## ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF BROWN
MACROALGAE LIPID ( Sargassum duplicatum) TO THE
Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) AND

## Shigella dysentriae BACTERIA
Riong Seulina Panjaitan 1* , Ani Rombe Sarungngu 1 , Lika Lastri Sitorus 1
1 Fakultas Farmasi Universitas 17 Agustus 1945 Jakarta
*E-mail: riongpanjaitan@yahoo.co.id
Diterima: 10 Oktober 2019. Disetujui: 28 Maret 2020. Dipublikasikan: 26 April 2020 DOI: 10.30870/educhemia.v5i1.6432
Abstract: Methicillin  Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA)  is  the  main  cause  of nosocomial  infections  in  burn  patients  due  to  the  occurrence  of  antibiotic  resistance. Dysentery or shigellosis is an infection that causes sores (ulcers) in the large intestine in the middle  caused  by  the  bacteria Shigella  dysentriae .  Some  studies  show  that Sargassum duplicatum has antibacterial abilities. This study aims to determine the antibacterial activity of Sargassum  duplicatum seaweed  lipid  extract  to  the  bacteria Methicillin  Resistant Staphylococcus  aureus (MRSA)  and Shigella  dysentriae bacteria.  The  method  used  in  this study was the Folch method (using sochletation with a solvent ratio of chloroform:methanol (2:1))  to  extract  lipids  from Sargassum  duplicatum .  Then  using  the  paper  disc  diffusion method with positive control of tetracycline. From the extraction results obtained, the lipid levels  of Sargassum  duplicatum ,  where  the  chloroform  phase  was  0.493%  (b  /  b)  and  the methanol phase was 2.40% (b / b). The results of the lipid antibacterial activity of Sargassum duplicatum at the pure concentration in the methanol phase with an average concentration of 7.07 mm on the Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) Bacteria while in the Shigella  dysentriae bacteria  obtained  an  average  of  7.05  mm  and  the  chloroform  phase obtained  an  average  diameter  of  9.16  mm  on Methicillin  Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA)  and  in Shigella  dysentriae Bacteria  an  average  of  3.99  mm  while  tetracycline antibiotics amounted to 11.67 mm on Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and 18.98 mm in Shigella dysentriae bacteria.
Keywords: Fatty acids; Lipid;  MRSA; Sargassum duplicatum; Shigella dysentriae
Abstrak: Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) merupakan penyebab utama infeksi nosokomial pada pasien luka bakar, karena terjadinya resisten antibiotik.Disentri atau shigellosis adalah infeksi yang menimbulkan luka (tukak) di usus besar pada bagian tengah yang  disebabkan  oleh Shigella  dysentriae .  Beberapa  penelitian  menunjukkan  bahwa Sargassum  duplicatum memiliki  kemampuan  antibakteri.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk mengetahui  aktivitas  antibakteri  ekstrak  lipid  rumput  laut Sargassum  duplicatum terhadap bakteri Methicillin  Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA)  dan Shigella  dysentriae . Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode Folch (menggunakan sokhletasi, dengan  perbandingan  pelarut  kloroform:metanol  (2:1))  untuk  mengekstrak  lipid  dari
Sargassum duplicatum . Selanjutnya, aktivitas antibakteridiuji dengan menggunakan metode difusi  kertas  cakram  dengan  kontrol  positif  adalah  tetrasiklin.Dari  hasil  ekstraksi  diperoleh kadar  lipid Sargassum  duplicatum ,  sebesar  0,493%  (b/b)  untuk  fasa  kloroform  dan  fasa metanol  sebesar  2,40%  (b/b).  Hasil  aktivitas  antibakteri  lipid Sargassum  duplicatum pada fasa metanol (konsentrasi murni (100%)) diperoleh rerata diameter daya hambat sebesar 7,07 mm terhadap Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) sedangkan pada bakteri Shigella  dysentriae dihasilkan  rerata  diameter  daya  hambat  sebesar  7,05  mm.  Untuk  fasa kloroform,  diperoleh  rerata  diameter  daya  hambat  sebesar  3,16  mm  pada Methicillin Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA)  sedangkan  pada Shigella  dysentriae rerata diameter  daya  hambat  sebesar  3,99  mm.  Kemudian,  rerata  diameter  daya  hambat  dari antibiotik  tetrasiklin  sebesar  11,67  mm  ( Methicillin  Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA))  dan 18,98 mm ( Shigella dysentriae).
Kata Kunci: Asam lemak, lipid, MRSA, Sargassum duplicatum, Shigella dysentriae

## PENDAHULUAN
Rumput  laut  (makroalga)  adalah sumber  daya  hayati  laut  yang  umum ditemukan  di  perairan  Indonesia,  salah satunya  dari  marga Sargassum .  Pada umumnya  rumput  laut  (makroalga) mengandung  rata-rata  kadar  lipid  nabati adalah 1-5% dari berat kering
(Dharmananda,
2002). Makroalga
( Sargassum sp.)  memiliki  trigliserida dengan persentase sekitar 0,62% (Ryantin Gunawan & Suhendra, 2012).
Dalam  dunia  kesehatan,  rumput  laut cokelat  memiliki  berbagai  senyawa bioaktif  yang  dapat  dimanfaatkan  antara lain  sebagai:  antibakteri,  antikanker, antioksidan, antihiperglikemik, antiobesitas, antistress oksidatif, pencegahan  komplikasi  diabetes  melitus, antikanker, antisinar ultra– violet,antitrombotik,antikoagulan, antiproliferatif  (anti  pembelahan  sel
secara  tidak  terkendali),  dan  antivirus (Asfar, 2015) . Beberapa penelitian telah
menunjukkan  bahwa  ekstrak  rumput  laut dari  berbagai  pelarut  memiliki  aktivitas antimikroba, seperti penelitian Renhoran, (2012) menyatakan alkaloid yang terdapat  dalam  ekstrak  metanol,  etanol, diklorometana  dan  eter Sargassum duplicatum memiliki kemampuan sebagai antibakteri.  Kemudian,  Alamsyah  & Widowati,  (2014)  melaporkan  bahwa ekstrak  alkaloid Sargassum  cinereum mempunyai aktivitas antibakteri terhadap Escherichia  coli dan Staphyllococus aureus . Selanjutnya,  Kemer et al., (2015) menyatakan  bahwa  ekstrak  etanol  alga cokelat  dapat  menghambat  pertumbuhan bakteri Shigella  dysentriae. Pada  tahun 2018,  Panjaitan  dan  Fida  melaporkan bahwa  fraksi  metanol  dari  lipid Sargassum polycistum menunjukan adanya  aktivitas  antibakteri  terhadap
bakteri
Bacillus aureus
dan
Staphylococcus aureus .
Terdapat dua kasus resistensi bakteri terhadap  antibiotik  yang  umum  terjadi yaitu  kasus  disentri  dan  infeksi nosocomial.  Disentri  atau shigellosis adalah  infeksi  yang  menimbulkan  luka (tukak) di usus besar pada bagian tengah yang  sering  disebut  kolon  yang disebabkan oleh bakteri Shigella dysentriae .  Gejala  khas  dari  penyakit  ini adalah sakit di perut yang sering disertai dengan  tinja  mengandung  darah  dan lendir serta nanah (Dewi, 2013).
Di  Indonesia,  resistensi  bakteri Shigella  dysentriae terhadap  antibiotik jenis  ampicillin  dan  kloramfenikoltelah banyak  dilaporkan,  tercatat  sekitar  29% kasus  kematian  diare  yang  disebabkan oleh  penyakit  disentri  menimpa  anak- anak pada rentang umur 1 sampai 4 tahun (Bangkele  &  Greis,  2015).  Lebih  lanjut, kasus  penyakit  disentri  tertinggi  di provinsi  DKI  Jakarta  ditemukan  pada kelompok  balita  sebanyak  8,9%,  dimana angka  ini  jauh  lebih  tinggi  dibandingkan untuk semua kelompok umur (4,3%) dan juga merupakan jumlah yang tertinggi di antara  provinsi  yang  lain  di  Indonesia (Kemenkes Ri., 2013).
Infeksi  nosokomial  adalah  infeksi yang  didapat  oleh  pasien  yang  sedang dirawat  di  rumah  sakit  dan  menjadi ancaman  yang  cukup  serius.  Adapun
penyebab  infeksi  nosokomial  ini  90% disebabkan oleh bakteri seperti,
Klebsiella  pneumonia,  Staphylococcus aureus,  Escherecia  coli,  Proteus  sp  dan Pseudomonas aeruginosa. Pada manusia, penyakit  (kasus) Methicillin  Resistant Staphylococcus  aureus (MRSA)  muncul akibat  luka  pada  permukaan  kulit  dan abses lokal, contohnya infeksi luka bakar yang  merupakan  masalah  kesehatan  di dunia  terutama  di  negara  berkembang. Luka  bakar  merusak  fungsi  kulit  untuk mencegah invasi mikroorganisme sehingga  pasien  luka  bakar  menjadi rentan    terhadap    infeksi  (Sarabashi, 2010). Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) disebabkan  oleh  bakteri  yang  patogen pada  pasien  infeksi  luka  bakar  sebagai akibat  dari  penggunaan  antibiotik  yang sembarangan dan mengakibatkan resistensi antibiotik (Saputro et al., 2016).
Penelitian  ini  dirancang  untuk mengetahui  kemampuan  lipid  dari Sargasssum  duplicatum terhadap  bakteri Methicillin  Resistant  Staphylococcus aureus (MRSA)  dan Shigella  dysentriae sebagai  penyebab  penyakit  infeksi nosocomial dan disentri.

## METODE

## Determinasi Makroalga
Determinasi sampel dilakukan dengan  tujuan  untuk  mengetahui  jenis
dari makroalga yang digunakan.
Determinasi dilakukan di Pusat Penelitian Oseanografi - Lembaga Ilmu
Pengetahuan  Indonesia  (LIPI)  Ancol Jakarta  Utara  Jl.  Pasir  Putih  Raya  No.1, RT.8/RW.10,  Kota  Tua,  Pademangan, Jakarta  Utara,  Daerah  Khusus  Ibukota Jakarta, 14430.

## Ekstraksi  Lipid Sargassum duplicatum
Ekstraksi lipid makroalga ( Sargassum duplicatum ) dilakukan dengan  cara  metode  sokhlet  yang menggunakan  campuran  pelarut  antara
kloroform dan metanol (2:1;v/v) berdasarkan  metode Folch .  Sokhletasi dilakukan sampai semua lipid Sargassum duplicatum terekstrak,  yang  ditandai dengan warna larutan di dalam sifon pada tabung  sokhlet  berubah  menjadi  larutan bening.  Dari  hasil  ekstraksi  tersebut didapatkan  dua  fasa  yaitu  fasa  atas  (fasa air:metanol)  dan  fasa  bawah  (fasa air:kloroform),  kemudian  kedua  fasa tersebut dipisahkan dengan menggunakan corong  pisah  Selanjutnya  pada  masing- masing  fasa  dipekatkan  dengan rotary evaporator untuk  mendapatkan  lipid murni  bebas  pelarut.  Lipid  yang diperoleh  dimasukkan  ke  dalam  botol coklat  dan  disimpan  di  lemari  pendingin pada suhu 4 o C .
Uji  Aktivitas  Antibakteri  dari  Ekstrak Lipid Sargassum duplicatum
Pengujian aktivitas antibakteri terhadap  ekstrak  lipid  rumput  laut ( Sargassum  duplicatum )  pada  bakteri Shigella  dysentriae dilakukan  dengan metode disc-diffusion .  Pertama,  cawan petri  yang  berisi  media nutrient  agar (NA) disebarkan bakteri Shigella dysentriae menggunakan batang L, kertas cakram  ditetesi  ekstrak  lipid  rumput  laut Sargassum duplicatum dengan konsentrasi 100%, 80%, 60%, 40%, 20% pada  masing-masing  fasa  (atas  dan bawah).  Kedua,  cawan  petri  berikutnya dibagi  menjadi  2  bagian  untuk  KKN (Kelompok  Kontrol  Negatif)  yang merupakan  pelarut  klofororm  dan metanol.  Dan  yang  terakhir  adalah Kelompok  Kontrol  Positif  (KKP)  yaitu antibiotik  tetrasiklin  (30  µg)  dilakukan pada satu cawan petri. Selanjutnya setiap petri  diinkubasi  pada  suhu  37 o C  selama 24  jam.  Kemudian  diamati  dan  diukur zona  bening  yang  terbentuk  di  sekitar kertas cakram dengan jangka sorong. Hal yang  sama  juga  dilakukan  terhadap bakteri Methicillin Resistant
Staphylococcus aureus (MRSA).

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Lipid Makroalga Sargassum duplicatum
Rumput  laut  yang  diperoleh  dari Pantai  Sayang  Heulang,  Kabupaten Garut,  Jawa  Barat  merupakan  spesies Sargassum  duplicatum (Gambar  1)
berdasarkan  hasil  determinasi  yang dilakukan di Pusat Penelitian Oseanografi -  Lembaga  Ilmu  Pengetahuan  Indonesia (LIPI) Ancol, Jakarta Utara.
Gambar 1. Sargassum duplicatum
Ekstraksi lipid rumput laut
Sargassum duplicatum berlangsung selama  16-18  jam  sampai  kandungan lipidnya  terekstrak  semua  yang  ditandai dengan  perubahan  warna  dari  cokelat menjadi  bening  pada  tabung  sokhlet. Kadar  lipid  yang  diperoleh  tercantum pada Tabel 1.
Tabel 1. Kadar Lipid Sargassum duplicatum Jenis Fraksi Kadar Lipid(% v/b) Kloroform 0,5% Metanol 2,437% Berdasarkan hasil pemeriksaan
organoleptis,  dapat  disimpulkan  bahwa ektsrak  lipid Sargassum  duplicatum berwarna  cokelat  (fasa  kloroform)  dan berwarna coklat kehijauan (fasa metanol) berbentuk  agak  mengental  seperti minyak,  berwujud  cair,  memiliki  rasa
agak pahit, dan berbau khas minyak ikan (amis).
Fasa kloroform Fasa metanol
Gambar 2. Lipid Sargassum duplicatum

## Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Lipid Sargassum duplicatum
Lipid Sargassum  duplicatum yang diperoleh pada konsentrasi murni menunjukkan  aktivitas  antibakteri  pada kedua bakteri resisten tersebut ( Methicillin  Resistant  Staphylococcus aureus (MRSA) dan Shigella dysentriae) . Akan  tetapi,  jika  ditinjau  perbedaan ukuran  diameter  daya  hambat  yang dihasilkan oleh lipid Sargassum duplicatum pada  konsentrasi  murni (100%) terhadap
penghambatan pertumbuhan  kedua  bakteri  tersebut (Tabel  2  dan  Tabel  3)  tidak  terdapat perbedaan yang terlalu signifikan.
Selanjutnya,  penentuan  konsentrasi hambat  minimum  lipid Sargassum
duplicatum dari  fasa  metanol  terhadap bakteri Methicillin Resistant
Staphylococcus  aureus (MRSA)  dan Shigella  dysentriae memberikan  zona
hambat hingga pada konsentrasi minimum yaitu 20%. Sementara itu, pada
fasa kloroform lipid Sargassum duplicatum terdapat perbedaan
konsentrasi  hambat  miniumum  untuk kedua jenis bakteri tersebut. Dimana fasa kloroform  lipid Sargassum  duplicatum memberikan konsentrasi hambat minimum pada konsentrasi 60% terhadap bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus  aureus (MRSA)  dan konsentrasi  80%  pada  bakteri Shigella dysentriae .  Kontrol  positif  (antibiotik tetrasiklin)  pada  masing-masing  bakteri menghasilkan  zona  hambat  rata-rata sebesar  11,67  mm  (terhadap  bakteri Methicillin  Resistent  Staphylococcus
aureus (MRSA) dan 18,98 mm (terhadap Shigella dysentriae) .
Jika  dibandingkan  ukuran  diameter zona  hambat  yang  dihasilkan  oleh  lipid Sargassum  duplicatum pada  kedua  fasa dengan tetrasiklin (kontrol positif) dalam menghambat pertumbuhan bakteri Methicillin  Resistant  Staphylococcus aureus (MRSA) (Tabel 2) dan Shigella dysentriae (Tabel  3)  maka  aktivitas antibakteri dari lipid Sargassum duplicatum masih tergolong rendah. Nilai konsentrasi  hambat  minimum  (KHM) dari masing-masing fasa lipid rumput laut Sargassum duplicatum dapat dilihat pada Tabel 2 dan Tabel  3.
Tabel 2. Ukuran Diameter Daya Hambat Terhadap Bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) Konsentrasi Rerata Diameter Daya Hambat (mm) Pada Fasa Kloroform Rerata Diameter Daya Hambat (mm) Pada Fasa Metanol 100% 3,16 7,07 80% 2,31 5,64 60% 1,05 4,86 40% 0 3,42 20% 0 2,47 Kontrol positif (tetrasiklin) 11,67 Kontrol negatif (pelarut metanol) 0 Kontrol negatif (pelarut kloroform) 0 Tabel 3. Ukuran Diameter Daya Hambat Terhadap Bakteri Shigella dysentriae Konsentrasi Rerata Diameter Daya Hambat (mm) pada Fasa Kloroform Rerata Diameter Daya  Hambat (mm) pada Fasa Methanol 100% 3,99 7,05 80% 3,10 6,76 60% 0 6,63 40% 0 4,69 20% 0 4,32 Kontrol positif (tetrasiklin) 18,98 Kontrol negatif (pelarut metanol) 0 Kontrol negatif (pelarut kloroform) 0
Dari pemaparan tersebut dapat disimpulkan  bahwa  pada  lipid Sargassum duplicatum pada  fasa  metanol  memiliki kemampuan  aktivitas  antibakteri  yang cukup  kuat  terhadap  bakteri Methicillin Resistent  Staphylococcus  aureus (MRSA) dan Shigella  dysentriae sedangkan  untuk fasa kloroform tergolong lemah.
Pengolongan  tersebut  sesuai  dengan kriteria  Davis,  (1971),  dimana  David mengklasifikasikan  kekuatan  aktivitas antibakteri  berdasarkan  ukuran  diameter zona  hambat  yang  terbentuk  menjadi empat  golongan  yaitu:    (1)  golongan sangat  kuat,  jika  diameter  zona  hambat yang  terbentuk  >20  mm,  (2)  golongan kuat,  jika  diameter  zona  hambat  yang terbentuk 10-20 mm, (3) golongan sedang, jika diameter zona hambat yang terbentuk 5-10 mm dan (4) golongan lemah, jika jika diameter  zona  hambat  yang  terbentuk  <5 mm.
Beberapa literatur menyatakan Arumugham,Suresh.,  dkk,  2014;  Andrew &  Valerie,  2010  bahwa  lipid  (termasuk asam lemak) dapat menghambat
pertumbuhan  bakteri  yaitu  melalui  aksi bakterisida, proses oksidatif dan menghambat sintesis asam lemak, kemudian  asam  lemak  akan  berinteraksi dengan membran seluler yang menyebabkan  kebocoran  molekul  dari  sel sehingga  bakteri  tersebut  tidak  dapat tumbuh.
Aktivitas  antibakteri  masing-masing fasa  lipid  rumput  laut Sargassum duplicatum pada  kondisi  murni  memiliki tingkat  aktivitas  yang  berbeda  jauh  jika dibandingkan  dangan  kontrol  positif (tetrasiklin).  Hal  ini  disebabkan  karena tetrasiklinmerupakan
antibiotik
berspektrum  luasyang  bekerja  dengan menghambat  sintesis  protein  Ayuning Putri  M,  Herawati  D,  (2015). Selanjutnya alasan  mengapa  tetrasiklin  memberikan aktivitas  antibakteri  yang  jauh  lebih  besar (kuat) dibandingkan dengan lipid Sargassum  duplicatum karena tetrasiklin bekerja  dengan  cara  menghambat  sintesis protein  pada  bakteri  sedangkan  lipid Sargassum  duplicatum diduga  bekerja dengan  cara  merusak  permeabilitas membran sel dari bakteri tersebut sehingga terjadi  kebocoran  sel  dan  mengakibatkan bakteri tersebut mati.

## KESIMPULAN
Ekstraksi  kasar  lipid  rumput  laut cokelat ( Sargassum duplicatum ) didapatkankadar  lipid  pada  fasa  metanol lebih  besar    yaitu    sebesar  2,437%  b/b, sedangkan  pada  fasa  kloroform  sebesar 0,5%  b/b.  Lipid Sargassum  duplicatum (konsentrasi  murni)  memberikan  rata-rata diameter  zona  hambat  sebesar  13,07  mm (fasa  metanol)  dan  9,16  mm  (fasa kloroform)  pada  bakteri Methicillin Resistant  Staphylococcusaureus (MRSA).
Sedangkan,pada Shigella  dysentriae, lipid Sargassum  duplicatum (konsentrasi  murni) memberikanrata-ratadiameter zona hambat sebesar  6,33  mm  (fasa  metanol)  dan  3,99 mm  (fasa  kloroform).  Konsentrasi  hambat minimum  (KHM)  dari  lipid Sargassum duplicatum pada  konsentrasi  20%  (fasa metanol)  dan  konsentrasi  60%  (fasa kloroform)  terhadap  bakteri Methicillin Resistant  Staphylococcus  aureus (MRSA) sedangkan pada bakteri
Shigella
dysentriae memiliki  konsentrasi  hambat minimum  (KHM)  yaitu  pada  konsentrasi 20%  (fasa  metanol)  sebesar  4,32  mm  dan konsentrasi 80% (fasa kloroform), sebesar 3,10 mm.
Penelitian  ini  memiliki  implikasi yang positif khususnya pada dunia farmasi dan  kesehatan  di  dalam  pencarian  bahan baku obat antibakteri dari bahan alam yang berasal  dari  laut  yaitu  dari  makroalga Sargassum duplicatum.

## DAFTAR PUSTAKA
Alamsyah, H. K., & Widowati, I. (2014). Aktivitas Antibakteri Ekstrak
Rumput  Laut  Sargassum  cinereum
(J.G.  Agardh)  Dari  Perairan  Pulau Panjang  Jepara  Terhadap  Bakteri
Escherichia coli Dan Staphylococcus epidermidis. Journal  of  Marine Research , 3 (2), 69–78.
Andrew,  p. D., & Valerie,  j. S. (2010).
Antibacterial  free  fatty  acids : activities , mechanisms of action and biotechnological  potential. Applied
Microbiology  and  Biotechnology ,
85 (6),
1629–1642.
https://doi.org/10.1007/s00253
Arumugham,Suresh.,Ramasamy,Praveen kumar.,Ramasamy,Thangaraj.,Felix,
Lewis,Oscar.,Edachery,Baldev.,Dhar umadurai,Dhanasekaran and Nooruddin,  T.  (2014).  Microalgal fatty  acid  methyl  ester  a  new  source
of bioactive compounds with antimicrobial  activity. Journal  of Tropical  Disease , 4 ,  S979–S984. https://www.sciencedirect.com/scien ce/article/pii/S2222180814607696 Asfar, N. W. (2015). Uji Toksisitas Akut Alga  Coklat  (  Sargassum  sp) Terhadap  Mencit  (  Mus  muscullus) .
11, 14.
Ayuning  Putri  M,  Herawati  D,  K.  N.
(2015). Pengembangan metode analisis  antibiotik  tetrasiklin  dalam hati ayam menggunakan
kromatografi  cair  kinerja  tinggi (KCKT). Prosiding Penelitian Sivitas Akademika  Unisba  (Kesehatan  Dan Farmasi) , 372–381.
Bangkele, E. Y., & Greis, S. (2015). Efek Anti  Bakteri  Dari  Ekstrak  Lengkuas Putih ( Alpinia galangal [ L ] Swartz )  Terhadap  Shigella  dysenteriae
Healthy Tadulako Journal ( Elli Yane B , Nursyamsi , Silvia Greis : 52-60 ) Disentri  basiler  atau  shigellosis merupakan suatu penyakit infeksi ya. Jurnal  Kesehatan  Tadulako , 1 (2),
52–60. http://jurnal.untad.ac.id/jurnal/index. php/HealthyTadulako/article/viewFil
e/5737/4503
Davis,  W.  W.  dan  T.  R.  S.  (1971).  Disc plate  methods  of  microbiological antibiotic  assay. Microbiology , 22 ,
659–665.
Dewi,  A.  K.  (2013).  Isolasi,  Identifikasi dan  Uji  Sensitivitas  Staphylococcus aureus  terhadap  Amoxicillin  dari
Sampel  Susu  Kambing  Peranakan Ettawa  (PE)  Penderita  Mastitis  Di Wilayah  Girimulyo,  Kulonprogo, Yogyakarta. American  Journal  of
Public  Health , 31 (2),  0126–0421. https://doi.org/10.2105/ajph.45.9.113
8.
Dharmananda, S. (2002). The nutritional and  medicinal  value  of  seaweeds used in Chinese medicine .
Kemenkes  Ri.  (2013). Riset  Kesehatan Dasar; RISKESDAS.
Kemer, K., Paransa, D. S. J., Rumengan,
A.  P.,  &  Mantiri,  D.  M.  H.  (2015). Antibakteri  Dari  Beberapa  Ekstrak
Pada  Alga  Coklat. Jurnal  LPPM
Bidang Sains Dan Teknologi , 2 (2000), 73–81. Renhoran, M. (2012). Aktivitas antioksidan dan antimikroba Sargassum polycystum. 77. http://repository.ipb.ac.id/bitstream/h andle/123456789/63631/C12mre.pdf
?sequence=6&isAllowed=y
Ryantin  Gunawan,  E.,  &  Suhendra,  D.
(2012).  Screening  Dan  Analisis Kadar  Omega-3  Dari  Rumput  Laut Pulau  Lombok  Ntb. Molekul , 7 (2),
95.
https://doi.org/10.20884/1.jm.2012.7.
2.111
Saputro,  I.,  Zarasade,  L.,  &  Prasanti,  R.
(2016). Hambatan Kolonisasi
Methicillin  Resistant  Staphylococcus Aereus  oleh  Ekstrak  Kulit  Delima pada  Luka  Bakar  Derajat-2  pada Tikus  (Inhibition  Of  Methicillin Resistant  Staphylococcus  Aureus Bacteria  Colonization  On  Second Degree  Burn  Wound  In  Wistar  Rat By US. Jurnal Veteriner , 17 (3), 418–
423.
https://doi.org/10.19087/jveteriner.20 16.17.3.418
Sarabashi,  S.  (2010). Anatomy  of  the Skin.  Dalam:  Sarabashi  S(Ed). (1st ed.).  Jaypee  Brothers  Medical Publisher.