## PENETAPAN KADAR FLAVONOID EKSTRAK TERPURIFIKASI UMBI BAWANG DAYAK (Eleutherine palmifolia (L). Merr) SECARA

## SPEKTROFOTOMETRI
Siti Jubaidah*, Eka Siswanto, Heri Wijaya, Muhammad Putu Aditya Akademi Farmasi Samarinda
*Email: ida_mapro13@yahoo.com
Artikel diterima: 30 Oktober 2018; Disetujui: 4 Maret 2019

## ABSTRAK
Bawang  dayak  ( Eleutherine  palmifolia (L).  Merr.)  adalah  salah  satu  jenis tumbuhan yang  berkhasiat sebagai obat. Salah satu senyawa yang cukup banyak pada  ekstrak  etanol  bawang  dayak  adalah  flavonoid,  sehingga  dapat  dilakukan pemisahan  senyawa  flavonoid  dengan  metode  purifikasi.  Penelitian  ini  bertujuan untuk  mengetahui  kadar  flavonoid  ekstrak  terpurifikasi  umbi  bawang  dayak dengan  beberapa  cara  pengeringan  secara  spektrofotometri  UV-Vis  dan  untuk mengetahui cara pengeringan yang menghasilkan kadar flavonoid paling tinggi. Cara  pengeringan  simplisia  umbi  bawang  dayak  adalah  dengan  sinar matahari  langsung  selama  6  jam  (P 1 ),  pengeringan  menggunakan  oven  dengan suhu  ±  60 º C  selama  6  jam  (P 2 ),  pengeringan  dengan  cara  ditutup  dengan  kain hitam  (P 3 ).  Ekstrak  terpurifikasi  dibuat  dengan  mengekstraksi  serbuk  simplisia umbi  bawang  dayak  dengan  metode  maserasi  menggunakan  etanol  70%, kemudian  dilakukan  purifikasi  bertahap  dengan  menggunakan  pelarut  n-heksan. Uji  kadar  flavonoid  ekstrak  terpurifikasi  umbi  bawang  dayak  dilakukan  dengan menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis.
Hasil  yang  diperoleh  dari  data  spektrofotometri  UV-Vis  adalah  kadar flavonoid  ekstrak  terpurifikasi  umbi  bawang  dayak  pada  pengeringan  sinar matahari  (P1)  0,79%,  pengeringan  oven  dengan  suhu  ±  60 0 C  (P2)  1,57%  dan pengeringan  ditutup  dengan  kain  hitam  (P3)  1,02%.  Tes  LSD  menunjukkan (P<0,05)  ada  perbedaan  yang  signifikan  pada  kadar  flavonoid  dengan  perbedaan cara pengeringan.
Kata Kunci: Bawang Dayak, Flavonoid, Ekstrak Terpurifikasi, Spektrofotometri UV-Vis

## ABSTRACT
Eleutherine  palmifolia  ( L)  Merr.  is  one  of  the  plant  that  has  function  as medicine. One of the compound which much contained in ethanol extract of dayak union is flavonoid, so that could separate with purification. The aim of this study is  to  determine  flavonoid  levels  in  purified  extract  of  dayak  union  root  with various drying treatments using UV-Vis spectrophotometry and to find out which drying treatment that obtaine the highest flavonoid levels.
Drying treatment of dayak union root simplicia were with direct sunlight for 6  hours  (P 1 ),  dried  by  oven  with  temperature  60ºC  for  6  hours  (P 2 ),  dried  by
covered  with  black  clothes  (P 3 ).  Dayak  union  root  simplicia  extracted  by maceratiin  method  using  ethanol  70%,  and  purified  step  by  step  using  n-hexane solvent. Flavonoid levels test of purified extract of dayak union root carried outby UV-Vis spectrophotometry method.
The  results  of  UV-Vis  spectrophotometry  obtained  flavonoid  levels  of purified  extract  of  dayak  union  root  in  dried  by  direct  sunlight  (P 1 )  was  0.79%, dried by oven with temperature 60ºC  (P 2 ) was 1.57%, and dried by coveredwith black clothes (P 3 ) was 1.02%. LSD test shows (P<0.05) the significant differences between flavonoid levels with different drying treatment .
Keywords: Dayak Union, Flavonoid, Purified Extract, UV-Vis Spectrophotometry

## PENDAHULUAN
Bawang  dayak  ( Eleutherine palmifolia (L).  Merr.)  adalah  salah satu  jenis  tumbuhan  yang  berkhasiat sebagai  obat.  Potensi  bawang  dayak sebagai  tumbuhan  obat  multifungsi sangat besar sehingga perlu ditingkatkan  penggunaannya  sebagai bahan  obat  modern  (Galingging, 2009).  Menurut  penelitian  Ernawati, dkk  (2012)  senyawa  flavonoid  yang terkandung  dalam  ekstrak  etanol bawang  dayak  cukup  tinggi  dan memiliki sifat sebagai antioksidan.
Kandungan  senyawa  flavonoid yang  tinggi  pada  bawang  dayak  ini, maka  perlu  dilakukan  pengolahan simplisia  dengan  beberapa  tahapan untuk  mendapatkan  kandungan  yang optimal.  Salah  satu  tahapan  yang dapat  dilakukan    adalah  dengan  cara pengeringan, yang dimaksudkan untuk  menurunkan  kandungan  air
dalam  bahan.  Menurut  Pramono (2005) jika kadar air dalam simplisia masih tinggi dapat mendorong enzim melakukan  aktifitasnya  mengubah kandungan  kimia  yang  ada  dalam simplisia  menjadi  produk  lain  yang mungkin  tidak  lagi  memiliki  efek farmakologi seperti senyawa aslinya, oleh sebab itu pengeringan merupakan tahap yang paling penting  dalam  pengolahan  tanaman obat.
Kualitas simplisia yang digunakan  sangat  dipengaruhi  oleh proses  pengeringan  yang  dilakukan (Mahapatra  dkk.,  2009).  Penelitian ini menggunakan ekstrak terpurifikasi  dari  umbi  bawang dayak, purifikasi dilakukan bertujuan untuk menghilangkan senyawa- senyawa  penganggu  namun  tetap mempertahankan  senyawa  aktifnya khususnya flavonoid (Warditiani
dkk, 2012). Sejauh ini belum pernah
dilakukan penelitian mengenai penetapan  kadar  flavonoid  ekstrak terpurifikasi  umbi  bawang  dayak dengan  perbedaan  cara  pengeringan secara spektrofotometri UV-Vis.

## METODE PENELITIAN

## Bahan
Umbi bawang dayak,
aluminium  klorida  1%,  aquadest, etanol  70%  (OneMed),  senyawa kuersetin , senyawa rutin.
Alat
Oven (Memmert), neraca analitik  (Ohaus),  perangkat  gelas
(Pyrex),  alat  maserasi,  penangas  air, Rotary Vacum Evaporator , pengayak mesh 60,
mikropipet, spektrofotometer.
Pelaksanaan Penelitian Tahap Pengeringan dan Pembuatan

## Simplisia
Umbi  bawang  dayak  yang sudah  bersih  dibagi  menjadi  tiga perlakuan.  Perlakuan  yang  pertama pengeringan  dengan  sinar  matahari langsung selama 6 jam (P 1 ), perlakuan  yang  kedua  pengeringan menggunakan  oven  dengan  suhu ±60 0 C  selama  6  jam  (P 2 ).  Perlakuan
yang  ketiga  dengan  cara  ditutup dengan kain  hitam  selama 2 x 6 jam (P 3 ). Umbi bawang dayak yang telah dihaluskan,  diayak  menggunakan pengayak mesh 60.
Ekstrak Umbi Bawang Dayak Terpurifikasi
Umbi bawang dayak yang telah dikeringkan  dengan  tiga  perlakuan dimaserasi dengan memasukkan satu bagian  serbuk  ke  dalam  maserator. Ditambahkan  sepuluh  bagian  etanol 70%,  rendam  selama  6  jam  pertama sambil  sesekali  diaduk,  kemudian diamkan  selama  18  jam.  Maserat dipisahkan kemudian diuapkan dengan rotary  vacum  evaporator pada temperatur tidak lebih dari 50 0 C hingga diperoleh ekstrak cair. Ekstrak cair tersebut diuapkan di atas penangas air hingga kental.
Ekstrak  kental  dimasukkan  ke dalam beaker gelas, masukkan pelarut n-heksan sebanyak 2 kali dari bobot  ekstrak  etanol  kental,  lalu diaduk dengan stirrer diatas hot plate ± 10 menit kemudian disaring. Filtrat yang  didapat  dibuang  dan  residunya dicuci  kembali  dengan  n-heksan sampai didapatkan filtrat yang jernih kemudian ambil residu yang tak larut
dan  uapkan  diatas  penangas  air hingga  kental.  Ekstrak  tak  larut  n-
heksan kental yang diperoleh merupakan ekstrak terpurifikasi
(Syamsul  dkk,  2011).  Selanjutnya
diuji fitokimia atau skrining fitokimia.
Penentuan Kadar Flavonoid Pembuatan Larutan Induk (Kuersetin 200 ppm)
Kuersetin  ditimbang  sebanyak 10  mg,  dilarutkan  kuersetin  dengan pelarut etanol 70%10 ml dalam gelas kimia,  dipindahkan  dalam  labu  ukur 50  ml,  dicukupkan  dengan  pelarut etanol 70% sampai tanda batas.

## Pembuatan Seri Larutan Standar
Larutan  standar  dibuat  dengan konsentrasi  0,1;  0,2;  0,3; 0,4;  0,5 ml ke  dalam  labu  ukur  10  ml,  larutkan dengan  etanol  70%  sampai  tanda batas,  sehingga  diperoleh  masing- masing  konsentrasi  2,  4,  6,  8,  10 ppm.
Pembuatan Larutan Blanko
Larutan blanko digunakan untuk  kalibrasi  sebagai  pembanding
dalam analisis spektrofotometri.
Larutan  ini  berisi  etanol  70% sebanyak  1,5  ml,  kalium  asetat  1M 0,1 ml, AlCl 3 1% 0,1 ml dimasukkan
ke dalam labu ukur 10 ml, kemudian ditambahkan  aquadest  sampai  tanda batas.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Larutan standar (8 ppm) dimasukkan  ke  dalam  kuvet  di  ukur absorbansi  pada  range  gelombang 300-500 nm, ditentukan nilai panjang gelombang maksimum.
Pembuatan Kurva Kalibrasi
Seri  larutan  standar  masing- masing konsentrasi 2, 4, 6, 8, 10 ppm di  pipet  sebanyak  0,5  ml  dan dimasukkan  ke  dalam  tabung  reaksi kemudian  ditambahkan  etanol  70% 1,5  ml,  AlCl 3 1%  0,1  ml,  kalium asetat  1M  0,1  ml  dan  ditambahkan aquadest  2,8  ml,  dikocok  sampai homogen.  Larutan  diinkubasi  pada suhu  kamar  selama  30  menit  dan serapan
diukur dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang maksimum.
Penentuan  Kadar  Flavonoid  Ekstrak Terpurifikasi Umbi Bawang Dayak
Ekstrak  terpurifikasi  umbi bawang  dayak  ditimbang  sebanyak 10  mg,  kemudian  dilarutkan  dengan 5  ml  etanol  70%  dimasukkan  ke dalam labu ukur 10 ml, dibilas gelas
kimia  dengan  etanol  70%,  kemudian dimasukkan  ke  dalam  labu  ukur hingga tanda batas, sehingga diperoleh  larutan  sampel  dengan konsentrasi  1000  ppm,  dilakukan pengenceran  dengan  cara  dipipet  1 ml  larutan  sampel  1000  ppm kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur  10  ml  dan  ditambahkan  etanol 70%  sampai  tanda  batas,  sehingga diperoleh  larutan  dengan  konsentrasi 100  ppm.  Lalu  larutan  dengan konsentrasi 100 ppm dipipet
sebanyak  0,5  ml  dan  dimasukkan  ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan  etanol  70%  1,5  ml,
AlCl 3 1%  0,1  ml,  kalium  asetat  1M
0,1 ml dan ditambahkan aquadest 2,8
ml, dikocok sampai homogen. Larutan  diinkubasi  pada  suhu  kamar selama  30  menit.  Serapan  diukur dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang maksimum.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Purifikasi dilakukan untuk mendapatkan  komponen  bahan  alam murni  bebas  dari  komponen  kimia yang  tidak  dibutuhkan.  Ekstrak kental  dari  hasil  ekstraksi  dengan metode maserasi, selanjutnya dipurifikasi  dengan  cara  dicuci menggunakan pelarut n-heksan. Hasil  dari  pencucian  n-heksan  dari masing-masing cara pengeringan dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil rendemen ekstrak terpurifikasi umbi bawang dayak ( Eleutherine palmifolia (L). Merr) No. Cara Pengeringan Rendemen (%) 1. Sinar Matahari (P 1 ) 11,60 2. Oven Suhu 60 o C (P 2 ) 10,36 3. Kain Hitam (P 3 ) 9,16
Berdasarkan data  yang didapat, pengeringan  sinar  matahari  (P1) memiliki  nilai  rendemen  yang  besar dibandingkan  dengan  pengeringan oven suhu 60 o C (P2) dan pengeringan kain hitam (P3).
Perlakuan suhu dan waktu pengeringan  menunjukkan  bahwa
semakin  tinggi  suhu  pengeringan maka  semakin  rendah  rendemen. Begitu pula dengan waktu pengeringan,  semakin  lama  waktu pengeringan  maka  semakin  rendah pula  rendemen  yang  dihasilkan (Susinggih, 2011). Suhu yang digunakan  pada  pengeringan  oven
adalah  60 o C,  sehingga  menyebabkan rendemen  yang  dihasilkan  lebih sedikit dibanding dengan pengeringan  sinar  matahari  yang menghasilkan rendemen paling
banyak. Waktu yang digunakan pada pengeringan  sinar  matahari  dan pengeringan  oven  adalah  6  jam, sedangkan pengeringan menggunakan kain hitam dibutuhkan waktu  selama  2  x  6  jam  untuk  bisa kering  secara  optimal.  Menurut Yuniarti,  dkk  (2010),  bahwa  suhu pengeringan berpengaruh nyata
terhadap nilai  rendemen  suatu  bahan karena  dapat  berpengaruh  terhadap turunnya  kadar  air  suatu  bahan pangan.
Uji skirining fitokimia dilakukan untuk mengetahui kandungan  senyawa-senyawa  apa saja  yang  terdapat  di  dalam  ekstrak terpurifikasi  umbi  bawang  dayak dengan  pereaksi  tertentu  dengan analisa  warna  atau  reaksi  warna. Hasil  identifikasi  dapat  dilihat  pada Tabel 2.
Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Terpurifikasi Umbi Bawang Dayak Golongan Pengeringan Sinar Matahari (P 1 ) Oven (P 2 ) Kain Hitam (P 3 ) Alkaloid (-) (-) (-) Flavonoid (+) (+) (+) Tanin (-) (-) (-) Saponin (-) (-) (-) Steroid (-) (-) (-) Rutin (+) (+) (+) Kuersetin (+) (+) (+) Keterangan:
(+): Mengandung golongan senyawa metabolit sekunder
(-): Tidak mengandung golongan senyawa metabolit sekunder Kadar Flavonoid Ekstrak Terpurifikasi Umbi Bawang Dayak  (Eleutherine  palmifolia  (L). Merr) Analisis dilakukan dengan tahapan  pembuatan  larutan  standar, yakni  dengan  menggunakan  larutan standar  kuersetin,  karena  kuersetin
merupakan flavonoid golongan flavonol  yang  memiliki  gugus  keto pada  atom  C-4  dan  juga  gugus hidroksil  pada  atom  C-3  dan  C-5 yang bertetangga.
Panjang
gelombang maksimum yang
dihasilkan  adalah  426  nm  pada konsentrasi 8 ppm, panjang
gelombang maksimum tersebut kemudian digunakan untuk
mengukur  serapan  kurva  kalibrasi dan  sampel  ekstrak  umbi  bawang dayak terpurifikasi pengeringan sinar matahari  (P1),  pengeringan  oven (P2)  dan  pengeringan  kain  hitam (P3).  Berdasarkan  kurva  kalibrasi
diperoleh  persamaan  regresi  linier yaitu,  y  =  0,00638  x  +  0,00075 dengan nilai linearitas sebesar
0,99845. Hasil rata-rata kadar flavonoid  ekstrak  terpurifikasi  umbi bawang dayak perbedaan cara pengeringan  dalam  bentuk  grafik dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Grafik jumlah kadar flavonoid perbedaan cara pengeringan
Dari hasil pengukuran menggunakan  spektrofotometri  UV-
Vis, dapat ditunjukkan bahwa perbedaan metode pengeringan berpengaruh  pada  kadar  flavonoid ekstrak  terpurifikasi  umbi  bawang dayak.  Pengeringan  menggunakan oven  dengan  suhu 60 o C  (P2) memiliki  kadar  flavonoid yang
paling tinggi,
karena suhu pemanasan  yang  terjadi  di  dalam
oven lebih merata dan sirkulasi udara yang dihasilkan sangat baik sehingga mengoptimalkan proses pengeringan. Pengeringan menggunakan oven merupakan  cara  pengeringan  yang baik  untuk  kandungan  fitokimia simplisia, karena selain dapat diselesaikan  dalam  waktu  yang singkat,  suhu  yang  digunakan  dari pengeringan menggunakan oven dapat terus dimonitor daripada
0.79% 1.57% 1.02% 0.00% 0.20% 0.40% 0.60% 0.80% 1.00% 1.20% 1.40% 1.60% 1.80% P1 P2 P3 % Kadar Flavonoid % Kadar Flavonoid
pengeringan  lainnya  (Darfour et.,  al , 2014).
Kadar flavonoid yang diperoleh,  dianalisis  secara  statistik menggunakan SPSS IBM 20. Pertama data dilakukan
uji
normalitas  dan  uji  homogenitas untuk  menunjukkan  bahwa  data termasuk  data  terdistribusi  normal dan  homogen  atau  tidak.  Apabila data terdistribusi normal dan
homogen  maka  dilanjutkan  dengan
uji  ANOVA.  Berdasarkan  pada  uji normalitas ( One-Sample Kromogorov-Smirnov Test ) menunjukkan bahwa kadar flavonoid
dari  perbedaan  cara  pengeringan terdistribusi  normal  (P>0,05)  dan pada  uji  homogenitas  menunjukkan bervariasi homogen (P>0,05) sehingga  dapat  dilanjutkan  dengan uji  ANOVA.  Pada  uji  ANOVA menunjukkan bahwa (P>0,05). Berdasarkan  uji  LSD  menunjukkan
bahwa uji tersebut memiliki signifikasi  <0,05  dengan  keputusan yang  berarti  terdapat  perbedaan bermakna  dari  hasil  kadar  flavonoid dengan  pengeringan  sinar  matahari (P1),  pengeringan  oven  (P2)  dan pengeringan  kain  hitam  (P3)  dengan
tingkat  kepercayaan  95%,  dapat ditarik  kesimpulan  bahwa  perbedaan cara pengeringan berpengaruh terhadap  kadar  flavonoid  ekstrak terpurifikasi umbi bawang dayak.

## KESIMPULAN
1. Kadar flavonoid ekstrak terpurifikasi umbi bawang dayak yang dihasilkan dari pengeringan  sinar  matahari  (P1) sebesar 0,79%, pengeringan oven dengan suhu ±60 o C sebesar 1,57%  dan  pengeringan  ditutup kain hitam (P3) sebesar 1,02%.
2. Cara pengeringan yang menghasilkan  kadar  flavonoid paling tinggi adalah pengeringan menggunakan oven dengan suhu ±60 o C  (P2),  diikuti  dengan pengeringan  menggunakan  kain hitam  (P3)  dan  pengeringan sinar matahari (P1).

## UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis  mengucapkan  terima kasih  kepada  Akademi  Farmasi Samarinda  yang  telah  memfasilitasi dalam penelitian ini.

## DAFTAR PUSTAKA
Chang C. Yang M, Wen Hand Chern J.  2004.  Estimation  of  Total
Flavonoid  Content  in  Propolis by Two Complementary Colorimetric  Methods.  J.  Food Drug Anal. Hal: 178-181. Darfour,  B.,  Asare,  I.,  Ofosu,  D. 2014.  The  Effect  of  Different Drying Methods on the Phytochemicals  and  Radical Scavenging Activity of  Ceylon Cinnamon (Cinnamomum zeylanicum) Plant Parts. Ghana Atomic  Energy  Commission: Ghana. Hal: 138. Ernawati  dan  Anni,  N.  2012.  ”Efek Antioksidan  Ekstrak  Etanol Bulbus Bawang Dayak (Eleutherine  americana  Merr.) Terhadap Struktur Mikroanatomi Tubulus Seminiferus Testis  Tikus Yang Dipapar Asap Rokok“. Skripsi, Universitas Lambung Mangkurat Program Studi Biologi  FMIPA:  Banjarbaru. Hal: 93-99. Galingging,  R.Y.  (2009).  Bawang Dayak (Eleutherine palmifolia) Sebagai Tanaman Obat Multifungsi.Warta Penelitian dan Pengembangan Badan
Penelitian  dan  Pengembangan Pertanian  Vol  15,  No.  3.  Hal: 2-4. Mahapatra,  A.K.  and  C.N.  Nguyen. 2009.  Drying  of  medicinal plants. ISHS Acta Horticulturae 756: International  Symposium  on Medicinal  and  Nutraceutical Plants. Pramono, S. 2006. Penanganan Pasca Panen Dan Pengaruhnya Terhadap  Efek  Terapi  Obat Alami. Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia  XXVIII,  Bogor,  15- 18 Sept. 2005. Hal: 1-6. Syamsul E.S, Nugroho A.E, Pramono,  S.  2011.  Aktivitas Antidiabetes Kombinasi Ekstrak  Terpurifikasi  Herba Sambiloto (Andrographis paniculata  (Burn.F.)  NESS.) Dan  Metformin  Pada  Tikus DM  Tipe  2  Resisten  Insulin. Majalah Obat Tradisional. Fakultas  Farmasi  Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta.
Hal: 125-126.
Susinggih,  W.,  Sucipto.,  Lia,  M.
2011.  Pengaruh  Suhu  dan Waktu  Pengeringan  Terhadap Aktivitas  Antioksidan  Pada Bubuk Kulit Manggis (Garcinia mangostana L.). Teknologi  Industri  Pertanian- Fakultas  Teknologi  Pertanian. Malang: Universitas Brawijaya. Yuniarti, N., D. Syamssuwida dan A. Aminah. 2010. Pengaruh Penurunan Kadar Air Terhadap Perubahan Fisiologi dan Kandungan  Biokimia  Benih Eboni (Diospyros celebica Bahk.). Jurnal Penelitian Hutan Tanaman:  Balai  Pembenihan.
Teknologi  Pembenihan  Bogor. Bogor. Hal: 191-198.