Bioproses Biji Kecipir (Psophocarpus tetragonolobus (L) D.C) oleh  Rhizopus oligosporus terhadap Peningkatan Protein Murni dan Penurunan Asam Sianida
(Bioprocess of Winged Bean Seeds (Psophocarpus tetragonolobus (L) DC) BY Rhizopus oligosporus to Improved Of Pure Protein Content And Decreased Of Cyanide)
Tjitjah Aisjah, dan Abun Fakultas Peternakan Universitas Padjadjaran E-mail : abun_hasbuna.fapet@yahoo.co.id

## Abstrak
Penelitian  telah  dilakukan  di  Laboratorium  Nutrisi  Ternak  Unggas,  Non  Ruminansia  dan Industri  Makanan  Ternak  Fakultas  Peternakan  Universitas  Padjadjaran,  Jatinangor Sumedang.  Tujuan penelitian untuk mendapatkan dosis inokulum Rhizopus oligosporus dan waktu fermentasi biji kecipir yang  optimum terhadap peningkatan kandungan protein murni dan penurunan asam sianida.  Penelitian dilakukan dengan metode eksperimen menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) pola tersarang (3x3).  Perlakuan terdiri atas faktor A, yaitu dosis  inokulum Rhizopus  oligosporus (d1=0,1%  b/b,  d2=0,2%  b/b,  dan  d3=0,3%  b/b)  dan faktor  B  yaitu  waktu  fermentasi  (w1=24  jam,  w2=  48  jam,  dan  w3=72  jam).    Faktor  B (waktu)  tersarang  pada  faktor  A  (dosis),  masing-masing  perlakuan  diulang  sebanyak  tiga kali.  Peubah  yang diamati adalah  kenaikan  kandungan  protein murni dan penurunan asam sianida.    Hasil  penelitian  diperoleh  bahwa  dosis  inokulum Rhizopus  oligosporus sebesar 0,2%  (b/b)  dan  waktu  fermentasi  48  jam,  merupakan  dosis  dan  waktu  optimal  yang menghasilkan  peningkatan  kandungan  protein  murni  tertinggi,  yaitu  sebesar  46,90%  (dari 15,70%  menjadi  23,06%).    Adapun  penurunan  kandungan  asam  sianida  tertinggi  diperoleh pada dosis inokulum Rhizopus oligosporus sebesar 0,3% (b/b) dengan waktu fermentasi 72 jam, yaitu sebesar 97,29% (dari 45,48 mg/kg menjadi 1,23 mg/kg).
Kata Kunci : Bioproses, biji kecipir, Rhizopus oligosporus, protein murni, sianida.

## Abstract
The  research  had  been  conducted  on  Poultry  Nutrition,  Non-Ruminant  and  Feed  Industry laboratoriy Padjadjaran University Faculty of Animal Husbandry, Jatinangor Sumedang. The research  objective  was  to  get  a  dose  of Rhizopus  oligosporus inoculum  and  the  time  of fermentation winged seeds which optimal to increase the pure protein content and a decrease in  cyanide.  The  study  was  conducted  with  an  experimental  method  using  a  Completely Randomized Design (CRD) nested pattern (3x3). The treatment consists of  factor A, which is dose Rhizopus oligosporus (d1 = 0.1%, d2 and d3 = 0.2% = 0.3%) and factor B is the time of fermentation (w1 = 24 hours, w2 = 48 hours, and w3 = 72 hours). Factor B (time) nested in factor A (dose), each treatment was repeated three times. Observed variable is the increase in pure protein, and decreased cyanide. The study found that Rhizopus oligosporus inoculum at dose of 0.2% and the fermentation time of 48 hours, were the optimal dose and timing that produces  the  highest  increase  in  pure  protein,  to  46.90%  (from  15.70%  to  23.06%)  .  The reduction in cyanide content obtained at the highest dose of Rhizopus oligosporus inoculum of 0.3% with a fermentation time of 72 hours, g to 97.29% (from 45.48 mg / kg to 1.23 mg / kg).
Keywords: Bioprocess, winged seeds, Rhizopus oligosporus, pure protein, cyanide.

## Pendahuluan
Kecipir  ( Psophocarpus  tetragonolobus (L) D.C)  merupakan  tanaman  kacang-kacangan  yang dapat  tumbuh  di  daerah  tropis  dan  bijinya mengandung  protein  yang  cukup  tinggi.  Sejauh  ini biji  kecipir  belum  banyak  dimanfaatkan  sebagai bahan  penyusun  ransum  unggas.  Produksi  rata-rata
biji  kecipir  di  Indonesia  adalah  4500  kg/hektar (Samosir, 1985;  Rukmana, 2000).
Hasil  analisis  Laboratorium  Nutrisi  Ternak Ruminansia  dan  Kimia  Makanan  Ternak  Fakultas Peternakan
Universitas Padjadjaran (2011)
menunjukkan  bahwa  komposisi  zat-zat  makanan yang  terkandung  dalam  biji  kecipir  yaitu  :  35,42% protein  kasar,  8,08%  serat  kasar,  10,51%  lemak
kasar,  2,97%  abu,  dan  4824  kkal/kg  energi  bruto. Biji  kecipir  memiliki  kandungan  protein  murni sebesar  15,70%  (Laboratorium  Teknologi  Pangan Universitas Pasundan, 2011). Selain  itu, biji kecipir mengandung  sejumlah  asam  amino  esensial  yang hampir  sama  dengan  yang  terdapat  pada  kacang kedelai,  bahkan  sebagian  diantaranya  memiliki jumlah  yang  lebih  besar  daripada  kacang  kedelai. Oleh  karena  itu,  biji  kecipir  dapat  dijadikan pengganti  atau  pendamping  kacang  kedelai  sebagai sumber  protein  nabati  dan  asam  amino  esensial apabila  dilakukan  pengolahan  terlebih  dahulu (Yuwanto  dkk.,  1981).    Bahan  pakan  yang mempunyai  kandungan  protein  lebih  dari  20% termasuk  bahan  pakan  sumber  protein  (Anggorodi, 1994;  Wahju,  1997).  Selain  mengandung  nutrien yang  cukup  tinggi,  biji  kecipir  juga  mengandung asam  sianida  (HCN)  yang  bersifat  racun  dan  dapat menghambat  pertumbuhan  unggas  (Scott  dkk., 1982). Hal tersebut menyebabkan keberadaan bahan pakan ini tidak bersaing  dengan  kebutuhan  manusia karena jika dikonsumsi berlebihan tanpa pengolahan yang tepat akan menyebabkan keracunan.
Dosis  letal  HCN  untuk  ternak  adalah sebagai  berikut:  sapi  2  mg/kg  bobot  badan,  domba 2,3 mg/kg bobot badan, babi 2,25 mg/ekor/hari, dan ayam  0,4  mg/ekor/hari  (Ong  dan  Yeong,  1977). Kandungan  HCN  biji  kecipir  sebesar  45,48  mg/kg (Laboratorium  Teknologi  Pangan  Fakultas  Teknik Universitas  Pasundan,  2011).    Angka  tersebut memperlihatkan bahwa kandungan HCN biji kecipir cukup  tinggi,  dan  apabila  diberikan  langsung  pada ternak tanpa diolah terlebih dahulu dapat menyebabkan  pertumbuhan  menjadi  terhambat, diare,  abnormalitas  pada  persendian  kaki  unggas (Scott dkk., 1982;  Rasyaf, 2005).
Detoksifikasi  HCN  terjadi  di  jaringan proventriculus,  hati,  ginjal,  dan  kelenjar  tiroid, karena jaringan tersebut mempunyai enzim rhodanase yang  berperan  dalam  mengubah  sianida menjadi  tiosianat  yang  dikeluarkan  melalui  urin (Agustiningsih, 2002). Asam sianida dapat mengganggu  ketersediaan  yodium  yang  dibutuhkan dalam  pembentukan  hormon  tiroid  (Purawisastra dan  Affandi  1998).  Penurunan  kadar  yodium  dapat diakibatkan  oleh  proses  detoksifikasi  HCN  dalam menghasilkan  tiosianat  yang  bersifat goitrogenik sehingga menganggu metabolisme protein. Penurunan hormon tiroid menyebabkan
metabolisme protein terganggu, akibatnya pembentukan  jaringan  terganggu  dan  pertumbuhan terhambat (Tillman dkk., 1991).
Upaya  yang  dilakukan  untuk  meningkatkan kualitas zat-zat makanan dan menurunkan kandungan  HCN  dalam  biji  kecipir,  diantaranya dengan  pengolahan  secara  mikrobiologis  melalui proses  fermentasi.    Proses  fermentasi  merupakan aktivitas  mikroorganisme  yang  dapat  menghasilkan produk  dengan  karakteristik  tekstur,  flavor,  aroma dan  perubahan  kualitas  nutrien  yang  lebih  baik dibandingkan  bahan  baku  asalnya,  dan  merupakan proses protein enrichment yaitu pengkayaan protein dari bahan tersebut (Simanjuntak 1998; Gushairiyanto 2004).  Beberapa kapang  yang sering digunakan  dalam  bioproses  antara  lain Aspergillus niger,  Aspergillus  oryzae,  Trichoderma  viridae, Trichoderma  reseii,  Rhizopus  oryzae,  Rhizopus oligosporus  dan  Neurospora  sitophila (Fardiaz, 1989;  Hardjo dkk., 1989).
Pada  saat  fermentasi  sebagian  protein  dan lemak  dihidrolisa  menjadi  asam-asam  amino  dan asam-asam  lemak  oleh  enzim  yang  dihasilkan kapang Rhizopus oligosporus sehingga  gizi tersebut mudah  dicerna  dan  diserap  oleh  tubuh  (Aisjah, 1995;  Haslina dan Pratiwi, 1996). Protein diuraikan oleh  enzim  proteolitik  menjadi  asam  amino sehingga N terlarutnya akan mengalami peningkatan (Suliantari  dan  Rahayu,  1990).  Adanya  enzim proteolitik  dari  kapang  ini  menyebabkan  proses hidrolisis  protein  menjadi  asam  amino  cepat, sehingga  dapat  memperbaiki  kecernaan  (Harris  dan Karmas,  1989;    Abun  dkk.,  2003).    Enzim proteolitik  yang  dihasilkan  dapat  merombak  rantai polimer  yang  panjang  dari  protein,  hal  tersebut terjadi pula pada ion sianida, sehingga menyebabkan terjadinya penurunan atau hilangnya HCN. Selanjutnya Rhizopus  oligosporus menghasilkan enzim  β -glukosidase  yang  dapat  menguraikan senyawa HCN (Purawisastra dan Affandi, 1998).
Proses  fermentasi  dipengaruhi  oleh  dosis dan  waktu  (Fardiaz,  1989;    Rahman,  1992; Iskandar,  2009).  Tingkat  dosis  berkaitan  dengan besaran populasi mikroba yang berpeluang menentukan  cepat  tidaknya  perkembangan  mikroba dalam  menghasilkan  enzim  untuk  merombak substrat  sehingga  pada  gilirannya  berpengaruh terhadap  produk  akhir.  Semakin  tinggi  dosis inokulum,  semakin  banyak  populasi  mikroba (kapang)  dan  komponen  substrat  yang  dirombak. Lama  inkubasi  berkaitan  dengan  waktu  yang  akan digunakan  kapang  untuk  tumbuh  dan  berkembang biak. Selama masa tersebut, kapang terus menggunakan  komponen-komponen  substrat  untuk kelangsungan hidupnya.
Semakin  singkat  waktu  inkubasi  semakin sedikit  kesempatan  inokulum  untuk  tumbuh  dan
berkembang  biak  sehingga  jumlah  komponen substrat  yang  dapat  diubah  semakin  sedikit  (Abun, 2003).

## Bahan dan Metode
Bahan  yang  digunakan  adalah  biji  kecipir sebagai  substrat  fermentasi,  kapang Rhizopus oligosporus, dan beras sebagai sumber  energi untuk kapang  pada  saat  pembuatan  inokulum.    Bahan lainnya  adalah  aquades,  alkohol,  NaCl  fisiologis, spirtus dan air.
Peralatan yang digunakan adalah: Autoclave untuk mensterilkan alat, blender untuk menghaluskan  substrat,  tabung  reaksi, Erlenmeyer , kantong  plastik,  kapas,  kain  kasa,  alumunium  foil, neraca  analitik  dan  digital,  pipet,  pH  meter,  jarum ose,  lemari  fermentor,  dan  perangkat  alat  Analisis Proksimat.

## Prosedur Percobaan
Percobaan  dimulai  dari  pembuatan  media agar dengan cara memasak 100 g kentang yang telah diblender  dan  500  ml  aquadest  dalam  beker  glass hingga terbentuk ekstrak kentang, disaring ke dalam erlenmeyer  dengan  corong  yang  dilapisi  kain  kasa. Ekstrak  kentang  ditambah  dengan  10  g  gula  pasir dan  30  g  agar  batangan  lalu  dimasak  sampai  larut, disterilisasi  dengan autoclave pada  tekanan  1atm, suhu 121 O C selama 15 menit dan didinginkan dalam tabung  reaksi  masing-masing  3,0  ml,  ditutup  kapas dan diletakkan dengan posisi miring .
Media  agar  yang  sudah  jadi  digunakan  untuk perbanyakan  kapang.    Biakan  murni Rhizopus oligosporus digoreskan  pada  media  agar  miring secara  aseptis  dengan  menggunakan  jarum  ose  ke dalam  tabung  reaksi  yang  berisi  media  agar kemudian  diinkubasikan  selama  3  hari  pada  suhu kamar.    Selanjutnya  adalah  pembuatan  inokulum Rhizopus oligosporus yang  digunakan  dalam proses fermentasi biji kecipir.
Biji  kecipir  digiling  terlebih  dahulu,  kemudian ditambahkan 1% tepung beras dan air sebanyak 60% (v/b)  dan  diaduk  sampai  rata.    Selanjutnya disterilisasi,  kemudian    ditiriskan  sampai  suhu mencapai  30 O C.    Substrat  yang  akan  di  fermentasi, diinokulasi  dengan  inokulum Rhizopus  oligosporus pada  dosis  0,1%  (b/b),  0,2%  (b/b),  dan  0,3%  (b/b). Masing-masing ditimbang sebanyak 100 g, kemudian  dimasukkan  ke  dalam  kantong  plastik dengan  ketebalan  2  cm  dan  dilubangi  agar  tercipta suasana  aerob.    Selanjutnya  diinkubasikan  dalam ruang fermentor pada suhu 30 O C selama 24 jam, 48 jam,  dan  72  jam.  Masing-masing  perlakuan  diulang sebanyak 3 kali.  Guna menjaga kelembaban selama
proses  fermentasi,  bagian  bawah  rak  fermentor dipasang  baki  plastik  yang  telah  diisi  dengan  air. Setelah  masing-masing  perlakuan  mencapai  waktu inkubasi, selanjutnya dilakukan sterilisasi selama 15 menit, kemudian dikeringkan. Selanjutnya dilakukan  analisis  kandungan  protein  murni  dan HCN pada produk fermentasi biji kecipir.

## Peubah yang Diamati
Peubah  yang  diamati  adalah  peningkatan kandungan protein murni dan penurunan kandungan asam  sianida.    Perhitungan  perubahan  kandungan protein  murni  dan  asam  sianida  adalah  sebagai berikut :
Perubahan nutrien (%) =   K 2 – K 1 X 100%
K 1
Keterangan : K 1 = Kandungan nutrien sebelum bioproses K 2 = Kandungan nutrien setelah bioproses
Rancangan  Percobaan  dan  Analisis  Statistik
Penelitian
dilakukan dengan metode eksperimen menggunakan Rancangan Acak
Lengkap  (RAL)  pola  tersarang  (3x3)  dengan  tiga kali  ulangan.  Perlakuan  terdiri  atas  faktor  A,  yaitu dosis  inokulum Rhizopus  oligosporus (d 1 =  0,1% b/b, d 2 = 0,2% b/b, dan d 3 = 0,3% b/b)  dan faktor B yaitu  waktu  fermentasi  (w 1 =  24  jam,  w 2 =  48  jam, dan w 3 = 72 jam).    Faktor B (waktu) tersarang pada faktor  A  (dosis).    Untuk  mengetahui  perbedaan pengaruh  antar  perlakuan,  dilakukan  pengujian dengan menggunakan jarak berganda Duncan.

## Hasil dan Pembahasan
Bioproses  adalah  proses  yang  dilakukan oleh  mikroba  untuk  mengubah  suatu  senyawa menjadi  produk  lain  yang  berguna  dan  memiliki nilai  lebih.    Produk  yang  dihasilkan  adalah  sel-sel mikroba,  enzim,  metabolik  primer  dan  metabolik sekunder.    Protein  murni  merupakan  asam  amino yang  mewakili  nitrogen  dan  diketemukan  terikat dalam  ikatan  peptida  untuk  membentuk  protein. Adapun  asam  sianida  (HCN)  merupakan  zat  anti nutrisi  yang  menjadi  pembatas  dalam  penggunaan bahan pakan untuk unggas.
Rataan  peningkatan  kandungan  protein murni  dan  penurunan  asam  sianida  pada  bioproses biji  kecipir  oleh Rhizopus  oligosporus, disajikan pada Tabel berikut.
Tabel  Rataan  Peningkatan  Kandungan  Protein Murni dan Penurunan Asam Sianida pada Bioproses Biji Kecipir oleh Rhizopus oligosporus . Perlakuan Peningkatan Kandungan Protein Murni Penurunan Kandungan Asam Sianida ....(%)..... ...(mg/kg).... d1w1 19,17 A 86,45 A d1w2 6,60 A 92,06 A d1w3 37,92 A 94,69 A d2w1 17,96 A 89,13 A d2w2 46,90 C 92,05 A d2w3 43,44 B 94,69 A d3w1 21,83 A 94,65 A d3w2 26,54 A 94,72 B d3w3 31,25 A 97,29 C Tabel di atas menunjukkan adanya perbedaan  kandungan  protein  murni  dan  asam sianida  pada  bioproses  biji  kecipir  oleh Rhizopus oligosporus . Perlakuan d2w2 menghasilkan peningkatan kandungan protein murni tertinggi yaitu sebesar  46,90%,    sedangkan  perlakuan  d1w2 menghasilkan peningkatan kandungan protein murni terendah  yaitu  sebesar  6,60%.    Tabel  tersebut memperlihatkan  pula  bahwa  perlakuan  d3w3 menghasilkan  penurunan  kandungan  asam  sianida tertinggi yaitu sebesar 97,29%, sedangkan perlakuan d1w1  menghasilkan  penurunan  kandungan  asam sianida  terendah  yaitu  sebesar  86,45%.    Perbedaan nilai  tersebut  disebabkan  oleh  adanya  perbedaan dosis dan waktu pada bioproses.
Dosis inokulum Rhizopus oligosporus 0,2% dengan  waktu  fermentasi  selama  42  jam  (d2w2) nyata  lebih  tinggi  peningkatan  kandungan  protein murni  dibanding  dengan  perlakuan  lainnya.    Dosis inokulum  yang  digunakan  menentukan  kandungan protein  murni  substrat  produk  fermentasi.  Tingkat dosis  berkaitan  dengan  besaran  populasi  mikroba yang  berpeluang  menentukan  cepat  tidaknya perkembangan  mikroba  dalam  menghasilkan  enzim untuk  merombak  substrat  sehingga  pada  gilirannya berpengaruh  terhadap  produk  akhir.  Kenaikan kandungan  protein  murni  produk  fermentasi
disebabkan  oleh  turunnya  nutrien  lain  seperti karbohidrat  dan lemak  yang digunakan  oleh  kapang untuk  pertumbuhan  dan  perkembangbiakannya. Kapang dapat mensintesis protein dengan mengambil sumber karbon dari karbohidrat (glukosa,  sukrosa,  dan  maltosa),  sumber  nitrogen dari bahan organik atau anorganik, dan mineral dari substratnya  (Fardiaz,  1989;    Hardjo  dkk.,  1989). Meningkatnya  protein  murni  substrat,  karena karbohidrat dan lemak berkurang dipergunakan oleh mikroba  sedangkan  protein  ditahan  oleh  mikroba berubah  menjadi  protein  tunggal  (Rahman,  1992; Rusdi, 1992). Semakin banyak pertumbuhan kapang maka  kandungan  protein  substrat  bertambah  dari tubuh  kapang  yang  tumbuh  (Aisjah,  1995;    Abun, 2003).
Dosis  inokulum  yang  rendah  menghasilkan peningkatan  kandungan  protein  murni  pun  lebih rendah.    Hal  tersebut  disebabkan  oleh  terbatasnya kesempatan mikroba untuk tumbuh dan berkembang biak  sehingga  produksi  enzim  sebagai  produk metabolit tidak optimal.  Begitu pula dosis inokulum terlalu  tinggi  menyebabkan  zat-zat  makanan berkurang sehingga proses fermentasi tidak optimal. Tanuwidjaja (1975) dan Iskandar (2009) menyatakan  bahwa  jumlah  mikroba  yang  terlalu banyak  dapat  menyebabkan  sporulasi  yang  terlalu cepat  sehingga  sebagian  energi  tidak  digunakan untuk  memperbanyak  sel,  begitu  pula  sebaliknya jumlah  mikroba  yang  sedikit  mengakibatkan pertumbuhannya  tidak  optimal.    Lebih  lanjut Sulaiman  (1988)  dan  Aisjah (1995)  mengemukakan bahwa  kandungan  protein  produk  fermentasi  secara proporsional  akan  mengalami  peningkatan  sejalan dengan  lama  fermentasi  sampai  batas  waktu tertentu,  kemudian  menurun  kembali.    Hidayat (2009)  mempertegas  bahwa  fermentasi  oleh  kapang Rhizopus  oligosporus pada  waktu  1-30  jam merupakan fase pertumbuhan cepat, terjadi peningkatan  suhu  dan  asam  lemak  bebas.  Pada waktu  30-50  jam  merupakan  fase  transisi  dan merupakan  fase  optimal  ditandai  dengan  penurunan suhu,  dan  jumlah  asam  lemak  yang  dibebaskan, pertumbuhan  kapang  tetap,  flavor  spesifik  dan tekstur  lebih  kompak.  Pada  waktu  50-90  jam merupakan  fase  pembusukan  ditandai  dengan peningkatan jumlah bakteri  dan jumlah asam lemak
bebas,  pertumbuhan  kapang  menurun  dan  pada kadar air tertentu pertumbuhan kapang terhenti.
Sifat  racun  sianida  bukan  dalam  bentuk asam  melainkan  dalam  bentuk  ion  sianida.    Ion sianida mengandung unsur nitrogen  yang dapat larut menjadi empat kali lipat sehingga terjadi pembentukan  asam  amino  bebas  (Gushairiyanto, 2004).
Purawisastra dan Affandi (1998)
mengemukakan  bahwa  salah  satu  sifat Rhizopus oligosporus adalah  mempunyai  aktivitas  proteolitik yang  tinggi.    Enzim  protease  merombak  rantai polimer  yang  panjang  dari  protein,  hal  tersebut terjadi  juga  pada  ion  sianida,  hasil  akhir  fermentasi antara  lain  air  sehingga  terjadi  ionisasi  dan menyebabkan  terjadinya  penurunan  asam  sianida. Penurunan  kandungan  asam  sianida  berbanding terbalik  dengan  kenaikan  kandungan  protein  murni produk fermentasi biji kecipir.  Semakin tinggi dosis dan  lama  waktu  fermentasi  (sampai  batas  waktu tertentu), semakin tinggi pula penurunan kandungan asam  sianida,  dan    terjadi  peningkatan  kandungan protein murni (Aisjah, 1995;  Abun, 2003).
Produk bioproses biji  kecipir  oleh Rhizopus oligosporus pada  dosis  inokulum  0,2%  (2  g/kg
substrat) dengan lama fermentasi 48 jam menghasilkan  peningkatan  protein  murni  tertinggi, yaitu  sebesar  46,90%  (dari  15,70%  menjadi 23,06%).    Adapun  penurunan  kandungan  asam sianida  tertinggi  diperoleh  pada  dosis  inokulum Rhizopus oligosporus sebesar 0,3% (3 g/kg substrat) dengan  waktu  fermentasi  72  jam,  yaitu  sebesar 97,29% (dari 45,48 mg/kg menjadi 1,23 mg/kg).

## Kesimpulan dan Saran
Dosis inokulum Rhizopus oligosporus 0,2% (b/b)  dan  waktu  fermentasi  48  jam  menghasilkan kenaikan kandungan  protein murni  tertinggi (46,90%).    Penurunan  asam  sianida  tertinggi diperoleh pada dosis inokulum Rhizopus
oligosporus sebesar  0,3%  (b/b)  dengan  waktu fermentasi 72 jam (97,29%).
Perlu  dilakukan  pengujian  secara  biologis pada  ternak  unggas  untuk  mendapatkan  tingkat penggunaan  produk  bioproses  biji  kecipir  yang difermentasi oleh Rhizopus oligosporus.

## Ucapan Terima Kasih
Penulis  mengucapkan  terima  kasih  kepada Iwan  Ridwan,  SPt.  dan  Ari  Setiya  Budi,  SPt.  yang telah  membantu  dalam  pelaksanaan  penelitian  ini. Ucapan  terima  kasih  disampaikan  pula  kepada Kepala  Laboratorium  Nutrisi  Ternak  Unggas,  Non ruminansia  dan  Industri  Makanan  Ternak,  Fakultas Peternakan  Universitas  Padjadjaran,  serta  sdr. Jhondri, ST., sdr. Suryaman Malik, atas terlaksananya penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Abun.  2003. Pengaruh  Dosis  Inokulan  Aspergillus niger dan  Lama Fermentasi  terhadap
Perubahan  Kandungan  Protein  Kasar  dan Serat  Kasar  Ampas  Umbi  Garut .  Tesis. Program Pascasarjana, Universitas
Padjadjaran, Bandung.
Abun,  D.  Rusmana  dan  N.  P.  Indriani.    2003. Penentuan  Kecernaan  Ransum  Mengandung Ampas  Umbi  Garut  (Maranta  arundinacea Linn.)  pada  Ayam  Broiler  dengan  Metode Pemotongan .  Jurnal  Bionatura  Vol.5(3):227- 238.
Agustiningsih,  D.  2002. Pengaruh  Penggunaan Bungkil  Biji  Karet  Fermentasi  dengan Inokulum  Tempe  dan  Oncom  terhadap Performans  Ayam  Pedaging .  Tesis.  Program Pascasarjana, Universitas Diponegoro, Semarang.
Aisjah,  T.  1995. Biokonversi  Limbah  Umbi
Singkong  Menjadi  Bahan  Pakan  Sumber Protein  Oleh  Jamur  Rhizopus  sp.  Serta Pengaruhnya  terhadap  Pertumbuhan  Ayam Pedaging. Disertasi.  Program  Pascasarjana Universitas Padjadjaran, Bandung. Fardiaz,  S.  1989. Mikrobiologi  Pangan .  Direktorat Jenderal  Pendidikan  Tinggi  Pusat  Antar Universitas  Pangan  dan  Gizi,  IPB.  Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi. Fakultas Pertanian, Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Gushairiyanto.  2004.  Detoksifikasi  dan  Fermentasi Kulit  Umbi  Ketela  Pohon  dengan  Kapang Aspergillus niger serta Implikasinya Terhadap
Kambing  Kacang  Jantan.  Disertasi,  Program Pascasarjana. Universitas Padjadjaran, Bandung.
Hardjo,  S.,  N.S.  Indrasti  dan  P.  Bantacut.  1989. Biokonversi  :  Pemanfaatn  limbah  insdustri pertanian . PAU Pangan dan Gizi IPB, Bogor. 14-20
Harris,  R.  S.  dan  E.  Karmas.  1989. Evaluasi  Gizi pada  Pengolahan  Bahan  Pangan. Institut Teknologi Bandung, Bandung.
Haslina dan E. Pratiwi.  1996. Manfaat Tempe Bagi Gizi  dan  Kesehatan Manusia .  Sainteks. 3.(4)
: 45-51.
Hidayat,  N.  2009. Tahapan  Proses  Pembuatan Tempe. http:// lecture.brawijaya.ac.id/ nurhidayat/.  Diakses  pada  tanggal  9  Juni 2011.
Iskandar,  J.  2009.  Pengaruh  Jumlah  Inokulum  dan Waktu  Fermentasi  Bungkil  Biji  Jarak  Pagar ( Jatropha  curcas )  oleh Rhizopus  oligosporus
Terhadap Kandungan Protein Kasar  dan Serat Kasar. Skripsi, Fakultas
Peternakan Universitas Padjadjaran, Sumedang.
Laborarorium Nutrisi Ternak Ruminansia dan Kimia
Makanan  Ternak.  2011. Hasil  Analisis Proksimat .  Fakultas  Peternakan  Universitas Padjadjaran, Sumedang.
Laboratorium  Teknologi  Pangan.  2011. Hasil Analisis . Fakultas Teknik Universitas Pasundan, Bandung. Ong, H.K. and S.W. Yeong.  1977. Prospect for the
Use  of  Rubber  Seed  Meal  for  Feeding  Pigs and  Foultry,  in  :  Feeding  Stuffs for Livestock in  South  East  Asia. Malaysia  Society  of Animal Production. P. 337-344.
Purawisastra,  S.  dan  E.  Affandi.  1998.  Pengujian
Kemampuan Beberapa Strain Kapang Rhizopus Untuk  Meningkatkan  Kandungan
Protein  Singkong  Pahit. Prosiding  Seminar Pertemuan  Ilmiah  Tahunan .  Pusat  Penelitian dan  Pengembangan  Gizi.  Lampung.  Hal.  58- 64.
Rahman,  A.  1992. Teknologi  Fermentasi  Industrial II. Arcan , Jakarta.
Rasyaf,  M.    2005. Beternak  Ayam  Ras  Pedaging . Penebar Swadaya, Jakarta.
Rukmana,  R.    2000. Kecipir,  Budidaya  dan Pengolahan Pasca Panen . Kanisius,
Yogyakarta.
Rusdi,  U.  D.  1992.  Fermentasi  Konsentrat  Campur Bungkil  Biji  Kapok  dan  Onggok  Serta Implikasinya  Terhadap  Pertumbuhan  Ayam Broiler.  Disertasi.  Universitas  Padjadjaran, Bandung.
Samosir, D. J. 1985. Studi Laboratoris  dan Biologis
Biji Kecipir sebagai Bahan Makanan . Disertasi Institut Pertanian Bogor.
Scott,  M.L.,  M.C.  Nesheim  and  R.J.  Young.    1982.
Nutrition  of  the  Chicken .  M.L.  Scott  and Associate, New York.
Shurtleff,  W.  and  A.  Aoyagi.  1979. The  Book  of Tempeh. Professional  Edition.  Harper  and Row Publisher. New York. 177-180.
Simanjuntak,  S.  D.  1998.  Pengaruh Aspergillus niger untuk Meningkatkan Nilai Gizi Bungkil Inti  Sawit  dalam  Ransum  Ayam  Broiler.
Tesis. Institut Pertanian Bogor, Bogor.
Sulaiman.    1988. Studi  Peningkatan Kualitas Kulit Singkong dengan Fermentasi oleh Aspergillus niger .  Tesis, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Suliantari  dan  W.P.  Rahayu.    1990 .    Teknologi Fermentasi  Biji-bijian  dan  Umbi-umbian . PAU-Pangan  dan  Gizi.    Institut  Pertanian Bogor, Bogor.
Tanuwidjaja,  L.  1975. Sengle  Cell  Protein . Ceramah Ilmiah.  LKN-LIPI, Bandung.
Tillman,  A.D.,  H.  Hartadi,  S.  Reksohadiprodjo,  S. Prawirokusumo  dan  S.  Lebdosoekojo.    1991. Ilmu  Makanan  Ternak  Dasar .    Gadjah  Mada University Press, Yogyakarta.
Yuwanto, T.S., Harimurti dan M. Anwar. 1981. Biji Kecipir  sebagai  Pengganti  Kedelai  di  Dalam Makanan  Ayam  Broiler. Buletin  Fakultas
Peternakan, Universitas Gajah Mada .
Yogyakarta, hal. 16-17.
Wahju,  J.    1997. Ilmu  Nutrisi  Unggas .    Cetakan keempat.    Gadjah  Mada  University  Press,
Yogyakarta.