## PEMANFAATAN KITOSAN DARI CANGKANG RAJUNGAN SEBAGAI BIOKOAGULAN PADA AIR LIMBAH INDUSTRI TAHU
Firman Windhono * , Muhammad Milzam Dzaky, Retno Dewati, AR Yelvia Sunarti
Program Studi Teknik Kimia Universitas Pembangunan Nasional ”Veteran” Jawa Timur Jalan Raya Rungkut Madya No.1 Gunung Anyar, Surabaya, Jawa Timur 60249, Indonesia Penulis korespondensi: windhono.firman@gmail.com

## Abstrak
Cangkang  rajungan  mengandung  senyawa  kitin  dan  kitosan  yang  dapat  digunakan  sebagai biokoagulan, yaitu biopolimer yang dapat digunakan secara komersial untuk membran yang berfungsi sebagai bahan koagulan  dan flokulan.  Kandungan kitin  pada cangkang rajungan mencapai 22,66%. Zat  kitin  pada cangkang  rajungan  diproses  menjadi  biokoagulan  untuk  menyerap  kandungan  senyawa  organik  di  dalam limbah produksi tahu, sehingga nilai chemical oxygen demand (COD) di dalam limbah tahu akan berkurang. Konsentrasi  COD  pada  limbah  produksi  tahu  mencapai  1017,35  mg/L,  sehingga  akan  mengakibatkan pencemaran perairan. Penambahan biokoagulan dengan metode koagulasi-flokulasi dapat mengurangi kadar COD. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui jumlah dosis optimum dalam pembuatan biokoagulan. Metode penelitian menggunakan tiga tahapan yaitu demineralisasi, deproteinasi, dan deasetilasi. Penelitian dilakukan  dengan  mengambil  sampel  limbah  dari  hasil  produksi  tahu  dan  ditambahkan  biokoagulan menggunakan  metode  koagulasi  dan  flokulasi.  Berdasarkan  hasil  penelitian,  diperoleh  penambahan biokoagulan 0,4 g:250 ml memiliki efisiensi yang terbaik yaitu 99,5%, sehingga dapat menurunkan kadar COD sebesar  1017,35  mg/L  menjadi  4,893  mg/L.  Hal  ini  telah  sesuai  dengan  standar  baku  mutu  yang  telah ditetapkan, sehingga pencemaran lingkungan perairan berkurang.
Kata kunci: biokoagulan; cangkang rajungan; kitin; kitosan

## UTILIZATION OF CHITOSAN FROM CRAMB SHELL AS A BIOCOAGULANT IN INDUSTRIAL WASTEWATER TOFU

## Abstract
The crab shell contains chitin and chitosan compounds which can be used as bio coagulants, namely biopolymers  that  can  be  used  commercially  for  membranes  that  function  as  a  coagulant  and  flocculant materials. The chitin content in the crab shell reaches 22.66%. The chitin substance in crab shells is processed into a bio coagulant to absorb the content of organic compounds in tofu production waste so that the value of Chemical Oxygen Demand (COD) in tofu waste will decrease. The concentration of COD in tofu production waste reaches  1017.35 mg/L, which will results in  water pollution.  The addition  of  bio coagulants with the coagulation-flocculation  method  can  reduce  COD  levels.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the optimal number of doses in the manufacture of bio coagulants. The research method uses three stages, namely demineralization, deproteination, and deacetylation. The research was conducted by taking samples of waste from tofu production and adding  bio  coagulants using coagulation  and flocculation  methods. Based on the research results, it was found that the addition of bio coagulant 0.4 g:250 ml had the best efficiency of 99.5%, so it could reduce COD levels by 1017.35 mg/L to 4.893 mg/L. This is under the quality standards that have been set so that pollution of the aquatic environment is reduced.
Keywords: biocoagulant; crab shell; chitin; chitosan

## PENDAHULUAN
Indonesia adalah negara dengan perairan yang sangat  luas,  ditambah  dengan  sumber  daya  yang melimpah. Salah satunya adalah komoditas rajungan, bahkan  diekspor  keluar.  Pada  tahun  2011,  ekspor
rajungan  di  Indonesia  sebanyak  250  juta  dollar  AS, mengalami  peningkatan  sekitar  10-20%  dari  tahun sebelumnya.  Pada  tahun  2010,  ekspor  rajungan  di Indonesia  yaitu  208,4  juta  dollar  AS  (Kementerian Kelautan & Perikanan, 2011).  Rajungan ini biasanya diekspor  dalam  keadaan  beku,  dimana  dilakukan
pemisahan kepala dan cangkang rajungan. Sehingga, dari kegiatan ini menghasilkan limbah rajungan yang begitu  cukup  banyak  dan  dibuang  begitu  saja,  yang dapat menyebabkan pencemaran lingkungan.
Meminimalkan bahan limbah dan meningkat- kan  pemanfaatannya  kembali  menjadi  bahan  yang berharga dan berkelanjutan secara biologis adalah hal yang  menantang  para  peneliti  dan  ilmuwan.  Kitin adalah polisakarida terbanyak kedua setelah selulosa. Kitin adalah polisakarida yang tersebar luas di alam dan  diproduksi  setiap  tahun  sebanyak  selulosa.  Itu yang  utama  komponen  struktural  dari  exoskeletons hewan  seperti  serangga  dan  krustasea  dengan kerangka  luar  itu  antara  lain  udang,  kepiting,  dan lobster. Lebih dari 1011 ton per tahun kitin diproduksi setiap  tahun  di  perairan  lingkungan.  Pemanfaatan limbah  ini  untuk  energi  terbarukan  produk  seperti biopolimer  kitin  dan  turunannya  adalah  peluang tujuan ganda. Oleh karena itu, kepiting, udang, squilla dan  limbah  sisik  ikan  adalah  bahan  baku  ide  untuk sintesis  kitin.  Ekstrak  kitin  dari  cangkang  kepiting dapat digunakan untuk menghasilkan produk turunan kitin,  seperti  sebagai  kitosan  juga  untuk  film bioplastik  dan  struktur  nano.  Cangkang  kepiting mengandung  25-30%  kitin,  25%  protein,  40-50% kalsium  karbonat.  Pembuangan  limbah  ini  dapat menimbulkan masalah berat bagi kehidupan manusia sehingga  perlu  dilakukan  penelitian  pengolahan limbah  cangkang  kepiting  dalam  sintesis  kitin (Pandharipande dan Bhagat, 2016).
Limbah  rajungan  yang  dihasilkan  berupa limbah padat berupa cangkang atau kulit dan limbah cair berupa air rebusan. Peningkatan ekspor rajungan setiap tahunnya, mengakibatkan jumlah limbah yang dihasilkan juga akan semakin meningkat. Selama ini, belum  ada  dilakukan  pengolahan  limbah  secara efektif  untuk  mengurangi  pencemaran  lingkungan. Setelah  dilakukan  pengkajian,  cangkang  rajungan mengandung  senyawa  kitin  dan  kitosan  yang  dapat digunakan  sebagai  biokoagulan,  yaitu  biopolimer yang  dapat  digunakan  secara  komersial  untuk membran yang berfungsi sebagai penukar ion, untuk pemurnian air, sebagai bahan baku benang bedah yag digunakan  pada  operasi  plastik,  dan  juga  sebagai bahan koagulan dan flokulan.
Kitin  merupakan  salah  satu  polimer  yang potensial  yang  sangat  multifungsi.  Kitin  memiliki keunggulan yaitu mempunyai sifat biokompatibilitas, biodegradabelitas, non -toksisitas  dan  sifat  adsorbsi. Namun,  biofungsionalitas  zat  kitin  dibatasi  oleh proses kelarutannya (Busyairi, 2014).
Selain  senyawa  kitin,  juga  terdapat  senyawa kitosan  yang  bisa  digunakan  untuk  mengurangi kekeruhan  dalam  air  hingga  90,37%  apabila dibandingkan dengan tawas, dengan konsentrasi yang sama,  hanya  mampu  mengurangi  kekeruhan  air sebesar 54,21%  (Manurung, 2011).
COD  dan  BOD  penting  dalam  pengendalian kandungan  total  pencemaran  dan  pengelolaan
lingkungan  perairan.  Hal  ini  untuk  mengetahui tingkat  tercemarnya  suatu  lingkungan  perairan terhadap  kandungan  relatif  bahan  organik  (Qiong, 2009).  Aspek  biokimia  yang  umum  diuji  dan  dapat digunakan  untuk  menentukan  kadar  air  pencemaran adalah  dengan  melihat  kandungan  oksigen  yang terlarut dalam air. Permintaan oksigen kimia (COD) dan permintaan oksigen biokimia (BOD) merupakan kriteria  yang  paling  banyak  digunakan  untuk penilaian kualitas air (Jouanneau, dkk., 2014).
Sehingga penting untuk penelitian lebih lanjut dan  mengembangkan  metode  penentuan  yang sederhana  dan  cepat  COD  dan  BOD.  Selain  itu, pembuangan  air  limbah  kota  dan  industri  serta pertanian  dan  drainase  industri  yang  mengandung bahan  organik  di  sumber  air  dapat  menyebabkan berkurangnya  oksigen  terlarut  (DO)  dan  kebutuhan oksigen biokimia (BOD) (Hassan, dkk., 2014).
Salah  satu  industri  yang  menyebabkan lingkungan  perairan  tercemar  adalah  buangan  air limbah  industri  tahu.    Kegiatan  industri  ini  dapat menghasilkan  senyawa  yang  berbahaya  bagi kehidupan hewan peliharaan, biota air dan manusia. Sehingga,  perlu  dilakukan  penanganan  lebih  lanjut untuk mengurangi pencemaran lingkungan perairan.

## Kitosan
Kitosan  memiliki  banyak  sifat  fisikokimia (OH  reaktif  dan  kelompok  NH 2 )  dan  biologis (biokompatibel,  biodegradable)  sifat  yang  mem- buatnya  menjadi  bahan  yang  menarik  untuk digunakan  dalam  berbagai  aplikasi.  Properti  ini meliputi:  biodegradabilitas,  kurangnya  toksisitas, efek  anti  jamur,  luka  percepatan  penyembuhan,  dan stimulasi  sistem  kekebalan  tubuh.  Karena  sifat biologis  dan  kimia  tersebut,  kitosan  memiliki kemampuan untuk mengikat bahan tertentu termasuk kolesterol, lemak, protein, ion logam, dan bahkan sel tumor.  Hal  ini  memungkinkan  kitosan  untuk digunakan  sebagai chelating agen  dalam  berbagai aplikasi (Senel dan McClure, 2004).
Kitosan  dapat  dikatakan  berkualitas  apabila memiliki standar mutu yang baik, dan parameternya dapat dilihat dari pengukuran kadar abu yaitu jumlah mineral  yang  terkandung,  Standar  mutu  kadar  abu kitosan yang telah ditetapkan oleh Protan Biopolimer, yakni  sebesar  <2%, kadar air ≤10%, kadar nitrogen ≤5%,  derajat  deasetilasi  dari  kitosan  adalah  ≥70% (Zahiruddin, 2008).

## Kogulasi dan Flokulasi
Proses  koagulasi  dan  flokulasi  banyak digunakan  dalam  air  dan  pengolahan  air  limbah. Tujuan  utamanya  adalah  untuk  menghilangkan partikel  koloid  tersuspensi  dan  untuk  mengurangi kekeruhan di badan air (Choy, dkk., 2014).  Proses ini biasanya berlangsung dalam reaktor kimia dimana air influen atau air limbah masuk ke bak dan bercampur dengan  bahan  koagulan  menggunakan mechanical
mixer ,  dilanjutkan  dengan  proses  sedimentasi  untuk menghilangkan  partikulat  melalui gravity  settling (Hammer dan Hammer, 2004).
Metode koagulasi dan flokulasi adalah salah satu metode yang bertujuan untuk mengurangi bahan pencemar  dalam  wujud  koloid  di  dalam  perairan. Metode ini dilakukan dengan penambahan koagulan yang  bersifat  sebagai  pengikat  partikel  yang terkandung pada perairan. Koagulan ini dapat berupa senyawa  anorganik,  organik,  dan  anionik  (Gebbie, 2005).
Penelitian  ini  dilakukan  dengan  tujuan  untuk memproduksi/mensintesis  kitosan  dari  cangkang rajungan sebagai biokoagulan. Selain itu, juga untuk mengetahui  pengaruh  penambahan  biokoagulan terhadap penurunan kadar COD pada limbah perairan industri tahu

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Pada  peenelitian  ini,  bahan  yang  digunakan adalah  cangkang  rajungan  yang  diambil  dari  Desa Kradenan  di  kota  Tuban,  air  limbah  industri  tahu dengan  COD  awal  sebesar  1017,35  mg/L  (6,5  L), aquadest, asam klorida 1N, natrium hidroksida 3N.

## Alat
Rangkaian  alat  koagulasi-flokulasi  dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1 . Alat koagulasi-flokulasi

## Prosedur Pembuatan Biokoagulan
Cangkang rajungan dicuci dan dikeringan pada suhu  80 o C  menggunakan  oven  selama  24  jam. Kemudian,  cangkang  rajungan  yang  sudah  kering dihaluskan dan diayak dengan  ayakan berukuran 50 mesh.

## Demineralisasi
Proses  demineralisasi  dilakukan  dengan  cara penambahan  HCL  1N  (1:7  terhadap  250  ml  air limbah)  ke  dalam  serbuk  cangkang  rajungan. Kemudian, diaduk selama 1 jam pada suhu 90°C, dan
didinginkan  serta  disaring.  Residu  yang  tersaring dicuci  menggunakan aquadest hingga pH netral  dan dikeringkan dalam oven 60°C selama 4 jam.

## Deproteinasi
Proses deprotenasi dilakukan dengan penambahan basa yaitu NaOH dengan konsentrasi 3N ke  dalam  kitin  kasar  hasil  demineralisasi.  Perban- dingan  yang  digunakan  yaitu  1:10  (250  ml  air limbah). Kemudian diaduk pada suhu 90 o C selama 1 jam.  Setelah  itu  didinginkan  dan  disaring.  Residu yang  dihasilkan  dilakukan  pencucian  dengan menggunakan aquadest hingga pH netral. Selanjutnya dikeringkan pada suhu 60°C di oven selama 4 jam.

## Deasetilasi
Proses deasetilasi dilakukan dengan pelarutan zat  kitin  hasil  proses  deproteinasi  ke  dalam  NaOH 50%,  menggunakan  perbandingan  1:20  (250  ml  air limbah). Kemudian dilakukan pengadukan pada suhu 140 o C  selama  2  jam.  Setelah  itu  didinginkan  dan disaring.  Residu  hasil  penyaringan  kemudian dilakukan  pencucian  menggunakan  aquadest  hingga pH netral. Selanjutnya dikeringan pada suhu 60°C di oven selama 4 jam.

## Koagulasi-flokulasi
Proses  koagulasi  dilakukan  dengan  cara menambahkan air sampel limbah tahu sebanyak 250 ml,  kemudian  dilakukan  pengukuran  pH  COD, sebagai  data  awal  sebelum  penambahan  kitosan. Setelah itu, penambahan kitosan dengan dosis 0,1 gr; 0,2 gr; 0,3 gr;  0,4gr; dan 0,5 gr ke dalam air sampel disertai denganpengadukan 400rpm selama 15 menit, 30  menit,  45  menit,  60  menit,  dan  75  menit. Kemudian didiamkan selama 30 menit dan disaring. Kemudian,  diukur  kembali  COD  filtratnya,  untuk melihat penurunan kadar COD.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, diperoleh data seperti ditunjukkan pada Tabel 1. Data nilai  hasil  pengukuran  parameter  berupa  kadar  air, kadar abu, kadar nitrogen, dan derajat deasetilasi.
Pada Tabel 1 menunjukkan baku mutu kitosan yang  dihasilkan.  Nilai  kadar  air,  kadar  abu,  kadar nitrogen dan derajat deasetilasi berturut-turut adalah 3,76 %; 3,35%; 4,33% dan 62,19 %. Nilai ini semua sudah sesuai dengan baku mutu yang diperbolehkan. Nilai kadar air menunjukkan bahwa nilai  dari kadar uji  lebih  rendah  dibandingkan  karakteristik  kitosan komersial  dengan  nilai  kadar  air  ≤10%.  Suptijah (2011)  menyebutkan  kadar  air  yang  rendah dikarenakan  cara  pengeringan  yang  sudah  baik  dan benar.  Pengaruh  dari  nilai  kadar  air  yaitu  proses pengeringan, lama pengeringan, jumlah kitosan yang dikeringkan,  luas  tempat  pengeringan  dan  sarana pengeringan.
Tabel 1 . Baku mutu kitosan Parameter Baku Mutu Hasil Sampel Kadar Air ≤ 10% 3,76% Kadar Abu ≤ 2% 3,35% Kadar Nitrogen ≤ 5% 4,33% Derajat Deasetilasi ≥ 70% 62,19%
Pada Tabel 1 menunjukkan bahwa nilai kadar abu  di  atas  mutu  yang  dipersyaratkan  yaitu  2,35%. Kadar  abu  menunjukkan  kandungan  mineral  yang terkandung dalam kitosan sehingga akan mempengaruhi  produk  akhir.  Faktor-faktor  yang mempengaruhi  jumlah  kadar  abu  dalam  kitosan adalah  kualitas  air  yang  digunakan  ketika  proses pencucian  kitosan  serta  efektif  atau  tidaknya  proses demineralisasi yang dilakukan. Proses penetralan pH yaitu pencucian menggunakan aquades setelah proses pelarutan menggunakan asam kuat maupun basa kuat juga  berpengaruh  terhadap  kadar  abu.  Kadar  abu dapat  menurun  karena  terbuang  bersama  air  apabila mineral  terlepas  dai  bahan  yang  akan  berikatan dengan pelarut.
Sedangkan nilai kadar nitrogen yang diperoleh sudah memenuhi standar mutu yang telah dipersyaratkan yaitu 4,33%. Kitosan terbukti mampu untuk difungsikan sebagai zat dalam mengikat air dan terlarut  dalam  asam  asetat  (Karamah.  2006). Meningkatkan  jumlah  kandungan  nitrogen  dalam kitosan,  maka  fungsinya  akan  semakin  menurun. Basa  kuat  yang  digunakan  adalah  NaOH  dengan konsentrasi  yang  tinggi.  Tingginya  konsentrasi NaOH  yang  digunakan  dan  lamanya  proses deproteinasi,  maka  reaksi  antara  protein  dengan larutan  Na-protein  akan  lebih  sempurna,  sehingga semakin banyak protein yang dikeluarkan.
Derajat  deasetilasi  yang  diperoleh  untuk cangkang rajungan adalah 82,19%. Derajat deasetilasi  kitosan  yang  diuji  tersebut  telah  sesuai dengan  baku  mutu  kitosan  yaitu  ≥70%  (Suptijah, 2011).  Derajat deasetilasi dapat menentukan jumlah gugus  asetil  yang  hilang  menggunakan  proses deasetilasi. Apabila nilai dari derajat deasetilasi tinggi maka  tingkat  kemurnian  kitosan  yang  dihasilkan semakin  tinggi  dan  semakin  banyak  jumlah  gugus amina pada molekul kitosan. Hal ini dikarenakan oleh kitosan  semakin  reaktif  karena  gugus  amina  yang dapat  menggantikan  gugus  asetil  semakin  banyak (Sinardi, 2013).
Dari  Gambar  2  dapat  diketahui  bahwa hubungan dosis kitosan dengan variabel 0,1gr; 0,2gr; 0,3gr;  0,4gr;  dan  0,5gr  terhadap  penurunan  kadar COD. Dimana pada Gambar 2 menunjukkan bahwa pada  saat  pengadukan,  semakin  banyak  dosis  yang diberikan pada limbah cair tahu maka semakin kecil nilai COD yang diperoleh. Selain itu, pada Gambar 2 juga  dapat  dilihat  bahwa  hubungan  waktu  kontak (menit)  dengan  variabel  15;  30;  45;  60;  dan  75 terhadap penurunan kadar COD, dimana pada grafik
menunjukkan bahwa pada saat pengadukan, semakin lama waktu kontak antara kitosan dengan limbah cair tahu maka semakin kecil nilai COD yang diperoleh. Hal  ini  menunjukkan  bahwa  pada  grafik  telah menunjukkan kesesuaian dengan teori terdahulu.
Gambar 2 . Hubungan antara dosis kitosan, waktu kontak dengan kadar COD
Penurunan konsentrasi COD disebabkan oleh faktor  dosis  koagulan.  Hal  ini  karena  zat  kitin sebagai  biokoagulan  yang  memiliki  sifat  biologis yang mampu untuk menyerap dan mengikat partikel- partikel  tersuspensi  (zat  organik)  sehingga  partikel tersebut  dapat  mengendap  (Nugraheni,  2014). Banyak  jumlah  biokoagulan  yang  ditambahkan, maka juga akan semakin banyak jumlah zat organik yang  dapat  diserap  oleh  biokoagulan  ini  dan  yang terendapkan di dalam air.
Pada  variabel  waktu  kontak  menurut  Lestari (2019)  bahwa  semakin  lama  waktu  pengadukan maka  partikel-partikel  koloid  akan  saling  menarik dan  menggumpal  membentuk  flok-flok  yang semakin  banyak  sehingga  penyisihan  padatan tersuspensi  semakin  besar  yang  mengakibatkan konsentrasi bahan organik yang terdapat pada limbah cair semakin menurun.
Berdasarkan  data  dan  grafik  tersebut  dapat dilihat  bahwa  efisiensi  penyisihan  maksimal  dari penggunaan biokoagulan adalah sebesar 99,5% yang didapat  dari  penambahan  biokoagulan  kitosan dengan  dosis  0,4gr  per  250  ml  sampel  limbah  atau 1,6gr  per  air  sampel  limbah.  Penambahan  dosis 0,4gr, biokoagulan dapat menyisihkan COD sebesar 99,5%  atau  1012,35  mg/L.  Pada  jumlah  dosis koagulan  lebih  dari  0,4gr,  maka  nilai  penurunan kadar COD yang dihasilkan juga semakin kecil. Hal ini  disebabkan  oleh  kelebihan  muatan  positif  yang terdapat pada bahan koagulan, sehingga mengakibatkan kurang maksimalnya dalam mengikat  zat  koloid  yang  menganduk  senyawa organik, begitu juga sebaliknya. Jika dosis koagulan yang  digunakan  kurang  dari  0,4gr,  efisiensi penurunan  paramater  kadar  COD  juga  kurang maksimal.  Hal  ini  disebabkan  oleh  sedikitnya  ion bermuatan  positif  dalam  biokoagulan,  sehingga menyebabkan  flok-flok  yang  memiliki  muatan negatif  tidak  terserap  semua  oleh  biokoagulan. Sehingga  akan  mempengaruhi  kadar  COD  dalam limbah yang dihasilkan.

## SIMPULAN
Biokoagulan  dapat  dibuat  dari  cangkang rajungan melalui proses demineralisasi, deproteinasi, deasetilasi dengan hasil sesuai standart mutu kitosan yaitu  memiliki  kadar  air  3,76%,  kadar  abu  2,35%, kadar  nitrogen  4,33%,  serta  derajat  deasetilasi 82,19%. Biokoagulan dapat menurunkan kadar COD sebesar  1017,35  mg/L  pada  limbah  air  pengolahan tahu  menjadi  4,893  mg/L  yang  telah  sesuai  dengan baku  mutu  yaitu  <350  mg/L.  Semakin  banyak penambahan dosis koagulan dan waktu kontak maka akan semakin turun nilai COD dari limbah tahu.

## SARAN
Kadar  abu  kitosan  yang  dihasilkan  masih mendekati  baku  mutu,  sehingga  harus  lebih diperhatikan  proses  penetralan  kitosan  dengan  air. Proses  penetralan  dapat  mempengaruhi  kadar  abu dengan  terlepasnya  mineral-mineral  dari  bahan kemudian akan terikat oleh pelarut sehingga mineral dapat terlarut.

## DAFTAR PUSTAKA
Bastaman.  1989.  Studies  on  degradation  and extraction  of  chitin  and  chitosan  from  prawn shells.  England  (UK):  The  Queen  University of Belfast.
Busyairi, M. 2014. Pengolahan Limbah Cair Dengan Parameter  Total  Suspended  Solid  (TSS)  dan Warna  Menggunakan  Biokoagulan  (Limbah Cangkang Kepiting). Surakarta. Jurnal Sains & Teknologi Lingkungan.
Choy,  S.  Y.,  Prasad,  K.  M.  N.,  Wu,  T.  Y., Raghunandan, M. E., & Ramanan, R. N. 2014. Utilization  of  plant-based  natural  coagulants as  future  alternatives  towards  sustainable water  clarification .  Journal  of  Environmental Sciences (China), 26(11), 2178–2189. Gebbie, P. (2005). A dummy’s guide to coagulants.
68th  Annual  Water  Industry  Engineers  and Operators’ Conference
Hadiwidodo,  M  ,Aulia,  Z,Sutrisno,  E  &  2011, Pemanfaatan  Limbah  Cangkang  Kepiting Sebagai  Biokoagulan  Untuk  Menurunkan Parameter  Pencemar  COD  dan  TSS  Pada Limbah Industri Tahu , Jurnal Teknik Lingkungan,5(2):7
Hammer, M.J. and Hammer, Jr. M.J. 2004. Water and
Wastewater  Technology  In:  Wastewater
Processing.  (5th  ed).  Pearson  Prentice  Hall: Ohio.
Hassan  R  P,  Noorollah  M  and  Mehdi  M.  2014.
Determination of Biochemical Oxygen Demand  (BOD)  Without  Nitrification  and Mineral  Oxidant  Bacteria  Interferences  by Carbonate Turbidimetry . Research Journal of Pharmaceutical,  Biological  and  Chemical Sciences.
Jouanneau  S,  Recoules  L  and  Durand  A  B.  2014. Methods  for  assessing  biochemical  oxygen Karamah,  Eva  Fathul.  2006,  Pralakuan Koagulasi  pada  Proses  Pengolahan  Air. demand (BOD). Water Research.
Lestari,  P.N.,  &  Linggawati,  A,  2019,  Pengaruh Waktu  Pengadukan  Cepat  Pada  Koagulasi Menggunakan  Metode  Pengaduk  Magnetik, Jurnal  Fakultas  Matematika  dan  Ilmu Pengetahuan Alam.
Nugraheni,  Dessy,  &  Tri,  2014,  Cangkang  Udang Sebagai Biokoagulan untuk Penyisihan Turbidity,  COD,  dan  BOD  pada  Pengolahan Limbah Farmasi PT Phapros TBK Semarang, Semarang.
Pandharipande, S., & Bhagat, P. H. 2016. Synthesis of chitin  from  crab  shells  and  its  utilization  in preparation of nanostructured film . Synthesis, 5(5), 1378-1383.
Qiong,  Y.  2009. Simultaneous  Determination  of Chemical  Oxygen  Demand  (COD)  and Biological  Oxygen  Demand  (BOD)  in Wastewater by Near-Infrared Spectrometry . J. Water Resource and Protection, 4 286-289.
Sari ,W, Silvia, R, & Farida, H, 2014,  Pemanfaatan kitosan  dari  cangkang  rajungan (portonus sanginolentus  l.) Sebagai  pengawet  ikan kembung  ( rastrelliger  sp )  dan  ikan  lele (clarias  batrachus), Jurnal  Teknik  Kimia USU, 3(4), 2-3. Senel S, McClure SJ. 2004. Potential applications of chitosan  in  veterinary  medicine .  Adv  Drug Deliv Re. ; 56(10): 1467-80
Sinardi, Soewandi, P. 2013 Pembuatan Karakteristik dan  Aplikasi  Kitosan  dari  Cangkang  Kerang Hijau  Sebagai  KoagulanPenjernih  Air.  Solo: Universitas Sebelas Maret
Suptijah P, et. al. 1992. Pengaruh Berbagai Metode Isolasi Kitin Kulit Udang terhadap Kadar dan Mutunya .  Laporan  Akhir  Penelitian.  Bogor  : Fakultas Perikanan, Institut Pertanian Bogor.
Zahiruddin,  W,  et.al.2008.  Karakteristik  Mutu  Dan Kelarutan Kitosan Dari  Ampas Silase Kepala Udang Windu (Penaeus Monodon). Teknologi Hasil Perikanan. Vol 11. No 2. 143-148.