Nilai  Antioksidan  dan  SPF  dari  Kombinasi  Minyak  Biji Nyamplung  ( Calophyllum  inophyllum L.)  dan  Minyak Kelapa Sawit ( Elaeis guineensis )
An Antioxidant and a SPF of Combination of Nyamplung Seed Oil (Calophyllum inophyllum L) and Palm Oil (Elaeis guineensis)
Indri Astuti Handayani 1* , Anny Victor Purba 2 , Deni Rahmat 2
1 Akademi Farmasi IKIFA, Jakarta
2 Magister Farmasi, Universitas Pancasila, Jakarta
Corresponding author: Indri Astuti Handayani: Email: indriastutihandayani@gmail.com
Submitted: 06-12-2019 Revised: 30-12-2019 Accepted: 30-12-2019
ABSTRAK Minyak biji nyamplung dilaporkan memiliki kandungan vit E 2,05% dan β karoten sebesar 8,44mg/100g,  minyak  kelapa  sawit  dilaporkan  memiliki  kandungan  vit  E  27,6mg/100g  dan  β karoten 505mg/kg sehingga dapat berfungsi sebagai antioksidan dan tabir surya. Tujuan penelitian ini adalah mengetahui peningkatan atau penurunan nilai antioksidan dan SPF dari kombinasi minyak antara  minyak  biji  nyamplung  dengan  minyak  kelapa  sawit.  Metode  untuk  mengukur  aktivitas antioksidan adalah peredaman radikal bebas, nilai SPF diukur menggunakan metode perhitungan nilai absorbansi menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Hasil penelitian menunjukkan minyak biji nyamplung, minyak kelapa sawit dan kombinasi minyak (2:3) memiliki aktivitas antioksidan (IC50) secara  berturut-turut  sebesar  192,77;  140,  89;  dan  237,26  µg/mL.  Nilai  SPF  dari  minyak  biji nyamplung, minyak kelapa sawit dan kombinasi minyak (2:3) pada konsentrasi 125 µg/mL sebesar 6,69, 1,33 dan 6,54.
Kata  kunci: Biji  nyamplung  ( Calophyllum  inophyllum L);  Kelapa  sawit  ( Elaeis  guineensis ); antioksidan; nilai SPF
ABSTRACT Nyamplung seed oil is reported to have a vi tamin E content of 2.05% and carotene β of 8.44mg / 100g, palm oil is reported to have a vitamin E content of 27.6mg / 100g and carotene β 505mg / kg so that it can function as an antioxidant and sunscreen. The purpose of this study was to determine the increase or decrease in antioxidant value and SPF from oil combinations between nyamplung seed oil and palm oil. The method for measuring antioxidant activity is the reduction of free radicals, the SPF value was measured using the method of calculating the absorbance value using a UV-Vis spectrophotometer. The results showed that nyamplung seed oil, palm oil and oil combinations (2: 3)  had  antioxidant  activity  (IC50)  in  a  row  of  192.77;  140,  89;  and  237.26  µg/mL.  SPF  values  of nyamplung seed oil, palm oil and oil combinations (2: 3) at concentrations of 125 µg/mL were 6.69, 1.33 and 6.54 Keywords :  Nyamplung  seeds  ( Calophyllum  inophyllum L);  palm  oil  ( Elaeis  guineensis ); microemulsion; antioxidants; SPF value
PENDAHULUAN Radiasi  sinar  ultraviolet  dari  sinar matahari akan menghasilkan radikal bebas yang dapat  mempercepat  proses  penuaan.  Radiasi sinar  matahari  yang  mengenai  kulit  secara berlebihan dapat menyebabkan gangguan pada kulit  seperti  hiperpigmentasi,  kulit  terbakar, penuaan dini, kulit hitam dan bersisik,  bahkan kanker  kulit. (‘Penentuan  Komposisi  Optimal Bahan Tabir Surya Kombinasi Oksibenson â € “ Oktildimetil  PABA  Dalam  Formula  Vanishing
Cream’,  2005) Hal  itulah  yang  menyebabkan perlu  penggunaan  kosmetik  perawatan  kulit yang  bersifat  antioksidan  dan  tabir  surya. Penggunaan  Antioksidan  dalam  berbagai penelitian  menunjukkan  dapat  menghambat penuaan  dini  dengan  cara  menangkal  radikal bebas yang terbentuk akibat metabolisme tubuh ataupun  karena  radiasi  sinar  UV.(T.  SaidabM.
DutotabC. MartinabJ.-L. BeaudeuxcC. BoucherdE. EneeaC. BaudouinbJ.-M. WarnetabP. Rat, 2006)
Hingga saat ini kosmetik perawatan kulit yang mengandung tabir surya masih menggunakan  zat  aktif  berupa  senyawa- senyawa anorganik yang relatif tidak baik bagi kesehatan,  salah  satunya  adalah  titanium dioksida.  Titanium  dioksida    merupakan  zat yang karsinogenik terhadap tubuh manusia.(T. SaidabM.  DutotabC.  MartinabJ.-L.B  eaudeuxcC.
BoucherdE. EneeaC. BaudouinbJ. -M.
WarnetabP. Rat, 2006) Oleh sebab itu penelitian tentang senyawa organik sebagai zat aktif pada sediaan  tabir  surya  sangat  diperlukan  untuk menambah  khasanah  bahan-bahan  organik yang diduga dapat berguna sebagai antioksidan dan tabir surya.
Nyamplung  (Calophyllum  inophyllum  L) merupakan tanaman yang tumbuh dan tersebar di Indonesia, terutama di daerah pesisir pantai. Minyak biji nyamplung mengandung vitamin E yang berkhasiat sebagai antioksidan. Minyak biji nyamplung pada konsentrasi rendah (1/10.000 mL/mL)  menunjukkan  serapan  UV  yang signifikan,  bersifat  antioksidan  dan  mampu melindungi  dari  pengaruh  oksidatif  dan kerusakan DNA.(Ekowati, 2013)
Pada  penelitian  terdahulu  didapat  data bahwa secara in vitro minyak nyamplung yang berasal dari daerah Kebumen pada konsentrasi 0,4mg/mL  mampu  menghasilkan  SPF  6  dan pada konsentrasi 0,8mg/mL mampu
menghasilkan SPF 14. (Sri Rejeki, 2014) Minyak biji nyamplung yang berasal dari daerah Cilacap pada konsentrasi 0,2 mg/mL; 0,25 mg/mL; 0,3 mg/mL  dapat  menghasilkan  nilai  SPF  masing- masing sebesar 10.34, 17.28 dan 26.07 dan hasil pengujian harga SPF losion tabir surya minyak nyamplung 30,46.(Sri Rejeki, 2014)(Ogbunugafor et al. , 2011)
Minyak  kelapa  sawit  merupakan  salah satu sumber karoten tertinggi yang diekuivalenkan dengan retinol (pro-vitamin A). Pada bidang kesehatan, karotenoid terutama β karoten  merupakan  salah  satu  senyawa antioksidan alami.
Menurut penelitian terdahulu  pada  konsentrasi  palm  oil  (1%),  25 µg/mL, 50  µg/mL dan 75 µg/mL didapat hasil mengukuran inhibisinya masing-masing sebesar  59.02,  70.16,  82.06  dan  88.16.  Hal  ini menunjukkan bahwa minyak kelapa sawit dapat berfungsi  sebagai  antioksidan.(Djajadisastra, 2007) Berdasarkan data diatas maka penelitian ini menggunakan kombinasi minyak nyamplung dan  minyak  kelapa  sawit  sebagai  bahan  aktif
untuk melihat apakah kombinasi kedua minyak ini  dapat  meningkatkan  aktivitas  antioksidan dan  nilai SPF.

## METODOLOGI
Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimen  untuk  mengetahui  kombinasi minyak nyamplung dengan minyak kelapa sawit yang mimiliki peningkatan nilai antioksidan dan SPF paling optimal.
Alat dan bahan Alat-alat  yang  digunakan  antara  lain blender, inkubator (Gemmyco), pH – meter tipe 510,  viskometer  Brookfield  (tipe  DV-E), timbangan analitik tipe 210 – LC, spektrofotometer (Hitachi – UV 1601). Bahan-bahan yang digunakan adalah Biji Nyamplung  (Calophyllum  inaphyllum  L), minyak kelapa sawit (Elaeis guineensis), DPPH (1,1  difenil  2  pikrilhidrazil)  (Qlab  FFUP), isopropyl  alcohol  (brataco);  n-hexan  (PT Merck), vitamin C BP.

## Prosedur kerja
Ekstraksi Minyak Biji Nyamplung Biji nyamplung diperoleh dari Kebumen. Biji  nyamplung  dikeringkan  selama  3  hari, kemudian
dibentuk serbuk. Ekstraksi menggunakan  metode  maserasi  menggunakan n-heksan selama 24 jam. Pemisahan pelarut dari ekstrak  menggunakan  cara  distilasi  pada  suhu 45 0 C  dengan  tekanan  400  milibar  sampai mendapatkan minyak nyamplung yang diinginkan
Ekstraksi Minyak Kelapa Sawit Minyak  kelapa  sawit  diperoleh  dari  PT Tunas  Baru  Lampung  Mesuji  Pks  2,  dalam bentuk crude palm oil (CPO).
Karakterisasi Minyak Karakaterisasi  minyak  meliputi:  Analisa komposisi  asam  lemak  menggunakan  alat  GC- FID;  analisa  bilangan  iod,  penyabunan, peroksida,  dan  asam  dengan  menggunakan metode titrimetri; analisa karotenoid menggunakan  metode  TLC scanner ;    analisa vitamin E menggunakan metode HPLC
Uji  Aktivitas  Antioksidan  (Djajadisastra, 2007)(Rosita, Purwanti and Agustin, 2010)
Pengujian aktivitas antioksidan menggunakan metode peredaman radikal bebas
(DPPH).  Aktivitas  antioksidan  deinyatakan dengan  nilai  IC50  dengan  satuan  µg/mL. Pengujian  aktivitas  antioksidan  untuk  masing- masing  minyak  serta  kombinasi  minyak nyamplung : minyak kelapa sawit (2:3). Larutan induk masing-masing dibuat dengan konsentrasi 1000 µg/mL, kemudian dipipet 30, 60,  90,  120,  150,  180,  210  dan  240µL menggunakan mikropipet kemudian diencerkan dengan  isopropil  alkohol  (pa)  sampai  2,0  mL dan ditambahkan larutan DPPH 0,5 mL, dikocok sampai  homogen.  Inkubasi  dalam  inkubator 37 0 C selama 30 menit, kemudian sampel-sampel dan  blanko  tersebut  diukur  serapannya  pada panjang gelombang 515 nm.
Persentase  (%)  inhibisi  oksidase  dapat dihitung dengan cara:
% 𝐼𝑛ℎ𝑖𝑏𝑖𝑠𝑖
= (𝑛𝑖𝑙𝑎𝑖 𝑠𝑒𝑟𝑎𝑝𝑎𝑛 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 − 𝑛𝑖𝑙𝑎𝑖 𝑠𝑒𝑟𝑎𝑝𝑎𝑛 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙) 𝑛𝑖𝑙𝑎𝑖 𝑠𝑒𝑟𝑎𝑝𝑎𝑛 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜
× 100%
Uji  Nilai  SPF  (Michael  Antolovich,  Paul  D. Prenzler , Emilios Patsalides, 2002) Ditimbang  seksama  100  mg  minyak  biji nyamplung,  100  mg  minyak  biji  kelapa  sawit, 100 mg kombinasi minyak biji nyamplung dan minyak  biji  kelapa  sawit  (2:3),  100  mg mikroemulsi kombinasi minyak nyamplung dan minyak  kelapa  sawit  (2:3),  masing-masing dilarutkan  dalam  isopropil  alkohol  hingga  100 mL (1000 µg/mL), kemudian dibuat konsentrasi 125 µg/mL dan 500 µg/mL, dan masing-masing diukur  serapannya  dengan  spektrofotometer pada  rentang  panjang  gelombang  290  sampai 370  nm  dengan  interval  5  nm.  Area  di  bawah kurva  (AUC)  dihitung  dari  nilai  serapan  pada panjang     gelombang    290-370    nm      dengan
interval 5 nm. Dihitung nilai log SPF dengan cara membagi  jumlah  seluruh  area  dibawah  kurva dengan selisih panjang gelombang terbesar dan terkecil kemudian dikalikan 2. Selanjutnya nilai log SPF diubah menjadi nilai SPF.
Nilai AUC dihitung menggunakan rumus:
AUC  = (Aa + Ab)/2  x  (dPa-b)
Aa =  Absorbansi pada panjang gelombang a nm; Ab =  Absorbansi pada panjang gelombang b nm; dPa-b  =  Selisih panjang gelombang a dan b

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Tingkat kekuatan antioksidan berdasarkan  nilai  IC 50
dapat  dikelompokkan menjadi 5 kelompok, yaitu sangat kuat (IC 50 <10 µg/mL), kuat (IC 50 10-50 µg/mL), sedang (IC 50 >50-100 µg/mL), lemah (IC 50 >100-250 µg/mL), dan  tidak  aktif  (IC 50 >250  µg/mL).(De  Bot, 1992).
Berdasarkan  hasil  pengukuran  aktivitas antioksidan pada tabel I menunjukkkan bahwa minyak  biji  nyamplung  diperoleh  nilai  IC 50 sebesar 192,77 µg/mL, dan IC 50 minyak kelapa sawit  adalah  140,89  µg/mL,  sehingga  minyak biji nyamplung dan minyak kelapa sawit dapat dikelompokkan  ke  dalam  antioksidan  yang memiliki aktivitas lemah, sedangkan kombinasi antara  minyak  biji  nyamplung  dan  minyak kelapa sawit (2:3) juga dapat dikelompokkan ke dalam  antioksidan  yang  memiliki  aktivitas lemah  karena  dari  hasil  pengukuran  di  dapat IC 50 sebesar  237,26  µg/mL.  Hasil  kombinasi minyak biji nyamplung dan minyak kelapa sawit menunjukkan  adanya  penurunan  aktivitas antioksidan,  ini  menunjukkan  bahwa  ketika minyak biji nyamplung dan minyak kepala sawit
Tabel I. Hasil uji aktivitas antioksidan
Bahan IC 50 (µg/mL) Vitamin C 19,827 Minyak biji nyamplung 192,773 Minyak kelapa sawit 140,896 Kombinasi minyak biji nyamplung dan kelapa sawit (2:3) 237,268 Tabel II. Hasil uji nilai SPF pada Konsentrasi 125 µg/Ml Bahan SPF Minyak biji nyamplung 6,69 Minyak kelapa sawit 1,33 Kombinasi minyak biji nyamplung dan kelapa sawit (2:3) 6,54
dikombinasi  tidak  terjadi  efek  sinergis  seperti yang diharapkan, hal ini bisa disebabkan karena adanya  berbagai  macam  komponen  dalam kedua minyak tersebut, maka kemungkinan efek yang  terjadi  sangat  komplek  dan  terkadang tidak dapat diperkirakan. (Yunitasari and Arani, 2008).
Berdasarkan  tabel  II  menunjukkan Minyak biji nyamplung konsentrasi 125 µg/mL mempunyai  nilai  SPF  sebesar  6,69.  Nilai  SPF yang didapat dari minyak kelapa sawit dengan konsentrasi  125  µg/mL  adalah  1,33.  Nilai  SPF yang  didapat  dari  kombinasi  minyak  biji nyamplung  dan  minyak  kelapa  sawit  dengan
Gambar 1. Profil serapan minyak biji nyamplung 125 µg/mL
Gambar 2. Profil serapan minyak kelapa sawit 125 µg/mL Gambar 3. Profil serapan kombinasi minyak biji nyamplung dan minyak  kelapa sawit 125 µg/mL 0 0,5 1 1,5 2 290 295 300 305 310 315 320 325 330 335 340 345 350 355 360 365 370 375 380 A bs orbans i Panjang gelombang (nm) Profil serapan kombinasi minyak biji nyamplung dan minyak kelapa sawit (2:3) Profil serapan kombinasi minyak biji nyamplung dan minyak kelapa sawit (2:3)
konsentrasi  125  µg/mL  adalah    6,54.  Grafik serapan untuk masing-masing
minyak ditunjukkan pada gambar 1 sampai 3.
Dari  hasil  pengukuran  yang  dilakukan diperoleh  data  nilai  SPF  untuk  minyak  biji nyamplung  pada  konsentrasi  125µg/mL sebesar  6,  69,  minyak  kelapa  sawit  1,33  dan kombinasi  minyak  biji  nyamplung  dan  minyak kelapa  sawit  6,54,  sehingga  minyak  biji nyamplung  dan  kombinasi  minyak  biji nyamplung  dan  minyak  kelapa  sawit  dapat dikelompokkan  dalam  kelompok  tabir  surya yang  mempunyai  tipe  proteksi  ekstra, sedangkan  minyak  kelapa  sawit  dapat dikelompokkan  dalam  tabir  surya  yang mempunyai  tipe  proteksi  minimal.(Sudradjat and Setiawan, no date) Nilai SPF pada kombinasi minyak biji nyamplung dan minyak kelapa sawit tidak terlalu jauh berbeda dengan nilai SPF dari minyak  nyamplung,  tetapi  bila  dibandingkan dengan nilai SPF minyak kelapa sawit nilai SPF kombinasi  minyak  biji  nyamplung  dan  minyak kelapa sawit sangat jauh berbeda, dapat dilihat adanya peningkatan yang cukup berarti dimana minyak  kelapa  sawit  dengan  nilai  SPF  1,33 mempunyai  tipe  proteksi  minimal  sedangkan bila dikombinasi dengan minyak biji nyamplung meningkat menjadi proteksi ekstra dengan nilai SPF 6,54.(Sudradjat and Setiawan, no date) Hal ini  kemungkinan  disebabkan  adanya  efek sinergis  antara  minyak  kelapa  sawit  dan minyak  biji  nyamplung  bila  dikombinasikan, terkait  dengan  daya  proteksinya  sebagai  tabir surya.

## KESIMPULAN
Kombinasi  minyak  biji  nyamplung  dan minyak  kelapa  sawit  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  (2:3)  dengan  aktivitas antioksidan  tingkat  lemah  dengan  nilai  IC 50 sebesar  237,26  µg/mL  dimana  kombinasi  ini mengalami penurunan aktivitas antioksidan jika dibandingkan  dengan  sebelum  di  kombinasi. Sedangkan nilai SPF dari kombinasi minyak biji nyamplung  dan  minyak  kelapa  sawit  (2:3) meningkat  menjadi  6,54  dimana  jika  di bandingkan dengan nilai SPF dari minyak kelapa sawit  sebelum  dikombinasikan  yaitu  sebesar 1,33 terlihat adanya peningkatan efek proteksi tabir  surya  dari  proteksi  minimal  menjadi ekstra, hal ini kemungkinan disebabkan karena terjadi efek sinergis.

## DAFTAR PUSTAKA
De Bot, K. (1992) ‘Levelt ’ s ’ Speaking ’ Model Adapted’, Applied Linguistics , 13(I), pp. 1 –
24. doi: 10.1287/isre.6.2.144. Djajadisastra  (2007) Buku  Pegangan  Ilmu Pengetahuan Kosmetika . Jakarta:
Erlangga.
Ekowati,  D.  (2013) Optimasi  Komposisi Emulgator  Krim  Minyak  Biji  Nyamplung (Calophyllum  inophyllum  L.)  Sebagai Sunscreen  dan  Antioksidan  dengan Metode Simplex Lattice Design . Yogyakarta:  Universitas  Gadjah  Mada. Available at: http://etd.repository.ugm.ac.id/index.ph p?mod=penelitian_detail&sub=Penelitia nDetail&act=view&typ=html&buku_id=5 8683.
Michael  Antolovich  ,  Paul  D.  Prenzler  ,  Emilios Patsalides,  S.  M.  and  K.  R.  (2002) ‘Methods for testing antioxidant activity’,
Royal Society of Chemistry , 127, pp. 183 – 198. Available at: https://pubs.rsc.org/en/content/article html/2002/an/b009171p.
Ogbunugafor,  H.  A. et  al. (2011)  ‘Physico - chemical  and  antioxidant  properties  of Moringa  oleifera  seed  oil ’, Pakistan Journal of Nutrition , 10(5), pp. 409 – 414. doi: 10.3923/pjn.2011.409.414.
‘Penentuan  Komposisi  Optimal  Bahan  Tabir Surya  Kombinasi  Oksibenson  â  €“ Oktildimetil  PABA  Dalam  Formula Vanishing Cream’ (2005), (2), p. 2005. Rosita,  N.,  Purwanti,  T.  and  Agustin  (2010) ‘Stabilitas  Fisik  dan  Efektivitas  Sediaan Tabir  Surya  Kombinasi  Oksibenson  dan
Oktil Metoksisinamat dengan
Penambahan  Asam  Glikolat’,  VII(2),  pp.
16 – 26. Sri  Rejeki  (2014) Penggunaan  Minyak Nyamplung  (Calophyllum  inophyllum  L) Sebagai  Bahan  Kosmetik  Tabir  Surya : Optimasi  Formula  Losio  Menggunakan Simplex  Lattice  Design  Dan  Penetapan Harga  SPF  Secara  In  Vitro .  Universitas Gadjah Mada.
Sudradjat,  R.  and  Setiawan,  D.  (no  date) ‘PEMBUATAN  BIODIESEL  DARI  BIJI NYAMPLUNG  (  The  Manufacture  of Biodiesel  from  Nyamplung  Seed  )’,  pp. 41 – 56.
T.SaidabM.DutotabC.MartinabJ.-L.  BeaudeuxcC. BoucherdE.  EneeaC.  BaudouinbJ.-M. WarnetabP. Rat  (2006)  ‘Cytoprotective effect  against  UV-induced  DNA  damage and  oxidative  stress:  Role  of  new biological UV  filter’, European  Journal  of Pharmaceutical   Sciences ,   30(3 – 4),    pp. 203 – 210. Available at: https://www.sciencedirect.com/science /article/pii/S0928098706003241. Yunitasari, E. P. and Arani, I. (2008) ‘Pengaruh
Jenis  Solvent  Dan  Variasi  Tray  Pada Pengambilan Minyak Nyamplung Dengan Metode  Ekstraksi  Kolom’, Tumbuhan berguna Indonesia jilid 3 , pp. 1 – 6.