INDUKSI KEMATANGAN GONAD INDUK JANTAN KERANG ABALONE ( Haliotis asinina )

## DENGAN METODE LASERPUNKTUR
INDUCTION OF GONAD MATURITY MALES BROODSTOCK ABALONE SHELL ( Haliotis asinina ) WITH LASERPUNCTUR METHODS

## Aprilia Putri Astutie, Sudarno dan Rahayu Kusdarwati
Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Kampus C Mulyorejo - Surabaya, 60115 Telp. 031-5911451

## Abstract
Abalone  is  one  kind  of  shellfish  fisheries  of  the  world  has  become  a  commodity  which  is currently experiencing  increased demand, especially  from  international  markets. As one  initial step of a series  of  required  maintenance  management  process  of  cultivating  a  good  broodstock,  to  get  the broodstock with the  maximum  level of gonad  maturity  is  by  induction using  laserpunctur.  Laserpunctur appropriate technology has been shown to accelerate the growth process, increase and accelerate gonadal maturation and spawning shorten the reproductive cycle of some species. The purpose of this study was to  determine  the  effect  laserpunctur  fired  on  gonadal  organs  of  the  male  gonadal  maturity  of  abalone shells and the best energy of the male gonadal maturation affect abalone shells.
The  treatment  used  is  laserpunctur  irradiation  on  the  male  gonad  organ  abalone  shells  with  a energy of 0 Joule (control), 0.5 Joules for 50 seconds, 1 Joule for 100 seconds, 1.5 Joules for 150 seconds and 2  Joule  for 200 seconds. Each treatment was repeated four times. The results of this  study was the laserpunctur  irradiation  fired  on  the  gonadal  organs  influence  the  development  of  gonadal  maturity  of male broodstock abalone shells. The best energy of laserpunctur in the male gonad maturation affects the abalone  shells  is  1.5  Joules  for  150  seconds.  The  results  of  histological  observation  of  gonadal  male broodstock H. asinina showed varying degrees of gonadal development in the process of gametogenesis is marked with an individual's reproductive cycle.
Keywords : Induction of Laserpunctur, Gonad Maturity, Abalone Broodstock Male, Gonad Histology

## Pendahuluan
Abalone  merupakan  salah  satu  jenis kerang  yang  telah  menjadi  komoditi  perikanan dunia  yang  saat  ini  sedang  mengalami peningkatan  permintaan  terutama  dari  pasar intenasional  (Grubert,  2005 dalam Totopando, 2009).  Sebagai  salah  satu  langkah  awal  dari suatu  rangkaian  proses  budidaya  diperlukan manajemen  pemeliharaan  induk  yang  baik, untuk  mendapatkan  induk  dengan  tingkat kematangan gonad yang maksimal yaitu dengan induksi  menggunakan  laserpunktur.  Teknologi tepat  guna  laserpunktur  telah  terbukti  dapat mempercepat  proses  pertumbuhan,  peningkatan pematangan gonad dan mempercepat pemijahan serta memperpendek siklus reproduksi beberapa spesies (Kusuma dkk., 2009a).
Rumusan  masalah  penelitian  ini  yaitu apakah  terdapat  pengaruh  laserpunktur  yang ditembakkan  pada  organ  gonad  terhadap kematangan gonad induk jantan kerang abalone dan  berapa  energi  laserpunktur  yang  terbaik dalam  mempengaruhi  kematangan  gonad  induk jantan  kerang  abalone.  Tujuan  penelitian  ini adalah untuk mengetahui pengaruh laserpunktur
yang  ditembakkan  pada  organ  gonad  terhadap kematangan gonad induk jantan kerang abalone dan  mengetahui  energi  laserpunktur  yang terbaik  dalam mempengaruhi  kematangan gonad  induk  jantan  kerang  abalone.  Manfaat yang  diharapkan  dari  penelitian  ini  yaitu memberikan informasi ilmiah tentang penggunaan  laserpunktur  dalam  mempengaruhi tingkat  kematangan  gonad  kerang  abalone sebagai  terobosan  baru  dalam  budidaya  kerang abalone, sehingga dapat  memberikan kontribusi pada  peningkatan  kesejahteraan  masyarakat terutama para pembudidaya kerang abalone.

## Metodologi
Waktu dan Tempat Penelitian ini dilaksanakan pada tanggal 11 April – 30 Mei 2011 di Laboratorium Pendidikan  Perikanan  Fakultas  Perikanan  dan Kelautan; Laboratorium D3 Pengobatan Tradisional  (BATRA)  Fakultas  Kedokteran Universitas Airlangga, Surabaya dan Laboratorium  Patologi  Balai  Karantina  Ikan
Kelas I Juanda, Sidoarjo.
Materi Penelitian Materi  penelitian  yang  digunakan terdiri  atas  bahan  dan  alat  penelitian.  Bahan penelitian yang digunakan adalah induk abalone jantan Haliotis  asinina yang  berasal  dari  BBL Lombok dengan ukuran panjang cangkang rata- rata 5 sampai 7 cm sebanyak 25 ekor dan umur rata-rata  12-14  bulan,  serta  pakan  rumput  laut Gracillaria sp. Peralatan yang digunakan dalam penelitian adalah laserpunktur, skimmer, blower,  pompa  air,  bak  plastik  volume  50  L, akuarium filter, aerator, selang aerator, mikroskop, kertas pH, termometer, salinometer, DO tes kit , timbangan digital Ohaus, penggaris, kain kasa, spatula plastik, selang air, styrofoam , rak susun, sikat dan spon.
Rancangan Penelitian Penentuan  titik  organ  abalone  yang akan  dilaser  didapat  dari  hasil  penelitian pendahuluan  dengan  perlakuan  titik  organ terbaik  yaitu  pada  organ  gonad.  Laserpunktur yang digunakan yaitu Helium-Neon
Laserpunktur dengan panjang gelombang 632,8 nm  dan  daya  keluaran  10  mW.  Energi  sinar yang digunakan selama terapi yaitu 0,5 Joule; 1 Joule; 1,5 Joule dan 2 Joule dengan lama waktu yang  berbeda  yaitu  selama  50  detik,  100  detik, 150  detik  dan  200  detik.  Penyinaran  hanya dilakukan  satu  kali  pada  tiap  abalone. Pengamatan  kematangan  gonad  dilakukan selama tujuh hari setelah penyinaran. Perlakuan penyinaran  laserpunktur  pada  penelitian  utama dengan ulangan sebanyak empat kali adalah :
Perlakuan A  :  kontrol (tanpa penyinaran laserpunktur) Perlakuan B  :  penyinaran  pada  organ  gonad dengan energi (dosis) 0,5 Joule Perlakuan C  :  penyinaran  pada  organ  gonad dengan energi (dosis) 1 Joule
Perlakuan D  :  penyinaran  pada  organ  gonad dengan energi (dosis) 1,5 Joule
Perlakuan E  :  penyinaran  pada  organ  gonad dengan energi (dosis) 2 Joule Persiapan Penelitian
Pembuatan konstruksi rak susun sebagai  wadah  pemeliharaan  induk  abalone sebanyak  dua  buah  dengan  panjang  150  cm, lebar  28  cm  dan  tinggi  98  cm,  yang  masing- masing  disusun  dua  tingkat.  Satu  tingkat  dapat dipasang  tiga  bak  sehingga  terdapat  bak pemeliharaan  sebanyak  12  buah.  Pada  bagian bawah  rak  diletakkan  akuarium  filter  untuk menyaring  kotoran  dan  dilengkapi  dengan skimmer  yang  bekerja  untuk  memecah  dan memisahkan  amoniak.  Sehingga  air  yang
dihasilkan  benar-benar  bersih  dan  jernih. Kondisi  ini  dapat  dipenuhi  karena  media  air menggunakan sistem resirkulasi. Sistem resirkulasi pada abalone dapat dilakukan dengan pengelolaan  air  secara  pakai  ulang.  Air  yang telah  digunakan  dapat  diproses  kembali. Selanjutnya air yang sudah mengalami perbaikan  kualitas  air  dialirkan  ke  bak pemeliharaan dengan menggunakan pompa air. Bak pemeliharaan induk abalone digunakan  bak  plastik  bervolume  50  l. Persiapan  bak  pemeliharaan  induk  dilakukan dengan  melubangi  bagian  tengah  bak  kurang lebih  3  cm  dan  dipasang  pipa  paralon  setinggi 20 cm yang digunakan untuk lubang pengeluaran  air.  Selanjutnya  membersihkan seluruh  permukaan  bak  dengan  sikat  dan desinfektan  (osasir  10ppm)  yang  bertujuan untuk  membersihkan  bak  dari  lumut  dan kotoran  yang  menempel.  Setelah  pembersihan dengan  osasir  bak  dicuci  dan  dikeringkan selama satu minggu hingga bak kering dan siap digunakan  untuk  pemeliharaan  induk  abalone. Bak yang telah bersih dan kering kemudian diisi dengan air  laut 33 ppt kurang  lebih  setinggi 25 cm  dan  dipasang  aerasi  sebanyak  satu  sampai dua titik.

## Adaptasi Lingkungan
Lingkungan  baru  dapat  mempengaruhi pertumbuhan Haliotis  asinina ,  oleh  karena  itu lingkungan dikondisikan sama dengan lingkungan  aslinya.  Lingkungan  baru Haliotis asinina yang  diharapkan  dalam  penelitian adalah  suhu  28-30 0 C,  pH  7-8,  salinitas  31- 32ppt,  H 2 S  dan  NH 3 kurang  dari  1ppm  serta oksigen  terlarut  lebih  dari  3ppm  (Tahang  dkk., 2006).  Abalone  diadaptasikan  pada  lingkungan yang baru kurang lebih selama satu bulan. Pada dasar  bak  diberi  potongan  pipa  paralon  PVC sebagai  tempat  berlindung  atau shelter dan ditutup  dengan  waring  yang  bertujuan  untuk menghindari abalone agar tidak keluar dari  bak pemeliharaan dan memudahkan dalam pengawasan.
Seleksi Induk Menurut Setyono (2004), seleksi induk matang  gonad  sangat  menentukan  tingkat keberhasilan pemijahan. Induk abalone baik dari alam  maupun breeding yang  baik  mempunyai ciri-ciri sebagai berikut (Sofyan dkk., 2006) : a.) tingkat  kematangan  gonad  cukup,  ditandai dengan gonadnya yang berisi telur atau sperma; b.)  otot  kaki  atau  daging  terlihat  segar  dengan warna  gelap  dan  tidak  lembek  dan  lemas;  c.) melekat kuat pada substrat; d.) dapat membalikkan  tubuhnya  segera  bila  diletakkan
dalam air dengan posisi terbalik; e.) sehat, organ tubuh  tidak  luka  dan  utuh;  f.)  ukuran  panjang cangkang  5  cm;  dan  g.)  merayap/berjalan  jika dilepaskan dari genggaman.
Penelitian pendahuluan dilakukan bertujuan  untuk  menentukan  titik  organ  yang akan  dilaser  dan  digunakan  pada  penelitian utama.  Titik  organ  yang  dilaser  pada  penelitian pendahuluan  adalah  kepala,  kaki  jalan  dan gonad  yang  merupakan  tempat  tersedianya hormon neurosecretory .  Hal  ini  sesuai  dengan pernyataan  Hahn  (1992) dalam Setyono  (2004) bahwa  sistem  endokrinologi/hormonal  dimana reproduksi  berhubungan  dengan  tersedianya hormon neurosecretory pada cerebral , pleural/pedal dan visceral ganglia .
Penelitian  utama  dilakukan  setelah penelitian pendahuluan. Perlakuan pada
penelitian utama tergantung dari hasil penelitian pendahuluan.  Hasil  penelitian  pendahuluan berupa  titik  organ  gonad  yang  dilaser,  yang dapat mempengaruhi tingkat kematangan gonad induk  jantan  kerang  abalone.  Perlakuan  yang digunakan  adalah  penyinaran  laserpunktur dengan  energi  0  Joule  (kontrol);  0,5  Joule selama  50  detik;  1  Joule  selama  100  detik;  1,5 Joule selama 150 detik dan 2  Joule  selama 200 detik.  Semakin  tinggi  energi  yang  dikeluarkan, maka  waktu  yang  dibutuhkan  lebih  lama. Menurut  Tatang dalam Fadila  (2009),  bahwa penyinaran  laserpunktur  yang  diberikan  pada tangkai mata kepiting untuk proses pembentukan  telur  vitelogenesis  sebanyak  0,5 Joule  dengan  daya  tembus  sinar  0,5-5  cm  dan penyinaran hanya dilakukan satu kali selama 50 detik.

## Hasil dan Pembahasan
Pertambahan Panjang Gonad Induk Jantan
Kerang Abalone Hasil  pengamatan  berupa  pertambahan panjang  gonad  dilakukan  untuk  mengetahui pengaruh penyinaran laserpunktur yang ditembakkan  pada  organ  gonad  induk  jantan kerang  abalone.  Rata-rata  panjang  gonad  induk jantan  kerang  abalone  sebelum  dan  sesudah perlakuan dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.  Rata-rata  panjang  gonad  induk  jantan kerang  abalone  sebelum  dan  sesudah perlakuan Perlakuan Sebelum dilaser (cm) Sesudah dilaser (cm) A (Kontrol) 1,425 1,425 B (0,5 Joule) 1,75 1,761 C (1 Joule) 1,8 1,807 D (1,5 Joule) 1,5 1,7 E (2 Joule) 1,375 1,443 Tingkat  Kematangan  Gonad  Induk  Jantan Kerang Abalone Hasil pengamatan perkembangan kematangan  gonad  dari  20  ekor  induk  jantan kerang  abalone  yang  diinduksi  menggunakan laserpunktur  menunjukkan  perubahan  kenaikan tingkat  kematangan  gonad.  Jumlah  perubahan tingkat  kematangan  gonad  pada  induk  jantan kerang  abalone  dapat  dilihat  pada  Tabel  2. Pengamatan  gonad  secara  visual  dapat  dilihat pada Gambar 1.
Tabel 2.  Jumlah  perubahan  tingkat  kematangan gonad (TKG) selama penelitian Stadia gonad Sebelum dilaser (ekor) Sesudah dilaser (ekor) 0 10 3 I 6 13 III 4 2 IV 0 2
Pengamatan  Histologi  Gonad  Induk  Jantan Kerang Abalone
Hasil  pengamatan  histologi  gonad induk  jantan H.  asinina menunjukkan  berbagai tingkat  perkembangan  gonad  dengan  ditandai dengan  proses  gametogenesis  yang  merupakan suatu siklus reproduksi individu. Untuk menentukan  ciri  setiap  tingkat  perkembangan dalam  satu  siklus  gametogenesis,  biasanya tergantung  dengan  penampakan  yang  paling menonjol atau penampakan khas yang ditunjukkan  oleh  kumpulan  sampel  gonad (Pradina,  1997).  Gambaran  histologi  gonad induk  jantan  kerang  abalone  dapat  dilihat  pada Gambar 2, 3 dan 4.
Gambar 1. Pengamatan gonad secara visual
Gambar 2.   Tahap I. Gambaran  mikroskopis gonad  induk  jantan kerang  abalone dengan pewarnaan HE dan perbesaran 100x. (SG=Spermatogonia, SC=Spermatosit)
Kualitas Air Pemeliharaan Induk Jantan Kerang Abalone
Parameter  kualitas  air  yang  diukur adalah  suhu,  pH,  salinitas  dan  oksigen  terlarut (DO).  Rata-rata  hasil  pengukuran  kualitas  air selama  penelitian  yaitu  suhu  27,5-29°C,  pH  7, salinitas  32-33  ppt  dan  oksigen  terlarut  5  ppm. Kualitas  air  selama  pemeliharaan  merupakan kualitas air yang baik untuk pemeliharaan induk kerang abalone.
Penyinaran  laserpunktur  pada  induk jantan  kerang  abalone  dengan  dosis  yang berbeda  menghasilkan  tingkat  kematangan gonad  induk  jantan  kerang  abalone  lebih  baik dari  pada  perlakuan  kontrol  (tidak  ditembak laser).  Hasil  penelitian  menunjukkan  bahwa pada  perlakuan  A  (kontrol)  tidak  terjadi pertambahan  panjang  gonad  dan  kenaikan tingkat  kematangan  gonad  dikarenakan  tidak
cukup  waktu  dalam  merangsang  pemijahan secara  alami  dan  tidak  adanya  rangsangan  dari luar.
Penyinaran laserpunktur pada perlakuan B, C, D dan E memberikan pengaruh terhadap kematangan gonad induk jantan kerang abalone. Hal ini ditunjukkan dengan meningkatnya  tahap  kematangan  gonad  baik dilihat  secara  visual  maupun  pengamatan histologi.  Hal  ini  sesuai  dengan  pendapat Kusuma  (2009b),  bahwa  laserpunktur  dapat diaplikasikan sebagai biostimulator untuk tujuan mempercepat  proses  pematangan  gonad  guna memacu  pemijahan,  sehingga  diharapkan  dapat memproduksi benih secara massal dan kontinyu. Menurut  Chester, et  al .  (1991) dalam Adikara dkk.  (1997),  energi  laser  yang  jatuh  pada jaringan hidup akan memberikan reaksi biologis tergantung  dari  jenis  jaringan,  kondisi  jaringan
Gambar 3.   Tahap III. Gambaran mikroskopis gonad induk jantan kerang abalone dengan pewarnaan HE  dan  perbesaran  100x.  (DG= Digestive  Gland (kelenjar  pencernaan),  CT= Connective Tissue (jaringan ikat), SP=Spermatozoa)
Gambar 4.   Tahap IV. Gambaran mikroskopis gonad induk jantan kerang abalone dengan pewarnaan HE  dan  perbesaran  100x.  (CT= Connective  Tissue (jaringan  ikat),  SP=Spermatozoa, TR=Trabekula)
dan  besarnya  energi  laser,  maka  dapat memberikan stimulasi. Menurut Oetomo (1980) bahwa rangsangan laserpunktur dapat menimbulkan aliran bioenergi untuk keseimbangan energi dalam tubuh. Berdasarkan hasil pengamatan histologi dapat diketahui anatomi
perkembangan gonad lebih jelas. Pada perlakuan D (1,5 Joule) diketahui gonad berada pada  fase  IV  atau.  Hal  ini  ditunjukkan  dengan adanya  banyaknya trabekula  yang tampak tidak teratur. Trabekula  ini  merupakan  pembawa  sel- sel  germinal  atau  bahkan  sel  kelamin  (gamet) (Rao,  1937  dan  Young  &  DeMartini,  1970 dalam Pradina, 1997). Namun pada pengamatan visual,  tidak  dapat  ditentukan  kenaikan  tingkat kematangan  gonad.  Hal  ini  dikarenakan  gonad yang  ada  dalam  kantung  gonad  terlihat  warna gonad  yang  sama  atau  tidak  dapat  dibedakan dengan warna gonad sebelumnya yaitu berwarna  oranye,  sehingga  dari  pemeriksaan histologi  ini  dapat  dibenarkan  bahwa  gonad induk  jantan  pada  perlakuan  D  yang  semula berada  pada  tahap  III  mengalami  peningkatan tingkat kematangan gonad menjadi tahap IV.
Pengamatan  preparat  histologi  juga menunjukkan  adanya  lobus-lobus  piramidalis yang  berisi  tubulus  seminiferus.  Tubulus seminiferus  merupakan  suatu  saluran  tempat memproduksi  spermatozoa.  Menurut  Darmanto (2003), tubulus seminiferus tertutup oleh lapisan epitel germinal yang mengandung sel spermatogenik.  Menurut  Hestiana  (2002),  sel- sel  spermatogenik  yang  terdapat  pada  tubulus seminiferus  adalah  spermatogonia,  spermatosit primer,  spermatosit  sekunder,  spermatid  dan spermatozoon.  Menurut  Sobhon  dkk.,  (1999), gonad  induk  jantan H.  asinina terdiri  dari  lima fase siklus reproduksi yaitu proliferatif, prematur,  dewasa,  pemijahan  dan spent .  Gonad dalam fase proliferasi dan prematur, mengandung  sel-sel  terutama  gonial  dan spermatosit  primer,  sedangkan  fase  dewasa berisi    sel  tahap  akhir,  yaitu  spermatid  dan spermatozoa di testis.
Proses reproduksi pada hewan dikendalikan oleh hormon. Pada ikan, reproduksi  bukan  hanya  dipengaruhi  oleh hormon, tetapi  juga oleh  faktor lingkungan  luar seperti  foto  periodik,  kondisi  air,  makanan  dan rangsang luar. Menurut Isnaeni (2006),
rangsang  luar  tersebut  diterima  oleh  ikan melalui  reseptor,  kemudian  diteruskan  ke  pusat neuroendokrin dan akhirnya akan
mempengaruhi  perubahan  dalam  gonad  (organ reproduksi). Perkembangan dan fungsi testis dipelihara oleh  hormon gonadotropin (FSH dan
LH)  yang  dihasilkan  oleh  kelenjar  hipofisis anterior.  LH  disebut  juga Interstitial  Cell- Stimulating Hormon (ICSH) karena  hormon  ini bekerja  merangsang  sel  interstitial  Leydig. Sintesis  dan  sekresi  hormon  gonadotropin  dari hipofisis anterior distimulasi oleh Gonadotropin Releasing  Hormon (GnRH)  yang  dihasilkan oleh  hipotalamus  (Seeley et.al .,  1998 dalam Hestiana, 2002).
FSH bekerja di dalam tubulus seminiferus untuk merangsang proses
spermatogenesis  melalui  sel  Sertoli  (Veldhuis, 1991 dalam Hestiana,  2002).  FSH  berikatan dengan reseptor spesifik yang melekat pada sel- sel  Sertoli  yang  menyebabkan  sel-sel  tumbuh dan mensekresi berbagai substansi spermatogenik,  serta  merangsang  fungsi  sel Sertoli yang lain. Sementara itu, LH
merangsang  sel  Leydig  untuk  menghasilkan testosteron. Testosteron ini kemudian  masuk ke tubulus seminiferus (sel Sertoli) dan mempunyai  efek  tropik  yang  kuat  terhadap spermatogenesis (Guyton dan Hall, 1996 dalam
Hestiana, 2002).

## Kesimpulan
Penyinaran laserpunktur yang ditembakkan pada bagian organ gonad berpengaruh terhadap perkembangan kematangan gonad induk jantan kerang abalone. Energi laserpunktur yang terbaik dalam mempengaruhi  kematangan  gonad  induk  jantan kerang  abalone  yaitu  sebesar  1,5  Joule  selama 150 sekon. Penyinaran laserpunktur
dapat digunakan  untuk  meningkatkan  pertambahan panjang  gonad  dan  tingkat  kematangan  gonad induk  jantan  kerang  abalone.  Perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  mengenai  penyinaran laserpunktur  yang  ditembakkan  pada  organ gonad  induk  betina  kerang  abalone  sehingga mendapatkan  induk  dengan  kematangan  gonad yang  maksimal  dan  dapat  terjadi  proses pemijahan.

## Daftar Pustaka
Adikara, R.T.S., Y. Damayanti, T. Adriani, dan T.  Suprayogi.  1997.  Penelitian  Peralatan Helium Neon Laser untuk Dimanfaatkan Dalam  Ujicoba  Teknologi  Laserpunktur pada Ternak. Lembaga Penelitian
Universitas Airlangga. Surabaya. Darmanto,  W.  2003.  Pola  Kematian  Sel Spermatogenik  dan  Kerusakan  Jaringan
Testis  Mencit  Akibat  Radiasi  Sinar-X.
Laporan  Penelitian  Lembaga  Penelitian Universitas Airlangga. Surabaya.
Fadila,  A.  2009.  Kombinasi  :  Peningkatan
Produktivitas  Kepiting  Bakau  Diperoleh dengan Mengkombinasikan Laserpunktur dan Teknik Inhibisi Tangkai Mata. http://almafadila. blogspot.com/2009/03/01. Hestiana, E.P. 2002. Gambaran Spermatogenesis  Tubulus  Seminiferus Mencit  ( Mus  Musculus )  Jantan  Strain Swiss Setelah Pemberian Ekstrak Metanol  Akar  Pasak  Bumi.  Laporan Penelitian Lembaga Penelitian Universitas Airlangga. Surabaya. Isnaeni,  W.  2006.  Fisiologi  Hewan.  Kanisius. Yogyakarta.
Kusuma,  P.  S.  W.,  Hariani,  D.,  Mukti,  A.  T., Satyantini,  W.  H.  dan  Agustin,  M. 2009a.  Pengembangan  Teknologi  Laser Sebagai Biostimulator untuk Pematangan
Telur  Kepiting  Bakau  ( Scylla  serrata ). http://www.unipasby.ac.id/content/penge mbangan-teknologi-laser sebagai- biostimulator-untuk-pematangan-telur- kepiting-bakau-scy.  Diakses  :  Kamis,
02/19/2009 - 10:26.
Kusuma, P. S. W., Hariani, D., Mukti, A. T. dan
Satyantini,  W.  H.  2009b.  Penyediaan Broodstock  Ikan  Lele  Dumbo  ( Clarias gariepinus )  Menggunakan  Teknologi Laserpunktur.http://www.unipasby.ac.id/ content/ penyediaan-broodstock-ikan- lele-dumbo-Clarias-gariepinus- menggunakan -teknologi-laserpunktur. Diakses : Kamis, 02/19/2009 – 10:38.
Oetomo.  1980.  Seni  Akupunktur  Modern.
Bharata. Jakarta. Pradina.  1997.  Pola  Pengeluaran  Oosit  pada Trochus niloticus , Suatu Analisa Historeproduksi.  Balitbang  Sumberdaya Laut P3O LIPI Ambon. 121-131.
Setyono,  D.E.D.  2004a.  Abalone  ( Haliotis asinina )  :  2  Factors  Effect  Gonad Maturation.  Oseana.  Vol.  XXIX,  Nomor 4. Setyono, D.E.D. 2004b. Broodstock Conditioning  of  The  Tropical  Abalone ( Haliotis  asinina )  in  The  Laboratory. Oseana. 36: 1–13 Sobhon,  P.,  Apisawetakan,  S.,  Chanpoo,  M., Wanichanon, C., dkk. 1999. Classification of Germ Cell, Reproductive  Cycle  and  Maturation  of Gonads  in Haliotis  asinina  Linnaeus . Science Asia. 25: 3-21 Sofyan,  Y.,  B.  Irwansyah  dan  Sukriadi.  2006. Pembenihan  Abalone  ( Haliotis  asinina ) di  Balai  Budidaya  Laut  Lombok. Departemen  Kelautan  dan  Perikanan Direktorat  Jenderal  Perikanan  Budidaya Balai Budidaya Laut. Lombok.
Tahang,  M.,  Imron,  dan  Bangun.  2006.
Pemeliharaan  Kerang  Abalone  ( Haliotis asinina )  dengan  Metode  Pen-Culture (Kurungan  Tancap)  dan  Keramba  Jaring Apung (KJA). Departemen Kelautan dan Perikanan  Direktorat  Jenderal  Perikanan Budidaya Balai  Budidaya  Laut Lombok.
Lombok.
Totopando.  2009.  Sekilas  Tentang  Abalone ( Haliotis  asinina )  http://abalone065.com /2009/07/ost.html.