  Tract  Infection) dimana  isolat K. pneumoniae berasal dari pasien yang sama dengan  RUTI  mengungkapkan  sidik  jari genom  yang  identik,  menunjukkan  bahwa K. pneumoniae menyebabkan ISK kambuh meskipun  telah  menjalani  terapi  antibiotik yang tepat. strain K. pneumoniae penyebab RUTI  memiliki  lebih  banyak  adhesi  dan invasif  daripada  strain  kolonisasi  ,  dari data  penelitian  menunjukkan  bahwa  strain K.  pneumoniae mungkin  dapat  bertahan dalam saluran kemih meskipun pengobatan antibiotik  yang  tepat,  dan  daya  rekat  yang lebih  besar  serta  invasif  tinggi,  ini medukung  hasil  penelitian  dimana  isolat yang  diidentifkasi  berasal  dari  urin  pasien dengan ISK berulang.
Dalam studi yang dilakukan Akhtar (2017), K. pneumoniae ditemukan merupakan bakteri yang dominan kedua di antara  semua  uropatogen  yang  diisolasi, dengan  tingkat  prevalensi  (21,4%)  setelah E  coli ,  Beberapa  penelitian  menunjukkan bahwa E.    coli merupakan  organisme
utama  yang  menyebabkan  ISK  pada kebanyakan  pasien  (Al-Badr  dan  Al- Shaikh,  2013;  Pallet  dan  Hand,  201). Imaniah  (2014)  menyatakan  bahwa K. pneumonia sudah  mengalami  resistensi 100%  terhadap  antibiotik  ceftazidim,
ceftriaxon, gentamisin dan trimetoprim/sulfametoxazole. Hasil penelitian oleh Anjaleena (2017)
menunjukan  3  dari  11  isolat Klebsiella pneumonia telah resisten terhadap ciprofloxacin. Menurut  Munita  dan Arias (2016), resistensi terhadap
fluoroquiolon  dapat  terjadi  melalui  tiga jalur  biokimiawi,  yang  kesemuanya  bisa berada  pada  satu  bakteri  yang  sama, sehingga menyebabkan dampak tambahan, seringkali  dampaknya  yaitu  peningkatan resistensi:  (i)  mutasi  pada  gen  yang menyandi  situs  target  fluoroquinolon,  (ii) ekspresi  yang  berlebihan  pompa efflux yang  mengeluarkan  obat  dari  dalam  sel; dan (iii) melindungi situs target fluoroquinolon  oleh  suatu  protein  yang disebut Qnr ( quinolone resistance ). Pasien dengan  ISK  kompleks,  baik  di  komunitas atau rumah sakit,  cenderung menunjukkan keragaman  mikroorganisme  yang  jauh lebih  besar  dengan  resistensi  yang  lebih luas  terhadap  antimikroba  dan  tingkat kegagalan  pengobatan  yang  lebih  tinggi jika  yang  mendasarinya  kelainan  tidak dapat diperbaiki, Semakin tingginya resistensi antimikroba membutuhkan pengembangan  pendekatan  yang  lebih bertarget  untuk  terapi  antimikroba  yang berhasil  di  masa  depan.  (Smelov et al ., 2016).
Meningkatnya  kejadian  resistensi
bakteri Klebsiella pneumonia yang merupakan  salah  satu  uropatogen  ISK telah  memberikan  urgensi  dalam  dunia kesehatan.    Strategi  pencegahan  resistensi
antibotik  seperti  pemberian  edukasi  cara menggunakan  antibiotik  yang  benar  dan pola  hidup  bersih  dan  sehat,  evaluasi terapeutik  dan  pemantauan  pola  resistensi perlu dilakukan.

## KESIMPULAN
1. Hasil  Uji  resistensi  dengan  17 isolat  menunjukan  ciprofloxacin memiliki  persentase  resisten  47,06 % dan sensitif sebesar 52,94 %.
2. Bakteri  yang  berhasil  diidentifikasi dari 1 isolat dengan resitensi tinggi yaitu Klebsiella pneumoniae.

## SARAN
1. Diagnosa  infeksi  saluran  kemih disarankan ditulis berdasarkan klasifikasi secara  jelas dalam rekam medik. 2. Penggunaan
antibiotik ciprofloxacin  perlu  dipehatikan terutama  pada  pasien  dengan  ISK berulang (kekambuhan).

## DAFTAR PUSTAKA
Anjaleena1,  T.  G.  ,  Sasikumari,  O.,
Gopakumar,  T.  2017.    A  Study  on the  Bacterial  Profile  of  Urinary Tract  Infection  in  Antenatal  Cases Attending  a  Tertiary  Care  Unit. Int.J.Curr.Microbiol.App.Sci. 6 (7) : 2423.
https://doi.org/10.20546/ijcmas.201 7.607.286.
Akhtar, N., Rezwanur, R., Shahin, S.2017.
Antimicrobial  sensitivity  pattern  of bacterial Pathogens associated with urinary  tract  infection. Delta  Med Col J. 5(2) :60 .
Al-Badr, A., Al-Shaikh, G. 2013. Recurrent  urinary  tract  infections management  in  women. Sultan
Qaboos  Univ  Med  J . 13(3) :  359– 367.
Badan  Pusat  Statistik  Sulawesi  Utara.
2017. Sulawesi Utara dalam angka . BPS SULUT, Manado.
Behzadi, P., E. Behzadi, H. Yazdanbod, R. Aghapour,  M.  A.  Cheshmeh,  D.  S. Omran.  2010.  A  survey  on  urinary tract  infections  associated  with  the three  most  common  uropathogenic bacteria. Journal of Clinical Medicine 5(2) : 112.
Biswas, R., R. Rabbani., H. S. Ahmed., M. A.  S.  Sarker.,  N.  Zafrin.,  M.
Rahman. 2014. Antibiotic
sensitivity  pattern  of  urinary  tract infection at  a tertiary care hospital. Bangladesh Crit Care . 2(1) : 23.
Clinical  Laboratory  sandardrs  Institute.
2012.  Performace  standards  for antimicrobial  disk  susceptibility test 22th ed.No.3 USA, Wayne PA
Imaniah,  Bayu.  2014.  Peta  Kuman  dan resistensinya  terhadap  antibiotika pada  penderita  infeksi  saluran kemih  (ISK)  di  RSUD  Moewardi tahun  2014.    [skripsi].  Universitas Muhamadiah Surakarta.
Lin,  W.H.,  Kao,C.Y.,  Yang,D.C., Tseng,
C.C., Wu,A.B., Teng,C.H., Wang,
M.C., Wu,  J.J.  2014.  Clinical  and microbiological  characteristics  of
Klebsiella pneumoniae
from community-acquired recurrent
urinary  tract  infections. Eur  J  Clin Microbiol Infect  Dis..  33(9):1533- 9. doi: 10.1007/s10096-014-2100-4
National  Kidney  and  Urologic  Diseases Information  Clearinghouse.  2011.
Urinary  Tract  Infections  in  Adults.
U.S.  Department  of  Health  and Human Services.
Munita, J.M., Arias, C.A. 2016.
Mechanisms of antibiotic resistance.  Microbiol  Spectr. 4(2) : 10.1128/microbiolspec.VMBF-
0016-2015.
doi:  10.1128/microbiolspec.VMBF
-0016-2015.
Nua, A., Fatimawali., Widhi, B. 2016. Uji
Kepekaan  Bakteri  yang  diisolasi dan diidentifikasi dari urin penderita  infeksi  saluran  kemih (ISK)  di  RSUP.  DR.R.D.  Kandou Manado terhadap antibiotik cefixime, ciprofloxacin, cotrimoksazole. Jurnal Ilmiah Farmasi  Pharmacon . 5 (4) :  179-
180.
Okayanti, Ni Made., Fatimawali., Tallei,T.
2017. Identifikasi secara biomolekuler bakteri resisten antibiotik  cefixime  dari  individu pengguna  tumpatan  gigi  amalgam .
Jurnal Ilmiah Farmasi Pharmacon .
6(4) : 210.
Pratiwi,  S.  2013.  Kajian  Uji  resistensi sensitifitas  antibiotic  ceftriakson dan  ciprofloxacin  pada  penderita infeksi  saluran  kemih  di  RSUP Fatmawati.  [skripsi].  UIN  Syarif Hadayatullah, Jakarta.
Rajabnia,  C.  M.,  Goorgan,  S.,  Fazeli,  F., dan Dashipour, A. 2012. Antibiotic resistance  pattern  in  urinary  tract infection  in  Imam-Ali  Hospital . Zahedan J.Res. Med.Sci.
Rambiko,  C.  S.,  Fatimawali.,  Bodhi,  W.
2016. Uji sensitivitas bakteri
penyebab infeksi nosokomial saluran  kemih  akibat  penggunaan kateter terhadap antibiotic ampicillin, amoxicillin dan ciprofloxacin di RSUP Prof.dr.R.D.Kandou Manado. Jurnal  Ilmiah  Farmasi  Pharmacon.
5(1) : 1-7.
Schulz,  L.,  Hoffman,  R.,  Pothof,  J.,  Fox,
B. 2016. Top Ten Myths Regarding the  Diagnosis  and  Treatment  of
Urinary  Tract Infections. The
Journal  of  Emergency  Medicine.
51(1) : 25-30.
Smelov,  V.,  Naber,  K.,  Johansen  T.E.B.
2016.  Improved  Classification  of Urinary  Tract  Infection:  Future Considerations.
European Assosiation  of  Urology 15 :  71-80.
http://dx.doi.org/10.1016/j.eursup.2
016.04.002.
Srinivasan,  R.,  Karaoz,  U.,  Volegova,  M., MacKichan,  J.,  Kato-Maeda  M, Miller,  S.  2015.  Use  of  16S  rRNA Gene  for  Identification  of  a  Broad
Range of Clinically Relevant
Bacterial  Pathogens.  PLoS  ONE 10(2 ):
e0117617.
https://doi.org/10.1371/journal.pon
e.0117617.
Sutrisna,  E.  M.  2012. Penggunaan Antibiotik Secara Rasional. Seminar IDI Girobogan, Purwodadi.
Tamisier,  M.  R.,  Benamar,  S.,  Raoult,  D., Fournier,  P.E.  2015.  Cautionary tale  of  using  16S  rRNA  gene sequence similarity values in identification  of  human-associated
bacterial species. International
Journal of Systematic and Evolutionary  Microbiology.  65, 1929–1934. DOI 10.1099/ijs.0.000161 Useng, Asmah. 2014. Analisis Penggunaan Antibiotik  Pada  Penyakit  Infeki Saluran Kemih Berdasarkan Evidance Base Medicine (EBM) di RSUD  Dr.  Moewardi  Periode Januari-Juni 2013. [Skripsi]. Universitas Muhamadiah, Surakarta.