EISSN: 2407-7690 https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/jmr
Potensi Ekstrak Teripang Stichopus hermanii, Semper 1868 (Holothuroidea : Stichopodidae) sebagai Penghasil Senyawa Antibakteri terhadap
Streptococcus mutans Clarke, 1924 (Bacilli : Streptococcaceae)

## Rika Monika*, Delianis Pringgenies, Wilis Ari Setyati
Departemen Ilmu Kelautan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Universitas Diponegoro Jl. Prof.H.Soedarto S.H, Tembalang,Semarang, Jawa Tengah 50275 Indonesia
*Corresponding author, e-mail : rikamonikaa07@gmail.com
ABSTRAK: Teripang Stichopus hermanii merupakan biota laut yang mempunyai senyawa dengan bioaktivitas sebagai antibakteri terhadap patogen. Stichopus hermanii mampu menghambat bakteri gram positif dan negatif. Produk teripang yang sudah ada banyak memperlihatkan manfaatnya salah satunya  untuk  gigi.  Produk  komersil  yang  terlihat  di  masyarakat  yakni  pasta  gigi,  namun  belum diketehaui  secara mendetail mengenai seberapa besar peran pasta gigi tersebut dalam mengatasi permasalahn gigi.  Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui senyawa yang aktif didalam ekstrak teripang Stichopus hermanii . Metode ekstraksi yakni dengan padat ke cair, pencarian senyawa aktif menggunakan skrining fitokimia dengan pereaksi yang berbeda setiap pengujiannya, dan uji aktivitas antibakteri menggunakan metode  difusi agar dengan konsentrasi  yang berbeda-beda.  Uji aktivitas antibakteri  pada  ekstrak S.  hermanii menggunakan  bakteri  patogen Streptococcus  mutans .  Hasil senyawa  aktif  yang  didapat  dari  skrinining  fitokimia  meliputi  flavonoid,  alkaloid,  triterpenoid  dan saponin.  Uji  aktivitas  antibakteri  menunjukkan  bahwa  ekstrak  metanol S.  hermanii mampu menghambat  bakteri S.mutans .  Zona  hambat  tertinggi  pada S.  mutans 5,86  mm  ±  4,92  dengan konsentrasi 80 µg/disk pada waktu 24 jam. Disimpulkan bahwa senyawa aktif pada ekstrak metanol S. hermanii mempunyai bioaktivitas antibakteri pada bakteri S. mutans .
Kata kunci: Antibakteri; Stichopus hermanii ; Streptococcus mutans.
Potential of Stichopus hermanii , Semper 1868 (Holothuroidea : Stichopodidae) Extract as a Producer of Antibacterial Compounds Against Streptococcus mutans Clarke, 1924 (Bacilli : Streptococcaceae)
ABSTRACT:  The  sea  cucumber Stichopus  hermanii is  a  marine  biota  that  has  compounds  with bioactivity  as  an  antibacterial  against  pathogens. Stichopus  hermanii can  inhibit  gram-positive  and gram-negative bacteria. Sea cucumber products that already exist have shown many benefits, one of which is for teeth. The commercial product seen in the community is toothpaste, but it is not yet known in detail how big the role of toothpaste is in overcoming dental problems. The purpose of this study was to determine the active compounds in sea cucumber extract Stichopus hermanii. The extraction method is solid to liquid, the search for active compounds uses phytochemical screening with different reagents for each test, and the antibacterial activity test uses the agar diffusion method with different concentrations. Antibacterial activity test on S. hermanii extract using the pathogenic bacterium Streptococcus mutans.  The  results  of  the  active  compounds  obtained  from  phytochemical  screening  include flavonoids,  alkaloids,  triterpenoids,  and  saponins.  The  antibacterial  activity  test  showed  that  the methanol extract of S. hermanii was able to inhibit S. mutans bacteria. The highest zone of inhibition in S. mutans was 5.86 mm ± 4.92 with a concentration of 80 g/disk at 24 hours. It was concluded that the  active  compound  in  the  methanolic  extract  of S.  hermanii had  antibacterial  bioactivity  on S. mutans bacteria.

## Keywords: Antibacteria; Stichopus hermanii; Streptococcus mutans

## PENDAHULUAN
Makanan dan minuman manis merupakan pemicu utama dalam permasalahan pada kesehatan gigi salah satunya yakni karies gigi. Karies adalah penyakit gigi dan mulut yang menyebabkan infeksi
atau kerusakan jaringan lunak gigi (Erlyn, 2016 ; Al- mohammadawy et al ., 2018), nyeri, bau mulut dan bahkan bisa kehilangan gigi (gigi berlubang) (Erlyn, 2016). Penyebab karies gigi bisa dikatakan multifaktor,  tetapi  terdapat  pemicu  utamanya  yakni  bakteri  dominan  yang  mampu  membentuk polisakarida ekstraseluler yang dapat ditemukan pada spesies Streptococcus mutans (Halim et al ., 2020). Streptococcus mutans penyebab karies akan membentuk gigi berlubang melalui fermentasi sukrosa  menjadi  asam,  dimana Streptococcus  mutans akan  berkembangbiak  dengan  cepat  pada kondisi asam atau pH gigi rendah (Novita, 2016).
Streptococcus merupakan bakteri fakultatif  anaerob (Halim et  al .,  2020), bakteri gram positif dan  non-motil  (Rolando,  2019).  Bakteri  patogen  ini  tidak  memiliki  gaya  hidup  bebas  dan  habitat utamanya ada pada mulut manusia khusunya plak gigi yang terbentuk pada permukaan gigi (Lemos et al ., 2013). Streptococcus mutans dikatakan mikroorganisme kariogenik karena mampu memecah gula untuk dijadikan energinya dengan syarat dapat menghasilkan produksi asam. Lingkungan asam membuat  bakteri  menghancurkan  gigi  yang  melaui  pelarutan  kalsium  untuk  membentuk  gigi berlubang  (Ranganathan  &  Akhila,  2019).  Bakteri S.  mutans dapat  memetabolisme  karbohidrat menjadi  asam  dan  dapat  berkembangbiak  dengan  cepat  pada  pH  yang  rendah  kisaran  4,5  -  5,5. Koloni bakteri S. Mutans berpasangan, tidak bergerak dan tidak bersepora (Kusumaningsari & Juni, 2011).
Permasalahan gigi dapat ditangani dengan penggunaan antibiotik, tetapi penggunaan antibiotik yang  terus  menerus  akan  berdampak  pada  kesehatan  gigi  manusia.  Alternatif  solusi  lain  dalam mengatasi  permasalah  tersebut  dengan  mencari  senyawa  bioaktif  dari  bahan  alam.    Salah  satu bahan  alam  yang  berpotensi  adalah  teripang  ( Sea  Cucumber ).  Menurut  Pringginies et  al .  (2015), teripang mempunyai bioaktivitas antibakteri yang lebih tinggi dibandingkan produk antibiotik komersil. Berdasarkan penelitian Tamara et al . (2015), bahwa Stichopus hermanii mampu menghambat bakteri gram  positif  dan  negatif.  Penelitian  tersebut  juga  dilakukan  oleh  Pringginies et  al .  (2017),  yang menyatakan bahwa teripang mempunyai kandungan senyawa bioaktif seperti antibakteri yang dapat ditemukan pada beberapa spesies teripang salah satunya Stichopus hermanii . Dengan  adanya  potensi  teripang Stichopus  hermanii sebagai  antibakteri  yang  dapat menghambat  baik  dari  bakteri  gram  positif  maupun  gram  negatif,  diduga  bahwa S.  hermanii juga mampu menghambat bakteri patogen gigi yakni S. mutans . Berdasarkan hal tersebut, maka tujuan dari  penelitian  ini  yakni  mengetahui  potensi  esktrak Stichopus  hermanii sebagai  antibakteri  dalam menghambat bakteri patogen karies gigi dan menentukan golongan senyawa aktif yang terkandung didalam ekstrak Stichopus hermanii berdasarkan uji fitokimia.

## MATERI DAN METODE
Sampel S. hermanii diambil dari Pulau Karimunjawa, Jepara. Sampel teripang dibersihkan dan dipisahkan  dengan  organ  bagian  dalam,  kemudian  daging  teripang  dijemur  dibawah  sinar  matahari secara tidak langsung (ditutupi dengan kain hitam) pada saat siang hari, sedangkan pengeringan pada malam hari dilakukan dengan lampu bolam 5 watt selama 5 hari berturut-turut. Teripang yang sudah kering kemudian diblender hingga menjadi serbuk (Pringgenies et al., 2017).
Ekstraski yang digunakan dalam penelitian ini menggunakan metode maserasi atau perendaman dengan  pelarut  metanol  (Pringgenies et  al .,  2017).  Ekstraksi  dilakukan  dengan  menimbang  serbuk Stichopus  hermanii yang  sudah  kering  sebanyak  300  gram.  Sampel  kemudian  dimasukkan  dalam erlenmeyer,  diberi  pelarut  metanol  dengan  perbandingan  1  (teripang)  :  5  (metanol)  sampai  sampel terendam.  Wadah  yang  berisi  teripang  dengan  pelarut  metanol  kemudian  dibaluti  alumunium  foil. Sampel  dimaserasi  selama  24  jam  dengan  suhu  37 o C.  Proses  maserasi  dilakukan  3  kali  sampai didapatkan maserat berwarna bening. Hasil maserasi yang berupa larutan disaring dengan kertas saring sehingga didapat filtrat dan residu (Susanto et al., 2018). Teknik pemekatan menggunakan bantuan rotary evaporator yang bertujuan untuk memperoleh senyawa hasil ekstraksi yang diinginkan. Filtrat yang diperoleh disentrifuge dengan kecepatan 6.000 rpm selama 10 menit dengan suhu  yang digunakan adalah 40 o C, agar senyawa bioaktif tidak rusak oleh pemanasan dengan suhu yang tinggi (Yuvaraj et al ., 2011).
Skrining fitokimia  yang dilakukan dalam penelitian  ini meliputi alkaloid, flavonoid, fenol, steroid, triterpenoid  dan  saponin.  Masing-masing  pengujian  menggunakan  esktrak teripang  sebanyak  10  mg dengan pereaksi yang berbeda tiap senyawa. Pengujian alkaloid dilakukan dengan ekstrak dilarutkan
ke  dalam  10  ml  klorofom  dan  0,5  ml  H 2 SO 4 ,  kemudian  dihomogenkan.  Sampel  didiamkan  sampai terbentuk dua lapisan, selanjutnya ditetesi pereaksi Dragendroff dan Mayer sebanyak 1 tetes. Ekstrak dikatakan positif alkaloid apabila pada pereaksi Dragendroff berubah warna menjadi jingga dan pereaksi Mayer  berwarna  kuning  (Sudarmi et  al .,  2017).  Uji  flavonoid  dilakukan  dengan  melarutkan  ekstrak dengan  2  ml  metanol,  mg  dan  5  tetes  HCl.  Ekstrak  positif  mengandung  flavonoid  apabila  terjadi perubahan warna merah atau jingga (Putri et al ., 2016). Uji Fenol dilakukan dengan melarutkan ekstrak dengan 2 ml metanol dan FeCl 3 . Esktrak yang positif mengandung fenol ditandai dengan terbentuknya cincin hijau keunguan (Sudarmi et al ., 2017). Uji steroid dan triterpenoid dilakukan melarutkan ekstrak kedalam 0,5 ml klorofom yang ditambahkan 0,5 ml Asam Anhidrida Asetat dan 2 ml H 2 SO 4 . Apabila terjadi  perubahan  warna  hijau  kebiruan  menandakan  bahwa  ekstrak  tersebut  positif  mengandung Steroid, sedangkan apabila terbentuk cincin dengan warna kecoklatan atau violet menandakan bahwa ekstrak  positif  mengandung  Triterpenoid    (Anggraeni et  al .,  2014).  Uji  saponin  dilakukan  dengan menyiapkan ekstrak yang dilarutkan ke 5 aquades dan kemudian sampel dikocok selama 10 detik. Hasil ekstrak yang menunjukkan busa atau buih setinggi 1-10 cm yang stabil ±10 menit, dan tidak hilang ketika ditambahkan 1 tetes HCl menandakan bahwa esktrak tersebut positif mengandung Saponin (Fithriani et al ., 2015).
Pengujian kontrol positif dan negatif dilakukan menggunakan metode Pringgenies (2015), dimana metode  yang  digunakan  adalah  metode  difusi.  Tujuan  dari  uji  kontrol  positif  yakni  untuk  melihat kemampuan  zona  hambat  antibiotik  yang  dibandingkan  dengan  kemampuaan  zona  hambat  dari Stichopus  hermanii .  Pengujian  kontrol  positif  dilakukan  dengan  menggunakan  antibiotik Amoxicillin dengan konsentrasi 20 µg/disc, karena menurut Pringgenies et al. (2017), bahwa dosis yang tepat dalam penggunaan  antibiotik  yang  diujikan  ke  bakteri  sebesar  20  µg/disc.  Pengujian  kontrol  negatif menggunakan  palarut  metanol  yang  diambil  sebanyak  10  µl  yang  diujikan  ke  bakteri Streptococcus mutans dan E.coli . Pengujian kontrol positif dan negatif dilakukan menggunakan paperdisk steril yang kemudian ditempel pada media yang sudah diswab bakteri Streptococcus mutans dan E.coli dengan tiga kali pengulangan.
Menurut Pringgenies et al. (2017), bahwa bakteri yang sudah dibiakkan dari media NB ( Nutrient borth ) kemudian diusapkan ke seluruh permukaan media NA ( Nutrient agar ) dengan cutton swab steril. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan cara mengencerkan 0,1 gram ekstrak yang diencerkan untuk membuat larutan stok dengan konsentrasi 80 µg/ µl. Tahap selanjutnya dengan menyiapkan paperdisk dengan ukuran sebesar 3 mm, dimana paperdisk steril ditempelkan ke media NA yang sudah diswab bakteri.  Hasil  pengenceran  pada  konsentrasi  yakni  20  µg/disc,  40  µg/disc,  dan  80  µg/disc  kemudian diteteskan menggunakan mikropipet sebanyak 10 µL dan dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan. Media uji kemudian dimasukkan ke dalam inkubator selama 1x24 jam dengan suhu 37 o C. Pengamatan dilakukan pada waktu 24 jam, 48 jam dan 72 jam, dimana media diamati dan diukur zona hambatnya menggunakan jangka sorong. Zona hambat yang terbentuk berupa zona bening disekitar paperdisk .

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil randemen yang didapat dari perendaman 300 gram teripang Stichopus hermanii dengan metanol  yakni  sebanyak  18,836  gram  dengan  persentase  sebesar  0,063%,  berwarna  coklat  pekat. Ekstraksi  yang  dilakukan  dalam  penelitian  ini  menggunakan  jenis  ekstraksi  maserasi.  Maserasi merupakan metode ekstraksi dingin dengan prinsip kerja yang sederhana yakni dengan perendaman menggunakan  pelarut  tanpa  memikirkan  suhu  disekitarnya.  Metode  maserasi  dipilih  karena  prinsip kerjanya yang dingin sehingga diharapkan banyak senyawa yang dapat terambil. Perendaman sampel teripang dilakukan selama 1x24 jam dengan pelarut metanol. Pemilihan waktu 1x24 jam karena menurut Pandey  &  Shalini  (2014),  bahwa  saat  proses  maserasi,  randemen  tertinggi  terdapat  pada  waktu maserasi 24 jam. Hal ini membuktikan bahwa semakin lama proses maserasi maka randemen yang dihasilkan juga semakin banyak.
Hasil ekstrak teripang dipekatkan menggunakan Rotary Vakum Evaporator , hal ini bertujuan untuk memisahkan  senyawa  ekstrak  dengan  pelarut  yang  didapat  dalam  bentuk  liquid.  Suhu  yang  yang digunakan  pada Rotary  evaporator 35 o C  agar  senyawa  bioaktif  didalamnya  tidak  rusak.  Harborne (1984), mangatakan bahwa penggunaan Rotary evaporator vacuum untuk memekatkan larutan hasil ekstraksi sebaiknya menggunakan suhu berkisar 30-40 o C. Hasil randemen Stichopus hermanii dengan pelarut metanol sebesar  0,065%, sehingga berpotensial untuk dimanfaatkan.  Menurut Susanto et al .
Journal of Marine Research Vol 10, No.3 Agustus 2021, pp. 421-427
(2018), hasil randemen ekstrak Stichopus hermanii dengan pelarut metanol sebesar 0,038 % berpotensi untuk dimanfaatkan. Hal ini membuktikan bahwa semakin tinggi nilai prosentasi ekstrak, maka semakin tinggi pula potensi ekstrak yang dapat dimanfaatkan. Skrining fitokimia merupakan salah satu uji yang digunakan untuk mengetahui senyawa dalam suatu sampel. Masing-masing pereaksi yang digunakan pada tiap senyawa berbeda-beda. Hasil skrining fitokimia pada esktrak Stichopus hermanii dapat dilihat pada Tabel 1.
Berdasarkan  hasil  pengujian  skrining  fitokimia,  ekstrak Stichopus  hermanii positif  mengandung senyawa aktif yang meliputi alkaloid, flavonoid, saponin dan triterpenoid. Senyawa  yang didapat dari skrining  fitokimia  beberapa  diantaranya  berpotensi  sebagai  antibakteri.  Menurut  Damaiyanti  (2015), senyawa saponin mempunyai aktivitas antibakteri dengan sistem kerja merusak membran sitoplasma dan membunuh sel. Susanto et al. (2018), bahwa teripang emas mempunyai kandungan alkaloid yang dapat  digunakan  untuk  aktivitas  antibakteri.  Akerina  &  Janer  (2019),  menjelaskan  bahwa  beberapa organisme  laut  yang  mempunyai  kandungan  Triterpenoid  mempunyai  aktivitas  biologis  seperti antibakteri,  antifungi  dan  antikanker.  Flavonoid  merupakan  senyawa  yang  sering  digunakan  untuk aktivitas  aktioksidan  karena  kemampuannya  dalam  menangkap  radikas  bebas.  Flavonoid  yang ditemukan  pada  daun  senggani  dengan  pelarut  n-Heksana  mempunyai  aktivitas  antioksidan  yang bermanfaat dalam pencegahan penyakit kanker.
Hasil uji kontrol positif dengan menggunakan antibiotik Amoxicilin menunjukkan bahwa Amoxicilin positif dalam menghambat bakteri S. mutans dan E.coli . Hasil hambatan yang terbentuk berupa zona bening.  Menurut  Erlyn  (2016),  menyatakan  bahwa  mekanisme  kerja  dari  antibiotik  ini  yaitu  dengan menghambat  sintesis  dinding  sel  bakteri.  Nilai  hambatan  paling  tinggi  pada  masing-masing  bakteri didapat  pada  waktu  24  jam,  dimana E.coli sebesar  25,98  mm  ±  0,63    sedangkan S.  mutans nilai hambatan tertinggi sebesar 12,37 mm ± 2,45. Nilai hambatan paling rendah didapat pada waktu 72 jam, dimana E.coli sebesar 19,8 mm ± 0,81 sedangkan S. mutans nilai hambatan terendah sebesar 9 mm ± 3,49.  Kedua  bakteri  mengalami  penurunan  diameter  zona  hambat,  dimana  bakteri S.  mutans lebih resisten dibandingkan dengan bakteri E.coli karena nilai hambatnya <13 mm. Menurut Pringginies et al. (2017), diameter zona hambat pada Amoxicilin dikatakan resisten apabila zona hambat yang terbentuk kurang <13 mm.
Tabel 1. Skrining Fitokimia dengan Ekstrak Stichopus hermanii
Senyawa Pereaksi Hasil Keterangan 1 2 Alkaloid Dragendroff dan Mayer +++ +++ Terbentuk dua lapisan (bagian atas) berwarna jingga dan kuning Flavonoid Mg dan HCl + ++ Berubah warna menjadi orange Fenol FeCl3 - - Tidak terbentuknya cincin dengan warna ungu kehijauan Saponin Aquades dan HCl +++ +++ Terbentuk busa Steroid Asam Anhidrida Asetat dan  H 2 SO 4 - - Tidak terbentuknya cincin berwarna violet Triterpenoid Asam Anhidrida Asetat dan  H 2 SO 4 +++ +++
Terbentuknya cincin kecoklatan
Keterangan: Banyak (+++)    Sedang (++)    Sedikit (+)    Tidak Ada (-)
Tabel 2. Uji Kontrol Positif dengan Amoxicilin Bakteri Diameter Zona Hambat (mm) 24 jam 48 jam 72 jam E.coli 25,98 ± 0,63 20,31 ± 0,94 19,8 ± 0,81 S.mutans 12,37 ± 2,45 10,87 ± 3,36 9 ± 3,49

## Journal of Marine Research
Vol 10, No.3 Agustus 2021, pp. 421-427
Hasil  kontrol  negatif  menggunakan  metanol  menunjukkan  tidak  adanya  zona  hambat  yang terbentuk,  sehingga  dapat  disimpulkan  bahwa  metanol  tidak  mampu  dalam  mengambat  bakteri S. mutans dan E.coli . Pendapat ini sesuai dengan Rasyid (2012), yang menyatakan bahwa metanol tidak mampu mengambat bakteri E.coli tetapi mampu menghambat bakteri lain seperti S. aureus, V. eltor , dan B. subtilis . S.mutans digunakan didalam penelitian ini karena merupakan bakteri patogen utama penyebab karies gigi. Menurut Halim et al . (2020), Streptococcus mutans adalah bakteri utama penyebab karies gigi dan merupakan bakteri fakultatif anaerob. Penggunaan E.coli dalam penelitian ini untuk mewakilkan apakah aktivitas antibakteri pada esktrak Stichopus hermanii dapat menghambat bakteri patogen lain khusunya didalam tubuh. Menurut Haribi & Khoirul (2010), E.coli hidup pada tubuh manusia khususnya pada usus besar (konon atau tempat pemrosesan feses) dan merupakan flora normal konon. Hasil uji antibakteri menggunakan paperdisk menunjukkan bahwa ekstrak Stichopus hermanii mampu menghambat bakteri E.coli dan S.mutans . Zona hambat S.mutans dan E. coli terbentuk pada konsentrasi 40 µg/disc dan 80 µg/disc. Hasil zona hambat pada E.coli tertinggi pada konsentrasi  80 µg/disc sebesar 5,81 mm ± 4,88 pada waktu 24 jam, sedangkan terendah pada konsentrasi 40 µg/disc sebesar 0,15 mm ± 0,14 diwaktu 72 jam. Zona hambat S.mutans yang terbentuk hanya pada konsentrasi 40 µg/disc dan 80 µg/disc, dimana zona hambat tertinggi bakteri S.mutans terdapat pada konsentrasi 80 µg/disc pada waktu 24 jam sebesar 5,86 mm ± 4,92 dan terendah pada konsentrasi 40 µg/disc yakni sebesar 0,19 mm ± 0,15 pada waktu 72 jam.
Hasil uji memperlihatkan aktivitas  antibakteri pada  bakteri S. mutans dan E. coli paling tinggi pada waktu 24 jam sedangkan terjadi penurunan pada waktu 48 jam dan 72 jam. Hal ini membuktikan bahwa  ekstrak Stichopus  hermanii memiliki  sifat bakteriostatik .  Menurut  Pringginies et  al. (2020), aktivitas bakteriostatik ditandai dengan zona hambat yang terlihat keruh karena masih terdapat titik-titik bakteri. Terbentuknya zona hambat pada bakteri S. mutans dan E. coli menunjukkan bahwa adanya zona hambat yang terbentuk tidak disebabkan oleh metanol melainkan pada ekstrak Stichopus hermanii dengan konsentrasi terbaik 80 µg/disc.

## Tabel 3. Uji Kontrol Negatif dengan Metanol
Bakteri Diameter Zona Hambat (mm) 24 jam 48 jam 72 jam E.coli 0 0 0 S.mutans 0 0 0
Tabel 4. Uji Antibakteri S.mutans dengan Ekstrak Stichopus hermanii Konsentrasi Diameter Zona Hambat (mm) 24 jam 48 jam 72 jam 20 µg/disc 0 0 0 40 µg/disc 0,21±0,17 0,19±0,18 0,19±0,15 80 µg/disc 5,86±4,92 5,69±4,78 5,41±4,58
Tabel 5. Uji Antibakteri E.coli dengan Ekstrak Stichopus hermanii Konsentrasi Diameter Zona Hambat (mm) 24 jam 48 jam 72 jam 20 µg/disc 0 0 0 40 µg/disc 0,32 ± 0,18 0,24 ± 0,19 0,15 ± 0,14 80 µg/disc 5,81 ± 4,88 6,49 ± 5,59 5,41 ± 4,58

## KESIMPULAN
Senyawa  aktif  yang  ditemukan  dalam  esktrak Sticopus  hermanii meliputi  alkaloid,  flavonoid, saponin, dan triterpenoid. Senyawa tersebut salah satu diantarnanya mempunyai aktivitas sebagai antibakteri yang terbukti menghambat bakteri patogen S. mutans dengan zona hambat tertinggi pada konsentrasi  80 µg/disc sebesar 5,86 mm ± 4,92 pada waktu 24 jam .

## DAFTAR PUSTAKA
Akerina,  F.O.  &  Janer,  S.  2019.  Analisis  Fitokimia  dan  Toksisitas  serta  Aktivitas  Antioksidan Beberapa  Jenis  Teripang  di  Desa  Kakara,  Halmahera  Utara. Jurnal  Agribisnis  Perikanan , 12(2):188-196. DOI: 10.29239/j.agrikan.12.2.188-196.
Al-mohammadawy,  Z.H.,  Ali,  K.A.  &  Ali,  M.S.  2018.  Isolation  and  Identification  of Streptococcus mutans from  Dental Caries by Using Sm479 gene. Indian Journal of  Public Health Research and Development , 9(10):668-680. DOI: 10.5958/0976-5506.2018.01205.6. Damaiyanti,  D.W.  2015.  Karakterisasi  Esktrak  Air  Teripang  Emas  ( Stichopus  hermanii ). Jurnal Kedokteran Gigi , 9(1):74-81. DOI: 10.30649/denta.v9i1.19. Erlyn,  P.  2016.  Efektivitas  Antibakteri  Fraksi  Aktif  Serai  ( Cymbopogon  citratus )  terhadap  Bakteri Streptococcus mutans . Syifa’MEDIKA , 6(2):111-125. DOI: 10.32502/sm.v6i2.1387. Fithriani, D., Sri, A., Susiana, M. & Rini, S. 2015. Uji Fitokimia, Kandungan Total Fenol dan Aktivitas Antioksidan Mikroalga Spirulina sp., Chlorella sp ., dan Nannochloropsis sp. Jurnal Pascapanen Dan Bioteknologi Kelautan Dan Perikanan, 10(2):101 –109. DOI: 10.15578/ jpbkp.v10i2.222. Halim, N.A., Nurul, S.Z., Sarah, S.M.H., Juzaily, H. & Muziman, S.M.M. 2020. Antibacterial Activity of Ethanol Extract of Sargassum polycystum Against Streptococcus mutans and Lactobacillus casei :  in  Vitro. International  Journal  of  Allied  Health  Sciences ,  4(1):1121-1127.  DOI: 10.5897/AJB11.966.
Harborne,  J.B.  1984.  Phytochemical  Methods:  A  Guide  to  Modern  Technique  of  Plant  Analysis, Chapman and Hall.  London, 19. Pp.37 –168.
Kusumaningsari, V.  & Juni, H. 2011. Efek Pengunyahan Permen Karet Gula dan Xylitol terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus mutans pada Plak Gigi. Majalah Kedokteran Gigi, 18(1):30- 34, DOI : 10.22146/majkedgiind.16473.
Lemos, J.A., Robert, G.Q., Hyun, J.K. & Jacqualine, A., 2013. Streptococcus mutans : a new Gram- positive paradigm?. Microbiology , 159:436 –445. DOI : 10.1099/mic.0.066134-0. Novita, W. 2016. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Daun Sirih ( Piper Betle L) terhadap Pertumbuhan Bakteri Streptococcus  mutans Secara in  Vitro . Jambi  Medical  Journal, 4(2):140 –155,  DOI: 10.22437/jmj.v4i2.3579.
Pringgenies,  D.,  Ali,  R.  &  Nerva,  S.  2017.  Antibacterial  Activity  for  Multi  Drug  Resistance  (MDR) Bacteria  Bysea  Cucumber Stichopus  Vastus Extract  from  Karimunjawa  Islands –  Indonesia.
Jurnal Ilmu dan Teknologi Kelautan Tropis , 9(2):695-707, DOI: 10.29244/jitkt.v9i2.19302. Pringgenies, D., Siti, R. & Ervia, Y. 2017. Exploration of Sea Cucumbers Stichopus hermanii from Karimunjawa  Islands  as  Production  of  Marine  Biological  Resources. Series:  Earth  and Environmental Science , 116. DOI :10.1088/1755-1315/116/1/012039.
Pringgenies,  D.,  Wilis,  A.S.,  Dwicahyo,  S.W.  &  Ali,  D.  2020.  Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak  Jeruju Acanthus  ilicifolius terhadap  Bakteri  Multi  Drug  Resistant. Jurnal  Kelautan  Tropis ,  23(2):145- 156. DOI: 10.36729/bi.v12i1.378.
Putri, R.R., Rafitah, H. & Indrati, K. 2016. Uji Aktivitas Antibakteri dan Uji Fitokimia Ekstrak Daun Mangrove Sonneratia  alba . Jurnal  Aquawarman ,  2(1):43-50.  DOI:  10.35800/mthp.7.2.2019. 23613.
Ranganathan, V. &  Akhila, C.H. 2019. Streptococcus mutans : has it Become Prime Perpetrator for Oral  Manifestations?. Journal  of  Microbiology  &  Experimentation ,  7(4):207-213.  DOI: 10.15406/jmen.2019.07.00261. Rolando, 2019 . Senyawa Antibakteri dari Fungi Endofit. Edisi Pertama. CV. Seribu Bintang, Malang, Jawa Timur.
Sudarmi, K., Ida, B.G.D. & Ketut, I.M. 2017. Uji Fitokimia Dan Daya Hambat Ekstrak Daun Juwet ( Syzygium cumini ) terhadap Pertumbuhan Escherichia coli dan Staphylococcus aureus ATCC. Jurnal Simbiosis , 5(2 ):47 –51. DOI: 10.24843/jsimbiosis.2017.v05.i02.p03.
Tamara,  R.,  Linda,  R.  &  Paulus,  B.T.  2015.  Daya  Hambat  Ekstrak  Teripang  Emas  ( Stichopus hermanii )  terhadap  Bakteri Enterococcus  faecalis . Jurnal  Kedokteran  Gigi ,  9(1):1-11.  DOI: 10.30649/denta.v9i1.4.
Yuvaraj, N., Kanmani, P., Satishkumar, R., Paari, K.A., Pattukumar, V. & Arul, V. 2011. Extraction, Purification and Partial Characterization of Cladophora glomerata Against Multidrug Resistant Human  Pathogen  Acinetobacter  baumannii  and  Fish  Pathogens. World  Journal  of  Fish  and Marine Sciences , 3(1):51-57. DOI: 10.1016/B978-0-12-387669-0.00006-5.