UJI DAYA HAMBAT EKSTRAK RIMPANG LENGKUAS MERAH ( Alpinia purpurata K.Schum) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Klebsiella pneumoniae ISOLAT SPUTUM PADA PENDERITA PNEUMONIA RESISTEN ANTIBIOTIK SEFTRIAKSON
Poetry Melinda S Abubakar 1) , Fatimawali 1) , Paulina V. Y. YamLean 1)
1) Program Studi Farmasi FMIPA UNSRAT Manado, 95115

## ABSTRACT
Red  galangal  rhizome  is  a  plant  that  has  various  properties  including  antifungal  and antibacterial. Red galangal rhizomes contain a class of flavonoids, phenols and terpenoids, which can be, used  as  basic  ingredients  of  modern  medicines.  Flavonoids  and  phenols  are  also  known  to  inhibit microbes.  Flavonoids  can  inhibit  microbes  that  have  been  resistant  to  antibiotics.  This  study  aims  to determine the antibacterial activity of red galangal rhizome extract (Alpinia purpurata K.Schum) and test its inhibitory effect on the growth of Klebsiella pneumoniae bacteria in sputum isolates in patients with pneumonia  resistant  ceftriaxone  antibiotics.  Red  galangal  rhizome  plant  was  extracted  by  maceration method using 96% ethanol. Antibacterial inhibitory tests were carried out using the disc and well method. The  results  showed  that  the  red  galangal  extract  of  rhizome  had  a  inhibitory  effect  on  the  bacterium Klebsiella pneumoniae. On the disc method for concentrations of 100%, 75%, 50%, 25% and 12.5% the diameter of the inhibition zone is 9.6 mm, 8.68 mm, 8.5 mm, 8.5 mm and 7.6 mm. The inhibition ability of bacterial growth on the disc method is categorized as moderate because it has an average inhibition zone diameter  of  5-10  mm.  Whereas  in  the  well  method  for  concentrations  of  100%,  75%,  50%,  25%  and 12.5%  the  diameter  of  the  inhibition  zone  was  25.8  mm,  20  mm,  15.6  mm,  12.7  mm  and  9.7  mm, respectively.  The  inhibition  ability  of  bacterial  growth  in  the  well  method  for  100%  concentration  is categorized  as  very  strong  because  it  has  an  average  inhibition  zone  diameter  of  >20  mm,  for concentrations  of  75%,  50%  and  25%  it  is  categorized  as  strong  because  it  has  an  average  inhibition zone  of  10-  20  mm  and  for  a  concentration  of  12.5%  it  is  categorized  as  moderate  because  it  has  an average inhibition zone diameter of 5-10 mm.

## Keywords : Red galangal rhizome, Alpinia purpurata K.Schum, Klebsiella pneumonia

## ABSTRAK
Rimpang  Lengkuas  merah  merupakan  tanaman  yang  memiliki  berbagai  khasiat  di  antaranya sebagai antijamur dan antibakteri. Rimpang Lengkuas merah mengandung golongan senyawa flavonoid, fenol dan terpenoid yang dapat digunakan sebagai bahan dasar obat-obatan moderen. Senyawa flavonoid dan fenol juga diketahui dapat menghambat  mikroba. Flavonoid dapat menghambat  mikroba yang telah resisten  terhadap  antibiotik.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak rimpang  Lengkuas  merah  (Alpinia  purpurata  K.Schum)  dan  menguji  daya  hambatnya  terhadap pertumbuhan  bakteri  Klebsiella  pneumoniae isolat sputum  pada  penderita  pneumonia  resisten  antibiotik seftriakson.  Tanaman  rimpang  Lengkuas  merah  di  ekstraksi  dengan  metode  maserasi  menggunakan pelarut  etanol  96%.  Uji  daya  hambat  antibakteri  dilakukan  dengan  metode  cakram  dan  sumuran.  Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak rimpang Lengkuas merah memiliki daya hambat terhadap bakteri Klebsiella  pneumoniae.  Pada  metode  cakram  untuk  konsentrasi  100%,  75%,  50%,  25%  dan  12,5%
diameter  zona  hambatnya  ialah  9,6  mm,  8,68  mm,  8,5  mm,  8,5  mm  dan  7,6  mm.  Kemampuan penghambatan pertumbuhan bakteri pada metode cakram di kategorikan sedang karena memiliki diameter zona  hambat  rata-rata  5-10  mm.  Sedangkan  pada  metode  sumuran untuk  konsentrasi 100%,  75%,  50%, 25%  dan  12,5%  diameter  zona  hambatnya  ialah  25,8  mm,  20  mm,  15,6  mm,  12,7  mm  dan  9,7  mm. Kemampuan  penghambatan  pertumbuhan  bakteri  pada  metode  sumuran  untuk  konsentrasi  100%  di kategorikan sangat kuat karena memiliki diameter zona hambat rata-rata >20 mm, untuk konsentrasi 75%, 50% dan 25% di kategorikan kuat karena memiliki diameter zona hambat rata-rata 10-20 mm dan untuk konsentrasi 12,5% di kategorikan sedang karena memiliki diameter zona hambat rata-rata 5-10 mm.
Kata Kunci :Rimpang Lengkuas merah,  Alpinia purpurata K.Schum, Klebsiella pneumonia

## PENDAHULUAN
Penyakit  infeksi  merupakan  jenis penyakit  yang  paling  banyak  diderita  oleh penduduk  di  negara  berkembang,  termasuk Indonesia.  Salah  satu  penyebab  penyakit infeksi  ialah mikroorganisme bakteri  (Radji, 2011).    Penyakit  yang  diakibatkan  oleh infeksi  mikroorganisme  merupakan  salah satu  penyakit  yang  selalu  menjadi  pusat perhatian  para  praktisi  dan  pemerhati kesehatan  (Wattimena,  1990).  Salah  satu penyakit infeksi akibat bakteri ialah pneumonia.
Pneumonia adalah peradangan parenkrim  paru  dimana  asinus  terisi  dengan cairan  dan  sel  radang,  dengan  atau  tanpa disertai infiltrasi sel radang ke dalam dinding alveoli  dan  rongga  interstisium  (Mukty  dan Alsagaff, 2010). Penyakit ini sering menyerang  anak  balita,  namun  dapat  juga ditemukan  pada  orang  dewasa.  Infeksi pneumonia  merupakan  infeksi  akut  yang mengenai  jaringan  paru-paru  (alveoli). Gejala  pneumonia  pada  umumnya  antara lain  demam,  sesak  napas,  napas  dan  nadi berdenyut  lebih  cepat,  dahak  berwarna kehijauan  atau  seperti  karet  (Misnadiarly, 2008). Salah satu bakteri penyebab pneumonia bakteri Streptococcus
pneumoniae, bakteri Staphylococcus  aureus dan bakteri Klebsiella pneumoniae (Brisse et al .,2009).
Pengobatan  klinis  untuk  menangani penyakit  infeksi  penggunaan  antibiotik sangat  diperlukan.  Tingginya  penggunaan antibiotik  secara  tidak  tepat  dikalangan masyarakat  saat  ini  menyebabkan  terjadinya masalah resistensi antibiotik. Menurut penelitian  Harum  2018  bakteri Klebsiella
pneumoniae merupakan  penyebab  penyakit pneumonia  yang  resisten  terhadap  antibiotik Setriakson.  Permasalahan  resisten  terjadi ketika  bakteri  berubah  yang  menyebabkan turun  atau  hilangnya  efektivitas  obat  atau senyawa  kimia  yang  digunakan  untuk mencegah  atau  mengobati  infeksi  (Utami, 2012).
Tingginya  angka  kematian  yang  disebabkan oleh  penyakit  infeksi  mengharuskan  kita untuk melakukan pengobatan yang maksimal. Indonesia merupakan negara yang terkenal  dengan  keanekaragam  tanaman terutama  hasil  pertanian  dan  rempah- rempah.  Hal  ini  didukung  oleh  keadaan geografis  Indonesia  yang  beriklim  tropis dengan curah hujan rata-rata tinggi sepanjang  tahun.  Sumber  daya  alam  yang dimiliki  telah  memberikan  manfaat  dalam kehidupan  sehari-hari  disamping  sebagai bahan  makanan,  juga  dimanfaatkan  sebagai obat tradisional (Wijayakusuma, 2000).
Keanekaragaman hayati yang memiliki  potensi untuk  dikembangkan sebagai  obat  tradisional  ialah  Lengkuas merah ( Alpinia purpurata K.Schum). Rimpang Lengkuas merah selain mengandung minyak atsiri juga mengandung golongan  senyawa  flavonoid,  fenol  dan terpenoid. Karena rimpang Lengkuas memiliki  kandungan  senyawa  flavonoid yang diduga mampu menghambat pertumbuhan  bakteri  yang  telah  resisten terhadap antibiotik (Yuharmen, 2002).
Hasil  penelitian  diatas  menunjukkan adanya  indikasi  ekstrak  rimpang  Lengkuas merah ( Alpinia purpurata K.Schum) mempunyai  daya  antibakteri,  maka  hal  ini menarik  perhatian  peneliti  untuk  melakukan
uji  daya  hambat  ekstrak  rimpang  Lengkuas merah ( Alpinia purpurata K.Schum)
terhadap  pertumbuhan  bakteri Klebsiella pneumoniae isolat  sputum  pada  penderita pneumonia  yang  resisten  terhadap  antibiotik seftriakson.

## METODE PENELITIAN
Penelitian  ini  dilakukan  pada  bulan Juni  –  Oktober  2018  di  laboratorium Mikrobiologi Program Studi Farmasi Fakultas  Matematika  dan  Ilmu  Pengetahuan Alam Universitas Sam Ratulangi Manado. Alat yang digunakan dalam penelitian yaitu timbangan analitik (aeADAM ® ),  blender  ( Philips ),  gelas  ukur ( Pyrex ),  tabung  reaksi (Pyrex ),  Erlenmeyer ( Pyrex ), beker gelas ( Pyrex ), corong, batang pengaduk, cawan petri Pyrex ), kertas saring, ayakan mesh ,  jarum  ose,  pecadang,  pingset, mikropipet (ecopippette TM ), waterbath , laminar  air  flaw (N-Biotecck),  autoklav (ALP), incubator (MMM Group), aluminium foil , Hot  plate (NESCO ® Lab),  mistar berskala (Combo ® ), kertas lebel dan spritus.
Bahan yang digunakan dalam penelitian  ini  yaitu  bakteri Klebsiella pneumoniae yang  telah  resisten  terhadap antibiotik, ekstrak rimpang Lengkuas merah, etanol  96%,  aquades, media  nutrient  agar (NA), kertas  cakram,  NaCl  0,9%,  H 2 SO 4 0,36 N dan BaCl 2. 2H 2 O 1,175%.
Jenis penelitian ini merupakan eksperimental  laboratorium  dengan  sampel ekstrak  etanol  tanaman  rimpang  Lengkuas merah  yang  dibuat  dengan  lima  variasi konsentrasi  100%  ,  75%,  50%,  25%  dan 12,5% dan dilakukan pengujian  pada bakteri

## Persiapan Sampel
Sampel  yang  digunakan  diambil  dari kelurahan  Rurukan,  Kecamatan  Tomohon Timur,  Tomohon,  Sulawesi  Utara.  Sampel yang diambil ialah bagian rimpang Lengkuas merah yang masih segar.
Pada  tahap  awal  sampel  rimpang Lengkuas merah ditimbang dengan berat 1,5 kg.  Selanjutnya  dicuci  dengan  air  mengalir dengan  tujuan  menghilangkan  pengotor.
Sampel kemudian dirajang untuk mempermudah proses
pengeringan.
Pengeringan  sampel  dilakukan  dengan  cara diangin-anginkan  selama  1  minggu.  Sampel yang  sudah  kering  kemudian  di  blender hingga  menjadi  serbuk  dan  ditimbang. Serbuk  yang  dihasilkan  diayak  dengan ayakan mesh , hingga diperoleh serbuk halus.

## Pembuatan Ekstrak
Metode yang digunakan untuk mengekstrak  rimpang  Lengkuas  merah ( Alpinia  purpurata  K.Schum ),  yaitu  dengan menggunakan  metode  maserasi.  Ditimbang sebanyak  150  g,  kemudian  dimasukkan  ke wadah  tertutup  rapat.  Sampel  yang  telah ditimbang diekstraksi dengan 750 mL etanol 96%  pada  suhu  kamar  selama  5  hari  sambil sesekali  diaduk.  Setelah  5  hari  sampel disaring  dengan  menggunakan  kertas  saring menghasilkan filtrat satu. Sisanya dimaserasi kembali  dengan 450  mL  pelarut etanol 96% selama  2  hari  sambil  sesekali  diaduk kemudian  di  saring  dengan  kertas  saring menghasilkan  filtrat  dua.  Filtrat  satu  dan filtrat  dua  dikumpulkan  dan  diuapkan menggunakan waterbath , sehingga diperoleh ekstrak  kental  Lengkuas  merah  dengan konsentrasi 100%.

## Sterilisasi Alat
Sterilisasi  alat  dilakukan  sebelum semua  peralatan  di  gunakan,  yaitu  dengan cara  membungkus  semua  peralatan  dengan aluminium  foil kemudian  dimasukkan  ke dalam autoklaf untuk sterilisasi dengan suhu 121 0 C selama 15 menit.
Pembuatan  Media  Dasar  dan  Media Pembenihan
Diambil Nutrient Agar (NA)
sebanyak  5,6  gram    dilarutkan  dalam  200 mL  aquadest  menggunakan  erlenmeyer. Setelah  itu,  media  dihomogenkan  dengan stirer diatas  penangas  air  sampai  mendidih. Media  yang  sudah  homogen  ini  disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121 0 C selama 15 menit, kemudian didinginkan sampai suhu ± 45-50 0 C. Media dasar dan media pembenihan  digunakan  dalam  pembuatan media  pengujian  sebagai  lapisan  dasar  dan lapisan kedua.

## Regenerasi Bakteri
Bakteri Klebsiella  pneumoniae yang akan diujikan, terlebih dahulu harus diregenerasikan. Hal pertama yang dilakukan  yaitu  membuat  media  miring nutrien  agar  (NA). Media (NA) dituangkan kedalam tabung reaksi, kemudian diletakkan pada  posisi  miring  dan  didiamkan  hingga agar  memadat.  Selanjutnya  menggoreskan biakan  dari  stok  bakteri  ke  agar  miring nutrient  agar  (NA) .  kultur  bakteri  pada masing-masing  agar  miring  diinkubasi  pada suhu 37 0 C selam 18-24 jam.
Pembuatan Larutan Mc.Farland 0,5
Larutan  H 2 SO 4 1%  sebanyak  9,95 mL  dicampurkan  dengan  larutan  BaCl 2 .2H 2 O  1,175%  sebanyak  0,05  mL  dalam erlenmeyer.  Kemudian  dikocok  sampai terbentuk larutan  yang keruh. Kekeruhan ini dipakai  sebagai  standar  kekeruhan  suspensi bakteri uji (Borges dan Bresson, 2004).

## Suspensi Bakteri
Suspensi  bakteri  dilakukan  dengan cara  bakteri  uji  yang  telah  diregenerasi diambil dengan jarum ose lalu disuspensikan ke  dalam  tabung  reaksi  berisi  5  mL  larutan NaCl  steril  0,9%.  Suspensi  yang  terbentuk disetarakan  kekeruhannya  dengan  larutan standar Mc  farland  No.0,5 yaitu  1,5  x  10 8

## CFU/mL.

## Pembuatan Larutan
a. Larutan Stok
Larutan  stok  dibuat  dari  hasil ekstraksi  yang  diperoleh  dengan  konsentrasi 100% kemudian diencerkan dengan aquadest sebanyak  empat  kali  pengenceran  dengan masing-masing  konsentrasi  75%,  50%,  25% dan 12,5% dengan menggunakan rumus :
b.  Larutan  Kontrol  Positif  dan  Kontrol Negatif
Kontrol  positif  dibuat  dari  sediaan obat  tablet  ciprofloxacin  500  mg,  dengan cara  satu  tablet  ciprofloxacin  digerus. Setelah itu di timbang 65 mg dan dilarutkan dalam  50  mL  aquadest,  selanjutnya  dibuat dengan  cara  diambil  1  mL  larutan  dan ditambahkan  aquadest  hingga  10  mL  untuk memperoleh larutan ciprofloxacin 5µg/50µL. Larutan kontrol negatif digunakan aquadest.
M 1 V 1 = M 2 V 2

## UJI EFFEKTIFITAS
a. Metode Cakram
Media Nutrien  Agar  (NA) sebanyak 15  mL  di  tuang  ke  dalam  cawan  petri  dan dibiarkan  memadat,  kemudiaan  dimasukkan
1 mL suspensi bakteri Klebsiella pneumoniae yang  telah  dicampurkan  ke dalam    media  pembenihan NA kemudian disebarkan biakan bakteri dengan menggunakan  kapas  steril  agar  suspensi tersebar  merata  pada  media  dan  didiamkan selama 10 menit agar suspensi terserap pada media.  Cawan  petri  tersebut  diletakkan kertas  cakram  ukuran  6  mm  dengan menggunakan  pinset  steril  yang  telah direndam  dalam  aquadest  (Kontrol  negatif) dan  kertas  cakram  ukuran  6  mm  yang  telah direndam  dalam  larutan  uji.  Selanjutnya semua  media  diinkubasi  kedalam  inkubator, inkubasi  dilakukan  pada  suhu  37 0 C  selama 24  jam.  Diukur  diameter  zona  bening  yang terbentuk  dengan  menggunakan  penggaris millimeter.
b. Metode Sumuran
Media  uji  dibuat  dengan  dengan  2 lapisan  media  agar,  yang  pengerjaannya seperti berikut :
1.Lapisan  dasar  dibuat  dengan  menuangkan masing-masing  15  mL NA ke  masing- masing 3 cawan petri, kemudian dibiarkan memadat.
2.Setelah memadat, permukaan lapisan dasar ditanam  5  pencadang  baja  yang  diatur jaraknya  agar  daerah  pengamatan  tidak bertumpu.
3.Suspensi  bakteri  dicampurkan  ke  dalam media pembenihan NA .
4.Selanjutkan  dituangkan  15  mL NA pada tiap cawan petri yang diletakan pencadang sebagai lapisan kedua.
5.Setelah lapisan kedua memadat, pencadang diangkat  secara  aseptik  menggunakan pinset  dari  masing-masing  cawan  petri, sehingga  terbentuk  sumur-sumur  yang akan digunakan dalam uji bakteri.
6.Sumuran  yang  terbentuk  diisi  dengan larutan  kontrol  dan  larutan  uji  masing- masing 50µl.
7.Selanjutnya  semua  media  di  inkubasi dalam inkubator pada suhu 37 0 C selama 24 jam.

## Pengukuran dan Penetapan Zona Hambat
Pengamatan  dilakukan  setelah  1x24 jam masa inkubasi.  Zona bening merupakan petunjuk  kepekaan  mikroba  terhadap  bahan antimikroba  yang  digunakan  sebagai  bahan uji  yang  dinyatakan  dengan  lebar  diameter zona  hambat  (Vandepite,  2005).  Diameter zona hambat diukur kemudian dikategorikan kekuatan  daya  antibakterinya  berdasarkan penggolongan Davis dan Stout (1971).

## HASIL DAN PEMBAHASAN Ekstraksi
Sampel  basah  rimpang  Lengkuas merah diperoleh sebanyak 1,5 kg, dikeringkan  dan  diblender  menghasilkan serbuk  simplisia  sebanyak  150  gram  dan  di ekstrak  menggunakan  cara  maserasi.  Proses maserasi  dilakukan  selama  5  hari  dengan menggunakan etanol 96% sebanyak 750 mL dan  remaserasi  selama  2  hari  menggunakan etanol  96%  450  mL  hingga  diperoleh  hasil maserat  etanol  Lengkuas  merah  (filtrat  1  + filtrat  2)  sebanyak  1100  mL.  Hasil  maserat
Lengkuas  merah  ini  kemudian  diuapkan dengan  menggunakan waterbath dengan tujuan  menguapkan  etanol  dari  proses maserasi  dan  menghasilkan  ekstrak  kental sebayak 11,08 gram.

## UJI EFFEKTIFITAS
a. Metode Cakram
Gambar 1. Hasil Metode Cakram Tabel 1. Hasil Pengukuran Daya Hambat denganMetode Cakram
Perlakuan U1 U2 U3 Rata-rata K(-) 0 0 0 0 K(+) 20 23 21 21,3 100% 10 9 10 9,6 75% 7 7,5 11,5 8,68 50% 8 10,5 7 8,5 25% 9 8,25 8,5 8,5 12,5% 7,5 8,5 7 7,6 b. Metode Sumuran
Gambar 2. Hasil Metode Sumuran
Tabel 2. Hasil Pengukuran Daya Hambat dengan Metode Sumuran
Perlakuan U1 U2 U3 Rata-rata K(-) 0 0 0 0 K(+) 9 14 24,8 16 100% 18 32,5 27 25,8 75% 14,7 26 22 20 50% 11 19 17 15,6 25% 9,5 16,7 12 12,7 12,5% 9,2 10 10 9,7 Uji  daya  hambat  ekstrak  Lengkuas merah terhadap bakteri Klebsiella
pneumoniae menggunakan  metode  cakram dan  metode  sumuran.  Kedua  metode  ini menggunakan  media Nutrient  Agar (NA). Media Nutrient  Agar (NA) merupakan medium yang baik sebagai tempat tumbuhnya  beberapa  bakteri  gram  positif dan  gram  negatif  yang  di  manfaatkan sebagai  sumber  nutrisi  bagi  pertumbuhan bakteri. Dalam uji effektivitas hasil diperoleh melalui pengamatan yang dilakukan  selama  1  x  24  jam  masa  inkubasi pada  suhu  37 0 C  dengan  3  kali  pengulangan. Pengujian  ini  menggunakan  kontrol  positif dan kontrol negatif. Kontrol positif berfungsi sebagai  kontrol  dari  zat  uji  dengan membandingkan  diameter  daerah  hambat yang  terbentuk  (Dwijendra,  2014).  Kontrol positif yang digunakan antibiotik ciprofloxacin. Menurut Sarro (2001) antibiotik Ciprofloxacin merupakan antibiotik  dengan  kegiatan  luas,  yaitu antibiotik  yang  memiliki  aktivitas  banyak jenis  bakteri,  virus,  jamur  dan  protozoa. Kontrol  negatif  berfungsi  untuk  mengetahui ada  tidaknya  pengaruh  pelarut  terhadap
pertumbuhan bakteri uji Klebsiella pneumoniae, sehingga dapat diketahui bahwa yang mempunyai aktivitas antibakteri adalah  zat  uji  bukan  pelarut  (Dwijendra, 2014).  Kontrol  negatif  yang  digunakan adalah aquadest.
Dari  hasil  yang  dilakukan  untuk metode  difusi  cakram  menunjukan  diameter zona  hambat  dari  kontrol  positif  bakteri  uji lebih  besar  dibandingan  dengan  ekstrak  dan kontrol  negatif  yaitu  21,3  mm  sedangkan untuk  metode  sumuran  yaitu  16  mm.  Untuk kontrol  negatif  baik  untuk  metode  cakram maupun metode
sumuran tidak memperlihatkan  adanya  daya  hambat  untuk bakteri  uji.  Hal  ini  mengindikasikan  bahwa kontrol  yang  digunakan  tidak  berpengaruh pada  uji  antibakteri,  sehingga  daya  hambat yang  terbentuk  tidak  dipengaruhi  oleh pelarut  melainkan  karena  aktivitas  senyawa yang  ada  pada  rimpang  Lengkuas  merah. Untuk  larutan  uji  konsentrasi  100%,  75%, 50%,  25%  dan  12,5%  pada  metode  cakram rata-rata  diameter  zona  beningnya  9,6  mm, 8,6  mm,  8,5  mm,  8,5  mm  dan  7,6  mm. Sedangkan  pada  metode  sumuran  rata-rata diameter zona beningnya ialah 25,8 mm, 20 mm, 15,6 mm, 12,7 mm dan 9,7 mm. Hal ini menunjukkan  semakin  besar  konsentrasi ekstrak  rimpang  Lengkuas  merah  yang diberikan, maka semakin besar pula diameter zona bening yang terbentuk.
Tabel 3. Standar Kekuatan Daya Antibakteri Menurut Davis dan Stout (1971)
Diameter Zona Bening Kategori >20 Sangat kuat 10 – 20 Kuat
5 – 10 Sedang <5 Lemah
Kriteria  inilah  yang  digunakan  dalam penelitian  untuk  penggolongan  daya  hambat larutan  uji.  Maka  daya  hambat  ekstrak rimpang  Lengkuas  merah  terhadap  bakteri Klebsiella  pneumonia untuk  metode  cakram dengan  konsentrasi  100%,  75%,  50%,  25% dan  12,5%  termasuk  dalam  kategori  sedang karena  memiliki  daya  hambat  5  –  10  mm. Untuk  metode  sumuran  pada  konsentrasi 100%  termasuk  kategori  sangat  kuat  karena memiliki  rata-rata  daya  hambat  25,8  mm. Untuk  konsentrasi  75%,  50%  dan  25% termasuk  dalam  kategori  kuat  karena  rata- rata  diameter  daya  hambatnya  10  –  20  mm. Dan  konsentrasi  12,5%  termasuk  kategori sedang  karena  rata-rata  diameter  daya hambatnya yaitu 9,7 mm.
Pada  penelitian  ini  metode  sumuran menunjukkan  hasil  yang  lebih  baik  yaitu zona  hambat  yang  terbentuk  lebih  besar dibandingkan metode cakram. Hal ini terjadi karena banyak faktor dan teori, pada metode sumuran  ekstrak  langsung  di  masukkan  ke setiap lubang, sehingga efek untuk menghambat  bakteri  menjadi  lebih  kuat. Sedangkan  pada  metode  cakram,  kertas cakram  harus  di  rendam  dalam  larutan ekstrak  Lengkuas  lalu  diletakkan  di  atas media NA .  Hasil  dari  penelitian  ini  sesuai dengan  penelitian  yang  telah  dilakukan Wahyu  Susilowati  (1997)  yang  menyatakan bahwa dengan menggunakan metode sumuran  dapat  menghasilkan  diameter  zona hambat  yang  besar.  Dan  diperkuat  dalam penelitian Eko Prayoga (2013) Hal ini terjadi karena  pada  metode  sumuran  terjadi  proses osmolaritas  dari  konsentrasi  ekstrak  yang
lebih  tinggi  dari  metode  cakram.  Pada metode sumuran setiap lubang di  isi dengan konsentrasi ekstrak, maka osmolaritas terjadi lebih  menyeluruh  dan  lebih  homogen  serta konsentrasi  ekstrak  yang  dihasilkan  lebih tinggi  dan  lebih  kuat  untuk  menghambat pertumbuhan bakteri.
Terbentuknya  daerah  zona  hambat menunjukkan terjadinya penghambatan pertumbuhan  koloni  bakteri  yang  diduga akibat  pengaruh  senyawa  bioaktif  yang terdapat  pada  ekstrak  Lengkuas  merah. Menurut  penelitian  Herni  dan  Shofia  (2015)
yang melakukan skrining fitokimia Lengkuas  merah  dan  Lengkuas  putih,
menunjukkan  hasil  untuk  ekstrak  etanol rimpang Lengkuas merah positif
mengandung  golongan  senyawa  flavonoid, tannin,  kuinon  dan  terpenoid.  Selain  itu ekstrak  rimpang  Lengkuas  merah  juga mengandung  minyak  atsiri  seperti  yang diungkapkan Kunia (2007), senyawa- senyawa tersebut diduga merupakan senyawa  yang  berperan  dalam  menghambat pertumbuhan bakteri Klebsiella pneumoniae. Pertumbuhan  bakteri  yang  terhambat atau  dapat  disebabkan  oleh  penghambatan terhadap  sintesis  dinding  sel,  penghambatan terhadap fungsi membran sel, penghambatan terhadap  sintesis  protein  atau  penghambatan terhadap  sintesis  asam  nukleat.  Menurut Volk  dan  Wheeler  (1988),  minyak  atsiri (seperti yang terkandung di dalam Lengkuas merah),  dapat  menghambat  pertumbuhan atau mematikan bakteri dengan mengganggu proses  terbentuknya  membran  atau  dinding sel karena komponen struktural membran sel bakteri tersusun atas protein dan lipid, hal ini menyebabkan  membran  sel  rentan  terhadap
zat  kimia  yang  dapat  menurunkan  tegangan permukaan. Kerusakan membran sel menyebabkan terganggunya transport nutrisi (senyawa  dan  ion)  melalui  membran  sel yang  pada  akhirnya  dapat  menyebabkan gangguan  terhadap  pertumbuhan  bakteri. Volk  dan  Wheeler  (1993)  menambahkan bahwa  walaupun  dinding  sel  seperti  yang terdapat pada bakteri memiliki struktur yang dapat  memberikan  kekuatan  tambahan  bagi sel,  namun  senyawa  kimia  seperti  tannin yang  juga  terkandung  dalam  Lengkuas merah  mempunyai  sifat  sebagai  pengelat yang  berefek  spasmolitik,  menciutkan  atau mengkerutkan  sel  sehingga  pertumbuhan bakteri terganggu.
Masduki  (1996)  juga  menyatakan bahwa  tannin  memiliki  daya  antibakteri dengan  cara  mempresipitasi  protein,  karena diduga  tannin  mempunyai  efek  yang  sama dengan  senyawa  fenolik.  Tannin  dapat bereaksi  dengan  membran  sel,  inaktivasi fungsi  materi  genetik.  Sedangkan  senyawa flavonoid  seperti  yang  juga  terkandung  di dalam  rimpang  Lengkuas  merah  menurut Ajizah  (2004),  diduga  menjadi  penyebab gangguan  terhadap  pertumbuhan Klebsiella pneumoniae karena adanya efek fenolik dari flavonoid.  Senyawa  fenol  dapat  bersifat koagulator protein. Protein yang menggumpal  tidak  dapat  berfungsi  lagi, sehingga  akan  mengganggu  pembentukan dinding  sel  bakteri  sehingga  pada  akhirnya bakteri  kehilangan  kemampuan  membentuk kolono dan menyebabkan kematian sel.

## KESIMPULAN
Berdasarkan  hasil  penelitian  yang dilakukan  dapat  disimpulkan  bahwa  ekstrak
rimpang  Lengkuas  merah  memiliki  daya hambat terhadap bakteri Klebsiella pneumoniae yang resisten antibiotik
seftriakson. Untuk metode cakram
konsentrasi  100%,  75%,  50%,  25%  dan 12,5%  termasuk  kategori  sedang.  Untuk metode sumuran konsentrasi 100% termasuk kategori  sangat  kuat,  konsentrasi  75%,  50% dan  25%  termasuk  kategori  kuat  dan  untuk konsentrasi 12,5% termasuk kategori sedang.

## SARAN
Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut  tentang  potensi  antibakteri  dari  zat aktif  yang  terdapat  dalam  ekstrak  rimpang Lengkuas merah.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajizah  A,  2004.  Sensitivitas Salmonella typhimurium Terhadap  Ekstrak  Daun Psidum  guajava L.  Jurnal  Bioscientiae.
1: 31-38
Borges,  M.  T.,  and  Bresson,  W.  2004. Delivery Methods for Introducing Endophitic Bacteria into Maize. Biocontrol . 49: 315-322.
Brisse. S., Fevre. C., Passer. V., Jeanjean. S. I.,  Tournebize,  R.,  &  Diancourt.  L.,  et al.,  2009.  Virulent  Clones  Of Klebsiella pneumonia Identification and Evolutionary Scenario Based on Genomik and Phenotypic Charaterization, Plos One, 4. Davis,  W.  W.,  T.R.  Stout.  1971.  Disc  plate method of microbiological assay. Journal of microbiology 22: 659-665.
Dwijendra,  I. M.  2014. Aktivitas  Antibakteri dan  Karakterisasi  Senyawa  Fraksi  Spos Lamellodysidea
herbacea yang
Diperoleh  dari  Teluk  Manado [skripsi]. Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Eka  Prayoga.  2013. Perbandingan  Efek Ekstrak  Daun  Sirih  Hijau  (Piper  betle
L.)  Dengan  Metode  Difusi  Disk  dan Sumuran Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus . SKRIPSI.  Program  Studi  Pendidikan
Dokter  Fakultas  Kedokteran  dan  Ilmu Kesehatan  Universitas  Islam  Negeri Syarif Hidayatullah, Jakarta.
Harum,  2018. Isolasi  dan  Identifikasi Biomolekuler Bakteri Penyebab Penyakit Pneumonia  yang  Resisten  Terhadap Antibiotik  Seftriakson  di  RSUP  Dr  R.  D Kandou .  Skripsi.  Fakultas  Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam :
Universitas Sam Ratulangi, Manado.
Kunia,  K.  2007.  Lengkuas  Pengganti Formula.http://anekaplanta.wordpress.co m/author/plantus/ (31 Oktober 2018)
Masduki,  I.  1996.  Efek  Antibakteri  Ekstrak Biji  Pinang  ( Areca  catechu )  terhadap S. aureus dan E. coli invitro. Jurnal Cermin Dunia Kedokteran. 109: 21-24 Misnadiraly,  2008.  Penyakit  Infeksi  Saluran
Napas  Pneumonia  Pada  Anak,  Orang Dewasa  dan  Usia  Lanjut.  Pustaka  Obor Populer. Jakarta.
Mukti  Abdul,  H.,  Alsaggaf  Hood,  2010. Dasar  –  dasar  Ilmu  Penyakit  Paru, Surabaya : Erlangga.
Radji,  M.,  2011.  Mikrobiologi  Panduan Mahasiswa  Farmasi  dan  Kedokteran. Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Sarro,  A.D.,  G.D.  Sarro.  2001.  Adverse Reactions  to  Fluoroquinolones.  An Overview on Mechanism Aspect.
Current  Medicinal  Chemistry. 8  :371- 384. Susilowati, W., Agustini, I., dan Indriastuti.1997.  Uji  Antibakteri  Ekstrak Biji  Alpokat  ( Persea  Americana  mill ) dari  Fraksi  petroleum  Eter.  III  (2)  :  48- 53.
Utami ER.2012. Antibiotika, Resistensi, dan Rasionalitas  terapi.  Saintis  2012  :  1(1)  : 124 -38.
Volk,  W.  And  Wheeler.  1988. The  Basic
Microbiology . Vol. I. Erlangga. Jakarta
Volk, W. A and Wheeler. 1993. Mikrobiologi Dasar Edisi Kelima.
Jakarta : Erlangga. Wahyu  E.  2009.  Aktivitas  Antibakteri
Ekstrak  Etanol  Daun  Pepaya  ( Carica
papaya L .) Terhadap Eschericia coli dan Staphylococcus aureus Multiresisten Antibiotik.  Skripsi.  Fakultas  Farmasi  : Universitas Muhammadiyah Surakarta. Wattimena,  J.  R,  M.  B  Widianto,  E.  Y Sukandar.,  1990.  “Patofisiology”,  Pusat Antar  Universitas  Ilmu  Hayati,  Institut Tekhnologi Bandung, Bandung.
Wijayakusuma,  H.  M.  2000.  Potensi Tumbuhan  Obat  Asli  Indonesia  sebagai Produk Kesehatan. Yogyakarta.
Yuharmen, dkk. 2002. Uji Aktivitas
Antimikroba  Minyak  Atsiri  dan  Ekstrak Methanol  Lengkuas  ( Lenguas  galang ) Jurusan  Kimia,  FMIPA.  Universitas Riau,Riau