DOI: http://dx.doi.org/10.29244/jhi.11.2.131-139
Tersedia online di http://journal.ipb.ac.id/index.php/jhi
Perbanyakan Lili ( Lilium longiflorum Thunb.) Secara In Vitro

## dengan Zat Pengatur Tumbuh BAP dan NAA
In Vitro Propagation of Lily (Lilium longiflorum Thunb.) with Growth Regulators BAP and NAA
Ni Wayan Deswiniyanti 1* , Ni Kadek Dwipayani Lestari 1 , Ida Ayu Astarini 2 , dan Yunita Hardini 2
Diterima 15 April 2020/Disetujui 10 Juni 2020

## ABSTRACT
Lily plant (Lilium longiflorum Thunb.) is an ornamental and cut flower. The demand for cut lily flowers has a promising demand, but the availability of seedling is llimited. This study consisted of in vitro germination of lily seeds on ½ Murashige & Skoog  (MS) medium, multiplication of base and shoot-tip explants in various treatments of MS medium with the combination of plant growtht regulator (PGR) BAP and NAA. The aims of this research were to obtain the appropriate combination of media and the parts of explants of growing shoots, roots and callus.The combinations of MS medium with BAP and NAA are (a)control 0:0 mg L -1 , (b)0:0.1 mg L - 1 , (c)0:1 mg L -1 , (d)0.1:0 mg L -1 , (e)0.1:0.1 mg L -1 , (f)(0.1:1 mg L -1 ), (g)1:0 mg L - 1 , (h)0.1:1 mg L - 1 , (i)1:1 mg L - 1 . The research were arranged as factorial design with two factor in Randomized Complete Block Design (RCBD). The first factors were combination of BAP and NAA, and the second one was the types of explant (base part of shoot and shoot tip). Lily seeds were succesfully germinated as much as 58%. Medium c and i succesfully induced explants  to  grow  buds,  roots  and  callus.  Medium  c  induced  shoots,  roots  and  callus,  meanwhile medium i induced roots and callus. Percentage of response growth of shoot base explants were 11.1% shoot growth and 13.3% roots, while shoot tip explants only showed 6.7% root growth without shoot growth. The growth of callus showed the same results on the base and shoot tip explants (4.4%).
Keywords: auxin, cytokinin, explant, germination, in vitro

## ABSTRAK
Tanaman  lili  ( Lilium  longiflorum Thunb.)  merupakan  tanaman  hias  dan  bunga  potong. Permintaan bunga potong lili sangat menjanjikan tetapi ketersediaan bibit masih terbatas. Penelitian ini  terdiri  dari  perkecambahan  biji  lili  secara in  vitro pada  media  ½  Murashige  &  Skoog  (MS), multiplikasi bagian eksplan pangkal dan ujung tunas pada berbagai perlakuan media MS kombinasi ZPT BAP dan NAA.   Tujuannya untuk  mendapatkan kombinasi  media yang tepat  dan  mengetahui persentase tertinggi bagian eksplan yang mampu tumbuh tunas, akar dan kalus. Kombinasi media MS dengan BAP dan NAA yaitu (a) kontrol 0:0 mg L -1 , (b) 0:0.1 mg L -1 , (c) 0:1 mg L -1 , (d) 0.1:0 mg L -1 , (e) 0.1:0.1  mg  L -1 , (f) 0.1:1  mg  L -1 , (g) 1:0  mg  L -1 , (h)  0.1:1  mg L -1 , (i) 1;1  mg L -1 . Penelitian  ini disusun  dalam  RAL  faktorial  dua  faktor  yaitu  kombinasi  pemberian  BAP  dan  NAA,  multiplikasi eksplan bagian pangkal dan ujung tunas. Biji lili mampu berkecambah sebanyak 58%. Media c dan i yang mampu menginduksi eksplan untuk tumbuh tunas, akar dan kalus. Media c mampu menginduksi tunas, akar dan kalus, media i mampu menginduksi akar dan kalus. Persentase respon  pertumbuhan eksplan  bagian  pangkal  tunas  yaitu  pertumbuhan  tunas  11.1%  dan  akar  13.3%,  sedangkan  eksplan bagian  ujung  tunas  menunjukkan  pertumbuhan  akar  6.7%  tanpa  pertumbuhan  tunas.  Pertumbuhan kalus menunjukkan hasil yang sama pada eksplan pangkal dan ujung tunas yaitu 4.4%.
Kata kunci: auksin, eksplan, in vitro, perkecambahan, sitokinin
1 Universitas Dhyana Pura, Badung, Bali, Indonesia, 80361
2 Universitas Udayana, Denpasar, Bali, Indonesia 80234 E-mail : deswiniyanti@undhirabali.ac.id (*penulis korespondensi)

## PENDAHULUAN
Bunga  lili  merupakan  salah  satu  jenis bunga  potong  yang  populer  di  pasar  global dunia  khususnya  negara  di  Eropa  dan menempati  urutan  kelima  setelah  mawar, krisan,  tulip  dan  gerbera.  Data  penjualan bunga  potong  lili  tahun  2019  di  Royal  Flora Holland  mencapai  282  juta  potong  (Gelder, 2020). Di Indonesia permintaan bunga potong lili  mengalami  peningkatan  lebih  kurang  7% tiap  tahun  (Pramanik et  al .,  2016).  Lili  putih yag  berbentuk  seperti  terumpet  ( Lilium longiflorum Thunb.).  Merupakan  salah  satu bunga  potong  yang  memiliki  nilai  ekonomi yang  menjanjikan  dan  sangat  potensial  untuk dikembangkan  di  Indonesia.  Pengembangan budidaya lili di Indonesia menghadapi kendala berupa  ketergantungan  benih  umbi  yang berasal dari luar negeri (Kurniati et al ., 2012). Direktorat  Perbenihan  dan  Sarana Produksi  Direktorat  Jenderal  Hortikultura (2011) mencatat bahwa impor benih umbi lili dari  tahun  ke  tahun  terus  mengalami peningkatan.  Impor  benih  lili  tahun  2008 sebanyak 1.273.550 umbi, meningkat menjadi 2.201.500  umbi  pada  tahun  2009,  dan  pada tahun 2010 menjadi 2.992.390 umbi. Ketergantungan  impor  benih  umbi  lili mengakibatkan  adanya  peningkatan  biaya produksi, tidak optimalnya produksi lili karena rendahnya  kemampuan  adaptasi  tanaman terhadap  lingkungan  tropis,  dan  terbawanya penyakit melalui umbi.
Teknik perbanyakan tanaman lili dapat dilakukan  secara  konvensional  menggunakan umbi (Muhit, 2011) dan secara in vitro kultur jaringan  dengan  eksplan  berbagai  bagian tanaman  (Mir et  al .,  2012).  Perbanyakan  lili secara in  vitro dapat  menggunakan  ekspan tunas  yang  berasal  dari  perkecambahan  dari biji  lili  yang  tujuannya  untuk  menghindari penyakit yang berasal dari umbi. Pertumbuhan dan  perkembangan  suatu  eksplan  dan  bibit dalam  kultur  jaringan  sangat  ditentukan  oleh komposisi  unsur  hara  pada  media  yang digunakan (Raynalta dan Sukma, 2013). Salah satu  media  kultur  yang  sering  digunakan adalah  media  MS  (Murashige  dan  Skoog, 1962).    Kantamaht et  al .  (2011)  melaporkan perbanyakan lili dengan media MS kombinasi 15  μM  BA  dan  0.5  μM  NAA  mampu menginduksi pertumbuhan hingga 100%.
Keseimbangan  antara  zat  pengatur
tumbuh auksin ( Naphthalene Acetic
Acid/ NAA)  dan  sitokinin  ( Benzyl  Amino Purine /BAP)  dalam media  berpengaruh terhadap keberhasilan kultur jaringan membentuk tunas baru (Poodineh et al . 2013).
Menurut.
Wicaksono et al. 2016, keseimbangan  zat  pengatur  tumbuh  yang digunakan menentukan pertumbuhan dan pola diferensiasi  eksplan.  Sebagai  contoh  dalam penelitian  perbanyakan  protocorm Lilium longiflorum dengan  kombinasi  0.5  mg  L -1 NAA:  2  mg  L -1 BA  pada  media  MS  berhasil dalam menginduksi pertumbuhan tunas hingga 94%  dan  pada  konsentrasi  2  mg  L -1 NAA:  0 mg  L -1 BA  mampu  menginduksi  akar  hingga 93% (Mir et al. 2012)
Teknik kultur jaringan dapat digunakan untuk  memproduksi  bibit Lilium  longiflorum Thunb. agar tidak mengimpor dari luar negeri. Penelitian ini melakukan perbanyakan tanaman  lili  dengan  biji  akan  lebih  beragam jika  dibandingkan  dengan  tanaman  hasil perbanyakan dengan umbi sehingga diperoleh individu  beragam  dengan  karakteristik  yang berbeda  dengan  induknya  sebagai  tujuan utama  dalam  pemuliaan  tanaman.  Teknik  ini juga  bertujuan  untuk  mendapatkan  jumlah tanaman  yang  banyak  dalam  jangka  waktu relatif  singkat.  Tujuan  penelitian  ialah mendapatkan  protokol  perbanyakan  tanaman lili  secara  in  vitro  melalui  kultur  multiplikasi tunas sebagai eksplan dan untuk mendapatkan kombinasi  zat  pengatur  tumbuh  NAA  dan BAP yang efektif untuk perbanyakan tanaman lili secara in vitro.

## BAHAN DAN METODE
Penelitian  dilakukan  di  Laboratorium Universitas Udayana dan di UPT Balai Benih Induk  Tanaman  Pangan  dan  Hortikultura Provinsi Bali. Penelitian dilaksanakan dua kali yaitu  penelitian  pertama  dari  bulan  Januari- April 2010 tentang perkecambahan in vitro biji lili pada  media ½ MS, dilanjutkan bulan Mei 2018 - Desember 2018 multiplikasi tunas dari eksplan  bagian  pangkal  dan  ujung  tunas. Penelitian induksi multiplikasi tunas menggunakan  RAL  faktorial  dengan  2  faktor yaitu kombinasi pemberian BAP dan NAA dan tipe eksplan (pangkal dan ujung tunas).
Tabel 1. Kombinasi perlakuan zat pengatur tumbuh (ZPT) BAP dan NAA
Media perlakuan ZPT BAP (mg L -1 ) ZPT NAA (mg L -1 )
Kombinasi BAP dan NAA (mg L -1 ) Media a (kontrol) 0 0 0: 0 Media b 0 0.1 0: 0.1 Media c 0 1 0: 1 Media d 0.1 0 0.1: 0 Media e 0.1 0.1 0.1: 0.1 Media f 0.1 0.1 0.1: 0.1 Media g 0.1. 1 0.1 : 1 Media h 1 0 1 : 0 Media i 1 0.1 1: 0.1 Media yang digunakan pada perkecambahan biji lili secara in vitro adalah media MS (Murashige & Skoog, 1962) dengan setengah konsentrasi atau ½ MS. Media untuk induksi  multiplikasi  tunas  yaitu  media  MS dengan kombinasi BAP (konsentrasi 0: 0.1: 1 mg L -1 ) dan NAA (konsentrasi 0: 0.1: 1 mg L -
1 ) (Tabel 1). Pembuatan media ½ MS sebanyak 1 liter yaitu 500 ml akuades ditambahkan 10 g L -1 gula, 3.5 g L -1 agar-agar, dan 2.2 g L -1 media MS.  Untuk  media  MS  sebanyak  1  liter  yaitu 500 ml akuades ditambahkan 40 g L -1 gula, 3.5 g  L -1 agar-agar,  4.4  g  L -1 media  MS, ditambahkan  kombinasi  BAP  konsentrasi  0: 0.1: 1 mg L -1 dan NAA konsentrasi 0: 0.1: 1 mg L -1 ,  kemudian  media  disterilisasi  dengan autoklaf pada suhu 121 0 C dan 15 psi selama 20 menit. Pengecambahan  biji  dilakukan  pada media  ½  MS  dengan  jumlah  50  ulangan. Pengamatan  dilakukan  selama  4  minggu hingga ukuran tunas mencapai lebih kurang 4- 5  cm.  Multiplikasi  tunas  menggunakan eksplan tunas lili hasil perkecambahan in vitro. Tunas  di  potong  menjadi  dua  bagian  yaitu bagian  ujung  tunas  dan  bagian  pangkal  tunas dengan panjang ± 1.5 - 2 cm. Eksplan di tanam pada media MS yang dikombinasikan dengan ZPT BAP dan NAA (Tabel 1). Jumlah eksplan yang  ditanam  sebanyak  90  eksplan  yaitu masing  –  masing  45  eksplan  (9  media  x  5 ulangan)  bagian  pangkal  tunas  dan  ujung tunas. Pengamatan dilakukan selama 8 minggu setelah tanam.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Teknik kultur jaringan dapat digunakan untuk  memproduksi bibit yang banyak  dalam waktu  yang  singkat.  Teknik  ini  dapat
diaplikasikan  pada  tanaman  lili  dengan menggunakan biji, daun, bunga, batang, umbi sebagai  eksplan.  Penelitian  ini  melakukan perbanyakan secara in vitro menggunakan biji yang  dikecambahkan  pada  media  ½  MS. Perkecambahan  biji  lili  ( L.  longiflorum Thunb).  pada  media  ½  MS  selama  empat minggu  telah  mampu  berkecambah  sebanyak 58% atau 29 ulangan dari total 50 ulangan. Tunas  hasil  perkecambahan  biji  lili  di multiplikasi  dan  disubkultur  pada  media  MS kombinasi ZPT BAP NAA (Tabel 1). Tujuan subkultur  dan  multiplikasi  ini  adalah  untuk memperoleh  konsentrasi  pada  kombinasi media  MS  yang  tepat.  Terdapat  9  kombinasi media  MS  termasuk  kontrol  (Tabel  3). Pengamatan yang dilakukan yaitu tiga variabel tumbuh tunas, tumbuh akar dan tumbuh kallus pada  eksplan.  Berikut  dijabarkan  signifikansi hasil uji LSD.
Hasil  menunjukkan  bahwa  ketiga variabel  kalus,  tunas  dan  akar  memiliki  hasil berbeda  nyata  yang  ditandai  dengan  angka signifikan  lebih  kecil  dari  0.05.  Hal  ini menunjukkan  bahwa  perlakuan  zat  pengatur tumbuh kombinasi BAP dan NAA memberikan  pengaruh  untuk  multiplikasi pertumbuhan tunas, akar dan kalus. Selanjutnya, analisa dilanjutkan uji LSD untuk mengetahui pengaruh yang berbeda nyata pada masing  –  masing  perlakuan.  Hasil  uji  LSD dapat  dilihat  pada  Tabel  2  dan  3.  Tabel  2 menunjukkan pada perlakuan eksplan pangkal tunas dengan media MS kombinasi ZPT BAP dan NAA  menunjukkan respon  pada  media c dan media i. Media c (1 mg L -1 NAA: 0 mg L - 1 BAP) mampu menginduksi tunas (0.001<0.05) dan akar (0.00<0.05), sedangkan media i (1 mg L -1 NAA: 1 mg L -1 BAP) mampu menginduksi  akar  (0.003<0.05)  dan  kalus (0.00<0.05) (Gambar 1).
Tabel  3.  menunjukkan  pada  perlakuan eksplan  ujung  tunas  dengan  media  MS kombinasi ZPT  BAP dan NAA  menunjukkan respon pada  media c dan  media i. Media c (1 mg  L -1 NAA:  0  mg  L -1 BAP)  mampu menginduksi pertumbuhan akar (0.001<0.05), sedangkan  media  i  (1  mg  L -1 NAA:  1  mg  L -
1 BAP) mampu menginduksi akar (0.005<0.05) dan  kalus  (0.00<0.05)  (Gambar  2).  Hasil penelitian multiplikasi bagian eksplan pangkal
tunas menunjukkan persentase jumlah pertumbuhan  tunas  dan  akar  lebih  tinggi dibandingan  dengan  eksplan  bagian  ujung tunas  (Gambar  3).  Eksplan  bagian  pangkal pertumbuhan tunas menunjukkan 11.11% dan akar 13.33%, sedangkan eksplan bagian ujung tunas tidak ada pertumbuhan tunas, pertumbuhan akar hanya 6.67%. Pertumbuhan kalus  menunjukkan  hasil  yang  sama  pada masing-masing eksplan (Gambar 4.)
Tabel 2. Uji lanjut LSD pada perlakuan eksplan pangkal tunas
Konsentrasi media BAP+NAA (mg L -1 ) Signifikansi ( p-value ) Tunas Akar Kalus Kontrol a (0:0) b (0: 0.1) 1.000 1.000 1.000 c (0; 1) 0.001* 0.001* 1.000 d (0.1; 0) 1.000 1.000 1.000 e (0.1: 0.1) 1.000 1.000 1.000 f  (0.1;1) 1.000 1.000 1.000 g  (1: 0) 1.000 0.188 1.000 h (0.1;1) 1.000 1.000 1.000 i (1;1) 1.000 0.003* 0.000*
Keterangan: Angka yang diikuti oleh tanda * menunjukkan hasil berbeda nyata pada uji LSD taraf 5%
Tabel 3. Uji lanjut LSD pada perlakuan eksplan ujung tunas
Konsentrasi media BAP+NAA (mg L -1 ) Signifikansi ( p-value ) Tunas Akar Kalus Kontrol a (0:0) b (0: 0.1) 1.000 1.000 1.000 c (0: 1) 1.000 0.001* 1.000 d (0.1: 0) 1.000 1.000 1.000 e (0.1: 0.1) 1.000 1.000 1.000 f  (0.1:1) 1.000 1.000 1.000 g  (1: 0) 1.000 1.000 1.000 h (0.1:1) 1.000 1.000 1.000 i (1:1) 1.000 0.005* 0.000*
Keterangan: Angka yang diikuti oleh tanda * menunjukkan hasil berbeda nyata pada uji LSD taraf 5%
Gambar 1. Jumlah pertumbuhan akar, tunas dan kalus pada eksplan pangkal tunas
0 0,5 1 1,5 2 2,5 a b c d e f g h i tunas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 akar 0 0 1 0 0 0 0 0 2 kalus 0 0 0 0 0 0 0 0 2 Ju m lah p e rtu m b u h an
Gambar 2. Jumlah pertumbuhan akar, tunas dan kalus pada eksplan ujung tunas
Gambar 3. Persentase jumlah pertumbuhan eksplan bagian pangkal dan ujung tunas
Gambar 4. Eksplan multiplikasi 8 mst yang tumbuh (a) tunas pada media c eksplan pangkal tunas, (b) akar pada media c eksplan pangkal tunas, (c) kalus media i pada ekplan ujung tunas 0 0,5 1 1,5 2 2,5 a b c d e f g h i tunas 0 0 0 0 0 0 0 0 0 akar 0 0 1 0 0 0 0 0 2 kalus 0 0 0 0 0 0 0 0 2 Ju m lah p er tu m b u h an 0,0% 2,0% 4,0% 6,0% 8,0% 10,0% 12,0% 14,0% tunas akar kalus
Pangkal 11,1% 13,3% 4,4% Tunas 0,0%
6,7% 4,4% P er senta se per tum buh an eks pl an a b c
Perkecambahan  Biji Lilium  longiflorum Thunb.
Perkecambahan  pada  biji  lili  secara  in vitro  merupakan  salah  satu  cara  untuk mendapatkan  eksplan  yang  steril,  sehat  dan bersih sebagai sumber eksplan pada penelitian multiplikasi eksplan bagian pangkal dan ujung tunas.  Hasil  perkecambahan  pada  media konsentrasi ½ MS berhasil berkecambah 58 % atau 29 ulangan  dari total 50 ulangan. Hal ini menunjukkan bahwa biji lili yang dikecambahkan  pada  media  ½  MS  mampu untuk berkecambah lebih dari 50%. Penelitian Pradhan et al . (2013) memperoleh hasil bahwa perkecambahan  biji Cymbidium  aloifolium pada  media  ½  MS  dan  ¼  MS  menunjukkan persentase perkecambahan ½ MS lebih tinggi (87.5%)  dibandingkan  ¼  MS  (82.5%).  Maka kandungan  unsur  hara  dan  vitamin  pada konsentrasu  media  ½  MS  sudah  mampu  dan mencukupi kebutuhan perkecambahan biji.

## Multiplikasi  Tunas  Bagian  Pangkal  dan Ujung Secara In Vitro
Penelitian  multiplikasi  eksplan  tunas berdasarkan analisis uji ANOVA menunjukkan  hasil  berbeda  nyata  secara signifikan (pvalue<0.05). Perlakuan penambahan  kombinasi  BAP  dan  NAA memberikan  pengaruh  untuk  pertumbuhan tunas,  akar  dan  kalus  dari  eksplan  tunas terutama  bagian  pangkal.  Hasil  signifikan yang  ditunjukkan  yaitu  respon  eksplan  pada bagian pangkal tunas menunjukkan persentase jumlah  pertumbuhan  tunas  dan  akar  lebih tinggi  dibandingan  dengan  eksplan  bagian ujung tunas (Gambar 3).
Kombinasi antara zat pengatur tumbuh sitokinin dan auksin dalam media kultur sangat menentukan keberhasilan multiplikasi tanaman dalam kultur jaringan (Yudhanto dan Wiendi,  2015).  Menurut  Campbell et  al . (2003)  zat  pengatur  tumbuh  sitokinin  dan auksin  dapat  merangsang  morfogenesis  sel dalam pembentukan akar, tunas maupun kalus. Penelitian Haryati (2015) menunjukkan bahwa kombinasi zat pengatur tumbuh auksin (NAA) dan  sitokinin  (BA)  berpengaruh  nyata  pada pembentukan tunas, akar dan kalus pada lili ( L . longiflorum Thunb)  secara  in  vitro.  Media yang  memberikan  tanggapan  positif  untuk induksi kalus yaitu media dengan penambahan
0.25  mg  L -1 BA  +  1.5  mg  L -1 NAA.  Pada perlakuan  media penambahan 0.75  mg L -1 BA + 1.5 mg L -1 NAA dan media 0.5 mg L -1 BA + 1.5 mg L -1 NAA menghasilkan tunas dan kalus. Hasil uji LSD menunjukkan dari semua perlakuan  media  masing  –  masing  bagian eksplan  terdapat  dua  media  yang  memiliki respon  yang  berbeda  nyata  yaitu  pada  media media  c  (1  mg  L -1 NAA:  0  mg  L -1 BAP)  dan media  i  (1  mg  L -1 NAA:  1  mg  L -1 BAP). Eksplan  yang  tumbuh  pada  media  media  c dengan  konsentrasi  1  mg  L -1 NAA:  0  mg  L - 1 BAP berhasil tumbuh tunas dan akar. Hal ini dapat  disebabkan  karena  penambahan  NAA (auksin)  memacu  pemanjangan  sel  serta morfogenesis tunas dan akar. Menurut Kristina (2009)  NAA  merupakan  hormon  auksin sintetik  yang  berfungsi  untuk  pemanjangan sel,  pembentukan  kalus  dan  morfogenesis tunas  dan  akar.  Auksin  yang  diberikan  pada media  kultur  dengan  konsentrasi  lebih  tinggi daripada  sitokinin  mampu  menginduksi  akar. Penelitian  Thi  Oo et  al. (2018)  juga memperoleh  hasil  bahwa  pemberian  NAA tanpa BAP pada Saccharum officinarum 5 mg L -1 sangat cepat merangsang pertumbuhan akar pada eksplan.
Media  i  yang  mengandung  1  mg  L - 1 BAP:  1  mg  L -1 NAA  memberikan  respon eksplan  terhadap  media  seperti  tumbuh  kalus dan akar, hal ini dikarenakan kombinasi NAA dan BAP efektif untuk pembentukan kalus dan akar  secara  bersamaan.  Menurut  George  dan Sherrington (1984), kalus yang terbentuk pada bagian  potongan  eksplan  terjadi  karena konsentrasi  penggunaan  konsentrasi  ZPT dalam  jumlah  seimbang  antara  sitokinin  dan auksin menstimulasi eksplan untuk membentuk kalus. Apabila konsentrasi sitokinin  diperbesar,  akan  mengarah  pada pembentukan dan perbanyakan tunas. membuat  komposisi  kedua  zat  pengatur tumbuh tersebut  di  dalam jaringan seimbang. Komposisi  media  dengan  kombinasi  zat pengatur  tumbuh  auksin  dan  sitokinin  dalam jumlah  yang  seimbang  dapat  menginisiasi pembesaran sel dan morfogenesis. Purmaningsih  dan Misky (2011) memperoleh konsentrasi  yang  seimbang  antara  NAA  dan BAP  (NAA  0.5  mg  L -1 :  BAP  0.5  mg  L -1 ) memberikan hasil terbaik untuk induksi kalus pada  tanaman Artemisia  annua L.  Penelitian Tang et  al. (2010)  memberikan  hasil  bahwa pada  media MS yang ditambahkan 0.5  mg L -
1 BA  dan  1-3  mg  L -1 2.4-D  dapat  menginduksi kalus pada Lilium leucanthum Baker.  Menurut Ridho et al. (2012) bahwa pembentukan kalus juga  dipengaruhi  beberapa  factor  antara  lain genotipa  tanaman,  jenis  eksplan,  jenis  media dan zat pengatur tumbuh serta umur eksplan. Perlakuan  media  a,  b,  d,  e,  f,  g,  dan  h tidak  memberikan respon  pertumbuhan tunas, akar  dan  kalus  Kombinasi  BAP  dan  NAA belum  sesuai  sehingga  belum mampu menginduksi  tunas,  akar  dan  kalus.  Menurut Purnamaningsih (2006)  morfogenesis eksplan tergantung  pada  keseimbangan  auksin  dan sitokinin  di  dalam  media  dan  interaksi  antara zat  pengatur  tumbuh  endogen  pada  eksplan dan zat pengatur tumbuh eksogen yang diserap dari  media  kultur.  Nurul et  al .  (2012) menyatakan  konsentrasi  zat  pengatur  tumbuh auksin dan sitokinin untuk memicu pertumbuhan  tunas  dan  akar  pada  setiap tanaman berbeda. Pertumbuhan tunas dan akar maupun kalus, dipengaruhi jenis dan konsentrasi  zat  pengatur  tumbuh.  Selain  itu juga dipengaruhi oleh beberapa faktor, antara lain  jenis  tanaman,  jenis  eksplan,  dan kandungan  sitokinin  dan  auksin  endogen  di dalam jaringan.
Eksplan bagian pangkal tunas menunjukkan  hasil  persentase  pertumbuhan tunas  dan  akar  lebih  tinggi  dibandingkan dengan bagian ujung tunas. Dengan persentase pertumbuhan  tunas  11.11%  dan  akar  13.33% pada eksplan pangkal tunas dan pertumbuhan tunas 0% dan akar 6.67% pada eksplan ujung tunas.    Sedangkan  pada  pertumbuhan  kalus memiliki  persentase  jumlah  yang  sama  yaitu 4.40%.    Irawati  (2005)  menyatakan  bahwa semakin dekat eksplan dengan bagian pangkal daun  akan  semakin  tinggi  kemampuan  untuk beregerasi  menjadi  tunas.  Adanya  auksin endogen  dan  adanya  penyebaran  auksin  pada bagian  tumbuhan  tidak  dalam  jumlah  yang sama (Reinhardt et al ., 2000).

## KESIMPULAN
Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan  bahwa  perkecambahan  biji  yang mampu  berkecambah  pada  media  ½  MS sebesar  58%.  Hasil  penelitian  multiplikasi eksplan  tunas  dengan  media  perlakuan kombinasi ZPT BAP dan NAA menunjukkan bahwa  media  c  dan  media  i  yang  mampu
menginduksi  pertumbuhan  tunas,  akar  dan kalus.  Media c (1 mg L -1 NAA: 0 mg L -1 BAP) mampu  menginduksi  tunas,  akar  dan  kalus, sedangkan  media  i  (1  mg  L -1 NAA:1  mg  L - 1 BAP)  mampu  menginduksi  akar  dan  kalus. Pertumbuhan  eksplan  bagian  pangkal  tunas menunjukkan  persentase  pertumbuhan  tunas dan akar lebih tinggi (tunas 11.11 % dan akar 13.33%) dibandingkan dengan eksplan bagian ujung  tunas  (tunas  0%,  akar  6.67%), sedangkan  pada  pertumbuhan  kalus  memiliki persentase jumlah yang sama yaitu 4.40%.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Terima kasih kepada Kemenristek/BRIN  yang  telah  membiayai penelitian ini. Terima kasih kepada Universitas  Udayana,  Universitas  Dhyana Pura  dan  UPT  Balai  Benih  Induk  Tanaman Pangan  dan  Hortikultura  Provinsi  Bali  atas dukungan berbagai fasilitas dalam menunjang penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Campbell,  N.A.  J.B.  Reece,  L.G.  Mitchell. 2003. Biologi. Erlangga, Jakarta.
Direktorat  Perbenihan  dan  Sarana  Produksi. 2011.  Data  Ekspor  Impor  Tanaman Hias,  Direktorat  Jenderal  Hortikultura,
Jakarta.
Gelder, K.V.2020. Number of cut flowers sold by Royal Flora Holland in 2019 by type (in  millions).  https://www.statista.com/ statistics/829433/sales-volume-of-cut- flowers-by-royal-floraholland-by-type/ #statisticContainer (20 Agustus 2020)
George, E.F., P.D Sherrington. 1984. Propagation by Tissue Culture. Exegetics Ltd, London.
Haryati,  B.Z.  2015.  Pengaruh  pemberian kombinasi zat pengatur tumbuh terhadap pembentukan tunas bunga lili ( Lilium  longiflorum Thunb.)  secara  in vitro. Jurnal KIP.  3(3):667-673.
Irawati.  2005.  Pembentukan  kalus  dan embriogenesis kultur pelepah daun dan daun Caladium hibrida . Berita Biologi. 7(5): 257-261.
Kantamaht, K., T. Ponpiboon, W. Wirakiat, K. Kanchanapoom. 2011. Regeneration of lily Lilium  longiflorum easter  lily  by callus  derived  from  leaf  explants cultured in  vitro .  J.  Scienceasia. 37(4):373-376.
Kurniati, R., A.  Purwito, G.A. Wattimena, B. Marwoto, Supenti. 2012. Induksi Kalus dan  Bulblet  serta  Regenerasi  Tanaman Lili Varietas Sorbon  dari Tangkai  Sari Bunga. J. Hort. 22(4):303-308.
Kristina,  N.N.  2009.  Induksi  tunas  Tabato barito  ( Ficus  deltoidea Jack)  secara in vitro menggunakan Benzyl Adenin (BA) dan Naphthalene  Acetic  Acid (NAA). Jurnal  Litri  Balai  Penelitian  Tanaman Obat dan Aromatik Bogor 15(1): 33-39.
Mir, J.I., N. Ahmed, H. Itoo, M. A. Sheikh, R. Rashid,  S.  H.  Wani.  2012.  In  vitro propagation of Lilium ( Lilium longiflorum ). Indian Journal of Agricultural Sciences. 82 (5):  455–458.
Muhit, A. 2011.Teknik Pengujian Tingkat Suhu dan Lama Penyimpanan Umbi terhadap Pembungaan Lili. Buletin Teknik Pertanian. 16 (1):16-20.
Murashige,  T.,  F.  Skoog.  1962.  A  revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue culture. Physiologia Plantarum. 15: 473–497.
Nurul, K., R. Catrina, D. Sukma. 2012. Induksi multiplikasi  tunas  anthurium  wave  of love  ( Anthurium  plowmanii )  secara  in vitro. J. Hortikultura Indonesia. 3(1): 1- 9.
Pradhan,  S.,  T.  regmi,  G.  Parmar,  B.  Pant. 2013.  Effect  of  different  media  on  in vitro  seed  germination  and  seedling development  of Cymbidium  aloifolium (L.) Sw. Nepal Jourunal of Science and Technology Vol 14 (1) 51-56.
Pramanik, D., N. Istiqomah, L. Chaidir. 2016. Studi tingkat ploidi pada lili ( Lilium sp.) hasil kultur antera melalui penghitungan  jumlah  kloroplas  dan kromosom. J. Agro. (3): 34-42.
Purmaningsih, R., M. Ashrina. 2011. Pengaruh BAP  dan  NAA  terhadap  induksi  kalus dan kandungan artemisinin dari Artemisia  annua L.  Berita  Biologi. 10(4):483-489.
Purnamaningsih,  R.  2006.  Induksi  kalus  dan optimasi regenerasi empat varietas padi melalui  kultur in  vitro. Jurnal  Agro Biogen 2(2): 74-80.
Poodineh,  A.  Mehraban,  A.  Hosein.  2014. Effect  of  water  stress  and  spraying cytokinin  hormone  on  Hamoon  wheat variety in Sistan region. Int. Journal of Farming and Allied Sci. 4 (4): 814-818.
Reinhardt  D.,  T.  Mandel,  C.  Kuhlemeier, 2000. Auxin regulates the initiation and radial  position  of  plant  lateral  organs. The Plant Cell. 12(4), 507-518.
Reynalta  E.,  D.  Sukma.  2013.  Pengaruh komposisi  media  dalam  perbanyakan protocormlike  bodies,  pertumbuhan planlet,  dan  aklimatisasi Phalaenopsis amabilis. Hortikultura Indonesia. 4(3):131-139.
Ridho  K.,  A.  Purwito,  G.A.  Wattimena,  B. Marwoto, Supenti. 2012. Induksi kalus tiga  kultivar  lili  dari  petal  bunga  pada beberapa  jenis  media.  J.  Hortikultura Indonesia. 3(1): 17-23.
Tang Y.P., X.Q. Liu, R.W. Gituru, L.Q. Chen. 2010.  Callus  induction  and  plant regeneration  from  in  vitro  cultured leaves,  petioles  and  scales  of Lilium leucanthum (Baker) Baker. J. Biotechnol  and  Biotechnol.  24(4): 2071-2076
Thi  Oo,  K.,  M.M.  Htwe.,  N.N.  San.  2018.  In vitro regeneration of sugarcane
( Saccharum  officinarum )  varietas  GUI 11  and  PMA  96/48.  Journal  of
Scientific  and  Innovative  Research 7(1): 7-11.
Wicaksono,  F.  Y.,  T.  Nurmala,  A.W.  Irwan,
A.S.U. Putri. 2016. Pengaruh pemberian  gibberellin  dan  sitokinin pada konsentrasi yang berbeda terhadap pertumbuhan dan hasil gandum ( Triticum  aestivum L.)  di  dataran medium  Jatinangor.  Jurnal  Kultivasi.
15(1): 52-58.
Yudhanto,  A.S.,  N.M.A  Wiendi.  2015. Pengaruh  pemberian  auksin  (NAA) dengan  sitokinin  (BAP,  Kinetin  dan 2ip)  terhadap  daya  proliferasi  tanaman kantong  semar  ( Nepenthes  mirabilis ) secara in vitro. Buletin Agrohorti. 3 (3): 276 – 284.