## PENGEMBANGAN PROSEDUR ANALISIS TOTAL VOLATIL BASES DENGAN MENGGUNAKAN INDIKATOR ALAMI

## DEVELOPMENT OF ANALYSIS PROCEDURE FOR TOTAL VOLATILE BASE USING NATURAL INDICATORS
Diterima tanggal 8 Agustus 2017, Disetujui tanggal 6 Oktober 2017 Ahmad Daud 1 , Sahriawati 1 , Suriati 1
1 Jurusan Teknologi Pengolahan Hasil Perikanan Politeknik Pertanian Negeri Pangkep
E-mail : sahriawati@gmail.com

## ABSTRAK
Berbagai  upaya  telah  dilakukan  untuk  menemukan  metode  pengukuran  tingkat  kesegaran  ikan yang cepat  dan  dapat  diandalkan.  Berbagai  metode  telah digunakan  untuk mengukur  perubahan postmortem  pada  kualitas  sensori,  kimia  dan mikrobiologi  ikan.  Salah  satu metode  analisis  yang menggunakan  indikator  yaitu  analisis Total  Volatil  Base  Nitrogen  (TVB-N) ,  sebagai  salah  satu analisis  untuk  menguji  kemunduran  mutu  ikan.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengkaji pemanfaatan  ekstrak  secang,  ekstrak  daun  jati,  ekstrak  kulit  buah  naga  sebagai  indikator  alami dalam  analisis  TVB-N.  Penelitian  ini  bersifat  eksperimental,  dengan  subjek    penelitian  adalah indikator  alami  ;  ekstrak  kayu  secang,  ekstrak  daun  jati,  ekstrak  kulit  buah  naga.  Objek  dalam penelitian ini adalah titik akhir titrasi pada analisa TVB, ketepatan dan kecermatan penggunaannya dalam  analisa  TVB-N.    Hasil  penelitian  menunjukkan  warna  titik  akhir  titrasi  dengan  indikator secang, kulit buah naga, ekstrak daun jati berturut-turut berwarna: kuning, tidak berwarna,  merah tua. Kombinasi perlakuan filtrat sampel di tambah indikator secang dan larutan penampung asam borat  3%  ditambah  indikator  tashiro  merupakan  perlakuan  yang  dapat  dimanfaatkan  sebagai alternatif penggunaan indikator alami pada analisa TVB-N, dengan volume titrasi rata-rata 5,76 ml, titik  akhir  titrasi  berwarna  kuning  dan  kadar  TVB-N  sebesar  31,12  mg%N.  Standar  deviasi  dari perlakuan  tersebut  sebesar  0,053  sehingga  perlakuan  tersebut  cermat  sebagai  indikator  dalam analisa TVB-N.
Kata  Kunci:  Total  Volatil  Base,  indikator  alami,  ekstrak  secang,  ekstrak  daun  jati,  ekstrak kulit buah naga.

## ABSTRACT
Much attention has been given to find a rapid and reliable method of fish freshness assessment. A variety  of  methods  have  been  used  to  measure  the  postmortem  changes  in  sensory  quality, chemistry and microbiology. One analysis to assess fish quality by using indicators is total volatile base  nitrogen  (TVB-N).    This  study  aimed  to  examine  the  utilization  of  sappan  wood  ( Biancaea sappan ) extract, teak leaf extract, dragon fruit skin extract as a natural indicator in TVB-N analysis. This  study  was  experimental  study  which  subjected  to  natural  indicator  such  as  sappan  wood extract,  teak  leaf  extract,  dragon  fruit  skin  extracts.  The  objective  of  this  study  was  to  obtain  the endpoint of the titration on TVB analysis, the precision and accuracy of TVB-N analysis. The result of  this  study  showed  that  the  color  of  end  point  of  titration  with  natural  indicator  was  yellow, colorless  to  dark  red.  The  combination  treatment  filtrated  sample  added  with  sappan  wood indicator,  3%  of  boric  acid  and  tashiro  indicator  can  be  utilized  as  an  alternative  for  natural indicators on TVB analysis, with an average titration volume of 5.76 ml, a yellow titration point end and a TVB level of 31.12 mg% N. The standard deviation of treatment was 0.053. It suggested that treatment was accurate as an indicator on TVB-N analysis.
Keywords: Total Volatile Base, natural indicator, sappan wood extract, teak leaf extract, dragon fruit skin extract.

## PENDAHULUAN
Kemunduran mutu ikan disebabkan oleh aksi  enzimatis  dan  aksi  bakteri.  Kedua  aksi  ini menguraikan  komponen  penyusun  jaringan tubuh  ikan  sehingga  menghasilkan  perubahan fisik  seperti  daging  ikan  menjadi  lunak  dan perubahan  kimia  yang  menghasilkan  senyawa mudah menguap dan berbau busuk (Hadiwiyoto,  1993).  Senyawa  yang  mudah menguap  ini  memberi  kesan  daging  ikan  telah menjadi  busuk.  Oleh  karena  itu,  senyawa- senyawa ini dipakai sebagai indeks kemunduran mutu ikan. Kadar senyawa mudah menguap ini dapat ditentukan secara laboratoris  yang  disebut  “Penentuan  Kadar TVB- N”  (Suwetja,  1993  dalam  Laismina et  al ., 2014).  Penentuan  kadar  TVB-N  merupakan metode  uji  kesegaran  bakteriologis  yang berkaitan  dengan  pengujian  organoleptik  dan penentuan pH. Semakin besar nilai kadar TVB- N  maka  semakin  tinggi  pula  nilai  pH  nya. Kondisi  tersebut  berbanding  terbalik  dengan penentuan  mutu  organoleptik  yang  semakin kecil  derajat  penerimaannya  oleh  panelis (Laismina et al ., 2014).
Kadar  TVB  digunakan  untuk  mengukur tingkat  kesegaran  ikan  dan  sebagai  batasan yang  layak  untuk  dikonsumsi.  Ikan  dinyatakan telah  busuk  ketika  memiliki  kadar  TVB  >30 mgN/100 gram, sedangkan batas nilai TVB ikan air  tawar  yang masih  dapat  diterima  ialah  18 – 25  mgN/100  g.  Hasil  penelitian  Nurjanah et al. (2004)  menyatakan  bahwa  perolehan  TVB pada  tiap  tahap,  yaitu  18,67 –  20  mgN/100  g (pre  rigor)  dan  20 –  24  mgN/100  g  (rigor mortis).  Tingkat  kebusukan  ikan  ini  juga  bisa dideteksi  dengan  penilaian  secara  sensori. Pada  ikan  yang  dibekukan,  hasil  uji  TVB  nya tidak  selalu  konsisten  karena  hilangnya  amina volatile  dari  ikan  yang  disimpan  dalam  es. Keragaman  TVB  berasal  dari  variasi  biologis dalam  kandungan  prekursornya.  Uji  TVB  ini diterapkan pada produk ikan basah, ikan kering dan  ikan  asap,  tetapi  sedikit  diterapkan  pada ikan  beku  (Ilyas,  1988).  Pengujian  kadar  TVB selama ini menggunakan indikator kimiawi yang harganya  relatif  mahal.  Penggunaan  indikator yang diekstrak dari bahan alami pada pengujian TVB belum banyak dikembangkan.
Indikator  alami  adalah  indikator  yang berasal dari bahan alami seperti ekstrak bunga berwarna.  Indikator  alami  dapat  dibuat  dari bagian  tanaman  yang  menghasilkan  warna. Setiap  tanaman  dapat  digunakan  sebagai sumber  zat  warna  alam  karena  mengandung pigmen, baik yang dibuat dari daun, bunga,buah dan batang. Berbagai jenis tumbuhan  yang  telah  dimanfaatkan  menjadi indikator  alami  diantaranya  adalah  bunga sepatu,  bougenvil,  kunyit,  rosella,  dan  kubus ungu  (Cita,  2015).  Beberapa  ekstrak  tanaman yang berpotensi untuk dijadikan indikator alami antara  lain  kayu  secang,  daun  jati  muda,  dan kulit buah naga.
Ekstrak  kayu  secang  dalam  pelarut etanol  70%  (berwarna  merah)  ditambahkan pada  larutan  buffer  pH  3,8 –  6,2  menjadi berwarna  kuning  lemah  (jernih),  pH  7,0 –  8,6 menjadi berwarna merah muda, pada pH 8,6 – 9,4  berwarna  orange,  dan  pada  pH  10,9 –  12 larutan  berwarna  merah  muda.  Warna  larutan ekstrak  secang  dalam  pelarut  alkohol  cukup tajam, lebih stabil (tidak mudah berubah warna) dibandingkan  dengan  ekstrak  dalam  aquades. Berdasarkan hasil pengamatan terjadi perubahan warna pada kondisi asam ke kondisi basa,  sehingga  disimpulkan  bahwa  ekstrak kayu  secang  dalam  pelarut  etanol  mempunyai dua  trayek  pH  yaitu  6,2 –  7,0  (orange-  merah muda)  dan  7,8 –  8,6  (orange  –  merah  muda) (Regina, 2012).
Daun  jati  muda  memiliki  kandungan pigmen  alami  yang  terdiri  dari  pheophipti n,  β- karoten,  pelargonidin  3-glukosida,  pelargonidin 3,7-diglukosida,  klorofil  dan  dua  pigmen  lain yang belum diidentifikasi Pelargonidin merupakan golongan pigmen antosianidin, yaitu aglikon antosianin yang terbentuk bila antosianin dihidrolisis dengan asam. Kandungan  ini  berfungsi  sebagai  pembentuk warna  (pemberi  pigmen)  yang  menyebabkan ekstrak  daun  jati  berwarna  merah  darah, pigmen  tersebut  mengalami  perubahan  warna pada  perubahan  keasamannya  (Ati,  2006). Perubahan  warna  indikator  ekstrak  pekat  daun jati  memberikan  trayek  pH  dari  pH  7  ke  pH  8, terjadi  pada  tepat  peralihan  kondisi  asam  ke basa (Yosi, 2013).

## Ahmad  Daud,  dkk.,  Pengembangan  Prosedur  Analisis  Total  Volatil  Bases  dengan Menggunakan Indikator Alami
Ekstrak kulit buah naga dapat digunakan sebagai indikator asam basa dengan perubahan  warna  dari  merah  muda  menjadi kuning  pada  titrasi  asam  kuat  dan  basa  kuat. Dengan  waktu  optimum  untuk  memperoleh ekstrak  kulit  buah  naga  pada  perendaman selama  24 jam  dalam  etanol  96%  (Army et  al ., 2016). Penelitian ini mengkaji tentang penggunaan  indikator  alami  dari  ekstrak  kayu secang,  daun  jati  muda,  dan  kulit  buah  naga pada analisa TVB.

## TUJUAN PENELITIAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keakuratan dan kecermatan indikator  alami  dalam  penggunaannya  untuk analisa TVB.

## BAHAN DAN METODE Alat dan Bahan
Alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini adalah  blender,  evaporator,    toples  bertutup, neraca  analitik,  gelas  ukur,  tabung  reaksi,  rak tabung,  pH  meter,  homogenizer,  tabung destilasi, heating mantel, dan beberapa peralatan gelas lainnya.
Bahan  yang  digunakan  dalam  penelitian ini  adalah  kayu  secang,  pucuk  daun  jati,  kulit buah  naga,  etanol  96%,  HCl,  NaOH,  Aquades, asam  perklorat  9%,  indikator  PP,  indikator tashiro, H 3 BO 3 3%, sampel analisa berupa ikan cakalang.

## Prosedur Penelitian Ekstraksi Indikator Alami
Pembuatan  ekstrak  indikator  alami dilakukan  seperti  prosedur  ekstraksi  pada  kulit buah  naga  yang  diterapkan  oleh  Army  (2016). Ketiga  bahan  dihaluskan  kemudian  masing- masing  ditimbang  sebanyak  100  gram  dengan menggunakan  neraca  analitik.  Menambahkan pelarut etanol 96% dengan perbandingan (1:2), kemudian  dimaserasi  selama  24  jam  untuk memperoleh  ekstrak.  Hasil  ekstrak  disaring dengan  kertas  saring.  Fraksi  etanol  yang diperoleh  dipekatkan  dengan rotary  vacuum evaporator hingga  diperoleh  ekstrak  kental. Filtrat  dituang  ke  dalam  botol  bertutup  dan disimpan  dalam  lemari  pendingin  hingga  siap digunakan.  Rendemen  dihitung  berdasarkan persamaan sebagai berikut:
Massa bahan sebelum ekstraksi (gram) Rendemen %       =                                                                        x 100% Massa hasil ekstraksi (gram)                                     (1)

## Uji Warna Indikator Pada pH 1 sampai pH 14
Untuk    membuktikan  perubahan  warna pada indikator alami maka diperlukan larutan uji dengan pH 1- 14. Larutan uji ini dibuat dari dua larutan  yaitu  HCl  dan  NaOH.  Larutan  dengan pH  1 –  6  dibuat  dari  larutan  HCl,  pH  7 di  buat dari aquadest, dan pH 8 – 14 dibuat dari larutan NaOH.  Pembuatan  larutan    pada  masing- masing  pH  dapat  dilakukan  berdasarkan ketepatan secara teoritis seperti yang dilakukan oleh Cita (2015).
Untuk uji warna langkah kerjanya sebagai berikut: Bersihkan  pelat tetes kemudian keringkan, teteskan larutan uji pH 1 sebanyak 7 tetes pada satu lubang pelat tetes, lakukan hal yang  sama  pada  masing-masing  larutan  uji sampai  pH  14,  teteskan  salah  larutan  indikator alami  pada  masing-masing  larutan  uji,  lakukan hal  yang  sama  pada  indikator  lainnya, bandingkan warna yang terjadi dengan menggunakan  indikator  PP  dan  indikator tashiro, sehingga memudahkan untuk penentuan titik akhir titrasi.
Analisis Kadar Total Volatil Base (TVB) (SNI 2354.8:2009)
Metode  analisis  kadar  TVB  berdasarkan pada SNI 2354.8:2009, menggunakan indikator PP dan Indikator Tashiro, penggunaan indikator tersebut  merupakan  kontrol  dalam  penelitian ini,  sebagai  perlakuan  penelitian,  ke  dua
indikator tersebut diganti mengunakan indikator alami  (indikator  ekstrak  secang,  ekstrak  daun jati,  dan  ekstrak  kulit  buah  naga),  perubahan warna  pada  metode  analisa  pada  tahap destilasi  dan  titik  akhir  titrasi  disesuaikan dengan  penunjukan  warna  masing-masing indikator  pada  pH  yang  telah  ditentukan  dan
Agrokompleks, Volume 17, Nomor 1 Januari 2018                                  ISSN:  1412-811X
disesuaikan  dengan  penunjukan  indikator  PP dan  indikator  tashiro  pada kondisi  pH  tersebut. Adapun  prosedur  kerja  analisa  kadar  TVB terbagi atas 3 tahap sebagai berikut:

## Tahap Ekstraksi
Pertama-tama sampel ditimbang sebanyak  10  gram  dengan  gelas  piala,  lalu ditambahkan 90 ml asam perklorat (PCA) 6% . Sampel dihomogenkan menggunakan homogenizer selama  2  menit.  Selanjutnya sampel  disaring  menggunakan  kertas  saring kasar  dan  menghasilkan  filtrat  yang  akan digunakan pada tahap selanjutnya.

## Tahap Destilasi
Sebanyak 50 ml sampel filtrat dimasukkan  ke  tabung  destilasi,  kemudian ditambahkan beberapa tetes indikator fenolftalein dan  ditambahkan  beberapa  tetes silikon  anti foaming. Tabung  destilasi  dipasang
pada  destilator  dan  ditambahkan  10  ml  NaOH 20% sampai basa yang ditandai dengan warna merah. Kemudian disiapkan penampung erlenmeyer yang berisi 100 ml H 3 BO 3 3% dan3- 5  tetes  indikator  tashiro  yang  berwarna  ungu. Setelah  itu  sampel  didestilasi  uap  kurang  lebih 10  menit  sampai  memperoleh  destilat  100  ml, sehingga  volume  akhir  mencapai  kurang  lebih 200  ml  larutan  berwarna  hijau.  Larutan  blanko disiapkan  dengan  mengganti  ekstrak  sampel dengan  50  ml  asam  perklorat  (PCA)  6%  dan dikerjakan  dengan  proses  yang  sama  dengan sampel.

## Tahap Titrasi
Larutan  destilat  sampel  dan  blanko  kemudian dititrasi  dengan  menggunakan  larutan  HCl 0,02N.  Titik  akhir  titrasi  ditandai  dengan terbentuknya warna ungu kembali. Perhitungan TVB  dapat  ditentukan  dengan  rumus  sebagai berikut:
(Vc – Vb) x N HCl x 14,007 x fp x 100) Kadar TVB (mgN/100 g)  = Bobot sampel (gr)                                 (2)

## Rancangan Penelitian
Penelitian  ini  bersifat  eksperimental, subjek  dalam  penelitian  ini  adalah  indikator alami  ;  ekstrak  kayu  secang,  ekstrak  daun  jati, ekstrak kulit buah naga. Objek dalam penelitian
ini adalah perubahan warna dan titik akhir titrasi masing-masing  indikator  pada  analisa  TVB, ketepatan  dan  kecermatan  penggunaannya dalam analisa TVB.
Tabel 1. Rancangan Penelitian Penggunaan Beberapa Indikator Alami
Filtrat + Indikator Asam Borat (H 3 BO 3 ) 3% + Indikator Tashiro (A1) Ekstrak secang (A2) Ekstrak daun jati (A3) Ekstrak kulit buah naga (A4) PP  (F1) F1A1 F1A2 F1A3 F1A4 Ekstrak secang (F2) F2A1 F2A2 F2A3 F3A4 Ekstrak daun jati (F3) F3A1 F3A2 F3A3 F3A4 Ekstrak kulit buah naga  (F4) F4A1 F4A2 F4A3 F4A4

## Analisa Data
Untuk  mengetahui  kecermatan  hasil pengukuran  dihitung  dengan  standar  deviasi (SD).  Standar  Deviasi  (SD),  yaitu  akar  jumlah kuadrat deviasi masing-masing hasil penetapan terhadap mean dibagi dengan derajat kebebasannya.  Keakuratan  suatu  metode diketahui  dari  galat  relatif  (%)  bila  data  hasil
pengukuran dengan metode tersebut dibandingkan  dengan  data  hasil  pengukuran dengan  metode  yang  dianggap  benar.  Pada penelitian  ini    metode  dengan  menggunakan indikator  PP  pada  filtrat  dan  indikator  tashiro pada  asam  borat  3%  dianggap  benar, dibandingkan  dengan  penggunaan  indikator alami.

## Ahmad  Daud,  dkk.,  Pengembangan  Prosedur  Analisis  Total  Volatil  Bases  dengan Menggunakan Indikator Alami

## HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil Ekstraksi Indikator Alami
Rendemen  ekstrak  etanol  ke  tiga  jenis indikator  dipengaruhi  oleh  pelarutnya.  Masing- masing  ke  tiga  jenis  indikator  diekstraksi
dengan metode maserasi menggunakan pelarut etanol  96%    dengan  perbandingan  bahan  dan pelarut  (1:2)  dimeserasi  selama  24  jam, memberikan  rendemen  hasil  ekstraksi  yang berbeda berdasarkan tabel 2 di bawah ini.
Tabel 2. Rendemen ektrak etanol indikator alami Jenis indikator alami Rendemen (%) Daun jati 8,7 Kayu secang 3,5 Kulit buah naga 0,58
Perbedaan  rendemen  ekstrak  etanol indikator  alami  disebabkan  oleh  jenis  pelarut, ekstrak  etanol  kulit  buah  naga  memiliki rendemen paling rendah menurut Saati  (2010), kadar  antosianin  pada  kulit  buah  naga  merah dengan  masa  penyimpanan  4  hari  dengan pelarut  air  dan  asam  sitrat  dengan  kadar  1,1 mg/100 ml, sementara Pratama (2013), mengemukakan  bahwa  perendaman  24  jam dengan  etanol  merupakan  waktu  optimum
untuk  ekstraksi  antisianin  daun  jati,  tingginya rendemen daun jati karena berada pada kondisi optimumnya.  Begitu  pula  dengan  ekstrak  kayu secang  jenis  pelarut  yang  sesuai  untuk ekstraksi  yaitu  aquades  dan  etanol,  ekstrak kayu  secang  dengan  etanol  relatif  stabil  dalam penyimpanan  selama  8  hari  dibanding  ekstrak kayu  secang dalam pelarut  air  (Padmaningrum et  al,  2012).  Indikator  alami  dalam  etanol  96% dapat dilihat pada Gambar 1  di bawah ini.
Gambar 1. Indikator alami kulit buah naga, secang dan daun jati

## Trayek pH Ekstrak Etanol Indikator Alami
Trayek pH diperoleh dari data pengamatan  perubahan  warna  dalam  berbagai variasi  pH.  Trayek  pH  adalah  pH  yang menyatakan perubahan warna menyolok. Ekstrak  indikator  alami  ditambahkan  pada larutan  buffer  pH  1-14.  Ekstrak  kayu  secang dalam  pelarut  etanol  96%  (berwarna  merah) ditambahkan  pada  larutan  buffer  pH  1-6,5 berwarna  kuning  lemah,  pH  7-7,5  berwarna merah, pH 8-11,5 berwarna orange dan pH 12- 14  merah  tua.  Sehingga  trayek  pH  ada  dua yaitu pH 6,5-7 (kuning – merah ) dan pH 7,5 – 11,5 (merah muda - orange).
Uji  trayek  pH  ekstrak  daun  jati  pH  1-14 menghasilkan pH 7-8 sebagai trayek pH (merah pekat –  merah).  Hal  ini  sesuai  penelitian  yang dilakukan oleh Pratama (2013).
Uji  trayek  pH  ekstrak  etanol  kulit  buah naga  tidak  memberikan  trayek  pH  karena  dari pH  1  sampai  14    memberikan  warna  kuning yang  sangat  lemah.  Menurut  Mancheix et  al. (1990)  dan  Geisman  (1969),  intensitas  warna dipengaruhi  oleh  keadaan  pigmen  dan  yang paling berpengaruh adalah konsentrasi, pH dan suhu.  Tidak  adanya  perubahan  warna  pada ekstrak kulit buah naga kemungkinan disebabkan oleh masa simpan buah naga yang sudah  lebih  dari  empat  hari,  seperti  yang

## Agrokompleks, Volume 17, Nomor 1 Januari 2018                                  ISSN:  1412-811X
dikemukakan  oleh  Saati  (2010),  bahwa  titik maksimal  absorbansi  buah  naga  merah  terjadi pada  masa  simpan  4  hari  karena  buah  telah mengalami  proses  pematangan  (maturation) dan  pemasakan  (ripening)  maksimal  selama  4 hari  dan  kemudian  akan  terjadi  penurunan kondisi  yang  diikuti  dengan  kerusakan  pada masa  penuaan  (senencence)  yaitu  selama penyimpanan  8  hari.  Semakin  tinggi  nilai absorbansi  semakin  tinggi  kadar  antosianin. Selain  hal  tersebut  tidak  terjadinya  perubahan warna pada ekstrak etanol kulit buah naga juga kemungkinan  disebabkan  oleh  asam  askorbat yang  merupakan  senyawa  yang  lazim  terdapat pada  buah-buahan.  Keberadaannya  mampu meningkatkan  kandungan  nutrisi  pada  buah akan tetapi juga dapat mempengaruhi stabilitas dari  pigmen  warna  antosianin,  menurut  Rein
(2005),  degradasi  antosianin  akan  menjadi lebih cepat dengan keberadaan asam askorbat.

## Aplikasi Indikator Alami Pada Analisis TVB
Pada  dasarnya  analisis  TVB  setelah proses  destilasi  dilakukan  titrimetri  dengan prinsip  asam  basa,  yaitu  kelebihan  basa  dari hasil destilasi dihitung berdasarkan jumlah hasil titrasi  dengan  menggunakan  HCl.  Adapun warna  titik  akhir  titrasi  dari  masing-masing indikator  terlihat  seperti  Gambar  2  yaitu indikator  penambahan  indikator  PP  pada  filtrat dan  indikator  tashiro  pada  penampung  destilat sebagai  kontrol  memberikan  warna  abu-abu netral,  penggunanaan  indikator  secang  titik akhir  titrasi  berwarna  sindur,  indikator  daun jati titk  akhir  titrasi  berwarna  merah,  sementara indikator dari kulit buah naga tidak berwarna.
Gambar 2. Titik akhir titrasi indikator alami
Hasil  titrasi  masing-masing  perlakuan  diperoleh  volume  titrasi  HCl  masing-masing perlakuan seperti disajikan pada tabel 3.
Tabel 3. Volume titrasi HCl
No Volume titrasi HCl (ml) F1A1 F1A2 F1A3 F2A1 F2A2 F2A3 F3A1 F3A2 F3A3 1 5,6 9,4 11,4 5,8 11,2 11,8 3,2 6,6 9,3 2 5,6 9,4 11,3 5,7 11,1 11,8 3,2 6,6 9,4 3 5,7 9,5 11,3 5,7 11,1 11,7 3,2 6,6 9,4 4 5,7 9,5 11,2 5,7 11,2 11,7 3,2 6,5 9,5 5 5,6 9,5 11,3 5,7 11,2 11,8 3,1 6,7 9,5 6 5,6 9,6 11,3 5,8 11,2 11,6 3,2 6,5 9,4 7 5,6 9,6 11,2 5,8 11,3 11,6 3,3 6,5 9,3 8 5,6 9,6 11,3 5,8 11,3 11,7 3,3 6,6 9,5 9 5,7 9,6 11,1 5,8 11,3 11,7 3,1 6,6 9,5 RERATA 5,63 9,52 11,27 5,76 11,21 11,7 3,2 6,58 9,42
Ahmad  Daud,  dkk.,  Pengembangan  Prosedur  Analisis  Total  Volatil  Bases  dengan Menggunakan Indikator Alami
SD 0,050 0,083 0,087 0,053 0,078 0,078 0,071 0,067 0,083 GALAT RELATIF 66,67 73,21 5,41 56,34 56,35 41,42 33,33 66,67
Berdasarkan hasil analisis untuk mengetahui  ketepatan  dan  keakuratan  hasil pengukuran  dihitung  dengan  standar  deviasi (SD), yaitu akar jumlah kuadrat deviasi masing- masing  hasil penetapan terhadap mean dibagi dengan  derajat  kebebasannya  (degree  of freedom)  (Mursyidin  &  Rohman,  2008).  Nilai standar  deviasi  volume  titrasi  yang  paling mendekati  kontrol  0,050  yaitu  standar  deviasi dengan  perlakuan  F2A1  sebesar  0,053, diperlukan  volume  titrasi  sebanyak  5,76  ml untuk  mencapai  titik  ekuivalen  yaitu  warna merah, sehingga disimpulkan bahwa perlakuan
F2A1  cermat  sebagai  indikator  dalam  analisis TVB  meskipun  kecermatannya  lebih  rendah dari  indikator  PP-tashiro  (0,050).  Keakuratan suatu metode diketahui dari galat relatif (%) bila data hasil pengukuran dengan metode tersebut dibandingkan  dengan  data  hasil  pengukuran dengan  metode  yang  dianggap  benar.  Pada metode  ini  penggunaan  indikator  PP-tashiro (F1A1)  dianggap  benar  dibandingkan  dengan penggunaan indikator alami . Berdasarkan nilai galat  relatif  F2A1  dianggap  besar  (5,21)  maka disimpulkan  bahwa  perlakuan  F2A1  memiliki keakuratan rendah.
Tabel 4. Kadar TVB Berat contoh (gr) KADAR TVB (mg%N) F1A1 F1A2 F1A3 F2A1 F2A2 F2A3 F3A1 F3A2 F3A3 10 30,26 51,55 62,75 31,38 61,63 64,99 16,81 35,86 50,99 10 30,26 51,55 62,19 30,82 61,07 64,99 16,81 35,86 51,55 10 30,82 52,11 62,19 30,82 61,07 64,43 16,81 35,86 51,55 10 30,82 52,11 61,63 30,82 61,63 64,43 16,81 35,30 52,11 10 30,26 52,11 62,19 30,82 61,63 64,99 16,25 36,42 52,11 10 30,26 52,67 62,19 31,38 61,63 63,87 16,81 35,30 51,55 10 30,26 52,67 61,63 31,38 62,19 63,87 17,37 35,30 50,99 10 30,26 52,67 62,19 31,38 62,19 64,43 17,37 35,86 52,11 10 30,82 52,67 61,07 31,38 62,19 64,43 16,25 35,86 52,11 RERATA 30,44 52,23 62,00 31,13 61,69 64,49 16,81 35,73 51,67 SD 0,28 0,47 0,49 0,30 0,44 0,44 0,40 0,37 0,47 GALAT RELATIF 66,67 73,21 5,41 56,35 56,35 41,42 33,33 66,67
Nilai  standar  deviasi  kadar  TVB  yang paling  mendekati  kontrol  0,28  yaitu  standar deviasi  dengan  perlakuan  F2A1  sebesar  0,30, sehingga  disimpulkan  bahwa  perlakuan  F2A1 cermat  sebagai  indikator  dalam  analisis  TVB meskipun  kecermatannya  lebih  rendah  dari indikator  PP-tashiro  (0,28).  Berdasarkan  nilai galat  relatif  F2A1  dianggap  besar  (5,41)  maka disimpulkan  bahwa  perlakuan  F2A1  memiliki keakuratan  rendah.  Volume  titrasi  berbanding lurus dengan kadar TVB.

## KESIMPULAN
Warna  titik  akhir  titrasi  dengan  indikator secang,  kulit  buah  naga,  ekstrak  daun  jati berturut-turut berwarna: sindur, tidak berwarna, merah  tua.  Kombinasi  perlakuan  F2A1  (filtrat sampel di  tambah indikator secang dan larutan penampung asam  borat  3%  ditambah  indikator tashiro)  merupakan  perlakuan  yang  dapat dimanfaatkan  sebagai  alternatif  penggunaan indikator alami pada analisa TVB
Agrokompleks, Volume 17, Nomor 1 Januari 2018                                  ISSN:  1412-811X

## DAFTAR PUSTAKA
Army,  Y.  Dan  Korry,  N.  2016. Pembuatan Indikator  Bahan  Alami  Dari  Ekstrak  Kulit Buah  Naga  (Hylocereus  polhyrhizus) Sebagai  Indikator  Alternatif  Asam  Basa Berdasarkan  Variasi  Waktu Perendaman . Jurnal  Kesehatan  Bakti  Tunas  Husada. Vol.16 No.1.
Ati, N.H., Puji, R., Soenarto, N. Dan Leenawati, L. 2016. The Composition and the content of  Pigment  Some  Dyeing  Plant  for  Ikat Weaving  in  Timoresse  Regency ,  Eas Nusa  Tenggara.  Indo.  J.  Chem.,  6  (3), 325 – 331. Tersedia di http:// pdm_mipa.ugm.ac.id/ojs/index.php/ijc/arti cle/view/327 [Diakses 14-09-2012].
Aurand,  L.W.,  Eoods,  A.E.  dan  Wells,  M.R. 1987. Food  Composition  and  Analysis .
The  Avi  Published  by  Van  Nostrand Reinhold Co. New York.
BSN  2009.  SNI  2354.8:  2009. Analisa  Kadar
Total Volatile Base (TVB) . Badan
Standardisasi Nasional Cita,  I.  2015. Pembuatan  Indikator  Asam  Basa Karamunting .  Jurnal  Kaunia  Vol  XI no.1ISSN  1829-5266  (print)  ISSN  2301- 8550 (online).
Citramukti,  I.  2008. Ekstraksi  dan  Uji  Kualitas Pigmen Antosianin Pada Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus costaricensis ). Skripsi.
Jurusan Teknologi Hasil Pertanian, Universitas Muhammadiyah Malang. 2008.
Gupta,  P.,  Jain  P.  dan  Jain,  P.K.  2012. Flower Sap:  A  Natural  Resource  As  Indicator  In Acidimetry  And  Alkalimetry .  International Journal  of  Chem  Tech  Research.  Vol.4 (4): 1619-1622
Hadiwiyoto,  S.  1993. Teknologi  Pengolahan Hasil  Perikanan.  Jilid  1 .  Penerbit  Liberty.
Yogyakarta.
Hutabarat,  F.  R.  2010. Studi  Pemanfaatan Ekstrak  Kulit  Ubi  Jalar  (Ipomoea  batatas poir) Sebagai Indikator Pada Titrasi Asam Basa .  Skripsi.  Medan:  FMIPA  Universitas Sumatera Utara.
Igidi, J.O., Nwabue F.I. dan Omaka, O.N. 2012. Physico  Chemical  Studies  of  Extracts
From Napoleona Vogelli Grown in Ebonyi State  as  A  Source  of  New  Acid.  Base Indicators . Research Journal in
Engineering  and  Aplied  Scieces  Vol.  1(2)
96-101.
Indah,  S.  2016. Pengaruh  Nilai  pH  Terhadap Warna  Dari  Kayu  Secang  (Caesalpinia Sappan L.) Sebagai Indikator Alami Baru .
Jurnal Media Medika Muda Vol.2 (2):
Laismina,  A.N.,  Montolalu,  L.A.D.Y.  dan Mentang, F. 2014. Kajian Mutu Ikan Tuna (Thunnus  albacares)  Segar  Di  Pasar Bersehati  Kelurahan  Calaca  Manado . Jurnal  Media  Teknologi  Hasil  Perikanan Vol.2 (2):15-19
Marulkar.  V.  S.,  Kavitake,  S.S.,  Killedar,  S.G. dan  Mali,  D.P.  2013.  Boerhavia  Erecta Linn.  Stem  Bark  Extract  A  Natural  Acid- Base Indicator. Asian Journal of Biomedical  and  Pharmaceutical  Sciences 3 (16) 2013, 10-13.
Mulyono, H.A.M. 2006. Kamus Kimia. PT Bumi Aksara, Jakarta.
Munandar,  A.,  Nurjanah,  dan  Nurilmala,  M. 2009. Kemunduran  Mutu  Ikan  Nila (Oreochromis niloticus) Pada Penyimpanan  Suhu  Rendah  dengan Perlakuan Cara Kematian dan Penyiangan . Jurnal Teknologi
Pengolahan  Hasil  Perikanan  Indonesia Vol. 12(2):88-101.
Nurjanah,  Setyaningsih,  I.,  Sukarno  dan Muldani, M. 2004. Kemunduran Mutu Ikan Nila  Merah  (Orechomis  sp)  Selama Penyimpanan  Pada  Suhu  Ruang .  Buletin Teknologi Hasil Perikanan 7 (1) : 37-43
Pathade,  K.  S.,  Patil,  S..B.,  Kondawar,    M.S., Naik  Wade,  N.S.  dan  Magdum,  C.S. 2009. Morus Alba Fruit-Herbal Alternative to Synthetic Acid Base Indicators .
International  Journal  of  Chem  Tech Research Vol.1(3): 549-551. Regina, T., P. dan Salirawati. 2007.
Pengembangan Prosedur Penentuan Kadar  Asam  Cuka  Secara  Titrasi  Asam Basa  dengan  Berbagai  Indikator  Alami (Sebagai alternatif Praktikum Titrasi Asam Basa  di  SMA ),  Laporan  Penelitian.
Fakultas MIPA, Universitas Negeri
Yogyakarta, Yogyakarta.
Ahmad  Daud,  dkk.,  Pengembangan  Prosedur  Analisis  Total  Volatil  Bases  dengan Menggunakan Indikator Alami
Regina,  T.,  P.,  Siti,  M.  dan  Antuni,  W.  2012. Karakter  Ekstrak  Zat  Warna  Kayu  Secang (Caesalpinia  Sappan  L.)  Sebagai  Indikator
Titrasi Asam  Basa . Prosiding Seminar Nasional Penelitian, Pendidikan dan
Penerapan  MIPA,  Fakultas  MIPA,  Universitas Negeri Yogyakarta, Yogyakarta.
Agrokompleks, Volume 17, Nomor 1 Januari 2018                                  ISSN:  1412-811X