Nuraini, A. et al. : Pengaruh konsentrasi Benzylaminopurine terhadap pertumbuhan eksplan tunas aksilar rami klon lokal Wonosobo secara in vitro
Nuraini, A. ∙ E. Aprilia ∙ Murgayanti ∙ A.P. Wulandari
Pengaruh konsentrasi Benzylaminopurine terhadap pertumbuhan eksplan tunas aksilar rami klon lokal Wonosobo secara in vitro
Sari Saat ini, perbanyakan rami menggunakan rizoma sebagai bahan tanamnya, tetapi dalam produksinya membutuhkan  waktu  yang  lama  dan  sebagai  bahan  tanam  umur  simpannya  singkat.  Kultur  jaringan merupakan salah satu teknologi untuk mendapatkan bahan tanam yang seragam dan sehat dalam waktu yang  singkat.  Tujuan  dilakukannya  penelitian  ini  adalah  untuk  mengetahui  pengaruh  konsentrasi  BAP terhadap  pertumbuhan  tunas  aksilar  pada  rami  klon  lokal  Wonosobo  dan  konsentrasi  mana  yang memberikan pengaruh terbaik. Percobaan dilakukan di Laboratorium Kultur Jaringan, Teknologi Benih, Fakultas  Pertanian,  Universitas  Padjadjaran.  Nodus  batang  dari  rami  klon  lokal  Wonosobo  diklturkan pada  media  MS  dengan  penambahan  berbagai  konsentrasi  BAP  selama  8  minggu  dan  diamati pertumbuhan  dan  perkembangannya.  Desain  penelitian  yang  digunakan  adalah  Rancangan  Acak Lengkap  (RAL)  dengan  6  perlakuan  yang  diulang  sebanyak  tiga  kali.  Adapun  perlakuannya  adalah kontrol (tanpa penambahan BAP), BAP 0,5 mg/L, BAP 1,0 mg/L, BAP 1,5 mg/L, BAP 2,0 mg/L, dan BAP 3,0  mg/L.  Hasil  percobaan  menunjukkan  penambahan  sitokinin  berpengaruh  terhadap  pertumbuhan tunas aksilar rami klon lokal Wonosobo. Penambahan 0,5 mg/L berpotensi memberikan pengaruh terbaik terhadap pertumbuhan tunas aksilar rami klon lokal Wonosobo dilihat dari waktu muncul tunas, jumlah tunas, jumlah daun, dan tinggi plantlet .
Kata Kunci : Benzylaminopurine (BAP) ∙ Rami ∙ Tunas aksilar
Effect of Benzylaminopurine concentration on the growth of axillary bud explants of ramie local clone of Wonosobo in in-vitro
Abstract . Currently , ramie propagation used the rhizome as the planting material. However, it took long  time  to  produce  and  the  longevity  of  rhizome  as planting  material  is  short.  Therefore,  another technology approach is needed. Tissue culture is one of alternative technologies that could to produce uniform  and  healthy  planting  material  within  short  time.  The  objective  of  this  research  was  to determine the effect of BAP concentration on the axillary bud growth of rami local clone of Wonosobo and  also  determine  which  concentration  gives  the  best  effect.  The  research  was  conducted  at  The Tissue  Culture  Laboratory  of  Seed  Technology,  Faculty  of  Agriculture,  Universitas  Padjadjaran. Nodes  of  ramie  local  clone  of  Wonosobo  were  cultured  for  8  weeks  on  Murashige  &  Skoog  (MS) medium added with various concentrations of BAP and then observed growth and development. The research  design  was  Completely  Randomize  Design  (RCD)  with  6  treatments  in  terms  of  BAP concentrations  and  3  replications.  The  treatment  was  ,control (without BAP); BAP 0,5 mg/L, BAP 1,0 mg/L, BAP 1,5 mg/L, BAP 2,0 mg/L, and BAP 3,0 mg/L. The result showed that there was different effect on axillary bud growth. The treatment of MS medium added with 0,5 mg/L BAP potentially showed as the best effect for bud appearance, number of shoots, number of leaves, and plantlet’s length.
Keywords : Axillary bud ∙ Benzylaminopurine (BAP) ∙ Ramie
Diterima :  10 November 2021, Disetujui : 9 Agustus 2022, Dipublikasikan : 15 Agustus 2022 DOI: http://dx.doi.org/10.24198/kultivasi.v21i2.36540
Nuraini, A. 1 ∙ E. Aprilia 2 ∙ Murgayanti 1 ∙ A.P. Wulandari 3 1 Departemen Budidaya Pertanian, Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang km. 21 Jatinangor 45363
2 Prodi Agroteknologi, Fakultas Pertanian UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang km. 21 Jatinangor 45363
3 Prodi Biologi, FMIPA UNPAD, Jalan Raya Bandung Sumedang km. 21 Jatinangor 45363 Korespondensi: anne.nuraini@unpad.ac.id

## ___________________________________________ Pendahuluan
Rami  merupakan  tanaman  herbaseus  yang dapat dimanfaatkan seluruh bagian tanamannya: batang dapat dijadikan serat, daun dijadikan  kompos,  dan  rizoma  (akar)  dijadikan bahan tanam. Serat yang dihasilkan dari batang rami berwarna putih, mudah diwarnai, kuat dan tidak mudah berubah, kekuatan tarik lebih kuat dari  linen,  sutra,  dan  bahkan  7  kali  lebih  kuat dari serat kapas (Habibie et al ., 2021).  Serat rami dapat  dijadikan  sebagai  alternatif  pengganti serat  kapas  yang  99,77%  masih  diimpor  untuk memenuhi  kebutuhan  serat  nasional  (Hanifah dan Kartiasih, 2018).
Salah  satu  daerah  produsen  rami  di Indonesia adalah Kabupaten Wonosobo. Berdasarkan  data  dari  CV.  Rabersa  Wonosibo tahun  2019,  luas  lahan  pertanaman  rami  di Kabupaten  Wonosobo  adalah  seluas  88185  m 2 (Wicaksono et  al. ,  2021).  Diantara  berbagai  klon rami yang ditanam di Wonosobo, terdapat klon lokal  yang  memiliki  perbedaan  morfologi dengan  klon  lain.  Dengan  demikian  klon  lokal dapat  dikembangkan  dan  perlu  diteliti  lebih lanjut untuk melihat potensinya.
Budidaya  rami  saat  ini  dilakukan  dengan menggunakan  bahan  tanam  rizoma  yang dihasilkan  dari  tanaman  yang  berumur  lebih dari 2 tahun (Purwati, 2010). Rizoma tidak dapat disimpan  dalam  waktu  yang  lama  karena bertunas dalam waktu yang singkat. Penyediaan dan penyimpanan rizoma menyebabkan terhambatnya  perkembangan  budidaya  rami nasional.Penyediaan  bahan  tanam  yang  banyak dalam waktu singkat serta dapat disimpan lama untuk  budidaya  rami  secara  komersial  dapat dilakukan  dengan  kultur  jaringan  atau in  vitro . Faktor yang mempengaruhi keberhasilan kultur jaringan  tanaman  adalah  genetik  tanaman, nutrisi,  lingkungan,  dan  hormon  (zat  pengatur tumbuh) (Pierik, 1987). Menurut Dwiyani (2015), dalam menginduksi tunas digunakan penambahan  zat  pengatur  tumbuh  jenis sitokinin  yang  dapat  meningkatkan  proliferasi tunas seperti 6-benzylaminopurine (BAP). Tanaman  rami  memiliki  banyak  nodus dalam  satu  batangnya,  sehingga  untuk  dapat menghasilkan  banyak  bahan  tanam,  nodus digunakan  sebagai  eksplan  karena  dapat menghasilkan tunas aksilar. Dibandingkan tunas apikal, tunas aksilar  digunakan sebagai eksplan karena  berukuran  lebih  kecil,  tidak  terlalu
tertutup  primordia  daun,  serta  jumlahnya  lebih banyak pada satu tanaman sehingga memungkinkan  untuk  memperoleh  lebih banyak eksplan (Vidyagina et al ., 2021). Diantara metode yang dikembangkan untuk mikropropagasi  tanaman,  proliferasi  tunas aksilar  adalah  yang  paling  banyak  digunakan dan  juga  dianggap  paling  cocok  untuk menjamin  stabilitas  genetik  tanaman  hasil regenerasi karena secara genetik identik dengan materi  awalnya  (Ngezahayo and Liu,  2014;  M. Nowakowska et al ., 2020).
Zat pengatur tumbuh BAP dapat mendukung  pertumbuhan  tunas  aksilar  pada tanaman  dengan  menekan  dominansi  apikal yang  disebabkan  oleh  aktivitas  auksin  endogen dalam  eksplan  (Satriawan et  al .,  2021).  Diantara berbagai  jenis  sitokinin,  BAP  dirasa  merupakan sitokinin  yang  paling  sering  digunakan  dan efektif  dalam  menginduksi  tunas  aksilar  (du Plessis et  al .,  2021;  Satriawan et  al .,  2021). Mukherjee et  al. (2018),  menyebutkan  bahwa diantara  dua  jenis  sitokinin  yaitu  kinetin  dan BA, yang lebih responsif dalam pemunculan dan multiplikasi  tunas  adalah  BA.  Kultur  jaringan rami dengan eksplan nodus yang dilakukan oleh Gati (1991) secara in vitro dengan menggunakan media  Murashige and Skoog  (MS)  dengan penambahan  BA  0,5  mg/L  menunjukkan  hasil terbaik  dalam  membentuk  (induksi)  tunas aksilar  (6,11  tunas)  dibandingkan  konsentrasi lain.
Penambahan  sitokinin  berupa  BAP  pada media  yang  berperan  dalam  pembelahan  sel diharapkan  dapat  memberikan  pengaruh terhadap  pertumbuhan  tunas.  Oleh  karena  itu perlu dilakukan percobaan untuk  mendapatkan konsentrasi BAP yang tepat untuk menumbuhkan tunas aksilar rami.
___________________________________________

## Bahan dan Metode
Penelitian  dilaksanakan  di  Laboratorium Kultur  Jaringan  Teknologi  Benih,  Fakultas Pertanian,  Universitas  Padjadjaran.  Percobaan dilakukan  pada  bulan  April  hingga  Juni  2021. Bahan  tanam  (eksplan)  yang  digunakan  berupa buku  batang  (nodus)  dari  tanaman  rami  klon lokal  Wonosobo  berumur  1-2  bulan  hasil penanaman di screenhouse. Sterilisasi  eksplan .  Batang  rami  klon Wonosobo  dipotong  sepanjang  3 – 4  cm  dan mengandung  1  nodus.  Eksplan  nodus  dicuci
Nuraini, A. et al. : Pengaruh konsentrasi Benzylaminopurine terhadap pertumbuhan eksplan tunas aksilar rami klon lokal Wonosobo secara in vitro
dengan  air  mengalir  lalu  direndam  dengan larutan  bakterisida  dan  fungisida  selama 30  menit,  lalu  dibilas  hingga  tidak  ada  residu yang  tersisa.  Selanjutnya  nodus  batang direndam  dengan  larutan  detergen  selama  3 menit,  dibilas akuades  steril  hingga  tidak berbusa,  dan  direndam  dalam  larutan  kaporit 1%  selama  5  menit  lalu  dibilas  hingga  tidak berbau,  selanjutnya  direndam  dengan  larutan PPM ( Plant Preservative Mixture ) selama 3 menit, kemudian  air  larutannya  dibuang,  dan  tidak dilakukan pembilasan kembali.
Media. Media  kultur  yang  digunakan adalah  Murashige  &  Skoog  (MS)  (Phytotech Labs®  product  M519)  4,43  g/L,  gula  30  g/L, agar 2 g/L, dan BAP sesuai perlakuan. Larutan stok  BAP  dengan  konsentrasi  100  mg/L  dibuat dengan  melarutkan  BAP  0,1  g  dengan menambahkan  sedikit  HCl  0,1  N  dan  aquades hingga  100  mL.  Larutan  stok  yang  digunakan untuk  membuat  1  L  media  perlakuan  A  (tanpa BAP); B (0,5 mg/L); C (1,0 mg/L); D (1,5 mg/L); E  (2,0  mg/L)  dan  F  (3,0  mg/L)      adalah  0;  0,5; 1,0; 1,5; 2,0; dan 3,0 ml.
Penanaman. Penanaman  dilakukan  di dalam LAF ( Laminar Air Flow ) yang sebelumnya telah  disinari  UV  (ultraviolet)  selama  60  menit dan  permukaannya  disemprot  dengan  alkohol 90%.  Di  dalam  LAF  eksplan  hasil  sterilisasi dipotong  hingga  berukuran  0,5 – 1  cm  dan ditanam pada media sesuai dengan perlakuan.
Analisis  data. Rancangan  penelitian  yang digunakan  adalah  rancangan  acak  lengkap (RAL)  yang  terdiri  dari  enam  perlakuan konsentrasi  BAP  yaitu  A  (tanpa  BAP);  B  (0,5 mg/L);  C  (1,0  mg/L);  D  (1,5  mg/L);  E  (2,0 mg/L) dan F (3,0 mg/L yang diulang sebanyak tiga  kali.  Analisis  data  kuantitatif  dianalisis dengan Independent Sample  t-test taraf  5%  untuk menguji  signifikansi  perbedaan  rata-rata  antara perlakuan  tanpa  BAP  dan  yang  diberi penambahan  BAP  menggunakan software SPSS 22.0.  Parameter  pengamatan  yaitu:  waktu muncul  tunas,  jumlah  tunas,  tinggi  tanaman, dan jumlah daun.
___________________________________________

## Hasil dan Pembahasan
Waktu  Muncul  Tunas. Hasil  analisis  pada Gambar  1  menunjukkan  terdapat  pengaruh yang  signifikan  pada  perlakuan  E  (BAP  2,0 mg/L)  dibandingkan  dengan  kontrol  dalam menghambat  waktu  kemunculan  tunas.  Hal  ini
dapat terjadi karena terlalu tingginya konsentrasi  BAP  eksogen  bagi  eksplan  yang diduga  telah  memiliki  sitokinin  endogen.  Efek penambahan  BAP  sangat  bergantung  pada kondisi  fisiologis  eksplan,  dimana  sudah terdapat  hormon  endogen  yang  bisa  jadi menghambat  pertumbuhan  eksplan  itu  sendiri (Sofian et al ., 2018).
Pengaruh  ZPT  eksogen  sangat  bergantung pada  kandungan  hormon  endogen  tanaman sehingga  akan  sangat  bervariasi  pengaruhnya (Bhojwani and Razdan,  1996).  Hormon  endogen dalam  bentuk  auksin  dapat  menyebabkan penghambatan  pertumbuhan  aksilar  karena berperan  dalam  dominansi  apikal  (Satriawan et al .,  2021).  Ketika  konsentrasi  auksin  dan sitokinin  pada  jaringan  seimbang,  dapat menghasilkan kalus. Maka dari itu, penggunaan ZPT  harus  dengan  konsentrasi  yang  tepat sehingga tujuan penggunaannya dapat tercapai.
Konsentrasi BAP yang  tepat  dapat mempercepat waktu munculnya tunas. Penambahan  BAP  0,5;  1,0;  dan  1,5  mg/L berpotensi  mempercepat waktu  munculnya  tunas dibandingkan dengan kontrol. Menurut Soelaiman dan  Ernawati  (2013),  kemunculan  tunas  dapat dipercepat  dengan  penambahan  ZPT  sitokinin berupa  BAP  yang  menyebabkan  terjadinya proliferasi  tunas  dan  pembentukan  tunas  aksilar . Kondisi serupa terjadi pada penelitian Hidayati et al .  (2014),  yaitu  penambahan  BAP  1,0  mg/L mempercepat  waktu  muncul  tunas  aksilar, sedangkan penambahan BAP 2,0 mg/L memperlambat  waktu  muncul  tunas  pada  kultur jaringan jeruk siam ( Citrus nobilis Lour.).
Keterangan:  A=0  mg/L;  B=0,5  mg/L;  C=  1,0  mg/L; D= 1,5 mg/L; E= 2,0 mg/L; F= 3,0 mg/L. Nilai  rata-rata  perlakuan  yang  diikuti  oleh  notasi  * menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan dibandingkan kontrol (A) berdasarkan uji t pada taraf 5 %. Gambar 1. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap rata-rata waktu muncul tunas
Konsentrasi  BAP  yang  terlalu  tinggi menyebabkan  ketidakseimbangan  metabolisme dalam  jaringan  yang  bisa  jadi  memperlambat proliferasi  tunas.  Nowakowska et  al. (2022), peningkatan  sitokinin  pada  regenerasi  tunas meningkatkan  kandungan  hidrogen  peroksida yang  menjadi  berbahaya  karena  dapat  merusak elemen  sel  struktural  akibat  oksidasi  dan degradasi  yang  memicu  kematian  sel  sehingga memperlambat regenerasi tunas.
Jumlah  Tunas. Hasil  analisis  statistik menunjukkan  bahwa  penambahan  BAP  tidak memberikan pengaruh yang signifikan terhadap jumlah  tunas  dibandingkan  dengan  kontrol  pada 4  MST  maupun  8  MST  (Gambar  2).  Meski demikian, penambahan BAP 0,5; 1,0; dan 1,5 mg/L berpotensi menghasilkan jumlah tunas yang lebih banyak  dibanding  kontrol.  Peningkatan  jumlah tunas ini terjadi karena penambahan BAP mampu mempercepat pembelahan sel dan proliferasi tunas (Dwiyani,  2015).  Konsentrasi  BAP  yang  tepat dapat  memicu  beberapa  sel  perifer  atau  sel subepidermal  yang  ada  di  dekat  tunas aksilar/nodus kotiledon/kotiledon yang tertekan  menjadi  kompeten  secara  morfologis untuk memproduksi tunas (Paul et al ., 2000).
Keterangan:  A=0  mg/L;  B=0,5  mg/L;  C=  1,0  mg/L; D= 1,5 mg/L; E= 2,0 mg/L; F= 3,0 mg/L. Nilai  rata-rata  perlakuan  yang  diikuti  oleh  notasi  * menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan dibandingkan kontrol (A) berdasarkan uji t pada taraf 5 %.

## Gambar 2. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap
rata-rata jumlah tunas pada 4 dan 8 MST
Pada  konsentrasi  BAP  2,0  dan  3,0  mg/L jumlah  tunas  yang  dihasilkan  sama  dengan kontrol. Penggunaan  sitokinin  yang  terlalu  kuat/ eksesif  dapat  menyebabkan  pengaruh  yang merugikan pada tahapan mikropropagasi (Mayerni et al ., 2020). Konsentrasi BAP yang terlalu tinggi  menyebabkan  rasio  hormon  menjadi  tidak
sesuai  dan  mengakibatkan  retardansi  tunas sehingga  tidak  terjadinya  multiplikasi  tunas  atau tidak  terbentuknya  tunas  baru  (Sulaiman et  al ., 2020).
Jumlah  Daun. Gambar  3  menunjukkan jumlah  daun  dari  minggu  ke  4  dan  8  setelah tanam. Semua perlakuan memperlihatkan adanya penambahan  jumlah  daun  dari  4  MST  ke  8  MST. Penambahan  jumlah  daun  dapat  meningkatkan proses  fotosintesis  dan  menandakan  adanya pertumbuhan eksplan (Rineksane and Dewi, 2018). Hasil analisis menunjukkan adanya pengaruh  yang  signifikan  pada  perlakuan  E  (2,0 mg/L) dan F (BAP 3,0 mg/L) dalam mengurangi jumlah  daun  baik  pada  4  MST  ataupun  8  MST dibandingkan  dengan  kontrol.  Hal  ini  terjadi karena  konsentrasi  sitokinin  yang  terlalu  tinggi dapat  menghambat  komponen  pertumbuhan tunas, salah satunya jumlah daun. Menurut Sofian et al. (2018) aktivitas ZPT eksogen yang diberikan bergantung  pada  kondisi  kimia  eksplan  yang  di dalamnya  terkandung  berbagai  hormon  endogen yang bisa jadi menghambat pertumbuhan eksplan itu sendiri. Menurut Mukherjee et al. (2018) , akibat peningkatan konsentrasi hormon, respons eksplan pada kultur in vitro diketahui juga meningkat pada level tertentu dan selanjutnya menurun meskipun konsentrasi  dinaikan.  Hal  serupa  terjadi  pada penelitian kultur jaringan rami yang dilakukan Sut et  al. (2004),  dimana  terjadi  peningkatan  rata-rata jumlah daun dari perlakuan BAP 0,5 – 1,5 mg/L, dan penurunan pada perlakuan 2,0 mg/L.
Keterangan:  A=0  mg/L;  B=0,5  mg/L;  C=  1,0  mg/L; D= 1,5 mg/L; E= 2,0 mg/L; F= 3,0 mg/L.
Nilai rata-rata perlakuan yang diikuti oleh notasi * menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan dibandingkan  kontrol  (A)  berdasarkan  uji  t  pada taraf 5 %.
Gambar 3. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap rata-rata jumlah daun pada 4 dan 8 MST
Nuraini, A. et al. : Pengaruh konsentrasi Benzylaminopurine terhadap pertumbuhan eksplan tunas aksilar rami klon lokal Wonosobo secara in vitro
Penambahan 0,5 mg/L menghasilkan jumlah daun  terbanyak  pada  minggu  ke  4  dan  8, meskipun  tidak  secara  signifikan  meningkatkan jumlah  daun  jika  dibandingkan  dengan  kontrol. Hal  ini  sejalan  dengan  jumlah  tunas  pada perlakuan  B  yang  lebih  banyak  dari  kontrol (Gambar 4). Jumlah daun dapat dipengaruhi oleh banyaknya  jumlah  tunas.  Peningkatan  jumlah tunas  diikuti  peningkatan  jumah  daun,  sehingga semakin banyak jumlah tunas maka jumlah daun yang dihasilkan lebih banyak (Amelia et al ., 2020).
Gambar 4. Pertumbuhan eksplan setiap perlakuan pada 8 MST
Tinggi Plantlet . Hasil analisis  menunjukkan tidak  terdapat  pengaruh  yang  signifikan  dari penambahan  BAP  terhadap  tinggi plantlet dibandingkan kontrol pada 4 MST maupun 8 MST (Gambar  5).  Pemanjangan  batang  BAP  berperan dalam  pembelahan  sel,  akan  tetapi,  ketika dikombinasikan  dengan  adanya  sedikit  auksin, dapat juga menyebabkan terjadinya pemanjangan sel,  dan  salah  satu  efeknya  diekspresikan  dengan peningkatan tinggi tunas (Rustikawati et al ., 2021). Dibandingkan  dengan  kontrol,  perlakuan  B (BAP  0,5  mg/L)  berpotensi  meningkatkan  tinggi plantlet.  Tinggi plantlet pada  4  MST  dan  8  MST perlakuan B menunjukkan rata-rata tinggi  terbaik (Gambar 1). Penambahan BAP dengan konsentrasi yang  tepat  dapat  meningkatkan  tinggi plantlet karena  BAP  merangsang  pembelahan  sel  yang dilanjutkan dengan pembesaran dan pemanjangan sel yang distumalasi oleh auksin endogen (Karjadi dan  Buchory,  2007). Selama  tahap  proliferasi  sel, sitokinin  mengontrol  pembelahan  sel  dengan mengaktifkan transisi G1/S dan G2/M pada siklus sel  (Wu et  al. ,  2021).    Auksin  menstimulasi  faktor perenggang  dinding  sel  seperti  elastin  unuk
menstimulasi pemanjangan sel untuk melonggarkan dinding sel (Nazir et al ., 2022).
Semakin  tinggi  konsentrasi  sitokinin  yang ditambahkan  semakin  menurun  tinggi plantlet yang  dihasilkan.  Menurut  Noah et  al. (2021) tingginya sitokinin dapat menghalangi rangsangan auksin dalam pemanjangan sel.
Keterangan:  A=0  mg/L;  B=0,5  mg/L;  C=  1,0  mg/L; D= 1,5 mg/L; E= 2,0 mg/L; F= 3,0 mg/L. Nilai rata-rata perlakuan yang diikuti oleh notasi * menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan dibandingkan  kontrol  (A)  berdasarkan  uji  t  pada taraf 5 %.

## Gambar 5. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap rata-rata tinggi plantlet pada 4 dan 8 MST
Jumlah Akar. Gambar 6 menunjukkan akar tidak terbentuk  pada  perlakuan  dengan  penambahan BAP  1,5 – 3,0  mg/L,  sehingga  secara  signifikan menurunkan  jumlah  akar  dibandingkan  dengan kontrol  .  Jumlah  akar  yang  dihasilkan  perlakuan kontrol  menunjukkan  jumlah  terbanyak  diduga karena kandungan auksin endogen dalam eksplan cukup  tinggi.  Penambahan  BAP  menyebabkan penurunan jumlah akar karena sitokinin berperan sebagai inhibitor dalam pembentukan akar lateral den  menghalangi  efek  rangsangan  dari  auksin (Noah et  al .,  2021).  Menurut  Rustikawati et  al.
(2021) sitokinin mampu menstimulasi pertumbuhan  akar  dibawah  laju  optimumnya, tetapi  pada  BAP  dengan  konsentrasi  tinggi menyebabkan penghambatan pertumbuhan akar.
Sitokinin  seperti  Benzylaminopurine  (6- BAP)  menghambat  inisiasi  dan  perkembangan akar  adventif  dengan  menangkal  pengaruh auksin  (Alallaq et  al .,  2020;  Lakehal et  al .,  2020). Sitokinin  mendorong  tahap  pertama  dalam inisiasi akar adventif yaitu proliferasi sel,  tetapi menghambat pada tahap kedua yaitu reprogramming   sel   yang  mengarah  ke  spesi-
A (Kontrol) B (BAP 0,5 mg/L) C (BAP 1,0 mg/L) D (BAP 1,5 mg/L) E (BAP 2,0 mg/L) F (BAP 3,0 mg/L) A (Kontrol) B (BAP 0,5 mg/L) C (BAP 1,0 mg/L) D (BAP 1,5 mg/L) E (BAP 2,0 mg/L) F (BAP 3,0 mg/L)
fikasi sel founder akar adventif dari mikro-kalus yang telah terbentuk sebelumnya (Lakehal et al ., 2020).
Keterangan:  A=0  mg/L;  B=0,5  mg/L;  C=  1,0  mg/L; D= 1,5 mg/L; E= 2,0 mg/L; F= 3,0 mg/L. Nilai  rata-rata  perlakuan  yang  diikuti  oleh  notasi  * menunjukkan  adanya  perbedaan  yang  signifikan dibandingkan kontrol (A) berdasarkan uji t pada taraf 5 %.
Gambar 6. Pengaruh konsentrasi BAP terhadap rata-rata jumlah akar
___________________________________________

## Kesimpulan dan Saran
Berdasarkan  hasil  percobaan,  maka  dapat disimpulkan bahwa:
1. Penambahan  BAP  berpengaruh  terhadap pertumbuhan  tunas  aksilar  rami  klon  lokal wonosobo.
2. Konsentrasi  BAP  0,5  mg/L  menunjukkan pengaruh  terbaik  terhadap  pertumbuhan tunas  aksilar  dalam  meningkatkan  jumlah tunas,  jumlah  daun,  dan  tinggi  tanaman dibandingkan dengan kontrol dan perlakuan konsentrasi yang lebih tinggi.
Saran. Perlu dilakukan penelitian lain untuk mencari  konsentrasi  yang  lebih  efektif  dalam menginduksi tunas aksilar pada rami klon lokal Wonosobo dengan konsentrasi BAP dibawah 0,5 mg/L.  Selain  itu,  pengkajian  tentang  pengaruh panjang ruas dan jumlah nodus yang digunakan juga penting untuk melihat efektivitasnya dalam induksi tunas rami klon lokal Wonosobo.
___________________________________________

## Daftar Pustaka
Alallaq, S.,  A. Ranjan, F. Brunoni, O. Novák, A. Lakehal,  and  C.  Bellini.  2020.  Red  light controls  adventitious  root  regeneration  by
modulating  hormone  homeostasis  in Picea abies seedlings.  Frontiers  in  Plant  Science, 11(September): 1 – 14.
Amelia,  Z.R.,  Supriyanto,  and  A.S.  Wulandari. 2020.  Effect  of  6-BAP  application  on  shoot production of
Melaleuca alternifolia seedlings seedlings. IOP Conf. Series: Earth and  Environmental  Science.  Available online  at    https://doi.org/10.1088/1755- 1315/528/1/012063
Bhojwani,  S.S.  and  M.K.  Razdan.  1996.  Plant Tissue  Culture:  Theory  and  Practice,  a Revised  Edition.  Studies  in  Plant  Science (5). Available online at
https://doi.org/10.1016/S0928-
3420(96)80002-4
du Plessis, H.J., R.V. Nikolova, B.A. Egan, and R. Kleynhans.  2021.  Preliminary  study  on  in vitro shoot culture of Hibiscus coddii subsp. barnardii,  an  indigenous  South  African flowering  plant.  Ornamental  Horticulture,
27(3): 408 – 416.
Dwiyani,  R.  2015.  Kultur  Jaringan  Tanaman. Pelawa Sari.
Available online at https://doi.org/10.1017/CBO97811074153 24.004
Gati,  E.  1991.  Pengaruh  beberapa  zat  tumbuh sitokinin  (BAP,  kinetin,  dan  2-ip)  pada perbanyakan mikro tanaman rami. 10 – 11.
Habibie,  S.,  N.  Suhendra,  B.A.  Setiawan,  M. Hamzah,  N.  Aisah,  D.A.  Fitriani,  R. Tasomara,  and  M.  Anggaravidya.  2021. Prospect  of  ramie  fiber  development  in indonesia and manufacturing of ramie fiber textile-based  composites  for  industrial needs,  an  overview.  International  Journal of Composite Materials, 11(3): 43 – 53. Hanifah,  N.  dan  F.  Kartiasih.  2018.  Determinan impor serat kapas di Indonesia tahun 1975- 2014 (pendekatan Eerror correction mechanism).  Media  Statistika,  11(2):  119 – 134.
Hidayati,  N.,  W.  Lestasi,  dan  M.  Isda.  2014. Induksi  tunas  in  vitro  jeruk  siam  ( Citrus nobilis Lour.)  asal  kampar  dari  eksplan tunas  apeks  dan  nodus  in  vitro.  JOM FMIPA, 1(2).
Karjadi,  A.  dan  A.  Buchory.  2007.  Pengaruh NAA  dan  BAP  terhadap  pertumbuhan jaringan  meristem  bawang  putih  pada media b5. Jurnal Hortikultura, 17(3): 85148. Lakehal, A., A. Dob, Z. Rahneshan, O. Novák, S. Escamez,  S.  Alallaq,  M.  Strnad,  H. Tuominen,  and  C.  Bellini.  2020.  Ethylene
response  factor  115  integrates  jasmonate and  cytokinin  signaling  machineries  to repress
adventitious rooting
in Arabidopsis.  New  Phytologist,  228(5): 1611 – 1626.
Mukherjee, P.K., R. Mondal, S. Dutta, K. Meena, M.  Roy,  and  A.B.  Mandal.  2018.  In  vitro micropropagation  in Boehmeria  nivea to generate  safe  planting  materials  for  large- scale cultivation. Czech Journal of Genetics and Plant Breeding, 54(4): 183 – 189. Nazir,  U.,  Z.  Gul,  G.M.  Shah,  and  N.I.  Khan. 2022.  Interaction  effect  of  auxin  and cytokinin  on  in  vitro  shoot  regeneration and rooting of endangered medicinal plant Valeriana  jatamansi jones  through  tissue culture. American Journal of Plant Sciences, 13(02): 223 – 240.
Ngezahayo,  F.  and  B.  Liu.  2014.  Axillary  bud proliferation approach for plant biodiversity  conservation  and  restoration. International  Journal  of  Biodiversity,  2014:
1 – 9.
Noah,  A.M.,  R.  Casanova-Sáez,  R.E.M  Ango,  I. Antoniadi,  M.  Karady,  O.  Novák,  N. Niemenak,  and  K.  Ljung.  2021.  Dynamics of  auxin  and  cytokinin  metabolism  during early  root  and  hypocotyl  growth  in theobroma cacao. Plants, 10(5).
Nowakowska,  K.,  A. Pińkowska, E.  Siedlecka, and  A.  Pacholczak.  2022.  The  effect  of cytokinins on shoot proliferation, biochemical changes and genetic stability of
Rhododendron  ‘Kazimierz  Odnowiciel’  in the in vitro cultures. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 149(3): 675 – 684.
Nowakowska, M., Ž. Pavlovic, M. Nowicki, S.L. Boggess,  and  R.N.  Trigiano.  2020.  In  vitro propagation  of  an  endangered Helianthus verticillatus by  axillary  bud  proliferation marzena. Plants, 9(712): 1 – 15. Paul,  V.,  R.  Chandra,  S.  Khetarpal,  and  R. Polisetty. 2000. The effect of BAP induction period  on  shoot  differentiation  from seedling    explants  of  chickpea  ( Cicer arietinum L.).  Journal  Plant  Biology,  27(3): 235 – 239.
Pierik,  R.I.  1987.  In  Vitro  Culture  of  Higher Plants. Martinus Nijhoff Publisher.
Purwati, R.D. 2010. Strategi pengembangan rami ( Boehmeria  nivea Gaud.).  Perspektif,  9(2): 106 – 118.
Rineksane,  I.A.  and  S.S.  Dewi.  2018.  The combination  of  rice  water  and  bap enhances the multiplication
of Grammatophyllum speciosum. Planta Tropika: Journal of Agro Science, 6(2): 92 – 99. Rustikawati,  R.,  C.  Herison,  E.  Inoriah,  and  V. Dwisari.  2021.  Effect  of  BAP  (6-Benzyl Aminopurine)  on  in  vitro  shoot  growth  of curcumas. Agritropica, 4(1): 82 – 92.
Satriawan,  D.,  S.  Nurliana,  and  T.  Pujiyanti. 2021.    Effectiveness  of  BAP  (6-Benzyl Amino  Purine)  for  buds  induction  of nutmeg  ( Myristica  fragrans Houtt.)  . Proceedings  of  the  3rd  KOBI  Congress, International  and  National  Conferences (KOBICINC  2020),  14(Kobicinc  2020):  12 –
15.
Available online at
https://doi.org/10.2991/absr.k.210621.003 Soelaiman,  V.  dan  A.  Ernawati.  2013. Pertumbuhan  dan  perkembangan  cabai keriting  ( Capsicum  annuum L.)  secara  in vitro  pada  beberapa  konsentrasi  BAP  dan IAA. Buletin Agrohorti, 1(1): 62.
Sofian,  A.A.,  E.  Prihastanti,  S.  Widodo,  and  A. Suedy.  2018.  Effect  of  IBA  and  BAP  on shoot  growth  of  tawangmangu  tangerine ( Citrus  reticulate )  by  in-vitro.  Biosaintifika, 10(2): 379 – 387. Sulaiman,  S.,  M.A.  Yusuf,  and  A.  Awal.  2020. Effect of plant growth regulators on in vitro culture  of  pineapple  ( Ananas  comosis L. Merr)  MID2  variety.  Food  Research,  4(4): 110 – 114.
Sut,  D.,  P.  Talukdar,  and  S.  Singh.  2004.  Micro- propagation  of  ramie  ( Boehmeria  nivea (L) Gaud)  through  shoot-tip  and  nodal segment  culture.  Indian  Journal  of Agricultural Research, 38(2): 131 – 134. Vidyagina,  E.O.,  N.N.  Kharchenko,  and  A.
Shestibratov. 2021. Efficient cryopreservation  of  populus  tremula  by  in vitro-grown  axillary  buds  and  genetic stability of recovered plants. Plants, 10(77).
Wicaksono,  I.A.,  I.  Windani,  and  E.  Erny.  2021. Prioritas strategi pengembangan serat rami ( Boehmeria  nivea proper)  jenis  ina  grass  di kabupaten  Wonosobo.  Agroland,  28(2):
197 – 203. Wu,  W.,  K.  Du,  and  X.  Kang.  2021.  The  diverse roles  of  cytokinins  in  regulating  leaf development. Horticulture Research,
8(118).