## PERTUMBUHAN KULTUR MIKROALGA DIATOM
Skeletonema costatum (Greville) Cleve ISOLAT JEPARA PADA MEDIUM f/2 DAN MEDIUM CONWAY
Dian Triastari Armanda
Program Studi Tadris Biologi Fakultas Ilmu Tarbiyah dan Keguruan IAIN Walisongo Semarang email : dianarmandha@yahoo.com
THE GROWT OF DIATOM Skeletonema costatum (Greville) Cleve OF JEPARA’S ISOLATES CULTURES IN f/2 DAN CONWAY CULTURE

## ABSTRACT
Skeletonema  costatum (Greville)  Cleve  (Bacillariophyceae)  is  the unisel photosynthetic microalgae’s diatom which has the silica as the main composition of its cell walls. Diatoms have some life phases that can be observed in its batch culture The purpose of this research is to study  the  population  growth  of  the  diatom Skeletonema  costatum populations  in  the f/2 medium  and  Conway  medium  of  the  growth curve is formed. This study also aims to determine the generation time and  instantaneous  growth  rate  of  this  the  diatom  species  in  both medium, in order to know which one is more appropriate medium for Skeletonema costatum.
The  batch  culture  of S.  costatum was  applied  at f/2 medium  and Conway  medium  with  three  replications  for  7x24  hours  in  a  sterile condition. Environmental parameters (pH, salinity, and temperature of the  medium)  were  measured  periodically.  The  population  growth  of the culture reached the lag phase in the first 24 hours, the exponential phase in the second 24 hours, whereas the stationary phase was in the third  24  hours.  The  growth  of S.  costatum in  both  medium  were  not significantly  different. Skeletonema  costatum growth  rate  in f/2 medium were 0.0282 cells/hour and its generation time were 25.5420 hours.  On  the  other  hand, Skeletonema  costatum growth  rate  in Conway medium were 0.0228 cells/hour and its generation time were 30.3728  hours.  This  study  proved  that  the  growth  of Skeletonema costatum populations in f/2 medium and Conway medium tends to be similar (Sig. 0.325, α = .10).
Keywords:  Skeletonema  costatum,  f  /2  medium,  Conway  medium, growth rate, generation time

## ABSTRAK
Skeletonema  costatum (Bacillariophyceae)  adalah  mikroalga  diatom  unisel fotosintetik yang memiliki dinding sel dengan penyusun utama berupa silika. Seperti organisme lain, diatom memiliki fase-fase hidup yang dapat diamati pada  kultur  sekali  unduhnya.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk mempelajari  pertumbuhan  populasi  diatom Skeletonema  costatum pada medium f/2 dan  medium  Conway  dari  kurva  pertumbuhan  yang  terbentuk.
Penelitian  ini  juga  bertujuan  untuk  mengetahui  waktu  generasi  dan kecepatan  tumbuh  instantaneous  jenis  diatom  ini  pada  kedua  medium tersebut,  sehingga  dapat  diketahui  medium  mana  yang  lebih  tepat  untuk Skeletonema costatum.
Kultur sekali unduh ( batch culture ) S. costatum dilakukan pada medium f/2 dan  medium  Conway  dengan  tiga  ulangan  selama  7x24  jam  dalam  kondisi steril.  Parameter lingkungan  (pH,  salinitas,  dan  temperatur  medium)  diukur secara periodik. Pertumbuhan kultur diatom S. costatum mencapai fase lag di 24 jam pertama, fase eksponensial di 24 jam kedua, fase stasioner di 24 jam ketiga, dan fase kematian di 24 jam berikutnya. Bentuk kurva pertumbuhan pada medium f/2 dan Conway tidak berbeda nyata. Kecepatan pertumbuhan Skeletonema  costatum pada  medium f/2 adalah  0,0282  sel/jam  dengan waktu  generasi  25,5420  jam.  Kecepatan  pertumbuhannya  pada  medium Conway  adalah  0,0228  sel/jam  dengan  waktu  generasi  30,3728  jam. Penelitian  ini  membuktikan  bahwa  pertumbuhan  populasi Skeletonema costatum pada medium Conway maupun f/2 cenderung serupa (Sig. 0,325, α =0,10).
Kata  kunci : Skeletonema  costatum,  f/2,  Conway,  kecepatan  pertumbuhan, waktu generasi

## PENDAHULUAN
Indonesia  memiliki  potensi  kelautan  yang  luar  biasa,  ditunjukkan  dengan  garis pantai  yang  terpanjang  di  dunia  (81.000  km).  Indonesia  juga  disebut mega biodiversity karena  keanekaragaman  hayatinya  yang  sangat  besar  dibandingkan negara  lain.  Salah  satu  keanekaragaman  hayati  laut  Indonesia  adalah  mikroalga diatom (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995). Saat ini, sekitar 20-25% produktivitas primer  biomassa  di  bumi  ini  dihasilkan  oleh  diatom.  Hal  tersebut  menunjukkan peran besar diatom bagi ekosistem (Hoek et al ., 1998). Peranan utama diatom dan mikroalga lain adalah sebagai  produsen tingkat  primer bagi  zooplankton, cacing, dan moluska (Nurwito, 1989).
Bioma , Vol. 2, No. 1, April 2013
Diatom  adalah  mikroalga  uniseluler  fotosintetik  yang  memiliki  dinding khas  terbuat  dari  silika.  Pola,  ukuran,  dan  ornamentasi  dinding  sel  yang  khas menjadi ciri taksonomi jenis-jenis diatom. Diatom memiliki klorofil a, c, alfa, dan betakaroten,  serta  xantofil  (fucoxantin,  diadinoxantin,  dan  diatoxantin)  sehingga warnanya  menjadi  coklat  keemasan.  Diatom  juga  dibagi  menjadi  dua  bentuk, yaitu  dapat  berupa centric  diatom maupun pennate  diatom.  Centric diatom berbentuk  simetri  radial  dan  reproduksinya  secara oogamy, sedangkan pennate diatom berbentuk kurang lebih simetri bilateral dan bereproduksi secara isogamy (Isnansetyo  dan  Kurniastuty,  1995).  Pembagian  diatom  atas  bentuk  dan  tipe reproduksi ini juga menjadi ciri taksonomi diatom. Lebih dari 250 genera dengan kurang  lebih  100.000  spesies  diatom  telah  ditemukan.  Diatom  bisa  hidup  di  air laut, air tawar, batu karang, maupun di tanah yang lembab (Hoek et al . , 1998).
Diatom  dapat  dikultur  untuk  menghasilkan  pakan  zooplankton,  ikan, udang, serta hewan tambak lain dengan ditumbuhkan secara monokultur maupun polikultur.  Secara  umum,  pada  kultur  mikroalga  dibutuhkan  berbagai  macam senyawa anorganik baik sebagai hara makro (N, P, K, S, Na, Si, dan Ca) maupun hara mikro (Fe, Zn, Cu, Mg, Mo, Co, B, dan lain-lain). Setiap unsur hara memiliki fungsi  khusus  yang  tercermin  pada  pertumbuhan  dan  kepadatan  yang  dicapai, tanpa  mengesampingkan  kondisi  lingkungan  (Andersen,  2005).  Faktor-faktor lingkungan yang berpengaruh terhadap pertumbuhan mikroalga antara lain cahaya, temperatur,  salinitas,  tekanan  osmose,  dan  pH  air,  yang  bisa  jadi  memacu  atau menghambat pertumbuhan (Fogg and Thake,1987).
Skeletonema  costatum adalah  jenis  diatom  yang  memiliki  klasifikasi sebagai berikut :
Filum : Heterokontophyta Kelas : Bacillariophyceae Ordo : Centrales Genus : Skeletonema Spesies : Skeletonema costatum ( Hoek, et al. , 1998).
Armanda, D.T., Pertumbuhan Kultur Mikroalga
Gambar 1. Skeletonema costatum (Anonim, 2005; Melanie, 2004)
Skeletonema costatum adalah diatom yang merupakan alga unisel filamentik yang selnya  berbentuk  kotak  yang  terdiri  atas epitheca (bagian  yang  lebih  besar)  dan hypotheca (bagian  yang  lebih  kecil)  yang  bertangkup  menjadi  satu.  Spesies  ini tergolong pennate  diatom yang  berkembang  biak  secara  isogami.  Bagian hypotheca nya berlubang-lubang  yang polanya khas dan indah  yang tersusun atas silicon  oksida  (SiO 2 )  dengan  diameter  sel  4  –  15  mikron.  Setiap  sel  diatom dipenuhi  sitoplasma.  Warna  sel  hijau  kecoklatan  dan  pada  setiap  sel  memiliki frustula  yang  menghasilkan  skeletal  eksternal.  Karotenoid  dan  diatomin merupakan  pigmen  yang  dominan  pada  jenis  ini  (Isnansetyo  dan  Kurniastuty, 1995).
Kondisi  optimum  pertumbuhan Skeletonema  costatum adalah  pada temperatur  20-25ºC,  salinitas  17-25  ppt,  pH  7-8,  serta  kadar  Vitamin  B  12 minimum  5  –  13,8  molekul  /  μ  m³  (Lee,  1995;  Maestrini et  al .,  1984).  Pada monokultur S.  costatum dalam batch  culture akan  didapatkan  setidaknya  empat fase  pertumbuhan populasi,  yaitu fase lag, fase eksponensial, fase stasioner, dan fase  kematian  (Schlegel,  1992).  Menurut  Renaud et  al. (1998),  pada  medium f/ 2 dengan  temperatur  25±1°C,  pH  8,3±0,2,  dan  salinitas  25  ppt, S.  costatum bisa mencapai  kecepatan  pertumbuhan  (μ)  sebesar  0,69  sel/hari.  Kecepatan pertumbuhan ini tergolong tinggi dibandingkan diatom jenis lain.
Penelitian  tentang  diatom  semakin  berkembang  dengan  diketahuinya potensi  diatom  sebagai  sumber  pakan,  penghasil  enzim,  penghasil  asam  lemak esensial,  senyawa antifouling ,  dan  lain  sebagainya.  Diatom  bahkan  tergolong mikroalga  yang  cukup  tinggi  kandungan  asam  lemaknya  sehingga  bisa  diekstrak
Bioma , Vol. 2, No. 1, April 2013
dan  diolah  lebih  lanjut  menjadi  biodiesel,  bahan  bakar  yang  dapat  terbarui ( renewable )  dan  ramah  lingkungan  (Hausemann et  al.,  2003 ). Skeletonema costatum saat  ini  banyak  digunakan  oleh  hampir  setiap  unit  pembenihan  udang windu di Indonesia (Isnansetyo dan Kurniastuty,1995).
Meski telah banyak penelitian terapan yang dilakukan untuk pemanfaatan diatom,  tetapi  penelitian  tentang  pertumbuhan  diatom  pada  medium  tertentu belum  banyak  dilakukan.  Tujuan  dari  penelitian  ini  adalah  untuk  mempelajari pertumbuhan  populasi  diatom Skeletonema  costatum pada  medium f/2 dan medium  Conway  dari  kurva  pertumbuhan  yang  terbentuk.  Penelitian  ini  juga bertujuan untuk mengetahui waktu generasi dan kecepatan tumbuh instantaneous jenis  diatom  ini  pada  kedua  medium  tersebut,  sehingga  dapat  diketahui  medium mana  yang  lebih  tepat  untuk Skeletonema  costatum. Data  pertumbuhan diharapkan dapat dikembangkan lebih lanjut dalam berbagai aplikasi pemanfaatan diatom jenis ini dan memacu berkembangnya penelitian lain yang sejenis.

## MATERIAL DAN METODE

## 1. S UBJEK P ENELITIAN
Subjek  penelitian  adalah Skeletonema  costatum (Bacillariophyceae) dari  Balai  Besar Pengembangan  Budidaya  Air  Payau  (BBPBAP)  Pantai  Kartini,  Jepara,  Jawa Tengah.

## 2. B AHAN YANG D IGUNAKAN
1) Komponen  Medium f/2 ,  komposisinya  terdiri  atas  makronutrien  yaitu NaH 2 PO 4 ,  NaNO 3 ,    dan  Na 2 SiO 3 ,  mikronutrien  yaitu  ZnSO 4 ,  CuSo 4 ,  CoCl 2 , MnCl 2 ,  dan  NaMoO 4 , trace  element yaitu  Na 2 EDTA  dan  FeCl 3 ,  serta kelompok  vitamin  terdiri  atas  Vitamin  B12  ( cyanocobalamine ), Thiamine HCl , dan Biotin.
2) Komponen  Medium  Conway,  komposisinya  terdiri  atas  NaH 2 PO 4 ,  Na 2 SiO 3 , Na 2 EDTA, FeCl 3 , dan Vitamin B 12 ( cyanocobalamine ).
Armanda, D.T., Pertumbuhan Kultur Mikroalga
3) Bahan  lain  yang  diperlukan  adalah  akuades,  air  laut,  serta  biakan  murni (isolat)  diatom Skeletonema  costatum yang  didapatkan  dari  Balai  Besar Pengembangan Budidaya Air Payau (BBPBAP)  Pantai Kartini, Jepara, Jawa Tengah.

## 3. A LAT YANG D IGUNAKAN
Alat-alat  yang  digunakan  dalam  penelitian  ini  diantaranya  adalah  :  autoklaf, Laminar  Air  Flow (LAF), almari pendingin, timbangan analitik,  gelas arloji,  dan sendok  plastik, jerry  can ,  toples  kapasitas  2,  erlenmeyer  250  ml,  aerator,  selang aerator, lampu neon 40 watt, labu ukur 250 ml, kertas payung, aluminium foil dan plastic  seal , Haemocytometer  Improved  Neubauer , hand  counter ,  mikroskop, syringe ,  dan  pipet  tetes.  Diperlukan  pula handrefraktometer ,  termometer,  dan indikator  universal  pH  masing-masing  digunakan  untuk  mengukur  parameter lingkungan selama kultur.

## 4. P ROSEDUR K ERJA
Penelitian ini dilakukan melalui beberapa tahapan, yaitu :

## 1) Sterilisasi Bahan dan Alat
Air laut dan akuades  yang telah dituangkan dalam toples dan erlenmeyer 250 ml disegel  kemudian  disterilisasi  dengan autoclave pada  temperatur  121°C  dan tekanan 1 atm, selama 15-20 menit (Andersen, 2005). Erlenmeyer 250 ml tempat medium, serta alat-alat plastik juga disterilisasi dengan cara serupa.

## 2) Preparasi Medium f/2
Masing-masing  komponen  kemikalia  mikronutrien, trace  element ,  vitamin,  dan Na 2 SiO 3 ditimbang,  diencerkan  dengan  akuades  steril  hingga  250  ml,  kemudian dimasukkan dalam empat erlenmeyer steril yang berbeda. Masing-masing larutan stok  ini  disimpan  di  dalam  kulkas  dan  siap  digunakan.  Senyawa  makronutrien berupa  NaH 2 PO 4 dan  NaNO 3 dimasukkan  dalam  labu  ukur  250  ml  beserta masing-masing  1  ml  stok  mikronutrien, trace  element ,  vitamin,  dan  Na 2 SiO 3 .
Bioma , Vol. 2, No. 1, April 2013
Campuran  ini  diencerkan  hingga  250  ml  dengan  air  laut.  Larutan  ini  disimpan dalam erlenmeyer steril sebagai medium f/2 250 ml yang siap diinokulasi biakan diatom.

## 3) Preparasi Medium Conway
Masing-masing komponen medium Conway yang berupa NaH 2 PO 4 , Na 2 SiO 3 , Na 2 EDTA, FeCl 3 , dan Vitamin B12 ditimbang dan diencerkan dengan akuades steril hingga  250  ml.  Campuran  ini  kemudian  dituang  ke  dalam  erlenmeyer  steril. Larutan ini selanjutnya disebut stok medium Conway 250 ml. Sebanyak 1 ml dari stok  ini  diambil  dan  diencerkan  hingga  250  ml  dengan  air  laut.  Larutan  ini disimpan  dalam  erlenmeyer  steril  sebagai  medium  Conway  250  ml  yang  siap diinokulasi biakan diatom.
4) Inokulasi dan Kultivasi ( Batch Culture ) Strain Skeletonema costatum
Isolat  diatom Skeletonema  costatum diambil  sebanyak  10  ml  dengan syringe , kemudian diinokulasi dan pada medium f/2 250 ml dan medium Conway 250 ml dengan tiga ulangan. Selanjutnya, diatom ini dikultur pada ruang inkubasi dengan suhu  berkisar  20-25°C,  di  bawah  cahaya  lampu  neon  40  watt,  dengan  selang aerasi yang dimasukkan dalam erlenmeyer kultur. Kultur dilakukan selama 7 x 24 jam.
5) Penghitungan  Pertumbuhan  Populasi  Kultur  Diatom Skeletonema costatum
Setiap  24  jam  sekali,  dilakukan  penghitungan  jumlah  sel  mikroalga  dengan  tiga kali  ulangan  pada  setiap  erlenmeyer  kultur.  Mikroalga  diambil  dengan  pipet sebanyak  2  ml  dan  disimpan  dalam  botol  falcon.  Selanjutnya  penghitungan jumlah  sel  dilakukan  pada  bilik Haemocytometer  Improved  Neubauer di  bawah mikroskop  (perbesaran  20x10)  dengan  bantuan hand  counter .  Jumlah  sel/ml dihitung dengan rumus berikut ini:
Jumlah sel/ml =  L  x  250  x  10³ 50

## Armanda, D.T., Pertumbuhan Kultur Mikroalga
Keterangan :
L : jumlah sel terhitung pada bilik 1/250 mm³
50 : jumlah bilik hitung
250 : volume bilik hitung
Setiap  pengambilan  sampel  mikroalga  diakhiri  dengan  pengukuran  data sekunder  berupa  salinitas,  temperatur,  dan  pH  medium  pada  setiap  erlenmeyer. Hasil  penghitungan  jumlah  sel  ini  dianalisis  dengan Univariate  Analysis  of Variance ,  sedangkan  data  sekunder  dianalisis  dengan Independent-Sample  T  test untuk mengetahui nyata tidaknya perbedaan antar variabel.

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Kultur  diatom Skeletonema  costatum telah  dilakukan  selama  7  x  24  jam  dengan kurva pertumbuhan populasi sebagai berikut :
JAM 168 144 120 96 72 48 24 0 M ea n 80000 70000 60000 50000 40000 30000 F.2 CONWAY Gambar 2. Perbandingan pertumbuhan populasi Skeletonema costatum pada medium f/2 dan Conway selama 7 x 24 jam
Skeletonema  costatum adalah  jenis  mikroalga  yang  pertumbuhannya  tergolong cepat, sehingga sudah dapat dipanen dalam waktu dua hari kulturnya. Berdasarkan
Bioma , Vol. 2, No. 1, April 2013
uji  statistik,  diketahui  bahwa  perbedaan  rerata  jumlah  sel Skeletonema  costatum pada  medium f/2 dan  medium  Conway  tidak  berbeda  nyata  (serupa)  (nilai signifikansi  0,325,  α  =  0,10).  Berdasarkan  data  di  atas,  tampak  bahwa  secara umum  pertumbuhan  populasi Skeletonema  costatum pada  medium f/2 dan medium  Conway  adalah  serupa,  walaupun  kurva  pertumbuhan  pada  medium f/2 menunjukkan  jumlah  sel  yang  cenderung  lebih  banyak  daripada  pada  medium Conway.  Dinamika  terjadi  selama  kultur  ini,  yaitu  berupa  naik  turunnya  jumlah sel  (hidup)  diatom.  Jumlah  sel  terbukti  berubah  pada  tiap  24  jamnya.  Perubahan ini  membentuk  kurva  pertumbuhan S.  costatum. Jumlah  awal  sel  diatom  pada medium Conway adalah 1600 sel/ml lebih banyak daripada diatom pada medium f/2 . Pada 24 jam  pertama, jumlah sel hanya bertambah sedikit, sedangkan pada 24 jam  kedua  terjadi  lonjakan  jumlah  sel  menjadi  kurang  lebih  dua  kalinya  (75.130 sel/ml pada f/2 dan 69.250 sel/ml pada Conway). Pada 24 jam ketiga dan keempat, jumlah  sel  menurun  perlahan  sehingga  kurva  pertumbuhan  turun.  Pada  24  jam kelima dan keenam, penurunan jumlah sel semakin drastis terjadi, namun pada 24 jam ketujuh penurunan pertumbuhan pelan kembali.
Berdasarkan  kurva  pertumbuhan  populasi Skeletonema  costatum secara batch  culture tersebut  dapat  dianalisis  adanya  fase-fase  pertumbuhan  polulasi S. costatum , yaitu antara lain :
1. Fase lag/ induction phase (24 jam pertama)
Fase  ini  disebut  juga  fase  istirahat.  Pada  fase  ini,  sel  diatom  beradaptasi  dengan medium  dan  lingkungan  kulturnya  (suhu,  salinitas,  pH).  Diatom  sudah bermetabolisme  sehingga  ukuran  selnya  meningkat.  Namun  diatom  belum menunjukkan  pertumbuhan  populasi  (kenaikan  jumlah  sel)  yang  nyata,  karena masih  dalam  proses  adaptasi.  Dalam  adaptasi  ini,  diatom  sudah  mulai memanfaatkan  nutrien  yang  ada,  meskipun  belum  optimum,  sehingga  beberapa enzim yang terkait pembelahan selnya juga belum tersintesis dengan optimal.
Lama  tidaknya  fase  lag  ini  sangat  tergantung  pada  viabilitas  sel  diatom. Bila sel inokulum  adalah sel  yang masih muda (artinya diambil  dari kultur  yang dalam keadaan fase eksponensial, bukan fase stasioner atau kematian), berarti sel

## Armanda, D.T., Pertumbuhan Kultur Mikroalga
ini  masih  viabel  untuk  membelah  (Fogg  and  Thake,1987).  Sel-sel  yang  viabel akan  lebih  cepat  beradaptasi,  sehingga  fase  lag  ini  menjadi  lebih  singkat. Sebaliknya,  sel-sel  tua  akan  melaui  fase  ini  lebih  lama.  Inokulum  diatom  pada percobaan  ini  dalam  keadaan  awal  fase  eksponensial,  sehingga  cenderung  masih viabel. Pada 24 jam pertama tampak bahwa pertambahan sel diatom pada medium Conway lebih banyak terjadi daripada diatom pada f/2 . Ini dimungkinkan karena inokulum  diatom  berasal  dari  stok  dengan  medium  Conway,  sehingga  diatom pada perlakuan medium Conway sudah lebih mudah beradaptasi.
2. Fase eksponensial/ logarithmic phase (24 jam kedua)
Pada  fase  ini,  jumlah  sel  mengalami  peningkatan  secara  cepat.  Puncak pertumbuhan populasi diatom terjadi pada fase ini. Fase ini adalah bukti sel telah berhasil  beradaptasi  dan  optimal  dalam  pemanfaatan  nutriennya.  Dari  kurva pertumbuhan  populasi,  jumlah  sel S.  costatum pada  medium f/2 jauh  lebih  besar daripada  pada  medium  Conway.  Pada  dasarnya  medium f/2 memang  lebih  kaya jenis  nutriennya  dibandingkan  medium  Conway,  sehingga  memungkinkan pertumbuhan S. costatum yang lebih baik pula.
3. Fase stasioner/ stationary phase (24 jam ketiga)
Pada  fase  ini,  pertumbuhan  populasi  diatom  cenderung  stasioner,  artinya pembelahan  sel  dan  kematian  sel  seimbang.  Fase  ini  berlangsung  sangat  singkat dalam  percobaan  ini,  sehingga  kecenderungan  yang  ada  adalah  penurunan pertumbuhan  populasi  pada  24  jam  ketiga  kultur.  Penurunan  pertumbuhan populasi ini karena diatom sudah mulai mengalami kematian.
4. Fase kematian/ death phase (24 jam keempat - keenam)
Pada  fase  ini,  penurunan  jumlah  sel S.  costatum lebih  besar  daripada  pada  fase stasioner.  Penurunan  jumlah  sel  ini  karena  seluruh  sel  secara  alami  mengalami kematian. Salah satu faktor yang mempercepat kematian ini adalah berkurangnya jumlah  nutrien  dan  semakin  banyaknya  metabolit  sekunder  diatom  yang  dapat menghambat pertumbuhan sel secara alami.
Gambar 3. Skeletonema costatum (perbesaran 40x10 kali) yang berhasil ditumbuhkan dalam penelitian.
Medium  Conway  tergolong  medium  yang  sederhana  karena  komposisinya  tidak kompleks.  Medium  ini  dipakai  untuk  menumbuhkan  berbagai  strain  diatom  di BBPBAP  Jepara.  Sedangkan  medium f/2 adalah  medium  untuk  diatom  secara umum.  Namun,  medium f/2 ini  justru  lebih  kompleks  komposisinya  daripada medium Conway.
Hara makro yang dibutuhkan Skeletonema costatum adalah N, P, K, S, Na, Si,  dan  Ca.  Unsur  N,  P,  dan  S  adalah  komponen  penting  untuk  pembentukan protein.  P  penting  dalam  transfer  energi  dan  biosintesis  asam  nukleat (Becker,1994).  K  berfungsi  dalam  metabolisme  karbohidrat  sementara  Na berperan  dalam  pembentukan  klorofil.  Si  merupakan  bahan  utama  pembentuk dinding sel diatom, sehingga Si menjadi kebutuhan vital diatom. Dinding sel yang bersilikat  ini  merupakan  bentuk  adaptasi  diatom  sebagai  mikroalga  yang  bisa melekat di substrat (bentonik) selain sifatnya yang planktonik (Sudjiharno, 2002). Berdasarkan  makronutrien  ini,  medium f/2 jelas  lebih  kaya  daripada  medium Conway. Hal ini karena sumber Na pada f/2 berasal dari dua sumber, yaitu NaNO 3 dan  NaH 2 PO 4 ,  sedangkan  pada  Conway  hanya  dari  NaH 2 PO 4 yang  bahkan jumlahnya lebih kecil. Si pada f/2 juga jauh lebih banyak daripada pada Conway (hampir  seribu  kali  lebih  banyak).  N  bahkan  hanya  ada  pada f/2 dan  tidak  ada pada makronutrien Conway.
Hara  mikro  yang  dibutuhkan S.  costatum adalah  Fe  ( trace  element ),  Zn,
Mn, Cu, Mg, Mo, Co, B, dan lain-lain (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995). Variasi mikronutrien ini didapatkan pada medium f/ 2 dan tidak didapatkan pada medium

## Armanda, D.T., Pertumbuhan Kultur Mikroalga
Conway.  Fe  diperlukan  dalam pembentukan klorofil, untuk  konversi energi  pada fotosintesis  dan  respirasi,  serta  menjadi  penyusun  sitokrom  (Becker,  1994). Pemberian  Fe  bersama  dengan  Na 2 EDTA  bertujuan  agar  Fe  bertahan  dalam kondisi  pH  yang  bervariasi,  sehingga  tetap  bisa  dipakai  meskipun  dalam  jangka waktu lama. EDTA ( etilenediamine tetraacetic acid ) dalam hal ini disebut buffer pH sekaligus chelating agent untuk menstabilkan FeCl 3 karena hanya larut dalam suasana  asam.  Sedangkan  Zn  adalah  molekul  yang  penting  dalam  pengaturan kecepatan fotosintesis diatom (Hu et al ., - ).
Vitamin  B-12  banyak  digunakan  untuk  memacu  pertumbuhan  melalui rangsangan  fotosintetik,  sedangkan  Thiamin  HCl  berfungsi  untuk  mempercepat pembelahan  sel.  Variasi  Vitamin  B-12,  Thiamin  HCl,  dan  biotin  ini  terdapat dalam medium f/2 dan tidak ditemukan  pada medium Conway.
Optimasi  pembelahan  sel  ini  tampak  pada  kurva  pertumbuhan Skeletonema costatum saat fase eksponensial. Pembelahan lebih cepat terjadi pada perlakuan f/2 (μ  =    0,0282  sel/jam)  dibandingkan  Conway  (μ  =  0,0228  sel/jam). Waktu  generasi  (g)  juga  lebih  singkat  pada  medium f/2 yaitu  25,5420  jam dibandingkan pada medium Conway yang sebesar 30,3728 jam.
Pada penelitian ini parameter lingkungan berupa salinitas, temperatur, dan pH  medium  diukur  setiap  24  jam.  Pengukuran  ini  bertujuan  untuk  melihat efek/gejala pertumbuhan S. costatum pada salinitas, temperatur, maupun pH. Hasil uji  statistik (Independent  Sample  T  test) menunjukkan  bahwa  salinitas  dan temperatur  tidak  berbeda  nyata  baik  pada  medium f/2 maupun  Conway,  namun ada beda nyata pada pH medium.
Salinitas medium kultur diatom ini mencerminkan jumlah Na dan Cl yang terdapat dalam medium. Berdasarkan hasil pengukuran, salinitas medium f/2 dan Conway  tidak  berbeda  nyata  (sig.  0,313;  α=0.05).  Salinitas  ini  berkisar  antara 34,60  –  41,113.  Pada  24  jam  pertama,  salinitas  menurun  karena  pemakaian  Na dan  Cl.  Kenaikan  salinitas  yang  terjadi  pada  jam-jam  selanjutnya  menunjukkan bahwa ada senyawa metabolit yang dihasilkan yang mengandung unsur Na dan Cl.
Temperatur  medium f/2 dan  Conway  juga  terbukti  tidak  berbeda  nyata (sig.  0,115;  α=0.05).  Temperatur  ini  berkisar  antara  19,83  –  23  °  C.  Temperatur
Bioma , Vol. 2, No. 1, April 2013
turun  pada  24  jam  pertama,  ketiga,  dan  kelima,  dan  naik  pada  24  jam  kedua, keempat,  dan  keenam  serta  ketujuh.  Data  ini  menunjukkan  dinamika  yang  jelas. Seharusnya,  metabolisme  bisa  mempengaruhi  suhu  medium.  Pada  proses katabolisme (pemakaian nutrien), temperatur medium menjadi lebih tinggi karena katabolisme  bersifat  eksoterm.  Namun    medium  pada  percobaan  ini  lebih terpengaruh  temperatur  ruangan  (dari  AC)  daripada  metabolisme  yang  ada. Artinya,  data  ini  tidak  menunjukkan  keterkaitannya  dengan  proses  metabolisme Skeletonema costatum .
pH medium f/2 dan Conway selama percobaan adalah berbeda nyata (sig.
0,043;  α=0.05).  pH  ini  berkisar  antara  6,83  –  7,16.  Pada  kedua  medium,  secara umum,  pH  turun  pada  24  jam  kedua  dan  ketiga.  Pada  24  jam  keempat  hingga keenam,  pH  cenderung  naik  dan  menjadi  stabil.  Pada  24  jam  ketujuh,  pH  turun kembali. Penurunan pH di sini bisa disebabkan oleh pemakaian nutrien (terutama pada  fase  eksponensial)  sehingga  medium  cenderung  asam.  Kenaikan  pH  dapat disebabkan  oleh  pengaruh  metabolit  yang  dikeluarkan  oleh  diatom  selama metabolismenya.

## KESIMPULAN
Meskipun medium f/ 2 lebih kaya nutrien daripada medium Conway, pertumbuhan populasi  sel  diatom Skeletonema  costatum secara batch  culture (kultur  sekali unduh)  pada  kedua  medium  menunjukkan  bentuk  dan  periode  setiap  fase  yang serupa  (signifikansi  0,325,  α=0,10).  Kecepatan  pertumbuhan Skeletonema costatum pada fase eksponensial f/2 adalah 0,0282 sel/jam dengan waktu generasi 25,54  jam.  Ini  jauh  lebih  cepat  daripada S.  costatum pada  fase  eksponensial Conway  dimana  kecepatan  pertumbuhannya  0,0228  sel/jam  dengan  waktu generasi 30,37 jam.

## Armanda, D.T., Pertumbuhan Kultur Mikroalga

## DAFTAR PUSTAKA
Andersen, R.A. (Eds).  2005. Algal culturing techniques. UK:  Elsevier Academic Press. p.507
Anonim.  2005. http://www.dnr.state.md.us/bay/  cblife/algae/  diatom/skeleton ema_costatum.html (Acces 2 Oktober 2008).
Becker,  E.  W.  1994. Microalgae:  biotechnology  and  microbiology .  Cambridge University Press. New York. USA. pp.24, 27
Fogg, G.E. and B.Thake. 1987. Algal cultures and phytoplankton ecology, 2 nd Ed.
The University of Wisconsin Press. England. pp.12-36, 43
Heusemann,M.,  R.Bartha, and T.Hausemann. 2003. An  Innovative Approach for Screening  Marine  Microalgae  for  Maximum  Flue  Gas  CO2  Biofixation Potential. http://www.carbon.sq.com/pdf/posters/BCl1.  pdf. (Acces  2 Februari 2005)
Hoek, C.V.D., D.G. Mann, H.M. Jahns. 1998. Algae:An Introduction to Phycology . Cambridge University Press. UK.
Hu,  H.,  Y.  Shi,  W.  Cong,  Z,  Cai.  -  .  Growth  and  Photosyntesis  Limitation  of Marine  Red  Tide  Algae Skeletonema  costatum by  Low  Concentration  of Zn2+. http://www.ncbi.nlm.gov/entrezquery.fcgi?cmd=Retrieve&db=Pub Med&list_uids=1471982&dopt=Abstract . ( Acces 10 Oktober 2005 )
Isnansetyo,  A.  dan  Kurniastuty.  1995. Teknik  Kultur  Phytoplankton  dan Zooplankton . Penerbit Kanisius. Yogyakarta. pp.40, 41, 58, 59, 82
Lee,R.E. 1995. Phycology,2 nd Ed . Cambridge University Press. UK.
Maestrini, S. Y., D.J. Bonin, & M.R. Droop. 1984. Phytoplankton as indicator of sea water quality:biassay approaches and protocols. In : L. E. Shubert (ed.). Algae  as  Ecological  Indicator .  Academic  Press  Inc.  London.  England. pp.106
Melanie,  F.  (2004).  Phytoplankton  dataset  : Skeletonema  costatum (Greville)
Cleve. http://nemys.ugent.be/  species.asp?  group=13&spec25494&act= &p=1. (Acces 5 Oktober 2006)
Nurwito.  1989.  Pengaruh  Penambahan  Silikat  pada  Medium  terhadap Pertumbuhan  Chaetoceros  gracilis  (Diatom). Prosiding  seminar  Fakultas Biologi UGM . Yogyakarta.
Bioma , Vol. 2, No. 1, April 2013
Renaud, S.M, L.V.Thinh, and D.L. Parry. 1998. The Gross Chemical Composition and  Fatty  Acid  Composition  of  18  Species  of  Tropical  Australian Microalgae  for  Possible  Use  in  Mariculture. Journal  of  Aquaculture , Elsevier (170): 147-159
Schlegel. H.G. 1992. General Microbiology, 7 th Ed. Cambridge University Press.
UK.
Sudjiharno.  2002. Budidaya  Fitoplankton  dan  Zooplankton .  Penerbit  Proyek Pengembangan Teknologi Balai Budidaya Laut Lampung. Lampung.