## POTENSI ANTIOKSIDAN FRAKSI ETIL ASETAT KULIT BATANG BAKAU HITAM ( Rhizophora mucronata(Lamk.)) DARI PANTAI TIMUR SURABAYA

## ANTIOXIDANT ACTIVITY ETHYL ACETAT FRACTION OF MANGROVE STEM BARK (Rhizophora mucronata (Lamk.)) from EAST COAST OF

## SURABAYA
Mahmiah 1 , Giftania Wardani Sudjarwo 2 , Febby Andriyani 2
1 Prodi Oseanografi, Fakultas Teknik dan Ilmu Kelautan, Universitas Hang Tuah
2 Prodi Farmasi, Fakultas Kedokteran, Universitas Hang Tuah
Korespondensi:
Info Artikel Sejarah Artikel: Diterima 29 Okt Jul 2020 Disetujui 28 April 2021 Publikasi Online 4  Mei 2021 Kata Kunci :
Fraksi etil asetat, kulit batang, Rhizophora mucronata , antioksidan, Pantai Timur Surabaya Keywords : Ethyl acetate fraction, stem
bark, Rhizophora mucronata , antioxidant, east coast of surabaya

## Abstrak
Latar  belakang: Wilayah  laut  Indonesia  yang  luas  dengan  garis  pantai  yang panjang  menyimpan  potensi  keanekaragaman  hayati  yang  ada  disekitar  laut terutama  potensi  hutan  mangrove.  Mangrove  merupakan  tumbuhan  halofilik  yang memiliki  karakteristik  mampu  menangani  perubahan  salinitas  garam  yang  tinggi dan hipoksia pada air laut. Selama ini antioksidan yang berasal dari alam digunakan dari  bahan  yang  ada  di  daratan  dan  pemanfaatan  dari  laut  masih  kurang.  Hal  ini yang  mendorong  untuk  mengembangkan  penelitian  terhadap  salah  satu  tumbuhan mangrove Rhizophora  mucronata yang  hidup  di  wilayah  pesisir  Pantai  Timur Surabaya terhadap  potensinya  sebagai  antioksidan. Tujuan: menentukan  aktivitas antioksidan  fraksi  etil  astetat  kulit  batang  mangrove Rhizophora  mucronata . Metode: ekstraksi  dengan  maserasi,  fraksinasi  dan  uji  aktivitas  antioksidannya dengan  KLT  autografi  dan  dengan  menggunakan  metode  DPPH  ( 2,2-diphenyl-  1- picrylhydrazyl) Hasil: aktivitas antioksidan  secara kualitatif dengan TLC autografi terdapat  noda  berwarna  kuning  menandakan  positif  antioksidan  dengan  nilai IC 50 fraksi  etil  asetat  kulit  batang R.  mucronata sebesar  577,145  ppm. Simpulan  dan saran: fraksi etil asetat kulit batang mangrove Rhizophora mucronata aktif sebagai antioksidan.  Penelitian  dapat  dilanjutkan  pada  tahapan  isolasi  dan  identifikasi senyawa aktif yang berpotensi sebagai antioksidan.

## Abstract
BBackground: Indonesia's vast marine area with a long coastline holds the potential things  for  biodiversity  around  the  sea.  Especially  the  potential  of  mangrove  forests. Mangroves are halophilic plants that have the characteristics of being able to handle changes  in  high  salinity  salts  and  hypoxia  in  seawater.  So  far,  antioxidants  derived from nature come from materials on land and the use of natural materials from the sea is  still  lacking.  This  encourages  research  to  be  conducted  of  Rhizophora  mucronata that live in the coastal areas of East Coast Surabaya on their potential as antioxidants. Objective:  To  determine  the  antioxidant  activity  of  the  ethyl  acetate  fraction  of Rhizophora  mucronata  mangrove  bark.  Methods: E xtraction  method  by  maceration, fractination,  and  testing  of  antioxidant  activity  with  TLC  autograph  and  using  the DPPH  method  (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl).  Results: Qualitative  antioxidant activity  with  autographic  TLC  contained  a  yellow  stain  indicating  an  antioxidant positive  with  IC50  value  of  ethyl  acetate  fraction  of  R.  mucronata  bark  of  577,145 ppm. Conclusions and suggestions: Rhizophora mucronata mangrove bark fraction is active as an antioxidant. This research can be continued at the stage of isolation and identification of active compounds that have the potential as antioxidants.
Mahmiah | Potensi Antioksidan Fraksi Etil Asetat ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 1 Tahun 2021

## PENDAHULUAN
Indonesia  merupakan  negara  kepulauan  dengan  garis  pantai  terpanjang  kedua  setelah Kanada (Lasabuda  2013)  yang  kaya  akan  sumber  daya  alam  yang  dapat  dimanfaatkan  potensi alamnya,  salah  satunya  adalah  mangrove  bakau  hitam  atau Rhizophora  mucronata (Lamk.). Tanaman ini merupakan tumbuhan halofilik yang mampu menangani salinitas kadar garam yang tinggi  dan  hipoksia  dari  air  laut  (West  and  Duke  2006).  Tumbuhan  mangrove R.mucronata secara  etnobotani,  bagian  daun  dan  kulit  batangnya  dimanfaatkan  oleh  masyarakat  sebagai antidiare. Secara kemotaksonomi, R.mucronata memiliki kandungan metabolit sekunder seperti golongan alkaloid, tanin, terpenoid, saponin, fenolik, flavanoid dan glikosida (Batool, Ilyas, and Shahzad 2014). Adanya golongan senyawa metabolit sekunder pada tumbuhan ini memberikan berbagai  aktivitas  biologis.  Beberapa  penelitian  menunjukkan R.mucronata memiliki  aktivitas biologis  terhadap  antibakteri,  antiplasmodial,  antioksidan,  antifungi,    antimikroba,  analgesik, antifertilitas, hepatoprotektif dan larvasida (Syed Ali et al. 2014).
Pemanfaatan  tumbuhan  mangrove  jenis  ini  masih  belum  banyak  dieksplorasi  aktivitas biologisnya.  Salah  satu  aktivitas  biologis  yang  akan  dieksplorasi  adalah  aktivitas  antioksidan. Antioksidan  merupakan  suatu  senyawa  atau  zat  yang  mudah  teroksidasi  dan  mampu  menunda atau mencegah terjadinya oksidasi suatu substrat serta dapat bersifat sebagai penangkal radikal bebas  (Kristanti et  al .,  2008).  Radikal  bebas  adalah  penyebab  timbulnya  berbagai  penyakit degeneratif seperti kanker, aterosklerosis, stroke dan sebagainya.
Aktivitas  radikal  bebas  dapat  diredam  dengan  pemberian  antioksidan.  Selain antioksidan  penting  bagi  peredaman  radikal  bebas,  antioksidan  juga  berperan  dalam mempertahankan  mutu  bahan  dan  produk  makanan  seperti  ketengikan,  perubahan  warna  dan tekstur  serta  dapat  mempertahankan  usia  simpan  produk  makanan  (Mishra  and  Singh  Bisht 2011).  Antioksidan  terdiri  dari  antioksidan  alami  dan  antioksidan  sintetik.  Antioksidan  alami relatif  lebih  aman  serta  membantu  penggurangan  penggunaan  antioksidan  sintetik  yang memiliki  efek  samping  lebih  besar.  Contoh  antioksidan  sintetik  yaitu  BHT  ( Butylated Hydroxytoluen ) yang dalam penggunaan dengan jumlah banyak dapat bersifat karsinogenik dan reaksi alergi bagi beberapa orang (Raad Shakir, Mohamed Ibrahim, and Ibrahim Jessim 2015)
Selama ini antioksidan alami didapatkan dari tumbuhan yang ada di daratan, oleh sebab itu perlu dilakukan pengkajian terhadap eksplorasi antioksidan yang berasal dari laut dan pesisir pantai.  Pantai  Timur  Surabaya  (Pamurbaya)  merupakan  salah  satu  habitat  mangrove  bakau hitam  atau Rhizophora  mucronata (Lamk.).  Pada  penelitian  sebelumnya  yang  telah  dilakukan oleh Mahmiah et al . (2016) terhadap ekstrak metanol kulit batang R.mucronata dari Pamurbaya mempunyai nilai IC 50 sebesar 438,8349 ppm.
Penelitian  ini  sebagai  eksplorasi  lanjutan  dari  penelitian  sebelumnya  yang  sudah dilakukan  terhadap  ekstrak  metanol  kulit  batang R.mucronata .  yaitu  uji  parameter standarisasi non  spesifik  (kadar  air,  abu,  dan  susut  kering)  dan  menentukan  kemampuan  antioksidan  dari fraksi  etil  asetat  kulit  batang R.mucronata melalui  penentuan  nilai  IC 50 menggunakan  metode DPPH.

## METODE PENELITIAN
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian  adalah  kulit  batang R.mucronata yang diperoleh dari daerah perairan Pamurbaya, Surabaya, Jawa Timur, pelarut metanol, pelarut etil
Mahmiah | Potensi Antioksidan Fraksi Etil Asetat ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 1 Tahun 2021
asetat, pelarut heksana, larutan DPPH merk Sigma, BHT (standart). Alat yang digunakan dalam penelitian adalah rotary evaporator , alat penggiling, corong Buchner, corong pisah, mikropipet, seperangkat alat gelas, vortex, spektrofotometer visible (vis), pinset, pipet, kuvet, sarung tangan, masker dan kertas saring.

## Determinasi R.mucronata
Determinasi  dilakukan  dengan  mencocokkan  bagian-bagian  tanaman R.mucronata sesuai  dengan  ciri-ciri  morfologinya  untuk  menetapkan  kebenaran  yang  berkaitan  dengan tanaman R.mucronata .  Determinasi  dilakukan  dengan  mengirimkan  sampel  uji  ke  LIPI (Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia)  UPT  Balai  Konservasi  Tumbuhan  Kebun  Raya Purwodadi, Malang, Pasuruan.

## Preparasi Sampel Kulit Batang R.mucronata
Sampel  yang  digunakan  yaitu  sampel  kulit  batang R.mucronata sebanyak    3  kg  dicuci bersih dengan air mengalir dan dipotong. Selanjutnya dikeringkan dengan pemanasan oven suhu 50˚C  selama  1  hari.  Simplisia  kulit  batang R.mucronata dibuat  serbuk  dengan  cara  digiling kemudian diayak menggunakan pengayak dan di timbang berat serbuk (Departemen Kesehatan RI 2000).

## Ekstraksi dan Partisi Sampel Kulit Batang R.mucronata
Serbuk kulit batang R.mucronata diekstraksi menggunakan metode ekstraksi maserasi. Serbuk  dimasukkan  ke  dalam  toples  kaca  dan  ditambahkan  pelarut  metanol  kemudian didiamkan selama 24 jam sambil sesekali diaduk. Setelah 24 jam, rendaman serbuk kulit batang R.mucronata disaring menggunakan corong buchner. Ekstraksi dilakukan sebanyak 3 x 24 jam. Semua  hasil  maserat  dikumpulkan  lalu  dipekatkan  dengan  menggunakan rotary  evaporator sampai diperoleh ekstrak kental kemudian ditunggu kering dan ditimbang bobotnya.
Proses  partisi  yang  dilakukan  dengan  menambahkan  pelarut  heksana  dan  pelarut  etil asetat  menggunakan  corong  pisah.  Lapisan  bagian  atas  yang  didapatkan  merupakan  fraksi heksana dan lapisan bagian bawah yaitu fraksi etil asetat. Kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator hingga mengental atau kering dan ditimbang bobotnya.

## Analisis Kadar Air Ekstrak Kulit Batang R.mucronata
Analisis  kadar  air  yang  dilakukan  pada  sampel  menggunakan  metode  IRM  ( Infra  Red Moisture ) dengan cara menyiapkan cawan kosong kemudian mengisi cawan tersebut dengan 2 gram  sampel.  Setelah  itu  mengatur  pencahayaan  lampu infra  red dan  thermometer  yang digunakan untuk mengatur suhu pemanasan pada sampel. Suhu yang digunakan yaitu 105˚C dan selama  proses  pemanasan  dengan  cahaya  lampu  diperhatikan  panah  yang  menunjukkan keseimbangan dari pengukuran kadar air dan setealh seimbang dibaca hasil pengukurannya (%). Ketentuan kadar air tidak lebih dari 10% .

## Analisis Kadar Abu Total Ekstrak Kulit Batang R.mucronata
Analisis kadar abu total pada sampel dilakukan dengan cara menimbang ekstrak sebanyak 1 gram dan dimasukkan ke dalam kurs porselin kemudian dipijarkan dengan suhu yang dinaikkan secara  bertahap  hingga  900˚C  selama  3  jam  sampai  arang  habis.  Kemudian  dilakukan penimbangan bobotnya (Departemen Kesehatan RI 2000).
% Kadar Abu Total =
Keterangan : W0 = bobot cawan kosong (gram) W1 = bobot ekstrak awal (gram)
Mahmiah | Potensi Antioksidan Fraksi Etil Asetat ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 1 Tahun 2021

## W2 = bobot cawan + ekstrak setelah diabukan (gram)

## Analisis Susut Pengeringan Ekstrak Kulit Batang R.mucronata
Analisis  Susut  pengeringan  dilakukan  dengan  cara  pengeringan  dengan  oven  pada  suhu 105˚C  selama  30  menit  atau  sampai  berat  konstan  yang  dinyatakan  dalam  persentase  (%). Persyaratan rentang yang diperbolehkan adalah kurang dari 10% (Depkes RI., 2000).
% Susut pengeringan =
Keterangan : a = bobot sampel sebelum pemanasan (gram) b = bobot sampel konstan setelah pemanasan (gram)

## Uji Aktivitas Antioksidan dengan TLC Autograph
Sebanyak  1  mg/ml  larutan  fraksi  etil  asetat  kulit  batang R.mucronata ditotolkan sebanyak 5 µL pada penotolan titik awal plat KLT (5 cm x 5 cm). Hasil positif antioksidan jika dihasilkan noda berwarna kuning dengan latar belakang ungu (Selvasundhari et al ., 2014).

## Uji Aktivitas Antioksidan dengan Spektofotometri Visible
Larutan  uji  merupakan  larutan  induk  1000  ppm  melalui  penambahan  larutan  DPPH  , etanol  dan  senyawa  yang  akan  diuji.  Larutan  pembanding  DPPH  10 -4 M  dibuat  dengan  cara mengencerkan DPPH dan penambahan etanol dan larutan buffer pH 5,5.  Konsentrasi larutan uji yang  dibuat  yaitu  50  –  800  ppm.  Larutan  kontrol  positif  yang  digunakan  adalah  BHT. Absorbansi  larutan  uji,  larutan  pembanding  dan  larutan  kontrol  positif  diukur  menggunakan spektrofotometri visible pada panjang gelombang 516,5 nm, 523,5 nm dan 530,5 nm. Kemudian dihitung absorbansi hitung pada panjang gelombang maksimum DPPH dan dihitung lagi dengan %peredaman DPPH. Hasil perhitungan %peredaman DPPH digunakan untuk menentukan nilai IC50.  Jika  IC 50 <  1000  ppm  maka  senyawa  tersebut  mempunyai  aktivitas  sebagai  antioksidan (Mahmiah, Sudjarwo, and Mizni 2017; Sudjarwo 2019)

## HASIL PENELITIAN
Ekstraksi dan fraksinasi bagian kulit batang mangrove R. mucronata
Penelitian  ini  tumbuhan  yang  digunakan  adalah Rhizophora  mucronata (Lamk.)  yang dikenal dengan bakau hitam dan termasuk dalam keluarga Rhizophoraceae. Ekstraksi dilakukan dengan  proses  maserasi  menggunakan  pelarut  metanol  pada  suhu  kamar.  Hasil  ekstraksi ditunjukkan pada Tabel 1.
Tabel 1. Data Hasil Ekstraksi dan Maserasi Kulit Batang R. mucronata
Parameter Standarisasi non spesifik
No. Bahan Tanaman Kulit Batang R. mucronata Bobot (gram) 1. Simplisia 249,9600 2. 3. Ekstrak Metanol Fraksi Etil Asetat 40,3210 6,5888
Mahmiah | Potensi Antioksidan Fraksi Etil Asetat ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 1 Tahun 2021
Hasil uji standarisasi non spesifik dari ekstrak metanol kulit batang R. mucronata disajikan pada Tabel 2.
Tabel 2. Data Parameter Non Spesifik Ekstrak Metanol Kulit Batang R. mucronata
KLT  Autografi  dan  aktivitas  antioksidan  fraksi  etil  asetat  kulit  batang  mangrove  R. mucronata
Uji  aktivitas  antioksidan  secara  kualitatif  dengan  KLT  autografi  fraksi  etil  asetat  kulit batang R. mucronata dibandingkan dengan standart Vitamin C dan BHT disajikan pada Gambar 1.
Gambar 1. KLT Autografi fraksi Etil Asetat kulit batang R. mucronata (Lamk)
Hasil  uji  aktivitas  antioksidan  kulit  batang R.  mucronata  (Lamk) dengan spektrofotometer visible yang  λ 523,50 nm ditunjukkan pada Tabel 3. Kurva regresi linear dari Konsentrasi fraksi etil asetat terhadap % Peredaman DPPH disajikan pada Gambar 2.
Tabel 3. Hasil % peredaman DPPH pada fraksi etil asetat kulit    batang R. mucronata
No. Konsentrasi (ppm) Rerata % Peredaman 1. 50 85,890 2. 100 82,288 3. 200 75,932 4. 400 63,008 5. 800 32,585
Gambar 2.  % Peredaman DPPH pada berbagai konsentrasi dari Fraksi Etil Asetat Kulit Batang
R. mucronata
No. Jenis Parameter Metode Persyaratan Hasil 1. Kadar air IRM <10 % 2,80% 2. Susut Pengeringan Gravimetri <10 % 2,04% 3. Kadar abu total Pemijaran 3-5 % 1,53%
2  3  4
1 1. Ekstrak metanol
2. Fraksi Etil Asetat 3. Standart Vitamin C 4. Standart BHT
Mahmiah | Potensi Antioksidan Fraksi Etil Asetat ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 1 Tahun 2021
Dalam penelitian ini tumbuhan yang digunakan adalah Rhizophora mucronata (Lamk.) yang dikenal dengan bakau hitam dan termasuk dalam keluarga Rhizophoraceae. Simplisia kulit batang R.  mucronata dikumpulkan  dari  daerah  Perairan  Surabaya,  Pantai  Timur  Surabaya (Pamurbaya).  Bagian  yang  digunakan  pada R.  mucronata yaitu  kulit  batang  yang  merupakan bagian  pelindung  dari  tumbuhan  mangrove  dan  bagian  yang  langsung  kontak  dengan  air  laut yang mengenang pada tumbuhan mangrove. Ekstraksi kulit batang R. mucronata menggunakan metode maserasi dengan menggunakan pelarut metanol. Metode maserasi dipilih karena mudah dan tidak menggunakan suhu tinggi yang mungkin dapat merusak senyawa-senyawa kimia yang ada didalam kulit batang R. mucronata yang memiliki aktivitas antioksidan. Penentuan  parameter  non  spesifik  ekstrak  metanol  kulit  batang R.  mucronata telah memenuhi  persyaratan  (Tabel  2)  .  Adapun  tujuan  penentuan  kadar  air  untuk  menghindari cepatnya  pertumbuhan  jamur  atau  adanya  kontaminasi  lain  (Azizah  and  Salamah  2013).  Pada penentuan kadar abu total umumnya berhubungan mineral yang terdapat didalam garam organik dan  anorganik  serta  terkadang  terbentuk  sebagai  senyawa  kompleks  yang  bersifat  organik (Azizah  and  Salamah  2013).  Penetapan  susut  pengeringan  yaitu  sebagai  indikator  besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan.
Pada  proses  fraksinasi  memiliki  tujuan  untuk  memisahkan  golongan  utama  dari  yang lain  (Aryantini,  Sari,  and  Juleha  2017).  Senyawa-senyawa  yang  bersifat  polar  akan  masuk dalam pelarut polar dan senyawa yang bersifat non polar akan masuk ke dalam pelarut yang non polar ( Phytochemical Methods 2020). Pelarut yang digunakan yaitu heksana yang bersifat non polar  dan  etil  asetat  yang  bersifat  semipolar.  Pemisahan  yang  terjadi  antara  etil  asetat  dan heksana  membentuk  perbedaan  warna  yaitu  heksana  berwarna  hijau  dan  etil  asetat  berwarna merah kecoklatan.
Uji  aktivitas  antioksidan  secara  kualitatif  dengan  KLT  autografi  dilakukan  dengan menyemprotkan  larutan  DPPH  pada  plat  KLT  yang  telah  ditotolkan  fraksi  etil  asetat  kulit batang R. mucronata dan BHT (Gambar 1). Hasil KLT autografi menunjukkan noda berwarna kuning  dengan  latar  berwarna  ungu  yang  menandakan  positif  adanya  aktivitas  antioksidan. Warna ungu yang stabil berasal dari DPPH ( 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl ) yang ketika bersama dengan senyawa lain yang siap mendonorkan  atom hidrogennya, maka akan membentuk DPPH non  radikal  ( 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazine )  dengan  ditandai  hilangnya  warna  ungu  berubah menjadi warna kuning pucat dari pikril yang masih ada  (Selvasundhari et al. 2014).
Uji  aktivitas  antioksidan  secara  kuantitatif  dengan  menggunakan  spektrofotmeter visible .  Metode  yang  digunakan  yaitu  mengukur  aktivitas  %  peredaman  DPPH  terhadap konsentrasi  suatu  senyawa.  DPPH  ( 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl )  merupakan  radikal  bebas yang  stabil  dengan  delokalisasi  elektron  yang  berlebih.  Nilai IC 50 merupakan  bilangan  yang menunjukkan  konsentrasi  senyawa  yang  mampu  menghambat  proses  oksidasi  sebesar  50%. Semakin  kecil  nilai IC 50 maka  semakin  tinggi  aktivitas  antioksidan  (Selvansundhari et  al ., 2014).  Fraksi  etil  asetat  kulit  batang R.  mucronata dengan  nilai IC 50 577,145  ppm  memiliki kemampuan  aktivitas  antioksidan  karena  pada  senyawa  yang  memilki IC 50 <1000  ppm  dapat memiliki  potensi  aktivitas  antioksidan  (Kristanti et  al .,  2008)  dan  memiliki  intensitas  dengan kategori  antioksidan lemah  (Hanin  and  Pratiwi  2017).  Kandungan  antioksidan juga  ditentukan oleh senyawa bioaktif dalam sampel (Hylocereus et al. 2016)
Nilai IC 50 pada fraksi etil asetat kulit batang R. mucronata dengan DPPH yaitu sebesar 577,145  ppm  dan  nilai IC 50 pada  BHT  (control  positif)  yaitu  sebesar  372,794  ppm.  Nilai IC 50 BHT  yang lebih rendah dibandingkan fraksi etil asetat kulit batang R. mucronata karena fraksi etil  asetat  kulit  batang R.  mucronata bukan  merupakan  senyawa  murni  seperti  BHT.  Dalam penelitian  ini  yang  digunakan  adalah  fraksi  etil  asetat  dari  kulit  batang R.  mucronata karena bersifat semi polar yang dapat menarik kandungan senyawa seperti flavanoid dan fenolik. Tidak digunakannya fraksi heksana dalam melakukan uji aktivitas antioksidan karena potensinya yang tergolong kurang aktif meskipun terdapat kandungan senyawa steroid dan terpenoid (Sudjarwo 2019)(Pratiwi  et  al.  2016).  Aktivitas  antioksidan  sebagai  penangkal  radiasi  bebas  dapat terhalangi  karena  adanya  kandungan  senyawa  non  polar  seperti  asam  lemak  dan  protein  yang
Mahmiah | Potensi Antioksidan Fraksi Etil Asetat ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 1 Tahun 2021
terdapat  dalam  fraksi  heksana  (Pratiwi  et  al.  2016).  Pada  fraksi  etil  asetat  kulit  batang R. mucronata memilki kandungan senyawa yang dapat menyebabkan adanya aktivitas antioksidan meskipun tidak sebesar ekstrak metanol yaitu golongan senyawa alkaloid, steroid dan flavanoid yang  terdapat  didalam  fraksi  etil  asetat  kulit  batang R.  mucronata berdasarkan  skrining fitokimia dan analisis GC-MS (Sudjarwo 2019).
Flavonoid  merupakan  golongan  senyawa  fenolik  yang  memiliki  peran  penting  dalam aktivitas  antioksidan  karena  banyak  mengandung  gugus  hidroksil  yang  mampu  mentransfer sebuah elektron kepada senyawa radikal bebas. Namun flavanoid yang terdapat dalam fraksi etil asetat  kulit  batang R.  mucronata jumlahnya  tidak  banyak.  Berdasarkan  %peak  area,  jumlah golongan  senyawa  flavanoid  pada  fraksi  etil  asetat  kulit  batang R.  mucronata yaitu  1,12  % sedangkan yang  memiliki %peak area terbesar yaitu golongan senyawa alkaloid sebesar 74,76 % (Mahmiah, Sudjarwo, and Mizni 2017; Sudjarwo 2019)
Dalam sebuah penelitian terhadap piperine yang merupakan golongan senyawa alkaloid memiliki  kemampuan  sebagai  antioksidan  dengan  cara  meningkatkan  produksi  gugus  hidroksi (OH - )  meskipun  dalam  konsentrasi  yang  `kecil.  Oleh  sebab  itu,  pada  fraksi  etil  asetat  kulit batang R.  mucronata masih  dapat  memberikan  aktivitas  antioksidan  meskipun  golongan senyawa flavanoid tidak banyak jumlahnya (Nimse and Pal 2015).

## SIMPULAN
Berdasarkan hasil yang telah diperoleh pada penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa Fraksi etil  asetat  kulit  batang R.  mucronata memiliki  aktivitas  antioksidan  dengan  dengan  nilai IC 50 sebesar 577,145 ppm.

## SARAN
Perlu  dilakukan  eksplorasi  lebih  lanjut  melalui  proses  isolasi,  identifikasi  senyawa metabolit  sekunder  dari  fraksi  etil  asetat  kulit  batang  mangrove Rhizophora  mucronata yang berpotensi sebagai antioksidan.

## UCAPAN TERIMAKASIH
Peneliti mengucapkan terimakasih atas didanainya penelitian ini dari program  HIBAH Penelitian Dasar Unggulan Perguruan Tinggi (PDUPT-KEMENRISTEKBRIN).

## REFERENSI
Ali M Syed, S Ravikumar, J Margaret Beula, V Anuradha & N Yogananth, 2014, Insecticidal Compounds of Rhizophoraceae Mangrove Plants for the Management of Dengue Vector
Aedes Aegypti , Vector Borne Dis Journal , 51: 106-114. Batool, Nazima, Shahdad, Armgha, Ilyas & Noshin, 2014, Asiatic Mangrove .
Departemen  Kesehatan  Republik  Indonesia,  2000, Parameter  Standar  Umum  Ekstrak Tumbuhan Obat , Jakarta, Depkes.
Dyah  Aryantini,  Fita  Sari,  Juleha,  2017,  Uji  Aktivitas  Antibakteri  Fraksi  Aktif  Terstandar Flavonoid Dari Daun Belimbing Wuluh ( Averrhoa Bilimbi L.), Jurnal WiyataPenelitian dan Sain 4 (2) : 143-150
Harborne, J.B, 1987, Phytochemical Methods . 2020. Ethnoveterinary Botanical Medicine . Kristanti, A Novi., dkk, 2008, Buku Ajar Fitokimia , Surabaya, Airlangga University Press.
Lasabuda  R,  2013,    Pembangunan  Wilayah  Pesisir  dan  Lautan  dalam  Perspektif  Negara Kepulauan Republik Indonesia, Jurnal Ilmiah , Platax, 2.
Mahmiah,  Giman,  N  S  Aminah  dan  M  Tanjung,  2016,  Antioxidant  Activity  of  Methanol Extracts From The Stem Bark Of Mangrove R.Mucronata , Proceeding ICMHS .
Mahmiah | Potensi Antioksidan Fraksi Etil Asetat ….. Jurnal Wiyata, Vol. 8 No. 1 Tahun 2021
Mahmiah, G W Sudjarwo dan Mas’uliyatul, 2017, Kandungan metabolit sekunder dari Fraksi etil asetat kulit batang Rhizophora mucronata L., Prosiding Seminar Nasional Kelautan Universitas Hang Tuah Surabaya , 20 Juli 2017
Mastuti  Widianingsih,  2016,  Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak  Metanol  Buah  Naga  Merah ( Hylocereus Polyrhizus (F.A.C Weber) Britton & Rose) Hasil Maserasi Dan Dipekatkan Dengan Kering Angin, Jurnal Wiyata Penelitian Dan Sain 3 (2) : 146-150
Nimse  dan  Dilipkumar,  2015,  Free  Radicals,  Natural  Antioxidants  and  their  reaction mechanisms, J RSC Adv , 5(2) : 79-86.
Norman C Duke, 2006, R.apiculata, R.mucronata, R. Stylosa, R. x annamalai, R. x lamarckii
(Indo-west pacific stilt mangrove) , Species Profiles for Pacific Island Agroforestry ver 2.1
Pratiwi L, A Fudholi, R Martien dan S Pramono, 2016, Ethanol Extract, Ethyl Acetate Extract,
Ethyl Acetate Fraction and n-Heksan Fraction Mangosteen Peels ( Garcinia mangosteen L.)  as  Source  of  Bioactive  Substance  Free  Radical  Scavengers, Journal  of Pharmaceutical Science and Clinical Research , 1: 71-82.
Race S, 2009, Antioxidants : The Truth about BHA, BHT TBHQ and Other Antioxidants Used as Food Additives , PDF Edition, Tigmor Book, UK.
Rojita M dan S S Bisht, 2011, Antioxidants and their characterization, Journal of Pharmacy Research , 4(8) : 2744 – 2746.
Rollando,  2016, Aktivitas  Sitotoksik  Ekstrak  Dan  Fraksi  Hasil  Fermentasi  Fungi  Endofit Genus Cephalosporium Sp.  Diisolasi  Dari  Daun  Meniran  ( Phyllantus  Niruri Linn.),
Jurnal Wiyata Penelitian Dan Sain 3 (1) : 5-10 Sudjarwo, Giftania Wardani. 2019. “Standardisasi Ekstrak Metanol Akar Mangrove Rhizophora Mucronata Poiret Dari Perairan Pantai Timur Surabaya” 1 (1): 371–76.
Selvansundhari  L,V  Babu,  V  Jenifer,  Jayasudha,  G  Thiruneelakandan  dkk,  2014,  In  Vitro
Antioxidant  Activity  of  Bark  Extracts  of R.mucronata , Science,  Technology  and  Arts Research Journal , 3(1): 21-25.
West, Indo, and Norman C Duke. 2006. “Species Profiles for Pacific Island Agroforestry,” no. April.