Diazinon is metabolized in liver becomes diazoxon, an active metabolite form that can cause free radical raising that leads to lipid peroxidation. The result of lipid peroxidation is MDA. Soyflour has higher isoflavones than the other  processed  food  of  Glycine  max L .This  isoflavones  donate  its  electron  and  hydrogen  atom  in  lipid peroxidation so it can block the lipid peroxidation. The aim of this experiment is to investigate the effect  of soy flour on MDA hepar level increase of male wistar rat induced by diazinon. The sample are divided into 5 groups which are Kn, K(-) group induced by diazinon 40mg/kgBW, K1, K2, K3 group given with soy flour 10%, 15%, and 20%  orally,  then  induced  by  diazinon  40  mg/kgBW.  MDA  liver  measured  on  the  day  34th  with  MDA-TBA methode  which  has  pink  colour  and  measured  by  spectrofotometer.  Average  of  liver  MDA  levels  is  Kn  6,35 µg/mL;  K(-)  9,23  µg/mL;  K1  8,85  µg/mL;  K2  7,88  µg/mL;  K3  7,04  µg/mL.  One  way  ANOVA  and  Post  hoc  LSD showed significantly different (p<0,05). Pearson correlation showed strong negative  correlation.
Keywords : Diazinon, Diazoxon, MDA, Soyflour, Glycine max L ., antioxidant
Diazinon  dimetabolisme  di  hati  menjadi  diazoxon,  bentuk  metabolit  aktif  yang  dapat  menyebabkan meningkatnya radikal bebas sehingga menginduksi terjadinya lipid peroksidasi yang dapat menghasilkan MDA. Tepung  kedelai  memiliki  kandungan  isoflavon  yang  lebih  tinggi  dibandingkan  produk  olahan  kedelai  lainnya. Isoflavon ini akan mendonorkan elektron dan atom hidrogen dalam proses lipid peroksidasi.  Tujuan penelitian untuk  mengetahui  pengaruh  tepung  kedelai  terhadap  peningkatan  kadar  MDA  hati  tikus  wistar  jantan  yang diinduksi  diazinon.  Sampel  dibagi  menjadi  5  kelompok  yaitu  Kn,  K(-)  diinduksi  diazinon  40mg/kgBB  peroral, kelompok  K1,  K2,  dan  K3  diberikan  tepung  kedelai  dengan  dosis  10%,  15%,  dan  20%  peroral,  kemudian diinduksi diazinon dosis 40mg/kgBB. Pengukuran kadar MDA hepar pada hari ke-34 dengan metode MDA-TBA yang akan menghasilkan warna merah muda yang diukur dengan spektrofotometer. D idapatkan hasil rata-rata Kn 6,35 µg/mL; K(-) 9,23 µg/mL; K1 8,85 µg/mL; K2 7,88 µg/mL; K3 7,04 µg/mL.Hasil uji one way ANOVA dan Post  hoc LSD  didapatkan  perbedaan  signifikan  antar  semua  kelompok  (p<0,05).  Hasil  korelasi Pearson menunjukkan hasil negatif dengan derajat korelasi kuat.
Kata kunci : Diazinon, Diazoxon, MDA, Tepung Kedelai, Glycine max L., antioksidan
Pengaruh Aktivitas Hepatoprotektor Tepung Kedelai ( Glycine max L.) terhadap Kadar MDA

## Hati Tikus Wistar Jantan yang Diinduksi Diazinon
Effect of Soyflour (Glycine max L .) Hepatoprotector Activity on Liver MDA Level in Male Wistar Rat Induced by Diazinon
Sofi Aliyatul Himah 1 , Desie Dwi Wisudanti 2 , Heni Fatmawati 3
1 Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Universitas Jember
2 Laboratorium FarmakologiFakultas Kedokteran Universitas Jember
3 Laboratorium Histologi Fakultas Kedokteran Universitas Jember Jalan Kalimantan No. 37, Jember, Indonesia, 68121 e-mail korespondensi: desie.fk@unej.ac.id
Abstrak
Abstract

## Pendahuluan
Indonesia merupakan negara agraris yang kehidupan sehari-harinya  tidak  lepas  dari  kegiatan  bercocok tanam.  Sayuran  dan  buah-buahan  sebagai  produk andalan  negara  agraris  ini  sering  dikaitkan  dengan penggunaan  pestisida  untuk  meningkatkan  kualitas dan kuantitas produknya. Pestisida dibagi menjadi 4 golongan, yaitu organoklorin, organofosfat, karbamat,  dan  piretroid  (Hudayya  dan  Jayanti , 2012).  Senyawa  organofosfat  adalah  kelompok pestisida yang paling banyak digunakan di dunia.
Golongan organofosfat yang paling sering digunakan yaitu  diazinon.  Diazinon  umumnya  digunakan  pada tanaman  buah,  padi,  tebu,  jagung,  tembakau  dan tanaman hortikultura karena sangat efektif memberantas dan membasmi  hama-hama tanaman seperti  kutu  daun,  lalat,  wereng,  kumbang penggerek  padi,  dan  sebagainya  (Agustina,  2016). Hal  ini  terbukti  pada  telah  ditemukannya  residu pestisida  diazinon  pada  bawang  merah  di  Alahan Panjang  dan  Sungai  Nanam  Kecamatan  Lembah Gumati  Padang  melebihi  nilai  Batas  Maksimum Residu  (BMR)  yaitu  2,006  mg/kg  dan  1,764  mg/kg (Asmita, 2010).
Organofosfat  umumnya  cepat  didekomposisi  di lingkungan  dan  tidak  bersifat  bioakumulatif,  namun memiliki  daya  racun  dan  toksisitas  yang  besar. Berdasarkan  hasil  penelitian  di  desa  Umbulsari, Kecamatan Umbulsari, Kabupaten Jember didapatkan    27,27%  dari  seluruh  responden  petani jeruk  penyemprot  pestisida  golongan  organofosfat mengalami  gejala  keracunan  akut  seperti  pusing, mata  berair,  dan  mual-mual  (Aribowo et  al .,  2016). Organisasi  kesehatan  dunia  (WHO)  memperkirakan setiap  tahun  terjadi  1-5  juta  kasus  keracunan pestisida  pada  pekerja  pertanian  dengan  tingkat kematian  mencapai  220.000  korban  jiwa  (Komisi Pestisida, 2014).
Beberapa  penelitian  menunjukkan  diazinon  bersifat hepatotoksik  pada  tikus.  Diazinon  meningkatkan kadar serum  alkalin fosfatase, alanin transaminase, aspartat  trasaminase, gamma  glutamyl  transferase , bilirubin  total,  kreatinin,  dan  malondialdehid  (Al- Attar et  al .,  2016).  Diazinon  mengandung  radikal bebas  yang  menyebabkan  stres  oksidatif  dan menginduksi  terjadinya  peroksidasi  lipid  (Oksay, 2012).  Peroksidasi  lipid  merupakan  reaksi  antara radikal bebas maupun oksidan yang menyerang lipid yang mengandung ikatan karbon ganda  yaitu PUFA. Peroksidasi  lipid  melibatkan  pemisahan  hidrogen dari  rantai  karbon  yang  digantikan  oleh  oksigen
menjadi lipid peroxyl radicals dan lipid hidroperoksida  (Ayala et  al .,  2014).  PUFA didegradasi  oleh  radikal-radikal  bebas  sehingga menghasilkan produk  samping yang disebut  dengan malondialdehid (MDA). MDA dapat digunakan untuk mengetahui  derajat  kerusakan  oksidatif  yang disebabkan  oleh  peroksidasi  lipid  (Retno et  al ., 2012).
Penggunaan pestisida khususnya jenis diazinon yang bersifat  hepatotoksik  ini  membutuhkan  suatu hepatoprotektor  untuk  mengontrol  kerusakan  hati yang  bersifat  progresif.  Hepatoprotektor  bekerja dengan  mencegah  adanya  ikatan  hidroksil  yang diakibatkan  oleh  radikal  bebas.  Hepatoprotektor dapat ditemukan secara alami pada tumbuhan yang mengandung  senyawa  antioksidan  (Al-Attar et  al. , 2016).  Senyawa  antioksidan  ini  diyakini  dapat menetralkan  efek  negatif  radikal  bebas  pada  sel-sel tubuh.  Kedelai  merupakan  bahan  penghasil antioksidan  alami,  salah  satu  komponen  terpenting dalam  kedelai  dan  bertindak  sebagai  antioksidan adalah  isoflavon.  Isoflavon  merupakan  salah  satu senyawa  yang  termasuk  golongan  flavonoid  dan merupakan  bagian  terbesar  dalam  golongan tersebut.Isoflavon  dalam  kedelai  berupa  genistein, daidzein, dan glicitein (Evans et al. , 2011). Isoflavon bekerja melalui beberapa mekanisme, yang pertama sebagai hidrogen  atom  transfer (HAT)  yaitu  dengan mendonorkan  atom  hidrogen,  dan single  electron transfer (SET)  dengan  mentransfer  elektron  untuk mereduksi  metal  ion,  radikal  dan carbonyls . Mekanisme  transfer  hidrogen  dapat  mencegah tahap  inisiasi  peroksidasi  lipid  dengan  bereaksi dengan  lipid  radikal  atau  secara  langsung menghambat  tahap  propagasi  peroksidasi  lipid dengan bereaksi dengan peroxyl radikal atau radikal akoxyl (Aytul, 2010).
Kedelai  merupakan  salah  satu  produk  unggulan Universitas Jember di antara 7 produk  lainnya yaitu tebu,  kopi,  dan  singkong.  Kedelai  dapat  diproses menjadi beberapa produk olahan seperti susu, tahu, tempe,  dan  tepung  sehingga  lebih  aplikatif  dan mudah dikonsumsi oleh berbagai lapisan masyarakat.  Tepung  kedelai  ternyata  memiliki kandungan  isoflavon yang  lebih tinggi dibandingkan produk  olahan  kedelai  lainnya,  yaitu  dengan kandungan  rata-rata  daidzein  sebesar  67,69%, genistein  89,42%, glicitein 20,02%  (Bhagwat et  al ., 2008).  Pemberian  terapi  profilaksis  dengan  diet tepung  kedelai  dapat  mengurangi  risiko  kerusakan hati akut pada tikus wistar jantan yang diinduksi CCl 4 dengan  cara  meningkatkan  antioksidan  intraseluler
seperti GSH, menurunkan level pembentukan MDA, menurunkan  level  SGOT,    dan  SGPT  hati  (Khan, 2012).
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian  tepung  kedelai (Glycine  max L .) sebagai hepatoprotektor  terhadap peningkatan  kadar malondialdehid (MDA) pada tikus wistar jantan yang diinduksi diazinon.

## Metode Penelitian

## Sampel tepung kedelai
Tepung kedelai ( Glycine max L . ) dalam penelitian ini dibuat  menggunakan  metode  basah  yaitu  dengan cara  kedelai  dengan  berat  2  kg  direndam  dalam  air dengan  perbandingan  2:1  selama  3  jam.  Setelah proses perendaman, kedelai ditiriskan, dan dikeringkan  di  bawah  sinar  matahari  selama  4  jam, kemudian  dilanjutkan  dengan  pengeringan  dalam oven  dengan  suhu  50 o C  selama  24  jam.  Setelah proses  pengeringan,  dilanjutkan  dengan  proses penggilingan dan pengayakan dengan menggunakan ayakan  80  mesh.  Setelah  itu  didapatkan  tepung kedelai  dengan  berat  bersih  1  kg.  Tepung  kedelai yang  diberikan  dengan  dosis  10%,  15%,  dan  20% untuk kelompok K1, K2 dan K3.

## Sampel penelitian
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian true experimental laboratories dengan rancangan penelitian posttest  only  control  group  design, bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  pemberian tepung  kedelai  terhadap  kadar  MDA  hati  pada mencit  yang  diinduksi  isoniazid  beserta  dosis efektifnya.    Penelitian  ini  sudah  mendapatkan persetujuan  dari  tim  etik  Fakultas  Kedokteran Universitas Jember. Penelitian dilakukan di laboratorium  Fisiologi  dan  Farmakologi  Fakultas Kedokteran Universitas Jember. Jumlah sampel yang digunakan  sebanyak  25  ekor  tikus  wistar  jantan dengan  berat  150-200  gram  yang  diambil  secara simple  random  sampling .  Sampel  dibagi  menjadi  5 kelompok  yaitu  kelompok  normal  (Kn),  kelompok kontrol  negatif  (K(-)),  kelompok  perlakuan  K1, kelompok  perlakuan  K2,  dan  kelompok  perlakuan K3, Proses induksi  diazinon dilakukan selama 5 hari. Kelomok normal diberikan sonde normal saline.
Kelompok  kontrol  negatif  K(-)  disondekan  normal saline kemudian diinduksi  diazinon dengan dosis 40 mg/kgBB  pada  hari  ke  29  selama  5  hari.  Kelompok perlakuan K1, K2 dan K3  disondekan tepung kedelai
dengan  dosis  10%,  15%,  dan  20%  selama  28  hari, kemudian  diinduksi  diazinon  dengan  dosis  40 mg/kgBB  pada  hari  ke  29  selama  5  hari.  Pada  hari ke-34  semua  sampel  diterminasi  dengan  cara  tikus dimasukkan ke dalam toples berisi kapas yang sudah dibasahi  oleh  eter.  Setelah  tikus  teranestesi dilakukan  pembedahan  dan  pengambilan  organ hepar.

## Pengukuran kadar MDA
Kadar MDA hati tikus diukur menggunakan pereaksi TBA  yang  akan  membentuk  produk  MDA-TBA berwarna  merah  muda  dan  diukur  menggunakan metode  spektrofotometri.  Organ  hati  dipotong kecil-kecil  lalu  dicuci  dengan  menggunakan  PBS. Organ hati yang sudah bersih ditimbang sebanyak 1 gram  dan  digerus  dalam  mortar  di  atas  balok  es kemudian  ditambahkan  NaCl  0,9%  dingin.  Dari masing-masing kelompok setelah dilakukan pembuatan  homogenat,  kemudian  disentrifugasi pada  kecepatan  8000  rpm  selama  20  menit, supernatan  diambil,  dan  dipindahkan  dalam microtube.  Sebanyak  100  µL  supernatan  hati ditambahkan 550 µL aquades steril, 100 µL TCA, 250 µL  HCl  1  M,  dan  100  µL  Na-Thiobarbiturat. Supernatan  dipanaskan  dalam    waterbath    dengan suhu  100ºC  selama  20  menit,  diangkat,  dan dibiarkan  dingin  pada  suhu  ruang.  Selanjutnya, disentrifugasi dengan kecepatan 500 rpm selama 10 menit.  Supernatan  diambil,  dan  dipindahkan  dalam microtube  baru.  Sampel  diukur  absorbansinya  pada panjang  gelombang  maksimum  533  nm.  Hasil dinyatakan dengan satuan µg/mL.

## Tabel 4.1 Rata-rata kadar MDA hati
Kelompok Perlakuan Rata-rata Kadar MDA Hati (µg/mL ± SD) (n=5) Kn K(-) K1 K2 K3 6,3534 ± 0,755033 9,226 ± 1,352479 8,8464 ± 0,331472 7,8836 ±0,614635 7,0374 ± 0,587869

## Analisis statistik
Analisis data yang digunakan adalah oneway ANOVA untuk mengetahui perbedaan kadar MDA hati antar kelompok  (p<0,05)  dan  dilanjutkan  dengan  uji Post hoc yaitu  LSD  untuk  mengetahui  kelompok  yang berbeda  signifikan  (p<0,05).  Uji  korelasi Pearson digunakan untuk mengetahui derajat korelasi antara variabel bebas dan variabel terikat.

## Hasil Penelitian
Data yang didapat berupa kadar MDA dengan satuan µg/mL seperti tampak pada Tabel 4.1.
Dari data tersebut dapat dilihat bahwa nilai rata-rata kadar MDA hati terkecil yaitu pada kelompok kontrol normal sebesar 6,3534 µg/mL, sedangkan nilai rata- rata  kadar  MDA  terbesar  yaitu  kelompok  kontrol negatif  sebesar  9,226  µg/mL.  Nilai  rata-rata  kadar MDA hati terkecil di kelompok perlakuan yaitu pada kelompok  dengan  pemberian  tepung  kedelai  20% sebesar 7,0374 µg/mL.
Gambar 1. Histogram hasil rata-rata kadar MDA hati *p<0,05  terhadap  kelompok  K(-)  dan ***p<0,001 terhadap kelompok K(-)
Hasil  analisis  data  menunjukkan  distribusi  data normal, varian data homogen sehingga diuji dengan One  Way  Anova dan  hasilnya  terdapat  perbedaan signifkan  antar  kelompok,  begitu  juga  dengan Post hoc LSD  (p<0,05).  Hasil  uji  Korelasi Pearson menunjukkan  besar  korelasi  antara  kedua  variabel tersebut  adalah  0,750  atau  negatif  kuat.  Arah korelasi  kedua  variabel  adalah  negatif,  yaitu  0,750, hal  tersebut  menunjukkan  bahwa  korelasi  kedua variabel  bersifat  terbalik,  yaitu  semakin  tinggi konsentrasi  tepung  kedelai  yang  diberikan  akan semakin rendah kadar MDA hati.

## Pembahasan
Penelitian  ini  masih  sangat  terbatas  karena  belum banyak  penelitian  tentang  pengaruh  tepung  kedelai pada  tikus  yang  diinduksi  diazinon.  Penelitian  ini bertujuan  untuk  mengetahui  pengaruh  tepung kedelai terhadap kadar MDA hati tikus wistar jantan yang diinduksi diazinon.
Hasil penelitian didapatkan rata-rata kadar MDA hati pada  kelompok  kontrol  normal  sebesar  6,3534 µg/mL.  Induksi  diazinon  40  mg/kgBB  selama  5  hari memperlihatkan adanya peningkatan rata-rata kadar
MDA  hati  pada  kelompok  kontrol  negatif  menjadi 9,226  µg/mL.  Kelompok  kontrol  normal  dan kelompok  kontrol  negatif  menunjukkan  adanya perbedaan  yang  signifikan.  Terbukti  bahwa  induksi diazinon  dapat  menyebabkan  peningkatan  kadar MDA  hati  karena  diazinon  mengandung  radikal bebas  yang  dapat  menyebabkan  stres  oksidatif  dan menginduksi terjadinya peroksidasi lipid.
Hasil  ini  sesuai  dengan  penelitian  sebelumnya bahwa  pemberian  diazinon  dengan  dosis  15 mg/kgBB  secara  oral  selama  empat  minggu  pada tikus  dapat  menyebabkan  peningkatan  MDA  hati tikus  (Lari et  al .,  2013).  Penelitian  serupa  lainnya menunjukkan  bahwa  diazinon  dapat  meningkatkan kadar  serum  alkalin  fosfatase,  alanin  transaminase, aspartat  trasaminase, gamma  glutamyl  transferase , bilirubin  total,  kreatinin,  dan  MDA,  sehingga menunjukkan  adanya  perubahan  histopatologi  dan biokimia hati (Al-Attar et al ., 2016). Diazinon diubah menjadi  bentuk  intermediet  aktif  diazoxon  oleh sitokrom hati P450s melalui pelepasan sulphur yang menempel  pada  fosfor  dan  insersi  atom  oksigen (desulfurasi oksidatif) (Abass et al. , 2012).
Diazoxon  berkonjugasi  dengan  beberapa  enzim  di hati  yaitu  enzim glutathion  S-transferase (GSTs) sehingga  menyebabkan  stres  oksidatif  berupa penurunan glutation  sulfyhidril (GSH)  intraseluler (Kaur et  al .,  2017).  Akibat  penurunan  GSH  sebagai antioksidan  maka  radikal  bebas  seperti  radikal hidroksil  (OH ∙ ), superoxide  anion radikal  (O 2 •− )  dan peroxyl radicals (ROO • ) tidak dapat diikat oleh GSH. Radikal  tersebut  bereaksi  dengan  asam  lemak  tak jenuh  ganda  pada  membran  sel  hati  sehingga menghasilkan  peroksidasi  lipid  yang  selanjutnya akan  mengubah  struktur  dan  fungsi  membran  sel berupa  meningkatnya  permeabilitas  membran hingga  kerusakan  sel  (Ayala et  al, 2014).  Reaksi peroksidasi  lipid  membran  sel  hati  menghasilkan produk akhir yaitu MDA (Retno et al ., 2012).
Pemberian  tepung  kedelai  konsentrasi  10%,  15%, dan  20%  menunjukkan  penurunan  kadar  MDA  hati tikus.  Jika  dibandingkan  dengan  kelompok  kontrol negatif,  pemberian  tepung  kedelai  konsentrasi  15% dan  20%  menunjukkan  perbedaan  yang  signifikan, sedangkan  tepung  kedelai  konsentrasi  10%  tidak memberikan  pengaruh  bermakna  terhadap  kadar MDA  hati  tikus.  Hasil  tersebut  sesuai  dengan penelitian  sebelumnya  tentang  pemberian  tepung kedelai  dengan  konsentrasi  10%,  25%,  dan  50% selama 14 hari terhadap kadar enzim hati dan profil lipid  pada  tikus  wistar,  pemberian  tepung  kedelai
*** * ***
10%  menunjukkan  hasil  yang  tidak  signifikan terhadap kadar MDA hati tikus (Anosike et al ., 2008).
Pemberian  tepung  kedelai  dengan  konsentrasi  15% dan 20% mampu mencegah peningkatan kadar MDA hati  tikus  wistar  jantan  yang  diinduksi  diazinon secara  signifikan.  Hasil  ini  sesuai  dengan  penelitian lain  bahwa  diet  tepung  kedelai  dengan  konsentrasi 10%  dan  15%  selama  7  hari  dapat  mencegah peningkatan  kadar  MDA  tikus  wistar  jantan  yang diinduksi  CCl 4 (Khan,  2012).  CCl 4 menyebabkan terjadinya  penurunan  signifikan  kadar  GSH.  GSH merupakan lini pertama pertahanan tubuh terhadap radikal  bebas.  Pada  kelompok  yang  diberi  tepung kedelai kadar GSH dipertahankan dalam jumlah yang cukup.
Diet tepung kedelai dapat mencegah toksisitas yang disebabkan oleh pemberian CCl4 melalui penurunan pembentukan  MDA  dan  inhibisi  level xanthine oksidase  (XO)  pada  hati.  Pemberian  tepung  kedelai konsentrasi  20%  apabila  dibandingkan  dengan kelompok  Kn  memiliki  perbedaan  yang  tidak signifikan,  menunjukkan  bahwa  pemberian  tepung kedelai  konsentrasi  20%  telah  mampu  menurunkan kadar  MDA  hati  tikus  sampai  mendekati  kadar normal.  Pernyataan  tersebut  didukung  oleh penelitian sebelumnya bahwa pemberian pemberian tepung  kedelai  dengan  konsentrasi  10%,  20%,  dan 30%  selama  56  hari  dapat  menurunkan  kadar  MDA tikus  dibandingkan  kelompok  kontrol  normal (Andrade et al. , 2013).
Penurunan  kadar  MDA  diduga  terjadi  karena senyawa isoflavon (golongan flavonoid) pada tepung kedelai  mampu  mencegah  terjadinya  peroksidasi lipid.  Tepung  kedelai  memiliki  senyawa  isoflavon berupa  daidzein, glicitein, dan  genistein  yang berperan  penting  sebagai  komponen  antioksidan (Evans et al. , 2011). Senyawa daidzein dan genistein bekerja melalui beberapa mekanisme, yang pertama sebagai hidrogen  atom  transfer (HAT)  yaitu  dengan mendonorkan  atom  hidrogen  dan single  electron transfer (SET)  dengan  mentransfer  elektron  untuk mereduksi  metal  ion,  radikal  dan carbonyls .
Mekanisme  transfer  hidrogen  dapat  mencegah tahap  inisiasi  peroksidasi  lipid  dengan  bereaksi dengan  lipid  radikal  atau  secara  langsung menghambat  tahap  propagasi  peroksidasi  lipid dengan bereaksi dengan peroxyl radikal atau radikal akoxyl sehingga  mencegah  pembentukan  MDA secara berkelanjutan (Aytul, 2010).

## Kesimpulan
Berdasarkan  hasil  penelitian  pemberian  tepung kedelai  dapat  mencegah  peningkatan  kadar  MDA hati tikus wistar jantan yang diinduksi diazinon.
Saran  ke  depan  perlu  penelitian  mengenai pemanfaatan  potensi  proteksi  tepung  kedelai terhadap  organ  hati  dengan  induksi  agen hepatotoksik  lainnya  dan  penelitian  dengan  durasi yang  lebih  lama  untuk  mengetahui  efek  tepung kedelai pada paparan diazinon kronis.

## Ucapan Terima Kasih
Peneliti mengucapkan terimakasih kepada dr. Desie Dwi  Wisudanti,  M.Biomed.  dan  dr.  Heni  Fatmawati, M.Kes.,  Sp.Rad.  atas  bimbingan  yang  diberikan dalam penulisan artikel penelitian ini.

## Daftar Pustaka
Abass K., M. Turpeinen, A. Rautio, J. Hakkola, dan O. Pelkonen.  2012  Metabolism  of  pesticides  by human  cytochrome  p450  enzymes  in  vitro  a survey. Insecticides advances in integrated pest management . 8 (1): 165 – 194.
Agustina,  N.  2016.  Diazinon. Makalah. Jakarta,  30
Mei 2016. 7 hlm.
Al-Attar,  A.  M.,  M.  Elnaggar,  dan  E.  Almalki.  2016.
Protective  effect  of  some  plants  oils  on diazinon  induced  hepatorenal  toxicity  in  male rats. Saudi Journal of Biological Science. 24 (1): 15-22.
Andrade,  G.  F.,  C.  de  Almeida,  A.  Espechit,  M. Dantas, L. Benjamin, S. Ribeiro, dan H. Martino. 2013. The addition of soyflour to cafetaria diet reduces  metabolic  risk  markers  in  wistar  rats. Lipids Health Dis. 12 (1): 145-174.
Anosike,  C.  A.,  O.  Obidoa,  dan  L.  U.  S.  Ezeanyika. 2008.  Beneficial  effects  of  soybean  diet  on serum  marker  enzymes,  lipid  profile,  and relative organ weights of wistar rats. Journal of Nutrition . 7 (6): 817-822.
Aribowo,  F.  P.,  A.  Sujoso,  dan  R.  Hartanti.  2016. Faktor  yang  berhubungan  dengan  gejala keracunan  akut  pestisida  organofosfat  pada petani  jeruk  (studi  di  desa  umbulsari kecamatan umbulsari kabupaten Jember).
Asmita,  N.  2010.Dampak  Penggunaan  Pestisida terhadap  Keanekeragaman  Arthopoda  dan Residunya  pada  Tanaman  Bawang  Merah ( Allium  cepa  var.  Ascolonicum )  di  Kecamatan
Lembah  Gumanti,  Sumatera  Barat. Skripsi . Padang: Fakultas Pertanian Universitas Andalas.
Ayala,  A.,  M.  Muñoz,  dan  S.  Argüelles.  2014.  Lipid peroxidation:  production,  metabolism,  and signaling  mechanisms  of  malondialdehyde  and 4-hydroxy-2-nonenal.  Oxidative  Medicine  and Cellular Longevity. 2 (2): 1-31.
Aytul,  K.  K.  2010.  Antimicrobial  and  Antioxidant Activities  of  Olive  Leaf  Extract  And  its  Food Applications. Tesis. Turki:  graduate  school  of engineering  and  sciences  of  Izmir  institute  of technology.
Bhagwat,  S.,  D.  Haytowitz,  dan  J.  Holden.  2008. USDA  database  for  the  isoflavone  content  of selected  foods.  Release  2.0.U.  S. Departement of Agriculture.Agricultural Research Service.
Evans,  M.,  J.  Elliott,  P.  Sharma,  R.  Berman,  dan  N. Guthrie. 2011. The effect of synthetic  genistein on  menopause  symptom  management  in healthy  postmenopausal  women:  A  multi- center,  randomized,  placebo-controlled  study. Maturitas . 68 : 189 – 196.
Hudayya,  A.,  dan  H.  Jayanti.  2012. Pengelompokan Pestisida  Berdasarkan  Cara  Kerja  (Mode  of Action). Bandung: Yayasan Bina Tani Sejahtera.
Kaur,  G.,  A.  Jain,  dan  S.  Singh.  2017.  CYP/PON genetic variations as determinant of organophosphate pesticides toxicity. Centre for
Environmental  Science  and  Technology. 96 (1): 187-201.
Khan,  T.  H.  2012.  Soy  diet  diminish  oxidativeinjure and  early  promotional  events  induced  by  CCL 4 in rat liver. International Journal of Pharmacology . 1 : 30-38.
Komisi  Pestisida.  2014.  Pedoman  Teknis  Kajian Pestisida  Terdaftar  dan  Beredar  TA.  2014. Direktorat  Jendral  Prasarana  dan  Sarana Pertanian.
Lari,  P.,  M.  Rashedinia,  K.  Abnous,  dan  H. Hosseinzadeh.  2013.  Evaluation  of  diazinon- induced  hepatotoxicity  and  protective  effects of  crocin. Toxicology  and  Industrial  Health. 31 (4): 367-376.
Oksay,  T.,  M.  Naziroglu,  O.  Ergun,  S.  Dogan,  O. Zatiks,  A.  Armagan,  A.  Ozorak,  dan  O.  Elik. 2012.  N-acetyl  cysteine  attenuates  diazinon exposure-induced  oxidative  stress  in  rat  testis. Article in Andrologia.
Ozcan,  T.,  A.  Bayizit,  L.  Ersan,  dan  B.
Delikanli.Phenolics in human health. International Journal of Chemical Engineering and Applications. 5 (5): 393-396.
Retno,  T.,  S.  Widyastuti,  dan  N.  Suarsana.  2012. Pengaruh  pemberian isoflavon  terhadap peroksidasi  lipid  pada  hati  tikus  normal. Indonesia Medicus Veterinus . 1 (4) : 483 – 491.