Majalah Farmaseutik Vol. 19 No. 2 : 279-288 ISSN-p : 1410-590x ISSN-e : 2614-0063
Uji  Transpor  Flavonoid  Total  Sediaan  Emulgel  Buah  Stroberi ( Fragaria vesca L.) Melewati Membran Shed Snakeskin
Transport Test of Total Flavonoid Model of Strawberry Emulgel (Fragaria vesca L.) Through Shed Snakeskin Membrane
Dian Eka Ermawati 1* , Suwaldi Martodihardjo 2 , T.N Saifullah Sulaiman 2 1 Departemen Farmasi, Sekolah Vokasi, Universitas Sebelas Maret
2 Departemen Farmasetika, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Corresponding author: Dian Eka Ermawati: Email: dianekae@staff.uns.ac.id
Submitted: 02-10-2022 Revised: 16-03-2023 Accepted: 24-03-2023 ABSTRAK
Bauh stroberi mengandung antioksidan diantaranya quercetin-3- β -D-glucoside, coenzym Q10 , antosianin pelargonidin-3-O-glucoside dan cyanidin-3-glucoside .  Jumlah  antosianin  dan  flavonoid dalam  buah  cenderung  mengalami  penurunan  40-50%  setelah  proses  formulasi  sehingga  perlu pengembangan  formula  untuk  dapat  diaplikasikan  sebagai  sediaan  topikal.  Kombinasi  emulgator dapat menstabilkan zat aktif serta meningkatkan daya permeasi sediaan.  Penelitian ini bertujuan untuk menentukan profil permeasi flavonoid total sediaan emulgel buah stroberi dengan kombinasi emulgator. Penelitian ini menggunakan model flavonoid total dari  emulgel buah stroberi. Emulgel dibuat dengan kombinasi emulgator span 80: croduret 50: propilen glikol pada rasio 2: 4: 2. Sediaan emulgel dilakukan  uji  permeasi menggunakan sel difusi Franz tipe vertikal modifikasi  dilengkapi dengan membran Shed Snakeskin. Hasil uji permeasi menunjukkan jumlah komulatif flavonoid total yang tertranspor mel ewati membran shed snakeskin sebesar 117,14 μg/cm 2 dari total 2,24 mg buah stroberi  dalam  formula  emulgel  selama  5  jam.  Permeabilitas  membran shed  snakeskin adalah 2,84x10- 5  μg/cm 2 dan  nilai  flux  6,6x10 -5 μg/detik. Kinetika  pelepasan  yang  diperoleh  mengikuti model kinetika Higuchi dengan mekanisme difusi.
Kata kunci: flavonoid; permeasi, Franz; emulgator; shed snakeskin
ABSTRACT
Strawberries  contain  antioxidants,  including  quercetin-3- β -D-glucoside,  coenzyme  Q10, anthocyanins  pelargonidin-3-O-glucoside,  and  cyanidin-3-glucoside.  The  amount  of  anthocyanins and flavonoids in fruit tends to decrease by 40-50% after the formulation process, so it is necessary to  develop  a  formula  to  be  applied  as  a  topical  preparation.  The  combination  of  emulsifiers  can stabilize the active substance and increase the permeation of the preparation. This  study aims to determine the total flavonoid permeation  profile of strawberry  fruit emulgel preparations with a combination  of  emulsifiers.  This  study  used  a  total  flavonoid  model  from  strawberry  emulgel. Emulgel was prepared with a combination of emulsifier span 80: croduret 50: propylene glycol at a ratio of 2: 4: 2. The permeation test was carried out using a modified vertical Franz diffusion cell equipped with Shed Snakeskin membrane. The permeation test results showed that the cumulative amount of total flavonoids transported across the shed snakeskin membrane was 117.14 g/cm2 out of a total of 2.24  mg of strawberries in the emulgel formula for 5 hours. The permeability of the snakeskin shed membrane was 2.84x10-5 g/cm2, and the flux value was 6.6x10-5 g/sec. The release kinetics follow the Higuchi kinetic model with the diffusion mechanism.
Keywords: flavonoid; permeation; Franz’s diffusion Cell ; emulgator; shed snakeskin

## PENDAHULUAN
Antioksidan  dalam  buah  stroberi  dapat meningkatkan  perlindungan  kulit  dari  bahaya sinar ultraviolet dan stress oksidatif yang dapat mempercepat proses penuaan kulit serta dapat merangsang produksi kolagen yang merupakan bagian  penting  pada  proses  peremajaan  kulit
(Rozman  dkk.,  2009).  Warna  merah  buah stroberi  dikarenakan  dua  tipe  zat  warna antosianin,  yang  juga  merupakan  sumber antioksidan,  yaitu  pelargonidin-3-O-glucoside adalah pigmen warna merah cerah dan cyanidin adalah  pigmen  warna  merah  tua  (Gössinger dkk.,  2009).  Buah  stroberi  merupakan  sumber
antioksidan  alami  karena  mengandung  asam askorbat,  polifenol  (Wang  dan  Jiao,  2000), quercetin-3- β -D-glucoside  (Zhu  dkk.,  2015). Buah  stroberi  juga  mengandung coenzym  Q10 (Kubo  dkk.,2008),  dan  telah  dilakukan penelitian  bahwa  jus  buah  stroberi  dapat menangkal  radikal  bebas  seperti superoxide radicals,  hydrogen  peroxide,  hydroxyl  radicals , dan singlet  oxygen (Wang  dan  Jiao,  2000). Penelitian  terbaru  menyebutkan  bahwa  jus buah stroberi mampu menghambat pigmentasi kulit  dengan  mekanisme  aksi  menghambat pembentukan  melanin  yaitu  pigmen  warna coklat,  melalui  jalur  penghambatan  aktivitas enzim tyrosinase ,  sehingga  kulit  tampak  lebih cerah  (Zhu  dkk.,  2015).  Agar  potensi antioksidan  buah  stroberi  dapat  diaplikasikan pada kulit maka dikembangkan bentuk sediaan emulgel. Emulsi dalam sediaan kosmetik dapat mengontrol  pelepasan  dan  mengoptimalkan penyebaran  komponen  aktif  sediaan  kosmetik terutama transport komponen hidrofilik sampai ke lapisan kulit terdalam,
sehingga meningkatkan
efek  bioaktif  dari  sediaan  kosmetik  (Ali dkk.,  2012).  Antosianin  jus  buah  stroberi memiliki stabilitas dan daya penetrasi ke dalam kulit  yang  rendah,  selain  itu  selama  proses pabrikasi  konsentrasinya  akan  mengalami penurunan masing-masing 53% untuk kandungan  pelargonidin3-O- glucoside  (Bursać Kovačević  dkk.,  2009)  dan  40% untuk kandungan flavonoid kuersetin (Häkkinen dkk., 2000).  Permasalahan  tersebut,  dapat  diatasi dengan  mengembangkan  formulasi  sediaan topikal  emulgel  untuk  meningkatkan  stabilitas dan daya penetrasi ke dalam kulit (Parveen dkk., 2011).  Tipe emulsi yang  dipilih  sebagai sistem pembawa adalah emulsi a/m (air/minyak) yang selanjutnya  didispersikan  dalam  matrik  gel. Sediaan  emulsi  a/m  yang  stabil  membutuhkan emulgator  yang  tepat,  agar  dapat  menyatukan komponen  air  dan  minyak.  Emulgator  yang biasa  digunakan  adalah  span  80,  cremofor, propilen  glikol  karena  memiliki  fungsi  tidak hanya  sebagai  emulgetor,  namun  juga  sebagai humektan, emollient serta co-solvent (Rowe dkk., 2013). Penelitian ini akan dilakukan pembuatan emulsi minyak/air dengan kombinasi emulgator span 80: croduret 50: propilen glikol pada rasio 2:  4:  2  (Ermawati  dkk.,  2017),  kemudian didispersikan  dalam  matrik  gel.  Permeasi kandungan  aktif  buah  stroberi  dengan  model
flavonoid  total  secara in  vitro bertujuan  untuk mengetahui jumlah zat aktif dan kecepatan zat aktif yang dapat melewati membrane. Pengujian in vitro permeasi suatu sediaan dilakukan untuk menggambarkan kinerja atau performance dari produk,  kinerja  produk  ini  digunakan  untuk mengetahui  kemampuan  kombinasi  emulgator dalam  melepaskan  flavonoid  total.  Metode in vitro memiliki  kelebihan  dibandingkan  dengan metode in  vivo ,  yaitu  pengujiannya  yang  lebih cepat dan menghindari penggunaan hewan uji. Shed  snakeskin digunakan  sebagai  membran pada penelitian ini sebagai pengganti membran kulit tikus dengan model uji sel difusi tipe Franz, dan  menunjukkan  permeabilitas  menyerupai membran stratum korneum manusia
(Ngawhirunpat  dkk.,  2006).  Kemiripan  hasil tersebut  berdasarkan  kemiripan  sifat  dan komponen  lipid  penyusun  stratum  korneum. Hal  ini  tidak  menunjukkan  perbedaan  yang signifikan  pada shed  snakeskin dari  berbagai spesies  ular  (Kumpugdee-Vollrath  dkk.,  2011). Berdasarkan  pernyataan  di  atas,  maka dilakukan uji in vitro permeasi sediaan emulgel dengan  model  flavonoid  total  dalam  buah stroberi.

## METODE
Alat: stirrer  100-2000  rpm  (Stuart Overhead  Stirrer),  neraca  analit  (Sartorius  BP 310P),  mikropipet,  pH  meter  (Hanna),  pH- indicator  strips  (E.Merck),  hotplate,  magnetic stirrer  (Stuart  CB162),  spektrofotometer  UV- VIS  (Genesys  10  UV  Scanning),  alat  difusi  tipe Franz (Pearmea Gear, dibuat oleh laboratorium proses material Departemen Teknik Fisika ITB), Viskometer  Brookfield  cone  and  plate  (DV-I Prime),  mikroskop  digital  (Olympus  CX-41), sentrifuge  600-6000  rpm  (5804R),  climated chamber  suhu  45°C,  Moisture  Ballance  (Ohaus MB23,  Germany),  alat  Freez-Drying  (alpha  LD plus), membran selofan (Spectrapor membrane tubing  MW  cutoff  6000-8000),  Blander (National). Bahan: Buah stroberi segar dipanen di  desa  Banyuroto,  Kecamatan  Sawangan, Magelang, Jawa Tengah, Span 80 (dikemas ulang PT. Bratachem), Isopropil miristat p.a (Merck), etanol  96%  p.a  (Merck),  propilen  glikol farmasetis  (dikemas  ulang  PT.  Bratachem), croduret 50 ss (CRODA), HCl 0,1% (Merck), PEG- 400 (dikemas ulang PT. Bratachem), polygel Ca (dikemas ulang PT.  Bratachem),  TEA (dikemas ulang PT. Bratachem), Tween 80 (dikemas ulang PT.  Bratachem),  reagen  DPPH  (Sigma),  baku
kuersetin  (sigma),  KCl  (Merck),  CH3COONa (Merck),  Na2HPO4  (dinatrium  fosfat)  anhidrat (Merck),  KH2PO4  (mono  kalium  fosfat),  HCl 37% p.a (Merck), kertas whattmann No.1, shed snakeskin (pemelihara  ular,  Yogyakarta),  NaCl (Merck),  Asam  Benzoat  (dikemas  ulang  PT. Bratachem),  asam  sitrat  (dikemas  ulang  PT. Bratachem).
Preparasi Sampel Tanaman  stroberi  diidentifikasi  di laboratorium  Taksonomi  Tumbuhan,  Fakultas Biologi,  Universitas  Gadjah  Mada,  Yogyakarta, Indonesia. Buah stroberi segar ditimbang 2,0 Kg lalu  diblander  tanpa  menggunakan  air, selanjutnya dilakukan pengeringan dengan alat Freeze  Dryer .  Serbuk  buah  stroberi  kering diukur  kandungan  airnya  menggunakan  alat Moisture Analyzer .
Pengujian Aktivitas Antioksidan Reagen kering DPPH ditimbang seksama 15,8  mg  selanjutnya  dilarutkan  dengan menggunakan etanol 96% p.a dalam labu takar 100,0 mL hingga batas pada labu takar. Larutan DPPH  0,4  mM  diambil  sejumlah  1,0  mL  dan ditambahkan  etanol  96%  p.a  add  5,0  mL.  Seri konsentrasi larutan dibuat pada konsentrasi 80 μg/mL, 120 μg/mL, 240 μg/mL, 320 μg/mL, dan 640  μg/mL  selanjutnya  dilakukan scanning panjang  gelombang  pada  rentang  200-700  nm dengan mengunakan alat spektrofotometer UV- VIS.  Persamaan  kurva  baku  yang  diperoleh digunakan untuk menghitung aktivitas antioksidan  buah  stroberi,  larutan  etanol  96% p.a digunakan sebagai blanko.
Serbuk  buah  stroberi  sejumlah  500  mg dilarutkan dengan menggunakan etanol 96% p.a dalam  labu  takar  50  mL.  Larutan  stok  diambil sejumlah  volume  masing-masing:  0,5  mL;  1,0 mL; 2,0 mL; 3,0 mL; 4,0 mL dan 5,0 mL dalam labu takar 5,0 mL dan ditambahkan etanol 96% p.a hingga tanda batas.
Larutan  serbuk  buah  stroberi  kering (stok)  diambil  sejumlah  2,0  mL  selanjutnya dimasukkan  dalam  labu  takar,  kemudian ditambahkan 1,0 mL larutan DPPH 0,4 mM dan etanol  96%  hingga  tanda  batas  yang  tertera pada  labu  takar  5,0  mL.  Seri  larutan  tersebut diukur absorbansinya dengan spektrofotometer UV-VIS  pada  Panjang  gelombang  maksimum DPPH (Musa dkk., 2013). Kurva baku diperoleh dengan membuat hubungan antara konsentrasi dengan  aktivitas  antioksidan  buah  stroberi. Perhitungan  linieritas  kurva  baku  dilakukan dengan  menghitung  nilai  koefisien  korelasi  (r) yang  memberikan  linearitas  paling  baik (r>0,99). Berdasarkan persamaan regresi linier yang  diperoleh,  dapat  dihitung  IC 50 buah stroberi kering (Musa dkk., 2013).

## Penetapan Kadar Flavonoid Buah Stroberi
Penentuan panjang gelombang kuersetin dalam larutan etanol 96% p.a Baku  kuersetin  ditimbang  seksama  25,0 mg kemudian dilarutkan dengan etanol 96% p.a dalam labu takar 25,0 mL (stok I). Larutan stok I selanjutnya  diambil  sejumlah  1,0  mL  kedalam labu takar 50,0 mL lalu ditambahkan etanol 96% p.a sampai tanda batas yang tertera pada labu takar  (stok  II).  Larutan  stok  II  selanjutnya dilakukan  scanning  dengan  menggunakan  alat
Table I. Formula emulgel buah stroberi (Ermawati et al., 2017)
Komponen Formula Konsentrasi (%) Fungsi Serbuk buah stroberi 1,0 Zat aktif PEG 400-HCl 0,1% 12,0 Solven buah stroberi Asam Benzoat 0,1 preservative Span 80 2,0 Emulgator lipofilik Croduret 50 4,0 Emulgator hidrofilik Propilen Glikol 2,0 Ko-emulgator Isopropil Miristat 18,9 Fase minyak Polygel Ca 1,5 Polimer gel Trietanolamin 1,5 Pembasa Tween 80 2,0 Agent pembasah Dapar pH 5,4 55,0 Pelarut Bobot formula 100,0
spektrofotometer UV-VIS pada rentang panjang gelombang 200-500 nm, dan larutan etanol 96% p.a digunakan sebagai blanko.
Pembuatan  kurva  baku  kuersetin  dengan konsentrasi 2,0 μg/mL - 10,0 μg/mL Larutan  stok  II  kuersetin,  diambil masing-masing sejumlah 0,5 mL; 1,0mL; 1,5 mL; 2,0 mL; dan 2,5 mL ke dalam labu takar 5,0 mL kemudian  ditambahkan  etanol  96%  p.a.  untuk mendapatkan  seri  kadar.  Seri  larutan  tersebut diukur absorbansinya dengan spektrofotometer UV-VIS  pada  panjang  gelombang  maksimum flavonoid.  Kurva  baku  diperoleh  dengan membuat hubungan antara konsentrasi kuersetin dengan nilai absorbansinya. Perhitungan  linieritas  kurva  baku  dilakukan dengan menghitung nilai koefisien korelasi (r). Persamaan kurva baku yang dipilih adalah yang memberikan linearitas r>0,99.
Penetapan kadar flavonoid total buah stroberi Jus buah stroberi kering ditimbang 500,0 mg kemudian dilarutkan dengan etanol 96% p.a dalam labu takar 5,0 mL, dilakukan penggojogan selama  30  detik,  selanjutnya  larutan  disaring. Filtrat jus buah stroberi kering diambil sejumlah 1,0  mL  ke  dalam  labu  takar  50,0  mL  dan ditambahkan etanol 96% p.a sampai tanda batas yang tertera pada labu takar. Larutan jus buah stroberi kering kemudian diukur absorbansinya dengan spektrofotometer UV- VIS pada panjang gelombang  maksimum  kuersetin  dengan menggunakan  blanko  larutan  etanol  96%  p.a. Kadar  flavonoid  total  jus  buah  stroberi  kering dihitung  dengan  menggunakan  persamaan regresi linier kurva baku kuersetin, dimana “y” merupakan  nilai  absorbansi  jus  buah  stroberi kering.
Formulasi sediaan emulgel buah stroberi Jus  buah  stroberi  kering  1,0-gram dilarutkan dengan 12,0 mL pelarut PEG400-HCl 0,1  %,  kemudian  disaring  dan  ditambahkan asam  benzoat  sejumlah  0,1%.  Fase  Minyak Isopropil miristat sejumlah 19,0 mL dituang ke dalam  beker  gelas  250,0  mL,  selanjutnya ditambahkan  campuran  emulgator  span  80, croduret  50  dan  propilen  glikol,  aduk  dengan menggunakan stirrer pada kecepatan 2000 rpm. Fase air yang mengandung buah stroberi kering ditungkan  sedikit  demi  sedikit  ke  dalam campuran      emulgator     dan      fase       minyak,
pengadukan  dilakukan  selama  15  menit  pada suhu  ruang  (25  °C)  hingga  terbentuk  emulsi a/m  yang  homogen  (Ermawati  et  al., 2007).
Polygel  Ca dilarutkan  dalam  larutan dapar pH 5,4 yang dipanaskan diatas waterbath pada  suhu  60°C,  ditambahkan  sedikit  demi sedikit TEA agar terbentuk gel yang jernih dan mengembang  dengan  sempurna.  Hidrogel sebagai  fase  sekunder  dituangkan  ke  dalam beker  gelas  250,0  mL,  kemudian  ditambahkan surfaktan yaitu tween 80. Campuran dihomogenkan  dengan  stirer  pada  kecepatan 650  rpm,  selanjutnya  emulsi  a/m  dituangkan sedikit  demi  sedikit.  Pengadukan  dilakukan selama 10 menit hingga terbentuk emulgel.

## Penetapan  kadar  flavonoid  total  sediaan emulgel buah stroberi
Formula  optimum  emulgel  jus  buah stroberi  kering  ditimbang  seksama  1,0  gram, kemudian  dilarutkan  dengan  etanol  96%  p.a hingga batas pada labu  takar 10,0 mL (stok I), larutan  kemudian  dihomogenkan  dengan bantuan vortex. Larutan stok I diambil sejumlah 1,0 mL ke dalam labu takar 50,0 mL kemudian ditambahkan etanol 96% p.a sampai tanda batas pada  labu  takar,  selanjutnya  larutan  disaring menggunakan kertas saring. Dilakukan pembacaan  absorbansi  filtrat  pada  panjang gelombang maksimal flavonoid. Kadar flavonoid dalam  formula  optimum  emulgel  jus  buah stroberi  kering  dihitung  dengan  menggunakan persamaan regresi linier hasil pembuatan kurva baku  kuersetin.  Perlakuan  diulang  tiga  kali (Häkkinen dkk., 2000).

## Uji stabilitas sediaan emulgel buah stroberi
Formula emulgel buah stroberi dilakukan uji  stabilitas  dengan  metode cycling  test yaitu disimpan  pada  suhu  rendah  yaitu  -4°C  selama 24  jam,  kemudian  dipindahkan  ke  suhu  45°C selama  24  jam.  Siklus  diulang  sebanyak  enam kali,  kemudian  dilakukan  pengamatan  apakah terjadi creaming,  flocculation,  dan  coalescence . Pengamatan sifat fisik kimia meliputi: Viskositas Formula optimum emulgel emulgel buah stroberi  sejumlah  75,0  g  dituangkan  ke  dalam gelas  aluminium  pada  alat  viskometer  Rion, selanjutnya  dilakukan  pengukuran  viskositas dengan  menggunakan  spindle  no.1  selama  10 menit.
Pengukuran pH
Formula  optimum  emulgel  jus  buah stroberi kering 1,0 gram ditambahkan akuades 9,0  gram,  larutan  selanjutnya  dihomogenkan dan dilakukan pembacaan besarnya pH dengan menggunakan  alat  pH  meter.  Sebelum digunakan  alat  pH  meter  dilakukan  kalibrasi terlebih dahulu dengan larutan dapar pH 4 dan pH  7  pada  suhu  ruang  25°C.  Pengukuran  pH sediaan dilakukan pada hari ke-1 dan hari ke-28 pada suhu 25°C.
Luas area sebar emulgel jus buah stroberi kering Formula  optimum  emulgel  jus  buah stroberi  kering,  setelah  didiamkan  selama  2 hari, ditimbang 0,5-gram dan diletakkan diatas kaca  bulat  berskala,  tutup  dengan  kaca  bulat yang  telah  ditimbang  bobotnya.  Diletakkan beban  150,0-gram  diatasnya  selama  1  menit, diukur diameter area sebar emulgel menggunakan  mistar.  Pengukuran  dilakukan pada  empat  sisi  secara  vetikal,  horizontal,  dan diagonal (Garg dkk., 2002).

## Uji Transpor membran
Shed  snakeskin ular  piton  jenis  albino didapatkan  dari  pemelihara  ular  di  Daerah Pogung  Yogyakarta,  dipotong  4  x  4  cm  bagian yang masih utuh, cuci bersih dan rendam dalam larutan buffer fosfat salin pH 7,4 selama 24 jam (Kumpugdee-Vollrath  dkk.,  2013).  Membran shelofan dipotong 4 x 4 cm kemudian direndalm dalam larutan dapar fosfat salin pH 7,4 selama 24 jam, sebagai membrane penopang. Baku kuersetin diitimbang seksama 25,0 mg kemudian dilarutkan dengan larutan dapar pospat  salin  pH  7,4  sampai  tanda  batas  pada labu  takar  25,0  mL  (stok  I).  Larutan  stok  I diambil  sejumlah  0,1  mL  ke  dalam  labu  takar 10,0 mL, selanjutnya ditambahkan larutan PBS sampai tanda batas (stok II). Scanning panjang gelombang  maksimal  kuersetin  dalam  larutan dapar fosfat salin pH 7,4 pada rentang panjang gelombang 200-450 nm (Kameda dkk., 1987).
Kurva  baku  dibuat  dengan  mengambil sejumlah larutan stock II yaitu 100,0 μL, 200,0 μL, 300,0  μL,  400,0  μL  dan  500,0  μL  dengan menggunakan  mikropipet  ke  dalam  labu  takar 10,0 mL, selanjutnya ditambahkan larutan PBS sampai  tanda  batas  untuk  memperoleh  seri kadar.  Seri  kadar  larutan  tersebut  diukur absorbansinya  dengan  spektrofotometer  pada panjang gelombang maksimum kuersetin dalam PBS.  Kurva  baku  diperoleh  dengan  membuat
hubungan antara konsentrasi kuersetin dengan nilai  absorbansi  yang  diperoleh.  Perhitungan linieritas  kurva  baku  dilakukan  dengan menghitung  nilai  koefisien  korelasi  (r). Persamaan  kurva  baku  dipilih  berdasarkan pada linearitas paling baik (r> 0,99).
Formula emulgel buah stroberi sejumlah 1,0-gram  dituangkan  ke  dalam  kompartemen donor, pengujian dilakukan dengan menggunakan  alat  sel  difusi  model  Franz. Kompartemen  reseptor  diisi  dengan  dapar fosfat salin pH 7,4 sejumlah 25,0 mL dan diaduk menggunakan magnetic  stirrer 100  rpm, selanjutnya diletakkan diatas thermolyne suhu 35±1°C. Pengambilan larutan sampel dilakukan dalam kurun waktu 5 jam, pengambilan larutan sampel  sebanyak  2,0  mL  dari  kompartemen reseptor menggunakan pipet volume 1,0 mL dan digantikan dengan larutan dapar fosfat salin pH 7,4 sejumlah volume yang diambil. Pengambilan sampel larutan pada menit ke 0, 15, 30, 45, 60, 90,  120,  150,  180,  240,  270  dan  300.  Larutan sampel selanjutnya dituangkan ke dalam flakon kaca,  sebelum  diukur  absorbansinya  dengan spektrofotometer
UV-VIS pada panjang gelombang maksimal flavonoid kuersetin dalam larutan  PBS,  sebagai  blanko  dibuat  larutan dapar  fosfat  salin  pH  7,4.  Berdasarkan data  absorbansi  yang  diperoleh,  kemudian dilakukan  perhitungan  jumlah  komulatif flavonoid yang tertranspor melewati membran shed snakeskin .
Analisa Data Analisa statistika student’s t -Test p- value 95%  untuk  membandingkan  hasil  sifat  fisika kimia  emulgel  selama  uji  stabilitas.  Penetapan kadar  zat  aktif  buah  stroberi  dan  emulgel menggunakan persamaan regresi linier y= bx+a. Perhitungan  jumlah  komulatif  kuersetin  yang tertranspor melewati membrane shed snakeskins ,  dihitung  dengan  rumus  (Sinko, 2013):
Q = {Cn x V + ∑ 𝑛−1 𝑖=1 C x S} ∶ A ……………………… (1)
Keterangan:  Q  :  Jumlah  komulatif  sampel menembus  membran  per  luas  area  difusi (μg/cm 2 );  Cn :  Konsentrasi  sampel  (μg/mL) pada  menit  ke-n;  V  :  Volume  sel  difusi  Franz (25,0  mL); ∑ 𝑛−1 𝑖=1 C:  Jml  konsentrasi  sampel (μg/mL) menit ke -0 sampai sebelum menit ke- n;  S  :  Volume  sampling  (2,0  mL);  A:  Luas  area membran (1,4 cm 2 )
Parameter permeabilitas dapat
ditentukan  berdasarkan  persamaan  Hukum Fick I:
𝑄 𝐴 = P app x C Do x t …………………………………………. (2)
Keterangan  :  Q  :  Jml  komulatif  sampel menembus  membran  per  luas  area  difusi (μg/cm 2 );  P app :  Permeabilitas  (mL/cm 2 /jam); A : Luas membran difusi (cm 2 ); C Do : Konsentrasi obat  pada kompartemen  donor  (μg/mL) ;  t  : waktu (jam)

## HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil identifikasi anatomi dan morfologi tanaman  stroberi  di  Laboratorium  Taksonomi Fakultas  Biologi  Universitas  Gadjah  Mada, menyebutkan  bahwa  tanaman  stroberi  yang berasal  dari  Desa  Banyuroto  Magelang  adalah tanaman stroberi dari Familia: Rosaceae , Genus: Fragaria , serta Species: Fragaria vesca L. Proses freeze  drying dilakukan  untuk  mengurangi kandungan air yang terkandung dalam jus buah stroberi,
namun tanpa menggunakan pemanasan, sehingga tidak merusak kandungan aktif akibat pengaruh suhu dan pH, juga untuk mengurangi kandungan air dalam buah hingga mencapai  <10%  sehingga  dapat  menghambat reaksi  enzimatis,  serta  melindungi  dari tumbuhnya  mikroba  (Departemen  Kesehatan, 2009). Proses freeze dying dilakukan selama 96 jam  hingga  didapatkan  serbuk  kering  buah stroberi.  Berat  serbuk  buah  stroberi  adalah 279,24-gram  dari  bobot  awal  buah  stroberi 2000,0  gram,  sehingga  dapat  dihitung randemen  sampel  adalah  13,96%.  Kandungan air serbuk buah stroberi adalah 13,46%.
Aktivitas antioksidan Hasil  pengukuran  panjang  gelombang maksimal  DPPH,  yang  akan  digunakan  untuk mengukur  aktivitas  antioksidan  jus  buah stroberi kering adalah 518 nm dengan operating time tidak melebihi batas waktu 30 menit. Hasil perhitungan  nilai  IC 50 buah  stroberi  kering terhadap radikal bebas DPPH pada penelitian ini adalah 0,331 mg/mL, hal ini sedikit lebih besar bila dibandingkan dengan penelitian sebelumnya  mengenai  aktivitas  antioksidan ekstrak  etanol  buah  stroberi  dengan  pereaksi DPPH yaitu 0,238 mg/mL (Zhu dkk., 2015). Nilai IC 50 dihitung  untuk  mengetahui  parameter konsentrasi  yang  ekuivalen  memberikan  50% efek  aktivitas  antioksidan  atau  menyatakan
konsentrasi  larutan  buah  stroberi  (mg/mL) yang dibutuhkan untuk meredam radikal DPPH sebesar  50%  (Musa  dkk.,  2013).  Persamaan kurva baku yang didapat adalah  y = 0,0855x + 21,677 dengan nilai r = 0,991.
Kadar flavonoid total buah dan sediaan emulgel stroberi
Hasil  pengukuran  panjang  gelombang maksimal  flavonoid  kuersetin  dalam  pelarut etanol 96% p.a pada rentang 200-600 nm adalah 377  nm.  Berdasarkan  hasil  pengukuran absorbansi  buah  stroberi  kering,  maka  dipilih kurva  baku  flavonoid  kuersetin  pada  rentang konsentrasi  2,0- 10,0  μg/mL.  Hubungan  antara kadar  flavonoid  kuersetin  dengan  nilai absorbansinya diperoleh persamaan kurva baku y  =  0,0675x-0,004.  Rata-rata  kadar  flavonoid dalam  buah  stroberi  kering  adalah  0,465 mg/100g.  Persamaan  kurva  baku  yaitu  y  = 0,0763x + 0,0017 dari harga koefisien korelasi (r)  lebih  dari  0,99.  Rata-rata  kadar  flavonoid dalam  emulgel  buah  stroberi  kering  pada  hari pertama adalah 0,447 mg/100g, selama 28 hari penyimpanan kadarnya menjadi 0,071 mg/100g. Menurut penelitian yang menyebutkan bahwa buah stroberi mengandung flavonoid kuersetin 0,17mg/100g, setelah  mengalami  perlakuan  atau  proses pembuatan  sediaan  emulgel  serta  disimpan selama kurun waktu 28 hari pada  suhu  ruang, maka  kadar  kuersetin  akan  mengalami penurunan sebesar 40% (Häkkinen dkk., 2000). Kandungan  flavonoid  kuersetin  sekitar  15% yang  masih  berada  dalam  sediaan  emulgel, artinya  selama  proses  pembuatan  sediaan emulgel  buah  stroberi  kering,  kandungan  aktif flavonoid  mengalami  penurunan,  akibat  faktor lingkungan yaitu reaksi oksidasi, pH dan suhu. Uji stabilitas emulgel Sediian  emulgel  menunjukkan  adanya pengendapan,  kemungkinan  terjadi  karena rusaknya  emulsi ( coalesence ) akibat  perlakuan suhu  ekstrim  pada  saat  uji cycling  test ,  hal  ini disebabkan oleh terjadinya kristalisasi pada fase kontinu  yang  menyebabkan  rusaknya  film antarmuka
ketika
emulsi mengalami pendinginan dibawah suhu 0°C dan pemanasan mencapai  suhu  45°C.  Artinya  formula  emulsi primer kurang stabil terhadap perubahan suhu (Palazolo  dkk.,  2011).  Pemisahan  fase  ketika sediaan disimpan pada suhu rendah kemungkinan terjadi karena adanya kristalisasi pada  fase  kontinyu  yang  menyebabkan
rusaknya  film  antarmuka  saat  emulsi mengalami
pendinginan. Sedangkan
penyimpanan pada suhu tinggi akan mengurangi  tegangan  antar  muka  dan viskositas,  dan  penyimpanan  pada  suhu  ruang dianggap sebagai temperatur dimana sifat-sifat
hidrofilik dan lipofilik berada dalam keseimbangan  sehingga  emulsi  cenderung stabil. Perubahan  temperatur dapat mengubah koefisien distribusi pengemulsi antara dua fase dan menyebabkan migrasi emulgator (Lachman dkk., 2007).
Gambar 1. Grafik hasil uji yang menunjukkan jumlah komulatif bobot flavonoid total yang tertranspor melewati membran shed snakeskin selama 300 menit
Table II. Hasil pengujian sifat fisika kimia sediaan emulgel buah stroberi selama 6 siklus
uji cycling test Viskositas (d.Pas) pH Daya sebar (cm) sebelum setelah sebelum setelah sebelum setelah 105,67  4,04 101,67  7,64 6,52  0,05 6,82  0,06 3,60  0,3 4,30  0,2 Table III. data hasil uji transport membran sediaan emulgel buah stroberi Time (minute) Rata-rata bobot tertranspor (mg) Q/A (  g/cm 2 ) 0 0,0034 2,21 15 0,0037 2,40 30 0,0048 3,12 45 0,0060 3,90 60 0,0080 5,19 90 0,0110 7,14 120 0,0145 9,42 150 0,0166 10,78 180 0,0179 11,62 210 0,0197 12,79 240 0,0213 13,83 270 0,0248 16,10 300 0,0287 18,64 Qkum 0,1803 117,14
A = luas membran (1,54 cm 2 ) 2,4 3,12 3,9 5,19 7,14 9,42 10,78 11,62 12,79 13,83 16,1 18,64 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240 270 300 Transpor test
Time (minute)
Luas area sebar menunjukkan
peningkatan,  hal  ini  dikarenakan  komponen emulgator  yaitu  croduret  50  dan  span  80 semakin lama disimpan pada suhu ruang (diatas 25°C)  maka  akan  semakin  cair  (liquid)  (Naqvi dkk.,  2015),  sehingga  menurunkan  viskositas sediaan,  dengan  menurunnya  viskositas  maka meningkatkan luas area sebar sediaan emulgel. Nilai pH formula emulgel sudah sesuai dengan pH  kulit  manusia  yaitu  antara  4,5-7,0  (Kogan dan  Garti,  2006).  Nilai  pH  sediaan  emulgel cenderung  konstan,  artinya  hidrogel  mampu menstabilkan  pH  sehingga  diharapkan  mampu menstabilkan  komponen  aktif  dari  pengaruh lingkungan.
Uji transport membran Hasil  pengukuran  panjang  gelombang maksimal  flavonoid  total  dalam  pelarut  dapar pospat  salin  pH  7,4  pada  rentang  200-600  nm adalah  372  nm.  Data  panjang  gelombang maksimal ini, digunakan pada pembuatan kurva baku kuersetin dalam pelarut dapar pospat salin pH  7,4  dan  untuk  menghitung  kadar  flavonoid formula  sediaan  emulgel  buah  stroberi  kering melewati  membran shed  snakeskin .  Kadar kuersetin dengan nilai absorbansinya diperoleh persamaan  kurva  baku  y  =  0,0548  x  -  0,0071. Dari  persamaan  kurva  baku  kuersetin  dapat dihitung  kadar  flavonoid  total  dalam  formula emulgel buah stroberi kering.
Membran  shed  snakeskins  sebagai pengganti membran kulit tikus dengan model uji sel difusi tipe Franz, menunjukkan permeabilitas  menyerupai  membran  stratum korneum  manusia  (Ngawhirunpat  dkk.,  2006).
Kemiripan hasil tersebut berdasarkan kemiripan sifat, suhu, kekentalan cairan tubuh, serta  komponen  lipid  penyusun  stratum korneum. Hal ini tidak menunjukkan perbedaan yang  signifikan  pada shed  snakeskins dari berbagai  spesies  ular  (Kumpugdee-Vollrath dkk.,  2011).  Grafik  profil  jumlah  komulatif flavonoid yang tertranspor melewati membran shed  snakeskin sediaan  emulgel  buah  stroberi kering  disajikan  pada  gambar  1.  Berdasarkan profil tersebut, jumlah komulatif flavonoid yang tertranspor  melewati membran shed snakeskin sediaan  emulgel  buah  stoberi  kering  terus mengalami kenaikan  per satuan waktu sampai menit  ke-300.  Jumlah  komulatif  flavonoid sediaan emulgel buah stroberi yang tertranspor selama  5  jam  pengujian  a dalah 117,14 μg/cm 2
dari total 2,24 mg sampel buah stroberi kering dalam  formula.  Nilai  permeabilitas  membran shed  snakeskin adalah  2,84x10 -5 cm/detik  dan nilai flux sebesar 6,6x10 -5 μg/cm 2 . Data hasil uji transport  melewati  membran shed  snakeskin sediaan  emulgel  buah  stroberi  kering,  tersaji pada  tabel  III.  Transpor  komponen  aktif flavonoid  dari  sediaan  emulgel  buah  stroberi kering melewati membran shed snakeskin pada penelitian  ini,  kemungkinan  dipengaruhi  oleh beberapa  komponen  bahan  penyusun  formula emulgel  yang  dikenal sebagai enhancer ,  antara lain  isopropyl  miristat  (Tsai  dkk.,  2010)  dan propilen glikol (Arellano dkk., 1999). Isopropil miristat  mengakibatkan  terjadinya  perubahan struktur lemak di stratum korneum. Perubahan tersebut mengakibatkan berkurangnya panjang jalur  penetrasi  obat  serta  meningkatkan permeabilitas kulit, sehingga difusi zat aktif ke dalam  kulit  meningkat  (Tsai  dkk.,  2010). Propilen  glikol  selain  sebagai  emulgator,  juga berfungsi  sebagai  emolient  untuk  membentuk celah  pada  sisi-sisi  stratum  korneum  sehingga memudahkan  zat  aktif  menembus  kulit (Arellano  dkk.,  1999).  Perlu  dilakukan penelitian  lebih  lanjut  tentang  pengaruh isopropil  miristat,  propilen  glikol,  dan komponen lain penyusun formula emulgel buah stroberi  kering  terhadap  profil  transpor komponen  aktif  melewati  membran  secara  in vitro.

## KESIMPULAN
Kombinasi  emulgator  span  80-croduret 50-  propilen  glikol  menghasilkan  sediaan emulgel yang memenuhi syarat sediaan gel yang baik.  Kadar  flavonoid  sediaan  emulgel  buah stroberi kering adalah 1,80%. Jumlah komulatif flavonoid sediaan emulgel buah stroberi kering yang  tertranspor  melewati  membran  shed snakeskin  117,14 μg/cm 2 dari  2,24  mg  jumlah flavonoid  dalam  sediaan  emulgel  selama  lima jam, serta nilai permeabilitas membran 2,84x10 - 5 μg/cm 2 dan  nilai  flux  6,6x10 -5 μg/detik. Kinetika  pelepasan  yang  diperoleh  mengikuti model  kinetika  Higuchi  dengan  mekanisme difusi.

## DAFTAR PUSTAKA
Ali,  M.D.,  Alam,  M.I.,  Shamim,  M.,  Imam,  F., Anwer,  T.,  Siddiqui,  M.R.,  dkk.,  2012.
Design and Characterization of Nanostructure Topical Gel of
Betamethasone Dipropionate for Psoriasis. japsonline.com.
Arellano, A., Santoyo, S., Mart ı́ n, C., dan Ygartua, P.,  1999.  Influence  of  propylene  glycol and  isopropyl  myristate  on  the  in  vitro percutaneous  penetration  of  diclofenac sodium  from  carbopol  gels.  European Journal  of  Pharmaceutical  Sciences,  7: 129 – 135.
Bursać  Kovačević,  D.,  Levaj,  B.,  dan  Dagović - Uzelac, V., 2009a. Free radical scavenging activity  and  phenolic  content  in strawberry  fruit  and  jam.  Agriculturae Conspectus  Scientificus  (ACS),  74:  155 – 159. Departemen  Kesehatan,  R.,  2009.  Materia Medika Indonesia, I. Departemen
Kesehatan, Republik Indonesia : Jakarta.
Ermawati, D.E., Martodiharjo, S., Sulaiman, T.N.
S.,  2017.  Optimasi  komposisi  emulgator formula  emulsi  air  dalam  minyak  jus buah stroberi (Fragaria vesca L.) dengan metode  simplex  lattice  design,  2(2):  78-
89. Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., dan Singla, A.K., 2002. Spreading of semisolid formulations: An update. Pharmaceutical technology, 26: 84 – 105. Gössinger, M., Moritz, S., Hermes, M., Wendelin,
S.,  Scherbichler,  H.,  Halbwirth,  H.,  dkk., 2009.  Effects  of  processing  parameters on  colour  stability  of  strawberry  nectar from puree. Journal of Food Engineering,
90: 171 – 178.
Häkkinen,  S.H.,  Kärenlampi,  S.O.,  Mykkänen, H.M., dan Törrönen, A.R., 2000. Influence of  domestic  processing  and  storage  on flavonol  contents  in  berries.  Journal  of Agricultural  and  Food  Chemistry,  48: 2960 – 2965.
Kameda,  K.,  Takaku,  T.,  Okuda,  H.,  Kimura,  Y.,
Okuda,  T.,  Hatano,  T.,  dkk.,1987. Inhibitory  Effects  of  Various  Flavonoids Isolated  from  Leaves  of  Persimmon  on Angiotensin-Converting Enzyme Activity. Journal of Natural Products, 50: 680 – 683. Kogan, A. dan Garti, N., 2006. Microemulsions as transdermal  drug  delivery  vehicles. Advances  in  Colloid  and  Interface Science, , Special Issue in Honor of Dr. K. L. Mittal 123 – 126: 369 – 385. Kubo,  H.,  Fujii,  K.,  Kawabe,  T.,  Matsumoto,  S., Kishida,  H.,  dan  Hosoe,  K.,  2008.  Food content of ubiquinol-10 and ubiquinone-
10  in  the  Japanese  diet.  Journal  of  Food Composition and Analysis, 21: 199 – 210. Kumpugdee-Vollrath,  M.,  Subongkot,  T.,  dan Ngawhirunpat,  T., n.d. Model  Membrane from Shed Snake Skins.
Lachman, L., Lieberman, H.., dan Kanig, J., 2007. The  Theory  and  Practice  of  Industrial Pharmacy, I. Washington Square,
Philadelphia, USA. Musa,  K.H.,  Abdullah,  A.,  Kuswandi,  B.,  dan Hidayat,  M.A.,  2013.  A  novel  high throughput  method  based  on  the  DPPH dry  reagent  array  for  determination  of antioxidant  activity.  Food  Chemistry,
141: 4102 – 4106. Naqvi,  A.Z.,  Noori,  S.,  dan  Kabir-ud-Din,  2015. Tensiometric studies on the  mixtures  of nonionic  Cremophor  RH  and  cationic gemini  surfactants.  Journal  of  Molecular Liquids, 208: 137 – 144.
Ngawhirunpat, T., Panomsuk, S., Opanasopit, P., Rojanarata,  T.,  dan  Hatanaka,  T.,  2006. Comparison of the percutaneous absorption  of  hydrophilic  and  lipophilic compounds  in  shed  snake  skin  and human skin. Die Pharmazie, 61: 331 – 335.
Palazolo,  G.G.,  Sobral,  P.A.,  dan  Wagner,  J.R., 2011.  Freeze-thaw  stability  of  oil-in- water  emulsions  prepared  with  native and thermally-denatured
soybean isolates.  Food  hydrocolloids,  25:  398 – 409.
Parveen, R., Baboota, S., Ali, J., Ahuja, A., Vasudev,
S.S.,  dan  Ahmad,  S.,  2011.  Oil  based nanocarrier for improved oral delivery of silymarin:  In  vitro  and  in  vivo  studies. International  Journal  of  Pharmaceutics, 413: 245 – 253.
Rowe, R.C., Sheskey, P.J., Cook, W.G., dan Quinn, M.E., 2013. Handbook of Pharmaceutical Excipients – 7th Edition. Taylor & Francis. Rozman, B., Gasperlin, M., Tinois-Tessoneaud, E., Pirot,  F.,  dan  Falson,  F.,  2009.
Simultaneous  absorption  of  vitamins  C and E from topical microemulsions using reconstructed human epidermis as a skin model. European Journal of Pharmaceutics  and  Biopharmaceutics,
72: 69 – 75.
Sinko J, M., 2013. Buku Martin Farmasi Fisika &
Ilmu  Farmasetika  Edisi  5  -  Mabastore: Toko Buku Kedokteran, 5th ed.
Tsai, Y.-H., Lee, K.-F., Huang, Y.-B., Huang, C.-T., dan Wu, P.-C., 2010. In vitro permeation
and  in  vivo  whitening  effect  of  topical hesperetin microemulsion delivery system. International Journal of Pharmaceutics, 388: 257 – 262. Wang,  S.Y.  dan  Jiao,  H.,  2000.  Scavenging capacity  of  berry  crops  on  superoxide radicals,  hydrogen  peroxide,  hydroxyl radicals,   and  singlet   oxygen.  Journal  of Agricultural  and  Food  Chemistry,  48: 5677 – 5684.
Zhu, Q., Nakagawa, T., Kishikawa, A., Ohnuki, K., dan  Shimizu,  K.,  2015.  In  vitro bioactivities and phytochemical profile of various parts of the strawberry (Fragaria ×  ananassa  var.  Amaou).  Journal  of Functional Foods, 13: 38 – 49.