Website: https://jurnal.yudharta.ac.id/v2/index.php/AGROMIX
DOI: https://doi.org/10.35891/agx.v11i2.1946 p-ISSN: 2085-241X ; e-ISSN: 2599-3003
Virulensi beberapa isolat Pantoea ananatis penyebab penyakit hawar daun bakteri (bacterial leaf blight) pada varietas bawang merah
The virulence of several isolates of Pantoea ananatis causes bacterial leaf blight in shallot varieties
Asrul 1)*
1 Fakultas Pertanian Universitas Tadulako, Kota Palu, Indonesia
* E-mail korespondensi: asrul1203@gmail.com
Informasi artikel: Dikirim: 20/04/2020 ditinjau: 20/04/2020 disetujui: 09/06/2020
Copyright (c) 2020 Asrul
ABSTRACT: Bacterial  leaf  blight  caused by  Pantoea  ananatis  in  onions  is  a  new disease  in  Indonesia.  Information  regarding  the  level  of  virulence  of  these pathogens in onion plants is unknown. This study aims to determine the level of virulence of P. ananatis isolates in onion plants originating from Cirebon, Tegal,
Nganjuk, Bantul, and Sigi districts. The study was conducted by an experimental method using 150 pathogen isolates and 4 onion cultivars in a greenhouse from 5 regions.  Experimental  data  were  analyzed  descriptively  with  the  help  of  image and  table  views.  The  results  showed  that  all  pathogenic  isolates  had  the  same level  of  virulence  (uniform)  and  were  very  virulent  against  4  cultivars  of  obese bima,  blue  rice  fields,  bauji,  and  palasa.  All  of  these  isolates  gave  the  same response to the fast incubation period (2.35 - 2.90 days), the percentage of leaves that were heavily attacked (67.44 - 81.76%), and a high infection rate (> 0.5 units per day).
Keywords :  Bacterial leaf blight, isolate, Pantoea ananatis, virulent
ABSTRAK: Penyakit  hawar  daun  bakteri (bacterial  leaf  blight) yang  disebabkan  oleh Pantoea ananatis pada  bawang-bawangan  merupakan  penyakit  baru  di  Indonesia.  Informasi  mengenai tingkat  virulensi  patogen  tersebut  terhadap  tanaman  bawang  belum  diketahui.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  menentukan  tingkat  virulensi  isolat P.  ananatis pada  tanaman  bawang  yang berasal  dari  Kabupaten  Cirebon,  Tegal,  Nganjuk,  Bantul,  dan  Sigi.  Penelitian  dilakukan  dengan metode eksperimen menggunakan 150 isolat patogen dan 4 kultivar bawang di rumah kaca dari 5 daerah. Data eksperimen dianalisis secara deskriptif dengan bantuan tampilan gambar dan tabel. Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  semua  isolat  patogen  mempunyai  tingkat  virulensi  yang sama  (seragam)  dan  bersifat  sangat  virulen  terhadap  4  kultivar  bawang  bima  curut,  biru  sawah, bauji, dan palasa. Semua isolat tersebut memberikan respon yang sama terhadap masa inkubasi yang  cepat  (2,35  –  2,90  hari),  persentase  daun  terserang  yang  berat  (67,44  –  81,76%),  dan  laju infeksi yang tinggi (> 0,5 unit per hari).
Kata kunci : hawar daun bakteri, isolat, Pantoea ananatis , virulensi
Sitasi: Asrul, A. (2020). Virulensi beberapa isolat Pantoea ananatis penyebab hawar daun bakteri pada tanaman bawang. AGROMIX, 11 (2), 136-150. https://doi.org/10.35891/agx.v11i2.1946

## PENDAHULUAN
Penyakit  hawar  daun  bakteri (bacterial leaf  blight) yang  disebabkan  oleh Pantoea ananatis pada  bawang  bombay  (Shin  dkk., 2019)  tergolong  penyakit  baru  di  Indonesia. Kehadiran  bakteri  tersebut  sangat  berbahaya karena  dapat  menginfeksi  bawang  merah  atau
wakegi (Asrul & Umrah, 2019) dan menimbulkan kerusakan tanaman antara 78,04 – 83,64% di lapangan (Asrul dkk., 2014). Infeksi pada  daun  kemudian  berkembang  ke  bawah leher  umbi  dapat  menyebabkan  penyakit  yang dikenal sebagai busuk tengah umbi ( bulb  center  rot )  di  tempat  penyimpanan
(Vahling‐Armstrong  dkk.,  2016;  Stumpf  dkk., 2017).
Dutta  dkk.  (2017)  melaporkan  bahwa P. ananatis merupakan patogen terbawa benih (umbi)  dan  dapat  disebarkan  melalui  benih. Patogen  yang  terbawa  bersama  benih  impor dapat  mengakibatkan  terjadinya  penyebaran melalui  perpindahan  benih  terinfeksi  ke daerah-daerah  baru.  Benih  (umbi)  bawang bombay  yang  diimpor  dari  luar  negeri memungkinkan  terjadinya  penyebaran  strain P.  ananatis baru  yang  bervirulensi  tinggi.
Kehadiran  strain  baru  yang  bervirulen  tinggi dapat  mematahkan  sifat  ketahanan  kultivar bawang  dengan  mudah  sehingga  dikuatirkan akan  mempengaruhi  keberlangsungan  usaha budidaya bawang merah di Indonesia.
Bila  umbi  impor  di  tanam di  lahan  perta- naman  bawang  merah  maka  patogen  yang terbawa  bersama  umbi  akan  terinfestasi  ke dalam  lahan  pertanian.  Hal  ini  menyebabkan terjadinya kontaminasi tanah sehingga menjadi sumber  inokulum  bagi  penanaman  bawang merah  berikutnya  terutama  bawang  merah lokal.  Ormsby  &  Pottinger  (2009)  melaporkan bahwa  tanah  atau  seresah  tanaman  (kompos) yang  terinfeksi  bakteri P.  ananatis dapat bertindak  sebagai  sumber  inokulum  utama karena  bakteri  tersebut  dapat  terbawa  secara internal  atau  eksternal  pada  seresah  tanaman. Oleh  karena  itu,  lahan  bekas  pertanaman bawang merah sakit karena terinfeksi P.  ananatis dapat  menjadi  area  yang  sangat
rawan terhadap budidaya bawang merah sehat selama periode tertentu.
Penggunaan kultivar tahan seperti Redwing di negara asal impor bawang bombay (AS) untuk mengurangi serangan patogen  pada areal  yang  luas  dan  seragam  akan  memberi tekanan seleksi terhadap P. ananatis (Vahling‐Armstrong  dkk.,  2016).  Hal  ini  akan mempercepat  terjadinya  perubahan  genetika patogen  untuk  membentuk  strain-strain  baru yang lebih virulen karena strain patogen kurang virulen  yang  menyerang  kultivar  tahan  dan seragam  akan  binasa  sedangkan  patogen  yang tertinggal hanya strain yang bervirulensi tinggi. Strain  ini  akan  terus  berkembangbiak  mem- bentuk  populasi  yang  terdiri  atas  strain-strain yang kuat (Agrios, 2005). Sifat virulensi patogen ditentukan  oleh  gen  resesif  sedangkan  sifat avirulen ditentukan oleh gen dominan (Gabriel, 1999).  Gen  virulen  mengendalikan  senyawa- senyawa  kimia  dan  proses  fisiologi  yang memberi  kontribusi  pada  patogen  dalam perbanyakan  diri  dan  mengembangkan  sifat- sifatnya untuk memproduksi sejumlah senyawa kimia  (Agrios,  2005).  Sedangkan  gen  avirulen bertanggung  jawab  terhadap  ketidakmampuan patogen menginfeksi tanaman (Staskawicz dkk., 1995).  Kehadiran  strain bakteri patogenik  yang bervirulensi  tinggi  pada  budidaya  bawang  di Indonesia  melalui  impor  bawang  bombay belum  tentu  dapat  ditanggulangi  sehingga menambah permasalahan baru bagi petani.
Informasi  mengenai  tingkat  virulensi P.  ananatis terhadap  bawang  merah  belum diketahui  secara  jelas.  Hal  ini  menjadi  penting karena  bakteri  patogenik  yang  bervirulensi tinggi memberikan indikasi kemampuan merusak  tanaman  yang  sangat  parah  sehingga berdampak  pada  kerusakan  serius  di  lapangan dan  di  tempat  penyimpanan.  Di  luar  negeri, kerusakan  bawang  bombay  akibat  serangan patogen ini mencapai 100% (Weller‐Stuart dkk., 2017).  Pengetahuan  tentang  tingkat  virulensi suatu  patogen  dapat  dijadikan  sebagai  dasar dalam  perencanaan  dan  penyusunan  strategi baru untuk pengendalian penyakit tanaman.
Oleh karena penyakit hawar daun bakteri merupakan penyakit baru dan belum pernah di laporkan tingkat virulensinya di Indonesia maka telah  dilakukan  pengujian  virulensi  beberapa isolat P.  ananatis dari  berbagai  daerah. Tujuan penelitian  ini  untuk  menentukan  tingkat virulensi  sejumlah  isolat P.  ananatis pada tanaman  bawang  yang  berasal  dari  Cirebon, Tegal, Nganjuk, Bantul, dan Sigi di dalam rumah kaca.

## METODE
Penelitian  ini  dilaksanakan  di  Labora- torium Bakteriologi Tumbuhan dan Rumah Kaca Jurusan  Hama  Penyakit  Tumbuhan  Fakultas Pertanian  UGM,  Yogyakarta.  Penelitian  ini menggunakan  teknik  survei  dan  eksperimen (percobaan).  Data  yang  diperoleh  selanjutnya
dianalisis  secara  deskriptif  dengan  bantuan tampilan gambar dan tabel.

## Pengambilan sampel
Pengambilan  sampel  daun  dilakukan secara purposive sampling di  berbagai  lokasi sentra  produksi  bawang  di  Desa  Kalirahayu (Cirebon), Sidapurna (Tegal), Sukomoro (Nganjuk),  Tirtomulyo  (Bantul),  dan  Sidera (Sigi).  Sebanyak  150  sampel  daun  sakit  yang diduga  terinfeksi  patogen  hawar  daun  bakteri dimasukkan  ke  dalam  kantong  plastik  dan diberi label, selanjutnya dibawa ke laboratorium untuk diuji lebih lanjut.

## Isolasi patogen
Isolasi bakteri patogenik dilakukan dengan  memotong  jaringan  daun  bawang bergejala (sakit) dan sehat (ukuran 0,5 x 0,5 cm) menggunakan  skalpel  steril.  Potongan  daun disterilkan  melalui  perendaman  dalam  larutan alkohol 70% selama 10 menit, kemudian dibilas dalam  air  steril,  dan  dikeringanginkan  diatas kertas filter kering. Selanjutnya, potongan daun dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi  berisi larutan  PBS  ( Phospat  Buffer  Saline )  steril  dan digojok  agar ooze dari  jaringan  sakit  keluar. Suspensi  yang  terbentuk  kemudian  digoreskan (Goszczynska  dkk.,  2007)  pada  permukaan medium  selektif  YPGA  ( Yeast  Peptone  Glucose Agar )  (Janse,  2005)  padat  menggunakan ose. Koloni  yang  tumbuh  secara  tunggal  dengan karakteristik yang menyerupai bakteri P.  ananatis yakni berbentuk  bundar,  cembung, tepi  rata,  berlendir  ( mucoid ),  berwarna  kuning
atau  krem  (Alippi  &  Lopez,  2010;  Zaid  dkk., 2012),  dipindahkan  ke  medium  YPGA  segar berulang  kali  menggunakan  metode  gores (Goszczynska dkk., 2006) dan diinkubasi selama 3  -  5  hari  hingga  diperoleh  isolat  murni  dari biakan tersebut.

## Uji reaksi hipersensitif
Sebanyak  150  isolat  bakteri  patogen berhasil  diisolasi  dari  jaringan  daun  sakit, selanjutnya  dilakukan  uji  reaksi  hipersensitif (RH)  pada  daun  tembakau  (Kawamoto  & Lorbeer,  1972  dalam Asrul  dkk.,  2013)  dan  uji patogenisitas pada daun bawang. Bila menimbulkan  reaksi  positif  berupa  gejala bercak  kebasah-basahan  ( water  soaking ),  dan nekrosis  maka  isolat  disimpan  dalam  air  steril, atau  larutan  gliserol  15%  pada  suhu  -20 O C untuk pengujian selanjutnya.

## Uji patogenisitas
Biakan  murni  isolat  asal  daun  bawang yang  menunjukkan  hasil  positif  pada  uji  reaksi hipersensitif,  selanjutnya  digunakan  dalam  uji patogenisitas  untuk  membedakan  bakteri patogenik  atau  saprofit.  Uji  patogenisitas  pada daun  bawang  merah  dilakukan  dengan menggunakan metode pelukaan daun menurut Carr dkk. (2013).

## Uji virulensi
Uji  virulensi  dilakukan  dengan  menggu- nakan  metode  pelukaan  buatan  menurut Nunez  dkk.  (2002).  Bawang  sehat  yang digunakan  dalam  uji  ini  terdiri  atas  4  kultivar
dari  5  daerah,  yaitu  Bima  Curut  (Ciribon  dan Tegal),  Bauji  (Nganjuk),  Biru-sawah  (Bantul), dan  Palasa    (Sigi).  Umbi  setiap  kultivar  yang telah  disimpan  selama  2  –  3  bulan  setelah panen  ditanam  dalam  pot  plastik  bersama pupuk organik. Setiap isolat patogen diinokulasikan  pada  tiga  bawang  sehat  untuk masing-masing kultivar berdasarkan lokasi yang sama  dengan  asal  isolat  patogen  sehingga diperlukan  150  tanaman  bawang  dengan rincian  51  kultivar  Bima  curut  (Ciribon),  30 kultivar  Bima  curut  (Tegal),  18  kultivar  Bauji (Nganjuk),  30  Biru-sawah  (Bantul),  dan  21 kultivar  Palasa  (Sigi).  Setelah  disemprot, tanaman  dipelihara  dan  ditempatkan  dalam rumah  kaca.  Sebagai  kontrol,  daun  bawang diinokulasi  dengan  10  ml  air  suling  steril. Inokulasi  patogen  dilakukan  pada  sore  hari dengan  umur  tanaman  dibuat  seragam,  yaitu 28  hari  setelah  tanam.  Perkembangan  gejala penyakit  diamati  setiap  hari  setelah  inokulasi selama 21 hari.

## Pengamatan
Pada  uji  virulensi,  variabel  pengamatan dilakukan  terhadap  masa  inkubasi,  persentase daun  terserang  patogen  dan  laju  infeksi penyakit. Masa inkubasi diamati dan ditetapkan berdasarkan  pemunculan  gejala  pertama setelah inokulasi. Pengamatan dilakukan setiap hari  dalam  satuan  hari  setelah  inokulasi  (hsi) dengan  melihat  gejala  serangan  berupa  daun layu  kebasahan-basahan  ( water  soaking ), mengkerut  (mengeriput),  terbentuk  lekukan
daun,  dan  klorosis  atau  nekrosis  berwarna putih hingga coklat, abu-abu, atau hitam.
Persentase  daun  terserang  patogen  pada daun dihitung dengan menggunakan rumus:
Keterangan : PS  =  Persentase daun terserang x =  Jumlah daun terinfeksi (rusak)
y =  Jumlah daun yang diamati dalam satu pot
Persentase daun terserang patogen untuk penyakit  hawar  daun  bakteri  menggunakan kategori sebagai berikut:
Tabel 1.  Kategori  penilaian  persentase  daun terserang
Persentase daun terserang Kategori kerusakan Kategori virulen 0 Normal Avirulen > 1 – 10% Ringan Kurang virulen > 10 – 20% Sedang Moderat virulen > 20 – 40% Berat Virulen > 40 – 100% Sangat berat Sangat virulen
Sumber : Raju dkk. (2011)
Laju  infeksi  atau  percepatan  pertam- bahan  populasi  patogen  per  unit  per  satuan waktu  dihitung  dengan  rumus  (Vander  der Plank, 1963):
( )
r  adalah  laju  infeksi;  t1  dan  t2  adalah waktu  pengamatan  awal  dan  akhir,  x1  dan  x2 adalah  proporsi  daun  terinfeksi  pada  saat  t1
(awal pengamatan) dan t2 (akhir pengamatan). Pengamatan  gejala  penyakit  dilakukan  pada semua  tanaman  hingga  21  hari  setelah inokulasi.
Tabel 2. Kategori laju infeksi penyakit Laju infeksi (unit / hari) Kategori > 0,50 Tinggi /cepat > 0,11 - < 0,50 Sedang < 0,11 Rendah / lambat
Sumber : Vander-der-Plank (1963)

## Analisis data
Data  hasil  pengamatan  yang  diperoleh dari  rumah  kaca,  diolah  dengan  menggunakan teknik tabulasi sederhana yang disajikan dalam bentuk  nilai  rata-rata  (persentase)  berikut dengan pengukuran standar deviasi (SD).

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Uji reaksi hipersensitif dan patogenisitas dari  150  isolat  patogen  yang  berasosiasi dengan  tanaman  sakit,  hanya  50  isolat  bakteri P.  ananatis yang  bereaksi  positif  terhadap  uji reaksi  hipersensitif  dan  patogenisitas  disajikan pada Tabel 3. Isolat-isolat tersebut dan kultivar bawang  kemudian  dikelompokan  berdasarkan daerah  asal  pengambilan  sampel,  yakni  17 isolat  asal  Cirebon  (CR),  10  isolat  Tegal  (TG),  6 isolat Nganjuk (NG), 10 isolat Bantul (BT) dan 7 isolat Sigi (PL).
Tabel 3. Isolat patogen P. ananatis , kultivar bawang, uji HR, dan uji patogenisitas
Isolat Kultivar bawang Jumlah isolat Uji HR (+) Uji patogenisitas (+) CR Bima curut 30 17 17 TG Bima curut 30 10 10 NG Bauji 30 6 6 BT Biru-sawah 30 10 10 PL Palasa 30 7 7
Keterangan : CR (Cirebon), TG (Tegal), NG (Nganjuk), BT (Bantul), dan PL (Sigi)
Hasil uji reaksi hipersensitif dan patogenisitas  menunjukkan  bahwa  dari  150 isolat  patogen  yang  berasosiasi  dengan tanaman  sakit,  hanya  50  isolat  yang  berhasil memperlihatkan  reaksi  positif  terhadap  daun tembakau  dan  daun  bawang.  Pada  daun tembakau,  reaksi  positif  ditunjukkan  dengan terbentuknya  gejala water  soaking (kebasah- basahan) , klorosis  (berwarna  kuning),  atau nekrosis  pada  permukaan  jaringan  daun (gambar  1).  Hal  ini  menunjukan bahwa bakteri tersebut  merupakan  bakteri  patogenik  pada tanaman  bawang.  Menurut  Kim  dkk.  (2012), bakteri P.  ananatis diketahui  menyebabkan reaksi hipersensitif pada daun tembakau.
Pada  daun  bawang,  terlihat  gejala  awal penyakit  berupa  bercak  kebasah-basahan ( water soaking ), layu,  lunak, berkerut,
membentuk lekukan, atau patahan ke atas atau kebawah  pada  titik  infeksi,  atau  kadang menggulung.  Daun  berwarna  putih  berubah menjadi kering berwarna coklat muda, abu-abu atau  hitam  karena  kematian  sel  (nekrosis) dalam  jaringan  daun.  Terkadang  sebelum nekrosis  didahului  dengan  gejala  klorosis. Selanjutnya  daun  mengalami  mati  pucuk.  Bila terinfeksi  berat,  seluruh  daun  mengalami kelayuan,  mengering  berwarna  putih,  atau coklat  (gambar  1).  Ini  berarti  bakteri  yang diisolasi dari sentra produksi bawang di lapang merupakan  bakteri  patogenik  pada  inangnya, bukan  sebagai  bakteri  saprofit.  Menurut Soesanto  dkk.  (2011),  uji  patogenisitas dilakukan  untuk  menentukan  mikroorganisme hasil  isolasi  merupakan  patogen  tanaman  atau bukan.
Gambar 1. Morfologi  koloni  bakteri P.  ananatis pada  medium  YPGA  (A);  uji  reaksi  hipersensitif pada  daun  tembakau:  bercak  nekrosis  berwarna  coklat  dikelilingi  bercak  klorosis berwarna  kuning  (B);  uji  patogenisitas  :  daun  tampak  keriput  dan  pada  ujungnya terdapat nekrosis berwarna putih (tanda panah) dan mati pucuk (C)
Hasil  isolasi  patogen  dari  daun  bawang sakit  menunjukkan  koloni  bakteri  berbentuk bundar, tepi rata, berlendir ( mucoid ), mengkilap,  tekstur  halus  ( smooth ),  cembung atau  berbentuk  kubah,  dan  berwarna  kuning muda  atau  krem  pada  permukaan  medium YPGA  (gambar  1).  Karakteristik  morfologis
koloni  ini  memiliki  kesamaan  dengan  koloni bakteri P.  ananatis yang  dilaporkan  oleh  Zaid dkk.  (2012),  (Alippi  &  López,  2010),  (kim  dkk., 2007), dan Janse (2005).
Masa inkubasi (hsi)
Hasil pengamatan terhadap masa inkubasi  atau  kemunculan  gejala  hawar  daun pertama  pada  empat  kultivar  bawang  yang diinokulasi  isolat  patogen  CR , TG,  NG,  BT,  dan PL disajikan pada tabel 4.
Tabel 4.  Masa inkubasi, persentase daun terserang, dan laju infeksi penyakit hawar daun bakteri
Isolat patogen Masa inkubasi (hari) Persentase dan Terserang (%) Laju infeksi (unit per hari) 28-49 hsi CR 2,70 + 0,307 86,83 + 9,038 0,5154 + 0,383 TG 2,63 + 0,688 79,44 + 14,416 0,6399 + 0,364 NG 2,77 + 0,379 77,73 + 15,721 0,5593 + 0,375 BT 2,90 + 0,664 81,71 + 11,276 0,5892 + 0.358 PL 2,35 + 0,336 91,76 + 8,761 0,6090 + 0.437
Keterangan : CR (Cirebon), TG (Tegal), NG (Nganjuk), BT (Bantul), dan PL (Sigi
Pada  tabel  4  terlihat  semua  isolat patogen  yang  diperoleh  dari  berbagai  sentra produksi  bawang  mampu  menimbulkan  gejala hawar  daun  bakteri  pada  semua  kultivar bawang setelah diinokulasikan dengan suspensi isolat  patogen P.  ananatis .  Rata-rata  masa inkubasi  yang  diperlukan  oleh  setiap  patogen untuk  mengekspresikan  gejala  penyakit  hawar daun pada bawang berkisar antara 2,35  – 2,90 hsi.  Pada  data  ini,  perbedaan  masa  inkubasi terendah  dan  tertinggi  hanya  0,55  hsi,  tidak mencukupi  satu  hari  yang  berarti  tidak  ada variasi  masa  inkubasi.  Masa  inkubasi  ini tergolong  cepat  seperti  dilaporkan  Asrul  & Umrah  (2019)  bahwa  bakteri P.  ananatis di Indonesia  hanya  membutuhkan  waktu  2  hsi untuk  menimbulkan  gejala  hawar daun bakteri pada bawang merah.
Masa  inkubasi  memiliki  keterkaitan  erat dengan  kerusakan  tanaman  dan  virulensi patogen.  Masa  inkubasi  yang  cepat  dapat
menimbulkan  kerusakan  berat  dan  kematian tanaman  lebih  singkat,  yang  ditandai  dengan kemunculan gejala lebih awal (Diab dkk., 1982). Pada  masa  inkubasi  yang  cepat  seringkali mempunyai  keparahan  gejala  penyakit  yang tinggi  dan  patogennya  bersifat  lebih  virulen. Cepat  atau  lamanya  masa  inkubasi  suatu penyakit  tanaman  dipengaruhi  oleh  faktor virulensi  patogen,  ketahanan  inang,  serta keadaan  lingkungan  terutama  suhu  dan kelembapan  (Agrios,  2005).  Oleh  karena penelitian  dilaksanakan  di  rumah  kaca  maka faktor lingkungan dan umur tanaman dianggap relatif  sama  sehingga  perbedaan  yang  ada hanya  terdapat  pada  ketahanan  tanaman  dan isolat-isolat patogen yang uji.
Masa  inkubasi  yang  cepat  pada  semua kultivar  bawang  menunjukkan  bahwa  tanaman tersebut  tidak  tahan  (rentan)  terhadap  infeksi penyakit  hawar  daun  bakteri.  Kultivar  rentan akan  memberi  peluang  bagi  patogen  untuk
lebih  menetap,  bertahan  dan  berkembang dibanding  tanaman  tahan.  Tanaman  rentan tidak akan mampu membatasi atau menghambat  reproduksi  dan  perkembangan patogen  yang  menyerang  (Guest  &  Brown, 1997)  karena  tidak  mempunyai  gen  ketahanan yang  efektif  untuk  mengatasi  virulensi  gen patogen  tersebut  sehingga  tanaman  hanya menjadi  substrat  bagi  perkembangan  patogen (Agrios,  2005).  Peran  bawang  merah  yang menjadi  substrat  bagi  patogen  menunjukan bahwa  kultivar  bawang  Bima  curut,  Bauji,  Biru sawah, dan Palasa merupakan inang yang cocok bagi pertumbuhan dan perkembangan patogen P. ananatis .
Secara  umum,  masa  inkubasi  antar  isolat patogen  kurang  bervariasi  atau  seragam (homogen)  berdasarkan  nilai  standar  deviasi. Kurangnya variasi masa inkubasi masing-masing isolat  menunjukkan  bahwa  kemampuan  setiap isolat  patogen  dalam  melakukan proses  infeksi hingga  menimbulkan  gejala  adalah  sama. Semua isolat diduga memiliki sifat genetik yang sama  dalam  mempengaruhi  faktor-faktor penyebab  virulensi  seperti  reproduksi  sel (keaktifan  berkembangbiak)  dan  produksi toksin.  Menurut  Schumann  dan  D'Arcy  (2010), strain  bakteri  patogen  yang  bersifat  virulen mampu  berkembangbiak  atau  menghasilkan inokulum  (sel  bakteri)  baru  lebih  cepat  dan menghasilkan  jumlah  turunan  (individu)  yang lebih banyak sehingga lebih agresif menginfeksi inangnya, begitu pula sebaliknya. Patogen yang
virulen  juga  mampu  menghasilkan  senyawa kimia toksin, enzim dan polisakarida, sedangkan strain avirulen tidak (Boch & Bonas, 2001;  Ezepchuk,  2013).  Dengan  demikian, semua  isolat  patogen  mempunyai  masa inkubasi  yang  cepat  sehingga  menyebabkan tingkat kerusakan tanaman lebih parah.

## Persentase daun terserang
Hasil  pengamatan  terhadap  persentase daun  terserang  menunjukkan  bahwa  seluruh isolat  patogen P.  ananatis yang  diinokulasikan pada  daun,  dapat  menginfeksi  semua  kultivar bawang  lebih  dari  40%  daun  terserang.  Hal  ini menandakan  bahwa  semua  isolat  patogen  yang berasal dari lokasi yang berbeda tergolong sangat virulen (kerusakan sangat berat). Hasil pengamatan persentase daun terserang P. ananatis disajikan pada tabel 4. Pada gambar 2 terlihat  daun  bawang  yang  diinokulasi  dengan isolat  patogen  menampakkan  gejala water soaking , kelayuan, mengkerut, memipih, melengkung,  mati  pucuk,  kematian  sel  daun (nekrosis) hingga seluruh daun layu dan mati. Hal ini menunjukkan ada perubahan pada daun yang terinfeksi P.  ananatis berupa  kerusakan  berat yang  menyebabkan  daun  tidak  dapat  berfungsi. Kerusakan tanaman yang sangat berat menunjukkan  tingkat  virulensi  patogen  sangat tinggi.  Patogen  virulen  mempunyai  sifat  lebih agresif  dan  ganas  dalam  menginfeksi  inangnya sehingga  menyebabkan  serangan  patogen  lebih parah.  Menurut  Surico  (2013) , patogen  virulen adalah  patogen  yang  menyebabkan  kerusakan terukur pada inang.
Gambar 2. Uji virulensi pada daun bawang: kontrol (A), gejala berkerut, daun melekuk, memipih, dan nekrosis berwarna putih dan mati pucuk (B dan C)
Sifat  virulensi  dari  patogen P.  ananatis disebabkan oleh  faktor  virulensi berupa sistem quorum sensing untuk produksi eksopolisakarida  (EPS)  dan  pembentukan bioﬁlm;  dan  pergerakan  flagel  bakteri  (Shin dkk.,  2019).  Setelah  daun  bawang  diinokulasi pada  uji  virulensi,  populasi  bakteri P.  ananatis akan memasuki tahap inkubasi hingga mencapai  jumlah  tertentu  sebelum  melakukan respon.  Kepadatan  jumlah  sel  sampai  pada batas  populasi  tertentu  terjadi  melalui  proses komunikasi antar sel bakteri dengan membentuk  sinyal  molekul  kimia  ( quorum sensing ).  Fenomena  komunikasi  ini  dilakukan untuk  ‘memanggil’  anggota  populasi  bakteri ditempat jauh agar  dapat membentuk kepadatan  populasi  hingga  mencapai  jumlah minimal  sel  untuk  mengekspresikan  gejala water soaking (kebasah-basahan).
EPS  yang  dihasilkan  bakteri P.  ananatis memiliki  peranan  penting  dalam  menginduksi gejala bercak water soaking dengan
menciptakan  kondisi  lingkungan  mikro  yang esensial  untuk  mempercepat  perbanyakan bakteri  hingga  mencapai  jumlah  tertentu  pada ruang antar sel (interseluler) daun. Keberadaan EPS  yang  bersifat  higroskopis  dalam  ruang interseluler  akan  menarik  air  dari  sitoplasma menyebabkan gejala kebasahan ( water soaking )  sehingga  menciptakan  kondisi  yang sesuai  untuk  mempercepat  perbanyakan bakteri.  Hal  ini  menyebabkan  daun  tanaman tampak  layu  (Habazar  &  Rivai,  2004). Komunitas bakteri ini akan membentuk asosiasi koloni  yang  disebut  biofilm.  Virulensi  sebagian besar mikroorganisme patogen ditentukan oleh kemampuannya  membentuk  biofilm.  Bakteri pembentuk  biofilm  seperti  bakteri P.  ananatis akan  mensekresikan  EPS  (Shin  dkk.,  2019) untuk  memperkuat  pelekatan bakteri  pada permukaan  substrat sehingga  dapat  bertahan dari gaya  fisik  yang  dapat  menyapu  bersih  sel- sel  yang  tidak  menempel.  Hal  ini  dapat meningkatkan daya tahan hidup
(survival) dan  daya  serang  patogen  terhadap inangnya
Selain itu, penyakit yang disebabkan oleh P.  ananatis pada  bawang  juga  ditentukan  oleh kemampuan  bakteri  untuk  bergerak  dan menyebar  dengan  cepat  di  dalam  sel  inang. Hasil  penelitian  Asrul  &  Umrah  (2019) menunjukkan  bahwa  bakteri P.  ananatis yang diisolasi  dari  bawang  merah  dan  wakegi memiliki flagel yang berfungsi untuk menggerakkan  bakteri  secara  aktif  (motil). Flagel tersebut tersebar pada seluruh permukaan  sel  dengan  bentuk  peritrikus. Pergerakan  flagel  ini  berperan  dalam  proses infeksi P. ananatis pada bawang (Weller‐Stuart dkk.,  2017) karena  dapat  memacu  bakteri untuk  lebih  agresif  sehingga  menimbulkan gejala  nekrosis  pada  daun  bawang  (Stice  dkk., 2018).  Pergerakan  flagela  membantu  bakteri P.  ananatis dalam  menemukan  titik  pelekatan yang  sesuai  dan  menempel  pada  seluruh permukaan  daun  bawang.  Sebelum  terjadi pelekatan sel pada permukaan daun, pergerakan  flagel  berperan  dalam  membantu bakteri  untuk  mencapai  area  pelekatan, penyebaran  bakteri  dalam  sel  tanaman,  dan berkontribusi terhadap kemampuan P. ananatis untuk  menyebabkan  penyakit  pada  bawang (Weller‐Stuart  dkk.,  2017). Bakteri  memiliki molekul  adhesi/pelekatan  pada  permukaan  sel inang atau dinding sel yang hidrofobik sehingga dapat  menempel  pada  membran  sel  inang. Pelekatan  ini  meningkatkan  virulensi  dengan
cara mencegah bakteri terbawa oleh aliran air. Pergerakan  dengan  menggunakan  flagel  ini memungkinkan  juga  bakteri  dapat  merespon dan  beradaptasi  dengan  perubahan  kondisi lingkungan (Weller‐Stuart dkk., 2017).
Gejala  nekrosis  yang  tampak  pada  daun bawang,  diawali  dengan  munculnya  gejala water  soaking akibat  keluarnya  larutan  asam asam  amino,  sukrosa  dan  ion-ion  organik  dari dalam  sel  (intraseluler)  ke  ruang  antar  sel (interseluler)  sehingga  menciptakan  kondisi yang  sesuai  untuk  percepatan  perkembang biakan bakteri di ruang interseluler. Selanjutnya jaringan  mengering  berupa  kematian  sel-sel pada  bagian  jaringan  atau  organ  tanaman (nekrosis),  dan  membentuk  warna  putih kemudian  coklat,  abu-abu  atau  hitam  dengan batas  yang  jelas.  Gejala  nekrosis  yang berkembang  pada  daun  ini  tidak  terlepas  dari peranan sistem quorum sensing dan pergerakan flagel bakteri P. ananatis (Morohoshi dkk., 2007).
Terkadang  gejala  klorosis  (bercak  hijau kekuningan) yang muncul pada daun kemungkinan disebabkan oleh pengaruh toksin yang  disekresikan  patogen.  Menurut  Stice  dkk. (2019) bakteri P. ananatis diduga menghasikan toksin  fosfonat  untuk  membunuh  sel  tanaman inang  dan  menyebabkan  pembusukan  pada umbi  bawang.  Schumann  dan  D'Arcy  (2010) melaporkan  bahwa  toksin  yang  disekresikan oleh  patogen  dalam  konsentrasi  yang  cukup tinggi  dapat  menimbulkan  gejala  klorosis
sehingga merusak
tanaman. Toksin menyebabkan  terjadinya  degenerasi  kloroplas, atau rusaknya klorofil dan akhirnya menimbulkan gejala klorosis pada daun (Billing, 1982).
Secara  umum,  gen  virulen  dapat memperoduksi  dan  menskresikan  senyawa kimia yang lebih banyak daripada gen avirulen. Senyawa  kimia  berupa  toksin,  enzim,  zat pengatur  tumbuh  (hormon),  dan  polisakarida yang  dibentuk  oleh  patogen  sebagai  senjata penyerangan  terhadap  inang  digunakan  untuk merusak  sel  inang  atau  mendegradasi  dinding sel tanaman, dan merombak zat makanan yang terdapat  di  dalam  sel  (Surico,  2013).  Produksi sejumlah  faktor  virulensi  yang  disekresikan patogen akan menginduksi berbagai jenis gejala seperti  klorosis,  nekrosis,  busuk  lunak,  hawar api,  layu  dan  lain-lain  hingga  menimbulkan keparahan  penyakit  tanaman  (Buonaurio, 2008).  Mekanisme  virulensi  yang  terjadi  pada patogen P. ananatis adalah terdapat suatu gen hfq yang berperan penting dalam mengendalikan  sistem quorum  sensing dan pergerakan  flagel.  Gen hfq inilah  yang mengatur  berbagai  sifat  virulensi  bakteri P. ananatis (Shin  dkk.,  2019). P.  ananatis yang sangat virulen menyebabkan proses pertumbuhan  bawang  yang  terinfeksi  menjadi terhambat dan menimbulkan kerusakan tanaman.  Ormsby  dan  Pottinger  (2009) melaporkan, penyakit hawar daun bakteri yang disebabkan P.  ananatis dapat  mempengaruhi
pertumbuhan tanaman berupa kematian daun, layu dan mati pucuk.

## Laju infeksi penyakit
Hasil  pengamatan  terhadap  laju  infeksi penyakit hawar daun bakteri pada semua isolat patogen  yang  berasal  dari  lokasi  yang  berbeda disajikan  pada  tabel  4.  Pada  tabel  tersebut terlihat  bahwa  rata-rata  laju  infeksi  pada berbagai  isolat  patogen  dalam  waktu  21  hsi berkisar  antara  0,52  -  0,64  per  unit  per  hari. Laju  infeksi  penyakit  ini  dihitung  berdasarkan perkembangan persentase daun terserang.
Laju  infeksi  merupakan  nilai  yang menunjukkan seberapa cepat populasi patogen dapat berkembang atau perkembangan populasi  patogen  per  unit  per  satuan  waktu (Oka, 1993; Brugman dkk., 2017;). Berdasarkan data  laju  infeksi  isolat  patogen  pada  semua kultivar  bawang  (tabel  4),  dapat  diartikan bahwa  dalam  setiap  100  daun  bawang, terdapat  sekitar  52  -  64  daun  terinfeksi  /  sakit (terserang  patogen)  setiap  harinya.  Menurut Van  der  Plank  (1963),  laju  infeksi  ini  tergolong tinggi  dan  seragam  untuk  semua  isolat  karena nilai laju infeksi berada diantara 0,11 - 0,50 per unit  per  hari  (>  0,11  <  0,50).  Ini  menandakan bahwa  perkembangan  populasi  bakteri P. ananatis sangat  cepat  sehingga  dapat  diduga patogen  tersebut  sangat  agresif  dan  ganas dalam  menginfeksi  daun  bawang.  Keagresifan patogen  didukung  oleh  keadaan  lingkungan rumah  kaca  dengan  suhu  dan  kelembapan udara  masing-masing  30,94  –  36,18 O C  dan
42,27  –  80,54%.  Kondisi  lingkungan  ini  cocok bagi  pertumbuhan  dan  perkembangan P. ananatis yaitu  berada  pada  suhu  udara  antara
28  –  35 O C  (Schwartz  dkk.,  2003)  dan kelembapan  udara  lebih  dari  75%  (Schroeder dkk., 2011).
Semua  kultivar  bawang  yang  digunakan tergolong rentan terhadap serangan patogen P. ananatis berdasarkan persentase daun terserang  (>  40%).  Kultivar  rentan  dan  kondisi lingkungan yang mendukung bagi perkembangan  patogen  menyebabkan  laju infeksi tinggi dan menimbulkan kerusakan daun yang parah. Menurut Van der Plank (1963), laju infeksi  dipengaruhi  oleh  keagresifan  patogen, lingkungan,  dan  ketahanan/kerentanan  inang.
Kerentanan  seluruh  kultivar  bawang  ini  diduga karena  terjadi  penurunan  aktivitas  enzim fenilalanin,  asam  salisilat,  fitoalekin,  dan peroksidase  yang dibentuk  bawang pada  umur tua.  Aktivitas  enzim  ini  disekresikan  tanaman sebagai  respon  ketahanan  terhadap  infeksi patogen  untuk  menghambat  perkembangan bakteri.  Hasil  penelitian  Resti  dkk.  (2016). menunjukkan bahwa aktivitas enzim peroksidase  menurun  (kontrol)  pada  daun bawang  merah  umur  44  hari  (14  +  30  hari). Enzim peroksidase merupakan suatu kelompok PR-protein dari golongan PR-9 yang terakumulasi  pada  saat  tanaman  sakit  atau sejenisnya. Peroksidase berperan dalam ketahanan tanaman terhadap serangan patogen.  McDonald  dkk.  (2004)  melaporkan
bahwa bakteri P. ananatis seringkali menyerang bawang yang telah berumur panen.

## KESIMPULAN
Isolat  bakteri P.  ananatis asal  Ciribon (CR), Tegal (TG), Nganjuk (NG), Bantul (BT), dan Palasa (PL) memiliki tingkat virulensi yang sama (seragam) dan bersifat sangat virulen terhadap bawang  kultivar  Bima  curut,  Biru  sawah,  Bauji, dan Palasa. Semua isolat tersebut memberikan respon yang sama terhadap masa inkubasi yang cepat  (2,35  –  2,90  hari),  persentase  daun terserang yang berat (67,44 – 81,76%), dan laju infeksi yang tinggi (> 0,5 unit per hari).

## DAFTAR PUSTAKA
Agrios,  N.  G.  (2005). Plant  Pathology (5  ed.). University of Florida.
Alippi, A. M., & López, A. C. (2010). First report of  leaf  spot  disease  of  maize  caused  by Pantoea  ananatis in  Argentina. Plant Disease , 94 (4), 487. https://doi.org/10.1094/PDIS-94-4-0487A Asrul,  B.  Hadisutrisno,  T.  Arwiyanto,  &  J. Widada (2014).
Peranan faktor lingkungan  terhadap  penyakit  hawar daun  bakteri  ( Pantoea  ananatis )  pada tanaman  bawang  merah.  hlm  1–12.
Seminar Nasional Perhimpunan Fitopatologi  Indonesia  (PFI)  Komda Yogyakarta,  Solo  dan  Semarang,  20 September. Yogyakarta.
Asrul,  B.  Hadisutrisno,  T.  Arwiyanto,  &  J.
Widada  (2013).  The  spread  of  bacterial leaf blight disease  at  production centers  of  shallot  in  indonesia. Biota, 18 (1), 27−36
Asrul  &  Umrah  (2019).  Host  range Pantoea ananatis the causal agent of bacterial leaf blight  on Allium spp. Agroland:  The Agricultural Sciences Journal , 6 (1), 27–33.
Billing,  E.  (1982).  Entry  and  establishment  of pathogenic  bacteria  in  plant  tissues. Symposium  Series  -  Society  for  Applied Bacteriology . http://agris.fao.org/agris- search/search.do? recordID=US201301987106
Boch,  J.,  &  Bonas,  U.  (2001).  Gram-Negative Plant  Pathogenic  Bacteria.  Milhldorfer  I, Schafer  KP  (eds):  Emerging  bacterial pathogens. Contrib  Microbiol.  Basel, Karger, 8, 186–196.
Brugman,  E.,  Purajanti,  E.  D.,  &  Fuskhah,  E. (2017). Pengendalian  penyakit  hawar (late  blight)  pada  kentang  (Solanum tuberosum l.) melalui penerapan
solarisasi  tanah  dan  aplikasi  agen  hayati Trichoderma harzianum [Disertasi].
Fakultas Peternakan dan Pertanian Undip. Buonaurio,  R.  (2008).  Infection  and  plant defense  responses  during  plant-bacterial interaction. Plant-microbe  interactions , 169–197.
Carr,  Eric  A.,  Zaid,  A.  M.,  Bonasera,  J.  M., Lorbeer,  J.  W.,  &  Beer,  S.  V.  (2013).
Infection  of  onion  leaves  by Pantoea ananatis leads  to  bulb  infection. Plant Disease , 97 (12), 1524–1528.
https://doi.org/10.1094/PDIS-06-12- 0597-RE
Diab, S., Bashan, Y., Okon, Y., & Henis, Y. (1982).
Effects  of  relative  humidity  on  bacterial scab  caused  by Xanthomonas  campestris
pv. vesicatoria on pepper.
Phytopathology , 72 (9), 1257–1260.
Dutta,  B.,  Anderson,  F.,  Smith,  S.,  &  Gitaitis,  R. D.  (2017).  Epiphytic  Survival  of  Pantoea ananatis  on  Richardia  scabra  L.  in Georgia. Plant  Disease , 101 (4),  613–618. https://doi.org/10.1094/PDIS-10-16- 1411-RE
Ezepchuk, Y. V. (2013). Biology of pathogenicity (theoretical  review). Annual  Research  & Review in Biology , 3 (4), 805–813.
Gabriel, D. W. (1999). Why do pathogens carry avirulence  genes? Physiological  and Molecular Plant Pathology , 55 , 205–214.
Goszczynska,  T.,  Botha,  W.  J.,  Venter,  S.  N.,  &
Coutinho,  T.  A.  (2007).  Isolation  and identification  of  the  causal  agent  of
brown stalk rot, a new disease of maize in South  Africa. Plant  Disease , 91 (6),  711– 718.  https://doi.org/10.1094/PDIS-91-6-
0711
Goszczynska, T., Moloto, V. M., Venter, S. N., & Coutinho,  T.  A.  (2006).  Isolation  and identification  of Pantoea  ananatis from onion  seed  in  South  Africa. Seed  Science and Technology , 34 (3), 655–668.
https://doi.org/10.15258/sst.2006.34.3.1 2 Guest,  D.,  &  Brown,  J.  (1997).  Plant  defences against pathogens. Dalam Plant pathogens  and  plant  diseases .  Rockvale Publications  for  the  Division  of  Botany,
Rockvale  Publications  for  the  Division  of Botany, University of New England Habazar,  T.,  &  Rivai,  F.  (2004). Bakteri patogenik  tumbuhan .  Andalas  University Press.
Janse, J. D. (2005). Phytobacteriology: Principles and practice . CABI.
Kim,  J.,  Choi,  O.,  &  Kim,  T.-S.  (2012).  An outbreak  of  onion  center  rot  caused  by Pantoea ananatis in Korea. Plant Disease ,
96 (10), 1576. https://doi.org/10.1094/PDIS-03-12- 0251-PDN
Kim,  M.  K.,  Ryu,  J.  S.,  Lee,  Y.  H.,  &  Yun,  H.  D. (2007).  First  report  of  Pantoea  spp. Induced  soft  rot  disease  of  Pleurotus eryngii  in  Korea. Plant  Disease , 91 (1), 109–113.  https://doi.org/10.1094/PD-91- 0109A
McDonald,  M.  R.,  de  los  Angeles  Jaime,  M.,  & Hovius,  M.  H.  Y.  (2004).  Management  of diseases of onions and garlic. Dalam S. A. M.  H.  Naqvi  (Ed.), Diseases  of  Fruits  and Vegetables:  Volume  II:  Diagnosis  and Management (hlm.  149–200).  Springer Netherlands.  https://doi.org/10.1007/1- 4020-2607-2_6
Morohoshi,  T.,  Nakamura,  Y.,  Yamazaki,  G., Ishida, A., Kato, N., & Ikeda, T. (2007). The plant pathogen Pantoea ananatis produces  Nacylhomoserine  lactone  and causes  center  rot  disease  of  onion  by quorum  sensing. Journal  of  Bacteriology ,
189 (22), 8333–8338. https://doi.org/ 10.1128/JB.01054-07
Nunez, J. J., Gilbertson, R. L., Meng, X., & Davis,
R. M. (2002). First report of Xanthomonas leaf  blight  of  onion  in  California. Plant Disease , 86 (3), 330–335.
https://doi.org/10.1094/PDIS.2002.86.3.3
30B
Oka,  I.  N.  (1993). Pengantar  epidemiologi penyakit tanaman . Gadjah Mada University Press.
Ormsby, M., & Pottinger, B. (2009). Import Risk Analysis:  Onion  (Allium  cepa  Liliaceae) Fresh  Bulbs  for  Consumption  from  China (12  ed.,  Vol.  12).  Ministry  of  Agriculture and  Forestry  Te  Manatu  Ahuwhenua, Ngaherehere.
Raju,  J.,  Benagi,  V.  I.,  Naragund,  V.  B.  &
Ashtaputre,  A.  (2011).  Survey  for  the incidence and severity of bacterial blight  in  pomegranate  caused  by Xanthomonas  axonopodis pv. punicae Karnataka. Journal  of  Agricultural Science, 24 (4), 570 – 572.
Resti,  Z.,  Habazar,  T.,  Putra,  D.  P.,  &  Nasrum.
(2016).  Aktivitas  enzim  peroksidase bawang  merah  yang  diintroduksi  dengan bakteri  endofit  dan  tahan  terhadap penyakit hawar daun bakteri ( Xanthomonas  axonopodis pv. allii ).
Jurnal  Hama  dan  Penyakit  Tumbuhan Tropika ,
16 (2), 131–137. https://doi.org/10.23960/j.hptt.216131-
137
Schroeder,  B.  K.,  Schwartz,  H.  F.,  Schwartz,  H.
F.,  &  du  Toit,  L.  J.  (2011). Bacterial Diseases .  Onion  ipmPIPE  Diagnostic
Pocket Series. http://mtvernon.wsu.edu/path_team/Oni on-Card-Bacterial-Diseases.pdf
Schumann,  G.,  &  D’Arcy,  C.  (2010). Essential plant  pathology.  2  a  Edición (2  ed.).  ST.
Paul, Minnesota (USA) American
Phytopathological Society Press.
Schwartz,  H.  F.,  Otto,  K.  L.,  &  Gent,  D.  H.  (2003).
Relation  of  temperature  and  rainfall  to development  of Xanthomonas and Pantoea leaf  blights  of  onion  in  Colorado. Plant Disease , 87 (1), 11–14. https://doi.org/10.1094/PDIS.2003.87.1.11
Shin,  G.  Y.,  Schachterle,  J.  K.,  Shyntum,  D.  Y.,
Moleleki, L. N., Coutinho, T. A., & Sundin, G. W. (2019). Functional Characterization of  a  Global  Virulence  Regulator  Hfq  and Identification of Hfq-Dependent sRNAs in the  Plant  Pathogen Pantoea  ananatis. Frontiers in Microbiology , 10 (2075), 1-19. https://doi.org/10.3389/fmicb.2019.02075 Stumpf, S., Gitaitis, R., Coolong, T., Riner, C., Dutta, B. (2017). Interaction of onion cultivar and growth stages on incidence of Pantoea ananatis bulb infection. Plant Disease, 101 (1),1616-1620.
Soesanto,  L.,  &  Rahayunia,  R.  F.  (2011).
Pengimbasan  ketahanan  bibit  pisang ambon  kuning  terhadap  penyakit  layu fusarium dengan beberapa jamur antagonis. Jurnal  Hama  dan  Penyakit Tumbuhan Tropika , 9 (2), 130–140. http://dx.doi.org/10.23960/j.hptt.29130- 140
Staskawicz,  B.  J.,  Ausubel,  F.  M.,  Baker,  B.  J., Ellis, J. G., & Jones, J. D. (1995). Molecular genetics  of  plant  disease  resistance. Science, 268 (5211), 661-667.
Stice,  S.,  Dutta,  B.,  &  Kvitko,  B.  H.  (2019). A plasmid  gene  cluster  makes  major contributions to Pantoea ananatis virulence on onion by conferring tolerance to  a  reactive  sulfur  phytoanticipin. Plant Health 2019. https://apsnet.confex.com/apsnet/2019/
meetingapp.cgi/Paper/14373
Stice, S. P., Stumpf, S. D., Gitaitis, R. D., Kvitko,
B.  H.,  &  Dutta,  B.  (2018).  Pantoea ananatis genetic diversity analysis reveals limited  genomic  diversity  as  well  as accessory  genes  correlated  with  onion pathogenicity. Frontiers  in  Microbiology , 9 (184),
1-18.
https://doi.org/10.3389/fmicb.2018.0018 4
Surico,  G.  (2013).  The  concepts  of  plant pathogenicity,  virulence/avirulence  and effector  proteins  by  a  teacher  of  plant pathology. Phytopathologia Mediterranea , 52 (3), 399–417.
Vahling‐Armstrong, C., Dung, J. K. S., Humann, J. L.,  &  Schroeder,  B.  K.  (2016).  Effects  of
postharvest  onion  curing  parameters  on bulb rot caused by Pantoea agglomerans , Pantoea  ananatis and Pantoea  allii in storage. Plant Pathology , 65 (4), 536–544.
https://doi.org/10.1111/ppa.12438
Vander-der-Plank,  J.  E.  (1963). Plant  diseases: epidemic and control . Academic Press.
Weller‐Stuart,  T.,  Toth,  I.,  Maayer,  P.  D.,  & Coutinho,  T.  (2017).  Swimming  and twitching  motility  are  essential  for attachment  and  virulence  of  Pantoea ananatis  in  onion  seedlings. Molecular
Plant Pathology , 18 (5), 734–745. https://doi.org/10.1111/mpp.12432
Zaid,  A.  M.,  Bonasera,  J.  M.,  &  Beer,  S.  V.
(2012).  OEM—A  new  medium  for  rapid isolation  of  onion-pathogenic  and  onion-
associated
bacteria.
Journal
of
Microbiological Methods , 91 (3), 520–526. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2012.09. 031