## EFEK PROTEKTIF MINYAK ZAITUN TERHADAP HISTOPATOLOGI LAMBUNG TIKUS PUTIH YANG
DIINDUKSI ALKOHOL 14%
Muhammad Reqza Pratama 1
1 Fakultas Kedokteran, Universitas Lampung
Abstrak Pendahuluan: Konsumsi  alkohol  yang  tidak  terkontrol  dapat  menyebabkan  kerusakan pada mukosa lambung, karenanya diperlukan proteksi yang rendah efek samping. Minyak zaitun kaya antioksidan untuk melindungi tubuh dari sisa metabolisme dan radikal bebas. Penelitian  ini  dilakukan  untuk  melihat  pengaruh  pemberian  minyak  zaitun  terhadap gambaran histopatologi lambung tikus yang diinduksi alkohol.
Metode: Penelitian  ini  menggunakan  teknik  eksperimental  laboratorium.  Desain  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah post-test  control  group  design dengan  sampel  30 tikus  putih  jantan  yang  di random  sampling menjadi  5  kelompok  selama  14  hari,  yaitu: Kelompok kontrol negative (K-) yang diberikan aquades 2 ml, kelompok control positif (K+) diinduksi alkohol 14% 2,4 ml, kelompok perlakuan 1 (P1) diinduksi alkohol 14% 2,4 ml dan minyak zaitun dengan dosis 0,27 ml, kelompok perlakuan 2 (P2) diinduksi alkohol 14% 2,4 ml  dan  minyak  zaitun  dengan  dosis  0,54  ml,  dan  kelompok  perlakuan  3  (P3)  diinduksi alkohol  14% 2,4 ml dan  minyak zaitun dengan dosis 1,08  ml.  Data dianalisis dengan  uji Non-parametric Kruskal-Wallis. Hasil: Pada  kelompok  K-  mukosa  lambung  tampak  normal,  tidak  ditemukan  sel  radang dan  erosi.  Pada  kelompok  K+  ditemukan  perubahan  berupa,  erosi  dan  ulserasi  pada beberapa  bagian  mukosa  lambung.  Pada  kelompok  P1  tampak  deskuamasi,  erosi  dan ulserasi  pada  beberapa  bagian  mukosa  lambung,  secara  umum  nampak  lebih  baik  dari kelompok  K+.  Pada  Kelompok P2  masih  nampak  deskuamasi dan  erosi pada  beberapa bagian mukosa, ulserasi sudah tidak ditemukan. Pada Kelompok P3 nampak deskuamasi dan Erosi namun lebih sedikit dari P2, tidak ditemukan ulserasi.
Kesimpulan: Tedapat efek protektif minyak zaitun terhadap histopatologi  lambung tikus putih yang diinduksi alkohol 14%.
Kata Kunci: Alkohol, Minyak zaitun, Mukosa lambung

## PROTECTIVE EFFECTS OF OLIVE OIL ON GASTRIC HISTOPATOLOGICAL DESCRIPTION OF WHITE RAT INDUCED BY 14% ALCOHOL

## Abstract
Introduction: Uncontrolled consumption of alcohol can cause damage to gastric mucosa. Olive oil is rich in antioxidants to protect body from metabolic waste and free radicals. This study  was  conducted  to  see  the  protective  effect  of  olive  oil  on  gastric  histopathological white rat induced by alcohol.
Methods: This study was laboratory experimental. The design was post-test control group with 30 white rats as sample randomly divided into 5 groups: The negative control group (K-) was given 2ml of distilled water, positive group (K+) use alcohol 14% 2.4 ml, trearment group  (P1)  was  induced  alcohol  14%  2.4  ml  and  olive  oil  at  dose  of  0.27  ml,  treatment group  2  (P2)  was  induced  alcohol  14%  2.4  ml  and  olive  oil  with  a  dose  of  0.54  ml,  and treatment group 3 (P3) induced alcohol 14% 2.4 ml and olive oil at a dose of 1.08 ml. The data were analyzed by using the Non-parametric Kruskal-Wallis test.
Results: Group K-, the gastric mucosa was normal, no inflammation and erosion. Group K+,  there  was  erosion  and  ulceration  were  found  in  several  parts  of  gastric  mucosa.  In

## Penelitian
group P1 , there was desquamation, erosion and ulceration of several parts of the gastric mucosa, generally look better than K+. In group P2 there still desquamation and erosion on several parts mucosa, no ulceration. In group P3 there still desquamation and erosion less than P2 group, there no ulceration.
Conclusion: There is a protective effect of olive oil on gastric histopathology of white rats induced by 14% alcohol.
Keywords: Alcohol, Gastric mucosa, Olive oil

## 1. PENDAHULUAN
Alkohol  merupakan  zat  cair  tidak berwarna, mudah menguap dan terbakar,  dan  bila  dikonsumsi  memiliki perasaan nyaman, hangat, dan memabukkan 1 Alkohol dimanfaatkan sebagai disinfektan,
bakterisida,
antiseptik, dobat sedatif dan depresan 3 .
Alkohol  dapat    merusak  organ tubuh  dan  sistem  saraf  pusat manusia 4 . Alkohol yang dikonsumsi juga mempengaruhi sekresi HCl, menurunakan  produksi  prostaglandin sebagai barier mukosa, dan mengganggu  motilitas  lambung  karena adanya peningkatan dari mediator
inflamasi 5 . Kerusakan pada lambung disebabkan oleh metabolisme dari alkohol itu sendiri, didalam tubuh alkohol yang dikonsumsi akan mengalami biotranformasi menjadi asetaldehid
dengan bantuan alkohol dehydrogenase (ADH)  yang  ditemukan  di  hati  dan lambung 6 .  Asetaldehid  oleh  ALDH  akan dirubah  menjadi  asam  asetat  yang selanjutnya akan masuk ke siklus crabs 7 . Selama proses
biotranformasi
etanol  menjadi asetaldehidyde ,  ion hidrogen  ditransfer  ke nicotinamide adenino  dinucleotide (NAD+)  untuk membentuk nikotinamida adenosin dinukleotida  hidrogen  (NADH),  proses oksidasi dari alkohol akan menyebabkan produksi NADH meningkat. Peningkatan
NADH  akan  membatasi  regenerasi glutathione (GSH), yang akan meningkatkan stres oksidatif. Peningkatan  NADH  dan  asetil-KoA mendukung  terjadinya  sintesis  asam lemak  dan  peningkatan  badan  keton, yang memperparah asidosis laktat 8 . Stress  oksidatif  terjadi  akibat tingginya kadar radikal bebas dibandingkan  antioksidan.  Hal  ini  akan mengaktivasi enzim
pro-apoptotik.
Radikal  bebas  memiliki  satu  atau  lebih molekul yang tidak berpasangan.
Molekul  radikal  bebas  sangat  reaktif untuk  membentuk  radikal  bebas  yang lainnya  secara  terus  menerus  dengan mengambil  molekul-molekul  dari  sel-sel disektarnya  menyebabkan  kerusakan sel 7 . Untuk mencegah terjadinya kerusakan  tersebut  diperlukan  peranan proteksi,  salah  satu  nya  adalah  minyak zaitun  yang  memiliki  khasiat  mencegah berbagai penyakit seperti; tekanan darah tinggi  (hipertensi),  demam,  pengerasan pembuluh darah (aerterisklerosis), kanker  payudara,  kanker  rahim.  Minyak zaitun  kaya  akan  antioksidan  yang berfungsi  untuk  melindungi  tubuh  dari sisa metabolisme dan radikal bebas yang dapat merusakan sel tubuh 9 . Berdasarkan uraian diatas peneliti tertarik melakukan penelitian lebih lanjut mengenai  pengaruh  pemberian  minyak zaitun sebagai tindakan protektif terhadap  lambung  akibat  konsumsi alkohol berlebih dengan melihat gambaran  histopatologi  lambung  tikus putih  ( Rattus  norvegicus )  jantan  galur Spargue dawley yang diinduksi alkohol.

## 2. METODE
Penelitian  ini  adalah  penelitian eksperimental laboratorium dengan desain post-test  control  group  design menggunakan  30  tikus  putih  ( Rattus norvegicus ) jantan galur Sprague dawley yang  berasal  dari  Balai  Penelitian Veteriner  (BALITVET)  Institut  Pertanian Bogor  dengan  usia  6-12  minggu  dan berat badan 160-240gram. dipilih secara acak dan dibagi menjadi 5 kelompok.
Alkohol  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  berdasarkan  penelitian sebelumnya  adalah  alkohol  dengan konsentrasi  14%  dengan  dosis  2,4  ml diberikan  dalam  waktu  14  hari  secara peroral sebagai penginduksi untuk kerusakan  lambung  pada  tikus  putih. Pembuatan  alkohol  14%  ini  setelah
melalui proses pengenceran dari alkohol berkonsentrasi 96% 10 . Pemberian minyak zaitun diberikan berdasarkan dosis aman minyak  zaitun  yang  dikonsumsi  oleh manusia,  yaitu  2  kali  sehari  1  sendok makan  yaitu  sebanyak  30  ml  dalam sehari,  kemudian  dikonversikan  ke hewan  coba  tikus  dengan  berat  dengan berat  badan  manusia  70  kg 11 .  Dengan berat  tikus  rata-rata  adalah  200  gram, didapatkan  dosis  pemberian  tikus  putih adalah  dengan  dosis  bertingkat  yaitu 0,27  ml,  0,54  ml,  dan  1,08  ml  diberikan setiap hari selama 14 hari.
Tikus di aklimatisasi selama 7 hari, kemudian tikus dikelompokan menjadi 5 kelompok  yaitu  kelompok  K-  hanya diberikan  akuades,  Kelompok  K+,  P1,
P2, dan P3 diberikan alkohol konsentrasi 14% dengan dosis 2,4 ml/hari.
Sedangkan, untuk kelompok P1, P2, dan P3  ditambahkan  pemberian  minyak zaitun  dengan  dosis  berturut  0,27  ml, 0,54  ml,  dan  1,08  ml  selama  14  hari, yang kemudian di- euthanasia menggunakan metode cervical dislocation ,  dilakukan  laparatomi  dan diambil  lambung  tikus  untuk  dibuat sediaan  mikroskopis.  Jenis  sediaan histopatolgis yang dibuat adalah sediaan mukosa  lambung  dengan  pewarnaan hematoxylin  eosin  (H&E) , lalu dilakukan pembacaan  melalui  mikroskop  dengan perbesaran 40x.
Hasil pembacaan kemudian diskoring  melalui  5  lapang  pandang dengan  skor  0  tidak  terjadi  perubahan, skor  1  terjadi  deskuamasi  epitel,  skor  2 erosi epitel mukosa. skor 3 ulserasi epitel berupa lesi atau defek mukosa muskularis sampai ke submucosa ataupun  bagian  lebih  dalam  lagi.  Hasil skoring  kemudian  diuji  analisis  statistik menggunakan program SPSS.

## 3. HASIL PENELITIAN
Hasil penelitian
berupa pengamatan  histopatologis  dan  skoring kerusakan  histopatologi  lambung  yang diambil  nilai  tertinggi  dari  lima  lapang pandang pengelihatan. Total skor kerusakan  mukosa  lambung  pada  tiap sampel kemudian dilakukan uji normalitas Shapiro-Wilk untuk  menilai normalitas datanya menggunakan program  statistik  SPSS.  Uji  normalitas Shapiro-Wilk, dianggap bermakna
apabila  p>0,05.  Total  skor  dan  hasil  uji normalitas Shaphiro-Wilk disajikan pada tabel 1 dan 2.
Pada hasil uji normalitas Saphiro - Wilk didapatkan  p<0,05,  pada  sebagian besar  kelompok.  Sehingga  data  secara menyeluruh  tidak  terdistribusi  normal, maka selanjutnya dilakukan transformasi data  menggunakan  Log10  dan  diuji normalitas kembali, pada K- tidak terjadi distribusi  atau  tidak  didapatkan  nilai  p; pada kelompok K+ didapatkan p= 0,026; pada kelompok P1 didapatkan p= 0,006; pada  P2  didapatkan  p=0,313;  pada kelompok P3 didapatkan p=0,006.
Berdasarkan  data  tersebut  maka  dapat disimpulkan bahwa data tidak
terdistribusi  normal.  Oleh  sebab  itu,  uji parametric One-way ANOVA tidak dapat digunakan,  sehingga  uji  hipotesis  yang dapat  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah uji non parametric Kruskal-Wallis Uji  Kruskal-Wallis  adalah  suatu analisis untuk menguji hipotesis
komperatif variable numeric yang
sebaran datanya tidak terdistribusi normal.  Hasil  uji  Kruskal-Wallis  pada penelitian ini menunjukkan p=0,00
(p<0,05), dari hasil tersebut disimpulkan bahwa pemberian minyak zaitun berpengaruh  pada  lambung  tikus  putih yang diinduksi alkohol. Hasil uji Kruskal- Wallis t ersaji pada tabel 3.
Tabel 1 . Skor kerusakan lambung
Tabel 2. Uji normalias shapiro-wilk
Tabel 3. Hasil uji hipotesis kruskal-wallis Total Skor Kruskal-Wallis H 23.265 df 4 Asymp. sig. ,000 Setelah uji Kruskal-Wallis dinyatakan bermakna (p<0,05), selanjutnya  dilakukan  uji Post  Hoc  Man
Whitney untuk  menganalisis  hubungan pada  berbagai  kelompok  sampel.  Hasil uji Man Whitney tersaji pada table 4.
Tabel 4. Hasil analisis uji post hoc mann whitney
*Hasil  analisis  uji  statistik mann  whitney bermakna apabila p<0,05
Berikut merupakan gambaran histopatologi  lambung  tikus  putih  pada masing-masing kelompok:
a. Kelompok K- Gambaran  histopatologi  lambung kelompok  K-,  mukosa  lambung tampak normal. Tidak ditemukan sel radang  dan  erosi  di  lima  lapang pandang, namun deskuamasi tampak pada sedikit lapang pandang mukosa lambung. b. Kelompok K+
Gambaran  histopatologi  lambung kelompok  K+,  tampak  adanya perubahan  pada  mukosa  lambung berupa,  tampak  adanya  erosi  dan ulserasi  pada  beberapa  bagian mukosa  lambung  dalam  5  lapang pandang.
c. Kelompok P1 Gambaran  histopatologi  lambung tikus  pada  kelompok  P1,  tampak adanya  deskuamasi  maupun  erosi pada  beberapa  bagian  mukosa lambung,  selain  itu  masih  dapat ditemukan  adanya  ulserasi  pada sedikit  mukosa  lambung.  Secara
Kelompok Perlakuan Skor Kerusakan Lambung Tiap Lapang Pandang Total Skor Rerata Skor 1 2  3  4  5
K – 1 0 0  0  0  0 0 0,08 2 0 0  0  0  1 1
3 0 0  0  0  0 0
4 0 0  0  1  0 1
5 0 0  0  0  0 0
K + 1 3 3  3  3  3 15 2,56 2 2 3  2  2  3 12
3 3 2  2  3  2 12 4 3 2  3  2  2 12
5 2 3  3  3  2 13
P 1 1 2 2  2  1  3 10 2,12 2 2 2  3  3  1 11
3 2 3  2  2  2 11
4 2 2  3  2  2 11 5 2 3  1  2  2 10
P 2 1 2 1  1  1  2 7 1,56 2 2 1  2  2  1 8
3 1 1  2  1  2 7
4 2 1  1  2  2 8
5 2 2  2  2  1 9
P 3 1 1 1  1  1  1 5 1,12 2 2 1  1  1  1 6
3 1 1  1  1  1 5 4 2 1  1  1  1 6
5 1 1  2  1  1 6 K- K+ P1
P2 P3 K- - 0,07  0,07  0,08  0,07 K+ 0,07  - 0,07  0,08  0,07 P1 0,07  0,07  - 0,08  0,07 P2 0,08  0,08  0,08  - 0,08 P3 0,07  0,07  0,07  0,08  -
Kelompok Perlakuan Shapiro - Wilk P sig K- 0,006 K+ 0,021 P1 0,006 P2 0,314 P3 0,006
umum nampak
lebih
baik
dibandingkan kelompok K+.
d. Kelompok P2 Gambaran  histopatologi  lambung tikus  pada  kelompok  P2,  masih nampak adanya
deskuamasi
maupun erosi pada beberapa bagian mukosa, namun sudah tidak ditemukan adanya ulserasi. e. Kelompok P3
Gambaran  histopatologi  lambung tikus  pada  kelompok  P3,  masih nampak  adanya  deskuamasi  pada beberapa bagian mukosa lambung. Masih  dapat  ditemukan  adanya erosi, namun lebih sedikit dibandingkan dengan kelompok P2.
Tidak  ditemukan  adanya  ulserasi pada 5 lapang pandang.
Gambar  1. Gambaran  histopatologi mukosa lambung tikus putih kelompok K- (Pembesaran mikroskop 40x).
Gambar  2. Gambaran  histopatologi lambung  tikus  putih  kelompok  kontrol positif  (K+)  (Perbesaran  mikroskop  10x) Keterangan  1.  Deskuamasi  2.  Erosi  3. ulserasi
Gambar  3 .  Gambaran  histopatologis lambung tikus putih kelompok perlakuan 1  (P1)  (Perbesaran  mikroskop  cahaya 40x) Keterangan 1. Deskuamasi, 2. Erosi
Gambar 4. Gambaran histopatologi lambung tikus putih kelompok P2 (Perbesaran mikroskop cahaya 40x) Keterangan 1. Deskuamasi
Gambar  5. Gambaran  histopatologi lambung tikus putih kelompok perlakuan 3  (P3)  (Perbesaran  mikroskop  cahaya 40x) Keterangan 1. Deskuamasi
1 2 3 1 1 2 1

## 4. PEMBAHASAN
Berdasarkan  hasil  pengamatan secara mikroskopis menunjukkan bahwa kelompok  kontrol  K-  memiliki  rata-rata skor  kerusakan  mukosa  lambung  yang sebesar  0,08.  Akuades  dan  makanan yang  diberikan  kepada  tikus  bukan merupakan  bahan  iritan.  Namun,  dari kelompok  K-,  terdapat  sedikit  mukosa lambung tikus yang mengalami perubahan  berupa  deskuamasi  pada mukosa  lambung.  Secara  keseluruhan pada kelompok K- masih tampak normal.
Seharusnya tidak didapatkan
kerusakan  pada  mukosa  lambung  pada kelompok  K-  yang  tidak  diberikan perlakuan karena akuades bukan bahan iritan.  Dalam  penelitian  Khakim  (2017)
Kelompok kontrol yang diberikan akuades  dapat  mengalami  perubahan karena  adanya  pengaruh  variabel  diluar kendali peneliti. Variabel luar yang dapat berperan  seperti  psikologis  tikus  atau kondisi  awal  tikus  sebelum  diberikan kontrol  akuades.  Selain  itu,  pola  dan perilaku  tikus  juga  dapat  dipengaruhi oleh perubahan lingkungan. Tikus dengan  teknik  random  sampling  dapat menjadi  stress  seperti  cemas  dan hiperaktif.  Dalam  Penelitian  Sanchez  et al,  (2002)  ketika  tikus  mengalami  stress maka  aktivitas  sitosol  akan  meningkat sehingga  menimbulkan  efek  pada  sel lambung.
Hasil analisis mikroskopik preparat lambung  kelompok  K+  menunjukan kerusakan lambung paling tinggi dibandingkan  dengan  kelompok  lain dengan  rerata  skor  sebesar  2,56. Kerusakan  sawar  mukosa  lambung merupakan dampak dari konsumsi alkohol secara berlebiha karena menyebabkan  penetrasi  alkohol  ke mukosa  lambung 13 .  Hal  ini  sejalan dengan  penelitian  oleh  kololu  dkk  pada tahun  2014  dengan  pemberian  alkohol 7%,  14%,  43%,  dan  70%  dalam  jangka waktu  5  hari  menyebabkan  kerusakan mukosa  lambung tikus berupa  erosi, sel radang, metaplasia intestinal dan pelebaran pembuluh darah yang keparahannya bertambah seiring dengan tingginya konsentrasi alkohol 10 .
Kerusakan lambung akibat kontak langsung dengan alkohol dalam konsentrasi  tinggi  dan  terus  menerus akan meningkatkan radikal bebas sehingga terjadi stres oksidatif. Lalu akan
mengaktivasi  enzim    pro-apoptotik. Radikal  bebas  memiliki  satu  atau  lebih molekul yang tidak berpasangan. Molekul  radikal  bebas  sangat  reaktif untuk  membentuk  radikal  bebas  yang lainnya  secara  terus  menerus  dengan mengambil  molekul  dari  sel  disektarnya menyebabkan  kerusakan  sel 7 .  Stres oksidatif  mempengaruhi  sekresi  HCl, menurunakan  produksi  prostaglandin sebagai  barier  mukosa,  menginduksi adanya  ulkus pada  mukosa,  dan mengganggu  motilitas  lambung  karena adanya peningkatan dari mediator
inflamasi histamin dan leukotrin 15 . Hasil analisis mikroskopis kelompok  P1  menunjukan  perbaikan atau tampak sedikit lebih baik dibandingkan  dengan  kelompok  K+.
Meskipun  terjadi  penurunan  rata-rata skor
kerusakan namun secara makroskopis masih terlihat banyak tanda dari  erosi  dan  masi  nampak  ulserasi pada  sedikit  mukosa  lambung.  Hal  ini disebabkan  karena  dosis  minyak  zaitun yang  diberikan  adalah  dosis  rendah sehingga  belum  menunjukan  perbaikan yang bermakna.
Hasil
analisis mikroskopis kelompok  P2  menunjukan  perbaikan atau penurunan rata-rata skor kerusakan mukosa  lambung,  yaitu  sudah  tidak ditemukan adanya ulserasi namun masih nampak  adanya  erosi  pada  beberapa bagian  mukosa  lambung.  Minyak  zaitun kaya  akan  antioksidan  yang  dapat mencegah  terjadinya  stress  oksidatif. Alkohol merupakan penyebab terjadinya stress  oksidatif,  senyawa  antioksidan akan  bereaksi  dengan  radikal  bebas melalui  mekanisme  donasi  sel  atom hidrogen  yang  akan  mengisi  atom  pada radikal  bebas  yang  tidak  berpasangan, sehingga  senyawa  antioksidan  akan mengisi  atom  pada  radikal  bebas  yang tidak berpasangan 16 .
Hasil analisis mikroskopis kelompok  P3  menunjukan  perbaikan atau penurunan rerata kerusakan mukosa  lambung  dibandingkan  dengan kelompok  K+  berupa  deskuamasi  pada beberapa  bagian  mukosa  lambung  dan sudah  tidak  tampak  adanya  erosi  dan ulserasi.  Pada  penelitian  didapatkan perbaikan gambaran histopatologi mukosa  lambung  tikus  sesuai  dengan peningkatan  dosis  pemberian  minyak zaitun.  Dengan  menggunakan  minyak
zaitun 0,27ml/hari selama 14 hari sudah dapat ditemukan sedikit perbaikan mukosa lambung kemudian dosis dinaikan dua kali lipat menjadi 0,54ml/hari  dan  1,08ml/hari  walaupun sudah  terjadi  perbaikan  namun  belum dapat  mengembalikan  mukosa  lambung menjadi seperti K- atau normal kembali.

## 5. KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan,  dapat  disimpulkan  bahwa terdapat  efek  protektif  minyak  zaitun terhadap  histopatologi  lambung  tikus putih  yang  diinduksi  alkohol,  berupa perbaikan  mukosa  lambung  disetiap perlakuan yang diberikan.

## 6. SARAN
Diharapkan untuk penelitian selanjutnya dapat mengembangkan organ  lain  yang  diteliti  seperti  hati  dan usus  dan  dapat  dikembangkan  dengan memberikan perbandingan antara minyak zaitun dengan obat-obatan yang dapat melindungi mukosa lambung. Diharapkan  penelitian  selanjutnya secara  spesifik  dapat  membedakan antioksidan  pada  minyak  zaitun  yang paling berpengaruh terhadap pemberian alkohol pada lambung.

## DAFTAR PUSTAKA
1. Almatsier  S.  2010.  Prinsip  dasar ilmu gizi. Jakarta: Gramedia pustaka utama.
2. Wibisono  AS.  2011.  Pengelolaan pasien dengan aquired immunodeficiency  syndrome  akibat infeksi  HIV,  Indonesian  Journal  of Intensive Care Medicine. 1(3). 3. Makiyah S, Soedjono A, Marsetyawan. 2005. Intensitas fluoresensi neuronneuron dopaminergik  di  area  ventralis tegmenti setelah pemberian alkohol secara  kronis  pada  tikus  (rattus norvegicus). Mutiara Medika:
Yogyakarta.
4. Utina.  SS.  2012.  Alkohol  dan pengaruhnya  terhadap  kesehatan mental.  Jurnal:  IAIN  Sultan  Amai Gorontalo. 5(2)
5. Dewi AK. 2013. Gambaran mikroskopis ginjal tikus putih (rattus sp.) Jantan dewasa setelah pemberian etanol kronis. 33-6.
6. Kumar  V,  Cotran  RS,  Robbins  SL. 2007. Buku ajar patologi. Edisi 7; ali Bahasa,  Brahm  U,  Pendt;  editor Bahasa Indonesia, Huriawati Hartanto, Nurwany Darmaniah, Nanda Wulandari.ed.7-Jakarta: EGC. 7. Avalos  SM,  Molina  AS.  2010.
Cellular and mitochondrial effects of alcohol consumption. Int. J. Environ. Res.  Public  Health.  7(12):  4281 – 304.
8. Haseba  T,  Ohno  Y.  2010.  A  new view  of  alcohol  metabolism  and alcoholism-role of the high Km class
III  alcohol  dehydrogenase  (ADH3). International Journal of Environmental Research and Public Health. 7: 1076-92.
9. Ahmad  SB.  2010.  Manfaat  minyak zaitun. Sukarta: Thibbia.
10. Kololu  DF,  Lintong  PM,  Loho  L.
2014. Gambaran histopatologis lambung tikus wistar (Rattus
Novergicus) yang diberikan alkohol. Jurnal e-Biomedik: 2(2):442-51.
11. Kusumawati  D.  2004.  Bersahabat dengan  hewan coba. Gadjah  Mada Press. Yogyakarta.
12. Khakim  JL.  2007.  Pengaruh  jus buah pepaya (carica papaya) terhadap kerusakan histologis lambung  mencit  yang  diinduksi aspirin.  Universitas  Sebelas  Maret. Surakarta.
13. Sanchez  O,  Arnau  A,  Pareje  M, Poch  E,  Ramirez  I,  Soley  M.  2002. Acute stress induced tissue injury in mice; differences between emotional  and  social  stress.  Cell stress society international. Barcelona. Hlm. 50(3): 82-119. 14. Fernandez-Checa  JC,  Kaplowitz  N. 2005. Hepatic mitochondrial glutathione:  transport  and  role  in disease  and  toxicity.  Toxicol  Appl
Pharmacol. 204(3):263-73.
15. Dewi AK. 2013. Gambaran mikroskopis ginjal tikus putih (rattus sp.) Jantan dewasa setelah pemberian etanol kronis. 33-6.
16. Hanani  E,  Mun’im  A,  Sekarini  R.
2005. Identifikasi senyawa antioksidan dalam spons
callyspongia  sp  dari  kepulauan seribu.  Majalah  Ilmu  Kefarmasian: 2(3):127-33.