## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3253

## Ekstrak Jeruk Nipis Sebagai Obat Terapi Penyembuhan Penyakit Gastritis dengan metode GC-MS
Khairul Pahmi Rahmawati * , Diah Miftahul Aini, Winda Harniati
Program Studi Farmasi, STIKES Kusuma Bangsa, Mataram, Indonesia Email: amiezulkarnaen@gmail.com
Abstrak - Penyakit gastritis atau yang biasa dikenal sebagai sakit maag terjadi akibat adanya peradangan pada mukosa lambung oleh tingginya kadar keasaman lambung. Penggunaan obat-obatan secara terus-menerus dapat berdampak buruk bagi kesehatan, sehingga penggunaan  obat  herbal  mulai  menjadi  pilihan,  yang  dalam  hal  ini  menggunakan  air  perasan  jeruk  nipis  sebagai  obat  atau  terapi penyembuhan. Pada penelitian sebelumnya menyatakan bahwa terjadinya penebalan dinding lambung pada mencit setelah diberikan diet ekstrak jeruk nipis. Namun belum diketahui senyawa bahan aktif yang bertanggung jawab pada proses pengendalian keasamaan asam lambung pada penyakit gastritis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui senyawa kimia yang terkandung pada jeruk nipis dalam meredakan rasa perih pada penderita maag. Penelitian ini akan dilakukan dengan metode eksperimental laboratorik yaitu dengan dilakuaun penapisan fitokimia, kemudian sampel dianalisis menggunakan GC-MS. Diperoleh hasil berupa senyawa alkaloid, glikosida, triterpenoid,  saponin,  polifenol,  flavonoid  serta  phenol  yang  berperan  sebagai  anti  oksidan  serta  sebagai  senyawa  induktor pembentukan stempsel. Selanjutnya, analisis GC-MS menunjukkan hadirnya senyawa turunan asam sitrat berupa citraconic anhindrat, itaconic  anhindrat  dan  Itaconic  acid  serta  senyawa  palmitic  acid  yang  merupakan  asam  lemak.  Asam  sitrat  merupakan  kelompok senyawa yang berperan sebagai larutan buffer. Sehingga saat asam lambung meningkat dan terjadi sakit maag, asam sitrat dari jeruk nipis dapat menetralkan tingkat keasamannya dengan prinsip kerja larutan buffer.
Kata kunci : Ekstrak Jeruk Nipis; Penapisan Fitokimia; Analisis GC-MS.
Abstract- Gerd or comonly known as gastritis deseas occure due to inflamation of the gastric mucosa. Drug consumption is no longer safe for the reason of side effect for long term ingestion. Thus, herbal medicine is starting become an option, by employing lime juice for medication or theraphy. Previous study indicated positive response of lime extract for medication on mice. However, the mechanism is yet to be discovered. This study aims to determine the chemical compounds contained in lime extract that responsible for antiulcer activity. The research was carried out in laboratory experimental method, by phytochemical screening than continued by GC-MS. The result shows that lime juice containaing secondary metabolits, namely alkaloid, glycosides, triterpenoid, saponin, polyphenol, flavonoid and phenol that act as an anty-oxidants as well as inductors for formation of stemp cell. Furthermore, GC-MS analysis showed that the presence of citric acid derivatives in the form of citraconic anhindrat, itaconic anhindrat and Itaconic acid, last but not least palmitic acid as part of fatty acid. Citric acid is a compound that has a cappability to be a buffer solution. Therefore, consuming lime juice for gerd medication will help neutralised acidity of the gastric with the principle of buffer solution.
Keywords : Lime Extract; Secondary Metabolites Compounds; GC-MS Analysis .

## 1. PENDAHULUAN
Penyakit maag merupakan penyakit yang umum terjadi dikalangan masyarakat berbagai usia. Penyakit ini terjadi sebagai akibat luka pada mukosa dan submukosa lambung. Penyakit ini diderita oleh seluruh kalangan masyarakat baik dewasa maupun  anak-anak.  Tingkat  sakit  gastritis  yang  banyak  ditemukan  pada  kalangan  dewasa  yaitu  tingkat  ringan  hingga sedang,  dalam  fase  ini  inflamasi  pada  lambung  hanya  berkisar  pada  lapisan  permukaan  saja,  sehingga  gejala  yang ditimbulkan tidak begitu perih. Namun, jika terus dibiarkan, maka akan menyebabkan kerusakan pada mukosa lambung serta kelenjar- kelenjar yang ada pada permukaan lambung. Penyakit ini bisa juga menjadi serius jika luka pada permukaan lambung berada pada tingkat yang lebih tinggi, yaitu terjadinya luka bertukak  pada mukosa lambung yang disebabkan oleh aktifitas sekresi sel peptik oleh lambung dengan adanya enzim pepsin. Tanda terjadinya penyakin ini yaitu adanya rasa sakit pada ulu hati, rasa panas di dada, hingga   mual dan muntah (El-Serag et al., 2004).
Beberapa faktor diduga bertanggung jawab pada terjadinya penyakit maag, diantaranya yaitu stress, penggunaan obat-obatan  tertentu,  merokok,  hingga  pola  makan  yang  tidak  teratur.  Pada  penelitian  sebelumnya  dinyatakan  bahwa, pola  makan  yang  kurang  tepat  memberikan  andil  yang  besar  dalam  memicu  terjadinya  penyakit  maag  (Jarosz  & Taraszewska,  2014).  Dilaporkan  bahwa,  mengkonsumsi  beberapa  makanan  seperti   makanan  tinggi  lemak,  makanan pedas,  bawang-bawangan,  tomat  dan  jus  tomat,  cokelat,  kopi,  produk minuman  olahan  terutama  yang  mengandung papermint, minuman soda, alkohol, hingga mengkonsumsi jeruk-jerukan dan jus jeruk (Hampel et al., 2005; Pehl et al., 1999; Rodriguez-Stanley et al., 2000).
Pengobatan  penyakit  maag  dilakukan  dengan  berbagai  cara  tergantung  pada  tingkat  keparahan  gastritis  yang dialami pasien. Pengobatan dilakukan secara terapi  tunggal dan  kombinasi  2 jenis obat  seperti Ranitidin dan Antasida atau Ranitidin dengan Sukralfat (Wardaniati et al., 2016). Sedangkan penggunaan obat-obatan secara terus menerus dapat memberikan efek yang kurang baik bagi tubuh manusia (Kinoshita et al., 2018). sehingga masyarakat kini telah mulai menggunakan obat herbal untuk mengobati penyakit maag, diantara tanaman yang digunakan yaitu akar jeruk nipis, serta ekstrak jeruk nipis.
Buah  jeruk  nipis  memiliki  kemampuan  sebagai  anti  bakteri.  Dalam  penelitan  oleh  Berlian  menyatakan  bahwa ekstrak  jeruk  nipis  dapat  menghambat  pertumbuhan  bakteri  E.Coli  pada  pangan  (Berlian  et  al.,  2016).  Dalam kesempatan  lain,  disebutkan  bahwa  ekstrak  jeruk  memberikan  reaksi  positif  dalam  menghambat  pertumbuhan bakteri Staphylococcus Aureus dan Streptococcus pyogenes(Adebayo-Tayo et al., 2016; Razak et al., 2013).

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3253
Penelitian  khusus  mengenai  metabolit sekunder pada ekstrak  jeruk  nipis sebagai  obat  penyakit gastritis belum banyak  dilakukan,  selama  ini,  analisa  manfaat  ekstrak  buah  ini  baru  berkisar  sampai  kemampuannya  secara  biologis dalam  mempengaruhi  ketebalan  dinding  lambung dan  menginduksi  regenerasi  sel(Moraes  et  al.,  2009).  Penelitian sebelumnya dengan menggunakan mencit yang diberika diet ekstrak jeruk nipis menunjukkan penebalan dinding lambung yang  merupakan  berita  baik  penderita  maag.  Dengan  demikian  ekstrak  jeruk  nipis  dapat  memicu  terjadi  peningkatan jumlah sel dinding lambung yang berguna sebagai perlindungan lambung saat proses pencernaan makanan(Moraes et al., 2009). Meski demikian, mekanisme reaksi kimiawi yang terjadi belum dapat dijelaskan, yaitu tentang bagimana proses yang terjadi pada jeruk nipis yang memiliki rasa yang asam menetralkan tingkat keasamanan pada lambung serta senyawa apa yang memberikan efek positif tersebut pada ekstrak jeruk nipis. Hal inilah yang melatar belakangi penulis melakukan penelitian dalam menganalisa kandungan metabolit sekunder ekstrak jeruk nipis menggunakan metode GC-MS, sehingga diharapkan dapat menganalisa karakteristik senyawa metabolit sekunder pada ekstrak buah jeruk nipis. Proses ekstraksi dalam  penelitian  ini  menggunakan  metanol,  karna  sifat  kepolaran  metanol  memiliki  kemampuan  yang  optimal  dalam mengekstrak  kandungan  metabolit  sekunder  pada  tanaman  sebagaimana  yang  telah  dilaporkan  pada  penelitian sebelumnya(Padmalochana & Rajan, 2014).
Gas  Chromatoraphy  -  Mass  Spectroscopy  (GC-MS)  merupakan  metode  pemisahan  suatu  senyawa  berdasarkan volatilitas unsur-unsur pembentuk senyawa yang di rangkaikan dengan detektor yang mengidentifikasi jenis komponen berdasarkan massanya. Metode ini digunakan untuk menganalisa berbagai macam komponen penyusun suatu senyawa yang  berbentuk  gas  dan  stabil  dalam  suhu  yang  cukup  tinggi  yang  kemudian  di  identifikasi  berdasarkan  massa molekulnya(Jenke, 1996).

## 2. METODOLOGI PENELITIAN
Adapun  metode  yang  akan  digunakan  yaitu  penapisan  fitokimia  meliputi  analisis  secara  kualitatif senyawa  alkaloid, Tannin, Triterpenoid, Saponin, flavonoid dan phenol. Selanjunya, identifikasi senyawa bahan aktif yang terkandung di dalamnya akan dianalisis menggunakan metode GC-MS Skrining Fitokimia Adapun rincian pengujian yang dilakukan meliputi:

## 1. Pemeriksaan alkaloid
Ekstrak jeruk nipis dibuat dalam 3 fraksi, pertama  ditambahkan HCl 2 N yang berfungsi sebagai blanko. Fraksi kedua ditambahkan  pereaksi  Dragendorff  sebanyak  3  tetes.  Serta  tabung  ketiga  ditambahkan  peraksi  Mayer.  Terbentuknya endapan  jingga  pada  tabung  kedua  serta  endapan  kuning  atau  kekuningan  pada  tabung  ketiga  menunjukkan  adanya alkaloid(Jones & Kinghorn, 2012).

## 2. Pemeriksaan glikosida
Pemeriksaaan Glikosida dilakukan dengan reaksi liebermann-Burchard. Sample dilarutkan dalam pelarut etanol lalu di panaskan  hingga  tersisa  sedikit.  Sisanya  kemudian  ditambahkan  5  mL  asam  asetat anhidrat  P,  yang  selanjutnya ditambahkan 10 tetes asam sulfat P. Terbentuknya warna biru atau hijau menunjukkan adanya glikosida di dalam ekstrak. 3. Pemeriksaan sterol dan triterpenoid
Ekstrak jeruk nipis ditambahkan kloroform dan asam asetat masing-masing sebanyak 1  mL. Selanjutnya tambahkan 2 mL Asam sulfat pekat melalui dinding tabung reaksi. Jika terbentuk warna hijau kebiruan, maka menunjukkan adanya sterol.  Namun  jika  yang  terbentuk  adalah  cincin  berwarna  kecoklatan  atau  violet  menunjukkan  adanya triterpenoid(Farnsworth, 1966).
4. Pemeriksaan saponin
Selanjutnya, pengujian kandungan senyawa saponin dilakukan dengan pengecekan buih. Ekstrak ditambahkan air panas sebanyak 10 mL, dikocok, lalu diamati apakah ada buih  yang  terbentuk setinggi 1-10 cm. Terhadap buih ini kemudian ditambahkan HCl 2N, lantas buih tidak hilang menunjukkan adanya senyawa saponin pada sampel(Wall et al., 1962).

## 5. Pemeriksaan polifenol dan tannin
Larutan ekstrak jeruk nipis sebanyak 1 mL direaksikan dengan larutan besi (III) klorida 10%. Jika terjadi perubahan warna menjadi biru tua atau hitam kehijauan menunjukkan adanya senyawa poifenol dan tannin(Gothandam et al., 2010). 6. Pemeriksaan flavonoid
Pengujian kehadiran senyawa golongan flavonoid dilakukan dengan menambahkan aseton  kedalam ekstrak yang telah kering,  kemudian  ditambahkan  serbuk  halus  asam  borat  P,  dan  serbuk  halus  asam  oksalat  P.  Campuran  kemudian dipanaskan diatas penangas air secara hati-hati. Selanjutnya campuran ditambahkan dengan eter P. Selanjutnya campuran di amati di bawah UV 366 nm. Jika larutan berfluorosense kuning intensif menunjukkan adanya plavonoid.
7. Pemeriksaan Phenol
Ekstrak  di  larutkan  dalam  air  kemudian  ditambahkan  beberapa  tetes  1%  timbal  asetat.  Adanya  endapan  putih mengindikasikan kehadiran senyawa phenol pada ekstrak analit(Gothandam et al., 2010).
8. Analisis Senyawa Aktif dengan GC-MS
Untuk mengetahui karakteristik kandungan senyawa aktif yang terdapat di dalam ekstrak jeruk nipis dilakukan analisis menggunakan gas chromatography-mass spectrometer merek Shimadzu QP2010 ULTRA, the RTX-5MS yang dilengkapi dengan kolom kapiler berdiameter 0.25 mm, panjang 30 m dan ketebalan film 0. 25µm, suhu injeksi 40 o C selama 5 menit dengan peningkatan suhu sebesar 30 o C/menit selama 7 menit hingga mencapai 260 o C. Fase gerak yang digunakan yaitu gas Helium dengan kecepatan rata-rata 30ml/min. Identifikasi oleh mass spectrum diatur pada 35-500 m/z(Ratnasari et

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3253
al., 2022). Identifikasi senyawa kemudian dilakukan dengan membandingkan spektrum massa sample dengan database pada system di dalam GC-MS.

## 3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan hasil skrining fitokimia diketahui bahwa ekstrak jeruk nipis mengandung metabolit sekunder dari golongan alkaloid,  glikosida,  triterpenoid,  saponin,  polifenol,  flavonoid  serta  phenol.  Beberapa  diantara  senyawa  tersebut merupakan golongan antioksidan yang dikenal  mampu  memberikan efek positif dalam penyembuhan berbagai macam penyakit degradatif (Gülçin, 2012).
Tabel 1. Hasil screening Fitokimia ekstrak jeruk nipis
Studi yang dilakukan oleh Efferth and Oesch menerangkan bahwa sekelompok senyawa alkaloid pada tanaman menghalangi pertumbuhan sel  tumor secara invivo, memberikan efek anti kangker, serta anti inflamasi serta memiliki efektifitas farmacology sebagai senyawa antiulcer yang mampu mengobati sakit maag (Efferth & Oesch, 2021; Falcão et al., 2008).
Glikosida  merupakan  senyawa  metabolit  sekunder  yang  penting  bagi  tumbuhan  serta  memiliki  efek  biologis sebagai terapetik. Struktur glikosida tersusun atas dua bagian berupa aglikon yang merupakan rantai karbon dan glikon yang  merupakan  gula,  sehingga  membuatnya  hydrofil  atau  larut  dalam  air.  Dengan  adanya  dua  kutub  berbeda  pada glikosida  memungkinkannya  menjadi  senyawa  yang  dapat  berekasi  dengan  permukaan  sel  biologis  anusia,  sehingga menjadikannya sebagai bahan baku obat(Rijai, 2016). Berdasarkan bentuk aglikon nya, glikosida dibagi menjadi beberapa golongan senyawa, diantaranya yaitu saponin  yang merupakan bentuk  trans-linked steroid, dimana aglikonnya berupa sapogenin. Selanjutnya saponin dibagi menjadi dua yaitu saponin steroid, saponin triterpenoid. Saponin steroid banyak dimanfaatkan sebagai obat penyakit gastritis, syphilis, reumatik, penyakit kulit, eczema dan lain sebagainya. Sedangkan saponin triterpenoid dimanfaatkan  agent peng-emulsi, stimulan ekspektoran pada bronkitis kronis, serta memiliki sifat anti fungi, antibakteri dan anti inflamasi(Savitri et al., 2021).
Flavonoid merupakan glikosida berwarna kuning hingga oranye, senyawa ini tersusun oleh struktur kerangka fenol dengan cincin aromatik. Senyawa flavonoid yang terkandung di dalam buah jeruk nipis terdiri dari C dan O-Glikosida. Jeruk nipis secara alami kaya akan senyawa flavonoid yang diklasifikasikan dalam bentuk, flavon, flavonol dan flavonon. Study yang dilakukan oleh Rodrigues dkk menyatakan bahwa mengkonsumsi flavonoid dapat menurunkan resiko terkena berbagai macam kanker termasuk lambung, payudara, prostat hingga kangker kolorektal(Rodríguez-García et al., 2019).
Flavonoid  dilaporkan  berperan  penting  dalam  menginduksi  regenerasi  stemsel(Li  et  al.,  2011).  Stemsel  adalah mikroorganisme dalam tubuh manusia yang bertanggung  jawab dalam mereparasi  sel  yang rusak(Khalid et  al., 2013). Saat sakit maag berlangsung, terjadi kerusakan sel pada mukosa saluran cerna. Hal ini kemudian memicu terjadinya rasa panas di dada atau lebih parahnya lagi dapat menyebabkan asma dan pneumonia ketika gas asam lambung naik ke dalam paru-paru(Danisa  M,  2018).  Oleh  karenanya,  ekstrak  jeruk  nipis  yang  kaya  akan  flavonoid,  dapat  membantu  dalam menginduksi  pembentukan  stem  sell  yang  berperan  penting  dalam  proses  penyembuhan(Khalid  et al.,  2013;  Li  et  al., 2011).
Selanjutnya, polifenol merupakan senyawa fenol yang secara struktur memiliki jumlah gugus hidroksil lebih dari satu. Fenol merupakan antioksidan yang memiliki efektivitas lebih tinggi dari senyawa antioksidan lain seperti vitamin C dan  E(Tachibana,  2011).  Fenol  sederhana  juga  merupakan  molekul  golongan  glikosida.  Fenol  merupakan  salah  satu senyawa  metabolit  sekunder  yang  terdapat  pada  ekstrak  jeruk  nipis  yang  berperan  sebagai  antioksidan(Zuraida  et  al., 2017).  Di  china,  sebuah  tanaman  Polygonum  paleaceum  dipercaya  memiliki  kandungansenyawa  fenolik  telah dimanfaatkan masyarakat secara tradisional sebagai obat penyembuhan penyakit yang berhubungan dengan sakit tukak lambung, gastritis akut, disentri,pendarahan dan lain sebagainya(Wang et al., 2005).
Berikutnya,  tanin  merupakan  salah  satu  senyawa  metabolit  sekunder  yang  termasuk  dalam  golongan  polifenol dengan  berat  molekul  sekitar  500-20.000  yang  tersusun  oleh  gugus  hidroksil  dan  karboksil  rantai  kompleks.  Tanin menupakan senyawa golongan polifenol yang digunakan tumbuhan untuk pertahanan diri melawan pathogen, pemangsa serta untuk  bertahan dari kondisi lingkungan yang tidak baik  bagi tanaman serta memiliki aktifitas antibakteri(Puspita
UJI FITOKIMIA PEREAKSI PENGAMATAN HASIL Alkaloid Reagen dragendorf Terbentuk endapan jingga + Glikosida Asam asetat anhidrat dan asam sulfat Terbentuk warna hijau + Triterpenoid Asam sulfat pekat Terbentuk cincin orange kecoklatan + Saponin HCl 2N Berbuih + Polifenol dan Tanin Besi (III) klorida 10% Berwarna orange pekat + Flavonoid Asam Oksalat Sample menjad kekuningan + Fenol Timbal Asetat Endapan putih +

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3253
Sari  et  al.,  2015).  Selain  itu  tanin  adalah  senyawa  yang  memiliki  kemampuan  anti-ulcer  yaitu  mampu  membantu mereparasi jaringan lambung(Bagus et al., 2022; Sekar Kinanti et al., 2022).
Triterpenoid merupakan senyawa metabolit sekunder turunan terpenoid dengan kerangka karbon berasal dari enam satuan  isoprena  (2-metilbuta-1,3-diene)  yang  diturunkan  dari  skualena  yang  merupakan  hidrokarbon  C 30 asiklik. Golongan triterpenoid memiliki aktifitas antiinflamasi, antiviral, antikangker, antimikroba(Rijai, 2016)[23]. Selanjutnya, terpen merupakan senyawa metabolit sekunder yang menunjukkan efektifitas farmakologi sebagai antiulcerogenik(Lewis et  al.,  n.d.).  Dalam  sebuah  analisis  fitokimia  pada  minyak  atsiri  ektrak  kulit  jeruk  oleh  Sun,  ditemukan  senyawa monoterpen berupa limonen sebagai metabolit sekunder dengan jumlah yang cukup dominan. Dimana limonen memiliki efektifitas  sebagai  antikangker,  pada  lambung,  pulmonari,  adenoma  dan  kangker  hati.  Senyawa  limonen  juga menunjukkan  efektifitas  farmakologi  dalam  mengobati  penyakit  gastreosofagus  refluks  atau  maag  dan  mengurangi sensasi heartburn(Jidong Sun, 2007; Moraes et al., 2009).
Gambar 1. Data absorbansi senyawa metabolit sekunder ekstrak jeruk nipis menggunakan GC-MS
Dalam data GC-MS ( Gambar 1 dan 2 ) senyawa yang terekam di dalam ekstrak jeruk nipis yaitu :2,5-Furandione, 3-methyl-  (CAS)  Citraconic  anhydride  (Citraconic  anhindrat);  Dihydro-3-Methylene-2,5-Furandione  (CAS)  itaconic anhindrat (itaconic anhindrat); Butanedioic acid, methylene- (CAS) Itaconic acid, Hexadecanoic acid (CAS) Palmitic acid atau Asam palmitat.
Gambar 2. Kandungan senyawa metabolit sekunder pada jeruk nipis yang dianalisis dengan GC-MS
Citraconic  anhindrat,  itaconic  anhindrat  dan  Itaconic  acid  merupakan  senyawa  turunan  dari  asam  sitrat.  Proses destilasi telah merubah asam sitrat melalui reaksi dekarboksilasi dan dehydrasi menghasilkan senyawa itaconic anhidrat, citraconic  anhidrat dan  Itaconic  acid( gambar  3) (Fischer  et  al.,  1995;  Wyrzykowski  et  al.,  2011). Komposisi  senyawa Citraconic anhindrat memiliki kelimpahan yang paling banyak di dalam ekstrak jeruk nipis, yaitu dengan total kelimpahan sebesar 77%. Hal ini disebabkan karena, Citraconic anhindrat merupakan produk akhir pada reaksi kondensasi asam sitrat dan turunannya. Baik itu asam sitrat, itaconic anhindrat atau itaconc acid jika mengalami kondensasi, akan menghasilkan produk berupa citraconic anhindrat .

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3253
Asam sitrat merupakan senyawa organik dengan rumus kimia HOC (COOH) (CH 2 COOH) 2 atau disingkat H 3 Cit termasuk dalam golongan asam lemah yang aman dikonsumsi dan ditemukan secara melimpah pada beberapa jenis buah dan  sayuran  seperti  jeruk  lemon,  jeruk  nipis  dan  jeruk  purut[6]. Selanjutnya  disebutkan  juga  jeruk  nipis   mengandung asam  sitrat  yang  cukup  tinggi  dengan  kadar  1.38  g/oz(Penniston  et  al.,  2008).  Senyawa  asam  sitrat  banyak  digunkan sebagai  pengawet  makanan,  zat  pembersih  serta  antioksidan,  serta  memiliki  afektifitas  biologis  dalam  menghambat kristalisasi  urin(Sheng  et  al.,  2004).    Asam  sitrat  merupakan  senyawa  penting  dalam  siklus  krebs  didalam  sel (Wyrzykowski  et  al.,  2010).  Sifat  rasa  asam  pada  asam  sitrat  disebabkan  dengan  adanya  tiga  gugus  karboksilat  pada struktur senyawa tersebut yang jika didalam larutan akan melepas proton sehingga meghasilkan ion sitrat. Ion sitrat sangat baik sebagai larutan penyangga atau larutan buffer, yaitu sebagai pengendali pH larutan (Wyrzykowski et al., 2010, 2011).
Larutan buffer adalah larutan yang terdiri dari asam lemah dan basa konjugatnya atau basa lemah dengan asam konjugatnya  ( gambar  4a) Larutan  buffer  berfungsi  untuk  mempertahankan  pH  suatu  larutan.  Jika  asam  atau  basa ditambakan  kedalam  larutan  buffer,  maka  perubahan  pH  tidak  akan  terjadi  secara  signifikan  atau  bahkan  cenderung konstan.  Hal  ini  karena  ketika  suatu  asam  ditambahkan  kedalam  larutan  buffer  yang  terdiridari  asam  lemah  dan konjugatnya, maka reaksi akan bergeser ke kiri, atau dengan kata lain, ion H + akan langsung ditangkap sehingga tidak terjadi  kenaikan  jumlah  ion  H + yang  menyebabkan  nilai  pH  naik  di  dalam  larutan.  Sehingga  pH  larutan  dapat dipertahankan ( gambar 4c) Selanjutnya, ketika penambahan basa kedalam larutan buffer, ion hidrogen dari basa tersebut akan ditangkap ke dalam reaksi kesetimbangan sehingga kenaikkan jumlah ion hidrogen di dalam larutan tidak signifkan ( gambar 4b) .
Gambar 4. Persamaan reaksi yang terjadi pada larutan buffer (penyangga): persamaan rekasi kesetimbangan larutan buffer (a); reaksi penambahan basa pada larutan buffer, persamaan reaksi bergeser ke arah kanan jika dilihat dari persamaan reaksi a (b); reaksi penambahan asam pada larutan buffer, persamaan reaksi bergeser ke arah kiri jika dilihat dari persamaan  reaksi a (c).
Larutan buffer diperlukan oleh tubuh untuk mempertahankan pH reaksi biokimia di dalam tubuh.  Secara kimia, asam sitrat memiliki tiga nilai ketetapan kesetimangan asam (Ka), hal ini memungkinkan asam sitrat menjadi zat buffer yang sangat baik. Di laboratorium, asam sirat banyak digunakan sebagai zat campuran pembuatan larutan buffer untuk menghasilkan campuran larutan buffer dengan rentang pH yang luas. Secara spesifik, asamsitrat memiliki 3 nilai Ka. nilai pKa asam sitrat yaitu 3,13; 4,76; 6,40(Wyrzykowski et al., 2010) ( gambar 5 ) dengan kemampuan menstabilkan pH pada rentan 2 – 8, sedangkan pada system biologis pada pH 7(Goldberg et al., 2002).
Gambar 5. Asam sitrat dengan 3 nilai kesetimbangan dissosiasi asam (Ka)
Kemampuan asam sitrat sebagai larutan buffer atau penyangga dapat menjadi alasan mengapa ekstrak jeruk nipis menjadi  salah  satu  obat  terapi  penyembuhan  bagi  penderita  penyakit  maag.  Saat  sakit  maag  terjadi  akibat  adanya peningkatan kadar keasaman lambung dari kadar ion H + yang meningkat akibat system biologis tubuh yang sedang tidak seimbang  yang  disebabkan  berbagai  faktor.  Peningkatan  kadar  ion  H + dalam  lambung  ditangkap  dan  bereaksi  dengan asam sitrat dari ekstrak jeruk nipis yang merupakan larutan buffer hingga tercapai kesetimbangan reaksi di dalam lambung ( gambar 6 ).
P roduk  terakhir  yang  teranalisis  yaitu  palmitic  acid  atau  asam  palmitat.  Palmitic  acid  atau  asam  palmitat merupakan asam lemak rantai panjang 16-Karbon yang merupakan asam lemak jenuh yang ditemukan luas pada tanaman,

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3253
binatang,  atau  bahkan  pada  mikro  organisme.  Karna  sifatnya  yang  mudah  ditemukan  dan  berlimpah,  asam  palmitat banyak  dimanfaatkan  dalam  bidang  industri  makanan  sebagai  zat  aditif  penambah  tekstur  makanan(Kingsbury  et  al., 1961).

## 4. KESIMPULAN
Metode  penyembuhan  epenyakit  maag  menggunakan  ekstrak  jeruk  nipis  oleh  masyarakat  dapt  terjadi  akibat  adanya senyawa metabolit sekunder ekstrak jeruk nipis berupa alkaloid, glikosida, triterpenoid, saponin, polifenol, flavonoid serta phenol yang berperan sebagai enti oksidan serta sebagai antiulcer, regenerasi sel lambung serta berperan dalam mengobati sakit  maag.  Selanjutnya,  analisis  GC-MS  menunjukkan  hadirnya  asam  sitrat  sebagai  zat  yang  terdeteksi,  Asam  sitrat merupakan kelompok senyawa yang berperan sebagai larutan buffer. Sehingga saat asam lambung meningkat dan terjadi sakit maag, asam sitrat dari jeruk nipis dapat menetralkan tingkat keasamannya dengan prinsip kerja larutan buffer.

## REFERENCES
Adebayo-Tayo,  B.  C.,  Akinsete,  T.  O.,  &  Odeniyi,  O.  A.  (2016).  Phytochemical  Composition  And  Comparative  Evaluation  Of Antimicrobial Activities Of The Juice Extract Of Citrus Aurantifolia And Its Silver Nanoparticles.  J. Pharm. Res, 12(1), 59–64. Http://Www.Nigjpharmres.Com
Bagus, I., Anandika, D., Amrullah, H. U., & Kunci, K. (2022). Humantech : Jurnal Ilmiah Multidisplin Indonesia Humantech Jurnal Ilmiah  Multi  Disiplin  Indonesia  Review:Studi  Tumbuhan  Sebagai  Antitukak  Pada  Bagian  Daun.  Humantech:  Jurnal  Ilmiah Multidisplin Indonesia, 2(3), 798–794.
Berlian, Z., Fatiqin, A., & Agustina, E. (2016). Penggunaan Perasan Jeruk Nipis (Citrus Aurantifolia) Dalam Menghambat Bakteri Escherichia Coli Pada Bahan Pangan. In Jurnal Bioilmi (Vol. 2, Issue 1).
Danisa M, C. (2018). Gastroesophageal Refl Ux Disease Aff Ects Millions Of People Worldwide With Signifi Cant Clinical Implicati Ons.
Efferth, T., & Oesch, F. (2021). Repurposing Of Plant Alkaloids For Cancer Therapy: Pharmacology And Toxicology. In Seminars In Cancer Biology (Vol. 68, Pp. 143–163). Academic Press. Https://Doi.Org/10.1016/J.Semcancer.2019.12.010
El-Serag, H. B., Petersen, N. J., Carter, J., Graham, D. Y., Richardson, P., Genta, R. M., & Rabeneck, L. (2004). Gastroesophageal Reflux Among Different Racial Groups In The United States. Gastroenterology, 126(7), 1692–1699.
Https://Doi.Org/10.1053/J.Gastro.2004.03.077
Falcão, H. D. S., Leite, J. A., Barbosa-Filho, J. M., De Athayde-Filho, P. F., Chaves, M. C. D. O., Moura, M. D., Ferreira, A. L., De Almeida, A. B. A., Souza-Brito, A. R. M., Diniz, M. D. F. F. M., & Batista, L. M. (2008). Gastric And Duodenal Antiulcer Activity Of Alkaloids: A Review. In Molecules (Vol. 13, Issue 12, Pp. 3198–3223). Https://Doi.Org/10.3390/Molecules13123198
Farnsworth, N. R. (1966). Biological And Phytochemical Screening Of Plants. In Journal O F Pharmaceutical Sciences M ~ T C ~ (Vol. 55, Issue 3).
Fischer, J. W., Merwin, L. H., & Nissan, R. A. (1995). Nmr Investigation Of The Thermolysis Of Citric Acid. Goldberg, R. N., Kishore, N., & Lennen, R. M. (2002). Thermodynamic Quantities For The Ionization Reactions Of Buffers. In Journal Of  Physical  And  Chemical  Reference  Data  (Vol.  31,  Issue  2,  Pp.  231–370).  American  Institute  Of  Physics  Inc. Https://Doi.Org/10.1063/1.1416902
Gothandam, K. M., Aishwarya, R., & Karthikeyan, S. (2010). ): Et Al. Preliminary Screening Of Antimicrobial Properties Of Few Medicinal Plants. Journal Of Phytology, 2010(4). Www.Journal-Phytology.Com
Gülçin, I. (2012). Antioxidant Activity Of Food Constituents: An Overview. In Archives Of Toxicology (Vol. 86, Issue 3, Pp. 345– 391). Https://Doi.Org/10.1007/S00204-011-0774-2
Hampel, H., Abraham, N. S., & El-Serag, H. B. (2005). Meta-Analysis: Obesity And The Risk For Gastroesophageal Reflux Disease And Its Complications Background: The Association Of Body Mass Index And Gastro. Www.Annals.Org
Jarosz,  M.,  &  Taraszewska,  A.  (2014).  Risk  Factors  For  Gastroesophageal  Reflux  Disease:  The  Role  Of  Diet.  Przeglad Gastroenterologiczny, 9(5), 297–301. Https://Doi.Org/10.5114/Pg.2014.46166
Jenke, D. R. (1996). Chromatographic Method Validation: A Review Of Current Practices And Procedures. Ii. Guidelines For Primary Validation Parameters. In Journal Of Liquid Chromatography And Related Technologies (Vol. 19, Issue 5, Pp. 737–757). Marcel Dekker Inc. Https://Doi.Org/10.1080/10826079608005534
Jidong Sun, P. (2007). Figure 1. D-Limonene. 259–264. Http://Mail.Encognitive.Com/Files/D-Limonene%20cancer%20treatment.Pdf Jones, W. P., & Kinghorn, A. D. (2012). Extraction Of Plant Secondary Metabolites. Methods In Molecular Biology, 864, 341–366.
Https://Doi.Org/10.1007/978-1-61779-624-1_13
Khalid, M., Aljurf, M., Saleemi, S., Khan, M. Q., Khan, B., Ahmed, S., Ibrahim, K. E. T., Mobeireek, A., Mohareb, F. Al, & Chaudhri, N.  (2013).  Gastroesophageal  Reflux  Disease  And  Its  Association  With  Bronchiolitis  Obliterans  Syndrome  In  Allogeneic Hematopoietic  Stem  Cell  Transplant  Recipients.  Experimental  And  Clinical  Transplantation,  11(3),  270–273. Https://Doi.Org/10.6002/Ect.2012.0207
Kingsbury, K. J., Paul, S., Crossley, A., & Morgan, D. M. (1961). The Fatty Acid Composition Of Human Depot Fat. In  Biochem. J (Vol. 78).
Kinoshita, Y., Ishimura, N., & Ishihara, S. (2018). Advantages And Disadvantages Of Long-Term Proton Pump Inhibitor Use. Journal Of Neurogastroenterology And Motility, 24(2), 182–196. Https://Doi.Org/10.5056/Jnm18001
Lewis, D., Hanson, P., & Phil, D. (N.D.). 4 Anti-Ulcer Drugs Of Plant Origin. In Progress In Medicinal Chemistry (Vol. 28).
Li, M., Tsang, K. S., Choi, S. T., Li, K., Shaw, P. C.,  & Lau, K. F. (2011). Neuronal Differentiation Of C17.2 Neural Stem Ce lls
Induced By A Natural Flavonoid, Baicalin. Chembiochem, 12(3), 449–456. Https://Doi.Org/10.1002/Cbic.201000570
Moraes, T. M., Kushima, H., Moleiro, F. C., Santos, R. C., Machado Rocha, L. R., Marques, M. O., Vilegas, W., & Hiruma-Lima, C.
A. (2009). Effects Of Limonene And Essential Oil From Citrus Aurantium On Gastric Mucosa: Role Of Prostaglandins And Gastric Mucus Secretion. Chemico-Biological Interactions, 180(3), 499–505. Https://Doi.Org/10.1016/J.Cbi.2009.04.006

## Journal of Pharmaceutical and Health Research

## ISSN 2721-0715 (media online)
DOI 10.47065/jharma.v4i1.3253
Padmalochana,  K.,  &  Rajan,  M.  S.  D.  (2014).  Antimicrobial  Activity  Of  Aqueous,  Ethanol  And  Acetone  Extracts  Of  Sesbania Grandiflora Leaves And Its Phytochemical Characterization.
Pehl, C., Waizenhoefer, A., Wendl, B., Schmidt, T., Schepp, W., & Pfeiffer, A. (1999). Effect Of Low And High Fat Meals On Lower Esophageal Sphincter Motility And Gastroesophageal Reflux In Healthy Subjects.
Penniston, K. L., Nakada, S. Y., Holmes, R. P., & Assimos, D. G. (2008). Quantitative Assessment Of Citric Acid In Lemon Juic e, Lime Juice, And Commercially-Available Fruit Juice Products. Journal Of Endourology, 22(3), 567–570.
Https://Doi.Org/10.1089/End.2007.0304
Puspita Sari, P., Susanah Rita, W., & Ni Made Puspawati, Dan. (2015). Identifikasi Dan Uji Aktivitas Senyawa Tanin Dari Ekstrak Daun Trembesi (Samanea Saman (Jacq.) Merr) Sebagai Antibakteri Escherichia Coli (E. Coli). Jurnal Kimia , 9(1), 27–34. Ratnasari, B. D., Aini, D. M., Yamin, I. S., & Antari, G. Y. (2022). Antiradical Activity Study Of Momordica Charantia L Seeds Based
On Dpph And Its Secondary Metabolites Analysis. Jurnal Ilmiah Medicamento, 8(1), 56–62.
Https://Doi.Org/10.36733/Medicamento.V8i1.3352
Razak,  A.,  Djamal,  A.,  &  Revilla,  G.  (2013).  Uji  Daya  Hambat  Air  Perasan  Buah  Jeruk  Nipis  (Citrus  Aurantifolia  S.)  Terhadap Pertumbuhan  Bakteri  Staphylococcus  Aureus  Secara  In  Vitro.  In  Jurnal  Kesehatan  Andalas  (Vol.  2,  Issue  1). Http://Jurnal.Fk.Unand.Ac.Id
Rijai, L. (2016). Senyawa Glikosida Sebagai Bahan Farmasi Potensial Secara Kinetik. J. Trop. Pharm. Chem. , 3(3), 213–218. Rodríguez-García, C., Sánchez-Quesada, C., Gaforio, J. J., & Gaforio, J. J. (2019). Dietary Flavonoids As Cancer Chemopreventive
Agents: An Updated Review Of Human Studies. In Antioxidants (Vol. 8, Issue 5). Mdpi. Https://Doi.Org/10.3390/Antiox8050137
Rodriguez-Stanley, S., Collings, K. L., Robinson, M., Owen, W., & Miner, P. B. (2000). The Effects Of Capsaicin On Re¯Ux, Gastric Emptying And Dyspepsia.
Savitri, L., Kasimo, E. R., Sukmawati, D. A. N., Juwita, S. T., Wahyuningtiyas, E., & Retnowati, A. (2021). Uji Potensi Triterpenoid Dari  Kulit  Batang  Waru  Jawa  (Hibiscus  Tiliaceus  L.)  Sebagai  Kandidat  Antiinflamasi  Pada  Mencit  (Mus  Musculus)  Model Rheumatoid Arthritis Berbasis In Silico. Jurnal Ilmiah Universitas Batanghari Jambi, 21(3), 1091.
Https://Doi.Org/10.33087/Jiubj.V21i3.1619
Sekar Kinanti, N., Kadek Warditiani, N., & Kunci, K.  (2022). Humantech Jurnal Ilmiah Multi Disiplin Indonesia Review Artikel: Aktivitas Antiulcer Dari Tanaman Famili Zingiberaceae. Humantech Jurnal Ilmiah Multi Disiplin Indonesia , 2(3), 692–696. Sheng, X., Jung, T., Wesson, J. A., & Ward, M. D. (2004). Adhesion At Calcium Oxalate Crystal Surfaces And The Effect Of Urinary Constituents. Www.Pnas.Orgcgidoi10.1073pnas.0406835101
Tachibana,  H.  (2011).  Green  Tea  Polyphenol  Sensing.  In  Proceedings  Of  The  Japan  Academy  Series  B:  Physical  And  Biological Sciences (Vol. 87, Issue 3, Pp. 66–80). Https://Doi.Org/10.2183/Pjab.87.66
Wall, M. E., Warnock, B. T., & Willaman, J. J. (1962). Steroidal Sapogenins. Lxviii. Their Occurrence In Agave Lecheguilla. Wang, K. J., Zhang, Y. J., & Yang, C. R. (2005). Antioxidant Phenolic Compounds From Rhizomes Of Polygonum Paleaceum. Journal
Of Ethnopharmacology, 96(3), 483–487. Https://Doi.Org/10.1016/J.Jep.2004.09.036
Wardaniati, I., Dahlan, A., Abdurrab, U., Andalas, U., & Ahmad Mochtar, R. (2016). Gambaran Terapi Kombinasi Ranitidin Dengan Sukralfat Dan Ranitidin Dengan Antasida Dalam Pengobatan Gastritis Di Smf Penyakit Dalam Rumah Sakit Umum Daerah (Rsud) Ahmad Mochtar Bukittinggi. In Jurnal Farmasi Higea (Vol. 8, Issue 1).
Wyrzykowski, D., Czupryniak, J., Ossowski, T., & Chmurzyński, L. (2010). Thermodynamic Interactions Of The Alkaline Earth Metal Ions  With  Citric  Acid.  Journal  Of  Thermal  Analysis  And  Calorimetry,  102(1),  149–154.  Https://Doi.Org/10.1007/S10973-010- 0970-Y
Wyrzykowski, D., Hebanowska, E., Nowak-Wiczk, G., Makowski, M., & Chmurzyński, L. (2011). Thermal Behaviour Of Citric Acid And Isomeric Aconitic Acids. Journal Of Thermal Analysis And Calorimetry, 104(2), 731–735. Https://Doi.Org/10.1007/S10973-
010-1015-2 Zuraida,  Z.,  Sulistiyani,  S.,  Sajuthi,  D.,  &  Suparto,  I.  H.  (2017).  Fenol,  Flavonoid,  Dan  Aktivitas  Antioksidan  Pada  Ekstrak  Kulit Batang Pulai (Alstonia Scholaris R.Br). Jurnal Penelitian Hasil Hutan, 35(3), 211–219. Https://Doi.Org/10.20886/Jphh.2017.35.3.211-219