Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.

## ANALISIS KADAR GULA TOTAL, FLAVONOID, DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI FORMULASI BROTOWALI DENGAN APEL MANALAGI SEBAGAI MINUMAN FUNGSIONAL
Analysis of Total Sugar Content, Flavonoids, and Antioxidant Activity Test of Brotowali Formulation with Manalagi Apples as A Functional Drink
Irene Nuariza Prasetyo 1 , Khoirul Anwar 2*
1,2 Program Studi Gizi, Fakultas Teknologi Pangan dan Kesehatan, Universitas Sahid, Jakarta, Indonesia Email: khoirul_anwar@usahid.ac.id

## ABSTRACT
Currently, the highest number of deaths in Indonesia is caused by non-communicable diseases. One of the non-communicable diseases is diabetes mellitus which is a metabolic disease. Efforts to prevent diabetes mellitus  with  non-pharmacological  therapy  can  use  plants  that  have  the  potential  to  have  anti-diabetic effects. This study aims to make brotowali with manalagi apples as a functional drink which has potential as an antidiabetic and to determine total sugar content, flavonoids, and antioxidant activity with 3 ratios of brotowali: manalagi apple (F1 1:2, F2 1:1, and F3 2:1). This study used a completely randomized design (CRD) with 3 formulations and 3 repetitions. The statistical tests used were Analysis of Variance (ANOVA) and Duncan's Multiple Range Test (DMRT). The results showed that F1, F2, and F3 averaged total sugar content respectively 27.4%, 22.3% and 20.9%, the average of flavonoids was 41.7 mgQE/g, 48.8 mgQE/g, and 62.8 mgQE/g, and the average antioxidant activity with IC50 values were 145.5 µg/ml, 109.3  µg/ml, and 92.2 µg/ml. The best formulation of brotowali functional drink with manalagi apple is formula F3 with total sugar content of 20.9%, flavonoid content of 62.8 mgQE/g and antioxidant activity with IC50 value of 92.2 µg/ml.
Keyword: Functional drink, total sugar, flavonoid, antioxidant activity

## ABSTRAK
Saat ini, kematian tertinggi di Indonesia disebabkan oleh penyakit tidak menular. Salah satu penyakit tidak menular adalah diabetes melitus yang merupakan penyakit metabolik. Upaya pencegahan diabetes melitus dengan terapi non farmakologi dapat menggunakan tanaman yang berpotensi antidiabetes. Penelitian ini bertujuan untuk membuat minuman fungsional brotowali dengan apel manalagi yang berpotensi sebagai antidiabetes dan mengetahui kadar gula total, flavonoid, dan aktivitas antioksidan dengan 3 variasi proporsi brotowali dan apel manalagi (F1 1:2, F2 1:1, dan F3 2:1). Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 3 formula dan 3 kali pengulangan. Uji statistik yang digunakan adalah Analysis of Variance (ANOVA) dan Duncan Multiple Range Test (DMRT). Hasil penelitian menunjukkan bahwa F1, F2, dan F3 rata-rata kadar gula totalnya berturut-turut yaitu 27,4%, 22,3% dan 20,9%, rata-rata flavonoid 41,7 mgQE/g, 48,8 mgQE/g, dan 62,8 mgQE/g, serta rata-rata aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 yaitu 145,5 µg/ml, 109,3 µg/ml, dan 92,2 µg/ml. Formula terbaik dari minuman fungsional brotowali dengan apel  manalagi  adalah  formula  F3  dengan  kadar  gula  total  20,9%,  kadar  flavonoid  62,8  mgQE/g,  dan aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 92,2 µg/ml.
Kata Kunci: Minuman fungsional, total gula, flavonoid, aktivitas antioksidan
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.

## PENDAHULUAN
Kematian  tertinggi  di  Indonesia disebabkan oleh penyakit tidak menular hingga  melampaui  angka  kematian akibat  penyakit  menular  (Hariawan, 2020). Salah satu dari beberapa penyakit tidak  menular  adalah  diabetes  melitus, menjadi  penyakit  tidak  menular  utama (Oktorina, et al. , 2019) Penyakit diabetes melitus  merupakan  penyakit  metabolik akibat penurunan fungsi organ pankreas dalam memproduksi insulin atau menurunnya sensitivitas reseptor insulin
(Lisiswanti dan Haryanto, 2017;
Saviqoh et  al. , 2021). Berdasarkan data
Riset  Kesehatan  Dasar  (RISKESDAS) tahun 2018 terjadi peningkatan prevalensi  penyakit  diabetes  melitus  di Indonesia  sebesar  1,6%.  Pada  tahun 2018  prevalensinya  sebesar  6,9%  dan pada  tahun  2018  mencapai  10,9%,  dan meningkat  lagi berdasarkan data Survei Kesehatan  Indonesia  tahun  2023  yaitu sebesar 11,7% (Kemenkes, 2018; Kemenkes RI, 2023). Kenaikan
prevalensi tersebut tidak sejalan dengan tujuan pembangunan berkelanjutan atau Sustainable Development Goals (SGDs) poin  ketiga,  mengenai  kehidupan  sehat dan  sejahtera  yang  ditargetkan  tercapai pada  tahun  2030  berkurang,  hingga sepertiga  angka  kematian  dini  akibat penyakit tidak menular. Berdasarkan hal
tersebut  maka  diperlukan  pencegahan dan pengobatan penyakit tersebut
(Kementerian PPN, 2020) Upaya pencegahan dan
penanggulangan diabetes dilakukan melalui  terapi  farmakologi  dan  non farmakologi. Terapi farmakologi meliputi  obat-obatan  dan  terapi  non- farmakologi  meliputi  modifikasi  gaya hidup,  utamanya  dengan  mengatur  pola makan,  salah  satunya  dengan  memilih bahan  makanan  yang  memiliki  efek antioksidan,  tinggi  serat,  dan  indeks glikemik  rendah  (Fujiwara et  al. ,  2019; Setyaji  dan  Maharini,  2021;  Fatima et al. ,  2023;  Mavroeidi et  al. ,  2024).
Konsumsi  pangan  tradisional  yang berasal  dari  tanaman  merupakan  upaya pencegahan  dan  penanggulangan  non farmakologis  yang  memiliki  tingkat bahaya  lebih  rendah  dibandingkan dengan  obat-obat  sintetik  atau  kimiawi (Setyaji  dan  Maharini,  2021;  Firdaus et al. , 2023).
Salah  satu  tanaman  obat  yang berasal dari Indonesia adalah Brotowali ( Tinospora  Crispa ),  yang  digunakan sebagai obat antidiabetes dan pengendali kadar  gula  darah  (Maylina,  2019; Pujiyanto et  al. ,  2019).  Brotowali memiliki  senyawa  kimia  aktif  alkaloid, diterpenoid,  flavonoid,  fenol,  pikoretin, palmatin,  glikosida  pikroretoaid,  dan
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
lignin  (Desmiaty  dan  Tambunan,  2014; Warnis et  al. ,  2021).  Kandungan flavonoid yang terdapat dalam brotowali dapat  meningkatkan  sensitivitas  insulin dan sebagai protektif dari kerusakan sel beta  pankreas  penghasil  insulin  (Ajie, 2015;  Kurniawati  dan  Sianturi,  2016). Selain  tanaman  brotowali,  buah  apel manalagi juga memiliki potensi sebagai antidiabetes (Authoria et al., 2023) .
Buah apel manalagi ( Malus Sylvestris  Mill )  juga  merupakan  salah satu  buah  lokal  Indonesia  dan  banyak dibudidayakan  di  daerah  Malang,  Jawa Timur  (Rahayuningsih et  al. ,  2021).
Apel manalagi mengandung antioksidan dan serat tinggi. Fungsi serat dilaporkan dapat memperlambat penyerapan glukosa dalam tubuh (Ayuhapsari et al. , 2018).  Selain  kandungan  serat,  apel manalagi juga memiliki indeks glikemik rendah,  sehingga  dapat  mengontrol  dan menurunkan kadar gula darah (Selfia et al., 2021). Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan  formula  terbaik  minuman fungsional brotowali dengan apel manalagi,  berdasarkan  kandungan  gula total, flavonoid, dan aktivitas antioksidannya.

## METODE

## Minuman Fungsional
Minuman  fungsional  brotowali dengan apel manalagi dibuat dari batang
brotowali  dan  buah  apel  manalagi. Minuman  fungsional  brotowali  dengan apel  manalagi  memiliki  3  konsep  yang sesuai dengan kriteria pangan fungsional. Minuman fungsional
brotowali dengan apel manalagi termasuk  ke  dalam  minuman  serbuk yang  dikemas  dengan  kantong  teh. Minuman  fungsional  brotowali  dengan apel  manalagi  mengacu  pada  SNI  01- 4320-1996  tentang  serbuk  minuman tradisional. Serbuk minuman tradisional didefinisikan  sebagai  produk  bahan minuman berbentuk serbuk atau granula yang dibuat dari rempah-rempah dengan atau tanpa penambahan bahan makanan lain dan bahan makanan yang diizinkan (Badan Standardisasi Nasional, 1996)

## Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam pembuatan produk minuman dari brotowali  dan  apel  manalagi  meliputi pisau,  talenan, slicer ,  oven, miller , loyang,  plastik  tahan  panas  dan  ayakan 60 mesh.  Alat yang digunakan untuk uji dan analisis kimia dari formula brotowali dan apel manalagi antara lain plat  tetes,  tabung  reaksi,  rak  tabung reaksi, beaker  glass ,  spektrofotometer UV-Vis , gelas  ukur,  kertas  saring, batang pengaduk, labu ukur, timbangan, cawan  porselen, waterbath ,  timbangan analitik, pipet tetes, pipet volume, gegep
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
kayu dan stopwatch .
Bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini adalah brotowali dan apel manalagi yang diperoleh dari supermarket  di  daerah  Jakarta  Timur. Bahan-bahan  untuk  uji  dan  analisis kimia  yaitu  metanol,  reagen benedict , serbuk  Mg,  HCl,  anthrone, aquadest,
H 2 SO 4 ,  NaOH,  AlCl 3 ,  larutan  standar glukosa,  larutan  standar  kuersetin, kalium asetat dan DPPH yang diperoleh dari toko bahan-bahan kimia nitra kimia Bantul.

## Variabel Penelitian Variabel Bebas
Variabel  bebas  dalam  penelitian ini  adalah  proporsi  brotowali  dan  apel manalagi dalam 3 taraf dengan pengulangan sebanyak 3 kali, yaitu: Taraf A1 = brotowali : apel manalagi = 1 : 2 Taraf A2 = brotowali : apel manalagi =
1 : 1
Taraf A3 = brotowali : apel manalagi =
2 : 1 Variabel Terikat dan Variabel

## Terkontrol
Variabel  terikat  dalam  penelitian ini adalah mutu minuman fungsional dari brotowali dengan apel manalagi,
meliputi uji minuman fungsional brotowali dengan apel manalagi meliputi uji  kadar  gula  total,  flavonoid,  dan  uji
aktivitas antioksidan.Variabel terkontrol adalah variabel yang dipertahankan tetap atau tidak berubah-ubah selama melakukan penelitian. Variabel terkontrol  pada  penelitian  ini  adalah suhu  pengeringan  brotowali  yaitu  60°C dengan  waktu  6  jam,  dan  suhu pengeringan apel manalagi 50°C dengan waktu 24 jam.
Rancangan Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap  (RAL)  dengan  tiga  kali pengulangan. Proses Pembuatan Minuman Fungsional    Pembuatan Serbuk
Brotowali (Kuswati, et  al. ,  2017;
Roestamadji et al. , 2017)
Pembuatan serbuk brotowali diawali  dari  sortasi  dengan  memilih batang  yang          memiliki  kriteria  tidak terlalu  tua  dan  tidak  terlalu  muda  serta tidak rusak. Kemudian dilakukan pencucian  dan  penirisan.  Setelah  itu dipotong tipis-tipis dan dilakukan pengeringan pada oven dengan suhu dan waktu yang telah ditentukan. Kemudian dihaluskan  dengan miller dan  diayak dengan ayakan 60 mesh.
Pembuatan Serbuk Apel Manalagi (Ayuhapsari;, et al. ;, 2018; Yuliwar,
2018)
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
Pembuatan  serbuk  apel  manalagi diawali dari sortasi dengan memilih buah dalam kondisi baik dan tidak busuk, serta dihilangkan bijinya.
Kemudian dilakukan  pencucian  dan  penirisan. Setelah  itu  dipotong  tipis-tipis  dengan menggunakan slicer dan  dilakukan pengeringan pada oven dengan suhu dan waktu yang telah ditentukan. Kemudian dihaluskan  dengan miller dan  diayak dengan ayakan 60 mesh.
Pembuatan Minuman Fungsional

## Brotowali dengan Apel Manalagi
Pembuatan  minuman  fungsional brotowali  dengan  apel  manalagi  adalah dengan  mencampurkan  kedua  serbuk masing-masing  bahan  sesuai  dengan formulasi yang telah ditentukan, kemudian dimasukkan ke dalam kemasan dengan berat 2 g/ kemasan.

## Teknik Pengujian
Pengujian  yang  dilakukan  pada penelitian  ini  meliputi  analisis  kadar flavonoid,  analisis kadar gula total,  dan uji  aktivitas  antioksidan.  Analisis  kadar gula total dan kadar flavonoid menggunakan uji kualitatif dan kuantitatif  sedangkan  uji  aktivitas antioksidan menggunakan uji kuantitatif.
Analisis Kadar Flavonoid (Fitriyah et al., 2019; Pauner dan Hamzah, 2022)
Masing-masing  sampel  ditimbang sebanyak 10 mg, kemudian dimasukkan ke  dalam  labu  ukur  50  ml.  Lalu ditambahkan etanol 96% sebanyak 10 ml (larutan  1000  mg/l).  Dipipet  sebanyak 0,5  ml  dari  larutan.  Dimasukkan  ke dalam labu ukur 5 ml dan ditambahkan etanol 96% sebanyak 1,5 ml, alumunium klorida  (AlCl3)  10%  sebanyak  0,1  ml, kalium  asetat  1M  sebanyak 0,1  ml,  dan ditambahkan aquadest sebanyak  2,8  ml kemudian  diinkubasi  selama  30  menit dengan suhu 25°C dan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 431  nm  menggunakan  spektrofotometri UV-Vis.
Analisis Kadar Gula Total (Pudyasmorowati, 2019; Galung,
2021)
Larutan  diambil  1  ml  ke  dalam tabung  reaksi  kemudian  ditambahkan 5,0  ml  pereaksi  anthrone,  ditutup  dan dicampur secara merata. Setelah tercampur  merata  dipanaskan  dalam penangas  air  100°C  selama  waktu operating time yang diperoleh. Didinginkan selama 1 menit dan dibaca absorbansinya pada panjang  gelombang maksimum. Data berupa absorbansi dan konsentrasi sampel, kemudian dimasukkan  dalam  persamaan  regresi linier  kemudian  diketahui  nilai  a,  b,  r 2 .
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
Nilai  r  harus  mendekati  ±  1  agar  kurva yang dihasilkan linier, r yang baik yaitu 0,999  artinya  korelasi  yang  sangat  kuat diantara  dua  variabel,  yaitu  variabel  X sebagai  konsentrasi  dan  variabel  Y sebagai  absorbansi  (Riyanto,  2011). Kadar gula dihitung dengan rumus:
y = bx + a x: konsentrasi (ppm) y: absorbansi b: koefisien regresi a: tetapan regresi
Uji Aktivitas Antioksidan (Handayani et al., 2014; Elfariyanti et al., 2022)
Pengujian  aktivitas  antioksidan dilakukan  dengan  tahapan  sebagai berikut:
1. Pembuatan larutan DPPH
Larutan DPPH 50 ppm dibuat dengan cara menimbang DPPH sebanyak 5 mg kemudian  dilarutkan  dengan  100  ml metanol absolut dalam labu terukur.
2. Pembuatan larutan sampel
Larutan  stok  dibuat  dengan  cara menimbang  ekstrak  etanol  brotowali dan apel manalagi sebanyak 5 mg dan dilarutkan  dengan  metanol  absolut yang kemudian  dihomogenkan,  lalu dicukupkan volumenya sampai
dengan  10  ml.  Selanjutnya  dibuat variasi  konsentrasi  10  ppm, 50  ppm, 100 ppm, 150 ppm, dan 200 ppm.
3. Pengukuran absorbansi blanko Pengujian dilakukan dengan memipet 4 ml DPPH. Divortex dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 30 menit pada ruangan gelap. Diukur absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm.
4. Penentuan absorbansi sampel
Sebanyak  1  ml  sampel  dipipet  dari masing-masing  variasi  konsentrasi, kemudian  dicampurkan  dengan  3  ml karutan  DPPH  50  ppm.  Selanjutnya diinkubasi selama 30 menit pada suhu 37°C.  Lalu  diukur  absorbansinya pada panjang gelombang maksimum.
5. Penentuan % inhibisi
Penentuan  %  inhibisi  dapat  dihitung dengan rumus sebagai berikut:
% Inhibisi =
𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜−𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑠𝑖 𝑏𝑙𝑎𝑛𝑘𝑜 x
100%
6. Penentuan nilai IC 50
Aktivitas
antioksidan diinterpretasikan  dengan  nilai  IC50. Nilai  IC50  adalah  konsentrasi  yang diperlukan  untuk  meredam  aktivitas radikal  bebas  sampai  dengan  50%. Semakin  rendah  nilai  IC50  maka semakin tinggi aktivitas antioksidannya.  Nilai  IC50  setiap konsentrasi  sampel  dapat  dihitung
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
dengan menggunakan rumus persamaan regresi linier menggunakan aplikasi Microsoft
Excel.  Konsentrasi  sampel  sebagai sumbu  X,  dan  %  inibisi  sebagai sumbu Y, sehingga diperoleh persamaan  y  =  ax  +  b.  Sedangkan untuk  penentuan  nilai  IC50  dapat dihitung  dengan  rumus  sebagai berikut:
IC 50 (X) = 50−𝑏 𝑎
Keterangan : Y = 50 A = intercept
B = slope

## Analisis Data
Data  yang  dikumpulkan  dengan analisis kuantitatif senyawa yang dilakukan  meliputi  analisis  kadar  gula total,  analisis  kadar  flavonoid,  dan  uji aktivitas    antioksidan.  Analisis  data dilakukan secara deskriptif dan inferensial. Analisis  deskriptif dilakukan untuk mengetahui kecenderungan karakteristik  contoh  sesuai  dengan perlakuan.  Data  diolah  dalam  bentuk nilai  rata-rata  yang  disajikan  dalam bentuk  Tabel  dan  Grafik.  Sedangkan analisis data secara inferensial dilakukan untuk  menguji  hipotesis  penelitian. Teknik  analisis  yang  digunakan  adalah sidik  ragam  atau  Analisis  Varian
(ANOVA)  dan  rancangan  percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap  (RAL).  Data  diolah  dalam bentuk  nilai  rata-rata  yang  disajikan dalam  bentuk  tabel  dan  grafik  batang. Teknik  analisis  yang  digunakan  adalah sidik  ragam atau  analisis  varian (ANOVA).  Bila  terdapat  pengaruh dilakukan  uji  lanjut  Duncan  Multiple Range Test (DMRT) dan uji Beda Nyata Terkecil  (BNT).  Uji  DMRT  dan  BNT dilakukan untuk melihat taraf mana yang menghasilkan perbedaan mutu.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Pengaruh proporsi brotowali dan apel manalagi  terhadap  kadar  gula  total minuman
Kadar  gula  total,  kadar  flavonoid total,  dan  aktivitas  antioksidan  formula minuman  fungsional  brotowali  dengan apel manalagi dapat dilihat pada Tabel 1. Gula  total  merupakan  gabungan  dari semua  jenis  gula  yang  terdiri  atas  gula pereduksi  dan  gula  non  preduksi,  serta karbohidrat  lain  yang  berasal  dari monosakarida,  disakarida,  polisakarida, maupun  oligosakarida  suatu  bahan pangan  (Choiriyah,  2020).  Penetapan kadar gula minuman fungsional brotowali dengan apel manalagi dilakukan  dengan  metode anthrone .
Penggunaan metode anthrone dikarenakan  metode  tersebut  memiliki
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
kelebihan  diantaranya  memiliki  presisi atau  ketepatan  yang  tinggi,  tingkat kesalahan  yang  rendah,  serta limit  of quantfication (LoQ) yang rendah (Richards et al. , 2020). Kadar gula total tertinggi  terdapat  pada  formulasi  F1 sebesar  27,4%  dan  terendah  pada formula  F3  sebesar  20,9%.  Ketiga formula  sudah  memenuhi  syarat  mutu yang ditetapkan oleh Badan Standarisasi Nasional  dalam  SNI  01-4320-1996 tentang  serbuk  minuman  tradisional dengan  nilai  maksimal  kadar  gula  total 85%  (Badan  Standardisasi  Nasional, 1996). Hasil uji ANOVA kadar gula total minuman  fungsional  brotowali  dengan apel  manalagi  memiliki  nilai p  value <0,05 yaitu 0,001. Hal tersebut menunjukkan bahwa proporsi brotowali dan  apel  manalagi  berpengaruh  nyata terhadap kadar gula totalnya. Perbedaan
kadar  gula  total  dari  ketiga  formula dipengaruhi  oleh  komposisi  dari  apel manalagi.  Kadar  gula  total  tertinggi terdapat  pada  F1  dengan  perbandingan brotowali dan apel manalagi sebesar 1:2. Hal  ini  karena  apel  merupakan  buah yang  memiliki  kandungan  total  gula yang  tinggi  dengan  nilai  14,19  ±  1,18 g/100  ml  (Ihwah  dan  Viandini,  2020). Penelitian lain menunjukkan juga bahwa persentase gula total pada apel manalagi sebesar  13,9%  (Fitriyah et  al. ,  2019).
Total  gula  yang  terkandung  dalam  apel manalagi,  terdiri  dari  gula  reduksi sebesar  6,25%  (Putri et  al. ,  2017).
Tingginya  kadar  gula  total  pada  apel manalagi  dapat  menyebabkan  risiko terjadinya  proses  karamelisasi  yang menyebabkan proses pencoklatan mejadi  lebih  mudah  terjadi  (Ishartati et al. , 2019).
Tabel 1. Kandungan kimia minuman fungsional brotowali dengan apel manalagi
Komponen F1 F2 F3 Kadar Gula Total (% b/b) 27,4 ± 1,07 b 22,3 ± 1,51 a 20,9 ± 0,78 a Kadar Flavonoid Total (mgQE/g) 41,73 ± 1,77 a 48,82 ± 1,44 b 62,80 ± 0,71 c Aktivitas Antioksidan IC 50 (μg/ml) 145,5 ± 0,55 c 109,29 ± 0,48 b 92,17 ± 2,50 a Keterangan: F1: Formulasi F1; F2: Formulasi F2; F3: Formulasi F3. Formulasi Brotowali : Apel Manalagi, F1 (1:2).; F2, (1:1) ; F3, (2:1); Notasi huruf menunjukkan perbedaan nyata pada taraf kepercayaan α=0,05
Pengaruh proporsi brotowali dan apel manalagi  terhadap  kadar  Flavonoid minuman
Flavonoid  merupakan  salah  satu senyawa  metabolit sekunder  yang banyak  ditemukan  pada  tanaman  dan
makanan serta memiliki aktivitas biologis  (Purnamasari et  al. ,  2022).
Peran flavonoid yang merupakan senyawa polifenol ini antara lain sebagai antioksidan,  antidiabetes,  antibakteri, antikanker, dan antiradang
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
(Primadiamanti et  al., 2022).  Kadar flavonoid  total  minuman  fungsional brotowali  dengan  apel  manalagi  dapat dilihat pada Tabel 2.
Kadar  flavonoid tertinggi  terdapat pada  formulasi  F3  sebesar  62,80 mgQE/g, dan terendah pada formula F1. Hasil  uji  ANOVA  kadar  flavonoid minuman  fungsional  brotowali  dengan apel  manalagi  memiliki  nilai p  value
<0,05 yaitu 0,000. Hal tersebut menunjukkan  bahwa  formulasi  pada minuman  fungsional  brotowali  dengan apel manalagi berpengaruh nyata terhadap kadar flavonoid yang dihasilkan.
Hal  tersebut  dapat  disimpulkan bahwa  formulasi  yang  memiliki  kadar flavonoid tertinggi adalah formula yang memiliki  komposisi  brotowali  yang lebih  banyak  dibandingkan  komposisi apel manalagi. Sejalan dengan penelitian sebelumnya  yang  menyatakan  bahwa kadar  flavonoid  total  ekstrak  batang brotowali 9,937±0,009 gQE/100g (Roni et al. , 2022). Flavonoid merupakan salah satu  jenis  antioksidan  yang  dapat menurunkan radikal bebas dan menghambat induksi mediator inflamasi yang berpotensi menyebabkan kerusakan  sel  beta  pancreas  (Saputra, 2021).  Mekanisme  senyawa  flavonoid yang  memiliki  sifat  antidiabetes  adalah
dapat  menurunkan  radikal  bebas  dan menghambat  terjadinya  oksidasi  pada penderita  diabetes  melitus  (Pasaribu et al. , 2021). Senyawa flavonoid juga dapat memberikan  efek  penurunan  kadar glukosa darah dengan cara mengoptimalkan  sekresi  insulin  karena sel  β  pankreas  yang  memproduksi insulin  sudah  teregenerasi  (Pasaribu et al. , 2021; Utami et al. , 2021).

## Aktivitas Antioksidan
Antioksidan  merupakan  suatu senyawa yang dapat memberikan elektron,  serta  mengikat  radikal  bebas (Manongko et  al., 2020).  Besarnya aktivitas  antioksidan  dinyatakan  dalam nilai IC 50 . Kategori kekuatan antioksidan berdasarkan  nilai  IC 50 yaitu  sangat  kuat (<50µg/ml),  kuat (50-100  µg/ml), sedang  (101-150  µg/ml),  dan  lemah (151-200  µg/ml)  (Islami  dan  Nasution, 2022).
Berdasarkan Tabel 2 menunjukkan bahwa  rata-rata  aktivitas  antioksidan yang  dinyatakan  dengan  nilai  IC 50 tertinggi  terdapat  pada  formulasi  F3 sebesar  92,17µg/ml,  dan  rata-rata  nilai IC 50 terendah  terdapat  pada  formula  F1 dengan  hasil  sebesar  145,5µg/ml.  Dari ketiga formula tersebut, aktivitas antioksidan formula F1 dan F2 termasuk dalam  kategori  sedang,  dan  formula  F3
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
termasuk  ke  dalam  kategori  kuat.  Hasil uji ANOVA aktivitas antioksidan minuman  fungsional  brotowali  dengan apel  manalagi  memiliki  nilai p  value
<0,05 yaitu 0,000. Hal tersebut menunjukkan  bahwa  formulasi  pada minuman  fungsional  brotowali  dengan apel manalagi berpengaruh nyata terhadap  aktivitas  antioksidan  yang dihasilkan.
Aktivitas
antioksidan
tertinggi  terdapat  pada  formula  F3 dengan  perbandingan  brotowali  dengan apel manalagi yaitu 2:1. Dapat disimpulkan  bahwa  formulasi  yang memiliki  aktivitas  antioksidan  tertinggi dengan  nilai  IC 50 kategori  kuat  adalah formulasi  yang  memiliki  komposisi brotowali yang lebih banyak dibandingkan  komposisi  apel  manalagi. Aktivitas  antioksidan  dari  brotowali memiliki  kategori  yang  kuat  sekitar 49,92µg/ml  dan  tergolong  kedalam kategori  kuat  (Warsinah et  al. ,  2020).
Hasil tersebut sejalan dengan penelitian Khairunnisa  (2017)  ekstrak  etanol brotowali  memiliki  nilai  IC 50 sebesar 46,96  μg/ml  yang  termasuk  ke  dalam kategori  sangat  kuat.  Nilai  IC 50 pada ketiga  formula  dikategorikan  aktif sebagai penghambat enzim α- glukosidase  yang  merupakan  enzim yang memiliki peran dalam metabolisme karbohidrat.  Penyerapan  glukosa  oleh
tubuh  dipengaruhi  oleh  enzim  α- glukosidase.  Semakin  aktif  enzim  α- glukosidase, maka glukosa yang diserap tubuh  akan  semakin  tinggi  dan  kadar glukosa di dalam darah akan meningkat (Rachmania et  al. ,  2016).  Nilai  IC 50 menunjukkan  kemampuan  suatu  bahan untuk mengendalikan aktivitas enzim α- glukosidase (Widowati, 2022).

## Penentuan Formulasi Terbaik
Formulasi terbaik ditentukan berdasarkan  uji  kimia  yang  telah dilakukan.  Formula  terbaik  diambil berdasarkan  perbandingan  yang  sering muncul  dari  hasil  terbaik  di  setiap parmeter  uji.  Hasil  terbaik  dengan parameter  Kadar  gula  total  diperoleh hasil  terbaik  yaitu  formula  F3  dengan perbandingan brotowali : apel manalagi 2:1  dengan  hasil  20%  yang  terpilihnya formula ini karena sebagai  antidiabetes, dipilih  yang  memiliki  kadar  gula  total terendah. Parameter antioksidan diperoleh hasil terbaik yaitu formula F3 dengan  perbandingan  brotowali  :  apel manalagi  2:1  dengan  hasil  Nilai  IC 50 sebesar 92,17 μg/ml  yang menunjukkan memiliki  aktivitas  antioksidan  kuat. Parameter  Kadar  flavonoid  diperoleh hasil  terbaik  yaitu  formula  F3  dengan perbandingan brotowali : apel manalagi
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
2:1  dengan  hasil  62,80  mgQE/g    yang merupakan kadar flavonoid tertinggi.

## KESIMPULAN
Formulasi  F3  dengan  proporsi brotowali :  apel  manalagi= 2:1 menjadi formula terbaik dari minuman fungsional brotowali dengan apel
manalagi. Formula ini memiliki kadar air
2,97%,  kadar  gula  total  20%,  kadar flavonoid  62,80  mgQE/g,  dan  aktivitas antioksidan kuat dengan nilai IC 50 92,17 μg/ml.  Perlu  dilakukan  penelitian  lebih lanjut terkait uji klinis untuk membuktikan  efek  antidiabetes  dari minuman  fungsional  brotowali  dengan apel manalagi.

## DAFTAR PUSTAKA
Ajie,  R.B.  2015.  ‘White  Dragon  Fruit (Hylocereus Undatus) Potential As Diabetes  Mellitus  Treatment’,  4,
pp. 69–72.
Authoria, N., Wijayanti, L. and
Febrinasari, R.P. 2023. ‘Efektivitas Kuersetin Dari
Ekstrak  Apel  Lokal  Terhadap Berat  Badan  Dan  Glukosa  Darah Puasa  Tikus  Model  Diabetes (Effectiveness  of  Quercetin  from Local  Apple  Extracts  on  Body Weight and Fasting Blood Gucose in Diabetic Rat Models)’, Journal of The Indonesian Nutrition Association ,  42(2),  pp.  171–180. Available at: https://doi.org/10.36457/gizindo.v
46i2.847.
Ayuhapsari;,  N.,  Wijaningsih;,  W.  and Jaelani;,  M.  2018.  ‘Efektifitas Pemberian  Buah  Apel  Manalagi dengan  Dosis  Bervariasi  terhadap
Penurunan  Kadar  Glukosa  Darah pada  Penderita  Diabetes  Mellitus tipe  II  di  Kelompok  PROLANIS Puskesmas Genuk Kota
Semarang’, Jurnal Riset Gizi , 6(2), pp. 13–18.
Badan Standardisasi Nasional. 1996. SNI 01-4320-1996  Serbuk  minuman tradisional .
Choiriyah,  N.A.  2020.  ‘Inkorporasi Tepung  Garut  Dan  Buah  Pisang Kepok  Pada  Pembuatan  Biskuit Dengan  Klaim  Tinggi  Serat  Serta Tinjauan Nilai Cerna Pati In Vitro Dan  Gula  Total’, Jurnal  Gizi Prima  (Prime  Nutrition  Journal) ,
5(2), p. 81. Available at: https://doi.org/10.32807/jgp.v5i2.
197. Desmiaty,  Y.  and  Tambunan,  R.M. 2014. ‘Uji Aktivitas Penghambatan Enzim a- Glukosidase serta Uji Mutu
Ekstrak  Etanol  Batang  Brotowali crispa  (  L  .)  Miers  .)  (  a-
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.

## Glukosidase  Inhibitor  Activity
Test and Quality Test of Ethanolic Extract of Brotowali Stem crispa ( L  .)  Miers  .))’, Ilmu  kefarmasian Indonesia , 12(2), pp. 232–237.
Dian  saviqoh,  I.,  Hasneli,  Y.  and Nopriadi.  2021.  ‘Analisis  Pola Hidup  Dan  Dukungan  Keluarga Pada Pasien Diabetes Melitus Tipe 2  Di  Wilayah  Kerja  Puskesmas Payung  Sekaki’, Health  Care :
Jurnal Kesehatan , 10(1), pp. 181–
193. Available at: https://doi.org/10.36763/healthcar
e.v10i1.116.
Elfariyanti,  E. et  al. 2022.  ‘Analisis
Kandungan Vitamin C Dan Aktivitas Antioksidan Buah-
Buahan  Khas  Dataran  Tinggi Gayo  Aceh’, Jurnal  Kedokteran dan  Kesehatan :  Publikasi  Ilmiah Fakultas  Kedokteran  Universitas Sriwijaya ,  9(2),  pp.  161–170.
Available at:
https://doi.org/10.32539/jkk.v9i2. 16999. Fatima,  M.T. et  al. 2023.  ‘The  role  of dietary  antioxidants  in  type  2 diabetes  and  neurodegenerative disorders:  An  assessment  of  the benefit  profile’, Heliyon ,  9(1),  p. e12698. Available
at: https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2 022.e12698. Firdaus, M., M., Subandrate., Sinulingga, S. 2023. ‘Efek
Antihiperglikemik Ekstrak n- Heksana  Daun  Benalu  Kersen pada  Tikus  Putih  Jantan  Model Diabetes Melitus’, Jurnal Kedokteran Dan Kesehatan , 19(2),
pp. 105–115. Available at: https://jurnal.umj.ac.id/index.php/ JKK.
Fitriyah, R.L., Hastuti, U.S. and Witjoro, A. 2019. ‘Kualitas Nata  de Apple dengan  Perbedaan  Varietas  Apel (Malus sylvestris Mill) dan Macam  Gula  Berdasarkan  Tebal, Berat dan Kadar Serat Qualities of Nata  de  Apple  with  Different Varieties of Apples (Malus sylvestris Mill) and Sugar based on Thickness,  Weigh’,  12.  Available at:
http://dx.doi.org/10.20961/bioedu kasi-uns.v12i1.27408.
Fujiwara,  Y. et  al. 2019.  ‘Relationship between diet/exercise and pharmacotherapy  to  enhance  the GLP‐1  levels  in  type  2  diabetes’,
Endocrinology, Diabetes &
Metabolism , 2(3), pp. 1–14. Available at: https://doi.org/10.1002/edm2.68.
Galung, F.S. 2021. ‘Analisis Kandungan
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
Karbohidrat ( Glukosa) Pada Salak Golla – Golla’, Journal of Agritech Science , 5(1), pp. 10–14.
Handayani, V. et al. 2014. ‘Uji Aktivitas
Antioksidan Ekstrak Metanol
Bunga  dan  Daun  Patikala  ( Etlingera elatior ( Jack ) R . M . Sm
)  Menggunakan  Abstrak’, Pharm
Sci Res , 1(2), pp. 86–93.
Hariawan, H. 2020. ‘CERDIK Meningkatkan Pengendalian Penyakit Tidak Menular di Indonesia:DOI: http://dx.doi.org/10.33846/2trik91 04’, 10(1), pp. 16–20.
Ihwah,  A.  and  Viandini,  U.H.  2020.
‘Forecasting of
purchasing quantity  of  Manalagi  apple  for apple juice drink production in PT XYZ  Malang’, IOP  Conference Series:  Earth  and  Environmental Science ,  475(1).  Available  at: https://doi.org/10.1088/1755- 1315/475/1/012054.
Ishartati,  E. et  al. 2019.  ‘The  study  of
Apple flour formulation for functional cookies’, IOP Conference  Series:  Earth  and Environmental  Science ,  379(1). Available at: https://doi.org/10.1088/1755- 1315/379/1/012012.
Islami, N. and Nasution, M.P. 2022. ‘Uji
Aktivitas  Antioksidan  Ekstrak Etanol Buah Kurma Safawi (Phoenix Dactylifera L.) Menggunakan  Metode  DPPH’, FARMASAINKES: Jurnal
Farmasi,  Sains,  dan  Kesehatan Vol. 1 No. 2 Februari 2022 , 1(2), pp. 149–157.
Kemenkes.  2018.  ‘Laporan  Riskesdas
2018  Nasional.pdf’, Lembaga
Penerbit Balitbangkes , p. hal 156.
Kemenkes  RI.  2023. Survei  Kesehatan Indonesia  Tahun  2023  Dalam
Angka , Survei Kesehatan
Indonesia  Tahun  2023 .  Jakarta:
BPPK, Kemenkes RI.
Kementerian  PPN.  2020.  ‘Pedoman Teknis Penyusunan Rencana Aksi -  Edisi  II  Tujuan  Pembangunan Berkelanjutan/ Sustainable Development Goals (TPB/SDGs)’,
Kementerian PPN [Preprint].
Khairunnisa,  N.A.  2017. Aktivitas Antioksidan  Senyawa  Alkaloid dari Ekstrak Etanol Batang
Brotowali  Tinospora  Crispa  (L.) Hook  F.  &  T.  dengan  Metode DPPH .  Medan.  Available  at: http://repositori.usu.ac.id/handle/1 23456789/1320.
Kurniawati, E. and Sianturi, C.Y. 2016. ‘Manfaat Sarang Semut (Myrmecodia  pendans)  sebagai
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.

## Terapi  Antidiabetes’, Majority ,
5(3), pp. 38–42.
Kuswati, R., Nurmita and Rijai, L. 2017.
‘Uji  In  Vivo  Aktivitas  Ekstrak
Etanol Batang Brotowali (Tinospora crispa) Sebagai Penurun  Kadar  Glukosa  Darah’, Mulawarman Pharmaceutical Conference ,  6(1),  pp.  78–83. Available at: https://prosiding.farmasi.unmul.ac .id/index.php/mpc/article/view/26
2.
Lisiswanti, R. and Haryanto, F.P. 2017.
‘Allicin  pada  Bawang  Putih (Allium  sativum)  sebagai  Terapi Alternatif  Diabetes  Melitus  Tipe
2’, Jurnal  Majority ,  6(2),  pp.  31–
36.
Manongko,  P.S.,  Sangi,  M.S.  and
Momuat, L.I. 2020. ‘Uji Senyawa Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Tanaman Patah
Tulang ( Euphorbia tirucalli L . )’,
JURNAL MIPA 9 (2) 64-69 dapat ,
9(2), pp. 64–69. Mavroeidi,  I. et  al. 2024.  ‘The  Role  of the Glycemic Index and Glycemic Load  in  the  Dietary  Approach  of Gestational  Diabetes  Mellitus’,
Nutrients , 16(3), pp. 1–14. Available at: https://doi.org/10.3390/nu160303 99.
Maylina,  A.  2019.  ‘Studi  Katalitik
Herbal  Pemanfaatan  Tanaman Brotowali  (Tinospora  cordifolia) Sebagai  Obat  Penurun  Kadar Glukosa Darah (Diabetes Mellitus)’, Journal  of  Chemical
Information  and  Modeling ,  53(9), pp. 1689–1699.
Oktorina, R., Wahyuni, A. and Harahap,
E.Y.  2019.  ‘Faktor-Faktor  Yang Berhubungan  Dengan  Perilaku Pencegahan  Ulkus  Diabetikum Pada Penderita Diabetes Mellitus’, REAL in Nursing Journal , 2(3), p. 108. Available at: https://doi.org/10.32883/rnj.v2i3.5 70.
Pasaribu,  S.F.,  Wiboworini,  B.  and Kartikasari,  L.R.  2021.  ‘Effect  of Germinated  Black  Rice  Krisna Extract on Fasting Blood Glucose and  Body  Weight  in  Diabetes Mellitus  Rats’, Int  J  Nutr  Sci 2021;6(4):194-200 , 6(4), pp. 194–
200. Available at: https://doi.org/10.30476/IJNS.202
1.93204.1163.Introduction.
Pauner,  A.  and  Hamzah,  B.  2022.
‘Analisis  Kadar  FlavonoidKulit Buah  Alpukat  (Persea  americana Mill)  YangBeredardiPasar  Inpres Palu’, Media  Eksakta ,  18(1),  pp.
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
69–73.
Primadiamanti,  A.,  Purnama,  R.C.  and Salsabilla,  N.A.  2022.  ‘Penetapan Kadar  Flavonoid  Pada  Batang Pepaya (Carica papaya L.) Dengan Metode  Spektrometri  Uv  –  Vis’, Jurnal  Farmasi  Malahayati ,  5(1),
pp. 64–75. Available at: https://doi.org/10.33024/jfm.v5i1. 6734.
Pudyasmorowati,  K.  2019.  ‘Penetapan
Kadar  Gula  Total  Jus  Buah  Apel Rome  Beauty  (Malus  sylvestris Mill)  Dengan  Metode  Anthrone- Sulfat’, Jurnal  Ilmu  Farmasi ,  1, pp. 22–25.
Pujiyanto,  S. et  al. 2019.  ‘Aktivitas Inhibitor α-Amilase Ekstrak Etanol Tanaman Brotowali
(Tinospora  crispa  L.)’, Bioma :
Berkala Ilmiah Biologi , 21(2), pp. 91–99. Available at:
https://doi.org/10.14710/bioma.21 .2.91-99.
Purnamasari,  A. et  al. 2022.  ‘Analisis Nilai Absorbansi Kadar Flavonoid
Tanaman  Herbal  Menggunakan Spektrofotometer Uv-Vis’, Teknosains: Media Informasi Sains  dan  Teknologi ,  16(1),  pp. 57–64. Available at:
https://doi.org/10.24252/teknosain s.v16i1.24185.
Putri, G.N., Susanto, W.H. and Wijayanti,  N.  2017.  ‘Pengaruh Varietas  Apel  (Malus  Sylvestris Mill)  Dan  Konsentrasi  Maizena Terhadap  Karakteristik  Lempok Apel  The  Effect  of  Apple  (Malus sylvestris  Mill)  Varieties  And Corn  Starch  Concentration  to  the Characteristics of Apple Lempok’, Jurnal  Pangan  dan  Agroindustri , 5(2), pp. 12–22.
Rachmania,  R.A. et  al. 2016.  ‘Analisis Penambatan  Molekul  Senyawa
Flavonoid  Buah  Mahkota  Dewa (Phaleria  Macrocarpa  (Scheff.) Boerl.) Pada Reseptor Α- Glukosidase Sebagai Antidiabetes’, Pharmacy,  Vol.13
No. 02 Desember 2016 , 13(02), pp.
239–251.
Rahayuningsih,  T.,  Rejeki,  F.S.  and Revitriani,  M.  .2021.  ‘Teknologi Pengolahan  Fruit  Leather  Pada Siswa  SMK  NU  Al  Hidayah
Ngimbang Lamongan’,
Humanism :  Jurnal  Pengabdian Masyarakat , 2(2), p. 85. Available at:
https://doi.org/10.30651/hm.v2i2. 7545.
Richards, C. et al. 2020. ‘Selection and optimization of protein and carbohydrate assays for the
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
characterization of marine biofouling’, Anal. Methods, 12, pp.
2228–2236.
Riyanto,  A.  2011. Aplikasi  metodologi penelitian  kesehatan .  Makassar:
Nuha Medika. Roestamadji, R.I. et al. 2017. ‘Journal of International  Dental  and  Medical
Research ISSN 1309-100X http://www.jidmr.com Ulcer Healing Potential Retno Indrawati Roestamadji,  and  et  al’, Jurnal Kesehatan  Perintis ,  4(1),  pp.  19–
25.
Roni,  A.,  Kurnia,  D.  and  Hafsyah,  N.
2022. ‘Penetapan Kadar Flavonoid
Dan  Aktivitas  Antioksidan  Pada Ekstrak Batang Brotowali
(Tinospora  Crispa  L.)  Dengan
Metode  Cuprac’, Jurnal  Ilmiah Ibnu Sina, 7(1), Maret 2022, 165- 173 , 7(1), pp. 165–173.
Saputra,  B.A.  2021.  ‘Potensi  Ekstrak Daun  Sambiloto  Sebagai  Obat
Antidiabetes’, Jurnal  Penelitian
Perawat  Profesional ,  3(2),  pp.
253–260.
Selfia,  S.,  Faisal,  M.  and  Indriyanti,  N.
2021. ‘Proceeding of Mulawarman
Pharmaceuticals Conferences’, Proceeding of Mulawarman Pharmaceuticals Conferences , (April 2021), pp. 135–138. Setyaji,  D.Y.  and  Maharini,  F.S.  2021.
‘Ganyong-kelor snack bar’s glycemic  index  as  a  diet  for diabetics’, Jurnal  Gizi  Indonesia
(The Indonesian Journal of Nutrition) ,  9(2),  pp.  105–110. Available at: https://doi.org/10.14710/jgi.9.2.10 5-110.
Utami,  I.K.,  Febrianti,  A.  and  Tandi,  J. 2021.  ‘Uji  Efektivitas  Ekstrak
Buah  Okra  Terhadap  Gambaran Diinduksi Streptozotocin Diabetes melitus adalah kelainan’,
FarmakologikaJurnal  Vol.XVIII. No.1 Februari 2021 [Preprint], (1). Warnis,  M.,  Salsabila,  J.  and  Rulianti,
M.R.  2021.  ‘Kadar  Sari  Larut Etanol Dari Ekstrak Batang Brotowali Measurement of Yield , Water  Solouble  Extract  Content  , and  Ethanol  Solouble  Extract Content  From  Brotowali  Stem Extract’,
Jurnal Kesehatan
Pharmasi , 3(2), pp. 118–123.
Warsinah, Baroroh, H.N. and Harwoko. 2020.  ‘Phytochemical  Analysis and Antioxidant Activity of
Brotowali  (Tinospora  crispa  L.
Mier)  Stem’, Molekul ,  15(2),  pp.
73–78.
WIDOWATI, M.M.A.D. 2022. Review : Efektivitas Kadar Ekstrak
Jurnal Gizi dan Pangan Soedirman.
Brotowali  ,  Daun  Sirsak  ,  Jahe  ,
Dan  Mahkota  Dewa  Sebagai Minuman Fungsional Antidiabetes Review :  The  Effectiveness  Of Brotowali , Soursop Leaf , Ginger ,  And  Mahkota  Dewa  Extracts  As Antidiabetic Functi . Semarang.
Yuliwar,  R.  2018.  ‘Jus  Apel  Manalagi dan  Kadar  Glukosa  Darah  Tikus
Putih yang Mengalami
Hiperglikemia’, Jurnal  Informasi
Kesehatan  Indonesia  (JIKI) ,  3(2),
p. 145.