Jurnal Pharmascience, Vol. 06 , No.02, Oktober 2019, hal: 40 - 47 ISSN-Print. 2355 – 5386 ISSN-Online. 2460-9560 https://ppjp.ulm.ac.id/journal/index.php/pharmascience

## Research Article

## Perbandingan Aktivitas Analgetik Infusa dan Ekstrak Etanol Umbi Akar Tawas Ut
( Ampelocissus rubiginosa Lauterb.)
Khoerul Anwar 1 *, Muhammad Riswandi 1 , Nurlely 2
1 Program Studi Farmasi FMIPA Universitas Lambung Mangkurat Banjarbaru 2 Program Studi Profesi Apoteker FMIPA Universitas Lambung Mangkurat Banjarbaru *email: endrasance@gmail.com

## ABSTRAK
Umbi  akar  tawas  ut  ( Ampelocissus  rubiginosa Lauterb.)  secara  empiris digunakan  untuk  mengurangi  nyeri.  Masyarakat  menggunakannya  dengan  cara meminum  air  seduhannya.  Penelitian  ini  bertujuan  untuk  mengetahui  perbandingan aktivitas  analgetik  dari  infusa  dan  ekstrak  etanol  umbi  akar A.  Rubiginosa. Uji analgetik  dilakukan  menggunakan  metode  geliat  ( Writhing  test )  dengan  pembanding parasetamol.  Tiga  puluh  ekor  mencit  dibagi  6  kelompok  masing-masing  5  ekor  per kelompok.  Kelompok  I  kontrol  positif  (parasetamol  65,25  mg/kgBB),  kelompok  II kontrol  negatif  (Na-CMC),  kelompok  III  infusa A.  rubiginosa 25  ml/kgBB,  dan kelompok  IV  ekstrak  etanol A.  rubuginosa 500  mg/kgBB.  Sesudah  diberi  perlakuan secara per oral sesuai kelompoknya, 30 menit kemudian diinduksi dengan asam asetat secara intraperitoneal. Jumlah geliat dihitung setiap 5 menit setelah pemberian larutan asam  asetat  1%  dengan  selama  1  jam.  Hasil  penelitian  menunjukkan  persen  proteksi pemberian  parasetamol  65,25  mg/kgBB,  infusa  A.  rubiginosa  65,25  mg/kgBB  dan ekstrak  etanol A.  rubiginosa 500  mg/kgBB  secara  berurutan  adalah  76,04;  87,41  dan 63,77%.  Dari  penelitian  dapat  disimpulkan  bahwa  infusa  umbi  akar A.  rubiginosa memiliki aktivitas analgetik yang kuat.
Kata kunci: Ampelocissus rubiginosa Lauterb., analgetik, infusa, ekstrak etanol

## ABSTRACT
Tuberous root of tawas ut ( Ampelocissus rubiginosa Lauterb.) empirically used to reduce pain. People use it by drinking boiled water of A. rubiginosa coarse powder. This  study  aims  to  determine  the  comparison  of  analgesic  activity  of  infusion  and ethanol  extract  of A.  rubiginosa tuberous  root.  Analgesic  test  was  performed  using  a stretching  method  (Writhing  test)  with  paracetamol  as  comparison.  Thirty  mice  were divided  into  6  groups  of  5  individuals  per  group.  Group  I  was  positive  control (paracetamol  65.25  mg  /  kgBW),  negative  control  group  II  (Na-CMC),  group  III A.
rubiginosa infusion 25 ml / kgBW, and group IV ethanol extract A. rubiginosa 500 mg / kgBW. After being treated orally according to the group, 30 minutes later induced with acetate acid intraperitoneally. The amount of stretching was calculated every 5 minutes after giving 1% acetic acid solution for 1 hour. The results showed percent protection of paracetamol  65.25  mg  /  kgBB, A.  rubiginosa infusion  65.25  mg  /  kgBB  and  ethanol extract A.  rubiginosa 500  mg  /  kgBB  was  76.04;  87.41  and  63.77%  respectively.  From the  research  it  can  be  concluded  that A.  rubiginosa root  tuber  infusion  has  a  strong analgesic activity.
Keyword: Ampelocissus rubiginosa Lauterb., analgetic, infusa, ethanol extract

## I. PENDAHULUAN
Nyeri  merupakan  suatu  keadaan  yang tidak nyaman dan menyiksa bagi penderitanya.  Prevalensi  data  penderita nyeri di  Indonesia sangat  besar khususnya untuk nyeri punggung bawah yaitu sebesar 49% (Meliala & Pinzon, 2007). Rasa nyeri timbul dari stimulasi yang disebabkan oleh mediator-mediator inflamasi, seperti histamin, serotonin, asetilkolin, bradikinin, dan prostaglandin yang dapat mengaktivasi  saraf  untuk  penghantaran stimulus nyeri (Dipiro et al ., 2008). Secara farmakologis  rasa  nyeri  dapat  diatasi dengan  penggunaan  obat-obat  antinyeri atau  analgetik.  Analgetik  perifer  seperti parasetamol, salisilat, ibuprofen, dan asam mefenamat  mampu  meringankan  atau menghilangkan rasa nyeri tanpa mempengaruhi  susunan saraf pusat (Ali et al ., 2016).
Obat bahan alam telah digunakan oleh masyarakat  di  berbagai  daerah  sebagai penghilang rasa nyeri. Beberapa tumbuhan obat yang dapat digunakan untuk menghilangkan  nyeri  diantaranya  umbi
Cyperus  rotundus dan  daun Callicarpa longifolia . Ekstrak kedua tumbuhan tersebut  teridentifikasi  memiliki  adanya berbagai  kandungan  yang  berperan  untuk menekan  nyeri  seperti  flavonoid,  saponin, dan  tanin  (Mackay  &  Miller,  2003; Puspitasari et  al .,  2003).  Tawas  ut ( Ampelocissus rubiginosa Lauterb.) secara empiris digunakan oleh penduduk Kalimantan  Tengah  sebagai  obat-obatan untuk  berbagai  penyakit  seperti  luka  dan nyeri  perut  dengan  cara  meminum  air rebusannya (Anwar et al ., 2018). Astuti et al . (2016) melaporkan aktivitas hepatoprotektor  infusa  umbi  akar  A. rubiginosa pada tikus yang diinduksi CCl 4 . Dengan perkembangan teknologi  obat tradisional,  bahan  alam  dibuat  menjadi ekstrak untuk mempermudah penggunaanya lebih lanjut. Pada penelitian ini  akan  dibandingkan  aktivitas  antara penggunaan  dalam  bentik  infusa  dan ekstrak  etanol.  Pemilihan  menggunakan pelarut  air  (infusa)  dimaksudkan  untuk menggambarkan  sediaan  yang  digunakan
secara  empiris  oleh  masyarakat  sebagai obat tradisional (Sahu et al ., 2012).

## II. METODE

## A. Alat
Alat-alat  yang  digunakan  adalah  alat- alat  gelas,  jarum  suntik  25  G1/4,  kandang mencit,  mortir,  penangas  air,  sonde  oral, spuit 0,5 ml, stopwatch, stemper, timbangan hewan, dan timbangan analitik.

## B. Bahan
Bahan-bahan  yang  digunakan  adalah aquades,  asam  asetat,  etanol,  Na-CMC, dan Parasetamol.

## C. Hewan uji
Hewan  uji  yang  digunakan  adalah mencit  jantan  berumur  lebih  kurang  5 minggu  yang  sehat  dengan  berat  badan antara 20 sampai 30 gram.

## D. Ethical Clearence
Penelitian  ini  sudah  mendapatkan persetujuan etik dari Komisi Etik Fakultas
Kedokteran Universitas Lambung Mangkurat No. 125/KEPK-FK UNLAM/EC/V/2019

## E. Prosedur Penelitian
1. Penyiapan simplisia
Umbi  akar A.  rubiginosa diperoleh dari  daerah  Palangkaraya,  Kalimantan Tengah.  Proses  pembuatan  simplisia  umbi
akar A.  rubiginosa dimulai  dengan  sortasi basah,  kemudian  dicuci  dengan  air  yang mengalir dan dikeringanginkan. Umbi akar yang  sudah  ditiriskan  dipotong-potong kecil  menjadi  haksel  dan  dikeringkan. Haksel  yang  sudah  kering  selanjutnya dihaluskan  menggunakan  blender  sampai menjadi serbuk.
2. Pembuatan Ekstrak Etanol Umbi Akar A. rubiginosa
Serbuk kering umbi akar A. rubiginosa sebanyak 500 gram dimasukkan  ke  dalam  maserator  lalu ditambahkan  dengan  pelarut  etanol  70% sebanyak  1  liter  dan  direndam  selama  24 jam. Hasil ekstraksi disaring menggunakan kertas saring. Ampas yang tersisa diremaserasi  sebanyak  2  kali.  Hasil  filtrat yang  diperoleh  dikentalkan  menggunakan rotary  evavorator  pada  suhu  30-40°C, kemudian  diuapkan  di  atas  penangas  air sampai  diperoleh  ekstrak  kental.  Setelah dipekatkan dengan cara diuapkan kemudian diperoleh ekstrak kental.
3. Pembuatan  Infusa  Umbi  Akar A.

## rubiginosa
Serbuk  dari  tumbuhan  umbi  tawas  ut ditimbang  sebanyak  1  gram,  kemudian dipanaskan  dengan  50  ml  akuades  selama 15  menit  terhitung  saat  suhu  airnya mencapai  90ºC  (Depkes  RI,  1979., Ningsih & Nova, 2014).

## Pembuatan Larutan Na-CMC
Konsentrasi  Na-CMC  yang  dibuat yaitu  0,5%  dengan  menimbang  sebanyak 0,25 g Na-CMC lalu dikembangkan dalam 5  ml  air  hangat  (60°C)  selama  30  menit. Setelah  mengembang  Na-CMC  digerus sampai homogen dan ditambahkan aquades sampai 50 ml.
4. Pembuatan Larutan Asam Asetat 1%
Asam  asetat  1  %  dibuat  dari  asam asesat  glasial  dengan  metode  pengenceran menggunakan  NaCl  fisiologis  sebagai pelarut.
5. Prosedur
Pengujian
Aktivitas
Analgetik
Sebelum  dilakukan  perlakuan  mencit
dipuasakan  ±  18  jam  dengan  tetap diberikan air minum.  Pada hari pengujian, mencit ditimbang bobotnya dan dikelompokkan  secara  acak  menjadi  6 kelompok  dengan  masing-masing  5  ekor mencit per kelompok. Kelompok I kontrol positif diberi parasetamol 65,25 mg/kgBB, kelompok  II  kontrol  negatif  diberikan larutan  Na-CMC  0,5%,    kelompok  III diberikan  infusa  umbi  akar A.  rubiginosa 25  ml/kgBB,  dan  kelompok  IV    diberi ekstrak etanol A. rubiginosa 500 mg/kgBB secara per oral. Selang 30 menit kemudian seluruh  kelompok  diinduksi  dengan  asam asetat  1  %  secara  intraperitoneal.  Jumlah total  geliat  dihitung  setiap  5  menit  setelah induksi  dengan  durasi  5  menit  selama  1 jam.

## F. Analisis Data
Semua  data  yang  diperoleh  dianalisa secara  statistik  dan  dihitung  persentase proteksi serta persentase aktivitas analgetik. Presentase proteksi yaitu kemampuan  bahan  uji  dalam  mengurangi respon geliat mencit yang disebabkan oleh induksi  asam  asetat  (Galani  &  Patel, 2011).  Persentase  ini  menggambarkan daya analgetik bahan uji dengan rumus:
% Proteksi = A – B x 100% A
A  =  rata-rata  jumlah  geliat  kelompok kontrol negatif
B  =  rata-rata  jumlah  geliat  kelompok kontrol bahan uji

## III. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Penyiapan  dan  Pembuatan  Bahan Uji
Tumbuhan A. rubiginosa yang digunakan  sebagai  sampel  penelitian  ini dideterminasi  di  Laboratorium  FMIPA ULM  Banjarbaru,  Kalimantan  Selatan untuk  mengidentifikasi  dan  memastikan bahwa  spesies  tumbuhan  yang  akan digunakan  sudah  tepat.  Hasil  determinasi menunjukkan  bahwa  tumbuhan  yang digunakan  dalam  penelitian  ini  adalah spesies Ampelocissus rubiginosa Lauterb. Pemberian sediaan infusa pada penelitian ini sebagai gambaran penggunaan secara empiris oleh masyarakat  sebagai  obat  bahan  alam.
Pembuatan  ekstrak  etanol  umbi  akar A.rubiginosa pada penelitian ini dilakukan dengan  metode  ekstraksi  dingin  yaitu maserasi untuk menjaga stabilitas senyawa yang tidak stabil atau tidak tahan terhadap suhu tinggi (Ningsih et al ., 2016). Ekstrak etanol kental umbi akar A. rubiginosa yang diperoleh  sebanyak  463,99  gram  dengan rendemen sebesar 46,399%. Ekstrak tersebut berwarna hitam kemerahan seperti warna infusa yang juga kemerahan.

## B. Uji  Efek  Analgetik  dengan  Metode Induksi Asam Asetat
Pada  penelitian  ini  menggunakan umbi  akar  tanaman A.  rubiginosa .  Uji analgetik  dilakukan  menggunakan  metode uji geliat ( Writhing test ) dengan penginduksi  asam  asetat.  Parasetamol digunakan  sebagai  kontrol  positif  karena parasetamol  merupakan  golongan  obat NSAID  yang  memiliki  efek  analgetik lemah  serta  lebih  lazim  digunakan dibandingkan  dengan  salisilat  karena hampir tidak mengiritasi lambung.
Parasetamol hanya mempunyai efek ringan pada  siklooksigenase  perifer  (Dipalma, 1986).
Induksi asam
asetat melalui intraperitoneal  menyebabkan  respon  nyeri (geliat) karena adanya rangsangan nosiseptif perifer oleh prostaglandin. Asam asetat  tersebut  menyebabkan  terjadinya pelepasan  substansi  endogen  berupa  asam
arakhidonat yang melalui jalur siklooksigenase (COX) melepaskan prostaglandin yang  berperan  sebagai mediator  inflamasi.  Prostaglandin  melalui sumsum  tulang  belakang  dan  stimulasi saraf  aferen  kemudian  menghasilkan respon  nyeri  berupa  kontraksi  geliat. Respon geliat ( writhing ) merupakan bentuk respon rasa nyeri yang diperlihatkan  mencit  akibat  pemberian asam  asetat  yang  ditunjukkan  dengan adanya  kontraksi  dari  dinding  perut, kepala,  dan  kaki  tertarik  kebelakang, sehingga  abdomen  menyentuh  dasar. Senyawa  yang  dapat  menghambat  atau menurunkan  jumlah  geliat  dari  induksi asam  asetat  dengan  menghambat  produksi prostaglandin adalah senyawa yang memiliki  efek  sebagai  analgetik  perifer (Sasongko et  al .,  2016;  Shoibe et  al .,
2017).  Jumlah  geliat  yang  terjadi  pada mencit  di  semua  kelompok  uji  disajikan pada Gambar 1.
Gambar  1. Rata-rata  jumlah  geliat  pada mencit  setiap  5  menit  selama 60 menit
Hasil pengamatan jumlah geliat tiap 5 menit  menunjukkan  bahwa  jumlah  geliat terbanyak  ditunjukkan  pada  menit  ke-5 dan  10,  serta  pada  menit-menit  setelahnya akan  turun.  Hal  ini  menunjukkan  bahwa asam  asetat  sebagai  penginduksi  nyeri mempunyai efek maksimal pada manit ke- 10 dan sesudahnya akan melemah kerjanya dalam  menginduksi  nyeri.  Jumlah  geliat pada  kelompok  II  kontrol  negatif  pada setiap  waktu  pengamatan  selalu  jauh  di atas  kelompok  lain  yang  diberi  perlakuan. Dari  hasil  ini  dapat  dikatakan  bahwa kelompok  uji  memiliki  aktivitas  analgetik ditandai  dengan  adanya  penurunan jumlah geliat dibandingan dengan kontrol negatif.
Gambar  2. Jumlah  geliat  rata-rata  setiap kelompok
Dari Gambar 2 dapat diketahui bahwa hasil  rata-rata  jumlah  geliat  perkelompok diketahui  bahwa  kelompok  III  yang diberikan  infusa  umbi  akar A.  rubiginosa 25 ml/kgBB memiliki jumlah geliat paling sedikit  dengan  rata-rata  jumlah  geliat sebesar  (8,4+2,61),  diikuti  kelompok  I kontrol positif 65,25 mg/kgBB (16,0+2,45),  kelompok  IV  ekstrak  etanol
500  mg/kgBB  (24,2+7,26)  dan  kelompok II  kontrol  negatif  yang  memiliki  jumlah geliat  paling  banyak  (66,8+23,04).  Hasil rata-rata  jumlah  geliat  digunakan  untuk menghitung  persentase  proteksi  (%),  yang dimaksudkan  untuk  mengetahui  besarnya daya  analgetik  parasetamol,  infusa,  dan ekstrak  etanol  umbi  akar A.  rubiginosa dibandingkan  kelompok  kontrol  negatif yang  mendapatkan  larutan    Na-CMC. Persentase proteksi (%) dapat menunjukkan  besar  daya  analgetik  bahan uji  dalam  mengurangi  respon  nyeri (geliat).
Gambar 3. Persentase proteksi (%)
Hasil perhitungan (Gambar 3) menunjukkan  bahwa  kelompok  infusa dosis  25  ml/kgBB  memberikan  persentase proteksi  (%)  yang  paling  tinggi  secara bermakna  sebesar  87,41%  diikuti  dengan kelompok  kontrol  positif  parasetamol 65,25  mg/kgBB  76,04%  dan  kelompok ekstrak  etanol  500  mg/kgBB  63,77%. Perbedaan tersebut mengindikasikan bahwa aktivitas analgesik dari infusa umbi
akar A. rubiginosa lebih tinggi dibandingkan  ekstrak  etanolnya.  Bahkan dibandingkan  kontrol  positif  parasetamol dosis  65,25  mg/kgBB  aktivitas  infusa umbi  akar A.  rubiginosa 25  ml/kgBB masih lebih kuat.
Infusa  yang  menggunakan  air  sebagai pelarut  akan  menyari  lebih  banyak senyawa  polar  seperti  senyawa  fenolik, flavonoid, tanin dan saponin dibandingkan etanol.  Beberapa  senyawa  polar  tersebut diketahui  mempunyai  aktivitas  sebagai analgesik. Penelitian Verdam et al. (2017) menunjukkan  bahwa  ekstrak  tumbuhan yang  juga  mengandung  senyawa  fenol dapat  menurunkan  jumlah  geliat  mencit secara  signifikan  dibandingkan  dengan kelompok kontrol negatif. Senyawa flavonoid memiliki aktivitas sebagai analgetik dengan mekanisme menghambat kerja  enzim  siklooksigenase  yang  dapat menurunkan sintesis prostaglandin sehingga mengurangi terjadinya vasodilatasi  pembuluh  darah  dan  aliran darah  lokal  sehingga  migrasi  sel  radang pada area radang akan menurun (Reynertson,  2007; Suryanto,  2013).
Flavonoid  juga  memiliki  kemampuan menghambat metabolisme asam arakidonat yang berperan dalam produksi prostaglandin  sebagai  mediator  nyeri (Shoibe et  al .,  2017).  Menurut  penelitian Wang et al . (2008), diketahui bahwa fraksi yang  mengandung  senyawa  saponin  juga
dapat  menurunkan  jumlah  geliat  mencit dengan  menghambat  aktivitas  enzim siklooksigenase  (COX)  yang  bertanggung jawab dalam produksi prostaglandin.

## IV. KESIMPULAN
Dari  penelitian  ini  dapat  disimpulkan bahwa  infusa  umbi  akar A.  rubiginosa dosis  25  ml/kgBB  mempunyai  aktivitas analgesik  yang  lebih  kuat  dibandingkan ekstrak  etanol  umbi  akar A.  rubiginosa dosis  500  mg/kgBB  pada  mencit  dengan metode geliat ( Writhing test ).

## DAFTAR PUSTAKA
Ali,  A.H.A.,  Rinidar,  Armansyah,  T., Rosmaidar,  Harris,  A.,  dan  Dasrul. 2016.  Potensi  Ekstrak  Daun  Sernai ( Wedelia  biflora )  Sebagai  Antinyeri Pada  Mencit  ( Mus  musculus ). Jurnal MedikaVeterinaria . 10 : 137-140. Anwar,  K.,  Widodo,  D.F.,  Nurlely,  N., Triyasmono,  L.,  Sudarsono,  S.  and Nugroho, A.E., Wound Healing Activity  of  Ethanolic  Extract  Gel  of
Tawas Ut Tuber ( Ampelocissus rubiginosa L.)  in  Incisional  Model Wistar Rats. Majalah Obat
Tradisional , 23 (1), pp.30-39. Astuti,  K.I.,  Anwar,  K.  dan  Biworo,  A., 2016.  Uji  Aktivitas  Infusa  Akar Tawas  Ut  ( Ampelocissus  rubiginosa
L.) sebagai  Hepatoprotektor Terhadap
Mencit  Putih  Jantan  Balb/C  yang Diinduksi Karbon
Tetraklorida
(CCl4). Jurnal Pharmascience , 3 (2).
Depkes  RI.  1979. Farmakope  Indonesia Edisi  III .  Departemen  Kesehatan Republik Indonesia. Jakarta.
Diphalma,  J.  R.  and  Digregorio,  G.  J,
1986. Basic Pharmacology in Medicine . 3th ed. McGraw-Hill
Publishing  Company  :  319-20.  New York.
Dipiro, J.T., B.G. Wells, Schwinghammer,
T.  L.,  and  Dipiro  C.  V.  2008.
Pharmacotherapy: A Pathophysiologic  Approach,  Seventh
Edition . Mc-Graw Hill.
Galani,  V.J.,  and  Patel,  B.G.  2011.
Analgesic and Anti-inflammatory Activity  of Argyreia  spesiosa and Sphearanthusn indicus in the Experimental Animal. Global Journal of Pharmacology . 5 : 54-59.
Mackay,  D.,  and  Miller,  A.L.  2003.
Nutritional Support for Wound Healing. Alternative Medicine Review .
8 : 369-370.
Meliala,  L.  and  Pinzon,  R.  2007.
Breakthrough  in  Management  of
Acute  Pain. Dexa  Media . 20 :  151- 155.
Ningsih,  S.  dan  Nova,  R.W.  2014.
Kemampuan Efek Sedasi Infusa Umbi Rumput  Teki  ( Cyperus  rotundus  L ) Pada  Mencit  Jantan  Ras  Swiss .
Indonesian Journal On Medical
Science . 1 : 66-73.
Ningsih,  D.R.,  Zusfahair,  dan  Kartika,  D.
Identifikasi Senyawa Metabolit
Sekunder  serta  Uji  Aktivitas  Ekstrak Daun  Sirsak  Sebagai  Antibakteri. Molekul . 11 : 101-111.
Puspitasari.,  Listyawati,  S.,  dan  Widiyani,
T.  2003.  Aktivitas  Analgetik  Ekstrak Umbi  Teki  ( Cyperus  rotundus L.) pada Mencit Putih ( Mus  musculus L.) Jantan. Biofarmasi. 1 : 50-57.
Reynertson,  K.  A.  2007.  Phytochemical Analysis  of  Bioactive  Constituens from Edible Myrtaceae Fruits. Ethnobotany Research &
Applications . 3 : 025-035.
Sahu, G. and Gupta, P.K., 2012. A Review
On Bauhinia variegata Linn,
International  Research  Journal  of Pharmacy . 3 : 48-51.
Sasongko, H., Sugiyarto, S., Efendi,  N.R.,
Pratiwi,  D.,  Setyawan,  A.D.  and Widiyani, T., 2016. Analgesic
Activity  of  Ethanolic  Extracts  of
Karika  Leaves  ( Carica  pubescens )  In Vivo. JPSCR: Journal of
Pharmaceutical  Science  and  Clinical
Research , 1 (2), pp.83-89. Shoibe,  M.,  Chy,  M.N.U,  Alam,  M., Adnan,M.,  Islam,  M.Z.,  Nihar,  S.W., Rahman,  N.,  and  Suez,  E.  2017.  In Vitro and In Vivo Biological Activities  of Cissus  adnata (Roxb.).
Biomedicines . 5 : 1-18.
Suryanto, E. 2013, Potensi Ekstrak Fenolik Buah  Pisang  Goroho  ( Musa  Spp. ) Terhadap  Gula  Darah  Tikus  Putih ( Rattus  norvegicus ).  Chem.  Prog. 6 :
6-10. Verdam, M.C.D.S., Simplicio, F.G., Andrade,  K.C.D.,  Fernandes,  K.L.M.,
Machado,  T.M.F.,  Silva,  M.A.D., Souza, M.P.D., Koolen, H.H.F., Paula, C.D.S.,  Hirota,  B.C.K.,  Oliveira, V.B.D.,  Miyazaki,  C.M.S.,  Kalegari,
M.,  Miguel,  M.D.,  Campelo,  P.M.S., and  Miguel,  O.G.  2017.  Analgesic, Anti-Inflammatory  and  Antioxidant Activities  of Byrsonima  duckeana W.
R. Anderson (Malpighiaceae). Hindawi The Scientific World Journal . 2017 : 1-9.
Wang,  J.  R.,  Zhou,  H.,  Jiang,  Z.H., Wong,  Y.F.,  and  Liu,  L.  2008.  In Vivo Anti-Inflammatory and
Analgesic  Activities  of  A  Purified
Saponin Fraction Derived from The
Root  of Ilex  pubescens . 31 :  643-
650.