## UJI AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL KULIT ARI BUAH JENGKOL
(Pithcelobium jiringa) SEBAGAI BIOLARVASIDA
NYAMUK (Aedes aegypti L.)
Noverda Ayuchecaria*, Nida Munirah, Amaliyah Wahyuni, Eka Kumalasari, Ratih Pratiwi Sari, Siska Musiam
Akademi Farmasi ISFI Banjarmasin
* Email: noverdaayu24@gmail.com
Artikel diterima: 28 Februari 2019; Disetujui: 28 Maret 2019

## ABSTRAK
Larvasida masih merupakan lini pertama dalam mencegah perkembangbiakan nyamuk Aedes aegypti L yang menyebabkan penyakit Demam Berdarah Dengue (DBD). Indonesia sendiri sebagai negara tropis memiliki banyak tanaman yang dapat digunakan sebagai biolarvasida  salah satunya adalah tanaman jengkol (Pithcelobium  jiringa) .  Kulit  ari  buah  jengkol  mengandung  metabolit sekunder  seperti  flavonoid,  saponin,  tannin  dan  triterpenoid  dimana  senyawa  ini memiliki  efek  larvasida.  Tujuan  dilakukannya  penelitian  ini  adalah  untuk mengetahui  aktivitas  ekstrak  etanol  kulit  ari  buah  jengkol  sebagai  biolarvasida nyamuk Aedes  aegypti L.  dari  nilai  LC 50 .  Penelitian  ini  merupakan  penelitian eksperimental  laboratorium.  Konsentrasi  perlakuan  yang  digunakan  dalam penelitian  ini  adalah  konsentrasi  10%,  30%,  dan  50%.  Temephos  1%  digunakan sebagai  kontrol  positif.  Konsentrasi  kemudian  diujicobakan  terhadap  20  larva Aedes  aegypti L.  instar  III  Hasil  analisis  SPSS  dengan  signifikansi  <0,05 menunjukkan  bahwa  ada  pengaruh  perlakuan  terhadap  jumlah  kematian  larva, dimana dari hasil analisis Tuckey menunjukkan bahwa konsentrasi 30% dan 50% dan  Temephos  1%  menunjukan  perbedaan  yag  bermakna  jumlah  kematian  larva uji.  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa  ekstrak  etanol  kulit  ari  buah  jengkol (Pithcelobium jiringa) efektif sebagai biolarvasida nyamuk Aedes aegypti L. Hasil analisis analisis probit menunjukkan LC 50 esktrak terhadap larva Aedes aegypti L. adalah  20.4716%  yang  merupakan  golongan  racun  rendah  pada  lingkungan perairan.
Kata kunci: Demam Berdarah Dengue, Biolarvasida, Pithcelobium jiringa , Aedes aegypti L.

## ABSTRACT
Larvasida is still the first line in the prevention of Dengue Hemorrhagic Fever (DHF) disease caused by Aedes aegypti L. mosquitoes. Indonesia itself as a tropical country has many beneficial plants, one of which is Pithcelobium jiringa pericarp. Until now, the use of  pericarp is still lacking even though jengkol fruit peels contain secondary  metabolites  such  as  flavonoids,  saponins,  tannins  and  triterpenoids, which  have  larvacidal  effects.  The  purpose  of  this  study  was  to  determine  the activity of ethanol extract of Pithcelobium jiringa pericarp as biolarvasida of Aedes
aegypti L. mosquitoes from LC 50 values. The treatment concentration used in this study  was  concentrations  of  10%,  30%,  and  50%.  Temephos  1%  is  used  as  a positive control. The concentration was then tested on 20 Aedes aegypti L. larvae. The results showed that there was a treatment effect (sig <0.05) on the number of larval  deaths,  which  from  the  results  of  Tuckey's  analysis  showed  that  30%  and 50%  concentrations  and  1%  Temephos  showed  significant  differences  in  the number of test larvae deaths. The results showed that the extract was effective as biolarvasida of Aedes aegypti L. mosquitoes. The results of probit analysis showed LC50 extract to Aedes aegypti L. larvae was 20.4716% which is a low toxin group in aquatic environments.
Keywords:  Dengue  Hemorrhagic  Fever,  Bio  larvasida,  Pithcelobium  jiringa, Aedes aegypti L.

## PENDAHULUAN
Indonesia merupakan salah satu negara  tropis  paling  besar  di  dunia. Iklim tropis pada daerah ini nerkolerasi  dengan  adanya  berbagai penyakit tropis yang disebabkan oleh nyamuk.  Salah  satu  penyebab  utama munculnya epidemi bermacam penyakit tropis adalah vektor penyakit yang tidak terkendali (Lailatul dkk., 2010). Menurut laporan  WHO  lebih  dari  70%  dari populasi  beresiko  terinfeksi  virus Demam  Berdarah Dengue (DBD) berasal  dari  Asia  Pasifik  seperti Indonesia.
Indonesia sendiri
menduduki  peringkat  kedua  kasus DBD  terbesar  setelah  Brazil  (WHO, 2009).
DBD  di  Indonesia  menjadi penyakit yang sulit diberantas karena laju perkembangbiakan nyamuk
Aedes  aegypti L. yang  menularkan penyakit ini cukup cepat. Oleh karena itu  diperlukan  upaya  pemberantasan nyamuk Aedes  Aegypti L.  dengan memutus  mata  rantai  penyebaran nyamuk Aedes aegypti
L. menggunakan  larvasida    (Daniel, 2008).  Selama  ini,  penggunaan insektisida  sebagai  larvasida  dikenal sebagai cara yang paling umum dalam pengendalian  pertumbuhan  vektor nyamuk Aedes  Aegypti L  (Musiam dkk., 2018).
Larvasida yang umum digunakan  saat  ini  adalah  larvasida berbahan  dasar  kimia  sintetis  yaitu bubuk  abate  yang  mengandung insektisida  Temephos  1%  (Hoedojo dan Zulhasril, 2008). Namun sekarang, resistensi terhadap
Temephos telah banyak ditemukan di Brazil, Kuba, El Savador, Argentina,
Venezuela,  Peru,  serta  Colombia (Grisales et  al .,  2013)  Resistensi Temephos  juga  terjadi  di  Indonesia, seperti  Kota  Banjarmasin  (Istiana et al ., 2012) Berkembangnya resistensi, peningkatan biaya insektisida sintesis dan  efek  yang  berbahaya  terhadap manusia  dan  populasi  non  target merupakan  alasan  pencarian  produk berbahan  dasar  tanaman  belakangan ini menjadi sangatlah penting.
Indonesia yang kaya akan flora mempunyai  berbagai  jenis  tanaman yang  berpotensi  sebagai  obat  obatan maupun biolarvasida, termasuk repellent (obat  penolak  serangga) (Anggraini,  2012).  Salah  satunya adalah  dengan  penggunaan  kulit jengkol.  Selain  karena  kulit  jengkol mudah didapatkan dan jarang digunakan,  kulit  jengkol  diduga mempunyai  sifat  toksik  terhadap larva  nyamuk  karena  mengandung senyawa  kimia  alkaloid,  terpenoid
dan saponin. Jengkol juga mengandung  asam  fenolat  yang terdiri atas flavonoid dan tanin. Tanin adalah  suatu  zat  kimia  yang  dapat menciutkan selaput lendir dari saluran pencernaan. Serangga yang memakan tumbuhan  dengan  kandungan  tanin
yang tinggi akan mengalami hambatan penyerapan nutrisi sehingga  proses  pertumbuhannya terhambat .
Melihat urgensi diatas, pemanfaatan  bahan  alam  untuk dijadikan biolarvasida sudahlah tentu akan sangat diharapkan. Biolarvasida dapat  dikembangkan  lebih  lanjut sebagai  alternatif  dalam  mencegah epidemi DBD.

## METODE PENELITIAN
Jenis penelitian yang dilakukan adalah penelitian eksperimental. Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Akademi Farmasi  ISFI  Banjarmasin  dan  Balai LITBANG  P2B2  Tanah  Bumbu Batulicin.
Populasi  dari  penelitian  ini adalah  ekstrak  kulit  ari  dari  buah jengkol  yang  diambil  di  Desa Andasan Kecamatan Martapura Kabupaten  Banjar.  Sampel  dari penelitian ini adalah ekstrak kulit ari buah  jengkol  dengan  konsentrasi 10%,  30%  dan  50%.    Kulit  ari  buah jengkol  yang  diambil  adalah  kulit yang  segar  dan  kulit  yang  berwarna cokelat,  tidak  layu  serta  berasal  dari
buah  jengkol  dipetik  langsung  dari pohonnya.  Kulit  ari  buah  jengkol  di
determinasi untuk memastikan kebenaran spesies.
Alat-alat  yang  dipakai  pada penelitian  adalah  pisau, blender , timbangan,  gelas  plastik,  gelas  ukur 100  ml, waterbath ,  toples  kaca,
cawan  penguap,  batang  pengaduk, penjepit  tabung, oven , tabung  reaksi, lampu  Bunsen,  corong Buchner , rotary  evaporator .  Bahan  yang digunakan  pada  penelitian  ini  adalah Larva Aedes aegypti L. instar III, kulit ari  buah  jengkol,  aquadest,  etanol 70%,  abate  1%,  air  kran,  serbuk logam Mg, FeCl 3 0,5M, H 2 SO 4 , HCl 2N, kloroform, NaOH 1N, iodium 0,1

## N.

## Pengolahan Sampel
Kulit  ari  buah  jengkol  segar dicuci dengan air mengalir.
Kemudian  dilakukan  sortasi  basah dan  ditimbang  sebagai  berat  basah. Kulit ari kemudian dijemur di bawah sinar  matahari  dengan  ditutup  kain hitam.  Timbang  simplisia  sebagai bobot kering ketika pengeringan telah sempurna  (bobot  konstan  dalam beberapa kali penimbangan). Simplisia  kemudian  dihaluskan  dan
diayak  serta  ditimbang  sebagai  berat serbuk simplisia.

## Pembuatan Ekstrak
Sebanyak  1  bagian  serbuk simplisia  di  tambahkan  4  bagian etanol  70%.  Campuran  kemudian dimaserasi  selama  3  hari.  Campuran yang  telah  dimaserasi  kemudian disaring  dengan  corong Buchner . Maserat  yang  diperoleh  kemudian dipekatkan menggunakan rotary evaporator dan waterbath hingga terbentuk  ekstrak  kental.  Ekstrak kental  selanjutnya  dilakukan  uji keberadan etanol.

## Skrinning Fitokimia
Skrinning fitokimia yang dilakukan  meliputi  uji  flavonoid, saponin, tannin dan triterpenoid.

## Uji Biolarvasida
Uji biolarvasida dilakukan terhadap 6 kelompok yang terdiri dari larutan ekstrak kulit ari buah jengkol dengan  konsentrasi  10%, 30%, 50%, kontrol positif temephos 1%, kontrol negatif  air  kran  dan  kontrol  negatif aquadest.
Tiap kelompok kemudian dimasukan  larva Aedes  aegypti L. instar  III  sebanyak  20  ekor.  Tiap kelompok  dilakukan  pengulangan
sebanyak  3  kali.  Jumlah  larva  yang mati  dihitung  setelah  melakukan pengamatan selama 24 jam.
Pengolahan Data
Data dianalisis
dengan menggunakan  SPSS  meliputi  uji normalitas dan homogenitas data, uji perbandingan serta Uji Probit.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Peneliti  mengambil sampel segar  berupa  kulit  ari  buah  jengkol. Kulit  yang  diperoleh  disortasi  basah untuk  menghilangkan  kotoran  serta debu  yang  menempel.  Kemudian dilakukan pencucian dengan menggunakan air. Pencucian dilakukan untuk menghilangkan tanah  dan  pengotoran  lainnya  yang melekat  pada  bahan  simplisia  (Wati,
2010).
Kulit dikeringkan dengan cahaya  matahari  diatas  nampan  dan ditutup  dengan  kain  hitam,  proses pengeringan  berlangsung  sekitar  3 sampai  4  hari  ditandai  dengan  daun yang mengkerut dan apabila diremas akan  hancur  serta  berat  kering  daun konstan  dalam  3  kali  penimbangan. Bobot  kering  daun  sebesar  1  kg. Penimbangan pertama seberat 1,2 kg,
penimbangan  kedua  dan  ketiga konstan  1  kg.  Pengeringan  bertujuan untuk mencegah kerusakan kandungan  zat  aktif  yang  ada  dalam tanaman  sehingga  dapat  disimpan dalam  jangka  waktu  yang  lama. Kerusakan  tersebut  akibat  peruraian zat  aktif  secara  enzimatis  seperti hidrolisis,  oksidasi  dan  polimerisasi, sehingga randemennya turun (Triayu, 2009).
Serbuk yang diperoleh kemudian  ditimbang  sebanyak  1  kg dan ditambah etanol 10%  sebanyak 4 liter.  Campuran  dimaserasi  selama 1x24  jam  sambil  sesekali  diaduk. Fungsi  pengadukan  adalah  untuk menjamin  keseimbangan  konsentrasi bahan  ekstraksi  yang  lebih  cepat didalam  cairan  penyari  (Voight, 1994). Hasil maserasi disaring dengan menggunakan corong  Buchner untuk memisahkan filtrat dengan ampas.
Sisa ampas dimaserasi kembali dengan  2  liter  etanol  dan  disaring kembali  sampai  didapatkan  total filtrat 4.500 mL.  Filtrat yang didapat kemudian dipekatkan dengan vacuum rotary evaporator dengan suhu 50°C selama 15-20 menit. Pengaturan suhu pada  50°C  bertujuan  agar  senyawa
berkhasiat  yang  terkandung  dalam simplisia  tetap  stabil  dan  tidak  rusak Hasil  ekstrak  cair  yang  didapat sebanyak  2.317  ml  ekstrak  cair. Rendemen  ekstrak  yang  diperoleh sebesar 17,77%.
Ekstrak  kemudian  dilakukan pengujian bebas etanol. Pengujian ini dilakukan  untuk  memastikan  bahwa tidak  ada  pelaru  yang  tertinggal  dan menyebabkan biasnya data. Hasil uji akan  menunjukan  hasil  yang  sama dengan  pengujian  gugus  alkohol sejenis  yaitu  tidak  terjadi  perubahan
warna  dari  jingga  menjadi  hijau (Kumalasari, 2011).

## Skrinning Fitokimia
Skrinning fitokimia merupakan langkah  awal  yang  penting  dalam penelitian  mengenai  tumbuhan  obat atau  dalam  hal  pencarian  senyawa aktif  baru  yang  berasal  dari  bahan alam.  Metode  uji  yang  banyak digunakan  adalah  metode  reaksi warna. Hasil skrinning fitokimia kulit ari  buah  jengkol  dapat  dilihat  pada tabel 1.
Tabel 1. Hasil Skrinning Fitokimia
Uji Hasil Kesimpulan Flavonnoid Warna Jingga + Saponin Berbuih + Tanin Endapan Coklat + Triterpenoid Warna Hijau Tua +
Keterangan: + = ekstrak positif mengandung metabolit sekunder
Uji Biolarvasida Larva  yang  digunakan  pada pengujian di identifikasi kebenarannya  di  Laboratorium  Balai Penelitian Dan Pengembangan
Kesehatan Tanah Bumbu. Larva yang digunakan adalah larva Aedes aegypti instar III. Larva telah memasuki instar III ditandai dengan usia larva 5-7 hari dan  ukuran  larva  4-7  mm.  Instar  III dipilih karena pads fase tersebut larva memiliki ketahanan yang cukup baik
terhadap lingkungan eksternal, selain itu  pads  instar  III  alat  tubuh  larva sudah  lengkap  sehingga  larva  sudah memiliki  alat  untuk  makan  dan  aktif untuk  perkembangannya  (Prijadi, 2014).
Hasil penelitian uji efek biolarvasida  ekstrak  kulit  ari  jengkol terhadap larva Aedes aegypti L. instar III  selama  24  jam  didapatkan  data primer  yang  disajikan  dalam  bentuk tabel 2.
Tabel 2. Jumlah mortalitas larva Aedes aegypti L pada berbagai konsentrasi ekstrak kulit ari buah jengkol selama 24 jam perlakuan.
Perlakuan Rata-rata Ekor % Kontrol negatif (aquadest) 0 0 Kontrol negatif(air kran) 0 0 Konsentrasi 10% 11 44 Konsentrasi 30% 14 56 Konsentrasi 50% 17 68 Kontrol positif (Temephos 1%) 20 100 Berdasarkan  hasil  uji  utama pada tabel 2 setelah 24 jam perlakuan dengan konsentrasi yang telah ditentukan  didapatkan  hasil  rata-rata persentase  kematian  larva  pada  tiap konsentrasi,  dapat  dilihat  adanya perbedaan  rata-rata  jumlah  kematian larva uji pada masing-masing
kelompok  perlakuan.  Namun,  dari tiap  replikasi  didapatkan  jumlah kematian  yang  sedikit  berbeda  pada tiap  perlakuan,  hal  ini  dipengaruhi oleh kesehatan larva yang digunakan pada  saat  pengujian  tidak  diketahui sebelumnya.
Tabel 3. Ringkasan Hasil Pos Hoc Analysis Tuckey Kelompok Nilai p Kontrol negatif (aquadest) Kontrol negatif (air kran) 0,000* Konsentrasi 10% 0,000* Konsentrasi 30% 0,000* Konsentrasi 50% 0,000* Kontrol positif  (Temephos I%) 0,000* Kontrol negatif (air kran) Konsentrasi 10% 0,000* Konsentrasi 30% 0,000* Konsentrasi 50% 0,000* Kontrol positif  (Temephos1 %) 0,000* Konsentrasi 10% Konsentrasi 30% 0,000* Konsentrasi 50% 0,000* Kontrol positif (Temephos1%) 0,000* Konsentrasi 30% Konsentrasi 50% 1,000 Kontrol positif  (Temephos 1%) 1,000 Konsentrasi 50% Kontrol positif  (Temephos 1%) 1,000 Keterangan: * bermakna Kelompok yang tidak memiliki
perbedaan  yang  bermakna  adalah kelompok konsentrasi 30%, 50% dan
Temephos  1%  (kontrol  positif) dikarenakan  pada  pengujian  selama
24  jam  jumlah  kematian  larva  uji sama.
Kelompok  perlakuan  dengan kontrol  negatif  tidak  menunjukkan adanya  kematian  larva  uji.  Dari
kelompok  perlakuan  10%  30%  dan 50% terdapat perbedaan yang signifikan jumlah kematian larva uji. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas larvasida ekstrak etanol kulit ari buah  jengkol terhadap larva Aedes aegypti lebih  rendah  dibandingkan dengan Temephos 1%.
Analisis probit bertujuan untuk mengetahui nilai LC 50 24 jam, dimana
dari  hasil  tersebut  dapat  diketahui konsentrasi  yang  memiliki  aktivitas larvasida  karena  pada  pengujian sesungguhnya  tidak  didapat  nilai LC 50 .  Setelah  dilakukan  analisis probit dengan menggunakan software minitab 18 dengan tingkat kepercayaan  95%,  didapatkan  hasil sesuai dengan tabel 4.
Tabel 4. Hasil analisis probit
Percent 50 Percentile 95.0% Fiducial Cl Standart error lower upper 20,4716 5,45052 15,1980 29,7955 Dari hasil analisis probit
didapatkan estimasi besar konsentrasi yang  mengakibatkan  kematian  larva sebanyak  50%  adalah  konsentrasi 20,4716%  dengan  interval  antara konsentrasi 15,1980% dan 29,7955%. Sehingga  dapat  ditarik  kesimpulan nilai LC 50 24 jam ekstrak etanol kulit ari  buah  jengkol  adalah  20,4716%, dimana  pada  konsentrasi  tersebut termasuk racun rendah pada
lingkungan perairan.
Jumlah kematian terbesar mendekati
29,7955%  dan  kematian  terkecil mendekati 15,1980%.
Nilai LC 50 dari ekstrak kulit ari jengkol  menunjukkan  bahwa  ekstrak kulit  ari  buah  jengkol  tanaman  ini memang  bersifat  toksik  bagi  larva Aedes  aegypti L.  khususnya  pada larva instar III.
Berdasarkan  hasil  penelitian dapat  ditarik  kesimpulan  semakin tinggi konsentrasi ekstrak etanol kulit ari  buah  jengkol  yang  digunakan maka  semakin  besar  pula  jumlah kematian  larva  uji  pada  percobaan. Kemampuan  larvasida  dari  ekstrak kulit ari buah jengkol dihasilkan dari beberapa senyawa kimia yang berada didalam  tumbuhan  tersebut.  Adapun
fitokimia dalam kulit ari buah jengkol adalah flavonoid, saponin, tannin dan triterpenoid.
Flavonoid  yang  merupakan golongan  fenol  dapat  menyebabkan penggumpalan  protein.  Denaturasi protein tersebut menyebabkan
permeabilitas  dinding  sel  dalam saluran pencernaan menurun. Hal ini akan mengakibatkan transport nutrisi terganggu  sehingga  pertumbuhan terhambat dan akhirnya larva nyamuk akan mati (Wati, 2010).
Zat lain yang mungkin menyebabkan  kemtian  larva  adalah
tanin.  Tanin  merupakan “phenolic compounds” yang dapat mempresipitasi protein. Tanin memiliki kemampuan untuk mempresipitasi  protein.  Pada  larva,
hal  ini  dapat  menghambat  protein yang diperlukan larva untuk
pertumbuhan, sehingga dapat menyebabkan larva mati (Sastriawan,
2014). Saponin sendiri dapat
menyebabkan  korosi  dinding  traktus digestivus larva dikarenakan kemampuan saponin merusak
membran,  selain  itu  saponin  juga dapat menganggu lapisan lipoid pada epikutikula  dan  lapisan  protein  pada
endokutikula  sehingga  memudahkan zat  toksik  masuk  kedalam  tubuh larva. Mekanisme serupa juga ditunjukan  oleh  ekstrak    metanol jeruk  nipis  terhadap  larva  (Musiam, 2018).

## KESIMPULAN
Dari hasil penelitian yang dilakukan  dapat  diambil  kesimpulan sebagai  berikut:  Konsentrasi  yang dapat  membunuh  50%  (LC 50 )  larva Aedes aegypti L. berada pada interval antara  15,1980%  dan  29,7955% dengan estimasi konsentrasi 20,4716%.

## DAFTAR PUSTAKA
Anggraini, A., Hamida, Moehammadi,  N.,  2012,  Uji Efektivitas Ekstrak Daun Jeruk Purut  (Citrus  hystrix  D.C)  dan Daun Jeruk Kalamondin ( Citrus mitis Blanco ) Sebagai Biolarvasida Terhadap Kematian  Larva  Instar  III Nyamuk Aedes  aegypti  L.,
Skripsi ,  Universitas  Airlangga,
Surabaya.
Daniel,  2008,  Ketika  Larva  dan Nyamuk  Dewasa  Sudah  Kebal
Terhadap
Insektisida, Farmacia, Vol.7 No.7.
Grisales N., Poupardin R., Gomez S.,
FonsecaGonzalez I., Ranson H., Lenhart  A.,  2013,  Temephos
resistance  in  Aedes  aegypti  in Colombia compromises dengue vector control, PLoS Negl Trop
Dis. 7 (9):e2438.
Hoedojo R dan Zulhasril, 2008, Buku ajar  parasitologi  kedokteran edisi  keempat.  Jakarta:  balai penerbit  fakultas  kedokteran universitas indonesia.
Istiana,  Heriyani  F.,  Isnaini,  2012,
Status Kerentanan Larva Aedes aegypti  terhadap  Temefos  di Banjarmasin Barat, Jurnal
Buski , 2 (2):53-58. Kumalasari, E., Sulistyani,  N., 2011, Aktivitas  Antifungi  Ekstrak Etanol Batang Binahong
( Anredera  cordifolia (Tenore) Steen.) Terhadap Candida albicans Serta Skrinning Fitokimia, Jurnal Ilmiah Kefarmasian, 1 (2):51-62. Lailatul,  L.,  Kodarohman,  A.,  Eko, R., 2010, Efektivitas biolarvasida ekstrak etanol limbah  penyulingan  minyak akar wangi ( Vetiveria zizanoides ) terhadap larva nyamuk aedes aegypti, culex sp, anopheles  sundaicus.  Jurnal
Sains  dan  Teknologi  Kimia,
1 (1), 59-65
Musiam,  S.,  Armianti,  M.,  Putra,
A.M.P., 2018, Uji Biolarvasida Ekstrak  Metanol  Daun  Jeruk
Nipis ( Citrus aurantifolia )
terhadap  Larva  Nyamuk Aedes aegypti L., Jurnal  Ilmiah  Ibnu Sina , 3 (1), 55-63.
Prijadi,  D.K.,  Wahongan  G.J.P., Bernadus  J.B.B.,  2014,  Uji Efektifitas  Ekstrak  Daun  Jeruk Nipis ( Citrus aurantifolia ) Dalam Menghambat Pertumbuhan Larva Aedes spp.. Jurnal e-Biomedik , 2 (1), 1-7 Sastriawan,  A.,  2014,  Efektivitas Serai Dapur ( Cymbopogon citratus )  Sebagai  Larvasida PadaLava Nyamuk Aedes spInstar III/IV, Skripsi, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah, Jakarta Triayu,  S.,  2009,  Aktivitas  minyak atsiri dan Uji Daya Antibakteri
Secara in Vitro, Skripsi, Universitas
Muhammadiyah Surakarta, Surakarta
Wati,  F.A.,  2010,  Pengaruh  Air
Perasan  Kulit  Jeruk  Manis ( Citrus  aurantium  sub  spesies sinensis) Terhadap Tingkat Kematian  Larva Aedes  aegypti instar  III  In  Vitro, Skripsi ,
Universitas Sebelas Maret, Surakata.
World  Health  Organization , 2009,
Dengue: Guidelines for Diagnosis Treatment, Prevention and Control , WHO, Geneva