Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
AKTIVITAS ANTIBIOFILM DAN ANTIBAKTERI DAUN BINAHONG (Anredera cordifolia (Ten) Steenis) TERHADAP Pseudomonas aeruginosa

## Chossy Fradine*, Ismi Rahmawati, Opstaria Saptarini
Jurusan Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Setia Budi, Surakarta
Email * : chosy.fradini@gmail.com
Artikel dipublikasikan pada: Webinar Nasional & Call for Paper ”Inovasi Terkini dalam Dunia Kesehatan: Terapi Gen dan Perkembangan Obat Baru Berbasis Genomika dalam Mengubah Paradigma Pengobatan”
28 Oktober 2023
DOI: https://doi.org/10.36387/jiis.v8i3.1705

## ABSTRAK
Tumbuhan  di  Indonesia  yang  mempunyai  aktivitas  sebagai  antibakteri adalah  daun  binahong  ( Anredera  cordifolia (Ten.)  Stennis).  Daun  binahong mengandung  senyawa  tannin,  flavonoid,  alkaloid,  terpenoid,  dan  saponin. Penelitian  bertujuan  memahami  potensi  ekstrak  maupun  fraksi  etil  asetat,  air,  n- heksan dalam menghambat pembentukan biofilm, degradasi biofilm,  nilai KHM, dan  nilai  KBM  bakteri P.  aeruginosa serta  mengetahui  pengaruh  kerja  fraksi teraktif  daun  binahong.  Daun  binahong  diekstraksi  mempergunakan  metode maserasi dengan pelarut etanol. Ekstrak kental lalu difraksinasi dengan pelarut etil asetat, air, serta n-heksan. Uji aktivitas antibiofilm dilakukan mempergunakan alat microplate  dan  pembacaan  dilakukan  dalam  panjang  gelombang  595  nm.  Uji aktivitas  antibakteri  menggunakan  metode  dilusi.  Nilai  rerata  IC 50 uji penghambatan pembentukan biofilm pada fraksi n-heksan, ekstrak, air, etil asetat pada bakteri P. aeruginosa adalah 1,21; 0,94; 0,78; 1,03. Nilai EC 50 uji degradasi biofilm  pada  fraksi  n-heksan,  ekstrak,  air,  etil  asetat  pada  bakteri P.  aeruginosa adalah 16,06; 10,95; 5,92; 12,35. Nilai konsentrasi bunuh minimum fraksi air daun binahong terhadap P. aeruginosa adalah 512 mg/ml.
Kata kunci: Antibakteri, Antibiofilm, Daun Binahong, P. aeruginosa .

## ABSTRACT
Plant  in  Indonesia  that  has  antibacterial  activity  is  binahong  (Anredera cordifolia (Ten.) Stennis). Binahong leaf contains flavonoid, saponins, tannins and terpenoids compounds. The purpose of the study are determining the potential of extracts  and  fractions  (n-hexane,  ethyl  acetate  and  water)  in  inhibiting  the formation of biofilms, biofilm degradation and the value of P. aeruginosa bacterial MBC  and  to  determining  the  working  location  of  the  most  active  binahong  leaf fraction. Binahong leaf is extracted  by using maceration method with ethanol as solvent. Then the viscous extract is fractionated with n-hexane, ethyl acetate and water. Antibiofilm activity test is carried out using a microplate and absorbance readings using a microplate reader at a wavelength of 595 nm. The antibacterial activity test uses the dilution method. The IC 50 value of the biofilm inhibition test
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
on the extract, water fraction, ethyl acetate and n-hexane for P.aeruginosa bacteria was 0,94; 1,21; 1,03; 0,78. The EC 50 value of the biofilm degradation test on the extract, n-hexane, ethyl acetat, water e for P. aeruginosa bacteria is 10,95; 16,06; 12,35; 5,92. The minimum bactericidal concentration value of binahong leaf water fraction for P. aeruginosa is 512 mg/ml.
Keywords: Antibacterial, Antibiofilm, Binahong leaf, P. aeruginosa .

## PENDAHULUAN
Tingginya  angka  mortalitas dan morbiditas dalam penyakit infeksi terjadi  karena  adanya  resistensi.
Bakteri dapat menjadi resisten dengan
membentuk
biofilm, biofilm
dihasilkan  oleh  beberapa  bakteri patogen, salah satu diantaranya adalah Pseudomonas  aeruginosa ,  sehingga infeksi  biofilm  bakteri P.  aeruginosa tidak  mudah  dieradikasi  dan  sering menyebabkan infeksi persisten
(Theodora et al ., 2019).
Pengembangan obat guna mengetahui aktvitas antibiofilm dinilai krusial untuk strategi dalam mengantisipasi  terdapatnya  resistensi
obat  (Fair  &  Tor,  2014).  Roy  et  al.,
(2018) menyatakan bahwasanya pertumbuhan biofilm bisa diperlambat dengan  memakai  antimikroba  yang mempunyai  potensi  dalam  melewati matriks biofilm.
Daun  Binahong  ( Anredera cordifolia (Ten.)  Stennis)  terdapat
kandungan terpenoid, saponin, flavonoid, tanin, alkaloid yang memberi  kemampuan  manfaat  untuk kesehatan (Karimatulhajj, 2020).
Penelitian terdahulu telah dilakukan  uji  fitokimia  tanaman binahong ditemukan bahwasanya daun tersebut  terdapat  kandungan  senyawa polifenol,  flavonoid,  serta  alkaloid (Leliqia et  al .,  2017).  Hasil  dari pengujian aktivitas antibakteri
memakai  metode  dilusi  diperoleh
KHM ekstrak etil  asetat daun binahong  pada  bakteri P.  aeruginosa yaitu sebesar 50 % dan KBM ekstrak etil asetat daun binahong pada bakteri P.  aeruginosa sebesar  100  %
(Sulistyarsi & Pribadi, 2018). Adanya KHM  dan  KBM  yang  merupakan awalmula proses pembentukan
biofilm, maka bila dilakukan
penghambatan sehingga diharap terganggu pula pembentukan biofilm. Penelitian tujuannya
memahami    aktivitas  antibiofilm
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
ekstrak maupun fraksi n-heksana, air, serta  etil  asetat  pada Pseudomonas aeruginosa dan  memahami  fraksi
yang  teraktif  yang  membuktikan aktivitas antibiofilm pada Pseudomonas aeruginosa .

## METODE PENELITIAN

## Alat dan Bahan
Alat  yang  dipergunakan  pada penelitian merupakan seperangkat alat gelas,  waterbath,  autoclave,  rotary evaporator, mikroskop, Biorad iMark, siringe, Iwaki, blue tip.
Bahan tumbuhan telah
dilakukan  proses  determinasi  di  UPT Laboratorium  Herbal  Materia  Medica Batu. Bahan yang dipakai etanol 96%.
nheksana,  etil  asetat,  aqua  destilata steril,  air.  Bakteri Pseudomonas aeruginosa ATTC  27853,  nutrient broth  (Merck®),  brain  heart  infusion
broth (Merck®), nutrient agar (Merck®),  kristal  violet  (Merck®).
Kontrol positif siprofloxacin.

## Ekstraksi dan fraksinasi
Serbuk simplisia daun binahong dimasukkan ke wadah yang warnanya  gelap  kemudian  ditambah
etanol  sembilan  puluh  enam  persen
memiliki
perbandingan 1:10,
kemudian dilakukan perendaman selama enam jam pertama dan sesekali diaduk  pelan-pelan.  Hasil  maserasi bisa dipisah dengan dekantasi, ataupun disaring.  Ekstrak  maserat  yang  sudah didapatkan lalu dipekatkan mempergunakan vacum rotary
evaporator  hingga  didapatkan  ekstrak kental (Depkes RI, 2000).
Fraksinasi mempergunakan cara ekstraksi cair pada ekstrak etanol sembilan  puluh  enam  persen  daun binahong  mempergunakan  sejumlah pelarut yakni etil asetat, nheksana, air dilakukan  pengulangan  sejumlah  tiga kali.  Hasil  fraksi  yang  diperoleh  lalu dikentalkan  dengan  penangas  air hingga kental.
Identifikasi kandungan kimia
ekstrak dan fraksi daun binahong Identifikasi kandungan
senyawa  kimia  terhadap  ekstrak maupun fraksi daun binahong
berlandaskan  pada  yang  terdapat dalam Fransworth, 1966.
Persiapan sampel
uji dan

## identifikasi bakteri
Kontrol pengujuan fraksi yang memiliki  variasi  kosentrasi  20,  40 serta  80  mg/ml.  Pembuatan  kontrol positif dengan penimbangan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
siprofloxacin  sejumlah  0,06  mg/ml lalu dilakukan pelarutan menggunakan aquadest steril.
Pengidentifikasian  bakteri P.
aeruginosa makroskopis,  biokimia,
serta  mikroskopis  dalam  mengetahui kebenaran bakteri.
Optimasi waktu pembentukan
biofilm Pseudomonas aeruginosa Optimasi
ini tujuannya memperoleh waktu inkubasi maksimal untuk membuat biofilm. Variasi waktu
inkubasi  yang  dipakai,  satu,  dua,  tiga
hari, dilaksanakan pembacaan
pertumbuhan  biofilm  memakai  alat
iMark- Biorad Microplate Reader.
Uji aktivitas
penghambatan
pembentukan biofilm. Uji ini dilaksanakan
mempergunakan  microplate  round bottom polystyrene 96 wells memakai media  BHI,  dibaca  pada  λ  595  nm.
Setiap  pengujian  diciptakan  replikasi
tiga kali (Kırmusaoğlu, 2019). Kontrol positif  mempergunakan  siprofloxacin yang memiliki konsentrasi 0,06
mg/ml. Nilai IC 50 Pseudomonas
aeruginosa ditetapkan  berdasarkan persamaan  regresi  linier  diantara
konsentrasui  sampel  dan  persentase penghambatan biofilm.
% Penghambatan Biofilm
= DO Kontrol negatif − DO  Sampel
DO Kontrol negatif X 100 %
*Keterangan: DO (Densitas Optik)

## Uji aktivitas degradasi biofilm
Uji ini dilaksanakan mempergunakan microplate
roundbottom  polystyrene  96  wells memakai  media  BHI.  Kontrol  positif mempergunakan siprofloxacin memiliki konsentrasi 0,06 mg/ml.
% Penghambatan Biofilm
= DO Kontrol negatif − DO  Sampel
DO Kontrol negatif X 100 %
*Keterangan: DO (Densitas Optik)
Uji  aktivitas  penghancuran biofilm Pseudomonas aeruginosa dimuatkan  dengan  parameter  EC 50 . Nilai  EC 50 ditetapkan  berdasarkan persamaan  regresi  linier  diantara konsentrasi  sampel  dan  persentase penghancuran biofilm.

## HASIL DAN PEMBAHASAN

## Hasil  Ekstrak  dan  Fraksi  Daun

## Binahong
Penelitian mempergunakan
serbuk  daun  binahong  1000  g menghasilkan  ekstrak  daun  binahong sebanyak 200 g maka persen
rendemen yang didapatkan merupakan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
dua puluh. Penelitian dari Kumalasari
&  Sulistyani,  (2011)  daun  binahong yang diekstraksi dengan pelarut etanol 70%  mempunyai  rendemen  ekstrak sebanyak 10, 19%.
Sesuai  pemaparan  Febrina  et al.  (2015)  faktor  yang  memberikan
pengaruh pada hasil ekstraksi
merupakan suhu, pengadukan, waktu, ukuran sampel dan pelarut
memberikan  pengaruh  pula  pada
jumlah rendemen. Bertambah kecilnya luas permukaan sampel akan meluaskan  kontak  juga  menambah hubungan  dengan  pelarut  (Sineke  et al., 2016).
Penelitian mempergunakan
ekstrak daun binahong sejumlah 20 g,
menghasilkan fraksi n-heksana sejumlah  4  g,  fraksi  etil  asetat
sejumlah 2 g, fraksi air sejumlah 13,5 g. Fraksi air yang diperoleh lebih besar
daripada fraksi lainnya sebab
kebanyakan senyawa yang ada di daun binahong memiliki sifat polar.
Hasil  Identifikasi  Senyawa  Kimia Ekstrak dan Fraksi Daun Binahong Tabel 1. Hasil identifikasi kandungan kimia ekstrak dan fraksi daun binahong
Metabolit Sekunder Ekstra k Fraksi n- heksa n Fraks i Etil Aseta t Fraks i Air Flavonoid Saponin Tanin Alkaloid Triterpen oid + + + + + - - - + + + - - + + + + + -
-
Keterangan: (+)=Ada kandungan senyawa uji (-) = Tidak ada kandungan senyawa uji

## Hasil Identifikasi Bakteri
Hasil identifikasi makroskopis dalam Gambar  1. membuktikan bakteri P. aeruginosa yang ditanam di media Pseudomonas  Selective  Agar
(PSA)  Pemberian  glycerol  di  media mikrobiologi  akan  sebagai  sumber energi  juga  menambah  pyocyanin yakni pigment yang diproduksi khusus oleh P.  aeruginosa .  Kandungan magnesium kloride maupun potassium sulphate  akan  menambah  produksi pyocyanin.
Hasil identifikasi membuktikan  bakteri P.  aeruginosa
yang  ditumbuhkan  di  media  PSA menciptakan  koloni  bulat  serta  ada perubahan  dihasilkan  dari  pigmen pyocianine.
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Gambar 1. Hasil identifikasi makroskopis P. aeruginosa pada Media PSA
Gambar 2. Hasil identifikasi mikroskopis P. Aeruginosa Observasi P. aeruginosa secara  mikroskopis  dalam  Gambar  2 memakai perwarnaan Gram perbesaran kuat (1000x). Hasil
pewarnaan Gram membuktikan
bakteri P.  aeruginosa adalah  bakteri
Gram  negatif  yang  diperlihatkan berdasarkan sel yang warnanya merah, sel bentuknya batang, dan sel tersebar. Sifat  bakteri  Gram  negatif  memliki kandungan  lipid  tebal  di  dinding  sel struktur dinding selnya ini menjadikan bakteri Gram negatif memiliki afinitas rendah.  Bakteri  Gram  negatif  tidak
bisa  menahan  kompleks  zat  warna
iodin serta menjadi transluen (Sulviana et al ., 2018). Tabel 2. Hasil Identifikasi uji biokimia P. aeruginosa ATCC 27853 Media Hasil Pengamatan Pustaka (Volk & Wheller 1990) KIA LIA SIM Citrat K/K S- K/K S- - - + + K/K S- K/K S- - - + + Keterangan: KIA : Kliger Iron Agar S : Terbentuk sulfide (Warna hitam) LIA : Lysine Iron Agar A : Reaksi asam SIM : Sulfida Indol Motility K : Reaksi basa Optimasi Waktu Pembentukan

## Biofilm
Optimasi  waktu  pembentukan biofilm P.  aeruginosa dilaksanakan selama tiga  hari  mempergunakan  alat Elisa Reader yang panjangnya gelombang 595 nm.
Tabel 3. Hasil optimasi waktu pembentukan biofilm No Absorbansi 24 Jam 48 Jam 72 Jam 1 0.132 0.271 0.361 2 0.138 0.265 0.372 3 0.156 0.249 0.381 4 0.118 0.242 0.359 5 0.102 0.256 0.365 6 0.093 0.283 0.371 7 0.121 0.291 0.394 8 0.101 0.258 0.387 9 0.123 0.255 0.379 10 0.155 0.247 0.388 Rata-rata 0.124 ± 0.021 0.262 ± 0.014 0.376 ± 0.011
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Berlandaskan  tabel  di  atas,
diketahui P. aureginosa bisa menciptakan biofilm yang positif dan paling  maksimal  di  waktu  inkubasi selama  tiga  hari.  Sesuai  pemaparan Pambayun et al. (2008) melihat kurva pertumbuhan  bakteri P.  aureginosa mencakup sejumlah fase pertumbuhan, yakni fase lag, fase log, fase stasioner, kematian. Panjang  gelombang  optimum yang dipakai pada penelitian
merupakan  595  nm,  berlandaskan
jurnal Tobi et al., 2022 melaksanakan optimasi panjang
gelombang mempergunakan  3  variasi  yakni  595 nm, 655 nm, serta 490 nm sedangkan panjang  gelombang  yang  paling
maksimum untuk melakukan pembacaan  biofilm  yakni  595  nm dipelrihatkan  dengan  nilai  OD  paling besar dalam
masing-masing
pembacaan.
Pertumbuhan  biofilm  bakteri
P.  aureginosa yang  paling  maksimal di hari ketiga memiliki nilai rerata OD sebanyak  0,376.  Waktu  itu  sebagai waktu maksimal
pertumbuhan biofilm. Pembentukan biofilm dimulai saat  bakteri  melekat  di  situasi permukaan  lewat  molekul  organik.
Tingkatan  perlekatan  sel  mikroba diatur faktor misalnya keadaan lapisan permukaan, sifat permukaan, karakteristik, juga hidrodinamika
melalui media cair, beberapa
karakteristik  permukaan  sel  mikroba,
regulasi  gen  dan  kuorum  sensing (Mahami &
Gyamfi, 2011).
Pembentukan  biofilm  dapat  terjadi diberbagai  jenis  permukaan  dan berbagai  kondisi  lingkungan  dimana bakteri  berada.  Bakteri,  molekul organik dan anorganik yang ada pada permukaan  lalu  menciptakan  situasi film.  Substrat  anorganik  maupun organik ini bersamaan dengan
mikroorganisme
mengalami
perpindahan  ke  permukaan  lewat difusi  ataupun  sesuai  dengan  aliran cairan.  Transfer  nutrisi  lebih  tinggi dalam  biofilm  daripada  fase  cair (Riemann & Cliver, 2006).
Aktivitas Penghambatan

## Pembentukan Biofilm
Pembentukan  biofilm  pada penelitian ini diukur secara kuantitatif dengan  teknik  kristal  violet  assay. Nilai
OD yang didapatkan menggambarkan ketebalan dari
biofilm yang terbentuk. Nilai rata-rata
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
persen  penghambatan  pembentukan biofilm yang terlihat pada Tabel
Tabel 4. Hasil persentase rata-rata penghambatan pembentukan biofilm Konsen- trasi Ekstrak Fraksi n- heksan Fraksi Etil Asetat Fraksi Air 20 mg/ml 40 mg/ml 80 mg/ml 55,80 ± 0,79 63,38 ± 0,93 66,67 ± 0,93 50,59 ± 1,27 56,26 ± 0,26 58,81 ± 1,10 54,25 ± 0,45 61,10 ± 1,25 65,11 ± 0,96 61,37 ± 1,03 68,22 ± 0,81 72,88 ± 0,45 Kontrol positif 75,43 ± 0,46 Kontrol positif yang digunakan adalah antibiotik siprofloxacin.
Siprofloxacin  memiliki  mekanisme kerja memblokir sintesis DNA dengan
menghambat  enzim  topoisomerase  II
dan enzim topoisomerase IV, antibiotik  ini  masuk  ke  sel  secara difusi  pasif  lewat  kanal  protein  yang berisikan air di membran intarseluler. Penghambatan  DNA  gyrase  dapat mencegah  perenggangan  ( relaxation )
DNA superkoil positif yang diperlukan untuk traskripsi normal dan replikasi. Penghambatan topoisomerase IV mengganggu
pemisahan  dari  replikasi  kromosom
DNA  ke  dalam  tiap-tiap  sel  anak
selama pembelahan sel, yang berakhir pada  kematian  sel  bakteri  (Pomeri,
2011). Sehingga peneliti
mengasumsikan  bahwa  siprofloxacin
bekerja memblokir transkripsi sintesis DNA  yang  ada  pada  bakteri  maupun pada biofilm.
Tabel 5. Nilai IC 50 Penghambatan Pembentukan Biofilm
Sam- pel Nilai IC 50 penghambatan pembentukan biofilm (mg/ml) Rata- rata IC 50 R1 R2 R3 Ekstrak 0.908 1.007 0.904 0.940 ± 0.048 Fraksi n- heksana 1.273 1.262 1.104 1.213 ± 0.077 Fraksi etil asetat 0.991 1.038 1.078 1.036 ± 0.036 Fraksi air 0.586 0.660 1.104 0.783 ± 0.229 Hasil persen (%) penghambatan biofilm P. memberikan nilai  IC 50 nilai  paling  kecil  sebanyak 0,783  mg/ml  dalam  fraksi  air.  Fraksi air  daun  binahong  mengandung beberapa  kandungan  senyawa  kimia, diantaranya adalah senyawa flavonoid juga tanin yang memiliki potensi bisa memperlambat  intercellular  adhesion genes icaA dan icaD merupakan faktor pembentukan  biofilm  (Lee  et  al., 2013). Penghambatan ekspresi gen ica ini  menyebabkan  tanin  dan  flavonoid juga  dapat  menghambat  adhesi  sel bakteri, baik perlekatan bakteri dengan permukaan  substrat  dan  perlekatan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
antara  bakteri,  yang  mana  adhesi merupakan faktor utama dalam pembentukan  biofilm  (Nuryastuti,
2010).  Kemampuan  penghambatan biofilm  dari  suatu  senyawa  terkait
dengan kemampuan
penetrasi senyawa itu ke biofilm yang terbentuk, yaitu dapat berpenetrasi dalam lapisan EPS  ataupun  lapisan  lendir  yang menyelubungi bakteri.

## Aktivitas Degradasi Biofilm
Berdasarkan  Tabel  6,  dapat diketahui bahwasanya persentase degradasi  biofilm  paling  tinggi  ada dalam  fraksi  air  dengan  dosis  80 mg/ml  yaitu  sebesar  72,80%.  Hasil data  persentase  degradasi  biofilm digunakan  untuk  menentukan  nilai EC 50 .
Berlandaskan  hasil  pengujian degradasi  biofilm  memakai  ekstrak juga  fraksi-fraksi  daun  binahong terlihat  memiliki  aktivitas  dalam
menghancurkan atau degradasi
biofilm  pada P.  aureginosa memberi
nilai IC 50 paling kecil sebanyak 0,783 mg/ml  dalam  fraksi  air.  IC 50 adalah konsentrasi,  tetapi  fraksi  air  melebihi fraksi etil asetat dan n-heksana. Fraksi air mempunyai kemampuan degradasi biofilm sebesar 5,920 mg/ml, fraksi n-
heksana  16,061  mg/ml,  fraksi  etil asetat 12,352 mg/ml.
Tabel 6. Hasil rata-rata persentase degradasi biofilm Konsen- trasi Ekstrak Fraksi n- heksan Fraksi Etil Asetat Fraksi Air 20 mg/ml 40 mg/ml 80 mg/ml 55,03 ± 1,16 64,99 ± 0,79 68,85 ± 1,04 50,90 ± 0,99 59,07 ± 1,01 61,85 ± 1,13 53,77 ± 0,77 58,89 ± 1,21 64,54 ± 1,41 60,41 ± 1,16 68,13 ± 1,54 72,80 ± 0,44 Kontrol positif 73,43 ± 0,55
Tabel 7. Nilai EC 50 degradasi biofilm
Sampe l Nilai EC 50 penghambatan pembentukan biofilm (mg/ml) Rata- rata EC 50 R1 R2 R3 Ekstra k 11.91 9 11.83 1 9.100 10.95 0 ± 1.31 Fraksi n- heksan a 18.79 8 15.31 8 14.06 5 16.06 1 ± 2.00 Fraksi etil asetat 10.87 5 13.79 1 12.38 9 12.35 2 ± 1.19 Fraksi air 7.304 4.156 6.299 5.920 ± 1.31
Beberapa  mekanisme  dalam menghancurkan  biofilm  diantaranya adalah  degradasi  matriks  biofilm, kematian  sel  dan  kebocoran  sel. Kandungan senyawa kimia pada fraksi air daun binahong merupakan saponin, tanin dan flavonoid.
Mekanisme  saponin untuk merusak  biofilm  dengan  memberikan
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
pengaruh pada matriks polimer
ekstraseluler yang terdapat di matriks biofilm  bakteri  maka  zat  polimer menurun  lalu  melakukan  perubahan integritas  membran  sel  bakteri  yang menjadikan  dinding  sel  bakteri  tidak stabil.  Senyawa  terpenoid  untuk
mendegradasi biofilm bisa menurunkan biofilm yang telah
terbentuk  serta  merusak  bakteri  di biofilm (Andrade et al., 2019).
Senyawa  tannin  mempunyai efek  kebocoran  maupun  kematian  sel pada  biofilm,  disamping  itu  tanin memiliki  efek  pula  bakteriosidik.
Senyawa  flavonoid  memiliki  efek memperlambat  molekul  adhesin  yang
sangatlah
diperlukan untuk membentuk  biofilm  (Karatan  &
Watnick, 2009). Flavonoid serta tanin
bekerja  secara  melakukan  pengikatan salah satu protein adhesin bakteri yang
dipergunakan untuk reseptor
permukaan  bakteri,  maka  adanya pengurangan  daya  perlekatan  bakteri dan  penghambatan  sintesis  protein dalma membentuk dinding sel (Agnol et al., 2003; Jagani et al., 2008).

## KESIMPULAN
Fraksi  air,  etil  asetat,  ekstrak, n-heksana daun binahong bisa memperlambat  pembentukan  maupun degradasi biofilm bakteri P.
aureginosa ATCC  27853.  Fraksi teraktif daun binahong yang
mempunyai aktivitas antibiofilm paling  besar  yaitu  fraksi  air  bernilai IC 50 penghambatan  biofilm  sebanyak
0,783  ±  0,229  mg/ml  serta  nilai EC 50 degradasi  biofilm  sebanyak  5,920  ± 1,31 mg/ml.

## UCAPAN TERIMA KASIH
Peneliti  menyatakan  terima kasih  pada  keluarga,  pembimbing, civitas  akademi  Universitas  Setia Budi.

## DAFTAR PUSTAKA
Andrade,  J.  C.,  da  Silva,  A.  R.  P., Freitas,  M.  A.,  Ramos,  B.  A., Freitas  T.  S.,  et  al.  2019.
Control of bacterial and fungal biofilms by natural products of Ziziphus joazeiro Mart. (Rhamnaceae). Comparative Immunology, Microbiology and  Infectious  Diseases.  65: 226–233. Departemen  Kesehatan  RI.  2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Cetakan pertama: 17-19,
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
Dikjen POM, Direktorat Pengawasan Obat Tradisional. Fair, R. J., & Tor Y. 2014. Antibiotics and  bacterial  resistance  in  the 21st  century.  Perspectives  in Medicinal  Chemistry.  6:  25– 64.
doi.org/10.4137/PMC.S14459
Farnsworth,  N.  R.  (1966).  Biological and  Phytochemical  Screening of  Plants. Science , 151 (3712), 874–875.
https://doi.org/10.1126/science .151.3712.874 Karimatulhajj,  H.  (2020).  Identifikasi Flavonoid dalam Fraksi Kloroform  Daun  Binahong (Anredera  cordifolia  (Tenore) Steen). Indonesian  Journal  of Pharmacy and Natural Product , 3 (2), 53–58.
Kumalasari,  E.,  &  Sulistyani,  N. (2011). Antifungal Activity Of
Ethanol  Extract  Of  Binahong Stem(  Anredera  cordifolia  ( Tenore  )  Steen  )  Against Candida  albicans  And  The Phytochemical Screening. Jurnal  Ilmiah  Kefarmasian ,
1 (2), 51–62.
Lee, L. H., Park, J. H., Cho, H. S., Joo, S.  W.,  Cho,  M.  H.,  &  Lee,  J.
2013. Anti-biofilm activities of quercetin  and  tannic  acid against Staphylococcus aureus.
Biofouling. 29(5): 491-499.
Mahami,  T.,  &  Gyamfi,  A.  2011. Biofilm-associated  infections:
Public  health  implications. International Research Journal of Microbiology (IRJM). 2(10): 375- 381. Nuryastuti,  T.  2010.  Environmental Signals Affecting icaexpression in Staphylococcus epidermidis Biofilm  [Thesis].  University Medical  Center  Groningen, University of Groningen, Netherlands. Pambayun, R., Gardjito, M., Sudarmadji,  S.,  &  Rahayu, K.K. 2008. Sensitivitas bakteri
Gram  positif  terhadap  katekin yang  diekstraksi  dari  gambir (Uncaria  gambir).  Agritech. 28(4).
Rahmawati.Ismi.  (2021).  Pengaruh Minyak  Atsiri  Daun  Jeruk Purut ( Citrus hystrix) Terhadap
Dinding Sel Bakteri S. Aureus. Jurnal Ilmu-ilmu Hayati.
20(1).
Rahmawati,  I.,  Samsumaharto,  R.  A., &  Iryanto,  E.  Z.  (2015).  Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n- Heksan,  Kloroform  dan  Air dari  Ekstrak  Daun  Zodia (Evodia  sauveolens,  Scheff.) Terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. Jurnal  BIOMEDIKA , 8 (2),  9– 14. http://ejurnal.setiabudi.ac.id/oj s/index.php/biomedika/article/ view/199
Sineke, F.U., Suryanto, E., & Sudewi, S. 2016. Penentuan kandungan fenolik  dan  sun  protecting factor (SPF) dari ekstrak etanol dari  beberapa  tongkol  jagung (Zea  mays  L.).  Pharmacon. 5(1)
Sulistyarsi,  A.,  &  Pribadi,  N.  W. (2018). Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Daun Binahong (Anredera cordifolia
Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 8(3), Januari 2024, 171-182 p-ISSN: 250a2-647X; e-ISSN: 2503-1902
(Ten.) Steenis) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus  aureus  DAN Pseudomonas  aeruginosa.  In Journal  of  Pharmaceutical
Science and Medical Research (Vol. 1, Issue 1).
Susanty, & Yudhistirani, S. A. (2018). Pengaruh  Waktu  Ekstraksi Daun  Binahong  (Anredera cordifolia  (Tenore)  Steenis) Terhadap  Kemampuan  Daya Hambat  Bakteri  Escherichia coli  untuk  Pembuatan  Hand Sanitizer. Jurnal  Konversi ,
7 (1), 1–10. https://jurnal.umj.ac.id/index.p hp/konversi/article/viewFile/2 664/2387
Susilowati, D., & Mitha, P. M. (2009). Aktivitas  Antibakteri  Ekstrak n-Heksan  ,  Etil  Asetat  ,  dan Etanol 70 % Daun Binahong ( Anredera  cordifolia  (  Ten  .) Steen ) terhadap Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 . 6 (3),
19–25.
Syarifuddin,  A.,  &  Sulistyani,  N.
(2018).  Aktivitas  Antibiotik Isolat Bakteri Kp13 dan
Analisa Kebocoran Sel Bakteri
Escherichia  coli. Jurnal  Ilmu Kefarmasian Indonesia , 16 (2),
137–144.
Theodora,  N.  A.,  Dominika,  V.,  & Waturangi,  D.  E.  (2019).
Screening and quantification of anti-quorum sensing and antibiofilm activities of phyllosphere  bacteria  against biofilm forming bacteria. BMC Research Notes , 12 (1), 10–14. https://doi.org/10.1186/s13104
-019-4775-1
Tobi,  C.  H.  B.,  Saptarini,  O.,  & Rahmawati, I. (2022). Aktivitas  Antibiofilm  Ekstrak dan  Fraksi-Fraksi  Biji  Pinang (Areca  catechu  L.)  Terhadap Staphylococcus  aureus  ATCC 25923. JPSCR:  Journal  of Pharmaceutical  Science  and Clinical  Research , 7 (1),  56. https://doi.org/10.20961/jpscr.
v7i1.43698